MD4101855T2 - Compuși antitumorali - Google Patents

Compuși antitumorali Download PDF

Info

Publication number
MD4101855T2
MD4101855T2 MDE20221377T MDE20221377T MD4101855T2 MD 4101855 T2 MD4101855 T2 MD 4101855T2 MD E20221377 T MDE20221377 T MD E20221377T MD E20221377 T MDE20221377 T MD E20221377T MD 4101855 T2 MD4101855 T2 MD 4101855T2
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
substituted
unsubstituted
compound
butyl
mmol
Prior art date
Application number
MDE20221377T
Other languages
English (en)
Inventor
Maria Del Carmen Cuevas Marchante
Andres Francesch Solloso
Valentin Martinez Barrasa
Original Assignee
Pharma Mar Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pharma Mar Sa filed Critical Pharma Mar Sa
Publication of MD4101855T2 publication Critical patent/MD4101855T2/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D515/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D515/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4995—Pyrazines or piperazines forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

Compus cu formula generală ID, în care X, R1-R4 au diverse semnificaţii, pentru utilizare în tratamentul cancerului.

Description

DOMENIUL INVENTIEI
Prezenta invenţie se referă la analogi sintetici ai ecteinascidinelor, în special ai ecteinascidinei 736 (ET-736), la compoziţii farmaceutice care îi conţin, la procedee pentru prepararea acestora şi la compuşii pentru utilizare ca agenţi antitumorali.
STADIUL TEHNICII
Ecteinascidinele sunt agenţi antitumorali extrem de puternici izolaţi din tunicatul marin Ecteinascidia turbinata. Unul dintre aceşti compuşi, ET-743 cu formula:
este utilizat ca medicament anticancer, sub denumirea comună internaţională trabectedin (INN), pentru tratamentul pacienţilor cu sarcom de ţesut moale (STS) metastatic şi avansat după eşecul antraciclinelor şi ifosfamidei sau care nu pot primi astfel de agenţi şi pentru tratamentul cancerului ovarian sensibil la platina, recidivat în combinaţie cu doxorubicină lipozomală pegilată.
Ecteinascidina 736 (ET-736) a fost descoperită pentru prima dată de Rinehart şi este caracterizată printr-o unitate de tetrahidro-β-carbolină în locul unităţii de tetrahidroizochinolină găsită mai uzual în compuşii de ecteinascidină izolaţi din surse naturale; Vezi de exemplu Sakai şi colab., Proc. Natl. Acad. Sci. SUA 1992, vol. 89, 11456-11460.
Brevetul US nr. 5149804 descrie Ecteinascidina 736 (ET-736), izolată din tunicatul de Caraibe ca Ecteinascidia turbinata şi structura acestuia. ET-736 protejează şoarecii in vivo la concentraţii foarte scăzute împotriva limfomului P388, melanomului B16 şi carcinomului pulmonar Lewis.
WO03014127 descrie mai mulţi analogi sintetici ai ET-736 şi activitatea lor citotoxică împotriva celulelor tumorale. În special, WO03014127 descrie compuşii A până la D împreună cu activitatea lor citotoxică împotriva unui grup de linii celulare canceroase.
WO2011/147828 descrie procedee de preparare pentru fabricarea compuşilor de ecteinascidină.
Un alt compus descris în această cerere de brevet, PM01183, se află în prezent în studii clinice pentru tratamentul cancerului. PM01183 are următoarea structură chimică:
PM01183 a demonstrat o activitate foarte puternică in vitro împotriva liniilor celulare tumorale solide şi nesolide, precum şi o activitate in vivo semnificativă în diverse linii celulare tumorale umane, xenogrefate la şoareci, precum cele pentru cancerul de sân, rinichi şi ovarian. PM01183 exercită efectele sale anticancerigene prin modificarea covalentă a guaninelor în canalul minor ADN care, în cele din urmă dau naştere la ruperea dublu-catenară a ADN-ului, oprirea fazei S şi apoptoza în celulele canceroase. Deşi s-au obţinut rezultate pozitive în aplicaţiile clinice în chimioterapie, cercetarea în domeniul compuşilor ecteinascidinei este încă deschisă pentru a identifica noi compuşi cu caracteristici optime de activitate, selectivitate faţă de tumoră, cu o toxicitate sistemică redusă şi/sau proprietăţi farmacocinetice îmbunătăţite.
DESCRIEREA PE SCURT A INVENŢIEI
Invenţia este definită prin revendicări. Subiectul care depăşeşte domeniul de aplicare a revendicărilor este dezvăluit doar prin motive illustrative şi care nu fac parte din invenţie. Într-un prim aspect al prezentei invenţii este furnizat un compus cu formula ID sau o sare acceptabilă din punct de vedere farmaceutic sau ester al acestuia:
în care:
X este -O-;
R1 este -OH sau -CN;
R2 este o grupare -C(=O)Ra;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb;
R4 este ales dintre hidrogen, CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc,
Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit;
Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; şi
Rc este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit sau alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit .
Într-un alt aspect al prezentei invenţii, este furnizată o compoziţie farmaceutică care cuprinde un compus conform prezentei invenţii şi un purtător acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
Încă într-un alt aspect al prezentei invenţii, este furnizată o formă de dozare care cuprinde o compoziţie farmaceutică conform prezentei invenţii.
Încă într-un alt aspect al przentei invenţii, este furnizat un compus, o compoziţie farmaceutică sau o formă de dozare conform prezentei invenţii pentru utilizare ca medicament.
Încă într-un alt aspect al prezentei invenţii, este furnizat un compus, o compoziţie farmaceutică sau o formă de dozare conform prezentei invenţii pentru utilizare în tratamentul cancerului.
Încă într-un alt aspect al prezentei invenţii, este furnizat un kit care cuprinde o cantitate eficace din punct de vedere terapeutic dintr-un compus conform prezentei invenţii şi un purtător acceptabil din punct de vedere farmaceutic. Kitul este destinat utilizării în tratamentul cancerului.
Încă într-un alt aspect al prezentei invenţii, este furnizat un procedeu pentru obţinerea compuşilor cu formula ID sau o sare acceptabilă din punct de vedere farmaceutic sau ester al acestuia; cuprinzând etapa de reacţie a unui compus cu formula II cu un compus cu formula III pentru a da un compus cu formula IV:
în care (în măsura în care este permis de către posibilele grupări substituente):
X este -O-;
R2 este o grupare -C(=O)Ra;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb;
R4 este ales dintre hydrogen, -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc;
Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit;
Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; şi
Rc este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit
Procedeul poate include etapa suplimentară de înlocuire a grupării ciano din compusul cu formula IV cu o grupare hidroxi pentru a da un compus cu formula ID în care R1 este OH.
SCURTĂ DESCRIERE A FIGURILOR
Figura 1. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S.
Figura 2. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S.
Figura 3. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoareci trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S.
Figura 4. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H526 la şoareci trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S.
Figura 5. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H82 la şoareci trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S.
Figura 6. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S.
Figura 7. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC-27 la şoareci trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S.
Figura 8. Evaluarea diametrului total tumoral al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R.
Figura 9. Evaluarea diametrului total tumoral al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D.
Figura 10. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R.
Figura 11. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D.
Figura 12. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R.
Figura 13. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D.
Figura 14. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R.
Figura 15. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D.
Figura 16. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC-27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R.
Figura 17. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC-27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D.
Figura 18. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 12-R.
Figura 19. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 12-R.
Figura 20. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 12-R.
Figura 21. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H526 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 12-R.
Figura 22. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H82 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 12-R.
Figura 23.Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 12-R.
Figura 24. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC-27 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 12-R.
Figura 25. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S.
Figura 26. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S.
Figura 27. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S.
Figura 28. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S.
Figura 29. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S.
Figura 30. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R.
Figura 31. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R.
Figura 32. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R.
Figura 33. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R.
Figura 34. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC-27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R.
Figura 35. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C şi 39-S.
Figura 36. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C şi 39-S.
Figura 37. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoareci trataţi cu placebo, compus C şi 39-S.
Figura 38. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H526 la şoareci trataţi cu placebo, compus C şi 39-S.
Figura 39. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H82 la şoareci trataţi cu placebo, compus C şi 39-S.
Figura 40. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, compus C şi 39-S.
Figura 41. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC27 la şoareci trataţi cu placebo, compus C şi 39-S.
Figura 42. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 47-R.
Figura 43. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 47-R.
Figura 44. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 47-R.
Figura 45. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H526 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 47-R.
Figura 46. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H82 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 47-R.
Figura 47. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 47-R.
Figura 48. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC27 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 47-R.
Figura 49. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 şi 32.
Figura 50. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 şi 32.
Figura 51. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 şi 32.
Figura 52. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H526 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 şi 32.
Figura 53. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H82 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 şi 32.
Figura 54. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 şi 32.
Figura 55. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 şi 32.
Figura 56. Evaluarea diametrului total al tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 35.
Figura 57. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 35.
Figura 58. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 35.
Figura 59. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 35.
Figura 60. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 35.
Figura 61. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor PC-3 la şoarecii trataţi cu placebo, 12-S şi 12-R.
Figura 62. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor PC-3 la şoarecii trataţi cu placebo şi 4-S.
Figura 63. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor DU-145 la şoarecii trataţi cu placebo şi 4-S.
Figura 64. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor 22Rv1 la şoarecii trataţi cu placebo şi 4-S.
Figura 65. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor PC-3 la şoarecii trataţi cu placebo şi 39-S.
Figura 66. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor DU-145 la şoarecii trataţi cu placebo şi 39-S.
Figura 67. Evaluarea volumului tumoral al tumorilor 22Rv1 la şoarecii trataţi cu placebo şi 39-S.
DESCRIEREA DETALIATĂ A EXEMPLELOR DE REALIZARE PREFERATE
Următoarele se aplică la toate aspectele prezentei invenţii:
În compuşii prezentei invenţii, grupările alchil pot fi ramificate sau neramificate şi, de preferinţă, au de la 1 până la aproximativ 12 atomi de carbon. O altă clasă mai preferată de grupări alchil are de la 1 până la aproximativ 6 atomi de carbon. Chiar mai preferate sunt grupările alchil având 1, 2, 3 sau 4 atomi de carbon. Metil, etil, n-propil, izopropil şi butil, inclusiv n-butil, izobutil, sec-butil şi tert-butil sunt grupări alchil în special preferate în compuşii prezentei invenţii.
În compuşii prezentei invenţii, grupările alchenil pot fi ramificate sau neramificate, au una sau mai multe duble legături şi de la 2 până la aproximativ 12 atomi de carbon. O altă clasă mai preferată de grupări alchenil are de la 2 până la aproximativ 6 atomi de carbon. Chiar mai preferate sunt grupările alchenil având 2, 3 sau 4 atomi de carbon. Etenil, 1-propenil, 2-propenil, 1-metiletenil, 1-butenil, 2-butenil şi 3-butenil sunt grupări alchenil în special preferate în compuşii prezentei invenţii.
În compuşii prezentei invenţii, grupările alchinil pot fi ramificate sau neramificate, au una sau mai multe legături triple şi de la 2 până la aproximativ 12 atomi de carbon. O altă clasă mai preferată de grupări alchinil are de la 2 până la aproximativ 6 atomi de carbon. Chiar mai preferate sunt grupările alchinil având 2, 3 sau 4 atomi de carbon.
Grupările aril adecvate în compuşii prezentei invenţii includ compuşii cu ciclu simplu şi multiplu, inclusiv compuşi cu cicluri multiple care conţin grupări aril separate şi/sau condensate. Grupările aril tipice conţin de la 1 până la 3 cicluri separate şi/sau condensate şi de la 6 până la aproximativ 18 atomi de carbon. De preferinţă, grupările aril conţin de la 6 până la aproximativ 10 atomi de carbon în ciclu. Grupările aril preferate în mod special au inclus fenil substituit sau nesubstituit, naftil substituit sau nesubstituit, bifenil substituit sau nesubstituit, fenantril substituit sau nesubstituit şi antril substituit sau nesubstituit.
Grupările heterociclice adecvate includ grupări heteroaromatice şi heteroaliciclice conţinând de la 1 până la 3 cicluri separate şi/sau condensate şi de la 5 până la aproximativ 18 atomi în ciclu. De preferinţă, grupările heteroaromatice şi heteroaliciclice conţin de la 5 până la aproximativ 10 atomi în ciclu, cel mai preferabil 5, 6 sau 7 atomi în ciclu. Grupările heteroaromatice adecvate în compuşii prezentei invenţii conţin unul, doi sau trei heteroatomi aleşi dintre atomi de N, O sau S şi includ, de exemplu, cumarinil incluzând 8-cumarinil, chinolil incluzând 8-chinolil, izochinolil, piridil, pirazinil, pirazolil, pirimidinil, furil, pirolil, tienil, tiazolil, izotiazolil, triazolil, tetrazolil, izoxazolil, oxazolil, imidazolil, indolil, izoindolil, indazolil, indolizinil, ftalazinil, pteridil, purinil, oxadiazolil, tiadiazolil, furazanil, piridazinil, triazinil, cinolinil, benzimidazolil,benzofuranil, benzofurazanil, benzotiofenil, benzotiazolil, benzoxazolil, chinazolinil, chinoxalinil, naftiridinil şi furopiridil. Grupările heteroaliciclice adecvate în compuşii prezentei invenţii conţin unul, doi sau trei heteroatomi aleşi dintre N, O sau S şi includ, de exemplu, pirolidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, tetrahidro-tiopiranil, piperidil, morfolinil, tiomorfolinil, tioxanil, piperazinil, azetidinil, oxtanilil, tietanil, homopiperidil, oxepanil, tiepanil, oxazeoinil, diazepinil, tiazepinil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, 2-pirolinil, 3-pirolinil, indolinil, 2H-piranil, 4H-piranil, dioxanil, 1,3-dioxolanil, pirazolinil, ditianil, ditiolanil, dihidropiranil, dihidrotienil, dihidrofuranil, pirazolidinil, imidazolinil, imidazolidinil, 3-azabiciclo[3.1.0]hexil, 3-azabiciclo] [4.1.0] heptil, 3H-indolil şi chinolizinil.
Grupările menţionate mai sus pot fi substituite la una sau mai multe poziţii disponibile cu una sau mai multe grupări adecvate, cum ar fi OR', =O, SR', SOR', SO2R', NOz, NHR', NR'R', =N-R', NHCOR', N(COR')2, NHSO2R', NR'C(=NR')NR'R', CN, halogen, COR', COOR', OCOR', OCONHR', OCONR'R', CONHR', CONR'R', OH protejat, amino protejat, SH protejat, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit, aril substituit sau nesubstituit şi grupare heterociclică substituită sau nesubstituită, în care fiecare dintre grupările R' este aleasă în mod independent din grupul constând din hidrogen, OH, NOz, NH2, SH, CN, halogen, COH, COalchil, COzH, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit, aril substituit sau nesubstituit şi grupare heterociclică substituită sau nesubstituită. Acolo în care astfel de grupări sunt ele însele substituite, substituenţii pot fi aleşi din lista de mai sus. în plus, acolo în care există mai multe grupări R' pe un substituent, fiecare R' poate fi identic sau diferit.
În compuşii din prezenta invenţie, substituenţii halogen includ F, CI, Br şi I.
ermenii "sare acceptabilă din punct de vedere farmaceutic" şi "ester" se referă la oricare sare sau ester acceptabil din punct de vedere farmaceutic care, la administrare la pacient, este capabil să furnizeze (direct sau indirect) un compus aşa cum este descris aici. Totuşi, se va aprecia că sunt dezvăluite şi săruri neacceptabile din punct de vedere farmaceutic, întrucât acestea pot fi utile în prepararea sărurilor acceptabile din punct de vedere farmaceutic. Prepararea sărurilor poate fi realizată prin metode cunoscute în domeniu.
De exemplu, sărurile acceptabile din punct de vedere farmaceutic ale compuşilor furnizaţi aici sunt preparate din compuşii de bază, care conţin un fragment bazic sau acid, prin procedee chimice convenţionale. În general, astfel de săruri sunt preparate, de exemplu, prin reacţia acidului sau bazei libere a acestor compuşi cu o cantitate stoechiometrică de bază sau acid adecvat în apă sau într-un solvent organic sau într-un amestec al ambelor. În general, mediile neapoase cum ar fi eterul, acetatul de etil, etanolul, 2-propanolul sau acetonitrilul sunt preferate. Exemple de săruri de adiţie cu acid includ săruri de adiţie cu acid mineral, cum ar fi, de exemplu, clorhidrat, bromhidrat, iodhidrat, sulfat, azotat, fosfat şi săruri de adiţie cu acid organic, cum ar fi, de exemplu, acetat, trifluoracetat, maleat, fumarat, citrat, oxalat, succinat, tartrat, malat, mandelat, metansulfonat şi p-toluensulfonat. Exemple de săruri de adiţie alcaline includ săruri anorganice, cum ar fi, de exemplu, săruri de sodiu, potasiu, calciu şi amoniu şi săruri alcaline organice, cum ar fi, de exemplu, etilendiamina, etanolamina, săruri de N,N-dialchilenetanolamină, trietanolamină şi aminoacizi bazici.
Compuşii conform invenţiei pot fi sub formă cristalină sau amorfă fie compuşi liberi, fie solvaţi (de exemplu, hidraţi) şi se intenţionează ca toate formele să fie în sfera prezentei invenţii. Metodele de solvatare sunt în general cunoscute în domeniu.
Este posibilă stereoizomeria cu privire la atomii de carbon asimetrici cu stereochimie nespecificată, prin urmare, în astfel de cazuri, atomii de carbon asimetrici pot avea configuraţie (R) sau (S). Toţi diastereomerii generaţi de o configuraţie specifică a unor astfel de atomi de carbon asimetrici în combinaţie cu alţi atomi de carbon asimetrici prezenţi în moleculă şi amestecurile acestora sunt consideraţi a fi în sferal prezentei invenţii. Este de asemenea posibilă şi stereoizomeria legată de dubla legătură (izomerie geometrică), prin urmare, în unele cazuri, molecula ar putea exista ca (E)-izomer sau (Z)-izomer. Dacă molecula conţine mai multe legături duble, fiecare legătură dublă va avea propria sa stereoizomerie, care ar putea fi aceeaşi sau diferită de stereoizomeria celorlalte legături duble ale moleculei. Mai mult, compuşii la care se face referire aici pot exista ca atropoizomeri. Stereoizomerii individuali care includ diastereoizomerii, izomerii geometrici şi atropoizomerii compuşilor la care se face referire aici şi amestecurile acestora sunt în sfera prezentei invenţii.
În plus, compuşii la care se face referire aici pot exista în forme marcate izotopic. Toate sărurile, esterii şi formele marcate izotopic acceptabile farmaceutic ale compuşilor la care se face referire aici, precum şi amestecurile acestora, sunt considerate în sfera prezentei invenţii.
Formele protejate ale compuşilor dezvăluiţi aici sunt considerate în sfera prezentei invenţii. Grupările protectoare adecvate sunt bine cunoscute de un specialist în domeniu. O trecere generală în revistă a grupărilor protectoare din chimia organică este oferită de Wuts, PGM şi Greene TW în Protecting Groups in ORganic Synthesis, Ed. a 4-a, Editura Wiley-Interscience şi de către Kocienski PJ în Protecting Groups, Ed. a III-a, Georg Thieme Verlag. Aceste referinţe oferă secţiuni despre grupările de protecţie pentru grupările OH, amino şi SH.
În sfera prezentei invenţii, o grupare protectoare OH este definită a fi fragmentul legat de O care rezultă din protecţia OH prin formarea unei grupări OH protejate adecvate. Exemple de astfel de grupări OH protejate includ eteri, eteri sililici, esteri, sulfonaţi, sulfenaţi şi sulfinaţi, carbonaţi şi carbamaŢi. În cazul eterilor, gruparea protectoare pentru OH poate fi aleasă dintre metil, metoximetil, metiltiometil, (fenildimetilsilil)metoximetil, benziloximetil, p-metoxibenziloximetil, [(3,4-dimetoxibenzil)oxi]metil, p-nitrobenziloximetil, o-nitrobenziloximetil, [(R)-1-(2-nitrofenil)etoxi]metil, (4-metoxifenoxi)metil, guaiacolmetil, [(p-fenilfenil)oxi]metil, t-butoximetil, 4-penteniloximetil, siloximetil, 2-metoxietoximetil, 2-cianoetoximetil, bis(2-cloretoxi)metil, 2,2,2-tricloretoximetil, 2-(trimetilsilil)etoximetil, mentoximetil, O-bis(2-acetoxi-etoxi)metil, tetrahidropiranil, fluor tetrahidropiranil, 3-bromotetrahidropiranil, tetrahidro-tiopiranil, 1-metoxiciclohexil, 4-metoxitetrahidropiranil, 4-metoxitetrahidro-tiopiranil, 4-metoxi-hidrotiopiranil S,S-dioxid, 1-[(2-clor-4-metil)-fenil]-4-metoxi-piperidin-4-il, 1-(2-fluorfenil)-4-metoxipiperidin-4-il, 1-(4-clorfenil)-4-metoxipiperidin-4-il, 1,4-dioxan-2-il, tetrahidrofuranil, tetrahidrotiofuranil, 2,3,3a,4,5,6,7,7a-octahidro-7,8,8-trimetil-4,7-metanobenzofuran-2-il, 1-etoxietil, 1-(2-cloretoxi)etil, 2-hidroxietil, 2-bromoetil, 1-[2-(trimetilsilil)etoxi]etil, 1-metil-1-metoxietil, 1-metil-1-benziloxietil, 1-metil-1-benziloxi-2-fluoretil, 1-metil-1-fenoxietil, 2,2,2-tricloretil, 1,1-dianisil-2,2,2-tricloretil, 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-fenilizopropil, 1-(2-cianoetoxi) etil, 2-trimetilsililetil, 2-(benziltio)etil, 2-(fenilselenil)etil, t-butil, ciclohexil, 1-metil-1'-ciclopropilmetil, alil, prenil, cinamil, 2-fenalil, propargil, p-clorofenil, p-metoxifenil, p-nitrofenil, 2,4-dinitrofenil, 2,3,5,6-tetrafluor-4-(trifluormetil)fenil, benzil, p-metoxibenzil, 3,4-dimetoxibenzil, 2,6-dimetoxibenzil, o-nitrobenzil, p-nitrobenzil, pentadienilnitro-benzil, pentadienilnitropiperonil, halobenzil, 2,6-diclorbenzil, 2,4-diclorbenzil, 2,6-difluorbenzil, p-cianobenzil, benzil fluor, 4-fluoralcoxibenzil, trimetilsililxilil, p-fenilbenzil, 2-fenil-2-propil, p-acilaminobenzil, p-azidobenzil, 4-azido-3-clorobenzil, 2-trifluormetilbenzil, 4-trifluormetilbenzil, p-(metilsulfinil)benzil, p-siletanilbenzil, 4-acetoxibenzil, 4-(2-trimetilsilil)etoximetoxibenzil, 2-naftilmetil, 2-picolil, 4-picolil, 3-metil-2-picolil N-oxid, 2-chinolinilmetil, 6-metoxi-2-(4-metilfenil)-4-chinolinmetil, 1-pirenilmetil, difenilmetil, 4-metoxidifenilmetil, 4-fenildifenilmetil, p,p'-dinitrobenzhidril, 5-dibenzosuberil, trifenilmetil, tris(4-t-butilfenil)metil, α-naftildifenilmetil, p-metoxi-fenildifenilmetil, di(p-metoxifenil)fenilmetil, tri(p-metoxifenil)metil, 4-(4'-bromfenaciloxi) fenildifenilmetil, 4,4',4"-tris(4,5-dicloroftalimidofenil)metil, 4,4',4"-tris(levulinoiloxifenil) metil, 4,4 ',4"-tris(benzoiloxifenil)metil, 4,4'-dimetoxi-3"-[N-(imidazolilmetil)]tritil, 4,4'-dimetoxi-3"-[N-(imidazoliletil)carbamoil]tritil, bis(4-metoxifenil)-1'-pirenilmetil, 4-(17-tetrabenzo [a,c,g,i] fluorenilmetil)-4,4"-dimetoxitritil, 9-antril, 9-(9-fenil)xantenil, 9-feniltioxantil, 9-(9-fenil-10-oxo)antril, 1,3-benzoditiolan-2-il, 4,5-bis(etoxicarbonil)-[1,3]-dioxolan-2-il, benzizotiazolil S,S-dioxid. În cazul eterilor sililici, gruparea protectoare pentru OH poate fi aleasă dintre trimetilsilil, trietilsilil, triizopropilsilil, dimetilizopropilsilil, dietilizopropilsilil, dimetilhexilsilil, 2-norbornildimetilsilil, t-butil-dimetilsilil, t-butildifenil-silil, tribenzilsilil, tri-p-xililsilil, trifenilsilil, difenilmetilsilil, di-t-butilmetilsilil, bis(t-butil)-1-pirenilmetoxisilil, tris(trimetilsilil)silil, (2-hidroxistiril) dimetilsilil, (2-hidroxistiril)diizo-propilsilil, t-butilmetoxifenilsilil, t-butoxidifenilsilil, 1,1,3,3-tetraizopropil-3-[2-(trifenil-metoxi)etoxi]disiloxan-1-il şi silil fluor. În cazul esterilor, gruparea protectoare pentru OH împreună cu atomul de oxigen al OH neprotejat de care este ataşat formează un ester care poate fi ales dintre formiat, benzoilformiat, acetat, cloracetat, dicloracetat, tricloracetat, tricloracetamidat, trifluoracetat, metoxiacetat, trifenilmetoxiacetat, fenoxiacetat, p-clorofenoxiacetat, fenilacetat, difenilacetat, 3-fenilpropionat, propanoil tip lanţ bisfluor, 4-pentenoat, 4-oxopentanoat, 4,4-(etilenditio)pentanoat, 5[3-bis(4-metoxifenil)hidroximetilfenoxi] levulinat, pivaloat, 1-adamantoat, crotonat, 4-metoxicrotonat, benzoat, p-fenilbenzoat, 2,4,6-trimetilbenzoat, 4-bromobenzoat, 2,5-difluorobenzoat, p-nitrobenzoat, picolinat, nicotinat, 2-(azidometil)benzoat, 4-azido-butirat, (2-azidometil) fenilacetat, 2-{[(tritiltio)oxi]metil}benzoat, 2-{[(4-metoxitritiltio)oxi ]metil}benzoat, 2-{[metil(tritiltio)amino]metil}benzoat, 2-{{[(4-metoxitritil)tio]metil-amino}metil}benzoat, 2-(aliloxi) fenilacetat, 2-(preniloximetil)benzoat, 6-(levuliniloxi-metil)-3-metoxi-2-nitrobenzoat, 6-(levuliniloximetil)-3-metoxi-4-nitrobenzoat, 4-benziloxibutirat, 4-trialchilsililoxi-butirat, 4-acetoxi-2,2-dimetilbutirat, 2,2-dimetil-4-pentenoat, 2-iodobenzoat, 4-nitro-4-metilpentanoat, o-(dibromometil)benzoat, 2-formilbenzensulfonat, 4-(metiltio-metoxi)butirat, 2-(metiltiometoximetil)benzoat, 2-(cloracetoximetil)benzoat, 2-[(2-cloracetoxi)etil]benzoat, 2-[2-(benziloxi)etil]benzoat, 2-[2-(4-metoxibenzil-oxi)etil]benzoat, 2,6-diclor-4-metilfenoxiacetat, 2,6-diclor-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil)fenoxiacetat, 2,4-bis(1,1-dimetilpropil)fenoxiacetat, clorodifenil-acetat, izobutirat, monosuccinoat, (E)-2-metil-2-butenoat, o-(metoxicarbonil)benzoat, α-naftoat, azotat, N,N,N',N'-tetrametilfosforodiamidat de alchil şi 2-clorobenzoat. În cazul sulfonaţilor, sulfenaţilor şi sulfinaţilor gruparea protectoare pentru OH împreună cu atomul de oxigen al OH neprotejat de care este ataşat formează un sulfonat, sulfenat sau sulfinaţi care pot fi aleşi dintre sulfat, alilsulfonat, metansulfonat, benzilsulfonat, tosilat, 2-[(4-nitrofenil)etil]sulfonat, 2-trifluormetilbenzensulfonat, 4-monometoxitritilsulfenat, 2,4-dinitrofenilsulfenat de alchil, 2,2,5,5-tetrametilpirolidin-3-on-1-sulfinat şi dimetilfosfinotioil. În cazul carbonaţilor, gruparea protectoare pentru OH împreună cu atomul de oxigen al OH neprotejat de care este ataşat formează un carbonat care poate fi ales dintre carbonat de metil, carbonat de metoximetil, carbonat de 9-fluorenilmetil, carbonat de etil, carbonat de bromoetil, carbonat de 2-(metiltiometoxi)etil, carbonat de 2,2,2-tricloretil, carbonat de 1,1-dimetil-2,2,2-tricloretil, carbonat de 2-(trimetilsilil)etil, carbonat de 2-[dimetil(2-naftilmetil)silil] etil, carbonat de 2-(fenilsulfonil)etil, carbonat de 2-(trifenilfosfonio)etil, carbonat de cis-[4-[[(metoxitritil)sulfenil]oxi]tetrahidrofuran-3-il]oxi, carbonat de izobutil, carbonat de t-butil, carbonat de vinil, carbonat de alil, carbonat de cinamil, carbonat de propargil, carbonat de p-clorofenil, carbonat de p-nitrofenil, carbonat de 4-etoxi-1-naftil, carbonat de 6-bromo-7-hidroxicumarin-4-ilmetil, carbonat de benzil, carbonat de o-nitrobenzil, carbonat de p-nitrobenzil, carbonat de p-metoxibenzil, carbonat de 3,4-dimetoxibenzil, carbonat de antrachinon-2-ilmetil, carbonat de 2-dansilietil, carbonat de 2-(4-nitrofenil)etil, carbonat de 2-(2,4-dinitrofenil)etil, carbonat de 2-(2-nitrofenil)propil, carbonat de 2-(3,4-metilendioxi-6-nitrofenil)propil, carbonat de 2-ciano-1-feniletil, carbonat de 2-(2-piridil)amino-1-feniletil, carbonat de 2-[N-metil-N-(2-piridil)]amino-1-feniletil, carbonat de fenacil, carbonat de 3',5'-dimetoxibenzoină, ditiocarbonat de metil şi tiocarbonat de S-benzil. Şi în cazul carbamaţilor, gruparea protectoare pentru OH împreună cu atomul de oxigen al OH neprotejat de care este ataşat formează un carbamat care poate fi ales dintre tiocarbamat de dimetil, carbamat de N-fenil şi carbamat de N-metil-N-(o-nitrofenil).
În sfera prezentei invenţii, o grupare de protecţie amino este definită a fi fragmentul N-legat care rezultă din protecţia grupării amino prin formarea unei grupări amino adecvate protejate. Exemple de grupări amino protejate includ carbamaţi, uree, amide, sisteme heterociclice, N-alchilamine, N-alchenilamine, N-alchinilamine, N-arilamine, imine, enamine, derivaţi N-metal, derivaţi N-N, derivaţi N-P, derivaţi N-Si şi derivaţi N-S. În cazul carbamaţilor, gruparea protectoare pentru gruparea amino împreună cu gruparea amino la care aceasta este ataşată formează un carbamat care poate fi ales dintre carbamat de metil, carbamat de etil, carbamat de 9-fluorenilmetil, carbamat de 2,6-di-t-butil-9-fluorenilmetil, carbamat de 2,7-bis(trimetilsilil)fluorenilmetil, carbamat de 9-(2-sulfo)fluorenilmetil, carbamat de 9-(2,7-dibrom)fluorenilmetil, carbamat de 17-tetrabenzo[a,c,g,i]fluorenilmetil, carbamat de 2-clor-3-indenilmetil, carbamat de benz[f]inden-3-ilmetil, carbamat 1,1-dioxobenzo[b]-tiofen-2-ilmetil, carbamat de 2-metilsulfonil-3-fenil-1-prop-2-enil, carbamat de 2,7-di-t-butil-[9,(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetrahidrotioxantil)]metil, carbamat de 2,2,2-tricloretil, carbamat 2-trimetilsililetil, carbamat de (2-fenil-2-trimetilsilil)etil, carbamat de 2-feniletil, carbamat de 2-cloretil, carbamat de 1,1-dimetil-2-haloetil, carbamat de 1,1-dimetil-2,2-dibromoetil, carbamat de 1,1-dimetil-2,2,2-tricloretil, carbamat de 2-(2'-piridil)etil, carbamat de 2-(4'-piridil)etil, carbamat de 2,2-bis(4'-nitrofenil)etil, carbamat de 2-[(2-nitrofenil)ditio]-1-feniletil, carbamat de 2-(N,N-diciclohexil-carboxamido)etil, carbamat de t-butil, carbamat de fluor BOC, carbamat de 1-adamantil, carbamat de 2-adamantil, carbamat de 1-(1-adamantil)-1-metiletil, carbamat de 1-metil-1-(4-bifenilil)etil, carbamat de 1-(3,5-di-t-butilfenil)-1-metiletil, carbamat de triizopropilsililoxi, carbamat de vinil, carbamat de alil, carbamat de prenil, carbamat de 1-izopropilalil, carbamat de cinamil, carbamat de 4-nitrocinamil, carbamat de 3-(3'-piridil)prop-2-enil, carbamat de hexadienil, carbamat de propargil, biscarbamat de 1,4-but-2-inil, carbamat de 8-chinolil, carbamat de N-hidroxipiperidinil, ditiocarbamat de alchil, carbamat de benzil, carbamat de 3,5-di-t-butilbenzil, carbamat de p-metoxibenzil, carbamat de p-nitrobenzil, carbamat de p-bromobenzil, carbamat de p-clorobenzil, carbamat de 2,4-diclorbenzil, carbamat de 4-metilsulfinilbenzil, carbamat de 4-trifluormetilbenzil, carbamat de fluorobenzil, carbamat de 2-naftilmetil, carbamat de 9-antrilmetil, carbamat de difenilmetil, carbamat de 4-fenilacetoxibenzil, carbamat de 4-azidobenzil, carbamat de 4-azido-metoxibenzil, carbamat de m-clor-p-aciloxibenzil, carbamat de m-cloro-p-aciloxibenzil, carbamat de p-(dihidroxiboril)-benzil, carbamat de 5-benzizoxazolilmetil, carbamat de 2-(trifluormetil)-6-cromonilmetil, carbamat de 2-metiltioetil, carbamat de 2-metilsulfoniletil, carbamat de 2-(p-toluensulfonil)etil, carbamat de 2-(4-nitrofenilsulfonil)etil, carbamat de 2-(2,4-dinitrofenilsulfonil)etil, carbamat de 2-(4-trifluormetilfenilsulfonil)etil, carbamat de [2-(1,3-ditianil)]metil, carbamat de 2-fosfonioetil, carbamat de 2-[fenil(metil)sulfonio]etil, carbamat de 1-metil-1-(trifenilfosfonio)etil, de 1,1-dimetil-2-cianoetil, carbamat 2-dansilietil, carbamat de 2-(4-nitrofenil)etil, carbamat de 4-metiltiofenil, carbamat de 2,4-dimetiltiofenil, carbamat de m-nitrofenil, carbamat de 3,5-dimetoxibenzil, carbamat de 1-metil-1-(3,5-dimetoxifenil)etil, carbamat de α-metilnitro-piperonil, carbamat de o-nitrobenzil, carbamat de 3,4-dimetoxi-6-nitrobenzil, carbamat de fenil(o-nitrofenil)metil, carbamat de 2-nitrofeniletil, carbamat de 6-nitroveratril, carbamat de 4-metoxifenacil, carbamat de 3',5'-dimetoxibenzoin, carbamat de 9-xantenilmetil, carbamat de N-metil-N-(o-nitrofenil), carbamat de t-amil, carbamat de 1-metilciclobutil, carbamat de 1-metilciclohexil, carbamat de 1-metil-1-ciclopropilmetil, carbamat de ciclobutil, carbamat de ciclopentil, carbamat de ciclohexil, carbamat de izobutil, carbamat de izobornil, carbamat de ciclopropilmetil, carbamat de p-deciloxibenzil, carbamat de diizopropilmetil, carbamat de 2,2-dimetoxi-carbonilvinil, carbamat de o-(N,N-dimetilcarboxamido)benzil, carbamat de 1,1-dimetil-3-(N,N-dimetil-carboxamido)propil, carbamat de butinil, carbamat de 1,1-dimetilpropinil, carbamat de 2-iodoetil, carbamat de 1-metil-1-(4'-piridil)etil, carbamat de 1-metil-1-(p-fenilazofenil)etil, carbamat de p-(p'-metoxifenilazo)benzil, carbamat de p-(fenilazo) benzil, carbamat de 2,4,6-trimetilbenzil, carbamat de izonicotinil, carbamat de 4-(trimetilamoniu)benzil, carbamat de p-cianobenzil, carbamat de di(2-piridil)metil, carbamat de 2-furanilmetil, carbamat de fenil, carbamat de 2,4,6-tri-t-butilfenil carbamat, carbamat de 1-metil-1-feniletil şi tiocarbamat de S-benzil. În cazul ureelor, grupările protectoare pentru gruparea amino pot fi alese dintre fenotiazinil-(10)-carbonil, N'-p-toluensulfonilaminocarbonil, N'-fenilaminotiocarbonil, 4-hidroxifenilaminocarbonil, 3-hidroxitriptaminocarbonil şi N'-fenilaminotiocarbonil. În cazul amidelor, gruparea protectoare pentru amino împreună cu gruparea amino la care este ataşată formează o amidă care poate fi aleasă dintre formamidă, acetamidă, cloracetamidă, tricloracetamidă, trifluoracetamidă, fenilacetamidă, 3-fenilpropanamidă, pent-4-enamidă , picolinamidă, 3-piridilcarboxamidă, N-benzoil-fenilalanil amidă, benzamidă, p-fenilbenzamidă, o-nitrofenilacetamidă, 2,2-dimetil-2-(o-nitrofenil) acetamidă, o-nitrofenoxiacetamidă, 3-(o-nitrofenil)propanamida, 2-metil-2-(o-nitrofenoxi) propanamidă, 3-metil-3-nitrobutanamidă, o-nitrocinamidă, o-nitrobenzamidă, 3-(4-t-butil-2,6-dinitrofenil)-2,2-dimetilpropanamidă, o-(benzoiloxi-metil)benzamidă, 2-(acetoximetil) benz-amidă, 2-[(t-butildifenilsiloxi)metil]benzamidă, 3-(3',6'-dioxo-2',4',5'-trimetilciclohexa-1',4'-dien)-3,3-dimetilpropionamidă, o-hidroxi-trans-cinamidă, 2-metil-2-(o-fenilazofenoxi)propanamidă, 4-clorbutanamidă, aceto-acetamidă, 3-(p-hidroxifenil)propanamidă, (Nʻ-ditiobenziloxicarbonil-amino)
acetamidă şi N-acetilmetioninamidă. În cazul sistemelor heterociclice, gruparea protectoare pentru gruparea amino împreună cu gruparea amino la care este ataşată formează un sistem heterociclic care poate fi ales dintre 4,5-difenil-3-oxazolin-2-onă, N-ftalimidă, N-dicloroftalimidă, N-tetracloroftalimidă, N-4-nitroftalimidă, N-tiodiglicoloil, N-ditiasuccinimidă, N-2,3-difenilmaleimidă, N-2,3-dimetilmaleimidă, N-2,5-dimetil-pirol, N-2,5-bis(triizopropilsiloxi)pirol, aduct de N-1,1,4,4-tetrametildisililazaciclo-pentan, N-1,1,3,3-tetra-metil-1,3-disilaisoindolină, N-difenilsilildietilenă, N-5-substituit-1,3-dimetil-1,3,5-triazaciclo-hexan-2-onă, N-5-substituit-1,3-benzil-1,3,5-triazaciclo-hexan-2-onă, 3,5-dinitro-4-piridonă 1-substituită şi 1,3,5-dioxazină. În cazul în care N-alchil-, N-alchenil-, N-alchinil- sau N-arilamine din care gruparea protectoare pentru gruparea amino poate fi aleasă dintre N-metil, N-t-butil, N-alil, N-prenil, N-cinamil, N-fenilalil, N-propargil, N-metoximetil, N-[2-(trimetilsilil)etoxi]metil, N-3-acetoxipropil, N-cianometil, N-2-azanorbornen, N-benzil, N-4-metoxibenzil, N-2,4-dimetoxibenzil, N-2-hidroxibenzil, N-ferocenilmetil, N-2,4-dinitrofenil, o-metoxifenil, p-metoxifenil, N-9-fenilfluorenil, N-fluorenil, N-2-picolilamină N'-oxid, N-7-metoxicumar-4-ilmetil, N-difenilmetil, N-bis(4-metoxifenil)metil, N-5-dibenzosuberil, N-trifenilmetil, N-(4-metilfenil)-difenilmetil şi N-(4-metoxifenil)difenilmetil. În cazul iminelor, gruparea protectoare pentru gruparea amino poate fi aleasă dintre N-1,1-dimetiltiometilen, N-benziliden, N-p-metoxibenziliden, N-difenilmetilen, N-[2-piridil)mesitil]metilen, N-(N',N'-dimetilaminometilen), N-(N',N'-dibenzilaminometilen), N-(N'-t-butilamino-metilen), N,N'-izopropiliden, N-p-nitro-benziliden, N-saliciliden, N-5-clorosaliciliden, N-(5-clor-2-hidroxifenil)fenilmetilen, N-ciclohexiliden şi N-t-butiliden. În cazul enaminelor, gruparea protectoare pentru gruparea amino poate fi aleasă dintre N-(5,5-dimetil-3-oxo-1-ciclohexenil), N-2,7-diclor-9-fluorenilmetilen, N-1-(4,4-dimetil-2,6-dioxociclohexiliden)etil, N-(1,3-dimetil-2,4,6-(1H,3H,5H)-trioxopirimidin-5-iliden)-metil, N-4,4,4-trifluor-3-oxo-1-butenil şi N-(1-izopropil-4-nitro-2-oxo-3-pirolin-3-il). În cazul derivaţilor N-metal, gruparea protectoare pentru gruparea amino poate fi aleasă dintre N-boran, ester N-difenilborinic, ester N-dietilborinic, N-9-borabiciclononan, ester N-difluoroborinic şi acid 3,5-bis(trifluormetil)fenilboronic; şi, de asemenea, inclusiv N-fenil(pentacarbonilcrom)carbenil, N-fenil(pentacarbonil-tungsten)carbenil, N-metil(penta-carbonilcromiu)carbenil, N-metil(pentacarboniltungsten)carbenil, N-chelat de cupru, N-chelat de zinc şi un derivat 18-coroană-6. În cazul derivaţilor N-N, gruparea protectoare pentru gruparea amino împreună cu gruparea amino la care este ataşată formează un derivat N-N care poate fi ales dintre N-nitroamino, N-nitrozoamino, N-oxid amină, azidă, derivat de triazen şi N-trimetilsililmetil-N-benzilhidrazină. În cazul derivaţilor N-P, gruparea protejată pentru gruparea amino împreună cu gruparea amino la care este ataşată formează un derivat N-P care poate fi ales dintre difenilfosfinamidă, dimetiltiofosfinamidă, difeniltiofosfinamidă, dialchil fosforamidat, dibenzil fosforamidat, difenil fosforamidat şi iminotrifenilfosforan. În cazul derivaţilor N-Si gruparea protectoare pentru NH2 poate fi aleasă dintre t-butildifenilsilil şi trifenilsilil. În cazul derivaţilor N-S gruparea amino protejată poate fi aleasă dintre derivaţii N-sulfenil sau N-sulfonil. Derivaţii de N-sulfenil pot fi aleşi dintre benzensulfenamidă, 2-nitrobenzensulfenamidă, 2,4-dinitrobenzensulfenamidă, penta-clorbenzensulfenamidă, 2-nitro-4-metoxibenzensulfenamidă, trifenilmetilsulfen-amidă, 1-(2,2,2-trifluoro-1,1-difenil)etil-sulfenamidă şi N-3-nitro-2-piridinsulfenamidă. Derivaţii N-sulfonil pot fi aleşi dintre metansulfonamidă, trifluormetansulfonamidă, t-butilsulfonamidă, benzilsulfonamidă, 2-(trimetilsilil)etan sulfonamidă, p-toluensulfon-amidă, benzensulfonamidă, o-anisilsulfonamidă, 2-nitrobenzensulfonamidă, 4-nitrobenzensulfonamidă, 2,4-dinitrobenzensulfonamidă, 2-naftalen sulfonamidă, 4-(4',8'-dimetoxinaftilmetil)benzensulfonamidă, 2-(4-metilfenil)-6-metoxi-4-metilsulfon-amidă, 9-antracensulfonamidă, piridin-2-sulfonamidă, benzotiazol-2-sulfonamidă, fenacilsulfonamidă, 2,3,6-trimetil-4-metoxibenzensulfonamidă, 2,4,6-trimetoxibenzen-sulfonamidă, 2,6-dimetil-4-metoxibenzensulfonamidă, pentametilbenzensulfon-amidă, 2,3,5,6-tetrametil-4-metoxibenzensulfonamidă, 4-metoxibenzen sulfonamidă, 2,4,6-trimetilbenzen-sulfonamidă, 2,6-dimetoxi-4-metilbenzensulfonamidă, 3-metoxi-4-t-butilbenzensulfonamidă şi 2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonamidă.
În sfera prezentei invenţii, o grupare protectoare pentru SH este definită ca fiind fragmentul legat la S care rezultă din protecţia grupării SH prin formarea unei grupări SH protejate adecvate. Exemple de astfel de grupări SH protejate includ tioeteri, disulfuri, tioeteri sililici, tioesteri, tiocarbonaţi şi tiocarbamaţi. În cazul tioeterilor, gruparea protectoare pentru SH poate fi aleasă dintre S-alchil, S-benzil, S-p-metoxibenzil, S-o-hidroxibenzil, S-p-hidroxibenzil, S-o-acetoxibenzil, S-p-acetoxibenzil, S-p-nitrobenzil, S-o-nitrobenzil, S-2,4,6-trimetilbenzil, S-2,4,6,-trimetoxibenzil, S-4-picolil, S-2-picolil-N-oxid, S-2-chinolinilmetil, S-9-antrilmetil, S-9-fluorenilmetil, S-xantenil, S-ferocenilmetil, S-difenilmetil, S-bis(4-metoxifenil)metil, S-5-dibenzosuberil, S-trifenilmetil, 4-metoxitritil, S-difenil-4-piridilmetil, S-fenil, S-2,4-dinitrofenil, S-2-chinolil, S-t-butil, S-1-adamantil, S-metoximetil, S-izobutoximetil, S-benziloximetil, S-1-etoxietil, S-2-tetrahidropiranil, S-benziltiometil, S-feniltiometil, S-acetamidometil (Acm), S-trimetilacetamidometil, S-benzamidometil, S-aliloxicarbonil-amino-metil, S-N-[2,3,5,6-tetrafluor-4-(N'-piperidino)-fenil-N-aliloxicarbonilaminometil, S-ftalimido-metil, S-fenilacetamidometil, S-acetilmetil, S-carboximetil, S-cianometil, S-(2-nitro-1-fenil)etil, S-2-(2,4-dinitrofenil)etil, S-2-(4'-piridil)etil, S-2-cianoetil, S-2-(trimetilsilil)etil, S-2,2-bis(carboetoxi)etil, S-(1-m-nitrofenil-2-benzoil)etil, S-2-fenilsulfoniletil, S-1-(4-metilfenil-sulfonil)-2-metilprop-2-il şi S-p-hidroxifenacil. În cazul disulfurilor, gruparea SH protejată poate fi aleasă dintre disulfura de S-etil, disulfura de S-t-butil, disulfură de S-2-nitrofenil, disulfură de S-2,4-dinitrofenil, disulfură de S-2-fenilazofenil, disulfură de S-2-carboxifenil şi disulfură de S-3-nitro-2-piridil. În cazul tioeterilor sililici, gruparea protectoare pentru SH poate fi aleasă din lista grupărilor de mai sus pentru protecţia OH cu eteri sililici. În cazul tioesterilor, gruparea protectoare pentru SH poate fi aleasă dintre S-acetil, S-benzoil, S-2-metoxiizobutiril, S-trifluoracetil, S-N-[[p-bifenilil)-izopropiloxi]carbonil]-N-metil-y-aminotiobutirat şi S-N-(t-butoxi-carbonil)-N-metil-y-aminotiobutirat. În cazul grupării protectoare tiocarbonat pentru SH poate fi aleasă dintre S-2,2,2-tricloretoxicarbonil, S-t-butoxicarbonil, S-benziloxicarbonil, S-p-metoxibenziloxicarbonil şi S-fluorenilmetilcarbonil. În cazul tiocarbamatului, gruparea SH protejată poate fi alesă dintre S-(N-etilcarbamat) şi S-(N-metoximetilcarbamat).
Menţionarea acestor grupări nu trebuie interpretată ca o limitare a sferei invenţiei, deoarece acestea au fost menţionate ca o simplă ilustrare a grupărilor de protecţie pentru grupările OH, amino şi SH, dar alte grupări care au funcţia menţionată pot fi cunoscute de către un specialist în domeniu şi trebuie să se înţeleagă că sunt de asemenea cuprinse în prezenta invenţie.
Pentru a prezenta o descriere mai concisă, unele dintre expresiile cantitative date aici nu sunt calificate cu termenul „aproximativ». Se înţelege că, indiferent dacă termenul „aproximativ» este utilizat în mod explicit sau nu, fiecare cantitate dată aici este menită să se refere la valoarea dată reală şi, de asemenea, este menită să se refere la aproximarea unei astfel de valori date care s-ar deduce în mod rezonabil, bazat pe cunoştinţele unui specialist în domeniu, inclusiv echivalente şi aproximări datorate condiţiilor experimentale şi/sau de măsurare pentru o asemenea de valoare dată.
Compusul conform invenţiei este un compus cu formula ID sau o sare acceptabilă din punct de vedere farmaceutic sau ester al acestuia:
în care:
X este -O-;
R1 este -OH sau -CN;
R2 este o grupare -C(=O)Ra;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb;
R4 este ales dintre hidrogen, -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc;
Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit;
Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; şi
Rc este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit.
Compuşii preferaţi dintre compuşii cu formula ID sunt cei cu formula generală IDa sau IDb sau o sare sau ester acceptabile din punct de vedere farmaceutic ai acestora:
De observat că în compuşii care au formula general IDa sau IDb, R4 nu poate fi hidrogen. Compuşii preferaţi ai compuşilor cu formula ID pot fi cei care au formula IDc sau o sare sau ester al acestora acceptabile din punct de vedere farmaceutic
în care:
R1 este -OH sau -CN;
R2 este o grupare -C(=O)Ra;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb;
Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi
Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşiii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
R1 este -OH;
şi X; R2; R3; R4; Ra; Rb; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşiii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
R2 este o grupare -C(=O)Ra în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
şi X; R1; R3; R4; Rb; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşiii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, hidrogenul fiind cea mai preferată grupare R3;
şi X; R1; R2; R4; Ra; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este -CH2OH;
şi X; R1; R2; R3; Ra; şi Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşiii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R1 este -OH;
şi R2; R3; R4; Ra; Rb; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşiii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
şi R1; R3; R4; Rb; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşiii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferabil R3 este hidrogen şi metoxi, hidrogenul fiind cea mai preferată grupare R3;
şi R1; R2; R4; Ra; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferabil Rc este metil. Cel mai preferabil R4 este -CH2OH;
şi R1; R2; R3; Ra; şi Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R1 este -OH;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
şi R3; R4; Rb; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R1 este -OH;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit . Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, hidrogenul fiind cea mai preferată grupare R3;
şi R2; R4; Ra; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R1  este -OH;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb, în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este -CH2OH;
şi R2; R3; Ra; şi Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, hidrogenul fiind cea mai preferată grupare R3;
şi R1; R4; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rc
este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este -CH2OH;
şi R1; R3; şi Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, R3 cel mai preferat fiind hidrogen;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este -CH2OH;
şi R1; R2; şi Ra; sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R1 este -OH;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, R3 cel mai preferat fiind hidrogen ;
şi R4; şi Rc sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R1 este -OH;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este -CH2OH;
şi R3; şi Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, hidrogenul fiind cea mai preferată grupare R3;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este -CH2OH.
şi R1 este aşa cum este definit mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, în care:
X este -O-;
R1 este -OH;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; unde Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, hidrogenul fiind cel mai preferat R3;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este -CH2OH.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală IDc în care:
R1 este -OH;
şi R2; R3; Ra şi Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală IDc, în care:
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
şi R1; R3; Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală IDc, în care:
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula IDc; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 este hidrogen şi metoxi, R3 fiind hidrogen cel mai preferat;
şi R1; R2 şi Ra; sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală IDc, în care:
R1 este -OH;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi terţ-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
şi R3 şi Rb sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală IDc, în care:
R1 este -OH;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula IDc; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 sunt hidrogen şi metoxi, R3 fiind de preferinţă hidrogen;
şi R2; şi Ra sunt definiţi mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală IDc, în care:
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula IDc; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Mai preferat R3 sunt hidrogen şi metoxi, hidrogenul fiind cel mai preferat R3;
şi R1 este definit mai sus.
Alţi compuşi preferaţi includ compuşii cu formula generală IDc, în care:
R1 este -OH;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc; în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula IDc; în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cea mai preferată grupare R3 este hidrogen şi metoxi, gruparea R3 cea mai preferată fiind hidrogen.
Următorii substituenţi preferaţi (acolo unde este permis prin grupări substituente posibile) se aplică la compuşii cu formula ID, IDa, IDb şi IDc:
În compuşii prezentei invenţii R1 în special preferat este -OH.
În compuşii prezentei invenţii R2 în special preferat este o grupare -C(=O)Ra în care Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R2 este acetil.
În compuşii prezentei invenţii, R3 în special preferat este hidrogen sau o grupare -ORb în care Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat R3 este hidrogen, şi metoxi, hidrogenul fiind cel mai preferat pentrun gruparea R3.
În compuşii prezentei invenţii, R4 în special preferat este ales dintre H,
-CH2OH şi -CH2OC(=O)Rc unde Rc este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este -CH2OH.
În compuşii cu formula generală ID, IDa şi IDb, R4 în special preferat este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb; în care Rc un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi tert-butil substituit sau nesubstituit. Cel mai preferat Rc este metil. Cel mai preferat R4 este
-CHzOH.
Compuşii cu formula IDa în special preferaţi sunt cei în care R4 este -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc .
În compuşii prezentei invenţii X este -O--.
Compuşii preferaţi conform prezentei invenţii includ:
Compuşi cu formula ID, IDa şi IDb în care:
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc ;
Fiind în special preferaţi compuşii cu formula IDa şi/sau compuşii în care R4 este -CH2OH.
Compuşii cu formula IDc în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula IDc;
Ra este ales dintre hidrogen şi alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit; şi
Rb este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
Compuşii în special preferaţi conform prezentei invenţii includ:
Compuşii cu formula ID, IDa şi IDb în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii ID, IDa şi IDb;
R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc ;
Ra este ales dintre hidrogen şi alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit;
Rb este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit; şi
Rc este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
Fiind mai preferaţi compuşii cu formula IDa şi/sau compuşii în care R4 este -CH2OH.
Compuşii cu formula IDc în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii cu formula IDc;
Ra este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit; şi
Rb este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
Compuşii mai preferaţi conform prezentei invenţii includ:
Compuşii cu formula ID, IDa şi IDb în care
X este -O- ;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii ID, IDa şi IDb;
R4 este-CHzOH;
Ra este ales dintre hidrogen şi alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit;şi
Rb este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
Fiind în special mai preferaţi compuşii cu formula IDa.
Compuşii cu formula ID, IDa şi IDb în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb pentru compuşii ID, IDa şi IDb;
R4 este-CHzOH;
Ra este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit; şi
Rb este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
Fiind în special mai preferaţi compuşii cu formula IDa.
Compuşii cu formula IDc în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc;
R3 este hidrogen sau metoxi pentru compuşii cu formula IDc şi
Ra este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
Compuşii în special mai preferaţi conform prezentei invenţii includ:
Compuşii cu formula ID, IDa şi IDb în care
X este -O- ;
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb;
R3 este hidrogen sau metoxi pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb;
R4 este-CH2OH;
Ra este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
Fiind în special mai preferaţi compuşii cu formula IDa.
Compuşii cu formula ID, IDa şi IDb în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb;
R3 este hidrogen sau metoxi pentru compuşii cu formula ID, IDa şi IDb;
R4 este-CH2OH şi
Ra este ales dintre metil, etil, n-propil, izopropil şi butyl, incluzând n-butil, sec-butil, izobutil şi terţ-butil.
Fiind chiar mai preferaţi compuşii cu formula IDa.
Compuşii cu formula IDc în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc;
R3 este hidrogen; şi
Ra este ales dintre metil, etil, n-propil, izopropil şi butyl, incluzând n-butil, sec-butil, izobutil şi terţ-butil.
Compuşii cu formula IDc în care
R2 este o grupare -C(=O)Ra pentru compuşii cu formula IDc;
R3 este metoxi şi
Ra este ales dintre metil, etil, n-propil, izopropil şi butyl, incluzând n-butil, sec-butil, izobutil şi terţ-butil.
Compuşii chiar mai preferaţi conform prezentei invenţii includ:
• Compuşi cu formula ID, IDa şi IDb în care
R2 este acetil;
R3 este hidrogen; şi
R4 este -CH2OH.
Fiind cei mai preferaţi compuşii cu formula IDa.
• Compuşi cu formula ID, IDa şi IDb în care
R1 este -OH;
R2 este acetil;
R3 este hydrogen; şi
R4 este -CH2OH.
Fiind cei mai preferaţi compuşii cu formula IDa.
• Compuşii cu formula IDc în care
R2 este acetil; şi
R3 este hydrogen.
• Compuşii cu formula IDc în care
R2 este acetil; şi
R3 este metoxi.
• Un compus conform prezentei invenţii cu formula:
sau o sare sau ester al acestora acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
Fiind în special preferat un compus cu formula:
• sau o sare sau ester al acestora acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
• Un compus conform prezentei invenţii cu formula:
• sau o sare sau ester al acestora acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
Fiind în special preferat un compus cu formula:
sau o sare sau ester al acestuia acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
Fiind în special preferat un compus cu formula:
sau o sare sau ester al acestuia acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
În exemple de realizare preferate suplimentare, preferinţele descrise mai sus pentru diferiţi substituenţi sunt combinate. Prezenta invenţie se referă, de asemenea, la astfel de combinaţii de substituţii preferate (în care sunt permise posibile grupări substituente) în compuşii cu formula ID, IDa şi IDb conform prezentei invenţii.
O caracteristică importantă a compuşilor descrişi mai sus este bioactivitatea lor şi în special activitatea lor citotoxică. În această privinţă, s-a descoperit în mod surprinzător că compuşii prezentei invenţii prezintă o activitate antitumorală îmbunătăţită, aşa cum este prezentată în exemplele 27 şi 29 până la 40.
Compoziţii care cuprind un compus cu formula ID, IDa, IDb şi IDc conform invenţiei şi utilizări ale acestora
Într-un alt exemplu de realizare a prezentei invenţii, este furnizată o compoziţie farmaceutică care cuprinde un compus conform prezentei invenţii şi un purtător acceptabil din punct de vedere farmaceutic. Exemplele de formă de administrare includ fără limitare orală, topică, parenterală, sublinguală, rectală, vaginală, oculară şi intranazală. Administrarea parenterală include injecţii subcutanate, tehnici de injecţie intravenoasă, intramusculară, intrasternală sau de perfuzie. De preferinţă, compoziţiile sunt administrate parenteral. Compoziţiile farmaceutice ale invenţiei pot fi formulate astfel încât să permită unui compus conform prezentei invenţii să fie biodisponibil la administrarea compoziţiei la un animal, de preferinţă uman. Compoziţiile pot lua forma uneia sau mai multor unităţi de dozare, în care, de exemplu, o tabletă poate fi o singură unitate de dozare şi un recipient al unui compus conform prezentei invenţii poate conţine compusul în formă lichidă sau sub formă de aerosoli şi poate conţine un o singură sau mai multe unităţi de dozare.
Purtătorul sau vehiculul acceptabil din punct de vedere farmaceutic poate fi sub formă de particule, astfel încât compoziţiile sunt, de exemplu, sub formă de tabletă sau pulbere. Purtătorii pot fi lichide, compoziţiile fiind, de exemplu, un sirop oral sau un lichid injectabil. În plus, purtătorii pot fi gazoşi sau lichizi, astfel încât să furnizeze o compoziţie de aerosoli utilă, de exemplu, în administrarea prin inhalare. Pulberile pot fi, de asemenea, utilizate pentru forme de dozare pentru inhalare. Termenul "purtător" se referă la un diluant, adjuvant sau excipient, cu care este administrat compusul conform prezentei invenţii. Astfel de purtători farmaceutici pot fi lichide, cum ar fi apa şi uleiuri, inclusiv cele de origine petrolieră, animală, vegetală sau sintetică, cum ar fi uleiul de arahide, uleiul de soia, uleiul mineral, uleiul de susan şi altele asemenea. Purtătorii pot fi ser fiziologic, gumă de salcâm, gelatină, pastă de amidon, talc, cheratină, silice coloidală, uree, dizaharide şi altele asemenea. În plus, se pot utiliza agenţi auxiliari, stabilizatori, de îngroşare, lubrifianţi şi coloranţi. Într-un exemplu de realizare, atunci când sunt administrate unui animal, compuşii şi compoziţiile conform prezentei invenţii şi purtătorii acceptabili farmaceutic sunt sterili. Apa este un purtător preferat atunci când compuşii conform prezentei invenţii sunt administraţi intravenos. Soluţiile saline şi soluţiile apoase de dextroză şi glicerol pot fi, de asemenea, folosite ca purtători lichizi, în special pentru soluţiile injectabile. Purtătorii farmaceutici adecvaţi includ, de asemenea, excipienţi cum ar fi amidon, glucoză, lactoză, zaharoză, gelatină, malţ, orez, făină, cretă, silicagel, stearat de sodiu, monostearat de glicerol, talc, clorură de sodiu, lapte degresat anhidru, glicerol, propilenglicol, apă, etanol şi altele asemenea. Compoziţiile prezente, dacă se doreşte, pot conţine, de asemenea, cantităţi minore de agenţi de umectare sau de emulsionare sau agenţi de tamponare a pH-ului.
Atunci când este destinată administrării orale, compoziţia este, de preferinţă, în formă solidă sau lichidă, în care formele semisolide, semilichide, suspensie şi gel sunt incluse în formele considerate aici fie solide, fie lichide.
Sub formă de compoziţie solidă pentru administrare orală, compoziţia poate fi formulată sub formă de pulbere, granulă, tabletă comprimată, pilulă, capsulă, gumă de mestecat, napolitană sau o formă similară. O astfel de compoziţie solidă conţine de obicei unul sau mai mulţi diluanţi inerţi. În plus, pot fi prezenţi unul sau mai mulţi pentru următoarele: lianţi cum ar fi carboximetilceluloza, etilceluloza, celuloza microcristalină sau gelatina; excipienţi cum ar fi amidon, lactoză sau dextrine, agenţi de dezintegrare cum ar fi acid alginic, alginat de sodiu, amidon de porumb şi alţii asemenea; lubrifianţi cum ar fi stearat de magneziu; agenţi de alunecare cum ar fi dioxidul de siliciu coloidal; agent de îndulcire cum ar fi zaharoza sau zaharina; un agent de aromatizare cum ar fi aroma de mentă, salicilat de metil sau portocale; şi un colorant.
Când compoziţia este sub formă de capsulă (de exemplu, o capsulă de gelatină), aceasta poate conţine, în plus faţă de materialele de tipul de mai sus, un purtător lichid cum ar fi polietilenglicol, ciclodextrine sau un ulei gras.
Compoziţia poate fi sub formă de lichid, de exemplu, un elixir, sirop, soluţie, emulsie sau suspensie. Lichidul poate fi util pentru administrare orală sau pentru administrare prin injectare. Atunci când este destinată administrării orale, o compoziţie poate cuprinde unul sau mai mulţi dintre un agent de îndulcire, conservanţi, colorant/colorant şi amplificator de aromă. Într-o compoziţie pentru administrare prin injectare, pot fi de asemenea incluse unul sau mai mulţi dintre un surfactant, conservant, agent de umectare, agent de dispersie, agent de suspendare, tampon, stabilizator şi agent izotonic.
Calea preferată de administrare este administrarea parenterală incluzând, dar fără a se limita la, intradermică, intramusculară, intraperitoneală, intravenoasă, subcutanată, intranazală, epidurală, intracerebrală, intraventriculară, intratecală, intravaginală sau transdermică. Modul preferat de administrare este lăsat la discreţia medicului şi va depinde parţial de locul afecţiunii medicale (cum ar fi situsul cancerului). Într-un exemplu de realizare mai preferat, compuşii conform prezentei invenţii sunt administraţi intravenos. Se preferă să se utilizeze timpi de perfuzie de până la 24 de ore, mai preferabil 1 până la 12 ore, cel mai preferat fiind 1 până la 6 ore. Timpii de perfuzie scurţi care permit efectuarea tratamentului fără o şedere peste noapte într-un spital sunt de dorit în special. Cu toate acestea, perfuzia poate dura 12 până la 24 de ore sau chiar mai mult dacă este necesar. Perfuzia poate fi efectuată la intervale adecvate de exemplu, de 1 până la 4 săptămâni.
Compoziţiile lichide ale invenţiei, dacă sunt soluţii, suspensii sau alte forme similare, pot include, de asemenea, unul sau mai multe dintre următoarele: diluanţi sterili, cum ar fi apa pentru injecţie, soluţie salină, de preferinţă ser fiziologic, soluţie Ringer, clorură de sodiu izotonică, uleiuri fixe cum ar fi mono sau digliceride sintetice, polietilenglicoli, glicerină sau alţi solvenţi; agenţi antibacterieni cum ar fi alcool benzilic sau metilparaben; şi agenţi pentru ajustarea tonicităţii, cum ar fi clorura de sodiu sau dextroza. O compoziţie parenterală poate fi înclusă într-o fiolă, o seringă de unică folosinţă sau un flacon cu doze multiple din sticlă, plastic sau alt material. Soluţia salină fiziologică este un adjuvant preferat.
Cantitatea de compus conform prezentei invenţii care este eficientă în tratamentul unei anumite tulburări sau afecţiuni va depinde de natura tulburării sau afecţiunii şi poate fi determinată prin tehnici clinice standard. În plus, testele in vitro sau in vivo pot fi utilizate opţional pentru a ajuta la identificarea intervalelor optime de dozare. Doza precisă care trebuie utilizată în compoziţii va depinde, de asemenea, de calea de administrare şi de gravitatea bolii sau tulburării şi ar trebui să fie decisă în funcţie de judecata medicului şi de circumstanţele fiecărui pacient.
Compoziţiile cuprind o cantitate eficientă dintr-un compus al prezentei invenţii astfel încât se va obţine o doză adecvată. Doza corectă a compuşilor va varia în funcţie de formularea particulară, modul de aplicare şi locul său particular, gazda şi boala care este tratată, de exemplu, cancer şi, dacă da, ce tip de tumoare. Alţi factori precum vârsta, greutatea corporală, sexul, dieta, timpul de administrare, rata de excreţie, starea gazdei, combinaţiile de medicamente, sensibilităţile de reacţie şi severitatea bolii trebuie luaţi în considerare. Administrarea poate fi efectuată continuu sau periodic în doza maximă tolerată.
În mod tipic, cantitatea este de cel puţin aproximativ 0,01% dintr-un compus din prezenta invenţie şi poate cuprinde cel puţin 80% din greutatea compoziţiei. Când este destinată administrării orale, această cantitate poate varia de la aproximativ 0,1% până la aproximativ 80% în greutate din compoziţie. Compoziţiile orale preferate pot cuprinde de la aproximativ 4% până la aproximativ 50% din compusul prezentei invenţii în greutatea compoziţiei.
Compoziţiile preferate ale prezentei invenţii sunt preparate astfel încât o unitate de dozare parenterală să conţină de la aproximativ 0,01% până la aproximativ 10% în greutate din compusul prezentei invenţii. Unitatea de dozare parenterală mai preferată conţine aproximativ 0,5 % până la aproximativ 5 % în greutate compus din prezenta invenţie.
Pentru administrare intravenoasă, compoziţia este adecvată pentru doze de la aproximativ 0,1 mg/kg până la aproximativ 250 mg/kg din greutatea corporală a animalului, de preferinţă de la aproximativ 0,1 mg/kg şi aproximativ 20 mg/kg din greutatea corporală a animalului, şi mai preferabil de la aproximativ 1 mg/kg până la aproximativ 10 mg/kg din greutatea corporală a animalului.
Compusul prezentei invenţii poate fi administrat pe orice cale convenabilă, de exemplu prin perfuzie sau injectare în bolus, prin absorbţie prin căptuşeli epiteliale sau mucocutanate.
În exemple de realizare specifice, poate fi de dorit să se administreze unul sau mai mulţi compuşi ai prezentei invenţii sau compoziţii local, în zona care este necesar tratament. Într-un exemplu de realizare, administrarea poate fi prin injectare directă la locul (sau locul anterior) al unui cancer, tumoră sau ţesut neoplazic sau pre-neoplazic.
Administrarea pulmonară poate fi, de asemenea, utilizată, de exemplu, prin utilizarea unui inhalator sau nebulizator şi formulare cu un agent de aerosolizare sau prin perfuzie într-un surfactant pulmonar fluorocarbon sau sintetic. În anumite variante de realizare, compusul prezentei invenţii poate fi formulat ca supozitor, cu lianţi şi purtători tradiţionali, cum ar fi trigliceride.
Compoziţiile prezente pot lua forma de soluţii, suspensii, emulsii, tablete, pastile, pelete, capsule, capsule care conţin lichide, pulberi, formulări cu eliberare susţinută, supozitoare, emulsii, aerosoli, spray-uri, suspensii sau orice altă formă adecvată pentru utilizare. Alte exemple de purtători farmaceutici adecvaţi sunt descrise în "Remington's Pharmaceutical Sciences" de E. W. Martin.
Compoziţiile farmaceutice pot fi preparate folosind o metodologie bine cunoscută în domeniul farmaceutic. De exemplu, o compoziţie destinată a fi administrată prin injectare poate fi preparată prin combinarea unui compus din prezenta invenţie cu apă sau alt diluant adecvat fiziologic, cum ar fi soluţie salină tamponată cu fosfat, astfel încât să formeze o soluţie. Se poate adăuga un surfactant pentru a facilita formarea unei soluţii sau suspensii omogene.
Compoziţiile preferate conform prezentei invenţii includ:
• Compoziţii farmaceutice care cuprind un compus al prezentei invenţii şi o dizaharidă. Dizaharidele preferate în mod special sunt alese dintre lactoză, trehaloză, zaharoză, maltoză, izomaltoză, celobioză, izozaharoză, izotrehaloză, turanoză, melibioză, gentiobioză şi amestecuri ale acestora. • Compoziţii farmaceutice liofilizate care cuprind un compus al prezentei invenţii şi o dizaharidă. Dizaharidele preferate în mod special sunt alese dintre lactoză, trehaloză, zaharoză, maltoză, izomaltoză, celobioză, izozaharoză, izotrehaloză, turanoză, melibioză, gentiobioză şi amestecuri ale acestora. Raportul dintre substanţa activă şi dizaharidă în exemplele de realizare ale prezentei invenţii este determinat în funcţie de solubilitatea dizaharidei şi, atunci când formularea este liofilizată, de asemenea, în funcţie de liofilitatea dizaharidei. Se are în vedere că acest raport substanţă activă: dizaharidă (greut/greut) poate fi de aproximativ 1:10 în unele exemple de realizare, aproximativ 1:20 în alte exemple de realizare, aproximativ 1:50 în încă alte exemple de realizare. Se are în vedere că alte exemple de realizare au astfel de rapoarte în intervalul de la aproximativ 1:5 până la aproximativ 1:500 şi încă alte exemple de realizare au astfel de rapoarte în intervalul de la aproximativ 1:10 până la aproximativ 1:500. Compoziţia care cuprinde un compus din prezenta invenţie poate fi liofilizată. Compoziţia care cuprinde un compus conform prezentei invenţii este prezentată de obicei într-o fiolă care conţine o cantitate menţionată dintr-un astfel de compus. S-a descoperit că compuşii prezentei invenţii şi compoziţiile prezentei invenţii sunt deosebit de eficace în tratamentul cancerului. Astfel, aşa cum s-a descris mai devreme, prezenta invenţie furnizează un compus sau o compoziţie pentru utilizare în tratamentul cancerului şi, mai preferabil, un cancer ales dintre cancerul pulmonar, inclusiv cancerul pulmonar fără celule mici şi cancerul pulmonar cu celule mici, cancerul de colon, cancerul de sân, cancer de pancreas, sarcom, cancer ovarian, cancer de prostată şi cancer gastric. Astfel, compuşii şi compoziţiile conform prezentei invenţii sunt utili pentru inhibarea înmulţirii sau proliferării unei celule tumorale sau a unei celule canceroase sau pentru tratarea cancerului la un animal. Compuşii şi compoziţiile conform prezentei invenţii prezintă o activitate excelentă în tratamentul cancerelor cum ar fi cancerul pulmonar, inclusiv cancerul pulmonar fără celule mici şi cancerul pulmonar cu celule mici, cancerul de colon, cancerul de sân, cancerul pancreasului, sarcomul, cancerul ovarian, cancerul de prostată. si cancer gastric. Cele mai preferate tipuri de cancer sunt selectate dintre cancerul pulmonar incluzând cancerul pulmonar fără celule mici şi cancerul pulmonar cu celule mici, cancerul de sân, cancerul de pancreas şi cancerul colorectal. În prezenta cerere, prin "cancer" se înţelege a include tumori, neoplazii şi orice altă boală malignă având drept cauză ţesut sau celule maligne. Termenul „tratare», aşa cum este utilizat aici, dacă nu se indică altfel, înseamnă inversarea, atenuarea, uşurarea sau inhibarea progresului bolii sau stării la care se aplică un astfel de termen sau unul sau mai multe simptome ale unei astfel de tulburări sau stări. Termenul "tratament", aşa cum este utilizat aici, dacă nu se indică altfel, se referă la actul de a trata, deoarece "tratare" este definit imediat mai sus. Compuşii şi compoziţiile conform prezentei invenţii pot fi administrate la un animal care a suferit şi o intervenţie chirurgicală ca tratament pentru cancer. Într-un exemplu de realizare a prezentei invenţii, tratamentul suplimentar este radioterapia. Într-un exemplu de realizare specific al prezentei invenţii, compusul sau compoziţia conform prezentei invenţii este administrată concomitent cu radioterapia. Într-un alt exemplu de realizare specific, terapia cu radiaţii este administrată înainte sau după administrarea compusului sau compoziţiei prezentei invenţii, de preferinţă cel puţin o oră, trei ore, cinci ore, 12 ore, o zi, o săptămână, o lună, mai mult de preferinţă câteva luni (de exemplu, până la trei luni) înainte sau după administrarea unui compus sau compoziţie din prezenta invenţie. Orice protocol de radioterapie poate fi utilizat în funcţie de tipul de cancer care urmează a fi tratat. De exemplu, dar fără limitare, se pot administra radiaţii cu raze X; în special, megavoltaj de înaltă energie (radiaţia de energie mai mare de 1 MeV) poate fi utilizat pentru tumorile profunde, iar fasciculul de electroni şi radiaţia cu raze X cu ortovoltaj pot fi utilizate pentru cancerele de piele. De asemenea, pot fi administraţi radioizotopi care emit raze gamma, cum ar fi izotopi radioactivi de radiu, cobalt şi alte elemente. Într-un alt exemplu de realizare a prezentei invenţii, este furnizat un kit care cuprinde o cantitate eficace terapeutic dintr-un compus conform prezentei invenţii şi un purtător acceptabil din punct de vedere farmaceutic. Într-un exemplu de realizare, kitul conform acestui exemplu de realizare este pentru utilizare în tratamentul cancerului şi, mai preferabil, un cancer ales dintre cancerul pulmonar, inclusiv cancerul pulmonar cu celule mici şi cancerul pulmonar cu celule mici, cancerul de colon, cancerul de sân, cancerul de pancreas , sarcom, cancer ovarian, cancer de prostată şi cancer gastric. Într-un alt exemplu de realizare a prezentei invenţii, este furnizat un procedeu pentru obţinerea unui compus cu formula ID, IDa şi IDb sau o sare acceptabilă farmaceutic sau ester al acestuia, care cuprinde etapa de reacţie a unui compus cu formula II cu un compus cu formula III pentru a da un compus cu formula IV:
în care (în care este permis de posibilele grupări substituente):
X este -O-;
R2 este o grupare -C(=O)Ra;
R3 este hidrogen sau o grupare -ORb;
R4 este ales dintre hidrogen, -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc;
Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit, alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit;
Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit, alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit;
Rc este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit.
Procedeele preferate conform prezentei invenţii includ:
• Un procedeu care utilizează un compus cu formula II în care:
R2 este o grupare -C(=O)Ra în care Ra este alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit. Deosebit de preferat Ra este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Mai preferat Ra este o grupare alchil substituită sau nesubstituită aleasă dintre metil, etil, n-propil, izopropil şi butil, inclusiv n-butil, sec-butil, izobutil şi tert-butil, metil fiind cea mai preferată grupare Ra.
• Un procedeu în care compusul cu formula III este ales dintr-un compus cu formula IIIa, IIIb şi IIIc:
• în care
X este -O-;
R3 este ales dintre hidrogen şi ORb în care Rb este alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit. În special preferat Rb este un alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit. Mai preferat Rb este o grupare alchil substituită sau nesubstituită aleasă dintre metil, etil, n-propil, izopropil şi butil, inclusiv n-butil, sec-butil, izobutil şi tert-butil. Mai preferat R3 este hidrogen sau metoxi. Cel mai preferat R3 este hidrogen.
R4 este -CHzOH.
În special preferat este compusul cu formula III care este un compus cu formula IIIa sau IIIb.
• Un procedeu care utilizează un compus cu formula III, IIIa sau IIIb în care R4 este - CH2OH.
Fiind preferat un procedeu care utilizează un compus cu formula IIIa sau IIIb în care R4 este aşa cum este definit mai sus.
Fiind mai preferat un procedeu care utilizează un compus cu formula IIIa în care R4 este aşa cum este definit mai sus.
EXEMPLE
Compusul 1 a fost preparat aşa cum este descris în Exemplul 20 din WO 01/87895.
Compuşii de referinţă A, B, C, D, E, F, ET-736 şi PM01183 au fost preparaţi aşa cum este descris în WO 03/014127 (Compuşii 19, 18, 44, 43, 2,1, 26 şi respectiv 27).
Exemplu de referinţă 1.
La o soluţie de 1 (0,5 g, 0,80 mmol) în acid acetic (20 mL, 0,04 M) s-a adăugat L-triptofanol (2-S) (533 mg, 3,0 mmol, Sigma-Aldrich). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 16 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. S-a adăugat o soluţie apoasă saturată de NaHCOs şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Cromatografia rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) a dat compuşii 3-S (616 mg, 97%) şi 3a-S (12 mg, 2%).
3-S
Rf= 0,50 (Hexan:EtOAc, 1:1).
1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 7,71 (s, 1 H), 7,36 (dd, J = 7,9, 1,0 Hz, 1 H), 7,27 (dd, J = 8,2, 0,9 Hz, 1 H), 7,13 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,2 Hz, 1 H), 7,03 (ddd, J = 8,0, 7,0, 1,0 Hz, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 6,26 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,04 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,14 (dd, J = 11,7, 1,2 Hz, 1 H), 4,60 (s, 1 H), 4,41 (s, 1 H), 4,36-4,24 (m, 2H), 4,21 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 3,82 (s, 3H), 3,52 (s, 1 H), 3,50-3,47 (m, 1 H), 3,45 (dq, J = 8,4, 2,2 Hz, 1 H), 3,35 (t, J = 10,1 Hz, 1 H), 3,01-2,78 (m, 5H), 2,62 (dd, J= 15,3, 4,7 Hz, 1 H), 2,41 (s, 1 H), 2,38 (s, 3H), 2,37-2,31 (m, 1 H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,06 (s, 3H).
ESI-MS m/z: 794,2 (M+H)+.
3a-S
Rf= 0,70 (Hexan:EtOAc, 1:1).
1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,83 (s, 1 H), 7,38 (dt, J = 7,9, 0,9 Hz, 1 H), 7,25 (dt, J = 8,3, 0,9 Hz, 1 H), 7,11 (ddd, J = 8,2, 7,1, 1,2 Hz, 1 H), 7,02 (ddd, J = 8,0, 7,0, 1,0 Hz, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 6,24 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,03 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 5,13 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,60 (s, 1 H), 4,39 (s, 1 H), 4,36-4,22 (m, 3H), 4,17-4,09 (m, 1 H), 3,91 (dd, J = 10,5, 8,6 Hz, 1 H), 3,83 (s, 3H), 3,51-3,41 (m, 2H), 3,04-2,92 (m, 3H), 2,72 (dd, J = 15,1, 4,0 Hz, 1H), 2,54-2,41 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,35-2,30 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,21-2,16 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,12 (s, 3H); 2,05 (s, 3H).
13C RMN (101 MHz, CDCI3): δ 171,2, 170,7, 168,6, 147,5, 145,8, 143,0, 141,1, 140,4, 135,6, 130,1, 129,5, 126,7, 122,2, 121,2, 120,9, 119,4, 118,4, 118,2, 113,6, 113,5, 110,9, 110,0, 109,1 , 102,1, 91,4, 67,2, 63,4, 61,3, 60,4, 59,7, 59,1, 54,8, 54,6, 47,7, 42,0, 41,6, 31,6, 24,0, 22,6, 24,0, 21,0, 15,9, 14,2, 9,7.
ESI-MS m/z: 836,2 (M+H)+.
(M+H)+.
La o soluţie de 3-S (616 mg, 0,77 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 51 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (3,40 g, 23,3 mmol). După 3 ore la 23 °C, amestecul de reacţie a fost stins cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat sub vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a da 4-S (471 mg, 78%).
Rf= 0,50 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,71 (s, 1 H), 7,36 (dd, J = 7,8, 1,1 Hz, 1 H), 7,26 (dd, J = 7,8, 1,1 Hz, 1 H), 7,12 (ddd, J = 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1 H), 7,03 (ddd, J = 8,0, 7,1, 1,0 Hz, 1 H), 6,64 (s, 1 H), 6,23 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,25 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 4,92 (s, 1 H), 4,52 (br s, 3H), 4,22 (dd, J = 11,4, 2,2 Hz, 1 H), 4,19 (s, 1 H), 3,83 (s, 3H), 3,54 (br s, 2H), 3,35 (t, J = 10,2 Hz, 1 H), 3,26 (s, 1 H), 3,01-2,93 (m, 3H), 2,88 (br s, 3H), 2,63 (dd, J = 15,2, 4,8 Hz, 1 H), 2,38 (s, 3H), 2,36-2,31 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).
13C RMN (126 MHz, CDCI3): δ 171,9, 168,6, 147,5, 145,4, 142,9, 141,2, 140,7, 135,5, 130,4, 126,8, 122,3, 122,0, 121,3, 119,4, 118,4, 115,2, 112,8, 111,0, 110,0, 109,6, 101,8, 81,9, 76,8, 65,2 , 62,8, 62,5, 60.4, 58,1, 57,9, 55,9, 55,1, 53,4, 51,6, 41,8, 41,3, 39,6, 24,1, 23,8, 20,5, 15,8, 9,7.
ESI-MS m/z: 767.3 (M-H2O+H)+.
(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z 767.2788 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H43N4O9S: 767,2745).
La o soluţie de 3a-S (30 mg, 0,035 mmol) în CH3CN:H2O O (1,39:1, 2,4 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNOs (180 mg, 1,07 mmol). După 3 ore la 23 °C, amestecul de reacţie a fost stins cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCOs, s-a agitat timp de 15 minute, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 4a-S (24 mg, 83%).
Rf= 0,60 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,81 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,30-7,21 (m, 1 H), 7,06 (dddt, J = 34,7, 8,0, 7,1, 1,1 Hz, 2H), 6,63 (s, 1 H), 6,22 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 6,02 (dd, J = 12,9, 1,4 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,25-5,21 (m, 1 H), 4,89 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 4,55-4,45 (m, 2H), 4,30-4,18 (m, 1 H), 4,14 (dd, J = 10,5, 4,2 Hz, 1 H), 4,00-3,88 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,56-3,44 (m, 2H), 3,23 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 2,95 (d, J = 15,7 Hz, 2H), 2,87-2,78 (m, 2H), 2,71 (dd, J = 15,0, 3,9 Hz, 1 H), 2,48 (dd, J = 15,1, 9,6 Hz, 1 H), 2,37 (s, 3H), 2,35-2,29 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,22-2,16 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,12 ( s, 3H), 2,03 (s, 3H).
ESI-MS m/z: 809,2 (M-H2O+H)+.
Exemplul de referinţă 2
La o soluţie de 1 (0,5 g, 0,80 mmol) în acid acetic (20 mL, 0,04 M) sa adăugat D-triptofanol (2-R) (533 mg, 3,0 mmol, Sigma-Aldrich). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 16 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. S-a adăugat o soluţie apoasă saturată de NaHC0s şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Cromatografia rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) a dat compusul 3-R (479 mg, 75%). Rf= 0,44 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,61 (s, 1 H), 7,39 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,29 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 7,12 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,03 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,60 (s, 1 H), 6,25 (s, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,04 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,62 (s, 1 H), 4,37 (s, 1 H), 4,32-4,25 (m, 1 H), 4,22 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 4,19-4,09 (m, 1 H), 3,82 (s, 3H), 3,77 (s, 1 H), 3,64 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 3,49-3,41 (m, 2H), 3,02-2,90 (m, 2H), 2,60-2,52 (m, 2H), 2,45 (d, J = 14,7 Hz, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,22-2,14 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (m, 3H). ESI-MS m/z: 794.3 (M+H)+.
La o soluţie de 3-R (479 mg, 0,60 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 40 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNOs (3,03 g, 18,1 mmol). După 3 ore la 23 °C, amestecul de reacţie a fost stins cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCOs, s-a agitat timp de 15 minute, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat sub vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a se obţine 4-R (428 mg, 91%). Rf= 0,45 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,62 (s, 1 H), 7,39 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,11 (ddd, J = 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1 H), 7,02 (ddd, J = 7,9, 7,1, 1,0 Hz, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 6,22 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,99 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,73 (s, 1 H), 5,17 (dd, J = 11,5, 1,2 Hz, 1 H), 4,86 (s, 1 H), 4,56-4,47 (m, 2H), 4,17 (dd, J = 5,1, 1,6 Hz, 1 H), 4,08 (dd, J = 11,5, 2,1 Hz, 1 H), 3,81 (s, 3H), 3,78 (d, J = 3,8 Hz, 1 H), 3,64 (dd, J = 10,8, 3,8 Hz, 2H), 3,51 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 3,48-3,43 (m, 2H), 3,24 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 3,00-2,80 (m, 2H), 2,57 (s, 1 H), 2,55-2,43 (m, 1 H), 2,40 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,19-2,12 ( m, 1 H), 2,16 (s, 3H), 2,08 (s, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCI3): δ 171,8, 168,6, 147,6, 145,4, 143,0, 141,3, 140,7, 136,0, 131,1, 130,0, 129,6, 126,6, 122,1, 121,6, 121,2, 119,4, 118,4, 115,6, 112,9, 111,1, 110,6, 101,8, 81,7, 65,8 , 62,7, 61,8, 60,4, 60,3, 57,9, 57,8, 56,1, 55,0, 52,1, 42,2, 41,3, 41,1, 23,8, 23,4, 20,5, 15,7, 9,8. ESI-MS m/z: 767,6 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767,2799 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H43N4O9S: 767,2745).
Exemplul 3 de referinţă. Prepararea Sinteza N-[(R)-(2-amino-3-(1H-indol-3-il)propil)]carbamatului de alil (9-R)
La o soluţie de D-triptofanol (2-R) (2,0 g, 10,4 mmoli) în CH3CN (42 mL, 4 mL/mmol) s-a adăugat dicarbonat de di-terţ-butil (4,6 g, 20,8 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 3 ore şi s-a concentrat în vid. Cromatografia rapidă (CH2Cl2:CH3OH de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 5-R (2,2 g, 73%). Rf= 0,5 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,13 (s, 1 H), 7,67 (dd, J = 7,8, 1,1 Hz, 1 H), 7,38 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1 H), 7,29-7,10 (m, 2H), 7,06 (s, 1 H), 4,82 (s, 1 H), 4,00 (s, 1 H), 3,71 (dd, J = 11,0, 3,8 Hz, 1 H), 3,62 (dd, J = 11,0, 5,5 Hz, 1 H), 3,01 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 2,14 (s, 1 H), 1,44 (s, 9H).
La o soluţie de 5-R (2.4 g, 8,2 mmol) în CH2Cl2 (50 mL, 6 mL/mmol) s-au adăugat ftalimidă (2,7 g, 18,2 mmol), trifenilfosfină (4,8 g, 18,2 mmol) şi amestecul a fost răcit la 0°C. O soluţie de azodicarboxilat de dietil în CH2Cl2 (25 mL, 3 mL/mmol) s-a adăugat timp de 15 min. Reacţia a fost agitată la 23°C timp de 16 ore, s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 6-R (3,3 g, 96%). Rf= 0,7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1HRMN(400 MHz, CDCI3): δ 8,50 (s, 1 H), 7,81 (dd, J = 5,5, 3,1 Hz, 2H), 7,66 (dd, J = 5,6, 3,2 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,19-7,04 (m, 3H), 4,81 (s, 1 H), 4,40 (s, 1 H), 3,83 (dd, J = 13,9, 3,7 Hz, 1 H), 3,72 (dd, J = 13,9, 9,9 Hz, 1 H), 3,08-3,01 (m, 2H), 1,23 (s, 9H).
La o soluţie de 6-R (3.25 g, 7,74 mmol) în etanol (231 mL, 30 mL/mmol) s-a adăugat hidrazină monohidrat (37 mL, 774 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 80 °C într-un tub sigilat timp de 2,25 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (EtOAc:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) s-a obţinut 7-R (2,15 g, 96%).
Rf= 0,2 (EtOAc:CH3OH, 6:4).
1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,60 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,33 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,13-7,04 (m, 2H), 7,05-6,96 (m, 1 H), 4,02-3,94 (m, 1 H), 2,99-2,87 (m, 3H), 2,78 (dd, J = 13,1, 9,7 Hz, 1 H), 1,39 (s, 9H).
ESI-MS m/z: 290,2 (M+H)+.
La o soluţie de 7-R (2,15 g, 7,4 mmol) în CH3CN (74 mL, 10 mL/mmol) şi DMF (7,4 mL, 1 mL/mmol) s-a adăugat N,N-diizopropiletilamină (1,06 mL, 5,9 mmol) şi cloroformiat de alil (7,9 mL, 74 mmol). Reacţia a fost agitată la 23 °C timp de 16 ore. Amestecul a fost diluat cu EtOAc, s-a adăugat NH4CI şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100) pentru a se obţine 8-R (1,69 g, 61%). Rf= 0,4 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,25 (s, 1 H), 7,62 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,35 (dd, J = 8,1, 0,9 Hz, 1 H), 7,16 (dddd, J = 27,8, 8,0, 7,0, 1,1 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 5,90 (ddt, J = 17,3, 10,7, 5,6 Hz, 1 H), 5,34-5,22 (m, 1 H), 5,20 (dt, J = 10,5, 1,4 Hz, 1 H), 5,12 (s, 1 H), 4,82 (s, 1 H), 4,55 (dq, J = 5,4, 1,7 Hz, 2H), 4,02 (s, 1 H), 3,35 (dt, J = 10,0, 4,7 Hz, 1 H), 3,21 (s, 1 H), 2,95 (ddd, J = 21,6, 15,4, 9,1 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H). ESI-MS m/z: 274.3 (M-Boc+H)+.
La o soluţie de 8-R (1.30 g, 3,50 mmol) în CH2Cl2 (58 mL, 16,6 mL/mmol) s-a adăugat acid trifluoracetic (30 mL, 8,3 mL/mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23 °C timp de 1,5 ore, s-a concentrat în vid pentru a se obţine 9-R brut care a fost folosit în etapele următoare fără purificare ulterioară. Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,95 (s, 1 H), 7,53 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,36 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,09 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,03 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 5,87 (ddt, J = 16,4, 10,8, 5,6 Hz, 1 H), 5,34-5,13 (m, 2H), 4,50 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,62 (bs, 1 H), 3,42 (dd, J = 14,9, 3,9 Hz, 1 H), 3,36-3,20 (m, 1 H), 3,11-3,00 (m, 2H). ESI-MS m/z: 274.3 (M+H)+.
Exemplul de referinţă 4. Prepararea N-[(S)-(2-amino-3-(1H-indol-3-il)propil)] carbamatului de alil (9-S)
[0168 ] La o soluţie de L-triptofanol (2-S) (2,0 g, 10,4 mmoli) în CH3CN (42 mL, 4 mL/mmol) s-a adăugat dicarbonat de di-tert-butil (4,6 g, 20,8 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat timp de 3 ore la 23°C şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) s-a obţinut 5-S (2,24 g, 73%).
Rf= 0,5 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,10 (s, 1 H), 7,65 (dd, J = 7,8, 1,1 Hz, 1 H), 7,37 (dd, J = 8,1, 1,3 Hz, 1 H), 7,23-7,11 (m, 2H), 7,06 (s, 1 H), 4,81 (s, 1 H), 3,99 (s, 1 H), 3,70 (dd, J = 11,0, 3,8 Hz, 1 H), 3,61 (dd, J = 11,0, 5,5 Hz, 1 H), 3,00 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 2,01 (s, 1 H), 1,42 (s, 9H).
La o soluţie de 5-S (1,2 g, 4,13 mmol) în CH2Cl2 (24,8 mL, 6 mL/mmol) s-a adăugat ftalimidă (1,33 g, 9,1 mmol), trifenilfosfină (2,4 g, 9,1 mmol) şi amestecul a fost răcit la 0°C. O soluţie de azodicarboxilat de dietil (3 mL, 10,32 mmol) în CH2Cl2 (12,4 mL, 3 mL/mmol) a fost adăugat timp de 15 min. Reacţia a fost agitată la 23°C timp de 16 ore şi s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a se obţine 6-S (2,8 g, >100%). Rf= 0,7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,49 (s, 1 H), 7,80 (dd, J = 5,4, 3,1 Hz, 2H), 7,66 (dd, J = 5,6, 3,2 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,21-7,04 (m,3H), 4,74 (s, 1 H), 4,42 (s, 1 H), 3,83 (dd, J = 13,9, 3,7 Hz, 1 H), 3,72 (dd, J = 13,9, 9,9 Hz, 1 H), 3,10-3,01 (m, 2H), 1,23 (s, 9H).
La o soluţie de 6-S (0,86 g, 2,07 mmol) în etanol (72 mL, 36 mL/mmol) s-a adăugat hidrazină monohidrat (10 mL, 207 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 80 °C într-un tub sigilat timp de 2,25 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (EtOAc:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) s-a obţinut 7-S (1,0 g, 84%).
Rf= 0,2 (EtOAc:CH3OH, 6:4).
1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,61 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,13-6,97 (m, 2H), 7,09 (s, 1 H), 4,06-3,96 (m, 1 H), 3,01-2,76 (m, 4H), 1,38 (s, 9H).
ESI-MS m/z: 290,3 (M+H)+.
La o soluţie de 7-S (0,95 g, 3,3 mmol) în CH3CN (33 mL, 10 mL/mmol) şi DMF (3,3 mL, 1 mL/mmol) s-au adăugat N,N-diizopropiletilamină (0,5 mL, 2,6 mmol) şi cloroformiat de alil (3,5 mL, 33 mmol). Reacţia a fost agitată la 23 °C timp de 20 ore. Amestecul a fost diluat cu EtOAc, s-a adăugat NH4CI şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100) pentru a se obţine 8-S (0,88 g, 73%). Rf= 0,5 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,17 (s, 1 H), 7,63 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,20 (dd, J = 8,1, 0,9 Hz, 1 H), 7,13 (dddd, J = 27,8, 8,0, 7,0, 1,1 Hz, 2H), 7,06 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 5,90 (ddt, J = 17,3, 10,7, 5,6 Hz, 1H), 5,31-5,18 (m, 2H), 5,09 (s, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,59-4,52 (m, 2H), 4,03 (s, 1H), 3,37 (dt, J = 10,0, 4,7 Hz, 1 H), 3,21 (s, 1 H), 3,05-2,87 (m, 2H), 1,42 (s, 9H). ESI-MS m/z: 274,3 (M-Boc+H)+.
La o soluţie de 8-S (0.875 g, 2,3 mmol) în CH2Cl2 (38 mL, 16,6 mL/mmol) s-a adăugat acid trifluoracetic (19 mL, 8,3 mL/mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23 °C timp de 2 ore, s-a concentrat în vid pentru a da 9-S brut care a fost folosit în etapele următoare fără purificare ulterioară. Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,56 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,37 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 7,13 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,05 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 5,94 (ddt, J = 16,4, 10,8, 5,6 Hz, 1 H), 5,34-5,16 (m, 2H), 4,56 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,60 (bs, 1H), 3,43 (dd, J = 14,9, 3,9 Hz, 1 H), 3,37-3,31 (m, 1 H), 3,14-2,99 (m, 2H). ESI-MS m/z: 274,3 (M+H)+.
Exemplul de referinţă 5
La o soluţie de 1 (1,45 g, 2,33 mmol) în acid acetic (58 mL, 0,08 M) s-au adăugat 9-R (0.95 g, 3,50 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 50°C timp de 18 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. S-a adăugat o soluţie apoasă saturată de NaHC0s şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) s-a obţinut compusul 10-R (1,3 g, 64%).
Rf= 0,5 (Hexan:EtOAc, 1:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,66 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,27 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,10 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1 H), 7,01 (td, J = 7,5, 7,0, 1,0 Hz, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 6,23 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 5,99-5,89 (m, 1H), 5,79 (s, 1H), 5,44-5,21 (m, 2H), 5,14-4,99 (m, 2H), 4,63 (ddd, J = 7,3, 4,4, 1,5 Hz, 2H), 4,36 (s, 1 H), 4,33-4,24 (m, 1 H), 4,29-4,26 (m, 1 H), 4,21 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 4,19-4,13 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,56 (s, 1 H), 3,48-3,43 (m, 3H), 3,27 (dt, J = 13,2, 4,0 Hz, 1 H), 3,04-2,88 (m, 2H), 2,56 (dd, J = 15,2, 3,8 Hz, 1 H), 2,49-2,35 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).
ESI-MS m/z: 877,3 (M+H)+.
La o soluţie de 10-R (600 mg, 0,68 mmol) în CH2Cl2 (12 mL, 18 mL/mmol) s-a adăugat diclorură de bis(trifenilfosfin)paladiu(II) (77 mg, 0,1 mmol) şi acid acetic (0,4 mL, 6,8 mmol). S-a adăugat hidrură de tributilstaniu (1,1 mL, 4,08 mmol) la 0°C, amestecul de reacţie a fost agitat la 0°C timp de 0,5 ore şi s-a concentrat în vid. Produsul brut obţinut a fost diluat cu EtOAc, s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NH4CI şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100 şi EtOAc:CH3OH, de la 100:1 la 1:100) s-a obţinut 11-R (440 mg, 82%). Rf= 0,5 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,64 (s, 1 H), 7,38 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,29 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,11 (ddt, J = 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1 H), 7,03 (ddt, J = 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1 H), 6,58 (s, 1 H), 6,24 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 6,02 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,02 (d, J = 11,8 Hz, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 4,36 (s, 1 H), 4,28 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 4,21 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 4,16 (s, 1 H), 3,80 (s, 3H), 3,51-3,39 (m, 4H), 3,32-3,13 (m, 3H), 2,95 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 2,89-2,76 (m, 2H), 2,73-2,57 (m, 1H), 2,42 (d, J = 14,8 Hz, 1 H), 2,36 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,09 (s, 3H). ESI-MS m/z: 793,2 (M+H)+.
La o soluţie de 11-R (850 mg, 1,07 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 70 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (3,64 g, 21,4 mmol). După 17 ore la 23 °C, reacţia a fost stinsă cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCOs, s-a agitat timp de 15 minute, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 12-R (553 mg, 66%). Rf= 0,3 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,60 (s, 1 H), 7,38 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,11 (ddt, J = 8,3, 7,1, 1,2 Hz, 1 H), 7,02 (ddt, J = 8,3, 7,1, 1,2 Hz, 1 H), 6,58 (s, 1 H), 6,22 (s, 1 H), 6,00 (s, 1 H), 5,16 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,87 (s, 1 H), 4,54 (s, 1 H), 4,51 (d, J = 3,3 Hz, 1 H), 4,17 (d, J = 5,4 Hz, 1 H), 4,07 (dd, J = 11,3, 2,2 Hz, 1 H), 3,81 (s, 3H), 3,52 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 3,24 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 2,99-2,78 (m, 4H), 2,66 (dd, J = 14,9, 3,5 Hz, 1 H), 2,49-2,39 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,28 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,21-2,16 (m, 2H), 2,15 ( s, 3H), 2,08 (s, 3H). 13C RMN (101 MHz, CD3OD): δ 171,7, 169,4, 148,7, 145,9, 143,7, 141,4, 140,9, 136,9, 130,8, 130,0, 129,7, 126,0, 121,4, 121,0, 119,7, 119,1, 118,4, 117,5, 114,9, 110,8, 107,5, 106,4, 102,1, 91,3, 63,2, 60,0, 59,0, 58,6, 55,3, 54,6, 52,7, 52,4, 48,4, 45,8, 42,5, 40,2, 24,5, 23,2, 19,2, 15,0, 8,2. ESI-MS m/z: 766,2 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 766,2972 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H44N5O8S+: 766.2905).
La o soluţie de 10-R (700 mg, 0,8 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 87,5 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (2,66 g, 16 mmol). După 20 ore la 23 °C, amestecul de reacţie a fost stins cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 minute, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2: CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 13-R (438 mg, 63%). Rf = 0,40 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,64 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,32-7,20 (m, 1 H), 7,11 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,01 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 6,21 (s, 1 H), 6,05-5,90 (m, 1 H), 5,99 (s, 1 H), 5,75 (d, J = 6,0 Hz, 1 H), 5,40-5,07 (m, 4H), 4,88 (d, J = 14,7 Hz, 1 H), 4,68-4,50 (m, 3H), 4,28-4,13 (m, 1 H), 4,08 (dt, J = 11,4, 2,4 Hz, 1 H), 3,83 (s, 3H), 3,68-3,40 (m, 4H), 3,37-3,19 (m, 2H), 2,98-2,79 (m, 2H), 2,59-2,36 (m, 3H) ), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10-2,16 (m, 1 H), 2,08 (s, 3H). ESI-MS m/z: 850,3 (M-H2O+H)+.
Exemplul de referinţă 6
La o soluţie de 1 (955 mg, 1,5 mmol) în acid acetic (37,5 mL, 0,08 M) s-a adăugat 9-S (627 mg, 2,29 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 50°C timp de 18 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. A fost adăugată o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) s-a obţinut compusul 10-S (756 mg, 58%). Rf= 0,4 (Hexan: EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,78 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,10 (ddd, J = 8,3, 7,0, 1,3 Hz, 1 H), 7,01 (td, J = 7,5, 7,0, 1,0 Hz, 1 H), 6,68 (s, 1 H), 6,23 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,07-5,93 (m, 1 H), 5,82 (s, 1 H), 5,41-5,19 (m, 2H), 5,1 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,66 (dt, J = 5,9, 1,3 Hz, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 4,37 (s, 1 H), 4,33-4,20 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,46 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 3,22-3,13 (m, 1 H), 3,11-2,88 (m, 4H), 2,66 (dd, J = 15,2, 4,2 Hz, 1 H), 2,51 (dd, J = 15,3, 6,0 Hz, 1 H), 2,43-2,32 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ESI-MS m/z: 877,3 (M+H)+.
La o soluţie de 10-S (650 mg, 0,72 mmol) în CH2Cl2 (13,3 mL, 18 mL/mmol) s-a adăugat diclorură de bis(trifenilfosfin)paladiu(II) (83 mg, 0,11 mmol) şi acid acetic (0,42 mL, 7,4 mmol). S-a adăugat hidrură de tributilstaniu (1,2 mL, 4,4 mmol) la 0°C, amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 0,5 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100 şi EtOAc:CH3OH, de la 100:1 la 1:100) s-a obţinut 11-S (445 mg, 78%). Rf= 0,5 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,74 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,12 (ddt, J = 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1 H), 7,02 (ddt, J = 8,3, 7,0, 1,4 Hz, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 6,26 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 6,04 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 11,8 Hz, 1 H), 4,59 (s, 1 H), 4,42 (s, 1 H), 4,36-4,17 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,51-3,39 (m, 3H), 2,98-2,75 ( m, 4H), 2,69-2,60 (m, 2H), 2,47 (d, J = 16,1 Hz, 1 H), 2,38 (s, 3H), 2,35-2,17 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ESI-MS m/z: 793,3 (M+H)+.
La o soluţie de 11-S (435 mg, 0,55 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 38,5 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (1,84 g, 11 mmol). După 24 de ore la 23 °C, reacţia a fost stinsă cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCOs, s-a agitat timp de 15 minute, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 12-S (152 mg, 35%). Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δ 7,34 (dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1 H), 7,28 (dd, J = 7,7, 1,5 Hz, 1 H), 7,04 (ddt, J = 8,2, 7,0, 1,1 Hz, 1 H), 6,95 (ddt, J = 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1 H), 6,55 (s, 1 H), 6,31-6,25 (m, 1 H), 6,15-6,05 (m, 1 H), 5,31 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 4,91 (s, 1 H), 4,64 (s, 1 H), 4,40-4,19 (m, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,64 (d, J = 5,2 Hz, 1 H), 3,44 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 3,03-2,85 (m, 4H), 2,85-2,65 (m, 2H), 2,59 (d, J = 15,6 Hz, 1 H), 2,52-2,39 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 2,00 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CD3OD): δ 171,4, 169,3, 148,6, 145,8, 143,5, 141,2, 140,8, 136,5, 131,2, 130,3, 129,5, 126,3, 121,6, 121,2, 119,8, 119,4, 118,6, 117,5, 114,9, 111,0, 107,5, 107,4, 102,2, 91,1, 63,5, 60,5, 59,2, 58,5, 55,3, 54,7, 53,4, 52,7, 48,6, 44,7, 42,7, 39,9, 24,3, 23,4, 19,2, 15,1, 8,2. ESI-MS m/z: 766,2 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 766,2958 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H44N5O8S: 766,2905).
La o soluţie de 10-S (5 mg, 0,006 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 0,5 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (29 mg, 0,17 mmol). După 20 de ore la 23 °C, amestecul de reacţie a fost stins cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 minute, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 13-S (5 mg, 100%). Rf= 0,40 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,75 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,32-7,20 (m, 1 H), 7,12 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,02 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 6,84 (s, 1 H), 6,24 (s, 1 H), 6,08-5,97 (m, 1 H), 6,01 (s, 1 H), 5,87 (s, 1 H), 5,42-5,19 (m, 1 H), 4H), 4,88 (s, 1H), 4,69-4,65 (m, 2H), 4,58 (s, 1H), 4,28-4,13 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,68-3,40 (m, 2H) , 3,24-3,15 (m, 2H), 3,08-2,90 (m, 2H), 2,73-2,57 (m, 2H), 2,53-2,37 (m, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) , 2,14 (s, 3H), 2,10-2,16 (m, 1 H), 2,03 (s, 3H). ESI-MS m/z: 850.3 (M-H2O+H)+.
Exemplul de referinţă 7. Prepararea compuşilor de referinţă 14-S şi 15-S
La o soluţie de 1 (50 mg, 0,08 mmol) în acid acetic (1 mL, 0,08 M) s-a adăugat L-triptofan (50 mg, 0,24 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 50°C timp de 17 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. A fost adăugată o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 80:20) s-a obţinut compusul 14-S (58 mg, 90%). Rf= 0,20 (CH2Cl2:CH3OH, 10:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,77 (s, 1 H), 7,39 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,13 (ddd, J = 8,2, 7,0, 1,2 Hz, 1 H), 7,04 (td, J = 7,5, 7,1, 1,0 Hz, 1 H), 6,56 (s, 1 H), 6,24 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 6,03 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,15 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,62 (s, 1 H), 4,43 (s, 1 H), 4,35 (dd, J = 11,7, 2,1 Hz, 1 H), 4,28 (dd, J = 5,2, 1,6 Hz, 1 H), 4,20 (s, 1 H), 3,78 (s, 3H), 3,52-3,41 (m, 4H), 3,07-2,88 (m, 2H), 2,91-2,80 (m, 2H), 2,42-2,21 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ESI-MS m/z: 808,6 (M+H)+.
La o soluţie de 14-S (52 mg, 0,066 mmol) în CH3CN:H2O (2:1, 4,5 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (164 mg, 1,45 mmol). După 20 de ore la 23 °C, un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCl şi NaHCO3 s-a adăugat, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 30 de minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 70:30) obţinându-se 15-S (18 mg, 35%). Rf= 0,15 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,76 (s, 1 H), 7,40 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,14 (t, J= 7.4 Hz, 1 H), 7,04 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 6,58 (s, 1 H), 6,23 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,28 (d, J = 12,7 Hz, 1 H), 4,95 (s, 1 H), 4,53 (s, 1 H), 4,28 (dd, J = 11,4, 2,0 Hz, 1 H), 4,21 (s, 1 H), 3,80 (s, 3 H), 3,58 (s, 1 H), 3,52-3,47 (m, 2 H), 3,28 (s, 1 H), 3,03 (dd, J = 15,8, 5,2 Hz, 1 H), 2,91-2,82 (m, 3H), 2,44 (d, J = 15,4 Hz, 1 H), 2,36 (s, 3H), 2,35-2,31 (m, 1 H), 2,28 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCI3): δ 173,7, 171,2, 168,7, 147,5, 145,7, 142,8, 141,2, 140,8, 135,6, 129,8, 126,3, 122,8, 121,5, 121,2, 119,9, 118,6, 117,7, 115,0, 111,1, 101,9, 81,5, 66,8, 62,9, 60,4, 57,9, 55,8, 55,1, 52,3, 42,3, 41,3, 38,3, 31,9, 29,4, 28,9, 24,5, 24,0, 23,8, 22,7, 20,5, 16,0, 9,7. ESI-MS m/z: 781,6 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 781.2610 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H41N4O10S: 781,2538).
Exemplul de referinţă 8.
A) Prepararea (S)-5-metoxi-triptofanolului (17-S)
La o soluţie de LiAlH4 (23,4 mL, 1,0 M în THF, 23,4 mmol) la -40 °C a fost adăugat cu grijă H2SO4 (0,31 mL, 5,57 mmol) şi o suspensie de 5-metoxi-L-triptofan (16-S) (1,0 g, 4,26 mmol, Chem-Impex) în THF (13,4 mL, 0,3 M). Amestecul de reacţie a fost lăsat să evolueze la 23 °C, s-a încălzit timp de 3 ore la 80 °C şi 18 ore la 23 °C. După răcire la -21 °C amestecul de reacţie a fost stins cu grijă cu NaOH 2N până la pH bazic. S-a adăugat EtOAc şi amestecul s-a filtrat prin Celită® şi s-a spălat cu CH3OH. Produsul brut a fost concentrat în vid pentru a da 17-S brut care a fost utilizat în etapa următoare fără purificare suplimentară. Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 4:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,19 (dt, J = 8,8, 0,7 Hz, 1 H), 7,06-7,00 (m, 2H), 6,72 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 3,77 (s, 3H), 3,63-3,48 (m, 1 H), 3,42-3,33 (m, 1 H), 3,17-3,06 (m, 1 H), 2,86 (ddt, J = 14,3, 6,1, 0,8 Hz, 1 H), 2,66 (dd, J = 14,3, 7,5 Hz, 1 H). ESI-MS m/z: 221,4 (M+H)+.
B) Prepararea (R)-5-metoxi-triptofanolului (17-R)
La o soluţie de LiAlH4 (11,7 mL, 1,0 M în THF, 11,7 mmol) la -40 °C a fost adăugat cu grijă H2SO4 (0,31 mL, 5,75 mmol) şi o suspensie de 5-metoxi-D-triptofan (16-R) (0,5 g, 2,13 mmol, Aldrich) în THF (6,7 mL, 0,3 M). Amestecul de reacţie a fost lăsat să evolueze la 23 °C, s-a încălzit timp de 3,5 ore la 80 °C şi 18 ore la 23 °C. S-a răcit la -21 °C, amestecul de reacţie a fost stins cu grijă cu NaOH 2N până la pH bazic. S-a adăugat EtOAc şi amestecul s-a filtrat prin Celită® şi s-a spălat cu CH3OH. Produsul brut a fost concentrat în vid pentru a da 17-R ca produs brut, care a fost utilizat în etapa următoare fără purificare suplimentară. Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 4:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,20 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 7,06-6,96 (m, 2H), 6,71 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1 H), 3,75 (s, 3H), 3,62-3,52 (m, 1 H), 3,37 (dd, J = 10,8, 7,0 Hz, 1 H), 3,09 (br s, 1 H), 2,82 (dd, J = 14,3, 5,9 Hz, 1 H), 2,62 (dd, J = 14,4, 7,6 Hz, 1 H). ESI-MS m/z: 221,6 (M+H)+.
Exemplul de referinţă 9
La o soluţie de 1 (530 mg, 0,85 mmol) în acid acetic (10,6 mL, 0,08 M) s-a adăugat 17-S (469 mg, 2,13 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 50°C timp de 18 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. S-a adăugat o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) s-a obţinut compusul 18-S (420 mg, 60%). Rf= 0,3 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,13 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,66 (dd, J= 8,8, 2,5 Hz, 1 H), 6,51 (s, 1 H), 6,27 (s, 1 H), 6,11 (s, 1 H), 5,21 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,67 (s, 1 H), 4,49-4,29 (m, 4H), 3,75 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,47 (t, J = 5,8 Hz, 3H), 3,37 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 3,01-2,81 (m, 2H), 2,75 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 2,66 (dd, J = 15,1, 4,1 Hz, 1 H), 2,55-2,35 (m, 4H), 2,34 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,99 (s, 3H). ESI-MS m/z: 824,3 (M+H)+.
La o soluţie de 18-S (420 mg, 0,519 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 36 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (2.60 g, 15,3 mmol). După 3 ore la 23 °C, amestecul de reacţie a fost stins cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a obţine 19-S (250 mg, 60%). Rf= 0,45 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δ 7,15 (dd, J = 8,9, 0,6 Hz, 1 H), 6,82 (dd, J = 2,4, 0,6 Hz, 1 H), 6,68 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1 H), 6,54 (s, 1 H), 6,27 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 6,08 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,30 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,62 (s, 1 H), 4,34 (dd, J = 11,4, 2,0 Hz, 1H), 4,31-4,27 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,66-3,58 (m, 1H), 3,55-3,45 (m, 2H), 3,42 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 2,93-2,73 (m, 3H), 2,68 (dd, J = 15,1, 4,2 Hz, 1 H), 2,54 (d, J = 15,4 Hz, 1 H), 2,42 (dd, J = 15,1, 10,1 Hz, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,09 (s, 3H), 2,00 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CD3OD): δ 172,7, 170,8, 155,1, 149,9, 147,2, 145,0, 142,6, 142,2, 133,1, 132,4, 132,1, 131,3, 128,1, 122,5, 121,6, 120,3, 116,4, 113,0, 112,9, 111,4, 109,0, 103,6, 100,8, 92,5, 66,6, 65,0, 61,7, 60,4, 59,9, 56,7, 56,1, 54,8, 54,1, 51,7, 44,1, 41,3, 30,7, 25,4, 24.7, 20,6, 16,3, 9,5. ESI-MS m/z: 798,1 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 797,2899 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C42H45N4O10S 797,2851).
Exemplul de referinţă 10
La o soluţie de 1 (311 mg, 0,50 mmol) în acid acetic (6,25 mL, 0,08 M) s-a adăugat 17-R (220 mg, 1,0 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 50°C timp de 18 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. S-a adăugat o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) s-a obţinut compusul 18-R (280 mg, 68%). Rf= 0,3 (Hexan: EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,53 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 6,82 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,78 (dd, J = 8,6, 2,3 Hz, 1 H), 6,60 (s, 1 H), 6,23 (s, 1 H), 6,02 (s, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 5,04 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,62 (s, 1 H), 4,36 (s, 1 H), 4,28 (d, J = 5,0 Hz, 1 H), 4,24-4,09 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,64 (s, 1 H), 3,47-3,40 (m, 3H), 3,01-2,90 ( m, 2H), 2,53 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 2,45-2,41 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,22-2,14 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 3H). ESI-MS m/z: 824,3 (M+H)+.
La o soluţie de 18-R (330 mg, 0,40 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 28 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (2,04 g, 12,0 mmol). După 3 ore la 23 °C, reacţia a fost stinsă cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a se obţine 19-R (224 mg, 69%). Rf= 0,44 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δ 7,14 (dd, J = 8,8, 0,5 Hz, 1 H), 6,83 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 6,68 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1 H), 6,59 (s, 1 H), 6,26 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,07 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,21 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,68-4,55 (m, 1 H), 4,32-4,25 (m, 2H), 4,12 (dd, J = 11,5, 2,1 Hz, 1 H), 3,75 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 3,60 (d, J = 5,2 Hz, 1 H), 3,57-3,45 (m, 3H), 3,41 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 2,97-2,83 (m, 3H), 2,73 (dd, J = 15,0, 3,4 Hz, 1 H), 2,69 (d, J = 14,9 Hz, 1 H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,20 (dd, J = 15,1, 10,4 Hz, 1 H), 2,12 (s, 3H), 2,11-2,08 (m, 1 H), 2,05 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CD3OD): δ 173,0, 170,8, 155,0, 149,8, 147,3, 145,0, 142,8, 142,3, 133,5, 133,1, 132,2, 132,1, 130,5, 127,8, 122,5, 121,7, 120,0, 116,4, 113,5, 112,9, 111,4, 110,2, 103,5, 100,9, 92,6, 66,8, 64,5, 61,3, 60,4, 60,0, 56,8, 56,1, 55,9, 54,1, 44,1, 41,3, 25,6, 24,5, 20,6, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: 797,4 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 797,2896 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C42H45N4O10S 797,2851).
Exemplul de referinţă 11. Prepararea N-[(S)-2-amino-3-(5-metoxi-1H-indol-3-il)propil)]carbamatului de alil (24-S)
La o soluţie de 17-S (6.9 g, 31,4 mmol) în CH3CN (126 mL, 4 mL/mmol) s-a adăugat dicarbonat de di-tert-butil (13,7 g, 62,8 mmoli). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 5,5 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) s-a obţinut 20-S (4,5 g, 45%).
Rf= 0,6 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,04 (s, 1 H), 7,25 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,10 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,03 (s, 1 H), 6,87 (dd, J = 8,8, 2,5 Hz, 1 H), 4,83 (s, 1 H), 3,98 (s, 1 H), 3,87 (s, 3H), 3,73-3,58 (m, 2H), 2,96 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H).
La o soluţie de 20-S (4,5 g, 14 mmol) în CH2Cl2 (84 mL, 6 mL/mmol) s-a adăugat ftalimidă (4,5 g, 30,9 mmol), trifenilfosfină (8,1 g, 30,9 mmol) şi amestecul s-a răcit la 0°C. S-a adăugat o soluţie de 40% azodicarboxilat de dietil în CH2Cl2 (10,4 mL, 35 mmol) timp de 15 min. Reacţia a fost agitată la 23°C timp de 18 ore şi s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 99:1 la 85:15) pentru a se obţine 21-S (5,8 g, 92%). Rf= 0,55 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,48 (s, 1 H), 7,78 (dd, J = 5,5, 3,1 Hz, 2H), 7,69-7,61 (m, 2H), 7,21 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,06 (dd, J = 18,5, 2,4 Hz, 2H), 6,81 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 4,87 (s, 1 H); 4,39 (s, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,83-3,66 (m, 2H), 2,98 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 1,20 (s, 9H).
La o soluţie de 21-S (6,29 g, 14 mmol) în etanol (420 mL, 30 mL/mmol) s-a adăugat hidrazină monohidrat (61,1 mL, 1260 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 80 °C într-un tub sigilat timp de 2 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) s-a obţinut 22-S (4,2 g, 95%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 8:2). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,22 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,12 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,06 (s, 1 H), 6,76 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 4,06-3,97 (m, 1 H), 3,82 (s, 3H), 3,06-2,82 (m, 4H), 1,37 (s, 9H).
La o soluţie de 22-S (4.0 g, 12,52 mmol) în CH3CN (125 mL, 10 mL/mmol) şi DMF (12 mL, 1 mL/mmol) s-au adăugat N,N-diizopropiletilamină (1,8 mL, 10 mmol) şi cloroformiat de alil (13,3 mL, 125 mmol). Reacţia a fost agitată la 23 °C timp de 5 ore. Amestecul a fost diluat cu EtOAc şi NH4CI s-a adăugat şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100) pentru a obţine 23-S (2.65 g, 52%). Rf= 0,5 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,11 (s, 1 H), 7,28-7,20 (m, 1 H), 7,04 (d, J = 13,1 Hz, 2H), 6,85 (dd, J = 8,9, 2,4 Hz, 1 H), 5,97-5,82 (m, 1 H), 5,33-5,24 (m, 1 H), 5,19 (dt, J = 10,4, 1,3 Hz, 1 H), 5,11 (s, 1 H), 4,82 (s, 1 H), 4,55 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,01 (s, 1 H), 3,86 (s, 3H), 3,37 (d, J = 13,7 Hz, 1 H), 3,21 (s, 1 H), 2,89 (dd, J = 14,5, 7,0 Hz, 1 H), 1,41 (s, 9H).
La o soluţie de 23-S (2,60 g, 6,44 mmol) în CH2Cl2 (106 mL, 16,6 mL/mmol) s-a adăugat acid trifluoracetic (54 mL, 8,3 mL/mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23 °C timp de 1,5 ore şi s-a concentrat în vid pentru a da 24-S (3,9 g, 100%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 8,27 (s, 1 H), 7,25 (dd, J = 9,0, 2,4 Hz, 1 H), 7,10 (s, 1 H), 6,96 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 6,87 (dd, J = 9,0, 2,4 Hz, 1 H), 5,81 (ddt, J = 16,3, 10,9, 5,7 Hz, 1 H), 5,23 (dd, J = 19,3, 13,6 Hz, 2H), 4,49 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,81-3,55 (m, 1 H), 3,62-3,39 (m, 2H), 3,08 (qd, J = 15,1, 7,3 Hz, 2H).
Exemplul de referinţă 12
La o soluţie de 1 (120 mg, 0,19 mmol) în acid acetic (6 mL, 0,08 M) s-a adăugat 24-S (117 mg, 0,35 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 18 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. A fost adăugată o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) se obţine compusul 25-S (95 mg, 54%). Rf= 0,4 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,64 (s, 1 H), 7,14 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (s, 1 H), 6,77 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,68 (s, 1 H), 6,24 (s, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 6,02-5,93 (m, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 5,38 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 5,26 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 5,11 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,66 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,57 (s, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,33-4,19 (m, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,46 (s, 2H) , 3,17 (s, 1 H), 3,10-2,90 (m, 3H), 2,68-2,45 (m, 2H), 2,38-2,33 (m, 1 H), 2,32 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,04 (s, 2H). ESI-MS m/z: 907,1 (M+H)+.
La o soluţie de 25-S (90 mg, 0,1 mmol) în CH2Cl2 (2 mL, 18 mL/mmol) s-au adăugat diclorură de bis(trifenilfosfin)paladiu(II) (12 mg, 0,1 mmol) şi acid acetic (0,056 mL, 0,99 mmol). S-a adăugat hidrură de tributilstaniu (0,16 mL, 0,60 mmol) la 0 °C, amestecul de reacţie a fost agitat la 0 °C timp de 0,5 ore şi s-a concentrat în vid. După Cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100 şi EtOAc:CH3OH, de la 100:1 la 1:100) s-a obţinut 26-S (75 mg, 92%). Rf= 0,25 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,62 (s, 1 H), 7,15 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 6,81-6,76 (m, 2H), 6,72 (s, 1 H), 6,25 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 6,03 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,12 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 4,41 (s, 1 H), 4,36-4,24 (m, 2H), 4,20 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 3,82 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,44 (dd, J = 22,0, 7,1 Hz, 2H), 3,08-2,78 (m, 4H), 2,73-2,64 (m, 2H), 2,41-2,22 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,25-2,15 (m, 1H) ), 2,14 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ESI-MS m/z: 823,3 (M+H)+.
La o soluţie de 26-S (70 mg, 0,085 mmol) în CH3CN:H2O (1,39: 1, 6 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (335 mg, 1,7 mmol). După 18 ore la 23 °C, reacţia a fost stinsă cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 27-S (23 mg, 33%). Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,62 (s, 1 H), 7,15 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,78 (s, 1 H), 6,75 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,21 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,78 (s, 1 H), 5,22 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,90 (s, 1 H), 4,58-4,42 (m, 3H), 4,29-4,10 (m, 2H), 3,84-3,80 (m, 1 H), 3,83 (s, 3H), 3,79 ( s, 3H), 3,53-3,48 (m, 2H), 3,22 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 3,12 (s, 1 H), 3,02 (d, J = 12,8 Hz, 1 H), 2,89-2,64 (m, 3H), 2,46 (s, 3H), 2,42-2,34 (m, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,03 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCI3): δ 172,1, 168,7, 154,0, 147,6, 145,6, 143,0, 141,2, 140,8, 131,6, 130,6, 129,6, 127,1, 121,8, 120,9, 118,4, 115,2, 112,5, 111,8, 101,8, 100,2, 81,5, 62,6, 60,6, 58,0 , 57,8, 56,0, 55,8, 55,0, 42,3, 41,4, 31,9, 29,7, 27,8, 26,9, 25,6, 24, 0, 22,7, 20,5, 16,0, 14,1, 13,6, 9,7. ESI-MS m/z: 796,3 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 796,3062 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C42H46N5O9S 796,3011).
Exemplul de referinţă 13. Prepararea N-[(R)-2-amino-3-(5-metoxi-1H-indol-3-il)propil)]carbamatului de alil (24-R)
La o soluţie de 17-R (2.35 g, 10,7 mmol) în CH3CN (43 mL, 4 mL/mmol) s-a adăugat dicarbonat de di-tert-butil (4,67 g, 21,4 mmoli). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 2,5 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) s-a obţinut 20-R (1,7 g, 50%). Rf= 0,6 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,05 (s, 1 H), 7,25 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 7,09 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,02 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,86 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 4,83 (s, 1 H), 3,98 (s, 1 H), 3,87 (s, 3H), 3,69 (td, J = 9,2, 7,5, 5,3 Hz, 1 H), 3,61 (dd, J = 10,9, 5,6 Hz, 1 H), 2,95 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H).
La o soluţie de 20-R (1.7 g, 5,3 mmol) în CH2Cl2 (32 mL, 6 mL/mmol) s-au adăugat ftalimidă (1,72 g, 11,7 mmol), trifenilfosfină (3,06 g, 11,7 mmol) şi amestecul s-a răcit la 0°C. O soluţie de 40% azodicarboxilat de dietil în CH2Cl2 (4,0 mL, 13,2 mmol) a fost adăugată timp de 15 min. Reacţia a fost agitată la 23°C timp de 16 ore şi s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 99:1 la 85:15) pentru a se obţine 21-R (2,0 g, 84%).
Rf= 0,45 (Hexan:EtOAc, 1:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,31 (s, 1 H), 7,80 (dd, J = 5,4, 3,0 Hz, 2H), 7,67 (dd, J = 5,4, 3,0 Hz, 2H), 7,30-7,12 (m, 2H), 7,08 (dd, J = 15,2, 2,4 Hz, 1 H), 6,84 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 4,85 (d, J = 9,2 Hz, 1 H), 4,43 (q, J = 5,3 Hz, 1 H), 3,86 (s, 3H), 3,83-3,68 (m, 2H), 3,01 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 1,22 (s, 9H).
La o soluţie de 21-R (2,0 g, 4,45 mmol) în etanol (133 mL, 30 mL/mmol) s-a adăugat hidrazină monohidrat (21,6 mL, 445 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 80 °C într-un tub sigilat timp de 2 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) s-a obţinut 22-R (1,15 g, 81%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 8:2). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,21 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,12 (s, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 6,75 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 3,95 (ddd, J = 10,7, 8,7, 5,4 Hz, 1 H), 3,82 (s, 3H), 2,98-2,79 (m, 3H), 2,75 (dd, J = 13,1, 9,4 Hz, 1 H), 1,37 (s, 9H).
La o soluţie de 22-R (1.1 g, 3,4 mmol) în CH3CN (3,4 mL, 1 mL/mmol) şi DMF (3,4 mL, 10 mL/mmol) s-au adăugat N,N-diizopropiletilamină (0,5 mL, 2,7 mmol) şi cloroformiat de alil (3,7 mL, 34 mmol). Reacţia a fost agitată la 23 °C timp de 19 ore. Amestecul a fost diluat cu EtOAc şi s-a adăugat NH4CI şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100) pentru a se obţine 23-R (0,95 g, 69%). Rf= 0,5 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 8,55 (s, 1 H), 7,20 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 6,98-6,87 (m, 1 H), 6,82 (dt, J = 8,8, 1,8 Hz, 1H), 5,96-5,81 (m, 1H), 5,37-5,22 (m, 2H), 5,22-5,14 (m, 1H), 5,02-4,97 (m, 1H), 4,60-4,47 (m , 2H), 4,00 (s, 1 H), 3,84 (s, 3H), 3,31 (s, 1 H), 3,19 (s, 1 H), 2,88 (td, J = 14,5, 13,3, 5,9 Hz, 2H), 1,40 (s, 9H).
La o soluţie de 23-R (0.94 g, 2,3 mmol) în CH2Cl2 (39 mL, 16,6 mL/mmol) s-a adăugat acid trifluoracetic (19 mL, 8,3 mL/mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23 °C timp de 1,5 ore şi s-a concentrat în vid pentru a da 24-R (0,72 g, 100%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,27 (d, J = 8,8, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,04 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,80 (ddd, J = 8,8, 2,4, 0,9 Hz, 1 H), 5,95 (ddt, J = 16,4, 10,8, 5,5 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 17,1 Hz, 1 H), 5,20 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 4,60-4,53 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,59 (dt, J = 11,4, 5,5 Hz, 1 H), 3,47-3,30 (m, 2H), 3,13-2,94 (m, 2H).
Exemplul de referinţă 14
La o soluţie de 1 (0.71 g, 1,14 mmol) în acid acetic (45 mL, 0,08 M) s-a adăugat 24-R (0,54 mg, 1,8 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 7 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. A fost adăugată o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) s-a obţinut compusul 25-R (670 mg, 65%). Rf= 0,4 (Hexan: EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,52 (s, 1 H), 7,17 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,83-6,73 (m, 2H), 6,61 (s, 1 H), 6,23 (d, J = 1,0 Hz, 1 H), 6,02 (d, J = 1,0 Hz, 1 H), 6,05-5,89 (m, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,44-5,30 (m, 1 H), 5,25 (d, J = 10,4 Hz, 1 H), 5,13-4,99 (m, 2H), 4,71-4,59 (m, 2H), 4,36 (s, 1 H), 4,30-4,07 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,79 ( s, 3H), 3,61-3,53 (m, 1 H); 3,48-3,41 (m, 3H), 3,26 (dt, J = 13,3, 3,8 Hz, 1 H), 3,04-2,88 (m, 2H), 2,52 (dd, J = 14,9, 3,7 Hz, 1 H), 2,46-2,35 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,12-2,02 (m, 1H), 2,09 ( s, 3H). ESI-MS m/z: 907,3 (M+H)+.
La o soluţie de 25-R (745 mg, 0,82 mmol) în CH2Cl2 (15 mL, 18 mL/mmol) s-a adăugat diclorură de bis(trifenilfosfin)paladiu(II) (92 mg, 0,1 mmol) şi acid acetic (0,47 mL, 8,2 mmol). S-a adăugat hidrură de tributilstaniu (1,33 mL, 4,9 mmol) la 0 °C, amestecul de reacţie a fost agitat la 0 °C timp de 0,75 h şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100 şi EtOAc:CH3OH, de la 100:1 la 1:100) s-a obţinut 26-R (680 mg, >100%). Rf= 0,25 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,57 (s, 1 H), 7,16 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,85-6,72 (m, 2H), 6,57 (s, 1 H), 6,21 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,00 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,05-4,97 (m, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 4,35 (s, 1 H), 4,31-4,09 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 1 H), 3H), 3,50-3,40 (m, 3H), 3,24 (dq, J = 9,9, 5,3 Hz, 1 H), 2,95 (s, 1 H), 2,91-2,75 (m, 2H), 2,62 (dd, J = 14,8, 3,6 Hz, 1 H), 2,43-2,28 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,22-2,14 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,08 ( s, 3H). ESI-MS m/z: 823,3 (M+H)+.
La o soluţie de 26-R (660 mg, 0,80 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 56 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (2,70 g, 16,0 mmol). După 16,5 ore la 23 °C, reacţia a fost stinsă cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 minute, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru,s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) obţinându-se 27-R (271 mg, 42%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,46 (s, 1 H), 7,16 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,72 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 6,58 (s, 1 H), 6,20 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 5,99 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 5,15 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 4,86 (s, 1 H), 4,52 (m, 2H), 4,17 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 4,07 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,55-3,43 (m, 2H), 3,32-3,20 (m, 2H), 3,01-2,82 (m, 4H), 2,68- 2,59 (m, 1 H), 2,44-2,31 (m, 1 H), 2,38 (s, 3H), 2,30-2,19 (m, 1 H), 2,26 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,07 (s, 3H). 13C RMN (101 MHz, CD3OD): δ 171,7, 171,3, 153,8, 153,3, 148,0, 147,6, 145,4, 145,4, 143,1, 141,3, 140,7, 131,6, 131,4, 131,2, 129,3, 126,8, 121,6, 120,9, 118,3, 115,6, 112,2, 111,8, 101,8, 100,2, 81,7, 63,5, 63,1, 61,7, 58,0, 57,8, 56,1, 55,8, 55,0, 42,2, 42,1, 41,4, 41,0, 25,1, 23,8, 20,5, 16,0, 9,7. ESI-MS m/z: 796.3 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 796.3045 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C42H46N5O9S 796,3011).
Exemplul de referinţă 15. Prepararea compuşilor de referinţă 28-S şi 29-S.
La o soluţie de 1 (450 mg, 0,72 mmol) în acid acetic (9 mL, 0,08 M) s-a adăugat 16-S (675 mg, 2,88 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 52°C timp de 3 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. O soluţie apoasă saturată de NaHCO3 a fost adăugată şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 80:20) s-a obţinut compusul 28-S (400 mg, 66%). Rf= 0,35 (CH2Cl2:CH3OH, 10:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3):δ 7,65 (s, 1 H), 7,15 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 6,85-6,76 (m, 2H), 6,57 (s, 1 H), 6,25 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,04 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,16 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,62 (s, 1 H), 4,44 (s, 1 H), 4,35 (dd, J = 11,7, 2,0 Hz, 1 H), 4,29 (dd, J = 5,2, 1,6 Hz, 1 H), 4,22 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 3,80 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,52-3,43 (m, 3H), 3,02-2,81 (m, 4H), 2,41-2,31 (m, 2H), 2,36 ( s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,05 (s, 3H). ESI-MS m/z: 838,6 (M+H)+.
La o soluţie de 28-S (400 mg, 0,48 mmol) în CH3CN:H2O (2:1, 33 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (1,20 g, 7,16 mmol). După 16 ore la 23 °C, s-a adăugat un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCl şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 30 de minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 70:30) obţinându-se 29-S (179 mg, 45%). Rf= 0,25 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δ 7,17 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 6,83 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,70 (dd, J = 8,9, 2,4 Hz, 1 H), 6,66 (s, 1 H), 6,29 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 6,10 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,32 (d, J = 11,6 Hz, 1 H), 4,65 (s, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 4,48 (s, 1 H), 4,38 (dd, J = 11,7, 2,1 Hz, 1 H), 3,75 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,41-3,35 (m, 1 H), 3,16-2,91 (m, 5H), 2,71 (dd, J = 15,3, 11,4 Hz, 2H), 2,54 (s, 1H), 2,42-2,36 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,99 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CDCI3): δ 171,3, 170,6, 155,2, 149,8, 147,5, 145,4, 142,8, 142,4, 133,0, 131,8, 130,0, 128,0, 122,2, 121,8, 115,5, 113,9, 113,3, 113,2, 111,4, 109,1, 103,8, 100,9, 91,6, 65,4, 61,9, 60,3, 59,4, 57,1, 56,4, 56,2, 55,2, 53,4, 43,7, 40,8, 38,3, 30,7, 26,4, 24,7, 20,4, 16,5, 9,6. ESI-MS m/z: 811.3 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 811,2682 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C42H43N4O11S 811,2644).
Exemplul de referinţă 16. Prepararea compuşilor de referinţă 28-R şi 29-R
La o soluţie de 1 (50 mg, 0,08 mmol) în acid acetic (1 mL, 0,08 M) s-a adăugat 16-R (66 mg, 0,3 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 50°C timp de 6 ore şi apoi acidul acetic a fost evaporat. S-a adăugat o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 80:20) s-a obţinut compusul 28-R (50 mg, 75%). Rf= 0,20 (CH2Cl2:CH3OH, 10:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): 7,63 (s, 1 H), 7,16 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,81 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,77 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 6,56 (s, 1 H), 6,21 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 6,00 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,77 (s, 1 H), 5,00 (d, J = 11,8 Hz, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 4,35 (s, 1 H), 4,27 (d, J = 5,0 Hz, 1 H), 4,22 - 4,04 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 3,48 - 3,40 (m, 2H), 3,00 (dd, J = 15,3, 4,8 Hz, 1 H), 2,92 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 2,71 (dd, J = 15,3, 10,1 Hz, 1 H), 2,46 (d, J = 14,9 Hz, 1 H), 2,34 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,21 (d, J = 15,0 Hz, 1 H), 2,15 (s, 3H), 2,07 (s, 3H). ESI-MS m/z: 838.8 (M+H)+.
La o soluţie de 28-R (50 mg, 0,06 mmol) în CH3CN:H2O (2:1, 4,2 mL, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (304 mg, 1,80 mmol). După 3 ore la 23 °C, s-a adăugat un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCl şi NaHCO3 s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 30 de minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH de la 99:1 la 70:30) obţinându-se 29-R (30 mg, 60%). Rf= 0,15 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): 7,68 (s, 1 H), 7,14 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,80 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,76 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 6,57 (s, 1 H), 6,17 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,95 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,12 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,85 (s, 1 H), 4,56 - 4,46 (m, 2H), 4,17 (s, 1 H), 4,10 (dd, J = 9,9, 4,9 Hz, 1 H), 4,05 (dd, J = 11,4, 2,0 Hz, 1 H), 3,78 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,51 (s, 1H), 3,48 - 3,42 (m, 2H), 3,23 (s, 1H), 3,00 (dd, J = 15,3, 4,9 Hz, 1 H), 2,90 - 2,77 (m, 2H), 2,71 (dd, J = 15,2, 9,9 Hz, 1 H), 2,48 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,34 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (d, J = 14,6 Hz, 1 H), 2,14 (s, 3H), 2,05 (s, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCI3): 175,6, 171,0, 168,7, 154,1, 147,3, 145,6, 143,1, 141,3, 140,8, 131,1, 130,4, 126,5, 121,9, 121,5, 121,3, 115,5, 112,9, 112,7, 112,0, 109,1, 101,9, 100,2, 81,5, 62,8, 61,7, 60,4, 57,9, 57,8, 56,0, 55,8, 54,8, 53,4, 42,5, 41,2, 40,3, 29,7, 24,6, 23,8, 20,5, 15,9, 9,8. ESI-MS m/z: 811,6 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 811,2687 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C42H43N4O11S 811,2644).
Exemplul de referinţă 17.
La o soluţie de compus 1 (2,0 g, 3,21 mmoli) în acetonitril (200 ml, 0,01 M) s-a adăugat clorhidrat de 2-benzofuran-3-il-etilamină (30) (1,90 g, 9,65 mmol, Sigma Aldrich) şi clorură cianurică (TCT) (200 mg, 10%). Amestecul de reacţie a fost agitat la 85 °C timp de 24 de ore şi apoi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 9:1 la 1:9) s-a obţinut compusul 31 (1,95 g, 79%). Rf= 0,5 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,38-7,36 (m, 2H), 7,19-7,10 (m, 2H), 6,64 (s, 1 H), 6,20 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 6,05 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 5,05 (d, J = 11,7 Hz, 1 H), 4,54 (s, 1 H), 4,33-4,24 (m, 2H), 4,23-4,16 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,49-3,38 (m, 2H), 3,28- 3,21 (m, 1H), 3,06-2,78 (m, 5H), 2,57-2,50 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,21 (m, 3H), 2,08 (s, 3H). ESI-MS m/z: 765,3 (M+H)+.
La o soluţie de compus 31 (380 mg, 0,49 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 25 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (1,30 g, 7,45 mmol). După 5 ore la 23 °C, s-a adăugat un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCl şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a se obţine compusul 32 (175 mg, 47%). Rf= 0,40 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,35 (ddd, J = 10,7, 7,6, 1,1 Hz, 2H), 7,14 (dtd, J = 19,7, 7,3, 1,3 Hz, 2H), 6,65 (s, 1 H), 6,16 (d, J= 1.5 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,15 (dd, J = 11,5, 1,2 Hz, 1 H), 4,80 (s, 1 H), 4,48 (d, J = 3,2 Hz, 1 H), 4,44 (s, 1 H), 4,20-4,06 (m, 2H), 3,81 (s, 1 H), 3,50 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 3,30 (ddd, J = 12,6, 7,9, 5,1 Hz, 1 H), 3,22 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 2,99 (d, J = 17,9 Hz, 1 H), 2,84 (dd, J = 19,2, 12,0 Hz, 3H), 2,59-2,49 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,21-2,14 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,06 ( s, 3H). 13C RMN (101 MHz, CDCI3): δ 171,2, 168,7, 154,4, 150,0, 147,9, 145,5, 142,9, 140,9, 140,8, 131,3, 129,0, 127,7, 123,7, 122,2, 121,2, 120,8, 118,9, 118,3, 115,5, 113,5, 111,7, 101,7, 82,1, 62,7, 61,7, 60,3, 57,8, 57,4, 55,9, 55,0, 42,2, 41,3, 39,7, 38,2, 29,7, 23,7, 21,3, 20,6, 15,9, 9,7. ESI-MS m/z: 738,6 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 756,2654 [M+H]+ (Calculat pentru C40H42N3O10S 756,2585).
Exemplul 18.
La o soluţie de 1 (500 mg, 0,80 mmol) în acid acetic (10 mL, 0,08 M) s-a adăugat clorhidrat de 2-(5-metoxibenzofuran-3-il)-etilamină (33) (Diverchim, ref: DW04590) (444 mg, 1,60 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 50°C timp de 6 zile şi apoi acidul acetic a fost evaporat. S-a adăugat o soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, 1:1) se obţinut 34 (270 mg, 43%).
Rf= 0,3 (Hexan:EtOAc, 1:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,25 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,80-6,73 (m, 2H), 6,63 (s, 1 H), 6,18 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,03 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,78 (s, 1 H), 5,03 (dd, J = 11,5, 1,3 Hz, 1 H), 4,52 (s, 1 H), 4,29 (s, 1 H), 4,26 (dd, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H), 4,23-4,16 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,46-3,43 (m, 1H), 3,43-3,37 (m, 1H), 3,24 (s, 1 H), 3,03 (d, J = 18,0 Hz, 1 H), 2,91 (dd, J = 17,9, 9,2 Hz, 1 H), 2,87-2,72 (m, 2H), 2,53-2,47 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,06 ( s, 3H).
ESI-MS m/z: 795,8 (M+H)+.
La o soluţie de 34 (345 mg, 0,43 mmol) în CH3CN:H2O (1,39: 1, 30 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (2,20 g, 13,0 mmol). După 3 ore la 23 °C, s-a adăugat un amestec 1: 1 de soluţii apoase saturate de NaCl şi NaHCO3, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a se obţine 35 (175 mg, 51%). Rf= 0,35 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CD3OD): δ 7,27 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 6,90 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 6,80 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1 H), 6,57 (s, 1 H), 6,23 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 6,05 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,23 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,27-4,08 (m, 4H), 3,77 (s, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,63 (d, J = 14,1 Hz, 2H), 3,40-3,34 (m, 2H), 2,93-2,87 (m, 5H), 2,80 (d, J = 15,5 Hz, 1 H), 2,57-2,54 (m, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,05 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CD3OD): δ 171,9, 170,6, 157,5, 147,0, 145,0, 142,3, 141,0, 132,2, 131,1, 129,1, 122,2, 120,9, 120,2, 116,3, 115,1, 114,0, 112,7, 111,4, 103,5, 102,7, 92,9, 62,0, 60,3, 59,8, 59,4, 56,5, 56,2, 56,0, 54,0, 43,8, 41,2, 40,7, 30,8, 30,3, 28,7, 24,5, 21,6, 20,6, 16,2, 9,6. ESI-MS m/z: 768,6 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 768,2630 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H42N3O10S 768,2585).
Exemplul 19
La o soluţie de LiAlH4 (148 mL, 1,0 M în THF, 148 mmol) la -40 °C a fost adăugat cu grijă H2SO4 (7,14 mL, 72,9 mmol) şi o suspensie de acid (S)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propanoic (36-S) (preparat aşa cum este descris în Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (5,54 g, 26,9 mmol) în THF (85 mL, 0,003 M). Amestecul de reacţie a fost lăsat să evolueze la 23 °C, încălzit la 80 °C timp de 3 ore şi 18 ore la 23 °C. După ce s-a răcit la -21 °C amestecul de reacţie a fost stins cu grijă cu NaOH 2N până la pH bazic. S-a adăugat EtOAc şi amestecul s-a filtrat prin Celită® şi s-a spălat cu CH3OH. Produsul brut a fost concentrat în vid pentru a da compusul 37-S (3,93 g, >100%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 4:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,67 - 7,62 (m, 1 H), 7,61 (s, 1 H), 7,51 - 7,41 (m, 1 H), 7,34 - 7,18 (m, 2H), 3,69 - 3,48 (m, 1 H), 3,44 (dd) , J = 10,8, 6,6 Hz, 1 H), 3,18 (dtd, J = 7,4, 6,4, 4,6 Hz, 1 H), 2,88 (ddd, J = 14,4, 6,1, 1,0 Hz, 1 H), 2,68 (ddd, J = 14,4, 7,5, 0,9 Hz, 1 H).
Exemplul 20
La o soluţie de LiAlH4 (118 mL, 1,0 M în THF, 118 mmol) la -40 °C a fost adăugat cu grijă H2SO4 (3,1 mL, 57,8 mmol) şi o suspensie de acid (R)-2-amino-3-(benzofuran-3-il) propanoic (36-R) (preparat aşa cum este descris în Tetrahedron Asymmetry 2008, 19, 500-511) (4,4 g, 21,4 mmol) în THF (67,4 mL, 0,003 M). Amestecul de reacţie a fost lăsat să evolueze la 23 °C, s-a încălzit la 80 °C timp de 3 ore şi 18 ore la 23 °C. Răcit la -21 °C amestecul de reacţie a fost stins cu grijă cu NaOH 2N până la pH bazic. S-a adăugat EtOAc şi amestecul s-a filtrat prin Celită® şi s-a spălat cu CH3OH. Produsul brut a fost concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15, Silice amină) s-a produs compusul 37-R (2,77 g, 68%).
Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 4:1).
1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,63 - 7,52 (m, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,46 - 7,33 (m, 1 H), 7,21 (dtd, J = 19,9, 7,3, 1,3 Hz, 2H), 3,57 (dd, J = 10,7, 4,6 Hz, 1 H), 3,42 (dd, J = 10,8, 6,6 Hz, 1 H), 3,15 (dtd, J = 7,6, 6,3, 4,6 Hz, 1 H), 2,84 (ddd, J = 14,4, 6,0, 1,0 Hz, 1 H), 2,64 (ddd, J = 14,4, 7,5, 0,9 Hz, 1 H).
Exemplul 21
La o soluţie de compus 1 (850 mg, 1,36 mmol) în CH3CN (136 mL, 0,01 M) s-au adăugat (S)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propan-1-ol (37-S) (1,30 g, 6,83 mmol şi clorură de cianură (TCT) (170 mg, 20%). Amestecul de reacţie a fost agitat la 85 °C timp de 24 de ore şi apoi a fost adăugată soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 9:1 la 1:9) se obţine compusul 38-S (750 mg, 69%). Rf= 0,25 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,39 - 7,33 (m, 1 H), 7,33 - 7,29 (m, 1 H), 7,20 (ddd, J = 8,3, 7,2, 1,4 Hz, 1 H), 7,14 (td, J = 7,4, 1,0 Hz, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 6,21 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,06 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,08 (d, J = 11,2 Hz, 1 H), 4,58 (s, 1 H), 4,37 (s, 1 H), 4,32 - 4,23 (m, 2H), 4,19 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 3,81 (s, 3H), 3,52 - 3,41 (m, 3H), 3,36 - 3,29 (m, 1 H), 3,13 (d, J = 9,8 Hz, 1 H), 3,00 - 2,81 (m, 3H), 2,57 (dd, J = 15,7, 4,9 Hz, 1 H), 2,50 (d, J = 15,2 Hz, 1 H), 2,37 (s, 3H), 2,31 - 2,25 (m, 1 H), 2,29 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 2,05 (s, 3H). ESI-MS m/z: 795.2 (M)+.
La o soluţie de compus 38-S (890 mg, 1,12 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 75 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (4,70 g, 28,0 mmol). După 18 ore la 23 °C, un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCl şi NaHCO3 s-a adăugat, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a da compusul 39-S (500 mg, 57%).
Rf= 0,30 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,38 - 7,33 (m, 1 H), 7,33 - 7,28 (m, 1 H), 7,23 - 7,16 (m, 1 H), 7,16 - 7,09 (m, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 6,18 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,03 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 5,19 (d, J = 11,2 Hz, 1 H), 4,85 (s, 1 H), 4,49 (s, 2H), 4,24 - 4,10 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 3,54 (d, J = 4,9 Hz, 1 H), 3,49 (d, J = 2,3 Hz, 3H), 3,33 (t, J = 10,1 Hz, 2H), 3,22 (s, 1 H), 2,98 (s, 1 H), 2,84 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62 - 2,53 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 2,30 - 2,24 (m, 1H), 2,28 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,04 (s, 3H).
13C RMN (126 MHz, CDCI3): δ 172,0, 170,7, 156,1, 150,6, 149,9, 147,1, 145,0, 142,4, 142,2, 132,0, 131,4, 128,7, 125,5, 123,8, 122,6, 121,6, 120,1, 116,5, 114,4, 112,3, 103,5, 92,6, 66,0, 65,1 , 62,2, 60,4, 59,7, 56,6, 56,1, 54,8, 54,1, 51,6, 44,0, 41,3, 38,3, 30,8, 24,8, 20,6, 16,3, 9,6. ESI-MS m/z: 768.2 (M-H2O+H)+.
(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 768,2652 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H42N3O10S 768,2585)
Exemplul 22.
La o soluţie de compus 1 (100 mg, 0,16 mmol) în CH3CN (16 mL, 0,01 M) s-a adăugat (R)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propan-1-ol (37-R) (307 mg, 1,6 mmol) şi clorură cianurică (TCT) (40 mg, 40%). Amestecul de reacţie a fost agitat la 85 °C timp de 44 de ore şi apoi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 9:1 la 1:9) s-a obţinut compusul 38-R (95 mg, 75%). Rf= 0,3 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,42 - 7,27 (m, 2H), 7,28 -7,09 (m, 2H), 6,58 (s, 1 H), 6,20 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,05 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 5,00 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 4,59 (s, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,31 - 4,16 (m, 4H), 3,80 (s, 3H), 3,79 - 3,76 (m, 1 H), 3,63 (s, 1 H), 3,54 - 3,40 (m, 4H), 2,99 - 2,87 (m, 2H), 2,68 (d, J = 15,0 Hz, 1 H), 2,56 - 2,47 (m, 1 H), 2,38 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 (s, 3H). ESI-MS m/z: 795,2 (M+H)+.
La o soluţie de compus 38-R (95 mg, 0,11 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 11 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (601 mg, 3,58 mmol). După 18 ore la 23 °C, un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCl şi NaHCO3 s-a adăugat, s-a agitat timp de 15 min, s-a diluat cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a da compusul 39-R (66 mg, 70%).
Rf= 0,3 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,39 - 7,31 (m, 2H), 7,23 - 7,07 (m, 2H), 6,59 (s, 1 H), 6,17 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 5,12 (dd, J = 11,3, 1,2 Hz, 1 H), 4,84 (s, 1 H), 4,56 - 4,43 (m, 2H), 4,19 - 4,07 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,83 - 3,74 (m, 1H), 3,66 - 3,51 (m, 3H), 3,24 (s, 1H), 2,99 - 2,79 (m, 2H), 2,75 - 2,64 (m, 1H), 2,59 - 2,43 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,07 (s, 3H).
13C RMN (101 MHz, CD3OD): δ 170,5, 169,1, 154,9, 148,9, 148,5, 145,7, 143,6, 141,1, 140,8, 130,6, 129,9, 127,1, 124,5, 122,4, 122,4, 121,2, 120,3, 118,7, 118,2, 115,1, 113,6, 110,9, 102,1, 91,1, 65,0, 63,3, 60,2, 59,0, 58,4, 55,4, 54,5, 52,7, 52,3, 42,5, 38,7, 29,4, 23,5, 23,2, 19,1, 14.8, 8.3.
ESI-MS m/z: 768,2 (M-H2O+H)+.
(+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767,2628 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H42N3O10S 768,2585).
Exemplul de referinţă 23. Prepararea N-[(S)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propil]carbamatului de alil (44-S).
La o soluţie de compus 37-S (1.0 g, 5,22 mmol) în CH3CN (21 mL, 4 mL/mmol) s-a adăugat di-tert-dicarbonat de butil (2,28 g, 10,4 mmoli). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 2 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) s-a obţinut compusul 40-S (0,5 g, 33%).
Rf= 0,7 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,64 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,46 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,36 - 7,19 (m, 2H), 4,94 (s, 1 H), 3,98 (s, 1 H), 3,71 - 3,56 (m, 2H), 2,93 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H).
La o soluţie de compus 40-S (0.5 g, 1,71 mmol) în CH2Cl2 (11 mL, 6 mL/mmol) s-a adăugat ftalimidă (0,55 g, 3,77 mmol), trifenilfosfină (0,99 g, 3,77 mmol) şi amestecul s-a răcit la 0°C. O soluţie de 40% azodicarboxilat de dietil în CH2Cl2 (1.26 mL, 4,29 mmol) a fost adăugată timp de 15 min. Reacţia a fost agitată la 23°C timp de 18 ore, concentrată în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 99:1 la 40:60) pentru a da compusul 41-S (0.68 g, 94%).
Rf= 0,8 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,89 - 7,79 (m, 2H), 7,83 - 7,62 (m, 2H), 7,65 - 7,55 (m, 2H), 7,49 - 7,42 (m, 1H), 7,33 - 7,20 (m, 2H), 483. d, J = 9,0 Hz, 1 H), 4,39 (ddt, J = 12,1, 6,3, 2,9 Hz, 1 H), 3,88 - 3,70 (m, 2H), 2,96 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H).
La o soluţie de compus 41-S (345 mg, 0,82 mmol) în etanol (25 mL, 30 mL/mmol) s-a adăugat hidrazină monohidrat (3,6 mL, 73,8 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 80 °C într-un tub sigilat timp de 2 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) s-a obţinut compusul 42-S (233 mg, 98%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 8:2). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,62 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,49 - 7,42 (m, 2H), 7,33 - 7,18 (m, 2H), 4,85 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 3,91 (s, 1 H), 2,91 - 2,76 (m, 3H), 2,67 (dd, J = 13,1, 6,8 Hz, 1 H), 1,25 (s, 9H).
La o soluţie de compus 42-S (280 mg, 0,96 mmol) în CH3CN (10 mL, 10 mL/mmol) şi DMF (16 mL, 1 mL/mmol) s-a adăugat N,N-diizopropiletilamină (0,14 mL, 0,77 mmol) şi cloroformiat de alil (1,02 mL, 9,64 mmol). Reacţia a fost agitată la 23 °C timp de 2 ore. Amestecul a fost diluat cu EtOAc şi s-a adăugat NH4CI şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100) pentru a da compusul 43-S (445 mg, >100%). Rf= 0,5 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,60 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,52 - 7,43 (m, 2H), 7,34 - 7,20 (m, 2H), 5,90 (ddt, J = 16,4, 10,8, 5,6 Hz, 1 H), 5,32 - 5,17 (m, 2H), 4,93 - 4,86 (m, 1 H), 4,56 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 4,08 - 3,98 (m, 1 H), 3,40 - 3,21 (m, 2H), 2,88 (m, 2H), 1,25 (s, 9H).
La o soluţie de compus 43-S (160 mg, 0,43 mmol) în CH2Cl2 (8 mL, 16,6 mL/mmol) s-a adăugat acid trifluoracetic (4 mL, 8,3 mL/mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 1,5 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) s-a obţinut compusul 44-S (175 mg, >100%). Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (400 MHz, CD3OD): δ 7,72 (s, 1 H), 7,64 (dt, J = 8,4, 0,9 Hz, 1 H), 7,49 (dt, J = 8,4, 0,9 Hz, 1 H), 7,37 - 7,22 (m, 2H), 5,94 (ddt, J = 16,3, 10,7, 5,5 Hz, 1 H), 5,32 (dq, J = 17,3, 1,7 Hz, 1 H), 5,19 (dq, J = 10,6, 1,5 Hz, 1 H), 4,56 (dt, J = 5,7, 1,5 Hz, 2H), 3,56 (qd, J = 7,0, 4,4 Hz, 1 H), 3,46 - 3,32 (m, 1 H), 3,32 - 3,24 (m, 1 H), 3,03 (dd, J = 14,8, 6,9 Hz, 1 H), 2,91 (ddd, J = 14,8, 7,1, 0,9 Hz, 1 H).
Exemplul de referinţă 24. Prepararea N-[(R)-2-amino-3-(benzofuran-3-il)propil]carbamatului de alil (44-R).
La o soluţie de compus 37-R (2.75 g, 14,4 mmol) în CH3CN (58 mL, 4 mL/mmol) s-a adăugat di-tert-dicarbonat de butil (6,27 g, 28,76 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 2,5 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a da compusul 40-R (3,7 g, 88%).
Rf= 0,6 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,64 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,52 - 7,43 (m, 2H), 7,35 - 7,20 (m, 2H), 4,85 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 4,00 (bs, 1 H), 3,69 (dd, J = 11,0, 4,0 Hz, 1 H), 3,62 (dd, J = 10,9, 5,1 Hz, 1 H), 2,94 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 1,42 (s, 9H).
La o soluţie de compus 40-R (3.7 g, 12,7 mmol) în CH2Cl2 (76 mL, 6 mL/mmol) s-au adăugat ftalimidă (4,1 g, 28 mmol), trifenilfosfină (7,3 g, 28 mmol) şi amestecul s-a răcit la 0°C. O soluţie de 40% azodicarboxilat de dietil în CH2Cl2 (9,4 mL, 31,7 mmol) a fost adăugată timp de 15 min. Reacţia a fost agitată la 23°C timp de 16 ore, s-a concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a da compusul 41-R (4.05 g, 76%).
Rf= 0,8 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,67 - 7,68 (m, 4H), 7,61 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,46 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,27 (dtd, J = 17,2, 7,3, 1,4 Hz, 2H), 4,84 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 4,46 - 4,30 (m, 1 H), 3,89 - 3,66 (m, 2H), 2,97 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 1,24 (s, 9H).
La o soluţie de compus 41-R (4,0 g, 9,5 mmol) în etanol (285 mL, 30 mL/mmol) s-a adăugat hidrazină monohidrat (41,5 mL, 856 mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 80 °C într-un tub sigilat timp de 2 ore şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) pentru a da compusul 42-R (2,2 g, 80%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 8:2). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,60 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,44 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,25 (dtd, J = 18,8, 7,3, 1,3 Hz, 2H), 4,94 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 3,98 - 3,78 (m, 1 H), 2,90 - 2,77 (m, 2H), 2,65 (dd, J = 13,1, 7,0 Hz, 1 H), 1,40 (s, 9H).
La o soluţie de compus 42-R (2.2 g, 7,6 mmol) în CH3CN (76 mL, 10 mL/mmol) şi DMF (7,6 mL, 1 mL/mmol) s-au adăugat N,N-diizopropiletilamină (1,1 mL, 6,08 mmol) şi cloroformiat de alil (8,05 mL, 76 mmol). Reacţia a fost agitată la 23 °C timp de 7 ore. Amestecul a fost diluat cu EtOAc şi s-a adăugat NH4CI şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100) pentru a da compusul 43-R (2.3 g, 81%). Rf= 0,7 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,60 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,52 - 7,43 (m, 2H), 7,34 - 7,20 (m, 2H), 5,90 (ddt, J = 17,3, 10,8, 5,6 Hz, 1 H), 5,29 (d, J = 17,2, 1 H), 5,20 (d, J = 10,4, 1 H), 5,10 (t, J = 6,2 Hz, 1 H), 4,86 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 4,56 (d, J = 5,4, 2H), 4,08 - 3,97 (m, 1 H), 3,36 (dt, J = 10,7, 4,7 Hz, 1 H), 3,30 - 3,23 (m, 1 H), 2,87 (td, J = 14,8, 6,5 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H).
La o soluţie de compus 43-R (1,32 g, 3,52 mmol) în CH2Cl2 (60 mL, 16,6 mL/mmol) s-a adăugat acid trifluoracetic (30 mL, 8,3 mL/mmol). Amestecul de reacţie a fost agitat la 23°C timp de 1,5 ore şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 100:1 la 50:50) pentru a da compusul 44-R (0,90 g, 94%).
Rf= 0,2 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,75 (s, 1 H), 7,69 - 7,61 (m, 1 H), 7,54 - 7,46 (m, 1 H), 7,39 - 7,24 (m, 2H), 5,95 (ddt, J = 16,3, 10,8, 5,5 Hz, 1 H), 5,32 (dd, J = 17,3, 1,8 Hz, 1 H), 5,24 - 5,16 (m, 1 H), 4,57 (dt, J = 5,7, 1,5 Hz, 2H), 3,68 (qd, J = 7.1, 4.2 Hz, 1 H), 3,48 (dd, J = 14,8, 4,2 Hz, 1 H), 3,42 - 3,30 (m, 1 H), 3,14 - 2,95 (m, 2H).
Exemplul de referinţă 25
La o soluţie de compus 1 (750 mg, 1,2 mmol) în CH3CN (120 mL, 0,01 M) s-au adăugat compusul 44-S (1370 mg, 6 mmol) şi clorură cianurică (TCT) (184 mg, 20%). Amestecul de reacţie a fost agitat la 85 °C timp de 23 de ore şi apoi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 9:1 la 1:9) s-a obţinut compusul 45-S (755 mg, 72%). Rf= 0,36 (Hexan:EtOAc, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,38 - 7,28 (m, 2H), 7,23 - 7,08 (m, 2H), 6,67 (s, 1 H), 6,19 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,09 - 5,95 (m, 1 H), 6,04 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 5,92 (s, 1 H), 5,80 (s, 1 H), 5,44 - 5,34 (m, 1 H), 5,26 (dq, J = 10,4, 1,3 Hz, 1 H), 5,08 (dd, J = 11,4, 1,1 Hz, 1 H), 4,70 - 4,63 (m, 2H), 4,56 (s, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,31 - 4,18 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,50 - 3,39 (m, 2H), 3,24 - 3,15 (m, 1 H), 3,00 (dt, J = 12,2, 6,0 Hz, 2H), 2,95 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 2,60 (dd, J = 15,4, 4,5 Hz, 2H), 2,44 (dd, J = 15,6, 5,2 Hz, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,25 - 2,20 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,12 (s, 1H), 2,04 (s, 3H). ESI-MS m/z: 878,2 (M+H)+.
La o soluţie de compus 45-S (750 mg, 0,85 mmol) în CH2Cl2 (15.3 mL, 18 mL/mmol) s-a adăugat diclorură de bis(trifenilfosfină)paladiu(II) (96 mg, 0,14 mmol) şi acid acetic (0,5 mL, 8,5 mmol). S-a adăugat hidrură de tributii staniu (1,4 mL, 5,1 mmol) la 0 °C, iar amestecul de reacţie a fost agitat la 0 °C timp de 30 minute şi a fost concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100 şi CH2Cl2:CH3OH, de la 100:1 la 1:100) pentru a da compusul 46-S (430 mg, 64%). Rf= 0,3 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,37 - 7,29 (m, 2H), 7,22 - 7,11 (m, 2H), 6,57 (s, 1 H), 6,21 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 6,06 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 5,07 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 4,37 (s, 1 H), 4,29 - 4,23 (m, 2H), 4,14 (s, 1 H), 3,79 (s, 3H), 3,50 - 3,47 (m, 2H), 3,38 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 2,95 -2,71 (m, 4H), 2,68 - 2,52 (m, 2H), 2,51 - 2,38 (m, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,33 - 2,26 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,17 - 2,08 (m, 1 H), 2,10 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). ESI-MS m/z: 794,3 (M+H)+.
La o soluţie de compus 46-S (550 mg, 0,7 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 49 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (2.4 g, 14 mmol). După 16 ore la 23 °C, reacţia a fost stinsă cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCOs, agitată timp de 15 minute, diluată cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi s-au concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a da compusul 47-S (53 mg, 10%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,36 (d, 7,9 Hz, 1 H), 7,33 (d, 7,4 Hz, 1 H), 7,23 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,16 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 6,77 (s, 1 H), 6,20 (s, 1 H), 6,04 (s, 1 H), 5,92 (s, 1 H), 5,20 (d, J = 11,1 Hz, 1 H), 4,90 (s, 1 H), 4,50 (s, 1 H), 4,46 - 4,39 (m, 1 H), 4,25 (d, J = 11,1 Hz, 1 H), 420 (s, 1 H), 3,84 (s, 3H), 3,81 (d, J = 4,2 Hz, 1 H), 3,58 (s, 1 H), 3,40 - 3,14 (m, 3H), 2,90 (t, J = 13,0 Hz, 1 H), 2,76 (m, 3H), 2,50 (s, 3H), 2,46 - 2,37 (m, 1 H), 2,32 - 2,26 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,04 (s, 3H). 13C RMN (126 MHz, CD3OD): δ 170,5, 169,2, 154,6, 149,1, 148,7, 145,7, 143,5, 141,0, 140,9, 131,2, 129,6, 126,9, 124,4, 122,5, 121,4, 119,7, 118,7, 115,9, 112,7, 111,0, 110,7, 102,1, 91,2, 63,5, 61,2, 59,2, 58,5, 55.3, 54.7, 53,4, 52,7, 43,3, 42,5, 39,9, 36,9, 29,3, 24,1, 23,6, 19,1, 15,0, 8.2. ESI-MS m/z: 767,2 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767,2794 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H43N4O9S 767,2745).
Exemplul de referinţă 26.
La o soluţie de compus 1 (621 mg, 1 mmol) în CH3CN (100 mL, 0,01 M) s-au adăugat compusul 44-R (825 mg, 3 mmol) şi clorură de cianură (TCT) (248 mg, 40%). Amestecul de reacţie a fost agitat la 85 °C timp de 66 de ore şi apoi s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi amestecul a fost extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-a filtrat şi s-a concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 9:1 la 1:9) se obţine compusul 45-R (530 mg, 58%).
Rf= 0,4 (Hexan:EtOAc, 1:1).
1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,42 - 7,28 (m, 2H), 7,23 - 7,08 (m, 2H), 6,60 (s, 1 H), 6,20 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,04 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,01 - 5,92 (m, 1 H), 5,77 (s, 1 H), 5,44 - 5,20 (m, 2 H), 5,09 (s, 1 H), 5,04 - 4,96 (m, 1 H), 4,71 - 4,55 (m, 2H), 4,34 (s, 1 H), 4,30 - 4,18 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,53 (dd, J = 10,2, 4,4 Hz, 1 H), 3,46 (m, 2H), 3,50 - 3,40 (m, 1 H), 3,03 - 2,87 (m, 2H), 2,67 (d, J = 15,0 Hz, 1 H), 2,47 (dd, J = 15,6, 3,7 Hz, 1 H), 2,40 - 2,32 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,19 - 2,12 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 2,09 ( s, 3H).
ESI-MS m/z: 878,3 (M+H)+.
La o soluţie de compus 45-R (552 mg, 0,63 mmol) în CH2Cl2 (11,3 mL, 18 mL/mmol) s-a adăugat diclorură de bis(trifenilfosfin)paladiu(II) (70,7 mg, 0,1 mmol) şi acid acetic (0,36 mL, 6,3 mmol). S-a adăugat hidrură de tributilstaniu (1,02 mL, 3,8 mmol) la 0 °C şi amestecul de reacţie a fost agitat la 0 °C timp de 0,5 ore şi concentrat în vid. Produsul brut obţinut a fost diluat cu EtOAc, s-a adăugat soluţie apoasă saturată de NH4CI şi amestecul a fost extras cu EtOAc. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. După cromatografie rapidă (Hexan:EtOAc, de la 100:1 la 1:100 şi EtOAc:CH3OH, de la 100:1 la 1:100) s-a obţinut compusul 46-R (423 mg, 85%). Rf= 0,3 (CH2Cl2:CH3OH, 1:1). 1H RMN (400 MHz, CDCI3): δ 7,45 - 7,28 (m, 2H), 7,23 - 7,08 (m, 2H), 6,56 (s, 1 H), 6,19 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 6,05 (d, J = 1,4 Hz, 1 H), 4,98 (d, J = 11,5 Hz, 1 H), 4,59 (s, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 4,27 (dd, J = 5,1, 1,7 Hz, 1 H), 4,22 - 4,16 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,49 - 3,39 (m, 2H), 3,31 (dq, J = 9,8, 5,5, 4,5 Hz, 2H), 2,95 (s, 1 H), 2,83 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 2,74 - 2,51 (m, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,32 - 2,21 (m, 2H), 2,26 (s, 3H); 2,16 (s, 3H), 2,06 (s, 3H). ESI-MS m/z: 794,3 (M+H)+.
La o soluţie de compus 46-R (412 mg, 0,52 mmol) în CH3CN:H2O (1,39:1, 36 ml, 0,015 M) s-a adăugat AgNO3 (1,76 g, 10,4 mmol). După 22 de ore la 23 °C, reacţia a fost stinsă cu un amestec 1:1 de soluţii apoase saturate de NaCI şi NaHCO3, agitată timp de 15 minute, diluată cu CH2Cl2, s-a agitat timp de 5 minute şi s-a extras cu CH2Cl2. Straturile organice combinate au fost uscate pe Na2SO4 anhidru, s-au filtrat şi concentrat în vid. Reziduul obţinut a fost purificat prin cromatografie rapidă (CH2Cl2:CH3OH, de la 99:1 la 85:15) pentru a da compusul 47-R (175 mg, 43%). Rf= 0,1 (CH2Cl2:CH3OH, 9:1). 1H RMN (500 MHz, CDCI3): δ 7,34 (dd, J = 11,1, 7,9 Hz, 2H), 7,22 - 7,07 (m, 2H), 6,57 (s, 1 H), 6,17 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 6,01 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 5,11 (d, J = 11,2 Hz, 1 H), 4,84 (s, 1 H), 4,53 - 4,47 (m, 2H), 4,21 - 4,07 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,56 (d, J = 5,1 Hz, 1 H), 3,43 (s, 1 H), 3,24 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 2,98 - 2,78 (m, 4H), 2,72 - 2,58 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,35 - 2,27 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,14 ( s, 3H), 2,08 (s, 3H). 13C RMN (101 MHz, CD3OD): δ 170,6, 169,1, 155,0, 148,8, 145,6, 143,7, 141,1, 140,8, 130,9, 129,7, 126,9, 124,2, 122,1, 119,6, 118,9, 115,0, 113,2, 112,5, 111,0, 102,1, 91,3, 63,3, 60,4, 59,0, 58,4, 55,3, 54,6, 52,6, 51,1, 44,9, 42,4, 39,8, 38,7, 29,4, 24,0, 23,2, 191, 15,0, 8,3. ESI-MS m/z: 767,2 (M-H2O+H)+. (+)-HR-ESI-TOF-MS m/z: 767,2806 [M-H2O+H]+ (Calculat pentru C41H43N4O9S 767,2745).
Exemplul 27. Bioteste in vitro pentru detectarea activităţii antitumorale
Scopul acestui test este de a evalua in vitro activitatea citostatică (capacitatea de a întârzia sau opri creşterea celulelor tumorale) sau citotoxică (capacitatea de a ucide celulele tumorale) a probelor testate.
LINII CELULARE
Denumire Nr. ATCC Specie Ţesut Caracteristici A549 CCL-185 uman plămâni carcinom pulmonar (NSCLC) HT29 HTB-38 uman colon adenocarcinom colorectal MDA-MB-231 HTB-26 uman sân adenocarcinom mamar PSN1 CRM-CRL-3211 uman pancreas adenocarcinomul pancreasului PC-3 CRL-1435 uman prostata adenocarcinom de prostată 22Rv1 CRL-2505 uman prostata carcinom de prostată
EVALUAREA ACTIVITĂŢII CITOTOXICE UTILIZND TESTE COLORIMETRICE SBR ŞI MTT
Un test colorimetric, folosind reacţia sulforhodaminei B (SRB) a fost adaptat pentru a oferi o măsurare cantitativă a creşterii şi viabilităţii celulelor (urmând tehnica descrisă de Skehan şi colab. J. Natl. Cancer Inst. 1990, 82, 1107-1112). Un alt test colorimetric bazat pe reducerea bromurii de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazoliu (MTT) la un formazan violet a fost, de asemenea, utilizat pentru a evalua activitatea antiproliferativă (urmând tehnica descrisă de Mosmann şi colab. J. Immunol. Meth. 1983, 65, 55-63).
Aceste forme de teste folosesc microplăci de cultură celulară cu 96 de godeuri, conform standardelor Institutului Naţional American de Standarde şi ale Societăţii pentru Automatizare şi Screening de Laboratoare (ANSI SLAS 1-2004 (R2012) 10/12/2011. Toate liniile celulare utilizate în acest studiu au fost obţinute din Colecţia Americană de Cultură de Tip (ATCC) şi derivă din diferite tipuri de cancer uman.
Celulele A549, HT29, MDA-MB-231 şi PSN1 au fost menţinute în Mediul Eagle Modificat Dulbecco (DMEM), în timp ce celulele PC-3 şi 22Rv1 au fost menţinute în Mediul Roswell Park Memorial Institute (RPMI). Toate liniile celulare au fost suplimentate cu 10% ser fetal bovin (FBS), 2 mM L-glutamină, 100 U/ml penicilină şi 100 U/ml streptomicină la 37 °C, 5% CO2 şi 98% umiditate. Pentru experimente, celulele au fost recoltate din culturi subconfluente folosind tripsinizare şi resuspendate în mediu proaspăt înainte de numărare şi placare.
Celulele A549, HT29, MDA-MB-231 şi PSN1 au fost însămânţate pe plăci de microtitrare cu 96 de godeuri, la 5000 de celule pe godeu în alicote de 150 μL şi lăsate să se ataşeze la suprafaţa plăcii timp de 18 ore (peste noapte) în mediu fără medicament. După aceea, o placă martor (netratată) a fiecărei linii celulare a fost fixată (aşa cum este descris mai jos) şi utilizată pentru valoarea de referinţă de timp zero. Plăcile de cultură au fost apoi tratate cu compuşi de testare (alicote de 50 µL de soluţii stoc 4X în mediu de cultură complet plus 4% DMSO) folosind zece diluţii în serie 2/5 (concentraţii variind de la 10 la 0,003 µg/mL) şi culturi triplicate (concentraţia 1% finală în DMSO). După 72 de ore de tratament, efectul antitumoral a fost măsurat utilizând metodologia SRB: pe scurt, celulele au fost spălate de două ori cu PBS, fixate timp de 15 minute în soluţie de glutaraldehidă 1% la temperatura camerei, clătite de două ori în PBS şi colorate în soluţie de SRB 0,4% timp de 30 min la temperatura camerei. Celulele au fost apoi clătite de mai multe ori cu soluţie de acid acetic 1% şi uscate la aer la temperatura camerei. SRB a fost apoi extras în soluţie de bază trizma 10 mM şi absorbanţa a fost măsurată într-un cititor de plăci spectrofotometric automat la 490 nm.
Un număr adecvat de celule PC-3 şi 22Rv1, pentru a atinge o densitate celulară finală în test, variind de la 5.000 la 15.000 de celule per godeu, în funcţie de linia celulară, au fost însămânţate în plăci cu 96 de godeuri şi lăsate să stea în mediu de cultură timp de 24 de ore la 37°C sub 5% CO2 şi 98% umiditate. Apoi, s-au adăugat compuşi sau DMSO în mediu de cultură pentru a atinge un volum final de 200 μL şi concentraţia dorită a compusului într-un interval care acoperă zece diluţii seriale 2/5 începând de la 0,1 μg/mL în 1% (vol/vol) DMSO. În acest moment, un set de „plăci de control timp zero» tratate cu 1% (vol/vol) DMSO au fost prelucrate cu MTT, aşa cum este descris mai jos. Restul plăcilor au fost incubate timp de 72 de ore în condiţiile de mediu menţionate mai sus. Ulterior, 50 μL dintr-o soluţie MTT de 1 mg/mL în mediu de cultură au fost adăugate în godeuri şi incubate timp de 6-8 ore la 37°C pentru a permite generarea de cristale de formazan. Mediul de cultură a fost apoi îndepărtat şi 100 μL de DMSO pur s-au adăugat în fiecare godeu pentru a dizolva produsul formazan într-o soluţie colorată a cărei absorbanţă la 540 nm a fost în cele din urmă măsurată într-un cititor de etichete multiplăci PolarStar Omega (BMG Labtech, Ortenberg, Germania).
Efectele asupra creşterii şi supravieţuirii celulelor au fost estimate prin aplicarea algoritmului NCI (Boyd MR şi Paull KD. Drug Dev. Res. 1995, 34, 91-104). Valorile obţinute în culturi în trei exemplare au fost ajustate prin regresie neliniară la o curbă logistică cu patru parametri prin analiză de regresie neliniară. Au fost calculaţi trei parametri de referinţă (conform algoritmului NCI menţionat anterior) prin interpolarea automată a curbelor obţinute printr-o astfel de potrivire: GI50= concentraţia de compus care produce 50% inhibare a creşterii celulare, în comparaţie cu culturile martor; TGI = inhibarea totală a creşterii celulare (efect citostatic), în comparaţie cu culturile martor şi LC50 = concentraţia compusului care produce 50% efect citotoxic net de distrugere a celulelor).
Tabelele 1-9 ilustrează datele despre activitatea biologică a compuşilor prezentei invenţii împreună cu activitatea biologică a compuşilor de referinţă. Doar compuşii 31, 32, 34, 35, 38-S, 38-R, 39-S şi 39-R sunt compuşi conform prezentei invenţii din tabelele 1-9; alţi compuşi precum A, B, E, F, ET-736, PM01183, 14-S, 15-S, 28-S, 28-R, 29-S, şi 29-R, nu fac parte din prezenta invenţie.
Tabel 1. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 3-S R1 = CN, R4 = -CH2OH 3a-S R1 = CN, R4 = -CH2OAc 10-S R1 = CN, R4 = -CH2NHAlloc 11-S R1 = CN, R4 = -CH2NH2 A R1 = CN 4-S R1 = OH, R4 = -CH2OH C R1 = OH 4a-S R1 = OH, R4 = -CH2OAc 12-S R1 = OH, R4 = -CH2NH2 13-S R1 = OH, R4 = -CH2NHAlloc A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 PC-3 22Rv1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 3-S 4.03E-10 2.77E-10 4.91E-10 9.95E-10 A 8.36E-09 7.71E-09 7.07E-09 1.29E-08 TGI 6.17E-10 >1.26E-07 5.29E-10 1.64E-09 8.87E-09 8.36E-09 9.38E-09 1.54E-08 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 6.17E-10 >1.26E-07 >1.29E-07 >1.29E-07 1.41E-08 1.93E-08 GI50 3a-S 3.11E-09 2.99E-09 2.87E-09 2.15E-09 TGI 3.23E-09 3.23E-09 3.59E-09 3.59E-09 LC50 >1.20E-07 >1.20E-07 4.90E-09 1.20E-08 GI50 10-S 2.05E-08 1.14E-08 4.79E-09 7.64E-09 TGI 3.08E-08 1.25E-08 8.44E-09 1.25·E-08 LC50 7.53E-08 >1.14E-06 1.60E-08 2.39E-08 GI50 11-S 8.45E-09 3.41E-09 2.27E-09 3.28E-09 TGI 2.65E-08 >1.26E-07 3.41E-09 4.54E-09 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 6.43E-09 8.07E-09 GI50 4-S 1.27E-09 1.27E-09 1.22E-09 1.78E-09 8.08E-10 3.58E-10 C 2.73E-08 2.08E-08 2.60E-08 3.64E-08 TGI 1.40E-09 1.40E-09 2.55E-09 2.29E-09 6.63E-08 2.34E-08 5.46E-08 4.42E-08 LC50 >1.27E-07 >1.27E-07 6.50E-09 3.44E-09 >1.30E-07 >1.30E-07 >1.30E-07 6.50E-08 GI50 4a-S 3.99E-09 3.14E-09 3.39E-09 3.02E-09 TGI 6.17E-09 3.39E-09 5.44E-09 3.27E-09 LC50 >1.21E-07 >1.21E-07 1.00E-08 3.51E-09 GI50 12-S 2.04E-08 4.85E-09 5.23E-09 3.44E-09 TGI 5.61E-08 8.42E-09 8.42E-09 5.49E-09 LC50 >1.28E-07 >1.28E-07 1.53E-08 1.21E-08 GI50 13-S 1.15E-08 1.15E-08 1.15E-08 1.96E-08 TGI 1.61E-08 1.27E-08 1.27E-08 2.88E-08 LC50 2.42E-08 >1.15E-06 1.38E-08 4.61E-08
Tabel 2. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 3-R R1 = CN, R4 = -CH2OH 10-R R1 = CN, R4 = -CH2NHAlloc 11-R R1 = CN, R4 = -CH2NH2 B R1 = CN 4-R R1 = OH, R4 = -CH2OH D R1 = OH 12-R R1 = OH, R4 = -CH2NH2 13-R R1 = OH, R4 = -CH2NHAlloc A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 3-R 4.03E-10 2.77E-10 2.77E-10 3.90E-10 B 2.06E-08 8.48E-09 9.00E-09 1.93E-08 TGI 5.79E-10 >1.26E-07 5.04E-10 6.05E-10 2.19E-08 9.13E-09 1.67E-08 2.06E-08 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 1.25E-09 >1.26E-07 >1.29E-07 >1.29E-07 3.47E-08 2.31E-08 GI50 10-R 3.76E-09 3.08E-09 2.85E-09 2.62E-09 TGI 5.93E-09 >1.14E-07 4.33E-09 3.88E-09 LC50 >1.14E-07 >1.14E-07 7.18E-09 6.61E-09 GI50 11-R 1.77E-09 1.39E-09 1.01E-09 1.39E-09 TGI 4.54E-09 >1.26E-07 1.51E-09 1.89E-09 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 2.65E-09 >1.26E-07 GI50 4-R 1.27E-09 1.26E-09 1.27E-09 4.59E-10 D 1.25E-08 1.03E-08 9.88E-09 2.08E-08 TGI 1.40E-09 1.40E-09 1.40E-09 8.54E-10 2.86E-08 2.34E-08 1.95E-08 2.21E-08 LC50 > 1.27E-07 >1.27E-07 1.53E-09 2.55E-09 >1.30E-07 >1.30E-07 5.33E-08 2.47E-08 GI50 12-R 1.40E-09 5.74E-10 3.19E-10 4.98E-10 TGI 2.93E-09 1.10E-09 6.76E-10 1.22E-09 LC50 1.22E-08 2.93E-09 1.40E-09 >1.28E-07 GI50 13-R 7.26E-09 6.91E-09 4.95E-09 2.88E-09 TGI 7.72E-09 7.60E-09 7.95E-09 3.11E-09 LC50 >1.15E-07 >1.15E-07 1.38E-08 3.46E-09
Tabel 3. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 38-S R1 = CN, R4 = -CH2OH 45-S R1 = CN, R4 = -CH2NHAlloc 46-S R1 = CN, R4 = -CH2NH2 A R1 = CN 39-S R1 = OH, R4 = -CH2OH C R1 = OH 47-S R1 = OH, R4 = -CH2NH2 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 PC-3 22Rv1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 38-S 8.05E-09 4.53E-09 2.52E-09 5.03E-09 A 8.36E-09 7.71E-09 7.07E-09 1.29E-08 TGI 8.55E-09 7.05E-09 4.28E-09 8.18E-09 8.87E-09 8.36E-09 9.38E-09 1.54E-08 LC50 9.44E-09 >1.26E-07 7.80E-09 1.51E-08 >1.29E-07 >1.29E-07 1.41E-08 1.93E-08 GI50 45-S 1.82E-08 1.82E-08 1.71E-08 1.94E-08 TGI 1.94E-08 1.94E-08 2.16E-08 2.62E-08 LC50 2.16E-08 >1.14E-07 2.96E-08 3.64E-08 GI50 46-S 8.19E-09 2.77E-09 3.65E-09 3.15E-09 TGI 2.14E-08 6.17E-09 6.80E-09 4.79E-09 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 1.26E-08 9.20E-09 GI50 39-S 4.84E-09 3.94E-09 3.44E-09 8.02E-09 2.78E-09 4.81E-10 C 2.73E-08 2.08E-08 2.60E-08 3.64E-08 TGI 8.27E-09 6.74E-09 7.13E-09 1.02E-08 6.63E-08 2.34E-08 5.46E-08 4.42E-08 LC50 1.65E-08 >1.27E-07 1.78E-08 1.27E-08 >1.30E-07 >1.30E-07 >1.30E-07 6.50E-08 GI50 47-S 1.40E-08 4.33E-09 6.24E-09 5.99E-09 TGI 2.80E-08 6.75E-09 9.68E-09 8.54E-09 LC50 >1.27E-07 >1.27E-07 1.66E-08 1.27E-08
Tabel 4. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 38-R R1 = CN, R4 = -CH2OH 45-R R1 = CN, R4 = -CHzNHAlloc 46-R R1 = CN, R4 = -CH2NH2 B R1 = CN 39-R R1 = OH, R4 = -CH2OH D R1 = OH 47-R R1 = OH, R4 = -CH2NH2 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 38-R 6.54E-10 5.41E-10 4.53E-10 6.54E-10 B 2.06E-08 8.48E-09 9.00E-09 1.93E-08 TGI 1.04E-09 5.91E-10 8.43E-10 9.94E-10 2.19E-08 9.13E-09 1.67E-08 2.06E-08 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 2.01E-09 1.76E-09 >1.29E-07 >1.29E-07 3.47E-08 2.31E-08 GI50 45-R 1.82E-08 1.25E-08 9.57E-09 1.06E-08 TGI 1.94E-08 2.28E-08 1.94E-08 1.94E-08 LC50 2.39E-08 >1.14E-07 4.33E-08 3.76E-08 GI50 46-R 1.51E-09 1.21E-09 1.23E-09 9.95E-10 TGI 2.77E-09 1.39E-09 1.39E-09 1.51E-09 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 1.51E-09 2.65E-09 GI50 39-R 2.67E-10 2.93E-10 2.04E-10 3.65E-10 D 1.25E-08 1.03E-08 9.88E-09 2.08E-08 TGI 4.33E-10 6.24E-10 5.98E-10 5.73E-10 2.86E-08 2.34E-08 1.95E-08 2.21E-08 LC50 >1.27E-07 >1.27E-07 2.80E-09 1.06E-09 >1.30E-07 >1.30E-07 5.33E-08 2.47E-08 GI50 47-R 2.04E-09 8.03E-10 5.99E-10 1.40E-09 TGI 3.82E-09 1.40E-09 1.17E-09 2.04E-09 LC50 1.40E-08 >1.27E-07 2.55E-09 3.31E-09
Tabel 5. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 18-S R1 = CN, R4 = -CH2OH 25-S R1 = CN, R4 = -CH2NHAlloc E R1 = CN 26-S R1 = CN, R4 = -CH2NH2 PM01183 R1 = OH 19-S R1 = OH, R4 = -CH2OH 27-S R1 = OH, R4 = -CH2NH2 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 18-S 1.70E-09 1.21E-09 1.21E-09 9.59E-10 E 3.28E-09 3.15E-09 2.27E-09 2.77E-09 TGI 3.03E-09 1.34E-09 1.34E-09 1.34E-09 3.40E-09 3.40E-09 3.78E-09 4.53E-09 LC50 >1.21E-07 >1.21E-07 1.58E-09 >1.21E-07 4.41E-09 >1.26E-07 7.43E-09 8.94E-09 GI50 25-S 7.17E-09 7.17E-09 5.84E-09 6.84E-09 TGI 7.61E-09 7.72E-09 9.04E-09 9.26E-09 LC50 >1.10E-07 >1.10E-07 1.54E-08 1.43E-08 GI50 26-S 1.12E-08 2.79E-09 1.34E-09 3.04E-09 TGI 2.19E-08 3.16E-09 1.94E-09 3.28E-09 LC50 >1.22E-07 >1.22E-07 3.89E-09 3.52E-09 GI50 19-S 3.07E-09 1.35E-09 1.96E-09 2.95E-09 PM 01183 3.31E-09 1.91E-09 2.29E-09 3.19E-09 TGI 3.31E-09 1.60E-09 3.31E-09 3.19E-09 3.57E-09 4.46E-09 3.95E-09 3.95E-09 LC50 >1.23E-07 >1.23E-07 1.10E-08 >1.23E-07 >1.27E-07 >1.27E-07 1.02E-08 5.73E-09 GI50 27-S 6.02E-09 1.23E-09 1.19E-09 1.97E-09 TGI 1.12E-08 1.35E-09 1.23E-09 2.83E-09 LC50 >1.23E-07 >1.23E-07 1.35E-09 4.55E-09
Tabel 6. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 18-R R1 = CN, R4 = -CH2OH 25-R R1 = CN, R4 = -CHzNHAlloc E R1 = CN 26-R R1 = CN, R4 = -CH2NH2 PM01183 R1 = OH 19-R R1 = OH, R4 = -CH2OH 27-R R1 = OH, R4 = -CH2NH2 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 18-R 1.21E-09 1.21E-09 1.21E-09 5.70E-10 E 3.28E-09 3.15E-09 2.27E-09 2.77E-09 TGI 1.34E-09 1.34E-09 1.34E-09 1.06E-09 3.40E-09 3.40E-09 3.78E-09 4.53E-09 LC50 >1.21E-07 >1.21E-07 1.46E-09 >1.21E-07 4.41E-09 >1.26E-07 7.43E-09 8.94E-09 GI50 25-R 1.32E-09 1.54E-09 1.21E-09 1.21E-09 TGI 2.43E-09 2.76E-09 2.54E-09 2.32E-09 LC50 9.92E-09 >1.10E-07 8.38E-09 6.73E-09 GI50 26-R 1.94E-09 7.29E-10 1.17E-09 9.72E-10 TGI 3.40E-09 1.58E-09 1.22E-09 1.70E-09 LC50 >1.22E-07 >1.22E-07 1.46E-09 3.52E-09 GI50 19-R 1.47E-09 1.72E-09 1.23E-09 1.23E-09 PM0 1183 3.31E-09 1.91E-09 2.29E-09 3.19E-09 TGI 3.56E-09 1.72E-09 1.35E-09 1.35E-09 3.57E-09 4.46E-09 3.95E-09 3.95E-09 LC50 >1.23E-07 >1.23E-07 >1.23E-07 1.47E-09 >1.27E-07 >1.27E-07 1.02E-08 5.73E-09 GI50 27-R 2.09E-09 5.04E-10 3.07E-10 6.39E-10 TGI 3.93E-09 5.53E-10 5.41E-10 1.17E-09 LC50 1.01E-08 >1.23E-07 8.60E-10 2.46E-09
Tabel 7. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 31 R1 = CN, R3 = H F R1 = CN, R3 = H 32 R1 = OH, R3 = H ET-736 R1 = OH, R3 = H 34 R1 = CN, R3 = OMe E R1 = CN, R3 = OMe 35 R1 = OH, R3 = OMe PM01183 R1 = OH, R3 = OMe A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 31 1.96E-08 1.05E-08 8.89E-09 6.80E-09 F 3.80E-08 2.09E-08 1.96E-08 3.27E-08 TGI 2.09E-08 1.57E-08 1.70E-08 1.57E-08 7.20E-08 2.36E-08 3.40E-08 6.02E-08 LC50 2.35E-08 > 1.31E-07 3.53E-08 4.31E-08 > 1.31E-07 > 1.31E-07 7.33E-08 1.07E-07 GI50 32 6.88E-09 6.88E-09 4.76E-09 6.09E-09 ET-736 2.25E-08 2.12E-08 2.12E-08 3.97E-08 TGI >1.32E-08 >1.32E-08 1.05E-08 8.34E-09 4.77E-08 2.25E-08 2.52E-08 5.96E-08 LC50 >1.32E-08 >1.32E-08 >1.32E-08 1.20E-08 >1.32E-07 >1.32E-07 4.77E-08 1.02E-07 GI50 34 5.91E-08 5.41E-08 4.53E-08 5.41E-08 E 3.28E-09 3.15E-09 2.27E-09 2.77E-09 TGI 8.05E-08 8.55E-08 7.67E-08 5.91E-08 3.40E-09 3.40E-09 3.78E-09 4.53E-09 LC50 >1.26E-07 1.25E-07 1.12E-07 >1.26E-07 4.41E-09 >1.26E-07 7.43E-09 8.94E-09 GI50 35 8.14E-09 7.89E-09 4.58E-09 6.24E-09 PM01183 3.31E-09 1.91E-09 2.29E-09 3.19E-09 TGI 8.78E-09 8.65E-09 8.27E-09 9.03E-09 3.57E-09 4.46E-09 3.95E-09 3.95E-09 LC50 >1.27E-07 >1.27E-07 1.65E-08 1.40E-08 >1.27E-07 >1.27E-07 1.02E-08 5.73E-09
Tabel 8. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 3-S R1 = CN, R3 = H 14-S R1 = CN, R3 = H 4-S R1 = OH, R3 = H 15-S R1 = OH, R3 = H 18-S R1 = CN, R3 = OMe 28-S R1 = CN, R3 = OMe 19-S R1 = OH, R3 = OMe 29-S R1 = OH, R3 = OMe A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 3-S 4.03E-10 2.77E-10 4.91E-10 9.95E-10 14-S >1.24E-07 1.21E-07 5.45E-08 >1.24E-07 TGI 6.17E-10 >1.26E-07 5.29E-10 1.64E-09 >1.24E-07 >1.24E-07 1.13E-07 >1.24E-07 LC50 >1.26E-07 >1.26E-07 6.17E-10 >1.26E-07 >1.24E-07 >1.24E-07 >1.24E-07 >1.24E-07 GI50 4-S 1.27E-09 1.27E-09 1.22E-09 1.78E-09 15-S >1.25E-06 3.00E-07 1.63E-07 2.38E-07 TGI 1.40E-09 1.40E-09 2.55E-09 2.29E-09 >1.25E-06 5.13E-07 2.13E-07 4.63E-07 LC50 >1.27E-07 >1.27E-07 6.50E-09 3.44E-09 >1.25E-06 9.14E-07 2.75E-07 8.39E-07 GI50 18-S 1.70E-09 1.21E-09 1.21E-09 9.59E-10 28-S 4.89E-07 2.51E-07 1.67E-07 2.51E-07 TGI 3.03E-09 1.34E-09 1.34E-09 1.34E-09 >1.19E-06 3.46E-07 2.51E-07 3.94E-07 LC50 >1.21E-07 >1.21E-07 1.58E-09 >1.21E-07 >1.19E-06 6.33E-07 3.94E-07 6.92E-07 GI50 19-S 3.07E-09 1.35E-09 1.96E-09 2.95E-09 29-S 6.15E-07 3.62E-07 2.17E-07 3.86E-07 TGI 3.31E-09 1.60E-09 3.31E-09 3.19E-09 >1.21E-06 5.31E-07 3.74E-07 5.07E-07 LC50 >1.23E-07 >1.23E-07 1.10E-08 >1.23E-07 >1.21E-06 8.32E-07 6.88E-07 6.88E-07
Tabel 9. Activitate biologică (Molar)
Compus Compus de referinţă 18-R R1 = CN 28-R R1 = CN 19-R R1 = OH 29-R R1 = OH A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 A549 HT29 MDA-MB-231 PSN1 GI50 18-R 1.21E-09 1.21E-09 1.21E-09 5.71E-10 28-R 1.67E-07 3.10E-08 1.91E-08 2.15E-08 TGI 1.34E-09 1.34E-09 1.34E-09 1.06E-09 3.58E-07 3.34E-08 3.22E-08 3.58E-08 LC50 >1.21E-07 >1.21E-07 1.46E-09 >1.21E-07 >1.19E-06 >1.19E-06 9.19E-08 6.68E-08 GI50 19-R 1.47E-09 1.72E-09 1.23E-09 1.23E-09 29-R 9.05E-08 3.02E-08 1.69E-08 3.02E-08 TGI 3.56E-09 1.72E-09 1.35E-09 1.35E-09 1.93E-07 3.26E-08 2.77E-08 3.14E-08 LC50 >1.23E-07 >1.23E-07 >1.23E-07 1.47E-09 >1.21E-06 >1.21E-06 1.57E-07 3.50E-08
Compuşii prezentei invenţii s-au dovedit a avea potenţă mărită in vitro, în comparaţie cu compuşii de referinţă. Aceasta demonstrează că compuşii conform prezentei invenţii prezintă o citoxiticitate mărită faţă de celulele canceroase şi sunt utili în tratamentul cancerului.
Exemplul 28. Determinarea MTD şi MTMD
Pentru toate experimentele au fost utilizaţi şoareci femele CD-1 sau Athymic Nude-Fox1 nu/nu (Envigo). Animalele (N=10/cuşcă) au fost introduse în cuşti ventilate individual (Sealsafe Plus®, Techniplast S.P.A.), pe parcursul unui ciclu lumină-întuneric de 12 ore la 21-23 °C şi 40-60% umiditate. Şoarecilor li s-a permis accesul liber la dieta standard iradiată pentru rozătoare (Tecklad 2914C) şi apă sterilizată. Animalele au fost aclimatizate timp de cinci zile înainte de a fi identificate individual prin tatuaj. Protocoalele pentru animale au fost revizuite şi aprobate conform comitetelor regionale de îngrijire şi utilizare a animalelor instituţionale.
Şoarecii au fost alocaţi aleatoriu în grupuri experimentale şi administraţi intravenos, o dată pentru determinarea MTD (Doza maximă tolerată) sau o administrare pe săptămână timp de trei săptămâni consecutive, pentru studiul de determinare MTMD (Doza maximă tolerată). Animalelor li s-au administrat formulare albă sau compus dizolvat în formula experimentală la diferite concentraţii. Volumul administrat a fost întotdeauna de 10 ml/kg. Odată administrate, animalele au fost monitorizate pentru semne clinice de toxicitate sistemică, modificări ale greutăţii corporale şi mortalitate până la 14 zile după administrare.
Rezultatele MTD sunt însumate în Tabelul 10
Tabel 10
Compus Traseu / Program Doze (mg/Kg) MTD (mg/kg) 4-S (referinţă) iv / SD 0,00, 0,25, 0,50, 1,00, 1,50, 2,00, 2,50, 5,00 1,0 4-R (referinţă) 0,25 19-S (referinţă) 0,5 19-R (referinţă) 0,00, 0,10, 0,15, 0,25, 0,50, 1,00, 1,50, 2,00, 2,50, 5,00 0,15 Compus C (referinţă) 0,00, 0,25, 0,50, 1,00, 1,50, 2,00, 2,50, 3,00, 4,00, 5,00 3,0 Compus D (referinţă) 0,00, 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00, 6,00, 8,00 0,5 32 0,00, 0,25, 0,50, 1,00, 1,50, 2,00, 2,50, 5,00 0,5
Rezultatele MTMD sunt rezumate în Tabelul 11
Tabel 11
Compus Traseu / Program Doze (mg/Kg) MTMD (mg/kg) 4-S (referinţă) iv / Q7dx3 0,00, 0,50, 0,75, 1,00, 1,25 1,25 4-R (referinţă) 0,00, 0,15, 0,20, 0,25, 0,30 0,30 12-S (referinţă) 0,00, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75, 1,00, 1,25, 1,50, 2,00, 2,50, 5,00 0,25 12-R (referinţă) 0,00, 0,010, 0,025, 0,050, 0,075, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75, 1,00, 1,25, 1,50, 2,00, 2,50, 5,00 0,05 19-S (referinţă) 0,00, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75 0,75 19-R (referinţă) 0,00, 0,025, 0,075, 0,10, 0,15 0,15 Compus C (referinţă) 0,0, 1,0, 1,5, 2,0, 3,0, 4,0 3,0 Compus D (referinţă) 0,00, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75 0,5 32 0,00, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75 0,5 35 0,00, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75 0,25 39-S 0,00, 0,01, 0,025, 0,05, 0,075, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75, 1,00, 1,25, 1,50, 2,00, 2,50, 5,00 1,25 47-R (referinţă) 0,00, 0,01, 0,025, 0,05, 0,075, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75, 1,00, 1,25, 1,50, 2,00, 2,50, 5,00 0,1 ET-736 (referinţă) 0,00, 0,10, 0,25, 0,50, 0,75 0,5 PM01183 (referinţă) 0,00, 0,14, 0,18 0,18 iv, intravenos Q7dx3, trei doze cumulate administrate săptămânal.
Exemple 29-40. Xenogrefe in vivo
Au fost utilizaţi şoareci nu/nu femele atimici (Harlan Laboratories Models, S.L. Barcelona, Spania sau Envigo, Spania) pentru toate experimentele. Animalele au fost introduse în cuşti ventilate individual Sealsafe® Plus, Techniplast S.P.A.), până la zece pe cuşcă pe un ciclu de 12 ore lumină-întuneric la 21-23 °C şi 40-60 % umiditate. Şoarecii au avut acces liber la dieta standard iradiată pentru rozătoare (Tecklad 2914C) şi apă sterilizată. Animalele au fost aclimatizate timp de cel puţin 5 zile înainte de implantarea tumorii cu o suspensie de celule tumorale.
LINII CELULARE
Denumire Nr. ATCC Nr ECCC* Specie Ţesut Caracteristici HT1080 CCL-121 - uman conjunctiv Fibrosarcom MDA-MB-231 HTB-26 - uman sanului Adenocarcinom mamar H460 HTB-177 - uman plămân, revărsat pleural NSCLC A2780 - 93112519 uman ovarian Carcinom ovarian HGC27 - 94042256 uman gastric Carcinom gastric H526 CRL-5811 - uman plămâni SCLC H82 HTB-175 - uman plămâni SCLC PC3 CLR-1435 - uman prostată; derivat din situs metastatic: os Adenocarcinom de prostată DU145 HTB-81 uman prostată; derivat din situs metastatic: creier Carcinom de prostată 22Rv 1 CRL-2505 uman prostată Carcinom de prostată * Colecţia europeană de culturi celulare
Celulele HT1080 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5% CO2 în Minimum Essential Medium Eagle (MEME) (Sigma-Aldrich, Co). Fiecare animal a fost implantat ortotopic în muşchiul gastroecnemian printr-o injecţie intramusculară folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc la vârsta de 4-6 săptămâni, cu 10×106 Celule HT1080, suspendate în mediu fără ser, fără antibiotice.
Celulele MDA-MB-231 au fost menţinute in vitro la 37°C cu 5% CO2 în Dulbecco's Modified Eagle's Medium (Sigma-Aldrich, Co). Celulele de cultură au fost trecute la fiecare 3 până la 5 zile la atingerea confluenţei. Fiecare animal a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 7,5×106 celule MDA-MB-231 suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice.
Celulele H460 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5% CO2 în mediu Dulbecco's Modified Eagle's (Sigma-Aldrich, Co). Celulele de cultură au fost trecute la fiecare 3 până la 5 zile după atingerea confluenţei. Fiecare animal a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 5×106 celule H460 suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice.
Celulele A2780 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5% CO2 în RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Celulele de cultură au fost trecute la fiecare 3 până la 5 zile după atingerea confluenţei. Fiecare animal a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 10×106 celule A2780 suspendate în 0,05 ml de soluţie constând din 50% Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice.
Celulele HGC27 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5% CO2 în mediu Dulbecco modificat Iscove (Sigma Aldrich, Co). Celulele de cultură au fost trecute la fiecare 3 până la 5 zile la atingerea confluenţei. Fiecare animal a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 5×106 celule HGC-27 suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences), 50% mediu fără ser sau antibiotice.
Celulele H526 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5% CO2 în mediu RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Celulele H526 au fost crescute sub formă de suspensie şi menţinute prin adăugarea de mediu proaspăt, pe măsură ce densitatea celulară creşte, la fiecare 2 până la 3 zile. În fiecare săptămână, cultura a fost restabilită prin centrifugarea suspensiei cu resuspensie ulterioară în mediu proaspăt la o concentraţie de 1 x 105 celule/ml. Fiecare animal a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 5×106 celule H526 suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice.
Celulele H82 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5% CO2 în mediu RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Celulele H82 au fost crescute sub formă de suspensie şi menţinute prin adăugarea de mediu proaspăt, pe măsură ce densitatea celulară creşte, la fiecare 2 până la 3 zile. În fiecare săptămână, cultura a fost restabilită prin centrifugarea suspensiei cu resuspensie ulterioară în mediu proaspăt, la o concentraţie de 1 x 105 celule/ml. Animalele au fost implantate subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 5×106 celule H82, suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice.
Celulele PC3 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5 % CO2 în mediu RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Celulele de cultură au fost trecute la fiecare 3 până la 5 zile la atingerea confluenţei. Fiecare şoarece femelă atimic a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 3×106 celule PC3 suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® Matrix (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice. În acest model, în loc de masculi, au fost folosite animale femele, deoarece creşterea PC-3 nu este dependentă de hormoni.
Celulele DU-145 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5 % CO2 în mediu RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Celulele de cultură au fost trecute la fiecare 3 până la 5 zile la atingerea confluenţei. Fiecare şoarece mascul atimic a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 5×106 Celule DU-145 suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® Matrix (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice.
Celulele 22Rv1 au fost menţinute in vitro la 37 °C cu 5 % CO2 în mediu RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, Co). Celulele de cultură au fost trecute la fiecare 3 până la 5 zile la atingerea confluenţei. Fiecare şoarece mascul atimic a fost implantat subcutanat (pe flancul drept folosind un ac 26G şi o seringă de 1 cc) la vârsta de 4-6 săptămâni cu 5×106 celule 22Rv1 suspendate în 0,05 ml dintr-o soluţie constând din 50% Matrigel® Matrix (Corning Incorporated Life Sciences) şi mediu 50% fără ser sau antibiotice.
Tolerabilitatea tratamentului a fost evaluată prin monitorizarea evoluţiei greutăţii corporale, a semnelor clinice de toxicitate sistemică, precum şi a dovezilor de afectare locală la locul injectării.
În studiile de xenogrefă cu linie celulară HT1080:
• Măsurătorile diametrului total (tumoră + picior) au fost determinate folosind un şubler digital (Fowler Sylvac, S235PAT). Acest diametru total şi greutăţile corporale ale animalelor au fost măsurate de 2-3 ori pe săptămână începând din prima zi de tratament (ziua 0). • Atunci când diametrul total a atins o lungime de aproximativ 7,0-8,0 mm, şoarecii au fost alocaţi aleatoriu în grupurile de tratament şi cele martor (N = 8-10/grup) în funcţie de greutatea corporală şi măsurătorile tumorii, folosind software NewLab Oncology (versiunea 2.25.06.00). • Pentru evaluarea eficacităţii antitumorale a fost utilizată comparaţia dintre diametrul total median (tumoră + picior) în grupurile de tratament cu diametrul total median (tumoră + picior) în grupul de control. • Animalele au fost eutanasiate când diametrul total al picioarelor a ajuns la circa 18 mm. În studiile de xenogrefă cu alte linii celulare: • Volumul tumorii a fost calculat folosind ecuaţia (a·b2)/2, în care a: lungimea (diametrul cel mai lung) şi b: lăţimea (diametrul cel mai scurt) au fost măsurate în mm utilizând şublerul digital (Fowler Sylvac, S235PAT). Dimensiunile tumorii şi greutăţile corporale au fost înregistrate de 2-3 ori pe săptămână începând din prima zi de tratament. • Când tumorile au ajuns la circa 150-250 mm3, animalele purtătoare de tumori (N = 8-10/grup) au fost alocate aleatoriu în grupurile de tratament, pe baza greutăţii corporale şi a măsurătorilor tumorii utilizând NewLab Oncology Software (versiunea 2.25.06.00). • Pentru evaluarea eficacităţii antitumorale a fost utilizată comparaţia dintre volumul tumoral median al grupurilor tratate şi al grupului de control. • Animalele au fost eutanasiate când tumorile lor au ajuns la circa 2000 mm3 şi/sau a fost observată necroză severă. Tratamentele care produc >20% letalitate şi/sau 20% pierdere netă în greutate corporală au fost considerate toxice. Tabelele şi figurile însumează datele obţinute din grupuri experimentale complete, adică acele grupuri care păstrează numărul iniţial de animale, n = 8-10. Totuşi, odată ce primul animal este sacrificat din cauza unei lungimi a tumorii > 18 mm sau a unei dimensiuni a tumorii > 2000 mm3, grupul experimental va fi considerat incomplet. Prin urmare, datele generate ulterior zilei de sacrificiu şi ulterior nu vor fi prezentate (adică nici în tabele, nici în figuri).
Exemplul de referinţă 29. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-S şi 12-S în mai multe modele de xenogrefă 4-S, 12-S şi compusul C au fost furnizate sub formă de flacoane liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Dozele administrate de 4-S, 12-S şi compus C au fost 1,25 mg/kg, 0,25 mg/kg şi, respectiv, 3,0 mg/kg.
A fost furnizat placebo sub formă de turtă liofilizată cu conţinut de 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie.
În aceste experimente, 4-S, 12-S şi Compus C precum şi placebo, au fost administrate intravenos o dată pe săptămână timp de 3 săptămâni consecutive, în Zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil.
Exemplul de referinţă 29a. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-S şi 12-S în xenogrefe de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a lui 4-S şi 12-S cu activitate antitumorală a compusului C prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT1080,
Tabelul 12 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C , 4-S şi 12-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 1.
Tabel 12
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor Compus C 4-S 12-S 0,0 7,5 7,5 7,5 7,5 2,0 9,4 8,8 7,7 8,2 5,0 11,4 9,0 8,3 8,6 7,0 12,1 9,6 8,8 9,5 9,0 13,2 10,2 8,4 10,0 12,0 14,5 10,2 8,4 11,2 14,0 15,2 11,2 9,6 11,7 16,0 15,9 12,4 10,0 12,7 19,0 18,0 13,3 10,4 13,5 21,0 15,2 12,1 14,4 23,0 18,0 12,7 16,5 27,0 13,5 15,2 30,0 15,6 16,4 33,0 18,0
Exemplul de referinţă 29b. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-S şi 12-S în xenogrefele de sân uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a lui 4-S şi 12-S cu activitatea antitumorală a compusului C prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 13 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoareci trataţi cu placebo, compus C , 4-S şi 12-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 2.
Tabel 13
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus C 4-S 12-S 0,0 149,4 149,4 150,6 150,2 2,0 240,0 217,1 197,3 229,9 5,0 325,1 281,3 250,9 290,5 7,0 407,8 338,6 265,0 398,2 9,0 514,8 385,1 272,5 508,9 12,0 648,1 400,4 270,6 602,5 14,0 799,0 436,9 281,3 751,0 16,0 1002,5 585,7 293,6 977,7 19,0 1233,9 774,7 322,1 1252,6 21,0 1539,1 965,9 324,4 1560,7 23,0 2006,5 1215,2 326,6 2005,9 26,0 2027,7 1503,2 398,8 2066,2 28,0 1785,3 501,8 30,0 2037,1 654,8 33,0 856,7 35,0 1147,1 37,0 1635,9
Exemplul de referinţă 29c. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-S şi 12-S în xenogrefele tumorale pulmonare umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-S şi 12-S cu activitatea antitumorală a compusului C prin utilizarea a trei modele diferite de xenogrefă de cancer pulmonar uman. Aceste modele corespund cancerului pulmonar fără celule mici (linia celulară H-460) şi cancerului pulmonar cu celule mici (liniile celulare H526 şi H82).
Tabelul 14 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 3.
Tabel 14
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus C 4-S 12-S 0,0 187,4 186,1 185,9 186,0 2,0 577,5 395,4 310,9 460,5 5,0 1352,0 665,9 634,6 922,4 7,0 1642,9 929,5 959,1 1252,1 9,0 2025,0 1063,7 1064,9 1409,4 12,0 1436,5 1421,0 1531,7 14,0 2025,0 1845,5 2025,0 16,0 2025,0 2025,0
Tabelul 15 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H526 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 4.
Tabel 15
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus C 4-S 12-S 0,0 217,2 217,9 211,8 212,7 2,0 410,7 262,4 279,0 412,7 4,0 778,5 108,3 98,8 637,9 7,0 1083,2 129,8 56,7 968,5 9,0 1371,0 85,9 62,5 1250,3 11,0 1782,0 52,3 32,0 1568,0 14,0 2025,0 54,1 18,0 2025,0 16,0 47,3 32,0 21,0 4,0 4,0 28,0 4,0 4,0 35,0 4,0 4,0 42,0 62,5 4,0 49,0 53,5 4,0
Tabelul 16 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H82 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 5.
Tabel 16
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus C 4-S 12-S 0,0 171,6 170,5 168,3 174,0 2,0 439,4 265,3 215,2 360,1 5,0 1024,7 488,7 253,6 899,7 7,0 1422,0 760,0 341,4 1398,6 9,0 1923,8 899,5 349,4 1847,6 12,0 2025,0 1038,5 436,4 2089,7 14,0 1213,4 516,0 16,0 1256,4 521,8 19,0 1741,5 560,9 21,0 1878,8 627,7 23,0 2057,0 690,9 26,0 953,4 28,0 847,1 30,0 1067,5 33,0 1200,6 35,0 1257,7 37,0 1497,7 41,0 2014,2
Exemplul de referinţă 29d. Studii in vivo pentru a determina efectul compuşilor 4-S şi 12-S în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-S şi 12-S cu activitatea antitumorală a compusului C prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 17 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 6.
Tabel 17
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus C 4-S 12-S 0,0 169,5 169,6 168,3 168,5 2,0 317,5 206,3 150,6 262,1 5,0 758,9 372,7 175,9 628,6 7,0 1351,9 607,6 317,7 976,3 9,0 1675,8 696,2 281,9 1387,5 12,0 2025,0 855,6 372,1 1666,0 14,0 1293,9 709,2 2025,0 16,0 1683,5 870,9 19,0 2137,5 1235,4 21,0 1453,3 23,0 1666,0 26,0 2025,0
Exemplul de referinţă 29e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 4-S şi 12-S în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-S şi 12-S cu activitatea antitumorală a compusului C prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 18 raportează creşterea volumului tumorii la tumorile HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C, 4-S şi 12-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 7.
Tabel 18
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus C 4-S 12-S 0,0 200,7 195,0 194,8 196,6 2,0 429,0 391,0 358,6 411,9 5,0 835,5 578,6 515,3 834,1 7,0 1256,5 708,2 589,2 1176,6 9,0 1602,2 937,7 779,4 1531,6 12,0 2040,7 1169,5 980,8 2030,2 14,0 1496,8 1153,3 16,0 1690,6 1346,2 19,0 2004,0 1643,4 21,0 2004,7
Exemplul de referinţă 30. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-R în mai multe modele de xenogrefă
Compusul 4-R a fost furnizat în flacoane liofilizate. Turta de 4-R a fost reconstituită cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,5 mg/mL. Soluţia stoc de 4-R a fost diluată în continuare în soluţie de dextroză 5% pentru injectare până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de 4-R a fost de 0,30 mg/kg.
Compusul D a fost furnizat în formă de flacoane cu substanţă medicamentoasă. Fiecare flacon a fost reconstituit întâi prin dizolvare totală în DMSO şi apoi cu adăugare de Kolliphor ELP (BASF)/etanol absolut (1:1, vol/vol) la o concentraţie de 0,8 mg/mL. S-au făcut diluţii suplimentare cu o soluţie tampon de lactat (pH = 4,0) până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de compus D a fost de 0,5 mg/kg.
PM01183 a fost furnizat sub formă de flacoane de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,2 mg/ml. S-au făcut diluţii ulterioare cu soluţie injectabilă de glucoză 5% sau clorură de sodiu 0,9% la concentraţiile formulării de dozare. Doza administrată a fost de 0,18 mg/kg.
Placebo a fost furnizat sub formă de turtă liofilizată conţinând 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie.
În aceste experimente, 4-R, Compusul D şi PM01183, precum şi placebo, au fost administrate intravenos o dată pe săptămână timp de 3 săptămâni consecutive, în Zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil.
Exemplul de referinţă 30a. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-R în xenogrefele de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-R şi a Compusului D cu activitate antitumorală a PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT1080.
Tabelul 19 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 8.
Tabel 19
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor PM01183 4-R 0 8,1 8,1 8,1 2 11,2 9,7 8,6 7 13,6 11,2 8,7 9 15,2 12,3 9,0 14 16,9 14,6 9,3 18 18,1 15,6 10,3 21 15,1 11,5 23 16,3 13,3 25 18,0 15,8 28 18,0
Tabelul 20 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 9.
Tabel 20
Zile Diametru total (tumoare + leg) (mm) Martor PM01183 Compus D 0 7,8 7,7 7,7 2 11,0 9,2 9,5 5 14,0 9,8 8,8 7 15,0 12,2 8,7 9 18,0 12,6 9,4 12 13,1 9,4 14 14,6 10,1 16 14,5 10,9 19 15,0 11,2 21 18,0 12,1 23 13,0 26 15,0 28 18,0
Exemplul de referinţă 30b. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-R în xenogrefele de sân uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-R şi Compusului D cu activitatea antitumorală a PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul de tumoră utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 21 raportează evaluarea volumului de tumoră mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 10.
Tabel 21
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 4-R 0 130,6 129,3 129,3 7 230,7 189,0 151,9 14 422,2 230,1 164,1 21 687,7 305,9 136,8 28 1114,9 535,8 195,9 35 1555,3 819,7 294,2 42 2138,5 962,7 494,4 49 1301,3 843,8 52 2199,4 1042,5
Tabelul 22 raportează evaluarea volumului tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 11.
Tabel 22
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 Compus D 0 129,2 129,6 129,5 7 284,0 185,9 147,9 14 564,3 290,8 186,4 21 686,0 337,9 136,5 28 1068,6 507,4 290,7 35 1359,4 796,1 431,7 42 1533,7 1062,5 770,1 49 1653,1 1416,3 970,0 56 2029,3 1673,3 1461,9 63 2060,8 1811,9 1526,4
Exemplul de referinţă 30c. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 4-R în xenogrefele tumorale pulmonare umane.
Scopul acestui studiu a constat în a compara activitatea antitumorală a compusului 4-R şi Compusului D cu activitatea antitumorală a PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer pulmonar uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară H-460.
Tabelul 23 raportează evaluarea volumului tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 12.
Tabel 23
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 4-R 0 156,2 156,7 155,5 2 290,9 227,3 223,3 7 1323,8 940,4 737,8 9 1816,9 1210,3 861,0 11 2120,9 1433,8 1102,9 14 1529,5 1638,0 16 2028,6
Tabelul 24 raportează evaluarea volumului tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compusul D. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 13.
Tabel 24
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 Compus D 0 205,2 204,5 203,4 2 508,0 418,1 367,3 7 1355,8 1004,0 792,0 9 1682,1 1211,3 854,6 12 1938,6 1515,4 1026,7 14 2275,9 1633,3 1175,8 16 1723,9 1322,1 19 2112,3 1581,1 21 2409,4 1789,3 23 1966,5 26 2080,7
Exemplul de referinţă 30d. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 4-R în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-R şi Compusului D cu activitatea antitumorală a compusului PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 25 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 14.
Tabel 25
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 4-R 0 172,8 175,5 175,2 5 896,6 671,2 611,4 7 1415,3 1048,9 1036,5 12 2205,3 2020,3 1992,0 14 2165,3
Tabelul 26 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compusul D. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 15.
Tabel 26
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 Compus D 0 189,4 191,2 190,1 3 588,5 454,5 319,6 5 1086,0 772,1 514,4 7 1428,6 1161,5 897,4 10 2077,1 1615,6 1239,8 12 2163,1 1703,0 1656,2 14 2029,3 1951,7 17 2121,7 19 2068,6
Exemplul de referinţă 30e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 4-R în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-R şi Compusului D cu activitatea antitumorală a compusului PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 27 raportează creşterea volumului tumorii a tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 4-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 16.
Tabel 27
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 4-R 0 174,6 171,6 173,0 2 319,1 317,5 266,8 5 632,5 404,0 370,7 7 1046,0 485,7 418,5 9 1359,1 604,6 627,8 12 1863,8 760,8 713,5 14 2115,0 789,6 837,0 16 719,5 867,1 19 895,9 1040,2 21 1051,3 1229,8 26 1901,2 1784,5 28 2028,9 2073,6
Tabelul 28 raportează creşterea volumului tumorii a tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi Compus D. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 17.
Tabel 28
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 Compus D 0 142,3 169,5 157,4 2 286,5 372,4 327,6 5 527,7 474,1 439,6 7 821,4 571,8 418,7 9 1130,9 787,9 567,9 12 1547,8 951,1 537,0 14 1868,5 1064,4 654,6 16 1887,0 1346,1 672,4 19 2162,3 1691,8 843,0 21 1920,0 842,7 23 2011,4 963,7 26 2102,2 1203,3 28 1589,7 30 1777,6 33 2146,2
Exemplul de referinţă 31. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 12-R în mai multe modele de xenogrefă.
Compusul 12-R a fost furnizat sub formă de fiole de liofilizare. Compus turtă de 12-R a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,5 mg/mL. Soluţia stoc 12-R a fost diluată în continuare în soluţie de dextroză 5% pentru injectare până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de 12-R a fost de 0,05 mg/kg.
Compusul D a fost furnizat sub formă de flacoane cu substanţă medicamentoasă. Fiecare flacon a fost reconstituit mai întâi prin dizolvare totală în DMSO şi apoi cu adăugare de Kolliphor ELP (BASF)/etanol absolut (1:1, vol/vol) la o concentraţie de 0,8 mg/mL. S-au făcut diluţii suplimentare cu o soluţie tampon de lactat (pH = 4,0) până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de compus D a fost de 0,5 mg/kg.
Placebo a fost furnizat sub formă de turtă liofilizată care conţine 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie.
În aceste experimente, 12-R, Compus D, precum şi placebo, au fost administrate intravenos o dată pe săptămână, timp de 3 săptămâni consecutive, în Zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil.
Exemplul de referinţă 31a. Studii in vivo pentru a determina efectul lui 12-R în xenogrefe de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 12-R cu activitatea antitumorală a Compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT1080.
Tabelul 29 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 12-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 18.
Tabel 29
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor Compus D 12-R 0,0 7,5 7,5 7,5 2,0 9,4 8,2 8,9 5,0 11,4 7,5 8,8 7,0 12,1 7,4 9,5 9,0 13,2 8,1 9,5 12,0 14,5 7,9 11,0 14,0 15,2 7,7 11,7 16,0 15,9 8,8 12,9 19,0 18,0 10,2 13,5 21,0 11,2 15,5 23,0 12,2 18,0 27,0 13,2 30,0 14,6 33,0 16,3 35,0 18,0
Exemplul de referinţă 31b. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 12-R în xenogrefele de sân uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 12-R cu activitatea antitumorală a Compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 30 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 12-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 19.
Tabel 30
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus D 12-R 0,0 149,4 149,6 149,8 2,0 240,0 217,2 223,0 5,0 325,1 284,5 296,1 7,0 407,8 310,0 378,3 9,0 514,8 325,5 472,7 12,0 648,1 268,4 609,9 14,0 799,0 237,7 782,5 16,0 1002,5 261,2 972,4 19,0 1233,9 251,3 1211,0 21,0 1539,1 219,9 1463,4 23,0 2006,5 221,8 1756,5 26,0 2027,7 245,5 2028,6 28,0 320,3 30,0 401,6 33,0 545,8 35,0 629,2 37,0 670,7 40,0 669,9 42,0 696,3 44,0 798,1 47,0 857,7
Exemplul de referinţă 31c. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 12-R în xenogrefele tumorale pulmonare umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 12-R cu activitatea antitumorală a Compusului D prin utilizarea a trei modele diferite de xenogrefă de cancer pulmonar uman. Aceste modele corespund cancerului pulmonar fără celule mici (linia celulară H460 şi cancerului pulmonar cu celule mici (liniile celulare H526 şi H82).
Tabelul 31 raportează evaluarea volumului tumorilor H460 la şoareci trataţi cu placebo, Compus D şi 12-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 20.
Tabel 31
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus D 12-R 0,0 187,4 187,2 187,0 2,0 577,5 329,7 410,7 5,0 1352,0 559,4 796,7 7,0 1642,9 756,5 1167,9 9,0 2025,0 971,9 1360,3 12,0 1370,9 1666,0 14,0 1626,8 2025,0 16,0 2025,0
Tabelul 32 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H526 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 12-R. Rezultatele sunt prezentate de asemenea în Figura 21.
Tabel 32
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus D 12-R 0,0 217,20 216,1 214,20 2,0 410,70 240,9 404,50 4,0 778,50 99,3 680,50 7,0 1083,20 56,7 995,20 9,0 1371,00 62,5 1290,50 11,0 1782,00 62,5 1568,00 14,0 2025,00 32,0 2025,00 16,0 4,0 21,0 4,0 28,0 4,0 35,0 4,0 42,0 4,0 49,0 4,0
Tabelul 33 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H82 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 12-R. Rezultatele sunt prezentate de asemenea în Figura 22.
Tabel 33
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus D 12-R 0,0 171,60 169,4 170,50 2,0 439,40 340,6 381,40 5,0 1024,70 443,3 793,20 7,0 1422,00 496,2 1187,20 9,0 1923,80 614,1 1699,30 12,0 2025,00 665,5 2125,60 14,0 1041,6 16,0 1151,2 19,0 1516,7 21,0 1748,0
Exemplul de referinţă 31d. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 12-R în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 12-R cu activitatea antitumorală a Compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 34 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, Compus D şi 12-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 23.
Tabel 34
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus D 12-R 0,0 169,5 168,8 169,6 2,0 317,5 225,7 302,8 5,0 758,9 256,6 786,5 7,0 1351,9 473,8 1113,3 9,0 1675,8 633,6 1490,6 12,0 2025,0 822,8 2025,00 14,0 1129,3 2025,00 16,0 1198,6 19,0 1649,6 21,0 2025,0
Exemplul de referinţă 31e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 12-R în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 12-R cu activitatea antitumorală a Compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 35 raportează creşterea volumului tumorii la tumorile HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, Compus D şi 12-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 24.
Tabel 35
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor Compus D 12-R 0,0 200,7 194,0 193,3 2,0 429,0 324,2 413,3 5,0 835,5 561,6 809,1 7,0 1256,5 504,2 1261,5 9,0 1602,2 584,2 1589,5 12,0 2040,7 767,7 2017,9 14,0 1056,8 2034,9 16,0 1440,2 19,0 1717,9 21,0 2043,4
Exemplul de referinţă 32. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-S în mai multe modele de xenogrefă
Compusul 19-S a fost furnizat sub formă de flacoane liofilizate. Turta de compus 19-S a fost reconstituită cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,5 mg/mL. Soluţia stoc de 19-S a fost diluată în continuare în soluţie de dextroză 5 % pentru injectare până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de 19-S a fost de 0,75 mg/kg.
Compusul PM01183 a fost furnizat sub formă de flacoane de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,2 mg/ml. Soluţia stoc de PM01183 a fost diluată în continuare în soluţie de glucoză 5% pentru injectare la concentraţiile formulării de dozare. Doza administrată a fost de 0,18 mg/kg.
Placebo a fost furnizat sub formă de turtă liofilizată care conţine 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie.
În aceste experimente, compusul 19-S şi PM01183, precum şi placebo, au fost administrate intravenos o dată pe săptămână timp de 3 săptămâni consecutive, în Zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil.
Exemplul de referinţă 32a.Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-S în xenogrefele de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 19-S şi PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT1080.
În Tabelul 36 se raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 25.
Tabel 36
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor PM01183 19-S 0 8,4 8,4 8,2 2 10,9 9,8 8,4 5 14,8 9,7 7,8 7 15,9 11,4 9,5 9 18,0 12,7 9,9 12 13,7 10,7 14 14,6 11,3 16 15,5 11,9 19 15,6 13,4 21 18,0 14,4 23 18,0
Exemplul de referinţă 32b. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-S în xenogrefe de adenocarcinom mamar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 19-S şi PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 37 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 26.
Tabel 37
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-S 0 132,6 134,3 133,6 4 194,1 177,2 157,2 7 248,2 186,3 142,6 11 377,6 250,7 133,9 14 461,3 266,1 117,3 18 679,2 327,7 79,3 21 753,2 391,0 89,2 25 909,2 493,1 120,6 28 1090,7 627,3 144,4 32 1433,4 789,0 246,1 36 1887,5 1022,0 419,3 39 1785,2 1294,2 593,7 42 2081,5 1643,3 945,9 46 2137,5 1658,9 985,3 49 1938,0 1211,5 53 1324,3 56 1703,9 60 1793,3 63 1603,0 70 2324,2
Exemplul de referinţă 32c. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-S în xenogrefele de cancer pulmonar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 19-S şi PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer pulmonar uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară H-460.
Tabelul 38 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H-460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 27.
Tabel 38
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-S 0 197,0 196,3 196,9 2 529,5 457,0 364,0 4 1057,4 861,5 624,9 7 1582,5 1280,2 966,5 9 2094,8 1424,9 1078,2 11 1969,9 1449,0 14 1761,5
Exemplul de referinţă 32d. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-S în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 19-S şi PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 39 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 28.
Tabel 39
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-S 0 163,4 163,6 164,4 2 287,1 235,5 187,9 4 568,7 463,2 205,4 7 1211,3 986,3 513,6 9 1633,7 1451,4 650,6 11 2047,8 2062 659,8 14 1236,2 18 1575,9 23 1895,7 25 2177,0
Exemplul de referinţă 32e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-S în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 19-S şi PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 40 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-S. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 29.
Tabel 40
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-S 0 178,3 177,6 181,5 2 409 395,6 404,6 5 907,4 572,4 600,3 7 1283,6 766,6 660,3 9 1664 950,7 787,5 14 2102,8 1199,4 864,4 16 1353,1 882,4 19 1294,3 925,2 21 1335,1 893,6 23 1320,3 874,4 26 1364,5 932,1 30 1671,9 1547,8 33 2009,2 2020,4
Exemplul de referinţă 33. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-R în mai multe modele de xenogrefă
Compusul 19-R a fost furnizat în formă de flacoane liofilizate. Turta de 19-R a fost reconstituită cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,5 mg/mL. Soluţia stoc de 19-R a fost diluată în continuare în soluţie de dextroză 5 % pentru injectare până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de 19-R (de referinţă) a fost de 0,15 mg/kg.
Compusul PM01183 a fost furnizat în formă de flacoane de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,2 mg/ml. Soluţia stoc de PM01183 a fost diluată în continuare în soluţie de glucoză 5% pentru injectare la concentraţiile formulării de dozare. Doza administrată a fost de 0,18 mg/kg.
Compusul placebo a fost furnizat în formă de turtă liofilizată care conţine 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie.
În aceste experimente, compusul 19-R şi PM01183, precum şi placebo, au fost administrate intravenos o dată pe săptămână, timp de 3 săptămâni consecutive, în Zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil.
Exemplul de referinţă 33a. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-R în xenogrefele de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 19-R cu activitatea antitumorală a compusului PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT1080.
Tabelul 41 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT-1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 30.
Tabel 41
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor PM01183 19-R 0 8,4 8,4 8,3 2 10,9 9,8 9,4 5 14,8 9,7 8,0 7 15,9 11,4 7,2 9 18,0 12,7 7,8 12 13,7 7,8 14 14,6 8,4 16 15,5 8,2 19 15,6 11,3 21 18,0 12,2 23 13,3 26 15,2 28 18,0
Exemplul de referinţă 33b. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-R în xenogrefe de adenocarcinom mamar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 19-R cu activitatea antitumorală a compusului PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 42 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 31.
Tabel 42
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-R 0 132,6 134,3 132,5 4 194,1 177,2 189,3 7 248,2 186,3 151,9 11 377,6 250,7 167,5 14 461,3 266,1 152,6 18 679,2 327,7 162,2 21 753,2 391,0 201,2 25 909,2 493,1 208,5 28 1090,7 627,3 274,8 32 1433,4 789,0 355,8 36 1887,5 1022,0 513,8 39 1785,2 1294,2 793,7 42 2081,5 1643,3 1012,2 46 2137,5 1658,9 1188,5 49 1938,0 1380,7 53 1568,0 56 1862,6 60 2129,4
Exemplul de referinţă 33c. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-R în xenogrefele tumorale pulmonare umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 19-R cu activitatea antitumorală a compusului PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer pulmonar uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară H-460.
Tabelul 43 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 32.
Tabel 43
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-R 0 197,0 196,3 196,8 2 529,5 457,0 418,7 4 1057,4 861,5 697,2 7 1582,5 1280,2 911,7 9 2094,8 1424,9 1111,5 11 1969,9 1281,3 14 1478,7 16 1594,0
Exemplul de referinţă 33d. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 19-R în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 19-R cu activitatea antitumorală a compusului PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 44 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 33.
Tabel 44
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-R 0 163,4 163,6 162,8 2 287,1 236,5 212,9 4 568,7 463,2 368,5 7 1211,3 986,3 841,3 9 1633,7 1451,4 1138,9 11 2047,8 2062,0 1519,9 14 2056,0
Exemplul de referinţă 33e. Studii in vivo pentru a determina efectul 19-R în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 19-R cu activitatea antitumorală a compusului PM01183 prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 45 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor HGC-27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 şi 19-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 34.
Tabel 45
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 19-R 0 178,3 177,6 182,0 2 409,0 395,6 414,9 5 907,4 572,4 735,0 7 1283,6 766,6 901,2 9 1664,0 950,7 1048,1 14 2102,8 1199,4 1293,9 16 1353,1 1488,8 19 1294,3 1668,3 21 1335,1 1845,0 23 1320,3 2025,0 26 1364,5 30 1671,9 33 2009,2
Exemplul 34. Studii in vivo pentru a determina efectul 39-S în mai multe modele de xenogrefă.
Compusul 39-S şi C (de referinţă) au fost furnizaţi sub formă de flacoane liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Dozele administrate de 39-S şi C (de referinţă) au fost 1,25 şi, respectiv, 3 mg/Kg.
A fost furnizat placebo sub formă de flacoane cu produs liofilizat. Fiecare flacon (zaharoză 200 mg + fosfat diacid de potasiu 13,6 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5) a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile (2 ml). S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5%.
În aceste experimente,compusul 39-S şi compusul C (de referinţă), precum şi placebo, au fost administrate intravenos într-un program săptămânal la un volum de 10 ml/Kg.
Exemplul 34a. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 39-S în xenogrefele de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a evalua activitatea antitumorală a compusului 39-S prin comparaţie cu activitatea antitumorală a compusului C (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT1080.
Tabelul 46 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C (de referinţă) şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 35.
Tabel 46
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor 39-S Compus C 0 7,5 7,5 7,5 2 9,4 7,9 8,8 5 11,4 6,4 9,0 7 12,1 6,8 9,6 9 13,2 6,9 10,2 12 14,5 6,6 10,2 14 15,2 6,4 11,2 16 15,9 6,8 12,4 19 18,0 7,0 13,3 21 7,0 15,2 23 8,5 18,0 27 10,8 30 12,5 33 14,3 35 15,3 37 18,0
Exemplul 34b. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 39-S în xenogrefe de adenocarcinom mamar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 39-S şi compusului C (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 47 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoareci trataţi cu placebo, compus C (de referinţă) şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 36.
Tabel 47.
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 39-S Compus C 0 149,4 151,0 149,4 2 240,0 209,3 217,1 5 325,1 290,9 281,3 7 407,8 301,8 338,6 9 514,8 300,8 385,1 12 648,1 278,7 400,4 14 799,0 249,7 436,9 16 1002,5 243,6 585,7 19 1233,9 248,3 774,7 21 1539,1 250,0 965,9 23 2006,5 260,3 1215,2 26 2027,7 304,9 1503,2 28 337,1 1785,3 30 451,3 2037,1 33 584,1 35 683,4 37 784,7 40 937,4 42 1060,5 44 1170,5 47 1112,9 49 1138,6 51 1283,2 54 1415,1 56 1518,7 58 1728,5 61 2017,9
Exemplul 34c. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 39-S în xenogrefele de cancer pulmonar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 39-S cu activitatea antitumorală a compusului C (de referinţă) prin utilizarea a trei modele diferite de xenogrefă de cancer pulmonar uman. Aceste modele corespund cancerului pulmonar fără celule mici (linia celulară H-460) şi cancerului pulmonar cu celule mici (liniile celulare H526 şi H82).
Tabelul 48 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C (de referinţă) şi compus 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 37.
Tabel 48
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 39-S Compus C 0 187,4 187,8 186,1 2 577,5 314,4 395,4 5 1352,0 584,1 665,9 7 1642,9 831,2 929,5 9 2025,0 841,0 1063,7 12 1008,0 1436,5 14 1309,8 2025,0 16 1470,0 2025,0 19 2025,0
Tabelul 49 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H526 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C (de referinţă) şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 38.
Tabel 49
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 39-S Compus C 0 217,2 214,5 217,9 2 410,7 260,3 262,4 4 778,5 80,0 108,3 7 1083,2 46,2 129,8 9 1371,0 32,0 85,9 11 1782,0 32,0 52,3 14 2025,0 4,0 54,1 16 4,0 47,3 21 4,0 4,0 28 4,0 4,0 35 4,0 4,0 42 4,0 62,5 49 4,0 53,5 56 4,0 70,0 63 4,0 132,3 70 4,0 368,5 77 4,0 465,8 84 4,0 107,4 91 4,0 130,0 98 4,0 4,0 105 4,0 4,0 112 4,0 4,0 119 4,0 4,0 126 4,0 4,0 133 4,0 4,0 140 4,0 4,0 147 4,0 4,0 165 4,0 4,0 175 4,0 4,0 191 4,0 4,0 205 4,0 4,0
Tabelul 50 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H82 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C (de referinţă) şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 39.
Tabel 50.
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 39-S Compus C 0 171,6 170,3 170,5 2 439,4 325,2 265,3 5 1024,7 430,8 488,7 7 1422,0 466,2 760,0 9 1923,8 544,3 899,5 12 2025,0 640,3 1038,5 14 711,2 1213,4 16 802,7 1256,4 19 916,0 1741,5 21 1047,2 1878,8 23 1189,1 2057,0 26 1497,2 28 1741,8 30 1731,7 33 2029,4
Exemplul 34d. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 39-S în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 39-S cu activitatea antitumorală a compusului C (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 51 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, compus C (de referinţă) şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 40.
Tabel 51
Zi Volumul median al tumorii (mm3) Martor 39-S Compus C 0 169,5 170,5 169,6 2 317,5 206,5 206,3 5 758,9 163,4 372,7 7 1351,9 298,6 607,6 9 1675,8 317,4 696,2 12 2025,0 378,2 855,6 14 668,5 1293,9 16 853,5 1683,5 19 1415,5 2137,5 21 1519,2 23 1666,0 30 2025,0
Exemplul 34e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 39-S în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 39-S cu activitatea antitumorală a compusului C (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 52 raportează creşterea volumului tumorii a tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, compus C (de referinţă) şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 41.
Tabel 52
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 39-S Compus C 0 200,7 195,6 195,0 2 429,0 356,3 391,0 5 835,5 469,7 578,6 7 1256,5 467,8 708,2 9 1602,2 575,2 937,7 12 2040,7 611,1 1169,5 14 637,3 1496,8 16 690,4 1690,6 19 701,8 2004,0 21 697,4 1741,4 23 715,5 2056,4 26 898,1 28 1163,4 30 1409,3 33 1450,5 35 1708,5 37 1804,4 40 2075,2
Exemplul de referinţă 35. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 47-R în mai multe modele de xenogrefă.
Compusul 47-R a fost furnizat sub formă de fiole liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de 47-R a fost de 0,1 mg/Kg.
Compusul D a fost furnizat sub formă de substanţă medicamentoasă sub formă de pulbere. Fiecare flacon a fost reconstituit mai întâi prin dizolvare totală în DMSO (Fisher) şi apoi adăugare de Kolliphor ELP (Basf)/etanol absolut (Merk) (1:1, vol/vol) la o concentraţie de 0,8 mg/mL. S-au făcut diluţii suplimentare cu o soluţie tampon de lactat (pH = 4,0) până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de Compus D a fost de 0,5 mg/Kg.
Placebo a fost furnizat sub formă de flacoane cu produs liofilizat. Fiecare flacon (zaharoză 200 mg + fosfat diacid de potasiu 13,6 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5) a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile (2 ml). S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5%.
În aceste experimente, compusul 47-R şi compusul D, precum şi placebo, au fost administrate intravenos pe un program săptămânal la un volum de 10 ml/Kg.
Exemplul de referinţă 35a. Studii in vivo pentru a determina efectul 47-R în xenogrefe de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a evalua activitatea antitumorală a compusului 47-R prin comparaţie cu activitatea antitumorală a compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT1080.
Tabelul 53 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 47-R. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 42.
Tabel 53
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor 47-R Compus D 0 7,5 7,5 7,5 2 9,4 8,9 8,2 5 11,4 10,1 7,5 7 12,1 10,5 7,4 9 13,2 11,5 8,1 12 14,5 13,5 7,9 14 15,2 13,9 7,7 16 15,9 14,6 8,8 19 18,0 18,0 10,2 21 11,2 23 12,2 27 13,2 30 14,6 33 16,3 35 18,0
Exemplul de referinţă 35b. Studii in viv pentru a determina efectul compusului 47-R în xenogrefe de adenocarcinom mamar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 47-R şi compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 54 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 47-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 43.
Tabel 54
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 47-R Compus D 0 149,4 150,5 149,6 2 240,0 225,3 217,2 5 325,1 323,2 284,5 7 407,8 405,0 310,0 9 514,8 495,9 325,5 12 648,1 594,1 268,4 14 799,0 769,5 237,7 16 1002,5 1009,5 261,2 19 1233,9 1298,0 251,3 21 1539,1 1580,7 219,9 23 2006,5 2006,5 221,8 26 2027,7 2032,1 245,5 28 320,3 30 401,6 33 545,8 35 629,2 37 670,7 40 669,9 42 696,3 44 798,1 47 857,7 49 870,7 51 925,8 54 1005,4 56 1064,2 58 1235,6 61 1367,8 63 1553,7 65 2017,9
Exemplul de referinţă 35c. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 47-R în xenogrefe de cancer pulmonar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 47-R cu activitatea antitumorală a compusului D prin utilizarea a trei modele diferite de xenogrefă de cancer pulmonar uman. Aceste modele corespund cancerului pulmonar fără celule mici (linia celulară H-460) şi cancerului pulmonar cu celule mici (liniile celulare H526 şi H82).
Tabelul 55 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 47-R. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 44.
Tabel 55
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 47-R Compus D 0 187,4 185,8 187,2 2 577,5 508,1 329,7 5 1352,0 979,3 559,4 7 1642,9 1280,0 756,5 9 2025,0 1543,1 971,9 12 1764,0 1370,9 14 1845,5 1626,8 16 2025,0
Tabelul 56 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H526 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 47-R. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 45.
Tabel 56
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 47-R Compus D 0 217,2 211,5 216,1 2 410,7 367,9 240,9 4 778,5 583,7 99,3 7 1083,2 941,7 56,7 9 1371,0 1305,2 62,5 11 1782,0 1484,7 62,5 14 2025,0 2025,0 32,0 16 4,0 21 4,0 28 4,0 35 4,0 42 4,0 49 4,0 56 4,0 63 4,0 70 4,0 77 4,0 84 4,0 91 4,0 98 4,0 105 4,0 112 4,0 119 4,0 126 4,0 133 4,0 140 4,0 147 4,0 165 4,0 175 4,0 191 4,0 205 4,0
Tabelul 57 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H82 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi compus 47-R. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 46.
Tabel 57.
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 47-R Compus D 0 171,6 169,0 169,4 2 439,4 371,6 340,6 5 1024,7 888,8 443,3 7 1422,0 1314,2 496,2 9 1923,8 1811,0 614,1 12 2025,0 2055,4 665,5 14 1041,6 16 1151,2 19 1516,7 21 1748,0
Exemplul de referinţă 35d. Studii in vivo pentru a determina efectul 47-R în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 47-R cu activitatea antitumorală a compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 58 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoareci trataţi cu placebo, compus D şi 47-R. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 47.
Tabel 58
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 47-R Compus D 0 169,5 170,6 168,8 2 317,5 280,6 225,7 5 758,9 653,9 256,6 7 1351,9 848,7 473,8 9 1675,8 1569,1 633,6 12 2025,0 1764,0 822,8 14 1666,0 1129,3 16 2025,0 1198,6 19 1649,6 21 2025,0
Exemplul de referinţă 35e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 47-R în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 47-R cu activitatea antitumorală a compusului D prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 59 raportează creşterea volumului tumorii a tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, compus D şi 47-R. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 48.
Tabel 59
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 47-R Compus D 0 200,7 194,0 194,0 2 429,0 359,4 324,2 5 835,5 774,8 561,6 7 1256,5 1155,4 504,2 9 1602,2 1474,7 584,2 12 2040,7 1870,2 767,7 14 2031,3 1056,8 16 2075,2 1440,2 19 1717,9 21 2043,4
Exemplul 36. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 32 în mai multe modele de xenogrefă.
Au fost furnizaţi compuşii 32 şi ET-736 în formă de flacoane liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de compus 32 şi ET-736 a fost de 0,5 mg/Kg.
A fost furnizat Placebo sub formă de produs liofilizat. Fiecare flacon (zaharoză 200 mg + fosfat diacid de potasiu 13,6 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5) a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile (2 ml). S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5%.
În aceste experimente, compusul 32 şi ET-736, precum şi placebo, au fost administrate intravenos la un program săptămânal la un volum de 10 ml/Kg.
Exemplul 36a. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 32 în xenogrefele de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a evalua activitatea antitumorală a compusului 32 prin comparaţie cu activitatea antitumorală a compusului ET-736 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT-1080,
Tabelul 60 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + picior) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 (de referinţă) şi 32. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 49.
Tabel 60
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor 32 ET-736 0 7,5 7,5 7,4 2 9,4 8,9 8,3 5 11,4 8,2 7,1 7 12,1 8,8 7,6 9 13,2 10,0 7,4 12 14,5 8,8 7,0 14 15,2 10,8 7,1 16 15,9 11,8 7,4 19 18,0 12,0 8,4 21 14,0 8,6 23 13,8 10,0 27 13,6 10,9 30 15,5 13,2 33 18,0 14,3 35 15,2 37 15,8 40 16,6 42 18,0
Exemplul 36b. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 32 în xenogrefe de adenocarcinom mamar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 32 şi ET-736 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 61 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 (de referinţă) şi 32. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 50.
Tabel 61
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 32 ET-736 0 149,4 150,2 150,0 2 240,0 233,6 237,7 5 325,1 310,6 302,1 7 407,8 386,1 364,9 9 514,8 437,5 404,6 12 648,1 493,4 395,4 14 799,0 560,3 398,3 16 1002,5 649,5 447,2 19 1233,9 853,0 485,0 21 1539,1 1017,5 536,3 23 2006,5 1263,2 669,8 26 2027,7 1487,7 778,9 28 1726,6 1046,1 30 1892,6 1315,9 33 2082,8 1664,9 35 2007,7
Exemplul 36c. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 32 în xenogrefele de cancer pulmonar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 32 şi ET-736 (referinţă) prin utilizarea a trei modele diferite de xenogrefă de cancer pulmonar uman. Aceste modele corespund cancerului pulmonar fără celule mici (linia celulară H-460) şi cancerului pulmonar cu celule mici (liniile celulare H526 şi H82).
Tabelul 62 prezintă evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 (de referinţă) şi 32. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 51.
Tabel 62
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 32 ET-736 0 187,4 183,9 185,8 2 577,5 455,2 457,8 5 1352,0 784,8 732,8 7 1642,9 837,4 930,1 9 2025,0 1044,3 1207,2 12 2025,0 1452,4 1568,0 14 1845,5 1845,5 16 2025,0 2025,0
Tabelul 63 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H526 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 (de referinţă) şi 32. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 52.
Tabel 63
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 32 ET-736 0 217,2 212,1 213,5 2 410,7 277,3 240,5 4 778,5 127,0 97,2 7 1083,2 95,0 48,8 9 1371,0 63,1 62,5 11 1782,0 62,5 62,5 14 2025,0 62,5 47,3 16 62,5 32,0 21 4,0 4,0 28 4,0 4,0 35 55,3 4,0 42 85,3 4,0 49 185,6 4,0 56 169,1 4,0 63 62,5 4,0 70 88,9 4,0 77 280,6 4,0 84 694,2 199,8 91 1150,9 786,5
Tabelul 64 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H82 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 (de referinţă) şi 32. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 53.
Tabel 64
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 32 ET-736 0 171,6 171,6 170,0 2 439,4 309,4 334,4 5 1024,7 485,0 539,4 7 1422,0 708,4 836,4 9 1923,8 972,6 1013,1 12 2025,0 1101,6 1290,9 14 1339,6 1648,0 16 1430,3 19 1885,7
Exemplul 36d. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 32 în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 32 şi ET-736 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 65 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, compusul ET-736 (de referinţă) şi 32. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 54.
Tabel 65
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 32 ET-736 0 169,5 168,6 168,8 2 317,5 262,9 251,2 5 758,9 572,7 382,6 7 1351,9 997,5 676,1 9 1675,8 1359,9 959,4 12 2025,0 1715,0 1241,5 14 2025,0 1582,7 16 2025,0 1646,4 19 1845,5 21 2025,0
Exemplul 36e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 32 în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 32 şi ET-736 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 66 raportează creşterea volumului tumorii la tumorile HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, ET-736 (de referinţă) şi 32. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 55.
Tabel 66
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 32 ET-736 0 200,7 194,8 195,9 2 429,0 386,3 359,2 5 835,5 551,3 537,6 7 1256,5 579,2 553,5 9 1602,2 665,8 604,7 12 2040,7 701,1 627,4 14 814,5 648,0 16 959,9 687,6 19 1312,4 760,0 21 1626,8 792,4 23 1737,3 818,9 26 1026,1 28 1354,9
Exemplul 37. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 35 (de referinţă) în mai multe modele de xenogrefă.
Compusul 35 a fost furnizat sub formă de flacoane liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de compus 35 a fost 0,25 mg/Kg.
PM01183 (de referinţă) a fost furnizat sub formă de flacoane de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii ulterioare cu soluţie injectabilă de glucoză 5% sau clorură de sodiu 0,9% până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de PM01183 (de referinţă) a fost 0,18 mg/Kg.
Placebo a fost furnizat sub formă de flacoane cu produs liofilizat, fiecare flacon (zaharoză 200 mg + fosfat diacid de potasiu 13,6 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5) a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile (2 mL). S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5%.
În acest experiment, compusul 35 şi PM01183 (de referinţă), precum şi placebo au fost administrate intravenos pe un program săptămânal la un volum de 10 ml/Kg.
Exemplul 37a. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 35 în xenogrefele de fibrosarcom uman.
Scopul acestui studiu a fost de a evalua activităţile antitumorale ale compusului 35 şi PM01183 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de sarcom uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară HT-1080.
Tabelul 67 raportează evaluarea diametrului total (tumoră + leg) a tumorilor HT1080 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 (de referinţă) şi 35. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 56.
Tabel 67
Zile Diametru total (tumoare + picior) (mm) Martor PM01183 35 0 8,4 8,4 8,3 2 10,9 9,8 9,4 5 14,8 9,7 8,7 7 15,9 11,4 8,0 9 18,0 12,7 9,9 12 13,7 11,4 14 14,6 12,5 16 15,5 13,2 19 15,6 14,6 21 18,0 15,7 23 18,0
Exemplul 37b. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 35 în xenogrefe de adenocarcinom mamar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 35 şi PM01183 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de sân uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară MDA-MB-231.
Tabelul 68 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor MDA-MB-231 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 (de referinţă) şi 35. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 57.
Tabel 68
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 35 PM01183 0 132,6 132,7 134,3 4 194,1 193,6 177,2 7 248,2 179,1 186,3 11 377,6 276,7 250,7 14 461,3 286,0 266,1 18 679,2 384,5 327,7 21 753,2 436,8 391,0 25 909,2 554,3 493,1 28 1090,7 647,0 627,3 32 1433,4 817,5 789,0 36 1887,5 1156,7 1022,0 39 1785,2 1387,6 1294,2 42 2081,5 1595,3 1643,3 46 2137,5 1689,9 1658,9 49 2044,2 1938,0
Exemplul 37c. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 35 în xenogrefele de cancer pulmonar uman.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 35 şi PM01183 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer pulmonar uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară H460.
Tabelul 69 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor H460 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 (de referinţă) şi 35. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 58.
Tabel 69
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 35 0 197,0 196,3 197,2 2 529,5 457,0 415,3 4 1057,4 861,5 750,8 7 1582,5 1280,2 1242,3 9 2094,8 1424,9 1536,3 11 1969,9 1728,7 14 2080,9
Exemplul 37d. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 35 în xenogrefele tumorale ovariene umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 35 şi PM01183 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer ovarian uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost A2780.
Tabelul 70 raportează evaluarea volumului tumorilor A2780 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 (de referinţă) şi 35. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 59.
Tabel 70
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor PM01183 35 0 163,4 163,6 163,6 2 287,1 236,5 189,9 4 568,7 463,2 284,3 7 1211,3 986,3 606,4 9 1633,7 1451,4 946,9 11 2047,8 2062,0 1394,2 14 2067,7
Exemplul 37e. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 35 în xenogrefele tumorale gastrice umane.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activităţile antitumorale ale compusului 35 şi PM01183 (de referinţă) prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer gastric uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost HGC27.
Tabelul 71 raportează creşterea în volum a tumorilor HGC27 la şoarecii trataţi cu placebo, PM01183 (de referinţă) şi 35. Aceste rezultate sunt prezentate de asemenea în Figura 60.
Tabel 71
Zile Volumul median al tumorii (mm3) Martor 35 PM01183 0 178,3 182,3 177,6 2 409,0 382,2 395,6 5 907,4 610,8 572,4 7 1283,6 775,5 766,6 9 1664,0 988,0 950,7 12 1692,4 1005,6 972,0 14 2102,8 1531,7 1199,4 16 1866,3 1353,1
Exemplul de referinţă 38. Studii in vivo pentru a determina efectul compuşilor 12-S şi 12-R în xenogrefele de prostată umană.
Compuşii 12-S şi 12-R au fost furnizaţi sub formă de fiole liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Dozele administrate de compuşi 12-S şi 12-R au fost 0,25 mg/kg şi, respectiv, 0,05 mg/kg.
A fost furnizat placebo sub formă de turtă liofilizată care conţine 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie.
În aceste experimente, compuşii 12-S şi 12-R, precum şi placebo, au fost administraţi intravenos o dată pe săptămână timp de 3 săptămâni consecutive, în zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compuşilor 12-S şi 12-R prin utilizarea unui model de xenogrefă de cancer de prostată uman.
Modelul tumoral utilizat în acest studiu a fost linia celulară PC-3.
Tabelul 72 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor PC-3 la şoarecii trataţi cu placebo, 12-S şi 12-R. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 61.
Tabel 72
Volumul median al tumorii (mm3) Zile Martor 12-R 12-S 0 128,0 129,0 128,0 2 149,6 136,2 141,5 4 197,0 144,2 143,7 7 250,9 172,2 183,9 11 291,6 183,6 208,1 14 326,5 205,2 270,7 16 361,9 256,0 286,3 18 397,0 325,7 336,1 21 476,9 322,2 357,1 23 506,1 407,8 400,8 25 526,7 419,9 443,6 29 593,6 459,1 523,4 32 769,5 512,1 652,6 35 875,3 579,2 689,7 37 900,0 613,8 692,2 39 977,8 764,1 726,9 42 1061,5 785,0 823,7 44 1463,4 845,5 864,2 46 1612,8 748,0 1182,8 49 1809,2 808,7 1219,2 51 2030,9 855,8 1331,9 56 1125,2 1335,2
Exemplul de referinţă 39. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 4-S în xenogrefele de prostată umană.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 4-S prin utilizarea a trei modele diferite de xenogrefă de cancer de prostată uman. Aceste modele corespund liniilor celulare PC-3, DU-145 şi 22Rv1.
Compusul 4-S a fost furnizat sub formă de flacoane liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de 4-S a variat în funcţie de studiu, fiind de 1,25 mg/Kg când modelul tumoral era PC-3, 1,00 mg/Kg când modelul tumoral era DU-145 şi 0,75 mg/Kg când tumora era modelul era 22Rv1, respectiv.
Placebo a fost furnizat sub formă de turtă liofilizată care conţine 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie.
În aceste experimente, 4-S, precum şi placebo au fost administrate intravenos o dată pe săptămână timp de 3 săptămâni consecutive, în Zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil.
Tabelul 73 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor PC-3 la şoarecii trataţi cu placebo şi 4-S . Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 62.
Tabel 73
Volumul median al tumorii (mm3) Zile Martor 4-S 0 140,5 141,3 2 178,6 130,7 4 233,1 147,6 7 284,6 157,7 9 331,7 200,9 11 433,7 192,8 14 500,4 210,8 16 570,8 255,5 18 680,3 261,1 21 850,1 282,4 23 928,5 382,2 25 915,7 451,6 28 1187,5 611,1 30 1270,1 762,3 32 1327,1 821,6 35 1373,6 1045,6
Tabelul 74 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor DU-145 la şoarecii trataţi cu placebo şi 4-S . Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 63.
Tabel 74
Volumul median al tumorii (mm3) Zile Martor 4-S 0 127,4 126,2 3 180,9 102,4 5 248,8 119,5 7 320,4 149,5 10 384,6 216,8 12 441,0 181,4 14 519,6 237,7 17 601,0 204,4 19 660,8 210,9 24 740,7 300,0 26 798,6 378,4 28 587,0 31 650,3
Tabelul 75 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor 22Rv1 la şoarecii trataţi cu placebo şi 4-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 64.
Tabel 75
Volumul median al tumorii (mm3) Zile Martor 4-S 0 174,6 173,6 3 307,2 70,3 5 511,5 63,1 7 739,1 76,7 10 955,2 49,1 12 1286,1 59,8 14 1385,8 74,9 17 1791,1 55,1 19 2025,0 64,9 24 138,4 26 186,9 28 242,0 31 392,5 33 561,8 35 799,3 38 1107,0 40 1426,4 42 1685,5 45 2025,0
Exemplul 40. Studii in vivo pentru a determina efectul compusului 39-S în xenogrefele de prostată umană.
Scopul acestui studiu a fost de a compara activitatea antitumorală a compusului 39-S prin utilizarea a trei modele diferite de xenogrefă de cancer de prostată uman. Aceste modele corespund liniilor celulare PC-3, DU-145 şi 22Rv1. Compusul 39-S a fost furnizat sub formă de flacoane liofilizate de produs liofilizat. Fiecare flacon a fost reconstituit cu apă sterilă pentru preparate injectabile la o concentraţie de 0,5 mg/ml. S-au făcut diluţii suplimentare cu soluţie injectabilă de dextroză 5% până la concentraţia formulării de dozare. Doza administrată de 39-S a variat în funcţie de studiu, fiind de 1,25 mg/Kg când modelul tumoral a fost PC-3, 1,00 mg/Kg când modelul tumoral a fost DU-145 şi respectiv 0,75 mg/Kg când modelul tumoral a fost 22Rv1. Placebo a fost furnizat sub formă de turtă liofilizată care conţine 100 mg zaharoză + fosfat diacid de potasiu 6,8 mg + acid fosforic q.s. pH 3,8-4,5 care a fost reconstituit cu apă pentru perfuzie. În aceste experimente, compusul 39-S, precum şi placebo, au fost administrate intravenos o dată pe săptămână timp de 3 săptămâni consecutive, în Zilele 0, 7 şi 14, ori de câte ori a fost posibil. Tabelul 76 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor PC-3 la şoarecii trataţi cu placebo şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 65.
Tabel 76
Volumul median al tumorii (mm3) Zile Martor 39-S 0 181,9 182,3 2 254,8 222,6 4 308,7 244,0 7 344,5 269,3 9 396,8 295,8 11 439,2 315,0 14 542,7 356,9 16 619,0 388,0 18 721,3 400,1 21 908,1 503,3 23 1039,1 556,0 25 1117,0 579,6 28 1232,3 694,9 30 1778,6 811,1 32 2018,1 1027,1 35 1194,3 37 1495,0 39 1710,7 42 2066,2
Tabelul 77 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor DU-145 la şoarecii trataţi cu placebo şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 66.
Tabel 77
Volumul median al tumorii (mm3) Zile Martor 39-S 0 156,8 179,9 2 198,3 199,9 4 253,9 222,2 7 325,8 340,5 9 385,1 354,1 11 462,2 349,7 14 483,8 429,1 16 599,0 454,8 18 664,0 449,7 21 816,9 517,5 23 861,3 568,5 25 977,9 629,4 28 973,6 775,7
Tabelul 78 raportează evaluarea volumului tumoral mediu al tumorilor 22Rv1 la şoarecii trataţi cu placebo şi 39-S. Aceste rezultate sunt prezentate şi în Figura 67.
Tabel 78
Volumul median al tumorii (mm3) Zile Martor 39-S 0 174,6 173,5 3 307,2 93,0 5 511,5 96,8 7 739,1 115,2 10 955,2 108,2 12 1286,1 128,4 14 1385,8 155,6 17 1791,1 173,4 19 2025,0 210,2 24 358,8 26 456,5 28 645,2 31 1049,5 33 1439,4 35 2025,0

Claims (24)

1. Compus cu formula ID sau o sare sau ester ale acestuia acceptabil din punct de vedere farmaceutic:
în care: X este -O-; R1 este -OH sau -CN; R2 este o grupare -C(=O)Ra; R3 este hidrogen sau o grupare -ORb; R4 este ales dintre hidrogen, -CHzOH şi -CH2O-(C=O)Rc; Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; şi Rc este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit.
2. Compus conform revendicării 1 ales cu formula IDa sau IDb sau o sare sau ester al acestuia acceptabil din punct de vedere farmaceutic:
în care: X este -O-; R1 este -OH sau -CN; R2 este o grupare -C(=O)Ra ; R3 este hidrogen sau o grupare -ORb; R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2OC(=O)Rc; Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit ; Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; şi Rc este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit.
3. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1 sau 2 în care R4 este ales dintre -CHzOH şi -CH2O-(C=O)Rc în care Rc este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit.
4. Compus conform revendicării 3, în care Rc este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi terţ-butil substituit sau nesubstituit; preferabil în care Rc este metil.
5. Compus conform revendicării 3, în care R4 este -CHzOH.
6. Compus conform revendicării 1 cu formula IDc sau o sare sau ester al acestuia acceptabil din punct de vedere farmaceutic
în care R1 este-OH sau -CN; R2 este o grupare -C(=O)Ra; R3 este hidrogen sau o grupare -ORb; Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; şi Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit şi alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit.
7. Compus conform oricăreia dintre revendicările de la 1 la 6, în care R1 este -OH.
8. Compus conform oricăreia dintre revendicările de la 1 la 7, în care R2 este o grupare -C(=O)Ra în care Ra este alchil C1-C6 substituit sau nesubstituit; de preferinţă în care Ra este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi terţ-butil substituit sau nesubstituit.
9. Compus conform revendicării 8 în care R2 este acetil.
10. Compus conform oricăreia dintre revendicările de la 1 la 9, în care R3 este hidrogen sau -ORb în care Rb este alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit; preferabil în care Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi terţ-butil substituit sau nesubstituit.
11. Compus conform revendicării 10 în care R3 este hidrogen.
12. Compus conform revendicării 10 în care R3 este -ORb în care Rb este alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit; preferabil în care Rb este ales dintre metil substituit sau nesubstituit, etil substituit sau nesubstituit, n-propil substituit sau nesubstituit, izopropil substituit sau nesubstituit, n-butil substituit sau nesubstituit, izobutil substituit sau nesubstituit, sec-butil substituit sau nesubstituit şi terţ-butil substituit sau nesubstituit.
13. Compus conform revendicării 12 în care R3 este metoxi.
14. Compus conform revendicării 1 cu formula:
sau o sare sau ester al acestuia acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
15. Compus conform revendicării 1 cu formula
16. Compus conform revendicării 1 cu formula
sau o sare sau ester al acestuia acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
17. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1 la 16, în care sarea este aleasă dintre clorhidrat, bromhidrat, iodhidrat, sulfat, azotat, fosfat, acetat, trifluoracetat, maleat, fumarat, citrat, oxalat, succinat, tartrat, malat, mandelat, metansulfonat, p-toluensulfonat, sodiu, potasiu, calciu, amoniu, etilendiamină, etanolamină, N,N-dialchilenetanolamină, trietanolamină şi aminoacizi bazici.
18. Compoziţie farmaceutică care cuprinde un compus conform oricăreia dintre revendicările de la 1 la 17 sau o sare sau ester acceptabil din punct de vedere farmaceutic al acestuia şi un purtător acceptabil din punct de vedere farmaceutic.
19. Formă de dozare care cuprinde o compoziţie farmaceutică conform revendicării 18.
20. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1 până la 17 sau o sare sau ester acceptabil din punct de vedere farmaceutic al acestuia sau o compoziţie conform revendicării 18 sau o formă de dozare conform revendicării 19 pentru utilizare ca medicament.
21. Compus conform oricăreia dintre revendicările 1 până la 17 sau o sare sau ester acceptabil din punct de vedere farmaceutic al acestuia sau o compoziţie conform revendicării 18 sau o formă de dozare conform revendicării 19, pentru utilizare în tratamentul cancerului.
22. Compus, compoziţie sau formă de dozare pentru utilizare conform revendicării 21, în care cancerul este ales dintre cancerul pulmonar, inclusiv cancerul pulmonar fără celule mici şi cancerul pulmonar cu celule mici, cancerul de colon, cancerul colorectal, cancerul de sân, cancerul de pancreas, sarcomul, cancerul ovarian, cancerul de prostată şi cancerul gastric; de preferinţă, în care cancerul este ales dintre cancerul pulmonar incluzând cancerul pulmonar fără celule mici şi cancerul pulmonar cu celule mici, cancerul de sân, cancerul de pancreas şi cancerul colorectal.
23. Procedeu pentru obţinerea unui compus definit în oricare dintre revendicările de la 1 la 17 sau a unei sări sau ester acceptabil din punct de vedere farmaceutic al acestuia: care cuprinde etapa de reacţie a unui compus cu formula II cu un compus cu formula III pentru a se obţine un compus cu formula IV: în care (unde este permis de către posibilele grupări substituente): X este -O-; R2 este o grupare -C(=O)Ra ; R3 este hidrogen sau o grupare -ORb; R4 este ales dintre hidrogen, -CzOH şi -CH2OC(=O)Rc; Ra este ales dintre hidrogen, alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit, alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; Rb este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit, alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit ; şi Rc este ales dintre alchil C1-C12 substituit sau nesubstituit, alchenil C2-C12 substituit sau nesubstituit, alchinil C2-C12 substituit sau nesubstituit; şi opţional cuprinzând etapa ulterioară de înlocuire a grupării ciano din compusul cu formula IV cu o grupare hidroxi pentru a se obţine un compus cu formula ID, în care R1 este OH.
24. Kit care cuprinde o cantitate eficace terapeutic dintr-un compus conform oricăreia dintre revendicările 1 la 17 sau o sare sau ester acceptabil din punct de vedere farmaceutic al acestuia şi un purtător acceptabil din punct de vedere farmaceutic; kitul cuprinzând, în mod opţional, instrucţiuni de utilizare a compusului în tratamentul cancerului şi, mai preferabil, a unui cancer ales dintre cancerul pulmonar, inclusiv cancerul pulmonar cu celule mici şi cancerul pulmonar fără celule mici, cancerul de colon, cancerul de sân, cancerul de pancreas, sarcomul, cancerul ovarian, cancerul de prostată, cancerul colorectal şi cancerul gastric.
MDE20221377T 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali MD4101855T2 (ro)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17382228 2017-04-27
EP17382497 2017-07-26

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MD4101855T2 true MD4101855T2 (ro) 2023-12-31

Family

ID=62063080

Family Applications (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDE20200225T MD3615544T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali
MDE20181217 MD3395821T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali
MDE20181216 MD3395820T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali
MDE20220945T MD4047002T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali
MDE20221377T MD4101855T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali

Family Applications Before (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDE20200225T MD3615544T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali
MDE20181217 MD3395821T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali
MDE20181216 MD3395820T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali
MDE20220945T MD4047002T2 (ro) 2017-04-27 2018-04-27 Compuși antitumorali

Country Status (39)

Country Link
US (5) US10538535B2 (ro)
EP (5) EP4101855B9 (ro)
JP (5) JP6501946B2 (ro)
KR (3) KR102492283B1 (ro)
CN (4) CN110621678B (ro)
AU (4) AU2018260314C1 (ro)
BR (1) BR112019022282A2 (ro)
CA (1) CA3061518A1 (ro)
CL (1) CL2019003057A1 (ro)
CO (1) CO2019011967A2 (ro)
CY (3) CY1121884T1 (ro)
DK (5) DK4047002T3 (ro)
EC (1) ECSP19083967A (ro)
ES (5) ES2960063T3 (ro)
FI (3) FI4047002T3 (ro)
HK (2) HK1255938B (ro)
HR (5) HRP20230455T1 (ro)
HU (5) HUE046109T2 (ro)
IL (3) IL295044B2 (ro)
JO (1) JOP20190254A1 (ro)
LT (5) LT3395820T (ro)
MA (2) MA44020B1 (ro)
MD (5) MD3615544T2 (ro)
ME (2) ME03467B (ro)
MX (3) MX392601B (ro)
MY (1) MY198004A (ro)
PH (1) PH12019550224A1 (ro)
PL (5) PL4101855T3 (ro)
PT (2) PT3395821T (ro)
RS (5) RS59173B1 (ro)
SA (1) SA523440283B1 (ro)
SG (2) SG10201913300YA (ro)
SI (5) SI4101855T1 (ro)
SM (5) SMT202300343T1 (ro)
TN (2) TN2019000210A1 (ro)
TW (3) TWI742273B (ro)
UY (1) UY37706A (ro)
WO (1) WO2018197663A1 (ro)
ZA (1) ZA201907119B (ro)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JOP20190254A1 (ar) 2017-04-27 2019-10-27 Pharma Mar Sa مركبات مضادة للأورام
TWI824043B (zh) * 2018-10-25 2023-12-01 西班牙商瑪製藥股份有限公司 藥物抗體共軛物
PH12022551216A1 (en) * 2019-11-21 2023-07-17 Pharma Mar Sa Methods of treating small cell lung cancer with lurbinectedin formulations
JP2023522259A (ja) 2020-04-21 2023-05-29 ファルマ、マール、ソシエダード、アノニマ 薬物抗体コンジュゲート
TW202144369A (zh) * 2020-04-26 2021-12-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 海鞘素類衍生物及其製備方法與醫藥用途
AU2022277799A1 (en) 2021-05-19 2023-12-21 Pharma Mar, S.A. Dosage regimens for ecubectedin
WO2024186263A1 (en) * 2023-03-07 2024-09-12 Axcynsis Therapeutics Pte. Ltd. Antibody-drug conjugates comprising trabectedin and lurbinectedin derivatives
WO2025077996A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of ecteinascidin compounds
EP4563149A1 (en) 2023-11-30 2025-06-04 Pharma Mar, S.A. Lurbinectedin, ecubectedin and a related compound for use in the treatment of skin cancers
TW202532075A (zh) * 2024-02-08 2025-08-16 大陸商映恩生物製藥（蘇州）有限公司 海鞘素類化合物及其應用
WO2025228596A1 (en) 2024-04-30 2025-11-06 Pharma Mar, S.A. Combination of pm14 and a topoisomerase i inhibitor in the treatment of cancer
WO2025228594A1 (en) 2024-04-30 2025-11-06 Pharma Mar, S.A. Use of ecubectedin in the treatment of cancers including combination therapy with atezolizumab
WO2025228597A1 (en) 2024-04-30 2025-11-06 Pharma Mar, S.A. Combination of compound ia and a topoisomerase i inhibitor in the treatment of cancer
WO2025228595A1 (en) 2024-04-30 2025-11-06 Pharma Mar, S.A. Use of compound ia in the treatment of cancers including combination therapy with atezolizumab.
WO2025233522A1 (en) 2024-05-10 2025-11-13 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for an ecteinascidin

Family Cites Families (220)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3205220A (en) 1961-10-26 1965-09-07 Lilly Co Eli Leurosidine and leurocristine and their production
US4762949A (en) 1979-06-20 1988-08-09 University Of Illinois Foundation Acyl and carbamimidoyl alkanediamines
GB2058047B (en) 1979-07-11 1983-09-21 Asahi Chemical Ind Amides and amidines
FR2461995A1 (fr) 1979-07-20 1981-02-06 Lcc Cice Cie Europ Compo Elect Transducteur magneto-electrique pour systeme d'enregistrement magnetique, et systeme d'enregistrement comportant un tel transducteur
US5137870A (en) 1980-09-12 1992-08-11 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Didemnins and nordidemnins
DE3161556D1 (en) 1980-09-12 1984-01-05 Univ Illinois Novel antibiotics, derivatives thereof, processes for their extraction, and compositions containing them
US4782135A (en) 1980-09-12 1988-11-01 Board Of Trustees, University Of Illinois Composition of matter and process
US4493796A (en) 1980-09-12 1985-01-15 Board Of Trustees, Univ. Of Ill. Didemnins A, B, C, and derivatives thereof, as antiviral agents
US4950649A (en) 1980-09-12 1990-08-21 University Of Illinois Didemnins and nordidemnins
US4548814A (en) 1980-12-18 1985-10-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Composition of matter and process
JPS5922518A (ja) 1982-07-29 1984-02-04 余合住金産業株式会社 洋服タンス
IT1153974B (it) 1982-09-23 1987-01-21 Erba Farmitalia Composizioni farmacologiche a base di cisplatino e metodo per il loro ottenimento
US4855086A (en) 1982-10-15 1989-08-08 Burroughs Wellcome Co. Novel pesticides, preparation and use
US4537883A (en) 1982-11-12 1985-08-27 Mead Johnson & Company Lyophilized cyclophosphamide
JPS59225189A (ja) 1983-06-03 1984-12-18 Shionogi & Co Ltd キノナミン誘導体およびその製造法
US4631149A (en) 1983-07-25 1986-12-23 University Of Illinois Antiviral eudistomins from a marine tunicate
JPS6084288A (ja) 1983-10-13 1985-05-13 Shionogi & Co Ltd シアノキノナミンアセテ−ト類およびその製造法
US4567253A (en) 1984-02-03 1986-01-28 Tony Durst 2-Substituted derivatives of podophyllotoxin and etoposide
JPS61109717A (ja) 1984-11-02 1986-05-28 Teruhiko Beppu 抗腫瘍剤
HU201672B (en) 1984-12-28 1990-12-28 Conpharm Ab Process for producing pharmaceutical compositions comprising podophyllotoxin
US4644072A (en) 1985-04-12 1987-02-17 Bristol-Myers Company Intermediates for the production of epipodophyllotoxin and related compounds and processes for the preparation and use thereof
DE3684868D1 (de) 1985-09-20 1992-05-21 Cernitin Sa Verwendung von pflanzenpollenextrakten zur herstellung von das wachstum von tumorzellen hemmenden pharmazeutischen praeparaten und verfahren zu ihrer herstellung.
US4731377A (en) 1986-01-31 1988-03-15 Harbor Branch Oceanographic Institute, Inc. Antitumor cyclic peroxides
US5256663A (en) 1986-06-09 1993-10-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions comprising ecteinascidins and a method of treating herpes simplex virus infections therewith
US5089273A (en) 1986-06-09 1992-02-18 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 729, 743, 745, 759A, 759B and 770
US5149804A (en) 1990-11-30 1992-09-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 736 and 722
AU589282B2 (en) 1986-06-09 1989-10-05 University Of Illinois Ecteinascidins 729, 743, 745, 759a, 759b and 770
US4816450A (en) 1986-09-15 1989-03-28 Duke University Inhibition of protein kinase C by long-chain bases
US4737510A (en) 1986-09-30 1988-04-12 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Bioactive metabolites from the caribbean sponge agelas coniferin
US5093330A (en) 1987-06-15 1992-03-03 Ciba-Geigy Corporation Staurosporine derivatives substituted at methylamino nitrogen
US4847246A (en) 1987-09-11 1989-07-11 Wilson George R Antiviral compositions derived from fireflies and their methods of use
FR2623504B1 (fr) 1987-11-25 1990-03-09 Adir Nouveaux derives n-(vinblastinoyl-23) d'acide amino-1 methylphosphonique, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US5559145A (en) 1988-06-01 1996-09-24 Oxaco S.A. 1,2,4-trioxane derivatives
DE68903907T2 (de) 1988-09-05 1993-06-09 Sankyo Co Cyclisches peptid, seine herstellung und seine verwendung zur behandlung von cardiovasculaeren stoerungen.
WO1990005731A1 (en) 1988-11-24 1990-05-31 University Of Queensland Cytotoxic macromolecules
US5190876A (en) 1988-12-27 1993-03-02 Emory University Method of modifying cellular differentiation and function and compositions therefor
US5583160A (en) 1989-02-03 1996-12-10 The Biomembrane Institute Methylsphingosine used to treat apoptosis
CA2007507C (en) 1989-02-03 1998-05-19 Yasuyuki Igarashi Sphingosine and n-methyl-sphingosine as inhibitor of cell growth
US4948791A (en) 1989-04-10 1990-08-14 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Novel Cytotoxic cyclic depsipeptides from the tunicate trididemnum solidum
US4986988A (en) 1989-05-18 1991-01-22 Arizona Board Of Regents Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptides dolastatin 13 and dehydrodolastatin 13
GB8922026D0 (en) 1989-09-29 1989-11-15 Pharma Mar Sa Novel anti-viral and cytotoxic agent
US20030148933A1 (en) 1990-10-01 2003-08-07 Pharma Mar S.A. Derivatives of dehydrodidemnin B
US5053559A (en) 1989-12-29 1991-10-01 Oxaco S.A. Cleavage of 1,2,4-trioxanes
KR910014122A (ko) 1990-01-19 1991-08-31 디께다 가즈히꼬 에토포시드-2-디메틸아미노 화합물의 동결건조 제제
JPH0539283A (ja) 1991-01-31 1993-02-19 Suntory Ltd 新規物質Ｓ−５９９１７ａ及びその製造方法
US5721352A (en) 1991-02-19 1998-02-24 University Of Florida Research Foundation Entomopoxvirus expression system
DE4120327A1 (de) 1991-06-20 1992-12-24 Basf Ag Neue peptide, ihre herstellung und verwendung
US5336669A (en) 1991-12-10 1994-08-09 Erbamont, Inc. Cyclophosphamide monohydrate and lactose
JPH05247055A (ja) 1992-03-03 1993-09-24 Meiji Seika Kaisha Ltd スタウロスポリン誘導体及びそれを含有する抗腫瘍効果増強剤
GB9206244D0 (en) 1992-03-23 1992-05-06 Pharma Mar Sa Cytotoxic compound from a marine sponge
GB9212000D0 (en) 1992-06-05 1992-07-15 Univ Madrid Complutense New synthetic antitumoral compound
WO1994004541A2 (en) 1992-08-12 1994-03-03 The Upjohn Company Protein kinase inhibitors and related compounds combined with taxol
US5756734A (en) 1992-09-11 1998-05-26 Pharmamar, S.A. Crambescidins: new antiviral and cytotoxic compounds from the sponge crambe crambe
ES2059259B1 (es) 1992-09-22 1995-10-01 Pharma Mar S A Pharmar Procedimiento de obtencion de nuevos areno (e)indoles utiles como intermedios en la sintesis de productos con actividad antitumoral.
US5580871A (en) 1992-11-20 1996-12-03 The Dupont Merck Pharmaceutical Company 4-Heteroaryl- 1,4-dihydropyridine compounds with calcium agonist and alpha1 -antagonist activity
US6274551B1 (en) 1994-02-03 2001-08-14 Pharmamar, S.A. Cytotoxic and antiviral compound
GB9302046D0 (en) 1993-02-03 1993-03-24 Pharma Mar Sa Antiumoral compound-v
GB9302044D0 (en) 1993-02-03 1993-03-24 Pharma Mar Sa Cytotoxic compounds i
US5569757A (en) 1993-03-30 1996-10-29 Rinehart; Kenneth L. 9-deazaadenosine and its 5'-α-D-glycopyranoside isolated from the cyanobacterium anabaena affinis strain VS-1
GB9308111D0 (en) 1993-04-20 1993-06-02 Pharma Gen S A Active compound from a stonge
US5556777A (en) 1993-09-09 1996-09-17 Pharmamar, S.A. Immunosuppressive pharmaceutical compositions new biological activity from a marine agrobacterium sp.
US5478932A (en) 1993-12-02 1995-12-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins
US5462726A (en) 1993-12-17 1995-10-31 Bristol-Myers Squibb Company Method of inhibiting side effects of solvents containing ricinoleic acid or castor oil or derivatives thereof employing a thromboxane A2 receptor antagonist and pharmaceutical compositions containing such solvents
US5514708A (en) 1994-02-18 1996-05-07 Pharmamar, S.A. Cytotoxic metabolites from Myriapora truncata
US20040059112A1 (en) 1994-02-18 2004-03-25 Rinehart Kenneth L. Ecteinascidins
US5681813A (en) 1994-04-06 1997-10-28 Pharma Mar, S.A. Thiodepsipeptide isolated from a marine actinomycete
ES2100124B1 (es) 1994-08-01 1998-04-01 Pharma Mar Sa Perfeccionamientos introducidos en la p.i. 9401697 por terpeno-quinonas con actividad antitumoral.
US5514705A (en) 1994-09-07 1996-05-07 Pharmamar, S.A. Epidioxymanadic acids A and B
US5523456A (en) 1994-09-29 1996-06-04 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
GB9422947D0 (en) 1994-11-14 1995-01-04 Univ Salamanca Immunosuppressive cyclolignan derivatives
GB9422946D0 (en) 1994-11-14 1995-01-04 Univ Salamanca Antineoplastic cyclolignan derivatives
GB9504662D0 (en) 1995-03-08 1995-04-26 Pharma Mar Sa Antitumour isocoumarins
US20010039041A1 (en) 1995-06-07 2001-11-08 Pharma Mar, S.A. Immunosuppressive sesbanimide compositions and methods of treatment using same
US5661175A (en) 1995-06-20 1997-08-26 Kashman; Yoel Hemiasterlin and geodiamolide TA
US5852033A (en) 1995-06-29 1998-12-22 Pharma Mar, S.A. Methods of treatment using lamellarin-class alkaloids
ES2102322B1 (es) 1995-07-13 1998-03-01 Pharma Mar Sa Procedimiento de preparacion de didemnina a.
US5681847A (en) 1995-12-05 1997-10-28 Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. Methods of using discodermolide compounds
EP0821068A3 (en) 1996-03-29 1999-06-02 Rohm And Haas Company Novel sphingolipids and a process thereto
GB9608010D0 (en) 1996-04-18 1996-06-19 Pharma Mar Sa Trunkamide A
US6156724A (en) 1996-06-07 2000-12-05 Rinehart; Kenneth L. Uses of didemnins as immunomodulating agents
US5721362A (en) 1996-09-18 1998-02-24 President And Fellows Of Harvard College Process for producing ecteinascidin compounds
JP2001503746A (ja) 1996-10-24 2001-03-21 ザ・ボード・オブ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・イリノイ ジデムニン類似体の半合成法
AU726146B2 (en) 1996-10-24 2000-11-02 Board Of Trustees Of The University Of Illinois, The Total synthesis of the amino hip analogue of didemnin A
GB9622427D0 (en) 1996-10-28 1997-01-08 Pharma Mar Sa Antimalarial drugs
US6800661B1 (en) 1997-04-15 2004-10-05 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Spisulosine compounds
US6028077A (en) 1997-04-15 2000-02-22 Rinehart; Kenneth L. Crambescidin compounds
USRE38793E1 (en) 1997-04-15 2005-09-06 Rinehart Kenneth L Spisulosine compounds
US5985876A (en) 1997-04-15 1999-11-16 Univ Illinois Nucleophile substituted ecteinascidins and N-oxide ecteinascidins
US6107520A (en) 1997-04-15 2000-08-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Spisulosine compounds
US6034058A (en) 1997-04-15 2000-03-07 Rinehart; Kenneth L. Semi-synthetic alanyl dilemnin analogs
AUPO656597A0 (en) 1997-05-02 1997-05-29 Australian National University, The Preparation of therapeutic compounds
WO1998050048A1 (en) 1997-05-07 1998-11-12 Pharma Mar, S.A. Aplidine as an l-type calcium channel enhancer
GB9723206D0 (en) 1997-11-03 1998-01-07 Inst Biomar Sa New cytotoxic pyridoacridine alkaloids
US6420357B1 (en) 1997-12-23 2002-07-16 Instituto Biomar, S.A. Cytotoxic alkaloid derivatives including Asmarine A and B isolated from a sponge
GB9727301D0 (en) 1997-12-23 1998-02-25 Inst Biomar Sa Asmarine A and B: New cytotoxic alkaloids
GB9801741D0 (en) 1998-01-27 1998-03-25 Inst Biomar Sa New cytotoxic tris (oxazole)-containing macrolides
GB9803448D0 (en) 1998-02-18 1998-04-15 Pharma Mar Sa Pharmaceutical formulation
DE69936845T2 (de) 1998-04-06 2008-05-08 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois, Urbana Halbsynthetische ectein-ascidine
US6656948B2 (en) 1998-04-29 2003-12-02 Universidad Complutense De Madrid Cytotoxic compounds: derivatives of the pyrido[2,3,4-kl]acridine ring system
DE69927014T2 (de) 1998-05-05 2006-06-14 Pharma Mar Sa Kultivierung von sessilen meerestieren
EP1077698B1 (en) 1998-05-11 2005-03-02 Pharma Mar, S.A. Metabolites of ecteinascidin 743
GB9810998D0 (en) 1998-05-21 1998-07-22 Univ Madrid Complutense Antitumour 1,5-diazaanthraquinones
US6124292A (en) 1998-09-30 2000-09-26 President And Fellows Of Harvard College Synthetic analogs of ecteinascidin-743
GB9821975D0 (en) 1998-10-08 1998-12-02 Pharma Mar Sa New cytotoxic alkaloids
US6245759B1 (en) 1999-03-11 2001-06-12 Merck & Co., Inc. Tyrosine kinase inhibitors
MY164077A (en) 1999-05-13 2017-11-30 Pharma Mar Sa Compositions and uses of et743 for treating cancer
AR035842A1 (es) 1999-05-14 2004-07-21 Pharma Mar Sa Metodo de hemisintesis para la formacion de compuestos intermediarios y derivados y de estructuras relacionadas con la ecteinascidina y de tetrahidroisoquinolinfenoles y compuestos intermediarios de aplicacion en dicho metodo
GB9918178D0 (en) 2000-05-15 1999-10-06 Pharma Mar Sa Synthetic methods
GB9915069D0 (en) 1999-06-28 1999-08-25 Inst Biomar Sa New indolocarbazole alkaloids from a marine actinomycete
US6635677B2 (en) 1999-08-13 2003-10-21 Case Western Reserve University Methoxyamine combinations in the treatment of cancer
CA2391502A1 (en) 1999-11-15 2001-05-25 Pharma Mar S.A Aplidine treatment of cancers
EP1254140A4 (en) 2000-01-19 2003-03-12 Univ Columbia SAFRAMYCIN-ECTEINASCIDIN SERIES COMPOUNDS, USES AND SYNTHESIS
GB0002952D0 (en) 2000-02-09 2000-03-29 Pharma Mar Sa Process for producing kahalalide F compounds
JP2003523338A (ja) 2000-02-16 2003-08-05 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ 抗腫瘍活性を有するオキシ−及びアミノ−置換テトラヒドロフリル誘導体
US20030187075A1 (en) 2000-03-20 2003-10-02 Junichi Tanaka Keith Sponge antitumor compounds
US6509315B1 (en) 2000-04-07 2003-01-21 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Didemnin analogs and fragments and methods of making and using them
IL152111A0 (en) 2000-04-07 2003-07-31 Univ Pennsylvania Tamandarin and didemnin analogs and methods of making and using them
ATE299146T1 (de) 2000-04-12 2005-07-15 Pharma Mar Sa Ecteinaschidin derivate mit antikrebs wirkung
US7919493B2 (en) 2000-04-12 2011-04-05 Pharma Mar, S.A. Anititumoral ecteinascidin derivatives
GB0010799D0 (en) 2000-05-04 2000-06-28 Inst Biomar Sa Stolonoxides
MXPA02011319A (es) 2000-05-15 2003-06-06 Pharma Mar Sa Analogos antitumorales de ecteinascidina 743.
US7420051B2 (en) 2000-05-15 2008-09-02 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of an ecteinaschidin compound
GB0011927D0 (en) 2000-05-17 2000-07-05 Inst Biomar Sa New use of citreamicins
DE60131076T2 (de) 2000-06-06 2008-07-31 Pharma Mar, S.A., Tres Cantos Antitumorale verbindungen
GB0016020D0 (en) 2000-06-29 2000-08-23 Inst Biomar Sa New polyciclic xanthones and their use
UA76718C2 (uk) 2000-06-30 2006-09-15 Фарма Мар, С.А. Протипухлинні похідні аплідину
MXPA03000341A (es) 2000-07-11 2004-04-05 Modesto Remuinan Derivados de variolina como agentes anit-cancer.
US6635054B2 (en) 2000-07-13 2003-10-21 Transurgical, Inc. Thermal treatment methods and apparatus with focused energy application
GB0019117D0 (en) 2000-08-03 2000-09-27 Univ Barcelona Derivatives of variolin B
DE60111858T2 (de) 2000-10-12 2006-04-20 Pharma Mar, S.A., Tres Cantos BEHANDLUNG VON KREBSERKRANKUNGEN mit APLIDIN IN KOMBINATION MIT CARNITIN ODER ACETYLCARNITIN
BR0114604A (pt) 2000-10-12 2003-10-14 Pharma Mar Sa Tratamento de c‰nceres
IL155297A0 (en) 2000-10-31 2003-11-23 Pharma Mar Sa Kahalalide f formulation
KR100718946B1 (ko) 2000-11-06 2007-05-16 파르마 마르, 에스.에이. 효과적인 항종양 치료
GB0030417D0 (en) 2000-12-13 2001-01-24 Pharma Mar Sa An anticancer lead compound isolated from a New Zealand ascidian
US20040047807A1 (en) 2001-01-24 2004-03-11 Dominik Meyer Use of neurotoxic substances in producing a medicament for treating joint pains
RU2003126171A (ru) 2001-01-25 2005-02-27 Бристол-Маерс Сквибб Компани (Us) Парентеральный состав, содержащий аналоги эпотилона
EP1360337A1 (en) 2001-02-09 2003-11-12 The Regents Of The University Of California Ecteinascidin family compounds: compositions and methods
GB0105745D0 (en) 2001-03-08 2001-04-25 Pharma Gen S A Immobilisation of ligands
GB0108234D0 (en) 2001-04-02 2001-05-23 Pharma Mar Sa Process for producing trunkamide A compounds
GB0116966D0 (en) 2001-07-11 2001-09-05 Pharma Mar Sa Anittumoral compounds
GB0117402D0 (en) 2001-07-17 2001-09-05 Pharma Mar Sa New antitumoral derivatives of et-743
GB0119243D0 (en) * 2001-08-07 2001-10-03 Pharma Mar Sa Antitumoral analogs of ET-743
AU2002336206B2 (en) 2001-10-19 2007-11-29 Pharma Mar, S.A. Use of aplidine for the treatment of pancreatic cancer
WO2003033012A1 (en) 2001-10-19 2003-04-24 Pharma Mar, S.A. Kahalalide compounds for use in cancer therapy
US20050054555A1 (en) 2001-10-19 2005-03-10 Jose Jimeno Kahalalide compounds for use in cancer therapy
IL161430A0 (en) 2001-10-19 2004-09-27 Pharma Mar Sa Pharmaceutical compositions containing ecteinascidin 743
GB0202544D0 (en) 2002-02-04 2002-03-20 Pharma Mar Sa The synthesis of naturally occuring ecteinascidins and related compounds
US20040019027A1 (en) 2002-04-12 2004-01-29 Barry Forman Method of treating cerebrotendinous xanthomatosis
GB0217638D0 (en) 2002-07-30 2002-09-11 Pharma Mar Sa Total synthesis of myriaporones
SI2357006T1 (sl) 2002-07-31 2016-01-29 Seattle Genetics, Inc. Konjugati zdravil in njihova uporaba za zdravljenje raka, avtoimunske bolezni ali infekcijske bolezni
GB0218816D0 (en) 2002-08-13 2002-09-18 Pharma Mar Sa Antitumoral analogs of lamellarins
GB0218813D0 (en) 2002-08-13 2002-09-18 Pharma Mar Sa DNA sequences from an endosymbiont and their uses
US20040033940A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Pharma Mar, S.A. Cyclic hepta-peptide derivative from colonial ascidians, lissoclinum SP
MXPA05004133A (es) 2002-10-18 2005-10-05 Pharma Mar Sau Nuevos compuestos antitumorales.
GB0304367D0 (en) 2003-02-26 2003-04-02 Pharma Mar Sau Methods for treating psoriasis
GB0229793D0 (en) 2002-12-20 2003-01-29 Pharma Mar Sa The gene cluster involved in safracin biosynthesis and its uses for genetic engineering
EP1594542B1 (en) 2003-02-20 2010-06-30 Seattle Genetics, Inc. Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer
GB0303940D0 (en) 2003-02-20 2003-03-26 Pharma Mar Sau Solid phase synthesis of antitumoral compounds
US7507708B2 (en) 2003-02-26 2009-03-24 Pharma Mar, S.A.U. Antitumoral compounds
WO2004080477A1 (en) 2003-03-12 2004-09-23 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Aplidine for multiple myeloma treatment
CN101579520A (zh) 2003-03-12 2009-11-18 达纳-法伯癌症协会有限公司 用于多发性骨髓瘤的治疗的aplidine
US8030279B2 (en) 2003-03-21 2011-10-04 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Tamandarin analogs and fragments thereof and methods of making and using
US8088387B2 (en) 2003-10-10 2012-01-03 Immunogen Inc. Method of targeting specific cell populations using cell-binding agent maytansinoid conjugates linked via a non-cleavable linker, said conjugates, and methods of making said conjugates
GB0312407D0 (en) 2003-05-29 2003-07-02 Pharma Mar Sau Treatment
AU2004256425A1 (en) 2003-06-09 2005-01-20 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for treating and diagnosing cancer
GB0314726D0 (en) 2003-06-24 2003-07-30 Inst Biomar Sa New cytotoxic depsipeptides
CA2533335A1 (en) 2003-07-25 2005-02-17 Novartis Ag Substituted lactams and their use as anti-cancer agents
GB0321066D0 (en) 2003-09-09 2003-10-08 Pharma Mar Sau New antitumoral compounds
ES2318343T3 (es) 2003-10-09 2009-05-01 Abbott Laboratories Derivados de pirrolidinil urea como inhibidores de la angiogenesis..
GB0324201D0 (en) 2003-10-15 2003-11-19 Pharma Mar Sau Improved antitumoral combinations
SI1689404T1 (sl) 2003-11-13 2009-02-28 Pharma Mar Sau Kombinacija et-743 s 5-fluorouracil pro zdravili za zdravljenje raka
GB0326486D0 (en) 2003-11-14 2003-12-17 Pharma Mar Sau Combination treatment
CN1897949A (zh) * 2003-11-14 2007-01-17 马尔药品公司 包含使用et－743和紫杉醇来治疗癌症的联合疗法
DE102004011809A1 (de) 2004-03-11 2005-09-29 Robert Bosch Gmbh Magnetsensoranordnung
GB0408958D0 (en) 2004-04-22 2004-05-26 Pharma Mar Sa Convergent synthesis for kahalalide compounds
WO2005118584A2 (en) 2004-05-26 2005-12-15 Axys Pharmaceuticals, Inc. Saframycin analogs as therapeutic agents in the treatment of cancer
US7446196B2 (en) 2004-06-03 2008-11-04 Kosan Biosciences, Incorporated Leptomycin compounds
MX2007000360A (es) 2004-07-09 2007-06-12 Pharma Mar Sa Marcadores moleculares de pronostico.
CA2583464A1 (en) 2004-09-29 2006-04-06 Pharma Mar S.A., Sociedad Unipersonal Ecteinascidin compounds as anti -inflammatory agents
US20090117176A1 (en) 2004-10-26 2009-05-07 Pharma Mar, S.A. Sociedad Unipersonal Anticancer Treatments
NZ554761A (en) 2004-10-29 2010-01-29 Pharma Mar Sa Formulations comprising ecteinascidin and a disaccharide
EP1817059A2 (en) 2004-12-01 2007-08-15 Genentech, Inc. Conjugates of 1,8-bis-naphthalimides with an antibody
WO2006066183A2 (en) 2004-12-16 2006-06-22 Axys Pharmaceuticals, Inc. Novel saframycin analogs as therapeutic agents
NZ563054A (en) 2005-05-03 2010-09-30 Pharma Mar Sa Antitumoral tetrahydro-pyrimidines
GB0515673D0 (en) 2005-08-01 2005-09-07 Pharma Mar Sa Antitumoral compounds
EP1925668A2 (en) 2005-08-02 2008-05-28 Pharma Mar, S.A. Genes involved in the biosynthesis of thiocoraline and heterologous production of same
GB0522082D0 (en) 2005-10-31 2005-12-07 Pharma Mar Sa Formulations
GB0523098D0 (en) 2005-11-14 2005-12-21 Pharma Mar Sa Antitumoral compounds
WO2007062413A2 (en) 2005-11-25 2007-05-31 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Use of parp-1 inhibitors
ES2276629B1 (es) 2005-12-15 2009-04-01 Pharma Mar, S.A. Compuestos antitumorales.
ES2288107B1 (es) 2006-01-27 2008-11-01 Fundacion Imabis Instituto Mediterraneo Para El Avance De La Biotecnologia Y La Investigacion Sanita Derivados aciclicos saturados e insaturados de cadena larga de sulfamidas como activadores especificos de receptores ppar-alfa.
WO2007101235A2 (en) 2006-02-28 2007-09-07 Pharma Mar, S.A. Improved antitumoral treatments
WO2007134203A2 (en) 2006-05-12 2007-11-22 Pharma Mar, S.A. Anticancer treatments with a combination of docetaxel and ecteinascidin
EP1864682A1 (en) 2006-06-09 2007-12-12 Sanofi-Aventis Leptomycin derivatives
UA97369C2 (ru) 2006-06-16 2012-02-10 Фарма Мар, С.А. Противоопухолевые соединения дигидропиран-2-она и фармацевтическая композиция на их основе
CA2703024A1 (en) 2007-10-19 2009-04-23 Giuseppe Longo Sorbello Improved antitumoral treatments
AU2008312400A1 (en) 2007-10-19 2009-04-23 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Improved antitumoral treatments
JP2011500046A (ja) 2007-10-19 2011-01-06 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ Ｅｔ−７４３治療のための予後分子マーカー
AU2008337605B2 (en) 2007-12-14 2013-08-29 Pharma Mar, S.A. Antitumoral compounds
BRPI0821114B8 (pt) 2007-12-20 2021-11-09 Pharma Mar Sa Composto antitumoral, composição farmacêutica, uso de um composto antitumoral, uso de uma composição farmacêutica, e processo para a preparação do referido composto
US20100323021A1 (en) 2008-01-30 2010-12-23 Pharma Mar, S.A. Antitumoral treatments
CA2717409A1 (en) 2008-03-07 2009-09-11 Pharma Mar, S.A. Improved anticancer treatments
CA2717117A1 (en) 2008-03-07 2009-09-11 Pharma Mar, S.A. Improved antitumoral treatments
WO2009140675A2 (en) 2008-05-16 2009-11-19 Pharma Mar, S.A. Combination therapy with an antitumor alkaloid
RU2519750C2 (ru) 2008-05-16 2014-06-20 Фарма Мар, С.А. Способы лечения множественной миеломы
RS55960B1 (sr) 2008-05-23 2017-09-29 Wyeth Llc Triazinska jedinjenja kao inhibitori pi3 kinaze i mtor
MX2011000144A (es) 2008-07-03 2011-02-24 Pharma Mar Sa Compuestos antitumorales.
AR072804A1 (es) 2008-07-15 2010-09-22 Genentech Inc Conjugados derivados de antraciclina,proceso para su preparacion,composiciones farmaceuticas que los contienen y su uso como agentes antitumorales.
RU2011105801A (ru) 2008-07-17 2012-08-27 Фарма Мар, С.А. (Es) Противораковые соединения
MX2011006532A (es) 2008-12-19 2011-07-13 Pharma Mar Sa Compuestos anticancerigenos.
WO2010149688A2 (en) 2009-06-24 2010-12-29 Pharma Mar, S.A. Antitumoral compounds
RS54780B1 (sr) 2010-04-27 2016-10-31 Pharma Mar Sa Antikancerski steroidni laktoni nezasićeni na poziciji 7(8)
ES2534331T3 (es) * 2010-05-25 2015-04-21 Pharma Mar S.A. Proceso sintético para la producción de compuestos e intermedios de ecteinascidina
HUE042801T2 (hu) 2010-11-12 2019-07-29 Pharma Mar Sa Kombinációs terápia mitózisgátlóval
DE102012211024B4 (de) 2012-06-27 2024-10-24 Robert Bosch Gmbh Verfahren zum Betreiben eines Fahrzeuges
JP5922518B2 (ja) 2012-07-20 2016-05-24 浜松ホトニクス株式会社 シンチレータパネル及び放射線検出器
GB201309807D0 (en) 2013-05-31 2013-07-17 Pharma Mar Sau Antibody drug conjugates
CN109476645A (zh) 2016-07-14 2019-03-15 辉瑞大药厂 作为vanin-1酶抑制剂的新的嘧啶甲酰胺
JOP20190254A1 (ar) * 2017-04-27 2019-10-27 Pharma Mar Sa مركبات مضادة للأورام
TWI824043B (zh) * 2018-10-25 2023-12-01 西班牙商瑪製藥股份有限公司 藥物抗體共軛物

Also Published As

Publication number Publication date
TWI875118B (zh) 2025-03-01
IL289963A (en) 2022-03-01
DK4101855T3 (da) 2023-11-06
DK3615544T3 (da) 2023-05-30
ES2741901T3 (es) 2020-02-12
MY198004A (en) 2023-07-25
NZ758490A (en) 2025-06-27
IL295044B1 (en) 2023-07-01
KR20210126791A (ko) 2021-10-20
PT3395821T (pt) 2019-08-27
CO2019011967A2 (es) 2020-02-18
NZ797531A (en) 2025-06-27
CA3061518A1 (en) 2018-11-01
AU2018260314A1 (en) 2019-10-31
EP4047002B1 (en) 2023-03-08
HUE045641T2 (hu) 2020-01-28
ME03466B (me) 2020-01-20
HK1255941B (en) 2020-04-29
IL295044A (en) 2022-09-01
JOP20190254A1 (ar) 2019-10-27
SG10201913300YA (en) 2020-03-30
ME03467B (me) 2020-01-20
RS64686B1 (sr) 2023-11-30
TW202344509A (zh) 2023-11-16
FI4047002T3 (fi) 2023-05-22
TWI742273B (zh) 2021-10-11
RS64200B1 (sr) 2023-06-30
JP2018188431A (ja) 2018-11-29
CY1121884T1 (el) 2020-10-14
HUE063736T2 (hu) 2024-01-28
CN114736219A (zh) 2022-07-12
SMT201900448T1 (it) 2019-09-09
EP3615544A1 (en) 2020-03-04
PT3395820T (pt) 2019-08-07
PL3395821T3 (pl) 2019-10-31
JP2023052597A (ja) 2023-04-11
EP3615544B1 (en) 2023-03-22
AU2018260314B2 (en) 2021-12-09
SMT202300169T1 (it) 2023-07-20
HK1255938B (en) 2020-04-29
MA44020A (fr) 2018-10-31
KR20200012846A (ko) 2020-02-05
CY1121885T1 (el) 2020-10-14
MX392601B (es) 2025-03-24
JP2022130682A (ja) 2022-09-06
TW202202509A (zh) 2022-01-16
IL289963B1 (en) 2023-06-01
ECSP19083967A (es) 2019-12-27
SG11201909841RA (en) 2019-11-28
HUE062157T2 (hu) 2023-10-28
ZA201907119B (en) 2021-07-28
RS59173B1 (sr) 2019-10-31
MA44021A (fr) 2019-05-15
DK4047002T3 (da) 2023-05-01
US11713325B2 (en) 2023-08-01
US11332480B2 (en) 2022-05-17
RS59174B1 (sr) 2019-10-31
FI3615544T3 (fi) 2023-05-23
EP3615544B9 (en) 2024-01-03
SA523440283B1 (ar) 2025-04-26
NZ797532A (en) 2025-06-27
SI3615544T1 (sl) 2023-07-31
US12384800B2 (en) 2025-08-12
US20220242883A1 (en) 2022-08-04
MA44020B1 (fr) 2019-08-30
MD3395821T2 (ro) 2019-10-31
EP4047002A1 (en) 2022-08-24
AU2022200249B1 (en) 2022-02-10
MD4047002T2 (ro) 2023-08-31
IL295044B2 (en) 2023-11-01
CN114751920B (zh) 2024-06-07
EP4101855B9 (en) 2024-01-03
US20240166666A1 (en) 2024-05-23
JP7490835B2 (ja) 2024-05-27
EP3395821A1 (en) 2018-10-31
LT4101855T (lt) 2023-08-25
MD3615544T2 (ro) 2023-08-31
LT3615544T (lt) 2023-05-10
AU2022200250B1 (en) 2022-02-10
MX2021016058A (es) 2022-02-03
KR20220109495A (ko) 2022-08-04
EP3395820B1 (en) 2019-05-15
RS64174B1 (sr) 2023-05-31
SMT202300343T1 (it) 2023-11-13
DK3395821T3 (da) 2019-08-19
IL289963B2 (en) 2023-10-01
PL3395820T3 (pl) 2019-11-29
PL4101855T3 (pl) 2023-12-27
WO2018197663A1 (en) 2018-11-01
MX392829B (es) 2025-03-24
CN110621678A (zh) 2019-12-27
US20180312529A1 (en) 2018-11-01
KR102510975B1 (ko) 2023-03-16
PL4047002T3 (pl) 2023-07-24
IL270153B2 (en) 2023-10-01
LT3395821T (lt) 2019-08-12
HRP20191443T1 (hr) 2019-11-15
FI4101855T3 (fi) 2023-09-22
ES2944344T3 (es) 2023-06-20
HUE062032T2 (hu) 2023-09-28
HUE046109T2 (hu) 2020-02-28
EP3395821B1 (en) 2019-05-15
EP4101855A1 (en) 2022-12-14
MD3395820T2 (ro) 2019-10-31
SI4101855T1 (sl) 2024-03-29
EP4101855B1 (en) 2023-08-02
JP2020517709A (ja) 2020-06-18
TWI807411B (zh) 2023-07-01
AU2022200250C1 (en) 2022-06-23
HRP20230433T1 (hr) 2023-07-07
HRP20191442T1 (hr) 2019-11-15
UY37706A (es) 2018-11-30
US10538535B2 (en) 2020-01-21
CY1126061T1 (el) 2023-11-15
US20210246146A1 (en) 2021-08-12
IL270153A (ro) 2019-12-31
SI3395820T1 (sl) 2019-09-30
JP7422812B2 (ja) 2024-01-26
LT4047002T (lt) 2023-05-10
TN2019000211A1 (en) 2021-01-07
CN110621678B (zh) 2024-09-20
US11339180B2 (en) 2022-05-24
TN2019000210A1 (en) 2021-01-07
HRP20231233T1 (hr) 2024-01-19
JP6501947B2 (ja) 2019-04-17
MX2021016054A (es) 2022-06-01
TW201906850A (zh) 2019-02-16
PH12019550224A1 (en) 2020-10-12
US20210070775A1 (en) 2021-03-11
ES2740073T3 (es) 2020-02-05
DK3395820T3 (da) 2019-08-12
IL270153B1 (en) 2023-06-01
CN117865987A (zh) 2024-04-12
MX2019012812A (es) 2020-01-14
ES2944579T3 (es) 2023-06-22
CL2019003057A1 (es) 2020-02-21
JP2018188432A (ja) 2018-11-29
SMT201900447T1 (it) 2019-09-09
PL3615544T3 (pl) 2023-07-17
BR112019022282A2 (pt) 2020-05-19
SMT202300160T1 (it) 2023-07-20
ES2960063T3 (es) 2024-02-29
AU2018260314C1 (en) 2022-04-21
HRP20230455T1 (hr) 2023-07-21
JP6501946B2 (ja) 2019-04-17
AU2022200249C1 (en) 2022-06-23
CN114751920A (zh) 2022-07-15
SI4047002T1 (sl) 2023-07-31
AU2022201657A1 (en) 2022-03-31
KR102491180B1 (ko) 2023-01-20
CN114736219B (zh) 2024-06-07
EP3395820A1 (en) 2018-10-31
MA44021B1 (fr) 2019-08-30
JP7186723B2 (ja) 2022-12-09
LT3395820T (lt) 2019-08-12
SI3395821T1 (sl) 2019-09-30
KR102492283B1 (ko) 2023-01-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7490835B2 (ja) 抗腫瘍化合物
HK40080330B (en) Antitumoral compounds
HK40069341B (en) Antitumoral compounds
HK40069341A (en) Antitumoral compounds
HK40080330A (en) Antitumoral compounds
EA048344B1 (ru) Противоопухолевые соединения
EA048007B1 (ru) Противоопухолевые соединения
EA048329B1 (ru) Противоопухолевые соединения
HK40023315B (en) Antitumoral compounds
HK40023315A (en) Antitumoral compounds