KR20180123512A - 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 펩티드 및 이를 포함하는 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 명세서는 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 펩티드를 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 텔로머라제로부터 유래된 펩티드를 포함하여 텔로머라제 활성의 감소 또는 텔로미어 길이의 감소로 인한 질환 및 세포 노화 또는 손실에 따른 증상을 예방, 개선 및 치료하는데 효과적인 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 일측면에 따른 펩티드는 텔로머라제 활성을 증가시키고 텔로미어 연장에 효능을 가져, 텔로머라제의 이상 활성 감소 및 텔로미어의 길이 감소 또는 손실에 의한 질환 치료 및 증상 개선 방법을 제공할 수 있다.

Description

텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 펩티드 및 이를 포함하는 조성물
본 명세서는 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 펩티드 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 텔로머라제로부터 유래된 펩티드를 포함하며 텔로머라제 활성의 감소 및 텔로미어 손실로 인한 세포의 퇴화, 노화 또는 사멸에 치료 또는 예방 효과를 보이는 조성물에 관한 것이다.
텔로미어 (telomere)는 염색체의 끝 부분에서 발견되는 DNA hexamer (TTAGGG) 서열을 반복하는 것으로, 염색체를 안정화시키는 기능을 가진 것으로 알려져 있다. 세포 복제를 반복하면서 염색체 끝이 단축되고 길이가 짧아질수록 세포의 노화를 의미하기 때문에 여러 조직에서 세포의 수명을 유지하는 중요한 요소이며 세포의 노화를 평가하는데 사용된다. 텔로머라제 (telomerase)는 텔로미어 (telomere)의 3' 말단에 텔로미어 반복서열의 첨가를 촉매하는 효소 단백질로 세포 노화에 따라 손실되는 텔로미어를 복구하는 역할을 한다. 대부분의 정상 성인 세포에서 텔로머라제는 발현되어 있지 않으며, 텔로미어 길이는 세포의 복제시 마다 점진적으로 감소되고 텔로미어 반복서열의 감소는 세포 노화를 유도한다.
특정 질병에서 이 텔로미어 말단이 비정상적으로 빠르게 손실되어 미성숙 세포의 노화 또는 퇴화가 유도된다. 인간의 경우, 인간 텔로머라제 (hTERT, human-telomerase reverse transcriptase)를 발현하는 세포는 정상적인 세포 노화 경로를 우회하는 경우로 나타났다. 짧은 텔로미어를 갖는 노화 세포에서 텔로머라제의 발현이 유도되면 텔로미어 길이가 증가하고, 더 젊은 세포와 유사한 표현형을 회복하는 것으로 나타났다.
암세포나 특정 줄기세포와는 다르게 체세포는 텔로머라제 활성이 거의 또는 전혀 없으며, 텔로미어를 포함하는 일부 염색체의 말단이 일정 수준 이하의 길이로 단축되는 경우 분열을 멈추고 프로그램된 세포 노화 (세포 사멸)의 단계로 들어간다. 텔로미어 말단 반복 서열의 손실은 텔로머라제의 활성 증대에 의해 감소되므로, 텔로미어 말단의 텔로미어 반복 서열을 첨가하는 효과를 가지는 텔로머라제 활성 유도는 노화 또는 사멸단계에 있는 체세포의 복제 및 분열을 재개시키고, 노화 또는 사멸단계의 세포가 많이 분포한 손상된 조직의 회복을 유도할 것으로 예상된다.
추가적으로 체세포에서 텔로머라제 활성을 증대시키는 경우, 퇴행성 신경 질환 (대표적으로 알츠하이머)의 치료 또는 예방, 감염된 세포를 죽이는 면역세포(세포 독성 T 림프구)의 조기 노화에 의해 촉발되는 HIV의 치료 또는 개선, 피부 외상 등의 상처 치료(wound healing), 골수 이식 등의 이식 세포의 유지 등에 도움이 될 수 있다. 추가적으로, 텔로머라제 활성은 텔로머라제의 효소 부분인 hTERT의 과발현(over-expression) 또는 열충격단백질(HSP, Heat-shock protein)과 같이 텔로머라제의 어셈블리를 조정하는 단백질의 발현에 의하여 증가되는 것으로 알려져 있다.
텔로미어 길이의 산정은 텔로미어의 생물학적 및 임상학적 중요도를 이해하는 데 중요하다. 텔로미어 길이는 세포의 염색체 안정성, 텔로머라제 활성 및/또는 발현, 증식 능력 및 노화 과정 연구에 유용한 지표로 작용한다. 텔로미어의 임상적 가치는 암, 조로 증후군 또는 부분적 조로증; 유전적 이상, 염색체 불안정으로 인한 질환 예컨대 블룸(Bloom) 증후군(감염자 염색체의 단절 및 재배열 빈도가 높은 희귀한 유전적 장애) 및 노화-관련 질환 예컨대 워너 증후근(Warner's Syndrome)(비교적 젊은 사람에서 급 노화를 나타내는 희귀 질환)에서 그 중요성이 입증될 수 있다. 텔로미어 길이의 동태는 특정 질환 진행에서 독특한 발현 패턴을 갖는다. 따라서, 이는 질환의 예측에 매우 유용하다.
한편, 텔로머라제의 활성 감소 및 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 퇴행성 신경 질환 및 잘 알려진 퇴행성 신경 질환인 알츠하이머 치료제의 개발을 위한 효력, 효능 실험에 사용되는 동물 모델로는 아밀로이드 베타의 축적 및 NFT (neurofibrillary tangle)가 유도되도록 특정 유전자 3개 (APP, Tau, PS1)가 변이된 쥐 (3xTg-AD mouse model) 등이 있다. 이 3가지의 유전자가 변이된 쥐는 시간이 경과할수록 알츠하이머 증상을 포함한 신경세포 손상 질병 진행 상황을 나타낸다. 이러한 신경세포의 손실이 유도되는 동물에 개발한 약제를 투여하여 신경세포의 파괴억제 및 재생능을 관찰하고 비투여 대조군과 비교하는 것으로 치료제 후보들의 효력, 효능을 측정 할 수 있다고 알려져 있다.
본 발명의 일측면에 따른 펩티드 PEP1은 (이하 PEP1) 텔로머라제 (telomerase)의 촉매부분에 존재하는 16개의 중요한 아미노산으로 구성된 펩타이드로 항염 및 항산화 등의 효능을 지닌 것으로 알려져 있다. 본 발명의 일측면에 따른 펩티드가 텔로머라제의 활성을 증가시키고 세포 내 텔로미어 길이를 증대시키는 효과가 있음이 동물 실험 등을 통하여 발견됨에 따라, PEP1이 텔로머라제 활성 감소 및 텔로미어 길이 축소에 의해 유도되는 다양한 질환들의 예방 및 치료에 효과를 보일 것으로 기대된다.
본 명세서는 텔로머라제의 역전사 효소 (reverse transcriptase of telomerase) 유래의 펩티드를 포함하는 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 조성물을 제공한다. 구체적으로 본 명세서는 인간 텔로머라제 역전사 효소 (reverse transcriptase of human telomerase, hTERT) 유래의 아미노산 펩티드를 포함하는 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 조성물을 제공한다. 보다 구체적으로는 본 명세서는 hTERT 유래의 16개 아미노산 펩티드인 PEP1을 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 조성물로 제공한다.
WO 2008-149345 A2
이러한 배경하에서 본 발명자들은 부작용이 거의 없으면서, 효과가 우수한 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 지닌 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소에 따른 증상 들의 예방 및 치료용 조성물을 개발하고자 예의 노력한 결과 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
본 명세서의 목적은 효과적이면서 동시에 부작용이 없으며 텔로머라제 활성을 증가시키고 텔로미어 길이를 연장시키는 펩티드 조성물 및 이를 이용한 텔로머라제 활성 감소 및 텔로미어 길이 감소에 따른 세포 노화, 손상, 사멸 등에 의해 유발되는 증상들의 예방 및 개선, 치료 방법을 제공하는데 있다.
본 발명의 일측면에 따르면, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 약학적으로 유효한 양으로 포함하는 텔로머라제의 활성 증가 또는 텔로미어의 길이를 연장시키기 위한 조성물이 제공된다.
본 발명은 다른 측면에서, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 필요로 하는 개체에 적용하는 것을 포함하는, 텔로머라제의 활성 증진 또는 텔로미어 길이의 연장 방법을 제공한다.
본 발명은 다른 측면에서, 텔로머라제의 활성 증진 또는 텔로미어 길이의 연장에 사용하기 위한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 제공한다.
본 발명은 또 다른 측면에서, 텔로머라제의 활성 증진 또는 텔로미어 길이의 연장을 위한 유효성분으로서 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 비치료적 화장 용도를 제공한다.
본 발명은 또 다른 측면에서, 텔로머라제의 활성 증진 또는 텔로미어 길이의 연장을 위한 조성물의 제조에 사용하기 위한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용도를 제공한다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물에 있어서, 상기 조성물은 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환 또는 세포 손실 및 노화에 따른 증상을 예방 또는 치료하기 위한 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명은 다른 측면에서, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 필요로 하는 개체에 적용하는 것을 포함하는, 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환 또는 세포 손실 및 노화에 따른 증상의 치료 방법 또는 예방 방법을 제공한다.
본 발명은 다른 측면에서, 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환 또는 세포 손실 및 노화에 따른 증상의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 제공한다.
본 발명은 또 다른 측면에서, 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환 또는 세포 손실 및 노화에 따른 증상을 개선 또는 예방하기 위한 유효성분으로서 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 비치료적 화장 용도를 제공한다.
본 발명은 또 다른 측면에서, 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환 또는 세포 손실 및 노화에 따른 증상을 치료 또는 예방하기 위한 조성물의 제조에 사용하기 위한, 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용도를 제공한다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물에 있어서, 상기 질환은 신경변성 질환, 신경계 퇴행성 질환, 골격계의 퇴행성 질환, 근육계의 퇴행성 질환, 바이러스성 감염 질환, 가속화된 세포 사망율을 유발하는 유전적 질환으로부터 선택되는 하나 이상의 질환인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물에 있어서, 상기 신경계 퇴행성 질환은 뇌질환, 척수손상, 말초신경손상, 말초신경질환, 근위축성 측색 경화증 (amyotrophic lateral sclerosis), 치매, 헌팅턴병, 파킨슨병, 알츠하이머성 질환, 척수 소뇌 변성증, 근위축성 측색 경화증, 및 다발성 신경병증 중 어느 하나인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물에 있어서, 상기 세포 손실 및 노화에 따른 증상은 피부 창상에 의한 조직 손실, 피부 주름, 빈혈, 피부 건선, 피부 암화로부터 선택되는 하나 이상의 증상인 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 다른 일측면에 따르면, 상기 조성물을 활성성분으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 약학적 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따른 약학적 조성물에 있어서, 상기 약학적 조성물은 서열번호 1의 펩티드가 0.1 μg/kg 내지 100 mg/kg 용량으로 투여되도록 하는 것을 특징으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 약학적 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 일측면에 따르면, 상기 조성물을 활성성분으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 건강기능식품용 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따른 건강기능식품용 조성물에 있어서, 상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 다른 일측면에 따르면, 상기 조성물을 활성성분으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 화장용 조성물이 제공된다.
본 발명의 다른 측면에 따른 화장용 조성물에 있어서, 상기 화장용 조성물은 스킨, 로션, 크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 폼 클렌징, 비누 및 피부외용 연고로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 이루어진 것을 특징으로 할 수 있다.
본 명세서에 따른 서열번호 1의 서열을 갖는 펩티드 또는 상기 서열과 80%의 상동성을 갖는 서열을 갖는 펩티드 또는 단편인 펩티드가 세포의 비정상적인 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소 및 손실 등에 의한 질환, 세포의 노화에 의한 증상, 신경세포 손실 및 재생능력 상실과 관련된 질환의 예방 및 치료 효능을 가져, 이들 질환의 예방 및 치료법을 제공한다.
도 1은 퇴행성 신경계 질환의 실험을 위한 유전자 조작 동물모델에서, 퇴행성 신경질환이 유도되었을 때, 본 명세서에 따른 펩타이드의 농도별 투여(0, 0.01, 0.1, 1 mg/kg)에 의해 텔로머라제 활성이 증가된 정도를 비교 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 퇴행성 신경계 질환의 실험을 위한 유전자 조작 동물모델에서, 퇴행성 신경 질환이 유도되었을 때, 본 명세서에 따른 펩타이드의 농도별 투여(0, 0.01, 0.1, 1 mg/kg)에 의해 텔로미어의 길이가 증가된 정도를 보여주는 염색체 전기영동 사진이다.
도 3은 텔로머라제 활성을 측정하는 RTA(Relative telomerase activities)를 계산하는 계산식이다.
도 4는 텔로머라제 활성을 측정하기 위한 실험에서 PCR 단계의 실험 조건을 나타낸 표이다.
도 5는 텔로미어 길이를 측정하기 위한 실험에서 이미지를 분석하는데 사용된 계산식이다.
본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
텔로미어 (telomere)는 염색체의 말단에 반복적으로 존재하는 유전 물질로서, 해당 염색체의 손상이나 다른 염색체와의 결합을 방지한다고 알려져 있다. 세포가 분열할 때마다 텔로미어의 길이는 조금씩 짧아지는데, 일정한 횟수 이상의 세포 분열이 있게 되면 텔로미어는 매우 짧아지고, 그 세포는 분열을 멈추고 죽게 된다. 반면 텔로미어를 길게 하면 세포의 수명이 연장된다고 알려져 있다. 텔로머라제 유래 펩티드인 PEP1은 췌장암을 비롯한 다양한 암에 대한 항암제로 개발되어 왔지만, 그간 항암 효과 이외에도, 항염, 항산화, 세포투과성 및 세포내 주요 신호전달 과정에 관여하는 것으로 밝혀졌으며, PEP1의 이러한 세포내 기능들에 착안하여 기존 항암제로서의 용도 이외에 새로운 적응증에 대한 활용가능성이 탐구되어 왔다.
본 발명자들은 텔로머라제로부터 유래되는 펩티드가 텔로머라제의 활성을 증대시키며 또한 텔로미어 길이를 증가시키는 활성이 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다. 보다 구체적으로 본 발명의 일측면에서는 알츠하이머 동물 모델 시험을 통해서 PEP1이 텔로머라제 활성이 감소되거나 길이가 짧아진 알츠하이머 동물 모델에서 추출된 세포 실험을 통해 텔로머라제 활성을 증가시키며, 텔로미어 관련 DNA의 길이를 증가시키는 결과를 확인하였다.
본 발명의 일측면에서, 서열 번호 1의 펩티드 (PEP1), 서열번호 1의 단편인 펩티드 또는 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드는 텔로머라제, 구체적으로 인간(Homo sapiens) 텔로머라제에서 유래한 펩티드를 포함한다.
본 명세서에 개시된 펩티드는 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 96% 이상, 97% 이상, 98% 이상, 99% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드를 포함할 수 있다. 또한, 본 명세서에 개시된 펩티드는, 서열번호 1을 포함하는 펩티드 또는 그 단편들과 1개 이상의 아미노산, 2개 이상의 아미노산, 3개 이상의 아미노산, 4개 이상의 아미노산, 5개 이상의 아미노산, 6개 이상의 아미노산 또는 7개 이상의 아미노산이 변화된 펩티드를 포함할 수 있다.
본 발명의 일측면에서, 아미노산 변화는 펩티드의 물리화학적 특성이 변경되도록 하는 성질에 속한다. 예를 들어, 펩티드의 열안정성을 향상시키고, 기질 특이성을 변경시키고, 최적의 pH를 변화시키는 등의 아미노산 변화가 수행될 수 있다.
서열 번호 1에 기재된 펩티드는 아래 표 1과 같다. 아래 표 1의 "이름"은 펩티드를 구별하기 위해 명명한 것이다. 본 발명의 일측면에서, 서열 번호 2에 기재된 펩티드는 인간 텔로머라제의 전체 펩티드를 나타낸다. 본 발명의 다른 일측면에서, 서열 번호 1의 서열을 갖는 펩티드, 서열 번호 1의 서열의 단편인 펩티드 또는 상기 펩티드 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드는 텔로머라제에 포함된 펩티드 중 해당 위치의 펩티드를 선별해 합성한 "합성 펩티드"를 포함한다. 서열번호 2는 전체 텔로머라제의 아미노산 서열을 나타낸 것이다.
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본 발명의 일측면에 따른 서열번호 1의 펩티드를 포함하는 조성물은 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환 또는 세포 손실 및 노화에 따른 증상을 예방 또는 치료하는데 유용하다. 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환은 신경변성 질환, 신경계 퇴행성 질환, 골격계의 퇴행성 질환, 근육계의 퇴행성 질환, 바이러스성 감염 질환, 가속화된 세포 사망을 유발하는 유전적 질환으로부터 선택되는 하나 이상의 질환이다. 텔로머라제 활성 증가가 이로울 수 있는 신경계 퇴행성 질환으로는 뇌질환, 척수손상, 말초신경손상, 말초신경질환, 근위축성 측색 경화증 (amyotrophic lateral sclerosis), 치매, 헌팅턴병, 파킨슨병, 알츠하이머성 질환, 척수 소뇌 변성증, 근위축성 측색 경화증, 및 다발성 신경병증 중 어느 하나일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 추가적으로, 텔로머라제 활성 증가가 이로울 수 있는 질병 상태로는, 퇴행성 관절 질병, 죽상경화증, 혈전증, 심부전 또는 허혈과 같은 스트레스로 인한 세포사, 연령-관련 반상 토행, AIDS, 가속화된 세포 재편성을 야기하는 유전 질환과 함께 발생하는 조직 재편성의 손상 및 기타 퇴행성 상태를 포함한다.
본 발명의 일측면에 따른 텔로머라제 활성을 증가시키는 조성물은 세포 손실 및 노화에 따른 증상 치료를 촉진하기에 효과적이며, 피부 창상에 의한 조직 손실, 피부 주름, 빈혈, 피부 건선, 피부 암화 또는 기타 급성 또는 만성 피부 질환으로부터 선택되는 하나 이상의 증상의 치료에 바람직한 효과를 가진다.
본 발명의 일측면에서는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 (comprising) 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 텔로머라제 활성 증가 및 텔로미어 연장 효능을 가지는 펩티드를 유효 성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물은 인간, 개, 닭, 돼지, 소, 양, 기니아피그 또는 원숭이를 포함하는 모든 동물에 적용될 수 있다.
본 발명의 일측면에서 조성물은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 (comprising) 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 신경세포 손실 예방 및 재생 효능을 가지는 펩티드를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 경구, 직장, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 골수 내, 경막 내 또는 피하 등으로 투여될 수 있다.
경구 투여를 위한 제형은 정제, 환제, 연질 또는 경질 캅셀제, 과립제, 산제, 액제 또는 유탁제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 비경구 투여를 위한 제형은 주사제, 점적제, 로션, 연고, 겔, 크림, 현탁제, 유제, 좌제, 패취 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 필요에 따라 희석제, 부형제, 활택제, 결합제, 붕해제, 완충제, 분산제, 계면 활성제, 착색제, 향료 또는 감미제 등의 첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 당업계의 통상적인 방법에 의해 제조될 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물의 유효 성분은 투여 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.01 ㎍/kg/일 내지 10g/kg/일, 구체적으로는 0.1 ㎍/kg/일 내지 1g/kg/일, 더 구체적으로는 0.5 ㎍/kg/일 내지 100 mg/kg/일이 될 수 있으나, 용량에 따른 효과의 차이를 보이는 경우 이를 적절히 조절할 수 있다. 본 발명의 일측면에 따른 약학 조성물은 1일 1회 내지 3회 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 일 측면에 따른 건강기능식품 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 일측면에 따른 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하여 사용하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 빵, 캔디류, 스낵류, 면류, 낙농제품, 비타민 복합제, 음료수, 차, 드링크제 등이 있으나, 이제 제한되는 것은 아니며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 일 측면에 따른 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 일 측면에 따른 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다.
본원발명에 따른 약학 조성물 또는 건강기능식품 조성물은 바람직하게는 0.1% 이상, 최대 약 10%, 바람직하게는 최대 약 5% 및 더 바람직하게는 최대 1% (w/v)로 서열번호 1의 펩티드를 함유한다. 적당한 농도의 선택은 예를 들어 바람직한 투여량, 빈도 및 활성 성분의 송달의 방법과 같은 인자들에 의존적이다.
본 발명의 일 측면에 따른 화장용 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이크림, 영양크림, 맛사지크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 파우더, 엣센스, 팩 등의 제형을 가질 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 화장료 조성물은 통상의 화장료 제조방법에 따라, 다양한 형태로 제조될 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물은 상기 펩티드를 함유하는 향장 제품, 화장수, 크림, 로션 등의 형태로 제조될 수 있으며, 이는 통상의 클렌징액, 수렴액 및 보습액으로 희석하여 사용될 수 있다. 또한, 상기 화장료 조성물은 화장료 조성물 분야에서 통상적으로 사용되는 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.
본 발명의 일측면에 따른 조성물의 제형은 특별히 한정되지 않으나, 예를 들어, 정제, 과립제, 분말제, 액제, 고형 제제 등으로 제형화될 수 있다. 각 제형은 유효 성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승 효과가 일어날 수 있다.
본 명세서에서 사용된 용어들은 특정 구체예들을 설명하기 위한 목적으로만 의도된 것이지 본 발명을 한정하고자 하는 의도가 아니다. 명사 앞에 개수가 생략된 용어는 수량을 제한하고자 하는 것이 아니라 언급된 명사 물품이 하나 이상 존재하는 것을 나타내는 것이다. 용어 "포함하는", "갖는", 및 "함유하는"은 열린 용어로 해석된다 (즉, "포함하지만 이에 한정되지는 않는"의 의미).
수치의 범위를 언급하는 것은 단지 그 범위 내에 속하는 각각의 별개의 수치들을 개별적으로 언급하는 것을 대신하는 쉬운 방법이기 때문이며, 그것이 아님이 명시되어 있지 않는, 각 별개의 수치는 마치 개별적으로 명세서에 언급되어 있는 것처럼 본 명세서에 통합된다. 모든 범위의 끝 값들은 그 범위 내에 포함되며 독립적으로 조합 가능하다.
본 명세서에 언급된 모든 방법들은 달리 명시되어 있거나 문맥에 의해 명백히 모순되지 않는 한 적절한 순서로 수행될 수 있다. 어느 한 실시예 및 모든 실시예 또는 예시적 언어 (예컨대, "~과 같은")를 사용하는 것은, 청구범위에 포함되어 있지 않는 한, 단지 본 발명을 더 잘 기술하기 위함이지 본 발명의 범위를 제한하고자 함이 아니다. 명세서의 어떤 언어도 어떤 비청구된 구성요소를 본 발명의 실시에 필수적인 것으로 해석되어서는 아니된다. 다른 정의가 없는 한, 본 명세서에 사용되는 기술적 및 과학적 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 갖는 사람에 의해 통상 이해되는 것과 같은 의미를 갖는다.
본 발명의 바람직한 구체예들은 본 발명을 수행하기 위해 발명자에게 알려진 가장 최적의 모드를 포함한다. 바람직한 구체예들의 변이들이 앞선 기재를 읽으면 당업자에게 명백하게 될 수 있다. 본 발명자들은 당업자들이 그러한 변이를 적절히 이용하길 기대하고, 발명자들은 본 명세서에 기재된 것과 다른 방식으로 본 발명이 실시되기를 기대한다. 따라서, 본 발명은, 특허법에 의해 허용되는 것과 같이, 첨부된 특허청구범위에서 언급된 발명의 요지의 균등물 및 모든 변형들을 포함한다. 더욱이, 모든 가능한 변이들 내에서 상기 언급된 구성요소들의 어떤 조합이라도 여기서 반대로 명시하거나 문맥상 명백히 모순되지 않는 한 본 발명에 포함된다. 본 발명은 예시적인 구체예들을 참조하여 구체적으로 나타내어지고 기술되었지만, 당업자들은 하기 청구범위에 의해 정의되는 발명의 정신 및 범위를 벗어나지 않고서도 형태 및 디테일에서 다양한 변화가 행해질 수 있음을 잘 이해할 것이다 .
이하, 실시예 및 실험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 아래 실시예 및 실험예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 그에 의해 제한되는 것은 아니다.
[실시예 1]
펩티드의 합성
서열번호 1의 펩티드 (이하 "PEP1"이라 함)를 종래에 알려진 고상 펩티드 합성법에 따라 제조하였다. 구체적으로, 펩티드들은 ASP48S (Peptron, Inc., 대한민국 대전)를 이용하여 Fmoc 고상 합성법 (solid phase peptide synthesis, SPPS)을 통해 C-말단부터 아미노산 하나씩 커플링함으로써 합성하였다. 다음과 같이, 펩티드들의 C-말단의 첫번째 아미노산이 수지에 부착된 것을 사용하였다. 예컨대 다음과 같다:
NH2-Lys(Boc)-2-chloro-Trityl Resin
NH2-Ala-2-chloro-Trityl Resin
NH2-Arg(Pbf)-2-chloro-Trityl Resin
펩티드 합성에 사용한 모든 아미노산 원료는 N-term이 Fmoc으로 보호 (protection)되고, 잔기는 모두 산에서 제거되는 Trt, Boc, t-Bu (t-butylester), Pbf (2,2,4,6,7-pentamethyl dihydro-benzofuran-5-sμfonyl) 등으로 보호된 것을 사용하였다. 예컨대 다음과 같다:
Fmoc-Ala-OH, Fmoc-Arg(Pbf)-OH, Fmoc-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Trp(Boc)-OH, Fmoc-Met-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Ahx-OH, Trt-Mercaptoacetic acid.
커플링 시약(Coupling reagent)으로는 HBTU[2-(1H-Benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetamethylaminium hexafluorophosphate] / HOBt [N-Hydroxxybenzotriazole] /NMM [4-Methylmorpholine] 를 사용하였다. Fmoc 제거는 20%의 DMF 중 피페리딘(piperidine in DMF)을 이용하였다. 합성된 펩티드를 Resin에서 분리 및 잔기의 보호기 제거에는 절단 칵테일 (Cleavage Cocktail) [TFA (trifluoroacetic acid) /TIS (triisopropylsilane) / EDT (ethanedithiol) / H2O=92.5/2.5/2.5/2.5] 를 사용하였다.
아미노산 보호기가 결합된 출발 아미노산이 고상 지지체에 결합되어 있는 상태를 이용하여 여기에 해당 아미노산들을 각각 반응시키고 용매로 세척한 후 탈보호하는 과정을 반복함으로써 각 펩티드를 합성하였다. 합성된 펩티드를 수지로부터 끊어낸 후 HPLC로 정제하고, 합성 여부를 MS로 확인하고 동결 건조하였다.
본 실시예에 사용된 펩티드에 대해 고성능 액체 크로마토그래피 결과, 모든 펩티드의 순도는 95% 이상이었다.
펩티드 PEP1 제조에 관한 구체적인 과정을 설명하면 다음과 같다.
1) 커플링
NH2-Lys(Boc)-2-chloro-Trityl Resin 에 보호된 아미노산 (8당량)와 커플링 시약 HBTU (8당량)/HOBt (8당량)/NMM (16당량)을 DMF에 녹여서 첨가한 후, 상온에서 2시간 동안 반응하고 DMF, MeOH, DMF순으로 세척하였다.
2) Fmoc 탈보호
20%의 DMF 중의 피페리딘(piperidine in DMF)을 가하고 상온에서 5분 간 2회 반응하고 DMF, MeOH, DMF순으로 세척하였다.
3) 1과 2의 반응을 반복적으로 하여 펩티드 기본 골격 NH2-E(OtBu)-A-R(Pbf)-P-A-L-L-T(tBu)-S(tBu)-R(Pbf)L-R(Pbf)-F-I-P-K(Boc)-2-chloro-Trityl Resin)을 만들었다.
4) 절단 (Cleavage): 합성이 완료된 펩티드 Resin에 절단 칵테일(Cleavage Cocktail) 을 가하여 펩티드를 Resin에서 분리하였다.
5) 얻어진 혼합물에 냉각 디에틸 에테르를 가한 후, 원심 분리하여 얻어진 펩티드를 침강시킨다.
6) Prep-HPLC로 정제 후, LC/MS로 분자량을 확인하고 동결하여 파우더로 제조하였다.
[실시예 2]
실험 재료 및 방법
실시예 2-1: 실험동물의 준비
동물에 관한 모든 절차는 한양대학교 실험동물 가이드라인에 따라 진행하였다. 모든 실험은 동물의 개체 수와 고통을 최소화 하였으며, 모든 동물은 한번만 사용되었다.
PEP1은 상기 실시예 1에 따른 방법으로 준비된 것을 사용하였으며, 나머지 시약 및 대조 물질은 시그마 알드리치(Sigma Aldrich)에서 구입한 순정품을 사용하였다.
알츠하이머병에서의 PEP1의 치료효과를 테스트하기 위하여 Jackson Laboratory에서 알츠하이머 형질 전환 마우스 (3XTg-AD)을 구입하여 사용하였다. 이 형질전환 마우스의 유전적 특성은 표 2와 같다.
Strain Name B6;129-Psen1tm1Mpm Tg(APPSwe,tauP301L)1Lfa/Mmjax
Common Names 3xTg-AD
Disease Alzheimer Disease; AD
Targeted Mutation amyloid beta precursor protein (APPSwe), microtubule-associated protein tau (tauP30IL)
Genotype Psen1tm1Mpm/Psen1tm1Mpm Tg(APPSwe,tauP301L)1Lfa
Phenotype amyloid beta deposits, neurofibrillary tangles, abnormal behavior( abnormal learning/memory/conditioning, abnormal contextual conditioning behavior)
8주령의 형질전환 마우스를 분양 받아, 예비 사육한 후, 형질전환 마우스의 개체수를 늘리기 위해 수컷과 암컷의 비율을 1:2로 케이지에 사육한 후, 약 7~8일이 지나서 분리하고, 약 7~8주 후 임신이 확인된 마우스는 1주가 지난 후 출산을 하게 되며 3주 동안의 이유과정을 거쳤다. 그리고 2주가 지나면 성숙한 마우스를 얻을 수 있다. 예비 사육 및 실험 전체 기간 동안 온도 23±2℃, 상대습도 60±10%를 유지하였으며, 12시간의 명암주기를 지켜서 사육하였다.
사육 후 PEP1의 농도별 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험동물을 나누어 실험 물질 투여를 실시하였다. 양성대조물질로 도네페질(Donepezil)을 이용하고 실험동물은 5군으로 구분하였으며, 각 군마다 10마리씩 배치하였다. 각 군별 투여 물질 및 투여량은 다음과 같다.
1군: 식염수(Saline)
2군: PEP1 0.01 mg/kg
3군: PEP1 0.1 mg/kg
4군: PEP1 1mg/kg
5군: 도네페질 1mg/kg
PEP1, 식염수 및 도네페질은 12개월 때부터 두 달 동안 일주일에 3번씩 각 농도 별로 피하 주사한 후, 1달 후(15개월 차)에 마우스(각 군당 10 마리)에 마취 후에, 0.9% 식염수를 이용하여 마우스의 심장을 통한 재관류를 시행하여 전체의 피를 제거하였다. 그 후 뇌를 꺼내어, 해마 부위와 전체 뇌 부위로 분리하여 뇌 조직을 얻어, 액체 질소를 이용하여 급격히 얼렸다.
실시예 2-2: 텔로머라제 활성 및 텔로미어 길이 측정 방법
텔로머라제 활성 및 텔로미어 길이가 시간이 지날수록 감소되는 것을 확인 하기 위하여 알츠하이머 유도 동물 모델의 7개월차(AD Tg 7M으로 표시)와 15개월차(AD Tg 15M으로 표시)에서 실시예 2-1의 방법으로 뇌 조직을 얻어 텔로머라제 활성 및 텔로미어 길이를 측정하였다.
PEP1에 의한 텔로머라제 활성을 조사하기 위해서 TeloTAGGG Telomerase PCR ELISAPLUS (Cat # 12 013 789 001, Roche Boehringer-Mannheim, IN, USA)를 사용하여 측정하였고 실시예 2-1의 방법에 따라 준비된 뇌 조직 전체를 분쇄한 후 2-3 g의 조직에 200 μl ice-cold lysis buffer를 넣고 ice에서 30분간 incubation 후 16,000 x g 20분간 원심분리 시키면 175 μl의 단백질이 분리된다. 10 μg 단백질을 정량하여 reaction mixture와 internal standard를 혼합하여 PCR (도 4 참조)을 실시 한 후, Hybridization을 진행 하고 특수 코팅된 MP module에 샘플을 넣고 반응 후 ELISA reader로 450, 690 nm 흡광도를 측정했다. Relative telomerase activities (RTA)는 제시된 계산식 (도 3 참조)을 이용하여 결과 도출을 하였다.
텔로미어 길이 측정은 TeloTAGGG Telomere length assay (Cat # 12 209 136 001, Roche Boehringer-Mannheim, IN, USA)를 사용하였고, 뇌 조직 전체를 분쇄한 후 High Pure PCR Template preparation kit (Cat # 11 796 828 001, Roche Boehringer-Mannheim, IN, USA)를 이용하여 DNA를 추출하여 1-2 μg의 purified genomic DNA와 Hinf1/Rsa 1 enzyme mixture와 혼합하여 37℃에서 2시간 반응시킨다. 반응이 끝나면 5μl gel eletrophoresis loading buffer 5x 와 혼합하여 0.8 % agarose gel에 5V/cm속도로 3시간 전기영동 시킨다. 반응을 마친 겔은 HCL solution에 10분간 반응시키면 bromophenol blue stain색이 노란색으로 바뀐다. denaturation solution과 neutralization solution으로 순차 반응 시킨 후 20x SSC이용하여 nylon membrane에 최소 6시간에서 12시간 서던 블랏(southern blotting)으로 transfer시켰다. Southern transfer가 끝나고 membrane을 120℃에서 20분간 구워 DNA를 membrane에 고정시켜 2x SSC buffer에 washing한 membrane을 Hybridization 후 image analyzer (GE Healthcare, ImageQuant LAS 4000)를 통해 4시간의 노출시간 설정으로 이미지 분석을 수행하였다 (분석식은 도 5 참조). 길이 측정 이미지를 위한 대조 DNA (control DNA 1, 2로 각각 표기)는 kit에서 제공하는 무작위 서열 DNA를 사용하였다.
실시예 2-3: 통계적 검증 방법
모든 통계적 검증에 SPSS 21 통계 프로그램과 통계 사이트(http://vassarstats.net)를 사용하였다. 등간척도나 비율척도로 측정된 데이터는 mean±S.E.M.으로 나타내었으며, 모수통계를 위해서는 one-way 혹은 two-way ANOVA test 후 Tukey test로 사후 검증을 실시하였고 비모두통계를 위해서는 Kruskal-Wallis test, Mann-Witney U-test를 이용하여 분석하였다. 각 군 간의 비교는 Tukey 검정법을 시행하였다. 명명척도의 경우 카이스퀘어 분석을 이용하여 군 간의 비교를 시행하였다. p값이 0.05 미만인 경우에 통계학적으로 유의한 것으로 판정하였다.
[실시예 3]
텔로머라제 활성 및 텔로미어 길이 측정 결과
실시예 3-1: 텔로머라제 활성 측정 결과
PEP1이 텔로머라제 활성을 증가시키는지를 확인하기 위하여, 실시예 2-1 및 2-2에 따른 방법을 통하여 측정하였다. 그 결과 PEP1 (0.1 mg/kg) 투여군(3군)에서 식염수 투여군(1군) 대비 266% 증가율을 보였고, PEP1 (1 mg/kg) 투여군(4군)에서 식염수 투여군(1군) 대비 370% 증가율을 보였으며, 도네페질 (1mg/kg) 투여군(5군)과 대비해서도 통계적으로 유의하게 증가하였다(도 1 참조). 또한 텔로머라제 활성이 7개월차(AD Tg 7M)에 비하여 15개월차(AD Tg 15M)에 감소되었음도 확인하였다.
실시예 3-2: 텔로미어 길이 측정 결과
PEP1이 보인 텔로머라제 활성 증가율이 텔로미어 길이 유지 또는 증가에도 직접적인 영향을 보이는지 확인하기 위하여 텔로미어 길이 측정 실험을 실시예 2-2에 따른 방법을 통하여 실시하였다. 그 결과 텔로머라제 활성 증가 결과와 동일하게 PEP1의 투여 농도에 따라 텔로미어 길이가 증가하는 결과가 나타났다(도 2 참조). 이는 PEP1이 텔로미어의 길이 또한 증대 시키며, 이를 통하여 염색체의 안정성 증대 및 세포 보호의 효과를 줄 수 있음을 알 수 있다. 또한 텔로미어 길이가 7개월차(AD Tg 7M)에 비하여 15개월차(AD Tg 15M)에 감소되었음도 확인하였다.
상기 실시예들을 통하여 PEP1이 동물모델을 통한 실험에서 텔로머라제 활성 증대 및 텔로미어 길이 증대의 효능을 가짐을 알 수 있다. 따라서 본 발명의 일측면에 따른 펩티드 PEP1은 세포의 비정상적인 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어의 길이 감소 및 손실 등에 의한 질환 및 세포의 노화에 의한 증상 등을 예방 또는 개선, 치료할 수 있는 물질로 개발될 수 있으며, 이를 이용하여 관련 질환의 예방 및 치료 방법을 제공할 수 있을 것이다.
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125 Asp Ala Leu Arg Gly Ser Gly Ala Trp Gly Leu Leu Leu Arg Arg Val 130 135 140 Gly Asp Asp Val Leu Val His Leu Leu Ala Arg Cys Ala Leu Phe Val 145 150 155 160 Leu Val Ala Pro Ser Cys Ala Tyr Gln Val Cys Gly Pro Pro Leu Tyr 165 170 175 Gln Leu Gly Ala Ala Thr Gln Ala Arg Pro Pro Pro His Ala Ser Gly 180 185 190 Pro Arg Arg Arg Leu Gly Cys Glu Arg Ala Trp Asn His Ser Val Arg 195 200 205 Glu Ala Gly Val Pro Leu Gly Leu Pro Ala Pro Gly Ala Arg Arg Arg 210 215 220 Gly Gly Ser Ala Ser Arg Ser Leu Pro Leu Pro Lys Arg Pro Arg Arg 225 230 235 240 Gly Ala Ala Pro Glu Pro Glu Arg Thr Pro Val Gly Gln Gly Ser Trp 245 250 255 Ala His Pro Gly Arg Thr Arg Gly Pro Ser Asp Arg Gly Phe Cys Val 260 265 270 Val Ser Pro Ala Arg Pro Ala Glu Glu Ala Thr Ser Leu Glu Gly Ala 275 280 285 Leu Ser Gly Thr Arg His Ser His Pro Ser Val Gly Arg Gln His His 290 295 300 Ala Gly Pro Pro Ser Thr Ser Arg Pro Pro Arg Pro Trp Asp Thr Pro 305 310 315 320 Cys Pro Pro Val Tyr Ala Glu Thr Lys His Phe Leu Tyr Ser Ser Gly 325 330 335 Asp Lys Glu Gln Leu Arg Pro Ser Phe Leu Leu Ser Ser Leu Arg Pro 340 345 350 Ser Leu Thr Gly Ala Arg Arg Leu Val Glu Thr Ile Phe Leu Gly Ser 355 360 365 Arg Pro Trp Met Pro Gly Thr Pro Arg Arg Leu Pro Arg Leu Pro Gln 370 375 380 Arg Tyr Trp Gln Met Arg Pro Leu Phe Leu Glu Leu Leu Gly Asn His 385 390 395 400 Ala Gln Cys Pro Tyr Gly Val Leu Leu Lys Thr His Cys Pro Leu Arg 405 410 415 Ala Ala Val Thr Pro Ala Ala Gly Val Cys Ala Arg Glu Lys Pro Gln 420 425 430 Gly Ser Val Ala Ala Pro Glu Glu Glu Asp Thr Asp Pro Arg Arg Leu 435 440 445 Val Gln Leu Leu Arg Gln His Ser Ser Pro Trp Gln Val Tyr Gly Phe 450 455 460 Val Arg Ala Cys Leu Arg Arg Leu Val Pro Pro Gly Leu Trp Gly Ser 465 470 475 480 Arg His Asn Glu Arg Arg Phe Leu Arg Asn Thr Lys Lys Phe Ile Ser 485 490 495 Leu Gly Lys His Ala Lys Leu Ser Leu Gln Glu Leu Thr Trp Lys Met 500 505 510 Ser Val Arg Asp Cys Ala Trp Leu Arg Arg Ser Pro Gly Val Gly Cys 515 520 525 Val Pro Ala Ala Glu His Arg Leu Arg Glu Glu Ile Leu Ala Lys Phe 530 535 540 Leu His Trp Leu Met Ser Val Tyr Val Val Glu Leu Leu Arg Ser Phe 545 550 555 560 Phe Tyr Val Thr Glu Thr Thr Phe Gln Lys Asn Arg Leu Phe Phe Tyr 565 570 575 Arg Lys Ser Val Trp Ser Lys Leu Gln Ser Ile Gly Ile Arg Gln His 580 585 590 Leu Lys Arg Val Gln Leu Arg Glu Leu Ser Glu Ala Glu Val Arg Gln 595 600 605 His Arg Glu Ala Arg Pro Ala Leu Leu Thr Ser Arg Leu Arg Phe Ile 610 615 620 Pro Lys Pro Asp Gly Leu Arg Pro Ile Val Asn Met Asp Tyr Val Val 625 630 635 640 Gly Ala Arg Thr Phe Arg Arg Glu Lys Arg Ala Glu Arg Leu Thr Ser 645 650 655 Arg Val Lys Ala Leu Phe Ser Val Leu Asn Tyr Glu Arg Ala Arg Arg 660 665 670 Pro Gly Leu Leu Gly Ala Ser Val Leu Gly Leu Asp Asp Ile His Arg 675 680 685 Ala Trp Arg Thr Phe Val Leu Arg Val Arg Ala Gln Asp Pro Pro Pro 690 695 700 Glu Leu Tyr Phe Val Lys Val Asp Val Thr Gly Ala Tyr Asp Thr Ile 705 710 715 720 Pro Gln Asp Arg Leu Thr Glu Val Ile Ala Ser Ile Ile Lys Pro Gln 725 730 735 Asn Thr Tyr Cys Val Arg Arg Tyr Ala Val Val Gln Lys Ala Ala His 740 745 750 Gly His Val Arg Lys Ala Phe Lys Ser His Val Ser Thr Leu Thr Asp 755 760 765 Leu Gln Pro Tyr Met Arg Gln Phe Val Ala His Leu Gln Glu Thr Ser 770 775 780 Pro Leu Arg Asp Ala Val Val Ile Glu Gln Ser Ser Ser Leu Asn Glu 785 790 795 800 Ala Ser Ser Gly Leu Phe Asp Val Phe Leu Arg Phe Met Cys His His 805 810 815 Ala Val Arg Ile Arg Gly Lys Ser Tyr Val Gln Cys Gln Gly Ile Pro 820 825 830 Gln Gly Ser Ile Leu Ser Thr Leu Leu Cys Ser Leu Cys Tyr Gly Asp 835 840 845 Met Glu Asn Lys Leu Phe Ala Gly Ile Arg Arg Asp Gly Leu Leu Leu 850 855 860 Arg Leu Val Asp Asp Phe Leu Leu Val Thr Pro His Leu Thr His Ala 865 870 875 880 Lys Thr Phe Leu Arg Thr Leu Val Arg Gly Val Pro Glu Tyr Gly Cys 885 890 895 Val Val Asn Leu Arg Lys Thr Val Val Asn Phe Pro Val Glu Asp Glu 900 905 910 Ala Leu Gly Gly Thr Ala Phe Val Gln Met Pro Ala His Gly Leu Phe 915 920 925 Pro Trp Cys Gly Leu Leu Leu Asp Thr Arg Thr Leu Glu Val Gln Ser 930 935 940 Asp Tyr Ser Ser Tyr Ala Arg Thr Ser Ile Arg Ala Ser Leu Thr Phe 945 950 955 960 Asn Arg Gly Phe Lys Ala Gly Arg Asn Met Arg Arg Lys Leu Phe Gly 965 970 975 Val Leu Arg Leu Lys Cys His Ser Leu Phe Leu Asp Leu Gln Val Asn 980 985 990 Ser Leu Gln Thr Val Cys Thr Asn Ile Tyr Lys Ile Leu Leu Leu Gln 995 1000 1005 Ala Tyr Arg Phe His Ala Cys Val Leu Gln Leu Pro Phe His Gln Gln 1010 1015 1020 Val Trp Lys Asn Pro Thr Phe Phe Leu Arg Val Ile Ser Asp Thr Ala 1025 1030 1035 1040 Ser Leu Cys Tyr Ser Ile Leu Lys Ala Lys Asn Ala Gly Met Ser Leu 1045 1050 1055 Gly Ala Lys Gly Ala Ala Gly Pro Leu Pro Ser Glu Ala Val Gln Trp 1060 1065 1070 Leu Cys His Gln Ala Phe Leu Leu Lys Leu Thr Arg His Arg Val Thr 1075 1080 1085 Tyr Val Pro Leu Leu Gly Ser Leu Arg Thr Ala Gln Thr Gln Leu Ser 1090 1095 1100 Arg Lys Leu Pro Gly Thr Thr Leu Thr Ala Leu Glu Ala Ala Ala Asn 1105 1110 1115 1120 Pro Ala Leu Pro Ser Asp Phe Lys Thr Ile Leu Asp 1125 1130

Claims (11)

  1. 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 펩티드, 상기 아미노산 서열과 80% 이상의 서열 상동성을 갖는 펩티드 또는 그 단편인 펩티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상을 약학적으로 유효한 양으로 포함하는 텔로머라제의 활성 증가 또는 텔로미어의 길이를 연장시키기 위한 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 텔로머라제 활성 감소 또는 텔로미어 길이 감소로 인해 유도되는 질환 또는 세포 손실 및 노화에 따른 증상을 예방 또는 치료하기 위한 것을 특징으로 하는 텔로머라제의 활성 증가 또는 텔로미어의 길이를 연장시키기 위한 조성물.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 질환은 신경변성 질환, 신경계 퇴행성 질환, 골격계의 퇴행성 질환, 근육계의 퇴행성 질환, 바이러스성 감염 질환, 가속화된 세포 사망율을 유발하는 유전적 질환으로부터 선택되는 하나 이상의 질환인 것을 특징으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 조성물.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 신경계 퇴행성 질환은 뇌질환, 척수손상, 말초신경손상, 말초신경질환, 근위축성 측색 경화증 (amyotrophic lateral sclerosis), 치매, 헌팅턴병, 파킨슨병, 알츠하이머성 질환, 척수 소뇌 변성증, 근위축성 측색 경화증, 및 다발성 신경병증 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 조성물.
  5. 제 2항에 있어서, 상기 세포 손실 및 노화에 따른 증상은 피부 창상에 의한 조직 손실, 피부 주름, 빈혈, 피부 건선, 피부 암화로부터 선택되는 하나 이상의 증상인 것을 특징으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 조성물.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 활성성분으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 약학적 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 서열번호 1의 펩티드가 0.1 μg/kg 내지 100 mg/kg으로 투여되도록 하는 것을 특징으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 약학적 조성물.
  8. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 활성성분으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 건강기능식품용 조성물.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 조성물은 분말, 과립, 환, 정제, 캡슐, 캔디, 시럽 및 음료 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 건강기능식품용 조성물.
  10. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 활성성분으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 화장용 조성물.
  11. 제 10항에 있어서, 상기 화장용 조성물은 스킨, 로션, 크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 폼 클렌징, 비누 및 피부외용 연고로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 이루어진 것을 특징으로 하는 텔로머라제 활성 증가 또는 텔로미어 길이를 연장시키기 위한 화장용 조성물.
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