MX2008000866A - Inhibidores de la proteasa ns3 del virus de la hepatitis c. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a compuestos macrociclicos de formula (I) que son utiles como inhibidores de la proteasa NS3 del virus de la hepatitis C (VHC), a su sintesis y a su uso para tratar o prevenir infecciones por VHC. (ver formula).

Description

INHIBIDORES DE LA PROTEASA NS3 DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C La presente invención se refiere a compuestos macrocíclícos que son útiles como inhibidores de la proteasa NS3 del virus de la hepatitis C (VHC), a su síntesis, y a su uso para tratar o prevenir la infección por VHC.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) es el principal problema de salud que da lugar a enfermedades hepáticas crónicas, tales como cirrosis y carcinoma hepatocelular, en un número considerable de individuos infectados, que se estima que es el 2-15% de toda la población. De acuerdo con el Centro para el Control de Enfermedades de Estados Unidos hay aproximadamente 3.9 millones de personas infectadas sólo en los Estados Unidos, aproximadamente cinco veces el número de personas infectadas por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH). De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud, hay más de 170 millones de individuos infectados en todo el mundo, infectándose cada año al menos de 3 a 4 millones de personas. Una vez infectados, aproximadamente el 20% de las personas eliminan el virus, aunque el resto sigue teniendo el VHC durante toda su vida. Del diez al veinte por ciento de los individuos infectados de forma crónica desarrollan con el tiempo cáncer o cirrosis que destruye el hígado. La enfermedad viral se transmite por via parenteral medíante sangre y productos sanguíneos contaminados, agujas contaminadas o por transmisión sexual o materno-filial de madres infectadas o madres portadoras a sus hijos. Los tratamientos actuales para la infección por VHC, que están restringidos a inmunoterapia con ¡nterferón-a recombinante solo o en combinación el análogo nucleósido ribavirina, son de un beneficio clínico limitado. Además, no hay una vacuna establecida para el VHC. Como consecuencia, existe una necesidad urgente de mejores agentes terapéuticos que combatan eficazmente la infección crónica por VHC. El estado actual de la técnica en el tratamiento de la infección por VHC se han analizado en las siguientes referencias: B. Dymock, y col., "Novel approaches to the treatment of hepatitis C virus infection," Antiviral Chemistrv & Chemotherapy, 11 : 79-96 (2000); H. Rosen, y col., "Hepatitis C virus: current understandíng and prospects for future therapies," Molecular Medicine Today, 5: 393-399 (1999); D. Moradpour, y col., "Current and evolving therapies for hepatitis C," European J. Gastroenterol. Hepatol.. 11 : 1189-1202 (1999); R. Bartenschlager, "Candídate Targets for Hepatitis C Virus-Specific Antíviral Therapy," Interviroloqy. 40: 378-393 (1997); G.M. Lauer y B.D. Walker, "Hepatitis C Virus Infection," N. Enql. J. Med.. 345: 41-52 (2001); B.W. Dymock, "Emerging therapies for hepatitis C virus infection," Emerginq Druqs, 6: 13-42 (2001); y C. Crabb, "Hard-Won Advances Spark Excitement about Hepatitis C," Science: 506-507 (2001). Varias enzimas codificadas viralmente son supuestos objetivos para la intervención terapéutica, incluyendo una metaloproteasa (NS2-3), una serina proteasa (NS3), una helicasa (NS3), y una polimerasa de ARN dependiente de ARN (NS5B). La proteasa NS3 se localiza en el dominio N-terminal de la proteina NS3, y se considera un objetivo farmacológico principal ya que es responsable de una escisión intramolecular en el sitio de NS3/4A y del procesamiento intermolecular corriente abajo en las uniones de NS4A/4B, NS4B/5A y NS5A/5B. Una investigación previa ha identificado clases de péptidos, tales como hexapéptidos así como tripéptidos analizados en las solicitudes de Patente de Estados Unidos US2005/0020503, US2004/0229818, y US2004/00229776, que muestran grados de actividad en la inhibición de la proteasa NS4. El objetivo de la presente invención es proporcionar compuestos adicionales que muestren actividad contra la proteasa NS3 del VHC.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCION La presente invención se refiere a nuevos compuestos macrocíclicos de fórmula (I) y/o sales o hidratos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Estos compuestos son útiles en la inhibición de la proteasa NS3 (no estructural 3) del VHC (virus de la hepatitis C), en la prevención o tratamiento de uno o más de los síntomas de la infección por VHC, como compuestos o sus sales o hidratos farmacéuticamente aceptables (cuando sea apropiado), o como ingredientes de la composición farmacéutica, en combinación o no con otros antivirales contra el VHC, agentes anti- infecciosos, inmunomoduladores, antibióticos o vacunas. Más particularmente, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) y/o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo: en la que: p y q son ambos 1 ; R1 es CONR10SO2R6; R2 es alquilo C-?-C6 o alquenílo C2-C6, donde dicho alquilo o alquenilo está opcionalmente sustituido con 1 a 3 halo; R3 es alquilo C C8 o cicloalquilo C3-C8, R5 es H; R6 es cicloalquilo C3-C6; Y es C(=0); Z es O; M es alquileno C C?2 o alquenileno C2-C?2; y cada R10 es independientemente H o alquilo CrC6.

La presente invención también incluye composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de la presente ¡nvención y procedimientos para preparar tales composiciones farmacéuticas. La presente invención incluye además métodos para tratar o prevenir uno o más síntomas de la infección por VHC. Otras modalidades, aspectos y características de la presente invención se describen además en o serán obvias a partir de la siguiente descripción, ejemplos y reivindicaciones adjuntas.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCION La presente invención incluye compuestos de la fórmula I anterior, y sales y/o hidratos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Estos compuestos y sus sales y/o hidratos farmacéuticamente aceptables son inhibidores de la proteasa del VHC (por ejemplo, inhibidores de la proteasa NS3 del VHC). La presente invención también incluye compuestos de fórmulas ll-a y lll-a, en las que todas las variables son como se han definido para la fórmula I.

Una primera modalidad de la presente invención es un compuesto de fórmula I, ll-a o lll-a, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R1 es CONR10SO2R6, y el resto de variables son como se han definido originalmente (es decir, como se han definido en la breve descripción de la invención). En un primer aspecto de la primera modalidad, R1 es CONHSO2R6 donde R6 es cicloalquilo C3-C5; y el resto de variables son como se han definido en la primera modalidad. En una característica del primer aspecto de la primera modalidad, R1 es CONHS02R6 donde R6 es ciclopropilo; y el resto de variables son como se han definido en la primera modalidad. Una segunda modalidad de la presente ¡nvención es un compuesto de fórmula I, ll-a o lll-a, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R2 es alquilo C-pCß o alquenilo C2-C6; y todas las demás variables son como se han definido en un principio o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un primer aspecto de la segunda modalidad, R2 es alquilo C?-C4 o alquenilo C2-C4; y las demás variables son como se han definido en un principio o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un segundo aspecto de la segunda modalidad, R2 es alquenilo C2-C4; y todas las demás variables son como se han definido en un principio o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En una característica del segundo aspecto de la segunda modalidad, R2 es vinilo; y todas las demás variables son como se han definido en la tercera modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un tercer aspecto de la segunda modalidad, R2 es alquilo C C4; y las demás variables son como se han definido en un principio o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En una característica del tercer aspecto de la tercera modalidad, R2 es etilo; y todas las demás variables son como se han definido en la tercera modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. Una tercera modalidad de la presente invención es un compuesto de fórmula I, ll-a o lll-a, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, donde R3 es cicloalquilo C3-C8 o alquilo C-?-C8; y las demás variables son como se han definido en un principio o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un primer aspecto de la tercera modalidad, R3 es cicloalquilo C5-C7 o alquilo C?-C8; y todas las demás variables son como se han definido en la tercera modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un segundo aspecto de la tercera modalidad, R3 es cicloalquilo C5-C6 o alquilo C?-C8; y todas las demás variables son como se han definido en la tercera modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un tercer aspecto de la tercera modalidad, R3 es propilo o butilo; y todas las demás variables son como se han definido en la tercera modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En una característica del tercer aspecto de la tercera modalidad, R3 es /-propilo, n-butilo o f-butilo; y todas las demás variables son como se han definido en la tercera modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un cuarto aspecto de la tercera modalidad, R3 es ciclopentilo o ciclohexílo; y todas las demás variables son como se han definido en la tercera modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. Una cuarta modalidad de la presente invención es un compuesto de fórmula I, ll-a o lll-a, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, donde M es alquileno C1-C10 o alquenileno C2-C-?0 (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y las demás variables son como se han definido en un principio o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un primer aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno C-i-Ce o alquenileno C2-C8 (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y las demás variables son como se han definido en un principio o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un segundo aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno C4 o alqueníleno C4 (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un tercer aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno C5 o alqueníleno C5 (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un cuarto aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno Ce o alquenileno Ce (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un quinto aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno C7 o alquenileno C7 (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un sexto aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno C8 o alqueníleno C8 (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un séptimo aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno C9 o alquenileno C9 (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un octavo aspecto de la cuarta modalidad, M es alquileno C-?0 o alquenileno Cío (incluyendo alquileno o alquenilo de cadena lineal o ramificada); y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores. En un noveno aspecto de la cuarta modalidad, M se selecciona entre los siguientes; y todas las demás variables son como se definen en la cuarta modalidad o como se han definido en una cualquiera de las modalidades anteriores.

Una quinta modalidad de la presente invención es un compuesto, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, seleccionado entre el grupo constituido por los siguientes compuestos. 111-21 I-5 111-16 -17 111-18 -22 III-35 III-36 III-53 III-39 III-40 III-54 111-57 111-58 III-63 I-59 III-60 1-64 111-71 III-72 III-73 III-76 ?n-80 III-83 IH-77 -78 III-79 I-84 111-92 -93 111-96 111-97 111-113 111-111 111-112 111-116 111-132 1-133 111-117 111-136 111-137 111-157 -152 111-153 111-154 1-158 111-192 111-193 111-196 -226 1-210 -197 111-198 111-199 III-200 -201 111-202 -203 III-204 III-205 111-206 111-207 Otras modalidades de la presente invención incluyen las siguientes: (a) Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, ll-a, o lll-a y un vehículo farmacéuticamente aceptable. (b) La composición farmacéutica de (a), que comprende además un segundo agente terapéutico seleccionado entre el grupo constituido por un agente antiviral contra el VHC, un inmunomodulador, y un agente antiinfeccioso. (c) La composición farmacéutica de (b), en la que el agente antivíral contra el VHC es un antiviral seleccionado entre el grupo constituido por un inhibidor de la proteasa del VHC y un inhibidor de la polimerasa NS5B del VHC. (d) Una combinación farmacéutica que es (i) un compuesto de fórmula I, ll-a, o lll-a y (ii) un segundo agente terapéutico seleccionado entre el grupo constituido por un agente antiviral contra el VHC, un inmunomodulador, y un agente antiinfeccioso; donde el compuesto de fórmula I, ll-a, o lll-a y el segundo agente terapéutico se emplean cada uno en una cantidad que hace que la combinación sea eficaz para inhibir la proteasa NS3 del VHC, o para tratar o prevenir la infección por VHC. (e) La combinación de (d), donde el agente antivíral contra el VHC es un antiviral seleccionado entre el grupo constituido por un inhibidor de la proteasa del VHC y un inhibidor de la polimerasa NS5B del VHC. (f) Un método para inhibir la proteasa NS3 del VHC en un sujeto en necesidad del mismo que comprende administrar al sujeto una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, ll-a, o lll-a. (g) Un método para prevenir o tratar la infección por VHC en un sujeto en necesidad del mismo que comprende administrar al sujeto una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I, ll-a, o lll-a. (h) El método de (g), donde el compuesto de fórmula I, ll-a, o lll-a se administra en combinación con una cantidad eficaz de al menos un segundo agente terapéutico seleccionado entre el grupo constituido por un agente antiviral contra el VHC, un inmunomodulador, y un agente antiinfeccíoso. (i) El método de (h), donde el agente antiviral contra el VHC es un antiviral seleccionado entre el grupo constituido por un inhibidor de la proteasa del VHC y un inhibidor de la polimerasa NS5B del VHC. (j) Un método para inhibir la proteasa NS3 del VHC en un sujeto en necesidad del mismos que comprende administrar al sujeto la composición farmacéutica de (a), (b), o (c) o la combinación de (d) o (e). (k) Un método para prevenir o tratar la infección por VHC en un sujeto en necesidad del mismo que comprende administrar al sujeto la composición farmacéutica de (a), (b), o (c) o la combinación de (d) o (e). La presente invención también incluye un compuesto de la presente invención (i) para uso en, (ii) para uso como un medicamento para, o (¡ii) para uso en la preparación de un medicamento para: (a) inhibir la proteasa NS3 del VHC, o (b) prevenir o tratar la infección por VHC. En estos usos, el compuesto de la presente invención puede emplearse opcionalmente en combinación con uno o más segundos agentes terapéuticos seleccionados entre agentes antivírales contra el VHC, agentes anti-infecciosos e inmunomoduladores. Las modalidades adicionales de la invención incluyen las composiciones farmacéuticas, combinaciones y método indicados en los puntos anteriores (a)-(k) y los usos indicados en el párrafo anterior, donde el compuesto de la presente ¡nvención empleado en los mismos es un compuesto de una de las modalidades, aspectos, clases, subclases o características de los compuestos descritos anteriormente. En todas estas modalidades, el compuesto puede usarse opcionalmente en forma de una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable según sea apropiado. Como se usa en este documento, el término "alquilo" se refiere a cualquier grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene un número de átomos de carbono en el intervalo especificado. De esta manera, por ejemplo, "alquilo C1-6" (o "alquilo C Cß") se refiere a todos los isómeros de hexil alquilo y pentil alquilo así como n-, iso-, sec- y /-butilo, n- e isopropilo, etilo y metilo. Como otro ejemplo, "alquilo C?_4" se refiere a n-, iso-, sec- y f-butilo, n- e isopropilo, etilo y metilo. El término "haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo donde un hidrógeno se ha reemplazado con un halógeno. El término "alcoxi" se refiere a un grupo "alquil-O-". El término "alquileno" se refiere a cualquier grupo alquileno de cadena lineal o ramificada que tiene un número de átomos de carbono en el intervalo especificado. De esta manera, por ejemplo, "-alquileno C -6-" se refiere a cualquiera de los alquílenos de Ci a C6 de cadena lineal o ramificada. Una clase de alquílenos de particular interés con respecto a la invención es -(CH2)l-6-, y sub-clases de particular interés ¡ncluyen -(CH2)l-4-, -(CH2)l-3-, -(CH2)l-2-, y -CH2-. También es de interés el alquileno -CHíCHß)-. El término "alquenileno" se refiere a cualquier grupo alquenileno divalente de cadena lineal o ramificada que tiene un número de átomos de carbono en el intervalo especificado. Los términos "cícloalquilo" se refieren a cualquier anillo cíclico de un alcano o alqueno que tiene un número de átomos de carbono en el intervalo especificado. De esta manera, por ejemplo, "cicloalquilo C3-8" (o "cicloalquilo C3-C8") se refiere a cíclopropilo, cíclobutilo, ciclopentilo, ciclohexílo, cicioheptilo y ciclooctilo. El término "cicloalcoxi" se refiere a un grupo "cicloalquil-O-". El término "halógeno" (o "halo") se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo (como alternativa denominados fluoro, cloro, bromo y yodo). A menos que se establezca expresamente lo contrario, todos los intervalos citados en este documento son inclusivos. Por ejemplo, un anillo heteroarilo descrito como que contiene de "1 a 3 heteroátomos" significa que el anillo puede contener 1 , 2 ó 3 heteroátomos. También debe entenderse que cualquier intervalo citado en este documento incluye dentro de su alcance todos los sub-intervalos de ese intervalo. Las formas oxidadas de los heteroátomos N y S también se incluyen dentro del alcance de la presente invención. Cuando cualquier variable (por ejemplo, R10) aparece más de una vez en cualquier constituyente o la fórmula I, ll-a, o lll-a o en cualquier otra fórmula que representa y describe compuestos de la invención, su definición en cada caso es independiente de su definición en cualquier otro caso. Además, se permiten combinaciones de sustituyentes y/o variables únicamente si dichas combinaciones dan como resultado compuestos estables. A menos que se establezca expresamente lo contrarío, se permite la sustitución con un sustituyente nombrado sobre cualquier átomo de un anillo (por ejemplo, arilo, un anillo heteroaromático o un anillo heterocíclico saturado) con la condición de que dicha sustitución del anillo se permita químicamente y dé como resultado un compuesto estable. Un compuesto "estable" es un compuesto que puede prepararse y aislarse y cuya estructura y propiedades permanecen o puede hacerse que permanezcan esencialmente inalteradas durante un periodo de tiempo suficiente para permitir el uso del compuesto para los fines descritos en este documento (por ejemplo, administración terapéutica o profiláctica a un sujeto). Como resultado de la selección de sustituyentes y patrones de sustitución, ciertos compuestos de la presente invención pueden tener centros asimétricos y pueden aparecer en forma de mezclas de estereoisómeros, o en forma de diastereómeros individuales, o enantiómeros. Todas las formas isoméricas de estos compuestos, ya estén en forma aislada o en mezclas, están dentro del alcance de la presente invención. Como se reconocería por un especialista en la técnica, ciertos los compuestos de la presente ¡nvención pueden existir en forma de tautómeros. Para los fines de la presente invención, una referencia a un compuesto de fórmula I, ll-a, o lll-a es una referencia al compuesto per se, o a cualquiera de sus tautómeros per se, o a mezclas de dos o más tautómeros.

Los compuestos de las presentes invenciones son útiles en la inhibición de la proteasa del VHC (por ejemplo, proteasa NS3 del VHC) y en la prevención o tratamiento de la infección por VHC. Por ejemplo, los compuestos de esta invención son útiles para tratar la infección por VHC después de una presunta exposición pasada al VHC por medios tales como transfusión de sangre, intercambio de fluidos corporales, picaduras, clavarse accidentalmente una aguja, o exposición a la sangre del paciente durante una intervención quirúrgica. Los compuestos de esta invención son útiles en la preparación y realización de ensayos de selección para compuestos antivírales. Por ejemplo, los compuestos de esta invención son útiles para aislar mutantes enzimáticos, que son herramientas de selección excelentes para compuestos antivirales más potentes. Además, los compuestos de esta invención son útiles para establecer o determinar el sitio de unión de otros antivirales a la proteasa del VHC, por ejemplo, mediante inhibición competitiva. De esta forma, los compuestos de esta invención son productos comerciales que se venden para estos propósitos. Los compuestos de la presente invención pueden administrarse en forma de sales farmacéuticamente aceptables. La expresión "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que posee la eficacia del compuesto parental y que no es biológicamente o de otra forma indeseable (por ejemplo, no es tóxica ni de otra forma perjudicial para el receptor de la misma). Las sales adecuadas ¡ncluyen sales de adición de ácidos que pueden formarse, por ejemplo, mezclando una solución del compuesto de la presente invención con una solución de un ácido farmacéuticamente aceptable tal como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido acético, ácido trifluoroacético o ácido benzoico. Muchos de los compuestos de la invención llevan un resto ácido, en cuyo caso las sales adecuadas farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden incluir sales de metales alcalinos (por ejemplo, sales sódicas o potásicas), sales de metales alcalinotérreos (por ejemplo, sales calcicas o de magnesio), y sales formadas con ligandos orgánicos adecuados tales como sales de amonio cuaternario. Además, en el caso de que esté presente un grupo ácido (-COOH) o alcohol, pueden emplearse esteres farmacéuticamente aceptables para modificar la solubilidad o hidrólisis características del compuesto. El término "administración" y variantes del mismo (por ejemplo, "administrar" un compuesto) con respecto a un compuesto de la invención significa proporcionar el compuesto o un profármaco del compuesto al individuo en necesidad de tratamiento. Cuando un compuesto de la invención o un profármaco del mismo se proporciona en combinación con uno o más de otros agentes activos (por ejemplo, agentes antivirales útiles para tratar la infección por VHC), el término "administración" y sus variantes se entienden cada uno como que incluyen administración concurrente y secuencial del compuesto o sal (o hidrato) y de otros agentes. Como se usa en este documento, el término "composición" pretende abarcar un producto que comprende los ingredientes especificados, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de combinar los ingredientes especificados. Por "farmacéuticamente aceptable" se entiende que los ingredientes de la composición farmacéutica deben ser compatibles entre sí y no perjudiciales para el receptor de los mismos. El término "sujeto" (de forma alternativa denominado en este documento como "paciente") como se usa en este documento se refiere a un animal, preferiblemente un mamífero, más preferiblemente un ser humano, que ha sido objeto de tratamiento, observación o experimento. La expresión "cantidad eficaz" como se usa en este documento significa la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que produce la respuesta biológica o medicinal en un tejido, sistema, animal o ser humano que está siendo investigado por parte del investigador, veterinario, doctor u otro médico. En una modalidad, la cantidad eficaz es una "cantidad terapéuticamente eficaz" para el alivio de los síntomas de la enfermedad o afección a tratar. En otra modalidad, la cantidad eficaz es una "cantidad profilácticamente eficaz" para la profilaxis de los síntomas de la enfermedad o afección a prevenir. El término también incluye en este documento la cantidad de compuesto activo suficiente para inhibir la proteasa NS3 del VHC y producir por lo tanto la respuesta que se busca (es decir, una "cantidad eficaz de inhibición"). Cuando el compuesto activo (es decir, ingrediente activo) se administra en forma de sal, las referencias a la cantidad del ingrediente activo son al ácido libre o forma de base libre del compuesto.

Para el propósito de inhibir la proteasa NS3 del VHC y de prevenir o tratar la infección por VHC, los compuestos de la presente invención, opcionalmente en forma de una sal o de un hidrato, pueden administrarse por cualquier medio que produzca el contacto del agente activo con el sitio de acción del agente. Esto puede administrarse mediante cualquier medio convencional disponible para uso junto con agentes farmacéuticos, como agentes terapéuticos individuales o en combinación de agentes terapéuticos. Pueden administrarse solos, pero típicamente se administran con un vehículo farmacéutico seleccionado en función de la vía de administración elegida y de la práctica farmacéutica convencional. Los compuestos de la ¡nvención pueden administrarse, por ejemplo, por vía oral, parenteral (incluyendo inyecciones subcutáneas, inyección intravenosa, intramuscular, intraestemal o técnica de infusión), por pulverización para inhalación, o por vía rectal, o en forma de una dosificación unitaria de una composición farmacéutica que contiene una cantidad eficaz del compuesto y excipientes, adyuvantes y vehículos no tóxicos convencionales farmacéuticamente aceptables. Las preparaciones líquidas adecuadas para administración oral (por ejemplo, suspensiones, jarabes, elíxires y similares) pueden prepararse de acuerdo con técnicas conocidas en la técnica y puede emplearse cualquiera de los medios habituales tales como agua, glicoles, aceites, alcoholes y similares. Las preparaciones sólidas adecuadas para administración oral (por ejemplo, polvos, pildoras, cápsulas y comprimidos) pueden prepararse de acuerdo con técnicas conocidas en la técnica y pueden emplearse excipientes sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares. Las composiciones parenterales pueden prepararse de acuerdo con técnicas conocidas en la técnica y típicamente puede emplearse agua estéril en forma de un vehículo y opcionalmente otros ingredientes, tales como un adyuvante de solubilidad. Las soluciones inyectables pueden prepararse de acuerdo con procedimientos conocidos en la técnica donde el vehículo comprende una solución salina, una solución de glucosa o una solución que contiene una mezcla de solución salina y glucosa. Otra descripción de procedimientos adecuada para uso en la preparación de composiciones farmacéuticas de la presente ¡nvención y de ingredientes adecuados para uso en dichas composiciones se proporciona en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18° edición, editado por A. R. Gennaro, Mack Publishing Co., 1990. Los compuestos de esta ¡nvención pueden administrarse por vía oral en un intervalo de dosificación de 0.001 a 1000 mg/kg de peso corporal de mamífero (por ejemplo, ser humano) al día en una dosis única o en dosis divididas. Un intervalo de dosificación preferido es de 0.01 a 500 mg/kg de peso corporal al día por vía oral en una dosis única o en dosis divididas. Otro intervalo de dosificación preferido es de 0.1 a 100 mg/kg de peso corporal al día por vía oral en dosis únicas o divididas. Para administración oral, las composiciones pueden proporcionarse en forma de comprimidos o cápsulas que contienen de 1.0 a 500 mg del ingrediente activo, particularmente 1 , 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, y 500 miligramos del ingrediente activo para el ajuste sintomático de la dosificación al paciente a tratar. El nivel de dosis específico y la frecuencia de dosificación para cualquier paciente particular puede variar y dependerá de varios factores incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica, la duración de acción de ese compuesto, la edad, el peso corporal, el estado general de salud, el sexo, la dieta, el modo y tiempo de administración, la velocidad de excreción, la combinación farmacéutica, la gravedad de la afección particular y la terapia que recibe el huésped. Como se ha observado anteriormente, la presente invención también se refiere a un procedimiento para inhibir la proteasa NS3 del VHC, para inhibir la replicación del VHC, o prevenir o tratar la infección por VHC con un compuesto de la presente invención en combinación con uno o más agentes terapéuticos y una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención y uno o más agentes terapéuticos seleccionados entre el grupo constituido por un agente antiviral contra el VHC, un inmunomodulador, y un agente antiínfeccioso. Tales agentes terapéuticos activos contra el VHC incluyen, pero sin limitación, ribavirina, levovirina, viramidina, timosína alfa-1 , R7025 (un interferón potenciado (Roche)), interferón-ß, interferón-a, interferón-a pegilado (peginterferón-a), una combinación de ¡nterferón-a y ribavirina, una combinación de peginterferón-a y ribavirina, una combinación de interferón-a y levovírina, y una combinación de peginterferón-a y levovirina. El ¡nterferón-a incluye, pero sin limitación, el interferón-a2a recombinante (tal como el interferón Roferon disponible en Hoffmann-LaRoche, Nutley, NJ), interferón-a2a pegilado (Pegasys™), interferón-a2b (tal como el interferón Intron-A disponible en Schering Corp., Kenilworth, NJ), interferón-a2b pegilado (Peglntron™), un interferón de consenso recombinante (tal como interferón alfacon-1), albuferón (interferón-a unido a albúmina de suero humana (Human Genome Sciences)), y un producto del interferón-a purificado. El interferón de consenso recombinante de Amgen tiene el nombre comercial Infergen®. La levovirina es el enantiómero L de ribavirina que ha mostrado actividad inmunomoduladora similar a ribavírina. Viramidina representa un análogo de ribavirina descrito en el documento WO 01/60379 (cedido por ICN Pharmaceutícals). De acuerdo con el procedimiento de la presente invención, los componentes individuales de la combinación pueden administrarse por separado en diferentes períodos de tiempo durante el transcurso de la terapia o simultáneamente en formas de combinación divididas o únicas. Para el tratamiento de la infección por VHC, los compuestos de la presente invención también pueden administrarse en combinación con un agente que es un inhibidor de la serina proteasa NS3 del VHC. La serina proteasa NS3 del VHC es una enzima viral importante y se ha descrito como que es una diana excelente para la inhibición de la replicación del VHC. Los inhibidores basados tanto en sustrato como en no sustrato de inhibidores de la proteasa NS3 del VHC se describen en los documentos WO 98/22496, WO 98/46630, WO 99/07733, WO 99/07734, WO 99/38888, WO 99/50230, WO 99/64442, WO 00/09543, WO 00/59929, GB-2337262, WO 02/48116, WO 02/48172, y en la Patente de Estados Unidos N° 6,323,180. La ribavirina, levovirina y viramidina pueden ejercer sus efectos anti-VHC modulando los grupos intracelulares de nucleótidos guananina mediante la inhibición de la enzima intracelular inosina monofosfato deshidrogenasa (IMPDH). IMPDH es la enzima limitante de velocidad en la vía biosintétíca en la biosíntesis del nucleótido de guanina de novo. La ribavirina se fosforila rápidamente de forma intracelular y el derivado monofosfato es un inhibidor de IMPDH. De esta forma, la inhibición de IMPDH representa otra diana útil para descubrir inhibidores de la replicación del VHC. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención también pueden administrarse en combinación con un inhibidor de IMPDH, tal como VX-497, que se describe en los documentos WO 97/41211 y WO 01/00622 (cedidos por Vértex); otro inhibidor de IMPDH, tal como el descrito en el documento WO 00/25780 (cedido por Bristol-Myers Squibb); o un micofenolato mofetil [véase A.C. Allison y E.M. Eugui, Aqents Action, 44 (Supl.): 165 (1993)]. Para el tratamiento de la infección por VHC, los compuestos de la presente invención también pueden administrarse en combinación con el agente antiviral amantadina (1-aminoadamantano) [para una descripción completa de este agente, véase J. Kirschbaum, Anal. Profiles Drug Subs. 12: 1-36 (1983)]. Para el tratamiento de la infección por VHC, los compuestos de la presente invención también pueden administrarse en combinación con el agente antiviral inhibidor de la polimerasa R7128 (Roche).

Los compuestos de la presente invención también pueden combinarse para el tratamiento de la infección por VHC con ribonucleósidos 2'-C-ramificados antivírales descritos en R. E. Harry-O'kuru, y col., J. Orq. Chem., 62: 1754-1759 (1997); M. S. Wolfe, y col., Tetrahedron Lett.. 36: 7611-7614 (1995); Patente de Estados Unidos N° 3,480,613 (25 de noviembre de 1969); Publicación Internacional Número WO 01/90121 (29 de noviembre de 2001); Publicación Internacional Número WO 01/92282 (6 de diciembre de 2001); y Publicación Internacional Número WO 02/32920 (25 de abril de 2002); y Publicación Internacional Número WO 04/002999 (8 de enero de 2004); y Publicación Internacional Número WO 04/003000 (8 de enero de 2004); y Publicación Internacional Número WO 04/002422 (8 de enero de 2004); cuyos contenidos se incorporan como referencia en su totalidad. Tales ribonucleósidos 2'-C-ramificados incluyen, pero sin limitación, 2'-C-metil-citidina, 2'-C-metil-uridina, 2'-C-metil-adenosina, 2'-C-metil-guanos¡na, y 9-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-2,6-diaminopurina, y el correspondiente éster de aminoácido de los hidroxilos C-2', C-3', y C-5' de ribosa y los correspondientes 1 ,3-propanodíol esteres cíclicos opcionalmente sustituidos de los derivados 5'-f osf ato. Los compuestos de la presente invención también pueden combinarse para el tratamiento de la infección por VHC con otros nueclósidos que tienen propiedades anti-VHC, tales como los descritos en los documentos WO 02/51425 (4 de julio de 2002), cedido por Mitsubishi Pharma Corp.; WO 01/79246, WO 02/32920, WO 02/48165 (20 de junio de 2002), y WO2005003147 (13 de enero de 2005) (incluyendo R1656, (2'R)-2'-desoxi-2'-fluoro-2'-C-metilcitidina, mostrado como los compuestos 3^ en la página 77) cedido por Pharmasset, Ltd.; WO 01/68663 (20 de septiembre de 2001), cedido por ICN Pharmaceuticals; WO 99/43691 (2 de septiembre de 1999); WO 02/18404 (7 de marzo de 2002), US2005/0038240 (17 de febrero de 2005) y WO2006021341 (2 de marzo de 2006), incluyendo 4'-azido nucleósidos tales como R1626, 4'-azidocitidina, cedido por Hoffmann-LaRoche; U.S. 2002/0019363 (14 de febrero de 2002); WO 02/100415 (19 de diciembre de 2002); WO 03/026589 (3 de abril de 2003); WO 03/026675 (3 de abril de 2003); WO 03/093290 (13 de noviembre de 2003); US 2003/0236216 (25 de diciembre de 2003); US 2004/0006007 (8 de enero de 2004); WO 04/011478 (5 de febrero de 2004); WO 04/013300 (12 de febrero de 2004); US 2004/0063658 (1 de abril de 2004); y WO 04/028481 (8 de abril de 2004); cuyos contenidos se incorporan en este documento como referencias en su totalidad. Para el tratamiento de una infección por VHC, los compuestos de la presente invención también pueden administrarse en combinación con un agente que es un inhibidor de la polimerasa NS5B del VHC. Tales inhibidores de la polimerasa NS5B del VHC que pueden usarse como terapia de combinación incluyen, pero sin limitación, los descritos en los documentos WO 02/057287, US 6.777.395, WO 02/057425, US 2004/0067901 , WO 03/068244, WO 2004/000858, WO 04/003138 y WO 2004/007512; cuyos contenidos se incorporan en este documento como referencia en su totalidad.

Otros inhibidores de la polimerasa del VHC incluyen, pero sin limitación, valopicitabina (NM-283; Idenix) y 2'-F-2'-beta-metilcitidina (véase también el documento WO 2005/003147, cedido por Pharmasset, Ltd.). En una modalidad, los inhibidores nucleósidos de la polimerasa NS5B del VHC que se usan en combinación con los presentes inhibidores de la proteasa NS3 del VHC se seleccionan entre los siguientes compuestos: 4-amino-7-(2-C-metil-ß-D-arabinofuranosil)-7/-/-p¡rrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-metílamino-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7L/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-dímetilamino-7-(2-C-metil-ß-D-ríbofuranosil)-7H-pírrolo[2,3-d]pir¡mid¡na; 4-ciclopropilamino-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pírrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-vinil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-hidroximetil-ß-D-ríbofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-fluorometíl-ß-D-ribofuranosil)-7/- -pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-5-metil-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]p¡rimidina; ácido 4-amino-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-carboxílico; 4-amino-5-bromo-7-(2-C-metil-ß-D-r¡bofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]p¡rimid¡na; 4-amino-5-cloro-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimídina; 4-amino-5-fluoro-7-(2-C-metil-ß-D-ríbofuranosil)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pir¡midina; 2,4-diamino-7-(2-C-metíl-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]p¡rimidina; 2-amino-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pírimidina; 2-amino-4-ciclopropilamino-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7 -/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 2-amino-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7 - -pírrolo[2,3-d]pirimidin-4(3/-/)-ona; 4-amino-7-(2-C-etil-ß-D- ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C,2-O-dimetil-ß-D-ribofuranosíl)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pihmidina; 7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(3H)-ona; 2-amino-5-metil-7-(2-C, 2-O-dímetil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pírim¡din-4(3/-/)-ona; 4-amino-7-(3-desoxi-2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(3-desoxi-2-C-metil-ß-D-arabinofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-2-fluoro-7-(2-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(3-C-metil-ß-D-ríbofuranosil)-7 -/-pirrolo[2,3-d]pírimidina; 4-amino-7-(3-C-metil-ß-D-xilofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirímid¡na; 4-amino-7-(2,4-di-C-metil-ß-D-ribofuranosil)-7/-/-pirrolo[2,3-d]pírimidina; 4-amino-7-(3-desoxi-3-fluoro-2-C-metil-ß-D-hbofuranosíl)-7/-/-pirrolo[2 ,3-d]pirimidina; y los 5'-trifosfatos correspondientes; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Los compuestos de la presente invención también pueden combinarse para el tratamiento de una infección por VHC con inhibidores no nucleósidos de la polimerasa del VHC tales como los descritos en el documento WO 01/77091 (18 de octubre de 2001), cedido por Tularik, Inc.; documento WO 01/47883 (5 de julio de 2001), cedido por Japan Tobacco, Inc.; documento WO 02/04425 (17 de enero de 2002), cedido por Boehringer Ingelheim; documento WO 02/06246 (24 de enero de 2002), cedido por Istituto di Rícerche di Biología Moleculare P. Angeletti S.P.A.; documento WO 02/20497 (3 de marzo de 2002); documento WO 2005/016927 (en particular JTK003), cedido por Japan Tobacco, Inc.; cuyos contenidos se incorporan en este documento como referencia en su totalidad; y HCV-796 (Viropharma Inc.). En una modalidad, los inhibidores no nucleósidos de la polimerasa NS5B del VHC que se usan en combinación con los presentes inhibidores de la proteasa NS3 del VHC se seleccionan entre los siguientes compuestos: ácido 14-ciclohexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílíco; ácido 14-ciclohexil-6-(2-morfolin-4-iletil)-5,6,7,8-tetrahidroíndolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-carboxílico; ácido 14-ciclohexil-6-[2-(dimetilamino)etíl]-3-metoxi-5, 6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílico; ácido 14-ciclohexil-3-metoxi-6-metil-5, 6, 7, 8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílico; ({[(14-ciclohexíl-3-metoxi-6-metil-5,6,7,8-tetrahidroíndolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-il)carbonil]am¡no}sulfon¡l)acetato de metilo; ácido ({[(14-ciclohexil-3-metoxi-6-metil-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-il)carbonil]amino}sulfon¡l)acético; 14-ciclohexil-?/- [(dimetilamino)sulfoníl]-3-metoxi-6-metil-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocín-11 -carboxamida; ácido 3-cloro-14-ciclohexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocín-11-carboxílico; ¿» s(trifluoroacetato) de ?/'-(11-carboxi-14-ciclohexil-7,8-dihidro-6H-indolo[1 ,2-e][1 ,5]benzoxazocin-7-il)-?/,?/-dimetiletano-1 ,2-diaminio; ácido 14-ciclohexil-7,8-dihidro-6 -/-indolo[1 ,2-e][1 ,5]benzoxazocin-11 -carboxílico; ácido 14-ciclohexíl-6-metil-7-oxo-5,6,7,8-tetrah¡droindolo[2,1-a][2,5]benzodíazocin-11 -carboxílíco; ácido 14-ciclohexil-3-metoxi-6-metil-7-oxo-5,6,7,8- tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílico; ácido 14-ciclohexil-6-[2-(dimetilamíno)etil]-3-metoxi-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílico; ácido 14-ciclohexil-6-[3- (dimetilamino)propil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílico; ácido 14-ciclohexil-7-oxo-6-(2-piperidin-1-iletil)-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílico; ácido 14-ciclohexil-6-(2-morfolín-4-iletil)-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-carboxílico; ácido 14-ciclohexil-6-[2-(dietilamino)etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílíco; ácido 14-ciclohexíl-6-(1-metilpipehdin-4-il)-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-carboxílico; 14-ciclohexil-N-[(dimetilamino)sulfoníl]-7-oxo-6-(2-piperidin-1-iletil)-5,6,7,8-tetrahidroíndolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-carboxamida; 14-ciclohexil-6-[2-(dímetilamino)etil]-?/-[(d¡met¡lamino)sulfonil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroíndolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxamida; ácido 14-ciclopentil-6-[2-(dimetilamino)etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-carboxílico; ácido 14-ciclohexil-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11 -carboxílíco; ácido 6-alil-14-ciclohexil-3-metoxi-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-carboxílico; ácido 14-ciclopentil-6-[2-(dimetilamíno)etil]-5, 6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocin-11-carboxílico; ácido 14-ciclohexíl-6-[2-(dimetilamino)etil]-5,6,7,8-tetrahidroíndolo[2,1-a][2,5]benzodiazoc¡n-11 -carboxílico; ácido 13-ciclohexil-5-metil-4, 5,6,7-tetrahidrofuro[3',2':6,7][1 ,4]diazocino[1 ,8-a]indol-10-carboxílíco; ácido 15- ciclohexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-7-oxo-6,7,8,9-tetrahidro-5/-/-indolo[2,1-a][2,6]benzodiazonin-12-carboxílico; ácido 15-ciclohexil-8-oxo-6,7,8,9-tetrahídro-5/-/-indolo[2,1-a][2,5]benzodiazonín-12-carboxílico; ácido 13-ciclohexil-6-oxo-6,7-díhidro-5/-/-indolo[1 ,2-o][1 ,4]benzodíazepina-10-carboxílíco; y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los inhibidores de la polimerasa NS5B del VHC basados en indol tetracíclico anteriores pueden obtenerse siguiendo los procedimientos A-E resumidos a continuación, donde pueden seleccionarse diferentes variables de acuerdo con el compuesto indol tetracíclico específico a preparar: Método A 1 ) Manipulación del grupo funcional 2) cierre del anillo Se funcionalizó el intermedio 2-bromoindol (preparado como se describe en la solicitud de patente Internacional publicada WO2004087714) sobre el nitrógeno del para introducir la funcionalidad de precursor W7X' a uno o a los dos elementos W/X de la unión. Después, se llevó la metodología de acoplamiento cruzado mediada por Pd (por ejemplo, Suzuki, Stille etc) en el C2 aromático que tiene la funcionalidad de precursor Z'/Y' a uno o a los dos elementos Z Y de la unión. La manipulación de grupos funcionales seguido de cierre del anillo proporcionó el sistema tetracíclico. Después, la desprotección del éster produjo los ácidos carboxílicos de indol objetivo, con el C2 aromático unido al nitrógeno del indol.

Método B Después de la formación del ensamblaje de unión para dar el 2-haloaromátíco apropiado, el cierre del anillo mediada por Pd produjo el sistema tetracíclíco condensado. Después, la desprotección del éster produjo los ácidos carboxílicos de indol objetivo, con el C2 aromático unido al nitrógeno del indol.

Método C El C2 aromático se introdujo al principio mediante metodología de acoplamiento cruzado mediado por Pd (Suzuki, Stille etc). Después, se desarrolló la unión, con delación sobre el nitrógeno del indol que finalmente cerraba el anillo. Después, la desprotección del éster produjo los ácidos carboxílicos de indol objetivo, con el C2 aromático unido al nitrógeno del indol.

Método D 1 ) manipulación del grupo funcional 2) desprotección Los intermedios tetracíclícos condensados que se produjeron en los métodos A-C experimentaron manipulación de la funcionalidad en la unión antes de la desprotección del éster, produciendo los ácidos carboxílicos de indol C2-unídos objetiovo.

Método E Los ácidos carboxílicos de ¡ndol C2-unidos que se produjeron en los métodos A-D se derivaron adicionalmente a través de manipulación de la funcionalidad carboxilato para dar compuestos que tienen un reemplazo carboxilato o carboxamida. Durante cualquiera de las secuencias sintéticas anteriores puede ser necesario y/o deseable proteger grupos sensibles o reactivos sobre cualquiera de las moléculas de interés. Esto puede realizarse por medio de grupos protectores convencionales, tales como los descritos en Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J. F. W. McOmie, Plenum Press, 1973; y T. W. Greene y P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley y Sons, 3a edición, 1999. Los grupos protectores pueden retirarse en cualquier etapa conveniente usando métodos conocidos en la técnica. La actividad inhibidora de la proteasa NS3 del VHC de los presentes compuestos puede ensayarse usando ensayos conocidos en la técnica. Uno de estos ensayos es el ensayo de fluorescencia de resolución en el tiempo (TRF) de la proteasa NS3 del VHC como se describe en el Ejemplo 56. Otros ejemplos de tales ensayos se describen, por ejemplo, en la publicación de patente Internacional WO2005/046712. Los compuestos útiles como inhibidores de la proteasa NS3 del VHC tendrían un valor de Ki menor de 50 µM, más preferiblemente menor de 10 µM y aún más preferiblemente menor de 100 nM. La presente invención también incluye procedimientos para fabricar compuestos de fórmula I, ll-a, o lll-a. Los compuestos de la presente invención pueden prepararse fácilmente de acuerdo con los siguientes esquemas de reacción y ejemplos, o modificaciones de los mismos, usando materiales de partida reactivos y procedimientos de síntesis convencionales fácilmente disponibles. En estas reacciones, también es posible hacer uso de variantes que se conocen por sí mismas por los especialistas en la técnica, pero no se mencionan con más detalle. Además, otros métodos para preparar compuestos de la invención serán evidentes para el especialista en la técnica en vista de los siguientes esquemas de reacción y ejemplos. A menos que se indique otra cosa, todas las variables son como se han definido anteriormente. Los siguientes esquemas de reacción y ejemplos sirven únicamente para ilustrar la invención y su práctica. Los ejemplos no se han construido como limitaciones del alcance o espíritu de la invención.

Descripción General de la Síntesis: Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse como se resume en los Esquemas generales 1 y 2.

ESQUEMA 1 El Esquema 1 (n = 0-9) resume la síntesis de una molécula representativa. Un derivado de 4-hidroxíprolina apropiadamente protegido (por ejemplo, un nitrógeno protegido con carbamato y un ácido protegido con éster pueden hacerse reaccionar con carbonildíimidazol o un reactivo equivalente y después pueden hacerse reaccionar con una isoindolina o tetrahidroisoquinolina apropiadamente sustituida. La funcionalidad alquenilo puede introducirse en esta etapa o en una etapa posterior mediante una reacción catalizada con paladio de un sustituyente haluro tal como cloruro, bromuro y yoduro, u otra funcionalidad tal como un triflato con un reactivo organometálico tal como un vinil o aliltrialquilestaño. Como alternativa, la funcionalidad alquenilo puede introducirse antes de la reacción con prolinol protegido. El Esquema 2 describe la síntesis de la olefina que contiene una porción aminoácido. Un aminoácido (disponible en el mercado o que puede prepararse fácilmente usando procedimientos conocidos en la técnica) donde la funcionalidad ácido se protege en forma de un éster (por ejemplo, R = metilo) puede convertirse en amidas A por acoplamiento de un ácido carboxílico olefínico utilizando una gran diversidad de agentes de acoplamiento de péptidos conocidos por los especialistas en la técnica tales como DCC, EDC, BOP, TBTU, etc. La preparación de sulfonamidas B puede realizarse por reacción con el cloruro de sulfonilo apropiado en un solvente orgánico (por ejemplo, THF) con una base de amina como eliminador. Los derivados de urea C pueden prepararse haciendo reaccionar el aminoéster con un reactivo tal como carbonildiimidazol, para formar un isocianato intermedio (Catalano y col., documento WO 03/062192) seguido de la adición de una segunda olefina que contiene amina. Como alternativa, puede usarse fosgeno, difosgeno o trifosgeno en lugar de carbonildiimidazol. Pueden prepararse derivados de cianoguanidína D por reacción del éster de aminoácido con C-cianocarbonimidato de difenilo en un solvente orgánico, seguido de la adición de una segunda olefina que contiene amina. Pueden prepararse derivados de carbamato E haciendo reaccionar una olefina que contiene alcohol con carbonildiimidazol (o fosgeno, trifosgeno o difosgeno) en un disolvente orgánico, seguido de la adición del aminoéster.

ESQUEMA 2 Después de la funcionalización de la amina, el éster puede hidrolizarse en un intervalo de condiciones básicas conocidas por los especialistas en la técnica (Theodora W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Tercera Edición, John Wiley y Sons, 1999). La desproteccíón del grupo protector de carbamato sobre la porción prolina puede realizarse mediante una diversidad de procedimientos conocidos por los especialistas en la técnica (Theodora W. Greene, Protective Groups ¡n Organic Synthesis, Tercera Edición, John Wiley y Sons, 1999). Para completar la síntesis de los compuestos de esta invención, el derivado de aminoácido puede acoplarse al derivado de prolina mediante una gran diversidad de reactivos de acoplamiento de péptidos tales como DCC, EDC, BOP, TBTU etc (véase el Esquema 1). Después, se realiza la macrociclización mediante una metátesis de olefina usando un intervalo de catalizadores que se han descrito en la bibliografía para este fin. En esta etapa, el enlace olefínico producido en la metátesis de cierre del anillo puede hidrogenarse opcionalmente para dar un engarce saturado o funcionalizarse mediante rutas alternativas tales como ciclopropanación. Después, el éster de prolina se hidroliza en condiciones básicas y se acopla al éster de ciclopropilaminoácido (la porción apropiada de alquenilo o alquilcíclopropano de la molécula puede prepararse como se ha descrito anteriormente (Llinas-Brunet y col., documento US 6,323,180) y se somete a una etapa de hidrólisis básica adicional, proporcionando los compuestos finales. El éster de prolina también puede hidrolizarse y acoplarse directamente a una acilsulfonamida de ácido ciclopropilamino funcionalizada apropiadamente (que puede prepararse de acuerdo con Wang X.A. y col., documento WO2003/099274), proporcionando los compuestos finales. Los catalizadores de metátesis de olefinas incluyen las siguientes especies basadas en Rutenio: F: Miller y col. J. Am. Chem. Soc 1996, 118, 9606; G: Kingsbury y col. J. Am. Chem. Soc 1999, 121 , 791 ; H: Scholl y col. Org. Lett. 1999, 1 , 953; Hoveyda y col. US2002/0107138; K: Furstner y col. J. Org. Chem 1999, 64, 8275. La utilidad de estos catalizadores en la metátesis de cierre del anillo se conoce bien en la bibliografía (por ejemplo, Trnka y Grubbs, Acc. Chem. Res. 2001 , 34, 18).

Lista de Abreviaturas BOP Hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-trís- (dimetilamino)-fosfonio DCC Diciclohexilcarbodiímida CH3CN Acetonitrilo DBU 1 ,8-Diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DCE Dicloroetano DCM Diclorometano DMAP 4-Dimetilamino piridina DIPE Diisoproiletilamina DMF Dimetilformamida DMSO Dimetil sulfóxido EDC ?/-(3-Dimetilaminopropil)-?/'-etilcarbodiimida Et3N Tríetilamina Et2O Éter dietílico EtOAc Acetato de etilo EtOH Etanol HATU Hexafluorofosfato de 0-(7-Azabenzotriazol-1-il)-?/,?/,?/',?/'-tetramet¡luronio HBr Ácido bromhídhco HCl Ácido clorhídrico HOAc Acido acético HOAt 1 -Hidroxi-7-azabenzotriazol LiOH Hidróxido de litio MeOH Metanol MgSO4 Sulfato de magnesio NaHCO3 bicarbonato sódico Na2SQ4 sulfato sódico NaOH Hídróxido sódico NH4CI Cloruro de amonio NH4OH hidróxido de amonio Pd/C Paladio sobre carbono Pd(PPh3)4 tefraa;tv/s(tr¡fenilfosf¡na)paladio (0) PhMe Tolueno PPh3 Trifenilfosfina TA Temperatura ambiente THF Tetrahidofurano TBTU Tetrafluoroborato de O-Benzotriazol-1-íl-?/,?/,?/',?/'-tetrametiluronio EJEMPLO 1 (5R7S,10S)-10-Butil-/V-((1 2S)-1- r(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil|-2- vinilciclopropil)-3,9.12-trioxo-1,6.7,9.10,11,12,14,15.16-decahidro-5H- 2,22:5, 8-dimetano-4, 13, 2,8, 11-benzodioxatr¡azacicloicosina-7- carboxamida (111-1) Etapa 1 : 4-Cloroisoindolina Una mezcla de anhídrido del ácido 3-cloroftálico (9 g, 49.2 mmol) y formamida (100 ml) se calentó a 125°C y se agitó durante 3 h. Después, se añadió agua (300 ml) y la mezcla se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el sólido blanco resultante se lavó con agua y se secó para dar 4-cloro-1/-/-isoindol-1 ,3(2H)-d¡ona (7.7 g, rendimiento del 86%). A 4-cloro-1H-isoindol-1 ,3(2H)-diona sólida (4.0 g, 22.0 mmol) se añadió gota a gota complejo de borano-THF (1 M/THF, 88.1 ml, 88.1 mmol) con agitación. Cuando se completó la adición, la mezcla de reacción se calentó a reflujo (80°C) y se agitó durante 6 h. Después, la mezcla de reacción se enfrió a 0°C, se añadió cuidadosamente gota a gota metanol (2.8 ml, 88.1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente. Se añadió HCl (6 N) hasta que la mezcla fue acida y después la mezcla se concentró. El producto bruto se disolvió en HCl 1 M y se extrajo dos veces con éter etílico y dos veces con diclorometano. El pH de la fase acuosa se ajustó a pH = 11 con NaOH sólido y se extrajo tres veces con acetato de etilo. Los extractos de acetato de etilo combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron, dando 4-cloroisoindolina (1.8 g, rendimiento del 53%). EMBR (IEN) m/z 154 [(M+H)+; cale, para C8H9CIN: 154].

Etapa 2: 2-Metil-(2S,4/?)-4-(í(4-cloro-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]oxi)pirrolidin-1 ,2-dicarbox¡lato de 1- erc-butilo A una solución de éster metílico de N-Boc prolina (2.87 g, 11.7 mmol) en DMF (15 ml) a 0°C se le añadió carbonildiimidazol (1.9 g, 11.7 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 30 min. Después, se añadió una solución de 4-cloroisoindolina (1.8 g, 11.7 mmol) en DMF (10 ml) y la mezcla de reacción se calentó a 50°C y se agitó durante 2 h. La mezcla de reacción se vertió en éter etílico y el HCl 0.5 M y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con agua, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó sobre gel de sílice (gradiente de elución de acetato de etilo del 10% al 90% en hexanos), dando 2-metil-(2S,4f?)-4-{[(4-cloro-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-il)carbonil]oxi}pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1 -rere-butilo (3.3 g, rendimiento del 66%). EMBR (IEN) m/z 325 [(M+H-Boc)+; cale, para C15H18CIN2O4: 325].

Etapa 3: 2-metil-(2S.4R-4-(í(4-vinil-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-¡l)carbonil1oxi)pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1-ferc-butilo Una solución de 2-metil-(2S,4f?)-4-{[(4-vinil-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]oxi}pirrolidin-1 ,2-d¡carboxilato de 1-terc-butílo (40 mg, 0.09 mmol), tríbutilestannano de vinilo (36 mg, 0.11 mmol) y fluoruro de cesio (31 mg, 0.21 mmol) en dioxano (0.5 ml) se desgasificó con N2 durante 15 min. Después, se añadió b/s(tributilfosfina)paladio (0) (2 mg, 0.005 mmol) y el recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó a 100°C durante 18 h. Después de un periodo de refrigeración, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo del 10% al 90% en hexanos), dando 2-metíl-(2S,4R)-4-{[(4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-il)carbonil]oxi}pirrolidín-1 ,2-dicarbox¡lato de 1-ferc-butílo (10 mg, rendimiento del 25%). EMBR (IEN) m/z 317 [(M+H-Boc)+; cale, para C?7H21N2O4: 317].

Etapa 4: ?/-[(Pent-4-eniloxi)carbonil]-.--norleucil-(4/?)-4-([(4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-*/-isoindol-2-¡l)carbonWoxi)-L-prolinato de metilo A un matraz que contenía 2-metil-(2S,4f?)-4-{[(4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-il)carbonil]oxi}pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1-ferc-butílo (60 mg, 0.14 mmol) se le añadió una solución 4 M de HCl en dioxano (2 ml). Después de 1 h, el análisis por CL-EM indicó el consumo completo del material de partida y la formación del producto Boc deseado. Después, los componentes volátiles se retiraron al vacio y el material bruto se recogió en DMF (2 ml). A esta mezcla se le añadieron ?/-[(pent-4-en-1-iloxi)carbonil]-L-norleucina (41 mg, 0.17 mmol) (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación), DIPEA (0.076 ml, 0.43 mmol), EDC (54 mg, 0.28 mmol) y HOAt (44 mg, 0.28 mmol). Después de agitar a t.a. durante 30 min, el consumo completo de la amina fue evidente por CL-EM. Después, la mezcla de reacción se trató con HCl 0.5 N y EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO . Después, el solvente se retiró al vacío y el producto bruto se purificó sobre sílice (EtOAc al 10-90%/hexanos), produciendo 60 mg (rendimiento del 79%) de ?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]-L- norleucil-(4/?)-4-{[(4-vin¡l-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-il)carbonil]oxi}-/.-prolinato de metilo. EMBR (IEN) m/z 542 [(M+H)+; cale, para C29H40N3O7: 542].

Etapa 5 (5R7S, 10S)-10-Butil-3,9.12-trioxo- 1.6,7.9,10,11 ,12,14,15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo Una solución de ?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]- .-norleucil-(4f?)-4- {[(4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-il)carbonil]oxi}-/.-prolinato de metilo (60 mg, 0.11 mmol) en DCE (20 ml) se desgasificó con N2 durante 15 min. Después, se añadió catalizador de metátesis de rutenio de Zhan RC-301 (Catalizador I de Zhan (representado como J en la página 43), RC-301 , Zannan Pharma Ltd.) (7 mg, 0.01 mmol). Después, la solución se calentó a 100°C durante 1 h. En este momento, el análisis por CL-EM y CCF indicó el completo consumo del material de partida y la formación de un producto casi unitario que tenía la masa deseada. Después, el solvente se retiró al vacío y el producto bruto se purificó sobre sílice (EtOAc al 5-70%/hexano), produciendo 45 mg (rendimiento del 79%) de (5R7S,10S)-10-butil-3,9,12-tríoxo-1 , 6,7,9,10,11 ,12,14,15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo. EMBR (IEN) m/z 514 [(M+H)+; cale, para C27H36N3O7: 514].

Etapa 6; (5R7S,10S)-10-Butil-?/-((1 2S)-1- {[(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-vinilciclopropil)-3,9,12-trioxo-1 ,6,7,9,10,11 , 12,14, 15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4.13.2.8.11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida A una solución de (5R7S,10S)-10-butil-3,9,12-trioxo-1 , 6,7,9,10,11 ,12,14,15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo (45 mg, 0.09 mmol) en THF (2 ml), MeOH (0.5 ml) y agua (1 ml) se le añadió LiOH (21 mg, 0.87 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 40°C y se agitó durante 1 h, momento en el que se observó el completo consumo del materíal de partida éster metílico por CL-EM. Después, la mezcla se trató con HCl 0.5 N y EtOAc. Después, la fase orgánica se secó sobre K2CO3 y el disolvente se retiró al vacío. El producto bruto se recogió en DMF (1 ml). A la solución anterior se le añadieron cloruro de (1f?,2S)-1- {[(ciclopropilsulfonil)amino]carbon¡l}-2-vinilciclopropanamin¡o (Llinas-Brunet y col. documento US03/15755 y Wang y col. documento WO 03/099274) (32 mg, 0.12 mmol), TBTU (51 mg, 0.16 mmol) y DIPEA (0.071 ml, 0.40 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se purificó directamente por HPLC de fase inversa, dando (5R7S, 10S)-10-butil-?/-((1 R2S)-1 -{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-vinílciclopropil)-3,9, 12-trioxo-1 , 6,7, 9,10,11 ,12, 14,15, 16-decahidro-5/-/-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazac¡cloicosina-7-carboxamida (27 mg, rendimiento del 47%). 1H RMN (500 MHz, ppm, CDCI3) d 10.01 (s , 1 H), 7.27 (m, 2 H), 7.12 (d, 1 H), 7.04 (s, 1 H), 6.40 (d, J = 16.1 Hz, 1 H), 6.08 (m, 1 H), 5.76 (m, 1 H), 5.44 (s, 1 H), 5.36 (d, 1 H), 5.25 (d, 1 H), 5.14 (d, 1 H), 4.80-4.68 (m, 3 H), 4.59 (d, 1 H), 4.44 (m, 2 H), 4.38 (m, 1 H), 4.28 (m, 1 H), 3.95 (m, 1 H), 3.77 (dd, 1 H), 2.94 (m, 1 H), 2.43 (m, 2 H), 2.29 (d, 2 H), 2.06 (m, 2 H), 1.94 (m, 1 H), 1.78 (m, 4 H), 1.45 (m, 1 H), 1.38-1.06 (m, 5 H), 1.04 (d, 2 H), 0.92 (t, 3 H) ppm. EMBR (IEN) m/z 712 [(M+H)+; cale, para 712].

EJEMPLO 2 f5R7S.10S)-10-ferc-Butil-A/-(f1R2S)-1- (r(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil>-2-vinilciclopropil)-3,9,12-trioxo- l.ej.g.lO.II.IS. .IS.IS-decahidro-SH-S.SSiS.a-dimetano^.lS.S.S.H- benzodioxatriazacicloicosina-7 -carboxamida (111-2) El EJEMPLO 2 se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 1 con la excepción de que se usó 3-metil-?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]-L-valina (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-[(pent-4-en-1-iloxi)carbonil]-L-norleucina en la Etapa 4. 1H RMN (500 MHz, ppm, CDCI3) d 9.90 (s , 1 H), 7.28 (m, 2 H), 7.13 (m, 2 H), 6.31 (d, J = 15.9 Hz, 1 H), 6.04 (m, 1 H), 5.74 (m, 1 H), 5.45 (m, 2 H), 5.27 (d, 1 H), 5.16 (d, 1 H), 4.77-4.66 (m, 3 H), 4.55 (d, 1 H), 4.48 (t, 1 H), 4.41-4.35 (m, 2 H), 4.27 (m, 1 H), 3.93 (m, 1 H), 3.74 (dd, 1 H), 2.93 (m, 1 H), 2.45 (d, 2 H), 2.32 (m, 2 H), 2.10-1.95 (m, 2 H), 1.74 (m, 1 H), 1.47 (m, 1 H), 1.37 (m, 2 H), 1.07 (s, 9 H) ppm.

EMBR (IEN) m/z 712 [(M+H)+; cale, para C35H46N5?9S: 712].

EJEMPLO 3 (5R7S.10S)-10-ferc-Butil-?f-((1R2S)-1- (r(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil)-2-vinilciclopropil)-15,15-dimetil- 3.9.12-trioxo-1.6.7.9.10.11.12.14.15,16-decahidro-5H-2,22:5.8-dimetano- 4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7 -carboxamida (III-8) Etapa 1 : 1-Bromo-2,3-D/s(bromometil)benceno Una suspensión de 3-bromo-o-xileno (196 g, 1.06 mol), N-bromosuccinimida (377 g, 2.15 mol) y peróxido de benzoilo (0.26 g, 1.0 mmol) en tetracloruro de carbono (1800 ml) se calentó a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 15 h. Los contenidos del matraz de reacción se enfriaron, se filtraron y el filtrado se evaporó. El material bruto se destiló a alto vacío. Las fracciones principales se destilaron entre 88°C y 152°C. Se recuperaron 108 g del material puro. Se recuperaron 182 g de material ligeramente bruto que podrían usarse en la siguiente reacción. 1H RMN (CDCI3) d (ppm) 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.26 (s, 1 H), 7.16 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 4.84 (s, 2 H), 4.64 (s, 2 H).

Etapa 2: 2-Bencil-4-bromoisoindolina Se suspendió bicarbonato potásico (204 g, 2.04 mol) en acetonitrilo (12 I) y la mezcla se calentó a 80°C. Se añadieron a la vez soluciones de 1-bromo-2,3-fe/s(bromometíl)benceno (280 g, 0.82 mol en 500 ml de acetonitrilo) y bencilamina (87.5 g, 0.82 mol en 500 ml de acetonitrilo) mediante embudos de adición durante 1 h. La mezcla de reacción se agitó a 77°C durante 16 h. Los contenidos del matraz de reacción se enfriaron, se filtraron y el disolvente se retiró por evaporación. La reacción se repartió entre K2CO3 1 M y EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se evaporaron. Después de la evaporación, la cromatografía ultrarrápida en columna (gradiente de elución: de heptano a EtOAc al 10% en heptano) dio el compuesto del título en forma de un aceite pálido. 1H RMN (CDCb) d (ppm) 7.41-7.39 (m, 2 H), 7.37-7.34 (m, 2 H), 7.32-7.27 (m, 2 H), 7.10-7.03 (m, 2 H), 4.02 (s, 2 H), 3.97 (s, 2 H), 3.91 (s, 2 H). EMBR (IEN) m/z 289 [(M+H)+; cale, para C15H15BrN: 289]. Se convirtió en la sal HCl en HCI/MeOH. Se añadió MTBE y el sólido se filtró, dando 118 g de producto en forma de la sal HCl.

Etapa 3: 2-Bencil-4-viníl¡soindolina Una solución de 2-bencil-4-bromoisoindolina (16.7 g, 58.0 mmol) y tributíl(vinil)estaño (20.3 ml, 69.6 mmol) en tolueno (400 ml) se desgasificó burbujeando gas nitrógeno a través de la solución durante 0.25 h. Se añadió fefragu/s rifenilfosfinaÍpaladio (0) (1.30 g, 1.16 mmol) y la solución resultante calentó en un baño de aceite a 100°C en atmósfera de nitrógeno durante 24 h. Los contenidos del matraz de reacción se enfriaron, se evaporaron y se sometieron a cromatografía ultrarrápida en columna eluyendo con 95/5 de hexano/acetato de etilo, dando después de la evaporación el compuesto del título en forma de un aceite pálido que se volvió rosa después de un periodo de reposo. EMBR (IEN) m/z 236 [(M+H)+; cale, para C17H18N: 236].

Etapa 4: 4-Vinilisoindolina Una solución de 2-bencil-4-vinílisoindolina (58 mmol) en 1 ,2-dicloroetano (150 ml) se puso en un matraz de fondo redondo de 1 I en atmósfera de nitrógeno. A esto se le unió un embudo de adición que contenía una solución de cloroformiato de 1-cloroetilo (7.51 ml, 69.6 mmol) en 1 ,2-dícloroetano. El matraz de reacción se enfrió en un baño de hielo y los contenidos del embudo de adición se añadieron gota a gota durante 20 min manteniendo la temperatura interna de la reacción <5°C. Después de que se completara la adición, el matraz de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y después se calentó a reflujo durante 45 min. Los contenidos del matraz de reacción se enfriaron a temperatura ambiente y después el disolvente se retiró por evaporación. Se añadió metanol (200 ml) y los contenidos del matraz de reacción se calentaron a reflujo durante 30 min. El matraz de reacción se enfrió y el disolvente se retiró por evaporación. Se añadió agua (200 ml) y la mezcla resultante se lavó con acetato de etilo (2 x 250 ml). La fase acuosa se hizo básica con hidróxido sódico 2 N y después se extrajo con cloruro de metileno (4 x 250 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron con sulfato sódico anhidro, se filtraron y el filtrado se evaporó. El residuo restante se sometió a cromatografía ultrarrápida en columna eluyendo con 97/3/0.3 a 95/5/0.5 de cloruro de metileno/metanol/hídróxido amónico. La evaporación de las fracciones dio el compuesto del título en forma de un aceite pardo, 6.00 g (41.4 mmol, rendimiento del 71 % en dos etapas). EMBR (IEN) m/z 146 [(M+H)+; cale, para C10H12N: 146].

Etapa 5: 2-metil-(2S.4R-4-(f(4-vinil-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2- ¡l)carbonil]oxi)pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1 -terc-butilo Una solución de 2-metil-(2S,4/:?)-4-hidroxipirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1 -rere-butilo (10.1 g, 41.4 mmol) en DMF (90 ml) en atmósfera de nitrógeno se enfrió a 0°C. A la reacción se le añadió 1 ,1 '-carbonildiimidazol sólido (6.70 g, 41.4 mmol). Los contenidos del matraz de reacción se calentaron a temperatura ambiente y después de 2 h se añadió una solución de 4-vinilisoindolina (6.00 g, 41.4 mmol) en DMF (10 ml). La reacción se calentó en un baño de aceite a 60°C durante 2 h y después se enfrió y se vertió en agua y bisulfato potásico al 5%. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (4 x 250 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato sódico anhidro, se filtraron y se evaporaron. La cromatografía en columna instantánea eluyendo con 70/30 de hexano/acetato de etilo dio el compuesto del título en forma de una espuma blanca, 13.9 g (33.4 mmol, rendimiento del 81%). EMBR (IEN) m/z 417 [(M+H)+; cale, para C227H29N2O6: 417].

Etapa 6: Clorhidrato de (3R5$)-5-(metoxicarbonil)pirrolidin-3-il 4-vinil-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-carboxilato Una solución de 2-metil-(2S,4f?)-4-{[(4-viníl-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-íl)carbonil]oxi}pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1 -terc-butilo (13.9 g, 33.4 mmol) en acetato de etilo (700 ml) se enfrió en un baño de hielo y después se saturó con gas cloruro de hidrógeno. El matraz de reacción se cerró herméticamente y se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 3.5 h, el solvente se retiró por evaporación, dando el compuesto del título en forma de un sólido gris, 11.2 g (rendimiento del 95%). 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 7.47-7.45 (m, 1 H), 7.32-7.31 (m, 1 H), 7.26-7.21 (m, 1 H), 6.79-6.73 (m, 1 H), 5.79 - 5.73 (m, 1 H), 5.46 (s, 1 H), 5.41 - 5.38 (m, 1 H), 4.80 - 4.72 (m, 4 H), 3.91 (s, 3 H), 3.74 - 3.63 (m, 2 H), 2.77 - 2.71(m, 1 H), 2.51-2.46 (m, 1 H). EMBR (IEN) m/z 317 [(M+H)+; cale, para C17H21N2O4: 317].

Etapa 7: ?/-{[(2,2-Dimetilpent-4-enil)oxi1carbonil)-3-metil- -valil- (4c?)-4-f[(4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-¡soindol-2-¡l)carbon¡noxi)-L-prolinato de metilo A una solución de clorhidrato de (3R5S)-5-(metoxicarbonil)pirrolidin-3-il 4-vinil-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-carboxilato (2.00 g, 5.67 mmol) y ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil- .-valina (1.54 g, 5.67 mmol) en DMF (100 ml) se le añadieron EDC (1.41 g, 7.37 mmol), HOBt (1.00 g, 7.37 mmol) y DIPEA (3.16 ml, 22.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 18 h y después se diluyó con acetato de etilo y NaHCO3 acuoso. Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2SO , se filtró y se concentró. El residuo bruto se purificó sobre gel de sílice (gradiente de elución de acetato de etilo del 5% al 50% en hexanos), dando ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-met¡l- .-val¡l-(4R)-4-{[(4-vinil-1 ,3-díhidro-2/- -isoindol-2-il)carbonil]oxi}-/.-prol¡nato de metilo (2.75 g, rendimiento del 85%) en forma de una espuma blanca. EMBR (IEN) m/z 570 [(M+H)+; cale, para C31H44N3O7: 570].

Etapa 8: (5R7S,10S)-10-terc-Butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-1 , 6,7,9, 10.11.12.14, 15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8,11-benzod ioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo Una solución de ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)ox¡]carbonil}-3-metil-L-valil-(4R)-4-{[(4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-iso¡ndol-2-il)carbonil]oxi}-/.-prolinato de metilo (2.46 g, 4.32 mmol) en diclorometano anhidro (450 ml) se purgó con nitrógeno durante 15 min. Después, se añadió gota a gota una solución de dicloruro de b/s(triciclohexilfosfina)-3-fenil-1 /- -indeno- 1-ilidenorutenio (catalizador Neolyst M1 adquirido en Strem) (0.40 g, 0.43 mmol) en diclorometano anhidro desgasificado (50 ml) durante 30 min. La mezcla de reacción se agitó a TA, tiempo durante el cual se añadieron 0.2 g del catalizador aproximadamente cada 8-12 h. El progreso de la reacción se controló por HPLC hasta que la reacción se completó a las 48 h. El residuo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con EtOAc al 10-70%/Hexano, dando (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-1 , 6,7, 9,10,11 ,12, 14,15, 16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2, 8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo (1.85 g, rendimiento del 76%). EMBR (IEN) m/z 542 [(M+H)+; cale, para C29H40N3O7: 542].

Etapa 9: Ácido (5R7S.10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9.12-trioxo-1 , 6.7.9.10,11.12, 14.15.16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2.8.11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilico A una solución de (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-tríoxo-1 ,6,7,9,10,11 ,12,14, 15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo (0.9 g, 1.67 mmol) en THF:H2O (2:1 , 45 ml) se le añadió LiOH (0.40, 16.7 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 40°C y se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con HCl acuoso y se extrajo con EtOAc. La fase de EtOAc combinada se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró.

El producto se usó sin purificación adicional. EMBR (IEN) m/z 528 [(M+H)+; cale, para C28H38N3O7: 528].

Etapa 10 (5R7S,10S)-10-terc-Butil-?/-((1R2S)-1-{[(ciclopropilsulfon¡l)amino1carbonil)-2-vinilciclopropil)-15.15-dimetil-3.9.12-trioxo-1.6.7, 9.10,11.12.14, 15.16-decahidro-5H-2.22:5.8-dimetano-4, 13.2.8.11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida Una solución de ácido (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-1 ,6,7,9,10,11 ,12,14,15,16-decahídro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzod¡oxatriazacicloicosina-7-carboxílico (100 mg, 0.19 mmol), cloruro de (1 2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-vinilciclopropanaminio (Llinas-Brunet y col. documento US03/15755 y Wang y col. documento WO 03/099274) (76 mg, 0.28 mmol), fosforohexafluoruro de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-?/,?/,?/',?/ -tetrametiluronio (HATU, 108 mg, 0.28 mmol), DIPEA (0.073 ml, 0.42 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (2 mg) en diclorometano (5 ml) se agitó a 40°C durante 1 h. La solución de reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo con EtOAc. La fase de EtOAc combinada se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2S?4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía instantánea eluyendo con MeOH al 3%/CH2CI2, dando (5R7S,10S)-10-terc-butil-?/-((1R2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-vinilciclopropil)-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-1 , 6,7,9,10,11 ,12, 14,15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclo¡cosina-7-carboxam¡da (80 mg, rendimiento del 57%). 1H RMN (400 MHz, ppm, CDCI3) d 7.48 (s, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 7.12 (d, 1 H), 6.23 (d, J = 15.9 Hz, 1 H), 5.94 (m, 1 H), 5.76 (m, 1 H), 5.50 (m, 2 H), 5.43 (s, 1 H), 5.24 (d, J = 16.6 Hz, 1 H), 5.11 (d, 1 H), 4.70 (s, 2 H), 4.61 (d, 1 H), 4.48 (m, 3 H), 4.35 (d, 1 H), 4.14 (d, 1 H), 3.74 (d, 1 H), 3.34 (d, 1 H), 2.89 (m, 1 H), 2.43 (dd, 2 H), 2.06 (m, 1 H), 1.93 (m, 1 H), 1.89 (dd, 1 H), 1.43 (d, 1 H), 1.25 (m, 3 H), 1.09 (s, 3 H), 1.06 (s, 9 H), 0.86 (s, 3 H). EMBR (IEN) m/z 740 [(M+H)+; cale, para C37H50N5O9S: 740].

EJEMPLO 4 (5R7S.10S)-10-terc-Butil-?f-((1R2S)-1- (f(c¡clopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-vinilciclopropil)-3,9,12-trioxo- 6.7.9.10.11,12.14.15.16.17-decahidro-1H,5H-2.23:5,8-dimetano-4,13.2,8.11 benzodioxatriazaciclohenicosina-7 -carboxamida (111-12) 111-12 El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 3 con la excepción de que se usó 3-met¡l-?/-[(hex-5-eniloxi)carbonil]-/_-val¡na (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina en la Etapa 7. H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 9.13 (s, 1 H), 7.26 (t, 1 H), 7.23 (d, 1 H), 7.16 (d, 1 H), 6.39 (d, J = 16.4 Hz, 1 H), 6.08 (m, 1 H), 5.76 (m, 1 H), 5.38 (s, 1 H), 5.29 (d, 1 H), 5.12 (d, 1 H), 4.79 (d, 1 H), 4.73 - 4.63 (m, 4 H), 4.41 (s, 1 H), 4.37 (c, 1 H), 4.24 (d, 1 H), 3.96 (dd, 1 H), 3.77 (quint., 1 H), 2.94 (m, 1 H), 2.51 (c, 1 H), 2.29 - 2.13 (m, 4 H), 1.87 (dd, 1 H), 1.68 (m, 2 H), 1.53 (quint., 2 H), 1.44 (dd, 1 H), 1.25 (m, 2 H), 1.05 (s, 9 H). EMBR (IEN) m/z 726 [(M+H)+; cale, para 726].

EJEMPLO 5 (5R7S.10S)-10-Butil-/V-((1R2S)-1-fr(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-v¡nilcicloprop¡l)-3.9.12-trioxo-6.7.9,10.11.12.14,15.16.17-decahidro-1H.5H- 2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7- carboxamida (111-133) 111-133 El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 3 con la excepción de que se usó 3- metil-?/-[(hex-5-eniloxi)carbonil]-/.-norleucina (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-{[(2,2-d¡metilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-/--valina en la Etapa 7. 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 7.24 (t, 1 H), 7.23 (d, 1 H), 7.15 (d, 1 H), 6.91 (d, 1 H), 6.37 (d, J = 16.1 Hz, 1 H), 6.07 (m, 1 H), 5.75 (m, 1 H), 5.39 (s, 1 H), 5.29 (d, 1 H), 5.12 (d, 1 H), 4.77 (d, 1 H), 4.66 (m, 3 H), 4.57 (m, 1 H), 4.47 (c, 1 H), 4.39 (c, 1 H), 4.27 (d, 1 H), 3.90 (dd, 1 H), 3.77 (quint., 1 H), 2.96 (m, 1 H), 2.49 (c, 1 H), 2.29 (m, 1 H), 2.22 (m, 3 H), 1.88 (dd, 1 H), 1 .75 (m, 2 H), 1.64 (m, 2 H), 1.52 (m, 2 H), 1.39 (m, 5 H), 1.27 (m, 1 H), 1.18 (m, 1 H), 1 .09 (m, 2 H), 0.94 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 726 [(M+H)+; cale, para C36H48N5?9S: 726].

EJEMPLO 6 (5R7S.10S)-10-Butil-?/-((1R2S)-1-(rfciclopropilsulfonil)amino1carbonil>-2-vinilciclopropil)-3,9,12-trioxo-1,6,7.9,10,11.12,14.15.16.17.18-dodecahidro- 5H-2, 24:5, 8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclodocosina-7- carboxamida (111-198) 111-198 El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 3 con la excepción de que se usó N- [(hept-6-en-1-iloxi)carbonil]-L-norleucína (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metíl- -valina en la Etapa 7. 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 9.26 (s, 1 H), 7.39 (d, 1 H), 7.24 (t, 1 H), 7.15 (d, 1 H), 6.30 (d, J = 15.9 Hz, 1 H), 6.20 (m, 1 H), 5.75 (m, 1 H), 5.53 (s, 1 H), 5.31 (d, 1 H), 5.12 (d, 1 H), 4.70 (m, 4 H), 4.43 (dd, 1 H), 4.34 (m, 2 H), 4.27 (c, 1 H), 3.91 (dd, 1 H), 3.79 (quint., 1 H), 3.31 (m, 1 H), 2.97 (m, 1 H), 2.31 (m, 1 H), 2.22 (m, 3 H), 1.89 (dd, 1 H), 1.74 (m, 2 H), 1.66 (m, 1 H), 1.56 (m, 3 H), 1.38 (m, 8 H), 1.19 (m, 1 H), 1.09 (m, 2 H), 0.94 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 740 [(M+H)+; cale, para C37H50N5O9S: 740].

EJEMPLO 7 (5R7S.10S)-10-terc-Butil-V-((1R2S)-1- (f(ciclopropil3ulfonil)amino]carbonil>-2-vinilciclopropil)-15,15-dimetil- 3.9.12-trioxo-6,7.9.10,11.12.14.15.16.17-decahidro-1H.5H-2.23:5.8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7 -carboxamida (lll- 199) El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 3 con la excepción de que se usó N-{[(2,2-dimetilhex-5-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-/.-valina en la Etapa 7. 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 9.17 (s, 1 H), 7.27 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.21 (t, J = 7.5 Hz, 2 H), 7.16 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 6.38 (d, J = 16 Hz, 1 H), 6.03 (m, 1 H), 5.79 (m, 1 H), 5.32 (m, 2 H), 5.13 (m, 1 H), 4.82-4.77 (m, 1 H), 4.73-4.61 (m, 4 H), 4.48 (s, 1 H), 4.39 (m, 1 H), 4.19 (d, J = 12 Hz, 1 H), 3.96 (m, 1 H), 2.96 (m, 1 H), 2.59-2.55 (m, 1 H), 2.35-2.12 (m, 4 H), 1.89 (m, 1 H), 1.49-1.23 (m, 6 H), 1.51-0.98 (m, 14 H), 0.95-0.85 (m, 4 H).

EMBR (IEN) m/z 754 [(M+H)+; cale, para C38H52N5O9S: 754].

EJEMPLO 8 (5R7S.10S)-10-tere-Butil-?MM R2RM - ff(ciclopropilsulfonil)aminolcarbonil>-2-etilciclopropil)-3,9,12-trioxo- 1.6.7.9,10,11.12,14,15,16,17,18-dodecahidro-5H-2.22:5,8-dimetano- 4.13,2.8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7 -carboxamida (III-200) III-200 Una solución del EJEMPLO 2 (0.32 mg, 0.45 mmol) y paladio sobre carbono (al 10% en peso, 0.03 g) en EtOAc (10 ml) se agitó vigorosamente en una atmósfera de hidrógeno durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa (columna DeltaPak C18), ensayando CH3CN al 40-65% en agua (con 1 g/l de NH OAc). Las fracciones se concentraron, se diluyeron con NaHCO3 acuoso saturado (20 ml) y se extrajeron con CH2CI2 (3 x 70 ml). Las fases de CH2CI2 combinadas se lavaron con agua (50 ml), se secaron sobre Na2S04, se filtraron y se concentraron, dando (5R7S,10S)-10-terc-butíl-?/-((1R2f?)-1-{[(cíclopropilsulfonil)amino]carboníl}-2-etilciclopropil)-3,9,12-trioxo- 1 ,6,7,9,10,11 ,12, 14, 15, 16, 17, 18-dodecahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzod¡oxatriazac¡cloicos¡na-7-carboxamida (0.31 g, rendimiento del 97%). 1H RMN (CD3OD, ppm) d 7.23 (t, 1 H), 7.14 (d, 1 H), 7.10 (d, 1 H), 7.02 (d, 1 H), 5.52 (s, 1 H), 4.74 - 4.60 (m, 4 H), 4.48 - 4.30 (m, 4 H), 3.88 (d, 1 H), 3.75 (s, 1 H), 2.99 (m, 1 H), 2.62 (m, 1 H), 2.41 (m, 2 H), 2.14 (m, 1 H), 1.79 (m, 1 H), 1.65 - 1.51 (m, 6 H), 1.47 - 1.19 (m, 5 H), 1.07 (s, 9 H), 0.99 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 716 [(M+H)+; cale, para C35H50N5O9S: 716].

EJEMPLO 9 (5R7S.10S)-10-ferc-Butil-iV-((1R2R)-1- (r(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-etilciclopropil)-3,9,12-trioxo- 6.7.9.10,11.12.14.15.16.17,18,19-dodecahidro-1R5H-2.23:5,8-dimetano- 4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7 -carboxamida (111-201) El compuesto del título se preparó a partir del EJEMPLO 4 usando el procedimiento descrito para el EJEMPLO 8. 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 7.23 (t, 1 H), 7.14 (d, 1 H), 7.10 (d, 1 H), 7.02 (d, 1 H), 5.36 (s, 1 H), 4.71 (m, 3 H), 4.64 (t, 1 H), 4.56 (m, 1 H), 4.40 (m, 2 H), 4.24 (d, 1 H), 3.96 (dd, 1 H), 3.72 (quint., 1 H), 2.98 (m, 1 H), 2.58 (m, 1 H), 2.49 (m, 2 H), 2.15 (t, 1 H), 1.69 - 1.19 (m, 15 H), 1.09 (m, 1 H), 1.06 (s, 9 H), 0.98 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 730 [(M+H)+; cale, para C36H52N5?9S: 730].

EJEMPLO 10 (5R7S.10S)-10-Butil-? -((1R2R-1-fr(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-etilciclopropil)-3,9,12-trioxo-6.7.9.10.11.12.14,15.16.17.18.19-dodecahidro- 1 5H-2, 23:5, 8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7- carboxamida (III-202) El compuesto del titulo se preparó a partir del EJEMPLO 5 usando el procedimiento descrito para el EJEMPLO 8. 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 7.23 (t, 1 H), 7.14 (d, 1 H), 7.09 (d, 1 H), 6.99 (d, 1 H), 5.39 (s, 1 H), 4.76 - 4.61 (m, 4 H), 4.43 (m, 3 H), 4.29 (d, 1 H), 3.92 (dd, 1 H), 3.69 (quint., 1 H), 2.99 (m, 1 H), 2.57 (m, 1 H), 2.51 (m, 2 H), 2.19 (tt, 1 H), 1.77 (m, 1 H), 1.70 - 1.30 (m, 20 H), 1.17 (m, 2 H), 1.10 (m, 2 H), 0.99 (t, 3 H), 0.95 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 730 [(M+H)+; cale, para C36H52N5O9S: 730].

EJEMPLO 11 (5R7S,10S)-10-Butil-?V-((1R2ff)-1-(r(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2- etilciclopropil)-3.9, 12-trioxo-1.6.7,9.10, 11, 12, 14,15.16.17.18, 19.20- tetradecahidro-5H-2.24 :5.8-dimetano-4.13.2.8.11- benzodioxatriazaciclodocosina-7 -carboxamida (III-203) El compuesto del título se preparó a partir del EJEMPLO 6 usando el procedimiento descrito para el EJEMPLO 8. 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 7.25 (t, 1 H), 7.15 (d, 1 H), 7.11 (d, 1 H), 5.55 (s, 1 H), 4.70 (m, 4 H), 4.49 (m, 1 H), 4.38 (t, 1 H), 4.29 (m, 2 H), 3.94 (dd, 1 H), 3.73 (quint., 1 H), 3.00 (m, 1 H), 2.63 (quint., 1 H), 2.51 (m, 1 H), 2.38 (m, 1 H), 2.20 (tt, 1 H), 1.76 (quint., 1 H), 1.68 - 1.07 (m, 24 H), 1.00 (t, 3 H), 0.95 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 744 [(M+H)+; cale, para Ca^NsOgS: 744].

EJEMPLO 12 (5R7S.10S)-10-ferc-Butil- V-((1R2ffl-1- ([(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-etilciclopropil)-15,15-dimetil- 3,9,12-trioxo-1.6.7.9,10,11.12,14.15,16,17,18-dodecahidro-5H-2,22:5.8- dimetano-4.13.2.8,11 -benzodioxatriazacicloicosina-7 -carboxamida (III- 204) El compuesto del título se preparó a partir del EJEMPLO 3 usando el procedimiento descrito para el EJEMPLO 8. 1H RMN (400 MHz, ppm, CD3OD) d 9.06 (s, 1 H), 7.22 (dd, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 7.07 (d, 1 H), 5.51 (s, 1 H), 4.72 (d, 2 H), 4.68 (d, 2 H), 4.44 (d, 2 H), 4.28 (m, 2 H), 3.87 (dd, 1 H), 3.28 (m, 1 H), 2.98 (d, 1 H), 2.85 (m, 3 H), 2.52 (m, 1 H), 2.43 (m, 2 H), 2.15 (m, 1 H), 1.15-1.17 (m, 3 H), 1.41 (m, 2 H), 1.30 (m, 1 H), 1.21 (m, 4 H), 1.08 (m, 1 H), 1.06 (s, 3 H), 1.05 (s, 9 H), 0.98 (t, 3 H), 0.81 (s, 3 H). EMBR (IEN) m/z 744 [(M+H)+; cale, para 744].

EJEMPLO 13 (5R7S.10S)-10-terc-But¡l-/V-((1 R2R - (f(ciclopropilsulfonil)aminolcarbonil>-2-etilciclopropil)-15,15-dimetil- 3.9.12-trioxo-ß.7,9.10.11.12.14,15,16,17,18,19-dodecahidro-1H.5H-2,23:5.8-dimetano-4.13.2,8, 11-benzod¡oxatriazaciclohenicosina-7 -carboxamida (III- 205) El compuesto del título se preparó a partir del EJEMPLO 7 usando el procedimiento descrito para el EJEMPLO 8. 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 9.09 (s, 1 H), 7.24 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.15 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.10 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 5.53 (s, 1 H), 4.75 - 4.59 (m, 4 H), 4.44 - 4.37 (m, 3 H), 4.20 (d, J = 12 Hz, 1 H), 3.95 - 3.91 (m, 1 H), 3.31 (m, 2 H), 2.99 - 2.96 (m, 1 H), 2.62 - 2.46 (m, 3 H), 2.17 - 2.13 (m, 1 H), 1.67 - 1.50 (m, 6 H), 1.37 - 1.18 (m, 7 H), 1.15 - 0.96 (m, 16 H), 0.80 (s, 3 H). EMBR (IEN) m/z 758 [(M+H)+; cale, para C38H56N5O9S: 758].

Preparación Alternativa Etapa 1 : 1-Bromo-2,3-p/s(bromometil)benceno A una suspensión de 3-bromo-o-xileno (999 g, 5.40 mol) en clorobenceno (9 I) a TA se le añadieron ?/-bromosuccinimida (1620 g, 9.1 mol) y peróxido de benzoílo (2.6 g, 10.8 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 80°C y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a 70°C y se añadió una porción adicional de NBS (302 g, 1.7 mol). La mezcla de reacción se calentó a 80°C y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 22 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, se diluyó con heptano (6 I) y se filtró. La torta de filtro se lavó con heptano (4 I) y los filtrados combinados se evaporaron. El producto bruto se disolvió en heptano (2 I) y cloroformo (200 ml) y se filtró a través de alúmina básica (500 g). La capa de alúmina se lavó con heptano (4 I) y los filtrados combinados se evaporaron, dando 1-bromo-2,3-b/s(bromometil)benceno (1760 g, peso bruto) que se usó sin purificación adicional. 1H RMN (CDCI3) d (ppm) 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.26 (s, 1 H), 7.16 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 4.84 (s, 2 H), 4.64 (s, 2 H).

Etapa 2: Clorhidrato 2-bencil-4-bromoisoindolina Se suspendió bicarbonato potásico (657 g, 6.56 mol) en MeCN (17 I) y la mezcla se calentó a 80°C. Se añadieron simultáneamente soluciones de 1-bromo-2,3-b/'s(bromometil)benceno bruto (900 g, 2.63 mol en 1 I de MeCN) y bencilamina (281 g, 2.63 mol en 1 L MeCN) mediante embudos de adición durante 2 h. La mezcla de reacción se agitó a 77°C durante 2 h y después se enfrió a TA y se agitó durante 16 h. Los contenidos del matraz de reacción se enfriaron, se filtraron y el solvente se retiró por evaporación. La reacción se repartió entre agua (6 I) y EtOAc (2 I). El pH se ajustó a >9 mediante la adición de K2CO3 1 M, las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con una porción adicional de EtOAc (2 I). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se evaporaron. El aceite bruto se diluyó con EtOH (300 ml) y se enfrió a 0°C. Se añadió HCl metanólico hasta que la mezcla fue acida, seguido de MTBE (700 ml) y la mezcla se sónico y después se agitó durante 15 h. Se añadió MTBE (1 I) y la mezcla se filtró y se lavó con EtOH al 20% en MTBE seguido de MTBE. El sólido se secó al aire, dando clorhidrato de 2-bencil-4-bromoisoindolina (211 g). Se aisló una porción adicional de producto (86 g) por concentración de las aguas madre.

EMBR (IEN) m/z 289 [(M+H)+; cale, para C15H15BrN: 289].

Etapa 3: 4-Bromoisoindolina A una solución de clorhidrato de 2-bencil-4-bromoisoíndolina (11 g, 30.96 mmol) en 200 ml de EtOAc se le añadió NaOH 1 M (100 ml) y la mezcla se agitó durante 30 mín. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO anhidro y el disolvente se evaporó hasta un aceite que se destiló azeotrópicamente una vez con tolueno (50 ml). El aceite se disolvió en clorobenceno (50 ml) y a la solución agitada se le añadieron tamices moleculares 4 A (5 g). Después de 10 min, se añadió gota a gota 1-cloroetilcloroformíato (5.6 ml, 51 mmol) durante 5 min. Después, la mezcla de reacción se calentó a 90°C durante 2 h, se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. Los sólidos se lavaron con clorobenceno (5 ml) y metanol (40 ml). El filtrado se calentó a 70°C durante 1 h., se dejó enfriar y se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Los sólidos se filtraron, se lavaron con clorobenceno (2 ml) y hexano y se secaron, dando 6.84 g del compuesto del título. EMBR (IEN) m/z 198.1 [(M+H)+; cale, para C8H9BrN: 198.0].

Etapa 4: 2-Met¡l-(2S.4R-4-(K4-bromo-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-il)carbonil1oxi)pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1-f-butilo A una solución de éster metílico de (2S,4f?)-BOC-4-hidroxiprolina (126.3 g, 515 mmol) en DMF (960 ml) a 0°C se le añadió N,N'-carbonildiimidazol (83.51 g, 515 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Se añadieron clorhidrato de 4-bromoisoindolína (120 g, 515 mmol) y diisopropiletilamina (96.3 ml, 540 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 50°C durante 6 h, después se dejó enfriar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (3 I) y KHSO4 acuoso al 10% (6 I), la fase acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (2 I) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO3 acuoso al 10% y salmuera, se secaron sobre Na2S04 y el disolvente se evaporó hasta una espuma (239 g). EMBR (IEN) m/z 471.0 [(M+H)+; cale, para C20H26BrN2O6: 471.1].

Etapa 5: 2-Metil-(2S.4R)-4-fK4-vinil-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)carboninoxi)pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1-r-butilo A una solución de 2-metil-(2S,4f?)-4-{[(4-bromo-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]oxi}pirrolidin-1 ,2-dicarboxilato de 1-f-butilo (10.0 g, 21.3 mmol) en etanol (200 ml) se le añadieron viniltrífluoroborato potásico (4.28 g, 32 mmol) y trietilamina (4.5 ml, 32 mmol) seguido de aducto de cloruro de dicloro[1 ,1-J /s(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) y diclorometano (175 mg, 0.21 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 6 h, se enfrió temperatura ambiente, se diluyó con KHSO4 acuoso al 10% y el etanol se retiró por evaporación al vacío. El residuo acuoso se extrajo con EtOAc, la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, el solvente se evaporó y el producto bruto se purificó por cromatografía sobre sílice eluyendo con EtOAc al 40-60%/hexano, dando, después de la evaporación, el compuesto del título (8.18 g). EMBR (IEN) m/z 417.2 [(M+H)+; cale, para C22H29N2O6: 417.2].

Etapa 6: Clorhidrato de (3R5S)-5-(metoxicarbonil)pirrolidin-3-il 4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindolo-2-carboxilato .HCl Una mezcla de 2-metil-(2S,4f?)-4-{[(4-vínil-1 ,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)carbonil]oxi}pirrolidin-1 ,2-dicarboxílato de 1-f-butilo (18.0 g, 43.2 mmol) y HCI/dioxano (4 M) (43.2 ml, 173 mmol) se agitó a TA durante 2 h. La mezcla de reacción se concentró para retirar el dioxano seguido de concentración en Et2O, dando clorhidrato de (3R5S)-5- (metoxicarbonil)pirrolidin-3-il 4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindolo-2-carboxilato en forma de un sólido blanquecino (15 g) que se usó sin purificación adicional. EMBR (IEN) m/z 317 [(M+H)+; cale, para C17H21N2O4: 317].

Etapa 7: ?/-{[(2,2-Dimetilhex-5-en-1-il)ox¡1carbonil)-3-metil-/_-val (4ft)-4-f[(4-vinil-1 ,3-dihidro-2/-/-isoindol-2-il)carbonil]oxi)- -prolinato de metilo A una solución de clorhidrato de (3R5S)-5-(metoxicarboníl)pirrolidin-3-il 4-vinil-1 ,3-dihidro-2H-isoindolo-2-carboxilato (5.0 g, 14.2 mmol) y ?/-{[(2,2-dimetilhex-5-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina (4.0 g, 14.2 mmol) en DMF (20 ml) a TA se le añadieron DIPEA (2.5 ml, 14.2 mmol), EDC (5.5 g, 28.4 mmol) y HOAt (1.9 g, 14.2 mmol). Después de 18 h, la mezcla de reacción se vertió en Et2O y se extrajo con HCl 1 N. La fase acuosa se extrajo con EtOAc y las fases orgánicas combinadas se lavaron con HCl 1 N, agua, NaHCO3 y salmuera. La fase orgánica se secó sobre MgS0 y el disolvente se retiró al vacío. El producto bruto se purificó sobre sílice (EtOAc al 30% en hexanos), proporcionando 4.2 g del compuesto del título en forma de un aceite pegajoso. EMBR (IEN) m/z 584.4 [(M+H)+; cale, para C32H46N3O7: 584.3].

Etapa 8: (5R7S,10S.18E)-10-terc-Butil-15.15-dimetil-3.9.12-trioxo-6.7, 9.10,11 , 12.14.15,16,17-decahidro-1H.5H-2.23:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatr¡azaciclohenicosin-7-carboxilato de metilo A una solución de ?/-{[(2,2-dimetilhex-5-en-1-il)oxi]carbonil)-3-metil-L-valil-(4f?)-4-{[(4-vínil-1 ,3-dihidro-2H-¡soindol-2-¡l)carbonil]oxi}-L-prolinato de metilo (4.7 g, 8.05 mmol) en DCM desgasificado (burbujeando nitrógeno durante 30 min) (1410 ml) se le añadió catalizador Zhan 1 B (catalizador Zhan 1 B, RC-303, Zannan Pharma Ltd.) (0.591 g, 0.805 mmol). Después, la mezcla se agitó a TA en una atmósfera de N2. Después de 19 h, la reacción se completó y se añadió DMSO (57 µl, 0.805 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h y la mezcla se concentró al vacío hasta -70 ml. Después, el producto se purificó directamente sobre sílice (gradiente de elución, EtOAc al 0-50% en hexanos), proporcionando 4.4 g del compuesto del título en forma de un aceite. EMBR (IEN) m/z 556.3 [(M+H)+; cale, para C30H42N3O7: 556.3].

Etapa 9: (5R7S,10S)-10-terc-Butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-6.7.9.10.11.12.14.15,16.17,18, 19-dodecahidro-1H.5H-2,23:5.8-dimetano- 4.13,2,8,11-benzodioxatriazac¡clohenicosin-7-carboxilato de metilo A una solución de (5R7S,10S,18E)-10-terc-butil-15,15-dimetil- 3,9,12-tñoxo-6,7,9,10,11 ,12,14,15,16,17-decahidro-1H,5/-/-2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzod¡oxatriaza-ciclohenicos¡na-7-carboxilato de metilo (4.4 g, 7.92 mmol) en EtOAc (79 ml) se le añadió Pd/C (0.421 g, 0.396 mmol). Después, se colocó un globo de H2 sobre el matraz de reacción. El matraz se evacuó rápidamente y se cargó con H2. Después de 17 h, la reacción se completó según se determinó por CL-EM. El Pd/C se filtró a través de lana de vidrio y el producto bruto se purificó sobre sílice (gradiente de elución, EtOAc al 0-60% en hexanos), proporcionando 4.01 g del compuesto del título en forma de un polvo blanco. EMBR (IEN) m/z 558.4 [(M+H)+; cale, para C30H44N3O7: 558.3].

Etapa 10: Ácido (5R7S,10S)-10-terc-Butil-15.15-dimetil-3.9.12-trioxo-ej.g.lO.H .^. .Id.ie.^.ld.ig-dodecahidro-IH.dH^^S^.d-dimetano-4,13,2,8, 11-benzodioxatriazaciclohenicosin-7-carboxílico A una solución de (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-6,7,9,10,11 ,12, 14, 15,16,17, 18,19-dodecahídro-1H,5H-2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8, 11-benzodioxatriazaciclohenicosin-7-carboxilato de metilo (5.76 g, 10.33 mmol) en THF (41.3 ml), MeOH (41.3 ml) y agua (20.7 ml) a TA se le añadió LiOH (4.33 g, 103 mmol). Después de que se completara la conversión (45 mín), según se determinó por CL-EM, la reacción se trató repartiéndose entre Et2O y HCl 1 N. Después, la fase acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 y el disolvente se retiró al vacío, proporcionando 5.53 g del compuesto del título, que se usó sin purificación adicional. EMBR (IEN) m/z 544.4 [(M+H)+; cale, para C29H42N3O7: 544.3].

Etapa U (5R7S,10S)-10-terc-Butil-?/-((1 R2R-1- (f(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil)-2-etilciclopropil)-15,15-dimetil-3.9.12-trioxo-6.7.9.10.11.12.14.15.16.17.18.19-dodecahidro-1H.5H-2.23:5.8-dimetano-4,13,2,8, 11-benzodioxatriazaciclohenicosin-7-carboxamida (HI-205) A una solución de ácido (5R7S,10S)-10-terc-Butil-15,15-dimetil- 3,9,12-trioxo-6,7,9,10,11 ,12, 14,15,16,17, 18, 19-dodecahidro-1H,5H-2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8, 11-benzodioxatriaza-ciclohenicosina-7-carboxílico (5.53 g, 10.17 mmol) y clorhidrato de (1R2R)-1-amino-?/-(ciclopropilsulfonil)-2-etílciclopropanocarboxamida (3.28 g, 12.21 mmol) en DMF (50.9 ml) se le añadieron DIPEA (7.11 ml, 40.7 mmol) y HATU (5.03 g, 13.22 mmol). Después de que se completara la conversión (1 h), la mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y HCl 1 N. La fase orgánica se lavó tres veces con salmuera, se secó sobre MgSO y el disolvente se retiró al vacío. Después, el material bruto se purificó sobre sílice (gradiente de elución, EtOAc al 20-80% en hexanos), proporcionando 5.8 g del compuesto del título en forma de un polvo blanco.

EJEMPLO 14 (5R7S.10S)-10-fere-Butil-?Md R2SH - (f(ciclopropilsulfonil)am8no1carbonil)-2-vinilciclopropil)-3.9.12-trioxo- 1.6.7.9.10,11, 12,14.15.16.17.18-dodecahidro-5H-2,22:5,8-dimetano- 4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7 -carboxamida (III-5) III-5 Etapa 1 : (5R7S, 10S1-10-terc-Butil-3.9.12-trioxo- 1.6.7.9.10.11.12.14.15.16-decahidro-5H-2.22:5.8-dimetano-4.13,2,8.11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo Se preparó (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo- 1 ,6,7,9,10,11 , 12,14, 15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8,11- benzodíoxatriazacícloicosina-7-carboxilato de metilo de acuerdo con el procedimiento usado para (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-1 , 6, 7, 9,10,11 ,12, 14, 15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2, 8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxílato de metilo (EJEMPLO 3, Etapa 8) con la excepción de que se usó 3-metil-?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]- .-valina (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina en la Etapa 7. EMBR (IEN) m/z 514 [(M+H)+; cale, para C27H36N3O7: 514].

Etapa (5R7S, 10S)-10-ferc-Butil-3,9, 12-trioxo- 1 ,6,7,9,10,11 ,12, 14, 15,16,17, 18-dodecahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo A una solución de (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo-1 ,6,7,9,10,11 ,12,14,15,16,17,18-dodecahídro-5H-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8, 11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carbox¡lato de metilo (0.10 g, 0.20 mmol) en acetato de etilo (7 ml) se le añadió paladio al 10% sobre carbono (0.01 g). La mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante 5 h a temperatura ambiente. Los contenidos del matraz de reacción se filtraron a través de celite y el filtrado se evaporó. El producto bruto se usó sin purificación adicional (0.09 g, rendimiento del 90%). EMBR (IEN) m/z 516 [(M+H)+; cale, para C27H38N3O7: 516].

Etapa 3 (5R7S,10S)-10-terc-Butil-?/-((1R2S)-1- (í(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-vin¡lciclopropil)-3,9,12-thoxo-1 , 6.7,9,10,11.12.14.15.16.17,18-dodecahidro-5H-2,22:5.8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida A una solución de (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo-1 ,6,7,9, 10,11 ,12, 14, 15,16,17,18-dodecahidro-5 V-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclo¡cosina-7-carboxilato de metilo (90 mg, 0.18 mmol) en THF (2 ml) y MeOH (0.5 ml) se le añadió LiOH (1 N, 1.75 ml, 1.75 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 40°C y se agitó durante 1 h, momento en el que se observó el consumo completo del material de partida éster metílico por CL-EM. Después, la mezcla se trató con HCl 0.5 N y EtOAc. Después, la fase orgánica se secó sobre K2CO3 y el solvente se retiró al vacío. El producto bruto se recogió en DMF (1 ml). A la solución anterior se le añadieron cloruro de (1 R,2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-vinilciclopropanaminío (51 mg, 0.19 mmol), TBTU (77 mg, 0.24 mmol) y DIPEA (0.07 ml, 0.40 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se purificó directamente por HPLC de fase inversa, dando (5R7S,10S)-10-terc-butil-?/-((1R2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-vinilciclopropíl)-3,9,12-trioxo-1 ,6,7,9,10,11 ,12,14,15,16,17,18-dodecahidro-5/-/-2,22:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (34 mg, rendimiento del 28%). H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 9.14 (s, 1 H), 7.23 (t, 1 H), 7.13 (d, 1 H), 7.10 (d, 1 H), 5.75 (quint., 1 H), 5.53 (s, 1 H), 5.29 (d, 1 H), 5.12 (d, 1 H), 4.75 - 4.59 (m, 5 H), 4.42 (m, 2 H), 4.34 (s, 1 H), 4.30 (d, 1 H), 3.88 (dd, 1 H), 3.75 (m, 1 H), 3.60 (c, 2 H), 2.95 (m, 1 H), 2.63 (m, 1 H), 2.41 (m, 2 H), 2.26 - 2.12 (m, 2H), 1.88 (dd, 1 H), 1.79 (m, 1 H), 1.56 (m, 3 H), 1.41 (m, 3 H), 1.25 (m, 2 H), 1.17 (t, 2 H), 1.06 (s, 9 H). EMBR (IEN) m/z 714 [(M+H)+; cale, para 714].

EJEMPLO 15 (5R7S.10S)-10-ferc-Butil-iV-((1R2S)-1- (r(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil)-2-vinilciclopropil)-15,15-dimetil- 3,9,12-trioxo-1,6,7,9,10,11,12.14,15,16,17,18-dodecahidro-5H-2.22:5.8- dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7 -carboxamida (III- 206) El compuesto del título se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 14 (usando las etapas 2 y 3) con la excepción de que se usó (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimet¡l-3,9,12-tr¡oxo-1 ,6,7,9,10,11 ,12, 14, 15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8,11-benzodioxatríazacicloicosina-7-carboxilato de metilo (EJEMPLO 3, Etapa 1) en lugar de (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo-1 , 6,7,9,10,11 ,12, 14, 15,16-decahidro-5/-/-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo en la Etapa 2. 1H RMN (400 MHz, ppm, CDCI3) d 9.91 (s, 1 H), 7.22 (t, 1 H), 7.09 (d, 2 H), 7.05 (d, 1 H), 5.77 (m, 1 H), 5.60 (s, 1 H), 5.45 (d, 1 H), 5.29 (s, 1 H), 5.15 (d, 1 H), 4.72 (c, 2 H), 4.40-4.55 (m, 4 H), 4.30 (d, 1 H), 4.25 (d, 1 H), 3.78 (dd, 1 H), 3.26 (d, 1 H), 2.91 (m, 1 H), 2.50 (m, 3 H), 2.39 (m, 3 H), 2.11 (m, 1 H), 1.98 (m, 2 H), 1.51 (m, 2 H), 1.38 (m, 4 H), 1.18 (m, 1 H), 1.04 (s, 9 H), 1.01 (t, 3 H), 0.79 (s, 3 H). EMBR (IEN) m/z 742 [(M+H)+; cale, para 742].

EJEMPLO 16 (5R7S.10S)-10-terc-Butil-V-((1R2 )-1- ([(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil)-2-etilciclopropil)-3,9,12-trioxo- 1,6,7,9,10.11.12.14,15.16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano^4.13.2.8.11- benzodioxatr?azacicloicosina-7 -carboxamida (111-16) A una solución de (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo-1 ,6,7,9,10,11 ,12,14, 15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxílato de metilo (EJEMPLO 14, Etapa 1) (60 mg, 0.12 mmol) en THF (1 ml) y MeOH (0.5 ml) se le añadió LiOH (1 N, 1.17 ml, 1.17 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 40°C y se agitó durante 1 h, momento en el que se observó el consumo completo del material de partida éster metílico por CL-EM. Después, la mezcla se trató con HCl 0.5 N y EtOAc. Después, la fase orgánica se secó sobre K2CO3 y el disolvente se retiró al vacío. El producto bruto se recogió en DMF (1 ml). A la solución anterior se le añadieron cloruro de (^ R,2R)-^-{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-etilciclopropanaminio (32 mg, 0.12 mmol), TBTU (48 mg, 0.15 mmol) y DIPEA (0.044 ml, 0.25 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se purificó directamente por HPLC de fase inversa, dando (5R7S, 10S)-10-terc-butil-?/-((1 R,2R)-? -{[(cíclopropilsulfoníl)amino]carbonil}-2-etilciclopropil)-3, 9, 12-trioxo-1 , 6,7, 9,10,11 ,12, 14,15,16-decahidro-5H-2, 22:5, 8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxamida (55 mg, rendimiento del 67%). 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 7.33 (d, 1 H), 7.26 (t, 1 H), 7.16 (d, 1 H), 6.39 (d, J = 15.7 Hz, 1 H), 6.13 (m, 1 H), 5.37 (s, 1 H), 4.69 (m, 4 H), 4.47 - 4.28 (m, 4 H), 3.89 (m, 1 H), 3.83 (d, 1 H), 2.98 (m, 1 H), 2.40 (m, 2 H), 2.31 (m, 1 H), 2.11 (t, 1 H), 1.99 (s, 1 H), 1.73 (s, 1 H), 1.60 (m, 2 H), 1.52 (m, 1 H), 1.29 - 1.15 (m, 3 H), 1.08 (s, 9 H), 0.98 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 714 [(M+H)+; cale, para C35H48N5O9S: 714].

EJEMPLO 17 (5R7S.10S)-10-ferc-Butil-iV-((1R2/?)-1- (f(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil>-2-etilciclopropil)-3.9,12-trioxo- 6.7,9.10,11,12,14,15.16.17-decahidro-1H.5H-2.23:5.8-dimetano-4.13.2.8.11 benzodioxatriazaciclohenicosina-7-carboxamida (III-207) III-207 Etapa (5R7S.10S)-10-terc-Butil-3.9,12-trioxo-6.7.9.10.11.12.14.15.16.17-decahidro-1H.5H-2.23:5.8-dimetano-4.13.2.8.11-benzodioxatriazaciclohenicosína-7-carboxilato de metilo Se preparó (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo- 6,7,9,10,11 , 12, 14, 15,16, 17-decahidro-1H,5H-2,23:5,8-dimetano-4, 13,2,8, 11- benzodioxatriazaciclohenicosina-7-carboxilato de metilo de acuerdo con el procedimiento usado para (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-1 , 6,7,9,10,11 ,12, 14,15, 16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2, 8,11-benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo (EJEMPLO 3, Etapa 8) con la excepción de que se usó 3-metil-?/-[(hex-5-eniloxi)carbonil]- -valina (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil- .-valina en la Etapa 7. EMBR (IEN) m/z 528 [(M+H)+; cale, para C28H38N3O7: 528].

Etapa 2: (5R7S.10S)-10-terc-Butil-?/-((1R2ffl-1- ([(ciclopropilsulfonil)amino1carbon¡l)-2-etilciclopropil)-3.9.12-trioxo-6.7.9.10.11.12.14.15.16.17-decahidro-1H.5H-2.23:5,8-dimetano-4.13.2.8.11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7-carboxamida El EJEMPLO 17 se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 16 con la excepción de que se usó (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo-6,7,9,10,11 ,12,14,15,16,17-decahidro-1H,5H-2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8, 11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7-carboxilato de metilo en lugar de (5R7S,10S)-10-terc-butil-3,9,12-trioxo-1 ,6,7,9,10,11 ,12,14,15,16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8, 11 -benzodioxatriazacicloicosina-7-carboxilato de metilo (EJEMPLO 14, Etapa 1). 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 9.06 (s, 1 H), 7.27 (t, 1 H), 7.24 (d, 1 H), 7.18 (d, 1 H), 6.40 (d, J = 16.4 Hz, 1 H), 6.11 (m, 1 H), 5.39 (t, 1 H), 4.80 (d, 1 H), 4.69 (m, 4 H), 4.42 (s, 1 H), 4.25 (d, 1 H), 3.97 (dd, 1 H), 3.79 (quint., 1 H), 2.98 (m, 1 H), 2.50 (c, 1 H), 2.78 (m, 2 H), 2.15 (m, 1 H), 1.77 -1.54 (m, 8 H), 1.32 - 1.19 (m, 4 H), 1.11 (m, 1 H), 1.07 (s, 9 H), 0.98 (t, 3 H). EMBR (IEN) m/z 728 [(M+H)+; cale, para C36H50N5O9S: 728].

EJEMPLO 18 (5R7S,10S)-10-rerc-Butil-/V-((1R2/?)-1- (f(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil)-2-etilciclopropil)-15,15-dimetil- 3.9.12-trioxo-6.7,9,10.11,12.14.15.16.17-decahidro-1R5H-2.23:5.8-dimetano-4,13.2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7 -carboxamida (III- 208) 111-208 Etapa 1: (5R7S.10S)-10-terc-Butil-15.15-dimetil-3,9.12-trioxo-6.7.9.10.11.12.14.15.16.17-decahidro-1H.5H-2.23:5,8-dimetano-4.13.2.8.11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7-carboxilato de metilo Se preparó (5R7S,10S)-10-terc-butíl-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo- 6,7,9,10,11 ,12, 14, 15,16,17-decahidro-1H,5H-2,23:5,8-dimetano-4, 13,2,8, 11-benzodioxatriazacíclohenicosina-7-carboxilato de metilo de acuerdo con el procedimiento usado para (5/?,7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-tr¡oxo-1 , 6,7, 9,10,11 ,12, 14,15, 16-decahidro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2, 8,11-benzodioxatriazacicloicosína-7-carboxilato de metilo (EJEMPLO 3, Etapa 8) con la excepción de que se usó ?/-{[(2,2-dimetilhex-5-enil)oxi]carbonil}-3-metil-L-valina (preparada de acuerdo con el procedimiento que se muestra a continuación) en lugar de ?/-{[(2,2-dimet¡lpent-4-enil)ox¡]carbon¡l}-3-met¡l-/_-valina en la Etapa 7. EMBR (IEN) m/z 556 [(M+H)+; cale, para C30H42N3O7: 556].

Etapa 2 (5R7S.10S)-10-terc-Butil-?/-((1R2R-1- {[(c¡clopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-etilciclopropil)-15.15-dimetil-3,9.12-trioxo-6.7.9.10.11.12.14.15.16.17-decahidro-1H.5H-2.23:5.8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosina-7-carboxamida El EJEMPLO 18 se preparó de acuerdo con el procedimiento usado para el EJEMPLO 16 con la excepción de que se usó (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetíl-3,9,12-trioxo-6,7,9,10,11 ,12,14,15,16,17-decahidro-1 /-/,5H-2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodíoxatriazaciclohenicos¡na-7-carboxílato de metilo en lugar de (5R7S,10S)-10-ferc-butil-3,9,12-trioxo-1 ,6,7, 9, 10, 11 , 12, 14,15, 16-decahídro-5H-2,22:5,8-dimetano-4, 13,2,8,11-benzodíoxatriazacicloicosína-7-carboxilato de metilo (EJEMPLO 14, Etapa 1). 1H RMN (500 MHz, ppm, CD3OD) d 10.05 (s, 1 H), 7.24 (m, 2 H), 7.17 (d, 1 H), 7.11 (d, 1 H), 6.61 (s, 1 H), 6.28 (d, J = 16.4 Hz, 1 H), 5.95 (m, 1 H), 5.58 (m, 1 H), 5.31 (s, 1 H), 4.71 (m, 2 H), 4.55 (m, 2 H), 4.46 (d, 2 H), 4.29 (dd, 1 H), 4.17 (d, 1 H), 3.89 (d, 1 H), 3.32 (d, 1 H), 2.92 (m, 1 H), 2.59 (m, 1 H), 2.21-2.30 (m, 2 H), 2.08 (m, 1 H), 1.60-1.78 (m, 6 H), 1.22-1.31 (m, 5 H), 1.06 (s, 9 H), 1.04 (t, 3 H), 0.093 (t, 3 H), 0.87 (s, 3 H). EMBR (IEN) m/z 756 [(M+H)+; cale, para C38H54N5O9S: 756].

Preparación de ?/-f(Pent-4-en-1-iloxi)carbonin- --norleucina: A una solución de 1-penten-4-ol (0.95 g, 11.0 mmol) en DMF (15 ml) a 0°C se le añadió carbonildiimidazol (1.79 g, 11.0 mmol). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 30 min. Después, se añadió clorhidrato de éster metílico de .-norleucina (2.0 g, 11.0 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 50°C y se agitó durante 15 min. Después de la refrigeración, la mezcla de reacción se diluyó con éter etílico y se lavó dos veces con agua. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (gradiente de elución de acetato de etilo del 10 al 90% en hexanos), proporcionando 2.1 g (rendimiento del 74%) de ?/-[(pent-4-en-1-iloxi)carbonil]- -norleucinato de metilo en forma de un aceite transparente. A una solución agitada de ?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]-L-norleucinato de metilo (8.50 g, 33.03 mmol) en THF (20 ml) se le añadió NaOH 1 N (20 ml). Esta solución de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h, después se acidificó a pH 3 con HCl 1 N y se extrajo con (3 x 250 ml) EtOAc. La fase de EtOAc combinada se lavó con 50 ml de agua y 50 ml de salmuera, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró, dando 7.09 g (rendimiento del 88%) del producto del título en forma de un aceite transparente. EMBR (IEN) m/z 244 [(M+H)+; cale, para C12H22NO4: 244].

Preparación de 3-Metil-?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]- --valina: Una solución de 4-pentenol (7.22 g, 83.8 mmol) y trifosgeno (11.3 g, 38.1 mmol) en dioxano (160 ml) se enfrió a 0°C seguido de una adición gota a gota de DIPEA (9.85 g, 76.2 ml). La suspensión blanca se agitó vigorosamente durante 1 h a 25°C y después se enfrió a 0°C. Se añadieron una solución 1 N de NaOH (76.2 ml) y f-butilglicina (10.0 g, 76.2 mmol). La suspensión resultante se calentó a 25°C y se agitó durante 18 h. Se retiró aproximadamente la mitad del dioxano al vacío y la solución se vertió en NaOH 1 N (100 ml) y se lavó con diclorometano (3 x 150 ml). La fase acuosa se acidificó con HCl 6 N y el producto deseado se extrajo con diclorometano (3 x 150 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando 13.7 g (rendimiento del 73.9%) de 3-metil-?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]-L-valina en forma de un aceite incoloro. EMBR (IEN) m/z 244 [(M+H)+; cale, para C12H22NO4: 244].

Preparación de ?/-í(Hex-5-en-1-iloxi)carbonil1-L-norleucina: Se preparó ?/-[(hex-5-en-1-iloxi)carboníl]- .-norleucina de acuerdo con el procedimiento para ?/-[(pent-4-en-1-iloxi)carbonil]-L-norleucina usando 5-hexenol en lugar de 4-pentenol. EMBR (IEN) m/z 258 [(M+H)+; cale, para C13H24NO4: 258].

Preparación de 3-Metil-?/-[(hex-5-eniloxi)carbonin-L-valina: Se preparó 3-metil-?/-[(hex-5-eniloxi)carbonil]-/.-valina de acuerdo con el procedimiento para 3-metil-?/-[(pent-4-eniloxi)carbonil]-/L-valina usando 5-hexenol en lugar de 4-pentenol. EMBR (IEN) m/z 258 [(M+H)+; cale, para C13H24NO4: 258].

Preparación de ?/-f(Hept-6-en-1-iloxi)carbonil1-L-norleucina: Se preparó ?/-[(hept-6-en-1-iloxi)carboníl]-/.-norleucina de acuerdo con el procedimiento para ?/-[(pent-4-en-1-iloxi)carbonil]-L-norleucina usando 6-heptenol en lugar de 4-pentenol. EMBR (IEN) m/z 272 [(M+H)+; cale, para C14H26NO4: 272], Preparación de ?/-{[(2,2-Dimetilpent-4-enil)oxpcarbonil)-3-metil- --valina: Etapa 1 : 2,2-Dimetilpent-4-en-1-ol Una solución de ácido 2,2-dimetil-4-pentenoico (6.0 g, 46.8 mmol) en THF anhidro se enfrió en un baño de hielo a 0°C. Se añadió una corriente lenta de hidruro de litio y aluminio 1 M en THF (56.2 ml, 56.2 mmol) y la reacción se dejó calentar a 25°C. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h antes de verterse en HCl 1 N y éter dietílico. La fase orgánica se separó, se secó sobre MgSO4 y se concentró, proporcionando 2,2-dimetilpent-4-en-1-ol en forma de un aceite transparente (4.7 g, rendimiento del 87.9%).

Etapa 2: ?/-{[(2,2-Dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil)-3-metil-L-valina Se añadió gota a gota DIPEA (2.48 g, 19.2 mmol) a una solución a 0°C de 2,2-dimetilpent-4-en-1-ol (2.24 g, 19.6 mmol) y trifosgeno (2.56 g, 8.64 mmol) en 60 ml de dioxano. La suspensión blanca resultante se agitó durante 5 min a 0°C y después se dejó calentar a 25°C durante 1 h. La suspensión se enfrió a 0°C con un baño de hielo, seguido de la adición de NaOH 1 N (19.2 ml) y L-terc-butilglícina (2.52 g, 19.2 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 25°C y se agitó durante 72 h. El dioxano se retiró al vacío y la mezcla de reacción se basificó a pH 12 con NaOH 1 N. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 150 ml) y después se acidificó a pH ~1 con HCl 6 N. La fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 150 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron, dando ?/-{[(2,2-dimetilpent-4-enil)oxi]carbonil}-3-metil- -valina en forma de un polvo blanco (4.26 g, rendimiento del 82.7%). EMBR (IEN) m/z 272 [(M+H)+; cale, para C14H26NO4: 272].

Preparación de ?/-([(2,2-D¡metilhex-5-enil)oxi]carbonil)-3-metil-L-valina: Etapa 1 : 2,2-Dimetilhex-5-enoato de etilo A una solución agitada de diisopropilamina (13.38 ml, 94.70 mmol) en THF anhidro (50 ml), a -70°C y en una atmósfera de nitrógeno, se le añadió lentamente n-BuLi 2.5 M en éter (36.50 ml, 91.25 mmol). Se agitó durante 15 minutos, después a esta solución se le añadió gota a gota isobutirato de etilo (11.51 ml, 86.09 mmol) en THF (50 ml) y se agitó durante 20 minutos antes de añadir gota a gota 4-bromo-1 -buteno (9.79 ml, 96.42 mmol) en HMPA (20 ml). Después, la solución de reacción se agitó a -50°C durante 5 horas, se inactivo con HCl 1 M (10 ml) y agua (100 ml) y después se extrajo con (3 x 125 ml) éter. La fase de éter combinada se lavó con agua (4 x 70 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2 x 70 ml), se secó sobre Na2S?4, se filtró y se concentró. El producto bruto se sometió a cromatografía ultrarrápida sobre 120 g de gel de sílice 60, eluyendo con EtOAc al 1 - 20%/Hexano, dando el producto del titulo en forma de un aceite transparente (11.01 g, rendimiento del 75%).

EMBR (IEN) m/z 171 [(M+H)+; cale, para C10H19O2: 171]. Etapa 2: 2,2-Dimetilhex-5-en-1-ol A una solución agitada de LAH 1 M en éter (142.14 ml, 142.14 mmol), a 0°C y en una atmósfera de nitrógeno, se le añadió gota a gota 2,2-dimetilhex-5-enoato de etilo (11.00 g, 64.61 mmol) dísuelto en 100 ml de éter anhidro durante 1 hora. Esta solución de reacción se agitó a 22°C durante 20 horas, después se inactivo con agua (3 ml), NaOH 1 M ( 1 ml) y agua (9 ml), se secó sobre Na2S?4, se filtró y se concentró, dando el producto del título (7.22 g, 87.09%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d 5.85-5.77 (m, 1 H); 5.01 (d, 1 H); 4.93 (d, 1 H); 3.33 (d, 2 H); 2.03 (m, 2 H); 1.34 (m, 2 H); 0.89 (m, 6 H) ppm.

Etapa 3: ?/-([(2,2-Dimetilhex-5-enil)oxi]carbonil)-3-metil-/.-val¡na A una solución agitada de 2,2-dímetilhex-5-en-1-ol (10.75 g, 83.85 mmol) en 1 ,4-dioxano anhidro (100 ml), a 0°C y en una atmósfera de nitrógeno, se le añadieron cuidadosamente trifosgeno (13.69 g, 46.12 mmol) y después DIPEA (14.61 ml, 83.85 mmol). Esta solución de reacción se agitó a 22°C durante 1 hora, se enfrió a 0°C, se añadieron lentamente NaOH 1 N (83.85 ml, 83.85 mmol) y L-terc-leucina (11.00 g, 83.85 mmol) y después se agitó a 22°C durante 20 horas. La solución de reacción se basificó a pH 10 con NaOH 1 N, se lavó con CH2CI2 (3 x 100 ml), se acidificó a pH 5 con HCl 1 N y se extrajo con CH2CI2 (3 x 150 ml). La fase de CH2CI2 combinada se lavó con agua (100 ml), se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró, dando el producto del título (20.26 g, 84.66%). 1H RMN (500 MHz, CDCI3) d 5.85-5.77 (m, 1 H); 5.24 (d, 1 H); 5.01 (d, 1 H); 4.93 (d, 1 H); 4.20 (d, 1 H); 3.86 (d, 1 H); 3.79 (d, 1 H); 2.01 (m, 2 H); 1.36 (m, 2 H); 1.04 (s, 9 H); 0.92 (m, 6 H) ppm. EMBR (IEN) m/z 286 [(M+H)+; cale, para C15H28NO4: 286].

Preparación de cloruro de (1R2R - (ciclopropilsulfon¡l)amino]carbonil)-2-etilciclopropanaminio: Una mezcla de cloruro de (1R2S)-1- {[(ciclopropilsulfonil)am¡no]carbonil}-2-vinilciclopropanaminio (Llinas-Brunet y col. documento US03/15755 y Wang y col. documento WO 03/099274) (0.05 g, 0.187 mmol) y paladio sobre carbono (al 10% en peso, 0.01 g) en EtOAc (5 ml) se agitó vigorosamente en una atmósfera de hidrógeno proporcionada por un globo de hidrógeno durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró y se concentró, dando cloruro de (1R2f?)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amíno]carbonil}-2-etilciclopropanaminio (0.045 g, rendimiento del 89%).

EJEMPLO 19 (5R7S.10S)-10-fere-Butil-? (1 R2SH - fr(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil>-2-vinilciclopropil)-15,15-dimetil-3.9.12-trioxo-6,7,9,10.11.12.14,15,16,17.18.19-dodecahidro-1H.5r -2.23:5.8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosin-7-carboxamida (III- 111-210 El EJEMPLO 19 se preparó a partir del ácido (5R7S,10S)-10-terc-butil-15,15-dimetil-3,9,12-trioxo-6,7,9,10,11 ,12,14,15,16,17,18,19-dodecahidro-1H,5H-2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8,11-benzodioxatriazaciclohenicosin-7-carboxílico (Preparación Alternativa del EJEMPLO 13, Etapa 4) usando el procedimiento para el EJEMPLO 3, Etapa 10. 1H RMN (500 MHz, CD3OD, ppm) d 7.25-7.09 (m, 3 H), 5.82-5.74 (m, 1 H), 5.35-5.29 (m, 2 H), 5.15-5.12 (m, 1 H), 4.75-4.59 (m, 3 H), 4.45-4.38 (m, 2 H), 4.21-4.12 (m, 1 H), 4.13-4.09 (m, 1 H), 3.95-3.92 (m, 1 H), 2.98-2.94 (m, 1 H), 2.62-2.54 (m, 1 H), 2.49-2.46 (m, 2 H), 2.25-2.21 (m, 1 H), 2.19-2.13 (m, 1 H), 1.90-1.88 (m, 1 H), 1.52 (m, 2 H), 1.48-1.45 (m, 1 H), 1.40-1.18 (m, 6 H), 1.15-1.00 (m, 14 H), y 0.81 (m, 4 H). EMBR (IEN) m/z 756.4 [(M+H)+; cale, para CssHssNsOgS: 755.9].

EJEMPLO 20 (5R7S.10S,18EV10-Ciclohexil-V-((1 R2S)-1 - (r(ciclopropilsulfonil)aminolcarbonil>-2-vinilciclo propil)-15,15-dimetil- 3,9,12-trioxo-6,7,9,10,11.12.14.15.16.17-decahidro-1H.5H-2,23:5,8-dimetano-4,13,2,8.11-benzodioxatriazaciclohenicosin-7 -carboxamida (lll- 225) III-225 El EJEMPLO 20 se preparó usando los procedimientos de la Preparación Alternativa del EJEMPLO 13, Etapas 1 , 2, 4 y 5 usando el ácido (2S)-ciclohexil({[(2,2-dimetilhex-5-en-1-il)oxi]carbonil}amino)acético en la Etapa 1 y cloruro de (1R2S)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-vinilciclo-propanaminio en la Etapa 5. 1H RMN (500 MHz, CD3OD, ppm) d 7.26 (m, 1 H), 7.20 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.15 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 6.38 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 5.99-6.02 (m, 1 H), 5.74-5.80 (m, 1 H), 5.29-5.34 (m, 2 H), 5.11-5.14 (m, 1 H), 4.79-4.81 (m, 2 H), 4.64-4.72 (m, 3 H), 4.56 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.36^1.40 (m, 2 H), 4.18 (d, J - 11.5 Hz, 1 H), 4.10 (d, J = 5.5 Hz, 0.5 H), 3.91-3.94 (dd, J = 11.5. 3.5 Hz, 1 H), 3.34 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 2.95-2.97 (m, 1 H), 2.52-2.56 (m, 1 H), 2.16-2.35 (m, 5 H), 1.65-1.82 (m, 8 H), y 0.85-1.43 (m, 17 H). EMBR (IEN) m/z 780.4 [(M+H)+; cale, para C40H53N5O9S: 780.9].

EJEMPLO 21 (5R7S,10S)-10-Ciclohexil-?M(1R2R - {[(ciclopropilsulfonil)amino1carbonil)-2-etilciclopropil)-15,15-dimet¡l- 3.9.12-tr?oxo-6.7,9,10.11.12.14.15.16,17.18,19-dodecahidro-1H,5H-2.23:5.8- dimetano-4.13.2,8,11 -benzodioxatriazaciclohenicosin-7 -carboxamida (III- 226) III-226 El EJEMPLO 21 se preparó a partir del EJEMPLO 20 usando el procedimiento descrito para el EJEMPLO 8. 1H RMN (500 MHz, CDCI3, ppm) d 10.13 (s, 1 H), 7.22 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.10 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.05 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 6.73 (s, 1 H), 5.40 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 5.36 (m, 1 H), 4.67-4.76 (m, 2 H), 4.55 (d, J = 15.5 Hz, 1 H), 4.44 (d, J = 14.5 Hz, 1 H), 4.41 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 4.29-4.39 (m, 2 H), 4.16 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 3.82-3.85 (dd, J = 11.5, 3.5 Hz, 1 H), 3.25 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 2.95 (m, 1 H), 2.51-2.59 (m, 2 H), 2.36-2.44 (m, 2 H), 1.73-1.76 (m, 5 H), y 0.79 (s a, 2 H). EMBR (IEN) m/z 784.4 [(M+H)+; cale, para C4oH57N5O9S: 784.4].

Preparación Alternativa de clorhidrato de (1 2f?)-1-amino-?/- (cicloprop¡lsulfonil)-2-et¡lciclopropanocarboxamida: Etapa 1 : ((1 R.2R)-1-{[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil)-2-etilciclopropiDcarbamato de terc-butilo: Se cargó un recipiente de hidrogenación con una suspensión de metanol (1000 ml) de ((1 R,2S)-1-{[(ciclopropilsulfoníl)amino]carbon¡l}-2-vinilciclopropil)carbamato de terc-butilo (164 g, 0.50 mol) (Wang y col, documento US 6,995,174) y Ru al 5%/C (seco, 7.5% en peso, 12.4 g) se mantuvo en agitación. El recipiente se colocó en atmósfera de nitrógeno (20 psig (137,895 kPa)) y se aireó a presión atmosférica tres veces para retirar el oxígeno residual. Después, el recipiente se colocó en atmósfera de nitrógeno (50 psíg (344,737 kPa)). Después de 20 horas, el recipiente se aireó a presión atmosférica. Después, la suspensión de reacción se transfirió fuera de la reacción y se filtró a través de Solka Flok (34 gramos, pesado con 100 ml de metanol) produciendo una solución transparente de color pardo claro. La Solka Flok se aclaró con metanol (200 ml x 2). Las soluciones de metanol combinadas se concentraron a presión reducida produciendo el producto bruto en forma de un sólido blanco (153 g). El producto bruto se suspendió en acetato de etilo (800 ml), se calentó a 40°C y se envejeció durante 30 minutos. Después, la solución se sembró, se envejeció durante 30 minutes, y se añadió heptano (500 ml) mediante un embudo de adición durante 30 minutos. El sólido parcialmente cristalizado se enfrió a temperatura ambiente y se envejeció durante una noche después de lo cual se añadió más heptano (500 ml). Después de una hora, se añadió más heptano (250 ml) mediante un embudo de adición, y la suspensión blanca se envejeció durante una hora. La solución se filtró y el sólido se aclaró con heptano/EtOAc (500 ml, 4:1) y se secó a presión reducida dando ((1R2R)-1- {[(ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-etílciclopropil)carbamato de terc-butilo (125.9 g).

Etapa 2: Clorhidrato de (1 R2R-1-amino-?/-(ciclopropilsulfon¡l)-2-etilciclopropanocarboxamida: Se enfrió una solución del producto de la Etapa 1 anterior (92 g, 0.28 mol) en DCM (1200 ml) a 0°C y se burbujeó HCl a través de la solución durante 10 minutos, el baño de refrigeración se retiró y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. El nitrógeno se burbujeó a través de la mezcla de reacción durante 5 minutos y los compuestos volátiles se evaporaron. El residuo se destiló azeotrópícamente con DCM (x3) dando un polvo blanquecino (75 g). EMBR (M+H)+ Cale. = 233; encontrado 233.

Preparación del ácido (2S)-ciclohexil(([(2,2-dimetilhex-5-en-1-il)ox¡1carbon¡l)amino)acético: El ácido (2S)-ciclohexil({[(2,2-dimetilhex-5-en-1-il)oxi]carbon¡l}amino)acético se preparó de acuerdo con el procedimiento para la 3-metil-?/-[(pent-4-eníloxi)carbonil]-L-valina usando el ácido (2S)-amino(ciclohexil)acético y 2,2-dimetilhex-5-en-1-ol. EMBR (IEN) m/z 312.3 [(M+H)+; cale, para C?7H30NO4: 312.2].

EJEMPLO 22 Ensayo de fluorescencia de resolución en el tiempo (TRF) de la proteasa NS3 del VHC El ensayo TRF de la proteasa NS3 se realizó en un volumen final de 100 µl en tampón de ensayo que contenía HEPES 50 mM, pH 7.5, NaCI 150 mM, glicerol al 15%, Tritón X-100 al 0.15%, DTT 10 mM, y PEG 8000 al 0.1%. La proteasa NS3 se preincubó con diversas concentraciones de inhibidores durante 10-30 minutos. El sustrato peptídíco para el ensayo es Ac-C(Eu)-DDMEE-Abu-[COO]-XSAK(QSY7)-NH2, donde Eu es un grupo marcado con europio, Abu es ácido 1 -aminobutanoico que conecta un engarce éster con el ácido 2-hidroxi propanoíco (X). La hidrólisis del péptido mediante la actividad de la proteasa NS3 provoca la separación del fluoróforo del inactivador, dando lugar al momento de la fluorescencia. La actividad de la proteasa se inició añadiendo el sustrato peptídico de TRF (concentración final 50-100 nM). La reacción de inactivo después de 1 hora a temperatura ambiente con 100 µl de MES 500 mM, pH 5.5. La fluorescencia del producto se detectó usando un aparato Víctor V2 o un fluorímetro de Fusión (Perkin Elmer Life and Analytical Sciiences) con excitación a 340 nm y emisión a 615 nm con un retraso de 50-400 µs. Las concentraciones de ensayo de las diferentes formas enzimáticas se seleccionaron con una relación entre señal e interferencia de 10-30. Las constantes de inhibición se obtuvieron usando un ajuste de 4 parámetros.

Los compuestos en los Ejemplos 1-21 se ensayaron para tener un valor de Ki de menos de 100 nM (por ejemplo, menos de 1 nM) en el ensayo TRF de la proteasa NS3 como se ha descrito anteriormente.

Claims (15)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I): I en la que: p y q son ambos 1 ; R1 es CONR10SO2R6; R2 es alquilo C C6 o alquenílo C2-C6, donde dicho alquilo o alquenílo está opcionalmente sustituido con 1 a 3 halo; R3 es alquilo C C8 o cicloalquilo C3-C8, R5 es H; R6 es cicloalquilo C3-C6;Y es C(=O); Z es O; M es alquileno C-?-C-|2 o alquenileno C2- C?2; y cada R10 es independientemente H o alquilo C-?-C6. 2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el compuesto es de fórmula lll-a: lll-a 3.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque R1 es CONHSO2R6. 4.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque R6 es ciclopropilo. 5.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque R2 es alquilo C-?-C4 o alquenilo C2-C4. 6.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque R3 es cicloalquilo Cs-C6 o alquilo CrC4. 7 '.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque M es alquileno C4-C10 o alquenilo C4-C10. 8.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el compuesto se selecciona entre los siguientes: 111-1 I-2 111-21 III-5 111-8 111-9 111-11 111-12 111-16 1-17 111-18 III-22 111-35 -36 III-53 III-39 111-40 111-54 III-57 -58 III-63 III-59 111-60 -64 1-71 I-72 HI-73 I-76 111-80 111-83 III-77 IH-78 HI-79 III-84 -92 -93 111-96 111-97 111-113 -111 111-112 111-116 111-132 111-133 m-117 111-136 111-137 111-157 111-152 111-153 -154 111-158 -192 1-193 111-196 III-226 111-210 111-197 111-198 111-199 III-200 111-201 III-202 III-203 III-204 -205 111-206 111-207 III-208 III-225 9.- Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. 10.- La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada además porque comprende además un segundo agente terapéutico seleccionado entre el grupo constituido por un agente antiviral contra el VHC, un inmunomodulador, y un agente antiinfeccioso. 11.- La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 10, caracterizada además porque el agente antiviral contra el VHC es un antiviral seleccionado entre el grupo constituido por un inhibidor de la proteasa del VHC y un inhibidor de la polimerasa NS5B del VHC. 12.- Un uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8 en la preparación de un medicamento para inhibir la actividad de la proteasa NS3 del VHC en un sujeto en necesidad del mismo. 13.- Un uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-8 en la preparación de un medicamento pare prevenir o tratar la infección por VHC en un sujeto en necesidad del mismo. 14.- El uso como se reclama en la reivindicación 13, en el que dicho medicamento comprende además al menos un segundo agente terapéutico seleccionado entre el grupo constituido por un agente antiviral contra el VHC, un inmunomodulador, y un agente antiinfeccioso. 15.- El uso como se reclama en la reivindicación 14, en el que el agente antivirai contra el VHC es un antiviral seleccionado entre el grupo constituido por un inhibidor de la proteasa del VHC y un inhibidor de la polimerasa NS5B del VHC.