KR20220140802A

KR20220140802A - 항-acvr1 항체 및 이의 용도

Info

Publication number: KR20220140802A
Application number: KR1020227031475A
Authority: KR
Inventors: 빈센트 제이. 이돈; 새라 제이. 핫셀; 아리스 엔. 이코노미디스
Original assignee: 리제너론 파아마슈티컬스, 인크.
Priority date: 2020-02-11
Filing date: 2021-02-10
Publication date: 2022-10-18
Also published as: ZA202208222B; AU2021218675A1; IL295419A; JP2023519100A; WO2021163170A1; EP4103617A1; MX2022009769A; US11945872B2; CN115362175A; US20210253716A1; US20240190974A1; CA3167441A1

Abstract

본 발명은 액티빈 A 수용체 유형 1 (Activin A receptor type 1: ACVR1) 단백질에 결합하는 단클론 항체 및 이의 사용 방법을 제공한다. 본 발명의 다양한 실시 형태에서, 상기 항체는 ACVR1에 결합하는 전장 사람 항체이다. 일부 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 ACVR1 매개성 골 형성 단백질 (bone morphogenetic protein: BMP) 신호 전달을 억제하여 ACVR1과 연관된 질환, 장애 또는 병태를 치료 또는 예방하는 수단을 제공하는데 유용하다.

Description

항-ACVR1 항체 및 이의 용도

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 PCT 국제 출원으로서 2021년 2월 10일자로 출원 중이고, 2020년 2월 11일자로 출원된 미국 가출원 US 62/975,047 및 2020년 5월 26일자로 출원된 미국 가출원 US 63/030,131의 35 U.S.C. §119(e) 하의 이익을 주장하며, 이들 각각의 전체 내용은 본 출원에 참조로 포함된다.

기술분야

본 발명은 액티빈 A 수용체 유형 1 (Activin A receptor type 1: ACVR1) 및/또는 ACVR1 돌연변이체 단백질에 특이적으로 결합하는 항체 및 항체의 항원 결합 단편, 및 이들 항체를 이용하는 치료 및 진단 방법에 관한 것이다.

액티빈 A 수용체 유형 1 (ACVR1, ActR1 또는 액티빈 수용체 유사 키나아제 2 (Activin receptor -like kinase 2: ALK2)로도 또한 공지됨)은 단일 통과 막 관통 수용체이며, TGF-β 수용체 슈퍼 패밀리의 유형 I 골 형성 단백질 (Bone Morphogenic Protein: BMP) 수용체의 구성원이다. 리간드 결합될 때, ACVR1은 유형 II 수용체와 함께 다운스트림 신호 전달 캐스케이드를 개시하여 수용체 특이적 R-SMAD 단백질 (SMAD1, SMAD5 또는 SMAD8)의 활성화를 유도한 다음 SMAD4와 결합하여 유전자의 전사 조절을 유도한다 (문헌 [Massague 1998, Massaque et al. 2005]).

ACVR1 단백질로도 또한 공지된 BMP 유형 I 수용체 ALK2를 인코딩하는 ACVR1 유전자의 돌연변이는 골외성 골 브릿지로 인해 심각한 체동 손상을 갖는 연조직에서 진행성 전위성 (ectopic) 골 형성을 유발하는 희귀 장애인 진행성 골화성 섬유 이형성증 (fibroplasia ossificans progressiva: FOP)을 유발할 수 있다. FOP의 원인이 되는 ACVR1 돌연변이는 SMAD 의존성 다운스트림 신호의 조절 이상을 일으키며, 비표준 리간드인 액티빈 A에 반응하는 능력을 돌연변이된 수용체에 부여하여 전위성 골 형성을 촉발시킨다. ACVR1을 인코딩하는 유전자에서의 기능 돌연변이의 획득은 FOP와 같은 사람의 골격외 (이소성) 골화의 쇠약성 장애를 초래한다. 예를 들어, 전형적인 FOP 환자는 ACVR1 단백질의 206번 위치에서 히스티딘 아미노산을 아르기닌 아미노산으로 대체할 수 있다. 이는 Acvr1:액티빈 A:Acvr2 비신호 전달 복합체를 신호 전달 복합체로 전환시키는 단백질의 글리신-세린 활성화 도메인의 변화를 유발한다. 액티빈 신기능의 결과는 섬유-지방 생성 선조체 (Fibro-adipogenic progenitor: FAP) 세포가 연골내 골화를 개시한다는 것이다. 다른 잔기를 포함하는 비정형 돌연변이가 유사하게 작용하여, BMP가 존재하지 않음에도 불구하고 ACVR1 단백질이 이의 활성 입체 형태에 고정된다. ACVR1 유전자의 돌연변이는 또한 산재성 내재성 뇌교종 (diffuse intrinsic pontine glioma: DIPG)과 관련될 수 있다.

주요 철 조절 인자 헵시딘의 간 발현은 골 형성 단백질 (BMP)/SMAD 경로에 의해 제어된다. BMP 신호 전달은 SMAD 단백질을 인산화하기 위해 리간드 (예를 들어, BMP7, BMP6 또는 BMP2), 유형 I 수용체 (예를 들어, ACVR1), 유형 II 수용체 (예를 들어, ACVR2 또는 BMPR2) 및 보조 수용체 헤모주벨린 (HJV)을 필요로 한다. ACVR1의 BMP6 매개성 활성화는 헵시딘을 인코딩하는 유전자인 Hamp의 전사를 직접 활성화한다. 헵시딘은 유일한 공지된 철 배출 인자 (exporter)인 페로포틴 (slc40a1)의 내재화를 유발하여 철 수준의 음성 조절 인자이다. BMP6-ACVR1 신호 전달 캐스케이드의 억제는 Hamp 전사 감소를 유발하여 헵시딘의 순환 수준 감소를 초래한다. 순환 헵시딘의 감소는 소장으로부터 철 흡수 증가를 가능하게 하는 페로포틴 수준의 증가를 초래하여 순환 철 수준을 증가시킨다.

ACVR1에 대한 단클론 항체는 카타기리 (Katagiri) 등의 미국 특허/출원공개 US 10,428,148, 2018/0118835 및 국제공기공보 WO 2019/172165에 기재되어 있다.

ACVR1 단백질, 이의 단편 또는 이의 돌연변이체에 고친화도로 특이적으로 결합하고 ACVR1 매개성 골형성 단백질 (BMP) 신호 전달을 억제하는 전장 사람 항체는, 예를 들어, 이소성 골화, 전위성 골화, 골 형성 이형성증, 빈혈 또는 산재성 내재성 뇌교종의 예방 및 치료에 중요할 수 있다.

본 발명은 액티빈 A 수용체 유형 1 (ACVR1) 단백질에 특이적으로 결합하고 ACVR1 매개성 BMP 신호 전달을 억제하는 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 특정 실시 형태에서, 상기 항-ACVR1 항체는 높은 친화도로 ACVR1에 결합하여 ACVR1을 차단거나 활성화된 입체 형태를 탈안정화시키는 전장 사람 항체이다. 본 발명의 항체는 특히 ACVR1 단백질의 활성을 탈안정화시키거나 감소시키는데 유용하다. 특정 실시 형태에서, 상기 항체는 대상체에서 ACVR1 관련 질환 또는 장애의 적어도 하나의 증상 또는 징후를 예방, 치료 또는 개선하는데 유용하다. 특정 실시 형태에서, 상기 항체는 ACVR1 관련 질환 또는 장애가 있거나 이에 걸릴 위험이 있는 대상체에게 예방적으로 또는 치료학적으로 투여될 수 있다. 구체적인 실시 형태에서, 상기 항체는 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 때 이소성 골화, 전위성 골화, 골 이형성증, 빈혈, 또는 뇌종양을 비롯한 특정 암의 예방 및 치료에 사용된다.

일부 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 ACVR1 단백질 및/또는 이의 돌연변이체에 결합한다. 또한, 본 출원에서 개시된 항체는 높은 친화도로 ACVR1 단백질 또는 이의 돌연변이체에 결합한다. 본 발명에서 사용되는 ACVR1 단백질은 사람 또는 마우스와 같은 포유 동물로부터 유래될 수 있는 ACVR1 단백질을 포함한다. 예를 들어, 사람 ACVR1의 전장 아미노산 서열은 UniProtKB 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)을 참조하여 이용 가능하다.

상기 ACVR1 단백질은, 예를 들어, 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 ACVR1 단백질의 1~20번 위치에 존재하는 신호 펩타이드를 포함할 수 있다. 성숙한 ACVR1 단백질은, 예를 들어, 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 21~509번 아미노산를 포함할 수 있다. 상기 ACVR1 단백질은, 예를 들어, 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 21~123번 아미노산에 세포외 도메인을 포함할 수 있다. 상기 ACVR1 단백질은, 예를 들어, 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 124~146번 아미노산에 막 관통 도메인을 포함할 수 있다. 상기 ACVR1 단백질은, 예를 들어, 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 208~502번 위치 내에 단백질 키나아제 도메인을 포함할 수 있다. 상기 ACVR 단백질은, 예를 들어, 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 N-연결된 (GlcNAc…) 아스파라긴을 포함하는 102번 아미노산 위치에서의 글리코실화를 포함할 수 있다. 상기 ACVR 단백질은, 예를 들어, 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 501번 위치에, 예를 들어, 포스포세린과 같은 변형된 잔기를 포함할 수 있다.

ACVR1 유전자의 돌연변이는 FOP를 비롯한 다양한 질환의 원인이 될 수 있다. 상기 ACVR1 단백질은 다양한 가족성 및 산발성 FOP 사례에서 발견될 수 있는 아미노산 치환을 갖는 돌연변이체 ACVR1 단백질일 수 있다. 사람 ACVR1 단백질은 서열 번호 341의 L196P (196번 위치의 류신을 프롤린으로 치환하는 돌연변이), delP197_F198insL (197번 위치의 프롤린 및 198번 위치의 페닐알라닌을 결실시키고 류신을 삽입하는 돌연변이), R202I (202번 위치의 아르기닌을 이소류신으로 치환하는 돌연변이), R206H (206번 위치의 아르기닌을 히스티딘으로 치환하는 돌연변이), Q207E (207번 위치의 글루타민을 글루탐산으로 치환하는 돌연변이), R258S (258번 위치의 아르기닌을 세린으로 치환하는 돌연변이), R25258G (258번 위치의 아르기닌을 글리신으로 치환하는 돌연변이), G325A (325번 위치의 글리신을 알라닌으로 치환하는 돌연변이), G328E (328번 위치의 글리신을 글루탐산으로 치환하는 돌연변이), G328R (328번 위치의 글리신을 아르기닌으로 치환하는 돌연변이), G328W (328번 위치의 글리신을 트립토판으로 치환하는 돌연변이), G356D (356번 위치의 글리신을 아스파르트산으로 치환하는 돌연변이) 및 R375P (375번 위치의 아르기닌을 프롤린으로 치환하는 돌연변이)를 포함하지만 이들에 한정되는 않는 다양한 돌연변이를 포함할 수 있다.

또 다른 예로서, 마우스 ACVR1 단백질의 전장 아미노산 서열은 승인 번호 P37172 (서열 번호 342)를 참조하여 이용 가능하다.

본 발명의 항체는 전장 (예를 들어, IgG1 또는 IgG4 항체)일 수 있거나, 또는 항원 결합 부분 (예를 들어, Fab, F(ab’)₂ 또는 scFv 단편)만을 포함할 수 있으며, 기능성에 영향을 주기 위해, 예를 들어, 숙주 내에서의 지속성을 증가시키기 위해, 또는 잔류 이펙터 기능을 제거하기 위해 변형될 수도 있다 (Reddy et al., 2000, J. Immunol. 164:1925-1933). 특정 실시 형태에서, 상기 항체는 이중 특이적일 수 있다.

제1 양태에서, 본 발명은 ACVR1 단백질에 특이적으로 결합하는 단리된 재조합 단클론 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 일부 실시 형태에서, 상기 항체는 전장 사람 단클론 항체이다.

본 발명의 예시적인 항-ACVR1 항체는 본 출원의 표 1 및 2에 열거되어 있다. 표 1은 예시적인 항체의 중쇄 가변 영역 (heavy chain variable region: HCVR), 경쇄 가변 영역 (light chain variable region: LCVR), 중쇄 상보성 결정 영역 (heavy chain complementarity determining region: HCDR) (HCDR1, HCDR2 및 HCDR3) 및 경쇄 상보성 결정 영역 (light chain complementarity determining region: LCDR) (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)의 아미노산 서열 식별자를 제시하고 있다. 표 2는 예시적인 항체의 HCVR, LCVR, HCDR1, HCDR2 HCDR3, LCDR1, LCDR2 및 LCDR3의 핵산 서열 식별자를 제시하고 있다.

본 발명은 표 1에 열거된 임의의 HCVR 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 이에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 HCVR를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 HCVR 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 이에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 LCVR를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 LCVR 아미노산 서열과 쌍을 이루는 표 1에 열거된 임의의 HCVR 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 LCVR 아미노산 서열 쌍 (HCVR/LCVR)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 특정 실시 형태에 따르면, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 예시적인 항-ACVR1 항체 내에 포함된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 특정 실시 형태에서, 본 발명의 항-ACVR1 항체는 서열 번호 2/10 (예를 들어, mAb27396), 22/30 (예를 들어, mAb27241), 22/72 (예를 들어, mAb27245), 42/48 (예를 들어, mAb27242), 58/62 (예를 들어, mAb27243), 76/84 (예를 들어, mAb27247), 96/104 (예를 들어, mAb27404), 116/119 (예를 들어, mAb27405), 128/136 (예를 들어, mAb27400), 203/211 (예를 들어, mAb29226), 273/277 (예를 들어, mAb29257) 및 300/307 (예를 들어, mAb29266) 중 하나로부터 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함한다.

본 발명은 또한 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 HCVR은 12개 이하의 아미노산 치환을 갖는 표 1에 열거된 아미노산 서열을 포함하고/하거나, 상기 LCVR은 10개 이하의 아미노산 치환을 갖는 표 1에 열거된 아미노산 서열을 포함한다. 예를 들어, 본 발명은 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 HCVR은 표 1에 열거된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12개의 아미노산 치환을 갖는다. 또 다른 예에서, 본 발명은 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 LCVR은 표 1에 열거된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 아미노산 치환을 갖는다. 하나의 실시 형태에서, 본 발명은 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 HCVR은 표 1에 열거된 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 아미노산 서열은 적어도 하나 이상의 아미노산 치환을 갖고/갖거나, 상기 LCVR은 표 1에 열거된 아미노산 서열을 포함하고, 여기서, 상기 아미노산 서열은 적어도 하나 이상의 아미노산 치환을 갖는다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 HCDR1 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 중쇄 CDR1 (HCDR1)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 HCDR2 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 중쇄 CDR2 (HCDR2)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 HCDR3 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 중쇄 CDR3 (HCDR3)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 LCDR1 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 경쇄 CDR1 (LCDR1)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 LCDR2 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 이에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 경쇄 CDR2 (LCDR2)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 LCDR3 아미노산 서열로부터 선택된 아미노산 서열, 또는 이에 대해 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열을 포함하는 경쇄 CDR3 (LCDR3)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

또한, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 LCDR3 아미노산 서열과 쌍을 이루는 표 1에 열거된 임의의 HCDR3 아미노산 서열을 포함하는 HCDR3 및 LCDR3 아미노산 서열 쌍 (HCDR3/LCDR3)을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 특정 실시 형태에 따르면, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 예시적인 항-ACVR1 항체 내에 포함된 HCDR3/LCDR3 아미노산 서열 쌍을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 특정 실시 형태에서, 상기 HCDR3/LCDR3 아미노산 서열 쌍은 서열 번호 28/36 (예를 들어, mAb27242), 60/66 (예를 들어, mAb27243), 82/90 (예를 들어, mAb27247), 8/16 (예를 들어, mAb27396), 102/110 (예를 들어, mAb27405), 28/66 (예를 들어, mAb27245), 134/142 (예를 들어, mAb27400), 209/217 (예를 들어, mAb29226), 261/283 (예를 들어, mAb29257) 및 305/313 (예를 들어, mAb29266)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명은 또한 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 HCVR은 표 1에 열거된 아미노산 서열과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 HCDR1, 표 1에 열거된 아미노산 서열과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 HCDR2, 및 표 1에 열거된 아미노산 서열과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 HCDR3을 포함한다. 특정 실시 형태에서, 본 발명은 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 LCVR은 표 1에 열거된 아미노산 서열과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 LCDR1, 표 1에 열거된 아미노산 서열과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 LCDR2, 및 표 1에 열거된 아미노산 서열과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 LCDR3을 포함한다. 예를 들어, 본 발명은 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 HCVR은 서열 번호 24 또는 44의 아미노산 서열 또는 서열 번호 24 또는 44와 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 HCDR1, 서열 번호 46의 아미노산 서열 또는 서열 번호 46과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 HCDR2, 및 서열 번호 28 또는 60의 아미노산 서열 또는 서열 번호 28 또는 60과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 HCDR3을 포함한다. 또 다른 예시적인 실시형태에서, 본 발명은 HCVR 및 LCVR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하며, 상기 LCVR은 서열 번호 50의 아미노산 서열 또는 서열 번호 50과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 LCDR1, 서열 번호 52 또는 64의 아미노산 서열 또는 서열 번호 52 또는 64와 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 LCDR2, 및 서열 번호 36 또는 66의 아미노산 서열 또는 서열 번호 36 또는 66과 1개의 아미노산이 상이한 아미노산 서열을 포함하는 LCDR3을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 예시적인 항체 내에 포함된 6개의 CDR의 세트 (즉, HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 특정 실시 형태에서, 상기 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3 아미노산 서열 세트는 서열 번호 44-46-28-50-52-36 (예를 들어, mAb27242), 24-46-60-50-64-66 (예를 들어, mAb27243), 78-80-82-86-88-90 (예를 들어, mAb27247), 4-6-8-12-14-16 (예를 들어, mAb27396), 98-100-102-106-122-110 (예를 들어, mAb27405), 98-100-102-106-108-110(예를 들어, mAb27404), 24-26-28-50-64-66 (예를 들어, mAb27245), 24-26-28-32-34-36 (예를 들어, mAb27241), 130-132-134-138-140-142 (예를 들어, mAb27400), 205-207-209-213-215-217 (예를 들어, mAb29226), 257-275-261-279-281-283 (예를 들어, mAb29257) 및 4-303-305-309-311-313 (예를 들어, mAb29266)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

관련 실시 형태에서, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 예시적인 항체에 의해 정의된 바와 같은 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍 내에 포함된 6개의 CDR의 세트 (즉, HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3)를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 예를 들어, 본 발명은 서열 번호 2/10 (예를 들어, mAb27396), 22/30 (예를 들어, mAb27241), 22/72 (예를 들어, mAb27245), 42/48 (예를 들어, mAb27242), 58/62 (예를 들어, mAb27243), 76/84 (예를 들어, mAb27247), 96/104 (예를 들어, mAb27404), 116/119 (예를 들어, mAb27405), 128/136 (예를 들어, mAb27400), 203/211 (예를 들어, mAb29226), 273/277 (예를 들어, mAb29257) 및 300/307 (예를 들어, mAb29266)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍 내에 포함된 HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3 아미노산 서열 세트를 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다.

HCVR 및 LCVR 아미노산 서열 내의 CDR을 확인하기 위한 방법 및 기술은 당해 분야에 널리 공지되어 있으며 본 출원에서 개시된 특정 HCVR 및/또는 LCVR 아미노산 서열 내의 CDR을 확인하는데 사용될 수 있다. CDR의 경계를 확인하는데 사용될 수 있는 예시적인 방법으로는, 예를 들어, 카바트(Kabat) 정의, 코티아(Chothia) 정의, 및 AbM 정의를 포함한다. 일반적으로, 카바트 정의는 서열 변동성을 기반으로 하고, 코티아 정의는 구조적 루프 영역의 위치를 기반으로 하며, AbM 정의는 카바트와 코티아 접근 방법을 절충한 것이다. 예를 들어, 문헌 [Kabat, "Sequences of Proteins of Immunological Interest," National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)]; [Al-Lazikani et al., J. Mol. Biol. 273: 927-948 (1997)]; 및 [Martin et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 9268-9272 (1989)]를 참조한다. 공용 데이터베이스도 항체 내의 CDR 서열을 확인하는데 활용할 수 있다.

특정 실시 형태에서, 본 출원은 ACVR1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 중쇄 가변 영역 (HCVR) 내에 포함된 3개의 중쇄 상보성 결정 영역 (CDR) (HCDR1, HCDR2 및 HCDR3) 및 경쇄 가변 영역 (LCVR) 내에 포함된 3개의 경쇄 CDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하고, 상기 HCVR은 (i) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열; (ii) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%의 동일성을 갖는 아미노산 서열; (iii) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 95%의 동일성을 갖는 아미노산 서열; 또는 (iv) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 12개 이하의 아미노산 치환을 갖고, 상기 LCVR은 (a) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열; (b) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%의 동일성을 갖는 아미노산 서열; (c) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 95%의 동일성을 갖는 아미노산 서열; 또는 (d) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열은 10개 이하의 아미노산 치환을 갖는다.

특정한 바람직한 실시 형태에서, 본 발명은 길항 방식으로 ACVR1에 특이적으로 결합하는, 즉, ACVR1 결합 및/또는 활성을 감소 또는 차단하는 항체를 포함한다.

본 발명은 변형된 글리코실화 패턴을 갖는 항-ACVR1 항체를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 바람직하지 않은 글리코실화 부위를 제거하기 위한 변형, 즉, 예를 들어, 항체 의존적 세포성 세포독성 (antibody dependent cellular cytotoxicity: ADCC) 기능을 증가시키기 위해 올리고사카라이드 쇄 상에 존재하는 푸코오스 잔기가 결핍된 항체가 유용할 수 있다 (문헌 [Shield et al. (2002) JBC 277:26733] 참조). 또 다른 적용에서, 보체 의존적 세포독성 (complement dependent cytotoxicity: CDC)을 변형시키기 위해 갈락토실화의 변형이 이루어질 수 있다.

특정 실시 형태에서, 본 발명은 ACVR1에 대한 pH 의존적 결합을 나타내는 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 예를 들어, 본 발명은 산성 pH에서 보다 중성 pH에서 더 높은 친화도 (즉, 산성 pH에서 감소된 결합)로 ACVR1에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함한다.

본 발명은 또한 HCVR의 CDR 및 LCVR의 CDR을 포함하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 ACVR1에 특이적으로 결합하기 위해 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제공하는데, 여기서, 상기 HCVR 및 LCVR은 각각 표 1에 열거된 HCVR 및 LCVR 서열로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는다.

본 발명은 또한 HCVR의 CDR 및 LCVR의 CDR을 포함하는 참조 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 ACVR1에 결합하기 위해 교차 경쟁하는 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제공하는데, 여기서, 상기 HCVR 및 LCVR은 각각 표 1에 열거된 HCVR 및 LCVR 서열로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는다.

본 발명은 또한 HCVR의 3개의 CDR 및 LCVR의 3개의 CDR을 포함하는 참조 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 동일한 에피토프에 결합하는 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제공하는데, 여기서, 상기 HCVR 및 LCVR은 각각 표 1에 열거된 HCVR 및 LCVR 서열로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는다.

본 발명은 또한 BMP7, 액티빈 A 또는 액티빈 유형 II 수용체와 신호 전달 복합체를 형성하는 다른 TGF베타 계열 리간드에 의한 리간드 유도 신호 전달을 억제하는 단리된 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제공한다. 일부 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 ACVR1이 액티빈 유형 II 수용체와 신호 전달 복합체를 형성하는 것을 방지한다. 본 발명은 BMP7 또는 액티빈 A 또는 액티빈 유형 II 수용체와 동일한 ACVR1 상의 에피토프에 결합할 수 있거나, BMP7 또는 액티빈 A 또는 액티빈 유형 II 수용체와 상이한 ACVR1 상의 에피토프에 결합할 수 있는 단리된 항체 및 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

특정 실시 형태에서, ACVR1의 제1 에피토프에 대한 제1 결합 특이성 및 ACVR1의 제2 에피토프에 대한 제2 결합 특이성을 포함하는 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 이중 특이적이며, 여기서, 상기 제1 및 제2 에피토프는 별개로서 중첩되지 않는다.

특정 실시 형태에서, 본 발명은 하기 특성들 중 하나 이상을 갖는 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다:

(a) 전장 사람 단클론 항체임;

(b) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 60 nM 미만, 12 nM 미만, 2 nM 미만, 1 nM 미만 또는 0.5 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 25℃에서 Fc (예를 들어, 서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함;

(c) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 150 nM 미만, 15 nM 미만, 5 nM 미만, 1.5 nM 미만 또는 1 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 37℃에서 mFc (예를 들어, 서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함;

(d) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 300 nM 미만, 150 nM 미만, 25 nM 미만, 10 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 2 nM 미만의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함;

(e) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 500 nM 미만, 50 nM 미만, 25 nM 미만 또는 10 nM 미만의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (f) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때, 마우스 ACVR1에 결합하지 않거나, 500 nM 초과의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (g) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때, 마우스 ACVR1에 결합하지 않거나, 500 nM 초과의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합함;

(k) 사람 ACVR1 단백질 또는 사람 ACVR(R206H) 단백질을 발현하는 세포에 결합함;

(l) 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 25 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 액티빈 A에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제함;

(m) 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 20 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 1 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 BMP7에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제함;

(m) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 혈청 헵시딘을 유의하게 감소시킴; (n) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 혈청 철 수준을 유의하게 증가시킴; 및/또는 (o) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 야생형 ACVR1 신호 전달을 억제함; 및

(o) 표 1에서 열거된 HCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 표 1에서 열거된 LCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함함.

제2 양태에서, 본 발명은 항-ACVR1 항체 또는 이의 부분을 인코딩하는 핵산 분자를 제공한다. 예를 들어, 본 발명은 표 1에 열거된 임의의 HCVR 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 HCVR 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 LCVR 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 LCVR 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 HCDR1 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 HCDR1 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 HCDR2 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 HCDR2 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 HCDR3 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 HCDR3 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 LCDR1 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 LCDR1 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 LCDR2 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 LCDR2 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 표 1에 열거된 임의의 LCDR3 아미노산 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하고; 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 LCDR3 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다.

본 발명은 또한 HCVR을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하는데, 여기서, 상기 HCVR은 3개의 CDR의 세트 (즉, HCDR1-HCDR2-HCDR3)를 포함하고, 상기 HCDR1-HCDR2-HCDR3 아미노산 서열 세트는 표 1에 열거된 임의의 예시적인 항체에 의해 정의된 바와 같다.

본 발명은 또한 LCVR을 인코딩하는 핵산 분자를 제공하는데, 여기서, 상기 LCVR은 3개의 CDR의 세트 (즉, LCDR1-LCDR2-LCDR3)를 포함하고, 상기 LCDR1-LCDR2-LCDR3 아미노산 서열 세트는 표 1에 열거된 임의의 예시적인 항체에 의해 정의된 바와 같다.

또한, 본 발명은 HCVR 및 LCVR 둘 다를 인코딩하는 핵산 분자를 제공하는데, 여기서, 상기 HCVR은 표 1에 열거된 임의의 HCVR 아미노산 서열 중의 아미노산 서열을 포함하고, 상기 LCVR은 표 1에 열거된 임의의 LCVR 아미노산 서열 중의 아미노산 서열을 포함한다. 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 표 2에 열거된 임의의 HCVR 핵산 서열 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열, 및 표 1에 열거된 임의의 LCVR 핵산 서열, 또는 이와 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 98% 또는 적어도 99%의 서열 동일성을 갖는 이의 실질적으로 유사한 서열로부터 선택된 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함한다. 본 발명의 이러한 양태에 따른 특정 실시 형태에서, 상기 핵산 분자는 HCVR 및 LCVR을 인코딩하며, 여기서, 상기 HCVR 및 LCVR은 모두 표 1에 열거된 동일한 항-ACVR1 항체로부터 유래한다.

관련 양태에서, 본 발명은 항체의 중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역을 포함하는 폴리펩타이드를 발현할 수 있는 재조합 발현 벡터를 제공한다. 예를 들어, 본 발명은 상기에서 언급된 임의의 핵산 분자, 즉, 표 2에 제시된 바와 같은 HCVR, LCVR 및/또는 CDR 서열을 인코딩하는 핵산 분자를 포함하는 재조합 발현 벡터를 포함한다. 특정 실시 형태에서, 본 발명은 (a) ACVR1에 결합하는 항체의 HCVR을 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 핵산 분자로서, 여기서, 상기 HCVR이 표 1에 열거된 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 핵산 분자; 및/또는 (b) ACVR1에 결합하는 항체의 LCVR을 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 핵산 분자로서, 여기서, 상기 LCVR이 표 1에 열거된 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터를 제공한다. 또한, 이러한 벡터가 도입된 숙주 세포 뿐만 아니라, 항체 또는 항체 단편의 생산을 가능하게 하는 조건하에 상기 숙주 세포를 배양하고, 이렇게 하여 생산된 항체 및 항체 단편을 회수함으로써 항체 또는 이의 부분을 제조하는 방법도 본 발명의 범위 내에 포함된다. 특정 실시 형태에서, 상기 숙주 세포는 포유 동물 세포 또는 원핵 세포를 포함한다. 특정 실시 형태에서, 상기 숙주 세포는 중국 햄스터 난소 (Chinese Hamster Ovary: CHO) 세포 또는 에세리키아 콜라이 (Escherichia coli: E. coli) 세포이다. 특정 실시 형태에서, 본 발명은 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 생산하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 프로모터에 작동 가능하게 연결된 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 HCVR 및/또는 LCVR을 인코딩하는 핵산 서열을 포함하는 발현 벡터를 숙주 세포 내로 도입하는 단계; 상기 핵산 서열의 발현에 유리한 조건하에 상기 숙주 세포를 배양하는 단계; 및 배양 배지 및/또는 숙주 세포로부터 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 단리하는 단계를 포함한다. 상기 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 종래 기술에 공지된 임의의 방법을 사용하여 정제될 수 있다.

제3 양태에서, 본 발명은 ACVR1에 특이적으로 결합하는 치료학적 유효량의 적어도 하나의 재조합 단클론 항체 또는 이의 항원 결합 단편 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 관련 양태에서, 본 발명은 항-ACVR1 항체와 제2 치료제의 조합인 조성물을 특징으로 한다. 하나의 실시 형태에서, 상기 제2 치료제는 항-ACVR1 항체와 유리하게 조합되는 임의의 작용제이다.

항-ACVR1 항체와 유리하게 조합될 수 있는 예시적인 작용제로는, ACVR1에 결합하고/하거나 ACVR1 활성을 활성화하는 기타 작용제 (다른 항체 또는 이의 항원 결합 단편 등 포함) 및/또는 ACVR1에 직접 결합하지 않지만 ACVR1 연관 질환 또는 장애의 적어도 하나의 증상 또는 징후 (본 출원의 다른 곳에서 개시됨)를 치료 또는 개선하는 작용제가 포함되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 항-ACVR1 항체와 관련된 추가의 조합 요법 및 보조 제형들은 본 출원의 다른 곳에서 개시되어 있다.

제4 양태에서, 본 발명은 항-ACVR1 항체 또는 본 발명의 항체의 항원 결합 부분을 사용하여 대상체에서 ACVR1과 연관된 질환 또는 장애를 치료하는 치료 방법을 제공하며, 여기서, 상기 치료학적 방법은 항체 또는 본 발명의 항체의 항원 결합 단편을 포함하는 치료학적 유효량의 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 치료되는 장애는 ACVR1 활성의 강화에 의해 향상, 개선, 억제 또는 예방되는 임의의 질환 또는 병태 (예를 들어, 빈혈, 이소성 골화, 전위성 골화, 골 이형성증 또는 산재성 내재성 뇌교종)이다. 특정 실시 형태에서, 본 발명은 치료학적 유효량의 본 발명의 항-ACVR1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, ACVR1 연관 질환 또는 장애를 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다. 일부 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 ACVR1 연관 질환 또는 장애가 있거나 이에 걸릴 위험이 있는 대상체에게 예방적으로 또는 치료학적으로 투여될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 이를 필요로 하는 대상체에게 제2 치료제와 조합하여 투여된다.

상기 제2 치료제는 항-액티빈 A 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 항-BMP7 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 항-ACVR2 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 항염증 약물, 스테로이드, 비스포스포네이트, 근육 이완제 또는 레티노산 수용체 (retinoic acid receptor: RAR) 감마 작용제, 생활 방식 변화, 식이 보충제, 및 당해 분야에 공지된 임의의 다른 약물 또는 요법으로 이루어진 그룹으로부터 선택될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 상기 제2 치료제는 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 관련하여 임의의 가능한 부작용(들) (이러한 부작용(들)이 발생하는 경우)을 제거 또는 감소시키는데 도움이 되는 작용제일 수 있다. 상기 항체 또는 이의 단편은 피하, 정맥내, 진피내, 복강내, 경구, 근육내 또는 뇌실내로 투여될 수 있다. 상기 항체 또는 이의 단편은 대상체의 체중 kg 당 약 0.1 mg 내지 약 100 mg의 용량으로 투여될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 10 mg 내지 600 mg을 포함하는 1회 이상의 용량으로 투여될 수 있다.

또한, 본 발명은 또한 ACVR1 결합 및/또는 활성의 활성화로부터 이익을 얻을 질환 또는 장애의 치료를 위한 약제의 제조에서 본 발명의 항-ACVR1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 용도를 포함한다.

다른 실시 형태들은 이후의 상세한 설명의 검토로부터 자명해질 것이다.

도 1a는 WT 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 수술 후 13주의 기간에 걸쳐 마이크로 CT에 의한 총 이소성 골화 (HO) 부피의 그래프를 도시한 것이다. 손상 유도와 동시에 시작하여 이소타입 대조군 항체 (원, n=12), ALK3-Fc (사각형, n=12) 또는 Acvr1 항체 mAb27242 (삼각형, n=12)를 마우스에게 투여하였다. 손상 후 3, 6, 9 및 13주에 μCT에 의해 HO 부피를 측정하였다. Acvr1 차단 항체는 수술후 9주까지 이소타입 대조군과 비교하여 총 HO를 유의하게 약화시켰다 (p<0.05).
도 1b는 WT 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 수술 후 13주의 기간에 걸쳐 마이크로 CT에 의한 부착된 이소성 골화 (HO) 부피의 그래프를 도시한 것이다. 손상 유도와 동시에 시작하여 이소타입 대조군 항체 (원, n=12), ALK3-Fc (사각형, n=12) 또는 Acvr1 항체 mAb27242 (삼각형, n=12)를 마우스에게 투여하였다. 손상 후 3, 6, 9 및 13주에 μCT에 의해 HO 부피를 측정하였다. Acvr1 차단 항체는 수술후 9주까지 이소타입 대조군과 비교하여 부착된 HO를 유의하게 약화시켰다 (p<0.05).
도 1c는 WT 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 수술 후 13주의 기간에 걸쳐 마이크로 CT에 의한 미부착된 이소성 골화 (HO) 부피의 그래프를 도시한 것이다. 손상 유도와 동시에 시작하여 이소타입 대조군 항체 (원, n=12), ALK3-Fc (사각형, n=12) 또는 Acvr1 항체 mAb27242 (삼각형, n=12)를 마우스에게 투여하였다. 손상 후 3, 6, 9 및 13주에 μCT에 의해 HO 부피를 측정하였다. Acvr1 차단 항체는 수술후 13주까지 이소타입 대조군과 비교하여 부착된 HO를 유의하게 약화시켰다 (p<0.01).
도 2a~2c는 수술후 13주에 마이크로 CT에 의해 총 HO, 부착된 HO (백색 파선으로 둘러싸임) 또는 미부착된 HO (짧은 백색 점선으로 둘러싸임) 부피로 측정될 때 WT 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 손상된 뒷다리에서 HO 부피의 이미지를 도시한 것이다.
도 2a는 이소 형태 대조군 항체를 투여받은 후 수술후 13주에 마이크로 CT에 의해 총 HO, 부착된 HO (백색 파선으로 둘러싸임) 또는 미부착된 HO (짧은 백색 점선으로 둘러싸임) 부피로 측정될 때 WT 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 손상된 뒷다리의 HO 부피의 대표적 이미지를 도시한 것이다.
도 2b는 Alk3-Fc를 투여받은 후 수술후 13주에 마이크로 CT에 의해 총 HO, 부착된 HO (백색 파선으로 둘러싸임) 또는 미부착된 HO (짧은 백색 점선으로 둘러싸임) 부피로 측정될 때 WT 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 손상된 뒷다리의 HO 부피의 대표적 이미지를 도시한 것이다. 마이크로 CT에 의한 HO 부피는 이소타입 대조군을 투여받은 마우스와 비교하여 ALK3-Fc를 투여받은 마우스에서 13주 후에 유의하게 감소하였다.
도 2c는 항-ACVR 항체 mAb27242를 투여받은 후 수술후 13주에 마이크로 CT에 의해 총 HO, 부착된 HO (백색 파선으로 둘러싸임) 또는 미부착된 HO (짧은 백색 점선으로 둘러싸임)로 측정될 때 WT 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 손상된 뒷다리의 HO 부피의 대표적 이미지를 도시한 것이다. 마이크로 CT에 의한 HO 부피는 이소타입 대조군 항체를 투여받은 마우스와 비교하여 항-ACVR 항체를 투여받은 마우스에서 13주 후에 유의하게 감소하였다.

본 발명을 기술하기 전에, 방법과 조건들은 다양할 수 있기 때문에, 본 발명은 여기에 기술된 특정한 방법과 실험 조건들에 한정되지 않는다는 점을 이해해야 한다. 본 출원에서 사용된 용어는 단지 특정 실시 형태들을 설명하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 첨부된 청구범위에 의해서만 한정될 것이기 때문에 한정적인 것으로 의도되지 않는다는 것을 또한 이해해야 한다.

달리 정의되지 않는다면, 본 출원에서 사용된 모든 기술 용어 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본 출원에서 기재된 것들과 유사하거나 균등한 임의의 방법들 및 재료들이 본 발명의 실시 또는 테스트에 사용될 수 있지만, 바람직한 방법들 및 재료들이 이하에서 기재될 것이다. 본 출원에서 언급된 모든 간행물, 특허 및 특허 출원은 그 전문이 본 출원에 참조로 포함된다.

정의

"ALK2"로도 또한 호칭되는 "ACVR1"이라는 용어는 액티빈 A 수용체 유형 1 (액티빈 유사 키나아제 2로도 또한 공지됨)을 지칭한다. ACVR1은 단일 통과 유형 I 막 단백질이다. 사람 ACVR1의 전장 아미노산 서열은 509개의 aa 잔기를 갖는 것으로서 UniProtKB 승인 번호 Q04771 (서열 번호 번호 341)을 참조하여 이용 가능하다. 상기 단백질은 21~123번 아미노산 잔기의 세포외 도메인, 124~146번 아미노산 위치의 막 관통 도메인 및 147~509번 위치의 세포질 도메인을 갖는다. 리간드 결합될 때, ACVR1은 2개의 유형 II 및 2개의 유형 I 막 관통 세린/트레오닌 키나아제로 이루어진 수용체 복합체를 형성한다. 유형 II 수용체는 유형 I 수용체를 인산화하고 활성화한다. 이는 자가 인산화된 다음, SMAD 전사 조절 인자에 결합하고 활성화한다. ACVR1은 액티빈에 대한 수용체이다.

전장 사람 ACVR1 단백질의 아미노산 서열은 승인 번호 Q04771로서 UniProtKB/Swiss-Prot에 제공된 아미노산 서열 (서열 번호 341)에 의해 예시된다. 마우스 ACVR1 단백질의 전장 아미노산 서열은 승인 번호 P37172 (서열 번호 342)를 참조하여 이용 가능하다.

“ACVR1”라는 용어는 재조합 ACVR1 단백질 또는 이의 단편을 포함한다. 상기 용어는, 예를 들어, 히스티딘 태그, PADRE 태그, 마우스 또는 사람 Fc, 또는 신호 서열에 커플링된 ACVR1 단백질 또는 이의 단편 (예를 들어, 서열 번호 338~340)을 또한 포함한다.

"ACVR1"이라는 용어는 돌연변이를 포함하는 ACVR1 단백질 또는 이의 단편을 포함할 수 있다. 예를 들어, 상기 돌연변이는 사람 ACVR1 UniProtKB 승인 번호 Q04771 (서열 번호 341)의 상응하는 아미노산 서열 또는 이의 단편을 기반으로 할 수 있다. 예를 들어, 상기 ACVR1 단백질 또는 이의 단편은 상응하는 서열 번호 341의 L196P, delP197_F198insL, R202I, R206H, Q207E, R258S, R258G, G325A, G328E, G328R, G328W, G356D 및 R375P를 포함하지만 이들에 한정되지 않는 돌연변이를 포함할 수 있다.

본 출원에서 사용되는 "항체"라는 용어는 이황화 결합에 의해 상호 연결된 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)인 4개의 폴리펩타이드 쇄로 구성된 면역글로불린 분자 (즉, "전장 항체 분자") 뿐만 아니라 이의 다량체 (예를 들어, IgM) 또는 이의 항원 결합 단편을 지칭한다. 각 중쇄는 중쇄 가변 영역 (“HCVR” 또는 “V_H”) 및 중쇄 불변 영역 (도메인 C_H1, C_H2 및 C_H3으로 이루어짐)으로 구성된다. 각 경쇄는 경쇄 가변 영역 (“LCVR 또는 “V_L”) 및 경쇄 불변 영역 (C_L)으로 구성된다. 상기 V_H 및 V_L 영역은 프레임워크 영역 (framework region: FR)이라 불리는 보다 잘 보존되는 영역과 함께 배치된, 상보성 결정 영역 (CDR)이라 불리는 초가변 영역으로 추가로 세분화될 수 있다. 각각의 V_H 및 V_L은 아미노-말단으로부터 카복시-말단으로 다음 순서로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 본 발명의 특정 실시 형태에서, 상기 항체 (또는 이의 항원 결합 단편)의 FR은 사람 생식 세포 서열과 동일할 수 있거나, 자연적으로 또는 인공적으로 변형될 수 있다. 아미노산 공통 서열은 2개 이상의 CDR의 병렬 분석 (side-by-side analysis)을 기반으로 정의될 수 있다.

하나 이상의 CDR 잔기의 치환 또는 하나 이상의 CDR의 생략도 또한 가능하다. 1개 또는 2개의 CDR을 결합을 위해 제거할 수 있는 항체가 과학 문헌에 기재되어 있다. 패들란 등 (문헌 [Padlan et al., 1995 FASEB J. 9: 133-139])은 공개된 결정 구조를 기반으로 항체와 이의 항원 사이의 접촉 영역을 분석하여 CDR 잔기의 약 1/5 내지 1/3만이 실제로 항원과 접촉하고 있는 것으로 결론을 내렸다. 패들란은 1개 또는 2개의 CDR이 항원과 접촉하고 있는 아미노산을 갖고 있지 않은 다수의 항체도 또한 밝혀냈다 (또한 문헌 [Vajdos et al., 2002 J Mol Biol 320: 415-428] 참조).

항원과 접촉하고 있지 않은 CDR 잔기는 이전 연구들 (예를 들어, CDRH2 중의 잔기 H60-H65는 필요하지 않은 경우가 많음)을 기초로 하여 분자 모델링에 의해 및/또는 실험적으로 초티아 CDR의 외측에 존재하는 카바트 CDR의 영역으로부터 확인될 수 있다. CDR 또는 이의 잔기(들)이 생략되는 경우, 이것은 통상적으로 또 다른 사람 항체 서열 또는 이러한 서열의 공통 서열 중의 해당 위치를 차지하고 있는 아미노산으로 치환된다. 치환할 CDR 및 아미노산 내의 치환 위치는 또한 실험적으로 선택될 수 있다. 실험적 치환은 보존적 또는 비보존적 치환일 수 있다.

본 출원에서 개시된 전장 사람 항-ACVR1 단클론 항체는, 상응하는 생식 세포 서열과 비교하여, 중쇄 및 경쇄 가변 도메인의 프레임워크 및/또는 CDR 영역 내에 하나 이상의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실을 포함할 수 있다. 이러한 돌연변이는 본 출원에서 개시된 아미노산 서열을, 예를 들어, 공개 항체 서열 데이터베이스로부터 이용 가능한 생식 세포 서열과 비교함으로써 용이하게 확인될 수 있다. 본 발명은 본 출원에서 개시된 임의의 아미노산 서열로부터 유래되는 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함하며, 여기서, 하나 이상의 프레임워크 및/또는 CDR 영역 내의 하나 이상의 아미노산은 상기 항체가 유래된 생식 세포 서열 중의 상응하는 잔기(들), 또 다른 사람 생식 세포 서열 중의 상응하는 잔기(들), 또는 상응하는 생식 세포 잔기(들)의 보존적 아미노산 치환으로 돌연변이된다 (이러한 서열 변화들은 본 출원에서 총괄적으로 "생식 세포 돌연변이"로서 지칭됨). 당해 분야의 통상의 기술자는, 본 출원에서 개시된 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열로부터 출발하여, 하나 이상의 개별 생식 세포 돌연변이 또는 이의 조합을 포함하는 다수의 항체 및 항원 결합 단편을 용이하게 제조할 수 있다. 특정 실시 형태에서, V _H 및/또는 V _L 도메인 내의 모든 프레임워크 및/또는 CDR 잔기들은 항체가 유래된 원래의 생식 세포 서열에서 발견되는 잔기들로 복귀 돌연변될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 특정 잔기들만, 예를 들어, FR1의 처음 8개의 아미노산 내에서 또는 FR4의 마지막 8개의 아미노산 내에서 발견되는 돌연변이된 잔기들만, 또는 CDR1, CDR2 또는 CDR3 내에서 발견되는 돌연변이된 잔기들만이 원래의 생식 세포 서열로 복귀 돌연변이된다. 다른 실시 형태에서, 프레임워크 및/또는 CDR 잔기(들) 중 하나 이상은 상이한 생식 세포 서열 (즉, 항체가 원래 유래된 생식 세포 서열과는 상이한 생식 세포 서열)의 상응하는 잔기(들)로 돌연변이된다. 또한, 본 발명의 항체는 프레임워크 및/또는 CDR 영역 내에 2개 이상의 생식 세포 돌연변이의 임의의 조합을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 여기서, 특정 개별 잔기들은 특정 생식 세포 서열의 상응하는 잔기로 돌연변이되는 반면, 원래의 생식 세포 서열과는 상이한 특정한 다른 잔기들은 유지되거나 상이한 생식 세포 서열의 상응하는 잔기로 돌연변이된다. 일단 수득되면, 하나 이상의 생식 세포 돌연변이를 포함하는 항체 및 항원 결합 단편은 하나 이상의 목적하는 특성, 예를 들어, 향상된 결합 특이성, 증가된 결합 친화도, 향상되거나 증진된 길항적 생물학적 특성, 감소된 면역원성 등에 대해 용이하게 테스트될 수 있다. 이러한 일반적인 방식으로 수득된 항체 및 항원 결합 단편은 본 발명 내에 포함된다.

본 발명은 하나 이상의 보존적 치환을 갖는 본 출원에서 개시된 임의의 HCVR, LCVR 및/또는 CDR 아미노산 서열의 변이체를 포함하는 전장 사람 항-ACVR1 단클론 항체를 또한 포함한다. 예를 들어, 본 발명은 본 출원에서 개시된 임의의 HCVR, LCVR 및/또는 CDR 아미노산 서열에 비해, 예를 들어, 10개 이하, 8개 이하, 6개 이하, 4개 이하 등의 보존적 아미노산 치환을 갖는 HCVR, LCVR 및/또는 CDR 아미노산 서열을 갖는 항-ACVR1 항체를 포함한다.

본 출원에서 사용되는 "사람 항체" 또는 "전장 사람 항체"라는 용어는 사람 생식 세포 면역글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역을 갖는 항체를 포함하는 것으로 의도된다. 본 발명의 사람 mAb는, 예를 들어, CDR, 특히, CDR3에서 사람 생식 세포 면역글로불린 서열에 의해 인코딩되지 않은 아미노산 잔기 (예를 들어, 시험관내의 랜덤 또는 부위 특이적 돌연변이 유발에 의해 또는 생체내의 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나, 본 출원에서 사용되는 "사람 항체" 또는 "전장 사람 항체"라는 용어는 또 다른 포유 동물 종 (예를 들어, 마우스)의 생식 세포로부터 유래된 CDR 서열이 사람 FR 서열로 이식된 mAb를 포함하도록 의도되지 않는다. 상기 용어는 비사람 포유 동물 또는 비사람 포유 동물의 세포에서 재조합에 의해 제조되는 항체를 포함한다. 상기 용어는 사람 대상체로부터 단리되거나 사람 대상체에서 생성된 항체를 포함하도록 의도되지 않는다.

본 출원에서 사용되는 "재조합"이라는 용어는, 예를 들어, DNA 스플라이싱 및 유전자 이식 발현을 포함하는 재조합 DNA 기술로서 당해 분야에 공지된 기술 또는 방법에 의해 생성, 발현, 단리 또는 수득된 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 지칭한다. 상기 용어는 비사람 포유 동물 (유전자 이식 비사람 포유 동물, 예를 들어, 유전자 이식 마우스 포함) 또는 세포 (예를 들어, CHO 세포) 발현 시스템에서 발현되거나 재조합 조합형 사람 항체 라이브러리로부터 단리된 항체를 지칭한다.

"특이적으로 결합하다" 또는 "~에 특이적으로 결합하다" 등의 용어는 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 생리학적 조건 하에서 비교적 안정한 항원과 복합체를 형성한다는 것을 의미한다. 특이적 결합은 적어도 약 1x10^-8 M 이하의 평형 해리 상수를 특징으로 할 수 있다 (예를 들어, 더 작은 K_D는 더 단단한 결합을 나타냄). 2개의 분자가 특이적으로 결합하는지 여부를 측정하는 방법은 당해 분야에 널리 공지되어 있으며, 예를 들어, 평형 투석, 표면 플라스몬 공명 등을 포함한다. 본 출원에서 기재된 바와 같이, ACVR1에 특이적으로 결합하는 항체는 표면 플라스몬 공명, 예를 들어, BIACORE^TM에 의해 식별되었다. 또한, ACVR1의 하나의 도메인 및 하나 이상의 추가의 항원에 결합하는 다중 특이적 항체, 또는 ACVR1의 2개의 상이한 영역에 결합하는 이중 특이적 항체는 이렇더라도 본 출원에서 사용되는 바와 같이 "특이적으로 결합하는" 항체로 간주된다.

"높은 친화도"의 항체라는 용어는, 표면 플라스몬 공명, 예를 들어, BIACORE^TM 또는 용액-친화도 ELISA에 의해 측정될 때, 적어도 10^-8 M, 바람직하게는 10^-9 M, 보다 바람직하게는 10^-10M, 보다 더 바람직하게는 10^-11 M의 K_D로 표현되는 ACVR1에 대한 결합 친화도를 갖는 mAb를 지칭한다.

"슬로우 오프 레이트 (slow off rate)", "Koff" 또는 "kd"라는 용어는, 표면 플라스몬 공명, 예를 들어, BIACORE^TM에 의해 측정될 때, 1x10^-3 s^-1 이하, 바람직하게는 1x10^-4 s^-1 이하의 속도 상수로 ACVR1로부터 해리하는 항체를 의미한다.

본 출원에서 사용되는 항체의 "항원 결합 부분", 항체의 "항원 결합 단편" 등의 용어는 항원에 특이적으로 결합하여 복합체를 형성하는 임의의 자연 발생되거나 효소에 의해 수득 가능하거나 합성되거나 유전적으로 조작된 폴리펩타이드 또는 당단백질을 포함한다. 본 출원에서 사용되는, 항체의 "항원 결합 단편" 또는 "항체 단편"이라는 용어는, ACVR1 단백질에 결합하는 능력을 보유하는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다.

구체적인 실시 형태에서, 본 발명의 항체 또는 항체 단편은 리간드 또는 치료학적 모이어티 ("면역 컨쥬게이트")와 같은 모이어티, 제2 항-ACVR1 항체, 또는 ACVR1 연관 질환 또는 장애를 치료하는데 유용한 임의의 기타 치료학적 모이어티에 컨쥬게이트될 수 있다.

본 출원에서 사용되는 "단리된 항체"는, 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체 (Ab)가 실질적으로 없는 항체를 지칭하도록 의도된다 (예를 들어, ACVR1에 특이적으로 결합하는 단리된 항체 또는 이의 단편은 ACVR1 이외의 항원에 특이적으로 결합하는 Ab가 실질적으로 없음).

본 출원에서 사용되는 "탈활성화 항체" 또는 "길항제 항체" (또는 "ACVR1 활성을 감소 또는 차단하는 항체" 또는 "활성화된 입체 형태를 탈안정화시키는 항체")는, ACVR1에 대한 결합이 ACVR1의 적어도 하나의 생물학적 활성의 탈활성화를 초래하는 항체를 지칭하도록 의도된다. 예를 들어, 본 발명의 항체는 이를 필요로 하는 대상체에게 투여될 때 빈혈을 감소시킬 수 있다.

본 출원에서 사용되는 "표면 플라스몬 공명"이라는 용어는, 예를 들어, BIACORE^TM 시스템 (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, N.J.)을 사용하여 바이오센서 매트릭스 내의 단백질 농도 변화의 검출에 의해 실시간 생체 분자 상호 작용의 분석을 가능하게 하는 광학적 현상을 지칭한다.

본 출원에서 사용되는 "K_D"라는 용어는 특정 항체-항원 상호 작용의 평형 해리 상수를 지칭하도록 의도된다.

"에피토프"라는 용어는 파라토프 (paratope)로서 공지된 항체 분자의 가변 영역에서 특이적 항원 결합 부위와 상호 작용하는 항원 결정 인자를 지칭한다. 단일 항원은 하나 초과의 에피토프를 가질 수 있다. 따라서, 상이한 항체들은 항원 상의 상이한 영역에 결합할 수 있고 상이한 생물학적 효과를 가질 수 있다. "에피토프"라는 용어는 또한 B 및/또는 T 세포가 반응하는 항원 상의 부위를 지칭한다. 이는 또한 항체에 의해 결합되는 항원의 영역을 지칭한다. 에피토프는 구조적 또는 기능적으로 한정될 수 있다. 기능적 에피토프는 일반적으로 구조적 에피토프의 하위 세트이며, 상호 작용의 친화도에 직접적으로 기여하는 잔기들을 갖는다. 에피토프는 또한 입체 형태를 가질 수 있는데, 즉, 비선형 아미노산으로 구성될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 에피토프는 아미노산, 당 측쇄, 포스포릴 기 또는 설포닐 기와 같은 분자의 화학적 활성 표면 그룹인 결정 인자를 포함할 수 있으며, 특정 실시 형태에서, 특이적인 3차원 구조적 특성 및/또는 비전하 (specific charge) 특성을 가질 수 있다.

본 출원에서 사용되는 "교차 경쟁하다 (cross-compete)"라는 용어는, 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 항원에 결합하여 또 다른 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 결합을 억제 또는 차단하는 것을 의미한다. 상기 용어는 또한 양 방향에서 2개의 항체 사이의 경쟁, 즉, 제2 항체에 결합하여 이의 결합을 차단하는 제1 항체와 그 반대의 경우를 포함한다. 특정 실시 형태에서, 상기 제1 항체와 제2 항체는 동일한 에피토프에 결합할 수 있다. 대안으로, 상기 제1 항체와 제2 항체는 하나의 결합이, 예를 들어, 입체 장애를 통해 제2 항체의 결합을 억제하거나 차단하도록, 상이하지만 중첩된 에피토프에 결합할 수 있다. 항체들 사이의 교차 경쟁은 당해 분야에 공지된 방법, 예를 들어, 실시간 무표지 생물층 간섭법 검정에 의해 측정될 수 있다. 2개의 항체 사이의 교차 경쟁은 자가-자가 결합으로 인해 배경 신호 보다 더 적은 제2 항체의 결합으로 표현될 수 있다 (여기서, 제1 및 제2 항체는 동일한 항체임). 2개의 항체 사이의 교차 경쟁은, 예를 들어, 기준선 자가-자가 배경 결합 보다 더 적은 제2 항체의 결합 %로 표현될 수 있다 (여기서, 제1 및 제2 항체는 동일한 항체임).

핵산 또는 이의 단편을 지칭할 때의 "실질적인 동일성" 또는 "실질적으로 동일한"이라는 용어는, 적절한 뉴클레오타이드 삽입 또는 결실에 의해 또 다른 핵산 (또는 이의 상보성 가닥)과 최적으로 정렬될 때, 하기에서 논의되는 바와 같이 FASTA, BLAST 또는 GAP와 같은 널리 공지된 서열 동일성에 대한 임의의 알고리즘에 의한 측정시, 뉴클레오타이드 염기 중 적어도 약 90%, 보다 바람직하게는 적어도 약 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%에서 뉴클레오타이드 서열 동일성이 있다는 것을 나타낸다. 참조 핵산 분자에 대해 실질적 동일성을 갖는 핵산 분자는 특정 경우에서 참조 핵산 분자에 의해 인코딩된 폴리펩타이드와 동일하거나 또는 실질적으로 유사한 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드를 인코딩할 수 있다.

폴리펩타이드에 적용되는 바와 같이, "실질적인 유사성" 또는 "실질적으로 유사한"이라는 용어는, 예를 들어, 디폴트 갭 가중치를 사용하는 GAP 또는 BESTFIT 프로그램에 의해 최적으로 정렬될 때의 2개의 펩타이드 서열이 적어도 90%의 서열 동일성, 보다 더 바람직하게는 적어도 95%, 98% 또는 99%의 서열 동일성을 공유한다는 것을 의미한다. 바람직하게, 동일하지 않은 잔기 위치들은 보존적 아미노산 치환에 의해 달라진다. "보존적 아미노산 치환"은 한 아미노산 잔기가 유사한 화학적 특성 (예를 들어, 전하 또는 소수성)을 갖는 측쇄 (R 기)를 갖는 또 다른 아미노산 잔기에 의해 치환되는 것이다. 일반적으로, 보존적 아미노산 치환은 단백질의 기능적 성질을 실질적으로 변화시키지 않을 것이다. 2개 이상의 아미노산 서열이 서로 보존적 치환이 상이한 경우, 유사성의 퍼센트 또는 정도는 치환의 보존적 성질을 보정하기 위해 상향 조정될 수 있다. 이러한 조정을 수행하는 수단은 당해 분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 본 출원에 참조로 포함되는 문헌 [Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24: 307-331]을 참조한다. 유사한 화학적 특성을 갖는 측쇄를 보유하는 아미노산의 기의 예로는 1) 지방족 측쇄: 글리신, 알라닌, 발린, 류신 및 이소류신; 2) 지방족-하이드록실 측쇄: 세린 및 트레오닌; 3) 아미드 함유 측쇄: 아스파라긴 및 글루타민; 4) 방향족 측쇄: 페닐알라닌, 타이로신 및 트립토판; 5) 염기성 측쇄: 라이신, 아르기닌 및 히스티딘; 6) 산성 측쇄: 아스파르테이트 및 글루타메이트, 및 7) 황 함유 측쇄: 시스테인 및 메티오닌이 포함된다. 바람직한 보존적 아미노산 치환기로는 발린-류신-이소류신, 페닐알라닌-타이로신, 라이신-아르기닌, 알라닌-발린, 글루타메이트-아스파르테이트 및 아스파라긴-글루타민이 있다. 대안으로, 보존적 치환은 본 출원에서 참조로 포함되는 문헌 [Gonnet et al. (1992) Science 256: 1443 45]에 개시된 PAM250 로그-유사성 매트릭스 (log-likelihood matrix)에서 양의 값을 갖는 임의의 변화이다. "적당한 보존적 (moderately conservative)" 치환은 PAM250 로그-유사성 매트릭스에서 음이 아닌 값을 갖는 임의의 변화이다.

폴리펩타이드에 대한 서열 유사성은 전형적으로는 서열 분석 소프트웨어를 사용하여 측정된다. 단백질 분석 소프트웨어는 보존적 아미노산 치환을 비롯한 다양한 치환, 결실 및 기타 변형에 대해 배정된 유사성의 측정치를 사용하여 유사한 서열을 일치시킨다. 예를 들어, GCG 소프트웨어는, 디폴트 파라미터로 사용되어 상이한 유기체 종 유래의 상동성 폴리펩타이드와 같은 밀접하게 관련된 폴리펩타이드들 사이 또는 야생형 단백질과 이의 돌연변이 단백질 사이의 서열 상동성 또는 서열 동일성을 결정할 수 있는 GAP 및 BESTFIT와 같은 프로그램을 포함한다. 예를 들어, GCG 버전 6.1을 참조한다. 폴리펩타이드 서열들은 또한 GCG 버전 6.1 내의 프로그램인 디폴트 또는 권장 파라미터들로 FASTA를 사용하여 비교될 수 있다. FASTA (예를 들어, FASTA2 및 FASTA3)은 질의 서열과 검색 서열 사이의 최상의 중첩 영역의 정렬 및 % 서열 동일성을 제공한다 (문헌 [Pearson (2000) 상기와 동일]). 본 발명의 서열을 상이한 유기체 유래의 다수의 서열들을 포함하는 데이터베이스와 비교할 때의 또 다른 바람직한 알고리즘은 디폴트 파라미터를 사용하는 BLAST, 특히, BLASTP 또는 TBLASTN 컴퓨터 프로그램이다. 예를 들어, 문헌 [Altschul et al., (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410] 및 [Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402]을 참조하며, 이들 각각은 본 출원에 참조로 포함된다.

"치료학적 유효량"이라는 문구는 목적하는 효과를 생성하기 위해 투여되는 양을 의미한다. 정확한 양은 치료의 목적에 따라 달라질 것이며, 공지된 기술을 사용하여 통상의 기술자에 의해 확인될 수 있을 것이다 (예를 들어, 문헌 [Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding] 참조).

본 출원에서 사용되는 "대상체"라는 용어는 빈혈 또는 전위성 골화와 같은 ACVR1 연관 질환 또는 장애의 개선, 예방 및/또는 치료를 필요로 하는 동물, 바람직하게는 포유 동물, 보다 바람직하게는 사람을 지칭한다. 상기 용어는 이러한 질환 또는 장애가 있거나 걸릴 위험이 있는 사람 대상체를 포함한다.

본 출원에서 사용되는 "치료하다", “치료하는” 또는 "치료"라는 용어는 ACVR1 연관 질환 또는 장애의 적어도 하나의 증상 또는 징후의 중증도의 감소 또는 개선을 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 항체와 같은 치료제의 투여로 인한 이러한 중증도의 감소 또는 개선을 지칭한다. 상기 용어는 질환의 진행 또는 증상/징후의 악화에 대한 억제를 포함한다. 상기 용어는 또한 질환의 긍정적인 예후를 포함하는데, 즉, 대상체는 본 발명의 항체와 같은 치료제의 투여시에 질환이 없을 수 있거나, 감소된 질환을 가질 수 있다. 상기 치료제는 치료학적 용량으로 대상체에게 투여될 수 있다.

"예방하다", “예방하는” 또는 "예방"이라는 용어는 본 발명의 항체의 투여시에 ACVR1 연관 질환 또는 장애의 발현 또는 이러한 질환 또는 장애의 임의의 증상 또는 징후의 억제를 지칭한다.

항체의 항원 결합 단편

달리 특별히 명시되지 않는다면, 본 출원에서 사용되는 "항체"라는 용어는 2개의 면역글로불린 중쇄 및 2개의 면역글로불린 경쇄를 포함하는 항체 분자 (즉, "전장 항체 분자") 뿐만 아니라 이의 항원 결합 단편을 포괄하는 것으로 이해해야 한다. 본 출원에서 사용되는 항체의 "항원 결합 부분", 항체의 "항원 결합 단편" 등의 용어는 항원에 특이적으로 결합하여 복합체를 형성하는 임의의 자연 발생되거나 효소에 의해 수득 가능하거나 합성되거나 유전적으로 조작된 폴리펩타이드 또는 당단백질을 포함한다. 본 출원에서 사용되는, 항체의 "항원 결합 단편" 또는 "항체 단편"이라는 용어는 ACVR1 단백질, 이의 단편 및/또는 이의 돌연변이체에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 항체의 하나 이상의 단편을 지칭한다. 항체 단편은 Fab 단편, F(ab')₂ 단편, Fv 단편, dAb 단편, CDR을 포함하는 단편, 또는 단리된 CDR을 포함할 수 있다. 특정 실시 형태에서, "항원 결합 단편"이라는 용어는 다중 특이적 항원 결합 분자의 폴리펩타이드 단편을 지칭한다. 항체의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 단백질 가수 분해와 같은 임의의 적합한 표준 기술, 또는 항체 가변 및 (임의로) 불변 도메인을 인코딩하는 DNA의 조작 및 발현을 수반하는 재조합 유전 공학 기술을 사용하여 전장 항체 분자로부터 유래될 수 있다. 이러한 DNA는 공지되어 있고/있거나, 예를 들어, 상업적 공급원, DNA 라이브러리 (예를 들어, 파지-항체 라이브러리 포함)로부터 용이하게 이용 가능하거나 합성될 수 있다. 상기 DNA는, 예를 들어, 하나 이상의 가변 및/또는 불변 도메인을 적합한 배열 형태로 정렬하기 위해, 또는 코돈을 도입하거나 시스테인 잔기를 생성하거나 아미노산을 변형시키거나 부가하거나 결실시키기 위해, 화학적으로 또는 분자 생물학 기술을 사용하여 서열 분석 및 조작될 수 있다.

항원 결합 단편의 비제한적인 예로는 다음이 포함된다: (i) Fab 단편; (ii) F(ab')₂ 단편; (iii) Fd 단편; (iv) Fv 단편; (v) 단일 쇄 Fv (scFv) 분자; (vi) dAb 단편; 및 (vii) 제한된 (constrained) FR3-CDR3-FR4 펩타이드 또는 항체의 초가변 영역 (예를 들어, CDR3 펩타이드와 같은 단리된 상보성 결정 영역 (CDR))을 모방하는 아미노산 잔기로 이루어진 최소 인지 단위. 　도메인 특이적 항체, 단일 도메인 항체, 도메인 결실된 항체, 키메라 항체, CDR 이식된 항체, 디아바디 (diabody), 트리아바디 (triabody), 테트라바디 (tetrabody), 미니바디 (minibody), 나노바디 (nanobody) (예를 들어, 1가 나노바디, 2가 나노바디 등), 소형 모듈식 면역 약물 (small modular immunopharmaceutical: SMIP) 및 샤크 가변 IgNAR 도메인과 같은 다른 조작된 분자들도 또한 본 출원에서 사용되는 "항원 결합 단편"이라는 표현 내에 포함된다.

항체의 항원 결합 단편은 전형적으로 적어도 하나의 가변 도메인을 포함할 것이다. 상기 가변 도메인은 임의의 크기 또는 아미노산 조성을 가질 수 있으며, 일반적으로 하나 이상의 프레임워크 서열에 인접하거나 이와 함께 프레임을 이루는 적어도 하나의 CDR을 포함할 것이다. V_L 도메인과 결합된 V_H 도메인을 갖는 항원 결합 단편에서, 상기 V_H 및 V_L 도메인은 서로에 대해 임의의 적합한 배열로 위치할 수 있다. 예를 들어, 상기 가변 영역은 이량체일 수 있으며, V_H-V_H, V_H-V_L 또는 V_L-V_L 이량체를 포함할 수 있다. 대안으로, 항체의 항원 결합 단편은 단량체성 V_H 또는 V_L 도메인을 포함할 수 있다.

특정 실시 형태에서, 항체의 항원 결합 단편은 적어도 하나의 불변 도메인에 공유적으로 연결된 적어도 하나의 가변 도메인을 포함할 수 있다. 본 발명의 항체의 항원 결합 단편 내에서 발견될 수 있는 가변 및 불변 도메인의 비제한적인 예시적 배열 형태는 다음을 포함한다: (i) V_H-C_H1; (ii) V_H-C_H2; (iii) V_H-C_H3; (iv) V_H-C_H1-C_H2; (v) V_H-C_H1-C_H2-C_H3; (vi) V_H-C_H2-C_H3; (vii) V_H-C_L; (viii) V_L-C_H1; (ix) V_L-C_H2; (x) V_L-C_H3; (xi) V_L-C_H1-C_H2; (xii) V_L-C_H1-C_H2-C_H3; (xiii) V_L-C_H2-C_H3; 및 (xiv) V_L-C_L. 상기에서 열거된 임의의 예시적인 배열 형태를 비롯한 가변 및 불변 도메인의 임의의 배열 형태에서, 상기 가변 및 불변 도메인은 서로 직접 연결될 수 있거나, 전체 또는 부분 힌지 또는 링커 영역에 의해 연결될 수 있다. 힌지 영역은 적어도 2개 (예를 들어, 5, 10, 15, 20, 40, 60개 또는 그 이상)의 아미노산으로 이루어질 수 있으며, 이러한 아미노산은 단일 폴리펩타이드 분자에서 인접한 가변 및/또는 불변 도메인들 사이에서 가요성 또는 반가요성 연결을 생성한다. 또한, 본 발명의 항체의 항원 결합 단편은 서로 및/또는 하나 이상의 단량체성 V_H 또는 V_L 도메인과의 비공유 결합으로 (예를 들어, 이황화 결합(들)에 의해) 상기에서 열거된 임의의 가변 및 불변 도메인 배열 형태의 동종 이량체 또는 이종 이량체 (또는 기타 다량체)를 포함할 수 있다.

전장 항체 분자에서와 같이, 항원 결합 단편은 단일 특이적 또는 다중 특이적 (예를 들어, 이중 특이적)일 수 있다. 항체의 다중 특이적 항원 결합 단편은 전형적으로는 적어도 2개의 상이한 가변 도메인을 포함할 것이며, 여기서, 각각의 가변 도메인은 별개의 항원 또는 동일한 항원 상의 상이한 에피토프에 특이적으로 결합할 수 있다. 본 출원에서 개시된 예시적인 이중 특이적 항체 형식을 비롯한 임의의 다중 특이적 항체 형식은, 당해 분야에서 이용 가능한 일상적인 기술을 사용하여 본 발명의 항체의 항원 결합 단편의 맥락에서 사용하기 위해 조정될 수 있다.

사람 항체의 제조

유전자 이식 마우스에서 사람 항체를 생성하는 방법은 당해 분야에 공지되어 있다. 이러한 공지된 임의의 방법은 본 발명의 내용과 관련하여 ACVR1에 특이적으로 결합하는 사람 항체를 제조하는데 사용될 수 있다.

하기 중 임의의 하나를 포함하는 면역원을 사용하여 ACVR1 단백질에 대한 항체를 생성할 수 있다. 특정 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 본래의 전장 ACVR1 단백질 (예를 들어, UniProtKB/Swiss-Prot 승인 번호 Q04771 참조), 또는 상기 단백질 또는 이의 단편을 인코딩하는 DNA로 면역화된 마우스로부터 수득된다. 대안으로, 상기 단백질 또는 이의 단편은 표준 생화학 기법들을 사용하여 제조되고 변형되고 면역원으로서 사용될 수 있다.

일부 실시 형태에서, 상기 면역원은 이. 콜라이 (E. coli ) 또는 임의의 기타 진핵 또는 포유 동물 세포, 예를 들어, 중국 햄스터 난소 (CHO) 세포에서 발현된 재조합 ACVR1 단백질 또는 이의 단편 (예를 들어, 서열 번호 338~340)일 수 있다.

VELOCIMMUNE® 기술 (예를 들어, 미국 특허 US 6,596,541, Regeneron Pharmaceuticals, VELOCIMMUNE® 참조] 또는 단클론 항체를 생성하기 위한 임의의 기타 공지된 방법을 사용하여, 사람 가변 영역 및 마우스 불변 영역을 갖는, ACVR1에 대한 높은 친화도의 키메라 항체를 초기에 단리한다. VELOCIMMUNE® 기술은 마우스가 항원 자극에 반응하여 사람 가변 영역 및 마우스 불변 영역을 포함하는 항체를 생성하도록 내인성 마우스 불변 영역 유전자좌에 작동 가능하게 연결된 사람 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 포함하는 게놈을 갖는 유전자 이식 마우스의 생성을 포함한다. 항체의 중쇄 및 경쇄의 가변 영역을 인코딩하는 DNA를 단리시켜 사람 중쇄 및 경쇄 불변 영역을 인코딩하는 DNA에 작동 가능하게 연결시킨다. 그 다음, 상기 DNA를 전장 사람 항체를 발현할 수 있는 세포 중에서 발현시킨다.

일반적으로, VELOCIMMUNE® 마우스를 관심 대상 항원으로 면역 유발시키고, 항체를 발현하는 마우스로부터 림프성 세포 (예를 들어, B 세포)를 회수한다. 상기 림프성 세포를 골수종 세포주와 융합시켜 불멸 하이브리도마 세포주를 제조할 수 있으며, 이러한 하이브리도마 세포주를 스크리닝하고 선택하여 관심 대상 항원에 특이적인 항체를 생성하는 하이브리도마 세포주를 식별한다. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역을 인코딩하는 DNA를 단리하여 중쇄 및 경쇄의 목적하는 이소타입 불변 영역에 연결시킬 수 있다. 이러한 항체 단백질을 CHO 세포와 같은 세포에서 생성할 수 있다. 대안으로, 항원 특이적 키메라 항체 또는 경쇄 및 중쇄의 가변 도메인을 인코딩하는 DNA를 항원 특이적 림프구로부터 직접 단리할 수 있다.

초기에, 사람 가변 영역 및 마우스 불변 영역을 갖는 높은 친화도의 키메라 항체를 단리한다. 하기 실험 섹션에서와 같이, 상기 항체를 특성화하고, 친화도, 선택성, 에피토프 등을 비롯한 목적하는 특성들에 대해 선택한다. 상기 마우스 불변 영역들을 목적하는 사람 불변 영역으로 대체하여 본 발명의 전장 사람 항체, 예를 들어, 야생형 또는 변형된 IgG1 또는 IgG4를 생성한다. 선택된 불변 영역이 특정 용도에 따라 다양할 수 있지만, 높은 친화도의 항원 결합 및 표적 특이성 특징들은 가변 영역에 남아 있다.

생물학적 동등물

본 발명의 항-ACVR1 항체 및 항체 단편은, 상기에서 기재된 항체와는 다르지만 ACVR1 단백질에 결합할 수 있는 능력을 보유하는 아미노산 서열을 갖는 단백질을 포함한다. 이러한 변이체 항체 및 항체 단편은 모체 서열과 비교할 때 아미노산의 하나 이상의 부가, 결실 또는 치환을 포함하지만, 상기에서 기재된 항체와 본질적으로 동등한 생물학적 활성을 나타낸다. 마찬가지로, 본 발명의 항체 인코딩 DNA 서열은 상기에서 개시된 서열과 비교할 때 뉴클레오타이드의 하나 이상의 부가, 결실 또는 치환을 포함하지만 본 발명의 항체 또는 항체 단편과 본질적으로 생물학적으로 동등한 항체 또는 항체 단편을 인코딩하는 서열을 포함한다.

2개의 항원 결합 단백질 또는 항체는, 예를 들어, 이들이 유사한 실험 조건하에 단일 용량으로 또는 다중 용량으로 동일한 몰 용량으로 투여될 때 흡수율 및 흡수 정도가 유의한 차이를 나타내지 않는 약제학적 동등물 또는 약제학적 대체물인 경우, 생물학적으로 동등한 것으로 간주된다. 일부 항체는, 이들이 흡수 정도에서는 동등하지만 흡수율에서 그렇지 않다면, 동등물 또는 약제학적 대체물로 간주될 것이고, 아직 생물학적으로 동등한 것으로 간주될 수 있는데, 그 이유는 흡수율의 이러한 차이가 의도적이고 라벨링에 반영되고, 예를 들어, 만성 사용시 유효한 체내 약물 농도의 달성에 필수적인 것이 아니고, 연구되는 특정 의약품에 대해 의학적으로 미미한 것으로 간주되기 때문이다.

하나의 실시 형태에서, 2개의 항원 결합 단백질들은, 이들의 안전성, 순도 또는 효능에서 임상적으로 유의미한 차이가 없다면, 생물학적으로 동등하다.

하나의 실시 형태에서, 2개의 항원 결합 단백질들은, 환자가 참조 제품과 생물학적 제품 사이에 1회 이상 스위칭될 수 있으며 이러한 스위칭이 없는 연속 요법과 비교하여 면역원성의 임상적으로 유의한 변화 또는 효능 감소를 비롯한 부작용의 위험 증가가 예상되지 않는다면, 생물학적으로 동등하다.

하나의 실시 형태에서, 2개의 항원 결합 단백질들은, 이들 둘 다가 사용 조건 또는 조건들에 대한 공통의 작용 기전 또는 기전들에 의해 이러한 기전들이 공지되어 있는 정도로 작용한다면, 생물학적으로 동등하다.

생물학적 동등성은 생체내 및/또는 시험관내 방법에 의해 입증될 수 있다. 생물학적 동등성의 측정법으로는, 예를 들어, (a) 항체 또는 이의 대사 산물의 농도를 시간의 함수로서 혈액, 혈장, 혈청 또는 기타 생물학적 체액 중에서 측정하는 사람 또는 기타 포유 동물의 생체내 테스트; (b) 사람 생체내 생체 이용률 데이터와의 상관 관계가 있고 이러한 데이터를 합리적으로 예측하는 시험관내 테스트; (c) 항체 (또는 이의 표적)의 적절한 급성 약리학적 효과를 시간의 함수로서 측정하는 사람 또는 다른 포유 동물의 생체내 테스트; 및 (d) 항체의 안전성, 효능, 또는 생체 이용률 또는 생물학적 동등성을 확립하는 잘 조절된 임상 시험이 포함된다.

본 발명의 항체의 생물학적으로 동등한 변이체는, 예를 들어, 잔기 또는 서열의 다양한 치환을 수행하거나, 생물학적 활성에 필요하지 않는 말단 또는 내부 잔기 또는 서열을 결실시킴으로써, 작제될 수 있다. 예를 들어, 생물학적 활성에 필수적이지 않은 시스테인 잔기는 복원시 불필요하거나 부정확한 분자내 이황화 결합의 형성을 방지하기 위해 결실되거나 다른 아미노산으로 대체될 수 있다. 다른 맥락에서, 생물학적으로 동등한 항체들은 항체의 글리코실화 특성을 변형시키는 아미노산 변화, 예를 들어, 글리코실화를 근절하거나 제거하는 돌연변이를 포함하는 항체 변이체를 포함할 수 있다.

Fc 변이체를 포함하는 항-ACVR1 항체

본 발명의 특정 실시 형태에 따르면, 예를 들어, 중성 pH와 비교하여, 산성 pH에서 FcRn 수용체에 대한 항체 결합을 증진시키거나 감소시키는 하나 이상의 돌연변이를 포함하는 Fc 도메인을 포함하는 항-ACVR1 항체가 제공된다. 예를 들어, 본 발명은 Fc 도메인의 C_H2 또는 C_H3 영역에서 돌연변이를 포함하는 항-ACVR1 항체를 포함하는데, 여기서, 상기 돌연변이(들)는 산성 환경 (예를 들어, pH가 약 5.5 내지 약 6.0의 범위인 엔도솜)에서 FcRn에 대한 Fc 도메인의 친화도를 증가시킨다. 이러한 돌연변이는 동물에게 투여될 때 항체의 혈청 반감기의 증가를 초래할 수 있다. 이러한 Fc 변형의 비제한적인 예로는, 예를 들어, 250번 (예를 들어, E 또는 Q), 250 및 428번 (예를 들어, L 또는 F), 252번 (예를 들어, L/Y/F/W 또는 T), 254번 (예를 들어, S 또는 T) 및 256번 (예를 들어, S/R/Q/E/D 또는 T) 위치에서의 변형; 또는 428 및/또는 433번 (예를 들어, H/L/R/S/P/Q 또는 K) 및/또는 434번 (예를 들어, A, W, H, F 또는 Y [N434A, N434W, N434H, N434F 또는 N434Y]) 위치에서의 변형; 또는 250 및/또는 428번 위치에서의 변형; 또는 307 또는 308번 (예를 들어, 308F, V308F) 및 434번 위치에서의 변형이 포함된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 변형은 428L (예를 들어, M428L) 및 434S (예를 들어, N434S) 변형; 428L, 259I (예를 들어, V259I) 및 308F (예를 들어, V308F) 변형; 433K (예를 들어, H433K) 및 434 (예를 들어, 434Y) 변형; 252, 254 및 256 (예를 들어, 252Y, 254T 및 256E) 변형; 250Q 및 428L 변형 (예를 들어, T250Q 및 M428L); 및 307 및/또는 308 변형 (예를 들어, 308F 또는 308P)을 포함한다. 더 또 다른 실시 형태에서, 상기 변형은 265A (예를 들어, D265A) 및/또는 297A (예를 들어, N297A) 변형을 포함한다.

예를 들어, 본 발명은 250Q 및 248L (예를 들어, T250Q 및 M248L); 252Y, 254T 및 256E (예를 들어, M252Y, S254T 및 T256E); 428L 및 434S (예를 들어, M428L 및 N434S); 257I 및 311I (예를 들어, P257I 및 Q311I); 257I 및 434H (예를 들어, P257I 및 N434H); 376V 및 434H (예를 들어, D376V 및 N434H); 307A, 380A 및 434A (예를 들어, T307A, E380A 및 N434A); 및 433K 및 434F (예를 들어, H433K 및 N434F)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 돌연변이의 하나 이상의 쌍 또는 그룹을 포함하는 Fc 도메인을 포함하는 항-ACVR1 항체를 포함한다. 상술한 Fc 도메인 돌연변이와 본 출원에서 개시된 항체 가변 도메인 내의 다른 돌연변이의 가능한 모든 조합들이 본 발명의 범위 내에서 고려된다.

본 발명은 키메라 중쇄 불변 (C_H) 영역을 포함하는 항-ACVR1 항체를 또한 포함하는데, 여기서, 상기 키메라 C_H 영역은 하나 초과의 면역글로불린 이소타입의 C_H 영역으로부터 유래된 분절을 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 항체는 사람 IgG1, 사람 IgG2 또는 사람 IgG4 분자로부터 유래된 C_H2 도메인의 일부 또는 전체를 사람 IgG1, 사람 IgG2 또는 사람 IgG4 분자로부터 유래된 C_H3 도메인의 일부 또는 전체와 조합하여 포함하는 키메라 C_H 영역을 포함할 수 있다. 특정 실시 형태에 따르면, 본 발명의 항체는 키메라 힌지 영역을 갖는 키메라 C_H 영역을 포함한다. 예를 들어, 키메라 힌지는 사람 IgG1, 사람 IgG2 또는 사람 IgG4 힌지 영역으로부터 유래된 "상부 힌지" 아미노산 서열 (EU 넘버링에 따르면 216 내지 227번 위치의 아미노산 잔기)을 사람 IgG1, 사람 IgG2 또는 사람 IgG4 힌지 영역으로부터 유래된 "하부 힌지" 서열 (EU 넘버링에 따르면 228 내지 236번 위치의 아미노산 잔기)과 조합하여 포함할 수 있다. 특정 실시 형태에 따르면, 상기 키메라 힌지 영역은 사람 IgG1 또는 사람 IgG4 상부 힌지로부터 유래된 아미노산 잔기 및 사람 IgG2 하부 힌지로부터 유래된 아미노산 잔기를 포함한다. 본 출원에서 기재된 바와 같이 키메라 C_H 영역을 포함하는 항체는, 특정 실시 형태에서, 항체의 치료학적 또는 약동학적 특성에 부정적인 영향을 미치지 않으면서 변형된 Fc 이펙터 기능을 나타낼 수 있다. (예를 들어, 미국 출원공개 US 2014/0243504를 참조하며, 이의 개시 내용은 그 전문이 본 출원에 참조로 포함된다).

항체의 생물학적 특성

일반적으로, 본 발명의 항체는 ACVR1 단백질에 결합하여 이의 활성을 감소시키는 기능을 한다. 예를 들어, 본 발명은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식을 사용하여, 표면 플라스몬 공명에 의해 측정될 때 500 nM 미만의 K_D로 (예를 들어, 25℃ 또는 37℃에서) 사람 ACVR1 단백질에 결합하는 항체 및 항체의 항원 결합 단편을 포함한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 표면 플라스몬 공명에 의해 측정될 때 약 500 nM 미만, 약 400 nM 미만, 약 300 nM 미만, 약 200 nM 미만, 약 100 nM 미만, 약 50 nM 미만, 약 25 nM 미만, 약 10 nM 미만, 약 5 nM 미만, 약 3 nM 미만, 약 2 nM 미만, 약 1 nM 미만의 K_D로 ACVR1에 결합한다. 특정 실시 형태에서, 본 발명은 전장 사람 단클론 항체인 단리된 항-ACVR1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 60 nM 미만, 12 nM 미만, 2 nM 미만, 1 nM 미만 또는 0.5 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 25℃에서 Fc (예를 들어, 서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 150 nM 미만, 15 nM 미만, 5 nM 미만, 1.5 nM 미만 또는 1 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 37℃에서 mFc (서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 300 nM 미만, 150 nM 미만, 25 nM 미만, 10 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 2 nM 미만의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 500 nM 미만, 50 nM 미만, 25 nM 미만, 10 nM 미만의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 마우스 ACVR1에 결합하지 않는다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 500 nM 초과의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 3에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 500 nM 초과의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합한다.본 발명은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 5에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 사람 ACVR1 단백질 또는 사람 ACVR(R206H) 단백질을 발현하는 세포에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 또한 포함한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 6에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 25 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 액티빈 A에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 6에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 20 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 1 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 BMP7에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제한다.

본 발명은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 7에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에 투여될 때 혈청 헵시딘을 유의하게 감소시키는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 또한 포함한다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 7에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에 투여될 때 혈청 철 수준을 유의하게 증가시킨다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 7에서 정의된 바와 같은 검정 형식 또는 이와 실질적으로 유사한 검정을 사용하여, 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에 투여될 때 야생형 ACVR1 신호 전달을 억제한다.

특정 실시 형태에서, 본 발명에 따른 항-ACVR 항체 또는 이의 항원 결합 단편은, 예를 들어, 본 출원의 실시예 8에서 기재된 바와 같은 야생형 마우스의 외상후 이소성 골화 (HO) 모델 또는 이와 실질적으로 유사한 모델에서 HO를 유의하게 약화시킨다.

특정 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 사람 ACVR1, 이의 단편 또는 이의 돌연변이체에 특이적으로 결합하고, 표 1에서 열거된 HCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 표 1에서 열거된 LCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함한다.

하나의 실시 형태에서, 본 발명은 ACVR1 단백질에 특이적으로 결합하고 ACVR1 매개성 골 형성 단백질 (BMP) 신호 전달을 억제하는 단리된 재조합 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제공하고, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 다음 특성들 중 하나 이상을 나타낸다: (a) 전장 사람 단클론 항체임; (b) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 60 nM 미만, 12 nM 미만, 2 nM 미만, 1 nM 미만 또는 0.5 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 25℃에서 Fc (예를 들어, 서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (c) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 150 nM 미만, 15 nM 미만, 5 nM 미만, 1.5 nM 미만 또는 1 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 37℃에서 mFc (예를 들어, 서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (d) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 300 nM 미만, 150 nM 미만, 25 nM 미만, 10 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 2 nM 미만의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (e) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 500 nM 미만, 50 nM 미만, 25 nM 미만 또는 10 nM 미만의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (f) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때, 마우스 ACVR1에 결합하지 않거나, 500 nM 초과의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (g) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때, 마우스 ACVR1에 결합하지 않거나, 500 nM 초과의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (k) 사람 ACVR1 단백질 또는 사람 ACVR(R206H) 단백질을 발현하는 세포에 결합함; (l) 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 25 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 액티빈 A에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제함; (m) 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 20 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 1 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 BMP7에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제함; (m) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 혈청 헵시딘을 유의하게 감소시킴; (n) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 혈청 철 수준을 유의하게 증가시킴; 및/또는 (o) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 야생형 ACVR1 신호 전달을 억제함; 및 (p) 표 1에서 열거된 HCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 표 1에서 열거된 LCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함함.

본 발명의 항체는 상기에서 언급된 생물학적 특성들 중 하나 이상의 특성 또는 이들의 임의의 조합을 보유할 수 있다. 본 발명의 항체의 다른 생물학적 특성들은 본 출원의 실시예를 비롯한 본 개시 내용의 검토로부터 당해 분야의 통상의 기술자에게 분명해질 것이다.

에피토프 맵핑 및 관련 기술들

본 발명은 ACVR1 단백질 분자의 하나 이상의 영역 내에서 발견되는 하나 이상의 아미노산과 상호 작용하는 항-ACVR1 항체를 포함한다. 상기 항체가 결합하는 에피토프는 ACVR1 단백질 분자의 상기에서 언급된 도메인들 중 어느 하나 내에 위치한 3개 이상 (예를 들어, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20개 또는 그 이상)의 아미노산의 단일 연속 서열 (예를 들어, 도메인의 선형 에피토프)로 이루어질 수 있다. 대안으로, 상기 에피토프는 상기 단백질 분자의 상기에서 언급된 도메인들 중 하나 또는 둘 다 내에 위치하는 복수의 비연속 아미노산 (또는 아미노산 서열) (예를 들어, 입체 형태 에피토프)로 이루어질 수 있다.

당해 분야의 통상의 기술자들에게 공지된 다양한 기술들을 사용하여, 항체가 폴리펩타이드 또는 단백질 내에서 "하나 이상의 아미노산과 상호 작용하는지" 여부를 결정할 수 있다. 예시적인 기법으로는, 예를 들어, 문헌 [Antibodies, Harlow and Lane, Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY]에 기재된 것과 같은, 일상적인 교차 차단 검정이 포함된다. 다른 방법으로는 알라닌 스캐닝 돌연변이 분석, 펩타이드 블롯 분석 (문헌 [Reineke (2004) Methods Mol. Biol. 248: 443-63]), 펩타이드 절단 분석, 결정학 연구 및 NMR 분석이 포함된다. 또한, 에피토프 절제, 에피토프 추출 및 항원의 화학적 변형과 같은 방법이 사용될 수 있다 (문헌 [Tomer (2000) Prot. Sci. 9: 487-496]). 항체가 상호 작용하는 폴리펩타이드 내에서 아미노산을 식별하는데 사용될 수 있는 또 다른 방법은 질량 분광법에 의해 검출되는 수소/중수소 교환이다. 일반적으로, 상기 수소/중수소 교환 방법은 관심 대상 단백질을 중수소 라벨링한 후, 항체를 중수소 라벨링된 단백질에 결합시키는 단계를 포함한다. 다음으로, 상기 단백질/항체 복합체는 물로 운반되고, 상기 항체 복합체에 의해 보호되는 아미노산 내에서 교환 가능한 양성자는 계면의 일부가 아닌 아미노산 내에서 교환 가능한 양성자 보다 더 느린 속도로 중수소에서 수소로의 역 교환을 겪게 된다. 그 결과, 상기 단백질/항체 계면의 일부를 형성하는 아미노산은 중수소를 보유할 수 있으므로, 상기 계면에 포함되지 않은 아미노산과 비교하여 상대적으로 보다 높은 질량을 나타낸다. 상기 항체의 해리 후, 상기 표적 단백질은 프로테아제 절단 및 질량 분광법 분석을 거쳐, 상기 항체가 상호 작용하는 특이적 아미노산에 상응하는 중수소 라벨링된 잔기를 드러낸다. 예를 들어, 문헌 [Ehring (1999) Analytical Biochemistry 267: 252-259]; [Engen and Smith (2001) Anal. Chem. 73: 256A-265A]를 참조한다.

“에피토프"라는 용어는 B 및/또는 T 세포가 반응하는 항원 상의 부위를 지칭한다. B 세포 에피토프는 단백질의 3차 폴딩에 의해 병치된 연속 아미노산 또는 비연속 아미노산들 모두로부터 형성될 수 있다. 연속 아미노산으로부터 형성된 에피토프는 전형적으로 변성 용매에 노출될 때 유지되는 반면, 3차 폴딩에 의해 형성된 에피토프는 전형적으로 변성 용매에 의해 처리될 때 손실된다. 에피토프는 전형적으로 독특한 공간적 입체 형태의 적어도 3개, 일반적으로 적어도 5개 또는 8~10개의 아미노산을 포함한다.

항원 구조 기반 항체 프로파일링 (Antigen Structure-based Antibody Profiling: ASAP)으로서 또한 공지된 변형 보조 프로파일링 (Modification-Assisted Profiling: MAP)은 화학적으로 또는 효소적으로 변형된 항원 표면에 대한 각 항체의 결합 프로파일의 유사성에 따라 동일한 항원에 대해 지시된 다수의 단클론 항체 (mAb)를 분류하는 방법이다 (미국 출원공개 US 2004/0101920을 참조하며, 그 전문이 본 출원에 구체적으로 포함됨). 각각의 범주는 또 다른 범주로 표시되는 에피토프와 확연히 상이하거나 부분적으로 중첩되는 독특한 에피토프를 반영할 수 있다. 이러한 기술은 유전적으로 동일한 항체의 신속한 필터링을 가능하게 하여 특성화의 초점을 유전적으로 구별되는 항체에 맞출 수 있다. 하이브리도마 스크리닝에 적용될 때, MAP는 목적하는 특성을 갖는 mAb를 생성하는 희귀 하이브리도마 클론의 식별을 용이하게 할 수 있다. MAP를 사용하여 본 발명의 항체를 상이한 에피토프에 결합하는 항체의 그룹으로 분류할 수 있다.

특정 실시 형태에서, 본 발명은 ACVR1의 세포내 도메인 내에서 발견되는 하나 이상의 에피토프와 상호 작용하는 항-ACVR1 항체 및 이의 항원 결합 단편을 포함한다. 상기 에피토프(들)은 ACVR1의 세포내 도메인 내에 위치한 3개 이상 (예를 들어, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20개 또는 그 이상)의 아미노산의 하나 이상의 연속 서열로 이루어질 수 있다. 대안으로, 상기 에피토프는 ACVR1 단백질 내에 위치한 복수의 비연속 아미노산 (또는 아미노산 서열)으로 이루어질 수 있다.

본 발명은 표 1에 열거된 임의의 특정한 예시적인 항체와 동일한 에피토프 또는 상기 에피토프의 일부에 결합하는 항-ACVR1 항체를 포함한다. 마찬가지로, 본 발명은 또한 ACVR1 단백질 또는 이의 단편에 결합하기 위해 표 1에 열거된 임의의 특정한 예시적인 항체와 경쟁하는 항-ACVR1 항체를 포함한다. 예를 들어, 본 발명은 ACVR1 단백질에 결합하기 위해 표 1에 열거된 하나 이상의 항체와 교차 경쟁하는 항-ACVR1 항체를 포함한다.

당해 분야의 통상의 기술자는 당해 분야에 공지된 일상적인 방법을 사용하여 항체가 참조 항-ACVR1 항체와 동일한 에피토프에 결합하는지, 또는 참조 항-ACVR1 항체와 결합하기 위해 경쟁하는지의 여부를 용이하게 판단할 수 있다. 예를 들어, 테스트 항체가 본 발명의 참조 항-ACVR1 항체와 동일한 에피토프에 결합하는지 여부를 판단하기 위해, 참조 항체는 포화 조건하에 ACVR1 단백질 또는 펩타이드에 결합하도록 한다. 다음으로, ACVR1 단백질 분자에 결합하는 테스트 항체의 능력을 평가한다. 테스트 항체가 참조 항-ACVR1 항체와 포화 결합한 후에 ACVR1에 결합할 수 있는 경우, 상기 테스트 항체는 참조 항-ACVR1 항체와 상이한 에피토프에 결합한다는 결론을 내릴 수 있다. 다른 한편으로, 테스트 항체가 참조 항-ACVR1 항체와 포화 결합한 후에 ACVR1 단백질에 결합할 수 없는 경우, 상기 테스트 항체는 본 발명의 참조 항-ACVR1 항체에 의해 결합된 에피토프와 동일한 에피토프에 결합할 수 있다.

항체가 참조 항-ACVR1 항체와 결합하기 위해 경쟁하는지 여부를 판단하기 위해, 상기에서 기재된 결합 방법은 2가지 방향으로 수행된다: 첫 번째 방향에서, 상기 참조 항체를 포화 조건하에 ACVR1 단백질에 결합하도록 한 후, ACVR1 분자에 대한 테스트 항체의 결합에 대해 평가한다. 두 번째 방향에서, 상기 테스트 항체를 포화 조건하에 ACVR1 단백질에 결합하도록 한 후, ACVR1 분자에 대한 참조 항체의 결합에 대해 평가한다. 2가지 방향의 경우는 모두에서, 제1 (포화) 항체만이 ACVR1 분자에 결합할 수 있는 경우, 상기 테스트 항체 및 참조 항체는 ACVR1에 결합하기 위해 경쟁하는 것으로 결론을 내린다. 당해 분야의 통상의 기술자가 인식하는 바와 같이, 참조 항체와 결합하기 위해 경쟁하는 항체는 반드시 참조 항체와 동일한 에피토프에 결합하지 않을 수 있지만, 중첩되거나 인접하는 에피토프에 결합하여 참조 항체의 결합을 입체적으로 차단할 수 있다.

두 항체가 각각 항원에 대한 다른 항체의 결합을 경쟁적으로 억제 (차단)하는 경우에는 동일하거나 중첩되는 에피토프에 결합한다. 즉, 1배, 5배, 10배, 20배 또는 100배 초과의 하나의 항체는 경쟁적 결합 검정에 의해 측정될 때 적어도 50%, 바람직하게는 75%, 90% 또는 심지어 99%까지 다른 항체의 결합을 억제한다 (예를 들어, 문헌 [Junghans et al., Cancer Res. 1990 50:1495-1502] 참조). 대안으로, 하나의 항체의 결합을 감소시키거나 제거하는 항원의 모든 아미노산 돌연변이가 반드시 다른 항체의 결합을 감소시키거나 제거하는 경우, 2개의 항체는 동일한 에피토프를 갖는다. 하나의 항체의 결합을 감소시키거나 제거하는 일부 아미노산 돌연변이가 다른 항체의 결합을 감소시키거나 제거하는 경우, 2개의 항체는 중첩 에피토프를 갖는다.

그 다음, 추가의 일상적인 실험 (예를 들어, 펩타이드 돌연변이 및 결합 분석)을 수행하여 관찰된 테스트 항체의 결합 결여가 실제로 참조 항체와 동일한 에피토프에 대한 결합으로 인한 것인지 또는 입체적 차단 (또는 또 다른 현상)이 관찰된 결합 결여의 원인인지 여부를 확인할 수 있다. 이러한 종류의 실험은 ELISA, RIA, 표면 플라스몬 공명, 유세포 측정 또는 당해 분야에서 이용 가능한 임의의 기타 정량적 또는 정성적 항체 결합 검정을 사용하여 수행될 수 있다.

면역 컨쥬게이트

본 발명은 ACVR1 연관 질환 또는 장애 (예를 들어, 빈혈 또는 전위성 골화)를 치료하기 위해, 치료학적 모이어티 ("면역 컨쥬게이트")에 컨쥬게이트된 사람 항-ACVR1 단클론 항체를 포함한다. 본 출원에서 사용되는 "면역 컨쥬게이트"라는 용어는 방사능 작용제, 사이토카인, 인터페론, 표적 또는 리포터 모이어티, 효소, 펩타이드 또는 단백질 또는 치료제에 화학적으로 또는 생물학적으로 연결되는 항체를 지칭한다. 항체가 표적에 결합할 수 있는 한, 상기 항체는 해당 분자의 어느 위치에서든 방사능 작용제, 사이토카인, 인터페론, 표적 또는 리포터 모이어티, 효소, 펩타이드 또는 치료제에 결합될 수 있다. 면역 컨쥬게이트의 예로는 항체 약물 컨쥬게이트 및 항체-독소 융합 단백질이 포함된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 작용제는 ACVR1에 대한 제2의 상이한 항체일 수 있다. 항-ACVR1 항체에 컨쥬게이트될 수 있는 치료학적 모이어티의 유형은 치료될 조건 및 달성될 목적하는 치료학적 효과를 고려할 것이다. 면역 컨쥬게이트를 형성하기에 적합한 작용제의 예는 당해 분야에 공지되어 있으며, 예를 들어, 국제공개공보 WO 05/103081을 참조한다.

다중 특이적 항체

본 발명의 항체는 단일 특이적, 이중 특이적 또는 다중 특이적일 수 있다. 다중 특이적 항체는 하나의 표적 폴리펩타이드의 상이한 에피토프에 특이적일 수 있거나, 하나 초과의 표적 폴리펩타이드에 특이적인 항원 결합 도메인을 포함할 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Tutt et al., 1991, J. Immunol. 147:60-69]; [Kufer et al., 2004, Trends Biotechnol. 22:238-244]을 참조한다.

본 발명의 임의의 다중 특이적 항원 결합 분자 또는 이의 변이체는, 당해 분야의 통상의 기술자에게 공지되어 있는 바와 같이, 표준 분자 생물학 기법 (예를 들어, 재조합 DNA 및 단백질 발현 기술)을 이용하여 작제될 수 있다.

일부 실시 형태에서, ACVR1 특이적 항체는 ACVR1의 별개의 도메인에 결합하는 가변 영역들이 함께 결합하여 단일 결합 분자 내에서 이중 도메인 특이성을 부여하는 이중 특이적 형식 ("이중 특이적 물질")으로 제조된다. 적절하게 설계된 이중 특이적 물질은 특이성과 결합 활성 모두를 증가시킴으로써 전반적인 ACVR1 단백질의 억제 효능을 향상시킬 수 있다. 개별 도메인 (예를 들어, N-말단 도메인의 분절)에 대해 특이성을 갖거나 하나의 도메인 내의 상이한 영역들에 결합할 수 있는 가변 영역은, 각 영역이 별도의 에피토프, 또는 하나의 도메인 내의 상이한 영역들에 동시에 결합할 수 있도록 하는 구조적 스캐폴드 상에서 쌍을 형성한다. 이중 특이적 물질에 대한 하나의 예에서, 하나의 도메인에 대해 특이성을 갖는 결합제의 중쇄 가변 영역 (V_H)을, 상기 V_H에 대한 본래의 특이성을 방해하지 않으면서 본래의 V_H와 쌍을 형성할 수 있는 비동족성 V_L 파트너를 식별하기 위해, 제2 도메인에 대해 특이성을 갖는 일련의 결합제의 경쇄 가변 영역 (V_L)과 재조합시킨다. 이러한 방식으로, 단일 V_L 분절 (예를 들어, V_L1)은 상이한 2개의 V_H 도메인 (예를 들어, V_H1 및 V_H2)과 조합되어 2개의 결합 "아암 (arm)" (V_H1-V_L1 및 V_H2-V_L1)으로 이루어진 이중 특이적 물질을 생성할 수 있다. 단일 V_L 분절의 사용은 시스템의 복잡도를 감소시킴으로써 이중 특이적 물질을 생성하는데 사용되는 클로닝, 발현 및 정제 공정을 단순화시켜 해당 공정에서의 효율성을 증가시킨다 (예를 들어, 미국 출원공개 US 2011/0195454 및 US 2010/0331527을 참조한다).

대안으로, 하나 초과의 도메인 및 제2 표적, 예를 들어, 제2의 상이한 항-ACVR1 항체 (이에 한정되는 것은 아님)에 결합하는 항체는 본 출원에서 기재된 기법들 또는 당해 분야의 통상의 기술자들에게 공지된 기타 기법들을 사용하여 이중 특이적 형식으로 제조될 수 있다. 별개의 영역에 결합하는 항체 가변 영역은, 예를 들어, ACVR1의 세포외 도메인 상에서 관련 부위에 결합하는 가변 영역과 함께 연결되어 단일 결합 분자 내에서 이중 항원 특이성을 부여할 수 있다. 적절하게 설계된 상기 특성을 갖는 이중 특이적 물질은 이중적인 기능을 수행한다. 세포외 도메인에 대해 특이성을 갖는 가변 영역은 세포외 도메인 외부에 대해 특이성을 갖는 가변 영역과 조합되고, 각각의 가변 영역이 별도의 항원에 결합할 수 있도록 하는 구조적 스캐폴드 상에서 쌍을 형성한다.

본 발명과 관련하여 사용될 수 있는 예시적인 이중 특이적 항체 형식은 제1 면역글로불린 (Ig) C_H3 도메인 및 제2 Ig C_H3 도메인의 사용을 수반하는데, 여기서, 상기 제1 및 제2 Ig C_H3 도메인은 서로 적어도 하나의 아미노산이 상이하고, 이러한 적어도 하나의 아미노산 차이는 아미노산의 차이가 없는 이중 특이적 항체와 비교하여 단백질 A에 대한 이중 특이적 항체의 결합을 감소시킨다. 하나의 실시 형태에서, 상기 제1 Ig C_H3 도메인은 단백질 A에 결합하고 제2 Ig C_H3 도메인은 단백질 A 결합을 감소시키거나 제거하는 돌연변이, 예를 들어, H95R 변형 (IMGT 엑손 넘버링에 따름; EU 넘버링으로는 H435R)을 포함한다. 상기 제2 C_H3는 Y96F 변형 (IMGT에 따름; EU에 따르면 Y436F)을 추가로 포함할 수 있다. 제2 C_H3 내에서 발견될 수 있는 추가의 변형으로는 IgG1 항체의 경우에는 D16E, L18M, N44S, K52N, V57M 및 V82I (IMGT에 따름; EU에 따르면 D356E, L358M, N384S, K392N, V397M 및 V422I임); IgG2 항체의 경우에는 N44S, K52N 및 V82I (IMGT에 따름; EU에 따르면 N384S, K392N 및 V422I임); 및 IgG4 항체의 경우에는 Q15R, N44S, K52N, V57M, R69K, E79Q 및 V82I (IMGT에 따름; EU에 의해서는 Q355R, N384S, K392N, V397M, R409K, E419Q 및 V422I임)이 포함된다. 상기에서 기재된 이중 특이적 항체 형식 상의 변화는 본 발명의 범위 내인 것으로 고려된다.

본 발명과 관련하여 사용될 수 있는 기타 예시적인 이중 특이적 형식으로는, 예를 들어, scFv 기반 또는 디아바디 이중 특이적 형식, IgG-scFv 융합체, 이중 가변 도메인 (DVD)-Ig, 콰드로마 (Quadroma), 놉-인투-홀 (knob-into-hole), 공통 경쇄 (예를 들어, 놉-인투-홀을 갖는 공통 경쇄 등), CrossMab, CrossFab, (SEED)바디, 류신 지퍼 (zipper), 듀오바디 (Duobody), IgG1/IgG2, 이중 작용성 Fab (DAF)-IgG 및 Mab² 이중 특이적 형식이 포함되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다 (상술한 형식들에 대해 살펴보려면, 예를 들어, 문헌 [Klein et al. 2012, mAbs 4:6, 1-11] 및 해당 문헌에 인용된 참고 문헌들을 참조한다). 이중 특이적 항체는, 예를 들어, 직교 화학 반응성을 갖는 비천연 아미노산을 사용하여 부위 특이적 항체-올리고뉴클레오타이드 컨쥬게이트를 생성한 다음 한정된 조성, 원자가 및 기하학적 구조를 갖는 다량체성 복합체로 자가-조립시키는 것과 같이, 펩타이드/핵산 컨쥬게이트화를 사용하여 작제될 수 있다. (예를 들어, 문헌 [Kazane et al., J. Am. Chem. Soc. [Epub: Dec. 4, 2012]]을 참조한다).

치료학적 투여 및 제형

본 발명은 본 발명의 항-ACVR1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 치료학적 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 치료학적 조성물은 개선된 수송, 전달, 내성 등을 제공하기 위해 제형 내에 포함되는 적절한 담체, 부형제 및 기타 작용제들과 함께 투여될 것이다. 모든 약사들에게 공지된 처방집 (formulary)에서 다수의 적절한 제형들을 찾아볼 수 있다: 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA.]. 이러한 제형으로는, 예를 들어, 분말, 페이스트, 연고, 젤리, 왁스, 오일, 지질, (양이온성 또는 음이온성) 지질을 함유하는 소포 (예를 들어, LIPOFECTIN^TM), DNA 컨쥬게이트, 무수 흡수 페이스트, 수중유 및 유중수 에멀젼, 에멀젼 카보왁스 (다양한 분자량의 폴리에틸렌 글리콜), 반고체 겔 및 카보왁스를 함유하는 반고체 혼합물이 포함된다. 문헌 [Powell et al. "Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238-311]도 참조한다.

항체의 용량은 투여될 대상체의 연령 및 신장, 표적 질환, 병태, 투여 경로 등에 따라 달라질 수 있다. 본 발명의 항체가 성인 환자에서 질환 또는 장애를 치료하거나 이러한 질환을 예방하기 위해 사용될 때, 일반적으로는 체중 1 kg당 약 0.1 내지 약 100 mg의 단일 용량으로 본 발명의 항체를 투여하는 것이 유리하다. 병태의 중증도에 따라, 치료의 빈도 및 지속 기간은 조정될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 적어도 약 0.1 mg 내지 약 800 mg, 약 1 내지 약 600 mg, 약 5 내지 약 500 mg, 또는 약 10 내지 약 400 mg의 초기 용량으로 투여될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 상기 초기 용량을 투여한 후, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 제2 용량 또는 복수의 후속 용량을 상기 초기 용량과 대략 동일하거나 더 적을 수 있는 양으로 투여할 수 있는데, 여기서, 상기 후속 용량들은 적어도 1일 내지 3일; 적어도 1주, 적어도 2주; 적어도 3주; 적어도 4주; 적어도 5주; 적어도 6주; 적어도 7주; 적어도 8주; 적어도 9주; 적어도 10주; 적어도 12주; 또는 적어도 14주로 나누어 진다.

다양한 전달 시스템, 예를 들어, 리포솜 내 캡슐화, 마이크로입자, 마이크로캡슐, 돌연변이 바이러스를 발현할 수 있는 재조합 세포, 수용체 매개성 엔도사이토시스가 공지되어 있고, 본 발명의 약제학적 조성물을 투여하는데 사용될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Wu et al. (1987) J. Biol. Chem. 262:4429-4432] 참조). 도입 방법으로는 진피내, 경피, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 비강내, 경막외, 뇌실내 및 경구 경로가 포함되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 상기 조성물은 임의의 통상적인 경로에 의해, 예를 들어, 주입 또는 볼루스 주사에 의해, 상피 또는 점막 피부 내벽 (예를 들어, 구강 점막, 직장 점막 및 장 점막 등)을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있으며, 기타 생물학적 활성제들과 함께 투여될 수 있다. 투여는 전신 또는 국소일 수 있다. 약제학적 조성물은 소포, 특히, 리포솜으로 전달될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Langer (1990) Science 249:1527-1533] 참조).

본 발명의 항체를 전달하기 위해 나노입자의 사용도 또한 본 출원에서 고려된다. 항체 컨쥬게이트된 나노입자는 치료 및 진단 용도 모두로 사용될 수 있다. 항체 컨쥬게이트된 나노입자 및 이의 제조 및 사용 방법은 본 출원에 참조로 포함되는 문헌 [Arruebo, M., et al. 2009 ("Antibody-conjugated nanoparticles for biomedical applications" in J. Nanomat. Volume 2009, Article ID 439389, 24 pages, doi: 10.1155/2009/439389)]에 상세히 기재되어 있다. 나노입자를 개발하여 약제학적 조성물에 함유된 항체에 컨쥬게이트시켜 세포를 표적화할 수 있다. 약물 전달을 위한 나노입자도 또한, 예를 들어, 미국 특허 US 8257740 또는 US 8246995에 기재되어 있으며, 이들 각각은 그 전문이 본 출원에 포함된다.

특정한 상황에서, 약제학적 조성물은 제어 방출 시스템으로 전달될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 펌프를 사용할 수 있다. 또 다른 실시 형태에서, 중합체 물질을 사용할 수 있다. 또 다른 실시 형태에서, 제어 방출 시스템은 조성물의 표적 근방에 배치될 수 있으므로, 전신 용량의 일부만을 필요로 한다.

주사 가능한 제제들은 정맥내, 피하, 두개내, 복강내 및 근육내 주사, 점적 주입 등을 위한 투여 형태를 포함할 수 있다. 이러한 주사 가능한 제제들은 공개적으로 공지된 방법들에 의해 제조될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 표준 바늘 및 주사기에 의해 피하로 또는 정맥내로 전달될 수 있다. 또한, 피하 전달과 관련하여, 펜 전달 장치 (pen delivery device)는 본 발명의 약제학적 조성물을 전달하는데 있어서 용이하게 적용된다. 이러한 펜 전달 장치는 재사용 가능하거나 일회용일 수 있다. 재사용 가능한 펜 전달 장치는 일반적으로 약제학적 조성물을 함유하는 교체 가능한 카트리지를 이용한다. 일단 카트리지 내의 모든 약제학적 조성물이 투여되어 카트리지가 비게 되면, 빈 카트리지는 용이하게 폐기되고 약제학적 조성물을 함유하는 새로운 카트리지로 교체될 수 있다. 이어서, 상기 펜 전달 장치는 재사용될 수 있다. 일회용 펜 전달 장치에서, 교체 가능한 카트리지는 없다. 오히려, 상기 일회용 펜 전달 장치는 해당 장치 내의 저장소에 보유된 약제학적 조성물로 예비 충전된다. 일단 저장소의 약제학적 조성물이 비게 되면, 전체 장치는 폐기된다.

DIPG의 치료에서, 혈뇌 장벽을 극복하는 것이 필요할 수 있다. 특정 실시 형태에서, 혈뇌 장벽은 당해 분야, 예를 들어, 문헌 [Parodi et al 2019, Pharmaceutics 11:245]에 개시된 하나 이상의 접근법을 사용함으로써 극복된다.

유리하게, 상기에서 기재된 경구 또는 비경구 사용을 위한 약제학적 조성물은 활성 성분의 용량에 맞도록 조정된 단위 용량의 투여 형태로 제조된다. 이러한 단위 용량의 투여 형태로는, 예를 들어, 정제, 환제, 캡슐, 주사제 (앰플), 좌제 등이 포함된다. 함유된 항체의 양은 일반적으로 단위 용량의 제형당 약 5 내지 약 500 mg이고; 특히 주사제 형태에 있어서는, 약 5 내지 약 300 mg으로, 다른 제형에 있어서는 약 10 내지 약 300 mg으로 항체를 함유하는 것이 바람직하다.

항체의 치료학적 용도

본 발명의 항체는 ACVR1과 연관된 질환 또는 장애 또는 병태를 치료 및/또는 예방하고/하거나 이러한 질환, 장애 또는 병태와 연관된 적어도 하나의 증상을 개선하는데 유용하다. 특정 실시 형태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 단편은 ACVR1 또는 돌연변이체 ACVR 단백질과 연관된 질환 또는 장애 또는 병태가 있는 환자에게 치료학적 용량으로 투여될 수 있다.

특정 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 이소성 골화, 전위성 골화, 골 이형성증, 빈혈 및 산재성 내재성 뇌교종으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 ACVR1 연관 또는 ACVR1 돌연변이체 단백질 연관 질환 또는 장애의 적어도 하나의 증상 또는 징후를 치료 또는 예방하는데 유용하다.

ACVR1 연관 질환 또는 장애를 앓을 위험이 있는 대상체에게 예방적으로 본 발명의 하나 이상의 항체를 사용하는 것이 또한 본 출원에서 고려된다.

본 발명의 하나의 실시 형태에서, 본 항체는 본 출원에서 개시된 질환 또는 장애를 앓고 있는 환자를 치료하기 위한 약제학적 조성물 또는 약제의 제조에 사용된다. 본 발명의 또 다른 실시 형태에서, 본 항체는 본 출원에서 개시된 질환, 장애 또는 병태를 치료 또는 개선하는데 유용한 당해 분야의 통상의 기술자들에게 공지된 임의의 다른 작용제 또는 임의의 다른 요법과 함께 보조 요법으로 사용된다.

조합 요법

조합 요법은 본 발명의 항체, 및 본 발명의 항체 또는 본 발명의 항체의 생물학적 활성 단편과 유리하게 조합될 수 있는 추가의 치료제를 포함할 수 있다. 본 발명의 항체는 ACVR1 연관 또는 ACVR1 돌연변이체 단백질 연관 질환 또는 장애를 치료하는데 사용되는 하나 이상의 약물 또는 요법과 상승 작용하도록 조합될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 상기 질환 또는 병태의 하나 이상의 증상을 개선하기 위해 제2 치료제와 조합될 수 있다.

질환, 장애 또는 병태에 따라, 본 발명의 항체는 하나 이상의 추가의 치료제와 조합하여 사용될 수 있다.

항-ACVR1 항체와 조합하여 투여될 수 있는 추가의 전위성 골화 치료 약물의 예로는 항-액티빈 A 억제제 또는 이의 항원 결합 단편, 및 항-ACVR2 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 항염증 약물, 스테로이드, 비스포스포네이트, 근육 이완제, 및 레티노산 수용체 (RAR) 감마 작용제가 포함될 수 있지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.

액티빈은 형질 전환 성장 인자-베타 (TGF-β) 슈퍼 패밀리에 속하며, 면역 반응 및 조직 수복 뿐만 아니라 세포 증식, 분화, 대사, 항상성 및 아폽토시스에 대한 광범위한 생물학적 효과를 발휘한다. 액티빈 A는 유형 I (Act RI-A 및 Act RI-B) 및 유형 II (Act RII-A 및 Act RII-B) 세린-트레오닌 키나아제 수용체의 이종 복합체에 결합하고 이를 활성화하는 이황화 결합된 동종 이량체 (2개의 베타-A 쇄)이다. 액티빈 A는 ACVR1 단백질 또는 ACVR1 돌연변이체 단백질에 대한 리간드로서 역할을 할 수 있다.

항염증 약물의 예로는 아스피린, 디클로페낙, 인도메타신, 이부프로펜, 케토프로펜, 나프록센, 피록시캄, 로페콕십, 셀레콕십, 아자티오프린, 페니실라민, 메토트렉세이트, 설파살라진, 레플루노마이드, 인플릭시맙 및 에타너셉트가 포함될 수 있다. 스테로이드의 예로는 프레드니솔론, 베클로메타손, 베타메타손, 플루티카손, 덱사메타손 및 하이드로코르티손이 포함될 수 있다. 비스포스포네이트의 예로는 알렌드로네이트, 시마드로네이트, 클로드로네이트, 에티드로네이트, 이반드로네이트, 인카드로네이트, 미노드로네이트, 네리드로네이트, 올파드로네이트, 파미드로네이트, 피리드로네이트, 리세드로네이트, 틸루드로네이트 및 졸레드로네이트가 포함될 수 있다. 근육 이완제의 예로는 사이클로벤자프린, 메탁살론 및 바클로펜이 포함될 수 있다. 레티노산 수용체 감마 작용제의 예로는 팔로바로텐이 포함될 수 있다. 빈혈에 대한 추가의 치료 약물로는 재조합 에리트로포이에틴 (recombinant erythropoietin: EPO) 및 철분 보충제가 포함될 수 있다. 산재성 내재성 뇌교종에 대한 추가의 치료학적 치료의 예로는 방사선 요법 또는 실험적 화학 요법이 포함될 수 있다.

본 출원에서 사용되는 "~와 조합하여"라는 용어는 추가의 치료학적 활성 성분(들)이 본 발명의 항-ACVR1 항체의 투여 전에, 이의 투여와 동시에 또는 이의 투여 후에 투여될 수 있다는 것을 의미한다. 또한, “~와 조합하여”라는 용어는 또한 항-ACVR1 항체 및 제2 치료제의 연속적 투여 또는 동시적 투여를 포함한다.

상기 추가의 치료학적 활성 성분(들)은 본 발명의 항-ACVR1 항체를 투여하기 전에 대상체에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 제1 성분이 제2 성분의 투여 1주 전, 72 시간 전, 60 시간 전, 48 시간 전, 36 시간 전, 24 시간 전, 12 시간 전, 6 시간 전, 5 시간 전, 4 시간 전, 3 시간 전, 2 시간 전, 1 시간 전, 30분 전 또는 30분 미만 전에 투여된다면, 상기 제1 성분은 상기 제2 성분 "전에" 투여되는 것으로 간주될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 상기 추가의 치료학적 활성 성분(들)은 본 발명의 항-ACVR1 항체를 투여한 후에 대상체에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 제1 성분이 제3 성분의 투여 30분 후, 1 시간 후, 2 시간 후, 3 시간 후, 4 시간 후, 5 시간 후, 6 시간 후, 12 시간 후, 24 시간 후, 36 시간 후, 48 시간 후, 60 시간 후, 72 시간 후 또는 그 이상 후에 투여된다면, 상기 제1 성분은 상기 제2 성분 "후에" 투여되는 것으로 간주될 수 있다. 다른 실시 형태에서, 상기 추가의 치료학적 활성 성분(들)은 본 발명의 항-ACVR1 항체와 동시에 대상체에게 투여될 수 있다. 본 발명의 목적을 위한 "동시" 투여는, 예를 들어, 단일 투여 형태로, 또는 30분 이하 이내로 대상체에게 서로 각각 투여되는 별도의 투여 형태로, 대상체에 대한 항-ACVR1 항체 및 추가의 치료학적 활성 성분의 투여를 포함한다. 별도의 제형으로 투여되는 경우, 각각의 제형은 동일한 경로를 통해 투여될 수 있으며 (예를 들어, 항-ACVR1 항체 및 추가의 치료학적 활성 성분은 모두 정맥 내 등으로 투여될 수 있음); 대안으로, 각각의 제형은 상이한 경로를 통해 투여될 수 있다 (예를 들어, 항-ACVR1 항체는 정맥 내로 투여될 수 있고, 추가의 치료학적 활성 성분은 경구로 투여될 수 있음). 임의의 경우에서, 단일 투여 형태로, 동일한 경로에 의한 별도의 투여 형태로, 또는 상이한 경로에 의한 별도의 투여 형태로 상기 성분들을 투여하는 것은 본 개시 내용의 목적상 모두 "동시 투여"로 간주된다. 본 개시 내용의 목적상, 추가의 치료학적 활성 성분의 투여 "전에", 투여와 "동시에", 또는 투여 "후에" (이들 용어는 상기 본 출원에서 정의한 바와 같음) 항-ACVR1 항체의 투여는 추가의 치료학적 활성 성분과 "조합하여" 항-ACVR1 항체의 투여로 간주된다.

본 발명은, 본 발명의 항-ACVR1 항체가 본 출원의 다른 곳에서 기재된 바와 같이 추가의 치료학적 활성 성분(들) 중 하나 이상과 공동 제형화된 약제학적 조성물을 포함한다.

항체의 진단 용도

본 발명의 항체는, 예를 들어, 진단 목적으로 샘플에서 ACVR1 단백질을 검출 및/또는 측정하는데 사용될 수 있다. 일부 실시 형태들은 ACVR1 연관 또는 ACVR 돌연변이체 단백질 연관 질환 또는 장애를 검출하기 위한 검정에서 본 발명의 하나 이상의 항체의 용도를 고려한다. ACVR1에 대한 예시적인 진단 검정은, 예를 들어, 환자로부터 수득된 샘플을 본 발명의 항-ACVR1 항체와 접촉시키는 단계를 포함할 수 있는데, 여기서, 상기 항-ACVR1 항체는 환자 샘플로부터 ACVR1을 선택적으로 단리하기 위해 검출 가능한 라벨 또는 리포터 분자로 라벨링되거나 포획 리간드로서 사용된다. 대안으로, 라벨링되지 않은 항-ACVR1 항체를 자체적으로 검출 가능하게 라벨링된 2차 항체와 함께 진단적 용도로 사용할 수 있다. 상기 검출 가능한 라벨 또는 리포터 분자는, 예를 들어, ³H, ¹⁴C, ³²P, ³⁵S 또는 ¹²⁵I와 같은 방사성 동위 원소; 플루오레세인 이소티오시아네이트 또는 로다민과 같은 형광성 또는 화학 발광성 모이어티; 또는 알칼리성 포스파타아제, β-갈락토시다아제, 서양 고추냉이 퍼옥시다아제 또는 루시퍼라아제와 같은 효소일 수 있다. 샘플 중에서 ACVR1을 검출 또는 측정하는데 사용될 수 있는 예시적인 구체적 검정으로는 효소 결합 면역 흡착 검정 (ELISA), 방사선 면역 검정 (RIA) 및 형광 활성화 세포 분류 (FACS)가 포함된다.

본 발명에 따른 ACVR1 진단 검정에 사용될 수 있는 샘플로는 정상 또는 병리 조건하에 검출 가능한 양의 ACVR1 단백질 또는 이의 단편을 함유하는, 환자로부터 수득 가능한 임의의 조직 또는 체액 샘플이 포함된다. 일반적으로, 건강한 환자 (ACVR1과 연관된 질환에 걸리지 않은 환자)로부터 수득된 특정 샘플 중 ACVR1 단백질의 수준을 측정하여 ACVR1의 기준선 또는 표준 수준을 먼저 확립할 것이다. 그 다음, ACVR1의 이러한 기준선 수준을 ACVR1 연관 병태 또는 이러한 병태와 연관된 증상을 갖는 것으로 의심되는 개체로부터 수득된 샘플 중에서 측정된 ACVR1의 수준과 비교할 수 있다.

ACVR1 단백질에 특이적인 항체들은 추가의 라벨 또는 모이어티를 함유하지 않을 수 있거나, 이들은 N-말단 또는 C-말단 라벨 또는 모이어티를 함유할 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 라벨 또는 모이어티는 비오틴이다. 결합 검정에서, 라벨 (존재하는 경우)의 위치는 펩타이드가 결합되는 표면에 대해 펩타이드의 배향을 결정할 수 있다. 예를 들어, 표면이 아비딘으로 코팅되는 경우, N-말단 비오틴을 함유하는 펩타이드는 펩타이드의 C-말단 부분이 상기 표면에서 멀어지도록 배향될 것이다.

실시예

하기 실시예들은, 본 발명의 방법 및 조성물을 제조하고 사용하는 방법에 대한 완전한 개시 및 기재를 당해 분야의 통상의 기술자들에게 제공하기 위해 제시되는 것이며, 본 발명자들이 본 발명으로 간주하는 것의 범위를 한정하는 것으로 의도되지 않는다. 사용된 수치 (예를 들어, 양, 온도 등)에 관하여 정확성을 보장하기 위해 노력하였으나, 일부 실험적 오차와 편차들을 설명해야 한다. 달리 명시되지 않는다면, 부는 중량부이고, 분자량은 평균 분자량이고, 온도는 섭씨 온도이고, 실온은 약 25℃이고, 압력은 대기압 또는 그 부근이다.

실시예 1: 액티빈 A 수용체 수용체 1 (ACVR1)에 대한 사람 항체의 생성

사람 면역글로불린 중쇄 및 카파 경쇄 가변 영역을 인코딩하는 DNA를 포함하는 VELOCIMMUNE^® 마우스에서 ACVR1 단백질에 대한 사람 항체를 생성하였다. 상기 마우스를 사람 ACVR1 단백질의 세포외 도메인 (예를 들어, 서열 번호 339)을 포함하는 면역원으로 면역화시켰다.

상기 항체 면역 반응을 ACVR1 특이적 면역 검정으로 모니터링하였다. 목적하는 면역 반응이 달성될 때, 비장 세포를 수확하고, 마우스 골수종 세포와 융합시켜 생존력을 보존하고, 하이브리도마 세포주를 형성하였다. 상기 하이브리도마 세포주를 스크리닝하고 선택하여 ACVR1 특이적 항체를 생성하는 세포주를 식별하였다. 상기 세포주를 사용하여 수개의 항-ACVR1 키메라 항체 (즉, 사람 가변 도메인 및 마우스 불변 도메인을 보유하는 항체)를 수득하였다.

그 전문이 본 출원에 참조로 구체적으로 포함되는 미국 특허 US 7,582,298에 기재된 바와 같이, 골수종 세포에 대한 융합 없이 항원 양성 마우스 B 세포로부터 항-ACVR1 항체를 직접 단리하였다. 이러한 방법을 사용하여, 몇 가지 전장 사람 항-ACVR1 항체 (즉, 사람 가변 도메인 및 사람 불변 도메인을 보유하는 항체)를 수득하였다.

상기에서 개시된 바와 같이 생성된 예시적인 항체를 mAb27396, mAb27241, mAb27242, mAb27243, mAb27245, mAb27247, mAb27404, mAb27405, mAb27400, mAb22124, mAb22125, mAb22168, mAb29226, mAb29226, mAb29237, mAb29256, mAb29257, mAb29261, mAb29266, mAb22115로서 명명하였다.

본 실시예의 방법에 따라 생성된 예시적인 항체들의 생물학적 특성은 하기에 제시된 실시예들에 상세히 기재되어 있다.

실시예 2: 중쇄 및 경쇄 가변 영역 아미노산 및 뉴클레오타이드 서열

표 1은 선택된 본 발명의 항-ACVR1 항체의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 및 CDR에 대한 아미노산 서열 식별자를 제시한다.

[표 1]

아미노산 서열 식별자

상응하는 핵산 서열 식별자는 표 2에 제시되어 있다.

[표 2]

핵산 서열 식별자

본 출원에서 언급된 항체는 전형적으로 전장 사람 가변 영역을 갖지만, 사람 또는 마우스 불변 영역을 가질 수 있다. 당해 분야의 통상의 기술자가 인식하는 바와 같이, 특정 Fc 이소타입을 갖는 항체는 상이한 Fc 이소타입을 갖는 항체로 전환될 수 있지만 (예를 들어, 마우스 IgG1 Fc를 갖는 항체는 사람 IgG4를 갖는 항체 등으로 전환될 수 있음), 어떠한 경우에도, 가변 도메인 (CDR 포함) - 표 1 또는 2에서 나타낸 수치 식별자로 표시됨 - 은 동일하게 유지될 것이고, 항원에 대한 결합 특성은 Fc 도메인의 성질과 관계 없이 동일하거나 실질적으로 유사할 것으로 예측된다. 특정 실시 형태에서, 마우스 IgG1 Fc를 갖는 선택된 항체를 사람 IgG4 Fc를 갖는 항체로 전환시켰다. 하나의 실시 형태에서, 상기 IgG4 Fc 도메인은 미국 출원공개 US 2010/0331527에 개시된 바와 같은 2개 이상의 아미노산 변화를 포함한다. 하나의 실시 형태에서, 상기 사람 IgG4 Fc는 이량체 안정화를 촉진하기 위해 힌지 영역 (S108P)에서 세린에서 프롤린으로의 돌연변이를 포함한다. 달리 명시되지 않는다면, 하기 실시예에서 사용된 모든 항체는 사람 IgG4 이소타입을 포함한다.

표 3은 선택된 본 발명의 항-ACVR1 항체의 중쇄 및 경쇄 (HC 및 LC)의 핵산 (DNA) 및 아미노산 (PEP) 서열 식별자를 제시한다.

[표 3]

중쇄 및 경쇄에 대한 서열 식별자

실시예 3: 표면 플라스몬 공명에 의해 측정된 ACVR1에 대한 항체 결합

실험 절차

실시간 표면 플라스몬 공명 바이오센서 (SPR-Biacore) Biacore 4000을 사용하여, 정제된 항-ACVR1 단클론 항체에 결합하는 ACVR1의 평형 해리 상수 (K_D)를 측정하였다. 모든 결합 연구를 25℃ 및 37℃의 10 mM HEPES, 150 mM NaCl, 3 mM EDTA 및 0.05% v/v 계면 활성제 Tween-20, pH 7.4 (HBS-ET) 실행 완충액에서 수행하였다. Biacore CM5 센서 표면을 단클론 마우스 항-사람 Fc 항체 (GE, # BR-1008-39 또는 REGN2567)와의 아민 커플링에 의해 먼저 유도체화시켜 항-ACVR1 단클론 항체를 포획하였다. 상이한 농도의 ACVR1 시약, C-말단 myc-myc-헥사히스티딘 태그로 발현된 사람 ACVR1 세포외 도메인 (hACVR1-MMH; 서열 번호 338), C-말단 myc-myc-헥사히스티딘 태그로 발현된 마우스 ACVR1 세포외 도메인 (mACVR1-MMH; 서열 번호 340), C-말단 마우스 IgG2a Fc 태그로 발현된 사람 ACVR1 세포외 도메인 (hACVR1-mFc; 서열 번호 339)을 HBS-ET 실행 완충액 (900 nM ~ 3.7 nM; 3배 연속 희석) 중에서 먼저 제조하였다. 그 다음, ACVR1 시약을 30 μL/분의 유속으로 2.5~3분 동안 항-사람 Fc 포획된 항-ACVR1 단클론 항체 표면에 주사하고, 단클론 항체 결합 ACVR1 시약의 해리를 HBS-ET 실행 완충액 중에서 10~15분 동안 모니터링하였다. 스크러버 (Scrubber) 2.0c 곡선 피팅 소프트웨어를 사용하여 1:1 결합 모델에 실시간 센서그램을 피팅함으로써 동력학 결합 속도 상수 (k _a ) 및 해리 속도 상수 (k _d )를 결정하였다. 결합 해리 평형 상수 (K_D) 및 해리 반감기 (t_1/2)를 하기와 같은 동력학 속도 상수로부터 계산하였다:

결과

25℃ 및 37℃에서 본 발명의 항-ACVR1 단클론 항체에 대한 다양한 ACVR1 시약의 결합 동력학 파라미터는 표 4 내지 9에 나타나 있다.

[표 4]

25℃에서 항-ACVR1 단클론 항체에 결합하는 hACVR1-MMH의 결합 동력학 파라미터

[표 5]

37℃에서 항-ACVR1 단클론 항체에 결합하는 hACVR1-MMH의 결합 동력학 파라미터

[표 6]

25℃에서 항-ACVR1 단클론 항체에 결합하는 hACVR1-mFc의 결합 동력학 파라미터

[표 7]

37℃에서 항-ACVR1 단클론 항체에 결합하는 hACVR1-mFc의 결합 동력학 파라미터

[표 8]

25℃에서 항-ACVR1 단클론 항체에 결합하는 mACVR1-mmh의 결합 동력학 파라미터

[표 9]

37℃에서 항-ACVR1 단클론 항체에 결합하는 mACVR1-mmh의 결합 동력학 파라미터

25℃에서, hACVR1-MMH에 결합하는 항-ACVR1 단클론 항체는 표 4에 나타난 바와 같이 1.56 nM 내지 1.97 μM 범위의 K_D 값을 나타냈다. 37℃에서, hACVR1-MMH에 결합하는 항-ACVR1 단클론 항체는 표 5에 나타난 바와 같이 5.77 nM 내지 438 nM 범위의 K_D 값을 나타냈다.

25℃에서, hACVR1-mFc에 결합하는 항-ACVR1 단클론 항체는 표 6에 나타난 바와 같이 0.20 nM 내지 55.4 nM 범위의 K_D 값을 나타냈다. 37℃에서, hACVR1-mFc에 결합하는 항-ACVR1 단클론 항체는 표 7에 나타난 바와 같이 0.67 nM 내지 145 nM 범위의 K_D 값을 나타냈다.

25℃에서, mACVR1-MMH에 결합하는 항-ACVR1 단클론 항체는 표 8에 나타난 바와 같이 171 nM 내지 2.13 μM 범위의 K_D 값을 나타냈다. 37℃에서, 하나의 항-ACVR1 단클론 항체만이 표 9에 나타난 바와 같이 504 nM의 K_D 값으로 mACVR1-MMH에 결합하였다.

실시예 4: 상이한 항-ACVR1 단클론 항체 사이의 교차 경쟁

실험 절차

Octet HTX 바이오센서 플랫폼 (Pall ForteBio Corp.) 상에서 실시간 무표지 생물층 간섭법 검정을 이용하여 항-ACVR1 단클론 항체 패널 내의 결합 경쟁을 결정하였다. 전체 실험을 10 mM HEPES, 150 mM NaCl, 3 mM EDTA 및 0.05% v/v 계면 활성제 Tween-20, 1 mg/mL BSA, pH7.4 (HBS-EBT) 완충액 중에서 1000 rpm의 속도로 플레이트를 진동시키면서 25℃에서 수행하였다. 2개의 항체가 각각의 에피토프에 결합하기 위해 서로 경쟁할 수 있는지 여부를 평가하기 위해, 10 μg/mL hACVR1-MMH를 함유하는 웰에 바이오센서 팁을 40초 동안 넣어 항-His 항체 코팅된 Octet 바이오센서 팁 (Fortebio Inc, # 18-5079)을 침지시킴으로써 C-말단 myc-myc-헥사히스티딘 태그 (hACVR1-MMH; 서열 번호 338)로 발현된 사람 ACVR1 세포외 도메인을 먼저 포획하였다. 그 다음, 상기 항원 포획된 바이오센서 팁을 mAb-1의 50 μg/mL 용액을 함유하는 웰에 4분 동안 침지시켜 제1 항-ACVR1 단클론 항체 (mAb-1으로 언급됨)로 포화시켰다. 그 다음, 바이오센서 팁을 제2 항-ACVR1 단클론 항체 (mAb-2로 언급됨)의 50 μg/mL 용액을 함유하는 웰에 3분 동안 침지시켰다. 바이오센서 팁을 본 실험의 매 단계 사이에 HBS-EBT 완충액 중에서 세척하였다. 실시간 결합 반응을 전체 실험 기간에 걸쳐 모니터링하고, 매 단계의 종료시에 결합 반응을 기록하였다. mAb-1과 복합체화된 hACVR1-MMH에 결합하는 mAb-2의 반응을 비교하고, 표 10에 나타낸 바와 같이 상이한 항-ACVR1 단클론 항체의 경쟁적/비경쟁적 거동을 결정하였다.

결과

[표 10]

항-ACVR1 단클론 항체 사이의 교차 경쟁

표 10은 선택된 항-ACVR1 항체들 사이의 교차 경쟁을 나타낸다.

실시예 5: HEK293/hACVR1-wt 및 HEK293/hACVR1-R206H 세포와의 유세포 측정에 의한 세포 결합

항-hACVR1 항체에 의한 세포 결합을 평가하기 위해, 반딧불이 루시퍼라아제 리포터 (BRE-Luc)에 융합된 BMP 반응 요소와 함께 HEK293 세포에서 전장 hACVR1을 안정하게 과발현하도록 2개의 세포주를 생성하였다. 하나의 세포주는 hACVR1의 야생형 버전 (승인 번호 Q04771의 1~509번 아미노산)을 포함하며 HEK293/BRE-luc/hACVR1 야생형으로 명명되었다. 이는 이하에서 HEK293/hACVR1-wt로서 언급된다. 다른 세포주는 hACVR1(R206H)을 포함하였다. 이러한 세포주의 단일 클론을 단리하고, 생성된 세포주를 HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H-클론 H2로 명명하였다. 이는 이하에서 HEK293/hACVR1-R206H로서 언급된다.

세포 표면 상에 발현된 수용체에 대한 본 발명의 항-ACVR1 항체의 결합을 평가하기 위해, 66.6 nM 또는 70 nM의 항체를 0.5 x 10⁶개 세포/웰과 함께 4℃에서 30분 동안 2% FBS 함유하는 PBS (칼슘 및 마그네슘 없음) 중에서 인큐베이션하였다. 1차 항체와의 인큐베이션 후, 세포를 3.2 μg/mL의 Alexa Fluor®-647 컨쥬게이트된 2차 항체 (Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc., 항-사람 # 109-607-003)로 4℃에서 25 또는 30분 동안 염색하였다. BD CytoFix^TM (Becton Dickinson, # 554655)를 사용하여 세포를 고정하고, Hypercyt® 또는 IQue® 유세포 측정기 (Intellicyt®) 상에서 분석하였다. 미염색 2차 항체 단독 대조군도 또한 모든 세포주에 대해 테스트하였다. ForeCyt® (IntelliCyt®) 소프트웨어를 사용하여 상기 결과들을 분석하여 생존 세포에 대한 형광의 기하학적 평균을 결정하고, 테스트 조건의 기하학적 평균 값을 상응하는 미염색 세포의 기하학적 평균 값으로 정규화하여 결합 비율을 계산하였다.

[표 11]

HEK293/BRE-luc/hACVR1 세포에 대한 항-hACVR1 항체의 결합

표 11에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 20개의 항-hACVR1 항체 중 4개는 4 내지 183배 범위의 결합 비율로 HEK293/hACVR1-wt 세포에 대한 결합을 나타냈다. 본 발명의 모든 20개의 항-hACVR1 항체를 HEK293/hACVR1-R206H 세포에 대한 결합에서 테스트하였으며, 이들은 2 내지 1900배 범위의 결합 비율로 세포에 대한 결합을 나타냈다. 본 발명의 항-hACVR1 항체는 1 내지 26배의 결합 비율로 HEK293 모체 세포에 대한 결합을 입증하였다. 이소타입 대조군 항체 및 이차 항체 단독 샘플은 1 내지 3배 범위의 결합 비율을 나타냈다.

실시예 6: hBMP7 또는 h액틴 A에 의해 활성화된 HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H-클론 H2 세포에 의한 세포 기반 생물학적 검정에서 ACVR1의 기능적 억제

액티빈 A 수용체 유형 I, ACVR1 (ActRI, ACVR1A 또는 Alk2로도 또한 공지됨)은 단일 통과 막 관통 수용체이며 TGF-β 수용체 슈퍼 패밀리의 유형 I BMP 수용체의 구성원이다. 리간드 결합될 때, ACVR1은 유형 II 수용체와 함께 다운스트림 신호 전달 캐스케이드를 개시하여 수용체 특이적 R-SMAD 단백질 (SMAD1, SMAD5 또는 SMAD8)의 활성화를 초래하고, SMAD, SMAD4와 협력하여 유전자의 전사 조절을 초래한다 (문헌 [Massague J, TGF-beta Signal Transduction, Annu. Rev. Biochem. 1998. 67:753-91, PMID: 9759503]; [Massague et al. Smad transcription factors, Genes Dev. 2005 19: 2783-2810, PMID: 16322555]). FOP에서 발견된 돌연변이 (문헌 [Shore et al., Nat Genet.　2006 May;38(5):525-7. Epub 2006 Apr 23. PMID: 16642017)인 ACVR1(R206H)의 항-ACVR1 항체 억제를 평가하기 위해, 생물학적 검정을 HEK293 세포 (사람 배아 신장, ATCC])에서 확립하였다. HEK293 세포는 ACVR1, 필수 유형 II 수용체, SMAD 단백질, 및 기능적 BMP 신호 전달 경로를 형성하는 기타 성분을 내인성으로 발현한다. ACVR1을 통해 신호 전달을 구동시키기 위해, 반딧불이 루시퍼라아제 리포터 (BRE-Luc)에 융합된 BMP 반응 요소와 함께 전장 사람 ACVR1 (1~509번 아미노산, R206H, 승인 #Q04771)을 안정하게 과발현하도록 세포주를 생성하였다. 세포주의 단일 클론을 단리하고, 생성된 세포주를 HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H-클론 H2로 명명하였다. 이는 이하에서 HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H로서 언급된다.

생물학적 검정을 위해, HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H 세포를 검정 완충액 (DMEM High 글루코오스 + 10% FBS + Pen/Strep/L-글루타민) 중에서 96웰 플레이트에 10,000개 세포/웰로 플레이팅하고, 5% CO₂하에 37℃에서 5 시간 동안 인큐베이션하였다. 5 시간 인큐베이션 후, 300 nM에서 73.2 pM으로 또는 173.3 nM에서 42.3 pM으로 검정 완충액 중에서 연속 희석된 항-ACVR1 항체 또는 이소타입 대조군 항체 (+ 테스트 분자 없이 완충액만 함유하는 샘플)를 세포에 첨가하고, 25℃에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 30분 후, 3 nM 사람 액티빈 A (h액티빈 A, R&D System 338-AC), 2 nM 사람 골 형성 단백질 7 (hBMP7, R&D System 354-BP/C) 또는 3 nM hBMP7을 세포에 첨가하였다. 리간드에 의한 용량 의존적 활성화를 수득하기 위해, 검정 완충액 (+ 테스트 분자 없이 완충액만 함유하는 샘플 포함) 중에서 h액티빈 A 또는 hBMP7을 200 nM에서 3.4 pM으로 또는 100 nM에서 1.7 pM으로 연속 희석하고, 항체로 처리되지 않은 세포에 첨가하였다. 5% CO₂하에 37℃에서의 밤새 인큐베이션 후, 루시퍼라아제 활성을 OneGlo^TM 시약 (Promega, # E6031) 및 VictorX 또는 Envision 플레이트 판독기 (Perkin Elmer)로 측정하였다. 프리즘 소프트웨어 (GraphPad)와 함께 비선형 회귀 (4-파라미터 로지스틱스)를 사용하여 상기 결과들을 분석하여 EC₅₀과 IC₅₀ 값을 수득하였다. 하기 수학식을 사용하여 억제의 백분율을 RLU 값으로 계산하였다:

이러한 수학식에서, "RLU_기준선"는 항체 없이 일정한 양의 리간드 (h액티빈 A 또는 hBMP7)를 처리한 세포의 발광 값이고, "RLU_억제"는 특정 농도의 리간드와 함께 최대 농도의 특정 항체를 갖는 세포의 발광 값이고, "RLU_배경'는 어떠한 리간드나 항체도 없는 세포의 발광 값이다.

본 발명의 20개의 항-사람 ACVR1 항체를 HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H 세포의 활성화를 억제하는 능력에 대해 테스트하였다. 결과는 표 12에 나타나 있다.

[표 12]

HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H 세포에서 hACVR1 리간드의 존재하에 항-hACVR1 항체의 억제

표 12에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 항체 중 10개는 2 nM hBMP7의 적어도 90% 억제를 나타내며, 억제 항체에 대한 IC₅₀ 값은 580 pM 내지 2.0 nM 범위이었다. 본 발명의 항체 중 5개는 3 nM h액티빈 A, 2 nM 또는 3 nM hBMP7의 46% 내지 78% 억제를 나타내며, 억제 항체에 대한 IC₅₀ 값은 140 pM 내지 >100 nM 범위이었다. 본 발명의 5개 항체는 테스트된 임의의 리간드의 억제를 나타내지 않았다. 이소타입 대조군 항체는 h액티빈 A 또는 hBMP7에 의해 활성화된 HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H 세포의 어떠한 측정 가능한 억제도 나타내지 않았다. 상기 리간드는 hBMP7에 대해 297 pM 또는 1.22 nM 및 h액티빈 A에 대해 333 pM의 EC₅₀ 값으로 HEK293/BRE-luc/hACVR1-R206H 세포를 활성화시켰다.

실시예 7: 생체내 항-ACVR1 항체 테스트; 헵시딘 및 철 수준에 대한 Acvr1 ^hu/hu 마우스의 혈청 분석

항-ACVR1 항체 mAb27242, mAb27243, mAb27247 및 hIgG4 이소타입 대조군 항체 (REGN1945)에 의한 처리 후 Acvr1 ^hu/hu 마우스에서 헵시딘 및 철 수준을 테스트하였다.

ACVR1의 BMP6 매개성 활성화는 헵시딘을 인코딩하는 유전자인 Hamp의 전사를 직접 활성화한다. 헵시딘은 유일한 공지된 철 배출 인자 (exporter)인 페로포틴 (slc40a1)의 내재화를 유발하여 철 수준의 음성 조절 인자이다. BMP6-ACVR1 신호 전달 캐스케이드의 억제는 Hamp 전사 감소를 유발하여 헵시딘의 순환 수준 감소를 초래한다. 순환 헵시딘의 감소는 소장으로부터 철 흡수 증가를 가능하게 하는 페로포틴 수준의 증가를 초래하여 순환 철 수준을 증가시킨다.

그러므로, 혈청 헵시딘 및 철에 대한 본 발명의 항-ACVR1 항체의 효과를 결정하기 위해, 생체내 실험을 마우스에서 수행하였다. 실험을 위해, 마우스 대립 유전자 대신 사람 ACVR1을 발현하는 마우스 (Acvr1 ^hu/hu 마우스로 지칭됨)를 이용하였다. 실험 1 및 5 일차에 42 마리의 암컷 Acvr1 ^hu/hu 마우스 (12~15주령)에게 10 mg/kg의 이소타입 대조군, mAb27242, mAb27243 또는 mAb27247을 투여하였다. 8 일차에 혈청 수집을 위해 마우스를 희생시켰다. 헵시딘-쥐과 동물 완전 ELISA (Intrinsic Lifesciences, Cat# HMC-001)를 사용하여 혈청을 헵시딘 단백질 수준에 대해 분석하고, QuantiChrom Iron Assay Kit (BioAssay Systems, Cat# DIFE-250)를 사용하여 철 수준을 분석하였다. 결과는 표 13에 나타나 있다.

[표 13]

Acvr1 ^hu/hu 마우스의 혈청 헵시딘 및 혈청 철 수준

표 13에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 ACVR1 항체, mAb27242 및 mAb27243은 Acvr1 ^{hu /hu} 마우스에서 혈청 헵시딘을 감소시키고 혈청 철 수준을 증가시킨 반면, mAb27247은 Acvr1 ^{hu /hu} 마우스에서 혈청 헵시딘 또는 혈청 철 수준에 어떠한 영향도 나타내지 않았다. 이는 mAb27242 및 mAb27243이 야생형 ACVR1 신호 전달을 억제할 수 있다는 것을 나타낸다.

실시예 8: 생체내 항-ACVR1 항체 테스트; 외상 후 이소성 골화 모델

본 연구는 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 본 발명의 항-ACVR1 항체 mAb27242 및 항-액티빈 A 항체의 효과를 평가하였다.

연조직에서의 전위성 골 형성인 이소성 골화 (HO)는 다음 2개의 주요 형태로 발생한다: 외상후 HO (tHO)는 전형적으로 근골격 또는 신경성 손상 및 ACVR1 수용체에서 R206H로 공지된 특정 점 돌연변이 다운스트림에 유전적으로 구동된 진행성 골화성 섬유 이형성증 (fibrodysplasia ossificans progressive: FOP)을 경험한 환자에서 발견되었다. 두 질환 모두는 전위성 골 형성에서 연골내 골화 과정을 겪는다.

HO에 대한 기본 관리는 FOP에서 거의 보편적으로 재발에 의해 종종 복잡해지는 외과적 절제로 남아 있다. HO의 외상후 및 FOP 종류 모두가 연골내 골화를 촉발하는 염증에서 이소성을 반영하는 것으로 입증되었지만, 이러한 수렴 프로그래밍에 대한 선행 신호는 기존 문헌 내에서 뚜렷하게 보인다. 두 종류 모두에서, 병리학은 Alk2/ACVR1, Alk3/BMPR1A, Alk4/ACVR1B, Alk5/TGFBRI, Alk6/BMPR1B 및 Alk7/ACVR1C를 비롯한 형질 전환 성장 인자 (TGFβ) 슈퍼 패밀리의 리간드에 민감한 수용체의 특정 하위 세트로부터의 신호 전달에 의존적인 것으로 보인다.

액티빈 A는 FOP 섬유 아세포에서 발견된다. FOP의 검증된 마우스 모델에서의 액티빈 A 격리는 후속 병변의 근절을 입증하였다. FOP (Acvr1[R206H])의 마우스 모델에서의 근육 손상은 액티빈 A 차단 항체를 사용하여 완전히 제거될 수 있는 HO를 초래한다 (문헌 [Hatsell et al. Sci Transl Med. Sep 2 2015; 7(303):303ra137]). 항-액티빈 A 중화 항체 REGN2477을 통한 액티빈 A의 약리학적 억제와 함께 FOP HO의 효과적인 약화도 또한 입증되었다 (문헌 [Upadhyay et al., 2017, J Bone Mineral Res 32(12):2489-2499]).

그러나, 최근 문헌은 tHO와 FOP 사이의 대조, 즉, FOP 병변 이면의 주요 구동력으로서 액티빈 A에 의한 순 기능 획득 및 신규 활성화를 부여하는 ACVR1 유전자를 확인하였다.

본 실험은 마우스의 생체내 외상후 HO 모델에서 본 발명의 항-ACVR1 항체 및 항-액티빈 A 항체의 효과를 평가하였다. 구체적으로, 항-ACVR1 항체 mAb27242에 의한 처리 후 외상후 이소성 골화를 마우스에서 마이크로 CT 분석에 의해 측정하였다.

마우스의 재조합 단백질 및 항체 투여

사람 Acvr1 항체 (본 발명에 따른 mAb27242 및 사람 액티빈 A에 대해 생성된 중화 항체 (미국 출원공개 US 2015/0037339))를 사용하였다. 여러 골 형성 BMP를 억제하는 잠재적인 억제 영향을 조사하기 위해 ALK3-Fc를 또한 외상후 HO 형성에서 사용하였다. Alk3-Fc를 CHO 세포에서 내부 자체적으로 생성하고 정제하였다. Alk3-Fc는 사람 IgG1 Fc 도메인 (D104-K330)에 연결된 Alk3 (Swiss Prot# P27037 Q24-R152)의 세포외 도메인으로 이루어진다.

치료 연구의 경우, 그룹 전체에 걸쳐 연령 일치를 보장하기 위해 마우스를 분리하고, 치료를 손상과 동일한 일자에 개시하였다. 마우스 (n=15/그룹)에게 25 mg/kg의 액티빈 A 차단 항체 또는 이소타입 대조군 항체를 매주 피하로 (s.c.) 주사하였다. 두 번째 실험의 경우, 마우스 (n=12/그룹)에게 10 mg/kg의 Acvr1 차단 항체, Alk3-Fc 또는 이소타입 대조군 항체를 s.c. 주사하였다. 적어도 13주의 기간에 걸쳐 생체내 마이크로 CT 이미지화에 의해 HO 형성을 모니터링하였다.

화상/절개 손상 모델

전위성 뼈에 대해 평가된 마우스는 야생형 (WT) C57BL/6J 마우스 (Jackson Laboratories)이었다. 간단히 말하자면, WT 마우스에게 40 mg/kg i.p.으로 5일 동안 타목시펜을 주사하여 모델을 개시하였다. 모든 마우스에게 48 시간 동안 0.06 mg·kg^-1 부프레노르핀으로 이루어진 수술전 진통제를 투여한 후, 흡입 이소플루란으로 마취하고, 진통제 투여로 수술후 면밀히 모니터링하였다. 마우스는 면도한 등 부분에 총 체표면적의 30% 부분 두께의 화상에 이어서 좌측 아킬레스건의 절개를 받았다. 수조에서 60℃로 가열된 금속 블록을 사용하여 등 부분 화상을 유도하고, 18초 동안 연속적으로 등 부분에 적용하였다. HO 알라겐이 3주까지 관찰되었으며, 마이크로 CT로 볼 수 있는 성숙한 골 형성이 9주까지 관찰되었다.

결과

Acvr1 차단 항체 또는 Alk3-Fc는 마우스의 외상후 HO 모델에서 HO를 약화시켰지만, 액티빈 A의 억제는 HO 형성을 변경하지 않는다.

tHO 모델에서 손상 유도와 동시에 시작하여, 마우스에게 이소타입 대조군 (n=12) 또는 항-ACVR (n=12) 항체 또는 Alk3-Fc (n=12)를 투여하였다. 도 1a~1c는 손상 유도와 동시에 시작하여 이소타입 대조군 항체 (원, n=12), ALK3-Fc (사각형, n=12) 또는 Acvr1 항체 (삼각형, n=12) (mAb27242)를 투여받은 마우스에서 마이크로 CT 분석 결과를 도시한 것이다. 총 HO (도 1a), 부착된 HO (도 1b) 및 미부착된 HO (도 1c) 부피를 손상 후 3, 6, 9 및 13주에 마이크로 CT 분석에 의해 측정하였다.

화상/건 절개 손상으로 유도된 야생형 마우스에서, 차단 항체를 사용한 ACVR1 억제는 HO 형성을 40% (13 주차에 3.92 mm³ 대 2.4 mm³ 총 HO) 감소시켰는데, 이는 HO 형성 및 성장을 담당하는 BMP 신호의 적어도 일부가 ACVR1을 통해 전달된다는 것을 입증한다. (도 1a~1c). Acvr1 차단 항체는 수술후 9주까지 이소타입 대조군과 비교하여 총 HO (도 1a) 및 부착된 HO (도 1b)를 유의하게 약화시켰다 (p<0.05). Acvr1 차단 항체는 수술후 13주까지 이소타입 대조군과 비교하여 미부착된 HO (도 1c)를 유의하게 약화시켰다 (p<0.01).

화상/건 절개 손상으로 유도된 야생형 마우스에서, ALK3-Fc는 HO를 60% (13 주차에 3.92 mm³ 대 1.63 mm³ 총 HO) 감소시켰지만 완전히 억제하지는 않았는데, 이는 이전에 공개된 데이터와 일치한다 (문헌 [Agarwal et al. Mol Ther. Aug 2 2017;25(8):1974-87]) (도 1a). Alk3-Fc는 수술후 6주까지 이소타입 대조군과 비교하여 총 HO (도 1a) 및 부착된 HO (도 1b)를 유의하게 약화시켰다 (p<0.05). Alk3-Fc는 또한 수술후 13주까지 이소타입 대조군과 비교하여 미부착된 HO (도 1c)를 유의하게 약화시켰다 (p<0.0001).

총 HO, 부착된 HO (백색 파선으로 둘러싸임) 또는 미부착된 HO (짧은 백색 점선으로 둘러싸임) 부피로 측정될 때 WT 마우스의 손상된 뒷다리에서 HO 부피의 이미지는 도 2a~2c에 도시되어 있다. 마이크로 CT에 의한 HO 부피는 ALK3-Fc (도 2b) 및 Acvr1 항체 (도 2c) 처리된 마우스 모두에서 13주 후에 이소타입 대조군 (도 2a)과 비교하여 유의하게 감소하였다. 총 HO 부피 및 부착된 HO 부피는 각각 Alk3-Fc 및 Acvr1 항체 처리된 그룹에서 손상 후 6 또는 9주까지 유의하게 감소하였다.

또한, 화상/건 절개 손상 모델에서 손상 유도와 동시에 시작하여 액티빈 A (n=15) 항체 또는 이소타입 대조군 (n=15)을 WT 마우스에게 투여하였다. 손상 후 9주에 마이크로 CT에 의해 HO 부피를 측정하였다. 총 부피, 부착된 HO 부피 또는 미부착된 HO 부피로 측정될 때, 손상된 뒷다리의 HO 부피는 처리 그룹 사이에 유의하게 다르지 않았다. 액티빈 A 억제는 HO 형성 또는 성장을 감소시키지 않았다. 부유 및 골 연관 HO의 추가 계층화는 또한 액티빈 A 처리된 동물과 비히클 대조군 처리된 동물 사이의 차이를 나타내지 않았다 (데이터는 표시되지 않음).

본 실시예는 Acvr1 차단 항체가 생체내 외상후 HO 모델에서 HO를 유의하게 약화시킨다는 것을 보여주지만, 항-액티빈 A 항체의 유의한 효과는 관찰되지 않았다.

본 발명은 본 출원에서 기재된 특정 실시 형태들에 의해 범위가 한정되지는 않는다. 실제로, 본 출원에서 기재된 사항들에 추가하여 본 발명의 다양한 변형은 전술한 설명으로부터 당해 분야의 통상의 기술자들에게 명백하게 될 것이다. 이러한 변형들은 첨부된 청구범위내에 포함되는 것으로 의도된다.

<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Idone, Vincent J. Hatsell, Sarah J. Economides, Aris N. <120> ANTI-ACVR1 ANTIBODIES AND USES THEREOF <130> 40848.0101WOU1 <140> New Filing <141> 2021-02-10 <150> US 62/975,047 <151> 2020-02-11 <150> US 63/030,131 <151> 2020-05-26 <160> 342 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 1 caggtgcatc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt aactatggca tacactgggt ccgccaggtt 120 ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaaataa taaatactat 180 ggggactccg tgaagggccg attcaccatc tctagagaca attccaagaa cacactgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag acctgaggac acggctatct attactgtgc gaaagatcgt 300 ggcctggaca cagctggtga ctactttgac tattggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctca 366 <210> 2 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 2 Gln Val His Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Ile His Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Asn Lys Tyr Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Arg Gly Leu Asp Thr Ala Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 3 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 3 ggattcacct tcagtaacta tggc 24 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 4 Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly 1 5 <210> 5 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 5 atatcatatg atggaaataa taaa 24 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 6 Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Asn Lys 1 5 <210> 7 <211> 45 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 7 gcgaaagatc gtggcctgga cacagctggt gactactttg actat 45 <210> 8 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 8 Ala Lys Asp Arg Gly Leu Asp Thr Ala Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 9 <211> 318 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 9 gaaatagtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctacagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gaatattagt agcaaattgg cctggtacca gcagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catttatggt gcatccacca gggcctctgg tatcccagcc 180 agattctggg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag tctgcagtct 240 gaagattttg cagtttttta ctgtctccag tataataact ggtggacgtt cggccaaggg 300 accaaggtgg aaatcaaa 318 <210> 10 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 10 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Thr Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Ser Ser Lys 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Trp Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Leu Gln Tyr Asn Asn Trp Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 11 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 11 cagaatatta gtagcaaa 18 <210> 12 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 12 Gln Asn Ile Ser Ser Lys 1 5 <210> 13 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 13 ggtgcatcc 9 <210> 14 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 14 Gly Ala Ser 1 <210> 15 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 15 ctccagtata ataactggtg gacg 24 <210> 16 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 16 Leu Gln Tyr Asn Asn Trp Trp Thr 1 5 <210> 17 <211> 1350 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 17 caggtgcatc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt aactatggca tacactgggt ccgccaggtt 120 ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcatatg atggaaataa taaatactat 180 ggggactccg tgaagggccg attcaccatc tctagagaca attccaagaa cacactgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag acctgaggac acggctatct attactgtgc gaaagatcgt 300 ggcctggaca cagctggtga ctactttgac tattggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctcagcct ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg cgccctgctc caggagcacc 420 tccgagagca cagccgccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacg 600 aagacctaca cctgcaacgt agatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 660 gagtccaaat atggtccccc atgcccaccc tgcccagcac ctgagttcct ggggggacca 720 tcagtcttcc tgttcccccc aaaacccaag gacactctca tgatctcccg gacccctgag 780 gtcacgtgcg tggtggtgga cgtgagccag gaagaccccg aggtccagtt caactggtac 840 gtggatggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gttcaacagc 900 acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag 960 tacaagtgca aggtctccaa caaaggcctc ccgtcctcca tcgagaaaac catctccaaa 1020 gccaaagggc agccccgaga gccacaggtg tacaccctgc ccccatccca ggaggagatg 1080 accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctaccccag cgacatcgcc 1140 gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1200 gactccgacg gctccttctt cctctacagc aggctcaccg tggacaagag caggtggcag 1260 gaggggaatg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacacag 1320 aagtccctct ccctgtctct gggtaaatga 1350 <210> 18 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 18 Gln Val His Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Ile His Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Asn Lys Tyr Tyr Gly Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Arg Gly Leu Asp Thr Ala Gly Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 19 <211> 642 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 19 gaaatagtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctacagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gaatattagt agcaaattgg cctggtacca gcagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catttatggt gcatccacca gggcctctgg tatcccagcc 180 agattctggg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag tctgcagtct 240 gaagattttg cagtttttta ctgtctccag tataataact ggtggacgtt cggccaaggg 300 accaaggtgg aaatcaaacg aactgtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360 gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420 agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480 agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540 agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600 agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgtt ag 642 <210> 20 <211> 213 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 20 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Thr Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Ile Ser Ser Lys 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Trp Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Leu Gln Tyr Asn Asn Trp Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 21 <211> 345 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 21 caggtgcagc tacagcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcgctg tctataatgg gtccttcagt agttactact ggaactggat ccgccagccc 120 ccggggaagg ggctggagtg gcttggagaa atcaatcata gaggaagcac caactacaac 180 ccgtccctca cgagtcgagt caccatatca gttgacacgt ccaagaacca gttctccctg 240 aagctgacct ctgtgaccgc cgcggacacg gcaatatatt attgtacggc gcatactcgg 300 ggctttctat actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca 345 <210> 22 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 22 Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Asn Gly Ser Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Thr 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Thr 85 90 95 Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 23 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 23 aatgggtcct tcagtagtta ctac 24 <210> 24 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 24 Asn Gly Ser Phe Ser Ser Tyr Tyr 1 5 <210> 25 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 25 atcaatcata gaggaagcac c 21 <210> 26 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 26 Ile Asn His Arg Gly Ser Thr 1 5 <210> 27 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 27 acggcgcata ctcggggctt tctatac 27 <210> 28 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 28 Thr Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr 1 5 <210> 29 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 29 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac atctatttaa attggtatca gcagcaacca 120 gggaaagccc ctaaactcct gatctacgat gtatccaatt tggtaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gtactggatc tgggacacat ttttccttca ccatcagcag cctgcaacct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tatgatgatc tcccgctcac tttcggcgga 300 gggaccacgg tggcgatcag a 321 <210> 30 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 30 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ile Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Val Ser Asn Leu Val Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Thr Gly Ser Gly Thr His Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Asp Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Arg 100 105 <210> 31 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 31 caggacatta acatctat 18 <210> 32 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 32 Gln Asp Ile Asn Ile Tyr 1 5 <210> 33 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 33 gatgtatcc 9 <210> 34 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 34 Asp Val Ser 1 <210> 35 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 35 caacactatg atgatctccc gctcact 27 <210> 36 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 36 Gln His Tyr Asp Asp Leu Pro Leu Thr 1 5 <210> 37 <211> 1329 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 37 caggtgcagc tacagcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcgctg tctataatgg gtccttcagt agttactact ggaactggat ccgccagccc 120 ccggggaagg ggctggagtg gcttggagaa atcaatcata gaggaagcac caactacaac 180 ccgtccctca cgagtcgagt caccatatca gttgacacgt ccaagaacca gttctccctg 240 aagctgacct ctgtgaccgc cgcggacacg gcaatatatt attgtacggc gcatactcgg 300 ggctttctat actggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctcagcctc caccaagggc 360 ccatcggtct tccccctggc gccctgctcc aggagcacct ccgagagcac agccgccctg 420 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 480 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcacga agacctacac ctgcaacgta 600 gatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagagagttg agtccaaata tggtccccca 660 tgcccaccct gcccagcacc tgagttcctg gggggaccat cagtcttcct gttcccccca 720 aaacccaagg acactctcat gatctcccgg acccctgagg tcacgtgcgt ggtggtggac 780 gtgagccagg aagaccccga ggtccagttc aactggtacg tggatggcgt ggaggtgcat 840 aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag ttcaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 900 ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaac ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 960 aaaggcctcc cgtcctccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagag 1020 ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccag gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg 1080 acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1140 cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1200 ctctacagca ggctcaccgt ggacaagagc aggtggcagg aggggaatgt cttctcatgc 1260 tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacacaga agtccctctc cctgtctctg 1320 ggtaaatga 1329 <210> 38 <211> 442 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 38 Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Asn Gly Ser Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Thr 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Thr 85 90 95 Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 39 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 39 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac atctatttaa attggtatca gcagcaacca 120 gggaaagccc ctaaactcct gatctacgat gtatccaatt tggtaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gtactggatc tgggacacat ttttccttca ccatcagcag cctgcaacct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tatgatgatc tcccgctcac tttcggcgga 300 gggaccacgg tggcgatcag acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 40 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 40 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ile Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Gln Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Val Ser Asn Leu Val Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Thr Gly Ser Gly Thr His Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Asp Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Arg Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 41 <211> 345 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 41 caggtgcagc tacagcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcgctg tctataatgg gtccttcagt agtttctact ggagctggat ccgccagccc 120 ccggggaagg ggctggagtg gcttggggaa atcaatcata gaggaagaac caacaacaac 180 ccgtccctcg cgagtcgagt caccatatca gttgacacgt ccaagagcca gttctccctg 240 aggctgacct ctgtgaccgc cgcggacacg gctacatatt attgtacggc gcatactcgg 300 ggctttctat actggggcca gggaacccgg gtcaccgtct cctca 345 <210> 42 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 42 Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Asn Gly Ser Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Arg Thr Asn Asn Asn Pro Ser Leu Ala 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Arg Leu Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Thr 85 90 95 Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Arg Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 43 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 43 aatgggtcct tcagtagttt ctac 24 <210> 44 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 44 Asn Gly Ser Phe Ser Ser Phe Tyr 1 5 <210> 45 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 45 atcaatcata gaggaagaac c 21 <210> 46 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 46 Ile Asn His Arg Gly Arg Thr 1 5 <210> 47 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 47 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggcaagccc ctaacctcct gatctacgat gtatttaatt tactaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat ttttccttca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tatgatgatc tcccgctcac tttcggcggc 300 gggaccacgg tggcgatcag a 321 <210> 48 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 48 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Asn Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Val Phe Asn Leu Leu Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Asp Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Arg 100 105 <210> 49 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 49 caggacatta acaactat 18 <210> 50 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 50 Gln Asp Ile Asn Asn Tyr 1 5 <210> 51 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 51 gatgtattt 9 <210> 52 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 52 Asp Val Phe 1 <210> 53 <211> 1329 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 53 caggtgcagc tacagcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcgctg tctataatgg gtccttcagt agtttctact ggagctggat ccgccagccc 120 ccggggaagg ggctggagtg gcttggggaa atcaatcata gaggaagaac caacaacaac 180 ccgtccctcg cgagtcgagt caccatatca gttgacacgt ccaagagcca gttctccctg 240 aggctgacct ctgtgaccgc cgcggacacg gctacatatt attgtacggc gcatactcgg 300 ggctttctat actggggcca gggaacccgg gtcaccgtct cctcagcctc caccaagggc 360 ccatcggtct tccccctggc gccctgctcc aggagcacct ccgagagcac agccgccctg 420 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 480 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcacga agacctacac ctgcaacgta 600 gatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagagagttg agtccaaata tggtccccca 660 tgcccaccct gcccagcacc tgagttcctg gggggaccat cagtcttcct gttcccccca 720 aaacccaagg acactctcat gatctcccgg acccctgagg tcacgtgcgt ggtggtggac 780 gtgagccagg aagaccccga ggtccagttc aactggtacg tggatggcgt ggaggtgcat 840 aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag ttcaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 900 ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaac ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 960 aaaggcctcc cgtcctccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagag 1020 ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccag gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg 1080 acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1140 cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1200 ctctacagca ggctcaccgt ggacaagagc aggtggcagg aggggaatgt cttctcatgc 1260 tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacacaga agtccctctc cctgtctctg 1320 ggtaaatga 1329 <210> 54 <211> 442 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 54 Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Asn Gly Ser Phe Ser Ser Phe 20 25 30 Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Arg Thr Asn Asn Asn Pro Ser Leu Ala 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Arg Leu Thr Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Thr 85 90 95 Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Arg Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 55 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 55 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggcaagccc ctaacctcct gatctacgat gtatttaatt tactaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat ttttccttca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tatgatgatc tcccgctcac tttcggcggc 300 gggaccacgg tggcgatcag acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 56 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 56 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Asn Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Val Phe Asn Leu Leu Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Asp Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Arg Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 57 <211> 345 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 57 caggtgcagc tacagcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcgctg tctataatgg gtccttcagt agttactact ggagctggat ccgccagccc 120 ccggggaagg gactggagtg gcttggggaa atcaatcata gaggaagaac caactacaac 180 ccgtccctca cgagtcgagt caccatttca gttgacacgt ccaagaacca gttctccctg 240 aagctgccct ctgtgaccgc cgcagacacg gccatatatt attgttcggc acatactcgg 300 ggctttctat attggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca 345 <210> 58 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 58 Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Asn Gly Ser Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Thr 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Pro Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 59 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 59 tcggcacata ctcggggctt tctatat 27 <210> 60 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 60 Ser Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr 1 5 <210> 61 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 61 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgttggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggtaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gtactggatc tgggacagat ttttccttca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tattatgatc tcccgctcac tttcggcgga 300 gggaccacgg tggcgatcag c 321 <210> 62 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 62 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Ser 100 105 <210> 63 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 63 gatgcatcc 9 <210> 64 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 64 Asp Ala Ser 1 <210> 65 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 65 caacactatt atgatctccc gctcact 27 <210> 66 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 66 Gln His Tyr Tyr Asp Leu Pro Leu Thr 1 5 <210> 67 <211> 1329 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 67 caggtgcagc tacagcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcgctg tctataatgg gtccttcagt agttactact ggagctggat ccgccagccc 120 ccggggaagg gactggagtg gcttggggaa atcaatcata gaggaagaac caactacaac 180 ccgtccctca cgagtcgagt caccatttca gttgacacgt ccaagaacca gttctccctg 240 aagctgccct ctgtgaccgc cgcagacacg gccatatatt attgttcggc acatactcgg 300 ggctttctat attggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctcagcctc caccaagggc 360 ccatcggtct tccccctggc gccctgctcc aggagcacct ccgagagcac agccgccctg 420 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 480 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcacga agacctacac ctgcaacgta 600 gatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagagagttg agtccaaata tggtccccca 660 tgcccaccct gcccagcacc tgagttcctg gggggaccat cagtcttcct gttcccccca 720 aaacccaagg acactctcat gatctcccgg acccctgagg tcacgtgcgt ggtggtggac 780 gtgagccagg aagaccccga ggtccagttc aactggtacg tggatggcgt ggaggtgcat 840 aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag ttcaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 900 ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaac ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 960 aaaggcctcc cgtcctccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagag 1020 ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccag gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg 1080 acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1140 cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1200 ctctacagca ggctcaccgt ggacaagagc aggtggcagg aggggaatgt cttctcatgc 1260 tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacacaga agtccctctc cctgtctctg 1320 ggtaaatga 1329 <210> 68 <211> 442 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 68 Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Asn Gly Ser Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Gly Glu Ile Asn His Arg Gly Arg Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Thr 50 55 60 Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Pro Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Ala His Thr Arg Gly Phe Leu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 69 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 69 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgttggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggtaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gtactggatc tgggacagat ttttccttca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tattatgatc tcccgctcac tttcggcgga 300 gggaccacgg tggcgatcag ccgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 70 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 70 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Ser Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 71 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 71 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggtaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gtactggatc tgggacagat ttttccttca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tattatgatc tcccgctcac tttcggcgga 300 gggaccacgg tggcgatcag a 321 <210> 72 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 72 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Arg 100 105 <210> 73 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 73 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggcgagtca ggacattaac aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggtaccggg ggtcccatca 180 aggttcagtg gtactggatc tgggacagat ttttccttca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatattg caacatatta ctgtcaacac tattatgatc tcccgctcac tttcggcgga 300 gggaccacgg tggcgatcag acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 74 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 74 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Asp Leu Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Thr Val Ala Ile Arg Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 75 <211> 348 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 75 gaaatacaac tggtagagtc tgggggtgac ttggtccagc ctggggggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactctgcta tgcactgggt ccgccaggct 120 tccgggaaag ggctggagtg ggttggccgt attagaaaca aagctaacac ttacgcgaca 180 tcatacgctg cgtcggtgaa aggcaggttc accgtctcca cagatgattc aaagaccacg 240 gcgtatctgc agatgagata cctgaaaatc gaggacacgg ccatctatta ctgtactagt 300 gaccaatttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcctca 348 <210> 76 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 76 Glu Ile Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 20 25 30 Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Arg Ile Arg Asn Lys Ala Asn Thr Tyr Ala Thr Ser Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Thr Asp Asp Ser Lys Thr Thr 65 70 75 80 Ala Tyr Leu Gln Met Arg Tyr Leu Lys Ile Glu Asp Thr Ala Ile Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Ser Asp Gln Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 77 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 77 ggattcacct tcagtgactc tgct 24 <210> 78 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 78 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser Ala 1 5 <210> 79 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 79 attagaaaca aagctaacac ttacgcgaca 30 <210> 80 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 80 Ile Arg Asn Lys Ala Asn Thr Tyr Ala Thr 1 5 10 <210> 81 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 81 actagtgacc aatttgacta c 21 <210> 82 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 82 Thr Ser Asp Gln Phe Asp 1 5 <210> 83 <211> 336 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 83 gatgttgtga tgactcagtc tccactctcc ctgtccgcca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta tacagtgatg gaatcaccta cttgacttgg 120 tttcaacaga ggccaggcca atctccaacg cgcctgattt atcaggtttc taaccgggac 180 tctggagtcc cagacagatt caacggcagt gggtcaggca ctgattttac actgaacatc 240 agcagggtgg aggctgaaga tgttggattt tattactgca tggaaggaac acactggccg 300 tggacgttcg gccaagggac caaggtggag ctcaaa 336 <210> 84 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 84 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Ser Ala Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Thr Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Thr Arg Leu Ile Tyr Gln Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Asn Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Phe Tyr Tyr Cys Met Glu Gly 85 90 95 Thr His Trp Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys 100 105 110 <210> 85 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 85 caaagcctcg tatacagtga tggaatcacc tac 33 <210> 86 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 86 Gln Ser Leu Val Tyr Ser Asp Gly Ile Thr Tyr 1 5 10 <210> 87 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 87 caggtttct 9 <210> 88 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 88 Gln Val Ser 1 <210> 89 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 89 atggaaggaa cacactggcc gtggacg 27 <210> 90 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 90 Met Glu Gly Thr His Trp Pro Trp Thr 1 5 <210> 91 <211> 1332 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 91 gaaatacaac tggtagagtc tgggggtgac ttggtccagc ctggggggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactctgcta tgcactgggt ccgccaggct 120 tccgggaaag ggctggagtg ggttggccgt attagaaaca aagctaacac ttacgcgaca 180 tcatacgctg cgtcggtgaa aggcaggttc accgtctcca cagatgattc aaagaccacg 240 gcgtatctgc agatgagata cctgaaaatc gaggacacgg ccatctatta ctgtactagt 300 gaccaatttg actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcctcagc ctccaccaag 360 ggcccatcgg tcttccccct ggcgccctgc tccaggagca cctccgagag cacagccgcc 420 ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 480 gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 540 ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cgaagaccta cacctgcaac 600 gtagatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagagag ttgagtccaa atatggtccc 660 ccatgcccac cctgcccagc acctgagttc ctggggggac catcagtctt cctgttcccc 720 ccaaaaccca aggacactct catgatctcc cggacccctg aggtcacgtg cgtggtggtg 780 gacgtgagcc aggaagaccc cgaggtccag ttcaactggt acgtggatgg cgtggaggtg 840 cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagttcaaca gcacgtaccg tgtggtcagc 900 gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aacggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 960 aacaaaggcc tcccgtcctc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga 1020 gagccacagg tgtacaccct gcccccatcc caggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc 1080 ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 1140 gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgc tggactccga cggctccttc 1200 ttcctctaca gcaggctcac cgtggacaag agcaggtggc aggaggggaa tgtcttctca 1260 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacac agaagtccct ctccctgtct 1320 ctgggtaaat ga 1332 <210> 92 <211> 443 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 92 Glu Ile Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Ser 20 25 30 Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Arg Ile Arg Asn Lys Ala Asn Thr Tyr Ala Thr Ser Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Thr Asp Asp Ser Lys Thr Thr 65 70 75 80 Ala Tyr Leu Gln Met Arg Tyr Leu Lys Ile Glu Asp Thr Ala Ile Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Ser Asp Gln Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125 Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 165 170 175 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190 Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205 Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 225 230 235 240 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 245 250 255 Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn 260 265 270 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 275 280 285 Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 290 295 300 Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 305 310 315 320 Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 325 330 335 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu 340 345 350 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 355 360 365 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 370 375 380 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 385 390 395 400 Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly 405 410 415 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 420 425 430 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 93 <211> 660 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 93 gatgttgtga tgactcagtc tccactctcc ctgtccgcca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta tacagtgatg gaatcaccta cttgacttgg 120 tttcaacaga ggccaggcca atctccaacg cgcctgattt atcaggtttc taaccgggac 180 tctggagtcc cagacagatt caacggcagt gggtcaggca ctgattttac actgaacatc 240 agcagggtgg aggctgaaga tgttggattt tattactgca tggaaggaac acactggccg 300 tggacgttcg gccaagggac caaggtggag ctcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360 ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420 ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480 tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540 agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600 gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttag 660 <210> 94 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 94 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Ser Ala Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Ile Thr Tyr Leu Thr Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Thr Arg Leu Ile Tyr Gln Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Asn Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Phe Tyr Tyr Cys Met Glu Gly 85 90 95 Thr His Trp Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Leu Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 95 <211> 342 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 95 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactata tgagttggat ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg gatttctttt attagtagaa ctggtagtac caaatactac 180 gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagaa ttcactgaat 240 ctacaaatga gcagcctgag agccgaggac acggccgtgt atttctgtgc gagagagcca 300 ctacaacact ggggccaggg caccctggtt accgtctcct ca 342 <210> 96 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 96 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Ser Phe Ile Ser Arg Thr Gly Ser Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Asn 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Pro Leu Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 97 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 97 ggattcacct tcagtgacta ctat 24 <210> 98 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 98 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr 1 5 <210> 99 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 99 attagtagaa ctggtagtac caaa 24 <210> 100 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 100 Ile Ser Arg Thr Gly Ser Thr Lys 1 5 <210> 101 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 101 gcgagagagc cactacaaca c 21 <210> 102 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 102 Ala Arg Glu Pro Leu Gln His 1 5 <210> 103 <211> 339 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 103 aatgttgtgc tgacccagac tccaatttcc tcacctgtca tccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta cacagtgatg gagacaccta cttgagttgg 120 cttcatcaga ggccaggcca gcctccaaga ctcctaattt atacggtttc taaccgggtg 180 tctggggtcc cagacagatt cagtggcagt ggggcaggga cagatttcac actgaaaatc 240 agtagggtgg aagctgagga tgtcggggtt tattactgca tgcaaggaac acaatttccc 300 gcgctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaa 339 <210> 104 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 104 Asn Val Val Leu Thr Gln Thr Pro Ile Ser Ser Pro Val Ile Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Ser Trp Leu His Gln Arg Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Val Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Thr Gln Phe Pro Ala Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 105 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 105 caaagcctcg tacacagtga tggagacacc tac 33 <210> 106 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 106 Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asp Thr Tyr 1 5 10 <210> 107 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 107 acggtttct 9 <210> 108 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 108 Thr Val Ser 1 <210> 109 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 109 atgcaaggaa cacaatttcc cgcgctcact 30 <210> 110 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 110 Met Gln Gly Thr Gln Phe Pro Ala Leu Thr 1 5 10 <210> 111 <211> 1326 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 111 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactata tgagttggat ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg gatttctttt attagtagaa ctggtagtac caaatactac 180 gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagaa ttcactgaat 240 ctacaaatga gcagcctgag agccgaggac acggccgtgt atttctgtgc gagagagcca 300 ctacaacact ggggccaggg caccctggtt accgtctcct cagcctccac caagggccca 360 tcggtcttcc ccctggcgcc ctgctccagg agcacctccg agagcacagc cgccctgggc 420 tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg 480 accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc ctacagtcct caggactcta ctccctcagc 540 agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg ggcacgaaga cctacacctg caacgtagat 600 cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag agagttgagt ccaaatatgg tcccccatgc 660 ccaccctgcc cagcacctga gttcctgggg ggaccatcag tcttcctgtt ccccccaaaa 720 cccaaggaca ctctcatgat ctcccggacc cctgaggtca cgtgcgtggt ggtggacgtg 780 agccaggaag accccgaggt ccagttcaac tggtacgtgg atggcgtgga ggtgcataat 840 gccaagacaa agccgcggga ggagcagttc aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 900 accgtcctgc accaggactg gctgaacggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 960 ggcctcccgt cctccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagagcca 1020 caggtgtaca ccctgccccc atcccaggag gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc 1080 tgcctggtca aaggcttcta ccccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1140 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc 1200 tacagcaggc tcaccgtgga caagagcagg tggcaggagg ggaatgtctt ctcatgctcc 1260 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acacagaagt ccctctccct gtctctgggt 1320 aaatga 1326 <210> 112 <211> 441 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 112 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Ser Phe Ile Ser Arg Thr Gly Ser Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Asn 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Pro Leu Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys 115 120 125 Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys 130 135 140 Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu 145 150 155 160 Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr 180 185 190 Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 210 215 220 Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 225 230 235 240 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 245 250 255 Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 260 265 270 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 275 280 285 Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 290 295 300 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 305 310 315 320 Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln 325 330 335 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met 340 345 350 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 355 360 365 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 370 375 380 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 385 390 395 400 Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val 405 410 415 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 420 425 430 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 113 <211> 663 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 113 aatgttgtgc tgacccagac tccaatttcc tcacctgtca tccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta cacagtgatg gagacaccta cttgagttgg 120 cttcatcaga ggccaggcca gcctccaaga ctcctaattt atacggtttc taaccgggtg 180 tctggggtcc cagacagatt cagtggcagt ggggcaggga cagatttcac actgaaaatc 240 agtagggtgg aagctgagga tgtcggggtt tattactgca tgcaaggaac acaatttccc 300 gcgctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaac gaactgtggc tgcaccatct 360 gtcttcatct tcccgccatc tgatgagcag ttgaaatctg gaactgcctc tgttgtgtgc 420 ctgctgaata acttctatcc cagagaggcc aaagtacagt ggaaggtgga taacgccctc 480 caatcgggta actcccagga gagtgtcaca gagcaggaca gcaaggacag cacctacagc 540 ctcagcagca ccctgacgct gagcaaagca gactacgaga aacacaaagt ctacgcctgc 600 gaagtcaccc atcagggcct gagctcgccc gtcacaaaga gcttcaacag gggagagtgt 660 tag 663 <210> 114 <211> 220 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 114 Asn Val Val Leu Thr Gln Thr Pro Ile Ser Ser Pro Val Ile Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Ser Trp Leu His Gln Arg Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Thr Val Ser Asn Arg Val Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Thr Gln Phe Pro Ala Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 115 120 125 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 130 135 140 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 145 150 155 160 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 165 170 175 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 180 185 190 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 195 200 205 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 220 <210> 115 <211> 342 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 115 caggtgcagc tggttgagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct 120 ccagggaagg gactggagtg ggtttcatat attagtagaa ctggtagtac caaatattac 180 gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaaaaa ctcactgaat 240 ctacaaatga gcagcctgag agccgaggac acggccgtgt atttctgtgc gagagagcca 300 ctacaacact ggggccaggg caccctggtt accgtctcct ca 342 <210> 116 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 116 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Arg Thr Gly Ser Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Asn 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Pro Leu Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 117 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 117 ggattcacct tcagtgacta ctac 24 <210> 118 <211> 339 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 118 aaaattgtgc tgacccagac tccactctcc tcacctgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagccttgta cacagtgatg gagacaccta cttgagttgg 120 cttcaccaga ggccaggcca gcctccaaga ctcctaatat atacgatttc taaccggttg 180 tctggggtcc cagacagatt cagtggcagt ggggcaggga cagatttcac actgaaaatc 240 agtagggtgg aagctgagga tgtcggggtt tattactgca tgcaaggaac acaatttccc 300 gcgctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaa 339 <210> 119 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 119 Lys Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Ser Trp Leu His Gln Arg Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Thr Ile Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Thr Gln Phe Pro Ala Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 120 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 120 caaagccttg tacacagtga tggagacacc tac 33 <210> 121 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 121 acgatttct 9 <210> 122 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 122 Thr Ile Ser 1 <210> 123 <211> 1326 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 123 caggtgcagc tggttgagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct 120 ccagggaagg gactggagtg ggtttcatat attagtagaa ctggtagtac caaatattac 180 gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaaaaa ctcactgaat 240 ctacaaatga gcagcctgag agccgaggac acggccgtgt atttctgtgc gagagagcca 300 ctacaacact ggggccaggg caccctggtt accgtctcct cagcctccac caagggccca 360 tcggtcttcc ccctggcgcc ctgctccagg agcacctccg agagcacagc cgccctgggc 420 tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg 480 accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc ctacagtcct caggactcta ctccctcagc 540 agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg ggcacgaaga cctacacctg caacgtagat 600 cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag agagttgagt ccaaatatgg tcccccatgc 660 ccaccctgcc cagcacctga gttcctgggg ggaccatcag tcttcctgtt ccccccaaaa 720 cccaaggaca ctctcatgat ctcccggacc cctgaggtca cgtgcgtggt ggtggacgtg 780 agccaggaag accccgaggt ccagttcaac tggtacgtgg atggcgtgga ggtgcataat 840 gccaagacaa agccgcggga ggagcagttc aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 900 accgtcctgc accaggactg gctgaacggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 960 ggcctcccgt cctccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagagcca 1020 caggtgtaca ccctgccccc atcccaggag gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc 1080 tgcctggtca aaggcttcta ccccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1140 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc 1200 tacagcaggc tcaccgtgga caagagcagg tggcaggagg ggaatgtctt ctcatgctcc 1260 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acacagaagt ccctctccct gtctctgggt 1320 aaatga 1326 <210> 124 <211> 441 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 124 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr Ile Ser Arg Thr Gly Ser Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Asn 65 70 75 80 Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys 85 90 95 Ala Arg Glu Pro Leu Gln His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys 115 120 125 Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys 130 135 140 Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu 145 150 155 160 Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr 180 185 190 Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 210 215 220 Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 225 230 235 240 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 245 250 255 Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 260 265 270 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 275 280 285 Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 290 295 300 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 305 310 315 320 Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln 325 330 335 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met 340 345 350 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 355 360 365 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 370 375 380 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 385 390 395 400 Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val 405 410 415 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 420 425 430 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 125 <211> 663 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 125 aaaattgtgc tgacccagac tccactctcc tcacctgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagccttgta cacagtgatg gagacaccta cttgagttgg 120 cttcaccaga ggccaggcca gcctccaaga ctcctaatat atacgatttc taaccggttg 180 tctggggtcc cagacagatt cagtggcagt ggggcaggga cagatttcac actgaaaatc 240 agtagggtgg aagctgagga tgtcggggtt tattactgca tgcaaggaac acaatttccc 300 gcgctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaac gaactgtggc tgcaccatct 360 gtcttcatct tcccgccatc tgatgagcag ttgaaatctg gaactgcctc tgttgtgtgc 420 ctgctgaata acttctatcc cagagaggcc aaagtacagt ggaaggtgga taacgccctc 480 caatcgggta actcccagga gagtgtcaca gagcaggaca gcaaggacag cacctacagc 540 ctcagcagca ccctgacgct gagcaaagca gactacgaga aacacaaagt ctacgcctgc 600 gaagtcaccc atcagggcct gagctcgccc gtcacaaaga gcttcaacag gggagagtgt 660 tag 663 <210> 126 <211> 220 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 126 Lys Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Ser Trp Leu His Gln Arg Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Thr Ile Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Thr Gln Phe Pro Ala Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 115 120 125 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 130 135 140 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 145 150 155 160 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 165 170 175 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 180 185 190 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 195 200 205 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 220 <210> 127 <211> 345 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 127 gagatgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc gctgaaagtc 60 tcctgtgcag cctctgggtt caccctcagt gactcttcta tacactgggt ccgccaggct 120 tccgggaaag ggctggagtg gattggccgt atcagaagca aaccttacag ttacgcgaca 180 gcatatgctg cgtcggtgaa aggcaggttc accatttcta gagatgattc aaagaacacg 240 gcgtttctgc aaatgagcgg cctgaaaacc gaggacacgg ccgtctatta ttgtactggg 300 ggggatgact tctggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctca 345 <210> 128 <211> 115 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 128 Glu Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Val Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Ser 20 25 30 Ser Ile His Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Arg Ser Lys Pro Tyr Ser Tyr Ala Thr Ala Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Ala Phe Leu Gln Met Ser Gly Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Gly Gly Asp Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 129 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 129 gggttcaccc tcagtgactc ttct 24 <210> 130 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 130 Gly Phe Thr Leu Ser Asp Ser Ser 1 5 <210> 131 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 131 atcagaagca aaccttacag ttacgcgaca 30 <210> 132 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 132 Ile Arg Ser Lys Pro Tyr Ser Tyr Ala Thr 1 5 10 <210> 133 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 133 actggggggg atgacttc 18 <210> 134 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 134 Thr Gly Gly Asp Asp Phe 1 5 <210> 135 <211> 318 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 135 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgttggaga cagaatcacc 60 atcacttgcc gggccagtca gagtattagt acttggttgg cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctataag gcgtctagtt tagaaggtgg ggtcccttca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttatta ctgccaacaa tataatactt attggacgtt cggccaaggg 300 accaaggtgg aaatcaaa 318 <210> 136 <211> 106 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 136 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 137 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 137 cagagtatta gtacttgg 18 <210> 138 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 138 Gln Ser Ile Ser Thr Trp 1 5 <210> 139 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 139 aaggcgtct 9 <210> 140 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 140 Lys Ala Ser 1 <210> 141 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 141 caacaatata atacttattg gacg 24 <210> 142 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 142 Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Trp Thr 1 5 <210> 143 <211> 1329 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 143 gagatgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc gctgaaagtc 60 tcctgtgcag cctctgggtt caccctcagt gactcttcta tacactgggt ccgccaggct 120 tccgggaaag ggctggagtg gattggccgt atcagaagca aaccttacag ttacgcgaca 180 gcatatgctg cgtcggtgaa aggcaggttc accatttcta gagatgattc aaagaacacg 240 gcgtttctgc aaatgagcgg cctgaaaacc gaggacacgg ccgtctatta ttgtactggg 300 ggggatgact tctggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctcagcctc caccaagggc 360 ccatcggtct tccccctggc gccctgctcc aggagcacct ccgagagcac agccgccctg 420 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 480 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcacga agacctacac ctgcaacgta 600 gatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagagagttg agtccaaata tggtccccca 660 tgcccaccct gcccagcacc tgagttcctg gggggaccat cagtcttcct gttcccccca 720 aaacccaagg acactctcat gatctcccgg acccctgagg tcacgtgcgt ggtggtggac 780 gtgagccagg aagaccccga ggtccagttc aactggtacg tggatggcgt ggaggtgcat 840 aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag ttcaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 900 ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaac ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 960 aaaggcctcc cgtcctccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagag 1020 ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccag gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg 1080 acctgcctgg tcaaaggctt ctaccccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1140 cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1200 ctctacagca ggctcaccgt ggacaagagc aggtggcagg aggggaatgt cttctcatgc 1260 tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacacaga agtccctctc cctgtctctg 1320 ggtaaatga 1329 <210> 144 <211> 442 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 144 Glu Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Val Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Ser 20 25 30 Ser Ile His Trp Val Arg Gln Ala Ser Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Arg Ile Arg Ser Lys Pro Tyr Ser Tyr Ala Thr Ala Tyr Ala Ala 50 55 60 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr 65 70 75 80 Ala Phe Leu Gln Met Ser Gly Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr 85 90 95 Tyr Cys Thr Gly Gly Asp Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 145 <211> 642 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 145 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgttggaga cagaatcacc 60 atcacttgcc gggccagtca gagtattagt acttggttgg cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctataag gcgtctagtt tagaaggtgg ggtcccttca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttatta ctgccaacaa tataatactt attggacgtt cggccaaggg 300 accaaggtgg aaatcaaacg aactgtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360 gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420 agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480 agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540 agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600 agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgtt ag 642 <210> 146 <211> 213 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 146 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Thr Trp 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Lys Ala Ser Ser Leu Glu Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Thr Tyr Trp Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro 100 105 110 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr 115 120 125 Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys 130 135 140 Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu 145 150 155 160 Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser 165 170 175 Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala 180 185 190 Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe 195 200 205 Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 147 <211> 363 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 147 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gatcccgtat 300 aactggaact acggaggggc ttttgatatc tggggccaag ggacaatggt caccgtctct 360 tca 363 <210> 148 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 148 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ile Pro Tyr Asn Trp Asn Tyr Gly Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 149 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 149 ggattcacct ttagcagcta tgcc 24 <210> 150 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 150 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala 1 5 <210> 151 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 151 attagtggta gtggtggtag caca 24 <210> 152 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 152 Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr 1 5 <210> 153 <211> 42 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 153 gcgatcccgt ataactggaa ctacggaggg gcttttgata tc 42 <210> 154 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 154 Ala Ile Pro Tyr Asn Trp Asn Tyr Gly Gly Ala Phe Asp Ile 1 5 10 <210> 155 <211> 324 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 155 gaaattgtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggaa aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagt agtaacttag cctggtacca gcagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccacca gggccactgg tatcccagcc 180 aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240 gaagattttg cagtttatta ctgtcaacag tataataact ggcctccgta cacttttggc 300 caggggacca agctggagat caaa 324 <210> 156 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 156 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Trp Pro Pro 85 90 95 Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 157 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 157 cagagtgtta gtagtaac 18 <210> 158 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 158 Gln Ser Val Ser Ser Asn 1 5 <210> 159 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 159 caacagtata ataactggcc tccgtacact 30 <210> 160 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 160 Gln Gln Tyr Asn Asn Trp Pro Pro Tyr Thr 1 5 10 <210> 161 <211> 1347 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 161 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gatcccgtat 300 aactggaact acggaggggc ttttgatatc tggggccaag ggacaatggt caccgtctct 360 tcagcctcca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcgc cctgctccag gagcacctcc 420 gagagcacag ccgccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacgaag 600 acctacacct gcaacgtaga tcacaagccc agcaacacca aggtggacaa gagagttgag 660 tccaaatatg gtcccccatg cccaccctgc ccagcacctg agttcctggg gggaccatca 720 gtcttcctgt tccccccaaa acccaaggac actctcatga tctcccggac ccctgaggtc 780 acgtgcgtgg tggtggacgt gagccaggaa gaccccgagg tccagttcaa ctggtacgtg 840 gatggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagtt caacagcacg 900 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaacgg caaggagtac 960 aagtgcaagg tctccaacaa aggcctcccg tcctccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1020 aaagggcagc cccgagagcc acaggtgtac accctgcccc catcccagga ggagatgacc 1080 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct accccagcga catcgccgtg 1140 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1200 tccgacggct ccttcttcct ctacagcagg ctcaccgtgg acaagagcag gtggcaggag 1260 gggaatgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacacagaag 1320 tccctctccc tgtctctggg taaatga 1347 <210> 162 <211> 448 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 162 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Ile Pro Tyr Asn Trp Asn Tyr Gly Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 163 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 163 gaaattgtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggaa aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagt agtaacttag cctggtacca gcagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccacca gggccactgg tatcccagcc 180 aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240 gaagattttg cagtttatta ctgtcaacag tataataact ggcctccgta cacttttggc 300 caggggacca agctggagat caaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 164 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 164 Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly 1 5 10 15 Lys Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Trp Pro Pro 85 90 95 Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 165 <211> 357 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 165 caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtgttgg cacaaacttt 180 gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240 atggaactga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtac gagagatggg 300 gcagcagctg gcctctttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357 <210> 166 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 166 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Val Gly Thr Asn Phe Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Asp Gly Ala Ala Ala Gly Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 167 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 167 ggatacacct tcaccggcta ctat 24 <210> 168 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 168 Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr 1 5 <210> 169 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 169 atcaacccta acagtgttgg caca 24 <210> 170 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 170 Ile Asn Pro Asn Ser Val Gly Thr 1 5 <210> 171 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 171 acgagagatg gggcagcagc tggcctcttt gactac 36 <210> 172 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 172 Thr Arg Asp Gly Ala Ala Ala Gly Leu Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 173 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 173 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcgagtca gggcattaac aattatttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagttc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180 cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaag tttaacagtg ccccgctcac tttcggcgga 300 gggaccaagg tggagatcaa a 321 <210> 174 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 174 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Phe Asn Ser Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 175 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 175 cagggcatta acaattat 18 <210> 176 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 176 Gln Gly Ile Asn Asn Tyr 1 5 <210> 177 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 177 gctgcatcc 9 <210> 178 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 178 Ala Ala Ser 1 <210> 179 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 179 caaaagttta acagtgcccc gctcact 27 <210> 180 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 180 Gln Lys Phe Asn Ser Ala Pro Leu Thr 1 5 <210> 181 <211> 1341 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 181 caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtgttgg cacaaacttt 180 gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240 atggaactga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtac gagagatggg 300 gcagcagctg gcctctttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcagcc 360 tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcgccctgct ccaggagcac ctccgagagc 420 acagccgccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 480 aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 540 ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac gaagacctac 600 acctgcaacg tagatcacaa gcccagcaac accaaggtgg acaagagagt tgagtccaaa 660 tatggtcccc catgcccacc ctgcccagca cctgagttcc tggggggacc atcagtcttc 720 ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 780 gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc 840 gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt 900 gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 960 aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 1020 cagccccgag agccacaggt gtacaccctg cccccatccc aggaggagat gaccaagaac 1080 caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 1140 gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac 1200 ggctccttct tcctctacag caggctcacc gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat 1260 gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca gaagtccctc 1320 tccctgtctc tgggtaaatg a 1341 <210> 182 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 182 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr 20 25 30 Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Val Gly Thr Asn Phe Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Asp Gly Ala Ala Ala Gly Leu Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 183 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 183 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcgagtca gggcattaac aattatttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagttc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180 cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaag tttaacagtg ccccgctcac tttcggcgga 300 gggaccaagg tggagatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 184 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 184 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Lys Phe Asn Ser Ala Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 185 <211> 348 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 185 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc acctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga agagcctgag agtcgaggac acggccgtat attactgtgc gaattcccca 300 tcctggttcg acccctgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcctca 348 <210> 186 <211> 116 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 186 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Lys Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Asn Ser Pro Ser Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser 115 <210> 187 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 187 ggattcacct ttagcaccta tgcc 24 <210> 188 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 188 Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Ala 1 5 <210> 189 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 189 attagtggta gtggtggtag taca 24 <210> 190 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 190 gcgaattccc catcctggtt cgacccc 27 <210> 191 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 191 Ala Asn Ser Pro Ser Trp Phe Asp Pro 1 5 <210> 192 <211> 324 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 192 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccgtca 180 aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta cccctccgat caccttcggc 300 caagggacac gactggagat taaa 324 <210> 193 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 193 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 194 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 194 cagagcatta gcagctat 18 <210> 195 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 195 Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 1 5 <210> 196 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 196 caacagagtt acagtacccc tccgatcacc 30 <210> 197 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 197 Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro Ile Thr 1 5 10 <210> 198 <211> 1332 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 198 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc acctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga agagcctgag agtcgaggac acggccgtat attactgtgc gaattcccca 300 tcctggttcg acccctgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcctcagc ctccaccaag 360 ggcccatcgg tcttccccct ggcgccctgc tccaggagca cctccgagag cacagccgcc 420 ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc 480 gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg gctgtcctac agtcctcagg actctactcc 540 ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc agcttgggca cgaagaccta cacctgcaac 600 gtagatcaca agcccagcaa caccaaggtg gacaagagag ttgagtccaa atatggtccc 660 ccatgcccac cctgcccagc acctgagttc ctggggggac catcagtctt cctgttcccc 720 ccaaaaccca aggacactct catgatctcc cggacccctg aggtcacgtg cgtggtggtg 780 gacgtgagcc aggaagaccc cgaggtccag ttcaactggt acgtggatgg cgtggaggtg 840 cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagttcaaca gcacgtaccg tgtggtcagc 900 gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aacggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 960 aacaaaggcc tcccgtcctc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga 1020 gagccacagg tgtacaccct gcccccatcc caggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc 1080 ctgacctgcc tggtcaaagg cttctacccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 1140 gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgc tggactccga cggctccttc 1200 ttcctctaca gcaggctcac cgtggacaag agcaggtggc aggaggggaa tgtcttctca 1260 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacac agaagtccct ctccctgtct 1320 ctgggtaaat ga 1332 <210> 199 <211> 443 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 199 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Lys Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Asn Ser Pro Ser Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 100 105 110 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 115 120 125 Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 130 135 140 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 145 150 155 160 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 165 170 175 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 180 185 190 Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr 195 200 205 Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 225 230 235 240 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 245 250 255 Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn 260 265 270 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 275 280 285 Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 290 295 300 Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 305 310 315 320 Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 325 330 335 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu 340 345 350 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 355 360 365 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 370 375 380 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 385 390 395 400 Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly 405 410 415 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 420 425 430 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 200 <211> 648 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 200 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccgtca 180 aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta cccctccgat caccttcggc 300 caagggacac gactggagat taaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 201 <211> 215 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 201 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 202 <211> 357 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 202 gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatggca tgcactgggt ccgacaagct 120 ccagggaagg gcctggagtg ggtctcagtt attagttgga atagtgctac catagactat 180 gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttccctgttt 240 ctgcaaatga acagtctgag acctgaggac acggccttgt attactgtgc aaagaaaaat 300 agccttggct ggttctttga ctactggggc cagggaaccc tggtcactgt ctcctca 357 <210> 203 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 203 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Val Ile Ser Trp Asn Ser Ala Thr Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Lys Asn Ser Leu Gly Trp Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 204 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 204 ggattcacct ttgatgatta tggc 24 <210> 205 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 205 Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Gly 1 5 <210> 206 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 206 attagttgga atagtgctac cata 24 <210> 207 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 207 Ile Ser Trp Asn Ser Ala Thr Ile 1 5 <210> 208 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 208 gcaaagaaaa atagccttgg ctggttcttt gactac 36 <210> 209 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 209 Ala Lys Lys Asn Ser Leu Gly Trp Phe Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 210 <211> 339 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 210 gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acgataacaa ctacttagct 120 tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aaactactca tttactgggc atctacccgg 180 gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240 atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300 cccctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaa 339 <210> 211 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 211 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 20 25 30 Ser Asn Asp Asn Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 95 Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys <210> 212 <211> 36 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 212 cagagtgttt tatacagctc caacgataac aactac 36 <210> 213 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 213 Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asp Asn Asn Tyr 1 5 10 <210> 214 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 214 tgggcatct 9 <210> 215 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> 215 <400> 215 Trp Ala Ser 1 <210> 216 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 216 cagcaatatt atagtactcc cctcact 27 <210> 217 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 217 Gln Gln Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu Thr 1 5 <210> 218 <211> 1341 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 218 gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatggca tgcactgggt ccgacaagct 120 ccagggaagg gcctggagtg ggtctcagtt attagttgga atagtgctac catagactat 180 gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttccctgttt 240 ctgcaaatga acagtctgag acctgaggac acggccttgt attactgtgc aaagaaaaat 300 agccttggct ggttctttga ctactggggc cagggaaccc tggtcactgt ctcctcagcc 360 tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcgccctgct ccaggagcac ctccgagagc 420 acagccgccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 480 aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 540 ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac gaagacctac 600 acctgcaacg tagatcacaa gcccagcaac accaaggtgg acaagagagt tgagtccaaa 660 tatggtcccc catgcccacc ctgcccagca cctgagttcc tggggggacc atcagtcttc 720 ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 780 gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc 840 gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt 900 gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 960 aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 1020 cagccccgag agccacaggt gtacaccctg cccccatccc aggaggagat gaccaagaac 1080 caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 1140 gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac 1200 ggctccttct tcctctacag caggctcacc gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat 1260 gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca gaagtccctc 1320 tccctgtctc tgggtaaatg a 1341 <210> 219 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 219 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Val Ile Ser Trp Asn Ser Ala Thr Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Lys Asn Ser Leu Gly Trp Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 220 <211> 663 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 220 gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acgataacaa ctacttagct 120 tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aaactactca tttactgggc atctacccgg 180 gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240 atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300 cccctcactt tcggcggagg gaccaaggtg gagatcaaac gaactgtggc tgcaccatct 360 gtcttcatct tcccgccatc tgatgagcag ttgaaatctg gaactgcctc tgttgtgtgc 420 ctgctgaata acttctatcc cagagaggcc aaagtacagt ggaaggtgga taacgccctc 480 caatcgggta actcccagga gagtgtcaca gagcaggaca gcaaggacag cacctacagc 540 ctcagcagca ccctgacgct gagcaaagca gactacgaga aacacaaagt ctacgcctgc 600 gaagtcaccc atcagggcct gagctcgccc gtcacaaaga gcttcaacag gggagagtgt 660 tag 663 <210> 221 <211> 220 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 221 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 20 25 30 Ser Asn Asp Asn Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 35 40 45 Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 85 90 95 Tyr Tyr Ser Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 115 120 125 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 130 135 140 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 145 150 155 160 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 165 170 175 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 180 185 190 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 195 200 205 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 220 <210> 222 <211> 351 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 222 caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaatctat 180 gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240 atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagatata 300 aactggtact tcgatctctg gggccgtggc accctggtca ctgtctcctc a 351 <210> 223 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 223 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ile Asn Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 224 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 224 ggttacacct ttaccagcta tggt 24 <210> 225 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 225 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Gly 1 5 <210> 226 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 226 atcagcgctt acaatggtaa caca 24 <210> 227 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 227 Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr 1 5 <210> 228 <211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 228 gcgagagata taaactggta cttcgatctc 30 <210> 229 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 229 Ala Arg Asp Ile Asn Trp Tyr Phe Asp Leu 1 5 10 <210> 230 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 230 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtttca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt acccgtggac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa a 321 <210> 231 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 231 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 232 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 232 cagggcatta gaaatgat 18 <210> 233 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 233 Gln Gly Ile Arg Asn Asp 1 5 <210> 234 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 234 ctacagcata atagttaccc gtggacg 27 <210> 235 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 235 Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp Thr 1 5 <210> 236 <211> 1335 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 236 caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaatctat 180 gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240 atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagatata 300 aactggtact tcgatctctg gggccgtggc accctggtca ctgtctcctc agcctccacc 360 aagggcccat cggtcttccc cctggcgccc tgctccagga gcacctccga gagcacagcc 420 gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480 ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540 tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacgaagac ctacacctgc 600 aacgtagatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga gagttgagtc caaatatggt 660 cccccatgcc caccctgccc agcacctgag ttcctggggg gaccatcagt cttcctgttc 720 cccccaaaac ccaaggacac tctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac gtgcgtggtg 780 gtggacgtga gccaggaaga ccccgaggtc cagttcaact ggtacgtgga tggcgtggag 840 gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagttca acagcacgta ccgtgtggtc 900 agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaacggca aggagtacaa gtgcaaggtc 960 tccaacaaag gcctcccgtc ctccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc 1020 cgagagccac aggtgtacac cctgccccca tcccaggagg agatgaccaa gaaccaggtc 1080 agcctgacct gcctggtcaa aggcttctac cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc 1140 aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgctggactc cgacggctcc 1200 ttcttcctct acagcaggct caccgtggac aagagcaggt ggcaggaggg gaatgtcttc 1260 tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cacagaagtc cctctccctg 1320 tctctgggta aatga 1335 <210> 237 <211> 444 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 237 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe 50 55 60 Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Ile Asn Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro 210 215 220 Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 225 230 235 240 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 245 250 255 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 260 265 270 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 275 280 285 Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 290 295 300 Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 305 310 315 320 Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala 325 330 335 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln 340 345 350 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 355 360 365 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 370 375 380 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 385 390 395 400 Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu 405 410 415 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 420 425 430 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 238 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 238 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtttca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt acccgtggac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 239 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 239 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 240 <211> 357 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 240 gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatggca tgcactgggt ccgacaagct 120 ccagggaagg gcctggagtg ggtctcagtt attagttgga atggtgccac catagactat 180 gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttccctgttt 240 ctgcaaatga acagtctgag acctgaggac acggccttgt attactgtgc aaagaaaaat 300 agccttggct ggttctttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctca 357 <210> 241 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 241 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Val Ile Ser Trp Asn Gly Ala Thr Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Lys Asn Ser Leu Gly Trp Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 242 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 242 attagttgga atggtgccac cata 24 <210> 243 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 243 Ile Ser Trp Asn Gly Ala Thr Ile 1 5 <210> 244 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 244 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ttgtaggaga cagagtcact 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120 gggaaaaccc ctaagcgcct gatctatact gcatccagtt tgcgaagtgg ggtcccatcg 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagac ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtctgcag cataataatt acccgtacac ttttggccag 300 gggaccaagc tggagatcaa a 321 <210> 245 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 245 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Phe Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Thr Ala Ser Ser Leu Arg Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 <210> 246 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 246 actgcatcc 9 <210> 247 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 247 Thr Ala Ser 1 <210> 248 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 248 ctgcagcata ataattaccc gtacact 27 <210> 249 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 249 Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Tyr Thr 1 5 <210> 250 <211> 1341 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 250 gaagtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatggca tgcactgggt ccgacaagct 120 ccagggaagg gcctggagtg ggtctcagtt attagttgga atggtgccac catagactat 180 gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ttccctgttt 240 ctgcaaatga acagtctgag acctgaggac acggccttgt attactgtgc aaagaaaaat 300 agccttggct ggttctttga ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcagcc 360 tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcgccctgct ccaggagcac ctccgagagc 420 acagccgccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 480 aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 540 ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac gaagacctac 600 acctgcaacg tagatcacaa gcccagcaac accaaggtgg acaagagagt tgagtccaaa 660 tatggtcccc catgcccacc ctgcccagca cctgagttcc tggggggacc atcagtcttc 720 ctgttccccc caaaacccaa ggacactctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 780 gtggtggtgg acgtgagcca ggaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggatggc 840 gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agttcaacag cacgtaccgt 900 gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 960 aaggtctcca acaaaggcct cccgtcctcc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 1020 cagccccgag agccacaggt gtacaccctg cccccatccc aggaggagat gaccaagaac 1080 caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 1140 gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac 1200 ggctccttct tcctctacag caggctcacc gtggacaaga gcaggtggca ggaggggaat 1260 gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacaca gaagtccctc 1320 tccctgtctc tgggtaaatg a 1341 <210> 251 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 251 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Val Ile Ser Trp Asn Gly Ala Thr Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Lys Asn Ser Leu Gly Trp Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 252 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 252 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ttgtaggaga cagagtcact 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120 gggaaaaccc ctaagcgcct gatctatact gcatccagtt tgcgaagtgg ggtcccatcg 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagac ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtctgcag cataataatt acccgtacac ttttggccag 300 gggaccaagc tggagatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 253 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 253 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Phe Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Thr Ala Ser Ser Leu Arg Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 254 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 254 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaaac ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aattatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt atcactggta atggtgttaa cacatattat 180 tcagtctccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgttt 240 ctggaaatga acagcctgag agccgaggac acggccatat attactgtgt gaaagaaagg 300 ggccacagct ggttcgggga ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctca 366 <210> 255 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 255 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Asn Gly Val Asn Thr Tyr Tyr Ser Val Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Glu Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Glu Arg Gly His Ser Trp Phe Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 256 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 256 ggattcacct ttagcaatta tgcc 24 <210> 257 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 257 Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala 1 5 <210> 258 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 258 atcactggta atggtgttaa caca 24 <210> 259 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 259 Ile Thr Gly Asn Gly Val Asn Thr 1 5 <210> 260 <211> 45 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 260 gtgaaagaaa ggggccacag ctggttcggg gactggttcg acccc 45 <210> 261 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 261 Val Lys Glu Arg Gly His Ser Trp Phe Gly Asp Trp Phe Asp Pro 1 5 10 15 <210> 262 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 262 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc ggtcaagtca gagtgttatc agctatctaa attggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaaactcct gatatttggt gcatccagtt taataagtgg ggtcccatca 180 aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcgtcag tctgcagcct 240 gaagatttcg cagtttactt ctgtcaacag aattaccttc ccccgctcac tttcggcgga 300 gggaccaagg tggagatcaa a 321 <210> 263 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 263 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Val Ile Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Phe Gly Ala Ser Ser Leu Ile Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Val Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asn Tyr Leu Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 264 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 264 cagagtgtta tcagctat 18 <210> 265 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 265 Gln Ser Val Ile Ser Tyr 1 5 <210> 266 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 266 caacagaatt accttccccc gctcact 27 <210> 267 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 267 Gln Gln Asn Tyr Leu Pro Pro Leu Thr 1 5 <210> 268 <211> 1350 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 268 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaaac ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aattatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt atcactggta atggtgttaa cacatattat 180 tcagtctccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgttt 240 ctggaaatga acagcctgag agccgaggac acggccatat attactgtgt gaaagaaagg 300 ggccacagct ggttcgggga ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctcagcct ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg cgccctgctc caggagcacc 420 tccgagagca cagccgccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacg 600 aagacctaca cctgcaacgt agatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 660 gagtccaaat atggtccccc atgcccaccc tgcccagcac ctgagttcct ggggggacca 720 tcagtcttcc tgttcccccc aaaacccaag gacactctca tgatctcccg gacccctgag 780 gtcacgtgcg tggtggtgga cgtgagccag gaagaccccg aggtccagtt caactggtac 840 gtggatggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gttcaacagc 900 acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag 960 tacaagtgca aggtctccaa caaaggcctc ccgtcctcca tcgagaaaac catctccaaa 1020 gccaaagggc agccccgaga gccacaggtg tacaccctgc ccccatccca ggaggagatg 1080 accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctaccccag cgacatcgcc 1140 gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1200 gactccgacg gctccttctt cctctacagc aggctcaccg tggacaagag caggtggcag 1260 gaggggaatg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacacag 1320 aagtccctct ccctgtctct gggtaaatga 1350 <210> 269 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 269 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Asn Gly Val Asn Thr Tyr Tyr Ser Val Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Glu Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Glu Arg Gly His Ser Trp Phe Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 270 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 270 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc ggtcaagtca gagtgttatc agctatctaa attggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaaactcct gatatttggt gcatccagtt taataagtgg ggtcccatca 180 aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcgtcag tctgcagcct 240 gaagatttcg cagtttactt ctgtcaacag aattaccttc ccccgctcac tttcggcgga 300 gggaccaagg tggagatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 271 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 271 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ser Ser Gln Ser Val Ile Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Phe Gly Ala Ser Ser Leu Ile Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Val Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asn Tyr Leu Pro Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 272 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 272 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaaac ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aattatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt atcactggta atggtattaa aacctactac 180 tcagtctccg cgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgttt 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccatat attactgtgt gaaagaaagg 300 ggccacagct ggttcgggga ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctca 366 <210> 273 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 273 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Asn Gly Ile Lys Thr Tyr Tyr Ser Val Ser Ala 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Glu Arg Gly His Ser Trp Phe Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 274 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 274 atcactggta atggtattaa aacc 24 <210> 275 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 275 Ile Thr Gly Asn Gly Ile Lys Thr 1 5 <210> 276 <211> 336 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 276 gatattgtga tgacccagac tccactctct tcacctgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aggcctcgta aacagtgatg gaaacaccta tttgagttgg 120 cttcaccaga ggccaggcca gcctccaaga ctcctaattt atgagatttc taaccgtttc 180 tctggagtcc cagacagatt cagtggcagt ggggctggga cagatttcac actgaaaatc 240 agtagggtgg aagctgagga tgtcggattt tattactgta tgcaatctac acaatttcct 300 ctcactttcg gcggagggac caaggtggag atcaaa 336 <210> 277 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 277 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Gly Leu Val Asn Ser 20 25 30 Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Leu His Gln Arg Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Glu Ile Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Phe Tyr Tyr Cys Met Gln Ser 85 90 95 Thr Gln Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 278 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 278 caaggcctcg taaacagtga tggaaacacc tat 33 <210> 279 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 279 Gln Gly Leu Val Asn Ser Asp Gly Asn Thr Tyr 1 5 10 <210> 280 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 280 gagatttct 9 <210> 281 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 281 Glu Ile Ser 1 <210> 282 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 282 atgcaatcta cacaatttcc tctcact 27 <210> 283 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 283 Met Gln Ser Thr Gln Phe Pro Leu Thr 1 5 <210> 284 <211> 1350 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 284 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaaac ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aattatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt atcactggta atggtattaa aacctactac 180 tcagtctccg cgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgttt 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccatat attactgtgt gaaagaaagg 300 ggccacagct ggttcgggga ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctcagcct ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg cgccctgctc caggagcacc 420 tccgagagca cagccgccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacg 600 aagacctaca cctgcaacgt agatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 660 gagtccaaat atggtccccc atgcccaccc tgcccagcac ctgagttcct ggggggacca 720 tcagtcttcc tgttcccccc aaaacccaag gacactctca tgatctcccg gacccctgag 780 gtcacgtgcg tggtggtgga cgtgagccag gaagaccccg aggtccagtt caactggtac 840 gtggatggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gttcaacagc 900 acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag 960 tacaagtgca aggtctccaa caaaggcctc ccgtcctcca tcgagaaaac catctccaaa 1020 gccaaagggc agccccgaga gccacaggtg tacaccctgc ccccatccca ggaggagatg 1080 accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctaccccag cgacatcgcc 1140 gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1200 gactccgacg gctccttctt cctctacagc aggctcaccg tggacaagag caggtggcag 1260 gaggggaatg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacacag 1320 aagtccctct ccctgtctct gggtaaatga 1350 <210> 285 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 285 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Asn Gly Ile Lys Thr Tyr Tyr Ser Val Ser Ala 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Glu Arg Gly His Ser Trp Phe Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 286 <211> 660 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 286 gatattgtga tgacccagac tccactctct tcacctgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aggcctcgta aacagtgatg gaaacaccta tttgagttgg 120 cttcaccaga ggccaggcca gcctccaaga ctcctaattt atgagatttc taaccgtttc 180 tctggagtcc cagacagatt cagtggcagt ggggctggga cagatttcac actgaaaatc 240 agtagggtgg aagctgagga tgtcggattt tattactgta tgcaatctac acaatttcct 300 ctcactttcg gcggagggac caaggtggag atcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360 ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420 ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480 tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540 agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600 gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttag 660 <210> 287 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 287 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Gly Leu Val Asn Ser 20 25 30 Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Leu His Gln Arg Pro Gly Gln Pro 35 40 45 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Glu Ile Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Phe Tyr Tyr Cys Met Gln Ser 85 90 95 Thr Gln Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 288 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 288 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaaac ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aattatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg gactggagtg ggtctcaggt atcactggca atggtattaa tacatattac 180 tcagtctccg tgaagggccg cttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacggtgttt 240 ctacaaatga acagcctgag agccgaggac acggccatat attactgtgt gaaagaaagg 300 ggccacagct ggttcgggga ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctca 366 <210> 289 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 289 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Asn Gly Ile Asn Thr Tyr Tyr Ser Val Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Glu Arg Gly His Ser Trp Phe Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 290 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 290 atcactggca atggtattaa taca 24 <210> 291 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 291 Ile Thr Gly Asn Gly Ile Asn Thr 1 5 <210> 292 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 292 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt acccgtggac tttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa a 321 <210> 293 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 293 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 294 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 294 ctacagcata atagttaccc gtggact 27 <210> 295 <211> 1350 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 295 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaaac ttggtacagc cgggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc aattatgcca tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg gactggagtg ggtctcaggt atcactggca atggtattaa tacatattac 180 tcagtctccg tgaagggccg cttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacggtgttt 240 ctacaaatga acagcctgag agccgaggac acggccatat attactgtgt gaaagaaagg 300 ggccacagct ggttcgggga ctggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctcagcct ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg cgccctgctc caggagcacc 420 tccgagagca cagccgccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacg 600 aagacctaca cctgcaacgt agatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 660 gagtccaaat atggtccccc atgcccaccc tgcccagcac ctgagttcct ggggggacca 720 tcagtcttcc tgttcccccc aaaacccaag gacactctca tgatctcccg gacccctgag 780 gtcacgtgcg tggtggtgga cgtgagccag gaagaccccg aggtccagtt caactggtac 840 gtggatggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gttcaacagc 900 acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa cggcaaggag 960 tacaagtgca aggtctccaa caaaggcctc ccgtcctcca tcgagaaaac catctccaaa 1020 gccaaagggc agccccgaga gccacaggtg tacaccctgc ccccatccca ggaggagatg 1080 accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctaccccag cgacatcgcc 1140 gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1200 gactccgacg gctccttctt cctctacagc aggctcaccg tggacaagag caggtggcag 1260 gaggggaatg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacacag 1320 aagtccctct ccctgtctct gggtaaatga 1350 <210> 296 <211> 449 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 296 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly Ile Thr Gly Asn Gly Ile Asn Thr Tyr Tyr Ser Val Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Phe 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys 85 90 95 Val Lys Glu Arg Gly His Ser Trp Phe Gly Asp Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr 210 215 220 Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 225 230 235 240 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 245 250 255 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp 260 265 270 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 275 280 285 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val 290 295 300 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 305 310 315 320 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 325 330 335 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 340 345 350 Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 355 360 365 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 370 375 380 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 385 390 395 400 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys 405 410 415 Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 420 425 430 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 445 Lys <210> 297 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 297 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt acccgtggac tttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 298 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 298 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Trp 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 299 <211> 369 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 299 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgaag tctctggatt cacatttagt aattatggca tgcactgggt ccgccaggct 120 ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt gtatcatatg atggaagtaa taaatactat 180 acagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtct 240 ctgcaaatga atagcctgag agctgaagac acggctgtgt attactgtgc gaaagatcgg 300 ggtatcactg gcacctcggg cggtgttttt gatatctggg gccaagggac aatggtcacc 360 gtctcttca 369 <210> 300 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 300 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Val Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Thr Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Ser 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Arg Gly Ile Thr Gly Thr Ser Gly Gly Val Phe Asp Ile 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 301 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 301 ggattcacat ttagtaatta tggc 24 <210> 302 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 302 gtatcatatg atggaagtaa taaa 24 <210> 303 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 303 Val Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys 1 5 <210> 304 <211> 48 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 304 gcgaaagatc ggggtatcac tggcacctcg ggcggtgttt ttgatatc 48 <210> 305 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 305 Ala Lys Asp Arg Gly Ile Thr Gly Thr Ser Gly Gly Val Phe Asp 1 5 10 15 <210> 306 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 306 gccatccgga tgacccagtc tccatcctca ttctctgcaa ctacaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc gggcgagtca gggtattagc agtcatttag cctggtatca gcaaaaacca 120 gggaaagccc ctaagttcct gatctatgtt gcatccactt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240 gaagattttg caacttatta ctgtcaacag tattatagtt accctccgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa a 321 <210> 307 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 307 Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Phe Ser Ala Thr Thr Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser His 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Phe Leu Ile 35 40 45 Tyr Val Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 308 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 308 cagggtatta gcagtcat 18 <210> 309 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 309 Gln Gly Ile Ser Ser His 1 5 <210> 310 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 310 gttgcatcc 9 <210> 311 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 311 Val Ala Ser 1 <210> 312 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 312 caacagtatt atagttaccc tccgacg 27 <210> 313 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 313 Gln Gln Tyr Tyr Ser Tyr Pro Pro Thr 1 5 <210> 314 <211> 1353 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 314 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgaag tctctggatt cacatttagt aattatggca tgcactgggt ccgccaggct 120 ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt gtatcatatg atggaagtaa taaatactat 180 acagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtct 240 ctgcaaatga atagcctgag agctgaagac acggctgtgt attactgtgc gaaagatcgg 300 ggtatcactg gcacctcggg cggtgttttt gatatctggg gccaagggac aatggtcacc 360 gtctcttcag cctccaccaa gggcccatcg gtcttccccc tggcgccctg ctccaggagc 420 acctccgaga gcacagccgc cctgggctgc ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg 480 acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta 540 cagtcctcag gactctactc cctcagcagc gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc 600 acgaagacct acacctgcaa cgtagatcac aagcccagca acaccaaggt ggacaagaga 660 gttgagtcca aatatggtcc cccatgccca ccctgcccag cacctgagtt cctgggggga 720 ccatcagtct tcctgttccc cccaaaaccc aaggacactc tcatgatctc ccggacccct 780 gaggtcacgt gcgtggtggt ggacgtgagc caggaagacc ccgaggtcca gttcaactgg 840 tacgtggatg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagttcaac 900 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaaggc ctcccgtcct ccatcgagaa aaccatctcc 1020 aaagccaaag ggcagccccg agagccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccaggaggag 1080 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaggctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260 caggagggga atgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacaca 1320 cagaagtccc tctccctgtc tctgggtaaa tga 1353 <210> 315 <211> 450 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 315 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Val Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr 20 25 30 Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Val Val Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Thr Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Ser 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Arg Gly Ile Thr Gly Thr Ser Gly Gly Val Phe Asp Ile 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val 195 200 205 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys 210 215 220 Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 316 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 316 gccatccgga tgacccagtc tccatcctca ttctctgcaa ctacaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc gggcgagtca gggtattagc agtcatttag cctggtatca gcaaaaacca 120 gggaaagccc ctaagttcct gatctatgtt gcatccactt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240 gaagattttg caacttatta ctgtcaacag tattatagtt accctccgac gttcggccaa 300 gggaccaagg tggaaatcaa acgaactgtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420 cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540 ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600 ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645 <210> 317 <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 317 Ala Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Phe Ser Ala Thr Thr Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser His 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Phe Leu Ile 35 40 45 Tyr Val Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Tyr Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110 Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125 Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160 Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175 Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190 Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205 Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 <210> 318 <211> 342 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 318 gaggtgcagc tggtggagtc ggggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacgtctagt agatattgga tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg gctggccaac ataaatcaag acggaagtga gaaatactat 180 ctggagtctc tgaggggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240 ctgcaaatga acaacctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagggatgag 300 gaaggttact ggggccaggg aaccctggtc accgtctcct ca 342 <210> 319 <211> 114 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 319 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Ser Ser Arg Tyr 20 25 30 Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ala Asn Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Leu Glu Ser Leu 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Glu Glu Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser <210> 320 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 320 ggattcacgt ctagtagata ttgg 24 <210> 321 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 321 Gly Phe Thr Ser Ser Arg Tyr Trp 1 5 <210> 322 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 322 ataaatcaag acggaagtga gaaa 24 <210> 323 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 323 Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys 1 5 <210> 324 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 324 gcgagggatg aggaaggtta c 21 <210> 325 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 325 Ala Arg Asp Glu Glu Gly Tyr 1 5 <210> 326 <211> 336 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 326 gatgttgtga tgactcagtc tctactctcc ctgtccgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta tacagtgatg gggacaccta cttgagttgg 120 tttcagcaga ggccaggcca atctccacgg cgcctaattt ataaggtttc tcaccgggac 180 tctggggtcc cagacagatt cagaggcagt ggttcaggca ctgatttcac actgaaaatc 240 agcagggtgg aggctgagga tgttgggatt tattactgca tgcaaggtac acactggcct 300 ccgacgttcg gccaagggac caaggtggaa atcaaa 336 <210> 327 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 327 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Leu Leu Ser Leu Ser Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Lys Val Ser His Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Arg Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Thr His Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 328 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 328 caaagcctcg tatacagtga tggggacacc tac 33 <210> 329 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 329 Gln Ser Leu Val Tyr Ser Asp Gly Asp Thr Tyr 1 5 10 <210> 330 <211> 9 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 330 aaggtttct 9 <210> 331 <211> 3 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 331 Lys Val Ser 1 <210> 332 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 332 atgcaaggta cacactggcc tccgacg 27 <210> 333 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 333 Met Gln Gly Thr His Trp Pro Pro Thr 1 5 <210> 334 <211> 1326 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 334 gaggtgcagc tggtggagtc ggggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacgtctagt agatattgga tgagttgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg gctggccaac ataaatcaag acggaagtga gaaatactat 180 ctggagtctc tgaggggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240 ctgcaaatga acaacctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagggatgag 300 gaaggttact ggggccaggg aaccctggtc accgtctcct cagcctccac caagggccca 360 tcggtcttcc ccctggcgcc ctgctccagg agcacctccg agagcacagc cgccctgggc 420 tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg 480 accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc ctacagtcct caggactcta ctccctcagc 540 agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg ggcacgaaga cctacacctg caacgtagat 600 cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag agagttgagt ccaaatatgg tcccccatgc 660 ccaccctgcc cagcacctga gttcctgggg ggaccatcag tcttcctgtt ccccccaaaa 720 cccaaggaca ctctcatgat ctcccggacc cctgaggtca cgtgcgtggt ggtggacgtg 780 agccaggaag accccgaggt ccagttcaac tggtacgtgg atggcgtgga ggtgcataat 840 gccaagacaa agccgcggga ggagcagttc aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 900 accgtcctgc accaggactg gctgaacggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 960 ggcctcccgt cctccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagagcca 1020 caggtgtaca ccctgccccc atcccaggag gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc 1080 tgcctggtca aaggcttcta ccccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1140 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc 1200 tacagcaggc tcaccgtgga caagagcagg tggcaggagg ggaatgtctt ctcatgctcc 1260 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acacagaagt ccctctccct gtctctgggt 1320 aaatga 1326 <210> 335 <211> 441 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 335 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Ser Ser Arg Tyr 20 25 30 Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 35 40 45 Ala Asn Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Leu Glu Ser Leu 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Asp Glu Glu Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 100 105 110 Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys 115 120 125 Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys 130 135 140 Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu 145 150 155 160 Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr 180 185 190 Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val 195 200 205 Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro 210 215 220 Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 225 230 235 240 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 245 250 255 Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 260 265 270 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 275 280 285 Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 290 295 300 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 305 310 315 320 Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln 325 330 335 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met 340 345 350 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 355 360 365 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 370 375 380 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 385 390 395 400 Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val 405 410 415 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 420 425 430 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 <210> 336 <211> 660 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 336 gatgttgtga tgactcagtc tctactctcc ctgtccgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta tacagtgatg gggacaccta cttgagttgg 120 tttcagcaga ggccaggcca atctccacgg cgcctaattt ataaggtttc tcaccgggac 180 tctggggtcc cagacagatt cagaggcagt ggttcaggca ctgatttcac actgaaaatc 240 agcagggtgg aggctgagga tgttgggatt tattactgca tgcaaggtac acactggcct 300 ccgacgttcg gccaagggac caaggtggaa atcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360 ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420 ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480 tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540 agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600 gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttag 660 <210> 337 <211> 219 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic <400> 337 Asp Val Val Met Thr Gln Ser Leu Leu Ser Leu Ser Val Thr Leu Gly 1 5 10 15 Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser 20 25 30 Asp Gly Asp Thr Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Lys Val Ser His Arg Asp Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Arg Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr Cys Met Gln Gly 85 90 95 Thr His Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 115 120 125 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 130 135 140 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 145 150 155 160 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 165 170 175 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 180 185 190 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 195 200 205 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 338 <211> 131 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acids 1-103: Human ACVR1 extracellular domain (21-123 of accession number Q04771) Amino acids 104-131: Myc-myc-hexahistidine tag <400> 338 Met Glu Asp Glu Lys Pro Lys Val Asn Pro Lys Leu Tyr Met Cys Val 1 5 10 15 Cys Glu Gly Leu Ser Cys Gly Asn Glu Asp His Cys Glu Gly Gln Gln 20 25 30 Cys Phe Ser Ser Leu Ser Ile Asn Asp Gly Phe His Val Tyr Gln Lys 35 40 45 Gly Cys Phe Gln Val Tyr Glu Gln Gly Lys Met Thr Cys Lys Thr Pro 50 55 60 Pro Ser Pro Gly Gln Ala Val Glu Cys Cys Gln Gly Asp Trp Cys Asn 65 70 75 80 Arg Asn Ile Thr Ala Gln Leu Pro Thr Lys Gly Lys Ser Phe Pro Gly 85 90 95 Thr Gln Asn Phe His Leu Glu Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp 100 105 110 Leu Gly Gly Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu His His His 115 120 125 His His His 130 <210> 339 <211> 336 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acids 1-103: Human ACVR1 extracellular domain (21-123 of accession number Q04771) Amino acids 104-336: mFc <400> 339 Met Glu Asp Glu Lys Pro Lys Val Asn Pro Lys Leu Tyr Met Cys Val 1 5 10 15 Cys Glu Gly Leu Ser Cys Gly Asn Glu Asp His Cys Glu Gly Gln Gln 20 25 30 Cys Phe Ser Ser Leu Ser Ile Asn Asp Gly Phe His Val Tyr Gln Lys 35 40 45 Gly Cys Phe Gln Val Tyr Glu Gln Gly Lys Met Thr Cys Lys Thr Pro 50 55 60 Pro Ser Pro Gly Gln Ala Val Glu Cys Cys Gln Gly Asp Trp Cys Asn 65 70 75 80 Arg Asn Ile Thr Ala Gln Leu Pro Thr Lys Gly Lys Ser Phe Pro Gly 85 90 95 Thr Gln Asn Phe His Leu Glu Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro 100 105 110 Cys Pro Pro Cys Lys Cys Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu 130 135 140 Ser Pro Ile Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro 145 150 155 160 Asp Val Gln Ile Ser Trp Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala 165 170 175 Gln Thr Gln Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Leu Arg Val Val 180 185 190 Ser Ala Leu Pro Ile Gln His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe 195 200 205 Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr 210 215 220 Ile Ser Lys Pro Lys Gly Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu 225 230 235 240 Pro Pro Pro Glu Glu Glu Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys 245 250 255 Met Val Thr Asp Phe Met Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn 260 265 270 Asn Gly Lys Thr Glu Leu Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp 275 280 285 Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys 290 295 300 Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly 305 310 315 320 Leu His Asn His His Thr Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys 325 330 335 <210> 340 <211> 131 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino acids 1-103: Mouse ACVR1 extracellular domain (21-123 of accession number P37172) Amino acids 104-131: Myc-myc-hexahistidine tag <400> 340 Val Glu Asp Glu Lys Pro Lys Val Asn Gln Lys Leu Tyr Met Cys Val 1 5 10 15 Cys Glu Gly Leu Ser Cys Gly Asn Glu Asp His Cys Glu Gly Gln Gln 20 25 30 Cys Phe Ser Ser Leu Ser Ile Asn Asp Gly Phe His Val Tyr Gln Lys 35 40 45 Gly Cys Phe Gln Val Tyr Glu Gln Gly Lys Met Thr Cys Lys Thr Pro 50 55 60 Pro Ser Pro Gly Gln Ala Val Glu Cys Cys Gln Gly Asp Trp Cys Asn 65 70 75 80 Arg Asn Ile Thr Ala Gln Leu Pro Thr Lys Gly Lys Ser Phe Pro Gly 85 90 95 Thr Gln Asn Phe His Leu Glu Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp 100 105 110 Leu Gly Gly Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu His His His 115 120 125 His His His 130 <210> 341 <211> 509 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Human ACVR1 Accession Q04771 <400> 341 Met Val Asp Gly Val Met Ile Leu Pro Val Leu Ile Met Ile Ala Leu 1 5 10 15 Pro Ser Pro Ser Met Glu Asp Glu Lys Pro Lys Val Asn Pro Lys Leu 20 25 30 Tyr Met Cys Val Cys Glu Gly Leu Ser Cys Gly Asn Glu Asp His Cys 35 40 45 Glu Gly Gln Gln Cys Phe Ser Ser Leu Ser Ile Asn Asp Gly Phe His 50 55 60 Val Tyr Gln Lys Gly Cys Phe Gln Val Tyr Glu Gln Gly Lys Met Thr 65 70 75 80 Cys Lys Thr Pro Pro Ser Pro Gly Gln Ala Val Glu Cys Cys Gln Gly 85 90 95 Asp Trp Cys Asn Arg Asn Ile Thr Ala Gln Leu Pro Thr Lys Gly Lys 100 105 110 Ser Phe Pro Gly Thr Gln Asn Phe His Leu Glu Val Gly Leu Ile Ile 115 120 125 Leu Ser Val Val Phe Ala Val Cys Leu Leu Ala Cys Leu Leu Gly Val 130 135 140 Ala Leu Arg Lys Phe Lys Arg Arg Asn Gln Glu Arg Leu Asn Pro Arg 145 150 155 160 Asp Val Glu Tyr Gly Thr Ile Glu Gly Leu Ile Thr Thr Asn Val Gly 165 170 175 Asp Ser Thr Leu Ala Asp Leu Leu Asp His Ser Cys Thr Ser Gly Ser 180 185 190 Gly Ser Gly Leu Pro Phe Leu Val Gln Arg Thr Val Ala Arg Gln Ile 195 200 205 Thr Leu Leu Glu Cys Val Gly Lys Gly Arg Tyr Gly Glu Val Trp Arg 210 215 220 Gly Ser Trp Gln Gly Glu Asn Val Ala Val Lys Ile Phe Ser Ser Arg 225 230 235 240 Asp Glu Lys Ser Trp Phe Arg Glu Thr Glu Leu Tyr Asn Thr Val Met 245 250 255 Leu Arg His Glu Asn Ile Leu Gly Phe Ile Ala Ser Asp Met Thr Ser 260 265 270 Arg His Ser Ser Thr Gln Leu Trp Leu Ile Thr His Tyr His Glu Met 275 280 285 Gly Ser Leu Tyr Asp Tyr Leu Gln Leu Thr Thr Leu Asp Thr Val Ser 290 295 300 Cys Leu Arg Ile Val Leu Ser Ile Ala Ser Gly Leu Ala His Leu His 305 310 315 320 Ile Glu Ile Phe Gly Thr Gln Gly Lys Pro Ala Ile Ala His Arg Asp 325 330 335 Leu Lys Ser Lys Asn Ile Leu Val Lys Lys Asn Gly Gln Cys Cys Ile 340 345 350 Ala Asp Leu Gly Leu Ala Val Met His Ser Gln Ser Thr Asn Gln Leu 355 360 365 Asp Val Gly Asn Asn Pro Arg Val Gly Thr Lys Arg Tyr Met Ala Pro 370 375 380 Glu Val Leu Asp Glu Thr Ile Gln Val Asp Cys Phe Asp Ser Tyr Lys 385 390 395 400 Arg Val Asp Ile Trp Ala Phe Gly Leu Val Leu Trp Glu Val Ala Arg 405 410 415 Arg Met Val Ser Asn Gly Ile Val Glu Asp Tyr Lys Pro Pro Phe Tyr 420 425 430 Asp Val Val Pro Asn Asp Pro Ser Phe Glu Asp Met Arg Lys Val Val 435 440 445 Cys Val Asp Gln Gln Arg Pro Asn Ile Pro Asn Arg Trp Phe Ser Asp 450 455 460 Pro Thr Leu Thr Ser Leu Ala Lys Leu Met Lys Glu Cys Trp Tyr Gln 465 470 475 480 Asn Pro Ser Ala Arg Leu Thr Ala Leu Arg Ile Lys Lys Thr Leu Thr 485 490 495 Lys Ile Asp Asn Ser Leu Asp Lys Leu Lys Thr Asp Cys 500 505 <210> 342 <211> 509 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Mouse ACVR1 Accession P37172 <400> 342 Met Val Asp Gly Val Met Ile Leu Pro Val Leu Met Met Met Ala Phe 1 5 10 15 Pro Ser Pro Ser Val Glu Asp Glu Lys Pro Lys Val Asn Gln Lys Leu 20 25 30 Tyr Met Cys Val Cys Glu Gly Leu Ser Cys Gly Asn Glu Asp His Cys 35 40 45 Glu Gly Gln Gln Cys Phe Ser Ser Leu Ser Ile Asn Asp Gly Phe His 50 55 60 Val Tyr Gln Lys Gly Cys Phe Gln Val Tyr Glu Gln Gly Lys Met Thr 65 70 75 80 Cys Lys Thr Pro Pro Ser Pro Gly Gln Ala Val Glu Cys Cys Gln Gly 85 90 95 Asp Trp Cys Asn Arg Asn Ile Thr Ala Gln Leu Pro Thr Lys Gly Lys 100 105 110 Ser Phe Pro Gly Thr Gln Asn Phe His Leu Glu Val Gly Leu Ile Ile 115 120 125 Leu Ser Val Val Phe Ala Val Cys Leu Leu Ala Cys Ile Leu Gly Val 130 135 140 Ala Leu Arg Lys Phe Lys Arg Arg Asn Gln Glu Arg Leu Asn Pro Arg 145 150 155 160 Asp Val Glu Tyr Gly Thr Ile Glu Gly Leu Ile Thr Thr Asn Val Gly 165 170 175 Asp Ser Thr Leu Ala Glu Leu Leu Asp His Ser Cys Thr Ser Gly Ser 180 185 190 Gly Ser Gly Leu Pro Phe Leu Val Gln Arg Thr Val Ala Arg Gln Ile 195 200 205 Thr Leu Leu Glu Cys Val Gly Lys Gly Arg Tyr Gly Glu Val Trp Arg 210 215 220 Gly Ser Trp Gln Gly Glu Asn Val Ala Val Lys Ile Phe Ser Ser Arg 225 230 235 240 Asp Glu Lys Ser Trp Phe Arg Glu Thr Glu Leu Tyr Asn Thr Val Met 245 250 255 Leu Arg His Glu Asn Ile Leu Gly Phe Ile Ala Ser Asp Met Thr Ser 260 265 270 Arg His Ser Ser Thr Gln Leu Trp Leu Ile Thr His Tyr His Glu Met 275 280 285 Gly Ser Leu Tyr Asp Tyr Leu Gln Leu Thr Thr Leu Asp Thr Val Ser 290 295 300 Cys Leu Arg Ile Val Leu Ser Ile Ala Ser Gly Leu Ala His Leu His 305 310 315 320 Ile Glu Ile Phe Gly Thr Gln Gly Lys Ser Ala Ile Ala His Arg Asp 325 330 335 Leu Lys Ser Lys Asn Ile Leu Val Lys Lys Asn Gly Gln Cys Cys Ile 340 345 350 Ala Asp Leu Gly Leu Ala Val Met His Ser Gln Ser Thr Asn Gln Leu 355 360 365 Asp Val Gly Asn Asn Pro Arg Val Gly Thr Lys Arg Tyr Met Ala Pro 370 375 380 Glu Val Leu Asp Glu Thr Ile Gln Val Asp Cys Phe Asp Ser Tyr Lys 385 390 395 400 Arg Val Asp Ile Trp Ala Phe Gly Leu Val Leu Trp Glu Val Ala Arg 405 410 415 Arg Met Val Ser Asn Gly Ile Val Glu Asp Tyr Lys Pro Pro Phe Tyr 420 425 430 Asp Val Val Pro Asn Asp Pro Ser Phe Glu Asp Met Arg Lys Val Val 435 440 445 Cys Val Asp Gln Gln Arg Pro Asn Ile Pro Asn Arg Trp Phe Ser Asp 450 455 460 Pro Thr Leu Thr Ser Leu Ala Lys Leu Met Lys Glu Cys Trp Tyr Gln 465 470 475 480 Asn Pro Ser Ala Arg Leu Thr Ala Leu Arg Ile Lys Lys Thr Leu Thr 485 490 495 Lys Ile Asp Asn Ser Leu Asp Lys Leu Lys Thr Asp Cys 500 505

Claims

액티빈 A 수용체 유형 1 (Activin A receptor type 1: ACVR1) 단백질 및/또는 이의 돌연변이체에 특이적으로 결합하는 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 ACVR1의 세포외 도메인 (서열 번호 341의 21~123번 아미노산) 내에 포함된 하나 이상의 아미노산과 상호 작용하고, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 전장 ACVR1 단백질 및/또는 이의 돌연변이체를 발현하는 세포에 결합하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제1항에 있어서, 상기 전장 ACVR1 단백질 또는 이의 돌연변이체가 전장 사람 ACVR 단백질 또는 이의 돌연변이체인, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제2항에 있어서, 상기 전장 사람 ACVR1 단백질이 서열 번호 341의 21~509번 아미노산을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 돌연변이체 ACVR1 단백질이 서열 번호 341의 ACVR1 L196P, delP197_F198insL, R202I, R206H, Q207E, R258S, R258G, G325A, G328E, G328R, G328W, G356D 및 R375P로 이루어진 그룹으로부터 선택된 돌연변이를 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제4항에 있어서, 상기 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 ACVR1(R206H) 단백질에 결합하고 ACVR1(R206H) 매개성 골 형성 단백질 (bone morphogenetic protein: BMP) 신호 전달을 억제하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
ACVR1 단백질에 특이적으로 결합하는 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 (i) 사람 ACVR1을 발현하는 세포에 결합하고/하거나 (ii) ACVR1에 결합하고 ACVR1 매개성 골 형성 단백질 (BMP) 신호 전달을 억제하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 전장 사람 단클론 항체인, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 다음으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 특성을 갖는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편: (a) 전장 사람 단클론 항체임; (b) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 60 nM 미만, 12 nM 미만, 2 nM 미만, 1 nM 미만 또는 0.5 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 25℃에서 Fc (예를 들어, 서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (c) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 150 nM 미만, 15 nM 미만, 5 nM 미만, 1.5 nM 미만 또는 1 nM 미만의 해리 상수 (K_D)로 37℃에서 mFc (서열 번호 339)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (d) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 300 nM 미만, 150 nM 미만, 25 nM 미만, 10 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 2 nM 미만의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (e) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때 500 nM 미만, 50 nM 미만, 25 nM 미만 또는 10 nM 미만의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 338)에 융합된 사람 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (f) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때, 마우스 ACVR1에 결합하지 않거나, 500 nM 초과의 K_D로 25℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (g) 표면 플라스몬 공명 검정에서 측정될 때, 마우스 ACVR1에 결합하지 않거나, 500 nM 초과의 K_D로 37℃에서 myc-myc-hexahistag (예를 들어, 서열 번호 340)에 융합된 마우스 ACVR1 세포외 도메인에 결합함; (k) 사람 ACVR1 단백질 또는 사람 ACVR(R206H) 단백질을 발현하는 세포에 결합함; (l) 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 25 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 액티빈 A에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제함; (m) 세포 기반 생물학적 검정에서 측정될 때 20 nM 미만, 5 nM 미만, 3 nM 미만 또는 1 nM 미만의 IC₅₀으로 사람 BMP7에 의해 사람 ACVR1(R206H)을 발현하는 세포의 활성화를 억제함; (m) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 혈청 헵시딘을 유의하게 감소시킴; (n) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 혈청 철 수준을 유의하게 증가시킴; 및/또는 (o) 마우스 대립 유전자 대신에 사람 ACVR1을 발현하는 마우스에게 투여될 때 야생형 ACVR1 신호 전달을 억제함; 및 (p) 표 1에서 열거된 HCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 HCVR 및 표 1에서 열거된 LCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 LCVR을 포함함.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 또는 항원 결합 단편이 중쇄 가변 영역 (heavy chain variable region: HCVR) 내에 포함된 3개의 중쇄 상보성 결정 영역 (complementarity determining region: CDR) (HCDR1, HCDR2 및 HCDR3); 및 경쇄 가변 영역 (light chain variable region: LCVR) 내에 포함된 3개의 경쇄 CDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하고, 여기서, 상기 HCVR이 표 1에서 열거된 HCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제9항에 있어서, 표 1에서 열거된 LCVR 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCVR을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제9항 또는 제10항에 있어서, 하기를 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편:
(a) 서열 번호 4, 24, 44, 78, 98, 130, 150, 168, 188, 205, 225, 257 및 321로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 HCDR1 도메인;
(b) 서열 번호 6, 26, 46, 80, 100, 132, 152, 170, 207, 227, 243, 259, 275, 291, 303 및 323으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 HCDR2 도메인;
(c) 서열 번호 8, 28, 60, 82, 102, 134, 154, 172, 191, 209, 229, 261, 305 및 325로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 HCDR3 도메인;
(d) 서열 번호 12, 32, 50, 86, 106, 138, 158, 176, 195, 213, 233, 265, 279, 309 및 329로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCDR1 도메인;
(e) 서열 번호 14, 34, 52, 64, 88, 108, 122, 140, 178, 215, 247, 281, 311 및 331로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCDR2 도메인; 및
(f) 서열 번호 16, 36, 66, 90, 110, 142, 160, 180, 197, 217, 235, 249, 267, 283, 313 및 333으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCDR3 도메인.
제11항에 있어서, 서열 번호 2/10, 22/30, 22/72, 42/48, 58/62, 76/84, 96/104, 116/119, 128/136, 148/156, 166/174, 186/193, 203/211, 223/231, 241/245, 255/263, 273/277, 289/293, 300/307 및 319/327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제12항에 있어서, (a) 서열 번호 44, 46, 28, 50, 52 및 36; 및 (b) 서열 번호 24, 46, 60, 50, 64 및 66으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 CDR을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제13항에 있어서, 서열 번호 42/48 및 58/62로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
ACVR1에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 상기 항체 또는 항원 결합 단편이 HCVR 내에 포함된 3개의 중쇄 CDR (HCDR1, HCDR2 및 HCDR3); 및 LCVR 내에 포함된 3개의 경쇄 CDR (LCDR1, LCDR2 및 LCDR3)을 포함하고, 여기서, 상기 HCVR이
(i) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열;
(ii) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%의 동일성을 갖는 아미노산 서열;
(iii) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 95%의 동일성을 갖는 아미노산 서열; 또는
(iv) 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열이 12개 이하의 아미노산 치환을 갖고, 상기 LCVR이
(a) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열;
(b) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 90%의 동일성을 갖는 아미노산 서열;
(c) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 95%의 동일성을 갖는 아미노산 서열; 또는
(d) 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하고, 상기 아미노산 서열이 10개 이하의 아미노산 치환을 갖는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제15항에 있어서, 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 HCVR을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제15항에 있어서, 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCVR을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제15항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HCVR 내에 포함된 3개의 CDR; 및 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 LCVR 내에 포함된 3개의 CDR을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 서열 번호 2/10, 22/30, 22/72, 42/48, 58/62, 76/84, 96/104, 116/119, 128/136, 148/156, 166/174, 186/193, 203/211, 223/231, 241/245, 255/263, 273/277, 289/293, 300/307 및 319/327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제15항에 있어서, 하기를 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편:
(a) 서열 번호 4, 24, 44, 78, 98, 130, 150, 168, 188, 205, 225, 257 및 321로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 HCDR1 도메인;
(b) 서열 번호 6, 26, 46, 80, 100, 132, 152, 170, 207, 227, 243, 259, 275, 291, 303 및 323으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 HCDR2 도메인;
(c) 서열 번호 8, 28, 60, 82, 102, 134, 154, 172, 191, 209, 229, 261, 305 및 325로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 HCDR3 도메인;
(d) 서열 번호 12, 32, 50, 86, 106, 138, 158, 176, 195, 213, 233, 265, 279, 309 및 329로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCDR1 도메인;
(e) 서열 번호 14, 34, 52, 64, 88, 108, 122, 140, 178, 215, 247, 281, 311 및 331로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCDR2 도메인; 및
(f) 서열 번호 16, 36, 66, 90, 110, 142, 160, 180, 197, 217, 235, 249, 267, 283, 313 및 333으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는 LCDR3 도메인.
제20항에 있어서, (a) 서열 번호 44, 46, 28, 50, 52 및 36; 및 (b) 서열 번호 24, 46, 60, 50, 64 및 66으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 CDR을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제21항에 있어서, 서열 번호 42/48 및 58/62로 이루어진 그룹으로부터 선택된 HCVR/LCVR 아미노산 서열 쌍을 포함하는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
HCVR의 3개의 CDR 및 LCVR의 3개의 CDR을 포함하는, ACVR 매개성 및/또는 ACVR1(R206H) 매개성 골 형성 단백질 (BMP) 신호 전달을 억제하는 단리된 단클론 항체 또는 이의 항원 결합 단편으로서, 상기 HCVR이 서열 번호 2, 22, 42, 58, 76, 96, 116, 128, 148, 166, 186, 203, 223, 241, 255, 273, 289, 300 및 319로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖고, 상기 LCVR이 서열 번호 10, 30, 48, 62, 72, 84, 104, 119, 136, 156, 174, 193, 211, 231, 245, 263, 277, 293, 307 및 327로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 갖는, 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
ACVR1에 결합하기 위해 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항의 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 경쟁하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항의 항체 또는 이의 항원 결합 단편과 동일한 에피토프에 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 따른 ACVR1에 결합하는 단리된 항체 또는 이의 항원 결합 단편 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 기재된 항체의 HCVR을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오타이드 분자.
제1항 내지 제25항 중 어느 한 항에 기재된 항체의 LCVR을 인코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 단리된 폴리뉴클레오타이드 분자.
제27항의 폴리뉴클레오타이드 서열 및/또는 제27항의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터.
제29항의 벡터를 발현하는 숙주 세포.
항-ACVR1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 생산을 허용하는 조건하에 제30항의 숙주 세포를 성장시키는 단계 및 이렇게 생산된 상기 항체 또는 단편을 회수하는 단계를 포함하는, 항-ACVR1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 생산하는 방법.
제31항에 있어서, 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물로서 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 제형화하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
ACVR1 연관 질환 또는 장애의 적어도 하나의 증상 또는 징후를 치료, 예방 또는 개선하는 방법으로서, 상기 방법이 치료학적 유효량의 제1항 내지 제25항 중 어느 한 항의 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 약제학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
제33항에 있어서, 상기 ACVR1 연관 질환 또는 장애가 이소성 골화 (heterotopic ossification), 전위성 골화 (ectopic ossification), 골 이형성증, 빈혈 및 산재성 내재성 뇌교종으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
제33항 또는 제34항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 이를 필요로 하는 대상체에게 예방적으로 또는 치료학적으로 투여되는, 방법.
제33항 내지 제35항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 제2 치료제와 조합하여 투여되는, 방법.
제36항에 있어서, 상기 제2 치료제가 항-액티빈 A 억제제, 항-BMP7 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 항-ACVR2 항체 또는 이의 항원 결합 단편, 항염증 약물, 스테로이드, 비스포스포네이트, 근육 이완제, 레티노산 수용체 (retinoic acid receptor: RAR) 감마 작용제, 생활 방식 변화 및 식이 보충제로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
제33항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 피하, 정맥내, 진피내, 복강내, 근육내 또는 뇌실내로 투여되는, 방법.