PT1430045E - Derivados de pirano como inibidores de ace e nep - Google Patents

Description

1 ΡΕ1430045

DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE PIRANO COMO INIDORES DE ACE E NEP" A EP-A-0468 339 revela certos compostos como ini-bidores da actividade da prolil-endopeptidase, em particular o composto cloridrato do éster benzílico do composto 2-hidroxi-2-(pirrolidin-2-il)acetil]-D-leucilvalina e um cloridrato do éster benzílico do intermediário N-ben-ziloxicarbonilvalilvalil-[2-hidroxi-2-(pirrolidin-2-il)ace-til]-D-leucilvalina. A EP-A-0 468 339 não revela que tal inibidor da endopeptidase tenha também uma actividade inibidora da ACE. O presente invento está dirigido para novos inibidores da vasopeptidase descritos abaixo os quais são úteis como inibidores duais da enzima de conversão da angiotensina (ACE) e da endopetidase neutra (NEP, EC 3.4.24.11). Os compostos do invento são particularmente úteis para o tratamento e/ou prevenção de estados que respondem à inibição de ACE e NEP. Pode ser mostrado que os compostos do invento também inibem a enzima da conversão da endotelina (ECE) e são úteis para o tratamento e/ou prevenção de estados que respondem à inibição de ECE.

0 presente invento relaciona-se com os compostos de fórmula I inibidores duais de ACE e NEP ΡΕ1430045 2

t 0 H ϊ I* ? aík-R, R,S—C- k II —c— I í —MiimhHhC \ 1 1 1 D-N—CH—COOBj R ff) em que R representa hidrogénio, alquilo inferior, arilo carbociclico ou heterocíclico-alquilo inferior ou cicloalquil-alquilo inferior;

Ri representa hidrogénio, cicloalquilo, arilo carbociclico ou heterociclico, ou biarilo; alk representa alquileno inferior; R3 representa hidrogénio ou acilo; R4 representa oxacicloalquilo, (tia-, oxotia- ou diooxotia)-cicloalquilo, azacicloalquilo, ou oxacicloalquilo-, (tia-, oxotia- ou diooxotia)-cicloalquil- ou azacicloalquil-alquilo inferior;

Rs representa hidrogénio ou alquilo inferior;

Rg representa alquilo inferior, arilo carbociclico ou heterociclico, (aril carbociclico ou heterociclico)-alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquil-alquilo inferior, biarilo ou biaril-alquilo inferior; 3 ΡΕ1430045 R.7 representa alquilo inferior, (aril carbocí-clico ou heterocíclico)-alquilo inferior, cicloalquil-alquilo inferior ou biaril-alquilo inferior; ou R6 e R7, juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam cicloalquilideno de 3 a 10 membros o qual pode ser substituído por alquilo inferior ou arilo-alquilo inferior ou pode ser fundido com um anel carbocíclico de 5 a 7 membros saturado ou insaturado; ou de 5 a 6 membros (oxacicloalquilideno, tiacicloalquilideno ou azacicloalquilideno), cada um opcionalmente substituído por alquilo inferior ou aril-alquilo inferior; ou 2,2-norbo-nilideno; COOR2 representa carboxilo ou carboxilo deriva-tizado na forma de um éster farmaceuticamente aceitável; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; - em que arilo representa arilo carbocíclico ou heterocíclico, monocíclico ou bicíclico, pelo que arilo carbocíclico monocíclico representa fenilo opcionalmente substituído por um até três substituintes seleccionados a partir de alquilo inferior, hidroxilo, alcoxilo inferior, aciloxilo, halogéneo, ciano, trifluoro-metilo, trifluorometoxilo, amino, alcanoil inferior-amino, alquil inferior-(tio, sufinilo ou sulfonilo), alcoxi inferior-carbonilo, mono ou di-alquil inferior-carbamoílo, 4 ΡΕ1430045 ou mono ou di-alquil inferior-amino; ou alquileno inferior-dioxilo; arilo carbocíclico bicíclico representa 1- ou 2-naftilo ou 1- ou 2-naftilo substituído de preferência por alquilo inferior, alcoxilo inferior ou halogéneo; arilo heterocíclico monocíclico representa tia-zolilo, tienilo, furanilo, piridilo, pirimidinilo, oxazo-lilo, isoxazolilo, pirrolilo, imidazolilo ou oxadiazolilo, sendo cada um opcionalmente substituído por alquilo inferior; arilo heterocíclico bicíclico representa indolilo ou benzotiazolilo opcionalmente substituído por hidroxilo, alquilo inferior, alcoxilo inferior ou halogéneo; em que acilo é derivado de um ácido carbocíclico e representa alcanoílo inferior, aril carbocíclico-alcanoílo inferior, aroílo, alcoxi inferior-carbonilo ou aril-alcoxi inferior-carbonilo opcionalmente substituído; pelo que o alcanoílo inferior é opcionalmente substituído por alcoxic inferior-arbonilo, alcanoil inferior-oxilo, alcanoil inferior-tio, alcoxilo inferior, alquil inferior-tio, hidroxilo, di-alquil inferior-amino, alcanoil inferio-ramino, morfolino, piperidino, pirrolidino ou 1-alquil inferior-piperazino; em que alquileno inferior refere-se à cadeia de 5 ΡΕ1430045 carbono divalente linear ou ramificado o qual pode ser substituído por alcoxilo inferior; e em que o termo "inferior" referido aqui em ligação com radicais orgânicos ou compostos define-os com até 7 átomos de carbono inclusive. 0 presente invento está também dirigido a composições farmacêuticas compreendendo os referidos compostos; métodos para a preparação dos referidos compostos; intermediários; e métodos de tratar distúrbios em mamíferos que respondem a inibição de ACE e NEP e, opcionalmente, inibição de ECE por administração dos referidos compostos a mamíferos com necessidade de tal tratamento. Ésteres farmaceuticamente aceitáveis são de preferência derivados éster pró-fármacos, que podem ser convertidos por solvólise ou nas condições fisiológicas nos ácidos carboxílicos livres de fórmula I. Ésteres pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis são de preferência, e.g., ésteres de alquilo inferior, ésteres de aril-alquilo inferior, ésteres de a-(alcanoil inferior-oxi)-alquilo inferior tais como éster pivaloílo-ximetilo, e ésteres de a-(alcoxi inferior-carbonil, morfolinocarbonil, piperidinocarbonil, pirrolidinocarbonil ou di-alquil inferior-aminocarbonil)-alquilo inferior.

Sais farmaceuticamente aceitáveis são sais deri- 6 ΡΕ1430045 vados de bases farmaceuticamente aceitáveis para quaisquer compostos ácidos do invento, e.g., aqueles em que COOR2 representa carboxilo. Tais são, e.g., sais de metais alcalinos (e.g., sais de sódio, potássio), sais de metais alcalino-terrososos (e.g., sais de magnésio, cálcio), sais de amina (e.g., sais de trometamina).

Compostos de fórmula I, dependendo da natureza dos substituintes, possuem dois ou mais átomos de carbono assimétricos. Os diastereómeros resultantes e antípodas ópticos estão englobados pelo invento eminente. A configuração preferida está indicada na fórmula Ia em que os carbonos assimétricos tendo os substituintes -alk-Ri e R4 têm tipicamente a configuração-S.

Preferidos são os compostos de fórmula I e Ia em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa hidrogénio, C5 ou C6-cicloalquilo, arilo carbocíclico ou hetero-cíclico, ou biarilo; alk representa alquileno inferior; R3 representa hidrogénio ou acilo; R4 representa oxaciclo-alquilo ou oxacicloalquil-alquilo inferior; R6 e R7 representam alquilo inferior; ou R6 e R7 juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam ciclo-alquilideno de 5 ou 6 membros; COOR2 representa carboxilo ou carboxilo derivatizado na forma de um éster farma- 7 ΡΕ1430045 ceuticamente aceitável; derivados dissulfureto derivados dos referidos compostos em que R3 é hidrogénio; e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Ainda preferidos são os referidos compostos de fórmula I e Ia em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa arilo carbocíclico ou heterociclico, ou biarilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoílo inferior opcionalmente substituído; R4 representa tetra-hidropiranilo ou 4-tetra-hidropiranilmetilo; Rô e R7 representa Ci-C4-alquilo e são idênticos; alk representa metileno ou etileno; COOR2 representa carboxilo, alcoxi inferior-carbonilo, (di-alquil inferior-aminocarbonil)-alcoxi inferior-carbonilo ou (mor-folinocarbonil, piperidinocarbonil ou pirrolidinocarbonil)-alcoxi inferior-carbonilo; e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Particularmente preferidos são os referidos compostos de fórmula I ou Ia em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa arilo carbocíclico ou arilo heterociclico nos quais arilo carbocíclico representa fenilo ou fenilo substituído por um ou dois hidroxilo, alcanoil inferior-oxilo, alquilo inferior, alcoxilo inferior, trifluorometilo, trifluorometoxilo ou halogéneo e nos quais arilo heterociclico representa indolilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoílo inferior; R4 representa 4-tetra-hidropiranilo; R8 e R7 representam metilo; alk representa metileno ou etileno; e COOR2 representa carboxilo ou alcoxi inferior-carbonilo; e seus sais farmaceuti-camente aceitáveis. 8 ΡΕ1430045

Também preferidos são os compostos de fórmula I ou Ia em que R e R5 representam hidrogénio; R4 representa fenilo, fluorofenilo, metoxifenilo, 2-tienil-5-piridilo, 4-bifenilo, ou 3-indolilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoilo inferior; R4 representa 4-tetra-hidropiranilo; R8 e R7 representam metilo; alk representa metileno ou etileno; e COOR2 representa carboxilo ou alcoxi inferior-carbonilo; e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Em particular são preferidos compostos de fórmula Ia em que R e R6 representam hidrogénio; R4 representa fenilo que é não substituído ou substituído por fenilo ou C1-C4 alcoxilo; ou Ri representa indolilo ou piridilo substituído por tienilo; R2 representa hidrogénio ou C1-C4 alquilo; R3 representa hidrogénio ou C2-C5 alcanoilo; R4 representa tetra-hidropiranilo ou 4-tetra-hidropiranil-metilo; R6 e R7 hidrogénio ou C2-C5 alcanoilo; R4 representa tetra-hidropiranilo ou 4-tetra-hidropiranilmetilo; R6 e R7 representam C1-C4 alquilo; ou R6 e R7, juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam ciclopentili-deno; alk representa C4 a C2 alquileno; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

As definições como tal ou combinadas como usadas aqui, salvo indicação em contrário, têm os significados seguintes dentro do âmbito do presente invento.

Arilo representa arilo carbocíclico ou hetero-cíclico, monocíclico ou bicíclico. 9 ΡΕ1430045

Arilo carbocíclico monocíclico representa fenilo opcionalmente substituído, sendo de preferência fenilo ou fenilo substituído por um até três substituintes, sendo estes de forma vantajosa alquilo inferior, hidroxilo, alcoxilo inferior, aciloxilo, halogéneo, ciano, trifluoro-metilo, trifluorometoxilo, amino, alcanoil inferior-amino; (tio, sufinil ou sulfonil)-alquilo inferior, alcoxi inferior-carbonilo, mono- ou di-alquil inferior-carbamoílo, ou mono- ou di-alquil inferior-amino; ou fenilo substituído por alquilenodioxilo.

Arilo carbocíclico bicíclico representa 1- ou 2-naftilo ou 1- ou 2-naftilo substituído de preferência por alquilo inferior, alcoxilo inferior ou halogéneo.

Arilo heterocíclico monocíclico representa de preferência tiazolilo, tienilo, furanilo, piridilo, pirimi-dinilo, oxazolilo, isoxazolilo, pirrolilo, imidazolilo ou oxadiazolilo, sendo cada um opcionalmente substituído por alquilo inferior.

Furanilo opcionalmente substituído representa 2-ou 3-furanilo substituído de preferência por alquilo inferior.

Piridilo opcionalmente substituído representa 2-, ou 3- ou 4-piridilo ou 2-, 3- ou 4-piridilo substituído de preferência por alquilo inferior, halogéneo ou ciano. 10 ΡΕ1430045

Tienilo opcionalmente substituído representa 2-ou 3-tienilo ou 2- ou 3-tienilo substituído de preferência por alquilo inferior.

Arilo heterocíclico bicíclico representa de preferência indolilo ou benzotiazolilo opcionalmente substituído por hidroxilo, alquilo inferior, alcoxilo inferior ou halogéneo, vantajosamente 3-indolilo ou 2-benzotiazolilo.

Arilo como em aril-alquilo inferior é de preferência fenilo ou fenilo substituído por um ou dois de alquilo inferior, alcoxilo inferior, hidroxilo, alcanoil inferior-oxilo, halogéneo, trifluorometilo, ciano, alcanoil inferior-amino ou alcoxi inferior-carbonilo; também, naftilo opcionalmente substituído.

Aril-alquilo inferior é vantajosamente benzilo ou 1- ou 2-fenetilo opcionalmente substituído no fenilo por um ou dois de alquilo inferior, alcoxilo inferior, hidroxilo, alcanoil inferior-oxilo, halogéneo ou trifluorometilo. 0 termo "inferior" referido aqui em conexão com radicais orgânicos ou compostos define-os com até 7 inclusive, de preferência até 4 inclusive e com vantagem um ou dois átomos de carbono. Podem ser de cadeia linear ou ramificada. 11 ΡΕ1430045

Alquilo inferior opcionalmente substituído refe-re-se a alquilo inferior ou alquilo inferior substituído por, e.g., halogéneo, hidroxilo, alcoxilo inferior, amino, (mono- ou di-alquilo inferior)amino, acilamino, 1-alquil inferior-piperazino, morfolino, piperidino, pirrolidino e semelhantes.

Alquileno inferior refere-se a cadeia de carbono divalente linear ou ramificada tendo de preferência 1 a 4 átomos de carbono, os quais podem ser substituídos por alcoxilo inferior, por exemplo, -CH2-, -CH(CH3)-, -CH2CH2- e semelhantes.

Um grupo alquilo inferior contém de preferência 1-4 átomos de carbono os quais podem ser de cadeia linear ou ramificada e representa, e.g., etilo, propilo, butilo ou vantajosamente metilo.

Um grupo alcoxilo inferior contém de preferência 1-4 átomos de carbono os quais podem ser de cadeia linear ou ramificada e representam, e.g., metoxilo, propoxilo, isopropoxilo ou vantajosamente etoxilo.

Cicloalquilo representa um radical hidrocarboneto cíclico saturado o qual contém de preferência 5 a 7 carbonos no anel, de preferência ciclopentilo ou ciclo-hexilo.

Oxacicloalquilo representa de preferência oxaci- 12 ΡΕ1430045 cloalquilo de 5 a 7 membros, e.g., tetra-hidropiranilo, tal como 4-tetra-hidrotiopiranilo.

Tiacicloalquilo representa de preferência tiaci-cloalquilo de 5 a 7 membros, e.g., tetra-hidrotiopiranilo, tal como 4-tetra-hidrotiopiranilo.

Azacicloalquilo representa de preferência azaci-cloalquilo de 5 a 7 membros, e.g., pirrolidinilo ou piperi-dinilo no qual o azoto pode ser substituído por alquilo inferior ou aril-alquilo inferior, tal como 4-piperidinilo ou 3-pirrolidinilo opcionalmente substituído no azoto por alquilo inferior. 0 termo cicloalquil-alquilo inferior representa de preferência (ciclopentil ou ciclo-hexil)-metilo, 1- ou 2-(ciclopentil ou ciclo-hexil)etilo, 1-, 2- ou 3-(ciclopentil ou ciclo-hexil) propilo ou 1-, 2-, 3- ou 4-(ciclopentil ou ciclo-hexil)-butilo. De forma similar (oxaciclil, tiacicloalquil ou azacicicloalquil)-alquilo inferior.

Um grupo alcoxi inferior-carbonilo contém de preferência 1 a 4 átomos de carbono na porção alcoxilo e representa, e.g., metoxicarbonilo, propoxicarbonilo, iso-propoxicarbonilo ou de forma vantajosa etoxicarbonilo.

Cicloalquilideno é de 3 a 10 membros, de preferência de 5 ou 6 membros, e representa um grupo de ligação 13 ΡΕ1430045 cicloalcano no qual os dois grupos ligados estão ligados ao mesmo carbono do anel cicloalcano, e.g., ciclopentilideno ou ciclo-hexilideno.

Oxacicloalquilideno de 5 ou 6 membros representa um tetra-hidrofurano ou grupo de ligação tetra-hidrofurano, i.e., tetra-hidrofuranilideno ou tetra-hidropiranilideno, no qual os dois grupos ligados estão ligados ao mesmo átomo de carbono dos anéis respectivos, e.g., na posição 3 ou 4 destes.

Tiacicloalquilideno de 5 ou 6 membros representa um grupo de ligação tetra-hidrotiofeno ou tetra-hidrotio-pirano no qual os dois grupos ligados estão ligados ao mesmo átomo de carbono dos respectivos anéis, e.g., na posição 3 ou 4 destes.

Azacicloalquilideno de 5 ou 6 membros representa um grupo de ligação pirrolidina ou piperidina no qual os dois grupos ligados estão ligados ao mesmo átomo de carbono dos respectivos anéis, e.g., na posição 3 ou 4 destes, e o azoto pode ser substituído por alquilo inferior, e.g., metilo, ou por aril-alquilo inferior, e.g., benzilo.

Cicloalquilideno fundido a um anel representa, e.g., cicloalquilideno benzo-fundido, e.g., 1,1- ou 2,2-tetralinilideno ou 1,1- ou 2,2-indanilideno.

Halogéneo(hal) representa de preferência fluoro ou cloro, mas pode também ser bromo ou iodo. 14 ΡΕ1430045

Acilo é derivado de um ácido carbocíclico e representa de preferência alcanoilo inferior opcionalmente substituído, aril carbocíclico-alcanoílo inferior, aroílo, alcoxi inferior-carbonilo ou aril-alcoxi inferior-carbo-nilo, vantajosamente alcanoilo inferior opcionalmente substituído, ou aroílo.

Alcanoilo inferior é de preferência acetilo, propionilo, butirilo, ou pivaloílo.

Alcanoilo inferior opcionalmente substituído, por exemplo, representa alcanoilo inferior ou alcanoilo inferior substituído por, e.g., alcoxi inferior-carbonilo, alcanoil inferior-oxilo, alcanoil inferior-tio, alcoxilo inferior, alquil inferior-tio, hidroxilo, di-alquil infe-rior-amino, alcanoil inferior-amino, morfolino, piperidino, pirrolidino ou 1-alquil inferior-piperazino.

Aroílo é aroílo carbocíclico ou heterocíclico, de preferência aroílo carbocíclico monocíclico ou aroílo heterocíclico monocíclico.

Aroílo carbocíclico monocíclico é de preferência benzoílo ou benzoílo substituído por alquilo inferior, alcoxilo inferior, halogéneo ou trifluorometilo.

Aroílo heterocíclico monocíclico é de preferência piridilcarbonilo ou tienilcarbonilo. 15 ΡΕ1430045

Aciloxilo é de preferência alcanoil inferior-oxilo opcionalmente substituído, alcoxi inferior-carbo-niloxilo, aroiloxilo carbocíclico monocíclico ou aroiloxilo heterocíclico monocíclico, opcionalmente substituídos, e.g., como descrito para os grupos envolvidos.

Aril-alcoxi inferior-carbonilo é de preferência carbocíclico monocíclico-alcoxi inferior-carbonilo, vantajosamente benziloxicarbonilo.

Biarilo representa o grupo -Ar-Ar' no qual Ar e Ar' representam independentemente arilo carbocíclico ou heterocíclico monocíclico, nomeadamente (i) aril carbocíclico monocíclico-arilo carbocíclico monocíclico (bife-nililo opcionalmente substituído), (ii) aril carbocíclico monocíclico-arilo heterocíclico monocíclico, (iii) aril heterocíclico monocíclico-arilo carbocíclico monocíclico, ou (iv) aril heterocíclico monocíclico-arilo heterocíclico monocíclico. Arilo heterocíclico monocíclico nos grupos Ar e/ou Ar' no biarilo é de preferência piridilo opcionalmente substituído (e.g., 3- ou 4-piridilo), tienilo (e.g., 2- ou 3-tienilo), oxazolilo (e.g., 2-, 4- ou 5-oxazolilo), tiazolilo (e.g., 2-, 4- ou 5-tiazolilo), oxadiazolilo (e.g., 3-[1,2,4]oxadiazolilo) , furanilo (e.g., 2- ou 3-furanilo), isoxazolilo (e.g., 4-isoxazolilo) ou pirimi-dinilo (e.g., 5-pirimidinilo) , em particular piridilo e tienilo. Exemplos são 4-bifenililo, opcionalmente substituído num ou em ambos os anéis fenilo por, e.g., alquilo 16 ΡΕ1430045 inferior, alcoxilo inferior, halogéneo ou trifluorometilo; também 5—fenil—(2- ou 3-tienilo), 5-fenil-(2- ou 3-fura-nilo), 2-fenil-(4- ou 5-oxazolilo), 2-fenil-(4- ou 5-tia-zolilo), 5-fenil-(3-[1,2,4]-oxadiazolilo) ou 6-fenil-3-piridilo opcionalmente substituídos; também 4-(5-isoxazo-lil)-fenilo, 4-(2-, 3- ou 4-piridil)-fenilo, 4—(2— ou 3-pirrolil)-fenilo, 4-(2- ou 3-furanil)-fenilo, 4—(2— ou 3-tienilo)-fenilo, ou 4-(5-pirimidinil)-fenilo opcionalmente substituídos; também 6-(2- ou 3-tienil)-3-piridilo, 6— (3 — piridil)-3-piridilo, 6 —(2 — ou 3-furanil)-3-piridilo ou 6-(2-tiazolil)-3-piridilo opcionalmente substituído. Substi-tuintes opcionais no fenilo são como indicado para bife-nililo, e substituintes opcionais nos grupos arilo heterocíclicos são de preferência alquilo inferior, tal como metilo.

Os novos compostos do invento são inibidores de ACE inibindo a conversão de angiotensina I para a substância pressora angiotensina II e diminuindo assim a tensão arterial nos mamíferos. Além disso os compostos do invento demonstraram inibição de NEP e potenciaram assim os efeitos cardiovasculares (e.g., diuréticos e natriuréticos) dos factores natriuréticos arteriais (ANF). 0 efeito combinado é benéfico para o tratamento de distúrbios cardiovasculares em mamíferos, em particular, hipertensão, estados cardíacos tais como insuficiência cardíaca congestiva, e insuficiência renal incluindo insuficiência renal crónica e aguda. 17 ΡΕ1430045

As propriedades acima citadas são demonstráveis em testes in vitro e in vivo, usando vantajosamente mamíferos, e.g., ratinhos, ratos, cães, macacos, ou órgãos isolados, tecidos e preparações destes. Os referidos compostos podem ser aplicados in vitro na forma de soluções, e.g., de preferência soluções aquosas, e em in vivo via entérica ou parentérica, vantajosamente, via oral ou intravenosa (i.v.), e.g., como uma suspensão ou solução aquosa. A dosagem in vitro pode variar entre as concentrações de 1CT6 e 10~9 molar. A dosagem in vivo pode variar, dependendo da via de administração, entre 0,01 e 50 mg/kg, vantajosamente entre 0,1 e 25 mg/kg. 0 teste in vitro é mais apropriado para os ácidos carboxílicos livres do invento. 0 composto teste é dissolvido em dimetilsulfóxido, etanol, ou solução de bicarbonato de sódio 0,25 M, e a solução é diluída com tampão até à concentração desejada. A inibição in vitro da ACE pelos compostos deste invento pode ser demonstrada por um método análogo ao dado em Biochem. Pharmacol., Vol. 20, p. 1367 (1971). O tampão para o ensaio de ACE é NaCl 300 mM, KH2P04 100 mM (pH 8,3). A reacção é iniciada pela adição de 100 μΐ de hipuril-histidil-leucina (2 mg/mL) a tubos contendo enzima e droga num volume de 150 μΐϋ e os tubos são incubados durante 30 minutos a 37°C. A reacção é terminada pela adição de 0,75 mL de NaOH 0,6 N. 100 μΕ de solução de o-ftaldeído preparada na altura (2 mg/mL em metanol) é adicionada aos 18 ΡΕ1430045 tubos, os componentes são misturados e deixados em repouso à temperatura ambiente. Após 10 minutos, é adicionado 100 μΐϋ de HC1 6N. Os tubos são centrif ugados e a densidade óptica do sobrenadante é lida a 360 nm. Os resultados são representados em função da concentração de fármaco para determinar o IC50 i.e., a concentração de fármaco que dá metade da actividade da amostra de controle contendo o fármaco.

Tipicamente, os compostos do invento demonstraram um IC50 no intervalo de 0,1-50 nM para inibição de ACE.

Ilustrativo do invento, o composto do Exemplo 2g apresenta um IC5o de 5,9 nM no ensaio in vitro de ACE.

Inibição de ACE pode ser demonstrada in vivo por administração oral ou i.v. medindo a inibição da resposta pressora induzida por angiotensina I em ratos com tensão normal. O teste in vivo para compostos administrados i.v. é realizada com ratos macho com tensão normal, os quais são anestesiados com metofan de sódio. Uma artéria femoral e uma veia femoral são canuladas respectivamente para medição directa da tensão arterial por administração i.v. de angiotensina I e administração i.v. ou p.o. de um composto deste invento. Após estabilizar a tensão arterial basal, são obtidas as respostas pressoras a 3 desafios de 300 ng/kg de angiotensina I i.v., a intervalos de 15 minutoos. 19 ΡΕ1430045

Tais respostas da tensão são usualmente novamente obtidas aos 15, 30, 60 e 90 minutos, e depois hora a hora até 6 horas após administração i.v. ou p.o do composto a ser testado, e comparadas com as respostas iniciais. Qualquer diminuição observada da referida resposta pressora é uma indicação da inibição de ACE.

Ilustrativo do invento, o composto do Exemplo lf inibe a resposta da tensão induzida pela angiotensina I durante 4 horas numa dose de 10 mg/kg p.o. de 98%. A inibição in vitro de NEP (EC 3.4.24.11) pode ser determinada como se segue: A actividade de NEP 3.4.24.11 é determinada pela hidrólise do substrato glutaril-Ala-Ala-Phe-2-naftilamida (GAAP) usando um procedimento modificado de Orlowski e Wilk (1981). A mistura de incubação (volume total 125 μΐ) contém 4,2 μΐϋ de proteína (membranas do córtex do rim do rato preparadas pelo método de Maeda et al. (1983), tampão tris 50 mM, pH 7,4 a 25°C, substrato 500 μΜ (concentração final), e aminopeptidase de leucina M (2,5 μg). A mistura é incubada durante 10 minutos a 25°C, e adicionado 100 μΕ de solução de "fast garnet" (250 μg de "fast garnet"/mL de Tween 20 a 10% em acetato de sódio 1M pH 4,2). A actividade da enzima é medida espectrofotometricamente a 540 nm. Uma unidade de actividade de NEP 24.11 é definida como 1 nmol de 2-naftilamina libertada por minuto a 25°C a pH 7,4. Os valores de IC50 são determinados, i.e., a concentração do 20 ΡΕ1430045 composto teste necessária para 50% de inibição da libertação de 2-naftilamina.

Tipicamente, os compostos do invento demonstram um IC50 no intervalo de 0,1-50 nM para inibição de NEP.

Ilustrativo do invento, o composto do Exemplo 2g demonstra um IC50 de 4,8 nM no ensaio in vitro de GAAP. A actividade anti-hipertensora pode ser determinada, e.g., no rato espontaneamente hipertenso (SHR) e no rato hipertenso pelo sal acetato de desoxi-corticosterona (DOCA), e.g., de acordo com Trapani et al., J. Cardlovasc.

Pharmacol., Vol. 14, pp. 419-424 (1989).

Ilustrativo do invento, o composto do exemplo 1(f) reduz a tensão arterial média em SHR conscientes de 16 mm de Hg numa dose de 11,6 mg/kg p.o.. A actividade diurética pode ser determinada em ensaios diuréticos padrão, e.g., como descrito em "New Anti-hypertensive Drugs" Publicações Spectrum, pp. 307-321 (1976) ou medindo a potenciação de natriurese e diurese induzidas pelo factor natriurético nos ratos. A inibição in vitro de ECE pode por exemplo ser determinada como se segue: A ECE é parcialmente purificada a partir de 21 ΡΕ1430045 células do endotélio aórtico primário porcino por croma-tografia em coluna de troca aniónica DE52 e a sua actividade é quantificada por RIA como descrito em Anal. Biochem., Vol. 212, pp. 434-436 (1993). Alternativamente, a enzima nativa pode ser substituída por uma forma recombi-nante de ECE, como descrito, por exemplo, em Cell, Vol. 78, pp. 473-485 (1994). A ECE-1 humana foi descrita por vários grupos (ver Schmidt et al., FEBS Letters, Vol. 356, pp. 238-243 (1994); Kaw et al., "4th Int. Conf. On Endothelin"; 23-25 de Abril, Londres, Reino Unido (1995) C6; Valdenaire et al., J. Biol. Chem., Vol. 270, pp 29794-29798 (1995); Shimada et al., Biochem. Biophys. Res. Commun., Vol. 207, pp 807-812 (1995)). A inibição de ECE pode ser determinada como descrito em Biochem. Mol. Biol. Int., Vol. 31, N° 5, pp. 861-867 (1993), por RIA para medir a ET-1 formada a partir da "Big ET-1".

Para avaliar o efeito de um inibidor na actividade de ECE-1, 10 μρ de proteína é pré-incubada com o composto na concentração desejada durante 20 minutos à temperatura ambiente em TES 50 mM, pH 7,0 e Triton X-100 0,005% num volume de 10 μΕ. A "Big ET-1" humana (5 μΕ) é então adicionada até uma concentração final de 0,2 μΜ, e a mistura da reacção é ainda incubada durante 2 horas a 37°C. A reacção é parada adicionando 500 μΕ de tampão RIA contendo Triton X-100 a 0,1%, albumina do soro bovino a 2%, e NaN3 a 0,02% em solução salina tamponizada com fosfato.

Amostras diluídas (200 μΕ) obtidas a partir do 22 ΡΕ1430045 ensaio acima da enzima são incubadas a 4°C durante a noite com 25 μύ cada de [125I]ET-1 (10 000 cpm/tubo) e anticorpos de coelho diluídos 1:20 000 que reconhecem especificamente o carboxilo terminal do triptofano de ET-1. Anticorpos anti-coelho na cabra acoplados a pérolas magnéticas (70 μρ) são então adicionados a cada tubo, e a mistura da reacção é ainda incubada durante 30 minutos à temperatura ambiente. As pérolas são transformadas em pastilhas usando uma armação magnética. 0 sobrenadante é decantado, e a radioactividade da pastilha é contada num contador gama. A ligação total específica e não específica é medida na ausência de ET-1 não radioactivo e anti-corpos anti-ET, respectivamente. Nestas condições, a ET-1 e "Big ET-1" substituem a ligação de [125I]ET-1 aos anticorpos com valores de IC50 de 21+2 e 260 000+66 000 fmol (média+SEM, n=3-5), respectivamente.

De modo a determinar o valor de IC50 de um inibidor, é determinada uma curva concentração-resposta de cada inibidor. Uma versão IBM-compatível do programa ALLFIT é usada para ajustar os dados ao modelo de local único. A inibição de ECE pode também ser determinada in vivo medindo a inibição da resposta pressora induzida pela "Big ET-1" no rato anestesiado ou consciente, como descrito abaixo. O efeito dos inibidores da resposta pressora resultantes do desafio com "Big ET-1" é medido em ratos Sprague-Dawley como descrito em Biochem. Mol. Biol. Int.,

Vol. 31, N° 5, pp. 861-867 (1993). Os resultados são 23 ΡΕ1430045 expressos como percentagem da inibição da resposta pressora induzida por "Big ET-1" quando comparados com o veiculo.

Os ratos macho Sprague-Dawley são anestesiados com Inactin (100 mg/kg i.p.) e são introduzidos catéteres na artéria e veia femoral para registar a tensão arterial média (MAP) e administrar compostos, respectivamente. É realizada uma traqueotomia e inserida uma cânula na traqueia para assegurar a potência das vias respiratórias. A temperatura do corpo dos animais é mantida a 3 7±1°C por meio de um cobertor aquecido. A seguir à cirurgia, o MAP é deixado a estabilizar antes de interromper a neurotrans-missão autonômica com clorisondamina (3 mg/kg i.v.). Os ratos são então tratados com o composto teste a 10 mg/kg i.v. ou veiculo e desafiados com "Big ET-1" (1 nmol/kg i.v.) 15 e 90 minutos mais tarde. Geralmente, os dados são reportados como o aumento máximo na MAP produzido por "Big ET-1" em animais tratados com o composto teste ou veiculo. A inibição de ECE pode também ser determinada in vivo medindo a inibição da resposta pressora induzida pela "Big ET-1" em SHR conscientes, e.g., como descrito em Biochem. Biophys. Res. Commun., Vol. 204, pp. 407-412 (1994) . O grau ou ausência de potencial imunoestimulador indesejável dos compostos do invento pode ser determinado com o ensaio do gânglio linfático poplíteo murino descrito em Toxicological Letters, Vols. 112/113, pp. 453-459 (2000). - 24 - ΡΕ1430045

Devido às suas propriedades inibidoras os compostos do invento eminente podem ser úteis para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios cardiovasculares, tais como hipertensão, insuficiência renal (incluindo edema e retenção de sal), e.g., insuficiência renal crónica ou aguda, edema pulmonar, insuficiência cardíaca (incluindo insuficiência cardíaca congestiva), arteriosclerose, dor, depressão, certos estados psicóticos, distúrbios cognitivos, angina, síndroma pré-menstrual, doença de Meniere, hiperaldosteronismo, hipercalciureia, ascites, glaucoma, asma, distúrbios gastrointestinais tal como diarreia, síndroma do cólon irritável e hiperacidez gástrica, isqué-mia cerebral (AVC), hemorragia sub-aracnóide, lesão cerebral traumática, vasoespasmo cerebral, hipertrofia arterial, restenose, doença de Raynaud, enfarte do mio-cárdio, obesidade, hiperplasia da próstata, enxaqueca, diabetes mellitus, e.g. nefropatia diabética, pré-eclam-psia, rejeição de transplante tal como no transplante da aorta ou órgão sólido e disfunção eréctil.

Além disso, são descritos intermediários de compostos de acordo com a fórmula I, em particular de compostos de fórmula VI dada a conhecer aqui abaixo, em que as variáveis alk, R, Ri, R2, R4, R5, R6, R7 têm os significados dados em cada caso para as variáveis correspondentes de compostos de fórmula I ou Ia, respectivamente. 25 ΡΕ1430045

Os compostos do invento, e.g., podem ser preparados

a) condensando um composto de fórmula II r I r ΝΠϊ-?-c_ Ν’—CH-COORj, k *

em que os símbolos alk, R, Rlf r6 e R7 têm os significados como definido acima e COOR2 representa carboxilo esteri-ficado, com um ácido carbocíclico de fórmula III fvs-c.-COOH (III) ou um derivado funcional reactivo deste, em que R4 e R5 têm significado como definido acima; R3' representa hidrogénio ou um grupo protector-S lábil, e.g., acilo, t-butilo ou benzilo opcionalmente substituído; ou

b) condensando um composto de fórmula IV t C>^CCI0H I Rr M “ ^-C-—NH- h ,(¾

ou um derivado funcional deste em que os símbolos R3 , R4-R5 e R6-R7 têm o significado como definido acima, com um aminoácido de fórmula V ΡΕ1430045 26

mx--m~çQm2 (νϊ em que alk, R e Ri têm o significado como definido acima e e COOR2 representa carboxilo esterifiçado; ou

c) condensando em condições básicas um composto de fórmula VI r-

$ tf H

(VI) em que os símbolos R, Ri, COOR2, R4-R7 e alk têm o significado como definido acima e Y representa um grupo hidroxilo esterificado reactivo (e.g., cloro ou bromo) como um grupo de saída, com um composto de fórmula R3'SH (VII) ou um seu sal, em que R3 representa um grupo protector de S lábil, e.g., acilo, t-butilo ou benzilo opcionalmente substituído; e converter o produto resultante num composto de fórmula I em que R3 é hidrogénio; e no referido processo acima, se proteger temporariamente qualquer(quaisquer) grupo(s) reactivo(s) interferente(s), remover o(s) referido(s) grupo(s) protectores, e depois 27 ΡΕ1430045 isolar o composto resultante do invento; e, se desejado, converter qualquer composto resultante do invento noutro composto do invento; e/ou, se desejado, converter uma função ácido carboxílico livre num derivado éster farmaceuticamente aceitável, ou converter o éster resultante no ácido livre ou noutro derivado éster; e/ou, se desejado, converter o composto livre resultante num sal ou o sal resultante no composto livre ou noutro sal, e/ou, se desejado, separar uma mistura de isómeros ou racematos, e/ou, se desejado, resolver um racemato obtido nos antípodas ópticos.

Nos compostos de partida e intermediários que são convertidos nos compostos do invento no modo descrito aqui, grupos funcionais presentes, tais como grupos tiol, carboxilo, amino e hidroxilo, são opcionalmente protegidos por grupos protectores convencionais que são comuns na química orgânica preparativa. Grupos tiol, carboxilo, amino e hidroxilo protegidos são aqueles que podem ser convertidos em condições suaves nos grupos tiol, carboxilo, amino e hidroxilo livres sem que tenham lugar outras reacções secundárias indesejáveis. 0 objectivo de introduzir grupos protectores é o de proteger os grupos funcionais de reacções indesejáveis com componentes da reacção e nas condições usadas para levar a cabo uma transformação química desejada. A necessidade e escolha de grupos protectores para uma reacção particular é conhecida dos especialistas na técnica e 28 ΡΕ1430045 depende da natureza do grupo funcional a ser protegido (grupo tiol, carboxilo, amino, etc), da estrutura e estabilidade da molécula da qual faz parte o substituinte, e das condições da reacção.

Grupos protectores bem conhecidos que satisfazem estas condições e a sua introdução e remoção são descritas, por exemplo, em J.F.W. McOrnie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, Londres, NI (1973); T.W. Greene e P.G.M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, NI, 3a Ed. (1999); e também em "The Peptides", Vol. 1, Schroeder e Luebke, Academic Press, Londres, NI (1965). A preparação de compostos do invento de acordo com o processo (a) envolvendo a condensação de uma amina de fórmula II com o ácido de fórmula III ou um derivado funcional reactivo deste, é levada a cabo por metodologia bem conhecida da síntese peptídica. A condensação de acordo com o processo (a) de um aminoéster de fórmula II com um ácido carbocíclico livre de fórmula III é levada vantajosamente a cabo na presença de um agente de condensação tal como diciclo-hexilcarbodi-imida, N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodi-imida, hi-droxibenzotriazole, l-hidroxi-7-azabenzotriazole, cloro-dimetoxitriazina, hexafluorofosfato de benzotriazol-l-ilo-xitris(dimetilamino)fosfónio (Reagente BOP), ou hexafluo-rofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrame- 29 ΡΕ1430045 tilurónio (HATU), sozinho ou em combinação, e trietilamina ou N-metilmorfolina, num solvente polar inerte, tal como dimetilformamida ou cloreto de metileno, de preferência à temperatura ambiente. A condensação de um aminoéster de fórmula (II) com um derivado funcional reactivo de um ácido de fórmula III na forma de um halogeneto de ácido, vantajosamente um cloreto de ácido, ou anidrido misto, é levada a cabo num solvente inerte como tolueno ou cloreto de metileno, vantajosamente na presença de uma base, e.g., uma base inorgânica tal como carbonato de potássio ou uma base orgânica tal como trietilamina, N-metilmorfolina ou piridina, de preferência à temperatura ambiente.

Derivados funcionais reactivos de ácidos carbo-xilicos de fórmula III são de preferência halogenetos de ácido (e.g., o cloreto de ácido) e anidridos mistos, tais como o anidrido de pivaloilo ou isobutiloxicarbonilo, ou ésteres activados, tal como éster de benzotriazole, 7-azabenzotriazole ou hexafluorofenilo. 0 material de partida de fórmula II pode ser preparado de acordo com métodos descritos aqui e ilustrados nos exemplos.

A preparação de um material de partida de fórmula II envolve a acilação de um éster de fórmula VIII ΡΕ1430045 30 alK-R, RNH-CH—COOR, (VBI)

em que alk, R e Ri têm o significado como definido aqui acima e COOR2 representa carboxilo esterificado (e.g., em que R2 é um alquilo inferior ou benzilo) com um aminoácido com o N apropriadamente protegido (ou um derivado funcional reactivo) de fórmula IX

R,NK XOOH

em que R6 e R7 têm significado como definido aqui acima e R8 é um grupo protector de amino lábil, e.g., t-butoxicar-bonilo, para obter o composto N-protegido correspondente de fórmula II. A condensação de um composto de fórmula VIII com um composto de fórmula IX é realizada por metodologia bem conhecida na síntese de peptídeos, e.g., como descrito acima para a condensação de um composto de fórmula II com um composto de fórmula III. O grupo N-protector é removido de acordo com métodos bem conhecidos na técnica, e.g., o t-butoxicarbonilo é removido com ácido anidro, tal como ácido trifluoroacético ou HC1.

Os aminoésteres e ácidos de partida de compostos de fórmula VIII e IX, respectivamente, são ou conhecidos na 31 ΡΕ1430045 técnica, ou se novos, podem ser preparados de acordo com métodos bem conhecidos na técnica, e.g., ou ilustrados aqui. Os ésteres de aminoácidos de fórmula VIII são de preferência os enantiómeros-S.

Os materiais de partida de fórmula III são conhecidos, ou se novos, podem ser preparados de acordo com métodos convencionais. Os materiais de partida são preparados, e.g., a partir dos α-aminoácidos racémicos ou opticamente activos correspondentes, por conversão destes no derivado α-bromo seguido por substituição deste com inversão de configuração usando o derivado tiol apropriado de fórmula VII, em condições básicas, por exemplo, como ilustrado no Pedido de Patente Europeia N° 524 553 publicado em 27 de Janeiro de 1993. A desbenzilação-S dos produtos finais resultantes é realizada por clivagem redutora, e.g., com Rayney níquel em etanol. A deacilação-S é realizada por, e.g., hidrólise catalisada por base com hidrogénio de sódio aquoso diluído. Materiais de partida de fórmula III cíclicos podem ser preparados por tratamento do ácido carboxílico cíclico (e.g., ácido ciclopentanocar-boxílico) com enxofre na presença de uma base forte, tal como dietilamida de lítio. A preparação dos compostos do invento de acordo com o processo (b) envolvendo a condensação de um ácido de fórmula IV com um éster de aminoácido de fórmula V é levada a cabo de modo similar ao do processo (a) . De forma similar, os materiais de partida de fórmula IV são 32 ΡΕ1430045 preparados por condensação de um ácido de fórmula III com o éster correspondente aos aminoácidos gem-disubstituídos de fórmula IX (em que Rs é agora hidrogénio) em condições similares àquelas descritas acima, seguido pela remoção do grupo protector do carboxilo. A preparação dos compostos do invento de acordo com o processo (c) envolvendo a substituição de um grupo de saida Y num composto de fórmula VI com um derivado tiol R3'-SH com um seu sal é levada a cabo de acordo com métodos bem conhecidos na técnica.

Um grupo hidroxilo esterificado reactivo, representado por Y, é um grupo hidroxilo esterificado por um ácido inorgânico ou orgânico. Grupos Y correspondentes são em particular halogéneo, por exemplo, cloro, bromo, iodo, também grupos sulfoniloxilo, tais como grupos alquilo inferior ou arilsulfoniloxilo, por exemplo grupos (metano-, etano-, benzeno- ou tolueno-)sulfoniloxilo, também o grupo trifluorometilsulfoniloxilo . A substituição é levada a cabo num solvente inerte, tal como dimetilformamida ou cloreto de metileno na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, trietilamina, di-isopropiletilamina, N-metilmorfolina e semelhantes à temperatura ambiente ou elevada. Usando um sal de R3 SH (e.g., tioacetato de potássio), a reacção é levada a cabo na ausência de uma base, num solvente inerte, tal como tetra-hidrofurano ou dimetilformamida. ΡΕ1430045 33

De forma similar, os materiais de partida de fórmula VI podem ser preparados fazendo reagir o derivado dipeptidico de fórmula II com um ácido de fórmula

em que R4 e R5 e Y têm o significado como definido acima, nas condições descritas para o processo (a).

Os compostos de fórmula X em que Y é halogéneo tais como ácidos α-bromocarboxilicos são conhecidos e são preparados, e.g., como descrito no Pedido Internacional WO 99/55726 publicado em 4 de Novembro de 1999.

Certos compostos do invento e intermediários podem ser convertidos um no outro de acordo com reacçoes gerais bem conhecidas na técnica.

Os mercaptanos livres podem ser convertidos nos derivados S-acilo por reacção com um derivado reactivo de um ácido carboxilico (correspondente a R3 sendo acilo na fórmula I), tal como um anidrido ácido ou o referido cloreto, de preferência na presença de uma base, tal como trietilamina num solvente inerte, tal como acetonitrilo ou cloreto de metileno. Álcoois e fenóis livres podem ser convertidos nos derivados acilo correspondentes, e.g., por reacção com um 34 ΡΕ1430045 cloreto de ácido correspondente na presença de uma base, tal como trietilamina.

Os mercaptanos livres, em que R3 representa hidrogénio, podem ser oxidados para os disulfuretos correspondentes, e.g., por oxidação ao ar ou com o uso de agentes oxidantes suaves, tal como iodo em solução alcoólica. Reciprocamente, os disulfuretos podem ser reduzidos para os mercaptanos correspondentes, e.g., com agentes redutores, tais como borohidreto de sódio, zinco e ácido acético, ou tributilfosfina. Ésteres de ácido carboxilico podem ser preparados a partir de ácido carboxilico por condensação com, e.g., o halogeneto correspondente a R2-OH, na presença de uma base, ou com um excesso de um álcool na presença de um catalisador ácido, de acordo com métodos bem conhecidos na técnica. Ésteres do ácido carboxilico e derivados S-acilo podem ser hidrolisados, e.g., com solução alcalina aquosa, tais como carbonatos ou hidróxidos de metais alcalinos. Os grupos éster e S-acilo podem ser selectivamente removidos como ilustrado aqui.

De preferência, e sempre que possível, os isómeros preferidos do invento de fórmula Ia são preparados a partir dos enantiómeros puros.

No caso de serem obtidas misturas de estereoisó-meros (e.g., diastereómeros), estes podem ser separados por 35 ΡΕ1430045 procedimentos conhecidos, tais como cristalização fraccio-nada e cromatografia (e.g., camada fina, coluna, croma-tografia flash). Ácidos livres racémicos podem ser resolvidos nos antípodas ópticos por cristalização fraccionada de sais d- ou 1-(α-metilbenzilamina, cinchonidina, cincho-nina, quinina, quinidina, desidroabietilamina, brucina ou estriquinina) e semelhantes. Produtos racémicos, se não forem diastereoisómeros, podem primeiro ser convertidos em diastereoisómeros com reagentes opticamente activos, tais como álcoois opticamente activos para formar ésteres, os quais podem ser então separados como descrito acima, e, e.g., hidrolizados para o enantiómero individual. Produtos racémicos podem também ser resolvidos por cromatografia quiral, e.g., cromatografia líquida de alta pressão usando um absorvente quiral; também por resolução enzimática, e.g., de ésteres com alcalase.

As reacções mencionadas acima são realizadas de acordo com métodos padrão, na presença ou ausência de diluentes, de preferência aqueles que sao inertes aos reagentes e são solventes destes, de catalisadores, de condensação alcalina ou ácida ou dos referidos outros agentes, respectivamente; e/ou inertes aos reagentes e solventes destes, de catalisadores, de condensação alcalina ou ácida ou os referidos outros agentes, respectivamente; e/ou atmosferas inertes, a baixas temperaturas, temperatura ambiente ou temperaturas elevadas, de preferência próximo do ponto de ebulição dos solventes usados, à pressão atmosférica ou superatmosférica. 36 ΡΕ1430045 O invento inclui ainda qualquer variante dos referidos processos, na qual um produto intermediário obtido em qualquer fase do processo é usado como um material de partida e quaisquer passos restantes são levados a cabo, ou o processo é interrompido em qualquer passo deste, ou na qual os materiais de partida são formados nas condições de reacção, ou na qual os componentes da reacção são usados na forma dos seus sais ou antípodas opticamente puros. Aqueles materiais de partida devem, sobretudo, ser usados nas referidas reacções, que conduzem à formação daqueles compostos indicados acima como sendo preferidos. 0 presente invento relaciona-se adicionalmente com composições farmacêuticas compreendendo os compostos do invento e seus sais de adição ácida não tóxicos, farma-ceuticamente aceitáveis, quer sozinhos quer em combinação com um ou mais aqentes farmaceuticamente activos. Tais agentes devem ser agentes anti-hipertensores, agentes anti-arteriosclerótico, agentes cardíacos, agentes diuréticos, agentes que baixam o colesterol e semelhantes. Quando usados em combinação com outros agentes terapêuticos podem ser administrados separadamente ou numa combinação fixa.

Exemplos de agentes terapêuticos que podem ser usados em combinação com antagonistas do receptor da angiotensina II, tais como valsartan, losartan, candesar-tan, eprosartan, irbesartan, olmesartan, saprisartan, tasosartan e telmisartan; β-bloqueadores, tais como 37 ΡΕ1430045 bisoprolol, propanolol, atenolol, sotalol e metoprolol; inibidores de renina, tais como aliskiren, detikiren, terlakiren e zankiren; bloqueadores dos canais de cálcio, tais como amlodipina, verapamil, diltiazem, bepridil, felodipina, isradipina, lacidipina, nicardipina, nife-dipina, niguldipina, niludipina, riosidina, nimodipina e nisoldipina; inibidores da sintase de aldosterona/antago-nistas de aldosterona, tais como eplerenona, (+)fadrozolo (WO 01/76574), espironolactona, anastraozolo, exemesartano e canrenona; diuréticos, tais como bumetanida, ácido etacrinico, furosemida, torsemida, clorotiazida, indapamida metazolona, amilorida, hidroflumetoazida, metilclotiazida, metolazona, diclorfenamida, triamtereno, clorotialidona e clorotiazida; antagonistas do receptor da vasopressina, tal como OPC 21268, SR 49059, SR 121463A, VPA 985, WAY 140288, OPC 31260 e YM 087; fármacos cardiotónicos, tal como enoximona e levosimendan; antagonistas da endotelina e inibidores de ECE, tais como atrasentan, bosentan, daru-sentan, sitaxentan, tezosentan, BMS 193884, J 104132, S0139, TBC 3711, YM 598 e compostos revelados em WO 99/55726, agentes anti-arterioscleróticos, particularmente agentes que baixam o colesterol, tais como sequestrantes do ácidos biliares (e.g., colestiramina e colestipol); inibidores da absorção do colesterol, tal como ezetimiba; fibratos, tais como fenofibrato e gemfibrozil; inibidores da HMG-CoA redutase (estatina), tais como atorvastatina, cerivastatina, compactina, dalvastatina, dihidrocompactina, fluindostatina, fluvastatina, lovastatina, mevastatina, pravastatina, rivastatina, rosuvastatina, velostatina, 38 ΡΕ1430045 simvastatina e pitavastatina; e derivados de ácido nicotí-nico; agentes tiromiméticos, tais como aqueles revelados na patente EUA N° 5 569 674 e WO 00/58279; também agentes anti-diabéticos, tais como repaglinida, nateglinida, metformina, rosiglitazona, pioglitazona, darglitazona, englitazona, ciglitazona, AD 5075, AY 31637, BM 13 1246, DN 108, DRF 2189, KRP 297, MCC 555, T 174, YM 268, carbutamida, cloropropamida, glibenclamida, glibomurida, glibuzolo, gliclazida, gliquidona, glisoxepid, glibutia-zole, glicopiramida, glihexamida, glimidina, glipinamida, fenbutamida, tolazamida, tolbutamida, tolciclamida, 1-butil-3-meanilureia, gliburida, glipizida, glimepirida, isoleucina-tiazolidida, DPP 728, LAF 237, KAF 1229, NH 622, glimepirida, mitiglinida, GLP-l(7-36), GLP-l(7-37), GLP-1(7-36)NH2, GLN9-GLP-1(7-37), D-GLN9-GLP-1(7-37), acetil LYS9-GLP-1 ( (7-37) , LYS18-GLP-1 ( (7-37) , GLP-1 ( 7-3 7) OH, GLY8-GLP-1 (7-3 7) , VAL8-GLP-1 (7-37) , THR8-GLP-1 ( 7-3 7 ) , Thr18-Lys18-GLP-1(7-37), MET8-GLP-1(7-37) , 4-imidazopropionil-GLP-l, exedin-4, amilina, pramlintida, CCK 8, miglitol, voglibose, acarbose, insulina e os compostos revelados em WO 99/20614, em particular DRF4158 o qual tem a estrutura seguinte:

O OH > 39 ΡΕ1430045 O presente invento também relata composições farmacêuticas compreendendo os compostos do presente invento e seus sais de adição ácida não tóxicos farmaceuti-camente aceitáveis, quer sozinhos quer em combinação com um ou mais outros agentes farmaceuticamente activos como indicado aqui antes do tratamento ou prevenção de estados ou distúrbios já revelados aqui.

Ainda mais, o presente invento relaciona-se com compostos de fórmula I, quer sozinhos quer em combinação com um ou mais agentes farmaceuticamente activos como dado a conhecer aqui, para a inibição da actividade de ACE e NEP e, opcionalmente, para a inibição da actividade de ECE. 0 presente invento também se relaciona com o uso dos compostos ou combinações do invento para a preparação de composições farmacêuticas e com composições farmacêuticas para a preparação de um medicamento para o tratamento e/ou prevenção de estados ou distúrbios dados a conhecer aqui, respectivamente.

Além disso, o presente invento relaciona-se com o uso do composto do presente invento para a preparação de um medicamento para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios modulados pela inibição da enzima de conversão da angioten-sina e endopeptidase neutra. O composto pode ser administrado a um mamífero com necessidade deste quer sozinho quer em combinação com um ou mais outros agentes farmaceuticamente activos como indicado acima. 40 ΡΕ1430045

As composições farmacêuticas de acordo com o invento são aquelas adequadas para administração entérica, tal como oral ou rectal, transdérmica e parentérica a mamíferos, incluindo o homem, compreendendo uma quantidade efectiva de um composto farmacologicamente activo do invento ou um seu sal farmaceuticamente aceitável sozinho ou em combinação com um ou mais veiculos farmaceuticamente aceitáveis, bem como em combinação com outros agentes terapêuticos também úteis para o tratamento ou prevenção de estados ou distúrbios, como indicado acima. aromas e adoçantes. Composições

Os compostos farmacologicamente activos do invento são úteis na manufactura de composições farmacêuticas compreendendo uma quantidade eficaz deste em conjunção ou numa mistura com excipientes ou veiculos adequados quer para aplicação entérica ou parentérica. Preferidos são comprimidos e cápsulas de gelatina compreendendo o ingrediente activo, junto com a) diluentes, e.g., lactose, dextrose, sacarose, manitol, sorbitol, celulose e/ou glicina; b) lubrificantes, e.g., sílica, talco, ácido esteárico, os seus sais de magnésio ou cálcio e/ou polietilenoglicol; para comprimidos também c) ligantes, e.g., siicato de alumínio e magnésio, pasta de amido, gelatina, tragacante, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio e/ou polivinilpirrolidona; se desejado, d) desintegrantes, e.g., amidos, agar, ácido algínico ou o seu sal de sódio, ou misturas efervescentes; e, se desejado, absorventes, corantes, 41 ΡΕ1430045 injectáveis são de preferência soluções ou suspensões isotónicas aquosas, e supositórios que são vantajosamente preparados a partir de emulsões ou suspensões gordas. As referidas composições podem ser esterilizadas e/ou contêm adjuvantes, tais como agentes conservantes, estabilizadores, humidificantes ou emulsionantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Além disso, as composições podem ainda conter outras substâncias terapeuticamente valiosas. As referidas composições são preparadas de acordo com métodos convencionais de mistura, granulação ou revestimento, respectivamente, e contêm 0,1 até 75%, de preferência 1 até 50%, do ingrediente activo.

Formulações adequadas para aplicação transdérmica incluem uma quantidade eficaz de um composto do invento com um veículo. Veículos vantajosos incluem solventes fama-cologicamente aceitáveis absorvíveis para ajudar a passagem através da pele do hospedeiro. Caracteristicamente, os dispositivos transdérmicos estão na forma de uma faixa compreendendo uma parte de apoio, um reservatório contendo o composto, opcionalmente com veículos, opcionalmente uma barreira de controle da taxa para distribuir o composto na pele do hospedeiro a uma taxa controlada e pré-determinada durante um período prolongado de tempo, e meios para segurar o dispositivo à pele.

Uma dosagem unitária para um mamífero de 50 a 70 kg pode conter entre 10 e 200 mg do ingrediente activo. A 42 ΡΕ1430045 dosagem do composto activo está dependente da espécie do animal de sangue quente (mamífero), do peso corporal, da idade e estado do indivíduo, e da forma de administração.

Os exemplos seguintes pretendem ilustrar o invento. As temperaturas são dadas em graus centígrados. Se não mencionado de outra forma, todas as evaporações são realizadas a pressão reduzida, de preferência entre 15 e 100 mm H. As rotações ópticas (expressas em graus)são medidas à temperatura ambiente a 589 nM (linha D do sódio) ou a outros comprimentos de onda como especificado nos exemplos. A estrutura dos compostos são confirmadas por métodos analíticos padrão tais como espectro de massa, análise elementar, RMN, espectroscopia de IV e semlhantes.

Os prefixos L, D, ou R e S são usadas para indicar a configuração absoluta num centro assimétrico. A estrutura dos agentes activos identificadas pelos nos dos códigos, nomes genéricos ou comerciais podem ser tiradas da presente edição do compêndio padrão "The Merck índex" ou a partir de bases de dados, e.g., Patentes Internacionais (e.g. "IMS World Publications"). O teor correspondente deste é aqui incorporado como referência. Qualquer especialista na técnica está completamente capaz de identificar os agentes activos e, baseados nestas referências, capaz de manufacturar e testar as indicações farmacêuticas e propriedades em modelos teste padrão, quer in vitro quer in vivo. 43 ΡΕ1430045

Os ingredientes activos correspondentes ou sais farmaceuticamente activos destes podem também ser usados na forma de um solvato, tal como um hidrato, ou incluindo outros solventes usados para cristalização.

Exemplo 1 (a) Éster etílico da N-[1-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-L-homofenilalanina

Uma mistura de tioacetato de potássio (1,66 g, 14,6 mmmol) e éster etílico da N-[1-[(R)-2-bromo-2-(4-tetra-hidropiranil)acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-L-homofenilalanina (1,84 g, 3,52 mmol) em 50 mL de tetra-hidrofurano é agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura é diluída com acetato de etilo, lavada com água, com solução saturada de bicarbonato de sódio, com água e sal e depois seca sobre sulfato de magnésio. A mistura é filtrada e concentrada à secura in vácuo. 0 óleo residual é cromatografado em sílica gel com hexano:acetato de etilo (50:50) para produzir o composto do título, p.f. 107-111 °C; [aD] -56,2 7o (c=0, 994, metanol). 44 ΡΕ1430045 O material de partida é preparado como se segue:

Uma solução de nitrito de sódio (4,71 g, 68,3 mmol) em 35 mL de água á adicionada gota à gota a uma solução gelada (0°C) de (D)-a-(4-tetra-hidropiranil)-glicina (J. Am. Chem. Soc., Vol. 117, pp. 9375-9376 (1995) (7,05 g, 44,3 mmol) e HBr (aq) a 48% (70 mL) em 35 mL de água. Após completar a adição, a mistura é deixada a aquecer à temperatura ambiente, agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura é extraída com acetato de etilo; a fase orgânica é lavada sequencialmente com água, tiosulfato de sódio aquoso a 5%, e água e sal, depois seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura é filtrada e concentrada in vacuo para produzir ácido (D)-a-brommo-a-(4-tetra-hidropiranil)-acético como um sólido. O outro intermediário é preparado como se segue: O gás cloreto de hidrogénio é borbulhado através de uma solução de (L)-homofenilalanina (5,13 g, 28,7 mmol) em 100 mL de etanol durante 5 minutos. A mistura é agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura é concentrada in vacuo para produzir cloridrato do éster etílico da L-homofenilalanina como um sólido branco.

Uma mistura de cloridrato do éster etílico da (L)-homofenilalanina (6,87 g, 28,3 mmol), N-CBZ-cicloleucina (7,69 g, 29,2 mmol), cloridrato de l—(3— dietilaminopropil)-3-etilcarbodi-imida (5,44 g, 28,5 mmol), 45 ΡΕ1430045 1-hidroxibenzotriazole (3,96 g, 29,3 mmol) e trietialmina (2,90 mL, 28,7 mmol) em 150 mL de cloreto de metileno é agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura é concentrada in vacuo, o resíduo é tomado em acetato de etilo, a solução é lavada com água, HC1 IN (aq), solução saturada de bicarbonato de sódio e água e sal, e depois seca sobre sulfato de magnésio. A mistura é filtrada e concentrada in vacuo para produzir éster etílico da N-(l-CBZ-aminociclopentanocarbonil)-(L)-homofenilalanina como um sólido branco; EM: M+l=453.

Uma solução de N-(1-CBZ-aminociclopentanocarbo-nil)-(L)-homofenilalanina (4,85 g, 10,7 mmol) em 150 mL de etanol na presença de 10% de paládio em carbono (0,5 g) à pressão de 45 psi de hidrogénio numa garrafa Parr durante 3 horas. A mistura é filtrada através de um bloco de celite e concentrada in vacuo para dar éster etílico de N-(l-amino-ciclopentanocarbonil)-(L)-homofenilalanina; EM: M+l=319.

Uma mistura de éster etílico de N-(l-amino-ciclopentanocarbonil)-(L)-homofenilalanina (3,62 g, 11,4 mmol), ácido (D)-a-bromo-a-(4-tetra-hidropiranil)acético (2,37 g, 10,7 mmol), cloridrato de 1-(3-dietilaminopropil)-3-etilcarbodi-imida (2,07 g, 0,8 mmol) e l-hidroxi-7-azabenzotriazole (1,49 g, 11,0 mmol) em cloreto de metileno (100 mL) é agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura é evaporada à secura in vacuo, o resíduo é tomado em acetato de etilo, a solução de acetato de etilo é lavada sequencialmente com água, HC1 (aq) IN, solução saturada de bicarbonato de sódio e água e sal, depois seca sobre 46 ΡΕ1430045 sulfato de magnésio anidro, e evaporada à secura in vacuo. O sólido resultante é cromatografado em sílica gel com hexano e acetato de etilo (50:50) para produzir éster etílico de N-[1-[(R)-2-bromo-2-(4-tetra-hidropiranil)ace-tilamino]ciclopentanocarbonil]-(L)-homofenilalanina; EM: M+l=522. São preparados de forma similar: (b) Éster etílico de N-[1-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-(L)-triptofano; p.f. 67-77°C; [a]D -49,13° (c 1,079, DMSO). (c) Éster etílico de N-[1-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-4-metoxifenilalanina; p.f. 125-126°C. (d) Éster etílico de N-[1-[2-acetiltio-3-(4-tetra-hidropiranil)-propionilamino]-ciclopentanocarbonil]-(L)-homofenilalanina; p.f. 33-38°C. (e) Éster etílico de N-[2-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropioni]-(L)-homofenilalanina; p.f. 83-85°C; [a]D -45,48° (c 1,0, metanol); usando BOC-a-metilalanina em vez de CBZ-leucina. (f) Éster etílico de N-[2-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-4-metoxifenilalanina, p.f. 39-42°C; [a]D -44,3° (c 1,05, metanol). - 47 - ΡΕ1430045 (g) Ester etílico de N-[2-[(S)-2-acetiltio-2-( 4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-4-bifenilalanina, p.f. 121-122°C. (h) Éster n-butílico de N-[2-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropionil]- (L) - [2-(2-tienil)-5-piridil]-alanina, p.f. 55-60°C. (i) Éster etílico de N-[ 1-[2-acetiltio-3-(4-tetra-hidropiranil)-propionilamino]-ciclopentanocarbonil]-(L)-homofenilalanina, p.f. 33-38°C. (j) Éster etílico de N-[1-[2-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-triptofano; p.f. 55-63°C.

Exemplo 2 (a) N-[1-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-L-triptofano

Uma solução de N-[1-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra hidropiranil)-acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-L-tripto- 48 ΡΕ1430045 fano (0,54 g, 1,0 mmol) em MeOH (5,0 mL) é tratada com NaOH IN (5,0 mL) sob uma atmosfera de árgon e agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A solução é acidificada com HC1 IN e concentrada in vacuo para remover a maior parte de MeOH. O resíduo aquoso é extraído com EtOAc (3x5,0 mL) e os extractos são combinados e lavados com água (5,0 mL) e solução de água e sal (5,0 mL) . A solução é seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada in vacuo. O produto é cristalizado a partir de éter t-butilmetílico-hexano para produzir o composto do título; p.f. 212-215°C; [a]D-6,58° (c 1,026, DMSO). São preparados de forma similar: (b) N-[1-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-(L)-homofenil-alanina; p.f. 193-195°C; [a]D -23,33° (c 1,05, metanol). (c) N-[2-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-homofenilalanina; p.f. 194-195°C; [<x]D -8,2° (c 0,3, metanol). (d) N-[2-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-[2-(2-tienil)-5-piridil] alanina; p.f. 192-193°C. (e) N-[2-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(l)-bifenilalanina; p.f. 199-200°C. 49 ΡΕ1430045 (f) N-[1-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-4-metoxifenilalani-na; p.f. 220-221°C. (g) N-[2-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(l)-4-metoxifenilalani-na; p.f. 182-183°C. (h) N-[1-[(S)-2-mercapto-3-(4-tetra-hidropira-nil)-propionilamino]-ciclopentanocarbonil]-(L)-homofenil-alanina; p.f. 145-147°C. (i) N-[2-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-triptofano; p.f. 195-201°C.

Exemplo 3 (a) Éster etílico da N-[2-[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-L-homofenilalanina

O composto do exemplo l(e) (0,49 g, 1,0 mmol) é dissolvido, sob uma atmosfera de árgon, em etanol absoluto (5 mL) e a solução é tratada com NaOH IN (1,0 mL, 1,0 50 ΡΕ1430045 mmol). A mistura é agitada à temperatura ambiente durante 4 horas e depois tratada com HC1 IN até pH 3. A mistura é evaporada para remover a maior parte do etanol e o produto é extraído com acetato de etilo. O extracto de acetato de etilo é lavado com água e depois água e sal. A solução é então seca sobre sulfato de sódio e evaporada à secura. O produto é triturado em éter t-butilmetílico e hexano, depois recolhido por filtração para dar o composto do título; p.f. 157-158°C; [a]D-21,93° (c. 0,66, metanol). São preparadas de forma similar: (b) Éster etílico da N-[2-[(S)-2-mercapto-2-(4- tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-triptofano; p.f. 138-145°C; [a]D-34,31° (c. 1,057, DMSO). (c) Éster etílico da N-[1-[(S)-2-mercapto-2-(4- tetra-hidropiranil)-acetilamino]-ciclopentanocarbonil]-(L)-triptofano; p.f. 186-190°C; [a]D-25,72° (c. 1,01, DMSO). (d) Éster etílico da N-[1-[2-mercapto-2-(4-tetra- hidropiranil)-propionilamino]-ciclopentanocarbonil]-(L)-homofenilalanina; p.f. 92-94°C; [a]D-9,28° (c. 1,114, metanol).

Lisboa, 22 de Novembro de 2006

Claims (19)

1. ΡΕ1430045 1 REIVINDICAÇÕES 1. Um composto de fórmula O R3S- Ç II c

   (I) em que R representa hidrogénio, alquilo inferior, arilo carbocíclico ou heterocíclico-alquilo inferior ou ciclo-alquil-alquilo inferior; Ri representa hidrogénio, cicloalquilo, arilo carbocíclico ou heterocíclico, ou biarilo; alk representa alquileno inferior; R3 representa hidrogénio ou acilo; R4 representa oxacicloalquilo, (tia-, oxotia- ou diooxotia)-cicloalquilo, azacicloalquilo, ou oxacicloalquilo-, (tia-, oxotia- ou diooxotia)-cicloalquil- ou azacicloalquil-alquilo inferior; R5 representa hidrogénio ou alquilo inferior; 2 ΡΕ1430045 R-6 representa alquilo inferior, arilo carbo-cíclico ou heterocíclico, (aril carbocíclico ou heterocí-clico)-alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquil-alquilo inferior, biarilo ou biaril-alquilo inferior; R7 representa alquilo inferior (aril carbocíclico ou heterocíclico)-alquilo inferior, cicloalquil-alquilo inferior ou biaril-alquilo inferior; ou Rg e R7, juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam cicloalquilideno de 3 a 10 membros o qual pode ser substituído por alquilo inferior ou aril-alquilo inferior ou pode ser fundido com um anel carbocíclico de 5 a 7 membros saturado ou insaturado; ou de 5 a 6 membros (oxacicloalquilideno, tiacicloalquilideno ou azacicloalquilideno), cada um opcionalmente substituído por alquilo inferior ou aril-alquilo inferior; ou 2,2-norbo-nilideno; COOR2 representa carboxilo ou carboxlo deriva-tizado na forma de um éster farmaceuticamente aceitável; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que arilo representa arilo carbocíclico ou heterocíclico, monocíclico ou bicíclico, pelo que arilo carbocíclico monocíclico representa fenilo opcionalmente substituído por um até três substituintes seleccionados a partir de alquilo inferior, hidroxilo, 3 ΡΕ1430045 alcoxilo inferior, aciloxilo, halogéneo, ciano, trifluo-rometilo, trifluorometoxilo, amino, alcanoil inferior-amino, alquil inferior-(tio, sufinilo ou sulfonilo), alcoxi inferior-carbonilo, mono ou di-alquil inferior-carbamoílo, ou mono ou di-alquil inferior-amino; ou alquileno inferior-dioxilo; arilo carbociclico biciclico representa 1- ou 2-naftilo ou 1- ou 2-naftilo substituído de preferência por alquilo inferior, alcoxilo inferior ou halogéneo; arilo heterociclico monociclico representa tiazo-lilo, tienilo, furanilo, piridilo, pirimidinilo, oxazolilo, isoxazolilo, pirrolilo, imidazolilo ou oxadiazolilo, sendo cada um opcionalmente substituído por alquilo inferior; arilo heterociclico biciclico representa indolilo ou benzotiazolilo opcionalmente substituído por hidroxilo, alquilo inferior, alcoxilo inferior ou halogéneo; em que acilo é derivado de um ácido carbociclico e representa alcanoílo inferior opcionalmente substituído, aril carbocíclico-alcanoílo inferior, aroílo, alcoxi inferior-carbonilo ou aril-alcoxi inferior-carbonilo; pelo que alcanoílo inferior é opcionalmente substituído por alcoxi inferior-carbonilo, alcanoil inferior-oxilo, alcanoil inferior-tio, alcoxilo inferior, alquil inferior-tio, hidroxilo, di-alquil inferior-amino, alcanoil inferior-amino, morfolino, piperidino, pirrolidino ou 1-alquil inferior-piperazino; 4 ΡΕ1430045 em que alquileno inferior refere-se à cadeia de carbono divalente linear ou ramificado o qual pode ser substituído por alcoxilo inferior; e em que o termo "inferior" referido aqui em ligação com radicais orgânicos ou compostos define-os com até 7 átomos de carbono inclusive.
2. 2. Um composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula r 0 ! r 0. slk-R, c— -c— f- 11 1 - C-N—CH-COORj R* R em que os carbonos assimétricos tendo os substituintes -alk-Ri e R4 têm tipicamente a configuração S, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
3. 3. Um composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula I, em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa hidrogénio, C5- ou C6-cicloalquilo, arilo carbocíclico ou heterocíclico, ou biarilo; alk representa alquileno inferior; R3 representa hidrogénio ou acilo; R4 representa oxacicloalquilo ou oxacicloalquil-alquilo inferior; Rç e R7 representa alquilo inferior; ou R6 e R7 juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam cicloalquilideno de 5 ou 6 membros; COOR2 representa carbo-xilo ou carboxilo derivatizado na forma de um éster 5 ΡΕ1430045 farmaceuticamente aceitável; ou um seu sal farmaceutica-mente aceitável.
4. 4. Um composto de acordo com a reivindicação 2 de fórmula Ia, em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa hidrogénio, C5-ou C6-cicloalquilo, arilo carbo-ciclico ou heterocíclico, ou biarilo; alk representa alqui-leno inferior; R3 representa hidrogénio ou acilo; R4 representa oxacicloalquilo ou oxacicloalquil-alquilo inferior; R6 e R7 representa alquilo inferior; ou R6 e R7 juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam cicloalquilideno de 5 ou 6 membros; C00R2 representa carboxilo ou carboxilo derivatizado na forma de um éster farmaceuticamente aceitável; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
5. 5. Um composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula I, em que R e R5 representa hidrogénio; Ri representa arilo carbociclico ou heterocíclico, ou biarilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoílo inferior em que alcanoílo inferior é opcionalmente substituído por alcoxi inferior-carbonilo, alcanoil inferior-oxilo, alcanoil inferior-tio, alcoxilo inferior, alquil inferior-tio, hidroxilo, di-alquil inferior-amino, alcanoil inferior-amino, morfolino, piperidino, pirrolidino ou 1-alquil inferior-piperazino; R4 representa tetra-hidropiranilo ou 4-tetra-hidropiranilmetilo; R6 e R7 representam C1-C4-alquilo e são idênticos; alk representa metileno ou etileno; C00R2 representa carboxilo, alcoxi inferior-carbo-nilo, (di-alquil inferior-aminocarbonil)-alcoxi inferior- 6 ΡΕ1430045 carbonilo ou (morfolinocarbonil, piperidinocarbonil ou pirrolidinocarbonil)-alcoxi inferior-carbonilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitáveis.
6. 6. Um composto de acordo com a reivindicação 2 de fórmula Ia, em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa arilo carbociclico ou heterociclico, ou biarilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoilo inferior em que alcanoilo inferior é opcionalmente substituído por alcoxi inferior-carbonilo, alcanoil inferior-oxilo, alcanoil inferior-tio, alcoxilo inferior, alquil inferior-tio, hidroxilo, di-alquil inferior-amino, alcanoil inferior-amino, morfolino, piperidino, pirrolidino ou 1-alquil inferior-piperazino; R4 representa tetra-hidropiranilo ou 4-tetra-hidropiranilmetilo; R6 e R7 representa Ci-C4-alquilo e são idênticos; alk representa metileno ou etileno; COOR2 representa carboxilo, alcoxi inferior-carbonilo, (di-alquil inferior-aminocarbonil)-alcoxi inferior-carbonilo ou (mor-folinocarbonil, piperidinocarbonil ou pirrolidinocarbonil)-alcoxi inferior-carbonilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7. 7. Um composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula I, em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa arilo carbociclico ou arilo heterociclico nos quais arilo carbociclico representa fenilo ou fenilo substituído por um ou dois hidroxilo, alcanoil inferior-oxilo, alquilo inferior, alcoxilo inferior, trifluoro-metilo, trifluorometoxilo ou halogéneo e nos quais arilo heterociclico representa indolilo; R3 representa hidrogénio 7 ΡΕ1430045 ou alcanoílo inferior; R4 representa 4-tetra-hidropiranilo; Rg e R7 representam metilo; alk representa metileno ou etileno; e COOR2 representa carboxilo ou alcoxi inferior-carbonilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitáveis.
8. 8. Um composto de acordo com a reivindicação 2 de fórmula I, em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa arilo carbocíclico ou arilo heterociclico nos quais arilo carbocíclico representa fenilo ou fenilo substituído por um ou dois hidroxilo, alcanoil inferior-oxilo, alquilo inferior, alcoxilo inferior, trifluorome-tilo, trifluorometoxilo ou halogéneo e nos quais arilo heterociclico representa indolilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoílo inferior; R4 representa 4-tetra-hidropiranilo; R6 e R7 representam metilo; alk representa metileno ou etileno; e COOR2 representa carboxilo ou alcoxi inferior-carbonilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitáveis.
9. 9. Um composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula I ou Ia, em que R e R5 representam hidrogénio; Ri representa fenilo, fluorofenilo, metoxifenilo, 4-bifenilo, 2-tienil-5-piridilo, ou 3-indolilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoílo inferior; R4 representa 4-tetra-hidropiranilo; R6 e R7 representam metilo; alk representa metileno ou etileno; e COOR2 representa carboxilo ou alcoxi inferior-carbonilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitáveis.
10. 10. Um composto de acordo com a reivindicação 2 de fórmula Ia, em que R e R5 representa hidrogénio; R4 ΡΕ1430045 representa fenilo que é não substituído ou substituído por fenilo ou Ci-C4 alcoxilo; ou Ri representa indolilo ou piridilo substituído por tienilo; R2 representa hidrogénio ou C1-C4 alquilo; R3 representa hidrogénio ou C2-C5 alca-noílo; R4 representa tetra-hidropiranilo ou 4-tetra-hidropiranilmetilo; R6 e R7 representam Ci-C4 alquilo; ou R6 e R7, juntos com o átomo de carbono ao qual estão ligados, representam ciclopentilideno; alk representa C7 a C2 alqui-leno; ou um seu sal farmaceuticamente aceitáveis.
11. 11. Um composto de acordo com a reivindicação 2 de fórmula Ia, em que R e R5 representam hidrogénio; R4 representa fenilo, fluorofenilo, metoxifenilo, 4-bifenilo, 2-tienil-5-piridilo, ou 3-indolilo; R3 representa hidrogénio ou alcanoílo inferior; R4 representa 4-tetra-hidro-piranilo; R6 e R7 representam metilo; alk representa metileno ou etileno; e COOR2 representa carboxilo ou alcoxi inferior-carbonilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitáveis.
12. 12. Um composto de acordo com a reivindicação 2 sendo éster etílico do N-[2-[(S)-2-acetiltio-2-(4-tetra-hidropiranil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-4-metoxi-fenilalanina, N—[2—[(S)-2-mercapto-2-(4-tetra-hidropira-nil)-acetilamino]-2-metilpropionil]-(L)-4-metoxifenilalani-na, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
13. 13. Um uso de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes para a preparação de um 9 ΡΕ1430045 medicamento para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios modulados pela inibição da enzima de conversão da angio-tensina e endopeptidases neutra.
14. 14. Um uso de acordo com a reivindicação 13 compreendendo a preparação de um medicamento para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios modulados pela inibição da enzima de conversão de endotelina.
15. 15. Um uso de acordo com a reivindicação 13 ou 14 para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios cardiovasculares, tais como hipertensão, insuficiência renal incluindo edema e retenção e sal, e.g. insuficiência renal crónica ou aguda , edema pulmonar, insuficiência cardíaca incluindo insuficiência cardíaca congestiva, aterios-clerose, dor, depressão, certos estados psicóticos, distúrbios cognitivos, angina, síndroma pré-menstrual, doença de Meniere, hiperaldosteronismo, hipercalciureia, ascites, glaucoma, asma, distúrbios gastrointestinais tais como diarreia, síndroma de cólon irritável e hiperacidez gástrica, isquémia cerebral (AVC), hemorragia subaracnóide, lesão cerebral traumática, vasoespasmo cerebral, hipertrofia arterial, restenose, doença de Raynaud, enfarte de miocárdio, obesidade, hiperplasia da próstata, enxaqueca, diabetes mellitus, e.g. nefropatia diabética, pré-eclam-psia, rejeição de transplante tal como em transplante da aorta ou de órgão sólido e disfunção eréctil.
16. 16. Uma composição farmacêutica compreendendo 10 ΡΕ1430045 uma quantidade eficaz de um composto de qualquer uma das reivindicações 1 até 12 em combinação com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis.
17. 17 . Uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 16 para inibir a enzima de conversão de angiotensina e endopeptidase neutra.
18. 18 . Uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 16 para inibir a enzima de conversão de endotelina.
19. 19. Uma composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 16 compreendendo ainda pelo menos um composto seleccionado a partir do grupo consistindo de antagonistas do receptor de angiotensina II, inibidores de renina, blo-queadores de canais de cálcio, inibidores da sintase aldos-terona/antagonistas de aldosterona, diurétiicos, antagonistas do receptor de vasopressina, drogas cardiotónicas, antagonistas de endotelina, inibidores de ECE, agentes anti-arterioscleróticos, inibidores da absorção de colesterol, fibratos, estatinas, agentes tiromiméticos e agentes anti-diabéticos. Lisboa, 22 de Novembro de 2006