LT5177B - Daugiavalentė meningokokinio polisacharido-baltymo konjugato vakcina - Google Patents

Daugiavalentė meningokokinio polisacharido-baltymo konjugato vakcina Download PDF

Info

Publication number
LT5177B
LT5177B LT2003071A LT2003071A LT5177B LT 5177 B LT5177 B LT 5177B LT 2003071 A LT2003071 A LT 2003071A LT 2003071 A LT2003071 A LT 2003071A LT 5177 B LT5177 B LT 5177B
Authority
LT
Lithuania
Prior art keywords
polysaccharide
conjugate
protein
vaccine
meningitidis
Prior art date
Application number
LT2003071A
Other languages
English (en)
Other versions
LT2003071A (lt
Inventor
Robert P. Ryall
Original Assignee
Aventis Pasteur
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23001755&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=LT5177(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Aventis Pasteur filed Critical Aventis Pasteur
Publication of LT2003071A publication Critical patent/LT2003071A/lt
Publication of LT5177B publication Critical patent/LT5177B/lt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/095—Neisseria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/116—Polyvalent bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Šiame išradime aprašoma kombinuota vakcina, kuri siūlo plačią apsugą nuo meningokokinės ligos, kurią sukelia patogeninė bakterija Neisseria meningitidis. ši vakcina susideda iš keturių atskirų polisacharido-baltymo konjugatų, kurie yra sukomponuoti kaip viena vakcinos dozė. Išgryninti kapsuliniai polisacharidai iš Neisseria meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių yra chemiškai aktyvuojami ir selektyviai prijungiami prie baltymo-nešiklio kovalentiniu cheminiu ryšiu, sudarant polisacharido-baltymo konjugatus, galinčius išgauti ilgalaikį imunitetą prieš įvairius N. meningitidis kamienus vaikams bei suaugusiems. ą

Description

IŠRADIMO KILMĖ
Išradimo sritis
Bendrai imant, šis išradimas yra susijęs su medicinos sritimi, o konkrečiau su mikrobiologija, imunologija, vakcinomis ir apsisaugojimu nuo bakterinio patogeno sukeltos infekcijos imunizuojant.
Giminingų darbų santrauka
Visame pasaulyje pagrindinė meningito ir sepsio priežastis yra Neisseria meningitidis. Meningokokinės ligos paplitimo dažnis pastarųjų trisdešimties metų laikotarpiu yra 1-5 atvejai 100000 gyventojų išsivysčiusiose šalyse ir 1025 atvejai 100000 gyventojų besivystančiose šalyse. (Reido, F.X., Plikaytis, B.D. and Broome, C.V. (1995) Pediatric Infectious Disease Journal 14, pp. 643-657.). Epidemijų metu meningokokinės ligos paplitimo dažnis pasiekia 1000 atvejų 1000000 gyventojų. Jungtinėse Valstijose per metus pasitaiko apie 2600 bakterinio meningito atvejų ir vidutiniškai 330000 atvejų besivystančiose šalyse. Mirtingumo nuo jo dažinis yra 10-20 %.
Patogeniniai meningokokai yra įvynioti į polisacharidinę kapsulę, kuri yra pririšta prie organizmo membranos išorinio paviršiaus. Remiantis kapsulinio polisacharido imunologiniu specifiškumu buvo identifikuota trylika skirtingų meningokokų serogrupių (Frasch, C.E., Zollenger, W.D. and Poolman, J.T. (1985) Revievv of Infectious Diseases 7, pp. 504-510). Penkios iš šių trylikos serogrupių sukelia daugumą meningokokinių ligų; šios serogrupės yra A, B, C, W135 ir Y. A serogrupė yra atsakinga už daugelį epideminių ligų. B, C ir Y serogrupės sukelia daugumą endeminių ligų ir lokalizuotus ligos protrūkius.
Vienintelis žinomas gamtinis Neisseria meningitidis šaltinis yra žmogaus nosiaryklės gleivinė. Kolonizacija vyksta ir išoriniame gleivinės ląstelių paviršiuje, ir nosiaryklės subepiteliniame audinyje. Meningokokai gali būti nešiojami mėnesius. Meningokokai gan duii išplatinami arba per tiesioginį kontaktą, arba oro lašelių pavidalu. Meningokokai įsiskverbia pereidami per gleivinės epitelį per fagocitines vakuoles kaip endocitozės išdava. Šeimininko gynyba nuo meningokokų įsiskverbimo priklauso nuo bakteriolizės, kurioje tarpininkauja komplementas. Serumo antikūnai, kurie yra atsakingi už šią komplemento tarpininkaujamą bakteriolizę, yra nukreipti didžiąja dalimi prieš išorinį kapsulinį polisacharidą.
Buvo aprašytos vakcinos meningokokinio polisacharido pagrindu, kurios išgauna imuninį atsaką prieš kapsulinį polisacharidą. Šie antikūnai gali vykdyti serogrupei specifinio meningokoko komplemento tarpininkaujamą bakteriolizę. Buvo parodyta, kad meningokokinio polisacharido vakcinos yra veiksmingos vaikams ir suaugusiems (Peltola, H., MakelS, H., Kayhty, H., Jousimies, H., Herva, E., Hallstrom, K., Sivonen, A., Renkonen, O.V., Pettay, O., Karanko, V., Ahvonen, P., Sarna, S. (1997) The New England Journal of Medicine 297, pp. 686-691, ir Artenstein, M.S., Gold, R., Zimmerly, J.G., Wyle, F.A., Schneider, H., Harkins, C. (1970) The New England Journal of Medicine 282, pp. 417-420), bet efektyvumas yra ribotas kūdikiams ir mažiems vaikams (Reingold, A.L., Broome, C.V., Hightower, A.W., Ajello,
G. W., Bolan, G.A., Adamsbaum, C., Jonės, E.E., Philips, C., Tiendrebeogo,
H. , Yada, A. (1985) The Lancet 2, pp. 114-118). Paskesnės šio polisacharido dozės jauniesiems populiacijos atstovams sukelia silpną arba ir visai nesukelia stimuliuojančio atsako (Goldschneider, I., Lepow, M.L., Gotschlich, E.C., Mauck, F.T., Bachl, F., Randolph, M. (1973) The Journal of Infectious Diseases 128, pp. 769-776, ir Gold, R., Lepow, M.L., Goldschneider, I. bei Gotschlich, E.C. (1977) The Journal of Infectious Diseases 136, S31-S35). Meningokokinio polisacharido vakcinų sukelta apsauga yra neilgalaikė; buvo nustatyta, kad suaugusiems ir vaikams virš keturių metų amžiaus ji trunka 3-5 metus (Brandt, B.L., Artenstein, M.S. (1975) The Journal of Infectious Deseases 131, pp. S69-S72, Kayhty, Karanko, V., Peltola, H., Sarna, S, Makela, H. (1980) The Journal of Infectious Diseases 142, pp. 861-868, ir Cessey, S.J., Allen, S.J., Menon, A., Todd, J.E., Cham, K., Carlone, G.M., Turner, S.H., Gheesling, L.L., DeVVitt, W., Plikaytis, B.D., Greenvvood, B. (1993) The Journal of Infectious Diseases 167, pp. 1212-1216). Vaikams nuo vienerių iki keturių metų apsaugos trukmė yra mažesnė nei 3 metai (Reingold, A.L., et ai. 1985).
Polisacharidai negali prisijungti prie daugumos histosuderinamumo komplekso molekulių, o tai yra būtina sąlyga antigeno pasireiškimui ir Τ'pagalbinių limfocitų stimuliavimui, t.y. jie yra nuo T-ląstelių nepriklausantys antigenai. Polisacharidai gali stimuliuoti B limfocitus antikūnų produkcijai be Tpagalbinių limfocitų pagalbos. B limfocitų T-nepriklausomos stimuliacijos pasėkoje po imunizacijos šiais antigenais atsiranda indukcijos atminties trūkumas. Polisacharidiniai antigenai gali iššaukti labai efektyvius Tnepriklausomus atsakus suaugusiems, bet šie T-nepriklausomi atsakai yra silpni kūdikių ir mažų vaikų nesubrendusioje imuninėje sistemoje.
T-nepriklausomi polisacharidiniai antigenai gal būti paversti Tpriklausomais antigenais kovalentiškai prijungiant polisacharidus prie baltymų molekulių (“nešiklių arba “baltymų-nešiklių”). B ląsteles, kurios prijungia konjugato vakcinos polisacharidinį komponentą gali aktyvuoti peptidams, kurie yra konjuguoto baltymo-nešiklio dalis, specifinės pagalbinės T ląstelės. T-pagalbininkų atsakas į baltymą-nešiklį padidina antikūnų prieš polisacharidą produkciją
Buvo parodyta, kad B serogrupės polisacharidas yra silpnai imunogeninis arba neimunogeninis žmonių populiacijos atveju (Wyle, F.A., Artenstein, M.S., Brandt, G.L., Tramont, E.C., Kasper, D.L., Altieri, P.L., Berman, S.L., Lovventhal, J.P. (1972) The Journal of Infectious Diseases, 126, pp. 514-522). Šios serogrupės polisacharido cheminis prijungimas prie baltymų nežymiai pakeitė laboratorinių gyvūnų imuninį atsaką (Jennings, H.J. and Lugowski, C. (1981) The Journal of Immunology 127, pp. 1011-1018). Manoma, kad šios serogrupės polisacharido imuninio atsako nebuvimas atsiranda dėl struktūrinių panašumų tarp B serogrupės polisacharido ir polisialilintų šeimininko glikoproteinų, tokių kaip nervinių ląstelių adhezijos molekulės.
Buvo aprašyta meningokokinė konjuguota vakcina C serogrupės polisacharido pagrindu. Ši vienvalentė vakcina išgauna stiprų funkcinį antikūnų atsaką į kapsulinį polisacharidą esantį ant C serogrupę atitinkančių N. meningitidis kamienų. Tokia vakcina gali apsaugoti tik nuo C serogrupės bakterijų sukeltos ligos.
Dabar esančios vakcinos meningoKOKimo poiisacnarido pagrindu yra riboto naudojimo vakcinos mažiems vaikams ir neduoda ilgalaikės apsaugos suaugusiems. Vienintelė meningokokinė vakcina, kuri, kaip buvo parodyta, gali duoti ilgalaikę apsaugą nuo meningokokinės infekcijos rizikos visoms grupėms, įskaitant vaikus, remiasi polisacharidu iš vienos N. meningitidis serogrupės ir neduoda apsaugos nuo infekcijos kitomis serogrupėmis. Taigi, egzistuoja poreikis meningokokinės konjuguotos vakcinos, galinčios suteikti plačią ilgalaikę apsaugą nuo meningokokinės ligos vaikams ir suaugusiems, susijusiems su meningokokinės infekcijos rizika. Šio išradimo daugiavalenčiai meningokokiniai polisacharidai išsprendžia šį poreikį pateikiant vakcinos kompozicijas, kuriose imunogeniniai polisacharidai iš daugumos N. meningitidis patogeninių serogrupių buvo paversti T-priklausomais antigenais sujungiant juos su baltymais-nešikliais.
IŠRADIMO SANTRAUKA
Šiame išradime yra pateikiamos meningokokinio polisacharido-baltymo konjugato imunologinės kompozicijos gydymui ligų, kurias sukelia patogeninis Neisseria meningitidis.
Šiame išradime yra pateikiamos imunologinės kompozicijos, turinčios du arba daugiau baltymo-polisacharido konjugatą kur kiekviename konjugate yra kapsulinis polisacharidas iš skirtingos N. meningitidis serogrupės, sujungtas su baltymu-nešikliu.
šiame išradime yra pateikiamos imunologinės kompozicijos, turinčios du arba daugiau atskirų baltymo-polisacharido konjugatą kur kiekviename konjugate yra kapsulinis polisacharidas iš skirtingos N. meningitidis serogrupės, sujungtas su baltymu-nešikliu.
Šiame išradime yra pateikiamos meningokokinio polisacharido-baltymo konjugato vakcinos nuo patogeninio Neisseria meningitidis. Šiame išradime yra pateikiamos daugiavalentės meningokokinės vakcinos, sudarytos iš imunologiškai efektyvių kiekių 2-4 atskirų baltymo-polisacharido konjugatą kur kiekvienas konjugatas turi skirtingą kapsulinį polisacharidą sujungtą su baltymu-nešikliu, ir kur kiekvienas kapsulinis polisacharidas yra pasirinktas iš grupės, kurią sudaro kapsuliniai polisacharidai iš A, C, W-135 ir Y serogrupių.
Šiame išradime taip pat yra pateikiami uaugiavaientes meningokokinio polisacharido-baltymo kompozicijos pagaminimo būdai, susidedantys iš dviejų arba daugiau kapsulinių polisacharidų iš patogeninių Neisseria meningitidis išskyrimo; išskirtų polisacharidų prijungimo prie vieno arba daugiau baltymųnešiklių ir konjugatų sumaišymo pagaminant daugiavalentę meningokokinio polisacharido-baltymo kompoziciją.
Šiame išradime taip pat yra pateikiamas imunologinio atsako į N. meningitidis kapsulinį polisacharidą indukavimo būdas, apimantis šio išradimo imunologinės kompozicijos imunologiškai aktyvaus kiekio įvedimą žmogui arba gyvūnui.
Šiame išradime yra pateikiama daugiavalentė meningokokinė vakcina, sudaryta iš imunologiškai efektyvių kiekių 2-4 atskirų baltymo-polisacharido konjugatų, kur kiekvienas konjugatas turi skirtingą kapsulinį polisacharidą, sujungtą su baltymu-nešikliu, ir kur kiekvienas kapsulinis polisacharidas yra pasirinktas iš grupės, kurią sudaro kapsuliniai polisacharidai iš A, C, W-135 ir Y serogrupių.
Šiame išradime yra pateikiamas žmogaus arba gyvūno, imlaus užkrėtimui N. meningitidis, apsaugojimo būdas, apimantis šio išradimo vakcinos imunologiškai efektyvios dozės įvedimą žmogui arba gyvūnui.
Visi patentai, patentinės paraiškos ir kitos čia cituojamos publikacijos yra pridedamos kaip literatūros šaltiniai.
SMULKUS IŠRADIMO APRAŠYMAS
Šis išradimas apima dviejų arba daugiau atskirų baltymo-polisacharido konjugatų imunologinę kompoziciją, kurioje kiekvienas iš konjugatų turi kapsulinį polisacharidą, sujungtą su baltymu-nešikliu. Taigi, šis išradimas apima kompozicijas, kurios susideda iš dviejų arba daugiau kapsulinių polisacharidų, sujungtų su vienu arba daugiau baltymų-nešiklių.
Kapsuliniai polisacharidai gali būti pagaminti pagal standartines specialistams žinomas metodikas. Šiame išradime pirmenybė teikiama kapsuliniams polisacharidams iš N. meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių.
Tinkamiausiame įgyvendinimo variante šių meningokokinių serogrupių konjugatai yra pagaminti atskirais būdais ir sukomponuoti į vienos dozės vaisto formą. Pavyzdžiui, kapsuliniai polisacharidai iš N. meningitidis A, C, W135 ir Y serogrupių yra atskirai išgryninti.
Tinkamiausiame šio išradimo įgyvendinimo variante išgrynintas polisacharidas, prieš prijungiant jį prie baltymo, yra depolimerizuojamas ir aktyvuojamas. Tinkamiausiame šio išradimo įgyvendinimo variante kapsulinis polisacharidas iš N. meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių yra dalinai depolimerizuojamas naudojant švelnias oksidacines sąlygas.
Po šios polisacharidų depolimerizacijos arba dalinės depolimerizacijos gali eiti aktyvacijos stadija. Terminas “aktyvacija” reiškia cheminį polisacharido apdorojimą taip, kad būtų gaunamos cheminės grupės, galinčios reaguoti su baltymu-nešikliu. Tinkamiausiais aktyvacijos metodais yra veikimas adipo rūgšties dihidrazidu fiziologiniame tirpale pH 5,0±0,1 maždaug dvi valandas 15-30 °C temperatūroje. Vienas aktyvacijos būdas yra aprašytas JAV patente 5965714.
Po aktyvacijos kapsuliniai polisacharidai gali būti sujungiami su vienu arba daugiau baltymų-nešiklių. Tinkamiausiame šio išradimo įgyvendinimo variante kiekvienas kapsulinis polisacharidas yra atskirai sujungiamas su vienu baltymu-nešikliu. Tinkamiausiame įgyvendinimo variante kapsuliniai polisacharidai iš N. meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių yra kiekvienas atskirai sujungiami su tuo pačiu baltymu-nešikliu.
Baltymais-nešikliais gali būti inaktyvuoti bakteriniai toksinai, tokie kaip difterito toksoidas CRM197, stabligės toksoidas, kokliušo toksoidas, E. coli LT, E. coli ST ir egzotoksinas A iš Pseudomonas aeruginosa. Taip pat gali būti naudojami bakterijų išorinių membranų baltymai, tokie kaip išorinių membranų c kompleksas (OMPC), porinai, transferiną rišantys baltymai, pneumolizės, pneumokokinis paviršiaus A baltymas (PspA) arba pneumokokinis adhezinis baltymas (PsaA). Baltymais-nešikliais taip pat gali būti naudojami kiti baltymai, tokie kaip ovalbuminas, sraigės limfos hemocianinas (KLH), jaučio serumo albuminas (BSA) arba tuberkulino išgrynintas tuberkulino baltymo darinys (PPD). Pageidautina, kad baltymaisnešikliais būtų baltymai, kurie yra netoksiški ir nesukelia reakcijos ir kad būtų galima gauti jų pakankamus kiekius ir pakankamo grynumo. Baltymai-nešikliai turėtų būti tinkami naudoti standartinio sujungimo metodikose. Tinkamiausiame šio išradimo įgyvendinimo variante baltymu-nešikliu yra naudojamas difterito toksinas, išskirtas iš Corynebacteria diphtheriae kultūrų ir chemiškai detoksikuotas naudojant formaldehidą.
Po kapsulinio polisacharido sujungimo su baltymu-nešikliu polisacharido-baltymo konjugatai gali būti gryninami (praturtinami polisacharido-baltymo konjugato požiūriu) panaudojant įvairias metodikas. Vienas gryninimo stadijos tikslas yra pašalinti nesurištą polisacharidą iš polisacharido-baltymo kojugato. Vienas gryninimo būdas, į kurį įeina ultrafiltracija esant amonio sulfato, yra aprašytas JAV patente 6146902. Kitu atveju, konjugatai gali būti išgryninami nuo nesureagavusio baltymo ir polisacharido panaudojant daugelį standartinių metodikų, įskaitant, tarp kitų, molekulinių sietų chromatografiją centrifugavimą tankio gradiente, hidrofobinės sąveikos chromatografiją arba frakcionavimą su amonio sulfatu. Žr., pvz., P.W. Anderson, et ai. (1986) J. Immunol. 137: 1181-1186. Žr. taip pat H.J. Jennings and C. Lugowski (1981) J. Immunol. 127:1011-1018.
Po polisacharido ir baltymo nešiklio sujungimo šio išradimo imunologinė kompozicija yra pagaminama sumaišant įvairius polisacharidobaltymo konjugatus. Šio išradimo imunologinė kompozicija susideda iš dviejų arba daugiau skirtingų kapsuliniių polisacharidų, sujungtų su vienu arba daugiau baltymų-nešiklių. Tinkamas šio išradimo įgyvendinimo variantas yra dvivalentė imunologinė kompozicija, susidedanti iš kapsulinių polisacharidų iš N. Meningitidis A ir C serogrupių, sujungtų su difterito toksoidu. Dar tinkamesnis šio išradimo variantas yra keturvalentė imunologinė kompozicija, susidedanti iš kapsulinių polisacharidų iš N. Meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių, sujungtų su difterito toksoidu.
Baltymų-nešiklių pagaminimas ir panaudojimas bei įvairios galimos sujungimo metodikos yra gerai žinomos specialistams. Tokie patyrę asmenys gali pagaminti šio išradimo konjugatus, naudodami šiame išradime esančias metodikas bei informaciją, nesunkiai randamą bendroje literatūroje. Patarimų taip pat galima rasti bet kuriame arba ir visuose šiuose JAV patentuose: U.S. 4356170; U.S. 4619828; U.S. 5153312; U.S. 5422427 ir U.S. 5445817.
Šio išradimo imunologinės kompozicijos yra padaromos atskirai pagaminant polisacharido-baltymo konjugatus iš skirtingų meningokokinių serogrupių ir po to sumaišant šiuos konjugatus. Šio išradimo imunologinės kompozicijos gali būti naudojamos kaip vakcinos. Šių vakcinų sukomponavimas gali būti atliekamas naudojant šioje srityje pripažintus būdus. Šio išradimo vakcinų kompozicijose taip pat gali būti vienas arba daugiau adjuvantų. Adjuvantais yra (kaip pavyzdžiai, bet jais neapsiribojama) aliuminio adjuvantai, Froindo adjuvantas, BAY, DC-cholis, pcpp, monofosforillipidas A, CpG, QS-21, choleros toksinas ir formilmetionilpeptidas. Žr., pvz., Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach, 1995 (M.F. Powell and M J. Nevvman, eds., Plenum Press, NY). Tinkamiausias adjuvantas yra aliuminio adjuvantas, toks kaip aliuminio hidroksidas arba aliuminio fosfatas.
Kaip parodyta toliau, šio išradimo vakcinos ir imunologinės kompozicijos iššaukia panašų į T-priklausomą imuninį atsaką įvairiuose gyvūnų modeliuose, tuo tarpu kai polisacharidinė vakcina iššaukia panašų į Tnepriklausomą imuninį atsaką. Taigi, šio išradimo kompozicijos yra taip pat naudingos tyrimo priemonės tiriant biologinius kelius ir procesus, susijusius su panašiu įT-priklausantį imuninį atsaką [N. meningitidis antigenus.
Šio išradimo vakcinos tam tikras kiekis gali būti įvedamas žmogui arba gyvūnui, o įvedimo režimas gali būti nustatytas pagal gerai žinomas farmacijoje ir veterinarijoje standartines metodikas, atsižvelgiant į tokius faktorius kaip konkretus antigenas, adjuvantas (jeigu yra), konkretaus gyvūno arba paciento amžius, lytis, svoris, rūšis ir būklė bei įvedimo būdas. Šiame išradime polisacharido-baltymo-nešiklio kiekis efektyviai vakcinacijos prieš N. meningitidis dozei pateikti gali būti tarp maždaug 0,02 pg iki maždaug 5 pg kilogramui kūno masės. Tinkamiausios šio išradimo kompozicijos ir būdo atveju dozė yra tarp maždaug 0,1 pg ir 3 pg kilogramui kūno masės. Pavyzdžiui, efektyviai dozei reikės mažiau antikūnų, jeigu praėjo mažiau laiko po infekcijos, nes buvo mažiau laiko bakterijų proliferacijai įvykti. Panašiu būdu efektyvi dozė priklausys nuo bakterijų kiekio diagnozės metu. Terapiniam naudojimui gali reikėti daugelio injekcijų, leidžiamų keletą dienų.
Šio išradimo daugiavalenčiai konjugatai gali būti įvedami kaip vienkartinė dozė arba serijomis (t.y. kaip “pakartotinis skiepijimas” arba “pakartotiniai skiepijimai”). Pavyzdžiui, vaikas gali gauti vienkartinę dozę gyvenimo pradžioje, po to pakartotiną dozę po iki 10 metų, kaip dabar yra rekomenduojama kitų vakcinų atveju vaikiškų ligų prevencijai.
Pakartotina dozė generuos antikūnus iš primuotų B-ląstelių, t.y. anamnezinį atsaką. Tai yra daugiavalentė konjugatinė vakcina iššaukia aukštą pirminį (t.y. po vienkartinio vakcinos įvedimo) funkcinį antikūnų atsaką jaunesnėje populiacijoje, lyginant su licenzijuota polisacharidine vakcina ir gali iššaukti anamnezinį atsaką (t.y. po papildomo įvedimo), kas rodo, kad daugiavalentės konjugatinės vakcinos iššauktas apsauginis imuninis atsakas yra ilgalaikis.
į šio išradimo kompozicijas gali įeiti skysti preparatai vartojimui per organizmo angas, t.y. oraliniu, nosiniu, analiniu, vaginaliniu, peroraliniu, įvedant į skrandį, per gleivinę (pvz. liežuvio, alveolių, dantenų, uodžiamąją arba respiratorinę gleivinę) ir t.t., tokie kaip suspensijos, sirupai arba eleksyrai; ir preparatai parenteriniam, poodiniam, intraderminiam, intraraumeniniam, intraperitoniniam arba intraveniniam vartojimui (pvz. vartojimui injekcijų pavidalu), tokie kaip sterilios suspensijos arba emulsijos. Tinkamiausias vartojimo būdas yra intraveninis arba parenterinis. į tokias kompozicijas gali būti pridėta tinkamo nešiklio, skiediklio arba pagalbinės medžiagos, tokios kaip sterilus vanduo, fiziologinis druskos tirpalas, gliukozė ir panašių, šios kompozicijos taip pat gali būti liofilizuotos. Kompozicijose gali būti papildomų medžiagų, tokių kaip drėkinantys arba emulguojantys agentai, pH buferinantys agentai, gelį sudarantys arba klampumą padidinantys priedai, apsaugančios medžiagos, skonį suteikiantys agentai, spalvą suteikiančios medžiagos ir panašios, priklausomai nuo vartojimo būdo ir norimo preparato. Norint pagaminti tinkamus preparatus per daug neeksperimentuojant, patarimų galima rasti standartiniuose tekstuose, kaip antai “Remington’s Pharmaceutical Science”, 17th edition, 1985, kuris duodamas kaip literatūros šaltinis.
Šio išradimo kompozicijas yra patogu pateikti kaip skystus preparatus, pvz., izotoninius vandeninius tirpalus, suspensijas, emulsijas arba klampias kompozicijas, kurios gali būti buferuojamos iki pasirinkto pH. Jeigu pirmenybė yra teikiama virškinimo traktui, šio išradimo kompozicijos gali būti “kietoje” piliulių, tablečių, kapsulių, kaplečių ir pan. formoje, įskaitant kietus preparatus, kurie yra prolonguoti arba kurie turi skystą užpildą, pvz. želatina padengtas skystis, kur skrandyje želatina ištirpsta ir paduodama į žarnyną. Jeigu yra pageidautinas vartojimas per nosį arba kvėpavimo traktą (per gleivinę), kompozicijos gali būti tokios formos, kad būtų išskiriama panaudojant slėgiu išpurškiantį dispenserį siurblinį dispenserį arba aerozolinį dispenserį. Aerozoliai yra paprastai suslėgti panaudojant angliavandenilį. Siurbliniai dispenseriai gali paduoti matuojamą dozę arba dozę, kuri turi konkretų dalelių dydį.
Paprastai yra lengviau pagaminti skystus preparatus nei gelius, kitas klampias kompozicijas ir kietas kompozicijas. Be to, skystas kompozicijas yra šiek tiek patogiau įvesti, ypatingai injekcijų arba peroraliniu būdu gyvūnams, vaikams, ypač mažiems vaikams ir kitiems, kurie turi sunkumų praryti piliulę, tabletę, kapsulę ir panašias, arba situacijose, kai reikia daug dozių. Antra vertus, gali būti pagamintos tam tikro klampumo klampios kompozicijos, kad būtų galima gauti ilgesnius kontaktus su gleivine, pavyzdžiui, padengiant skrandį arba nosies gleivinę.
Suprantama, kad tinkamų nešiklių ir kitų priedų pasirinkimas priklausys nuo tikslaus vartojimo būdo ir konkrečios dozuotos formos prigimties, pvz., skystos dozuotos formos (pvz., kur kompozicija yra paruošta tirpalo, suspensijos, gelio arba kitos skystos formos pavidalu) arba kietos dozuotos formos (pvz., kur kompozicija yra paruošta piliulės, tabletės, kapsulės, kapletės, prolonguoto veikimo formos arba skysčiu užpildytos formos pavidalu).
Tirpalai, suspensijos ir geliai, apart veikliojo ingrediento, paprastai turi didelį kiekį vandens (pageidautina išgryninto vandens). Taip pat juose gali būti nedideli kiekiai kitų ingredientų, tokių kaip pH reguliuojančių medžiagų (pvz. bazės, tokios kaip NaOH), emulsiklių arba disperguojančių agentų, buferinančių agentų, apsaugančių medžiagų, drėkinančių medžiagų, gelį sudarančių medžiagų (pvz., metilceliuliozės), spalvą ir/arba skonį suteikiančių medžiagų. Šios kompozicijos gali būti izotoninės, t.y. jos gali turėti tą patį osmoso slėgį kaip kraujas ir ašarų skystis.
Šio išradimo kompozicijų norimas izotoniškumas gali būti pasiekiamas naudojant natrio tartratą, propilenglikolį arba kitus neorganinius arba organinius tirpinius. Tinkamiausias yra natrio chloridas, ypatingai natrio jonų turinčių buferių atveju.
Pasirinkto lygio kompozicijos klampumas gali būti išlaikomas naudojant farmaciškai priimtiną tirštinantį agentą. Tinkamiausia yra metilceliuliozė, nes ji nesunkiai ir ekonomiškai prieinama ir su ja lengva dirbti. Kitais tinkamais tirštinančiais agentais yra, pavyzdžiui, ksantano derva, karboksimetilceliuliozė, hidroksipropilceliuiiozė, karbomeras ir panašios medžiagos. Tinkamiausia tirštinančio agento koncentracija priklausis nuo pasirinkto agento. Svarbu naudoti tokį kiekį kuris duos pasirinktą klampumą. Klampios kompozicijos paprastai yra pagaminamos iš tirpalų, pridedant tokių tirštinančių agentų.
Farmaciškai priimtinos apsaugančios medžiagos gali būti naudojamos kompozicijos laikymo laikui pailginti. Tinkama medžiaga gali būti benzilo alkoholis, tačiau taip pat gali būti naudojama daug įvairiausių kitų apsaugančių medžiagų, įskaitant, pavyzdžiui, parabenus, timerosalį chlorbutanolį arba benzalkonio chloridą. Tinkama apsaugančios medžiagos koncentracija bus nuo 0,02 % iki 2 % skaičiuojant nuo bendros masės, nors gali būti pastebimų nukrypimų priklausomai nuo pasirinkto agento.
Specialistai pripažins, kad kompozicijos komponentai turi būti pasirinkti taip, kad kad jie būtų chemiškai inertiški N. meningitidis polisacharidobaltymo-nešiklio konjugato požiūriu.
Toliau šis išradimas bus aprašomas remiantis toliau duodamais iliustraciniais, neapribojančiais pavyzdžiais, smulkiai parodančiais keletą tinkamiausių šio išradimo įgyvendinimo variantų. Kiti šio išradimo pavyzdžiai bus aiškūs specialistams nenukrypstant nuo išradimo esmės.
PAVYZDŽIAI pavyzdys
Neisseria meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių išgrynintų kapsulinių polisacharidų miltelių pagaminimas
Negrynintos pastos preparatas
Atskiros Neisseria meningitidis A, C, W135 ir Y drėgnai užšaldytos sėklinės kultūros buvo atšildytos, išimtos panaudojant skystą Watson Scherp terpę ir pasėtos į Blake butelius, kuriuose yra Mueller Hinton agaro terpės. Blake buteliai buvo inkubuojami 35-37 °C temperatūroje CO2 atmosferoje 1512 valandų. Po inkubacijos laikotarpio išaugusios kultūros buvo išimtos iš Blake butelių ir sudėtos į 4 I talpos kolbas su VVatson Scherp terpe. Kolbos buvo inkubuojamos 35-37 °C temperatūroje 3-7 valandas ant platforminės purtyklės. Keturių litrų talpos kolbų turinys buvo perkeltas į fermentacijos indą su VVatson Scherp terpe. Fermentacijos indas buvo inkubuojamas 35-37 °C temperatūroje 7-12 valandų, kontroliuojant ištirpusio deguonies kiekį ir pH pridedant papildomo maisto ir putas naikinančių priedų. Po inkubacijos laikotarpio fermentacijos indo turinys buvo perkeltas į 500 I talpos baką, pridedama Cetavlon’o ir medžiaga maišoma 1 valandą. Cetavlon’u paveikta išaugusi kultūra buvo centrifuguojama esant apie 15000-17000xg ir maždaug 30-70 litrų per valandą srauto greičiui. Negrynas polisacharidas buvo nusodintas iš nuopilo antra Cetavlon’o porcija. į šį nuopilą pridedama Cetavlon’o ir medžiaga maišoma mažiausiai 1 valandą kambario temperatūroje. Ši medžiaga laikoma 1-5 °C temperatūroje 8-12 valandų. Nusėdęs polisacharidas surenkamas centrifuguojant esant apie 4500050000xg ir 300-400 ml per minutę srauto greičiui. Surinkta pasta laikoma -60 °C arba žemesnėje temperatūroje iki tolesnio apdorojimo.
Išgrynintu polisacharido milteliu preparatas
Inaktyvuota pasta atšildoma ir perkeliama į maišyklę. Pasta maišoma su 0,9 M kalcio chloridu pagaminant homogeninę suspensiją. Ši suspensija centrifuguojama esant maždaug 10000xg 15 minučių. Nuopilas nudekantuojamas per medvilne išklotą padėklą į konteinerį kaip pirmasis ekstraktas. Į pastą įpilamas antras 0,9 M kalcio chlorido tūris ir maišoma pagaminant homogeninę suspensiją. Ši suspensija centrifuguojama, kaip aprašyta aukščiau, ir nuopilas sumaišomas su nuopilu iš pirmosios ekstrakcijos. Atliekamos iš viso keturios ekstrakcijos ir supilami nuopilai kartu. Šie supilti ekstraktai koncentruojami ultrafiltacijos būdu naudojant 10-30 kDa MVVCO spiralinius ultrafiltracijos elementus.
į koncentratą pridedama magnio chlorido ir naudojant natrio hidroksidą pH sureguliuojamas iki 7,2-7,5. į šį koncentratą pridedama DNazės ir RNazės ir inkubuojama maišant 25-28 °C temperatūroje 4 valandas. Pridedama etanolio iki 30-50 % koncentracijos. Nusėdusi nukleorūgštis ir baltymas pašalinami centrifuguojant esant 10000xg 2 valandas. Išskiriamas nuopilas ir polisacharidas nusodinamas pridedant etanolio iki 80 % ir paliekant stovėti per naktį 1-5 °C temperatūroje. Alkoholis ištraukiamas ir polisacharido nuosėdos centrifuguojamos 5 minutes esant 10000xg. Nusodintas polisacharidas plaunamas alkoholiu. Polisacharidas plaunamas acetonu ir centrifuguojamas 15-20 minučių esant 10000xg. Polisacharidas išdžiovinamas vakuume. Pradiniai polisacharido milteliai ištirpinamai natrio acetato tirpale. Pridedama magnio chlorido ir naudojant natrio hidroksidą pH sureguliuojamas iki 7,2-7,5. į šį tirpalą pridedama DNazės ir RNazės ir inkubuojama 25-28 °C temperatūroje maišant 4 valandas likusioms nukleorūgštims pašalinti. Po inkubavimo su šiais fermentais į polisacharidofermento mišinį pridedamas toks pat tūris natrio acetato-fenolio tirpalo ir palaikoma ant platforminės purtyklės 1-5 °C temperatūroje apytikriai 30 minučių. Mišinys centrifuguojamas esant 10000xg 15-20 minučių. Nuimamas ir saugomas viršutinis vandeninis sluoksnis. į šį vandeninį sluoksnį pridedamas toks pats tūris natrio acetato-fenolio tirpalo ir ekstrahuojama kaip aprašyta aukščiau. Atliekamos iš viso keturios ekstrakcijos baltymui ir endotoksinui pašalinti iš polisacharido tirpalo. Sumaišyti vandeniniai ekstraktai praskiedžiami iki 10 kartų vandeniu injekcijoms ir diafiltruojami prieš 10 tūrių vandens injekcijoms. į diafiltruotą polisacharidą pridedama kalcio chlorido. Polisacharidas nusodinamas per naktį 1-5 °C temperatūroje pridedant etanolio iki 80 %. Alkoholinis nuopilas nupilamas ir surinktas polisacharidas surenkamas centrifuguojant 15 minučių esant 10000xg. Išgrynintas polisacharidas plaunamas du kartus etanoliu ir vieną kartą acetonu. Perplauti milteliai džiovinami vakuume eksikatoriuje. Išdžiovinti milteliai laikomi -30 °C arba žemesnėje temperatūroje iki pavertimo konjugatu.
pavyzdys
Neisseria meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių išgrynintų kapsulinių polisacharidų miltelių depolimerizacija
Šiam preparatui gauti naudojamos medžiagos yra išgryninti kapsulinio polisacharido iš Neisseria meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių milteliai (pagaminti pagal 1 pavyzdį), sterilus 50 mM natrio acetato buferis, pH 6,0, sterili 1N hidrochlorido rūgštis, sterilus 1N natrio hidroksidas, 30 % vandenilio peroksidas ir sterilus fiziologinis druskos tirpalas (0,85 % natrio chloridas).
Kiekvienos serogrupės polisacharidas yra depolimerizuojamas atskiroje reakcijoje. į nerūdijančio plieno baką įdedama iki 60 g išgryninto kapsulinio polisacharido miltelių. Į ši polisacharidą pridedama sterilaus 50 mM natrio acetato buferio, pH 6,0, kad polisacharido koncentracija būtų 2,5 g litre. Polisacharido tirpalas maišomas 1-5 °C temperatūroje 12-24 valandas, kad ištirptų. Reakcijos indas prijungiamas prie šilumokaičio elemento. Dar pridedama 50 mM natrio acetato buferio, pH 6,0, kad polisacharido koncentracija reakcijai vykdyti pasidarytų 1,25 g litre. Šis polisacharido tirpalas kaitinamas 55±0,1 °C temperatūroje. į reakcijos mišinį dedamos 30 % vandenilio peroksido alikvotos, kad koncentracija reakcijos mišinyje būtų 1 % vandenilio peroksido.
Reakcijos eiga kontroliuojama sekant polisacharido molekulės dydžio pasikeitimą laikui bėgant. Kas 15-20 minučių iš reakcijos mišinio paimamos alikvotos ir suleidžiamos į HPSEC kolonėlę polisacharido molekulės dydžiui matuoti. Kai polisacharido molekulės dydis pasiekia tikslinį molekulės dydį šildymo elementas išjungiamas ir polisacharido tirpalas greitai atšaldomas iki 5 °C leidžiant cirkuliuoti ledinį vandenį iš vonios. Depolimerizuoto polisacharido tirpalas sukoncentruojamas iki 15 g/litre prijungiant reakcijos baką prie ultrafiltracijos elemento su 3000 MWCO regeneruotos celiuliozės patronų. Sukoncentruotas depolimerizuoto polisacharido tirpalas diafiltruojamas prieš 10 tūrių sterilaus fiziologinio druskos tirpalo (0,85 % natrio chlorido). Depolimerizuotas polisacharidas laikomas 1-5 °C temperatūroje iki kitos proceso stadijos.
Depolimerizuoto polisacharido molekulės dydis buvo nustatomas perleidžiant per gel-filtracijos chromatografijos kolonėlę, parduodamą pagal prekės vardą “Ultrahydrogel™ 250”, kuri buvo kalibruota naudojant dekstraninius molekulių dydžio standartus ir pagal daugiakampę lazerio šviesos sklaidą. Polisacharido kiekis buvo nustatytas pagal fosforo kiekį A serogrupei naudojant Bartlet, G.R.J. (1959) Journal of Biological Chemistry, 234, pp. 466-468 aprašytą metodą, ir pagal sialo rūgšties kiekį C, W135 ir Y serogrupėms naudojant Svennerholm, L. (1955) Biochimica Biophysica Actą 24, pp. 604-611 aprašytą metodą. O-acetilo kiekis buvo nustatytas pagal
Hesterin, S. (1949) Journal of Biological Chemistry 180, p. 249 aprašytą metodą. Redukcijos aktyvumas buvo nustatytas pagal Park, J.T. and Johnson, M.J. (1949) Journal of Biological Chemistry 181, pp. 149-151 aprašytą metodą. Depolimerizuoto polisacharido struktūrinis vientisumas buvo nustatytas pagal baltymų 1H ir 13C BMR. Depolimerizuoto polisacharido grynumas buvo nustatytas matuojant LAL (endotoksino) kiekį ir liekamojo vandenilio peroksido kiekį.
pavyzdys
Neisseria meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių depolimerizuoto polisacharido darinių gavimas
Šiam preparatui gauti naudojamos medžiagos yra vandenilio peroksidu depolimerizuotas kapsulinis polisacharidas iš Neisseria meningitidis A, C, W135 ir Y serogrupių (pagamintas pagal 2 pavyzdį), adipo rūgšties dihidrazidas, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimidas (EDAC) tik A serogrupei, natrio cianborhidridas, sterili 1N hidrochlorido rūgštis, sterilus 1N natrio hidroksidas, sterilus 1M natrio chloridas ir sterilus fiziologinis druskos tirpalas (0,85 % natrio chloridas).
Kiekvienos serogrupės polisacharido darinys buvo gaminamas atskiroje reakcijoje. Į nerūdijančio plieno baką buvo pridedama išgryninto depolimerizuoto polisacharido ir praskiedžiama steriliu 0,85 % fiziologiniu druskos tirpalu, kad galutinė polisacharido koncentracija būtų 6 g/litre. į šį tirpalą pridedama alikvota koncentruoto adipo rūgšties dihidrazido, ištirpinto steriliame 0,85 % fiziologiniame tirpale, kad reakcijos mišinio koncentracija būtų 1 g litre. Tik A serogrupės atveju pridedama alikvota koncentruoto EDAC, ištirpinto steriliame 0,85 % fiziologiniame tirpale, gaunant reakcijos mišinio koncentraciją 1 g litre. pH sureguliuojamas iki 5,0±0,1 ir šis pH buvo palaikomas 2 valandas, naudojant sterilią 1N hidrochlorido rūgštį ir sterilų 1N natrio hidroksidą kambario temperatūroje (15-30 °C). Po 2 valandų į reakcijos mišinį pridedama alikvota koncentruoto natrio cianoborhidrido, ištirpinto 0,85 % fiziologiniame tirpale, kad reakcijos mišinio koncentracija būtų 2 g litre. Reakcijos mišinys maišomas kambario temperatūroje (15-30 °C) 44±4 valandas, pH palaikant 5,5±0,5. Praėjus šiam reakcijos laikui, pH sureguliuojamas iki 6,0±0,1 ir polisacharido darinys sukoncentruojamas iki 12 g polisacharido litre, prijungiant reakcijos baką prie ultrafiltracijos elemento su 3000 MWC0 regeneruotos celiuliozės patronų. Sukoncentruotas polisacharido darinys dializuojamas prieš 30 tūrių 1M natrio chlorido, po to 10 tūrių 0,15 M natrio chlorido. Bakas atjungiamas nuo ultrafiltracijos elemento ir laikomas 1-5 °C temperatūroje 7 dienas. Bakas vėl prijungiamas prie ultrafiltracijos elemento su 3000 MWC0 regeneruotos celiuliozės patronų ir diafiltruojama prieš 30 tūrių 1M natrio chlorido, o po to prieš 10 tūrių 0,15 M natrio chlorido.
Polisacharido darinio molekulės dydis, polisacharido kiekis ir O-acetilo kiekis buvo matuojami tais pačiais metodais, kaip ir naudoti depolimerizuotam polisacharidui. Hidrazido kiekis buvo matuojamas panaudojant 2,4,6trinitrobenzensulfonrūgšties metodą, kurį aprašė Snyder, S.L. and Sobocinski, P.Z. (1975) Analytical Biochemistry 64, pp. 284-288. Polisacaharido darinio struktūrinis vientisumas buvo nustatytas protonų 1H ir 13C BMR. Polisacharido darinio grynumas buvo nustatytas matuojant neprijungto hidrazido kiekį LAL (endotoksino) kiekį ir likusio cianborhidrido kiekį. 4 pavyzdys
Baltymo-nešiklio pagaminimas
Negryninto difterito toksoido baltymo pagaminimas
Liofilizuotos sėklinės kultūros buvo praskiestos ir inkubuotos 16-18 valandų. Šios kultūros alikvota buvo įdėta į 0,5 litro talpos kolbą su auginimo terpe ir ši kolba buvo inkubuota 34,5-36,5 °C temperatūroje rotorinėje purtyklėje 7-9 valandas. Alikvota iš šios kolbos su kultūra buvo įdėta į 4 litrų talpos kolbą su auginimo terpe ir ši kolba buvo inkubuota 34,5-36,5 °C temperatūroje rotorinėje purtyklėje 14-22 valandas. Kultūros iš 4 litrų kolbos buvo naudojamos fermentatoriui su auginimo terpe inokuliuoti. Fermentatorius buvo inkubuojamas 34,5-36,5 °C temperatūroje 70-144 valandas. Fermentatoriaus turinys buvo nufiltruotas per giluminius filtrus į surinkimo indą. į išaugintą medžiagą buvo pridėta formaldehido tirpalo (37 %) alikvota, kad koncentracija būtų 0,2 %. pH buvo sureguliuotas iki 7,4-7,6. Išauginta medžiaga buvo nufiltruota per 0,2 mikronų filtrinį patroną į sterilius 20 litrų butelius. Buteliai buvo inkubuoti 34,5-36,5 °C temperatūroje 7 dienas. Į kiekvieną 20 litrų butelį buvo pridėta formaldehido tirpalo (37 %) alikvota, kad koncentracija būtų 0,4 %. Mišinių pH buvo sureguliuotas iki 7,4-7,6. Buteliai buvo inkubuoti 34,5-36,5 °C temperatūroje 7 dienas purtyklėje. į kiekvieną 20 litrų butelį buvo pridėta formaldehido tirpalo (37 %) alikvota, kad koncentracija būtų 0,5 %. Mišinių pH buvo sureguliuotas iki 7,4-7,6. Buteliai buvo inkubuoti 34,5-36,5 °C temperatūroje 8 savaites. Buvo tikrinta negryninto toksoido detoksifikacija. Tyrimo laikotarpiu buteliai buvo laikomi 1-5 °C temperatūroje.
Negryno difterito toksoido baltymo gryninimas
Negrynas toksoidas buvo paliktas atšilti iki kambario temperatūros ir 20 litrų buteliai buvo supilti į gryninimo baką. Toksoido pH buvo sureguliuojamas iki 7,2-7,4, į negryną toksoidą pridedama aktyvuotos anglies ir maišoma 2 minutes. Aktyvuotos anglies ir toksoido mišinys paliekamas stovėti 1 valandą po to nufiltruojamas per giluminį filtrinį patroną į antrą gryninimo baką į filtratą pridedama kieto amonio sulfato, kad būtų gaunamas 70 % įsisotinimas. pH sureguliuojamas iki 6,8-7,2 ir tirpalas paliekamas stovėti 16 valandų. Nusėdęs baltymas nufiltruojamas ir plaunamas 70 % prisotinimo amonio sulfato tirpalu, pH 7,0. Nuosėdos ištirpinamos steriliame distiliuotame vandenyje ir baltymo tirpalas nufiltruojamas į nerūdijančio plieno surinkimo indą. pH sureguliuojamas iki 6,8-7,2 ir pridedama amonio sulfato iki 40 % įsisotinimo. Tirpalo pH sureguliuojamas iki 7,0-7,2 ir tirpalas paliekamas stovėti 16 valandų. Nuosėdos nufiltruojamos ir atmetamos. į filtratą pridedama amonio sulfato iki 60 % įsisotinimo ir pH sureguliuojamas iki 7,0-7,2. Mišinys paliekamas stovėti 16 valandų ir nusėdęs baltymas nufiltruojamas. Nuosėdos ištirpinamos steriliame distiliuotame vandenyje, nufiltruojamos neištirpusiam baltymui pašalinti ir diafiltruojamos prieš 0,85 % fiziologinį druskos tirpalą.
Išgryninto difterito toksoido baltymo koncentracija ir sterilus filtravimas
Baltymo tirpalas sukoncentruojamas iki 15 g baltymo litre ir diafiltruojamas prieš 10 tūrių 0,85 % fiziologinio tirpalo naudojant 10000
MWCO regeneruotos celiuliozės filtro patroną. Koncentruotas baltymo tirpalas sterilizuojamas filtruojant per 0,2 mikronų membraną. Baltymo tirpalas laikomas 1-5 °C temperatūroje iki jo pavertimo konjugatu.
Baltymo koncentracija buvo nustatyta Lowry, O.H. et ai. (1951) Journal of Biological Chemistry 193, p. 265-275 metodu. Baltymo grynumas buvo išmatuotas pagal sterilumą, LAL (endotoksino) kiekį ir liekamojo formaldehido kiekį.
pavyzdys
Vienvalenčių neisseria meningitidis A, C, W~135 ir Y polisacharidų konjugatų su difterito toksoido baltymu pagaminimas
Šiems preparatams gauti naudojamos medžiagos yra polisacharido iš Neisseria meningitidis A, C, W-135 ir Y adipo rūgšties darinys (pagamintas pagal 3 pavyzdį), sterilus difterito toksoido baltymas (pagamintas pagal 4 pavyzdį), EDAC, amonio sulfatas, sterili 1N hidrochlorido rūgštis, sterilus 1N natrio hidroksidas ir sterilus fiziologinis druskos tirpalas (0,85 %).
Kiekvienos serogrupės polisacharido konjugatas buvo pagamintas atskiroje reakcijoje. Visi keturi konjugatai buvo pagaminti tokiu būdu: į nerūdijančio plieno baką pridedama polisacharido adipo rūgšties darinio, imant reakcijos koncentraciją 700-1000 ųmolių litrui reaktingo hidrazido, ir išgryninto difterito toksoido baltymo, imant reakcijos koncentraciją 3,8-4,0 g baltymo litrui. Pradinėms medžiagos praskiesti iki norimos koncentracijos buvo naudojamas fiziologinis druskos tirpalas (0,85 %) ir pH buvo sureguliuojamas iki 5,0±0,1. Į polisacharido ir baltymo mišinį buvo pridedama EDAC alikvota, kad reakcijos koncentracija būtų 2,28-2,4 g/l. Reakcijos pH buvo laikomas 5,0±0,1 2 valandas 15-30 °C temperatūroje. Po 2 valandų pH buvo sureguliuojamas iki 7,0±0,1 naudojant sterilų 1N natrio hidroksidą ir reakcijos mišinys laikomas 1-5 °C temperatūroje 16-20 valandų.
Reakcijos mišiniui leidžiama sušilti iki 15-30 °C ir reakcijos indas prijungiamas prie ultrafiltravimo elemento su 30000 MWC0 regeneruotos celiuliozės patronu. Pridedama kieto amonio sulfato iki 60 % įsisotinimo (A, W-135 ir Y serogrupių atveju) ir 50 % įsisotonimo (C serogrupės atveju).
Konjugato reakcijos mišinys diafiltruojamas prieš 20 tūrių 60 % įsisotinimo amonio sulfato tirpalą (A, W-135 ir Y serogrupių atveju) ir 50 % įsisotinimo amonio sulfato tirpalą (C serogrupės atveju), o po to 20 tūrių fiziologinio druskos tirpalo (0,85 %). Šis diafiltruotas konjugatas pirmiausia filtruojamas per filtro kapsulę, turinčią 1,2 mikronų ir 0,45 mikronų filtrus ir po to per antrą filtro kapsulę, turinčią 0,22 mikronų filtrą.
Polisacharido ir O-acetilo kiekis buvo matuojamas tais pačiais metodais, kaip ir naudoti depolimerizuoto polisacharido ir polisacharido darinio atveju. Baltymo kiekis buvo nustatytas Lowry metodu. Konjugato molekulės dydis buvo nustatytas perleidžiant per gel-filtracijos chromatografijos kolonėlę, kuri parduodama pagal prekės ženklą “TSK6000PW”, kuri naudoja DNR kaip tuščio tūrio žymeklį ATP kaip bendro tūrio žymeklį ir jaučio tiroglobuliną kaip etaloninį žymeklį Be to, konjugato, eliuuoto iš TSK6000PW kolonėlės, molekulės dydis buvo matuojamas daugiakampės lazerio šviesos sklaidos metodu. Konjugato antigeninis charakteris buvo matuojamas pagal susirišimą su anti-polisacharido serogrupei specifiniais antikūnais, naudojant dvigubo sumuštinio ELISA metodą. Konjugatų grynumas buvo nustatytas matuojant nesurišto (nekonjuguoto) polisacharido kiekį eliuuojant per hidrofobinės sąveikos chromatografijos kolonėlę, nekonjuguoto baltymo - kapiliarinės elektroforezės metodu, nustatant sterilumą, LAL (endotoksino) kiekį liekamąjį EDAC kiekį ir liekamąjį amonio jonų kiekį pavyzdys
Daugiavalentės meningokokinio A, C, W-135 ir Y polisacharido ir difterito toksoido konjugato vakcinos kompozicija
Šiam preparatui gauti naudojamos medžiagos yra A, C, W-135 ir Y serogrupių polisacharido-difterito toksoido konjugatas (pagamintas pagal 5 pavyzdį), sterilus 100 mM natrio fosfatu buferintas fiziologinis druskos tirpalas (0,85 % natrio chlorido).
į fiziologinį tirpalą (0,85 %) nerūdijančio plieno pagrindinės masės konteineryje įpilama alikvota sterilaus 100-500 mM natrio fosfatu buferinto fiziologinio tirpalo, kad galutinėje vakcinos koncentracijoje būtų 10 mM natrio fosfato. Į šį pagrindinės masės konteinerį, kuriame yra 10 mM sterilus natrio fosfato fiziologinis druskos tirpalas, pridedama alikvota kiekvieno iš 2-4 sterilių vienvalenčių meningokokinio polisacharido-difterito toksoido konjugatų, kad kiekvienos serogrupės polisacharido koncentracija būtų 8 ųg mililitre buferio. Sukomponuotas keturvalentis konjugatas sumaišomas ir nufiltruojamas per 0,2 ųm filtrą į antrąjį pagrindinės masės baką.
Kiekvienos daugiavalentėje kompozicijoje esančios serogrupės polisacharido kiekis buvo nustatytas pagal komponentinę sacharidų analizę, naudojant aukšto pH anijonų mainų chromatografiją su pulsiniu amperometriniu detektavimu. Baltymo kiekis buvo išmatuotas Lowry metodu. Vakcinos pH buvo išmatuotas naudojant kombinuotą elektrodą, sujungtą su pH-metru. Daugiavalentės konjugatinės vakcinos antigeninis charakteris buvo matuojamas pagal susirišimą su anti-polisacharido serogrupei specifiniais antikūnais, naudojant dvigubo sumuštinio ELISA metodą. Daugiavalentinės konjugatinės vakcinos imunogeniškumas buvo matuojamas pagal kiekvieno vakcinoje esančio konjugato sugebėjimą iššaukti ir pirminį ir pakartotinį antipolisacharidinį IgG imuninį atsaką gyvūnų modelyje. Daugiavalentės konjugatinės vakcinos grynumas buvo nustatomas matuojant nesurišto (nekonjuguoto) polisacharido kiekį naudojant aukšto pH anijonų mainų chromatografiją su pulsiniu amperometriniu detektavimu, sterilumą, LAL (endotoksino) kiekį pirogenų kiekį ir bendrąjį saugumą.
pavyzdys
Daugiavalenčio meningokokinio A, C, W-135 ir Y polisacharido ir difterito toksoido baltymo konjugato su aliuminio hidroksido adjuvantu pagaminimas
Adsorbuoto ant aliuminio hidroksido konjugato pagaminimas. Šiam preparatui gauti naudojamos medžiagos apima 5 pavyzdyje aprašytus A, C, W-135 ir Y serogrupių polisacharido-difterito toksoido konjugatus, sterilų fiziologinį druskos tirpalą (0,85 % natrio chloridas) ir sterilų aliuminio hidroksidą fiziologiniame druskos tirpale (0,85 % natrio chloridas).
Į pagrindinės masės konteinerį su fiziologiniu druskos tirpalu įdedama alikvota kiekvieno sterilaus vienvalenčio meningokokinio polisacharidodifterito toksoido konjugato, kad kiekvienos serogrupės polisacharido galutinė koncentracija būtų 8 pg mililitre buferio. į šią daugiavalentę konjugatinę vakciną pridedama alikvota sterilaus aliuminio hidroksido fiziologiniame tirpale (0,85 % natrio chloridas), kad galutinė koncentracija būtų 0,44 mg aliuminio jonų mililitre vakcinos.
pavyzdys
Konjugato su aliuminio fosfato adjuvantu pagaminimas
Šiam preparatui gauti naudojamos medžiagos apima 5 pavyzdyje aprašytus A, C, W-135 ir Y serogrupių polisacharido-difterito toksoido konjugatus, sterilų fiziologinį druskos tirpalą (0,85 % natrio chloridas) ir sterilų aliuminio fosfatą fiziologiniame druskos tirpale (0,85 % natrio chloridas).
į pagrindinės masės konteinerį su fiziologiniu druskos tirpalu įdedama kiekvieno sterilaus vienvalenčio meningokokinio polisacharido-difterito toksoido konjugato alikvota, kad kiekvienos serogrupės polisacharido galutinė koncentracija būtų 8 pg mililitre buferio. į šią daugiavalentę konjugatinę vakciną pridedama alikvota sterilaus aliuminio fosfato fiziologiniame tirpale (0,85 % natrio chloridas), kad galutinė koncentracija būtų 0,44 mg aliuminio jonų mililitre vakcinos.
pavyzdys
Keturavalentės konjugatinės vakcinos imunogeniškumas
Prieš klinikinį įvertinimą buvo tiriamas keturvalentinės konjugatinės vakcinos sugebėjimas iššaukti imuninį atsaką mažiems laboratoriniams gyvūnams. Konjugatinių vakcinų imunogeniškumo, lyginant su poilsacharidinėmis vakcinomis, įvertinimui buvo naudojamos pelės, žiurkės ir triušiai. Šie gyvūnų modeliai yra tinkami, nes jie gali atskirti konjugatinę vakciną nuo atitinkamo polisacharido pagal jų imuninio atsako charakterį. Konjugatinę vakcina šiuose modeliuose iššaukia panašų į T-priklausomą imuninį atsaką, tuo tarpu kai polisacharidinė vakcina iššaukia Tnepriklausomą imuninį atsaką.
Pelių imunogeniškumo tyrimuose konjugatas buvo praskiestas fiziologiniu druskos tirpalu (0,85 % natrio chloridu) ir įvedama maždaug nuo vienos ketvirtosios iki vienos šešioliktosios žmogaus dozės. Pelėms įvedama viena arba dvi vakcinos dozės (konjugatas arba polisacharidas) ir praėjus dviems savaitėms po skiepijimo imami kraujo mėginiai. Viena grupė buvo neimunizuota kontrolinė grupė. Kiekvienos serogrupės polisacharidų antikūnai buvo matuojami ELISA metodu. Serumo mėginiai buvo inkubuojami su kiekvieno kapsulinio polisacharido, kuris buvo prijungtas prie ELISA mikrotitro plokštelių duobučių, pertekliumi. Kiekvienos serogrupės polisacharidui prijungti prie mikrotitro duobučių buvo naudojamas metilintas žmogaus serumo albuminas. Po inkubavimo mikrotitro duobutės buvo plaunamos buferiu ir į antikūno-polisacharido kompleksą buvo pridedama antrinio antikūno-fermento konjugato, kuris jungiasi su anti-meningokokinio polisacharido antikūnu. Mikrotitro plokštelė plaunama ir į polisacharidomeningokokinio antikūno-antrinio antikūno-fermento konjugatą pridedama cheminio substrato. Fermentas hidrolizuoja dalį cheminio substrato, kuris duoda spalvotą medžiagą. Susidariusios spalvotos medžiagos kiekis yra proporcingas polisacharido-meningokokinio antikūno-antrinio antikūnofermento konjugato, kuris yra prijungtas prie mikrotitro duobutės, kiekiui. Vakcinos veiksmingumas buvo nustatytas palyginant su kiekvienos serogrupės etaloniniais antiserumais, kurie buvo matuojami toje pačioje mikrotitro plokštelėje, skaičiuojant pagal lygiagretes tieses, naudojant keturių parametrų atitikimą. Pelės etaloniniai antiserumai buvo gauti iš to paties kamieno pelių, kurios buvo atskirai imunizuotos kiekvienos serogrupės konjugato vakcinos trimis dozėmis. Pelės etaloniniaims antiserumams buvo priskirti titrai remiantis atvirkštiniu praskiedimu, duodančiu optinį tankį lygų 1,0.
lentelėje pateikta anti-polisacharido IgG titrų kiekvienai serogrupei, gautų Swiss-Webster pelėms, kurios buvo vakcinuotos dviem dozėmis arba keturvalentės konjugatinės vakcinos (skystos ir kompozicijoje su aliuminio hidroksidu), arba atitinkamos keturvalentės polisacharidinės vakcinos, suvestinė. IgG titrai buvo matuoti naudojant sumaišytą serumą iš dešimties pelių grupės. Dvi grupės po 10 pelių buvo naudojamos imuniniam atsakui į kiekvieną vakcinos kompoziciją matuoti. Abi grupės buvo skiepytos 1-ą dieną. 15-tą dieną (praėjus 2 savaitėms po skiepijimo) iš vienos 10 pelių grupės buvo imami kraujo mėginiai, o antroji 10 pelių grupė 15-tą dieną buvo skiepyta antra vakcinos doze. Po 2 savaičių 29-tą dieną buvo paimti kraujo mėginiai iš antrosios 10 pelių grupės ir iš neimunizuotos kontrolinės grupės. Visi antikūnai buvo titruoti tuo pačiu metu, tai yra 15-tos ir 29-tos dienos kraujo mėginiai buvo matuoti tuo pačiu laiku kartu su neimunizuotomis kontrolėmis ir pelių etaloniniais serumais.
lentelė
Swiss-Webster pelių, skiepytų keturavalenčiu konjugatu arba polisacharidu, sumaišyto serumo anti-poilisacharidinio IgG titrai
Vakcinos grupė Do- zė, P9 ps Anti- žmogaus A Anti- žmogaus C Anti- žmogaus W135 Anti-žmogaus Y
15 d. 29 d. 15 d. 29 d. 15d. 29 d. 15 d. 29 d.
konjugatas (be adjuvanto) 0,25 131 2640 250 1510 1350 6100 5660 4830
konjugatas (be adjuvanto) 0,50 171 6220 416 2050 849 26000 5980 112000
konjugatas (be adjuvanto) 1,0 249 4500 525 2740 1450 16600 11300 59100
konjugatas (aliuminio hidr.) 0,25 2920 4500 1010 2980 2300 33700 11600 124000
konjugatas (aliuminio hidr.) 0,50 5800 9550 2280 1010 4810 71900 26400 330000
konjugatas (aliuminio hidr.) 1,0 6210 9350 2630 12800 7870 94000 32700 302000
polisacaridas (be adjuvanto) 1,0 136 173 184 205 612 608 4470 3910
neimunizuota nėra - 110 - 145 - 623 - 777
Keturvalentė vakcina (be adjuvanto ir su aliuminio hidroksido adjuvantu) gali iššaukti stiprų anti-polisacharidinį IgG imuninį atsaką šiame pelių modelyje. Aliuminio hidroksido adjuvantas pagerina ir pirminį, ir pakartotinį atsaką į kiekvieną iš keturių serogrupių polisacharidinius konjugatus. Keturvalentė polisacharidinė vakcina iššaukia nežymų imuninį atsaką į A, C ir W135 serogrupes šiame pelių modelyje, lyginant su neimunizuota kontrole, tuo tarpu Y serogrupė iššaukia pastebimą atsaką, tačiau neduoda pakartotino atsako. Šiame modelyje keturvalentė polisacharidinė vakcina nesukelia pakartotino atsako visų keturių serogrupių polisacharidams. Šis modelis gali nesunkiai parodyti skirtumus tarp polisacharidinės vakcinos ir konjugatinės vakcinos ir pagal imuninio atsako dydį, ir pagal pakartotinio atsako charakterį kiekvienos serogrupės konjugatinei vakcinai.
Keturvalentės konjugatinės vakcinos beadjuvantinė forma buvo tirta klinikoje, nustatant jos saugumą ir imunogeniškumą jauniems sveikiems suaugusiems ir mažiems sveikiems vaikams. Tyrimuose su suaugusiais subjektai buvo skiepyti viena vakcinos doze, sukomponuota taip, kad joje būtų po 4 ųg kiekvieno iš keturių konjugatų kaip polisacharido. Kraujo mėginiai buvo imami prieš pat skiepijimą ir praėjus 28 dienoms po skiepijimo. Antikūnai prieš kiekvienos serogrupės konjugatą buvo matuojami ELISA metodu, kuris leido nustatyti anti-polisacharidinio IgG kiekį. ELISA metodas yra labai panašus į metodą, kuriuo buvo nustatoma, ar yra ir koks kiekis IgG antikūno yra pelės serume.
Trumpai tariant, serumo mėginiai buvo inkubuojami ELISA mikrotitro duobutėse, kurios buvo padengtos pertekliumi meningokokinio polisacharido, kuris buvo surištas su plokštele panaudojant metilintą žmogaus serumo albuminą. Surišto antikūno kiekis buvo nustatomas panaudojant peroksidaze žymėto pelės anti-žmogaus IgG specifinio monokloninio antikūno reakciją. Paskesnė reakcija, naudojanti peroksidazės substratą, generuoja chromogeninį produktą, kuris buvo matuojamas spektrofotometriškai. Gauto chromoforo optinis tankis koreliuojasi su IgG antikūno, kuris yra prijungtas prie meningokokinio polisacharido ant mikrotitro plokštelės, kiekiu serume. Antikūno kiekis buvo apskaičiuotas lyginant žmogaus etaloninį serumą (CDC 1922) su priskirta reikšme, naudojant 4-parametrinės logistinės kreivės metodą. Be to, buvo matuojama antikūnų geba lizuoti serogrupei būdingas bakterijas. Serumo mėginiai pirmiausia buvo inaktyvuojami šiluma, kad būtų suardomas komplementas. Serumo mėginiai praskiedžiami du kartus sterilioje 96 duobučių mikrotitro plokštelėje. Serogrupei būdingos bakterijos kartu su tik ką gimusio triušio komplementu pridedamos į praskiestus serumus ir paliekama inkubuotis. Po inkubacijos periodo į serumo/komplemento/bakterijų mišinį pridedama padengiančios agaru terpės. Padengiančiai agaru terpei leidžiama sukietėti ir tada inkubuojama per naktį 37 °C temperatūroje esant 5 % anglies dioksido. Kitą dieną suskaičiuojamos duobutėse esančios bakterijos. Titro galinis taškas nustatomas pagal atvirkštinį serumo praskiedimą duodantį didesnį nei 50 % bakterijų sunaikinimą, lyginant su komplemento kontrolinių duobučių vidurkiu.
lentelėje pateikta anti-polisacharido vidutinių IgG koncentracijų kiekvienai serogrupei ir vidutinių serumo baktericidinių antikūnų (SBA) titrų, suaugusiųjų serume prieš ir po skiepijomo keturvalente konjugatine vakcina, sukomponuota taip, kad būtų 4 ųg polisacharido dozei. Imuninis atsakas į visų keturių serogrupių konjugatus buvo patenkinamas, kuris yra palyginamas su imuniniu atsaku, gautu panaudojant licenzijuotą polisacharidinę vakciną atsižvelgiant į abu IgG antikūnus ir funkcinius baktericidinius antikūnų atsakus. Buvo rasta, kad vakcina yra saugi šiai amžiaus grupei ir saugumo rodikliai yra panašūs į licenzijuotos polisacharidinės vakcinos rodiklius.
lentelė
Jaunų sveikų suaugusiųjų, skiepytų keturvalente meningokokine konjugatine vakcina, turinčia 4 pg/dozei polisacharido, anti-polisacharidinio IgG GMC (grupės vidutinė koncentracija) ir serumo baktericidinių antikūnų GMT (grupės vidutiniai titrai)
Imuninis atsakas pagal serogrupę Nprieš/Npo IgG GMC (ųg/ml) [95 % PI] SBA GMT [95 % PI]
prieš PO prieš PO
A 28/28 3,3 [2,3-4,8] 38,4 [22,2-66,4] 487 [231-1027] 6720 [4666-15428]
C 28/28 0,4 [0,2-0,7 [30-10,1] 16,4 [7,1-37,7] 1560 [800-4042]
VV-135 28/28 0,6 [0,3-1,0] 5,8 [2,9-11,7] 10,0 [5,9-16,9] 609 [250-1481]
Y 28/28 1,3 [0,7-2,5] 6,8 [3,2-14,6] 19,0 [8,0-41,2] 39, [143-1061]
Jaunesnio amžiaus grupėse (mažesni nei 2 metų vaikai) imuninis atsakas į polisacharidinę vakciną yra silpnas, ir buvo nustatyta, kad imunitetas po vienerių metų išnyksta. 12-15 mėnesių amžiaus vaikams buvo įvedama viena keturvalentės konjugatinės vakcinos dozė, kurioje yra po 4 ųg kiekvienos serogrupės polisacharido dozėje, ir praėjus dviems mėnesiams po pirmosios dozės yra įvedama antroji keturvalentės konjugatinės vakcinos dozė. Kraujo mėginiai buvo imami prieš pirmąjį ir antrąjį skiepijimus ir praėjus mėnesiui po antrojo skiepijimo. Antikūniniai atsakai į šių keturių serogrupių konjugatus yra susumuoti 3 lentelėje. Kiekvienai serogrupei pakartotinis atsakas IgG antikūnui ir funkciniam-baktericidiniam antikūnui buvo stebimas po antrosios keturvalenčio konjugato dozės. Konjugatinės vakcinos išgautų IgG antikūnų kiekis yra palyginamas su kiekiu, kurį išgauna licenzijuotas polisacharidas šio amžiaus grupėje: 3,64 pg/ml [2,96-4,49] IgG antikūnų atsakas į C serogrupės polisacharidą po 6 savaičių. Tačiau konjugatinės vakcinos išgauto baktericidinio antikūno kiekis yra daug didesnis nei kiekis, kurį išgauna licenzijuota polisacharidine vakcina šio amžiaus grupėje: SBA titras yra 7,2 [5,0-10,4] po 6 savaičių. Manoma, kad šis neatitikimas tarp IgG antikūno ir baktericidinio antikūno jaunesnėje populiacijoje atsiranda dėl didesnės dalies mažos traukos antikūnų jaunesnėje populiacijoje. Priešingai, atrodo, kad konjugatas išgauna daug didesnę dalį didelės traukos antikūnų. Laikoma, kad didesnės traukos antikūnas yra atsakingas už baktericidinį aktyvumą.
lentelė
Mažų sveikų vaikų (1-2 metų amžiaus), skiepytų dviem keturvalentės meningokokinės konjugatinės vakcinos dozėmis, turinčiomis po 4 ųg dozėje polisacharido, anti-polisacharidinių IgG GMC (grupės vidutinė koncentracija) ir serumo baktericidinio antikūno GMT (grupės vidutiniai titrai)
Imuninis atsakas pagal serogrupę N1/N2/N3 IgG GMC (pg/ml) [95 % PI] SBA GMT [95 % PI]
prieš 1 dozę Prieš 2 dozę PO 2 dozės prieš 1 dozę prieš 2 dozę PO 2 dozės
A 8/8/8 0,2 [0,ΙΟ,4] 2,1 [0,9- 4,8] 4,4 [2,1- 9,1] 8,7 [1,4- 55,1] 1328 [179- 9871] 3158 [1857- 5371]
C 8/8/8 0,2 [0,0- 0,7] 1,0 [0,3- 3,1] 1,5 [0,6- 3,6] 6,7 [2,0- 23,0] 117 [37,7- 365] 304 [128- 721]
VV-135 8/8/8 0,1 [0,ΙΟ,2] 0,6 [0,2- 1,9] 1,5 [0,8- 3,1] 6,2 [2,2- 17,2] 22,6 [2,8- 185] 430 [172- 1076]
Y 8/8/8 0,3 [0,2- 0,4] 1,2 [0,5- 2,8] 4,5 [2,7- 7,6] 5,7 [3,7- 8,8] 98,7 [20,4- 478] 304 [101- 920]
Apart keturvalentės konjugatinės vakcinos sugebėjimo išgauti didelį funkcinį antikūninį atsaką jaunoje populiacijoje, lyginant su licenzijuota polisacharidine vakcina, keturvalentė konjugatinė vakcina gali išgauti anamnezinį atsaką rodantį kad šio išradimo keturvalentės vakcinos duodama apsauga yra ilgalaikė. Tobulinat keturvalentę konjugatinę vakciną pirmiausia buvo atliekami tyrimai su dvivalente AC konjugato kompozicija. Ši vakcina turi platesnį veikimą nei dabartinis licenzijuotas vienvalentis C konjugatas, bet neapsaugo nuo ligų, kurias sukelia W-135 ir Y serogrupės.
Buvo atliktas klinikinis tyrimas su kūdikiais, kuriame buvo lyginamas imuninis atsakas į dvivalentę AC polisacharido vakciną su atsaku į dvivalentę AC konjugatinę vakciną, šiame tyrime buvo įvesta trečioji kūdikių grupė, kuri buvo kontrolinė grupė ir ji gavo Haemophilus influenzae b tipo konjugatą.
Visų trijų vakcinų grupės gavo tas pačias pediatrines vakcinas. Dvivalenčio AC konjugato grupė gavo tris konjugatinės vakcinos dozes (4 pg polisacharido dozei) 6-tą 1O-tą ir 14-tą amžiaus savaitę. Dvivalenčio AC polisacharido grupė gavo dvi dvivalenčio AC polisacharido vakcinos dozes (50 pg polisacharido dozei) 10-tą ir 14-tą amžiaus savaitę. Haemophilus influenzae b tipo konjugato grupė gavo tris konjugatinės vakcinos dozes 6-tą 10-tą ir 14-tą amžiaus savaitę. Kraujo mėginiai buvo imami 6-tą savaitę (prieš skiepijimą) ir 18-tą savaitę (praėjus 4 savaitėms po skiepijimo). Kai vaikai buvo 11-12 mėnesių amžiaus, buvo paimti kraujo mėginiai ir vaikai, gavę arba dvivalentę AC konjugatinę, arba dvivalentę AC polisacharidinę vakciną gavo pakartotiną AC polisacharido dozę. Pakartotinės polisacharido dozės davimo prasmė buvo noras įvertinti, ar subjektams bus ar nebus sukeliamas anamnezinis atsakas.
šio tyrimo rezultatai (pirminis ir polisacharido pakartotinas imuninis atsakas) yra pateikti 4 lentelėje IgG antikūninio atsako atveju ir 5 lentelėje SBA antikūninio atsako atveju. IgG antikūninis atsakas po pirminės serijos buvo maždaug toks pats ir polisacharido, ir konjugatinės vakcinos atveju.
Tačiau konjugatu skiepytų subjektų baktericidinis antikūninis atsakas buvo daug didesnis nei polisacharidu skiepytų subjektų. Kaip buvo stebėta vienerių metų subjektų atveju, kūdikių skiepijimas polisacharidu iššaukia labai nedaug funkcionalių baktericidinių antikūnų. Atrodo, kad kūdikių pagaminami antikūnai prieš polisacharidinę vakciną turi mažesnę trauką tuo tarpu kai konjugatinė vakcina iššaukia didesnės traukos antikūnus, ir tai paaiškina didesnį baktericidinių antikūnų titrą Didelis funkcinių antikūnų, kuriuos išgauna pakartotina polisacharidinės vakcinos dozė subjektams, gavusiems konjugatinę vakciną pirminėse skiepijimo serijose, kiekis rodo, kad šie subjektai buvo primuoti atsiminimui arba nuo T-ląstelių priklausančiam imuniniam atsakui išgauti. Subjektai, kurie gavo polisacharidinę vakciną, ’ pirminėse skiepijimo serijose davė vidutinį atsaką į polisacharido pakartotiną dozę, kas rodo, kad tai yra nuo T-ląstelių nepriklausantis atsakas.
lentelė
Kūdikių, skiepytų prieš A ir C serogrupes prieš ir po pirminių imunizacijos serijų (6, 10 ir 14 savaičių amžiaus) ir gavusių pakartotiną skiepijimą dvivalenčiu AC polisacharidu 11-tą ir 12-tą jų amžiaus mėnesį antipolisachiridinių IgG GMC (grupės vidutinė koncentracija)
Imuninis atsakas pagal vakcinos am Pirminio skiepijimo GMC [95 % PI] PS papildomo skiepijimo GMC [95 % PI]
N Prieš Po N Prieš Po
A serogrupė:
AC konjugatas 34 3,4 [2,2-5,41 5,8 [4,3-8,0] 31 0,2 [0,1-0,3] 7,0 [4,0-12,0]
AC polisacharidas 35 3,0 [1,7-5,3] 5,5 [4,1-7,3] 30 0,9 [0,5-1,4] 3,1 [2,0-4,7]
HIB konjugatas 36 0,6 [0.4-0,8] NN NN NN
C serogrupė:
AC konjugatas 31 1,6 [0,9-2,8] 2,8 [2,0-3,9] 31 0,1 [0,1-0,2] 8,1 [4,5-14,5]
AC polisacharidas 35 (X, 5,3 [3,8-7,4] 30 0,6 [0,3-1,0] 2,8 [1,7-4,7]
HIB konjugatas 36 2,0 [1,2-3,5] 0,5 [0,3-0,7] NN NN NN
lentelė
Kūdikių, skiepytų prieš A ir C serogrupes prieš ir po pirminių imunizacijos serijų (6, 10 ir 14 savaičių amžiaus) ir gavusių pakartotiną skiepijimą dvivalenčiu AC polisacharidu 11-tą ir 12-tą jų amžiaus mėnesį SBA antikūnų GMT (grupės vidutiniai titrai)
Imuninis Pirminio skiepijimo GMC PS papildomo skiepijimo
atsakas pagal [95 % PI] GMC [95 % PI]
vakcinos
grupę
N Prieš Po N Prieš Po
A serogrupė:
AC konjugatas 34 11,8 [7,2-19,3] 177 [101-312] 24 10,1 [5,6-18,0] 373 [162-853]
AC polisacharidas 32 14,7 [8,5-25,4] 7,0 [4,7-10,5] 26 6,1 [3,9-9,5] 24,1 [11-53]
HIB konjugatas 35 11,2 [6,8-18,3] 6,7 [4,3-10,5] NN NN NN
C serogrupė:
AC konjugatas 34 50,8 [24-107] 189 [128-278] 27 4,6 [3,5-5,6] 287 [96,2-858]
AC polisacharidas 32 62,7 [29-131] 25,4 [14,4- 44,6] 36 4,1 [3,9-4,3] 14,4 [7,9-26,1]
HIB konjugatas 36 45,3 [21,9- 133] 7,3 [4,7-11,3] NN NN NN
Apart šio išradimo siūlomų privalumų, pagerinant apsaugą prieš meningokokinę ligą jaunų asmenų populiacijoje ir duodant platesnę apsaugą prieš A, C, W-135 ir Y serogrupes, šis keturvalentis konjugatas gali apsaugoti nuo kitų patogenų, indukuojant antikūninį atsaką į baltymą-nešiklį. Kai kūdikiams yra įvedama keturvalentė konjugatinė vakcina, kurioje naudojamas difterito toksoido konjugatas, šie subjektai taip pat gauna Įprastą pediatrinę imunizaciją, į kurią įeina difterito toksoidas. Todėl, šiems subjektams nėra antikūninio atsako į difterito toksoidą pastebimo pagerėjimo. Tačiau, kai difterito toksoido konjugatas yra įvedamas subjektams, kurie negavo kartu esančio difterito toksoido turinčios vakcinos, stebimas stiprus pakartotinas atsakas į difterito toksoidą. Šie subjektai gavo trijų dozių DTP režimą būdami 2, 3 ir 4 mėnesių amžiaus. Šiame tyrime subjektai gavo arba vieną dvivalenčio AC konjugato dozę, arba vieną dvivalentės polisacharidinės vakcinos dozę būdami tarp 2 ir 3 metų amžiaus. Kraujo mėginiai buvo imami skiepijimo metu arba praėjus 30 dienų po skiepijimo. Dvivalenčiame AC konjugate baltymu-nešikliu buvo naudojamas difterito toksoidas.
Difterito toksoido imuninis atsakas abiejų vakcinų grupėse yra parodytas 6 lentelėje. Kaip ir laukiama, polisacharidas nestimuliavo antidifteritinio imuninio atsako, tačiau stiprus anti-difteritinis imuninis atsakas buvo stebimas subjektams, kurie gavo AC konjugatą. Taigi, meningokokinė konjugatinė vakcina gali duoti papildomą naudą stimuliuojant imuninį atsaką į baltymą-nešiklį, tokiu būdu duodama apsaugą nuo ligų, kurias sukelia Corynebacteria diphtheriae, kai baltymu-nešikliu yra naudojamas difterito toksoidas.
lentelė
Mažų sveikų vaikų, skiepytų arba dvivalente difterito toksoido konjugatinė vakcina, kurioje yra 4 pg polisacharido dozei, arba dvivalente AC polisacharidine vakcina, kurioje yra 50 pg polisacharido dozei, anti-difteritinių antikūnų pagal ELISA GMT (grupės vidutinis titras) lU/ml
Imuninis atsakas pagal vakcinos grupę Nprieš/Npo Anti-difteritiniai antikūnai (ELISA - lU/ml) Γ95 % Pll
prieš Po
AC konjugatas 104/103 0,047 [0,036-0,060] 21,2 [11,6-38,6]
AC polisacharidas 103/102 0,059 [0,045-0,076] 0,059 [0,045-0,077]

Claims (16)

  1. Išradimo apibrėžtis
    I. Imunologinė kompozicija, sudaryta iš dviejų, trijų arba keturių atskirų baltymo-polisacharido konjugatų, besiskirianti tuo, kad kiekvienas konjugatas susideda iš kapsulinio polisacharido iš dviejų arba daugiau N. meningitidis serogrupių, sujungto su vienu arba daugiau baltymų-nešiklių.
    • » ,
  2. 2. Imunologinė kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad kapsuliniai polisacharidai yra pasirinkti iš grupės, susidedančios iš N. meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių kapsulinių polisacharidų.
  3. 3. Imunologinė kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad kapsuliniai polisacharidai yra iš N. meningitidis A ir C serogrupių.
  4. 4. Imunologinė kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad kapsuliniai polisacharidai yra iš N. meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių.
  5. 5. Imunologinė kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad baltymas-nešiklis yra difterito toksoidas.
  6. 6. Imunologinė kompozicija pagal 1 punktą, besiskirianti tuo, kad į ją įeina dar ir adjuvantas.
  7. 7. Imunologinė kompozicija pagal 5 punktą, besiskirianti tuo, kad adjuvantas yra aliuminio hidroksidas.
  8. 8. Imunologinė kompozicija pagal 5 punktą, besiskirianti tuo, kad adjuvantas yra aliuminio fosfatas.
    ‘
  9. 9. Imunologinė kompozicija pagal 1 punktą skirta panaudoti imuninio atsako indukavimui į N. meningitidis kapsulinį polisacharidą, įvedant minėtos kompozicijos imunologiškai efektyvų kiekį žmogui arba gyvūnui.
  10. 10. Daugiavalentė meningokokinė vakcina, turinti imunologiškai efektyvius kiekius nuo dviejų iki keturių atskirų baltymo-polisacharido konjugatų, besiskirianti tuo, kad kiekvienas konjugatas turi skirtingą kapsulinį polisacharidą, sujungtą su baltymu-nešikliu, ir kurioje kiekvienas kapsulinis polisacharidas yra pasirinktas iš grupės, susidedančios iš A, C, W-135 ir Y serogrupių kapsulinių polisacharidų.
    II. Daugiavalentė meningokokinė vakcina pagal 9 punktą, besiskirianti tuo, kad kapsuliniai polisacharidai yra pagaminti iš N. meningitidis A ir C serogrupių.
  11. 12. Daugiavalentė meningokokinė vakcina pagal 9 punktą, besiskirianti tuo, kad kapsuliniai polisacharidai yra pagaminti iš N. meningitidis A, C, W-135 ir Y serogrupių.
  12. 13. Daugiavalentė meningokokinė vakcina pagal 9 punktą, besiskirianti tuo, kad baltymas-nešiklis yra difterito toksoidas.
  13. 14. Daugiavalentė meningokokinė vakcina pagal 9 punktą, besiskirianti tuo, kad į ją įeina dar ir adjuvantas.
    ’
  14. 15.Daugiavalentė meningokokinė vakcina pagal 13 punktą, besiskirianti tuo, kad adjuvantas yra aliuminio hidroksidas.
  15. 16.Daugiavalentė meningokokinė vakcina pagal 13 punktą, besiskirianti tuo, kad adjuvantas yra aliuminio fosfatas.
  16. 17.Imunologinė kompozicija pagal 9 punktą, skirta panaudoti žmogaus arba gyvūno, imlaus N. meningitidis infekcijai, apsaugojimui, įvedant minėtos kompozicijos imunologiškai efektyvų kiekį žmogui arba gyvūnui.
LT2003071A 2001-01-23 2003-07-23 Daugiavalentė meningokokinio polisacharido-baltymo konjugato vakcina LT5177B (lt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US26343501P 2001-01-23 2001-01-23

Publications (2)

Publication Number Publication Date
LT2003071A LT2003071A (lt) 2004-08-25
LT5177B true LT5177B (lt) 2004-11-25

Family

ID=23001755

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
LT2003071A LT5177B (lt) 2001-01-23 2003-07-23 Daugiavalentė meningokokinio polisacharido-baltymo konjugato vakcina

Country Status (38)

Country Link
US (9) US8722062B2 (lt)
EP (3) EP2957300B1 (lt)
JP (6) JP2005504718A (lt)
KR (2) KR100947757B1 (lt)
CN (1) CN100556459C (lt)
AP (1) AP1897A (lt)
AU (2) AU2007216743A1 (lt)
BE (3) BE2012C050I2 (lt)
BR (1) BRPI0206672B8 (lt)
CA (1) CA2435681C (lt)
CR (1) CR7035A (lt)
CY (2) CY1113072T1 (lt)
DK (2) DK2332581T3 (lt)
EA (1) EA006947B1 (lt)
EC (1) ECSP034701A (lt)
ES (3) ES2388848T3 (lt)
FR (3) FR12C0072I2 (lt)
GE (1) GEP20053691B (lt)
HR (1) HRP20030598B1 (lt)
HU (2) HU230490B1 (lt)
IL (3) IL157060A0 (lt)
IS (1) IS6881A (lt)
LT (1) LT5177B (lt)
LU (1) LU92108I2 (lt)
LV (1) LV13128B (lt)
MX (2) MXPA03006561A (lt)
NO (1) NO20033816L (lt)
NZ (2) NZ622900A (lt)
OA (1) OA12590A (lt)
PL (1) PL226184B1 (lt)
PT (2) PT2332581E (lt)
RO (1) RO122761B1 (lt)
SI (1) SI21352A (lt)
TN (1) TNSN03041A1 (lt)
UA (1) UA92579C2 (lt)
WO (1) WO2002058737A2 (lt)
YU (1) YU66103A (lt)
ZA (1) ZA200306176B (lt)

Families Citing this family (89)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9928196D0 (en) 1999-11-29 2000-01-26 Chiron Spa Combinations of B, C and other antigens
PL226184B1 (pl) 2001-01-23 2017-06-30 Aventis Pasteur Poliwalentna sprzezona szczepionka meningokokowa polisacharyd- bialko
GB0115176D0 (en) * 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
AU2014218428B2 (en) * 2001-06-20 2016-08-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Capsular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
MX339524B (es) 2001-10-11 2016-05-30 Wyeth Corp Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica.
MXPA04011249A (es) * 2002-05-14 2005-06-06 Chiron Srl Vacunas mucosales con adyuvante de quitosano y antigenos meningococicos.
GB0302218D0 (en) * 2003-01-30 2003-03-05 Chiron Sri Vaccine formulation & Mucosal delivery
WO2004033623A2 (en) * 2002-05-16 2004-04-22 Aventis Pasteur, Inc. Animal component free meningococcal polysaccharide fermentation and seedbank development
WO2004011027A1 (en) * 2002-07-30 2004-02-05 Baxter International Inc. Chimeric multivalent polysaccharide conjugate vaccines
CA2506090A1 (en) * 2002-11-14 2004-05-27 Carmen Rosa Soto Rodriguez Method of obtaining conjugate vaccines and vaccine compositions containing same
GB0227346D0 (en) 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
EP2172213B1 (en) * 2003-01-30 2013-04-03 Novartis AG Injectable vaccines against multiple meningococcal serogroups
CA2517439C (en) * 2003-03-07 2013-07-23 Wyeth Holdings Corporation Polysaccharide - staphylococcal surface adhesin carrier protein conjugates for immunization against nosocomial infections
CA2524853A1 (en) * 2003-05-07 2005-01-20 Aventis Pasteur, Inc. Method of enhanced immunogenicity to meningococcal vaccination
CN1798548B (zh) * 2003-06-02 2010-05-05 诺华疫苗和诊断公司 基于含吸附类毒素和含多糖抗原微粒体的免疫原性组合物
BRPI0411815A (pt) * 2003-06-23 2006-08-08 Baxter Int vacinas contra neisseria meningitidis do tipo y e suas combinações meningocócicas
WO2005000345A2 (en) * 2003-06-23 2005-01-06 Aventis Pasteur, Inc. Immunization method against neisseria meningitidis serogroups a and c
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
PL1961426T3 (pl) 2003-10-02 2012-03-30 Gsk Vaccines S R L Skojarzone szczepionki przeciwko zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych
GB0406013D0 (en) * 2004-03-17 2004-04-21 Chiron Srl Analysis of saccharide vaccines without interference
GB0408977D0 (en) 2004-04-22 2004-05-26 Chiron Srl Immunising against meningococcal serogroup Y using proteins
GB0408978D0 (en) 2004-04-22 2004-05-26 Chiron Srl Meningococcal fermentation for preparing conjugate vaccines
AU2011204789B2 (en) * 2004-04-22 2013-07-11 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Immunising against meningococcal serogroup Y using proteins
GB0409745D0 (en) * 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
SI1740217T1 (sl) * 2004-04-30 2011-10-28 Novartis Ag Konjugirano meningokokno cepljenje
GB0413868D0 (en) * 2004-06-21 2004-07-21 Chiron Srl Dimensional anlaysis of saccharide conjugates
CN101934077A (zh) * 2004-08-30 2011-01-05 圣诺菲·帕斯图尔公司 多价的脑膜炎球菌产生的多糖-蛋白质偶联物和疫苗
GB0419846D0 (en) 2004-09-07 2004-10-13 Chiron Srl Vaccine adjuvants for saccharides
CN101072586A (zh) * 2004-09-21 2007-11-14 圣诺菲·帕斯图尔公司 多价脑膜炎球菌源性多糖－蛋白质缀合物及疫苗
GB0428394D0 (en) * 2004-12-24 2005-02-02 Chiron Srl Saccharide conjugate vaccines
GB0505518D0 (en) 2005-03-17 2005-04-27 Chiron Srl Combination vaccines with whole cell pertussis antigen
JP2008536515A (ja) 2005-04-18 2008-09-11 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス， インコーポレイテッド ワクチンの調製のためのｂ型肝炎ウイルス表面抗原の発現
KR20130122810A (ko) 2005-06-27 2013-11-08 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 백신 제조 방법
EP1931380A2 (en) 2005-09-01 2008-06-18 Novartis Vaccines and Diagnostics GmbH & Co. KG Multiple vaccination including serogroup c meningococcus
US20070065462A1 (en) * 2005-09-21 2007-03-22 Ryall Robert P Multivalent meningococcal derivatized polysaccharide-protein conjugates and vaccine
EP1993604B1 (en) * 2006-03-17 2015-12-02 The Government of the United States of America as represented by The Secretary of the Department of Health and Human Services Methods for preparing complex multivalent immunogenic conjugates
US10828361B2 (en) 2006-03-22 2020-11-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Regimens for immunisation with meningococcal conjugates
ES2670231T3 (es) * 2006-03-22 2018-05-29 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Regímenes para inmunización con conjugados meningocócicos
GB0605757D0 (en) 2006-03-22 2006-05-03 Chiron Srl Separation of conjugated and unconjugated components
US8414899B2 (en) 2006-04-11 2013-04-09 Yeda Research And Development Co. Ltd. Vaccines comprising multimeric HSP60 peptide carriers
AU2008259423A1 (en) 2007-06-04 2008-12-11 Novartis Ag Formulation of meningitis vaccines
EP2200642B1 (en) 2007-10-19 2012-04-18 Novartis AG Meningococcal vaccine formulations
GB0822634D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Meningitis vaccines
GB0822633D0 (en) 2008-12-11 2009-01-21 Novartis Ag Formulation
EP2367568A2 (en) 2008-12-17 2011-09-28 Novartis AG Meningococcal vaccines including hemoglobin receptor
US8003112B2 (en) * 2009-04-16 2011-08-23 Howard University Meningococcal and pneumococcal conjugate vaccine and method of using same
JP5781542B2 (ja) 2009-12-30 2015-09-24 ノバルティス アーゲー Ｅ．ｃｏｌｉキャリアタンパク質に結合体化した多糖免疫原
CA2793510A1 (en) 2010-03-18 2012-02-16 Novartis Ag Adjuvanted vaccines for serogroup b meningococcus
EP3246044B2 (en) 2010-08-23 2024-04-10 Wyeth LLC Stable formulations of neisseria meningitidis rlp2086 antigens
ES2744471T3 (es) 2010-09-04 2020-02-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Ensayos de anticuerpos bactericidas para evaluar la inmunogenia y la potencia de vacunas de sacárido capsular meningocócico
ES2864635T3 (es) 2010-09-10 2021-10-14 Wyeth Llc Variantes no lipidadas de antígenos ORF2086 de Neisseria meningitidis
US20130315959A1 (en) 2010-12-24 2013-11-28 Novartis Ag Compounds
JP6191082B2 (ja) 2011-03-02 2017-09-06 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム より低用量の抗原および／またはアジュバントを有する混合ワクチン
JP6088507B2 (ja) 2011-07-08 2017-03-01 ノバルティス アーゲー チロシンライゲーションの方法
WO2013068949A1 (en) 2011-11-07 2013-05-16 Novartis Ag Carrier molecule comprising a spr0096 and a spr2021 antigen
JP2015517089A (ja) 2012-03-08 2015-06-18 ノバルティス アーゲー タンパク質ベースの髄膜炎菌ワクチンのためのインビトロ有効性アッセイ
US20150125486A1 (en) 2012-03-08 2015-05-07 Novartis Ag Adjuvanted formulations of pediatric antigens
SA115360586B1 (ar) 2012-03-09 2017-04-12 فايزر انك تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها
MY167723A (en) 2012-03-09 2018-09-21 Pfizer Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
CN102660602B (zh) * 2012-04-17 2015-03-25 江苏康泰生物医学技术有限公司 快速纯化细菌荚膜多糖的方法
US10124051B2 (en) 2012-05-22 2018-11-13 Glaxosmithkline Biologicals Sa Meningococcus serogroup X conjugate
MX363511B (es) * 2012-08-16 2019-03-26 Pfizer Proceso de glucoconjugación y composiciones.
AU2013311702A1 (en) 2012-09-06 2015-02-19 Novartis Ag Combination vaccines with serogroup B meningococcus and D/T/P
CN102861326A (zh) * 2012-09-19 2013-01-09 天津康希诺生物技术有限公司 流脑多糖-蛋白质缀合疫苗及制备方法
BR112015014250A2 (pt) 2012-12-18 2017-07-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa método para imunizar um bebê, vacina de combinação e, kit
ES2685894T3 (es) 2013-03-08 2018-10-15 Pfizer Inc. Polipéptidos de fusión inmunogénicos
EA034380B1 (ru) * 2013-03-18 2020-01-31 Глаксосмитклайн Байолоджикалс С.А. Способ предупреждения заболевания, вызванного n. meningitidis
US9359400B2 (en) 2013-07-11 2016-06-07 Novartis Ag Site-specific chemoenzymatic protein modifications
WO2015033251A2 (en) 2013-09-08 2015-03-12 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
US20170198004A1 (en) 2014-05-24 2017-07-13 Biological E Limited Novel semi-synthetic meningococcal conjugate vaccine
KR20190049940A (ko) 2015-02-19 2019-05-09 화이자 인코포레이티드 나이세리아 메닌지티디스 조성물 및 그의 방법
EP3258850B1 (en) 2015-02-20 2020-06-24 Bayer HealthCare LLC Contrast imaging agent with dissolved gas-evolving fluid
KR20160011136A (ko) 2015-03-25 2016-01-29 한국기계연구원 내식성이 향상된 마그네슘 합금 및 이를 이용하여 제조한 마그네슘 합금 부재의 제조방법
GB201518668D0 (en) 2015-10-21 2015-12-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic Comosition
HRP20221099T1 (hr) 2015-12-30 2022-11-25 Ascendis Pharma A/S Automatski injektor sa sustavom zadržavanja uloška
KR102204927B1 (ko) 2016-07-25 2021-01-19 에스케이바이오사이언스(주) 피막 다당류-단백질 접합 백신의 품질 평가 방법
CA3033364A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Sanofi Pasteur, Inc. Neisseria meningitidis vaccine
US20180064801A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Glaxosmithkline Biologicals Sa Vaccines for neisseria gonorrhoeae
AU2018215585B2 (en) 2017-01-31 2022-03-17 Pfizer Inc. Neisseria meningitidis compositions and methods thereof
WO2019198096A1 (en) * 2018-04-11 2019-10-17 Msd Wellcome Trust Hilleman Laboratories Pvt. Ltd. Tetravalent meningococcal vaccine composition and process to prepare thereof
EP3632465A1 (en) 2018-10-03 2020-04-08 Sanofi Pasteur Inc. Combined immunization against meningococcal disease and human papillomavirus
US12005110B2 (en) 2019-02-14 2024-06-11 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Honeybee commensal Snodgrassella alvi vaccine against pathogenic Neisseriaceae
CN110903388B (zh) * 2019-12-03 2024-01-02 兰州生物制品研究所有限责任公司 一种将脑膜炎球菌抗血清去交叉反应的方法
AU2020406676A1 (en) 2019-12-17 2022-06-23 9286-3620 Québec Inc. Oral delivery systems based on in situ forming protein/polysaccharide coacervates
KR102610292B1 (ko) 2021-02-10 2023-12-04 에스케이바이오사이언스(주) 스트랩토코커스 뉴모니애 다당류와 운반체 단백질의 접합체 제조 방법
CA3211240A1 (en) 2021-02-19 2022-08-25 Sanofi Pasteur Inc. Meningococcal b recombinant vaccine
WO2023200704A1 (en) 2022-04-11 2023-10-19 Sanofi Pasteur Inc. Protein-saccharide conjugation with sodium cyanoborohydride
TW202423477A (zh) 2022-08-03 2024-06-16 美商賽諾菲巴斯德公司 針對腦膜炎奈瑟氏菌b的含佐劑免疫原性組成物

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4356170A (en) 1981-05-27 1982-10-26 Canadian Patents & Development Ltd. Immunogenic polysaccharide-protein conjugates
US4619828A (en) 1982-07-06 1986-10-28 Connaught Laboratories, Inc. Polysaccharide exotoxoid conjugate vaccines
US5153312A (en) 1990-09-28 1992-10-06 American Cyanamid Company Oligosaccharide conjugate vaccines
US5422427A (en) 1991-09-17 1995-06-06 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Health And Human Services Pneumococcal fimbrial protein A
US5445817A (en) 1992-08-21 1995-08-29 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Pertussis toxin used as a carrier protein with non-charged saccharides in conjugate vaccines

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4351761A (en) 1978-05-15 1982-09-28 Research Corporation Purified antigen to test for Neisseria gonorrhoeae antibodies
US4404371A (en) 1981-01-14 1983-09-13 Battelle Memorial Institute Carboxymethylcellulose with carbonate bridges and preparation thereof
US4351762A (en) * 1981-03-10 1982-09-28 Bioresearch, Inc. Rapid, quantitative peptide synthesis using mixed anhydrides
US4902506A (en) 1983-07-05 1990-02-20 The University Of Rochester Immunogenic conjugates
DE3382737T2 (de) 1982-11-10 1994-05-19 Mitsubishi Heavy Ind Ltd Nickel-Chrom-Legierung.
US4762713A (en) * 1983-07-05 1988-08-09 The University Of Rochester Boosting of immunogenic conjugate vaccinations by unconjugated bacterial capsular polymers
US4761283A (en) 1983-07-05 1988-08-02 The University Of Rochester Immunogenic conjugates
EP0200249B1 (en) 1985-04-17 1988-10-19 Akzo N.V. Method of applying a road marking composition
DE3518706A1 (de) 1985-05-24 1986-11-27 Kernforschungszentrum Karlsruhe Gmbh, 7500 Karlsruhe Verfahren zur herstellung von formkoerpern mit verbesserten, isotropen eigenschaften
US4814276A (en) 1986-04-25 1989-03-21 Becton, Dickinson And Company Selective medium for growth of neisseria
AU640118B2 (en) 1988-12-19 1993-08-19 De Staat Der Nederlanden Vertegenwoordigd Door De Minister Van Welzijn, Volksgezonheid En Cultuur Meningococcal class 1 outer-membrane protein vaccine
US4963534A (en) 1989-05-19 1990-10-16 Merck & Co., Inc. Process for solubilizing polyanoinic bacterial polysaccharides in aprotic solvents
NZ239643A (en) 1990-09-17 1996-05-28 North American Vaccine Inc Vaccine containing bacterial polysaccharide protein conjugate and adjuvant (c-nd-che-a-co-b-r) with a long chain alkyl group.
WO1992016232A1 (en) 1991-03-12 1992-10-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce Polysaccharide-protein conjugates
US5314811A (en) 1992-07-13 1994-05-24 Merck & Co., Inc. Process for converting lipid-containing bacterial capsular polysaccharide into lipid-free polysaccharide
SK18594A3 (en) 1991-08-16 1994-08-10 Merck & Co Inc Method of production of capsular polysacharide without lipid and endotoxine
FR2682388B1 (fr) 1991-10-10 1995-06-09 Pasteur Merieux Serums Vacc Procede de preparation d'un oligoside par depolymerisation d'un polyoside issu d'un agent pathogene, oligoside ainsi obtenu et son utilisation notamment comme agent vaccinal.
ATE168271T1 (de) * 1992-05-23 1998-08-15 Smithkline Beecham Biolog Kombinierte impfstoffe, die hepatitis b oberfläche antigen und andere antigenen enthalten
AU4841693A (en) * 1992-08-31 1994-03-29 North American Vaccine, Inc. Vaccines against group c neisseria meningitidis
TR199701547T1 (xx) 1995-06-07 1998-03-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Polisakarit antijen protein e�leni�i i�eren a��.
US20030157129A1 (en) 1995-06-23 2003-08-21 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Vaccine comprising a polysaccharide antigen - carrier protein conjugate and free carrier protein
US5811102A (en) * 1995-06-07 1998-09-22 National Research Council Of Canada Modified meningococcal polysaccharide conjugate vaccines
US20020054884A1 (en) 1995-06-23 2002-05-09 Smithkline Beecham Biologicals, Sa Vaccine composition comprising a polysaccharide conjugate antigen adsorbed onto aluminium phosphate
DK0833662T4 (da) 1995-06-23 2011-02-28 Smithkline Beecham Biolog Vaccinepræparat omfattende et Haemophilus influenza B-polysaccharidkonjugatantigen adsorberet på aluminiumphosphat
US6248334B1 (en) 1997-01-08 2001-06-19 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Process for preparing conjugate vaccines including free protein and the conjugate vaccines, immunogens, and immunogenic reagents produced by this process
KR100593466B1 (ko) * 1997-01-21 2007-04-25 파스퇴르 메리오 세룸 에 박신 다당류-펩타이드접합체
ES2229477T3 (es) 1997-01-24 2005-04-16 Berna Biotech Ag Procedimiento nuevo para el aislamiento de polisacaridos.
US6403306B1 (en) * 1997-04-09 2002-06-11 Emory University Serogroup-specific nucleotide sequences in the molecular typing of bacterial isolates and the preparation of vaccines thereto
US6087328A (en) 1997-04-24 2000-07-11 Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine Coupling of unmodified proteins to haloacyl or dihaloacyl derivatized polysaccharides for the preparation of protein-polysaccharide vaccines
EP2199382A3 (en) 1997-05-28 2010-09-22 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Culture medium with yeast or soy bean extract as aminoacid source and no protein complexes of animal origin
EP0994723A1 (en) * 1997-06-24 2000-04-26 Chiron Corporation Methods of immunizing adults using anti-meningococcal vaccine compositions
US5965714A (en) 1997-10-02 1999-10-12 Connaught Laboratories, Inc. Method for the covalent attachment of polysaccharides to protein molecules
DK1051506T4 (da) 1997-12-23 2019-10-21 Pfizer Ireland Pharmaceuticals Fremgangsmåder til ekstraktion og isolering af bakterielle kapselpolysaccharider til anvendelse som vacciner eller bundet til proteiner som konjugatvacciner
US7018637B2 (en) * 1998-02-23 2006-03-28 Aventis Pasteur, Inc Multi-oligosaccharide glycoconjugate bacterial meningitis vaccines
US6146902A (en) * 1998-12-29 2000-11-14 Aventis Pasteur, Inc. Purification of polysaccharide-protein conjugate vaccines by ultrafiltration with ammonium sulfate solutions
DE60011571T2 (de) 1999-02-01 2005-08-18 Eisai Co., Ltd. Verbindungen mit immunologischem adjuvanseffekt
WO2000056360A2 (en) * 1999-03-19 2000-09-28 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Vaccine against antigens from bacteriae
CA2929348A1 (en) 1999-05-19 2000-11-30 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Combination neisserial compositions
GB9918319D0 (en) 1999-08-03 1999-10-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
GB9925559D0 (en) 1999-10-28 1999-12-29 Smithkline Beecham Biolog Novel method
ATE400296T1 (de) 1999-12-02 2008-07-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Zusammensetzungen und methoden zur stabilisierung von biologischen molekülen nach lyophilisierung
US6800455B2 (en) * 2000-03-31 2004-10-05 Scios Inc. Secreted factors
EP1946769B1 (en) 2000-06-29 2012-05-30 SmithKline Beecham Biologicals S.A. Multivalent vaccine composition with reduced dose of Haemophilus influenzae type B
PL226184B1 (pl) * 2001-01-23 2017-06-30 Aventis Pasteur Poliwalentna sprzezona szczepionka meningokokowa polisacharyd- bialko
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4356170A (en) 1981-05-27 1982-10-26 Canadian Patents & Development Ltd. Immunogenic polysaccharide-protein conjugates
US4619828A (en) 1982-07-06 1986-10-28 Connaught Laboratories, Inc. Polysaccharide exotoxoid conjugate vaccines
US5153312A (en) 1990-09-28 1992-10-06 American Cyanamid Company Oligosaccharide conjugate vaccines
US5422427A (en) 1991-09-17 1995-06-06 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Health And Human Services Pneumococcal fimbrial protein A
US5445817A (en) 1992-08-21 1995-08-29 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Pertussis toxin used as a carrier protein with non-charged saccharides in conjugate vaccines

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ANDERSON PW ET AL.: "Vaccines consisting of periodate-cleaved oligosaccharides from the capsule of Haemophilus influenzae type b coupled to a protein carrier: structural and temporal requirements for priming in the human infant", J IMMUNOL., 1986, pages 1181 - 1186, XP055007229
FRASCH CE ET AL.: "Serotype antigens of Neisseria meningitidis and a proposed scheme for designation of serotypes", REV INFECT DIS, 1985, pages 504 - 510, XP009148762, DOI: doi:10.1093/clinids/7.4.504
GOLDSCHNEIDER, I. ET AL.: "Immunogenicity of group A and group C meningococcal polysaccharide in human infants.", J INFECT DIS., 1973, pages 769 - 776
H J JENNINGS AND C LUGOWSKI: "Immunochemistry of groups A, B, and C meningococcal polysaccharide-tetanus toxoid conjugates.", THE JOURNAL OF IMMUNOLOGY, 1981, pages 1011 - 1018
PELTOLA H ET AL.: "Clinical Efficacy of Meningococcus Group A Capsular Polysaccharide Vaccine in Children Three Months to Five Years of Age", N ENGL J MED., 1997, pages 686 - 691
REIDO F.X. ET AL.: "Epidemiology and prevention of meningococcal disease", PEDIATR INFECT DIS J., 1995, pages 643 - 657
WYLE FA ET AL.: "Immunologic response of man to group B meningococcal polysaccharide vaccines", J INFECT DIS., 1972, pages 514 - 521

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0206672B1 (pt) 2018-11-06
JP2016128526A (ja) 2016-07-14
US9844601B2 (en) 2017-12-19
JP2014065745A (ja) 2014-04-17
MXPA03006561A (es) 2004-10-15
US10617766B2 (en) 2020-04-14
EP2957300B1 (en) 2021-07-14
NO20033816D0 (no) 2003-08-27
PT2332581E (pt) 2015-10-16
US8999354B2 (en) 2015-04-07
FR15C0094I1 (lt) 2016-01-22
FR22C1001I1 (fr) 2022-02-18
FR12C0072I1 (lt) 2013-01-04
UA92579C2 (ru) 2010-11-25
HUP0302999A2 (hu) 2003-12-29
SI21352A (sl) 2004-06-30
IS6881A (is) 2003-07-22
IL225522A (en) 2016-04-21
OA12590A (en) 2006-06-08
AP1897A (en) 2008-10-10
CN1610560A (zh) 2005-04-27
TNSN03041A1 (en) 2005-12-23
HU230490B1 (hu) 2016-08-29
DK1355673T3 (da) 2012-09-17
US20160000928A1 (en) 2016-01-07
US8734813B2 (en) 2014-05-27
US20140308311A1 (en) 2014-10-16
NZ602682A (en) 2014-05-30
CY2012030I1 (el) 2015-08-05
US20150174259A1 (en) 2015-06-25
HRP20030598B1 (hr) 2013-05-31
EA200300827A1 (ru) 2004-06-24
US20130224241A1 (en) 2013-08-29
HUP0302999A3 (en) 2011-05-30
KR100947751B1 (ko) 2010-03-18
IL157060A (en) 2013-04-30
JP5795721B2 (ja) 2015-10-14
EP1355673B1 (en) 2012-05-30
EP1355673A2 (en) 2003-10-29
CA2435681A1 (en) 2002-08-01
AU2010219288A1 (en) 2010-09-23
BE2022C502I2 (lt) 2023-04-12
US20030068336A1 (en) 2003-04-10
GEP20053691B (en) 2005-12-12
ES2892316T3 (es) 2022-02-03
HUS1600040I1 (hu) 2019-05-28
EP2332581B1 (en) 2015-07-01
IL157060A0 (en) 2004-02-08
IL225522A0 (en) 2013-06-27
KR20090029857A (ko) 2009-03-23
LU92108I2 (fr) 2013-01-29
BRPI0206672B8 (pt) 2021-05-25
CA2435681C (en) 2011-06-21
JP2005504718A (ja) 2005-02-17
ECSP034701A (es) 2003-10-28
CN100556459C (zh) 2009-11-04
ES2544979T3 (es) 2015-09-07
NZ622900A (en) 2015-11-27
WO2002058737A2 (en) 2002-08-01
US20130216571A1 (en) 2013-08-22
WO2002058737A3 (en) 2003-05-22
YU66103A (sh) 2006-05-25
US8722062B2 (en) 2014-05-13
BE2015C077I2 (lt) 2021-02-04
PL373710A1 (en) 2005-09-05
DK2332581T3 (en) 2015-10-05
LU92108I9 (lt) 2019-01-15
US9173955B2 (en) 2015-11-03
HRP20030598A2 (en) 2005-06-30
JP2014043474A (ja) 2014-03-13
ZA200306176B (en) 2005-03-30
JP2014043475A (ja) 2014-03-13
US8741314B2 (en) 2014-06-03
PL226184B1 (pl) 2017-06-30
RO122761B1 (ro) 2010-01-29
AU2007216743A1 (en) 2007-10-04
AP2003002829A0 (en) 2003-09-30
JP2011140522A (ja) 2011-07-21
PT1355673E (pt) 2012-08-31
BR0206672A (pt) 2005-05-10
FR15C0094I2 (fr) 2017-05-19
BE2012C050I2 (lt) 2021-03-23
CY2012030I2 (el) 2016-08-31
US10143757B2 (en) 2018-12-04
US20130177588A1 (en) 2013-07-11
US20180154010A1 (en) 2018-06-07
MX341760B (es) 2016-09-02
US20190060475A1 (en) 2019-02-28
CY1113072T1 (el) 2015-08-05
EA006947B1 (ru) 2006-06-30
KR100947757B1 (ko) 2010-03-18
KR20030084913A (ko) 2003-11-01
FR12C0072I2 (fr) 2013-11-01
EP2957300A2 (en) 2015-12-23
EP2332581A1 (en) 2011-06-15
EP2957300A3 (en) 2016-03-30
LV13128B (en) 2004-07-20
LT2003071A (lt) 2004-08-25
ES2388848T3 (es) 2012-10-19
CR7035A (es) 2008-11-25
NO20033816L (no) 2003-09-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10617766B2 (en) Multivalent meningococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine
AU2014201676B2 (en) Multivalent meningococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine
AU2002241951A1 (en) Multivalent meningococcal polysaccharide-protein conjugate vaccine

Legal Events

Date Code Title Description
PD9A Change of patent owner

Owner name: SANOFI PASTEUR INC., US

Effective date: 20140507

TC9A Change of representative

Representative=s name: ZABOLIENE, REDA, LT

Effective date: 20140507

MK9A Expiry of a patent

Effective date: 20220122