KR20120007015A

KR20120007015A - 피세아탄놀 함유 조성물 및 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법

Info

Publication number: KR20120007015A
Application number: KR1020117025604A
Authority: KR
Inventors: 유코 마츠이; 마사노리 가메이; 겐키치 스기야마
Original assignee: 모리나가 세이카 가부시키가이샤
Priority date: 2009-04-03
Filing date: 2009-04-03
Publication date: 2012-01-19
Also published as: EP2415743A4; BRPI0925037A2; EP2415743A1; BRPI0925037B1; CA2755418C; US9393191B2; PL2415743T3; KR101305846B1; PT2415743E; ES2545975T3; AU2009343571A1; HK1164832A1; EP2415743B1; DK2415743T3; CA2755418A1; JPWO2010113315A1; HRP20151037T1; JP5347018B2; US20130165529A1; HUE027734T2

Abstract

[과제] 천연물 유래의 조성물로서 피세아탄놀을 고함유로 함유하는 피세아탄놀 함유 조성물 및 그 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법을 제공하는 것에 있다.
[해결수단] 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 포함하는 피세아탄놀 함유 조성물을 패션 프루트 종자(passion fruit seed)로부터 추출하여 얻는다. 또한, 그 피세아탄놀을 추출할 때, 패션 프루트 종자를 분쇄한 후, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매로부터 선택된 1종 이상을 첨가하여 교반해서, 상기 용매 중에 피세아탄놀을 추출한다. 이 경우, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매의 양쪽 용매를 사용하여 단계 추출하는 것이 바람직하다.

Description

피세아탄놀 함유 조성물 및 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법{Piceatannol-containing composition and method of producing piceatannol-containing composition}

본 발명은, 패션 프루트 종자 유래의 피세아탄놀을 함유하는 피세아탄놀 함유 조성물 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

하기 비특허문헌 1에는, 포도 유래의 폴리페놀류 화합물인 레스베라트롤(Resveratrol)이나 피세아탄놀(Piceatannol)에는, 멜라닌 생산세포에 의한 멜라닌의 생성을 억제하는 작용효과가 있는 것이 기재되어 있다. 그러나, 그 작용효과의 확인시험을 위해서는, 시판의 시약이 사용되고 있어, 포도 등 천연물에 유래하는 피세아탄놀 등을 함유하는 조성물을 얻는 것에 관해서는 기재가 없다.

한편, 하기 특허문헌 1에는, 레스베라트롤을, 호장(Reynoutria japonica Houtt.var.japnica) 뿌리의 추출물로부터 저렴하게 선택적 또한 고효율로 농축·회수하는 것이 기재되어 있다. 또한, 하기 특허문헌 2에는, 레스베라트롤을 함유하는 월귤 추출물이 기재되어 있다. 또한, 하기 특허문헌 3, 4에는, 패션 프루트(시계초과, Passiflora sp.)의 추출물, 특히 패션 프루트 과피의 추출물에 관한 기재가 있고, 그 추출물의 식품, 영양보조식품, 및 의학용으로의 사용에 관한 기재가 있다.

그러나, 상기 문헌의 기술은, 모두, 천연물로부터 얻어지는 조성물로서 피세아탄놀을 고함유로 포함하는 것을 제공하는 기술은 아니었다.

일본국 특허공개 제2005-281179호 공보 일본국 특허공개 제2009-13159호 공보 일본국 특허공개 제2007-302659호 공보 일본국 특허공표 제2007-531734호 공보

Takako Yokozawa and You Jung Kim, Piceatannol Inhibits Melanogenesis by Its Antioxidative Actions, Biological & Pharmaceutical Bulletin Vol. 30 (2007) No. 11 p2007-2011

식품 안전에 관한 일반적 관념에서는, 기능성 식품이나 건강식품 등의 음식품에 배합되는 피세아탄놀은, 천연물 유래의 것인 것이 바람직하다. 그러나, 종래, 피세아탄놀을 풍부하게 포함하는 천연물이 알려져 있지 않고, 또한, 포도 등의 천연물로부터는 매우 저함유의 조성물밖에 얻어지지 않았다.

따라서, 본 발명의 목적은, 천연물 유래의 조성물로서 피세아탄놀을 고함유로 함유하는 피세아탄놀 함유 조성물, 및 그의 제조방법을 제공하는 것에 있다.

본 발명자들은, 상기 목적을 달성하기 위해 예의 연구한 결과, 종래, 이용하는 용도도 없어 폐기하고 있었던 패션 프루트 종자(passion fruit seed)에, 피세아탄놀이 풍부하게 포함되어 있는 것을 발견하고, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물은, 패션 프루트 종자로부터 얻어지고, 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 포함하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물에 의하면, 피세아탄놀을 고함유로 함유하는, 천연물 유래의 조성물을 제공할 수 있다. 그리고 천연물 유래의 조성물이기 때문에, 화장품이나 의약품, 더 나아가서는 기능성 식품이나 건강식품 등의 음식품에 배합하는데도 적합하다.

한편, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법은, 패션 프루트 종자를 분쇄한 후, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매로부터 선택된 1종 이상을 첨가하여 교반해서, 상기 용매 중에 피세아탄놀을 추출하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 의하면, 패션 프루트 종자로부터의 피세아탄놀의 추출에, 함수 알코올계 용매 또는 함수 케톤계 용매를 사용하기 때문에, 천연물 유래의 조성물로서 피세아탄놀을 고함유로 함유하는 것을, 고수율로 제조할 수 있다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 패션 프루트 종자를 분쇄한 후, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매 중 어느 한쪽을 첨가하여 교반해서, 그 용매 중에 피세아탄놀을 추출하여 제1 추출물을 얻고, 추가로, 상기 추출물로서 회수되지 않은 잔사에, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매 중 상기에서 선택하지 않은 다른 한쪽을 첨가하여 교반해서, 그 용매 중에 피세아탄놀을 추출하여 제2 추출물을 얻어, 상기 제1 추출물과 제2 추출물을 혼합하는 것이 바람직하다. 이 태양에 의하면, 복수의 용매로 단계 추출하기 때문에, 피세아탄놀을 고함유로 함유하는 피세아탄놀 함유 조성물을, 보다 고수율로 제조할 수 있다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 상기 패션 프루트 종자는, 패션 프루트의 생 종자 또는 패션 프루트의 생 종자를 건조한 종자인 것이 바람직하다.

또한, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 상기 함수 알코올계 용매가 함수 에탄올이거나, 또는 상기 함수 케톤계 용매가 함수 아세톤인 것이 바람직하다. 그 함수율로서는, 함수 에탄올의 경우에는, 에탄올을 20~99.9 체적% 포함하는 것인 것이 바람직하다. 함수 아세톤의 경우에는, 아세톤을 20~99.9 체적% 포함하는 것인 것이 바람직하다. 이들 태양에 의하면, 피세아탄놀의 추출 효율이 보다 좋다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 상기 각 용매 중에 있어서의 교반을, 초음파진동 또는 진탕에 의해 행하는 것이 바람직하다. 이 태양에 의하면, 피세아탄놀의 추출 효율이 보다 좋다.

또한, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 추출 후, 용매를 감압 증류 제거하는 것이 바람직하다.

한편, 본 발명의 다른 하나는, 패션 프루트 종자로부터 얻어지고, 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 포함하는 피세아탄놀 함유 조성물을 첨가한 음식품이다.

또한, 본 발명의 또 다른 하나는, 패션 프루트 종자로부터 얻어지고, 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 포함하는 피세아탄놀 함유 조성물을 첨가한 화장품이다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물에 의하면, 피세아탄놀을 고함유로 함유하는, 천연물 유래의 조성물을 제공할 수 있다. 그리고 천연물 유래의 조성물이기 때문에, 화장품이나 의약품, 더 나아가서는 기능성 식품이나 건강식품 등의 음식품에 배합하는데도 적합하다. 한편, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 의하면, 패션 프루트 종자로부터의 피세아탄놀의 추출을 위한 용매로서, 함수 알코올계 용매 또는 함수 케톤계 용매를 사용하기 때문에, 천연물 유래의 조성물로서 피세아탄놀을 고함유로 함유하는 것을, 고수율로 제조할 수 있다. 또한, 함수 알코올계 용매 또는 함수 케톤계 용매에 속하는 복수의 용매로 단계적으로 추출하는 것도 가능하여, 이것에 의해 보다 고수율로 제조할 수 있다.

도 1은 종자(A) 과피(b) 및 과육(c)으로부터의 추출물의 HPLC 크로마토그램을 나타내는 도표이다.
도 2는 도 1의 HPLC 분석에서 41분 부근에 용출되는 성분의 질량 스펙트럼(A) 및 UV 스펙트럼(B)을 나타내는 도표이다.
도 3은 레스베라트롤(Resveratrol, 분자량 228)의 질량 스펙트럼(A) 및 UV 스펙트럼(B)을 나타내는 도표이다.
도 4는 피세아탄놀(Piceatannol, 분자량 244)의 질량 스펙트럼(A) 및 UV 스펙트럼(B)을 나타내는 도표이다.
도 5는 용매인 에탄올(A) 또는 아세톤(B)의 함수율이 피세아탄놀의 추출 효율에 미치는 영향을 나타내는 도표이다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물은, 패션 프루트 종자로부터 얻어진 조성물로서, 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 함유한다. 그 형상은 액상, 고형상, 반고형상, 겔상 등이어도 되고, 또한, 패션 프루트 종자 그 자체나 종자를 분쇄한 페이스트나 종자를 동결건조하여 분쇄한 분말 등의 종자 가공물이어도 된다. 그 피세아탄놀의 고형분 환산 함유량으로서는, 0.0001~99.9 질량%인 것이 바람직하고, 0.01~50 질량%인 것이 더욱 바람직하며, 0.1~10 질량%인 것이 가장 바람직하다.

피세아탄놀(Piceatannol)은, 하기 화학식 1로 표시된다.

상기 화학식으로 표시되는 피세아탄놀은, 2개의 페닐기가 트랜스형의 알켄기로 연결된 구조의, 트랜스형 피세아탄놀인데, 본 발명에 있어서, 피세아탄놀(Piceatannol)은, 상기 화학식에 있어서, 2개의 페닐기가 시스형의 알켄기로 연결된 구조의, 시스형 피세아탄놀도 포함하는 개념이다.

패션 프루트는, 패시플로라속 시계초과의 식물로, 별명:과일시계초(果物時計草)로 불리고, 그 열매는 달콤새콤하여 과일로서 열매를 그대로 먹거나, 그 과즙을 주스로 하여 마시거나, 젤리, 케이크 등의 음식품에 배합하여, 플레이버로 사용되거나 하고 있다. 패션 프루트의 종자는 단단하여, 주스 등으로 하는 경우에는 과실로부터 제거되고, 과실을 씨째 음식한 경우에도 그 외피는 단단하여 소화를 받기 어렵기 때문에 그대로 배설되어 버린다. 본 발명은, 종래, 이용하는 용도도 없어 폐기하고 있던 패션 프루트 종자에, 피세아탄놀이 풍부하게 포함되어 있는 것을 발견한 것에 기초하는 발명이다. 또한, 본 발명에 사용되는, 패션 프루트 종자는, 종래부터의 패션 프루트의 식경험으로부터도 증명되는 바와 같이, 기능성 식품이나 건강식품 등의 음식품에 배합하더라도, 그 안전성에는 문제가 없는 것이다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물은, 바람직하게는 예를 들면, 생으로, 또는 건조시킨 패션 프루트 종자를 분쇄하여, 각종 용매를 사용해서 추출하는 방법에 의해 얻을 수 있다. 그 패션 프루트 종자에는, 추출 효율을 좋게 하기 위해, 적절히, 산 또는 알칼리 분해, 효소 분해 등의 화학적 처리를 행하고, 그것으로부터 추출해도 된다. 또한, 하기에 설명하는 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 의하면, 피세아탄놀을 고함유로 함유하는 조성물을 특히 고수율로 얻을 수 있기 때문에, 그 방법에 의해 얻는 것이 가장 바람직하다.

이하에, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 대해서 설명한다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 먼저, 패션 프루트 종자를 분쇄한다. 패션 프루트 종자는, 생으로, 또는 건조시킨 패션 프루트 종자를 사용해도 되고, 추출 효율을 좋게 하기 위해, 적절히, 산 또는 알칼리 분해, 효소 분해 등의 화학적 처리를 행하고, 그것으로부터 추출해도 된다. 분쇄는, 공지의 분쇄기를 사용해서 행할 수 있다. 또한, 패션 프루트 종자에는 유분이 많기 때문에 분쇄 후에는 페이스트상이 되는 경우가 있다.

다음으로, 분쇄한 패션 프루트 종자에 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매로부터 선택된 1종 이상을 첨가하여 교반해서, 그 용매 중에 피세아탄놀을 추출한다.

함수 알코올계 용매로서는, 에탄올, 메탄올, 프로판올 등의 함수 용매를 사용할 수 있고, 특히, 함수 에탄올이 바람직하다. 또한, 함수 케톤계 용매로서는, 아세톤, 메틸에틸케톤, 디에틸케톤, 클로로아세톤 등의 함수 용매를 사용할 수 있고, 특히, 함수 아세톤이 바람직하다.

그 함수율로서는, 함수 에탄올의 경우에는, 에탄올을 20~99.9 체적% 포함하는 것인 것이 바람직하고, 40~99.9 체적% 포함하는 것인 것이 더욱 바람직하며, 60~80 체적% 포함하는 것인 것이 가장 바람직하다. 함수 아세톤의 경우에는, 아세톤을 20~99.9 체적% 포함하는 것인 것이 바람직하고, 40~99.9 체적% 포함하는 것인 것이 더욱 바람직하며, 60~80 체적% 포함하는 것인 것이 가장 바람직하다. 상기 범위를 벗어나면, 피세아탄놀의 추출 효율이 나빠지는 경우가 있기 때문에 바람직하지 않다. 또한, 이하, 함수 용매의 함수율의 표기에 대해서는, 간편화를 위해, 예를 들면, 20 체적%로 함수시킨 80 체적% 에탄올을 「80% 함수 에탄올」로 표기한다. 또한, 예를 들면, 30 체적%로 함수시킨 70 체적% 에탄올을 「70% 함수 에탄올」로 표기한다. 더욱이, 예를 들면, 30 체적%로 함수시킨 70 체적% 아세톤을 「70% 함수 아세톤」으로 표기한다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 상기 각 용매 중에 있어서의 교반을, 초음파진동 또는 진탕에 의해 행하는 것이 바람직하다. 이것에 의하면, 분쇄되어 상기 각 용매에 접한 패션 프루트 종자에, 유효하게 진동이 부여되기 때문에, 패션 프루트 종자로부터의 상기 각 용매 중으로의 피세아탄놀의 추출 효율을 높일 수 있다. 초음파진동은 공지의 초음파장치에 의해 부여할 수 있다. 또한, 진탕은 공지의 진탕장치에 의해 부여할 수 있다.

또한, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 추출 후, 상기 용매를 감압 증류 제거하는 것이 바람직하다. 이것에 의하면, 유기 용매를 포함하지 않는 조성물로 할 수 있어, 기능성 식품이나 건강식품 등의 음식품에 배합하기 위한 식품 소재로서, 그 안전성의 기준 등에 적합하게 하는 것이 가능하다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법에 있어서는, 복수의 용매로 단계적인 추출을 행할 수 있다. 이것에 의해, 피세아탄놀을 고함유로 함유하는 피세아탄놀 함유 조성물을, 보다 고수율로 제조할 수 있다.

구체적으로는, 예를 들면, 패션 프루트 종자를 분쇄한 후, 상기 함수 알코올계 용매 및 상기 함수 케톤계 용매 중 어느 한쪽을 첨가하여 교반해서, 그 용매 중에 피세아탄놀을 추출하여 제1 추출물을 얻는다. 원심 등에 의해 추출물과 그 추출물로서 회수되지 않은 잔사로 분리하여, 그 잔사에, 상기 용매 중 선택하지 않은 다른 한쪽을 첨가하여 교반해서, 그 용매 중에 피세아탄놀을 추출하여 제2 추출물을 얻는다. 그리고, 상기 제1 추출물과 제2 추출물을 혼합한다. 또한, 이 제2 추출물 단독으로도 패션 프루트 종자의 추출물로서 이용 가능한 것은 물론이다.

또한, 패션 프루트 종자가, 상기 함수 알코올계 용매 또는 상기 함수 케톤계 용매에 의한 제1 추출 처리를 받음으로써, 그 텍스쳐 등의 특성이 추출에 적합한 것으로 변화되는 것이 생각되기 때문에, 계속되는 제2 추출 처리시에는, 상기 함수 알코올계 용매 또는 상기 함수 케톤계 용매를 사용하는 경우는 물론, 그 이외의 용매를 사용하는 경우에도, 그 추출 효율이 개선되는 것을 기대할 수 있다. 또한, 후술하는 실시예에서도 나타내어지는 바와 같이, 상기 함수 알코올계 용매 또는 상기 함수 케톤계 용매의 추출 효율이 좋은 것은 그 함수에 의한 것으로 생각되기 때문에, 물이나 수성 용매로 패션 프루트 종자에 대해 제1 처리를 행하면, 계속되는 제2 추출 처리시에는, 상기 함수 알코올계 용매 또는 상기 함수 케톤계 용매를 사용하는 경우는 물론, 그 이외의 용매를 사용하는 경우에도, 그 추출 효율이 개선되는 것을 기대할 수 있다.

상기 방법으로 얻어진 패션 프루트 종자의 추출물은, 이것을, 그대로 또는 농축하여 액체상의 것을 피세아탄놀 함유 조성물로 하는 것도 가능하다. 또한 동결건조 또는 분무건조에 의해 분말화하여 분말상의 것을 피세아탄놀 함유 조성물로 하는 것도 가능하다. 또한, 이들 형태에 제한되는 것도 아니다. 추출물 중에 포함되는 불용물은, 적절히, 여과 등으로 제거할 수 있다. 불용물은 추가로 분쇄하여, 미세입자상으로 해도 된다.

또한, 상기와 같이 하여 얻어지는 패션 프루트 종자로부터의 1차적 추출물을, 이온 교환, 사이즈 배제 칼럼크로마토법, HPLC법, 겔 여과, 막분리 등에 의해, 피세아탄놀을 지표로 하여 분획, 정제하여, 이것을 피세아탄놀 함유 조성물로 하는 것도 가능하다.

구체적으로는, 예를 들면, 후술하는 실시예에서 나타내어지는 바와 같이, 패션 프루트 종자로부터 추출한 조성물을 하기 조건으로 HPLC에 걸었을 때에는 피세아탄놀은 41분 부근에 용출된다. 또한, 이 용출 분획에 대해서 질량분석장치에 의한 질량 스펙트럼 측정을 행하면, 네거티브 이온 모드의 시그널로서 m/z243을 나타낸다.

[HPLC 조건]

·칼럼 : Mightysil RP-18 GP150-4.6 직경 4.6 ㎜, 길이 150 ㎜(간토 가가쿠 가부시키가이샤 제조)

·칼럼온도 : 40℃

·용출조건 : 유속 1 ㎖/min, 0% 메탄올→30% 메탄올(60 min)

·UV 검출 : 280 nm

따라서, 본 발명에 있어서는, 상기에 예시되는 바와 같은 피세아탄놀의 물성을 지표로 하여, 적절히 분획, 정제하여, 피세아탄놀의 함유량이 높여진, 패션 프루트 종자 유래의 피세아탄놀 함유 조성물을 조제할 수 있다.

본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물은, 필요에 따라, 약학적으로 허용되는 기재나 담체를 첨가하여, 정제, 과립제, 산제, 액제, 분말, 과립, 캡슐제, 젤리상제 등의 형태로 하여, 이것을 의약에 이용할 수 있을뿐 아니라, 연고제, 크림제, 젤, 팩, 화장수, 화장료 등의 형태로 하여, 이것을 화장품으로서 이용할 수 있다.

또한, 본 발명의 피세아탄놀 함유 조성물은, 특정 보건용 식품, 영양보조식품, 기능성 식품 등에 배합하여 섭취하는 것도 가능하다. 이러한 식품으로서는, 예를 들면, 초컬릿, 비스킷, 껌, 캔디, 쿠키, 구미(gummy), 타정과자 등의 과자류; 시리얼; 분말음료, 청량음료, 유음료, 영양음료, 탄산음료, 젤리음료 등의 음료; 아이스크림, 샤벳 등의 냉과(冷菓)를 들 수 있다. 추가로, 메밀 국수, 파스타, 우동, 소면 등의 면류도 바람직하게 예시할 수 있다. 또한, 특정 보호용 식품이나 영양보조식품 등의 경우라면, 분말, 과립, 캡슐, 시럽, 태블릿, 당의정 등의 형태의 것이어도 된다.

실시예

이하 실시예를 들어 본 발명을 구체적으로 설명하나, 이들 실시예는 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

<시험예 1> [패션 프루트로부터의 피세아탄놀의 검출·동정]

패션 프루트를 과피·과육·종자의 3개의 부위로 나누고, 각각을 동결건조하여, 분쇄기(상품명 「샘플밀 형식 SK-M」, 교리츠 리코 가부시키가이샤)로 분쇄하여, 각 부위를 80% 함수 에탄올로 추출하였다. 원심 후, 그 상청을 취하여 증발 농축 후, 동결건조하여 분말로 하였다. 이 분말을 물에 녹여 추출물로 하였다. 그리고, 각각의 고형분 농도를, 종자 추출물에 대해서는 0.01 g/㎖로 희석하고, 과피 추출물, 또는 과육 추출물에 대해서는 0.1 g/㎖로 희석하여, 그들의 5 ㎕씩을 HPLC에 걸었다.

HPLC에 의한 분석 조건은, 이하와 같이 하였다.

·칼럼온도 : 40℃

·용출 조건 : 유속 1 ㎖/min, 0% 메탄올→30% 메탄올(60 min)

·UV 검출 : 280 nm

도 1(A)~도 1(C)에는, 상기 각각의 추출물의 HPLC 크로마토그램을 나타낸다. 그 결과, 도 1(A)에 나타내어지는 바와 같이, 종자 추출물에 대해서는, 41분 부근에 피크가 보였다. 이에 비해, 과피 및 과육으로부터의 추출물에 대해서는, 인젝션한 고형분 농도가, 종자 추출물의 10배임에도 불구하고, 41분 부근의 피크를 확인할 수 없었다.

다음으로, 종자 추출물의, 상기 유지시간 41분 부근에 용출되는 성분이, 어떠한 물질인지를 이하와 같이 동정하였다.

먼저, HPLC/질량분석장치(써모 일렉트론 가부시키가이샤 제조, 장치명 「Thermo-LCQ-MS/MS」)를 사용하여, 그 질량 스펙트럼을 측정하였다(도 2(A)). 포지티브, 네거티브의 양쪽 이온 모드로 검토하였으나 네거티브에 양호한 이온이 발견되었기 때문에, 그 데이터를 사용하였다. 그 결과, 주요 시그널 m/z243은, (M-H)^-이고, 다른 피크 m/z279는 (M+2H₂O-H)^-로 귀속되고, m/z487은 (M×2-H)^-로 귀속될 수 있었다. 따라서, 분자량을 244로 결정할 수 있었다. 또한, UV 스펙트럼을 취하면, λ_max로서, 220 nm, 304 nm, 322 nm가 관찰되었다(도 2(B)).

이들 질량 스펙트럼이나 UV 스펙트럼의 결과는, 피넛 과피에 포함되는 폴리페놀인 레스베라트롤(Resveratrol, 분자량 228)과 유사하였다(도 3(A),(B) 참조). 또한, 별도로 폴리페놀을 흡착하는 수지인 폴리비닐폴리피롤리돈(PVPP: Polyvinylpolypyrrolidone)으로의 흡착도 확인되었다. 또한, 상기 41분 부근의 피크는, 동일한 HPLC 조건에서의 레스베라트롤의 유지시간에 비해, 역상 칼럼으로의 유지시간이 작았다. 이들을 종합하여, 상기 종자 추출물의, 유지시간 41분 부근에 용출되는 성분은, 레스베라트롤보다 수산기 1개분 분자량이 큰, 하기 화학식 1로 표시되는 피세아탄놀(Piceatannol, 분자량244)이라고 생각되었다.

[화학식 1]

이에, 피세아탄놀의 순화합물(시그마사 제조)에 대해서, 상기와 동일한 조건에서의 HPLC 분석을 행하여, 추가로 질량 스펙트럼과 UV 스펙트럼을 얻었다(도 4(A),(B)). 그 결과, HPLC에 있어서의 유지시간, 질량 스펙트럼 및 UV 스펙트럼의 귀속이 모두 일치하고 있었다.

이상으로부터, 상기 종자 추출물의, 상기 HPLC 분석에서의 41분 부근의 피크는 피세아탄놀의 피크로, 패션 프루트의 종자에는 피세아탄놀이 많이 포함되어 있는 것이 명확해졌다. 한편, 패션 프루트의 과피나 과육으로부터는 피세아탄놀은 검출되지 않았다.

<시험예 2> [패션 프루트 종자로부터의 피세아탄놀의 추출-그 첫번째]

패션 프루트 종자로부터의 피세아탄놀의 추출방법에 대해서 검토하였다. 구체적으로는, 일본산과 외국산의 2종류의 패션 프루트의 종자에 대해서, 각종 용매를 사용하여, 피세아탄놀의 추출 효율을 조사하였다.

(1) 80% 함수 에탄올에 의한 추출

분쇄한 종자의 5 g에 80% 함수 에탄올의 50 ㎖를 첨가하고, 30분간 초음파를 걸면서 추출을 행하였다. 그 상청을 회수한 후, 동일한 조작으로 2회, 합계 3회의 추출을 행하였다. 그리고 회수한 추출액을 모으고, 얻어진 추출액을 80% 함수 에탄올로 200 ㎖로 정용(定容)하여, 그 10 ㎕를 HPLC에 걸었다. 그리고, 통상의 방법에 따라, HPLC 분석의 피크 면적으로부터, 그것을 표준품 농도의 검량선에 적용함으로써, 그 추출물에 포함되는 피세아탄놀의 양을 정량하였다. 또한, 참고를 위해, 레스베라트롤도 동일하게 정량하였다.

(2) 70% 함수 아세톤에 의한 추출

상기 80% 함수 에탄올에 의한 추출 후의 추출 잔사에, 70% 함수 아세톤의 50 ㎖를 첨가하고, 30분간 초음파를 걸면서 추출을 행하였다. 그 상청을 회수한 후, 동일한 조작으로 2회, 합계 3회의 추출을 행하였다. 그리고 회수한 추출액을 모으고, 얻어진 추출액을 70% 함수 아세톤으로 200 ㎖로 정용하여, 상기와 동일하게 해서, 그 추출물에 포함되는 피세아탄놀 및 레스베라트롤의 양을 정량하였다.

(3) 초산에틸에 의한 추출

용매를 초산에틸로 바꾸고, 패션 프루트(상기 외국산)의 종자에 대해서, 상기 80% 함수 에탄올에 의한 추출과 동일하게 하여, 동결건조한 종자 분말 5 g으로부터 추출되는 피세아탄놀 및 레스베라트롤의 양을 정량하였다.

(4) 디클로로메탄에 의한 추출

용매를 디클로로메탄으로 바꾸고, 패션 프루트(상기 외국산)의 종자에 대해서, 상기 80% 함수 에탄올에 의한 추출과 동일하게 하여, 동결건조한 종자 분말 5 g으로부터 추출되는 피세아탄놀 및 레스베라트롤의 양을 정량하였다.

결과를 하기 표 1에 정리하였다. 또한, 이 표 1에서는, 추출 효율의 결과를, 동결건조한 종자 분말의 100 g당으로부터 추출되는, 피세아탄놀의 양 또는 레스베라트롤의 양으로 환산하여 표시하고 있다.

표 1에 나타내어지는 바와 같이, 80% 함수 에탄올에 의한 추출 후의 추출 잔사로부터도, 80% 함수 에탄올에 의한 추출에 비해, 그 이상의 피세아탄놀이 추출되고 있었다. 한편, 초산에틸 단독에 의한 추출에서는 추출 효율은 나쁘고, 디클로로메탄 단독에 의한 추출에서는, 피세아탄놀이나 레스베라트롤이 검출되지 않았다. 따라서, 70% 함수 아세톤에 의한 추출이 가장 효율이 좋은 것이 명확해졌다. 또한, 80% 함수 에탄올에 의한 추출과 70% 함수 아세톤에 의한 추출을 병용함으로써, 추출 효율이 더욱 좋아지는 것이 명확해졌다.

<시험예 3> [패션 프루트 종자로부터의 피세아탄놀의 추출-그 두번째]

패션 프루트 종자로부터의 피세아탄놀의 추출방법에 대해서 추가로 검토하였다. 구체적으로는, 용매인 에탄올이나 아세톤의, 그 함수율이 추출 효율에 미치는 영향을 조사하였다.

이를 위해, 용매로서, 각종 함수율의 에탄올, 또는 아세톤을 사용하여, 상기 시험예 2와 동일하게 해서, 패션 프루트(상기 외국산)의 동결건조한 종자 분말 5 g으로부터 추출되는 피세아탄놀 및 레스베라트롤의 양을 정량하였다. 또한, 상기 시험예 2에서 사용한 용매인 초산에틸이나 디클로로메탄은, 모두 물과의 상용성이 부족하기 때문에, 동일한 함수율의 용매를 조제하는 것은 불가능하다.

결과를 하기 표 2에 정리하였다. 또한, 도 5에는, 피세아탄놀의 결과에 대해서 그래프로 하였다. 또한, 이 표 2, 도 5에서도, 추출 효율의 결과는, 동결건조한 종자 분말의 100 g당으로부터 추출되는, 피세아탄놀의 양 또는 레스베라트롤의 양으로 환산하여 표시하고 있다.

표 2, 도 5에 나타내어지는 바와 같이, 에탄올을 사용한 경우에는, 80% 함수 에탄올에 의한 추출이 가장 효율이 좋았다. 또한, 아세톤을 사용한 경우에는, 70% 함수 아세톤에 의한 추출이 가장 효율이 좋았다.

<시험예 4>

상기 시험예 2에 있어서 용매를 제거한 후의 추출물(상기 외국산 유래)을 칭량하여, 피세아탄놀 고형분 함량을 산출하였다. 그들의 값을 표 3에 나타낸다.

표 3에 나타내어지는 바와 같이, 80% 함수 에탄올에 의한 추출에서는, 피세아탄놀의 고형분 농도는 2.6 ㎎/100 ㎎ 추출물(2.6 질량%)이었다. 또한, 80% 함수 에탄올에 의한 추출 후의 70% 함수 아세톤에 의한 추출에서는, 3.7 ㎎/100 ㎎ 추출물(3.7 질량%)이었다. 따라서, 70% 함수 아세톤에 의한 추출 쪽이 보다 많은 피세아탄놀을 얻을 수 있는 동시에(시험예 2, 3에서 나타낸 바와 같이), 피세아탄놀의 순도도, 보다 높은 것이 얻어지는 것이 명확해졌다.

Claims

패션 프루트 종자(passion fruit seed)로부터 얻어지고, 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 포함하는 것을 특징으로 하는 피세아탄놀 함유 조성물.
패션 프루트 종자를 분쇄한 후, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매로부터 선택되는 1종 이상을 첨가하여 교반해서, 상기 용매 중에 피세아탄놀을 추출하는 것을 특징으로 하는 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
제2항에 있어서,
패션 프루트 종자를 분쇄한 후, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매 중 어느 하나를 첨가하여 교반해서, 그 용매 중에 피세아탄놀을 추출하여 제1 추출물을 얻고, 추가로, 상기 추출물로서 회수되지 않은 잔사에, 함수 알코올계 용매 및 함수 케톤계 용매 중 상기에서 선택하지 않은 다른 쪽을 첨가하여 교반해서, 그 용매 중에 피세아탄놀을 추출하여 제2 추출물을 얻어, 상기 제1 추출물과 제2 추출물을 혼합하는, 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
제2항 또는 제3항에 있어서,
상기 패션 프루트 종자는, 패션 프루트의 생 종자 또는 패션 프루트의 생 종자를 건조한 종자인 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
제2항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 함수 알코올계 용매가 함수 에탄올이거나, 또는 상기 함수 케톤계 용매가 함수 아세톤인 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
제5항에 있어서,
상기 함수 에탄올은, 에탄올을 20~99.9 체적% 포함하는 것인 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
제5항에 있어서,
상기 함수 아세톤은, 아세톤을 20~99.9 체적% 포함하는 것인 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
제2항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 각 용매 중에 있어서의 교반을, 초음파진동 또는 진탕에 의해 행하는 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
제2항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
추출 후, 용매를 감압 증류 제거하는 피세아탄놀 함유 조성물의 제조방법.
패션 프루트 종자로부터 얻어지고, 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 포함하는 피세아탄놀 함유 조성물을 첨가한 것을 특징으로 하는 음식품.
패션 프루트 종자로부터 얻어지고, 피세아탄놀을 0.0001~99.9 질량%의 함유량으로 포함하는 피세아탄놀 함유 조성물을 첨가한 것을 특징으로 하는 화장품.