PT733642E - Derivados n-acido acetico de benzazepina benzoxazepina e benzotiazepina bem como processo para a sua preparacao e medicamentos que os contem - Google Patents

Derivados n-acido acetico de benzazepina benzoxazepina e benzotiazepina bem como processo para a sua preparacao e medicamentos que os contem Download PDF

Info

Publication number
PT733642E
PT733642E PT96104265T PT96104265T PT733642E PT 733642 E PT733642 E PT 733642E PT 96104265 T PT96104265 T PT 96104265T PT 96104265 T PT96104265 T PT 96104265T PT 733642 E PT733642 E PT 733642E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
group
formula
acid
compounds
groups
Prior art date
Application number
PT96104265T
Other languages
English (en)
Inventor
Thormahlen Dr Dirk
Harald Waldeck
Dagmar Holtje
Josef Messinger
Jochen Antel
Michael Wurl
Original Assignee
Solvay Pharm Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Solvay Pharm Gmbh filed Critical Solvay Pharm Gmbh
Publication of PT733642E publication Critical patent/PT733642E/pt

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/16Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K5/00Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06Dipeptides
    • C07K5/06139Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10Antioedematous agents; Diuretics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

V
"DERIVADOS N-ACIDO ACÉTICO DE BENZAZEPINA, BENZOXAZEPINA E BENZOTIAZEPINA, BEM COMO PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO E MEDICAMENTOS QUE OS CONTÊM"
DESCRIÇÃO A presente invenção refere-se a novos derivados de N--ácido acético de benzazepina, benzoxazepina e benzotiazepina, que possuem na posição α relativamente ao átomo de azoto um grupo oxo e que são substituídos na posição 3- por um grupo 1-(carbóxi-alquilo)-ciclopentilcarbonilamina e seus sais e éster biolábil, bem como preparações farmacêuticas que contenham estes compostos, e processo para a preparação destes compostos.
Das patentes europeias EP-A 0 636 621 e EP-A 0 636 630 bem como da publicação de Lombaert et al., na revista Biochem. Biophys. Res. Comm., volume 204, Nr. 1, 1994, páginas 407-412, são já conhecidos compostos que possuem um efeito inibidor relativamente à endopeptidase neutral (= NEP) e à enzima que converte a endotelina (= ECE) . Os compostos das publicações acima referidas diferenciam-se dos da presente invenção através de significativas diferenças estruturais.
Para além disso são publicados nas patentes europeias EP-A 0 534 396, EP-A 0 595 610 e EP-A 0 599 444 derivados de benzazepina que possuem estruturas semelhantes aos compostos da presente invenção, que possuem actividade inibitória relativamente à enzima conversora de angiotensina (= ACE) e relativamente a NEP. Nenhuma das três patentes europeias acima mencionadas considerou no entanto, que compostos de benzazepina da forma descrita possuíssem também actividade 1 inibitória relativamente a ECE. A presente invenção tem assim como objectivo desenvolver novos compostos de benzazepina, benzoxazepina e benzotiazepina com valiosas caracteristicas de actividade farmacológica. Para além disso, a presente invenção tem como objectivo desenvolver novos compostos activos para tratamento de insuficiência cardíaca utilizáveis farmacologicamente.
Foi descoberto que os novos derivados N-ácido acético de benzazepina, benzoxazepina e benzotiazepina possuindo na posição 3 um grupo eventualmente esterificado 1-(carbóxi-alquilo)-ciclopentilcarbonilamina, possuem caracteristicas de actividade farmacológica elevadas a nível do coração e revelam um efeito inibidor sobre a endopeptidase neutral com um perfil de actividade favorável, podendo por esta razão reduzir a pressão arterial elevada em situações de insuficiência cardíaca, permitindo diminuir o esforço do coração, possuindo por isso um forte efeito diurético.
A presente invenção refere-se a novos compostos de fórmula geral I (ver fórmula I) em que R1 significa um grupo Ci-C4-alcóxilo-Ci-C4-alquilo, cujo grupo C-_-C,;-alcóxilo é substituído por um grupo C1-C4-alcóxilo, um grupo fenilo-Ci-C4-alquilo ou um grupo fenilóxilo-Ci-C4-alquilo que eventualmente pode ser substituído no anel fenílico por Ci-Cí-alquilo, Ci-C4--alcóxilo ou halogénio, ou um grupo naftilo-Ci-C4--alquilo, 2 A significa CH2, 0 ou S, R2 significa hidrogénio ou halogénio, R3 significa hidrogénio ou halogénio R11 significa hidrogénio ou um grupo formador de um grupo éster biolábil e R3 significa hidrogénio ou um grupo formador de um grupo éster biolábil e sais farmacologicamente compatíveis dos ácidos de fórmula I.
Desde que nos compostos de fórmula I os substituíntes signifiquem ou possuam grupos alquilo inferiores e alcóxilo inferiores, estes podem ser lineares ou ramificados, quando nada se indicar em contrário, e possuir 1 a 4, de preferência 1 a 2 átomos de carbono, e representarem de preferência metilo ou metóxilo. Desde que os substituíntes signifiquem halogénio ou substituíntes contendo halogénio, então sugere--se em especial flúor, cloro ou bromo, de preferência flúor ou cloro.
Nos compostos de fórmula I, A pode ser um grupo metileno, oxigénio ou enxofre, representando de preferência metileno.
Os compostos de fórmula I podem possuir no anel fenílico os substituíntes R2 e R3. De preferência ambos os substituíntes R2 e R3 ou pelo menos um deste substituíntes significa hidrogénio. R1 representa, de preferência, um grupo contendo um anel aromático eventualmente substituído, por exemplo, um grupo fenil-alquilo (alquilo inferior) ou um grupo fenilóxi-alquilo (alquilo inferior), nos quais a cadeia alquílica inferior possui 1 a 4, de preferência 1 a 2 átomos de carbono. Em especial o grupo R1 representa um grupo fenilo 3 eventualmente substituído, que pode estar eventualmente substituído uma ou mais vezes por halogénio, grupos alcóxilo inferiores ou grupos alquilo inferiores, ou por um grupo naftiletilo. Desde que R1 signifique um grupo alcóxi-alquilo (com o alcóxilo e o alquilo inferiores) substituído no alcóxilo inferior, então representa de preferência um grupo alcóximetilo (alcóxilo inferior), onde o grupo alcóxilo inferior possui 1 a 4, de preferência 1 a 2 átomos de carbono, sendo substituído por um alcóxilo, em especial metóxilo.
Os compostos de fórmula I representam eventualmente derivados ésteres de ácidos dicarboxílicos. Dependendo da forma de aplicação, adequam-se mono-ésteres biolábeis, em especial compostos onde R4 significa um grupo formador de grupos éster biolábeis e Rb significa hidrogénio, ou de preferência ácidos dicarboxílicos, sendo estes últimos especialmente adequados para administração intravenosa.
Como grupos formadores de éster biolábil R4 e R5, adequam-se grupos Ci-C4-alquilo, grupos fenilo ou grupos fenilalquilo em Ci-C3 eventualmente substituídos por grupos C:-C,!-alquilo ou substituídos no anel fenílico por Ci-C4-alquilo ou por uma cadeia alquílica C3-C4 em dois átomos de carbono vizinhos, grupos dioxolanilmetilo substituídos eventualmente por Ci-C4-alquilo, em especial (2,2-trimetil-1,3-dioxalano-4-ilo)-metilo ou grupos C2-C6-alcanoilóximetilo substituídos eventualmente no grupo oximetilo através de Ci--C4-alquilo. Desde que o grupo éster formado R4 ou R5 signifiquem alquilo, este significa um grupo alquilo, podendo significar de preferência um grupo alquilo não ramificado com 1 a 4, de preferência 2 átomos de carbono. Desde que os grupos formadores de grupos éster biolábeis significarem um grupo fenil-alquilo (alquilo inferior) substituído, as correspondentes cadeias alquílicas possuem 1 a 3, de 4
preferência 1 átomo de carbono. Desde que que o anel fenilico seja substituído por uma cadeia alquílica inferior, esta pode possuir entre 3 a 4, de preferência 3 átomos de carbono. Como substituíntes R4 e/ou R5 contendo grupos fenilo, adequam-se em especial fenilo, benzilo, ou indanilo. Desde que R4 e/ou Rb representem um grupo alcanoilóximetilo eventualmente substituído, os correspondentes grupos alcanoilóxilo possuem entre 2 a 6, de preferência de 3 a 5 átomos de carbono, e é de preferência ramificado, podendo significar o grupo pivaloílo-óximetilo ( = grupos tert-butilcarbonilóximetilo).
De acordo com a presente invenção, obtêm-se novos compostos de fórmula I e seus sais, nos quais de uma forma conhecida, se fazem reagir ácidos de fórmula geral II (ver fórmula II)
onde R1 possui os significados acima mencionados e R4a representa um grupo de protecção de ácidos, ou derivados de ácidos passíveis de reagir, com aminas de fórmula geral III (ver fórmula III)
onde Rz, R'5 e A possuem os significados acima mencionados e R5a significa um grupo de protecção de ácidos, transformando--os em amidas de fórmula geral IV (ver fórmula IV) onde R1, R2, R3, R4a, Rba e A possuem os significados acima mencionados, onde na fórmula IV os grupos de protecção R4a e R5a, desde que não signifiquem grupos éster biolábeis desejáveis, são hidrolisados simultaneamente ou numa sequência preferida, procedendo-se à esterificaçâo 5
U desejada dos grupos ácidos livres com um álcool de fórmula geral V ou um derivado reactivo correspondente de fórmula geral Va (ver fórmulas V e Va) onde R6 representa um grupo formador de um éster biolábil e X um grupo reactivo hidrolisável, e desejavelmente os ácidos de fórmula geral I são transformados em sais fisiologicamente compatíveis ou sais de · ácidos de fórmula I na sua forma livre.
Como sais fisiologicamente compatíveis de ácidos dicarboxílicos ou mono-ésteres de fórmula I, sugerem-se os seus metais alcalinos, alcalinoterrosos ou sais de amónio, por exemplo, sais de sódio ou cálcio ou sais com aminas orgânicas neutras farmacologicamente compatíveis como por exemplo dietilamina ou tert-butilamina.
Os compostos de fórmula I possuem dois carbonos quirais, designadamente um carbono que possui a cadeia amídica na posição 3 do anel, e o outro carbono quiral possui o grupo R1 acoplado, na cadeia amídica. Os compostos podem-se apresentar em várias formas opticamente activas - estereoisómeros, ou na forma de racematos. A presente invenção abrange quer as misturas racémicas quer os isómeros puros dos compostos de fórmula I. A transformação de ácidos de fórmula II com aminas de fórmula III em amidas de fórmula IV pode decorrer de forma conhecida através de métodos habituais de formação de grupos amida através da aminoacilação. Como agentes para a acilação podem ser utilizados os ácidos de fórmula II ou seus derivados passíveis de reagir. Como derivados passíveis de reagir, sugerem-se especialmente misturas de 6 anidridos de ácido e halogenetos de ácidos. Podem assim ser utilizados por exemplo, cloretos de ácido e brometos de ácido dos ácidos de fórmula II ou misturas de ésteres e ácidos de fórmula II com ácidos orgânicos, por exemplo ácidos alcanosulfónicos inferiores, como por exemplo, ácido metanosulfónico ou ácidos sulfónicos aromáticos como por exemplo ácido benzosulfónico ou ácidos benzosulfónicos substituídos por grupos alquilo inferiores ou halogénio, por exemplo, ácido toluenosulfónico ou ácido bromobenzosulfónico. A acilação pode decorrer em condições reaccionais que incluam agitação num solvente orgânico inerte, de preferência a uma temperatura entre -20°C e a temperatura ambiente. Como solventes, adequam-se em especial hidrocarbonetos halogenados como diclorometano ou hidrocarbonetos aromáticos como benzeno ou tolueno ou éteres cíclicos como tetra-hidrofurano ou dioxano ou misturas destes solventes. A acilação pode, convenientemente, em especial quando se utiliza como agente de acilação uma mistura de anidrido de ácido de fórmula II com um ácido sulfónico, ser realizada na presença de um reagente que se ligue a ácidos. Como agente ligador de ácidos adequam-se bases que sejam solúveis no meio reaccional, em especial bases orgânicas como tert-alquilamina (alquilo inferior) e piridina, como por exemplo trietilamina, tripropilamina, piridina, 4-dimetilaminopiridina, 4--dietilaminopiridina, ou 4-pirrolidinopiridina. Quando se utiliza um excesso de bases orgânicas, estas podem simultaneamente actuar como solventes.
De forma vantajosa, podem ser obtidos in situ misturas de anidridos ácidos de ácidos de fórmula II com ácidos sulfónicos orgânicos através da transformação de ácidos de fórmula II com halogenetos de ácidos, em especial de cloreto de ácido, do ácido sulfónico orgânico, que sem serem isolados podem ser utilizados logo de seguida com o composto de 7
r I r amina de fórmula III.
Caso sejam utilizados ácidos de fórmula II como agente de acilação, a transformação dos compostos amino de fórmula III com ácidos de fórmula II pode, convenientemente, ser efectuada também na presença de um reagente de acoplamento adequado para formação de amidas como na química dos peptideos, que conduz à formação de amidas com ácidos livres, dado que reage in si tu com os ácidos para formar um derivado ácido passível de reacção, sendo em especial conhecida como alquilcarbodi-imida, por exemplo, ciclo-alquilcarbodi-imida como diciclo-hexilcarbodi-imida ou l-etilo-3-[3- -(dimetilamino)-propilo]-carbodi-imida, carbonildi-imidazolo e sal de N-alquilo-2-halogenopiridino (alquilo inferior), em especial halogeneto ou tosilato, de preferência iodeto de N--metilo-2-cloropiridinio (ver por exemplo Mukaijama em "Angewandte Chemie" 91, páginas 789-812). A transformação na presença de um reagente de acoplamento pode, convenientemente, decorrer a uma temperatura entre -30 a +50°C, utilizando como solventes hidrocarbonetos halogenados e/ou hidrocarbonetos aromáticos, eventualmente na presença de uma amina que se ligue a ácidos. A partir dos compostos obtidos por transformação dos compostos de fórmula II com compostos de fórmula III, obtêm--se compostos de fórmula IV que podem possuir grupos de protecção R4s e R3a, e desde que estes não sejam desejáveis nos compostos de fórmula I, podem constituir grupos formadores de grupos éster biolábeis, que poderão ser hidrolisados de forma conhecida.
Como grupos de protecção R42 e R5a podem ser escolhidos grupos de protecção habituais de grupos ácido, que de seguida por métodos conhecidos possam ser hidrolisados. Grupos de protecção de grupos ácido adequados são connhecidos, por 8 exemplo, por McOmie "Protective Groups in Organic Chemistry" Plenum Press e Greene "Protective Groups in Organic Synthesis" Wiley Interscience Publication.
Desde que devam ser preparados compostos de fórmula I em que R'1 e Rb sejam idênticos, devem ser escolhidos convenientemente, grupos de protecção R4a e R5a idênticos nos compostos de partida II e III.
Desde que devam ser preparados compostos de fórmula I onde R4 e R5 possuam significados diferentes, devem ser escolhidos convenientemente, para os compostos de partida II e III diferentes grupos protectores, que poderão ser hidrolisados selectivamente, e de uma forma conhecida, em condições diferentes. Como exemplo de três grupos de protecção que podem ser hidrolisados em diferentes condições, apresentam-se: 1. Ésteres metilico ou etílico, que em condições básicas são facilmente hidrolisáveis, apesar de em condições ácidas ou após hidrogenólise serem significativamente mais estáveis, 2. Ésteres tert-butílicos, que em condições ácidas são facilmente hidrolisáveis, apesar de em condições básicas ou após hidrogenólise serem significativamente mais estáveis e 3. Ésteres benzílicos, que são facilmente hidrolisáveis por hidrogenação mas que também podem ser hidrolisados em condições básicas, apesar de em condições ácidas serem significativamente mais estáveis.
Caso devam ser preparados, por exemplo, compostos dicarboxilicos de fórmula I, onde R4 e R5 sejam ambos hidrogénio, então devem-se utilizar grupos protectores 9 K<ia e Rsa gUe devem ser de preferência grupos de protecção hidrolisáveis em meio ácido, por exemplo grupo tert-butilo, obtendo-se por transformação do compostos de fórmula II com o composto de fórmula III o éster tert-butílico do composto de fórmula IV, que é submetido a tratamento ácido para sofrer hidrólise. A hidrólise pode, por exemplo, ser efectuada por tratamento com ácido trifluoro-acético como tal, ou numa solução de ácido trifluoro-acético num solvente de hidrocarboneto halogenado, por exemplo, diclorometano, ou através de tratamento com HCl-gás em condições reaccionais envolvendo um solvente orgânico inerte, por exemplo acetato de etilo. A reacção pode ser executada a temperaturas entre -25°C e a temperatura ambiente.
Caso devam ser preparados, por exemplo, compostos monocarboxilicos de fórmula I, onde R4 é um grupo formador de grupos éster biolábeis e Rs significa hidrogénio, podem ser utilizados como compostos de partida de fórmula II, compostos onde R4s seja já o grupo formador de éster biolábil desejado, por exemplo, o grupo etilo e como grupo protector R5a no composto de fórmula III, grupos protectores que possam ser hidrolisados nas condições reaccionais, onde o grupo R4-OCO-não seja hidrolisado. Caso o grupo R4-OCO- seja o grupo etilo, que é relativamente estável em meio ácido, adequam-se gupos protectores Rba, por exemplo, como o grupo tert-butilo hidrolisável em meio ácido ou um grupo hidrolisável hidrogenoliticamente como o grupo benzilo.
Caso o grupo R4a no composto de fórmula II representar um grupo formador de éster biolábil sensível a meio ácido, o grupo protector R5a no composto de fórmula III, deve de forma conveniente ser escolhido de forma a constituir um grupo hidrolisável hidrogenoliticamente como o grupo benzilo, e este então hidrolisado hidrogenoliticamente no composto de fórmula IV resultante da transformação do composto de 10 ] .
fórmula II com o composto de fórmula III. A hidrogenólise pode decorrer por hidrogenação catalítica na presença de um catalisador, de preferência um catalisador de Pd/C sob condições reaccionais que incluam solvente orgânico inerte, por exemplo, álcoois inferiores como etanol ou um éster alquílico inferior como acetato de etilo. De forma conveniente, a hidrogenação catalítica decorre a uma pressão de hidrogénio de 4 a 5 bar e à temperatura ambiente.
Para a preparação de compostos de fórmula I, onde R4 constitui um grupo formador de grupo éster biolábil e R3 significa hidrogénio, podem também ser utilizados compostos de partida de fórmulas II e III com diferentes grupos protectores R4a e Roa com diferentes reactividades, em que os compostos de fórmula IV resultantes da transformação dos compostos de fórmula II com os compostos de fórmula III, são submetidos a hidrólise do grupo de protecção R4a mantendo contudo o grupo de protecção R5a, obtendo-se o produto reaccional de fórmula IV' (ver composto de fórmula IV') onde R1, R2, R3, Roa e A possuem os significados acima mencionados, sendo o grupo formador do grupo éster biolábil R4 introduzido por reacção do grupo ácido livre dos compostos de fórmula IV'com um composto de fórmula V ou Va e de seguida hidrólise do grupo de protecção R5a dos compostos resultantes de fórmula IV.
Assim é possível, por exemplo, a partir de compostos de fórmula IV, onde R4a é um grupo de protecção hidrolisável em meio ácido, em especial o grupo tert-butilo, e R3a um grupo de protecção estável em meio ácido, por exemplo benzilo, obter uma hidrólise apenas do grupo de protecção R4a. 0 ácido monocarboxílico resultante de fórmula IV', pode através de 11
métodos habituais, ser esterificado através de um álcool de fórmula V ou de um composto correspondente de fórmula Va. Como grupos reactivos X hidrolisáveis nos compostos de fórmula Va, adequam-se halogénio, em especial, cloro ou bromo, ou um grupo orgânico sulfónico, por exemplo o grupo ácido alcanosulfónico (alcano inferior), como por exemplo, ácido metanosulfónico, ou de ácidos sulfónicos aromáticos como ácido benzosulfónico ou através de ácidos benzosulfónicos substituídos por grupos alquilo inferiores ou halogénio, como ácido toluenosulfónico. Para a esterificação podem ser utilizados, de uma forma conhecida, álcoois de fórmula V, por exemplo, com um ácido de fórmula IV' ou um derivado reactivo deste ácido, daqueles adequados para acilação de álcoois. A transformação pode, por exemplo, decorrer sob as condições reaccionais já conhecidas para a transformação de compostos de fórmula II com compostos de fórmula III.
De forma análoga, podem ser preparados compostos de fórmula I, escolhendo os correspondentes diferentes grupos de protecção, de forma que R° signifique um grupo formador de ésteres biolábeis e R4 signifique hidrogénio ou um grupo formador de ésteres biolábeis daqueles utilizados para R5.
Nas transformações acima mencionadas, os centros quirais nos compostos de partida de fórmula II e II não são alterados, de forma que podem ser obtidos, de acordo com os compostos de partida, compostos isomericamente puros de fórmula I ou misturas de isómeros. Para a preparação de compostos enantiomericamente puros e assim compostos opticamente activos de fórmula I, transformam-se convenientemente compostos enantiomericamente puros de fórmula II com compostos enantiomericamente puros de fórmula III. Caso se efectue a transformação com um composto enantiomericamente puro de fórmula II e um composto 12 tf racémico de fórmula III ou um composto racémico de fórmula II com um composto enantiomericamente puro de fórmula III, então obtém--se em qualquer dos casos uma mistura de dois diasterómeros, que, se assim se desejar, se podem separar de forma conhecida. A transformação de compostos racémicos de fórmula II com compostos racémicos de fórmula III origina uma mistura correspondente de 4 isómeros, que se assim se desejar, poderão ser separados através de formas conhecidas.
Os compostos de partida de fórmula II podem ser obtidos de acordo com métodos conhecidos.
Por exemplo, os compostos de fórmula geral lia (ver fórmula Ila)
onde R4a possui os significados acima mencionados e R*a tem o mesmo significado que R], com a excepção de ser um grupo alcóxilo-alcóximetilo (ambos os alcóxilos inferiores), são obtidos, fazendo reagir um derivado de ácido acrílico de fórmula geral VI (ver fórmula VI)
onde R4a e Rla possuem os significados acima referidos, com ácido ciclopentanóico de fórmula VII (ver fórmula VII) A reacção pode decorrer de uma forma conhecida sob as condições da reacção de adição de Michael, num solvente orgânico inerte, por reacção do ácido ciclopentanóico com uma base forte, para formação do dianião do ácido ciclopentanóico, e de seguida transformação com um derivado éster do ácido acrílico de fórmula VI. Como solvente, adequam-se éter, em especial, éteres cíclicos como por 13
exemplo tetra-hidrofurano. Como bases fortes, adequam-se amidas de metais alcalinos não nucleófilas, como por exemplo, di-isopropilamida de litio. Convenientemente, faz-se reagir o ácido ciclopentanóico em tetra-hidrofurano com dois equivalentes de di-isopropilamida de litio, sendo a mistura reaccional de seguida transformada com o composto de fórmula VI. A temperatura da reacção pode ser entre -70 e 0°C.
Compostos de fórmula geral Ilb (ver fórmula Ilb)
onde R4a possui os significados acima mencionados e Rib significa um grupo alcóxilo-alcóximetilo (ambos os alcóxilos inferiores) , podem ser obtidos, transformando um éster de ácido halocarboxilico de fórmula geral VIII (ver fórmula VIII)
onde R4a possui o significado acima mencionado e Y significa um halogénio, com ácido ciclopentanóico de fórmula VII, sendo o produto da reacção resultante de fórmula geral IX (ver fórmula IX) onde R4a possui o significado acima mencionado, transformado com compostos de fórmula geral Xb (ver fórmula Xb) onde Rlb e X possuem os significados acima referidos. A transformação do éster do ácido halocarboxilico de fórmula VIII com ciclopentanóico de fórmula VII pode ser executada de forma conhecida e sob condições reaccionais que incluam solvente inerte na presença de uma base forte para assim se 14
poder formar o dianião. A reacção pode por exemplo ser executada sob as condições referidas para a transformação de ciclopentanóico com compostos de fórmula VI. A transformação seguinte dos ácidos de fórmula IX com os compostos de fórmula Xb pode ser executada, de uma forma conhecida, sob as condições adequadas já referidas para a alquilação na posição α de ésteres de ácido carboxilicos num solvente orgânico inerte na presença de uma base forte. De preferência utilizam-se compostos de fórmula Xb, nos quais X significa cloro ou bromo. Como solvente, adequam-se éteres, em especial éteres cíclicos como tetra-hidrofurano ou dioxano. Como base forte podem ser utilizados hidretos de metais alcalinos ou amidas de metais alcalinos, por exemplo di-isopropilamida de litio.
Os compostos de fórmula II possuem no grupo R1 um átomo de carbono com um centro quiral, sendo obtidos na síntese na forma de racematos. Os compostos opticamente activos podem ser obtidos da mistura racémica através de métodos conhecidos, por exemplo, por separação em materiais de separação quirais ou através da transformação com bases adequadas opticamente activas, por exemplo, <x--metilbenzilamina ou pseudoefedrina, seguidos de separação nos seus antípodas ópticos por cristalização do sal obtido.
Derivados éster de ácido acrílico de fórmula VI podem ser obtidos, utilizando derivados éster de ácido dialquilfosfono—acético (alquilo inferior) de fórmula geral XI (ver fórmula XI) onde R‘la e Rld possuem os significados acima mencionados, e R' e R6 ambos significam alquilo inferior, de preferência metilo 15 7=-
ou etilo, que são transformados com formaldeído sob condições reaccionais que incluem solvente orgânico inerte, e em
condições básicas. Por exemplo, os compostos de fórmula XI podem ser transformados com paraformaldeido em éter, de preferência um éter cíclico como tetra-hidrofurano, na presença de uma base, de preferência um alcoolato de metal alcalino não nucleófilo como tert-butilato de potássio, a uma temperatura entre -20 a +30°C.
Compostos de fórmula XI podem ser obtidos de uma forma conhecida, utilizando derivados de ácido fosfono-acético de fórmula geral XII (ver fórmula XII) onde R4a, R' e Rrf possuem os significados acima referidos, que são transformados com compostos de fórmula Xa (ver fórmula Xa) onde Ra e X possuem os significados acima mencionados. A transformação pode ser executado sob as condições reaccionais habituais de alquilação com um solvente orgânico polar aprótico, na presença de uma base a uma temperatura entre 0 e 80°C. De preferência, são utilizados compostos de fórmula Xa, em que X significa halogénio, em especial bromo ou iodo ou tosilato. Como solvente, adequam-se por exemplo, amidas, como dimetilformamida ou também éter. Como bases, adequam-se alcoolatos de metais alcalino não nucleófilos como por exemplo tert-butilato de potássio.
Compostos de fórmula VI podem ser obtidos, utilizando derivados de ácido malónico de fórmula geral XIII, (ver fórmula XIII), 16
Γ i onde R4a e Rla possuem os significados acima mencionados, que são tratados de uma forma conhecida com formaldeído sob condições básicas. Assim, os derivados de ácido malónico de fórmula XIII podem, por exemplo, ser transformados numa solução aquosa de formaldeído na presença de uma amina orgânica secundária, em especial, piperidina, a uma temperatura entre 0 e 30°C, de preferência a uma temperatura superior à temperatura ambiente. Os derivados de ácido malónico de fórmula XIII podem ser transformados com paraformaldeído em piridina a uma temperatura entre 40 e 60°C.
Os mono-ésteres de ácido malónico de fórmula XIII podem ser obtidos, utilizando di-ésteres de ácido malónico de fórmula geral XIV (ver fórmula XIV)
onde R4a possui os significados acima mencionados e R9 significa um alquilo inferior, em especial, metilo ou benzilo, que são transformados com compostos de fórmula Xa, sendo o derivado di-éster do ácido malónico de fórmula geral XV (ver fórmula XV) onde Rla, R'1a e Rs possuem os significados acima referidos, hidrolisado parcialmente obtendo-se o derivado mono-éster do ácido malónico de fórmula XIII. A introdução de grupos R1a no di-éster do ácido malónico de fórmula XIV pode ser executada de uma forma conhecida por transformação de um éster de fórmula XIV com um composto de fórmula Xa num solvente orgânico aprótico polar, de 17
( i \ preferência dimetilformamida, na presença de uma base, por exemplo, um alcoolato de metal alcalino não nucleófilo, como por exemplo, tert-butiliato de potássio a uma temperatura de 0 a 80°C. A transformação pode, por exemplo, ser executada sob as condições referidas acima para a transformação dos compostos de fórmula XI com os compostos de fórmula Xa.
Os di-ésteres do ácido malónico substituídos obtidos de fórmula XV podem ser transformados nos correspondentes mono-ésteres do ácido malónico, através de hidrólise de uma forma conhecida, do grupo R9 de fórmula XIII. Desde que o grupo de protecção R4" e o grupo R9 sejam grupos diferentes, e apresentem diferentes reactividades, então a hidrólise do grupo R9 é convenientemente escolhida, de forma que o grupo R":a não seja afectado por essa hidrólise. Desde que o grupo R9 signifique benzilo, a hidrólise pode decorrer hidrogenoliticamente de uma forma conhecida. Os grupos éster alquílicos inferiores sofrem hidrogenólise sob condições ácidas ou básicas de uma forma conhecida, dependendo do tipo de grupo alquilo. De preferência, R9 significa um grupo etilo, que é hidrolisável em condições básicas. Aqui, o éster alquílico de fórmula XV pode ser tratado com um álcool inferior ou uma mistura de álcoois inferiores com água em hidróxido de metal alcalino, por exemplo hidróxido de potássio. Se os grupos R4a e R9 forem idênticos, a quantidade de hidróxido alcalino deve ser mantida tão reduzida, de forma que só se efectue uma hidrólise parcial.
Compostos de fórmula III podem ser obtidos de uma forma conhecida, utilizando compostos de fórmula XVI (ver fórmula XVI) onde R2, R3 e A possuem os significados acima mencionados e o grupo R:“R11N- significa um grupo amina que está 18 1
protegido com um grupo de protecção de grupos amina, que são transformados com compostos de fórmula XVII (ver fórmula XVII)
onde R5s e X possuem os significados acima mencionados, obtendo-se como produto da reacção compostos de fórmula geral XVIII (ver fórmula XVIII) onde R2, RJ, R5a, A e o grupo R10R11N- possuem os significados acima mencionados, de onde se obtém posteriormente o grupo amina livre. A transformação de compostos de fórmula XVI com compostos de fórmula XVII pode ser efectuada pelos métodos habituais utilizados para alquilação de amidas. De preferência são utilizados compostos de fórmula XVII, nos quais X significa halogénio, de preferência bromo ou iodo. A transformação pode ser efectuada num solvente orgânico polar aprótico, por exemplo, dimetilformamida ou num éter cíclico, como tetra-hidrofurano, na presença de uma base. Como bases adequadas, sugerem-se bases não nucleófilas, como por exemplo, tert-butilato de potássio. Se se desejar, a transformação pode também decorrer na presença de um hidróxido de metal alcalino, por exemplo, hidróxido de potássio, num sistema de duas fases, na presença de um catalisador de transferência de fase, por exemplo, halogeneto de tetra-alquilamónio (alquilo inferior), como brometo de tetrabutilamónio.
De seguida, o grupo amina dos compostos obtidos de formula XVIII pode ser hidrolisado de uma forma conhecida, e libertado do seu grupo protector. Para protecção do grupo amina podem ser utilizados grupos de protecção de grupo amina que sejam facilmente hidrolisáveis, por exemplo 19
grupos de protecção conhecidos da química de peptídeos. Grupos de protecção adequados são por exemplo, aqueles conhecidos através de E. McOmie "Protective Groups in Organic Chemistry" Plenum Press, 1971. Adequam-se, por exemplo, como grupos protectores, os grupos ftalimida ou os grupos tert--butóxicarbonilo ou também os grupos benzilóxicarbonilo. Devem também ser escolhidos grupos de protecção, dependendo do significado dos grupos R"s, que de seguida possam ser hidrolisados sob condições reaccionais, sob as quais os grupos R5'1 não sejam afectados. Como grupos de protecção hidrolisáveis em meio básico, adequam-se por exemplo grupos ftalimida, os quais, através de tratamento com etanolamina ou com hidrazina a temperatura elevada, por exemplo temperaturas entre 70 e 90°C, possam ser hidrolisados. Os grupos ftalimida adequam-se por exemplo como grupos de protecção para compostos em que A signifique enxofre. Como grupos de protecção hidrolisáveis em meio ácido, adequam-se por exemplo, grupos tert-butóxicarbonilo cujo tratamento em meio ácido, por exemplo através de tratamento com ácido trifluoro-acético ou com gás de ácido clorídrico em acetato de etilo, permite a sua hidrólise. O grupo tert-butóxicarbonilo, adequa-se, por exemplo, como grupo protector para compostos em que A signifique oxigénio. Como grupos de protecção hidrogenoliticamente hidrolisáveis, adequam-se por exemplo grupos benzilóxicarbonilo, que são hidrolisados através da hidrogenação com hidrogénio na presença de um catalisador de paládio/carbono.
Os compostos de fórmula III possuem no carbono que está ligado ao grupo amina, um centro quiral. Desde que sejam utilizados compostos de partida opticamente puros de fórmula XVI, então serão obtidos compostos de fórmula III opticamente puros. Isto é especialmente verdade para aqueles compostos em que A signifique oxigénio ou enxofre. Se se partir de compostos de partida de fórmula XVI racémicos, então 20 ? Γ i vl serão obtidos compostos de fórmula III racémicos. Este facto é o caso, para compostos em geral, em que A signifique um grupo metileno. Misturas racémicas de compostos de fórmula III podem ser separados nos seus isómeros opticamente puros através de métodos conhecidos, por exemplo, por separação cromatográfica em materiais de separação quirais ou por transformação com ácidos adequados opticamente activos, por exemplo, ácido tartárico, e de seguida separação dos antípodas ópticos por cristalização fraccionada dos sais obtidos. Para se aumentar o rendimento do isómero óptico desejado, pode-se efectuar uma reacção com ácidos opticamente activos, e simultaneamente ou logo depois da precipitação do sal de um dos isómeros com o ácido opticamente activo na mistura reaccional, efectua-se uma re-racemização do isómero que ainda se mantém em solução, por adição de preferência, de um aldeído aromático, como por exemplo benzaldeido. Aqui a racemização do centro quiral decorre através da formação de uma imina por acção do aldeído.
Os compostos de fórmula XVI podem ser obtidos de uma forma conhecida. Por exemplo, os compostos de fórmula geral XVI a (ver fórmula XVIa)
onde R2, R3 e o grupo R10R:1N- possuem os significados acima mencionados, podem ser obtidos, utilizando compostos de fórmula geral XIX (ver fórmula XIX) onde R% RJ e Y possuem os significados acima mencionados, e o halogénio Y é substituído pelo grupo R10RLlN- através de formas conhecidas. Por exemplo, um composto de fórmula XIX pode ser transformado com um sal metalo-alcalino numa 21 ν L-C, amida R,0R1:1NH, de preferência ftalimida de potássio. A transformação pode decorrer sob condições reaccionais que incluam um solvente orgânico inerte polar aprótico, de preferência dimetilformamida, a uma temperatura entre 40 e 80°C.
Compostos de fórmula XIX podem ser obtidos de uma forma conhecida através da transformação de Beckmann de compostos oxima de fórmula geral XX (ver fórmula XX) onde R2, R2 e Y possuem os significados acima mencionados, em que se tratam os compostos de fórmula XX com ácidos, sob as condições da transformação de Beckmann. Convenientemente, os compostos de fórmula XX são transformados, por tratamento com ácido poli fosfórico a temperaturas entre 60 e 90°C, nos compostos de fórmula XIX.
Oximas de fórmula XX podem ser obtidas de cetonas cíclicas de fórmula geral XXI (ver fórmula XXI) onde R2 e RJ possuem os significados acima descritos, em que a cetona de fórmula XXI para a introdução do grupo Y é tratada com halogénio, sendo a cetona halogenada obtida transformada com hidroxilamina. Convenientemente pode-se conduzir a halogenação α da cetona seguida da formação da oxima, num processo apenas num único recipiente, onde a cetona de fórmula XXI é colocada num solvente orgânico inerte, por exemplo um álcool inferior, como metanol, tratada com halogénio, sendo de seguida adicionada de hidroxilamina.
Convenientemente, a hidroxilamina é utilizada na forma de sal de hidroxilamina, por exemplo, cloreto de hidroxilamina 22
L·, K sendo de seguida adicionada água. O processo pode decorrer a uma temperatura entre 0 e 40°C, de preferência à temperatura ambiente.
Compostos de fórmula geral XVIb (ver fórmula XVIb)
onde R2, e o grupo R^R^N- possuem os significados acima mencionados e Aa significa oxigénio ou enxofre, podem ser obtidos, de forma conhecida, através de ciclização de compostos amino-ácidos aromáticos de fórmula geral XXII (ver fórmula XXII) onde R2, RJ, Aa. e o grupo R10RUN- possuem os significados acima referidos. A ciclização dos compostos de fórmula XXII decorre através da eliminação de água e pode ser executada de acordo com os métodos conhecidos para formação de lactamas. Assim, a ciclização decorre, por exemplo, na presença de um composto de acoplamento que active o grupo ácido, conhecido da química de peptídeos para formação de amidas, por exemplo uma carbodi-imida, sob condições reaccionais que envolvam um solvente orgânico polar inerte, por exemplo, dimetilformamida. A transformação pode ser executada por exemplo, sob as condições acima referidas para a transformação de compostos de fórmula II com compostos de fórmula III. Como agente para activação de grupos ácido, pode ser utilizado cianeto de di-etilofosfónico, sendo a transformação executada na presença de uma base orgânica, por exemplo uma tri-alquilamina (alquilo inferior) como tri-etilamina.
Os compostos de fórmula geral XXII podem ser obtidos de forma conhecida por reacção dos correspondentes compostos 23
nitro de fórmula geral XXIII (ver fórmula XXIII) onde R2, R3 Aa e o grupo R10Ri:iN- possuem os significados acima mencionados. A redução dos grupos nitro pode ser executada da forma conhecida para a transformação de compostos nitrobenzeno em comopostos de anilina, por exemplo por hidrogenação catalítica na presença de um catalisador de paládio/carvâo. A redução pode também ser executada utilizando outros agentes de redução, que permitem a obtenção de hidrogénio in sítu, por exemplo ferro/ácido clorídrico ou zinco/ácido clorídrico.
Os compostos de fórmula XXIII podem ser obtidos de uma forma conhecida, por transformação de compostos o-
-fluoronitrobenzeno de fórmula geral XXIV (ver fórmula XXIV)
onde R2 e RJ possuem os significados acima mencionados, com ácidos de fórmula geral XXV (ver fórmula XXV) onde Aa e o grupo R10Ri:lN- possuem os significados acima mencionados. Os compostos de fórmula XXV representam serina, em particular, derivados de cisteína, cujos grupos amino estão protegidos. A transformação decorre sob condições reaccionais que envolvam solvente orgânico inerte na presença de uma base. A transformação de fluoronitrobenzenos com nucleófilos fortes de derivados de cisteína pode ser executada num álcool inferior ou numa mistura álcool/água na presença de uma base fraca como hidrogenocarbonato de sódio.
Para a transformação com derivados de serina que são 24
r \ \i nucleófilos fracos comparáveis, executa-se a reacção convenientemente com uma base forte, por exemplo hidreto de metal alcalino num solvente orgânico polar como dimetilformamida.
De forma desejada, pode-se, após a formação de compostos de fórmula XXIII, que originalmente nos compostos de fórmula XXV possuem grupos de protecção amina, permutar por outros grupos protectores amina, que se diferenciam melhor no que se refere à reactividade dos grupos R5a, e assim se revelam mais adequados para o tratamento de compostos de fórmula XXIII. A presente invenção refere-se também a medicamentos contendo uma quantidade farmacologicamente activa de um composto de acordo com a presente invenção.
Os compostos de fórmula I e os seus sais farmacologicamente compatíveis revelam possuir características farmacológicas interessantes. Em especial, as substâncias possuem um efeito inibidor sobre a endopeptidase neutral (=NEP) . A NEP é uma enzima, que é responsável pela hidrólise de peptideos sodiuréticos endógenos, por exemplo, dos peptideos sodiuréticos atriais (=ANP). Através do seu efeito inibidor sobre a actividade da NEP, as substâncias permitem melhorar a actividade biológica e a duração dos peptideos sodiuréticos que são afectados pela NEP, em especial pela ANP, sendo também adequadas para o tratamento de estados de doença que são favoravelmente influenciados por este tipo de hormonas, em especial insuficiência cardíaca. A insuficiência cardíaca, através de uma redução da capacidade do coração em bombear, conduz a um aumento da resistência periférica e assim a um retorno do fluxo de sangue para o sistema pulmonar e para o próprio coração. 25
Como consequência verifica-se uma pressão mais elevada dentro do coração que provoca uma dilatação das paredes da câmara nos auriculos e da câmara do coração. Nestas condições o coração funciona como um orgão endócrino, isto é, ele actua de forma a libertar na circulação sanguínea, o ANP que possui uma actívidade vasodilatadora e diurética/sodiurética. 0 ANP possui uma actívidade que reduz a pressão sanguínea. Isto acontece através da diurese/sódiurese (redução do volume de sangue a circular) e através da redução da resistência periférica (pressão anterior e posterior). A actívidade da ANP sobre a capacidade cardíaca deve ser considerada como um mecanismo endógeneo cardioprotectivo. A actívidade da ANP é no entanto verificado num curto período de tempo, uma vez que a hormona da NEP é rapidamente hidrolisada.
Devido às suas características inibidoras de NEP, os compostos de acordo com a presente invenção melhoram os mecanismos cardiprotectores do ANP e revelam em especial uma elevada actívidade relativamente e um aumento das actividades diuréticas/sódiuréticas.
Os compostos de acordo com a presente invenção revelam possuir um bom perfil de actívidade associada a uma boa compatibilidade e possuem uma selectividade relativamente à inibição de NEP possuindo adicionalmente um reduzido efeito inibidor relativamente à enzima convertora de endotelina (=ECE). Em estados avançados de insuficiência cardíaca, verifica-se um aumento consequente de angiostensina II, endotelina e catecolaminas, e assim um aumento da resistência periférica e da pressão arterial, que provoca a hipertrofia e dilatação do músculo do coração. As características adicionais de inibição de ECE podem assim aumentar a reduzida actívidade dos compostos de acordo com a presente invenção relativamente à resistência periférica. 26
V 0 aumento das caracteristicas inibitórias de NEP e ECE e diurese/sodiurese das substâncias, vão ser determinadas através de métodos farmacológicos padrão in vitro e in vivo.
Descrição dos métodos de estudo farmacológicos 1. Determinação da dose tóxica minima A ratos do sexo masculino com um peso de corpo de 20-25 g foi administrada uma dose máxima de 300 mg/kg por via oral, da substância teste. Os animais foram observados cuidadosamente durante 3 horas relativamente a simptomas de toxicidade. Durante um período de 72 horas após a administração foram registados adicionalmente todos os simptomas e casos de morte. Simptomas laterais foram também observados e registados. Quando foram observados morte e fortes simptomas tóxicos, foram administrados outros ratos com doses mais reduzidas, até que não fossem verificados mais simptomas tóxicos. A dose mais reduzida, que provoca morte ou fortes simptomas tóxicos, é ilustrada na tabela A seguinte como a dose tóxica minima. Os números dos exemplos constantes da tabela A referem-se aos exemplos de preparação que se encontram descritos mais a frente.
Tabela A
Substância teste Dose Tóxica Minima mg/kg de rato, via oral 6 >300 24 >300 27 >300 37 >300 27 2. Determinação in vitro de actividade inibidora de NEP das substâncias e determinação da afinidade das moléculas das substâncias para a molécula da enzima
Para determinar a actividade inibidora das substâncias de acordo com a presente invenção sobre a endopeptidase neutral (=NEP), determinou-se com um teste padrão in vitro a actividade inibidora das substâncias relativamente a hidrólise da metionina-encefalina (= Met-encefalina) que tem lugar através da actividade enzimática da NEP. Aqui, como medida para a actividade inibitória das substâncias, foram utilizados os valores de Ki (= constante de inibição). Os valores de Ki de uma susbtância teste com actividade inibidora são os valores da constante de dissociação do complexo enzima-substância teste, em particular, complexo (enzima-substracto)-substância teste, e possui unidades de concentração.
Execução do teste
Para a execução do teste foram preparadas amostras de 100pL de diferentes soluções de incubação contendo 10 ng de NEP purificado (E .C. 3.4.24.11) e em cada uma adicionada uma quantidade diferente de substância teste e de substracto (Met-encefalina) e 50 mM de tampão Tris ( = tris(hidróximetilo)aminometano/HCl, pH 7,4).
Por cada substância teste foram preparadas 24 diferentes soluções de incubação com três diferentes concentrações de substância teste, em cada um dos casos combinado com uma quantidade de Met-encefalina de 2, 5, 7, 10, 12, 15, 40 e 100 μΜ.
Em cada teste foram efectuados dois controlos às soluções de incubação e tratados em conjunto o 28 f u controlo de enzima, que não contém teste substância, e o controlo de substância, que não contém quer enzima quer substância teste.
As soluções de incubação foram incubadas durante 45 minutos a 37°C numa banho de água sob agitação. A reacção enzimática foi iniciada após 15 minutos através da adição de substracto (Met-encefalina) , sendo terminada após o tempo de incubação através de aquecimento durante 5 minutos a 95°C. De seguida a solução incubada foi centrifugada durante 3 minutos a 12000 x g e as concentrações do substracto que não reagiu e do produto de hidrólise formado através da reacção enzimática foram determinadas a partir do sobrenadante. Aqui as amostras são subsmetidas a HPLC (= cromatografia liquida de alta eficiência) em sílica-gel hidrofóbica, sendo os produtos da reacção enzimática e do substracto que não reagiu determinados através de detecção fotométrica a um comprimento de onda de 205 nm. Para a separação por HPLC foi utilizada uma coluna (4,6 x 250 mm), que possui material de empacotamento de fase-reversa Encapharm® 100 RP18, com um tamanho de partícula de 5 μπι. 0 fluxo de solvente foi de 1,4 mL/min, estando a coluna submetida a uma temperatura de 40°C. 0 solvente A é constituído por 5 mM de H3PO4, pH 2,5 e o solvente B é constituído por acetonitrilo + 1% de 5 mM de H3P04, pH 2,5. A partir das concentrações medidas para as diferentes amostras, relativamente aos produtos de hidrólise, e relativamente ao substracto que não reagiu, foi calculado um valor de Ki para cada substância teste. A tabela B seguinte ilustra os valores de Ki determinados para as substâncias teste. Os números dos exemplos referem-se aos exemplos de preparação descritos mais a frente no texto. 29
Tabela B
Substância teste Valor de Ki Exemplo Nr. Em nM/L 6 0, 67 8 0,40 11 2,55 13 0,76 22 2,15 24 1,00 26 1,22 29 1,08 3. Estudo in vitro da actividade inibidora das substâncias
sobre ECE
Para determinar a actividade inibidora das substâncias de acordo com a presente invenção sobre a enzima convertora endotelina (=ECE), estudou-se in vitro, através de testes padrão, a actividade inibidora das substâncias onde se verifica a hidrólise de big-endotelina-1 (bigET-1). Aqui como medida de actividade inibidora das substâncias foi determinado o valor IC50. 0 valor IC5o de uma substância com actividade inibidora sobre uma enzima é o valor correspondente a 50% da concentração da substância teste para a qual se obtém um valor de inibição de 50% da ECE.
Preparação da fracção de membrana de célula de endotélio contendo ECE Células de óvulos de hamsters chineses (= Chinese hamster ovarian cell, com a abreviatura - células CHO), nas quais foi exprimido ECE recombinante humano (ver Schmidt et al.,
u, "Federation of European Biochemical Societies Letters" 356 (1994), 238 a 243), foram lisadas e as membranas celulares separadas por centrifugação a 10000 x g durante 10 minutos. Depois de se resuspender três vezes e de se efectuarem repetidas centrifugações, as membranas celulares foram lavadas. A fracção de membranas celulares contendo ECE foi resuspendida em 100 mM de tampão Tris/HCl (=Tris(hidróximetil)aminometano, pH 7,0 contendo 250 mM de NaCl), e congeladas a -70°C até serem utilizadas para teste enzimático.
Condução do teste
Para a execução do teste foram preparados 100 pL de amostra de diferentes soluções de incubação contendo 5 pg de proteína de uma preparação de membranas celulares contendo ECE e cada uma contendo quantidades diferentes de substância teste e 24 pM de substracto (peptídeo sintético: H2N-Asp-Ile-Ala-Trp--Phe-Asn-Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-COOH) e 100 mM de tampão Tris (=Tris(hidróximetil)aminometano/HCl, pH 7,0 contendo 250 mM de cloreto de sódio). Para além disso cada solução de incubação contém 100 pM de Tiorfano, 10 pM de captopril e 1 mM de fluoreto de fenilsulfonilo, 100 pM de pepstatina A (= inibidor de protease) e 100 pM de Amastatina (= inibidor de protease).
Por cada substância teste são preparadas 6 soluções de incubação diferentes com 3 diferentes concentrações de substância teste cada uma para determinação em duplicado.
Para cada teste é também executado um teste sem enzima para fins de controlo.
As soluções de incubação são pré incubadas durante 15 minutos a 37°C, antes de lhes ser adicionado o substracto. A 31
reacção enzimática é inicidada através da adição de substracto; a reacção decorre durante 60 minutos, a 37°C e é terminada por aquecimento da solução de incubação durante 5 minutos a 95°C. Os produtos de hidrólise, obtidos por reacção enzimática a partir do substracto, H2N-Asp-Ile-Ala-Trp-COOH e H2N-Phe-Asn—Thr-Pro-Glu-His-Val-Val-Pro-Tyr-Gly-Leu-Gly-COOH foram determinados com auxilio de cromatografia liquida de alta eficiência (HPLC). A execução das determinações por HPLC decorreram de acordo com o descrito para os testes in vitro de inibição de actividade de NEP.
Das concentrações obtidas em produtos de hidrólise das diferentes amostras, foi determinado para cada substância, de uma forma conhecida, o IC50. A Tabela C seguinte ilustra os valores determinados de IC50 para as substâncias teste.
Tabela C
Substância teste IC50 em μΜ/L 39 0, 52 8 1,29 38 2,20 4. Determinação in vivo da influência das substâncias na diurese/sodiurese em ratos com agravamento de volume A actividade in vivo foi determinada em ratos com agravamento de volume. Nesta experiência foi provocada através de uma infusão de solução isotónica de cloreto de sódio, uma mais elevada pressão de enchimento cardial, e por consequência uma libertação de ANP provocando assim diurese/sodiurese. 32
Lc, .....^ \
Condução do teste
As experiências foram executadas em ratos Wistar com um peso de corpo de 200-400 g. Sob anestesia neuroléptica (Fentanyl; Hypnorm®, firma produtora Fa. Jansen) é colocado um catéter na veia femoral direita para se proceder à infusão provocando um agravamento do volume com solução isotónica de cloreto de sódio. Após se abrir uma cavidade abdominal é colocado um segundo catéter na bexiga ligando-se à uretra, de forma que se possa medir o volume de urina, a sodiurese e potassiurese. A zona abdominal é de novo fechada e o animal recebe uma infusão prolongada de solução de cloreto de sódio (0,5 mL/100 g de peso de corpo) durante todo o período de ensaio que é de 2 horas. Após um período de equilíbrio de 30 minutos, foram recolhidas todos os 10 minutos, amostras de urina antes de se efectuar a adição da substância teste. Estes pré-valores (valores "predrug") foram determinados de forma a verificar se o animal submetido ao teste possui um fluxo contínuo de urina.
As soluções contendo as substâncias teste foram administradas de forma intra-venosa (injecção Bolus, na veia femoral) ou de forma oral (através de uma sonda) em grupos de 10 ratos. Ambas as formas de administração contêm um grupo de controlo, que são constituídas por soluções placebo, que não possuem composto activo. 5 minutos após a administração intra-venosa, em particular 120 minutos após administração oral, os ratos foram submetidos a um maior agravamento de volume por administração de uma solução de cloreto de sódio por via intra-venosa (2 mL/100 g de peso de corpo em 2 minutos), sendo a urina recolhida durante um período de 60 minutos. À quantidade de urina recolhida e que durante este período é analisada são determinados os teores em sódio e potássio. Da quantidade de urina recolhida verificou-se 33 f u que sob agravamento de volume decorre um aumento da segregação de urina relativamente aos valores anteriores.
Na tabela D seguinte estão ilustrados os valores de agravamento de volume após adição das substâncias teste que conduziram a um aumento da segregação de urina em % relativamente aos valores dos agravamentos de volume após adição de placebo e os respectivos aumentos de segregação de urina. Para além disso são ainda ilustrados os valores em %, para as quantidades de sódio e potássio, para as substâncias teste sob a acção de agravamento de volume e os valores para placebo sob acção de agravamento de volume.
Tabela D
Substância teste Exemplo Nr. Forma de administração Dose mg/kg Aumento da segregação de urina sob agravamento de volume após adição de substância teste em % em relação ao aumento de segregação de urina sob agravamento de volume após adição de placebo Segregação de Na e.K sob agravamento de volume após adição de substância teste em % relativamente à guantidade segregada após adição de placebo Na K 8 *H I—1 o 123,5% 160,9% 80, 8% 8 1,0 i . v. 153,7% 230,4% 121,8% 4 15 p.o. 196,5% n* n* 4 51 p.o. 271% n* n* *n = não determinado
Os resultados do teste acima indicados ilustram que os compostos de fórmula I possuem uma elevada afinidade para o NEP e assim podem provocar um aumento do ANP no sangue através da inibição da enzima que hidrolisa ANP, e desta forma permitir, de acordo com a dose, o aumento do efeito diurético/sodiurético do ANP sem que isso afecte significativamente a perda de potássio.
Devido à actividade acima descrita, os compostos de 34 f- U: ^ \l fórmula I são adequados como medicamentos para mamíferos de grande porte, em especial seres humanos, para o tratamento de insuficiência cardíaca e para auxiliar a diurese/sodiurese, em especial em casos de pacientes que sofram de insuficiência cardíaca. Aqui são administrados em formas medicamentosas, ácidos dicarboxílicos de fórmula I, e seus sais convenientemente, de forma parenteral, em especial i.v. e mono ou di-ésteres de fórmula I, convenientemente em forma de administração oral. As doses utilizadas das substâncias a serem administradas e a sua forma de aplicação, podem ser individualmente diferentes, e variam de acordo com a natureza e tipo do estado a ser tratado. Por exemplo, formulações parenterais em geral possuem menos composto activo que os preparados para administração oral. Em geral adequam-se para aplicações em animais de grande porte, em especial seres humanos, formas de medicamentos com um teor de composto activo de 1 a 200 mg por dose unitária.
Como meio de tratamento, os compostos de fórmula I podem estar contidos em preparados galénicos com os agentes farmacêuticos habituais, como por exemplo, comprimidos, cápsulas, supositórios, ou soluções. Estas preparações galénicas podem ser preparadas de acordo com métodos conhecidos, utilizando agentes veiculares habituais sólidos ou líquidos, como por exemplo, lactose, amido, ou talco ou parafina líquida e/ou sob utilização de agentes auxiliares farmacêuticos, por exemplo, agentes lubrificantes de comprimidos, agentes de dissolução ou conservantes.
Os exemplos descritos de seguida permitem melhor elucidar a presente invenção, sem no entanto a limitar sob qualquer forma.
As estruturas dos novos compostos foram inequivocamente determinadas através de ensaios espectroscópicos, em 35 especial por análise de espectros de RMN- ressonância magnética nuclear, espectros de massa-espectrometria de massa, espectros IR-infra-vermelho/UV-ultra-violeta e eventualmente por determinação da rotação óptica.
Exemplo 1 Éster tert-butílico do ácido 3-{1-[2'-(etóxicarbonilo)-4'--fenilo-butilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-lH-benzazepina-1-acético A) A uma solução de 160,1 g de éster di-etilico do ácido malónico em 1 litro de dimetilformamida são adicionados 123,4 g de butilato de tert-butilo em pequenas porções a uma temperatura de 15°C. A mistura reaccional foi agitada durante 30 minutos, sendo depois adicionado gota-a-gota, à temperatura ambiente, 207,7 g de brometo de fenentilo em 200 mL de dimetilformamida. De seguida a mistura reaccional foi aquecida a 60°C durante uma hora e de novo arrefecida. A dimetilformamida foi removida a pressão reduzida, sendo o resíduo retomado numa mistura de éter tert-butilmetílico e água. A fase orgânica foi separada, lavada com água e seca sobre sulfato de sódio, sendo finalmente evaporada a pressão reduzida. O óleo residual que constitui o produto bruto, foi destilado a pressão reduzida. Obtiveram-se 202,5 g de éster butílico do ácido 2-etóxicarbonilo-4-fenilo-butanóico, KPi,5 (ponto de fusão a 1,5 torr) = 148-153°C. B) A uma solução de 23,6 g do produto di-éster acima obtido, em 285 mL de etanol, foi adicionada uma solução de 6,17 g de hidróxido de potássio em 76 mL de água sob arrefecimento em gelo. A mistura reaccional foi agitada por várias horas à temperatura ambiente. De seguida o etanol foi removido a pressão reduzida, sendo o resíduo tert-butilmetílico e retomado numa mistura de éter ...... 36 r~ água. A fase orgânica foi separada e eliminada, sendo a fase aquosa diluída com uma solução aquosa de ácido clorídrico sob arrefecimento em gelo, e de seguida extraída várias vezes com éter tert-butilmetílico. As fases de éter tert--butilmetílico reunidas foram lavadas com água, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas a pressão reduzida. Obtiveram-se 20,2 g de um óleo de éster etílico de ácido 2-carbóxi-4-fenil-butanóico, que sem mais qualquer outro tipo de tratamento foi utilizado no passo seguinte. C) A 20,2 g de produto obtido anteriormente foram adicionados sucessivamente sob arrefecimento em gelo 11 mL de uma solução aquosa a 35% de formaldeído e 9,23 mL de piperidina. A mistura reaccional foi agitada por várias horas à temperatura ambiente, e de seguida diluída com éter tert-butilmetílico, lavando-se depois com uma solução aquosa de hidrogenosulfato de potássio e com água, secou-se sobre sulfato de sódio e evaporou-se. O resíduo foi seco a pressão reduzida. Obtiveram-se 14,8 g de éster etílico do ácido a-(2-feniletilo)-acrílico. D) Sob atmosfera de azoto são dissolvidos 25,2 mL de di-isópropilamina em 150 mL de tetra-hidrofurano absoluto e arrefeceu-se a -35°C. A esta solução foram adicionados gota-agota 100 mL de uma solução 1,6 normal de butil--litio em hexano. A mistura foi de seguida agitada durante 30 minutos a 0°C e de seguida adicionou-se gota--a-gota uma solução de 8,1 mL de ácido ciclopentanóico em 20 mL de tetra-hidrofurano absoluto. A mistura reaccional foi agitada 2 horas a 0°C. Depois adicionou-se gota-a--gota 16,8 g do éster acrílico preparado de acordo com C) em 20 mL de tetra-hidrofurano absoluto, ficando a mistura reaccional a repousar durante 2 horas a 0°C e de 37 -t
U seguida várias horas a -15°C. Para o tratamento, a mistura reaccional é adicionada de uma solução aquosa a 10% de ácido clorídrico e extraída com n-hexano. A fase orgânica é lavada sete vezes com uma solução aquosa meio saturada da bicarbonato de sódio e lavada uma vez com água, seca sobre sulfato de sódio e evaporada a pressão reduzida. O produto bruto obtido como resíduo foi purificado por cromatografia em "flash" (cromatografia rápida em coluna) em sílica-gel utilizando n-hexano/acetato de etilo (8:2). Obtiveram-se 19,6 g de um produto puro de ácido 1-)2- — (etóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo]-ciclopentano-1—carboxílico, com um ponto de fusão de 68 a 69°C. E) A iima solução de α-tetralona em 820 mL de metanol foram lentamente adicionados, sob arrefecimento em gelo, gota-a-gota 108,3 g de bromo. De seguida a mistura foi agitada 30 minutos à temperatura ambiente e a esta temperatura foi adicionada de 122,4 g de hidroxilamina-hidrocloreto e 110 mL de água. A mistura foi deixada em agitação durante 3 dias à temperatura ambiente. Adicionaram-se então 493 mL de água, precipitando um resíduo branco após uma hora. A mistura reaccional foi agitada por mais 3 dias e arrefecida a 5°C. 0 resíduo foi filtrado, lavado com água e seco a pressão reduzida a 40°C. Obtiveram-se 136,7 g de 2-bromo-3,4-di-hidronaftalina-1(2H)-ona-oxima com um ponto de fusão de 130 a 132°C. F) 79,5 g da oxima acima obtida foi adicionada em porções a 452 g de ácido polifosfórico a 80°C, sendo a mistura reaccional deixada sob agitação 18 horas a 80°C. De seguida diluiu-se cuidadosamente com 710 mL de água,
sendo a mistura agitada 2 horas à temperatura ambiente. O resíduo foi filtrado, lavado com água, solução de bicarbonato de sódio e mais uma vez com água, lavada 38 com éter tert-butilmetílico e seca sobre hidróxido de potássio a 60°C. Obtiveram-se 66,6 g de 3-bromo-4,5-di-hidro-lH-l-benzazepina-2(3H)-ona com um ponto de fusão de 168 a 170°C. G) 80 g do produto acima obtido foi suspendido em 140 mL de dimetilformamida. A suspensão foi adicionada de uma solução de 72,6 g de ftalimida de potássio em 205 mL de dimetilformamida e de seguida deixada 16 horas a 60°C sob agitação. Para o tratamento da mistura reaccional, arrefeceu-se à temperatura ambiente, adicionaram-se lentamente gota-a-gota 800 mL de água deixando-se a mistura 2 horas sob banho de gelo e agitação. O resíduo na forma de papa cristalina foi filtrado, e lavado em primeiro lugar com uma mistura de água/dimetilformamida e de seguida com éter metilo-tert-butilico, sendo depois seco durante 2 dias a 60°C sob pressão reduzida. Obtiveram-se 73,3 g de 4,5-di-hidro-3-ftalimido-lH-1-benzazepina-2(3H)-ona com um ponto de fusão de 185 a 195°C.
Η) A uma suspensão de 27 g do composto acima obtido em 90 mL de dimetilformamida foi adicionada, sob arrefecimento em gelo, uma solução de 12,3 g butilato de tert-butilo em 40 mL de dimetilformamida. Após 30 minutos de agitação sob arrefecimento em gelo foram adicionados, gota-a-gota durante 1 hora, 20,7 g de éster butílico do ácido bromo- acético a uma temperatura entre 0 e 5°C. Agitou-se durante mais uma hora a 0°C. A mistura reaccional foi então aquecida a 40°C, adicionou-se gota-a-gota 164 mL de água durante 3 horas e agitou-se por mais 3 horas a 30°C. A solução aquosa foi decantada do precipitado, sendo o precipitado recristalisado em éter tert-butilmetílico. Os cristais formados foram filtrados, lavados com água e lavados com éter tert- butilmetílico sendo 39 finalmente secos a 60°C sob pressão reduzida. Obtiveram-se 26,3 g de éster tert-butílico do ácido 2, 3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-3-ftalimido—1H-1-benzazepina-1-acético com ponto de fusão de 194-197°C. I) 7 g do éster acima obtido foram adicionados durante 5 minutos a 13,8 mL de etanolamina a 80°C. Após 5 minutos formou-se uma solução límpida, que foi arrefecida à temperatura ambiente e diluída com tolueno. A solução foi agitada com uma 140 mL de uma solução aquosa a 5% de cloreto de sódio, sendo separada a fase orgânica, secou--se sobre sulfato de sodio e evaporou-se. O resíduo formado foi recristalisado em éter tert-butilmetilico. Obtiveram-se 4,0 g de ácido 3-amino-2,3,4,5-tetra-hidro--2-oxo-lH-l-benzazepina-l-acético com um ponto de fusão de 117-118°C. J) 2,9 g da amina acima obtida e 3,2 g de ácido obtido de acordo com D) foram dissolvidos em 100 mL de diclorometano. À mistura reaccional foram adicionados sob, arrefecimento em gelo, 2,2 mL de N-metilmorfolina, 1,27 g de hidróxibenzotriazolo e 3,81 g de N-etilo-N-(3-
-dimetilaminopropilo)-carbodi-imida-hidrocloreto. A mistura reaccional foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, diluiu-se a mistura com diclorometano, e lavou-se sucessivamente com água, solução aquosa de bicarbonato de sódio, água, solução aquosa de bicarbonato de sódio e de novo com água. A fase orgânica foi então seca sobre sulfato de sódio e o solvente evaporado a pressão reduzida. 0 produto bruto assim obtido foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel sob uma pequena pressão (=cromatografia em flash), utilizando n-hexano/acetato de etilo, em que o teor de acetato de etilo durante a cromatografia foi aumentado 40
de 1:9 para 3:7. Obtiveram-se 5,4 g de composto em titulo puro na forma de um óleo.
Espectros de IR-infra-vermelho (como filme): 3400 cm'1; 1725 cm-1; 1660 cirf1
Exemplo 2: Ácido 3—{1—[2'—(etóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo)]- -ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH--1-benzazepina-l-acético 5 g de éster tert-butilico do ácido 3—{1—[2'— - (etóxicarbonilo)-4'-fenilo-butilo]-ciclopentano-1--carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-benzazepina--1—acético (preparado de acordo com o Exemplo 1) foram dissolvidos em 16 mL de ácido trifluoro-acético. A solução foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, removeu-se a pressão reduzida o ácido trifluoro-acético. 0 resíduo foi dissolvido em diclorometano sendo a solução lavada com água até ficar neutra. De seguida a fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada a pressão reduzida. 0 resíduo foi várias vezes agitado com n-hexano e evaporado até à secura. Obtiveram-se 3,4 g do composto em titulo na forma de espuma sólida com uma gama de temperaturas de fusão de 81 a 104°C.
Exemplo 3 Éster tert-butílico do ácido (3S,2'R)-3-{1-[2'--(etóxicarbonilo)-4'-fenilo-butilo]-ciclopentano-1--carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-benzazepina-l--acético A) 30,5 g de ácido 1-[2'-(etóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo]--ciclopentano-1- carboxílico (preparado de 41
u t acordo com o Exemplo 1D) e 11,6 g de L-(-)-a- metilbenzilamina foram dissolvidos, sob aquecimento, em etanol. A mistura reaccional foi arrefecida durante 12 horas num frigorifico, sendo depois filtrados os cristais em papa precipitados, que foram secos e recristalizados em etanol várias vezes (até se obter um valor constante de rotação óptica), e de seguida secos a pressão reduzida. Obtiveram-se 17,7 g de um sal de a- metilbenzilamónio do ácido acima referido com um ponto de fusão de 118-121°C, com um valor de rotação óptica de [a]20D = + 5,6° (c= 0,5 em metanol).
Para a hidrólise com vista à formação do ácido livre, o sal foi dissolvido numa mistura de água/diclorometano, sendo a mistura acidificada com uma solução aquosa de hidrogenosulfato de potássio. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa extraida três vezes com diclorometano. As fases orgânicas reunidas foram lavadas com água, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas a pressão reduzida. O resíduo foi seco. Obtiveram-se 11,2 g de ácido (2 'R)-1-[2(etóxicarbonilo-4'-fenilbutilo]--ciclopentano-l-carboxílico, opticamente puro com um valor de rotação óptica de [a]20D = + 7,4° (c= 0,651 em metanol). B) A uma solução de 24,5 g de éster tert-butílico do ácido 3-amino-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l--acético (preparado de acordo com o Exemplo II)aquecida a 65°C, foi adicionada uma solução de 12,65 g ácido L-( + )--tartárico em 54 mL de etanol aquecido a 65°C. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante uma hora. De seguida foram adicionados gota-a-gota 1,72 mL de benzaldeído em 1,3 mL em etanol. A suspensão obtida foi aquecida a refluxo durante 14 horas a 80°C, e depois 42 π arrefecida à temperatura ambiente. 0 precipitado cristalino resultante, foi retomado em 80 mL de etanol e aquecido de novo a refluxo durante 8 horas. Foi de novo arrefecido à temperatura ambiente, os cristais foram filtrados e secos a pressão reduzida a 50°C. Obtiveram-se 23,6 g de sal de ácido tartárico com um ponto de fusão de 195 a 196°C com uma valor de rotação óptica de [a]2uD = -152° (c= 0,5 em metanol) .
Para a hidrólise com vista à formação da base livre foram dissolvidos 23,6 g do sal de ácido tartárico numa mistura de 250 mL de água e 108 mL de diclorometano sob agitação a 0°C, ajustando-se o valor de pH a 9, 6 com uma solução aquosa de amoníaco. A fase orgânica foi separada, e a fase aquosa foi extraída várias vezes com 30 mL de diclorometano, reuniram-se as fases orgânicas, secaram-se sobre sulfato de sódio, e finalmente foram evaporadas sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi recristalisado em éter tert-butilmetílíco e levado à secura a pressão reduzida. Obtiveram-se 12,2 g de éster tert-butílico do ácido (3 S)-3-amino-2,3,4,5-tetra-hidro--2-oxo-lH-l- benzazepina-l-acético com um ponto de fusão de 113 a 115°C e com um valor de rotação óptica de [a]20D = -276,2° (c— 0,5 em metanol). C) 5,4 g do ácido obtido de acordo com A) foram dissolvidos em 60 mL de diclorometano seco. A solução foi adicionada de 2,33 mL de trietilamina e arrefecida a -20°C. Adicionou-se lentamente gota-a-gota uma solução de 1,31 mL de ácido metanosulfónico em 5 mL de diclorometano seco. Após 15 minutos sob agitação adicionaram-se uma solução de 4,8 g de amina obtida de acordo com o Exemplo B) e 2,33 mL de trietilamina em 60 mL de diclorometano. De seguida a mistura reaccional foi agitada durante 1 43
U κ hora à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, a mistura foi adicionada de água, sendo a fase orgânica separada, lavando-se com uma solução de hidrogenosulfato de potássio e de seguida com água, sendo efectuada a secagem sobre sulfato de sódio, filtrando-se de seguida e removendo-se o solvente a pressão reduzida. 0 produto pruto resultante foi purificado por cromatografia em flash em 500 g de silica-gel utilizando n-hexano/acetato de etilo (7:3). Após secagem a pressão reduzida obtiveram-se 9,5 g de composto puro em título na forma de um óleo, com um valor de rotação óptica de [a]20D = -115,2° (c= 0,463 em metanol).
Exemplo 4 Ácido (3S, 2'R)-3-{1-[2'-(etóxicarbonilo)-4'-fenilo-butilo]- -ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH--benzazepina-1-acético 9,4 g de éster tert-butílico do ácido (3S, 2'R)-3-{l- -[2'-(etóxicarbonilo)-4'-fenilo-butilo]-ciclopentano-1--carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH--benzazepina-1—acético (preparado de acordo com o exemplo 3) foram dissolvidos em 15 mL de diclorometano sob arrefecimento em gelo. A solução foi adicionada de 31 mL de ácido trifluoro-acético sendo a mistura reaccional deixada 12 horas num frigorífico a 4°C. Para o tratamento da mistura reaccional, removeram-se o diclorometano e o ácido trifluoro-acético a pressão reduzida. O produto bruto assim obtido foi retomado em acetato de etilo e lavado com água, solução aquosa diluida de bicarbonato de sódio e de novo com água. A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio e evaporada a pressão reduzida. O resíduo obtido foi purificado por cromatografia em flash em sílica-gel, 44 r utilizando-se como solvente diclorometano e de seguida diclorometano/metanol (95:5). 0 produto obtido foi seco durante 2 dias a 80°C a pressão reduzida. Obtiveram-se 7,3 g de produto em titulo na forma de uma espuma sólida com um ponto de fusão de 71 a 74°C, com um valor de rotação óptica de [a]^°D = -131,0° (c= 0,5 em metanol).
Exemplo 5 Éster tert-butílico do ácido 3-{1-[2'-(tert-butóxicarbonilo)--4'-fenilo-butilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5--tetra-hidro-2-oxo-lH-benzazepina-l-acético A) 118 g de éster tert-butllico do ácido dimetilfosfono--acético foram dissolvidos em 875 mL de dimetilformamida seca em atmosfera de azoto. À solução foram adicionados 58,9 g de tert-butilato de potássio sob arrefecimento em gelo. De seguida a mistura reaccional foi aquecida a 60°C durante um curto período de tempo e arrefecida à temperatura ambiente. À mistura reaccional foi adicionada gota-a-gota uma solução de 104,9 g de brometo de fenentilo em dimetilformamida. A mistura reaccional foi aquecida por mais 2 horas a 60°C. Para o tratamento da mistura reaccional, a dimetilformamida foi removida por pressão reduzida e o resíduo resultante foi dissolvido em éter metilo-tert—butílico. A solução foi acidificada com uma solução aquosa de hidrogenosulfato de potássio. A fase orgânica foi depois separada, lavada com água, seca sobre sulfato de sódio, e evaporada a pressão reduzida. 0 produto bruto obtido foi purificado por cromatografia em flash em 3 kg de sílica-gel utilizando como solvente diclorometano/éter tert-butilmetílico (4:1). Obtiveram-se 105,1 g de produto puro na forma de óleo de éster tert-butílico do ácido 2-(dimetilfosfono)-4-fenilo-n-butanóico. 45
Γ~' ι] Β) 105,1 g do produto acima obtido foram dissolvidos em 705 mL de tetra-hidrofurano seco sob atmosfera de azoto. A esta solução foram adicionados 28,4 g de paraformaldeído. Adicionaram-se lentamente gota-a-gota 32,5 g de tert--butilato de potássio em 100 mL de tetra-hidrofurano. De seguida a mistura reaccional foi agitada durante 1 hora. Para o tratamento da mistura reaccional, acidificou-se a mistura com uma solução aquosa gelada de hidrogenosulfato de potássio diluindo-se posteriormente com éter tert--butilmetílico. A fase orgânica foi separada e lavada com água, seca sobre sulfato de sódio, e evaporada a pressão reduzida. O produto bruto obtido foi submetido a purificação por cromatografia em flash em 700 g de silica-gel utilizando como solvente uma mistura de n--hexano/acetato de etilo (9:1). Foram obtidos 47,0 g de éster butilico do ácido α-fenentilacrílico, na forma de um óleo incolor. C) A uma solução arrefecida a -50°C de 50,2 mL de di--isopropilamina em 450 mL de tetra-hidrofurano absoluto, foram adicionados gota-a-gota 200 mL de uma solução 1,6 molar de butil-litio em n-hexano, sendo a mistura reaccional agitada durante 30 minutos a 0°C. De seguida, foram adicionados gota-a-gota à mistura reaccional e a esta temperatura 16,2 mL de ácido ciclopentanóico em 40 mL de tetra-hidrofurano absoluto. A mistura reaccional foi agitada por mais 2 horas a 0°C. De seguida foi adicionada lentamante à mistura uma solução de 38 g de composto obtido de acordo com o Exemplo B) em 50 mL de tetra-hidrofurano. A mistura reaccional foi agitada mais 2 horas a 0°C e depois deixada em repouso várias horas a -15°C. Para o tratamento da mistura reaccional, foi adicionado à mistura, sob arrefecimento em gelo, uma 46 y t solução aquosa saturada de hidrogenosulfato de potássio de forma a acidificar a mistura, extraindo-se três vezes com n-hexano. As fases orgânicas reunidas foram lavadas sete vezes com uma solução aquosa meio saturada de bicarbonato de sódio e finalmente com água, sendo efectuada a secagem sobre sulfato de sódio, evaporando-se finalmente sob pressão reduzida. 0 produto bruto obtido na forma de um óleo foi recristalisado em n-hexano. Foram obtidos 41,9 g de cristais puros de ácido 1—[2'-{tert--butóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo]-ciclopentano-1--carboxílico com um ponto de fusão entre 75 e 77°C.
D) 3,3 g de produto obtido anteriormente, 2,7 g de éster tert-butilico de ácido 3-amino-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo--ΙΗ-1-benzazepina-l-acético (preparado de acordo com o Exemplo II), 1,53 mL de N-metilmor folina e 1,18 g de hidróxibenzotriazolo foram dissolvidos em 93 mL de diclorometano absoluto sob atmosfera de azoto. A esta solução foram adicionados 3,52 g de N-etilo-N'-(3--dimetilaminopropilo)-carbodi-imida-hidrocloreto. A mistura reaccional foi então agitada sob arrefecimento em gelo durante 2 horas. Para o tratamento da mistura reaccional, lavou-se sucessivamente a mistura com água, solução aquosa de hidrogenosulfato de potássio, água, solução aquosa de bicarbonato de sódio e de novo com água. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, e evaporada a pressão reduzida. 0 produto bruto resultante foi purificado por cromatografia em flash em 200 g de silica-gel utilizando como solvente n-hexano/acetato de etilo (7:3), recristalisando-se finalmente em éter tert-butilmetílico. Foram obtidos 4,2 g de composto em titulo puro com um ponto de fusão de 110 a 114°C. 47
* I Ví
Exemplo 6 Ácido 3— [ 1— (2'— (carbóxi-4'-fenilo-butilo)-ciclopentano-1--carbonilamino]-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-benzazepina-l--acético 4,1 g de éster tert-butílico do ácido 3-{1-[2'-(tert--butóxicarbonilo)-4'-fenilo-butilo]-ciclopentano-1--carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-benzazepina-1—acético (preparado de acordo com o Exemplo 5) foram dissolvidos em 13 mL de ácido trifluoro-acético a uma temperatura de 4°C numa atmosfera livre de humidade. A solução obtida foi agitada durante 3 horas a esta temperatura. Para o tratamento da mistura reaccional foi evaporada a pressão reduzida. Para se remover completamente o ácido trifluoro-acético, lavou-se várias vezes o resíduo com diclorometano e evaporou-se de novo. reduzida. 0 resíduo resultante foi dissolvido em diclorometano, lavado com água, seco sobre sulfato de sódio e evaporado a pressão reduzida. 0 produto bruto resultante foi recristalisado em diclorometano. Foram obtidos 2,7 g de composto em título puro com um ponto de fusão de 178 a 183°C.
Exemplo 7 Éster tert-butílico do ácido (3S,2'R)-3-{1-[2'-(tert--butóxicarbonilo)-4'-fenilo-butilo]-ciclopentano-1--carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-benzazepina-l--acético A) 68' g de de ácido 1-[2'-(tert-butóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo]-ciclopentano-1—carboxílico (preparado de acordo com 5C) e 23,5 mL de L-(-)-a-metilbenzilamina foram dissolvidos sob aquecimento em 200 mL de etanol. A mistura reaccional foi tratada de acordo com o descrita 48
para o exemplo 3A) . Foram obtidos 32,2 g de sal de amónio de α-metilbenzilo do ácido acima referido com um ponto de fusão de 118 a 119°C, e um valor de rotação óptica de [α]2:ο = +9,2° (c= 0,5 em metanol). Para a formação do ácido livre, este sal foi tratado de acordo com o processo descrito no Exemplo 3A). Foram obtidos 23 g de ácido (2'R)-3-[1-(2-(tert—butóxicarbonilo)-4'- fenilo-butilo]-ciclopentano-l-carboxílico com um ponto de fusão de 68 a 70°C, e um valor de rotação óptica de [a]20D = +15,4° (c= 0,5 em metanol). B) B) 60,1 g do ácido obtido acima foram transformados com 50,3 g de éster tert-butílico do ácido (3S)-3-amino-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l-acético (preparado de acordo com o Exemplo 3B), de forma análoga ao descrita no Exemplo 3C) , sendo a mistura tratada de seguida de acordo com o método descrita em 3C) . Foram obtidos 94,3 g de composto em titulo na forma de uma espuma, com um valor de rotação óptica de [a]2uD = -110,2° (c= 0,5 em metanol).
Espectros de IR-infra-vermelho (em pastilha de KBr) : 3420 cm-1, 1743 cm’ :, 172 5 cm'1, 167 0 cm’1.
Exemplo 8 Ácido (3S,2'R)—3—[1—(2'-carbóxi-4'-fenilo-butilo]- -ciclopentano-l-carbonilamino]-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH--1-benzazepina-1-acético 93 g de de éster tert-butílico do ácido (3S,2'R)-3-{l--[2'-(tert-butóxicarbonilo)-4'-fenilo-butilo]--ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2--oxo-lH-benzazepina-1—acético (preparado de acordo com o Exemplo 7) foi hidrolisado com ácido trifluoro-acético de acordo com o método descrito no Exemplo 6, sendo 49 t a mistura reaccional tratada de acordo com o método descrito para o Exemplo 6. Foram obtidos 63,5 g de composto em titulo na forma de uma espuma sólida com uma gama de ponto de fusão de 97 a 122°C, e um valor de rotação óptica de [a]20D = -136,2° (c= 0,5 em metanol).
Exemplo 9 Éster benzilico do ácido (3S,2'S)-3-{1-[2'-tert--butóxicarbonilo-3'-(2-metóxi-etóxilo)-propilo]-ciclopentano--1-carbonilamino}-3,4-di-hidro-4-oxo-l,5-benzoxazepina-5(2H)— -acético A) A uma solução de 100 g de ácido 3-bromopropiónico em 200 mL de éter di-etilico foram adicionados 7 mL de ácido sulfúrico sendo a mistura reaccional arrefecida a -20°C. Foram depois adicionados 123 mL de isobuteno liquefeito. A mistura reaccional foi, durante várias horas, agitada à temperatura ambiente num frasco resistente a pressão. De seguida, para o tratamento da mistura reaccional, adicionou-se uma solução aquosa de sódio alcalino para diluir a mistura. A fase etérea foi separada e a fase aquosa extraída de novo com éter. As fases orgânicas reunidas foram lavadas com uma solução de cloreto de sódio e secas sobre sulfato de sódio, sendo finalmente evaporadas a pressão reduzida. O produto bruto obtido foi destilado a pressão reduzida. Foram obtidos 100 g de éster tert-butílico do ácido 3-bromopropanóico, KP2o (ponto de fusão a 20 torr)= 75 a 77°C.
B) 50,4 mL de di-isopropilamina foram dissolvidos em 300 mL de tetra-hidrofurano absoluto em atmosfera de azoto arrefecendo-se a solução a -70°C. A esta solução, foram adicionados gota-a-gota, a esta temperatura, 200 mL de uma solução 1,6 molar de butil-litio em n-hexano. A 50
L· t mistura reaccional foi deixada aquecer a 0°C, agitada a esta temperatura durante 30 minutos e arrefecida de novo a -20°C. De seguida, foram adicionados gota-a-gota à mistura reaccional e a esta temperatura, 16,2 mL de ácido ciclopentanóico em 30 mL de tetra-hidrofurano absoluto. A mistura reaccional foi agitada por mais 2 horas à temperatura ambiente. A mistura foi de novo arrefecida a -10°C, e adicionada lentamente e gota-a-gota a uma solução também arrefecida a -10°C de 35 g de éster tert--butílico de ácido 3-bromopropanóico em 100 mL de tetra--hidrofurano. A mistura reaccional foi agitada por várias horas à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, adicionou-se uma solução diluida de ácido clorídrico de forma a acidificar a solução e diluiu-se com 375 mL de éter di-etílico. A fase orgânica foi separada, sendo a fase aquosa extraída mais três vezes com 100 mL de éter di-etílico. As fases orgânicas reunidas foram lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas a pressão reduzida. O resíduo resultante foi dissolvido em 300 mL de éter di-etílico. A solução foi lavada seis vezes com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio, e de seguida agitada e extraída quatro vezes com uma solução aquosa a 10% de carbonato de sódio. As fases de carbonato de sódio reunidas foram, sob arrefecimento, acidificadas e extraídas três vezes, com 150 mL de cada vez, com éter di-etílico. Estes extractos de éter foram reunidos e a solução obtida lavada com uma solução aquosa de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio e evaporada a pressão reduzida. 0 produto bruto obtido foi recristalisado em n-hexano a quente. Foram obtidos 7,7 g de produto puro de ácido 1-[2'-(tert-butóxicarbonilo)--etilo]-1-ciclopentanocarboxílico com um ponto de fusão de 78 a 81°C. 51 1__ r
I \ C) 30 mL de di-isopropilamina foram dissolvidos em 100 mL de tetra-hidrofurano sob atmosfera de azoto, sendo esta solução arrefecida a -70°C. A esta solução foram adicionados gota-a-gota 132 mL de uma solução 1,6 molar de butil-litio em n-hexano, sendo a mistura reaccional agitada durante 30 minutos a 0°C, e depois de novo arrefecida a 0°C. De seguida foram adicionadas sucessivamente a esta mistura reaccional uma solução de 24,2 g de composto preparado de acordo com B) e 100 mL de tetra-hidrofurano absoluto, e de seguida adicionada gota-a-gota uma solução de 14,2 mL de cloreto de metóxi--etóximetilo em 20 mL de tetra-hidrofurano absoluto. A mistura reaccional foi deixada sob agitação durante 16 horas à temperatura ambiente. Para o tratamento desta mistura reaccional, esta foi lançada numa mistura de gelo/água, acidificada com solução aquosa de hidrogenosulfato de potássio e extraída três vezes com com 300 mL de acetato de etilo, de cada vez. As fases orgânicas foram reunidas, lavadas com uma solução aquosa de cloreto de sódio e secas sobre sulfato de potássio, sendo evaporadas a pressão reduzida. O produto bruto resultante foi purificado por cromatografia em flash em 500 g de sílica-gel utilizando diclorometano/éter (8:2) como eluente. Foram obtidos 26,5 g de ácido l-[2'-(tert--butóxicarbonilo)-3'-(2-metóxi-etóxilo)-propilo]--ciclopentano-l-carboxílico na forma de um óleo. D) 36,7 g de ácido racémico acima obtido foram dissolvidos em 184 mL de n-hexano, sendo a esta solução adicionados 18,4 g de (+)-pseudo-efedrina. O precipitado formado foi, por um curto período de tempo, aquecido a refluxo, e de novo colocado em solução. A solução foi arrefecida num
frigorífico e deixada em repouso, durante várias horas. O precipitado cristalino formado, foi filtrado, lavado com n-hexano gelado e recristalisado ainda quatro 52
vezes em n--hexano. Foram obtidos 16,2 g de sal de pseudo-efedrina do ácido acima obtido com um ponto de fusão de 89-91 °C, e com um valor de rotação óptica de [οι]2";. = +36,5° (c= 1 em metanol) .
Para a formação do ácido por hidrólise utilizaram-se 16,0 g do sal, que se suspenderam em n-hexano, sendo esta solução acidificada com uma solução aquosa gelada de hidrogenosulfato de potássio. A fase orgânica foi separada, e a fase aquosa extraída ainda duas vezes com n-hexano. As fases orgânicas reunidas foram lavadas com uma solução de cloreto de sódio, secas em sulfato de sódio e evaporadas a pressão reduzida. O resíduo resultante foi seco a 50°C a pressão reduzida. Foram obtidos 9,9 g de ácido (2'S)-1-[2'-(tert--butóxicarbonilo)-3'-(2-metóxi-etóxilo)-propilo] --ciclopentano-l-carboxílico na forma de um óleo com um valor de rotação óptica de [a]20D = +2,9° (c= 1 em metanol). E) 17,2 g de hidreto de sódio (80%) foram dissolvidos em 400 mL de dimetilformamida seca em atmosfera de azoto, e na ausência de humidade. A esta solução a 0°C foi adicionada lentamente gota-a-gota uma solução de 50 g de L-BOC--serina (= N-(tert-butóxicarbonilo)-serina) em 50 mL de -dimetilformamida seca. A mistura reaccional foi lentamente aquecida a 15°C, tendo-lhe sido depois adicionada gota-a-gota uma solução de 37,4 g de o-nitrofenol em 50 mL de dimetilformamida, sendo esta mistura reaccional agitada por várias horas à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, esta foi lançada sobre uma solução aquosa gelada de hidrogenosulfato de potássio. De seguida foi várias vezes extraída com acetato de etilo e as fases orgânicas 53
^ reunidas, adicionadas de solução aquosa de bicarbonato de sódio. A fase aquosa foi separada, lavada com éter e finalmente acidificada com hidrogenosulfato de potássio antes de ser extraída com acetato de etilo. Os extractos de acetato de etilo foram lavados com água, secos sobre sulfato de sódio e evaporados a pressão reduzida. Foram obtidos 54,2 g de ácido (2S)-3-(2-nitrofenóxilo)-2-(tert-butóxicarbonilamino)-propiónico, que sem mais qualquer outro tratamento foi utilizado para o passo seguinte.
F) 54,2 g do ácido acima obtido foram dissolvidos em 600 mL de metanol. A solução foi adicionada de 1,8 g de catalisador de paládio (5% Pd/carvão). A solução foi de seguida hidrogenado com uma pressão de hidrogénio a 5 bar. O catalisador foi filtrado, e a solução depois de filtrada evaporada a pressão reduzida. O produto bruto assim obtido foi recristalisado numa mistura de éter tert-butilmetílico/n-hexano. Foram obtidos 30,1 g de ácido (2S)-3-(2-aminofenóxilo)-2-(tert- -butóxicarbonilamino)-propiónico com um ponto de fusão de 87 a 91°C, e um valor de rotação óptico de [a]20D = +55,9° (c= 1 em metanol). G) 13,3 g do ácido acima obtido foi dissolvido em 71 mL de dimetilformamida na ausência de humidade. A esta solução foram adicionados, sob arrefecimento em gelo, uma solução de 7,8 mL de cianeto de di-etilfosfónico em 6 mL de dimetilformamida. Após 10 minutos adicionaram-se gota-a--gota 5,7 mL de tri-etilamina, sendo a mistura reaccional agitada 1 hora à temperatura ambiente. A mistura reaccional foi de seguida lançada em água gelada e extraída várias vezes com éter tert-butilmetílico. As fases orgânicas reunidas foram secas e evaporadas a pressão reduzida. Como produto bruto obteve-se um resíduo 54
I I ο
Γ“ que foi recristalisado em etanol. Foram obtidos 1,3 g de (3 S)-3-(tert-butóxicarbonilamina)-2,3-di-hidro-l,5-benzoxazepina-4(5H)-ona, com um valor de rotação óptica de [a]2CD = -194° (c= 1 em metanol) .
H) 16 g do produto acima obtido foram dissolvidos em 313 mL de tetra-hidrofurano na ausência de humidade. A esta solução foram adicionados gota-a-gota sucessivamente uma solução de 7,1 g de tert-butilato de potássio em 30 mL de tetra-hidrofurano e uma solução de 10,9 mL de éster benzilico de ácido bromo-acético em 10 mL de tetra--hidrofurano. Esta mistura reaccional foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente. De seguida foi diluída com éter tert-butilmetílico, lavada com água sendo a fase orgânica seca em sulfato de sódio e evaporada a pressão reduzida. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia em flash em 500 g de sílica-gel utilizando como eluente uma mistura de n-hexano/acetato de etilo (3:2). Foram obtidos 20,5 g de éster benzilico do ácido (3S)-3-(tert-butóxicarbonilamina)-4-oxo-3,4-di-hidro-l, 5--benzoxazepina-5(2H)-acético na forma de um óleo, com um valor de rotação óptica de [a]20D = -152° (c= 0,68 em metanol). I) 20 g do produto acima obtido foi dissolvido em 137 mL de diclorometano. A solução foi adicionada de 77 mL de ácido trifluoro-acético e agitada durante 1 hora. De seguida foi evaporada a pressão reduzida, sendo o resíduo dissolvido em diclorometano e adicionado de solução aquosa de bicarbonato de sódio até se obter uma reacção básica. A fase orgânica foi então separada, lavada com água e seca sobre sulfato de sódio, sendo evaporada a pressão reduzida. Foram assim obtidos 15,7 g de éter benzilico de ácido (3S)-3-amino-4-oxo-3,4-di-hidro-l, 5- 55 r L-^ —ç* lj ' -benzoxazepina-5(2H)-acético com um valor de rotação óptica de [a]20D = -187,5° (c= 0,536 em metanol). J) 15,7 g do produto acima obtido foram dissolvidos em 48 mL de diclorometano seco sendo a solução adicionada sucessivamente, à temperatura ambiente, com 1,6 g de ácido obtido de acordo com D), 0,7 9 mL de N-
-metilmorfolina e 1,83 g de N-etilo-N'-(3--dimetilaminopropilo)-carbodi-imida-hidrocloreto. A mistura reaccional foi agitada ainda 1 hora, à
temperatura ambiente. Esta mistura reaccional foi sucessivamente lavada com água, solução aquosa de hidrogenosulfato de potássio, água, solução aquosa de bicarbonato de sódio e de novo com água, sendo seca sobre sulfato de sódio e evaporada a pressão reduzida. O produto bruto obtido como resíduo foi purificado por cromatografia em flash em sílica-gel utilizando um eluente constituído por n-hexano/acetato de etilo (7:3). Foram obtidos 1,8 g de composto em título na forma de um óleo, com um valor de rotação óptica de [a]2CD = -96,3° (c= 0,326 em metanol).
Exemplo 10 Éster benzílico do ácido (3S,2'S)-3-{1-[2'-carbóxi-3'-(2--metóxi-etóxilo)-propilo]-ciclopentano-1-carbonilamino}-4--oxo-3,4-di-hidro-l,5-benzoxazepina-5(2H)—acético 1,6 g de éster benzílico do ácido (3S,2'S)-3-{1-[2'--tert-butóxicarbonilo-3'-(2-metóxi-etóxilo)-propilo]--ciclopentano-l-carbonilamino]-4-oxo-3,4-di-hidro-l, 5--benzoxazepina-5(2H)—acético (preparado de acordo com o Exemplo 9) foram dissolvidos com 5 mL de ácido trifluoro-acético sob arrefecimento. A solução foi deixada várias horas a uma temperatura de 4°C. De 56
t seguida, a mistura reaccional foi evaporada a pressão reduzida, e o produto bruto resultante foi purificado por cromatografia em flash em sílica-gel utilizando como eluente uma mistura de diclorometano/éter tert--butilmetílico/metanol (85:15:5). Após secagem, foram obtidos 1,0 g de produto em título na forma de um óleo, com um valor de rotação óptica de [a]20D = -117,2° (c= 0,42 em metanol).
Exemplo 11 Ácido (3S,2'S)—3—{1—(2 -carbóxi-3'-(2-metóxi-etóxilo)- -propilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-4-OXO-3,4-di-hidro- -1,5-benzoxazepina-5(2H)—acético 0,95 g de éster benzílico do ácido (3S,2'S)-3-{1-[2'--carbóxi-3'-(2-metóxi-etóxilo)-propilo]-ciclopentano-1--carbonilamino}-4-OXO-3,4-di-hidro-l,5-benzoxazepina--5(2H)—acético (preparado de acordo com o Exemplo 10) foram dissolvidos em 50 mL de etanol. A esta solução foram adicionados 0,2 g de catalisador de paládio (Pd/carvão 5%) . Hidrogenou-se durante 2 horas com uma pressão de 5 bar. Para o tratamento da mistura reaccional, filtrou-se o catalisador, evaporou-se a mistura filtrada a pressão reduzida, secando-se finalmente o resíduo. Foram obtidos 0,7 g de composto em título na forma de um produto em espuma, com uma valor de rotação óptica de [<x]20D = -142,6° (c= 0,5 em metanol). 57
t
Exemplo 12 Éster tert-butílico do ácido (3R)-3-{1-[2'-tert- -butóxicarbonilo-4'-(4-fluorofenóxilo)-butilo]-ciclopentano- -1-carbonilamino}-4-OXO-3,4-di-hidro-l,5-benzotiazepina- -5(2H)—acético A) 20,5 g de éster tert-butílico do ácido dimetilfosfono--acético foram transformados com 25 g de brometo de 4--fluorofenóxi-etilo de acordo com o método descrito no Exemplo 5A) . A mistura reaccional foi tratada de acordo com o descrita no Exemplo 5A) . Foram obtidos 20,4 g de éster tert-butílico do ácido 4-(4-fluorofenóxilo)-2-(dimetilfosfono)-n-butanóico. B) 20,4 g do produto acima obtido foram transformados de acordo com o método descrito no Exemplo 5B) com 4,8 g de paraformaldeído. A mistura reaccional foi tratada de acordo com o método descrita no Exemplo 5B) . Como produto bruto, foram obtidos 15,3 g de éster tert-butílico do ácido a-[2-(4-fluorofenóxilo)-2-(dimetilfosfono)-n--butanóico na forma de um óleo. Este composto foi utilizado no passo seguinte sem mais qualquer tipo de purificação cromatográfica. C) 15,3 g do produto obtido acima foram transformados com 5,1 mL de ácido ciclopentanóico de acordo com o método descrito para o exemplo 5C) . A mistura reaccional foi tratada de acordo com o método descrita pra 5C) . Foram obtidos 6,0 g de ácido 1-[2'-(tert-butóxicarbonilo)-4'--(4-fluorofenóxilo)-butilo]-ciclopentano-l-carboxílico com um ponto de fusão de 58-63°C, e mais 7,6 g de óleo, que se encontrava ainda ligeiramente impuro. D) A uma solução de 100 mL de 1-f luoro-2-nitrobenzeno em 1880 mL de etanol foram adicionados 122,4 g de N-acetilo- 58 u, -N-cisteina e 181,9 g de hidrogenocarbonato de sódio em 550 mL de água. A mistura reaccional foi aquecida a refluxo durante 3 horas, e depois arrefecida à temperatura ambiente, sendo filtrada do precipitado formado. 0 filtrado foi concentrado a 700 mL, e o resíduo retomado em 1,8 L de água. A fase aquosa foi extraída com éter di-etílico e de seguida, através de adição de solução concentrada de ácido clorídrico, ajustada a pH 1. Verificou-se a precipitação de um sólido amarelo, que foi filtrado. Foram obtidos 253,6 g de R-(2-nitrofenilo)-N--acetilo-L-cisteína, que foi utilizada no passo seguinte sem mais qualquer tipo de purificação. E) 253,6 g do produto acima obtido foram adicionados com 825 mL de uma solução 18 molar de ácido sulfúrico em 3,3 L de água. A mistura reaccional foi aquecida a refluxo durante 40 minutos, e arrefecida de seguida a 0°C. Foram adicionados 1925 mL de uma solução aquosa de amoníaco. Aqui, precipitou um sólido, que foi filtrado e recristalisado em água. Foram obtidos 143 g de R-(2--nitrofenilo)-L-cisteína. F) 100 g de composto acima obtido e 62,2 g de carbonato de potássio foram dissolvidos em 7 L de água. De seguida, num período de 3 horas, foram adicionados em porções, 120 g de carbetóxiftalimida, sendo a mistura reaccional agitada por mais 5 horas, e de seguida deixada várias horas em repouso. O precipitado formado foi filtrado, sendo o filtrado adicionado de uma solução aquosa de ácido clorídrico concentrado de forma a ajustar o pH da solução entre um valor de 2 e 3. O filtrado agora precipitado foi filtrado, lavado várias vezes com água, e finalmente adicionado de 1 L de etanol ligeiramente quente (40°C). Após arrefecimento, filtrou-se o sólido formado, e secou-se ao ar. Foram obtidos 100 g de ácido 59 (2R)-3-(2-nitrofeniltio)-2-ftalimido-propanóico, que foi utilizado sem mais qualquer outro tipo de purificação. G) 100 g do produto acima obtido foram misturados com 1,5 L de metanol. A esta solução foram adicionados 0,8 g de catalisador de Pd/carvão (5%), sendo a mistura reaccional submetida a hidrogenação durante 5 horas. De seguida separou-se o catalisador e o solvente foi evaporado a pressão reduzida. Foram obtidos 71,6 g de ácido (2R)-3--(2-aminofeniltio)-2-ftalimido-propanóico na forma de um óleo amarelo acastanhado, que foi utilizado sem mais qualquer outro tipo de purificação. H) 71,6 g de produto acima obtido foi dissolvido em dimetilformamida. A esta solução foram adicionados 38,0 g de 1-[3-(dimetilamino)-propilo]-3-etilcarbodi-imida- -hidrocloreto, sendo a mistura reaccional agitada durante 3 horas à temperatura ambiente. De seguida, a mistura reaccional foi diluida com 1,5 L de acetato de etilo e extraída várias vezes com 1,5 L de uma solução aquosa 1 normal de hidrogenocarbonato de sódio. A fase orgânica foi depois lavada duas vezes com 2 00 mL de água (de cada vez), seca sobre sulfato de magnésio e evaporada a pressão reduzida. O resíduo foi purificado através de cromatografia em flash, em coluna, utilizando como eluente acetato de etilo/ciclo-hexano (1:1). Foram obtidos 46,3 g de (3R)-2,3-di-hidro-3-ftalimido-l, 5--benzotiazepina-4(5H)-ona.
I) A uma solução de 46,3 g do produto acima obtido em 300 mL de tetra-hidrofurano, foram adicionados 10,6 g de hidróxido de potássio pulverizado e 4,8 g de brometo de tetrabutilamónio. A mistura reaccional foi arrefecida a 0°C, tendo-lhe sido adicionada lentamente gota-a-gota 23,2 mL de éster tert- butílico do ácido bromo- 60 acético. A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente durante mais 3 horas. De seguida foi filtrada, sendo o filtrado evaporado a pressão reduzida até à secura. 0 resíduo foi retomado em éter di-etílico, e a fase etérea lavada com água e uma solução aquosa 1 molar de hidrogenosulfato de potássio, secando-se de seguida sobre sulfato de magnésio, e finalmente evaporou-se a pressão reduzida. 0 óleo resultante como material bruto, foi adicionado de acetato de etilo e éter di-etílico. 0 precipitado formado foi filtrado. Foram obtidos 34 g de (3R)-5-(tert-butóxicarbonilmetilo)-2,3-di-hidro-3--ftalimido-1,5-benzotiazepina-4(5H)-ona na forma de um sólido. Após concentração das águas mães a pressão reduzida, obtiveram-se de novo mais 25 g de produto na forma de um óleo ligeiramente impuro. Valor da rotação óptica é de [α]20ΰ = -146° (c= 0,8 em diclorometano) . J) 2 g do produto acima obtido foram adicionados de 7,5 mL de etanolamina, sendo a mistura agitada 10 minutos a 80°C. De seguida, foi removida a fonte de calor, e agitou-se por mais 3 0 minutos. Para o tratamento da mistura reaccional, esta foi misturada com 70 mL de uma solução aquosa a 5% de cloreto de sódio, sendo esta mistura extraída com tolueno. A fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio e evaporada à secura a pressão reduzida. Obtiveram-se 1,46 g de produto bruto, contendo ainda tolueno, de éster tert-butílico de ácido (3R)-3 amino-4-oxo-3,4-di-hidro-l,5-benzotiazepina—5(2H)-acético na forma de um sólido contendo tolueno. K) A 100 mL de diclorometano seco foram adicionados 1,45 g de produto acima obtido, 1,75 g de derivado do ácido ciclopentanóico obtido de acordo com o Exemplo C), 0,70 g
de hidróxibenzotriazolo e 1,50 mL de N-metilmorfolina. A mistura reaccional foi então arrefecida a 0°C, 61 Γ g sendo-lhe adicionada 1,76 g de l-etilo-3-(3-dimetilaminopropilo)—carbodi-imida-hidrocloreto, submetendo-se depois a mistura reaccional a uma agitação durante 5 horas à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, esta foi adicionada de uma solução aquosa de 1 molar de hidrogenosulfato de potássio, sendo a fase orgânica separada e lavada com uma solução saturada de hidrogenocarbonato de potássio e solução aquosa de cloreto de sódio, secando-se finalmente sobre sulfato de sódio antes de se proceder à evaporação a pressão reduzida. 0 produto bruto assim obtido, foi purificado por cromatografia em flash em coluna, utilizando como eluente n-hexano/acetato de etilo. Foram obtidos 1,9 g de composto em titulo na forma de um óleo.
Espectros de IR-infra-vermelho (na forma de filme): 3366 cm"1, 3059 cm'1, 2969 cm'1, 2874 cm'1, 1727 cm'1, 1657 cm"1, 1505 cm"1.
Exemplo 13 Ácido (3R)—3—{1—[2'-carbóxi-4'-(4-fluorofenóxilo)-butilo]--ciclopentano-l-carbonilamino}-4-ΟΧΟ-3,4-di-hidro-l,5--benzotiazepina-5(2H)—acético 1,9 g de éster tert-butilico do ácido (3R)-3-{1-[2(tert— butóxicarbonilo)-4'-(4-fluorofenóxílo)-butilo]-ciclopentano--1-carbonilamino}-4-ΟΧΟ-3,4-di-hidro-l,5-benzotiazepina--5(2H)—acético (preparado de acordo com o exemplo 12) foram hidrolisados de acordo com o método descrito no Exemplo 6 com ácido trifluoro-acético. A mistura reaccional foi tratada de acordo com o descrito para o exemplo 6. Foram obtidos 0,56 g de produto em titulo na forma de um sólido amorfo, com um ponto de fusão de 90-94°C. 62 i__ò }==2fc»-
Exemplo 14 Éster tert-butilico do ácido (3R)-3-{1-[2'-(tert- -butóxicarbonilo)-5'-(3,4-dimetóxifenilo)-pentilo]--ciclopentano-l-carbonilamino}-4-OXO-3, 4-di-hidro-l, 5--benzotiazepina-5(2H)—acético A) 6,7 g de trifenilfosfina foram dissolvidos em 200 mL de acetonitrilo. Após arrefecimento da solução a 0°C, adicionaram-se gota-a-gota 1,3 mL de bromo. O banho de arrefecimento foi então afastado, tendo sido adicionado gota-a-gota uma solução de 5 g de 3-(3,4-dimetóxifenilo)--1-propanol em 80 mL de acetonitrilo. A mistura reaccional foi de seguida aquecida a refluxo, onde com auxilio de uma remoção de água durante 6 horas, foi possivel retirar 10 mL de destilado, sendo esta acrescentada de acetonitrilo fresco. Para o tratamento da solução obtida, o solvente foi removido a pressão reduzida e o resíduo resultante retomado em éter di--etílico e filtrado. O filtrado foi concentrado a pressão reduzida e purificado por cromatografia em flash em coluna utilizando uma mistura de ciclo-hexano/éter tert--butilmetílico (7:2) como elunete. Foram obtidos 5,5 g de -3-(3,4-dimetóxifenilo)-1-bromo-propano na forma de um óleo incolor. B) 5,5 g do produto acima obtido, foram transformados, de acordo com o método descrito em 5A), com 3,8 mL de éster tert-butilico do ácido dimetilfosfono-acético. A mistura reaccional foi tratada de acordo com o descrita para o Exemplo 5A) . Foram obtidos 6,1 g de éster tert-butilico do ácido 4-(3,4-dimetóxifenilo)-2-(dimetilfosfono)--valérico na forma de óleo incolor. C) 6 g do produto acima obtido foram transformados de acordo 63 cora o método descrita em 5B) com paraformaldeido. A mistura reaccional foi tratada de acordo com o Exemplo 5B). O produto assim obtido foi purificado por cromatografia em flash em coluna utilizando éter tert--butilmetílico/ciclo-hexano (1:3) como eluente. Foram obtidos 3,4 g de éster tert-butílico do ácido 1-[3-(3,4--dimetóxifenilo)-propilo]-acrílico na forma de óleo. D) 3,4 g de produto acima obtido foi transformado de acordo com o método descrito em 5C) com 1,3 mL de ácido ciclopentanóico. A mistura reaccional foi tratada de acordo com o método descrito em 5C) . 0 produto bruto foi purificado por cromatografia em flash em coluna utilizando acetato de etilo/ciclo-hexano (1:3) como eluente. Foram obtidos 2,5 g de ácido l-[2-(tert--butóxicarbonilo)-5-(3,4-dimetóxifenilo)-pentilo]--ciclopentanóico na forma de óleo.
E) 2,5 g do produto acima obtido foram dissolvidos em 50 mL de acetonitrilo. A uma temperatura de 0°C e sob ausência de humidade, foram adicionados a esta mistura sucessivamente 4,2 mL de di-isopropil-etilamina, 1,7 g de iodeto de 2-cloro-l-metilpiridinio e 2,5 g de éster tert--butílico de ácido (3R)-3-amino-4-oxo-3,4-di-hidro-l,5--benzotiazepina-5(2H)-acético (preparado de acordo com o exemplo 12 J) . A mistura reaccional foi agitada ainda durante 30 minutos a 0°C e 2 horas à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, esta foi evaporada à secura a pressão reduzida, sendo o resíduo resultante retomado em diclorometano. A solução foi agitada de seguida com uma solução aquosa diluida de ácido clorídrico e depois com água. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída 2 vezes com diclorometano. De seguida, as fases orgânicas reunidas 64 p L·, ^^ foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas a pressão reduzida. Como resíduo foram obtidos 3 g de composto em título na forma de um óleo.
Cromatografia em camada delgada em sílica-gel: Rf = 0,4 (Eluente Ciclo-hexano/acetato de etilo 1:1)
Exemplo 15 Ácido (3R)—3—{1—[2'-carbóxi-5'-(3,4-dimetóxifenilo)-pentilo]--ciclopentano-l-carbonilamino}-4-oxo-3,4-di-hidro-l,5--benzotiazepina-5(2H)—acético 3 g de éster tert-butílico do ácido (3R)-3-{1-[2'-(tert--butóxicarbonilo)-5"-(3,4-dimetóxifenilo)-pentilo]--ciclopentano-l-carbonilamino}-4-oxo-3,4-di-hidro-l,5--benzotiazepina-5(2H)—acético (preparado de acordo com o Exemplo 14) foram dissolvidos em 20 mL de diclorometano. A esta solução foram adicionados 3 mL de ácido trifluoro--acético, sendo a mistura agitada 2 dias à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, esta foi evaporada a pressão reduzida. Para se efectuar a total remoção do ácido trifluoro-acético, o resíduo foi lavado várias vezes com 2 mL de tolueno e novamente evaporada. O produto bruto obtido foi submetido a cromatografia em flash em coluna de sílica gel para ser purificado, onde se utilizou como eluente diclorometano/acetato de etilo 1:1 e de seguida acetato de etilo puro. Depois de se proceder à concentração do eluato a pressão reduzida, foram obtidos 1,26 g de produto em título na forma de um sólido amorfo.
Espectro de IR-infra-vermelho em pastilhas de KBr: 3365 cm'1, 2942 cm"1, 1726 cm-1, 1652 cm”1 65
V
Exemplo 16 Éster benzílico do ácido 3-{1-[2'-tert-butóxicarbonilo)-4'--fenilbutilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l—acético A) 10,5 g de éster tert-butílico do ácido 3-amino-2,3,4,5- -tetra-hidro-2-oxo-1H-1-benzazepina-1-acético (preparado de acordo com o Exemplo II), 8,25 g de ácido p--toluenosulfónico-hidratado, e 20,1 mL de álccol benzílico foram adicionados a 174 mL de tolueno. A mistura reaccional foi aquecida durante 4 horas com remoção simultânea de água, formando-se lentamente um precipitado. De seguida, o tolueno foi removido a pressão reduzida, e o resíduo agitada posteriormente com éter tert-butilmetílico e filtrado. 0 resíduo sólido assim obtido foi dissolvido em diclorometano, sendo adicionada à solução uma solução aquosa de carbonato de sódio, sob arrefecimento, de forma a torná-la alcalina. A fase de diclorometano foi separada, lavada com água e seca sobre sulfato de sódio. 0 produto bruto obtido foi purificado por recristalisação em éter tert-butilmetílico. Foram obtidos 8,2 g de éster benzílico de ácido 3-amino--2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l-acético com um ponto de fusão de 105 a 107°C. B) 12,8 g do produto acima obtido foi transformado com ácido 1-[2'-(tert—butóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo]--ciclopentano-1—carboxílico (preparação de acordo com o Exemplo 5C) ) de acordo com o método descrito no Exemplo 3C). A mistura reaccional foi tratada de acordo com o descrita para o Exemplo 3C. Foram obtidos 19,3 g de composto em título com um ponto de fusão de 118 a 123°C. 66 1/
Exemplo 17 Éster benzílico do ácido 3-[1-(2'-carbóxi-4'- -fenilbutilo)-ciclopentano-l-carbonilamino]-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l—acético 15 g de éster benzílico do ácido 3—{1—[2'-tert- -butóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo]-ciclopentano-1--carbonilamino}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina--1—acético (preparação de acordo com o Exemplo 16) foram transformados com 56 mL de ácido trifluoro-acético de acordo com o método descrita no Exemplo 6. A mistura reaccional foi tratada de acordo com o descrita no Exemplo 6 sendo o produto bruto recrístalisado em éter tert-butilmetílico. Foram obtidos 13,1 g de composto em título com um ponto de fusão de 86 a 90°C.
Exemplo 18 Éster benzílico do ácido 3—{1—[2'-tert- -butilcarbonilóximetóxicarbonilo)-4'- -fenilbutilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l—acético 2 g de éster benzílico do ácido 3-[1-(2'-carbóxi-4'- -fenilbutilo)-ciclopentanò-l-carbonilamino]-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l—acético (preparado de acordo com o Exemplo 17) foram dissolvidos na ausência de humidade em 20 mL de diclorometano seco. A esta solução foram adicionados 0,46 mL de trietilamina e 0,1 g de dimetilaminopiridina. Sob arrefecimanto em gelo foi adicionada gota-a-gota uma solução de 0,5 g de éster metílico do ácido cloropivalínico em 3 mL de diclorometano seco. A mistura reaccional foi de seguida deixada em agitação durante 2 dias à temperatura ambiente. Para o tratamento da mistura reaccional, lançou-se a mistura em água, separou-se a fase 67 11
V 11 V ] . I____
t orgânica, e lavou-se com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio e de seguida com água, secou-se de seguida em sulfato de sódio e concentrou-se a pressão reduzida. Como resíduo, resultou um produto bruto que foi purificado por cromatografia em flash em coluna com 150 g de sílica-gel, sendo utilizado como eluente uma mistura de n-hexano/acetato de etilo com uma composição de 7:3, sendo depois utilizada uma composição de 1:1. Foram obtidos 1,1 g de éster benzílico do ácido 3-{1-[2'-(pivaloílóximetóxicarbonilo)-4'- -fenilbutilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l—acético na forma de uma espuma sólida com uma gama de temperaturas de fusão de 71-7 8 °C.
Exemplo 19 Ácido 3-{1-[2'-pivaloílóximetóxicarbonilo)-4'- -fenilbutilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-ΙΗ-1-benzazepina-1—acético 1,0 g de éster benzílico do ácido 3-{1-[2'-tert- -butilcarboniloximetóxicarbonilo)-4'- -fenilbutilo]-ciclopentano-l-carbonilamino}-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l—acético (preparado de acordo com o exemplo 18) foram dissolvidos em 100 mL de etanol. A solução foi adicionada de 0,5 g de catalisador de paládio/carvão (5%). A mistura foi de seguida hidrogenada com uma pressão de hidrogénio de 5 bar durante 3 horas. Para o tratamento da mistura reaccional, o catalisador foi filtrado, sendo a solução de filtrado concentrada a pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi levado à secura a 80°C a pressão reduzida. Foram obtidos 0,7 g de composto em título na forma de um produto vítrico.
Espectro de IR-infra-vermelho (em pastilhas de KBr): 3410 cm-1, 1750 cm"J, 1660 cm-1. 68 i Γ
De acordo com os métodos descritos nos Exemplos anteriores, foram preparados os compostos da Tabela I a partir de compostos de fórmula I.
Ex. Nr. -R1 R'1 RJ R’ R5 A Configuração Estérea C-sei C-rin Observações Pf=ponto de fusão em °C Espectros de IS bandas em cm’1 20 Phe-CH2-CH2- H H H H ch2 rac rac ac, esp, pf:7S-95 21 CH3-C- (CH2) 2-o-ch2- H H ri H ch2 rac rac ac, ol, IR:3400, 1730, 1660 2950, 22 CH<.-C-(CH2)2-0-CH2- K H H H Ci-2 S-k S-k ac, esp, pf:60-66 23 Phe-CH2-CH2- H H u H ch2 rac S-k Ac, esp, pf: a partir de 113 24 r.ap-CH2-CH2- K H H H CIÍ2 rsc rac ac, ol, IR: 294 S, 1632, 1195 1726, 25 phe-O- (CH2) j H H H H ch2 rac rac ac, ol, IR: 2951, 1634, 1241 1726, 26 4 - F-phe-O-CH^-CHs- K K H H Cl Ta rac rac ac, pf:136-138 27 one-CHí- H K H H CI-12 rac rac ac, pf:216-217 28 phe-CH2-CH2- H H H H 0 R-k S-k a c, o .1 , IR: 3 4 0 0, 1720, 1645 2940, 28 ohe-CH2- H H H M ch2 rac S-k ac, pf:J 16-117 33 4-CH3-phe-CH2- H H H H ch2 rac ra c ac, pí:223-225 31 4- F-phe-0-CH2-CH2- Cl Cl H H s rac R-k ac, pf:98-102 32 4-CH2C-phe- !CH2) 3- H I-l [: H s rac R-k ac, ol, IR:3366, 172b, 1653 2943, 33 Phe-CH2“CH2" H H i ci-:.-, i 3c H ch2 rac rac ac, pf:195-196 34 Phe-CH2-CH2- H H Ind H ch2 rac rac ac, pf: 1.4 6-14 9 35 ?he-CH2-CK2- H H di ox H C:l2 rac rac ac, ol, IR:3410, i73b, 1660 2950, 36 Phe-CH2-CH2- H u Phe H ch2 rac rac ac, pf:108-lll 37 Phe-CH2-CM2- H H H H ch2 R-k S-k Na,pf>270 38 nap-CH2- II H H H ch2 rac rac ac, pf:1165-170 39 nap-CH2-CH2- H H H H ch2 R-k S-k ac, esp, IR:3402, 1723, 1663 2949, 40 nao-CH2-CH2- H H C2H5 H ch2 R-k S-k phe=fenilo, nap=a-naftilo, Ind=5-indanilo, diox=(2,2--dimetilo-1,3-dioxolano-4-ilo)-metilo, C-sei=centro quiral na cadeia lateral, C-rin=centro quiral no anel, rac= racémico, R-k=configuração R, S-k= configuração S, esp=espuma resinica, ol=óleo, ac=ácido livre, Na=sal disódico
Exemplo I
Comprimidos contendo ácido (3S,2'R)-3-{1-[2'- -(etóxicarbonilo)-4'-fenilbutilo]-ciclopentano-1--carbonilamina}-2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina--1-acético
Prepararam-se comprimidos com a seguinte composição por comprimido: 69
2 0 mg 60 mg 135 mg 6 mg Ácido (3S,2'R)-3-{l-[2'-(etóxicarbonilo) -4'-fenilbutilo]-ciclopentano-1--carbonilamina}-2,3,4,5-tetra--hidro-2-oxo-1H-1-benzazepina-1-acético Amido de milho Lactose
Gelatina (numa solução a 10%) 0 composto activo, o amido de milho e a lactose foram misturadas com a solução a 10% de gelatina formando uma mistura viscosa. Esta pasta foi fragmentada, e o granulado resultante colocado num recipiente adequado, sendo seco a 45°C. 0 granulado seco foi conduzido a uma máquina para fragmentação sendo posteriormente misturado com os seguintes agentes auxiliares:
Talco 5 mg
Estearato de magnésio 5 mg
Amido de milho 9 mg sendo finalmente transformados por compressão em comprimidos de 240 mg.
Exemplo II
Soluções injectáveis contendo ácido (3S,2'R)—3—[1—(2'— -carbóxi-4'-fenilbutilo)-ciclopentano-l-carbonilamina]--2,3,4,5-tetra-hidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l-acético
Prepararam-se soluções injectáveis com a seguinte composição por 5 mL de preparação Ácido (3S,2'R)-3-[1-(2'-carbóxi--4'-fenilbutilo)-ciclopentano-1--carbonilamina]-2,3,4,5-tetra- hidro- 70 1 t -2-oxo-lH-l-benzazepina-l-acético 10 mg Na2HP04 . 7H20 43,24 mg NaH2P04 . 2H20 1,12 mg NaCl 30,0 mg Água purificada 4948,0 mg
Os compostos sólidos foram dissolvidos em água, sendo a solução esterilizada e colocados 5 mL da solução em ampolas. 71 t
O (CHj)4 R^OOC-CH—CH^-C^CO—NK-\_ N-CHa-COOR" (CH2)4
R'
R4aOOC-CH-CH2-C—COOH (CH2)4
R OOC-CH-CH2-C—COOH (CH2)4
R^OOC-CH-Chfe-C—COOH
..4a
(CH2)4 O
R OOC-CH—CH2—C-CO—N
72
IV u
r6-oh V r6-x Va R4aOOC-C=CH2 Vl (CH2)4
H-C—COOH R4 a OOC— CH2—CH2— Y VIII (CH2)4 ( \ , \ ) FTOOC—CHj-CHf- C— -COOH 0) 1 X Xa R1b-X Xb 73 !
^13 /0r7 ROOC-Ch-^or8
XI
4a P* R4aOOC—CH2-ρΓ 8 ii^OR
XII 1 a
R4aOOC— CH-COOH
XIII R4aOOC —CH2—COOR9
XIV R1a R4aOOC—CK-COOR9
XV
XVI
XV la 74
XVIb X-Chf-COOR53
XVII
XVIII
XIX
-R
-R
XX
NOH 75
XXI
NR R
XXV I a
HO-C-CH-CHo-A-H
II 0
Lisboa, 19 de Dezembro de 2000 0 AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL,
'V—T 76

Claims (8)

  1. V REIVINDICAÇÕES 1. Compostos de fórmula geral I
    em que R: significa um grupo Ci-C4-alcóxilo-Ci-C4- alquilo, cujo grupo Ci-C4-alcóxilo é substituído por um grupo CT-C^-alcóxilo, ou por um grupo fenilo-Ci-C4—alquilo ou por um grupo fenilóxilo-Ci-C4-alquilo que eventualmente pode ser substituído no anel fenílico por Ci-C4-alquilo, Cx-C4-alcóxilo ou halogénio, ou um grupo naftilo-Ci-C4-alquilo, A significa CH2, 0 ou S, R‘ significa hidrogénio ou halogénio, RJ significa hidrogénio ou halogénio R1 2 3 significa hidrogénio ou um grupo formador de um grupo éster biolábil e R5 significa hidrogénio ou um grupo formador de um grupo éster biolábil e sais fisiologicamente compatíveis com os ácidos de fórmula I. 1 1 Compostos de acordo com a reivindicação 1, caracterizados 2 por R3 e/ou Rb significarem grupos formadores de grupos 3 éster biolábeis.
  2. Γ\l u w. t
  3. 3. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 2, caracterizados por os grupos éster biolábeis serem grupos Ci-C^-alquilo, grupos fenilo ou grupos fenilalquilo, em especial fenilo, benzilo ou indanilo, que podem estar eventualmente substituídos no anel de fenilo por Ci-C4-alquilo ou por uma cadeia Cs-Cj-alquílica ligada a dois carbonos vizinhos, por serem grupos dioxolanilmetilo substituídos no anel de dioxolano eventualmente por Ci-C,:-alquilo, em especial (2,2--trimetil-1,3-dioxolano-4-ilo)-metilo ou grupos C2-Cs--alcanoilóximetilo substituídos eventualmente no grupo óximetilo através de C-.-Cí-alquilo.
  4. 4. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 3, caracterizados por R"1 significar biolábil e Rb significar hidrogénio. um grupo éster
  5. 5. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 4, caracterizados por A significar CH2.
  6. 6. Compostos de acordo com a reivindicação 5, caracterizados por R1 significar um grupo fenentilo ou um grupo naftiletilo e R2 significar hidrogénio.
  7. 7. Medicamentos, contendo uma quantidade farmacologicamente activa de um composto de acordo com a reivindicação 1, e agentes adjuvantes e/ou veiculares habituais.
  8. 8. Processo para a preparação de compostos de fórmula geral I
    2
    em que R‘ significa um grupo Ci-C4-alcóxilo-Ci-C4-alquilo, cujo grupo C:-C4-alcóxilo é substituído por um grupo Ci-Cj-alcóxilo, ou por um grupo fenilo-Ci-Cí--alquilo ou por um grupo f enilóxilo-Ci-C,j-alquilo que eventualmente pode ser substituído no anel fenílico por Ci-C<-alquilo, Ci-C4-alcóxilo ou halogénio, ou um grupo naf tilo-Ci-C4-alquilo, A significa CH2, O ou S, R2 significa hidrogénio ou halogénio, R3 significa hidrogénio ou halogénio R/: significa hidrogénio ou um grupo formador de um grupo éster biolábil e R5 significa hidrogénio ou um grupo formador de um grupo éster biolábil e sais fisiologicamente compatíveis com os ácidos de fórmula I, caracterizado por se fazer reagir um ácido de fórmula II
    II o em que R1 possui os significados acima mencionados e R4a significa um grupo de protecção de ácidos, ou por se fazerem reagir os seus derivados de ácidos com aminas de fórmula geral III 3
    em que R2, R3 e A possuem os significados acima mencionados e R5a significa um grupo de protecção de ácidos, obtendo-se as amidas de fórmula IV
    em que R1, R2 , RJ, R4a, Rba e A possuem os significados acima mencionados, e onde nos compostos de fórmula IV, os grupos de protecção de ácidos R4a e R5a se não significarem desejavelmente os grupos formadores de éster biolábeis, possam ser hidrolisados em simultâneo ou por uma ordem preferida e se assim se desejar, que esterifiquem os grupos ácidos livres com álcool de fórmula geral V ou um derivado correspondente reactivo de fórmula geral Va R6-OH (V) r6-x (Va) em que R° significa um grupo formador de éster biolábil, e X um grupo reactivo hidrolisável e 4 em que os ácidos obtidos de fórmula I, podem ser transformados desejavelmente em sais fisiologicamente compatíveis, ou em que os sais de ácidos de fórmula I podem ser transformados em ácidos livres. Lisboa, 19 de Dezembro de 2000 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL
    \ 5
PT96104265T 1995-03-23 1996-03-18 Derivados n-acido acetico de benzazepina benzoxazepina e benzotiazepina bem como processo para a sua preparacao e medicamentos que os contem PT733642E (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19510566A DE19510566A1 (de) 1995-03-23 1995-03-23 Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PT733642E true PT733642E (pt) 2001-03-30

Family

ID=7757471

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT96104265T PT733642E (pt) 1995-03-23 1996-03-18 Derivados n-acido acetico de benzazepina benzoxazepina e benzotiazepina bem como processo para a sua preparacao e medicamentos que os contem

Country Status (25)

Country Link
US (1) US5677297A (pt)
EP (1) EP0733642B1 (pt)
JP (1) JP3942670B2 (pt)
KR (1) KR100482499B1 (pt)
CN (1) CN1059436C (pt)
AR (1) AR023289A1 (pt)
AT (1) ATE197801T1 (pt)
AU (1) AU701271B2 (pt)
CA (1) CA2172354C (pt)
CZ (1) CZ289245B6 (pt)
DE (2) DE19510566A1 (pt)
DK (1) DK0733642T3 (pt)
DZ (1) DZ2003A1 (pt)
ES (1) ES2152444T3 (pt)
GR (1) GR3035410T3 (pt)
HU (1) HU226064B1 (pt)
IL (1) IL117265A (pt)
NO (1) NO305904B1 (pt)
NZ (1) NZ286224A (pt)
PL (1) PL184336B1 (pt)
PT (1) PT733642E (pt)
RU (1) RU2159768C2 (pt)
SK (1) SK281079B6 (pt)
UA (1) UA44712C2 (pt)
ZA (1) ZA961243B (pt)

Families Citing this family (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19510566A1 (de) * 1995-03-23 1996-09-26 Kali Chemie Pharma Gmbh Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
DE19638020A1 (de) * 1996-09-18 1998-03-19 Solvay Pharm Gmbh Die gastrointestinale Durchblutung fördernde Arzneimittel
DE19750002A1 (de) * 1997-11-12 1999-05-20 Solvay Pharm Gmbh Phosphonsäure-substituierte Benzazepinon-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
FR2781483A1 (fr) * 1998-07-21 2000-01-28 Hoechst Marion Roussel Inc Derives de thioazepinone, procede de preparation et intermediaires de ce procede, application a titre de medicament et compositions pharmaceutiques les renfermant
DE19906310A1 (de) * 1999-02-16 2000-08-17 Solvay Pharm Gmbh Arzneimittel zur Behandlung von Bluthochdruck
DE19932555A1 (de) * 1999-07-13 2001-01-18 Solvay Pharm Gmbh Arzneimittel mit protektiver Wirkung gegen oxidativ-toxische und insbesondere gegen kardiotoxische Substanzen
US20020052370A1 (en) * 2000-07-06 2002-05-02 Barber Christopher Gordon Cyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase
PL367093A1 (en) * 2001-05-18 2005-02-21 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Use of compounds with combined nep/mp-inhibitory activity in the preparation of medicaments
JP4521185B2 (ja) * 2001-09-10 2010-08-11 テイボテク・フアーマシユーチカルズ・リミテツド ヘキサヒドロ−フロ[2,3−b]フラン−3−オールの製造法
KR100710547B1 (ko) * 2002-01-02 2007-04-24 에스케이 주식회사 (s)-3-아미노-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-벤자제핀-1-아세트산 및 이의 에스테르 화합물의 제조방법
EP1468010A1 (en) 2002-01-16 2004-10-20 Solvay Pharmaceuticals B.V. Solid salts benzazepine compounds and their use in the preparation of pharmaceuticals compounds
AR038681A1 (es) * 2002-02-14 2005-01-26 Solvay Pharm Bv Formulacion oral de solucion solida de una sustancia activa pobremente soluble en agua
US6842358B2 (en) * 2002-08-01 2005-01-11 Netlogic Microsystems, Inc. Content addressable memory with cascaded array
US7045653B2 (en) * 2002-12-23 2006-05-16 Pfizer, Inc. Pharmaceuticals
KR100710548B1 (ko) * 2002-12-26 2007-04-24 에스케이 주식회사 (s)-3-아미노-2,3,4,5-테트라히드로-2-옥소-1H-1-벤자제핀-1-아세트산 및 이의 에스테르 화합물의 제조방법
US7427611B2 (en) 2003-09-26 2008-09-23 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Amidomethyl-substituted 1-(carboxyalkyl)-cyclopentyl-carbonylamino-benzazepine-N-acetic acid compounds, process and intermediate products for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
DE10344848A1 (de) * 2003-09-26 2005-04-14 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Amidomethyl-substituierte l-(Carboxyalkyl)-cyclopentylcarbonylamino-benzazepin-N-essigsäurederivate, Verfahren und Zwischenprodukte zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enhaltende Arzneimittel
US7452875B2 (en) 2003-09-26 2008-11-18 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Amidomethyl-substituted 1-(carboxyalkyl) cyclopentyl-carbonylamino-benzazepine-N-acetic acid compounds, process and intermediate products for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
SA04250283B1 (ar) * 2003-09-26 2008-05-26 سولفاي فارماسيتيكالز جي أم بي أتش مشتقات من amidomethy1-substituted1-(carboxyalkyl)-cyclopentylcarbonylamino-benzazepine-N-acetic acid
US7262184B2 (en) 2003-09-26 2007-08-28 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Amidomethyl-substituted 1-(carboxyalkyl) cyclopentyl-carbonylamino-benzazepine-N-acetic acid compounds, process and intermediate products for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
CN100566719C (zh) * 2003-11-18 2009-12-09 索尔瓦药物有限公司 用于治疗尤其是在糖尿病患者中的肾的功能障碍、疾病或者病症的药物组合物
WO2005067937A1 (en) * 2004-01-12 2005-07-28 Solvay Pharmaceuticals B.V. Neutral endopeptidase (nep) and human soluble endopeptidase (hsep) inhibitors for prophylaxis and treatment of neurodegenerative disorders
US7232813B2 (en) * 2004-01-12 2007-06-19 Solvay Pharmaceuticals B.V. Neutral endopeptidase (NEP) and human soluble endopeptidase (hSEP) inhibitors for prophylaxis and treatment of neuro-degenerative disorders
US20050267072A1 (en) * 2004-05-14 2005-12-01 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions containing dually acting inhibitors of neutral endopeptidase for the treatment of sexual dysfunction
US20050267124A1 (en) * 2004-05-14 2005-12-01 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions comprising NEP-inhibitors, inhibitors of the endogenous producing system and PDEV inhibiitors
WO2006000564A1 (en) * 2004-06-23 2006-01-05 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions comprising nep-inhibitors, inhibitors of the endogenous endothelin producing system and at1-receptor antagonists
US20050288272A1 (en) * 2004-06-23 2005-12-29 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions comprising NEP-inhibitors, inhibitors of the endogenous endothelin producing system and AT1 receptor antagonists
EP1827448A1 (en) 2004-12-15 2007-09-05 Solvay Pharmaceuticals GmbH Pharmaceutical compositions comprising nep-inhibitors, inhibitors of the endogenous endothelin producing system and hmg coa reductase inhibitors
TW200633713A (en) * 2004-12-23 2006-10-01 Solvay Pharm Bv Oral immediate release formulation of a poorly water-soluble active substance
US20060159748A1 (en) * 2004-12-23 2006-07-20 Rajesh Jain Oral immediate release formulation of a poorly water-soluble active substance
US20060205625A1 (en) * 2005-02-18 2006-09-14 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions comprising NEP-inhibitors, inhibitors of the endogenous endothelin producing system and diuretics
WO2007102171A2 (en) * 2006-03-07 2007-09-13 Panacea Biotec Ltd Novel salts of 1h-1-benzazepine-1-acetic acid, their preparation and pharmaceutical composition
US20070292503A1 (en) * 2006-06-16 2007-12-20 Gorissen Henricus R Oral pharmaceutical composition of poorly water-soluble active substance
US20070299054A1 (en) * 2006-06-22 2007-12-27 Rajesh Jain Oral pharmaceutical composition of a poorly water-soluble active agent
EP2234608A2 (en) 2007-12-11 2010-10-06 Viamet Pharmaceuticals, Inc. Metalloenzyme inhibitors using metal binding moieties in combination with targeting moieties
WO2010132127A1 (en) 2009-05-13 2010-11-18 Intra-Cellular Therapies, Inc. Organic compounds
AR079059A1 (es) 2009-12-07 2011-12-21 Abbott Healthcare Products Bv Acido ((3s)-3-(((1-(((2r)-2-carboxi-4-(1-naftil) butil) ciclopentil)-carbonil) amino )-2-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1h-1-benzazepin-1-il) acetico cristalino, su preparacion y uso
KR20180094131A (ko) 2010-09-01 2018-08-22 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 신장 손상을 갖는 개체에 대한 로카세린의 투여
SG10201506874UA (en) 2010-09-01 2015-10-29 Arena Pharm Inc Modified-release dosage forms of 5-ht2c agonists useful for weight management
US8993631B2 (en) * 2010-11-16 2015-03-31 Novartis Ag Method of treating contrast-induced nephropathy
MX354476B (es) 2010-12-15 2018-03-07 Theravance Inc Inhibidores de neprilisina.
AU2011343899B2 (en) 2010-12-15 2016-06-30 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
ES2564275T3 (es) 2011-02-17 2016-03-21 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Derivados aminobutíricos sustituidos como inhibidores de neprilisina
WO2012112742A1 (en) 2011-02-17 2012-08-23 Theravance, Inc. Substituted aminobutyric derivatives as neprilysin inhibitors
CA2835216A1 (en) 2011-05-31 2012-12-06 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
US8686184B2 (en) 2011-05-31 2014-04-01 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
CN103582630B (zh) 2011-05-31 2016-08-17 施万生物制药研发Ip有限责任公司 脑啡肽酶抑制剂
TWI560172B (en) 2011-11-02 2016-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
CA2871292A1 (en) 2012-05-31 2013-12-05 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Nitric oxide donor neprilysin inhibitors
US8871792B2 (en) 2012-06-08 2014-10-28 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
AU2013271537B2 (en) 2012-06-08 2017-05-11 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
JP6092390B2 (ja) 2012-08-08 2017-03-08 セラヴァンス バイオファーマ アール&ディー アイピー, エルエルシー ネプリライシン阻害剤
WO2014127331A1 (en) 2013-02-17 2014-08-21 Intra-Cellular Therapies, Inc. Novel uses
EP2964616B1 (en) 2013-03-05 2017-05-03 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Neprilysin inhibitors
AU2015211041B2 (en) 2014-01-30 2018-11-08 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc 5-biphenyl-4-heteroarylcarbonylamino-pentanoic acid derivatives as neprilysin inhibitors
CA2934936A1 (en) 2014-01-30 2015-08-06 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
JP6591530B2 (ja) 2014-08-07 2019-10-16 イントラ−セルラー・セラピーズ・インコーポレイテッドIntra−Cellular Therapies, Inc. 有機化合物
KR102345318B1 (ko) 2014-12-02 2021-12-31 현대모비스 주식회사 에이밍 보정 구조를 구비한 차량용 램프
US9433598B2 (en) 2015-02-11 2016-09-06 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc (2S,4R)-5-(5′-chloro-2′-fluorobiphenyl-4-yl)-4-(ethoxyoxalylamino)-2-hydroxymethyl-2-methylpentanoic acid
JP6714009B2 (ja) 2015-02-19 2020-06-24 セラヴァンス バイオファーマ アール&ディー アイピー, エルエルシー (2r,4r)−5−(5’−クロロ−2’−フルオロビフェニル−4−イル)−2−ヒドロキシ−4−[(5−メチルオキサゾール−2−カルボニル)アミノ]ペンタン酸
CN105017154B (zh) * 2015-07-07 2017-10-10 浙江博聚新材料有限公司 一种3‑溴‑1,3,4,5‑四氢‑2h‑1‑苯并氮杂卓‑2‑酮制备方法
TWI731943B (zh) 2016-03-08 2021-07-01 美商施萬生物製藥研發Ip有限責任公司 結晶型(2s,4r)-5-(5’-氯-2’-氟-[1,1’-聯苯]-4-基)-2-(乙氧基甲基)-4-(3-羥基異㗁唑-5-甲醯胺基)-2-甲基戊酸及其用途
US10682354B2 (en) 2016-03-28 2020-06-16 Intra-Cellular Therapies, Inc. Compositions and methods
PL424453A1 (pl) * 2018-01-31 2019-08-12 Forty-Four Pharmaceuticals Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Sposoby zmniejszania szkodliwego działania niedoboru perfuzji narządów miąższowych przez inhibitory obojętnej endopeptydazy (NEP) i ludzkiej rozpuszczalnej endopeptydazy (hSEP)
JP7401442B2 (ja) 2018-01-31 2023-12-19 イントラ-セルラー・セラピーズ・インコーポレイテッド 新規使用
PL424452A1 (pl) 2018-01-31 2019-08-12 Forty-Four Pharmaceuticals Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością Inhibitory obojętnej endopeptydazy (NEP) i ludzkiej rozpuszczalnej endopeptydazy (hSEP) do profilaktyki i leczenia chorób oczu
US20230118503A1 (en) * 2020-07-19 2023-04-20 Christopher Turski NEUTRAL ENDOPEPTIDASE (NEP) AND HUMAN SOLUBLE ENDOPEPTIDASE (hSEP) INHIBITORS FOR PROPHYLAXIS AND TREATMENT OF EYE DISEASES

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS608283A (ja) * 1983-06-29 1985-01-17 Mitsui Toatsu Chem Inc ベンゾチアゼピン誘導体およびその製造方法
AU657793B2 (en) * 1991-09-27 1995-03-23 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel 2-substituted indane-2-carboxyalkyl derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE
US5457196A (en) * 1991-09-27 1995-10-10 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. 2-substituted indane-2-carboxyalkyl derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE
RU2124503C1 (ru) * 1992-05-18 1999-01-10 И.Р.Сквибб энд Санз, Инк. Гетероциклические азотсодержащие производные карбоновой кислоты, способ их получения и фармацевтическая композиция
US5504080A (en) * 1992-10-28 1996-04-02 Bristol-Myers Squibb Co. Benzo-fused lactams
IT1266570B1 (it) * 1993-07-30 1997-01-09 Zambon Spa Derivati della propanammide n-eteroaril sostituiti utili nel trattamento delle malattie cardiovascolari
IT1266571B1 (it) * 1993-07-30 1997-01-09 Zambon Spa Derivati della beta-mercapto-propanammide utili nel trattamento delle malattie cardiovascolari
DE19510566A1 (de) * 1995-03-23 1996-09-26 Kali Chemie Pharma Gmbh Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel

Also Published As

Publication number Publication date
KR100482499B1 (ko) 2006-08-23
US5677297A (en) 1997-10-14
EP0733642B1 (de) 2000-11-29
PL184336B1 (pl) 2002-10-31
SK35496A3 (en) 1997-02-05
DE59606160D1 (de) 2001-01-04
ZA961243B (en) 1996-08-27
CN1147506A (zh) 1997-04-16
AU701271B2 (en) 1999-01-21
CZ289245B6 (cs) 2001-12-12
IL117265A0 (en) 1996-06-18
DE19510566A1 (de) 1996-09-26
AR023289A1 (es) 2002-09-04
JPH08269011A (ja) 1996-10-15
IL117265A (en) 2000-07-16
DK0733642T3 (da) 2001-01-15
CA2172354C (en) 2002-10-08
NO961181D0 (no) 1996-03-22
HU226064B1 (en) 2008-04-28
ATE197801T1 (de) 2000-12-15
KR960034178A (ko) 1996-10-22
JP3942670B2 (ja) 2007-07-11
RU2159768C2 (ru) 2000-11-27
PL313433A1 (en) 1996-09-30
UA44712C2 (uk) 2002-03-15
NO961181L (no) 1996-09-24
NO305904B1 (no) 1999-08-16
SK281079B6 (sk) 2000-11-07
CN1059436C (zh) 2000-12-13
HUP9600680A3 (en) 1998-07-28
ES2152444T3 (es) 2001-02-01
HU9600680D0 (en) 1996-05-28
DZ2003A1 (fr) 2002-07-20
EP0733642A1 (de) 1996-09-25
GR3035410T3 (en) 2001-05-31
CA2172354A1 (en) 1996-09-24
HUP9600680A2 (en) 1997-01-28
CZ86396A3 (en) 1996-10-16
NZ286224A (en) 1997-09-22
AU4821096A (en) 1996-10-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PT733642E (pt) Derivados n-acido acetico de benzazepina benzoxazepina e benzotiazepina bem como processo para a sua preparacao e medicamentos que os contem
EP1140918B1 (en) Thrombin inhibitors
US4513009A (en) Aminoacid derivatives and their therapeutic applications
US5380713A (en) Peptide aldehydes as antithrombotic agents
US5550131A (en) 2-piperazinone compounds and their use
US5416066A (en) 1,4-benzothiazepine derivatives
PT640617E (pt) Compostos azepino-(2,1-a)-isoquinolina substituidos
HU223752B1 (hu) A gasztrointesztinális keringést elősegítő gyógyászati készítmény
PT669936E (pt) Derivados de lactama biciclica de mercaptoacetilamida uteis como inibidores de encefalinase e de ace
US4912120A (en) 3,5-substituted 4,5-dihydroisoxazoles as transglutaminase inhibitors
US4970297A (en) Transglutaminase inhibitors
HU204539B (en) Process for producing oligopeptides containing cyclic proline-analogue amino-acids and pharmaceutical compositions contaiing them as active components
PT1430045E (pt) Derivados de pirano como inibidores de ace e nep
CA2221035A1 (fr) Inhibiteurs de tripeptidylpeptidases
EP1648924B1 (en) Dipeptide transglutaminase inhibitors and methods of using the same
US5644055A (en) Antihypertensive tricyclic azepine derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE
US6774110B2 (en) Orally available peptidic thrombin inhibitors
US5760285A (en) Phosphonyldipeptides useful in the treatment of cardiovascular diseases
JPH0987280A (ja) オキソピペラジン誘導体又はその塩
MXPA01006708A (en) Thrombin inhibitors
MXPA96003347A (en) Derivatives of 1,3,5,5-tetrahydro-benzo [c] azepin-3-ona mercaptoacetilamido novedosos, useful as inhibitors of encephalinase and convertible enzyme of angiotens
AU3006401A (en) Vla-4 integrin antagonists
JPH09221470A (ja) アジリジンジカルボン酸誘導体、その製造法および用途