KR100482499B1

KR100482499B1 - 벤자제핀-,벤즈옥사제핀-및벤조티아제핀-n-아세트산유도체와그제조방법및그들을함유한약제학적조성물

Info

Publication number: KR100482499B1
Application number: KR1019960007794A
Authority: KR
Inventors: 발데크 하랄드; 휠트제 다크마르; 메싱거 요제프; 안텔 요헨; 부를 미하일; 토르멜렌 딜크
Original assignee: 솔베이 파머슈티컬스 게엠베하
Priority date: 1995-03-23
Filing date: 1996-03-21
Publication date: 2006-08-23
Also published as: AR023289A1; IL117265A; CZ86396A3; JPH08269011A; SK281079B6; HU9600680D0; ES2152444T3; EP0733642B1; ZA961243B; NO305904B1; EP0733642A1; HUP9600680A2; PL184336B1; AU701271B2; DE59606160D1; ATE197801T1; CZ289245B6; NO961181L; CN1147506A; PL313433A1

Abstract

NEP-억제효과를 갖는 하기 일반식(Ⅰ)의 화합물 및 생리학적으로 내성을 갖는 그의 염.

여기에서, R¹은 저급알콕시라디칼이 저급알콕시기로 치환되는 저급 알콕시-저급-알킬기이거나, 페닐고리에서 저급알킬, 저급알콕시 또는 할로겐으로 선택적 치환이 가능한 페닐-저급-알킬기 또는 페닐옥시-저급알킬기이거나, 또는 나프틸-저급-알킬기이며,

A는 CH₂, O 또는 S이며,

R²는 수소 또는 할로겐이며,

R³는 수소 또는 할로겐이며,

R⁴는 수소 또는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고,

R⁵는 수소 또는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이다.

Description

벤자제핀-, 벤즈옥사제핀- 및 벤조티아제핀-N-아세트산 유도체와 그 제조방법 및 그들을 함유한 약제학적 조성물

본 발명은 질소원자에 대해 α위치에 있는 옥소기를 포함하며 3위치에서 1-(카르복시알킬)시클로펜틸카르보닐아미노 라디칼로 치환된 신규한 벤자제핀-, 벤즈옥사제핀- 및 벤조티아제핀-N-아세트산 유도체와, 그들의 염과 생체내 가변성(biolabile) 에스테르, 그들을 함유하는 약제학적 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

본 발명은 귀중한 약리학적 성질들을 갖는 신규한 벤자제핀, 벤즈옥사제핀 및 벤조티아제핀 화합물들을 개발하는 데에 목적을 두고 있다. 더우기, 본 발명은 심부전 치료에 사용될 수 있는 신규한 약제학적 활성물질들을 개발하는 데에 목적을 두고 있다.

선택적으로 에스테르화된 1-(카르복시알킬)시클로펜틸카르보닐아미노 라디칼이 3위치에 있는 신규한 벤자제핀-, 벤즈옥사제핀- 및 벤조티아제핀-N-아세트산 유도체들은 심장에 영향을 미치는 귀중한 약리학적 성질들을 가지고 있으며 심부전으로 생기는 높은 심장 충만압을 줄이므로써 심장을 안정화시키고 이뇨를 증진시키는 것을 토대로 한 유리한 측면으로 중성 엔도펩티다제에 현저한 저해영향을 미친다는 것이 지금까지 알려져 있다.

따라서 본 발명은 일반식(Ⅰ)의 신규한 화합물 및 생리학적으로 내성을 갖는 그의 염에 관한 것이다.

여기에서, R¹은 저급 알콕시 라디칼이 저급알콕시기로 치환되는 저급알콕시-저급-알킬기이거나, 페닐고리에서 저급알킬, 저급알콕시 또는 할로겐으로 선택적 치환이 가능한 페닐-저급-알킬기 또는 페닐옥시-저급-알킬기이거나, 또는 나프틸-저급-알킬기이며,

A는 CH₂, O 또는 S 이며,

R²는 수소 또는 할로겐이며,

R³는 수소 또는 할로겐이며,

R⁴는 수소 또는 생체내 가변성 에스테르(biolabile ester)를 형성하는 기이고,

일반식 Ⅰ의 화합물에 있는 치환기들이 저급 알킬 또는 알콕시기들이거나 이들을 포함할 경우, 이들은 곧은 사슬 또는 가지난 사슬일 수 있고, 특히 1∼4개, 바람직하게는 1∼2개의 탄소원자들을 포함하며 바람직하게는 메틸 또는 메톡시이다. 치환기들이 할로겐이거나 할로겐 치환기들을 포함할 경우, 특히 플루오르, 염소 또는 브롬이 적당하며, 바람직하게는 플루오르 또는 염소가 적당하다.

일반식 Ⅰ의 화합물에서 A는 메틸렌기, 산소 또는 황이 가능하며, 바람직하게는 메틸렌이다.

일반식 Ⅰ의 화합물은 페닐고리에 치환기 R² 및 R³를 가질 수 있다. 그러나, 바람직하게는 치환기 R²와 R³ 또는 이들 치환기들 중 적어도 하나는 수소이다.

R¹은 바람직하게는 방향족 고리를 포함하는 라디칼이며, 예를들면 저급 알킬렌 고리가 1∼4개, 바람직하게는 1∼2개의 탄소원자를 포함할 수 있는 선택적으로 치환된 페닐-저급-알킬 또는 페닐옥시-저급-알킬 라디칼이다. 특히, R¹은 할로겐, 저급알콕시 또는 저급 알킬로 선택적으로 한번 이상 치환가능한 선택적으로 치환된 펜에틸기이거나 나프틸에틸기이다. R¹이 저급 알콕시로 치환된 저급 알콕시-저급-알킬기일 경우, 이는 저급 알콕시 라디칼이 1∼4개, 바람직하게는 1∼2개의 탄소원자들을 포함하고 저급알콕시, 특히 메톡시로 치환된 저급 알콕시메틸기가 바람직하다.

일반식 Ⅰ의 화합물은 선택적으로 에스테르화된 디카르복실산 유도체이다. 투여형태에 따라, 특히 R⁴가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고 R⁵는 수소인 생체내 가변성 모노에스테르 또는 디카르복실산이 바람직하며, 후자의 경우는 정맥내 투여시 특히 적당하다.

생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기로 적당한 R⁴ 및 R⁵로는 저급 알킬기, 페닐고리에서 저급알킬 또는 인접한 두 탄소원자들과 결합한 저급 알킬렌 사슬로 선택적으로 치환되는 페닐 또는 페닐-저급-알킬기, 디옥솔란 고리에서 저급 알킬로 선택적으로 치환된 디옥솔라닐메틸기 또는 옥시메틸기상에서 저급알킬로 선택적으로 치환되는 C₂-C₆-알카노일옥시메틸기가 있다. 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 R⁴ 또는 R⁵가 저급알킬인 경우, 이는 1∼4개, 바람직하게는 2개의 탄소원자들을 갖는 곧은 알킬기가 바람직하다. 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기가 선택적으로 치환된 페닐-저급-알킬기인 경우, 그의 알킬렌 사슬은 1∼3개, 바람직하게는 1개의 탄소원자를 포함할 수 있다. 페닐고리가 저급 알킬렌 고리로 치환될 경우, 이는 3∼4개, 바람직하게는 3개의 탄소원자들을 포함할 수 있다. 특히 페닐을 포함하는 적당한 R⁴ 및/또는 R⁵는 페닐, 벤질 또는 인다닐이다. R⁴ 및/또는 R⁵가 선택적으로 치환된 알카노일옥시메틸기인 경우, 그의 알카노일옥시기는 2∼6개, 바람직하게는 3∼5개의 탄소원자들을 포함할 수 있고 바람직하게는 가지난 사슬이며, 예를들면 피발로일옥시메틸라디칼(t-부틸카르보닐옥시메틸 라디칼)이 있다.

본 발명에 따른 일반식 (Ⅰ)의 신규한 화합물 및 그의 염은, 하기 일반식 (Ⅱ)의 산 또는 그의 반응성 산유도체와 하기 일반식(Ⅲ)의 아민이 반응하여 하기 일반식 (Ⅳ)의 아미드가 생성되며, 하기 일반식(Ⅳ)의 화합물에 있는 산 보호기 R^4a 및 R^5a가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기가 아니면 이들은 적당한 순서에서 동시에 또는 연속적으로 제거되며, 필요하다면 비보호 산성기는 하기 일반식(V)의 알코올 또는 상응하는 하기 일반식(Va)의 반응성유도체와 에스테르화반응하며, 필요하다면 생성된 일반식(Ⅰ)의 산이 생리학적으로 내성인 그의 염으로 전환되거나 일반식 (Ⅰ)의 산의 염이 유리산으로 전환되는 단계를 거쳐서 제조된다.

여기에서, R¹은 상기한 바와 같고 R^4a는 산보호기이며,

여기에서, R², R³ 및 A는 상기한 바와 같고 R^5a는 산보호기이며,

여기에서 R¹, R², R³, R^4a, R^5a 및 A는 상기한 바와 같고,

R⁶ - OH (V) R⁶ - X (Va)

여기에서 R⁶은 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고 X는 제거될 수 있는 반응성기이다.

일반식 (Ⅰ)로 표시되는 디카르복실산 또는 모노에스테르의 생리학적으로 내성을 갖는 염은 그들의 알칼리금속, 알칼리토금속 또는 암모늄염, 예를들면 나트륨 또는 칼슘염, 또는 디에틸아민 또는 삼차부틸아민과 같은 약리학적으로 중성인 유기 아민의 생리학적으로 내성을 갖는 염이 적당하다.

일반식 (Ⅰ)의 화합물은 고리의 3위치에 있고 아미드 사이드 체인을 가지며 아미드 사이드 체인에 R¹라디칼을 갖는 두개의 비대칭 탄소원자들을 포함한다. 따라서 이 화합물은 광학적 활성을 갖는 여러 개의 입체이성질체 형태 또는 라세미체로서 존재할 수 있다. 본 발명은 라세미 혼합물과 일반식 (Ⅰ)의 이성질적으로 순수한 화합물을 포함한다.

일반식 (Ⅱ)의 산과 일반식 (Ⅲ)의 아민이 반응하여 일반식 (Ⅳ)의 아미드를 생성하는 반응은 아미노아실화반응에 의해 아미드기들을 생성하는 공지된 방법으로 수행될 수 있다. 사용가능한 아실화제로는 일반식 (Ⅱ)의 산 또는 그의 반응성유도체가 있다. 특히 적당한 반응성유도체로는 혼합된 산무수물과 산할로겐화물이 있다. 따라서, 예를들면 일반식 (Ⅱ)의 산의 산염화물이나 산브롬화물 또는 예로써 톨루엔술폰산이나 브로모벤젠술폰산과 같은 저급알킬 또는 할로겐으로 치환된 벤젠술폰산 또는 벤젠술폰산과 같은 방향족 술폰산이나 메탄술포산을 예로써 갖는 저급알칸술폰산과 같은 유기술폰산이나 일반식 (Ⅱ)의 산의 혼합무수물이 사용가능하다. 아실화반응은 바람직하게는 -20℃ 내지 실온의 반응조건하에서 비활성인 유기용매에서 수행될 수 있다. 적당한 용매로는 디클로로메탄과 같은 할로겐화 탄화수소, 벤젠 또는 톨루엔과 같은 방향족 탄화수소, 테트라히드로퓨란 또는 디옥산과 같은 사이클릭 에테르 또는 이들 용매의 혼합물이 있다.

아실화반응은, 특히 일반식 (Ⅱ)의 산과 술폰산의 혼합 무수물이 아실화제로 사용될때 산-결합시약의 존재하에서 유리하게 수행될 수 있다. 적당한 산-결합시약들로는 반응혼합물에 녹기 쉬운 염기, 특히 t-저급-알킬아민과 피리딘과 같은 유기염기, 예를들면 트리에틴아민, 트리프로필아민, 피리딘, 4-디메틸아미노피리딘, 4-디에틸아미노피리딘 또는 4-피롤리디노피리딘이 있다. 유기염기가 과도하게 사용될 경우 이는 용매로서도 동시에 작용할 수 있다.

일반식 (Ⅱ)의 산과 유기술폰산의 혼합산 무수물은 유기술폰산의 산할로겐화물, 특히 산염화물과 일반식 (Ⅱ)의 산과의 반응에 의해서 원상태(in situ)에서 얻어지며 더우기 일반식 (Ⅲ)의 아민화합물과 분리됨이 없이 직접 반응하는 것이 가능하며 유리하다.

일반식 (Ⅱ)의 산이 아실화제로 사용된다면, 일반식 (Ⅲ)의 아미노화합물과 일반식 (Ⅱ)의 산과의 반응도 역시 아미드형성에 적당한 펩타이드 케미스트리(peptide chemistry)로부터 공지된 커플링시약의 존재하에서 유리하게 수행될 수 있다. 반응성산유도체를 생성하기 위하여 원상태(in situ)에서 산과 반응하므로써 유리산(free acid)으로 아미드형성을 촉진시키는 커플링시약의 예를들면 디시클로헥실카르보디이미드와 같은 시클로알킬카르보디이미드 또는 1-에틸-3-[3-(디메틸아미노)프로필]카르보디이미드 등의 알킬카르보디이미드, 카르보닐디이미다졸 및 특히 할로겐화물 또는 토실레이트 바람직하게는 N-메틸-2-클로로피리디늄 요오디드 등의 N-저급-알킬-2-할로피리디늄염을 들 수 있다(예로서, Mukaijama in Angewandte Chemie 91, pages 789-812 참고). 커플링 시약의 존재하에서의 반응은 산-결합아민의 존재하에서 적당한 경우 할로겐화 탄화수소와 같은 용매 및/또는 방향족 용매를 사용하면서 -30 내지 50 ℃에서 유리하게 수행될 수 있다.

보호기 R^4a 및 R^5a가 일반식 (Ⅰ)의 화합물에서 요구되는 생체내 가변성 에스테르기를 형성하는 기가 아닌 경우, 이들은 공지된 방법에 의해서 일반식 (Ⅱ)의 화합물과 일반식 (Ⅲ)의 화합물의 반응에 의해 생성된 일반식 (Ⅳ)의 화합물로부터 제거된다.

산 기능을 보호하며 공지된 방법에 의해 이후에 다시 제거되는 보호기를 보호기 R^4a 및 R^5a로서 선택하는 것이 가능하다. 예를들면, 『McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press and Greene, "Protective Groups in Organic Syntnesis" Wiley Interscience Publication』에 적당한 산보호기들이 개시되어 있다.

R⁴ 및 R⁵가 동일한 일반식 (Ⅰ)의 화합물을 제조할 경우, 출발화합물 (Ⅱ) 및 (Ⅲ)에 있는 동일한 보호기 R^4a 및 R^5a를 선택하는 것이 유리하다.

R⁴ 및 R⁵가 상이한 의미를 갖는 일반식 (Ⅰ)의 화합물을 제조할 경우, 공지된 방법에 의해서 상이한 조건하에서 선택적으로 다시 제거될 수 있는, 출발화합물 (Ⅱ) 및 (Ⅲ)에 있는 상이한 보호기들을 선택하는 것이 유리하다. 상이한 조건하에서 제거될 수 있는 보호기들의 세가지 예들을 들면 다음과 같다 :

1. 염기성 조건하에서는 쉽게 분해되지만 산성조건 또는 가수소분해반응(hydrogenolysis)에서는 더욱 안정한 메틸 또는 에틸에스테르,

2. 산에 의해서 쉽게 분해되지만 염기성조건 또는 가수소분해반응에서는 더욱 안정한 삼차부틸에스테르 및

3. 가수소분해반응이나 염기성 조건하에서는 쉽게 분해되지만 산성조건하에서 더욱 안정한 벤질에스테르.

예로서, R⁴ 및 R⁵가 모두 수소인 일반식 (Ⅰ)의 디카르복실산 화합물을 제조할 경우, 사용되는 바람직한 보호기 R^4a 및 R^5a는 산에 의해서 제거될 수 있는 보호기, 예를들면 삼차부틸기이며, 일반식 (Ⅱ)의 화합물과 일반식 (Ⅲ)의 화합물과의 반응에 의해서 생성된 일반식 (Ⅳ)의 삼차 부틸에스테르화합물은 산처리에 의해서 나중에 분해된다. 이러한 분해는 예를들면, 트리플루오로아세트산의 처리 또는 디클로로메탄과 같은 할로겐화 탄화수소중의 트리플루오로아세트산 용액의 처리에 의하거나, 반응조건하에서 비활성인 유기용매, 예를들면 에틸아세테이트중의 HCl 기체의 처리에 의해서 일어난다. 이 반응은 -25℃ 내지 실온에서 수행될 수 있다.

예를들면, R⁴가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고 R⁵가 수소인 일반식 (Ⅰ)의 모노카르복실산 화합물을 제조할 경우, R^4a가 이미 요구된 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기, 예를들면 에틸기인 화합물을 일반식 (Ⅱ)의 출발화합물로서 사용하고, R⁴-OCO기가 분해되지 않는 반응조건하에서 분해되는 보호기를 일반식 (Ⅲ)의 화합물에 있는 보호기 R^5a로서 사용하는 것이 가능하다. R⁴-OCO기가 상대적으로 산에 안정한 에틸에스테르기라면, 적당한 보호기 R^5a는 예를들면, 산에 의해 제거될 수 있는 삼차 부틸기이거나 가수소분해반응에 의해서 제거될 수 있는 벤질과 같은 기이다.

일반식 (Ⅱ)의 화합물에 있는 R^4a가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 산-민감성기라면, 가수소분해 반응에 의해서 제거될 수 있는 벤질과 같은 기를 일반식 (Ⅲ)의 화합물에 있는 보호기 R^5a로서 선택하고, 이를 일반식 (Ⅱ)의 화합물과 일반식 (Ⅲ)의 화합물의 반응으로 생성된 일반식 (Ⅳ)의 화합물로부터 가수소분해반응에 의해서 제거하는 것이 유리하다. 이 가수소분해반응은 반응조건하에서 비활성인 유기용매, 예를들면 에탄올과 같은 저급알콜 또는 에틸 아세테이트와 같은 저급 알킬에스테르에서 바람직하게는 Pd/C 촉매의 존재하에서 촉매수소화반응에 의해서 수행될 수 있다. 이 촉매 수소화반응은 실온의 4∼5bar의 수소압력하에서 유리하게 수행된다.

R⁴가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고 R⁵가 수소인 일반식 (Ⅰ)의 화합물을 제조하기 위해서, 상이한 반응성을 갖는 상이한 보호기 R^4a 및 R^5a를 갖는 일반식 (Ⅱ) 및 (Ⅲ)의 출발화합물을 선택하며, 일반식 (Ⅱ)의 화합물과 일반식 (Ⅲ)의 화합물의 반응에 의해서 얻어진 일반식 (Ⅳ)의 화합물로부터 보호기 R^5a를 유지시키면서 보호기 R^4a를 먼저 제거시킨 다음, 이어서 하기 일반식 (Ⅳ')의 반응생성물에 적용시켜 일반식 (Ⅳ')의 화합물에 있는 유리산기와 일반식 (V) 또는 (Va)의 화합물의 반응에 의해서 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기인 R⁴가 형성된 다음, 생성된 일반식 (Ⅳ)의 화합물로부터 보호기 R^5a를 제거하는 것

여기에서, R¹, R², R³, R^5a 및 A는 상기한 바와 같다.

따라서, 예를들면 R^4a가 산에 의해 제거될 수 있는 보호기, 특히 삼차 부틸기이고, R^5a는 산에 안정한 보호기, 예를들면 벤질기인 일반식 (Ⅳ)의 화합물로부터 보호기 R^4a만을 산성 제거반응시키는 것이 가능하다. 이어서 생성된 일반식 (Ⅳ')의 모노카르복실산은 통상적인 에스테르형성방법에 의해서 일반식 (V)의 알코올 또는 상응하는 일반식 (Va)의 화합물과 에스테르화반응을 하게 된다. 일반식 (Va)의 화합물에서 제거될 수 있는 적당한 반응성기 X로는 특히 염소 또는 브롬과 같은 할로겐이나 유기술폰산라디칼, 예를들면 메탄술폰산과 같은 저급-알칸-술폰산 또는 벤젠술폰산이나 톨루엔술폰산과 같이 저급알킬 또는 할로겐으로 치환된 벤젠술폰산과 같은 방향족 술폰산의 저급-알킬-술폰산 라디칼을 들 수 잇다. 에스테르화 반응에 있어서, 일반식 (V)의 알코올은, 예를들면 알코올의 아실화반응에 대한 공지된 방법으로 일반식 (Ⅳ')의 산 또는 이산의 반응성산유도체와 반응할 수 있다. 예를들면, 이 반응은 일반식 (Ⅱ)의 화합물과 일반식 (Ⅲ)의 화합물이 반응하는 조건하에서 수행될 수 있다.

R⁵가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는기이고 R⁴가 수소이거나 R⁵와는 상이한 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기인 일반식 (Ⅰ)의 화합물을, 상이한 보호기를 적절히 선택하여 제조하는 것이 가능하다.

상기한 반응에서, 일반식 (Ⅱ) 및 (Ⅲ)의 출발화합물에서의 비대칭 중심은, 출발화합물의 성질에 따라서, 이성질적으로 순수한 일반식 (Ⅰ)의 화합물 또는 이성질체 혼합물을 얻기 위해서 불변적이다. 이성질적으로 순수하고 광학적으로 균일한 일반식 (Ⅰ)의 혼합물을 제조하기 위해서, 거울상 이성질적으로(enantiomerically) 순수한 일반식 (Ⅱ)의 화합물과 거울상 이성질적으로 순수한 일반식 (Ⅲ)의 화합물이 반응하는 것이 유리하다. 거울상 이성질적으로 순수한 일반식 (Ⅱ)의 화합물이 일반식 (Ⅲ)의 라세미 화합물과 반응하거나 일반식 (Ⅱ)의 라세미 화합물과 거울상 이성질적으로 순수한 일반식 (Ⅲ)의 화합물이 반응한다면, 각각의 경우에 두 부분입체이성질체(diastereomer)의 혼합물이 얻어지고, 필요하다면 공지된 방법으로 분류될 수 있다. 일반식 (Ⅱ)의 라세미 화합물과 일반식 (Ⅲ)의 라세미 화합물의 반응은, 필요하다면 공지된 반응으로 분류가능한 상응하는 4개의 이성질체 혼합물을 제공한다.

일반식 (Ⅱ)의 출발화합물은 공지된 방법에 의해서 얻어질 수 있다.

예를들면, 하기 일반식 (Ⅱa)의 화합물은 하기 일반식 (Ⅵ)의 아크릴산 유도체와 하기 일반식 (Ⅶ)의 시클로펜탄카르복실산의 반응에 의해서 얻어질 수 있다.

여기에서 R^4a는 상기한 바와 같고, R^1a는 저급알콕시-저급-알콕시메틸라디칼을 제외하고 상기 R¹과 같고,

여기에서 R^4a 및 R^1a는 상기한 바와 같다.

상기 반응은 시클로펜탄카르복실산과 강염기가 반응하여 시클로펜탄카르복실산의 이음이온(dianion)을 형성한 다음, 일반식 (Ⅵ)의 아크릴산 에스테르유도체와 반응하는 반응조건하에서 비활성인 유기용매에서 마이클 첨가반응의 조건하에서 공지된 방법에 의해서 수행될 수 잇다. 적당한 용매로는 에테르, 특히 테트라하이드로퓨란과 같은 시클릭에테르가 있다. 적당한 강염기로는 리튬디이소프로필아미드와 같은 비친핵성 유기 알칼리금속아미드가 있다. 테트라히드로퓨란중의 시클로펜탄카르복실산과 2당량의 리튬디이소프로필아미드가 반응하고, 이어서 이 반응혼합물과 일반식 (Ⅵ)의 화합물이 반응하는 것이 유리하다. 이 반응온도는 -70 내지 0℃이다.

하기 일반식 (Ⅱb)의 화합물은 하기 일반식 (Ⅷ)의 할로카르복실산에스테르와 일반식(Ⅶ)의 시클로펜탄카르복실산의 반응과 하기 일반식(IX)의 반응생성물과 하기 일반식 (Xb)의 화합물의 반응에 의해서 얻어질 수 있다.

여기에서 R^4a는 상기한 바와 같고, R^1b는 저급알콕시-저급-알콕시메틸라디칼이고,

R^4aOOC-CH₂-CH₂-Y (Ⅷ)

여기에서 R^4a는 상기한 바와 같고, Y는 할로겐이며,

여기에서 R^4a는 상기한 바와 같다. 일반식(Ⅷ)의 할로카르복실산에스테르와 일반식 (Ⅶ)의 시클로펜탄카르복실산의 반응은 시클로펜탄카르복실산의 이음이온을 형성하는 강염기 존재하의 반응조건하에서 비활성인 용매에서 공지된 방법으로 수행될 수 있다. 예를들면, 이 반응은 시클로펜탄카르복실산과 일반식 (Ⅵ)의 화합물의 반응에서 지정된 반응조건하에서 수행될 수 있다. 일반식 (IX)의 산과 일반식 (Xb)의 화합물의 후속반응은 강염기 존재하에서 반응조건하의 비활성인 유기용매에서의 카르복실산 에스테르의 α-알킬화반응에 적당한 조건하에서 공지된 방법에 의해서 수행될 수 있다. 사용되는 바람직한 일반식 (Xb)의 화합물은 X가 염소 또는 브롬인 화합물이다. 적당한 용매는 에테르, 특히 테트라히드로퓨란 또는 디옥산과 같은 시클릭에테르이다. 알킬리금속수소화물 또는 아미드, 예를들면 리튬디이소프로필아미드를 강염기로서 사용하는 것이 가능하다.

일반식 (Ⅱ)의 화합물은 라디칼 R¹을 갖는 탄소원자에 대해 비대칭중심을 가지며 합성에 의해 그들의 라세미체 형태로 얻어진다. 광학적으로 활성인 화합물은 공지된 방법, 예를들면 비대칭 분리물질에 대한 크로마토그래피분리법 또는 적당한 광학적으로 활성인 염기, 예를들면 α-메틸벤질아민이나 유사-에페드린과의 반응에 의해서 라세미 혼합물로부터 얻어질 수 있으며, 얻어진 염을 분별결정에 의해 이들의 광학 대칭체로 후속 분류하게 된다.

일반식 (Ⅵ)의 아크릴산에스테르유도체는 반응조건하에서 비활성인 유기용매에서 염기성 조건하에서 포름알데히드와 하기 일반식 (XI)의 (디-저급-알킬포스포노)아세트산 에스테르 유도체의 반응에 의해서 공지된 방법으로 얻어질 수 있다.

여기에서 R^4a 및 R^1a는 상기한 바와 같고, R⁷ 및 R⁸은 각각 저급알킬, 바람직하게는 메틸 또는 에틸을 나타낸다. 예를들면, 일반식 (XI)의 화합물은 -20 내지 30℃에서 염기, 바람직하게는 포타슘 삼차 부톡사이드와 같은 비친핵성알칼리금속 알코올레이트의 존재하에서 에테르, 바람직하게는 테트라히드로퓨란과 같은 시클릭에테르에서 파라포름알데히드와 반응할 수 있다.

일반식 (XI)의 화합물은 하기 일반식 (XⅡ)의 포스포노아세트산유도체와 하기 일반식 (Xa)의 화합물의 반응에 의해서 공지된 방법으로 얻어질 수 있다.

여기에서 R^4a, R⁷ 및 R⁸은 상기한 바와 같고,

R^1a - X (Ⅹa)

여기에서 R^a 및 X는 상기한 바와 같다. 이 반응은 0 내지 80℃에서 염기 존재하의 반응조건에서 비활성인 비양성자성 극성 유기용매에서의 알킬화반응에 대해 통상적인 조건하에서 수행될 수 있다. 사용되는 바람직한 일반식 (Xa)의 화합물은 X가 특히 브롬 또는 요오드인 할로겐 또는 토실레이트인 화합물이다. 적당한 용매의 예로는 디메틸포름아미드와 같은 아미드 또는 에테르가 있다. 적당한 염기로는 포타슘 삼차-부톡사이드와 같은 비친핵성 알칼리 금속 알코올레이트가 있다.

일반식 (Ⅵ)의 화합물은 하기 일반식 (XⅢ)의 말론산 유도체를 염기성조건하에서 포름알데히드로 처리하므로써 얻어질 수 있다.

여기에서 R^4a 및 R^1a는 상기한 바와 같다. 따라서, 예를들면 일반식 (XⅢ)의 말론산유도체는 0 내지 30℃, 바람직하게는 실온이하의 온도에서 2차 유기아민, 특히 피페리딘의 존재하에서 포름알데히드 수용액과 반응할 수 있다. 또한 반응식 (XⅢ)의 말론산 유도체는 40 내지 60℃에서 피리딘에서 파라포름알데히드와 반응할 수 있다.

일반식 (XⅢ)의 말론산 모노에스테르는 하기 일반식 (XⅣ)의 말론산 디에스테르와 일반식 (Xa)의 화합물이 반응하여 생성된 하기 일반식 (XV)의 말론산디에스테르유도체가 부분 가수분해에 의해서 일반식 (XⅢ)의 상응하는 말론산 모노에스테르 유도체로 전환되므로써 제조된다.

R^4aOOC-CH₂-COOR⁹ (ⅩⅣ)

여기에서 R^4a는 상기한 바와 같고, R⁹는 저급 알킬, 특히 메틸 또는 벤질을 나타내며,

여기에서 R^1a, R^4a 및 R⁹는 상기한 바와 같다.

일반식 (ⅩⅣ)의 말론산 디에스테르에 대한 라디칼 R^1a의 적용은 0℃ 내지 80℃에서 포타슘 삼차-부톡사이드와 같은 비친핵성알칼리금속 알코올레이트의 존재하에서, 비양성자성 극성 용매 바람직하게는 디메틸포름아미드에서 일반식 (ⅩⅣ)의 에스테르와 일반식 (Xa)의 화합물이 반응하는 통상적인 방법에 의해서 수행될 수 있다. 이 반응은, 예를들면 일반식 (XⅠ)의 화합물과 일반식 (Xa)의 화합물의 반응에서 지정된 조건하에서 수행될 수 있다.

생성된 일반식 (XV)의 치환된 말론산 디에스테르는 통상의 방법에 따라 라디칼 R⁹를 제거하므로써 일반식 (XⅢ)의 상응하는 말론산 모노에스테르로 전환될 수 있다. 보호기 R^4a와 라디칼 R⁹가 상이한 반응성을 갖는 상이한 라디칼인 경우, 라디칼 R^4a가 공격받지 않는 조건하에서 라디칼 R⁹를 제거하는 것은 유리하다. R⁹가 벤질인 경우, 이 제거반응은 가수소분해반응에 의해서 통상의 방법에 따라 발생할 수 있다. 저급 알킬에스테르 R⁹는 알킬라디칼의 성질에 따라 좌우되는 산성 또는 알칼리조건하에서 통상의 방법에 따라 가수분해반응에 의해서 제거된다. 바람직하게는 R⁹는 알칼리가수분해반응에 의해서 제거될 수 있는 에틸이다. 이러한 목적을 위해서 저급 알콜 또는 저급알콜과 물의 혼합물에서 일반식 (XV)의 알킬에스테르를 알칼리금속하이드록사이드, 예를들면 수산화칼륨으로 처리하는 것이 가능하다. 라디칼 R^4a 및 R⁹가 동일한 경우, 알칼리금속하이드록사이드의 양은 부분가수분해반응만이 발생하도록 적게 유지된다.

일반식 (Ⅲ)의 화합물은 하기 일반식 (ⅩⅣ)의 화합물과 하기 일반식 (XⅦ)의 화합물이 반응하여 생성된 하기 일반식 (XⅧ)의 반응생성물에 있는 R¹⁰R¹¹N기로부터 유리아미노기를 유리시키므로써 얻어질 수 있다.

여기에서 R², R³ 및 A는 상기한 바와 같고, R¹⁰R¹¹N기는 아미노보호기에 의해 보호되는 아미노기를 나타내며,

X-CH₂-COOR^5a (ⅩⅦ)

여기에서 R^5a 및 X는 상기한 바와 같고,

여기에서 R², R³, R^5a, A 및 R¹⁰R¹¹N기는 상기한 바와 같다. 일반식 (XⅥ)의 화합물과 일반식 (XⅦ)의 화합물의 반응은 아미드의 알킬화반응에 통용되는 방법에 의해서 수행될 수 있다. 사용되는 바람직한 일반식 (XⅦ)의 화합물은 X가 할로겐, 바람직하게는 브롬 또는 요오드인 화합물이다. 이 반응은 염기의 존재하에서 비양성자성 극성유기용매, 예를들면 테트라하이드로퓨란과 같은 시클릭에테르 또는 디메틸포름아미드에서 수행될 수 있다. 적당한 염기로는, 예를들면 포타슘 삼차-부톡사이드와 같은 비친핵성 염기가 있다. 필요하다면 이 반응은 상전이촉매, 예를들면 테트라부틸암모늄브로미드와 같은 테트라-저급-알킬암모늄할로겐화물의 존재하의 이상(two-phase)시스템에서 알칼리금속하이드록사이드, 예를들면 수산화칼륨 존재하에서 역시 수행될 수 있다.

생성된 일반식 (XⅧ)의 화합물에 있는 아미노기는 통상의 방법에 따라 보호기가 제거된 다음에 유리될 수 있다. 아미노기를 보호하는 것으로 알려지고 쉽게 다시 제거될 수 있는 보호기는, 예를들면 아미노기를 보호하는 데 사용될 수 있다. 적당한 보호기의 예들은 『E. McComie "Protective groups in Organic Chemistry" Plenum Press 1971』에 기재되어 있다. 적당한 보호기의 예로는 프탈이미드기 또는 삼차 부톡시카르보닐기, 그렇지 않으면 벤질옥시카르보닐기가 있다. 각각의 경우에, R^5a기가 공격받지 않는 조건하에서 뒤이어 제거될 수 있는 보호기를 R^5a의 의미에 따라 선택하는 것이 필요하다. 염기성 매질(basic medium)에서 제거될 수 있는 적당한 보호기의 예로는 높은 온도, 예를들면 70 내지 90℃에서 에탄올아민 또는 히드라진의 처리에 의해서 제거될 수 있는 프탈이미드기가 있다. 예를들면, 프탈이미드기는 A가 황인 화합물에 대한 보호기로서 적당하다. 산에 의해서 제거될 수 있는 적당한 보호기의 예로는 산처리, 예를들면 트리플루오로아세트산 처리 또는 에틸아세테이트에서의 염화수소기체의 처리에 의해서 다시 제거될 수 있는 삼차 부톡시카르보닐기가 있다. 예를들면, A가 산소인 화합물에 대한 보호기로서 삼차 부톡시카르보닐기가 적당하다. 가수소분해반응에 의해서 제거될 수 있는 적당한 보호기의 예로는 팔라듐/목탄 촉매의 존재하에서 수소화반응에 의해서 제거될 수 있는 벤질옥시카르보닐기가 있다.

일반식 (Ⅲ)의 화합물은 아미노기를 갖는 탄소원자에 대해서 키랄성(Chirality) 중심을 가지고 있다. 일반식 (XⅥ)의 출발화합물이 광학적으로 순수한 경우, 광학적으로 순수한 일반식 (Ⅲ)의 화합물이 얻어진다. 이는 특히 A가 산소 또는 황인 화합물에 적용된다. 또한, 일반식 (XⅥ)의 출발 화합물이 라세미 화합물인 경우, 일반식 (Ⅲ)의 라세미 화합물이 얻어진다. 이는 일반적으로 A가 메틸렌기인 화합물의 경우에 적용된다. 일반식(Ⅲ)의 화합물의 라세미 혼합물은 통상의 방법, 예를들면 비대칭성 분리물질에 대한 크로마토그래피 분리법 또는 타르타르산과 같은 적당한 광학적으로 활성인 산과 반응한 다음에 생성된 염의 분류결정에 의한 광학대칭체 분류방법에 의해서 그들의 광학적 이성질체로 분류될 수 있다. 광학적으로 활성인 산으로 반응혼합물에 있는 하나의 이성질체 염의 상당한 침전형성과 동시에 또는 그후에, 벤즈알데히드와 같은 방향족 알데히드를 첨가하여 용액에 남아 있는 이성질체를 재라세미화(reracemization)시키는 반응을 개시하는 적당한 광학적으로 활성인 산과의 반응에서 바람직한 광학적 이성질체의 수율을 증가시키는 것이 가능하다. 이러한 경우에, 키랄성 중심에서의 라세미화 반응은 알데히드에 의한 이민형성반응에 의해 일어난다.

일반식 (XⅥ)의 화합물은 통상의 방법으로 얻어질 수 있다. 예를들면, 하기 일반식(XⅥa)의 화합물은 통상의 방법에 따라 하기 일반식 (XIX)의 화합물에 있는 할로겐 Y를 R¹⁰R¹¹N기로 치환하므로써 얻어질 수 있다.

여기에서 R², R³ 및 R¹⁰R¹¹N기는 상기한 바와 같고,

여기에서 R², R³ 및 Y는 상기한 바와 같다. 예를들면, 일반식 (XIX)의 화합물은 아미드의 알칼리금속염(R¹⁰R¹¹NH), 바람직하게는 포타슘프탈이미드와 반응할 수 있다. 이 반응은 40 내지 80℃에서 반응조건하에서 비활성인 비양성자성 유기용매, 바람직하게는 디메틸포름아미드에서 수행될 수 있다.

일반식 (XIX)의 화합물은, 베크만 자리옮김(Beckmann rearrangememt)의 조건하에서 하기 일반식 (XX)의 화합물을 산처리하는, 하기 일반식 (XX)의 옥심화합물의 베크만 자리옮김으로 얻어질 수 있다.

여기에서 R², R³ 및 Y는 상기한 바와 같다.

일반식 (XIX)의 화합물로의 일반식 (XX)의 화합물의 자리옮김은 60 내지 90℃에서 폴리인산의 처리에 의해서 유리하게 수행된다.

일반식 (XX)의 옥심은 하기 일반식 (XXI)의 케톤을 할로겐으로 초기에 처리하여 라디칼 Y를 도입한 다음 생성된 할로겐화케톤을 히드록실아민과 반응하는, 하기 일반식(XXI)의 시클릭케톤으로부터 출발하는 반응에 의해서 얻어질 수 있다.

여기에서 R² 및 R³는 상기한 바와 같다. 케톤의 α-할로겐화반응과 그후의 옥심형성반응은 원-포트(one-pot) 공정으로 유리하게 수행될 수 있으며, 이러한 경우에 일반식 (XXI)의 케톤은 비활성 유기용매, 예를들면 메탄올과 같은 저급알콜에서 할로겐으로 초기 처리된 다음에 이 반응혼합물에 히드록실아민이 첨가된다. 히드록실아민은, 예를들면 히드로클로라이드와 같은 히드록실아민염의 형태로 사용되고 반응혼합물에 물이 첨가된다. 이 공정은 0 내지 40℃, 바람직하게는 실온에서 수행될 수 있다.

하기 일반식 (XⅥb)의 화합물은 하기 일반식 (XXⅡ)의 방향족 아미노산 화합물의 고리화반응에 의해서 통상의 방법에 따라 얻어질 수 있다.

여기에서 R², R³ 및 R¹⁰R¹¹N기는 상기한 바와 같고, A^a는 산소 또는 황을 나타내며,

여기에서 R², R³, A^a 및 R¹⁰R¹¹N기는 상기한 바와 같다. 일반식 (XXⅡ)의 화합물의 고리화반응은 물의 제거로 일어나며, 락탐 형성반응에 따른 통상의 방법에 의해서 수행될 수 있다. 따라서, 이 고리화반응은 예를들면 산성기를 활성화시키고 카르보디이미드와 같은 아미드형성에 대한 펩타이드 케미스트리로부터 공지된 커플링시약의 존재하에서 반응조건하에서 비활성인 극성유기용매, 예를들면 디메틸포름아미드에서 수행될 수 있다. 이 반응은, 예를들면 일반식 (Ⅲ)의 화합물과 일반식 (Ⅱ)의 화합물의 반응에서 정의된 조건하에서 수행될 수 있다. 디에틸포스포릴시안화물을 산성기 활성제로서 사용하고 유기염기, 예를들면 트리에틸아민과 같은 트리-저급-알킬아민의 존재하에서 반응을 수행하는 것 역시 가능하다.

일반식 (XXⅡ)의 화합물은 상응하는 하기 일반식 (XXⅢ)의 니트로화합물의 환원에 의해서 통상의 방법에 따라 얻어질 수 있다.

여기에서 R², R³, A^a 및 R¹⁰R¹¹N기는 상기한 바와 같다. 니트로기의 환원은, 예를들면 팔라듐/목탄촉매의 존재하에서 촉매수소화반응과 같이 니트로벤젠화합물을 아닐린화합물로 환원시키는 공지된 방법에 의해서 수행될 수 있다. 또한, 이 환원반응은 원상태(in situ)에서 수소를 발생시키는 또 다른 환원제, 예를들면 금속철/염산 또는 금속아염/염산을 사용하여 수행될 수 있다.

일반식 (XXⅢ)의 화합물은 하기 일반식 (XXⅣ)의 0-플루오로니트로벤젠 화합물과 하기 일반식 (XXV)의 산의 반응에 의해서 통상의 방법에 따라 얻어질 수 있다.

여기에서 R² 및 R³는 상기한 바와 같고,

여기에서 A^a 및 R¹⁰R¹¹N기는 상기한 바와 같다. 일반식 (XXV)의 화합물은 아미노기가 보호된 세린과 시스테인 유도체들이다. 이 반응은 염기 존재하에서 반응조건하에서 비활성인 유기용매에서 일어난다. 플루오로니트로벤젠과 강한 친핵성 시스테인 유도체와의 반응은 소듐비카보네이트와 같은 약염기의 존재하에서 저급알콜 또는 알콜/물 혼합물에서 수행될 수 있다. 비교적 약한 친핵성 세린 유도체와의 반응은 디메틸포름아미드와 같은 극성유기용매에서, 예를들면 알칼리금속수소화물과 같은 강염기를 사용하는 것이 유리하다.

필요하다면, 일반식 (XXⅢ)의 화합물이 형성된 후에 일반식 (XXV)의 화합물에 있는 아미노보호기를, 라디칼 R^5a와 다른 반응성을 가지고 있어 일반식 (XXⅢ)의 화합물 공정에 더욱 적당한 또 다른 아미노 보호기로 바꾸는 것이 가능하다.

일반식 (Ⅰ)의 화합물 및 이들의 약리학적으로 허용가능한 염은 약리학적 성질에 의해서 구분된다. 특히, 이 물질들은 중성 엔도펩티다제(이하, NEP라 한다)에 대한 억제효과를 나타낸다. NEP는 내재성 나트륨배설증가제 펩타이드들, 예를들면 심방성 나트륨배설증가제 펩타이드(이하, ANP라 한다)의 분해를 일으키는 효소이다. NEP 활성에 대한 이들의 억제효과 때문에, 이 물질은 NEP 특히 ANP에 의해서 공격받을 수 있는 나트륨배설증가제 펩타이드들의 생물학적 활성 및 수명을 증진시킬 수 있어 그러한 호르몬에 의해서 영향받는 병적상태의 치료, 특히 심부전 치료에 적당하다.

심부전의 경우, 병적으로 감소된 심장의 박출량으로 말초성 저항에서 반사운동이 증가하게 되고 따라서 폐순환 및 심장 자체에서 혈액이 충혈된다. 이는 심방 및 심실에 있는 실벽(chamber wall)의 확장을 야기시키는 높은 심장충만압의 결과가 나타나게 된다. 이러한 상황에서 내분비기관과 같은 심장기능은, 다시 말해서 현저한 혈관확장 및 이뇨/나트륨배설증가활성을 갖는 ANP를 혈류로 분비하는 것이다. ANP는 높은 심장충만압을 줄이는 작용을 한다. 이는 이뇨/나트륨배설증가(순환하는 혈액 용적의 감소) 및 말초성 저항의 감소(전부하(preload)) 및 후부하(afterload)의 감소)에 의해서 발생된다. ANP의 심장-완화 작용은 내재성 심장보호메카니즘으로서 고려된다. 그러나, ANP의 작용은 NEP에 의해서 호르몬이 빠르게 분해되기 때문에 내구성이 부족하다.

그들의 NEP-억제성질때문에, 본 발명에 따른 화합물은 ANP 작용의 심장보호메카니즘을 개선시킬 수 있으며, 특히 증진된 이뇨/나트륨배설증가 활성에 대해서는 큰 효과를 나타낸다.

본 발명에 따른 화합물은 우수한 내성을 갖는 유리한 측면의 작용에 의해서 구별되고, 또한 NEP-억제작용의 상당한 선택성을 나타내며 엔도텔린 전환효소(endothelin-converting enzyme)에 대한 약간의 억제효과를 부가적으로 나타낸다. 심부전의 앞선 단계에서는 안지오텐신 Ⅱ, 엔도텔린 및 카테콜아민의 혈액수준에서 반사운동이 증가하며, 따라서 말초성 저항 및 심장충만압이 증가하게 되어 심장근육층의 비대증 및 확장증이 일어나게 된다. 이러한 경우에 부가적인 ECE-억제성질은 말초성 저항에 대한 본 발명에 다른 물질의 효과를 증진시킬 수 있다.

이 물질의 NEP-와 ECE-억제성질 및 이뇨/나트륨배설증가의 증진성질은 생체 외(in vitro) 및 생체 내(in vivo) 표준 약리학적 실험방법에 의해서 설명되어 왔다.

약리학적 조사방법을 설명하면 다음과 같다 :

1. 최소 독성 복용량의 결정

체중 20∼25g의 수컷 쥐에 최대 복용량 300mg/kg의 시험물질을 구강투여한다. 3시간동안 이 쥐들에 대해서 독성증후를 주의깊게 관찰한다. 또한, 투여 후 72시간 이상의 기간동안에 관찰되는 모든 증후 및 사망에 대해서 기록한다. 수반하는 증후도 마찬가지로 관찰하고 기록한다. 심한 독성 증후 또는 사망이 관찰된다면, 독성 증후가 더이상 나타나지 않을 때까지 쥐에 대해서 복용량을 점점 줄인다. 심한 독성 증후 또는 사망을 야기시키는 최소 복용량은 하기 표A에 최소 독성 복용량으로 나타내었다. 하기 표 A에 표시된 실시예 번호는 후술할 제조예를 나타내는 것이다.

표 A

2. 생체 외 NEP-억제효과 측정 및 효소에 대한 친화력 측정.

중성 엔도펩티다제(NEP)에 대한 본 발명에 따른 물질의 억제효과를 설명하기 위해서, NEP의 효소 활성때문에 발생하는 메티오닌 엔케팔린(met-enkephalin)의 가수분해에 대한 억제효과를 생체 외 표준시험에 의해서 측정하였다. 물질의 Ki(억제상수)는 그들의 억제활성도를 측정하므로써 결정되었다. 효소-억제 활성도를 갖는 시험물질의 Ki는 효소/시험물질 복합체 또는 (효소/물질)-시험물질 복합체에 대한 해리상수이며, 농도의 단위를 갖는다.

시 험 과 정

시험을 수행하기 위해서, 정제된 NEP 10ng을 함유하는 100μl의 다양한 항온처리 용액 각각의 경우(예를들면 3,4,24,11)와 상이한 양의 시험물질 각각의 경우와, 기질(메티오닌 엔케팔린)과 50mM의 완충용액(트리스(히드록시메틸)-아미노메탄/HCl, pH7.4) 각각의 경우를 제조하였다.

각각의 시험물질에 대해서, 메티오닌 엔케팔린 함량이 2,5.7,10,12,15,40 및 100㎛인 세가지 상이한 농도의 시험물질로 24가지의 상이한 항온처리용액을 제조하였다.

각각의 시험에서, 두가지 형태의 항온처리 대조용액을 각각의 경우에 대해서도 취급하였는데, 그 하나는 시험물질을 포함하지 않은 효소 대조군이며, 다른 하나는 효소도 시험물질도 포함하지 않은 기질 대조군이다.

항온처리 용액은 37℃ 무중탕(water bath)에서 45분동안 흔들면서 항온처리한다. 기질(메티오닌 엔케팔린)을 첨가하고 15분 후에 효소반응이 시작되고 95℃에서 5분동안 가열하여 항온처리시간이 끝날때에 정지된다. 이어서 이 항온처리용액을 3분동안 12,000 X g에서 원심분리하며, 미반응된 기질과 효소반응에 의해 형성된 가수분해 생성물의 농도는 상청액에서 결정된다. 이를 위하여, 상청액 시료 각각의 경우에 대해서 소수성 실리카겔에 대한 고압액 체크로마토그래피(HPLC)로 분리하고, 효소반응의 생성물 및 미반응된 기질은 205nm의 파장에서 광도법으로 결정한다. HPLC 분리법에서는 역상분리물질(Encapharm 100 RP 18) 5μ를 포함하는 컬럼(4.6×250mm)을 사용한다. 용매의 유량은 1.4ml/min이고 컬럼은 40℃로 따뜻하게 한다. 이동상 A는 5mM의 H₃PO₄, pH2.5이며 이동상 B는 아세토니트릴 + 1％ 5mM H₃PO₄, pH2.5 이다.

각각의 시험물질에 대한 Ki는 다양한 시료에서 측정되는 가수분해 생성물 및 미반응된 기질의 농도로부터 통상의 방법에 따라 계산된다. 시험물질에 대해서 측정한 Ki값을 하기 표B에 나타내었다. 하기 표B에 표시된 번호는 후술할 실시예의 번호를 나타낸다.

표 B

3. 생체 외 ECE-억제효과 측정

엔도텔린전환효소(이하, ECE라 한다)에 대한 본 발명에 따른 물질의 억제효과를 설명하기 위하여, ECE의 효소활성때문에 발생하는 빅 엔도텔린 1(big ET-1)의 가수분해에 대한 억제효과를 생체 외 표준시험법으로 측정하였다. 물질의 IC₅₀은 이들의 억제활성도를 측정하므로써 결정되었다. 효소 억제 활성도를 갖는 시험물질의 IC₅₀은 ECE의 효소활성도의 50％가 억제될때의 시험물질의 농도이다.

ECE를 포함하는 내피세포막의 제조

인간 ECE의 재조합체 발현이 있는 중국산 큰 쥐의 난자세포(chinese hamster ovarian cells, 이하 CHO 세포라 한다)들을 분해시킨 다음, 이들 세포막을 10,000×g으로 10분동안 원심분리시켜 제거하였다. 이들 세포막을 재현탁에 의해 세척하고 원심분리를 3회 반복한다. ECE를 포함하는 세포막을 100mM의 트리스/HCl 완충용액(트리스(히드록시메틸)아미노메탄/HCl, PH7.0, 250mM NaCl 함유)에서 재현탁시킨 다음 효소시험하기 전에 70℃에서 동결시켜 보관한다.

시 험 과 정

이 시험을 수행하기 위해서, ECE를 포함하는 내피세포막의 단백질 5㎍을함유하는 100μl의 다양한 항온처리용액 각각의 경우와, 상이한 양의 시험물질과 24μM의 기질(합성펩타이드 : H₂N-Asp-Ile-Ala-Trp-Phe-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-COOH) 각각의 경우 및 100mM의 트리스 완충용액(트리스(히드록시메틸)아미노메탄/HCl, pH7.0, 250mM의 염화나트륨 함유)을 제조한다. 게다가, 각각의 항온처리용액은 100μM의 티오판(thiorphan), 10μM의 캡토프릴(Captopril), 1mM의 페닐술포닐플루오라이드, 100μM의 펩스타틴 A(pepstatin A)(프로테아제 억제제), 100μM의 아마스타틴(amastatin)(프로테아제 억제제)을 포함한다.

각각의 시험물질에 대해서, 세가지 상이한 농도의 시험물질을 각각의 경우에 중복하여 6가지 상이한 항온처리 용액을 제조한다.

각각의 시험에서, 효소를 포함하지 않는 대조군을 각각의 경우에 대해서 취급한다.

기질을 첨가하기 전에 항온처리용액을 37℃에서 15분동안 예비 항온처리한다. 효소반응은 기질의 첨가로 시작된다 ; 이 반응은 60분이 소요되며, 37℃에서 수행되고, 항온처리용액을 95℃에서 5분동안 가열시키므로써 반응은 정지된다. 효소반응에 의해 기질로부터 형성된 가수분해 생성물인 H₂N-Asp-Ile-Ala-Trp-COOH 및 H₂N-Phe-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-COOH는 고압 액체크로마토그래피(HPLC)로 결정된다. 이 HPLC 분리법은 상기의 생체 외 NEP-억제효과 측정의 경우에서 언급한 바와 같이 수행된다.

각각의 시험 물질에 대한 IC₅₀은 다양한 시료에서 측정된 가수분해 생성물의 농도로부터 통상의 방법에 따라 계산된다. 시험물질에 대해서 측정한 IC₅₀ 값을 하기 표 C에 나타내었다.

표 C

4. 용적 하중된(Volume-loaded) 쥐의 이뇨/나트륨배설증가에 대한 생체 내 물질의 효과 측정

생체 내 활성도는 용적하중된 쥐에서 측정하였다. 이 시험을 통하여, 등장성 염화나트륨 용액의 주입에 의해서 심장 충만압이 높아져 ANP가 방출되고 이뇨/나트륨배설증가가 된다.

시 험 과 정

이 시험은 체중이 200∼400g인 수컷 쥐(wistar rat)들을 가지고 수행한다. 신경이완성 진통상태(fentanyl ; Hypnorm, manufactured by Janssen)에서, 등장성 염화나트륨 용액의 사용으로 주입 베이스라인 및 용적하중을 위해 오른쪽 대퇴골 정맥에 카테터를 고정시킨다. 복강이 열린 후, 제2의 카테터를 방광에 삽입시키고 오줌의 부피, 나트륨배설증가 및 칼륨배설증가를 측정하기 위해서 요도를 묶는다.

복강을 다시 닫고 이 쥐들에 염화나트륨용액(0.5ml/체중 100g)을 2시간 내내 연속 주입시킨다. 30분의 평형기간 후, 시험물질을 가하기 전 예비상에서 각각의 경우에 대해서 10분이상 오줌시료를 3회 모은다. 이 예비값("predruy"값)은 시험쥐들의 오줌의 연속 유출량을 측정하기위해 결정된다.

이어서 시험물질을 함유하는 용액을 10마리의 쥐에 정맥내 투여(대퇴골 정맥내 농축괴 주사) 또는 경구투여(by gavage)하고, 각각의 경우에 활성 물질을 포함하지 않는 플라시보용액을 투여한 대조군이 있다. 물질의 정맥내 투여 후 5분 또는 경구투여 후 120분이 경과되면, 쥐들은 정맥내 투여(2ml/체중 100g, 2분내)로 증가되는 염화나트륨용액의 부피로 채워지게 되며, 오줌을 60분 이상 동안에 모은다. 이 기간동안에 모은 오줌량을 결정한 다음, 그의 나트륨과 칼륨 함량을 측정한다. 예비값에 비하여 용적하중하에서 발생하는 배설물의 증가량은 오줌의 결과량으로부터 추론된다.

하기 표 D에서 플라시보 투여 후 용적하중하에서 발생하는 오줌 배출량의 증가분을 기저로 한 시험물질의 투여후 용적하중하에서 발생하는 오줌 배출량의 증가분을 퍼센트로서 나타내었다. 또한, 시험물질의 투여후 용적하중하에서 배설되는 나트륨과 칼륨의 양을 플라시보 투여후 용적하중하에서 배설되는 나트륨과 칼륨양의 퍼센트로서 나타내었다.

표 D

n^* : 결정되지 않음

상기 결과로부터 일반식 (Ⅰ)의 화합물은 NEP에 대한 높은 친화력을 가지고 있으며, ANP 분해효소를 억제시키므로써 혈액내의 ANP레벨(level)을 증가시키는 데에 기여하고 따라서 극소량의 칼륨이 손실되는 것에 비하여 이뇨/나트륨배설증가 효과는 의존적으로 증가함을 알 수 있다.

상기한 그들의 효과 때문에, 일반식 (Ⅰ)의 화합물은 거대한 포유동물, 특히 인간에게 있어서, 심부전 치료 및 특히 심부전으로 고통받는 환자의 이뇨/나트륨배설증가를 저지시키는데 적당한 약제이다. 일반식 (Ⅰ)의 디카르복실산 및 그들의 염은 비경구적 투여, 특히 정맥내 투여가 가능한 약제형태로 유리하게 사용되며, 일반식 Ⅰ의 모노-또는 디에스테르는 경구투여가 가능한 약제형태로 유리하게 사용된다. 사용되는 복용량은 개인적으로 다를 수 있으며, 물론 치료되는 상태의 성질, 사용되는 물질 및 투여형태에 따라 다양할 수 있다. 예를들면, 비경구적 조제물은 일반적으로 경구 조제물보다 활성이 덜한 물질을 포함하고 있다. 그러나, 단일 복용량에 대해서 1 내지 200mg 함량의 활성물질을 갖는 약제형태는 거대 포유동물, 특히 인간에게 투여하는 것이 일반적으로 바람직하다.

일반식 (Ⅰ)의 화합물은 통상적인 약제학적 보조물질과 함께 정제, 캡슐제, 좌약 또는 액제와 같은 약제학적 조성물로 제공된다. 이 약제학적 조성물은 락토오스, 녹말이나 탈크 또는 액체 파라핀과 같은 통상의 고체 또는 액체 부형제를 사용 및/또는 정제 붕괴제, 가용화제 또는 방부제와 같은 통상의 약제학적 보조물질을 사용하는 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.

다음의 실시예들은 본 발명을 상세하게 예시하고자 하는 것이며 본 발명을 한정시키는 것은 아니다.

신규한 화합물의 구조는 분광학적 분석법, 특히 NMR, 질량, IR 및/또는 UV 스펙트럼 분석법으로 확인되었으며, 적당한 경우는 광회전을 결정하였다.

실시예 1

삼차 부틸-3-{1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트.

A) 15℃에서 1ℓ의 디메틸포름아미드중의 디에틸말로네이트 160.1g의 용액에 포타슘 삼차 부톡사이드 123.4g을 첨가하였다. 이 반응혼합물을 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 200ml의 디메틸포름아미드중의 펜에틸브로미드 207.7g의 용액을 적하하였다. 이어서 이 반응혼합물을 60℃에서 1시간 동안 가열시키고 다시 냉각시켰다. 감압하에서 디메틸포름아미드를 증발시키고, 잔류물은 메틸삼차부틸에테르와 물의 혼합물에서 처리되었다. 유기상을 분리하여 물로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 유성(Oily) 잔류물로서 남아 있는 초기 생성물을 감압하에서 증류시켜 정제하였다. 끓는 점(1.5)이 148∼153℃인 에틸-2-에톡시카르보닐-4-페닐부타노에이트 202.5g을 얻었다.

B) 물 76ml중의 수산화칼륨 6.17g의 용액을 얼음으로 냉각시키면서 에탄올 285ml중의 상기에서 얻은 디에스테르 생성물 23.6g의 용액에 첨가하였다. 이 반응혼합물을 실온에서 여러시간동안 교반하였다. 이어서 에탄올을 감압하에서 증발시키고, 잔류물을 메틸삼차부틸에테르와 물의 혼합물에서 처리하였다. 유기상을 분리하여 버리고, 수상을 얻음으로 냉각시키면서 묽은 염산수용액으로 산성화시킨 다음, 메틸삼차부틸에테르로 여러번 추출하였다. 복합 메틸삼차부틸에테르상을 물로 세척한 다음 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 초기 유성 에틸-2-카르복시-4-페닐부타노에이트 20.2g을 얻었으며 더이상 정제하지 않고 공정처리하였다.

C) 35％의 진한 포름알데히드 수용액 11ml와 피페리딘 9.23ml을 얼음으로 냉각시키면서 상기에서 얻은 생성물 20.2g에 연속적으로 첨가하였다. 반응혼합물을 실온에서 여러시간동안 교반한 다음, 메틸삼차부틸에테르로 희석시키고, 포타슘비설페이트 수용액 및 물로 세척한 후, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 감압하에서 건조하였다. 에틸-α-(2-페닐에틸)아크릴레이트 14.8g을 얻었다.

D) 질소기압하에서, 디이소프로필아민 25.2ml를 무수 테트라하이드로퓨란 150ml에 용해시킨 다음, -35℃로 냉각시켰다. 이 용액에 n-헥산중의 부틸리튬 1.6 노르말용액 100ml를 적하하였다. 이어서 이 반응혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음 무수 테트라하이드로퓨란 20ml중의 시클로펜탄카르복실산 8.1ml의 용액을 적하하였다. 이 반응혼합물을 0℃에서 2시간동안 교반하였다. 이어서 무수 테트라하이드로퓨란 20ml중의 상기 C)에서 얻은 아크릴산에스테르 16.8g의 용액을 적하한 다음 이 반응혼합물을 2시간동안 0℃로 유지시키고, 이어서 여러시간동안 -15℃로 유지시켰다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 10％의 진한 염산 수용액으로 산성화시키고 n-헥산으로 추출하였다. 유기상을 소듐비카보네이트 반포화(half-saturated) 수용액으로 7회 세척하고 물로 1회 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 잔류물로서 얻은 초기 생성물을 n-헥산/에틸아세테이트(8:2)를 사용하는 실라카겔상 플래시(flash) 크로마토그래피로 정제하였다. 녹는점이 68∼69℃인 순수 1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르복실산 19.6g을 얻었다.

E) 브롬 108.3g을 얼음으로 냉각시키면서 메탄올 820ml중의 α-테트랄온(α-tetralone)100g의 용액에 천천히 적하하였다. 이어서 이 반응혼합물을 실온에서 30분동안 교반한 다음 실온에서 히드록실아민 히드로클로라이드 122.4g을 첨가한 후 물 110ml를 첨가하였다. 이 혼합물을 실온에서 3일동안 교반하였다. 이어서 물 493ml를 첨가하고, 1시간후에 흰색 침전물을 분리하였다. 이 반응 혼합물을 3일간 더 교반한 다음, 5℃로 냉각시켰다. 침전물을 진공여과(suction)시키고, 물로 세척한 다음 감압하의 40℃에서 건조시켰다. 녹는점이 130∼132℃인 2-브로모-3,4-디히드로나프탈렌-1(2H)-온-옥심 136.7g을 얻었다.

F) 상기에서 얻은 옥심 79.5g을 80℃로 가열시킨 폴리인산 452g에 첨가한 다음, 이 반응혼합물을 80℃에서 18시간 교반하였다. 이어서, 이 혼합물을 710ml의 물로 주의 깊게 희석시키고 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 생성된 침전물을 진공여과시키고, 물로 세척한 다음 소듐비카보네이트 수용액으로 세척하고 다시 물로 세척한 후 메틸 삼차 부틸에테르로 최종적으로 세척하고 60℃에서 수산화칼륨으로 건조시켰다. 녹는점이 168∼170℃인 3-브로모-4,5-디히드로-1H-1-벤자제핀-2(3H)-온 66.6g을 얻었다.

G) 상기에서 얻은 생성물 80g을 디메틸포름아미드 140ml에서 현탁시켰다. 이 현탁액에 205m의 디메틸포름아미드중의 72.6g의 포타슘 프탈이미드 용액을 첨가하고, 이어서 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 이 혼합물을 실온으로 냉각시키고 800ml의 물을 서서히 적하한 다음, 이 혼합물을 2시간 동안 얼음으로 냉각시키면서 교반하였다. 생성된 결정체를 진공여과시키고 물/디메틸포름아미드 혼합물로 먼저 세척시킨 다음 메틸삼차 부틸에테르로 세척하고 이어서 60℃에서 2일동안 감압하에서 건조시켰다. 녹는점이 185∼195℃인 4,5-디히드로-3-프탈이미도-1H-1-벤자제핀-2(3H)-온을 얻었다.

H) 40ml의 디메틸포름아미드중의 12.3g의 포타슘 삼차부톡사이드 용액을 얼음으로 냉각시키면서 90ml의 디메틸포름아미드중의 상기에서 얻은 생성물 27g의 현탁액에 첨가하였다. 30분동안 얼음으로 냉각시키면서 교반한 후, 20.7g의 삼차 부틸브로모아세테이트를 0∼5℃에서 1시간 동안 적하하였다. 이 혼합물을 1시간 동안 0℃에서 교반하였다. 이어서 이 반응혼합물을 40℃로 데운 다음, 물 164ml를 3시간에 걸쳐서 적하한 다음, 이 혼합물을 1시간 동안 30℃에서 교반하였다. 이어서 이 수용액을 기울여 따르고 남은 고체잔류물을 메틸삼차부틸에테르로부터 결정화시켰다. 형성된 결정체를 진공여과시키고, 물과 메틸삼차부틸에테르로 세척한 다음 60℃에서 감압하에서 건조시켰다. 녹는점이 194∼197℃인 삼차부틸-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-3-프탈이미도-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트 26.3g을 얻었다.

Ⅰ) 상기에서 얻은 에스테르 7g을 80℃로 가열시킨 에탄올아민 13.8ml에 5분에 걸쳐서 첨가하였다. 5분 후, 선명한 용액이 형성되었고, 이를 실온으로 냉각시킨 다음 톨루엔 105ml로 희석시켰다. 이 용액을 5％의 진한 염화나트륨 수용액 140ml로 흔들면서 추출한 다음, 유기상을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 잔류물을 메틸삼차부틸에테르로부터 결정화시켰다. 녹는점이 117∼118℃인 삼차 부틸-3-아미노-2,3,4,5-테트라-히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트 4.0g을 얻었다.

J) 상기에서 얻은 아민 2.9g 및 상기 D)에서 얻은 산 3.2g을 디클로로메탄 100ml에 용해시켰다. 이 반응혼합물에 2.2ml의 N-메틸모르포린, 1.27g의 히드록시벤조트리아졸 및 3.81g의 N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드하이드로클로라이드를 얼음에 냉각시키면서 첨가하였다. 이어서 이 반응혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 이 반응혼합물을 디클로로메탄으로 희석시킨 다음, 연속적으로 물, 포타슘비설페이트수용액, 물, 소듐 비카보네이트 수용액으로 세척하고 다시 물로 세척하였다. 이어서 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 용매를 감압하에서 증발시켰다. 이러한 방법으로 얻은 초기 생성물을, n-헥산/에틸아세테이트를 사용하며 용리전개 동안에 용리액의 에틸아세테이트 함량을 1:9∼3:7로 증가시키면서 약간 높은 압력하에서의 실리카겔상 컬럼크로마토그래피(플래시크로마토그래피)로 정제하였다. 순수한 주제(title) 화합물 5.4g을 유성(oily)생성물로서 얻었다.

IR 스펙트럼(필름) : 3400cm^-1, 1725cm^-1, 1660cm^-1

실시예 2

3-{1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산.

삼차 부틸-3-{1-[2'-에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 1의 제조방법 참고) 5g을 트리플루오로아세트산 16ml에 용해시켰다. 이 용액을 3시간동안 실온에서 교반하였다. 제조공정을 위해서, 트리플루오로아세트산을 감압하에서 증발시켰다. 남아 있는 잔류물을 디클로로메탄에 용해시킨 다음, 이 용액을 중성이 될때까지 물로 세척하였다. 이어서 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 남아 있는 잔류물을 n-헥산으로 여러번 교반하고, 매 번 다시 건조시켜 건조상태가 되게 하였다. 녹는점이 81∼104℃인 고체형태의 주제 화합물 3.4g을 얻었다.

실시예 3

삼차부틸(3S, 2'R)-3-{1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트.

A) 1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르복실산(실시예 1D)의 제조방법 참고) 30.5g 및 L-(-)-α-메틸벤질아민 11.6g을 가열시키면서 에탄올에 용해시켰다. 이 반응혼합물을 12시간 동안 냉각장치에서 냉각시킨 다음, 분리되어 나온 결정체를 진공여과시키고 건조시킨 다음, 광회전이 일정할때까지 에탄올로부터 여러 번 재결정한 후 감압하에서 건조시켰다. 녹는점이 118∼121℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = +5.6°(메탄올에서 c=0.5)인 상기 산의 α-메틸벤질암모늄염 17.7g을 얻었다.

산을 유리시키기 위해서, 이 염을 물/디클로로메탄 혼합물에서 처리하고, 이 혼합물을 포타슘비설페이트 수용액으로 산성화시켰다. 유기상을 분리한 다음, 수상을 디클로로메탄으로 3회 추출하였다. 복합 유기 추출물을 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 남아 있는 잔류물을 건조시켰다. 광회전이 [α]_D ²⁰ = +7.4°(메탄올에서 c=0.651)인 순수(2'R)-1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르복실산 11.2g을 얻었다.

B) 65℃로 가열시킨 에탄올 54ml중의 L-(+)-타르타르산 12.65g의 용액을, 65℃로 가열시킨 24.5g의 라세미 삼차 부틸-3-아미노-2,3,45-테트라히드로-2-옥소-1H-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 1 I)의 제조방법 참고)용액에 첨가하였다. 이 라세미혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서 에탄올 1.3ml중의 벤즈알데히드 1.72ml의 용액을 적하하였다. 생성된 현탁액을 14시간동안 80℃에서 환류시킨 다음 실온으로 냉각시켰다. 생성된 결정 침전물을 진공여과시키고 에탄올 80ml에서 처리한 다음 다시 8시간 동안 환류시켰다. 이어서 실온으로 냉각시킨 다음 결정체를 진공여과시키고 50℃에서 감압 건조시켰다. 녹는점이 195∼196℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = -152°(메탄올에서 c=0.5)인 타르타르산염 23.6g을 얻었다.

염기를 유리시키기 위해서, 타르타르산염 23.6g을 물 25ml와 디클로로메탄 108ml의 혼합물에서 교반시키면서 0℃로 냉각시키고, 암모니아 수용액을 가하여 pH를 9.6으로 맞추었다. 유기상을 분리하고, 수상을 30ml의 디클로로메탄으로 여러 번 추출하였으며, 유기상을 화합시키고 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 농축하였다. 남아 있는 잔류물을 메틸 삼차 부틸에테르로부터 재결정시킨 다음 감압하에서 건조시켰다. 녹는점이 113∼115℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = -276.2°(메탄올에서 c=0.5)인 삼차 부틸(3S)-3-아미노-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트 12.2g을 얻었다.

C) 상기 A)에서 얻은 산 5.4g을 건조된 디클로로메탄 60ml에 용해시켰다. 이 용액을 트리에틸아민 2.33ml와 혼합시키고 -20℃로 냉각시켰다. 이어서 건조된 디클로로메탄 5ml중의 메탄술포닐클로라이드 1.31ml의 용액을 천천히 적하하였다. 15분 동안 교반한 후, 디클로로메탄 60ml중의 트리에틸아민 2.33ml와 상기 B)에서 얻은 아민 4.8g의 용액을 적하하였다. 이어서 이 반응혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 이 반응혼합물을 물에 따른 다음, 유기상을 분리하고 포타슘비설페이트 수용액으로 세척하고 이어서 물로 세척한 다음 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 여과 및 농축하였다. 남아 있는 초기 생성물을 n-헥산/에틸아세테이트(7:3)를 사용하는 500g의 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 감압하에서 건조시켜 광회전이 [α]_D ²⁰ = -115.2°(메탄올에서 c=0.463)인 오일로서 순수 주제화합물 9.5g을 얻었다.

실시예 4

(3S, 2'R)-3-{1-[2'-{에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산.

삼차 부틸(3S, 2'R)-3-{1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 3의 제조방법 참고) 9.4g을 얼음으로 냉각시키면서 15ml의 디클로로메탄에 용해시켰다. 이 용액에 트리플루오로아세트산 31ml를 첨가한 다음 이 반응혼합물을 4℃의 냉각장치에 약 12시간동안 보관하였다. 제조공정을 위해서, 디클로로메탄 및 트리플루오로아세트산을 감압하에서 증발시켰다. 생성된 초기 생성물을 에틴아세테이트에서 처리한 다음 물, 묽은 소듐비카보네이트 용액으로 세척하고 다시 물로 세척하였다. 유기상을 분리하고 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 용리액으로서 초기에는 디클로로메탄을 사용하고 이어서 디클로로메탄/메탄올(95:5)을 사용하는 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 남아있는 잔류물을 정제하였다. 생성물을 80℃에서 2일 동안 감압하에서 건조시켰다. 녹는점이 71∼74℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = -131.0°(메탄올에서 c=0.5)인 고체형태의 순수 주제화합물 7.3g을 얻었다.

실시예 5

삼차 부틸-3-{1-[2'-(삼차부톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]-시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트.

A) 질소하에서 삼차 부틸디메틸포스포노아세테이트 118g을 건조된 디메틸포름아미드 875ml에 용해시켰다. 이 용액에 포타슘 삼차 부톡사이드 58.9g을 얼음으로 냉각시키면서 첨가하였다. 이어서 이 반응혼합물을 단시간 동안에 60℃로 가열시킨 다음 실온으로 냉각시켰다. 이 반응혼합물에 디메틸포름아미드 110ml중의 페닐에틸브로미드 104.9g의 용액을 적하하였다. 이어서 이 반응혼합물을 2시간동안 60℃로 가열하였다. 제조공정을 위해서, 디메틸포름아미드를 감압하에서 충분히 분리한 다음, 남아 있는 잔류물을 메틸 삼차 부틸에테르에 용해시켰다. 이 용액을 포타슘비설페이트 수용액으로 산성화시켰다. 이어서 유기상을 분리한 후 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 용리액으로서 디클로로메탄/메틸삼차부틸에테르를 사용하는 3kg의 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 초기생성물을 정제하였다. 유성 생성물로서 순수 삼차 부틸-2-(디메틸포스포노)-4-페닐-n-부티레이트 105.1g을 얻었다.

B) 질소하에서 상기에서 얻은 생성물 105.1g을 건조된 테트라하이드로퓨란 705ml에 용해시켰다. 이 용액에 파라포름알데히드 28.4g을 첨가하였다. 이어서 테트라하이드로퓨란 100ml중의 포타슘 삼차 부톡사이드 32.5g의 용액을 천천히 적하하였다. 이어서 이 반응혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 차가운 포타슘비설페이트 수용액으로 산성화시키고 메틸삼차부틸에테르로 희석시켰다. 이어서 유기상을 분리하고 물로 세척한 다음 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 농축하였다. n-헥산/에틸아세테이트(9:1)를 사용하는 700g의 실리카겔상 플래시크로마토그래피로 초기 생성물을 정제하였다. 무색 오일로서 삼차 부틸-α-(펜에틸)아크릴레이트 47.0g을 얻었다.

C) n-헥산중의 부틸리튬 1.6몰 용액 200ml를, -50℃로 냉각시킨 무수테트라하이드로퓨란 450ml중의 디이소프로필아민 50.2ml의 용액에 적하하고, 이 반응혼합물을 30분동안 0℃로 유지시켰다. 이어서, 이 온도에서 무수테트라하이드로퓨란 40ml중의 시클로펜탄카르복실산 16.2ml의 용액을 적하하였다. 이 반응혼합물을 2시간동안 0℃에서 교반하였다. 이어서 무수 테트라하이드로퓨란 50ml중의 상기 B)에서 얻은 생성물 38g의 용액을 천천히 반응혼합물에 첨가하였다. 이 반응혼합물을 2시간동안 0℃에서 교반한 다음 여러시간동안 -15℃로 유지시켰다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 얼음으로 냉각시키면서 포타슘비설페이트 포화수용액으로 산성화시킨 다음, n-헥산으로 3회 추출하였다. 복합 유기상을 반포화(half-saturated) 소듐비카보네이트 수용액으로 7회 세척한 다음 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 유성(oily) 초기생성물을 얼음처럼 차가운 n-헥산으로부터 재결정시켰다. 녹는점이 75∼77℃인 순수결정체 1-[2-(삼차부톡시카르보닐)-4-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르복실산 41.9g을 얻었다.

D) 상기에서 얻은 생성물 3.3g, 삼차 부틸-3-아미노-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 1 I)의 제조방법 참고) 2.7g 및 히드록시벤조트리아졸 1.18g을 질소하에서 무수 디클로로메탄 93ml에 용해시켰다. 이 용액에 N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드하이드로클로라이드 3.52g을 얼음에 냉각시키면서 첨가하였다. 이어서 이 반응혼합물을 2시간 동안 얼음으로 냉각시키면서 교반하였다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 연속적으로 물, 포타슘비설페이트 수용액, 물, 소듐비카보네이트 수용액 및 물로 세척하였다. 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 농축하였다. 용리액으로서 n-헥산/에틸아세테이트를 사용하는 200g의 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 남아있는 초기 생성물을 정제한 다음 메틸삼차부틸 에테르로부터 재결정시켰다. 녹는점이 110∼114℃인 순수 주제화합물 4.2g을 얻었다.

실시예 6

3-[1-(2'-카르복시-4'-페닐부틸)시클로펜탄-1-카르보닐아미노]-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산.

삼차부틸-3-{1-[2'-(삼차부톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-삼차-아하이드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 5의 제조방법 참고) 4.1g을 수분을 제거한 4℃에서 트리플루오로아세트산 13ml에 용해시켰다. 이 온도에서 생성된 용액을 3시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 감압하에서 농축하였다. 트리플루오로아세트산을 완전히 제거하기 위해서, 잔류물을 디클로로메탄과 혼합시킨 다음 여러번 증발시켰다. 이어서 생성된 잔류물을 디클로로메탄에서 용해시킨 다음, 이 용액을 물로 세척하고 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 농축하였다. 잔류물로서 남아있는 초기 생성물을 디클로로메탄으로부터 재결정시켰다. 녹는점이 178∼183℃인 순수 주제화합물 2.7g을 얻었다.

실시예 7

삼차 부틸(3S, 2'R)-3-{1-[2'-(삼차부톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트.

A) 1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-4'-페닐부틸)-시클로펜탄-1-카르복실산(실시예 5 C)의 제조방법 참고) 68g 및 L-(-)-α-메틸벤질아민 23.5ml를 가열시키면서 에탄올 200ml에 용해시켰다. 이 반응혼합물을 상기 실시예 3 A)에서 정의된 바와 같이 공정처리하였다. 녹는점이 118∼119℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = +9.2°(메탄올에서 c=0.5)인 상기 산의 α-메틸벤질암모늄염 32.2g을 얻었다. 산을 유리시키기 위해서, 이 염을 실시예 3 A)에서 정의한 공정으로 처리하였다. 녹는점이 68∼70℃이고, 광회전이 [α]_D ²⁰ = +15.4°(메탄올에서 c=0.5)인 (2'R)-1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르복실산 23g을 얻었다.

B) 실시예 3 c)에서 정의된 방법에 의해서, 상기에서 얻은 산 60.1g을 삼차 부틸(3S)-3-아미노-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 3B)의 제조방법 참고) 50.3g과 반응시킨 다음, 생성된 반응혼합물을 실시예 3 c)에서 정의된 바와 같이 공정처리하였다. 광회전이 [α]_D ²⁰ = -110.2°(메탄올에서 c=0.5)인 폼(foam) 형태의 주제화합물 94.3g을 얻었다.

IR 스펙트럼(KBr disc) : 3420cm^-1, 1743cm^-1, 1725cm^-1, 1670cm^-1

실시예 8

(3S, 2'R)-3-[1-2'-카르복시-4'-페닐부틸)시클로펜탄-1-카르보닐아미노]-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산.

실시예 6에서 정의된 방법에 의해서 삼차 부틸(3S, 2'R)-3-{1-[2'-(삼차 부톡시-카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 7의 제조방법 참고) 93g을 트리플루오로아세트산으로 가수분해한 다음, 이 반응혼합물을 실시예 6에서 정의된 바와 같이 공정처리하였다. 녹는점이 97∼122℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = -136.2°(메탄올에서 c=0.5)인 고체폼(foam)형태의 주제화합물 63.5g을 얻었다.

실시예 9

벤질(3S, 2'S)-3-{1-[2'-삼차부톡시카르보닐)-3'-(2'-메톡시에톡시)프로필]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-3,4-디히드로-4-옥소-1.5-벤즈옥사제핀-5(2H)-아세테이트.

A) 황산 7ml를 디에틸에테르 200ml중의 3-브로모프로피온산 100g의 용액에 첨가한 다음, 이 반응혼합물을 -20℃로 냉각시켰다. 이어서 액화 이소부텐 123ml를 첨가하였다. 이 반응혼합물을 실온의 압력용기(pressur vessel)에서 여러시간 동안 교반하였다. 그 다음에, 제조공정을 위해서 반응혼합물을 얼음처럼 차가운 묽은 수산화나트륨 수용액에 부었다. 에테르상을 분리하고 수상을 에테르로 1회 이상 추출하였다. 복합유기상을 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 초기 생성물을 감압하에서 증류하였다. 끓는점(20)이 75∼77℃인 삼차 부틸-3-브로모프로피온산염 100g을 얻었다.

B) 디이소프로필아민 50.4ml를 질소하에서 무수 테트라하이드로퓨란 300ml에 용해시킨 다음, 이 용액을 -70℃로 냉각시켰다. 이 온도에서, 이 용액에 n-헥산중의 부틸리튬 1.6몰 용액 200ml를 천천히 적하하였다. 반응혼합물을 0℃로 데운 다음, 상기 온도에서 30분동안 교반하고 다시 -20℃로 냉각시켰다. 상기 온도에서, 무수 테트라하이드로퓨란 30ml중의 시클로펜탄카르복실산 16.2ml의 용액을 적하하였다. 이어서 반응혼합물을 실온에서 2시간동안 교반하였다. 이어서 혼합물을 -10℃로 냉각시킨 다음, -10℃로 냉각된 테트라하이드로퓨란 100ml중의 삼차 부틸-3-브로모프로피온산염 35g의 용액에 천천히 적하하였다. 반응혼합물을 실온에서 여러시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위하여, 이를 묽은 염산수용액으로 산성화시킨 다음 디에틸에테르 375ml로 희석시켰다. 유기상을 분리하고, 수상을 매 회마다 100ml의 디에틸에테르를 사용하여 3회 이상 추출하였다. 복합유기추출물을 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 남아있는 잔류물을 디에틸에테르 300ml에 용해시켰다. 이 용액을 소듐비카보네이트 수용액으로 6회 흔들어 준 다음 10％의 진한 탄산나트륨 수용액으로 4회 흔들어 주었다. 복합 탄산나트륨 용액을 얼음으로 냉각시키면서 산성화시키고 매 회마다 150ml의 에테르를 사용하여 3회 추출하였다. 에테르 추출물은 에에테르(ethereal) 용액과 화합한 다음, 생성된 용액을 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 농축하였다. 초기 생성물을 얼음처럼 차가운 n-헥산으로부터 결정화시켰다. 녹는점이 78∼81℃인 순수 1-[2-(삼차 부톡시카르보닐)에틸]-1-시클로펜탄 카르복실산 7.7g을 얻었다.

C) 디이소프로필아민 30ml를 질소하에서 무수테트라하이드로퓨란 100ml에 용해시킨 다음, 이 용액을 -70℃로 냉각시켰다. 이 용액에 n-헥산중의 부틸리튬 1.6몰 용액 132ml를 적하한 다음, 이 반응혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하고, 이어서 -70℃로 다시 냉각시켰다. 이 반응혼합물에 무수테트라하이드로퓨란 100ml중의 상기 B)에서 얻은 생성물 24.2g의 용액과 무수테트라하이드로퓨란 20ml중의 메톡시에톡시메틸클로라이드 14.2ml의 용액을 연속적으로 적하하였다. 이어서 반응혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위하여, 반응혼합물을 얼음/물 혼합물에 부은 다음 포타슘비설페이트 수용액으로 산성화시키고 매 회마다 300ml의 에틸아세테이트를 사용하여 3회 추출하였다. 유기상을 화합시키고 염화나트륨 수용액으로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 농축하였다. 용리액으로서 디클로로메탄/에테르(8:2)를 사용하는 500g의 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 남아 있는 초기 생성물을 정제하였다. 오일로서 순수한 1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-3'-(2-메톡시에톡시)프로필]시클로펜틴-1-카르복실산 26.5g을 얻었다.

D) 상기에서 얻은 라세미산 36.7g을 n-헥산 184ml에 용해시키고, 이 용액에 (+)-유사에페드린(pseudoephedrine)을 첨가하였다. 분리된 침전물을 환류조건하에서 단시간 가열시키면서 다시 용해시켰다. 이어서 용액을 냉각시키고 여러시간 동안 냉각장치에 보관하였다. 형성된 결정 침전물을 진공여과시키고, 얼음처럼 차가운 n-헥산으로 세척한 다음 n-헥산으로부터 4회 이상 재결정시켰다. 녹는점이 89∼91℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = +36.5°(메탄올에서 c=1)인 상기 산의 유사에페드린염 16.2g을 얻었다.

산을 유리시키기 위해서, 상기 염 16g을 n-헥산에서 현탁시키고, 이 반응혼합물을 얼음처럼 차가운 포타슘 비설페이트 수용액으로 산성화시켰다. 유기상을 분리하고 수상을 n-헥산으로 2회 이상 추출하였다. 복합 유기상을 염화나트륨 수용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 감압하의 50℃에서 건조시켰다.

광회전이 [α]_D ²⁰ = +2.9°(메탄올에서 c=1)인 오일로서 (2'S)-1-[2'-(삼차-부톡시카르보닐)-3'-(2-메톡시에톡시)프로필]시클로펜탄-1-카르복실산 9.9g을 얻었다.

E) 수소화나트륨(80％) 17.2g을 질소하에서 건조 디메틸포름아미드 400ml에 용해시키고 수분을 제거하였다. 0℃에서 이 용액에 건조 디메틸포름아미드 50ml중의 L-BOC-세린(즉, N-(삼차 부톡시카르보닐)세린) 50g의 용액을 천천히 적하하였다. 이 반응혼합물을 15℃로 서서히 데운 후, 디메틸포름아미드 50ml중의 0-니트로페놀 37.4g의 용액을 적하하고, 반응혼합물을 실온에서 여러시간 동안 교반하였다. 제조공정을 위하여, 반응혼합물을 얼음처럼 차가운 포타슘비설페이트 용액에 부었다. 이어서, 에틸아세테이트로 여러 번 추출한 다음, 복합 유기상을 소듐비카보네이트 수용액과 혼합하였다. 수상을 분리하고, 에테르로 세척한 다음 포타슘비설페이트 용액으로 산성화시키고 에틸아세테이트로 추출하였다. 에틸아세테이트 추출물을 물로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 초기 (2S)-3-(2-니트로페녹시)-2-(삼차-부톡시카르보닐아미노)프로피온산 54.2g을 얻었으며, 더 이상 정제하지 않으면서 공정처리하였다.

F) 상기에서 얻은 산 54.2g을 메탄올 600ml에 용해시켰다. 팔라듐 촉매(5％ Pd/목탄) 1.8g을 이 용액에 첨가하였다. 이어서 1시간 동안 5bar의 수소압력으로 수소화반응이 수행되었다. 촉매를 여과시키고, 여과용액을 감압하에서 농축하였다. 초기 생성물을 얼음으로 냉각시키면서 메틸 삼차 부틸에테르/n-헥산혼합물로부터 결정화시켰다. 녹는점이 87∼91℃이고 광회전이 [α]_D ²⁰ = +55.9°(메탄올에서 c=1)인 (2S)-3-(2-아미노페녹시)-2-(삼차 부톡시카르보닐아미노)프로피온산 30.1g을 얻었다.

G) 상기에서 얻은 산 13.3g을 수분을 제거시키면서 건조 디메틸포름아미드 71ml에 용해시켰다. 이 용액에 디메틸포름아미드 6ml중의 디에틸포스포릴 시안화물 7.8ml의 용액을 얼음으로 냉각시키면서 첨가하였다. 10분 후, 트리에틸아민 5.7ml를 적하하고 이 반응혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 제조공정을 위해 반응혼합물을 얼음물에 부은 다음 메틸 삼차 부틸에테르로 여러 번 추출하였다. 복합유기상을 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 잔류물로서 남아있는 초기 생성물을 에탄올로부터 결정화시켰다. 광회전이 [α}_D ²⁰ = -194°(메탄올에서 c=1)인 (3S)-3-(삼차 부톡시카르보닐아미노)-2,3-디히드로-1,5-벤즈옥사제핀-4(5H)-온 1.3g을 얻었다.

H) 상기에서 얻은 생성물 16g을 수분을 제거시키면서 테트라하이드로퓨란 313ml에 용해시켰다. 테트라하이드로퓨란 30ml중의 포타슘 삼차 부톡사이드 7.1g의 용액과 테트라하이드로퓨란 10ml중의 벤질 브로모아세테이트 10.9ml의 용액을 연속적으로 이 용액에 적하하였다. 이 반응혼합물을 실온에서 1시간동안 교반하였다. 이어서, 제조공정을 위해서, 메틸 삼차-부틸에테르로 희석시키고 물로 세척한 다음, 유기상을 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 농축하였다. 용리액으로서 n-헥산/에틸아세테이트(3:2)를 사용하는 500g의 실리카겔상 플래시크로마토그래피로 초기 생성물을 정제하였다. 오일로서 광회전이 [α]_D ²⁰ = -152°(메탄올에서 c=0.68)인 순수한 벤질 (3S)-3-(삼차 부톡시카르보닐아미노)-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤즈옥사제핀-5(2H)-아세테이트 20.5g을 얻었다.

I) 상기에서 얻은 생성물 20g을 디클로로메탄 137ml에 용해시켰다. 이 용액에 트리플루오로아세트산 77ml를 첨가하고, 이 혼합물을 1시간동안 교반하였다. 이어서 감압하에서 농축하고 잔류물을 디클로로메탄에서 용해시킨 다음, 반응이 알칼리성이 될때까지 소듐비카보네이트 수용액을 첨가하였다. 유기상을 분리하고, 물로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 농축하였다. 광회전이 [α]_D ²⁰ = -187.5°(메탄올에서 c=0.536)인 순수한 벤질-(3S)-3-아미노-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤즈옥사제핀-5(2H)-아세테이트 15.7g을 얻었다.

J) 상기에서 얻은 생성물 15.7g을 건조 디클로로메탄 48ml에 용해시키고, 실온에서 상기 D)에서 제조된 산 1.6g, N-메틸모르포린 0.79ml 및 N-에틸-N'-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드 1.83g을 상기 용액에 연속적으로 첨가하였다. 이어서 반응혼합물을 실온에서 1시간동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 연속적으로 물, 포타슘비설페이트 수용액, 물, 소듐비카보네이트 수용액 및 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 잔류물로서 남은 초기 생성물을, 용리액으로서 n-헥산/에테르아세테이트(7:3)를 사용하는 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 오일로서 광회전이 [α]_D ²⁰ = -96.3°(메탄올에서 c=0.326)인 주제화합물 1.8g을 얻었다.

실시예 10

벤질(3S, 2'S)-3-{1-[2'-카르복시-3'-(2-메톡시-에톡시)프로필]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤즈옥사제핀-5(2H)-아세테이트.

벤질 (3S, 2'S)-3-{1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-3'-(2-메톡시에톡시)프로필]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤즈옥사제핀-5(2H)-아세테이트(실시예 9의 제조방법 참고) 1.6g을 얼음으로 냉각시키면서 트리플루오로아세트산 5ml에서 용해시켰다. 이 용액을 여러시간 동안 4℃로 유지시켰다. 그 다음에, 제조공정을 위해서, 감압하에서 증발시키고 잔류물로 남아있는 초기 생성물을 디클로로메탄/메틸삼차부틸에테르/메탄올(85:15:5)을 사용하는 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 건조시켜서 광회전이 [α]_D ²⁰ = -117.2°(메탄올에서 c=0.42)인 오일로서 주제화합물 1.0g을 얻었다.

실시예 11

(3S, 2'S)-3-{1-[2'-카르복시-3'-(2-메톡시에톡시)프로필]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤즈옥사제핀-5(2H)-아세트산.

벤질(3S, 2'S)-3-{1-[2'-카르복시-3'-(2-메톡시에톡시)프로필]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤즈옥사제핀-5(2H)-아세테이트(실시예 10의 제조방법 참고) 0.95g을 에탄올 50ml에 용해시켰다. 이 용액에 팔라듐 촉매(Pd/목탄 5％) 0.2g을 첨가하였다. 이어서 2시간 동안 5bar의 수소압력하에서 수소화반응시켰다. 제조공정을 위해서, 촉매를 여과시키고, 여과용액을 감압하에서 증발시킨 다음, 남아있는 잔류물을 건조시켰다. 광회전이 [α]_D ²⁰ = -142.6°(메탄올에서 c=0.5)인 폼(foam)형태의 주제화합물 0.7g을 얻었다.

실시예 12

삼차 부틸(3R)-3-{1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-4'-(4-플루오로페녹시)부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조티아제핀-5(2H)-아세테이트.

A) 삼차 부틸디메틸포스포노아세테이트 20.5g을 실시예 5 A)에서 정의된 방법에 따라 4-플루오로페녹시에틸 브로미드 25g과 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 5 A)에서 정의된 바에 따라서 공정처리하였다. 삼차-부틸-4-(4-플루오로페녹시)-2-(디메틸포스포노)-n-부티레이트 20.4을 얻었다.

B) 상기에서 얻은 생성물 20.4을 실시예 5 B)에서 정의된 방법에 따라 파라포름알데히드 4.8g과 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 5 B)에서 정의된 바에 따라서 공정처리하였다. 초기생성물로서 유성 삼차 부틸 α-[2-(4-플루오로페녹시)에틸]아크릴레이트 15.3g을 얻었다. 이를 크로마토그래피로 더 이상 정제하지 않고 다음 단계에서 공정처리하였다.

C) 상기에서 얻은 생성물 15.3g을 실시예 5 C)에서 정의된 방법에 따라서 시클로펜탄카르복실산 5.1ml와 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 5 C)에서 정의된 바에 따라서 공정처리하였다. 녹는점이 58∼63℃인 1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-4'-(4-플루오로페녹시)부틸]시클로펜탄-1-카르복실산 6.0g을 얻었으며, 또한 약간 오염된 유성 생성물 7.6g을 얻었다.

D) 550ml의 물중에서 소듐 비카보네이트 181.9g과 N-아세틸-L-시스테인 122.4g의 용액을 1800ml의 에탄올중의 1-플루오로-2-니트로-벤젠 100ml의 용액에 첨가하였다. 이 반응혼합물을 3시간 동안 환류시킨 다음, 실온으로 냉각시키고 침전물을 제거하기 위해 여과시켰다. 여과액을 약 700ml로 농축하고, 남아있는 잔류물을 1.8ℓ의 물에서 처리하였다. 수상을 디에틸에테르로 추출한 다음, 진한 염산 수용액을 첨가하여 pH1로 조절하였다. 황색고체가 침전되었고 이를 진공여과시켰다. 초기 생성물인 R-(2-니트로페닐)-N-아세틸-L-시스테인 253.6g을 얻었으며 이를 더 이상 정제하지 않으면서 공정처리하였다.

E) 상기에서 얻은 생성물 253.6g을 18몰의 황산 825ml 및 물 3.3ℓ와 혼합하였다. 반응혼합물을 40분 동안 환류시키고 0℃로 냉각시켰다. 진한 암모니아 수용액 1925ml를 첨가하였다. 침전된 고체를 진공여과시키고 물로부터 재결정시켰다. R-(2-니트로페닐)-L-시스테인 143g을 얻었다.

F) 상기에서 얻은 생성물 100g과 탄산나트륨 62.2g을 물 7ℓ에 용해시켰다. 이어서 카르보에톡시-프탈이미드 120g을 3시간에 걸쳐서 첨가하고 반응혼합물을 5시간 동안 교반한 다음 여러시간 동안 보관하였다. 침전된 고체를 진공여과시키고, 여과액에 진한 염산수용액을 가하여 pH2∼3으로 조절하였다. 분리된 침전물을 진공여과시키고, 물로 여러 번 세척한 다음 에탄올 1ℓ에서 가볍게 가열(약 40℃)시키면서 현탁하였다. 냉각 후, 고체를 진공여과시키고 공기 건조시켰다. (2R)-3-(2-니트로페닐티오)-2-프탈이미도프로피온산 100g을 얻었으며, 이를 더 이상 정제하지 않으면서 공정처리하였다.

G) 상기에서 얻은 생성물 100g을 메탄올 1.5ℓ에서 현탁시켰다. 여기에 팔라듐/목탄(5％) 촉매 0.8g을 첨가하고, 이 반응혼합물을 5시간 동안 수소화반응시켰다. 이어서 촉매를 제거하고 용매를 감압하에서 증발시켰다. 초기 생성물인 황갈색오일로서 (2R)-3-(2-아미노페닐티오)-2-프탈이미도프로피온산 71.6g을 얻었으며, 이를 더 이상 정제하지 않으면서 공정처리하였다.

H) 상기에서 얻은 생성물 71.6g을 디메틸포름아미드에 용해시켰다. 이 용액에 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드 38.0g을 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 3시간동안 교반하였다. 이어서 반응혼합물을 에틸아세테이트 1.5ℓ로 희석시킨 다음, 매 회마다 1.5ℓ의 소듐 비카보네이트 노르말 수용액을 사용하여 여러 회 추출하였다. 유기상을 매 회마다 물 200ml를 사용하여 2회 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 잔류물을 용리액으로서 에틸아세테이트/시클로헥산(1:1)을 사용하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. (3R)-2,3-디히드로-3-프탈이미도-1,5-벤조티아제핀-4(5H)-온 46.3g을 얻었다.

I) 분말형 수산화칼륨 10.6g과 테트라부틸암모늄브로미드 4.8g을 테트라하이드로퓨란 300ml중의 상기에서 얻은 생성물 46.3g의 용액에 첨가하였다. 이 반응혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음 삼차 부틸브로모아세테이트 23.2ml를 천천히 적하하였다. 이어서 반응혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 그 다음에 여과시키고, 여과액을 감압하에서 중발시켰다. 잔류물을 디에틸에테르에서 처리한 다음, 에테르상을 물과 1몰 포타슘비설페이트용액으로 세척하고 황산마그네슘으로 건조시킨 다음 감압하에서 농축하였다. 남아있는 유성 초기 생성물을 에틸아세테이트 및 디에틸에테르와 혼합하였다. 형성된 침전물을 진공여과시켰다. 고체인 (3R)-5-(삼차부톡시카르보닐메틸)-2,3-디히드로-3-프탈이미도-1,5-벤조티아제핀-4(5H)-온 34g을 얻었다. 모액을 감압하에서 농축시켜 약간 불순한 유성생성물 25g을 얻었다.

광회전 [α]_D ²⁰ = -146°(디클로로메탄 c=0.8)

J) 상기에서 얻은 생성물 2g을 에탄올아민 7.5ml와 혼합시킨 다음, 이 혼합물을 80℃에서 10분동안 교반하였다. 이어서 열을 제거하고 혼합물을 30분 더 교반하였다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 5％ 진한 염화나트륨수용액 70ml와 혼합하고, 생성된 혼합물을 톨루엔으로 추출하였다. 유기상을 분리하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 증발시켰다. 톨루엔 함유고체로서 삼차부틸(3R)-3-아미노-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조티아제핀-5(2H)-아세테이트 1.46g을 얻었다.

K) 상기 생성물 1.45g, 상기 C)에서 얻은 시클로펜탄카르복실산유도체 1.75g, 히드록시벤조트리아졸 0.70g 및 N-메틸모르포린 1.50ml를 건조 디클로로메탄 100ml에 첨가하였다. 이 반응혼합물을 0℃로 냉각시킨 다음, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드 1.76g을 첨가하고 반응혼합물을 실온에서 5시간 교반하였다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 1몰 포타슘비설페이트 용액과 혼합시킨 다음, 유기상을 분리하고 1몰 포타슘비카보네이트 용액과 포화 염화나트륨용액으로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에서 증발시켰다. 생성된 초기 생성물을 용리액으로서 n-헥산/에틸아세테이트(4:1)를 사용하는 플래시 컬럼크로마토그래피로 정제하였다. 오일로서 주제화합물 1.9g을 얻었다.

IR 스펙트럼(필름) : 3366cm^-1, 3059cm^-1, 2969cm^-1, 2874cm^-1, 1727cm^-1, 1657cm_-1, 1505cm^-1

실시예 13

(3R)-3-{1-[2'-카르복시-4'-(4-플루오로페녹시)부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조티아제핀-5(2H)-아세트산.

삼차 부틸(3R)-3-{1-[2'-(삼차-부톡시카르보닐)-4'-(4-플루오로페녹시)부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조티아제핀-5(2H)-아세테이트(실시예 12의 제조 방법 참고) 1.9g을 실시예 6에서 정의된 방법에 따라 트리플루오로아세트산으로 가수분해시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 6에서 정의된 바에 따라 공정처리하였다. 녹는점 90∼94℃의 무정형 고체인 주제화합물 0.56g을 얻었다.

실시예 14

삼차 부틸 (3R)-3-{1-[2'-{삼차부톡시카르보닐)-5'-(3,4-디메톡시페닐)펜틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조티아제핀-5(2H)-아세테이트.

A) 트리페닐포스핀 6.7g을 아세토니트릴 200ml에 용해시켰다. 이 용액을 0℃로 냉각시킨 후, 브롬 1.3ml를 적하하였다. 냉각조(Cooling bath)를 제거하고, 아세토니트릴 80ml중의 3-(3,4-디메톡시페닐)-1-프로판올 5g의 용액을 적하하였다. 이어서, 6시간에 걸쳐서 여러번 증류액 10ml를 제거하기 위해서 워터트랩(water trap)을 사용하고 제거된 양은 새로운 아세토니트릴로 대체시키는 환류조건하에서 반응혼합물을 가열하였다. 제조공정을 위해서, 용매는 감압하에서 증발시키고 남아있는 잔류물은 디에틸에테르에서 처리한 다음 여과시켰다. 여과액을 감압하에서 농축하고 시클로헥산/메틸삼차부틸에테르(7:2)를 사용하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 무색오일로서 3-(3,4-디메톡시페닐)-1-브로모프로판 5.5g을 얻었다.

B) 상기에서 얻은 생성물 5.5g을 실시예 5 A)에서 정의된 방법에 따라서 삼차부틸디메틸포스포노아세테이트 3.8ml와 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 5 A)에서 정의된 바에 따라 공정처리하였다. 무색오일로서 삼차부틸 4-(3,4-디메톡시페닐)-2-(디메틸포스포노)발레르산염 6.1g을 얻었다.

C) 상기에서 얻은 생성물 6g을 실시예 5 B)에서 정의된 방법에 따라 파라포름알데히드와 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 5 B)에서 정의된 바에 따라 공정처리하였다. 초기 생성물을 용리액으로서 메틸 삼차 부틸 에테르/시클로헥산(1:3)을 사용하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 유성 삼차 부틸-1-[3-(3,4-디메톡시페닐)프로필]-아크릴레이트를 얻었다.

D) 상기에서 얻은 생성물 3.4g을 실시예 5 C)에서 정의된 방법에 따라 시클로펜탄 카르복실산 1.3ml와 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 5 c)에 정의된 바에 따라 공정처리하였다. 초기 생성물을 용리액으로서 에틸아세테이트/시클로헥산(1:3)을 사용하는 플래시 컬름 크로마토그래피로 정제하였다. 유성 1-[2-(삼차 부톡시카르보닐)-5-(3,4-디메톡시페닐)펜틸]시클로펜탄카르복실산 2.5g을 얻었다.

E) 상기에서 얻은 생성물 2.5g을 아세토니트릴 50ml에 용해시켰다. 0℃ 및 수분이 제거된 상태에서, 이 용액에 디이소프로필에틸아민 4.2ml, 2-클로로-1-메틸피리디늄요오디드 1.7g 및 삼차 부틸(3R)-3-아미노-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조디아제핀-5(2H)-아세테이트(실시예 12 J)의 제조방법 참고) 2.5g을 첨가하였다. 반응혼합물을 0℃에서 30분동안 교반하고 실온에서 2시간 교반하였다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 감압하에서 증발시키고 남아 있는 잔류물을 디클로로메탄에서 용해시켰다. 이 용액을 먼저 묽은 염산수용액으로 흔들어준 다음 물로 흔들어 주었다. 유기상을 분리하고 수상을 디클로로메탄으로 2번 이상 추출하였다. 이어서, 복합 유기상을 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 농축하였다. 유성 잔류물로서 주제화합물 3g을 얻었다. 실리카겔상 얇은층 크로마토그래피 : Rf = 0.4(용리액으로서 시클로헥산/에틸아세테이트(1:1) 사용).

실시예 15

(3R)-3-{1-[2'-카르복시-5'-(3,4-디메톡시페닐)펜틸]-시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조티아제핀-5(2H)-아세트산.

삼차 부틸(3R)-3-{1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-5'-(3,4-디메톡시페닐)펜틸]시클로펜탄-1-카르보닐-아미노}-4-옥소-3,4-디히드로-1,5-벤조티아제핀-5(2H)-아세테이트(실시예 14의 제조방법 참고) 3g을 디클로로메탄 20ml에 용해시켰다. 이 용액에 트리플루오로아세트산 3ml를 첨가하고, 이 반응혼합물을 실온에서 2일동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 이 반응혼합물을 감압하에서 농축하였다. 트리플루오로아세트산을 완전히 제거하기 위해서, 잔류물을 톨루엔 2ml와 혼합하고 다시 여러시간 동안 증발시켰다. 이러한 방법에 의해 얻은 초기 생성물을 용리액으로서 초기에 디클로로메탄/에틸아세테이트(1:1)을 사용한 다음 순수 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카겔상 플래시크로마토그래피로 정제하였다. 감압하에서 용출액을 농축하여 무정형 고체인 주제화합물 1.26g을 얻었다.

IR 스펙트럼(KBr disc) : 3365cm^-1, 2942cm^-1, 1726cm^-1, 1652cm^-1

실시예 16

벤질 3-{1-[2'-(삼차 부톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트.

A) 삼차부틸 3-아미노-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 1Ⅰ)의 제조방법 참고) 10.5g. P-톨루엔술폰산수화물 8.25g 및 벤질알코올 20.1ml를 톨루엔 174ml에 첨가하였다. 이 반응혼합물을 4시간 동안 워터 트랩으로 끓이는 동안 최초에 분리되어 나온 침전물을 천천히 용해시켰다. 이어서 톨루엔을 감압하에서 스트립(strip)한 다음, 남아있는 잔류물을 메틸삼차부틸에테르로 교반하고 여과시켰다. 이러한 방법에 의해서 얻은 고체 잔류물을 디클로로메탄에서 용해시키고, 이 용액에 얼음으로 냉각시키면서 탄산나트륨 수용액을 가하여 알칼리성으로 만들었다. 디클로로메탄상을 분리하고 물로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고 증발시켰다. 초기 생성물을 정제하기 위해 메틸삼차부틸에테르로부터 재결정시켰다. 녹는점이 105∼107℃인 벤질 3-아미노-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트 8.2g을 얻었다.

B) 상기에서 얻은 생성물 12.8g을 실시예 3 C)에서 정의된 방법에 따라 1-[2'-(삼차부톡시카르보닐)-4-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르복실산(실시예 5 c)의 제조방법 참고) 13.7g과 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 3 c)에서 정의된 바에 따라 공정처리하였다. 녹는점이 118∼123℃인 주제화합물 19.3g을 얻었다.

실시예 17

벤질 3-[1-(2'-카르복시-4'-페닐부틸)시클로펜탄-1-카르보닐아미노]-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트.

벤질 3-{1-[2-(삼차부톡시카르보닐)-4-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 16의 제조방법 참고) 15g을 실시예 6에서 정의된 방법에 따라 트리플루오로아세트산 56ml와 반응시켰다. 이 반응혼합물을 실시예 6에서 정의된 바에 따라 공정처리한 다음, 초기 생성물을 메틸삼차부틸에테르로부터 결정화시켰다. 녹는점이 86∼90℃인 주제화합물 13.1g을 얻었다.

실시예 18

벤질 3-{1-[2'-(삼차부틸카르보닐옥시메톡시카르보닐)-4-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트.

벤질 3-[1-(2'-카르복시-4'-페닐부틸)시클로펜탄-1-카르보닐아미노]-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 17의 제조방법 참고) 2g을 수분을 제거하면서 건조 디클로로메탄 20ml에 용해시켰다. 이 용액에 트리에틸아민 0.46ml와 디메틸아미노피리딘 0.1g을 첨가하였다. 이어서, 얼음으로 냉각시키면서 건조 디클로로메탄 3ml중의 클로로메틸피볼레이트 0.5g의 용액을 적하하였다. 이 반응혼합물을 실온에서 2일동안 교반하였다. 제조공정을 위해서, 반응혼합물을 물에 부은 다음 유기상을 분리하고, 소듐비카보네이트 수용액으로 세척한 다음 물로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음 감압하에서 농축하였다. 잔류물로서 남아있는 초기생성물을 용리액으로서 성분비가 초기에는 7:3이고 이어서 1:1인 n-헥산/에틸아세테이트 혼합물을 사용하는 150g의 실리카겔상 플래시 크로마토그래피로 정제하였다. 녹는점 71∼78℃인 고체폼(foam)으로서 순수 벤질-3-{1-[2'-(피발로일옥시메톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐-아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트 1.1g을 얻었다.

실시예 19

3-{1-[2'-(피발로일옥시메톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]-시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산.

벤질-3-{1-[2'-(피발로일옥시메톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세테이트(실시예 18의 제조방법 참고) 1.0g을 에탄올 100ml에 용해시켰다. 이 용액에 팔라듐/목탄 촉매(5％) 0.5g을 첨가하였다. 이어서 3시간 동안 5bar의 수소압력하에서 수소화반응시켰다. 제조공정을 위해서, 촉매를 여과시키고 여과용액을 증발시켰다. 남아있는 잔류물을 80℃의 감압하에서 건조시켰다. 유리같은 (glass-like) 주제화합물 0.7g을 얻었다.

IR 스펙트럼(KBr disc) : 3410cm^-1, 1750cm^-1, 1660cm^-1

하기 표 Ⅰ에 나타낸 일반식 Ⅰ의 화합물도 상기 실시예에서 정의된 방법에 의해서 제조가능하다.

주) 1) diox : (2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)메틸

2) C-s : 사이드체인에 있는 비대칭 중심

3) C-r : 고리에 있는 비대칭 중심

실시예 Ⅰ

(3S, 2'R)-3-{1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산을 함유하는 정제.

하나의 정제당 하기 조성을 갖는 정제들을 제조하였다 :

(3S, 2'R)-3-{1-[2'-(에톡시카르보닐)-4'-페닐부틸]시클로펜탄-1-카르보닐아미노}-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산 20mg

옥수수 전분 60mg

락토오스 135mg

젤라틴(10％ 진한 용액) 6mg

10％ 진한 젤라틴 용액을 사용하여 활성물질, 옥수수전분 및 락토오스를 페이스트(paste) 상태로 전환시켰다. 이 페이스트를 분쇄한 다음, 생성된 입자체를 적당한 판(Plate)에 놓고 45℃에서 건조시켰다. 건조시킨 입자체를 분쇄기에 통과시키고 하기 보조물질들과 함께 믹서에서 혼합시킨 다음, 압축시켜 정제 240mg을 제조하였다.

탈크 5mg

마그네슘 스테아레이트 5mg

옥수수 전분 9mg

실시예 Ⅱ

(3S, 2'R)-3-[1-(2'-카르복시-4'-페닐부틸)시클로펜탄-1-카르보닐아미노]-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산을 함유하는 주사용액

5ml 당 하기 조성을 갖는 주사용액을 제조하였다.

(3S, 2'R)-3-[1-(2'-카르복시-4'-페닐부틸)시클로펜탄-1-카르보닐아미노]-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산 10mg

Na₂HPO₄·7H₂O 43.24mg

NaH₂PO₄·2H₂O 7.72mg

NaCl 30.0mg

정제수 4948.0mg

상기 물질들을 물에 용해시킨 다음, 이 용액을 살균시키고 5ml씩 분배하여 앰풀(ampoul)을 제조하였다.

Claims

하기 일반식 (Ⅰ)로 표시되는 화합물 및 생리학적으로 내성을 갖는 그의 염·

여기에서, R¹은 C₁∼C₄-알콕시라디칼이 C₁∼C₄-알콕시기로 치환된 C₁∼C₄-알콕시-C₁∼C₄-알킬기이거나, 페닐고리에서 C₁∼C₄-알킬, C₁∼C₄-알콕시 또는 할로겐으로 선택적 치환이 가능한 페닐-C₁∼C₄-알킬기 또는 페닐옥시-C₁∼C₄-알킬기이거나, 또는 나프틸-C₁∼C₄-알킬기이며,

A는 CH₂, O 또는 S 이며,

R²는 수소 또는 할로겐이며,

R³는 수소 또는 할로겐이며,

R⁴는 수소 또는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고,

R⁵는 수소 또는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이다.
제1항에 있어서, R⁴, R⁵, 또는 R⁴ 및 R⁵가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기는 C₁∼C₄-알킬기, 페닐고리에서 C₁∼C₄-알킬 또는 인접한 두 탄소원자들과 결합한 C₃∼C₄-알킬렌 사슬로 선택적으로 치환된 페닐 또는 페닐-C₁∼C₃-알킬기 또는 인도닐, 디옥솔란 고리에서 C₁∼C₄-알킬로 선택적으로 치환된 디옥솔라닐메틸기 또는 옥시메틸기상에서 C₁∼C₄-알킬로 선택적으로 치환된 C₂∼C₆-알카노일옥시메틸기인 것을 특징으로하는 화합물.
제1항 또는 제3항에 있어서, R⁴는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고, R⁵는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항 또는 제3항에 있어서, A는 CH₂인 것을 특징으로 하는 화합물.
제5항에 있어서, R¹은 펜에틸기 또는 나프틸에틸기이고, R²는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
약리학적 유효량의 제1항에 따른 화합물 및 통상의 약제학적 보조물질, 부형제, 또는 보조물질 및 부형제들을 함유하는 중성엔도펩티다제 억제제.
하기 일반식 (Ⅱ)의 산 또는 그의 반응성산유도체와 하기 일반식 (Ⅲ)의 아민이 반응하여 하기 일반식 (Ⅳ)의 아미드가 생성되며, 하기 일반식 (Ⅳ)의 화합물에 있는 산보호기 R^4a 및 R^5a가 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기가 아니면 이들은 적당한 순서에서 동시에 또는 연속적으로 제거되며, 필요하다면 비보호 산성기는 하기 일반식(V)의 알코올 또는 상응하는 하기 일반식(Va)의 반응성유도체와 에스테르화반응하며, 필요하다면 생성된 하기 일반식 (Ⅰ)의 산이 생리학적으로 내성인 그의 염으로 전환되거나 하기 일반식 (Ⅰ)의 산의 염이 유리산으로 전환되는 것을 특징으로 하는 하기 일반식 (Ⅰ)의 화합물 및 생리학적으로 내성을 갖는 그의 염의 제조방법.

여기에서 R¹은 C₁∼C₄-알콕시 라디칼이 C₁∼C₄-알콕시기로 치환된 C₁∼C₄-알콕시-C₁∼C₄-알킬기이거나, 페닐고리에서 C₁∼C₄-알킬, C₁-C₄-알콕시 또는 할로겐으로 선택적 치환이 가능한 페닐-C₁∼C₄-알킬 또는 페닐옥시-C₁∼C₄-알킬기이거나, 또는 나프틸-C₁∼C₄-알킬기이며,

A는 CH₂, O 또는 S이며,

R²는 수소 또는 할로겐이며,

R³는 수소 또는 할로겐이며,

R⁴는 수소 또는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고,

R⁵는 수소 또는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이며,

여기에서 R¹은 상기한 바와 같고 R^4a는 산보호기이며,

여기에서 R², R³ 및 A는 상기한 바와 같고 R^5a는 산보호기이며,

여기에서 R¹, R², R³, R^4a, R^5a 및 A는 상기한 바와 같고,

R⁶ - OH (V) R⁶ - X (Va)

여기에서 R⁶은 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고, X는 제거될 수 있는 반응성기이다.
제3항에 있어서, 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기는 페닐, 벤질 또는 인다닐인 것을 특징으로 하는 화합물.
제3항에 있어서, 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기는 (2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)메틸인 것을 특징으로 하는 화합물.
제2항에 있어서, 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기는 C₁∼C₄-알킬기, 페닐고리에서 C₁∼C₄-알킬 또는 인접한 두 탄소원자들과 결합한 C₃∼C₄-알킬렌 사슬로 선택적으로 치환된 페닐 또는 페닐-C₁∼C₃-알킬기 또는 인도닐, 디옥솔란 고리에서 C₁∼C₄-알킬로 선택적으로 치환된 디옥솔라닐메틸기 또는 옥시메틸기상에서 C₁∼C₄-알킬로 선택적으로 치환된 C₂∼C₆-알카노일옥시메틸기인 것을 특징으로하는 화합물.
제11항에 있어서, R⁴는 생체내 가변성 에스테르를 형성하는 기이고, R⁵는 수소인 것을 특징으로 하는 화합물.
제11항에 있어서, A는 CH₂인 것을 특징으로 하는 화합물.
제7항에 있어서, 심부전치료용인 것을 특징으로 하는 중성엔도펩티다제 억제제.