KR101413392B1 - 단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물 - Google Patents

단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 신규 부류의 하기 화학식 I의 화합물, 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물, 및 비정상적이거나 탈조절된 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애, 특히 B-Raf의 비정상적 활성화를 수반하는 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하기 위한 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다.
<화학식 I>
Figure 112012024375536-pct00086

Description

단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물 {COMPOUNDS AND COMPOSITIONS AS PROTEIN KINASE INHIBITORS}
<관련 출원에 대한 상호-참조>
본 출원은 2009년 8월 28일에 출원된 미국 가특허 출원 61/238,073, 및 2010년 3월 11일에 출원된 61/313,039를 우선권으로 주장한다. 상기 출원의 전체 개시내용은 모든 목적에 대해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
<기술 분야>
본 발명은 신규 부류의 화합물, 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물, 및 비정상적이거나 탈조절된 키나제 활성과 관련된 질환 또는 장애, 특히 B-Raf의 비정상적 활성화를 수반하는 질환 또는 장애를 치료하거나 예방하기 위한 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다.
단백질 키나제는 다양한 세포 과정을 조절하고 세포 기능에 대한 제어를 유지함에 있어 중추적인 역할을 하는 대규모의 단백질 족이다. 상기 키나제의 부분적이고 비제한적인 목록에는 수용체 티로신 키나제, 예컨대 혈소판-유래 성장 인자 수용체 키나제 (PDGF-R), 신경 성장 인자 수용체, trkB, Met 및 섬유아세포 성장 인자 수용체, FGFR3; 비-수용체 티로신 키나제, 예컨대 Abl 및 융합 키나제 BCR-Abl, Lck, Csk, Fes, Bmx 및 c-src; 및 세린/트레오닌 키나제, 예컨대 B-Raf, sgk, MAP 키나제 (예를 들어, MKK4, MKK6 등), 및 SAPK2α, SAPK2β 및 SAPK3이 포함된다. 키나제의 이상 활성은 양성 및 악성 증식성 장애뿐만 아니라 면역계 및 신경계의 부적절한 활성화에 기인한 질환을 비롯한 다수의 질환 상태에서 관찰되어 왔다.
본 발명의 신규 화합물은 B-Raf 또는 그의 돌연변이체 형태 (예를 들어, V600E)의 활성을 억제하며, 따라서 B-Raf-관련 질환의 치료에 유용할 것으로 예상된다.
<발명의 개요>
한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 및 그의 N-옥시드 유도체, 전구약물 유도체, 보호된 유도체, 호변이성질체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물, 및 상기 화합물의 제약상 허용되는 염 및 용매화물 (예를 들어, 수화물)을 제공한다.
<화학식 I>
Figure 112012024375536-pct00001
식 중,
Y는 N 및 CR6으로부터 선택되고;
R1은 수소, -X1R8a, -X1OX2R8a, -X1C(O)NR8aR8b, -X1NR8aX2R8b, -X1NR8aC(O)X2OR8b, -X1NR8aC(O)X2NR8aR8b, -X1NR8aS(O)0-2R8b로부터 선택되며; 여기서 각 X1은 독립적으로 C1 - 4알킬렌이며; 임의로 X1은 히드록시, 할로, 시아노, C1 - 4알킬, 할로-치환된-C1 - 4알킬, C1-4알콕시 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 선택되는 기로 대체되는 1개 내지 3개 수소를 가지며; X2는 결합 및 C1 - 4알킬렌으로부터 선택되며; 여기서 R8a 및 R8b는 수소, C1 - 6알킬, 할로-치환된-C1 - 6알킬, C3 - 8시클로알킬, 헤테로아릴 및 C3 - 8헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택되며; 여기서 R8a 또는 R8b의 시클로알킬, 헤테로시클로알킬 또는 헤테로아릴은 아미노, 시아노, C1 - 4알킬, C1 - 4알콕시, 할로-치환된-C1 -4알킬 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환되되; 단 R1이 -X1NHC(O)OR8b 및 -X1NR8aS(O)0-2R8b로부터 선택되는 경우에 R8b는 수소가 아니고;
R2, R3, R5 및 R6은 수소, 할로, 시아노, C1 - 4알킬, 할로-치환된-C1 - 4알킬, C1 - 4알콕시 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택되되; 단 R5가 플루오로이며 R1이 수소, -X1R8a, -X1OX2R8a, -X1C(O)NR8aR8b, -X1NR8aX2R8b, -X1NR8aC(O)X2OR8b 및 -X1NR8aS(O)0-2R8b로부터 선택되는 경우에, R3 및 R6이 둘 모두 수소는 아니고;
R4는 -R9 및 -NR10R11로부터 선택되며; 여기서 R9는 C1 - 6알킬, C3 - 8시클로알킬, C3-8헤테로시클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴로부터 선택되며; 여기서 상기 R9의 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 할로, 시아노, C1 - 4알킬, 할로-치환된-C1 - 4알킬, C1 - 4알콕시 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환되며; R10 및 R11은 수소 및 R9로부터 독립적으로 선택되고;
R7은 수소, C1 - 4알킬, C3 - 5시클로알킬 및 C3 - 5헤테로시클로알킬로부터 선택되며; 여기서 상기 R7의 알킬, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 할로, 시아노, 히드록실, C1 - 4알킬, 할로-치환된-C1 - 4알킬, C1 - 4알콕시 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환된다.
제2 측면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 N-옥시드 유도체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 1종 이상의 적합한 부형제와 함께 함유하는 제약 조성물을 제공한다.
제3 측면에서, 본 발명은 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 N-옥시드 유도체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 동물에게 투여하는 것을 포함하는, 키나제 활성, 특히 B-Raf 활성의 억제가 질환의 병리상태 및/또는 증상을 예방, 억제 또는 완화시킬 수 있는 동물에서의 질환을 치료하는 방법을 제공한다.
제4 측면에서, 본 발명은 키나제 활성, 특히 B-Raf 활성, 특히 돌연변이체 B-raf (예를 들어, V600E)가 질환의 병리상태 및/또는 증상의 원인이 되는 동물에서의 질환을 치료하기 위한 의약의 제조에 있어서 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.
제5 측면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물, 및 그의 N-옥시드 유도체, 전구약물 유도체, 보호된 유도체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물, 및 그의 제약상 허용되는 염의 제조 방법을 제공한다.
도 1: 도 1은 MEK 소분자 억제제의 첨가가 Raf 소분자 억제제에 의해 유발된 유도성 ERK 신호전달, 세포 성장 및 형질전환을 역전시킬 수 있음을 예시한다.
정의
기로서의 "알킬" 및 다른 기 (예를 들어, 할로-치환된 알킬 및 알콕시)의 구조적 요소로서의 "알킬"은 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. C1 -4-알콕시에는 메톡시, 에톡시 등이 포함된다. 할로-치환된-C1 - 4알킬은 임의의 수소가 할로겐으로 치환될 수 있는 알킬기 (분지형 또는 비분지형)를 의미한다. 예를 들어, 할로-치환된-C1 - 4알킬은 트리플루오로메틸, 디플루오로에틸, 펜타플루오로에틸 등일 수 있다. 유사하게, 히드록시-치환된-C1 - 6알킬은 임의의 수소가 히드록실로 치환될 수 있는 알킬기 (분지형 또는 비분지형)를 의미한다. 예를 들어 히드록시-치환된-C1 - 6알킬에는 2-히드록시에틸 등이 포함된다. 유사하게, 시아노-치환된-C1 - 6알킬은 임의의 수소가 시아노로 치환될 수 있는 알킬기 (분지형 또는 비분지형)를 의미한다.
"아릴"은 6개 내지 10개의 고리 탄소 원자를 함유하는 모노시클릭 또는 융합 비시클릭 방향족 고리단을 의미한다. 예를 들어, 아릴은 페닐 또는 나프틸, 바람직하게는 페닐일 수 있다. "아릴렌"은 아릴기로부터 유도된 2가 라디칼을 의미한다.
"시클로알킬"은 지정된 개수의 고리 원자를 함유하는, 포화 또는 부분 불포화된 모노시클릭, 융합 비시클릭 또는 가교 폴리시클릭 고리단을 의미한다. 예를 들어, C3 - 10시클로알킬에는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 등이 포함된다.
"헤테로아릴"은 상기 아릴에 대해 정의된 것과 같으며, 여기서 하나 이상의 고리 구성원은 헤테로원자이다. 예를 들어, 헤테로아릴에는 피리딜, 인돌릴, 인다졸릴, 퀴녹살리닐, 퀴놀리닐, 벤조푸라닐, 벤조피라닐, 벤조티오피라닐, 벤조[1,3]디옥솔, 이미다졸릴, 벤조-이미다졸릴, 피리미디닐, 푸라닐, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피라졸릴, 티에닐 등이 포함된다.
"헤테로시클로알킬"은 본 출원에서 정의된 것과 같은 시클로알킬을 의미하되, 단 언급된 고리 탄소 중 하나 이상이 -O-, -N=, -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O)- 또는 -S(O)2-로부터 선택되는 잔기로 대체되며, 여기서 R은 수소, C1 - 4알킬 또는 질소 보호기이다. 예를 들어, 본 발명의 화합물을 기재하기 위해 본 출원에서 사용되는 C3 - 8헤테로시클로알킬에는 2H-피란, 4H-피란, 피페리딘, 1,4-디옥산, 모르폴린, 1,4-디티안, 티오모르폴리노, 이미다졸리딘-2-온, 테트라히드로푸란, 피페라진, 1,3,5-트리티안, 피롤리딘, 피롤리디닐-2-온, 피페리딘, 피페리디논, 1,4-디옥사-8-아자-스피로[4.5]데크-8-일 등이 포함된다.
"할로겐" (또는 할로)은 클로로, 플루오로, 브로모 또는 아이오도를 나타낸다.
"pMEK"는 인산화 Mek를 의미한다.
"pERK"는 인산화 ERK를 의미한다.
"치료하다", "치료하는" 및 "치료"는 질환 및/또는 그에 수반되는 증상을 완화 또는 경감시키는 방법을 지칭한다.
본 발명의 화합물은 캠드로우 울트라 (Chemdraw Ultra) (버전 10.0) 및/또는 캠악손 네임 제너레이터 (ChemAxon Name Generator) (제이켐 (JChem) 버전 5.3.1.0)를 사용하여 명명한다.
바람직한 실시양태의 기술
본 발명은 키나제 관련 질환, 특히 B-Raf 키나제 관련 질환; 예를 들어, 전이성 흑색종, 고형 종양, 뇌 종양, 예컨대 다형성 교모세포종 (GBM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 전립선암, 위암, 유두성 갑상선 암종, 난소 저등급 암종 및 결장직장암의 치료를 위한 화합물, 조성물 및 방법을 제공한다.
한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물에 대하여, R1은 -X1R8a 및 -X1NHC(O)OR8b로부터 선택되며; 여기서 각 X1은 독립적으로 C1 - 4알킬렌이며; 임의로 X1은 히드록시, 할로, 시아노, C1 - 4알킬 및 할로-치환된-C1 - 4알킬로부터 선택되는 기로 대체되는 1개 내지 3개 수소를 가지며; 여기서 R8a 및 R8b는 수소 및 C1 - 6알킬로부터 독립적으로 선택되되; 단 R1이 -X1NHC(O)OR8b인 경우에 R8b는 수소가 아니다.
또 다른 실시양태는 하기 화학식 Ia의 화합물이다.
<화학식 Ia>
Figure 112012024375536-pct00002
식 중, Y는 N 및 CR6으로부터 선택되고; R2, R3, R5 및 R6은 수소, 할로, 시아노, C1 - 4알킬, 할로-치환된-C1 - 4알킬, C1 - 4알콕시 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택되되; 단 R5가 플루오로이며, R1이 수소, -X1R8a, -X1OX2R8a, -X1C(O)NR8aR8b, -X1NR8aX2R8b, -X1NR8aC(O)X2OR8b 및 -X1NR8aS(O)0-2R8b로부터 선택되는 경우에, R3 및 R6이 둘 다 수소는 아니고; R4는 -R9 및 -NR10R11로부터 선택되며; 여기서 R9는 C1 - 6알킬, C3 - 8시클로알킬, C3 - 8헤테로시클로알킬, 아릴 및 헤테로아릴로부터 선택되며; 여기서 상기 R9의 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴은 할로, 시아노, C1 - 4알킬, 할로-치환된-C1 - 4알킬, C1 - 4알콕시 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환되며; R10 및 R11은 수소 및 R9로부터 독립적으로 선택되고; R7은 수소, C1 - 4알킬, C3 - 5시클로알킬 및 C3-5헤테로시클로알킬로부터 선택되며; 여기서 상기 R7의 알킬, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 할로, 시아노, 히드록실, C1 - 4알킬, 할로-치환된-C1 - 4알킬, C1 - 4알콕시 및 할로-치환된-C1 - 4알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환된다.
추가의 실시양태에서, R4는 -R9이며; 여기서 R9는 C1 - 3알킬 및 C3 - 8시클로알킬로부터 선택되며; 여기서 상기 R9의 알킬 또는 시클로알킬은 할로 및 할로-치환된-C1 - 4알킬로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환된다.
추가의 실시양태에서, R2는 수소 및 플루오로로부터 선택되고; R3은 클로로, 플루오로 및 메틸로부터 선택되고; R5는 수소, 클로로 및 플루오로로부터 선택되고; Y는 N 및 CR6으로부터 선택되고; R6은 수소 및 플루오로로부터 선택된다.
추가의 실시양태는 하기로부터 선택되는 화합물이다: 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-클로로-5-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[2-플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[3-클로로-5-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2,6-디플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[2,6-디플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-{[4-(3-{2-플루오로-3-[(3,3,3-트리플루오로프로판)술폰아미도]페닐}-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일]아미노}프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-클로로-2-메탄술폰아미도피리딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-플루오로-2-메탄술폰아미도피리딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-클로로-3-에탄술폰아미도-4,5-디플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2,4-디플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[1-(프로판-2-일)-3-(2,4,5-트리플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-에탄술폰아미도-2,4-디플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-2-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로필]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[2,4-디플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-시클로프로판술폰아미도-2,5-디플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-3-시클로프로판술폰아미도-2-플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 및 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[5-클로로-2-플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트.
추가의 실시양태는 하기 화학식 Ib의 화합물이다.
<화학식 Ib>
Figure 112012024375536-pct00003
식 중, R3은 클로로, 플루오로 및 메틸로부터 선택되고; R5는 플루오로 및 클로로로부터 선택되고; R7은 에틸 및 이소프로필로부터 선택된다.
추가의 실시양태는 하기로부터 선택되는 화합물이다: 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2,5-디플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-에틸-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-플루오로-3-메탄술폰아미도-5-메틸페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-클로로-3-메탄술폰아미도-5-메틸페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-클로로-5-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2R)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2,5-디클로로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 및 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트.
또 다른 실시양태는 하기로부터 선택되는 화합물이다: N-[5-클로로-3-(4-{2-[(2-시아노에틸)아미노]피리미딘-4-일}-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일)-2-플루오로페닐]메탄술폰아미드; N-{5-클로로-3-[4-(2-{[2-(디메틸아미노)에틸]아미노}피리미딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일]-2-플루오로페닐}메탄술폰아미드; N-(5-클로로-2-플루오로-3-{4-[2-(메틸아미노)피리미딘-4-일]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일}페닐)메탄술폰아미드; 및 N-{3-[4-(2-아미노피리미딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}메탄술폰아미드.
추가의 실시양태는 하기 실시예 및 표로부터 선택되는 화합물이다.
추가의 실시양태는 하기로부터 선택되는 중간체 화합물이다: 3-브로모-5-클로로-2-플루오로아닐린; 시아노-(2-메틸티오-피리미딘-4-일)-아세트산 tert-부틸 에스테르; 1-이소프로필-4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민; 2-((2-벤질리덴-1-에틸히드라지닐)메틸렌)-말로노니트릴; 1-(3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)에탄온; 1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)에탄온; 1-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)에탄온; 1-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄온; 3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-온; 3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-온; 3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-온; 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-아민; 4-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-아민; 4-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-아민; 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-올; 2-클로로-4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘; (S)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트; (R)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트; (S)-tert-부틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트; 3-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판니트릴; 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-N-메틸피리미딘-2-아민; N1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)-N2,N2-디메틸에탄-1,2-디아민; N-(3-브로모-2,4-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드; 3-플루오로-4-아이오도피리딘-2-아민; 3-클로로-4-아이오도피리딘-2-아민; 3-브로모-2,5,6-트리플루오로아닐린; 2,4-디브로모-3,6-디클로로아닐린; 3-브로모-2-클로로-5-메틸아닐린; 3-브로모-2,5-디플루오로아닐린; 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조산; tert-부틸 3-브로모-5-클로로-2-플루오로페닐카르바메이트; tert-부틸 3-브로모-2-플루오로-5-메틸페닐카르바메이트; tert-부틸 5-클로로-2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트; tert-부틸 2,6-디플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트; N-(2,4-디플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)프로판-1-술폰아미드; 2-(2-플루오로-3-니트로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란; 2,5-디플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 2-클로로-5-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 2,5-디클로로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 2-클로로-5-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; tert-부틸 2-플루오로-5-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트; 3-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민; 2,3,6-트리플루오로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 3-클로로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민; 3-클로로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 및 3-메톡시-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린.
또한, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 모든 적합한 동위원소 변형체를 포함한다. 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 동위원소 변형체는 하나 이상의 원자가 동일한 원자 번호를 갖지만 자연에서 흔히 발견되는 원자 질량과 상이한 원자 질량을 갖는 원자로 대체된 것으로서 정의된다. 본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염에 도입될 수 있는 동위원소의 예에는 수소, 탄소, 질소 및 산소의 동위원소, 예컨대 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 35S, 18F, 36Cl 및 123I가 포함되지만, 이들로 제한되지는 않는다. 본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염의 소정의 동위원소 변형체, 예를 들어 방사성 동위원소, 예컨대 3H 또는 14C가 도입된 것들은 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에서 유용하다. 특정 예에서, 3H 및 14C 동위원소가 그의 제조의 용이성 및 검출 가능성 때문에 사용될 수 있다. 다른 예에서, 동위원소, 예컨대 2H로의 치환은 보다 큰 대사 안정성, 예컨대 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여 요구량으로 인한 소정의 치료상 이점을 수득할 수 있다. 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 동위원소 변형체는 일반적으로 적합한 시약의 적절한 동위원소 변형체를 사용하여 통상의 절차에 의해 제조할 수 있다.
몇몇 Raf 억제제는, 야생형 B-Raf 세포에서 MEK 및 ERK 신호전달을 증가시키는 것 이외에, 암세포주에서 세포 성장을 유도하며 섬유아세포에서 형질전환 및 성장을 유발한다. 앞서, 하류 신호전달의 유도는 공개된 Raf 경로 피드백 루프 (feedback loop)에서 기인하였다. 그러나, pMEK 및 pERK의 유도는 Raf 억제제 처리 수 분 내에, 심지어 보고된 피드백 인산화 사건이 B-Raf 및 C-Raf에 대하여 나타나기 전에 일어날 수 있다. 신호전달 및 세포 성장의 유도는 둘 모두 2상 패턴으로 일어나며, 낮은 화합물 농도 (0.01-0.1 μM)에서 최대 유도를 유발하며, 보다 높은 화합물 농도 (1-10 μM)에서 보다 덜 완전한 유도를 유발한다. 이러한 2상 패턴은 또한 정제된 야생형 B-Raf 또는 C-Raf로의 생화학적 분석에서 관찰되며, 2개 신호전달 서브유닛의 상호작용을 수반하는 메카니즘을 시사한다. 추가적으로, Raf 이량체화는, Raf 분자의 트랜스-인산화를 통해서가 아니라 아마도 키나제의 형태 활성화에 의해 pMEK를 상향조절할 수 있다. 이 모델과 부합하여, Raf 억제제 처리는 세포에서 B-Raf/C-Raf 이량체 형성을 유도한다. 추가적으로 siRNA로의 A- 또는 B-Raf의 녹다운 (knockdown)은 pMEK 및 pERK의 Raf 억제제 유도를 없애지 않으며, C-Raf의 녹다운은 유도를 약간만 감소시킨다. 특히, K-Ras 돌연변이 세포에서의 K-Ras의 녹다운은 또한 유도를 약간만 감소시켜, 이러한 효과가 Ras에 의해 주로 매개되는 것이 아님을 암시한다. 종합하면, 데이터는 하나의 Raf 분자에 결합하는 억제제가 이량체에서의 파트너 Raf 분자의 형태 활성화 및 이량체화를 유도하는 것인 모델을 시사한다. 이는 야생형 Raf 및 돌연변이체 Ras 종양이 선택적 Raf 키나제 억제제에 둔감한 이유를 설명할 수 있으며, 또한 독성에 대해 중요한 의미를 가질 수 있는데, 강한 미토겐 신호전달의 유도가 정상 조직의 과증식을 유발할 수 있기 때문이다. Raf 억제제 유도 메카니즘의 이해는 개선된 억제제의 설계를 도출할 수 있다.
Raf 억제제와 함께 MEK 억제제의 첨가는 ERK 신호전달의 유의한 억제를 유발하며, 따라서 세포 증식 및 형질전환의 감소를 유발한다. MEK 억제제 단독 처리는 임상에서 용량 제한 독성을 유발하기 때문에, Raf 억제제와 MEK 억제제의 조합은 우수한 치료 전략에 해당할 수 있다.
또한, 본 발명은 본 발명에 개시된 B-Raf 억제제와 다른 작용제와의 조합물을 포함한다. 특히, 본 발명은 MEK1/2 억제제와의 조합물을 제공한다. 도 1은 MEK 소분자 억제제의 첨가가 Raf 소분자 억제제에 의해 유발된 유도성 ERK 신호전달, 세포 성장 및 형질전환을 역전시킬 수 있음을 예시한다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물 (본 발명의 화합물 9, 즉 (S)-메틸 1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(메틸술폰아미도)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트)은 SW620 세포를 사용한 셀 타이터 글로 (Cell Titer Glo) 분석 중 도 1에서 (-) 억제로서 나타나는 세포 증식에서의 유도를 유발할 수 있다. Y 축은 (-) 및 (+) 억제를 나타낸다. 각 실험은 10 내지 0.002 μM의 일련의 9개 연속 희석으로서 나타낸다. 화합물 A1 (N-(4-메틸-3-(1-(6-(4-메틸피페라진-1-일아미노)피리미딘-4-일)-1H-이미다졸-2-일아미노)페닐)-3-(트리플루오로메틸)벤즈아미드)는 대조군이고, A3은 MEK 억제제 (PD0325901)이다. 화합물 9는 MEK 억제제 A3의 부재, 및 1 μM, 0.1 μM 및 0.01 μM의 존재 하에서 시험한다.
약리학 및 효용성
본 발명의 화합물은 키나제의 활성을 조절하며, 그로 인하여, 키나제가 질환의 병리상태 및/또는 증상의 원인이 되는 질환 또는 장애의 치료에 유용하다. 본원에 기재된 화합물 및 조성물에 의해 억제되고 본원에 기재된 방법이 유용한 키나제의 예에는 B-Raf (B-Raf의 돌연변이체 형태를 포함함)가 포함되나, 이에 한정되지는 않는다.
미토겐-활성화 단백질 키나제 (MAPK) 경로는 세포 증식, 생존, 분화 및 이동의 제어를 조정하는 다수의 이펙터 분자의 활성을 매개한다. 예를 들어 성장 인자, 사이토카인 또는 호르몬에 의한 세포의 자극은, 원형질막-관련 Ras가 GTP-결합되어 Raf를 동원하도록 활성화된다. 이러한 상호작용은 Raf의 키나제 활성을 유도하여 MAPK/세포외 신호-관련 키나제 (ERK) (MEK)의 직접적인 인산화를 유발하고, 결국 ERK를 인산화시킨다. 이어서, 활성화된 ERK는 각종 이펙터 분자, 예를 들어 키나제, 포스파타제, 전사 인자 및 세포골격 단백질을 인산화시킨다. 따라서, Ras-Raf-MEK-ERK 신호전달 경로는 신호를 세포 표면 수용체로부터 세포핵으로 전송하며, 이는 예를 들어 세포 증식 및 생존에 필수적이다. 이러한 신호전달 캐스케이드의 조절은 다수의 Ras 이소형 (K-Ras, N-Ras 및 H-Ras를 포함함), Raf 이소형 (A-Raf, B-Raf, C-Raf/Raf-1), MEK 이소형 (MEK-1 및 MEK-2) 및 ERK 이소형 (ERK-1 및 ERK-2)에 의해 추가적으로 강화된다. 인간 암 중 10 내지 20％가 발암성 Ras 돌연변이를 가지며 다수의 인간 암이 활성화된 성장 인자 수용체를 갖기 때문에, 상기의 경로는 중재를 위한 이상적인 표적이다.
다수의 신호전달 경로에서의 Raf의 필수적인 역할 및 입지는, 포유동물 세포 내 탈조절되고 우세한 억제성 Raf 돌연변이체를 이용한 연구뿐만 아니라 모델 유기체에 생화학 및 유전적 기술을 이용한 연구로부터 입증되었다. 과거에는, 항-종양 약물 표적인 Raf에 관한 초점은 Ras의 하류 이펙터로서의 그의 기능으로 집중되었었다. 그러나, 최근 결과들은, Raf가 발암성 Ras 대립유전자에 대한 요구 없이 소정의 종양의 형성에 중요한 역할을 할 수 있다는 것을 제시한다. 특히, B-Raf 및 N-Ras 대립유전자의 활성화는 흑색종 중 약 70％, 유두성 갑상선 암종 중 40％, 난소 저등급 암종 중 30％ 및 결장직장암 중 10％에서 확인되었다. K-Ras에서의 돌연변이는 췌장암 중 대략 90％에서 발생된다. 대부분의 B-Raf 돌연변이는 키나제 도메인 내에서 발견되며, 단일 치환체 (V600E)가 80％ 이상을 차지한다. 돌연변이된 B-Raf 단백질은, MEK에 대한 상승된 키나제 활성 또는 C-Raf의 활성화 중 하나를 통해 Raf-MEK-ERK 경로를 활성화시킨다.
따라서, B-Raf에 대한 키나제 억제제의 개발은 많은 유형의 인간 암, 특히 전이성 흑색종, 고형 종양, 뇌 종양, 예컨대 다형성 교모세포종 (GBM), 급성 골수성 백혈병 (AML), 폐암; 유두성 갑상선 암종, 난소 저등급 암종 및 결장직장암의 치료에 대한 새로운 치료 기회를 제공한다. 여러 Raf 키나제 억제제는 시험관내 및/또는 생체내 분석에서 종양 세포 증식의 억제에 효능을 나타내는 것으로서 기재되었다 (예를 들어, 미국 특허 제6,391,636호, 제6,358,932호, 제6,037,136호, 제5,717,100호, 제6,458,813호, 제6,204,467호 및 제6,268,391호 참조). 다른 특허 및 특허 출원은 백혈병의 치료 (예를 들어, 미국 특허 제6,268,391호, 제6,204,467호, 제6,756,410호 및 제6,281,193호; 및 포기된 미국 특허 출원 제20020137774호 및 제20010006975호 참조) 또는 유방암의 치료 (예를 들어, 미국 특허 제6,358,932호, 제5,717,100호, 제6,458,813호, 제6,268,391호, 제6,204,467호 및 제6,911,446호 참조)를 위한 Raf 키나제 억제제의 사용을 제시한다. 데이터는, Raf 키나제 억제제가 MAPK 경로를 통한 신호전달을 유의하게 억제하여, B-Raf (V600E) 종양의 극적인 감소를 유발할 수 있음을 입증한다.
본 발명의 화합물은, 상기 암 세포에서 신호 캐스케이드를 차단함으로써 B-Raf 키나제를 수반하는 세포 과정을 억제하여, 궁극적으로 세포의 정지 및/또는 사멸을 유도한다.
상기에 따라, 본 발명은 폐 암종, 전립선암, 위암, 췌장 암종, 방광 암종, 대장 암종, 골수 장애, 전립선암, 갑상선암, 흑색종, 샘종, 및 난소, 안구, 간, 담관 및 신경계의 암종을 예방 또는 치료하는 방법을 추가로 제공한다. 또한, 본 발명은 치료 유효량 (하기 "투여 및 제약 조성물" 참조)의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 상기 기재된 임의의 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서 상기 질환 또는 장애를 예방 또는 치료하는 방법을 추가로 제공한다. 상기 임의의 용도에 있어서, 요구되는 투여량은 투여 방식, 치료할 특정 병태 및 원하는 효과에 따라 달라질 것이다.
투여 및 제약 조성물
일반적으로, 본 발명의 화합물은 당업계에 공지된 임의의 일반적이고 허용되는 방식을 통해 단독으로 또는 1종 이상의 치료제와 함께 치료 유효량으로 투여될 것이다. 치료 유효량은 질환의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적 건강 상태, 사용되는 화합물의 효력 및 여타 인자에 따라 광범위하게 달라질 수 있다. 일반적으로, 전신적으로 체중 1 kg 당 약 0.03 내지 30 mg의 1일 투여량에서 만족스러운 결과가 얻어지는 것으로 나타난다. 보다 큰 포유동물, 예를 들어 인간에서 지정된 1일 투여량은 약 0.5 mg 내지 약 2000 mg의 범위로, 예를 들어 1일 4회 이하의 분할 투여 또는 지연형 투여로 편리하게 투여된다. 경구 투여용으로 적합한 단위 투여 형태는 약 1 내지 500 mg의 활성 성분을 포함한다.
본 발명의 화합물은 제약 조성물로서 임의의 통상적인 경로, 특히 장내로, 예를 들어 경구로 (예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로), 또는 비경구로 (예를 들어, 주사용 용액제 또는 현탁액제 형태로), 국소로 (예를 들어, 로션, 겔, 연고 또는 크림의 형태로), 또는 비내 또는 좌제 형태로 투여될 수 있다. 유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본 발명의 화합물을 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께 포함하는 제약 조성물은 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 통상적인 방식으로 제조할 수 있다. 예를 들어, 경구 조성물은 활성 성분을, a) 희석제, 예를 들어 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및/또는 글리신; b) 윤활제, 예를 들어 실리카, 활석, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염, 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 정제의 경우 또한 c) 결합제, 예를 들어 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트래거캔스, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 필요한 경우 d) 붕해제, 예를 들어 전분, 아가, 알긴산 또는 그의 나트륨 염, 또는 발포성 혼합물; 및/또는 e) 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제와 함께 포함하는, 정제 또는 젤라틴 캡슐제일 수 있다. 주사용 조성물은 등장성 수용액제 또는 수현탁액제일 수 있고, 좌제는 지방 에멀젼 또는 현탁액으로부터 제조할 수 있다. 조성물은 멸균되고/거나, 아쥬반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 에멀젼화제, 용해 촉진제, 삼투압 조절용 염 및/또는 완충제를 함유할 수 있다. 추가로, 이들은 또한 치료적으로 가치있는 다른 성분을 함유할 수도 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 마이크로에멀젼 예비 농축물 (MEPC)로 제제화될 수 있다. 화학식 I의 화합물은 56％ PEG400, 29％ 크레모포어 (cremophor) EL 및 15％ 올레산의 혼합물 중 40 mg/㎖로 제조할 수 있다. 화학식 I의 화합물을 포함하지 않은 상기 혼합물을 우선 볼텍싱/진탕에 의해 제조한다. 본 발명의 화합물을 첨가하고, 초음파처리를 이용하여 분말을 비히클 내에 분산시킨다. 혼합물을 수조에서 약 1시간 동안 교반하며 80℃로 가열시키고, 15분마다 초음파처리하였다. 이러한 혼합물은 약 1주일 동안 실온에서 물리적 및 화학적으로 안정하다.
경피 적용에 적합한 제제는 유효량의 본 발명의 화합물을 담체와 함께 포함한다. 담체는 흡수가능한 약리학상 허용되는 용매를 포함하여 숙주의 피부를 통한 통과를 보조할 수 있다. 예를 들어, 경피 장치는 후면 부재, 임의로는 담체와 함께 화합물을 함유한 저장소, 임의로 화합물이 숙주의 피부에 지연된 기간에 걸쳐 제어된 예정 속도로 전달되도록 하는 속도 제어 장벽, 및 피부에 장치를 고정하기 위한 수단을 포함하는 붕대의 형태이다. 매트릭스 경피 제제가 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, 피부 및 안구에 대한 국소 적용에 적합한 제제는 바람직하게는 당업계에 널리 공지되어 있는 수용액제, 연고, 크림 또는 겔이다. 이는 가용화제, 안정화제, 장성 증진제, 완충제 및 보존제를 함유할 수 있다.
본 발명의 화합물은 치료 유효량으로 1종 이상의 치료제와 함께 투여될 수 있다 (제약 조합물). 예를 들어, 다른 항-종양제 또는 항-증식제, 예를 들어 유사 분열 억제제, 알킬화제, 항-대사물질, 삽입성 항생제, 성장 인자 억제제, 세포 주기 억제제, 효소, 토포이소머라제 억제제, 생물학적 반응 개질제, 항체, 세포독성제, 항-호르몬, 항-안드로겐, 항-맥관형성제, 키나제 억제제, pan 키나제 억제제 또는 성장 인자 억제제와 함께 사용하는 경우에 상승 효과가 발생할 수 있다.
본 발명의 화합물은 치료 유효량으로, 옥수수 전분, 감자 전분, 타피오카 전분, 전분 페이스트, 전호화 전분, 당, 젤라틴, 천연 검, 합성 검, 나트륨 알기네이트, 알긴산, 트래거캔스, 구아 검, 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트, 카르복시메틸 셀룰로스 칼슘, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 활석, 탄산칼슘, 분말 셀룰로스, 덱스트레이트, 카올린, 만니톨, 규산, 소르비톨, 아가-아가, 탄산나트륨, 크로스카르멜로스 나트륨, 크로스포비돈, 폴라크릴린 칼륨, 나트륨 전분 글리콜레이트, 클레이, 나트륨 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산, 미네랄 오일, 경질 미네랄 오일, 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 다른 글리콜, 나트륨 라우릴 술페이트, 수소화 식물성 오일, 땅콩 오일, 면실 오일, 해바라기 오일, 참깨 오일, 올리브 오일, 옥수수 오일, 대두 오일, 아연 스테아레이트, 나트륨 올레에이트, 에틸 올레에이트, 에틸 라우레이트, 실리카, 및 이들의 조합물로부터 선택되는 1종 이상의 적합한 부형제와 함께 투여될 수 있다.
본 발명의 한 실시양태는 추가의 치료제를 대상체에게 투여하는 것을 추가로 포함하는, 청구항 12 또는 13의 방법이다. 추가의 치료제는 항암 약물, 진통제, 항구토제, 항우울제 또는 소염제를 포함한다. 또한, 추가의 치료제는 상이한 Raf 키나제 억제제, 또는 MEK, mTOR, HSP90, AKT, PI3K, CDK9, PAK, 단백질 키나제 C, MAP 키나제, MAPK 키나제 또는 ERK의 억제제이고, 본 발명의 화합물과 동시에 대상체에게 투여된다.
예를 들어, Raf 억제제와 함께 MEK 억제제를 첨가하는 것은 ERK 신호전달의 유의한 억제를 유발하며, 결과적으로 세포 증식 및 형질전환의 감소를 유발한다. MEK 억제제 단독으로 처리하는 것은 임상에서 용량 제한 독성을 유발하기 때문에, Raf 억제제와 MEK 억제제 조합은 우수한 치료 전략에 해당된다. MEK 억제제의 예에는 AS703026 (EMD 세로노 (Serono)); MSC1936369B (EMD 세로노); GSK1120212 (글락소스미스클라인 (GlaxoSmithKline)); AZD6244 (메모리얼 슬로안-케터링 캔서 센터 (Memorial Sloan-Kettering Cancer Center)); PD-0325901 (화이자 (Pfizer)); ARRY-438162 (어레이 바이오파마 (Array BioPharma)); RDEA119 (아디아 바이오사이언즈, 인크. (Ardea Biosciences, Inc.)); GDC0941 (제넨테크 (Genentech)); GDC0973 (제넨테크); TAK-733 (밀레니엄 파마슈티컬즈, 인크. (Millennium Pharmaceuticals, Inc.)); RO5126766 (호프만-라 로슈 (Hoffmann-La Roche)); 및 XL-518 (엑셀리시스 (Exelixis))가 있다.
본 발명의 또 다른 실시양태는 치료 유효량의 <발명의 개요>의 화합물 (Raf 억제제) 및 1종 이상의 MEK 단백질 키나제 억제제를 포함하는, 조합물 및 암의 치료 방법이다.
본 발명의 화합물이 다른 치료제와 함께 투여되는 경우, 공동-투여되는 화합물의 투여량은 물론 사용된 공동-약물의 유형, 사용된 특정 약물, 치료하고자 하는 병태 등에 따라 달라질 것이다.
본 발명은 또한, a) 본원에 기재된 유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본 발명의 화합물인 제1 작용제 및 b) 1종 이상의 공동-작용제를 포함하는 제약 조합물, 예를 들어 키트를 제공한다. 상기 키트는 그의 투여를 위한 지침서를 포함할 수 있다.
본원에 사용된 용어 "공동-투여" 또는 "병용 투여" 등은 단일 환자에게 선택된 치료제들을 투여하는 것을 포함하는 의미이며, 작용제들을 반드시 동일 투여 경로에 의해 또는 동시에 투여할 필요는 없는 치료 요법을 포함하려고 한다.
본원에 사용된 용어 "제약 조합물"은 1종 초과의 활성 성분을 혼합하거나 조합하는 것으로부터 생성된 생성물을 의미하는 것으로, 활성 성분의 고정 및 비고정 조합물 둘 모두를 포함한다. 용어 "고정 조합물"은 활성 성분, 예를 들어 화학식 I의 화합물 및 공동-작용제가 단일체 형태 또는 단일 투여 형태로 동시에 환자에게 투여된다는 것을 의미한다. 용어 "비고정 조합물"은 활성 성분, 예를 들어 화학식 I의 화합물 및 공동-작용제 둘 모두가 동시에, 공동으로, 또는 특정 시간 제한 없이 순차적으로 개별체로서 환자에게 투여되는 것을 의미하며, 여기서 상기 투여는 환자의 신체에 2개 화합물의 치료 유효 수준을 제공한다. 비고정 조합물은 또한 칵테일 요법, 예를 들어 3종 이상의 활성 성분의 투여에도 적용된다.
본 발명의 화합물의 제조 방법
본 발명은 또한 본 발명의 화합물의 제조 방법을 포함한다. 기재된 반응에서, 반응성 관능기 (예를 들어, 히드록시, 아미노, 이미노, 티오 또는 카르복시 기)가 최종 생성물에 필요한 경우, 이들의 원치않는 반응 참여를 피하기 위해 이들 관능기를 보호하는 것이 필요할 수 있다. 통상의 보호기는 표준 실무에 따라 사용될 수 있으며, 예를 들어 문헌 [T.W. Greene and P. G. M. Wuts in "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991]를 참조한다.
화학식 I의 화합물은 하기 반응식 I에서와 같은 절차에 의해 제조할 수 있다.
<반응식 I>
Figure 112012024375536-pct00004
식 중, R1, R2, R3, R4, R5, R7 및 Y는 <발명의 개요>에 정의된 바와 같고, P는 적합한 보호기 (예를 들어, MEM, MOM, SEM, R4SO2 등)이고, M은 이탈기 (예를 들어, 클로로, 브로모, 아이오도, 메탄술포닐옥시, p-톨루엔술포닐옥시 등)이다. 화학식 I의 화합물은 화학식 2의 화합물로부터 보호기 P를 제거하여 (예를 들어, P가 MEM, MOM 또는 SEM인 경우, 양성자성 용매, 예컨대 메탄올 또는 물의 존재 하에 강산, 예컨대 염화수소로 처리하거나; 또는 P가 제2 술포닐기 R4SO2인 경우, 임의로 공용매, 예컨대 톨루엔의 존재 하에 수성 또는 메탄올성 탄산나트륨 또는 탄산칼륨으로 처리함으로써) 합성할 수 있다.
화학식 2의 화합물은 적합한 용매 (예를 들어, DMF, DMSO 등) 및 적합한 염기 (예를 들어, 탄산칼륨, 수소화나트륨 등)의 존재 하에 화학식 3의 화합물을 화학식 4의 알킬화제와 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 0℃ 내지 약 150℃의 온도 범위에서 수행되며, 완결을 위해 약 24시간까지의 시간이 소요될 수 있다. 임의로, 반응 혼합물은 임의의 보호기를 제거하도록 추가로 반응시킨다.
화학식 I의 화합물은 또한 하기 반응식 II에서와 같은 절차에 의해 제조할 수 있다.
<반응식 II>
Figure 112012024375536-pct00005
식 중, R1, R2, R3, R4, R5 및 Y는 <발명의 개요>에 정의된 바와 같다. 화학식 I의 화합물은 적합한 염기 (예를 들어, 피리딘, 트리에틸아민, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘 등) 및 적합한 용매 (예컨대, 피리딘, 디클로로메탄, 2-메틸THF 등)의 존재 하에 화학식 5의 화합물을 화학식 6의 술포닐화 시약과 반응시킴으로써 합성할 수 있다. 상기 반응은 약 0℃ 내지 약 100℃의 온도 범위에서 수행되며, 완결을 위해 약 24시간까지의 시간이 소요될 수 있다. 임의로, 반응 혼합물은 임의의 보호기를 제거하도록 추가로 반응시킨다. 일부 경우에, 술포닐화 시약은 비스-술포닐 유도체를 생성하기 위해 2회 반응시킬 수 있다. 이러한 경우에, 비스-술포닐 화합물은, 임의로 공용매, 예컨대 톨루엔 또는 2-메틸THF의 존재 하에, 양성자성 용매, 예컨대 메탄올 또는 물의 존재 하에서 적합한 염기 (예를 들어, 수산화나트륨 또는 수산화칼륨, 또는 탄산나트륨 또는 탄산칼륨)로 처리함으로써 화학식 a의 화합물로 전환될 수 있다. 상기 반응은 약 20℃ 내지 약 100℃의 온도 범위에서 수행되며, 완결을 위해 약 24시간까지의 시간이 소요될 수 있다.
화학식 I의 화합물은 또한 하기 반응식 III에서와 같은 절차에 의해 제조할 수 있다.
<반응식 III>
Figure 112012024375536-pct00006
식 중, R1, R2, R3, R4, R5 및 Y는 <발명의 개요>에 정의된 바와 같고, R50은 이탈기 (예를 들어, 아이오도, 브로모, 클로로, 트리플루오로메탄-술포닐옥시 등)이고, 각각의 R'는 예를 들어 수소, 메틸 등일 수 있거나, 또는 2개의 R'기가 함께 합쳐져 시클릭 보로네이트 에스테르를 형성할 수 있다. 2개의 R90기는 각각 수소일 수 있거나, 또는 2개의 R90기가 함께 적합한 질소 보호기를 나타낼 수 있다 (예를 들어, 하나의 R90은 수소일 수 있고, 나머지는 BOC일 수 있음). 화학식 Ia의 화합물은, 적합한 전이 금속 촉매 (예를 들어, 테트라키스(트리페닐포스핀팔라듐)(0) 또는 PdCl2(dppf), 적합한 용매 (예를 들어, DME, 디옥산, 톨루엔, 에탄올 등) 및 적합한 염기 (예를 들어, 무수 탄산칼륨 또는 탄산나트륨 수용액 등)의 존재 하에 화학식 7의 화합물을 화학식 8의 화합물과 반응시킴으로써 합성할 수 있다. 상기 반응은 약 20℃ 내지 약 120℃의 온도 범위에서 수행되며, 완결을 위해 약 24시간까지의 시간이 소요될 수 있다. 임의로, 반응 혼합물은 임의의 보호기를 제거하도록 추가로 반응시킨다.
또한, 화학식 1의 화합물은, 화학식 7의 화합물을 화학식 8a의 화합물과 반응시켜 화학식 9의 화합물이 생성되는 유사한 스즈키 (Suzuki) 반응 프로토콜에 의해 제조할 수 있다. R90기의 탈보호에 이어서, 반응식 II에 대해 기재된 바와 같은 술포닐화 반응은 화학식 Ia의 화합물을 생성시킨다.
당업자는, 예를 들어 주석 시약 (스틸 (Stille) 커플링) 또는 아연 시약 (네기시 (Negishi) 커플링)을 사용하는 다른 유기금속 커플링 반응이 반응식 III에 기재된 보론 시약을 사용하는 스즈키 커플링 반응 대신에 이용될 수도 있음을 알 것이다.
화학식 7의 화합물은 하기 반응식 IV에서와 같은 절차에 의해 제조할 수 있다.
<반응식 IV>
Figure 112012024375536-pct00007
이 경우에서, M은 이탈기 (예를 들어, 클로로, 브로모, 아이오도, 메탄술포닐 등)이고, R50은 이탈기 (예를 들어, 아이오도, 브로모, 클로로, 트리플루오로메탄술포닐옥시 등)이고, R7은 <발명의 개요>에 정의된 바와 같다. 화학식 7의 화합물은 화학식 10의 아민 화합물을 화학식 11의 화합물과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 25 내지 약 120℃의 온도에서 용매, 예컨대 이소프로판올, DMSO, NMP 또는 디옥산 중에서 적합한 염기 (예를 들어, 트리에틸아민, 탄산칼륨 등)의 존재 하에 수행된다. 일부 경우에서, 새롭게 도입된 R1기의 추가 변환이 후속적으로 수행되어 목적하는 최종 의도한 R1기에 도달할 수 있다.
M이 메탄술포닐인 화학식 11의 화합물의 부분집합인 화학식 11a의 화합물은 하기 반응식 V에서와 같은 절차에 의해 제조할 수 있다.
<반응식 V>
Figure 112012024375536-pct00008
식 중, R7 및 R50은 <발명의 개요>에 정의된 바와 같다. 화학식 11a의 화합물은, 약 -78℃ 내지 약 50℃의 온도에서 화학식 12의 화합물을 적합한 산화 시스템 (예를 들어, 용매 디클로로메탄 중의 m-클로로퍼벤조산, 또는 수성 메탄올 중의 옥손 (Oxone)™ 등)과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 완결을 위해 약 24시간까지의 시간이 소요된다.
R50이 클로로, 브로모 또는 아이오도인 화학식 12의 화합물은 또한, 화학식 13의 아민 화합물을 적합한 디아조화 시약 시스템 (예를 들어, 구리 (I) 할라이드 염과 조합된 아질산, 아이오딘화구리 (I)/메틸렌 아이오다이드와 조합된 이소아밀 니트리트, 아세토니트릴 중의 보론 트리플루오라이드, 아이오딘 및 아이오딘화칼륨과 조합된 이소아밀 니트리트 등)과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 0 내지 약 80℃의 온도에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 6시간이 소요된다.
화학식 13의 화합물은 반응식 I에 대해 기재된 바와 같이, 화학식 14의 화합물을 화학식 3의 화합물과 반응시킴으로써 제조할 수 있다.
화학식 14의 화합물은 적합한 용매 (예를 들어, 에탄올 등) 중에서의 히드라진 또는 히드라진 염으로의 화학식 15의 엔아미노니트릴 화합물의 고리화에 의해 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 25 내지 약 100℃의 온도에서 수행되며, 완결을 위해 약 1시간 내지 약 24시간이 소요될 수 있다.
별법으로, 화학식 13의 화합물은, 화학식 15의 화합물과 일치환된 히드라진 R7NH-NH2와의 반응에 의해 한 단계 절차로 화학식 15의 화합물로부터 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 25 내지 약 100℃의 온도에서 수행되며, 완결을 위해 약 1시간 내지 약 24시간이 소요될 수 있다.
화학식 15의 화합물은 또한 약 50 내지 약 150℃의 온도에서, 임의로 공용매, 예컨대 DMF의 존재 하에 화학식 16의 화합물을 DMF DMA 또는 브레데렉 (Bredereck) 시약과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다.
화학식 16의 화합물은 적합한 불활성 용매 (예를 들어, 톨루엔 등) 중에서 화학식 17의 화합물을 적합한 산 (예를 들어, p-톨루엔술폰산 등)으로 처리함으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 50 내지 약 120℃의 온도에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다.
마지막으로, 화학식 17의 화합물은 약 25 내지 약 80℃의 온도에서 적합한 염기 (예를 들어, 수소화나트륨 등) 및 적합한 용매 (예를 들어, DMSO 등)의 존재 하에 4-클로로-2-(메틸티오)피리미딘을 tert-부틸 시아노아세테이트와 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다.
M이 할로겐인 화학식 11의 화합물의 부분집합인 화학식 11b의 화합물은 하기 반응식 VI에서와 같은 절차에 의해 제조할 수 있다.
<반응식 VI>
Figure 112012024375536-pct00009
식 중, R7 및 R50은 <발명의 개요>에 정의된 바와 같다. M이 할로겐인 화학식 11b의 화합물은, 화학식 20의 화합물을 적합한 디아조화 시약 시스템 (예를 들어, 구리 (I) 할라이드 염과 조합한 아질산, p-톨루엔술폰산과 조합한 아질산나트륨 및 아이오딘화칼륨)과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 0 내지 약 80℃의 온도에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 6시간이 소요된다. 별법으로, 0 내지 40℃에서 약 0.5 내지 약 6시간의 기간 동안 카르복실산 (예를 들어, 트리플루오로아세트산 등)의 존재 하에 화학식 20의 화합물을 디아조화 시약 (예를 들어, 아질산나트륨 등)으로 처리한 다음, 염기성 수용액 (예를 들어, 탄산칼륨 수용액 등)으로 처리하는 것은 화학식 21의 화합물 (이러한 화합물은 호변이성질체 형태로 존재할 수 있음)을 제공한다. 후속적으로, 약 50 내지 약 110℃의 온도에서 약 1 내지 약 72시간의 기간 동안 임의로 염기, 예컨대 N,N-디메틸아닐린 또는 DIPEA의 존재 하에, 및 임의로 불활성 용매 (예컨대, 아세토니트릴 또는 톨루엔) 및 첨가제 (예컨대, DMF)의 존재 하에 화학식 21의 화합물을 염소화제 (예를 들어, 옥시염화인 등)로 처리하는 것은, M이 염소인 화학식 11b의 화합물을 제공한다.
화학식 20의 화합물은 또한 약 50 내지 약 180℃의 온도에서 약 2 내지 약 48시간 동안, 임의로 적합한 용매 (예를 들어, sec-부탄올, NMP 등) 중에서, 염기 (예를 들어, 수산화리튬 등)의 존재 하에 화학식 22의 화합물을 구아니딘 또는 구아니딘 염 (예를 들어, 구아니딘 히드로클로라이드 또는 구아니딘 카르보네이트)과 반응시킴으로써 제조할 수 있다.
화학식 22의 화합물은, 약 50 내지 약 150℃의 온도에서 임의로 공용매, 예컨대 DMF의 존재 하에 화학식 23의 화합물을 DMF DMA 또는 브레데렉 시약과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 반응은 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다.
R50이 클로로, 브로모 또는 아이오도인 화학식 23의 화합물은 또한 화학식 24의 아민 화합물을 적합한 디아조화 시약 시스템 (예를 들어, 구리 (I) 할라이드 염과 조합된 아질산, p-톨루엔술폰산 및 아이오딘화칼륨과 조합된 아질산나트륨, 또는 보론 트리플루오라이드-THF, 아이오딘, 아이오딘화칼륨 및 아세토니트릴과 조합된 이소아밀니트리트)과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 0 내지 약 80 ℃의 온도에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 6시간이 소요된다.
화학식 24의 화합물은 또한, 약 0 내지 약 100℃의 온도에서 불활성 용매, 예컨대 THF, 에테르 또는 시클로프로필 메틸 에테르 중에서 화학식 25의 화합물을 유기금속 시약 (예컨대, 메틸리튬, 메틸리튬-브로민화리튬 착체 또는 메틸마그네슘 할라이드 시약)과 반응시킨 다음, 켄칭 수용액으로 처리함으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 완결을 위해 약 2 내지 약 48시간이 소요된다.
화학식 25의 화합물은 반응식 I에 기재된 바와 같이, 화학식 26의 화합물을 화학식 3의 화합물과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 별법으로, 화학식 25의 화합물은 화학식 27의 화합물 (여기서, 2개의 R"기는 함께 산-불안정한 보호기 (예를 들어, 벤질리덴과 같은 이민 또는 t-부틸카르바메이트와 같은 카르바메이트)를 형성함)로부터 제조할 수 있다. 상기 반응은, 약 25 내지 약 100℃의 온도에서 용매, 예컨대 에탄올 중에서 화학식 27의 화합물을 수성의 산성 시약 (예를 들어, 진한 염산 등)으로 처리함으로써 수행된다. 바람직하게는, 2개의 R"기는 함께, 벤질리딘과 같은 이민을 형성한다.
화학식 27의 화합물은 또한 화학식 28의 화합물을 화학식 29의 화합물 (여기서, 2개의 R"기는 함께 산-불안정한 보호기 (예를 들어, 벤질리덴과 같은 이민 또는 t-부틸카르바메이트와 같은 카르바메이트)를 형성함)와 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 25 내지 약 120℃의 온도에서 용매 (예를 들어, 톨루엔, 메탄올 또는 에탄올) 중에서, 임의로 촉매, 예컨대 DMAP의 존재 하에 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다. 임의로, 상기 반응은 약 -80 내지 약 25℃의 온도에서 약 0.5 내지 약 12시간의 기간에 걸쳐 염기 (예를 들어, n-부틸리튬 등)의 존재 하에 불활성 용매 (예를 들어, THF 등) 중에서 수행된다.
화학식 29의 화합물은 당업자에게 공지되어 있는 방법에 의해 제조할 수 있다. 예를 들어, 화학식 29의 화합물 (여기서, 2개의 R"기는 함께 벤질리덴기를 형성함)은, 약 25 내지 약 120℃의 온도에서 약 1 내지 약 24시간 동안 용매, 예컨대 에탄올 또는 톨루엔 중에서 벤즈알데히드를 일치환된 히드라진 R7NHNH2와 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 별법으로, 상기 반응은 일치환된 히드라진 염 (예를 들어, 히드로클로라이드 염 또는 옥살레이트 염 등)을 염기 (예를 들어, 아세트산나트륨 또는 트리에틸아민)와 함께 사용하여 수행할 수 있다.
화학식 8 또는 화학식 8a의 화합물은 하기 반응식 VII에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.
<반응식 VII>
Figure 112012024375536-pct00010
식 중, R2, R3, R4, R5 및 Y는 <발명의 개요>에 정의된 바와 같고, M은 이탈기 (예를 들어, 아이오도, 브로모, 클로로, 트리플루오로메탄술포닐옥시 등)이고, 각각의 R'는, 예를 들어 수소, 메틸 등일 수 있거나, 또는 2개의 R'기는 함께 합쳐져 시클릭 보로네이트 에스테르를 형성할 수 있다. 2개의 R90기는 각각 수소일 수 있거나, 또는 2개의 R90기는 함께, 적합한 질소 보호기를 나타낼 수 있다 (예를 들어, 하나의 R90은 수소일 있고, 나머지는 BOC일 수 있음). 화학식 8 또는 8a의 화합물은, 화학식 50 또는 화학식 50a의 화합물을 각각 적합한 용매 (예를 들어, 톨루엔, 디옥산 등) 중에서 적합한 전이 금속 촉매 (예를 들어, PdCl2(dppf)) 및 적합한 염기 (예를 들어, 아세트산칼륨 등)의 존재 하에 디보론 화합물 (예를 들어, 비스(피나콜레이토)디보론 등)과 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 20℃ 내지 약 120℃의 온도 범위에서 수행되며, 완결을 위해 약 24시간까지의 시간이 소모될 수 있다. 화학식 50의 화합물은 또한 반응식 II에 기재된 바와 같이 화학식 51의 화합물의 술포닐화에 의해 제조할 수 있다. 당업자는, 화학식 51 또는 화학식 50a의 화합물, 예를 들어 3-브로모아닐린 또는 N-BOC-보호된 3-브로모아닐린이 하기 실시예에 추가로 기재된 것들을 비롯한 (이에 한정되지는 않음) 다양한 방법에 의해 제조될 수 있음을 알 것이다.
화학식 70의 화합물은 하기 반응식 VIII에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.
<반응식 VIII>
Figure 112012024375536-pct00011
식 중, R8b는 <발명의 개요>에 정의된 바와 같고, R55는 C1 - 4알킬 또는 할로-치환된-C1 - 4알킬로부터 선택된다. 화학식 70의 화합물은, 약 25 내지 약 75℃의 온도에서 약 0.5 내지 약 12시간의 기간에 걸쳐 적합한 용매 (예를 들어, 에탄올 또는 에틸 아세테이트) 중에서 화학식 71의 화합물을 적합한 환원 시스템 (예를 들어, 팔라듐 촉매 상에서의 수소화 등)으로 처리함으로써 제조할 수 있다.
화학식 71의 화합물은 또한, 화학식 73의 화합물의 히드록시기를 적합한 이탈기로 전환시키는 단계, 이어서 아지드 음이온으로 치환시키는 단계로 이루어진 2 단계 방법에 의해 제조할 수 있다. 제1 단계에 대하여, 적합한 시약에는 적합한 염기, 예컨대 트리에틸아민과 조합한 삼브로민화인 또는 메탄술포닐 클로라이드가 포함된다. 상기 반응은 약 0 내지 약 50℃의 온도에서 적합한 용매 (예를 들어, 디클로로메탄 등) 중에서 수행된다. 제2 단계에 대하여, 치환은 약 25 내지 약 150℃의 온도에서 적합한 용매 (예를 들어, DMF 또는 DMSO) 중에서 아지드 시약 (예를 들어, 나트륨 아지드 등)으로 수행된다. 상기 반응은 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다. 별법으로, 상기 변환은 히드라조산 (아지드 염, 예컨대 나트륨 아지드 및 산으로부터 동일계에서 형성됨)의 존재 하에 화학식 73의 화합물을 포스핀 시약 (예를 들어, 트리페닐포스핀 등) 및 아조디카르복실레이트 시약 (예를 들어, 디에틸아조디카르복실레이트 등)으로 처리함으로써 한 단계로 수행될 수 있다. 상기 반응은 약 -80℃ 내지 약 75℃의 온도에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다.
화학식 73의 화합물은 화학식 74의 화합물을 클로로포르메이트 (예를 들어, 메틸 클로로포르메이트 등) 또는 또 다른 알콕시카르보닐화 시약, 예컨대 디-tert-부틸디카르복실레이트로 처리함으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 -80 내지 약 25℃의 온도에서 불활성 용매 (예를 들어, 디클로로메탄 등) 중에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 12시간이 소요된다. 임의로, 염기, 예컨대 트리에틸아민이 사용될 수 있다. 또한, 상기 반응은 약 25℃의 온도에서 약 2 내지 약 16시간의 기간 동안 용매 (예컨대, THF 또는 디옥산) 및 염기성 수용액 (예컨대, 중탄산나트륨 수용액)으로 이루어진 2상 시스템에서 수행될 수 있다.
화학식 70의 화합물은 또한 하기 반응식 IX에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다.
<반응식 IX>
Figure 112012024375536-pct00012
식 중, R8b는 <발명의 개요>에 기재된 바와 같고, R55는 C1-4알킬 또는 할로-치환된-C1-4알킬로부터 선택되고, R56은 적합한 보호기, 예를 들어 벤질옥시카르보닐 (CBz)이다. 화학식 70의 화합물은 화학식 75의 화합물의 탈보호에 의해 제조할 수 있다. 예를 들어, 화학식 70의 화합물은, R56이 Cbz인 화학식 75의 화합물을 약 25 내지 약 75℃의 온도에서 약 0.5 내지 약 12시간의 기간에 걸쳐 임의로 염화수소와 같은 산의 존재 하에, 적합한 용매 (예를 들어, 에탄올, 메탄올, MTBE 또는 에틸 아세테이트) 중에서 적합한 환원 시스템 (예를 들어, 팔라듐 촉매 상에서의 수소화 등)으로 처리함으로써 제조할 수 있다. 별법으로, 상기 탈보호는 적합한 수소 공여체, 예컨대 포름산, 암모늄 포르메이트 또는 1,4-시클로헥사디엔을 사용하여 전달 수소화 조건 하에 수행할 수 있다. 화학식 75의 화합물은 또한 화학식 76의 화합물을 클로로포르메이트 (예를 들어, 메틸 클로로포르메이트 등) 또는 또 다른 알콕시카르보닐화 시약, 예컨대 디-tert-부틸디카르복실레이트와 반응시킴으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 -80 내지 약 25℃의 온도에서 불활성 용매 (예를 들어, 디클로로메탄 등) 중에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다. 임의로, 염기, 예컨대 트리에틸아민이 사용될 수 있다. 또한, 상기 반응은 약 25℃의 온도에서 약 2 내지 약 16시간의 기간 동안 용매 (예컨대, THF 또는 디옥산) 및 염기성 수용액 (예컨대, 중탄산나트륨 수용액)으로 이루어진 2상 시스템에서 수행될 수 있다. 화학식 76의 화합물은 화학식 77의 화합물의 보호에 의해 제조될 수 있다. 상기 보호 조건은 화학식 76의 단일 이성질체를 우선적으로 또는 실질적으로 제공하도록 선택될 수 있다. 별법으로, 상기 조건은, 화학식 77의 단일 이성질체의 형성에 대한 선호도가 적거나 없지만 그럼에도 화학식 76의 화합물이 추가 사용에 충분한 순도로 단리될 수 있도록 선택할 수 있다. 이러한 순도를 얻는 수단에는 유리 염기 또는 염의 결정화가 포함될 수 있다. R56이 Cbz인 화학식 76의 화합물은 화학식 77의 화합물을 벤질 클로로포르메이트로 처리함으로써 제조할 수 있다. 상기 반응은 약 -80 내지 약 25℃의 온도에서 불활성 용매 (예를 들어, 디클로로메탄 등) 중에서 수행되며, 완결을 위해 약 1 내지 약 24시간이 소요된다. 임의로, 염기, 예컨대 트리에틸아민이 사용될 수 있다. 또한, 상기 반응은 약 25℃의 온도에서 약 2 내지 약 24시간의 기간 동안 용매 (예컨대, THF 또는 디옥산) 및 염기성 수용액 (예컨대, 중탄산나트륨 수용액)으로 이루어진 2상 시스템에서 수행될 수 있다. 화학식 77의 화합물의 염을 트리에틸아민 또는 탄산나트륨과 같은 염기와 함께, 유리 염기 대신의 투입물로서 사용할 수 있다.
당업자는, 화학식 70의 화합물이 단일 거울상이성질체 또는 거울상이성질체의 혼합물일 수 있고, 화학식 70의 단일 거울상이성질체 화합물은 화학식 74 또는 화학식 77의 적절한 단일 거울상이성질체 화합물로 출발함으로써 수득할 수 있다는 것을 알 것이다.
화학식 Ia의 화합물 합성의 상세한 예는 하기 실시예에서 발견할 수 있다.
본 발명 화합물의 추가적 제조 방법
본 발명의 화합물은 화합물의 유리 염기 형태를 제약상 허용되는 무기산 또는 유기산과 반응시킴으로써 제약상 허용되는 산 부가염으로서 제조할 수 있다. 별법으로, 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염기 부가염은 화합물의 유리 산 형태를 제약상 허용되는 무기 염기 또는 유기 염기와 반응시킴으로써 제조할 수 있다.
별법으로, 본 발명의 화합물의 염 형태는 출발 물질 또는 중간체의 염을 사용하여 제조할 수 있다.
본 발명의 화합물의 유리 산 또는 유리 염기 형태는 각각 상응하는 염기 부가염 또는 산 부가염 형태로부터 제조할 수 있다. 예를 들어, 산 부가염 형태의 본 발명의 화합물은 적합한 염기 (예컨대, 수산화암모늄 용액, 수산화나트륨 등)로 처리함으로써 상응하는 유리 염기로 전환될 수 있다. 염기 부가염 형태의 본 발명의 화합물은 적합한 산 (예컨대, 염산 등)으로 처리함으로써 상응하는 유리 산으로 전환될 수 있다.
산화되지 않은 형태의 본 발명의 화합물은 0 내지 80℃에서 적합한 불활성 유기 용매 (예를 들어, 아세토니트릴, 에탄올, 수성 디옥산 등) 중 환원제 (예를 들어, 황, 이산화황, 트리페닐 포스핀, 수소화붕소리튬, 수소화붕소나트륨, 삼염화인, 삼브로민화인 등)로 처리함으로써 본 발명의 화합물의 N-옥시드로부터 제조할 수 있다.
본 발명의 화합물의 전구약물 유도체는 당업자들에게 공지된 방법으로 제조할 수 있다 (예를 들어, 추가 상세 사항은 문헌 [Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985] 참조). 예를 들어, 적절한 전구약물은 유도체화되지 않은 본 발명의 화합물을 적합한 카르바밀화제 (예를 들어, 1,1-아실옥시알킬카르바노클로리데이트, 파라-니트로페닐 카르보네이트 등)와 반응시킴으로써 제조할 수 있다.
본 발명의 화합물의 보호된 유도체는 당업자들에게 공지된 수단으로 제조될 수 있다. 보호기의 생성 및 그의 제거에 적용할 수 있는 기술에 대한 상세한 설명은 문헌 [T. W. Greene, "Protecting groups in Organic Chemistry", 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999]에서 발견할 수 있다.
본 발명의 화합물은 용매화물 (예를 들어, 수화물)로서 편리하게 제조되거나, 또는 본 발명의 과정 동안 용매화물 (예를 들어, 수화물)로서 형성될 수 있다. 본 발명의 화합물의 수화물은 디옥신, 테트라히드로푸란 또는 메탄올과 같은 유기 용매를 사용하여 수성/유기 용매 혼합물로부터의 재결정화에 의해 편리하게 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 화합물의 라세미 혼합물을 광학 활성 분할제와 반응시켜 1쌍의 부분입체이성질체 화합물을 형성하고, 부분입체이성질체를 분리하고, 광학적으로 순수한 거울상이성질체를 회수함으로써, 이들의 개별 입체이성질체로서 제조될 수 있다. 거울상이성질체의 분할이 본 발명의 화합물의 공유 부분입체이성질체 유도체를 사용하여 수행될 수 있기는 하지만, 해리가능한 복합체가 바람직하다 (예를 들어, 결정질 부분입체이성질체 염). 부분입체이성질체는 독특한 물성 (예를 들어, 융점, 비점, 용해도, 반응성 등)을 갖고, 이러한 차이점을 이용함으로써 용이하게 분리될 수 있다. 부분입체이성질체는 크로마토그래피에 의해, 또는 바람직하게는, 용해도의 차이에 기초한 분리/분할 기술에 의해 분리될 수 있다. 이어서, 광학적으로 순수한 거울상이성질체는, 라세미화를 일으키지 않는 임의의 실시 수단에 의해 분할제와 함께 회수된다. 화합물의 라세미 혼합물로부터 화합물의 입체이성질체를 분할하기 위해 적용가능한 기술의 보다 상세한 설명은 문헌 [Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley And Sons, Inc., 1981]에서 발견할 수 있다.
요컨대, 화학식 I의 화합물은
(a) 반응식 I 내지 IX의 단계;
(b) 임의로는 본 발명의 화합물을 제약상 허용되는 염으로 전환시키는 단계;
(c) 임의로는 본 발명의 화합물의 염 형태를 염이 아닌 형태로 전환시키는 단계;
(d) 임의로는 본 발명의 화합물의 산화되지 않은 형태를 제약상 허용되는 N-옥시드로 전환시키는 단계;
(e) 임의로는 본 발명의 화합물의 N-옥시드 형태를 이의 산화되지 않은 형태로 전환시키는 단계;
(f) 임의로는 이성질체의 혼합물로부터 본 발명의 화합물의 개별 이성질체, 예를 들어 입체이성질체를 분할하는 단계;
(g) 임의로는 유도체화되지 않은 본 발명의 화합물을 제약상 허용되는 전구약물 유도체로 전환시키는 단계; 및
(h) 임의로는 본 발명의 화합물의 전구약물 유도체를 이의 유도체화되지 않은 형태로 전환시키는 단계
를 포함하는 방법에 의해 제조될 수 있다.
출발 물질의 제법이 구체적으로 기재되어 있지 않는다면, 그 화합물은 공지된 것이거나, 당업계에 공지된 방법과 유사하게 또는 하기 실시예에 개시된 바와 같이 제조될 수 있다.
당업자는 상기 변형이 단지 본 발명의 화합물의 제조 방법에 대한 대표적인 것일 뿐이고, 널리 공지된 다른 방법도 유사하게 이용될 수 있음을 인지할 것이다.
실시예
본 발명은 본 발명에 따른 화학식 I의 화합물의 제법을 설명하는 하기 중간체 및 실시예에 의해 추가로 예시되지만, 이에 한정되지는 않는다.
사용된 약어는 하기와 같다: 벤질옥시카르보닐 (Cbz); tert-부톡시카르보닐 (BOC); 세포 증식 (CP); 디클로로메탄 (DCM); N,N-디-이소프로필에틸아민 (DIPEA); [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센] 디클로로팔라듐(II) (PdCl2(dppf)); 1,2-디메톡시에탄 (DME); N,N-디메틸 아세트아미드 (DMA); N,N-디메틸아미노피리딘 (DMAP); N,N-디메틸 포름아미드 (DMF); N,N-디메틸 포름아미드 디메틸아세탈 (DMF DMA); 디메틸술폭시드 (DMSO); 에틸 아세테이트 (EtOAc); 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC); 이소프로필 아세테이트 (iPrOAc); 메탄술포닐 (Ms); 2-메틸테트라히드로푸란 (2-메틸THF); N-메틸피롤리디논 (NMP); 테트라히드로푸란 (THF); 박층 크로마토그래피 (TLC); 및 파라-톨루엔술폰산 (pTsOH).
중간체. 시아노-(2-메틸티오-피리미딘-4-일)-아세트산 tert-부틸 에스테르
Figure 112012024375536-pct00013
DMSO (100 ㎖) 중의 수소화나트륨 (7.15 g, 179 mmol, 오일 중 60％)의 현탁액에 tert-부틸 시아노아세테이트 (24.8 g, 170 mmol)를 23℃에서 첨가하였다. 수소의 발생이 중단된 후, 4-클로로-2-메틸티오피리미딘 (13.7 g, 85 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응물을 16시간 동안 80℃에서 가열시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 빙냉 포화 염화암모늄 (300 ㎖)으로 켄칭시켰다. 고체를 여과하고, 물 (2×200 ㎖)로 세척하였다. 헥산 300 ㎖를 상기 고체에 첨가하고, 현탁액을 60℃에서 1시간 동안 가열시킨 다음, 실온으로 냉각시켰다. 고체를 여과하고, 헥산으로 세척하여, 표제 화합물을 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00014
중간체. (2-메틸티오-피리미딘-4-일)-아세토니트릴
Figure 112012024375536-pct00015
무수 톨루엔 (100 ㎖) 중의 중간체 시아노-(2-메틸티오-피리미딘-4-일)-아세트산 tert-부틸 에스테르 (5.3 g, 20 mmol)의 용액에 p-톨루엔술폰산 (800 mg)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 8시간 동안 가열 환류시키고, 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 1 N 수산화나트륨 수용액 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (3:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00016
중간체. 4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민
Figure 112012024375536-pct00017
단계 1. 3-(디메틸아미노)-2-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)아크릴로니트릴. N,N-디메틸포름아미드 디메틸 아세탈 (30 ㎖)을 중간체 (2-메틸티오-피리미딘-4-일)-아세토니트릴 (2.62 g, 15.7 mmol)에 첨가하고, 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 냉각된 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 2. 4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민. 무수 에탄올 (75 ㎖) 중의 이전 단계 (전체량)로부터의 조질의 3-(디메틸아미노)-2-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)아크릴로니트릴과 히드라진 일수화물 (2.36 ㎖, 47 mmol)의 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (디클로로메탄 용리액 중 2 → 5％ 메탄올)로 정제하여, 4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민을 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00018
중간체. 1-이소프로필-4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민
Figure 112012024375536-pct00019
중간체 4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민 (10.0 g, 40 mmol)을 THF (200 ㎖) 중에 용해시킨 다음, 2-아이오도프로판 (6.3 ㎖, 63 mmol) 및 나트륨 메톡시드 (메탄올 중 25 중량％, 14.3 ㎖, 63 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소 분위기 하에 교반하면서 3일 동안 50℃에서 가열시킨 다음, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트 (200 ㎖) 중에 녹이고, 탄산칼륨 수용액 및 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜, 갈색 잔류물을 제공하였다. 잔류물을 실리카 겔 (헥산/에틸 아세테이트 용리액) 상에서 크로마토그래피하여, 1-이소프로필-4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민을 고체로서 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00020
1-에틸-4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민 및 1-메틸-4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민을 유사하게 제조하였다.
중간체. 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘
Figure 112012024375536-pct00021
중간체 1-이소프로필-4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1H-피라졸-3-아민 (4.0 g, 16.0 mmol), 이소펜틸니트리트 (13.2 g, 112 mmol) 및 메틸렌 아이오다이드 (30 ㎖)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열시켰다. 진공 하에 휘발성 물질을 제거하여 암색의 잔류물을 제공하였고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피 (2:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)에 의해 정제하여 표제 화합물을 고체로서 제공하였다; MS m/z: 361.1 (M + 1).
4-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘; 4-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘; 및 4-(3-아이오도-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘을 유사하게 제조하였다.
중간체. 4-(3-아이오도-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘
Figure 112012024375536-pct00022
3,4-디히드로-2H-피란 (1 ㎖) 중의 4-(3-아이오도-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘 (270 mg, 0.85 mmol) 및 p-톨루엔술폰산 일수화물 (32 mg, 0.17 mmol)의 용액을 60℃에서 5시간 동안 가열시켰다. 냉각된 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고, 혼합물을 물 및 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 (헥산 용리액 중 10％ 에틸 아세테이트) 상에서 크로마토그래피하여, 표제 화합물을 제공하였다. MS (m/z): 402.7 (M+1).
중간체. 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸술포닐)피리미딘
Figure 112012024375536-pct00023
디클로로메탄 (60 ㎖) 중의 중간체 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘 (4.51 g, 12.5 mmol)의 용액에 m-클로로퍼벤조산 (3.65 g, 77％ 순도, 16.3 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 질소 하에 3시간 동안 0℃에서 교반한 다음, 에틸 아세테이트로 희석시키고, 탄산칼륨 수용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜, 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸술포닐)피리미딘을 고체로서 제공하였다. MS m/z: 393.0 (M + 1).
4-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸술포닐)피리미딘 및 4-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸술포닐)피리미딘을 유사하게 제조하였다.
중간체. 1-벤질리덴-2-이소프로필히드라진
Figure 112012024375536-pct00024
50％ 에탄올 125 ㎖ 중의 무수 아세트산나트륨 (8.2 g, 0.1 mol)를 함유한 둥근 바닥 플라스크에 이소프로필히드라진 HCl 염 (11.1 g, 0.1 mol) 및 벤즈알데히드 (10.6 g, 0.1 mol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응물을 에테르 (3 x 250 ㎖)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 중탄산나트륨 수용액 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시키고, 톨루엔과 함께 동시 증발시켜 (3x), 표제 화합물을 오일로서 제공하였다. MS m/z 163.3 (M + 1).
에틸히드라진 옥살레이트로부터 출발하여, 에탄올 및 아세트산나트륨 대신에 각각 메탄올 및 트리에틸아민을 사용하여 1-벤질리덴-2-에틸히드라진을 유사하게 제조하였으며; 메틸히드라진으로부터 출발하여, 첨가된 염기 없이 용매로서 메탄올을 사용하여 1-벤질리덴-2-메틸히드라진을 유사하게 제조하였다.
중간체. 2-((2-벤질리덴-1-이소프로필히드라지닐)메틸렌)-말로노니트릴
Figure 112012024375536-pct00025
무수 THF 200 ㎖ 중의 중간체 1-벤질리덴-2-이소프로필히드라진 (12.9 g, 0.079 mol)의 용액을 아르곤 분위기 하에 드라이 아이스/아세톤 조에서 냉각시켰다. 이 용액에 n-부틸리튬 (헥산 중 1.6 M, 66 ㎖, 0.106 mol)을 시린지 (syringe)를 통해 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 혼합물을 드라이 아이스 온도에서 추가로 5분 동안 교반하였다. THF (30 ㎖) 중의 2-(에톡시메틸렌)말로노니트릴 (13.6 g, 0.11 mol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 드라이 아이스 온도에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 포화 중탄산나트륨 수용액으로 켄칭시켰다. 켄칭시킨 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 에탄올 중에서 초음파처리하며 현탁시켰다. 생성된 침전물을 여과를 통해 수집하고, 소량의 냉 에탄올로 세척하여, 2-((2-벤질리덴-1-이소프로필히드라지닐)메틸렌)말로노니트릴을 황색 고체로서 수득하였다. 모액을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 (1:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 추가의 2-((2-벤질리덴-1-이소프로필히드라지닐)메틸렌)말로노니트릴을 제공하였다. MS m/z 239.2 (M + 1).
중간체. 2-((2-벤질리덴-1-에틸히드라지닐)메틸렌)-말로노니트릴
Figure 112012024375536-pct00026
톨루엔 100 ㎖ 중의 2-(에톡시메틸렌)말로노니트릴 (15.2 g, 0.124 mol)의 용액에 중간체 1-벤질리덴-2-에틸히드라진 (18.4 g, 0.124 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 정치시켰으며, 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 추가로 16시간 동안 교반하였다. 침전물을 필터 상에서 수집하고, 소량의 냉 에탄올로 세척하여, 2-((2-벤질리덴-1-에틸히드라지닐)메틸렌)말로노니트릴을 고체로서 수득하였다.
2-((2-벤질리덴-1-메틸히드라지닐)-메틸렌)말로노니트릴을 유사하게 제조하였다.
중간체. 3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-카르보니트릴
Figure 112012024375536-pct00027
중간체 2-((2-벤질리덴-1-이소프로필히드라지닐)-메틸렌)말로노니트릴 (9.42 g, 40 mmol), 진한 염산 (5 ㎖) 및 에탄올 (50 ㎖)의 혼합물을 20분 동안 가열 환류시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 에테르 (50 ㎖)를 첨가하였다. 혼합물을 초음파처리한 다음, 상위의 에테르 층을 폐기하였다. 잔류물에 5 N 수산화나트륨 수용액 20 ㎖를 첨가하고, 혼합물을 디클로로메탄으로 추출하였다 (3x). 유기 층을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 (1:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-카르보니트릴을 갈색 고체로서 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00028
3-아미노-1-에틸-1H-피라졸-4-카르보니트릴 및 3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-4-카르보니트릴을 유사하게 제조하였다.
중간체. 1-(3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)에탄온
Figure 112012024375536-pct00029
무수 THF 200 ㎖ 중의 중간체 3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (5.29 g, 36.5 mmol)의 용액에 메틸마그네슘 브로마이드 용액 (에테르 중 3 M, 56.5 ㎖, 0.17 mol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 4시간 동안 가열 환류시켰다. 혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 10％ 염산 수용액을 사용하여 중성 pH로 켄칭시켰다. 반응물을 대량의 9:1 디클로로메탄/이소프로판올로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 (1:1 에틸 아세테이트/헥산 → 9:1 에틸 아세테이트/메탄올 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 담갈색 고체로서 수득하였다.
Figure 112012024375536-pct00030
1-(3-아미노-1-에틸-1H-피라졸-4-일)에탄온 및 1-(3-아미노-1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄온을 유사하게 제조하였다.
중간체. 1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)에탄온
Figure 112012024375536-pct00031
아세토니트릴 150 ㎖ 중의 중간체 1-(3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)에탄온 (3.97 g, 24 mmol) 및 p-TsOH.H2O (9.07 g, 48 mmol, 2 당량)의 용액에, 물 20 ㎖ 중의 아질산나트륨 (2.97 g, 43 mmol, 1.8 당량) 및 아이오딘화칼륨 (8.0 g, 48 mmol, 2.0 당량)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 상기 온도에서 10분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온되도록 하고, 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시킨 다음, 물로 희석시키고, 탄산나트륨 수용액을 사용하여 pH 9 내지 10으로 중화시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다 (3x). 합한 유기 층을 티오황산나트륨 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 (1:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 담갈색 고체로서 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00032
1-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)에탄온 및 1-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)에탄온을 유사하게 제조하였다.
중간체. 3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-온
Figure 112012024375536-pct00033
중간체 1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)에탄온 (5.0 g, 18.0 mmol)과 N,N-디메틸포름아미드 디메틸 아세탈 (50 ㎖)의 혼합물을 155℃에서 20시간 동안 가열시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜, 조질의 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z 334.0 (M + 1).
3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-온 및 3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-온을 유사하게 제조하였다.
중간체. 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-아민
Figure 112012024375536-pct00034
조질의 중간체 3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)프로프-2-엔-1-온 (4.0 g, 12.0 mmol), 구아니딘 히드로클로라이드 (2.63 g, 27.6 mmol), 수산화리튬 (635 mg, 27.6 mmol) 및 sec-부탄올 (50 ㎖)의 혼합물을, 110℃에서 20시간 동안 밀봉된 반응 용기에서 교반하며 가열시켰다. 냉각된 반응 혼합물을 농축시킨 다음, 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 에틸 아세테이트를 고체 잔류물에 첨가하고, 혼합물을 초음파처리하였다. 고체 생성물을 필터 상에서 수집하고, 에틸 아세테이트로 세정하고, 건조시켜, 표제 화합물을 황갈색 고체로서 수득하였다. MS m/z 330.0 (M + 1).
4-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-아민 및 4-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-아민을 유사하게 제조하였다.
중간체. 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-올
Figure 112012024375536-pct00035
아질산나트륨 (314 mg, 4.55 mmol)을 0℃에서, 중간체 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-아민 (500 mg, 1.52 mmol) 및 트리플루오로아세트산 (15 ㎖)의 교반 혼합물에 나누어 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 1시간 동안 교반한 다음, 용매를 진공 하에 제거하였다. 조질의 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시키고, 포화 탄산칼륨 수용액 및 염수로 세척하여, 표제 화합물을 고체로서 제공하였다. MS m/z 331.0 (M + 1).
4-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-올 및 4-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-올을 유사하게 제조하였다.
중간체. 2-클로로-4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘
Figure 112012024375536-pct00036
옥시염화인 (10 ㎖) 중의 중간체 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-올 (438 mg, 1.33 mmol)의 용액을 110℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 혼합물을 진공 하에 농축시킨 다음, 중탄산나트륨 수용액을 주의하여 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜, 표제 화합물을 황색 고체로서 수득하였다. MS m/z 349.0 (M + 1).
2-클로로-4-(3-아이오도-1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘 및 2-클로로-4-(3-아이오도-1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리미딘을 유사하게 제조하였다.
중간체. (S)-메틸 1-히드록시프로판-2-일카르바메이트
Figure 112012024375536-pct00037
THF-H2O (1:1, 650 ㎖) 중의 (S)-알라니놀 (10 g, 130 mmol) 및 중탄산나트륨 (32.8 g, 390 mmol)의 용액에 메틸 클로로포르메이트 (11.4 ㎖, 143 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 교반하고, 4시간에 걸쳐 실온으로 가온되도록 한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 1 N 수산화나트륨 수용액 및 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조질의 표제 화합물을 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS m/z 134.1 (M + 1).
(S)-알라니놀 대신에 (R)-알라니놀을 사용하여, (R)-메틸 1-히드록시프로판-2-일카르바메이트를 유사하게 제조하였으며; 메틸 클로로포르메이트 대신에 디-t-부틸-디카르보네이트를 사용하여, (S)-1,1-디메틸에틸 1-히드록시프로판-2-일카르바메이트를 유사하게 제조하였다.
중간체. (S)-메틸 1-아지도프로판-2-일카르바메이트
Figure 112012024375536-pct00038
무수 디클로로메탄 (100 ㎖) 중의 중간체 (S)-메틸 1-히드록시프로판-2-일카르바메이트 (2.65 g, 20 mmol) 및 트리에틸아민 (7.0 ㎖, 50 mmol)의 용액에 메탄술포닐 클로라이드 (1.91 ㎖, 23.9 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 1 N 수산화나트륨 용액 및 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 이어서, 조질의 메실레이트 생성물을 무수 DMF (70 ㎖) 중에 용해시키고, 나트륨 아지드 (5.2 g, 80 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하며 가열시켰다. 냉각된 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트와 염수 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피 (8:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, (S)-메틸 1-아지도프로판-2-일카르바메이트를 제공하였다. MS m/z 159.1 (M + 1).
(R)-메틸 1-아지도프로판-2-일카르바메이트 및 (S)-1,1-디메틸에틸 1-아지도프로판-2-일카르바메이트를 유사하게 제조하였다.
중간체. (S)-메틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트
Figure 112012024375536-pct00039
에틸 아세테이트 (200 ㎖) 중의 중간체 (S)-메틸 1-아지도프로판-2-일카르바메이트 (2.86 g, 18.2 mmol)의 용액에 탄소 상의 10％ 팔라듐 (습윤, 286 mg)을 첨가하였다. 플라스크를 탈기시키고, 수소 기체 (벌룬, 1 대기압)로 재충전하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하였다. 여액을 농축시켜, 조질의 (S)-메틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트를 수득하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다.
Figure 112012024375536-pct00040
(R)-메틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트 및 (S)-1,1-디메틸에틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트를 유사하게 제조하였다.
중간체. (S)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트
Figure 112012024375536-pct00041
이소프로판올 (30 ㎖) 및 디옥산 (20 ㎖) 중의 중간체 2-클로로-4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘 (1.4 g, 4.01 mmol), (S)-메틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트 (0.8 g, 6 mmol) 및 트리에틸아민 (2.8 ㎖, 20 mmol)의 용액을, 125℃에서 48시간 동안 밀봉된 용기에서 가열시켰다. 냉각된 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 수성 중탄산나트륨을 잔류물에 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 (1:2 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다. MS m/z 445.0 (M + 1).
(R)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트; (S)-tert-부틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트; 3-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판니트릴; 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-N-메틸피리미딘-2-아민; 및 N1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일)-N2,N2-디메틸에탄-1,2-디아민을 유사하게 제조하였다.
중간체. N-(3-브로모-2,4-디플루오로페닐)프로판-1-술폰아미드
Figure 112012024375536-pct00042
3-브로모-2,4-디플루오로아닐린 (4.16 g, 20 mmol, EP184384), n-프로판술포닐 클로라이드 (4.6 ㎖, 40 mmol), 피리딘 (8 ㎖), DMAP (97 mg) 및 DCM (100 ㎖)의 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 중탄산나트륨 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 수성 중탄산나트륨 및 염수로 세척하였다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (8:1 → 3:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다. MS m/z 313.9 (M + 1).
중간체. 3-플루오로-4-아이오도피리딘-2-아민
Figure 112012024375536-pct00043
무수 THF (40 ㎖) 중의 2-아미노-3-플루오로피리딘 (1.0 g, 8.9 mmol)의 용액을 -78℃에서 n-부틸리튬 (헥산 중 1.6 M, 13.9 ㎖, 22.3 mmol)으로 적가하며 처리하였다. 첨가 후, 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 다음, THF (20 ㎖) 중의 아이오딘 (10.2 g, 40.1 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기 추출물을 티오황산나트륨, 중탄산나트륨 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (8:1 → 2:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z 238.9 (M + 1).
3-클로로-4-아이오도피리딘-2-아민을 유사하게 제조하였다.
중간체. 3-브로모-2,5,6-트리플루오로아닐린
Figure 112012024375536-pct00044
마이크로파 튜브에 1-브로모-2,3,4,5-테트라플루오로벤젠 (1.0 g) 및 28％ 수성 수산화암모늄 (5 ㎖)을 첨가하였다. 혼합물을 마이크로파 조사 하에 150℃에서 2시간 동안 가열시킨 다음, 혼합물을 물에 붓고, 헥산으로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, MgSO4로 건조시킨 다음, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피 (9:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 무색 액체로서 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00045
중간체. 2,4-디브로모-3,6-디클로로아닐린
Figure 112012024375536-pct00046
2,5-디클로로아닐린 (0.2 g), N-브로모숙신이미드 (0.48 g) 및 THF (20 ㎖)의 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피 (8:2 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z: 318 (M+H)+.
중간체. 1,3-디브로모-2,5-디클로로벤젠
Figure 112012024375536-pct00047
2,4-디브로모-3,6-디클로로아닐린 (5.0 g), tert-부틸 니트리트 (3.3 g) 및 EtOH (50 ㎖)의 교반 혼합물을, 50℃에서 2시간 동안 밀봉된 튜브에서 가열시켰다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피 (헥산 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z: 303 (M+H)+.
중간체. 3-브로모-2-클로로-5-플루오로아닐린
Figure 112012024375536-pct00048
단계 1. 3-브로모-2-클로로-N-(디페닐메틸렌)-5-플루오로아닐린. 2,6-디브로모-4-플루오로-1-클로로벤젠 (865 mg, 3 mmol), 벤조페논 이민 (0.61 ㎖, 3.6 mmol), Pd2(dba)3 (137 mg, 0.15 mmol), 나트륨 t-부톡시드 (432 mg, 4.5 mmol), (S)-BINAP (280 mg, 0.45 mmol) 및 톨루엔 (30 ㎖)의 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기 상을 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 플래시 크로마토그래피 (40:1 → 20:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 분말로서 제공하였다. MS m/z 388.9 (M + 1).
단계 2. 3-브로모-2-클로로-5-플루오로아닐린. THF (20 ㎖) 중의 3-브로모-2-클로로-N-(디페닐메틸렌)-5-플루오로아닐린 (1.16 g)의 용액을 2 N 염산 (1.5 ㎖, 1 당량)으로 처리하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기 상을 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 잔류물을 실리카 겔 (40:1 → 15:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액) 상에서 크로마토그래피하여, 벤조페논으로 오염된 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z 223.9 (M + 1).
3-브로모-2,5-디클로로아닐린; 3-브로모-2-클로로-5-메틸아닐린; 및 3-브로모-2,5-디플루오로아닐린을 유사하게 제조하였다.
Figure 112012024375536-pct00049
중간체. 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조산
Figure 112012024375536-pct00050
2-브로모-4-클로로-1-플루오로벤젠 (4.31 g, 20 mmol)의 용액을 THF 중의 LDA (디이소프로필아민 (3.38 ㎖, 24 mmol) 및 n-BuLi (1.6 M, 13.1 ㎖, 21 mmol)로부터 제조됨)의 -78℃ 용액에 적가하였다. 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 캐뉼러를 통해 드라이 아이스와 THF (40 ㎖)의 -78℃ 교반 혼합물로 서서히 옮겼다 (약 30 내지 60분). 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 가온되도록 하였다 (기체 발생). 혼합물을 농축시킨 다음, 1 N 수산화나트륨 용액 50 ㎖로 처리하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (폐기됨)로 추출하였다. 수성 층을 1 N 염산으로 산성화시킨 다음, 클로로포름 (3 x 400 ㎖)으로 추출하였다. 클로로포름 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜, 조질의 표제 화합물을 제공하였다. 생성물은 소량의 이성질체 생성물 2-브로모-6-클로로-3-플루오로벤조산으로 오염되었다. 표제 화합물 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조산에 대한 1H NMR:
Figure 112012024375536-pct00051
3-브로모-2,6-디플루오로벤조산 및 3-브로모-2-플루오로-5-메틸벤조산을 유사하게 제조하였다.
중간체. tert-부틸 3-브로모-5-클로로-2-플루오로페닐카르바메이트
Figure 112012024375536-pct00052
1:1 t-부탄올/톨루엔 (25 ㎖) 중의 조질의 중간체 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조산 (2.03 g, 8 mmol), 디페닐포스포릴 아지드 (2.07 ㎖, 9.6 mmol, 1.2 당량) 및 DIPEA (1.67 ㎖, 9.6 mmol, 1.2 당량)의 용액을 110℃에서 36시간 동안 가열시켰다. 혼합물을 농축시킨 다음, 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (30:1 → 10:1 헥산/에틸 아세테이트 용리액)로 정제하여, 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z: 267.8 (M+H)+. (M-tBu).
tert-부틸 3-브로모-2,6-디플루오로페닐카르바메이트 및 tert-부틸 3-브로모-2-플루오로-5-메틸페닐카르바메이트를 유사하게 제조하였다.
중간체. 3-브로모-5-클로로-2-플루오로아닐린
Figure 112012024375536-pct00053
DCM/TFA (1:1, 20 ㎖) 중의 tert-부틸 3-브로모-5-클로로-2-플루오로페닐카르바메이트 (900 mg, 2.78 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시킨 다음, 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 녹이고, 수성 중탄산나트륨 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜, 조질의 표제 화합물 (736 mg)을 제공하였다. MS m/z 223.9 (M+1).
중간체. 5-브로모-3-메톡시-2-메틸아닐린
Figure 112012024375536-pct00054
4-브로모-2-메톡시-6-니트로톨루엔 (500 mg, 2.032 mmol), 아세트산 (20 ㎖) 및 철 (1135 mg, 20.32 mmol)의 불균일 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트를 첨가한 다음, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여액을 농축시켰다. 잔류물을 에틸 아세테이트와 포화 중탄산나트륨 수용액 사이에 분배하였다. 수성 층을 추가의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 상을 물 및 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜, 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z: 218.0 (M+H)+.
중간체. tert-부틸 5-클로로-2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트
Figure 112012024375536-pct00055
중간체 tert-부틸 3-브로모-5-클로로-2-플루오로페닐카르바메이트 (1.45 g, 4.46 mmol), 비스(피나콜레이토)디보론 (1.7 g, 6.69 mmol), 아세트산칼륨 (1.53 g, 15.6 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (163 mg, 0.22mmol) 및 디옥산 (100 ㎖)의 혼합물을, 100℃에서 16시간 동안 밀봉된 튜브에서 가열시켰다. 조질의 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 중에 녹이고, 중탄산나트륨 수용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조질의 화합물을 뜨거운 헥산 (600 ㎖)으로 희석시키고, 65℃로 30분 동안 가열시킨 다음, 실온으로 냉각시켰다. 갈색 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 케이크를 헥산으로 세척하였다. 합한 여액을 농축시켜, 조질의 표제 화합물을 황색 오일로서 제공하였다. MS m/z 233 (M-피나콜-tBu).
5-클로로-2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; tert-부틸 2,6-디플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트; N-(2,4-디플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)프로판-1-술폰아미드; 2-(2-플루오로-3-니트로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란; 2,5-디플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 2-클로로-5-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 2,5-디클로로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 2-클로로-5-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; tert-부틸 2-플루오로-5-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트; 3-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민; 2,3,6-트리플루오로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 3-클로로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민; 3-클로로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린; 3-메톡시-2-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린을 유사하게 제조하였다.
중간체. 2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린
Figure 112012024375536-pct00056
중간체 2-(2-플루오로-3-니트로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (500 mg), 탄소 상의 10％ 팔라듐 (50 mg) 및 에틸 아세테이트 (20 ㎖)의 혼합물을 수소 1 대기압 하에 16시간 동안 교반하였다. 혼합물에 질소를 분사하고, 여과하였다. 여액을 농축시켜 표제 화합물을 제공하였으며, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS m/z 237.1 (M + 1).
실시예 1
메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[2,6-디플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트 (표 1의 화합물 7)
Figure 112012024375536-pct00057
조질의 중간체 N-(2,4-디플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐)프로판-1-술폰아미드 (854 mg), 중간체 (S)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (350 mg, 90％ 순수한), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (90 mg), 2 M 탄산나트륨 수용액 (6 ml), 톨루엔 (50 ml) 및 에탄올 (6 ml)의 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 냉각된 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (70:1 → 40:1 DCM/메탄올 용리액)로 정제하여 표제 화합물을 제공하였다.
실시예 2
메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-클로로-5-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트 (표 1의 화합물 15)
Figure 112012024375536-pct00058
단계 1. (S)-메틸 1-(4-(3-(3-아미노-2-클로로-5-플루오로페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. 조질의 중간체 2-클로로-5-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린 (214 mg), 중간체 (S)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (68 mg, 0.14 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)-팔라듐(0) (16 mg), 2 M 탄산나트륨 수용액 (3 ml), 톨루엔 (18 ml) 및 에탄올 (3 ml)의 혼합물을 85℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (60:1 → 40:1 DCM/메탄올 용리액)로 정제하여 (S)-메틸 1-(4-(1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트로 오염된 표제 화합물 (46 mg)을 제공하였다. MS m/z 462.1 (M + 1).
단계 2. (S)-메틸 1-(4-(3-(2-클로로-5-플루오로-3-(메탄술폰아미도)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. 단계 1의 아닐린 생성물 (46 mg), 피리딘 (2 ml), 트리에틸아민 (1 mL), DCM (4 ml) 및 메탄술포닐 클로라이드 (23 μl, 0.3 mmol)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 조질의 반응 혼합물을 농축시킨 후, 잔류물을 톨루엔 (9 ml), 에탄올 (1 ml), 탄산나트륨 (2 g) 및 물 (10 ml)의 혼합물에 용해시켰다. 교반된 혼합물을 85℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 단계 1에서와 같은 후처리로 조 생성물을 제공하고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피 (60:1 → 40:1 DCM/메탄올 용리액)로 정제하여 표제 화합물을 제공하였다.
실시예 3
메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[5-클로로-2-플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트 (표 1의 화합물 1)
Figure 112012024375536-pct00059
단계 1. (S)-메틸 1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(tert-부톡시카르보닐아미노)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. 조질의 중간체 tert-부틸 5-클로로-2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트 (2.0 g), 중간체 (S)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (600 mg, 1.34 mmol), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (150 mg, 0.13 mmol), 2 M 탄산나트륨 수용액 (6.7 ml, 13.5 mmol), 톨루엔 (80 mL) 및 에탄올 (6 mL)의 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (80:1 → 60:1 DCM/메탄올 용리액)로 정제하여 트리페닐포스핀 옥시드로 오염된 표제 화합물을 제공하였다. MS m/z 562.1 (M + 1).
단계 2. (S)-메틸 1-(4-(3-(3-아미노-5-클로로-2-플루오로페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. DCM (50 mL) 및 TFA (20 mL) 중 일부 정제된 (S)-메틸 1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(tert-부톡시카르보닐아미노)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (1.15 g)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거한 후, 중탄산나트륨 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출한 후, 합한 유기 추출물을 중탄산나트륨 및 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 실리카 겔 크로마토그래피 (60:1 → 40:1 DCM/메탄올 용리액)로 생성물을 수득하였다; MS m/z 462.1 (M + 1).
단계 3. 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[5-클로로-2-플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트. (S)-메틸 1-(4-(3-(3-아미노-5-클로로-2-플루오로페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (41 mg, 0.09 mmol), 트리에틸아민 (1 ml) 및 DCM (4 ml)의 혼합물을 프로판술포닐 클로라이드 (40 mg, 0.27 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 조질의 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 톨루엔 (9 ml), 에탄올 (1 ml), 탄산나트륨 (2 g) 및 물 (10 ml)의 혼합물에 용해시켰다. 교반된 혼합물을 85℃에서 16시간 동안 가열시켰다. 단계 1에서와 같은 후처리로 조 생성물을 제공하고, 이를 실리카 겔 크로마토그래피 (60:1 → 40:1 DCM/메탄올 용리액)로 정제하여 표제 화합물을 제공하였다.
실시예 4
메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트 (표 1의 화합물 33)
및
메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트 (표 1의 화합물 31)
Figure 112012024375536-pct00060
단계 1. 5-클로로-2-플루오로-3-(4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)아닐린. 중간체 4-(3-아이오도-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(메틸티오)피리미딘 및 중간체 5-클로로-2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)아닐린으로부터 출발하여 실시예 3, 단계 1의 절차에 따라 제조하였다. MS m/z 420.0 (M + 1).
단계 2. N-(5-클로로-2-플루오로-3-(4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)페닐)메탄술폰아미드) 및 N-(5-클로로-2-플루오로-3-(4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)페닐)-N-(메틸술포닐)메탄술폰아미드. 디클로로메탄 (10 mL) 중 5-클로로-2-플루오로-3-(4-(2-(메틸티오)피리미딘-4-일)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-3-일)아닐린 (233 mg, 0.55 mmol) 및 트리에틸아민 (2 mL)의 용액에 메탄술포닐 클로라이드 (0.13 mL, 1.66 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하여, 표제 화합물의 혼합물을 제공하였다 (LCMS 분석). 에틸 아세테이트를 첨가하고, 혼합물을 물 및 염수로 세척한 후, 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조질의 표제 혼합물을 제공하고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. MS m/z 모노-술폰아미드 498.0 (M + 1); 비스-술폰아미드 576.0 (M + 1).
단계 3. 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트. 단계 2로부터의 조질의 생성물 혼합물을 THF-H2O (1:1, 30 mL)에 용해시키고, 실온에서 옥손(Oxone)® (1.68 g, 2.75 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반한 후, 에틸 아세테이트를 첨가하였다. 유기 층을 중탄산나트륨 수용액, 물 및 염수로 세척한 후, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조질의 잔류물을 NMP (5 mL)에 용해시키고, 중간체 (S)-메틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트 (146 mg, 1.1 mmol) 및 탄산나트륨 (233 mg, 2.2 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 교반하면서 가열시켰다. 냉각된 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석시킨 후, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (디클로로메탄 중 2％ 메탄올 용리액)하여 표제 화합물을 제공하였다.
단계 4. 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트. MeOH (15 mL) 중 메틸 (2S)-1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(메틸술폰아미도)페닐)-1-(테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (94 mg, 0.16 mmol)의 용액에 진한 염산 (0.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 수성 중탄산나트륨을 첨가하여 pH를 9로 조정하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 수성 중탄산나트륨 및 염수로 세척하였다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (30:1 → 15:1 디클로로메탄/메탄올 용리액)로 정제하여 표제 화합물을 제공하였다.
실시예 5
메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트 (표 1의 화합물 9)
Figure 112012024375536-pct00061
메탄술포닐 클로라이드 (0.277 mL, 3.57 mmol)를 DCM (30 mL) 및 피리딘 (10 mL) 중 (S)-메틸 1-(4-(3-(3-아미노-5-클로로-2-플루오로페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (550 mg, 1.2 mmol)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 중탄산나트륨 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 염수로 세척하였다. 유기 상을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피 (60:1 → 40:1 DCM/메탄올)로 정제하여 표제 화합물을 제공하였다. 다른 합성법은 하기 실시예 6에서 기술하였다.
또한, 반응 혼합물로부터 메틸 N-[(2S)-2-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로필]카르바메이트 (표 1의 화합물 32), N-{3-[4-(2-아미노피리미딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}메탄술폰아미드 (표 1의 화합물 30)를 단리하였다.
실시예 6
메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트 (표 1의 화합물 9)
Figure 112012024375536-pct00062
단계 1. 1-벤질리덴-2-이소프로필히드라진. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계 및 첨가 깔때기가 장착된 반응기로 이소프로필히드라진 염화수소 염 (712 g, 6.43 mol), 아세트산나트륨 (528 g, 6.43 mol) 및 50％ 에탄올 (4500 mL)을 충전하였다. 혼합물을 20℃에서 5분 동안 교반하였다. 배치 온도를 23℃ 미만으로 유지시키면서 벤즈알데히드 (683 g, 6.43 mol)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 20시간에 걸쳐 교반하였다. 톨루엔 (6500 mL)을 첨가하고, 5분 동안 교반을 유지하였다. 유기 층을 분리하였다. 포화 중탄산나트륨 수용액 (4800 mL)을 격렬히 교반된 유기 층에 서서히 첨가하였다 (주의: 수성 층의 pH는 약 8.0임). 유기 층을 분리하고, 포화 중탄산나트륨 수용액 (3000 mL)으로 세척하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 진공 (50 → 20 torr) 하에 40℃에서 농축시켜 표제 화합물을 황색 오일로 수득하였다 (추가 정제 없이 사용함).
단계 2. 2-((2-벤질리덴-1-이소프로필히드라지닐)메틸렌)-말로노니트릴. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계 및 첨가 깔때기가 장착된 플라스크에 (에톡시에틸리딘)말로노니트릴 (755 g, 6.18 mol), DMAP (150 g, 1.23 mol) 및 에탄올 (6400 mL)을 충전하였다. 혼합물을 교반하여 어두운 오렌지색 용액을 수득하고, 20℃에서 12℃로의 흡열이 관찰되었다. 1-벤질리덴-2-이소프로필히드라진 (1101 g, 조질)을 15분에 걸쳐 서서히 첨가하여 32℃로의 발열과 오렌지색 현탁액이 수득되었다. 상기 오렌지색 현탁액을 50℃로 가열시키고, 50℃에서 30분 동안 유지시켜 암갈색 현탁액을 수득하였다. 에탄올 (3200 mL)을 혼합물에 첨가하고, 상기 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 20℃에서 1시간 동안 유지시켰다. 슬러리를 여과하고, 고체 케이크를 에탄올 (3000 mL)로 세정하였다. 고체를 수집하고, 진공 하에 40℃/5 torr에서 3시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 황색 고체로 수득하였다. HPLC 순도 > 99％.
단계 3. 3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-카르보니트릴. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계, 응축기 및 첨가 깔때기가 장착된 플라스크에 2-((2-벤질리덴-1-이소프로필히드라지닐)메틸렌)-말로노니트릴 (632.6 g, 2.65 mol), MeOH (2.5 L) 및 진한 (12 N) HCl (329.0 mL, 3.94 mol)을 충전하였다. 혼합물을 63℃로 가열시키고, 63℃에서 30분 동안 유지시켜 오렌지색 용액을 수득하였다. 혼합물을 15℃로 냉각시켰다. 헵탄 (4 L) 및 MTBE (1 L)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 이어서, 물 (7.5 L)을 15℃ 내지 25℃에서 30분에 걸쳐 계속 첨가하였다. 물 첨가가 완료된 후, 혼합물을 10분 동안 25℃에서 교반하였다. 헵탄/MTBE 층을 분리하였다. 수성 층을, 10분 동안 25℃에서 각각의 세척액을 교반함으로써 (4:1 v/v) 헵탄/MTBE 혼합물 (2 x 5 L)로 세척하였다. 층들을 분리하였다. 고체 염화나트륨 (1 Kg)을 수성 층에 첨가하였다. 이어서, 포화 탄산칼륨 수용액을 수성 층에 서서히 첨가하여 CO2 발생을 제어하고, pH를 약 9.0으로 조정하였다. 이어서, 수성 층을 CH2Cl2 (1 x 2.2 L, 1 x 800 mL)로 2회 추출하였다. 합한 CH2Cl2 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 잔류물 무게가 약 1 Kg이 될 때까지 여액을 30℃의 배쓰 온도에서 진공 (200 torr) 하에 농축시켰다. 헵탄 (6.0 L)을 CH2Cl2 용액에 교반하면서 서서히 (약 20분에 걸쳐) 첨가하였고, 슬러리가 형성되었다. 잔류물 부피가 약 6.2 L가 될 때까지 혼합물을 진공 (60 torr) 하에 25℃의 내부 온도에서 농축시켰다. 슬러리를 15℃로 냉각시키고, 상기 온도에서 10분 동안 유지시켰다. 생성물을 여과하고, 고체를 헵탄 (1 L)으로 세척하였다. 고체를 진공 (5 torr) 하에 30℃에서 4시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 황색 고체로 수득하였다. HPLC 순도 > 99％.
단계 4. 1-(3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-에탄온. 기계적 교반기, 온도계, 환류 응축기, 가열/냉각 능력, 첨가 깔때기 및 질소 주입구/배출구가 장착된 플라스크에 3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-카르보니트릴 (274 g, 1.82 mol) 및 시클로펜틸 메틸 에테르 (2600 mL)를 20℃에서 질소 하에 충전하였다. 현탁액을 -10℃로 냉각시켰다. 디에틸 에테르 용액 (6.0 L, 9.00 mol) 중 1.5 M 메틸리튬/브로민화리튬 착체를 2.5시간에 걸쳐 -10℃ 내지 0℃에서 적가하였다. 메틸리튬 첨가가 완료되었을 때, 반응 현탁액을 5℃ 내지 10℃로 빠르게 가온시키고, 상기 온도 범위에서 1시간 동안 유지시켰다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 2 N HCl (6.0 L)을 5-10℃에서 적가하였다. (상부) 유기 층을 분리하고, 2 N HCl (500 mL)로 추출하였다. 합한 수성 층을 실온에서 16시간에 걸쳐 교반하였다. 혼합물을 15℃로 냉각시키고, 50％ NaOH (260.0 g)로 염기성화하여 약 11.0의 pH를 얻었다. 혼합물을 CH2Cl2 (1 x 2.0 L, 1 x 1 L)로 추출하였다. 합한 CH2Cl2 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 황색 고체 (278 g)를 수득하였다. 고체를 65℃로 가열시킨 후, EtOAc (750 mL)에 용해시켰다. 용액을 실온으로 냉각시키고, 슬러리를 수득하였다. 헵탄 (1500 mL)을 실온에서 40분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 슬러리를 -10℃로 냉각시키고, -10℃에서 30분 동안 유지시켰다. 슬러리를 여과하고, 필터 케이크를 헵탄 (300 mL)으로 세정하였다. 고체를 진공 (5 torr) 하에 40℃에서 3시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 담갈색 고체로 수득하였다. HPLC 순도 > 99％. M.P. 136-139℃.
단계 5. 1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-에탄온. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계 및 첨가 깔때기가 장착된 플라스크를 1-(3-아미노-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-에탄온 (250.0 g, 1.49 mol) 및 아세토니트릴 (3725 mL)로 충전하였다. 혼합물을 -20℃로 냉각시켰다. 내부 온도를 -10℃ 미만으로 유지시키면서 BF3.THF (313.1 g, 2.23 mol)를 적가하였다. 내부 온도를 -10℃ 미만으로 유지시키면서 이소아밀 니트리트 (227.5 g, 1.94 mol)를 적가하였다. 혼합물을 10℃로 가온시키고, 10℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 10-15℃에서 I2 (28.5 g, 0.112 mol), KI (371.9 g, 2.24 mol) 및 아세토니트릴 (1160 mL)의 혼합물을 함유한 플라스크에 격렬히 교반하면서 약한 흐름으로 첨가하였다. 첨가로 인해 질소 기체 및 약간의 발열이 발생하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. HPLC 결과, 디아조늄 중간체가 남아 있지 않은 것으로 나타났다. 이어서, 8％ 염화나트륨 용액 (4360 mL) 중 중아황산나트륨 (157.1 g, 1.51 mol)을 15-20℃에서 첨가하였다. 포화 탄산칼륨을 사용하여 혼합물을 pH 약 8.5로 염기성화하였다. 상부 아세토니트릴 층을 분리하고, 진공 하에 농축시켜 오일성 잔류물을 수득하였다. 오일을 iPrOAc (2770 mL)에 용해시키고, 포화 탄산나트륨 수용액 (1100 mL)으로 세척하였다. iPrOAc 층을 분리하고, 약 1.5 L의 잔류 부피로 농축시켰다. 현탁액을 수득하였다. 현탁액에 헵탄 (5.5 L)을 30분에 걸쳐 20℃에서 첨가하였다. 헵탄 첨가가 완료된 후, 현탁액을 10분 동안 20℃에서 교반하였다. 슬러리를 여과하고, 고체를 헵탄 (1 L)으로 세정한 후, 20℃에서 진공 (5 torr) 하에 16시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다. MP: 90-92℃.
단계 6. 3-(디메틸아미노)-1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-프로프-2-엔-1-온. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계 및 첨가 깔때기가 장착된 플라스크에 1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-에탄온 (640 g, 2.30 mol) 및 DMF (6.4 L)를 충전하였다. 수득한 오렌지색 용액을 120℃로 가열시켰다. 브레데렉 시약 (598.6 g, 3.43 mol)을 한 번에 첨가하였다. 첨가로 인해 배치 온도가 114℃로 감소하고, 용액의 색상이 보다 어두운 오렌지색으로 변하였다. 혼합물을 120℃에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시킨 후, 5 mmHg, 60℃에서 농축시켜 오일성 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 74℃로 가온시켜 iPrOAc (2400 mL)에 용해시켰다. 혼합물을 35℃로 냉각시키고, 교반하여 슬러리를 수득하였다. 헵탄 (6000 mL)을 35℃ 내지 실온에서 1시간에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 -15℃로 냉각시키고, 여과하고, 고체를 진공 하에 40℃에서 3시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 고체로 수득하였다. HPLC 순도 > 98％. MP: 106-109℃.
단계 7. 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-피리미딘-2-아민. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계, 딘-스탁 트랩 (Dean-Stark trap) 및 응축기가 장착된 플라스크에 (E)-3-디메틸아미노-1-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-프로프-2-엔-1-온 (735 g, 2.2 mol), 구아니딘 카르보네이트 (596 g, 3.3 mol) 및 NMP (5200 mL)를 충전하였다. 혼합물을 130℃로 가열시키고, 130℃에서 5시간 동안 유지시켰다 (주의: 임의의 저비점 분획물을 딘-스탁 트랩으로 수집함). 혼합물을 80℃로 냉각시키고, 15％ 수성 염화나트륨 (7500 mL)을 80℃ 내지 35℃에서 약 1시간에 걸쳐 첨가하였다. 수성 염화나트륨의 첨가를 통해 생성물이 대략 절반 정도 침전되기 시작하였다. 혼합물을 실온으로 추가 냉각시키고, 30분 동안 유지시켰다. 고체 생성물을 여과하여 수집하고, 진공 하에 65℃에서 16시간 동안 건조시켜 표제 화합물을 고체로 수득하였다. HPLC 순도 > 99％. MP: 167-169℃.
단계 8. 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-피리미딘-2-올. 기계적 교반기 및 온도계가 장착된 플라스크를 질소 퍼징 하에 TFA (748.8 mL)로 충전하였다. 빙수조를 이용하여 내부 온도를 30℃ 미만으로 유지시키면서 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-피리미딘-2-아민 (300 g, 0.91 mol)을 고체로서 나누어서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하여 용액을 수득하였다. 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 아질산나트륨 (79.7 g, 1.27 mol)을 22-28℃에서 5시간에 걸쳐 빠르게 교반하면서 나누어서 첨가하였다 (주의: 일부 기체 발생이 관찰되고, 냉수조를 이용하여 용이하게 제어되는 약한 발열이 있음). DCM (12 L)을 첨가하고, 혼합물을 27℃로 가온시켰다. 물 (4400 mL)을 첨가하였다 (주의: 시작시 기체 발생). 포화 탄산칼륨 용액 (약 1500 mL)을 혼합물에 서서히 첨가하여 pH 약 9.0으로 염기성화하였다 (주의: 다량의 기체가 발생함). 혼합물에 물 (100 mL) 중 중아황산나트륨 (32 g, 0.30 mol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 27℃에서 15분 동안 교반하고, pH를 약 9.0으로 재조정하였다. DCM 층을 분리하고, 잔류물 무게가 약 2300 g (약 1750 mL)이 될 때까지 진공 (200-100 mmHg) 하에 40℃의 배쓰 온도에서 농축시켰다. 20℃에서 잔류물에 MTBE (1500 mL)를 첨가하였다. 혼합물울 20℃에서 10분 동안 교반한 후, 여과하였다. 고체를 16시간 동안 30℃에서 진공 (5 torr) 하에 건조시켜 표제 화합물을 회백색 고체로 수득하였다. HPLC 순도 > 99％. MP: 216-218℃.
단계 9. 2-클로로-4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-피리미딘. 교반기, 온도계, 응축기, 첨가 깔때기 및 질소 주입구/배출구가 장착된 플라스크에 4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-피리미딘-2-올 (311 g, 942 mmol)을 충전하였다. 20℃에서 상기 고체에 아세토니트릴 (2500 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 교반하여 현탁액을 수득하였다. 현탁액에 DIPEA (246.2 mL, 1.41 mol) 및 이어서 DMF (218.8 mL, 2.83 mol)를 첨가하였다. 수득한 현탁액을 5분 동안 20℃에서 교반하였다. 현탁액에 POCl3 (217 g, 1.41 mol)을 20-40℃에서 첨가하여 오렌지색 용액을 수득하였다. 혼합물을 80℃로 가온시키고, 80℃에서 3시간 동안 유지시켰다. 혼합물을 10℃로 냉각시키고, 탈이온수 (5550 mL) 중 수산화암모늄 (622 mL, 28％)의 용액을 20℃ 미만의 온도를 유지시키면서 1.5시간에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 수산화암모늄의 첨가가 완료된 후, 수득한 현탁액을 40분 동안 10-20℃에서 교반하였다. 고체 생성물을 여과하여 수집하고, 밤새 40℃에서 진공 (5 torr) 하에 건조시켜 표제 화합물을 갈색 고체로 수득하였다. HPLC 순도 > 99％.
단계 10. (S)-벤질 2-(메톡시카르보닐아미노)프로필카르바메이트. 디클로로메탄 (500 mL) 중 (S)-1,2-디아미노프로판 디히드로클로라이드 (50 g, 340 mmol)의 현탁액에 탄산칼륨 (1190 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 교반하고, 여과하여 여액을 수집하였다. 여액을 0-5℃로 냉각시키고, 벤질 클로로포르메이트 (51 ml, 357 mmol)를 적가하면서 교반하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 혼합물을 3시간 동안 0-5℃에서 교반한 후, 실온으로 가온시키고, 실온에서 밤새 교반하였다. 상기 혼합물에 트리에틸아민 (71 ml, 510 mmol)을 적가하고, 혼합물을 0-5℃로 냉각시켰다. 메틸 클로로포르메이트 (28 ml, 357 mmol)를 0-5℃에서 서서히 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온시키고, 밤새 교반하였다. 혼합물을 물에 부었다. 유기 휘발성 물질을 진공 하에 제거하였다. 수득한 수성 슬러리를 여과하여 고체를 수집한 후, 필터 케이크를 에틸 아세테이트로 세척하여 백색 고체를 제공하였다 (65 g, 92-94％ HPLC 순도). 에틸 아세테이트로부터 여러 번 재결정화하여 표제 화합물을 백색 고체로 제공하였다. HPLC 순도 99.5％.
단계 11. (S)-메틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트 염산 염. 메탄올 중 (S)-벤질 2-(메톡시카르보닐아미노)프로필카르바메이트의 용액을 50-60 psi에서 5％ 팔라듐/C 촉매 상에서 수소화하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축시켜 무색 오일을 수득하였다. 무색 오일 60 g을 무수 디클로로메탄 200 mL에 용해시키고, 용액을 빙수조에서 0-5℃로 냉각시켰다. 메탄올 중 HCl의 용액 (약 75 mL)을 용액의 pH가 1 미만이 될 때까지 적가하였다. 수득한 현탁액을 0-5℃에서 30분 동안 교반한 후, 고체를 여과를 통해 수집하였다. 고체를 디클로로메탄 및 이어서 헥산으로 세척하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다.
단계 12. 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤즈알데히드. 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘 (327 g, 98％, 2.274 mol) 및 THF (1.9 L, HPLC 등급)의 용액을 아르곤 분위기 하에 -75℃ (드라이 아이스-메탄올 배쓰)로 냉각시켰다. 1.6 M n-BuLi/헥산 용액 (1.47 L, 2.35 mol)을 -72 내지 -67℃에서 1시간에 걸쳐 상기 혼합물에 서서히 첨가하였다. 혼합물을 -72 내지 -67℃에서 30분 동안 교반하여 담황색 현탁액을 수득하였다. 2-브로모-4-클로로-1-플루오로벤젠 (435 g, 97％, 2.02 mol)을 -72 내지 -67℃에서 30분에 걸쳐 혼합물에 서서히 첨가한 후, 상기 혼합물을 추가 30분 동안 -72 내지 -67℃에서 교반하였다. 디메틸포름아미드 (230 g, 99.5％, 3.14 mol)를 -70 내지 -65℃에서 30분에 걸쳐 혼합물에 서서히 첨가한 후, 상기 혼합물을 -70 내지 -65℃에서 30분 동안 교반하여 담갈색 용액을 수득하였다. 냉각조를 제거한 후, 포화 염화암모늄 용액 (720 mL)을 -60 내지 -30℃에서 15분에 걸쳐 배치에 첨가하여 흐린 혼합물을 수득하였다. 상기 혼합물에 6 N 염산을 -30 내지 10℃에서 15분에 걸쳐 빠르게 첨가하여 pH 1이 되게 한 후, 에틸 아세테이트 (2.0 L)를 10 내지 20℃에서 첨가하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트 (1 x 300 mL)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물 (1 x 800 mL) 및 염수 (1 x 500 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하였다. 여액을 진공 (60-65℃) 하에 농축시켜 표제 화합물을 황갈색 점성 오일로 수득하였고, 이는 방치한 지 수 시간 후에 고체화되었다. 1H NMR (CDCl3): δ 7.76-8.30 (m, 2H), 10.0-10.8 (br s, 1H); MS m/z 238.0 (M+1).
단계 13. 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조산. 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤즈알데히드 (415 g), tert-부탄올 (1.2 L) 및 물 (1.2 L)의 교반 혼합물을 30℃로 가온시킨 후, 과망간산칼륨 (335 g, 2.12 mol)을 40-45℃에서 1시간에 걸쳐 배치에 (5회 나누어서) 첨가하였다. 암자색 내용물을 45-50℃에서 30분, 50-55℃에서 30분 및 55-60℃에서 30분 동안 단계적으로 가열시켜 자색-갈색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 20℃로 냉각시킨 후, 포화 아황산나트륨 용액을 음성 과산화물 시험물이 얻어질 때까지 22-27℃에서 첨가하였다. 온수 (2.5 L, 약 50℃) 및 포화 탄산나트륨 용액 (100 mL)을 상기 혼합물에 15분에 걸쳐 순차적으로 첨가하였다. 어두운 색의 현탁액을 1 cm 셀라이트 베드를 통해 여과하고, 필터 케이크를 온수 (4 x 1 L, 약 50℃)로 세척하였다. 합한 여액을 6 N 염산 용액을 사용하여 pH 1로 산성화시켜 황색 오일성 현탁액을 수득하였다. 에틸 아세테이트 (3 L)를 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. (상부) 유기 층을 물 (1.2 L)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 (60-65℃) 하에 농축시켜 진황색 현탁액을 수득하였다. 헥산 (700 mL)을 잔류물에 첨가하고, 현탁액을 5-10℃로 냉각시켰다. 고체를 여과하여 수집하고, 필터 케이크를 진공 (65℃) 하에 밤새 건조시켜 표제 화합물을 황색 고체로 수득하였다.
Figure 112012024375536-pct00063
단계 14. tert-부틸 3-브로모-5-클로로-2-플루오로페닐카르바메이트. 3-브로모-5-클로로-2-플루오로벤조산 (243 g, 97.5％, 0.935 mol), 트리에틸아민 (105 g, 99.5％, 1.02 mol) 및 tert-부탄올 (1.4 L)의 혼합물을 74℃로 가열시켰다. 톨루엔 (960 mL) 중 디페닐포스포릴 아지드 (260 g, 97％, 0.916 mol)의 용액을 75-79℃에서 1시간에 걸쳐 (적당히 환류시키면서) 혼합물에 서서히 첨가하였다. 혼합물을 30분에 걸쳐 83℃로 서서히 가열시키고, (적당히 환류시키면서) 1시간 동안 83-84℃에서 유지시켰다. 내용물을 진공 (65-70℃) 하에 점성 오일로 농축시켰다. 톨루엔 (2 L) 및 물 (1.5 L)을 배치에 순차적으로 첨가한 후, 혼합물을 35℃에서 15분 동안 교반하였다. 수성 층을 폐기하였다. 유기 층을 포화 중탄산나트륨 용액 (400 mL) 및 물 (400 mL)로 세척하였다. 유기 층을 진공 (60-65℃) 하에 약 350 mL 잔류물로 농축시켰다 (약 94％ 순도). 10％ 에틸 아세테이트/헥산 (약 1.2 L, v/v)을 배치에 첨가한 후, 혼합물을 50℃에서 15분 동안 가열시켜 담황색 균일 용액을 수득하였다. 에틸 아세테이트/헥산 용액을 4-L 파이렉스 (Pyrex) 부흐너 깔때기 (조질의 프릿화된 디스크를 가짐, 40-60 μm, 직경 16 cm, 높이 18 cm) 상의 미리 만들어진 실리카 겔 (1.8 kg, 70-200 메쉬)/헥산 베드로 옮겼다. t-부틸 카르바메이트 생성물을 3-5％ 에틸 아세테이트/헥산 (총 부피 약 5 L, v/v)으로 서서히 (중력에 의해) 용리시켜 표제 화합물을 회백색 고체로 수집하였다.
Figure 112012024375536-pct00064
단계 15. (S)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계 및 응축기가 장착된 4구 플라스크에 2-클로로-4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)-피리미딘 (300.0 g), (S)-메틸 1-아미노프로판-2-일카르바메이트 염산 염 (174.3 g), 탄산나트륨 (365.7 g) 및 DMSO (2400 mL)를 충전하였다. 혼합물을 90℃의 내부 온도에서 18시간 동안 교반하면서 가열시켰다. 혼합물을 40℃로 냉각시켰다. 톨루엔 (3870 mL)을 37-43℃에서 교반하면서 첨가하였다. 물 (7200 mL)을 37-43℃에서 첨가하였다. 톨루엔 층을 37-43℃에서 분리하였다. 상기 톨루엔 층에 15％ 염화나트륨 수용액 (3870 mL)을 첨가하고, 37-43℃에서 10％ 시트르산 수용액을 첨가하여 수성 층의 pH를 약 5.0으로 조정하였다. pH 조정에는 약 20 mL의 10％ 수성 시트르산이 필요하였다. 이어서, 톨루엔 층을 포화 중탄산나트륨 수용액 (2880 mL)으로 37-43℃에서 세척하였다. 표제 화합물을 함유한 톨루엔 층을 단계 17의 투입물로서 사용하였다.
단계 16. tert-부틸 5-클로로-2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트. 질소 퍼징 하에 기계적 교반기, 온도계, 응축기 및 가열막이 장착된 플라스크에 tert-부틸 3-브로모-5-클로로-2-플루오로페닐카르바메이트 (33.0 g), 비스(피나콜레이토)디보론 (447.0 g), 아세트산칼륨 (405.6 g) 및 톨루엔 (2700 mL)을 충전하였다. 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반하고, PdCl2(dppf) (50.4 g)를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 108±2℃로 가열시켰다 (주의: 혼합물이 50-60℃에서 어두운 색으로 변함). 톨루엔 (1770 mL) 중 tert-부틸 3-브로모-5-클로로-2-플루오로페닐카르바메이트 (414 g)의 용액을 108±2℃에서 70분에 걸쳐 첨가하였다. 혼합물을 108±2℃에서 15시간 동안 유지시켰다. 혼합물을 질소 흐름 하에 실온으로 냉각시킨 후, 셀라이트를 통해 여과하였다. 표제 화합물을 함유한 여액을 단계 17의 투입물로서 사용하였다.
단계 17. (S)-메틸 1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(tert-부톡시카르보닐아미노)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. 플라스크에 (S)-메틸 1-(4-(3-아이오도-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (3870 ml의 톨루엔 용액, 약 382 g, 0.861 mol) 및 tert-부틸 5-클로로-2-플루오로-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페닐카르바메이트 (4470 ml의 톨루엔 용액, 약 467.0 g, 1.26 mol)를 충전하였다. 수득한 갈색 용액에 물 (1400 mL) 중 탄산나트륨 (349.8 g, 3.30 mol)의 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물에 PdCl2(dppf) (34.5 g, 0.047 mol)를 첨가하였다. 혼합물을 교반하면서 80℃로 가온시키고, 상기 온도에서 2시간 동안 유지시켰다. 혼합물을 40℃로 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액 내 층들을 분리하였다. 표제 화합물을 함유한 톨루엔 층을 바로 단계 18의 투입물로서 사용하였다.
단계 18. (S)-메틸 1-(4-(3-(3-아미노-5-클로로-2-플루오로페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. 플라스크에 (S)-메틸 1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(tert-부톡시카르보닐아미노)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (약 7.3 L의 톨루엔 용액, 약 483.3 g, 0.86 mol)를 20℃에서 질소 분위기 하에 충전하였다. 상기 용액에 12 N HCl (574.3 mL, 6.95 mol)을 약 20분에 걸쳐 25℃ 미만의 온도를 유지시키면서 첨가하였다. HCl 첨가로 인해 19℃에서 24℃로의 발열이 일어났다. 혼합물을 20-23℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 물 (3100 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 20℃에서 교반하였다. 수성 층을 분리하고, 2-메틸THF (3100 mL)로 세척하였다. 수성 층에 포화 탄산칼륨 수용액 (약 778 mL)을 서서히 첨가하였다. 수성 층의 pH는 약 8.5였다. 수성 층을 2-메틸THF (3825 mL)로 추출하였다. 2-메틸THF 층을 진공 (60 mmHg, 40℃) 하에 농축시켰다. 잔류물을 2-메틸THF (약 3800 mL)로 희석시켜 표제 화합물의 용액을 제공하고, 이를 바로 단계 19의 투입물로서 사용하였다. HPLC 순도: 95％.
단계 19. (S)-메틸 1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(N-(메틸술포닐)메틸술폰아미도)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트. 플라스크에 (S)-메틸 1-(4-(3-(3-아미노-5-클로로-2-플루오로페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (약 3.8 L의 메틸THF 용액, 약 396.5 g, 0.86 mol)를 20℃에서 충전하였다. 상기 용액에 트리에틸아민 (435.0 g, 4.3 mol)을 첨가하였다. 용액을 0 내지 -5℃로 냉각시켰다. 상기 용액에 메탄술포닐 클로라이드 (246.0 g, 2.15 mol)를 20분에 걸쳐 0 내지 -5℃에서 교반하면서 적가하였다. 혼합물을 18-20℃로 가온시키고, 상기 온도에서 20분 동안 유지시켰다. 반응 혼합물에 물 (2115 mL)을 30분에 걸쳐 18-20℃에서 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 혼합물을 10분 동안 20℃에서 교반하였다. 이어서, 2 N HCl (약 1230 mL)을 사용하여 pH를 6.0 내지 6.5로 조정하였다. 이어서, 포화 중탄산나트륨 수용액을 사용하여 pH를 7-7.5로 조정하였다. 혼합물을 10분 동안 20℃에서 교반하였다. 층들을 분리하였다. 표제 화합물을 함유한 2-메틸THF 층을 단계 20에서 바로 사용하였다.
단계 20. 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트. 플라스크에 (S)-메틸 1-(4-(3-(5-클로로-2-플루오로-3-(N-(메틸술포닐)메틸술폰아미도)페닐)-1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리미딘-2-일아미노)프로판-2-일카르바메이트 (약 3.8 L의 메틸THF 용액, 약 531.5 g, 0.86 mol)를 충전하였다. 상기 용액에 3 N 수성 수산화나트륨 (1782.8 mL, 5.34 mol)을 15-20℃에서 교반하면서 첨가하였다. 혼합물을 20-23℃에서 30분에 걸쳐 격렬히 교반하고, 교반을 멈추었다. 수성 층을 폐기하였다. 2 N HCl (약 410 mL)을 유기 층에 첨가하여 pH를 6.0-6.5로 조정한 후, 포화 중탄산나트륨 수용액 (약 300 mL)을 첨가하여 pH를 약 8.5로 조정하였다. 수성 층을 폐기하였다. 유기 층을 15％ 염화나트륨 수용액 (2000 mL)으로 세척하였다. 유기 층을 진공 (80 torr) 하에 45℃의 배쓰 온도에서 농축시켜 갈색 용액 (780 g)을 수득하였다. 상기 용액을 2-메틸THF (3500 mL)로 희석시킨 후, 2-메틸THF (1 L) 중 PICA HP 120N 활성 탄소 (90 g, CDH858)의 현탁액을 첨가하였다. 수득한 흑색 현탁액을 60℃로 가온시키고, 60℃에서 16시간 동안 유지시켰다. 16시간 동안 유지시킨 후의 Pd 함량은 309 ppm이었다. 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 셀라이트 패드 (2-메틸THF로 미리 습윤됨)를 통해 여과하였다. 반응 플라스크를 2-메틸THF (500 mL)로 세정하였다. 이어서, 상기 세정액을 PICA/셀라이트의 필터 케이크를 통해 부었다. 여액에 PL-TMT 수지 (90 g)를 첨가하였다. 수득한 현탁액을 교반하면서 60℃로 가열시키고, 상기 온도에서 4시간 동안 유지시켰다. 60℃에서 4시간 후의 Pd 함량은 2.3 ppm이었다. 혼합물을 20℃로 냉각시키고, 20℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드 (2-메틸THF로 미리 습윤됨)를 통해 여과하였다. 여액을 진공 (100-80 torr) 하에 40-45℃에서 농축시켜 오렌지색 오일을 수득하였다. 상기 잔류 오일을 78℃로 가온시켜 200 프루프 에탄올 3 L에 용해시켰다. 이어서, 수득한 투명한 오렌지색 용액을 3시간에 걸쳐 20℃로 냉각시켰고, 침전물이 형성되었다. 이어서, 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 0℃에서 1시간 동안 유지시켰다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 에탄올 (300 mL)로 세척하였다. 고체를 14시간 동안 40℃에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다; MP: 186 - 189℃.
하기 표 1의 화합물을 적절한 출발 물질을 사용하여 상기 실시예와 유사하게 제조하였다.
<표 1>
Figure 112012024375536-pct00065
Figure 112012024375536-pct00066
Figure 112012024375536-pct00067
Figure 112012024375536-pct00068
Figure 112012024375536-pct00069
Figure 112012024375536-pct00070
Figure 112012024375536-pct00071
Figure 112012024375536-pct00072
Figure 112012024375536-pct00073
Figure 112012024375536-pct00074
Figure 112012024375536-pct00075
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실시예 122
B-Raf V600E/Mek 증폭된 발광 근접성 동질 검정 (B-Raf V600E 생화학적 검정)
B-Raf (V600E; 4 pM) 및 비오티닐화된 Mek (사멸 키나제; 10 nM)를 검정 완충액 (50 mM 트리스, pH 7.5, 15 mM MgCl2, 0.01％ BSA 및 1 mM DTT)에서 2X 최종 농도로 합하고, 100％ DMSO에 희석시킨 40X 본 발명의 화합물 0.5 μl를 함유한 검정 플레이트 (그라이너 (Greiner) 백색 384웰 검정 플레이트 #781207)에 웰 당 10 μl씩 분배하였다. 상기 플레이트를 실온에서 60분 동안 인큐베이션하였다.
검정 완충액에 희석시킨 2X ATP (10 μM)를 웰 당 10 μl씩 첨가하여 B-Raf 키나제 활성 반응을 개시하였다. 3시간 후, 중지 시약 (60 mM EDTA, 0.01％ 트윈20 (Tween20))을 첨가하여 반응을 중지시켰다. 토끼 항-p-MEK (셀 시그널링 (Cell Signaling), #9121) 항체 및 알파 스크린 (Alpha Screen) IgG (단백질A) 검출 키트 (퍼킨엘머 (PerkinElmer) #6760617R)를 사용하여 비드 완충액 (50 mM 트리스, pH 7.5, 0.01％ 트윈20) 중 항체 (1:2000 희석) 및 검출 비드 (비드 모두 1:1000 희석)의 혼합물을 웰 당 30 μl씩 첨가함으로써 인산화 생성물을 측정하였다. 암 조건 하에 첨가를 수행하여 검출 비드를 빛으로부터 보호하였다. 플레이트의 상부에 뚜껑을 두고, 상기 플레이트를 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 퍼킨엘머 인비젼 (PerkinElmer Envision) 장치 상에서 발광을 판독하였다. 50％ 억제에 대한 각 화합물의 농도 (IC50)를 XL 피트 (XL Fit) 데이터 분석 소프트웨어를 이용하여 비-선형 회귀로 계산하였다.
유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본 발명의 화합물은, 예를 들어 본 출원에 기재된 시험관내 시험에 의해 나타난 바와 같이 유용한 약리학적 특성을 나타내었다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 V600E B-Raf에 대해 1 x 10-10 내지 1 x 10-5 M의 범위, 바람직하게는 500 nM, 250 nM, 100 nM 및 50 nM 미만의 IC50을 나타내었다.
예를 들어, 발광 근접성 동질 검정에서의 본 발명의 몇몇 화합물에 대한 IC50 데이터를 상기 표에 나타내었다.
실시예 123
A375 세포 증식 검정 (A375 CP)
A375는 B-Raf V600E 돌연변이를 갖는 흑색종 세포주이다. 루시페라제를 발현하도록 설계된 A375-luc 세포를 10％ FBS를 함유한 DMEM 중 1,500개 세포/50 μl/웰로 384-웰 백색 투명 바닥 플레이트에 플레이팅하였다. 적합한 농도로 100％ DMSO에 용해시킨 본 발명의 화합물을 로봇식 핀 툴 (Pin Tool)을 이용하여 세포로 옮겼다 (100 nl). 세포를 25℃에서 2일 동안 인큐베이션한 후, 브라이트글로 (BrightGlo)TM 25 μl를 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 발광에 의해 판독하였다. 50％ 억제에 대한 각 화합물의 농도 (IC50)를 XL 피트 데이터 분석 소프트웨어를 이용하여 비-선형 회귀로 계산하였다.
유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본 발명의 화합물은, 예를 들어 본 출원에 기재된 시험관내 시험에 의해 나타난 바와 같이 유용한 약리학적 특성을 나타내었다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 야생형 및 V600E B-Raf에 대해 500 nM, 250 nM, 100 nM 및 50 nM 미만의 범위의 IC50을 나타내었다.
예를 들어, A375 세포 증식 검정에서의 본 발명의 몇몇 화합물에 대한 IC50 데이터를 상기 표에 나타내었다.
실시예 124
면역검정
세포를 조직 배양물-처리된 플레이트에 96-웰 당 30 x 103개 세포의 밀도로 1640 RPMI + 10％ FBS 중에서 시딩하고, 이어서 37℃ 및 5％ CO2에서 24시간 동안 인큐베이션한 후, 화합물을 첨가하였다. 시험 화합물을 DMSO에서 순차적으로 희석시킨 후, 상기 세포에 첨가하고 (0.1％의 최종 DMSO 농도), 37℃ 및 5％ CO2에서 3시간 동안 인큐베이션하였다. 샌드위치 면역검정 키트 (메조 스케일 디스커버리 (Meso Scale Discovery))를 사용하여 pMEK 및 pERK 수준을 측정하였다. 배양물 상등액을 제거하고, 차가운 용해 완충액 (키트로 제공됨)을 30분 동안 서서히 진탕하면서 첨가하여 세포를 용해시켰다. pMEK1/2 (Ser217/221) 및 pERK1/2 (Thr/Tyr202/204, Thr/Tyr185/187)의 검출을 위해, 용해물을 블로킹된 항체-코팅된 플레이트 (키트와 함께 제공됨)에 첨가하고, 4℃에서 밤새 진탕하면서 인큐베이션하였다. 플레이트를 세척하고, 제공된 표지 항체를 이용하여 인단백질을 검출하고, 섹터 (Sector) 6000 장치 상에서 이를 판독하였다.
실시예 125
SW620 세포 생존력 검정
SW620 세포를 벽이 검고 바닥이 투명한 조직 배양물-처리된 플레이트에 96-웰 당 1500개 세포의 밀도로 1640 RPMI + 10％ FBS 중에서 시딩하였다. 시험 화합물을 DMSO에서 순차적으로 희석시킨 후, 상기 세포에 첨가하고 (0.1％의 최종 DMSO 농도), 37℃ 및 5％ CO2에서 4일 동안 인큐베이션하였다. 세포 생존력을 측정하기 위해서, 세포 플레이트를 실온이 되게 하고, 배양 배지를 제거하고, 셀 타이터 글로 시약 (프로메가 (Promega), 제조업자의 프로토콜에 따라 혼합한 후 성장 배지로 1:2 희석시킨 키트 성분) 200 μl를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 5분 동안 진탕한 후, 실온에서 5분 동안 인큐베이션하고, 발광을 측정하였다 (트리룩스 (Trilux), 퍼킨 엘머).
실시예 126
Rat1 연질 아가로스 검정
Rat1 세포를 96-웰 당 1000개 세포의 밀도로 1％ 아가로스 (론자 (Lonza))에 현탁시켰다. 아가로스/세포 혼합물을 고체화하였다. 시험 화합물을 DMSO에서 순차적으로 희석시킨 후, 아가로스 세포 혼합물의 상부에 첨가하고 (0.2％의 최종 DMSO 농도), 37℃ 및 5％ CO2에서 인큐베이션하였다. 17일 후, 세포를 알마르블루 (alamarBlue) (TREK 다이아그노스틱스 (TREK Diagnostics))와 함께 인큐베이션하고, 스펙트라맥스 (Spectramax) 플레이트 판독기 (몰레큘라 디바이시스, 인크 (Molecular Devices, Inc); 562 nm에서 측정된 흡광도)로 대사 활성을 측정하여 콜로니 성장을 측정하였다.
실시예 127
간 마이크로솜 청소율 검정
화합물의 간 대사 안정성과 관련된 잠재적 위험성을 평가하기 위해서 시험관내 마이크로솜 청소율 검정을 고안하였다. 시험 화합물 (1 μM)을 100 mM 인산칼륨 완충액 중 다양한 종 (마우스, 래트, 원숭이, 개 및 인간)으로부터의 간 마이크로솜 (0.5 mg/mL) 및 NADPH (1 mM)와 함께 37℃에서 인큐베이션하였다. 특정 반응 시점 (0, 5, 10 및 30분)에서, 반응 분취물을 제거하고, 질량 분석 내부 표준물을 함유한 빙냉 아세토니트릴을 첨가하여 반응을 종결시켰다. 샘플을 원심분리하고, 상등액을 LC-MS/MS로 분석하였다. 시험관내 대사 반감기 (t1/2, 분) 및 내인성 청소율 (intrinsic clearance; CLint, μL/분/mg)은 반응 혼합물로부터의 모 화합물의 소실에 의해 측정되는 바와 같이 시험 화합물의 대사 속도 및 정도에 기초하였다. 이들 값을 비교하여 간 대사 청소율 (CLh, mL/분/kg) 및 추출률 (ER, 종에서의 간 혈류에 대한 예상되는 간 대사 청소율의 비로 표현됨)을 예상할 수 있었다. 일반적으로, 시험관내에서 높은 예상 CLint 또는 ER을 갖는 화합물이 생체내에서 노출-제한 대사에 대해 위험성이 높은 것으로 여겨진다.
본 발명의 몇몇 화합물에 대해 측정된 추출비를 하기 표에 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00077
Figure 112012024375536-pct00078
실시예 128
A549 p38α MAP 키나제 브라이트-글로 리포터 유전자 검정
A549 세포를 IL-8 프로모터-유도된 리포터인 pGL3-IL8-Luc를 이용하여 안정적으로 형질감염시켰다. 상기 세포를 384-웰 순수 백색 플레이트 (40 μl/웰, 5％CD-FBS, 1xP/S, DMEM)에 4 x 105/ml로 플레이팅하고, 37℃에서 밤새 (18 내지 20시간) 인큐베이션하였다. 시험 화합물을 DMSO로 순차적으로 희석시킨 후, 시험 용액 50 nl를 인큐베이션물에 첨가하였다 (0.1％의 최종 DMSO 농도). 시험 화합물과 함께 30분 동안 인큐베이션한 후, 세포를 1 ng/ml IL-1 베타 (웰 당 10 μl의 5 ng/ml 용액)로 자극하였다. 자극 7 내지 8시간 후, 브라이트-글로 (25 μl/웰)를 첨가하여 루시퍼라제 발현을 측정하였다. 본 발명의 몇몇 화합물에 대한 IC50 데이터를 하기 표에 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00079
Figure 112012024375536-pct00080
실시예 129
생체내 약동학 검정
완전한 약동학 연구: 수컷 Balb/c 마우스 (n=3, 체중 22-25 g) 또는 수컷 위스타 (Wistar) 래트 (n=3, 체중 250-300 g)에 시험 화합물을 외측 꼬리 정맥을 통해 정맥내 투여하거나 또는 위관영양법을 통해 경구 투여하였다. 제제는 통상 75％ PEG300 및 25％ D5W 중의 화합물 2.5 mg/mL 용액이었다. 각각 50 μL의 혈액 샘플 6개를 투여후 24시간 동안 순차적으로 수집하였다. 혈액 샘플을 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 혈장 샘플을 LC-MS/MS로 분석 및 정량화하였다.
신속한 약동학 연구: 수컷 Balb/c 마우스 (n=3, 체중 22-25 g) 또는 수컷 위스타 래트 (n=3, 체중 250-300 g)에 시험 화합물을 외측 꼬리 정맥을 통해 정맥내(IV) 투여하거나 또는 위관영양법을 통해 경구(PO) 투여하였다. 제제는 통상 75％ PEG300 및 25％ D5W 중의 화합물 2.5 mg/mL 용액이었다. 각각 50 μL의 혈액 샘플 6개를 투여후 24시간 동안 순차적으로 수집하였다. 투여 경로 당 각 시점에서의 3마리 동물에 대해 혈액 샘플을 원심분리하고, 혈장을 분리하여 모았다. 혈장 샘플을 LC-MS/MS로 분석 및 정량화하였다.
완전한 및 신속한 약동학 연구 둘 다에 대해, 윈논린 (Winnonlin) 5.0 소프트웨어 (파사이트 (Pharsight), 미국 캘리포니아주 마운티 뷰 소재)를 이용하여 비-구획 회귀 분석에 의해 다음의 파라미터를 계산하였다: 혈장 청소율 (Cl), 혈장 최대 농도 (Cmax), 농도-시간-곡선-하-혈장 면적 (AUC0-inf) 및 경구 생체이용률％ (F％).
본 발명의 몇몇 화합물에 대한 마우스에서의 약동학 파라미터를 하기 표에 제공하였다.
Figure 112012024375536-pct00081
Figure 112012024375536-pct00082
Figure 112012024375536-pct00083
유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 화학식 I의 화합물은, 예를 들어 본 출원에 기재된 시험관내 및 생체내 시험에 의해 나타난 바와 같이 유용한 약리학적 특성을 나타내었다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물은 바람직하게는 A375 CP 세포 증식 검정에서 250 nM 또는 이보다 양호한 범위, 바람직하게는 200 nM, 150 nM, 100 nM 및 50 nM 미만의 IC50을 나타내었다.
R1에서의 2-(메톡시카르보닐아미노)-1-프로필 기는 p38을 비롯한 다른 키나제에 대해 바람직한 수준의 활성 및 선택성을 제공한다. 예를 들어, 활성의 30배 초과 증가는 A375 IC50이 각각 2 nM 및 76 nM인 화합물 9 및 29 사이에서 존재한다.
화학식 Ib의 화합물의 R5 위치에서의 플루오로 또는 클로로, 및 R3 위치에서의 플루오로, 클로로 또는 메틸을 이용한 페닐 치환 패턴이 대사 안정성 (인간 및 마우스에서의 ER)에 대해 최적이다. 예를 들어, 각각 < 0.21 및 0.69인 화합물 9 및 6의 ER (인간)을 비교한다.
R1에서의 2-(메톡시카르보닐아미노)-1-프로필 기, R3/R5 치환 패턴 및 R4에서의 메틸 기의 조합은 전체 약물 노출 (AUC)에 대해 놀라운 효과를 갖는다. 예를 들어, 10 mg/kg의 경구 용량에서 AUC가 30±4 μM*시간인 화합물 9를 (화합물 1, 3, 4, 6 및 7과 비교하여) 참조한다.
실시예 130
생체내 효능 - 14일 A375 마우스 이종이식 모델
A375 세포를 5％ CO2를 갖는 37℃ 인큐베이터에서 멸균 조건 하에 2 내지 4주 동안 성장시켰다. 10％ FBS가 보충된 RPMI-1640 배지에서 세포를 배양하였다. 세포를 0.05％ 트립신/EDTA와 함께 주 2회 계대배양하였다. 이식 당일에 세포를 HBSS (행크 평형 염 용액 (Hank's Balanced Salt Solution))에서 수거하였다. 제1일에 암컷 Nu/Nu 마우스 (찰스 리버 (Charles River), 연구 개시 시점에 10-11주령)의 우측 옆구리에 50％ 마트리겔 (matrigel) 0.2 mL 중 5x106개 A375 세포/마우스를 피하주사 (SQ)로 이식하였다. 이식 후 제19일에 마우스를, 평균 종양 부피가 215 mm3이고 평균 체중이 24 g인 6개의 그룹 (그룹 당 마우스 9마리)으로 무작위화하였다. 시험 화합물 (목적하는 투여 수준을 달성하기에 적합한 농도로 제제화된 화합물)을 투여 당 0.2 mL의 투여 부피를 이용하여 제19일에 시작해 14일 동안 1일 2회 투여하였다. 임상 관찰을 매일 실시하였다. 종양 부피 및 체중을 주 2회 측정하였다. 종점: 최초 체중의 25％를 초과하는 체중 감소가 관찰되고/거나 종양 부피가 3000 mm3를 초과하는 임의의 개별 동물 또는 그룹.
화합물 9 (20％ PEG300/3％ ETPGS/77％ 물에서 제제화됨)를 하기 투여 처방계획을 이용하여 상기 프로토콜에 따라 투여하였다.
그룹 1: 비히클, qd x14
그룹 2: 1 mg/kg 화합물 9, bid x14
그룹 3: 3 mg/kg 화합물 9, bid x14
그룹 4: 10 mg/kg 화합물 9, bid x14
그룹 5: 20 mg/kg 화합물 9, bid x14
최초 투여한 지 14일 후에 종양 부피를 평가하였다. 일부 반응은 대조군 종양 성장의 20-50％ 종양 성장을 갖는 것으로 규정하였다. 안정한 질환은 최초 종양 크기의 +/-20％ 이내의 최종 종양 부피를 갖는 것으로 규정하였다. 일부 퇴행은 최초 종양 부피의 80％ 미만의 최종 종양 부피를 갖는 것으로 규정하였다.
그룹 2: 일부 반응
그룹 3: 안정한 질환
그룹 4: 일부 퇴행
그룹 5: 일부 퇴행
본원에 기재된 실시예 및 실시양태가 단지 설명 목적을 위한 것이고, 이러한 측면에서 다양한 변형 및 변경이 당업자들에게 시사될 것이며, 상기 변형 및 변경이 본 출원의 취지 및 범위, 및 첨부된 특허청구범위의 범주 내에 포함된 것임을 이해해야 한다. 본원에 인용된 모든 문헌, 특허 및 특허 출원은 모든 목적을 위해 본원에 참고로 포함된다.

Claims (24)

  1. 하기 화학식 Ia의 화합물, 또는 그의 호변이성질체, 입체이성질체 또는 제약상 허용되는 염.
    <화학식 Ia>
    Figure 112013109518798-pct00084

    식 중,
    Y는 N 및 CR6으로부터 선택되고;
    R2, R3, R5 및 R6은 수소, 할로, 시아노, C1-4알킬, 할로-치환된-C1-4알킬, C1-4알콕시 및 할로-치환된-C1-4알콕시로부터 독립적으로 선택되되; 단 R5가 플루오로인 경우에, R3 및 R6이 둘 다 수소는 아니고;
    R4는 -R9 및 -NR10R11로부터 선택되며; 여기서 R9는 C1-6알킬 및 C3-8시클로알킬로부터 선택되며; 여기서 상기 R9의 알킬 또는 시클로알킬은 할로, 시아노, C1-4알킬, 할로-치환된-C1-4알킬, C1-4알콕시 및 할로-치환된-C1-4알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환되며; R10 및 R11은 수소 및 R9로부터 독립적으로 선택되고;
    R7은 수소, C1-4알킬, C3-5시클로알킬, 및 O, N 또는 S로부터 선택되는 헤테로원자를 포함하는 C3-5헤테로시클로알킬로부터 선택되며; 여기서 상기 R7의 알킬, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 할로, 시아노, 히드록실, C1-4알킬, 할로-치환된-C1-4알킬, C1-4알콕시 및 할로-치환된-C1-4알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환된다.
  2. 제1항에 있어서, R4가 -R9이며; 여기서 R9는 C1 - 3알킬 및 C3 - 8시클로알킬로부터 선택되며; 여기서 상기 R9의 알킬 또는 시클로알킬은 할로 및 할로-치환된-C1 - 4알킬로부터 독립적으로 선택되는 1개 내지 3개 라디칼로 임의로 치환되는 것인 화합물.
  3. 제2항에 있어서, R2가 수소 및 플루오로로부터 선택되고; R3이 클로로, 플루오로 및 메틸로부터 선택되고; R5가 수소, 클로로 및 플루오로로부터 선택되고; Y가 N 및 CR6으로부터 선택되고; R6이 수소 및 플루오로로부터 선택되는 것인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-클로로-5-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[3-클로로-5-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-클로로-2-메탄술폰아미도피리딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-플루오로-2-메탄술폰아미도피리딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-클로로-3-에탄술폰아미도-4,5-디플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2,4-디플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[1-(프로판-2-일)-3-(2,4,5-트리플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-에탄술폰아미도-2,4-디플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-2-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로필]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(옥산-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[2,4-디플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(3-시클로프로판술폰아미도-2,5-디플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-3-시클로프로판술폰아미도-2-플루오로페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 및 메틸 N-[(2S)-1-[(4-{3-[5-클로로-2-플루오로-3-(프로판-1-술폰아미도)페닐]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일}피리미딘-2-일)아미노]프로판-2-일]카르바메이트로부터 선택되는 화합물.
  5. 제1항에 있어서, 하기 화학식 Ib의 화합물.
    <화학식 Ib>
    Figure 112012024375536-pct00085

    식 중,
    R3은 클로로, 플루오로 및 메틸로부터 선택되고;
    R5는 플루오로 및 클로로로부터 선택되고;
    R7은 에틸 및 이소프로필로부터 선택된다.
  6. 제5항에 있어서, 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2,5-디플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-에틸-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-플루오로-3-메탄술폰아미도-5-메틸페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-클로로-3-메탄술폰아미도-5-메틸페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2-클로로-5-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 메틸 N-[(2R)-1-({4-[3-(5-클로로-2-플루오로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트; 및 메틸 N-[(2S)-1-({4-[3-(2,5-디클로로-3-메탄술폰아미도페닐)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-4-일]피리미딘-2-일}아미노)프로판-2-일]카르바메이트로부터 선택되는 화합물.
  7. N-[5-클로로-3-(4-{2-[(2-시아노에틸)아미노]피리미딘-4-일}-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일)-2-플루오로페닐]메탄술폰아미드; N-{5-클로로-3-[4-(2-{[2-(디메틸아미노)에틸]아미노}피리미딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일]-2-플루오로페닐}메탄술폰아미드; N-(5-클로로-2-플루오로-3-{4-[2-(메틸아미노)피리미딘-4-일]-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일}페닐)메탄술폰아미드; 및 N-{3-[4-(2-아미노피리미딘-4-일)-1-(프로판-2-일)-1H-피라졸-3-일]-5-클로로-2-플루오로페닐}메탄술폰아미드로부터 선택되는 화합물.
  8. 삭제
  9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 화합물을 하나 이상의 제약상 허용되는 부형제와 함께 포함하는, 암을 치료하기 위한 제약 조성물.
  10. 제9항에 있어서, 부형제가 옥수수 전분, 감자 전분, 타피오카 전분, 전분 페이스트, 전호화 전분, 당, 젤라틴, 천연 검, 합성 검, 나트륨 알기네이트, 알긴산, 트래거캔스, 구아 검, 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 셀룰로스 아세테이트, 카르복시메틸 셀룰로스 칼슘, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 미세결정질 셀룰로스, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 탈크, 탄산칼슘, 셀룰로스 분말, 덱스트레이트, 카올린, 만니톨, 규산, 소르비톨, 아가-아가, 탄산나트륨, 크로스카르멜로스 나트륨, 크로스포비돈, 폴라크릴린 칼륨, 나트륨 전분 글리콜레이트, 클레이, 나트륨 스테아레이트, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산, 미네랄 오일, 경질 미네랄 오일, 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 다른 글리콜, 나트륨 라우릴 술페이트, 수소화 식물성 오일, 땅콩 오일, 면실 오일, 해바라기 오일, 참깨 오일, 올리브 오일, 옥수수 오일, 대두 오일, 아연 스테아레이트, 나트륨 올레에이트, 에틸 올레에이트, 에틸 라우레이트, 실리카, 및 이들의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
  11. 제9항에 있어서, 추가의 치료제를 더 포함하는 제약 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 추가의 치료제가 항암 화합물, 진통제, 항구토제, 항우울제 및 소염제로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
  13. 유효량의 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 화합물을 포함하는, 암을 치료하기 위한 제약 조성물.
  14. 제13항에 있어서, 암이 폐 암종, 췌장 암종, 방광 암종, 대장 암종, 골수 장애, 전립선암, 갑상선암, 흑색종, 샘종, 및 난소, 안구, 간, 담관 및 신경계의 암종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
  15. 제13항에 있어서, 추가의 치료제를 더 포함하는 제약 조성물.
  16. 제15항에 있어서, 추가의 치료제가 항암 약물, 진통제, 항구토제, 항우울제 또는 소염제를 포함하는 것인 제약 조성물.
  17. 제16항에 있어서, 추가의 치료제가 상이한 Raf 키나제 억제제, 또는 MEK, mTOR, HSP90, AKT, PI3K, CDK9, PAK, 단백질 키나제 C, MAP 키나제, MAPK 키나제 또는 ERK의 억제제인 제약 조성물.
  18. 제17항에 있어서, MEK 억제제가 AS703026; MSC1936369B; GSK1120212; AZD6244; PD-0325901; ARRY-438162; RDEA119; GDC0941; GDC0973; TAK-733; RO5126766; 및 XL-518로부터 선택되는 것인 제약 조성물.
  19. 유효량의 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는, 폐 암종, 췌장 암종, 방광 암종, 대장 암종, 골수 장애, 전립선암, 갑상선암, 흑색종, 샘종, 및 난소, 안구, 간, 담관 및 신경계의 암종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 Raf 키나제에 의해 매개되는 병태를 치료하기 위한 제약 조성물.
  20. 제19항에 있어서, Raf 키나제가 돌연변이체 b-Raf 키나제인 제약 조성물.
  21. 제20항에 있어서, 돌연변이체 b-Raf 키나제가 b-Raf(V600E)인 제약 조성물.
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
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Families Citing this family (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JO3002B1 (ar) 2009-08-28 2016-09-05 Irm Llc مركبات و تركيبات كمثبطات كيناز بروتين
MX340392B (es) 2010-02-25 2016-07-06 Dana Farber Cancer Inst Inc Mutaciones del protooncogen de serina/treonina-proteina cinasa b-raf (braf) que confieren resistencia a los inhibidores del protooncogen de serina/treonina-proteina cinasa b-raf.
US8907270B2 (en) 2010-06-30 2014-12-09 Schlumberger Technology Corporation Method and apparatus for gain regulation in a gamma detector
CN108542906A (zh) * 2011-11-11 2018-09-18 诺华股份有限公司 治疗增生性疾病的方法
SI2782557T1 (sl) * 2011-11-23 2019-02-28 Array Biopharma, Inc., Farmacevtske formulacije
US9408885B2 (en) 2011-12-01 2016-08-09 Vib Vzw Combinations of therapeutic agents for treating melanoma
CN103159736B (zh) * 2011-12-10 2015-05-13 通化济达医药有限公司 取代的吡唑激酶抑制剂
EP2793879A4 (en) * 2011-12-23 2015-07-01 Millennium Pharm Inc HETEROARYLE AND USES THEREOF
PL2831589T3 (pl) 2012-03-28 2018-10-31 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Mutanty C-RAF, które nadają oporność na inhibitory RAF
CN104640857B (zh) 2012-07-18 2017-07-04 圣路易斯大学 作为整合素拮抗剂的β氨基酸衍生物
US8716226B2 (en) 2012-07-18 2014-05-06 Saint Louis University 3,5 phenyl-substituted beta amino acid derivatives as integrin antagonists
AR091876A1 (es) * 2012-07-26 2015-03-04 Novartis Ag Combinaciones farmaceuticas para el tratamiento de enfermedades proliferativas
EP2882440B1 (en) 2012-08-07 2019-02-27 Novartis AG Pharmaceutical combinations comprising a b-raf inhibitor, an egfr inhibitor and optionally a pi3k-alpha inhibitor
EP2884979B1 (en) 2012-08-17 2019-06-26 F.Hoffmann-La Roche Ag Combination therapies for melanoma comprising administering cobimetinib and vemurafinib
US20150232452A1 (en) * 2012-09-19 2015-08-20 Ruga Corporation Novel raf kinase inhibitors
US20150283136A1 (en) * 2012-11-08 2015-10-08 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising a b-raf inhibitor and a histone deacetylase inhibitor and their use in the treatment of proliferative diseases
MY181085A (en) 2013-03-21 2020-12-17 Novartis Ag Combination therapy
TWI634114B (zh) 2013-05-08 2018-09-01 永恒生物科技公司 作為激酶抑制劑之呋喃酮化合物
CN105228983A (zh) 2013-05-30 2016-01-06 普莱希科公司 用于激酶调节的化合物及其适应症
EP3757130A1 (en) 2013-09-26 2020-12-30 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
TW201605450A (zh) 2013-12-03 2016-02-16 諾華公司 Ｍｄｍ２抑制劑與ＢＲＡＦ抑制劑之組合及其用途
US10668055B2 (en) * 2013-12-20 2020-06-02 Biomed Valley Discoveries, Inc. Cancer treatment using combinations of ERK and RAF inhibitors
AU2014372166B2 (en) * 2013-12-23 2017-10-26 Novartis Ag Pharmaceutical combinations
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
DE102015103158A1 (de) 2014-03-04 2015-09-10 Bergische Universität Wuppertal Verbindungen für die Behandlung des Melanoms
CU24481B1 (es) 2014-03-14 2020-03-04 Immutep Sas Moléculas de anticuerpo que se unen a lag-3
WO2015145388A2 (en) 2014-03-27 2015-10-01 Novartis Ag Methods of treating colorectal cancers harboring upstream wnt pathway mutations
EP3143166A4 (en) 2014-05-16 2018-04-18 University of Massachusetts Treating chronic myelogenous leukemia (cml)
JP6636014B2 (ja) * 2014-09-12 2020-01-29 ノバルティス アーゲー Ｒａｆキナーゼ阻害剤としての化合物および組成物
JP6681905B2 (ja) 2014-09-13 2020-04-15 ノバルティス アーゲー Ａｌｋ阻害剤の併用療法
AU2015327868A1 (en) 2014-10-03 2017-04-20 Novartis Ag Combination therapies
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
CR20170143A (es) 2014-10-14 2017-06-19 Dana Farber Cancer Inst Inc Moléculas de anticuerpo que se unen a pd-l1 y usos de las mismas
TN2017000375A1 (en) 2015-03-10 2019-01-16 Aduro Biotech Inc Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene" -dependent signalling
PT3317301T (pt) 2015-07-29 2021-07-09 Novartis Ag Terapias de associação compreendendo moléculas de anticorpo contra lag-3
US20180207273A1 (en) 2015-07-29 2018-07-26 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
WO2017019896A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
SG11201803520PA (en) 2015-11-03 2018-05-30 Janssen Biotech Inc Antibodies specifically binding pd-1 and their uses
AU2016369537B2 (en) 2015-12-17 2024-03-14 Novartis Ag Antibody molecules to PD-1 and uses thereof
SG11201805387RA (en) 2015-12-30 2018-07-30 Univ Saint Louis Meta-azacyclic amino benzoic acid derivatives as pan integrin antagonists
RU2615986C1 (ru) * 2016-02-25 2017-04-12 Закрытое акционерное общество "Р-Фарм" (ЗАО "Р-Фарм") Замещенные метил (2-{ 4-[3-(3-метансульфониламино-2-фтор-5-хлор-фенил)-1Н-пиразол-4-ил]пиримидин-2-иламино} -этил)карбаматы, способ их получения и применения
RU2759669C2 (ru) * 2016-06-03 2021-11-16 Аррэй Байофарма Инк. Фармацевтические комбинации
WO2018009466A1 (en) 2016-07-05 2018-01-11 Aduro Biotech, Inc. Locked nucleic acid cyclic dinucleotide compounds and uses thereof
WO2018124001A1 (ja) 2016-12-27 2018-07-05 国立研究開発法人理化学研究所 Ｂｍｐシグナル阻害化合物
JP7341060B2 (ja) 2017-02-10 2023-09-08 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ｍａｐｋ経路の活性化に関連付けられる癌の処置のための方法及び医薬組成物
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
CN107540699A (zh) * 2017-10-16 2018-01-05 康化（上海）新药研发有限公司 一种2‑氨基‑3‑氟吡啶‑4‑硼酸盐酸盐的合成方法
EP3732285A1 (en) 2017-12-28 2020-11-04 Tract Pharmaceuticals, Inc. Stem cell culture systems for columnar epithelial stem cells, and uses related thereto
EP3816162A4 (en) * 2018-07-12 2021-08-11 Shenzhen TargetRx, Inc. DIARYL PYRAZOLE COMPOUND, COMPOSITION THEREOF, AND USE THEREOF
WO2020124397A1 (en) * 2018-12-19 2020-06-25 Inventisbio Shanghai Ltd. C-terminal src kinase inhibitors
US20220040324A1 (en) 2018-12-21 2022-02-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of antibody-drug conjugate and kinase inhibitor
US20220168250A1 (en) 2019-05-16 2022-06-02 Eli Lilly And Company TRIPLE COMBINATION OF AN ERK1/2 INHIBITOR WITH A BRAF INHIBITOR AND AN EGFR INHIBITOR FOR USE IN THE TREATMENT OF BRAFv6ooE COLORECTAL CANCER
CN114746419B (zh) 2019-12-05 2023-10-24 国家医疗保健研究所 N-(3-(5-(嘧啶-4-基)噻唑-4-基)苯基)磺酰胺化合物及其用作braf抑制剂的用途
WO2022036176A1 (en) 2020-08-13 2022-02-17 Albert Einstein College Of Medicine N-cyclyl-sulfonamides useful for inhibiting raf
WO2022074011A1 (en) 2020-10-05 2022-04-14 Pierre Fabre Medicament Combination of encorafenib and binimetinib as adjuvant treatment for resected stage ii melanoma
WO2022195551A1 (en) 2021-03-18 2022-09-22 Novartis Ag Biomarkers for cancer and methods of use thereof
KR20240008410A (ko) 2021-06-09 2024-01-18 에프. 호프만-라 로슈 아게 암 치료를 위한 병용요법
CN114181197B (zh) * 2022-02-16 2022-05-06 北京康立生医药技术开发有限公司 一种治疗肠癌的药物的制备方法、制剂及纯度分析方法
WO2023230554A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Pfizer Inc. Combination of a braf inhibitor, an egfr inhibitor, and a pd-1 antagonist for the treatment of braf v600e-mutant, msi-h/dmmr colorectal cancer
WO2024163166A1 (en) * 2023-01-30 2024-08-08 5Metis, Inc. Boron containing compounds and their uses

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009062676A2 (en) * 2007-11-14 2009-05-22 Ortho-Mcneil-Janssen Pharmaceuticals, Inc. Imidazo[1,2-a]pyridine derivatives and their use as positive allosteric modulators of mglur2 receptors

Family Cites Families (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4104250A (en) * 1976-08-11 1978-08-01 Borg-Warner Corporation Flame-retardant polymers with 1,3,5-triazines having halo- and halo-aryl substitutents
JPS5475888A (en) 1977-11-29 1979-06-18 Jiyasuko Kk Surgical laser
EP0184384B1 (en) 1984-12-06 1989-08-02 Pfizer Inc. Substituted dihydroquinolone carboxylic acids, anti-bacterial compositions containing them
US6391636B1 (en) 1994-05-31 2002-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of raf gene expression
US6358932B1 (en) 1994-05-31 2002-03-19 Isis Pharmaceticals, Inc. Antisense oligonucleotide inhibition of raf gene expression
US6037136A (en) 1994-10-24 2000-03-14 Cold Spring Harbor Laboratory Interactions between RaF proto-oncogenes and CDC25 phosphatases, and uses related thereto
WO1997008950A1 (en) 1995-09-07 1997-03-13 Fuisz Technologies, Ltd. System for rendering substantially non-dissoluble bio-affecting agents bio-available
US5717100A (en) 1995-10-06 1998-02-10 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
JP2000511419A (ja) 1996-05-23 2000-09-05 アプライド・リサーチ・システムズ・エイアールエス・ホールディング・ナムローゼ・フェンノートシャップ Ｒａｆ―１または１４―３―３タンパク質のＩＬ―２受容体β鎖への結合を阻害する化合物およびそれを含有する医薬組成物
AR012634A1 (es) 1997-05-02 2000-11-08 Sugen Inc Compuesto basado en quinazolina, composicion famaceutica que lo comprende, metodo para sintetizarlo, su uso, metodos de modulacion de la funcion deserina/treonina proteinaquinasa con dicho compuesto y metodo in vitro para identificar compuestos que modulan dicha funcion
US6514977B1 (en) 1997-05-22 2003-02-04 G.D. Searle & Company Substituted pyrazoles as p38 kinase inhibitors
GEP20033053B (en) 1997-05-22 2003-08-25 Searle & Co Substituted Pyrazoles as P38 Kinase Inhibitors, Methods for their Production, Pharmaceutical Compositions Containing Them and Methods for Treatment
US6187799B1 (en) 1997-05-23 2001-02-13 Onyx Pharmaceuticals Inhibition of raf kinase activity using aryl ureas
GB9716557D0 (en) 1997-08-06 1997-10-08 Glaxo Group Ltd Benzylidene-1,3-dihydro-indol-2-one derivatives having anti-cancer activity
US6022884A (en) 1997-11-07 2000-02-08 Amgen Inc. Substituted pyridine compounds and methods of use
US6204467B1 (en) 1998-03-24 2001-03-20 Ford Global Technologies, Inc. Method and apparatus for resistive welding
ME00275B (me) 1999-01-13 2011-02-10 Bayer Corp ω-KARBOKSIARIL SUPSTITUISANI DIFENIL KARBAMIDI KAO INHIBITORI RAF KINAZE
US6316435B2 (en) 1999-02-24 2001-11-13 Supergen, Inc. Combination therapy for lymphoproliferative diseases
PT1239831E (pt) 1999-12-23 2013-01-23 Mayne Pharma International Pty Ltd Composições farmacêuticas melhoradas para fármacos fracamente solúveis
AU2001285349A1 (en) 2000-08-30 2002-03-13 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Induction of ldl receptor expression by extracellular-signal regulated kinase, erk-1/2
PE20020354A1 (es) 2000-09-01 2002-06-12 Novartis Ag Compuestos de hidroxamato como inhibidores de histona-desacetilasa (hda)
NZ552335A (en) 2001-10-25 2008-11-28 Novartis Ag Combinations comprising a selective COX-2 inhibitor and a microtubule interfering agent
JP4399265B2 (ja) 2001-12-21 2010-01-13 ヴァーナリス（ケンブリッジ）リミテッド ３，４−ジアリールピラゾール、および癌の治療におけるそれらの使用
SI2130537T1 (sl) 2002-03-13 2013-01-31 Array Biopharma, Inc. N3-alkilirani derivati benzimidazola kot inhibitorji mek
US20080085902A1 (en) 2003-09-23 2008-04-10 Guido Bold Combination Of A Vegf Receptor Inhibitor Or With A Chemotherapeutic Agent
US8969372B2 (en) 2003-11-14 2015-03-03 Aptose Boisciences Inc. Aryl imidazoles and their use as anti-cancer agents
AU2005205118B2 (en) 2004-01-09 2009-02-26 Novartis Ag Phenyl-[4-(3-phenyl-1H-pyrazol-4-yl)-pyrimidin-2-yl]-amine derivatives as IGF-IR inhibitors
RU2401265C2 (ru) 2004-06-10 2010-10-10 Айрм Ллк Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназы
US20060058311A1 (en) 2004-08-14 2006-03-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combinations for the treatment of diseases involving cell proliferation
BRPI0606281A2 (pt) 2005-03-17 2009-06-09 Novartis Ag compostos orgánicos
US20070099856A1 (en) 2005-05-13 2007-05-03 Gumerlock Paul H Combined treatment with docetaxel and an epidermal growth factor receptor kinase inhibitor using an intermittent dosing regimen
JP5178515B2 (ja) 2005-08-12 2013-04-10 シンタ ファーマシューティカルズ コーポレーション Ｈｓｐ９０活性を調節するピラゾール化合物
MX2008002492A (es) 2005-08-22 2008-04-03 Novartis Ag Composiciones farmaceuticas que comprenden un farmaco dependiente del ph, un modificador del ph, y un agente retardante.
US20080242667A1 (en) 2005-08-26 2008-10-02 Smithkline Beecham Corporation Pyrimidinyl-Pyrazole Inhibitors of Aurora Kinases
PE20070427A1 (es) 2005-08-30 2007-04-21 Novartis Ag Compuestos derivados de benzimidazoles sustituidos como inhibidores de tirosina quinasas
WO2007105058A2 (en) 2006-03-16 2007-09-20 Pfizer Products Inc. Pyrazole compounds
MX2008012716A (es) 2006-04-05 2008-10-14 Novartis Ag Combinaciones de agentes terapeuticos para el tratamiento de cancer.
WO2007123892A2 (en) * 2006-04-17 2007-11-01 Arqule Inc. Raf inhibitors and their uses
JP2010502743A (ja) 2006-09-11 2010-01-28 キュリス，インコーポレイテッド 抗増殖薬剤としての多機能性低分子
ES2385613T3 (es) 2006-09-18 2012-07-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Método para tratar cánceres que portan mutaciones de EGFR
MX2009003456A (es) 2006-10-02 2009-04-14 Irm Llc Compuestos y composiciones como inhibidores de proteina cinasa.
WO2008045627A2 (en) 2006-10-06 2008-04-17 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof
BRPI0807812A2 (pt) 2007-02-15 2020-06-23 Novartis Ag Combinações de lbh589 com outros agentes terapêuticos para tratar câncer
US20090022789A1 (en) 2007-07-18 2009-01-22 Supernus Pharmaceuticals, Inc. Enhanced formulations of lamotrigine
CA2695114A1 (en) * 2007-08-01 2009-02-05 Pfizer Inc. Pyrazole compounds and their use as raf inhibitors
CA2699301A1 (en) 2007-10-19 2009-04-23 Abbott Gmbh & Co. Kg Solid dispersion product of n-aryl urea-based drugs
KR101408517B1 (ko) * 2008-03-21 2014-06-17 노파르티스 아게 신규한 헤테로시클릭 화합물 및 그의 용도
UA103319C2 (en) 2008-05-06 2013-10-10 Глаксосмитклайн Ллк Thiazole- and oxazole-benzene sulfonamide compounds
EA019722B1 (ru) * 2008-07-24 2014-05-30 НЕРВИАНО МЕДИКАЛ САЙЕНСИЗ С.р.л. 3,4-диарилпиразолы в качестве ингибиторов протеинкиназ
MX2011001090A (es) 2008-07-28 2011-03-15 Gilead Sciences Inc Compuestos de inhibidor de desacetilasa de histona de cicloalquilideno y heterocicloalquilideno.
BRPI0920608A2 (pt) 2008-09-29 2019-09-24 Boehringer Ingelheim Int compostos quimicos
EA020783B1 (ru) 2008-10-07 2015-01-30 Астразенека Юк Лимитед Фармацевтическая композиция, содержащая 4-[3-(4-циклопропанкарбонилпиперазин-1-карбонил)-4-фторбензил]-2н-фталазин-1-он и коповидон
WO2010056662A1 (en) * 2008-11-11 2010-05-20 University Of Washington Activated wnt-beta-catenin signaling in melanoma
JP5490137B2 (ja) * 2008-12-19 2014-05-14 ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ プロテインキナーゼ阻害薬としての二環式ピラゾール
AR075180A1 (es) 2009-01-29 2011-03-16 Novartis Ag Formulaciones orales solidas de una pirido-pirimidinona
RU2402602C1 (ru) 2009-02-12 2010-10-27 Государственное учреждение Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ МЕЛАНОМЫ ЧЕЛОВЕКА mel Rac, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ВАКЦИН
WO2010100127A1 (en) 2009-03-04 2010-09-10 Novartis Ag Disubstituted imidazole derivatives as modulators of raf kinase
TWI532484B (zh) 2009-06-08 2016-05-11 艾伯維有限公司 包含凋亡促進劑之固態分散劑
WO2010145998A1 (en) * 2009-06-15 2010-12-23 Nerviano Medical Sciences S.R.L. Substituted pyrimidinylpyrrolopyridinone derivatives, process for their preparation and their use as kinase inhibitors
KR101256018B1 (ko) * 2009-08-20 2013-04-18 한국과학기술연구원 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 1,3,6-치환된 인돌 화합물
JO3002B1 (ar) * 2009-08-28 2016-09-05 Irm Llc مركبات و تركيبات كمثبطات كيناز بروتين
US8242260B2 (en) * 2009-08-28 2012-08-14 Novartis Ag Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
EP2528909B1 (en) 2010-01-27 2016-06-22 Nerviano Medical Sciences S.r.l. Sulfonamido derivatives of 3,4-diarylpyrazoles as protein kinase inhibitors
CA2829790C (en) 2010-03-30 2018-06-05 Verseon Corporation Multisubstituted aromatic compounds as inhibitors of thrombin
EP2601185B1 (en) 2010-08-03 2015-10-07 Nerviano Medical Sciences S.r.l. Derivatives of pyrazolophenyl-benzenesulfonamide compounds and use thereof as antitumor agents
CN103442715A (zh) 2011-03-21 2013-12-11 瓦尔库里亚公司 包括hdac抑制剂以及类固醇的药用组合物及其用途
AU2012271814A1 (en) 2011-06-14 2013-12-12 Novartis Ag Combination of panobinostat and ruxolitinib in the treatment of cancer such as a myeloproliferative neoplasm
CN108542906A (zh) 2011-11-11 2018-09-18 诺华股份有限公司 治疗增生性疾病的方法
SI2782557T1 (sl) 2011-11-23 2019-02-28 Array Biopharma, Inc., Farmacevtske formulacije
US20150283136A1 (en) 2012-11-08 2015-10-08 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising a b-raf inhibitor and a histone deacetylase inhibitor and their use in the treatment of proliferative diseases
US10576680B2 (en) 2015-11-19 2020-03-03 The Boeing Company Modular thermoforming system

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009062676A2 (en) * 2007-11-14 2009-05-22 Ortho-Mcneil-Janssen Pharmaceuticals, Inc. Imidazo[1,2-a]pyridine derivatives and their use as positive allosteric modulators of mglur2 receptors

Also Published As

Publication number Publication date
EP2470526B1 (en) 2014-05-28
US9314464B2 (en) 2016-04-19
PL2470526T3 (pl) 2014-10-31
SMT201700036B (it) 2017-03-08
ES2492499T3 (es) 2014-09-09
IN2012DN02469A (ko) 2015-08-21
US20130296318A1 (en) 2013-11-07
AR077975A1 (es) 2011-10-05
US20160280686A1 (en) 2016-09-29
AU2010286569A1 (en) 2012-04-12
CY1118452T1 (el) 2017-07-12
IL218084A0 (en) 2012-04-30
EP2727918B1 (en) 2016-10-12
AU2010286569C1 (en) 2019-11-28
CN102725283A (zh) 2012-10-10
US8501758B2 (en) 2013-08-06
CO6612222A2 (es) 2013-02-01
LUC00102I2 (ko) 2024-05-21
SG10201405311TA (en) 2014-09-26
MY156259A (en) 2016-01-29
EA201500175A1 (ru) 2015-05-29
US9850230B2 (en) 2017-12-26
ECSP23004573A (es) 2023-04-28
US20110306625A1 (en) 2011-12-15
USRE49556E1 (en) 2023-06-20
NL300973I1 (ko) 2019-03-27
TN2012000081A1 (en) 2013-09-19
LUC00101I1 (ko) 2019-02-13
HK1167390A1 (en) 2012-11-30
NZ598924A (en) 2013-07-26
US20160122324A1 (en) 2016-05-05
US10568884B2 (en) 2020-02-25
JO3002B1 (ar) 2016-09-05
EP2727918A1 (en) 2014-05-07
DOP2012000051A (es) 2012-05-31
GEP20146102B (en) 2014-05-27
LT2727918T (lt) 2017-01-25
EA201200373A1 (ru) 2012-09-28
US9593099B2 (en) 2017-03-14
SG178351A1 (en) 2012-03-29
LTC2470526I2 (lt) 2020-04-27
CY2019014I1 (el) 2019-11-27
CL2012000340A1 (es) 2012-08-17
CY2019014I2 (el) 2019-11-27
RS55568B1 (sr) 2017-05-31
US20160280687A1 (en) 2016-09-29
HUE032847T2 (hu) 2017-11-28
KR20120062839A (ko) 2012-06-14
US20160263113A1 (en) 2016-09-15
JP6045519B2 (ja) 2016-12-14
HRP20170005T1 (hr) 2017-03-10
ZA201202020B (en) 2012-12-27
UY32860A (es) 2011-03-31
HUS1900012I1 (hu) 2019-04-29
PT2470526E (pt) 2014-09-01
JP2013503186A (ja) 2013-01-31
US20180297986A1 (en) 2018-10-18
NL300973I2 (nl) 2022-05-05
LUC00101I2 (ko) 2020-01-23
US10005761B2 (en) 2018-06-26
BR112012004453A8 (pt) 2021-06-08
LTPA2019006I1 (lt) 2019-03-25
LTPA2019005I1 (lt) 2019-03-25
ES2610825T3 (es) 2017-05-03
US20200323852A1 (en) 2020-10-15
CA2771775A1 (en) 2011-03-03
ME02684B (me) 2017-06-20
ECSP12011700A (es) 2012-03-30
EA025222B1 (ru) 2016-12-30
JP5475888B2 (ja) 2014-04-16
JP2014098022A (ja) 2014-05-29
WO2011025927A1 (en) 2011-03-03
SMT201400133B (it) 2014-11-10
CN103896921A (zh) 2014-07-02
GT201200053A (es) 2014-03-27
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