KR100393701B1

KR100393701B1 - 치환된옥사졸리딘칼파인및/또는카텝신b억제제및이를포함하는약제학적조성물

Info

Publication number: KR100393701B1
Application number: KR1019970704709A
Authority: KR
Inventors: 노튼 피 피트; 슈자스 메디; 매튜 디 린닉; 마이클 알 안젤라스트로; 김화옥
Original assignee: 아벤티스 파마슈티칼스 인크.
Priority date: 1995-01-11
Filing date: 1995-12-15
Publication date: 2003-11-28
Also published as: DK0802909T3; JPH10512257A; TW454001B; CA2210258A1; DE69523072T2; FI972935A; AR001787A1; US5691368A; AU692044B2; PT802909E; AU4473196A; EP0802909A2; ES2165441T3; ATE206413T1; HUT77649A; NO309267B1; CN1088456C; IL116724A; NZ298999A; WO1996021655A3

Abstract

본 발명은 칼파인 및/또는 카텝신 B의 옥사졸리딘 억제제 및 이를 함유하는 조성물에 관한 것이다. 칼파인 및/또는 카텝신 B의 억제제로서, 상기 화합물은 급성 또는 만성 신경변성 장애를 앓고 있는 환자의 치료에 유용하다.

Description

치환된 옥사졸리딘 칼파인 및/또는 카텝신 B 억제제 및 이를 포함하는 약제학적 조성물

뇌혈관 공급의 손상으로 인한 신경학적 손상은 사망 및 장애를 유발한다. 허혈성 신경사의 병인과 관련하여, 세포내 칼슘의 지속된 증가가 세포의 기능을 손상시키거나 훼손시킬 수 있는 여러 가지 세포내 현상을 유발한다는 것이 제시되었다[참조: Hong, Seung-Chyul, et al., Stroke, 25, 663-669(1994); Siesjo, B.K., et al., J. Cereb. Blood Flow Metab., 9, 127-140(1989); Siesjo, B. K., J. Neurosurg., 77, 169-184(1992)]. 생리학적 조건하에서, 세포내 칼슘 농도의 정확한 유지는 신중하게 조절된다. 허혈 동안 칼슘 항상성 상실 및 세포내 칼슘의 증가는 여러 칼슘-민감성 메카니즘이 부적절하게 활성화되도록 하여, 세포 기능이 해를 끼치게 된다. 상기 유형의 메카니즘의 제1 예는 칼슘-활성화된 단백질분해이다. 허혈 동안, 칼파인으로서 공지된 칼슘 활성화된 중성 프로테아제의 연속적인 자극은 기질 단백질의 비정상적인 단백질분해를 유발한다[참조: Seubert, P., et al., Brain Res., 492, 366-370(1989); Inuzuka, T., et al., Stroke, 21, 917-922(1990); Lee, K.S., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 88, 7233-7237(1991)].

칼파인에 대한 바람직한 기질은 미세관-관련 단백질 2(MAP2), 스펙트린 및 신경세사(neurofilament) 단백질과 세포골격 단백질을 포함한다. 이외의 기질은 단백질 키나제 C 및 칼슘/칼모듈린-의존 단백질 키나제 II와 같은 주요 조절 효소를 포함한다. 상기 세포골격 단백질은 분해되고, 상기 조절 효소의 양은 허혈성 에피소드에 따라 감소된다. 명백하게, 상기 구조 및 조절 단백질 중 몇몇 또는 모두의 조절되지 않은 단백질분해는 세포 생존을 심각하게 손상시킬 수 있다. 따라서, 칼슘-활성화된 단백질분해의 억제제는 허혈성 세포 손상에서 유용한 치료학적 작용을 제공한다.

최근, 디펩티딜 알데히드, Cbz-Val-Phe-H는 파손된 막 제제 및 손상되지 않은 세포 시스템 모두에서 칼파인에 대해 낮은 K_i를 나타내는, 칼파인의 세포-침투 억제제로서 입증되어 있다[참조: Mehdi, S., Trends Biochem Sci., 16, 150-153(1991)]. Cbz-Val-Phe-H는 또한 환자에게서 카텝신 B를 억제하는데 유용하다[참조: 유럽 특허원 OPI 제0363284호, 공개일: 1990년 4월 11일, 발명자: Bey, P. 등] 또한, Cbz-Val-Phe-H로 처치된 래트는 염수 처리되거나 부형제 처리된 대조군 동물보다 상당히 적은 용적의 뇌 경색을 나타낸다. Cbz-Val-Phe-H 30mg/kg 또는 60mg/kg의 누적 용량의 정맥 주사는 경색, 부종 및 칼슘-활성화된 단백질분해를 감소시키는데 효과적이다. 단두 후 허혈증에 대한 단백질분해 반응은 또한 Cbz-Val-Phe-H에 의해 감소될 수 있다[참조: Hong, Seung-Chyul, et al., Stroke, 25, 663-669(1994)].

본 발명자들은 Cbz-Val-Phe-H의 치환된 옥사졸리딘 유도체가 우수한 세포 침투능을 나타내면서 칼파인 및 카텝신 B에 대해 낮은 K_i를 갖는다는 것을 밝혀 내었다. 본 발명의 목적은 칼파인 및/또는 카텝신 B를 억제하기 위한 치료제를 필요로 하는 환자에게 이를 제공하는 것이다. 본 발명의 추가의 목적은 급성 또는 만성 신경변성 장애를 앓고 있는 환자 처치시의 치료제를 제공하는 것이다.

발명의 요약

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 및 약제학적으로 허용되는 이의 염에 관한 것이다:

[화학식 I]

상기 화학식 I에서,

R 및 Q는 각각 독립적으로 수소, OH, C₁-C₄알킬, C₁-C₄알콕시, NO₂, NH₂또는 할로겐이고;

R₁및 R₂는 각각 독립적으로 C₁-C₄알킬이고;

R₃은 수소, C₁-C₈알카노일,

R₄및 R₅는 각각 독립적으로 수소, C₁-C₄알킬 또는 벤질이고;

R₆은 3급-부틸옥시카보닐, 카보벤질옥시 또는 화학식

[여기서, Z는 N 또는 CH이고; B는 화학식

(여기서, R'은 수소 또는 C₁-C₆알킬 그룹이다)의 그룹이다]이고;

R₇은 수소 또는 메틸이고;

R₈은 C₁-C₄알킬이고;

m은 정수 0 또는 1이고;

n은 정수 0 또는 1이고;

p는 정수 0 내지 3이고;

q는 정수 0 내지 3이다.

화학식 I의 화합물은 칼파인 및/또는 카텝신 B 억제제이므로, 급성 또는 만성 신경 변성 장애, 예를 들어 허혈성 발작(허혈증 또는 색전증 기원), 출혈성 발작 및 후속적인 혈관 현상, 심근 경색, 관상동맥 바이패스(coronary bypass) 및 이식 수술의 신경학적 결과, 두부 외상, 알츠하이머병, 노화 관련 치매, 혈관성 치매, 파킨슨병 및 근위축성 측색 경화증 등의 치료에 유용하다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "C₁-C₄알킬"은 탄소수 1 내지 4의 포화된 직쇄 또는 측쇄 탄화수소 라디칼을 의미한다. 상기 용어의 범주 내에 포함되는 것은 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸 및 이소부틸 등이다. 용어 "C₁-C₄알콕시"는 탄소수 1 내지 4의 포화된 직쇄 또는 측쇄 탄화수소 라디칼을 갖는 산소 라디칼로 이루어진 알콕시 라디칼을 의미한다. 상기 용어의 범주 내에 포함되는 것은 메톡시, 에톡시, 프로폭시, n-부톡시, 이소부톡시, 2급 부톡시 및 3급 부톡시 등이다. 용어 "C₁-C₈알카노일"은 포르밀, 아세틸, 프로피오닐, 부티릴, 펜타노일, 헥사노일 및 2-에틸헥사노일 등이다. 용어 "할로", "할로겐" 또는 "할라이드"는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드원자를 의미한다.

용어 "Ts" 또는 "토실레이트"는 화학식

의 p-톨루엔설포네이트 작용기를 의미한다.

용어 "Bn"은 화학식

의 벤질 작용기를 의미한다.

용어 "CBz" 또는 "카보벤질옥시"는 화학식

의 카보벤질옥시 작용기를 의미한다.

용어 "BOC" 또는 "3급 부틸옥시카보닐"은 화학식

의 3급 부틸옥시카보닐 작용기를 의미한다.

용어 "입체이성체"는 공간에서 이들 원자의 배향만이 상이한, 개개 분자의 모든 이성체에 대한 일반적 용어이다. 이는 거울상 이성체(에난티오머), 기하(시스/트랜스) 이성체, 및 서로 거울상이 아닌 하나 이상의 키랄 중심을 갖는 화합물의 이성체(디아스테레오머)를 포함한다. 아미노산에 대해, 명명 L/D 또는 R/S는 문헌[참조: IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature, Eur. J. Biochem. 138: 9-37(1984)]에 기술된 바와 같이 사용될 수 있다.

용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 목적하는 효능을 성취하기 위해 투여되는 용량에서 실질적으로 무독성이고, 중요한 약리학적 활성을 독립적으로 지니지 않는 염을 의미한다. 상기 용어의 범주 내에 포함되는 염은 브롬화수소산, 염산,황산, 인산, 질산, 포름산, 아세트산, 프로피온산, 석신산, 글리콜산, 락트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, α-케토글루타르산, 글루탐산, 아스파르트산, 말레산, 하이드록시말레산, 피루브산, 페닐아세트산, 벤조산, p-아미노벤조산, 안트라닐산, p-하이드록시벤조산, 살리사이클산, 하이드록시에탄설폰산, 에틸렌설폰산, 할로벤젠설폰산, 톨루엔설폰산, 나프탈렌설폰산, 메탄설폰산 및 설파닐산 등이다.

본 명세서 내에서 사용되는 천연 아미노산은 키랄성 탄소원자를 함유한다. 특별히 달리 기술하지 않는 한, 바람직한 화합물은 L-배위의 광학 활성 아미노산을 사용하나; 본 발명자들은 사용되는 아미노산이 D-배위일 수도 있음을 고려한다. 또한, m 및 n이 모두 정수 1인 화학식 I의 화합물은 라세미체 혼합물을 포함하는, D- 및 L-이성체의 혼합물일 수 있다. 본 명세서의 범주 내에 포함되는 α-아미노 산에 대해 인지된 약어의 예는 표 1에 기재되어 있다.

[표 1]

화학식 I의 화합물(여기서, R₆은 3급 부틸옥시카보닐, 카보벤질옥시 또는 치환체가 상기 기술된 바와 같은

이다)을 제조하는데 필요한 출발물질은 시판되고 있거나 당해 분야의 통상적인 기술 중의 하나에 의해 용이하게 제조된다. 예를 들어, 화학식

의 중간체

(여기서, Z는 상기 기술된 바와 같고, B는 화학식

이다)는 문헌[참조: 유럽 특허원 OPI 제0529568호, 발명자: Peet 등, 공개일: 1993년 3월 3일]에 명시되어 있다. 또한, 화학식

의 중간체는 반응식 I에 기술되어 있는 바와 같이 제조될 수 있다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당해 분야의 숙련가에 의해 용이하게 입수가능하다.

[반응식 I]

반응식 I은 화학식

의 적합한 중간체(여기서, Z는 상기 정의된 바와 같다)를 제조하는 일반적 합성 방법을 제공한다.

단계 A에서, 화학식 1의 적합한 2,5-피리딘디카복실산, 2-메틸 에스테르의카복실산 작용기(참조: Nippon Kagaku Zasshi, 1967,88, 563)를 당해 분야의 숙련가에게 익히 공지되고 친숙한 기술 및 공정을 사용하고, 티오닐 클로라이드와 같은 시약을 사용하여 이의 산 클로라이드로 전환시켜, 상응하는 화학식 2의 6-카보메톡시니코티노일 클로라이드를 수득한다.

단계 B에서, 화학식 2의 클로라이드를 당해 분야의 숙련가에게 익히 공지되고 친숙한 기술 및 공정에 의해 모르폴린을 사용하여 아미드화시켜, 상응하는 화학식 3의 5-(모르폴린-4-카보닐)-2-피리딘카복실산, 메틸 에스테르를 수득한다.

단계 C에서, 화학식 3의 5-(모르폴린-4-카보닐)-2-피리딘카복실산, 메틸 에스테르를 당해 분야의 숙련가에게 익히 공지되고 친숙한 기술 및 공정에 의해, 예를 들어 메탄올 중의 수산화리튬을 사용하여 가수분해시켜, 화학식 4의 5-(모르폴린-4-카보닐)-2-피리딘 카복실산을 수득한다.

또한, 화학식

의 적합한 중간체를 반응식 II(여기서, 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다)에 기술된 바와 같이 제조할 수 있다. 시약 및 출발 물질은 당해 분야의 숙련가에 의해 용이하게 입수가능하다.

[반응식 II]

반응식 II는 화학식

의 적합한 중간체(여기서, Z는 상기 정의된 바와 같다)를 제조하는 일반적인 합성 방법을 제공한다.

단계 A에서, 화학식 I의 2,5-피리딘디카복실산, 2-메틸 에스테르의 유리 카복실산 작용기(참조: Nippon Kagaku Zassi, 1967,88, 563)를 당해 분야의 숙련가에게 익히 공지되고 친숙한 기술 및 공정을 사용하여 이의 3급 부틸 에스테르, 예를 들어 디사이클로헥실카보디이미드의 3급 부틸 알콜 부가물(참조: Synthesis, 1979, 570)로 전환시켜, 상응하는 화학식 5의 2,5-피리딘디카복실산, 2-메틸 에스테르, 5-3급 부틸 에스테르를 수득한다.

예를 들어, 화학식 1의 2,5-피리딘디카복실산, 2-메틸 에스테르를 메틸렌 클로라이드와 같은 적합한 유기 용매 중에서 몰 과량의 디사이클로헥실카보디이미드의 3급 부틸 알콜 부가물과 합한다. 반응은 전형적으로 0℃ 내지 실온의 온도 범위에서 2 내지 24시간 동안 수행한다. 화학식 5의 2,5-피리딘디카복실산, 2-메틸 에스테르, 5-3급 부틸 에스테르를 당해 분야에 공지된 바와 같은 표준 추출 방법에 의해 반응 혼합물로부터 분리시키고, 결정화에 의해 정제할 수 있다.

단계 B에서, 화학식 5의 2,5-피리딘디카복실산, 2-메틸 에스테르, 5-3급 부틸 에스테르를 모르폴린으로 아미드화시켜, 상응하는 화학식 6의 6-(모르폴린-4-카보닐)니코틴산, 3급 부틸 에스테르를 수득한다.

예를 들어, 화학식 5의 2,5-피리딘디카복실산, 2-메틸 에스테르, 5-3급 부틸 에스테르를 테트라하이드로푸란과 같은 적합한 유기 용매 중에서 몰 과량의 모르폴린과 접촉시킨다. 반응은 전형적으로 실온 내지 환류 온도 범위에서 5시간 내지 3일 동안 수행한다. 화학식 6의 6-(모르폴린-4-카보닐)니코틴산, 3급 부틸 에스테르를 당해 분야에 공지된 바와 같은 표준 추출 방법에 의해 반응 혼합물로부터 분리시키고, 결정화에 의해 정제할 수 있다.

단계 C에서, 화학식 6의 6-(모르폴린-4-카보닐)니코틴산, 3급 부틸 에스테르를, 예를 들어 니트로메탄 중의 HCl로 가수분해시켜, 상응하는 화학식 7의 6-(모르폴린-4-카보닐)니코틴산을 수득한다.

화학식 I의 화합물을 제조하기 위한 반응식 VI의 출발 물질은 반응식 III에서 기술한 바와 같이 제조할 수 있다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당해 분야의 숙련가가 용이하게 입수 가능하다.

[반응식 III]

R₈= R₁또는 R₂

Pg = 보호 그룹

X = 적합한 카복실산 보호 그룹 또는 수지

반응식 III, 단계 A에서, 화학식 8의 화합물을, 펩티드 합성에서 사용되는반응과 같이 당해 분야에 유사하게 공지된 표준 반응을 사용하여 화학식 9a의 화합물과 커플링시킨다. 예를 들어, 통상적인 펩티드 합성에서, 펩티드는 기술된 방법을 사용하여 N-말단 잔기의 α-아민을 탈보호시키고 펩티드 결합을 통해 후속적으로 N-보호된 아미노산을 커플링시킴으로써 연장시킬 수 있다. 상기 탈보호 및 커플링 방법은 목적하는 서열을 수득할 때까지 반복한다. 상기 커플링을 반응식 III에 제시된 바와 같이 계단식으로, 또는 단편의 축합에 의해, 또는 두 방법의 조합에 의해, 또는 본 명세서에 참조로 인용된 문헌[참조: Merrifield,J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2149-2154]에 의해 독창적으로 기술된 방법에 따른 고체상 펩티드 합성에 의해 구성 아미노산을 사용하여 수행할 수 있다. 고체상 합성 방법을 사용할 경우, C-말단 카복실산을 불용성 담체(통상적으로, 폴리스티렌)에 부착시킨다. 상기 불용성 담체는 연장 조건에 안정하지만, 이후에는 용이하게 분리되는 결합을 형성한다. 상기 담체의 예는 클로로- 또는 브로모메틸 수지, 하이드록시메틸 수지 및 아미노메틸 수지이다. 이들 수지 중 다수는 목적하는 C- 말단 아미노산이 이미 혼입되어 있는 상태로 시판되고 있다.

상기한 것 이외에, 펩티드 합성법은 본 명세서에 참조로 인용된 문헌[참조: Stewart 및 Young, "Solid Phase Peptide Synthesis", 2nd ed., Pierce Chemical Co., Rockford, IL(1984); Gross, Meienhofer, Udenfreind, Eds., "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol 1, 2, 3, 5 및 9, Academic Press, New York, 1980-1987; Bodanszky, "Peptide Chemistry: A Practical Textbook", Springer-Verlag, New York(1988); 및 Bodanszky, et al., "The Practice of PeptideSynthesis", Springer-Verlag, New York(1984)]에 기재되어 있다.

두 개의 아미노산, 아미노산과 펩티드, 또는 두 개의 펩티드 단편 간의 커플링을 표준 커플링 방법, 예를 들어 아지드 방법, 혼합된 카본산-카복실산 무수물(이소부틸 클로로포르메이트) 방법, 카보디이미드(디사이클로헥실카보디이미드, 디이소프로필카보디이미드 또는 수용성 카보디이미드) 방법, 활성 에스테르(p-니트로 페닐 에스테르, N-하이드록시-석신산 이미도 에스테르) 방법, 우드워드(Woodward) 시약 K 방법, 카보닐디이미다졸 방법, BOP-Cl과 같은 인 시약, 또는 산화 환원 방법을 사용하여 수행할 수 있다. 상기 방법 중 몇몇(특히, 카보디이미드 방법)은 1-하이드록시벤조트리아졸을 첨가함으로써 촉진시킬 수 있다. 상기 커플링 반응은 용액(액체상) 또는 고체상 중에서 수행할 수 있다.

구성 아미노산의 작용성 그룹은 일반적으로 바람직하지 않는 결합의 형성을 방지하기 위해 커플링 반응 동안 보호되어야 한다. 사용될 수 있는 보호 그룹은 본 명세서에 참조로 인용된 문헌[참조: Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley & Sons, New York(1981) 및 "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, New York(1981)]에 기재되어 있다.

C-말단 잔기의 α-카복실 그룹은 통상적으로 분리되어 카복실산 그룹을 제공할 수 있는 에스테르에 의해 보호된다. 사용될 수 있는 보호 그룹은 다음을 포함한다: 1) 알킬 에스테르, 예를 들어, 메틸 및 3급 부틸, 2) 아릴 에스테르, 예를 들어, 벤질 및 치환된 벤질, 또는 3) 온화한 염기 처리 또는 온화한 환원 방법에 의해 분리될 수 있는 에스테르, 예를 들어, 트리클로로에틸 및 펜아실 에스테르.

증가하는 펩티드 쇄에 커플링될 각 아미노산의 α-아미노 그룹은 보호되어야 한다. 당해 분야에 공지된 모든 보호 그룹을 사용할 수 있다. 상기 보호 그룹의 예는 다음을 포함한다: 1) 아실 유형, 예를 들어, 포르밀, 트리플루오로아세틸, 프탈로일 및 p-톨루엔설포닐; 2) 방향족 카바메이트 유형, 예를 들어, 벤질옥시카보닐(Cbz 또는 Z) 및 치환된 벤질옥시카보닐, 1-(p-비페닐)-1-메틸에톡시-카보닐, 및 9-플루오레닐메틸옥시카보닐(Fmoc); 3) 지방족 카바메이트 유형, 예를 들어 3급 부틸옥시카보닐(Boc), 에톡시카보닐, 디이소프로필메톡시카보닐 및 알릴옥시카보닐; 4) 사이클릭 알킬 카바메이트 유형, 예를 들어, 사이클로펜틸옥시카보닐 및 아다만틸옥시카보닐; 5) 알킬 유형, 예를 들어, 트리페닐메틸 및 벤질; 6) 트리알킬실란, 예를 들어, 트리메틸실란; 및 7) 티올 함유 유형, 예를 들어, 페닐티오카보닐 및 디티아석시노일. 바람직한 α-아미노 보호 그룹은 Boc, Cbz 또는 Fmoc이고, 바람직하게는 Boc이다. 펩티드 합성용으로 적합하게 보호된 다수의 아미노산 유도체는 시판되고 있다.

새롭게 첨가된 아미노산 잔기의 α-아미노 그룹의 보호 그룹은 다음 아미노산의 커플링에 앞서 분리된다. 상기 보호 그룹의 분리 조건은 문헌[참조: Greene, "Protective Groups in Organic Chemistry", Chapter 7, John Wiley & Sons, New York(1981)]에 기술되어 있다. Boc 그룹을 사용할 경우, 선택 방법은 트리플루오로아세트산 자체 또는 디클로로메탄 중의 트리플루오로아세트산, 또는 디옥산 또는 에틸 아세테이트 중의 HCl이다. 이어서, 생성된 암모늄 염을 커플링에 앞서 또는 동일 반응계 내에서 수성 완충액과 같은 염기성 용액, 또는 디클로로메탄 또는 디메틸포름아미드 중의 3급 아민을 사용하여 중화시킨다. Fmoc 그룹을 사용할 경우, 선택되는 시약은 디메틸포름아미드 중의 피페리딘 또는 치환된 피페리딘이지만, 2급 아민 또는 염기성 수용액을 사용할 수 있다. 탈보호는 0℃ 내지 실온의 온도에서 수행한다.

측쇄의 작용기를 갖는 모든 아미노산은 상기 기술된 그룹을 사용하는 펩티드의 제조시 보호되어야 한다. 당해 기술분야의 숙련가는 상기 측쇄의 작용기에 적합한 보호 그룹의 선택 및 사용이 아미노산 및 펩티드 내 다른 보호 그룹의 존재에 좌우됨을 인지할 것이다. 상기 보호 그룹의 선택은 α-아미노 그룹의 탈보호 및 커플링시 제거되지 않아야 한다는 점에서 중요하다.

예를 들어, Boc를 α-아미노 보호 그룹으로서 사용할 경우, 벤질(Bn) 에테르를 Try, Ser 또는 Thr과 같은 하이드록시를 함유하는 아미노산의 측쇄를 보호하기 위해 사용할 수 있다.

고체상 합성법을 사용할 경우, 펩티드를 통상적으로 보호 그룹 제거와 동시에 수지로부터 분리한다. Boc 보호 반응이 합성에 사용될 경우, 0℃ 에서 디메틸설파이드, 아니솔, 티오아니솔 또는 p-크레졸과 같은, 무수 HF를 함유하는 첨가제를 사용하는 처리는 수지로부터 펩티드를 분리하는 바람직한 방법이다. 펩티드의 분리는 또한 다른 산 시약, 예를 들어 트리플루오로메탄설폰산/트리플루오로아세트산 혼합물을 사용하여 수행할 수 있다. Fmoc 보호 반응을 사용할 경우, N-말단 Fmoc 그룹을 상기 기술된 시약을 사용하여 분리한다. 기타 보호 그룹 및 펩티드는 트리플루오로아세트산 용액, 및 아니솔 등과 같은 각종 첨가제를 사용하여 수지로부터분리한다.

보다 특히, 반응식 III, 단계 A에서, 화학식 8의 α-아미노산(여기서, X는 메틸 에스테르와 같은 적합한 α-카복실 보호 그룹이다)을 불활성 대기, 예를 들어, 질소하에 적합한 무수 유기 용매, 예를 들어, 무수 DMF 또는 무수 메틸렌 클로라이드에 용해시킨다. 상기 용액에 적합한 무수 유기 용매, 예를 들어, 무수 DMF 또는 무수 메틸렌 클로라이드에 용해된 N-하이드록시벤조트리아졸 수화물 1당량, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드 1당량 및 보호된 화학식 9a의 α-아미노산 1당량을 가한다. 이어서, 반응물을 약 1 내지 15시간 동안 교반한다. 이어서, 화학식 10의 커플링된 생성물을 당해 기술분야에 익히 공지된 방법, 예를 들어 추출 기술 및 플래시 크로마토그래피에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매로 희석시키고, 물로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 10의 커플링된 생성물을 수득한다.

또는, 반응식 III, 단계 A에서 적합하게 보호된 화학식 9a의 α-아미노산을 불활성 대기, 예를 들어, 질소하에 적합한 유기 용매에 용해시킨다. 적합한 유기 용매의 예는 석유 에테르, 사염화탄소와 같은 염소화 탄화수소, 에틸렌 클로라이드, 메틸렌 클로라이드, 또는 클로로포름; 1,2,4-트리클로로벤젠, 또는 o-디클로로벤젠과 같은 염소화 방향족; 이황화탄소; 디에틸 에테르, 테트라하이드로푸란 또는1,4-디옥산과 같은 에테르계 용매, 또는 벤젠, 톨루엔 또는 크실렌과 같은 방향족 용매이다. 메틸렌 클로라이드가 상기 커플링 반응에 바람직한 용매이다. 이어서, 용액을 적합한 아민 1 내지 4당량으로 처리한다. 적합한 아민의 예는 트리-(저급 알킬)아민(예: 트리에틸아민)과 같은 3급 유기 아민, 또는 피콜린, 콜리딘 및 피리딘과 같은 방향족 아민이다. 피리딘, 피콜린 또는 콜리딘을 사용할 경우, 이들은 매우 과량으로 사용할 수 있고, 따라서 또한 반응 용매로서도 작용한다. N-메틸모르폴린(NMM)이 커플링 반응에 특히 적합하다. 이어서, 용액을 약 -20℃로 냉각시키고, 이소부틸 클로로포르메이트 1당량을 가한다. 반응물을 약 10 내지 30분 동안 교반하고, 화학식 8의 아미노산 에스테르(여기서, X는 메틸 또는 에틸과 같은 에스테르 그룹이고, 아미노산은 산 부가염 또는 유리 염기일 수 있다) 1 내지 4당량을 반응물에 가한다. 반응물을 약 -20℃에서 30분 내지 2시간 동안 교반시킨 다음, 이를 실온으로 가온시키고, 1 내지 3시간 동안 교반한다. 이어서, 화학식 10의 커플링된 생성물을 당해 기술분야에 익히 공지된 기법, 예를 들어, 추출 기법 및 플래시 크로마토그래피에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 반응물을 메틸렌 클로라이드와 같은 적합한 유기 용매로 희석시키고, 물로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 10의 커플링된 생성물을 수득한다.

반응식 III, 단계 A1에서, 화학식 10의 커플링된 생성물 상의 보호 그룹(Pg)을 문헌[참조: T. W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", Chapter7, 1981, John Wiely & Sons, Inc]에 기술된 바와 같이, 당해 기술분야에 익히 공지된 조건하에 제거하고, 1급 아민을 R₆과 커플링시켜, 화학식 11의 커플링된 생성물을 수득한다. 예를 들어, Pg가 화학식 10의 커플링된 생성물 상의 3급 부틸 카바메이트(BOC)일 경우, 당해 화합물을 메탄올계 염산에 용해시키고, 수시간 동안 교반시킨 다음, 진공하에 농축시킨다. 이어서, 잔사를 물에 용해시키고, 포화된 중탄산나트륨으로 중화시키고, 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 1급 아민을 수득한다.

또는, Pg가 화학식 10의 커플링된 생성물 상의 3급 부틸 카바메이트(BOC)일 경우, 당해 화합물을 트리플루오로아세트산에 용해시키고, 실온에서 1 내지 12시간 동안 교반시킬 수 있다. 이어서, 반응물을 조심스럽게 물에 부어, 중탄산나트륨으로 중화시키고 에틸 아세테이트로 추출한다. 합한 유기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트/핵산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 1급 아민을 수득한다.

반응식 III, 단계 A2에서는, 상기 제조된 1급 아민을 당해 기술분야에 익히 공지된 조건하에 R₆에 커플링시켜, 화학식 11의 커플링된 생성물을 수득한다. 예를 들어, R₆이 화학식 9c의 산인 경우, 화학식 9c의 산을 상기 반응식 III, 단계 A에서기술된 방법과 유사한 커플링 반응에 적용시킨다.

[화학식 9c]

예를 들어, 화학식 9c의 산을 불활성 대기, 예를 들어, 질소하에 메틸렌 클로라이드와 같은 적합한 유기 용매에 용해시킨다. 이어서, 용액을 N-메틸 모프폴린과 같은 적합한 아민 1 내지 4당량으로 처리하고, 약 -20℃로 냉각시키고 이소부틸클로로포르메이트 1당량을 가한다. 반응물을 약 10분 내지 30분 동안 교반하고, 상기 제조된 1급 아민 1 내지 4당량을 반응물에 가한다. 반응물을 약 -20℃에서 30분 내지 2시간 동안 교반시킨 다음, 실온으로 가온시키고 1 내지 3시간 동안 교반한다. 이어서, 화학식 11의 커플링된 생성물을 당해 기술분야에 익히 공지된 기법, 예를 들어 추출 기법 및 플래시 크로마토그래피에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 반응물을 메틸렌 클로라이드와 같은 적합한 유기 용매로 희석시키고, 물로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 11의 커플링된 생성물을 수득한다.

또는, 상기 제조된 1급 아민을 불활성 대기, 예를 들어, 질소하에 메틸렌 클로라이드와 같은 적합한 무수 유기 용매에 용해시킨다. 이 용액에 메틸렌 클로라이드와 같은 적합한 무수 유기 용매에 용해된 N-하이드록시 벤즈트리아졸 수화물 1당량, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드 1당량 및 화학식 9c의 산 1당량을 가한다. 이어서, 반응물을 약 1 내지 15시간 동안 교반한다. 이어서, 화학식 11의 커플링된 생성물을 당해 기술분야에 익히 공지된 기법, 예를 들어, 추출 기법 및 플래시 크로마토그래피에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 반응물을 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매로 희석시키고, 물로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 11의 커플링된 생성물을 수득한다.

화학식 11의 커플링된 생성물을 또한 화학식 8의 α-아미노산(여기서, X는 메틸 에스테르와 같은 적합한 α-카복실 보호 그룹이다)과 화학식 9b의 α-아미노산과의 커플링 반응에 의해 반응식 III, 단계 B에서 직접 제조할 수 있다. 화학식 9b의 α-아미노산은 R₆치환체를, 반응식 III, 단계 A에서 기술된 공정과 같이 당해 분야의 숙련가에게 익히 공지된 조건하에 화학식 9b'의 아미노산(여기서, X는 메틸 에스테르와 같은 α-카복실 보호 그룹이다)에 커플링시킴으로써 쉽게 제조된다.

[화학식 9b']

이어서, 상기 커플링된 생성물의 α-카복실 보호 그룹을 당해 기술분야에 익히 공지된 조건하에 제거하여 화학식 9b의 α-아미노산을 제공한다. 예를 들어, X가 메틸 또는 에틸 그룹인 상기 화합물을 에탄올에 용해시키고, 동일 용적의 물 및 1당량의 수산화리튬으로 처리한다. 반응물을 1 내지 6시간 동안 교반한다. 다음, 생성된 산을 당해 분야에 익히 공지된 기술에 의해 분리시킨다. 예를 들어, 유기 용매를 진공하에 제거하고, 잔류된 수용액을 묽은 염산으로 산성화시킨다. 이어서, 상기 수용액을 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매로 추출하고, 합한 유기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시켜, 화학식 9b의 α-아미노산을 수득한다.

반응식 III, 단계 C에서, 화학식 11의 커플링된 생성물을 당해 기술분야에 익히 공지된 조건하에 탈보호시키거나 고체상으로부터 분리시켜, 화학식 12의 산을 수득한다. 예를 들어, 화학식 11 상의 X가 메틸 또는 에틸 그룹인 화합물을 에탄올과 같은 적합한 유기 용매에 용해시키고, 거의 동일 용적의 물로 처리한다. 상기 용액에 수산화리튬 1 내지 2당량을 교반시키면서 가하고, 반응물을 1 내지 6시간 동안 교반한다. 이어서, 생성된 산을 당해 분야에 익히 공지된 기술에 의해 분리 및 정제시킨다. 예를 들어, 유기 용매를 진공하에 제거하고, 잔류된 수용액을 묽은 염산으로 산성화시킨다. 이어서, 수성 상을 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매로 추출하고, 합한 유기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 이어서, 잔사를 메탄올/클로로포름과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 12의 산을 수득할 수 있다.

화학식 I의 화합물을 제조하는 반응식 VI의 추가의 출발 물질은 반응식 IV에 기술된 바와 같이 제조할 수 있다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당해 분야의 숙련가가 용이하게 입수가능하다.

[반응식 IV]

Pg = 보호 그룹

X = 적합한 카복실 보호 그룹 또는 수지

반응식 IV, 단계 A1에서, 화학식 10a의 커플링된 생성물[반응식 III에서 제조, R₈은 R₁과 동일하고, R₇은 수소이다]을 반응식 III, 단계 A1에 기술된 방법과 유사한 조건하에 탈보호시켜 1급 아민을 생성시킨다. 이어서, 생성된 1급 아민을 반응식 III, 단계 A에서 상기 기술된 공정과 유사한 방법으로 화학식 9a"의 보호된 α-아미노산과 커플링 반응시켜, 화학식 13의 커플링된 생성물을 수득한다.

반응식 IV, 단계 C1에서, 상기 제조된 화학식 13의 커플링된 생성물을 반응식 III, 단계 A1에서 기술된 공정과 유사한 조건하에 탈보호시켜 1급 아민을 생성 시킨다. 이어서, 생성된 1급 아민을 반응식 III, 단계 A에서 상기 기술된 방법과 유사한 방식으로 R₆과 커플링 반응시켜, 화학식 14의 커플링된 생성물을 수득한다.

또는, 상기 화학식 14의 커플링된 생성물을 반응식 IV, 단계 B1 및 B2에서 기술된 바와 같이 직접 제조할 수 있다. 화학식 10a의 커플링된 생성물을 반응식 III, 단계 A1에서 기술된 공정과 유사한 조건하에 탈보호시켜, 1급 아민을 수득한다. 이어서, 생성된 1급 아민을 반응식 III, 단계 A에서 상기 기술된 공정과 유사한 방식으로 화학식 9b"의 α-아미노산[반응식 III에서 제조, R₈은 R₂와 동일하다]과 커플링 반응시켜, 화학식 14의 커플링된 생성물을 수득한다.

반응식 IV, 단계 C에서, 상기 제조된 화학식 14의 커플링된 생성물을 반응식 III, 단계 C에서 상기 기술한 바와 같이 당해 기술분야에 익히 공지된 조건하에 탈보호시키거나 고체상으로부터 분리시켜, 화학식 15의 산을 수득한다.

반응식 III 및 IV에서 기술된 바와 같은 아미노산의 커플링 순서는 단지 예시적인 것이며, 어떠한 방법으로든 본 발명의 범주를 제한하고자 하는 것이 아님을 이해하여야 한다. 반응식 III 및 IV에 기재된 바와 같은 커플링 순서가 사용가능한 출발 물질에 따라 달라질 수 있다는 것은 당해 분야의 숙련가에 의해 이해되며 쉽게 측정된다. 예를 들어, 치환되거나 비치환된 페닐알라닌은 반응식 VI에서 폐환에 앞서 쇄에 커플링된 최종 잔기일 수 있다.

반응식 III, IV 및 VI 에서 필요로 하는, R₇이 메틸인 출발 물질을 반응식 V에 기술된 바와 같이 제조할 수 있다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당해 분야의 숙련가에 의해 용이하게 입수가능하다.

[반응식 V]

R₈= R₁또는 R₂

X = 적합한 카복실 보호 그룹 또는 수지

반응식 V, 단계 A에서, 화학식 16의 α-아미노산(여기서, X는 메틸 에스테르와 같은 적합한 α-카복실 보호 그룹이다)을 반응식 III, 단계 A에 기술된 공정과유사한 방식으로 R₆과 커플링시켜, 커플링된 생성물을 수득한다.

반응식 V, 단계 B에서, 커플링된 생성물을 반응식 III, 단계 C에서 상기 기술된 바와 같이 당해 기술분야에서 익히 공지된 조건하에 탈보호시키거나 고체상으로부터 분리시켜, 화학식 17의 산을 수득한다.

반응식 V, 단계 C에서, 화학식 17의 산을 N-메틸화시켜, 화학식 18의 N-메틸화된 화합물을 수득한다. 예를 들면, 화학식 16의 산을 테트라하이드로푸란과 같은 적합한 유기 용매에 용해시키고, 약 0℃로 냉각시키고, 과량의 메틸 요오다이드로 처리한다. 이어서, 수소화나트륨 1 내지 3당량을 상기 용액에 가하여 0℃에서 약 10분 동안 교반시킨 다음, 실온으로 가온시키고 24 내지 48시간 동안 교반한다. 이어서, 생성물을 추출 방법과 같은 당해 분야에 익히 공지된 방법에 의해 분리시킨다. 예를 들어, 묽은 수성 염산을 가하고, 반응물을 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매로 추출한다. 이어서, 유기 추출물을 합하고, 5% 티오황산나트륨 및 염수로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔 패드를 통해 여과시키고 진공하에 농축시켜, 화학식 18의 N-메틸화된 화합물을 수득한다.

또는, 화학식 18의 N-메틸화된 화합물은 반응식 V, 단계 D 및 E에서 기술된 공정에 따라 화학식 17의 산으로부터 제조할 수 있다.

반응식 V, 단계 D에서, 화학식 17의 산을 폐환시켜 화학식 17a의 옥사졸리딘을 수득한다. 예를 들면, 화학식 17의 산을 벤젠과 같은 적합한 유기 용매에 용해 시키고, 과량의 파라포름알데히드로 처리한다. 여기에, 약 0.2 내지 0.4당량의 p-톨루엔설폰산을 가하고, 반응물을 딘-스타크 트랩(Dean-Stark trap)을 사용하여 연속적으로 물을 제거하면서 약 23시간 동안 환류 가열한다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 생성물을 당해 분야에 익히 공지된 기술에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 냉각된 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매에 용해시키고, 포화된 중탄산나트륨으로 세정하고, 유기 상을 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 이어서, 잔사를 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 17a의 옥사졸리딘을 수득한다.

반응식 V, 단계 E에서, 화학식 17a의 옥사졸리딘을 당해 기술분야에 익히 공지된 조건하에 환원시켜, 화학식 18의 N-메틸화된 화합물을 수득한다. 예를 들어, 화학식 16a의 옥사졸리딘을 클로로포름과 같은 적합한 유기 용매에 용해시키고, 과량의 트리플루오로아세트산으로 처리한다. 상기 용액에 실온에서 교반시키면서 과량의 트리에틸실란을 가한다. 반응물을 1 내지 7일 동안 교반시킨 다음, 진공하에 농축시켜, 화학식 18의 N-메틸화된 화합물을 수득한다.

R₃이 수소인 화학식 I의 화합물은 반응식 VI에서 기술된 바와 같이 제조할 수 있다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 반응식 VI에서 화학식 19의 산은 당해 분야의 숙련가에 의해 상업적으로 또는 예를 들어, 일반적으로 반응식 I 내지 V에 기재된 공정에 따라 입수가능하다. 시약은 당해 분야의 숙련가에 의해 용이하게 입수가능하다.

[반응식 VI]

반응식 VI, 단계 A에서, 화학식 19의 산을 폐환 반응시켜, 화학식 20의 옥사졸리디논을 수득한다. 예를 들어, 화학식 19의 산을 적합한 용매 중의 p-톨루엔설폰산 0.1 내지 0.3당량 및 화학식

의 케톤 또는 알데히드(여기서, R₄및R₅는 각각 독립적으로 수소, 아릴, C₁-C₄알킬 또는 벤질이다) 과량과 합한다. 상기 켄톤 또는 알데히드의 예는 파라포름알데히드, 아세트알데히드, 아세톤, 프로피온알데히드, 부티르알데히드, 이소부티르알데히드, 2-부타논, 발레르알데히드, 이소발레르알데히드, 2-메틸부티르알데히드, 2-펜타논, 3-펜타논, 2-헥사논, 3-헥사논, 2-메틸-3-펜타논, 3-메틸-2-펜타논, 4-메틸-2-펜타논, 3-헵타논, 4-헵타논, 5-노나논, 벤즈알데히드 및 페닐아세트알데히드 등이다. 적합한 유기 용매의 예는 벤젠, 1,2-디클로로에탄 및 톨루엔 등이다. 바람직한 유기 용매는 톨루엔이다. 화학식 19의 산의 중량의 약 3배에 상당하는 양의 4A 분자체를 반응물에 임의로 가할 수 있다. 이어서, 반응물을 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 2 내지 24시간 동안 환류 가열한다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시킨다. 생성물을 추출 방법 및 플래시 크로마토그래피와 같은 당해 분야에 익히 공지된 기술에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 잔사를 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매에 용해시키고, 포화된 중탄산나트륨으로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 생성물을 헥산/에틸 아세테이트와 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 20의 옥사졸리디논을 수득한다.

단계 B에서, 화학식 20의 옥사졸리디논을 당해 기술분야에 익히 공지된 조건 하에 환원시켜, 화학식 Ia의 옥사졸리딘을 수득한다. 예를 들어, 화학식 20의 옥사졸리디논을 톨루엔과 같은 적합한 유기 용매에 용해시키고 -78℃로 냉각시킨다. 디이소부틸알루미늄 하이드라이드와 같은 적합한 환원제 약 2.1당량을 가하고, 반응물을 20분 내지 2시간 동안 -78℃에서 교반한다. 이어서, 반응물을 묽은 수성 염산으로 조심스럽게 급냉시키고, 반응물을 실온으로 가온시킨다. 생성물을 추출 방법 및 플래시 크로마토그래피와 같이 당해 분야에 익히 공지된 기술에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 반응물을 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매로 추출한다. 합한 유기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 이어서, 생성물을 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 Ia의 옥사졸리딘을 수득한다.

R₃이 C₁-C₄알카노일 또는 4-모르폴린카보닐인 화학식 I의 화합물은 반응식 VII에서 기술한 바와 같이 제조할 수 있다. 달리 나타내지 않는 한, 모든 치환체는 상기 정의된 바와 같다. 시약 및 출발 물질은 당해 분야의 숙련가가 용이하게 입수 가능하다.

[반응식 VII]

반응식 VII에서, 화학식 Ia의 옥사졸리딘을 당해 기술분야에 익히 공지된 표준 조건하에 O-아실화시켜, 화학식 Ib의 0-아실화된 옥사졸리딘을 수득한다. 예를 들어, 화학식 Ia의 옥사졸리딘을 메틸렌 클로라이드와 같은 적합한 유기 용매에 용해시키고, 약간 과량의 적합한 트리알킬아민, 예를 들어, 트리에틸아민으로 처리한다. 과량의 알킬화제를 실온에서 가하고, 반응물을 실온에서 1 내지 24시간 동안교반한다. O-아실화제의 예는 아세틸 클로라이드, 프로피오닐 클로라이드, 부티릴 클로라이드, 이소부티릴 클로라이드, 벤조일 클로라이드, 모르폴린 카보닐 클로라이드, 메틸 석시닐 클로라이드, 메틸 옥살릴 클로라이드, 에틸 옥살릴 클로라이드, 2-에틸헥사노일 클로라이드 및 4-메톡시페닐아세틸 클로라이드 등이다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시킨다. 이어서, 생성물을 추출 방법 및 플래시 크로마토그래피와 같이 당해 분야에 익히 공지된 기술에 의해 분리, 정제시킨다. 예를 들어, 잔사를 묽은 수성 염산 및 에틸 아세테이트와 같은 적합한 유기 용매에 용해시킨다. 층을 분리시키고, 수성 층을 에틸 아세테이트로 추출한다. 유기층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고. 여과시키고 진공하에 농축시킨다. 생성물을 에틸 아세테이트/헥산과 같은 적합한 용출제를 사용하는 실리카 겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 화학식 Ib의 O-아실화된 옥사졸리딘을 수득한다.

하기 실시예는 반응식 I 내지 VII에서 기술된 바와 같은 전형적인 합성법을 나타낸다. 상기 실시예는 단지 예시적인 것이지 어떠한 방법으로든 본 발명의 범주를 제한하고자 하는 것은 아니다. 본원에 사용된 바와 같이, 하기 용어는 다음과 같은 의미를 나타낸다: "g"는 그램을 의미하고; "mmol"은 밀리몰을 의미하고; "ml"는 밀리리터를 의미하고; "bp"는 비점을 의미하고; "mp"는 융점을 의미하고; "℃"는 섭씨 온도를 의미하고; "mm Hg"는 수은의 밀리미터를 의미하고; "μL"은 마이크로리터를 의미하고; "㎍"은 마이크로그램을 의미하고; "μM"는 마이크로몰을 의미하고; "Cbz"는 카보벤질옥시를 의미하고; "DMF"는 디메틸포름아미드를 의미하고;"THF"는 테트라하이드로푸란을 의미하고; "TBAF"는 테트라부틸암모늄 플루오라이드를 의미하고; "NMM" N-메틸모르폴린을 의미하고; "DMSO"는 디메틸설폭사이드를 의미하고; "HOBT"는 하이드록시벤조트리아졸을 의미하고; "EDC"는 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드를 의미한다.

실시예 1

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 104,903)의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A; Cbz-VaI-Phe-OH(4.67g, 11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니(Sigma Chemical Company), St. Louis, MO 63178)를 벤젠(120ml) 중의 파라포름알데히드(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg, 2.6mmol)과 합한다. 반응물을 딘-스타크 트랩으로 물을 연속적으로 제거하면서 23시간 동안 환류 가열한다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고, 포화 수성 중탄산나트륨(60ml)을 혼합시키면서 가한다. 이어서, 층을 분리시키고 수성 층을 에틸 아세테이트(2x50ml)로 추출한다. 유기층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트, 95:5 내지 90:10 내지 80:20, 실리카 겔)에 의해 정제하여, [S-(R^*,R^*)]-[2-메틸-1-[[5-옥소-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(2.00g, 42%)를 발포체로서 수득한다; [α]²⁰ _D+113.95(c 0.55, CHCl₃): IR(CHCl₃) 3314, 3032, 2934, 1804, 1714, 1659, 1437, 1233cm^-1; MS m/z 411(M+H⁺), 367, 268, 234, 206, 178, 162, 91.

C₂₃H₂₆N₂O₅에 대한 원소 분석:

이론치: C, 67.31; H, 6.38; N, 6.83;

계산치: C, 67.12; H, 6.51; N, 6.85.

단계 B

반응식 VI, 단계 B: 상기 제조된 [S-(R^*,R^*)]-[2-메틸-1-[[5-옥소-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(1.93g, 4.7mmol)를 톨루엔(60ml)에 용해시키고 용액을 -78℃로 냉각시킨다. 이어서, 상기 용액을 디이소부틸알루미늄 하이드라이드(10ml, 10mmol, 톨루엔 중의 IM 용액, DIBAL-H)로 처리하고 용액을 30분 동안 -78℃에서 교반한다. 이어서, 1N HCl(60ml)을 반응물에 서서히 가한 다음, 실온으로 가온시킨다. 반응물을 에틸 아세테이트(3x50ml)로 추출한다. 합해진 유기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트, 95:5 내지 90:10 내지 80:20 내지 60:40, 실리카 겔)에 의해 정제하여, 최종적인 표제 화합물(640mg, 33%)을 오일로서 수득한다; [α]²⁰ _D-46.13(c 0.98, CHCl₃): IR(KBr) 3406(br), 3032, 2964, 1710, 1640, 1529, 1454cm^-1; MS m/z 411(M+H⁺), 383, 339, 275, 91.

C₂₃H₂₈N₂O₅에 대한 원소 분석:

이론치: C, 66.98; H, 6.83; N, 6.79;

계산치: C, 66.88; H, 7.07; N, 6.81.

실시예 2

[4S-[3R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 104,860)의 제조

반응식 VII; 실시예 1에서 제조된 표제 화합물(250mg, 0.6mmol) 및 트리에틸아민(0.3ml)을 메틸렌 클로라이드(20ml)에 용해시킨다. 이어서, 아세틸 클로라이드(0.3ml, 4.2mmol)를 실온에서 상기 용액에 가하고 반응물을 밤새 교반한다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(30ml) 및 1NHCl(30ml)에 용해시킨다. 층을 분리시키고 수성 층을 에틸 아세테이트(3x30ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 예비 박층 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트, 80:20, 실리카 겔)에 의해 정제하여, 표제 화합물(200mg, 73%)을 점성 오일로서 수득한다;

C₂₅H₃₀N₂O₆에 대한 원소 분석:

이론치: C, 66.07; H, 6.65; N, 6.16;

계산치: C, 65.76; H, 6.60; N, 6.16.

실시예 3

[4s-[3(R ^* ),4α,5β]]-3[3-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]부틸]-4-(페닐메틸)-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산(MDL 105, 803)의 제조

반응식 VII ; 실시예 1에서 제조된 표제 화합물(243mg, 0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml)에 용해시킨다. 4-디메틸아미노피리딘(10mg, DAMP)을 교반시키면서 가한다. 이어서, 트리에틸아민(0.2ml, 1.2mmol) 및 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.1ml, 0.86mmol)를 가하고, 반응물을 약 20시간 동안 실온에서 교반한다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(50ml) 및 1N HCl(20ml)에 용해시킨다. 층을 분리시키고 유기 층을 염수(50ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고, 여액을 진공하에 농축시킨다. 생성된 백색 고체를 에틸 아세테이트/헥산으로부터 재결정화시켜, 표제 화합물(200mg)을 백색 고체로서 수득한다; [α]²⁰ _D-70.51(c 0.91, DMSO), IR (KBr)3302 (br), 3030, 2965, 1717, 1659, 1433, 1242cm^-1.

C₂₈H₃₅N₃O₂에 대한 원소 분석:

이론치: C, 63.99; H, 6.71; N, 8.00;

계산치: C, 63.50; H, 6.70; N, 7.93.

실시예 4

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]메틸-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 105,423)의 제조

단계 A

반응식 V, 단계 D; Cbz-Val-OH(5.0g, 20mmol)를 1,2-디클로로에탄(200ml) 중의 p-톨루엔설폰산 1수화물(300mg) 및 파라포름알데히드(4.0g)와 합하고, 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 밤새 환류 가열한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고 포화 중탄산나트륨(100ml)으로 세척한다. 수성 세척물을 에틸 아세테이트(100ml)로 추출한다. 유기 상 및 추출물을 합하고 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 진공하에 농축시켜,폐환된 화합물(5.40g)을 오일로서 수득한다.

단계 B

반응식 V, 단계 E; 상기 제조된 폐환된 화합물(2.63g, 10mmol)을 클로로포름(100ml) 및 트리플루오로아세트산(30ml)에 용해시킨다. 트리에틸실란(4.8ml, 30mmol)을 실온에서 교반시키면서 가한다. 약 1주일 후에 반응물을 진공하에 농축시켜, 화학식

의 산(3.21g)을 점성오일로서 수득한다.

상기 산은 일반적으로 문헌[참조: Pitzele, B.S. et al.,J. Med. Chem., 37, 888-896, (1994)]에 기술된 방법에 따라 제조할 수 있다.

단계 C

반응식 V, 단계 C; Cbz-Val-OH(10g, 39.8mmol)를 THF(200ml)에 용해시키고 용액을 0℃로 냉각시킨다. 수소화나트륨(5g, 120mmol, 오일 중의 60% 분산액)을 가하고 20분 동안 교반한다. 이어서, 메틸 요오다이드(3ml, 48.2mmol)를 가하고 반응물을 0℃에서 3시간 동안, 실온에서 밤새 교반한다. 물(100ml)을 서서히 가하고 혼합물을 디에틸 에테르(50ml)로 세척한다. 수성 층을 6N HCl로 약 pH 3까지 산성화시키고, 에틸 아세테이트(4x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 5% 티오황산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 진공하에 농축시켜, 출발 물질과 목적하는산(8.74g)과의 혼합물을 수득한다. 상기 혼합물 및 추가의 Cbz-Val-OH(1.5g)를 THF(200ml)에 용해시킨다. 상기 용액을 0℃로 냉각시킨다. 수소화나트륨(5g, 120mmol, 오일 중의 60% 분산액)을 가하고 10분 동안 교반한다. 이어서, 메틸 요오다이드(6ml, 96.4mmol)를 가하고 반응물을 밤새 환류 가열한다. 실온으로 냉각시킨 후에 물(100ml) 및 수산화리튬 1수화물(3g)을 서서히 가하고 3시간 동안 교반한다. 혼합물을 디에틸 에테르(100ml)로 세척한다. 수성 층을 6N HCl로 약 pH 3까지 산성화시키고 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 5% 티오황산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고, 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 THF(100ml 및 물(100ml)에 용해시키고, 수산화리튬 1수화물(3g)로 처리하고 실온에서 2일 동안 교반한다. 이어서, 반응물을 디에틸 에테르(100ml)로 세척하고, 6N HCl로 약 pH 3까지 산성화시킨다. 수성 층을 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 5% 티오황산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 산(1.19g)을 수득한다.

단계 D

반응식 III, 단계 B: HCl·Phe-OCH₃(2.92g, 11mmol)를 DMF(20ml)에 용해시키고 용액을 0℃로 냉각시킨다. 트리에틸아민(1.7ml, 12mmol)을 가하고 10분 동안 교반한다. 이어서, 상기 형성된 산(100ml의 THF에 용해된 10mmol, 상기 다른 방법으로 형성된 산을 사용할 수 있다)에 이어, HOBt(1.62g, 12mmol) 및 EDC(2.3g, 12mmol)를 가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안, 실온에서 밤새 교반한다. 반응물을 진공하에 농축시키고 잔사를 1N HCl(100ml)에 용해시키고, 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 95:5에 이어, 9:1에 이어, 8:2에 이어, 6:4)에 의해 정제하여, 커플링된 생성물(3.65g, 86%)을 수득한다.

단계 E

반응식 III, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(3.30g)을 THF(100ml) 및 물(50ml)에 용해시킨다. 수산화리튬 1수화물(900mg)을 가하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반한다. 이어서, 상기 반응물을 디에틸 에테르(100ml)로 세척하고, 수성 층을 6N HCl로 약 pH 2까지 산성화시킨다. 이어서, 산성화된 수성 층을 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 산(2.47g, 77%)을 오일로서 수득한다.

단계 F

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(2.40g, 5.8mmol)을 1,2-디클로로에탄(200ml) 중의 파라포름알데히드(4.0g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg)과 합하고, 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 6시간 동안 환류 가열한다. 냉각시킨 후에, 추가량의 포름알데히드(2.0g)을 가하고, 물을 연속적으로 제거하면서 반응물을 밤새 환류 가열한다. 냉각 후에, 반응물을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(200ml)에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 9:1에 이어 8:2)에 의해 정제하여, 폐환된 화합물(980mg, 40%)을 점성 오일로서 수득한다.

단계 G

반응식 VI, 단계 B; 상기 제조된 폐환된 화합물(1.90g, 4.48mmol)을 톨루엔(50ml)에 용해시키고 용액을 -78℃로 냉각시킨다. 교반시키면서, 디이소부틸알루미늄 하이드라이드(톨루엔 중의 1M 용액 6ml, 6mmol)를 가하고 1시간 동안 교반한다. 이어서, 물(20ml)을 가하고 혼합물을 1N HCl(100ml)에 붓는다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 8:2에 이어 6:4)에 의해 정제하여, 최종적인 표제 화합물(540mg)을 오일로서 수득한다; [α]²⁰ _D-93.49(c 1.00, CHCl₃).

실시예 5

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-3-메틸부틸]메틸-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 V, 단계 C; Cbz-Leu(5.80g, 21.9mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니)을 테트라하이드로푸란(150ml)에 용해시킨다. 메틸 요오다이드(11ml, 176mmol)를 가하고 용액을 0℃로 냉각시킨다. 수소화나트륨(3g, 77mmol, 오일 중의 60% 분산액)을 상기 용액에 가하고 반응물을 10분 동안 교반시킨 다음, 실온으로 가온하여 40시간 동안 교반한다. 이어서, 1N HCl(100ml)을 가하고, 반응물을 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 5% 티오황산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, N-메틸화된 생성물(7.36g)을 오일로서 수득한다.

단계 B

반응식 III, 단계 B; HCl·Phe-OCH₃(4.75g, 22mmol)를 DMF(30ml)에 용해시킨다. 상기 용액을 0℃로 냉각시키고 트리에틸아민(6.2ml, 44mmol)을 가한다. 10분 후에, 상기 제조된 N-메틸화된 화합물의 용액(DMF 130ml에 용해된 7.36g)을 상기 용액에 가한 다음, HOBt(2.97g, 22mmol) 및 EDC(4.2g, 22mmol)를 가한다. 반응물을0℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 실온으로 밤새 가온한다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고 1N HCl(100ml)로 세정한다. 수성 세정액을 에틸 아세테이트(2x100ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 커플링된 생성물(10.26g)을 오일로서 수득한다.

단계 C

반응식 III, 단계 C; 상기 커플링된 생성물(10.26g)을 THF(100ml) 및 물(100ml)에 용해시킨다. 혼합물을 수산화리튬·H₂O(1.0g)로 처리하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한다. 이어서, 상기 반응물을 디에틸 에테르(100ml)로 세정하고 수성 층을 6N HCl로 약 pH 2까지 산성화시킨다. 이어서, 상기 수성 층을 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하여 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 진공하에 농축시켜, 산(7.63g)을 점성 오일로서 수득한다.

단계 D

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(7.50g, 17.6mmol)을 1,2-디클로로에탄(200ml) 중의 파라포름알데히드(6.0g), p-톨루엔설폰산·H₂O(700mg) 및 4A 분자체(19g)와 합한다. 딘-스타크 트랩을 통해 물을 제거하면서 반응물을 2.5시간 동안 환류 가열한다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시킨 다음, 상기 용액을 에틸 아세테이트(400ml)를 사용하여 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시킨다. 여액을 진공하에 농축시키고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 핵산/에틸 아세테이트, 95:5에 이어 9:1에 이어 8:2)에 의해 정제하여, 폐환된 화합물(5.19g, 67%)을 점성 오일로서 수득한다.

단계 E

반응식 VI, 단계 B; 상기 폐환된 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계에서 기술된 방법과 유사한 방식으로 환원시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 6

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보릴]-3-메틸부틸]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 III, 단계 B; HCl·Phe-O-3급-부틸(4.65g, 18mmol)을 DMF(40ml)에 현탁시킨다. 상기 현탁액을 0℃로 냉각시키고 트리에틸아민(5.6ml, 40mmol)을 가한다. 10분 동안 교반한 후에, THF(50ml)에 이어, Cbz-Leu-OH(4.77g, THF 100ml 중의18mmol), HOBt(2.6g, 19mmol) 및 EDC(3.63g, 19mmol)를 가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안, 실온에서 밤새 교반한다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 1N HCl(100ml)에 용해시키고 수성 층을 에틸 아세테이트(4x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 포화 탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 커플링된 생성물(9.93g)을 오일로서 수득한다.

단계 B

반응식 III, 단계 C; 상기 커플링된 생성물(9.93g)을 메틸렌 클로라이드(20ml)에 용해시키고 트리플루오로아세트산(10ml)으로 처리한다. 반응물을 실온에서 밤새 교반시킨 다음 진공하에 농축시켜, 산을 점성 오일로서 수득한다.

단계 C

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산을 1,2-디클로로에탄(200ml)에 용해시키고 파라포름알데히드(5g), p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg) 및 4A 분자체(19g)로 처리한다. 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 반응물을 약 18시간 동안 환류 가열한다. 이어서, 반응물을 실온으로 냉각시킨 다음, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시킨다. 여액을 진공하에 농축시켜, 오일을 수득한다. 실리카 겔의 상기 패드를 상기 오일과 합해진 에틸 아세테이트(300ml)에 이어, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 9:1에 이어 8:2에 이어 6:4)에 의해 정제하여, 폐환된 화합물(1.04g)을 발포체로서 수득한다.

단계 D

반응식 VI, 단계 B, 상기 폐환된 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1의 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 7

[4S-[3(R ^* )4α,5β]]-N-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-4-모르폴린카복스아미드의 제조

단계 A

L-발린(6.4g, 54.6mmol)을 물(100ml) 중의 수산화나트륨(6.6g, 160mmol)화합한다. 상기 용액을 0℃로 냉각시키고 디에틸 에테르(100ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(8ml, 68.6mmol) 용액을 교반하면서 적가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안, 실온에서 밤새 교반한다. 층을 분리시키고 수성 층을 6N HCl로 약 pH 2까지 산성화시킨다. 이어서, 산성화된 수성층을 에틸 아세테이트(3x100mmol)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 여과하고 진공하에농축시켜, 커플링된 생성물(5.88g)을 수득한다.

단계 B

반응식 III, 단계 B; HCl·Phe-OCH₃(4.32g, 20mmol)를 DMF(20ml)에 용해시키고 용액을 0℃로 냉각시킨다. 트리에틸아민(6ml)을 가하여 10분 동안 교반한다. 상기 형성된 커플링된 생성물(4.56g, THF 150ml에 용해된 19.83mmol)에 이어, HOBt(2.83g, 21mmol) 및 EDC(4.0g, 21mmol)를 가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안, 실온에서 밤새 교반한다. 반응물을 진공하에 농축시키고 잔사를 1N HCl(100ml)에 용해시키고 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 정제하여, 커플링된 생성물(5.60g, 72%)을 점성 오일로서 수득한다.

단계 C

반응식 III, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(5.6g, 14.3mmol)을 THF(100ml) 및 물(100ml)에 용해시킨다. 수산화리튬 1수화물(670mg, 16mmol)을 가하고, 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한다. 이어서, 반응물을 디에틸 에테르(100ml)로 세척하고 수성 층을 6N HCl로 약 pH 2까지 산성화시킨다. 이어서, 상기 산성화된 수성 층을 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고여액을 진공하에 농축시켜, 산(4.58g, 85%)을 발포성 고체로서 수득한다.

단계 D

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 1,2-디클로로에탄(200ml) 중의 파라포름알데히드(4.0g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg)과 합하고 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 약 6시간 동안 환류 가열한다. 냉각 후에, 반응물을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(200ml)에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 정제하여, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 E

반응식 VI, 단계 B; 상기 제조된 폐환 화합물(4.48mmol)을 톨루엔(50ml)에 용해시키고 용액을 -78℃로 냉각시킨다. 교반시키면서, 디이소부틸알루미늄 하이드라이드(톨루엔 중의 1M 용액 6ml, 6mmol)를 가하고 1시간 동안 교반한다. 이어서, 물(20ml)을 가하고 혼합물을 1N HCl(100ml)에 붓는다. 상기 혼합물을 에틸 아세테이트(3x100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 염수(100ml)로 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 정제하여, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 8

[4S[4α,5β]]-5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리딘카복실산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A; Cbz-Phe-OH(2.5g)를 톨루엔(100ml) 중의 파라포름알데히드(5.0g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg)과 합하고 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 20시간 동안 환류 가열한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트, 9:1에 이어 8:2)에 의해 정제한 다음, 제2의 결정물을 회수하면서 에틸 아세테이트/헥산으로부터 재결정화시켜, 폐환 화합물(2.10g, 81%)을 백색 고체로서 수득한다; [α]²⁰ _D+201.5(c 1.00, CHCl₃); IR(KBr) 3032, 2966, 1792, 1683, 1433cm^-1.

C₁₈H₁₇NO₄에 대한 원소 분석:

이론치: C, 69.44; H, 5.50; N, 4.50;

계산치: C, 69.30; H, 5.51; N, 4.46.

단계 B

반응식 VI, 단계 B; 상기 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계에 기술된 방법과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 9

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(부티릴옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 103,821)의 제조

반응식 VII; [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.6mmol, 실시예 1에서 제조됨)를 메틸렌 클로라이드(20ml) 중의 트리에틸아민(0.3ml)에 용해시킨다. 부티릴 클로라이드(4.2mmol)를 실온에서 상기 용액에 가하고 반응물을 밤새 교반한다. 상기 반응물을 진공하에 농축시키고 잔사를 에틸 아세테이트(30ml) 및 1N HCl(30ml)에 용해시킨다. 층을 분리시키고 수성 층을 에틸 아세테이트(3x30ml)로추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 정제하여, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 9A

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(부티릴옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 103,821)의 다른 제조

반응식 VII; [4S-[3(R^*), 4α, 5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.375g, 0.909mmol, 실시예 1에서 제조됨)를 메틸렌 클로라이드(3.6ml)에 용해시킨다. N-메틸모르폴린(0.202g, 2.00mmol) 및 부티릴 클로라이드(0.194g, 1.82mmol)를 가하고 밀봉된 마이크로바이알 내에서 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 1N HCl(25ml), 포화된 NaHCO₃(1x25ml)와 함께 분별 깔때기로 이동시키고 Mg₂SO₄로 건조 시킨다. 용매를 진공하에 제거하고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트(2:1), 메틸렌 클로라이드와 함께 적하)에 의해 정제하여, 표제 화합물(0.328g)을 점성의 투명한 무색 오일로서 수득한다.

실시예 10

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-2,2-디메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A, Cbz-Val-Phe-OH(4.67g, 11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. louis, MO)를 벤젠(120ml) 중의 아세톤(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg, 2.6mmol)과 합한다, 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 반응물을 약 23시간 동안 환류 가열한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고, 포화된 수성 중탄산나트륨(60ml)으로 세정한다. 수성 세정액을 에틸 아세테이트(2x50ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 이어서, 잔사를 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 B

반응식 VI, 단계 B; 상기 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 11

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(아세틸옥시)-2,2-디메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

반응식 VII; [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-2,2-디메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.6mmol, 실시예 10에서 제조됨) 및 트리에틸아민(0.3ml)을 메틸렌 클로라이드(20ml)에 용해 시킨다. 이어서, 아세틸 클로라이드(0.3ml, 4.2mmol)를 실온에서 상기 용액에 가한 다음 반응물을 밤새 교반한다. 이어서, 상기 반응물을 진공하에 농축시키고 잔사를 에틸 아세테이트(30ml) 및 1N HCl(30ml)에 용해시킨다. 층을 분리시키고 수성 층을 에틸 아세테이트(3x30ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트, 80:20, 실리카 겔)에 의해 정제하여, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 12

[2R-[2α,3,(S ^* ),4β,5α]]-[1-[[5-하이드록시-2-메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(C); 및[2R-[2α ,3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-2-메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(D)의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A; Cbz-Val-Phe-OH(4.67g, 11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO)를 벤젠(120ml) 중의 아세트알데히드(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg, 2.6mmol)과 합한다. 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 반응물을 약 23시간 동안 환류 가열한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고, 포화 수성 중탄산나트륨(60ml)으로 세정한다. 수성 세정액을 에틸 아세테이트(2x50ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 폐환 화합물을 이성체 A 및 B의 혼합물로서 수득한다.

이어서, 상기 이성체들을 플래시 크로마토그래피에 의해 혼합물로부터 각각 분리시킬 수 있다. 또는, 상기 혼합물을 환원 단계에 적용시킨 다음, 상기 이성체들을 DIBAL로 환원시킨 후에 분리할 수 있다.

단계 B

반응식 VI, 단계 B; 상기 폐환 화합물, A 또는 B(4.7mmol) 또는 화합물 A 및 B의 혼합물을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계에 기술된 방법과 유사한 방법으로 환원시켜, 최종 표제 화합물 C 및 D를 수득한다.

실시예 13

[2R-[2α,3,(S ^* ),4β,5α]]-[1-[[5-하이드록시-2-(페닐메틸)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(C); 및 [2S-[2α,3,(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-2-(페닐메틸)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(D)의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A; Cbz-Val-Phe-OH(4.67g, 11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)를 벤젠(120ml) 중의 페닐아세트알데히드(5g) 및p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg, 2.6mmol)과 합한다. 딘-스타크 트랩을 통해 물을 연속적으로 제거하면서 반응물을 약 23시간 동안 환류 가열한다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고, 포화된 수성 중탄산나트륨(60ml)으로 세정한다. 수성 세정액을 에틸 아세테이트(2 ×50ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 폐환 화합물을 이성체 A 및 B의 혼합물로서 수득한다.

이어서, 상기 이성체들을 플래시 크로마토그래피에 의해 혼합물로부터 분리 시킬 수 있다. 또는, 상기 혼합물을 환원 단계에 적응시킨 다음, 상기 이성체들을 DIBAL로 환원시킨 후에 분리할 수 있다.

단계 B

반응식 VI, 단계 B: 상기 폐환된 화합물, A 또는 B(4.7mmol) 또는 화합물 A 및 B의 혼합물을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에기술된 방법과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물 C 및 D를 수득한다.

실시예 14

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-[(4-하이드록시페닐)메틸]-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 III, 단계 B; HCl·Tyr-O-3급 부틸(18mmol)을 DMF(40ml)에 현탁시킨다. 상기 현탁액을 0℃로 냉각시키고 트리에틸아민(5.6ml, 40mmol)을 가한다. 10분 동안 교반시킨 후에, THF(50mL)에 이어, Cbz-Val-OH(THF 100ml에 용해된 18mmol), HOBt(2.6g, 19mmol) 및 EDC(3.63g, 19mmol)를 가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안, 실온에서 밤새 교반한다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 1N HCl(100ml)에 용해시키고 수성 층을 에틸 아세테이트(4 ×100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 포화 탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 여과시키고 진공하에 농축시켜, 커플링된 생성물을 수득한다.

단계 B

반응식 III, 단계; 상기 커플링된 생성물을 메틸렌 클로라이드(20ml)에 용해시키고 트리플루오로아세트산(10ml)으로 처리한다. 반응물을 실온에서 밤새 교반 시킨 다음 진공하에 농축시켜, 산을 점성 오일로서 수득한다.

단계 C

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 파라포름알데히드(4.0g), p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg) 및 1,2-디클로로에탄(200ml)으로 실시예 1, 단계 A에 기술된 방법과 유사한 방식으로 폐환시킨 다음, 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트) 후 폐환 화합물을 수득한다.

단계 D

반응식 VI, 단계 B: 상기 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 방법과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 15

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 III, 단계 B; 무수 디클로로메탄(15ml) 중의 N-벤질옥시카보닐-L-발린 무수물(0.339g, 0.7mmol) 용액에 O-메틸-L-티로신, 벤질 에스테르, 톨루엔-4-설포네이트(0.330g, 0.7mmol) 및 N-메틸 모르폴린(0.081g, 0.8mmol)을 가한다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한다. 반응물을 진공하에 농축시키고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔: 2:8 에틸 아세테이트/사이클로헥산)에 의해 정제하여, 커플링된 화합물을 수득한다.

단계 B

반응식 III, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(14.3mmol)을 THF(100ml) 및 물(100ml)에 용해시킨다. 수산화리튬 1수화물(670mg, 16mmol)을 가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한다. 이어서, 상기 반응물을 디에틸 에테르(100ml)로 세척하고 수성 층을 6N HCl로 약 pH 2까지 산성화시킨다. 산성화된 수성 층을 에틸 아세테이트(3 ×100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 여과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 산을 수득한다.

단계 C

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 파라포름알데히드(4.0g), p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg) 및 1,2-디클로로에탄(200ml)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 방법과 유사한 방식으로 폐환시키고, 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트) 후 폐환 화합물을 수득한다.

단계 D

반응식 VI, 단계 B; 상기 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 방법과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 16

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-[(4-니트로페닐)메틸]-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 III, 단계 B; 무수 디클로로메탄(50ml) 중의 L-발린 무수물(4.80g, 100mmol) 용액에 4-니트로-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(2.24g, 10mmol)를 가한다. 반응물을 실온에서 밤새 교반한다. 반응물을 진공하에 농축시키고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔: 4:6 에틸 아세테이트/사이클로헥산)에 의해 정제하여, N-벤질옥시카보닐-L-발릴-4-니트로-L-페닐알라닌 메틸 에스테를 수득한다.

R_f=0.32(에틸 아세테이트/사이클로헥산 1:1)

단계 B

반응식 III, 단계 C; N-벤질옥시카보닐-L-발릴-4-니트로-L-페닐알라닌 메틸에스테르(14.3mmol, 상기에서 제조됨)을 THF(100ml) 및 물(100ml)에 용해시킨다. 수산화리튬 1수화물(670mg, 16mmol)을 가하고 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반한다. 이어서, 상기 반응물을 디에틸 에테르(100ml)로 세척하고 수성 층을 6N HCl로 약 pH 2까지 산성화시킨다. 산성화된 수성 층을 에틸 아세테이트(3 ×100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 여과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 산을 수득한다,

단계 C

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 파라포름알데히드(4.0g), p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg) 및 1,2-디클로로에탄(200ml)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 방법과 유사한 방식으로 폐환시키고 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트) 후에 폐환 화합물을 수득한다.

단계 D

실시예 17

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[4-[(4-아미노페닐)메틸]-5-하이드록시-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

무수 에탄올(50ml) 및 N,N-디메틸포름아미드(5ml) 중의 N-벤질옥시카보닐-L-발릴-4-니트로-L-페닐알라닌 메틸 에스테르(0.91g, 2mmol, 실시예 15에서 제조됨) 및 염화 주석(II) 2수화물(1.56g, 7mmol)의 용액을 4시간 동안 환류 가열한다. 상기 혼합물을 냉각시키고, 물로 희석시키고, 탄산수소나트륨으로 중화시키고 에틸 아세테이트(3 ×50ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 여과시키고 진공하에 농축시켜, 아민 화합물을 수득한다.

단계 B

반응식 III, 단계 C; 상기 제조된 아민 화합물(14.3mmol)을 물(100ml) 및 THF(100ml) 중의 수산화리튬 1수화물(16mmol)을 사용하여 실시예 16, 단계 B에서 기술된 방법과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 산을 수득한다.

단계 C

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 파라포름알데히드(4.0g), p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg) 및 1,2-디클로로에탄(200ml)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 방법과 유사한 방식으로 폐환시키고 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트) 후, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 D

반응식 VI, 단계 B; 상기 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 18

[4S-[3[R ^* (1R ^* ,2R ^* )],4α,5β]]-1-[[[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸부틸-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 III, 단계 A; HCl·Phe-OCH₃(4.75g, 22mmol)를 DMF(30ml)에 용해시킨다. 상기 용액을 0℃로 냉각시키고 트리에틸아민(6.2ml, 44mmol)을 가한다. 10분 후에, N-3급 부톡시카보닐-Val(DMF 13ml 중에 용해된 22mmol) 용액을 상기 용액에 가한 다음, HOBt(2.97g, 22mmol) 및 EDC(4.2g, 22mmol)를 가한다. 반응물을 ℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 실온으로 밤새 가온한다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고 1N HCl(100ml)로 세정한다. 수성 세정액을 에틸 아세테이트(2 ×100ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산 마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 커플링된 생성물을 수득한다.

단계 B

반응식 IV, 단계 B1; 상기 커플링된 생성물을 메틸렌 클로라이드(20ml)에 용해시키고 트리플루오로아세트산(10ml)으로 처리한다. 반응물을 실온에서 반새 교반한 다음 진공하에 농축시켜, 탈보호된 아민을 수득한다.

단계 C

반응식 IV, 단계 B2; 상기 제조된 탈보호된 아민(22mmol)을 DMF(30ml)에 용해시킨다. 상기 용액을 0℃로 냉각시키고 트리에틸아민(6.2ml, 44mmol)을 가한다. 10분 후에, Cbz-Ile(DMF 130ml 중에 용해된 22mmol) 용액을 상기 용액에 가한 다음, HOBt(2.97g, 22mmol) 및 EDC(4.2g, 22mmol)를 가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안 교반한 다음, 실온으로 밤새 가온한다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고 1N HCl(100ml)로 세정한다. 수성 세정액을 에틸 아세테이트(2 ×100ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 커플링된 생성물을 수득한다.

단계 D

반응식 IV, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(14.3mmol)을 물(100ml) 및 THF(100ml) 중의 수산화리튬 1수화물(16mmol)을 사용하여 실시예 16, 단계 B에서 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 산을 수득한다.

단계 E

단계 F

실시예 19

[4S-[3[R ^* (1R ^* ,2R ^* )],4α,5β]]-1-[[[1-[[5-(아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸프로필-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

반응식 VII; [4S-[3[R^*(1R^*,2R^*)], 4α,5β]]-[1-[[[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸부틸-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.6mmol, 실시예 18에서 제조됨) 및 트리에틸아민(0.3ml)을 메틸렌 클로라이드(20ml)에 용해시킨다. 이어서, 아세틸 클로라이드(0.3ml, 4.2mmol)를 실온에서 상기 용액에 가한 다음 반응물을 밤새 교반한다. 이어서, 상기 반응물을 진공하에 농축시키고 잔사를 에틸 아세테이트(30ml) 및 1N HCl(30ml)에 용해시킨다. 층을 분리시키고 수성 층을 에틸 아세테이트(3 ×30ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트, 80:20, 실리카 겔)에 의해 정제하여, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 20

[4S-[3[R ^* (1R ^* )],4α,5β]]-1-[[[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸프로필-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 IV, 단계 B2; 상기 실시예 17, 단계 B에서 제조된 탈보호된 아민(22mmol)을 DMF(30ml)에 용해시킨다. 상기 용액을 0℃로 냉각시키고 트리에틸아민(6.2ml, 44mmol)을 가한다. 10분 후에, Cbz-Val(DMF 130ml 중에 용해된22mmol) 용액을 상기 용액에 가한 다음, HOBt(2.97g, 22mmol) 및 EDC(4.2g, 22mmol)를 가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안 교반시킨 다음 실온으로 밤새 가온한다. 이어서, 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 에틸 아세테이트(100ml)에 용해시키고 1N HCl(100ml)로 세정한다. 수성 세정액을 에틸 아세테이트(2 ×100ml)로 추출한다. 유기 층 및 유기 추출물을 합하고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 여액을 진공하에 농축시켜, 커플링된 생성물을 수득한다.

단계 B

반응식 IV, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(14.3mmol)을 물(100ml) 및 THF(100ml) 중의 수산화리튬 1수화물(16mmol)을 사용하여 실시예 16, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 산을 수득한다.

단계 C

단계 D

실시예 21

[4S-[3[R ^* (1R ^* )],4α,5β]]-[1-[[[1-[[5-(아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸프로필-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

반응식 VII; 실시예 20의 표제 화합물(0.6mmol)을 메틸렌 클로라이드(20ml) 중의 아세틸 클로라이드(4.2mmol) 및 트리에틸아민(0.3ml)을 사용하여 실시예 19에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 22

반응식 VII; 실시예 7에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 23

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-N-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]메틸-4-모르폴린카복스아미드의 제조

단계 A

반응식 V, 단계 D; 화학식

의 화합물(11.7mmol, 실시예 7, 단계 A에서 제조됨)을 벤젠(120ml) 중의 파라포름알데히드(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 B

반응식 V, 단계 E; 상기 제조된 폐환 화합물(10mmol)을 클로로포름(100ml) 중의 트리플루오로아세트산(30ml) 및 트리에틸실란(30mmol)을 사용하여 실시예 4, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, N-메틸화된 화합물을 수득한다.

단계 C

반응식 III, 단계 B; 상기 제조된 N-메틸화된 화합물(10mmol)을 DMF(20ml) 및 THF(100ml) 중의 트리에틸아민(12mmol), HOBt(12mmol) 및 EDC(12mmol)를 사용하여 실시예 4, 단계 D에 기술된 공정과 유사한 방식으로 HCl·Phe-OCH₃(11mmol)와 커플링시켜, 커플링된 화합물을 수득한다.

단계 D

반응식 III, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(14.3mmol)을 물(100ml) 및 THF(100ml) 중의 수산화리튬 1수화물(16mmol)을 사용하여 실시예 7, 단계 C에 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 산을 수득한다.

단계 E

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 1,2-디클로로에탄(200ml) 중의 파라포름알데히드(4.0g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물을 사용하여 실시예 4, 단계 F에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 F

반응식 VII, 단계 C; 상기 제조된 폐환 화합물(4.48mmol)을 톨루엔(50ml) 중의 DIBAL(6mmol)을 사용하여 실시예 4, 단계 G에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 24

반응식 VII; 실시예 23에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 25

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[4-[(4-클로로페닐)메틸]-5-하이드록시-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

N-BOC-p-클로로-L-Phe(20mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)를 디에틸 에테르(400ml)에 용해시키고, 0℃로 냉각시킨 다음 약간 과량의 디아조메탄(엷은 황색 유지)으로 처리한다. 묽은 아세트산을 몇 방울 가하여 과량의 디아조메탄을 급냉시킨다. 이어서, 상기 반응물을 염수(200ml)로 세정하고,무수 황산마그네슘으로 건조하고, 여과시키고 농축시켜, 메틸 에스테르(N-BOC-p-클로로-L-Phe-OCH₃)를 수득한다.

단계 B

반응식 IV, 단계 B1; 상기 제조된 메틸 에스테르를 메틸렌 클로라이드(20ml) 중의 트리플루오로아세트산(10ml)을 사용하여 실시예 18, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 탈보호된 화합물, (p-클로로-L-Phe-OCH₃)를 수득한다.

단계 C

반응식 IV, 단계 B2; 상기 제조된 탈보호된 화합물(22mmol)을 트리에틸아민(44mmol), HOBt(22mmol) 및 EDC(22mmol)를 사용하여 실시예 18, 단계 C에 기술된 공정과 유사한 방식으로 CBz-VaL(DMF 130ml에 용해된 22mmol)과 커플링시켜, 커플링된 화합물을 수득한다.

단계 D

반응식 IV, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 화합물(14.3mmol)을 물(100ml) 및 THF(100ml) 중의 수산화리튬 1수화물(16mmol)을 사용하여 실시예 7, 단계 C에 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 산을 수득한다.

단계 E

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 1,2-디클로로에탄 중의 파라포름알데히드(4.0g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 방법과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 F

반응식 VI, 단계 B; 상기 제조된 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 최종 표제 화합물을 수득한다.

실시예 26

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-3-[3-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]부틸]-4[(4-클로로페닐)메틸]-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산의 제조

반응식 VII; 실시예 25에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 27

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-에틸]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A; N-CBz-Ala-Phe-OH(11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)를 벤젠 중의 파라포름알데히드(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 B

반응식 VI, 단계 B; 상기 제조된 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(50ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 28

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-3-[1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]프로필]-4-(페닐메틸)-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산의 제조

반응식 VII; 실시예 27에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 29

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸부틸]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A; N-CBz-Ile-Phe-OH(11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)를 벤젠 중의 파라포름알데히드(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 B

실시예 30

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-3-[3-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]펜틸]-4-(페닐메틸)-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산의 제조

반응식 VII; 실시예 29에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 31

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-(4-하이드록시페닐)메틸]-3-옥사졸리디닐]카보닐]-3-메틸부틸]-카밤산, 페닐메틸 에스테르의 제조

단계 A

반응식 VI, 단계 A; N-CBz-Leu-Tyr-OH(11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)를 벤젠 중의 파라포름알데히드(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 B

실시예 32

[4S-[3-(R ^* ),4α,5β]]-3-[4-메틸-1-옥소-2-[[페닐메톡시)카보닐]아미노]펜틸]-4-[(4-하이드록시페닐)메틸]-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산의제조

반응식 VII; 실시예 31에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 33

단계 A

반응식 VI, 단계 A; N-BOC-norLeu-Phe-OH(11.7mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)를 벤젠 중의 파라포름알데히드(5g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(500mg)을 사용하여 실시에 1, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 B

반응식 VI, 단계 B; 상기 제조된 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(5ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 34

반응식 VII; 실시예 33에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 35

단계 A

반응식 III, 단계 B; HCl·Phe-OCH₃(4.32g, 20mmol)를 DMF(20ml)에 용해시키고 용액을 0℃로 냉각시킨다. 트리에틸아민(60ml)을 가하고 10분 동안 교반한다. 이어서, N-BOC-N-메틸-L-Ala(THF 150ml 중에 용해된 19.83mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)을 상기 용액에 가한 다음, HOBt(2.83g, 21mmol) 및 EDC(4.0g, 21mmol)를 가한다. 반응물을 0℃에서 3시간 동안, 실온에서 밤새 교반한다. 반응물을 진공하에 농축시키고, 잔사를 1N HCl(100ml)에 용해시키고 에틸 아세테이트(3 ×100ml)로 추출한다. 유기 추출물을 합하고, 포화 중탄산나트륨(100ml) 및 염수(100ml)로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조하고, 실리카 겔의 짧은 패드를 통해 통과시키고 진공하에 농축시킨다. 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트)에 의해 정제하여, 커플링된 생성물을 수득한다.

단계 B

반응식 III, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(14.3mmol)을 물(100ml) 및 THF(100ml) 중의 수산화리튬 1수화물(16mmol)을 사용하여 실시예 15, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 산을 수득한다.

단계 C

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 파라포름알데히드(4.0g), p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg) 및 1,2-디클로로에탄(200ml)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트)시킨 후, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 D

반응식 VI, 단계 B; 상기 제조된 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔(60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 방법과 유사한 방식으로 환원시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 36

반응식 VII; 실시예 35에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 37

단계 A

N-BOC-O-에틸-L-Tyr-OH(20mmol, 구입원: 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)를 실시예 25, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 디아조메탄을 사용하여, 메틸 에스테르(N-BOC-O-에틸-L-Tyr-OCH₃)를 수득한다.

단계 B

반응식 IV, 단계 B1; 상기 제조된 메틸 에스테르를 메틸렌 클로라이드(20ml) 중의 트리플루오로아세트산(10ml)을 사용하여 실시예 18, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 탈보호된 화합물, (O-에틸-L-Tyr-OCH₃)를 수득한다.

단계 C

반응식 IV, 단계 B2; 상기 제조된 탈보호된 화합물(22mmol)을 트리에틸아민(44mmol), HOBt(22mmol) 및 EDC(22mmol)를 사용하여 실시예 18, 단계 C에 기술된 공정과 유사한 방식으로 N-BOC-norVal(DMF 130ml에 용해된 22mmol, 구입원 시그마 케미칼 캄파니, St. Louis, MO 63178)과 커플링시켜, 커플링된 화합물을 수득한다.

단계 D

반응식 IV, 단계 C; 상기 제조된 커플링된 생성물(14.3mmol)을 물(100ml) 및 THF(100ml) 중의 수산화리튬 1수화물(16mmol)을 사용하여 실시예 7, 단계 C에 기술된 공정과 유사한 방식으로 탈보호시켜, 산을 수득한다.

단계 E

반응식 VI, 단계 A; 상기 제조된 산(5.8mmol)을 1,2-디클로로에탄 중의 파라포름알데히드(4.0g) 및 p-톨루엔설폰산 1수화물(200mg)을 사용하여 실시예 1, 단계 A에 기술된 공정과 유사한 방식으로 폐환시켜, 폐환 화합물을 수득한다.

단계 F

반응식 VI, 단계 B; 상기 제조된 폐환 화합물(4.7mmol)을 톨루엔 (60ml) 중의 DIBAL(10mmol)을 사용하여 실시예 1, 단계 B에 기술된 공정과 유사한 방식으로 환원시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 38

반응식 VII; 실시예 37에서 제조된 표제 화합물(0.59mmol)을 메틸렌 클로라이드(30ml) 중의 4-모르폴린카보닐 클로라이드(0.86mmol), DMAP(10mg) 및 트리에틸아민(1.2mmol)을 사용하여 실시예 3에 기술된 공정과 유사한 방식으로 O-아실화시켜, 표제 화합물을 수득한다.

실시예 39

[4S-3-(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(프로피오닐옥시)-4(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 105,837)의 제조

반응식 VII; [4S-[3R-(R^*), 4α, 5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.375g, 0.909mmol, 실시예 1에서 제조됨)를 메틸렌 클로라이드(9ml)에 용해시킨다. N-메틸모르폴린(0.276g, 2.73mmol) 및 프로피오닐 클로라이드(0.126g, 1.36mmol)를 가하고 N₂하에 실온에서 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 추가의 메틸렌 클로라이드(40ml)로 희석시키고 1N HCl(2 ×25ml), 포화된 NaHCO₃(1 ×25ml) 및 염수(1 ×25ml)로 세척하고 MgSO₄로 건조한다, 용매를 진공하에 제거하고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 헥산/에틸 아세테이트(2:1), 메틸렌 클로라이드와 함께 적하)에 의해 정제하여, 표제 화합물(0.299g)을 점성의 투명한 무색 오일로서 수득한다.

실시예 40

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(에틸석시닐옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 105,608)의 제조

반응식 VII; [4S-[3(R^*), 4α, 5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.57g, 1.38mmol, 실시예 1에서 제조됨), 에틸 석시닐 클로라이드(0.45g, 2.77mmol) 및 N-메틸모르폴린(0.306g, 3.04mmol)을 메틸렌 클로라이드(5.4ml)에 용해시킨다. 반응 혼합물을 밤새 교반하고, H₂O에 붓고 디에틸 에테르(2 ×150ml)로 추출한다. 합한 추출물을 묽은 HCl, 묽은 NaHCO₃및 H₂O로 세척하고 Na₂SO₄로 건조한다. 용매를 진공하에 제거하고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 용출제: 25% 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 정제하여, 표제 화합물(함께 혼합한 후의 세 개 분획의 전체= 468mg)을 수득한다.

실시예 41

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(2-에틸헥사노일옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 104,092)의 제조

반응식 VII; [4S-[3(R^*), 4α, 5β]]-[1-[[5-하이드록시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.5g, 1.21mmol, 실시예 1에서 제조됨)를 메틸렌 클로라이드(5.4ml)에 용해시킨다. N-메틸모르폴린(0.27g, 2.67mmol) 및 2-에틸헥사노일 클로라이드(0.39g, 2.4mmol)를 가하고 반응 혼합물을 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 H₂O에 붓고 디에틸 에테르(3 ×50ml)로 추출한다. 합한 추출물을 묽은 HCl 및 NaHCO₃로 세척하고 Na₂SO₄로 건조한다. 용매를 진공하에 제거하고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 용출제: 25% 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 정제하여, 표제 화합물(120mg)을 수득한다.

실시예 42

[4S-[3(R ^* ),4α,5β]]-[1-[[5-(4-메톡시페닐아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(MDL 105,236)의 제조

반응식 VII; [4S-[3(R^*), 4α, 5β]]-[1-[[5-하이드록시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르(0.5g, 1.21mmol, 실시예 1에서 제조됨)를 메틸렌 클로라이드(5ml)에 용해시킨다.N-메틸모르폴린(0.27g, 2.67mmol) 및 4-메톡시페닐아세틸 클로라이드(0.44g)를 가하고 반응 혼합물을 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르가 덮인 H₂O에 붓는다. 수성 층을 추가의 디에틸 에테르(2 ×50ml)로 추출하고 합한 추출물을 묽은 HCl 및 NaHCO₃로 세척하고 Na₂SO₄로 건조한다. 용매를 진공하에 제거하고 잔사를 플래시 크로마토그래피(실리카 겔, 용출제: 25% 에틸 아세테이트/헥산)에 의해 정제하여, 표제 화합물(580mg)을 수득한다.

본 발명의 범주 내에 있는 신규한 화합물 중의 하나의 부그룹은 R이 수소, OH 또는 할로겐이고, R₁이 이소프로필, 이소부틸, 2급 부틸 또는 메틸이고; R₂가 이소부틸이고; R₃이 수소이고; R₄및 R₅가 각각 독립적으로 수소 또는 메틸이고; R₆이 카보벤질옥시 또는 화학식

[여기서, Z는 N 또는 CH이고; B는 화학식

또는

의 그룹(여기서, R'는 수소 또는 C₁-C₆알킬 그룹이다)이다]이고; R₇이 수소이고, m이 정수 0 또는 1이고; n이 정수 0 또는 1인 화학식 I의 화합물이다.

본 발명의 범주 내에 있는 신규한 화합물의 다른 부그룹은 R이 수소, OH 또는 할로겐이고; R₁및 R₂가 각각 독립적으로 C₁-C₄알킬이고; R₄및 R₅가 각각 독립적으로 수소 또는 메틸이고; R₆이 카보벤질옥시이고; m이 0이고; n이 정수 1인 화학식 I의 화합물이다.

하기 리스트는 본 발명에 따르는 화합물의 일부를 나타낸다:

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-3-[3-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]부틸]-4-(페닐메틸)-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]메틸카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-3-메틸부틸]메틸카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-3-메틸부틸]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-4-모르폴린카복스아미드;

[4S-[4α,5β]]-5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리딘카복실산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(부티릴옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-2,2-디메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(아세틸옥시)-2,2-디메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[2R-[2α,3, (S^*),4β,5α]]-[1-[[5-하이드록시-2-메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[2S-[2α,3,(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-2-메틸-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[2R-[2α,3,(S^*),4β,5α]]-[1-[[5-하이드록시-2-(페닐메틸)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[2S-[2α,3,(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-2-(페닐메틸)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-[(4-하이드록시페닐)메틸]-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-[(4-메톡시페닐)메틸]-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-[(4-니트로페닐)메틸]-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[4-[(4-아미노페닐)메틸]-5-하이드록시-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*(1R^*,2R^*)],4α,5β]]-[1-[[[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸부틸카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*(1R^*,2R^*)],4α,5β]]-[1-[[[1-[[5-(아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸부틸카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3[R^*(1R^*)],4α,5β]]-[1-[[[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸부틸카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3[R^*(1R^*)],4α,5β]]-[1-[[[1-[[5-(아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]아미노]카보닐]-2-메틸부틸카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-N-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]메틸-4-모르폴린카복스아미드;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[4-[(4-클로로페닐)메틸-5-하이드록시-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-3-[3-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]부틸]-4-[(4-클로로페닐)메틸]-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-에틸]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-3-[1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]프로필]-4-(페닐메틸)-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸부틸]카밤산, 페닐메틸 에스테르;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-3-[3-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]펜틸]-4-(페닐메틸)-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산;

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-[(4-하이드록시페닐)메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-3-메틸부틸]카밤산, 페닐메틸 에스테르; 및

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-3-[4-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]펜틸]-4-[(4-하이드록시페닐)메틸]-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산.

추가의 양태에서, 본 발명은 칼파인의 억제를 필요로 하는 환자 또는 급성 또는 만성 신경변성 장애를 앓고 있는 환자에게 치료학적 유효량의 화학식 I의 화합물을 투여함을 포함하여, 상기 환자를 치료하는데 있어서 칼파인을 억제하는 방법을 제공한다. 용어 "급성 또는 만성 신경변성 장애"는 성인의 중추 신경계에서 뉴론의 부적절하고 유해한 결실을 특징으로 하는 질환 또는 상태를 의미하고 허혈성 발작(혈전증 또는 색전증 기원), 출혈성 발작 및 후속적인 혈관 현상, 심근 경색, 관상 동맥 바이패스 및 이식 수술의 신경학적 결과, 두부 외상, 알츠하이머병, 노화 관련 치매, 혈관성 치매, 파킨슨병 및 근위축성 측색 경화증 등을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 급성 또는 만성 신경변성 장애 치료용으로 특히 바람직한 화학식 I의 화합물은 다음을 포함한다:

[4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]메틸카밤산, 페닐메틸 에스테르; 및

[4S-[4α,5β]]-5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리딘카복실산, 페닐메틸 에스테르.

본원에서 사용된 것으로서, "환자"는 특정의 급성 또는 만성 신경변성 장애를 앓고 있는 포유동물과 같은 온혈 동물을 의미한다. 기니아 피그, 개, 고양이, 래트, 마우스, 말, 소, 양 및 사람이 상기 용어의 의미의 범주 내에 있는 동물의 예이다.

용어 "치료학적 유효량"은 환자에게 연속적인 주입 또는 1회 또는 다수 용량의 투여시 급성 또는 만성 신경변성 장애와 관련된 손상 정도를 감소시켜, 개선된 결과 및/또는 치료의 부재시 예상되는 결과와 비교하여 질환 진행의 지연 또는 방지를 유도하는데 있어서 유효한 양을 의미한다. 용어 "치료학적 유효량"은 반드시 질환의 완전한 제거 또는 치유를 의미하는 것은 아니다. 치료학적 유효량 또는 용량을 결정하는데 있어, 다수의 인자가 주치의 진단자에 의해 고려되는데, 이는 포유동물의 종; 이의 체격, 연령, 및 전반적인 건강; 관련된 특이적 질환; 질환의 정도 또는 관여도 또는 중증도; 개인 환자의 반응; 투여할 특정 화합물; 투여 방법; 투여할 제제의 생체이용률; 선택된 투여 섭생법; 수반된 약물 사용; 및 이외의 관련 상황을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.

화학식 I의 화합물의 치료학적 유효량은 1일 체중 kg당 약 0.1mg(mg/kg/일) 내지 약 100mg의 범위로 예상된다. 바람직한 양은 약 0.5 내지 약 30mg/kg/일로 가변적일 것으로 예상된다.

본 발명의 화합물은 매우 강력한 칼파인 및 카텝신 B의 억제제이다. 본 발명의 화합물은 효소 칼파인의 억제를 통한 이의 억제 효과를 나타내고, 이에 의해 허혈성 발작(혈전증 또는 색전증 기원), 출혈성 발작 및 후속적인 혈관 현상, 심근 경색, 관상 동맥 바이패스 및 이식 수술의 신경학적 결과, 두부 외상, 알츠하이머 병, 노화 관련 치매, 혈관성 치매, 파킨슨병 및 근위축성 측색 경화증 등을 포함하는 급성 또는 만성 신경변성 장애를 지연시키거나 방지하는 것으로 여겨진다. 그러나, 본 발명은 목적-용도 응용에서 이의 유효성을 설명하기 위해 특정 이론 또는 제안된 메카니즘에 한정되지는 않는다.

상기 기술된 질환 상태로 고생하는 환자의 치료를 수행할 경우, 화학식 I의 화합물은 경구 또는 비경구 경로를 포함하여, 상기 화합물을 유효량으로 생체이용 가능하도록 하는 형태 또는 방법으로 투여할 수 있다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물을 경구, 피하, 근육내, 정맥내, 경피내, 비강내, 직장내 및 국소 등으로 투여할 수 있다. 경구 또는 정맥내 투여가 일반적으로 바람직하다. 제형을 제조하는 당해 기술분야의 숙련가는 치료할 질환 상태, 질환의 단계 및 다른 관련 상황에 대해 선택된 화합물 특유의 특징에 따라 적합한 투여 형태 및 방법을 쉽게 선택할 수 있다[참조: Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publicating Co. (1990)].

상기 화합물들은 단독으로 또는 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 함께 약제학적 조성물 형태로 투여할 수 있고, 이들의 비와 특성은 선택된 화합물의 용해도 및 화학적 특성, 선택된 투여 경로, 및 표준 약제학적 관행에 의해 결정된다. 본 발명의 화합물은 자체로 유효하지만, 안정성, 결정화 용이성 및 용해도의 증가 등의 목적을 위해 약제학적으로 허용되는 이의 염, 예를 들어, 산 부가 염 형태로 제형화하여 투여할 수 있다.

또 다른 양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물을 하나 이상의 불활성 담체와 함께 혼합물 또는 다른 형태로 포함하는 조성물을 제공한다. 상기 조성물은, 예를 들어, 검정 표준, 대량 출하의 편리한 방법 또는 약제학적 조성물로서 유용하다. 화학식 I의 화합물의 검정가능한 양은 당해 분야의 숙련가에 의해 익히 공지되고 이해되는 표준 검정 공정 및 기술에 의해 쉽게 측정가능한 양이다. 화학식 I의 화합물의 검정가능한 양은 일반적으로 조성물의 약 0.001중량% 내지 약 75중량%의 범위로 가변적이다. 불활성 담체는 분해되지 않거나 화학식 I의 화합물과 공유 결합적으로 반응하는 물질일 수 있다. 적합한 불활성 담체의 예는 물; 수성 완충액, 예를 들어, 일반적으로 고 성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 분석에 유용한 완충액; 유기 용매, 예를 들어, 아세토니트릴, 에틸 아세테이트 및 헥산 등; 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제이다.

보다 특히, 본 발명은 치료학적 유효량의 화학식 I의 화합물을 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와의 혼합물 또는 다른 형태로 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

상기 약제학적 조성물은 약제학적 분야에 익히 공지된 방법으로 제조된다. 담체 또는 부형제는 활성 성분에 대한 부형제 또는 매질로서 작용할 수 있는 고체, 반고체 또는 액제 물질일 수 있다. 적합한 담체 또는 부형제는 당해 분야에 익히 공지되어 있다. 상기 약제학적 조성물은 경구, 비경구 또는 국소용으로 적용될 수 있고, 정제, 캡슐제, 좌제, 액제, 현탁제 등의 형태로 환자에게 투여할 수 있다.

본 발명의 화합물은, 예를 들어 불활성 희석제 또는 식용 담체와 함께 경구 투여할 수 있다. 이들은 젤라틴 캡슐에 봉입되거나 정제로 압착될 수 있다. 경구 치료학적 투여 목적을 위해, 본 화합물을 부형제와 함께 혼입할 수 있고, 정제, 트로키제, 캡슐제, 엘리서르제, 현탁제, 시럽제, 웨이퍼제 및 저작성 검 등의 형태로 사용할 수 있다. 상기 제제는 활성 성분으로서 본 발명의 화합물을 4% 이상 함유 하여야 하나, 특정 제형에 따라 가변적일 수 있고, 편의적으로 단위 중량의 4% 내지 약 70%일 수 있다. 조성물에 존재하는 본 화합물의 양은 적합한 용량이 수득될 수 있을 정도이다. 본 발명에 따르는 바람직한 조성물 및 제제는 경구 투여 단위 제형이 본 발명의 화합물을 5.0 내지 300mg 함유하도록 제조된다.

정제, 환제, 캡슐제 및 트로키제 등은 또한 하기 조제를 하나 이상 함유할 수 있다: 미세결정성 셀룰로즈, 트라가칸트 고무 또는 젤라틴과 같은 결합제; 전분 또는 락토즈와 같은 부형제; 알긴산, 프리모겔(Primiogel) 및 옥수수 전분 등과 같은 붕해제; 마그네슘 스테아레이트 또는 스테로텍스(Sterotex)와 같은 윤활제; 콜로이드성 이산화규소와 같은 활주제; 및 첨가될 수 있는 슈크로스 또는 사카린과 같은 감미제; 또는 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 오렌지 향미와 같은 향미제. 용량 단위 제형이 캡슐제일 경우, 이는 상기 유형의 물질 이외에, 폴리에틸렌 글리콜 또는 지방유와 같은 액체 담체를 함유할 수 있다. 기타 용량 단위 제형은 용량 단위의 물리적 형태를 변형시키는 기타 각종 물질을, 예를 들면, 제피제로서 함유할 수 있다. 따라서, 정제 또는 환제는 슈가, 쉘락 또는 기타 장 피복제로 피복할 수 있다. 시럽제는 본 화합물 이외에 감미제로서의 슈크로스, 및 특정의 방부제, 염료 및 착색제, 및 향미제를 함유할 수 있다. 상기 각종 조성물을 제조하는 데 사용되는 물질은 사용되는 양에서 약제학적으로 순수하고 무독성이어야 한다.

비경구 치료학적 투여 목적을 위해, 본 발명의 화합물은 액제 또는 현탁제에 혼입할 수 있다. 상기 제제는 본 발명의 화합물을 0.1% 이상 함유하여야 하나, 본 발명의 화합물의 중량의 0.1 내지 약 50%의 범위일 수 있다. 상기 조성물에 존재하는 본 발명의 화합물의 양은 적합한 용량이 수득될 수 있을 정도이다. 본 발명에 따르는 바람직한 조성물 및 제제는 비경구 용량 단위가 본 발명의 화합물을 5.0 내지 100mg 함유하도록 제조된다.

본 발명의 화학식 I의 화합물은 또한 국소 투여할 수 있고, 이러한 경우 담체는 액제, 연고제 또는 겔 기제를 적합하게 포함할 수 있다. 기제는, 예를 들어 석유, 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 밀랍, 광유, 물 및 알콜과 같은 희석제, 유화제 및 안정화제 중의 하나 이상을 포함할 수 있다. 국소용 제형은 화학식 I의 화합물또는 약제학적으로 허용되는 이의 염을 약 0.1 내지 약 10% w/v(단위 용적당 중량)의 농도로 함유할 수 있다.

액제 또는 현탁제는 또한 하기 보조제를 하나 이상 포함할 수 있다: 주사용 물, 염수, 비휘발성 오일, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 이외의 합성 용매와 같은 멸균 희석제; 벤질 알콜 또는 메틸 파라벤과 같은 항균제; 아스코르브산 또는 아황산나트륨과 같은 항산화제; 에틸렌 디아민테트라아세트산과 같은 킬레이트제; 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트와 같은 완충제 및 염화나트륨 또는 덱스트로즈와 같은 긴장 조절제. 비경구용 제제는 앰풀, 1회용 주사기 또는 유리 또는 플라스틱으로 제조된 다중 투여량 바이알에 봉입할 수 있다.

칼파인 및/또는 카텝신 B를 억제하는 본 발명의 화합물의 활성 및 따라서 허혈성 발작(혈전증 또는 색전증 기원), 출혈성 발작 및 후속적인 혈관 현상, 심근경색, 관상동맥 바이패스 및 이식 수술의 신경학적 결과, 두부 외상, 알츠하이머 병, 노화 관련 치매, 혈관성 치매, 파킨슨병 및 근위축성 측색 경화증 등을 포함하는 급성 또는 만성 신경변성 장애를 지연시키거나 방지하는 화학식 I의 화합물의 유용성은 익히 인지되고 신뢰할 수 있는 시험관내 및 생체내 모델에 의해 입증할 수 있다.

실시예 43

칼파인 억제제의 존재하 칼파인의 시험과내 검정

근육 및 적혈구 칼파인을 기질로서 3급-Boc-Val-Leu-Lys-7-아미도-4-메틸-쿠마린을 사용하여 형광계 공정에 의해 검정한다[참조: Sasaki et al., J. Biol.Chem.259, 12489-l2494(1984)]. 효소 칼파인은 시판되고 있고 시그마(Sigma)로부터 구입할 수 있다. 검정 완충액, pH, 검정 기술 및 억제 상수(Ki)의 계산은 문헌 [참조: Mehdi et., Biochem. Biophys. Res. Commun.157, 1117-1123(1998)]에 기술된 것과 유사하다. 표 2는 선택된 본 발명의 화합물의 칼파인 억제능을 요약한다.

[표 2]

시험관내 칼파인 억제

실시예 44

국부적 뇌 허혈증 모델에서 MDL 104,903을 사용한 생체내 신경보호

허혈성 발작 후 신경학적 손상을 제한하고/하거나 생체내 칼파인을 억제하는 화학식 I의 화합물의 효능을 문헌[참조: Hong et al., Stroke25, 663-669(1994)]에 예시한 바와 같은 중뇌 동맥 및 동측성 공통 경동맥의 영구적인 직렬식 교합에 의해 생성된 국부적 허혈증; 문헌[참조: Bartus et al., Stroke25, 2265-2270(1994)]에 교시된 바와 같은 중뇌 동맥 및 좌우 공통 경동맥의 영구적 및/또는 가역적 교합에 의한 국부적 허혈증; 및 문헌[참조: Lee et al., Pro. Nal. Acad.Sci.88, 7233-7237(1991)]에 의해 기술된 바와 같은 공통 경동맥 및/또는 척추 동맥의 가역적 교합에 의한 전체적 허혈증을 포함하는, 허용된 국부 및 전체적인 허혈증 모델을 사용하여 입증할 수 있다.

예를 들어, 12마리 수컷의 자연발생성 고혈압 래트를 두 그룹, 비히클-처리된 그룹 및 칼파인 억제제-처리된 그룹(MDL 104,903; 4 ×30mg/kg 누진적 투여량)으로 분배한다. 허혈증은 우측 중뇌 동맥 및 우측 공통 경동맥의 영구적인 직렬식 교합에 의해 유도된다. 상기 동물을 외과적 처리한 후 24시간 후에 희생시키고, 경색 용적의 정량적인 측정을 표준 조직학적 기술 및 정량적 이미지 분석법을 사용하여 수행한다. 허혈증이 개시된 뒤 5분 후 2시간 간격으로 대퇴부 정맥을 통해 4 ×30mg/kg의 정맥내 투여량이 제공된 래트에 대해, 경색 용적의 20.5% 감소가 관찰된다. 뇌경색 및 부종에서의 감소를 입증하는 결과를 하기 표 3에 나타낸다.

[표 3]

레트에서 뇌 경색을 감소시키는 MDL 104,903의 효과

A. 비히클- 처리된 그룹

B. 억제제-처리된 그룹

C. 경색 감소의 평균치 및 백분율의 비교

특정의 일반적 용도를 갖는 구조적으로 관련된 화합물의 그룹으로서, 특정의 그룹 및 배위가 바람직하다. 바람직한 화학식 I의 화합물은 하기 그룹을 포함한다.

치환체 R에 대해서는, R이 수소 또는 OH인 화학식 I의 화합물이 바람직하고, 수소일 경우 특히 바람직하다.

치환체 R₁및 R₂에 대해서는, R₁및 R₂가 각각 독립적으로 메틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸 또는 2급-부틸인 화학식 I의 화합물이 바람직하고, 이소프로필인 경우가 특히 바람직하다.

치환체 R₃에 대해서는, R₃이 수소인 화학식 I의 화합물이 특히 바람직하다.

치환체 R₄및 R₅에 대해서는, R₄및 R₅가 각각 독립적으로 수소 또는 메틸인 화학식 I의 화합물이 바람직하고, 수소인 경우가 특히 바람직하다.

치환체 R₆에 대해서는, R₆이 카복시벤질옥시 또는

[여기서, Z는 N 또는 CH이고; B는

의 그룹(여기서 R'는 수소 또는 C₁-C₆알킬 그룹이다)이다]인 화학식 I의 화합물이 바람직하다.

본 발명이 이의 특정 양태에 관여되어 기술되었지만, 이는 추가로 변형될 수 있으며, 본원은 일반적으로 본 발명의 원리에 따르며 본 명세서로부터 출발하여 본 발명이 속한 분야에서 익히 공지되거나 통상적인 실행 내에 포함되고, 상기 기술된 본질적인 특징에 적용될 수 있고, 첨부된 특허청구의 범주 내에 따르는 본 발명의 모든 변형, 용도 또는 적용도 포함하는 것으로 이해되어야 할 것이다.

Claims

화학식 I의 화합물 및 약제학적으로 허용되는 이의 염.

화학식 I

상기 화학식 I에서,

R 및 Q는 각각 독립적으로 수소, OH, C₁-C₄알킬, C₁-C₄알콕시, NO₂, NH₂또는 할로겐이고;

R₁및 R₂는 각각 독립적으로 C₁-C₄알킬이고;

R₃은 수소, C₁-C₈알카노일,

또는
[여기서, R₈은 C₁-C₄알킬이다]이고;

R₄및 R₅는 각각 독립적으로 수소, C₁-C₄알킬 또는 벤질이고;

R₆은 3급-부틸옥시카보닐, 카보벤질옥시 또는

화학식

[여기서, Z는 N 또는 CH이고; B는 화학식

또는
의 그룹(여기서, R'는 수소 또는 C₁-C₆알킬 그룹이다)이다]이고;

R₇은 수소 또는 메틸이고;

m 및 n은 각각 정수 0 또는 1이고;

p 및 q는 각각 정수 0 내지 3이다.
제1항에 있어서, R₁및 R₂가 각각 독립적으로 메틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸 또는 2급 부틸이고, n이 정수 1인 화합물.
제1항에 있어서, R₃이 수소인 화합물.
제2항에 있어서, R, R₄, R₅및 R₇이 각각 수소인 화합물.
제4항에 있어서, B가 화학식

또는
의 그룹인 화합물.
제4항에 있어서, R₆이 카보벤질옥시인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-3-[3-메틸-1-옥소-2-[[(페닐메톡시)카보닐]아미노]부틸]-4-(페닐메틸)-5-옥사졸리디닐 에스테르, 4-모르폴린카복실산인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]메틸카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[4α,5β]]-5-하이드록시-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리딘카복실산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(부티릴옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(프로피오닐옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(에틸석시닐옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(2-에틸헥사노일옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항에 있어서, [4S-[3(R^*),4α,5β]]-[1-[[5-(4-메톡시페닐-아세틸옥시)-4-(페닐메틸)-3-옥사졸리디닐]카보닐]-2-메틸프로필]-카밤산, 페닐메틸 에스테르인 화합물.
제1항 내지 제16항 중의 어느 한 항에 따르는 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 급성 또는 만성 신경변성 장애 치료용 약제학적 조성물.
제1항 내지 제16항 중의 어느 한 항에 따르는 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 허혈성 발작 치료용 약제학적 조성물.
제1항 내지 제16항 중의 어느 한 항에 따르는 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 출혈성 발작 치료용 약제학적 조성물.