KR101284130B1 - 콜로니 계수 방법 - Google Patents

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다카시 니시다
승란 리
치즈카 카이
구니미츠 도요시마
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가부시키가이샤 엔테크
토호 쇼지 가부시키가이샤
가부시키가이샤 야쿠르트 혼샤
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Abstract

해결해야할 과제
샬레(laboratory dish)를 촬영 매체로 촬영한 촬영 영상을 데이터 처리하여 계수할 경우, 촬영 조건에 의한 콜로니수의 계수의 변동을 배제하고, 쉽고 간편한 방법으로 신뢰성이 높은 안정적인 콜로니의 계수 수치를 획득할 수 있는 콜로니수의 계수 방법을 제공한다.
해결 수단
샬레 2 내의 배지 1에서 생성된 미생물 콜로니를, 샬레의 배지 표면 1f의 중심 부근을 회전축 C1으로 하여 상기 회전축의 연장선 방향에 배치한 CCD 카메라 7(쵤영 매체)로 촬영하고 데이터 처리하여 콜로니수를 계수하는 경우, 샬레의 1회전을 지정된 수로 분할하여 얻은 지정 각도만큼 회전축을 중심으로 하여 샬레를 회전하고, 지정 각도만큼의 샬레 회전마다 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하고; 지정 각도에 있어서의 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 데이터 처리하여 지정 각도에서의 콜로니수를 개별적으로 계수하고; 각 지정 각도마다 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 샬레 내의 콜로니수를 산출한다.

Description

콜로니 계수 방법{Method for counting colonies}
본 발명은 샬레(petri dish)를 사용한 배지 내에 균류 및 곰팡이 등의 미생물을 배양한 후 생성된 미생물의 콜로니수를 측정하는 콜로니의 계수 방법에 관한 것이다.
식품공업분야에서는, 미생물의 계수 대상이 되는 제품이 문제를 일으키지 않는지 또는 식품의 제조 공정으로 유용한 미생물이 적절하게 증식하고 있는지 등을 확인할 필요가 있다. 이러한 확인을 위해 사용할 수 있는 살아있는 세포 검출 시스템으로서, 배지를 사용한 배양형의 계수 방법이 대개 이용된다. 예를 들면, 미생물 계수의 공식적 방법으로서 한천 배지를 사용하여 미생물의 콜로니수를 계측하는 방법이 사용되고 있다. 특히, 미생물의 분포도가 낮은 계수 대상 제품에 있어서, 상기 방법은 미생물을 단시간에 배양하여 미생물의 콜로니를 생성시킴으로써 쉽고 간편하게 정확도가 뛰어난 미생물의 수를 계측하는 방법으로서 널리 이용되고 있다.
또한, 한천 배지 등에 생성된 콜로니수를 시각적으로 계수하는 종래의 방법 대신에, CCD 카메라 등을 이용하여 촬영한 계수 대상 배지의 영상 데이터를 데이터 처리하여 콜로니수를 자동적으로 계수하는 몇몇의 방법이 제안되고 있다. 즉, 제안된 콜로니 계수 방법은 연결된 콜로니의 형태를 식별하여 콜로니수를 계수하는 방법(특허문헌 1 참조) 및 색조의 짙은 담색을 이용하여 콜로니인 미생물의 주변 원호를 검출하여 미생물 수를 계수하는 방법(특허문헌 2 참조)을 포함한다.
또한, 쉽고 간편한 방법으로 색조를 이용한 CCD 카메라 영상을 통해 데이터 처리하여 콜로니수를 높은 정확도로 계수하는 방법(특허문헌 3 참조)이 제시되고 있다. 본 발명자들은 콜로니의 검사 영역을 분할하여 단색의 CCD 카메라를 사용해 콜로니를 높은 정확도로 자동적으로 계수하는 검사 방법(특허문헌 4 참조)을 제시하고 있다.
그러나, 종래의 콜로니수 계수 방법은 동일한 계수 대상 샬레(petri dish)의 콜로니수를 계수하더라도, 대상 샬레에 대한 조명의 평면 위치 및 조명의 각도, 및 CCD 카메라와 샬레 사이의 거리 등이 변동되어 콜로니수를 계수하는 경우, 매번 계수된 콜로니수의 값이 서로 달라지는 것은 종래부터 경험에 의해 확실시되어 왔다. 이러한 이유는 한천 배지 등에서 다양한 깊이에 분포되어 생성된 미소한 콜로니에 대하여 조명 및 CCD 카메라의 상대적 위치, 및 콜로니 사이의 상대적인 위치 등이 복잡하게 연관되어 있어, CCD 카메라에 의한 콜로니의 영상 데이터가 변동되며, 영 상 데이터의 데이터 처리 방법과 연동하는 콜로니의 자동적인 계수 수치의 변동하기 때문으로 여겨진다.
이러한 이유로 인해, 정확한 콜로니수의 파악이 의무화되어 있는 식품업계에 있어서 동일한 샬레 내의 콜로니의 계수값 변동폭의 변동이 배제되어 계측 데이터가 안정적이고 실용적인 콜로니수의 계수 방법이 요구되고 있다.
특허문헌 1: 일본 공개 특허번호 H09-140397 호
특허문헌 2: 일본 공개 특허번호 2001-22929 호
특허문헌 3: 일본 공개 특허번호 2004-194610 호
특허문헌 4: 일본 공개 특허번호 2006-345750 호
발명이 해결하고자 하는 과제
상기 과제에 있어서, 본 발명의 목적은 촬영 조건에 의한 콜로니수의 계수의 변동을 배제하고, 쉽고 간편한 방법으로 신뢰성이 높은 안정적인 콜로니수의 계수 수치를 획득할 수 있는 콜로니수의 계수 방법을 제공하는 것이다.
과제를 해결하기 위한 수단
청구항 1에 있어서, 본 발명은 샬레(petri dish) 내의 배지에서 생성된 미생물의 콜로니를, 상기 샬레의 배지 표면의 중심 부근을 회전축으로 하여 상기 회전축의 연장선 방향에 배치한 촬영 매체에 의해 촬영하고 데이터 처리하여 콜로니수를 계수하는 경우, 상기 샬레의 1회전을 지정된 수로 분할하여 얻은 지정 각도만큼 상기 회전축을 중심으로 하여 상기 샬레를 회전시키고, 상기 지정 각도만큼의 샬레의 회전마다 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하고, 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 데이터 처리하여 상기 지정 각도마다 콜로니수를 개별적으로 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 개별적으로 계수한 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법에 관한 것이다.
청구항 2에 있어서, 본 발명은 샬레 내의 배지에서 생성된 미생물의 콜로니를, 상기 샬레의 배지 표면의 중심 부근을 회전축으로 하여 상기 회전축의 연장선 방향에 배치한 촬영 매체에 의해 촬영하고 데이터 처리하여 콜로니수를 계수하는 경우, 상기 샬레의 1회전을 지정된 수로 분할하여 얻은 지정 각도만큼 상기 촬영 매체를 회전시키고, 상기 지정 각도만큼의 상기 촬영 매체의 회전마다 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하고, 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 데이터 처리하여 상기 지정 각도마다 콜로니수를 개별적으로 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 개별로 계수한 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법에 관한 것이다.
청구항 3에 있어서, 본 발명은 상기 각 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하는 경우, 상기 촬영 매체는 하나의 지정 각도에 대해서 다수 회씩 촬영하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 영상 데이터를 획득하고, 상기 획득한 영상 데이터를 각각 데이터 처리하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수를 다수 회 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 각각 개별로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 청구항 1에 따른, 콜로니수의 계수 방법에 관한 것이다.
청구항 4에 있어서, 본 발명은 상기 각 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영할 경우, 상기 촬영 매체는 하나의 지정 각도에 대해서 다수 회씩 촬영하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 영상 데이터를 획득하고, 상기 획득한 영상 데이터를 각각 데이터 처리하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수를 다수 회 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 각각 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 청구항 2에 따른, 콜로니수의 계수 방법에 관한 것이다.
청구항 5에 있어서, 본 발명은 상기 샬레를 상기 지정 각도로 회전시킬 때마다 일단 정지하여 상기 촬영 매체로 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하는 청구항 1에 따른, 콜로니수의 계수 방법에 관한 것이다.
청구항 6에 있어서, 본 발명은 상기 촬영 매체를 상기 지정 각도로 회전시킬 때마다 일단 정지하여 상기 촬영 매체로 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하는 청구항 2에 따른, 콜로니수의 계수 방법에 관한 것이다.
발명의 효과
본 발명의 청구항 1의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 샬레 내의 배지에서 생성된 미생물의 콜로니를, 상기 샬레의 배지 표면의 중심 부근을 회전축으로 하여 상기 회전축의 연장선 방향에 배치한 촬영 매체로 촬영하고 데이터 처리하여 콜로니수를 계수하는 경우, 상기 샬레의 1회전을 지정된 수로 분할하여 얻은 지정 각도만큼 상기 회전축을 중심으로 하여 상기 샬레를 회전시키고, 상기 지정 각도만큼의 샬레의 회전마다 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하고, 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 데이터 처리하여 상기 지정 각도마다 콜로니수를 개별적으로 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하기 위해서, 샬레 및 콜로니에 대해 조명 및 촬영 매체가 특정한 위치에 있는 경우에 획득되는 편향된 영상 데이터에 근거한 콜로니 계수 수치가 사용되는 문제점이 해결된다. 따라서, 다수의 촬영 조건에 의해 평준화된 안정적인 데이터 산출이 가능해진다.
본 발명의 청구항 2의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 샬레 내의 배지에서 생성된 미생물의 콜로니를, 상기 샬레의 배지 표면의 중심 부근을 회전축으로 하여 상기 회전축의 연장선 방향에 배치한 촬영 매체로 촬영하고 데이터 처리하여 콜로니수를 계수하는 경우, 상기 샬레의 1회전을 지정된 수로 분할하여 얻은 지정 각도만큼 상기 촬영 매체를 회전시키고, 상기 지정 각도만큼의 상기 촬영 매체의 회전마다 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하고, 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 데이터 처리하여 상기 지정 각도마다 콜로니수를 개별적으로 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하기 위해서, 샬레 및 콜로니에 대해 조명 및 촬영 매체가 특정한 위치에 있는 경우에 획득되는 편향된 영상 데이터에 근거한 콜로니 계수 수치가 사용되는 문제점이 해결된다. 따라서, 다수의 촬영 조건에 의해 평준화된 안정적인 데이터 산출이 가능해진다. 또한, 크기, 무게, 취약성 등으로 인해 용이하게 촬영되는 대상을 회전할 수 없는 경우에도 적합하다.
본 발명의 청구항 3의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 청구항 1에 있어서, 상기 각 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영할 경우, 상기 촬영 매체는 하나의 지정 각도에 대해서 다수 회씩 촬영하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 영상 데이터를 획득하고, 상기 획득한 영상 데이터를 각각 데이터 처리하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수를 다수 회 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 각각 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하기 위해서, 각 지정 각도마다 생기는 영상 데이터의 촬영 조건 등의 변동을 다수회의 촬영에 의해 배제할 수 있고, 샬레 내의 콜로니수를 더욱 안정적으로 계수할 수 있다.
본 발명의 청구항 4의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 청구항 2에 있어서, 상기 각 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영할 경우, 상기 촬영 매체는 하나의 지정 각도에 대해서 다수 회씩 촬영하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 영상 데이터를 획득하고, 상기 획득한 영상 데이터를 각각 데이터 처리하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수를 다수 회 계수하고, 상기 각 지정 각도마다 각각 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하기 위해서, 각 지정 각도마다 생기는 영상 데이터의 촬영 조건 등의 변동을 다수회의 촬영에 의해 배제할 수 있고, 샬레 내의 콜로니수를 더욱 안정적으로 계수할 수 있다.
본 발명의 청구항 5의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 청구항 1에 있어서, 상기 샬레를 상기 지정 각도로 회전시킬 때마다 일단 정지하여 상기 촬영 매체로 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여, 지정 각도에서의 촬영 영상이 선명해지고, 상기 영상의 데이터 처리에 의한 콜로니 계수의 정확도가 향상된다.
본 발명의 청구항 6의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 청구항 2에 있어서, 상기 촬영 매체를 상기 지정 각도로 회전시킬 때마다 일단 정지하여 상기 촬영 매체로 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여, 지정 각도에서의 촬영 영상이 선명해지고, 상기 영상 데이터 처리에 의한 콜로니 계수의 정확도가 향상된다.
발명의 실시를 위한 최선의 형태
이하, 본 발명의 콜로니수의 계수 방법을 도 1 내지 도 5를 바탕으로 하여 설명한다. 도 1은 본 발명에 있어서 콜로니 계수를 실시하는 장치의 구조단면도이다. 도 2는 도 1의 장치의 평면도이다. 도 3은 샬레 내의 배지에서 생성된 콜로니를 예시하는 촬영 영상의 모식도이다. 도 4는 본 발명에 있어서 콜로니 계수의 공정을 나타내는 플로우 차트(flow chart)이다. 도 5는 다른 실시태양에 있어서 콜로니수 계수를 실시하는 장치의 구조단면도이다.
<제 1의 실시 형태>
도 1의 구조단면도 및 도 2의 평면도를 이용하고, 본 발명의 콜로니수의 계수 방법을 실시하기 위해 적절한 계수장치 50을 설명한다. 상기 계수장치 50은 샬레 회전기계 설치 장치 55, 촬영 매체(CCD 카메라 7), 데이터 처리 장치 9를 포함한다.
상기 샬레 회전기계 설치 장치 55에는 그 상부에 지지판 5를 가지는 가대 17; 그 위로 투명회전판 22; 구동 모터 19를 포함할 수 있다. 상기 투명회전판 22는 회전대 16 위에 나사와 같은 것으로 고정되어 있다(도면에 기재하지 않음). 또한, 상기 회전대 16은 지지 롤러 23(3개의 부위에 위치함)에 의해 상기 지지판 5 위에 회전가능하게 지지되어 있다. 상기 회전대 16에는 구동 벨트 21이 팽팽한 상태로 설치되어 있다. 상기 지지판 5 위의 구동 모터 19에 고정된 구동 풀리 20이 구동 벨트 21에 전달되어서 구동된다. 계수 대상이 되는 샬레 2(해당 샬레 배지 1)는 원반 모양의 투명회전판 22의 대략 회전 중심위치 위에 설치된다. 계수 대상이 되는 샬레 2의 배지 표면 1f의 중심 부근에 회전축 C1이 설치된다. 회전축 C1은 샬레의 배지 표면 1f와 서로 직교한다.
상기 회전대 16을 가진 지지판 5는 기재된 가대 17의 상부에 배치되어 있다. 상기 지지판 5 위로는 확산판 4가 배치된다. 상기 가대 17의 내부에는 아래쪽에서부터 순서대로 조명 장치 6 및 평행판 18을 갖출 수 있다. 평행판 18은 조명 장치 6의 광선을 위쪽에 평행 광선으로서 안정적으로 진행시킨다. 확산판 4는 상기 광선을 균일하게 확산시켜서 배지 1의 영상을 정확하게 촬영하도록 하는 기능을 하고 있다.
촬영 매체의 하나의 예로서 나타낸 CCD 카메라 7은 샬레 2의 위쪽, 즉, 회전축 C1의 연장선 방향에 배치된다. 샬레 2는 샬레 개구부 3을 아래쪽으로 향한 상태(뒤집어 엎은 상태)로 투명회전판 22에 올려놓고 이의 배지 1은 아래쪽의 조명 장치 6에 조명된다. 그리고 나서, CCD 카메라 7은 샬레의 바닥 표면 방향으로부터 해당 샬레의 주변을 포함한 배지의 영상을 투과 빛으로서 촬영한다. 기재된 실시태양에 있어서, 상기 회전축 C1은 샬레 2의 배지 표면 1f의 중심으로 설정되고, CCD 카메라 7은 샬레 2의 회전축 C1을 거의 그대로 늘린 연장선 위로 배치된다. CCD 카메라와 샬레 회전축의 위치 관계는 샬레 전체의 촬영이 가능한 위치이면 정확한 연장선상이 아니더라도 다소의 축의 위치 차이는 허용된다. 또한, 샬레(배지 표면)에 설정되는 회전축의 위치도 반드시 정확해야하는 것은 아니며, 샬레의 크기(직경), 투명회전판에 놓을 때의 위치의 차이 등에 의해 영향을 받는다. 이 때문에, 회전축은 샬레 전체의 촬영, 샬레의 회전에 지장을 초래하지 않는 범위에서 대략 샬레의 중심으로 설정된다. 설명에 있어서, 샬레는 뚜껑을 열어서 뒤집어 엎은 상태로 투명회전판에 놓여 있지만, 샬레의 뚜껑을 덮은 채로 놓을 수 있고, 어느 것이라도 적절하다.
상기 데이터 처리 장치 9는 개인용 컴퓨터 등이 적당한 연산 장치이며, 신호 케이블 8c를 통해 CCD 카메라 7과 연결되어 있다. 샬레를 촬영하여 획득된 영상 데이터가 데이터 처리 장치 9에 보내지고, 데이터 처리(하기 상세히 기재)를 실시하여 샬레 내의 콜로니 K의 수를 계수한다. 필요에 따라서 촬영된 샬레 영상 등은 영상 모니터 12에 표시된다. 또한, 상기 구동 모터 19와 상기 데이터 처리 장치 9의 사이에도 신호 케이블 8m을 갖출 수 있다. 상기 데이터 처리 장치 9의 제어를 바탕으로, CCD 카메라 7에 의한 촬영과 연동하여 구동 모터 19의 구동이 실시되고, 지정된 수의 투명회전판 22(샬레 2)의 회전이 실시된다.
상기 기재된 CCD 카메라 7의 지지 구조는 도면에서 생략되어 있다. 촬영 매체에 있어서, 해당 실시태양의 CCD 카메라뿐만 아니라 CMOS 영상 센서(image sensor) 등의 공지의 기기를 이용할 수 있다. 배지 1을 촬영할 경우에 샬레 개구부 3을 아래쪽으로 하여 아래쪽에서 조명하는 구성은 하기에 기재되어 있다. 그러나, 샬레 1을 위쪽으로 배치하여 조명 장치 6과 CCD 카메라 7을 상하 반대의 배치로 하는 것도 가능하고, 특히 이와 같이 기재한 실시태양에 한정되는 것은 아니다. 도면에 있어서, 부호 2a는 샬레의 측벽을 나타낸다.
도 3은 상기 CCD 카메라 7에 의해 샬레 2의 바닥 표면을 촬영했을 경우의 촬영 영상 14의 예이다. 샬레 측벽 2a의 안쪽은 배지 1이며, 계수 대상이 되는 미생물의 콜로니 K가 다양한 형태로 생성되어 있다. 본 발명의 실시태양의 콜로니수 계수 방법에 있어서, 샬레 측벽 2a 내부의 콜로니 계수영역 13은 중심부를 차지하는 중심영상영역 10과 그 외측의 주변영상영역 11로 분할되어 있다. 도면에 기재된 것과 같이, CCD 카메라 7에 의한 촬영에서는 샬레의 전체(배지 표면 1f 전체)가 촬영되어, 영상 데이터로서 데이터 처리 장치 9에 받아들여진다.
상기의 중심영상영역 10 및 주변영상영역 11의 샬레 측벽 2a의 내경에 대한 치수 또는 비율은 특별히 한정되지 않는다. 이전의 경험에 근거하여, 상기 중심영상영역 10은 샬레 측벽 2a에 의한 영향이 적고 양호한 영상을 얻을 수 있는 영역에서 선택된다. 상기 주변영상영역 11은 샬레 측벽 2a에 근접하여 촬영 영상에 의한 콜로니 K의 계수와 다른 영역에서 선택된다.
도 4에 나타낸 플로우 차트(flow chart)에 따라, 콜로니수의 계수 방법의 전체를 설명한다. 우선, 각도 분할수 설정(J0)에 있어서, 샬레를 1회전 시킬 때에 그 360°를 어느 지정된 수로 분할할지 설정된다. 하기의 실시태양에 있어서, 분할수(지정된 수에 상응)에 상응하는 콜로니 계수는 촬영과 데이터 처리 사이의 균형이 비교적 효율적으로 실시되는 것으로 여겨지는 6분할(지정된 수 = 6)로 설정된다. 즉, 지정 각도 60°로서 상기 지정 각도마다 회전축 C1을 중심으로 하여 샬레를 회전 및 정지시켜서, CCD 카메라 7로 상기 배지 표면 전체의 촬영을 한번 실시하는 콜로니수의 계수 방법으로 설정되어 있다. 이하, 6분할(지정된 수 = 6)을 예로 하여 설명한다.
상기 투명회전판 22 위에 설치된 샬레에 대해 CCD 카메라 7에 의한 첫 번째의 샬레 촬영(Ji = J1)을 실시한다. 그런 다음, 상기 샬레 전체의 촬영 영상의 영상 데이터 14(도 3 참조)는 신호 케이블 8c로 송신되어 데이터 처리 장치 9에 입력되고(S1), 데이터 처리(상세히 하기)에 의해 해당 지정 각도의 콜로니수 계수가 실시된다. 그런 다음, 상기 샬레는 지정 각도(60°)로 회전한 후에 정지되고, 처음으로부터 60°회전한 두 번째의 샬레 촬영(Ji = J2)이 실시된다. 그 후, 샬레 회전축을 중심으로 하나의 지정 각도로 회전하고 지정 각도의 회전마다 일단 정지하여 해당 지정 각도마다 촬영 및 콜로니수 계수가 계속된다.
그런 다음, 상기 데이터 처리 장치 9에 받아들인 촬영 영상 14의 영상 데이터로부터 계수 대상이 되는 계수 영상이 생성된다(S2). 촬영 영상 14의 영상 데이터 처리에 있어서, 도 3에 나타낸 것과 같이, 미리 설정한 조건에 따라서 샬레 측벽 2a의 안쪽에 콜로니 K를 계수하는 계수영역 13이 결정된다(S3). 또한, 계수영역 13은 샬레 2의 반사광 등에 의한 데이터의 교란이 많은 주변영상영역 11과 데이터가 안정적인 중심영상영역 10으로 분할된다(S4). 그리고 나서, 각각의 영상영역 10 및 11로 적용된 영상 데이터의 사전 처리 및 계수 매체는 각각 콜로니수를 계수하는데 사용된다(S5 및 S6).
예를 들면, 샬레 측벽 2a에 근접하여 반사광 등에 의한 데이터의 교란이 많은 주변영상영역 11의 영상 데이터에 대해서는, 미리 지정한 하나의 임계값을 사용하여 데이터의 이진법 영상의 작성에 의해 콜로니수는 계수된다. 또한, 계수영역 13의 면적의 주요부를 차지하여 데이터가 안정적인 중심영상영역 10에서는, 계수 대상으로서의 콜로니 K와 배경의 배지와의 차이를 두드러지게 하는 자동 임계값결정법의 판별 분석법을 사용하여 콜로니 K가 계수된다.
상기 주변영상영역 11의 콜로니 계수 수치와 중심영상영역 10의 콜로니 계수 수치는 각각의 영역이 통합된다(S7). 그리고 나서, 각 영역마다 통합된 계수 수치로부터 해당 지정 각도에 있어서의 계수영역 13 전체의 콜로니수가 계수되고 획득되며(S8), 해당 지정 각도에 있어서의 콜로니수의 데이터로서 데이터 처리 장치 9에 기록된다(S9).
촬영 영상 14의 영상 데이터로부터 콜로니수를 계수하는 경우, 상기 방법(배경기술에 기술된 특허문헌 4(일본 특허 공개 번호 2006-345750호)를 비롯한 공지의 계수 방법이 적용된다.
그런 다음, 단계 S9의 개별 각도의 콜로니수 기록에 의해 축적된 각 지정 각도에서의 콜로니수 데이터의 합계가 J0으로 설정한 분할수에 도달하는지 확인한다(S10). 본 발명의 실시태양에 있어서, 합계가 6에 도달하는지를 확인한다.
만약 상기 합계가 6에 도달하지 않았다면, 샬레는 60° 더 회전되고(S11), 계수 대상의 샬레에 대한 제 2번째의 촬영이 실시되어(Ji = J2) 촬영 영상 14가 획득되고, 플로우 차트(flow chart)에 기재된 것과 같이 촬영 영상 데이터 입력(S1) 단계부터 각 지정 각도의 콜로니수 기록(S9) 단계까지 콜로니 K의 계수에 대한 데이터 처리가 계속해서 실시된다.
그런 다음, 각 지정 각도마다 콜로니수의 계수를 계속해서 실시한다. 각각의 지정 각도의 콜로니수 기록에 의해 축적된 각 지정 각도에서의 콜로니수 데이터의 합계가 분할수(지정된 수)와 같은 6, 즉 제 6번째(300°)에 도달한 것을 확인하고, 해당 샬레에 대한 촬영 및 콜로니수의 계수를 종료한다.
그런 다음, 지금까지 데이터 처리 장치 9에 기록한 0°, 60°, 120°, 180°, 240° 및 300°의 각각의 각도에 대한 6개의 콜로니수가 수치처리되어, 최종적으로 해당 샬레에 있어서의 콜로니수가 산출된다(S12). 이러한 실시태양에 있어서, 제 1번째(0°) 내지 제 6번째(300°)의 6개의 콜로니 계수 수치를 바탕으로 이들의 평균값을 산출함으로써, 샬레의 콜로니수가 산출된다. 이후, 콜로니수 계수의 대상 샬레를 다른 샬레로 교체하고, 0°부터 시작하여 각각의 지정 각도 60°에서의 콜로니수 계수 및 데이터 기록을 실시하여 순차적으로 각 샬레에 대한 콜로니수의 산출을 실시한다. 샬레를 촬영할 경우에, 제 1번째를 60°의 각도로 하고 제 6번째를 360°의 각도로 할 수도 있다.
본 발명의 실시태양에 있어서, 360°를 6분할 하였으나, 특별히 6분할에 한정되는 것은 아니다. 샬레 촬영에 따른 콜로니 계수 및 계수 수치의 정확도 향상을 고려하여, 샬레의 1회전을 바람직한 분할수(지정된 수)로 나누고 상기 분할수를 바탕으로 하는 지정 각도만큼 샬레를 회전시켜서 콜로니수를 계수할 수 있다. 본 발명의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 콜로니수의 계산값에 분수가 나타나기도 하지만, 계수된 콜로니수의 이용 목적에 따라, 그대로 데이터를 분수로 사용할지, 반올림 등의 처리를 통해서 정수로서 사용할지는 자유롭게 선택할 수 있다.
본 발명의 실시태양의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 종래 지적되었던 것과 같이, 샬레 및 콜로니에 대하여 조명 및 다양한 카메라가 특정한 위치에 있을 경우에 획득되는 편향된 영상 데이터에 근거한 콜로니 계수 수치가 사용되는 문제점이 해결된다. 즉, 다수의 촬영 조건에 의해 평준화된 안정적인 데이터 산출이 가능해진다. 특히, 각 지정 각도의 회전마다 일단 정지되어, 지정 각도에서의 촬영 영상이 선명해지고, 상기 영상 데이터 처리에 의한 콜로니수 계수의 정확도는 향상된다. 또한, 콜로니 계수 수치의 안정화 및 신뢰성 향상에 의해, 미생물 등의 시험 조건과 콜로니수의 상관성이 명확해지고, 미생물에 관한 기술개발이나 문제점의 원인 규명 등의 지침이 명확해지며, 기술연구 활동을 가속화하는 효과가 있다.
<제 2의 실시태양>
제 2 실시태양에 있어서, 제 1 실시태양에 기재한 1회전의 분할수(지정된 수)로부터 얻을 수 있는 지정 각도에 있어서, 그 하나의 지정 각도에 대하여 CCD 카메라 7로 다수 회 촬영한다. 그리고 나서, 해당 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 배지 표면 전체의 영상 데이터가 획득된다. 획득된 해당 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 배지 표면 전체의 영상 데이터 각각에 대하여, 도 3에 기재된 콜로니수의 계수 방법에 의한 데이터 처리가 적용되어, 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수가 다수 회 계수된다. 그런 다음, 각 지정 각도마다 각각 개별적으로 계수된 콜로니수가 수치처리되어, 해당 샬레 내의 콜로니수가 산출된다. 제 2 실시태양에 있어서, 도 4의 플로우 차트(flow chart) 중 단계 Ji의 샬레의 촬영은 "다수 회의 샬레 촬영"을 나타낸다.
예를 들면, 분할수(지정된 수)를 6으로 한다고 가정하면, 상응하는 지정 각도는 60°가 된다. 우선, 제 1번째(0°)에 5회 촬영한다. 그 다음, 지정 각도 60°로 회전한 제 2번째(60°)에서도 5회 촬영한다. 계속되는 제 3번째(120°)에서도 5회 촬영하고, 최종 제 6번째(300°)에서도 5회 촬영한다. 그런 다음, 획득된 총 30개의 배지 표면 전체의 영상 데이터 각각에 대하여 콜로니수가 계수된다. 그 결과, 해당 샬레에 대해서 30개의 콜로니 계수 수치가 생긴다. 그리고 나서, 수치처리를 하여 30개의 콜로니 계수 수치로부터 평균값이 산출된다. 이러한 평균값이 해당 계수 대상 샬레의 콜로니수의 산출값이 된다.
또는, 각각의 지정 각도에서 획득한 5장의 배지 표면 전체의 영상 데이터로부터 얻을 수 있는 5개의 콜로니 계수 수치를 평균하여, 일단 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수의 산출값을 획득한다. 그런 다음, 이들의 평균을 산출하기 위하여 모든 지정 각도에 있어서의 콜로니수 산출값을 획득할 수 있다.
또한, 각 지정 각도로 계수된 5개의 콜로니수의 평균값으로부터 예를 들면 5% 이상 차이가 있는 특이한 수치 데이터를 제거하고 남아있는 지정 각도의 콜로니수의 평균값을 산출하고, 전체의 콜로니수의 평균값을 산출하여 계수 대상 샬레의 콜로니수로서 설정하는 등, 사용 목적에 따른 다양한 종류의 데이터 처리를 실시하여 콜로니수를 산출할 수 있다. 또한, 수치 데이터의 선택을 위해 적절한 탐색을 수행하여 산출 수치의 신뢰도를 향상시킬 수도 있다. 하나의 지정 각도에서의 촬영 횟수는 콜로니수를 계수할 목적 또는 조건에 따라서 적당히 변경할 수 있다. 제 2 실시태양에 있어서, 각 지정 각도에서 발생하는 영상 데이터의 촬영 조건 등의 변동을 다수회의 촬영에 의해 배제할 수 있고, 샬레 내의 콜로니수를 더욱 안정적으로 계수할 수 있다.
<제 3의 실시태양>
제 3 실시태양에 있어서, 제 1 실시태양과 달리, 지정 각도로 회전시킬 때마다 샬레를 일단 정지시키지 않고, 샬레를 연속 회전시키면서 순차적으로 각 지정 각도의 회전마다 샬레의 촬영을 실시하고, 획득된 영상 데이터의 데이터 처리로부터 콜로니수가 계수 및 기록된다. 그리고 나서, 이러한 콜로니 계수 수치를 바탕으로 대상 샬레의 콜로니수가 산출된다. 상기 콜로니수 계수 방법, 데이터 처리, 및 수치처리는 제 1 실시태양에 따른다. 이렇게 함으로써, 샬레의 일단 정지가 없어지기 때문에, 단위 시간당의 샬레의 계측수를 늘릴 수 있다. 그러나, 샬레가 회전 상태인 동안 촬영되기 때문에, 콜로니수 계수 방법의 영상 처리의 정확도를 고려할 필요가 있다.
<제 4의 실시태양>
제 4 실시태양에 있어서, 계수 대상이 되는 샬레를 회전시키는 것이 아니라, 촬영 매체를 회전시켜서 촬영 및 계수한다. 도 5의 구조단면도로부터 알 수 있듯이, 계수장치 60은 샬레 설치 장치 65, 촬영 매체(CCD 카메라 7), 회전 촬영부 66, 및 데이터 처리 장치 9를 포함하여 구성되어 있다.
상기 샬레 설치 장치 65는 가대 17의 상부에 지지판 5가 배치되고, 상기 지지판 5 위로는 확산판 4를 포함할 수 있다. 상기 가대 17의 내부에는 아래쪽에서부터 순서대로 조명 장치 6 및 평행판 18을 갖출 수 있다. 상기 지지판 5에는 다리부 5h를 가지고 있고, 그 상부에 보유판 5b가 접속된다.
회전 촬영부 66은 상기 보유판 5b 위에 설치된다. 회전 촬영부 66에는 회전 대 16, 회전판 22r, 및 구동 모터 19를 포함할 수 있다. 상기 원반 모양의 회전판 22r은 회전대 16 위에 나사(도면에 기재하지 않음)와 같은 것으로 고정된다. 또한, 상기 회전대 16은 지지 롤러 23에 의해 보유판 5b 상에서 회전가능하게 지지되어 있다. 상기 회전대 16에는 구동 벨트 21이 팽팽한 상태로 장치되어 있다. 상기 보유판 5b 상의 구동 모터 19에 고정된 구동 풀리 20이 구동 벨트 21에 전달되어서 구동된다. 상기 원반 모양의 회전판 22r의 중심위치에 촬영 매체인 CCD 카메라 7이 갖추어져 있다.
상기 CCD 카메라 7(촬영 매체)은 계수 대상이 되는 샬레 2(샬레의 배지 표면 1f)의 중심 부근을 회전축 C1으로 할 경우 회전축 C1의 연장선 방향에 배치된다. 본 발명의 실시태양에 있어서, 촬영 매체 측의 회전축 C2는 회전판 22r의 중심위치에 직교하여 설정되어 있고, 샬레의 배지 표면의 중심 부근에 설정된 회전축 C1과 거의 일치하는 배치이다. 물론, 샬레의 회전축 C1과 CCD 카메라 측(회전축 C2)과의 위치 관계는 상기 제 1 실시태양와 같은 이유에 의해, 샬레 전체의 촬영이 가능한 위치이면, 정확한 연장선상이 아니더라도, 다소의 축의 위치 차이는 허용된다. 이와 같이, 샬레(배지 표면)에 설정되는 회전축 C1의 위치는 반드시 정확한 것이 아니고, 샬레의 크기(지름), 도 5의 확산판 4에 샬레를 올려놓을 때의 위치의 차이 등에 의해 영향을 받는다. 이 때문에, 샬레의 회전축 C1은 샬레 전체의 촬영, 샬레의 회전에 지장을 초래하지 않는 범위에서 대략 샬레의 중심으로 설정된다. 제 4실시태양의 촬영 매체 및 데이터 처리 장치 9의 상세한 설명은 제 1 실시태양와 같기 때문에, 그 설명은 생략한다. 도 1 및 다른 도면과 공통된 구성요소는 동일 부호로서 나타낸다.
제 4 실시태양으로서 도 5에 기재된 계수장치 60을 사용한 콜로니수 계수 방법은 도 4의 플로우 차트(flow chart)에 나타낸 제 1 실시태양과 거의 같다. 이러한 경우, 단계 S11은 샬레의 회전이 "카메라 회전"으로 변경된다. 또한, 본 발명의 실시태양에 따른 계수장치 60을 사용한 콜로니수 계수 방법에 있어서도 하나의 지정 각도에 대하여 촬영 매체로 다수 회 촬영하는 제 2 실시태양, 샬레를 대신하여 촬영 매체를 연속 회전시키면서 촬영하는 제 3 실시태양, 및 그 외의 수치의 선택 및 평균값의 계산 방법 등을 조합시키는 것이 가능하다.
제 4 실시태양에 있어서, 샬레 등의 촬영되는 대상은 고정되고, 촬영 매체 측을 회전할 수 있다. 이 때문에, 크기, 무게, 취약성 등에 의해 용이하게 회전할 수 없는 촬영되는 대상의 촬영 및 계측에 적절하다. 예를 들면, 액체 배지 등으로 배양하였을 경우에 촬영하는 상황이 해당된다. 도면에 있어서, 샬레는 뚜껑을 열어서 뒤집어 엎은 상태로 확산판에 놓여 있지만, 샬레는 뚜껑을 덮은 채로 올려놓을 수 있고, 어느 것이라도 적절하다.
상기 제 1 내지 4의 각 실시태양에 있어서, 샬레의 촬영 위치를 균등한 각도로 분할하여 촬영 조건을 균등화하고 있다. 그 결과, 샬레 촬영 위치는 최초에 촬영하는 위치에 의해 결정되는 우연에 의지하고 있다. 이러한 점에서, 우선 샬레를 회전시키면서 각 지정 각도에 있어서의 콜로니수를 시험적으로 계수한다. 예를 들면, 이 중 많은 콜로니수가 계수된 각도의 근방의 각도에 있어서, 별도 지정된 수의 촬영 및 콜로니수 계수를 실시하고, 이러한 콜로니수 계수 데이터를 데이터 처리하여 검사 대상의 샬레의 콜로니수로서 설정하면, 실제에 근접한 많은 콜로니수를 계수할 수 있다. 상기와 같이, 콜로니수에 대한 계수 데이터의 사용 목적에 따라 바람직한 조건의 다수의 촬영 영상을 촬영 및 콜로니수 계수를 실시하고, 이들 다수의 계수 수치를 데이터 처리하여 콜로니수를 계수할 수 있다.
본 발명에 있어서의 콜로니수의 계수 방법으로서, 도 4의 설명은 각각 검사 영역을 주변영상영역 11 및 중심영상영역 10으로 분할하고, 촬영 영상의 콜로니 계수하고 데이터 처리를 실시하는 실시태양을 나타낸다. 본 발명은 상기 촬영 영상의 콜로니 계수의 데이터 처리에 한정되지 않고, 다양한 종류의 촬영 영상 데이터 처리 매체를 이용하여 콜로니를 계수할 수도 있다.
즉, 계수 대상 샬레 또는 촬영 매체를 회전시켜서, 해당 촬영 매체로 촬영한 다수의 촬영 영상의 영상 데이터를 데이터 처리하여 안정적인 콜로니 계수 수치를 획득하는 것에 본 발명의 주된 목적이 있다. 예시의 콜로니수 계수 방법에 한정되지 않고 다양한 종류의 데이터 처리 매체 및 계수 방법이 본 발명의 범위 및 사상 내에 적용될 수 있다.
또한, 본 발명은 샬레를 사용한 배지에 있어서의 콜로니 K의 계수 방법에 관한 것이나, 본 발명을 샬레 대신에 플라스틱 시트를 사용한 배지에서 생성시킨 콜로니 등 기타 방식의 배지에도 적용할 수 있다.
도 1은 본 발명에 있어서 콜로니 계수를 실시하는 장치의 구조단면도이다.
도 2는 도 1의 장치의 평면도이다.
도 3은 샬레 내의 배지에서 생성된 콜로니를 예시하는 촬영 영상의 모식도이다.
도 4는 본 발명에 있어서 콜로니 계수의 공정을 나타내는 플로우 차트(flow chart)이다.
도 5는 기타의 실시태양에 있어서 콜로니 계수를 실시하는 장치의 구조단면도이다.
부호의 설명
1 배지
2 샬레
2a 샬레 측벽
3 샬레 개구부
4 확산판
5 지지판
6 조명장치
7 CCD 카메라(촬영 매체)
8c, 8m 신호 케이블
9 데이터 처리 장치
10 중심 영상 영역
11 주변 영상 영역
12 영상 모니터
13 계수영역
14 촬영 영상
16 회전대
17 가대
18 평행판
19 구동 모터
20 구동 풀리
21 구동 벨트
22 투명 회전판
23 지지 롤러
50,60 계수장치
55 샬레 회전기계 설치 장치
65 샬레 설치 장치
66 회전 촬영부
C1 셜레의 회전축
C2 촬영 매체의 회전축
K 콜로니
J0 각도 분할수 설정
Ji 샬레 촬영
S1 촬영 영상 데이터 입력
S2 계수 영상 생성
S3 계수 영역 자동 추출
S4 계수 영역 분할
S5 주변 영상 영역의 계수
S6 중심 영상 영역의 계수
S7 계수값의 통합
S8 지정 각도의 콜로니 계수
S9 지정 각도의 콜로니수 기록
S10 분할수의 비교
S11 샬레 회전
S12 최종값 산출
본 발명자들은 지금까지 상기한 실시태양의 콜로니수의 계수 방법을 이용하고, A, B, C의 3종류의 균을 배양한 샬레에 있어서의 콜로니수의 계측을 시도했다. 균 A는 시료 번호 1, 2, 3 및 4를 갖는 샬레이고, 균 B는 시료 번호 5, 6, 7 및 8을 갖는 샬레에 해당된다. 균 C는 시료 번호 9, 10, 11 및 12를 갖는 샬레에 해당된다. 상세한 계측 결과는 표 1과 같다.
표 1의 최상단에 나타낸 1분할, 2분할, 4분할, 6분할, 8분할, 12분할, 및 15분할은 샬레를 1회전(360°) 시킬 경우에 촬영한 분할수, 즉 지정된 수를 가리킨다. 1분할의 경우, 계측 대상의 샬레를 회전시키지 않고 오직 하나의 위치에서 촬영하였다. 예를 들면, 6분할의 경우, 360°를 분할수(지정된 수)인 6으로 나눈 60°를 지정 각도로 하여 이 60°의 지정 각도만큼 샬레를 회전시켜서 6회의 다른 조건으로 동일한 샬레를 촬영하여 콜로니수를 계수하였다. 다른 분할수에서도 이와 같이 실시하였다. 표에서, 분할수에 첨부된 괄호의 도수는 분할수에 상응하는 지정 각도이다.
표 1에 나타낸 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 각각의 지정 각도만큼의 회전에 있어서 일단 정지하여 4회의 촬영을 실시하였고, 상기 지정 각도당 4개의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하였다. 획득한 영상 데이터는 계측 대상의 샬레 내의 콜로니수를 평균하여 계수하는데 사용하였다. 예를 들면, 분할수가 6이고 지정 각도가 60°인 경우, 24개의 영상 데이터가 획득되었다. 각 시료 번호의 샬 레에 대하여 각각의 분할수에서의 계수 결과가 표 1의 "개수"이다. 각 시료 번호의 샬레의 하단에 기재한 % 수치는 "각 콜로니수 개수"의 "15등분 한 경우의 콜로니 개수"에 대한 비율의 퍼센트에 의한 표시이다.
예를 들면, 시료 번호 1에 있어서, 15분할로서 지정 각도 24°로 샬레를 회전 및 정지시켜서 각각의 회전 위치에서 4회씩 촬영하였다. 그런 다음, 콜로니수의 평균값은 177.2개였다. 이와 반대로. 샬레를 회전시키지 않는 1분할의 경우의 콜로니수는 179.5개를 나타냈다. 따라서, 그 비율은 101.3%가 되었다. 이와 같이, 6분할의 경우의 콜로니수는 176.3개이므로, 그 비율은 99.5%가 되었다. 표 1의 아래쪽 3줄은 각 시료 번호에서의 15분할의 콜로니 계수 수치에 대한 1분할 또는 12분할의 콜로니 계수 수치 비율의 퍼센트의 최대값, 최소값, 및 이의 표준오차이다.
균종류
 시료번호 단위 1분할
(360°)		 2분할
(180°)		 4분할
(90°)		 6분할
(60°)		 8분할
(45°)		 12분할
(30°)		 15분할
(24°)
A 1 개수 179.5 175.6 176.2 176.3 177.1 178.1 177.2
% 101.3 99.1 99.4 99.5 99.9 100.5 100.0
2 개수 200.8 196.7 196.7 196.1 197.6 197.2 196.5
% 102.2 100.1 100.1 99.8 100.6 100.4 100.0
3 개수 193.0 189.5 190.5 190.7 190.7 189.7 189.7
% 101.7 99.9 100.4 100.5 100.5 100.0 100.0
4 개수 135.0 133.1 131.4 132.1 132.3 131.8 132.3
% 102.0 100.6 99.3 99.8 100.0 99.6 100.0
B 5 개수 256.0 252.7 253.2 253.0 253.7 253.7 253.5
% 101.0 99.7 99.9 99.8 100.1 100.1 100.0
6 개수 181.8 180.6 181.4 180.7 180.6 180.2 180.6
% 100.7 100.0 100.4 100.1 100.0 99.8 100.0
7 개수 83.8 84.0 83.2 83.0 83.7 83.7 84.3
% 99.4 99.6 98.7 98.5 99.3 99.3 100.0
8 개수 93.5 95.5 94.5 94.0 95.0 95.2 95.0
% 98.4 100.5 99.5 98.9 100.0 100.2 100.0
C 9 개수 268.8 274.1 272.2 274.1 272.2 271.1 272.7
% 98.6 100.5 99.8 100.5 99.8 99.4 100.0
10 개수 226.3 229.0 229.4 228.7 228.0 230.4 230.2
% 98.3 99.5 99.7 99.3 99.0 100.1 100.0
11 개수 251.5 255.3 253.6 252.1 253.6 253.3 252.4
% 99.6 101.1 100.5 99.9 100.5 100.4 100.0
12 개수 194.5 191.3 192.4 192.4 192.0 194.2 196.0
% 99.2 97.6 98.2 98.2 98.0 99.1 100.0
%의 최대값 % 102.2 101.1 100.5 100.5 100.6 100.5 100.0
%의 최소값 % 98.3 97.6 98.2 98.2 98.0 99.1 100.0
%의 표준오차 % 1.45 0.91 0.71 0.74 0.74 0.46 0.00
상기의 결과에서 샬레를 회전시키지 않는 1분할의 경우에 나타난 퍼센트 표시 값은 최대값 102.2% 및 최소값 98.3%과 같이 큰 진동폭을 나타냈다. 또한, 각 분할수에 있어서의 시료 번호 1 내지 12의 퍼센트 표시 값으로부터 표준오차를 계산한 경우에 샬레를 회전시키지 않는 1분할의 경우가 최대값을 나타냈다.
콜로니수의 퍼센트 표시에 기초한 진동폭 및 표준오차에 있어서, 샬레를 회전시키지 않고 계수하였을 경우의 콜로니 계수 수치가 샬레를 회전시켜서 많은 조건하에서 촬영하여 콜로니수를 계수한 계수 수치에 비해 더 큰 오차를 나타냈다. 이는 콜로니 계수 대상의 샬레를 회전시키지 않고 촬영하여 콜로니수의 계수를 실시하는 종래의 콜로니 방법에 비해 샬레를 회전시켜서 콜로니를 계수하는 본 발명의 콜로니수의 계수 방법이 보다 안정적인 계수 데이터를 제공할 수 있는 것을 나타낸다.
또한, 분할수를 변경했을 경우의 콜로니 계수의 계측 정확도를 비교하면, 4분할 또는 6분할에서는 변동폭 및 표준오차가 적었고 거의 균등한 값을 나타내고, 8분할 이상에서는 촬영 및 영상 데이터 처리 등의 수고의 증대에 비해서 계수 정확도의 향상이 적은 것으로 나타났다. 이 때문에, 계수 대상의 미생물, 배양 조건,및 콜로니 계수 데이터의 이용 목적에 따라, 4분할 또는 6분할 정도가 효과적인 콜로니 계수를 위한 적절한 분할수이다.

Claims (6)

  1. 샬레(petri dish) 내의 배지에서 생성된 미생물의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 상기 샬레의 배지 표면의 중심 부근을 회전축으로 하여 상기 회전축의 연장선 방향에 배치한 촬영 매체로 촬영하고 데이터 처리하여 콜로니수를 계수하는 경우,
    상기 샬레의 1회전을 4 분할 내지 6 분할하여 얻은 지정 각도만큼 상기 회전축을 중심으로 하여 상기 샬레를 회전시키고; 상기 지정 각도만큼의 샬레의 회전마다 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하고;
    상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 데이터 처리하여 상기 지정 각도에서의 배지 표면 전체의 콜로니수를 개별적으로 계수하고; 및
    상기 각 지정 각도마다 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법.
  2. 샬레 내의 배지에서 생성된 미생물의 콜로니수의 계수 방법에 있어서, 상기 샬레의 배지 표면의 중심 부근을 회전축으로 하여 상기 회전축의 연장선 방향에 배치한 촬영 매체로 촬영하고 데이터 처리하여 콜로니수를 계수하는 경우,
    상기 샬레의 1회전을 4 분할 내지 6 분할하여 얻은 지정 각도만큼 상기 촬영 매체를 회전시키고, 상기 지정 각도만큼의 상기 촬영 매체의 회전마다 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하여 상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 획득하고;
    상기 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체의 영상 데이터를 데이터 처리하여 상기 지정 각도에서의 배지 표면 전체의 콜로니수를 개별적으로 계수하고; 및
    상기 각 지정 각도마다 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 각 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하는 경우,
    상기 촬영 매체는 하나의 지정 각도에 대해서 다수 회씩 촬영하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 영상 데이터를 획득하고;
    상기 획득한 영상 데이터를 각각 데이터 처리하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수를 다수 회 계수하고; 및
    상기 각 지정 각도마다 각각 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법.
  4. 제 2항에 있어서, 상기 각 지정 각도에 있어서의 상기 샬레의 배지 표면 전 체를 촬영하는 경우,
    상기 촬영 매체는 하나의 지정 각도에 대해서 다수 회씩 촬영하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 다수의 영상 데이터를 획득하고;
    상기 획득한 영상 데이터를 각각 데이터 처리하여 상기 하나의 지정 각도에 있어서의 콜로니수를 다수 회 계수하고; 및
    상기 각 지정 각도마다 각각 개별적으로 계수된 콜로니수를 수치처리하여 상기 샬레 내의 콜로니수를 산출하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 샬레를 상기 지정 각도로 회전시킬 때마다 일단 정지하여 상기 촬영 매체로 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법.
  6. 제 2항에 있어서, 상기 촬영 매체를 상기 지정 각도로 회전시킬 때마다 일단 정지하여 상기 촬영 매체로 상기 샬레의 배지 표면 전체를 촬영하는 것을 특징으로 하는 콜로니수의 계수 방법.
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