KR840007105A - Dna서열 및 이를 함유하는 플라스미드의 제조방법 - Google Patents

Dna서열 및 이를 함유하는 플라스미드의 제조방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

DNA서열 및 이를 함유하는 플라스미드의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제 1도는 발현 플라스미드 pFR103의 구성을 나타내는 개략도(분절의 크기는 실제 크기가 아니다).

Claims (40)

  1. 다음 식(Ⅰ)의 DNA서열.
  2. 제1항에 따르는 뉴클레오타이드 서열이 리보좀 결합서열 다음에 추가로 링커 서열을 함유함을 특징으로 하는 DNA서열.
  3. 제2항에 있어서, 다음식(Ⅱ)의 DNA서열.
  4. 제2항 또는 3항에 따르는 서열이외에 세균에 의해 발현되는 형태의 폴리펩타이드에 대한 구조유전자 서열을 함유하며, DNA서열의 조합은 DNA서열이 3',5'-포스포르디에스테르 결합에 의해 DNA링커 서열에 결합됨으로서 일어남을 특징으로 하는 DNA서열.
  5. 제4항에 있어서,구조 유전자가 인터페론에 대해 코드화됨을 특징으로 하는 DNA서열.
  6. 제4항에 있어서,구조 유전자가 인간 인터페론 αA에 대해 코드화됨을 특징으로 하는 DNA서열.
  7. 제4항에 있어서, 다음식(Ⅹ)를 나타냄을 특징으로 하는 DNA서열.
  8. 다음 식(ⅩI)의 DNA리보좀 결합/링커 서열
  9. 다음식(Ⅲ)의 DNA 링커 서열.
  10. 제1항 내지 9항에 따르는 DNA서열 및 그의 돌연변이체를 함유하는 플라스미드.
  11. 제10항에 있어서, 제1항, 2항, 3항 또는 8항에 따르는 DNA서열 및 그의 돌연변이체를 함유함을 특징으로 하는 발현 플라스미드.
  12. 제1항에 따르는 DNA서열 및 그의 돌연변이체를 함유함을 특징으로 하는 발현 플라스미드 pER103.
  13. 제10항에 있어서, 제4항, 5항, 6항 또는 7항에 따르는 DNA서열 하나이상 및 임의로 파르-로커스 및 이들의 돌연변이체를 함유함을 특징으로 하는 생성 플라스미드.
  14. 제13항에 있어서, 제7항에 따르는 한개 또는 두개의 DNA서열 및 임의로 pPM 31로부터 분리된 파르-로커스 및 이들의 돌연변이체를 함유함을 특징으로 하는 인터페론 생성 플라스미드.
  15. 제7항에 따르는 DNA서열, 및 그의 돌연변이체를 함유함을 특징으로 하는, 인터페론 생성 플라스미드pER 33.
  16. 제7항에 따르는 DNA서열 두개 및 그의 돌연변이체를 함유함을 특징으로 하는, 인터페론 생성플라스미드 pER 21/1.
  17. 제7항에 따르는 DNA서열 및 pPM 31로부터 분리된 파르-로커스 및 그의 돌연변이체를 함유함을 특징으로 하는, 인터페론 생성 플라스미드parpER 33.
  18. 세라티아 마르세센스의 트립토판오페론의 90-bp 프로모터/오퍼레이터 서열을 다음 식(ⅩII)의 리보좀 결합 서열과 결합시킴을 특징으로 하여, 제1항에 따르는 DNA서열을 제조하는 방법.
  19. 제1항에 따르는 DNA서열을 제2항 또는 3항에 따르는 링커 서열과 결합시킴을 특징으로 하여, 제2항 내지 7항중의 어느 하나에 따르는 DNA 서열을 제조하는 방법.
  20. 제2항 또는 3항에 따르는 DNA 서열을 폴리펩타이드에 대해 코드화된 구조 유전자에 결합시킴을 특징으로 하여, 제4항 내지 7항중의 어느 하나에 따르는 DNA서열을 제조하는 방법.
  21. 제20항에 있어서, 사용된 구조 유전자가 인간 인터페론 αA에 대해 코드화됨을 특징으로 하는 방법
  22. 플라스미드, 바람직하게는 플라스미드 pBR 32를 제1항 내지 7항중의 어느 하나에 따르는 DNA서열과 결합시킴을 특징으로 하여, 제10항에 따르는 플라스미드를 제조하는 방법.
  23. 벡터가 플라스미드 pBR322이며, 이것으로부터 플라스미드 자체의 29bp 길이의 Eco RI-Hin dⅢ 분절을 제한 엔도뉴클레아제 분해에 의해 제거하고, 그 대신에 리가제 반응에 의해 제1항 2항 또는 3항에 DNA 따르는 서열을 삽입시킴을 특징으로 하여, 제11항 또는 12항에 따르는 발현플라스미드를 제조하는 방법.
  24. 폴리펩타이드에 대해 코드화된 구조유전자를 링커서열을 사용하여 삽입시키고 임의로 계속해서 pPM31로부터 분리된 파르-로커스를 벡터, 바람직하게는 발현 플라스미드 pER 103내로 삽입시킴을 특징으로 하여 제4항, 5항, 6항 또는 7항에 따르는 DNA서열을 함유하는 제13항 내지 17항중의 어느 하나에 따르는 생성 플라스미드를 제조하는 방법.
  25. 제7항에 따르는 추가의 DNA 서열을 제24항에 따라 제조된 생성 플라스미드에 삽입시킴을 특징으로 하여, 제13항, 14항 또는 16항에 따르는 생성 플라스미드를 제조하는 방법.
  26. IFN-αA에 대해 코드화된 제7항에 따르는 DNA 서열을, 링커 서열을 사용하여 발현 플라스미드 pER 103내로 삽입시킴을 특징으로 하여, 생성 플라스미드 pER 33을 제조하는 방법.
  27. pPM 31로부터 분리된 파르-로커스를 제26항에 따라 제조된 생성 플라스미드 pER 33내로 도입시킴을 특징으로 하여, 생성 플라스미드 parp ER 33을 제조하는 방법.
  28. 제7항에 따르는 DNA 서열 하나 이상을 제26항에 따라 제조된 생성 플라스미드 pER 33내로 도입시킴을 특징으로 하여, 제7항에 따르는 여러가지 DNA 서열을 함유하는 생성 플라스미드를 제조하는 방법.
  29. 제7항에 따르는 DNA서열을 제26항에 따라 제조된 생성 플라스미드 pER 33내로 도입시킴을 특징으로 하여, 생성 플라스미드 pER 21/1을 제조하는 방법.
  30. 인간 인터페론의 조절된 생성을 위해 적절한 호스트를 제13항 내지 17항중의 어느 하나에 따르는 생성 플라스미드로 형질 전환시킴을 특징으로 하여, 인간 인터페론을 제조하는 방법.
  31. 제23항에 있어서, 호스트로 에쉐리키아 콜리 HB101과 같은 세균을 사용함의 특징으로 하는 방법.
  32. 제23항 또는 24항에 따라 제조된 IFN-αA.
  33. ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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