KR870001312A - 융합 단백질의 제조방법 - Google Patents

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Abstract

내용 없음.

Description

융합 단백질의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 플라스미드 pH 120/14의 제조공정.
제2도는 플라스미드 pH 106/4의 제조공정.
제3도는 플라스미드 pH 154/25의 제조공정.
제12도는 플라스미드 pInt 13의 제조공정.

Claims (12)

  1. 융합 단백질을 암호화하는 유전자 구조를 숙주 세포에서 발현시키고 융합 단백질을 분리하여 일반식(Ⅰ)의 융합 단백질을 제조하는 방법.
    Met-Xn-D'-Y-Z (1)
    상기식에서, n은 0 또는 1이고, X는 유전적으로 암호화할 수 있는 아미노산 1 내지 12개의 서열이며, D'은 이·콜라이 trp 오페론중 D-펩티드의 아미노산 23-93 서열부위에 있는 약 70개의 아미노산 서열이고, Y는 이어지는 아미노산 서열 Z를 절단해 낼 수 있게 하는 유전적으로 암호화할 수 있는 아미노산 한개, 또는 그 이상의 서열을 나타내며, Z는 유전적으로 암호화할 수 있는 아미노산 서열이다.
  2. 제1항에 있어서, n이 1이고 X가 5개까지의 아미노산을 포함하는 일반식(Ⅰ)의 융합 단백질에 대한 구조 유전자로 이루어진 방법.
  3. 제1 또는 2항에 있어서, n이 1이고 Lys-Ala이 X의 N-종결 말단에 위치하는 일반식(Ⅰ)의 융합 단백질에 대한 유전자 구조로 이루어진 방법.
  4. 제1 내지 3항중 어느 한 항에 있어서, Y가 C-종결 말단에 Met,Cys,Trp,Arg 또는 Lys 또는 m이 1,2 또는 3을 나타내는 그룹(Asp)m-Pro 또는 Glu-(Asp)m-Pro 또는 Ile-Glu-Gly-Arg 중 하나를 함유하거나, 또는 이들 아미노산으로 구성 또는 이들 그룹 중 하나로 구성되는 일반식(Ⅰ)의 융합 단백질에 대한 유전자 구조로 이루어진 방법.
  5. 제1 내지 4항 중 어느 한 항에 있어서, Z가 사람 프로인슐린 또는 히루딘의 아미노산 서열을 나타내는 일반식(Ⅰ)의 융합 단백질에 대한 구조 유전자로 이루어진 방법.
  6. 제1 내지 5항 중 어느 한 항에 있어서, DNA 서열(Ⅰ)(별첨)이 D'을 암호화하는 일반식(Ⅰ)의 융합 단백질에 대한 유전자 구조로 이루어진 방법.
  7. 제6항에 있어서, 하기 DNA 서열(암호화 본쇄)이 유전자 구조에서 X를 암호화하는 방법.
    5' AAA GCA AAG GGC 3'
  8. 제1 내지 7항 중 어느 한 항에 있어서, 융합 단백질이 불용성이도록 유전자 구조를 선택하는 방법.
  9. 제1 내지 8항 중 어느 한 항에 있어서, 유전자 구조를 이·콜라이 trp 오페론으로부터의 프로모터, 오퍼레이터 및 L-펩티드의 리보솜 결합 부위를 함유하는 벡터의 상태에 함유시키는 방법.
  10. 제9항에 있어서, 벡터가 위치 29 HnidⅢ 부위에서 위치 2066 PvuⅡ 부위까지의 절편이 pBR 322 DNA로 부터 결실된 pBR 322의 유도체인 방법.
  11. 제1 내지 10항 중 어느 한 항에 있어서, 숙주 세포가 이·콜라이인 방법.
  12. 제1 내지 11항에서 청구한 바와 같이 수득한 융합 단백질로부터 아미노산 서열 Z를 화학적으로 또는 효소적으로 절단하여 진핵 단백질을 제조하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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