KR20110045093A

KR20110045093A - 다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올 유도체

Info

Publication number: KR20110045093A
Application number: KR1020117006928A
Authority: KR
Inventors: 빈센트 마스시티; 벤자민 미카 콜맨
Original assignee: 화이자 인코포레이티드
Priority date: 2008-08-28
Filing date: 2009-08-17
Publication date: 2011-05-03
Also published as: CA2733795A1; PE20110288A1; FR18C1036I1; CN102149717B; NO2018019I1; EA018492B1; BRPI0918841A2; EA201100266A1; HK1156616A1; CN103497199A; BRPI0918841B1; RS52236B; HUS1800031I1; KR101446454B1; MX2011002166A; KR20130116078A; NI201100043A; CN102149717A; SV2011003842A; CO6341636A2

Abstract

본 발명의 본원에 기재된 화학식 I의 화합물, 나트륨-글루코스 전달체 억제제(특히, SGLT2 억제제)에 의해 매개되는 질병, 상태 및/또는 장애의 치료를 위한 상기 화합물의 용도에 관한 것이다. 본원에 개시된 화합물은 비만 및 이와 관련된 동반 질환, 특히 유형 II(유형 2) 당뇨병의 예방 및 치료에 유용하다.
화학식 I

Description

다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올 유도체{DIOXA-BICYCLO[3.2.1]OCTANE-2,3,4-TRIOL DERIVATIVES}

본 발명은 다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올 유도체, 결정 구조, 약학 조성물, 및 이것의 나트륨-글루코스 공-전달체(SGLT) 억제제로서의 용도에 관한 것이다.

비만은 고혈압, 인슐린 내성, 당뇨병, 심장동맥병 및 심부전(종합적으로 대사 증후군으로서 지칭됨)과 같은 동반 질환을 포함하는 심각한 의학적 합병증으로 인해 유의적인 건강상의 문제이다. 비만 및 이와 관련된 동반 질환은 선진국에서 건강 문제를 계속 일으키고 있으며, 마찬가지로 개발 도상국에서도 영향을 주기 시작하고 있다. 비만의 부정적인 건강상의 결과는 비만을 미국에서 예방가능한 사망의 제 2의 주요 요인으로 만들며, 사회에 중요한 경제학적 및 심리사회학적 영향을 준다. 문헌[McGinnis M, Foege WH., "Actual Causes of Death in the United States," JAMA, 270, 2207-12 (1993)]을 참고한다. 비만 및 이와 관련된 동반 질환, 특히 유형 II(유형 2) 당뇨병을 치료 및/또는 예방하는 신규한 약제를 확인하고 개발할 필요성이 존재한다.

보다 최근에는, 나트륨-글루코스 공-전달체(SGLT) 억제제, 특히 SGLT2 억제제가 사구체 중의 신장 여과액으로부터 글루코스의 재흡수를 차단하여 소변 중 글루코스 배출을 유도하는 것으로 밝혀졌다. 과량의 글루코스가 배출됨에 따라, 혈당 수준이 감소하고 글루코스의 간 저장능이 감소하고, 인슐린 분비가 감소되고, 이어서 탄수화물의 지방으로의 전환이 감소하고, 결국 축적 지방이 감소된다. SGLT2의 선택적 억제는 글루코스 배출을 향상시킴으로써 혈장 글루코스를 정상화시키는 것으로 기대된다. 결과적으로, SGLT2 억제제는 체중 증가 또는 저혈당증 위험 없이 당뇨병 증상의 개선을 위한 흥미로운 수단을 제공한다. 문헌[Isaji, M., Current Opinion Investigational Drugs, 8(4), 285-292 (2007)]을 참고한다. 또한, 치료 표적으로서 SGLT의 일반적인 개괄은 문헌[Asano, T., et al., Drugs of the Future, 29(5), 461-466 (2004)]을 참고한다.

NIDDM 및 비만의 치료에 유용한 것으로 밝혀진 대표적인 글리코사이드의 예는 다음 문헌에서 찾을 수 있다: 미국 특허 제 6,515,117 호, 제 6,414,126 호, 제 7,101,856 호, 제 7,169,761 호 및 제 7,202,350 호, 미국 특허 출원 공개 제 US2002/0111315 호, 제 US2002/0137903 호, 제 US2004/0138439 호, 제 US2005/0233988 호, 제 US2006/0025349 호, 제 US2006/0035841 호 및 제 US2006/0632722 호, 및 국제 특허 출원 공개 제 WO WO01/027128 호, 제 WO02/044192 호, 제 WO02/088157 호, 제 WO03/099836 호, 제 WO04/087727 호, 제 WO05/021566 호, 제 WO05/085267 호, 제 WO06/008038 호, 제 WO06/002912 호, 제 WO06/062224 호, 제 WO07/000445 호, 제 WO07/093610 호 및 제 WO08/002824 호.

특정 글리코사이드는 유전자독성이며, 잠재적으로 돌연변이유발 또는 발암성이도록 세포의 유전적 물질에 영향을 준다. 유전자독성 물질은 시험관내 포유류 세포 소핵 시험(MNvit), 경제 협력 개발 기구(OECD) 초벌 시험 지침서(Draft TG) 487 (2007); 시험관내 포유류 염색체 변형 시험, OECD TG 473 (1997); 박테리아 역 돌연변이 시험, OECD TG 471 (1997); 포유류 적혈구 소핵 시험, OECD TG 474 (1007) 등과 같은 표준 분석법을 사용하여 검출될 수 있다. 따라서, 비만 및 이와 관련된 동반 질환, 특히 유형 2 당뇨병 및 관련 장애의 보다 효과적이고 안전한 치료법에 대한 필요성이 여전히 존재한다.

하기 화학식 A 및 B의 화합물은 나트륨-글루코스 공-전달체(SGLT) 억제제, 특히 SGLT2 억제제로서 작용하는 것으로 밝혀졌고, 따라서 상기 억제에 의해 매개되는 질병(예컨대, 비만, 유형 2 당뇨병과 관련된 질병, 및 비만-관련 및 당뇨병-관련 동반 질환)의 치료에 사용될 수 있다. 이러한 화합물은 하기 화학식 A 및 B로 표시될 수 있다:

[화학식 A]

[화학식 B]

상기 식에서,

R¹은 H, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)알콕시, Cl, F, 사이아노, 플루오로-치환된 (C₁-C₂)알킬, (C₁-C₄)알킬-SO₂- 또는 (C₃-C₆)사이클로알킬이고,

R²는 (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)알콕시, (C₂-C₄)알킨일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시, Cl, F, 사이아노, 플루오로-치환된 (C₁-C₂)알킬, (C₁-C₄)알킬-SO₂-, (C₃-C₆)사이클로알킬, 또는 N, O 및 S 중에서 각각 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 갖는 (C₅-C₆)헤테로사이클이다.

일반적으로, 당해 분야의 숙련자는 선택된 치환기가 화합물의 약리학적 특징에 악영향을 주지 않거나 약제의 용도를 부정적으로 방해하지 않는 한 다양한 치환기가 화학식 A 또는 B의 화합물에 부가될 수 있음을 이해한다.

화학식 A의 특정한 화합물은 다음을 포함한다: (1S,2S,3S,4R,5S)-1-하이드록시메틸-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; 2-(4-메톡시벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-(하이드록시메틸)-6,8-다이옥사-바이사이클로[3,2,1]옥트-5-일)벤조나이트릴; 2-(4-에톡시벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-(하이드록시메틸)-6,8-다이옥사-바이사이클로[3,2,1]옥트-5-일)벤조나이트릴; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-플루오로-3-[4-(테트라하이드로-퓨란-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-클로로벤질)-4-플루오로페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-플루오로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; 및 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-클로로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올.

화학식 B의 특정한 화합물은 다음을 포함한다: (1S,2S,3S,4S,5S)-1-하이드록시메틸-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-클로로벤질)-4-플루오로페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올.

본 발명의 추가의 양태는 하기 화학식 4A의 화합물을 포함하는 결정이다:

[화학식 4A]

본 발명의 또 다른 양태는 (1) 본 발명의 화합물 및 (2) 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물이다. 바람직하게는, 상기 조성물은 치료 효과량의 본 발명의 화합물을 포함한다. 또한, 상기 조성물은 하나 이상의 추가적인 약학 제제(본원에 기재된 바와 같음)를 함유할 수 있다. 바람직한 제제는 항비만제 및/또는 항당뇨병제(하기 본원에 기재된 바와 같음)를 포함한다.

본 발명의 또 다른 양태에서, 치료 효과량의 본 발명의 화합물(또는 이의 약학 조성물)을 치료를 필요로 하는 동물(바람직하게는, 인간)에게 투여하는 단계를 포함하는, 동물에서 SGLT2 억제에 의해 조절되는 질병, 장애 또는 상태를 치료하는 방법이 제공된다. SGLT2 억제에 의해 조절되는 질병, 상태 및/또는 장애는, 예컨대 유형 2 당뇨병, 당뇨신장병, 인슐린 내성 증후군, 고혈당증, 고인슐린혈증, 고지질혈증, 내당능장애, 비만(체중 조절 또는 체중 유지를 포함), 고혈압 및 혈당 수준의 감소를 포함한다.

본 발명의 화합물은 다른 약학 제제(특히, 하기 본원에서 기재된 항비만제 및 항당뇨병제)와 병용하여 투여될 수 있다. 병용 치료는 (a) 본 발명의 화합물, 본원에서 기재된 하나 이상의 추가의 약학 제제 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 단일 약학 조성물로서, 또는 (b) (i) 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 제 1 조성물 및 (ii) 본원에 기재된 하나 이상의 추가의 약학 제제 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 제 2 조성물을 포함하는 두 개의 별도의 약학 조성물로서 투여될 수 있다. 약학 조성물은 동시에 또는 순차적으로 및 임의의 순서로 투여될 수 있다.

상기 일반적인 설명 및 하기 상세한 설명은 단지 예시적이고 설명적인 것이며, 청구되는 본 발명을 제한하지 않는 것으로 이해해야 한다.

도 1은 SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅된 실시예 8A의 화합물에 대한 정밀화된 결정 구조를 나타낸다.
도 2는 SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅된 실시예 9A의 화합물에 대한 정밀화된 결정 구조를 나타낸다.
도 3은 실시예 22에 대해 관찰된 분말 X선 회절 패턴을 나타낸다: 실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 실시예 18의 공결정.
도 4는 실시예 22에 대해 관찰된 분말 X선 회절 패턴을 나타낸다: 실시예 4A의 화합물과 L-피로글루탐산의 실시예 20의 공결정.
도 5는 실시예 23에 대해 관찰된 시차 주사 열량 열분석도를 나타낸다: 실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 실시예 18의 공결정.
도 6은 실시예 23에 대해 관찰된 시차 주사 열량 열분석도를 나타낸다: 실시예 4A의 화합물과 L-피로글루탐산의 실시예 20의 공결정.
도 7은 실시예 24에 대한 정밀화된 결정 구조를 나타낸다: SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅된 실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 공결정.
도 8은 실시예 25에 대한 정밀화된 결정 구조를 나타낸다: SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅된 실시예 4A의 화합물과 L-피로글루탐산의 공결정.
도 9는 실시예 26에 대해 관찰된 ¹³C 고상 핵 자기 공명 스팩트럼을 나타낸다: 실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 공결정. 별표로 표시된 피크는 스핀 측파대이다.

본 발명은 본 발명 및 그 안에 포함된 실시예의 예시적인 실시양태의 하기 상세한 설명을 참조하여 보다 더 용이하게 이해될 수 있다.

본 발명의 화합물, 조성물 및 방법을 개시하고 기재하기 전에, 본 발명이 당연히 다양할 수 있는 특정 합성 방법으로 제한되지 않음을 이해해야 한다. 또한, 본원에서 사용되는 용어는 단지 특정 실시양태를 기재하기 위함이고, 제한하려는 의도가 아님을 이해해야 한다. 수를 나타내는 것 이외에 복수 및 단수는 호환적으로 처리해야 한다.

본원에서 사용되는 용어 "알킬"은 화학식 C_nH_2n+1의 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 알케인 라디칼은 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. 예를 들면, 용어 "(C₁-C₆)알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 1가 직쇄 또는 분지쇄 지방족 기(예컨대, 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-뷰틸, i-뷰틸, s-뷰틸, t-뷰틸, n-펜틸, 1-메틸뷰틸, 2-메틸뷰틸, 3-메틸뷰틸, 네오펜틸, 3,3-다이메틸프로필, 헥실, 2-메틸펜틸 등)를 지칭한다. 유사하게, 알콕시, 아실(예컨대, 알카노일), 알킬아미노, 다이알킬아미노, 알킬설폰일 및 알킬티오 기의 알킬 부분(즉, 알킬 잔기)은 상기와 동일한 정의를 갖는다. "선택적으로 치환된"으로서 나타내는 경우, 알케인 라디칼 또는 알킬 잔기는 치환되지 않거나, "치환된"의 정의에서 하기 나열한 치환기들 중에서 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환기(일반적으로, 퍼클로로 또는 퍼플루오로알킬과 같이 할로겐 치환기의 경우를 제외하고 1 내지 3개의 치환기임)로 치환될 수 있다. "할로-치환된 알킬"은 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 알킬 기를 지칭한다(예컨대, 플루오로메틸, 다이플루오로메틸, 트라이플루오로메틸, 퍼플루오로에틸, 1,1-다이플루오로에틸 등).

용어 "사이클로알킬"은 단일 고리, 2중 환식 고리 또는 스피로 고리로서 존재할 수 있고 완전히 수소화된 비방향족 고리를 지칭한다. 달리 명시하지 않는 한, 카보사이클릭 고리는 일반적으로 3 내지 8원 고리이다. 예를 들면, 사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로뷰틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헥센일, 노르보르닐 (바이사이클로[2.2.1]헵틸), 바이사이클로[2.2.2]옥틸 등과 같은 기를 포함한다.

용어 "헤테로사이클"은 단일 고리, 2중 환식 고리 또는 스피로 고리로서 존재할 수 있고 완전히 수소화된 비방향족 고리를 지칭한다. 달리 명시하지 않는 한, 헤테로사이클릭 고리는 일반적으로 황, 산소 및/또는 질소 중에서 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자(바람직하게는 1 또는 2개의 헤테로원자)를 함유하는 3 내지 6원 고리이다. 헤테로사이클릭 고리는 에폭시, 아지리딘일, 테트라하이드로퓨란일, 피롤리딘일, N-메틸피롤리딘일, 피페리딘일, 피페라진일, 피라졸리딘일, 4H-피란일, 모르폴리노, 티오모르폴리노, 테트라하이드로티에닐, 테트라하이드로티에닐, 1,1-다이옥사이드 등과 같은 기를 포함한다.

용어 "치료 효과량은 (i) 특정 질병, 상태 또는 장애를 치료하거나, (ii) 특정 질병, 상태 또는 장애의 하나 이상의 증상을 감소, 개선 또는 제거하거나, (iii) 본원에 기재된 특정 질병, 상태 또는 장애의 하나 이상의 증상의 발병을 예방하거나 지연시키는 본 발명의 화합물의 양을 의미한다.

용어 "동물"은 인간(남성 또는 여성), 반려 동물(예컨대, 개, 고양이 및 말), 식품-공급원 동물, 동물원 동물, 해양 동물, 새 및 다른 유사한 동물 종을 지칭한다. "식용 동물"은 식품-공급원 동물, 예컨대 소, 돼지, 양 및 가금류를 지칭한다.

용어 "약학적으로 허용가능한"은 물질 또는 조성물이 화학적으로 및/또는 독소학적으로 제형을 포함한 다른 성분 및/또는 치료될 포유류와 융화되어야함을 가리킨다.

용어 "치료하는", "치료하다" 또는 "치료"는 예방적 및 완화적 치료 둘 다를 포함한다.

본원에서 사용되는 용어 "조절된" 또는 "조절하는" 또는 "조절하다"는 달리 지시되지 않는 한 본 발명의 화합물에 의해 부분적으로 또는 완전히 전달체를 가로지르는 글루코스 수송을 차단시키는 나트륨-글루코스 전달체(특히, SGLT2)의 억제를 지칭한다.

용어 "본 발명의 화합물"(달리 구체적으로 표명하지 않는 한)은 화학식 A 및 화학식 B의 화합물, 및 모든 순수한 입체이성질체 및 혼합 입체이성질체(부분 입체이성질체 및 거울상이성질체 포함), 호변이성질체 및 동위원소 표지된 화합물을 지칭한다. 본 발명의 화합물의 수화물 및 용매화물은 본 발명의 조성물인 것으로 고려되며, 이때 상기 화합물은 각각 물 또는 용매와 결합한다. 또한, 화합물은 하나 이상의 결정질 상태, 즉 공결정, 다형체로서 존재할 수 있거나, 비정질 고체로서 존재할 수 있다. 이러한 모든 형태는 청구범위에 의해 포함된다.

하나의 실시양태에서, R¹은 H, 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, 사이클로프로필 또는 사이클로뷰틸이다. 다른 실시양태에서, R¹은 H, 메틸, 에틸, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃또는 사이클로프로필이다. 추가의 실시양태에서, R¹은 H, 메틸, 에틸, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃ 또는 사이클로프로필이다. 또 다른 추가의 실시양태에서, R¹은 메틸, 에틸, F, Cl, 사이아노, CF₃또는 사이클로프로필이다.

하나의 실시양태에서, R²는 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, -CF₂CH₃, 에틴일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시 또는 사이클로프로필이다. 다른 실시양태에서, R²는 메틸, 에틸, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, -CF₂CH₃, 에틴일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시 또는 사이클로프로필이다. 추가의 실시양태에서, R²는 메틸, 에틸, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, -CF₂CH₃, 에틴일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시 또는 사이클로프로필이다. 또 다른 추가의 실시양태에서, R²는 메톡시 또는 에톡시이다.

하나의 실시양태에서, 결정은 화학식 4A의 화합물 및 L-프롤린 또는 L-피로글루탐산을 포함한다.

추가의 실시양태에서, 결정은 다음 중 하나 이상을 갖는다:

(a) P2(1)2(1)2(1)의 스페이스 기 및 실질적으로 다음과 동일한 단위 격자 파라미터:

a = 7.4907(10)Å α = 90°

b = 12.8626(15)Å β = 90°

c = 28.029(4)Å γ = 90°;

(b) 6.4 ± 0.2, 16.7 ± 0.2, 17.4 ± 0.2 및 21.1 ± 0.2의 2-쎄타 값을 포함하는(CuKα 방사선, 1.54056Å의 파장) 분말 X선 회절 패턴;

(c) 29.5ppm의 결정질 아다만틴에 대해 500MHz 분광계로 측정되는 경우 16.5 ± 0.2, 131.1 ± 0.2, 158.7 ± 0.2 및 181.5 ± 0.2ppm에서 피크 위치를 갖는 고상 ¹³C NMR 스팩트럼; 또는

(d) 약 142.5 ± 2℃의 흡열을 갖는 시차 주사 열량 열분석도.

추가의 실시양태에서, 결정은 1:1의 화학량론적 비율로 화학식 4A의 화합물 및 L-피로글루탐산을 포함하는 공결정이다.

본 발명의 화합물은, 특히 본원에 포함된 설명에 비추어 화학 분야에 널리 알려진 것과 유사한 공정을 포함하는 합성 경로에 의해 합성될 수 있다. 출발 물질은 일반적으로 상업적 공급처, 예컨대 알드리치 케미칼스(Aldrich Chemicals)(미국 위스콘신주 밀와우키 소재)로부터 입수가능하거나, 당해 분야의 숙련자에게 공지된 방법을 사용하여 용이하게 제조된다(예컨대, 일반적으로 문헌[Louis F. Fieser and Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-19, Wiley, New York (1967-1999 ed.)] 또는 부록을 포함한 문헌[Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin](또한, 바일슈타인(Beilstein) 온라인 데이터베이스를 통해 입수가능)에 기재된 방법에 의해 제조된다).

예시적인 목적을 위해, 하기 도시된 반응식은 본 발명의 화합물 및 주요 중간체의 가능한 합성 경로를 제공한다. 각 반응 단계의 보다 상세한 설명에 대해서는 하기 실시예 부분을 참고한다. 당해 분야의 숙련자는 다른 합성 경로를 사용하여 본 발명의 화합물을 합성할 수 있음을 이해할 것이다. 특정 출발 물질 및 시약을 반응식에 나타내었고 하기에 논의하였지만, 다양한 유도체 및/또는 반응 조건을 제공하도록 다른 출발 물질 및 시약이 용이하게 대체될 수 있다. 또한, 하기 기재된 방법에 의해 제조된 다수의 화합물은 당해 분야의 숙련자에게 공지된 통상적인 화학을 사용하여 본 발명에 비추어 추가로 변형될 수 있다.

본 발명의 화합물의 제조에서, 중간체의 먼거리 작용기를 보호할 필요가 있을 수 있다. 이러한 보호의 필요성은 먼거리 작용기의 특성 및 제조 방법의 조건에 따라 달라질 것이다. "하이드록시-보호기"는 하이드록시 작용기를 차단하거나 보호하는 하이드록시 기의 치환기를 지칭한다. 적합한 하이드록시-보호기(O-Pg)는, 예를 들면 알릴, 아세틸(Ac), 실릴(트라이메틸실릴(TMS) 또는 3급-뷰틸다이메틸실릴(TBS)과 같은 것), 벤질(Bn), 파라-메톡시벤질(PMB), 트리틸(Tr), 파라-브로모벤조일, 파라-나이트로벤조일 등(1,3-다이올의 보호를 위해서는 벤질리덴)을 포함한다. 이러한 보호의 필요성은 당해 분야의 숙련자에 의해 용이하게 결정된다. 보호기 및 이의 용도에 대한 일반적인 설명은, 문헌[T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991]을 참고한다.

반응식 1은 본 발명의 화합물을 제공하는데 사용할 수 있는 일반적인 절차를 개략한다.

[반응식 1]

알릴 2,3,4-트라이-O-벤질-D-글루코피라노사이드(I-a, 여기서 Pg¹은 벤질 기이다)는 문헌[Shinya Hanashima, et al., in Bioorganic & Medicinal Chemistry, 9, 367 (2001)]; [Patricia A. Gent et al. in Journal of the Chemical Society, Perkin 1, 1835 (1974)]; [Hans Peter Wessel in the Journal of Carbohydrate Chemistry, 7, 263, (1988)]; 또는 [Yoko Yuasa, et al., in Organic Process Research & Development, 8, 405-407 (2004)]에 기재된 절차에 의해 제조될 수 있다. 반응식 1의 단계 1에서, 하이드록시메틸렌 기를 스베른(Swern) 산화에 의해 글리코사이드로 도입시킨 후 알칼리 금속 수산화물(예컨대, 수산화나트륨)의 존재하에 포름알데하이드로 처리한다. 이는 알돌-칸니자로(aldol-Cannizzaro) 반응으로서 지칭된다. 스베른 산화는 문헌[Kanji Omura and Daniel Swern in Tetrahedron, 34, 1651 (1978)]에 의해 기재된다. 또한, 당해 분야의 숙련자에게 공지된 이러한 방법의 변형이 사용될 수 있다. 예를 들면, 문헌[Ozanne, A. et al. in Organic Letters, 5, 2903 (2003)]에 기재된 안정화된 2-요오도벤조산과 같은 다른 산화제 및 당해 분야의 숙련자에게 공지된 다른 산화제가 사용될 수 있다. 알돌 칸니자로 순서는 문헌[Robert Schaffer in the Journal of The American Chemical Society, 81, 5452 (1959)] 및 문헌[Amigues, E.J., et al., in Tetrahedron, 63, 10042 (2007)]에 의해 기재되어 있다.

반응식 1의 단계 2에서, 보호기(Pg²)는 중간체(I-b)를 목적하는 특정 보호기를 위한 적절한 시약 및 절차로 처리시킴으로써 부가될 수 있다. 예를 들면, p-메톡시벤질(PMB) 기는 중간체(I-b)를 테트라하이드로퓨란, 1,2-다이메톡시에테인 또는 N,N-다이메틸포름아마이드(DMF)와 같은 용매 중 수소화나트륨, 수소화칼륨, 칼륨 3급-뷰톡사이드의 존재하에 p-메톡시벤질 브로마이드 또는 p-메톡시벤질 클로라이드로 처리함으로써 도입될 수 있다. 또한, 용매, 예컨대 다이클로로메테인, 헵테인 또는 헥세인 중 촉매량의 산(예컨대, 트라이플루오로메테인설폰산, 메테인설폰산 또는 캄포르설폰산)의 존재하에 파라-메톡시벤질트라이클로로아세트이미데이트를 비롯한 조건을 사용할 수 있다. 벤질(Bn) 기는 중간체(I-b)를 용매, 예컨대 테트라하이드로퓨란, 1,2-다이메톡시에테인 또는 N,N-다이메틸포름아마이드 중 수소화나트륨, 수소화칼륨, 칼륨 3급-뷰톡사이드의 존재하에 벤질 브로마이드 또는 벤질 클로라이드로 처리함으로써 도입될 수 있다. 또한, 다이클로로메테인, 헵테인 또는 헥세인과 같은 용매 중 촉매량의 산(예컨대, 트라이플루오로메테인설폰산, 메테인설폰산 또는 캄포르설폰산)의 존재하에 벤질트라이클로로아세트이미데이트를 비롯한 조건을 사용할 수 있다.

반응식 1의 단계 3에서, 알릴 보호기는 제거(예컨대, 메탄올 중 염화팔라듐에 의해 처리함으로써; 다이클로로메테인과 같은 공용매가 또한 사용될 수 있다; 당해 분야의 숙련자에게 공지된 다른 조건이 또한 사용될 수 있다, 예컨대 문헌[T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991)]을 참고한다)되어 락톨(I-d)을 형성한다.

반응식 1의 단계 4에서, 비보호된 하이드록시 기의 옥소 기로의 산화(예컨대, 스베른 산화)에 의해 락톤(I-e)이 형성된다.

반응식 1의 단계 5에서, 락톤(I-e)은 N,O-다이메틸 하이드록실아민 하이드로클로라이드와 반응하여 상응하는 와인랩(Weinreb) 아마이드를 형성하며, 이는 폐쇄/개방 형태(I-f/I-g)로 평형으로 존재할 수 있다. "와인랩 아마이드"(I-g)는 당해 분야의 숙련자에게 공지된 절차를 사용하여 제조될 수 있다. 문헌[Nahm, S., and S.M. Weinreb, Tetrahedron Letters, 22 (39), 3815-1818 (1981)]을 참고한다. 예를 들면, 중간체(I-f/I-g)는 시판되는 N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드 및 활성화제(예컨대, 트라이메틸알루미늄)로부터 제조될 수 있다.

반응식 1의 단계 6에서, 아릴벤질 기(Ar)는 약 -78℃ 내지 약 20℃의 온도 범위에서 테트라하이드로퓨란(THF) 중 목적하는 유기금속 시약(예컨대, 유기 리튬 화합물(ArLi) 또는 유기마그네슘 화합물(ArMgX))을 사용하여 도입된 후, 상응하는 락톨(I-i)로 가수분해(양성자성 조건하에 정치시킬 때)되며, 이는 상응하는 케톤(I-h)과 평형을 이룰 수 있다. 화학식 A 및 B의 화합물에서 발견되는 가교 케탈 모티프는 사용되는 보호기에 적절한 시약을 사용하여 보호기(Pg²)를 제거함으로써 제조될 수 있다. 예를 들면, PMB 보호기는 약 0 내지 약 23℃(실온)에서 아니솔 및 다이클로로메테인(DCM)의 존재하에 트라이플루오로아세트산으로 처리하여 제거될 수 있다. 이 후, 남아있는 보호기(Pg¹)는 특정 보호기에 적절한 화학을 사용하여 제거될 수 있다. 예를 들면, 벤질 보호기는 약 실온에서 양성자성 용매(예컨대, 에탄올/THF) 중 팔라듐(Pd 블랙)의 존재하에 포름산으로 처리하여 제거되어 최종 생성물 A 및 B를 산출한다. R¹이 CN인 경우, 또한 약 -78℃ 내지 약 실온의 온도 범위에서 다이클로로메테인 또는 1,2-다이클로로에테인과 같은 용매 중 삼염화붕소와 같은 루이스산을 사용하여 벤질 보호기 및/또는 파라-메톡시벤질 보호기를 제거할 수 있다.

중간체(I-i) 또는 생성물 A 또는 B에서 R¹이 CN이고, R²가 (C₁-C₄)알콕시인 경우, 삼염화붕소 또는 삼브롬화붕소와 같은 루이스산으로 처리할 시에, 상응하는 페놀로의 탈알킬화가 부분적으로 완성되어 R¹이 CN이고, R²가 OH인 상응하는 화합물 A 또는 B가 초래될 수 있다. 이러한 경우, (C₁-C₄)알콕시 기는 온화한 염기성 조건하에(예를 들면, 약 실온 내지 약 56℃의 온도 범위에서 아세톤 중 탄산칼륨) (C₁-C₄) 알킬 요오다이드를 사용하여 선택적 알킬화에 의해 재도입될 수 있다.

R¹ 및/또는 R²가 (C₁-C₄)알킬-SO₂-인 경우, 당해 분야의 숙련자는 유기금속 첨가 단계 6(반응식 1)이 유기금속 시약을 함유하는 상응하는 (C₁-C₄)알킬-S-에 대해 수행된다는 것을 이해한다. 그 후, 티오-알킬은 후속 단계에서 당해 분야의 숙련자에게 공지된 통상적인 방법을 사용하여 상응하는 설폰으로 산화된다.

본 발명의 화합물은 임의의 적합한 방법을 사용하여 공결정으로서 제조될 수 있다. 이러한 공결정을 제조하는 대표적인 반응식은 하기 반응식 2에 기재되어 있다:

[반응식 2]

Me가 메틸이고, Et가 에틸인 반응식 2 중 단계 1에서, 1-(5-브로모-2-클로로벤질)-4-에톡시벤젠을 3:1의 톨루엔:테트라하이드로퓨란에 용해시킨 후 생성된 용액은 -70℃ 미만으로 냉각한다. -65℃ 이하로 반응을 유지하면서 이 용액에 헥실리튬을 첨가하고, 그 후 1시간 동안 교반한다. (3R,4S,5R,6R)-3,4,5-트리스(트라이메틸실릴옥시)-6-((트라이메틸실릴옥시)메틸)-테트라하이드로피란-2-온(II-a)을 톨루엔에 용해시키고 생성된 용액을 -15℃로 냉각한다. 그 후, 이 용액을 -70℃ 아릴리튬 용액에 첨가하고 이어서 1시간 동안 교반한다. 그 후, 메탄올 중 메테인설폰산의 용액을 첨가하고, 이어서 실온으로 가온하고 16 내지 24시간 동안 교반한다. α-아노머 수준이 3% 이하인 경우 반응이 완성된 것으로 간주한다. 그 후, 5M 수산화나트륨 수용액을 첨가하여 반응을 염기성화시킨다. 생성된 염을 여과 제거한 후 조질 생성물 용액을 농축시킨다. 2-메틸테트라하이드로퓨란을 공용매로서 첨가하고, 유기 상을 물로 2회 추출한다. 그 후, 유기 상을 톨루엔 중 4 부피로 농축한다. 그 후, 농축물을 5:1의 헵테인:톨루엔 용액에 첨가하여 침전물을 형성시킨다. 고체를 모으고 진공하에 건조하여 고체를 수득한다.

반응식 2의 단계 2에서, 염화메틸렌 중 화합물(II-b)에 이미다졸을 첨가한 후 0℃로 냉각하고, 그 후 트라이메틸실릴클로라이드를 첨가하여 퍼실릴화된 생성물을 수득한다. 반응을 실온으로 가온시키고 물을 첨가하여 급냉시키고, 유기 상을 물로 세척한다. 이러한 화합물(II-c)의 조질 염화메틸렌 용액을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 그 후 다음 단계에서 조질 상태로 취한다.

반응식 2의 단계 3에서, 염화메틸렌 중 화합물(II-c)의 조질 용액을 저 부피로 농축하고, 그 후 용매를 메탄올로 교환한다. 화합물(II-c)의 메탄올 용액을 0℃로 냉각하고, 그 후 탄산칼륨 1몰%를 메탄올 중 용액으로서 첨가하고 이어서 5시간 동안 교반한다. 그 후, 반응을 메탄올 중 아세트산 1몰%를 첨가하여 급냉시키고, 실온으로 가온시키고, 에틸 아세테이트로 용매 교환한 후, 소량의 무기 고체를 여과한다. 화합물(II-d)의 조질 에틸 아세테이트 용액을 다음 단계에서 직접 취한다.

반응식 2의 단계 4에서, 화합물(II-d)의 조질 용액을 저 부피로 농축시킨 후, 염화메틸렌 및 다이메틸설폭사이드로 희석한다. 트라이에틸아민을 첨가한 후 10℃로 냉각하고, 황 트라이옥사이드 피리딘 착체를 고체로서 3부분으로 나누어 10분 간격으로 첨가한다. 반응을 10℃에서 추가로 3시간 교반한 후 물로 급냉시키고 실온으로 가온시킨다. 상을 분리한 후 염화메틸렌 층을 수성 염화암모늄으로 세척한다. 화합물(II-e)의 조질 염화메틸렌 용액을 다음 단계에서 직접 취한다.

반응식 2의 단계 5에서, 화합물(II-e)의 조질 용액을 저 부피로 농축한 후, 용매를 에탄올로 교환한다. 수성 포름알데하이드 30 당량을 첨가한 후 55℃로 가온시킨다. 삼염기성 인산칼륨 2 당량의 수용액을 첨가한 후 55℃에서 24시간 동안 교반한다. 그 후, 반응 온도를 추가로 12시간 동안 70℃로 상승시킨다. 반응을 실온으로 냉각하고, 3급-뷰틸 메틸 에터 및 염수로 희석한다. 상을 분리한 후 유기 상을 에틸 아세테이트로 용매 교환한다. 에틸 아세테이트 상을 염수로 세척하고, 저 부피로 농축한다. 그 후, 조질 농축물을 5% 메탄올, 95% 톨루엔으로 용리하는 실리카 겔 플래시 크로마토그래피에 의해 정제한다. 분획을 함유하는 생성물을 모으고, 저 부피로 농축한다. 메탄올을 첨가하고 침전이 발생할 때까지 교반한다. 현탁액을 냉각하고, 고체를 모으고, 헵테인으로 세정한 후 건조시킨다. 생성물(II-f)은 고체로서 단리된다.

반응식 2의 단계 6에서, 화합물(II-f)을 염화메틸렌 5 부피에 용해시키고, 이어서 실리아본드(SiliaBond, 등록상표명) 토스산 1몰%를 첨가하고 실온에서 18시간 동안 교반한다. 산 촉매를 여과 제거하고, 화합물(II-g)의 염화메틸렌 용액을 다음 단계인 공결정화 절차에 직접 취한다.

반응식 2의 단계 7에서, 화합물(II-g)의 염화메틸렌 용액을 농축한 후, 용매를 2-프로판올로 교환한다. 물을 첨가한 후 55℃로 가온한다. L-피로글루탐산 수용액을 첨가한 후 생성된 용액을 실온으로 냉각한다. 그 후, 용액을 시딩하고, 18시간 동안 과립화시킨다. 냉각 후에, 고체를 모으고, 헵테인으로 세척한 후 건조시킨다. 생성물(II-h)은 고체로서 단리된다.

본 발명의 화학식 A의 화합물에 대한 또 다른 합성 경로는 반응식 3에 나타내었고 하기에 기재하였다:

[반응식 3]

R₃이 알킬 또는 플루오로-치환된 알킬(산소 원자에 인접한 탄소 제외)인 경우 화합물(III-a)의 합성은 반응식 2의 단계 1에 기재된 것과 유사한 방식으로 제조될 수 있다. 반응식 3의 단계 1에서, 1차 하이드록시 기는 적절한 보호기에 의해 선택적으로 보호된다. 예를 들면, 트리틸 기(Pg₃ = Tr)는 중간체(III-a)를 약 0℃ 내지 약 실온의 온도 범위에서 톨루엔, 테트라하이드로퓨란 또는 다이클로로메테인과 같은 용매 중 피리딘과 같은 염기의 존재하에 클로로트라이페닐메테인으로 처리함으로써 도입될 수 있다. 이러한 보호기 및 실험 조건의 추가의 예는 당해 분야의 숙련자에게 공지되어 있으며, 문헌[T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991]에서 찾을 수 있다.

반응식 3의 단계 2에서, 2차 하이드록시 기는 적절한 보호기에 의해 보호될 수 있다. 예를 들면, 벤질 기(Pg₄는 Bn이다)는 중간체(III-b)를 약 0℃ 내지 약 80℃의 온도 범위에서 테트라하이드로퓨란, 1,2-다이메톡시에테인 또는 N,N-다이메틸포르아마이드와 같은 용매 중 수소화나트륨, 수소화칼륨, 칼륨 3급-뷰톡사이드의 존재하에 벤질 브로마이드 또는 벤질 클로라이드로 처리함으로써 도입될 수 있다. 아세틸 또는 벤조일 기(Pg₄는 Ac 또는 Bz이다)는 중간체(III-b)를 약 0℃ 내지 약 80℃의 온도 범위에서 테트라하이드로퓨란, 1,2-다이메톡시에테인 또는 다이클로로메테인과 같은 용매 중 트라이에틸아민, N,N-다이아이소프로필에틸아민 또는 4-(다이메틸아미노)피리딘과 같은 염기의 존재하에 아세틸 클로라이드, 아세틸 브로마이드 또는 아세트산 무수물 또는 벤조일 클로라이드 또는 벤조산 무수물로 처리함으로써 도입될 수 있다.

반응식 3의 단계 3에서, 1차 하이드록시 기는 탈보호되어 중간체(III-d)가 초래된다. Pg₃이 Tr인 경우, 중간체(III-c)를 약 -20℃ 내지 약 실온의 온도 범위에서 메탄올과 같은 알콜성 용매 중 파라-톨루엔설폰산과 같은 산의 존재하에 처리하여 중간체(III-d)가 제공된다. 클로로폼과 같은 공용매가 사용될 수 있다.

반응식 3의 단계 4에서, 하이드록시메틸렌 기는 반응식 1(단계 1) 및 반응식 2(단계 4 및 5)에 이미 기재된 것과 유사한 방법을 통해 도입된다. 또한, 알칼리 금속 알콕사이드의 존재하에 약 실온 내지 약 70℃의 온도 범위에서 에탄올과 같은 용매 중 파라포름알데하이드와 같은 포름알데하이드의 다른 공급원이 이 단계에서 사용될 수 있다. Pg₄가 Bn인 경우, 이 단계는 중간체(III-e)를 제공하고, Pg₄가 Ac 또는 Bz인 경우, 이 단계는 중간체(III-f)를 제공한다.

반응식 3의 단계 5에서, 중간체(III-e)를 약 -10℃ 내지 약 실온의 온도 범위에서 다이클로로메테인과 같은 용매 중 트라이플루오로아세트산 또는 산성 수지와 같은 산으로 처리하여 중간체(III-g)를 산출한다.

반응식 3의 단계 6에서, 그 후, 남아있는 보호기(Pg₄)는 특정 보호기에 적절한 화학을 사용하여 제거될 수 있다. 예를 들면, 벤질 보호기는 약 실온에서 양성자성 용매(예컨대, 에탄올/THF) 중 팔라듐(Pd 블랙)의 존재하에 포름산으로 처리하여 제거되어 최종 생성물 A를 산출한다.

반응식 3의 단계 7에서, 중간체(III-f)를 약 -10℃ 내지 약 실온에서 다이클로로메테인과 같은 용매 중 트라이플루오로아세트산 또는 산성 수지와 같은 산으로 처리하여 최종 생성물 A를 산출한다.

생성물 A를 합성하는 또 다른 반응식을 하기 반응식 4에 나타내었고, 하기에 기재하였다:

[반응식 4]

반응식 4의 단계 1에서, 중간체(III-a)를 약 -20℃ 내지 약 실온의 온도 범위에서 테트라하이드로퓨란, 2-메틸테트라하이드로퓨란과 같은 용매 중 피리딘, 트라이에틸아민, N,N-다이아이소프로필에틸아민과 같은 염기의 존재하에 적절한 아릴설폰일 클로라이드 R₄SO₂Cl 또는 아릴설폰산 무수물 R₄S(O)₂OS(O)₂R₄(이때 R₄는 선택적으로 치환된 아릴 기로서, 예컨대 아릴설폰일 클로라이드에서 발견는 것(4-메틸-벤젠설폰일 클로라이드, 4-나이트로-벤젠설폰일 클로라이드, 4-플루오로-벤젠설폰일 클로라이드, 2,6-다이클로로-벤젠설폰일 클로라이드, 4-플루오로-2-메틸-벤젠설폰일 클로라이드 및 2,4,6-트라이클로로-벤젠설폰일 클로라이드) 및 아릴설폰산 무수물에서 발견되는 것(p-톨루엔설폰산 무수물)이 있다)로 처리한다. 아연(II) 브로마이드와 같은 몇몇 루이스산을 첨가제로서 사용할 수 있다.

반응식 4의 단계 2에서, 중간체(IV-a)는 콘블럼(Kornblum) 유형의 산화(문헌[Kornblum, N., et al., Journal of The American Chemical Society, 81, 4113 (1959)])로 처리되어 상응하는 알데하이드가 산출되고, 이는 상응하는 수화물 및/또는 헤미아세탈 형태와 평형으로 존재할 수 있다. 예를 들면, 중간체(IV-a)를 약 실온 내지 약 150℃의 온도 범위에서 다이메틸 설폭사이드와 같은 용매 중 피리딘, 2,6-루티딘, 2,4,6-콜리딘, N,N-다이아이소프로필에틸아민, 4-(다이메틸아미노)피리딘과 같은 염기의 존재하에 처리한다. 그 후, 생성된 알데하이드 중간체는 단게 1(반응식 1) 및 단계 5(반응식 2)에 기재된 알돌/칸니자로 조건에 가해져 중간체(IV-b)가 산출된다.

반응식 4의 단계 3에서, 중간체(IV-b)를 약 -10℃ 내지 약 실온의 온도 범위에서 다이클로로메테인과 같은 용매 중 트라이플루오로아세트산 또는 산성 수지와 같은 산으로 처리하여 최종 생성물 A가 산출된다.

R²가 (C₂-C₄)알킨일인 경우, 방법은 하기 반응식 5를 사용하여 수행될 수 있으며, 여기서 R⁶은 H 또는 (C₁-C₂)알킬이다:

[반응식 5]

중간체(V-i)를 제공하는 반응식 5의 단계 1에서, 유기금속 첨가 단계는 Pg₅가 하이드록시 기에 적합한 보호기인 화합물(V-a)로부터 유도된 유기금속 시약을 사용하여 반응식 1의 단계 6에서 기재된 것과 유사한 방식으로 수행된다. 예를 들면, Pg₅는 3급-뷰틸다이메틸실릴 기(TBS)일 수 있다(예를 들면, {4-[(5-브로모-2-클로로-페닐)-메틸]-페녹시}-3급-뷰틸-다이메틸-실란의 제조를 위한 미국 특허 출원 공개 제 US2007/0054867 호 참고).

반응식 5의 단계 2에서, Pg²가 PMB인 경우, 중간체(V-i)를 약 -10℃ 내지 약 실온의 온도 범위에서 다이클로로메테인과 같은 용매 중 아니솔의 존재하에 트라이플루오로아세트산, 메테인설폰산 또는 산성 수지와 같은 산으로 처리하여 중간체(V-j)가 산출된다.

반응식 5의 단계 3에서, 보호기(Pg₅) 및 (Pg¹)는 제거되어 화합물(V-k)을 제공할 수 있다. 전형적으로, (Pg₅)는 TBS이고, Pg¹은 Bn이다. 이러한 상황에서, 보호기는 화합물(V-j)을 순차적으로 (1) 0℃ 내지 약 40℃의 온도 범위에서 테트라하이드로퓨란 또는 2-메틸테트라하이드로퓨란과 같은 용매 중 테트라뷰틸암모늄 플루오라이드로 처리하고, (2) 약 실온에서 양성자성 용매(예컨대, 에탄올/THF) 중 팔라듐(Pd 블랙)의 존재하에 포름산으로 처리하여 제거된다. 이러한 순서에서, 2개의 반응의 순서는 상호교환가능하다.

반응식 5의 단계 4에서, 중간체(V-k)를 0℃ 내지 약 40℃의 온도 범위에서 다이클로로메테인 또는 1,2-다이클로로에테인과 같은 용매 중 트라이에틸아민 또는 4-다이메틸아미노피리딘과 같은 염기의 존재하에 N,N-비스-(트라이플루오로메테인설폰일)-아닐린으로 처리하여 중간체(V-l)를 산출한다.

반응식 5의 단계 5에서, 중간체(V-l)를 소노가쉬라(Sonogashira) 유형의 반응(문헌[Sonogashira, K. Coupling Reactions Between sp² and sp Carbon Centers. In Comprehensive Organic Synthesis (eds. Trost, B. M., Fleming, I.), 3, 521-549, (Pergamon, Oxford, 1991)]을 참고한다)에 가한다. 예를 들면, 화합물(V-l)을 약 실온 내지 약 120℃의 온도 범위에서 N,N-다이메틸포름아마이드와 같은 용매 중 트라이에틸아민 또는 N,N-다이아이소프로필에틸아민과 같은 염기의 존재하에 비스-(트라이페닐포스핀)-팔라듐 다이클로라이드 또는 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)과 같은 촉매를, 구리(I) 요오다이드의 존재하에 적절한 말단 알킨 HCCR⁶으로 처리하여 목적하는 생성물 A 및 B를 산출한다. R⁶이 H인 경우, 트라이메틸실릴아세틸렌을 사용하는 것이 보다 편리하다. 이 경우, 상기 기재된 반응으로부터 얻은 조질 물질을 약 실온에서 MeOH와 같은 알콜성 용매 중 탄산칼륨과 같은 염기로 처리한 후 당해 분야의 숙련자에게 공지된 전통적인 후처리 후에 R²가 -CCH인 목적하는 생성물 A 및 B를 산출한다.

당해 분야의 숙련자는 상기 반응식 1 내지 5에 기재된 화학이 중간체(V-k)를 다루는 여러 가지 방식을 나타냄을 이해한다. 다시, 특히 R¹이 Cl인 경우, 화합물(V-k)은 전통적인 조건하에 페닐 기를 선택적으로 알킬화하도록 선택된 알킬화제로 처리되어 R²가 (C₁-C₄)알콕시인 생성물 A(및 반응식 1 및 5에서는 B)를 산출한다.

본 발명의 화합물은 비대칭 또는 키랄 중심을 함유하고, 따라서 상이한 입체이성질체 형태로 존재한다. 달리 특정하지 않는 한, 본 발명의 화합물의 모든 입체이성질체 형태 및 라세미 혼합물을 비롯한 이들의 혼합물은 본 발명의 부분을 형성하는 것으로 의도된다. 또한, 본 발명은 모든 기하 및 위치 이성질체를 포함한다. 예를 들면, 본 발명의 화합물이 이중 결합 또는 융합 고리를 혼입하는 경우, 시스- 및 트랜스-형태 및 혼합물 둘 다가 본 발명의 범위에 포함된다.

부분 입체이성질체 혼합물은 당해 분야의 숙련자에게 공지된 방법, 예컨대 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화, 증류, 승화에 의해 물리 화학적 차이를 기준으로 그의 개별 부분 입체이성질체로 분리될 수 있다. 거울상이성질체는 적절한 광학적으로 활성인 화합물(예컨대, 키랄 알콜 또는 모셔(Mosher)의 산 클로라이드와 같은 키랄 보조제)과 반응시켜 거울상이성질체 혼합물을 부분 입체이성질체 혼합물로 전환시키고, 이러한 부분 입체이성질체를 분리하고, 개별 부분 입체이성질체를 상응하는 순수한 거울상이성질체로 전환(예컨대, 가수분해)시킴으로써 분리될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물 중 일부는 아트로프이성질체(atropisomer)(예컨대, 치환된 바이아릴)일 수 있고, 이는 본 발명의 일부로서 고려된다. 또한, 거울상이성질체는 키랄 HPLC(고압 액체 크로마토그래피) 컬럼을 사용하여 분리될 수 있다.

또한, 본 발명의 중간체 및 화합물은 상이한 호변이성질체 형태로 존재할 수 있고, 이러한 모든 형태는 본 발명의 범위에 포함된다. 용어 "호변이성질체" 또는 "호변이성질체 형태"는 낮은 에너지 장벽을 통해 상호전환가능한 상이한 에너지를 갖는 구조 이성질체를 지칭한다. 예를 들면, 양성자 호변이성질체(또한, 양성자성 호변이성질체로서 공지됨)는 양성자의 이동을 통한 상호전환, 예컨대 케토-에놀 및 이민-엔아민 이성질체화를 포함한다. 양성자 호변이성질체의 특정 예는 양성자가 두 개의 고리 질소 사이에서 이동할 수 있는 이미다졸 잔기이다. 원자가 호변이성질체는 결합 전자 중 몇몇의 재조직화에 의한 상호전환을 포함한다. 몇몇 중간체(및/또는 중간체의 혼합물)의 폐쇄된 형태와 개방된 형태 간의 평형은 당해 분야의 숙련자에 의해 공지된 알도스를 포함한 변선광의 과정을 연상시킨다.

또한, 본 발명은 본원에 인용된 것과 동일하지만 사실 하나 이상의 원자가 통상 천연에서 발견되는 원자량 또는 원자번호와 상이한 원자량 또는 원자번호를 갖는 원자에 의해 대체되는 본 발명의 동위원소-표지된 화합물을 포함한다. 본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 플루오르, 요오드 및 염소의 동위원소, 예컨대 각각 ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F, ¹²³I,¹²⁵I 및 ³⁶Cl을 포함한다.

본 발명의 특정 동위원소-표지된 화합물(예컨대, ³H 및 ¹⁴C로 표지된 것들)은 화합물 및/또는 기질 조직 분포 분석에 유용하다. 삼중수소화된(즉, ³H) 및 탄소-14(즉, ¹⁴C) 동위원소가 제조의 용이성 및 검출성을 위해 특히 바람직하다. 또한, 중수소(즉, ²H)와 같은 중급 동위원소에 의한 치환은 보다 큰 대사 안정성(예컨대, 생체내 반감기의 증가 또는 투여량 요건의 감소)으로부터 발생되는 특정 치료학적 이점을 제공할 수 있고, 따라서 몇몇 환경에 바람직할 수 있다. ¹⁵O, ¹³N, ¹¹C 및 ¹⁸F와 같은 양전자 방출 동위원소는 기질 점유력을 시험하는 양전자 방출 단층 촬영(PET) 연구에 유용하다. 본 발명의 동위원소 표지된 화합물은 일반적으로 반응식 및/또는 하기 실시예에 개시된 것과 유사한 절차에 의해 비동위원소 표지된 시약 대신 동위원소 표지된 시약을 사용하여 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물은 나트륨-글루코스 전달체(특히, SGLT2)의 억제에 의해 조절되는 질병, 상태 및/또는 장애를 치료하는데 유용하며, 따라서 본 발명의 다른 실시양태는 치료 효과량의 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물이다. 본 발명의 화합물(본원에서 사용되는 조성물 및 방법을 포함)은 또한 본원에 기재된 치료학적 용도를 위한 약제의 제조에 사용될 수 있다.

전형적인 제형은 본 발명의 화합물 및 담체, 희석제 또는 부형제를 혼합함으로써 제조된다. 적합한 담체, 희석제 및 부형제는 당해 분야의 숙련자에게 공지되어 있고, 탄수화물, 왁스, 수용성 및/또는 팽윤성 중합체, 친수성 또는 소수성 물질, 젤라틴, 오일, 용매, 물 등과 같은 물질을 포함한다. 사용되는 특정 담체, 희석제 또는 부형제는 본 발명의 화합물이 적용되는 수단 및 목적에 따라 좌우된다. 용매는 포유류에게 투여될 안전한 것으로서(GRAS), 일반적으로 당해 분야의 숙련자에 의해 인식되는 용매를 기준으로 선택된다. 일반적으로, 안전한 용매는 비독성 수성 용매, 예컨대 물 및 물에 용해되거나 혼화성인 다른 비독성 용매이다. 적합한 수성 용매는 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(예컨대, PEG400, PEG300) 등 및 이들의 혼합물을 포함한다. 제형은 또한 하나 이상의 완충제, 안정화제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 유화제, 현탁화제, 보존제, 항산화제, 불투명제, 활택제, 가공 보조제, 착색제, 감미제, 방향제, 향미제 및 약물(즉, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물)의 우아한 존재를 제공하거나 약학 생성물(즉, 약제)의 제조를 보조하는 다른 공지된 첨가제를 포함한다.

제형은 통상적인 용해 및 혼합 절차를 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들면, 벌크 약물 물질(즉, 본 발명의 화합물 또는 화합물의 안정화된 형태, 예컨대 사이클로덱스트린 유도체 또는 다른 공지된 착화제와의 착체)을 상기 기재된 하나 이상의 부형제의 존재하에 적합한 용매에 용해시킨다. 본 발명의 화합물은 전형적으로 약학 투여량 형태로 제형화되어 용이하게 제어가능한 약물 투여량을 제공하고 우아하고 용이하게 취급가능한 제품을 환자에게 제공한다.

또한, 약학 조성물은 화학식 I의 화합물의 용매화물 및 수화물을 포함한다. 용어 "용매화물"은 화학식 I의 화합물(이의 약학적으로 허용가능한 염 포함)과 하나 이상의 용매 분자의 분자 착체를 지칭한다. 이러한 용매 분자는 약학 분야에 통상 사용되는 것들이고, 이들은 수용체, 예컨대 물, 에탄올, 에틸렌 글리콜 등에 무해한 것으로 공지되어 있다. 용어 "수화물"은 용매 분자가 물인 착체를 지칭한다. 용매 및/또는 수화물은 바람직하게는 결정질 형태로 존재한다. 다른 용매가 보다 바람직한 용매화물의 제조에서 중간체 용매화물로서 사용될 수 있다(예컨대, 메탄올, 메틸 t-뷰틸 에터, 에틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, (S)-프로필렌 글리콜, (R)-프로필렌 글리콜, 1,4-뷰틴-다이올 등). 또한, 결정질 형태는 다른 무해한 소 분자, 예컨대 L-페닐알라닌, L-프롤린, L-피로글루탐산 등과의 착체로서, 공결정 또는 공결정질 물질의 용매화물 또는 수화물로서 존재할 수 있다. 용매화물, 수화물 및 공결정질 화합물은 본원에서 참고로서 인용되는 국제 특허 출원 공개 제 WO 08/002824 호에 기재된 절차 또는 당해 분야의 숙련자에게 공지된 다른 절차를 사용하여 제조될 수 있다.

적용하기 위한 약학 조성물(또는 제형)은 약물의 투여에 사용되는 방법에 따라 여러 방식으로 패키지될 수 있다. 일반적으로, 분포를 위한 제품은 적절한 형태로 약학 제형이 그 안에 놓인 용기를 포함한다. 적합한 용기는 당해 분야의 숙련자에게 공지되어 있고, 병(플라스틱 및 유리), 사쉐(sachet), 앰플, 플라스틱 봉지, 금속 실린더 등과 같은 물질을 포함한다. 또한, 용기는 탬퍼-프루프(tamper-proof) 조립체를 포함하여 패키지의 내용물로의 부주의한 접근을 방지한다. 또한, 용기는 그 위에 용기의 내용물을 기재하는 표지가 놓인다. 표지는 또한 적절한 경고문을 포함할 수 있다.

본 발명은 추가로 치료 효과량의 본 발명의 화합물 또는 효과량의 본 발명의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물을 치료가 필요한 동물에게 투여함을 포함하는, 동물에서 나트륨-글루코스 전달체의 억제에 의해 조절되는 질병, 상태 및/또는 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 이 방법은 특히 SGLT2의 억제로부터 이점을 갖는 질병, 상태 및/또는 장애의 치료에 특히 유용하다.

본 발명의 한 양태는 비만 및 비만-관련 장애(예컨대, 과체중, 체중 증가 또는 체중 유지)의 치료이다.

비만 및 과체중은 일반적으로 체질량 지수(BMI)에 의해 정의되며, 이는 총 체지방과 상관관계를 가지며 질병의 상대적 위험성을 평가한다. BMI는 체중(kg)을 키(제곱 미터)로 나눔으로써 계산된다(kg/m²). 과체중은 전형적으로 25 내지 29.9kg/m²의 BMI로서 정의되고, 비만은 전형적으로 30kg/m²의 BMI로서 정의된다. 예컨대, 문헌[National Heart, Lung, and Blood Institute, Clinical Guidelines on the Identification, Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults, The Evidence Report, Washington, DC: U.S. Department of Health and Human Services, NIH publication no. 98-4083 (1998)]을 참고한다.

본 발명의 또 다른 양태는 당뇨병, 또는 유형 1(인슐린-의존 진성 당뇨병, 또한 IDDM으로서 지칭됨) 및 유형 2(비인슐린-의존 진성 당뇨병, 또한 NIDDM으로서 지칭됨) 당뇨병, 내당능장애, 지연된 상처 치료, 고인슐린혈증, 지방산의 상승된 혈액 수준, 고지질혈증, 고중성지질혈증, 증후군 X, 증가된 고밀도 지단백질 수준, 인슐린 내성, 고혈당증 및 당뇨 합병증(예컨대, 죽상 동맥 경화증, 관상 동맥 심질환, 뇌졸중, 말초 혈관 질환, 신장병, 고혈압, 신경병 및 망막병)을 비롯한 당뇨병-관련 장애의 발병 또는 진행을 치료 또는 지연시키는 것이다.

본 발명의 또 다른 양태는, 비만 동반 질환, 예컨대 대사 증후군의 치료이다. 대사 중후군은 이상지질혈증, 고혈압, 인슐린 내성, 당뇨병(예컨대, 유형 2 당뇨병), 심장동맥병 및 심부전과 같은 질병, 상태 또는 장애를 포함한다. 대사 증후군에 대한 보다 상세한 정보는, 예컨대 문헌[Zimmet, P.Z., et al., "The Metabolic Syndrome: Perhaps an Etiologic Mystery but Far From a Myth - Where Does the International Diabetes Federation Stand?," Diabetes & Endocrinology, 7(2), (2005)] 및 [Alberti, K.G., et al., "The Metabolic Syndrome - A New Worldwide Definition," Lancet, 366, 1059-62 (2005)]을 참고한다.

바람직하게는, 본 발명의 화합물의 투여는 하나 이상의 심장혈관 질병 위험 인자를 통계적으로 유의하게(p<0.05) 감소시킨다(예컨대, 약물을 함유하지 않는 비히클 대조군과 비교하여 혈장 렙틴, C-반응성 단백질(CRP) 및/또는 콜레스테롤이 저하됨). 또한, 본 발명의 화합물의 투여는 글루코스 혈청 수준을 통계적으로 유의하게(p<0.05) 감소시킨다.

약 100kg의 체중을 갖는 정상 성인 인간에 있어서, 체중 1kg 당 약 0.001mg 내지 약 10mg의 투여량 범위가 전형적으로 충분하고, 바람직하게는 약 0.01mg/kg 내지 약 5.0mg/kg, 보다 바람직하게는 약 0.01mg/kg 내지 약 1mg/kg이다. 그러나, 치료될 대상의 연령 및 체중, 의도되는 투여 경로, 투여되는 특정 화합물 등에 따라 일반적인 투여량 범위에서 몇몇 변형이 요구될 수 있다. 특정 환자에 대한 투여량 범위 및 최적 투여량의 결정은 본 발명의 이점을 갖는 당해 분야의 숙련자의 능력 범위에 속한다. 또한, 본 발명의 화합물은 지속된 방출, 제어된 방출 및 지연된 방출 제형으로 사용될 수 있고, 이들 형태는 또한 당해 분야의 숙련자에게 공지된 것임을 주지해야 한다.

또한, 본 발명의 화합물은 본원에 기재된 질병, 상태 및/또는 장애의 치료를 위한 다른 약학 제제와 함께 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물을 다른 약학 제제와 병용하여 투여함을 포함하는 치료 방법이 또한 제공된다. 본 발명의 화합물과 병용하여 사용될 수 있는 적합한 약학 제제는 항비만제(식욕 억제제 포함), 항당뇨병제, 항고혈당성제, 지질 저하제, 소염제 및 항고혈압제를 포함한다.

적합한 항비만제는 카나비노이드-1(CB-1) 길항제(예컨대, 리모나반트), 11β-하이드록시 스테로이드 데하이드로게나제-1(11β-HSD 유형 1) 억제제, 스테아로일-CoA 데사투라제-1(SCD-1) 억제제, MCR-4 작용제, 콜레사이스토키닌-A(CCK-A) 작용제, 모노아민 재흡수 억제제(예컨대, 시부트라민), 교감신경작용제, β₃아드레날린 작용제, 도파민 작용제(예컨대, 브로모크립틴), 멜라닌 세포-자극 호르몬 유사체, 5HT2c 작용제, 멜라닌 농축 호르몬 길항제, 렙틴(OB 단백질), 렙틴 유사체, 렙틴 작용제, 갈라닌 길항제, 리파제 억제제(예컨대, 테트라하이드로립스타틴, 즉 오를리스타트), 식욕저하제(예컨대, 봄베신 작용제), 신경펩타이드-Y 길항제(예컨대, NPY Y5 길항제), PYY_3-36(이의 유사체 포함), 갑상선모방제, 데하이드로에피안드로스테론 또는 그의 유사체, 글루코코르티코이드 작용제 또는 길항제, 오렉신 길항제, 글루카곤-유사 펩타이드-1 작용제, 섬모 신경영양 인자(예컨대, 악소킨(Axokine, 상표명), 리제네론 파마슈티칼스 인코포레이티드(Regeneron Pharmaceuticals, Inc.)(미국 뉴욕주 테리타운 소재) 및 프록터 앤드 갬블 컴퍼니(Procter & Gamble Company)(미국 오하이오주 신시내티 소재)로부터 입수가능함), 인간 아구티-관련 단백질(AGRP) 억제제, 그렐린 길항제, 히스타민 3 길항제 또는 역 작용제, 뉴로메딘 U 작용제, MTP/ApoB 억제제(예컨대, 소화관-선택적 MTP 억제제, 예컨대, 디를로타피드), 오피오이드 길항제, 오렉신 길항제 등을 포함한다.

본 발명의 병용 양태에서 사용하기에 바람직한 항비만제는 CB-1 길항제(예컨대, 리모나반트, 타라나반트, 수리나반트, 오테나반트, SLV319(CAS 번호 464213-10-3) 및 AVE1625(CAS 번호 358970-97-5)), 소화관-선택적 MTP 억제제(예컨대, 디를로타피드, 미트라타피드 및 임플리타피드, R56918(CAS 번호 403987) 및 CAS 번호 913541-47-6), CCKa 작용제(예컨대, 국제 특허 출원 공개 제 WO 2005/116034 호 또는 미국 특허 출원 공개 제 2005-0267100 A1 호에 기재된 N-벤질-2-[4-(1H-인돌-3-일메틸)-5-옥소-1-페닐-4,5-다이하이드로-2,3,6,10b-테트라아자-벤조[e]아줄렌-6-일]-N-아이소프로필-아세트아마이드), 5HT2c 작용제(예컨대, 로르카세린), MCR4 작용제(예컨대, 미국 특허 제 6,818,658 호에 기재된 화합물), 리파제 억제제(예컨대, 세틸리스타트(Cetilistat)), PYY_3-36(본원에서 사용되는 "PYY_3-36"는, 미국 특허 출원 공개 제 2006/0178501 호에 기재된 것과 같은 PEG화된 PYY_3-36과 같은 유사체를 포함한다), 오피오이드 길항제(예컨대, 날트렉손), 올레오일-에스트론(CAS 번호 180003-17-2), 오비네피타이드(TM30338), 프라밀린타이드(심린(Symlin, 등록상표명)), 테소펜신(NS2330), 렙틴, 리라글루타이드, 브로모크립틴, 오를리스타트, 엑세나티드(비에타(Byetta, 등록상표명)), AOD-9604(CAS 번호221231-10-3) 및 시부트라민을 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물 및 병용 요법은 운동 및 현명한 식이요법과 함께 투여된다.

적합한 항당뇨병제는 아세틸-CoA 카복실라제-2(ACC-2) 억제제, 포스포다이에스터라제(PDE)-10 억제제, 다이아실글리세롤 아실트랜스퍼라제(DGAT) 1 또는 2 억제제, 설폰일유레아(예컨대, 아세토헥사아마이드, 클로르프로프아마이드, 다이아비네제, 글리벤클라미드, 글리피자이드, 글리부라이드, 글리메피라이드, 글리클라자이드, 글리펜타이드, 글리퀴돈, 글리솔라마이드, 톨라자마이드 및 톨부타마이드), 멜길티나이드, α-아밀라제 억제제(예컨대, 텐다미스타트, 트레스타틴 및 AL-3688), α-글루코사이드 하이드롤라제 억제제(예컨대, 아카르보스), α-글루코시다제 억제제(예컨대, 아디포신, 카미글리보스, 에미글리타테, 미글리톨, 보길보스, 프라디미킨-Q 및 살보스타틴), PPAR_γ작용제(예컨대, 발라글리타존, 시글리타존, 다르글리타존, 엔글리타존, 이사글리타존, 피오글리타존, 로시글리타존 및 트로글리타존), PPAR α/γ 작용제(예컨대, CLX-0940, GW-1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767 및 SB-219994), 비구아나이드(예컨대, 메트포르민), 글루카곤-유사 펩타이드 1(GLP-1) 작용제(예컨대, 엑센딘-3 및 엑센딘-4), 단백질 티로신 포스파타제-1B(PTP-1B) 억제제(예컨대, 트로두스쿠에민, 히르티오살 추출물 및 문헌[Zhang, S., et al., Drug Discovery Today, 12(9/10), 373-381 (2007)]에 기재된 화합물), SIRT-1 억제제(예컨대, 레세르바트롤), 다이펩티딜 펩티데아제 IV(DPP-IV) 억제제(예컨대, 시타글립틴, 빌다글립틴, 알로글립틴 및 사삭글립틴), 인슐린 분비촉진물질, 지방산 산화 억제제, A2 길항제, c-jun 아미노-말단 키나아제(JNK) 억제제, 인슐린, 인슐린 모방체, 글리코겐 포스포릴라제 억제제, VPAC2 수용체 작용제 및 글루코키나아제 활성화제를 포함한다. 바람직한 항당뇨병제는 메트포르민 및 DPP-IV 억제제(예컨대, 시타글립틴, 빌다글립틴, 알로글립틴 및 사삭글립틴)이다.

적합한 소염제는 생식관/요로 감염 방지 및 치료를 포함한다. 예시적인 제제는 크랜베리스(즉, 바시니움 마크로카르폰(Vaccinium macrocarpon)) 및 크랜베리 유도물, 예컨대 크랜베리 쥬스 크랜베리 추출물 또는 크랜베리의 플라보놀을 포함한다. 크랜베리 추출물은 하나 이상의 플라보놀(즉, 안토사이아닌 및 프로안토사이아니딘) 또는 미리세틴-3-β-자일로피라노사이드, 쿠에르세틴-3-β-글루코사이드, 쿠에르세틴-3-α-아라비노피라노사이드, 3'-메톡시쿠에르세틴-3-α-자일로피라노사이드, 쿠에르세틴-3-O-(6"-p-코우마로일)-β-갈락토사이드, 쿠에르세틴-3-O-(6"-벤조일)-β-갈락토사이드 및/또는 쿠에르세틴-3-α-아라비노푸라노사이드를 포함한 정제된 크랜베리 플라보놀 화합물을 포함한다.

본 발명의 실시양태는 하기 실시예에 의해 예시된다. 그러나, 본 발명의 실시양태는 본 발명에 비추어 당해 분야의 숙련자에게 다른 변형이 공지되거나 자명하기 때문에 이들 실시예의 특정 설명에 한정되지 않음을 이해해야 한다.

실시예

달리 특정되지 않는 한 출발 물질은 일반적으로 상업적인 공급처, 예컨대 알드리치 케미칼스(미국 위스콘신주 밀와우키 소재), 란캐스터 신테시스 인코포레이티드(Lancaster Synthesis, Inc.)(미국 뉴헴프셔주 윈드함 소재), 아크로스 오가닉스(Acros Organics)(미국 뉴저지주 페어라운 소재), 메이브릿지 케미칼 컴파니 리미티드(Maybridge Chemical Company, Ltd.)(영국 콘월 소재), 타이거 사이언티픽(Tyger Scientific)(미국 뉴저지주 프린세톤 소재), 아스트라제네카 파마슈티칼스(AstraZeneca Pharmaceuticals)(영국 런던 소재) 및 아셀라 켐바이오(Accela ChemBio)(미국 캘리포니아주 산디에고 소재)로부터 입수가능하다.

일반적인 실험 절차

NMR 스팩트럼은 양성자에 대해 400MHz에서 실온에서 배리안 유니티(Varian Unity, 상표명) 400(미국 캘리포니아주 팔로 알토 소재의 배리안 인코포레이티드(Varian Inc.)로부터 입수가능)에서 기록하였다. 화학적 이동은 내부 표준으로서 잔여 용매에 대한 ppm(델타)으로 표현하였다. 피크 모양은 다음과 같이 나타내었다: s, 단일선; d, 이중선; dd, 이중선의 이중선; t, 삼중선; q, 사중선; m, 다중선; bs 또는 br.s., 넓은 단일선; 2s, 2개의 단일선; br.d., 넓은 이중선. 전기분무 이온화 질량 스팩트럼(ES)은 워터스(Waters, 상표명) ZMD 기계(캐리어 기체: 질소; 용매 A: 물/0.01% 포름산, 용매 B: 아세토나이트릴/0.005% 포름산; 미국 메사추세스주 밀포드 소재의 워터스 코포레이션(Waters Corp.)으로부터 입수가능)에서 얻었다. 고 분해능 질량 스팩트럼(HRMS)은 아질런트(Agilent, 상표명) 모델 6210 비행 시간 상에서 얻었다. 단일 염소 또는 단일 브롬-함유 이온의 강도를 기재할 경우, 예상되는 강도 비율을 관찰하고(대략 ³⁵Cl/³⁷Cl-함유 이온에 대해 3:1이고, ⁷⁹Br/⁸¹Br-함유 이온에 대해 1:1이다), 오직 낮은 질량 이온의 강도만이 주어진다. 몇몇 경우 오직 대표적인 ¹H NMR 피크만이 주어졌다.

컬럼 크로마토그래피는 유리 컬럼 또는 플래시 40 바이오타지(Biotage, 상표명) 컬럼(미국 코네티컷주 셀톤 소재의 아이에스씨 인코포레이티드(ISC, Inc.))에서 베이커(Baker, 상표명) 실리카 겔(미국 뉴저지주 필립스버그 소재의 제이.티. 베이커(J.T. Baker); 40 마이크롬) 또는 실리카 겔 50(미국 뉴저지주 깁스토운 소재, EM 사이언시즈(EM Sciences, 상표명))을 사용하여 수행하였다. MPLC(중간 압력 액체 크로마토그래피)는 바이오타지(상표명) SP 정제 시스템 또는 텔레다인(Teledyne, 상표명) 이스코(Isco, 상표명)로부터의 콤비플래시(Combiflash, 등록상표명) 컴파니온(Companion, 등록상표명)을 사용하여 수행하였고, 바이오타지(상표명) SNAP 카트리지 KPsil 또는 레디세프(Redisep) Rf 실리카(텔레다인(상표명) 이스코(상표명)로부터의 것)를 저 질소 압력하에 사용하였다. HPLC(고압 액체 크로마토그래피)는 시마쥬(Shimadzu, 상표명) 10A LC-UV 또는 아질런트(상표명) 1100 분취용 HPLC를 사용하여 수행하였다.

달리 명시한 경우를 제외하고, 모든 반응은 무수 용매를 사용하여 질소 기체의 불활성 대기하에 실행하였다. 또한, 달리 명시한 경우를 제외하고, 모든 반응은 실온(약 23℃)에서 실행하였다.

TLC(박막 크로마토그래피)를 실행할 경우, R_f는 화합물에 의해 움직인 거리를 용리액에 의해 움직인 거리로 나눈 비율로서 정의되고, R_t는 체류 시간이다.

출발 물질

일반적으로, 다음과 같은 임의의 출발 물질은 미국 특허 출원 공개 제 2008/0132563 호의 반응식 7 또는 8, 또는 다르게는 미국 특허 출원 공개 제 2007/0259821 호의 반응식 2, 3 또는 8에 기재된 절차를 사용하여 제조될 수 있다. 보다 구체적으로, 하기 실시예에서 사용되는 다음과 같은 출발 물질은 상응하는 제조처로부터 구매하거나 상응하는 참고 문헌에 기재된 절차를 사용하여 제조될 수 있다:

4-브로모-2-(4-메톡시-벤질)-1-메틸-벤젠은 국제 특허 출원 공개 제 WO 01/027128 호의 실시예 8에 기재된 절차에 의해 제조될 수 있다.

4-브로모-2-(4-에톡시-벤질)-1-메틸-벤젠은 미국 특허 출원 공개 제 US2008/0132563 호의 제조예 17에 기재된 절차에 의해 제조될 수 있다.

4-브로모-1-클로로-2-(4-메톡시-벤질)-벤젠은 미국 특허 출원 공개 제 US2008/0132563 호의 제조예 19 또는 미국 특허 출원 공개 제 US2007/0259821 호의 실시예 V에 기재된 절차에 의해 제조될 수 있다.

4-브로모-1-클로로-2-(4-에톡시-벤질)-벤젠은 중국 상하이 소재의 상하이 하오유안 켐익스프레스 컴파니 리미티드(Shanghai Haoyuan Chemexpress Co., Ltd.)로부터 구매할 수 있다.

4-브로모-2-(4-메톡시-벤질)-벤조나이트릴은 미국 특허 출원 공개 제 US2007/0259821 호의 실시예 XXII에 기재된 절차에 의해 제조될 수 있다.

다음과 같은 출발 물질을 하기 기재한 바와 같이 제조하였다.

4-브로모-1-플루오로-2-(4-메톡시-벤질)-벤젠의 제조 :

0℃에서 옥살릴 클로라이드(11.0mL, 126mmol)를 다이클로로메테인(150mL) 및 N,N-다이메틸포름아마이드(1.5mL) 중 5-브로모-2-플루오로-벤조산(25.0g, 114mmol)의 잘 교반된 현탁액에 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온으로 점차 가온시켰다. 18시간 후에, 고체가 용액이 되었다. 생성된 밝은 오렌지색 용액을 감압하에 농축하고, 다이에틸 에터로 2회 세척하여 옅은 오랜지색 오일로서 5-브로모-2-플루오로-벤조일 클로라이드(27.0g, 정량 수율)를 수득하였다.

내부 온도를 10℃ 미만으로 유지하도록 0℃에서 다이클로로메테인(150mL) 중 5-브로모-2-플루오로-벤조일 클로라이드(27.0g, 114mmol) 및 아니솔(12.9g, 13.0mL, 119mmol)의 용액에 삼염화알루미늄(16.2g, 119mmol)을 나누어 첨가하였다. 0℃에서 4시간 동안 교반한 후, 용액을 분쇄된 얼음에 붓고, 생성된 혼합물을 교반하였다. 30분 후에, 유기 상을 제거하고, 수성 상을 다이클로로메테인으로 2회 추출하였다. 합한 유기 상을 1M 염산 수용액으로 1회, 1M 수산화나트륨 수용액으로 1회, 염수로 1회 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축하였다. 생성된 잔여물을 에탄올로부터 재결정화하여 백색 고체로서 (5-브로모-2-플루오로-페닐)-(4-메톡시-페닐)-메탄온(22.5g, 64%)을 수득하였다.

0℃에서 다이클로로메테인(20mL) 및 아세토나이트릴(60mL) 중 (5-브로모-2-플루오로-페닐)-(4-메톡시-페닐)-메탄온(22.5g, 72.80mmol) 및 트라이에틸실란(27.9mL, 20.3g, 175.0mmol)의 잘 교반된 용액에 삼플루오르화 붕소 에터레이트(32.0mL, 36.2g, 255.0mmol)를 적가하였다. 삼플루오르화붕소 에터레이트를 내부 온도가 20℃를 초과하지 않는 속도로 첨가하였다. 반응 용액을 실온으로 가온시키고 밤새 교반하였다. 총 18시간 후에, 물(15.0mL) 중 수산화칼륨(5.0g)의 용액을 첨가하고, 생성된 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 수성 상을 다이에틸 에터로 2회 추출하였다. 합한 유기 상을 1M 수산화나트륨 수용액으로 1회, 염수로 1회 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 에탄올을 생성된 잔여물에 첨가하자마자, 백색 고체가 형성되었다. 고체를 모으고, 고 진공하에 건조시켜 백색 고체로서 4-브로모-1-플루오로-2-(4-메톡시-벤질)-벤젠(20.1g, 93% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 3.79 (s, 3 H), 3.89 (s, 2 H), 6.85 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.91 (t, 1 H), 7.12 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.21 - 7.31 (m, 2 H).

출발 물질 4-브로모-2-(4-에톡시-벤질)-벤조나이트릴의 제조 :

N-메틸피롤리돈(4mL) 중 에틸 (4-에톡시-페닐) 아세테이트(2.68g, 12.87mmol), 4-브로모-2-플루오로-벤조나이트릴(2.74g, 13.70mmol)의 용액을 0℃에서 N-메틸피롤리돈(13mL) 중 칼륨 3급-뷰톡사이드(3.14g, 27.98mmol)의 현탁액에 서서히 첨가하였다. 첨가시에, 용액은 암 적색이 되었다. 암 적색 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반한 후 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 메탄올(10mL) 및 1M 수산화나트륨 수용액(13.7mL)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염산(1M 수용액)을 사용하여 pH를 약 4로 조정하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(50mL x 4)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조하고, 건조물로 증발시켰다. N,N-다이메틸포름아마이드(5mL) 및 탄산칼륨(7g)을 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 100℃로 가열하고 실온으로 냉각시켰다. 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(60mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조하고, 건조물로 증발시켰다. 조질 물질을 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피하여(헵테인 중 0 내지 14%의 에틸 아세테이트 구배로 용리함), 조질 생성물(목적하는 생성물 및 다른 생성물 함유) 2.26g을 수득하였다. 조질 생성물을 메탄올로 침전시켜 4-브로모-2-(4-에톡시-벤질)-벤조나이트릴(1.2g, 4.15ppm 사중선 및 1.5ppm 삼중선에서 NMR 피크를 갖는 다른 화합물 5%를 함유함)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 7.48-7.38 (m, 3 H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.08 (s, 2H), 4.03 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

출발 물질 4-브로모-2-(4-에톡시-벤질)-1-플루오로-벤젠의 제조:

0℃에서 다이클로로메테인(20mL) 중 4-브로모-1-플루오로-2-(4-메톡시-벤질)-벤젠(4.2g, 14.2mmol)의 용액에 다이클로로메테인(15.7mL, 16.0mmol) 중 삼브롬화붕소 1M 용액을 10분에 걸쳐 서서히 적가하였다. 삼브롬화붕소의 첨가가 완료되자 마자, 반응 혼합물을 실온으로 점차 가온시켰다. 4시간 후에, 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 1N 염산 수용액(20mL)을 서서히 첨가하여 급냉시켰다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 다이클로로메테인으로 2회 추출하였다. 합한 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축하여 밝은 핑크색 고체(3.83g, 96%)를 수득하였다. 조질 생성물 4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페놀을 추가의 정제없이 다음 단계에서 사용하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 3.88 (s, 2 H), 4.76 (br. s., 1 H), 6.77 (d, J=8.2 Hz, 2 H), 6.91 (t, J=9.1 Hz, 1 H), 7.07 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 7.23 (dd, J=6.8, 2.3 Hz, 1 H), 7.26 - 7.31 (m, 1 H).

0℃에서 냉각된 무수 N,N-다이메틸포름아마이드(20mL) 중 4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페놀(6.0g, 21.0mmol)의 용액에 수소화 나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액, 1.02g, 25.6mmol)을 첨가하였다. 45분 동안 0℃에서 교반한 후, 요오도에테인(2.08mL, 25.6mmol)을 적가하고, 생성된 혼합물을 실온으로 가온시켰다. 18시간 후에, 반응 혼합물을 물로 급냉시키고, 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 유기 층을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 헵테인 중 0 내지 10% 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 황색 오일로서 목적하는 생성물 4.6g(58% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 1.40 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 3.89 (s, 2 H), 4.01 (q, J=6.9 Hz, 2 H), 6.83 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 6.91 (t, J=9.0 Hz, 1 H), 7.10 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.20 - 7.30 (m, 2 H).

톨루엔-4-설폰산 테트라하이드로-퓨란-3-일 에스터의 제조:

실온에서 무수 피리딘(60mL)의 3-하이드록시 테트라하이드로퓨란(2.5g, 28.0mmol)의 용액에 4-톨루엔 설폰일 클로라이드(6.49g, 34.0mmol)를 첨가하였다. 실온에서 18시간 동안 반응 혼합물을 교반한 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔여물을 헵테인 중 0 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 무색 오일로서 목적하는 생성물 3.5g(51% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 2.05 - 2.12 (m, 2 H), 2.45 (s, 3 H), 3.77 - 3.92 (m, 4 H), 5.09 - 5.14 (m, 1 H), 7.35 (d, J=8.00 Hz, 2 H), 7.79 (d, 2 H).

톨루엔-4-설폰산 옥세탄-3-일 에스터의 제조:

실온에서 무수 피리딘(25mL)의 옥세탄-3-올(1.0g, 13.0mmol)의 용액에 4-톨루엔 설폰일 클로라이드(3.09g, 16.2mmol)를 첨가하였다. 실온에서 18시간 동안 반응 혼합물을 교반한 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔여물을 헵테인 중 0 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 목적하는 생성물 1.9g(62% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 2.46 (s, 3 H), 4.63 - 4.75 (m, 4 H), 5.26 - 5.34 (m, 1 H), 7.36 (d, J=8.00 Hz, 2 H), 7.78 (d, J=8.40 Hz, 2 H).

출발 물질 3-[4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페녹시]-테트라하이드로-퓨란의 제조:

실온에서 N,N-다이메틸포름아마이드(15.0mL) 중 4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페놀(1.5g, 5.3mmol) 및 탄산세슘(2.61g, 8.0mmol)의 용액에 N,N-다이메틸포름아마이드(10.0mL) 중 톨루엔-4-설폰산 테트라하이드로-퓨란-3-일 에스터(1.94g, 8.0mmol)의 용액을 첨가하였다. 그 후, 반응 혼합물을 50℃에서 밤새 교반하였다. 총 18시간 후에, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 염수로 희석하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 생성된 조질 잔여물을 헵테인 중 0 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 무색 오일로서 목적하는 생성물 1.66g(89% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 2.09 - 2.24 (m, 2 H), 3.86 - 4.01 (m, 6 H), 4.86 - 4.91 (m, 1 H), 6.80 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.91 (t, J=9 Hz, 1 H), 7.10 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 7.23 (dd, J=6.8, 2.5 Hz, 1 H), 7.26 - 7.31 (m, 1 H).

출발 물질 3-[4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페녹시]-옥세탄의 제조:

실온에서 N,N-다이메틸포름아마이드(15.0mL) 중 4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페놀(1.1g, 3.9mmol) 및 탄산세슘(1.91g, 5.87mmol)의 용액에 N,N-다이메틸포름아마이드(10.0mL) 중 톨루엔-4-설폰산 옥세탄-3-일 에스터(1.34g, 8.0mmol)의 용액을 첨가하였다. 그 후, 반응 혼합물을 65℃에서 밤새 교반하였다. 총 18시간 후에, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 염수로 희석하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물로 2회, 염수로 1회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 생성된 조질 잔여물을 헵테인 중 0 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체로서 목적하는 생성물 0.948g(72% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 3.88 (s, 2 H), 4.76 (dd, J=7.22, 5.3 Hz, 2 H), 4.95 (t, J=6.6 Hz, 2 H), 5.14 - 5.21 (m, 1 H), 6.63 (d, J=8.4 Hz, 2 H), 6.92 (dd, 1 H), 7.10 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 7.23 (dd, J=6.6, 2.15 Hz, 1 H), 7.26 - 7.31 (m, 1 H).

3-(4-(5-브로모-2-클로로벤질)페녹시)옥세탄의 제조:

4-브로모-1-클로로-2-(4-메톡시벤질)-벤젠(10g, 32mmol)을 다이클로로메테인(32mL)에 용해시키고, 질소하에 0℃로 냉각하였다. 다이클로로메테인(35.3mL, 34.3mmol) 중 1.0M 삼브롬화붕소 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 첨가 후에, 얼음 욕을 치우고, 용액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 1N 염산 수용액(45mL)을 첨가하여 급냉시켰다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 분별 깔때기로 옮기고, 유기 층을 모으고, 수성 층을 다이클로로메테인(45mL)으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 진공하에 농축하여 백색 고체로서 4-(5-브로모-2-클로로벤질)페놀(9.5g, 99% 수율)을 수득하였다.

실온에서 N,N-다이메틸포름아마이드(77.5mL) 중 조질 4-(5-브로모-2-클로로벤질)페놀(3.0g, 10mmol) 및 탄산세슘(4.9g, 15mmol)의 용액에 N,N-다이메틸포름아마이드(8mL) 중 톨루엔-4-설폰산 옥세탄-3-일 에스터(3.5g, 15mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 22시간 동안 65℃로 가열하고, 이때 탄산세슘(3.3g, 10mmol)의 추가 분취량을 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 추가로 12시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 이때 물 및 에틸 아세테이트를 첨가하고, 혼합물을 1N 염산 수용액으로 조심스럽게 산성화시켰다. 유기 층을 분리하고, 염수(3회)로 세척하고, 진공하에 농축하였다. 바이오타지 MPLC(헵테인 중 0 내지 25% 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는, 실리카 겔)에 의해 정제하여 백색 고체로서 3-(4-(5-브로모-2-클로로벤질)페녹시)옥세탄(2.5g, 70% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 다이클로로메테인-d2) 델타 ppm 7.34 - 7.28 (m, 2 H), 7.26 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.14 - 7.09 (m, 2 H), 6.69 - 6.35 (m, 2 H), 5.22 - 5.16 (m, 1 H), 4.96 - 4.91 (m, 2H), 4.72 - 4.68 (m, 2H), 4.01 (s, 2H).

4-브로모-2-(4-클로로-벤질)-1-플루오로-벤젠의 제조:

무수 테트라하이드로퓨란(200mL) 중 5-브로모-2-플루오로벤즈알데하이드(10.2g, 50mmol)의 용액을 -78℃로 냉각하였다. 4-클로로페닐-마그네슘 브로마이드(다이에틸 에터 중 1M, 60mL, 60mmol)의 용액을 8분에 걸쳐 주사기로 첨가하였다. 5분 동안 저온에서 계속 교반하고, 반응을 실온으로 가온시키고, 이 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 용액을 얼음 물 욕에서 냉각시키고, 포화 염화암모늄 수용액(40mL)을 첨가하여 급냉시켰다. 유기 층을 따라내고, 수성 잔여물을 감압하에 농축하여 임의의 잔여 유기 용매를 제거하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트(200mL X 2)로 추출하고, 추출물을 따라낸 테트라하이드로퓨란 용액과 합쳤다. 이 용액을 염수(25mL)로 세척하고, 건조하고(황산나트륨), 여과하고, 감압하에 농축하여 황색 고체로서 조질 (5-브로모-2-플루오로페닐)-(4-클로로페닐)-메탄올(15.2g, 96% 수율)을 수득하였다.

0℃에서 질소하에 다이클로로메테인(40mL) 및 아세토나이트릴(20mL) 중 상기 (5-브로모-2-플루오로페닐)-(4-클로로페닐)-메탄올(15.0g, 48mmol) 및 트라이에틸실란(18.5mL, 116mmol)의 용액에 삼플루오르화붕소 다이에틸 에터레이트(22.7mL, 181mmol)를 서서히 첨가하였다. 생성된 용액을 18시간 동안 교반하면서 실온으로 서서히 가온시켰다. 반응을 얼음 물 욕에서 냉각시키고, 7M 수산화칼륨 수용액(30mL)을 서서히 첨가하여 급냉시키고, 메틸 3급-뷰틸 에터(200mL X 2)로 추출하였다. 합한 유기 용액을 물(25mL X 2), 염수(25mL X 2)로 세척하고, 건조하고(황산나트륨), 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 헵테인 중 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 무색 오일로서 2-(4-클로로벤질)-4-브로모-1-플루오로벤젠(5.0g, 35% 수율)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 7.33-7.22 (m, 4H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.93 (dd, J = 9.2, 9.2 Hz, 1H), 3.92 (s, 2H).

중간체의 제조

중간체 ((2R,3R,4S,5R)-6-알릴옥시-3,4,5-트리스-벤질옥시-테트라하이드로-피란-2-일)-메탄올(I-1a)의 제조:

D-글루코스(1.2kg, 6.6mol), 트라이플루오로메테인 설폰산(12mL) 및 알릴 알콜(5L)의 현탁액을 3일 동안 80℃에서 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 휘발물질을 진공에서 제거하고, 잔여물을 N,N-다이메틸포름아마이드(8L)에 용해시켰다. 이를 4개의 동일한 반응으로 나누고, 각각에 트리틸 클로라이드(463g, 1.67mol) 및 트라이에틸아민(231mL, 1.67mol)을 첨가하였다. 트라이에틸아민을 첨가하면서 약한 발열이 관찰되었다. 반응 혼합물을 30℃에서 2일 동안 교반한 후, 각각의 반응을 반으로 나누어, 8개의 동일한 반응을 만들었다. 이들 반응 각각에, 벤질 클로라이드(300mL, 2.60mol)를 첨가하고, 40 내지 50℃로 반응 온도를 유지하면서 수소화나트륨(102.5g, 2.60mol)을 나누어 첨가하였다. 첨가를 완료한 후, 반응 혼합물을 20시간 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, 각각의 반응을 얼음/물(2L)에 붓고, 에틸 아세테이트(2.5L)로 추출하였다. 각각의 유기 상을 포화 염수/물(1:1, 2 x 2L)로 세척하고, 합한 후, 황산마그네슘 상에서 건조하였다(3:1 헥세인/에틸 아세테이트 중 생성물 R_f 0.85). 여과하고, 증발시킨 후, 잔여물을 다이클로로메테인(16L)과 메탄올(4L)의 혼합물에 용해시켰다. 혼합물을 5개의 동일한 부분으로 나누고, 각각에 황산(32mL)을 첨가하였다. 반응을 3시간 동안 교반하고, 염수/2M 수산화나트륨 수용액(1:1, 2 x 2L)으로 세척하고, 합한 후, 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 여과하고, 진공하에 농축한 후, 잔여물을 톨루엔 중 30% 에틸 아세테이트로 용리하는 실리카 겔 상에서 추가로 정제하여 아노머의 혼합물로서 중간체 화합물(I-1a)을 수득하였다(1.77kg, D-글루코스로부터 54% 수율). 3:1 헥세인/에틸 아세테이트 중 R_f 0.15.

중간체 ((3S,4S,5R)-6-알릴옥시-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-하이드록시메틸-테트라하이드로-피란-2-일)-메탄올(I-1b)의 제조:

다이클로로메테인(160mL) 중 다이메틸설폭사이드(87mL, 1.22mol)의 용액에 -78℃에서 다이클로로메테인(2.5L) 중 옥살릴 클로라이드(64.7mL, 0.76mol)의 용액을 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 다이클로로메테인(500mL) 중 중간체(I-1a)(287g, 0.59mol)의 용액을 -78℃에서 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 트라이에틸아민(417mL, 2.9mol)을 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 혼합물을 실온으로 자가 가온시켰다. 그 후, 반응 혼합물을 1M 염산 수용액(2L) 및 물(2L)로 세척한 후, 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 이 반응 절차를 6개의 동일한 반응에 대해 반복하고, 건조시킨 후, 이들을 합하고, 증발시켜 황색 오일로서 알데하이드(1.71kg)를 수득하였다. 이 오일을 아이소프로판올(2.57L)에 용해시키고, 7개의 동일한 반응으로 나누었다. 이들 각각에 37% 포름알데하이드 수용액(0.79L, 10mol)을 첨가하고, 물(130mL) 중 수산화나트륨(32g, 0.8mol)의 용액을 적가하였다. 첨가를 완료한 후, 반응 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염수(2L)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2L)로 추출하였다. 유기 상을 포화 중탄산나트륨 수용액(2L), 염수(2L)로 추가로 세척한 후 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 7개의 반응으로부터의 유기 상을 합하고, 증발시키고, 잔여물을 실리카 겔(에틸 아세테이트 중 4:1 내지 1:1 헥세인으로 용리함) 상에서 정제하여 아노머의 혼합물로서 중간체 화합물(I-1b)을 수득하였다(980g, 2개의 단계에 대해 53% 수율). 1:1 헥세인/에틸 아세테이트 중 R_f 0.57 및 0.60.

(3S,4S,5R)-6-알릴옥시-3,4,5-트리스-벤질옥시-2,2-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란(I-1c) :

출발 다이올 [((3S,4S,5R)-6-알릴옥시-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-하이드록시메틸-테트라하이드로-피란-2-일)-메탄올(I-1b: 10g, 19.208mmol)을 N,N-다이메틸포름아마이드(70mL)에 용해시키고, 0℃로 냉각하였다. 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액, 1.69g, 42.3mmol)을 첨가하고, 반응을 1시간 동안 0℃에서 교반한 후 1-브로모메틸-4-메톡시-벤젠(5.96mL, 40.3mmol)을 첨가하였다. 그 후, 반응을 밤새 60℃로 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 반응을 물로 급냉시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(2회). 합한 유기 층을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 그 후, 반응을 실리카 겔(헵테인 중 0 내지 80%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리함) 상에서 크로마토그래피하여 생성물(I-1c) 7.55g(52% 수율)을 수득하였다. MS 778.8 (M + NH₄ ⁺; 양성 모드).

(3R,4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-1d) :

실온에서 메탄올(60mL) 및 다이클로로메테인(20mL) 중 출발 물질 ((3S,4S,5R)-6-알릴옥시-3,4,5-트리스-벤질옥시-2,2-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란(I-1c: 7.55g, 9.92mmol)의 용액에 팔라듐(II) 클로라이드(528mg, 2.98mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 이 온도에서 4시간 동안 교반하였다. TLC는 보다 극성인 생성물의 깨끗한 형성을 가리켰다. 반응을 셀라이트(Celite, 등록상표명)를 통해 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 헵테인 중 0 내지 80%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 생성물(I-1d) 5.6g(78% 수율)을 수득하였다. MS 738.8 (M + NH₄ ⁺; 양성 모드).

(3R,4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-온(I-1e):

-78℃에서 다이클로로메테인(65mL) 중 옥살릴 다이클로라이드(1.9mL, 23mmol)의 용액에 다이클로로메테인(5mL) 중 다이메틸 설폭사이드(3.3mL, 47mmol)의 용액을 첨가하고, 생성된 용액을 30분 동안 이 온도에서 교반하였다. 그 후, 다이클로로메테인(15.0mL) 중 출발 물질 ((3R,4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-1d, 5.6g, 7.7mmol)의 용액을 적가하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하고, 온도를 -60℃로 상승시켰다. 트라이에틸아민(9.7mL, 69.5mmol)을 적가하고, 혼합물을 1시간에 걸쳐 0℃로 가온시켰다. 반응을 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하여 급냉시키고, 유기 상을 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 헵테인 중 0 내지 60%의 에틸 아세테이트 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 생성물(I-1e)을 수득하였다(4g, 72% 수율).

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 3.24 (d, J=10 Hz, 1 H), 3.40 - 3.47 (m, 2 H), 3.74 (s, 3 H), 3.77 (s, 3 H), 3.86 (d, J=10 Hz, 1 H), 4.07 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 4.15 (d, J=9.6 Hz, 1 H), 4.35 - 4.55 (m, 6 H), 4.65 - 4.72 (m, 2 H), 4.82 (d, J=11 Hz,1 H), 4.87 (d, J=11.2 Hz, 1 H), 5.10 (d, J=11.1 Hz, 1 H), 6.74 - 6.79 (m, 2 H), 6.81 - 6.85 (m, 2 H), 7.11 (dd, J=7.0, 2.5 Hz, 2 H), 7.17 - 7.41 (m, 17 H).

(2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g) 및/또는 (3R,4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(메톡시-메틸-아미노)-테트라하이드로-피란-2-올(I-1f) :

0℃에서 다이클로로메테인(100mL) 중 락톤 ((3R,4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-온(I-1e: 10.4g, 14.5mmol) 및 N,O-다이메틸-하이드록실아민 하이드로클로라이드(1.77g, 29.0mmol)의 용액에 헥세인(14.5mL, 29.0mmol) 중 트라이메틸 알루미늄의 2.0M 용액을 적가하고, 생성된 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각하고, 1N 염산 수용액을 서서히 첨가하여 급냉시켰다. 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 1N 염산 수용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 중간 압력 크로마토그래피(헵테인 중 5 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배)에 의해 정제하여 생성물 6.5g(58%)을 수득하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 2.62 (br. s, 1 H), 2.94 (br. s., 3 H), 3.23 (br. s., 3 H), 3.42 (d, J=9.4 Hz, 1 H), 3.50 - 3.60 (m, 3 H), 3.75 (s, 3 H), 3.77 (s, 3 H), 4.03 (d, J=6.9 Hz, 1 H), 4.20 (dd, J=6.9, 3.3 Hz, 1 H), 4.31 - 4.44 (m, 5 H), 4.46 - 4.51 (m , 2H), 4.53 (d, J=12 Hz, 1 H), 4.66 (d, J=12 Hz, 1 H), 4.80 (br. d, J=11.5 Hz, 1 H), 4.87 (d, J=11.4 Hz, 1 H), 6.77 - 6.83 (m, 4 H), 7.15 - 7.35 (m, 19 H). ([M+H⁺] 780.8, 양성 모드; [M+HCO₂ ^-] 824.7, 음성 모드). C₄₆H₅₄NO₁₀(M+H⁺)에 대해 계산된 HRMS 780.3742, 실측치 780.3708.

(2R,3S,4S)-2,3,4,6-테트라키스-벤질옥시-5-벤질옥시메틸-5-하이드록시-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-6g) 및/또는 (3R,4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-벤질옥시메틸-2-(메톡시-메틸-아미노)-테트라하이드로-피란-2-올(I-6f):

이 화합물을 (I-1b)의 (I-1c)로의 전환에 기재된 실험 부분에서 사용되는 알킬화제가 파라-메톡시벤질 브로마이드 대신에 벤질 브로마이드인 것을 제외하고는, (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g) 및/또는 (3R,4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-2-(메톡시-메틸-아미노)-테트라하이드로-피란-2-올(I-1f)의 합성에 대해 기재된 것과 유사한 절차를 사용하여, [((3S,4S,5R)-6-알릴옥시-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-하이드록시메틸-테트라하이드로-피란-2-일)-메탄올(I-1b)로부터 출발하여 제조하였다.

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 ppm 2.66 (br. s, 1 H), 2.94 (br. s., 3 H), 3.23 (br. s., 3 H), 3.48 (d, J=9.4 Hz, 1 H), 3.55 - 3.66 (m, 3 H), 4.05 (d, J=6.9 Hz, 1 H), 4.21 (dd, J=6.9, 3.3 Hz, 1 H), 4.36 (d, 1H, J = 11.7 Hz), 4.41 - 4.58 (m, 7 H), 4.68 (d, J=11.9 Hz, 1 H), 4.81 (br. d, J=11.5 Hz, 1 H), 4.89 (d, J=11.5 Hz, 1 H), 7.15 - 7.35 (m, 25 H). MS [M+H⁺] 720.7, 양성 모드; [M+HCO₂ ^-] 764.7, 음성 모드).

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-1i):

n-뷰틸 리튬(0.97mL, 2.5M/헥세인, 3.15 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(2.7mL) 중 4-브로모-2-(4-메톡시-벤질)-1-메틸-벤젠(690mg, 3 당량)의 산소 탈기된 용액(질소 기체의 양성 스트림하에 놓이고 캡으로 밀봉된 예비 건조된 바이오타지(상표명) 마이크로파 바이알 10 내지 20mL에 놓임)에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(1.35mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(608mg)의 용액을 주사기 펌프를 사용하여 1.5시간에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반한 후 14시간에 걸쳐 -20℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워(deep Dewar)에 놓음; 디워 크기: 외경 10cm, 내경 8cm, 높이 9cm). 다이에틸 에터를 첨가하고, 반응을 1M 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 헵테인 중 20 내지 50%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(440mg, 61% 수율).

C₅₉H₆₂O₁₀Na (M+Na⁺)에 대해 계산된 HRMS: 953.4235, 실측치 953.4236.

{(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-1k) :

다이클로로메테인(3mL) 중 중간체(I-1i)(150mg)의 용액에 아니솔(90μL, 5 당량)을 첨가한 후, 다이클로로메테인 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액 3mL를 첨가하고, 생성된 혼합물을 약 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 조질 물질을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용함) 상에서 크로마토그래피하여 이성질체의 혼합물로서 목적하는 생성물을 수득하였다(66mg, 61% 수율). MS (LCMS) 673.9 (M+H⁺; 양성 모드).

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-2i):

n-뷰틸 리튬(0.312mL, 2.5M/헥세인, 3.05 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(0.9mL) 중 4-브로모-2-(4-에톡시-벤질)-1-메틸-벤젠(238mg, 3.05 당량)의 산소 탈기된 용액(질소 기체의 양성 스트림하에 놓이고 캡으로 밀봉된 예비 건조된 바이오타지(상표명) 마이크로파 바이알 10 내지 20mL에 놓임)에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(0.6mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(200mg)의 용액을 주사기 펌프를 사용하여 1.5시간에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반한 후 16시간에 걸쳐 실온으로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음; 디워 크기: 외경 10cm, 내경 8cm, 높이 9cm). 다이에틸 에터를 첨가하고, 반응을 1M 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 조질 물질을 바이오타지(상표명) 자동화된 크로마토그래피 유닛(2개의 스태킹된 10g 실리카 겔 컬럼; 헵테인 중 0 내지 60%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리함)을 사용하여 크로마토그래피하여 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(136mg, 56% 수율). MS (LCMS) 968 (M+Na⁺; 양성 모드).

{(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-2k) :

다이클로로메테인(4mL) 중 중간체(I-2i)(136mg, 0.145mmol)의 용액에 아니솔(310μL, 약 5 당량)을 첨가한 후, 다이클로로메테인 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액 4mL를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 조질 물질을 ISCO(상표명) 컴비플래시(combiflash, 등록상표명) 컴파니온(등록상표명) 자동화된 크로마토그래피 유닛(4g 실리카 겔 컬럼)을 사용하고, 헵테인 중 0 내지 70%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 크로마토그래피하여 이성질체의 혼합물로서 목적하는 생성물(85mg, 85% 수율)을 수득하였다. MS (LCMS) 687.7 (M+H⁺; 양성 모드).

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-3i):

n-뷰틸 리튬(0.97mL, 2.5M/헥세인, 3.15 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(2.7mL) 중 4-브로모-1-클로로-2-(4-메톡시-벤질)-벤젠(725mg, 2.95 당량)의 산소 탈기된 용액(질소 기체의 양성 스트림하에 놓이고 캡으로 밀봉된 예비 건조된 바이오타지(상표명) 마이크로파 바이알 10 내지 20mL에 놓임)에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(1.35mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(616mg)의 용액을 주사기 펌프를 사용하여 1.5시간에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반한 후 14시간에 걸쳐 -20℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음; 디워 크기: 외경 10cm, 내경 8cm, 높이 9cm). 다이에틸 에터를 첨가하고, 반응을 1M 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(530mg, 71% 수율).

{(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-3k) :

다이클로로메테인(11mL) 중 중간체(I-3i)(530mg)의 용액에 아니솔(300μL, 5 당량)을 첨가한 후, 다이클로로메테인 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액 11mL를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 조질 물질을 헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(229mg, 59% 수율)을 수득하였다. MS (LCMS) 693.6 (M+H⁺; 양성 모드).

(4S,5S)-3,4,5- 트리스 - 벤질옥시 -2-[4- 클로로 -3-(4- 에톡시 -벤질)- 페닐 ]-6,6-비스-(4- 메톡시 - 벤질옥시메틸 )- 테트라하이드로 -피란-2-올(I-4i):

n-뷰틸 리튬(1.0mL, 2.5M/헥세인, 3.25 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(2.9mL) 중 4-브로모-1-클로로-2-(4-에톡시-벤질)-벤젠(815mg, 3.25 당량)의 산소 탈기된 용액(질소 기체의 양성 스트림하에 놓이고 캡으로 밀봉된 예비 건조된 바이오타지(상표명) 마이크로파 바이알 10 내지 20mL에 놓임)에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(1.45mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(600mg)의 용액을 주사기 펌프를 사용하여 1.3시간에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반한 후 14시간에 걸쳐 -25℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음; 디워 크기: 외경 10cm, 내경 8cm, 높이 9cm). 다이에틸 에터를 첨가하고, 반응을 1M 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(280mg, 38% 수율).

C₅₉H₆₁O₁₀ClNa (M+Na⁺)에 대해 계산된 HRMS: 987.3845, 실측치 987.3840.

{(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-4k) :

다이클로로메테인(31mL) 중 중간체(I-4i)(1.46g)의 용액에 아니솔(900μL, 약 5 당량)을 첨가한 후, 다이클로로메테인 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액 31mL를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 조질 물질을 헵테인 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(670mg, 63% 수율)을 수득하였다.

C₄₃H₄₄O₇Cl (M+H⁺)에 대해 계산된 HRMS: 707.2770, 실측치 707.2765.

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-6,6-비스-(4메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-5i):

n-뷰틸 리튬(462μL, 2.5M/헥세인, 3.0 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(1.4mL) 중 4-브로모-1-플루오로-2-(4-메톡시-벤질)-벤젠(341mg, 3 당량)의 산소 탈기된 용액(질소 기체의 양성 스트림하에 놓이고 캡으로 밀봉된 예비 건조된 바이오타지(상표명) 마이크로파 바이알 10 내지 20mL에 놓임)에 적가하였다(매 5초 당 1 방울). 생성된 용액을 이 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(0.70mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(300mg, 0.385mmol)의 용액을 매우 서서히 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 혼합물을 추가의 시간 동안 -78℃에서 교반한 후 12시간에 걸쳐 10℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음; 디워 크기: 외경 10cm, 내경 8cm, 높이 9cm). 반응을 다이에틸 에터로 희석하고, 1N 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하여 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(199mg, 55% 수율).

{(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-5k):

다이클로로메테인(3.75mL) 중 (4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-6,6-비스-(4메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-5i; 191mg, 0.204mmol)의 용액에 아니솔(0.178mL, 1.63mmol)을 첨가한 후, 질소하에 실온에서 다이클로로메테인(3.75mL) 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액을 첨가하였다. 1시간 동안 실온에서 교반한 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(115mg, 83% 수율)을 수득하였다. MS (LCMS) 677.7 (M+H⁺; 양성 모드).

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-10i)

n-뷰틸 리튬(508μL, 2.5M/헥세인, 3.0 당량)을 -78℃에서 질소하에 무수 테트라하이드로퓨란(1.5mL) 중 4-브로모-2-(4-에톡시-벤질)-1-플루오로-벤젠(392.0mg, 1.27mmol)의 산소 탈기된 용액에 적가하였다(매 5초 당 1 방울). 생성된 용액을 이 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(0.75mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(330.0mg, 0.423mmol)의 용액을 매우 서서히 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 혼합물을 추가의 시간 동안 -78℃에서 교반한 후 12시간에 걸쳐 10℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음). 반응을 다이에틸 에터로 희석하고, 1N 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하여 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(180mg, 44% 수율).

{(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-10k)

다이클로로메테인(2.0mL) 중 중간체(I-10i)(180.0mg, 0.19mmol)의 용액에 아니솔(0.175mL, 1.60mmol)을 첨가한 후, 질소하에 실온에서 다이클로로메테인(2.0mL) 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액을 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(85.0mg, 64% 수율)을 수득하였다.

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-{4-플루오로-3-[4-(테트라하이드로-퓨란-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-11i)

n-뷰틸 리튬(1.0mL, 2.5M/헥세인, 3.0 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(3.0mL) 중 3-[4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페녹시]-테트라하이드로-퓨란(878mg, 2.50mmol)의 산소 탈기된 용액에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(1.5mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(650mg, 0.833mmol)의 용액을 매우 서서히 적가하고(0.9mL/시간), 생성된 혼합물을 추가의 시간 동안 -78℃에서 교반한 후 12시간에 걸쳐 10℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음). 반응을 다이에틸 에터로 희석하고, 1N 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하여 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(287mg, 34% 수율).

((2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-{4-플루오로-3-[4-(테트라하이드로-퓨란-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일)-메탄올(I-11k)

다이클로로메테인(2.0mL) 중 (4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-{4-플루오로-3-[4-(테트라하이드로-퓨란-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-11i)(275mg, 0.28mmol)의 용액에 아니솔(0.250mL, 2.29mmol)을 첨가한 후, 질소하에 실온에서 다이클로로메테인(8.0mL) 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액을 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(168mg, 83% 수율)을 수득하였다.

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-[3-(4-클로로-벤질)-4-플루오로-페닐]-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-12i):

n-뷰틸 리튬(1.0mL, 2.5M/헥세인, 3.1 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(3.0mL) 중 4-브로모-2-(4-클로로-벤질)-1-플루오로-벤젠(702mg, 2.9 당량)의 산소 탈기된 용액(질소 기체의 양성 스트림하에 놓이고 캡으로 밀봉된 예비 건조된 바이오타지(상표명) 마이크로파 바이알 10 내지 20mL에 놓임)에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 25분 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(1.5mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(621mg)의 용액을 주사기 펌프를 사용하여 적가하고(0.9mL/시간), 생성된 혼합물을 추가로 17시간 동안 저온에서 교반하였다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음; 디워 크기: 외경 10cm, 내경 8cm, 높이 9cm). 반응을 1M 염산 수용액(1.5mL)을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 포화 수성 염화암모늄(15mL)으로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다(15mL x 3). 합한 유기 용액을 염수(30mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(477mg, 64% 수율).

{(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[3-(4-클로로-벤질)-4-플루오로-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-12k) :

다이클로로메테인(9mL) 중 중간체(I-12i)(243mg)의 용액에 아니솔(0.15mL, 5.3 당량)을 첨가한 후, 트라이플루오로아세트산(1.0mL, 50 당량)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 조질 물질을 헵테인 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(102mg, 58% 수율)을 수득하였다.

(4S,5S)-3,4,5- 트리스 - 벤질옥시 -2-{4- 플루오로 -3-[4-( 옥세탄 -3- 일옥시 )-벤질]- 페닐 }-6,6- 비스 -(4- 메톡시 - 벤질옥시메틸 )- 테트라하이드로 -피란-2-올(I-13i)

n-뷰틸 리튬(1.12mL, 2.5M/헥세인, 3.0 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(3.0mL) 중 3-[4-(5-브로모-2-플루오로-벤질)-페녹시]-옥세탄(942.0mg, 2.79mmol)의 산소 탈기된 용액에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(1.5mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(725.0mg, 0.930mmol)의 용액을 매우 서서히 적가하고(0.9mL/시간), 생성된 혼합물을 추가의 시간 동안 -78℃에서 교반한 후 12시간에 걸쳐 10℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음). 반응을 다이에틸 에터로 희석하고, 1N 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 40%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(535mg, 59% 수율).

((2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-{4-플루오로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일)-메탄올(I-13k)

다이클로로메테인(2.0mL) 중 (4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-{4-플루오로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-13i)(535mg, 0.548mmol)의 용액에 아니솔(0.480mL, 4.38mmol)을 첨가한 후, 질소하에 실온에서 다이클로로메테인(8.0mL) 중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액을 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 조질 잔여물을 실리카 겔(헵테인 중 10 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(300mg, 76% 수율)을 수득하였다.

(4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-{4-클로로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-14i):

n-뷰틸 리튬(0.97mL, 2.5M/헥세인, 3.15 당량)을 -78℃에서 무수 테트라하이드로퓨란(2.7mL) 중 3-(4-(5-브로모-2-클로로벤질)페녹시)옥세탄(824mg, 2.95 당량)의 산소 탈기된 용액(질소 기체의 양성 스트림하에 놓이고 캡으로 밀봉된 예비 건조된 바이오타지(상표명) 마이크로파 바이알 10 내지 20mL에 놓임)에 적가하고(매 5초 당 1 방울), 생성된 용액을 이 온도에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 그 후, 무수 테트라하이드로퓨란(1.35mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-하이드록시-6-(4-메톡시-벤질옥시)-5-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-1g)(616mg)의 용액을 주사기 펌프를 사용하여 1.5시간에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 -78℃에서 교반한 후 14시간에 걸쳐 -20℃로 가온시켰다(차가운 온도를 유지하기 위해 알루미늄 호일로 피복된 딥 디워에 놓음; 디워 크기: 외경 10cm, 내경 8cm, 높이 9cm). 다이에틸 에터를 첨가하고, 반응을 1M 염산 수용액을 적가하여 급냉시켰다. 생성된 2상 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켰다. 헵테인 중 0 내지 50%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 이성질체의 혼합물로서 생성물을 수득하였다(563mg, 72% 수율).

((2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-{4-클로로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일)-메탄올(I-14k) :

다이클로로메테인(2.84mL) 중 중간체 (4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-2-{4-클로로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,6-비스-(4-메톡시-벤질옥시메틸)-테트라하이드로-피란-2-올(I-14i)(282mg)의 용액에 아니솔(200μL, 약 7 당량)을 첨가한 후, 다이클로로메테인중 20% 트라이플루오로아세트산의 용액 3.07mL를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1.5시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 조질 물질을 헵테인 중 10 내지 50%의 에틸 아세테이트의 구배를 사용하는 실리카 겔 상에서 크로마토그래피하여 이성질체의 혼합물로서 생성물(186mg, 89% 수율)을 수득하였다.

실시예 1

(1S,2S,3S,4R,5S)-1-하이드록시메틸-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(1A) 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-1-하이드록시메틸-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(1B) :

에탄올/테트라하이드로퓨란(7mL, 4/1 부피) 중 {(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-1k: 236mg)의 용액에 포름산(270μL, 19 당량) 및 팔라듐 블랙(150mg, 4 당량)을 연속적으로 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 팔라듐을 여과하고, 용매 증발 후 수득된 조질 혼합물을 헵테인 중 85 내지 100%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 수득된 생성물의 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC 방법: 역상 C18 페노메넥스(phenomenex) 컬럼 루나(Luna) 5㎛ 150 x 21.20mm, 20mL/분, 아세토나이트릴/0.1% 포름산:물/0.1% 포름산의 구배; 20분에 걸친 20 내지 60%의 아세토나이트릴/0.1% 포름산. UV 검출: 254nm. HPLC는 3:1의 부분 입체이성질체의 비율(1A:1B)을 가리켰다.

1A: (55mg, 39% 수율); R_t = 10.9분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다. MS (LCMS) 403.3 (M+H⁺; 양성 모드) 447.3 (M+HCO₂ ^-, 음성 모드).

¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 7.33 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 7.30 (dd, 1H, J = 7.6 및 1.6 Hz), 7.10 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 7.02-6.98 (m, 2H), 6.79-6.75 (m, 2H), 4.13 (d, 1H, J = 7.4 Hz), 3.90 (s, 2H), 3.82 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.77 (dd, 1H, J = 8.2 및 1.2 Hz), 3.72 (s, 3H), 3.66 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.65 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 3.59 (d, 1H, J = 7.8 Hz), 3.58 (dd, 1H, J = 7.5 및 1.5 Hz), 2.16 (s, 3H). C₂₂H₂₇O₇ (M+H⁺)에 대해 계산된 HRMS: 403.1751, 실측치 403.1737.

1B: (20mg, 14% 수율); R_t = 11.5분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다. MS (LCMS) 403 (M+H⁺; 양성 모드) 447 (M+HCO₂ ^-, 음성 모드).

¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 7.38 (d, 1H, J = 1.8 Hz) 7.33 (dd, 1H, J = 7.9 및 1.8 Hz), 7.10 (d, 1H, J = 7.9 Hz), 7.02-6.97 (m, 2H), 6.79-6.74 (m, 2H), 4.02 (d, 1H, J = 7.4 Hz), 3.93 (t, 1H, J = 2.2 Hz), 3.91 (br. s, 2H), 3.88 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.84 (d, 2H, J = 2.4 Hz), 3.75 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.71 (s, 3H), 3.49 (d, 1H, J = 7.4 Hz), 2.16 (s, 3H).

실시예 2

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(2A) 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(2B)

에탄올/테트라하이드로퓨란(7mL, 약 4/1 부피) 중 {(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-2k: 85mg, 0.12mmol)의 용액에 포름산(95μL, 19 당량) 및 팔라듐 블랙(53mg, 4 당량)을 연속적으로 첨가하고, 생성된 혼합물 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 팔라듐을 여과하고, 용매 증발 후 수득된 조질 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC 방법: 역상 C18 페노메넥스 컬럼 루나 5㎛ 150 x 21.20mm, 20mL/분, 아세토나이트릴/0.1% 포름산:물/0.1% 포름산의 구배; 20분에 걸친 20 내지 60%의 아세토나이트릴/0.1% 포름산. UV 검출: 254nm. HPLC는 4:1의 부분 입체이성질체의 비율(2A:2B)을 가리켰다.

2A: (20mg; 38% 수율) R_t = 12.7분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다.

MS (LCMS) 417.3 (M+H⁺; 양성 모드); 461.4 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 1.34 (t, J=6.9 Hz, 3 H), 2.18 (s, 3 H), 3.60 (d, J=8 Hz, 2 H), 3.66 (t, J=8 Hz, 1 H), 3.68 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 3.78 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 3.84 (d, J=12.4 Hz, 1 H), 3.92 (s, 2 H), 3.97 (q, J=7 Hz, 2 H), 4.15 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 6.77 (m, 2 H), 7.00 (m, 2 H), 7.12 (d, J=7.7 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J=7.9 및 1.4 Hz, 1 H), 7.34 (s, 1 H).

2B: (5mg; 9% 수율) R_t = 13.2분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다.

MS (LCMS) 417.3 (M+H⁺; 양성 모드); 461.4 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 1.34 (t, J=6.9 Hz, 3 H), 2.18 (s, 3 H), 3.52 (d, 1H, J= 7.4 Hz), 3.77 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 4.00-3.84 (m, 8 H), 4.04 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 6.79-6.75 (m, 2 H), 7.03-6.98 (m, 2 H), 7.12 (d, J=7.9 Hz, 1 H), 7.35 (dd, J=7.7 및 1.9 Hz, 1 H), 7.39 (d, J = 1.9 Hz, 1 H).

실시예 3

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(3A) 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(3B) :

에탄올/테트라하이드로퓨란(7mL, 4/1 부피) 중 {(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-3k: 229mg)의 용액에 포름산(270μL, 20 당량) 및 팔라듐 블랙(140mg, 4 당량)을 연속적으로 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 1시간 후에, 추가의 포름산(270μL, 20 당량) 및 팔라듐 블랙(140mg, 4 당량)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 팔라듐을 여과하고, 용매 증발 후 수득된 조질 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC 방법: 역상 C18 페노메넥스 컬럼 루나 5㎛ 150 x 21.20mm, 20mL/분, 아세토나이트릴/0.1% 포름산:물/0.1% 포름산의 구배; 20분에 걸친 20 내지 60%의 아세토나이트릴/0.1%포름산. UV 검출: 254nm. HPLC는 1.4:1의 부분 입체이성질체의 비율(3A:3B)을 가리켰다.

3A: (50mg; 36% 수율) R_t = 12.1분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 농축시켰다.

MS (LCMS) 423.3 (M+H⁺; 양성 모드); 467.3 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 7.43 (s, 1H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.08 (d, 2H), 6.79 (d, 2H), 4.12 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 4.01 (s, 2H), 3.81 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.75 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 3.73 (s, 3H), 3.66 (d, 1H, J = 11.7 Hz), 3.63 (t, 1H, J = 8.2 Hz), 3.57 (d, 1H, J = 7.4 Hz), 3.52 (d, 1H, J = 7.8 Hz). C₂₁H₂₄O₇Cl (M+H⁺)에 대해 계산된 HRMS: 423.1205, 실측치 423.1192.

3B: (37mg; 27% 수율) R_t = 12.8분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 농축시켰다.

MS (LCMS) 423.3 (M+H⁺; 양성 모드) 467.3 (M+HCO₂ ^-, 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 7.50 (d, 1H, J = 1.9 Hz) 7.42 (dd, 1H, J = 8.3 및 1.9 Hz), 7.35 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.12-7.07 (m, 2H), 6.83-6.78 (m, 2H), 4.06-4.01 (m, 3H), 3.91-3.83 (m, 4H), 3.78-3.72 (m, 4H), 3.51 (d, 1H, J = 7.5 Hz).

실시예 4

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(4A) 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(4B) :

에탄올/테트라하이드로퓨란(10mL, 4/1 부피) 중 {(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-4k: 335mg)의 용액에 포름산(420μL, 22 당량) 및 팔라듐 블랙(208mg, 4 당량)을 연속적으로 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 1시간 후에, 추가의 포름산(420μL, 22 당량) 및 팔라듐 블랙(208mg, 4 당량)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 팔라듐을 여과하고, 용매 증발 후 수득된 조질 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC: 역상 C18 제미니(Gemini) 컬럼 5㎛ 30 x 100mm, 40mL/분, 아세토나이트릴/0.1% 포름산: 물/0.1% 포름산의 구배; 18분에 걸친 25 내지 50%의 아세토나이트릴/0.1% 포름산; UV 검출: 220nm. HPLC는 1.1:1의 부분 입체이성질체의 비율(4A:4B)을 가리켰다.

4A: (60mg, 29% 수율); R_t = 12.4분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다.

MS (LCMS) 437.3 (M+H⁺; 양성 모드); 481.3 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 7.43 (d, 1H, J = 1.9 Hz), 7.36 (dd, 1H, J = 8.3 및 2 Hz), 7.32 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.08-7.04 (m, 2H), 6.79-6.75 (m, 2H), 4.12 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 4.00 (s, 2H), 3.96 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 3.81 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.75 (dd, 1H, J = 8.3 및 1.3 Hz), 3.65 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.63 (t, 1H, J = 8.2 Hz), 3.57 (dd, 1H, J = 7.5 및 1.3 Hz), 3.52 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 1.33 (t, 3H, J = 6.9 Hz). C₂₂H₂₆O₇Cl (M+H⁺)에 대해 계산된 HRMS: 437.1361, 실측치 437.1360.

4B: (30mg, 15% 수율); R_t = 13.2분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다.

MS (LCMS) 437.3 (M+H⁺; 양성 모드) 481.3 (M+HCO₂ ^-, 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 7.48 (d, 1H, J = 1.9 Hz) 7.40 (dd, 1H, J = 8.1 및 1.9 Hz), 7.32 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.08-7.03 (m, 2H), 6.80-6.74 (m, 2H), 4.04-3.99 (m, 3H), 3.95 (q, 2H, J = 7 Hz), 3.89-3.81 (m, 4H), 3.73 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 3.49 (d, 1H, J = 7.3 Hz), 1.32 (t, 3H, J = 7 Hz). C₂₂H₂₆O₇Cl (M+H⁺)에 대해 계산된 HRMS: 437.1361, 실측치 437.1358.

실시예 5

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(5A) 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(5B) :

에탄올/테트라하이드로퓨란(10mL)의 4:1의 용액 중 {(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(115mg, 0.170mmol)의 용액에 포름산(137μL, 3.42mmol) 및 팔라듐 블랙(73mg, 0.687mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 3시간 후에, 추가의 포름산(137μL, 3.42mmol) 및 팔라듐 블랙(73mg, 0.687mmol)을 첨가하였다. 18시간 후에, 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 생성된 조질 잔여물을 실리카 겔(다이클로로메테인 중 0 내지 15% 메탄올의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체 64mg을 수득하였다. 이성질체의 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC 방법: 역상 C18 페노메넥스 컬럼 루나 5㎛ 150 x 21.20mm, 20mL/분, 아세토나이트릴/0.1% 포름산:물/0.1% 포름산의 구배; 20분에 걸친 20 내지 80%의 아세토나이트릴/0.1% 포름산. UV 검출: 254nm. HPLC는 1:1의 부분 입체이성질체의 비율(5A:5B)을 가리켰다.

5A: (6mg; 9% 수율) R_t = 8.5분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다.

¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 3.55 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 3.58 (dd, J=7.5, 1.2 Hz, 1 H), 3.64 (t, J=8.2 Hz, 1 H), 3.67 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 3.74 (s, 3 H), 3.77 (dd, J=8.3, 1.2 Hz, 1 H), 3.83 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 3.91 (s, 2 H), 4.14 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 6.76 - 6.84 (m, 2 H), 7.02 (dd, J=9.9, 8.3 Hz, 1 H), 7.09 - 7.13 (m, 2 H), 7.37 - 7.44 (m, 2 H); MS: 407.4 (M+ H⁺; 양성 모드); 451.3 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드)

5B: (12mg; 17% 수율) R_t = 9분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다. 조질 물질을 에틸 아세테이트 및 헵테인으로부터 침전시켰다. 생성된 백색 고체를 헵테인으로 2회 세척하고 감압하에 건조시켰다.

¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 3.51 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 3.74 (s, 3 H), 3.75 (d, 1H, J = 13 Hz), 3.83 - 3.93 (m, 6 H), 4.03 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 6.78 - 6.82 (m, 2 H), 7.02 (dd, J=9.9, 8.5 Hz, 1 H), 7.09 - 7.13 (m, 2 H), 7.42 - 7.49 (m, 2 H); MS: 407.4 (M+ H⁺; 양성 모드); 451.3 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드)

실시예 6

2-(4-메톡시벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-(하이드록시메틸)-6,8-다이옥사-바이사이클로[3,2,1]옥트-5-일)-벤조나이트릴(6A):

n-뷰틸 리튬(1.04mL, 2.6mmol, 헥세인 중 2.5M)을 0℃에서 아이소프로필 마그네슘 브로마이드(1.27mL, 1.27mmol, 테트라하이드로퓨란 중 1M)의 용액에 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 -78℃로 냉각하고, 무수 테트라하이드로퓨란(1mL) 중 4-브로모-2-(4-에톡시-벤질)-벤조나이트릴(380mg, 1.20mmol)의 용액을 첨가하였다. 녹색 빛의 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하고, 무수 테트라하이드로퓨란(2mL) 중 (2R,3S,4S)-2,3,4,6-테트라키스-벤질옥시-5-벤질옥시메틸-5-하이드록시-헥산산 메톡시-메틸-아마이드(I-6g)(700mg, 0.972mmol)의 용액을 서서히 첨가하였다(20분에 걸침, 매 5초 당 1 방울). 용액을 1시간 동안 -78℃에서 교반하고, 3시간에 걸쳐 실온으로 서서히 가온시켰다. 반응을 1M 염산 수용액을 적가하여 급냉시킨 후 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 2상 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 유기 상을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고 농축하여 조질 생성물을 수득하였다. 조질 생성물을 헵테인 중 0 내지 20%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적하는 중간체 2-(4-에톡시-벤질)-4-((4S,5S)-3,4,5-트리스-벤질옥시-6,6-비스-벤질옥시메틸-2-하이드록시-테트라하이드로-피란-2-일)-벤조나이트릴(300mg; 34% 수율)을 수득하였다. MS 918.8 (M+Na⁺, 양성 모드).

삼염화붕소(4.18mL, 4.18mmol, 헥세인 중 1M 용액)를 -78℃에서 CH₂Cl₂(2mL) 중 상기 중간체(250mg, 0.279mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온시켰다. 혼합물을 물(10mL)로 급냉시키고, 에틸 아세테이트(50mL)로 추출하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조하고, 건조물로 증발시켰다. 실리카 겔(다이클로로메테인 중 메탄올: 1 내지 9 부피로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적하는 중간체 2-(4-하이드록시-벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-5-일)-벤조나이트릴(35mg, 30% 수율)을 수득하였다.

탄산칼륨(28mg, 0.2mmol)을 아세톤(0.4mL) 중 상기 중간체(34mg, 0.077mmol)의 용액에 첨가한 후, 실온에서 요오도메테인(7μL, 0.11mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 45℃에서 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(60mL)로 희석하고, 물로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조하고, 건조물로 증발시켰다. 실리카 겔(다이클로로메테인 중 메탄올: 1 내지 9 부피로 용리함) 상의 분취용 박막 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적하는 생성물 6A를 단리하였다(18mg; 57% 수율).

¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 7.69 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.19-7.14 (m, 2H), 6.87-6.82 (m, 2H), 4.18 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.86 (d, J = 12.7 Hz, 1H); 3.81 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.69 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.67 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 3.61 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.54 (d, J = 8 Hz, 1H); MS 458.4 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드).

실시예 7

2-(4-에톡시벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-(하이드록시메틸)-6,8-다이옥사-바이사이클로[3,2,1]옥트-5-일)-벤조나이트릴(7A) :

탄산칼륨(8mg, 0.058mmol)을 아세톤(0.4mL) 중 중간체 2-(4-하이드록시-벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-5-일)-벤조나이트릴(실시예 6 참고; 8.9mg, 0.022mmol)의 용액에 첨가한 후 실온에서 요오도에테인(4μL, 0.044mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 45℃에서 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(60mL)로 희석하고 물로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조하고, 건조물로 증발시켰다. 실리카 겔(다이클로로메테인 중 메탄올: 1 내지 9 부피로 용리함) 상의 분취용 박막 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적하는 생성물 7A를 단리하였다(2.4mg; 26% 수율).

¹H NMR (메탄올-d ₄) 델타 7.69 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.17-7.13 (m, 2H), 6.86-6.81 (m, 2H), 4.18 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 4.01 (q, J = 7.0 Hz, 2H); 3.86 (d, J = 12.5 Hz, 1H); 3.80 (dd, J = 8.0 및 1.2 Hz, 1H), 3.70 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.67 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.61 (dd, J = 7.5 및 1.2 Hz, 1H), 3.54 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 1.37 (t, J = 7.0 Hz, 3H); MS 472.1 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드).

실시예 8은 실시예 3B의 구조 및 입체화학을 확인하기 위해 실시예 3B의 화합물의 결정질 유도체의 제조를 예시한다.

실시예 8

(1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(3B)의 4-브로모벤조일화에 의해 (8A)가 생성됨 :

무수 테트라하이드로퓨란(600μL) 중 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(3B)(11mg, 0.026mmol)의 용액에 실온에서 N,N-다이아이소프로필에틸아민(32μL, 7 당량) 및 4-다이메틸아미노피리딘(3mg, 0.9 당량)을 첨가한 후, 파라-브로모벤조일 클로라이드(35mg, 6 당량)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 62시간 동안 실온에서 교반하였다. 에틸 아세테이트 및 물을 첨가하고, 유기 상을 0.5M 염산 수용액 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 상을 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하고, 조질 물질을 헵테인 중 15 내지 30%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 생성물 27mg을 수득하였다(90% 수율).

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 7.82 (m, 2H), 7.74-7.64 (m, 4H), 7.58-7.46 (m, 8H), 7.42-7.34 (m, 4H), 7.29 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.89 (m, 2H), 6.63 (m, 2H), 6.04 (dd, 1H, J = 9.6 및 1 Hz), 5.98 (dd, 1H, J = 9.6 및 4.4 Hz), 5.89 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 4.70 (d, 1H, J = 12.4 Hz), 4.65 (d, 1H, J = 12.4 Hz), 4.60 (d, 1H, J = 8 Hz), 3.98-3.88 (m, 3H), 3.73 (s, 3H).

단일 결정을 용매로서 헵테인 및 에틸 아세테이트를 사용하는 증기 확산 기법에 의해 수득하였다. 융점 = 191℃. 단일 결정 X선 분석. 대표적인 결정을 조사하고, 1Å 데이터 세트(최대 sinΘ/λ = 0.5)를 브루커(Bruker) APEX II/R 회절분석기로 모았다. 절대 배열의 결정을 용이하게 하기 위해 프리델(Friedel) 쌍을 모았다. 결정학을 위한 국제 표(International Tables for Crystallography)로부터 원자 산란 인자를 취하였다. 문헌[International Tables for Crystallography, Vol. C, pp. 219, 500, Kluwer Academic Publishers, 1992]을 참고한다. 모든 결정학적 계산은 SHELXTL 시스템에 의해 용이하게 된다(SHELXTL, 버전 5.1, 브루커 AXS, (1997) 참고). 모든 회절분석 데이터를 실온에서 모았다. 적절한 결정, 데이터 수집 및 정밀화를 하기 표 1에 요약하였다.

실시예 8A에 대한 결정 데이터 및 구조 정밀화

실험식	C₄₉H₃₅O₁₁Br₄Cl
화학식량	1154.86
온도	296(2) K
파장	1.54178 Å
결정 시스템	단사정계
스페이스 기	C2
단위 격자 치수	a = 23.7485(6)Å α= 90°. b = 6.3175(2)Å β= 104.4910(10)°. c = 32.3167(8)Å γ= 90°.
부피	4694.3(2) Å³
Z	4
밀도(계산치)	1.634mg/m³
흡수 계수	5.216mm^-1
F(000)	2296
결정 크기	0.12 x 0.03 x 0.02mm³
데이터 수집에 대한 쎄타 범위	3.75 내지 50.43°.
수집된 반사	8339
독립적 반사	3932 [R(int) = 0.0491]
쎄타에 대한 완전도 = 50.43°	89.7%
흡수 보정	실험적 흡수 보정
정밀화 방법	F²에 대한 완전 행렬 최소자승법
데이터/구속/파라미터	3932 / 1 / 587
F²에 대한 굿니즈-오브-피트(Goodness-of-fit)	0.967
최종 R 지수[I>2시그마(I)]	R1 = 0.0371, wR2 = 0.0854
절대 구조 파라미터	-0.03(2)
소광 계수	0.00011(3)
가장 큰 차이의 피크 및 정공	0.297 및 -0.294 e.Å^-3

실험 구조는 직접 방법으로 얻었다. 이러한 실험 구조는 통상적으로 정밀화하였다. 수소 위치를 가능하다면 계산하였다. 메틸 수소를 차등 푸리에(Fourier) 기법에 의해 위치시킨 후 이상화하였다. 수소 파라미터를 구조 인자 계산에 부가하였으나 정밀화하지 않았다. 최소자승 정밀화의 최종 주기에서 계산된 이동은 모두 상응하는 표준 편차의 0.1 미만이었다. 최종 R 지수는 3.71%이었다. 최종 차등 푸리에는 손실되거나 잘못 놓인 어떠한 전자 밀도도 나타내지 않았다. 정밀화된 구조를 SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅하였다(도 1). 절대 배열을 플랙(Flack)의 방법에 의해 결정하였다. 문헌[Flack, H.D., Acta Crystallogr., A39, 876, (1983)]을 참고한다.

실시예 9는 실시예 4A의 구조 및 입체화학을 확인하기 위해 실시예 4A의 화합물의 결정질 유도체의 제조를 예시한다.

실시예 9

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(4A)의 4-나이트로벤조일화를 통해 (9A)를 생성함:

0℃로 냉각된 무수 테트라하이드로퓨란(300μL) 중 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(4A: 10.6mg, 0.024mmol)의 용액에 N,N-다이아이소프로필에틸아민(30μL, 7 당량) 및 4-다이메틸아미노피리딘(3mg, 1 당량)을 첨가한 후, 파라-나이트로벤조일 클로라이드(27mg, 6 당량)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 6시간 동안 60℃에서 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트 및 물을 첨가하고, 유기 상을 0.5M 염산 수용액 및 염수로 연속적으로 세척하였다. 유기 상을 황산마그네슘 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하고, 조질 물질을 헵테인 중 10 내지 50%의 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카 겔 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 생성물 18mg을 수득하였다(73% 수율).

¹H NMR (400 MHz, 클로로폼-d) 델타 8.33 (m, 2H), 8.28-8.12 (m, 8H), 8.07 (m, 2H), 8.00 (m, 2H), 7.91 (m, 2H), 7.45-7.40 (m, 2H), 7.34 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.87 (m, 2H), 6.64 (m, 2H), 6.13 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.06 (t, 1H, J = 8.3 Hz), 5.86 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 4.81 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 4.75 (d, 1H, J = 12.7 Hz), 4.60 (d, 1H, J = 12.8 Hz), 4.06 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 3.98-3.90 (m, 4H), 1.39 (t, 3H, J = 7 Hz).

단일 결정을 용매로서 아세토나이트릴/아이소프로판올로부터 서서히 재결정화하여 수득하였다. 융점 = 211℃. 대표적인 결정을 조사하고, 0.88Å 데이터 세트(최대 sinΘ/λ = 0.57)를 브루커 APEX II/R 회절분석기로 모았다. 절대 배열의 결정을 용이하게 하기 위해 프리델 쌍을 모았다. 결정학을 위한 국제 표로부터 원자 산란 인자를 취하였다. 문헌[International Tables for Crystallography, Vol. C, pp. 219, 500, Kluwer Academic Publishers,1992]을 참고한다. 모든 결정학적 계산은 SHELXTL 시스템에 의해 용이하게 된다(SHELXTL, 버전 5.1, 브루커 AXS, (1997) 참고). 모든 회절분석 데이터를 실온에서 모았다. 적절한 결정, 데이터 수집 및 정밀화를 하기 표 2에 요약하였다.

실시예 9A에 대한 결정 데이터 및 구조 정밀화

실험식	C₅₀H₃₇N₄O₁₉Cl
화학식량	1033.29
온도	296(2) K
파장	1.54178 Å
결정 시스템	단사정계
스페이스 기	P2(1)
단위 격자 치수	a = 17.5050(4)Å α= 90°. b = 6.2303(2)Å β= 97.6580(10)°. c = 21.9545(5)Å γ= 90°.
부피	2373.03(11) Å³
Z	2
밀도(계산치)	1.446mg/m³
흡수 계수	1.452mm^-1
F(000)	1068
결정 크기	0.18 x 0.02 x 0.01mm³
데이터 수집에 대한 쎄타 범위	2.55 내지 61.76°.
수집된 반사	8972
독립적 반사	5062 [R(int) = 0.0236]
쎄타에 대한 완전도 = 61.76°	85.8%
흡수 보정	실험적 흡수 보정
최대 및 최소 투과율	0.9856 및 0.7801
정밀화 방법	F²에 대한 완전 행렬 최소자승법
데이터/구속/파라미터	5062 / 1 / 668
F²에 대한 굿니즈-오브-피트	1.009
최종 R 지수[I>2시그마(I)]	R1 = 0.0436, wR2 = 0.1090
절대 구조 파라미터	0.02(3)
소광 계수	0.0015(2)
가장 큰 차이의 피크 및 정공	0.217 및 -0.173 e.Å^-3

실험 구조는 직접 방법으로 얻었다. 이러한 실험 구조는 통상적으로 정밀화하였다. 수소 위치를 가능하다면 계산하였다. 메틸 수소를 차등 푸리에 기법에 의해 위치시킨 후 이상화하였다. 수소 파라미터를 구조 인자 계산에 부가하였으나 정밀화하지 않았다. 최소자승 정밀화의 최종 주기에서 계산된 이동은 모두 상응하는 표준 편차의 0.1 미만이었다. 최종 R 지수는 4.36%이었다. 최종 차등 푸리에는 손실되거나 잘못 놓인 어떠한 전자 밀도도 나타내지 않았다.

정밀화된 구조를 SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅하였다(도 2). 절대 배열을 플랙의 방법에 의해 결정하였다. 문헌[Flack, H.D., Acta Crystallogr., A39, 876, (1983)]을 참고한다.

실시예 10

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올( 10 A) 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올( 10 B)

에탄올/테트라하이드로퓨란(10mL)의 4:1 용액 중 {(2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일}-메탄올(I-10k)(80.0mg, 0.120mmol)의 용액에 포름산(93μL, 2.32mmol) 및 팔라듐 블랙(62mg, 0.580mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 3시간 후에, 추가의 포름산(93μL, 2.32mmol) 및 팔라듐 블랙(62mg, 0.580mmol)을 첨가하였다. 5시간 후에, 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 생성된 조질 잔여물을 실리카 겔(다이클로로메테인 중 0 내지 15% 메탄올의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체 35.0mg을 수득하였다(이성질체의 혼합물). 이성질체의 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC 방법: 역상 C18 제미니 컬럼, 5㎛ 30x100mm, 40mL/분 유량, 아세토나이트릴/0.1% 포름산: 물/0.1% 포름산의 구배; 18분에 걸친 25 내지 50%의 아세토나이트릴/0.1% 포름산; UV 검출: 220nm.

HPLC 분석 방법: 역상 C18 제미니 컬럼, 5㎛ 4.6x150mm, 1mL/분 유량, 아세토나이트릴/0.1% 트라이플루오로아세트산 : 물/0.1% 트라이플루오로아세트산의 구배; 12분에 걸친 5 내지 100%의 아세토나이트릴/0.1% 트라이플루오로아세트산; UV 검출: 220nm.

10A: (2.2mg, 4.5% 수율) R_t = 7분 (분석 방법); 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다.

MS (LCMS) 421.4 (M+H⁺; 양성 모드) 465.3 (M+HCO₂ ^-, 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 1.33 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 3.53 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 3.57 (dd, J=7.5, 1.5 Hz, 1 H), 3.60 - 3.67 (m, 2 H), 3.75 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1 H), 3.81 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 3.89 (s, 2 H), 3.96 (q, J=6.9 Hz, 2 H), 4.12 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 6.77 (m, 2 H), 7.00 (dd, J=9.4, 8.2 Hz, 1 H), 7.08 (m, 2 H), 7.36 - 7.41 (m, 2 H).

10B: (1.8mg, 3.7% 수율) R_t = 7.13분 (분석 방법); 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다.

MS (LCMS) 421.4 (M+H⁺; 양성 모드) 465.3 (M+HCO₂ ^-, 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 1.34 (t, J=7.0 Hz, 3 H), 3.51 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 3.75 (d, 1 H, J = 12.5 Hz), 3.82 - 4.01 (m, 8 H), 4.03 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 6.79 (m, 2 H), 7.02 (dd, J=9.8, 8.4 Hz, 1 H), 7.10 (m, 2 H), 7.41 - 7.49 (m, 2 H).

주: 분취용 HPLC 후, 이들 생성물을 함유하는 분획을 농축하고, 실리카 겔(다이클로로메테인 중 0 내지 10%의 메탄올의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 재정제하였다.

실시예 11

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-플루오로-3-[4-(테트라하이드로-퓨란-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올( 11 A)

에탄올/테트라하이드로퓨란(10mL)의 4:1 용액 중 ((2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-{4-플루오로-3-[4-(테트라하이드로-퓨란-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일)-메탄올(I-11k)(160.0mg, 0.218mmol)의 용액에 포름산(185μL, 4.64mmol) 및 팔라듐 블랙(148mg, 1.39mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 3시간 후에, 추가의 포름산(185μL, 4.64mmol) 및 팔라듐 블랙(148mg, 1.39mmol)을 첨가하였다. 5시간 후에, 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 생성된 조질 잔여물을 실리카 겔(다이클로로메테인 중 0 내지 15% 메탄올의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체 100mg을 수득하였다(이성질체의 혼합물). 이성질체의 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC 방법: 역상 C18 제미니 컬럼, 5㎛ 30x100mm, 40mL/분 유량, 아세토나이트릴/0.1% 포름산: 물/0.1% 포름산의 구배; 18분에 걸친 25 내지 50% 아세토나이트릴/0.1% 포름산; UV 검출: 220nm.

HPLC 분석 방법: 역상 C18 제미니 컬럼, 5㎛ 4.6x150mm, 1mL/분 유량, 아세토나이트릴/0.1% 트라이플루오로아세트산 : 물/0.1% 트라이플루오로아세트산의 구배; 12분에 걸친 5 내지 100% 아세토나이트릴/0.1% 트라이플루오로아세트산; UV 검출: 220nm.

11A: (19mg, 19% 수율) R_t = 6.43분 (분석 방법); 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다.

¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 2.03 - 2.11 (m, 1 H), 2.15 - 2.25 (m, 1 H), 3.55 (d, 1 H, J = 8 Hz), 3.59 (dd, 1 H, J = 7.4 및 1 Hz), 3.61 - 3.69 (m, 2 H), 3.77 (dd, J=8.2 및 1 Hz, 1 H), 3.81 - 3.96 (m, 7 H), 4.14 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 4.94 - 4.98 (m, 1 H), 6.79 (m, 2 H), 7.02 (dd, J=9.9, 8.5 Hz, 1 H), 7.12 (m, 2 H), 7.37 - 7.45 (m, 2 H).

실시예 12

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-클로로벤질)-4-플루오로페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(12A) 및 (1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-클로로벤질)-4-플루오로페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(12B)

에탄올/테트라하이드로퓨란(2mL, 4/1 부피) 중 중간체(I-12k)(102mg)와 팔라듐 블랙(98mg, 6.1 당량)의 혼합물에 포름산(0.9mL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 1시간 후에, 추가의 팔라듐 블랙(67mg, 4.2 당량)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 팔라듐을 셀라이트(등록상표명)를 통해 여과하여 제거하고, 여과물을 농축하여 생성 혼합물을 수득하였다. 이 물질을 분취용 HPLC에 의한 정제를 위해 조질 물질의 제 2 배치(상기 절차에 따라 중간체(I-12k)(80mg)로부터 제조됨)와 합하였다.

분취용 HPLC 조건: 역상 C18 제미니 컬럼 5㎛ 30 x 100mm, 유량 40mL/분, 아세토나이트릴/0.1% 포름산: 물/0.1% 포름산의 구배; 18분에 걸친 25 내지 50%의 아세토나이트릴/0.1% 포름산, UV 검출: 220nm.

HPLC 분석 방법: 역상 C18 제미니 컬럼, 5㎛ 4.6 x 150mm, 1mL/분 유량, 아세토나이트릴/0.1% 트라이플루오로아세트산 : 물/0.1% 트라이플루오로아세트산의 구배; 12분에 걸친 5 내지 100% 아세토나이트릴/0.1% 트라이플루오로아세트산; UV 검출: 220nm.

12A: (18mg, 16% 수율) R_t = 7.11분 (분석 방법); MS (LCMS) 411.3 (M+H⁺; 양성 모드); 409.2 (M-H⁺; 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d₄) 델타 ppm 7.45-7.42 (m, 2H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.05 (dd, J = 9.6, 9.2 Hz, 1H), 4.15 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.84 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.78 (dd, J = 8.4, 1.2 Hz, 1H), 3.68 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.66 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 3.60 (dd, J = 7.4, 1.4 Hz, 1H), 3.56 (d, J = 7.6 Hz, 1H).

12B: (12mg, 11% 수율) R_t = 7.25분 (분석 방법); MS (LCMS) 411.3 (M+H⁺; 양성 모드); 409.1 (M-H⁺; 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 7.52-7.45 (m, 2H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.05 (dd, J = 9.8, 8.6 Hz, 1H), 4.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.91-3.84 (m, 4H), 3.76 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.52 (d, J = 7.6 Hz, 1H).

실시예 13

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-플루오로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올( 13 A)

에탄올/테트라하이드로퓨란(10mL)의 4:1 용액 중 ((2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-{4-플루오로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일)-메탄올(I-13k)(300mg, 0.417mmol)의 용액에 포름산(333μL, 8.34mmol) 및 팔라듐 블랙(266mg, 2.50mmol)을 연속적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 3시간 후에, 추가의 포름산(333μL, 8.34mmol) 및 팔라듐 블랙(266mg, 2.50mmol)을 첨가하였다. 5시간 후에, 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압하에 농축시켰다. 생성된 조질 잔여물을 실리카 겔(다이클로로메테인 중 0 내지 15% 메탄올의 구배로 용리함) 상의 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 고체 153.0mg을 수득하였다(이성질체의 혼합물). 이성질체의 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

13A: (23mg, 12% 수율) R_t = 7.9분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켰다.

¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 3.52 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 3.57 (d, J=7.2 Hz, 1 H), 3.60 - 3.68 (m, 2 H), 3.75 (d, J=8.2 Hz, 1 H), 3.81 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 3.89 (s, 2 H), 4.12 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 4.63 (dd, J=7.3, 4.8 Hz, 2 H), 4.95 (t, J=6.5 Hz, 2 H), 5.16 - 5.23 (m, 1 H), 6.63 (m, 2 H), 7.00 (dd, J=9.7, 8.5 Hz, 1 H), 7.10 (m, 2 H), 7.36 - 7.42 (m, 2 H).

실시예 14

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-클로로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(14A)

에탄올/테트라하이드로퓨란(14mL, 4/1 부피) 중 중간체 ((2S,3S)-2,3,4-트리스-벤질옥시-5-{4-클로로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥트-1-일)-메탄올(I-14k)(182mg)의 용액에 포름산(190μL, 20 당량) 및 팔라듐 블랙(106mg, 4 당량)을 연속적으로 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 교반하였다. 2시간 후에, 추가의 테트라하이드로퓨란 1mL를 첨가하고, 생성된 혼합물을 추가의 시간 동안 실온에서 교반하였다. 이 시점에서, 추가의 포름산(190μL, 20 당량) 및 팔라듐 블랙(106mg, 4 당량)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 시간 동안 교반하였다. 팔라듐을 여과하고, 용매(이성질체의 혼합물을 함유함)의 증발 후 수득된 조질 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.

분취용 HPLC 방법: 역상 C18 X브리지 컬럼 5㎛ 100 x 30 mm, 유량 40mL/분, 아세토나이트릴/0.1% 포름산: 물/0.1% 포름산의 구배; 11분에 걸친 30 내지 55%의 아세토나이트릴/0.1% 포름산; UV 검출: 220nm.

14A: (20mg, 17% 수율); R_t = 4.43분; 생성물을 함유하는 분획을 감압하에 농축시켜 백색 고체를 생성하였다.

MS (LCMS) 465.3 (M+H⁺; 양성 모드); 509.2 (M+HCO₂ ^-; 음성 모드). ¹H NMR (400 MHz, 메탄올-d ₄) 델타 ppm 3.53 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 3.58 (dd, J=7.4, 1.4 Hz, 1 H), 3.64 (t, J=8.2 Hz, 1 H), 3.67 (d, J=12.4 Hz, 1 H), 3.77 (dd, J=8.4, 1.4 Hz, 1 H), 3.83 (d, J=12.6 Hz, 1 H), 4.03 (s, 2 H), 4.14 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 4.65 (m, 2 H), 4.97 (t, J=6.6 Hz, 2 H), 5.22 (m, 1 H), 6.65 (m, 2 H), 7.11 (m, 2 H), 7.34 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.38 (dd, J=8.4, 2.2 Hz, 1 H), 7.45 (d, J=2.0 Hz, 1 H).

실시예 15

L-프롤린과 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)의 공결정화에 의해 (15)를 생성함:

물에 용해된 L-프롤린(대략 480mg/mL)을 실시예 4A의 화합물에 첨가하였다(1몰(실시예 4A의 화합물) 당 대략 80몰 L-프롤린). 에탄올을 사용하여 부피를 2배로 하였고, 용액을 캡핑시키고, 대략 12시간 동안 교반하였다. 부피를 벤치에서 증발시켜 반으로 감소시켰다. 에탄올을 사용하여 부피를 2배로 하였고, 다시 용액의 부피를 증발시켜 반으로 감소시켰다. 원심분리 여과를 사용하여 고체를 회수하였다.

실시예 16

L-프롤린과 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)의 공결정화에 의해 (16)을 생성함:

물에 용해된 L-프롤린(대략 480mg/mL)을 실시예 4A의 화합물에 첨가하였다(실시예 4A의 화합물 1몰 당 대략 59몰 L-프롤린). 메탄올을 사용하여 부피를 2배로 하였고, 용액이 투명해졌다. 아세톤으로 사용하여 부피를 25% 만큼 증가시켰다. 용액을 캡핑시키고, 대략 12시간 동안 교반하였다. 부피를 벤치에서 증발시켜 대략 60% 만큼 감소시켰다. 메탄올을 사용하여 부피를 2배로 하였고, 잔여 용매를 증발시켜 백색 고체 침전물을 남겼다.

실시예 17

L-프롤린과 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)의 공결정화에 의해 (17)을 생성함:

L-프롤린으로 포화된 에탄올 용액을 유리 바이알 중 실시예 4A의 화합물에 첨가하였다(실시예 4A의 화합물 1몰 당 대략 2.2몰 L-프롤린). 투명한 용액을 캡핑시키고, 대략 72시간 동안 교반하였다. 실온에서 증발시켜 부피를 반으로 감소시켰다. 침전물이 관찰되었고, 바이알을 캡핑시키고, 대략 12시간 동안 교반하였다. 원심분리 여과를 사용하여 백색 고체를 모았다.

실시예 18

L-프롤린과 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)의 공결정화에 의해 (18)을 생성함:

물에 용해된 L-프롤린(330mg/mL)을 용액이 흐려질 때까지 아이소프로판올에 용해된 실시예 4A의 화합물(98mg/mL) 약 2mL에 적하시켰다. 15 내지 20분 후에, 침전물이 관찰되었고, 현탁액이 진해졌다. 물 약 8mL를 첨가하고, 용액을 캡핑시키고, 밤새 교반하였다. 진공 여과를 사용하여 백색 고체를 모으고, 대략 2시간 동안 50℃ 진공 오븐에서 건조시켰다.

실시예 19

L-피로글루탐산과 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올 (실시예 4A의 화합물)의 공결정화에 의해 (19)를 생성함:

아이소프로필 알콜 중 화합물(4A)(97.97mg/mL) 153μL를 물 중 L-피로글루탐산(213.0mg/mL) 500μL로 피펫팅하였다. 용액을 캡핑시키고, 밤새 교반하였다. 대략 5 내지 10mg 이상의 고체 L-글루탐산을 첨가하였다. 에탄올 100μL를 첨가하였다. 용액을 캡핑시키고, 밤새 교반하였다. 총 부피가 대략 2mL로 조정될 때까지 에탄올을 첨가하였다. 용액을 비캡핑시키고, 후드에서 밤새 정치시켰다. 대략 10 내지 30mg의 실시예 4A의 화합물을 첨가하였다. 용액을 캡핑시키고, 대략 2일 동안 교반하였다. 백색 침전물이 관찰되었다. 현탁액을 0.45마이크롬 나일론 필터막 삽입물을 갖춘 Co-star 미량원심분리기 관으로 피펫팅하였다. 고체가 용액으로부터 분리될 때까지 용액을 원심분리하였다. 공결정(19)을 회수하였다.

실시예 20

L-피로글루탐산과 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올 (실시예 4A의 화합물)의 공결정화에 의해 (20)을 생성함:

1:1 에탄올/물 용액 4 내지 5mL를 L-피로글루탐산(412.1mg/mL)으로 포화시켰다. 실시예 4A의 화합물 730mg을 L-피로글루탐산 용액 3.2mL에 첨가하였다. 대략 1분 후에, 침전물이 관찰되었다. 용액은 교반하기에 너무 진하여 1:1 에탄올/물 용액 2mL를 첨가하였다. 용액을 밤새 교반하였다. 0.45마이크롬 나일론 필터막 상에서 진공 여과를 사용하여 고체를 모았다. 고체를 대략 2시간 동안 50℃ 진공 오븐에서 건조시켰다. 공결정 착체(20) 대략 960mg을 회수하였다. 실시예 4A의 화합물 대 L-피로글루탐산의 화학량론적 비율은 정량 NMR을 사용하여 1:1.63으로 측정하였다. 에탄올에 물질을 현탁시켜 과량의 L-피로글루탐산을 제거함으로써 1:1 공결정(20)을 수득하였다.

실시예 21

L-피로글루탐산과 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올 (실시예 4A의 화합물)의 공결정화에 의해 (21)을 생성함:

실시예 4A의 화합물 494mg을 아이소프로판올 및 에탄올(각각 4:1)의 용액 1.5mL에 용해시켰다. L-피로글루탐산 917.2mg을 물 3mL에 용해시켰다. 두 용액을 40℃로 가열하였다. L-피로글루탐산 용액 200μL를 모든 용액이 옮겨질 때까지 매 분마다 실시예 4A의 화합물 용액에 첨가하였다(용액이 옮겨질 때까지 모든 용액을 캡핑함). L-피로글루탐산 용액을 갖는 바이알을 에탄올 200μL로 세척하고, 용액을 실시예 4A의 화합물 용액으로 옮겼다. 용액을 5분 동안 교반한 후, 열을 차단하였다(매 3분 마다 대략 1℃에서 냉각된 용액). 30℃에서, 용액을 주변 온도 교반기에 두고 20분 동안 20℃에서 교반하였다. 용액이 투명해졌다. 건조 시드 약 2mL를 첨가하였다. 다음 2시간에 걸쳐 현탁액이 진해졌다. 용액을 밤새 교반하였다. 피렉스(Pyrex) 2mL 10 내지 15M 소결된 유리 깔때기 필터 상에서 진공 여과를 사용하여 고체를 회수하였다. 50℃ 진공 오븐에서 24시간 동안 고체를 건조시켰다.

실시예 22

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-프롤린의 공결정 및 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-피로글루탐산의 공결정:

분말 X선 회절 분석: 실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 공결정 및 실시예 4A의 화합물과 L-피로글루탐산의 공결정의 분말 X선 회절 패턴을 구리 방사선(파장: 1.54056Å)을 사용하는 브루커 D5000 회절분석기 상에서 수행하였다. 관의 전압 및 암페어수를 각각 40kV 및 40mA로 설정하였다. 발산 및 회절 슬릿을 1mm에서 설정하고, 수광 슬릿을 0.6mm에서 설정하였다. 회절된 방사선을 케베스(Kevex) PSI 검출기에 의해 검출하였다. 3.0 내지 40° 2θ의 분 당 2.4°(0.04° 단계 당 1초)에서 쎄타-2쎄타 연속 스캔을 사용하였다. 알루미나 표준물질을 분석하여 기계 정렬을 검사하였다. 데이터를 모으고, 브루커 축 소프트웨어 버전 7.0을 사용하여 분석하였다. 샘플을 석영 홀더에 놓아 준비하였다. 브루커 기계는 시멘스(Simens)로부터 구매했고, 따라서, 브루커 D5000 기계는 본질적으로 시멘스 D5000과 동일한 것임을 주지해야 한다. 에바 어플리케이션(Eva Application) 13.0.0.3 소프트웨어를 사용하여 PXRD 스팩트럼을 시각화하고 평가하였다. PXRD 데이터 파일(.raw)을 피크 조사 전에 처리하지 않았다. 일반적으로, 2의 역치값 및 0.3의 너비 값을 사용하여 예비 피크 할당을 만들었다. 자동화된 할당 출력물을 시각적으로 검사하여 필요한 경우 수동으로 만든 유효성 및 조정을 보장하였다.

본원에 기재된 측정을 위해 사용되는 브루커 시스템과 같은 브래그-브렌타노(Bragg-Brentano) 기계 상에서의 X선 회절 측정을 수행하기 위해, 샘플을 전형적으로 공동을 갖는 홀더에 놓았다. 유리 슬라이드 또는 랜덤 표면 및 적절한 샘플 높이를 보장하기 위한 등가물에 의해 샘플 분말을 압착시켰다. 그 후, 샘플 홀더를 기계에 놓았다. 먼저 홀더의 평면에 대한 작은 각도에서 X선 입사광이 샘플을 향하게 한 후, 입사광과 홀더의 평면 사이의 각도를 연속적으로 증가시키는 아크(arc)를 통해 이동시켰다. 이러한 X선 분말 분석과 관련된 측정 차이는 다음을 비롯한 다양한 인자로부터 발생한다: (a) 샘플 준비의 오차(예컨대, 샘플 높이), (b) 기계 오차(예컨대, 플랫 샘플 오차), (c) 검정 오차, (d) 작동자 오차(피크 위치를 결정할 경우 존재하는 오차를 포함), 및 (e) 물질의 특성(예컨대, 바람직한 배향 및 투명성 오차). 검정 오차 및 샘플 높이 오차는 종종 동일한 방향에서 모든 피크의 이동을 일으킨다. 플랫 홀더를 사용할 경우 샘플 높이의 작은 차이는 XRPD 피크 위치의 큰 변위를 초래할 것이다. 체계적 연구는, 전형적인 브래그-브렌타노 배열에서 시마쥬 XRD-6000을 사용할 경우, 1mm의 작은 높이 차이가 1° 2θ만큼 높은 피크 이동을 초래한다는 것을 보여주었다(문헌[Chen et al.; J Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2001; 26,63]). 이러한 이동은 X선 회절도로부터 확인될 수 있으며, 이동을 보상하거나(모든 피크 위치 값에 체계적 보정 인자를 적용함), 기계를 재검정하여 제거될 수 있다. 상기 언급한 바와 같이, 체계적 보정 인자를 적용하여 피크 위치를 일치하게 함으로써 다양한 기계로부터의 측정치를 교정할 수 있다. 일반적으로, 이러한 보정 인자는 브루커로부터의 측정된 피크 위치를 예상된 피크 위치와 일치하게 할 것이고, 이는 0 내지 0.2° 2θ의 범위에 속할 수 있다.

분말 X선 회절 값은 일반적으로 기계 및 시험 조건의 약간의 변형으로 인하여 ± 0.2 2θ° 이내로 정밀하다.

실시예 18로부터의 실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 공결정은 도 3에 제공된 바와 같이 다음과 같은 분말 X선 회절 패턴을 특징으로 하며, 이는 2θ° 및 CuK_α 방사선을 사용하는 브루커 D5000 회절분석기 상에서 측정된 2.7% 이상의 상대 강도를 갖는 상대 강도로 표현된다:

^*상대 강도는 결정 크기 및 형태학에 따라 변할 수 있다.

실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 공결정의 특징적인 2θ 피크 또는 조합:

실시예 20으로부터의 실시예 4A의 화합물과 L-피로글루탐산의 공결정은 도 4에 제공된 바와 같이 다음과 같은 분말 X선 회절 패턴을 특징으로 하며, 이는 2θ° 및 CuK_α 방사선을 사용하는 브루커 D5000 회절분석기 상에서 측정된 2.7% 이상의 상대 강도를 갖는 상대 강도로 표현된다:

^*상대 강도는 결정 크기 및 형태학에 따라 변할 수 있다.

실시예 4A의 화합물과 L-피로글루탐산의 공결정의 특징적인 2θ 피크 또는 조합:

실시예 23

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-프롤린의 공결정 및 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-피로글루탐산의 공결정 :

시차 주사 열량 열분석도 분석:

열분석도를 TA 인스투루먼트(Instruments) Q1000 시차 주사 열량기(DSC)에 의해 얻었다. 샘플 1 내지 2mg을 알루미늄 샘플 판에 놓은 후, 구멍이 있는 뚜껑으로 덮었다. 분 당 10℃에서 25℃로부터 200 내지 300℃로 온도가 증가함에 따라 비어있는 판에 대한 에너지를 측정하였다. 용융 흡열의 시작 온도를 융점으로서 기록하였다. 용융 흡열의 시작 온도는 다른 요인 중에서도 특히 가열 속도, 샘플의 순도, 결정 및 샘플의 크기에 따라 좌우된다. 전형적으로, DSC 결과는 약 ±2℃, 바람직하게는 ±1.5℃ 이내로 정밀하다.

실시예 4A의 화합물과 L-프롤린의 실시예 18의 공결정 DSC 결과를 도 5에 도시하였다.

실시예 4A의 화합물과 L-피로글루탐산의 실시예 20의 공결정 DSC 결과를 도 6에 도시하였다.

실시예 24

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-프롤린의 공결정

단일 결정 X선 분석. 실시예 17로부터의 여과물을 사용하고, 느리게 증발시켜 농축된 대표적인 결정을 조사하고, 0.85Å 데이터 세트(최대 sinΘ/λ = 0.60)를 브루커 APEX 회절분석기 상에서 모았다. 절대 배열의 결정을 용이하게 하기 위해 프리델 쌍을 모았다. 문헌[International Tables for Crystallography, Vol. C, pp. 219, 500, Kluwer Academic Publishers, 1992]으로부터 원자 산란 인자를 취하였다. 모든 결정학적 계산은 SHELXTL 시스템, 버전 5.1, 브루커 AXS, 1997에 의해 용이하게 된다. 모든 회절분석 데이터를 실온에서 모았다. 적절한 결정, 데이터 수집 및 정밀화를 하기 표 24-1에 요약하였다.

실험 구조는 직접 방법으로 얻었다. 이러한 실험 구조는 예상치 못한 물 분자 및 L-프롤린에 의한 형태 무질서를 제외하고 통상적으로 정밀화하였다. L-프롤린은 "반-의자" 및 "봉투" 형태로 약 60/40 점유도로 모델링되었다. 매우 유사한 무질서는 문헌[H. D. Flack, Acta Crystallogr., A39, 876, 1983]에서 관찰된다.

N1, O6 및 O7에 결합된 수소 원자는 차등 푸리에 기법에 의해 위치하고 구속된 거리로 정밀화하였다. O5에 결합된 관련 수소 원자는 푸리에 기법으로부터 위치하였지만, 이상적인 위치에서는 삭제되고, 위치하였다(HFIX83). O4에 결합된 관련 수소 원자는 푸리에 기법으로 발견될 수 없으며, 이는 이상적인 위치에 위치하였다(HFIX83). 물 분자 상의 수소 원자는 위치할 수 없고 용액 밖에 남겨진다. 수소 파라미터를 구조 인자 계산에 부가하였으나 정밀화하지 않았다. 최소자승법 정밀화의 최종 주기에 계산된 이동은 모두 상응하는 표준 편차의 0.1 미만이었다. 최종 R 지수는 5.15%이었다. 최종 차등 푸리에는 손실되거나 잘못 놓인 어떠한 전자 밀도도 나타내지 않았다.

정밀화된 구조를 SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅하였다(도 7). 절대 배열을 플랙⁴의 방법에 의해 결정하였다. 좌표, 비등방성 온도 인자, 거리 및 각도는 보충 물질로서 이용가능하다(표 24-2 내지 24-5).

[표 24-1]

실시예 24에 대한 결정 데이터 및 구조 정밀화

[표 24-2]

실시예 24에 대한 원자 좌표(× 10⁴) 및 동일한 등방성 변위 파라미터(Å²×10³). U(eq)는 직교화된 U_ij 텐서의 자취의 삼분의 1로서 정의된다.

[표 24-3]

실시예 24에 대한 결합 길이[Å] 및 각도[°]

[표 24-4]

실시예 24에 대한 비등방성 변위 파라미터(Å²×10³). 비등방성 변위 인자 멱지수는 다음 형태를 취한다: -2π²[h² a^*2U₁₁ + ... + 2 h k a^* b^* U₁₂]

[표 24-5]

실시예 24에 대한 수소 좌표(×10⁴) 및 등방성 변위 파라미터(Å²×10³)

실시예 25

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-피로글루탐산의 실시예 20으로부터의 공결정:

단일 결정 X선 분석. 실시예 20으로부터의 샘플의 대표적인 결정을 조사하고, 0.90Å 데이터 세트(최대 sinΘ/λ = 0.56)를 브루커 APEX 회절분석기 상에서 모았다. 절대 배열의 결정을 용이하게 하기 위해 프리델 쌍을 모았다. 입체화학을 플랙 파라미터로부터 결정하고, 또한 공형성자(L-피로글루탐산)의 공지된 키랄성으로부터 결정하였다. 문헌[International Tables for Crystallography, Vol. C, pp. 219, 500, Kluwer Academic Publishers, 1992]으로부터 원자 산란 인자를 취하였다. 모든 결정학적 계산은 SHELXTL 시스템, 버전 5.1, 브루커 AXS, 1997 시스템에 의해 용이하게 된다. 모든 회절분석 데이터를 실온에서 모았다. 적절한 결정, 데이터 수집 및 정밀화를 하기 표 25-1에 요약하였다.

실험 구조는 직접 방법으로 얻었다. 이러한 실험 구조는 0.1 화학량론적 물로서 정밀화된 낮은 잔여 피크를 제외하고 통상적으로 정밀화하였다. 먼저 분자 상의 하이드록시 기를 삭제하고, 생성된 q 피크를 정밀화하고 측정한 후, 이 피크를 물 분자로부터의 잔여 피크와 비교함으로써 물의 화학량론을 발견하였다. 이 방법을 사용하여, 1 대 0.1(분자 대 물) 비율을 평가하였다. 추가로, 물 분자를 용액으로부터 제거하고, 머테리얼 스투디오, 플라톤 앤드 머큐리(Material Studio, Platon and Mercury)에 의해 결정 내의 공간에 대해 조사함으로써, 물 분자에 대해 33Å³의 가능한 부피를 나타냈다(물은 전형적으로 약 40Å³의 공간을 갖는다). 질소 및 산소 상의 수소 원자를 차등 푸리에 기법에 의해 위치시키고, 어떠한 구속 없이 자유롭게 정밀화하였다. 헤테로원자에 결합된 몇몇 양성자(H97a, H97b, H97c 및 H97c)는 다소 짧은 결합 길이(실측치 약 0.8Å 대 예상치 약 0.96)를 나타냈으나, 거리는 구속되지 않은 채로 두었다. O99(물) 상의 수소 원자는 차이 맵으로부터 발견되지 않았고, 구조 용액 밖에 남겨진다. 수소 파라미터를 구조 인자 계산에 부가하였으나 정밀화하지 않았다. 최소자승법 정밀화의 최종 주기에 계산된 이동은 모두 상응하는 표준 편차의 0.2 미만이었다. 최종 R 지수는 3.58%이었다. 최종 차등 푸리에는 손실되거나 잘못 놓인 어떠한 전자 밀도도 나타내지 않았다. 남겨진 잔여물 중에서, 하나는 O39(카복실산)에 결합된 양성자에 대해 적당한 위치이다. 이 잔여물은 H98a 위치(O39에 대해 결합된 양성자)에 대한 추가의 점유 위치일 수 있으나, 상기와 같이 정밀화되지 않는다.

정밀화된 구조를 SHELXTL 플롯팅 패키지를 사용하여 플롯팅하였다(도 8). 절대 배열을 플랙의 방법에 의해 결정하였다(문헌[H. D. Flack, Acta Crystallogr., A39, 876, 1983]). 좌표, 비등방성 온도 인자, 거리 및 각도는 보충 물질로서 이용가능하다(표 25-2 내지 25-5).

[표 25-1]

실시예 25에 대한 결정 데이터 및 구조 정밀화

[표 25-2]

실시예 25에 대한 원자 좌표(× 10⁴) 및 동일한 등방성 변위 파라미터(Å²×10³). U(eq)는 직교화된 U_ij 텐서의 자취의 삼분의 1로서 정의된다.

[표 25-3]

실시예 25에 대한 결합 길이[Å] 및 각도[°]

[표 25-4]

실시예 25에 대한 비등방성 변위 파라미터(Å²×10³). 비등방성 변위 인자 멱지수는 다음 형태를 취한다: -2π²[h² a^*2U₁₁ + ... + 2 h k a^* b^* U₁₂]

[표 25-5]

실시예 25에 대한 수소 좌표(×10⁴) 및 등방성 변위 파라미터(Å²×10³)

실시예 26

(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-피로글루탐산의 공결정:

고상 NMR:

반응식 2에 기재된 방법을 사용하여 제조된 (1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올(실시예 4A의 화합물)과 L-피로글루탐산의 공결정 약 80mg을 4mm ZrO₂ 회전자로 단단하게 패킹하였다. 실온 및 넓은 구멍의 브루커-바이오스핀(Biospin) DSX 500 MHz(¹H 진동수) NMR 분광계에 위치된 브루커-바이오스핀 4mm BL CPMAS 탐침 상의 압력에서 스팩트럼을 모았다. 패킹된 회전자를 매직 각도(magic angle)에서 배향시키고 15.0kHz에서 스핀시켰다. ¹³C 고상 스팩트럼을 양성자 디커플링된 교차-편파 매직 각도 스피닝 실험(cross-polarization magic angle spinning experiment (CPMAS))을 사용하여 모았다. 교차-편파 접촉 시간은 2.0ms로 설정되었다. 약 85kHz의 양성자 디커플링 장을 적용하였다. 14초의 재주기 지연으로 1448 스캔을 모았다. 결정질 아다만탄의 외부 표준을 사용하고, 이의 상향 장 공명을 29.5ppm으로 설정하는 탄소 스팩트럼이 참조되었다. 화학적 이동 데이터는 특히 시험 조건(즉, 스피닝 속도 및 샘플 홀더), 참조용 물질, 및 데이터 처리 파라미터에 따라 좌우된다. 전형적으로, ss-NMR 결과는 약 ±0.2ppm 이내로 정밀하다.

관찰된 탄소 화학적 이동

특징적 피크는 별표로 표시하였다.

모든 피크는 (±0.2ppm)이다.

(a) 29.5ppm에서 고상 아다만탄의 외부 샘플에 대해 참고함.

(b) 피크 높이로서 정의됨. 강도는 CPMAS 실험 파라미터의 실제 설정 및 샘플의 열적 이력에 따라 달라질 수 있다. CPMAS 강도는 반드시 정량적일 필요는 없다.

실시예 26의 SSNMR ¹³C CPMAS 스팩트럼이 도 9에 나타나 있다. 도 9에서 별표로 표시된 피크는 스핀 측파대이다.

약리학적 시험

SGLT2의 억제에 의해 조절되는 질병의 치료를 위한 본 발명의 실시는 하기 기재된 프로토콜 중 하나 이상의 활성에 의해 증명될 수 있다.

생물학적 분석

시험관내 분석

SGLT2 작용성 분석은 SGLT2 전달체를 통해 흡수한 메틸-알파-D-글루코피라노사이드(AMG- 글루코스의 비대사성 형태)의 억제를 검출하도록 고안되었다. SGLT2 전달체는 신장의 근위요세관으로부터 글루코스를 회수하고, 그의 억제는 당을 소변에서 소비시킨다. 양성 대조군 화합물인 플로리진(Phlorizin)은 SGLT2의 글루코스 흡수의 공지된 억제제이고, 이를 시험 화합물의 높은 비율의 SGLT2 억제 효과를 비교하기 위해 사용하였다.

인간 SGLT2(pcDNA5/FRT)를 안정하게 발현하는 CHO-FlpIn(인비트로겐(Invitrogen), 미국 캘리포니아주 칼스배드 소재) 세포를 성장 배지[1:1 F-12/DMEM 배지(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 깁코(Gibco)), 10% FBS(미국 미조리주 세인트 루이스 소재의 시그마(Sigma)), 1X Pen/Strep(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 깁고), 600㎍/mL 하이드로마이신(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 인비트로겐)] 100μL 중 100,000세포/웰의 밀도에서 Iso-TC 96 웰 판(미국 메사추세스주 월탐 소재의 퍼킨 엘머(Perkin Elmer))에서 평판배양하였다. 시험 화합물을 시험하기 전에, 합류 세포를 1:1 F-12/DMEM 배지에서 37℃에서 2시간 동안 혈청 결핍시키고, 1시간 후에 새로운 F-12/DMEM 배지로 대체하였다. 다이메틸설폭사이드(미국 미조리주 세인트 루이스 소재의 시그마) 중 시험 화합물을 흡수 완충제로 미리 세정된 세포 판에 대해 흡수 완충제[140mM NaCl(미국 위스콘신주 매디슨 소재의 프로메가(Promega)), 2mM KCl(미국 캘리포니아주 홀리스터 소재의 테크노바(Teknova)), 1mM CaCl₂(미국 캘리포니아주 홀리스터 소재의 테크노바), 1mM MgCl₂(미국 캘리포니아주 홀리스터 소재의 테크노바) 및 10mM HEPES(미국 캘리포니아주 칼스배드 소재의 깁코)]에서 100배로 희석하였다. 세포를 15분 동안 시험 화합물로 예비배양한 후 웰 마다 50μL AMG[비표지된 AMG(미국 미조리주 세인트 루이스 소재의 알드리치) 중 40 nCi AMG[U-¹⁴C](미국 메사추세스주 월탐 소재의 퍼킨 엘머)]를 첨가하여 AMG 최종 농도 11.33μM을 수득하였다. 그 후, AMG 흡수를 위해 37℃에서 3시간 동안 세포 판을 배양하였다. 배양 후, 세포를 차가운 세척 완충제(200μM 플로리진(시그마)을 함유하는 흡수 완충제)로 2회 세척하고, 공기 건조시키고, 회전식 진탕기 상의 200mM NaOH 30μL 및 1% SDS 완충제에서 용해시켰다. 마이크로신트(Microsint) 40(미국 메사추세스주 월탐 소재의 퍼킨 엘머)을 용해된 세포(200μL의 최종 부피를 제공함)에 첨가하고, 30분 동안 회전식 진탕기에 의해 혼합하였다. 암실에서 밤새 판을 보관하고, ¹⁴C 검출을 위해 정규화된 프로토콜을 사용하여 1540 마이크로베타 트리루스(Trilux)(미국 메사추세스주 월탐 소재의 발락(Wallac))에서 정량화하였다. AMG 흡수를 억제하는 시험 화합물의 효과 비율을 하기와 같이 계산하였다:

[% 효과 = ((ZPE-T/(ZPE-HPE)) x 100%]

여기에서, "ZPE"는 0.5% DMSO를 함유하는 대조군 웰에서 분 당 보정된 카운트(CCPM)이며, T는 표준 곡선의 여러 농도에서 시험 화합물을 함유하는 웰에서의 CCPM이고, HPE는 10μM 플로리진을 함유하는 대조군 웰에서 CCPM을 지칭하는 고 비율의 효과이다. IC₅₀ 값을 투여량 반응식을 사용하여 계산하였고, 이를 표 3에서 시험된 화합물에 대해 요약하였다. 시험관내 시험 설명에 사용되는 약어는 다음을 포함한다:

SGLT2 유형 2 나트륨/글루코스 공전달체

AMG 메틸-α-D 글루코피라노사이드

DMEM 둘베코(Dulbecco)의 변형된 이글 배지

IC50 50% 억제 농도

FBS 우 태아 혈청

DMSO 다이메틸설폭사이드

SDS 나트륨 도데실 설페이트

CHO-FlpIn FRT 부위를 함유하는 중국 햄스터 난소 세포

생체내 분석

실시예 1A 및 4A를 요 글루코스 배출을 통한 글루코스 수송의 억제를 평가하기 위해 래트에서 시험하였다. 수컷 스프라그 다우레이(Sprague Dawley) 래트(약 300g)를 소변 수집을 위한 대사성 우리에 단독으로 가두었다. 래트는 표준 실험 음식 및 물에 임의로 접근하였다. 래트(n = 2 내지 5/그룹)는 경구 영양법으로 비히클 또는 화합물을 섭취하였다. 투여 용액은 0.1mg/kg, 1mg/kg, 3mg/kg, 10mg/kg, 30mg/kg 및 60mg/kg 투여량에 대해 각각 0.03mg/mL, 0.3mg/mL, 0.9mg/mL, 3mg/mL, 9mg/mL 및 18mg/mL이었다. 투여 부피는 모든 투여량에 대해 체중 300g 당 1mL이었다. 하나의 그룹은 실시예 1A 10mg/kg 투여량을 섭취하였고, 다른 그룹은 실시예 4A 0.1, 1, 3, 10, 30 또는 60mg/kg 투여량을 섭취하였다. 비히클은 20% v/v PEG400 및 24% v/v 하이드록시프로필 베타 사이클로덱스트린; HPBCD이다. 경구 투여 후, 24시간 동안 소변을 모았다. 로슈 히타치(Roche Hitachi) 917 분광계(미국 메사추세스주 홀리스톤 소재의 다이아몬드 다이아그노스틱스(Diamond Diagnostics))를 사용하여 340nm에서 UV 흡광 분광측정에 의해 소변 중 글루코스 농도를 측정하였다. 소변에서 배출된 글루코스의 총 양을 하기 식을 사용하여 소변 농도와 소변 부피의 곱으로서 계산하였다:

배출된 요 글루코스(mg)/체중 200g = 요 글루코스 농도(mg/dL) × 소변 부피(dL) × 200/래트 체중(g).

배출된 요 글루코스(UGE)의 양을 상기 기재된 방법에 의해 실시예 1A 및 실시예 4A에 대한 래트로부터 수집하였고, 이를 표 4에 나타내었다. 혈액(0.1mL)을 투여후 1, 2, 4, 7, 24시간에 PK 부수 그룹 동물로부터 모아 혈장을 얻고, LC-MS/MS로 분석하였다. 시험된 다양한 투여량에서 평균 PK 파라미터를 하기 표 4에 나타내었다.

래트에서의 약동학적 시험

실시예 1A, 2A, 4A, 12A 및 14A를 래트에서 시험하여 최대 농도(C_최대), 혈장 농도 시간 곡선의 면적(AUC), 제거율(CL), 분포의 정상 상태 부피(Vss), 반감기(t_1/2) 및 생체이용률(F)을 비롯한 약동학적 파라미터를 평가하였다. 수컷 스프라그 다우레이(약 300g)를 사용하였다. 래트는 정맥내(IV) 또는 경구 영양법(PO) 투여에 의해 화합물을 섭취하였고, 투여 용액을 제형화하기 위한 비히클을 포함한 시험된 투여량은 하기 표 5에 열거하였다.

IV 또는 PO 투여 후, 혈액 0.2mL를 여러 시점에서 경정맥으로부터 샘플링하였다(표 5). 혈장 샘플 및 표준 물질 20μL 분취량을 내부 표준 물질을 함유하는 아세토나이트릴에 의해 단백질 침전시켰다. 샘플을 와동시키고, 원심분리하여 상청액을 수득하였고, 이를 LC-MS/MS에 의해 분석하였다. 분석자(버전 1.4.1)를 사용하여 피크 면적을 측정하고, 분석물 대 내부 표준 물질의 피크 면적 비율을 계산하였다. LC-MS/MS 조건은 다음과 같다: 질량 분광계 + 공급원 유형은 Sciex API 4000 -터보 스프레이(Turbo Spray)이고; HPLC 펌프는 시마쥬이고; 자동샘플러는 CTC PAL 자동샘플러이고; 주입 부피는 3.0 내지 10μL이고; 구배는 이동상 A: 10mM 암모늄 아세테이트 및 물 중 1% 아이소프로필 알콜; B: 아세토나이트릴을 사용하였고; 유량은 분 당 0.300mL(컬럼 2.0 x 30mm 5마이크롬 루나 C18 컬럼 (페노메넥스)이다). 검출 모드는 음성적이었다.

가중 선형(1/x 또는 1/x2) 회귀를 적용함으로써 검정 곡선을 표준 물질 대 내부 표준 물질의 피크 면적 비율로부터 만들었다. 표준 곡선의 역동적 범위는 5.00ng/mL 내지 5000ng/mL이다.

왓슨(Watson)(버전 7.2)에서 비구분적 분석을 사용하여 개별 동물 데이터로부터 약동학적 파라미터를 결정하였다. 정량 한계 미만(BLQ)의 농도를 계산에 사용하기 위해 0ng/mL로서 기록하였다. 다음과 같은 계산을 사용하였다.

AUC(0-τ) = 선형 사다리꼴 방법을 사용하여 결정됨

AUC(0-∞) = AUC(0-τ) + 외삽된 면적은 τ에서의 혈장 농도를 말단 log-선형 상의 경사로 나눔으로써 결정됨

CL = 투여량/AUC(0-∞)

Vdss = CL × MRT

C_최대= 혈장 농도 시간 곡선으로부터 직접적으로 기록됨

T_최대= 혈장 농도 시간 곡선으로부터 직접적으로 기록됨

t1/2 = ln(0.5)/말단 log-선형 상의 경사

F% = 투여량 당 AUC(0-∞) PO/투여량 당 AUC(0-∞) IV

C(0) = IV 투여 후 명백한 분포 상으로부터 선형 회귀에 의해 외삽됨

MRT = AUMC(AUC(0-∞)/AUC(0-∞))

본 발명을 통해, 다양한 문헌이 인용되었다. 이들 문헌의 내용은 그 전체가 본원에서 모든 목적을 위해 참고로서 인용된다.

본 발명의 범위 또는 범주를 벗어나지 않으면서 본 발명 내에 다양한 변형 및 변화가 생길 수 있음이 당해 분야의 숙련자에게 명백할 것이다. 본 발명의 다른 실시양태는 본원에 개시된 본 발명의 실시 및 명세서를 고려하여 당해 분야의 숙련자에게 자명할 것이다. 실시예를 포함한 명세서는 단지 예시적인 것으로 간주되고, 본 발명의 진정한 범위 및 범주는 하기 청구범위에 의해 나타내는 것으로 의도된다.

Claims

하기 화학식 A 또는 B의 화합물:
화학식 A

화학식 B

상기 식에서,
R¹은 H, (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)알콕시, Cl, F, 사이아노, 플루오로-치환된 (C₁-C₂)알킬, (C₁-C₄)알킬-SO₂- 또는 (C₃-C₆)사이클로알킬이고,
R²는 (C₁-C₄)알킬, (C₁-C₄)알콕시, (C₂-C₄)알킨일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시, Cl, F, 사이아노, 플루오로-치환된 (C₁-C₂)알킬, (C₁-C₄)알킬-SO₂-, (C₃-C₆)사이클로알킬, 또는 N, O 및 S 중에서 각각 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 갖는 (C₅-C₆)헤테로사이클이다.
제 1 항에 있어서,
화학식 A의 화합물인 화합물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
R¹이 H, 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, 사이클로프로필 또는 사이클로뷰틸이고,
R²가 메틸, 에틸, 프로필, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, -CF₂CH₃, 에틴일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시 또는 사이클로프로필인 화합물.
제 3 항에 있어서,
R¹이 H, 메틸, 에틸, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃또는 사이클로프로필이고,
R²가 메틸, 에틸, 아이소프로필, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, -CF₂CH₃, 에틴일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시 또는 사이클로프로필인 화합물.
제 4 항에 있어서,
R¹이 H, 메틸, 에틸, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃또는 사이클로프로필이고,
R²가 메틸, 에틸, 메톡시, 에톡시, F, Cl, 사이아노, -CF₃, -CF₂CH₃, 에틴일, 3-옥세탄일옥시, 3-테트라하이드로퓨란일옥시 또는 사이클로프로필인 화합물.
제 5 항에 있어서,
R¹이 메틸, 에틸, F, Cl, 사이아노, CF₃ 또는 사이클로프로필이고,
R²가 메톡시 또는 에톡시인 화합물.
(1S,2S,3S,4R,5S)-1-하이드록시메틸-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
2-(4-메톡시벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-(하이드록시메틸)-6,8-다이옥사-바이사이클로[3,2,1]옥트-5-일)벤조나이트릴;
2-(4-에톡시벤질)-4-((1S,2S,3S,4R,5S)-2,3,4-트라이하이드록시-1-(하이드록시메틸)-6,8-다이옥사-바이사이클로[3,2,1]옥트-5-일)벤조나이트릴;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-플루오로-3-[4-(테트라하이드로-퓨란-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[3-(4-클로로벤질)-4-플루오로페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-플루오로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; 및
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-{4-클로로-3-[4-(옥세탄-3-일옥시)-벤질]-페닐}-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올
로 이루어진 군 중에서 선택되는 화합물.
(1S,2S,3S,4R,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올인 화합물.
(1S,2S,3S,4S,5S)-1-하이드록시메틸-5-[3-(4-메톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-메틸-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-클로로-3-(4-에톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4S,5S)-5-[4-플루오로-3-(4-메톡시-벤질)-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올;
(1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-에톡시-벤질)-4-플루오로-페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사-바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올; 및
(1S,2S,3S,4S,5S)-5-[3-(4-클로로벤질)-4-플루오로페닐]-1-하이드록시메틸-6,8-다이옥사바이사이클로[3.2.1]옥테인-2,3,4-트라이올
로 이루어진 군 중에서 선택되는 화합물.
하기 화학식 4A의 화합물을 포함하는 결정:
화학식 4A
제 10 항에 있어서,
L-프롤린 또는 L-피로글루탐산을 추가로 포함하는 결정.
제 10 항에 있어서,
L-피로글루탐산을 추가로 포함하고, 다음 중 하나 이상을 갖는 결정:
(a) P2(1)2(1)2(1)의 스페이스 기 및 실질적으로 다음과 동일한 단위 격자 파라미터:
a = 7.4907(10)Å α = 90°
b = 12.8626(15)Å β = 90°
c = 28.029(4)Å γ = 90°
(b) 6.4 ± 0.2, 16.7 ± 0.2, 17.4 ± 0.2 및 21.1 ± 0.2의 2-쎄타 값을 포함하는(CuKα 방사선, 1.54056Å의 파장) 분말 X선 회절 패턴; 및
(c) 29.5ppm의 결정질 아다만틴에 대해 500MHz 분광계로 측정되는 경우 16.5 ± 0.2, 131.1 ± 0.2, 158.7 ± 0.2 및 181.5 ± 0.2ppm에서 피크 위치를 포함하는 고상 ¹³C NMR 스팩트럼.
제 10 항에 있어서,
L-피로글루탐산을 추가로 포함하고, 이때 결정이 화학식 4A의 화합물 및 L-피로글루탐산을 1:1의 화학량론적 비율로 포함하는 공결정인, 결정.
제 10 항에 있어서,
L-피로글루탐산을 추가로 포함하고,
(b) 6.4 ± 0.2의 2-쎄타 값을 포함하는(CuKα 방사선, 1.54056Å의 파장) 분말 X선 회절 패턴; 및
(c) 29.5ppm의 결정질 아다만틴에 대해 500MHz 분광계로 측정되는 경우 16.5 ± 0.2, 158.7 ± 0.2 및 181.5 ± 0.2ppm에서 피크 위치를 포함하는 고상 ¹³C NMR 스팩트럼을 갖는 결정.
제 10 항에 있어서,
L-프롤린을 추가로 포함하고, 다음 중 하나 이상을 갖는 결정:
(a) C2의 스페이스 기 및 실질적으로 다음과 동일한 단위 격자 파라미터:
a = 32.8399(16)Å α = 90°
b = 7.2457(4)Å β = 101.268(5)°
c = 11.8023(6)Å γ = 90°; 및
(b) 7.6 ± 0.2, 12.1 ± 0.2, 20.3 ± 0.2 및 28.8 ± 0.2의 2-쎄타 값을 포함하는(CuKα 방사선, 1.54056Å의 파장) 분말 X선 회절 패턴.
(i) 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 제 10 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 결정, 및 (ii) 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물.
제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 치료 효과량의 화합물 또는 제 10 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 치료 효과량의 결정을 치료가 필요한 동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 동물에서 비만 및 비만-관련 장애를 치료하는 방법.
제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 따른 치료 효과량의 화합물 또는 제 10 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 치료 효과량의 결정을 치료가 필요한 동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 동물에서 유형 2 당뇨병 및 당뇨병-관련 장애의 진행 또는 발병을 치료하거나 지연시키는 방법.
제 16 항에 따른 약학 조성물을 치료가 필요한 동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 동물에서 비만 및 비만-관련 장애를 치료하는 방법.
제 16 항에 따른 약학 조성물을 치료가 필요한 동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 동물에서 유형 2 당뇨병 및 당뇨병-관련 장애의 진행 또는 발병을 치료하거나 지연시키는 방법.