LV10290B - Peptide as bradykinin-antagonistes - Google Patents

Description

LV10290

Beschreibung .Peptide mit bradykinin-antagonistischer Wirkung Die Erfindung betrifft neue Peptide mit bradykinin-antagonistischer Wirkung sowie ein Verfahren zu deren Herstellung.

Bradykinin-antagonistische Peptide werden in WO 86/07263 beschriebeņ, bei denen u. a. L-Pro in Position 7 des Peptidhormons Bradykinin oder anderer Bradykininanaloga durch eine D-Aminosadre, wie D-Phe, D-Thia, D-Pal, CDF, D-Nal, MDY, D-Phg, D-His, D-Trp# D-Tyr, D-hPhe, D-Val, D-Ala, D-His, D-Ile, D-Leu und DOMT· ersetzt ist.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue wirksame Peptide mit bradykinin-antagonistischer Wirkung zu finden.

Diese Aufgabe wird gelost durch die Peptide der Formel I A-B-C-E-F-K- (D)-Tic-G-M-F' - I (I), . in welcher A a^) Wasserstoff/ (C1-C8)-Alkyl/ (Οχ-Ce)-Alkan°yl, (Cx-Cg)-Alkoxycarbonyl oder (Ci-C8)-Alkylsulf°nyl bedeutet, • in welchen jeweils 1, 2toder 3 Viasserstoffatome gegebenenfalls durch.1, 2 oder 3 gleiche oder verschiedene Reste aus de.r Reihe Carboxy,

Amino, (Cx-C4)-Alkyl, (Cl~C4)-Alkylamino, 2

Hydroxy, (Ci-C4)-Alk°xy,

Halogen,

Di- (C^-C4)r al^lamino, 5 . Carbamoyl/

Sulfamoyl/ (Οχ-C4) - Alkoxyc:arbonyl, (C6-Ci2)-Aryl und (C6-Ci2)-Aryl-(Ci-C5)-alkyl ersetzt sind, 10 oder in welchen jeweils 1 Wasserstoffatom gegebenenfalls durch einen Rest aus der Reihe (C3-C8)-Cycl°alkyl/ (Ci-C4)-Alkylsulf°nyl, (Οχ-C4)-Alkylsulfinyl, 15 (c6~c12)·Aryl"(Ci-C4)-alkylsulfonyl, (C&-C^2)- Ary 1- (Cj_-C4)- alky 1 sulf iny 1, (c6-c12).-Aryi0xy, (C3~Cg)-Heteroaryl und (C3-Cg)-Heteroaryloxy 20 und 1 oder 2 Wasserstoffatome durch 1 oder 2 gleiche oder verschiedene Reste aus der Reihe Carboxy, ....

Amino, 25 (C1-C4)-Alkylamino/

Hydroxy, (cl~c4)-Alkoxy/

Halogen,

Di-(C1-C4)-alkylamino/ 30 Carbamoyl,

Sulfamoyl, (Ci~C4)-Alkoxycarbony1, <Cfi- C12)-Aryl und (C6-C12) -Aryl- (Cr C5) - alkyl ersetzt sind, 35 5 3 LV10290 a2) (C3-C8)-Cycl°alkyl,

Carbamoyl, das gegebenenfalls am Stickstoff durch (Ci-Cg)-Alkyl oder (Cg-C^2)-Aryl substituiert sein kann, (C7-C13)-Aryloyl (C6”Cļ2)-Arylsulfonyl, ΙΌ. (C3-Cg)-Heteroaryl/ oder (C3-Cg)-Heteroaroyl bedeutet, wobei in den unter a·^) und a2) definierten Resten jeweils Aryl, Heteroaryl, Aroyl,

Arylsulfonyl und Heteroaroyl gegebenenfalls durch 1, 2, 3 oder 4 gleiche oder verschiedene Reste aus der Reihe

Carboxy/ 15

Ainino,

Nitro, (Cļ-C4)-Alky1amino/

Hydroxy/ 20 25 a3> (Ci:C4)-Alkyl# (C1-C4)-Alkoxy/ Halogen, Cyano, Di-(C2-C4)-alkylamino, Carbamoyl/ Sulfamoyl und (Cl“C4)-Alkoxycarbonyl substituiert ist, oder einen Rest der Formel II bedeutet, R·4· - N - CH - C - R2 i R' M 0 (II) R1 wie A unter a-^) oder a2) definiert ist, R2 Wasserstoff oder Methyl bedeutet, R2 Viasserstoff oder (CrC6)-Alkyl, vorzugsweise (C1-C4)-Alkyl, 30 4 das gegebenenfaļls durch Amino, substituiertes Amino,

Hydroxy, 5 Carboxy,

Carbamoyl/

Guanidino, substituiertes Guanidino,

Ureido, 10 Mercapto,

Methylmercapto/

Phenyl, · 4-Chlorpheny1, 4-Fluorpheny1, 15 4-Nitrophenyl, 4-Methoxyphenyl, 4-Hydroxyphenyl,

Phthalimido, 4-Imidazolyl, 20 3-Indolyl/ 2- Thienyl/ 3- Thienyl, 2- Pyridyl, 3- Pyridyl oder 25 Cyclohexyl monosubstituiert ist, bedeuten, wobei substituiertes Amino fūr eine Verbindung -NH-A- und substituiertes Guanidino fur eine Verbindung -NH-C(NH)-NH-A stehen, in denen 30 A wie unter a-j_) oder a2) definiert ist; B fūr eine basische Aminosaure in der L- oder D-Konfiguration steht, die in der Seitenkette substituiert sein kann; C fur eine Verbindung der Formel IIla oder Illb steht G'-G?-Gly (IHa) G’-NH-(CH2)n-CO (Illb)/ 35 5 LV 10290 worin

G' unabhangig voneinander einen Rest der Formel IV

R4 R5 O

I l II - N - CH - C - (IV) worin 4 c R und RJ zusammen mit den diese tragenden Atomen ein heterocyclisches mono, bi- oder tricyclisches Ringsystem mit 2 bis 15 C-Atomen bilden und n 2 bis 8 ist; E fur den Rest einer neutralen, sauren oder basischen, aliphatischen oder alicyclisch - aliphatischen Aminosāure steht; F unabhangig voneinander den Rest einer neutralen, sauren oder basischen, aliphatischen oder aromatischen Aminosāure bedeutet, die in der Seitenkette substituiert sein kann, oder fur eine direkte Bindung steht; (D)-Tic den Rest der Formel V bedeutet; H 0

G wie G' oben definiert ist oder eine direkte Bindung bedeutet; F* wie F definiert ist, einen Rest -NH-(CH2>n-, mit n = 2 bis 8, bedeutet, oder, fails G keine direkte Bindung bedeutet, fur eine direkte Bindung stehen kann und, I *OH, -NH2 oder -NHC2H5 ist, K den Rest -NH-(CH2)χ-C0- mit x = 1-4 bedeutet oder fur eine direkte Bindung steht, und 6 M wie F definiert ist sowie deren physiologisch vertrāgliche Salze. 5 Fails nicht anders angegeben, steht die Abkiirzung ’eines

Aminosāurerestes ohne einen Stereodeskriptor fur den Rest in der L-Form (vgl. Schroder, Liibke, The Peptides/ Band I, New York 1965, Seiten ΧΧΙΙ-ΧΧΙΙΙ; Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Band XV/1 und 2, Stuttgart 1974), 10 wie z. B.

Aad, Abu, TAbu, ABz, 2ABz, eAca, Ach, Acp, Adpd, Ahb, Aib, |3Aib, Ala, PAla, AAla, Alg,.All, Ama, Amt, Ape, Apm, Apr, Arg, Asn, Asp, Asu, Aze, Azi, Bai, Bph, Can, Cit, Cys, 15 Cyta, Daad, Dab, Dadd, Dap, Dapm, Dasu, Djen, Dpa, Dtc,

Fel, Gln, Glu, Gly, Guv, hAla, hArg, hCys, hGln, hGlu, His, hīle, hLeu, hLys, hMet, hPhe, hPro, hSer, hThr, hTrp, hTyr,. Hyl, Hyp, 3Hyp, Ile, Ise, Iva, Kyn, Lant, Lcn, -Leu, Lsg, Lys, 3Lys, ALys, Met, Mim, Min, nArg, Nle, Nva, 01y, Orn,

Pan, Pec, Pen, Phe, Phg, Pie, Pro, APro, Pse, Pya, Pyr, Pza, Qin, Ros, Sar, Sec, Sem, Ser, Thi, $Thi, Thr, Thy, Thx, Tia, Tie, Tly, Trp, Trta, Tyr, Vai.

Als.Rest eines heterocyclischen Ringsystems der Formel IV 25 kommen insbesondere Reste von Heterocyclen aus der folgenden Gruppe in Betracht:

Pyrrolidin-2-carbonsaure; Piperidin-2-carbonsāure; 1,2,3,4-Tetrahydroisochinolin-3-carbonsāure; 30 Decahydroisochinolin-3-carbonsāure;

Octahydroindol-2-carbonsāure;

Decahydrochinolin-2-carbonsāure; Octahydrocyclopenta[b]pyrrol-2-carbonsāure; 2-Aza-bicyclo[2.2.2] octan-3-carbonsāure; 35 2-Azabicyclo[2.2. l]heptan- 3-carbonsāure; 7 LV10290 2-Azabicyclo[3.1.0]hexan-3-carbonsaure; 2-Azaspiro[4.4]nonan-3-carbonsaure; 2-Azaspiro[4.5] - decan- 3- carbonsaure;

Spiro[(bicyclo[2.2.1]-heptan)-2,3-pyrrolidin-5-carbonsaure]; 5 Spiro[ (bicyclo[2.2.2]octan)-2,3-pyrrolidin-5-carbonsāure]; 2-Azatricyclo[4.3.0.1^'decan-3-carbonsaure; Decahydrocyclohepta[b]pyrrol-2-carbonsaure; Decahydrocycloocta[b]pyrrol-2-carbonsaure; Octahydrocyclopenta[c]pyrrol-2-carbonsaure; 10 Octahydroisoindol-1-carbonsaure; 2,3,3a,4,6a-Hexahydrocyclopenta[b]pyrrol-2-carbonsaure; 2,3,3a,4,5,7a-Hexahydroindol-2-carbonsāure; Tetrahydrothiazol-4-carbonsaure;

Isoxazolidin-3-carbonsaure;*Pyrazolidin-3-carbonsaure; 15 Hydroxyprolin-2-carbonsāure; die aile gegebenenfalls substituiert sein konnen: 8

CO- >

9 LV10290

Die oben genannten Resten zugrundeliegenden Heterocyclen sind beispielsweise bekannt aus US-A 4 344 949, US-A 4 374 847, US-A 4 350 704, 5 EP-A 50 800, EP-A 31 741, EP-A 51 020, EP-A 49 658, EP-A 49 605, EP-A 29 488, EP-A 46 953, EP-A 52 870, EP-A 271 865, DE-A 32 26 768, DE-A 31 51 690, DE--A. 32 10 496, DE-A 32 11 397, DE-A 32 11 676, DE-A 32 27 05.5, DE-A 32 42 151, DE-A 32 46 503 und 10 DE-A 32 46 757.

Ferner werden einige dieser Heterocyclen vorgeschlagen in DE-A 38 18 850.3. 15 ' Fails im Einzelfall nicht anders angegeben, kann Alkyl geradkettig oder verzweigt seiņ. Entsprechendes gilt fur davon abgeleitete Reste wie Alkoxy, Aralkyl oder Alkanoyl. (C6-Ci2)-Aryl bedeutet vorzugsweise Phenyl, Naphtyl oder 20 Biphenylyl. Entsprechend sind davon abgeleitete Reste, wie Aryloxy, Aralkyl oder Aroyl, zu formulieren.

Halo steht fiir Fluor, Chlor, Brom oder Jod, vorzugsweise fūr Chlor. 25

Als Salze kommen insbesondere Alkali- oder Erdalkalisalze, Salze mit physiologisch vertraglichen Aminen und Salze mit anorganischen oder organischen Sāuren wie z.B. HC1, HBr, H2S04, H3PO4, Maleinsaure, Fumarsaure, Citronensaure, 30 Weinsaure, Essigsaure in Frage.

Bevorzugt sind Peptide der Formel I,'in welcher 35 B Arg, Lys, Orn, 2,4-Diaminobutyroyl oder einen L-Homoargininrest bedeutet, wobei jeweils die Amino- bzw. die Guanidinogruppe der Seitenkette durch A wie unter a^) oder a2) beschrieben substituiert sein kann; E fur den Rest einer aliphatischen oder alicyclisch- aliphatischen Aminosaure in der L- oder D-Konfiguration steht, die in der Seitenkette 1 bis 14 C-Atome enthalt, wie Alanin, Serin, Threonin, 0-(Cļ-Cg)-Alkyl oder 0-(C6-C10)-Aryl geschiitztes Serin oder Threonin, Valin, Norvalin, Leucin, Isoleucin, Norleucin, Neopentylglycin, tert.-Butylglycin oder (C3-C7)-Cyclo-alkyl- (C^-Cg)-alkyl-glycin; . - F' den Rest einer basischen Aminosaure in der L- oder D-Konfiguration, wie Arg oder Lys bedeutet, wobei die Guanidinogruppe bzw. Aminogruppe der Seitenkette durch A wie unter a^) oder a2) beschrieben substituiert sein kann, oder einen Rest -NH-(CH2)n - mit n = 2 bis 8 -bedeutet; K fur den Rest -NH-(CH2)x-CO- mit x = 2-4 steht oder eine direkte Bindung bedeutet.

Besonders bevorzugt sind Peptide der Formel I, in welcher. B Arg, Orn oder Lys bedeutet, wobei die Guanidinogruppe bzw. die Aminogruppe der Seitenkette unsubstituiert ist oder durch (C1-Cg)-Alkanoyl, (C7-C13)-Aryloyl, (C3-Cg)-Heteroaryloyl, (C^-Cg)-Alkylsulfonyī oder (C6-Ci2)-Arylsulf°nyl substituiert sein kann, wobei die Aryl-, Heteroaryl-, Aryloyl-, Arylsulfonyl- und Heteroaryloylreste wie unter a2j beschrieben mit gegebenenfalls 1, 2, 3 oder 4 gleichen oder verschiedenen Resten substituiert sein konnen. E Leucin, Isoleucin, Norleucin, tert.-Butylglycin, Serin, Threonin oder Cyclohexylalanin bedeutet; 11LV10290 K fur eine direkte.Bindung steht und M fur eine 'direkte Bindung steht 5 Ganz besonders bevorzugt sind Peptide der Formel I, in welcher A Wasserstoff, (D)- oder (L)-H-Arg, (D)- oder.(L)-H-Lys oder (D)- oder (L)-H-Orn bedeutet, 1° Arg, Orn oder Lys bedeutet, wobei die Guanidinogruppe bzw. die Aminogruppe der Seitenkette durch Wasserstoff, (C1-Cg)-Alkanoyl, (Cy-Cļ3)-Aryloyl/ (C3-Cg)-Heteroaryloyl, (C-j_-Cg)-Alkylsulfonyl oder (C6-Ci2)-Arylsulfonyl substituiert sein kann, wobei die Aryl-, Heteroaryl-/ Aryloyl-, Arylsulfonyl- und Heteroaryloylreste gegebenenfalls mit 1, 2, 3 oder 4 gleichen oder verschiedenen Resten aus der Reihe Methyl, Methoxy und Halogen substituiert sein konnen. Pro-Pro-Gly/ Hyp-Pro-Gly oder Pro-Hyp-Gly bedeutet Leu# Ile oder Cha bedeutet Ser, Hser, Lys/ Leu, Vai, Nle, Ile oder Thr bedeutet fur eine direkte Bindung steht M. fur eine direkte Bindung steht 30 G fur den Rest eines heterocyclischen Ringsystems der Formel IV steht, wobei die Reste der Heterocyclen Pyrrolidin-2-carbonsaure; Piperidin-2-carbonsāure; Tetrahydroisochinolin-3-carbonsāure/ cis- und trans-35 Decahydroisochinolin-3-carbonsāure; cis-endo-, cis-exo trans-Octahydroindol-2-carbonsāure; cis-endo-, cis-exo 15 20 25

B

E

K / 12 trans-0ctahydrocyclopentano[b]pyrrol-2-carbonsaure, oder Hydroxyprolin-2-carbonsaure bevorzugt. sind. F' Arg bedeuten und 5 I fur OS steht.

Beispiele fūr ganz besonders bevorzugte Peptide der Formel I sind;

10 H- (D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Leu-Ser- (D)-Tic-Oic-Arg-OH

Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung von Peptiden der Formel I, das dadurch gekennzeichnet ist, daB man 15 a) ein Fragment mit C-terminaler freier Carboxylgruppe oder dessen aktiviertes Derivat mit einem entsprechenden Fragment mit N-terminaler freier Aminogruppe umsetzt oder 20 b) das Peptid stufenweise aufbaut, in der nach (a) oder (b) erhaltenen Verbindung gegebenenfalls eine oder mehrere zum Schutz anderer Funktionen temporar eingefuhrte Schutzgruppen abspaltet und die so erhaltenen Verbindungen der Formel I 25 gegebenenfalls in ihr physiologisch vertrāgliches Salz uberfuhrt.

Die Peptide der vorliegenden Erfindung wurden nach allgemein bekannten Methoden der Peptidchemie, siehe z.B. 30 Ηο^βη-νίβγΐ, Methoden der organischen Chemie, Band 15/2, bevorzugt mittels Festphasensynthese wie z.B. von B. Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85, 2149 (1963) oder R.C. Sheppard, Int. J. Peptide Protein Res. 21, 118 (1983) beschrieben oder durch āguivalente bekannte Methoden 35 hergestellt. Als α-Aminoschutzgruppe werden 13 LV10290

Urethanschutzgruppen wie z.B. die tert.-Butyloxycarbonyl(Boc)- oder

Fluorenylmethyloxycarbonyl(Fmoc)-Schutzgruppe verwendet. Fails zur Verhinderung von Nebenreaktionen oder fiir die 5 Synthese spezieller Peptide erforderlich, sind die funktionellen Gruppen in der Seitenkette von Aminosāuren durch geeignete Schutzgruppen (siehe z.B. T.W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis") zusatziich geschiitzt, wobei in erster Linie 10 Arg(Tos), Arg(Mts), Arg(Mtr), Arg(PMC)/ AspfOBzl),

Asp(OBut), Cys(4-MeBzl), Cys(Acm), Cys(SBut), Glu(OBzl), Glu(OBut), His(Tos), His(Fmoc), His(Dnp), His(Trt), Lys(Cl-Z)/ Lys(Boc), Met(O), Ser(Bzl), Ser(But), Thr(Bzl), Thr(But), Trp(Mts), Trp(CHO), Tyr(Br-Z), Tyr(Bzl) oder 15 Tyr(But) eingesetzt werden.

Die Festphasensynthese beginnt am C-terminalen Ende des Peptids mit der Kupplung einer geschutzten Aminosaure an-ein entsprechendes Harz. Derartige Ausgangsmaterialien 20 konnen durch Verknupfung einer geschutzten Aminosaure mit einem mit einer Chlormethyl-, Hydroxymethyl-, Benzhydrylamino(BHA)-, Methylbenzhydrylamino(MBHA)-Gruppe modifiziertem Polystyrol- oder Polyacrylamid-Harz uber eine Ester- bzw. Amidbindung erhalten werden. Die als 25 Trāgermaterial verwendeten Harze sind kommerziell erhaltlich. BHA- und MBHA-Harze ,werden fur gewohnlich verwendet, wenn das synthetisierte Peptid am C-Terminus eine freie Amidgruppe enthalten soli. Fails das Peptid eine sekundare Amidgruppe am C-terminalen Ende enthalten soli 30 wird ein Chlormethyl- bzw. Hydroxymethyl-Harz verwendet und die Abspaltung mit. den entsprechenden Aminen durchgefuhrt. Will man z.B. das Ethylamid erhalten, kann das Peptid mit Ethylamin vom Harz abgespalten werden, wobei die Abspaltung der Seitenketten-Schutzgruppen nachfolgend durch andere geeignete Reagenzien, erfolgt. Sollen .im Peptid die tert.- 35 14

Butyl-Schutzgruppen der- Aminosaure Seitenkette erhalten bleiben, so wird die Synthese mit der Fmoc-Schutzgruppe zur temporāren Blockierung der a-Amino-Gruppe der Aminosaure unter Verwendung der z.B. bei R.G. Sheppard, J. Chem. Soc., 5 Chem. Comm. 1982, 587 beschriebenen Methodik durchgefuhrt, wobei die Guanidino-Funktion des Arginins durch Protonierung mit Pyridinium-Perchlorat geschutzt wird und der Schutz der anderen in der Seitenkette funktionalisierten Aminosauren mit durch katalytische 10 Transferhydrierung (A. Felix et al. J. Org. Chem. 13, 4194 (1978) oder durch Natrium in flūssigem Ammoniak (W. Roberts, J. Am. Chem. Soc. 76, 6203 (1954)) abspaltbaren Benzylschutzgruppen erfolgt. 15 Nach Abspaltung der Aminoschutzgruppe der an das Harz gekuppelten Aminosaure mit einem geeigneten Reagenz, wie z.B. Trifluoressigsaure in Methylenchlorid im Falle der Boc-Schutzgruppe oder einer-20 %igen Losung von Piperidin in Dimethylformamid im Falle der Fmoc-Schutzgruppe, werden 20 die nachfolgend geschutzten Aminosauren nacheinander in der gevrtinschten Reihenfolge aufgekuppelt.

Die intermediar entstehenden N-termiņai geschutzten Peptidharze werden vor der Verknupfung mit dem nachfolgenden Aminosāurederivat durch die vorbeschriebenen 25 Reagenzien entblockiert.

Als Kupplungsreagenz konnen aile moglichen in der Peptidsynthese verwendeten Aktivierungs-Reagenzien, siehe z.B. Houberi-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Band 30 15/2, verwendet werden, insbesondere aber Carbodiimide wie z.B. N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid, N,N*-Diisopropylcarbodiimid oder N-Ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid. Die Kupplung kann dabei direkt durch Addition von Aminosāureder-ivat mit dem 35 Aktivierungsreagenz und gegebenenfalls einem die

Racemisierung unterdrūckenden Zusatz vie z.B. 1-Hydroxybenzotriazol (HOBt) (W. Konig, R. Geiger, Chem. 15 LV10290

Ber. 103/ 708 (1970)) oder 3-Hydroxy-4-oxo-3,4-dihydrobenzotriazin (HOObt) (W. Konig, R. Geiger, Chem. Ber. 103,' 2054 (1970) zum Harz durchgefuhrt werden oder aber die Voraktivierung des Aminosāurederivats als symmetrisches Anhydrid oder HOBt- bzw. HOObt-Ester kann separat erfolgen und die Losung der aktivierten Spezies in einem geeigneten Losungsmittel zum kupplungsfāhigen Peptidharz gegeben werden.

Die Kupplung bzw. Aktivierung der Aminosāurederivate mit einem der oben genannten Aktivierungsreagenzien kann in Dimethylformamid, N-Methylpyrrolidon oder' Methylenchlorid oder einer Mischung aus den genannten Losungsmitteln durchgefuhrt werden. Das aktivierte Aminosaurederivat wird ublicherweise in einem 1,5 bis 4 fachen ŪberschuB eingesetzt. In Fallen, in denen eine unvollstāndige Kupplung eintritt, wird die Kupplungsreaktion wiederholt, ohne vorher die fur die Kupplung der nāchstfolgenden Aminosāure notige Entblockierung der a-Aminogruppe des Peptidharzes durchzufuhren.

Der erfolgreiche Ablauf der Kupplungsreaktion kann mittels der Ninhydrin-Reaktion, wie z.B. von E. Kaiser et al. Anal. Biochem. 34 595 (1970) beschrieben, uberpruft werden. Die Synthese kann auch automatisiert z.B. mit einem Peptid-Synthesizer Modeli 430A der Fa. Applied Bios'ystems durchgefuhrt werden, wobei entweder die vom Geratehersteller vorgesehenen Syntheseprogramme oder aber auch vom Benutzer selbst erstellte verwendet werden konnen. Letztere werden insbesondere bei der Verwendung von mit der Fmoc-Gruppe geschutzten Aminosāurederivaten eingesetzt.

Nach Synthese der Peptide in der vorgehend beschriebenen Weise kann das Peptid vom Harz mit Reagenzien, wie z.B. fliissigem Fluorwasserstoff (bevorzugt bei den nach der Boc-Methode hergestellten Peptiden) oder Trifluoressigsaure (bevorzugt bei den nach der Fmoc-Methode synthetisierten 16

Peptiden) abgespalten werden. Diese Reagenzien spalten nicht nur das Peptid vom Harz sondern auch die weiteren Seitenkettenschutzgruppen der Aminosaurederivate. Auf diese Weise erhalt man aufier bei der Verwendung von BHA- und 5 MBHA-Harzen das Peptid in Form der freien Saure. Bei den BHA- bzw. MBHA-Harzen erhālt man bei der Spaltung mit t

Fluorwasserstoff oder Trifluormethansulfonsaure das Peptid als Saureamid. Weitere Verfahren zur Herstellung von Peptidamiden sind in EP-A 287 882 und EP-A 322 348 10 beschrieben. Hier erfolgt die Abspaltung der Peptidamide vom Harz durch Behandlung mit in der Peptidsynthese iiblicherweise verwendeten mittelstarken Sauren (z.B.

Trifluoressigsaure) wobei als Kationenfanger Substanzen wie Phenol, Kresol, Thiokresol, Anisol, Thioanisol, 15 Ethandithiol, Dimethylsulfid, Ethylmethylsulfid oder ahnliche in der Festphasensynthese iibliche Kationenf anger einzeln oder eine Mischung von zwei oder mehr dieser Hilfsmittel zugesetzt werden. Die Trifluoressigsaure kann dabei auch durch geeignete Losungsmittel, wie z.B. 20 Methylenchlorid, verdunnt angewendet werden.

Fails die tert.-Butyl bzw. Benzylseitenketten-Schutzgruppen der Peptide erhalten bleiben sollen, wird die Abspaltung des an einem besonders modifizierten Tragerharz 25 synthetisierten Peptides mit 1 % Trifluoressigsaure in

Methylenchlorid durchgefuhrt, wie. z.B. bei R.C. Sheppard J. Chem. Soc.# Chem. Comm. 1982, 587 beschrieben. Sollen einzelne tert.-Butyl bzw. Benzylseitenketten-Schutzgruppen erhalten bleiben, so verwendet man eine geeignete 30 Kombination der Synthese- und Abspaltmethoden.

Filr die Synthese von Peptiden mit einer C-terminalen Amidgruppierung oder einer ω-Amino- bzw. u-Guanidinoalkylgruppierung wird ebenfalls das von Sheppard 35 beschriebene modifizierte Tragerharz verwendet. Nach der

Synthese wird das in der Seitenkette vollgeschutzte Peptid 17 LV10290 vom Harz abgespalten und anschlieBend in klassischer Losungssynthese mit dem entsprechenden Amin bzw. w-Aminoalkylamin oder u-Guanidinoalkylamin umgesetzt, wobei gegebenenfalls vorhandene weitere funktionelle Gruppen in 5 ' bekannter Weise temporar geschutzt werden konnen.

Ein weiteres Verfahren zur Herstellung von Peptiden mit einer ω-Aminoalkylgruppierung ist in EP-A 264 802 beschrieben. 10

Die Peptide der vorliegende Erfindung wurden vorzugsweise - unter Verwendung der Festphasentechnik nach zwei generellen Schutzgruppentaktiken synthetisiert: 15 Die Synthese erfolgte mit einem automatischen

Peptidsynthesizer Modeli 430 A der Fa. Applied Biosystems unter Verwendung von Boc- bzw. Fmoc-Schutzgruppen zur temporaren Blockierung der o-Aminogruppe. 20 Bei Verwendung der Boc-Schutzgruppe wurden fiir die Synthese die vom Hersteller des Gerātes vorprogrammierten Synthesezyklen benutzt.

Die Synthese der Peptide mit einer freien Carboxylgruppe am 25 C-terminalen Ende erfolgte an einem mit der entsprechenden Boc-Aminosaurē funktionalisiertem 4-(Hydroxymethyl)phenyl-acetamidomethylpolystyrolharz (R.B. Merrifield, J. Org. Chem. 43, 2845 (1978)) der Fa. Applied Biosystems. Fur die Herstellung der Peptidamide wurde ein MBHA-Harz derselben 30 Firma verwendet.

Als Aktivierungsreagenzien dienten N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid oder Ν,Ν'-Diisopropylcarbodiimid. Die Aktivierung erfolgte als symmetrisches Anhydrid, als HOBt-Ester oder HOObt-Ester in CH2CI2, CH2CI2 - DMF-Gemischen oder NMP. Fūr die Kupplung wurden 2-4 Aguivalente an aktiviertem Aminosaurederivat 35 18 eingesetzt. Fur Falle in denen die Kupplung unvollstāndig verlief, wurde die Reaktion wiederholt.

Bei der Verwendung der Fmoc-Schutzgruppe zum temporaren 5 Schutz der α-Aminogruppe wurden fiir die Synthese mit dem automatischen Peptid-Synthesizer Modeli 430A der Fa.

Applied Biosystems eigene Syntheseprogramme eingegeben. Die Synthese erfolgte an einem p-Benzyloxybenzylalkohol-Harz (S. Wang, J.Am.Chem.Soc. 9ji, 1328 (1973)) der Fa. Bachem 10 das nach bekannter Methode (E. Atherton et al. J.C.S.Chem. Comm. 1981, 336) mit der'entsprechenden Aminosaure · verestert war. Die Aktivierung der Aminosaurederivate als HOBt- oder HOObt-Ester erfolgte direkt in den vom Geratehersteller gelieferten Aminosāurecartridges. durch 15 Zugabe einer Losung vori Diisopropylcarbodiimid in DMF zu der vorher eingewogenen Mischung aus Aminosaurederivat und HOBt oder HOObt. Ebenfalls eingesetzt werden konnen in Substanz hergestellte Fmoc-Aminosaure-OObt Ester wie sie in EP-A 247 573 beschrieben sind. Die Abspaltung der 20 Fmoc-Schutzgruppe erfolgte mit einer 20 %igen Losung von Piperidin in DMF im ReaktionsgēfaB. Der verwendete Ūbe'rschuB an reaktivem Aminosaurederivat betrug 1,5 bis 2,5 AquivalenteFails die Kupplung nicht vollstāndig war, wurde sie wie bei der Boc-Methode wiederholt. 25

Die erfindungsgemaBen Peptide haben einzeln oder in Kombination eine bradykinin-antagonistische Wirkung, die in verschiedenen Modellen getestet werden kann (s. Handbook of Exp. Pharmacol. V°1· 25, Springer Verlag, 1970, S. 53 -30 55), so z. B. am isolierten Rattenuterus, am

Meerschweinchenileum. oder an der isolierten Pulmonalaterie des Meerschweinchens. Fūr die Testung der erfindungsgemaBenPeptide an der 35 isolierten Arteria pulmonalis werden Meerschweinchen 19 LV10290 (Dunkin Hartley) mit einem Gewicht von 400 - 450 g durch Genickschlag getotet.

Der Brustkorb wird geoffnet und die Arteria pulmonalis 5 vorsichtig herausprapariert. Das umlieg'ende Gewebe wird sorgfaltig entfernt und die Arteria pulmonalis in einem Winkel von 45° spiralig aufgeschnitten.

Der GefaBstreifen von 2,5 cm Lange und 3 - 4, mm Breite wird 10 in einem 10 ml fassenden Organbad, das mit Ringerlosung gefūllt ist, fixiert.

Zusammensetzung der Losung in mmol/1

NaCl 154 KC1 5,6 CaCl2 1/9 NaHC03 2,4' Glukose 5,0 20-

Die Losung wir mit 95 % 02 und 5 % C02 durchperlt und auf 37° C erwārmt. Der pH betrāgt 7,4, die Vorlast am Gefāfistreifen betragt 1,0 g. 25 Die isotonische Kontraktionsānderungen werden mit einem

Hebelvorsatz und einem HF-Modēm (Wegmesser) von Hugo Sachs erfaBt und auf einen Kompensationsschreiber (BEC, Goerz Metrawatt SE 460) registriert; 30 Nach 1 Stunde Aquilibrierung wird mit dem Versuch begonnen. Nachdem die Gefāfistreifen ihre maximale Empfindlichkeit gegenuber 2 x 10" mol/1 Bradykinin erreicht haben -Bradykinin fuhrt zu einer Kontraktion der GefaBstreifen -werden die Peptide in den Dosen 5 x 10"8 - 1 x 10"5 mol/1 jeweils 10 Minuten einwirken lassen und nach erneuter Gabe 35 20 von Bradykinin die Abnahme des Effektes von Bradykinin gegenuber der Kontrolle verglichen.

Zur Erkennung eines partialagonistischen Effektes werden die Peptide in den Dosen 1 x 10" ^ - 1 x 10" ** mol/1 verwendet.

Die aus den Dosiswirkungskurven errechneten ICgQ-Werte der erfindungsgemaBen Peptide sind in der Tabelle 1 aufgefvihrt.

Tabelle 1:

Verbindung ICgg rm H-(D)-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Leu-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH 5,9*10"^

Der therapeutische Nutzen der erfindungsgemāBen Peptide umfaBt aile pathologischen Zustande, die durch Bradykinin und Bradykinin verwandte Peptide vermittelt, ausgelost oder unterstiitzt werden. Dies beinhaltet u.a. Traumata, wie Wunden, Verbrennungen, Ausschlage, Erytheme/ Odeme, Angina, . Arthritis, Asthma, Allergien, Rhinitis, Schock,

Entzundungen, niedriger Blutdruck, Schmerz, Juckreiz und veranderte Sperma-Motilitat.

Die Erfindung betrifft daher auch die Verwendung von Peptiden der Formel I als Heilmittel und pharmazeutische Prāparate, die diese Verbindungen enthalten.

Pharmazeutische Praparate enthalten eine wirksame Menge des Wirkstoffs der Formel I - einzeln oder in Kombination -zusammen mit einem anorganischen oder organischen pharmazeutisch verwendbaren Tragerstoff.

Die Anwendung kann enteral, parenteral - wie z. B. subkUtan, i. m. oder i. v. sublingual, epikutan, nasal, rēktai, 21 · LV10290 intravaginal, intrabukkal oder per Inhalation erfolgen. Die Dosierung des Wirkstoffs hāngt von der Warmbluter-Spezies, dem Korpergewicht/ Alter und von der Applikationsart ab.

Die pharmazeutischen Prāparate.der vorliegenden Erfindung werden in an sich bekannten Losungs-, Misch-, Granulier-oder Dragierverfahren hergestellt.

Fur die orale Anwendungsform oder zur Applikation auf die Schleimhaute werden die aktiven Verbindungen mit den dafūr iiblichen Zusatzstoffen wie Tragerstoffen, Stabilisatoren oder inerten Verdiinnungsmitteln vermischt und durch iibliche Methoden in geeignete Darreichungsformen gebracht/ wie . Tabletten, Dragees, Steckkapseln, waBrige, alkoholische oder olige Suspensionen oder wāBrige/ alkoholische oder olige Losungen. Als inerte Trager konnen z.B. Gummi arabicum, Magnesia, Magnesiumcarbonat, Kaliumphosphat, Milchzucker, Glucose, Magnesiumstearylfumarat oder Starke, insbesondere Maisstarke verwendet werden. Dabei kann die Zubereitung sowohl als Trocken- und Feuchtgranulat erfolgen. Als olige Trāgerstoffe oder Losungsmittel konunen beispielsweise pflanzliche oder tierische Ole in Betracht, wie Sonnenblumenol und Lebertran.

Ein .Praparat fur die topische Anwendung kann als waBrige oder olige Losung, Lotion, Emulsion oder Gelee, Salbe oder Fettsalbe oder/ fails moglich/ in Sprayform vorliegen, wobei gegebenenfalls durch Zusatz eines Polymers die Haftung verbessert werden kann.

Fiir die intranasale Anwendungsform werden die. Verbindungen mit den dafur ublichen Zusatzstoffen wie Stabilisatoren oder inerten Verdūnnungsmitteln vermischt und durch ūbliche· Methoden in geeignete Darreichungsformen gebracht, wie waSrige/ alkoholische oder olige Suspensionen oder waBrige/ alkoholische oder olige Losungen. WaBrigen intranasalen Zubereitungen konnen Chelatbildner, •Etl^lendiamin-N/N/N',N'- 22 tetraessigsaure, Citronensaure, Weinsaure oder deren Salze zugefugt werden. Die Applikation der Nasallosungen kann mittels Dosierzerstauber erfolgen oder als Nasaltropfen mit viskositātserhohendem Anteil bzw. Nasengels oder 5 Nasencremes.

Fur die inhalative Anwendung konnen Vernebler oder Druckgaspackungen unter Verwendung inerter Tragergase benutzt werden. 10

Zur intravenosen, subkutanen, epikutanen oder intradermalen Applikation werden die aktiven Verbindungen oder deren physiologisch vertragliche Salze/ gewiiņschtenf alls mit den pharmazeutisch ublichen Hilfsstoffe'n, beispielsweise zur 15 Isotonierung oder pH-Einstellung sowie Losungsvermittler/

Emulgatoreņ, oder anderen Hilfsstoffen, in Losung,

Suspension oder Emulsion gebracht.

Aufgrund der kurzen Halbwertszeiten ēiniger der 20 beschriebenen Arzneistoffe in Korperflussigkeiten ist der

Einsatz von injizierbaren Retardzubereitungen sinnvoll. Als Arzneiformen konnen z. B. olige Kristallsuspensionen, Mikrokapseln, Rods oder Implantate verwendet werden, wobei die letzteren aus gewebevertraglichen Polymeren/ 25 insbesondere bioabbaubaren Polymeren/ wie z. B. auf der

Basis von Polymilchsaure-Polyglykolsaure-Copolymeren oder Humanalbumin aufgebaut sein konnen.

Ein geeigneter Dosisbereich fur topische und inhalative 30 Anwendungsformen sind Losungen mit 0,01-5 mg/ml, bei systemischen Applikationsformen sind 0,01-10 mg/kg geeignet.

Verzeichnis der Abkurzungen:

Die fur Aminosāuren verwendeten Abkurzungen entsprechen dem ' 35 in der Peptidchemie ublichen drei Buchstaben-Code wie er in Europ. J. Biochem. 138, 9 (1984) beschrieben ist. Weitere verwendete Abkurzungen sind nachfolgend aufgelistet. 23 LV10290

Acm Acetamidomethyl e-Ahx e-Aminohexanoyl Aoc cis, endo-2-Azabicyclo[3.3.0]octan-3-S-carb Boc tert.-Butyloxycarbonyl 5 But tert.-Butyl Bzl Benzyl CDF Chlor-(D)-phenylalanyl Cha Cyclohexylalanyl Chg Cyclohexylglycyl 10 Cl-Z 4-Chlor-benzyloxycarbonyl DMF Dimethylformamid DOMT 0-Methyl-(D)-Threonyl Dnp 2,4-Dinitrophenyl Fmoc 9-Fluorenylmethyloxycarbonyl 15 MDY 0-Methyl-(D)-Tyrosyl Me Methyl 4-Mebzl 4-Methylbenzyl Mtr 4-Methoxy-2/3/6-trimethylphenyllsuli'onyl Mts Mesitylen-2-sulfonyl 20 Nal Naphthy1alany1 NMP N-Methylpyrrolidin Npg Neopentylglycyl Oic cis-endo-Octahydroindol-2-carbonyl Opr Isoxazolidin-3-ylcarbonyl 25 . Pal Pyridylalanyl‘ • Pmc 2,2,5,7,8-Pentamethylchroman-6-sulfonyl Tbg tert.-Butylglycyl TFA Trifluoressigsaure' Thia 2-Thienylalanyl 30 Tcs 4-Methylphenylsulfonyl Tic 1,2,3,4-Tetr ahydr oisochinolin-3-ylcarb ohy1 Trt Trityl

Die folgenden Beispiele sollen die bevorzugten Methoden zur Festphasen-Synthese der erfindungsgemāBen Peptide verdeutlichen, ohne daB die Erfindung darauf eingeschrankt wāre. 35 24

Man verwendete folgende Aminosaure-Derivate:

Fmoc-Arg(Mtr)-OH, Boc-(D)-Arg-OH, Fmoc-Arg(Pmc)-OH, Fmoc-Hyp-OH, Fmoc-Pro-OObt, Fmoc-Gly-OObt, Fmoc-Phe-OObt, 5 Fmoc-Ser(tBu)-OObt, Fmoc-(D)-Tic-OH, Fmoc-Gln-OH,

Fmoc-Aoc-OH, Fmoc-Thia-OH, Fmoc-Opr-OH, Fmoc-(D)-Asn-OH, Fmoc-3-Ala-OH, Fmoc-Oic-OH.

Beispiel 1: 10 .

H-(D)-Arg-Arg-Hyp-Pro-Gly-Leu-Ser-(D)-Tic-Oic-Arg-OH wurde mit einem Peptid-Synthesizer Modeli 430 A der Fa. Applied Biosystems unter Verwendung der Fmoc-Methode an 15 einem mit Fmoc-Arg(Mtr)-OH.veresterten p-Benzyloxybenzylalkohol-Harz der Fa. Novabiochem (Beladung ca. 0,5 mmol/g Harz) stufenweise aufgebaut. Es wurde 1 g des Harzes eingesetzt und die Synthese mit Hilfe eines fur die Fmoc-Methode modifizierten Synthese-Programmēs 20 durchgefiihrt.

In die Cartridges des Synthesizers wurden jeweils 1 mmol der Aminosaurederivate mit freier Carboxylgruppe zusammen mit 0,95 mmol HOObt eingewogen. Die Voraktivierung dieser 25 Aminosauren erfolgte direkt in den Cartridges durch Losen in 4 ml DMF und Zugabe von 2 ml einer 0,55 mol Losung von Diisopropylcarbodiimid in DMF.

Die HOObt-Ester der anderen Aminosauren wurden in 6 ml NMP gelost und dann ebenso wie die in situ voraktivierten 30 Aminosauren an das vorher mit 20 % Piperidin in DMF entblockierte Harz gekuppelt. Nach beendeter Synthese wurde das Pe'ptid unter gleichzeitiger Entfernung der Seitenkettenschutzgruppen mit Trifiuoressigsāure unter Verwendung von Thioanisol und Ethandithiol als 35 Kationenfānger vom Harz abgespalten. Der nach Abziehen der LV10290 25

Trifluoressigsaure erhaltene Ruckstand wurde mehrfach mit Essigester digeriert und zentrifugiert. Der verbliebene Ruckstand wurde an ®Sephadex LH 20 mit 10 %iger Essigsaure chromatographiert. Die das reine Peptid enthaltenden Eraktionen wurden vereinigt und gefriergetrocknet MS(FAB) : 1264 (M+H) 26 4 Patentansprūche:

1. Peptid der Formel I A-B-C-E-F-K-(D)-Tic-G-M-F'-I (I), LV 10290 5 in welcher 10 15 20 25 30 A a^) Wasserstoff, (C^- Cg) -Alky1, (C1-Cg)-Alkanoyl/ .· (Ci“Cg)-Alk°xycarb°nyl oder (Ci~ Cg)-Alky1sulf°ny1 bedeutet, in welchen jeweils 1, 2 oder 3 Wasserstoffatome gegebenenfalls durch 1, 2 oder 3 gleiche oder verschiedene Reste aus der Reihe Carboxy, Amino, (Gl“c4)“Alkyl/ (Cļ-C^l-Alkvlamino, Hydroxy, (ci~ C4)-Alkoxy/ . Halogen, Di-(Cļ-C4)-alkylamino, Carbamoyl, Sulfamoyl, (C^-C4)-Alkoxyc arbony1, (C6-Ci2)-Aryl und (Cg-C^2)*Aryl-(C2-C5)-alkyl ersetzt sind, oder in welchen jeweils 1 Wasserstoffatom gegebenenfalls durch einen Rest aus der Reihe (C3-Cg)-Cycloalkyl / (^1'" C4) - Alky 1 sul f ony 1, (Cļ_- C4) - Alky 1 sul f inyl, (Cg- Cj_2) - Ary 1- (C-^- C4) - alkylsulf onyl, (Cg-C12)-Aryl-(Ci~C4)-alky1sulfinyl, (ce-ci2)-Aryloxy^ 35 27 5 10 15 20 25 30 35 (C3-Cg)-Heterc>aryl und (C3-Cg)-Heteroaryloxy und 1 oder 2 Wasserstoffatome durch 1 oder 2 gleiche oder verschiedene Reste aus der Reihe Carboxy, Amino, (Cl“c4)-Alkylamino, Hydroxy, (Ci-C4)-Alk°xy# Halogen, Di- (C^-C^)-alkylamino, Carbamoyl/ Sulfamoyl, . ' (Ci~)-Alkoxycarb°nyl, (C6-Ci2)-Aryl und (c6-ci2)-Ary1-<ci-c5)-alkY1 ersetzt sind, a2) (C3-Cg)-Cycloalkyl/ Carbamoyl, das gegebenenfalls am Stickstoff durch (Ci~C6)-Alkyl oder (C6-Cļ2)-Aryl substituiert sein kann, (c7~c18 )-Aryloyl, (Cg-C22)-Arylsulfonyl oder (C3-Cg)-Heteroaryl oder (C3-Cg)-Heteroaroyl bedeutet, wobei in den unter a^j und a2j deflnierten Resten jeweils Heteroaryl, Aroyl, Arylsulfonyl und Heteroaroyl gegebenenfalls durch 1, 2, 3 oder 4 oder verschiedene Reste aus der Reihe Carboxy/ Amino, • Nitro, (ci"c4}-Alkylamino, Hydroxy, (cl“c4)“Aiky1/ (Cl“C4)-Alkoxy# 28LV10290

Halogen,

Cyano,

Di-(ci“c4)~alkylamino, Carbamoyl,

Sulfamoyl und (Cļ-C4)-Alkoxycarbonyl 10 substituiert ist, oder a-j) einen Rest der Formel II bedeutet, C - (II) II 0

R1 - N CH i k2 R3 wie A unter a·^) oder definiert ist, 15 R^ Wasserstoff oder Methyl bedeutet,

Wasserstoff oder (C^-C^)-Alkyl, vorzugsweise (C^-C^)-Alkyi, das gegebenenfalls durch 20 25 30

AminO/ substituiertes Amino,

Hydroxy,

Carboxy,

Carbamoyl/

Guanidino, substituiertes Guanidino/ /

UreidO/

Mercapto,

MethylmercaptO/

Phenyl/ 4-Chlorphenyl/ 4-Fluorphenyl/ · 4-Nitrophenyl, 4-Methoxyphenyl, 4-Hydroxyphenyl/

Phthalimido, 4-Imidazolyl/ 35 3-Indolyl, 2- Thienyl, 3- Thienyl, 2- Pyridyl/ 3- Pyridyl oder

Cyclohexyl monosubstituiert ist, bedeuten,. wobei substituiertes Amino fiir eine Verbindung -NH-A-und substituiertes Guanidino fiir eine Verbindung -NH-C(NH)-NH-A stehen, in deņen A wie unter a^) oder a2) definiert ist; fiir eine basische Aminosāure in der‘L- oder D-Konfiguration steht# die in der Seitenkette · substituiert sein kann; fiir eine Verbindung der Formel IIla oder Illb steht

G'-G'-Gly G'-NH-(CH2)n-CO (Illa) (Illb), worin

G1 unabhāngig voneinander einen Rest der Formel IV

R4 R5 0 I I II - N - CH -C - (IV) worin R4 und R^ zusammen mit den diese tragenden Atomen ein heterocyclisches mono, bi- oder tricyclisches Ringsystem mit 2 bis 15 C-Atomen bilden, und n 2 bis 8 ist; fiir den Rest einer neutralen, sauren oder basischen, aliphatischen oder alicyclisch - aliphatischen Aminosāure steht; unabhāngig voneinander den Rest einer neutralen, sauren oder basischen, aliphatischen oder aromatischen Aminosāure bedeutet, die in der·Seitenkette 30 LV10290 substituiert sein kann, oder fiir eine direkte Bindung steht; (D)-Tic den Rest der Formel V bedeutet;

H O ocr (V) 10 15 wie G' oben definiert ist oder eine direkte Bindung bedeutet; · F’ wie F definiert ist, einen Rest -NH-(ΟΗ^.^-, mit n = 2 bis 8, bedeutet, oder, fails G keine direkte Bindung bedeutet, fiir eine direkte Bindung stehen kann und, I -0H, -NH2 oder -NHC2H5 ist, K den Rest -NH-(CH2)x-CO- mit x = 1-4 bedeutet oder fiir 20 eine direkte Bindung steht, und M wie F definiert ist. sowie deren physiologisch vertrāgliche Salze. 25 2. Peptid der Formel I gemaB Anspruch 1, in welchem B Arg, Lys, Orn, 2,4-Diaminobutyroyl oder einen L-Homoargininrest bedeutet, wobei jeweils die Amino-30 bzw. die Guanidinogruppe der Seitenkette durch A wie unter a^) oder a2) in Anspruch 1 beschrieben substituiert sein kann; fiir den Rest einer aliphatischen oder alicyclisch-* aliphatischen Aminosaure in der L- oder D-Konfiguration steht, die in der Seitenkette 1 bis 14 C-Atome enthalt; 35 5 31 5 31 F' den Rest einer basischen Aminosaure in der L- oder D-Konfiguration, wie Arg oder Lys bedeutet, wobei die Guanidinogruppe bzw. Aminogruppe der Seitenkette durch A wie unter a·^) oder a£) in Anspruch 1 beschrieben substituiert sein kann, oder einen Rest -NH-(CH2)n -mit n = 2 bis 8 - bedeutet und j K fur den Rest -NH-(CH2)X-C0- mit x = 2-4 steht oder eine direkte Bindung bedeutet. 10 3. Peptid der Formel I gemāfl Anspruch 1 und/oder 2 in welchem * B Arg, Orn oder Lys bedeutet, wobei die Guanidinogruppe 15. bzw. die Aminogruppe der Seitenkette unsubstituiert ist oder durch (C]_-Cg)-Alkanoyl, (Cy-Cļ3)-Aryloyl, (C3-Cg)-Heteroaryloyl, (Cļ-Cg)-Alkylsulfonyl oder (Cg-Ci2)-Arylsulfonyl substituiert sein kann, wobei die Aryl-, Heteroaryl-, Aryloyl-, Arylsulfonyl- und 20 Heteroaryloylreste wie unter a2j beschrieben mit gegebenenfalls 1, 2, 3 oder 4 gleichen oder verschiedenen Resten substituiert sein konnen. E Leucin, Isoleucin, Norleucin, tert.-Butylglycin, Serin, 25 Threonin oder Cyclohexylalanin bedeutet und K fur eine direkte Bindung steht und M fur eine direkte Bindung steht. 4. Peptid der Formel I gemaB einem oder mehreren der

Ansprūche. 1 bis 3, sind Peptide der Formel I, in welchem A Wasserstoff, (D)- oder (L)-H-Arg,.(D)— oder (L)-H-Lys oder (D)— oder (L)-H-Orn bedeutet; 35 "· w / - LV10290 32 B Arg, Orn oder Lys bedeutet, wobei die Guanidinogruppe bzw. die Aminogruppe der Seitenkette durch Wasserstof£, (Cļ-Cg)-Alkanoyl, ((~7"(''i3)-Aryloyl/ (C3-Cg-Heteroaryloyl, (C^-Cg)-Alkylsulfonyl oder (C6-Ci2)-Arylsulf°nyl substituiert sein kann, wobei die Aryl-, Heteroaryl-, Aryloyl-, Arylsulfonyl- und Heteroaryloylreste gegebenenfalls mit 1, 2, 3 oder 4 gleichen oder verschiedenen Resten aus der Reihe Methyl, Methoxy und Halogen substitiuiert sein konnen. C ΡΓΟ-ΡΓΟ-σΐγ, Hyp-Pro-Gly oder Pro-Hyp-Gly bedeutet E Leu, Ile oder Cha bedeutet F Ser, Hser, Εγε, Leu, Vai, Nle, Ile oder Thr bedeutet K fur eine direkte Bindung steht M fiir eine direkte Bindung steht G fur den Rest eines heterocyclischen Ringsystems der Formel IV steht, wobei die Reste der Heterocyclen Pyrrolidin-2-carbonsāure; Piperidin-2-carbonsaure; l,2,3,4-Tetrahydroisochinolin-3-carbonsāure, cis- und trans-Decahydroisochinolin-3-carbonsāure; cis-endo-, cis-exo-, trans-Octahydroindol-2-carbonsāure, cis-endo-, cis-exo-, trans-Octahydrocyclopentano[b]pyrrol-2-carbonsāure oder Hydroxyprolin-2-carbonsāure bevorzugt sind. F und F' Arg bedeuten und I fiir OH steht. 5. Herstellung eines Peptids der Formel I gemāB einem oder mehreren der Anspruche 1 bis 4, dadurph gekennzeichnet, dafl man 33 a) ein Fragment mit C-terminaler freier Carboxylgruppe oder dessen aktiviertes Derivat mit einem entsprechen-den Fragment mit N-terminaler freier Aminogruppe um-setzt oder b) das Peptid stufenwe'ise aufbaut, in der nach (a) oder (b) erhaltenen Verbindung gegebenenfalls eine oder mehrere zum Schutz anderer Funktionen temporār eingefiihrte Schutzgruppen abspaltet und die so erhaltenen Verbindungen der Formel I gegebenenfalls in ihr physiologisch vertragliches Salz iiberfuhrt. 6. Verwendung eines Peptids der Formel I gemafl einem oder mehreren der Anspruche 1 bis 4 als Heilmittel. 7. Verwendung eines Peptids der Formel I gemafi einem oder mehreren der Anspruche 1 bis 4 zur Behandlung pathologischer Zustande, die durch Bradykinin \md Bradykinin verwandte Peptide vermittelt, ausgelost oder unterstutzt werden. 8. Pharmazeutisches Mittel enthaltend ein Peptid der Formel I gemaB einem oder mehreren der Anspruche 1 bis 4. 34 LV10290

Zusammenfassung

Peptide rait bradykinin-antagonistischer Wirkung Peptide der Forroel I A-B-C-E-F-K-(D)-Tic-G-M-F'-I (I) 5 worin A fiir Wasserstoff, Alkyl, Alkanoyl/ Alkoxycarbonyl, Alkylsulfonyl, Cycloalkyl/ Aryl, ArylsuIfonyl, Heteroaryl oder eine Aminosaure steht, die gegebenenfalls substituiert sein konnen, B-eine basische Aminosaure ist, C ein Di- oder Tripeptid bedeutet, E fiir den Rest einer aliphatischen oder 10 alicyclisch - aliphatischen Aminosaure steht, F unabhangig voneinander eine gegebenenfalls in der Seitenkette substituierte Aminosaure oder eine direkte Bindung bedeutet, G eine Aminosaure ist, F' wie F definiert ist, -NH-(CH2)2_8 °der gegebenenfalls eine direkte Bindung 15 bedeuten kann, I -OH, -NH2 oder -NHC2H5 ist und K einen Rest -NH- (CH2)^_4-CO- bedeutet oder fiir eine direkte Bindung steht, haben bradykinin-antagonistische V/irkung.

Ihr therapeutischer Nutzen umfafit aile pathologischen Zustande, die durch Bradykinin und Bradykinin verwandte 20 Peptide vermittelt, ausgelost oder unterstiitzt werden. Die Peptide der Formel I werden nach bekannten ’Methoden der Peptidsynthese hergestellt.

Claims (8)

1. LV10290 IZGUDROJUMA FORMULA 1. Pegtīds ar formulu (I) A-B-C-E-F-K- (D)-Tic - G - H - F’ - I (I) kurā: A ir: a*) ūdeņradis, Cj_g-alkilgrupa, C^_g-alkanoilgrupa, Cj_g-alkoksikarbonilgrupa, C^g-alkilsulfonilgrupa, pie kam šajās grupās 1-3 ūdeņraža atomi var būt aizvietoti ar 1 - 3 vienādiem vai dažādiem aizvietotājiem no grupas: karboksilgrupa, amlnogrupa, C^_^-alkilgrupa, ^-alki laminogrupa, hidroksilgrupa, C^^ralkoks lgrupa, halogēns, di-iCj^-alklUaminogrupa, karbamoilgrupa, sulfa-moilgrupa, C^_^-alkoksikarbonilgrupa, C^^-ari lgrupa, Cg_ļ2“arll-Cj_5-alkllgrupa; 1 vai arī viens ūdeņraža atoms aizvietots ar aizvietotāju no grupas: C3_g-cikloalkilgrupa, Cj_^-alkilsulfonilgrupa, Cj_^-al- kilsulfinilgrupa, C- ļ0-aril-C, --alkilsulfonilgrupa, o-l£ 1 C^^-aril-Cj^-alkilsulfinilgrupa, Cg_j2-aril-0ksigrupa · C3_g-heteroarilgrupa, C3_9-heteroariloksigrupa; un 1 - 2 ūdeņraža atomi aizvietoti ar 1 - 2 aizvietotājiem no grupas: karboksilgrupa, aminogrupa, Cj^-alkilaminogrupa, hidr- oksilgrupa, C^_^-alkoksigrupa, halogēns, di-CC^-alkil) aminogrupa, karbamoilgrupa, sulfamoil- grupa, C^_^-alkoksikarbonilgrupa, C^jg-ari lgrupa, C,. .0-aril-C1 -alkilgrupa; b"lZ 1-o -cikloalkilgrupa, -8 rbamoilgrupa, kurai pie N atoma var būt C, ,,-alkil- l—o upa vai C^^-arilgrupa, _ļ2~arilgrupa, _^g-ariloilgrupa, _ļ2-arilsulfonilgrupa, g-heteroarilgrupa, 1 2 pie kam aizvietotājos a un a minētās arilgrupas, hetero-arilgrupas, ariloilgrupas, arilsulfonilgrupas un hetero-ariloilgrupas var būt aizvietotas ar 1 - 4 vienādiem vai
2. 2 LV 10290 dažādiem aizvietotājiem no grupas: karboksilgrupa, aminogrupa, nitrogrupa, C^-alkilgrupa, Cļ_^-alkilaminogrupa, hidroksilgrupa, Cj^-alkokslgrupa, · halogēns, ciāngrupa, di-(Cj_^-alkil)aminogrupa, karbamoil-grupa, sulfamoilgrupa, Cļ_4-alkoksikarbonilgrupa; vai arī: 3 a ) aizvietotājs ar formulu (II) R1- N - CH - CO - * (II) R2 R3 kurā: 1 12 R nozīmes ir aizvietotājos a un a jau minētās; 2 R ir ūdeņradis vai metilgrupa;
3. 3 R ir ūdeņradis vai C, .-alkilgrupa, sevišķi, l—O ’ Cj_^-alkilgrupa, kas var būt aizvietota ar vienu aizvietotāju no grupas: aminogrupa, aizvietota aminogrupa, hidroksilgrupa, karboksilgrupa, karbamoilgrupa, guanidī-nogrupa, aizvietota guanidīnogrupa, ureīdogru-pa, merkaptogrupa, metilmerkaptogrupa, fenil-grupa, 4-hlorfenilgrupa, 4-fluorfenilgrupa, 4-nitrofenilgrupa, 4-metoksifenilgrupa, 4-oksi-fenilgrupa, ftalimidogrupa, 4-imidazolilgrupa, 3-indolilgrupa, 2-tienilgrupa, 3-tienilgrupa, 2-piridilgrupa, 3-piridilgrupa, cikloheksilgru-pa, pie kam aizvietota aminogrupa apzīmē savienojumu -NH-A- un 3 aizvietota guanidīnogrupa apzīmē savienojumu -NH-C(=NH)-NHA 12 kur A nozīmes ir dotas ar aizvietotāju a un a nozīmēm; B ir bāziska aminoskābe ar L- vai D-konfigurāciju, kura var būt aizvietota sānu virknē; C ir savienojums ar formulu (IIla) vai (Illb): G’ - G’ - Gly (IIla) G’-HN- (CH^- CO (Illb) kur G’ neatkarīgi viens no otra var būt atlikums ar formulu (IV) - N - CH-CO- (IV) R4 R5 4 5 kurā R un R abi kopa ar atomiem, pie kuriem tie atrodas, var veidot heterociklisku sistēmu ar 1 - 3 gredzeniem, kurā ir 2 - 15 oglekļa atomi; n = 2 - 8; E ir neitrālas, skābas vai bāziskas alifātiskas vai alicikliski-alifātiskas aminoskābes palieka; F neatkarīgi viens no otra ir neitrālas, skābas vai bāziskas alifātiskas vai aromātiskas aminoskābes atlikums, kurš var būt aizvietots sānu virknē, vai arī vienkāršā saite; 4 LV10290 (D)-Tic lr grupa ar formulu (V)

   (V) G ir ar tādu pašu nozīmi, kā G’, vai ari vienkāršā saite; F* ir ar tādu pašu nozīmi, kā F, vai ari grupa -NH-(CH9) ~, kur c Π n=2 “'8; vai arī, Ja G nav vienkāršā fcaite, var apzīmēt, vienkāršo saiti; I ir -OH, -NH_ vai -NHC0H_; Z Z b K lr grupa -NH-(CH_) -CO-, kur x=l - 4, vai arī apzīmē vienkāršo w Λ saiti; M ir tādas pašas nozīmes, kā F, kā ari šo savienojumu fizioloģiski pieņemamās sālis. 2. ar formulu (I) pēc punkta 1, kurā: B ir Arg, Lys, Orn, 2,4-diamlnobutiroilgrupa vai L-homoarginlna palieka, pie kam sānu virknes amlnogrupa vai guanldlnogrupa var 1 2 būt aizvietota ar aizvietotājiem A atbilstoši nozīmēm a un a pēc punkta 1; 5 E lr alifātiskas vai allcikliski-alifātiskas L- vai D-aminoskābes palieka, kuras sānu virknē ir 1 - 14 oglekļa atomi; F* ir bāziskas L- vai D-aminoskābes palieka, piemēram, arglnīna vai lizīna palieka, pie kam sānu virknes aminogrupa vai guanidīnogrupa 1 2 var būt aizvietota ar aizvietotājiem A atbilstoši nozīmēm a un a pēc punkta 1, vai arī grupa -NH-(CH9) kur n=2 - 8; Μ Π K ir grupa -NH-(CH9) -C0-, kur x=l - 4, vai arī apzīmē vienkāršo Μ X saiti. 3. Peptīds ar formulu (I) pēc punkta 1 un/vai 2, kura: B ir Arg, Lyš vai Orn atlikums, pie kam sānu virknes aminogrupa vai guanidīnogrupa var būt aizvietota ar Cļ_g-alkanoilgrupu, C^_^-ar- iloilgrupu, Cg_g-heteroariloilgrupu, Cj_g-alkilsulfonilgrupu vai C6_i2~arilsulf°nilgrupu, pie kam heteroarilgrupas, arlloilgrupas, arilsulfonilgrupas, arilgrupas un heteroariloilgrupas var būt aiz- 2 vietotas, ka norādīts pie aizvietotāja a , ar 1 - 4 vienādiem vai dažādiem aizvietotājiem; E ir leicīns, izoleicīns, norleicīns, terc-butilglicīns, serīns, treonīns vai cikloheksilalanīns; K ir vienkāršā saite; M ir vienkāršā saite. 6 LV10290
4. 4. Peptlds ar formulu (I) pēc viena vai vairākiem punktiem 1-3, kurā: A ir ūdeņradis, (D)- vai (L)-H-Arg, (D)- vai (L)-H-Lys, (D)— vai (L)-H-Orn; B ir Arg, Lys vai Orn atlikums, pie kam sānu virknes aminogrupa vai guanidīnogrupa var būt aizvietota ar C^_g-aikanoilgrupu, C7_ļ3-ariloilgrupu, C^g-heteroariloilgrupu, Cļ_g-alkilsulfo-nilgrupu vai C^^-arilsulfonllgrupu, pie kam heteroarilgru-pas, ariloilgrupas, arilsulfonilgrupas, arilgrupas un hetero-ariloilgrupas var būt aizvietotas ar 1 - 4 vienādiem vai dažā- 4 diem aizvietotājiem no grupas: metilgrupa, metoksigrupa, halogēns; C ir Pro-Pro-Gly, Hyp-Pro-Gly vai Pro-Hyp-Gly; E ir Leu, Ileu, Thg vai Cha; F ir Ser, Hser, Lys, Leu, Vai, Nle, Ile vai THr; K ir vienkāršā saite; M ir vienkāršā saite; G ir heterociklisks atlikums ar formulu (IV), jo sevišķi tāds atlikums, kā pirolidIn-2-karbomskābes; piperidīn-2-karbonskā- f 7 bes; l,2,3,4-tetrahidrohinolīn-3-karbonskābes; cis- un trans-dekahldroizohinolīn-3-karbonskābes; cis-endo-, cis-ekso-, trans-oktahidrolndol-2-karbonskābes; cis-endo-, cis-ekso-. trans-oktahidrociklopentano[b]pirol-2-karbonskābes vai oksi-prolīn-2-karbonskābes atlikums; F’ ir Arg; I ir OH.
5. 5. Peptīda ar formulu (I) pēc viena vai vairākiem punktiem 1-4 iegūšanas paņēmiens, kas atšķiras ar to, ka : a) fragmentu ar brīvu C-terminālo karboksilgrupu, vai tā aktivē-to atvasinājumu apstrādā ar atbilstošu fragmentu, kurā ir brīva N-terminālā aminogrupa; vai b) peptīdu uzbūvē pakāpeniski; un pēc varianta (a) vai (b) iegūtajā peptīdā, Ja nepieciešams, nošķeļ vienas vai otras funkcionālās grupas aizsargāšanai izmantotās grupas, un tādā veidā iegūto savienojumu ar formulu (I) pārvērš tā fizioloģiski pieņemamā sālī.
6. 6. Peptīda ar formulu (I) pēc viena vai vairākiem punktiem 1-4 pielietojums par ārstniecības līdzekli.
7. 7. Peptīda ar formulu (I) pēc viena vai vairākiem punktiem 1-4 pielietojums tādu patoloģisko stāvokļu ārstēša nai, kurus Izsauc, uztur un veicina bradikinīns vai tam radniecīgie 8 LV10290 peptldi.
8. 8. Ārstniecības līdzeklis, kas satur peptīdu ar formulu (I) pēc viena vai vairākiem punktiem 1-4. 9