KR20150129034A - 붕소-함유 디아실하이드라진류 - Google Patents

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쉴라 케이. 첼라판
로버트 이. 호만
인나 셜먼
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인트렉손 코포레이션
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Abstract

본 발명은 하기 화학식 I을 갖는 붕소-함유 디아실하이드라진류 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물을 제공한다:
Figure pct00267

상기 식에서, R1, R2, R3, R4, 및 R5는 본 명세서 내에 개시된 바와 같이 정의된다. 또한, 본 발명은 에크디손 수용체-기반 유도성 유전자 발현 시스템에서 붕소-함유 디아실하이드라진류의 사용을 제공한다. 따라서, 본 발명은 유전자 발현 수준의 제어가 바람직한, 유전자 요법, 질환의 치료, 단백질 및 항체의 대량 생산, 세포 기반 스크리닝 어세이, 기능 유전체학, 단백질체학, 대사체학, 및 형질전환 유기체 내 형질 조절과 같은 적용에 유용하다.

Description

붕소-함유 디아실하이드라진류{BORON-CONTAINING DIACYLHYDRAZINES}
본 발명은 생물 공학, 유전 공학, 유전자 발현, 및 의약 화학 분야에 관한 것이다. 본 발명은 신규한 붕소-함유 디아실하이드라진류, 및 핵 수용체-기반 유도성 유전자 발현 시스템에서의 이들 화합물들의 사용을 제공한다.
유전자 공학 분야에서, 유전자 발현의 정밀한 조절은 발달 및 다른 생리학적 과정을 연구하고, 조작하고, 제어하기 위한 가치있는 수단이다. 유전자 발현은 다수의 특이적인 단백질-단백질 상호작용을 수반하는 복잡한 생물학적 과정이다. 단백질 합성의 첫 번째 단계로서 필요한 RNA를 생산하도록 유전자 발현을 일으키기 위하여, 전사 활성 인자가 유전자 전사를 조절하는 프로모터 가까이에 운반되어야 한다. 전형적으로, 전사 활성 인자 자체가, 유전자의 프로모터 영역에 존재하는 DNA 결합 부위와 결합하는 적어도 하나의 DNA 결합 도메인을 갖는 단백질과 연관되어 있다. 따라서, 유전자 발현이 발생하기 위하여, DNA 결합 도메인과 DNA 결합 도메인으로부터 적절한 간격으로 위치하는 전사활성 도메인을 포함하는 단백질이 유전자의 프로모터 영역 내 정확한 위치에 운반되어야 한다.
전통적인 형질전환 접근법은 설계된 이식 유전자를 발현시키는 세포-타입 특이적 프로모터를 이용한다. 이식 유전자를 함유하는 DNA 구조물을 먼저 숙주 게놈에 도입한다. 전사 활성 인자에 의해 촉발될 때, 이식 유전자의 발현은 주어진 세포 타입 내에서 발생한다.
세포 내에서 외래 유전자의 발현을 조절하는 또 다른 수단은 유도 프로모터를 통하는 것이다. 이러한 유도 프로모터의 사용예로는 PRl-a 프로모터, 원핵생물의 억제인자-작동인자 시스템, 면역억제-이뮤노필린 시스템, 및 스테로이드 호르몬 수용체 시스템과 같은 고등 진핵세포 전사 활성화 시스템을 포함하며, 이는 하기에 기술된다.
담배로부터의 PRl-a 프로모터는 병원체 공격에 뒤따르는 전신의 후천적 내성 반응 동안 유도된다. PRl-a의 사용은 이것이 종종 내인성 물질, 및 병원체, UV-B 조사 및 오염물과 같은 외부 인자에 반응하기 때문에 제한될 수 있다. 열 충격, 인터페론 및 중금속에 의해 유도되는 프로모터 기반의 유전자 조절 시스템이 보고된 바 있다 (Wurn et al., Proc . Natl . Acad . Sci . USA 83:5414-5418 (1986); Arnheiter et al., Cell 62:51-61 (1990); Filmus et al., Nucleic Acids Research 20:27550-27560 (1992)). 그러나, 이들 시스템들은 비-표적 유전자의 발현에 대한 이들의 영향으로 인해 제한을 갖는다. 이들 시스템들은 또한 누출적(leaky)이다.
원핵생물의 억제인자-작동인자 시스템은 박테리아의 억제인자 단백질과 이들이 결합하는 특이 작동인자 DNA 서열을 이용한다. 박테리아 에셔리키아 콜라이(Escherichia coli) 유래의 테트라사이클린 ("Tet") 및 락토스 ("Lac") 억제인자-작동인자 시스템 모두 식물 및 동물 내에서 유전자 발현을 조절하는데 사용되어 왔다. Tet 시스템에서, 테트라사이클린은 TetR 억제인자 단백질과 결합하고, 이는 작동인자로부터 억제인자 단백질을 방출하는 입체형태적인 변화를 일으키고 그 결과 전사가 일어나게 한다. Lac 시스템에서, lac 오페론은 락토스, 또는 이소프로필-b-D-티오갈락토시드와 같은 합성적인 유사체의 존재에 반응하여 활성화된다. 불행하게도, 이러한 시스템의 사용은 리간드, 즉 테트라사이클린 및 락토스의 불안정한 화학적 성질, 이들의 독성, 이들의 자연발생적인 존재, 또는 유도 또는 억제에 요구되는 비교적 높은 수준에 의해 제한된다. 유사한 이유로, 동물에서의 이러한 시스템의 이용이 제한된다.
FK506, 라파마이신 및 사이클로스포린 A와 같은 면역억제 분자들은 이뮤노필린 FKBP12, 사이클로필린 등에 결합할 수 있다. 이러한 정보를 사용하여, FK506을 각각의 2개의 단백질 상에 위치시키거나 또는 FK506을 하나에 위치시키고 사이클로스포린 A를 다른 하나에 위치시킴으로써 간단하게 임의의 2개의 단백질을 합류시키는 일반적인 전략이 고안되어 왔다. 그 다음 FK506 (FK1012)의 합성 호모다이머 또는 FK506-사이클로스포린 (FKCsA)의 융합으로부터 비롯되는 화합물은 이들 분자의 이합체화를 유도하기 위해 사용될 수 있다 (Spencer et al., Science 262:1019-24 (1993); Belshaw et al., Proc Natl Acad Sci USA 93:4604-7 (1996)). FKBP12에 융합된 Gal4 DNA 바인딩 도메인 및 사이클로필린에 융합된 VP16 활성인자 도메인, 및 FKCsA 화합물이 사용되어 Gal4 결합 부위를 함유하는 프로모터의 조절 하에 리포터 유전자의 헤테로이합체화 및 활성화를 보였다. 불행하게도, 이러한 시스템은 바람직스럽지 않은 부작용을 가질 수 있는 면역억제제를 포함하고, 따라서 다양한 포유류의 유전자 스위치 적용을 위한 이의 사용을 제한한다.
스테로이드 호르몬 수용체 시스템과 같은 고등 진핵세포 전사 활성화 시스템이 또한 이용되어 왔다. 스테로이드 호르몬 수용체는 핵 수용체 상과(superfamily)의 구성원이고 척추 동물 및 무척추 동물 세포에서 발견된다. 불행하게도, 유전자 발현, 특히 식물 및 포유동물에서의 유전자 발현의 조절을 위한 수용체를 활성화하는 스테로이드 화합물의 사용은 이러한 생물 내의 많은 다른 자연적인 생물학적 경로에서의 이들의 관여로 인하여 제한된다. 이러한 어려움을 극복하기 위하여, 대안적인 시스템이 곤충 에크디손 수용체 (EcR)를 사용하여 개발되어 왔다.
곤충의 성장, 탈피, 및 발달은 에크디손 스테로이드 호르몬 (탈피 호르몬) 및 유충 호르몬에 의해 조절된다 (Dhadialla et al., Annu. Rev. Entomol. 43: 545-569 (1998)). 곤충에서 에크디손에 대한 분자 표적은 적어도 에크디손 수용체 (EcR) 및 울트라스피라클 단백질 (ultraspiracle protein (USP))로 이루어진다. EcR은 시그니처 DNA 및 리간드 결합 도메인, 및 활성화 도메인을 특징으로 하는 핵 스테로이드 수용체 상과의 구성원이다 (Koelle et al., Cell, 67:59-77 (1991)). EcR 수용체는 포나스테론 A(ponasterone A) 및 무리스테론 A(muristerone A)와 같은 다수의 스테로이드 화합물에 대해 반응을 보인다. 엑디스테로이드 작용제 활성을 갖는 비스테로이드 화합물이 롬 앤 하스 사(Rohm and Haas Company)에서 시판하는 상업적으로 이용가능한 살충제 테부페노자이드(tebufenozide) 및 메톡시페노자이드(methoxyphenozide)를 포함하여 기술되어 왔다 (국제공보 제WO 96/27673호 및 미국특허 제US 5,530,028호 참조). 둘 모두의 유사체들은 다른 생물에서 뛰어난 안전성 프로파일을 갖는다.
곤충 에크디손 수용체 (EcR)는 포유류 레티노이드 X 수용체(RXR)의 곤충 동족체인 울트라스피라클 (USP)과 헤테로이합체화하고, 엑디스테로이드 및 에크디손 수용체 반응 구성요소를 결합시켜 에크디손 반응 유전자의 전사를 활성화시킨다. EcR/USP/리간드 복합체는 곤충 발달 및 생식 도중에 중요한 역할을 한다. Ecr은 A/B(전이활성화(transactivation), C(DNA 결합, 헤테로이합체화), D(힌지(Hinge), 헤테로이합체화), E(리간드 결합, 헤테로이합체화 및 전이활성화) 및 F(전이활성화) 도메인의 5 개의 모듈 도메인을 갖는다. A/B, C 및 E와 같은 이들 도메인의 일부는 다른 단백질과 융합될 때 이들의 기능을 유지한다.
엄격히 조절된 유도성 유전자 발현 시스템 또는 "유전자 스위치"는 유전자 요법, 세포에서 단백질의 대량 생산, 세포 기반 고속 스크리닝 어세이(cell based high throughput screening assays), 기능 유전체학(functional genomics) 및 형질전환 식물 및 동물에서의 형질 조절과 같은 다양한 적용에 유용하다.
EcR-계 유전자 스위치의 첫번째 버젼(version)은 노랑초파리(Drosophila melanogaster) EcR(DmEcR) 및 생쥐(Mus musculus) RXR(MmRXR)를 사용하였으며, 스테로이드, 포나스테론 A의 존재하에 이들 수용체가 포유류 세포주 및 형질전환 쥐에서의 리포터 유전자를 전이활성화시킨다는 것을 보여주었다(Christopherson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:6314-6318 (1992); No et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93:3346-3351 (1996)). 이후, 문헌[Suhr et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 95:7999-8004 (1998)]은 비-스테로이드성 에크디손 작용제인 테부페노자이드가 외인성 헤테로이합체 파트너(partner)가 없는 경우 Bombyx mori EcR(BmEcR)를 통해 포유류 세포에서 리포터 유전자의 활성화를 높은 레벨로 유도하였음을 보였다.
국제특허 제WO 97/38117호 및 제WO 99/58155호는 외인성 유전자의 발현을 조절하는 방법으로서, 상기 외인성 유전자 및 에크디손 반응 구성요소를 포함하는 DNA 구조물이 리간드가 존재하는 경우 및 선택적으로는 사일런트(silent) 파트너로 작용할 수 있는 수용체가 존재하는 경우에 결과적으로 상기 에크디손 반응 구성요소와 결합하여 유전자 발현을 유도하는 에크디손 수용체를 포함하는 제2 DNA 구조물에 의하여 활성화되는 방법을 개시한다. 선택의 대상이 되는 에크디손 수용체는 노랑초파리(Drosophila melanogaster)로부터 분리되었다. 전형적으로, 이러한 시스템은 최적의 활성화를 제공하기 위하여 사일런트 파트너, 바람직하게는 레티노이드 X 수용체(RXR)의 존재를 필요로 한다. 포유류 세포에서, 곤충 에크디손 수용체(EcR)는 레티노이드 X 수용체(RXR)와 헤테로이합체화하고 리간드 의존 방식으로 표적 유전자의 발현을 조절한다. 국제특허 제WO 99/02683호는 누에 나방 봄빅스 모리(Bombyx mori)로부터 분리된 에크디손 수용체가 외인성 이합체 파트너 필요 없이 포유류 시스템에서 작동하는 것을 개시한다.
미국 특허 제6,265,173 B1호는 수용체의 스테로이드/티로이드(thyroid) 상과의 다양한 구성원들이 노랑초파리(Drosophila melanogaster) 울트라스피라클 수용체(USP) 또는 유전자 발현 시스템에의 사용을 위한 USP의 적어도 이합체화 도메인을 포함하는 그 단편과 화합할 수 있음을 개시한다. 미국 특허 제5,880,333호는 전이활성화 도메인 및 DNA 결합 도메인이 두 개의 다른 하이브리드(hybrid) 단백질 상에 위치하는 식물에 사용되는 노랑초파리(Drosophila melanogaster) EcR 및 울트라스피라클(USP) 헤테로이합체 시스템을 개시한다. 불행하게도, 이러한 USP-기반의 시스템은 동물 세포에서 항시적(constitutive)이므로, 리포터 유전자 발현을 조절하는데는 효과적이지 않다.
이러한 각각의 경우에, 전이활성화 도메인 및 DNA 결합 도메인(국제특허 제WO 99/02683호에서와 같은 천연 EcR 또는 국제특허 제WO 97/38117호에서와 같은 변형된 EcR 중 어느 하나)은 단일 분자에 결합되었으며, 다른 헤테로이합체 파트너인 USP 또는 RXR은 이들의 자연 상태에서 사용되었다.
상기 기술된 EcR-기반의 유전자 조절 시스템의 단점은 리간드가 없는 경우의 상당한 배경 활성(background activity) 및 식물 및 동물 모두에의 사용을 위한 이러한 시스템의 비적용성(non-applicability)을 포함한다(미국 특허 제5,880,333호 참조). 그러므로, 식물 및 동물 양쪽 모두에서 외인성 유전자의 발현을 정확히 조절하는 개선된 EcR-기반의 시스템에 대한 당업계의 요구가 존재한다. 이러한 개선된 시스템은 유전자 요법, 단백질 및 항체의 대량 생산, 세포-기반의 고속 스크리닝 어세이, 기능 유전체학 및 형질전환 동물에서의 형질 조절과 같은 다양한 적용에 유용할 것이다. 유전자 요법과 같은 특정 적용에 대하여, 합성 비-스테로이드 리간드에 잘 반응하고 동시에 천연 스테로이드에 반응을 나타내지 않는(insensitive) 유도성 유전자 발현 시스템을 갖는 것은 바람직할 수 있다. 따라서, 간단하고 컴팩트하며 용이하게 이용가능한 비교적으로 값싸며 숙주에 독성이 낮은 리간드에 의존하는 개선된 시스템은 생물학적 시스템 조절에 유용한 것으로 밝혀질 것이다.
전이활성화 및 DNA 결합 도메인이 두 개의 다른 단백질 상에 이들을 배치되어 서로 분리되는 에크디손 수용체-기반의 유도성 유전자 발현 시스템이 리간드가 없는 경우 배경 활성을 상당히 감소시키며 리간드가 존재하는 경우 배경보다 활성을 상당히 증가시킨다는 것이 알려진 바 있다 (국제특허 제WO 01/70816 A1호 참조). 이러한 2-하이브리드 시스템은 국제특허 제WO 97/38117호 및 제WO 99/02683호에 개시된 2 개의 시스템과 비교하여 상당히 개선된 유도성 유전자 발현 모듈화(modulation) 시스템이다. 상기 2-하이브리드 시스템은 한 쌍의 상호작용하는 단백질의 능력을 이용하여 DNA 결합 도메인이 유전자상의 DNA 결합 부위와 결합하는 경우에, 전이활성화 도메인이 프로모터를 더 효과적으로 활성화시키도록, DNA 결합 도메인에 대하여 더 바람직한 위치로 전사 활성화 도메인을 가져오게 한다(예를 들어, 미국 특허 제5,283,173호 참조). 요약하면, 상기 2-하이브리드 유전자 발현 시스템은 2 개의 유전자 발현 카세트(cassettes)를 포함한다; 핵 수용체 폴리펩티드에 융합된 DNA 결합 도메인을 인코딩하는 제1 유전자 발현 카세트 및 다른 핵 수용체 폴리펩티드에 융합된 전이활성화 도메인을 인코딩하는 제2 유전자 발현 카세트. 리간드가 존재하는 경우, 상기 제1 폴리펩티드와 상기 제2 폴리펩티드의 상호작용으로 DNA 결합 도메인을 전이활성화 도메인에 효과적으로 속박하게 한다. 상기 DNA 결합 및 전이활성화 도메인은 두 개의 다른 분자 상에 존재하기 때문에, 리간드가 없는 경우의 배경 활성은 상당히 감소된다.
또한, 2-하이브리드 시스템은 예를 들어, 포나스테론 A("PonA") 또는 무리스테론 A("MurA")과 같은 스테로이드 리간드와 비교하는 경우에, 예를 들어, 디아실하이드라진과 같은 비-스테로이드 리간드에 대한 개선된 민감도를 제공한다. 즉, 스테로이드와 비교하여 비-스테로이드 리간드는 더 낮은 농도에서 더 높은 활성을 제공한다. 또한, 상기 2-하이브리드 시스템은 변형되지 않은 RXR이 헤테로이합체 수용체 파트너로서 사용되는 경우에 흔히 발생하는 RXR의 과다발현으로 인한 일부 부작용을 회피하게 된다. 하나의 2-하이브리드 시스템에서, EcR 또는 RXR의 천연 DNA 결합 및 전이활성화 도메인이 제거되면, 그 결과 이들 하이브리드 분자는 세포에 존재하는 다른 스테로이드 호르몬 수용체와 상호작용하는 기회가 더 줄어들어, 결국에는 부작용이 감소하게 된다. 부가적인 유전자 스위치 시스템은 하기 특허 및 특허 출원에 기술된 것들을 포함한다: 미국 특허 제7,091,038호; 국제특허 제WO 2004078924호; 유럽 특허 제1266015호; 미국 공개 제20010044151호; 미국 공개 제20020110861호; 미국 공개 제20020119521호; 미국 공개 제20040033600호; 미국 공개 제20040197861호; 미국 공개 제20040235097호; 미국 공개 제20060020146호; 미국 공개 제20040049437호; 미국 공개 제20040096942호; 미국 공개 제20050228016호; 미국 공개 제20050266457호; 미국 공개 제20060100416호; 국제특허 제W0 2001/70816호; 국제특허 제WO2002/29075호; 국제특허 제WO 2002/066612호; 국제특허 제WO 2002/06613호; 국제특허 제WO 2002/066614호; 국제특허 제WO 2002/066615호; 국제특허 제WO2005/108617호; 미국 특허 제6,258,603호; 미국 공개 제20050209283호; 미국 공개 제20050228016호; 미국 공개 제20060020146호; 유럽 특허 제0965644호; 미국 특허 제7,304,162호; 및 미국 특허 제7,304,161호.
에크디손 수용체-기반의 유전자 조절 시스템에서의 개선으로 인하여, 다양한 적용에서 이들의 사용이 증가되어 왔다. 디아실하이드라진 ("DAH") 화합물, 및 에크디손 수용체-기반의 유전자 조절 시스템에서 리간드로서 이들의 적용은 미국 특허 제8,076,517호; 제7,456,315호; 제7,304,161호; 및 제6,258,603호 및 이들 내에 인용된 특허들에 개시되어 있다. 그러나, 개선된 물리화학적 및/또는 약리학적 특성을 갖는 DAH에 대한 요구가 존재한다.
발명의 간략한 요약
일 양태에서, 본 발명은 하기 화학식 I-XI로 표시되는 붕소-함유 디아실하이드라진 화합물들, 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물을 제공하고, 이들은 본 명세서에서 집합적으로 "개시 화합물들(Compounds of the Disclosure)"로서 언급된다. 개시 화합물들은 이들의 구조 내에 적어도 하나의 붕소 원자를 함유한다.
다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물들 및 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물을 제공한다. 또 다른 양태에서, 조성물은 약학적으로 허용가능한 조성물이다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 에크디손 수용체-기반 유도성 유전자 발현 시스템에서 리간드로서 사용하기 위한 개시 화합물을 제공한다. 본 발명의 이점은 사용자의 요구에 맞도록 유전자 발현을 조절하고 발현 수준을 맞추는 수단을 제공한다는 점이다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물 또는 이의 조성물로 숙주 세포 또는 비인간 유기체를 접촉시킴을 포함하는 분리된 숙주 세포 또는 비인간 유기체에서 목적 유전자의 유전자 발현을 조절하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물 또는 이의 조성물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 대상체의 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하는 방법을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하는데 사용하기 위한 개시 화합물 또는 이의 조성물을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하기 위한 약물의 제조에 사용하기 위한 개시 화합물 또는 이의 조성물을 제공한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 살충적으로 유효한 양의 개시 화합물 또는 이의 조성물을 곤충 또는 이들의 서식지와 접촉시키는 단계를 포함하는 곤충을 제어하는 방법을 제공한다.
발명의 상세한 설명
일 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 I을 갖는 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00001
상기 식에서,
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 임의로 치환된 알킬, 및 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 4- 내지 8-원 사이클로알킬을 형성하고;
R3는 수소, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 아릴, 및 임의로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R4는 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
Figure pct00002
및
Figure pct00003
;
X1은 -O- 및 -N(R8a)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Y1은 -(CR9aR9b)m-이고;
Z1은 -O- 및 -N(R8b)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는 Z1는 부존재하고;
R6a는 하이드록시, 알킬, 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R6a는 하이드록시 산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
R7a 및 R7b는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R7a' 및 R7b'는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8a 및 R8b는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R9a 및 R9b는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
m은 1, 2, 3, 또는 4이고;
X2는 -O- 및 -N(R8c)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Y2는 -(CR9cR9d)n-이고;
Z2는 -O- 및 -N(R8d)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나 또는 Z2는 부존재하고;
R6b는 하이드록시, 알킬, 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R6b는 하이드록시 산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
R7c 및 R7d는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8c 및 R8d는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R9c 및 R9d는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
X는 -O- 및 -N(R8e)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R6c는 하이드록시, 알킬, 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R6c는 하이드록시 산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
R7e 및 R7f는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8e는 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R6d는 하이드록시, 알킬, 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R6d는 하이드록시 산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
R6f는 수소, 알킬, 아미노 및 하이드록시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
X5는 -O- 및 -N(R8k)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R7g 및 R7h는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8k는 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
X6은 -O- 및 -N(R8l)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
X7은 -O- 및 -N(R8n)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R81은 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8m은 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8n은 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10a는 수소 및 -(CR11aR11b)o--B(R12a)(R12b)로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10b , R10c，및 R10d는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 알콕시알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬，임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐，임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 헤테로알킬, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -S02R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는
Rl0b은 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, -N(H)CHO, -N(H)CN, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 헤테로알킬, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -S02R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 및/또는
R10c 및 R10d는 2개의 인접한 탄소원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴그룹을 형성하고; 예를 들어, R4-5는 하기 식과 같고:
Figure pct00004
Figure pct00005
또는
Figure pct00006
;
예를 들어, R4-6은 하기 식과 같고:
Figure pct00007
Figure pct00008
또는
Figure pct00009
;
예를 들어, R4-7은 하기 식과 같고:
Figure pct00010
Figure pct00011
또는
Figure pct00012
;
Rlla 및 Rllb는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R12a 및 R12b은 하이드록시 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R12a 및 R12b는 함께 결합 -0(CR13aR13b)pO-을 형성하거나; 또는
-B(R12a)(R12b)는 플루오라이드 부가물을 형성하고;
R13a 및R13b 는 각각 독립적으로 수소 및 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
o는 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
p는 2, 3, 또는 4이고;
R5는 R4-3, R4-4, R4-8, R4-9, 또는 R4-10이거나; 또는 R5는 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
Figure pct00013
Figure pct00014
및
Figure pct00015
;
X3은 -O- 및 -N(R8f)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Y3는 -(CR9eR9f)q-이고;
Z3는 -O- 및 -N(R8g)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는 Z3는 부존재하고;
R6e는 하이드록시 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R6e는 하이드록시산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
R7i 및 R7j는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8f 및 R8g는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R9e 및 R9f는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
q는 1, 2, 3, 또는 4이고;
X4는 -O- 및 -N(R8h)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Y4는 -(CR9gR9h)r-이고 ;
Z4는 -O- 및 -N(R8i)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는 Z4는 부존재하고;
R6g은 하이드록시 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R6g는 하이드록시산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
R7k 및 R7l는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R8h 및 R81은 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R9g 및 R9h는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
r은 1, 2, 3, 또는 4이고;
R10e는 수소 및 -(CR11cR11d)s-B(R12c)(R12d)로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10f, R10g, 및 R10h는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16 , -S02R17 , -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R10f는 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -S02R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10g 및 R10h은 2개의 인접한 탄소원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴 그룹을 형성하고; 예를 들어, R3-3은 하기 식과 같고:
Figure pct00016
Figure pct00017
또는
Figure pct00018
;
Rllc 및 Rlld는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R12c 및 R12d는 하이드록시 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R12c 및 R12d는 함께 결합 -0(CR13cR13d)tO-를 형성하거나; 또는
-B(R12c)(R12d)는 플루오라이드 부가물을 형성하고;
R13c 및 R13d는 각각 독립적으로 수소 및 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
s는 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
t는 2, 3, 또는 4이고;
R14a 및 R14b는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -SO2R17, -N(R18)C0R19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R15a 및 R15b는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -SO2R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R16은 수소, 하이드록시, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 알콕시, 아릴옥시, 및 아릴알킬옥시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R17은 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 및 임의로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R18는 수소, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 및 임의로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R19는 수소, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시 및 아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R20은 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 및 아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R21은 수소, 알킬, 아릴, 시아노, 및 니트로로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
단:
a) R4가 R4-5, R4-6, 또는 R4-7이고 R5가 R5-3인 경우, R10a 또는 R10e의 하나는 수소가 아니거나; 또는
b) R4가 R4-5, R4-6, 또는 R4-7이고 R5가 R5-4 또는 R5-5인 경우, R10a는 수소가 아니다.
다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R5는 R5-1, R5-2, R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R1, R2, R3, 및 R4는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-1이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-2이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-3이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-4이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-5이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10a는 -(CR11aR11b)o-B(R12a)(R12b)이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-5이고; R5는 R5-3이고; R10e는 -(CR11cR11d)s-B(R12c)(R12d)이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-6이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10a는 -(CR11aR11b)o-B(R12a)(R12b)이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-7이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10a는 -(CR11aR11b)o-B(R12a)(R12b)이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-8이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10a는 -(CR11aR11b)o-B(R12a)(R12b)이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-9이고; R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은 화학식 I을 갖는 화합물, 및 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 II를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00019
상기 식에서, R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R1, R2, R3, R10b, R10c, 및 o는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, o는 0이다. 다른 구현예에서, R10b 및 R10c는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, 알콕시알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, R10b 및 R10c는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-4 알킬, 알콕시알킬, 및 C1-4 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 III를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00020
상기 식에서, R1, R2, R3, R10b, R10c, R10d, R10f, R10g 및 s는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, s는 0이다. 다른 구현예에서, R10b, R10c, 및 R10d는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R10b는 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10c 및 R10d는 2개의 인접한 탄소 원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴기를 형성한다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 IV를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00021
상기 식에서, R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이고; R6a는 하이드록시이며; R1, R2, R3, R7a, X1, Y1, 및 Z1는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, R7a는 수소, 할로겐, 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재한다. 다른 구현예에서, Z1는 -O-이다. 다른 구현예에서, Z1는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, X1는 -O-이다. 다른 구현예에서, X1는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, R9a 및 R9b는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재하고, m은 1, 2, 또는 3이다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재하고, m은 1이다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 V를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00022
상기 식에서, R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이고; R6a는 하이드록시이고; R1, R2, R3, R7a, X1, Y1, 및 Z1는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, R7a는 수소, 할로겐, 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재한다. 다른 구현예에서, Z1는 -O-이다. 다른 구현예에서, Z1는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, X1는 -O-이다. 다른 구현예에서, X1는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, R9a 및 R9b는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재하고, m은 1, 2, 또는 3이다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재하고, m은 1이다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 VI를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00023
상기 식에서, R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이고; R6a는 하이드록시이고; R1, R2, R3, R7a, X1, Y1, 및 Z1는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, R7a는 수소, 할로겐, 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재한다. 다른 구현예에서, Z1는 -O-이다. 다른 구현예에서, Z1는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, X1는 -O-이다. 다른 구현예에서, X1는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, R9a 및 R9b는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재하고, m은 1, 2, 또는 3이다. 다른 구현예에서, Z1는 부존재하고, m은 1이다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 VII를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00024
상기 식에서, R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R6b는 하이드록시이고; R10e는 수소이고; R1, R2, R3, R7c, X2, Y2, 및 Z2는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, R7c는 수소, 할로겐, 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재한다. 다른 구현예에서, Z2는 -O-이다. 다른 구현예에서, Z2는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, X2는 -O-이다. 다른 구현예에서, X2는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, R9c 및 R9d는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재하고, n은 1, 2, 또는 3이다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재하고, n은 1이다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 VIII를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00025
상기 식에서, R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R6b는 하이드록시이고; R10e는 수소이고; R1, R2, R3, R7c, X2, Y2, 및 Z2는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, R7c는 수소, 할로겐, 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재한다. 다른 구현예에서, Z2는 -O-이다. 다른 구현예에서, Z2는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, X2는 -O-이다. 다른 구현예에서, X2는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, R9c 및 R9d는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재하고, n은 1, 2, 또는 3이다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재하고, n은 1이다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 IX를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00026
상기 식에서, R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R6b는 하이드록시이고; R10e는 수소이고; R1, R2, R3, R7c, X2, Y2, 및 Z2는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, R7c는 수소, 할로겐, 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재한다. 다른 구현예에서, Z2는 -O-이다. 다른 구현예에서, Z2는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, X2는 -O-이다. 다른 구현예에서, X2는 -N(H)-이다. 다른 구현예에서, R9c 및 R9d는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재하고, n은 1, 2, 또는 3이다. 다른 구현예에서, Z2는 부존재하고, n은 1이다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4가 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Figure pct00027
R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R10e는 수소이며; R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I을 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다. 다른 구현예에서, R7a는 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R8a는 수소 및 C1-4　알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R6f는 수소, C1-4 알킬, 하이드록시, 및 -NH2로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은
R4는 R4-5이고;
R10a는 수소이고;
R10b, R10c, 및 R10d는 독립적으로 수소, 할로겐, 아미노, 시아노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
R10b는 수소, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, -N(H)CHO, -N(H)CN, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10c 및 R10d는 2개의 인접한 탄소 원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴기를 형성하고;
R5는 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
Figure pct00028
및
Figure pct00029
;
R7a는 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I을 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은
R4가 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Figure pct00030
Figure pct00031
및
Figure pct00032
R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10e는 수소이고;
R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I을 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은
R4가 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Figure pct00033
Figure pct00034
및
Figure pct00035
R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
R10e는 수소인, 화학식 I을 갖는 화합물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R1는 임의로 치환된 C1-6 알킬이고; R2는 수소 및 임의로 치환된 C1-6 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R3는 임의로 치환된 C1-6 알킬이고; R4 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R1는 메틸, 에틸, n-프로필, 및 n-부틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R2는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R4 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다. 다른 구현예에서, R3는 메틸 및 tert-부틸로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, R2는 수소이고 R3는 tert-부틸이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R1는 임의로 치환된 C1-6 알킬이고; R2는 수소이고; R3는 임의로 치환된 페닐, 임의로 치환된 피리딜, 및 임의로 치환된 피리미디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; R4 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다. 다른 구현예에서, R3는 임의로 치환된 피리딜 및 임의로 치환된 피리미디닐로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R1, R2, 및 R3는 각각 메틸이고; R4 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 광학 활성을 나타내지 않는, 즉 아키랄 또는 라세믹인, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R1, R2, 및 R3를 지니는 탄소 원자는 비대칭 탄소 원자이고 상기 비대칭 탄소 원자의 절대 배열은 R인, 즉 R 이성질체로 에난티오머적으로 농축된, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다. 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R 이성질체의 에난티오머 잉여가 적어도 약 60%, 예를 들어 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 91%, 적어도 약 92%, 적어도 약 93%, 적어도 약 94%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99%인, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물이다. 다른 구현예에서, R 이성질체의 에난티오머 잉여는 적어도 약 90%이다. 다른 구현예에서, R 이성질체의 에난티오머 잉여는 적어도 약 95%이다. 다른 구현예에서, R 이성질체의 에난티오머 잉여는 약 98%이다. 다른 구현예에서, R 이성질체의 에난티오머 잉여는 약 98%이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R1, R2, 및 R3를 지니는 탄소 원자는 비대칭 탄소 원자이고 상기 비대칭 탄소 원자의 절대 배열은 S인, 즉 S 이성질체로 에난티오머적으로 농축된, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다. 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 S 이성질체의 에난티오머 잉여가 적어도 약 60%, 예를 들어, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 91%, 적어도 약 92%, 적어도 약 93%, 적어도 약 94%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99%인, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물이다. 다른 구현예에서, S 이성질체의 에난티오머 잉여는 적어도 약 90%이다. 다른 구현예에서, S 이성질체의 에난티오머 잉여는 적어도 약 95%이다. 다른 구현예에서, S 이성질체의 에난티오머 잉여는 약 98%이다. 다른 구현예에서, S 이성질체의 에난티오머 잉여는 약 99%이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 X을 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00036
상기 식에서, R1는 R3와 동일하지 않으며, R1, R3, R4, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, 화학식 X 및 XI를 갖는 화합물의 혼합물에서, 화학식 X를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 60%, 예를 들어 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 91%, 적어도 약 92%, 적어도 약 93%, 적어도 약 94%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99%이다. 다른 구현예에서, 화학식 X를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 90%이다. 다른 구현예에서, 화학식 X를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 95%이다. 다른 구현예에서, 화학식 X를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 98%이다. 다른 구현예에서, 화학식 X를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 99%이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 화학식 XI을 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다:
Figure pct00037
상기 식에서, R1는 R3와 동일하지 않으며, R1, R3, R4, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같다. 다른 구현예에서, 화학식 X 및 XI를 갖는 화합물의 혼합물에서, 화학식 XI를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 60%, 예를 들어 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 91%, 적어도 약 92%, 적어도 약 93%, 적어도 약 94%, 적어도 약 95%, 적어도 약 96%, 적어도 약 97%, 적어도 약 98%, 또는 적어도 약 99%이다. 다른 구현예에서, 화학식 XI를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 약 90%이다. 다른 구현예에서, 화학식 XI를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 95%이다. 다른 구현예에서, 화학식 XI를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 98%이다. 다른 구현예에서, 화학식 XI를 갖는 화합물의 에난티오머 잉여는 적어도 약 99%이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은
R4가 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
Figure pct00038
Figure pct00039
및
Figure pct00040
R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
R10e는 수소이고;
R1, R2, 및 R3는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 X 또는 XI을 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다. 다른 구현예에서, R7a는 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, R10b 및 R10c는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 알콕시알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, R10b 및 R10c는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-4 알킬, 알콕시알킬, 및 C1-4 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, R5는 R5-3이다. 다른 구현예에서, R10f, R10g, 및 R10h는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, R1는 에틸 및 n-프로필로 이루어진 그룹으로부터 선택되고 R3는 tert-부틸이다. 다른 구현예에서, R1는 tert-부틸이고 R3는 임의로 치환된 페닐이다. 다른 구현예에서, R5는 3,5-디메틸페닐이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-1 또는 R4-8이고; R6a는 하이드록시 산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-2이고; R6b는 하이드록시 산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-3이고; R6c는 하이드록시 산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-4이고; R6d는 하이드록시 산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R5는 R5-1이고; R6e는 하이드록시 산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R4는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R5는 R5-2이고; R6g는 하이드록시 산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R4는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-1 또는 R4-8이고; R6a는 아미노산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-2이고; R6b는 아미노산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-3이고; R6c는 아미노산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-4이고; R6d는 아미노산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R5는 R5-1이고; R6e는 아미노산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R4는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R5는 R5-2이고; R6g는 아미노산 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R4는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-XI 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-5, R4-6, 또는 R4-7이고; R10a는 -(CR11aR11b)o-B(R12a)(R12b)이고; -B(R12c)(R12d)는 플루오라이드 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 R4는 R4-5, R4-6, 또는 R4-7이고; R10e는 -(CR11cR11d)s-B(R12c)(R12d)이고; -B(R12a)(R12b)는 플루오라이드 부가물을 형성하고; R1, R2, R3, 및 R5는 화학식 I과 관련하여 정의된 바와 같은, 화학식 I-IX 중 임의의 하나를 갖는 화합물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물이다.
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 식을 갖는 화합물이다:
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
Figure pct00044
Figure pct00045
Figure pct00046
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 하기 표 A의 화합물이다.
[표 A]
Figure pct00047
Figure pct00048
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알킬"은 1 내지 12 개의 탄소 원자 (즉, C1-12 알킬) 또는 지정된 탄소원자의 수(즉, 메틸과 같은 C1 알킬, 에틸과 같은 C2 알킬, 프로필 또는 이소프로필과 같은 C3 알킬 등)를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 지방족 탄화수소를 언급한다. 일 구현예에서, 알킬기는 직쇄 C1-10 알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알킬기는 분지쇄 C3-10 알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알킬기는 직쇄 C1-6 알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알킬기는 분지쇄 C3-6 알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알킬기는 직쇄 C1-4 알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알킬기는 분지쇄 C3-4 알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알킬기는 직쇄 또는 분지쇄 C3-4- 알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알킬기는 부분적으로 또는 완전히 중수소화, 즉 알킬기의 하나 이상의 수소 원자가 중수소 원자로 대체된다. 비제한적인 예의 C1-10 알킬기는 메틸 (-CD3 포함), 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, sec-부틸, tert-부틸, iso-부틸, 3-펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실 등을 포함한다. 비제한적인 예의 C1-4 알킬기는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, sec-부틸, tert-부틸, 및 iso-부틸을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 알킬"은 상기 정의된 알킬이 니트로, 할로알콕시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 사이클로알킬 등으로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 3 개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 것을 의미한다. 일 구현예에서, 임의로 치환된 알킬은 2개의 치환기로 치환된다. 다른 구현예에서, 임의로 치환된 알킬은 하나의 치환기로 치환된다. 임의로 치환된 알킬의 비제한적인 예는 -CH2CH2NO2, -CH2CH2CO2H, -CH2CH2SO2CH3, -CH2CH2COPh, -CH2C6H11 등을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "사이클로알킬"은 1 내지 12 개의 탄소 원자 (즉, C3-12 사이클로알킬) 또는 지정된 탄소수를 갖는 1 내지 3 개의 고리를 함유하는 포화 및 부분적으로 불포화 (1 또는 2 개의 이중 결합 함유) 사이클릭 지방족 탄화수소를 언급한다. 일 구현예에서, 사이클로알킬기는 2개의 고리를 갖는다. 일 구현예에서, 사이클로알킬기는 하나의 고리를 갖는다. 다른 구현예에서, 사이클로알킬기는 C3-8 사이클로알킬기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 사이클로알킬기는 C3-6 사이클로알킬기로부터 선택된다. 사이클로알킬기의 비제한적인 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 노르보르닐, 데칼린, 아다만틸, 사이클로헥세닐 등을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 사이클로알킬"은 상기에서 정의된 사이클로알킬이 할로, 니트로, 시아노, 그룹, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클로, 알콕시알킬, (아미노)알킬, 하이드록시알킬아미노, (알킬아미노)알킬, (디알킬아미노)알킬, (시아노)알킬, (카르복사미도)알킬, 머캡토알킬, (헤테로사이클로)알킬, 및 (헤테로아릴)알킬로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 3개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않는 것을 의미한다. 일 구현예에서, 임의로 치환된 사이클로알킬은 2개의 치환기로 치환된다. 다른 구현예에서, 임의로 치환된 사이클로알킬은 1개의 치환기로 치환된다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "사이클로알케닐"은 부분적으로 불포화된 상기 정의된 사이클로알킬기를 언급한다. 일 구현예에서, 사이클로알케닐은 하나의 탄소-대-탄소 이중 결합을 갖는다. 다른 구현예에서, 사이클로알케닐은 C4-8 사이클로알케닐기로부터 선택된다. 예시적인 사이클로알케닐은 사이클로펜테닐, 사이클로헥세닐 등을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 사이클로알케닐"은 상기에서 정의된 사이클로알케닐이 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로알킬, 모노하이드록시알킬, 디하이드록시알킬, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클로, 알콕시알킬, (아미노)알킬, 하이드록시알킬아미노, (알킬아미노)알킬, (디알킬아미노)알킬, (시아노)알킬, (카르복사미도)알킬, 머캡토알킬, (헤테로사이클로)알킬, 및 (헤테로아릴)알킬로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 3개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않는 것을 의미한다. 일 구현예에서, 임의로 치환된 사이클로알케닐은 2개의 치환기로 치환된다. 다른 구현예에서, 임의로 치환된 사이클로알케닐은 1개의 치환기로 치환된다. 다른 구현예에서, 사이클로알케닐은 비치환된다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알케닐"은 1개, 2개 또는 3 개의 탄소-대-탄소 이중 결합을 함유하는 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 언급한다. 일 구현예에서, 알케닐기는 C2-6 알케닐로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알케닐기는 C2-4 알케닐로부터 선택된다. 알케닐기의 비제한적인 예시는 에테닐, 프로페닐, 이소프로페닐, 부테닐, sec-부테닐, 펜테닐, 및 헥세닐을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 알케닐"은 상기 정의된 바와 같은 알케닐이 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클로로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 3개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않는 것을 의미한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알키닐"은 1 내지 3 개의 탄소-대-탄소 삼중 결합을 함유하는 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 언급한다. 일 구현예에서, 알키닐은 하나의 탄소-대-탄소 삼중 결합을 갖는다. 일 구현예에서, 알키닐은 C2-6 알키닐기로부터 선택된다. 일 구현예에서, 알키닐은 C2-4 알키닐기로부터 선택된다. 알키닐기의 비제한적인 예는 에티닐, 프로피닐, 부티닐, 2-부티닐, 펜티닐, 및 헥시닐기를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 알키닐"은 상기 정의된 바와 같은 알키닐이 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 또는 헤테로사이클로로부터 독립적으로 선택된 1개, 2개 또는 3개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않는 것을 의미한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "할로알킬"은 하나 이상의 불소, 염소, 브롬 및/또는 요오드 원자에 의해 치환된 알킬기를 언급한다. 일 구현예에서, 알킬기는 1개, 2개 또는 3개의 불소 및/또는 염소 원자로 치환된다. 다른 구현예에서, 할로알킬기는 C1-4 할로알킬기로부터 선택된다. 할로알킬기의 비제한적인 예는 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 펜타플루오로에틸, 1,1-디플루오로에틸, 2,2-디플루오로에틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 3,3,3-트리플루오로프로필, 4,4,4-트리플루오로부틸, 및 트리클로로메틸기를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "하이드록시알킬"은 1개 이상, 예를 들어 1개, 2개 또는 3개의 하이드록시기로 치환된 알킬을 언급한다. 일 구현예에서, 하이드록시알킬기는 모노하이드록시알킬기, 즉 1개의 하이드록시기로 치환된 것이다. 다른 구현예에서, 하이드록시알킬기는 디하이드록시알킬기, 즉 2개의 하이드록시기로 치환된 것이다. 다른 구현예에서, 하이드록시알킬기는 C1-4 하이드록시알킬기로부터 선택된다. 하이드록시알킬기의 비제한적인 예는 하이드록시메틸, 하이드록시에틸, 하이드록시프로필 및 하이드록시부틸기, 예컨대 1-하이드록시에틸, 2-하이드록시에틸, 1,2-디하이드록시에틸, 2-하이드록시프로필, 3-하이드록시프로필, 3-하이드록시부틸, 4-하이드록시부틸, 2-하이드록시-1-메틸프로필, 및 1,3-디하이드록시프로프-2-일을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알콕시"는 말단 산소 원자에 부착된, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐 또는 임의로 치환된 알키닐을 언급한다. 일 구현예에서, 알콕시기는 C1-4 알콕시기로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 알콕시기는 말단 산소 원자에 부착된 C1-4 알킬기, 예를 들어 메톡시, 에톡시, 및 tert-부톡시로부터 선택된다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알킬티오"는 임의로 치환된 알킬기로 치환된 황 원자를 언급한다. 일 구현예에서, 알킬티오기는 C1-4 알킬티오기로부터 선택된다. 비제한적인 예의 알킬티오기는 -SCH3, 및 -SCH2CH3를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알콕시알킬"은 알콕시기로 치환된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 알콕시알킬기는 메톡시메틸, 메톡시에틸, 메톡시프로필, 메톡시부틸, 에톡시메틸, 에톡시에틸, 에톡시프로필, 에톡시부틸, 프로폭시메틸, iso-프로폭시메틸, 프로폭시에틸, 프로폭시프로필, 부톡시메틸, tert-부톡시메틸, iso-부톡시메틸, sec-부톡시메틸, 및 펜틸옥시메틸을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "할로알콕시"는 말단 산소 원자에 부착된 할로알킬을 언급한다. 비제한적인 예의 할로알콕시기는 플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 트리플루오로메톡시, 및 2,2,2-트리플루오로에톡시를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "헤테로알킬"은 1 내지 10개의 탄소 원자, 및 O, N, 또는 S로부터 선택되는, 동일하거나 상이할 수 있는, 적어도 2개의 헤테로원자를 함유하며, 여기에서 1) 질소 원자(들) 및 황 원자(들)는 임의로 산화될 수 있고; 및/또는 2) 질소 원자(들)는 임의로 4급화될 수 있는; 안정한 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 라디칼을 언급한다. 헤테로원자는 헤테로알킬기의 임의의 내부 위치 또는 헤테로알킬기가 분자의 나머지 부분에 부착된 위치에 위치할 수 있다. 일 구현예에서, 헤테로알킬기는 2개의 산소 원자를 함유한다. 비제한적인 예의 헤테로알킬기는 -CH2OCH2CH2OCH3, -OCH2CH2OCH2CH2OCH3, -CH2NHCH2CH2OCH2, -OCH2CH2NH2, -NHCH2CH2N(H)CH3, 및 -OCH2CH2OCH3를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "아릴"은 6개 내지 14개의 탄소 원자를 갖는 모노시클릭 또는 비시클릭 방향족 고리 시스템(즉, C6-C14-아릴)을 언급한다. 비제한적인 예의 아릴기는 페닐("Ph"로 축약됨), 나프틸, 페난트릴, 안트라실, 인데닐, 아줄레닐, 비페닐, 비페닐레닐, 및 플루오레닐기를 포함한다. 일 구현예에서, 아릴기는 페닐 또는 나프틸로부터 선택된다. 일 구현예에서, 아릴기는 페닐이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 아릴"은 상기에서 정의된 아릴기가 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 헤테로아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클로, 알콕시알킬, (아미노)알킬, 하이드록시알킬아미노, (알킬아미노)알킬, (디알킬아미노)알킬, (시아노)알킬, (카르복사미도)알킬, 머캡토알킬, (헤테로사이클로)알킬, (사이클로알킬아미노)알킬, (C1-C4 할로알콕시)알킬, 또는 (헤테로아릴)알킬로부터 독립적으로 선택된 1개 내지 5개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 것을 의미한다. 일 구현예에서, 임의로 치환된 아릴은 임의로 치환된 페닐이다. 일 구현예에서, 임의로 치환된 아릴은 4개의 치환기를 갖는다. 다른 구현예에서, 임의로 치환된 페닐은 3개의 치환기를 갖는다. 다른 구현예에서, 임의로 치환된 페닐은 2개의 치환기를 갖는다. 다른 구현예에서, 임의로 치환된 페닐은 1개의 치환기를 갖는다. 비제한적인 예의 임의로 치환된 아릴은 2-메틸페닐, 2-메톡시페닐, 2-플루오로페닐, 2-클로로페닐, 2-브로모페닐, 3-메틸페닐, 3-메톡시페닐, 3-플루오로페닐, 3-클로로페닐, 4-메틸페닐, 4-에틸페닐, 4-메톡시페닐, 4-플루오로페닐, 4-클로로페닐, 2,6-디-플루오로페닐, 2,6-디-클로로페닐, 2-메틸,3-메톡시페닐, 2-에틸,3-메톡시페닐, 3,4-디-메톡시페닐, 3,5-디-플루오로페닐, 3,5-디-메틸페닐, 3,5-디메톡시,4-메틸페닐, 2-플루오로-3-클로로페닐, 및 3-클로로-4-플루오로페닐을 포함한다. 용어 임의로 치환된 아릴은 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬 및 융합된 임의로 치환된 헤테로사이클로 고리를 갖는 기를 포함하는 것을 의미한다. 예는 하기를 포함한다:
Figure pct00049
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "아릴옥시"는 말단의 산소 원자에 부착된 임의로 치환된 아릴을 언급한다. 비제한적인 예의 아릴옥시기는 PhO-이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "헤테로아릴옥시"는 말단의 산소 원자에 부착된 임의로 치환된 헤테로아릴을 언급한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "아르알킬옥시" 또는 "아릴알킬옥시"는 말단 산소 원자에 부착된 아르알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 아릴알킬옥시는 PhCH2O-이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족"은 5 내지 14 개 고리 원자(즉, C5-C14 헤테로아릴) 및 산소, 질소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3 또는 4개의 헤테로원자를 갖는 모노시클릭 및 비시클릭 방향족 고리 시스템을 언급한다. 일 구현예에서, 헤테로아릴은 3개의 헤테로원자를 갖는다. 다른 구현예에서, 헤테로아릴은 2개의 헤테로원자를 갖는다. 다른 구현예에서, 헤테로아릴은 1개의 헤테로원자를 갖는다. 일 구현예에서, 헤테로아릴은 C5 헤테로아릴이다. 다른 구현예에서, 헤테로아릴은 C6 헤테로아릴이다. 비제한적인 예의 헤테로아릴기는 티에닐, 벤조[b]티에닐, 나프토[2,3-b]티에닐, 티안트레닐, 퓨릴, 벤조퓨릴, 피라닐, 이소벤조퓨라닐, 벤조옥사조닐, 크로메닐, 크산테닐, 2H-피롤일, 피롤일, 이미다졸일, 피라졸일, 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 피리다지닐, 이소인돌일, 3H-인돌일, 인돌일, 인다졸일, 퓨리닐, 이소퀴놀일, 퀴놀일, 프탈라지닐, 나프티리디닐, 신놀리닐, 퀴나졸리닐, 프테리디닐, 4aH-카바졸일, 카바졸일, β-카르보리닐, 페난트리디닐, 아크리디닐, 피리미디닐, 페난트롤리닐, 페나지닐, 티아졸일, 이소티아졸일, 페노티아졸일, 이속사졸일, 퓨라자닐, 및 페녹사지닐을 포함한다. 일 구현예에서, 헤테로아릴은 티에닐 (예를 들어, 티엔-2-일 및 티엔-3-일), 퓨릴 (예를 들어, 2-퓨릴 및 3-퓨릴), 피롤일 (예를 들어, 1H-피롤-2-일 및 1H-피롤-3-일), 이미다졸일 (예를 들어, 2H-이미다졸-2-일 및 2H-이미다졸-4-일), 피라졸일 (예를 들어, 1H-피라졸-3-일, 1H-피라졸-4-일, 및 1H-피라졸-5-일), 피리딜 (예를 들어, 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 및 피리딘-4-일), 피리미디닐 (예를 들어, 피리미딘-2-일, 피리미딘-4-일, 및 피리미딘-5-일), 티아졸일 (예를 들어, 티아졸-2-일, 티아졸-4-일, 및 티아졸-5-일), 이소티아졸일 (예를 들어, 이소티아졸-3-일, 이소티아졸-4-일, 및 이소티아졸-5-일), 옥사졸일 (예를 들어, 옥사졸-2-일, 옥사졸-4-일, 및 옥사졸-5-일) 및 이속사졸일 (예를 들어, 이속사졸-3-일, 이속사졸-4-일, 및 이속사졸-5-일)로부터 선택된다. 용어 “헤테로아릴”은 또한 가능한 N-옥사이드를 포함하는 것으로 의미된다. 예시적인 N-옥사이드는 피리딜 N-옥사이드 등을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 헤테로아릴"은 상기에서 정의된 헤테로아릴이 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클로, 알콕시알킬, (아미노)알킬, 하이드록시알킬아미노, (알킬아미노)알킬, (디알킬아미노)알킬, (시아노)알킬, (카르복사미도)알킬, 머캡토알킬, (헤테로사이클로)알킬, 및 (헤테로아릴)알킬로부터 독립적으로 선택된, 1 내지 4 개의 치환기, 예를 들어 1 또는 2 개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않은 것을 의미한다. 일 구현예에서, 임의로 치환된 헤테로아릴은 하나의 치환기를 갖는다. 일 구현예에서, 임의로 치환된 헤테로아릴은 임의로 치환된 피리딜, 즉 2-, 3-, 또는 4-피리딜이다. 임의의 이용가능한 탄소 또는 질소 원자가 치환될 수 있다. 다른 구현예에서, 임의로 치환된 헤테로아릴은 임의로 치환된 인돌이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "헤테로사이클" 또는 "헤테로사이클로"는 3 내지 14 개 고리 구성원 (즉, 3- 내지 14-원 헤테로사이클로) 및 적어도 하나의 헤테로원자를 갖는 1개, 2개 또는 3개의 고리를 함유하는 포화 및 부분적으로 불포화(예를 들어, 1 또는 2 개의 이중 결합 함유) 사이클릭기를 언급한다. 각각의 헤테로원자는, 설폭시드 및 술폰을 포함하는, 산소, 황, 및/또는 4급화될 수 있는 질소 원자로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다. 용어 "헤테로사이클로"는 2-이미다졸리디논과 같은 시클릭 우레이도기, 및 β-락탐, γ-락탐, δ-락탐 및 ε-락탐과 같은 시클릭 아미드기를 포함하는 것을 의미한다. 용어 "헤테로사이클로"는 또한 융합된 임의로 치환된 아릴기를 갖는 기, 예를 들어 인돌리닐를 포함하는 것을 의미한다. 일 구현예에서, 헤테로사이클로기는 1개의 고리 및 1개 또는 2개의 산소 및/또는 질소 원자를 함유하는 5-원 또는 6-원 시클릭기로부터 선택된다. 헤테로사이클로는 탄소 또는 질소 원자를 통해 분자의 나머지에 임의로 연결될 수 있다. 비제한적인 예의 헤테로사이클로기는 2-옥소피롤리딘-3-일, 2-이미다졸리디논, 피페리디닐, 모르폴리닐, 피페라지닐, 피롤리디닐, 및 인돌리닐을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "임의로 치환된 헤테로사이클로"는 상기 정의된 헤테로사이클로가 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 할로알콕시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, 알킬카르보닐, 아릴카르보닐, 알킬설포닐, 아릴설포닐, 우레이도, 구아니디노, 카르복시, 카르복시알킬, 알킬, 사이클로알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로사이클로, 알콕시알킬, (아미노)알킬, 하이드록시알킬아미노, (알킬아미노)알킬, (디알킬아미노)알킬, (시아노)알킬, (카르복사미도)알킬, 머캡토알킬, (헤테로사이클로)알킬, (헤테로아릴)알킬 등으로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 4개의 치환기로 치환되거나 치환되지 않는 것을 의미한다. 치환은 임의의 이용가능한 탄소 또는 질소 원자 상에서 발생할 수 있고, 스피로사이클을 형성할 수 있다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "아미노"는 -NH2를 언급한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알킬아미노"는 -NHR22를 언급하며, 여기에서 R22는 알킬이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "디알킬아미노"는 -NR23aR23b를 언급하며, 여기에서 R23a 및 R23b는 각각 독립적으로 알킬이거나 R23a 및 R23b는 함께 3- 내지 8-원의 임의로 치환된 헤테로사이클로를 형성한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "하이드록시알킬아미노"는 -NHR24를 언급하며, 여기에서 R24는 하이드록시알킬이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "사이클로알킬아미노"는 -NR25aR25b를 언급하며, 여기에서 R25a는 임의로 치환된 사이클로알킬이고 R25b는 수소 또는 알킬이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(아미노)알킬"은 아미노기로 치환된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 아미노알킬기는 -CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2NH2, -CH2CH2CH2CH2NH2 등을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(알킬아미노)알킬"은 알킬아미노기로 치환된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 (알킬아미노)알킬기는 -CH2CH2N(H)CH3이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(디알킬아미노)알킬"은 디알킬아미노기로 치환된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 (디알킬아미노)알킬기는 -CH2CH2N(CH3)2이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(사이클로알킬아미노)알킬"은 사이클로알킬아미노기로 치환된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 (사이클로알킬아미노)알킬기는 -CH2N(H)사이클로프로필, -CH2N(H)사이클로부틸, 및 -CH2N(H)사이클로헥실을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(시아노)알킬"은 하나 이상의 시아노, 예를 들어 -CN 기로 치환된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 (시아노)알킬기는 -CH2CH2CN, -CH2CH2CH2CN, 및 -CH2CH2CH2CH2CN을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "카복사미도"는 용어는 식 -C(=O)NR26aR26b의 라디칼로서, 여기에서 R26a 및 R26b는 각각 독립적으로 수소, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 아릴, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴이거나, 또는 R26a 및 R26b는 이들이 부착된 질소와 함께 3-원 내지 8-원 헤테로사이클로기를 형성하는 라디칼을 언급한다. 일 구현예에서, R26a 및 R26b는 각각 독립적으로 수소 또는 임의로 치환된 알킬이다. 비제한적인 예의 카복사미도는 -CONH2, -CON(H)CH3, CON(CH3)2, 및 CON(H)Ph를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(카복사미도)알킬"은 카복사미도기로 치환된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 (카복사미도)알킬기는 -CH2CONH2, -C(H)CH3-CONH2, 및 -CH2CON(H)CH3를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "술폰아미도"는 식 -SO2NR27aR27b의 라디칼로서, R27a 및 R27b는 각각 독립적으로 수소, 임의로 치환된 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나, 또는 R27a 및 R27b는 이들이 부착된 질소와 함께 3-원 내지 8-원 헤테로사이클로기를 형성하는 라디칼을 언급한다. 비제한적인 예의 술폰아미도기는 -SO2NH2, -SO2N(H)CH3, 및 -SO2N(H)Ph를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알킬카르보닐"은 알킬기로 치환된 카르보닐기, 즉 -C(=O)-를 언급한다. 비제한적인 예의 알킬카르보닐기는 -COCH3이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "아릴카르보닐"은 임의로 치환된 아릴기로 치환된 카르보닐 기, 즉 -C(=O)-를 언급한다. 비제한적인 예의 아릴카르보닐기는 -COPh이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알킬설포닐"은 임의의 상기 언급된 임의로 치환된 알킬기로 치환된 설포닐기, 즉 -SO2-를 언급한다. 비제한적인 예의 알킬설포닐기는 -SO2CH3이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "아릴설포닐"은 임의의 상기 언급된 임의로 치환된 아릴기로 치환된 설포닐기, 즉 -SO2-를 언급한다. 비제한적인 예의 아릴설포닐기는 -SO2Ph이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "머캡토알킬"은 -SH 기로 치환된 임의의 상기 언급된 알킬기를 언급한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "카르복시"는 식 -COOH의 라디칼을 언급한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "카르복시알킬"은 -COOH로 치환된 임의의 상기 언급된 알킬기를 언급한다. 비제한적인 예의 카르복시알킬기는 -CH2CO2H이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알콕시카르보닐"은 알콕시기로 치환된 카르보닐기, 즉 -C(=O)-를 언급한다. 비제한적인 예의 알콕시카르보닐기는 -CO2Me 및 -CO2Et이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "아르알킬"은 1개, 2개, 또는 3개의 임의로 치환된 아릴기로 치환된 알킬기를 언급한다. 일 구현예에서, 아르알킬기는 1개의 임의로 치환된 아릴기로 치환된 C1-4 알킬이다. 비제한적인 예의 아르알킬기는 벤질, 페네틸, -CHPh2, 및 -CH(4-F-Ph)2를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "우레이도"는 식 -NR30a-C(=O)-NR30bR30c의 라디칼로서, 여기에서 R22a는 수소, 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이고, R30b 및 R30c는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이거나, 또는 R30b 및 R30c는 이들이 부착된 질소와 함께 4-원 내지 8-원 헤테로사이클로기를 형성하는 라디칼을 언급한다. 비제한적인 예의 우레이도기는 -NH-C(C=O)-NH2 및 -NH-C(C=O)-NHCH3를 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "구아니디노"는 식 -NR28a-C(=NR29)-NR28bR28c의 라디칼로서, 여기에서 R28a, R28b, 및 R28c는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 또는 임의로 치환된 아릴이고, R29는 수소, 알킬, 시아노, 알킬설포닐, 알킬카르보닐, 카르복사미도, 또는 술폰아미도인 라디칼을 언급한다. 비제한적인 예의 구아니디노기는 -NH-C(C=NH)-NH2, -NH-C(C=NCN)-NH2, -NH-C(C=NH)-NHCH3 등을 포함한다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(헤테로사이클로)알킬"은 1개, 2개, 또는 3개의 임의로 치환된 헤테로사이클로기로 치환된 알킬기를 언급한다. 일 구현예에서, (헤테로사이클로)알킬은 1개의 임의로 치환된 헤테로사이클로기로 치환된 C1-4 알킬이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "(헤테로아릴)알킬"은 1개, 2개, 또는 3개의 임의로 치환된 헤테로아릴기로 치환된 알킬기를 언급한다. 일 구현예에서, (헤테로아릴)알킬기는 1개의 임의로 치환된 헤테로아릴기로 치환된 C1-4 알킬이다.
본 발명의 목적을 위하여, 그 자체로서 또는 다른 기의 부분으로 사용된 용어 "알킬카르보닐아미노"는 아미노에 부착된 알킬카르보닐기를 언급한다. 비제한적인 예의 알킬카르보닐아미노기는 -NHCOCH3이다.
본 발명은 상이한 원자 질량 또는 질량 수를 갖는 원자로 대체된 하나 이상의 원자를 가짐으로써 동위원소적으로 표지된 (즉, 방사성표지된), 임의의 개시 화합물들을 포함한다. 개시된 화합물 내에 결합될 수 있는 동위원소의 예는 2H (또는 중수소 (D)), 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, 및 36Cl 각각과 같은, 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소 및 염소의 동위원소, 예를 들어 3H, 11C, 및 14C를 포함한다. 일 구현예에서, 개시 화합물 내 자리의 실질적으로 모든 원자가 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된 조성물이 제공된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물 내 자리의 일부 원자가 대체된 조성물, 즉 개시 화합물이 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 자리가 농축된 조성물이 제공된다. 동위원소로 표지된 개시 화합물들은 당업계에 알려져 있는 방법으로 제조될 수 있다.
개시 화합물은 하나 이상의 비대칭 중심을 함유할 수 있고 이에 따라 에탄티오머, 디아스테레오머, 및 다른 입체이성질체 형태를 발생시킬 수 있다. 본 발명은 모든 이러한 가능한 형태뿐만 아니라 이들의 라세믹 및 분해된 형태 및 이의 혼합물의 사용을 포함하는 것을 의미한다. 개별적인 에탄티오머는 본 발명의 관점에서 당업계에 알려져 있는 방법에 따라 분리될 수 있다. 본원에 개시된 화합물이 올레핀성 이중 결합 또는 기하학적 비대칭의 다른 중심을 함유하는 경우, 달리 명기되지 않는 한, 이들은 E 및 Z 기하학적 이성질체 모두를 포함하는 것으로 의도된다. 모든 토토머가 또한 본 발명에 포함되는 것으로 의도된다. 예를 들어, 화학식 I의 R4-5의 하기 토토머가 본 발명에 포함된다:
Figure pct00050
화학식 I의 R4-6 및 R5-4의 하기 토토머가 본 발명에 포함된다:
Figure pct00051
본원에서 사용된 바와 같은, 용어 "입체이성질체"는 단지 공간 내 이들 원자의 배향만이 상이한 개별적인 분자의 모든 이성질체의 일반적인 용어이다. 이는 에탄티오머 및 서로 거울상 이미지가 아닌 하나 이상의 키랄 중심을 갖는 화합물의 이성질체 (디아스테레오머)를 포함한다.
용어 "키랄 중심" 또는 "비대칭 탄소 원자"는 4개의 상이한 기가 부착된 탄소 원자를 언급한다.
용어 "에난티오머" 및 "에난티오머릭"은 이의 거울상 이미지로 중첩될 수 없고 이에 따라 광학적으로 활성인 분자를 언급하며, 여기에서 에난티오머는 편광의 평면이 일 방향으로 회전하고 이의 거울상 이미지 화합물은 편광의 평면이 반대 방향으로 회전한다.
용어 "라세믹"은 동등분의 에난티오머의 혼합물을 언급하며 여기에서 혼합물은 광학적으로 비활성이다.
용어 "절대 배열(absolute configuration)"은 키랄 분자 존재물 (또는 작용기)의 원자의 공간적인 배열 및 이의 입체화학적 설명, 예를 들어 R 또는 S를 언급한다.
명세서에 사용된 입체화학적 용어 및 규칙은, 달리 기재되지 않는 한, Pure & Appl. Chem 68:2193 (1996)에 기술된 것들과 일치하는 것으로 의미된다.
용어 "에난티오머 잉여(enantiomeric excess)" 또는 "ee"는 하나의 에난티오머가 다른 것과 대비하여 얼마나 존재하는지에 대한 척도를 언급한다. R 및 S 에난티오머의 혼합물에 대하여, 퍼센트 에난티오머 잉여는 │R - S│*100으로 정의되며, 여기에서 R 및 S는 R + S =1이 되는 혼합물에서 에난티오머의 각각의 몰 또는 중량 분율이다. 키랄 물질의 광학 회전에 관한 지식을 이용하여, 퍼센트 에난티오머의 잉여는 ([α]obs/[α]max)*100으로 정의되며, 여기에서 [α]obs는 에난티오머의 혼합물의 광학 회전이며 [α]max는 순수한 에난티오머의 광학 회전이다. 에난티오머 잉여의 측정은 NMR 분광법, 키랄 컬럼 크로마토그래피 또는 광학 편광측정법(polarimetry)을 포함하는 다양한 분석 기법을 이용하여 가능하다.
용어 "에난티오머적으로 순수한" 또는 "에난티오순수(enantiopure)"는 자신의 분자 모두가(검출 한계 내에서) 동일한 키랄리티 의미를 갖는 키랄 물질의 샘플을 언급한다.
용어 "에난티오머적으로 농축된" 또는 "에난티오농축된"은 이의 에난티오머 비율이 50:50 보다 큰 키랄 물질의 샘플을 언급한다. 에난티오머적으로 농축된 화합물은 에난티오머적으로 순수할 수 있다.
본 발명은 비독성 약학적으로 허용가능한 염을 포함하여, 개시 화합물들의 염의 제조 및 사용을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 부가염의 예는 무기 및 유기 산 부가염 및 염기성 염을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 염은, 이에 제한되는 것은 아니나, 나트륨염, 칼륨염, 세슘염 등과 같은 금속 염; 칼슘염, 마그네슘염 등과 같은 알칼리 토금속; 트리에틸아민염, 피리딘염, 피콜린염, 에탄올아민염, 트리에탄올아민염, 디사이클로헥실아민염, N,N'-디벤질에틸렌디아민염 등과 같은 유기 아민염; 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 포스페이트, 설페이트 등과 같은 무기산염; 시트레이트, 락테이트, 타르트레이트, 말레에이트, 푸마레이트, 만델레이트, 아세테이트, 디클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 옥살레이트, 포르메이트 등과 같은 유기산염; 메탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 등과 같은 설포네이트; 및 아르기네이트, 아스파르기네이트, 글루타메이트 등과 같은 아미노산염을 포함한다.
산부가염은 염산, 푸마르산, 말레산, 숙신산, 아세트산, 시트르산, 타르타르산, 카본산, 인산, 옥살산, 디클로로아세트산 등과 같은 약학적으로 허용가능한 비독성 산의 용액과 특정 개시 화합물의 용액을 혼합함으로써 형성할 수 있다. 염기성 염은 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화콜린, 탄산나트륨 등과 같은 약학적으로 허용가능한 비독성 염기의 용액과 본 발명의 화합물의 용액을 혼합함으로써 형성할 수 있다.
용어 "약학적으로 허용가능한 염"은 하기 일반식을 갖는 보론산염을 포함하는 것을 의미한다:
Figure pct00052
상기 식에서, M+는 H+ 또는 1가의 양이온이다. 예로서, 화합물 53 (하기 참조)은 하기 반응식에 따라 NaOH와 반응하여 약학적으로 허용가능한 염으로 전환된다:
Figure pct00053
본 발명은 개시 화합물들의 용매화물의 제조 및 사용을 포함한다. 용매화물은 전형적으로 화합물의 생리학적인 활성 또는 독성을 유의적으로 변경시키지 않고 그 자체가 약리학적 등가물로서 작용할 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "용매화물"은 예를 들어 용매 분자 대 본 발명의 화합물의 비율이 각각 약 2:1, 약 1:1 또는 약 1:2인, 디용매화물(disolvate), 모노용매화물(monosolvate) 또는 헤미용매화물(hemisolvate)과 같은 용매 분자와 본 발명의 화합물의 조합, 물리적 회합 및/또는 용매화이다. 이러한 물리적 회합은 수소 결합을 포함하는, 다양한 정도의 이온 및 공유 결합을 수반한다. 하나 이상의 용매 분자가 결정성 고체의 결정 격자 내에 결합된 경우와 같은, 특정한 경우에, 용매화물은 분리될 수 있다. 따라서, "용매화물"은 용액-상 및 분리가능한 용매화물 모두를 포함한다. 개시 화합물들은 물, 메탄올, 에탄올 등과 같은 약학적으로 허용가능한 용매와 함께 용매화된 형태로 존재할 수 있으며, 본 발명이 개시 화합물들의 용매화 및 비용매화 형태 모두를 포함하는 것으로 의도된다. 용매화물의 하나의 종류는 수화물이다. "수화물"은 용매 분자가 물인 용매화물의 특정 하위그룹에 관한 것이다. 용매화물은 전형적으로 약리학적 등가물로서 작용할 수 있다. 용매화물의 제조는 당업계에 알려져 있다. 예를 들어, 에틸 아세테이트 및 물을 사용한 플루코나졸의 용매화물의 제조를 기술하는 문헌 [M. Caira et al, J. Pharmaceut. Sci., 93(3):601-611 (2004)] 을 참조하라. 용매화물, 헤미용매화물, 수화물 등의 유사한 제조는 E.C. van Tonder et al., AAPS Pharm. Sci. Tech., 5(1):Article 12 (2004), 및 A.L. Bingham et al., Chem. Commun. 603-604 (2001)에 기술되어 있다. 전형적인 비제한적인 용매화물의 제조 공정은 20℃ 내지 약 25℃ 이상의 온도에서 원하는 용매 (유기, 물 또는 이의 혼합물) 내에서 개시 화합물을 용해시킨 다음, 결정을 형성시키기에 충분한 속도로 용액을 냉각시키고, 결정을 공지의 방법, 예를 들어 여과로 분리시키는 것을 수반한다. 적외선 분광법과 같은 분석 기법이 용매화물의 결정 내 용매의 존재를 확인하기 위해 사용될 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "플루오라이드 부가물"은 일반식 RB(OH)2를 갖는 보론산과 KHF2의 축합 생성물을 언급한다. 플루오라이드 부가물의 일반 구조는 하기 식과 같다:
Figure pct00054
상기 식에서, M+은 1가 양이온이다. 예를 들어, R10a가 -B(OH)2인, 화학식 I의 기 R4-5의 플루오라이드 부가물은 하기 식과 같다:
Figure pct00055
R4-5 플루오라이드 부가물.
본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "하이드록시산 부가물"은 일반식 (R)(RO)B-OH를 갖는 보론산과 식 HOOC-C(R')(R")-OH를 갖는 하이드록시산의 축합 생성물을 언급한다. R' 및 R"는 각각 독립적으로 수소, 카르복시, 임의로 치환된 알킬, 아르알킬, 아미노알킬, 할로알킬, 시아노, (시아노)알킬, (카르복사미도)알킬, (카르복시)알킬 또는 하이드로시알킬 등으로부터 선택된다. R' 및 R"는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 사이클로알킬 또는 헤테로사이클로기를 형성한다. 비제한적인 예의 R'/R" 기는 수소, -CH3, -OH, -CH(CH3)2, -CH(CH3)(Et), -CH2Ph, -CH2CH2SCH3, -CH2CO2H, -CH2CH2CO2H, -(CH2)4NH2, -CH2OH, -CH(CH3)OH, -CH2Ph-OH, -CH2-imidazole, -CH2SH, -CH2C(O)NH2, -CH2CH2C(O)NH2, -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2CH2-, 및 -CH2CH2OCH2CH2-를 포함한다. 일 구현예에서, R'는 -CH2Ph, -CO2H, -CH2CO2H, 및 -CH2CONH2로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 하이드록시산 부가물의 일반적인 구조는 하기 식과 같다:
Figure pct00056
상기 식에서, M+는 1가 양이온이다. 예를 들어, 화학식 I의 기 R4-1의 하이드록시산 부가물은 하기 식과 같다:
Figure pct00057
R4-1 하이드록시 산 부가물.
본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "아미노산 부가물"은 일반식 (R)(RO)B-OH를 갖는 보론산과, β-아미노산을 포함하는 천연 또는 비천연의 D- 또는 L-아미노산, 예를 들어 식 HOOC-C(R"')(R"")-NH2를 갖는 아미노산의 축합 생성물에 관한 것이다. 적합한 비천연 아미노산은, 제한 없이, 2-메틸발린, 2-메틸알라닌, (2-i-프로필)-β-알라닌, 페닐글리신, 4-메틸페닐글리신, 4-이소프로필페닐글리신, 3-브로모페닐글리신, 4-브로모페닐글리신, 4-클로로페닐글리신, 4-메톡시페닐글리신, 4-에톡시페닐글리신, 4-하이드록시페닐글리신, 3-하이드록시페닐글리신, 3,4-디하이드록시페닐글리신, 3,5-디하이드록시페닐글리신, 2,5-디하이드로페닐글리신, 2-플루오로페닐글리신, 3-플루오로페닐글리신, 4플루오로페닐글리신, 2,3-디플루오로페닐글리신, 2,4-디플루오로페닐글리신, 2,5-디플루오로페닐글리신, 2,6-디플루오로페닐글리신, 3,4-디플루오로페닐글리신, 3,5-디플루오로페닐글리신, 2-(트리플루오로메틸)페닐글리신, 3-(트리플루오로메틸)페닐글리신, 4-(트리플루오로메틸)페닐글리신, 2-(2-티에닐)글리신, 2-(3-티에닐)글리신, 2-(2-퓨릴)글리신, 3-피리딜글리신, 4-플루오로페닐알라닌, 4-클로로페닐알라닌, 2-브로모페닐알라닌, 3-브로모페닐알라닌, 4-브로모페닐알라닌, 2-나프틸알라닌, 3-(2-퀴노일)알라닌, 3-(9-안트라세닐)알라닌, 2-아미노-3-페닐부타노산, 3-클로로페닐알라닌, 3-(2-티에닐)알라닌, 3-(3-티에닐)알라닌, 3-페닐세린, 3-(2-피리딜)세린, 3-(3-피리딜)세린, 3-(4-피리딜)세린, 3-(2-티에닐)세린, 3-(2-퓨릴)세린, 3-(2-티아졸일)알라닌, 3-(4-티아졸일)알라닌, 3-(1,2,4-트리아졸-1-일)-알라닌, 3-(1,2,4-트리아졸-3-일)-알라닌, 헥사플루오로발린, 4,4,4-트리플루오로발린, 3-플루오로발린, 5,5,5-트리플루오로류신, 2-아미노-4,4,4-트리플루오로부티르산, 3-클로로알라닌, 3-플루오로알라닌, 2-아미노-3-플루로부티르산, 3-플루오로노르류신, 4,4,4-트리플루오로트레오닌, L-알릴글리신, tert-류신, 프로파르길글리신, 비닐글리신, S-메틸시스테인, 사이클로펜틸글리신, 사이클로헥실글리신, 3-하이드록시노르발린, 4-아자류신, 3-하이드록시류신, 2-아미노-3-하이드록시-3-메틸부타노산, 4-티아이소류신, 아시비신, 이보텐산, 퀴스콸산, 2-인다닐글리신, 2-아미노이소부티르산, 2-사이클로부틸-2-페닐글리신, 2-이소프로필-2-페닐글리신, 2-메틸발린, 2,2-디페닐글리신, 1-아미노-1-사이클로프로판카르복실산, 1-아미노-1-사이클로펜탄카르복실산, 1-아미노-1-사이클로헥산카르복실산, 3-아미노-4,4,4-트리플루오로부티르산, 3-페닐이소세린, 3-아미노-2-하이드록시-5-메틸헥사노산, 3-아미노-2-하이드록시-4-페닐부티르산, 3-아미노-3-(4-브로모페닐)프로피온산, 3-아미노-3-(4-클로로페닐)프로피온산, 3-아미노-3-(4-메톡시페닐)프로피온산, 3-아미노-3-(4-플루오로페닐)프로피온산, 3-아미노-3-(2-플루오로페닐)프로피온산, 3-아미노-3-(4-니트로페닐)프로피온산, 및 3-아미노-3-(1-나프틸)프로피온산의 에탄티오머 및 라세미 형태를 포함한다. 이들 비천연 아미노산은 알드리치(Aldrich), 시그마(Sigma), 플루카(Fluka), 란카스터(Lancaster), 아이씨엔(ICN), 티씨아이(TCI), 어드밴스드 켐테크(Advanced ChemTech), 오크우드 프러덕트(Oakwood Products), 인도핀 케미컬 컴퍼니(Indofine Chemical Company), 엔에스씨 테크놀로지(NSC Technology), 피씨알 리서치 케미컬스(PCR Research Chemicals), 바켐(Bachem), 아크로스 오가닉스(Acros Organics), 셀진(Celgene), 비오넷 리서치(Bionet Research), 타이거 사이언티픽(Tyger Scientific), 토크리스(Tocris), 리서치 플러스(Research Plus), 애쉬 스테벤스(Ash Stevens), 칸토(Kanto), 치로사이언스(Chiroscience), 및 페닌술라 랩(Peninsula Lab)을 포함하는 상업적인 공급자로부터 상업적으로 이용가능하다. 하기 아미노산은 문헌 과정에 따라 합성될 수 있다: 3,3,3-트리플루오로알라닌 (Sakai, T.; et al.. Tetrahedron 1996, 52, 233) 및 3,3-디플루오로알라닌 (D'Orchymont, H. Synthesis 1993, 10, 961). Z의 위치에 사용될 수 있는 다른 N-보호기는 아세틸 (Ac), tert-부톡시카르보닐 (Boc), 메톡시카르보닐, 또는 에톡시카르보닐을 포함한다. 비제한적인 예의 R"'/R"" 기는 수소, CH3, OH, -CH(CH3)2, -CH(CH3)(Et), -CH2Ph, -CH2CH2SCH3, -CH2CO2H, -CH2CH2CO2H, -(CH2)4NH2, -CH2OH, -CH(CH3)OH, -CH2Ph-OH, -CH2-imidazole, -CH2SH, -CH2C(O)NH2, 및 -CH2CH2C(O)NH2를 포함한다. 하이드록시산 부가물의 일반적인 구조는 하기 식과 같다:
Figure pct00058
상기 식에서, M+는 H+ 또는 1가 양이온이다. 예로서, 화학식 I의 기 R4-1의 아미노산 부가물은 하기 식과 같다:
Figure pct00059
R4-1 아미노산 부가물.
본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "1가 양이온"은, 이에 제한되는 것은 아니나, 알칼리 금속 이온, 예를 들어 Na+ 및 K+와 같은 무기 양이온뿐만 아니라 이에 제한되는 것은 아니나, 암모늄 및 치환된 암모늄 이온, 예를 들어 NH4 +, NHMe3 +, NH2Me2 +, NHMe3 + 및 NMe4 +와 같은 유기 양이온을 언급한다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "미분화(micronization)"는 입자 집단의 크기를 전형적으로 미크론 스케일로 감소시키는 공정 또는 방법을 언급한다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "미크론" 또는 "㎛"는 1　x　10-6 미터인 "마이크로미터"를 언급한다.
다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물 및 하나 이상의 부형제를 포함하는 조성물을 제공한다. 일 구현예에서, 부형제는 디메틸 설폭시드 또는 아세톤을 포함한다. 일 구현예에서, 조성물은 "약학적으로 허용가능한 조성물"을 제공하기 위하여 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함한다. 다른 구현예에서, 조성물은 미분화된 개시 화합물들을 포함한다. 다른 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 부형제는 미그룔 (Miglyol) 812, 포스포리폰(phospholipon) 90G, 또는 토코페릴 폴리에틸렌 글리콜 1000 숙시네이트, 또는 이의 혼합물을 포함한다. 다른 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 부형제는 본질적으로 미그룔 812, 포스포리폰 90G, 및 토코페릴 폴리에틸렌 글리콜 1000 숙시네이트로 이루어진다. 다른 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 부형제는 라브라솔®(Labrasol®)을 포함한다. 다른 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 부형제는 소르비탄 모노라우레이트, 하이드록시프로필메틸셀룰로스 아세테이트 숙시네이트, 소듐 타우로콜레이트, 에토셀TM(ethocelTM) 또는 팔미토일-올레오일-포스파티딜콜린, 또는 이의 혼합물을 포함한다. 다른 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 부형제는 수소화된 대두 레시틴을 포함한다. 개시 화합물은 당업자에게 잘 알려져 있는 방법을 사용하여 하나 이상의 부형제와 혼합될 수 있다.
다른 구현예에서, 부형제는 에탄올, 이소프로판올, 프로필렌 글리콜, 벤질 알코올, 글리세린, 소르비톨, 수크로스, 카보폴, 말토덱스트린, 라이카신 (말티톨), 소듐 벤조에이트, 소듐 사카라이드, 루트롤 E, F, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 시트르산, 카프룔 90, 트윈 80 (폴리소르베이트 80), 콜리돈®(Kollidon®) CL-M, 폴리옥실 스테아레이트, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, 크레모포어®(Cremophor®) RH 40, 크레모포어® EL, 소듐 카르복시메틸 셀룰로스 (CMC), 구아 검, 잔탄 검, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 폴리비닐 피롤리돈, 또는 이의 혼합물을 포함한다.
다른 구현예에서, 부형제는 라브라필®(Labrafil®), 라브라솔®(Labrasol®), 겔루서®(Gelucire®), 라브라팍®(Labrafac®), 라우로글리콜TM(LauroglycolTM) 90, 페세올TM(PeceolTM), 트란스쿠톨®(Transcutol®), 콤프리톨®(Compritol®), 겔로일®(Geloil®), 겔레올TM(GeleolTM), 또는 프레시롤®(Precirol®) 또는 이의 혼합물을 포함한다.
다른 구현예에서, 부형제는 카프물(capmul), 카프텍스®(Captex®) 또는 악코논®(Acconon®) 또는 이의 혼합물을 포함한다.
다른 구현예에서, 부형제는 다이나세린®(DYNACERIN®), 다이나셋®(DYNACET®), 다이나산(DYNASAN), 갈레놀®(GALENOL®), 임위토르(IMWITOR) (글리세릴 모노올레에이트, 스테아레이트, 카프릴레이트), 이소폴®(ISOFOL®)(장쇄 알코올), 리폭솔®(LIPOXOL®)(마크로골(Macrogol)), 마싸 에스타리눔(MASSA ESTARINUM) (수소화 코코-글리세라이드(Hydrogenated Coco-Glycerides)), 미글욜(MIGLYOL) (카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드), 나콜®(NACOL®), 나폴(Nafol) (알코올), 소프티겐®(SOFTIGEN®), 소프티산®(SOFTISAN®), 와이텝솔(WITEPSOL) (수소화 코코-글리세라이드), 또는 와이토칸®(WITOCAN®)(수소화 코코-글리), 또는 이의 혼합물을 포함한다.
다른 구현예에서, 부형제는 히프로멜로스 아세테이트 숙시네이트를 포함한다.
다른 구현예에서, 부형제는 솔루플러스®(Soluplus®)(폴리비닐카프로락탐-폴리비닐 아세테이트-폴리에틸렌 글리콜 그라프트 공중합체를 포함한다.
조성물은 0.01 중량% 내지 99 중량%, 예를 들어 약 1 중량 %, 약 2 중량%, 약 3 중량%, 약 4 중량%, 약 5 중량%, 약 6 중량%, 약 7 중량%, 약 8 중량%, 약 9 중량%, 또는 약 10 중량%, 약 15 중량%, 약 20 중량%, 약 25 중량%, 약 30 중량%, 약 35 중량%, 약 40 중량%, 약 45 중량%, 약 50 중량%, 약 55 중량%, 약 60 중량%, 약 65 중량%, 약 70 중량%, 약 75 중량%, 약 80 중량%, 약 85 중량%, 약 90 중량%, 또는 약 95 중량%의 개시 화합물을 함유할 수 있다. 임의의 특정 조성물 내 양은 유효 투여량, 즉 유전자 발현의 원하는 수준을 이끌어내기 위해 필요한 투여량에 의존할 것이다.
다른 양태에서, 본 발명은 미분화된 개시 화합물들, 및 이의 조성물을 제공한다. 일 구현예에서, 개시 화합물의 미분화된 형태의 평균 입자 크기 분포는 약 20 ㎛ 또는 그 미만, 예를 들어, 약 19 ㎛, 약 18 ㎛, 약 17 ㎛, 약 16 ㎛, 약 15 ㎛, 약 14 ㎛, 약 13 ㎛, 약 12 ㎛, 또는 약 11 ㎛, 또는 그 미만이다. 다른 구현예에서, 평균 입자 크기 분포는 약 10 ㎛ 또는 그 미만, 예를 들어, 약 9 ㎛, 약 8 ㎛, 약 7 ㎛, 약 6 ㎛, 또는 약 5 ㎛, 또는 그 미만이다. 다른 구현예에서, 평균 입자 크기 분포는 약 5 ㎛ 또는 그 미만, 예를 들어, 약 4 ㎛, 약 3 ㎛, 약 2 ㎛, 또는 약 1 ㎛, 또는 그 미만이다. 다른 구현예에서, 평균 입자 크기 분포는 약 1 ㎛ 또는 그 미만, 예를 들어, 약 0.9 ㎛, 약 0.8 ㎛, 약 0.7 ㎛, 약 0.6 ㎛, 약 0.5 ㎛, 약 0.4 ㎛, 약 0.3 ㎛, 약 0.2 ㎛, 약 0.1 ㎛, 약 0.09 ㎛, 약 0.08 ㎛, 약 0.07 ㎛, 약 0.06 ㎛, 약 0.05 ㎛, 약 0.04 ㎛, 약 0.03 ㎛, 약 0.02 ㎛, 또는 약 0.01 ㎛ 또는 그 미만이다.
다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물, 또는 미분화된 개시 화합물과 하나 이상의 부형제를 혼합하는 단계를 포함하는, 조성물을 제조하는 방법을 제공한다. 일 구현예에서, 부형제는 약학적으로 허용가능한 부형제이다.
다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물, 또는 이의 조성물로 숙주 세포를 접촉시킴을 포함하는, 숙주 세포 내 목적 유전자의 유전자 발현을 조절하는 방법을 제공한다. 일 구현예에서, 숙주 세포는 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하고, 여기에서 상기 목적 유전자의 발현수준이 개시 화합물의 부재하의 상기 목적 유전자의 발현수준에 비하여 증가한다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 분리된 숙주 세포이다. 특정한 다른 구현예에서, 분리된 숙주 세포는, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 구조체로 체외(ex-vivo) 유전자 조작(예를 들어, 형질전환, 트랜스펙션 또는 감염)된다. 다른 구현예에서, 체외 유전자 조작된 숙주 세포가 대상체에 투여된다. 특정한 구현예에서, 목적 유전자의 발현은 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치의 제어 하에 있다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 대상체, 예를 들어 동물, 예를 들어 인간 내에 있다. 예를 들어, 대상체 내 하나 이상의 세포 (숙주 세포)는 대상체 (또는 이의 숙주 세포의 선발 개체)에 바이러스 벡터를 투여함으로써 체내 유전자 조작될 수 있으며, 여기에서 바이러스 벡터는 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 또 다른 구현예에서, 숙주 세포는 포유류 대상체로부터 얻어진 자가(autologous) 숙주 세포이며, 여기에서 자가 숙주 세포는 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 구조체로 유전자 조작된다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 동종이형 줄기 세포 또는 면역 세포이며, 여기에서 동종이형 줄기 세포는 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 구조체로 유전자 조작된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물은 약학적으로 허용가능한 조성물로서 대상체에 투여된다. 다른 구현예에서, 유전자 스위치는 개시 화합물을 결합하는 에크디손 수용체 (EcR) 리간드 결합 도메인을 포함한다. 다른 구현예에서, 유전자 스위치는 개시 화합물을 결합하는 제1 리간드 결합 도메인 (예를 들어, EcR 리간드 결합 도메인)과 이합체화(dimerize)하는 제2 리간드 결합 도메인을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, EcR 리간드 결합 도메인은 상응하는 야생형 EcR 폴리펩타이드 서열 대비 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 다른 구현예에서, 제2 리간드 결합 도메인은 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 제2 리간드 결합 도메인은 야생형 곤충 USP (울트라스피라클 단백질)이다. 다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 (RxR) 리간드 결합 도메인은 키메릭 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 키메릭 리간드 결합 도메인은 포유류 RxR/무척추 동물 USP 키메라이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 펩타이드, 단백질, 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 추가로 포함하고, 이의 발현이 상기 유전자 스위치에 의해 조절된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물, 또는 이의 조성물을 대상체에게 투여함을 포함하는 대상체의 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하는 방법을 제공한다. 일 구현예에서, 하나의 벡터 (또는 2개 이상의 벡터들)는 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 (또는 폴리뉴클레오타이드들)를 포함한다. 일 구현예에서, 벡터 (또는 벡터들)는 DNA 또는 RNA 벡터일 수 있다. 일 구현예에서, 벡터 (또는 벡터들)는 플라스미드 또는 바이러스 벡터 (예를 들어, 아데노바이러스 벡터 또는 아데노-관련 바이러스 벡터)일 수 있다. 일 구현예에서, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 (또는 폴리뉴클레오타이드들)를 포함하는 벡터 (또는 벡터들)는 대상체의 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하기 위하여 대상체에 투여된다. 일 구현예에서, 개시 화합물의 투여 이후, 목적 유전자(gene-of-interest (GOI))가, GOI를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 (또는 폴리뉴클레오타이드들)을 포함하고 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 포함하는 벡터 (또는 벡터들)로부터 대상체에서 체내 발현된다. 일 구현예에서, 대상체 또는 비인간 유기체 내 숙주 세포는 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다. 다른 구현예에서, 대상체는 인간이다. 다른 구현예에서, 질환, 장애, 상해 또는 증상은 암, 대사 관련 질환, 신장 질환, 빈혈, 자가 면역성 질환, 안과 질환, 혈액 질환, 신경성 질환, 폐 (허파) 질환, 류마티스 질환, 심장 질환, 간 (간장) 질환 및 감염성 질환으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 다른 구현예에서, 질환, 장애, 상해 또는 증상은 암이다. 다른 구현예에서, 암은 흑색종이다. 다른 구현예에서, 유전자 스위치가 에크디손 수용체 (EcR) 리간드 결합 도메인을 포함한다. 다른 구현예에서, 유전자 스위치는 개시 화합물을 결합하는 제1 리간드 결합 도메인 (예를 들어, EcR 리간드 결합 도메인)과 이합체화하는 제2 리간드 결합 도메인을 추가로 포함한다. 일 구현예에서, EcR 리간드 결합 도메인은 상응하는 야생형 EcR 폴리펩타이드 서열 대비 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다. 다른 구현예에서, 제2 리간드 결합 도메인은 야생형 곤충 USP (울트라스피라클 단백질)이다. 다른 구현예에서, 제2 리간드 결합 도메인은 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 (RxR) 리간드 결합 도메인은 키메릭 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 키메릭 리간드 결합 도메인은 포유류 RxR/무척추 동물 USP 키메라이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 펩타이드, 단백질, 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 추가로 포함하고, 이의 발현이 상기 유전자 스위치에 의해 조절된다. 다른 구현예에서, 유전자 스위치는 IL-12 또는 그의 서브유닛을 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절한다. (예를 들어, 제US 2011/0268766호 참조).
다른 구현예에서, 본 발명은 대상체의 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하는데 사용하기 위한 개시 화합물, 또는 이의 조성물을 제공한다.
다른 구현예에서, 본 발명은 대상체의 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하는데 약제를 제조하기 위해 사용하기 위한 개시 화합물, 또는 이의 조성물을 제공한다.
다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물을 포함하는 키트, 또는 개시 화합물 및 하나 이상의 부형제의 조성물을 포함하는 키트를 제공한다. 일 구현예에서, 키트는 분리된 숙주 세포 또는 대상체에 개시 화합물을 투여하기 위한 설명서를 추가로 포함한다. 다른 구현예에서, 키트는 레오스위치 테라퓨틱 시스템®(RheoSwitch Therapeutic System®) (예를 들어, "RheoSwitch® Mammalian Inducible Expression System"을 위한 설명서 매뉴얼, New England BioLabs® Inc., Version 1.3, November 2007; Karzenowski, D. et al., BioTechiques 39:191-196 (2005); Dai, X. et al., Protein Expr. Purif. 42:236-245 (2005); Palli, S. R. et al., Eur. J. Biochem. 270:1308-1515 (2003); Dhadialla, T. S. et al., Annual Rev. Entomol. 43:545-569 (1998); Kumar, M. B, et al., J. Biol. Chem. 279:27211-27218 (2004); Verhaegent, M. and Christopoulos, T. K., Annal. Chem. 74:4378-4385 (2002); Katalam, A. K., et al., Molecular Therapy 13:S103 (2006); 및 Karzenowski, D. et al., Molecular Therapy 13:S194 (2006) 참조)을 추가로 포함한다.
개시 화합물들은 다른 약학적으로 활성인 화합물과 함께 대상체에 투여될 수 있다. 개시 화합물과 조합하여 사용되기 위한 약학적으로 활성인 화합물은 수용체에 대한 부작용 및 화합물 간의 바람직하지 않은 상호작용을 피하기 위해 선택될 것임을 당업자는 이해할 것이다. 개시 화합물과 조합하여 사용될 수 있는 다른 약학적으로 활성인 화합물의 예는, 예를 들어 AIDS 화학치료제, 아미노산 유도체, 진통제, 마취제, 항문직장 제품, 제산제 및 가스제거제(antiflatulent), 항생제, 항응고제, 해독제, 항섬유소용해제, 항히스타민, 항염증제, 항신생물제, 항기생충제, 항원충제, 해열제, 방부제, 진경제 및 항콜린제, 항바이러스제, 식욕억제제, 관절염 의약, 생물학적 반응 개질제, 골 대사 조절제, 장 배설촉진제, 심혈관제, 중추신경계 자극제, 뇌 물질대사 증진제, 귀지분해제 (cerumenolytic), 콜린에스테라제 억제제, 감기 및 기침 제제, 콜로니 자극 인자, 피임제, 세포보호제, 치과 제제, 탈취제, 피부과제제, 해독제(detoxifying agent), 당뇨병제제, 진단제, 설사 의약, 도파민 수용체 작용제, 전해질, 효소 및 소화제, 에르고트 제제(ergot preparation), 가임제, 섬유 보충제, 항진균제, 유루증 억제제(galactorrhea inhibitor), 위산 분비 억제제, 위장 프로키네틱 제제, 고나도트로핀 억제제, 모발 성장 자극제, 조혈제, 혈류역동학 제제(hemorrheologic agent), 지혈제, 히스타민 H2 수용체 길항제, 호르몬, 고혈당제, 저지질혈증제, 면역억제제, 설사제, 나균저지제, 백혈구분리반출 부가제, 폐 계면활성제, 편두통 제제, 점액용해제, 근육 이완 길항제, 근육 이완제, 마약 길항제, 비강 스프레이제, 비강 의약 뉴클레오사이드 유사체, 영양 보충물, 골다공증 제제, 분만촉진제, 부교감신경억제제, 부교감신경흥분제, 파킨슨 약물(Parkinsonism drug), 페니실린 보조제, 인지질, 혈소판 억제제, 포르피린증 제제(porphyria agent), 프로스타글란딘 유사체, 프로스타글란딘, 양성자 펌프 억제제, 소양증 의약, 향정신제, 퀴놀론, 호흡 자극제, 타액 자극제, 염 치환제, 경화제, 피부 상처 제제, 금연 보조제, 술폰아미드, 교감신경차단제, 혈전용해제, 투렛 증후군 제제(Tourette's syndrome agent), 떨림 제제, 결핵 제제, 요산뇨증 제제, 뇨관 제제, 자궁 수축제, 자궁 이완제, 질 제제, 현기증 제제, 비타민 D 유사체, 비타민, 및 의학 영상 조영 매질을 포함한다. 일부 경우에서 개시 화합물은 예를 들어, 특수 약물을 대사하는 효소를 생산하는 유전자를 "턴 오프(turn off)" 시키는 약물 치료요법에 대한 보조제로서 유용할 수 있다.
농업 적용을 위해, 개시 화합물들, 또는 이의 조성물은 바실러스 투링지엔시스(Bacillus thuringiensis: Bt) 독소와 같은 살충 단백질의 발현을 제어하는데 사용될 수 있다. 이러한 발현은 조직 또는 식물 특이적일 수 있다. 또한, 특히 식물 해충의 제어가 또한 요구되는 경우, 하나 이상의 살충제가 개시 화합물, 또는 이의 조성물과 화합됨으로써, 살충제가 별도로 적용되는 경우보다, 더 적은 총 적용을 포함하는 추가의 장점 및 효능 제공할 수 있다. 살충제와의 혼합물을 사용하는 경우, 조성물 중 각각의 성분의 상대적 비는 처리될 작물, 해충 및/또는 잡초와 관련하여 각각의 살충제의 상대적 효능 및 바람직한 적용 비율에 의존할 것이다. 당업자는 살충제의 혼합물이 단독으로 사용된 1개의 살충제보다 더 광범위한 활성 스펙트럼과 같은 장점을 제공할 수 있음을 인식할 것이다. 개시 화합물들과의 조성물 중에 화합될 수 있는 살충제의 예는 살진균제, 제초제, 살충제, 살비제, 및 살미생물제을 포함한다.
다른 농업적 구현예에서, 개시 화합물들은 하나 이상의 목적 유전자 (GOIs)의 발현을 제어하기 위해 사용될 수 있다. 예시적인 GOI는 임의의 원하는 특징(trait)을 포함하며, 상기 특징은 작물학적인 특징, 입력 특징(input trait), 예컨대 제초제- 또는 살충제-내성, 최종 소비자 (동물 또는 인간)를 위한 영양학적으로 바람직한 GOI 뿐만 아니라 식물 생성물의 효과적인 가공을 위한 원하는 GOI이든지 아니든지 관계없다. 따라서, 특정 구현예에서, 식물 세포, 식물 조직, 전체 식물 등은 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드로 유전자 조작되고, 여기에서 하나 이상의 GOI의 발현은 유전자 스위치의 제어 하에 있다. 유사하게, 특정 구현예에서, 진균 세포, 박테리아 세포 또는 효모 세포는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드로 유전자 조작되고, 여기에서 하나 이상의 GOI의 발현은 유전자 스위치의 제어 하에 있다.
곤충에서 에크디손 수용체은 에크디손 스테로이드 호르몬(탈피 호르몬) 및 포나스테론 A 및 무리스테론 A와 같은 다른 스테로이드성 화합물에 대해 천연적으로 반응성이다 (Graham et al., Insect Biochemistry and Molecular Biology 37:611-626 (2007); Dinan and Hormann, "Ecdysteroid Agonists and Antagonists," Comprehensive Molecular Insect Science, 1st ed.:197-242, (2005)). 에크디손 수용체 작용제 활성을 갖는 디아실하이드라진은 살충제로서 기술되어 왔다(참조: 미국 특허 제5,530,028호).
다른 양태에서, 본 발명은 개시 화합물, 또는 이의 조성물의 살충적 유효량을 곤충 또는 이들의 서식지와 접촉시킴을 포함하는, 곤충을 제어, 예를 들어 감소시키거나 이의 확산을 방지하거나, 이를 사멸시키는 방법을 제공한다. 다른 구현예에서, 개시 화합물들, 또는 이의 조성물은 다음 곤충에 대해 살충적으로 활성이다:
(1) 레피도프테란(lepidopteran)[레피도프테라(Lepidoptera)]의 목으로부터의 곤충, 예를 들어, 아그로티스 입실론(Agrotis ypsilon), 아그로티스 세게툼(Agrotis segetum), 알라바마 아르길라체아(Alabama argillacea), 안피카르시아 겜마탈리스(Anficarsia gemmatalis), 아르기레스티아 콘주겔라(Argyresthia conjugella), 아우토그라파 감마(Autographa gamma), 부팔루스 피니아리우스(Bupalus piniarius), 카코에키아 무리나나(Cacoecia murinana), 카푸아 레티쿨라나(Capua reticulana), 케이마토비아 브루마타(Cheimatobia brumata), 코리스토네우라 푸미페라나(Choristoneura fumiferana), 코리스토네우라 옥시덴탈리스(Choristoneura occidentalis), 시르피스 우니푼크타(Cirphis unipuncta), 키디아 포모넬라(Cydia pomonella), 덴드롤리무스 피니(Dendrolimus pini), 디아파니아 니티달스(Diaphania nitidalls), 들라트라에아 그란디오셀라(Dlatraea grandiosella), 에아리아스 인술라나(Earias insulana), 엘라스모팔푸스 리그노셀루스(Elasmopalpus lignosellus), 유포에킬리아 암비구엘라(Eupoecilia ambiguella), 에베트리아 보울리아나(Evetria bouliana), 펠티아 서브테라네아(Feltia subterranea), 갈레리아 멜로넬라(Galleria mellonella), 그라폴리타 푸네브라나(Grapholitha funebrana), 그라폴리타 몰레스타(Grapholitha molesta), 헬로티스 아르미게라(Hellothis armigera), 헬로티스 비레스센스(Hellothis virescens), 헬로티스 제아(Heliothis zea), 헬룰라 운달리스(Hellula undalis), 히베르니아 데폴리아리아(Hibernia defoliaria), 하이판트리아 쿠네아(Hyphantria cunea), 하이포노메우타 말리넬루스(Hyponomeuta malinellus), 케이페리아 라이코페르시셀라(Keiferia lycopersicella), 람브디나 피스셀라리아(Lambdina fiscellaria), 라파이그마 엑시구아(Laphygma exigua), 류코프테라 코페엘라(Leucoptera coffeella), 류코프테라 스시텔라(Leucoptera scitella), 리토콜레티스 블란카르델라(Lithocolletis blancardella), 로베시아 보트라나(Lobesia botrana), 록소스테게 스틱티칼리스(Loxostege sticticalis), 라이만트리아 디스파르(Lymantria dispar), 라이만트리아 모나카(Lymantria monacha), 라이오티아 클레르켈라(Lyonetia clerkella), 말라코소마 네우스트리아(Malacosoma neustria), 마메스트라 브라씨카에(Mamestra brassicae), 오르기아 슈도트수가타(Orgyia pseudotsugata), 오스트리니아 누비랄리스(Ostrinia nubilalls), 파놀스 플람메아(Panolls flammea), 펙티노포라 고씹피엘라(Pectinophora gossypiella), 페리드로마 사우키아(Peridroma saucia), 팔레라 부세팔라(Phalera bucephala), 프토리마에아 오페르쿨렐라(Phthorimaea operculella), 필록니스티스 시트렐라(Phyllocnistis citrella), 피에리스 브라씨카에(Pieris brassicae), 플라타이페나 스카브라(Plathypena scabra), 플루텔라 크실로스텔라(Plutella xylostella), 슈도플루시아 인클루덴스(Pseudoplusia includens), 라이아시오니아 프루스트라나(Rhyacionia frustrana), 스크로비팔풀라 아브솔루타(Scrobipalpula absoluta), 시토트로가 세레알렐라(Sitotroga cerealella), 스파르가노티스 필레리아나(Sparganothis pilleriana), 스포도프테라 프루글페르다(Spodoptera fruglperda), 스포도프테라 리토랄스(Spodoptera littoralls), 스포도프테라 리투라(Spodoptera litura), 타우마토포에아 피티오캄파(Thaumatopoea pityocampa), 토르트릭스 비리다나(Tortrix viridana), 트리코플루시아 니(Trichoplusia ni) 및 제이라페라 카나덴시스(Zeiraphera Canadensis);
(2) 딱정벌레[콜레오프테라), 예를 들어, 아그릴루스 시노아투스(Agrilus sinuatus), 아그리오테스 리네아투스(Agriotes lineatus), 아그리오테스 오브스쿠루스(Agriotes obscurus), 암피말루스 솔스티티알리스(Amphimallus solstitialis), 아니산드루스 디스파르(Anisandrus dispar), 안토노무스 그란디스(Anthonomus grandis), 안토노무스 포모룸(Anthonomus pomorum), 아프토나 유포리다에(Aphthona euphoridae), 안토우스 해모로이달스(Athous haemorrhoidals), 아토마리아 리네아리스(Atomaria linearis), 블라스토파구스 피니페르다(Blastophagus piniperda), 블리토파가 운다타(Blitophaga undata), 브루쿠스 루피마누스(Bruchus rufimanus), 부루쿠스 피소룸(Bruchus pisorum), 브루쿠스 렌티스(Bruchus lentis), 바이크티스쿠스 베툴라에(Byctiscus betulae), 카씨다 네불로사(Cassida nebulosa), 케로토마 트리푸르카타(Cerotoma trifurcata), 세토니아 아우라타(Cetonia aurata), 세우토르힌쿠스 아씨밀리스(Ceuthorrhynchus assimilis), 세우토르힌쿠스 나피(Ceuthorrhynchus napi), 카에토크네마 티비알리스(Chaetocnema tibialis), 코노데루스 베스페르티누스(Conoderus vespertinus), 크리오세리스 아스파라기(Crioceris asparagi), 크테니세라 아종(Ctenicera ssp.), 디아브로티카 론기코르니스(Diabrotica longicornis), 디아브로티카 세미푼크타타(Diabrotica semipunctata), 디아브로티카 12-푼크타타 스페시오사(Diabrotica 12-punctata Diabrotica speciosa), 디아브로티카 비르기페라(Diabrotica virgifera), 에피라크나 바리베스티스(Epilachna varivestis), 에피트릭스 히이르트펜니스(Epitrix hiirtpennis), 유티노보쓰루스 브라시이렌시스(Eutinobothrus brasiilensis), 하일로비우스 아비에티스(Hylobius abietis), 하이페라 브룬네이펜니스(Hypera brunneipennis), 하이페라 포스티카(Hypera postica), 입스 타이포그라푸스(Ips typographus), 레마 빌리네아타(Lema bilineata), 레마 멜라노푸스(Lema melanopus), 렙티노타르사 데셈리네아타(Leptinotarsa decemlineata), 리모니우스 칼리포르니쿠스(Limonius californicus), 리쏘로프트루스 오리조필루스(Lissorhoptrus oryzophilus), 멜라노투스 콤무니스(Melanotus communis), 멜리게테스 아에네우스(Meligethes aeneus), 멜롤론타 히포카스타니(Melolontha hippocastani), 멜롤론타 멜로론타(Melolontha melolontha), 오울레마 오리자에(Oulema oryzae), 오티오린쿠스 술카투스(Otiorrhynchus sulcatus), 오티오린쿠스 오바투스(Otiorrhynchus ovatus),
파에돈 코클레아리아에(Phaedon cochleariae), 파일로비우스 피리(Phyllobius pyri), 파일로트레타 크리소세팔라(Phyllotreta chrysocephala), 파일로파가 종(Phyllophaga sp.), 파일로페르타 호르티콜라(Phyllopertha horticola), 필로트레타 네모룸(Phyllotreta nemorum), 필로트레타 스트리올라타(Phyllotreta striolata), 포필리아 자포니카(Popillia japonica), 시토나리네아투스(Sitona lineatus) 및 시토필루스 그라나리아(Sitophilus granaria);
(3) 파리, 모기[디프테라(Diptera)], 예를 들어, 아에데스 에에깁티(Aedes aegypti), 아에데스 알보픽투스(Aedes albopictus), 아에데스 벡산스(Aedes vexans), 아나스트렙파 루덴스(Anastrepha ludens), 아노펠레스 마쿨리펜니스(Anopheles maculipennis), 아노펠레스 크루시안스(Anopheles crucians), 아노펠레스 알비마누스(Anopheles albimanus), 아노펠레스 감비아에(Anopheles gambiae), 아노펠레스 프레보르니(Anopheles freeborni), 아노펠레스 류코스파이루스(Anopheles leucosphyrus), 아노펠레스 미니무스(Anopheles minimus), 아노펠레스 쿠아드리마쿨라투스(Anopheles quadrimaculatus), 칼리포라 비시나(Calliphora vicina), 세라티티스 카피타타(Ceratitis capitata), 크라이소마이아 베치아나(Chrysomya bezziana), 크리소마이아 호미니보락스(Chrysomya hominivorax), 크라이소마이아 마셀라리아(Chrysomya macellaria), 크라이솝스 디스카일스(Chrysops discails), 크리솝스 실라세아(Chrysops silacea), 크라이솝스 알란티쿠스(Chrysops allanticus), 코클리오마일라 호미니보락스(Cochliomyla hominivorax), 콘타리니아 소르기콜라(Contarinia sorghicola), 코르딜로비아 안트로포파가(Cordylobia anthropophaga), 쿨리코이데스 푸렌스(Culicoides furens), 쿨렉스 피피엔스(Culex pipiens), 쿨렉스 니그리팔푸스(Culex nigripalpus), 쿨렉스 퀸쿠에파스시아투스(Culex quinquefasciatus), 쿨렉스 타르살리스(Culex tarsalis), 쿨리세타 이노르나타(Culiseta inornata), 쿨리세타 멜라누라(Culiseta melanura), 다쿠스 쿠쿠르비타에(Dacus cucurbitae), 다쿠스 올레아에(Dacus oleae), 다시네우라 브라씨카에(Dasineura brassicae), 델리아 안티쿠에(Delia antique), 델리아 코아르크타타(Delia coarctata), 델리아 플라투라(Delia platura), 델라 라디쿰(Della radicum), 데르마토비아 호미니스(Dermatobia hominis), 판니아 카니쿨라리스(Fannia canicularis), 게오마이자 트리푼크타타(Geomyza Tripunctata), 가스테로필루스 인테스티날리스(Gasterophilus intestinalis), 글로씨나 모르시프탄스(Glossina morsiftans), 글로씨나 팔팔리스(Glossina palpalis), 글로씨나 푸스시페스(Glossina fuscipes), 글로씨나 타키노이데스(Glossina tachinoides), 하에마토비아 이리탄스(Haematobia irritans), 하플로디플로시스 에쿠에스트리스(Haplodiplosis equestris), 히펠라테스 아종(Hippelates spp.), 하일레마이아 플라투라(Hylemyia platura), 하이포데르마 리네아타(Hypoderma lineata), 레프토코놉스 토렌스(Leptoconops torrens), 리리오마이자 사티바에(Liriomyza sativae), 리리오마이자 트리폴리이(Liriomyza trifolii), 루실리아 카프리나(Lucilia caprina), 루실리아 쿠프리나(Lucilia cuprina), 루실라 세리카타(Lucilla sericata), 라이코리아 펙토랄리스(Lycoria pectoralis), 만소니아 티틸라누스(Mansonia titillanus), 마이아에티올라 데스트룩토르(Mayetiola destructor), 무스카 도메스티카(Musca domestica), 무스시나 스타불란스(Muscina stabulans), 오에스트루스 오비스(Oestrus ovis), 오포마이자 플로룸(Opomyza florum), 오스키넬라 프리트(Oscinella frit), 페고마이아 하이소사이아미(Pegomya hysocyami), 포르비아 안티쿠아(Phorbia antiqua), 포르비아 브라씨카에(Phorbia brassicae), 포르비아 코아르크타타(Phorbia coarctata), 플레보토무스 아르겐티페스(Phlebotomus argentipes), 프소로포아 콜룸비아에(Psorophora columbiae), 프실라 로사에(Psila rosae), 프소로포라 디스콜로르(Psorophora discolor), 프로시물룸 믹스툼(Prosimullum mixtum), 라콜레티스 세라시(Rhagoletis cerasi), 라골레티스 포모넬라(Rhagoletis pomonella), 사르코파가 하에모르호이달리스(Sarcophaga haemorrhoidalis), 사르코파가 종(Sarcophaga sp.),
시물리움 비타툼(Simulium vittatum), 스토목시스 칼시트란스(Stomoxys calcitrans), 타바누스 보비누스(Tabanus bovinus), 타바누스 아트라투스(Tabanus atratus), 타바누스 리네올라(Tabanus lineola), 및 타바누스 시밀리스(Tabanus similis), 티풀라 올레라세아(Tipula oleracea), 및 티풀라팔루도사(Tipulapaludosa):
(4) 삽주벌레[타이사노프테라(Thysanoptera)], 예를 들어, 디크로모트립스 코르베티(Dichromothrips corbetti), 디크로모트립스 아종(Dichromothrips ssp), 프란클리니엘라 푸스카(Frankliniella fusca), 프란클니엘라 옥씨덴탈스(Frankllniella occidentalls), 프란클니엘라 트리시키(Frankllniella tritici), 스키르토트를프스 시트리(Scirtothrlps citri), 쓰립스 올라이자에(Thrips olyzae), 쓰립스 팔미(Thrips palmi) 및 쓰립스 타바시(Thrips tabaci),
(5) 일개미[이소프테라(Isoptera)], 예를 들어,
칼로테르메스 프라비콜리스(Calotermes flavicollis), 류코테르메스 프라비페스(Leucotermes flavipes), 헤테로테르메스 아우레우스(ㅍ), 레티쿨테르메스 플라비페스(Reticulltermes flavipes), 레트프쿨테르메스 비르기니쿠스(Retfculltermes virginicus), 레티쿨테르메스 루시푸구스(Reticulltermes lucifugus), 테르메스 나탈렌시스(Termes natalensis), 및 코프토테르메스 포로모사누스(Coptotermes formosanus),
(6) 바퀴[블라타리아-블라토데아(Blattaria-Blattodea), 예를 들어, 블라텔라 게르마니카(Blattella germanica), 블라텔라 아사히나에(Blattella asahinae), 페리플라네타 아메리카나(Periplaneta americana), 페리플라네타 자포니카(Periplaneta japonica), 페리플라네타 브룬네아(Periplaneta brunnea), 페리플라네타 풀리그기노사(Periplaneta fuligginosa), 페리프라네타 아우스트랄라시아에(Periplaneta australasiae), 및 블라타 오리엔탈리스(Blatta orientalis);
(7) 반시류 곤충(true bug)[헤미프테라(Hemiptera)], 예를 들어, 아크로스테르눔 힐라레(Acrosternum hilare), 블리쑤스 레우코프테루스(Blissus leucopterus), 시르토펠티스 노타투스(Cyrtopeltis notatus), 다이데르쿠스 신굴라투스(Dysdercus cingulatus), 다이데르쿠스 인테르메디우스(Dysdercus intermedius), 유라이가스테르 인테그리셉스(Eurygaster integriceps), 에우스키스투스 임피크티벤프리스(Euschistus impictivenfris), 렙토글로쑤스 필로푸스(Leptoglossus phyllopus), 라이구스 을네올라리스(Lygus llneolaris), 라이구스 프라텐시스( Lygus pratensis), 네자라 비리두이아(Nezara viriduia), 피에스마 쿠아드라타(Piesma quadrata), 솔루베아 인술라리스(Solubea insularis), 티안타 페르디토르(Thyanta perditor), 아키르토시폰 오노브라이키스(Acyrthosiphon onobrychis), 아델게스 라리시스(Adelges laricis), 아피둘라 나스투르티(Aphidula nasturti); 아피스 파바에(Aphis fabae), 아피스 포르베시(Aphis forbesi), 아피스 포미(Aphis pomi), 아피스 고씨피이(Aphis gossypii), 아피스 그로쑬라리아에(Aphis grossulariae), 아피스 스크네이데리(Aphis schneideri), 아피스 스피라에콜라(Aphis spiraecola), 아피스 삼부시(Aphis sambuci), 아카이르쏘시폰 피숨(Acyrthosiphon pisum), 아우라코프툼 솔라니(Aulacofthum solani), 베미시아 아르겐티포리이(Bemisia argentifolii), 브라카이카우두스 카르두이(Brachycaudus cardui), 브라카이카우두스 헬리크라이시(Brachycaudus helichrysi), 브라카이카우두스 페르시카에(Brachycaudus persicae), 브라카이카우두스 프루니콜라(Brachycaudus prunicola), 브레비코라이네 브라씨카에(Brevicoryne brassicae), 카피프토포루스 호르니(Capiftophorus horni), 세로시파 고씨피이(Cerosipha gossypii), 차에토시폰 프라가에폴리이(Chaetosiphon fragaefolii), 크라입토마이주스 리비스(Cryptomyzus ribis), 드레이푸시아 노르드만니아나에(Dreyfusia nordmannianae), 드레이푸시아 피세아에(Dreyfusia piceae), 다이사피스 라디코라(Dysaphis radicola), 다이사우라코르툼 슈도솔라니(Dysaulacorthum pseudosolani), 다이사피스 플란타기네아(Dysaphis plantaginea), 다이사피스 파이리(Dysaphis pyri), 엠포아스카 파바에(Empoasca fabae), 하이알로프테루스 프루니(Hyalopterus pruni), 하이페로마이주스 락투카에(Hyperomyzus lactucae), 마크로시품 아베나에(Macrosiphum avenae), 마크로시품 유포르비아에(Macrosiphum euphorbiae), 마크로시푼 로사에(Macrosiphon rosae), 메고우라 비키아에(Megoura viciae), 멜라나피스 파이라리우스(Melanaphis pyrarius), 메토폴로피움 디르호둠(Metopolophium dirhodum), 마이주스 페르시카에(Myzus persicae), 마이주스 아스칼로니쿠스(Myzus ascalonicus), 마이주스 세라시(Myzus cerasi), 마이주스 배리안스(Myzus varians), 나소노비아 리비스-니그리(Nasonovia ribis-nigri), 닐파르바타 루겐스(Nilaparvata lugens), 펨피구스 부르사리우스(Pemphigus bursarius), 페르킨시엘라 사크카이키다(Perkinsiella saccharicida), 포로돈 후물리(Phorodon humuli), 프실라 말(Psylla mall), 스실라 피리(Psylla piri), 로팔로마이주스 아스칼로니쿠스(Rhopalomyzus ascalonicus), 로팔로시품 마이디스(Rhopalosiphum maidis), 로팔로시품 파디(Rhopalosiphum padi, 로팔로시품 인세르품(Rhopalosiphum inserfum), 사파피스 말라(Sappaphis mala), 사파피스 말리(Sappaphis mali), 사키자피스 그라미눔(Schizaphis graminum), 스키조네우라 라누기노사(Schizoneura lanuginosa), 시토비온 아베나에(Sitobion avenae), 트리알레우로데스 바포라리오룸(Trialeurodes vaporariorum), 톡소프테라 아우란티이안드(Toxoptera aurantiiand), 비테우스 비티폴리(Viteus vitifolli), 시멕스 렉툴라리우스(Cimex lectularius), 시멕스 헤미프테루스(Cimex hemipterus), 레두비우스 세닐리스(Reduvius senilis), 트리아토마 아종(Triatoma spp.), 및 아릴루스 크리타투스(Arilus critatus);
(8) 개미, 꿀벌, 말벌, 잎벌[하이메노프테라(Hymenoptera)], 예를 들어, 아탈리아 로사에(Athalia rosae), 앗타 세팔로테스(Atta cephalotes), 앗타 카피구아라(Atta capiguara), 앗타 세팔로테스(Atta cephalotes), 아프타 라에비가타(Afta laevigata), 앗타 로부스타(Atta robusta), 앗타 섹스덴스(Atta sexdens), 앗타 텍사나(Atta texana), 크레마토가스터 아종(Crematogaster spp.), 호플로캄파 미누타(Hoplocampa minuta), 호플로캄파 테스투디네아(Hoplocampa testudinea), 모노모리움 파라오늘스(Monomorium pharaonls), 솔레노프시스 게미나타(Solenopsis geminata), 솔레노프시스 인빅타(Solenopsis invicta), 솔레노프시스 리크테리(Solenopsis richteri), 솔레노프시스 크실로니(Solenopsis xyloni), 포고노마이르멕스 바르바투스(Pogonomyrmex barbatus), 포고노마이르멕스 칼리포르니쿠스(Pogonomyrmex californicus), 페이돌레 메가세팔라(Pheidole megacephala), 다사이무틸라 옥시덴탈리스(Dasymutilla occidentalis), 봄부스 아종 베스풀라 스쿠아모사(Bombus spp. Vespula squamosa), 파라베스풀라 불가리스(Paravespula vulgaris), 파라베스풀라 펜실바니카(Paravespula pennsylvanica), 파라베스풀라 게르마니카(Paravespula germanica), 도리쵸베스풀라 마쿨라타(Dolichovespula maculata), 베스파 크라브로(Vespa crabro), 폴리스테스 루비기노사(Polistes rubiginosa), 캄포노투스 플로리다누스(Camponotus floridanus), 및 리네피쎄마 후밀레(Linepithema humile);
(9) 귀뚜라미, 여치(grasshoppers), 메뚜기(locust)[오르토프테라(Orthoptera)], 예를 들어, 아체타 도메스티카(Acheta domestica), 그릴로탈파 그릴로탈파(Gryllotalpa gryllotalpa), 로쿠스타 미그라토리아(Locusta migratoria), 멜라노플루스 비빗타투스(Melanoplus bivittatus), 멜라노플루스 페무루브룸(Melanoplus femurrubrum), 멜라노플루스 멕시카누스(Melanoplus mexicanus), 멜라노플루스 산귀니페스(Melanoplus sanguinipes), 멜라노플루스 스프레투스(Melanoplus spretus), 노마다크리스 셈템파스시아타(Nomadacris septemfasciata), 스키스토세르카 아메리칸스(Schistocerca americans), 스키스토세르카 그레가리아(Schistocerca gregaria), 도시오스타우루스 마로카누스(Dociostaurus maroccanus), 타치시네스 아사이나모루스(Tachycines asynamorus), 오에달레우스 세네가렌시스(Oedaleus senegalensis), 조노제루스 바리에가투스(Zonozerus variegatus), 히에로글라이푸스 다가넨시스(Hieroglyphus daganensis), 크라우싸리아 안굴리페라(Kraussaria angulifera), 칼리프타무스 이탈쿠스(Calliptamus itallcus), 초르토이세테스 테르미니페라(Chortoicetes terminifera), 및 로쿠스타나 파르달리나(Locustana pardalina);
(10) 예를 들어 아르가시다에(Argasidae), 익소디다에(Ixodidae) 및 사르코프티다에(Sarcoptidae) 과의 아라키니드(arachnid)(진드기목(Acarina))와 같은 거미류, 예컨대, 암블리옴마 아메리카눔(Amblyomma americanum), 암블리옴마 바리에가툼(Amblyomma variegatum), 암브리옴마 마쿨라툼(Ambryomma maculatum), 아르가스 페르시쿠스(Argas persicus), 부필루스 안눌라투스(Boophilus annulatus), 부필루스 데콜로라투스(Boophilus decoloratus), 부필루스 미크로플루스(Boophilus microplus), 데르마센토르 실바룸(Dermacentor silvarum), 데르마센토르 안데르소니(Dermacentor andersoni), 데르마센토르 바리아블리스(Dermacentor variabllis), 하이알롬마 트룬카툼(Hyalomma truncatum), 익소데스 리시누스(Ixodes ricinus), 익소데스 루비쿤두스(Ixodes rubicundus), 익소데스 스카풀라리스(Ixodes scapularis), 익소데스 홀로사이클루스(Ixodes holocyclus), 익소데스 파시피쿠스(Ixodes pacificus), 오르니쏘도루스 모우바타(Ornithodorus moubata), 오르니쏘도루스 헤름시(Ornithodorus hermsi), 오르니쏘도루스 투리카타(Ornithodorus turicata), 오르니쏘니쑤스 바코티(Ornithonyssus bacoti), 오토비우스 메그니니(Otobius megnini), 데르마나이쑤스 갈리나에(Dermanyssus gallinae), 프소롭테스 오비스(Psoroptes ovis), 리피세팔루스 산구이네우스(Rhipicephalus sanguineus), 리피세팔루스 압펜디쿨라투스(Rhipicephalus appendiculatus), 리피세팔루스 에베르트시(Rhipicephalus evertsi), 사르코프테스 스카비에이(Sarcoptes scabiei), 및 에리오파이다에 아종(Eriophyidae spp.), 예컨대, 아풀루스 스플레크텐달리(Aculus schlechtendali), 파일로코프트라타 올레이보라(Phyllocoptrata oleivora) 및 에리오파이에스 쉘도니(Eriophyes sheldoni), 타르소네미다에 아종(Tarsonemidae spp.), 예컨대, 파이토네무스 팔리두스(Phytonemus pallidus) 및 폴리파고타르소네무스 라투스(Polyphagotarsonemus latus); 테누이팔피다에아종(Tenuipalpidae spp.), 예컨대, 브레비팔푸스 포에니시스(Brevipalpus phoenicis); 테트라나이키다에 아종(Tetranychidae spp.), 예컨대, 테트라나이쿠스 신나바리누스(Tetranychus cinnabarinus), 테라나이쿠스 칸자와이(Tetranychus kanzawai), 테트라나이쿠스 파시피쿠스(Tetranychus pacificus), 테트라나이쿠스 텔라리우스(Tetranychus telarius) 및 테트라나이쿠스 우르티카에(Tetranychus urticae), 파노니쿠스 울미(Panonychus ulmi), 파노나이쿠스 시트리(Panonychus citri), 및 올리고나이쿠스 프라텐시스(Oligonychus pratensis); 아라네이다(Araneida), 예를 들어, 라프로덱투스 ?탄스(Lafrodectus mactans), 및 록소크셀레스 레클루사(Loxosceles reclusa),
(11) 벼룩[시포나프테라(Siphonaptera)], 예를 들어, 크테노세팔리데스 펠리스(Ctenocephalides felis), 크테노세팔리데스 카니스(Ctenocephalides canis), 크세노프실라 체오피스(Xenopsylla cheopis), 풀렉스 이리프탄스(Pulex irriftans), 툰가 페네프란스(Tunga penefrans), 및 노소프실루스 파스시아투스(Nosopsyllus fasciatus);
(12) 좀벌레, 얼룩좀[타이사누라(Thysanura)], 예를 들어, 레피스마 사카린스(Lepisma saccharins) 및 테르모비아 도메스틱스(Thermobia domestics):
(13) 지네[칠로포다(Chilopoda)], 예를 들어, 스쿠티게라 콜레오프트라타(Scutigera coleoptrata),
(14) 노래기[디플로포다)(Diplopoda)], 예를 들어, 나르세우스 아종(Narceus spp.),
(15) 집게벌레[데르마프테라(Dermaptera)], 예를 들어, 포리프쿨라 아우리쿨라리아(forifcula auricularia); 및/또는
(16) 이[프씨라프테라(Phthiraptera)], 예를 들어, 페디쿨루스 후마누스 카피티스(Pediculus humanus capitis), 페디쿨루스 후마누스 코르포리스(Pediculus humanus corporis), 프티루스 푸비스(Pthirus pubis), 해마토피누스 에우리스테르누스(Haematopinus eurysternus), 해마토피누스 수이스(Haematopinus suis), 리노그나투스 비툴리(Linognathus vituli), 보비콜라 보비스(Bovicola bovis), 메노폰 갈리나에(Menopon gallinae), 메나칸투스 스트라미네우스(Menacanthus stramineus) 및 솔레노포테스 카필라투스(Solenopotes capillatus).
또 다른 구현예에서, 개시 화합물들 또는 이의 조성물은 디프테라, 헤미프테라 및/또는 레피도프테라 목의 곤충에 대해 살충적으로 활성이다. 다른 구현예에서, 개시 화합물들 또는 이의 조성물은 레피도프테라 목의 곤충에 대해 살충적으로 활성이다. 다른 구현예에서, 개시 화합물들 또는 이의 조성물은 헤미프테라 목의 곤충에 대해 살충적으로 활성이다.
개시 화합물들 또는 이의 조성물은 통상의 고-리터 수압 스프레이, 저-리터 스프레이, 에어-블라스트(air-blast), 및 공기 스프레이와 같이 통상적으로 사용되는 방법에 의한 수성 스프레이로서 식물 잎에 적용될 수 있다. 희석 및 적용률은 사용된 장치의 유형, 바람직한 방법 및 적용 빈도, 및 리간드 적용률에 의존할 것이다. 스프레이 탱크 내 추가의 애주번트(adjuvant)를 포함하는 것이 바람직할 수 있다. 이러한 애주번트는 계면활성제, 분산제, 스프레더(spreaders), 점착제(sticker), 소포제, 유화제, 및 문헌 [McCutcheon's Emulsifiers and Detergents, McCutcheon's Emulsifiers and Detergents/Functional Materials, 및 McCutcheon's Functional Materials, 이들 모두는 MC Publishing Company(뉴저지주 소재)의 맥커쳔 디비젼(McCutcheon Division)에 의해 매년 발행됨]에 기술된 다른 유사한 물질을 포함한다. 개시 화합물들 또는 이의 조성물은 또한 이들의 적용 전에 비료제 또는 비료 물질과 혼합될 수 있다. 개시 화합물들 또는 이의 조성물, 및 고체 비료 물질은 또한 혼합 또는 배합 장치 내에서 혼합될 수 있거나, 또는 이들은 과립 제형 내에 비료제과 함께 혼입될 수 있다. 처리될 작물 및 잡초에 적합한 비료제의 어떠한 상대적인 비율도 사용할 수 있다. 개시 화합물들 또는 이의 조성물은 5% 내지 50%의 비료 조성물을 일반적으로 포함할 것이다. 이들 조성물은 원하는 식물의 신속한 성장을 촉진하고 동시에 유전자 발현을 조절하는 비료 물질을 제공한다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "치료학적 유효량"은 질환, 증상, 상해, 또는 장애의 하나 이상의 징후를 치료하거나, 질환, 증상, 상해, 또는 장애의 진행을 방지하거나, 질환, 증상, 상해, 또는 장애의 퇴행을 유발하기에 충분한 개시 화합물의 양을 언급한다. 예를 들어, 암의 치료와 관련하여, 하나의 구현예에서, 치료학적 유효량은 종양 성장 비율을 감소시키거나, 종양 덩어리를 감소시키거나, 전이의 수를 감소시키거나, 종양 진전까지의 시간을 증가시키거나, 생존 시간을 적어도 약 5%, 적어도 약 10%, 적어도 약 15%, 적어도 약 20%, 적어도 약 25%, 적어도 약 30%, 적어도 약 35%, 적어도 약 40%, 적어도 약 45%, 적어도 약 50%, 적어도 약 55%, 적어도 약 60%, 적어도 약 65%, 적어도 약 70%, 적어도 약 75%, 적어도 약 80%, 적어도 약 85%, 적어도 약 90%, 적어도 약 95%, 또는 적어도 약 100%까지 증가시키는 개시 화합물의 양을 언급할 것이다.
본원에서 사용된 바와 같은, 용어 "살충적 유효량"은 곤충을 제어, 예를 들어, 감소시키거나 이의 확산을 방지하거나 사멸시키기에 충분한 개시 화합물의 양을 언급한다. 예를 들어, 살충적 유효량은 곤충의 조기성숙 탈피 및 사멸을 유도하는 개시 화합물의 양을 언급할 것이다.
용어 단수 "하나(a, an)"는 하나 이외의 하나 이상을 언급한다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "약"은 인용된 수 ± 10%를 포함한다. 따라서, "약 10"은 9 내지 11을 의미한다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "부형제"는 개시 화합물 이외의 조성물 중 임의의 성분을 언급한다. 부형제는 전형적으로 조성물에 첨가되어 개시 화합물의 가공, 취급, 투여 등을 촉진시키기 위해 조성물에 첨가된 비활성 물질이다. 유용한 부형제는, 이에 제한되는 것은 아니나, 애주번트, 항접착제, 결합제, 담체, 붕해제, 여과제, 풍미제, 착색제, 희석제, 윤활제, 활주제, 방부제, 흡착제, 용매, 계면활성제, 및 감미제을 포함한다.
통상의 약제학적 부형제는 당업자에게 잘 알려져 있다. 특히, 당업자는, 문헌[Handbook of Pharmaceutical Excipients, Pharmaceutical Press 4th Ed. (2003), 및 Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins, 21st ed. (2005)]에 나열된 것을 포함하여, 광범위한 약학적으로 허용가능한 부형제가 개시 화합물들과 혼합하여 사용될 수 있음을 인지할 것이다. 일 구현예에서, 조성물은 하기 부형제 중 하나 이상을 포함한다: 물, 라브라솔(Labrasol), 라우로글리콜(Lauroglycol) 90, 포살(Phosal) 53 MCT, 미글욜(Miglyol, 크레모포어(Cremophor) EL, 폴리소르베이트 80, 크릴레트(Crillet) 1 HP, 이소프로필 미리스테이트, 올레산 및/또는 PEG 400 NF. 다른 구현예에서, 조성물은 지질을 포함한다.
약학적으로 허용가능한 담체은 사카라이드, 예를 들어, 트레할로즈, 락토즈 또는 슈크로즈, 만니톨 또는 소르비톨, 셀룰로오즈 제제 및/또는 인산칼슘, 예를 들어, 트리인산칼슘 또는 인산수소칼슘과 같은 충전제(filler), 및 예를 들어, 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸 셀룰로오즈, 하이드록시프로필메틸셀룰로오즈, 소듐 카복시메틸셀룰로오즈 및/또는 폴리비닐 피롤리돈을 사용한 전분 페이스트와 같은 결합제를 포함한다. 원하는 경우, 상기에서 언급한 전분 및 또한 카르복시메틸-전분, 가교결합된 폴리비닐 피롤리돈, 한천, 또는 알긴산 또는 이의 염, 예를 들어, 소듐 알기네이트과 같은 붕해제를 첨가할 수 있다. 보조제(auxiliary)은 유동-조절제 및 윤활제, 예를 들어, 실리카, 탈크, 스테아르산, 또는 이의 염, 예를 들어 스테아르산마그네슘 또는 스테아르산칼슘, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜이다. 일 구현예에서, 당의정 코어는, 원하는 경우, 위액에 대해 내성인 적합한 코팅과 함께 제공된다. 이러한 목적을 위해, 농축된 사카라이드 용액을 사용할 수 있으며, 이는 아라비아 검(gum arabic), 탈크, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 이산화티탄, 락커 용액(lacquer solution) 및 적합한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 임의로 함유할 수 있다. 위액에 대해 내성인 코팅을 제조하기 위하여, 아세틸셀룰로오즈 프탈레이트 또는 하이드록시프로필메틸-셀룰로오즈 프탈레이트와 같은 적합한 셀룰로오즈 제제의 용액을 사용한다. 염료 또는 안료는 예를 들어, 확인을 위하여 또는 활성 화합물 투여량의 조합을 특징화하기 위하여 정제 또는 당의정 코팅에 첨가될 수 있다.
경구적으로 사용될 수 있는 약학적 제제는 젤라틴으로 제조된 푸시-핏 캡슐(push-fit capsule), 및 젤라틴과, 글리세롤 또는 소르비톨과 같은 가소제로 제조된 연질의 밀봉된 캡슐을 포함한다. 푸시-핏 캡슐은 락토즈와 같은 충전제, 전분과 같은 결합제, 및/또는 탈크 또는 스테아르산 마그네슘과 같은 윤활제 및, 임의로, 안정화제와 임의로 혼합될 수 있는 과립 또는 나노입자의 형태의 활성 화합물을 함유할 수 있다. 일 구현예에서, 이들은 지방 오일, 또는 액체 파라핀과 같은 적합한 액체 중에, 임의로 안정화제와 함께 용해되거나 현탁된다.
지방 오일은 모노-, 디 또는 트리글리세라이드를 포함할 수 있다. 모노-, 디- 및 트리글리세라이드는 C6, C8, C10, C12, C14, C16, C18, C20 및 C22 산으로부터 유래한 것을 포함한다. 예시적인 디글리세라이드는 특히, 디올레인, 디팔미톨레인, 및 혼합된 카프릴린-카프린 디글리세라이드를 포함한다. 바람직한 트리글리세라이드는 야채 오일, 어류 오일, 동물 지방, 수소화된 야채 오일, 부분 수소화된 야채 오일, 합성 트리글리세라이드, 개질된 트리글리세라이드, 분획화된 트리글리세라이드, 중간쇄 및 장쇄 트리글리세라이드, 구조화된 트리글리세라이드, 및 이들의 혼합물을 포함한다. 예시적인 트리글리세라이드는 아몬드 오일; 바바수야자 오일; 서양지치 오일; 까막까치밥나무 종자 오일; 카놀라 오일; 피마자 오일, 코코넛 오일; 옥수수 오일; 면화 오일; 달맞이꽃 오일; 포도씨 오일; 땅콩 오일(groundnut oil); 머스타드 종자 오일; 올리브 오일; 팜 오일; 야자핵 오일; 땅콩 오일(peanut oil); 평지씨 오일; 잇꽃 오일; 참깨 오일; 상어간 오일; 대두 오일; 해바라기 오일; 수소화된 피마자 오일; 수소화된 코코넛 오일; 수소화된 팜 오일; 수소화된 대두 오일; 수소화된 야채 오일; 수소화된 면화씨 오일 및 피마자 오일; 부분 수소화된 대두 오일; 부분적으로 대두 및 면화씨 오일; 글리세릴 트리카프로에이트; 글리세릴 트리카프릴레이트; 글리세릴 트리카프레이트; 글리세릴 트리운데카노에이트; 글리세릴 트리라우레이트; 글리세릴 트리올레이트; 글리세릴 트릴리놀레이트; 글리세릴 트릴리놀레네이트; 글리세릴 트리카프릴레이트/카프레이트; 글리세릴 트리카프릴레이트/카프레이트/라우레이트; 글리세릴 트리카프릴레이트/카프레이트/리놀레이트; 및 글리세릴 트리카프릴레이트/카프레이트/스테아레이트를 포함한다.
일 구현예에서, 트리글리세라이드는 상표명 라브라팍 씨씨(LABRAFAC CC) 하에 이용가능한 중간 쇄 트리글리세라이드가다. 다른 트리글리세라이드는 천연 오일, 예를 들어, 천연 식물 오일, 특히 제품: 미글욜(MIGLYOL) 810; 미글욜(MIGLYOL) 812; 미글욜(MIGLYOL) 818; 및 카프텍스®(CAPTEX®) 355를 포함하여, 공지된 상표명 미글욜(MIGLYOL) 하에 상업적으로 이용가능한 것과 같은 분획화된 코코넛 오일을 포함한다. 다른 트리글리세라이드는 제품 미리톨(MYRITOL) 813을 포함하여, 상표명 미리톨(MYRITOL) 하에 공지된 상업적으로 이용가능한 것과 같은 카프릴릭-카프르산 트리글리세라이드이다. 이러한 부류의 추가적인 트리글리세라이드는 카프물(CAPMUL) MCT, 카프텍스®(CAPTEX®) 200, 카프텍스®(CAPTEX®) 300, 카프텍스®(CAPTEX®) 800, 네오비(NEOBEE) M5 및 마졸(MAZOL) 1400이다.
트리글리세라이드를 포함하는 약학적 조성물은 수성 용매와 함께 용해시 맑은 용액을 형성할 수 있는 친지성 및/또는 소수성 계면활성제을 추가로 포함할 수 있다. 하나의 이러한 계면활성제는 토코페릴 폴리에틸렌 글리콜 1000 숙시네이트(비타민 E TPGS)이다. 이러한 조성물의 예는 미국 특허 제6,267,985호에 기술되어 있다.
다른 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 담체는 라브라솔(LABRASOL)(Gattefosse SA)을 포함하며, 이는 PEG-8 카프릴릭/카프릭 글리세라이드이다. 다른 구현예에서, 약학적으로 허용가능한 담체는 PL90G, 비타민 E TPGS, 및 미글욜(Miglyol) 812N을 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 선제 치료를 포함하여 질환, 장애, 상해 또는 증상의 완화 또는 치유의 목적을 위해 개시 화합물, 또는 이의 조성물을 대상체에게 투여함을 포함함을 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "대상체(subject)"는 곤충, 식물, 조류, 또는 동물, 예를 들어, 인간 또는 가축 동물, 예를 들어, 소, 양, 돼지, 말, 개 또는 고양이를 언급한다. 일 구현예에서, 대상체의 숙주 세포는 개시 화합물에 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "목적 유전자(gene of interest)"는 펩타이드, 단백질, 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 발현시키고자 원하는 임의의 유전자이다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "유전자 발현"은 DNA의 전령 RNA(mRNA)로의 전사, 및/또는 mRNA의 아미노산 서열로의 해독을 언급한다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "유전자 발현을 조절하는"은 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과의 접촉의 부재하에서의 유전자 발현의 수준 대비 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 개시 화합물의 접촉에 대한 반응으로 유전자 발현의 수준을 증가시킴을 언급한다.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "유전자 스위치"는 (a) 개시 화합물, 즉 리간드에 결합하고, (b) 리간드-의존적인 방식으로 목적 유전자의 전사를 조절하는 기능을 하는 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드 복합체를 언급한다. 유전자 스위치는 유전자 요법, 세포에서 단백질의 생산, 세포 기반 고속 스크리닝 어세이, 기능 유전체학, 및 형질전환 식물 및 동물에서의 형질 조절과 같은 다양한 적용에 유용하다.
일 구현예에서, 유전자 스위치를 엔코팅하는 폴리뉴클레오타이드는 재조합 폴리뉴클레오타이드, 즉, 분자 생물학적 조작에 의해 가공되어 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드이다. 다른 구현예에서, 재조합 폴리뉴클레오타이드는 합성 폴리뉴클레오타이드이다. 예를 들어, 미국 특허 공개 제2012/0322148호, 제2012/0185954호, 및 제2011/0059530호 참조.
본원에서 사용되는 바와 같은, 용어 "유전자"는 전사만으로(예를 들어, 생물활성 RNA 종) 또는 전사 및 해독으로(예를 들어, 폴리펩타이드) 생산된 기능성 분자을 포함하는 기능성 분자를 엔코딩하는 뉴클레오타이드를 포함하는 폴리뉴클레오타이드를 언급한다. 용어 "유전자"는 cDNA 및 게놈성 DNA 핵산을 포함한다. "유전자"는 또한 코딩 서열의 앞쪽(5' 비-코딩 서열) 및 뒤쪽(3' 비-코딩 서열)의 조절 서열을 포함하여, 특이적인 RNA, 단백질 또는 폴리펩타이드를 발현하는 핵산 단편을 언급한다. "천연 유전자"는 이의 자체 조절 서열과 함께 천연에서 발견되는 유전자를 언급한다. "키메라 유전자(Chimeric gene)"는 천연에서 함께 발견되지 않는 조절 및/또는 코딩 서열을 포함하는, 천연 유전자가 아닌 임의의 유전자를 언급한다. 따라서, 키메라 유전자는 상이한 공급원으로부터 기원한 조절 서열 및 코딩 서열, 또는 동일한 공급원으로부터 기원한 조절 서열 및 코딩 서열을 포함할 수 있지만 천연에서 발견되는 것과는 상이한 방식으로 배열된다. 키메라 유전자는 상이한 공급원으로부터 기원한 코딩 서열 및/또는 상이한 공급원으로부터 기원한 조절 서열을 포함할 수 있다. "내인성 유전자"는 유기체의 게놈내 이의 천연 위치내 천연 유전자를 언급한다. "외부" 유전자 또는 "이종" 또는 "외인성" 유전자는 숙주 유기체 내에서 일반적으로 발견되지 않지만 유전자 전달에 의해 숙주 유기체내로 도입되는 유전자를 언급한다. 외부 유전자은 비-천연 유기체내로 삽입된 천연 유전자, 또는 키메라 유전자을 포함할 수 있다. "이식유전자(transgene)"는 형질전환 과정에 의해 게놈내로 도입된 유전자이다.
일 구현예에서, 개시 화합물들은 조성물로서 분리된 숙주 세포 또는 대상체에게 투여된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물들은 약학적으로 허용가능한 조성물로서 분리된 숙주 세포 또는 대상체에게 투여된다.
본원에서 사용된 바와 같은, 용어 "개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화되다"는 선택적인 단백질-단백질 상호작용을 언급한다.
일 구현예에서, 개시 화합물의 유전자 스위치 효능 또는 "EC50"은 세포 유전자 스위치 어세이에서 약 20 μM 이하, 약 10 μM 이하, 약 5 μM 이하, 약 3 μM 이하, 약 2 μM 이하, 약 1 μm 이하, 약 500 nM 이하, 약 300 nM 이하, 약 200 nM 이하, 약 100 nM 이하, 예를 들어 약 75 nM, 약 50 nM, 약 25 nM, 약 15 nM, 약 10 nM, 약 9 nM, 약 8 nM, 약 7 nM, 약 6 nM, 약 5 nM, 약 4 nM, 약 3nM, 약 2 nM, 약 1 nM, 약 0.5 nM 이하이다. 유전자 스위치-조절된 유전자 발현을 측정하기 위한 시험관내 어세이의 예들은 당업자에게 잘 알려져 있다. 예를 들어, Karzenowski et al., BioTechniques 39: 191-200 (2005) 참조.
본원에서 사용된 바와 같은, "EC50"은 "최대 유효 농도의 1/2"이며, 이는 지정된 노출 시간 이후 발현의 기본선 수준과 발현의 최대 수준 사이의 중간인 목적 유전자를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현 시 유전자 스위치-조절된 변화를 유도하는 개시 화합물의 농도를 언급한다.
본원에서 사용된 바와 같은, 용어 "개시 화합물에 결합하는 리간드 결합 도메인"은 개시 화합물에 선택적으로 결합하는 아미노산 서열을 언급한다. 본원에 기재된 방법에서, 개시 화합물은 리간드 결합 도메인, 예를 들어, 목적 유전자를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 서열의 발현을 조절하는 리간드-의존성 전사 활성 복합체의 일부분인, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인에 결합한다. 따라서, 목적 유전자의 발현은 리간드(개시 화합물) 의존적 방식으로 조절된다.
일 구현예에서, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인, 예를 들어, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인은 다른 리간드 결합 도메인, 예를 들어, 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인과 이합체화하여 단백질-단백질 복합체를 형성한다.
일 구현예에서, 목적 유전자의 발현은 개시 화합물의 농도 또는 용량과는 독립적인 온/오프(on/off) 방식으로 개시 화합물에 의해 조절된다. 다른 구현예에서, 목적 유전자의 발현은 농도(또는 용량)-의존적 방식으로 개시 화합물에 의해 조절되며, 즉, 개시 화합물의 농도(또는 용량)과 목적 유전자의 유전자 발현 수준 간에 투여량-반응 관계가 존재한다. 예를 들어, US 2009/0123441 참조.
용어 '작동적으로 연결된(operably linked)"은 단일 폴리뉴클레오타이드 상에서 폴리뉴클레오타이드 서열이 연합하여 하나의 기능이 다른 것에 의해 영향받는 것을 언급한다. 예를 들어, 프로모터는 코딩 서열의 발현에 영향을 미칠 수 있는 경우(즉, 코딩 서열이 프로모터의 전사 조절하에 있는 경우) 코딩 서열과 작동적으로 연결된다. 코딩 서열은 센스(sense) 또는 안티센스(antisense) 배향으로 조절 서열에 작동적으로 연결될 수 있다.
일 구현예에서, 숙주 세포는 분리된 숙주 세포이다. 일 구현예에서, "분리된" 숙주 세포는 대상체 내에서 존재하지 않는 세포를 언급한다. 일 구현예에서, "분리된" 숙주 세포는 세포 배양 장치 또는 세포 배양 제제 내의 하나 이상의 숙주 세포를 언급한다.
일 구현예에서, 숙주 세포는 피검자내에 있으며, 숙주 세포는 대상체에게 개시 화합물, 또는 이의 조성물을 투여함으로써 개시 화합물에 의해 접촉된다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 시험관내에서 개시 화합물, 또는 이의 조성물과 접촉된다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 생체외에서 개시 화합물, 또는 이의 조성물과 접촉된다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 인간 대상체이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 동물 대상체이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 식물 대상체이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 해조류(algae) 대상체이다.
일 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체에게 투여된다. 일 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 경구적으로 대상체에게 투여된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 비경구적으로 대상체에게 투여된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 피하내, 근육내, 정맥내, 복강내 또는 종양내로 투여된다.
상기 투여의 방식 이외에 또는 이와 함께, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체에 의해 소비되는 식품에 첨가될 수 있다. 일 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 식품 물질과 화합되거나, 배합되거나 혼합되어 "식품 제품"을 제공한다. 용어 "식품 물질"은 최대로 광범위한 의미로 사용되며, 동물, 예를 들어, 인간에 의해 소비되는 섭취가능한 물질의 임의의 형태, 예를 들어, 고체, 에멀젼, 액체를 포함한다. 식품 제품은, 대상체가 이의 식이(diet)와 함께 개시 화합물, 또는 이의 조성물을 적절한 양으로 취하도록 제형화될 수 있다. 다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 식품 물질에 첨가하기 위한 프리믹스로서 제형화된다. 일 구현예에서, 식품 제품 또는 프리믹스는 개시 화합물, 또는 이의 조성물, 및 하나 이상의 지질을 포함한다.
일 구현예에서, 개시 화합물을 결합하는 유전자 스위치내 리간드 결합 도메인은 개시 화합물을 결합하는 그룹 H 핵 수용체 리간드 결합 도메인, 또는 이의 돌연변이체이다. 다른 구현예에서, 그룹 H 핵 수용체 리간드 결합 도메인은 개시 화합물을 결합하는, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 유비퀴토스 수용체 리간드 결합 도메인, 오르판 수용체-1 리간드 결합 도메인, NER-1 리간드 결합 도메인, 수용체-상호작용 단백질-15 리간드 결합 도메인, 간 X 수용체-3 리간드 결합 도메인, 스테로이드 호르몬 수용체-유사 단백질 리간드 결합 도메인, 간 X 수용체 리간드 결합 도메인, 간 X 수용체 리간드 결합 도메인, 파르네소이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 수용체-상호작용 단백질-14 리간드 결합 도메인, 및 파르네솔 수용체 리간드 결합 도메인 리간드 결합 도메인, 또는 이의 돌연변이체로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
다른 구현예에서, 그룹 H 핵 수용체 리간드 결합 도메인은 개시 화합물을 결합하는 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 또는 이의 돌연변이체이다. 다른 구현예에서, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인은, 개시 화합물을 결합하는, 아르트로포드(Arthropod) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 레피도프테란(Lepidopteran) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 디프테란(Dipteran) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 오르토프테란(Orthopteran) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 호모프테란(Homopteran) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인 및 헤미프테란(Hemipteran) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 잎말이 나방과 크리스토네우라 풀미페라나(Choristoneura fumiferana) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 딱정벌레 테네브리오 몰리토르(Tenebrio molitor) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 만두카 섹스타(Manduca sexta) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 헬리오씨에스 비레스센스(Heliothies virescens) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 깔따구(midge) 키로노무스 텐탄스(Chironomus tentans) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 누에나방 봄빅스 모리(Bombyx mori) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 아프리카 나비(squinting bush brown) 비사이클루스 아나이나나(Bicyclus anynana) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 칠엽수(buckeye) 주노니아 코에니아(Junonia coenia) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 초파리 드로소필라 멜라노가스터(Drosophila melanogaster) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 모기 아에데스 아에깁티(Aedes aegypti) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 검정파리 루실리아 카피타타(Lucilia capitata) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 검정파리 루실리아 쿠프리나(Lucilia cuprina) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 검정파리 칼리포라 비키니아(Calliphora vicinia) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 지중해 과실파리(Mediterranean fruit fly) 세라티티스 카피타타(Ceratitis capitata) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 메뚜기 로쿠스타 미그라토리아(Locusta migratoria) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 진딧물 마이주스 페르시카에(Myzus persicae) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 농게 셀루카 푸길라토르(Celuca pugilator) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 진드기 암브라옴마 아메리카눔(Amblyomma americanum) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 가루이 바메시아 아르겐티포리(Bamecia argentifoli) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 매미충 네포테틱스 신크티셉스(Nephotetix cincticeps) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 또는 이의 돌연변이체로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 다른 구현예에서, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인은 잎말이 나방과 코리스토네우라 푸미페라나(Choristoneura fumiferana) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인이며, 이에 대한 아미노산 서열은 미국 특허공개 제2006/0100416 A1호에 개시되어 있다.
다른 구현예에서, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인은 개시 화합물을 결합하는 잎말이 나방과 코리스토네우라 푸미페라나 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인의 돌연변이체이다.
적합한 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인은 예를 들어, 미국 특허 제7,935,510호; 제7,919,269호; 제7,563,879호; 및 미국 특허 공개 제2006/0100416 A1호에 개시된 것을 포함한다.
일 구현예에서, 유전자 스위치는 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인을 포함한다. 일 구현예에서, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인은 그룹 B 핵 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 그룹 B 핵 수용체 리간드 결합 도메인은 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, H-2 영역 II 결합 단백질 리간드 결합 도메인, 핵 수용체 보조-조절인자-1 리간드 결합 도메인, 울트라스피라클 단백질 리간드 결합 도메인, 2C1 핵 수용체 리간드 결합 도메인, 및 코리온 인자 1 리간드 결합 도메인으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인은 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인이 아니다.
일 구현예에서, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인은 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 척추동물 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 호모 사피엔스(Homo sapiens) 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 레티노익 X 수용체 α 아이소형이다. 다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 레티노익 X 수용체 β 아이소형이다. 다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 레티노익 X 수용체 γ 아이소형이다.
다른 구현예에서, 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 무척추동물 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다. 다른 구현예에서, 무척추동물 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 로쿠스타 미그라토리아(Locusta migratoria) 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다.
다른 구현예에서, 무척추동물 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인은 비-레피도프테란(non-Lepidopteran), 비-디프테란(non-Dipteran) 레티노익 X 수용체 리간드 결합 도메인이다.
일 구현예에서, 레티노이드 수용체 리간드 결합 도메인은 척추동물 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 무척추동물 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 울트라스피라클 단백질 리간드 결합 도메인, 또는 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인이다.
일 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인은 2개의 폴리펩타이드 단편을 포함하며, 여기에서 제1의 폴리펩타이드 단편은 척추동물 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 무척추동물 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 또는 울트라스피라클 단백질 리간드 결합 도메인으로부터이고, 제2의 폴리펩타이드 단편은 상이한 척추동물 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 상이한 무척추동물 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 또는 상이한 울트라스피라클 단백질 리간드 결합 도메인으로부터이다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인은 미국 특허 제7,531,326호에 개시된 것이다.
다른 구현예에서, 각각 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 제1 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 1-6, 나선 1-7, 나선 1-8, 나선 1-9, 나선 1-10, 나선 1-11, 또는 나선 1-12를 포함하며, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 7-12, 나선 8-12, 나선 9-12, 나선 10-12, 나선 11-12, 나선 12, 또는 F 도메인을 포함한다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 본 발명에 따른 제1 종의 RXR의 나선 1-6을 포함하고, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 7-12를 포함한다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 본 발명에 따른 제1 종 레티노이드 X 수용체의 나선 1-7을 포함하고, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 8-12를 포함한다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 제1 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 1-8을 포함하고, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 9-12를 포함한다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 제1 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 1-9를 포함하고 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 10-12를 포함한다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 제1 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 1-10을 포함하고 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 11-12를 포함한다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 제1 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 1-11을 포함하고 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 12를 포함한다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 제1 종의 레티노이드 X 수용체의 나선 1-12를 포함하고 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 제2 종의 레티노이드 X 수용체의 F 도메인을 포함한다.
일 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인 내의 제1의 폴리펩타이드 단편은 인간 레티노이드 X 수용체 서열이고, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인 내의 제2의 폴리펩타이드 단편은 무척추동물 레티노이드 X 수용체 서열이다. 다른 구현예에서, 무척추동물 레티노이드 X 수용체 서열은 로쿠스타 미그라토리아(Locusta migratoria) 레티노이드 X 수용체 서열이다.
다른 구현예에서, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제1의 폴리펩타이드 단편은 인간 레티노이드 X 수용체의 나선 1-8을 포함하고, 키메라 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인의 제2의 폴리펩타이드 단편은 로쿠스타 미그라토리아 레티노이드 X 수용체의 나선 9-12를 포함한다.
일 구현예에서, 유전자 스위치는 DNA 결합 도메인("DBD")을 추가로 포함한다. 다른 구현예에서, DBD는 GAL4 DBD, LexA DBD, 전사 인자 DBD, 스테로이드/갑상선 호르몬 핵 수용체 상과 구성원 DBD, 박테리아 LacZ DBD, 및 효모 DBD로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, 유전자 스위치는 전사 활성 도메인 ("TD")을 추가로 포함한다. 다른 구현예에서, 전사활성 도메인은 VP16 TD, GAL4 TD, NF-kB TD, BP64 TD, 및 B42 산성 TD로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
일 구현예에서, DNA 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인, 및 전사 활성 도메인은 동일한 폴리뉴클레오타이드 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩된다.
다른 구현예에서, DNA 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인, 및 전사 활성 도메인은 하나 이상의 개별적인 폴리뉴클레오타이드 서열 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩된다.
다른 구현예에서, DNA 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인, 및 전사 활성 도메인은 2개의 개별적인 폴리뉴클레오타이드 서열 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩된다.
다른 구현예에서, DNA 결합 도메인 및 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인은 제1의 폴리뉴클레오타이드 서열 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩되고, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인 및 전사활성 도메인은 제2의 폴리뉴클레오타이드 서열 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩된다.
다른 구현예에서, DNA 결합 도메인 및 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인은 제1의 폴리뉴클레오타이드 서열 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩되고, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인 및 전사활성 도메인은 제2의 폴리뉴클레오타이드 서열 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩된다.
구현예에서, 하나 이상의 DNA 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인, 및 전사 활성 도메인은 하나 이상의 개별적인 폴리뉴클레오타이드 서열 내에 함유된 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 엔코딩된 후, 하나 이상의 개별적인 폴리뉴클레오타이드 서열은 하나 이상의 개별적인 프로모터에 작동적으로 연결된다. 다른 구현예에서, 하나 이상의 개별적인 폴리뉴클레오타이드 서열은 하나 이상의 개별적인 인핸서 성분에 작동적으로 연결된다. 다른 구현예에서, 프로모터(들) 및/또는 인핸서(들)은 구성적으로 활성이다. 다른 구현예에서, 프로모터(들) 및/또는 인핸서(들)은 조직 특이적인 프로모터 및/또는 인핸서이다.
일 구현예에서, 유전자 스위치는 DNA 결합 도메인, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인, 및 전사활성 도메인을 포함한다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 DNA 결합 도메인, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 및 전사 활성 도메인을 포함한다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 DNA 결합 도메인, 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 키메라 척추동물/무척추동물 레티노이드 X 수용체 리간드 결합 도메인, 및 전사활성 도메인을 포함한다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 DNA 결합 도메인 (DBD) 및 제1의 리간드 결합 도메인 (LBD)을 포함하는 제1의 폴리펩타이드를 포함하고 전사활성 도메인 (TAD) 및 제2의 LBD를 포함하는 제2의 폴리펩타이드를 포함한다. 일 구현예에서, 제1의 LBD는 EcR 리간드 결합 도메인이다. 일 구현예에서, 제1의 LBD는 RxR, USP, 키메라 LBD, 또는 키메라 RxR/USP LBD이다. 일 구현예에서, 제2의 LBD는 EcR 리간드 결합 도메인이다. 일 구현예에서, 제2의 LBD는 RxR, USP, 키메라 LBD, 또는 키메라 RxR/USP LBD이다. 일 구현예에서, DBD는 Gal4 DNA 결합 도메인이다. 일 구현예에서, TAD는 VP16 전사활성 도메인이다. 일 구현예에서, 유전자 스위치는 Gal4 DNA 결합 도메인 및 EcR 리간드 결합 도메인 (LBD)을 포함하는 제1의 폴리펩타이드를 포함하고 VP16 전사활성 도메인 및 키메라 RxR/USP 리간드 결합 도메인을 포함하는 제2의 폴리펩타이드를 포함한다. 일 구현예에서, EcR 리간드 결합 도메인은 상응하는 야생형 EcR 폴리펩타이드 서열 대비 하나 이상의 아미노산 치환을 포함한다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 GAL4 DNA 결합 도메인, 조작되어 미국 특허 공개 제2006/0100416 A1호에 기재된 코리스토네우라 푸미프라나 (Choristoneura fumifrana) 에크디손 수용체 서열의 돌연변이체 V107I 및 Y127E를 함유하는 코리스토네우라 푸미페라나 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 키메라 호모 사피엔스/로쿠스타 미그라토리아 레티노이드 X 수용체 리간드 결합, 및 VP16 전사활성 도메인을 포함한다.
용어 "V107I"는, 미국 특허 공개 제2006/0100416 A1호에 기재된 코리스토네우라 푸미프라나 에크디손 수용체 서열 내 107번 위치에서 발린 아미노산 잔기가 이소루이신으로 변경된 것을 의미한다. 용어 "Y127E"는 미국 특허 공개 제2006/0100416 A1호에 기재된 코리스토네우라 푸미프라나 에크디손 수용체 서열 내 127번 위치의 타이로신 아미노산 잔기가 글루타메이트로 변경된 것을 의미한다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는, 이의 발현이 유전자 스위치에 의해 조절되는 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 추가로 포함한다. 유전자 스위치 복합체를 결합하는 프로모터는 이의 발현이 유전자 스위치에 의해 조절되는 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드에 작동적으로 연결된다.
다른 구현예에서, 이의 발현이 유전자 스위치에 의해 조절되는 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 DNA 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인, 및 전사 활성 도메인 중 하나 이상을 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드와 동일한 폴리뉴클레오타이드 내에 함유된다. 이러한 구조물은 예를 들어, 미국 특허 공개 2009/0123441호에 개시되어있다.
다른 구현예에서, 이의 발현이 유전자 스위치에 의해 조절되는 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 DNA 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인, 개시 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인과 이합체화하는 리간드 결합 도메인, 및 전사 활성 도메인 중 하나 이상을 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드 이외의 상이한 폴리뉴클레오타이드 내에 함유된다.
일 구현예에서, 유전자 스위치는 스테로이드 호르몬에 대해서 보다 개시 화합물 1에 대해 더욱 민감하다. 다른 구현예에서, 유전자 스위치는 다른 디아실하이드라진 화합물에 대해서 보다 개시 화합물에 대해 더욱 민감하다.
다른 리간드와 관련하여, 개시 화합물에 대한 유전자 스위치의 민감성은 시험관내 어세이, 예를 들어, 반딧불 루시퍼라제와 같은 리포터 유전자를 사용하는 시험관내 어세이에서 용이하게 측정될 수 있다. 이러한 시험관내 어세이의 예들은 당업자에게 잘 알려져 있다. 예를 들어 Karzenowski et al., BioTechniques 39: 191-200 (2005) 참조.
일 구현예에서, 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드는 벡터에 함유된다. 일 구현예에서, 벡터는 플라스미드, 발현 벡터, 레플리콘, 파아지 벡터, 코스미드, 바이러스 벡터, 리포좀, 전기적으로 하전된 지질(예를 들어, 사이토펙틴), DNA-단백질 복합체, 및 바이오폴리머로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 벡터는 레트로바이러스 벡터이다. 다른 구현예에서, 벡터는 아데노-관련 바이러스 벡터, 폭스 바이러스 벡터, 바쿨로바이러스 벡터, 박시니아 바이러스 벡터, 헤르페스 단순 바이러스 벡터, 엡슈타인-바르 바이러브 벡터, 아데노바이러스 벡터, 게미니 바이러스 벡터, 및 카울리모 바이러스 벡터로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
일 구현예에서, 숙주 세포는 원핵 숙주 세포이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 진핵 숙주 세포이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 면역 세포 (예를 들어, T-세포, B-세포, 자연 살해 세포 등) 또는 줄기 세포 (예를 들어, 중간엽 줄기 세포 (MSC), 자궁 내막 유래 줄기 세포, 자궁 내막 재생 세포 등)이다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는 척추동물 숙주 세포이다. 다른 구현예에서, 숙주 세포는 무척추동물 숙주 세포이다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는 박테리아 세포, 진균 세포, 효모 세포, 선충류 세포, 곤충 세포, 어류 세포, 식물 세포, 조류(avian) 세포, 해조류(algae) 세포, 동물 세포, 및 포유동물 세포로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는 제브라피쉬 세포(zebrafish cell), 닭 세포, 햄스터 세포, 마우스 세포, 래트 세포, 토끼 세포, 고양이 세포, 개 세포, 소 세포, 염소 세포, 젖소 세포, 돼지 세포, 말 세포, 양 세포, 유인원 세포, 원숭이 세포, 침팬지 세포, 및 인간 세포로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는 아스퍼길러스(Aspergillus) 세포, 트리코데르마(Trichoderma) 세포, 사카로마이세스(Saccharomyces) 세포, 피키아(Pichia) 세포, 칸디다(Candida) 세포, 한세눌라(Hansenula) 세포로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는 시네코시스티스(Synechocystis) 세포, 사이네콕쿠스(Synechococcus) 세포, 살모넬라(Salmonella) 세포, 바실러스 세포, 아키네토박터(Acinetobacter) 세포, 로도코쿠스(Rhodococcus) 세포, 스트렙토마이세스( Streptomyces) 세포, 에스케리키아(Escherichia) 세포, 슈도모나스(Pseudomonas) 세포, 메틸로모나스(Methylomonas) 세포, 메틸로박터(Methylobacter) 세포, 알칼리게네스(Alcaligenes) 세포, 사이네코사이스티스(Synechocystis) 세포, 아나바에나(Anabaena) 세포, 티오바실러스(Thiobacillus) 세포, 메타노박테리움(Methanobacterium) 세포 및 크렙시엘라(Klebsiella) 세포로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는 사과 세포, 애기장대(Arabidopsis) 세포, 바즈라(bajra) 세포, 바나나 세포, 보리 세포, 콩(bean) 세포, 비트 세포, 흑녹두 세포, 병아리콩 세포, 칠리(chili) 세포, 오이 세포, 가지 세포, 파바빈(favabean) 세포, 옥수수 세포, 멜론 세포, 기장 세포, 녹두 세포, 귀리 세포, 오크라(okra) 세포, 피니쿰(Panicum) 세포, 파파야 세포, 땅콩 세포, 완두콩 세포, 후추 세포, 나무콩(pigeonpea) 세포, 파인애플 세포, 강남콩(Phaseolus) 세포, 감자 세포, 호박 세포, 벼 세포, 수수 세포, 대두 세포, 스쿼시(squash) 세포, 사탕수수 세포, 사탕무우 세포, 해바라기 세포, 고구마 세포, 차 세포, 토마토 세포, 담배 세포, 수박 세포, 버섯 세포, 및 밀 세포로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 숙주 세포는 햄스터 세포, 마우스 세포, 래트 세포, 토끼 세포, 고양이 세포, 개 세포, 소 세포, 염소 세포, 젖소 세포, 돼지 세포, 말 세포, 양 세포, 원숭이 세포, 침팬지 세포, 및 인간 세포로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
숙주 세포 형질전환은 당업계에 잘 알려져 있으며, 이에 제한되는 것은 아니지만 전기천공(electroporation), 바이러스 감염, 플라스미드 (또는 벡터) 형질감염, 비-바이러스 벡터 매개된 형질감염, 아그로박테리움-매개된 형질전환, 입자 충격 등을 포함하는 다양한 방법에 의해 달성될 수 있다. 원하는 유전자 산물의 발현은 적합한 조건 하에서 형질전환된 숙주 세포를 배양하고 형질전환된 유전자의 발현을 유도시키는 것을 수반한다. 원핵 및 진핵 세포에서 배양 조건 및 유전자 발현 프로토콜은 당업계에 잘 알려져 있다. 세포를 수거하고 유전자 산물을 유전자 산물에 대해 특이적인 프로토콜에 따라 분리할 수 있다.
또한, 삽입된 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절하거나, 원하는 특정 방식으로 폴리펩타이드 생성물을 변형시키고 가공하는 숙주 세포를 선택할 수 있다. 상이한 숙주 세포는 단백질의 해독 및 해독후 프로세싱 및 변형(예를 들어, 글리코실화, 절단(예를 들어, 시그날 서열의 절단))을 위한 특징적이고 특이적인 메카니즘을 갖는다. 적절한 세포주 또는 숙주 세스템을 선택하여 발현된 외부 단백질의 원하는 변형 및 프로세싱을 보증할 수 있다. 예를 들어, 박테리아 시스템내에서의 발현을 사용하여 비-글리코실화된 코어 단백질 생성물을 생산할 수 있다. 그러나, 박테리아 내에서 발현된 폴리펩타이드는 적절히 폴딩되지 않은 수 있다. 효모 세포내에서의 발현은 글리코실화된 생성물을 생산할 수 있다. 진핵 세포내에서의 발현은 이종 단백질의 "천연의" 글리코실화 및 폴딩의 가능성(likelihood)을 증가시킬 수 있다. 또한, 포유동물 세포에서의 발현은 폴리펩타이드의 활성을 재구성하거나 구성하기 위한 도구(tool)를 제공할 수 있다. 또한, 상이한 벡터/숙주 발현 시스템은 상이한 정도로 단백질분해적 절단과 같은 프로세싱 반응에 영향을 미칠 수 있다.
일 구현예에서, 숙주 세포는 2개 이상의 직교형 유전자 스위치(orthogonal gene switch)을 포함한다. 2개 이상의 개별적으로 작동가능한 유전자 조절 시스템은 (a) 이의 각각의 리간드에 의한 제공된 유전자 스위치의 각각의 조정이 유전자 스위치에 의해 조절되는 유전자의 발현의 크기에 있어서 측정가능한 변화를 생성하는 경우, 및 (b) 상기 변화가 숙주 세포내에 존재하는 모든 다른 유전자 스위치의 발현 시 변화 보다 통계적으로 유의적으로 상이한 경우 "직교형"인 것으로 일컬어진다. 일 구현예에서, 각각의 개별적으로 작동가능한 유전자 스위치의 조절은 숙주 세포 내 모든 다른 작동가능한 유전자 스위치 보다 적어도 2-배, 3-배, 4-배, 5-배, 10-배, 20-배, 50-배, 70-배, 100-배, 200-배, 300-배, 400-배 또는 500-배 더 크게 유전자 발현 변화에 영향을 미친다. 직교형 유전자 스위치 시스템의 비-제한적 예들은 미국 특허 공개 제US 2002/0110861 A1호에 개시되어 있다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 암, 예를 들어 골수이형성, 유방암, 전립샘암, 림프종, 피부암, 췌장암, 결장암, 흑색종, 악성 흑색종, 난소암, 뇌암, 전두 암종(primary brain carcinoma), 두경부암(head-neck cancer), 신경교종, 아교모세포종, 간암, 방광암, 비-소세포 폐암, 두부 또는 경부 암종, 유방 암종, 난소 암종, 폐 암종, 소-세포 폐암종, 빌름스 종양(Wilms' tumor), 자궁경부 암종(cervical carcinoma), 고환 암종, 방광 암종, 췌장 암종, 위 암종, 결장 암종, 전립선 암종, 비뇨생식기 암종, 갑상선 암종, 식도 암종, 골수종, 다발 골수종, 부신 암종, 신세포 암종, 자궁내막 암종, 부신 피질 암종, 악성 췌장 인슐린종, 악성 유암 암종(malignant carcinoid carcinoma), 융모암종, 균상식육종, 악성 고칼슘혈증, 자궁경부 과형성(cervical hyperplasia), 백혈병, 급성 림프성 백혈병, 만성 림프성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 만성 과립구백혈병, 급성 과립구백혈병, 모발 세포 백혈병, 신경아세포종, 횡문근육종, 카포시육종(Kaposi's sarcoma), 진성적혈구증가증(polycythemia vera), 본태성 혈소판증가증(essential thrombocytosis), 호지킨병(Hodgkin's disease), 비-호지킨 림프종, 연-조직 육종, 중피종, 골원성육종, 원발성 고분자글로불린혈증, 및 망막모세포종 등으로부터 선택되는 암을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 물질대사-관련 질환, 예를 들어, 이상지질혈증, 죽상동맥경화증, 인슐린 저항성, 당뇨병(예를 들어, 제I 형 당뇨병, 제II 형 당뇨병, MODY, 및 임신성 당뇨병), 비만, 손상된 글루코즈 내성, 죽상 질환, 고혈압, 심장 질환(이는 관상 심장 질환, 뇌졸중, 심부전증, 관상동맥부전, 및 고혈압), 고지질혈증, 글루코즈 내성, 인슐린 저항성, 고혈당증, 고인슐린혈증, 대사증후군 X (또는 증후군 X, 또는 인슐린 저항성 증후군, 또는 레이븐 증후군(Reaven's syndrome), 또는 대사적 심혈관 위험 증후군), 고혈압, 만성피로, 가속화된 노화, 변성 질병, 노화의 내분비 결핍, Gm1 강글리오사이드증(gangliosidosis), 모르퀴오(Morquio)-B 질병, 크라베 질병(Krabbe's disease), 파브리 질병(Fabry's disease), 가우쳐 질병(Gaucher's disease), 타이-사스 질병(Tay-Sachs disease), 샌드호프 질병(Sandhoff disease), 푸코사이드축적증, 탄수화물 대사 질환(예를 들어면, 글리코겐 저장 질병), 아미노산 대사의 질환(예를 들어, 페닐케톤뇨증, 단풍나무시럽뇨병, 글루타린산혈증 타입 1), 유기산 대사의 질환(예를 들어, 알캅톤 뇨증 (alcaptonuria), 지방산 산화 및 미토콘드리아 대사의 질환(예를 들어, 중간 쇄 아실 데하이드로게나제 결핍증), 포르피린 대사의 질환(예를 들어, 급성 간헐성 포르피린증), 퓨린 또는 피리미딘 대사의 질환(예를 들어, 레슈-니한 증후군(Lesch-Nyhan syndrome)), 스테로이드 대사의 질환(예를 들어, 선천성부신과형성), 미토콘드리아 기능의 질환(예를 들어, 케아른스-사이레 증후군(Kearns-Sayre syndrome)), 및 퍼옥시좀 기능의 질환(예를 들어, 젤웨거 증후군(Zellweger syndrome))으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 대사성 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 신장 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다. 일 구현예에서, 신장 질환은 신부전이다. 다른 구현예에서, 신장 질환은 만성 신부전이다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 빈혈을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다. 일 구현예에서, 빈혈은 신장 질환, 예를 들어, 신부전 또는 만성 신부전과 관련된 빈혈이다. 다른 구현예에서, 빈혈은 예를 들어, 하나 이상의 화학요법제을 사용한 암 치료요법과 관련된다. 다른 구현예에서, 빈혈은 고령과 관련되어 있다. 다른 구현예에서, 빈혈은 손상된 폐 기능과 관련되어 있다. 다른 구현예에서, 빈혈은 골수이형성과 관련되어 있다. 다른 구현예에서, 빈혈은 방사선 치료요법과 관련되어 있다. 다른 구현예에서, 빈혈은 치명적인 질병과 관련되어 있다. 다른 구현예에서, 빈혈은 심장 질환과 관련되어 있다. 다른 구현예에서, 빈혈은 심장 질환이 아니다. "심장 질환"의 비제한적인 예는 울혈성 심부전, 저산소증, 허혈성 심장병, 고혈압성 심장 질환, 관상동맥질환, 말초 혈관질환 및 허혈성 심장발작, 예를 들어, 심근경색, 심장마비, 심부전, 부정맥, 심근 파열, 심막염, 심장성 쇼크, 혈전증, 색전증, 죽상동맥경화증, 및 동맥 협착증이다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 자가 면역성 질환, 예를 들어, 아클로하이드라 자가면역 활성 만성 간염 (Achlorhydra Autoimmune Active Chronic Hepatitis,), 급성 파종뇌척수염, 급성 출혈성 백질뇌염, 애디슨병 (Addison's Disease), 감마글로불린혈증, 무감마글로불린혈증, 원형탈모증, 근육위축가쪽경화증, 강직척추염, 항-GBM/TBM 신장염, 항인지질증후군, 항신테타제 증후군(Antisynthetase syndrome), 관절염, 아토피성 알레르기, 아토피성 피부염, 재생불량성 빈혈, 자가면역 심근증, 자가면역 용혈성빈혈, 자가면역 간염, 자가면역 내부 귀병, 자가면역 림프구증식성 증후군, 자가면역 말초 신경장애, 자가면역 췌장염, 자가면역 폴리엔도크린 증후군(polyendocrine syndrome) 제I, 제II, 및 제III 형, 자가면역 프로게스테론 피부염, 자가면역 저혈소 판자색반, 자가면역 포도막염, 발로병(Balo disease)/발로 동심성 경화증(Balo concentric sclerosis), 베체트 증후군(Bechets Syndrome), 버거병(Berger's disease), 비커스태프 뇌염(Bickerstaff's encephalitis), 블라우 증후군(Blau syndrome), 물집유천포창, 캐슬맨병(Castleman's disease), 만성 피로 면역 기능장애 증후군, 만성 염증성 탈수초성 다발성 신경병증, 만성 재발성 다촛점 골수염(chronic recurrent multifocal ostomyelitis), 처그-스트라우스 증후군(Churg-Strauss syndrome), 반흔성 유천포창(Cicatricial Pemphigoid), 복강 질환, 코간 증후군(Cogan syndrome), 한랭응집소병, 보체성분 2 결핍증, 두개동맥염, CREST 증후군, 크론병(Crohns Disease), 쿠싱 증후군(Cushing's Syndrome), 피부백혈구파괴혈관염, 데고병(Dego's disease), 포진피부염, 피부근염, 진성 당뇨병 제1형, 확산 피부 전신 경화증(Diffuse cutaneous systemic sclerosis), 드레슬러 증후군(Dressler's syndrome), 원반모양홍반루푸스, 습진, 골부착부위염-관련 관절염(Enthesitisrelated arthritis), 호산성근막염, 후천성 표피수포증, 결절성홍반, 원발성 혼합 한냉글로불린증(Essential mixed cryoglobulinemia), 에반스 증후군, 진행성 골화성 섬유성 골이형성증, 섬유근육염, 섬유화 폐포염(Fibrosing aveolitis), 위염, 위장 유천포창, 거대세포동맥염, 굳파스쳐 증후군(Goodpasture's syndrome), 그레이브스병 (Graves' disease), 길랑-바레 증후군(Guillain-Barre syndrome)(GBS), 하시모토 뇌염(Hashimoto's encephalitis), 하시모토 갑상선염(Hashimoto's thyroiditis), 용혈성 빈혈, 헤노흐-쇤라인 자반병(Henoch-Schonlein purpura), 임신성 포진, 휴즈 증후군(Hughes syndrome)(또는 항인지질 증후군), 저감마글로불린혈증, 특발성 염증성 탈수초질환(Idiopathic Inflammatory Demyelinating Diseases), 특발성 폐 섬유증, 특발성 혈소판감소 자색반, IgA 신증(또는 버거병), 봉입체 근염 (Inclusion body myositis), 구강 탈수초 다발성신경장애(ory demyelinating polyneuopathy), 소아 특발성 관절염, 소아 류마티스 관절염, 람버트-이튼 근무력 증후군(Lambert-Eaton myasthenic syndrome), 백혈구파쇄성 맥관염, 편평 태선, 경화성 태선, 선형 IgA 병(Linear IgA disease)(LAD), 루게릭병(Lou Gehrig's Disease), 류포이드 간염(Lupoid hepatitis), 홍반루프스, 마지드 증후군(Majeed syndrome), 메니에르병 (Meniere's disease), 현미경다발혈관염, 밀러-피셔 증후군(Miller-Fisher syndrome), 혼합 결합 조직병, 무챠-하버만병(Mucha-Habermann disease), 머클-웰스 증후군(Muckle-Wells syndrome), 다발골수종, 중증 근무력증, 근염, 발작성 수면, 시각신경척수염(또한 데빅병(Devic's Disease)), 안구 반흔성 유천포창, 오드 갑상선염(Ord thyroiditis), 재발류머티즘, PANDAS(연쇄 구균 관련 소아기 자가면역성 신경정신과적 질환(Pediatric Autoimmune Neuropsychiatric Disorders Associated with Streptococcus)), 신생물딸림 소뇌 변성, 신생물딸림 소뇌 변성, 패리 롬버그 증후군 (Parry Romberg syndrome), 파슨나지 터너 증후군(Parsonnage-Turner syndrome), 주변포도막염, 천포창, 보통 천포창, 악성 빈혈(Pernicious anaemia), 정맥주위성 뇌척수막염, POEMS 증후군, 결절성다발동맥염, 류마티스성 다발성근육통, 다발근육염, 원발쓸개관간경화증, 건선, 건선관절염, 괴저고름피부증, 적혈구계무형성증, 라스무센뇌염(Rasmussen's encephalitis), 레이노 현상(Raynaud phenomenon), 재발성 다발연골염, 라이터 증후군(Reiter's syndrome), 후복막섬유증, 류마티스 관절염, 류마티스열, 슈미트 증후군(Schmidt syndrome), 슈나이츨러 증후군(Schnitzler syndrome), 공막염, 쇠그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 척추관절병증, 점성 혈액 증후군(sticky blood syndrome), 스틸병(Still's Disease), 아급성세균성심내막염(Subacute bacterial endocarditis)(SBE), 수삭 증후군(Susac's syndrome), 스위트 증후군(Sweet syndrome), 시덴함무도병(Sydenham Chorea), 교감눈염증, 타카야수 관절염(Takayasu's arteritis), 측두동맥염(Temporal arteritis), 톨로사-헌트 증후군(Tolosa-Hunt syndrome), 횡단척수염, 궤양성 대장염, 미분화 결합조직병, 미분화 척추관절병증, 맥관염, 베게너 육아종증(Wegener's granulomatosis), 윌슨 증후군, 및 비스코트-알드리치 증후군 (Wiskott-Aldrich syndrome)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 자가 면역성 질환를 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 안과 질환, 예를 들어, 개방 각 녹내장(예를 들어, 원발성 개방 각 녹내장, 색소성 녹내장, 및 박탈성 녹내장, 저안압 녹내장), 각 폐쇄성 녹내장(또한 폐쇄 각 녹내증(closed angle glaucoma)으로도 알려져 있음, 협각 녹내장, 동공차단녹내장, 및 섬모체 차단 녹내장(ciliary block glaucoma))(예를 들어, 급성 각폐색성 녹내장 및 만성 각폐색성 녹내장), 무홍채성 녹내장(Aniridic Glaucoma), 선천성 녹내장, 소아 녹내장, 렌즈-유발된 녹내장, 신생혈관 녹내장(예를 들어, 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 데코이(decoy)로 구성된 벡터 사용, 안료 유래 성장 인자(PDGF), 엔도스타틴, 안지오스타틴, 또는 안지오포이에틴-1), 외상후 녹내장, 스테로이드-유발된 녹내장, 스터그-웨버 증후군 녹내장(Sturge-Weber Syndrome Glaucoma), 및 포도막염-유발된 녹내장을 포함하는 녹내장, 당뇨병성 망막병증(예를 들어, VEGF 데코이, PDGF, 엔도스타틴, 안지오스타틴, 또는 안지오포에틴-1로 구성된 벡터를 사용), 황반 변성(예를 들어, VEGF 데코이, PDGF, 엔도스타틴, 안지오스타틴, 안지오포에틴-1, ATP 결합 카세트 아계열 A 구성원 4(ATP Binding Casette Subfamily A Member 4)로 구성된 벡터), 황반 변성(예를 들어, VEGF 데코이, PDGF, 엔도스타틴, 안지오스타틴, 안지오포에틴-1, ATP 결합 카세트 아계열 A 구성원 4로 구성된 벡터를 사용), 맥락막 혈관신생(예를 들어, VEGF 데코이, PDGF, 엔도스타틴, 안지오스타틴, 또는 안지오포에틴-1으로 구성된 벡터를 사용), 혈관 누출, 및/또는 망막 부종, 세균성 결막염, 진균성 결막염, 바이러스성 결막염, 포도막염, 각막후면침착물(keratic precipitates), 황반부종(예를 들어, VEGF 데코이, PDGF, 엔도스타틴, 안지오스타틴 또는 안지오포에틴-1으로 구성된 벡터를 사용), 안구내 렌즈 이식 후 염증 반응, 포도막염 증후군(예를 들어, 만성 홍채모양체염 또는 만성 안구내염), 망막 혈관염(예를 들어, 류마티스 관절염, 소아 류마티스 관절염, 전신 홍반루푸스, 진행성 전신 경화증, 결절성다발성동맥염, 베게너육아종증, 측두동맥염, 아다만티아데스 베체트병(Adamantiades Bechcet disease), 쇠그렌 재발성 다발연골염(Sjorgen's, relapsing polychondritis) 및 HLA-B27 관련 척추염에서 관찰되는 바와 같은), 사르코이드증, 얼즈병(Eales disease), 급성 망막 괴사, 보그트 고야나키 하라다 증후군(Vogt Koyanaki Harada syndrome), 안구톡소포자충증, 방사선 망막증, 증식성 유리체망막병증, 안구내염, 안구 녹내장(예를 들어, 염증성 녹내장), 시신경염, 허혈성 시신경염(예를 들어, 이소성의 NADH 데하이드로게나제 유닛 4로 구성된 벡터), 갑상선 연관 눈확병증, 안와가성종양, 안료 분산 증후군(색소성 녹내장), 공막염, 상공막염 맥락막병(예를 들어, "백색-점(White-dot)" 증후군, 이에 제한되는 것은 아니나, 급성 다발성 후부 판상을 포함함), 망막병증(예를 들어, 낭포황반부종, 중심성장액맥락막병증 및 추정 안구 히스토플라즈마증 증후군(presumed ocular histoplasmosis syndrome) (예를 들면, 신경아교 세포 유래 향신경성 인자, 페리페린-2로 구성된 벡터), 망막 혈관 질환(예를 들어, 당뇨병성 신경병증, 코츠병(Coat's disease) 및 망막동맥의 대혈관류), 망막 동맥 폐색증, 망막 혈관 폐색증, 미숙아망막증, 색소성 망막염(예를 들어, 망막 색소 특이적인 65kDa 단백질로 구성된 벡터), 가족성 삼출 유리체망막증(FEVR), 특발성 폴립모양 맥락막 혈관병증, 황반부망막전막(epiretinal macular membrane) 및 백내장으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 안과 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 안과 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여되며, 여기에서 안과 질환은 녹내장, 습성 및 건성 연령-관련 황반 변성, 당뇨망막병증, 및 황반 부종으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 혈액 질환, 예를 들어, 빈혈, 출혈 및 응고 질환(예를 들어, 파종성 혈관내응고(DIC), 혈우병, 헤노쉬-숀리엔 자색반(Henoch-Schonlien Purpura), 유전성출혈성모세혈관확장증, 혈소판감소증(ITP, TTP), 혈전성향증(thrombophilia), 본 빌레브란트병(Von Willebrand's disease), 백혈병(예를 들어, 급성 림프성 백별형, 급성 골수세포백혈병, 만성 림프성백혈병, 만성 골수세포 백혈병), 림프종(예를 들면, 호지킨 림프종(Hodgkin lymphoma), 비-호지킨 림프종(non-Hodgkin lymphoma)), 골수증식 질환(예를 들어, 골수섬유증, 진성적혈구증가증, 고혈소판증), 혈장 세포 질환(예를 들어, 고분자글로불린혈증, 의미 미결정 단세포군감마글로불린병증(monoclonal gammopathies of undetermined significance), 다발골수종), 비장 질환, 백혈구 세포 질환(예를 들어, 호염기성 질환, 호산구성 질병, 림프구감소증, 단세포 질환, 호중성감소증(neutropenia), 호중구성 백혈구증가증), 혈전증, 심정맥 혈전증(DVT), 색소침착증, 월경과다증, 겸상적혈구병, 및 지중해빈혈로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 혈액 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 신경성 질환, 예를 들면, 가우셔병(Gaucher disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 근위축성측색경화증(ALS), 다발경화증(MS), 헌팅통병(Huntington's disease), 프레드릭 운동실조증(Fredrich's ataxia), 경도인지장애(Mild Cognitive Impairment), 대뇌 아밀로이드맥관증병, 파킨슨병(Parkinsonism Disease), 루이체 질환, 전측두엽 치매(FTD), 다계통위축증(MSA), 진행성핵상마비, 및 운동 질환(운동실조, 뇌성마비, 무도병아데토시스(choreoathetosis), 긴장이상, 투렛 증후군(Tourette's syndrome), 핵황달 포함) 및 트레머 질환(tremor disorders), 및 백질이영양증(부신백질이영양증, 이염백질이영양증, 카나반병(Canavan disease), 알렉산더병(Alexander disease), 펠리쩨우스-메르츠바허병(Pelizaeus-Merzbacher disease)), 신경 세로이드 지방갈색소증(neuronal ceroid lipofucsinoses), 운동실조 모세혈관확장증(ataxia telangectasia), 레트 증후군(Rett Syndrome), 알파-시누클레이노패씨(alpha.-synucleinopathy)(예를 들어, 루이체 질환, 다계통 위축증, 할로포르덴-스파츠병(Hallervorden-Spatz disease), 또는 전측두엽 치매), 니만-피크 타입 C 질병(Niemann-Pick Type C disease: NPCD), 척수소뇌 운동실조 제1 형, 제2 형, 및 제3 형, 및 덴타토루브랄 팔리도루이시안 위축증(dentatorubral pallidoluysian atrophy)(DRLPA)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 신경성 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 폐 질환, 예를 들면, 천식, 폐확장부전, 기관지염, COPD(만성 폐쇄성 폐병), 폐기종, 폐 암, 중피종, 폐렴, 석면증, 아스페르길루스종, 아스페르길루스증, 아스페르길루스증 - 급성 침습성, 기관기확장증, 폐쇄세기관지기질화폐렴(BOOP), 호산구 폐렴, 괴사성 폐렴, 랄 유출(ral effusion), 진폐증, 기흉, 폐방선균증, 모나리 아베올라 단백질증(monary alveolar proteinosis), 폐 탄저병, 폐의 동정맥 기형, 폐 섬유증, 폐 색전, 폐 조직구증 X(호산구성 육아종), 폐고혈압증, 폐부종, 폐출혈, 폐 노카르디아증, 폐결핵, 폐정맥 폐쇄증, 류마티스 폐질환, 사코이드증, 방사선 섬유증, 과민성 폐렴, 급성 호흡곤란증후군(ARDS), 유아 호흡곤란증후군, 특발폐섬유증, 특발성 간질성 폐렴, 림프관평활근종증, 폐 랑게르한스 세포 조직구 증식증(pulmonary Langerhans' cell histiocytosis), 폐포단백질증, 부비강염, 편도염, 중이염, 인두염, 후두염, 폐과오종, 폐분리증, 선천성낭성선종양기형(congenital cystic adenomatoid malformation: CCAM), 및 낭포성 섬유증으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 폐 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 류마티스 질환, 예를 들어, 전신 홍반성 루푸스, 피부근염, 피부경화증, 전신 괴사성 동맥염, 피부괴사세정맥염, 류마티스 관절염, 쇠그렌 증후군(Sjogren's Syndrome), 레이노현상(Raynaud's phenomenon), 라이터 증후군(Reiter's syndrome), 관절염, 건선 관절염, 혈청음성 척추관절염, 쇠그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 전신 경화증, 피부근염/다발성근염, 혼합 결합조직 질병, 및 강직성 척추염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 류마티스 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 감염성 질환, 예를 들어, 진균 질병, 예컨대 피부사상균증(예를 들어, 백선증, 버짐 또는 백선 감염), 무좀, 손발톱주위염(paronychia), 어루러기(pityriasis versicolor), 홍색음선, 피부스침증, 기저기로 인한 발진(fungal diaper rash), 칸디다 외음염, 칸디다 귀두염, 외이도 진균증, 칸디다증(피하 및 점액피부), 만성 무코칸디다증(chronic mucocandidiasis)(예를 들어, 아구청 및 질 칸디다증), 크립토코쿠스증, 지오트리쿰증(geotrichosis), 트리코스포론증(trichosporosis), 아스페르길루스증(aspergillosis), 페니실리오시스(penicilliosis), 말피부사상균증(fusariosis), 털곰팡이증, 스포로트릭스증(sporotrichosis), 색소진균증, 콕시디오이데스진균증(coccidioidomycosis), 히스토플라스마증(histoplasmosis), 분아균증(blastomycosis), 파라콕시디오이데스진균증(paracoccidioidomycosis), 슈달레쉐리오시스(pseudallescheriosis), 균종, 사상균성각막염, 이진균증, 뉴모시스티스병(pneumocystosis), 및 진균혈증, 악시네토박터 감염, 방선균증, 아프리카 수면병(African sleeping sickness), AIDS(후천성 면역결핍증), 아메바성감염, 아나플라즈마증(Anaplasmosis), 탄저병, 아르카노박테리움 해몰리티쿰(Arcanobacterium haemolyticum) 감염, 아르헨티나 출혈열, 회충증, 아스페르길루스증, 아트로바이러스 감염, 바베스열원충, 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 감염, 세균 폐렴, 세균성 질염(BV), 박테리오이데스(Bacteroides) 감염, 발란티듐증, 바일리사스카리스(Baylisascaris) 감염, BK 바이러스 감염, 흑색사모증, 블라스토시스티스 호미니스(Blastocystis hominis) 감염, 보렐리아(Borrelia) 감염, 보툴리눔 식중독(및 유아 보툴리눔 식중독), 브라질 출혈열(Brazilian hemorrhagic fever), 브루셀라증, 부르콜데리아(Burkholderia) 감염, 브룰리 궤양, 칼시바이러스 감염(노로바이러스 및 사포바이러스), 칸디다증, 고양이할큄병, 봉와직염, 샤가스병(미국 트리파노소마증(American trypanosomiasis)), 연성하감, 수두, 클라미디아 감염증(Chlamydia), 콜레라, 색소효모균증, 간흡충증, 클로스트리디움 디피실레(Clostridium difficile), 콕시디오이데스 진균증, 콜로라도 진드기열(CTF), 일반 감기(급성 바이러스 비인두염; 급성 코감기), 크로이츠펠트-야곱병(CJD), 효모균증, 크립토스포리디오시스증(Cryptosporidiosis), 오우스 유충이행증(ous larva migrans)(CLM), 뎅기열, 디엔타모에비아시스(Dientamoebiasis), 디프테리아, 열두조충증, 열두조충증, 긴촌충증(Dracunculiasis), 에볼라 출혈열, 포충증, 엘리히증(Ehrlichiosis), 요충증(요충 감염), 엔테로코쿠스(Enterococcus) 감염, 엔테로바이러스 감염(Enterovirus infection), 발진 티푸스, 전염성홍반, 돌발성발진(Exanthem subitum), 비대흡충증, 간질증, 치명성 가계 불면증(Fatal familial insomnia: FFI), 사상충증, 푸소박테리움(Fusobacterium) 감염, 가스 괴저(클로스트리듐 균괴사), 지오트라쿰진균증, 게르슈트만-슈트라우쓸러-샤인커 증후군(Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome)(GSS), 비저 지아르디아증(Giardiasis Glanders), 악구충증, 임질, 서해부육아종(도노바니아증), 그룹 A 스트렙토코쿠스 감염, 그룹 B 스트렙토코쿠스 감염, 해모필루스 인플루자에증(Haemophilus influenzae), 수족구병(hand and, foot and mouth disease)(HFMD), 침습아스페르길루스증(HPS), 헬리코박터 필로리(Helicobacter pylori) 감염, 아이씨-요독 증후군(ic-uremic syndrome)(HUS), 신장 증후군을 지닌 출혈열(HFRS), A, B, C, D, E형 간염, 헤르페스 단성, 히스토플라즈마증(Histoplasmosis), 십이지장충 감염, 엔 보카바이러스 감염(n bocavirus infection), 인간 에윙기 엘리히증(Human ewingii ehrlichiosis), 인간 과립구 아나플라즈마증(HGA), 인간 과립구 아나플라즈마증(HGA), 인간 단핵구 엘리히증(Human monocytic ehrlichiosis), 인간 파필로마바이러스(HPV) 감염, 인간 인플루엔자 바이러스 감염, 선충증, 엡슈타인-바르 바이러스 감염성 단핵증(Mono), 인플루엔자(flu), 포자충증, 가와사키병, 각막염, 킹젤라 킹가에(Kingella kingae) 감염, 쿠루병(Kuru), 라싸열(Lassa fever), 레지오넬라증(재향군인병(Legionnaires' disease)), 레지오넬로시스(Legionellosis)(폰티악 열(Pontiac fever)), 라이슈마니어증(Leishmaniasis), 나병, 렙토스피라병(Leptospirosis), 선회병(Listeriosis), 라임병(Lyme disease)(라임 보렐리아증(Lyme borreliosis)), 림프 필라리아병(Lymphatic filariasis)(상피병), 림프구성 맥낙 뇌막염, 말라리아, 마르부르크 출혈열(MHF), 홍역, 멜리오이도시스(Melioidosis)(휘트모어병(Whitmore's disease)), 수막염, 메닌고코컬병(Meningococcal disease), 요코가와흡충증(Metagonimiasis), 작은포자충, 전염물렁종(MC), 볼거리, 발진열(Murine typhus)(Endemic typhus), 마이코플라즈마 폐렴, 균종(Mycetoma), 구더기증, 신생아결막염(신생아 안염), (새로운) 변이체 크로이펠츠-야콥병(vCJD, nvCJD), 노카르디아증, 회선사상충증(Onchocerciasis)(River blindness), 파라콕시디오이드진균증(Paracoccidioidomycosis)(남아메리카분아균증), 폐흡충증, 파스투렐라병(Pasteurellosis), 머리이기생증(머리이), 몸이증(몸 이(Body lice)), 음모슬증감염(모슬, 사면발이), 골반내 염증 질환(PID), 백일해(백일 기침(Whooping cough)), 흑사병, 폐렴구균성 감염, 뉴모시스티스 폐렴(PCP), 폐렴, 소아마비, 급성 회백수염, 프레보텔라(Prevotella) 감염, 매리 아메바성 수막뇌염(mary amoebic meningoencephalitis)(PAM), 진행성 다병소성백질뇌증, 앵무병(Psittacosis), Q 열, 광견병, 쥐물음열(Rat-bite fever), 소합포성폐염바이러스감염증, 리노스포리듐증, 이노바이러스 감염(inovirus infection), 리케챠 감염, 리케챠두창(Rickettsialpox), 리프트 밸리열(Rift Valley fever)(RVF), 로키산홍반열(RMSF), 로타바이러스 감염, 풍진, 살모넬라증, SARS(중증급성호흡기증후군), 옴, 주혈흡충병, 패혈증, 이질(세균 이질), 대상포진(Shingles)(Herpes zoster), 천연두(마마), 스포로트릭스증(Sporotrichosis), 포도알균 식중독(Staphylococcal food poisoning), 스타필로코쿠스 감염, 분선충증, 매독, 조충증, 타누스(tanus)(파상풍), 수염백선증(모창(Barber's itch)), 두부백선(두피의 백선), 체부백선(신체의 백선), 완선(샅진균증), 손백선증(손의 백선), 흑색백선증, 손발톱백선증(손발톱진균증), 어루러기(전풍(Pityriasis versicolor)), 톡소카라증(장기유충이행충)(VLM)), 톡소플라스마증, 선모충증, 트리코모나스증, 편충증(편충 감염), 결핵, 야토병, 우레아플라스마 우레알라이티쿰(Ureaplasma urealyticum) 감염, 베네주엘라형 마뇌염(Venezuelan equine encephalitis), 베네주엘라 출혈열, 바이러스 폐렴, 서부 나일강 열, 백색사모(블랑카 백선(Tinea blanca)), 예르시니아 슈도투베르쿨로시스(Yersinia pseudotuberculosis) 감염, 예르시니아증(Yersiniosis), 황열병, 및 접합균증으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 감염성 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 혈관부종을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다. 다른 구현예에서, 혈관부종은 유전성 혈관부종이다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 패혈증, 응고항진, 폐 기능장애, 저산소혈증, 출혈성 췌염, 심근경색증, 심폐 이식, 외상, 열 손상 및 혈관 유출로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 질환, 증상 또는 장애를 치료하기 위해 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 칼리크레인의 억제가 치료학적으로 유리한 효과를 제공하는 질환, 증상 또는 장애를 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다. 이러한 질환, 증상 또는 장애의 예들은 이에 제한되는 것은 아니나 접촉 시스템(contact system)의 질환, 증상 또는 장애를 포함한다. 예를 들어 Shariat-Madar et al., Innate Immunity, vol. 10, no. 1, 3-13 (2004) and Frick, et al., EMBO J., (2006) 25, 5569 - 5578 (2006) 참조. 다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 죽상경화혈전증(atherothrombosis), 관상동맥병, 알츠하이머병, 염증성 장 질병(예를들어, 크론병), 혈관 유출, 급성 호흡곤란증후군 및 브래디키닌-매개된 염증으로 이루어진 그룹으로 선택되는 질환, 증상 또는 장애를 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 브래디키닌 B2 수용체의 억제가 치료학적으로 유리한 효과를 제공하는 질환, 증상 또는 장애를 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 사구체경화증, 알츠하이머병, 뇌수종, 혈관 유출, 급성 호흡곤란 증후군, 통증, 염증, 외상, 화상, 쇼크, 알레르기, 및 심혈관 질환으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 질환, 증상 또는 장애를 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 감염성 질환, 예를 들어 소호흡기 질환, 돼지 호흡기 질환, 조류 인플루엔자, 조류 감염성 기관지염, 광우병, 개과 리슈만편모충증, 만성 소모성 질환, 인간 면역결핍바이러스(HIV), 간염, A형 간염, B형 간염, C형 간염, 고전적 돼지열, 포낭충, 송아지유행성폐염, FIP, 구제역, 야그지크테(Jaagsiekte), 매디-비스나(Maedi-Visna), 동물 유방염, 견소포자균, 양아구창(Orf)(동물 질환), 가성우역(Peste des petits ruminants), 매독병(Pox disease), 앵무새의 부리 및 깃털병, 광견병, 지중해열(브루셀라병) 또는 뱅병(Bang's disease) 또는 파상열, 말타열, 전염성 유산, 유행성 유산, 살모넬라 식중독, 장 파라티푸스(enteric paratyphosis), 세균이질, 가성결핵증, 흑사병, 악성유행성 열(pestilential fever), 폐결핵, 비브리오증, 서클링병(Circling disease), 바일병(Weil's disease)(렙토스피라증 또는 카니콜라열, 출혈성 황달(황달출혈성 렙토스피라), 낙농장 작업자열(dairy worker fever)(엘. 하드조(L. hardjo)), 회귀열, 진드기-매개 재귀열, 나선상균열, 바가본드열(vagabond fever), 기근열, 라임 관절염, 반워쓰 증후군(Bannworth's syndrome)(라임병), 진드기-기원 메닌고폴리뉴리티스(tick-borne meningopolyneuritis), 만성이동홍반, 비브리오병, 콜리박테리오증(Colibacteriosis), 콜리톡세미아(colitoxemia), 백리(white scours), 백조의 위 부종, 장 파라티푸스, 포도상구균성 영양 중독증, 포도상구균성 위장염, 개 코로나바이러스(CCV) 또는 개 파보바이러스 장염, 고양이 감염성 복막염 바이러스, 전염성 위장염(TGE) 바이러스, 해거먼 레드마우스병(Hagerman Redmouth Disease)(ERMD), 전염성 조혈괴사증(IHN), 돼지 방사상간균(해모필루스) 늑막폐렴, 한센병, 스트렙토트리코시스(Streptotrichosis), 양의 진균성 피부염, 가성피저, 휘트모어병(Whitmore's disease), 프란시스병(Francis' disease), 사슴파리 열(deer-fly fever), 토끼열, 오하라병(O'Hara disease), 스트렙토바실러리 열(Streptobacillary fever), 하베르힐열, 유행성 관절염 홍반, 쥐물림증, 선적 또는 수송열(shipping or transport fever), 출혈성 패혈증, 비둘기병, 앵무새열, 클라미디아증, 북미분아진균증, 시카고병, 길크리스트병(Gilchrist's disease), 고양이 할큄열, 양성 림프성막내피증, 양성 비세균성 임파선염, 바실루스 혈관종, 바실루스 간자반병, 쿼리열(Query fever), 발칸반도 인플루엔자, 발칸 독감(Balkan grippe), 도살열(abattoir fever), 진드기-매개열, 뉴모리케챠증(pneumorickettsiosis), 미국 참진드기발진티푸스(American Tick Typhus), 진드기-매개된 발진티푸스 열, 소낭 리케챠병, 규왕립식물원 반점열(Kew Gardens Spotted Fever), 벼룩-매개된 발진티푸스 열, 유행성 발진티푸스열, 도시발진티푸스, 백선, 피부 사상균증, 버짐, 백선증, 소포자균증, 샅진균증, 무좀(Athlete's Foot), 스포로트릭스 셴키(Sporothrix schenckii), 2형 진균, 크립토코커스종 및 히스토플라스마증, 양성 표피 원두(Benign Epidermal Monkeypox), BEMP, 헤르페스 바이러스 시미아에(Herpesvirus simiae), 원숭이 B 병(Simian B Disease), 베네주엘라 마뇌병, C형 기면성뇌염, 황열병, 흑토병, 한타바이러스폐증후군, 한국형출혈열, 신염성 이하선염(Nephropathia Epidemica), 유행성 출혈열, 출혈성 신증신염, 림프구 맥락수막염, 캘리포니아 뇌염/라 크로쎄 뇌염(La crosse encephalitis), 아프리카 출혈열, 녹색 또는 버빗 원숭이 병(Green or Vervet Monkey Disease), 광견병, 공수병, 전염성 간염, 유행성 간염, 유행 황달, 풍진(Rubeola), 홍역(Morbilli), 백조 및 말 인플루엔자(Swine and Equine Influenza), 조류 흑사병, 뉴캐슬병(Newcastle disease), 바베스열원충증(Piroplasmosis), 톡소포자충증, 아프리카수면병, 감비아파동편모충증, 로시데아파동편모충증, 샤가스병(Chagas's Disease), 샤가스-마자병(Chagas-Mazza Disease), 남미 트리파노소미아시스(South American Trypanosomiasis), 이질아메바, 발란티움 설사, 크립토스포리디오시스증, 편모충증, 피부 레슈마니아증: 치클레오 궤양(Chiclero ulcer), 비인두 리슈마니아증, 피안볼스(pianbols), 우타(uta), 및 부바(buba)(아메리카에서); 동양궤양증, 알레포 보일(Aleppo boil)(구대륙에서); 바그다드 보일(Bagdad boil), 델리 보일(Delhi boil), 바우루 궤양(Bauru ulcer), 내장 레슈마니아증(Visceral leishmaniasis): 흑혈병(kala-azar), 미포자충증, 아니사키아시스병(Anisakiasis), 선모충병, 안지오스트롱길로시스(Angiostrongylosis), 호산성 수막염 또는 수막뇌염(에이. 칸토넨시스(A. cantonensis)), 복부 안지오스트롱길로시스(abdominal angiostrongylosis)(에이. 코스타리센시스(A. costaricensis)), 구충증, 아메리카구충증, 십이지장충병, 모세선충증, 브루기아시스(Brugiasis), 개회충증, 장결절충증, 분선충증, 모양선충증, 회충증, 열두조충증, 스파르가눔증(Sparganosis), 포충증(Hydatidosis) 포충병(Hydatid Disease), 포낭충 과립증, 낭포성 포충낭 질병, 촌충 감염증, 및 주혈흡충으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 감염성 질환을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 대상체의 만성 신장병, 골관절염, 종양학(oncology), 바이러스 상기도 감염, 고양이 혈장세포 구내염, 고양이 호산성 육아종, 고양이 백혈병 바이러스 감염, 개 홍역 감염, 전신 진균 감염, 심근증, 및 뮤코다당침착증 VII을 치료하기 위하여 대상체에게 투여된다.
본 발명의 방법에서, 유전자 스위치는 펩타이드, 단백질, 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절한다. 일 구현예에서, 유전자 스위치는 대상체, 예를 들어, 인간에서 질환, 증상 또는 장애의 치료를 위해 치료학적 목적의 펩타이드, 단백질, 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절한다. 다른 구현예에서, 목적한 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드는 Her-2/neu (ERBB2/c-erbB-2), 오스테오칼신, 스트로멜라이신-1, 전립샘 특이적인 항원, 인간 나트륨-요오다이드 동시수송체(human sodium-iodide symporter), H19, IF-1, IGF-2, 타이모신 β15, T 세포 인자, 연골-기원한 레티노산-민감성 단백질, 프로스타신, 텔로머라제 촉매성 서브유닛, 사이클린-A, 미드킨; c-erbB-2, 전립샘-특이적인 막 항원, p51, 텔로머라제 RNA, 프로스타트산 포스파타제, PCA3dd3, DF3/MUC1, 헥스 II, 사이클로옥시게나제-2, 슈퍼(super) PSA, skp2, PRL-3, CA125/M17S2, IAI.3B, CRG-L2, TRPM4, RTVP, TARP, 텔로메어 리버스 트랜스크립타제(telomere reverse transcriptase), A4 아밀로이드 단백질, 아밀로이드 β-단백질 전구체, 알츠하이머병 A4 아밀로이드 단백질의 전구체, 뉴로펩타이드 FF, 세포질세망 스트레스 성분, 우로코르틴 II, 타이로신 하이드록실라제, 상보체 인자 3; 혈청 아밀로이드 A3, 메탈로프로테이나제-3의 조직 억제제(TIMP-3), p75 종양 괴사 인자 수용체, 종양 괴사 인자-α, TRPM4, RTVP, TARP, 텔로메어 리버스 트랜스크립타제, A4 아밀로이드 단백질, 아밀로이드 β-단백질 전구체, 알츠하이머병 A4 아밀로이드 단백질의 전구체, 뉴로펩타이드 FF, 세포질세망 스트레스 성분, 우로코르틴 II, 타이로신 하이드록실라제, 상보성 인자 3; 혈청 아밀로이드 A3, 메탈로프로테이나제-3의 조직 억제제(TIMP-3), p75 종양 괴사 인자 수용체, 종양 괴사 인자-α, 퍼옥시좀 증식인자 활성화된 수용체/IIA-1 비췌장 분비된 포스포리파제 A2, SOCS-3, SR-BI, Ob, 부위-1 프로테아제, TIGR, VL30, 여기 아미노산트랜스포터(excitatory amino acid transporter)-2, MDTS9, LIM, 피롤린 5-카복실라제 리덕타제, SIM2, Bax, Fas, bbc3, PINK-1, 트로포닌 T, myoD, 액틴, 평활근 22α 우트로핀, 마이오스타틴, 평활근 미오신 중쇄, 심장안키린 반복체 단백질, MLP, 스무텔린(Smoothelin), MYBPC3, Tα1 α-투불린, 세포내 부착 분자-4 (ICAM-4), γ-아미노부티르산 A형 수용체 β1 서브유닛, 뉴런 니코틴성 아세틸콜린 수용체 β2-소단위, 프레세닐린-1, 칼슘-칼모둘린-의존성 키나제 IIα CRF2α 수용체, 신경 성장 인자, GLP-2 수용체, 제I 형 트랜스글루타미나제, K14, 스테아로일-CoA 데사투라제, 메그신(Megsin), 프롤락틴, GDF-9, PSP94, NRL, NGAL, 긴 유장 산성 단백질, 포유동물 관련된 아밀로이드 A, 엔도텔린-1, 세르글리신, 혈소판-내피 세포 부착 분자-1 (PECAM-1), 타이(Tie) 수용체 타이로신 키나제, KDR/flk-1, 엔도글린, CCR5, CD11d, 혈소판 당단백질 IIb, 프레프로엔도텔린-1, 인터루킨-18 결합 단백질, CD34, Tec 타이로신 키나제, MLH1, MSH2, MSH6, PMS1, APC, LEF-1, F2 수용체, TGF-β 제II 형 수용체, EYA4, PCA3, K2, PROST 03, PCAM-1, PCADM-1, PCA3dd3, PCAV, PAcP, ATB0, CSA-1, SYG972, Urb-ctf, BCU399, TBX2, Cyr61, DIAPH3, BEHAB, IL-8, BLSA, BP1, DAP-키나제, HOXA9, ARP, Nbk, CD43, β7-hcG, β6-hCG, β6e-hCG, β5-hCG, β8-hcG, β3-hCG, MTA1s, Old-35, Old-64, LAGE-1, CIF150/hTAFII150, P65 온코페탈(oncofetal) 단백질, 텔로머라제, CYP1B1, 14-3-3σ NES1, CAR-1, HMGI, MAG, ELL2, 에프린 B2, WAF1, CIF130, C35, BMP2, BUB3, 폴리머라제 카파, EAG1, EAG2, HMG I, HLTF, Barx2, Pp 32r1, BMP4, TS10q23.3, 핵 방추체-관련 단백질, PFTAIRE, SEMA3B, MOGp, 포르틸린, IGFBP-3, 폴리호메오틱 2, PNQALRE, SCN5A, miR15, miR16, 헤드핀(Headpin), PAOh1/SMO, 히포(Hippo), Mst2, PSMA-유사, JAB1, NF-AT, P28ING5, MTG16, ErbB-2, HDAC9, GPBP, MG20, KLF6, ARTS1, Dock 3, 안넥신 8, MH15, DELTA-N p73, RapR6, StarD10, Ciz1, HLJ1, RapR7, A34, Sef, 킬린(Killin), SGA-1M, TGFβ 제II 형 수용체, GCA-관련 유전자, PRV-1, Vezf1, MLP, VEGI, PRO256, AOP2, 레모델린, 포스포디에스테라제 4D, 프로스타글란딘 수용체 아형 EP3, CARP, HOP, PLTP, UCP-2, FLJ11011, 코다닌-1, 레시스틴, 아르키펠린, 뉴로나틴, Ncb5or, 7B2, PTHrP, PEX, KChIPl, SLIT-3, CX3CR1, SMAP-2, IC-RFX, E2IG4, UCP2, Ob 수용체, Ob, Dp1, NRG-1, 시냅신 III, NRG1AG1, AL-2, 프롤린 데하이드로게나제, MNR2, ATM, Ho-1, CON202, 아탁신-1, NR3B, NIPA-1, DEPP, 아드레노메둘린, csdA, Inf-20, EOPA, SERT, FRP-1, 혈청 아밀로이드 A, BMP2, BMPR1A, ACLP, 레시스틴-유사 분자 β, Dlg5, TRANCE, 매트릴린-3, 시노비올린, HIV LTR, SHIVA, EBI 1, EBI 2, EBI 3, NM23, Eps8, Beta-10, 모낭 성장 인자, 코르네오데스모신, GCR9, Bg, FGF23, BBSR, MIC-1, MIA-2, IL-17B, 포르밀글리신 생성 효소, LPLA2, CXCL1O, HFE2A, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10R DN 또는 이의 서브유닛, IL-15, IL-18, IL-21, IL-23, IL-24, IL-27, GM-CSF, IFN-알파, IFN-감마, IFN-알파 1, IFN 알파 2, IL-15-R-알파, CCL3 (MIP-1a), CCL5 (RANTES), CCL7 (MCP3), XCL1 (림포탁틴), CXCL1 (MGSA-알파), CCR7, CCL19 (MIP-3b), CXCL9 (MIG), CXCL10 (IP-10), CXCL12 (SDF-1), CCL21 (6Ckine), OX40L, 4-1BBL, CD40, CD70, GITRL, LIGHT, b-데펜신(b-Defensin), HMGB1, Flt3L, IFN-베타, TNF-알파, dnFADD, BCG, TGF-알파, PD-L1 RNAi, PD-L1 안티센스 올리고뉴클레오타이드, TGFbRII DN, ICOS-L, S100, CD40L, p53, 수르비빈, p53-수르비빈 융합, MAGE3, 미엘린 기본 단백질, PSA 및 PSMA로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
다른 구현예에서, 목적 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드는 섬모 향신경성 인자, 바소히빈(vasohibin), IL-10, 에리쓰로-단백질, VEGF 트랩(trap), 또는 PDGF이다.
다른 구현예에서, 목적 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드는 JUN-키나제 억제제, 바소인히빈, EPO, 또는 CTNF이다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 IL-12 또는 이의 서브유닛을 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절한다. 다른 구현예에서, IL-12 또는 이의 서브유닛은 인간 IL-12 또는 이의 서브유닛이다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 C1 에스테라제 억제제(예를 들어, 인간 C1 에스테라제 억제제), 칼리크레인 억제제, 또는 브래디키닌 B2 수용체 길항제를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절한다.
칼리크레인 억제제의 예들은, 이에 제한되는 것은 아니나, 미국 특허 공개 제2010/0034805호, 제2009/0264350호, 제2009/0234009호, 제2008/0221031호, 제2007/0213275호, 제2006/0264603호 및 제2005/0089515호에 개시된 에칼란티드 및 칼리크레인 억제제를 포함한다.
브래디키닌 B2 수용체 억제제의 예들은, 이에 제한되는 것은 아니나, 헬로키네스타틴 및 항-브래디키닌 B2 수용체 항체를 포함한다. 헬로키네스타틴의 아미노산 서열은 Kwok, H.F. et al., Peptides 29I 65-72 (2008)에 개시되어 있다. 항-브래디키닌 B2 수용체 항체의 비제한적인 예들이 Alla, S.A. et al., J. Biol. Chem. 271: 1748-1755 (1996)에 개시되어 있다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 대상체, 예를 들어, 인간에서 암, 예를 들어, 흑색종을 치료하기 위하여 IL-12 또는 이의 서브유닛을 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절한다.
다른 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 (a) GAL4 DNA 결합 도메인, 돌연변이 V107I 및 Y127E(미국 특허공개 제2006/0100416 A1호에 개시된 코리스토네우라 푸미프라나(Choristoneura fumifrana) 에크디손 수용체 서열 관련)를 갖는 코리스토네우라 푸미페라나(Choristoneura fumiferana) 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인, 호모 사피엔스(Homo sapiens) RXR의 나선 1-8 및 로쿠스타 미그라토리아(Locusta migratoria) RXR의 나선 9-12로 이루어진 키메라 RXR 리간드 결합 도메인, VP16 전사 활성 도메인을 포함하는 유전자 스위치, 및 (b) 인간 IL-12, 및 유전자 스위치내 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인이 개시 화합물을 결합하는 경우 인간 IL-12의 발현을 조절하는 폴리뉴클레오타이드에 의해 엔코딩되는 유전자 스위치를 엔코딩한다. 추가적인 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 흑색종과 같은 암을 갖는 대상체에게 투여된다. 폴리뉴클레오타이드는 약학적으로 허용가능한 담체 중에서 종양내로 투여되거나, 또는 수지상 세포와 같은 면역 세포에 의해 함유된다. 일 구현예에서, 폴리뉴클레오타이드는 대상체에게 투여된 후 개시 화합물, 또는 이의 조성물이 투여된다. 다른 구현예에서, 개시 화합물, 또는 이의 조성물이 대상체에게 투여된 후 폴리뉴클레오타이드가 투여된다. 예를 들어, 개시 화합물, 또는 이의 조성물은 폴리뉴클레오타이드를 대상체에게 투여한 날에 대해 -1, 0, +1, +2, +3, +4, +5, +6, +7 이상되는 날에 대상체에게 투여될 수 있다.
다른 구현예에서, 유전자 스위치는 대상체에서 재생성 의약, 예를 들어, 혈액 약(blood pharming)의 공정, 즉, 적혈구 세포 또는 다른 혈액 제품의 생산 시 조혈 줄기 세포, 조혈 선조 세포, 또는 유도된 다능성 줄기 세포의 분화, 전환-분화, 재프로그래밍(reprogramming), 자가-재생(self-renewal), 또는 확장에 사용하기 위한, 전사 인자, 예를 들어 GATA-1, GATA의 친구(FOG-1), EKLF (크루펠-유사 전사 인자), p45/핵 인자-적혈구 2 (NF-E2), 줄기 세포 백혈병 (SCL) 또는 T-세포 급성 림프구 백혈병-1, OCT4, 또는 Sry-관련 고-이동성 그룹 박스 전사 인자 (high-mobility group box transcription factor) (Sox6), 또는 성장 인자, 예를 들어 IGFII, bFGF, Flt3, 줄기 세포 인자 (SCF), 트롬보포이에틴 (TPO), 골 형성 단백질 4 (BMP4), 재조합 인간 혈관 내피 성장 인자 (VEGF-A165), 인터루킨-3 (IL-3) 인터루킨-6 (IL-6), 또는 인터루킨-11 (IL-11), 또는 에리트로포이에틴을 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드의 발현을 조절한다.
일반적인 합성 방법
개시 화합물은 본 발명을 고려하여 당업자에게 알려진 방법을 이용하여 (예를 들어, 미국특허 제8,076,517호, 제7,456,315호, 제7,304,161호, 및 제6,258,603호 참조) 및/또는 하기 반응식들에 나타난 설명적인 방법에 의하여 제조된다.
반응식 1
Figure pct00060
반응식 2
Figure pct00061
반응식 3
Figure pct00062
R4가 R4-1 (J가 CH인 경우) 또는 R4-8 (J가 N인 경우)인, 화학식 I을 갖는 개시 화합물을 반응식 2 및 3에 기술된 바와 같이 제조할 수 있다. 간략하게는, 반응식 2에서, 화학식 A의 피나콜보란 화합물을 화학식 B의 보록솔로 전환시키고, 보록솔을 화학식 C를 갖는 하이드라진과 반응시켜 화학식 D를 갖는 아실하이드라진을 얻는다. 아실하이드라진을 산 클로라이드와 반응시켜 화학식 E를 갖는 디아실하이드라진을 얻는다.
반응식 3에서, 화학식 F를 갖는 화합물을 화학식 C를 갖는 하이드라진과 반응시켜 화학식 G를 갖는 아실하이드라진을 얻는다. 아실하이드라진을 산 클로라이드와 반응시켜 화학식 H를 갖는 디아실하이드라진을 얻는다. 화학식 H를 갖는 화합물의 브로모기를 화학식 J를 갖는 피나콜보란으로 전환시킨 다음 보론산으로 전환시키고 이를 고리화하여 화학식 K를 갖는 디아실하이드라진을 얻는다.
반응식 4
Figure pct00063
R4가 R4-2인 화학식 I을 갖는 개시 화합물을 반응식 4에 기술된 바와 같이 제조할 수 있다. 간략하게는, 화학식 L을 갖는 디아실하이드라진의 올레핀을 화학식 M을 갖는 피나콜보란으로 전환시킨다. 피나콜보란을 화학식 N을 갖는 보론산으로 전환시키고, 화학식 N을 갖는 화합물을 고리화하여 화합물 O를 얻는다.
반응식 5
Figure pct00064
R4가 R4-3이고, R6c가 OH이고, R7e 및 R7f가 수소인 화학식 I을 갖는 개시 화합물은 반응식 5에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
반응식 6
Figure pct00065
반응식 7
Figure pct00066
반응식 8
Figure pct00067
R4가 R4-4이고, R6d가 OH이고, R7g 및 R7h가 수소인 화학식 I을 갖는 개시 화합물은 반응식 6, 7, 및 8에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
반응식 9
Figure pct00068
R4가 R4-9이고, R7a' 및 R7b'가 수소인 화학식 I을 갖는 개시 화합물은 반응식 9에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
반응식 10
Figure pct00069
R4가 R4-10이고, X6가 -O-이고, R7a' 및 R7b'가 각각 수소인 화학식 I을 갖는 개시 화합물은 반응식 10에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다. R4가 R4-10이고, X6가 -N(R8l)-이고, R7a' 및 R7b'가 각각 수소인 화학식 I을 갖는 개시 화합물은 반응식 7에 기술된 바와 같이 제조될 수 있다.
도 1은 레오스위치®(RheoSwitch®) 벡터 (RS-1)에 대한 벡터 지도이다.
도 2A-2E는 도 1의 벡터 지도에 대한 핵산 서열 (서열 번호 1)을 개시한다. 각괄호 내에 개시된 핵산 서열은 하기 벡터 서열 성분을 나타낸다: [6x GalRE]1, [fLuc]2, [VP16]3, [RXR]4, [Gal4DBD]5 및 [EcR VY]6.
도 3은 우측 및 좌측 장딴지근 상에서의 IM에 의한 Ad-RTS-fLUC의 주사 및 100 mg/kg 체중의 화합물 13, 59, 67, 85, 및 86의 경구 투여에 의한 마우스 장딴지근에서의 루시퍼라제의 발현을 보여주는 막대 그래프이다.
실시예
실시예 1
N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드(화합물 50)(Cpd. No. 50)
Figure pct00070
단계 1: 3-보로노-4-메틸벤조산의 합성
Figure pct00071
3-브로모-4-메틸벤조산 (11.00 g, 51.2 mmol)을 2개의 적하 깔대기와 아르곤 주입구가 구비된 500 ml 3-구 둥근 바닥 플라스크 내에서 아르곤 하에 무수 THF (150 ml)에 용해시켰다. 교반된 용액을 -78℃로 냉각시키고 n-BuLi (헥산 중 1.6M, 60.7 ml, 97.0 mmol)를 적하 깔대기로 적가하였다 (1시간 동안). 첨가를 완료한 후, 용액을 추가로 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 여기에, B(OMe)3 (17.7 ml, 159.0 mmol)를 2번째 적하 깔대기로 서서히 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 다음 하룻밤 동안 상온으로 승온시켰다. 용매를 감압 하에 증발시켰다. 미정제 생성물을 에테르에 용해시키고 HCl (1N) 수용액에 부어 넣었다. 혼합물을 에테르(3 X 150 ml)로 추출하고, 화합된 유기층을 식염수로 세척한 후, 무수 MgS04 상에서 건조시키고, 여과한 뒤, 증발 건조시켰다. 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (220 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배 및 이후 DCM/MeOH 구배)을 사용하여 정제하였다. 불순물을 헥산/EtOAc로 세척해내고 순수 생성물을 MeOH/DCM (5:95) 용매 혼합물로 용리시켜 3.3 g (33% 수율)의 순수 SKC-01-126을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, 아세톤-d6) δ 12.10 (br s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.90 - 7.63 (m, 1H), 7.11 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H).
단계 2: 메틸 4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조에이트
Figure pct00072
환류 응축기 및 건조 가드 튜브(drying guard tube)가 구비된 250 ml 둥근 바닥 플라스크 내의 MeOH (100 ml) 중 SKC-01-126 (3.3 g, 18.3 mmol)의 교반된 용액에 3 ml 진한 H2S04를 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤 동안 환류시켰다. 상온으로 냉각시킨 후, 용매를 진공 증발시켰다. 물을 첨가하고 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 화합된 유기층을 식염수로 세척한 후, 무수 MgS04 상에서 건조시키고, 여과한 뒤, 증발 건조시켜 흰색 고체로서 메틸 에스테르 SKC-01-127을 얻었다. 추가 정제 없이, 메틸 에스테르 (4.00 g, 20.6 mmol)를 딘-스탁 트랩이 구비된 250 ml 둥근 바닥 플라스크 내 건조 톨루엔 (100 ml)에 용해시켰다. 교반된 반응 혼합물에, 2,3-디메틸부탄-2,3-디올 (3.66 g, 30.9 mmol)을 첨가하고 이어서 촉매량의 p-TSOH.H20 (0.196 g, 1.03 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2일 동안 밤새 가열하여 환류시켰다. 물을 수집하고 (~2 ml) 제거하였다. 냉각 후, 반응 혼합물은 고체가 되었다. 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (80 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 사용하여 정제하여 SKC-01-138을 얻었다. LCMS (M+H) 277. 1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.32 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 1.25 (s, 12H).
단계 3: 1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카르복실산의 합성
Figure pct00073
무수 CC14 (30 ml) 중의 SKC-01-138 (1.50 g, 5.43 mmol) 용액에 N-브로모숙신이미드 (1.01 g, 5.70 mmol)를 첨가하였다. 이 교반된 혼합물에, 디사이클로헥산카보니트릴을 1시간 동안 4회 분할하여 촉매 (0.07 g, 0.27 mmol)로서 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤 동안 70℃에서 교반하였다. LCMS가 벤질 브로마이드의 예측된 질량을 갖는 5.75 분에서의 주요 피크를 보였다. 냉각 후, 용매를 진공 증발시켰다. 미정제 생성물을 에테르에 용해시키고 여과하여 임의의 숙신이미드를 제거하였다. 여과액을 KOH (H20 중 15% w/v, 3X70 ml)로 추출하였다. 수상을 상온 ("rt")에서 1-2 시간 동안 교반하였다. 용액을 0℃로 냉각시키고 HCl (H20 중 6N, ~120 ml)을 서서히 첨가하여 pH <2에 이르게 하였다. 흰색 침전물을 프릿 유리 깔대기(fritted glass funnel)를 통해 여과하여 수집한 후 대기 건조시켜 흰색 고체 분말로서 5-카르복시벤조보록솔 SKC-01-150 (0.800 g, 83% 수율)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.91 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.04(dd, J=8.0, 1.5 Hz, lH), 7.52 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.05 (s, 2H).
단계 4: N'-(tert-부틸)-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보히라지드의 합성
Figure pct00074
무수 DMF (1.5 ml) 중의 SKC-01-150 (150 mg, 0.84 mmol)의 교반된 용액에 상온에서 아르곤 하에 BOP (373 mg, 0.84 mmol), HOBt (129 mg, 0.84 mmol) 및 DIPEA (0.294 ml, 1.68 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 여기에 tert-부틸 하이드라진 히드로클로라이드 (105 mg, 0.84 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 1시간 동안 40℃에서 교반하였다. LCMS가 보록소졸 카르복실산의 완전한 전환을 보여주었다. 반응 혼합물을 신틸레이션 바이알에 넣고, 제네박(Genevac)을 이용하여 DMF를 제거하였다. 점성의 미정제 혼합물을 15% KOH 수용액 및 에테르에 용해시켰다. 반응 혼합물을 에테르로 추출하고 KOH 수용액으로 3회 세척하였다. 생성물을 함유하는 수용성 분획을 아이스 배쓰 상에서 냉각시키고 6N HCl을 서서히 첨가하여 pH 1-2로 만들었다. 혼합물을 에틸 아세테이트를 이용하여 추출하였다. 생성물은 수용성 분획 내에 머물렀으며 진공 하에 증발 건조되었다. DCM 중의 5% MeOH로 생성물을 세척하고 여과액을 수집하여 생성물로부터 고체 KCl을 제거하여 95% 순수 생성물을 얻었다. 생성물을 중성 알루미나 (24 g 중성 알루미나 컬럼, MeOH:DCM 용매 혼합물) 상에 흡착시킨 후에 ISCO 시스템을 이용하여 추가로 정제하였다. 생성물을 DCM 중의 ~5% MeOH을 이용하여 용리시켰다. 분획을 수집하고 건조시켜 순수 보록사졸 카보하이드라지드 SKC-02-011 (0.187 g, 89% 수율)을 얻었다. 점착성 생성물을 물 및 소량의 THF에 용해시키고, 냉동시킨 후 동결건조시켜 밝은 노란색 분말을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.11 (s, 1H), 7.93 (dd, J = 8.0, 1.7 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.0, 0.7 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 1.19 (s, 10H).
상기 기술된 과정을 사용하여, 하기 반응을 수행하여 SCK-02-021을 얻었다:
Figure pct00075
상기 반응을 위하여, 무수 DMF (1.7 ml) 중의 SKC-01-150 (170 mg, 0.96 mmol), BOP (423 mg, 0.96 mmol), HOBt (146 mg, 0.96 mmol), DIPEA (0.834 ml, 4.78 mmol) 및 하이드라진 히드로클로라이드 (105 mg, 0.84 mmol)를 화합시켰다. 미정제 혼합물을 ISCO 시스템 (24 g 중성 알루미나, MeOH/DCM 구배)을 이용하여 정제하였다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.05 (s, 1H), 7.87 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.50 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 5.12 (s, 1H), 2.51 - 2.44 (m, 1H), 1.76 - 1.59 (m, 1H), 1.51 - 1.27 (m, 1H), 1.11 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 1.02 (s, 9H).
상기 기술된 과정을 약간 변경하여, 하기 반응을 수행함으로써 (R)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-7-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드를 얻었다:
Figure pct00076
단계 4: N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드 (화합물 50)의 합성:
Figure pct00077
아르곤 하의 100 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 DCM (2 ml) 중의 산 클로라이드 (0.061 g, 0.363 mmol) 용액에 보록사졸 카보하이드라지드 SKC-02-011 (0.090 g, 0.363 mmol)을 첨가하고 이어서 트리에틸 아민 (0.051 ml, 0.0363 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS는 예측된 생성물과 함께 몇몇의 피크를 보였다. 예비 HPLC에 의한 정제로 20 mg (14%)의 화합물 50을 얻었다. 1NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.54 (dd, J= 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.09 (s, 2H), 6.91 (s, 1H), 4.99 (s, 2H), 2.20 (s, 6H), 1.49 (s, 9H).
SKC-01-150 (100 mg, 0.56 mmol), BOP (249 mg, 0.56 mmol), HOBt (86 mg, 0.56 mmol), DIPEA (0.098 ml, 0.56 mmol)를 사용한 단일 용기 과정(one pot procedure)을 이용하여 화합물 50를 또한 제조하였다. 하이드라지드를 제외한 모든 시약을 100 ml 둥근 바닥 플라스크 내에서 혼합하였고 무수 DMF (2 ml) 중에 용해시킨 후 상온에서 5분 동안 아르곤 하에 교반하였다. 여기에, N-(tert-부틸)-3,5-디메틸하이드라지드 (124 mg, 0.56 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 하룻밤 동안 75℃에서 가열하였다. LCMS가 2개의 근접한 피크를 보였으며, 피크 중 하나는 ES+ 및 ES-모드에서 예측된 생성물의 질량 (mwt. 380.24)을 보였다. 반응 혼합물을 에테르로 희석시키고 10% w/v KOH 수용액으로 추출하였다. 수성 분획의 LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 수성 층을 0℃로 냉각시키고, 6N HCL로 적가 처리하여 산성 (pH 1-2)으로 만든 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 분획을 수집하고, 무수 MgS04 상에서 건조시킨 후, 여과하고 농축시켰다. 잔류물을 예비 HPLC을 이용하여 정제하여 20 mg (9%)의 화합물 50을 얻었다.
상기 기술된 과정을 이용하여, 하기 반응을 수행함으로써 화합물 51을 얻었다.
Figure pct00078
2 ml 디클로로메탄 중의 SKC-02-021 (70 mg, 0.24 mmol), 3,5-디메틸 벤조일 클로라이드 (40.7 mg, 0.24 mmol) 및 트리에틸아민 (0.101 ml, 0.72 mmol)을 이용하여 반응을 수행하였다. 미정제 반응 혼합물을 예비적 HPLC를 이용하여 정제하여 화합물 51을 얻었다.
상기 기술된 과정을 이용하여, 하기 반응을 수행함으로써 (R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-7-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드 (화합물 59)를 얻었다:
Figure pct00079
화합물 59: LCMS[MH+]=441. 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.37(d, J=54.9 Hz, 1H), 9.39(t, J=7.9 Hz, 1H), 7.34 - 6.93 (m, 4H), 6.75 (td, J=13.6, 7.5 Hz, 1H), 5.16 - 4.87 (m, 2H), 4.54 - 4.17 (m, 1H), 3.17 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 1.79 - 1.41 (m, 2H), 1.10 - 0.93 (m, 12H).
N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-((R)-2,2-디메틸펜탄-3-일)-7-플루오로-5'-옥소-3H-114-스파이로[벤조[c][1,2]옥사보롤-1,2'-[1,3,2]옥사자보롤리딘]-6-카보하이드라지드 (화합물 95)를 하기와 같이 화합물 59로부터 제조하였다:
Figure pct00080
5.3 ml의 건조 톨루엔 및 1 ml의 디메틸설폭시드 중의 글리신 (11.93 mg, 0.159 mmol) 용액을 교반기가 구비된 25 ml 플라스크에 넣었다. (R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-7-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드 (70 mg, 0.159 mmol)를 첨가하고 혼합물을 28시간 동안 환류 하에 두었다. 진공에서 톨루엔을 제거한 후, DMSO 중의 생성물 용액을 15.5g 텔레다인(Teledyne) ISCO C18 역상 컬럼 상에 옮기고 0-100% CH3CN-H20(30 분)로 용리시켰다. 원하는 분획을 모아 동결건조시켜 흰색 고체로서 19 mg (11.4% 수율)의 스파이로 부가물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.43 - 10.18(m, 1 H - NH 회전 이성질체의 혼합물), 7.19 - 6.72(m, 5H), 6.41 - 6.37(t, 0.46 H, 부분 회전 이성질체), 4.98 -4.76(m, 2H), 4.43 - 4.21 (2개 d, 1H, CH), 3.56 - 3.52(중첩 s, 2H), 3.32 (s, DMSO-d6 물 피크), 2.50 (DMSO-d6), 2.32 및 2.24(s, 6H), 1.54 - 1.46(m, 2H), 1.07 - 0.88(m, 12H); MS (ESI) 계산치 C26H32BFN3O5 - ([M+2H]+) 498, 실측치 498.
상기 기술된 과정을 이용하여, 하기 반응을 수행함으로써 (R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카보하이드라지드 (화합물 67)를 얻었다:
메틸 2-플루오로-3-메틸-4-(4,4,5,5,-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트:
Figure pct00082
메틸 4-브로모-2-플루오로-3-메틸벤조에이트 (2.6 g, 10.52 mmol), 포타슘 아세테이트 (3.61 g, 36.8 mmol), 및 무수 디옥산 (90 mL) 중의 다이머 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2-2'비스(1,3,2-디옥사보롤란 (4.01 g, 15.79 mmol)를 RB 플라스크 내에서 함께 혼합하였다. 혼합물을 배기시키고(evacuated) 3회 아르곤으로 채운(backfilled) 후 상온에서 교반하였다. 상기 혼합물에, Pd(dppf)2Cl2.DCM을 첨가하고 배기시킨 후 혼합물을 3회 아르곤으로 채운 뒤 혼합물을 하룻밤 동안 80 ℃에서 가열하였다. 어두운 색의 반응 혼합물을 냉각시키고, 셀리트(celite)의 쇼트 패드를 통해 여과한 후 용매를 제거하였다. 물 및 EtOAc를 첨가하고 혼합물을 추출하였다. 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조한 후, 여과하고 용매를 제거하였다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 SKC-09-031 (2.8 g, 90% 수율)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 - 7.60 (m, 1H), 7.54 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.62 - 2.31 (m, 3H), 1.36 (s, 12H).
4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카르복실산:
Figure pct00083
환류 응축기가 구비된 200 ml RB 플라스크 내 무수 CCl4 (80 mL) 중의 상기 에스테르 (2.00 g, 6.80 mmol) 용액에 NBS (1.20 g, 6.80 mmol) 및 (E)-1,1'-(디아젠-1,2-디일)디사이클로헥산카보니트릴 (0.166 g, 0.68 mmol)을 첨가하고 아르곤 하에 하룻밤 동안 80 ℃에서 반응 혼합물을 교반하였다. 전체 양의 NBS (1.2 g) 및 촉매 (0.166 g)를 1시간 동안 4회 분할하여 첨가하였다. LCMS는 4.59에서 하나의 주요 피크를 보였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 용매를 제거하였다. 고체를 에테르에 현탁시키고 여과하여 고체를 제거하였다. 여과액을 농축시켜 용매를 제거하고; 물로 희석한 후 EtOAc로 추출하였다. 유기 분획을 수집하고, 무수 MgS04 상에서 건조시킨 후, 여과하고 회전 증발 농축기 상에서 용매를 제거하였다. LCMS (M+2) 374.60.
7% KOH (~80 mL) 수용액을 미정제 중간체에 첨가하고 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 에테르로 추출하였으며, 생성물은 수성 분획 (LCMS 기반)에 들어갔고, 일부 불순물을 함유하는 에테르 층을 버렸다. 수성 분획을 냉각시키고 6N HCl로 pH 3까지 서서히 산성화시켰다. 흰색 침전물이 형성되었고, 여과하여 침전물을 수집하고 진공 하에 건조시켰다. LCMS는 2.55에서 단일 피크를 보였다. LCMS (M+1) 197.17. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.34 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 8.00 - 7.69 (m, 1H), 7.61 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 5.11 (s, 2H).
두 단계 커플링을 위한 일반적인 과정: 신틸레이션 바이알 내에서 DMF 중의 4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카르복실산 (1.0 당량), PyBOP (1.0 당량), DIEA (2.0 당량)를 함께 혼합하고, 아르곤 하에서 3분 동안 40℃에서 교반하였다. 상기 혼합물에, 하이드라진 염 (1 당량)을 첨가하고 1-2시간 동안 40℃에서 혼합물을 교반하였다. 반응을 LCMS로 모니터링하였다. 용매를 제네박을 이용하여 제거하였다. 7% KOH 수용액을 첨가하고, 15분 동안 교반한 후 에테르로 추출하였다. 수성 분획을 수집하고, 냉각시킨 후 6N HCl로 pH 3까지 산성화시켰다. 즉시 EtOAc로 추출하고, 유기 분획을 수집한 후, 무수 MgS04 상에서 건조시키고 용매를 제거하였다. 미정제 혼합물을 최종적으로 중성 알루미나 컬럼 (MeOH/DCM 용매 구배)를 이용하거나 또는 ISCO 상에서 RediSep C18 컬럼 (물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 용매 구배)을 이용하여 정제하였다.
2번째 단계에서, DCM 중의 상기 중간체 (1.0 당량)의 교반된 용액에 TEA (1.2 당량) 및 산 클로라이드 (1.0 당량)를 아르곤 하에 상온에서 첨가하고 35분 동안 혼합물을 교반하였다. 반응을 LCMS로 모니터링하였다. 용매를 제거하고 미정제 혼합물을 ISCO 상에서 RediSep C18 컬럼 (물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 용매 구배)을 이용하여 정제하였다.
Figure pct00084
4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카르복실산 (1.0 g, 5.10 mmol), PyBOP (2.66 g, 5.10 mmol), DIEA (1.78 mL, 10.21 mmol)를 DMF (15 mL) 중에 함께 혼합하고 (R)-(2,2-디메틸-펜탄-3-일)하이드라진 4-메틸벤젠설포네이트 (1.54g, 5.10 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 40℃에서 교반하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 일반적인 작업 과정 후에, 미정제 혼합물을 최종적으로 ISCO 상에서 RediSep C18 컬럼 (100 g 컬럼, 물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 용매 구배)을 이용하여 정제하여 무색 고체로서 SKC-09-034 (0.820 g, 52% 수율)를 분리하였다. LCMS (M+1) 308.81. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.77 (s, 1H), 9.52 (s, 1H), 7.66 -7.43 (m, 2H), 5.10 (s, 2H), 4.20 - 3.58 (m, 1H), 1.56-1.53 (m, 1H), 1.31-1.22 (m, 1H), 1.05- 0.86 (m, 12H).
화합물 67을 상온에서 중간체 SKC-09-034 (0.600 g, 1.95 mmol), DCM (10 mL) 중의 TEA (0.326 mL) 및 3,5-디메틸벤조일 클로라이드 (0.328 g, 1.95 mmol)을 이용하여 합성하였다. 반응을 3개의 피크 (LCMS 기반), 예측된 생성물 질량 (441.91, M+1)을 갖는 하나의 주요 피크를 갖는 35분 이후에 중지하였다. Redisep C18 컬럼 (C18 100 g, 물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 용매 구배)을 이용하여 정제 후에, 최종 DAH를 화합물 67 (0.575 g, 67% 수율)로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.48 (d, J= 48.2 Hz, 1H), 9.53 (s, 1H), 7.47 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.21 - 6.94 (m, 3H), 6.61 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.34 (dd, J= 72.7, 10.2 Hz, 1H), 2.25 (s, 6H), 1.74 - 1.39 (m, 2H), 1.10 - 0.91 (m, 12H).
Figure pct00085
상기 반응을 하룻밤 동안 아르곤 하에 상온에서 DCM (2 mL) 중의 SKC-07-068 (0.200 g, 0.65 mmol), TEA (0.109 mL, 0.779 mmol) 및 3,5-비스(메틸-d3)벤조일 클로라이드 (0.136 g, 0.779 mmol)를 이용하여 수행하였다. LCMS는 2개의 부가적인 피크와 함께 447.14 (M+1)의 예측된 생성물 질량을 갖는 피크를 보였다. 생성물을 분리하였다.
N'-(tert-부틸)-4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카보하이드라지드:
Figure pct00086
일반적인 과정 이후에, DMF (6 mL) 중의 4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카르복실산 (0.500 g, 2.55 mmol), PyBOP (1.34 g, 2.55 mmol), DIEA (0.89 mL, 5.10 mmol)를 함께 혼합하고 이어서 tert-부틸 하이드라진 히드로클로라이드 (0.318 g, 2.55 mmol) 를 첨가한 후 혼합물을 1시간 동안 40℃에서 교반하였다. LCMS는 267.01 (M+1)의 예측된 생성물 질량을 갖는 2.43에서의 주요 피크를 보였다. 일반적인 작업 과정 이후에, 미정제 건조 샘플 (SKC-07-069, 0.800 g, 일부 DMF 함유)을 추가적인 정제 없이 다음 단계를 위하여 사용하였다.
N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카보하이드라지드:
Figure pct00087
DCM (3 mL) 중의 상기 합성된 모노B (SKC-7-069, 0.400 g, 1.50 mmol)의 교반된 용액에 하룻밤 동안 아르곤 하에 상온에서 TEA (0.210 mL, 1.50 mmol) 및 3,5-디메틸벤조일 클로라이드 (0.253 g, 1.50 mmol)를 첨가하였다. LCMS는 399.09 (M+1)의 예측된 생성물 질량을 갖는 3.45에서의 날카로운 피크와 함께 몇몇의 피크를 보였다. 회전 증발 농축기 상에서 용매를 제거하고 미정제 혼합물을 예비 HPLC (물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 용매 구배)를 이용하여 정제하여 0.080 g의 생성물 화합물 65를 얻었다. LCMS: 399.09 (M+1). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.70 (s, 1H), 9.51 (s, 1H), 7.46 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.04 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 6.80 - 6.66 (m, 1H), 5.05 (s, 2H), 2.25 (s, 6H), 1.49 (s, 9H).
N'-(3,5-비스(메틸-d3)벤조일)-N'-(tert-부틸)-4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카보하이드라지드:
Figure pct00088
하룻밤 동안 아르곤 하에 상온에서 DCM (3 mL) 중의 모노B (SKC-07-069 미정제, 0.400 g, 1.50 mmol), TEA (0.210 mL, 1.50 mmol) 및 3,5-비스(메틸-d3)벤조일 클로라이드 (0.263 g, 1.50 mmol)를 이용하여 표제 화합물을 합성하였다. 예비 HPLC (물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 용매 구배)로 정제한 후, 0.148 g의 순수 생성물 화합물 66을 분리하였다. LCMS: 405.07 (M+l). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.70 (s, 1H), 9.51 (s, 1H), 7.46 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 8.4, 1.6 Hz, 3H), 6.83 - 6.41 (m, 1H), 5.05 (s, 2H), 2.54 (s, 1H), 1.48 (d, J= 5.4 Hz, 9H).
N'-(2,2-디메틸-1-페닐프로필)-4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카보하이드라지드:
Figure pct00089
일반적인 과정 이후에, DMF (10 mL) 중의 4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카르복실산 (0.500 g, 2.55 mmol), PyBOP (1.34 g, 2.55 mmol), DIEA (0.89 mL, 5.10 mmol)를 함께 혼합하고 이어서 (2,2-디메틸-1-페닐프로필)하이드라지드 히드로클로라이드 (0.548 g)를 첨가하고 1.5시간 동안 40℃에서 혼합물을 교반하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 일반적인 작업 과정 이후에, 미정제 혼합물을 최종적으로 ISCO (물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 용매 구배) 상에서 RediSep C18 컬럼을 이용하여 정제하고 무색 고체로서 표제 화합물 SKC-09-041 (0.400 g, 44% 수율)을 분리하였다. LCMS (M+l) 357.25.
N'-(2,2-디메틸-1-페닐프로필)-N'(3,5-디메틸벤조일)-4-플루오로-1-하이드록시-1,3-디히드로벤조[c][1,2]옥사보롤-5-카보하이드라지드:
Figure pct00090
DCM (5 mL) 중의 상기 합성된 모노B (SKC-09-041, 0.200 g, 0.56 mmol)의 교반된 용액에 35분 동안 아르곤 하에 상온에서 TEA (0.094 mL, 0.67 mmol) 및 3,5-디메틸벤조일 클로라이드 (0.095 g, 0.56 mmol)를 첨가하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 작은 피크 및 미반응된 출발 물질과 함께 몇몇의 피크를 보였다. 회전 증발 농축기 상에서 용매를 제거한 후 미정제 혼합물을 RediSep 컬럼 (C18, 13 g, 물 중의 0.1% 포름산/아세토니트릴 구배)을 이용하여 정제하고 화합물 89 (0.070 g, 25% 수율)를 분리하였다. LCMS (M+l) 489.28 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.84 (s, 1H), 9.50 (s, 1H), 7.58 - 7.00 (m, 9H), 6.58 - 6.45 (m, 1H), 5.69 (d, J= 33.9 Hz, 1H), 5.06 (s, 2H), 2.23 (s, 6H), 1.08 (s, 9H).
실시예 2
(R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸헥산-3-일)-2-하이드록시-9-메틸-2,3,4,5-테트라히드로벤조[f][1,2]옥사보레핀-8-카보하이드라지드 (화합물 70)의 합성:
Figure pct00091
단계 1: 메틸 3-하이드록시-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00092
응축기 및 마그네틱 교반기가 구비된 1L 3-구 둥근 바닥 플라스크에 3-H하이드록시 2-메틸 벤조산 (15.2 g, 100 mmol) 및 무수 MeOH (400 ml)을 첨가하였다. 여기에, 7 ml의 진한 H2SO4를 첨가하고 혼합물을 아르곤 하에서 하룻밤 동안 환류시켰다. LCMS는 생성물로의 완전한 전환을 보여주었다. 반응 혼합물을 수집하고 용매를 진공 하에 제거하였다. 미정제 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시켰다. 수성 작업 및 에틸 아세테이트를 사용한 추출 후에, 혼합물을 ISCO 시스템 (120 g 실리카 겔 컬럼, 헥산:에틸 아세테이트 용매 혼합물)을 이용하여 정제하여 84% 분리 수율로 메틸 벤조에이트 유도체 (주요 피크, 헥산 중의 ~12% EtOAc로 용리)를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.57 (dd, J= 7.8, 1.0 Hz, 1H), 7.26 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 7.10 (dd, J= 8.0, 0.9 Hz, 1H), 5.49 (s, 1H), 4.06 (s, 3H), 2.62 (s, 3H).
단계 2: 메틸 3-(알릴옥시)-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00093
아르곤 하 상온에서 1L 둥근 바닥 플라스크 내 아세톤 중의 메틸 3-하이드록시-2-메틸 벤조에이트 (30 g, 180.0 mmol)의 교반된 용액에 포타슘 카보네이트 (42.4 g, 30.6 mmol)를 첨가하였다. 여기에 알릴 브로마이드 (39.3 g, 28.1 ml)를 첨가하고, 반응 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 수성 작업 및 에틸 아세테이트를 사용한 추출 후에, 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (실리카 겔 컬럼, 헥산:EtOAc 용매 혼합물)을 이용하여 정제하여 오일 (89% 수율)로서 생성물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.41 (dd, J = 7.8, 0.9 Hz, 1H), 7.22 - 7.08 (m, 1H), 6.97 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.10-6.03 (m, 1H), 5.43 (dq, J = 17.3, 1.7 Hz, 1H), 5.29 (dq, J = 10.6, 1.5 Hz, 1H), 4.55 (dt, J = 5.0, 1.6 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.47 (s, 3H).
단계 3: 메틸 4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00094
메틸 4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트 (3.5 g, 16.97 mmol)를 마이크로웨이브 바이알 내 1-메틸 피롤리딘-2-온 (4 ml) 중에 용해시키고, 캡으로 닫은 후 220℃, 최대 압력 300 psi, 작동 시간(run time) 5분, 대기 시간(hold time) 50분으로 교반하면서 마이크로파 조사 (CEM 디스커버) 시켰다. 냉각 후, 미정제 혼합물을 곧바로 실리카 겔 컬럼 (220 g) 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (헥산:EtOAc 용매 혼합물, 생성물을 헥산 중 ~12% EtOAc로 용리시킴)을 이용하여 정제하여 밝은 노란색 고체로서 2.1 g (주요 피크, 60% 수율)의 생성물 SKC-03-012를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.04-5.95 (m, 1H), 5.21-5.16 (m, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.44 - 3.43 (d, 2H), 2.47 (s, 3H).
단계 4: 4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조산의 합성
Figure pct00095
상온에서 THF:MeOH (3:1 비율, 80 ml)의 혼합물 중의 메틸 4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트 (6.5 g, 31.6 mmol)의 교반된 용액에 25.3 g (316 mmol)의 50 w/w% NaOH 수용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 50℃에서 교반하였다. LCMS가 완전한 반응임을 보여주었다. 반응 혼합물을 상온으로 냉각시키고 메탄올을 회전 증발 농축기 상에서 제거한 후 에틸 아세테이트로 희석시켰다. 미정제 반응 혼합물을 1N HCl로 산성화시켰다. 일부 생성물이 침전되어 나왔다. 이를 물로 희석시키고 에틸 아세테이트를 이용하여 추출하였다. 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 농축시켰다. 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (80 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~30% EtOAc로 용리시키고, 생성물 분획을 수집하고 농축시켰다. 1H　NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.12 - 5.78 (m, 1H), 5.30 - 5.08 (m, 2H), 3.45 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 3.7 Hz, 3H).
단계 5: 3-아세톡시-4-알릴-2-메틸벤조산의 합성
Figure pct00096
4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조산 (2.0 g, 10.4 mmol)을 500 ml 둥근 바닥 플라스크 내에서 6　ml 물 중에 현탁시키고, 아이스 배쓰 내에서 냉각시킨 후, 교반하였다. NaOH 수용액 (6 ml 물 중 50% NaOH의 4.2 g)을 서서히 첨가하였다. 혼합물을 용액이 맑아질 때까지 수분 동안 교반하였다. 아세트산 무수물을 pH 6이 얻어질 때까지 적가하고, 그 때 반응 혼합물은 오프 화이트 색을 갖는 짙은 슬러리가 되었다. 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 반응 혼합물은 짙은 흰색 슬러리가 되었다. pH를 진한 HCl로 2로 조정하였다. 침전물이 형성되면, 진공 하에 여과하고 건조시켰다. 화합된 건조 생성물을 DCM 중에 용해시키고 40 g 실리카 컬럼 및 헥산/EtOAc 용매 구배를 이용한 ISCO 시스템 상에서 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~30% EtOAc로 용리시킨 후, 분획을 수집하고 진공 하에 건조시켜 (2.4 g, 98%) SKC-01-116을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12.0 (br s, 1H), 7.92 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.03 - 5.67 (m, 1H), 5.26 - 4.89 (m, 2H), 3.31 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.37 (s, 3H).
단계 6: (R)-6-알릴-3-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-2-메틸페닐 아세테이트의 합성
Figure pct00097
건조 튜브로 밀폐된 250 ml 둥근 바닥 플라스크 내 3-아세톡시-4-알릴-2-메틸벤조산 (1.5 g, 6.40 mmol) 용액에 무수 DCM (10　ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 상온에서 교반하였다. 여기에 과량의 티오닐 클로라이드 (2 ml) 및 한 방울의 무수 DMF를 첨가하고, 반응 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 드라이 아이스로 트랩을 냉각시킨 후 과량의 티오닐 클로라이드를 워터 배쓰 상에서 40℃로 진공 하에 제거하였다. 무수 DCM을 첨가하고 진공 하에 제거하여 생성물을 건조시켰다. 이를 다음 단계를 위하여 그 자체로 사용하였다.
상기 산 클로라이드 (1.55 g, 6.15 mmol)를 무수 DCM (6 ml) 중에 용해시키고 아르곤 하에 상온에서 6 ml의 무수 DCM 중의 이전에 합성된 (R)-N-(2,2-디메틸헥산-3-일)-3,5-디메틸벤조하이드라지드 (1.7 g, 6.15 mmol, 95% ee)의 교반된 용액에 첨가하였다. 무수 트리에틸아민 (0.86 ml, 6.15 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 주요 피크를 보였다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고 진공 하에 건조시켰다. 건조 분말을 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (40 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~20% EtOAc로 용리시킨 후, 생성물 분획을 수집하고 농축시켜 SKC-03-019 (2.8 g, 93%)를 얻었다. 이를 다음 탈아세틸화 단계를 위하여 그 자체로 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.38 (d, J = 63.8 Hz, 1H), 7.22 - 6.93 (m, 4H), 6.72 (dd, J = 45.7, 7.8 Hz, 1H), 6.02 - 5.60 (m, 1H), 5.25 - 4.91 (m, 2H), 4.45 (dd, J = 67.4, 10.2 Hz, 1H), 3.19 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.24 (m, 2H), 1.99 (s, 6H), 1.15-1.41 (m, 5H), 1.04 (s, 9H), 0.88 -0.79 (m, 3H).
유사하게, 무수 에테르 (25 ml) 중의 산 클로라이드 (400　mg, 1.58 mmol), N-(tert-부틸)-3,5-디메틸벤조하이드라지드 (291 mg, 1.32 mmol), TEA (0.184 ml, 1.32 mmol)를 이용하여 하기 반응을 수행하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 주요 피크를 보였으며, 미정제 혼합물을 ISCO 시스템 (24 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~35% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하고 진공 하에 건조시켜 SKC-01-120 (260 mg, 45%)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.64 (s, 1H), 7.06 (s, 2H), 7.00 (s, 1H), 6.93 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 5.93 - 5.66 (m, 1H), 5.14 - 4.96 (m, 2H), 3.20 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.29 (d, J = 12.3 Hz, 9H), 1.81 (br s, 3H), 1.58 (s, 9H).
Figure pct00098
단계 7: (R)-4-알릴-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'(2,2-디메틸헥산-3-일)-3-하이드록시-2-메틸벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00099
SKC-03-019 (2.7 g, 5.48 mmol)를 250 ml 둥근 바닥 플라스크 내 MeOH:H2O의 혼합물 (3:1 비율, 40 ml) 중에 용해시켰다. 여기에, 과량의 소듐 바이카보네이트 (6.91　g, 82 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 MeOH을 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 제거하였다. 수성 작업 및 에틸 아세테이트를 사용한 추출 후, 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후, 농축시켰다. 미정제 혼합물을 DCM 중에 용해시키고, 실리카 상에 흡착시킨 후, 흐르는 것이 없을 때까지 건조시켰다. 이를 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (40 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 30% EtOAc로 용리시키고, 분획을 수집한 후 진공 하에 건조시켜 2.2 g (89%)의 SKC-03-023을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.17 (d, J = 65.5 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.10-7.03 (m, 3H), 6.87 - 6.84 (m, 1H), 6.24-6.23 (m, 1H), 5.90-5.83 (m, 1H), 5.20 - 4.87 (m, 2H), 4.52-4.42 (m, 1H), 3.64-3.60 (m, 2H), 2.24 (d, J = 4.7 Hz, 6H), 1.61-1.78 (m, 4H), 1.41 (br s, 3H), 1.03 (d, J = 7.2 Hz, 9H), 0.85 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
유사하게, MeOH:H2O의 혼합물 (3:1 비율, 12 ml) 중의 SKC-01-120 (710 mg, 1.63 mmol) 및 소듐 바이카보네이트 (1.37 g, 16.26 mmol)를 이용하여 하기 반응을 수행하고, 혼합물을 하룻밤 동안 45℃에서 교반하였다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후, 미정제 혼합물을 ISCO 시스템 (24 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)를 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~38% EtOAc로 용리시켜 SKC-01-135 (320 mg, 50%)를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3+ DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 6.49 (d, J = 4.7 Hz, 2H), 6.36 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 6.17 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 5.82 - 5.48 (m, 1H), 5.38 - 5.11 (m, 1H), 5.40 - 5.15 (m, 1H), 4.53 - 4.15 (m, 2H), 3.57 - 3.09 (m, 1H), 2.72 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 1.66 (s, 6H), 1.25 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.95 (dd, J = 8.7, 6.9 Hz, 9H).
Figure pct00100
단계 8: (R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸헥산-3-일)-3-하이드록시-2-메틸-4-(3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)프로필 벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00101
오븐 건조된, 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크에 테플론 코팅된 자석 교반바, 및 2개의 고무 격막을 장착시키고 격막 중 하나는 아르곤/진공 매니폴드에 니들(needle)로 연결시켰다. 상기 아르곤 플러시 처리된 둥근 바닥 플라스크에 SKC-01-140 (510 mg, 1.13 mmol), 무수 THF (5 ml) 및 개질된 윌킨손 촉매(Wilkinson's catalyst) (40 mg, 0.057 mmol)를 넣었다. 3회 진공/아르곤 퍼지 사이클 후, 혼합물을 모든 시약이 용해될 때까지 (<2분) 상온에서 교반하였다. 상기 교반된 맑은 반응 혼합물에 시린지를 통해 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란 (Bpin-H) (0.494 ml, 3.40 mmol)을 첨가하고, 이어서 추가로 아르곤/진공/아르곤 퍼지 처리하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. 반응 혼합물의 색이 밝은 노란색으로부터 어두운 갈색 용액으로 변화하였다. 하룻밤 동안 교반 후, LCMS가 생성물로의 완전한 전환을 보여주었다. 수 방울의 물 (<1ml) 및 MeOH (5 ml)을 조심스럽게 첨가하여 반응 혼합물을 퀀칭시키고 용매를 회전 증발 농축기 상에서 진공 하에 제거하였다. 건조 미정제 생성물을 DCM 중에 용해시키고 실리카 상에 흡착시킨 후, 진공 하에 건조시켰다. 흐르는 것이 없게 되면, 빈 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물 분획을 수집 (10% EtoAc/헥산에서) 하고 진공 하에 건조시켰다 (630 mg, 96% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.16 (d, J = 64.4 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.83 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.42 - 6.16 (m, 1H), 4.62 - 4.24 (m, 1H), 2.25 (d, J = 4.5 Hz, 5H), 2.00 (s, 6H), 1.60 (s, 2H), 1.55 - 1.38 (m, 4H), 1.17 (s, 9H), 1.08 (s, 9H), 1.05 - 0.99 (m, 3H), 0.88 - 0.78 (m, 2H).
상기 기술된 동일한 과정을 이용하여, 하기 반응을 수행하였다.
Figure pct00102
오븐 건조된, 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크에 테플론 코팅된 자석 교반바, 및 2개의 고무 격막을 장착시키고 격막 중 하나는 아르곤/진공 매니폴드에 니들(needle)로 연결시켰다. 상기 아르곤 플러시 처리된 둥근 바닥 플라스크에 4-알릴-3-하이드록시-DAH (320 mg, 0.811 mmol), 개질된 윌킨손 촉매 (28 mg, 0.041 mmol) 및 무수 THF (5 ml)를 넣었다. 3회 진공/아르곤 퍼지 사이클 후, 혼합물을 모든 시약이 용해될 때까지 (< 2분) 상온에서 교반하였다. 상기 교반된 맑은 반응 혼합물에 시린지를 통해 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란 (Bpin-H) (0.354 ml, 2.43 mmol)을 첨가하고, 이어서 추가로 아르곤/진공/아르곤 퍼지 처리하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. 하룻밤 동안 교반 후, LCMS가 생성물로의 완전한 전환을 보여주었다. 수 방울의 물 (<1ml) 및 MeOH (5 ml)을 조심스럽게 첨가하여 반응 혼합물을 퀀칭시키고 용매를 회전 증발 농축기 상에서 진공 하에 제거하였다. 건조 미정제 생성물을 DCM 중에 용해시키고 실리카 상에 흡착시킨 후, 진공 하에 건조시켰다. 흐르는 것이 없게 되면, 빈 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~30% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하고 진공 하에 건조시켰다 (310 mg, 73% 수율). 상기 실험을 반복하였다. (SKC-01-128, 63% 수율 및 SKC-01-134, 73% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.34 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.13 - 6.96 (m, 3H), 6.80 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 2.26 (s, 6H), 1.74 (s, 3H), 1.51 - 1.47 (m, 11H), 1.17 (s, 12H), 1.12 - 1.00 (m, 2H), 0.65 (t, J = 7.9 Hz, 2H).
단계 9: 화합물 70의 합성:
Figure pct00103
상기 Bpin-DAH (630 mg, 1.09 mmol)를 THF:물 혼합물 (4:1, 20 ml) 및 소듐 페리오데이트 (1.4 g, 6.53 mmol)와 혼합하고, THF 중의 HCl의 2.0 M 용액 (1.09 ml, 2.18 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS는 하나의 주요 피크를 보였다. 용매를 회전 증발 농축기 상에서 제거하고, 잔류물을 EtOAc로 희석시킨 후 추출하였다. 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축시켰다. 미정제 생성물을 중성 알루미나 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (8 g 중성 알루미나 컬럼, DCM/MeOH 용매 혼합물)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 DCM 중 ~5% MeOH로 용리시키고 수집한 후 건조시켰다. DMSO-d6에서의 1H NMR 스펙트럼은 적어도 3개의 생성물의 혼합물을 보여주었다. D2O를 첨가하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6 + D2O) δ 7.23 - 7.00 (m, 3H), 6.98 - 6.79 (m, 1H), 6.55 - 6.17 (m, 1H), 4.72 - 4.17 (m, 1H), 2.30 (s, 6H), 1.91 - 1.69 (m, 2H), 1.72 - 1.31 (m, 9H), 1.08 (s, 9H), 0.94 - 0.83 (m, 3H), 0.67 (t, J = 7.8 Hz, 2H).
유사한 방식으로, 화합물 69를 하기와 같이 제조하였다:
Figure pct00104
상기 Bpin-DAH (75 mg, 0.11 mmol)를 THF:H2O 혼합물 (4:1, 10 ml) 및 소듐 페리오데이트 (184 mg, 0.861 mmol)와 혼합하고, THF 중의 HCl의 2.0 M 용액 (0.144 ml, 0.287 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS는 단일 피크를 보였다. 용매를 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 제거하고, 잔류물을 EtOAc로 희석시키고 추출하였다. 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축시켰다. 미정제 생성물을 중성 알루미나 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (8 g 중성 알루미나 컬럼, DCM/MeOH 용매 혼합물)을 이용하여 정제하였다. DCM 중 ~5% MeOH로 용리시킨 단일 생성물을 수집하고 건조시켰다. 생성물이 CDCl3 중에 가용성이 아니어서, 이를 1H NMR 분석을 위하여 DMSO-d6 중에 용해시켰다. DMSO-d6에서의 1H NMR 스펙트럼은 적어도 3개의 생성물의 혼합물을 보여주었다. 수 방울의 D2O를 첨가하여 임의의 교환가능한 프로톤을 중수소화하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6 + D2O) δ 7.01 (s, 3H), 6.87 - 6.72 (m, 1H), 6.13 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 2.47 - 2.37 (m, 2H), 2.22 (s, 6H), 1.72 (s, 3H), 1.47 (d, J = 3.5 Hz, 11H), 0.58 (t, J = 7.9 Hz, 2H).
실시예 3
(R)-(3-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-2-메톡시-3-메틸페닐)프로필)보론산 (화합물 27)의 합성:
Figure pct00105
단계 1: (R)-4-알릴-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'(2,2-디메틸헥산-3-일)-3-메톡시-2-메틸벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00106
아르곤 하 상온에서, 환류 응축기가 장착된 1-구 100 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 아세톤 (5 ml) 중의 SKC-03-023 (500 mg, 1.11 mmol) 용액에 무수 K2CO3 (169 mg, 1.22 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 50℃에서 교반하였다. 여기에, MeI (0.104 ml, 1.66 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS는 이것이 완전히 반응한 것을 보여주었다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석시키고 여과하여 K2CO3를 제거하였다. 여과액을 진공 하에 건조시켰다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고, 건조시켜 흐르는 것이 없게 만든 후, 카트리지 상에 로딩하고, ISCO 시스템 (24 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)를 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~15% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하고 농축시켜 메틸화된 생성물 SKC-03-036 (270 mg, 52%)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.16 - 6.83 (m, 4H), 6.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.92 (m, 1H), 5.08 (m, 2H), 4.66 (t, J = 25.6 Hz, 1H), 3.663 (s, 3H), 3.38 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 2.27 (s, 6H), 1.85-1.76 (m, 4H), 1.54 - 1.34 (m, 3H), 1.11 (d, J = 19.7 Hz, 9H), 0.94-0.86 (m, 3H).
단계 2: (R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸헥산-3-일)-3-메톡시-2-메틸-4-(3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)프로필 벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00107
오븐 건조된, 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크에 테플론 코팅된 자석 교반바, 및 2개의 고무 격막을 장착시키고 격막 중 하나는 아르곤/진공 매니폴드에 니들(needle)로 연결시켰다. 상기 아르곤 플러시 처리된 둥근 바닥 플라스크에 무수 THF (2 ml) 중의 4-알릴-3-하이드록시-DAH (SKC-03-036, 270 mg, 0.58 mmol) 및 개질된 윌킨손 촉매 (20.08 mg, 0.029 mmol)를 넣고, 3회 진공/아르곤 퍼지 사이클을 수행하였다. 혼합물을 모든 시약이 용해될 때까지 (< 2분) 상온에서 교반하였다. 상기 교반된 맑은 반응 혼합물에 시린지를 통해 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란 (Bpin-H) (0.254 ml, 1.74 mmol)을 첨가하고, 추가로 아르곤/진공/아르곤 퍼지를 수행한 후, 반응 혼합물을 5시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 혼합물의 색이 밝은 노란색으로부터 어두운 갈색으로 변하였다. LCMS는 반응이 5시간 내에 완료된 것을 보여주었으나 이를 하룻밤 동안 교반하도록 두었다. 수 방울의 물을 서서히 첨가하였다. 비등이 중지되면, MeOH을 첨가하고 반응 혼합물을 농축시켰다. 미정제 혼합물을 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 20% EtOAc/헥산으로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하고 진공 하에 건조시켜 230 mg (67%)의 화합물　29를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.08 - 6.91 (m, 3H), 6.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.53-4.28 (m, 1H), 3.55 (d, J = 4.2 Hz, 3H), 2.25 (d, J = 4.5 Hz, 6H), 1.79-1.74 (m, 2H), 1.66 )s. 3H), 1.7 - 1.39 (m, 6H), 1.17 (s, 12H), 1.03 (d, J = 5.8 Hz, 9H), 0.93 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 0.85 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 0.69 (t, J = 7.6 Hz, 2H).
단계 3: (R)-(3-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-2-메톡시-3-메틸페닐)프로필)보론산 (화합물 27)의 합성:
Figure pct00108
THF/물 혼합물 (4:1 비율, 5 ml) 중의 화합물　29 (230 mg, 0.388 mmol) 용액에 소듐 페리오데이트 (498 mg, 2.33 mmol)를 첨가하고 그 다음 에테르 중 2M HCl (0.388 ml, 0.776 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수시간 동안 상온에서 교반하고, LCMS를 체크한 후, 반응물을 하룻밤 동안 계속하여 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하여 고체를 제거하고, DCM로 세척한 후, 진공 하에 건조시켰다. 미정제 반응 혼합물을 중성 알루미나 상에 흡착시키고 건조시켰다. 흐르는 것이 없게 되면, ISCO 카트리지 상에 로딩하고 정제하였다 (24 g 중성 알루미나 컬럼, MeOH-DCM 용매 혼합물). 생성물을 DCM 중 2% MeOH로 용리시켜 130 mg의 화합물 27 (66%)을 > 95% ee로 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.43 - 9.78 (m, 1H), 8.35 - 8.03 (m, 1H), 7.18 - 6.89 (m, 4H), 6.66 - 6.38 (m, 1H), 4.67 - 4.36 (m, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 3H), 3.30 (s, 3H), 3.18 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 2.64 - 2.51 (m, 2H), 2.25 (d, J = 4.3 Hz, 6H), 1.88 - 1.16 (m, 8H), 1.03 (d, J = 5.9 Hz, 9H), 0.89 -0.80 (m, 3H).
실시예 4
(R)-(3-(2-디플루오로메톡시)-4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-3-메틸페닐)프로필)보론산 (화합물　28)의 합성
Figure pct00109
단계 1: (R)-4-알릴-3-(디플루오로메톡시)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸헥산-3-일)-2-메틸벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00110
3-하이드록시-4-알릴 DAH (2.8 g, 6.21 mmol)를 환류 응축기가 장착된 둥근 바닥 플라스크 내 DMF/물 혼합물 (6:1 비율, 11.6 ml) 중에 용해시켰다. 여기에, 세슘 카보네이트 (4.05 g, 12.43 mmol) 및 디플루오로아세테이트 소듐 염 (1.42 g, 9.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 30분 동안 130℃ (응축기는 대기에 개방됨)에서 교반하였다. LCMS는 67%의 생성물 및 33%의 출발 물질의 전환을 보여주었다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후, 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (24 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~18% EtOAc로 용리시키고 출발 물질을 헥산 중 25% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하고 건조시켜 무색 고체로서 1.13 g의 순수 생성물 (반응된 SM 기초 64% 수율)을 얻었다. 1.2 g의 출발 물질을 회수하였다. 생성물 구조는 LCMS 데이터에 기초하여 정하였다.
단계 2: (R)-3-(디플루오로메톡시)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸헥산-3-일)-2-메틸-4-(3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일) 프로필벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00111
아르곤 하에 상온에서 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크 내 무수 THF (6 ml) 중의 상기 합성된 4-알릴-3-(디플루오로메톡시)-DAH (600 mg, 1.2 mmol)의 용액에 촉매 (41.4 mg, 0.06 mmol)를 첨가하였다. 3-사이클의 진공/아르곤 퍼징 후, Bpin-H (0.523 ml, 3.60 mmol)를 시린지를 통해 첨가하고 추가로 진공/아르곤의 2회 퍼지 사이클을 수행하였다. 반응 혼합물을 아르곤 하에 환류시키면서 4시간 동안 교반하였다. 20분 이내에, 반응 혼합물의 색이 밝은 갈색으로 변하였다. 2시간 후 LCMS는 생성물로의 ~46% 전환을 보여주었다. 온도를 76℃로 낮추고 반응 혼합물을 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS는 미반응된 출발 물질 및 예측된 생성물과 함께 부가적인 2개의 더 작은 극성 피크를 보였다. 반응 후, 2 ml의 MeOH 및 수 방울의 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 용매를 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 제거한 후, 미정제 혼합물을 DCM 중에 용해시키고 실리카 상에 흡착시켰다. 건조시키고 흐르는 것이 없게 되면, 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. ISCO 컬럼 이후 660 mg의 혼합물 (헥산 중 ~15% EtOAc로 용리시킴, SM + 생성물, 36:62 비율)을 수집하고 다음 단계를 위하여 그 자체로 사용하였다.
단계 3: (R)-(3-(2-디플루오로메톡시)-4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-3-메틸페닐)프로필)보론산 (화합물　28)의 합성:
Figure pct00112
상기 혼합물 (660 mg)을 THF:물의 혼합물 (4:1, 30 ml) 및 소듐 페리오데이트 (1.35 g, 6.30 mmol) 중에 용해시키고, THF 중의 2.0 M HCl (1.05 ml, 2.10 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 40℃에서 교반하였다. LCMS는 예측된 생성물에 대한 주요 피크를 보였다. 반응물을 추가로 30분 동안 40℃에서 계속하여 교반하고 하룻밤 동안 상온에 두었다. 수성 작업 및 에틸 아세테이트를 사용한 추출 후, 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 뒤, 여과하고, 농축시켰다. 미정제 혼합물을 예비적 HPLC를 이용하여 정제하여 LCMS 데이터 기초의 화합물 28을 얻었다. (> 95% ee).
실시예 5
N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-6-메틸-3,4-디히드로-1H-벤조[c][1,5,2]디옥사보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 75)의 합성:
Figure pct00113
단계 1: 메틸 3-하이드록시-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00114
실시예 1에 기술된 바와 같은 실험 과정
단계 2: 메틸 4-브로모-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트의 합성:
Figure pct00115
500 ml 3-구 둥근 바닥 플라스크에 2개의 적하 깔대기를 장착시켰다. 여기에, CH2Cl2 (140 ml) 중의 tert-부틸 아민 (4.4 g, 60.2 mmol) 용액을 첨가하고 플라스크를 -78℃로 냉각시켰다. CH2Cl2 (60 ml) 중의 브롬 (9.6 g, 60.2 mmol) 용액을 적하 깔대기로 30분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 추가로 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. CH2Cl2 (25 ml) 중의 메틸 3-하이드록시-2-메틸 벤조에이트 (10.0 g, 60.2 mmol) 용액을 1시간 동안 두번째 적하 깔대기로 첨가하였다. (US 2005110979). 반응 혼합물을 상온으로 승온시킨 후 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS가 3개의 피크를 보였다. 수성 작업을 하고 DCM으로 추출한 후 ISCO 시스템 (2 X 80 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 용매 혼합물)을 이용하여 플래시 컬럼 크로마토그래피를 하여 생성물을 얻었다 (1번째 피크, 분획 4-5, 3.3 g, 22% 수율). 부생성물을 분리하고 디브로모- 및 5-브로모 유도체로서 간주하였다. 1H NMR (CDCl3): 7.29-7.21 (dd, 2H), 5.64 (s, 1H), 3.81(s, 3H), 2.45(s, 3H).
단계 2: 메틸 4-브로모-2-메틸-3-2-((테트라히드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조에이트의 합성:
Figure pct00116
아르곤 하의 무수 DMF (20 ml) 중의 메틸 4-브로모-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트 (1.0g, 4.08 mmol) 용액에 무수 K2C03 (1.12 g, 8.16 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 상기 교반된 혼합물에 2-(2-브로모에톡시) 테트라히드로-2H-피란 (1.28g, 6.12 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 60℃로 가열하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 가열을 멈추고 상온에서 하룻밤 동안 교반을 계속하였다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후에, 유기 분획을 무수 MgS04 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축시켰다. 조 생성물을 ISCO 시스템 (40 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 사용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중의 ~10% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하고 농축시켜 1.48 g (97% 수율)의 SKC-02-034를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.53 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.46 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 4.78 (t, J= 3.5 Hz, 1H), 4.22 - 4.03 (m, 3H), 4.07 - 3.76 (m, 5H), 3.60-3.52 (m, 1H), 2.61 (s, 3H), 1.98 - 1.38 (m, 6H).
단계 3: 4-브로모-2-메틸-3-2((테트라히드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조산의 합성:
Figure pct00117
2 ml의 MeOH 중의 상기 메틸 에스테르 (330 mg, 0.884 mmol)에 KOH 수용액 (10 ml 물 중의 1.0 g의 KOH)을 첨가하고, 반응물을 6시간 동안 상온에서 교반하였다. LCMS는 ~5% 생성물 형성을 나타내었다. 반응 혼합물에 3 ml의 MeOH을 첨가하고, 60℃로 가열하였다. LCMS는 단일 피크를 보였다. 포화 NaHCO3를 pH 9까지 첨가하였다. 생성물을 EtOAc 중에 추출하기 위해 시도하였으나, 이는 수성 분획에 머물렀다. 반응 혼합물을 아이스 배쓰 내에서 냉각시키고 1N HCl을 서서히 첨가하여 pH 4로 만들었다. 생성물을 EtOAc를 이용하여 추출하였으며, 분획 둘 모두의 LCMS가 생성물의 거의 동일한 양을 보여주었다. 수성 분획을 pH 0-1로 다시 산성화시켰으며, LCMS는 주요 피크 이외에 부가적인 피크 (소수)를 보였다. 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후, 농축시켰다. 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (12 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 25% EtOAc로 용리시켜 220 mg (70% 수율)의 생성물을 얻었다.
실험을 30 ml의 MeOH 및 50 ml의 10% KOH 수용액 중에서 2.2 g 스케일로 반복하였다. 반응물을 55℃에서 6시간 내에 완료하였다. 포화된 NaHCO3를 첨가하고 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. 혼합물을 아이스 배쓰 내에서 냉각시키고 1N HCl을 서서히 첨가하여 pH 3-4로 만들었다. EtOAc를 이용하여 추출한 다음 수성 분획을 1N HCl로 다시 pH 1-2로 산성화하였다. 2번째 회 추출하였다. 화합된 유기 분획을 농축시키고 ISCO 시스템 (40 g 실리카 gold 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 주요 피크를 헥산 중 35% EtOAc로 용리시켜 SKC-02-042를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.77 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 4.26 - 4.02 (m, 3H), 3.91-3.80 (m, 2H), 3.69 - 3.40 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.01 - 1.39 (m, 6H).
단계 4: 퍼플루오로페닐-4-브로모-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조에이트의 합성
Figure pct00118
상기 산 (SKC-02-042, 770 mg, 2.14 mmol)을 아르곤 하에 200 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 에틸 아세테이트 (9 ml) 중에 용해시키고 상온에서 교반하였다. 여기에 펜타플루오로페놀 (434 mg, 2.36 mmol) 및 DCM 중의 1M DCC (2.36 ml, 2.36mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. 5 ml의 물을 추가 10분 동안 교반하면서 첨가하였다. 침전물을 여과하였다. 여과액을 EtOAc 및 물로 희석시키고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후 여과하고 농축시켰다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~8% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하고 건조시켜 SKC-02-044 (1.1 g, 98% 수율)를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.74 (t, J = 11.3 Hz, 1H), 4.84 (t, J = 3.3 Hz, 1H), 4.26-4.10 (m, 3H), 4.06-3.87 (m, 2H), 3.72-3.55 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.03-1.70 (m, 6H).
단계 5: 4-브로모-N'-(tert-부틸)-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00119
EtOAc (4 ml)를 상온에서 200 ml 둥근 바닥 플라스크 내 K2CO3 수용액 (25 중량%, 3.4 ml 물 중 600 mg K2CO3)의 교반된 용액에 첨가하였다. 여기에 tert-부틸 하이드라진 하이드로클로라이드 (267 mg, 2.14 mmol)를 첨가하고 이어서 EtOAc (3 ml) 중에 용해된 Pf 에스테르 유도체 (750 mg, 1.43 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS를 체크하기 위하여, 소량의 샘플을 약한 산성의 버퍼 용액 (pH 6.5 알드리치 입수)과 혼합하여 임의의 미반응된 유리 하이드라진을 퀀칭시켰다. 미정제 혼합물을 버퍼 용액 (pH 6.5)으로 희석시키고 수분 동안 교반하였다. LCMS는 2개의 피크를 보였으며, 주요 피크는 예측된 생성물 질량을 가졌다. 일반적인 수성 작업 및 에틸 아세테이트를 사용한 추출 후, 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축시켰다. 미정제 혼합물을 DCM 중에 재용해시키고, 실리카 상에 흡착시킨 후 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~45% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하여 490 mg, 80% 수율의 하이드라지드 생성물 SKC-02-050을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.96 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.72 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.15 - 4.03 (m, 3H), 3.97 - 3.73 (m, 2H), 3.51-3.49 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.91 - 1.44 (m, 6H), 1.13 (s, 9H).
단계 6: 4-브로모-N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00120
100 ml 둥근 바닥 플라스크 내 DCM (2 ml) 중의 SKC-02-045 (500 mg, 1.16 mmol)의 교반된 용액에 3,5-디메틸 벤조일 클로라이드 (196 mg, 1.16 mmol)를 첨가하였다. 용액이 맑아졌다. 여기에, TEA (0.162 ml, 1.16 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 아르곤 하에 교반하였다. LCMS는 2개의 피크를 보였으며, 주요 피크는 예측된 생성물 질량을 보였다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~40% EtOAc로 용리시켰다. 생성물 분획을 수집하여 560 mg (86% 수율)의 고체 생성물 SKC-02-047을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.55 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 4.2 Hz, 3H), 6.42 (dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1H), 4.65 (t, J = 3.1 Hz, 1H), 4.14 - 3.58 (m, 5H), 3.55 - 3.37 (m, 1H), 2.24 (s, 6H), 1.79 (s, 3H), 1.77 - 1.37 (m, 15H).
단계 7: N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00121
아르곤 하에 상온에서 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크 내 무수 1,4-디옥산 (2 ml) 중의 상기 합성된 4-브로모-DAH (200 mg, 0.36　mmol)의 교반된 용액에 팔라듐 (II) 아세테이트 (4.0mg, 0.018 mmol), 포스핀 리간드 (25.0 mg, 0.071 mmol) 및 트리에틸아민 (0.15 ml, 1.069 mmol)을 첨가하였다. 3-사이클의 진공/아르곤 퍼징 후, Bpin-H (0.16 ml, 1.069 mmol)를 시린지를 통해 첨가하고 이어서 추가로 진공/아르곤의 2회 퍼징 사이클을 수행하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 상온에서 교반한 다음 40℃로 가열하고 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 생성물 피크를 보였다. 반응 후, 2 ml의 MeOH 및 수 방울의 물을 반응 혼합물에 첨가하고 용매를 회전 증발 농축기 상에서 제거하였다. 미정제 혼합물을 DCM 중에 재용해시키고 실리카 상에 흡착시켰다. 건조시키고 흐르는 것이 없게 되면, 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하여 50 mg의 SKC-02-048을 얻었다.
단계 8: N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-6-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[c][1,5,2]디옥사보레핀-7-카보하이드라지드의 합성
Figure pct00122
50 mg의 SKC-02-048을 하룻밤 동안 40℃에서 0.1% 포름산을 함유하는 2 ml의 물/아세토니트릴의 1:1 혼합물 중에서 교반하고, LCMS로 체크하였다. 반응이 완료된 후, 용매를 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 제거하고 미정제 생성물을 예비적 HPLC로 정제한 후 동결건조하여 순수 건조 분말로서 17 mg의 화합물　75를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.49 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.57 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.04 (s, 3H), 6.19 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.41 - 4.18 (m, 2H), 4.16 - 3.96 (m, 2H), 2.25 (s, 6H), 1.70 (s, 3H), 1.49 (s, 9H).
실시예 6
(R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-1-하이드록시-6-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[c][1,5,2]디옥사보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 79)의 합성
Figure pct00123
단계 1: 4-브로모-N'-((R)-2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00124
EtOAc (6 ml)를 상온에서 둥근 바닥 플라스크 내 25 중량% K2CO3 수용액 (3.2 ml 물 중 800 mg K2CO3)의 교반된 용액에 첨가하였다. 여기에 tert-부틸 하이드라진을 첨가하고 이어서 EtOAc (4 ml) 중에 용해된 Pf 에스테르 화합물 (1.0 g, 1.904 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS는 단일 피크를 보였다. 미정제 혼합물을 MeOH로 희석시키고, 농축시킨 후, DCM 중에 용해시키고, 실리카 상에 흡착시킨 뒤, ISCO 시스템 (40 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~35% EtOAc로 용리시켜 610 mg (68%)의 생성물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.66 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.70 (t, J = 3.3 Hz, 1H), 4.06 - 4.01 (m, 2H), 3.97 - 3.89 (m, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 2H), 3.51 - 3.40 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 1.82 - 1.35 (m, 8H), 1.04 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.93 (s, 9H).
단계 2: 4-브로모-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-((R)-2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00125
2 ml DCM 중의 SKC-03-034 (310 mg, 0.658 mmol)의 용액에 산 클로라이드 (111 mg, 0.658 mmol)를 첨가하였다. 용액이 맑아졌다. TEA (66.5 mg, 0.092 ml)를 적가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 상온에서 아르곤 하에 교반하였다. 반응 혼합물이 무색의 짙은 슬러리로 되었으며, 이를 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS는 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 반응 혼합물을 실리카 겔 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~20% EtOAc로 용리시켜 380 mg (96 %)의 SKC-03-037을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.33 (d, J = 57.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.06 - 6.97 (m, 2H), 6.62 - 6.41 (m, 1H), 4.70 - 4.60 (m, 1H), 4.33 (dd, J = 82.0, 10.4 Hz, 1H), 3.99 - 3.82 (m, 3H), 3.82 - 3.71 (m, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 1H), 3.52 - 3.34 (m, 1H), 2.24 (d, J = 4.9 Hz, 6H), 1.83 -1.28 (m, 11H), 1.12 - 0.99 (m, 12H).
단계 3: (R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-1-하이드록시-6-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[c][1,5,2]디옥사보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 79)의 합성
Figure pct00126
아르곤 하에 상온에서 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크 내 무수 1,4-디옥산 (3 ml) 중의 SKC-03-037 (380 mg, 0.630 mmol)의 용액에 팔라듐 (II)아세테이트 (7.07 mg, 0.031 mmol), 포스핀 리간드 (44.1 mg, 0.126 mmol) 및 트리에틸아민 ((0.263 ml, 1.889 mmol)을 첨가하였다. 3-사이클의 진공/아르곤 퍼징 후, Bpin-H (0.273 ml, 1.889 mmol)를 시린지를 통해 첨가하고 이어서 추가로 2회 퍼지 사이클의 진공/아르곤 처리하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 상온에서 교반한 다음 40℃로 승온시킨 후 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 생성물 피크 및 프로톤화된 생성물 (SKC-03-040-1)에 해당하는 더욱 극성인 피크를 보였다. 반응 후, 2 ml의 MeOH 및 수 방울의 물을 반응 혼합물에 첨가하고 진공 하에 농축시켰다. 미정제 혼합물을 DCM 중에 재용해시키고 실리카 상에 흡착시켰다. 이를 건조시켜 흐르는 것이 없게 되면, 이를 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 주요 분획 (화합물 70)을 헥산 중 20% EtOAc로 용리시켰다. 두 번째 피크 (SKC-03-040-1)를 헥산 중 25% EtOAc로 용리시켰다. 2개의 생성물 피크를 분리하였다. SKC-03-040의 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.33 (d, J = 58.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 25.0 Hz, 3H), 6.70 - 6.23 (m, 1H), 4.78 - 4.60 (m, 1H), 4.43 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.99 - 3.80 (m, 3H), 3.84 - 3.71 (m, 1H), 3.68 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.50 - 3.39 (m, 1H), 2.24 (d, J = 4.9 Hz, 6H), 1.80 - 1.34 (m, 8H), 1.09 -0.92 (m, 24H).
얻어진 Bpin화된(Bpinlated) 생성물 (SKC-03-040)을 하룻밤 동안 40℃에서 0.1% 포름산을 함유하는 2 ml의 물/아세토니트릴의 1:1 혼합물과 함께 교반하였다. LCMS는 이것이 완전히 반응됨을 보여주었다. 용매를 제거하고 잔류물을 예비적 HPLC로 정제한 후 동결건조하여 건조 분말로서 화합물 79 (83 mg; >95%　ee)을 얻었다.
첫번째 단계에서 얻어진 프로톤화된 생성물도 또한 하룻밤 동안 40℃에서 0.1% 포름산을 함유하는 2 ml의 물/아세토니트릴의 1:1 혼합물과 함께 교반하여 건조 분말로서 41 mg의 SKC-03-040-2 (>95% ee)를 얻었다.
상기 기술된 과정을 사용하여, 화합물 82를 SKC-06-005로부터 제조하였다:
Figure pct00127
화합물 82 LCMS [MH+] = 443.
실시예 7
(R)-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸펜탄-3-일) 하이드라진카르보닐)-2-(2-메톡시에톡시)-3-메틸페닐)보론산 (화합물 26)의 합성:
Figure pct00128
단계 1: 메틸 4-브로모-3-(2-메톡시에톡시)-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00129
2-메틸-3-하이드록시l-4-브로모 메틸 에스테르 (2.0 g, 8.16 mmol)를 환류 응축기가 장착된 100 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 DMF (20 ml) 중에 용해시키고, 무수 포타슘 카보네이트 (2.26 g, 16.32 mmol)를 이에 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 아르곤 하에 상온에서 교반하였다. 여기에, 1-브로모-2-메톡시에탄 (1.70 g, 12.24 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 90℃로 가열하고 아르곤 하에 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS는 단일 피크를 보였다. 반응 혼합물을 냉각시켰다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후, 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 농축시켰다. 이를 추가적인 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 2: 4-브로모-3-(2-메톡시에톡시)-2-메틸벤조산의 합성
Figure pct00130
상기 메틸 에스테르 SKC-04-011 (3.1 g의 미정제 중량, 그러나 2.0 g의 순수 화합물로 계산됨)의 MeOH (25 ml) 용액에 50 ml의 10% KOH 수용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 50℃에서 교반하였다. LCMS가 반응이 단지 75% 완료된 것을 보여주었다. 반응물을 추가로 7시간 동안 가열한 다음, 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS가 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 진공 하에 모든 MeOH를 제거하였다. 수성 반응 혼합물을 아이스 배쓰 상에서 냉각시키고 1N HCl을 pH 4-5까지 서서히 첨가하였다. 흰색 생성물이 침전되어 나왔다. 이를 여과하고 하룻밤 동안 40℃에서 진공 하에 건조시켜 무색 분말로서 1.34　g (70%)의 산 SKC-04-012를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.15 (br s, 3H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.09 - 3.90 (m, 2H), 3.73 - 3.63 (m, 2H), 3.33 (s, 3H), 2.47 (s, 3H).
단계 3: 퍼플루오로페닐 4-브로모-3-(2-메톡시에톡시)-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00131
4-브로모-3-(2-메톡시에톡시)-2-메틸벤조산 (SKC-04-012, 1.37 g, 4.74 mmol)을 아르곤 하에 250 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 EtOAc (20 ml) 중에 용해시키고 상온에서 교반하였다. 여기에 펜타플루오로페놀 (0.959 g, 5.21 mmol) 및 DCM 중 1M DCC (5.21 ml, 5.21 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. 2 ml의 물을 추가로 10분 동안 교반하면서 첨가하였다. 침전물을 여과해내었다. 여과액을 EtOAc로 희석시키고 추출하였다. 수성 작업 후, 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고 농축시켰다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (24 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물 분획을 헥산 중 5% EtOAc로 용리시켜 무색 고체로서 1.79 g (83% 수율)의 Pf 에스테르 유도체 SKC-04-017을 얻었다.
단계 4: (R)-4-브로모-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3-(2-메톡시에톡시)-2-메틸벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00132
EtOAc (12 ml)를 상온에서 둥근 바닥 플라스크 내 25 중량% K2CO3 수용액 (6.5 ml 물 중 1.63 g K2CO3)의 교반된 용액에 첨가하였다. 여기에 tert-부틸 하이드라진 염 (1.784 g, 5.90 mmol)을 첨가하고 이어서 EtOAc (8 ml) 중에 용해시킨 상기 Pf 에스테르 유도체 (1.79 g, 3.93 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 예측된 생성물 질량을 갖는 주요 피크를 보였다. 미정제 혼합물을 산성 버퍼 용액 (Aldrich, pH 6.5)으로 희석시키고 EtOAc로 추출하였다. 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고 농축시켰다. 미정제 생성물을 DCM 중에 재용해시키고, 실리카 상에 흡착시킨 후, ISCO 시스템 (40 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~30% EtOAc 혼합물로 용리시켜 1.6 g (99%)의 SKC-04-026을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.66 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.84 (dd, J = 6.5, 3.3 Hz, 1H), 4.01 - 3.96 (m, 2H), 3.72 - 3.63 (m, 2H), 3.34 (s, 3H), 2.38 - 2.31 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.60 - 1.49 (m, 1H), 1.34 - 1.21 (m, 1H), 1.03 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.93 (s, 9H).
단계 5: (R)-4-브로모-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3-(2-메톡시에톡시)-2-메틸벤조하이드라지드의 합성
Figure pct00133
무수 DCM (2 ml) 중의 (R)-4-브로모-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3-(2-메톡시에톡시)-2-메틸벤조하이드라지드 (SKC-04-026, 750 mg, 1.869 mmol)의 용액에 3,5-디메틸벤조일 클로라이드 (315 mg, 1.869 mmol) 및 트리에틸아민 (0.260 ml, 1.869 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 아르곤 하에 상온에서 교반하였다. LCMS가 2개의 주요 피크를 보였다. 미정제 혼합물을 DCM 중에 용해시키고 실리카 상에 흡착시킨 후, ISCO 시스템 (40 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물 분획을 헥산 중 30% EtOAc로 용리시켜 SKC-04-028-3을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.57 - 10.08 (m, 1H), 7.48 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.19 - 6.96 (m, 3H), 6.49 (dd, J = 50.2, 8.2 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 82.0, 10.2 Hz, 1H), 3.96 - 3.78 (m, 2H), 3.62 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.31 (s, 3H), 2.25 (s, 6H), 1.78 - 1.29 (m, 5H), 1.12 - 0.92 (m, 12H).
단계 6: (R)-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸펜탄-3-일) 하이드라진카르보닐)-2-(2-메톡시에톡시)-3-메틸페닐)보론산 (화합물　26)의 합성
Figure pct00134
아르곤 하에 상온에서 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크 내 무수 1,4-디옥산 (4 ml) 중의 상기 합성된 4-브로모-DAH (SKC-04-028-3, 400 mg, 0.750 mmol) 용액에 팔라듐 (II) 아세테이트 (8.42 mg, 0.037 mmol), 포스핀 리간드 (52.6 mg, 0.150 mmol) 및 트리에틸아민 (0.314 ml, 2.249 mmol)을 첨가하였다. 3-사이클의 진공/아르곤 퍼징 후, Bpin-H (0.327 ml, 2.249 mmol)를 시린지를 통해 첨가하고 이어서 추가로 진공/아르곤의 2회 퍼지 사이클 처리하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 상온에서 교반한 다음 40℃로 승온시킨 후 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS가 Bpin화된 생성물 피크 및 프로톤화된 생성물에 해당하는 질량을 갖는 더욱 극성인 피크를 보였다. 반응 후, 2ml의 MeOH 및 수 방울의 물을 반응 혼합물에 첨가하였다. 용매를 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 제거하고 미정제 혼합물을 DCM 중에 재용해시킨 후 실리카 상에 흡착시켰다. 건조시키고 흐르는 것이 없게 되면, 이를 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (24 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 2개의 생성물을 함께 용리시켰다. 분획물을 화합하고 예비적 HPLC를 이용하여 정제하였다. SKC-04-032 Pk1가 분리되었다 (31 mg, > 95% ee). HPLC 정제 도중에, Bpin화된 생성물이 보론산 유도체로 서서히 가수분해하였다. 40℃에서 HPLC 용매 혼합물 (물/ACN 혼합물 중 0.1% HCO2H, 2ml) 중에서 하룻밤 동안 교반한 후, 물질을 예비 HPLC로 재정제하여 화합물 26 (9 mg) (> 95%　ee)을 얻었다.
실시예 8
(R)-(3-(1-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-(3-메톡시-2-메틸벤조일) 하이드라진카르보닐)-5-메틸페닐)보론산 (화합물 33)의 합성
Figure pct00135
단계 1: 3-메틸-5-(4,4,5,5,-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조일 클로라이드의 합성:
Figure pct00136
3-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤조산 (700　mg, 2.67 mmol)을 교반 바가 구비된 100 ml 둥근 바닥 플라스크 내에 넣었다. 3.0 ml의 무수 클로로포름을 플라스크에 첨가하고 이어서 2.0 ml의 티오닐 클로라이드 및 1 방울의 무수 DMF를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 35℃에서 교반한 다음 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. MeOH로 소량을 퀀칭시킨 후 샘플의 LCMS는 산이 남지 않았음을 보여주었다. 용매 및 과량의 티오닐 클로라이드를 진공 하에 제거하여 SKC-03-071을 얻었다. SKC-03-071을 추가적인 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 2: (R)-N'-2,2-디메틸펜탄-3-일)-3-메톡시-2-메틸-N'-(3-메틸-5-(4,4,5,5,-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조일)벤조하이드라지드의 합성:
Figure pct00137
상기 산 클로라이드 (SKC-03-071, 403 mg, 1.437 mmol)를 무수 DCM (2 ml) 중에 용해시키고 아르곤 하에 상온에서 3 ml의 무수 DCM 중의 이전에 합성된 (R)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3-메톡시-2-메틸벤조하이드라지드 (400 mg, 1.437 mmol, >95% ee)의 교반된 용액에 첨가하였다. 무수 트리에틸아민 (0.200 ml, 1.437 mmol)을 첨가하고 반응 혼합물을 3시간 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 일부 다른 소수 피크와 함께 예측된 생성물 질량을 갖는 주요 피크를 보였다. 미정제 혼합물을 중성 알루미나 상에 흡착시키고 진공 하에 건조시켰다. 건조 분말을 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (24 g 중성 알루미나 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 헥산 중 ~15% EtOAc에서, 생성물을 가수분해 생성물과 함께 용리시켜 혼합물로서 SKC-03-072 (270 mg)를 얻었다. 이를 다음 가수분해 단계를 위하여 그 자체로 사용하였다.
단계 3: (R)-(3-(1-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-(3-메톡시-2-메틸벤조일)하이드라진카르보닐)-5-메틸페닐)보론산 (화합물 33)의 합성
Figure pct00138
상기 혼합물, SKC-03-072 (270 mg, 0.517 mmol)를 THF:H2O 혼합물 (4:1, 15 ml) 및 소듐 페리오데이트 (221 mg, 1.034 mmol)와 함께 혼합하고, THF 중의 HCl의 2.0 M 용액 (1.55 ml, 3.10 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 보론산의 예측된 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 용매를 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 제거하였다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후, 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축시켰다. 미정제 생성물을 예비 HPLC을 이용하여 정제하여 32 mg (14%)의 화합물 33을 얻었다. 33. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.51 - 9.87 (m, 1H), 7.99 (br s, 1H), 7.64 (dd, J = 20.2, 11.7 Hz, 2H), 7.40 - 7.25 (m, 1H), 7.13 - 7.03 (m, 1H), 6.98 - 6.89 (m, 1H), 6.48 - 6.17 (m, 1H), 4.58 - 4.12 (m, 1H), 3.76 - 3.68 (m, 3H), 2.28 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.49 (d, J = 31.9 Hz, 5H), 1.16 - 0.92 (m, 12H).
상기 기술된 방법을 이용하여, (R)-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-3-플루오로페닐)보론산 (화합물 13)을 SKC-07-018로부터 제조하였다:
Figure pct00139
화합물 13 LCMS [MH+] = 443.
포타슘 (R)-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일-2(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진-1-카르보닐)-3-플루오로페닐)트리플루오로보레이트 (화합물 93)를 하기와 같이 화합물　13로부터 제조하였다:
Figure pct00140
포타슘 하이드로겐 플루오라이드 (1.81 ml, 5.43 mmol, 알드리치로부터의 H2O 중 3.0 M)의 용액을 상온에서 화합물 13 (0.300 g, 0.68 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다 (J. Org. Chem. 77:6384-6393 (2012)). 무색의 맑은 용액이 5분 내에 서서히 침전하기 시작하고 20분 내에 두꺼운 흰색 침전물을 일으켰다. 혼합물을 상온에서 2.5시간 동안 교반한 다음 감압 하에 농축시켜 흰색 고체를 얻었다. 아세톤을 흰색 고체에 첨가하고 여과 깔대기를 통해 여과시켰다. 여과액을 소량의 침전물이 관찰될 때까지 회전 증발 농축기 상에서 감압 하에 농축시켰다. 디에틸 에테르를 결과적인 흰색 고체에 첨가하여 침전을 촉진시켰다. 침전물을 여과하여 수집하고, 에테르로 세척한 후 건조시켜 흰색 보레이트 염 화합물 93 (0.276 g, 81% 수율)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.18 (d, J = 56.9 Hz, 1H), 7.00-6.92 (m, 5H), 6.52 (dd, J = 14.2, 7.1 Hz, 1H), 4.43 (dd, J = 58.4, 8.6 Hz, 1H), 2.24 (s, 6H), 1.79 - 1.34 (m, 4H), 1.02 (d, J = 3.2 Hz, 9H), 0.88 (dt, J = 31.9, 6.9 Hz, 3H).
상기 기술된 방법을 이용하여, (R)-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-2-플루오로페닐)보론산 (화합물 22)을 SKC-07-055A로부터 제조하였다:
Figure pct00141
화합물 22 LCMS [MH+] = 443.
상기 기술된 방법을 이용하여, (4-(2-(tert-부틸)-2-(3,5-디메틸벤조일) 하이드라진카르보닐)-2-플루오로페닐)보론산 (화합물 23)을 SKC-07-055B로부터 제조하였다:
Figure pct00142
상기 기술된 방법을 이용하여, (R)-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸헥산-3-일)하이드라진카르보닐)-3,5-디플루오로페닐)보론산 (화합물 24)를 SKC-07-043A로부터 제조하였다:
Figure pct00143
화합물 24 LCMS [MH+] = 461.
상기 기술된 방법을 이용하여, (4-(2-(tert-부틸)-2-(3,5-디메틸벤조일) 하이드라진카르보닐)-3,5-디플루오로페닐)보론산 (화합물 25)을 SKC-07-043B로부터 제조하였다:
Figure pct00144
실시예 9
합성 중간체의 제조
Figure pct00145
단계 1: 메틸 3-하이드록시-2-메틸-4-(프로프-1-엔-1일)벤조에이트의 합성
Figure pct00146
적하 깔대기가 장착된 둥근 바닥 플라스크 내에 아르곤 하에 상온에서 무수 DMSO (20 ml) 중의 메틸 4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트 (4.12 g, 20 mmol)를 첨가하였다. 1.0 M THF 중의 t-BuOK (5.61 g, 50 mmol)를 교반된 용액에 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 하룻밤 동안 55℃에서 가열하였다. 반응을 LCMS를 이용하여 모니터링하였다. 반응이 완료된 후, 이를 냉각시키고, 1N HCl로 산성화시킨 후 30분 동안 교반하였다. 수성 작업 및 에틸 아세테이트를 사용한 추출을 하여 미정제 혼합물을 얻고 이를 ISCO 시스템 (40 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 용매 구배)을 이용하여 정제하여 4.12 g (77%)의 생성물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.61 (dd, J = 15.9, 1.7 Hz, 1H), 6.37 - 6.13 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 1.96 (dd, J = 6.6, 1.7 Hz, 3H).
단계 2: 메틸 4-포밀-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00147
디옥산/물 (280 ml, 2.5/1 비율) 중의 메틸 3-하이드록시-2-메틸-4-(프로프-1-엔-1일)벤조에이트 (1.66 g, 8.05 mmol) 용액에 소듐 페리오데이트 (3.96 g, 18.51 mmol) 및 tert-부탄올 중의 오스뮴 테트록시드의 2.5 중량% 용액 (3.3 ml, 2.66 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS가 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후, 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (40 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배) 상에서 정제하여 1.2 g (77% 수율)의 알데히드를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.39 (s, 1H), 9.93 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.44 (s, 3H).
단계 3: 메틸 4-포밀-2-메틸-3-(((트리플루오로메틸)설포닐) 옥시)벤조에이트의 합성
Figure pct00148
아르곤 하에 -78℃에서 무수 DCM (22ml) 중의 메틸 4-포밀-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트 (1.1g, 5.66 mmol)의 교반된 용액에 트리플릭 안하이드라이드 (1.6g, 5.66 mmol)를 적가하고 이어서 트리에틸아민 (0.79 ml, 5.66 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 교반하고 상온으로 승온시켰다. 반응 혼합물이 첨가 도중에 무색에서 노란색으로 변한 다음 하룻밤 동안 밝은 갈색으로 변하였다. 하룻밤 동안 교반한 LCMS는 단일 피크를 보였다. 일반적인 수성 작업 및 DCM을 사용한 추출 후, 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고 농축시켰다. 미정제 혼합물을 실리카 겔 상에 흡착시키고 건조시켰다. 이를 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (24 g 실리카 겔 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물 분획을 수집하고 진공 하에 건조시켜 1.58 g (85%의 최종 생성물)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.26 (s, 1H), 7.99 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 2.63 (s, 3H).
단계 4: 메틸 4-(하이드록시메틸)-2-메틸-3-(((트리플루오로메틸) 설포닐)옥시)벤조에이트의 합성
Figure pct00149
아르곤 하에 얼음 온도에서 MeOH (10 ml) 중 상기 화합물 (1.58 g, 4.84 mmol)의 교반된 용액에 소듐보로하이드라이드 (0.183 g, 4.84 mmol)를 첨가하였다. 2시간 후 LCMS는 새로운 주요 피크를 보였다. 물 (~2 ml)을 첨가하여 반응물을 퀀칭시켰다. MeOH을 회전 증발 농축기 상에서 제거하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 농축시킨 뒤, ISCO 시스템 (24 g 실리카 컬럼, 헥산-EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물 분획을 수집하여 970 mg (61%)의 최종 알코올을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.93 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.56 (d, 1H), 4.84 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 2.14 (t, J = 6.2 Hz, 1H).
단계 5: 메틸 2-메틸-4-(((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)메틸)-3-(((트리플루오로메틸)설포닐)옥시)벤조에이트의 합성:
Figure pct00150
둥근 바닥 플라스크 내 무수 DCM (35 ml) 중의 상기 알코올 (970 mg, 2.95 mmol)의 교반된 용액에 3,4-디하이드로-2H- 피란 (2.48 g, 29.5 mmol) 및 피리디늄 p-톨루엔설포네이트 (371 mg, 1.47 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 아르곤 하에 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS가 단일 피크를 보였다. 수성 작업 및 DCM을 사용한 추출 후, 미정제 반응 혼합물을 ISCO 시스템-실리카 겔 컬럼 (24 g, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하여 780 mg (64%)의 최종 생성물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.90 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 4.75 - 4.56 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.89 - 3.82 (m, 1H), 3.60 - 3.48 (m, 1H), 2.59 (s, 3H), 1.93 - 1.50 (m, 6H).
Figure pct00151
단계 1: 2-(트리메틸실릴)에틸 3-아세톡시-2-메틸벤조에이트의 합성:
Figure pct00152
500 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 DCM (100 ml) 중의 상기 벤조산 (15.54 g, 80.00 mmol)의 용액에 10 ml의 티오닐 클로라이드 및 1 방울의 무수 DMF를 첨가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 용매 및 과량의 티오닐 클로라이드를 진공 하에 제거하여 생성물 SKC-01-048을 얻었다. SKC-01-048을 다음 단계에서 추가적인 정제 없이 사용하였다.
건조 튜브가 장착된 500 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 DCM (100 ml) 중의 상기 산 클로라이드 (13.61 g, 64.00 mmol)의 교반된 용액에 실릴 알코올 (11.35g, 96.00 mmol)을 첨가하였다. 상기 혼합물에, 트리에틸아민을 적가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 새로운 주 피크를 보였다. 반응물을 48시간까지 상온에서 교반시켰다. 수성 작업 및 DCM을 사용한 추출 후, 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 뒤, 농축시켰다. 미정제 혼합물을 ISCO 시스템 (120 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 5% EtOAc로 용리시켜 18.84 g (77%)의 SKC-01-049를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.73 - 7.57 (m, 1H), 7.25 - 6.98 (m, 2H), 4.37 - 4.23 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.09 - 1.00 (m, 2H), -0.00 (s, 9H).
단계 2: 2-(트리메틸실릴)에틸 3-하이드록시-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00153
상기 실릴 에스테르 (SKC-01-049, 14.43 g, 49.00 mmol)를 MeOH:물 (1:4, 100 ml) 및 소듐 바이카보네이트 (20.57 g, 245.00 mmol)와 혼합하고 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 단일 피크를 보였다. 메탄올을 제거하고 반응 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 농축시켰다. 미정제 혼합물을 ISCO 시스템 (120 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하여 12.0 (99%)의 SKC-01-053을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (dd, J = 7.8, 1.1 Hz, 1H), 7.26 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 8.0, 0.9 Hz, 1H), 5.47 (s, 1H), 4.61 - 4.53 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 1.38 - 1.18 (m, 2H), 0.25 (s, 9H).
단계 3: 2-(트리메틸실릴)에틸 3-(알릴옥시)-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00154
100 ml 둥근 바닥 플라스크 내 무수 아세톤 (20 ml) 중의 실릴 에스테르 (SKC-01-053, 290 mg, 1.15 mmol)의 교반된 용액에 무수 포타슘 카보네이트 (318 mg, 2.30 mmol)를 첨가하고 이어서 알릴 브로마이드 (0.15 ml, 1.73 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 예측된 생성물 질량을 갖는 단일 피크를 보였다. 용매를 회전 증발 농축기 상에서 제거하고 반응 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 미정제 생성물을 ISCO 시스템 (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~5% EtOAc로 용리시켜 180 mg (54%)의 생성물 SKC-01-055를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.31 (dd, J = 7.8, 0.9 Hz, 1H), 7.08 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.08 - 5.88 (m, 1H), 5.40 - 5.29 (m, 1H), 5.26 - 5.15 (m, 1H), 4.50 - 4.41 (m, 2H), 4.35 - 4.24 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.10 - 0.99 (m, 2H), -0.00 (s, 9H).
단계 4: 2-(트리메틸실릴)에틸 4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트의 합성
Figure pct00155
2-(트리메틸실릴)에틸 3-(알릴옥시)-2-메틸벤조에이트 (500 mg, 1.70 mmol)를 마이크로웨이브 바이알 내 1-메틸 피롤리딘-2-온 (1 ml) 중에 용해시키고, 캡으로 닫은 후, 220℃, 최대 압력 300 psi, 작동 시간 5분, 대기 시간 15분으로 교반하면서 마이크로파 조사 (CEM 디스커버) 시켰다. LCMS가 예측된 생성물 질량을 갖는 주요 피크를 포함하는 3개의 피크를 보였다. 냉각시킨 후, 미정제 혼합물을 실리카 겔 컬럼 (12 g) 상에 곧바로 로딩하고 ISCO 시스템 (헥산:EtOAc 용매 혼합물, 생성물이 헥산 중 ~5% EtOAc로 용리됨)을 이용하여 정제하여 SKC-01-056을 얻었다. 상기 실험을 1-2 g 스케일로 수회 반복하였다. 분리된 생성물의 전체 중량은 3.6 g이었다.
단계 5: 2-(트리메틸실릴)에틸-3-하이드록시-2-메틸-4-(3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)프로필)벤조에이트의 합성
Figure pct00156
오븐 건조된, 100 ml의 2구 둥근 바닥 플라스크에 테플론 코팅된 마그네틱 교반 바, 및 아르곤/진공 매니폴드에 연결된 니들을 구비한 격막으로 2개의 고무 격막을 장착시켰다. 상기 아르곤 플러시 처리된 둥근 바닥 플라스크에 2-(트리메틸실릴)에틸 4-알릴-3-하이드록시-2-메틸벤조에이트 (1.2 g, 4.10 mmol), 개질된 윌킨손 촉매 (129 mg, 0.129 mmol) 및 무수 THF (13 ml)를 충진하였다. 3회 진공/아르곤 퍼지 사이클을 수행하고, 혼합물을 모든 시약이 용해될 때까지(<2 분) 상온에서 교반하였다. 상기 교반된 맑은 반응 혼합물에 시린지를 통해 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란 (Bpin-H) (1.790 ml, 12.31 mmol)을 첨가하고 이어서 추가로 아르곤/진공/아르곤 퍼지를 수행하였다. 하룻밤 동안 교반 후, LCMS가 생성물로의 완전한 전환을 보였다. 반응 혼합물을 몇 방울의 물 (<1 ml) 및 MeOH (5 ml)을 조심스럽게 첨가하여 퀀칭시키고 용매를 회전 증발 농축기 상에서 진공 하에 제거하였다. 건조 미정제 생성물을 DCM 중에 용해시키고, 실리카 상에 흡착시킨 후 진공 하에 건조시켰다. 흐르는 것이 없게 되면, 이를 빈 카트리지 상에 로딩하고 ISCO 시스템 (40 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~5% EtOAc로 용리시켜 SKC-02-014 (1.32 g, 77% 수율)를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.32 (d, 1H), 6.95 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.48 - 4.30 (m, 2H), 2.69 - 2.54 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 1.76 - 1.60 (m, 2H), 1.33 (s, 12H), 1.19 - 1.07 (m, 2H), 1.05 - 0.83 (m, 2H), 0.14 - 0.04 (m, 8H).
단계 6: (3-(2-하이드록시-3-메틸-4-((2-(트리메틸실릴)에톡시)카르보닐) 페닐)프로필)보론산의 합성
Figure pct00157
THF/물 혼합물 (4:1 비율, 90 ml) 중의 SKC-02-014 (1.32 g, 3.14 mmol)의 용액에 소듐 페리오데이트 (4.03 g, 18.84 mmol)를 첨가한 다음 에테르 중 2M HCl (3.14 ml, 6.28 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석시키고 EtOAc로 추출하였다. 미정제 반응 혼합물을 실리카 겔 상에 흡착시키고 건조시켰다. 흐르는 것이 없게 되면, 이를 ISCO 카트리지 (40 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 용매 혼합물) 상에 로딩하였다. 생성물을 헥산 중 ~32% EtOAc로 용리시켜 700 mg (66%)의 SKC-02-016을 얻었다. 가장 우선적인 구조가 1H NMR에 기초하여 폐쇄 형태이다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.50 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.44 - 4.31 (m, 2H), 2.74 - 2.59 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.01 - 1.82 (m, 2H), 1.21 - 1.05 (m, 2H), 1.00 - 0.75 (m, 2H), 0.08 (s, 9H).
단계 7: 2-하이드록시-9-메틸-2,3,4,5-테트라하이드로벤조[f][1,2]옥사보레핀-8-카르복실산의 합성
Figure pct00158
아르곤 하에 얼마간의 5A 분자체를 함유하는 적하 깔대기 및 응축기가 장착된 둥근 바닥 플라스크 내 무수 톨루엔 중에 SKC-02-16 (150 mg, 0.443 mmol)을 용해시켰다. 상기 p-톨루엔에 술폰산 모노 하이드레이트 (56.2 mg, 0.296)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 환류시키고 냉각시켰다. LCMS가 완전한 전환을 보였다. 톨루엔을 진공 하에 제거하고 미정제 생성물을 실리카 겔 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (4 g 실리카 컬럼 및 헥산/EtOAc 용매 구배 이용) 상에서 정제하였다. 생성물을 헥산 중 30% EtOAc로 용리시켜 생성물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, 아세톤) δ 7.57 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 2.69 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 0.85 - 0.71 (m, 2H).
실시예 10
IXS-1-54-1의 합성
Figure pct00159
단계 1: 2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤조산.
Figure pct00160
응축기, 마그네틱 교반기 및 비활성 가스 출구가 장착된 300 ml 둥근 바닥 3구 플라스크에 3-아이오도-2-메틸-벤조산 (10 g, 38.2mmol), 비스(피나콜라토)디보론 (11.64 g, 46.0mmol), 포타슘 아세테이트 (11.23 g, 112.0mmol) 및 100 ml의 무수 DMSO를 첨가하였다. 플라스크를 15-20분 동안 질소로 퍼징시켰다. 촉매 디클로로 [1, 1'-비스(디페닐포스피노)페로센]팔라듐 디클로로메탄 (0.85 g, 1.1mmol)을 약간 양성의 질소 흐름 하에 개방된 넥(neck)를 통해 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시킨 다음 500 ml의 물에 부어 넣었다. 상온에서 1시간 동안 교반 후, 갈색을 띤 침전물을 프릿 여과 깔대기 상으로 여과하고 물로 세척하였다. 침전물을 200 ml의 에테르 중에 재용해시키고 1" 두께 층의 셀리트를 통해 여과하여 미량의 Pd를 제거하였다. 여과 케이크를 100 ml 에테르로 세척하였다. 화합된 에테르성 용액을 4 x 200 ml의 2N NaOH로 세척하였다. 수상을 화합시키고 pH = 5-6까지 (대략 100 ml) 6N HCl로 산성화시켰다. 흰색 침전물을 프릿 필터 상으로 여과시키고, 200 ml의 물로 세척한 후, 2시간 동안 60℃ 진공 오븐 내에서 건조시켰다. 여과액을 하룻밤 동안 냉장고에 둔 후, 제2 수확물의 흰색 침전물을 여과를 통해 분리하였다. 얻어진 생성물의 전체 양은 5.5 g (55% 수율)이었다. 1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 8.05 (d, 1H), 7.9 (d, 1H), 7.25 (t, 1H), 2.6 (s, 3H), 1.4 (s, 12H).
단계 2: 2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤조일 클로라이드
Figure pct00161
2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤조산 (1.2 g, 46.0mmol)을 작은 교반 바가 장착된 40 ml 신틸레이션 바이알 내에 넣었다. 10.0 ml의 무수 클로로포름을 첨가하고 이어서 1.8 ml의 티오닐 클로라이드 및 2 방울의 무수 DMF를 첨가하였다. 3시간 후, 용매 및 과량의 티오닐 클로라이드를 진공 하에 증발시켰다. 갈색 잔류물을 40 ml의 헥산으로 처리하고, 여과한 후, 농축하여 녹색을 띤 오일로서 985 mg (수율 = 70.5%)의 생성물을 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.15 (d, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.3 (t, 1H), 2.75 (s, 3H), 1.4 (s, 12H). 반응을 수회 수행하였으며 수율은 60 내지 99%의 범위이었다.
단계 2: 3-메톡시-2-메틸-벤조산 N'-(1-에틸-2,2-디메틸-프로필)-하이드라지드
Figure pct00162
반응을 미니-교반 바가 구비된 20 ml 신틸레이션 바이알 내에서 수행하였다. 상온에서 무수 에테르 (10 ml) 중 2,2-디-메-펜틸하이드라진 클로라이드 (2,2-디-메-펜틸하이드라진 클로라이드) (0.181 g, 1.0mol)의 교반된 용액에 2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤조일 클로라이드 (0.281 g, 1.0mmol) 및 과량의 트리에틸아민 (0.28 ml, 2.0mmol)을 첨가하였다. 침전물을 곧바로 형성하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 상온에서 교반하고, 침전물을 여과하고 메틸렌 클로라이드 (20 ml)로 세척하였다. 용매를 증발시키고 잔류물을 수 방울의 에테르를 함유한 20 ml의 펜탄 중에 재용해시켰다. 플라스크를 2시간 동안 냉각시켜 침전물을 얻고 이를 여과하고 1시간 동안 진공 하에 건조시켰다. W1 = 0.05 g. 1H NMR 및 MS는 이것이 IXS-1-52-1임을 보였다. 여과액을 증발시키고, 1 ml의 메틸렌 클로라이드 중에 재용해시킨 후 헥산/에틸 아세테이트 구배로 24 g ISCO 컬럼 상에서 정제하였다. 생성물 분획을 화합시켜 0.110 g (수율 = 44%)의 IXS-1-52-2를 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.85 (d, 1H), 7.4 (d, 1H), 7.25 ( t, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.9 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.05 (d, 1H), 1.8 (m, 1H), 1.6 (m, 2H), 1.4 (s, 12H), 1.35 (s, 3H), 1.15 (m, 1H), 1.05 (s, 9H). MS: [MH+] = 389mv.
단계 3: 2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤조산 N'-(1-tert-부틸-부틸)-하이드라지드.
Figure pct00163
반응을 미니-교반 바가 구비된 20 ml 신틸레이션 바이알 내에서 수행하였다. 에테르 (5 ml) 중의 2-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-[1,3,2]디옥사보로란-2-일)-벤조산 N'-(1-tert-부틸-부틸)-하이드라지드 (IXS-1-44-1, 0.194 g, 0.5mmol)의 교반된 현탁액에 3,5-디메틸-벤조일 클로라이드 (0.084 g, 0.0005 mol)를 첨가하고 이어서 트리에틸아민 (0.07 ml, 0.5mmol)을 첨가하였다. 침전물을 곧바로 형성하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 상온에서 교반한 다음, 침전물을 여과하고 얼마간의 에테르 (10-20 ml)로 세척하였다. 50:50 =헥산: 에틸 아세테이트에서의 에테르 용액의 TLC는 주요 스팟이 Rf = 0.6을 갖는 모노-치환된 생성물임을 보여준다. 용매를 거의 건조될때까지 증발시키고 20 ml의 헥산 중에 재용해시켰다. 침전물이 형성되었으며, 이를 차가운 헥산으로 세척하고 2시간 동안 진공에서 건조시켜 0.177 g의 IXS-1-54-1 (수율 = 68%)을 얻었다. 구조를 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) 및 MS:( [MH+] = 521mv)로 확인하였다.
실시예 11
화합물 58의 합성
Figure pct00164
단계 1: 2-플루오로-3-아이오도-4-메틸-벤조니트릴의 합성
Figure pct00165
마그네틱 교반기, 써모미터, 투입 깔대기, 및 질소 주입구를 구비한 오븐 건조된, 3-구 500 ml 둥근 바닥 플라스크를 20분 동안 N2로 퍼징시켰다. 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (41.84 ml, 241 mmol)을 시린지를 통해 플라스크 내로 주입하고, 이어서 100 ml의 무수 THF를 주입하였다. 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시키고 n-BuLi (헥산 중 2.5M 용액, 102 ml, 254 mmol)을 캐눌라를 통해 주입하였다. 온도를 -70℃ 내지 -80℃ 범위로 유지시키는 것을 확실히 하면서, 첨가를 서서히 한 방울씩 수행하였다. (~40 분). 투입 플라스크를 100 ml의 무수 THF로 세척하고 반응 혼합물을 맑은 용액이 혼탁해지는 시간 중에 30분 동안 -50℃로 승온시켰다. 반응 혼합물을 다시 -78℃로 냉각시키고, 80 ml의 무수 THF 중에 용해된 2-플루오로-4-메틸벤조니트릴 (30 g, 222 mmol)을 내부 온도를 -70℃ 아래로 유지하면서 교반된 용액에 적가하였다 (대략 20분). 투입 깔대기를 100 ml 분할의 THF로 1회 세척하고 반응 혼합물을 60분 동안 -50℃까지 승온시켰다. 반응 혼합물을 다시 -78℃로 냉각시키고, 100 ml의 THF 중의 아이오딘 (62 g, 244 mmol)의 포화된 용액을 투입 깔대기 내로 주입하였다. 퀀칭을 단계적으로 수행하였고, 결과적인 노란색 혼합물을 내부 온도 -60℃ 아래에 두었다 (대략 20분). 투입 깔대기를 50 ml의 THF로 2회 세척한 다음 혼합물을 상온으로 승온시켰다. 하룻밤 동안 교반한 후, 전체 혼합물을 1000 ml의 물 중 20 g 티오설파이트의 용액에 첨가하고, 1시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트 3 x 250 ml로 세척하였다. 화합된 유기 층을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축시켰다. 잔류물을 ISCO 시스템을 이용하여 정제하였다. 생성물 분획을 화합하고 농축시켰다. 생성물을 에테르/헥산으로 재결정화시켜 33 g (57%)의 생성물을 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.50 (dd, 1H), 7.16 (d, 1H), 2.50 (s, 3H). LC-MS (M+1) = 262 M/Z.
단계 2: 2-플루오로-3-아이오도-4-메틸 벤조산의 합성
Figure pct00166
응축기 및 마그네틱 교반기가 장착된 500 ml 둥근 바닥 3구 플라스크에 2-플루오로-3-아이오도-4-메틸-벤조니트릴 (33 g, 126.4mmol), 70 ml의 메탄올, 및 70 ml의 60% 황산 수용액을 첨가하였다. 플라스크를 밀봉하고 온도를 115℃까지 증가시켰다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상기 온도에서 교반하였다. 형성된 침전물을 프릿 필터 상으로 여과하고, 1L의 물로 세척한 후, 2시간 동안 진공 하에 건조시킨 다음 3시간 동안 60℃ 진공 오븐 내에서 건조시켜 31.5 g의 IXS-4-95-1을 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 13.2 (broad s, 1H), 7.74 (t, 1H), 7.26 (d, 1H), 2.47 (s, 3H), 및 MS [MH+] = 280).
단계 3: 2-플루오로-3-아이오도-4-메틸-벤조산 메틸 에스테르의 합성
Figure pct00167
마그네틱 교반-바 및 응축기가 장착된 500 ml 1구 플라스크에 2-플루오로-3-아이오도-4-메틸-벤조산 (31.5 g, 112.5 mmol), 250 ml의 메탄올 및 10 ml의 황산을 첨가하였다. 반응물을 하룻밤 동안 90℃로 가열하였다. LCMS가 반응이 90% 완료된 것을 보여주었다. 메탄올을 증발시키고 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 용해시키고 물로 세척하였다. 유기 상을 물 중 25% NaOH 용액으로 pH=9까지 서서히 염기성화시켰다. 유기 상을 2 x 200 ml의 물로 세척하였다. 분리된 물 세척물을 100　ml의 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 모든 유기 상을 화합하고 농축시켜 오일의 잔류물을 얻었으며 이를 에테르/헥산으로 재결정화시켰다. 결정을 2개의 배치로 분리하고, 순수 헥산으로 세척한 후 2시간 동안 진공 하에 건조시켜 31 g (94%)의 생성물을 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.78 (t, 1H), 7.08 (d, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.50 (s, 3H) 및 MS: [MH+] = 295)
단계 4: 메틸 2-플루오로-4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조에이트의 합성
Figure pct00168
응축기, 마그네틱 교반기 및 질소 출구가 구비된 100 ml 3-구 둥근 바닥 플라스크에 질소 하에 메틸 2-플루오로-3-아이오도-4-메틸벤조에이트 (2.0 g, 6.80 mmol), 10.0 ml의 무수 1,4-디옥산, 디아세톡시팔라듐 (0.076 g, 0.340 mmol) 및 [1,1'-비페닐]-2-일디사이클로헥실포스핀 (0.477 g, 1.360 mmol)을 넣었다. 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란 (2.96 ml, 20.40 mmol)을 시린지를 통해 적가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 60℃로 가열한 후 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 거의 100% 전환을 보였다. 디옥산을 제거하고 잔류물을 에틸 아세테이트/헥산 구배를 이용하여 80 g ISCO 실리카 컬럼 상에서 정제한 다음 메탄올/DCM 구배로 전환시켜 1.25 g (62.5%)의 IXS-5-48-1, 1.25 g (62.5%)을 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 7.81 (t, 1H), 7.16 (d, 1H), 3.83 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 1.33 (s, 12H), 및 MS: [MH+] = 295).
단계 5: 7-플루오로-1-하이드록시-1,3-디하이드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카르복실산의 합성.
Figure pct00169
40 ml CCl4 중의 메틸 2-플루오로-4-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일) 벤조에이트 (0.6 g, 2.040 mmol)의 용액에 N-브로모숙신이미드 (0.363 g, 2.040 mmol) 및 (E)-1,1'-(디아젠-1,2-디일)디사이클로헥산카르보니트릴 (0.050 g, 0.204 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물 중 5% KOH로 추출하였다 (3x 20 ml). 수상을 1시간 동안 교반한 다음 용액을 0℃로 냉각시키고 1N HCl로 pH<1까지 서서히 산성화시켰다. 형성된 침전물을 프릿 필터 상으로 여과시키고 하룻밤 동안 진공에서 건조시켜 0.137 g의 IXS-5-49-1을 얻었다. DMSO-d6에서의 1H NMR은 원하는 생성물과 일치한다. MS [MH+] = 196.
단계 6: N'-(tert-부틸)-7-플루오로-1-하이드록시-1,3-디하이드로벤조[c][1,2] 옥사보롤-6-카보하이드라지드의 합성:
Figure pct00170
질소로 퍼징된 20 ml 신틸레이션 바이알 내 무수 DMF (1.5 ml) 중 보록소졸 카르복실릭 (INX-5-49-1, 130.0 mg, 0.663 mmol)의 교반된 용액에 상온에서 BOP (197.0 mg, 0.663 mmol), HOBt (90.0 mg, 0.663 mmol) 및 DIPEA (0.579 ml, 3.32 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 여기에 tert-부틸 하이드라진 하이드로클로라이드 (105 mg, 0.84 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 새로운 피크인 보록소졸 카르복실산의 완전한 전환을 보여주었다. DMF를 제네박을 이용하여 제거하였다. 점성의 미정제 혼합물을 5% KOH 수용액 (50 ml) 및 EtOAc (50 ml) 중에 용해시키고 추출하였다. 생성물을 함유하는 화합된 수성 분획을 0.1N HCl로 중성화시킨 다음, 물을 회전 증발 농축기 상에서 제거하였다. 잔류물을 DCM 중 10% MeOH로 세척하고 ISCO 시스템을 이용하여 정제하였다. 생성물을 DCM 중 ~2% MeOH로 용리시켜 100 mg (57%)의 보록사졸 카보하이드라지드 INX-5-57-1을 얻었으며, 이를 다음 단계를 위하여 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.69 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.67 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 22.8 Hz, 1H), 5.03 (s, 2H), 4.92 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 1.06 (s, 9H).
단계 7: N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-7-플루오로-1-하이드록시-1,3-디하이드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드 (화합물 58)의 합성:
Figure pct00171
둥근 바닥 플라스크 내 3,5-디메틸벤조일 클로라이드 (0.076 g, 0.451 mmol)를 디에틸 에테르 (2.0 ml) 중에 용해시켰다. 여기에, N'-(tert-부틸)-7-플루오로-1-하이드록시-1,3-디하이드로벤조[c][1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드 (0.100 g, 0.376 mmol)를 첨가하고 이어서 TEA (0.105 ml, 0.752 mmol)를 첨가하였다. 트리에틸 아민 첨가 후, 침전물이 용액으로부터 발생하였다. 90분 교반 후, 추가의 동량의 TEA를 첨가하고, 반응물을 상온에서 60분 동안 교반시켰다. 용매를 증발시키고 잔류물을 예비적 HPLC를 이용하여 정제하여 화합물　58을 얻었다. 1H　NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.39 (s, 1H), 6.97 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.89 - 6.83 (m, 3H), 6.72 - 6.64 (m, 1H), 4.76 (s, 2H), 2.04 (d, J = 4.5 Hz, 6H), 1.29 (s, 9H).
실시예 12
4-하이드록시메틸-2-플루오로-벤조산의 합성
Figure pct00172
단계 1: 2-플루오로-4-메틸-벤조산의 합성
Figure pct00173
마그네틱 교반 바, 투입 깔대기 및 질소 주입구가 장착된, 1L 3-구 둥근 바닥 플라스크에 1-브로모-2-플루오로-4-메틸-벤젠 (43.0 g, 227.47 mmol) 및 300 ml의 무수 THF를 첨가하였다. 플라스크를 30분 동안 질소로 퍼징시킨 다음 아세톤-드라이-아이스 배쓰를 이용하여 -78℃로 냉각시켰다. T-BuLi, 헥산 중 2.5 M 용액 (100.00 ml, 250.00 mmol)을 30분에 걸쳐 적가하였다. 투입 깔대기를 반응 플라스크 내로 100 ml의 무수 THF를 사용하여 세척하였다. 결과적인 약간 노란색의 반응 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 전체 혼합물을 캐눌라 이동 수단(transfer)을 통해 150 ml의 THF 중 200 g의 드라이-아이스 상으로 부어 넣었다. 혼합물을 교반하면서 상온으로 승온시키고, 500 ml의 물로 희석시킨 후, 분별 깔대기 내로 이동시키고, 에테르로 추출하였다 (2 x 500 ml). 에테르 상을 버렸다. 수용성 상을 pH <<2까지 1N HCl로 산성화시키고 (그 다음 다시 에테르 (2 x 500 ml)로 추출하고 에틸 아세테이트 (2 x 200 ml)로 추출하였다. 화합된 유기 상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고 감압 하에 농축시켰다. 이에 따라 얻어진 흰색 결정성 잔류물을 1시간 동안 진공에서 건조시켜 35.06 g IXS-4-49-crude를 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 13.04 (bs, 1H), 7.76 (t, 1H), 7.15 (t, 2H), 2.36 (s, 3H). 전반적인 수율은 89.55%이다.
단계 2: 2-메틸-3-하이드록시-벤조산 메틸 에스테르의 합성
Figure pct00174
마그네틱 교반-바 및 응축기가 장착된, 500 ml 1-구 둥근 바닥 플라스크에 2-플루오로-4-메틸-벤조산 (10.0 g, 64.88 mmol), 250 ml의 메탄올 및 5 ml의 황산을 첨가하였다. 반응물을 하룻밤 동안 90℃로 가열하였다. 메탄올을 증발시키고 잔류물을 헥산/에틸 아세테이트 구배를 이용하여 125g 필터 실리카 ISCO 컬럼 상에서 정제하여 10.01g의 IXS-4-52-1을 얻었다. 전반적인 수율은 91.75%이다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.80 (t, 1H), 6.95 (2d, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.37 (s, 3H).
단계 3: 4-브로모메틸-2-플루오로-메틸-벤조에이트의 합성
Figure pct00175
마그네틱 교반 바 및 응축기 및 유리-스토퍼(stopper)가 장착된, 250 ml 3-구 둥근 바닥 플라스크에 2-플루오로-4-메틸 메틸 벤조에이트 (10.01　g, 59.52 mmol), 100 ml의 카본 테트라클로라이드, N-브로모숙신이미드 (10.70 g, 60.12 mmol), 및 2,2'-아조비스이소부티로니트릴 (AIBN, 0.39 g, 2.38 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 6시간 동안 100℃에서 가열한 다음 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. 플라스크를 30분 동안 얼음 내에서 냉각시키고 결과적인 침전물을 여과로 수집한 후 헥산으로 세척하였다. 여과액을 따로 두었다. 침전물을 에틸 아세테이트 중에 재용해시키고 헥산을 고체가 형성되기 시작할 때까지 첨가하였다. 플라스크를 1시간 동안 그대로 두었다. 침전된 고체를 여과로 수집하고 건조시켰다. 고체를 엘렌마이어 플라스크 내에 넣고 3시간 동안 100 ml의 물과 함께 교반하였다. 고체를 여과로 재분리하고, 헥산으로 세척한 후, 2시간 동안 60℃ 진공 오븐 내에서 건조시켜, 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.89 (t, 1H), 7.18 (2d, 2H), 4.42 (s, 2H) 3.91 (s, 3H)에 의해 나타난 바와 같은, 4.36 g의 4-브로모메틸-2-플루오로-메틸-벤조에이트 (IXS-4-53-1)를 얻었다.
단계 4: 4-하이드록시메틸-2-플루오로-벤조산의 합성
Figure pct00176
마그네틱 교반 바 및 응축기가 장착된, 250 ml 1-구 둥근 바닥 플라스크에 2-플루오로-4-브로모메틸 메틸 벤조에이트 (5.94 g, 24.04 mmol), 70 ml의 아세틱 안하이드라이드 및 소듐 아세테이트 (2.56 g, 31.26 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 하룻밤 동안 150℃에서 가열하였다. 반응물을 상온으로 냉각시키고 TLC로 체크하였다. 200 ml의 물을 조심스럽게 첨가하고, 반응 혼합물을 분별 깔대기에 이동시켰다. 수용성 상을 에테르 2 x 100 ml 및 에틸 아세테이트 3 x 100 ml로 추출하였다. 유기 분획을 화합하고 농축시켰다. 잔류물을 50 ml의 메탄올 중에 용해시키고 마그네틱 교반 바가 장착된 250 ml 1-구 플라스크 내로 이동시켰다. 포타슘 하이드록사이드 (6.75 g, 120 mmol)를 20 ml 메탄올 중에 용해시키고 반응 플라스크 내로 첨가한 후, 반응 혼합물을 하룻밤 동안 90℃로 가열하였다. 반응물을 상온으로 냉각시키고 TLC로 체크하였다. 100 ml의 물을 조심스럽게 첨가하고 반응 혼합물을 pH<2까지 3M HCl 용액으로 조심스럽게 산성화시켰다. 수용성 상을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 농축시키고 에틸 아세테이트/헥산 구배를 이용하여 ISCO 시스템 상에서 정제하여 2.32 g의 IXS-4-60-2를 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) 전체 수율은 57.0%이다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 13.02 (bs, 1H), 7.80 (t, 1H), 7.21 (t, 2H), 5.44 (bs, 1H), 4.45 (s, 2H).
실시예 13
N'-벤조일-N'-(tert-부틸)-1-부틸-7-플루오로-1,3-디하이드로벤조[c][1,2] 옥사보롤-6-카보하이드라지드 (화합물 64)의 합성
Figure pct00177
단계 1: 2-플루오로-4-메틸벤조산의 합성
Figure pct00178
마그네틱 교반기, 투입 깔대기, 환류 응축기, 및 질소 주입구가 구비된, 오븐 건조된 1L 3-구 둥근 바닥 플라스크를 45분 동안 질소로 퍼징시켰다. 플라스크를 1-브로모-2-플루오로-4-메틸 벤젠 (43.0 g, 227.47 mmol) 및 무수 THF (250 ml)로 충진하였다. 혼합물을 드라이 아이스-아세톤 배쓰 내에서 -78℃로 냉각시키고, 온도를 대략 78℃로 유지하면서 교반된 반응물에 n-BuLi (헥산 중 2.5M 용액, 100.09 ml, 250.22 mmol)를 적가하였다. 투입 깔대기를 2번의 10 ml 분할의 무수 THF로 세척한 다음 반응물을 1시간 동안 -78℃에서 교반하였다. 전체 혼합물을 THF (50 ml) 중 고체 이산화탄소 상에 부어 넣고 상온으로 승온시켰다. 300 ml의 물을 첨가하고 모두 용해시켰다. 결과적인 혼합물을 분별 깔대기로 이동시키고 에테르 (2 X 500 ml)로 추출하였다. 에테르 상을 버렸다. 화합된 수용성 상을 pH <3까지 3N HCl로 산성화시켰고 흰색 침전물이 형성되었다. 수상을 에테르 (2 x 500 ml) 및 에틸 아세테이트 (3 X 500 ml)로 추출하였다. 화합된 유기상을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 농축시켜 핑크색을 띤 흰색 결정성 분말로서 31.4 g의 IXS-3-48을 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 12.99 (s, 1H), 7.77-7.73 (t, 1H), 7.14-7.09 (m, 2H), 2.30 (s, 3H).
단계 2: 4-(브로모메틸)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure pct00179
4-플루오로-4-메틸 벤조산 (10.0 g, 64.88 mmol)을 환류 응축기, 마그네틱 교반 바 및 건조 튜브가 장착된 500 ml 3-구 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. 100 ml의 CCl4를 첨가하고 반응 혼합물을 80℃로 가열하였다. NBS를 20 ml 신틸레이션 바이알 내에 칭량하고 4시간의 기간동안 스파툴라를 이용하여 8번으로 분할하여 첨가하였다. 유사하게 AIBN을 8번으로 분할하여 첨가하였다. 결과적인 혼합물을 80℃에서 추가로 3시간 동안 교반한 다음 상온으로 냉각시킨 후 하룻밤 동안 교반하였다. 밝은 노란색 현탁액을 약 1.5 인치 층의 실리카 겔를 구비한 여과 깔대기 상으로 여과한 다음 1L의 디클로로메탄으로 세척하였다. 얼마간의 침전물이 여과액으로부터 발생하여 에틸 아세테이트를 첨가하여 이를 맑게 만들었다. 여과액을 작은 엘렌마이어 플라스크 내에 100 ml 앨리쿼트(aliquot)로 수집하고 이를 TLC로 분석하였다. 출발 물질 및 다른 불순물을 함유한 앨리쿼트를 버렸다. 생성물 앨리쿼트를 화합하고 농축시켰다. 잔류물을 50 ml의 에테르 중에서 마쇄(trituration)시키고, 프릿 필터 상으로 여과시킨 후, 1시간 동안 진공 하에 건조시켜 14.98 g의 미정제 생성물을 얻었다. 1H NMR은 이것이 생성물과 숙신이미드 부산물의 1: 2 혼합물임을 보여주었다. 생성물을 프릿 깔대기로 이동시키고, 물 및 헥산으로 세척한 후, 2시간 동안 진공 하에 건조시켰다. 1H NMR은 이것이 여전히 20%의 숙신이미드 부생성물을 함유함을 보여주었다. 혼합물을 ISCO 시스템 (40 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하여 IXS-2-56-3 (800 mg)을 얻었다. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 12.25 (s, 1H), 6.87-6.83 (t, 1H), 6.42-6.36 (m, 2H), 3.73 (s, 2H).
단계 3: N'-벤조일-4-(브로모메틸)-N'-(tert-부틸)-2-플루오로벤조하이드라지드의 합성:
Figure pct00180
상기 벤조산 (IXS-3-56-3, 8.0 g, 0.034 mmol)을 건조 튜브가 장착된 250 ml 1-구 둥근 바닥 플라스크에 첨가하였다. 50 ml 무수 클로로포름을 첨가하고 반응 혼합물을 교반하였다. 상기 교반된 용액에, 티오닐 클로라이드 (12.49 ml, 0.17 mmol)를 첨가하고 이어서 3 방울의 무수 DMF를 첨가하였다. 하룻밤 동안 교반 후, 용매 및 과량의 티오닐 클로라이드를 진공 하에 제거하고 결과적인 잔류물을 무수 디클로로메탄으로 수회 세척한 후, 증발시키고 진공 하에 건조시켰다. 40 ml 헥산을 첨가하고 결과적인 혼합물을 프릿 여과 깔대기를 통해 여과하여 8.0 g의 녹색을 띤 색깔의 오일을 얻었으며, 이를 추가적인 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
다음 단계를 위하여, 하이드라진 (4.89 g, 25.45 mmol), 산 클로라이드 (8.0 g, 31.81 mmol) 및 100 ml의 에테르를 250 ml 1-구 둥근 바닥 플라스크 내에 첨가하고, 반응 혼합물을 상온에서 교반하였다. 여기에, 트리에틸아민 (4.43 ml, 31.81 mmol)을 첨가하였다. 하룻밤 동안 교반 후, TLC는 생성물로의 완전한 전환을 보여주었다. 디클로로메탄을 첨가하여 모든 침전물을 용해시키고 생성물을 ISCO 시스템 (2 X 80 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하여 8.75 g의 IXS-3-58을 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 10.72 (s, 1H), 7.53-7.28 (m, 6H), 7.23-7.21 (d, 1H), 6.84-6.75 (t, 1H), 4.60 (s, 2H), 1.50 (s, 9H).
단계 4: N'-벤조일-N'-(tert-부틸)-2-플루오로-4-(하이드록시메틸) 벤조하이드라지드의 합성:
Figure pct00181
250 ml 1-구 둥근 바닥 플라스크에 상기 4-브로모메틸 DAH 유도체 (8.75 g, 21.48 mmol), CaCO3 (1.08 g, 10.74 mmol), 및 디옥산과 물의 1:1 혼합물 (140 ml)을 첨가하고, 혼합물을 85℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 대부분의 디옥산을 회전 증발 농축기 상에서 제거하였다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후, 유기 상을 화합하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 ISCO 시스템 (80 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하여 IXS-3-59-2를 얻었다 (6.35 g, 86%). 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 10.56 (s, 1H), 7.41-7.26 (m, 5H), 7.18-7.04 (m, 2H), 6.73-6.69 (m, 1H), 5.37-5.32 (t, 1h)4.47-4.46 (d, 2H), 1.54 (s, 9H).
단계 5: N'-벤조일-N'-(tert-부틸)-1-부틸-7-플루오로-1,3-디하이드로벤조[c] [1,2]옥사보롤-6-카보하이드라지드 (화합물 64)의 합성:
Figure pct00182
마그네틱 교반기, 써모미터, 누진 압력-균압화된(graduated pressure-equalized) 투입 깔대기 및 질소 주입구를 구비한 오븐 건조된 3-구 250 ml 둥근 바닥 플라스크를 20분 동안 질소로 퍼징시켰다. 플라스크에 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (3.65 ml, 21.48 mmol) 및 무수 THF (40 ml)를 충진하고 드라이아이스-아세톤 배쓰 내에서 -30℃로 냉각시켰다. 온도를 -30℃ 내지 -35℃ 사이에서 유지하면서 교반된 반응물에 n-BuLi (13.07 ml, 20.91 mmol)를 적가하였다 (~10분). 투입 깔대기를 10 ml 분할의 무수 THF로 2회 세척하고 반응 혼합물을 -76℃로 냉각시켰다. 내부 온도를 -73℃ 아래로 유지하면서 교반된 크림색-노란색 용액에 트리이소프로필 보레이트 (5.34 ml, 23.23 mmol)를 적가하였다 (~10분). IXS-3-59-2 (2.0 g, 5.81 mmol)를 무수 THF (10 ml) 중에 용해시키고 10분에 걸쳐 반응 혼합물에 적가하였다. 투입 깔대기를 10 ml 분할의 무수 THF로 2회 세척하고, 반응 혼합물을 3.5시간 동안 -76℃로 냉각시킨 후, 상온으로 서서시 승온시켰다. 상온에서 1시간 후, 반응 혼합물을 20 ml의 물 중 2M H2SO4로 퀀칭시켰다. 결과적인 혼합물을 상온에서 1시간 동안 교반한 다음 물 및 에테르로 희석시켰다. 유기 상을 분리하고 수용성 상을 에테르 (2 X 100 ml) 및 EtOAc (2 X 100 ml)로 세척하였다. 유기 분획을 화합하고, 농축시킨 후, ISCO 시스템 (80 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하여 71 mg의 화합물 69를 얻었다. 1H NMR (DMSO-d6 400 MHz) δ 10.55 (s, 1H), 7.42-7.39 (m, 2H), 7.34-7.30 (m, 3H), 7.14-7.12 (m, 1H), 6.76-6.66 (m, 1H), 5.10 (s, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.40-1.29 (m, 4H), 1.25-1.09 (m, 2 H), 0.88-0.83 (m, 3H).
실시예 14
N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-6-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[f][1,4,5]옥사자보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 91)
및
(R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-2,2-디메틸펜탄-3-일)-1-하이드록시-6-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[f][1,4,5]옥사자보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 92)의 합성
Figure pct00183
3-아세톡시-4-브로모-2-메틸벤조산
Figure pct00184
물 (12 mL)을 엘렌마이어 플라스크 내 4-브로모-3-하이드록시-2-메틸벤조산 (5 g, 21.6 mmol)에 첨가하고 아이스 배쓰 내에서 냉각시켰다. 50% NaOH 수용액 (12 mL 물과 혼합된 8.06 g, 108 mmol)을 첨가하고 혼합물을 용액이 맑아질 때까지 수분 동안 교반하였다. 아세틱 안하이드라이드 (2.04 mL, 21.6 mmol)를 pH 5에 도달할 때까지 적가하였고; 그때에 반응 혼합물이 오프 화이트 색을 갖는 짙은 슬러리가 되었다. 혼합물을 상온에서 하룻밤 동안 교반하였다. LCMS가 예측된 생성물 질량을 갖는 주요 피크 및 출발 물질의 소수 극성 피크를 보였다. pH를 2로 조정하고 침전물을 여과하였다. 침전물의 LCMS가 이것이 예측된 아세테이트 및 출발 페놀의 3:1 혼합물임을 보여주었다. 여과액이 또한 일부 생성물을 함유하여, 모두 화합시키고, 건조시킨 후 실리카 상에 흡착시킨 뒤 ISCO를 이용하여 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하였다. 주 피크를 수집하고, 용매를 제거한 후 생성물을 진공 하에 건조시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.27 (s, 1H), 7.81 - 7.33 (m, 2H), 2.37 (s, 6H), 2.34 (s,3H).
무수 클로로포름 (12 mL) 중 상기 산 SKC-09-060 (3.3 g, 12.1 mmol)의 용액에 옥살릴 클로라이드 (2.12 mL, 24.2 mmol) 및 1 방울의 DMF를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 40℃에서 교반하였다. LCMS가 산 클로라이드로의 완전한 전환을 보여주었다. 용매를 회전 증발 농축기 상에서 진공 하에 제거하고 건조시켜 고체로서 6-브로모-3-(클로로카르보닐)-2-메틸페닐 아세테이트 (SKC-09-062)를 얻었다.
(R)-6-브로모-3-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸펜탄-3-일)하이드라진-1-카르보닐)-2-메틸페닐 아세테이트:
Figure pct00185
무수 DCM (10 mL) 중의 (R)-N-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3,5-디메틸벤조하이드라지드 (2.86 g, 10.9 mmol, >95% ee)의 교반된 용액에 TEA (2.288 mL, 16.4 mmol)를 아르곤 하에 상온에서 첨가하였다. 여기에, 산 클로라이드 (3.5 g, 12.0 mmol)의 DCM 용액 (5 mL)을 첨가하고 상온에서 교반하였다. 30분 후 LCMS가 반응이 완료된 것을 보여주었다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고 ISCO (헥산/EtOAc 구배)를 이용하여 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 주요 분획을 수집하고 건조시켜 무색의 고체 생성물 SKC-09-063 (2.2 g, 39%)을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.47 (d, J = 61.1 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.06 (t, J = 15.3 Hz, 3H), 6.70 (dd, J = 45.3, 8.0 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 80.7, 9.5 Hz, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (d, J = 5.5 Hz, 6H), 1.48 (d, J = 24.5 Hz, 4H), 1.11 - 1.02 (m, 12H), 0.91 (dt, J = 42.5, 7.2 Hz, 5H).
6-브로모-3-(2-(tert-부틸)-2-(3,5-디메틸벤조일)하이드라진-1-카르보닐)-2-메틸페닐 아세테이트:
Figure pct00186
동일한 과정에 따라, DCM (10 mL) 중의 N-(tert-부틸)-3,5-디메틸벤조하이드라지드 (1.37 g, 6.2 mmol), TEA (1.3 mL, 9.4 mmol), 및 상기 산 클로라이드 (2.0 g, 6.9 mmol)로 출발하여 77% 수율 (2.29 g)로 표제 화합물을 제조하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.68 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.04 (s, 3H), 6.56 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (s,6H), 1.65 (s, 3H), 1.49 (s, 9H).
(R)-4-브로모-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3-하이드록시-2-메틸벤조하이드라지드:
Figure pct00187
K2CO3 (1.76 g, 12.8 mmol)를 상온에서 20 ml의 MeOH 중 SKC-09-063 (2.2 g, 4.3 mmol)의 무색 현탁액에 첨가하였다. 수분 내에, 반응 혼합물의 색이 밝은 노란색으로 변하였으며 아세테이트가 용해하기 시작하였다. LCMS에 기초할 때 반응이 30분 이내에 완료되었다. 고체를 여과하여 제거하고, EtOAc로 헹군 후 감압 하에 용매를 제거하고 미정제 혼합물을 ISCO (헥산/EtOAc 구배) 상에서 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 흰색 분말의 SKC-09-066 (1.8 g, 89%)을 얻었다. LCMS: 477.19 (M+1).
4-브로모-N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-3-하이드록시-2-메틸벤조하이드라지드:
Figure pct00188
30분 동안 20 mL MeOH 중에서 SKC-09-015 (2.29 g, 4.8 mml) 및 K2CO3 (1.99 g, 14.5 mmol)을 사용하여 상기 과정을 따르고, 펜탄/에테르 용매 혼합물 중에서 마쇄 후 SKC-09-021을 분리하였다. (1.83 g, 88% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.47 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.30 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.03 (s, 3H), 6.09 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.24 (s, 6H), 1.73 (s, 3H), 1.48 (s, 9H). 1H NMR (400 MHz, DMSO+ 2 방울의 D2O) δ 7.27 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 6.09 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.22 (s, 6H), 1.70 (s, 3H), 1.46 (s, 9H).
(R)-4-브로모-3-(시아노메톡시)-N'-3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-메틸벤조하이드라지드:
Figure pct00189
아르곤 하에 둥근 바닥 플라스크 내 무수 DMF (10 mL) 중 SKC-09-066 (1.35 g, 2.8 mmol), K2CO3 (0.510 g, 3.7 mmol) 및 2-브로모아세토니트릴 (0.24 mL, 3.4 mmol)을 함께 혼합하고 50℃로 가열하였다. 반응이 10'(LCMS 기초)에 완료되었으며, 무색의 RM이 노란색으로 변하였다. 물로 희석시키고, EtOAc에서 추출한 후 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 뒤 용매를 제거하였다. 미정제 혼합물을 실리카 상에 흡착시키고 ISCO (12 g 실리카 컬럼, 헥산/EtOAc 구배)를 이용하여 정제하였다. 흰색 고체 생성물 SKC-09-068 (1.53 g)이 정량적인 수율로 분리되었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.40 (d, J = 59.5 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.16 - 6.95 (m, 3H), 6.58 (dd, J = 46.5, 8.2 Hz, 1H), 5.01 - 4.91 (m, 2H), 4.50 - 4.17 (m, 1H), 2.89 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.25 (d, J = 5.1 Hz, 6H), 1.99 (s, 1H), 1.76 - 1.62 (m, 4H), 1.62 - 1.33 (m, 2H), 1.12 - 0.82 (m, 14H).
4-브로모-N'-(tert-부틸)-3-(시아노메톡시)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-2-메틸벤조하이드라지드:
Figure pct00190
50℃에서 무수 DMF (7 mL) 중 SKC-09-021 (1.8 g, 4.2 mmol), K2CO3 (0.750 g, 5.4 mmol) 및 2-브로모아세토니트릴 (0.35 mL, 4.9 mmol)을 이용하여 상기 과정에 따랐다. 반응이 2시간 이내에 완료되었다. 크로마토그래피 후, 1.67 g의 생성물 SKC-09-023을 85% 수율로 분리하였다 (LCMS: 473, M+1).
(R)-3-(시아노메톡시)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드:
Figure pct00191
1,4-디옥산 (10 mL) 중 SKC-09-068 (1.53g, 2.9 mmol)의 용액에 KOAc (0.876 g, 8.9 mmol), Pin2B2 (1.13 g, 4.5 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 배기시키고 아르곤으로 채웠으며, 상기 공정을 3회 반복하였다. PdCl2[dppf].DCM (0.097 g, 0.119 mmol)을 첨가하였다. RM을 총 3회 재빨리 배기시키고 아르곤으로 채웠으며 반응물을 하룻밤 동안 80℃에서 아르곤 하에 교반하고, 냉각시킨 후, 여과하고 증발시켰다. 물을 미정제 혼합물에 첨가하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 잔류물을 ISCO, 헥산/EtOAc 용매 구배를 이용하여 실리카 겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 SKC-09-071을 분리하였다 (0.600 g, 36% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.39 (dd, J = 62.5, 11.4 Hz, 1H), 7.64 - 7.38 (m, 1H), 7.15 - 6.97 (m, 3H), 6.57 (dd, 1H), 4.95 - 4.68 (m, 2H), 4.33 (dd, J = 82.4, 10.3 Hz, 1H), 2.25 (d, J = 5.9 Hz, 6H), 1.71 - 1.62 (m, 3H), 1.29 (s, 12H), 1.14 - 0.91 (m, 15H).
N'-(tert-부틸)-3-(시아노메톡시)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-2-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드:
Figure pct00192
1,4-디옥산 (8 mL) 중 SKC-09-023 (1.20 g, 2.5 mmol) 용액에 KOAc (0.748 g, 7.6 mmol), Pin2B2 (0.968 g, 3.8 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 배기시키고 아르곤으로 채웠으며, 상기 공정을 3회 반복하였다. PdCl2[dppf].DCM (0.062 g, 0.076 mmol)을 첨가하였다. RM을 총 3회 재빨리 배기시키고 아르곤으로 채웠으며 반응물을 하룻밤 동안 80℃에서 아르곤 하에 교반하고, 냉각시킨 후, 여과하고 증발시켰다. 물을 미정제 혼합물에 첨가하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 잔류물을 ISCO, 헥산/EtOAc 용매 구배를 이용하여 실리카 겔 상에서 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 SKC-09-071을 분리하였다 (0.650 g, 49% 수율, LCMS: 520.41, M+1).
Figure pct00193
아르곤 하에 100 ml 2-구 둥근 바닥 플라스크 내 메톡시 니트릴 (SKC-09-028, 0.200 g, 0.39 mmol)의 얼음 냉각된 MeOH (8 mL) 용액에 Boc-안하이드라이드 및 NiCl2.헥사하이드레이트를 첨가하였다. RM을 총 3회 재빨리 배기시키고 아르곤으로 채웠으며 5분 동안 0℃에서 교반하였다. 여기에 소듐 보로하이드라이드를 3 분할하여 첨가하였다. 맑은 무색의 용액이 수분 내로 검은 색으로 변하였으며, 많은 기포 형성이 또한 관찰되었다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 계속하여 교반하고 이를 상온으로 승온시켰다. LCMS가 3개의 피크, 예측된 생성물 질량을 갖는 덜 극성인 피크를 보였다. 수 방울의 물을 첨가하여 반응을 퀀칭시켰다. 진공 하에 MeOH을 제거하였다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후 유기 분획을 수집하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고 회전 증발 농축기 상에서 용매를 제거하였다. 미정제 혼합물을 최종적으로 아세토니트릴/물 용매 구배를 이용하여 C18 RediSep 컬럼 (100g)을 사용하여 정제하였다. 3개의 피크가 분리되었으며 덜 극성인 피크가 1H NMR 및 LCMS에 기초하여 예측된 N-Boc 보호된 아민 (SKC-09-035; 0.040　g)으로서 특징지어진다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.60 - 10.35 (m, 1H), 7.47 - 7.26 (m, 1H), 7.01 (d, J = 20.0 Hz, 3H), 6.46 - 6.31 (m, 1H), 3.82 - 3.58 (m, 2H), 3.24 (dt, J = 14.4, 5.6 Hz, 2H), 2.25 (s, 5H), 1.72 (d, J = 7.5 Hz, 3H), 1.48 (d, J = 6.4 Hz, 9H), 1.38 (s, 9H), 1.33 - 1.25 (m, 12H).
(R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-2,2-디메틸펜탄-3-일)-1-하이드록시-6-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[f][1,4,5]옥사자보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 92):
Figure pct00194
수소화 보틀 내 MeOH (20 mL) 중 SKC-09-071 (0.500 g, 0.89 mmol) 용액에 특정의 레이니(Raney)-Ni(물 중의 상업적으로 이용가능한 샘플의 레이니-Ni을 MeOH로 수회 헹군 후)을 첨가하였다. 혼합물을 24시간 동안 파르 쉐이커(Parr shaker) 내에서 수소화하였다 (H2, 50 psi). LCMS를 체크하였으며, 이는 2개의 주요 피크를 보였고, 하나는 예측된 생성물 질량을 갖는 것이고 두번째 것은 반응식에 도시된 바와 같이 페놀 화합물이었다. 미정제 혼합물 (pH 8.0)을 셀리트의 쇼트 패트를 통해 여과시키고 용매를 진공 하에 제거하였다. 물로 희석시키고 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 생성물이 수용성 분획으로 가고 부 생성물(페놀 유도체)은 유기 분획에 남았다. 수용성 분획을 아이스 배쓰 상에서 pH ~3로 산성화시켰으며, 즉시 에틸 아세테이트로 추출하였다. 생성물이 EtOAc 분획으로 갔고, 이를 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 용매를 진공 하에 제거하였다. 최종적으로 미정제 혼합물을 ISCO (C18 컬럼, CH3CN/물 용매 구배)로 역상 컬럼을 이용하여 정제하여 화합물 92 (0.233 g, 56 % 수율)를 얻었다. LCMS: 466.3 (M+1).
1H NMR 스펙트럼은 화합물이 혼합물임을 시사하였으며; 이는 상이한 토토머 및/또는 개방형 및 폐쇄형 형태의 평형일 수 있다. 동일한 샘플에 2 방울의 D2O를 첨가 후 또 다른 1H NMR을 취하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.49 - 9.90 (m, 1H), 8.35 - 7.51 (m, 1H), 7.37 - 6.87 (m, 4H), 6.66 - 5.99 (m, 2H), 4.52 - 3.83 (m, 4H), 3.29 - 2.76 (m, 2H), 2.26 (dd, J = 19.3, 14.3 Hz, 6H), 1.76 - 1.33 (m, 5H), 1.15 - 0.90 (m, 12H). 1H NMR (400 MHz, DMSO + 2 방울의 D2O) δ 8.37 - 7.15 (m, 2H), 7.15 - 6.94 (m, 3H), 6.59 - 6.22 (m, 1H), 4.29 (dd, J = 79.9, 10.3 Hz, 1H), 4.07 (s, 1H), 3.89 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 3.19 - 2.88 (m, 2H), 2.44 - 2.11 (m, 6H), 1.79 - 1.27 (m, 5H), 1.14 - 0.72 (m, 12H).
N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-6-메틸-1,2,3,4-테트라하이드로벤조[f][1,4,5]옥사자보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 91)
Figure pct00195
상기 과정에 따라, 파르 쉐이커 내에서 수소 (50 psi) 하에 SKC-09-028 (240 mg), 레이니-Ni을 사용하여 출발하여 화합물 91 (0.040 g)을 제조하였다. LCMS: 424 (M+1). 1H NMR 스펙트럼은 화합물이 혼합물임을 시사하였으며; 이는 상이한 토토머 및/또는 개방형 및 폐쇄형 형태의 평형일 수 있다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.54 - 10.09 (m, 1H), 7.81 (dt, J = 26.6, 11.2 Hz, 1H), 7.29 - 6.94 (m, 4H), 6.52 - 6.03 (m, 1H), 4.11 (s, 2H), 2.95 (d, J = 26.1 Hz, 3H), 2.28 - 2.14 (m, 6H), 1.78 - 1.68 (m, 3H), 1.48 (d, J = 4.2 Hz, 9H).
실시예 15
N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-2-플루오로-4-(메톡시메틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드 (화합물 94);
(3-(2-tert-부틸)-2-(3,5-디메틸벤조일)하이드라진-1-카르보닐)-2-플루오로-6-(메톡시메틸)페닐)보론산 (화합물 88); (R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-플루오로-4-(메톡시메틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드 (화합물 87);
및
(R)-(3-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸펜탄-3-일)하이드라진-1-카르보닐)-2-플루오로-6-(메톡시메틸)페닐)보론산 (화합물 86)의 합성:
Figure pct00196
메틸 2-플루오로-4-(메톡시메틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조에이트:
Figure pct00197
DCM (40 mL) 중 SKC-10-014 (2 g, 5.4 mmol)의 교반된 용액에 상온에서 MeOH 중 NH3 (알드리치 유래)의 100 mL의 차가운 용액을 첨가하였다. LCMS가 반응이 15분 내에 완료됨을 보여주었다. 용매를 회전 증발 농축기 상에서 진공 하에 제거하고, 물 및 EtOAc로 희석시킨 후, 반응 혼합물을 아이쓰 배쓰 상에서 냉각시키고 6N HCl로 서서히 산성화시켰다. 즉시 차가운 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시킨 후, 여과하고 용매를 제거하였다. 미정제 혼합물을 RediSep C18 컬럼 (아세토니트릴/물 구배)을 이용하여 정제하였다. 분리된 주요 생성물의 1H NMR은 예측된대로 이것이 메톡시 메틸 유도체 (SKC-10-015-Pk2, 1.34 g, 74% 수율)이고 벤질 아민 화합물이 아님을 확인해주었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.89 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.55 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 1.37 (s, 12H). 13C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 166.34, 164.98, 150.36, 150.27, 133.42, 122.36, 122.33, 84.28, 77.36, 77.05, 76.73, 73.51, 58.17, 52.21, 24.85.
2-플루오로-4-(메톡시메틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조산:
Figure pct00198
아이스 배쓰 내 물 (2ml) 중 상기 에스테르 SKC-10-015-Pk2 (620 mg, 1.9 mmol)의 교반된 현탁액에 10 mL의 7% KOH 수용액을 첨가하였다. 5분 후 LCMS가 모든 출발 물질이 반응하였음을 보여주었고 예측된 생성물 질량을 갖는 새로운 극성 피크가 관찰되었다. 6N HCl을 0℃에서 교반된 반응 혼합물에 서서히 첨가하였고, pH ~2로 조정하였으며, 흰색 침전물이 형성되었다. 이를 즉시 여과 깔대기를 통해 여과하고 침전물을 수집한 후, 물 및 그 다음 펜탄으로 헹군 다음, 진공 하에 건조시켜 흰색 분말로서 SKC-10-016 (460 mg, 78% 수율)을 얻었다.
0℃에서 SKC-10-016 (350 mg, 1.1 mmol), 2 mL 클로로포름 중 옥살릴 클로라이드 (0.19 mL, 2.3 mmol) 및 1 방울의 DMF의 반응으로 상응하는 산 클로라이드 (SKC-10-017)를 제조하였다. 반응은 <30분 이내에 완료된다. 용매를 회전 증발 농축기 상에서 진공 하에 제거하고, 고 진공 하에서 건조시킨 후, 그대로 다음 단계를 위해 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 13.15 (s, 1H), 7.84 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.26 (s, 3H), 1.31 (s, 12H). 1H NMR (400 MHz, DMSO + 2 방울의 D2O) δ 7.82 (s, 1H), 7.19 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.24 (s, 3H), 1.29 (s, 12H).
N'-(tert-부틸)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-2-플루오로-4-(메톡시메틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드 (화합물 94) 및 (3-(2-tert-부틸)-2-(3,5-디메틸벤조일)하이드라진-1-카르보닐)-2-플루오로-6-(메톡시메틸)페닐)보론산 (화합물 88):
Figure pct00199
무수 DCM (2 mL) 중 N-(tert-부틸)-3,5-디메틸벤조하이드라지드 (0.300 g, 0.83 mmol)의 교반된 용액에 아르곤 하에 TEA (0.17 mL, 1.25 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 얼음 물 배쓰 상에서 냉각시킨다. 여기에 상기에서 제조된 산 클로라이드 (SKC-10-019)를 첨가하고 수분 동안 혼합물을 교반하였다. 5분 후 LCMS가 513 (M+1)의 예측된 생성물 질량을 갖는 4.02 분에서의 주요 피크, 431 (M+1)의 상응하는 보론산 질량에 해당하는 질량을 갖는 2.98에서의 소수 피크 및 모든 출발 물질이 소비됨을 보였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 실리카 상에 흡착시킨 후, Bpin 생성물인 화합물 94를 먼저 헥산/EtOAc 구배로 용리시키고 이후 용매를 2% NH4OH를 함유하는 DCM/MeOH로 변경하는 컬럼 크로마토그래피 (RediSep 컬럼, 실리카 24 g)로 정제하여 제2의 생성물 (화합물 88)을 분리하였다. 분획을 수집하고, 용매를 회전 증발 농축기 상에서 진공 하에 제거한 후, 최종적으로 동결건조시켜 분말로서 화합물 94 (0.220 g, 52% 수율) 및 화합물 88 (0.120 g, 34% 수율)을 얻었다. 화합물 94: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.58 (s, 1H), 7.05 (dd, J = 26.3, 13.0 Hz, 4H), 6.86 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.24 (s, 6H), 1.47 (s, 9H), 1.29 (s, 12H). 1H NMR (400 MHz, DMSO+ 2 방울의 D2O) δ 7.03 (dd, J = 24.9, 10.3 Hz, 4H), 6.84 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.22 (s, 6H), 1.46 (s, 9H), 1.27 (s, 12H). 화합물 88: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.49 (s, 1H), 8.22 (s, 2H), 7.14 - 6.89 (m, 4H), 6.72 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.24 (s, 6H), 1.48 (s, 9H).
(R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-플루오로-4-(메톡시메틸)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드 (화합물 87) 및 (R)-(3-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸펜탄-3-일) 하이드라진-1-카르보닐)-2-플루오로-6-(메톡시메틸)페닐)보론산 (화합물 86):
Figure pct00200
상기 과정에 따라, (R)-N-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3,5-디메틸벤조하이드라지드 (0.254 g, 0.97 mmol, >96% ee), DCM (2mL) 중 TEA (0.202 mL, 1.45 mmol)를 함께 혼합하고 이어서 상기 산 클로라이드, SKC-10-017 (0.350 g, 1.07 mmol)을 혼합한 후, 10분 동안 교반하고, 최종적으로 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 정제하여 용매 혼합물로서 (0.1% 포름산을 함유한, 물/아세토니트릴) RedeisepC18 컬럼 상에서의 2차 정제 후 화합물 87 (0.070 g) 및 화합물 86 (0.100 g)을 얻었다. 화합물 87: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.36 (d, J = 60.2 Hz, 1H), 7.20 - 6.92 (m, 4H), 6.64 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.48-4.20 (m, 3H), 3.21 (s, 3H), 2.24 (s, 6H), 1.75 - 1.50 (m, 2H), 1.29 (s, 12H), 1.04 - 0.84 (m, 12H). 1H NMR (400 MHz, DMSO + D2O) δ 7.13 - 6.94 (m, 4H), 6.63 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 4.44 - 4.00 (m, 3H), 3.18 (s, 3H), 2.22 (s, 6H), 1.68 - 1.51 (m, 2H), 1.28 (d, J = 12.5 Hz, 12H), 1.03 - 0.81 (m, 12H). 화합물 86: 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.29 (d, J = 54.2 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 23.6 Hz, 2H), 7.22 - 6.92 (m, 4H), 6.54 (dd, J = 13.1, 5.7 Hz, 1H), 4.43-4.34 (m 3H), 3.22 (s, 3H), 2.25 (s, 6H), 1.76 - 1.38 (m, 2H), 1.09 - 0.95 (m, 12H). 1H NMR (400 MHz, DMSO+ 2 방울의 D2O) δ 7.14 - 6.86 (m, 4H), 6.55 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.44 - 4.15 (m, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.23 (s, 6H), 1.68 - 1.48 (m, 2H), 1.06 - 0.91 (m, 12H).
실시예 16
(R)-(4-(2-(3,5-디메틸벤조일)-2-(2,2-디메틸펜탄-3-일)하이드라진-1-카르보닐)-3-플루오로페닐)보론산 (화합물 85)의 합성
Figure pct00201
단계 1
마그네틱 교반 바가 구비된 25 mL 둥근 바닥 플라스크에 7 mL CH2Cl2 중의 (R)-N-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-3,5-디메틸벤조하이드라지드 (1.317 g, 5.02 mmol) 및 증류수 (4 mL) 중 포타슘 카보네이트 (1.388 g, 10.04 mmol)의 용액을 첨가하고 0 - 4℃에서 아이스 배쓰 내에서 냉각시키고 10분 동안 교반하였다. 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조일 클로라이드 (1.714 g, 6.02 mmol)를 3.5 mL 디클로로메탄 중의 용액으로서 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 0-4℃에서 교반하고, 아이스 배쓰를 제거한 후 혼합물을 상온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응을 LCMS로 분석하였으며 이는 반응이 완료되었음을 보였다. 유기 층을 Biotage 상분리 컬럼을 이용하여 분리하고 ISCO HPLC 시스템 상의 40 g Redisep SiO2 컬럼으로 이동시켰다. 화합물을 0-100% EtOAc - 헥산으로 용리시킨 다음 10% MeOH - CH2Cl2로 용리시켰다. 원하는 분획을 화합하고 회전 증발기 상에서 농축시켜 오프-화이트 폼으로서 원하는 화합물을 얻었다 (1.518 g, 59% 수율). MS (ESI) C29H40BFN2O4 ([M+H]+)에 대한 계산치 511, 실측치 511.
단계 2
THF (24 mL) 및 물 (6 mL) 중 ((R)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-N'-(2,2-디메틸펜탄-3-일)-2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보로란-2-일)벤조하이드라지드 (1.518 g, 2.97 mmol)의 용액을 소듐 페리오데이트 (2.148 g, 10.04 mmol) 및 HCl (2.0 M) (3.77 ml, 7.53 mmol)로 처리하고 결과적인 노란색 혼합물을 16시간 동안 상온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 고체를 EtOAc로 세척하였다. 여과액을 10 ml H2O로 희석시키고 EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하였다. 화합된 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고 여과한 후 회전 증발기 상에서 농축시켰다. 결과적인 잔류물을 ISCO HPLC 시스템 상에서 0-100% EtOAc - 헥산으로 용리시킨 다음 10% MeOH - CH2Cl2로 용리시켰다. 원하는 분획을 화합하고 회전 증발기 상에서 감압 하에 농축시켜 흰색 분말로서 화합물 85를 얻었다 (1.25 g, 58% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.47 - 10.30 (d,1H), 8.33 (s, 2H), 7.57 - 7.49 (m, 2H), 7.17 - 7.00 (m, 3H), 6.63 - 6.60 (t, 1H), 4.44 - 4.24 (d, 1H), 2.26 (s, 6H), 1.66 - 1.46 (br m, 2H), 1.11 - 0.96 (m, 12H); MS (ESI) C23H30BFN2O4 ([M+H]+)에 대한 계산치 429, 실측치 429.
실시예 17
N'-(2,2-디메틸-1-페닐프로필)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-6-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[c][1,5,2]디옥사보레핀-7-카보하이드라지드 (화합물 83)의 합성
Figure pct00202
4-브로모-N'-(2,2-디메틸-1-페닐프로필)-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조하이드라지드:
Figure pct00203
EtOAc (6 ml)를 상온에서 둥근 바닥 플라스크 내 25 중량% K2CO3 수용액 (6 mL 물 중 0.947 g K2CO3)의 교반된 용액에 첨가하였다. 여기에 (2,2-디메틸-1-페닐프로필)하이드라진 하이드로클로라이드 (0.736 g, 3.43 mmol)를 첨가하고 이어서 EtOAc (6 ml) 중에 용해된 Pf 에스테르 화합물 (SKC-05-069, 1.20 g, 2.28 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 교반하였다. LCMS가 521.14의 질량을 갖는 4.77에서의 주요 피크를 보였다. 수성 작업 및 EtOAc를 사용한 추출 후, 유기 분획을 무수 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과한 후 용매를 진공 하에 회전 증발 농축기 상에서 제거하였다. 최종적으로 RediSep 컬럼 (실리카 40 g, 헥산/EtOAc 용매 구배)을 이용하여 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 1.15 g SKC-06-023 (1.15 g, 97% 수율)의 예측된 생성물을 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.43 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.54 - 7.13 (m, 6H), 6.67 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.39 (dd, J = 5.5, 4.3 Hz, 1H), 4.78 - 4.46 (m, 1H), 3.97 - 3.59 (m, 6H), 3.44 (dd, J = 10.6, 5.4 Hz, 1H), 1.96 (s, 3H), 1.78 - 1.38 (m, 7H), 1.24 (s, 1H), 0.93 (s, 9H).
4-브로모-N'-(2,2-디메틸-1-페닐프로필)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-2-메틸-3-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)벤조하이드라지드:
Figure pct00204
3 mL DCM 중 SKC-06-023 (0.600 g, 1.16 mmol) 용액에 상기 산 클로라이드 (0.195 g, 1.16 mmol)를 첨가하였다. 용액이 맑아졌다. TEA (0.161 mL, 1.16 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 하룻밤 동안 상온에서 아르곤 하에 교반하였다. LCMS가 651.09 (M+1)의 예측된 생성물 질량을 갖는 피크 및 569.01의 질량을 갖는 또 다른 하나를 보였다. 반응 혼합물을 실리카 겔 상에 흡착시키고 ISCO 시스템 (RediSep 컬럼, 실리카 24 g, 헥산/EtOAc 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 헥산 중 ~30% EtOAc로 용리시켜 0.230 g (30% 수율)의 예측된 생성물 SKC-06-025를 얻었다. 화합물 SKC-06-025-peak4를 헥산 중 ~40% EtOAc로 용리하였으며 이는 2-하이드록시에톡시 유도체 (0.450 g, 69% 수율)로서 특징지어졌다. 반응을 반복하고 정제를 RediSep 컬럼 (Al2O3 pH= 7, 24 g) 상에서 수행하여 예측된 생성물 (46% 수율)을 분리하였다. THP 기의 탈보호화가 이 경우에는 관찰되지 않는다. SKC-06-025의 1H NMR; (400 MHz, DMSO) δ 10.67 (s, 1H), 7.48 (dd, J = 7.4, 3.7 Hz, 3H), 7.36 - 7.19 (m, 4H), 7.14 (s, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.66 (dd, J = 8.3, 3.9 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 5.77 (s, 1H), 4.73 - 4.53 (m, 2H), 3.97 - 3.59 (m, 6H), 3.52 - 3.38 (m, 2H), 2.24 (s, 6H), 1.78 - 1.42 (m, 9H), 1.35 (s, 3H), 1.08 (s, 9H). SKC-06-025 PK4의 1H NMR; (400 MHz, DMSO) δ 10.67 (s, 1H), 7.57 - 7.43 (m, 3H), 7.37 - 7.25 (m, 3H), 7.15 (s, 2H), 7.04 (s, 1H), 6.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.77 (br s, 1H), 4.85 (s, 1H), 3.68 (dd, J = 24.1, 4.7 Hz, 4H), 2.24 (s, 6H), 1.37 (s, 4H), 1.08 (s, 10H).
(4-2-(2,2-디메틸-1-페닐프로필)-2-(3,5-디메틸벤조일)하이드라진-1-카르보닐-3-메틸-2-(2-((테트라하이드로-2H-피란-2-일)옥시)에톡시)페닐)보론산:
Figure pct00205
1,4-디옥산 (2 mL) 중 SKC-06-025 (0.410 g, 0.63 mmol) 용액에 KOAc (0.185 g, 1.88 mmol), Pin2B2 (0.240 g, 0.94 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 배기시키고 아르곤으로 채웠으며, 이러한 공정을 3회 반복하였다. PdCl2[dppf].DCM 부가물 (0.015 g, 0.02 mmol)을 첨가하였다. RM을 총 3회 재빨리 배기시키고 아르곤으로 채웠으며 반응물을 교반하고 80℃로 가열하도록 세팅시켰다. 돌발적으로, 온도가 190℃가 되었고 반응 혼합물의 색이 밝은 빨간색으로부터 어두운 갈색으로 변하였다. 반응을 10분 내로 중지시켰다. LCMS가 Bpin화된 화합물의 예측된 생성물 질량 (697.32, M+1)을 갖는 5.35에서의 주요 피크 및 붕소가 부착되지 않은 부 생성물에 해당하는 571.34의 질량을 갖는 4.80에서의 소수 피크를 보였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 여과한 후 용매를 진공 하에 제거하였다. 미정제 혼합물을 중성 알루미나 상에 흡착시키고 RediSep 컬럼 (Al2O3 pH = 7, 24 g)을 이용하여 정제하였다. 부 생성물을 헥산 중 ~15% EtOAc로 용리시키고 주요 생성물을 헥산 중 90% EtOAc로 용리시켜 0.041 g의 표제 화합물 SKC-09-029를 얻었다. Bpin은 보론산으로 가수분해된 것으로 보인다 (LCMS 기초: 615.24 M+1). 동일한 컬럼에 MeOH/DCM 구배로 다시 수행하고 또 다른 0.196 g의 보론산 유도체 (SKC-06-029, 0.237 g 전체, 61% 수율)를 분리하였다. CMS: 615.24 (M+1). 다음 단계를 위해 그대로 사용하였다.
N'-2,2-디메틸-1-페닐프로필)-N'-(3,5-디메틸벤조일)-1-하이드록시-6-메틸-3,4-디하이드로-1H-벤조[c][1,5,2]디옥사보레핀-7-카보하이드라지드:
Figure pct00206
상기 합성된 보론산 유도체 (SKC-06-030, 0.236 g)를 하룻밤 동안 40℃에서 포름산을 함유하는 물/아세토니트릴 (10 mL 물: 20 mL 아세토니트릴 및 0.5 mL 포름산)의 혼합물 10 mL와 함께 교반하였다. LCMS가 이것이 완전한 반응임을 보였으며, 515.28 (M+1)의 예측된 생성물 질량을 갖는 4.22에서의 단일 피크를 보였다. 용매를 제거하고 잔류물을 RediSep 컬럼 (Al2O3 pH = 7, 24 g, 디클로로메탄/MeOH 용매 구배)을 이용하여 정제하였다. 생성물을 DCM 중 ~7% MeOH 혼합물로 용리시켰다. 분획을 건조시킨 후, 화합물 83 (0.140 g, 71% 수율)을 고체로서 분리하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.63 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.60 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.55 - 6.78 (m, 8H), 6.44 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.76 (s, 1H), 4.24 (d, J = 4.4 Hz, 3H), 4.08 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 2.25 (s, 6H), 1.26 (s, 3H), 1.08 (d, J = 12.0 Hz, 9H).
실시예 18
시험관내 활성
대표적인 개시 화합물을 시험관 내 유전자 스위치 어세이로 생물학적 활성에 대하여 테스트하였다 (표 1 및 1A). 유전자 스위치 어세이는 예를 들어, 미국특허 제8,076,517호; 제7,456,315호;실 제7,304,161호; 및 제6,258,603호에 개시되어 있다.
안정한 세포주 제조
CHO-K1 세포를 레오스위치®의 제어 하에 반딧불 루시퍼라제 (fLUC)를 코딩하는 플라스미드 (RS-1, 도 1)로 안정하게 트랜스펙션시켜 안정한 세포주 CHO-K1_RS-1을 얻었다. 바이알 당 5X106 세포로 대략 100개 바이알을 함유하는 마스터 셀 뱅크를 생성하였다. 1개의 바이알의 CHO-K1_RS-1을 해방시키고 각각의 시험관 내 효능 스크리닝에 앞서 2주 동안 배양시켰다. 성분의 위치를 보여주는 RS-1의 핵산 서열을 도 2A-2E에 나타내었다.
효능 스크린
대조구 및 테스트 화합물을 처리하기 이십사(24) 시간 전에 CHO-K1_RS-1 세포를 30 ㎕의 배양 배지 내에 웰 당 3,600 세포로 백색-불투명한 384-웰 세포 배양 플레이트 내에 접종하였다. 세포를 화합물 처리때까지 37℃에서 습한 CO2 인큐베이터 내에서 인큐베이션시켰다.
화합물을 이어지는 희석 및 어세이 전에 100% 건조 DMSO 중 25 mM로 제조하고 밀봉된 1ml 튜브 내에서 상온으로 보관하였다. 세포 처리 날, 대조구 및 테스트 화합물을 함유하는 튜브를 분류하고 리간드를 이어지는 희석을 위하여 96-웰 폴리프로필렌 플레이트에 넣었다. 화합물을 Biomek FX 자동화 액체 취급기를 이용하여 25 mM 내지 2.5 nM의 범위로 8-포인트, 10-배 희석 시리즈로 100% 건조 DMSO 중에서 희석시켰다.
그 다음 희석된 화합물을 4개씩 384-웰 폴리프로필렌 플레이트의 각각의 웰에 넣어 플레이트의 상이한 사분면으로 각각의 화합물 희석액의 4개의 복제(replicate)을 갖는 단일 384-웰 플레이트를 얻었다. 384-웰 플레이트 상의 각각의 웰에 20 ㎕의 희석된 화합물을 넣었다. 희석된 화합물을 함유하는 384-웰 플레이트 및 배양시킨 세포를 함유하는 플레이트를 Biomek FX 상에 로딩하고 30 nl의 화합물을 384-핀 V&P 사이언티픽 핀 툴(384-pin V&P Scientific Pin Tool)을 이용하여 세포를 함유하는 각각의 웰에 넣었다. 결과적인 1000-배 희석액 (30 nl 내지 30 ㎕)은 0.1% DMSO 중 25 μM 내지 2.5 pM의 최종 투여량(dosing) 범위를 발생시켰다. 2개의 복제 플레이트를 제조하여 루시퍼라제 발현 어세이 및 APH 세포 생존능 어세이를 위한 전용 플레이트를 제공하였다.
세포를 37℃에서 습한 CO2 인큐베이터 내에서 24시간 동안 화합물과 함께 인큐베이션시켰다. 인큐베이션 후, 세포를 프로메가(Promega)로부터의 스테디 글로 어세이(Steady Glo assay)를 이용하여 루시퍼라제 발현 (fLUC 어세이)에 대하여 분석하였다. 세포를 시약 첨가 전에 15분 동안 상온으로 평형화시켰다. 삼십 마이크로리터 (30 ㎕)의 분석 시약을 Biomek FX를 이용하여 384-웰 플레이트의 각각의 웰에 첨가하였다. 시약을 10-120분 동안 세포와 함께 인큐베이션시키고 몰레큘라 디바이스 스펙트라맥스 엘 루미노미터 (Molecular Devices Spectramax L luminometer) 상에서 판독하였다. 분석 시약을 제조사의 설명서에 따라 제조하였다.
데이터 분석
루시퍼라제 발현 데이터는 DMSO 단독으로 처리된 세포로부터의 기준선 시그널로 표준화하였다. 비히클-처리된 세포 대 처리된 세포의 시그널 비를 플롯팅하고 비-선형 회귀를 그래프 패드 프리즘(Graph Pad Prism) 소프트웨어를 이용하여 수행하였다. EC50, (log)EC50 및 힐 기울기(Hill slope) 데이터를 산출하였다. 리포터 유전자 발현, 예를 들어 루시퍼라제 발현은 목적 유전자의 발현을 위한 프록시로서의 역할을 한다. 예를 들어, 제US 2009/0123441호 및 제WO 2011/119773호 참고.
[표 1]
Figure pct00207
Figure pct00208
Figure pct00209
Figure pct00210
Figure pct00211
표 1에서 사용된 약어는 하기 표 2에서 제공된다.
[표 2]
Figure pct00212
[표 1A]
Figure pct00213
실시예 19
약동학적 (PK) 분석
대표적인 개시 화합물 (차트 1) 및 붕소 원자를 함유하지 않는 대표적인 DAHs (차트 2)의 약동학을 하기 프로토콜에 따라 측정하였다:
동물 투여(dosing)
암컷 스프라그 다우리 래트를 위관 영양으로 화합물을 경구 투여(10 mg/kg; 비히클 = 2 mg/mL의 카프리올 90 / 트리아세틴 (1:1, v/v); 3마리 동물/화합물)하기 전에 최소한 8시간 (하룻밤) 동안 단식시키고 투여 전에 체중을 재었다. 정확한 부피의 적절한 제형을 해당 일(day)의 (동물) 체중에 기초하여 투여하였다. 체중, 투여량 부피, 및 투여 시간을 각각의 동물에 대하여 기록하였다. 동물에게 활성화 리간드 투여 후 적어도 4시간 동안 급이하지 않았다.
혈장 수집
대략 200 μL/혈액 샘플을 각각의 동물로부터 각각의 시점에 EDTA 튜브 내 카테터 샘플 포인트로부터 수집하였다. 혈액 수집의 정확한 시간을 각각의 동물에 대하여 기록하였다. 혈액 샘플을 수집 이후 즉시 시작하여 4℃ (젖은 얼음)에 두었으며 2500　rpm으로 12분 동안 수집으로부터 15분 이내에 원심분리하였다. 원심분리 후, 혈장 샘플을 분석때까지 -80℃에서 보관하였다. 샘플 시간은 하기와 같았다: 0일: 0, 0.5, 1, 2, 3, 4, 6 및 8 시간; 1일: 24 시간.
혈장 내 화합물의 측정
LC-MS/MS 방법: 단백질 침전법을 사용한 액체 크로마토그래피 탠텀 질량 분광기를 사용하여 리간드를 투여한 모둔 동물로부터 수집된 래트 혈장 샘플 내 화합물을 정량하였다. 직선성 범위는, 0.99 이상의 검정 곡선(calibration curve)에 대한 상관 계수를 갖는, 1 ng/mL 내지 1000 ng/mL이었으며 분석물은 모든 검정 농도에서 ±15%의 타깃 이내에서 정량화하였다.
약동학적 (PK) 파라미터 측정
혈장 내 화합물의 하기 PK 파라미터를 윈논린(WinNonlin) 소프트웨어, 버젼 5.3 이상의 비-구획 방법을 이용하여 계산하였다: 최대 농도 (Cmax), 최대 농도의 시간 (Tmax), 반감기 (t½), 제로 시점으로부터 마지막 샘플까지의 곡선 아래 면적 (AUC0-t), 및 경구 클리어런스.
통계학적 분석
기술 통계 (평균, 표준 편차 [SD], 변이 계수 [CV%], 중간, 최저, 및 최대)를 사용하여 모든 그룹 내 화합물에 대한 PK 파라미터를 요약하였다 (데이터 미도시).
결과 및 토의
혈장 리간드 농도를 어낼리스트®(analyst®) 소프트웨어 프로그램으로 산출된 표준 곡선으로부터 샘플에 대한 곡선 값 아래 영역을 외삽함으로써 계산하였다. 모든 동물을 대표하는 혈장 샘플에 대한 ng/mL 값을 사용하여 약동학적 (PK) 파라미터를 산출하였다. 표 3에 나태낸 바와 같이, 개시 화합물은 붕소 원자를 함유하지 않은 DAHs보다 예기치 않게 더욱 높은 Cmax 및 Tmax 값, 및 예기치 않게 더욱 낮은 클리어런스 값을 갖는다.
차트 1
Figure pct00214
화합물 59 화합물 5 화합물 13
Figure pct00215
화합물 22 화합물 58 화합물 67
Figure pct00216
화합물 75
차트 2
Figure pct00217
화합물 A 화합물 B 화합물 C
[표 3]
Figure pct00218
실시예 20
마우스에서의 생체 내 Ad-RTS-fLUC 발현
암컷 CD1 마우스 내 Ad-RTS-fLUC의 근육내 (IM) 주사 및 경구 위관 영양에 의한 대표적인 개시 화합물 이후 fLUC 발현을 하기 프로토콜에 따라 측정하였다:
화합물 제형
화합물을 카프리올 90/트리아세틴 (1:1, v/v) 중 20 mg/mL의 농도로 제형화하고 100 mg/kg 투여량으로 경구 위관 영양으로 경구적으로 투여된다.
DNA
Ad-RTS-fLUC (1.1 x 1012 vp/mL의 시작 농도)를 A195 저장 버퍼 (10 mM 트리스, pH 7.4, 0.1 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 10 mM 히스티딘, 75 mM NaCl, 5% 수크로스, 0.02% Ps-80, 및 0.5% EtOH) 중에서 보관하였다 (Evans et al., 1997). 본 분석에서 Ad-RTS-fLUC의 투여 경로는 우측 및 좌측 장딴지근(비복근) 상에서 IM을 통하였다.
투여량 투여
암컷 CD1 마우스에게 하기 표에 따라 투여하였다.
GOI 구조물(Construct)
Figure pct00219
개시 화합물 (경구 위관 영양)
Figure pct00220
생체 내 분석 개요
분석 -1일째에, 마우스에게 각각 50 ㎕으로 우측 및 좌측 장딴지근 상에 IM으로 Ad-RTS-fLUC를 1x1010 vp (총 100 ㎕)의 투여량으로 제공하였다.
테스트 화합물의 단일 투여를 0일째 마지막 세트의 Ad-RTS-fLUC 주사 이후 처음 24시간에 설계된 그룹에 대한 체중에 기초하여 경구 위관 영양으로 투여하였다.
IVIS
IVIS를 0일째 마지막 위관 영양/투여 이후 6, 24, 및 48시간째에 수행하였다. 일단 동물을 적절히 마취시키고, 150 mg/kg의 루시페린 (PBS 중 희석)을 IP 경로로 투여하였다. 동물을 IVIS 표면 상의 노즈콘(nosecone) 상에 위치시켰다. 이미징 파라미터 및 검정 곡선을 실증적으로 결정하였다 (칼리퍼 라이프 사이언스 리빙 이미지 소프트웨어(Caliper Life Sciences Living Image Software)). 이미지를 주사 후 대략 15분 이내에 습득하였다. 이미징 후, 동물을 그들의 케이지로 돌려보내고 마취로부터 완전히 회복될 때까지 모니터링하였다.
데이터 분석 및 이미지 재건을 리빙 이미지 소프트웨어 버젼 4.0 (Living Image Software Version 4.0)을 이용하여 수행하였다. 발광 수준을 목적 영역 주변에 손으로 그려넣은 개별적인 목적 지역 (region of interest, ROI) 마커를 측정함으로써 정량화하였다. 이들 마커들은 ROI를 분리하여, 임의의 원하지 않는 발현 수준을 걸러낸다. 소프트웨어 보정 툴을 이용하여, 백그라운드 노이즈 및 이상한 블리드 오버(pixilated bleed over)를 제거하여 가변성을 감소시켰다. 표면 방사휘도 (Surface radiance) 수준 (조직 표면으로부터 방출되는 빛 세기)을 ROI에 의해 방출되는 초 당 광자(photon) 입자 (p/sec)의 양으로 측정하였다. 이들 값을 최대 방사휘도 또는 총 플럭스(Total Flux)로서 표현한다.
통계학적 분석
IVIS 데이터를 요약하고 처리구 간에 비교하여 fLUC 유도능을 평가하였다. 결과를 도 3에 나타내었다. 데이터는 대표적인 개시 화합물이 생체 내에서 레오스위치를 활성화시킨다는 것을 보여준다. 도 3에 도시된 플래시보 데이터를 유사한 분석으로부터 얻었다.
앞서 기술된 구현예들 및 예시들은 본 발명의 범위에 대하여 어떠한 점에서도 제한하는 것으로 의도되지 않으며, 본원에 제시된 특허청구범위는 명시적으로 본원에 제시되어 있거나 제시되어 있지 않든 모든 구현예들 및 예시들을 포함하는 것으로 의도되는 것으로 이해된다.
본원에 인용된 모든 특허 및 공개는 이들 전체로 참조로서 전적으로 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> INTREXON CORPORATION <120> BORON-CONTAINING DIACYLHYDRAZINES <130> IPA151018-US <140> PCT/US2014/028768 <141> 2014-3-14 <150> US 61/792,412 <151> 2013-03-15 <160> 1 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 10975 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> RheoSwitch(R) Vector <400> 1 gctgagctat gcctaatcaa gtcacggtaa ctatgactct cttaaggtag ccaaatggcg 60 ccacgaaagg aggtcgtgaa atggataaaa aaatacagcg tttttcatgt acaactatac 120 tagttgtagt gcctaaataa tgcttttaaa acttaaaaat atcagataac agcttggtgg 180 cacccattgt gttcacagga gatacagctt tatctgtact gatattaatg acatgctgca 240 ctcggtgtga aagggcatct agtaggctat ggcagggcct gccgccccga cgttggctgc 300 gagccctggg ccttcacccg aacttggggg gtggggtggg gaaaaggaag aaacgcgggc 360 gtattggccc caatggggtc tcggtggggt atcgacagag tgccagccct gggaccgaac 420 cccgcgttta tgaacaaacg acccaacacc gtgcgtttta ttctgtcttt ttattgccgt 480 catagcgcgg gttccttccg gtattgtctc cttccgtgtt tcatcagaaa aactcgtcca 540 gcaggcggta gaaagcgatg cgctgagaat ctggtgcagc gatgccgtac agaaccagga 600 agcggtcagc ccattcgccg cccagttctt cagcgatgtc gcgggtagcc agagcgatgt 660 cctggtagcg gtcagcaacg cccagacgac cacagtcgat gaagccagag aagcggccgt 720 tttcaaccat gatgttcggc aggcaagcgt cgccgtgggt aacaaccagg tcttcgccgt 780 ctggcatacg agctttcagg cgagcgaaca gttcagccgg agccaggccc tggtgttctt 840 cgtccaggtc gtcctggtca accaggccag cttccatgcg ggtgcgagcg cgttcgatgc 900 ggtgtttagc ctggtggtcg aacggacaag tagccgggtc cagggtgtgc aggcggcgca 960 tagcgtcagc catgatagaa actttttcag ccggagccag gtgagaagac agcagatcct 1020 ggcccggaac ttcgcccagc agcagccagt cgcggccagc ttcggtaaca acgtccagaa 1080 cagcagcgca cggaacgccg gtggtagcca gccaagacag gcgagcagct tcgtcttgca 1140 gttcgttcag agcgccagac aggtcggttt taacgaacag aaccgggcgg ccctgagcag 1200 acaggcggaa aacagcagcg tcagagcagc cgatggtttg ttgtgcccag tcgtaaccaa 1260 acagacgttc aacccaagca gccggagagc cagcgtgcag gccgtcctgt tcgatcatgg 1320 tggccccccc cccccccgga atagctctga ggccgaggca gcttcggcct ctgcataaat 1380 aaaaaaaatt agtcagccat ggggcggaga atgggcggaa ctgggcggag ttaggggcgg 1440 gatgggcgga gttaggggcg ggactatggt tgctgactaa ttgagatgct tgctttgcat 1500 acttctgcct gctggggagc ctggggactt tccacacctg gttgctgact aattgagatg 1560 cttgctttgc atacttctgc ctgctgggga gcctggggac tttccacacc ctaaccatgc 1620 attcaactat cccaacgagg gattcgaagg acgataccta cgttagactt aactataacg 1680 gtcctaaggt agcgaccact tagacgtgtt gaaaccctag ggccgcacag gcccgccgac 1740 gatccgagcg tggccatcgt ggcccaccta agtggtccag gaacggcgtg ggctcgttta 1800 aaccgtacca ttagggaaag tacccactta tgtgggcgat cgcttaatta aggccggccg 1860 ccgcaataaa atatctttat tttcattaca tctgtgtgtt ggttttttgt gtgaatccat 1920 agtactaaca tacgctctcc atcaaaacaa aacgaaacaa aacaaactag caaaataggc 1980 tgtccccagt gcaagtccag gtgccagaac atttctctat ccataatgca ggggtaccgg 2040 gtgatgacgg tgaaaacctc caattgcgga gtactgtcct ccgagcggag tactgtcctc 2100 cgagcggagt actgtcctcc gagcggagta ctgtcctccg agcggagtac tgtcctccga 2160 gcggagtact gtcctccgag cggagagtcc ccggggacct agagggtata taatgggtgc 2220 cttagctggt gtgtgacctc atcttcctgt acgcccctgc aggggcgcgc cacgcgtccg 2280 cgggctagcg ccaccatgga agatgccaaa aacattaaga agggcccagc gccattctac 2340 ccactcgaag acgggaccgc tggcgagcag ctgcacaaag ccatgaagcg ctacgccctg 2400 gtgcccggca ccatcgcctt taccgacgca catatcgagg tggacattac ctacgccgag 2460 tacttcgaga tgagcgttcg gctggcagaa gctatgaagc gctatgggct gaatacaaac 2520 catcggatcg tggtgtgcag cgagaatagc ttgcagttct tcatgcccgt gttgggtgcc 2580 ctgttcatcg gtgtggctgt ggccccagct aacgacatct acaacgagcg cgagctgctg 2640 aacagcatgg gcatcagcca gcccaccgtc gtattcgtga gcaagaaagg gctgcaaaag 2700 atcctcaacg tgcaaaagaa gctaccgatc atacaaaaga tcatcatcat ggatagcaag 2760 accgactacc agggcttcca aagcatgtac accttcgtga cttcccattt gccacccggc 2820 ttcaacgagt acgacttcgt gcccgagagc ttcgaccggg acaaaaccat cgccctgatc 2880 atgaacagta gtggcagtac cggattgccc aagggcgtag ccctaccgca ccgcaccgct 2940 tgtgtccgat tcagtcatgc ccgcgacccc atcttcggca accagatcat ccccgacacc 3000 gctattctca gcgtggtgcc atttcaccac ggcttcggca tgttcaccac gctgggctac 3060 ttgatctgcg gctttcgggt cgtgctcatg taccgcttcg aggaggagct attcttgcgc 3120 agcttgcaag actataagat tcaatctgcc ctgctggtgc ccacactatt tagcttcttc 3180 gctaagagca ctctcatcga caagtacgac ctaagcaact tgcacgagat cgccagcggc 3240 ggagcgcctc tcagcaagga ggtaggtgag gccgtggcca aacgcttcca cctaccaggc 3300 atccgccagg gctacggcct gacagaaaca accagcgcca ttctgatcac ccccgaaggg 3360 gacgacaagc ctggcgcagt aggcaaggtg gtgcccttct tcgaggctaa ggtggtggac 3420 ttggacacag gtaagaccct gggtgtgaac cagcgcggcg agctgtgcgt ccgtggcccc 3480 atgatcatga gcggctacgt gaacaacccc gaggctacaa acgctctcat cgacaaggac 3540 ggctggctgc acagcggcga catcgcctac tgggacgagg acgagcactt cttcatcgtg 3600 gaccggctca agagcctgat caaatacaag ggctaccagg tagccccagc cgaactggag 3660 agcatcctgc tgcaacaccc caacatcttc gacgccgggg tcgctggcct gcccgacgac 3720 gatgctggcg agctgcccgc cgcagtcgtc gtgctggaac acggtaaaac catgaccgag 3780 aaggagatcg tggactatgt ggccagccag gttacaaccg ccaagaagct gcgcggtggt 3840 gttgtgttcg tggacgaggt gcctaaagga ctgaccggca agttggacgc ccgcaagatc 3900 cgcgagattc tcattaaggc caagaagggc ggcaagatcg ccgtgtaaat cgattgcgca 3960 aagctttcgc gataggcgag accaatgggt gtgtacgtag cggccgcgtc gactgatggg 4020 tggcatccct gtgacccctc cccagtgcct ctcctggccc tggaagttgc cactccagtg 4080 cccaccagcc ttgtcctaat aaaattaagt tgcatcattt tgtctgacta ggtgtccttc 4140 tataatatta tggggtggag gggggtggta tggagcaagg ggcaagttgg gaagacaacc 4200 tgtagggcct gcggggtcta ttgggaacca agctggagtg cagtggcaca atcttggctc 4260 actgcaatct ccgcctcctg ggttcaagcg attctcctgc ctcagcctcc cgagttgttg 4320 ggattccagg catgcatgac caggctcagc taatttttgt ttttttggta gagacggggt 4380 ttcaccatat tggccaggct ggtctccaac tcctaatctc aggtgatcta cccaccttgg 4440 cctcccaaat tgctgggatt acaggcgtga accactgctc ccttccctgt ccttctgatt 4500 ttaaaataac tataccagca ggaggacgtc cagacacagc ataggctacc tggccatgcc 4560 caaccggtgg gacatttgag ttgcttgctt ggcactgtcc tctcatgcgt tgggtccact 4620 cagtagatgc ctgttgaatt atttaaatcg gtccgcgtac ggctcttctc cccctcgagg 4680 gcctccgcgc cgggttttgg cgcctcccgc gggcgccccc ctcctcacgg cgagcgctgc 4740 cacgtcagac gaagggcgca gcgagcgtcc tgatccttcc gcccggacgc tcaggacagc 4800 ggcccgctgc tcataagact cggccttaga accccagtat cagcagaagg acattttagg 4860 acgggacttg ggtgactcta gggcactggt tttctttcca gagagcggaa caggcgagga 4920 aaagtagtcc cttctcggcg attctgcgga gggatctccg tggggcggtg aacgccgatg 4980 attatataag gacgcgccgg gtgtggcaca gctagttccg tcgcagccgg gatttgggtc 5040 gcggttcttg tttgtggatc gctgtgatcg tcacttggtg agtagcgggc tgctgggctg 5100 ggtacgtgcg ctcggggttg gcgagtgtgt tttgtgaagt tttttaggca ccttttgaaa 5160 tgtaatcatt tgggtcaata tgtaattttc agtgttagac tagtaaattg tccgctaaat 5220 tctggccgtt tttggctttt ttgttagacg ccgcgggggg gggggggggg ctagcgccac 5280 catgggcccc aagaagaaaa ggaaggtggc cccccccacc gacgtgagcc tgggcgacga 5340 gctgcacctg gacggcgagg acgtggccat ggcccacgcc gacgccctgg acgacttcga 5400 cctggacatg ctgggcgacg gcgacagccc cggccccggc ttcacccccc acgacagcgc 5460 cccctacggc gccctggaca tggccgactt cgagttcgag cagatgttca ccgacgccct 5520 gggcatcgac gagtacggcg gcgaattcga gatgcccgtg gacaggattc tggaggccga 5580 actcgccgtg gagcagaaaa gcgaccaggg cgtggagggc cccggcggaa ccggcggcag 5640 cggcagcagc cccaacgacc ccgtgaccaa catctgccag gccgccgaca agcagctgtt 5700 caccctggtg gagtgggcca agaggattcc ccacttcagc agcctgcccc tggacgacca 5760 ggtgatcctg ctgagggccg gatggaacga gctgctgatc gccagcttca gccacaggag 5820 catcgacgtg agggacggca tcctgctggc caccggcctg cacgtccata ggaacagcgc 5880 ccacagcgcc ggagtgggcg ccatcttcga cagggtgctg accgagctgg tgagcaagat 5940 gagggacatg aggatggaca agaccgagct gggctgcctg agggccatca tcctgttcaa 6000 ccccgaggtg aggggcctga aaagcgccca ggaggtggag ctgctgaggg agaaggtgta 6060 cgccgccctg gaggagtaca ccaggaccac ccaccccgac gagcccggca gattcgccaa 6120 gctgctgctg aggctgccca gcctgaggag catcggcctg aagtgcctgg agcacctgtt 6180 cttcttcagg ctgatcggcg acgtgcccat cgacaccttc ctgatggaga tgctggagag 6240 ccccagcgac agctgagcat gcccccctct ccctcccccc cccctaacgt tactggccga 6300 agccgcttgg aataaggccg gtgtgcgttt gtctatatgt tattttccac catattgccg 6360 tcttttggca atgtgagggc ccggaaacct ggccctgtct tcttgacgag cattcctagg 6420 ggtctttccc ctctcgccaa aggaatgcaa ggtctgttga atgtcgtgaa ggaagcagtt 6480 cctctggaag cttcttgaag acaaacaacg tctgtagcga ccctttgcag gcagcggaac 6540 cccccacctg gcgacaggtg cctctgcggc caaaagccac gtgtataaga tacacctgca 6600 aaggcggcac aaccccagtg ccacgttgtg agttggatag ttgtggaaag agtcaaatgg 6660 ctctcctcaa gcgtattcaa caaggggctg aaggatgccc agaaggtacc ccattgtatg 6720 ggatctgatc tggggcctcg gtgcacatgc tttacatgtg tttagtcgag gttaaaaaac 6780 gtctaggccc cccgaaccac ggggacgtgg ttttcctttg aaaaacacga tccatatggc 6840 caccatgaag ctgctgagca gcatcgagca ggcttgcgac atctgcaggc tgaagaagct 6900 gaagtgcagc aaggagaagc ccaagtgcgc caagtgcctg aagaacaact gggagtgcag 6960 atacagcccc aagaccaaga ggagccccct gaccagggcc cacctgaccg aggtggagag 7020 caggctggag aggctggagc agctgttcct gctgatcttc cccagggagg acctggacat 7080 gatcctgaag atggacagcc tgcaagacat caaggccctg ctgaccggcc tgttcgtgca 7140 ggacaacgtg aacaaggacg ccgtgaccga caggctggcc agcgtggaga ccgacatgcc 7200 cctgaccctg aggcagcaca ggatcagcgc caccagcagc agcgaggaga gcagcaacaa 7260 gggccagagg cagctgaccg tgagccccga gtttcccggg atcaggcccg agtgcgtggt 7320 gcccgagacc cagtgcgcca tgaaaaggaa ggagaagaag gcccagaagg agaaggacaa 7380 gctgcccgtg agcaccacca ccgtcgatga ccacatgccc cccatcatgc agtgcgagcc 7440 cccccccccc gaggccgcca ggattcacga ggtcgtgccc aggttcctga gcgacaagct 7500 gctggtgacc aacaggcaga agaacatccc ccagctgacc gccaaccagc agttcctgat 7560 cgccaggctg atctggtatc aggacggcta cgagcagccc agcgacgagg acctgaaaag 7620 gatcacccag acctggcagc aggccgacga cgagaacgag gagagcgaca cccccttcag 7680 gcagatcacc gagatgacca tcctgaccgt gcagctgatc gtggagttcg ccaagggcct 7740 gcccggattc gccaagatca gccagcccga ccagatcacc ctgctgaagg cttgcagcag 7800 cgaggtgatg atgctgaggg tggccaggag gtacgacgcc gccagcgaca gcatcctgtt 7860 cgccaacaac caggcttaca ccagggacaa ctacaggaag gctggcatgg ccgaggtgat 7920 cgaggacctc ctgcacttct gcagatgtat gtacagcatg gccctggaca acatccacta 7980 cgccctgctg accgccgtgg tgatcttcag cgacaggccc ggcctggagc agccccagct 8040 ggtggaggag atccagaggt actacctgaa caccctgagg atctacatcc tgaaccagct 8100 gagcggcagc gccaggagca gcgtgatcta cggcaagatc ctgagcatcc tgagcgagct 8160 gaggaccctg ggaatgcaga acagcaatat gtgtatcagc ctgaagctga agaacaggaa 8220 gctgcccccc ttcctggagg agatttggga cgtggccgac atgagccaca cccagccccc 8280 ccccatcctg gagagcccca ccaacctgtg aatcgattag acatgataag atacattgat 8340 gagtttggac aaaccacaac tagaatgcag tgaaaaaaat gcttaatttg tgaaatttgt 8400 gatgctattg cttaatttgt aaccattata agctgcaata aacaagttaa taaaacattt 8460 gcattcattt tatgtttcag gttcaggggg agatgtggga ggttttttaa agcaagtaaa 8520 acctctacaa atgtggtatc tagagctctt ccaaaattaa tacgcattcg cgtgcgaaat 8580 cattaccctg ttatccctac gcctagcctt agggttcaca tctatgtcgg gtgcggagaa 8640 agaggtaatg aaatggcaat aacaggctag aaccagctaa cgttaggagc atagattggg 8700 gcattccgga actataaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt 8760 cgtgccagct gcataaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc 8820 gcgcttccgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg 8880 tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa 8940 agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg 9000 cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga 9060 ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg 9120 tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg 9180 gaagcgtggc gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc 9240 gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg 9300 gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca 9360 ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt 9420 ggcctaacta cggctacact agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag 9480 ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg 9540 gtggtttttt tgtttgcaag cagcagatta cgcgcagaaa aaaaggatct caagaagatc 9600 ctttgatctt ttctacgggg tctgacgctc agtggaacga aaactcacgt taagggattt 9660 tggtcatgag attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt 9720 ttaaatcaat ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga catgcgcagt taccaatgct 9780 taatcagtga ggcacctatc tcagcgatct gtctatttcg ttcatccata gttgcctgac 9840 tccccgtcgt gtagataact acgatacggg agggcttacc atctggcccc agtgctgcaa 9900 tgataccgcg agacccacgc tcaccggctc cagatttatc agcaataaac cagccagccg 9960 gaagcgccga gcgcagaagt ggtcctgcaa ctttatccgc ctccatccag tctattaact 10020 gttgccggga agctagagta agtagttcgc cagttaatag tttgcggagc gttgttgcca 10080 ttgctacagg catcgtggtg tcacgctcgt cgtttggtat ggcttcattc agctccggtt 10140 cccaacgatc aaggcgagtt acatgatccc ccatgttgtg caaaaaagcg gttagctcct 10200 tcggtcctcc gatggttgtc agaagtaagt tggccgcagt gttatcactc atggttatgg 10260 cagcactgca taattctctt actgtcatgc catccgtaag atgcttttct gtgactggtg 10320 agtattcaac caagtcattc tgagaatagt gtatgcggcg accgagttgc tcttgcccgg 10380 cgtcaatacg ggataatacc gcgccacata gcagaacttt aaaagtgctc atcattggga 10440 agcgttcttc ggggcgaaaa ctctcaagga tcttaccgct gttgagatcc agttcgatgt 10500 aacccacacg agcacccaac tgatcttcag catcttttac tttcaccagc gtttctgggt 10560 gagcaaaaac aggaaggcaa aatgccgcaa aaaagggaat aagggcgaca cggaaatgtt 10620 gaatactcat actcttcctt tttcaatatt attgaagcat ttatcagggt tattgtctca 10680 tgagcggata catatttgaa tgtatttaga aaaataaaca aataggggtt ccgcgcacat 10740 ttccccgaaa agtgccacct gaggtctaag aaaccattat tatcatgaca ttaacctata 10800 aaaataggcg tatcacgagg ccctttcttc tcgcgcgttt cggtgatgac ggtgaaaacc 10860 tctgacacat gcagctcccg gatacggtca cagcttgtct gtaagcggat gccgggagca 10920 gacaagcccg tcagggcgcg tcagcgggtg ttggcgggtg tcggggctgg cttaa 10975

Claims (70)

  1. 하기 화학식 I을 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00221

    상기식에서,
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소, 임의로 치환된 알킬, 및 할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
    R1 및 R2는 이들이 부착된 탄소원자와 함께 4- 내지 8-원 사이클로알킬을 형성하고;
    R3은 수소, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 아릴, 및 임의로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R4는 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    Figure pct00222

    Figure pct00223

    Figure pct00224

    및
    Figure pct00225

    X1은 -O- 및 -N(R8a)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    Y1은 -(CR9aR9b)m-이고;
    Z1는 -O- 및 -N(R8b)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는 Z1는 부존재하고;
    R6a는 하이드록시, 알킬, 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
    R6a는 하이드록시산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
    R7a 및 R7b는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R7a ' 및 R7b '는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시 알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8a 및 R8b는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R9a 및 R9b는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    m은 1, 2, 3, 또는 4이고;
    X2는 -O- 및 -N(R8c)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    Y2는 -(CR9cR9d)n-이고;
    Z2는 -O- 및 -N(R8d)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나 또는 Z2는 부존재하고;
    R6b는 하이드록시, 알킬, 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는 R6b는 하이드록시산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
    R7c 및 R7d는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8c 및 R8d는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R9c 및 R9d는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
    X는 -O- 및 -N(R8e)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R6c는 하이드록시, 알킬 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
    R6c는 하이드록시 산부가물 또는 아미노 산부가물을 형성하고;
    R7e 및 R7f는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8e는 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R6d는 하이드록시, 알킬 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나;
    R6d는 하이드록시산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
    R6f는 수소, 알킬, 아미노 및 하이드록시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    X5는 -O- 및 -N(R8k)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R7g 및 R7h는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8k는 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    X6은 -O- 및 -N(R81)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    X7은 -O- 및 -N(R8n)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R81은 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8m은 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8n은 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10a는 수소 및 -(CR11aR11b)o-B(R12a)(R12b)로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10b , R10c，및 R10d는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 알콕시알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬，임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐，임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 헤테로알킬, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -S02R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는
    Rl0b은 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, -N(H)CHO, -N(H)CN, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 헤테로알킬, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -S02R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고; 및/또는
    R10c 및 R10d는 2개의 인접한 탄소원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴그룹을 형성하고;
    Rlla 및 Rllb는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R12a 및 R12b은 하이드록시 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는 R12a 및 R12b는 함께 결합 -0(CR13aR13b)pO-을 형성하거나; 또는
    -B(R12a)(R12b)는 플루오라이드 부가물을 형성하고;
    R13a 및R13b 는 각각 독립적으로 수소 및 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    o는 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
    p는 2, 3, 또는 4이고;
    R5는 R4-3, R4-4, R4-8, R4-9, 또는 R4-10이거나; 또는 R5는 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
    Figure pct00226

    Figure pct00227
    및
    Figure pct00228

    X3은 -O- 및 -N(R8f)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    Y3는 -(CR9eR9f)q-이고;
    Z3는 -O- 및 -N(R8g)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는 Z3는 부존재하고;
    R6e는 하이드록시 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
    R6e는 하이드록시산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
    R7i 및 R7j는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8f 및 R8g는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R9e 및 R9f는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    q는 1, 2, 3, 또는 4이고;
    X4는 -O- 및 -N(R8h)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    Y4는 -(CR9gR9h)r-이고 ;
    Z4는 -O- 및 -N(R8i)-로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나, 또는 Z4는 부존재하고;
    R6g은 하이드록시 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
    R6g는 하이드록시산 부가물 또는 아미노산 부가물을 형성하고;
    R7k 및 R71는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 알콕시, 및 알킬티오로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8h 및 R81은 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R9g 및 R9h는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    r은 1, 2, 3, 또는 4이고;
    R10e는 수소 및 -(CR11cR11d)s-B(R12c)(R12d)로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10f, R10g, 및 R10h는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16 , -S02R17 , -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
    R10f는 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -S02R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10g 및 R10h은 2개의 인접한 탄소원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴 그룹을 형성하거나; 또는
    Rllc 및 Rlld는 각각 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R12c 및 R12d는 하이드록시 및 알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되거나; 또는
    R12c 및 R12d는 함께 결합 -0(CR13cR13d)tO-를 형성하거나; 또는
    -B(R12c)(R12d)는 플루오라이드 부가물을 형성하고;
    R13c 및 R13d는 각각 독립적으로 수소 및 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    s는 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
    t는 2, 3, 또는 4이고;
    R14a 및 R14b는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -SO2R17, -N(R18)C0R19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R15a 및 R15b는 각각 독립적으로 수소, 할로, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노, -N(H)CHO, -N(H)CN, 임의로 치환된 알킬, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 임의로 치환된 헤테로사이클, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시, 알킬티오, 카르복사미도, 술폰아미도, -COR16, -SO2R17, -N(R18)COR19, -N(R18)S02R20 또는 N(R18)C=N(R21)-아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R16은 수소, 하이드록시, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 알콕시, 아릴옥시, 및 아릴알킬옥시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R17은 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 및 임의로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R18는 수소, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 및 임의로 치환된 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R19는 수소, 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 알콕시, 아릴옥시, 아릴알킬옥시 및 아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R20은 할로알킬, 하이드록시알킬, 아릴알킬, 임의로 치환된 알킬, 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 알케닐, 임의로 치환된 알키닐, 임의로 치환된 헤테로사이클, 임의로 치환된 아릴, 임의로 치환된 헤테로아릴, 및 아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R21은 수소, 알킬, 아릴, 시아노, 및 니트로로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    단:
    a) R4가 R4-5, R4-6, 또는 R4-7이고 R5가 R5-3인 경우, R10a 또는 R10e의 하나는 수소가 아니고;
    b) R4가 R4-5, R4-6, 또는 R4-7이고 R5가 R5-4 또는 R5-5인 경우, R10a는 수소가 아니다.
  2. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-1이고;
    R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10e는 수소인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  3. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-2이고;
    R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10e는 수소인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  4. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-3이고;
    R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10e는 수소인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  5. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-4이고;
    R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10e는 수소인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    [청구항5]
    제1항에 있어서,
    R4는 R4-4이고;
    R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10a는 -(CR11aR11b)o-B(R12a)(R12b)인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물
  6. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-5이고;
    R5는 R5-3이고;
    R10e는 -(CRl1cRlld)s-B(R12c)(R12d)인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  7. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-6이고;
    R5는 R5-3, R5-4, 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10a는 -(CRllaRllb)o-B(R12a)(R12b)인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  8. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-7이고;
    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10a는 -(CRllaRllb)o-B(R12a)(R12b)인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  9. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-8이고;
    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10a는 -(CRllaRllb)o-B(R12a)(R12b)인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  10. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-9이고;
    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10a는 수소인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  11. 제1항 또는 제5항에 있어서,
    하기 화학식 II를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00229

    상기식에서,
    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
  12. 제1항, 제5항 및 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    o가 0인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  13. 제1항, 제5항, 제11항 및 제12항 중 어느 한 항에 있어서,
    R10b 및 R10c는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 알콕시알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  14. 제1항 또는 제6항에 있어서,
    하기 화학식 III를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00230

  15. 제1항, 제6항 및 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
    o가 0인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  16. 제1항, 제6항, 제14항 및 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
    R10b, R10c, 및 R10d는 독립적으로 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고,
    R10b는 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고,
    R10c 및 R10d는 2개의 인접한 탄소원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴을 형성하는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  17. 제1항에 있어서,
    하기 화학식 IV를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00231

    상기식에서,
    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10e는 수소이고,
    R6a는 하이드록시인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  18. 제17항에 있어서,
    하기 화학식 V를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00232

  19. 제17항에 있어서,
    하기 화학식 VI를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00233

  20. 제1항, 및 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    R7a는 수소, 할로겐 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  21. 제1항 및 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    Z1가 부존재하는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  22. 제1항 및 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    Z1은 -O-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  23. 제1항 및 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    Z1은 -N(H)-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  24. 제1항 및 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서,
    X1이 -O-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  25. 제1항 및 제17항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
    X1이 -N(H)-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  26. 제1항 및 제17항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서,
    R9a 및 R9a는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  27. 제1항, 제17항 내지 제21항 및 제24항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서,
    Z1이 부존재하고, m이 1, 2 또는 3인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  28. 제1항에 있어서,
    하기 화학식 VII를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물:
    Figure pct00234

    상기식에서,
    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R6b는 하이드록시이고;
    R10e는 수소이다
  29. 제28항에 있어서,
    하기 화학식 VIII를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물;
    Figure pct00235

  30. 제28항에 있어서,
    하기 화학식 IX를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물;
    Figure pct00236

  31. 제1항, 및 제28항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서,
    R7c는 수소, 할로겐 및 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  32. 제1항 및 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    Z2가 부존재하는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  33. 제1항 및 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    Z2가 -O-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  34. 제1항 및 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    Z2가 -N(H)-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  35. 제1항 및 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    X2가 -O-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  36. 제1항 및 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    X2가 -N(H)-인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  37. 제1항 및 제28항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서,
    R9c및 R9d가 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  38. 제1항, 제28항 내지 제32항 및 제35항 내지 제37항중 어느 한 항에 있어서,
    Z2가 부존재하고 n이 1, 2 또는 3인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  39. 제1항에 있어서,
    R4가 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
    Figure pct00237

    Figure pct00238

    Figure pct00239

    Figure pct00240

    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10e는 수소인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  40. 제39항에 있어서,
    R7a는 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R8a는 수소 및 C1-4 알킬로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R6f는 수소, C1-4 알킬, 하이드록시, 및 -NH2로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  41. 제1항에 있어서,
    R4는 R4-5이고,
    R10a는 수소이고,
    R10b, R10c 및 R10d는 독립적으로 수소, 할로겐, 아미노, 시아노, -N(H)CHO-, -N(H)CN, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10b는 수소, 할로겐, 하이드록시, 아미노, 시아노, -N(H)CHO-, -N(H)CN, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10c 및 R10d는 2개의 인접한 탄소원자와 함께 융합된 임의로 치환된 사이클로알킬, 임의로 치환된 헤테로사이클로, 또는 임의로 치환된 헤테로아릴을 형성하고,
    R5는 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
    Figure pct00241
    및
    Figure pct00242

    R7a는 수소, 할로겐, 하이드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시 및 C1-4 할로알콕시로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  42. 제1항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 임의로 치환된 C1-6 알킬이고;
    R2는 수소 및 임의로 치환된 C1-6 알킬이고
    R3는 임의로 치환된 C1-6 알킬인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  43. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1은 메틸, 에틸, n-프로필, 및 n-부틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R2는 수소 및 메틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  44. 제43항에 있어서,
    R3이 메틸 및 tert-부틸로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  45. 제44항에 있어서,
    R2가 수소이고 R3이 tert-부틸인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  46. 제1항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 임의로 치환된 C1-6 알킬이고; R2가 수소이고; R3이 임의로 치환된 페닐, 임의로 치환된 피리딜, 및 임의로 치환된 피리미디닐으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  47. 제44항에 있어서,
    R1, R2 및 R3는 각각 메틸인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  48. 제1항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 화합물이 광학활성을 나타내지 않는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  49. 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1, R2 및 R3을 갖는 탄소원자가 비대칭 탄소원자이고, 상기 비대칭 탄소원자의 절대배치가 R인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  50. 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1, R2 및 R3을 갖는 탄소원자가 비대칭 탄소원자이고, 상기 비대칭 탄소원자의 절대배치가 S인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  51. 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 X 를 갖는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00243

    상기 식에서
    R1은 R3와 동일하지 않다.
  52. 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 XI 를 갖는
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
    Figure pct00244

    상기 식에서
    R1은 R3와 동일하지 않다.
  53. 제51항 또는 제52항에 있어서,
    R4는 하기 식으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고:
    Figure pct00245

    Figure pct00246
    및
    Figure pct00247

    R5는 R5-3, R5-4 및 R5-5로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
    R10e는 수소인
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  54. 제1항에 있어서,
    하기 화학식으로 이루어진 그룹으로부터 선택된
    화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물:
    Figure pct00248

    Figure pct00249

    Figure pct00250

    Figure pct00251

    Figure pct00252

    Figure pct00253

    Figure pct00254

    Figure pct00255

    Figure pct00256

    Figure pct00257

    Figure pct00258

    Figure pct00259

    Figure pct00260

    Figure pct00261

    Figure pct00262

    Figure pct00263

    Figure pct00264

    Figure pct00265

    및
    Figure pct00266

  55. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
  56. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염으로 숙주세포를 접촉시킴을 포함하는 분리된 숙주세포 또는 비인간 유기체에서 목적 유전자의 유전자 발현을 조절하는 방법.
  57. 제56항에 있어서, 상기 숙주 세포 또는 비인간 유기체가 상기 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 방법.
  58. 제56항에 있어서,
    상기 목적 유전자의 발현수준이 상기 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염의 부재하의 상기 목적 유전자의 발현수준에 비하여 증가하는
    방법.
  59. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 대상체에게 투여함을 포함하는 대상체의 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하는 방법.
  60. 제59항에 있어서, 상기 대상체 내의 숙주 세포가 상기 화합물을 결합하는 리간드 결합 도메인을 포함하는 유전자 스위치를 엔코딩하는 뉴클레오타이드를 포함하는 방법.
  61. 제60항에 있어서, 상기 대상체가 인간인 방법.
  62. 제61항에 있어서,
    상기 질환, 장애, 상해 또는 증상이 암, 대사 관련 질환, 신장 질환, 빈혈, 자가 면역성 질환, 안과 질환, 혈액 질환, 신경성 질환, 폐 질환, 류마티스 질환, 심장 질환, 간 질환 및 감염성 질환으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
  63. 제60항에 있어서, 상기 유전자 스위치가 에크디손 수용체 리간드 결합 도메인을 포함하는 방법.
  64. 제60항에 있어서, 상기 숙주세포가 펩타이드, 단백질 또는 폴리펩타이드를 엔코딩하는 폴리뉴클레오타이드를 추가로 포함하고, 이의 발현이 상기 유전자 스위치에 의해 조절되는 방법.
  65. 제64항에 있어서, 상기 폴리펩타이드가 IL-12 또는 그의 서브유닛을 엔코딩하는 방법.
  66. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서,
    질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하는데 사용하기 위한 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물.
  67. 제66항에 있어서,
    상기 질환, 장애, 상해 또는 증상이 암, 대사 관련 질환, 신장 질환, 빈혈, 자가 면역성 질환, 안과 질환, 혈액 질환, 신경성 질환, 폐 질환, 류마티스 질환, 심장 질환, 간 질환 및 감염성 질환으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 방법.
  68. 질환, 장애, 상해 또는 증상을 치료하기 위한 약제를 제조하기 위한 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물의 용도.
  69. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물의 살충 유효량으로 해충 또는 이의 서식지를 접촉시킴을 포함하는 해충의 방제방법.
  70. 제1항 내지 제54항 중 어느 한 항의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함하는 키트.
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