JPS6150956B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は構造： ［ただし式中R¹は （ＹはＨ、OHまたはCH₂NHBであり、ＢはＨま
たはアミノ保護基であり、ＺはＨ、OHまたは
NH₂である）； 【式】および 【式】 から成る群からえらばれたアシルであり、ｎは１
ないし９の整数であり、R³はＨまたはメトキシ
である］の新規な化合物、そのエステルまたは毒
性のない医薬として使用可能な塩の製法に関す
る。 式の化合物の該エステルは、式 （ただし式中、Ｗが水素を表わす時には、Ｚは
（低級）アルカノイル、ベンゾイル、ナフトイ
ル、フロイル、テノイル、ニトロベンゾイル、メ
チルベンゾイル、ハロベンゾイル、フエニルベン
ゾイル、Ｎ−フタルイミド、Ｎ−サクシニミド、
Ｎ−サツカリノ、Ｎ−（低級）アルキルカルバモ
イル、（低級）アルコキシ、（低級）アルキルチ
オ、フエノキシ、カルバルコキシ、カルボベンゾ
キシ、カルバモイル、ベンジロキシ、クロロベン
ジロキシ、カルボフエノキシ、カルボ−三級−ブ
トキシまたは（低級）アルキルスルホニルを表わ
し、Ｗがカルバルコキシを表わす時には、Ｚはカ
ルバルコキシを表わし、Ｗがフエニルを表わす時
には、Ｚはベンゾイルまたはシアノを表わし、あ
るいはＷおよびＺは合して４ないし８個の炭素原
子を含む２−オキソシクロアルキルを表わす）の
基を有するものを包含する。本発明の好適な実施
の態様においては４位カルボン酸またはそのエス
テルは−COOR²と表すことができ、R²は、水
素、ピバロイロキシメチル、アセトキシメチル、
メトキシメチル、アセトニル、フエナシル、Ｐ−
ニトロベンジル、β・β・β−トリクロロエチ
ル、３−フタリジルまたは５−インダニルであ
る。 後に更に詳細に述べるように、本発明はこれら
の酸の塩も提供する。この二環性の核の立体化学
は、セフアロスポリンＣにおいて見出されるもの
である。 下記のアシル基は本発明の式の目的化合物中
のアシル基（R¹）とは異なるが、同じ構造式中
に下記のアシル基を有する化合物は後に述べる如
く本発明の目的化合物を製造するための７−アミ
ノ中間体の出発原料として有用である。 （） 〔ただしR¹⁶は（低級）アルキルまたは式 （ただしｎは１ないし16の整数であり、R¹⁷および
R¹⁸は、同一または異なつていて、各々Ｈ、Cl、
Br、Ｆ、NO₂、（低級）アルキルまたは（低級）
アルコキシである）のアールアルキル基であ
る〕； （） 〔ただし式中R¹⁹は（低級）アルキルまたは式 （ただしｎは０ないし６の整数であり、R¹⁷および
R¹⁸は、同一または異なつていて、各々Ｈ、Cl、
Br、Ｆ、NO₂、（低級）アルキルまたは（低級）
アルコキシである）の基である〕； （） 〔ただしR²⁰はα−ハロまたはα・α−ジハロC₂
〜C₄アルカノイルであるかまたはR²⁰は米国特許
3819619中開示されているようなＮ−イソボルニ
ロキシカルボニルであるかまたはR²⁰は式 （ただし式中R²¹およびR²²は各々水素、低級アル
キル、フエニル、ハロフエニル、トリル、低級ア
ルコキシフエニル、あるいはナフチルであり、Ｘ
は酸素または硫黄であり、R²³は米国特許3819621
中開示されているような低級アルキルである）の
基であり、あるいはR²⁰は水素である（セロフア
ロスポリンＣにおけるように）〕。 本発明の好適な実施の態様は、R¹が次の構造
を有する式の化合物よりなる。 【式】 【式】 【式】および 【式】 本発明の他の好適な実施態様は、R¹が次の構
造を有する場合の７−側鎖においてＤ配置を有す
る式の化合物よりなる。 【式】 【式】 本発明の他の好適な実施態様は、R¹が次の構
造を有する場合の７−側鎖においてＤ配置を有す
る式の化合物よりなる。 【式】（Ｙは前記定義のとおり である）。 本発明の他の好適な実施態様は、R′が次の構
造を有する場合の式の化合物よりなる。 【式】 本発明は、式 （ただし式中R¹は前記定義のアシルであり、R³は
Ｈまたはメトキシであり、ｎは１から９までの整
数である）の化合物、あるいはそのエステルまた
は毒性のない医薬として使用可能な塩に関するも
のである。その方法は、式 （ただし式中R¹はＨまたは前記定義のアシルであ
り、R³は上に定義したとおりである）の化合
物、あるいはその塩または容易に加水分解可能な
エステルを式 （ただし式中ｎは１ないし９である）の化合物と
反応させ、かつ、R¹がＨである時には、得られ
た化合物を式 R¹−Ｘ （ただし式中Ｘはハロゲン化物またはその官能均
等物であり、R¹は前記定義のアシルであり、こ
れは、アシル基が遊離のアミノまたはヒドロキシ
ルを有する時には、該基は常用の保護基によつて
閉塞されており、次に除去されて式の化合物を
得る）のアシル化剤で処理し、所望の場合には、
得られた式の化合物の遊離の酸、塩または容易
に加水分解可能なエステルにおいて該得られた化
合物を対応するそのエステルまたは毒性のない医
薬として使用可能な塩に変換し、所望の場合に
は、得られた式の化合物の塩または容易に加水
分解可能なエステルにおいて該化合物を対応する
式の遊離の酸に変換することを特徴とする。 本発明はまた、構造 （ただしR³はＨまたはメトキシであり、ｎは１な
いし９の整数であり、R¹は前記定義のアシルで
ある）を有する抗菌剤の製法を提供し、その方法
は、式 （ただし式中R³およびｎは上のとおりである）の
化合物、あるいはその塩または容易に加水分解可
能なエステルまたはベンズアルデヒドまたはサリ
シルアルデヒドとのようなシツフ塩素（米国特許
3284451および英国特許1229453のものおよび７−
アミノペニシラン酸について使用するために米国
特許3249622中記載され、英国特許1073530中使用
されているシリルエステル類のいずれか、特にピ
バロイロキシメチル、アセトキシメチル、メトキ
シメチル、アセトニル、フエナシル、ｐ−ニトロ
ベンジル、β・β・β−トリクロロエチル、３−
フタリジルおよび５−インダニルエステルを包含
するが、それらに限定されない）を有機モノカル
ボン酸塩化物またはアシル化剤としてのその官能
均等物と反応させることを特徴とする。 上記の官能均等物は、混合無水物、特に炭酸の
低級脂肪族モノエステル、あるいはアルキルおよ
びアリールスルホン酸のような比較的強酸から製
造される混合無水物およびジフエニル酢酸のよう
な比較的立体障害のある酸の混合無水物を包含す
る対応する酸の無水物を含む。特に有用な無水物
は、Ｎ−カルボキシ−無水物（ロイヒ（Leuch）
の無水物ともいう；米国特許3080356および
3206455参照）（Ｄ−マンデル酸カルボキシ無水物
（米国特許3167549）または対応する置換マンデル
酸カルボキシ無水物を包含するが、それに限定さ
れない）である。その外、酸アジ化物または活性
エステルまたはチオエステル（例えば、ｐ−ニト
ロフエニル、２・４−ジニトロフエノール、チオ
フエノール、チオ酢酸との）を使用することがで
き、または遊離の酸を最初塩化Ｎ・N′−ジメチ
ルクロロホルミミニウム〔英国特許1008170およ
びノヴアクおよびワイヘート、Experientia
XI、６、360（1965）参照〕と反応させて後また
は酵素またはＮ・N′−カルボニルジイミダゾー
ルまたはＮ・N′−カルボニルジトリアゾール
〔南アフリカ特許出願63／2684参照〕またはカル
ボジイミド試薬〔特にＮ・N′−ジシクロヘキシ
ルカルボジイミド、Ｎ・N′−ジイソプロピルカ
ルボジイミドまたはＮ−シクロヘキシル−N′−
（２−モルホリノエチル）カルボジイミド；シー
ハンおよびヘス、J.Am.Chem.Soc.、77、1967
（1955）参照〕、あるいはアルキリルアミン試薬
〔R.ブイーユおよびH.G.フイーエ、Angew.
Chem.国際版、３、582（1964）参照〕またはイ
ソキサゾリウム塩試薬〔R.B.ウツドワード、R.
A.オロフソンおよびH.メイヤー、J.Amer.Chem.
Soc.、83、1010（1961）参照〕、あるいはケテン
イミン試薬〔C.L.スチーブンスおよびM.E.ムン
ク、J.Amer.Chem.Soc.、80、4065（1958）参
照〕またはヘキサクロロシクロトリホスフアトリ
アジンまたはヘキサブロモシクロトリホスフアト
リアジン（米国特許3651050）またはアジ化ジフ
エニルホスホリル〔DPPA；J.Amer.Chem.Soc.
、94、6203〜6205（1972）〕またはシアン化ジエ
チルホスホリル〔DEPC；Tetrahedron Letters
18号、1595〜1598頁（1973）〕またはジフエニル
ホスフアイト〔Tetrahedron Letters 49号、
5047〜5050頁（1972）〕の使用により、該遊離の
酸自体を化合物とカツプルさせることができ
る。酸塩化物の他の均等物は、対応するアゾール
化物、即ちそのアミド窒素が少なくとも２個の窒
素原子含有する準芳香族五員環、即ち、イミダゾ
ール、ピラゾール、トリアゾール類、ベンズイミ
ダゾール、ベンズトリアゾールおよびそれらの置
換誘導体のメンバーであるところの対応する酸の
アミドである。アゾール化物の一般的製法の例と
して、テトラヒドロフラン、クロロホルム、ジメ
チルホルムアミドまたは類似の不活性溶媒中で室
温において等モルの割合でＮ・N′−カルボニル
ジイミダゾールをカルボン酸と反応させて実際上
定量的収量でカルボン酸イミダゾール化物を生成
させ、炭酸ガスおよび１モルのイミダゾールが遊
離される。ジカルボン酸はジイミダゾール化物を
生じる。副生物、イミダゾールは沈殿し、分離す
ることができ、イミダゾール化物を単離すること
ができるが、このことは必須ではない。セフアロ
スポリンを製造するためにこれらの反応を実施す
る方法およびこのようにして製造されたセフアロ
スポリンを単離するために使用される方法は、当
該技術において周知である。 遊離の酸を化合物とカツプルさせるための酵
素の使用を上に挙げた。種々の微生物により提供
される酵素、例えばT.タカハシら、J.Amer.
Chem.Soc.、94(11)、4035〜4037（1972）およびT.
ナラら、J.Antibiotics（Japan）24(5)、321〜323
（1971）および米国特許3682777に記載されている
ものを用いるその遊離の酸のエステル、例えばメ
チルエステルの使用は上記の方法の範囲内に含ま
れる。 有機カルボン酸〔置換または非置換Ｄ−マンデ
ル酸（α−カルボキシル上保護基つきまたはな
し）を包含するが、それに限定されない〕の上述
したような化合物（または塩または好適には、
ベンズアルデヒドとのような、そのシツフ塩基の
容易に加水分解可能なエステル）とのカツプリン
グのためには、カツプリング剤として塩化ホスホ
ニトリリツク三量体（J.Org.Chem.、33(7)、2979
〜81、（1968）またはJ.Amer.Chem.Soc.、90、
823〜824および1652〜1653（1968）および米国特
許3455929に記載されているようなＮ−エトキシ
−１・２−ジヒドロキノリン（EEDQ）を利用す
ることも便利であり能率がよい。この反応は好適
には、３種の試薬すべてほぼ等モル量を使用して
ベンゼン、エタノールまたはテトラヒドロフラン
中30〜35℃において実施され、次いで常用の単離
および常法による存在する閉塞基の除去を行な
う。 本発明のその外の方法は、式 （ただし式中ｎは１ないし９である）を有するチ
オールによる７−アシルアミノセフアロスポラン
酸（明細書中記載されその他報告されているアシ
ル化操作中３−チオール化−７−アミノセフアロ
スポラン酸の代りに７−アミノセフアロスポラン
酸を用いることにより製造）の３−アセトキシ基
の変位および次に、α−ヒドロキシまたはα−ア
ミノ等またはカルボキシル基上またはその両方上
のように、保護基が存在すればその除去による本
発明の化合物の製造よりなる。上記のチオールに
よる上記の３−アセトキシ基の変位は、水または
水性アセトン中のような溶液状態で少なくとも室
温、好適には約50゜ないし100゜の範囲内の温度
において重炭酸ナトリウムのような温和な塩基の
存在下に、例えば好適には約PH６のような中性近
くで実施することができる。好適には過剰のチオ
ールを用いる。反応混合物を注意して酸性にし、
次いで水混和性の有機溶媒で抽出することによつ
て反応生成物を単離する。例示の目的（限定ので
はなく）で若干の特定の例を提供するために、置
換または非置換Ｄ−マンデルアミド−セフアロス
ポラン酸を、J.Med.Chem.17(1)、34〜41（1974）
およびその中に引用されている文献中一般的また
は特定的に記載されている操作によつて製造され
る。上に記したように、多くの他の７−アシルア
ミドセフアロスポラン酸の製造が特許および科学
文献、例えば米国260−243℃類に記載されてい
る。 有機カルボン酸がアミノまたはヒドロキシルの
ような官能基を有する時には、最初アミノまたは
ヒドロキシ基を閉塞（または保護）し、次にカツ
プリング反応を実施し、最後に得られた化合物を
保護基の化学的除去にかける、即ち得られた化合
物を保護基の離脱反応にかけることがしばしば望
ましい。 詳細には本発明の範囲内に、前述したアシル化
法において有機モノカルボン酸またはその酸塩化
物または、例えば次の特許に記載されているよう
な、前に６−アミノペニシラン酸をアシル化する
のに使用された他の均等物の使用により製造され
る抗菌剤が含まれる。米国特許2941995；
2951839；2985648；2996501；3007920；
3025290；3028379；3035047；3040033；
3041332；3041333；3043831；3053831；
3071575；3071576；3079305；3079306；
3080356；3082204；3093547；3093633；
3116285；3117119；3118877；3120512；
3120513；3130514；3127394；3140282；
3040032；3142673；3147247；3174964；
3180863；3198804；3202653；3202654；
3202655；3210337；3157639；3134767；
3132136；英国特許明細書874414；874416；
876516；876662；877120；877323；877531；
878233；880042；880400；882335；888110；
888552；889066；889069；889070；889168；
889231；890201；891174；891279；891586；
891777；891938；893518；894247；894457；
894460；896072；899199；900666；902703；
903785；904576；905778；906383；908787；
914419；916097；916204；916205；916488；
918169；920176；920177；920300；921513；
922278；924037；925281；931567；932644；
938066；938321；939708；940488；943608；
944417；多数のベルギー特許、例えば593222；
595171；597857；602494；603703；609039；
616419；617187；南アフリカ特許出願、例えば
60／2882；60／3057；60／3748；61／1649；
R61／2751；62／54；62／4920および63／2423。 明細書中使用される場合用語「（低級）アルキ
ル」は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピ
ル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、アミル、
ヘキシル、２−エチルヘキシル、ヘプチル、デシ
ル等のような１個から10個までの炭素原子を有す
る直鎖および枝分れ鎖脂肪族炭化水素残基を意味
する。同様に、他の基の説明、例えば「（低級）
アルコキシ」の部分として用語「（低級）」が使用
される場合、それは上記の基のアルキル部分をい
い、それに従つて「（低級）アルキル」に関して
前述したとおりである。 かくして本発明はまた、構造 （ただしR³はＨまたはメトキシであり、ｎは１な
いし９の整数であり、R¹は前記定義のアシルで
ある）を有する抗菌剤の製法を提供し、その方法
は、式 （ただし式中R¹は前記定義のアシルであり、R³は
Ｈまたはメトキシである）を有する化合物（セフ
アロスポリンＣ自体を包含する）を式 （ただし式中ｎは１ないし９である）を有する化
合物と反応させることを特徴とする。 ７−側鎖に置換アミノ基を有する化合物の場合
には、最初非置換（遊離または一級）アミノ基を
有する化合物を製造し、次にこの生成物を適当な
試薬と反応させて上に例示した型の最終生成物を
製造することがしばしば望ましい。 本発明はまた、関連事項としての構造 （ただしｎは１ないし９であり、R³はＨまたはメ
トキシである）有する新規かつ価値ある中間体の
製法を提供し、その方法は、構造 （ただしｎは１ないし９の整数であり、アシル基
（R¹′）は、および項に上に定義した
ものの一である）を有する試薬を、好適にはシリ
ル化された形で、イミノ−塩化物に（PCl₅を用
いてなど）、ついでイミノエーテルに（メタノー
ルを用いてなど）、ついで加水分解により所望の
生成物に（水を用いてなど）変換することによつ
て、該試薬から７−側鎖を除去することを特徴と
する。上記の反応の実施のための詳細は当該技術
に既知であり、例えば、米国特許3575950；
3573295および3573296に教示されている。 本発明はまた、関連事項として構造 （ただしｎは１ないし９である）を有する新規か
つ価値ある中間体の製法を提供し、その方法は、
７−アミノセフアロスポラン酸またはその塩また
は容易に加水分解されるエステルまたはシツフ塩
基を式 （ただし式中ｎは１ないし９である）を有する化
合物（明細書中HSR²ともいう）と反応させるこ
とを特徴とする。 上記の塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウ
ムおよびアルミニウムのような毒性のない金属の
塩、アンモニウム塩および置換アンモニウム塩、
例えばトリエチルアミンを含むトリアルキルアミ
ン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−ベンジ
ル−ベータ−フエネチルアミン、１−エフエナミ
ン、Ｎ・Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、デヒ
ドロアビエチルアミン、Ｎ・N′−ビス−デヒド
ロアビエチルエチレンジアミン、Ｎ−（低級）ア
ルキルピペラジン、例えばＮ−エチルピペラジ
ン、ならびにベンジルペニシリンとの塩を形成さ
せるために使用されている他のアミンのような毒
性のないアミンの塩を包含する、その毒性のない
カルボン酸の塩；ならびに塩酸塩、臭化水素酸
塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、スルフアミン酸塩
および燐酸塩のような鉱酸付加塩およびマレイン
酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、シユウ酸塩、コハク
酸塩、安息香酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、リン
ゴ酸塩、マンデル酸塩、アスコルビン酸塩のよう
な有機酸付加塩を包含する、その毒性のない酸付
加塩（即ち、アミンの塩）を包含する。 ２−ヨードエトキシカルボニル（英国特許
1349673）ｔ−ブトキシカルボニル、カルボベン
ジロキシ、ホルミル、ｏ−ニトロフエニルスルフ
エニル、β・β・β−トリクロロエトキシカルボ
ニル、４−オキソ−２−ペンテニル−２、１−カ
ルボメトキシ−１−プロペニル−２−等のような
置換分によつてアミノ基が「閉塞」されている化
合物（中間体としてか代謝プレカーサーとして使
用）も本発明に包含される。詳細には上記の閉塞
基に包含されるのは、例えば、米国特許3198804
および3347851に開示されているケトン（特にア
セトン）およびアルデヒド（特にホルムアルデヒ
ドおよびアセトアルデヒド）および、例えば、米
国特許3325479に開示されているβ−ケトエステ
ルおよびβ−ジケトンおよび日本特許71／24714
（Farmdoc 47321S）に開示されているβ−ケト
アミドである。 好適な本発明のセフアロスポリンのエステル
は、ピパロイロキシメチル、アセトキシメチル、
メトキシメチル、アセトニルおよびフエナシルエ
ステルである。すべては、遊離のカルボキシル基
を有するセフアロスポリンの製造において有用な
中間体であり、最初の３種はまた、経口投与する
と異なつた速度および量の吸収を示し、血液およ
び組織中異なつた濃度の活性抗菌剤を生じるので
興味がある。 上に示したように、７−アミノセフアロスポラ
ン酸のこれらの５種のエステルは、各々既知の方
法により製造される。一つのすぐれた操作は米国
特許3284451のものであり、そこではセフアロチ
ンナトリウムが、対応する活性のクロロまたはブ
ロモ化合物（例えば臭化フエナシル、クロロアセ
トン、クロロメチルエーテル、塩化ピバロイロキ
シメチル〔ピバル酸クロロメチルともいわれ
る〕、塩化アセトキシメチル）との反応によつて
エステル化され、次にチエニル酢酸側鎖が、同じ
特許におけるように酵素的にかまたは米国特許
3575970およびJournal of Antibiotics、
(11)、767〜773（1971）におけるように化学的に除
去される。他の一つのよい方法においては、英国
特許1229453におけるように、７−アミノセフア
ロスポラン酸のトリエチルアミン塩を活性ハロゲ
ン化合物と直接反応させる。 次にこれらの７−アミノセフアロスポラン酸の
エステルを、明細書中７−アミノセフアロスポラ
ン酸自体について例示されているのと同様にして
求核試薬HSR²と反応させる。前と同様、次に７
−アミノセフアロスポラン酸の３−チオール化エ
ステルを有機カルボン酸、例えばＤ−（−）−２−
フエニルグリシンとカツプルさせる。例えば７−
側鎖中のアミノまたはヒドロキシ基上の、閉塞基
の除去前または後に、このようにして得られたセ
フアロスポリンのエステルを、それ自体を使用し
ないならば、水性または酵素的加水分解（ヒトま
たは動物の血清によるなど）または酸性またはア
ルカリ性加水分解または、米国特許3284451中、
またペニシリン系列において、シーハンら、J.
Org.Chem.29(7)、2006〜2008（1964）により教
示されているようにチオフエノキシ化ナトリウム
による処理によるなどして、エステル化基の除去
によつてその遊離の酸（その双生イオンを含む）
（ならびに、所望の場合には、任意の塩）に変換
する。 他の別の合成においては、明細書中記載したよ
うにして３−チオール化７−アミノセフアロスポ
ラン酸を製造し、次に７−アミノ基においてアシ
ル化し、例えば、最終セフアロスポリンの塩化チ
オニルとの反応によつて製造される酸塩化物との
適当なアルコールとの反応または他の本質的に酸
性のエステル化操作によるなどして最終にエステ
ル化する。 本発明はまた、関連事項として構造 を有する新規かつ価値ある中間体の製法を提供
し、その方法は、無水溶媒中式 のチオールのリチオ誘導体を生成させ、該リチオ
誘導体を炭酸ガスと反応させて一生成物を生成さ
せ、これを次に加水分解して式 の化合物を得ることを特徴とする。 本発明はまた、関連事項として構造 （ただしｎは１ないし９である）を有する新規か
つ価値ある中間体の製法を提供し、その方法は、 (A) 式 〔ただし式中ｎは１ないし９の整数であり、
R¹⁰⁰は１ないし６個の炭素原子の（低級）アル
キルまたは式 （ただし式中R¹はＨ、Br、Ｉ、Cl、Ｆ、１ない
し６個の炭素原子の（低級）アルキルまたはア
ルコキシ、NO₂等であり、ｚは０ないし４であ
る）を有する残基である〕を有するイソシアネ
ートをアジ化ナトリウムで処理して式 （ただし式中ｎおよびR¹⁰⁰は上に定義したとお
りである）を有するチオール−エステルを製造
し； (B) チオール−エステルを加水分解して式 （ただし式中ｎは上のとおりである）を有する
チオール酸を製造することを特徴とする。 ヒトにおける細菌感染の処置に際しては、本発
明の化合物は、約５から200mg／Kg／日まで、好
適には約５から20mg／Kg／日までの量が分服、例
えば１日３ないし４回経口的または非経口的に投
与される。それらは、適当な生理的に使用可能な
担体または賦形剤と共に、例えば、125、250また
は500mgの活性成分を含有する用量単位で投与さ
れる。用量単位は、溶液または懸濁液のような液
剤の形である。 出発物質 Ａ １−カルボキシメチル−５−メルカプトテト
ラゾール (a) １−メチル−５−メルカプトテトラゾール
の再結晶 操作： １ 110ｇの１−メチル−５−メルカプトテ
トラゾールを350mlの沸騰水中スラリとす
る。溶液に近いものが得られる。 ２ この熱溶液（50〜60゜）を、1/4ないし
1/3インチの詰めた過助剤（「スーパーコ
ル」）を含有するブヒナー斗（11cm
SS604号紙）を通して真空によりすみやか
に過する。フイルターパツドを50〜60℃
のクロロホルム50mlで洗浄し、これを液
に加える。 ３ 液を約０〜６℃に冷却し、２時間０〜
６℃に保つ。生成した結晶を、０〜６℃に
おいて過により集め、０〜６℃のクロロ
ホルム60mlで洗浄し、これを液に加え
る。結晶（カツトＡ）を37〜45℃において
18時間風乾する。 ４ 回転真空エバポレーター（浴60℃）上約
半分の容量まで液を濃縮する。このスラ
リを０〜６℃に冷却し、２時間０〜６℃に
保つ。結晶を０〜６℃において過により
集め、０〜６℃のクロロホルム40mlで洗浄
し、これを液に加える。結晶（カツト
Ｂ）を37〜45℃において18時間風乾する。
結晶カツトＡおよびＢを混成して約65重量
％の収量を得る。 ５ 工程４カツトＢの液を工程４中記載し
たようにして２回再処理して更に15％の回
収を得ることができる。 (b) １−カルボキシメチル−５−メルカプトテ
トラゾールのジ−ナトリウム塩の製造 操作： １ 撹拌機つき２リツトル３頚フラスコ中の
実質的に乾燥した純テトラヒドロフラン
100mlを塩−アセトン−氷浴中で約−10℃
まで冷却する。液面に乾燥窒素ガスを吹込
む。 ２ このテトラヒドロフランに乾燥窒素気流
中撹拌下にヘキサン中15.06％（1.6N）の
ブチルリチウム（フート・ミネラル・カン
パニー）500mlを10分間に亘つて添加す
る。この溶液に近いものを−５ないし−10
℃に冷却する。 ３ 実質的に純粋な乾燥したテトラヒドロフ
ラン200mlに１−メチル−５−メルカプト
テトラゾール（上のようにして再結晶）
46.4ｇを溶解する。濁つている場合にはこ
の溶液を過し、５ないし10℃に冷却す
る。 ４ ブチルリチウム溶液に撹拌下乾燥窒素気
流中工程３の冷却溶液を10分間に亘つて添
加する。温度は、−５℃ないし最高＋10℃
に保たなければならない。沈殿が生成する
ことがある。 ５ この混合物を窒素気流中０℃ないし＋10
℃において0.5時間撹拌する。 ６ 無水炭酸ガスを、外温（０〜10℃）ない
し＋20℃以下において15分間早い速度およ
び早い撹拌下に吹込む。 ７ 低湿度の場所で生成する白色沈殿を過
により適当に集める。沈殿をテトラヒドロ
フラン約75mlで洗浄する。 ８ 水250ml（PH8.5〜9.5）にこの沈殿を溶
解する。テトラヒドロフランの第二の層が
存在していてよい。このものは、真空回転
式エバポレーター（浴50℃）中除去するこ
とができる。 ９ 濃塩酸でこの水溶液をPH1.6〜2.0に調節
する。 10 この酸水溶液を酢酸エチル250mlづつで
２回抽出する。各250mlの酢酸エチルを水
100mlづつで逆抽出する。水抽出液を棄て
る。酢酸エチル抽出液（水層を含まない）
を過し、混成する。 11 酢酸エチル抽出液を合して真空回転式エ
バポレーター（浴60℃）上濃縮乾固する。 12 フラスコ中の結晶をクロロホルム300ml
と共に２分間沸騰させる。熱スラリを加熱
ブヒナー斗（11cm−SS−604紙）を通し
て真空過する。結晶を50℃のクロロホル
ム約75mlで洗浄する。室温において約３時
間結晶を風乾し、次に約100〜200メツシユ
とする。 13 正確に工程12中記載されるようにしてこ
の100〜200メツシユの結晶を処理する（熱
クロロホルムは未反応の１−メチル−５−
メルカプトテトラゾールの大部分を除去す
る）。収量：結晶性１−カルボキシメチル
−５−メルカプトテトラゾール約45ないし
50ｇ。これらの結晶は、0.02ないし0.05モ
ルの１−メチル−５−メルカプトテトラゾ
ールを含有していてよい。 14 工程13の結晶を、室温において３〜５分
間エチルエーテル250mlでスラリとする。
この混合物を過する。不溶物（0.5〜５
％）は、次の仮の構造の夾雑対称メルカプ
トテトラゾールケトンであるかもしれな
い： 注意：この化合物は、約205〜210℃におい
て爆発する。 15 エーテ14のエーテル液を、真空回転式
エバポレーター（浴50℃）上蒸発乾固させ
る。約0.01〜0.05モルの１−メチル−５−
メルカプトテトラ含有する結晶性１−カル
ボキシメチル−５−メルカプトテトラゾー
ル約42ないし48ｇが回収される。 16 この結晶を無水エタノール420mlに溶解
する（約100mg/ml）。溶液を50〜60℃に加
温する。 17 工程16の熱溶液に、イソプロパノール中
41％の２−エチルヘキサン酸ナトリウム
（SEH）310mlをきわめて早い撹拌下10分
間に亘つて添加する。結晶性沈殿が生成す
る。この混合物を50〜60℃において20分間
スラリにする。 18 加熱ブヒナー斗（11cm−SS−604号
紙）を通してこの混合物を熱時過する。
結晶を50℃のエタノール75mlで洗浄する。 19 工程18のエタノール湿結晶をエタノール
200〜300ml中スラリにする。スラリを200
メツシユのふるいに通す。早い撹拌下この
スラリを50〜60℃に５分間加熱する（未反
応の１−メチル−５−メルカプトテトラゾ
ールナトリウムは熱エタノールにきわめて
可溶性である）。 20 加熱ブヒナー斗中11cm−SS−604号紙
上50〜60℃において結晶を集める。この結
晶を75〜100mlのエタノールで洗浄し、50
〜60℃において24〜48時間真空乾燥する。 収量：１−カルボキシメチル−５−メル
カプトテトラゾールジ−ナトリウム
（NMRにより観察して１−メチル−５−メ
ルカプトテトラゾールを含まない）40〜48
ｇ。 Ｂ ７−アミノ−３−（カルボキシメチルテトラ
ゾール−５−イルチオメチル）−３−セフエム
−４−カルボン酸 １ 撹拌機、温度調整機、温度計および窒素導
入管を備えた３頚フラスコ中に、７−アミノ
セフアロスポラン酸18ｇ（0.066モル）およ
び0.1MPH6.4の緩衝液（燐酸ナトリウム、一
塩基性・1H₂O20.7ｇ＋燐酸ナトリウム、二
塩基性、無水8.5ｇ、全量２リツトルに）を
入れる。 ２ 工程１中記載した混合物の撹拌下、重炭酸
ナトリウム1.5ｇおよび１−カルボキシメチ
ル−５−メルカプトテトラゾールジナトリウ
ム16ｇ（0.078モル）を添加する。 ３ 撹拌継続下、10分間この混合物に窒素を吹
込む。 ４ 撹拌および窒素流入を保ちながら、20分間
に亘つてスラリを56℃に加熱する。この間
に、重炭酸ナトリウム6.5ｇを少しづつ増や
して添加する。 ５ 連続撹拌および窒素流入下、この溶液の温
度を56℃に４時間保つ。PHは6.2〜6.6に留ま
らなければならない。 ６ 氷浴中反応混合物を５℃に冷却する。 ７ この混合物に１：１燐酸／水の溶液50mlま
たは濃HClを添加して2.0〜3.0のPHにする。 ８ 過により生成物を集める。冷水20ml、次
いで冷メタノール200mlでフイルターケーキ
を洗浄する。 ９ 固体を風乾して定重量とする。（典型的な
操作は生成物14.5ｇを生じた。）この生成物
は色が黄色ないし暗褐色に変つてよい。 10 この生成物を200メツシユのステンレスス
チールふるいに通す。 11 早い撹拌下ｎ−プロパノール200mlにこ200
メツシユの粉末10ｇを懸濁する。 12 濃塩酸2.0mlを添加し、室温において0.5時
間はげしく撹拌する。 13 スラリを過する。ｎ−プロパノール20ml
で褐色固体を洗浄し、液に洗液を添加する
（追加の生成物の可能性のある回収のために
フイルターケーキとつておく）。 14 工程13のｎ−プロパノール液に炭（「ダ
ルコＧ−60」）1.5ｇを添加する。0.5時間ス
ラリにする。過により炭を除く。ｎ−プロ
パノール20mlで炭を洗浄し、洗液を液に添
加する。 15 早い撹拌下、ｎ−プロパノール液にトリ
エチルアミンを添加して見掛けのPH3.0とす
る。結晶が生成する。10分間スラリにする。 16 過により白色結晶を集め、ｎ−プロパノ
ール30ml、メタノール50mlで洗浄し、40℃に
おいて24時間風乾する。収量：７−アミノ−
３−（１−カルボキシメチルテトラゾール−
５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−
カルボン酸４ないし８ｇ。 17 ７−アミノ−３−（１−カルボキシメチル
テトラゾール−５−イルチオメチル）−３−
セフエム−４−カルボン酸の別の精製操作は
次のとおりである： (a) １Ｎ塩酸75ml中室温において10〜15分間
200メツシユの生成物（工程10から）10ｇ
をスラリにする。過して暗褐色固体を除
く。 (b) 炭（「ダルコＧ−60」）2.5ｇを添加し、
0.5時間スラリにする。 (c) 過により炭を除く。水15mlで炭を洗浄
し、洗液を液に添加する。 (d) 早い撹拌下、液に濃水酸化アンモニウ
ムを添加してPH2.5〜3.0とする。結晶が生
成する。 (e) 結晶塊を25分間スラリにする。過によ
り結晶を除く。水30ml、メタノール50mlで
結晶を洗浄し、室温において風乾する。収
量：白色に近い結晶４〜７ｇ。 本発明の化合物を製造するために使用される
他の試薬は、当該技術（例えば、上記の特許お
よび刊行物など）中記載されているとおりにか
または厳密に類似の操作によつて合成される。
例えば、Ｄ−（−）−α−アミノ酸を使用する時
には、米国特許3198804；3342677または
3634418中、またはフリースら、Acta Chem.
Scand.17、2391〜2396（1966）により、また
はナイムスら、Biochemistry（Wash.）５、
203〜213（1966）により、または本題について
の他の刊行物中に述べられている操作に従つて
製造される。しかし、便宜上また例示の目的
で、三級−ブトキシカルボニルにより「閉塞」
されている遊離のアミノ基を有するカルボン酸
を製造するための上記の合成の若干の特定の例
を下に示す。 Ｃ ２−（三級−ブトキシカルボニルアミノメチ
ル）−１・４−シクロヘキサジエニル酢酸 液体アンモニア（Li50mgで処理して根跡の水
分を除去してある）1.5リツトル中ｏ−アミノ
メチルフエニル酢酸16.5ｇ（0.1モル）の溶液
を乾燥ｔ−BuOH500mlでゆつくり希釈した。
この溶液に４時間に亘つてLi3.4ｇ（0.5原子）
を少量づつ添加し、この混合物を室温において
16時間撹拌し（フード中液体アンモニアを除去
する）、最後に40℃以下で蒸発乾固した。残留
物を水500mlに溶解し、IR−120（H⁺、700ml）
樹脂のカラム上溶液をクロマトグラフ処理し、
１％NH₄OH溶液で溶離した。溶離液のニンヒ
ドリン陽性フラクシヨンを合し、蒸発乾固し
た。残留物を熱アセトン50mlづつで４回洗浄
し、エタノール−水（１：１）500mlで再結晶
して無色の針状晶、ｏ−（２−アミノメチル−
１・４−シクロヘキサジエニル）酢酸11.2ｇ
（67％）を得た。Mp183℃。 IR：ν^ｎｕｊ _ｎａｘ1630、1520、1380、1356cm^-1。 NMR：δ^D2O+K2CO32.72（4H、ｓ、
【式】）、3.01（2H、ｓ、CH₂CO）、3.20 （2H、ｓ、ＣＨ _２−Ｎ）、5.78（2H、ｓ、
【式】）。 分析 C₉H₁₃NO₂として 計算値：Ｃ、64.65；Ｈ、7.84；Ｎ、8.38。 実験値：Ｃ、64.77；Ｈ、8.06；Ｎ、8.44。 ｏ−（２−アミノメチル−１・４−シクロヘキ
サジエニル）−酢酸製造のための改良操作 Ｄ−２−アミノ−２−（１・４−シクロヘキ
サジエニル）酢酸をつくるために米国特許
3720665（例１）中ウエルチ、ドルフイニおよ
びジアルツンにより使用された方法を採用し
た。蒸留液体アンモニア830mlの溶液をアルゴ
ン気流中リチウム40mlで乾燥した。この溶液に
撹拌下２−アミノメチルフエニル酢酸11.0ｇ
（0.07モル）および三級ブチルアルコール340ml
を添加した。２時間に亘つてこの溶液にはげし
い撹拌下全量で1.6ｇ（0.225モル）のリチウム
を添加した。次にこの灰色の混合物をトリエチ
ルアミン（TEA）35ｇ（0.215モル）で処理
し、一夜室温において18時間撹拌した。40゜
（15mm）において三級ブチルアルコールを除去
して白色残留物を得、これをP₂O₅上一夜真空
乾燥した。この固体を１：１メタノール−水30
mlに溶解し、撹拌下５゜において１：１クロロ
ホルム−アセトン3.5リツトルに添加した。こ
の混合物を20分間撹拌し、アミノ酸、α−（２
−アミノメチル−１・４−シクロヘキサジエニ
ル）酢酸を集め、P₂O₅上16時間真空乾燥して
白色結晶、mp190゜（分解）6.3ｇ（58％）を
得た。IRおよびNMRスペクトルは構造と合致
していた。 水281ml中２−アミノメチル−１・４−シク
ロヘキサジエニル酢酸14.89ｇ（0.09モル）お
よび水酸化ナトリウム7.20ｇ（0.18モル）溶液
に撹拌下テトラヒドロフラン（THF）152ml中
アジ化三級ブトキシカルボニル19.31ｇ（0.135
モル）溶液を添加した。この溶液25゜において
18時間撹拌し、次に珪藻土（スパー−セル）を
通して過した。40゜（15mm）においてTHF
を除去し、残留溶液をエーテル（175ml×２）
で洗浄し、６Ｎ塩酸（HCl）で酸性にした。こ
の混合物を氷浴中撹拌し、沈澱を集め、P₂O₅
上25゜において18時間真空乾燥して白色粉末と
して２−（三級ブトキシカルボニルアミノメチ
ル）−１・４−シクロヘキサジエニル酢酸17.3
ｇ（72.6％）を得た。IRおよNMRスペクトル
は構造と合致していた。 Ｄ Ｄ−（−）ｐ−ヒドロキシ−α−三級−ブト
キシカルボキサミドフエニル酢酸 乳鉢中酸化マグネシウム5.65ｇ（0.14モル）
およびＤ−（−）−ｐ−ヒドロキシフエニルグリ
シン11.7ｇ（0.07モル）をつぶし、50％ジオキ
サン177mlに添加した。この混合物に早い撹拌
下アジ化三級ブトキシカルボニル20.0ｇ（0.14
モル）をゆつくり添加し、45゜ないし50゜にお
いて20時間撹拌した。次にこの混合物を氷水
710mlおよび酢酸エチル177mlで希釈した。この
混合物を過し、液を２相に分離した。有機
層を50ml×３の３％重炭酸ナトリウム溶液およ
び50ml×３の水で洗浄した。すべての水相を合
し、濃塩酸でPH5.0に調節した。生成物を125ml
×３の酢酸エチル中に抽出した。酢酸エチルを
50ml×２の水で洗浄し、硫酸マグネシウム上乾
燥し、次に35゜15mmにおいて蒸発させて油を得
た。この油を石油エーテルでつぶして白色固体
としてＤ−（−）−ｐ−ヒドロキシ−α−三級−
ブトキシカルボキサミドフエニル酢酸を得た。
この生成物を集め、P₂O₅上25゜において18時
間真空乾燥して灰白色の粉末13.5ｇ（72.2％）
を得た。Mp102゜。IRおよびNMRスペクトル
は構造と合致していた。 Ｅ Ｄ−（−）−α−三級ブトキシカルボキサミド
フエニル酢酸 従つた操作は、上のＤ−（−）−ｐ−ヒドロキ
シ−α−三級−ブトキシカルボキサミドフエニ
ル酢酸に対して使用したものであつた。２得分
の試料が得られ、5.2ｇ（30％）Mp82゜を生じ
た。IRおよびNMRスペクトルは構造と合致し
ていた。 Ｆ 〔２−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアミ
ノ）メチル−１−シクロヘキセン−１−イル〕
酢酸とも命名される２−（三級−ブトキシカル
ボニルアミノメチル）−１・２−シクロヘキセ
ニル酢酸 (a) ａ−〔２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ
メチル）−１・４−シクロヘキサジエニル〕
酢酸(1) 水150ml中α−（２−アミノメチル−１・４
−シクロヘキサジエニル）酢酸8.0ｇ（0.048
モル）およびNaOH3.8ｇ（0.096モル）の溶
液に撹拌下THF80ml中アジ化ｔ−ブトキシ
カルボニル10.3ｇ（0.072モル）を添加し、
混合物を室温において18時間撹拌した。減圧
下テトラヒドロフラン（THF）を除去し、
残留溶液をエーテル（100ml×２）で洗浄
し、6NHClで酸性にし、エーテル（100ml×
３）で抽出した。抽出液を合して水（100ml
×２）および飽和NaCl溶液（100ml）で洗浄
し、Na₂SO₄で乾燥し、蒸発乾固した。油状
残留物をｎ−ヘキサンでつぶしてmp113℃無
色粉末の１ 10.5ｇ（82％）を得た。 IR：ν^ｎｕｊ _ｎａｘ3370、1715、1640、1530、1280、
1160cm^-1。 NMR：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.45（9H、ｓ、ｔ−Bu−Ｈ
）、
2.73（4H、ｓ、【式】）、3.16（2H、ｓ、 ＣＨ ₂CO）、3.76（2H、ｄ、６Hz、ＣＨ ₂N）、4.90
（1H、ｍ、ＮＨ）、5.66（2H、ｓ、【式】）、 10.6（1H、br−ｓ、COOＨ）。 分析 C₁₄H₂₁NO₄として 計算値：Ｃ、62.90；Ｈ、7.92；Ｎ、5.24。 実験値：Ｃ、63.13；Ｈ、8.21；Ｎ、5.26。 (b) 〔２−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアミ
ノ）メチル−１・４−シクロヘキサジエン−
１−イル〕酢酸(2) ３％水酸化アンモニウム（10ml）中〔２−
（Ｎ−ｔ−ブキシカルボニルアミノ）メチル
−１・４−シクロヘキサジエン−１−イル〕
酢酸(1)（1.33ｇ、５ミリモル）の溶液をパラ
ジウム炭（10％、0.2ｇ）を用いて40psiにお
いて水素添加した。３時間で理論量の水素が
吸収された。触媒を除き、希HClで液をPH
２まで酸性にし、酢酸エチル（50ml×２）で
抽出した。抽出液を合して水（20ml）洗し、
Na₂SO₄で乾燥し、減圧下蒸発させて油
（1.34ｇ）を得、このものは数日間放置する
と固化した。ｎ−ヘキサン−酢酸エチルから
再結晶してmp118〜119゜の無色柱状晶とし
て21.2ｇ（90％）を得た。 IR：ν^{ｎｕｊｏｌ} _ｎａｘ3450、1730、1660、1510cm^-1
。 NMR：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.58（9H、ｓ、ｔ−ブチル
−
Ｈ）、1.50〜1.90（4H、ｍ、−CH₂−）、1.90〜2.20
（4H、ｍ、アリル系メチレン−Ｈ）、3.18（2H、
ｓ、CH₂−CO）、3.78（2H、ｄ、６PH、CH₂−
Ｎ）、5.00（1H、br−ｓ、NH）、8.98（1H、br−
ｓ、COOH）。 分析 C₁₄H₂₃NO₄として 計算値：Ｃ、62.43；Ｈ、8.61；Ｎ、5.20。 実験値：Ｃ、62.12；Ｈ、8.77；Ｎ、5.37。 Ｇ 例えば、米国特許第3823141に従つて ２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル−
４−ヒドロキシフエニル酢酸を製造する。 Ｈ 例えば米国特許3657232に従つて ｏ−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノメチ
ル）フエニルチオ酢酸を製造する。また米国特
許3813390参照。 Ｉ 例えば、米国特許3813391に従つて β−〔ｏ−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノメ
チル）フエニル〕−プロピオン酸を製造する。 Ｊ Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２
−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グ
リシン ２−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル
グリシン室温において水400ml中２−メチルフ
エノール54.6（0.5モル）および濃水酸化アン
モニウム140mlの懸濁液に水100ml中75％グリオ
キシル酸59.02ｇ（0.6モル）の溶液を添加し
た。混合物の温度は37゜に上昇した。この混合
物を室温において65時間撹拌した。初めPH10.1
の溶液を、６Ｎ塩酸でPH6.8に調節し、生成物
を結晶化させた。過により生成物を集めた。
水洗し、五酸化燐上真空乾燥して２−（3′−メ
チル−4′−ヒドロキシフエニル）グリシン31.5
ｇ（34.8％）を得た；分解点196〜199゜。赤外
および核磁気共鳴スペクトルは所望の生成物と
合致していた。 文献：ビーチヤム・グループ・リミテツド、
1972に対するベルギー特許774029号
（Farmdoc27、122T）、これはmp205〜207℃
を報告している。 分析 C₉H₁₁NO₃として 計算値：Ｃ、59.66；Ｈ、6.13；Ｎ、7.73。 実験値：Ｃ、57.68；Ｈ、6.23；Ｎ、7.47；
H₂O 2.34 実験値、2.34％のH₂Oに対して 補正；Ｃ、59.06；Ｈ、6.12；Ｎ、7.67。 Ｄ・Ｌ−Ｎ−クロロアセチル−２−（3′−メチ
ル−4′−ヒドロキシフエニル）グリシン 水175ml中Ｄ・Ｌ−２−（3′−メチル−4′−ヒ
ドロキシフエニル）グリシン20.2ｇ（0.112モ
ル）の懸濁液を20％水酸化ナトリウムでPH10.3
に調節して溶液を生じさせた。この溶液を氷浴
中で冷却した。無水クロル酢酸（38.2ｇ、
0.224モル）を全部一度に添加し、更にPH変化
が検出されなくなるまで反応混合物のPHを20％
水酸化ナトリウムの添加によつてPH10に維持し
た。冷時更に10分間反応混合物を撹拌した。次
に反応混合物をPH2.0まで６Ｎ塩酸で酸性にし
て生成物を結晶化させた。過により生成物を
集め、水洗し、風乾した。熱水200mlから再結
晶してＤ・Ｌ−Ｎ−クロロアセチル−２−
（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グリ
シン13.7ｇ（47.4％）を得た。赤外および核磁
気共鳴スペクトルは所望の生成物と合致してい
た。 分析 C₁₁H₁₂NO₄Cl・H₂Oとして 計算値：Ｃ、47.92；Ｈ、5.118； Ｎ、5.081。 実験値：Ｃ、48.11；Ｈ、5.16 ； Ｎ、5.15 。 Ｄ−（−）−Ｎ−クロロアセチル−２−（3′−メ
チル−4′−ヒドロキシフエニル）グリシン Ｄ・Ｌ−Ｎ−クロロアセチル−２−（3′−メ
チル−4′−ヒドロキシフエニル）グリシン
（5.0ｇ、0.0194モル）および酢酸Ｌ−エフエナ
ミン（6.1ｇ、0.0213モル）をイソプロピルア
ルコール50ml中蒸気浴上加熱することにより溶
解した。水（50ml）を添加し、冷却すると、Ｌ
エフエナミン塩が晶出した。過によりこの塩
を集め、風乾した。 この塩を水30mlおよび塩化メチレン50mlに懸
濁し、20％水酸化ナトリウムでこの混合物をPH
10.0に調節した。相を分離し、水相を更に塩化
メチレンで２回抽出した。 次に水溶液を６Ｎ塩酸でPH2.0に調節して生
成物を晶出させた。過によりこの生成物を集
め、五酸化燐上真空乾燥してＤ−（−）−Ｎ−ク
ロロアセチル−２−（3′−メチル−4′−ヒドロ
キシフエニルグリシン0.9ｇ（36.1％）を得
た；mp170〜172゜、〔α〕^２４゜_Ｄ＝185.9゜（C1、
95％EtOH）。赤外および核磁気共鳴スペクト
ルは所望の生成物と合致していた。 分析 C₁₁H₁₂NO₄Clとして 計算値：Ｃ、51.27；Ｈ、4.69；Ｈ、5.436。 実験値：Ｃ、51.21；Ｈ、4.77；N5.29 。 普通エフエナミンといわれている（Federal
Register、1951年６月７日）１・２−ジフエニ
ル−２−メチルアミノエタノールは構造 を有している。この化合物は、Ｎ−メチル−
１・２−ジフエニル−２−エチルアミンまたは
アルフア、ベータージフエニル−ベーターヒド
ロキシ−Ｎ−メチル−エチルアミンまたは１・
２−ジフエニル−２−メチルアミノ−１−エタ
ノールとも命名される。 本発明は、左旋性−エリスロ異性体のみを利
用する。その製法およびペニシリンＧとの反応
は、米国特許2645638（V.V.ヤング）および
2768081（F.H.バツクウオルター）中記載され
た。後者は、W.B.ウイートレーら、J.Org.
Chem.、18(11)、1564〜1571（1935）と同様に初
期の文献を吟味している。それはシーハンら、
J.Am.Chem.Soc.、81、3089〜3094（1959）に
よりフエノキシメチルペニシリンを分割するの
に使用された。特に3091頁参照。 Ｄ−（−）−２−（３−メチル−4′−ヒドロキシ
フエニル）グリシン Ｄ−（−）−Ｎ−クロロアセチル−２−（3′−
メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グリシン
（11.1ｇ、0.431モル）を２Ｎ塩酸100mlと合
し、混合物を1.5時間還流した。この溶液を冷
却し、20％水酸化ナトリウムでPHを5.0に調節
して生成物を晶出させた。過によりこの生成
物を集め、水洗し、五酸化燐上真空してＤ−
（−）−２−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエ
ニル）グリシン7.4ｇ（94.7％）を得た；分解
点205〜209゜、〔α〕^２４ _Ｄ＝−152.6゜（C1、1N
HCl）。赤外および核磁気共鳴スペクトルは所
望の生成物と合致していた。 分析 C₉H₁₁NO₃として 計算値：Ｃ、59.66；Ｈ、6.13；Ｎ、7.73。 実験値：Ｃ、58.62；Ｈ、5.49；Ｎ、5.49
H₂O、1.46。 実験値、1.46％のH₂Oに対して 補正：Ｃ、59.48；Ｈ、5.41；Ｎ、7.84。 Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２−
（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グリ
シン Ｄ−（−）−２−（3′−メチル−4′−ヒドロキ
シフエニル）グリシン7.2ｇ（0.0397モル）お
よび粉末酸化マグネシウム3.2ｇ（0.08モル）
に、室温において撹拌下アジ化ｔ−ブトキシカ
ルボニル9.7ｇ（0.068モル）を滴加した。次に
窒素気流中19時間42〜45゜に混合物を加熱し
た。次にこの混合物を氷水100mlで希釈した。
この溶液を酢酸エチルと重層し、過して分離
した若干の不溶物を分離した。液の水相を分
離し、更に酢酸エチルで２回抽出した。次に42
％燐酸で水相をPH5.0に調節し、酢酸エチルで
５回抽出した。有機層を合して水で３回洗浄
し、硫酸ナトリウム上乾燥し、減圧下溶媒を除
去して油が残つた。この油を五酸化燐上真空乾
燥してＤ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル
−２−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニ
ル）グリシン10.6ｇ（95％）を得た。赤外スペ
クトルは所望の構造と合致していた。 Ｋ Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２
−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキシフエニル）
グリシン ２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキシフエニ
ル）グリシン 水100ml中75％グリオキシル酸59.2ｇ（0.6モ
ル）の溶液を室温において水400ml中２−メト
キシフエノール62.07ｇ（0.5モル）および濃水
酸化アンモニウム140mlの懸濁液に添加した。
混合物の温度は35゜に上昇した。この混合物を
室温において65時間撹拌した。晶出した生成物
を過により集め、水、次にアセトンで洗浄
し、五酸化燐上真空乾燥して２−（3′−メトキ
シ−4′−ヒドロキシフエニル）グリシン57.4ｇ
（58.2％）を得た；分解点218〜220゜（文献240
゜）。赤外および核磁気共鳴スペクトルは所望
の生成物と合致していた。 分析 C₉H₁₁NO₄として 計算値：Ｃ、54.82；Ｈ、5.62；Ｈ、7.10。 実験値：Ｃ、53.77；Ｈ、5.91；N6.97；
H₂O、1.13。 実験値、1.13％のH₂Oに対して 補正：Ｃ、54.38；Ｈ、5.85；Ｎ、7.05。 文献：B.ブロツク、Z.Physiol.Chem.、98、226
（1917）。 ２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキシフエニ
ル）グリシンの分割 Ａ メチル２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキ
シフエニル）グリシネート 無水メタノール500ml中２−（3′−メトキシ
−4′−ヒドロキシフエニルグリシン94ｇ
（0.476モル）の懸濁液に冷却下早い速度で20
分間HClガスを通した。最初透明な溶液が得
られ、次に結晶性生成物が大量に分離した。
20時間後メチルエステル塩酸塩を過し、メ
タノールでわずかに洗浄した；風乾後99.6
ｇ。水800ml中この塩酸塩の溶液を冷却下PH
８に調節し（NaOH）エステル遊離塩基の結
晶性沈殿を得た；81.3ｇ。IRおよびNMRス
ペクトルは合致していた。 分析 C₁₀H₁₃NO₂として 計算値：Ｃ、56.86；Ｈ、6.20；Ｎ、6.63。 実験値：Ｃ、56.46；Ｈ、6.28；Ｎ、6.55；
H₂O、0.59。 Ｂ Ｄ−（−）−２−（3′−メトキシ−4′−ヒド
ロキシフエニル）グリシン メチル２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキ
シフエニル）グリシネート50ｇ（0.237モ
ル）、酢酸19ml（0.333モル）およびｉ−
PrOH（イソプロピルアルコール）１リツト
ルの混合物を加熱沸騰させて部分的に溶液と
した。よく撹拌しながらジベンゾイル−ｄ−
酒石酸−水物（89.2ｇ、0.237モル）を添加
し、次にこの混合物を還流した。直ちに塩が
析出し始めた。加熱を止め、フラスコを室温
までゆつくり放冷した。氷浴中冷却後過に
より沈殿を集めた。液をその初めの容量の
約３分の１まで濃縮して少量の塩の第二の得
分を得た；風乾後両得分の全収量54.1ｇ（固
体Ａ；下記参照。 液を濃縮して溶媒をなくした。粘稠な残
留物を1N HCl 300mlと合し、この混合物を
CHCl₃400mlで抽出した。CHCl₃相を1N HCl
100mlづつで２回抽出した。HCl抽出液を合
して短時間濃縮して残留CHCl₃を除き、１時
間還流した。溶液を少量になるまで濃縮して
アミノ酸HCl塩を晶出させた。生成物を過
により集め、1N HCl 50mlから再結晶した。
水200ml中この生成物の溶液をPH4.5に調節し
た（NaOH）。この混合物を沸騰近くまで加
熱し、放冷して綿毛状針様結晶としてＤ−
（−）−２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキシ
フエニル）グリシンを沈殿させた。一夜冷却
後、この生成物を過により集め、水でわず
かに洗浄し、40゜において風乾した；8.7
ｇ、〔α〕^２４゜_Ｄ＝−136.5゜（Cl、1N HCl）。
IRおよびNMRスペクトルは完全に合致して
いた。 分析 C₉H₁₁NO₄・H₂Oとして 計算値：Ｃ、50.23；Ｈ、6.09；Ｎ、6.51；
H₂O、8.37。 実験値：Ｃ、50.43；Ｈ、6.23；Ｎ、6.51；
H₂O、8.95。 Ｃ Ｌ−（＋）−２−（3′−メトキシ−4′−ヒド
ロキシフエニル）グリシン 上の固体Ａ（54.1ｇ）をよく撹拌しながら
1N HCl 300mlおよびCHCl₃500mlに懸濁し
た。この塩はこの系中容易には分解せず、従
つてCHCl₃をできるだけ分離し、よく撹拌し
ながらMIBK300mlを添加した。MIBK相を更
に1N HCl 20mlづつで３回抽出した。HCl抽
出液を合し過し、短時間濃縮して残留溶媒
を除去し、１時間加熱還流してエステルを加
水分解した。この反応混合物を少容になるま
で濃縮した。氷浴中冷却後結晶性アミノ酸
HCl塩を過により集めた。この塩を1N
HCl 75mlから再結晶し、加温により水500ml
に溶解し、溶液をポリツシユ過し、PH4.5
に調節し（NaOH）双生イオンを晶出させ
た。この混合物を加熱沸騰させ、過し、冷
所に貯蔵して結晶性生成物、Ｌ−（＋）−２−
（3′−メトキシ−4′−ヒドロキシフエニル）
グリシンを沈殿させた。この生成物を過に
より集め、水およびメタノールでわずかに洗
浄し、40゜において乾燥した；9.6ｇ、〔α〕
^２４ _Ｄ＝＋127.2゜（C1、1N HCl）。IRおよび
NMRスペクトルは合致していた。 分析 C₉H₁₁NO₄・H₂Oとして 計算値：Ｃ、50.23；Ｈ、6.09；Ｎ、6.51；
H₂O 8.37。 実験値：Ｃ、50.53；Ｈ、6.06；Ｎ、6.62；
H₂O、7.46。 Ｄ−（−）−Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−
２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキシフエニ
ル）グリシン Ｄ−（−）−２−（3′−メトキシ−4′−ヒド
ロキシフエニル）グリシン8.6ｇ（0.04モ
ル）、酸化マグネシウム3.2ｇ（0.08モル）、
アジ化ｔ−ブトキシカルボニル9.7ｇ（0.068
モル）および１：１ジオキサン−水240ml
を、窒素気流中45〜50゜において20時間撹拌
した。冷却した反応混合物を氷水240mlで希
釈し、過し、酢酸エチルで１回抽出した。
酸性（PHを２）にした水相を酢酸エチルで５
回抽出した。酢酸エチル抽出液を合し、乾燥
（Na₂SO₄）し、減圧下濃縮して溶媒をなくし
て粘稠な油として生成物を得た；6.3ｇ。 Ｌ Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２
−（４−アセトキシフエニル）グリシン この化合物は、上述した操作中Ｄ−（−）−２
−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グ
リシンの代りに等モル重量のＤ−（−）−２−
（４−アセトキシフエニル）グリシン（次のよ
うにして製造される）を用いることにより製造
される。 Ｄ−（−）−２−アミノ−２−（４−アセトキシ
フエニル）酢酸の製造 方法Ａ（溶媒として酢酸中） Ｄ−（−）−ｐ−ヒドロキシフエニルグリシン
塩化物203.5ｇ（１モル）、酢酸800mlおよび塩
化アセチル314ｇ（４モル）を室温において48
時間撹拌する。固体を集め、アセトンで３回
（250ml×３）、エタノールで２回（250ml×２）
洗浄し、40゜において乾燥する。収量210ｇ
（85.4％）。この塩酸塩を水３リツトルに溶解す
る；溶液を＋５ないし10℃に冷却し、20％
NH₄OHでPHを4.5に調節する。この懸濁液を５
℃において１時間撹拌し、固体を集め、水で２
回、アセトンで２回洗浄し、40℃において乾燥
する。収量133ｇ（Ｄ−（−）−ｐ−ヒドロキシ
フエニルグリシンから64％）。α_D（１％、HCl
Ｎ／10）＝−104.5。 方法Ｂ（塩化メチレン中） Ｄ−（−）−ｐ−ヒドロキシフエニルグリシン
塩酸塩4.07ｇ（0.02モル）、塩化メチレン30ml
および塩化アセチル6.28ｇ（0.08モル）を室温
において48時間撹拌する。固体を集め、アセト
ンで２回、エタノールで２回洗浄する。収量
4.17ｇ（84.5％）。分析Cl＝14.8％（計算値14.4
％）。 方法Ｃ（トリフロロ酢酸中） 室温においてトリフロロ酢酸10mlに、Ｄ−
（−）−ｐ−ヒドロキシフエニルグリシン1.67ｇ
（0.01モル）を撹拌下に添加する。溶解後、塩
化アセチル1.57ｇ（0.02モル）を添加する。わ
ずかに発熱反応の後、固体が生じる。この懸濁
液を室温において1.5時間撹拌し、トリクロロ
酢酸を真空除去する。残りの固体を集め、塩化
メチレン、エタノールで洗浄する。このＤ−
（−）−２−アミノ−２−（４−アセトキシフエ
ニル）酢酸は、方法ＡまたはＢにより製造した
ものと同一である。収量：1.9ｇ（75％）。 Ｍ Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２
−（1′−シクロヘキセニル）グリシン この化合物は、上述した操作中Ｄ−（−）−２
−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グ
リシンの代りに等モル重量のＤ−（−）−２−
（1′−シクロヘキセニル）グリシン〔ベルギー
特許773773（Farmdoc 25515T）または米国特
許3824237により製造）を用いることにより製
造される。 Ｎ Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２
−（3′−クロロ−4′−ヒドロキシフエニル）グ
リシンは、例えば、米国特許3489751中開示さ
れているようにして製造される。 Ｏ Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−２
−（1′・4′−シクロヘキサジエニル）グリシン この化合物は、上述した操作中Ｄ−（−）−２
−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グ
リシンの代りに等モル重量のＤ−（−）−２−
（1′・4′−シクロヘキサジエニル）グリシン
（別名Ｄ−２−アミノ−２−（１・４−シクロヘ
キサジエニル）酢酸）（米国特許3485891に従つ
て製造）を用いることにより製造される。 Ｐ Ｄ−（−）−２−三級−ブトキシカルボキサミ
ド−３−（1′・4′−シクロヘキサジエニル）プ
ロピオン酸 この化合物は、上述した操作中Ｄ−（−）−２
−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グ
リシンの代りに等モル重量のＤ−２−アミノ−
３−（4′−メトキシ−１・４−シクロヘキサジ
エニル）プロピオン酸（米国特許3485819に従
つて製造）を用いることにより製造される。 Ｒ ２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノメチルフ
エニル−酢酸は、例えば、米国特許3766175に
従つて製造される。 Ｓ Ｎ−三級−ブトキシカルボニル−１−アミノ
シクロヘキサンカルボン酸 この化合物は、上述した操作中Ｄ−（−）−２
−（3′−メチル−4′−ヒドロキシフエニル）グ
リシンの代りに等モル重量の１−アミノ−シク
ロヘキサンカルボン酸を用いることにより製造
される。 Ｔ Ｄ−（−）−α−三級−ブトキシカルボキサミ
ド−３−チエニル酢酸は、例えば、米国特許
3634418、米国特許3198804およびその中に引用
されている適当な文献に従つて製造される。 Ｕ Ｄ−（−）−α−三級−ブトキシカルボキサミ
ド−２−チエニル酢酸は、例えば、米国特許
3634418、米国特許3198804およびその中に引用
されている適当な文献に従つて製造される。 Ｖ β−（２−三級−ブトキシカルボニルアミノ
メチル−１・４−シクロヘキサジエニル）−プ
ロピオン酸 (a) β−（２−アミノメチル−１・４−シクロ
ヘキサジエニル）−プロピオン酸 液体アンモニア（1000ml）（約50mgのリチ
ウムで前処理して根跡の水を除去）中β−
（ｏ−アミノメチルフエニル）プロピオン酸
（10.74ｇ、60ミリモル）の溶液を乾燥ｔ−
BuOH（300ml）で注意して希釈した。この
溶液にリチウム（2.08ｇ、0.3原子）を３時
間に亘つて少量づつ添加し、混合物を一夜撹
拌して液体アンモニアを除去し、蒸発乾固さ
せた。残留物を水（200ml）に溶解した。こ
の溶液をIR−120（H⁺形、500ml）のカラム
上クロマトグラフ処理し、水（2000ml）およ
び５％水酸化アンモニウム（約2000ml）で注
意して溶離した。ニンヒドリン陽性フラクシ
ヨンを合し、蒸発乾固し、残留物を90％エタ
ノールから晶出させて無色の針状晶を得た。
β−（２−アミノメチル−１・４−シクロヘ
キサジエニル）プロピオン酸の収量は9.68ｇ
（89％）mp228〜229℃であつた。 IR：ν^ｎｕｊ _ｎａｘ2130、1540、1300cm^-1。 NMR：δ^Ｄ２Ｏ _ｐｐｎ2.68（4H、ｓ、CH₂CH₂CO）、
2.74（4H、ｓ、環メチレン）、3.68（2H、
ｓ、CH₂N）、5.79（2H、ｓ、環ビニル−
Ｈ）。 分析 C₁₀H₁₅NO₂として 計算値：Ｃ、66.27 ；Ｈ、8.34
；Ｎ、7.73。 実験値：Ｃ、66.25、66.31；Ｈ、8.35、
8.52 ；Ｎ、7.61、7.71。 (b) β−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ
メチル−１・４−シクロヘキサジエニル）プ
ロピオン酸 50％THF（20ml）中β−（２−アミノメチ
ル−１・４−シクロヘキサジエニル）プロピ
オン酸（1.40ｇ、7.7ミリモル）およびトリ
エチルアミン（2.02ｇ、20ミリモル）の混合
物にTHF（５ml）中アジドギ酸ｔ−ブチル
（1.43ｇ、10ミリモル）の溶液を添加し、反
応混合物を室温において一夜撹拌した。この
混合物をエーテル（20ml×２）で洗浄し、水
層を希塩酸でPH２にで酸性にした。この混合
物をクロロホルム（30ml×３）で抽出し、抽
出液を合して水洗し、乾燥した。減圧下抽出
液を蒸発させて無色の油としてβ−（２−三
級−ブトキシカルボニルアミノメチル−１・
４−シクロヘキサジエニル）プロピオン酸を
得た。収量、2.10ｇ（97％）。 IR：ν^ｌｉｑ _ｎａｘ1700、1510、1240、1160cm^-1。 NMR：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.47（9H、ｓ、ｔ−Bu−
Ｈ）、2.45（4H、ｓ、CH₂CH₂）、2.69
（4H、ｓ、環メチレン）、3.80（2H、ｄ、
５Hz、CH₂N）、5.70（2H、ｓ、環ビニル
−Ｈ）。 Ｗ β−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノメ
チル−１−シクロヘキセニル）プロピオン酸 β−（２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノメ
チル）−１・４−シクロヘキサジエニル）プロ
ピオン酸（0.92ｇ、3.2ミリモル）を３％水性
水酸化アンモニウム（20ml）に溶解し、パン装
置中パラジウム炭（10％、0.1ｇ）を用い30psi
において３時間水素添加した。このの混合物を
過し、液を希塩酸でPH２まで酸性にし、酢
酸エチル（30ml×３）で抽出した。抽出液を合
して少量の水で洗浄し、乾燥した。減圧下に溶
媒を除去してβ−（２−ｔ−ブトキシカルボニ
ルアミノメチル−１−シクロヘキセニル）プロ
ピオン酸を油として得た；収量0.84ｇ（91
％）。 IR：ν^ｌｉｑcm^−１3350（NH）、3200〜2400
（COOH）、1750（CO）、1250、1165
（BOC）。 NMR：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.48（9H、ｓ、ｔ−Bu）、1
.5〜
1.8（4H、ｍ、ＣＨ ₂CＨ _２）、1.8〜2.2
（4H、ｍ、アリル−CH₂）、2.4（4H、CHＨ
₂CＨ ₂CO）、3.72（2H、ｓ、Ｎ−CH₂）。 Ｘ Ｄ−（−）−Ｎ−三級−ブトキシカルボニル−
２−（4′−ヒドロキシメチル）グリシン この化合物は、Ｄ−（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシ
カルボニル−ｐ−ヒドキシメチル−フエニルグ
リシンとも命名され、南アフリカ特許74／4055
に従つて製造される；便宜上その中の適切な開
示を下に再生する。 乾燥テトラヒドロフラン（THF）200ml中
１・４−ベンゼンジカルボキシアルデヒド
（50.0ｇ、0.373モル）の溶液に、氷浴中窒素気
流中乾燥テトラヒドロフラン500mlに溶解した
水素化リチウムトリ（ｔ−ブトキシ）アルミニ
ウム（104.0ｇ、0.410モル）を滴加した。氷浴
中0.5時間撹拌して後、反応混合物を氷冷２Ｎ
塩酸２リツトルに注いだ。こ水溶液をエーテル
800mlづつで４回抽出した。エーテル層を合し
て氷冷５％重炭酸ナトリウム溶液500ml、次に
飽和塩化ナトリウム溶液500mlで洗浄した。乾
燥後エーテルを減圧下に除去して粗ｐ−ヒドロ
キシメチルベンズアルデヒド46ｇを得た。この
粗生成物を中性アルミナ１Kg上クロマトグラフ
処理し、エーテルで溶離されたフラクシヨンを
濃縮した。冷却するとｐ−ヒドロキシメチルベ
ンズアルデヒド（17.0ｇ、35％の収量）、
mp44.5〜46℃が晶出した。 50℃に加熱した60％エタノール110ml中ｐ−
ヒドロキシベンズアルデヒド（10.0ｇ、0.0735
モル）と炭酸アンモニウム（17.1ｇ、0.15モ
ル）との混合物に撹拌下水10mlに溶解したシア
ン化ナトリウム（4.0ｇ、0.081モル）を滴加し
た。この混合物を撹拌し、55〜60℃に３時間加
熱し、次に１時間温度を85℃に上昇させた。氷
浴中冷却後、濃塩酸の添加によつて溶液のPHを
６とした。一夜冷却すると、固体が沈殿し、そ
れを過し、冷水で洗浄し、乾燥した。この５
−（ｐ−ヒドロキシメチルフエニル）ヒダント
イン（11.0ｇ、72％の収量）、mp189〜196゜
（分解）を使用して更に精製することなくアミ
ノ酸を製造した。 125mlの水中５−（ｐ−ヒドロキシメチルフエ
ニル）ヒダントイン（10.9ｇ、0.053モル）と
水酸化バリウム（25.5ｇ、0.081モル）との混
合物を18時間撹拌還流した。氷浴中冷却後反応
混合物を水125mlで希釈した。この溶液を濃硫
酸でPH１まで酸性にし、炭酸鉛で６とした。硫
酸鉛を過して後、液を硫化水素で飽和し、
硫化鉛を過した。次に減圧下エタノールと共
沸させることによつてこの溶液を100mlまで濃
縮した。冷却後、ｐ−ヒドロキシメチルフエニ
ルグリシン（5.2ｇ、54％の収量）、mp228〜
229℃（分解）が沈殿した。エタノール−水か
ら再結晶後この化合物はmp230〜231゜（分
解）を有していた。 分析 C₉H₁₁NO₃として 計算値：Ｃ、59.66；Ｈ、6.12；Ｎ、7.73。 実験値：Ｃ、59.46；Ｈ、6.24；Ｎ、7.93。 160mlの水中ｐ−ヒドロキシフエニルグリシ
ン（8.0ｇ、0.044モル）とトリエチルアミン
（8.8ｇ、0.087モル）との溶液に120mlのテトラ
ヒドロフランに溶解したアジ化ｔ−ブトキシカ
ルボニル（6.95ｇ、0.049モル）を添加した。
室温において一夜撹拌後、反応混合物をエーテ
ル200mlづつで２回洗浄した。水層をエーテル
で覆い、氷浴中３Ｎ塩酸でPH３〜3.5まで酸性
にした。この酸性溶液をエーテル200mlづつで
３回抽出した。エーテル層を合して飽和塩化ナ
トリウム溶液で洗浄し、乾燥し、エーテルを減
圧下に蒸発させた。得られた油クロロホルム−
ヘキサンでつぶし、固体を別してdl−Ｎ−ｔ
−ブトキシカルボニル−ｐ−ヒドロキシメチル
フエニルグリシン（7.74ｇ、63％の収量）、
mp139〜141.5℃（分解）を得た。 分析 C₁₄H₁₉NO₅として 計算値：Ｃ、59.78；Ｈ、6.81；Ｎ、4.98。 実験値：Ｃ、59.67；Ｈ、6.76；Ｎ、4.69。 dl−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−ｐ−ヒド
ロキシメチルフエニルグリシン（7.560ｇ、
0.0269モル）とキニン（10.199ｇ、0.0269モ
ル）とを混合し、沸騰エタノール110mlに溶解
した。この溶液を室温まで放冷し、一夜結晶化
させた。塩を別し、結晶化を３回くり返し
た。 この塩（17.76ｇ、mp198〜201゜分解、
〔α〕^２５ _Ｄ−149.8、Ｃ＝１、CH₃OH）は、３回再
結晶の後、分割された塩（4.6ｇ、mp205〜６
゜分解、〔α〕^２５ _Ｄ−163.4、Ｃ＝１、CH₃OH）を
得た。更に再結晶しても旋光は増大しなかつ
た。 この（−）−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−
ｐ−ヒドロキシメチルフエニルグリシンの
（−）キニン塩を氷浴中75mlの水と175mlのエー
テルとの中に懸濁し、３Ｎ塩酸を添加してPH
2.5とした。エーテル層を除き、水層をエーテ
ル100mlづつで２回抽出した。エーテル層を合
して飽和塩化ナトリウムで洗浄し、乾燥し、減
圧下にエーテルを除去した。残留物をクロロホ
ルム−ヘキサンでつぶし、過してＤ−（−）−
Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−ｐ−ヒドロキシ
メチルフエニルグリシン（1.68ｇ、98％の回
収）、mp111〜113.5゜分解、〔α〕^２５ _Ｄ＝−136.5
（Ｃ＝１、CH₃OH）。 明細書中のような核のアシル化の前遊離アミ
ン基を有する予期される７−側鎖について「エン
−アミン」閉塞基の使用は、米国特許3223141、
米国特許3813390、米国特許3813391、米国特許
3823141およびベルギー特許773773等から周知で
ある。 ２−〔Ｎ−（１−カルベトキシプロペン−２−イ
ル）アミノメチル〕−１・４−シクロヘキサジエ
ニル酢酸ナトリウム(4) 無水EtOH100ml中金属ナトリウム460ml（0.02
モル）の溶液に撹拌下２−アミノメチル−１・４
−シクロヘキジエニル酢酸3.34ｇ（0.02モル）お
よびアセト酢酸エチル3.1ｇ（0.024モル）を添加
し、混合物を撹拌下４時間加熱還流した。熱反応
混合物を過し、液を一夜冷所に保つてmp264
℃の無色針状晶４ 2.0ｇを得た。母液の濃縮に
よつて更に生成物（3.3ｇ）を得た。全収量は5.3
ｇ（88％）であつた。 IR：ν^ｎｕｊ _ｎａｘ3300、1635、1600、1570、1300、
1275、1170、1090cm^-1。 NMR：δ^Ｄ２Ｏ _ｐｐｎ1.23（3H、ｔ、７Hz、ＣＨ ₂CＨ
_３）、1.96および2.25（3H、ｓ、Ｃ＝Ｃ−ＣＨ
_３、シスおよびトランス）、2.70（4H、ｓ、
【式】）、3.04（2H、ｓ、ＣＨ ₂CO）、3.66 および3.95（2H、ｓ、ＣＨ _２−Ｎ、シスおよび
トランス）、4.07（2H、ｑ、７Hz、ＣＨ ₂CH₃）、
4.45および4.56（1H、ｓ、【式】シスおよ トランス）、5.76（2H、ｓ、【式】）。 分析 C₁₅H₂₀NO₄Naとして 計算値：Ｃ、59.79；Ｈ、6.69；Ｎ、4.64。 実験値：Ｃ、59.69；Ｈ、6.76；Ｎ、4.75。 Ｄ−Ｎ−（２−メトキシカルボニル−１−メチル
ビニル）−α−アミノ−α−（3′−メチル−4′−ヒ
ドロキシフエニル）酢酸ナトリウム メタノール320ml中NaOH3.02ｇ（0.078モル）
の溶液に撹拌下Ｄ−（−）−２−（3′−メトキシ−
4′−ヒドロキシフエニル）グリシン0.08モルを添
加し、得られる溶液を加熱還流し、その間メタノ
ール80ml中アセト酢酸メチル9.6ml（0.088モル）
の溶液を30分間に亘つて添加する。更に30分の還
流後、トルエンを同じ速度で添加してほぼ同じ内
容を保ちながらメタノールを留去する。内温が
100℃に達した時この懸濁液を氷水中４時間冷却
する。過し、よくトルエルで洗浄し、風乾し、
一定の重量になるまでP₂O₅上真空乾燥して固体
のＤ−Ｎ−（２−メトキシ−カルボニル−１−メ
チルビニル）−α−アミノ−α−（3′−メチル−
4′−ヒドロキシフエニル）酢酸ナトリウムを得
る。 Ｄ−Ｎ−（２−メトキシカルボニル−１−メチル
ビニル）−α−アミノ−α−（3′−メトキシ−4′−
ヒドロキシフエニル酢酸ナトリウム メタノール320ml中NaOH3.02ｇ（0.078モル）
の溶液に撹拌下Ｄ−（−）−２−（3′−メトキシ−
4′−ヒドロキシフエニル）グリシン0.08モルを添
加し、得られる混合物を加熱還流し、その間メタ
ノール80ml中アセト酢酸メチル9.6ml（0.088モ
ル）の溶液を30分間に亘つて添加する。更に30分
還流後、トルエンを同じ速度で添加してほぼぽ同
じ内容を保ちながらメタノールを留去する。内温
が100℃に達した時この懸濁液を氷水中４時間冷
却する。過し、よくトルエンで洗浄し、風乾
し、一定の重量になるまでP₂O₅上真空乾燥して
固体のＤ−Ｎ−（２−メトキシ−カルボニル−１
−メチルビニル）−α−アミノ−α−（3′−メトキ
シ−4′−ヒドロキシフエニル）酢酸ナトリウムを
得る。 酸塩化物塩酸塩のように、保護基としてプロト
ンを同様に使用することは周知であり、次のよう
に例示することができる： 次の操作によつて塩酸塩化Ｄ−（−）−２−
（3′−メトキシ−4′−ヒドロキシフエニル）グリ
シルが高い純度かつきわめて効率よく製造され
る： Ｄ−（−）−２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキ
シフエニル）グリシン約0.06をジオキサン100ml
中スラリ化する。このスラリを撹拌し、スラリ温
度を50〜58℃に保ちながらCOCl₂（ホスゲン）を
導入する。全部で3.5時間ホスゲンを導入する。
黄色の溶液が得られる。この溶液を窒素でパージ
して過剰のCOCl₂を追出す。HClガスを2.5時間溶
液に通じる。この溶液を撹拌し、少量を若干のエ
ーテルで希釈して若干の結晶を得、これを種とし
てこのバツチに添加する。この溶液を20〜25℃で
16時間撹拌する。得られた結晶性塩酸塩化Ｄ−
（−）−２−〔3′−メトキシフエニル）グリシルの
スラリを過して生成物を集める。フイルター−
ケーキをジオキサンと塩化メチレンとで洗浄し、
次に真空デシケーター中P₂O₅上乾燥して塩酸塩
化Ｄ−（−）−２−（3′−メトキシ−4′−ヒドロキ
シフエニル）−グリシル約７ｇを得る。 塩酸塩化Ｄ−（−）−２−アミノ−２−（４−アセ
トキシフエニル）アセチルの製造 Ｄ−（−）−２−アミノ−２−（４−アセトキシ
フエニル）酢酸83.6ｇ（0.40モル）と無水塩化メ
チレン1.25リツトルとを撹拌下−５℃に冷却す
る。次にゆつくり五塩化燐152ｇを、次いでジメ
チルホルムアルデヒド４mlを添加する。この混合
物を０℃において４時間撹拌する。固体を進め、
無水塩化メチレンで洗浄し、室温において真空乾
燥する。収量：61ｇ（57.5％）。分析 全塩素＝
27.2％（理論値26.9％）。 Ｄ−マンデル酸カルボキシ無水物の製造 Ｄ−マンデル酸カルボキシ無水物 乾燥テトラヒドロフラン中Ｄ−（−）−マンデル
酸(1)2.0ｇ（0.013モル）の溶液に30分間ホスゲン
を通じた。この溶液を一夜放置し、その後10分間
加熱還流した。減圧下に溶媒を蒸発させて油状残
留物を得、これはｎ−ヘキサン（20ml）でつぶす
ことにより固化した。過によりこの生成物を集
め、KOH上真空乾燥した。収量2.3ｇのＤ−マン
デル酸カルボキシ無水物。 IR：ν^ｎｕｊ _ｎａｘ1895、1875、1780cm^-1。 本発明の最も活性のある化合物の中には７−側
鎖中α−炭素原子においてＤ−配置を有するも
の、即ち、明細書中例示したようなＤ−２−フエ
ニルグリシンまたはＤ−マンデル酸あるいはモノ
置換Ｄ−２−フエニルグリシンまたはＤ−マンデ
ル酸からつくられるものがある。その外、β−ラ
クタム核中２個の光学活性不斉中心における配置
は、醗酵により製造されるセフアロスポリンＣ中
ならびにそれから誘導される７−アミンセフアロ
スポラン酸中に見出されるものである。 次の実施例は、本発明の例示（しかし限定では
ない）として示される。すべての温度は摂氏の度
である。７−アミノセフアロスポラン酸を７−
ACAと略す；−ACA−は構造 を有する部分を表わし、かくして７−ACAは 【式】として表わすことができ る。メチルイソブチルケトンをMIBKとして表わ
す。「スケリソルブＢ」は、主としてｎ−ヘキサ
ンよりなるbp60〜68℃の石油エーテルフラクシ
ヨンである。 LA−１樹脂は、各二級アミンが式 （ただし式中各R¹、R²およびR³は１価の脂肪族炭
化水素残基であり、R¹、R²およびR³は総計で11
個から14個までの炭素原子を有する）を有する二
級アミンの混合物である。二級アミンのこの特定
の混合物は、これらの実施例において時に「液体
アミン混合物号」といわれ、次の物理特性を有
する透明こはく色溶液である：25℃における粘度
70cpα、20℃における比重0.826；25℃における
屈折率1.4554；10mmにおける蒸留範囲170℃まで
−0.5％、170〜220℃−３％、220〜230℃−90
％、230゜を超える−6.5％。 IR−120はアンバーライトIR−120とも称さ
れ、スルホン酸残基を有する強陽イオン交換樹脂
である。アンバーライトIR−120は、市販のポリ
スチレンスルホン酸型の陽イオン交換樹脂であ
る；かくしてそれはクニン、Ion Exchange
Resins、２版（1958）、ジヨン、・ウイリー・ア
ンド・サイズ・インコーポレーテツドに示される
操作によつて得られるジビニルベンゼンで交さ結
合した核スルホン化ポリスチレン樹脂である。そ
の中例えば84および87頁参照。 好適な実施の態様の説明 １−カルボキシエチルテトラゾール−５−チオ
ールの製造 (A) ２−カルベトキシエチルイソシアネート 塩酸β−アラニンエチルエステル（93.6
ｇ）、トリエチルアミン（123.5ｇ）および塩化
メチレン（400ml）を混和し、−10℃に冷却し
た。温度を約−10℃に保ちながら上の溶液にク
ロロホルム150mlに溶解した二硫化炭素（46.5
ｇ）を２時間の間に添加した。添加完了後、約
10分間温度10℃まで昇温させた。この溶液をふ
たたび−10℃に冷却し、撹拌下40分間でクロロ
ホルム60ml中クロロギ酸66.9ｇを添加した。30
分間温度を室温まで昇温させ、ふたたび０℃に
冷却した。０℃においてトリエチルアミン61.6
ｇを更に添加し、次に溶液を室温において３時
間撹拌した。 この混合物を水で処理し、有機相を集め、
2NHCl 250ml２回、NaHCO₃250ml２回、次に
水250ml２回洗浄した。有機相をNa₂SO₄上乾燥
し、溶媒を真空下除去して油（所望の生成物で
あることが見出された）93.7ｇを得た。IRおよ
びNMRスペクトルは構造と合致していた。 (B) １−カルボキシエチルテトラゾール−５−チ
オール アジ化ナトリウム（29.7ｇ）を水400mlに溶
解し、窒素気流中60℃に加熱した。スケリソル
ブＢ（本質的にｎ−ヘキサン）50mlに溶解した
２−カルボエトキシエチルイソシアネート
（46.9ｇ）を加熱したアジ化ナトリウム溶液に
添加した。この溶液を約70〜72℃において約
150分間撹拌し、次に氷浴中30℃に冷却した。
PHが12になるまで50％水酸化ナトリウム溶液を
添加した。この混合物を70℃において40分間加
熱し、氷浴中15℃に冷却した。濃HClを使用し
てPHを２に調節し、次に酢酸エチル（150ml×
４）で抽出した。酢酸エチル抽出液を水洗し、
硫酸ナトリウム上乾燥した。溶媒を真空蒸発さ
せ、塩化メチレンからの結晶として生成物を集
めた。表題の生成物19.5ｇを得た。 １−カルボキシアルキルテトラゾール−５−チ
オールの製造 １−カルボキシエチルテトラゾール製造のため
の操作においてその中で使用されるβ−アラニン
エチルエステルの代りに等モル量の４ないし10個
の炭素原子の適当に置換されたアミノ酸エステル
を用いて対応する１−カルボキシ（C₁−C₉アル
キル）テトラゾール−５−チオール；例えば １−カルボキシプロピルテトラゾール−５−チ
オール、 １−カルボキシブチルテトラゾール−５−チオ
ール、 １−カルボキシペンチルテトラゾール−５−チ
オール、 １−カルボキシヘキシルテトラゾール−５−チ
オール、 １−カルボキシヘプチルテトラゾール−５−チ
オール、 １−カルボキシオクチルテトラゾール−５−チ
オール、ならびに １−カルボキシノニルテトラゾール−５−チオ
ールを得る。 ７−アミノ−７−メトキシ−３−（１−カルボ
キシメチルテトラゾール−５−イルチオメチ
ル）−３−セフエム−４−カルボン酸の製造 一般に、米国特許3875146中７−メトキシ置換
７−アミノセフアロスポラン酸の製造のために記
載されている操作に従つて表題の化合物に対する
出発物質を製造する。 方法 １ 撹拌機、温度調整機、温度計および窒素導入
管を備えた３た３フラスコ中に、７−アミノ−
７−メトキシセフアロスポラン酸18ｇ（0.066
モル）、ならびに0.1MPH6.4燐酸緩衝液（燐酸
ナトリウム、一塩基性、1H₂O20.7ｇ＋燐酸ナ
トリウム、二塩基性、無水8.5ｇ全量で２リツ
トルに）300mlを入れる。 ２ 工程１記載の混合物の撹拌下、重亜硫酸1.5
ｇおよび１−カルボキシメチル−５−メルカプ
トテトラゾールジナトリウム16ｇ（0.078モ
ル）を添加する。 ３ 撹拌継続下、混合物に10分間窒素を通じる。 ４ 撹拌および窒素導入を保ちながら、20分間ス
ラリを56℃に加熱する。この間重炭酸ナトリウ
ムを少しづつ増やして添加する。 ５ 撹拌および窒素導入の継続下、溶液の温度を
４時間56℃に保つ。PHは6.2〜6.6の間に留まら
なければならない。 ６ 氷浴中反応混合物を５℃に冷却する。 ７ この混合物に１：１燐酸／水溶液50mlまたは
濃塩酸をPH2.0〜3.0まで添加する。 ８ 過により生成物を集める。フイルターケー
キを冷水20ml、次いで冷メタノール200mlで洗
浄する。 ９ 定重量になるまで固体を風乾する。この生成
物は色が黄色から暗褐色まで変動する。 10 この生成物を200メツシユのステンレススチ
ールのふるいに通す。 11 早い撹拌下200メツシユ粉末10ｇをｎ−プロ
パノール200mlに懸濁する。 12 濃塩酸2.0mlを添加し、室温において0.5時間
はげしく撹拌する。 13 スラリを過する。褐色の固体をｎ−プロパ
ノール20mlで洗浄し、液に洗液を添加する
（追加の生成物の可能性のある回収のためにフ
イルターケーキを取つておく）。 14 工程13のｎ−プロパノール液に炭（「ダル
コＧ−60」）1.5ｇを添加する。0.5時間スラリ
化する。過により炭を除く。炭をｎ−プロパ
ノール20mlで洗浄し、液に洗浄を添加する。 15 早い撹拌下、見掛けのPH3.0までｎ−プロパ
ノール液にトリエチルアミンを添加する。結
晶が生成する。10分間スラリ化する。 16 過により白色結晶を集め、ｎ−プロパノー
ル30ml、メタノール50mlで洗浄し、40℃におい
て24時間真空乾燥する。 方法 (A) 触媒量のｐ−トルエン−スルホン酸の存在下
に７−アミノ−３−（１−カルボキシメチルテ
トラゾール−５−イルチオメチル）−３−セフ
エム−４−カルボン酸をジオキサンに溶解す
る。メタノールを添加し、溶液を数回真空下に
乾固させ、その後更にジオキサンを添加する。
ジフエニルジアゾメタンを、セフアロスポリン
モル当りジアゾメタン２モルの比で添加する。
溶媒類を真空下に除去して７−アミノ−３−
（１−カルボキシメチルテトラゾール−５−イ
ルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボン
酸ジベンズヒドリルエステル（）を得る。 (B) 上の工程Ａにおいて得られたジベンズヒドリ
ルエステルを塩化メチレンに溶解し、ｐ−ニト
ロベンズアルドヒドをアルデヒド対セフアロス
ポリン約１：１のモル比で添加する。少量の無
水硫酸マグネシウムを添加し、混合物を外温に
おいて0.5時間撹拌して７−（ｐ−ニトロベンジ
リデンアミノ）−３−（１−カルボキシメチルテ
トラゾール−５−イル−チオメチル）−３−セ
フエム−４−カルボン酸ジベンズヒドリルエス
テル（）を得る。 (C) 工程Ｂにおいて得られた化合物を乾燥テト
ラヒドロフランに溶解し、窒素気流中この溶液
−78℃に溶解する。セフアロスポリンの量に対
して等モル量のフエニルリチウムを−78℃にお
いて添加する。温度を−50℃まで上昇させ１：
１ジメチルスルホキシド（DMSO）：ヘキサメ
チレンホスホルアミド中新たに調製したメト硫
酸ｏ−メチル−ジメチルスルホキソニウム
〔（CH₃）₂SOCH₃OSO₂CH₃〕を添加する。
このメトキシ化反応混合物を−50℃において10
分間撹拌し、次に室温まで昇温させて生成物、
７−メトキシ−７−（ｐ−ニトロベンジリデン
アミノ）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾ
ール−５−イル−チオメチル）−３−セフエム
−４−カルボン酸ジベンズヒドリルエステル
（）を得る。 (D) 工程Ｃにおいて得られた化合物を、室温に
おいて１ないし24時間、メタノール中等モル量
の塩酸アニリンで処理することによつて加水分
解する。 ７−アミノ−７−メトキシ−３−（１−カルボ
キシアルキルテトラゾール−５−イルチオメチ
ル）−３−セフエム−４−カルボン酸の製造 上の操作中適当なチオール、例えば １−カルボキシプロピル−５−メルカプトテト
ラゾールジナトリウム、 １−カルボキシブチル−５−メルカプトテトラ
ゾールジナトリウム、 １−カルボキシペンチル−５−メルカプトテト
ラゾールジナトリウム、 １−カルボキシヘキシル−５−メルカプトテト
ラゾールジナトリウム、 １−カルボキシヘプチル−５−メルカプトテト
ラゾールジナトリウム、 １−カルボキシオクチル−５−メルカプトテト
ラゾールジナトリウムおよび １−カルボキシノニル−５−メルカプトテトラ
ゾールジナトリウムを用いて対応する７−アミノ
−７−メトキシ−３−（１−カルボキシアルキル
テトラゾール−５−イルチオメチル）−３−セフ
エム−４−カルボン酸を得る。 ３−アミノメチル−２−チオフエン酢酸の製造 (A) チオフエン−３−カルボクスアルデヒドジメ
チルアセタール（2a） メタノール（200ml）中チオフエン−３−カ
ルボクスアルデヒド⁽¹⁾（322ｇ、1.9モル）、ト
リメトキシメタン（636ｇ、６モル）およびIR
−120樹脂（H⁺、６ｇ）の混合物を４時間還流
した。樹脂を除き、液を減圧下に蒸発させて
無色の油を得、これ減圧蒸留した。収量423ｇ
（94％）、bp90〜95℃13mmHg。 ir：ν^ｌｉｑ _ｎａｘ3150、1045、1025cm^-1。 nmr：δ^ｎｅａｔ _ｐｐｎ3.21（6H、ｓ、OCH₃）、5.43
（1H、ｓ、【式】）、7.0〜7.4（3H、 ｍ、チオフエン−Ｈ） (1) S.グロノヴイツ、Arkev、Kemi、．８、
411（1955） (B) ２−ホルミルチオフエン−３−カカルボクス
アルデヒドジメチルアセタール（3a） 無水エーテル（１リツトル）中2a（423ｇ、
2.68モル）の溶液に乾燥N₂気流中ゆるやかな還
流を保ちながら新たに調節したエーテル中ｎ−
ブチルリチウム（27モル）の溶液を１時間で滴
加した。還流を0.5時間保ち、この混合物には
げしい撹拌下無水エーテル（0.8リツトル）中
DMF（ジメチルホルムアミド）（432ｇ、６モ
ル）の溶液を0.75時間に亘つて滴加した。添加
完了後、混合物を一夜撹拌し、撹拌下砕氷（１
Kg）中に注ぎ、室温まで昇温させた。有機層を
分離し、水層をNaClで飽和し、エーテル（200
ml×２）で十分抽出した。エーテル抽出液を合
し、MgSO₄上乾燥し、濃縮した。残留物を減
圧蒸留し、淡黄色の油を集めた（100〜123℃、
0.7mmHg）。収量277ｇ（56％）。 ir：ν^ｌｉｑ _ｎａｘ3110、1660、1100cm^-1。 nmr：δ^ｎｅａｔ _ｐｐｎ3.40（6H、ｓ、OCH₃）、5.86
（1H、ｓ、【式】）、7.27（1H、ｄ、Ｊ ＝６Hz、チオフエン−Ｈ３）、7.81（1H、ｄ−
ｄ、Ｊ＝６Hz、チオフエン−H2）、10.37（1H、
ｄ、Ｊ＝１、５Hz、−CHO）。 (C) １−メチルスルフイニル−１−メチルチオ−
２−（３−カルボクスアルデヒドエチレン
（4b） K.オグラら⁽⁴⁾により報告されたのに類似の
操作に従つて4aの製造を実施した。THF（テ
トラヒドロフラン）（５ml）中トライトンＢ
（メタノール中40％、２ml）をメチルメチルチ
オメチルスルホキシド⁽²⁾（2.5ｇ、20ミリモ
ル）および２−ホルミル−３−チオフエンカル
ボクスアルデヒドエチレンアセタール⁽³⁾
（3b）の溶液に添加した。この混合物を約１時
間還流し、減圧濃縮した。残留物をベンゼン
（150ml）に溶解し、水（20ml×３）で抽出し
た。有機層をMgSO₄上乾燥し、減圧下蒸発乾
固した。残留物をシリカゲル（80ｇ）上カラム
クロマトグラフ処理し、ベンゼン（500ml）お
よびクロロホルム（100ml）で順次溶離した。
クロロホルム溶離液から淡黄色の油として生成
物4b4.9ｇ（85％）を単離した。 ir：ν^ｌｉｑ _ｎａｘ3110、1600cm^-1。 nmr：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ2.42（３、ｘ、Ｓ−CH₃）、
2.78
（3H、ｓ、SO−CH₃）、4.15（4H、ｍ、CH₂CH₂
−）、6.12（1H、ｓ、【式】）、7.34 （1H、ｄ、Ｊ＝4.5Hz、チオフエン−Ｈβ）、7.40
（1H、ｄ、Ｊ＝4.5Hz、チオフエン−Ｈα）、8.28
（1H、ｓ、−CH＝）。 ４のセミカルバゾンを常法により製造し、エ
ーテル−DMFから晶出させた。Mp213℃。 分析 C₁₀H₁₃N₃O₂S₂として 計算値：Ｃ、39.58；Ｈ、4.32；Ｎ、13.85；
Ｓ、31.70。 実験値：Ｃ、39.46；Ｈ、4.24；Ｎ、14.05；
Ｓ、31.63。 (2) K.オグラら、Bull.Chem.Soc.（Japan）、
45、2203（′72） (3) D.W.マクドウエルら、J.Org.Chem.31、
3592（′66） (4) K.オグラら、Tetrahedron Letters、1383
（1972）。 (D) １−メチルスルフイニル−１−メチルチオ−
２−（３−カルボクスアルデヒドジメチルアセ
タール−２−チエニル）エチレン（4a） 4bに対するのと類似の操作によつて化合物
4aを製造した。THF（300ml）中メチルメチル
チオメチルスルホキシド（72ｇ、0.58モル）お
よび3a（108ｇ、0.58モル）の溶液にトライト
ンＢ（メタノール中40％、50ml）を添加し、混
合物を４時間還流した。シリカゲル（400ｇ）
を用いてカカラムクロマトグラフ処理し、クロ
ロホルム（５リツトル）で溶離して淡黄色の油
として4a130.5ｇ（78％）を得た。 ir：ν^ｌｉｑ _ｎａｘ3100、1580、1100、1050cm^-1。 nmr：δ^ＣＣｌ４ _ｐｐｎ2.42（3H、ｓ、Ｓ−CH₃）、2.
70
（3H、ｓ、SO−CH₃）、3.34（6H、ｓ、OCH₃）、
5.56（1H、ｓ、【式】）、7.20（1H、ｄ、Ｊ ＝６Hz、チオフエン−Ｈβ）、7.40（1H、ｄ、Ｊ
＝６Hz、チオフエン−Ｈα）、8.12（1H、ｓ、−
CH＝）。 (E) ３−ホルミル−２−チエニル酢酸エチル⁽⁴⁾
(5) 乾燥塩化水素（33ｇ）を無水エタノール
（500ml）に吸収させた。この溶液に4a（130
ｇ、0.45モル）を添加し、この混合物を５分間
加熱環流した。反応混合物を水で希釈し、減圧
下に蒸発させた。残留物をベンゼン（100ml×
２）で抽出し、ベンゼン抽出液を合し、水（50
ml）で洗浄し、MgSO₄上乾燥し、蒸発乾固し
た。油状残留物シリカゲル（400ｇ）上カラム
クロマトグラフ処理し、クロロホルム（５リツ
トル）で溶離した。所望の生成物を含有するフ
ラクシヨンを合し、濃縮した。残留油（60ｇ）
を減圧蒸留してbp120〜126℃／１mmHgの５、
23ｇ（23％）を得た。 ir：ν^ｌｉｑ _ｎａｘ3110、1730、1670cm^-1。 nmr：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.30（3H、ｔ、Ｊ＝６Hz、
−
CH₂CＨ _３）、4.25（2H、ｑ、Ｊ＝６Hz、−ＣＨ
₂CH₃）、4.26（2H、ｓ、−CH₂CO）、7.25（1H、
ｄ、Ｊ＝５Hz、チオフエン−Ｈβ）、7.48（1H、
ｄ、Ｊ＝５Hz、チオフエン−Ｈα）、10.15
（1H、ｓ、CHO）。 ５の分析用試料を２・４−ジニトロフエニル
ヒドラゾンとし、それをクロロホルムから晶出
させた。Mp178〜179℃。 ir：ν^{ｍｕｊｏｌ} _ｎａｘ1720、1610、1570cm^-1。 分析 C₁₅H₁₄N₄O₆Sとして 計算値：Ｃ、47.62；Ｈ、3.73；Ｎ、14.81；
Ｓ、8.47。 実験値：Ｃ、47.33；Ｈ、3.47；Ｎ、14.77；
Ｓ、8.68。 類似の操作に従つてエチレンアセタール
4b2.2ｇ（7.0ミリモル）を無水エタノール800
ml中乾燥塩化水素1.1ｇで処理して５を得、こ
のものをシリカゲル（30ｇ）上カラムクロマト
グラフイーによつて精製した。クロロホルムで
溶離して淡黄色の油として５、663mg（44％）
を得た。 (F) ３−ホルミル−２−チエニル酢酸エチルオキ
シム(6) ５℃において50％水性エタノール（40ml）中
アルデヒド５（3.14ｇ、16ミリモル）および塩
酸ヒドロキシルアミン（2.2ｇ、32ミリモル）
の溶液に撹拌下炭酸ナトリウム（1.7ｇ、16ミ
リモル）を添加した。反応混合物室温まで昇温
させた。2.5時間後、反応混合物を減圧濃縮し
た。残留物をベンゼン（50ml×３）で抽出し
た。ベンゼン抽出液を水（10ml）で洗浄し、
MgSO₄上乾燥し、減圧下蒸発させた。シリカ
ゲル（60ｇ）上カラムクロマトグラフイーによ
り分離して無色の油６、2.7ｇ（80％）を得
た。 ir：ν^ｌｉｑ _ｎａｘ3400、1730、1620cm^-1。 nmr：δアセトン^−ｄ６ _ｐｐｎ1.23（3H、ｔ、Ｊ＝7.5
Hz、−CH₂CＨ _３）、4.01（2H、ｓ、−CH₂CO）、
4.14（2H、ｑ、Ｊ＝7.5Hz、−ＯＨ ₂CH₃）、7.31
（2H、ｓ、チオフエン−Ｈ）、8.26（1H、ｓ、−
CH−Ｎ）、10.15（1H、ｓ、NOH、D₂Oの添加に
より消失）。 (G) ３−アミノメチル−２−チエニル酢酸のδ−
ラクタム 方法Ａ：接触還元 無水エタノール（68ml）中オキシム６（2.65
ｇ、12.4ミリモル）、10％パラジウム炭、乾燥
塩化水素（1.4ｇ、37.2ミリモル）の混合物を
室温において常圧下一夜水素添加した。触媒を
２回交換し、反応を３日間に亘つて実施した。
触媒を除き、液を減圧濃縮した。残留物に水
（10ml）を添加し、混合物を酢酸エチル（10ml
×２）で洗浄した。水層を炭酸ナトリウムでPH
９に調節し、塩化ナトリウムで飽和し、酢酸エ
チル（20ml×３）で抽出した。酢酸エチル抽出
液をMgSO₄上乾燥し、炭で処理し、減圧下に
蒸発させた。酢酸エチルから再結晶してmp194
〜195℃の無色針状晶として７、417mg（22％）
を得た。 ir：ν^ＫＢｒ _ｎａｘ3200、1650、1480cm^-1。 nmr：δ^{ＤＭＳＯ−ｄ６} _ｐｐｎ3.53（2H、ｔ、Ｊ＝３H
z、−
CH₂CO−）、4.36（2H、ｄ、ｔ、Ｊ＝３、1.5
Hz、D₂Oの添加により二重項に変化、Ｊ＝３Hz、
CH₂N）、6.95（1H、ｄ、Ｊ＝4.5Hz、チオフエン
−Ｈβ）、7.45（1H、ｄ、Ｊ＝4.5Hz、チオフエン
−Ｈα）、8.0（1H、ｍ、D₂Oの添加により消失、
NH）。 分析 C₇H₇NOSとして 計算値：Ｃ、54.88；Ｈ、4.61；Ｎ、9.14；
20.93。 実験値：Ｃ、55.04；Ｈ、4.45；Ｎ、9.13；
20.50。 方法Ｂ：Zn−未還元 酢酸（200ml）中オキシム６（18.3、86ミリ
モル）の溶液に、はげしい撹拌下40〜50℃にお
いて亜鉛末（17ｇ、258ミリモル）を１時間に
亘つて少量づつ添加した。反応混合物を室温に
おいて１夜撹拌し、60℃において４時間加熱し
た。内容物を過し、液を減圧濃縮した。残
留油に水（100ml）を添加し、混合物をエーテ
ル（50ml×２）で洗浄した。この水溶液に酢酸
エチル（100ml）を重層し、炭酸ナトリウムで
PH10に調節した。沈殿を去した。液を酢酸
エチルで抽出した。酢酸エチル抽出液を水（10
ml）で洗浄し、MgSO₄上乾燥し、減圧下に蒸
発させた。残留固体ベンゼンでつぶした。酢酸
エチルから晶出させてラクタム７、2.7ｇ（21
％）を得、このものはIRおよびNMRスペクト
ルが方法Ａと同一であつた。 (H) ３−アミノメチル−２−チエニル酢酸(8) ラクタム７（2.8ｇ、18.8ミリモル）と6b塩
酸（50ml）との混合物を３時間加熱還流させ
た。反応混合物を減圧濃縮した。残留物に水
（20ml）を添加し、混合物を炭で処理し、減圧
下に蒸発させた。残留物をTHFでつぶしてア
ミノ酸８塩酸塩（3.72ｇ：mp171〜172℃；ir
（KBr）cm^-1：3450、3000、1700、1200；nmr
（D₂O）ppm：4.80（2H、ｓ、−CH₂CO）、4.27
（2H、ｓ、CH₂−Ｎ）、7.26（1H、ｄ、Ｊ＝６
Hz、チオフエン−Ｈβ）、7.53（1H、ｄ、Ｊ＝
６Hz、チオフエン−Ｈα）を得た。この塩酸塩
（3.71ｇ、17.9ミリモル）を水（10ml）に溶解
し、IR−120（Ｈ、30ml）のカラム上クロマト
グラフ処理し、水（100ml）および５Ｎ−
NH₄OH（２リツトル）で順次展開した。アン
モニア溶離液を蒸発乾固させた。残留物を水性
アセトンから晶出させて８、mp223〜225℃3.0
ｇ（98％）を得た。 ir：ν^ＨＢｒ _ｎａｘ3000、1260、1520cm^-1。 nmr：δ^D2O-Na2CO33.20（sH、ｓ、−CH₂OC）、
4.13（2H、ｓ、CH₂N）、7.04（1H、ｄ、Ｊ＝６
Hz、チオフエン−Ｈβ）、7.30（1H、ｄ、Ｊ−６
Hz、チオフエン−Ｈα）。 分析 C₇H₉NO₂Sとして 計算値：Ｃ、49.10；Ｈ、5.30；Ｎ、8.18；
ｓ、18.73。 実験値：Ｃ、48.53：Ｈ、5.22；Ｎ、7.98；
ｓ、18.97。 (I) ３−ｔ−ブトキシカルボニルアミノメチル−
２−チエニル酢酸(9) 50％水性アセトン（80ml）中３−アミノメチ
ル−２−チエニル酢酸８（3.1ｇ、18ミリモ
ル）およびトリエチルアミン（８ｇ、80ミリモ
ル）の混合物をはげしく撹拌しながら０℃にお
いて20分間に亘つてアジ化ｔ−ブトキシカルボ
ニル（5.7ｇ、40ミリモル）を滴加した。反応
混合物を一夜撹拌し、減圧濃縮した。濃縮液を
エーテル（20ml×２）で洗浄し、濃HClでPH２
に調節し、酢酸エチル（50ml×２）で抽出し
た。酢酸エチル抽出液を飽和水性塩化ナトリウ
ムで洗浄し、MgSO₄上乾燥し、炭で処理し、
減圧下に蒸発させた。残留物をｎ−ヘキサンで
つぶし、ｎ−ヘキサンおよびベンゼンから晶出
させてmp62〜63℃の無色針状晶９、4.5ｇ（92
％）を得た。 ir：ν^{ｎｕｊｏｌ} _ｎａｘ3350、1700cm^-1 nmr：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.43（9H、ｓ、BOC−Ｈ）、
3.27
（2H、ｓ、CH₂CO）、4.16（2H、ｄ、Ｊ＝６Hz、
CH₂−ND₂Oを添加した時一重項、5.00（1H、
br、−NH−、D₂O添加により消失）、6.30（1H、
ブロードｓ、−COOH、D₂Oの添加により消失）、
6.86（1H、ｄ、Ｊ＝６Hz、チオフエン−Ｈβ）、
7.06（1H、ｄ、Ｊ＝６Hz、チオフエン−Ｈα）。 分析 C₁₂H₁₇NO₄Sとして 計算値：Ｃ、52.89；Ｈ、6.29；Ｎ、5.14；
Ｓ、11.77。 実験値：Ｃ、53.30；Ｈ、6.39；Ｎ、5.13；
Ｓ、11.72。 (J) １−カルボキシメチル−５−メルカプトテト
ラゾールの別合成 塩酸グリシンエチルエステル13.95ｇ（0.10
モル）、水酸化ナトリウム8.0ｇ（0.20モル）お
よび二硫化炭素8.37ｇ（0.11モル）の混合物に
撹拌下水125ml中アジ化ナトリウム7.47ｇ
（0.115モル）の溶液を添加した。この溶液を
6.5時間加熱還流し、25℃に16時間保存した。
暗褐色の混合物を過し、液を濃塩酸でPH
1.5まで酸性にした。この溶液を炭処理し、黄
色の液を酢酸エチル100ml×４で抽出した。
酢酸エチルを水洗し、硫酸マグネシウム上乾燥
し、40゜（15mm）において蒸発させて油を得
た。この油を塩化メチレンでつぶし、生成物を
集めた。試料を五塩化燐上25゜において16時間
真空乾燥した。irおよびnmrスペクトルは構造
と合致していた。 文献：ドイツ特許106645。 (K) ７β−（ｏ−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルア
ミノメチルフエニルアセトアミド）−７α−メ
トキシセフアロスポラン酸の製造 (1) ７−（ｏ−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルア
ミノメチルフエニルアセトアミド）セフアロ
スポラン酸ベンズヒドリル 乾燥エーテル（100ml）中ベンゾフエノン
ヒドラゾン（5.88ｇ、30ミリモル）と無水硫
酸ナトリウム（８ｇ）との混合物に酸化第二
水銀黄（16.12ｇ、74ミリモル）を添加し
た。この混合物に撹拌下KOH−飽和エタノ
ール（1.5ml）を添加し、撹拌を室温におい
て1.5時間継続した。この混合物を過し、
液をテトラヒドロフラン（THF）（60ml）
中７−（ｏ−Ｎ−ｔブトキシカルボニルアミ
ノメチルフエニルアセトアミド）セフアロス
ポラン酸（10.38ｇ、20ミリモル）の溶液に
添加した。反応混合物を室温において３時間
撹拌し、減圧下に蒸発させた。残留物をｎ−
ヘキサン（200ml）でつぶし、過により集
めた。粗生成物を熱ベンゼン（100ml）に溶
解し、少量の炭で処理した。液をエーテル
（500ml）で希釈し、冷蔵庫中一夜放置して無
色の結晶性固体として表題の生成物を得た。
収量12.25ｇ（89％）；mp150〜153℃。 ir：ν^ＫＢｒ _ｎａｘ3340、3300、1785、1740、1720
、
1680、1540、1230、1170cm^-1。 uv：λ^ＥｔＯＨ _ｎａｘ263nｍ（ε8580）。 〔α〕^２６ _Ｄ：＋５゜（ｃ＝1.0、クロロホル
ム）。 nmr：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.45（9H、ｓ、ｔ−Bu−
Ｈ）、
2.02（3H、ｓ、OAc）、3.39（2H、ｍ、２−
Ｈ）、3.68（2H、ｓ、CH₂CO）、4.32（2H、ｄ、
４Hz、CH₂N、D₂Oの添加により一重項）、4.72
（1H、ｄ、14Hz、３−Ｈ）、4.93（1H、ｄ、４
Hz、６−Ｈ）、5.05（1H、ｄ、14Hz、３−Ｈ）、
5.35（1H、br、CH₂NＨ、D₂Oの添加により消
失）、5.86（1H、ｄ、４および８Hz、７−Ｈ、
D₂Oの添加によりＪ＝４Hzをもつ二重項項）、
6.95（1H、ｓ、Ph₂CＨ）、7.2〜7.5（14H、ｍ、
フエニル−Ｈ）。 分析 C₃₇H₃₉N₃O₈Sとして 計算値：Ｃ、64.80、 ；Ｈ、5.73、
；Ｎ、6.13、 ；Ｓ、4.68、 。 実験値：Ｃ、46.70、64.65；Ｈ、5.95、
5.70 ；Ｎ、6.12、6.00；Ｓ、4.82、4.68。 (2) ７β（ｏ−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルア
ミノメチルフエニルアセトアミド）−７α−
メトキシセフアロスポラン酸ベンズヒドリル 乾燥THF（20ml）中工程１からの化合物
（3050mg、4.45ミリモル）の溶液を冷却（−
65℃）下メタノール−THF（12ml：20ml）
中リチウム（108mg、15.6ミリモル）の溶液
（乾燥氷−アセトン浴中−65℃に冷却した）
中に一度に注いだ。１分後ｔ−ブチルハイポ
クロライト（529mg、0.54ml、4.9ミリモル）
をこの混物に添加し、同じ温度において15分
間撹拌した。この混合物に酢酸（１ml）を添
加して反応を止めた。この混合物を水（200
ml）中に注ぎ、酢酸エチル（50ml×４）で抽
出した。抽出液を合して水洗し、減圧下に蒸
発させた。残留物を熱ベンゼン（20ml）に溶
解し、少量の炭で処理した。液をエーテル
（200ml）で希釈し、冷蔵庫中に保つて結晶性
生成物として表題の化合物を得た。収量2094
mg（66％）；mp171〜173℃。ベンゼン−エ
ーテルから再結晶、mp174〜175℃。 ir：ν^ＫＢｒ _ｎａｘ3350、3250、1785、1750、1735
、
1680、1525、1230、1170、1080cm^-1。 uv：λ^ＥｔＯＨ _ｎａｘ247nｍ（ε6790）、267nｍ、
（ε
7070）。 〔α〕^２２ _Ｄ：＋98゜（ｃ＝0.5、クロロホル
ム）。 nmr：δ^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.43（9H、ｓ、ｔ−Bu−
Ｈ）、
2.00（3H、ｓ、OAc）、3.2〜3.4（2H、ｍ、２−
Ｈ）、3.49（3H、ｓ、OMe）、3.72（2H、ｓ、
CH₂DO）、4.34（2H、ｄ、６Hz、D₂Oの添加によ
り一重項、ＣＨ ₂N）、4.74（1H、ｄ、14Hz、３−
Ｈ）、5.04（1H、ｓ、６−Ｈ）、5.10（1H、ｄ、
14Hz、３−Ｈ）、6.93（1H、ｓ、CH₂Ph₂）、7.2〜
7.5（14H、ｍ、フエニル−Ｈ）。 分析 C₃₈H₄₁N₃O₉Sとして 計算値：Ｃ、63.76；Ｈ、5.77；Ｎ、5.87；
Ｓ、4.38。 実験値：Ｃ、63.62、63.67；
Ｈ、5.83、5.65；Ｎ、5.87、5.73； Ｓ、48.9、4.72。 (3) ７β−（ｏ−アミノメチルフエニルアセト
アミド）−７α−メトキシセフアロスポラン
酸 工程２からの生成物（4.60ｇ、6.43ミリモ
ル）とトリクロロ酢酸（TFA）（８ml）との
混合物を０ないし20℃において20分間撹拌し
て粘稠な溶液を得、これをエーテル（100
ml）で希釈して表題の化合物のTFA塩を沈
殿させ、これを過により集め、アセトンニ
トリル（200ml）に溶解した。この溶液を少
量の炭で処理した。沈殿がそれ以上生じるな
くなるまで液に濃NH₄OH−アセトニトリ
ル（１：１）の混合物を滴加した。過によ
り表題の化合物を集め、アセトンニトリル
（50ml）で洗浄し、乾燥した。収量2.49ｇ
（86％）；mp161〜165℃（分解）。 ir：ν^ＫＢｒ _ｎａｘ3600〜2400、1770、1740（sh）
、
1665、1600、1230、1135cm^-1。 nmr：λ^１％^{ＮａＨＣＯ３} _ｎａｘ2.10（3H、ｓ、OAc
）、
3.15（1H、ｄ、18Hz、２−Ｈ）、3.53（3H、ｓ、
OCH₃）、3.62（1H、ｄ、18Hz、２−Ｈ）、3.90
（2H、ｓ、CH₂N）、5.12（1H、ｓ、６−Ｈ）、
7.45（4H、ｓ、フエニル−Ｈ）。 分析 C₂₀H₂₃N₃O₇S・2H₂Oとして 計算値：Ｃ、49.48；Ｈ、5.61；Ｎ、8.65；
Ｓ、6.60。 実験値：Ｃ、49.64、49.38；Ｈ、4.93、
4.86； Ｎ、8.86、8.92；Ｓ、6.57。 (4) ７β−（ｏ−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル
アミノメチルフエニルアセトアミド）−７α
−メトキシセフアロスポラン酸 50％水性THF（12ml）中工程３からの生
成物（800mg、1.8ミリモル）、3.6−ジメメチ
ルピリミジン−２−イチオカルボン酸ｔ−ブ
チル（864mg、3.7ミリモル）およびトリエチ
ルアミン（273mg、0.38ml、2.7ミリモル）の
混合物を室温において４時間撹拌した。この
混合物酢酸エチル（100ml）で希釈し、水層
の黄色が消失するまで6N HCl 10mlづつで数
回洗浄した。有機層を水洗し、乾燥した。減
圧下に溶媒を蒸発させて表題の生成物を得、
これを過により集め、ｎ−ヘキサンで洗浄
し、乾燥した。収量568mg（57％）；mp102
〜106℃（分解）。 ir：ν^ＫＢｒ _ｎａｘ3300、1780、1720、1700、1515
、
1230、1165cm^-1。 uv：λ^ＥｔｏＨ _ｎａｘ244nｍ（ε6630）、266nｍ（
ε
7150）。 nmr：^{ＣＤＣｌ３} _ｐｐｎ1.48（9H、ｓ、ｔ−Bu−Ｈ
）、
2.08（3H、ｓ、COCＨ _３）、3.3〜3.4（2H、ｍ、
２−Ｈ）、3.48（3H、ｓ、OCＨ _３）、3.78（2H、
ｓ、ＣＨ ₂CO₂）、4.30（2H、ｄ、６Hz、D₂Oの添
加により一重項）、4.82（1H、ｄ、15Hz、３−
Ｈ）、5.08（1H、ｓ、６−Ｈ）、5.12（1H、ｄ、
15Hz、３−Ｈ）、7.26（4H、ｓ、フエニル−
Ｈ）、8.20（1H、br、D₂Oの添加により消失、NH
またはCOOH）、8.85（1H、br−ｓ、D₂Oの添加
により消失）。 分析 C₂₅H₃₁N₃O₉Sとして 計算値：Ｃ、54.63；Ｈ、5.69；Ｎ、7.65；
Ｓ、5.84。 実験値：Ｃ、54.33、54.42；
Ｈ、5.73、5.59；Ｎ、7.44、7.39； Ｓ、6.01、5.97。 実施例 １ ７−（２−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシ−メチルテトラゾー
ル−５−イチオメチル）−３−セフエム−４−
カルボン酸 １ 撹拌器、温度計付３ツ首フラスコに脱イオン
水100mlを入れ７−アミン−３−（１−カルボキ
シ−メチルテトラゾール−５−イチオメチル）
−３−セフエム−４−カルボン酸7.6ｇ（0.021
モル）とＮ−メチルモルフオリン3.4ｇ（0.034
モル）を加え０℃に冷却した。撹拌しながら氷
浴で０℃に保つた。 ２ 撹拌器付の別のフラスコに２−（１−カルボ
キシ−１−プロペン−２−イルアミノ−メチ
ル）−フエニル酢酸ナトリウム9.6ｇ（0.03モ
ル）とテトラヒドロフラン184mlを加えた。撹
拌しながらドライアイスアセトン浴を用いて懸
濁液を−30℃に冷却した。撹拌冷却をつづけな
がらジメチルベンジルアミン20滴とイソブチル
クロロフオーメート4.4ｇ（0.03モル）を加え
た。出来た混合液５分間撹拌した。 ３ 工程２からの混合液全部を工程１の撹拌溶液
に一度に加えた。出来た溶液を３℃で１時間撹
拌した。 ４ 反応混合液から真空（15mm）を用いて30℃で
テトラヒドロフランを蒸発した。 ５ 濃塩酸を用い残つた水溶液のPHを4.0に調整
した。 ６ 木炭（“ダルコG60”）2.5ｇを溶液に加え20
分間混合した。木炭を別した。 ７ 液を120mlの酢酸エチルで覆い撹拌しなが
ら濃塩酸でPHを3.8に下げた。出来た少量の淡
褐色固体を別した。（再作業および回収を除
いて） ８ 氷浴を用いて液を５℃に冷却し撹拌しなが
ら濃塩酸でPHを2.5−2.8に下げた。５℃の温度
に保ち１時間撹拌をつづけた。 ９ 生成物を過捕集した。過ケーキを５mlの
冷脱イオン水と次いで５mlの冷メタノールで洗
つた。 10 固体７−（２−アミノメチルフエニルアセト
アミド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾ
ール−５−イチオメチル）−３−セフエム−４
−カルボン酸を恒量となる迄風乾した。（標準
的試験で生成物4.1ｇを得た。） 11 工程10で得た生成物を20メツシユステンレス
スチール鋼をとおした。 12 この200メツシユ生成物10ｇを100mlクロロフ
オルムにスラリ化した。トリエチルアミン５ml
を加えて混合物を激しく撹拌しながら50℃に加
熱した。混合物を50℃で５分間スラリ化した。 13 温い混合物を過した。（７−ACA、７−ア
ミノ−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル
−５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−
カルボン酸、顔料および他の不純物が温クロロ
フオルム−トリエチルアミン溶液中に溶解して
いた。）過ケーキを25mlのクロロフオルムで
洗い２時間風乾した。７−（２−アミノメチル
−フエニルアセトアミド）−３−（１−カルボキ
シメチル−テトラゾル−５−イルチオメチル）
−３−セフエム−４−カルボン酸の収量１−８
ｇであつた。 14 工程13で得た生成物を200メツシユ網をとお
した。 15 この200メツシユ生成物10ｇを75mlの0.1Ｎ塩
塩中に10−15分間でスラリとした。混合物を
過し過ケーキを25mlの水と50mlのメタノール
で洗い室温で２−３時間風乾した。収量10ｇ迄
であつた。 16 工程15で得た７−（２−アミノメチルフエニ
ル−アセトアミド）−３−（１−カルボキシメチ
ルテトラゾル−５−イルチオメチル）−３−セ
フエム−４−カルボン酸10ｇを65mlのメタノー
ル中にスラリとした。 (a) 濃塩酸２mlを加えた。溶液又は溶液に似た
ものを得た。５分間撹拌した。 (b) 上の(a)の溶液をはげしく撹拌しながら水
130mlを加えた。すぐに沈殿（殆んど色があ
つた。）を得た。（PHは1.3−1.6を必要とす
る。） (c) 混合物を１時間スラリ化してすぐ過し
た。（くりかえし回収して固体を除く） (d) 液に種を入れゆつくりまぜた。約15−30
分で晶出開始した。 (e) 晶出開始後室温又は４℃で混合液を２時間
かきまぜた。 (f) 結晶を別し65％水、35％メタノール
（Ｖ／Ｖ）混合液25mlで洗いメタノール50ml
で洗い50℃で24時間真空乾燥した。純白７−
（２−アミノメチルフエニルアセトアミド）−
３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５
−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カ
ルボン酸収量９ｇ迄であつた。 17 次の方法は７−（２−アミノメチルフエニル
−アセトアミド）−３−（１−カルボキシメチル
テトラゾル−５−イルチオメチル）−３−セフ
エム−４−カルボン酸の結晶化の２別法であ
る。 A1 工程15で得た生成物10ｇを100mlのメタノー
ル中にスラリとする。 ２ 濃塩酸２mlを加えて溶液又は溶液又は溶液
に近いものとする。 ３ 混合物に木炭（“ダルコＧ−60”）1.5ｇを
加え0.5時間スラリとする。 ４ 木炭を別し20mlのメタノールで洗う。メ
タノール洗滌液を液に加える。 ５ 液に水120mlを加える。（少量の沈殿が生
じることあり、これは別しくりかえし回収
を差控える。） ６ 工程５の溶液を激しく撹拌し10％水酸化ナ
トリウムでPH2.5−3.0に調整する。結晶が生
成する。 ７ 混合物を0.5時間スラリとする。結晶を
別し50％メタノール−水（Ｖ／Ｖ）液20mlお
よびメタノール30mlで洗い50℃で24時間真空
乾燥した。純７−（２−アミノメチル−フエ
ニルアセトアミド）−３−（１−カルボオキシ
メチル−テトラゾル−５−イルチオメチル）
−３−セフエム−４−カルボン酸収量９ｇ迄
を得る。 B1 工程15で得た生成物10ｇを75mlの水中にス
ラリとする。 ２ 10％水酸化ナトリウムを加えてPHを6.8−
7.2に保つ。溶液又は溶液に近いものを得
る。 ３ 木炭（“ダルコＧ−60”）1.5ｇを加え混合
物をPH6.8−7.2に保ちながら（つづいて0.1−
１Ｎ水酸化ナトリウムを加える。）30分間ス
ラリ化する。 ４ 木炭を別する。木炭を20mlの水で洗い洗
滌液を液に加える。 ５ 工程４のPH6.8−7.2の溶液は上記Ａの工程
６と７に記載のとおりPH2.5−3.0で（塩酸添
加により）晶出するか工程16のｄ、ｅ、ｆに
記載のとおりPH1.2−1.5で晶出する。両方の
場合結晶性７−（２−アミノメチルフエニル
アセトアミド）−３−（１−カルボキシルメチ
ルテトラゾール−５−イルチオメチル）−３
−セフエム−４−カルボン酸９ｇ迄を得る。
この生成物はしばしば結晶性１水和物として
えられる。この化合物をねずみの体重Kg当り
10mgの投薬量で筋肉内注射で投薬した場合15
分間で19.7mg/mlの血液濃度を得た。 E.コリA15119、K.ニユーモーニアA9977
およびE.クロウエイキA21020の致命的筋肉
内投薬量に対抗するねずみにおけるこの化合
物の50％動物における保護投薬量はそれぞれ
0.39−0.42、1.5−25および１−3.2mg/Kgであ
つた。 実施例 ２ ７−（Ｄ−α−ヒドロキシフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−
５−イルチオ−メチル）−３−セフエム−４−
カルボン酸２カリウム Ａ ７−（Ｄ−α−フオルミルオキシフエニルア
セトアミド）−３−（１−カルボキシメチルテト
ラゾル−５−イルチオ−メチル）−３−セフエ
ム−４−カルボン酸 10mlの水に７−アミノ−３−（１−カルボキ
シ−メチルテトラゾル−５−イルチオメチル）
−３−セフエム−４−カルボン酸500mgの懸濁
液に０℃で激しく撹拌しながら重炭酸ナトリウ
ム200mgを加えた。溶液が出来た処でアセトン
10ml中Ｄ−（−）−２−フオルミルオキシ−２−
フエニル塩化アセチル340mg（0.0172モル）の
液を一度に加えた。沈殿が出来たら直ちに固体
重炭酸ナトリウムを加えてPH８で１時間撹拌し
た。アセトンを15mm30℃で蒸発し溶液上に20ml
の酢酸エチル層をつくり：１りん酸で酸性とし
た。酢酸エチルで抽出した後混合液を過し有
機層を分離した後蒸発して生成物を得た。これ
は実質的に純７−（Ｄ−α−フオルミルオキシ
フエニルアセトアミド）−３−（１−カルボキシ
−メチルテトラゾル−５−イルチオメチル）−
３−セフエム−４−カルボン酸と一致した。 Ｂ ７−（Ｄ−α−ヒドロキシフエニルアセトア
ミド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル
−５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−
カルボン酸２カリウム 工程Ａで単離した固体を５mlのメタノールと
５滴の濃塩酸中にとかした。溶液を木炭で処理
し水蒸気浴上で３分間熱した。混合物を過し
15mlの水で稀釈した。ゴム状固体を冷水とすり
つぶし次に無水エーテルですりつぶした。固体
を５mlのアセトンに溶かし２−エチル−カプロ
ン酸カリウム50mgを加えた。７−（Ｄ−α−ヒ
ドロキシフエニルアセトアミド）−３−（１−カ
ルボキシメチルテトラゾル−５−イルチオメチ
ル）−３−セフエム−４−カルボン酸２カリウ
ムを白色固体として捕集した。収量90mg、融点
175℃徐々に分解。C₁₉H₁₆K₂N₆O₇S₂に対する分
析値： 計算値：Ｃ、39.19；Ｈ、2.77；Ｎ、14.42 測定値：Ｃ、39.89；Ｈ、3.50；Ｎ、12.58 この化合物をねずみ体重Kg当り10mgの投薬量
で筋肉内注射で投薬した場合15分間で21.4mg/
mlの血液濃度を得た。 E.コリA15119の致命的筋肉内投薬に対抗す
るねずみにおけるこの化合物の50％動物保護投
薬量は0.8mg/Kgであつた。 実施例 ３ ７−（Ｄ−α−アミノフエニルアセトアミド）−
３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５−
イルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボ
ン酸 テトラヒドロフラン（THF）17ml中にＤ−
（−）−α−tert−ブトオキシカルボキスアミドフ
エニル酢酸0.55ｇ（0.0022モル）とトリエチルア
ミン（TEA）0.22ｇ（0.0022モル）を含む溶液を
０℃でイソブチルクロロフオーメート0.300ｇ
（0.0022モル）と激しく撹拌した。混合液を０℃
で30分間撹拌し50％THF6.8ml中に７−アミノ−
３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５−イ
ルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボン酸
0.0022モルとTEA0.445ｇ（0.0044モル）を含む
溶液を加えた。出来た溶液を25℃で２時間撹拌し
た後40゜15mmでTHEを蒸発して油を得た。この
油を２×50mlのエーテルで洗い水で倍にうすめ稀
塩酸でPH3.0とした。混合物を氷浴中で１時間撹
拌し生成物を75mlの酢酸エチル中で抽出した。抽
出液を２×20mlの水と２×50mlの飽和塩化ナトリ
ウム溶液で洗つた。酢酸エチルを35゜15mmで蒸発
して油を得てスケリソルブ（Skellysolve）Ｂと
すりつぶして７−（Ｄ−α−tert−ブトオキシカ
ルボクスアミドフエニルアセトアミド）−３−（１
−カルボキシメチルテトラゾル−５−イルチオメ
チル）−３−セフエム−４−カルボン酸480mg
（35.3％）を得た。この試料をトリフルオロ酢酸
１mlに加え溶液を０゜で１時間撹拌した後エーテ
ル50mlで稀釈した。塩を捕集し10mlの水にとかし
稀水酸化アンモニウム（NH₄OH）でPH4.0とし
た。生成物を捕集し水とアセトンで洗いP₂O₅上
で25゜18時間真空乾燥して７−（Ｄ−α−アミノ
フエニルアセトアミド）−３−（１−カルボキシメ
チルテトラゾル−５−イルチオメチル）−３−セ
フエム−４−カルボン酸150mg（23.96％）を得
た。融点＞180゜徐々に分解。IRおよびNMRスペ
クトルは構造と一致した。C₁₉H₁₉N₇O₆S₂・１1/2
H₂Oに対する分析： 計算値：Ｃ、42.84；Ｈ、4.16；Ｎ、18.41 測定値：Ｃ、43.17；Ｈ、4.12；Ｎ、16.74 実施例 ４ ７−（２−アミノメチル−１・４−シクロヘキ
サジエニルアセトアミド）−３−（１−カルボキ
シメチルテトラゾル−５−イルチオメチル）−
３−セフエム−４−カルボン酸 19.2mlのTHF中に２−ｔ−ブトオキシカルボ
ニルアミノメチル−１・４−シクロヘキサジエニ
ル−酢酸0.80ｇ（0.003モル）とトリエチルアミ
ン0.303ｇ（0.003モル）を含む溶液を０゜で撹拌
しイソブチルクロロフオーメート0.41ｇ（0.003
モル）を加えた。混合液を０゜で30分間撹拌しこ
れを50％THF9.2ml中に７−アミノ−３−（１−
カルボキシメチルテトラゾル−５−イルチオメチ
ル）−３−セフエム−４−カルボン酸0.003モルと
TEA0.61ｇ（0.006モル）を含む溶液に加えた。
出来た溶液を25℃で1.5時間撹拌した。30゜15mm
でテトラフランを蒸発し２×30mlのエーテルで洗
い水で倍にうすめた。溶液を稀塩酸でPH3.5とし
生成物を集めP₂O₅上で25℃で18時間真空乾燥し
て白色粉末1.55ｇ（54.0％）を得た。上記７−
（α−（２−ｔ−ブトオキシカルボニルアミノメチ
ル−１・４−シクロヘキシルジエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５
−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボ
ン酸にトリフルオロ酢酸全量3.4mlを加え０℃で
１時間撹拌した。溶液を150mlのエーテルで稀釈
し沈殿を過捕集した。トリフルオロ酢酸塩を
3.4mlの水に懸濁し稀水酸化アンモニウムでPH4.5
とした。ゴム状残渣を水とすりつぶし集め水で洗
いアセトンで洗つた。生成物を25℃でP₂O₅上で
18時間真空乾燥して７−（２−アミノメチル−
１・４−シクロヘキサジエニルアセトアミド）−
３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５−イ
ルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボン酸
53mg（15.72％）を得た。融点＞160゜徐々に分
解。 C₂₀H₂₈N₇O₆S₂・1/2H₂Oに対する分析： 計算値：Ｃ、45.18；Ｈ、4.55；Ｎ、18.44 測定値：Ｃ、45.46；Ｈ、4.68；Ｎ、17.19。 IRとNMRスペクトルは構造と一致した。 実施例 ５ ７−（α−アミノ−４−ヒドロキシフエニルア
セトアミド）−３−（１−カルボオキシメチルテ
トラゾル−５−イルチオメチル）−３−セフエ
ム−４−カルボン酸 テトラヒドロフラン92ml中にＤ−（−）−Ｎ−
tert−ブトオキシカルボニル−ｐ−ヒドロキシフ
エニルグリシン2.7ｇ（0.01モル）を含む溶液に
Ｎ−メチル−モルフオリン1.1ｇ（0.01モル）を
加えた。溶液を０℃に冷却し一度にイソブチルク
ロロフオーメート1.4ｇ（0.01モル）を加えた。
10分間撹拌した後この混合無水溶液を水50ml中７
−アミノ−３−（１−カルボキシメチルテトラゾ
ル−５−イルチオメチル）−３−セフエエム−４
−カルボン酸3.7ｇ（0.01モル）とＮ−メチルモ
ルフオリン1.1ｇ（0.01モル）を含む溶液に０℃
で加えた。溶液を１時間撹拌しテトラヒドロフラ
ンを15mm30℃で蒸発して全容量を45mlとした。溶
液を１：１りん酸を用いてPHを２とし酢酸エチル
で抽出して水で洗い溶媒を共沸して30℃（15mm）
でガラス状固体を得た。残渣をエーテルですりつ
ぶして用いた酸をすべて除去し過捕集した。こ
れはハイドロスコピツク（hydroscopic）であり
直ちに５mlのトリフルオロ酢酸に移し27℃で１時
間撹拌した。溶液を25mlのエーテルで稀め生成物
を過捕集して５mlの中に懸濁させた。混合物を
濃水酸化アンモニウムでPH３としイソプロパノー
ル10mlで稀釈した。淡黄褐色固体を過捕集し
P₂O₅上で24時間真空乾燥して７−（α−アミノ−
４−ヒドロオキシフエニルアセトアミド）−３−
（１−カルボキシメチルテトラゾル−５−イルチ
オメチル）−３−セフエム−４−カルボン酸300mg
を得た。 C₁₉H₁₉N₇O₇S₂・3/4ｉ−C₃H₇Oに対する分析： 計算値：Ｃ、42.78；Ｈ、4.44；Ｎ、17.32 測定値：Ｃ、42.86；Ｈ、4.55；Ｎ、15.39 IRとNMRスペクトルは構造と一致した。 NMRスペクトルは生成物中にイソプロピルア
ルコール0.75モルの存在を示した。 参考例 １ ７−（Ｄ−α−〔３−（２−フロイル）ウレイ
ド〕−４−ヒドロオキシフエニルアセトアミ
ド）セフアロスポラン酸ナトリウム 乾燥ジメチルフオルムアミド175ml中に７−（Ｄ
−α−アミノ−４−ヒドロオキシフエニルアセト
アミド）−セフアロスポラン酸（ジメチルフオル
ムアミド−水溶媒化合物として）20.8ｇ（0.0413
モル）の氷冷却懸濁液にトリエチルアミン（6.4
ml、0.0454モル）と２−フロイルソシアネート
12.7ｇ（0.1039モル）を加えた。約１分後に氷浴
をとり去り混合物を１時間撹拌した。暗色液を
600mlの水で稀釈し酢酸エチル層でおい水相を42
％りん酸を用いてPH2.5酸性とした。両相を分離
しジメチルフオルムアミド水性相を酢酸エチルで
更に４回抽出した。併せた有機層抽出液を５回水
洗し木炭処理し過し減圧濃縮して残つた水を除
去した。新酢酸エチルを加えて溶液を撹拌しなが
ら１−ブタノール中２−エチルカプロン酸ナトリ
ウムの15.1ml（0.0408モル）で処理して生成物を
晶出させた。18.1ｇ7.5.5％IRスペクトルは望む
製品と一致した。 ７−｛Ｄ−α〔３−（２−フロイル）ウレイド〕
−４−ヒドロオキシフエニルアセトアミド｝−
３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５−
イルチオメチル）−セフエム−４−カルボン酸
２ナトリウム塩 ７−｛Ｄ−α−〔３−（２−フロイル）ウレイ
ド〕−４−ヒドロオキシフエニルアセトアミド｝
セフアロスポラン酸ナトリウム4.0ｇ（0.0069モ
ル）、５−メルカプト−１−テトラゾル酢酸２ナ
トリウム塩1.83ｇ（0.00895モル）およびPH6.4の
0.1Mりん酸緩衝液200mlの混合液を窒素雰囲気の
もとで75℃に６時間加熱した。一夜冷凍機中に貯
えておいた反応混合物を過して少量の沈殿物を
除いた。液を6N HClでPH２とし酢酸エチルで
３回抽出した。最初の抽出時混合物を過して少
量の不溶物を除いた。酢酸エチル酢出液を併せて
（容量500ml）水洗し乾燥（硫酸ナトリウム）した
後、過し１−ブタノール中２−エチルカプロン
酸ナトリウム5.1ml（0.0138モル、２等量）で処
理して油を得てこれを分離した。溶媒を少し濃縮
して水を除き混合物を冷凍機に貯えた。溶媒をデ
カントしゴム状生成物をアセトンとすりつぶして
過出来る固体を2.0ｇ得た。生成物をP₂O₅上真
空乾燥した。IRスペクトルは望む製品と一致し
た。 実施例１、２、３、４、５および参考例１の方
法で製造した化合物を水溶液とし栄養ブロツス
（Broth）で稀釈した試料は管稀釈法により37℃
で一夜培養して検査した場合示した微有機体に対
し次の最低抑制濃度（M.I.C）（mcg/ml）をあら
わすことがわかつた。 【表】 【表】 【表】 実施例 ６ ７−（２−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−
５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カ
ルボキシル酸１ナトリウム塩３水和物 １ 結晶性７−（２−アミノメチルフエニルアセ
トアミド）−３−（１−カルボキシメチルテトラ
ゾル−５−イルチオメチル）−３−セフエム−
４−カルボン酸（実施例１で製造したとおり）
10ｇを50mlの脱イオン水に懸濁させた。 ２ 激しく撹拌しながら10％水酸化ナトリウムを
加えてPHを7.4−7.7に保つた又は一定とした。
溶液又は溶液に近いものを得た。 ３ 活性炭（“ダルコＧ−60”）２ｇを加えて混合
物を30分間スラリとした。１Ｎ水酸化ナトリウ
ムでPHを7.4−7.7とした。 ４ 木炭を別し10mlの水で洗つた。洗滌液を
液に併せた。 ５ 工程４のPH7.4−7.7の液を適当な無菌過と
方法により無菌で発熱原ないものとした。 工程３、４および５を完了するに必要な時間
は室温において５時間を超えてはならない。 ６ 工程５の無菌液を激しく撹拌しながらこれに
無菌法を用いて無菌で発熱原のないアセトンの
ほぼ等量（65ml）を５分間で加えた。 ７ 概略の元の水量を基準として更に２倍量
（120ml）の無菌の発熱原のないアセトンを急速
撹拌しながら15−20分間で加えた。結晶が生成
した。 ８ 混合物を10分間スラリ化した。 ９ 更に３倍量（180ml）の無菌アセトンを15分
かかつて加えた。混合物を30分間スラリ化し
た。 10 結晶を過捕集し75mlの無菌アセトンで洗い
45−50℃で真空乾燥又は50−56℃で24時間風乾
した。収量約8.8ｇ ７−（２−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５
−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボ
ン酸１ナトリウム塩３水和物の特性は次のとお
り： 水％（KF） 9.2（理論値9.05％） ナトリウム％（フイルム光度計）
4.0（理論値3.86％） 水中溶解度 ＞500mg/ml 水中安定性は250mg/mlで室温で少くも24時間安
定であつた。 注射用製品の処法 ７−（２−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−
５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カ
ルボン酸１ナトリウム塩のその場での製造法： (A) 8.5mlの水中に７−（２−アミノメチルフエニ
ルアセトアミド）−３−（１−カルボキシメチル
テトラゾル−５−イルチオメチル）−３−セフ
エム−４−カルボン酸（両性イオン）2.5ｇを
激しく撹拌して懸濁させくえん酸ナトリウム又
はNa₂HPO₄又はNa₃PO₄又は他の適当する“塩
基”を加えて溶液を得た。（PHは7.8を超えては
ならない。）“塩基”の量は記録しておいた。 (B) 上記Ａで決定した比率で７−（２−アミノメ
チルフエニルアセトアミド）−３−（１−カルボ
キシメチルテトラゾル−５−イルチオメチル）
−３−セフエム−４−カルボン酸2.5ｇと固体
“塩基”の物理的混合物をつくつた。種々の濃
度の７−（２−アミノメチルフエニルアセトア
ミド）−３−（１−カルボキシルメチルテトラゾ
ール−５−イルチオメチル）−３−セフエム−
４−カルボン酸を得る為後から水を加えてその
場でつくつた７−（２−アミノメチルフエニル
アセトアミド）−３−（１−カルボキシルメチル
−フエニルアセト−５−イルチオメチル）−３
−セフエム−４−カルボン酸１ナトリウム塩溶
液を得た。 ７−（２−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５
−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボ
ン酸１ナトリウム塩３水和物が遊離酸７−（２−
アミノメチルフエニルアセトアミド）−３−（１−
カルボキシメチルテトラゾル−５−イルチオメチ
ル）−３−セフエム−４−カルボン酸（両性イオ
ン）１水和物の様に高温で安定でない場合にこの
方法は望ましい。 ７−（Ｏ−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５
−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カルボ
ン酸溶液の安定性に関しては室温PH10.3（150mg/
ml溶解に対し可能な最低PH）で殆んど瞬間的に50
％の生物活性損失が認められた。次の30分間で更
に活性21％が失なわれた。 対照的に７−（２−アミノメチルフエニルアセ
トアミド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾ
ル−５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−
カルボン酸１ナトリウム塩３水和物125.0mg/mlを
含む溶液はPH7.0において少くも24時間室温で目
立つた損失を示さなかつた。 実施例１および米国特許第3766175号のクレイ
ム２の７−（Ｏ−アミノメチルフエニルアセトア
ミド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−
５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カル
ボン酸と名づけた化合物はある種のグラム−陰性
有機体に対し特に非常に望ましい活性スペクトル
を示す非常に効力あるセフアロスポリンである。
あいにくこの両性イオンは水およびPH約7.2又は
その辺の血液に特に殆んど溶解しない。特にこの
溶解度測定試験で緩衝水性媒質および犬の尿様室
温で約1.0−3.0mg/mlの結果を与えた。新しい猟
犬尿のPHは7.6である。これは排泄中濃縮される
時腎臓内で結晶形で沈殿すると想像される事実か
らこの両性イオンを人に投薬した帰の毒性影響の
可能性について問題となる。これは人には非常に
好ましくない。７−（Ｏ−アミノメチルフエニル
アセトアミド）−３−（１−メチル−１・２・３・
４−テトラゾル−５−イルチオメチル）−３−セ
フエム−４−カルボン酸の普通の水溶性形および
誘導体の使用によるこの予期された問題解決の普
通の試みは塩又は誘導体内で両性イオン転化して
水溶液および血液中で低溶解度を示す為不成功と
わかつたのである。７−（Ｏ−アミノメチルフエ
ニルアセトアミド）−３−（１−メチル−１・２・
３・４−テトラゾル−５−イルチオメチル）−３
−セフエム−４−カルボン酸の価値ある生物学的
活性を損失することなくこの問題を解決すること
が本発明の目的であつた。種々失敗した後本発明
による好ましい性質をもつ７−（２−アミノメチ
ルフエニルアセトアミド）−３−（１−カルボキシ
メチルテトラゾル−５−イルチオメチル）−３−
セフエム−４−カルボン酸の提供によりこの問題
を解決した。特にPH7.0のりん酸緩衝液中の７−
（２−アミノメチルフエニル−アセトアミド）−３
−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５−イル
チオメチル）−３−セフエム−４−カルボン酸の
試料は25℃で15.3mg/mlより大きくまた13.6mg/ml
より小さい溶解度を示した：この場合緩衝液の容
量が不充分でPHは6.48におちた。故に本発明によ
り提供される両性イオン型の７−（２−アミノメ
チルフエニルアセトアミド）−３−（１−カルボキ
シメチルテトラゾル−５−イルチオメチル）−３
−セフエム−４−カルボン酸でさえ血液流中に充
分の溶解度をもち腎臓内で晶出することなくそれ
によつて有毒結果の心配は殆んど僅かの患者とな
る。 また、上述したとおり水性溶解度の小さいとい
う性質は問題を提供したが、その問題はPH約７の
様な人間への注射用に適したPHにおけるこの様な
溶解度をあらわしなおたとい両性イオン型に転化
してさえ血液流および腎臓の液体中に充分な溶解
度を示す本発明の７−（２−アミノメチルフエニ
ルアセトアミド）−３−（１−カルボキシメチルテ
トラゾル−５−イルチオメチル）−３−セフエム
−４−カルボン酸１ナトリウム塩３水和物の製造
により解決された。 上記によれば本発明の化合物の利点は従来法で
知られている他の多数の化合物と比較して水溶性
の改良された点で更に筋肉内に経口投薬にてこの
化合物は一般に優秀な血液濃度を得る。 実施例 ７ ７−（Ｄ−α−ヒドロキシフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−
５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カ
ルボン酸２ナトリウム 25mlの水中７−アミノ−３−（１−カルボキシ
メチルテトラゾル−５−イルチオメチル）−３−
セフエム−４−カルボン酸1.6ｇ（0.008モル）と
重炭酸ナトリウム2.1ｇを含む液を５℃に冷却し
それにアセトン20ml中にＤ−（−）−α−フオルミ
ルオキシフエニルアセチルクロライド1.5ｇ
（0.0039モル）を含む液を加えた。溶液を１時間
撹拌しアセトンを減圧除去し酢酸エチル50mlで覆
つた。混合液を１：１りん酸でPH２とした。酢酸
エチルを水洗し15mm圧で共沸乾固して残渣をエー
テルでスラリとした。生成物を捕集しP₂O₅上で
真空乾燥して生成物500mgを得た。融点＞140℃分
解を伴なう。 C₂₁H₂₀N₆O₈S₂・（C₂H₅）₂Oに対する分析値： 計算値：Ｃ、48.23；Ｈ、4.84；Ｎ、13.49 測定値：Ｃ、48.12；Ｈ、4.31；Ｎ、12.02 IRおよびNMRスペクトルは構造と一致した。
この化合物をねずみの体重Kg当り10mgの投薬量で
筋肉内注射で投薬した場合15分間で16.0mg/mlの
血液濃度を得た。 実施例 ８ ７−（３−アミノメチル−２−チエニルアセト
アミド）−３−（１−カルボキシメチルテトラゾ
ル−５−イルチオメチル）−３−セフエム−４
−カルボン酸 Ａ ７−（３−ｔ−ブトオキシカルボニルアミノ
メチル−２−チエニルアセトアミド）−３−（１
−カルボキシメチルテトラゾル−５−イルチオ
メチル）−３−セフエム−４−カルボン酸 テトラヒドロフラン（THF）中に３−ｔ−
ブトオキシカルボニル−アミノメチル−２−チ
エニル酢酸（542mg、２ミリモル）、２・４−ジ
ニトロフエノール（368mg、２ミリモル）およ
びジシクロヘキシルカルボジイミド（412mg、
２ミリモル）を含む混合液を室温で1.5時間撹
拌した。沈殿した尿素を除去し液を液圧蒸発
した。得た活性エステル（1.0ｇ）を10mlの
THF中に溶かし、水（５ml）中に７−アミノ
−３−（１−カルボキシメチルテトラゾル−５
−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カル
ボン酸（656mg、２ミリモル）とトリエチルア
ミン（816mg、８ミリモル）の混合液中に０℃
で撹拌しながらそれを加えた。室温で撹拌を
3.5時間つづけた後反応混合物を水（20ml）に
加えエーテルで洗つた。（４×20ml）水溶液を
酢酸エチルで覆い濃エClで５℃でPHを２に調
整した。有機層を分離し水性層を酢酸エチルで
抽出した。（２×50ml）酢酸エチル抽出液を併
せて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗いHgSO₄
上で乾燥し減圧蒸発した。残つた油をシリカゲ
ル（10ｇ）上でクロマトグラフ法にかけた。カ
ラムをクロロフオルム（150ml）と３％メタノ
ール−クロロフオルム（100ml）で次々に展開
した。クロロフオルム溶離液から２・４−ジニ
トロフエノール（50mg）を回収しメタノールク
ロロフオルム溶離液の蒸発により首題セフアロ
スポリンを単離した。収率29％。融点1185−
188℃分解を伴なう。 C₂₈H₂₇N₇O₈S₃に対する分析： 計算値：Ｃ、42.91；Ｈ、4.54；
Ｎ、15.23、Ｓ；14.94 測定値：Ｃ、43.02；Ｈ、4.17；
Ｎ、15.07；Ｓ、15.04 Ｂ ７−（３−アミノメチル−２−チエニルアセ
トアミド）−３−（１−カルボキシメチルテトラ
ゾル−５−イルチオメチル）−３−セフエム−
４−カルボン酸 工程Ａで得たブロツクされたセフアロスポリ
ン（610mg、1.05ミリモル）に０℃でトリフル
オロ酢酸（0.6ml）を加え混合液を室温で15分
間撹拌した。反応混合液に無水エーテル（15
ml）を加えて沈殿を分離し過捕集し無水エー
テル（２×10ml）で洗いアセトニトリル（10
ml）にとかした。溶液に濃水酸化アンモニウム
２滴を加えた。分離した固体を過捕集しアセ
トニトリル（２×10ml）で洗い75℃／１mmHg
で７時間乾燥して首題生成物を得て１等量の水
酸化アンモニウムで処理して１アンモニウム塩
として捕集した。収率83％融点174−178℃、分
解を伴なう。 C₁₈H₂₁N₈O₆S₃・H₂Oに対する分析： 計算値：Ｃ、38.56；Ｈ、4.32；
Ｎ、19.98；Ｓ、17.16 測定値：Ｃ、38.89；Ｈ、4.06；
Ｎ、18.83；Ｓ、15.24 IRとNMRは構造と一致した。 実施例 ９ ７−（２−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボキシエチルテトラゾル−
５−イルチオメチル）−３−セフエム−４−カ
ルボン酸 Ａ Ｏ−（１−カルボメトオキシ−プロペン−２
−イルアミノメチル）−フエニル酢酸カリウム
（エナミン） １ タンク１中にＯ−アミノメチルフエニル酢
酸1000ｇ、水酸化カリウム340ｇ、アセト酢
酸メチル1412ｇおよび無水メタノール32400
mlを入れた。 ２ 混合液を撹拌しながら４時間還流加熱し
た。 ３ 反応溶液を減圧50℃以上で濃縮して最初の
容量の約1/5とした。 ４ 濃縮液にMIBK10000mlを加えてメタノー
ルが除去される迄減圧濃縮をつづけた。 ５ 濃縮液がスラリとなるに必要なMIBKを
10000ml又は適当量を加えた。 ６ 混合物を５−10℃に冷却30分撹拌した。 ７ スラリを過しケーキをMIBK5000mlと次
いでアセトン5000mlで洗つた。 ８ 生成物を40℃の空気循環オーブンで乾燥し
た。 ９ 白色結晶性生成物収量1605−1680ｇ（88−
92％）融点140−142℃ Ｂ ７−（２−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−３−（１−カルボエチルテトラゾール−２
−チオメチル）−３−セフエム−４−カルボン
酸 A′ 撹拌器、乾燥器付三ツ首フラスコ中に工程
Ａからのエナミン（4.09ｇ）とテトラヒドロフ
ラン90mlを混合しドライアイスアセトン浴中で
冷却した。Ｎ・Ｎ−ジメチルベンジルアミン８
滴を加え−38℃に冷却した。イソブチルクロロ
フオーメート（1.95ｇ）を加え15分撹拌した B′ 水50mlとＮ−メチルモルフオリン2.29ｇ中に
７−アミノ−３−（１−カルボキシエチルテト
ラゾル−２−イルチオメチル）−３−セフエム
−４−カルボン酸（3.5ｇ）をとかし２℃に冷
却した。この溶液に工程A′からの無水物を撹
拌しながら加えた。混合液を２℃で1.5時間撹
拌した。テトラヒドロフランを真空除去した後
酢酸エチル層で覆いPH３とした。氷浴中で撹拌
した後生成物250mgを得た。融点140分解。
IRとNMRは構造と一致したが主として原料物
質の20％不純物を示した。この化合物をねずみ
体重Kg当り10mgの投薬量で筋肉内注射で投薬し
た場合15分間で血液濃度22.3mg/mlを得た。 実施例 10 ７β−（Ｏ−Ｎ−ｔ−ブトオキシカルボニルア
ミノメチル−フエニルアセトアミド）−７α−
メトオキシ−３−（１−カルボニルメチルテト
ラゾル−５−イルチオメチル）−３−セフエム
−４−カルボン酸 PH7.0の0.1Mりん酸緩衝液（５ml）中に７β−
（Ｏ−Ｎ−ｔ−ブトオキシカルボニルアミノメチ
ル−フエニルアセトアミド）−７α−メトオキシ
セフアロスポラン酸（549mg．１ミリモル）、重炭
酸ナトリウム（84mg．１ミリモル）および１−カ
ルボキシメチル−メルカプトテトラゾル２ナトリ
ウム塩（816mg．４ミリモル）を含む混合液を85
℃に１時間加熱した。冷却後混合液を稀HClでPH
１とし酢酸エチルで抽出した。（３×30ml）抽出
液を併せ水洗乾燥し減圧蒸発して油を得てこれを
シリカゲルカラム（WaKo−ゲルＣ−200、10
ｇ）上でクロマトグラフ法にかけた。カラムをク
ロロフオルム−ソタノール（50：１）で溶離し
た。第１溶離液は（100ml）原料のメルカプタン
（0.30ｇ）を含んでいた。第２溶離液は（50ml）
望む生成物を含んでおりこれを少量の炭素と処理
し減圧蒸発して無定形粉末として首題製品を得
た。（140mg．22％）融点110−120℃（分解） IR：ν^ＫＢｒ _ｎａｘ3600−2400、1780、1690、1520、
1385、1250、1160cm^-1 UV：λ^ＥｔｏＨ _ｎａｘ246nｍ（ε6300）、274nｍ（ε67
00） NMR：δ^{ＤＭＳＯ−ｄ} _ｐｐｎ1.35（9H、ｓ、ｔ−Bu−Ｈ
）、
3.38（3H、ｓ、OCH₃）、3.65（2H、ｓ、
CH₂CO）、4.13（1H、ｄ、14Hz、３−Ｈ）、4.16
（2H、ｄ、６Hz、D₂Oでシングレツト、CH₂N）、
4.50（1H、ｄ、14Hz、３−Ｈ）、5.01（1H、ｓ、
６−Ｈ）、5.26（2H、ｓ、テトラゾール−
CH₂CO）、7.20（4H、ｓ、フエニル−Ｈ）、9.20
（1H、ｓ、CONH、P₂O添加で消滅） C₂₆H₃₁N₇O₉S₂・2H₂Oに対する分析値： 計算値：Ｃ、45.54；Ｈ、5.14；Ｎ、14.30 測定値：Ｃ、45.71；Ｈ、4.51；Ｎ、13.65 45.73 4.42 13.91 実施例 11 ７β−（Ｏ−アミノメチルフエニルアセトアミ
ド）−７α−メトオキシ−３−（１−カルボキシ
メチルテトラゾル−５−イルチオメチル）−３
−セフエム−４−カルボン酸 実施例10において得た生成物（120mg、0.18ミ
リモル）およびトリフルオロ酢酸（TFA）（0.3
ml）の冷混合物を室温で20分間撹拌して粘液を得
た。これにエーテル（20ml）を加えて製品の
TFA塩を得てこれを過捕集しアセトニトリル
−水（50：１、20ml）にとかした。溶液を少量の
炭素で処理した。この液に濃NH₄OH−アセト
ニトリル（１：２）の混合液を撹拌しながら滴加
して沈殿を完了させた。ゴム状沈殿を集めアセト
ニトリル（20ml）とすりつぶし首題製品を得これ
を過捕集しアセトニトリル（５ml）で洗い乾燥
した。収量62mg（63％）融点185−190℃（分解） IR：ν^ＫＢｒ _ｎａｘ3600−2600、1700、1605、1380、
1300、1110、1085cm^-1 UV：λ^１％^{ＮａＨＣＯ３} _ｎａｘ238nｍ（ε8300）、270n
ｍ（ε
9100） C₂₁H₂₃N₇O₇S₂・1/2H₂Oに対する分析値： 計算値：Ｃ、45.15；Ｈ、4.23；Ｎ、17.55 測定値：Ｃ、45.26；Ｈ、4.81；Ｎ、18.51。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式 ［ただし式中R¹は （ＹはＨ、OHまたはCH₂NHBであり、ＢはＨま
   たはアミノ保護基であり、ＺはＨ、OHまたは
   NH₂である）； 【式】および 【式】 から成る群から選ばれたアシルであり、R³はＨ
   またはメトキシであり、ｎは１から９までの整数
   である］の化合物、あるいはそのエステルまたは
   毒性のない医薬として使用可能な塩の製法におい
   て、式、 （ただし式中R¹は上記定義のアシルであり、R³は
   上に定義したとおりである）の化合物、あるいは
   その塩または容易に加水分解可能なエステルを式 （ただし式中ｎは１ないし９である）の化合物と
   反応させることを特徴とする方法。 ２ 式 （ただし式中R¹は （ＹはＨ、OHまたはCH₂NHBであり、ＢはＨま
   たはアミノ保護基であり、ＺはＨ、OHまたは
   NH₂である）； 【式】および 【式】 から成る群からえらばれたアシルであり、R³は
   Ｈまたはメトキシであり、ｎは１から９までの整
   数である）の化合物、あるいはそのエステルまた
   は毒性のない医薬として使用可能な塩の製法にお
   いて、式、 （ただし式中R³は上に定義したとおりである）の
   化合物、あるいはその塩または容易に加水分解可
   能なエステルを式 （ただし式中ｎは１ないし９である）の化合物と
   反応させ、得られた化合物を式、R¹−Ｘ （ただし式中Ｘはハロゲン化物またはその官能均
   等物であり、R¹は上記定義のアシルであり、そ
   れは、アシル基が遊離のアミノまたはヒドロキシ
   ルを含む時には、該基は常用の保護基によつて閉
   塞されており、次に除去されて式の化合物を得
   る）のアシル化剤で処理することを特徴とする方
   法。