KR20220162181A - 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도 - Google Patents

균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR20220162181A
KR20220162181A KR1020227040694A KR20227040694A KR20220162181A KR 20220162181 A KR20220162181 A KR 20220162181A KR 1020227040694 A KR1020227040694 A KR 1020227040694A KR 20227040694 A KR20227040694 A KR 20227040694A KR 20220162181 A KR20220162181 A KR 20220162181A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
protein
mycelialized
medium
high protein
protein food
Prior art date
Application number
KR1020227040694A
Other languages
English (en)
Inventor
부펜드라 쿠마르 소니
브룩스 존 켈리
제임즈 패트릭 랭건
헌팅턴 데이비스
알란 디. 한
Original Assignee
마이코테크놀로지, 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 마이코테크놀로지, 인코포레이티드 filed Critical 마이코테크놀로지, 인코포레이티드
Publication of KR20220162181A publication Critical patent/KR20220162181A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/006—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from vegetable materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/008—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/12—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from cereals, wheat, bran, or molasses
    • A23J1/125—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from cereals, wheat, bran, or molasses by treatment involving enzymes or microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/14—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from leguminous or other vegetable seeds; from press-cake or oil-bearing seeds
    • A23J1/148—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from leguminous or other vegetable seeds; from press-cake or oil-bearing seeds by treatment involving enzymes or microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/14—Vegetable proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
    • A23L11/50—Fermented pulses or legumes; Fermentation of pulses or legumes based on the addition of microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L19/00—Products from fruits or vegetables; Preparation or treatment thereof
    • A23L19/01—Instant products; Powders; Flakes; Granules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/20—Synthetic spices, flavouring agents or condiments
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
    • A23L27/20—Synthetic spices, flavouring agents or condiments
    • A23L27/24—Synthetic spices, flavouring agents or condiments prepared by fermentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/16—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by heating loose unpacked materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/16—Inorganic salts, minerals or trace elements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/185—Vegetable proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/195—Proteins from microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
    • A23L7/10—Cereal-derived products
    • A23L7/104—Fermentation of farinaceous cereal or cereal material; Addition of enzymes or microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
    • A23L7/20—Malt products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/54—Proteins
    • A23V2250/548—Vegetable protein
    • A23V2250/5482—Cereal protein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/54—Proteins
    • A23V2250/548—Vegetable protein
    • A23V2250/5488—Soybean protein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/10—Drying, dehydrating

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Seasonings (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

부형제를 포함한 건조 중량 100g 당 적어도 20g의 단백질과 같은 고 단백질을 갖는 수용성 배지를 건조 중량 기준으로 균류를 배양하는 단계를 포함하는, 균사체화된 고단백 식품을 제조하는 방법이 개시되어 있다. 상기 균류는 플레우로투스 오스트레아투스(Pleurotus ostreatus), 플레우로투스 에린기이(Pleurotus eryngii), 레피스타 누다(Lepista nuda), 헤리시움 에리나세우스(Hericium erinaceus), 렌티눌라 에도데스(Lentinula edodes), 아가리쿠스 블라제이이(Agaricus blazeii), 라에티포루스 술푸레우스(Laetiporus sulfureus) 및 이의 조합을 포함할 수 있다. 배양 후, 상기 물질은 건조 또는 농축을 통해 균사체화된 고단백 식품을 수득함으로써 수확된다. 생성된 균사체화된 고단백 식품은 고기, 짭짤함, 감칠맛, 팝콘과 같은 바람직한 풍미 또는 맛을 증가시키고/거나 쓴맛, 쏘는 맛 또는 콩 맛과 같은 바람직하지 않은 풍미를 감소시킴으로써 조절된 이의 맛, 풍미 또는 향을 가질 수 있다. 비-균사체화된 대조 물질과 비교하여 풍미 제거 및/또는 향 제거도 관찰될 수 있다. 또한, 균사체화된 고단백 식품이 개시되어 있다.

Description

균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도{METHODS FOR THE PRODUCTION AND USE OF MYCELIATED HIGH PROTEIN FOOD COMPOSITIONS}
본 출원은 2016 년 4 월 14 일자로 출원된 "균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도"라는 명칭의 미국 가출원 번호 제62322726호의 우선권을 주장하며, 이의 각각의 개시 내용은 본원에 참고 문헌으로 포함된다.
허용 가능한 맛, 풍미 및/또는 향 프로파일을 갖는 효율적이고, 고품질이며, 저가의 고단백 식품 공급원에 대한 필요성이 증대되고 있다. 그러나, 특히 저비용 채식 단백질 공급원을 통해 그러한 제품을 얻는 것이 어렵다는 것이 입증되었다.
이전의 연구는 배양 배지에서 적은 양의 단백질을 사용하여 균류를 배양하는 것을 개시하고 있다. 미국 특허 제2,693,665호는 우레아 및/또는 다양한 암모늄염으로 임의로 보충된 감귤 주스, 배 주스, 아스파라거스 주스, "유기 물질", 탄수화물, 질소원 및 이들 물질의 임의의 조합에서 아가리쿠스 캄페스트리스(Agaricus campestris)를 침지 배양하는 것에 대해 논한다.
미국 특허 제2,761,246호는 침지된 모첼라 에스쿨렌타 (Morchella esculenta) 및 보다 광범위하게 헬벨라세애(Helvellaceae) 균사체를 인간 식품으로 생산을 위한 방법을 개시한다. 이 문헌은 암모늄 염 보충된 배지로서 다양한 당밀(molasses) 용액을 사용하고, 균사의 구형 핵형성 부위로 탄산칼슘 또는 황산칼슘을 포함하여 바이오매스 수율을 30배(fold) 증가시킨다는 것에 대해 논한다. 일반적으로 상기 특허는 "많은 단당류, 일부 이당류 또는 이들의 가수분해물"과 같은 탄수화물 공급원 및 "암모늄염 또는 아미노산 또는 임의의 종류의 단백질 가수분해물"과 같은 질소원에서 침지된 균사체를 성장시키는 기술을 개시한다. 배양 증식 모티프는 3개의 분리된 배양 및 간헐적인 여과 단계를 포함한다.
미국 특허 제2,928,210호는 설파이트 액 오염을 방지하기 위한 효율적인 방법으로서의 아이디어를 제시하면서, 유기 및 무기 염이 보충된 설파이트 액 폐기물로부터 버섯 균사체를 생산하는 방법을 개시한다. 배양 증식은 잔류물을 제거하기 위해 균사체를 씻어 내고, 제품을 인간의 식품 등급으로 만드는데 필요한 단계로 가르쳐준다. 이는 그렇지 않을 경우 수율에 크게 기여할 수 있는 이형 고체를 씻어내는 단점을 초래한다. 이는 또한 상기 공보가 해결하려고 하는 것과 동일한 문제를 제시 할 새로운 폐기물 흐름을 소개한다.
미국 특허 제3,086,320호는 우유를 포함하는 배지에서 균주를 성장시킴으로써 모첼라 에스큘렌타 (M. esculenta), 헬벨라 기가스 (Helvella gigas), 코프리누스 코마투스(Coprinus comatus) 및 아가리쿠스 캄페스트리스 (A. campestris)의 침지된 균사체의 풍미(flavor)를 향상시키기 위한 방법을 개시한다. 상기 특허에서는 식용 균사체의 주요 쟁점이 "균사체는 천연 sporophore와 풍미가 비슷하지만 강도와 종류에서 이를 맞추기에 부족하다"고 주장하였다. 이 특허는 응축된 우유가 응축되지 않은 상태로 대체되는 경우, 응축된 천연 탈지유에 대해 약 0.03 내지 1.66% (w/w)의 양으로 탈지 분유를 1 내지 50 % (v/v)의 천연 탈지유 또는 무지방 분유를 함유하는 농축 천연 탈지유 0.33 내지 16.66 %의 사용을 개시한다. 천연 탈지 분유를 사용하는 경우, 우유 단백질 가수분해물은 약 5 % (w/w)의 양으로 사용될 수 있다. 이 특허는 탈지유를 5 ~ 10 % (v/v)의 양으로 사용하도록 권장하고 있다. 균사체의 풍미는 우유의 농도가 높을수록 좋아지는 것으로 알려져 있다.
미국 특허 제4,071,973호는 담자균류 (Basidiomycetes)에 대한 배양 조건을 개시한다. 이 특허는 "균류의 몸통"으로 배지를 접종하고 50-70 g/L로 수크로스와 혼합되며, 0.2-15 g/L로 "분쇄된 사탕수수, 사탕수수 바가스 (bagasse), 소나무-조직 및 밀기울 (wheat bran)"의 미세분말로 보충된 "질소, 인산염 및 칼륨을 위한 무기 영양염"을 공급하는 것을 개시한다. 산소는 배지에 대해 30-90% (v/v)로 제어되며, 0.12-0.5 MPa (17.4 - 72.5 psi)의 관압으로 0.1-1.0 L/minute로 산소가 공급된다. 사용된 염은 질산암모늄, 인산나트륨, 황산마그네슘7수화물, 황산철 (II)7수화물 및 인산수소이칼륨을 포함한다. 공기 압력 사이클은 압력 조절기로 조절된다. 이 특허는 증가된 산소 수준을 통한 세포 성장의 증가가 예상치 못했던 것이라고 주장한다.
그러므로 효율적이고, 고품질이며, 허용 가능한 맛, 풍미 및/또는 향 프로파일을 갖는 저가의 고단백 식품 공급원, 및 고도의 단백질성 배지, 특히 건조 중량 기준으로 50% 초과의 단백질 배지를 균사체화할 수 있는 공정이 필요하다.
본 발명자들은 고 단백질 배지에서 균류를 배양하는 것이 경제성 있는 제품을 제공함을 발견하였으며, 또한 그러한 처리가 고단백 식품 조성물의 맛, 풍미 또는 향을 예상치 못한 방식으로 변화시킬 수 있음을 발견하였다. 상기 과정은 또한 균사 물질로 채워진 단백질 농축물, 분리물 및 고단백 식품의 제조를 가능하게 하여, 본 발명의 방법에 따른 제품 생산에 사용되는 배지의 양상을 변경시킨다. 본 발명은 또한 본 발명의 방법에 따라 제조된 산물의 아미노산 프로파일을 최적화하기 위해 단백질 공급원을 쌓는 능력을 나타낸다.
따라서, 본 발명은 고단백 물질을 포함하는 수용성 배지에서 부형제를 포함한 총 건조 중량 100g 당 적어도 20g 단백질의 단백질 함량으로 균류를 배양하여 균사체화된 고단백질 식품을 제조하는 방법을 포함하며, 그 결과 고단백 물질과 비교하여 균사체화된 고단백 식품의 풍미 또는 맛이 조절된다.
상기 방법에서 사용하기에 적합한 균류는 예를 들어, 플레우투스 오스트레아투스(Pleurotus ostreatus), 플레우투스 에린기이(Pleurotus eryngii), 레피스타 누다(Lepista nuda), 헤리쿰 에리나세우스(Hericium erinaceus), 렌티눌라 에도데스(Lentinula edodes), 아가리쿠스 블라제이이(Agaricus blazeii), 라에티포러스 술푸레우스(Laetiporus sulfureus) 및 이들의 조합을 포함한다.
수용성 배지의 단백질 양은 단백질 10 g/L 내지 단백질 500 g/L일 수 있다. 수용성 배지는 채식 또는 비채식 공급원 유래의 단백질 농축물 또는 단백질 분리물인 고단백 물질을 포함할 수 있다. 상기 채식 공급원은 완두, 쌀, 대두, 시아노박테리아, 곡물, 헴프 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다.
생산된 균사체화된 고단백 식품은 저온 살균, 멸균, 건조, 분말화할 수 있다. 생성된 균사체화된 고단백 식품은 균사체화된 고단백 식품 내 고기 풍미 증가, 우마미 맛 향상, 짭짤한 풍미 강화, 팝콘 풍미 강화, 또는 버섯 풍미 향상과 같은 풍미, 맛 및/또는 향을 강화시킬 수 있다; 또는 생성된 고단백 식품은 그 자체의 풍미, 맛 및/또는 향을 감소시켜 그 결과 향 또는 맛이 더 나아지거나, 쓴맛, 쏘는 맛, 콩 풍미, 맛 또는 향을 감소시킬 수 있다.
본 발명은 또한 예를 들어 본 발명의 방법에 의해 제조된 균사체회된 고단백 식품을 포함한다. 상기 균사체화된 고단백 식품은 적어도 20% 단백질일 수 있고, 완두 또는 쌀과 같은 채식 공급원으로부터 얻을 수 있으며, 바람직한 풍미를 강화시키고/거나 바람직하지 않은 풍미를 감소시킬 수 있다.
특정 이론에 구속되기를 바라지 않고, 본원에 개시된 기기 및 방법과 관련된 기본 원리의 신념 또는 이해에 대한 논의가 있을 수 있다. 어떠한 기계론적 설명 또는 가설의 궁극적인 정확성에도 불구하고, 본 발명의 구현은 유효하고 유용할 수 있다는 것이 인정된다.
도 1. 균사 배양에 의한 접종 전에 쌀 및 완두 단백질을 함유한 배지의 10배 현미경 사진.
도 2. 쌀과 완두 단백질을 함유한 배지에서 성장한 4일째 균사체 배양물의 10배 현미경 사진.
도 3. 쌀과 완두 단백질을 함유한 배지에서 성장한 10일째 균사체 배양물의 10배 현미경 사진.
일반적으로, 본원에 사용된 용어 및 어구는 당업계에서 인식되는 의미를 가지며, 이는 당업자에게 공지된 표준 텍스트, 저널 참조 및 문맥을 참조하여 찾을 수 있다. 다음의 정의는 본 발명의 문맥 상 특정 용도를 명확히 하기 위해 제공된다.
일 구현예에서, 본 발명은 균사체화된 고단백 식품을 제조하는 방법을 포함한다. 상기 방법은 선택적으로 고단백 물질을 포함하는 수용성 배지를 제공하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 수용성 배지는 건조 중량 기준으로 총 부형제 100 g 당 적어도 20 g의 단백질로 포함되거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 구성될 수 있다. 상기 배지는 또한 다음에서 확인되듯이 임의의 부가적인 부형제로 포함되거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 구성될 수 있다. 상기 수용성 배지는 균류 배양물로 접종될 수 있다. 이어서, 접종된 배지를 배양하여 균사체화된 고단백 식품을 제조할 수 있고, 배양 단계의 부재 하에 고단백 물질과 비교하여 균사체화된 고단백 식품의 맛, 풍미 및/또는 향을 조절할 수 있다.
상기 수용성 배지는 고단백 물질로 포함될 수 있고, 구성될 수 있거나 필수적으로 구성될 수 있다. 수용성 배지에 포함되는 고단백 물질은 채식뿐만 아니라 비채식 공급원을 포함하는 여러 공급원에서 얻을 수 있으며 단백질 농축물 및/또는 분리물을 포함할 수 있다. 채식 공급원은 완두, 쌀, 병아리 완두, 대두, 시아노박테리아, 헴프와 같은 채식 공급원 및 기타 공급원, 또는 이들의 조합으로부터 제조된 식사, 단백질 농축물 및 분리물을 포함한다: 예를 들어, 50% 이상의 단백질을 함유한 시아노박테리아는 또한 고단백 물질의 공급원으로 사용될 수 있다. 일반적으로, 단백질 농축물은 콩가루와 같이 식사에서 오일 및 대부분의 가용성 당을 제거함으로써 제조된다. 이러한 단백질 농축물은 여전히 섬유와 같은 비 단백 물질의 상당 부분을 함유할 수 있다. 일반적으로 이러한 제품의 단백질 농도는 55 ~ 90%이다. 단백질 분리물의 생산을 위한 공정은 일반적으로 섬유와 같은 대부분의 비단백 물질을 제거하고 약 90 - 99% 이하의 단백질을 함유할 수 있다. 일반적인 단백질 분리물은 보통 연속적으로 건조되고 분말 형태로 입수 가능하며 "단백질 분말"로 불릴 수도 있다.
고단백 물질에 대한 비채식 공급원도 본 발명에서 사용될 수 있다. 이러한 비채식 공급원에는 유장, 카세인, 계란, 육류(예, 쇠고기, 닭고기, 돼지고기 공급원), 분리물, 농축물, 육수 또는 분말이 포함된다. 그러나, 일부 구현예에서 채식 공급원은 비채식 공급원에 비해 특정 이점을 갖는다. 예를 들어, 유장이나 카제인 단백질 분리물은 일반적으로 일정량의 락토오스(유당)을 함유하고 유당불내증을 가진 사람들에게는 어려움을 유발할 수 있다. 계란 단백질 분리물은 계란에 알레르기가 있는 사람들에게 문제를 일으킬 수 있으며 또한 꽤 비싸다. 특정 식물성 원료도 단점을 가지고 있지만 대두 단백질 분리물은 PDCAAS(Protein Digestibility Corrected Amino Acid Scores)와 DIAAS(digestible indispensable amino acid scores) 점수를 가지며 저가이고, 대두는 알레르기성이며 식물성 에스트로젠과 맛에 대한 우려 때문에 약간의 소비자 저항을 가지고 있다. 쌀 단백질은 잘 소화되지만, 라이신과 같은 일부 아미노산이 결핍되어 있다. 그러므로 쌀 단백질은 완전한 단백질이 아니며, 더 많은 사람들은 쌀 단백질이 좋아하기 힘든 맛과 향을 가진 것으로 인식한다. 완두 단백질은 일반적으로 모든 필수 아미노산을 포함하는 것으로 간주되며, 균형이 맞지 않아 완전하지 못하고, 많은 사람들은 완두 단백질이 좋아하기 힘든 향을 가진 것으로 인식한다. 헴프 단백질은 알맞은 맛과 향을 가진 완전한 단백질이지만 비싸다.
일 구현예에서, 개시된 임의의 고단백 물질의 혼합물은 예를 들어 (아미노산 조성의 측면에서) 보다 완전한 고단백 물질과 같은 바람직한 특성을 제공하는데 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 완두 단백질 및 쌀 단백질과 같은 고단백 물질을 혼합할 수 있다. 일 구현예에서, 상기 혼합물의 비율은 1 : 10 내지 10 : 1의 완두 단백질 : 쌀 단백질 (건조 기준) 일 수 있다. 일 구현예에서, 상기 비율은 선택적으로 5 : 1 내지 1 : 5, 2 : 1 내지 1 : 2, 또는 일 구현예에서 1 : 1 일 수 있다.
고단백 물질 자체는 약 20% 단백질, 30% 단백질, 40% 단백질, 45% 단백질, 50% 단백질, 55% 단백질, 60% 단백질, 65% 단백질, 70% 단백질, 75% 단백질, 80% 단백질, 85% 단백질, 90% 단백질, 95% 단백질 또는 98% 단백질, 또는 적어도 약 20% 단백질, 적어도 약 30% 단백질, 적어도 약 40% 단백질, 적어도 약 50% 단백질, 적어도 약 55% 단백질, 적어도 약 60% 단백질, 적어도 약 65% 단백질, 적어도 약 70% 단백질, 적어도 약 75% 단백질, 적어도 약 80% 단백질, 적어도 약 85%의 단백질, 적어도 약 90%의 단백질, 적어도 약 95%의 단백질, 또는 적어도 약 98%의 단백질일 수 있다.
본 발명은 예를 들면 허용 가능한 시식 및/또는 풍미가 나는 고단백 식품의 생산을 위한 경제적으로 실행 가능한 경제적 방법을 제공하는 농축 배지의 용도를 개시한다. 본 발명의 일 구현예에서, 총 배지 농도는 최대 150 g/L이지만 또한 5 g/L와 같이 더 낮은 수준에서 수행될 수 있다. 배지 내 보다 높은 농도는 더 두꺼운 및/또는 점성이 더 높은 배지를 생성시키고, 따라서 배양 또는 발효 중 엔지니어링 문제를 피하기 위해 당업계에 공지된 방법에 의해 선택적으로 처리된다. 경제적 이익을 극대화하기 위해 배지 L 당 고단백 물질을 더 많이 사용한다. 사용된 양은 배양되는 고단백 물질의 양을 최대화시키면서 점도, 포밍 등과 같은 배양 중에 발생할 수 있는 가공 상의 기술적 어려움을 최소화하도록 선택된다. 사용된 양은 당업자에 의해 결정될 수 있으며, 발효 방법에 따라 다양할 것이다.
상기 수용성 배지 중 총 단백질의 양은 부형제를 포함한 총 건조 중량 100g 당 또는 건조 중량 기준으로 총 전체 성분 당 적어도 20g, 50g, 55g, 60g, 65g, 70g, 75g, 80g, 85g, 90g, 95g 또는 100g 또는 그 이상의 단백질로 포함되거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 구성될 수 있다. 대신에, 단백질의 양은 부형제를 포함한 전체 건조 중량 100g 당 20g 내지 90g, 30g 내지 80g, 40g 내지 70g, 50g 내지 60g의 단백질로 포함되거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 구성될 수 있다.
일부 구현예에서, 수용성 배지 내 총 단백질은 부형제를 포함한 건조 중량 100g 당 약 45g 내지 약 100g 또는 약 80-100 g의 단백질이다.
또 다른 구현예에서, 수용성 배지는 약 1 g/L 내지 100 g/L, 약 5 g/L 내지 95 g/L, 약 10 g/L 내지 90 g/L, 약 15 g/L 내지 약 85 g/L, 약 20 g/L 내지 약 80 g/L, 약 25 g/L 내지 약 75 g/L, 약 30 g/L 내지 약 70 g/L, 약 35 g/L 내지 약 65 g/L, 약 40 g/L 내지 약 60 g/L, 약 45 g/L 내지 약 55 g/L, 또는 약 50 g/L 단백질, 또는 적어도 약 10 g/L, 적어도 약 15 g/L, 적어도 약 20 g/L, 적어도 약 25 g/L, 적어도 약 30 g/L, 적어도 약 35 g/L, 적어도 약 40 g/L 또는 적어도 약 45 g/L를 포함한다.
일부 구현예에서, 발효기에 사용되는 양은 약 1 g/L 내지 150 g/L, 약 10 g/L 내지 140 g/L, 약 20 g/L 내지 130 g/L, 약 30 g/L 내지 약 120 g/L, 약 40 g/L 내지 약 110 g/L, 약 50 g/L 내지 약 100 g/L, 약 60 g/L 내지 약 90 g/L 약 70 g/L 내지 약 80 g/L, 또는 적어도 약 20 g/L, 적어도 약 30 g/L, 적어도 약 40 g/L, 적어도 약 50 g/L, 적어도 약 60 g/L, 적어도 약 70 g/L, 적어도 약 80 g/L, 적어도 약 90 g/L, 적어도 약 100 g/L, 적어도 약 110 g/L, 적어도 약 120 g/L, 적어도 약 130 g/L 또는 적어도 약 140 g/L를 포함한다.
일부 구현예에서, 수용성 배지는 약 50 g/L 내지 약 100 g/L; 또는 약 80 g/L, 약 85 g/L, 약 150 g/L, 약 90 g/L, 또는 약 95 g/L를 포함한다.
이러한 백분율을 계산할 때, 고단백 물질에서 단백질의 백분율이 설명되어야 함을 알 수 있다. 예를 들어, 고단백 물질의 양이 10g이고 고단백 물질이 80% 단백질인 경우, 단백질 공급원은 단백질 8 g과 비단백 물질 2 g을 포함한다. 부형제 10g을 첨가하여 부형제를 포함한 총 건조 중량 20g을 만들 때, 총 부형제 20g 당 단백질 총량은 8g, 또는 40% 단백질, 또는 총 단백질 + 부형제 100g 당 40g 단백질이다. 효모 추출물 또는 펩톤과 같은 단백질-함유 부형제가 배지에 첨가되는 경우, 당분야에 공지된 바와 같이 부형제를 더한 총 중량 g 당 단백질의 양은 단백질의 백분율 및 단백질-함유 부형제의 첨가량을 고려하여 약간 높을 것이며, 본원에서 논의한 바와 같이 계산을 수행할 것이다.
일부 구현예에서, 고단백 물질은 본 발명의 수용성 배지를 제조한 후에 수용성 배지에 완전히 용해되지 않는다. 대신에, 고단백 물질은 부분적으로 용해되거나, 및/또는 부분적으로 현탁될 수 있고/거나 부분적으로 콜로이드될 수 있다. 그러나 고단백 물질이 완전히 용해되지 않아도 고단백 물질의 배양 동안 포지티브 변화가 영향을 받을 수 있다. 일 구현예에서, 수용성 배지 내 고단백 물질은 교반 및/또는 진탕을 확보함으로써 배양 중에 가능한 한 균질하게 유지된다.
일 구현예에서, 본원 및/또는 특정 구현예에서 정의된 수용성 배지는 고단백 물질 이외의 물질, 예를 들어 부형제를 추가로 포함하거나, 이를 구성하거나, 필수적으로 이루어진다. 부형제는 균류 성장을 강화 및/또는 지지하는 당업계에 공지된 임의의 다른 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질/펩타이드와 같은 영양제, 당업계에 공지된 아미노산 및 맥아 추출물, 고기 국물, 펩톤, 효모 추출물 등의 추출물; 탄수화물과 같은 당업계에 공지된 에너지원; 예를 들어, 칼슘, 마그네슘, 철, 미량 금속, 인산염, 황산염을 포함하는 당업계에 공지된 필수 금속 및 무기물; 포스페이트, 아세테이트 및 임의로 pH 지시약 (예를 들어, 페놀 레드)과 같은 당업계에 공지된 완충제를 포함할 수 있다. 부형제에는 탄수화물 및/또는 탄수화물 공급원이 5 - 10 g/L로 첨가될 수 있다. 그러한 제제에 pH 지시약을 첨가하는 것이 일반적이다.
부형제는 또한 당업계에 공지된 바와 같이 펩톤/단백질/펩타이드를 포함할 수 있다. 이들은 당업계에서 사용되는 바와 같이, 통상 단백질 가수분해물(펩톤) 및 육수의 혼합물로서 첨가되지만, 이들 성분은 전형적으로 본 명세서에 개시된 것보다 훨씬 낮은 수준의 단백질을 함유하는 수준으로 포함된다. 많은 배지는 예를 들면, 0.1 내지 5%의 효모 추출물 등을 포함하는 훨씬 더 많은 배지를 포함하는 다른 부형제에 대하여 1 내지 5%의 펩톤 함량을 갖는다.
일 구현예에서, 부형제는 예를 들어, 효모 추출물, 맥아 추출물, 말토덱스트린, 펩톤, 및 디암모늄 포스페이트 및 마그네슘 설페이트와 같은 염뿐만 아니라 감자 또는 당근 분말과 같은 기타 정의되고 정의되지 않은 성분을 포함한다. 일부 구현예에서, 이들 성분의 유기(USDA에 의해 작성된 바와 같이 국립 유기농 프로그램에 의해 제시된 명세서에 따라 결정됨) 형태가 사용될 수 있다.
일 구현예에서, 부형제는 건조 당근 분말, 건조 맥아 추출물, 디암모늄 포스페이트, 마그네슘 설페이트 및 시트르산로 포함되거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 이루어진다. 일 구현예에서, 부형제는 0.1-10 g/L의 건조 당근 분말, 0.1 내지 20 g/L의 건조 맥아 추출물, 0.1 내지 10 g/L의 디암모늄포스페이트 및 0.1 내지 10 g/L의 마그네슘 설페이트로 포함되거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 이루어진다. 부형제는 또한 시트르산 및 소포제 성분으로 임의로 포함되거나, 구성되거나, 또는 필수적으로 이루어질 수 있다.
상기 방법은 또한 접종을 통해 멸균 절차를 수행할 수 있도록 증기 멸균 및 기타 모든 공지된 방법을 포함하는 당 분야에 공지된 방법에 의해 접종 전 수용성 배지를 멸균하는 임의의 단계, 및 순수 균류 균주에 의한 배양 및 균사체화를 가능하게 하는 배양 단계를 포함할 수 있다. 대안적으로, 배지의 성분은 별도로 멸균될 수 있고, 상기 배지는 무균 절차에 따라 제조될 수 있다.
상기 방법은 또한 배지에 균류 배양물을 접종하는 단계를 포함한다. 상기 균류 배양물은 당업계에 공지된 임의의 방법으로 배양하여 제조할 수 있다. 일 구현예에서, 상기 배양 방법은 예를 들어, 2014년 3월 15일 출원된 PCT/US14/29989, 2014 년 3월 15일 출원된 PCT/US14/29998에서 찾을 수 있으며, 이들 모두는 그 전체가 본원에 참조로 포함된다.
접종 단계 이전에 균류 배양물은 당업계에 공지된 바와 같이 증식 및 유지될 수 있다. 일 구현예에서, 본 명세서에서 논의된 균류는 3 - 4% 아가(m/v)와 함께 2 - 3% (v/v) 망고 퓨리 상에 보관될 수 있다. 이러한 배지는 전형적으로 1.4 - 1.5 L 배지로 채워진 2L 핸들형 유리병에서 제조된다. 이러한 컨테이너는 50 -60 90 mm 페트리 플레이트에 분주한다. 상기 배지는 당해 분야에 공지된 방법, 통상적으로 오토클레이브에 의해 우선 멸균된다. 종래의 B. stearothermophilus 및 열전(thermocouple) 방법은 살균 매개 변수를 확인하는데 사용된다. L. sulfureus와 같은 몇몇 균주는 1% 황색 옥수수 가루가 보충되었을 때 더 잘 자란다. 아가 배지는 고단백 물질로 구성되어 최종 배양물에 대한 균주를 민감하게 할 수 있다. 이 기술은 또한 본원에서 논의된 유기체의 균주 선정에 관여할 수 있다. 아가 배지는 손으로 만질 수 있는 지점(~ 40 ~ 50 ℃)까지 냉각되면 분주되어야 한다.
일 구현예에서, 본 발명에 개시된 바와 같은 고단백 물질을 접종하기 위해 사용되는 균류를 유지 및 증식시키는 단계는 다음과 같이 수행될 수 있다. 예를 들어, 상기 방법에 따라 물질을 연속적으로 생산하는데 사용될 수 있는 증식 방안이 본 명세서에서 논의된다. 일단 마스터 배양액을 접종하고 연속적으로 콜로니화하면, 준비된 액체 배지로 균사체를 증식시키기 위해 페트리 플레이트 배양물은 언제든지 사용될 수 있다. 이와 같이, 플레이트는 대수(log)기 또는 고정기 동안 임의의 시점에서 증식될 수 있지만, 3개월 이내에, 또 다른 구현예에서는 2년 이내에 사용되도록 권장되며, 비록 당업자에 의해 적절하게 처리된다면 일반적으로 4 ℃에서 10년 동안 그리고 실온에서 최대 6년 동안 저장될 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명에 개시된 바와 같이 고단백 물질을 접종하는데 사용하기 위한 균류를 유지 및 증식시키는데 사용되는 액체 배양물은 모디프로서 선택적 보충물을 포함한 미정의 농업 배지를 포함하여 고체-상태 물질 또는 보다 많은 양의 액체를 접종하는 목적으로 배양물을 제조한다. 일부 구현예에서, 액체 배지 제조물은 본원에 개시된 바와 같이 제조된다. 액체 배지는 또한, 아가 배지와 유사하게 멸균 및 냉각될 수 있다. 아가 배지와 마찬가지로, 고의적이며, 어떤 바람직하지 않은 유기체로 오염되지 않은 한 이론적으로 임의의 균류 배양액을 접종할 수 있다 (디아조트로피(질소 자급 영양체)로 접종된 균류가 본 발명의 방법에 바람직할 수 있음).
따라서, 액체 배지는 일반적으로 아가, 액체 및 다른 형태의 배양물로 접종된다. 생물반응기는 교반, 거품, 온도 및 pH 및 기타 매개 변수를 모니터링하고 제어 할 수 있는 능력을 제공하므로 더 짧은 균사체화 주기 및 더 농축된 배지를 만들 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명에 개시된 바와 같이 고단백 물질을 접종하는데 사용하기 위한 균류는 침지된 액체 배양으로 제조되고 진탕기 테이블 상에서 교반될 수 있거나, 또는 당 분야에 공지된 방법 및 본 발명에 개시된 배합 방법에 따라 진탕 플라스크에서 제조될 수 있다. 본 발명의 수용성 배지를 접종하는데 사용하기 위한 균류 성분은 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 일 구현예에서, 균류 성분은 글리세롤 저장액으로부터 페트리 플레이트의 간단한 증식 모티프에 의해 0.5-4L 삼각 플라스크에 50% 글리세롤 저장액으로 제조될 수 있다. 페트리 플레이트는 다양한 배지 성분 이외에 10 - 35 g/L의 아가를 포함할 수 있다. 멸균 작업이 수행되는, 1 - ~ 3,652일 사이에 어디에서나 성장하는 선택된 페트리 플레이트는 진탕 테이블 또는 고정 배양기에서 배양하기 위해 0.5 - 4 L 삼각 플라스크 (또는 250-1000 mL Wheaton 병 또는 기타 적합한 유리 제품)로 증식될 수 있다. 컨테이너가 작을수록 진탕이 더 빨라진다. 일 구현예에서, 진탕은 컨데이터 크기에 따라 약 1"의 스윙 반경에서 40-160 RPM을 권장한다.
본 발명의 배양 단계는 당업계에 공지되어 있고 본원에 개시된 방법 (예, 무균 절차와 같은)에 의해 수행될 수 있으며 발효기, 진탕 플라스크, 생물반응기 또는 다른 방법으로 수행될 수 있다. 진탕 플라스크에서, 일 구현예로, 교반 속도는 50 내지 240 RPM, 또는 85 내지 95 RPM이고, 1 내지 90일 동안 인큐베이션시킨다. 또 다른 구현예에서, 상기 인큐베이션 온도는 70 내지 90 ℉이다. 또 다른 구현예에서, 상기 인큐베이션 온도는 87 내지 89 ℉이다. 당 분야에 공지된 액체-상태 발효 교반 및 스월링 기술(swirling techniques)은 또한 당 분야에서 알려진 바와 같이, 자기 교반 막대, 스테인레스 스틸 임펠러, 살균된 고압 공기 주입, 진탕 테이블(shaker table)의 사용을 이용한 기계적 전단(mechanical shearing) 및 조명 처방 (illumination regimen), 배치 공급 또는 케모스타틱(chemostatic) 배양과 같은 다른 방법을 포함하여 사용된다.
일 구현예에서, 배양 단계는 당분야에서 알려진 바와 같이 토리구형 돔, 원통형 몸체와 구형 캡베이스가 이상적으로 구성되어 있으며, 상기 몸체가 재킷화되고, 자기 구동 믹서가 장착되고, DO, pH, 온도, 레벨 및 전도도 미터를 포함하는 장비에 대한 접근성을 위해 제공하는 포트로 구성된 생물 반응기에서 수행된다. 본 발명의 방법을 수행할 수 있는 임의의 용기(vessel)가 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 상기 셋-업은 0.1 내지 5.0 ACH를 제공한다. 당업자에게 공지된 다른 엔지니어링 방식이 또한 사용될 수 있다.
반응기는 물로 채워져 있어야 한다. 급수 시스템은 증류기와 상기 반응기 사이에 멸균 가능한 라인이 있는 WFI(water for injection) 시스템이 이상적이지만 물이 살균되는 한 RO 또는 모든 음용수를 사용할 수 있다. 일 구현예에서 전체 배지는 현장에서 살균 처리되는 반면, 다른 구현예에서 농축 배지를 멸균하고 여과 및/또는 가열 멸균된 용기에 채운 물로 희석되거나 대량 서식하는 균류에 대한 오염을 촉진시키지 않도록 충분히 처리된다. 또 다른 구현예에서, 고온 고압 살균은 배지에 유해하지 않을 정도로 충분히 빠르다. 일 구현예에서, 전체 배지는 130 내지 150 ℃의 고온을 1 내지 15분 동안 지속하여 연속 방식으로 멸균된다. 일단 멸균 배지의 작업 부피로 준비하고, 탱크를 가볍게 흔들어주고 접종할 수 있다. 현장에서 농축물 또는 전체 배지 용적으로, 상기 배지가 임의로 교반되는 동안 자켓, 챔버 또는 둘 모두를 스티밍하여 가열 멸균할 수 있다. 상기 배지는 임의로 대신 저온 멸균될 수 있다.
일 구현예에서, 상기 반응기는 50,000 내지 200,000 L 작업 부피의 생물반응기와 같은 큰 부피로 사용된다. 이러한 부피로 물질을 제조할 때 배양물은 일련의 큰 생물반응기를 통과해야 하며, 임의의 생물반응기는 씨드 연속의 매개 변수에 따라 작업 부피의 0.5-15%로 접종된다. 전형적인 공정은 본 발명의 방법을 스케일링할 때 마스터 배양물에서 페트리 플레이트로, 플라스크로, 씨드 생물반응기로, 최종 메인 생물반응기로 배양물을 옮길 것이다. 큰 부피에 도달하기 위해, 3-4 씨드를 사용할 수 있다. 상기 씨드의 배지는 메인 배지와 동일하거나 다를 수 있다. 일 구현예에서, 씨드에 대한 균류 배양물은 본원에서 정의된 바와 같은 단백질 농축물이며, 주요 발효물의 제조에서 고단백 배지를 적용시키는 균류 배양을 돕는다. 이러한 기술은 다음 실시예에서 논의된다. 일 구현예에서, 불용성 오일, 폴리디메틸실록산 및 다른 실리콘, 특정 알콜, 스테아레이트 및 글리콜을 포함하여 당업계에 공지된 것과 같이, 배지 0.5 내지 2.5 g/L 정도의 소포제를 사용함으로써 발포가 최소화된다. 일 구현예에서, 예를 들어 pH를 낮추는 것은 L. edodes의 배양 성장을 돕는다. pH는 시트르산 또는 당업계에 공지된 임의의 다른 화합물에 의해 조정될 수 있지만, 균사체화된 고단백 제품에 대한 신맛을 피하도록 주의해야 한다. 예를 들어, 성장을 돕기 위해 pH를 약 4.5 내지 5.5로 조절할 수 있다.
도 1 내지 도 3은 균사체화된 고단백 식품을 제조하기 위해 수용성 배지를 접종하는데 사용하기 위한 균류 성분으로서 L. edodes의 제조의 예시를 나타낸다. 일 구현예에서, 40% 단백질 (전체+부형제 20g당 8g) 배지에서 완두 단백질과 쌀 단백질의 1 : 1 혼합물을 제조하고, 도 1-도 3은 시간 경과(0, 4 및 10일)에 따른 현미경 검사 결과를 나타낸다. 바이오매스 농도의 증가는 pH의 하락과 관련이 있다. 1 내지 10일 동안 진탕한 후, 진탕 플라스크의 분취량(예, 10 내지 500 mL)을 멸균 절차를 사용하여 멸균 제조된 밀봉 용기(예: 맞춤형 스테인레스 스틸 캔 또는 적절한 원추형 튜브)에 옮길 수 있으며, 약 5-60%의 멸균된 실온(v/v) 글리세롤로 조절할 수 있다. 상기 글리세롤 저장액은 방수 밀봉으로 봉할 수 있으며 저장을 위해 -20 ℃에서 보관할 수 있다. 냉동고는 이상적으로는 일정한 온도의 냉동고이다. 4 ℃에서 보관한 글리세롤 저장액도 사용할 수 있다. 아가 배양물은 본 발명의 방법에 대한 접종물 (inoculant)로서 사용될 수 있으며, 당업계에 공지된 임의의 배양 증식 기술이 사용될 수 있다.
모든 균류가 본원에 기재된 바와 같이 배지에서 성장할 수 있는 것은 아니라는 것이 밝혀졌다. 본 발명에 유용한 균류는 고등 담자균류(Basidio-) 및 자낭균류(Ascomycetes)에서 유래된다. 일부 구현예에서, 본 발명에 사용하기에 유효한 균류는 플레우투스 오스트레아투스(Pleurotus ostreatus), 플레우투스 에린기이(Pleurotus eryngii), 레피스타 누다(Lepista nuda), 헤리쿰 에리나세우스(Hericium erinaceus), 렌티눌라 에도데스(Lentinula edodes), 아가리쿠스 블라제이이(Agaricus blazeii) 및 라에티포러스 술푸레우스(Laetiporus sulfureus)를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다. 일 구현예에서, 상기 균류는 렌티눌라 에도데스이다. 균류는 상업적으로, 예를 들어 Penn State Mushroom Culture Collection으로부터 입수할 수 있다. 균주는 전형적으로 50 mL 시험관 내 "마스터 배양물" PDY 경사로 얻었으며, 균류는 저장되지 않으나 플레이트될 때까지 아가리쿠스 블라제이이(A. blazeii)는 4 ℃에 저장된다. 플레이팅을 위해, 소량의 배양물은 전형적으로 멸균된 배지가 진탕 플라스크를 오염시키지 않도록 멸균된 진탕 플라스크(예: 250 mL)로 옮겨진다 (액체 배지 레시피는 다음에 논의된다). 접종된 플라스크를 약 10시간 동안 흔들고 상기 플라스크의 분취액을 멸균 아가 배지의 제조된 페트리 플레이트 상에 도말한다. 하나의 플라스크를 사용하여 수십에서 수백 가지의 페트리 플레이트 배양물을 제조할 수 있다. 본 발명자들은 이러한 개시된 방법이 간단하고 효율적이라는 것을 알았지만, 마스터 배양을 증식시키는 다른 방법이 있다.
본 발명에 따라 배양 단계를 종결시키고 본 발명에 따른 균사체화된 고단백 식품을 수확할 때를 결정하는 것은 허용 가능한 맛, 풍미 및/또는 향 프로파일을 갖는 균사체화된 고단백 식품을 얻는 것은 본원에 정의된 다수의 요인, 예를 들어, 균사체의 육안 검사, 균사체의 현미경 검사, pH 변화, 용존 산소 함량의 변화, 단백질 함량의 변화, 생성된 바이오매스의 양 및/또는 맛 프로파일, 풍미 프로파일 또는 향 프로파일의 평가 중 임의의 하나에 따라 결정될 수 있다. 일 구현예에서, 단백질의 중요한 이화 작용이 일어나기 전에 배양 및 수확 중에 단백질 함량을 추적하여 수확을 결정할 수 있다. 본 발명자들은 단백질 이화 작용이 본원에 정의된 조건 하에 배양 30 내지 50시간에서 생물반응기에서 개시될 수 있다는 것을 발견하였다. 또 다른 구현예에서, 일정량의 바이오매스의 생산은 수확에 사용된 기준이 될 수 있다. 예를 들어, 바이오매스는 여과에 의해, 예를 들어 10-1000 ㎛의 필터를 통해 측정될 수 있고, 0.1 내지 25 g/L, 일 구현예에서 약 0.2-0.4 g/L의 단백질 농도를 가진다. 일 구현예에서, 수확은 용존 산소가 약 10% 내지 약 90%의 용존 산소 또는 약 80% 미만의 용존 산소에 도달할 때 발생할 수 있다. 또한, 균사체화의 효과는 총 환원당 (보통 40-95% 감소), β-글루칸 및/또는 키틴 형성(일반적으로 102-104 ppm 정도), 균주(예, L. edodes에 대해 0.1 내지 20 ppm 정도의 에리타데닌, H. erinaceus에 대해 0.1 내지 20 ppm 정도의 에리나신) 또는 질소 이용 (질소성 염 또는 단백질의 사용을 통한 모니터링, 단백질이 이용되기 시작하면 배양이 중지되거나 균사체 대사 산물의 존재를 강화시키기 위해 배양이 계속될 수 있음)에 따른 작은 분자 대사 산물 생산과 같은 균사체화 성장을 위한 대용으로 측정될 수 있다. 일 구현예에서, 배양 단계 후 균사체화된 고단백 식품 중의 총 단백질 수율은 약 75 % 내지 약 95 %이다.
수확은 균사체화 단계의 결과인 균사체화된 고단백 식품을 얻는 단계를 포함한다. 수확 후, 배양은 다양한 방법에 따라 진행할 수 있다. 일 구현예에서, 균사체화된 고단백 식품은 저온 살균 또는 멸균된다. 일 구현예에서, 상기 균사체화된 고단백 식품은 당업계에 공지된 방법에 따라 건조된다. 또한, 물질의 농축물 및 분리물은 당업계에 공지된 다양한 용매 또는 다른 가공 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 일 구현예에서, 상기 물질은 저온 살균되거나 멸균되고, 건조되고 당업계에 공지된 방법에 의해 분말화된다. 건조는 데시케이터, 진공 건조기, 원추형 건조기, 분무 건조기, 유동층 또는 당업계에 공지된 임의의 방법으로 수행될 수 있다. 바람직하게는, 가장 큰 소화력 및 생체 이용률을 갖는 건조된 균사체화된 고단백 제품(예, 분말)을 생산하는 방법이 선택된다. 건조된 균사체화된 고단백 제품은 임의로 블렌딩되거나, 파쇄되거나 분쇄되거나, 또는 당업계에 공지된 다른 방법일 수 있다.
많은 경우에, 채식 또는 비채식 공급원(예, 계란, 유장, 카제인, 쇠고기, 대두, 쌀, 헴프, 및 완두 등)로부터의 단백질 농축물 또는 분리물과 같은 본원에 개시된 고단백 물질의 풍미, 맛 및/또는 향은 자극적인 향 및 쓴맛 또는 쏘는 맛을 갖는 불쾌한 것으로 종종 인지되는 풍미를 가질 수 있다. 이러한 바람직하지 않은 풍미와 맛은 공급원 및/또는 가공과 관련이 있으며, 이러한 풍미 또는 맛은 다른 향료로 감추거나 또는 속이기가 어렵거나 불가능할 수 있다. 본 발명은 하기에 보다 상세히 설명되는 바와 같이, 이들 맛 및/또는 풍미를 조절하는 작용을 한다.
본 발명의 일 구현예에서, 균사체화된 고단백 식품 또는 제품의 풍미 및/또는 맛은 고단백 물질(출발 물질)과 비교하여 조절된다. 일부 구현예에서, 멸균 및 균사체화 둘 다는 결과물인 균사체화된 고단백 식품의 맛 조절에 기여한다.
일 구현예에서, 본 발명에 따라 제조된 결과물인 균사체화된 고단백 식품의 향은 고단백 물질(출발 물질)과 비교하여 감소 및/또는 개선된다. 환언하면, 바람직하지 않은 향은 감소되고/거나 바람직한 향은 증가된다. 또 다른 구현예에서, 풍미 및/또는 맛은 감소 및/또는 개선될 수 있다. 예를 들어, 바람직한 풍미 및/또는 맛은 본 발명의 방법에 의해 고단백 물질에 증가시키거나 첨가할 수 있으며, 버섯, 고기, 우마미, 팝콘, 버터 및/또는 기타 풍미 또는 맛을 식품에 첨가한 균사체화된 고단백 식품을 생성한다. 바람직한 향 및/또는 맛의 증가는 5의 척도(1은 맛이 없으며 5는 매우 강한 맛임)에서 1 이상의 증가로 평가될 수 있다 .
균사체화된 고단백 식품의 풍미 및/또는 맛은 또한 본 발명의 방법에 의해 개선될 수 있다. 예를 들면, 풍미 제거는 더 마일드한 풍미의 결과를 달성하고/거나 쓴맛 및/또는 쏘는 맛 및/또는 콩 및/또는 잡초 및/또는 풀 맛의 감소를 가져올 수 있다. 본원에 개시된 바와 같은 바람직하지 않은 풍미 및/또는 맛의 감소는 5의 척도 (1은 맛이 없으며, 5는 매우 강한 맛임)에서 1 이상 감소로 평가될 수 있다.
배양 시간 및/또는 조건은 원하는 향, 풍미 및/또는 맛의 결과를 달성하도록 조정될 수 있다. 예를 들어, 약 2~3일 동안 성장된 배양물은 풍미가 제거된 제품을 생산할 수 있지만, 배양 기간이 길어질수록 배양이 증가함에 따른 변화/강화될 수 있는 다양한 향이 발생할 수 있다. 대조군 및/또는 고단백 물질 및/또는 멸균 또는 균사체화되지 않은 저온 살균된, 건조되고 분말화된 배지와 비교하여, 일부 구현예에서 생성된 균사체화된 고단백 식품은 덜 쓴 맛이 있고 보다 마일하고 덜한 콩의 향을 갖는다.
본 발명의 일 구현예에서, 본 발명의 방법에 의해 제조된 균사체화된 고단백 식품은 완전한 아미노산 프로파일 (1일 필요량의 모든 아미노산)을 가지며, 이는 이로부터 제조된 배지가 그러한 프로파일을 갖기 때문이다. 아미노산 및 아미노산 프로파일 변형이 본 발명의 방법에 따라 가능하지만, 본 발명의 방법에 따라 제조된 많은 산물은 아미노산 프로파일을 보존하는 동시에, 보다 종종 프로테옴의 분자량 분포를 변경시킨다.
일 구현예에서, 쌀 및 완두 단백질 농축 배지에서 성장할 때 플레우로투스 오스트레아투스(Pleurotus ostreatus)는 버섯 향이 두드러지게 나타나는 몇 초 후에 남는 강한 향기로운 향을 전달할 수 있다. 일 구현예에서, 균주는 맛좋은 고기 향 및/또는 우마미, 짭짤함 또는 고기 풍미 및/또는 맛을 전달한다. L. edodes 및 A. blazeii는 일부 구현예에서, 배양물이 페이크 플라스크(fake flask) 또는 생물반응기에 존재 여부에 따라 1.5 내지 8일과 같은 더 짧은 배양 시간으로 풍미를 제거하는데 효과적이다. L. edodes는 완두와 쌀 단백질 농축물 혼합물의 풍미 제거에 특히 효과적이다.
본 발명의 일 구현예에서, 글루텐 분리물 또는 농축물은 수용액에 본원에 기술된 바와 같은 부형제를 함유한 용액으로 혼합될 수 있다. 일 구현예에서, 배지의 글루텐 함량은 건조 중량 기준으로 ≥10% (10-100%)이며, 본원에 개시된 임의의 균류, 예를 들어 L. sulfureus로 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 접종을 위해 당업계에 공지된 방법에 의해 멸균된다. L. sulfureus는 다량의 구아노신 모노포스페이트(GMP) (20-40 g/L)와 글루텐 가수분해물을 생성한다는 것이 밝혀졌으며, 배양 과정이 ELISA 분석법에 따라 건조 중량 기준으로 20ppm 이하의 글루텐과 같은 측정 가능한 글루텐 함량을 낮추게 하는 결과를 초래한다고 이론화된다. 이론에 얽매이지 않고, 배양물은 GMP 및 글루텐 가수분해물의 생성 작용에 의해 상승 작용으로 감칠 맛을 생성한다고 믿어진다. 이론에 얽매이지 않고, GMP와 글루텐 가수분해물의 조합은 첨가제 방식과는 반대로 일종의 증식제로 우마미(감칠맛) 강도를 증폭시킨다. 배양물은 본 발명에 개시된 방법 중 임의의 방법에 의해 처리될 수 있고 유력한 감칠맛의 제품을 생산하는 것은 당업계에 공지되어 있다. 글루텐은 옥수수, 밀 등과 같은 당업계에 공지된 임의의 공급원으로부터 얻을 수 있고, 공급원으로부터 농축물 또는 분리물로 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 본원에 개시된 방법 중 임의의 방법으로 제조된 균사체화된 식품을 포함한다.
본 발명은 또한 본원에서 정의된 바와 같은 균사체화된 고단백 식품을 포함한다. 상기 균사체화된 고단백 식품은 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90% 또는 적어도 95%의 단백질로 포함되거나, 구성되거나, 필수적으로 이루어진다.
본원에 사용된 "균사체화된(myceliated)"은 본원에서 정의된 바와 같이 생균과 함께 배양되었고 본원에 정의된 고단백 물질을 의미하며, 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 20%, 적어도 30%, 적어도 40%, 적어도 50%, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 100%, 적어도 120%, 적어도 140%, 적어도 160%, 적어도 180%, 적어도 200%, 적어도 250%, 적어도 300%, 적어도 400%, 적어도 500%의 바이오매스 증가를 달성하여 균사체화된 고단백 식품을 생산한다.
일부 구현예에서, 고단백 물질은 완두, 쌀, 대두 또는 이들의 조합을 포함하여, 본 명세서에 정의된 채식 또는 비채식 공급원으로부터 수득될 수 있는 단백질 농축물 또는 단백질 분리물이다. 일부 구현예에서, 상기 균사체화된 고단백 식품은 본원에서 정의된 균류 배양에 의해 균사체화될 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 균사체화된 고단백 식품은 고단백 물질과 비교하여 고기, 짭짤함, 우마미, 팝콘 및/또는 버섯 풍미, 향 및/또는 맛을 강화시킬 수 있다. 다른 구현예에서, 상기 균사체화된 고단백 식품은 풍미, 맛 및/또는 향이 감소되어(풍미 제거) 더 마일드하고/하거나 개선된 풍미, 맛 또는 향을 낸다. 일 구현예에서, 쓴 맛, 쏘는 맛 및/또는 콩, 잔디 또는 잡초 맛이 감소된다.
실시예 1:
18개의 1L 배플형 DeLong 삼각 플라스크를 RO수 내 유기 완두 단백질 농축물 25g/L (80% 단백질로 표기함), 유기 쌀 단백질 농축물 25g/L (80% 단백질로 표기함), 유기 건조 맥아 추출물 4g/L, 디암모늄 포스페이트 2g/L, 유기 당근 분말 1g/L 및 마그네슘 설페이트 헵타하이드레이트 0.4g/L로 구성된 배지로 채웠다. 상기 플라스크를 스테인레스 스틸 캡으로 덮고 플라스크를 120 - 121 ℃에서 1시간 동안 유지한 액상 사이클 상의 오토클레이브에서 멸균시켰다. 플라스크를 조심스레 깨끗한 HEPA 층류로 옮겨 18시간 동안 냉각시켰다. P. ostreatus, P. eryngii, L. nuda, H. erinaceus, L. edodes, A. blazeii, L. sulfureus 및 B. edulis의 성숙한 페트리 플레이트 배양물 2cm2 피스를 16개의 플라스크에 이어서 접종하고, 각 균주는 동일한 플레이트에서 2번씩 행하였다. 모든 18개의 플라스크를 실온에서 1"의 스윙 반경을 가진 150 rpm의 진탕 테이블(shaker table)에 두었다. Oyster (P. ostreatus), Blewit (Lepista nuda) 및 Lion 's Mane (H. erinaceus) 배양 모두는 육안 및 현미경 검사를 통해 72시간 만에 완료된 것으로 간주되었다.(균사체 볼(ball)은 배양물에서 명확하게 볼 수 있었고, 이 볼들의 분리물은 광학 현미경 하에서 조밀한 균사 조직을 나타냈다). 다른 샘플들, 잘 자라지 않은 Porcini (Boletus edulis)의 경우 7일째에 수확되었다. Oyster는 특히 강렬한 짭짤한 맛과 끝맛의 버섯 풍미를 지녔다. Blewit은 비슷했지만 짭짤한 맛은 별로 없다. Lion's Mane 샘플에는 별개의 '팝콘' 향이 있다. 3일, 7일 된 샘플은 맛이 거의 없는 것으로 여겨졌지만 맛있는 고기 향이 나는 덕다리버섯(Laetiporus sulphureus, Chicken of the Woods) 샘플 제품에 대해서는 거의 고려되지 않았다. 대조군 샘플은 완두와 쌀 단백질의 조합과 같은 냄새가 나고 맛이 나 바람직한 것으로 고려되지 않았다. 생성된 모든 배양물의 최종 단백질 함량은 50-60%이고, 수율은 건조 및 페슬링(pestling) 후에 80-90%였다.
실시예 2:
3개의 4L 삼각 플라스크를 완두 단백질 농축물 5g/L (80% 단백질로 표기함), 쌀 단백질 농축물 5g/L (80% 단백질로 표기함), 맥아 추출물 3g/L 및 당근 분말 1g/L로 구성된 배지로 채웠다. 상기 플라스크를 오토클레이브 테이프로 5-6회 싸서 살균 가능한 바이오 랩(biowrap)으로 감싸고 (테이프가 부착된 바이오 랩은 쉽게 벗겨 내고 모양을 잃지 않고 플라스크에 다시 놓아야 한다) 플라스크를 120 - 121 ℃에서 1시간 동안 유지한 오토클레이브에서 멸균시켰다. 플라스크를 조심스럽게 깨끗한 HEPA 층류로 옮겨 18시간 동안 냉각시켰다. L. edodes의 60일 된 P1 페트리 플레이트 배양물 2cm2 조각을 각 플라스크에 연속적으로 접종하고 26 ℃에서 1 "스윙 반경을 가진 120 rpm 진탕 테이블에 올려 놓았다. 7 내지 15일 후, 발명자들은 20 mL의 배양액 분액에 pH 프로브를 사용하여 모든 배양물의 pH가 접종 이후 약 2점이 떨어졌음을 발견하였다. L. edodes는 다양한 유기산을 g/L 정도 또는 그 근사치로 생산하는 것으로 알려져 있으며 이러한 산의 발현은 이러한 배양물에서 pH를 떨어뜨릴 가능성이 높다. 현미경 검사를 수행하여 균사체의 존재를 확인하고 박테리아 오염의 정도를 확인하기 위해 LB 배지에 배양하였다. 이 배양물은 추가 가공 (저온 살균 및 선택적 건조)이 가능한 식품으로 사용될 수 있었지만, 본 발명자는 전형적으로 본 발명의 방법에 따라 개시된 바와 같이 제조된 배지의 생물반응기 배양용 접종물과 같은 배양물을 사용한다.
실시예 3:
7 L 생물반응기를 완두 단백질 농축물 5 g/L (80% 단백질로 표기함), 쌀 단백질 농축물 5g/L (80% 단백질로 표기함), 맥아 추출물 3g/L 및 당근 분말 1g/L로 구성된 4.5L의 배지로 채웠다. 생물반응기 상 개방된 포트를 주석 호일로 감싸고 생물반응기를 120 - 121 ℃에서 2시간 동안 유지하는 오토클레이브에서 멸균시켰다. 생물반응기를 청정실에서 깨끗한 벤치로 조심스럽게 옮겨 셋업하고 18시간 동안 냉각시켰다. 생물반응기에 실시예 2에서 제조된 바와 같이 12일 된 플라스크로부터 얻은 접종물 280 mL를 접종하였다. 생물반응기는 3.37 L/분 (0.75 VVM)의 공기 공급을 가지며 26 ℃에서 유지되었다. 킥-인/킥-아웃 소포 시스템이 설치되었고, 1.5 g/L의 thh소포제가 공정 중에 첨가된 것으로 추정되었다. ~3-4 일 후에, 발명자들은 플라스크 배양에서 관찰된 것과 유사하게, 접종 이후 배양물의 pH가 약 1.5 포인트 떨어진 것으로 나타났다. 균사체의 존재를 확인하기 위해 현미경 검사를 실시하고 (육안으로 볼 수 있는 균사체 펠렛을 확인할 수 있음), 상기 배양물을 LB 배지에 배양하여 박테리아 오염의 정도를 확인하고 아무것도 관찰되지 않았다. 이 배양물을 추가의 가공 (저온 살균 및 임의적으로 건조) 식품으로 사용할 수 있었지만, 본 발명자들은 전형적으로 본 발명의 방법에 따라 개시된 바와 같이 제조된 배지의 생물반응기 배양용 접종물과 같은 배양물을 사용한다.
실시예 4:
250 L의 생물반응기를 완두 단백질 농축물 45g/L (80% 단백질로 표기함), 쌀 단백질 농축물 45g/L (80% 단백질로 표기함), 당근 분말 1g/L, 디암모늄 포스페이트 1.8g/L, 마그네슘 설페이트 헵타하이드레이트 0.7g/L, 소포제 1 g/L 및 시트르산 1.5 g/L로 구성된 배지로 채우고, 120 - 121 ℃에서 100분간 유지하면서 당업계에 공지된 방법으로 현장에서 멸균시켰다. 생물반응기에 실시예 3에서 제조된 바와 같이 2개의 생물반응기에서 5 L의 접종물을 접종하였다. 상기 생물반응기는 공기 공급량이 30 L/min (0.2 VVM)이며 26 ℃에서 유지되었다. 상기 배양물을 육안 (균사체 펠렛) 및 현미경 검사를 통해 4일 후에 성공적으로 수확하였다. 배양물의 pH는 가공 중에 변하지 않았지만 DO가 25% 떨어졌다. 배양물을 박테리아 오염의 정도를 확인하기 위해 LB 배지에 도말하였으며, 아무것도 관찰되지 않았다. 그 후 배양물을 82 ℃에서 30분 동안 저온 살균하고 30분의 램프 업 시간 및 17 ℃에서 45분의 냉각 시간을 가졌다. 배양물을 최종적으로 분무 건조하고 맛을 보았다. 최종 산물은 약 10% 까지의 농도에서 지각할 수 없는 맛의 약한 향을 갖는 것으로 나타났다. 산물은 건조 중량 기준으로 ~ 75% 단백질이었다.
실시예 5:
250 L의 생물반응기를 완두 단백질 농축물 45g/L (80% 단백질로 표기함), 쌀 단백질 농축물 45g/L (80% 단백질로 표기함), 당근 분말 1g/L, 디암모늄 포스페이트 1.8g/L, 마그네슘 설페이트 헵타하이드레이트 0.7g/L, 소포제 1 g/L 및 시트르산 1.5 g/L로 구성된 배지로 채우고, 120 - 121 ℃에서 100분간 유지하면서 당업계에 공지된 방법으로 제자리에서 멸균시켰다. 생물반응기에 실시예 3에서 제조된 바와 같이 2개의 생물반응기에서 5 L의 접종물을 접종하였다. 상기 생물반응기는 공기 공급량이 30 L/min (0.2 VVM)이며 26 ℃에서 유지되었다. 상기 배양물을 육안 (균사체 펠렛) 및 현미경 검사를 통해 4일 후에 성공적으로 수확하였다. 배양물의 pH는 가공 중에 변하지 않았지만 DO가 25% 떨어졌다. 배양물을 박테리아 오염의 정도를 확인하기 위해 LB 배지에 도말하였으며, 아무것도 관찰되지 않았다. 그 후 배양물을 82 ℃에서 30분 동안 저온 살균하고 30분의 램프 업 시간 및 10 ℃에서 90분의 냉각 시간을 가졌다. 배양물을 최종적으로 20% 고형분으로 농축시키고, 분무 건조하고 맛을 보았다. 최종 산물은 약 10%까지의 농도에서 지각할 수 없는 맛의 약한 향을 갖는 것으로 나타났다. 산물은 건조 중량 기준으로 ~ 75% 단백질이었다.
실시예 6:
8개의 1L 배플형 DeLong 삼각 플라스크를 완두 단백질 농축물 45g/L (80% 단백질로 표기됨), 쌀 단백질 농축물 45g/L (80% 단백질로 표기됨), 당근 분말 1g/L, 맥아 추출물 1g/L, 디암모늄 포스페이트 1.8g/L 및 마그네슘 설페이트 헵타하이드레이트 0.7g/L로 이루어진 0.4L의 배지로 채우고 120 내지 121 ℃에서 1시간 동안 유지시킨 오토클레이브에서 멸균시켰다. 그 후, 플라스크를 조심스럽게 클린벤치(laminar flow hood)로 위치시키고 18시간 동안 냉각시켰다. 사용된 균주는 종 당 2개의 플라스크로 G. lucidum, C. sinensis, I. obliquus 및 H. erinaceus인 것을 제외하고는 실시예 2에서 제조된 240 ㎖의 배양액으로 각각의 플라스크를 접종하였다. 상기 플라스크를 1 "스윙 반경으로 8일 동안 26 RPM에서 26 ℃에서 진탕시켰다. 이때 실시예 5에서 논의된 파라미터에 따라 저온 살균하고, 건조시키고, 페슬링(pestle)하고 맛을 보았다. G. lucidum 산물은 전형적인 '레이쉬(reishi)' 향이 포함되어 있었으며 대부분 맛이 좋았다. 다른 샘플들은 좋은 것으로 여겨졌지만 더 전형적인 버섯 향이 있었다.
참고문헌에 의한 통합에 관한 진술 및 변경
본원 전반에 걸친 모든 참고문헌, 예를 들어, 발행 또는 부여된 특허 또는 등가물을 포함한 특허 서류; 특허 출원 간행물; 비특허문헌 또는 기타 입수 자료;를 포함하는 특허 서류는 본원에서 참조 문헌으로서 개별적으로 인용되는 것처럼 본원에서 참조 문헌으로서 전체적으로 인용되며, 각 참조 문헌은 본 출원의 개시 내용과 적어도 부분적으로 모순되지 않는다. (예를 들어, 부분적으로 일치하지 않는 참고문헌은 참고문헌의 부분적으로 일치하지 않는 부분을 제외하고는 참고문헌에 의해 포함된다).
본 명세서에서 사용된 용어 및 표현은 설명의 용어로서 사용되는 것이지 한정하기 위한 것이 아니며, 도시되고 기술된 특징 또는 그 일부의 등가물을 배제하는 그러한 용어 및 표현의 사용에 대한 의도는 없으며, 청구된 발명의 범위 내에서 다양한 변형이 가능하다는 것이 인정된다. 따라서, 본 발명이 바람직한 실시예들, 예시적인 실시예들 및 선택적 특징들에 의해 구체적으로 개시되었지만, 본 명세서에 개시된 개념들의 수정 및 변형은 당업자에 의해 가능할 수 있고, 그러한 수정 및 변경은 첨부된 청구 범위에 의해 정의된 바와 같은 본 발명의 범위 내에 있는 것으로 간주된다. 본 명세서에 제공된 특정 실시예는 본 발명의 유용한 실시예의 예이며, 본 발명은 장치, 장치 구성 요소, 방법 단계의 많은 변형 예를 사용하여 수행될 수 있음이 당업자에게 명백할 것이다. 본 명세서에서. 당업자에게 자명한 바와 같이, 본 방법에 유용한 방법 및 장치는 다수의 선택적인 조성물 및 처리 요소 및 단계를 포함할 수 있다.
온도 범위, 시간 범위 또는 조성 또는 농도 범위와 같은 명세서에서 범위가 주어질 때마다, 모든 중간 범위 및 하위 범위는 주어진 범위에 포함된 모든 개별 값뿐만 아니라 이 공개에 포함되어야 한다. 본 명세서의 설명에 포함된 범위 또는 서브 범위 내의 임의의 하위 범위 또는 개별 값은 본 명세서의 청구범위에서 제외될 수 있음을 이해할 것이다.
본 명세서에서 언급된 모든 특허 및 공보는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자의 수준을 나타낸다. 본원에 인용된 인용 문헌은 그들의 공개 또는 출원일 현재의 최신 기술을 나타내기 위해 본원에 참고 문헌으로 인용되며, 이 정보는 필요에 따라 본원에서 선행 기술의 특정 실시예를 배제하기 위해 사용될 수 있는 것으로 의도된다. 예를 들어, 물질의 조성을 청구할 때, 본원에 인용된 문헌에 가능한 개시가 제공되는 화합물을 포함하는 출원인의 발명 이전에 당업계에 공지되고 이용 가능한 화합물은 본원의 청구항의 조성물에 포함되는 것으로 의도되지 않는다는 것을 이해해야 한다.
본 명세서에서 사용된 바와 같이, "포함하다"는 "함유하다", "포함하다" 또는 "특징 지워진다"와 동의어이며, 포괄적이거나 제한이 없으며 추가의 언급되지 않은 요소 또는 방법 단계를 배제하지 않는다. 본 명세서에 사용 된 바와 같이, "~로 이루어진"은 청구항 요소에 특정되지 않은 임의의 요소, 단계 또는 성분을 배제한다. 본 명세서에 사용된 바와 같이, "필수적으로 이루어진다"는 청구항의 기본적이고 신규 한 특성에 실질적으로 영향을 미치지 않는 재료 또는 단계를 배제하지 않는다. 본원의 각각의 예에서, "포함한다", "필수적으로 이루어진다" 및 "구성된다"와 같은 용어는 다른 두 용어 중 하나로 대체될 수 있다. 여기에 예시적으로 기술된 본 발명은 여기에 구체적으로 개시되지 않은 임의의 요소 또는 요소, 제한 또는 제한이 없는 경우에 적합하게 실시될 수 있다.
당업자는 합성 방법, 정제 방법, 분석 방법, 분석 방법, 및 구체적으로 예시 된 것들 이외의 생물학적 방법이 과도한 실험에 의지하지 않고 본 발명의 실시에 사용될 수 있음을 이해할 것이다. 임의의 그러한 물질 및 방법의 모든 당업계에 공지 된 기능적 등가물은 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다. 채용된 용어 및 표현은 설명의 용어로서 사용되는 것이지 제한을 위한 것이 아니며, 도시된 기재 및 그 일부의 등가물을 배제하는 용어 및 표현의 사용에 있어 의도는 없지만, 청구된 발명의 범위 내에서 다양한 변형이 가능하다는 것을 인식해야 한다. 따라서, 본 발명이 바람직한 실시예들 및 선택적 특징들에 의해 구체적으로 개시되었지만, 본 명세서에 개시된 개념들의 변형 및 변형이 당업자에 의해 가능할 수 있고, 그러한 수정들 및 변경들이 첨부된 청구 범위에 의해 정의된 바와 같은 본 발명의 범위 내에 있다.

Claims (14)

  1. 고단백 물질을 포함하는 수용성 배지를 제공하는 단계;
    균류 배양물을 상기 배지에 접종하는 단계; 및
    상기 배지를 배양하여 균사체화된 고단백 식품을 생산하는 단계;를 포함하되,
    상기 수용성 배지는 건조 중량 기준으로 적어도 50%(w/w) 단백질을 포함하고,
    상기 배지는 적어도 50g/L의 단백질을 포함하며,
    상기 고단백 물질은 완두, 쌀 또는 이들의 조합을 포함하는 채식 공급원으로부터 유래되고,
    상기 균류 배양물은 렌티눌라 에도데스(Lentinula edodes) 또는 아가리쿠스 블라제이이(Agaricus blazeii)로 이루어지며,
    상기 생산하는 단계 동안 균류 배양물의 pH는 변하지 않고,
    상기 균사체화된 고단백 식품은 균사체화되지 않은 고단백 물질과 비교하여 감소된 바람직하지 않은 풍미 및 감소된 향을 갖는 것인, 균사체화된 고단백 식품을 제조하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 균류 배양물은 침지된 균류 배양물인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 수용성 배지는 건조 중량 기준으로 적어도 60%(w/w) 단백질인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 상기 고단백 물질은 건조 중량 기준으로 적어도 70%(w/w) 단백질인 방법.
  5. 제1항에 있어서, 상기 고단백 물질은 단백질 농축물 또는 단백질 분리물인 방법.
  6. 제1항에 있어서, 상기 고단백 물질은 접종하는 단계 이전에 멸균 또는 저온 살균되는 방법.
  7. 제1항에 있어서, 상기 방법은 균사체화된 고단백 식품을 건조시키는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  8. 제1항에 있어서, 상기 배지는 건조 당근 분말, 건조 맥아 추출물, 디암모늄 포스페이트, 마그네슘 설페이트 및 시트르산을 추가로 포함하는 방법.
  9. 제1항에 있어서, 상기 배양하는 단계는 배지 내의 용존 산소가 시작 용존 산소의 80% 및 90% 사이에 도달할 때까지 수행되는 방법.
  10. 제1항의 방법에 따라 제조된 균사체화된 식품.
  11. 제1항에 있어서,
    상기 방법은 균사체화된 고단백 식품을 저온 살균 또는 멸균하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  12. 균사체화된 고단백 식품을 포함하는 조성물로서,
    상기 균사체화된 고단백 식품은 건조 중량 기준으로 적어도 50%(w/w) 단백질이고,
    상기 균사체화된 고단백 식품은 완두 또는 쌀 농축물로부터 유래하며,
    상기 균사체화된 고단백 식품은 적어도 50g/L의 단백질을 포함하는 배지에서 아가리쿠스 블라제이이(Agaricus blazeii) 또는 렌티눌라 에도데스(Lentinula edodes)로 이루어지는 균류 배양물에 의해 균사체화되고,
    상기 균사체화된 고단백 식품은 완두 또는 쌀 농축물과 비교하여 감소된 바람직하지 않은 풍미 및 감소된 향을 가지며, 및
    상기 균사체화된 고단백 식품은 제1항의 방법에 따라 제조된 것인, 균사체화된 고단백 식품 조성물.
  13. 제12항에 있어서, 상기 균사체화된 고단백 식품은 건조 중량 기준으로 적어도 70%(w/w) 단백질인 조성물.
  14. 제12항에 있어서, 상기 균사체화된 고단백 식품은 분말 형태인 조성물.
KR1020227040694A 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도 KR20220162181A (ko)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662322726P 2016-04-14 2016-04-14
US62/322,726 2016-04-14
KR1020217027364A KR20210111870A (ko) 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도
PCT/US2017/027731 WO2017181085A1 (en) 2016-04-14 2017-04-14 Methods for the production and use of myceliated high protein food compositions

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020217027364A Division KR20210111870A (ko) 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220162181A true KR20220162181A (ko) 2022-12-07

Family

ID=60040165

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187032846A KR20180130572A (ko) 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도
KR1020217027364A KR20210111870A (ko) 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도
KR1020227040694A KR20220162181A (ko) 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020187032846A KR20180130572A (ko) 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도
KR1020217027364A KR20210111870A (ko) 2016-04-14 2017-04-14 균사체화된 고단백 식품 조성물의 제조 방법 및 용도

Country Status (12)

Country Link
US (1) US10010103B2 (ko)
EP (2) EP3981260A1 (ko)
JP (1) JP6931359B2 (ko)
KR (3) KR20180130572A (ko)
CN (2) CN109068710B (ko)
AU (1) AU2017248805B2 (ko)
BR (1) BR112018070148A2 (ko)
CA (1) CA3018423C (ko)
ES (1) ES2886484T3 (ko)
MX (2) MX2018012324A (ko)
SG (1) SG11201808284QA (ko)
WO (1) WO2017181085A1 (ko)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10709157B2 (en) 2014-08-26 2020-07-14 Mycotechnology, Inc. Methods for the production and use of mycelial liquid tissue culture
WO2016138476A1 (en) 2015-02-26 2016-09-01 Mycotechnology, Inc. Methods for lowering gluten content using fungal cultures
US10806101B2 (en) 2016-04-14 2020-10-20 Mycotechnology, Inc. Methods for the production and use of myceliated high protein food compositions
US11166477B2 (en) 2016-04-14 2021-11-09 Mycotechnology, Inc. Myceliated vegetable protein and food compositions comprising same
CN108029452A (zh) * 2017-12-05 2018-05-15 李博 一种猴头菇培养料及其培养猴头菇培养方法
CO2018001097A1 (es) 2018-02-01 2019-08-09 Reishi Colombia S A S Alimento funcional y proceso para su obtencion
US20210251271A1 (en) * 2018-05-24 2021-08-19 Mycotechnology, Inc. Method for the production and use of myceliated mixed nutrient product for enhanced nutrient supplements
JP2021526861A (ja) 2018-06-08 2021-10-11 エマルジー インコーポレイテッド 真菌の菌糸体を増殖させ、それから可食製品を形成するための方法
WO2020061502A1 (en) 2018-09-20 2020-03-26 The Better Meat Company Enhanced aerobic fermentation methods for producing edible fungal mycelium blended meats and meat analogue compositions
CN109275893A (zh) * 2018-10-27 2019-01-29 福建拓天生物科技有限公司 一种养胃速溶粉及其制备方法
CA3119164A1 (en) * 2018-11-14 2020-05-22 Bolt Threads, Inc. Methods of generating mycelium materials with improved properties
US20220104523A1 (en) * 2019-01-09 2022-04-07 Mycotechnology, Inc. Food and beverage products comprising ascomycetes
CA3136268A1 (en) * 2019-04-16 2020-10-22 Mycotechnology, Inc. Fungal extracts and flavor combinations thereof
CN114007438A (zh) * 2019-05-08 2022-02-01 麦可科技有限公司 用于生产菌丝化的增量组合物的方法
EP4102958A4 (en) * 2020-02-14 2024-01-10 Emergy Inc METHOD FOR PRODUCING DIRECTED MYcelial FIBERS
WO2021195175A1 (en) * 2020-03-24 2021-09-30 Usarium Inc Fibrous meats by solid-state fermentation and extrusion
BR112022025416A2 (pt) 2020-06-25 2023-01-24 Mycotechnology Inc Proteína doce de trufa
DE102020123866A1 (de) 2020-09-14 2022-03-17 Universität Hohenheim Verfahren zum Herstellen eines herzhaften Aromas
CN112166972B (zh) * 2020-10-29 2022-04-12 黑龙江坤健生物科技有限公司 一种旋转升降式灵芝上下表面孢子粉采集装置
JP2024501297A (ja) 2020-12-24 2024-01-11 ムシュラブス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 真菌バイオマスの生産
CN113412932A (zh) * 2021-06-08 2021-09-21 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种食用菌丝蛋白加工方法及应用
WO2023126389A1 (en) 2021-12-27 2023-07-06 Innomy Biotech, S.L Edible myceliated composition
WO2023137192A1 (en) * 2022-01-15 2023-07-20 The Fynder Group, Inc. Meat replica fungal food product
WO2024003323A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Mushlabs Gmbh Production of a fungal fermentation medium from brewer's spent grain

Family Cites Families (132)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL7322C (nl) 1919-08-18 1922-07-15 The Floyd W Robison Co Werkwijze voor de behandeling van koffieboonen.
US1822227A (en) 1927-12-21 1931-09-08 Louise B P Lendrich Process of improving coffee-beans
US2419515A (en) 1942-12-14 1947-04-22 Phillips Petroleum Co Preparation of 1, 3-butylene glycol
US2451567A (en) 1946-09-10 1948-10-19 Mense Elmer H Le Process for preparing starch hydrolyzing enzyme with aspergillus
US2505811A (en) * 1947-12-06 1950-05-02 George M Wilcs Essence of mushroom and its preparation
US2693665A (en) * 1948-01-23 1954-11-09 Humfeld Harry Production of mushroom mycelium by submerged culture in a liquid medium
US2693664A (en) 1949-08-20 1954-11-09 Szuecs Joseph Method of enhancing mushroom mycelium flavor
US2761246A (en) 1953-05-19 1956-09-04 Szuecs Joseph Mushroom culture
US2928210A (en) 1958-01-13 1960-03-15 Anheuser Busch Fermentation process for producing edible mushroom mycelium
US3086320A (en) 1961-08-08 1963-04-23 Producers Creamery Company Process and composition for growing mushroom mycelium submerged fermentation
JPS5622520B1 (ko) 1970-02-24 1981-05-26
US3885048A (en) * 1971-02-08 1975-05-20 James J Liggett Method for preparing simulated meat, fish and dairy products
US3810997A (en) 1971-10-07 1974-05-14 Kraftco Corp Treatment of soybeans with yeast
US3749584A (en) 1972-03-28 1973-07-31 Us Agriculture Decaffeination of beverages
US4071973A (en) 1975-05-13 1978-02-07 Chiyokichi Iizuka Method of artificially growing edible fungi
GB2059243B (en) 1979-09-24 1983-06-08 Anvar Process for the fermentation of cocoa beans
JPS58149697A (ja) 1982-02-27 1983-09-06 Dainippon Ink & Chem Inc β−１，３グリコシルステビオシドの製造方法
DE3239219A1 (de) 1982-10-22 1984-04-26 Coffex AG, 8201 Schaffhausen Verfahren zur verminderung des chlorogensaeuregehalts von rohkaffee
JPS61219340A (ja) 1985-03-27 1986-09-29 Lotte Co Ltd カカオニブの醗酵処理方法
JPH0679547B2 (ja) 1985-10-16 1994-10-12 大日本インキ化学工業株式会社 ステビア甘味料及びその製造方法
US4891220A (en) 1988-07-14 1990-01-02 Immudyne, Inc. Method and composition for treating hyperlipidemia
DE4341316A1 (de) 1993-12-03 1995-06-08 Lehmann Maschf F B Verfahren zum Entkeimen und Trocknen von rohen Kakaobohnen oder Kakaokernbruch
US5934012A (en) 1994-11-23 1999-08-10 Hps Biotechnologies, Inc. Process for production of mushroom inoculum
AU5764098A (en) 1996-12-23 1998-07-17 Gist-Brocades B.V. Method for producing a protein hydrolysate
AU732047B2 (en) 1998-04-17 2001-04-12 Alltech, Inc. Compositions for removal of mycotoxins from feed
JPH11346657A (ja) 1998-06-04 1999-12-21 Natl Food Res Inst カカオビンズの殺菌方法
US6490824B1 (en) 1999-04-23 2002-12-10 Tsukuba Biosystems, Ltd. Method for culturing a basidiomycetous fungus in a liquid culture medium
US6372462B2 (en) 1999-10-15 2002-04-16 Medmyco Ltd. Process for producing, methods and compositions of cholesterol lowering agents from higher basidiomycetes mushrooms
US6383799B1 (en) 1999-10-15 2002-05-07 Medmyco Ltd. Process for producing, methods and compositions of glucuronoxylomannan as nutriceutical agent from higher basidiomycetes mushroom
US6277396B1 (en) 2000-05-11 2001-08-21 Maximum Human Performance, Inc. Dietary supplement containing a thermogenic substance and an adrenal support substance
US6558943B1 (en) 2000-09-05 2003-05-06 Sun Ten Pharmaceutical Co., Ltd. Method for propagating fungi using solid state fermentation
US20140105928A1 (en) 2004-01-06 2014-04-17 Paul Edward Stamets Antiviral and antibacterial activity from medicinal mushrooms
US8765138B2 (en) 2004-01-06 2014-07-01 Paul Edward Stamets Antiviral and antibacterial activity from medicinal mushrooms
US20110008384A1 (en) 2004-01-06 2011-01-13 Paul Edward Stamets Antiviral activity from medicinal mushrooms
US6660290B1 (en) 2000-10-04 2003-12-09 Myco Pesticides Llc Mycopesticides
US6569475B2 (en) 2000-10-06 2003-05-27 Jae-Mahn Song Process for mycelial culture using grain
JP2002191354A (ja) 2000-10-06 2002-07-09 Kabaiotekku Co Ltd 茸菌糸体の生産方法およびその用途（Ｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐｒｏｄｕｃｉｎｇｍｕｓｈｒｏｏｍｍｙｃｅｌｉｕｍａｎｄｕｓｅｓｔｈｅｒｅｏｆ）
DE10053051C2 (de) 2000-10-13 2002-10-31 Coty Bv Kosmetische Zubereitung mit Pflanzenextrakten
US6476003B1 (en) 2000-11-06 2002-11-05 Immusonic, Inc. Method for preparing small particle size glucan in a dry material
US6956120B2 (en) 2000-11-09 2005-10-18 Yasushi Onaka β-1.3-1.6 glucan (Aureobasidium medium)
AU2002244133A1 (en) 2001-02-20 2002-09-04 Paul Stamets Delivery systems for mycotechnologies, mycofiltration and mycoremediation
AT413540B (de) 2001-12-20 2006-03-15 Erber Ag Mikroorganismus, welcher ochratoxine sowie ochratoxine und zearalenone entgiftet, sowie verfahren und verwendung hiefür
KR100480981B1 (ko) * 2002-04-18 2005-04-07 김정옥 느타리 버섯 균사체 배양물로부터 육고기향의 생산 방법
WO2004001053A1 (ja) 2002-06-25 2003-12-31 Asahi Denka Co., Ltd. βグルカン含有油脂組成物及びβグルカンを生産する新規微生物
US6723356B2 (en) 2002-07-03 2004-04-20 Ariake Japan Co. High quality fermented bouillon, and method for production thereof
KR100454766B1 (ko) 2002-08-20 2004-11-03 주식회사 엔비텍 버섯 균사체를 이용한 유가공 폐수의 처리방법
DE60307766T2 (de) 2002-12-10 2007-10-11 Ajinomoto Co., Inc. Gewürzmittel und Verfahren zu seiner Herstellung
JP2005027540A (ja) 2003-07-09 2005-02-03 Ikse:Kk アガリクス飲料
US20050031761A1 (en) 2003-08-05 2005-02-10 Donald Brucker Methods of producing a functionalized coffee
JP2005065643A (ja) * 2003-08-27 2005-03-17 Kume Quality Prod Kk 食品およびその製造方法
CN1870899B (zh) 2003-09-25 2010-09-29 三得利控股株式会社 咖啡果实的处理方法
WO2005072533A1 (ja) 2004-01-30 2005-08-11 Kao Corporation コーヒー飲料組成物
JP4587442B2 (ja) 2004-02-12 2010-11-24 株式会社クレハ 新規な高脂血症治療剤および食品
US7652204B2 (en) 2004-06-08 2010-01-26 Ndsu Research Foundation Breeding of fusarium resistant tetraploid durum wheat
US7407795B2 (en) 2004-07-15 2008-08-05 John Holliday Method for growing Cordyceps sinensis on a substrate and novel method for hybridizing different strains of Cordyceps sinensis
US7514085B2 (en) 2004-07-16 2009-04-07 Medimush A/S Immune modulating compounds from fungi
JP4126037B2 (ja) 2004-09-28 2008-07-30 リンナイ株式会社 ガスコンロ
WO2006063219A2 (en) 2004-12-09 2006-06-15 Pro-Health, Inc. Product and method for oral administration of nutraceuticals
US20110081448A1 (en) 2005-01-05 2011-04-07 Firmenich Sa Process for treating vanilla beans
US8333658B2 (en) 2005-01-18 2012-12-18 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Determining authorization to manipulate a token
EP1709969A1 (en) 2005-04-07 2006-10-11 Praktijkonderzoek Plant en Omgeving B.V. Health promoting dairy and food products containing mushroom glucan produced through fermentation of Grifola frondosa
TWI389645B (zh) 2005-05-25 2013-03-21 Suntory Holdings Ltd The method of treating raw beans with controlled pH
US20060280753A1 (en) 2005-06-11 2006-12-14 Mcneary Peter Composition and Method For Obtaining A Nutritional Food Product Using Solid Substrate Fermentation
JP2007037527A (ja) * 2005-06-28 2007-02-15 Oubiken:Kk 大豆加工素材の製造方法
EP2325295A3 (en) 2005-09-12 2013-05-29 Vrije Universiteit Brussel Cacao starter cultures and fermentation method
US8715979B2 (en) 2005-10-05 2014-05-06 Asahi Breweries, Ltd. Method of producing filamentous fungus culture product
KR100747787B1 (ko) 2006-02-23 2007-08-08 안영환 송이버섯이 포함된 된장의 제조방법
FI20065182A0 (fi) 2006-03-20 2006-03-20 Elixi Oil Oy Fermentoitu elintarvike
EP2068641B1 (en) 2006-10-05 2016-08-10 Olam International Limited Method of producing high-brightness cocoa powder and related compositions
WO2008097482A2 (en) 2007-02-05 2008-08-14 Holliday John C Mycellated grain and other myceliated agricultural materials to be used as animal food supplement
CA2680273C (en) 2007-03-09 2017-02-28 Novozymes A/S Thermostable asparaginases
US9034402B2 (en) 2007-04-16 2015-05-19 Solae, Llc Protein hydrolysate compositions having improved sensory characteristics and physical properties
JP5031508B2 (ja) 2007-04-19 2012-09-19 ハウス食品株式会社 苦味が低減されたフェヌグリーク種子及びその製造方法
US8617868B2 (en) 2007-04-20 2013-12-31 Dsm Ip Assets B.V. Asparaginase enzyme variants and uses thereof
US20080274234A1 (en) 2007-05-01 2008-11-06 Carter Robert Miller Processing cocoa beans and other seeds
US20080296223A1 (en) 2007-05-30 2008-12-04 Bryan Hiromoto Bioremediation methods using fungal compositions
DE102007027825A1 (de) 2007-06-13 2008-12-18 C-Lecta Gmbh Amidohydrolasen zur Aufbereitung von Nahrungs- oder Genussmitteln
CN101784203A (zh) 2007-06-29 2010-07-21 麦克内尔营养有限公司 包含甜菊糖的餐桌甜味剂及其制备方法
JP5475945B2 (ja) 2007-11-20 2014-04-16 花王株式会社 容器詰コーヒー飲料
US20090220645A1 (en) 2008-02-25 2009-09-03 Luis Federico Martinez Quality Enhancement of Coffee Beans by Acid and Enzyme Treatment
WO2009138419A2 (en) 2008-05-15 2009-11-19 Barry Callebaut Ag Method for processing cocoa beans
US8623445B2 (en) 2008-05-16 2014-01-07 Bio-Extraction Inc. Protein concentrates and isolates, and processes for the production thereof
US8821955B2 (en) 2008-05-16 2014-09-02 Siebte Pmi Verwaltungs Gmbh Protein concentrates and isolates, and processes for the production thereof
HUE033952T2 (en) 2008-05-16 2018-01-29 Siebte Pmi Verwaltungs Gmbh Oil seed protein concentrates and methods for their preparation
EP2316278B1 (en) 2008-08-29 2013-04-10 Pharvis R&D Korea Co., Ltd. Method for producing fermented edible plants or edible animal/plants, fermented edible plants or edible animal/plants produced by same, and foods containing same
EP2335490B1 (en) 2008-10-02 2013-05-29 Suntory Beverage & Food Limited Roasted coffee beans and a method of storing roasted coffee beans
FR2937866B1 (fr) 2008-10-30 2010-11-26 Natura Cosmeticos Sa Complexe antioxydant, compositions cosmetiques et pharmaceutiques contenant ledit complexe et utilisation dudit complexe
US8685475B2 (en) 2008-11-25 2014-04-01 Amorepacific Corporation Method for manufacturing fermented tea using Bacillus SP. strains
JP5820726B2 (ja) 2008-11-28 2015-11-24 アーチャー−ダニエルズ−ミッドランド カンパニー カカオ豆を洗浄して、豆から得られるカカオ製品の品質を改善する方法
MX2011006024A (es) 2008-12-12 2011-06-21 Givaudan Sa Proceso de fermentacion.
IT1392414B1 (it) 2008-12-23 2012-03-02 Giuliani Spa Procedimento di biotecnologia microbica per la completa degradazione di glutine nelle farine.
US20120028345A1 (en) 2009-02-18 2012-02-02 Darah Ibrahim solid state fermentation (ssf) system
WO2010104926A1 (en) 2009-03-11 2010-09-16 Cargill, Incorporated Process for making a cocoa product
IT1393420B1 (it) 2009-03-19 2012-04-20 Ceccarelli Apparato per la compattazione e la disidratazione di rifiuti organici
US20100239711A1 (en) 2009-03-23 2010-09-23 Pei-Jung Li Method for manufacturing coffee by solid state fermentation
BR112012008212B1 (pt) 2009-07-29 2020-04-07 Barry Callebaut Ag uso de uma composição microbiana, e métodos para regular a fermentação de material vegetal e para produção de um material derivado de cacau
JP2011041540A (ja) 2009-08-24 2011-03-03 Asahi Breweries Ltd 廃菌体を用いたβ−グルカナーゼ及びキシラナーゼの製造方法及び液体培地
WO2011032244A1 (pt) 2009-09-17 2011-03-24 Blazei Brazil Ltda Farinhas produzidas com grãos miceliados com fungos
EP2478769B8 (en) 2009-09-17 2020-08-12 Blazei Brazil LTDA Process for producing flours from fungus myceliated grain
KR20140079248A (ko) 2009-09-21 2014-06-26 엔시아 바이오사이언스 인크 산화적 스트레스, 알츠하이머 질환 및 관련 질환 상태의 치료를 위한 비타민 ｄ２ 강화 버섯 및 진균류
JP5272072B2 (ja) 2009-09-29 2013-08-28 イーエヌ大塚製薬株式会社 豆類の軟化方法
US8486675B2 (en) 2009-11-11 2013-07-16 Bioexx Specialty Proteins Ltd. Protein concentrates and isolates, and processes for the production thereof from macroalgae and/or microalgae
LT2498619T (lt) 2009-11-11 2017-08-25 Siebte Pmi Verwaltungs Gmbh Baltymų koncentratai ir izoliatai bei jų gavimo būdai iš skrudintų aliejinių augalų sėklų miltų
WO2011094579A2 (en) 2010-01-29 2011-08-04 New Chapter Inc. Mushroom compositions and methods for making and using
US20110206721A1 (en) 2010-02-19 2011-08-25 Vijaya Nair Fermented soy nutritional supplements including mushroom components
BR112012022054A2 (pt) 2010-03-02 2015-09-15 Functional Technologies Corp microorganismo transformado, método de redução de asparagina durante o preparo ou processamento de alimento, médtodo de redução de acrilamidia em um produto alimentício, e, produto alimentício
CN102869772A (zh) 2010-04-27 2013-01-09 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 新颖的天冬酰胺酶
US8999645B2 (en) 2010-05-07 2015-04-07 Menon Renewable Products, Inc. Bioreactors comprising fungal strains
EP2576761B1 (en) 2010-06-03 2017-02-08 Carmel-Haifa University Economic Corporation Ltd Extracts of cyathus striatus mushrooms, pharmaceutical compositions comprising them and a new cyathus striatus strain
US8227224B2 (en) 2010-06-09 2012-07-24 Ford Global Technologies, Llc Method of making molded part comprising mycelium coupled to mechanical device
NZ603773A (en) 2010-07-14 2014-05-30 Nestec Sa Asparaginase from basidiomycetes
ES2373852B1 (es) 2010-07-29 2012-12-18 Consejo Superrior De Investigaciones Cientificas (Csic) Degradación biológica de ocratoxina a en ocratoxina alfa.
US10000854B2 (en) 2010-08-24 2018-06-19 Kitz Corporation Method for preventing elution of Bi from copper alloy
JP5574991B2 (ja) 2011-01-07 2014-08-20 新潟麦酒株式会社 トリュフ栽培用の培地、及びトリュフ菌糸体
KR20140099528A (ko) * 2011-12-02 2014-08-12 프레리 아쿠아 테크 고 품질의 단백질 농축물을 위한 미생물 기반의 공정
DK2790525T3 (en) * 2011-12-12 2017-10-09 Nestec Sa VEGETABLE BASED CHICKEN MEAT ALTERNATIVE
NL2008812C2 (en) 2012-05-14 2013-11-18 Ssipfeed B V ANIMAL FEED MATERIAL AND USE OF THE FEED MATERIAL.
US9427008B2 (en) * 2012-09-06 2016-08-30 Mycotechnology, Inc. Method of myceliation of agricultural substates for producing functional foods and nutraceuticals
US9068171B2 (en) 2012-09-06 2015-06-30 Mycotechnology, Inc. Method for myceliating coffee
US20140170264A1 (en) 2012-09-06 2014-06-19 Mycotechnology, Inc. Improved method for myceliating raw coffee beans including removal of chlorogenic acids
CN102860541B (zh) 2012-09-07 2016-01-13 窦桂明 一种无膻、无腥味羊肉汤的制备方法
WO2014055035A1 (en) 2012-10-04 2014-04-10 Phyto Pharma Pte Ltd New cordyceps militaris strain cbs 132098 and biologically active fruiting bodies, mycelial biomass and extracts therefrom
KR20150131293A (ko) 2013-03-15 2015-11-24 마이코테크놀로지, 인코포레이티드 균사체화된 커피 산물 및 제조방법
US10231469B2 (en) * 2014-03-15 2019-03-19 Mycotechnology, Inc. Myceliated products and methods for making myceliated products from cacao and other agricultural substrates
US20160120201A9 (en) 2014-03-15 2016-05-05 Mycotechnology, Inc. Myceliated Coffee Products and Methods for Making Myceliated Coffee Products
KR101487724B1 (ko) 2014-06-11 2015-02-06 주식회사 알비알 발효 미강 추출물을 이용한 가공 현미 및 이의 제조방법
CN104082037A (zh) * 2014-07-10 2014-10-08 乳山市华隆生物科技有限公司 生物酶辅助后处理猴头菇发酵菌丝液并制备菌丝粉的方法
US10709157B2 (en) * 2014-08-26 2020-07-14 Mycotechnology, Inc. Methods for the production and use of mycelial liquid tissue culture
CN113519814B (zh) 2014-08-26 2024-04-02 麦可科技有限公司 含菌丝液体组织培养物上清与食品的组合物及其用途
US9572364B2 (en) 2014-08-26 2017-02-21 Mycotechnology, Inc. Methods for the production and use of mycelial liquid tissue culture
WO2016138476A1 (en) 2015-02-26 2016-09-01 Mycotechnology, Inc. Methods for lowering gluten content using fungal cultures
CN106174475B (zh) * 2016-07-07 2019-09-13 恩施圣希源生物科技有限公司 一种硒蛋白多糖营养复合粉及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CA3018423C (en) 2021-02-23
CA3018423A1 (en) 2017-10-19
AU2017248805A1 (en) 2018-10-04
AU2017248805B2 (en) 2020-07-23
CN115720814A (zh) 2023-03-03
EP3451856B1 (en) 2021-07-21
JP6931359B2 (ja) 2021-09-01
KR20180130572A (ko) 2018-12-07
MX2022009901A (es) 2022-08-25
EP3981260A1 (en) 2022-04-13
BR112018070148A2 (pt) 2019-05-07
EP3451856A1 (en) 2019-03-13
KR20210111870A (ko) 2021-09-13
CN109068710A (zh) 2018-12-21
EP3451856A4 (en) 2019-11-06
ES2886484T3 (es) 2021-12-20
MX2018012324A (es) 2019-05-22
WO2017181085A1 (en) 2017-10-19
US10010103B2 (en) 2018-07-03
CN109068710B (zh) 2022-11-18
JP2019513402A (ja) 2019-05-30
SG11201808284QA (en) 2018-10-30
US20170295837A1 (en) 2017-10-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2017248805B2 (en) Methods for the production and use of myceliated high protein food compositions
US11343978B2 (en) Methods for the production and use of myceliated high protein food compositions
JP6616826B2 (ja) 菌糸体の液体組織培養物の製造及び使用のための方法
JP7417964B2 (ja) サッカロポリスポラ、及び当該サッカロポリスポラの、生体アミンの低減における使用
CN103396956B (zh) 一种酿酒酵母及其筛选培养方法和用于豆粕发酵的方法
WO2016138476A1 (en) Methods for lowering gluten content using fungal cultures
KR20150095258A (ko) 발효주의 제조방법
CN109295146A (zh) 酶法鲍鱼酶法提取物及其制备方法
CN100347289C (zh) 枯草芽孢杆菌株及其应用方法
CN105852104A (zh) 一种保健型速溶蛋白粉的制作方法
CN111493292A (zh) 一种以海洋生物和/或海产品加工废弃物为原料制备精膏的方法
EP4352201A1 (en) Methods for the production of mycelial biomass from date extract
KR20150095292A (ko) 발효식초의 제조방법
KR101283450B1 (ko) 발효통을 이용한 오메가-3을 함유한 버섯 재배방법
CN103849575B (zh) 一种单细胞蛋白的生产方法
KR20070008381A (ko) 인삼 성분이 함유된 새송이 버섯의 재배방법
CN109452607A (zh) 包含鲍鱼酶法提取物的调味汁及其制备方法
RU2448526C2 (ru) Способ получения соевого соуса
CN107916194A (zh) 一种以黑糖和羊奶果制备羊奶果发酵酒的方法
RU2732832C1 (ru) Культивирование посевного мицелия гриба Pleurotus ostreatus (вешенки обыкновенной) c использованием сырой пивной дробины - отхода пивоваренной промышленности
CN108668778A (zh) 一种用于阿魏菇的培养料及栽培方法
US20240124833A1 (en) Production of coloured fungal mycelium
US20240155983A1 (en) Active Mycelium Compound Extraction Process
CN115044477A (zh) 一种日本棒束孢菌株及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
A107 Divisional application of patent
A302 Request for accelerated examination
E902 Notification of reason for refusal
E601 Decision to refuse application
X091 Application refused [patent]
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)