JPS61502839A - ミモトープを検出または決定する方法 - Google Patents

ミモトープを検出または決定する方法

Info

Publication number
JPS61502839A
JPS61502839A JP60503303A JP50330385A JPS61502839A JP S61502839 A JPS61502839 A JP S61502839A JP 60503303 A JP60503303 A JP 60503303A JP 50330385 A JP50330385 A JP 50330385A JP S61502839 A JPS61502839 A JP S61502839A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
catamer
specimens
antibody
solid support
monomers
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP60503303A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH07119760B2 (ja
Inventor
ギイセン，ヘンドリツク　マリオ
Original Assignee
コモンウエルス・セ−ラム・ラボラトリ−ズ・コミッション
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=3770684&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=JPS61502839(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by コモンウエルス・セ−ラム・ラボラトリ−ズ・コミッション filed Critical コモンウエルス・セ−ラム・ラボラトリ−ズ・コミッション
Publication of JPS61502839A publication Critical patent/JPS61502839A/ja
Publication of JPH07119760B2 publication Critical patent/JPH07119760B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
    • C07K1/047—Simultaneous synthesis of different peptide species; Peptide libraries
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6878—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids in eptitope analysis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/82—Proteins from microorganisms
    • Y10S530/826—Viruses

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Diaphragms For Electromechanical Transducers (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Lubricants (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Testing Of Optical Devices Or Fibers (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Exchange Systems With Centralized Control (AREA)
  • Control Of Eletrric Generators (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Management, Administration, Business Operations System, And Electronic Commerce (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ミモトーブの２方法 この発明は抗原のエピトープに相当する、またはエピトープに等価の分子トポロ ジーを有するモノマー分子の連鎖を検出または決定する方法に関する。
本明細書中に使用される、下記にリストアンプした用語は、以下に述べる意味を 有する。
エピトープ（ｅｐｉｔｏｐｅ）：抗体分子との相互作用の領域によって描写され る抗原分子の特定の表面。
カタマー（ｃａｔａｍｅｒ）：小さい分子の正確に定義された連鎖を有し、かつ 小さい分子の正確な数の縮合によって形成されたポリマー分子。
この用語は、ポリマー分子において小さい分子を結合するために異なるタイプの 縮合反応が用いられている場合を含むことに注意すべきである。
用語“カタマー（ｃａｔａｍｅｒ）’の前に置かれた数字は、カタマーが示され た数の小さい分子の縮合によって形成されたことを示し、たとえば、８−カタマ ーは８箇の小さい分子からカタマーが形成されていることを意味する。
カタマーの例には、既知のペプチド、および既知のオリゴｔｉ類が含まれる。
七ノマー：相互に縮合してカタマーを形成することができる、多数の小分子の群 。
この小分子の群には、たとえば通常のし一アミノ酸の群、Ｄ−アミノ酸の群、合 成アミノ酸の群、ヌクレオチドの群およびペントースおよびヘキソースの群が含 まれるが、これらに限定されない。
ペプチド：小分子がα−アミノ酸であり、このα−アミノ酸がペプチド結合で相 互に連合しているカタマー。
本明細書中においては、アミノ酸がＬ−光学具ミモトープ（ｍｉｍｏｔｏｐｅ） ：少なくともその配置の一つに、擬態であるがエピトープのそれと等価の分子ト ポロジーの表面領域を有するカタマー。
相補性（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ）：抗体パラトープ（ｐａｒａｔｏｐｅ） の反応表面と、特定エピトープとの相互組み合わせに関する。これら゛表面は、 抗体パラトープと、そのエピトープとの結合の間、組み合わされなければならな い。すなわち、パラトープおよびそのエピトープは相補性として記述され、更に 特徴となる接触表面は相互に相補性である。
パラトープＣｐａｒａ、Ｌｏｐｅ）：特定のエピトープに対して相補性である抗 体の結合部位。
以下は、すでに良く知られていることである：、１．抗原はタンパク質または多 Ｉ！類のような巨大分子であり、必ずとは云えないが、通常ではヒトおよび動物 には異物であり、人体または動物体内に導入されたときに法案性または細胞性免 疫応答、またはこの両者を刺激する； ２、抗体が結合する抗原の特定領域は、エピトープとして知られている； ３、抗原分子上には、一つ以上のエピトープが存在すること； ４、抗原に対する体の合液素性応答は、抗原の種々のエピトープに対する抗体を 生成することであること；個々の抗体の夫々は、モノクロナール抗体（ｍｏｎｏ −ｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ）であり、定義により単一のｐｒｏｇｅ−ｎｉ ｔｏｒＢ−ｃｅｌｌの増加および分化によってもたらされる細胞の群から生成さ れる； ５、抗体分子のパラトープは、エピトープと抗体の間の接触表面である抗体結合 部位の分子表面として定義される； ６、抗体の与えられたエピトープに対して、夫々パラトープにおいて異なる、一 つ以上の抗体が生成される； 夫々のパラトープは、相補性エピトープへの特殊性によって特徴づけられる；お よび ７、抗原による攻撃に対応して生成された抗体は、幾分かは抗原と結合すること によって直接的に中和されること；他の部分はマクロファージ系によって処理さ 、れうる集合体（ａｇｇｒｅｇａｔｅ）を形成することができること；更になお 他の部分は評価しうる何らの生物学的影響も示すことができないこと。
本発明の第１の目的は、抗原のエピトープと同等なモノマーの一つ以上の短い連 鎖を検出または決定することにあり、これらの連鎖はエピトープとして同一の抗 体と結合することができる。
これらカタマーは、エピトープのミモトープである。
この情報は、疾病に対する合成カタマーワクチンをデザインする上で、およびす べての特定の診断薬および治療薬をデザインする上ではかり知れないほど価値が ある。
相互に縮合してカタマーを形成することができる小分子の最も有用な群は、α− アミノ酸である。
しかしながら、化学的に矛盾なく選択された他の分子も使用することができる。
たとえばβ−アミノ酸は、カタマーの正確に制御された位置にｅｘｔｒａ−Ｃ− ｂｏｎｄ５ｐ−ａｃｅｒを付加できる利点があるので使用することができる。
本発明によれば、対象の抗体の特定パラトープに対して相補性のあるエピトープ のトポロジー的当量テするモノマーの連鎖を検出または決定する方法を提供する ことにある。
この方法は下記の工程からなる： １．多数のカタマー標本を合成する； このカタマー標本は、夫々のカタマーにおける一つ以上の指定された位置におけ る構成が知られている多数のカタマーから成り、その他の位置における構成は、 多数の規定された一連のモノマーからランダムに構成されており；そして上記多 数のカタマー標本は、規定された位置における構成が、規定された一連のモノマ ーの部分を含むように組織的に変化する標本から成る； ２、上記多数のカタマー標本の夫々を対象とする抗体と接触させる；次いで、 ３、上記多数のカタマー標本の夫々と上記与えられた抗体との間の結合の有無を 検出または決定して、上記与えられた抗体のパラトープに対するミモトーブの部 分的連鎖を表示する。
好ましくは、本発明の方法は更に下記の工程からなる： ４、更に多数のカタマー標本の夫々が、各カタマーにおいて一つ以上の追加位置 を、指定された位置として更に有する更に多数のカタマー標本を上記のようにし て合成する； ５、上記更に多数のカタマー標本に関して、上記工程２および３を繰り返す。
工程４および５の操作は、各カタマー標本におけるすべての位置が明らかになる まで繰り返される；そしてすべでの推論されたミモトーブが次いで合成され、こ の与えられた抗体に対応するエピトープに対してより良いミモトープである対象 とする抗体との相対的な反応能力から決定される。
本発明の方法は、与えられた抗体が、抗体が指向されるエピトープのミモトープ であるカタマーと明確に反応することを実現化することにもとづいている。
更に本発明の方法は、免疫学の現代技術によれば抗体と、そのエピトープとの間 の反応を、両者が極めて小量存在する場合も検出することができる知識にもとづ くものである。
抗体と、そのエピトープが約１ｐモルの量で存在する場合には、結合は検出され る。
従って、もしも抗体がそのエピトープに対してミモトープであるカタマーとの混 合物として存在するならば、その混合物と反応してミモトープと特異的に結合す る。
ミモトープの同定は、反応性力タマー標本の指定された位置における既知のモノ マー組成から推論される。
完全なミモトープは、このようにして推定された反応性成分の幾つかの組合せで あると考えられる。
本発明の方法は、抗原の性質について前もっての情報を必要とせず、特に抗原を 形成する七ツマ−の連鎖の予備知識を必要としないことが明らかである。
事実、本発明の実施のためには、抗体が指向する抗原源や木質について知ること を必要としない。
更に本発明は、特定の抗体の生成を刺激するエピトープについて推論を必要とし ない。
本発明の方法は、連続したエピトープと同様に非連続的なミモトープを確認する ことができる。
本発明の方法の特性の故に、本発明の方法は、一部分が、または全体が非タンパ ク質性であり、そのエピトープが適当なカタマーによちて擬態化されうるいづれ の抗原にも適用できると思われる。
ミモトープは、抗原を形成する同一のモノマーセットの部分から形成されても良 いし、されなくても良い。
好ましくは本発明の方法は、合成された多数のカタマー標本を、対象とする抗体 に対してスクリーニングすることにより行なわれる。
理想的には、抗体は、いづれかの通常の方法によって製造されたモノクロナール 抗体である。
ヒトおよび動物からのポリクロナール抗血清は、モノクロナール抗体源が入手で きないならば使用することができる。しかしながら、このとき得られたデータの 解析は、観察された反応が一つ以上のモノクロナール抗体からの反応であるので 、複雑である。
ポリクロナール抗血清を使用する場合には、当該分野で良く知られた技術、たと えば等電焦点法、ＨＰＬＧにも・とづくクロマトグラフィまたは親和力クロマト グラフィを用いて抗体の多様化を減少させる必要がある。
最近の指摘によれば、モノマーが一連のα−アミノ酸に由来する場合には長さが 約８モノマーであるカタマーによってエピトープが擬態化される。
８カタマーがエピトープのミモトープとなる能力は、特定のモノマーを有するす べての位置に決定的に依存するものではない。しかしながら、本発明は８個のモ ノマーから形成された連鎖に限定されないことが理解されるべきである。
本発明の実施に際して合成される、要求される多数のカタマー標本は、既知のカ タマー製造法のいづれかによって製造することができる。
モノマーがアミノ酸であるときの好ましい方法は、オーストラリア特許明細書第 ２５４２９／８４号に記述された固相技術を用いる方法であり、ここではカタマ ーの各゛混合物はポリエチレン支持体上に合成される。
下記は、本発明の態様の一つの詳細な記述である二カタマーを固体支持体上に合 成することである。
本態様においては、多数のカタマーはすべて下記一般式を有する。
Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｄｚ−Ｄ＋−Ｘ−Ｘ−χ−Ｘ−（固体支持体〕ここでＸは一連のモ ノマー中の一つを表わす。
理想的には、各カタマー標本は、カタマーの式における各Ｘの位置が、一連の千 ツマー中の夫々がカタマー標本においてほぼ等モル量存在するような一連のモノ マー構成員を表わすカタマーを含むべきである。
各Ｘの位置にモノマーの同じ組みを使用する必要がないことに注意すべきである 。
上記一般式におけるＹは、カタマーの末端基であり、たとえば水素原子またはア セチル基であるが、これに限定されない。
ＤｌおよびＤ２は、合成された各カタマー標本において、既知かつ一定のモノマ ーによって占められた指定位置を示す。しかしながら、ツタマー標本間において 、組織的に変更することができる。
同一のモノマーの組みを各指定位置に使用する必要がないことに注目すべきであ る。
また、カタマーがアミノ酸から合成された場合には、カタマーはその−ＣＯＯＨ 末端基またはアミン末端基を経て固体支持体と結合することに注目すべきである 。
もしもｉｆ）＜Ｄ１位置において結合されるモノマーの組みにおける構成上ツマ −の数であり、ｊがＤ２において結合される七ツマ−の組みにおける構成モノマ ーの数であるならば、ｉとｊの合計の相異なるカタマー標本が合成される。
零Ｂ様においては、支持体として棒（ｒｏｄ）が用いられ、この棒に七ツマ−が 結合される。
この棒は次いでモノマーの組みの考慮される各構成モノマーを含む反応混合物に さらされる。
この結果、第１のＸ位置にモノマーが結合する。
この操作を３回繰り返すと、カタマーのＺ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｃ固体支持体〕が 得られ、ここで２は考慮されるモノマーの組みに対する適切な保護基である。
モノマーがアミノ酸のときのＺの例には、ＢＯＣおよびＦｍｏｃ基が含まれる。
この方法の実施の、この段階までは、すべての棒は同一の方法で処理される。
Ｄ８位置における結合のために、各棒が保護されたアミノ酸のような単一の七ツ マ−のみを含む反応混合物で処理されるａＤ１位置において、ｉモノマーは夫々 、ｊ−棒と結合する。Ｄ２位置における結合のために、各棒は保護されたアミノ 酸などのような単一モノマーのみを含む反応混合物で再び処理される。Ｄ１位置 に特定のモノマーを有する夫々のｊ棒は、Ｄ２位置に結合した相異なるモノマー を有する。このようにして、モノマーの組みの構成モノマーのすべての結合がｉ 、ｊ棒に見出される。
残りのＸ位置へのモノマーの結合は、固体支持体に接近したＸ位置における結合 と同一である。
複数のカタマー標本の合成の後に、保護基側枝が通常の技術を用いてカタマー標 本から除去され、棒に結合したカタマーは洗浄される。
データの解析を助けるために、−組み以上の多数のカタマー標本を合成すること が本発明の好ましい態様であることが見出された。
すなわち、上述したような下記一般式を有するカタマーの合成と同様に、 Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｄｚ−Ｄ＋−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕下記一般式を有する カタマーのセットが更に合成された。
Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｄｚ−Ｘ−Ｄ＋−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｃ固体支持体〕および Ｙ−Ｘ−Ｄｚ−Ｘ−Ｘ−Ｄ＋−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕他のカタマー標本の セットの合成のために、他の一般式が選択されることに注目すべきである。
Ｂ、カタマー標の試験 上記Ａにおけるようにして製造された多数のカタマー標本を、次いで対象となる 特定の抗体と接触させる。
抗体とカタマー標本の成分との間の反応は、次いで、通常のいづれかの方法、た とえば放射線免疫試験（ＲＩＡ）によって、検出される。
しかしながら、抗体−ミモトープ結合の存在の好ましい検出方法は、良く知られ た、酵素が連結した免疫溶媒試験（ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ：Ｅ ＬＩＳＡ）を使用することである。
夫々の試験の最後に、カタマー標本から抗体を、たとえば８Ｍ尿素、０．１％２ −メルカプトエタノールおよび０．１％ナトリウムドデシルサルフェート溶液で 洗浄し、次いでリン酸塩緩衝食塩水で数回洗浄することにより除去することがで きる。
このようにして、多数のカタマー標本を多くの他の抗体との試験に使用すること ができる。
Ｃ，データの解析 カタマー標本と抗体との試験において、成る種の棒が抗体と検出可能な結合を示 すことが見出される。
かかる反応性の棒に結合したカタマー標本は、位置Ｄ１およびＤ２にモノマーセ ットの構成モノマーの定義された結合を含む。
このモノマーの結合は、抗体に対して相補性のあるエピトープに対するミモトー プを形成するカタマーの部分を形成すると思われる。
更にデータの解析は、種々の方法によって行なうことができる。
かかる方法には下記が含まれる； １、これら反応性モノマーの組み合せおよび入れ替えによって、エピトープのた めの一つ以上のミモｔ−−プを含むカタマーのリストを作成する；このリストに おける各カタマーは可能なモミトープと考えられる； ２、七ツマ−の反応性組み合せのリストから最も好ましい候補物を取り出しくし かし、これらモノマーが最高の抗体結合活性を示す必要はない）、更にカタマー 標本のセットを合成する。このカタマー標本においては、モノマーの既知の反応 性組み合せは一定に保たれ、カタマーの他の位置におけるモノマーは組織的に変 化される；すなわち上記例において、かかるカタマー標本の好適なセットには下 記式のカタマーが含まれる。
Ｙ−Ｘ−０３−０２−ＤＩ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕および Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｄｚ−ＤＩ−Ｄ４−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕ここでＤｌおよび Ｄ２はモノマーの反応性組合せを構成し、Ｄ３およびＤ４はモノマーの組みの構 、成モノマーの夫々が組織的に変化する、他の指定された位置である；および ３、多数のカタマー標本のセットの一つ以上からの結果を組み合せ、解読してモ ノマーの単一連鎖、または対象とするエピトープを模擬する、かかる連鎖の極め て少数を得る； これは、上述した態様を用いて、相互に隣接する場合の七ツマ−の反応性組合せ 、一つの位置によって分離された、モノマーの反応性組合せ、および最後に二つ の位置によって分離されたモノマーの反応性組合せをすべて知ることができるか らである；これらのデータは容易に解説することができ、ミモトープの連鎖を得 る；この方法は、多数のカタマー標に最も有利である。
Ｄ、′択されたミモトープの合成 選択されたミモトープは、オーストラリア特許明細書第２５４２９／８４号に記 載された方法と類似の方法を用いて合成することができる。選択されたカタマー が合成された後に、これらカタマーは対象とする抗体と反応せしめられる。
抗体と最も強く結合しているカタマーを選択することは単純である。このカタマ ーがエピトープの最良のミモトーブであることの最終的チェ・ツクとして、カタ マーの連鎖がオーストラリア特許明細書第２５４２８／８４号に記載されたよう な置換ネット（ｎｅｔ）の母体連鎖として用いられる。
下記に示す実施例１．２および３において、限定されたモノマーセットは通常の し一α−アミノ酸の組みである。
このモノマーのセットは、指定された位置および任意の位置（上述した一般式に おいて用いたようなりＩ＋Ｄ２およびＸ位置）の両方のために用いられる。
更に、これら実施例において、カタマーの末端基（Ｙ基）はアセチル基である。
去施±上 下記一般式を有する多数の８−カタマー標本が合成された。
アセチ／Ｌｚ−ＮＨ−Ｘ−Ｘ−Ｄｚ−ＤＩ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕こ こでＸは、２０の通常のα−アミノ酸の群の一員であり、この結果、この群の各 員はカタマー標本においてＸ位置にほぼ等モル量存在する；指示された位置Ｄ１ およびＤ２も共に同一のモノマーの群の一員であり；−Ｎｉ＋−はカタマーの末 端アミン基を表わす。
８−カタマー標本は一般的にオーストラリア特許明細書第２５４２９／８４号に 記載されているように、合成中にα−アミノ酸を保護するためにＢＯＣ基を用い て、固体ポリマーのピンまたは棒上に合成された。
通常のα−アミノ酸の群の各員は、Ｘ位置に下記のようにして結合された： １、アミノ酸の混合物を１０２ｒｎｌのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解 した。この混合物は下記から成る。
ＢＯＣ−Ｌ−アラニン３２■ ＢＯＣ−メトキシベンジ１）−Ｌ−システィン１００■ＢＯＣ−ベンジ１ｌ−Ｌ −アスパラギン酸９０■ＢＯＣ−ベンジルーし一グルタミン！９６ＭＢＯＣ−Ｌ −フェニ）シ７ラニン６１■ＢＯＣ−Ｌ−グリシン２７■ ＢＯＣ−）シルーＬ−ヒスチジン１４２■ＢＯＣ−Ｌ−イソＵイシｙ−’ＡＨｔ ０５１ｍｇＢＯＣ−カルボベンゾキシ−し−リジン１２４■ＢＯＣ−Ｌ−ａイシ ｙ−１（ｚｏ５５ｑＢＯＣ−Ｌ−メチオニン５４■ ＢＯＣ−Ｌ−アスパラギン４７■ ＢＯＣ−Ｌ−プロリン４２■ ＢＯＣ−Ｌ−グルタミン５３■ ＢＯＣ−）シ）１−し−アスパラギン・ｕｚｏ１６７■ＢＯＣ−ベンジルーし一 セリン７６■ ＢＯＣ−ベンジルーし一スレオニン８３■ＢＯＣ−Ｌ−バリン４２■ ＢＯＣ−Ｌ−）リブドア７ン７８ｍｇ ＢＯＣ−ベンジ１トＬ−チロシン１１６ｌｔｇ２．１３１０■の１−ヒドロキシ ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を３４ｍｆのＤＭＦに溶解した溶液を作った。
３、Ｎ、Ｎ’−ジクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１１５０■を３４ｒ ｎｌのＤＭＦに溶解した溶液を作った。
４、使用前に、ＨＯＢＴの溶液をアミノ酸の溶液に加え、混合した。次いで、Ｄ ＤＣの溶液を加え混合した。次いで、すでに固体支持体上のカタマーまたは結合 分子を、得られた混合物と反応させた。
個々のし一アミノ酸を、オーストラリア特許明細書第２５４２９／８４号記載の 方法に従ってり、およびＤ２位置に結合させた。
この結果、４００のカタマー標本の合成において、２０の通常のアミノ酸をＤｌ およびＤ２位置に結合させることができた。
多数の８−カタマー標本をモノクロナール抗体に対してＥＬＩＳＡによって試験 をした。このモノクロナール抗体は、当該分野において良く知られている技術を 用いて、鵞口癒ビールス（Ｆｏｏｔ−ａｎｄ−ＭｏｕｔｈＤｉｓｅａｓｅＶｉｒ ｕｓ；ＦＭＤＶ）亜型Ａ、。に対して製造された。
ＥＬＩＳＡ試験の実施においては、支持体に支持されたペプチドを、１％オバル ブミン／１％牛血清アルブミン１０．１％トウィーン（Ｔｗｅｅｎ）２０のリン 酸塩緩衝食塩水（ＰＢＳ）から成るプリコート溶液中で２５℃で１時間保持して 、抗体の非特定的な吸収を塞いだ。
次いで、４℃で１夜、適当に希釈したプリコート溶液中でモノクロナール抗体を 保持した後に、０．０５％トウィーン（Ｔｗｅｅｎ）２０／ＰＢＳ溶液で３回洗 浄した。
２５℃で１時間、ワサビ（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ）ペルオキシダーゼに配合さ れ、プリコート溶液で希釈されたｇｏｏｄａｎｔｉ−ｍｏｕｓｅＩｇＧと反応後 に、ＰＢＳ／）ウィーンで十分に洗浄して過剰の配合体を除去した。
抗体の存在は、新らたに調整した酵素基質溶液（〇−フェニレンジアミン４０■ およヒ１８μ２の“１２０νｏ１．”過酸化水素のリン酸塩／クエン酸塩緩衝液 １００ｍ１溶液、ｐｌ＋５．０）との４５分間の反応および４５０ｎｍにおいて 検出された発色によって検出した。
第１図は、この抗体による８−カタマー標本の試験結果を示す。第１図において 、２０の線から成る各群は、ＥＬＩＳＡ試験において、４５０ｎｍで測定したと きに発現した色の吸光度の単位における応答を表わす。
２０の線の群における夫々の線は、各群の直下に一つの文字記号で与えられた共 通のアミノ酸をり３位置に有する。
２０の線の各群の夫々の°線は、Ｄ２位置に異なるアミノ酸を表わす−これらは 単一文字記号のアルファベット順である。これらの結果を第１表にまとめた（第 １表および残りの実施例を通して、アミノ酸への単一文字記号が用いられる）。
（本頁以下余白） 第１表 ペプチド混合物吸光Ｅａ＋ｓ ＾ｃ−Ｘ−Ｘ−Ｍ−Ｈ−χ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−３ｓＯ，６２４Ａｃ−Ｘ−Ｘ−Ｍ−に −Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓｓ０．５８２＾ｃ−Ｘ−Ｘ−に−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓ ｓ０．５３７八ｃ−Ｘ−Ｘ−に−１トＸ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−５，０，５１０八ｃ−Ｘ −Ｘ−ローＨ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓｓ０．４８８Ａｃ−Ｘ−Ｘ−Ｈ−Ｈ−Ｘ−Ｘ −Ｘ−Ｘ−Ｓｓ０．４８６Ａｃ−Ｘ−Ｘ−Ｑ−Ｎ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓｓ０．４ ６０Ａｃ−Ｘ−Ｘ−Ｗ−Ｍ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−３ｓＯ，４４ＢＡｃ−Ｘ−Ｘ−に −Ｎ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓｓ０．４３１Ａｃ−Ｘ−Ｘ−Ｈ−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ −３ｓＯ，４１７より低い２００の値の平均吸光係数は０．２０２であった（標 準偏差０．０２１）。
Ａｃはアセチル基を意味する。
Ｓ、は〔固体支持体〕を意味する。
第１表から、抗体は多数の８−カタマー標本と強く反応することが明らかである 。反応の強さの順に、指示された位置＜ＤＺＤＩ）が−Ｍ−Ｈ−、−Ｍ−に−、 −に−に−、−に−Ｈ−、−Ｑ−Ｈ−および−Ｈ−Ｈ−である８−カタマー標本 が含まれる。
更に二種の多数の８−カタマー標本が合成された。
これらは下記の式を有する。
７セチル−ＮＨ−Ｘ−Ｄ３−Ｍ−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕および アセチ／Ｌ、−ＮＨ−Ｘ−Ｘ−Ｍ−に−０，−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕ここ でＭはメチオニン残基を示し、Ｋはリジン残基を示し、Ｄ、およびＤ４は、これ ら一連の合成のために新らたに指示された位置を示す。式中で用いられた他の用 語はすでに用いられたとおりである。
これら８−カタマー標本は、ＦＭＤＶＡ、Ｏに対するモノクロナール抗体に対し て試験された。
第２Ａ図および第２Ｂ図は、第１図に示した結果を得るのに用いたモノクロナー ル抗体によるＥＬＩＳＡ試験の結果を示す。第２Ａ図は、下記一般式の８−カタ マー標本を表わす。
アセチル−ＮＨ−Ｘ−Ｄｚ−Ｍ−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕第２Ｂ図 は下記一般式の８−カタマー標本を示す。
アセチ／ｌ、−ＮＨ−Ｘ−Ｘ−Ｍ−に−０４−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕第２ Ａ図および第２Ｂ図の両方において、Ｄ３またきの発色の吸光度を表わす各線の 下に示した。
この結果を第２表にまとめた。抗体結合活性を、１゜１よりも大きな値を与える すべての８−カタマー標木について、指定されたアミノ酸対Ｍ−Ｋを含む８−カ タマー標本について示した。また、逆の対に−Ｍについて見出された値も示した 。
Ａｃ−Ｘ−Ｗ−Ｍ−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓｓ２．５０Ａｃ−Ｘ−Ｘ−Ｍ−に− Ｑ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−３ｓ２．２０Ａｃ−Ｘ−Ｑ−Ｍ−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−５ｓ１ ．６９八ｃ＝−Ｘ−Ｘ−Ｍ−に−Ｗ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−３ｓ１．９７Ａｃ−Ｘ−Ｎ− Ｍ−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓｓ１．２７Ａｃ−Ｘ−Ｘ−Ｍ−に−Ｇ−Ｘ−Ｘ−Ｘ −Ｓｓ１．４１Ａｃ−Ｘ−Ｇ−Ｍ−に−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｓｓ１．１４＾ｃ−Ｘ −Ｘ−Ｍ−に−Ｎ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−３ｓ１．２６Ａｃ−Ｘ−Ｃ−Ｍ−に−Ｘ−Ｘ− Ｘ−Ｘ−Ｓｓ１．１１コントロ一ル連鎖ＭＫ１．００（Ｅ４Ｓ。＝０．１４）Ｋ −ＭＯ，９７ モノクロナール抗体と最も反応性に冨む８−カタマー標本は、指定された位置に 下記の連鎖を有することが明らかである。第２Ａ図から、−Ｈ−Ｍ−に−、−Ｗ −Ｍ−に−および−Ｑ−Ｍ−に一０ 第２Ｂ図から、−Ｍ−に−Ｈ−、−Ｍ−に−Ｑ−および−Ｍ−に−Ｗ−０ Ｍ−にで指示された対のいずれかの側にヒスチジンの加入によって、最大の抗体 結合活性が得られた。
しかしながら、アミノ末端側のヒスチジンは、トリプトファンよりも著るしく良 好ではなく、指定された連鎖Ｗ−Ｍ−に−１１が更に評価するために選定された 。
指定され、個々の好ましい延長とＭ−に対との組み合わせが最適であると予想さ れる連鎖Ｗ−Ｍ−に−Ｈを先行させたときの効果を試験した。
母体連鎖アセチル−ＮＨ−Ｘ−Ｗ−Ｍ−に−Ｈ−Ｘ−ＸＸＳｓ（固体支持体〕に もとづくカタマ一連鎖を合成し、四つの指定された位置の各々を１９のすべての アミノ酸で一度に一つづつ置換した。
このカタマー標本の組みのモノクロナール抗体（ＭＡｂ）との結合活性の試験か ら、Ｑ−Ｍ−Ｒ−Ｈが好ましい連鎖延長であることが示された（得られたＥ４ｓ 。
は；ＡｃＸＷＭＫＨＸＸＸ５ｓ＝０．６９゜ＡｃＸＱＭＫＨＸＸＸＳｓ”’１． ４７゜およびＡｃＸＷＭＲＨＸＸＸＳｓ”’ １．１１．試験バックグラウンド０．２であった）。
指定された連鎖Ｍ−に−Ｈのアミノ末端側におしＡで、・Ｍ−に対について決定 されたように、トリプトファンよりもグルタミンが優れていることは、個々Ｇこ 決定された最適性の相互依存性を示している。
次に、下記一般式の８−カタマー標本を合成した。
アセチ／Ｌ、−ＮＨ−０５−Ｑ−Ｍ−Ｒ−Ｈ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕およ び ？セチル−Ｎｌｌ−Ｘ−Ｑ−Ｍ−Ｒ−Ｈ−０，−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕最高の 抗体結合活性を有する標本は、Ｄ、＝）ＩＪブトファンおよびＤ６＝セリンの場 合であり、このことからＷ−Ｑ−Ｍ−Ｒ−Ｈ−３が最適の連鎖であることが示唆 される。
この連鎖のいづれかの側にアミノ酸を更に指定することによる抗体結合活性の著 るしい改善は達成されなかった。
この連鎖のすべての単一アミノ酸置換からなり、ヘキサペプチドとして合成した ペプチドのセットの評価から、Ｗ−Ｑ−Ｍ−Ｒ−Ｈ−３が最適のへキサペプチド に近いことが確認された。
ペプチドのアルギニンをグリシンで置換して連鎖Ｗ−Ｑ−Ｍ−Ｇ−Ｈ−３を与え るときに、いくらかの抗体結合活性の増加が示された。
関連するペプチドの決定された群の試験ＭＡｂに対する抗体結合反応の特異性を 確認するために、ペプチド数に対する試験ＭＡｂの滴定数を、マツコラクジラ・ ミオグロビンまたはへバチテイス（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ）Ａに抗体結合反応の特 異性は、これらペプチドの連鎖を決定するために用いた抗体のＭＡｂ試験から明 らかである。
第３表 ぺブチド試験ＭＡｂ抗へパチティスＡ抗ミオグロビンＡｃ−Ｘ−Ｘ−Ｍ−に−Ｘ −Ｘ−Ｓｓ、２，０００＜２００＜２００Ａｃ−Ｘ−Ｗ−Ｍ−に−Ｘ−Ｘ−５ｓ １４．０００＜２００１，６００八ｃ−Ｘ−Ｘ−トに−Ｈ−Ｘ−３ｓ１７，００ ０＜２００＜２００八ｃ−Ｘ−Ｗ−トに−Ｈ−Ｘ−５ｓ３６．０００＜２００８ ００Ａｃ−Ｗ−Ｑ−Ｍ−Ｒ−Ｈ−３−３ｓ１００，０００＜２００＜２００Ａｃ −Ｗ−Ｑ−トＧ−Ｈ−Ｓ−５５１，２・０．０００＜２００＜２００決定され、 バックグラウンド試験の３倍の吸光を与える腹水の相互希釈に相当する。
数値は、希釈した夫々の腹水と関係のないペプチドコントロール（ＡｃＧＤＬＧ ＳＩＳｓおよびＡｃＧＤＬＱＶＬＳｓ）との反応によって決定された非特定的吸 収により補正した。
モノクロナール抗体試験は、下記のようであった二本書中に記載したような試験 ＭＡｂ、抗−ＦＭＤＶ。
タイプＡ、。（全ビールスに対する滴定数１．３Ｘ１０６）；抗へプチティスＡ １反応の位置は未知（ヘパチティスＡビールスに対する滴定数１０６）；および 抗ミオグロビン（マツコラクジラ）、反応位置は未知（マッコウクジラ・ミオグ ロビンに対する滴定数１０６）。
裏施炭主 実施例２は、本発明をポリクロナール抗体に適用した場合を述べる。
実施例１に記述したように、下記一般式を有する多数の８−カタマーを更に合成 した。
７セチルーＮ１１−Ｘ−Ｘ−０２−ＤＩ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕これ ら力タマーを、合成ペプチドＣ−Ｇ−Ｄ−Ｌ−Ｇ−３−１−Ａ−Ｋに対して得ら れた抗体に対して試験した。
この合成ペプチドは、メリーフィールド（Ｍｅｒｒｉｆ１ｅｌｄ）の固相ペプチ ド合成の通常の技術を用いて合成した。
このペプチドをシスティン残基のスルフヒドリル基を経てＫｅｙｈｏｌｅＬｉｍ ｐｅｔＨａｅｍｏｃｙａｍｉｎと結合させた。
この結合したペプチドをフロイント（Ｆｒｅｕｎｄ）の不完全補助薬（ｉｎｃｏ ｍｐｌｅｔｅａｄｊｕｖａｎｔ）で組織化し、兎に筋肉的注射した。
注射後４０日を経て兎の血液から抗血清を得た。
多数の８−カフマー標本の抗体によるＥＬｒＳＡ試験の結果を、第１図と同様な 方法で第３図に示した。
第３図から、Ｅ（グルタミン酸）をＤ１位置に有する、すべての８−カフマー標 本は、抗体と顕著に反応することが明らかである。抗体と顕著に反応する他の組 み合わせには、減少する順に、−Ｄ−１−、−Ｇ−ｐ−、−１−Ｇ−および−Ｄ −Ｖ−が含まれる。
上記実施例１で述べたようにして、下記の式を有する多数の８−カフマー標本を 更に合成した。
アセチ／Ｌｚ−ＮＨ−Ｘ−０３−ＤＪ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｃ固体支持体〕ここで Ｄはアスパラギン酸であり、■はイソロイシンである。
抗体との試験結果を、第２図と同様な方法で第４図に示した。第４Ａ図は下記一 般式の８−カフマー標本を示し、 アセチ／Ｉ／−ＮＨ−Ｘ−０３−Ｄ−１−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕第４ Ｂ図は下記一般式の８−カフマー標本を示す。
アセチル−ＮＨ−Ｘ−Ｘ−Ｄ−Ｉ−０４−Ｘ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕第４図か ら抗体と反応する８−カフマー標本は、指定された位置に下記の連鎖を含むこと を示す、。
−Ｇ−Ｄ−１−、−Ａ−Ｄ−１−、−Ｐ−Ｄ−１−。
−Ｄ−１−Ｄ−、−Ｄ−１−Ｍ−および−Ｄ−１−Ｔ第４Ａ図と第４Ｂ図との比 較から、−Ｄ−Ｉ一対の直前の位置は、−Ｄ−１一対の直後の位置よりも、はる かに少ない範囲のアミノ酸が許されることが明白である。
下記母体連鎖にもとづき、カフマー標本における四つの指定された位置が夫々、 一度に一つづつ、すべて１９の他のアミノ酸で置換された８−カフマー標本を合 成した。
７−！＝チルーＮＨ−Ｘ−Ｘ−Ｇ−Ｄ−１−Ｄ−Ｘ−Ｘ−（固体支持体〕この標 本の組みの、試験抗体との結合活性についての試験は、この抗体との反応能力を 保持するためにはアミノ末端アスパラギン酸は他のアミノ酸で置換され得ないこ と；イソロイシンはバリン、ロイシンまたはスレオニンまたは結合活性は減少す るが約１０の他の゛アミノ酸で置換できること；およびカルボキシル末端アスパ ラギン酸は事実上いづれのアミノ酸によっても置換することができ、この位置に おけるセリンは最も強い結合を与えることを示している。
また試験結果は、指定された連鎖Ｇ−Ｄ−Ｉ−３が鎖延長のためには好ましいこ とを示している。
上記のような指定連鎖の延長は、アミノ末端へのトリプトファンおよびカルボキ シル末端へのヒスチジンの加入が好ましいことを示している。
しかしながら、いづれの鎖延長も抗体結合活性においては顕著な増加を示さなか った。
好ましい指定された連鎖Ｗ−Ｇ−Ｄ−１−３−Ｈを更に延長することは、更に連 鎖を延長することに、はとんど利点がないことを示した。
この特定の抗体に対して決定されたミモトープ、すなわちＷ−Ｇ−Ｄ−１−３− Ｈは、抗体を導入するために使用したペプチド、すなわちＣ−Ｇ−Ｄ−Ｌ−Ｇ− ５−Ｉ−Ａ−Ｋに対して一時的な類似性を有するのみであることに注目すべきで ある。
しかしながら、免疫学的連鎖Ｇ−Ｄ−Ｌ−Ｇ−３−■にもとづく置換ネットにお ける抗体の試験は、連鎖ＧＤＬＧＳＩ（Ｅ４Ｓ。値は夫々０．４５および０、１ ６）を導入するよりも連鎖Ｇ−Ｄ−Ｇ−３−１が著るしく好ましいことを示した 。
決定されたミモトープと抗体に結合しているペプチドとの間には類似性がある。
このことは本発明の方法を広範囲に適用できる強力な証拠である。
実施例３ この実施例３は多数のカフマー標本の鎖長を８−カタマーよりも短（することが できることを示す。
下記一般式を有する４−カフマー標本を合成した。
？セチルーＮｌｌ−Ｘ−０２−０．−Ｘ−（固体支持体〕ここで略記号は実施例 １で用いたものと同様であり、合成方法も実施例１で用いた方法と同一である。
この４−カタマーを当該分野において良く知られている技術を用いてマツコラク ジラ・ミオグロビンに対して生じたモノクロナール抗体に対して試験した。
この抗体による多数の４−カフマー標本のＥＬＩＳＡ試験の結果を、第１図と同 様な方法で第５図に示す。
第５図から、下記の一般式を有するカタマー標本のみが アセチ／Ｉ、−Ｎ）Ｉ−Ｘ−Ｌ−Ａ−Ｘ−［固体支持体〕モノクロナール抗体と 反応することができることが明らかである。
前記実施例１に述べたようにして、更に下記一般式を有する多数の４−カタマー 標本を合成した。
アセチル−ＮＨ−０３−Ｌ−Ａ−Ｘ−（固体支持体〕および アセチル−ＮＨ−Ｘ−Ｌ−Ａ−０４−（固体支持体〕第４表にモノクロナール抗 体によるＥＬＩＳＡ系において試験をした最も活性的なカタマー標本をまとめた 。
第４表 アミノ末端延長カルボキシル末端延長 連鎖活性連鎖活性 ＾ｃ−Ｐ−Ｌ−Ａ−Ｘ−３ｓ１．８０Ａｃ−Ｘ−Ｌ−Ａ−Ｑ−３ｓ１．７３Ａｃ −Ａ−Ｌ−Ａ−Ｘ−Ｓｓ１．３０Ａｃ−Ｘ−Ｌ−Ａ−Ｒ−Ｓｓ１．５８Ａｃ−Ｆ −Ｌ−Ａ−Ｘ−Ｓｓ１．３３八ｃ−Ｘ−Ｌ−Ａ−Ｓ−Ｓｓ１．３９コントロール 連鎖 Ａｃ−Ｘ−Ｌ−Ａ−Ｘ−３ｓ１．００（Ｅｓｓｏ＝０．１７）Ａｃ−Ｘ−Ｌ−Ａ −Ｘ−Ｓｓ０．９４ 下記母体連鎖に基づくカタマー標本を合成して、実施例２に述べたような置換ネ ットを形成した。
アセチル−ＮＨ−Ｐ−Ｌ−八−Ｑ−（固体支持体〕これらのペプチドのモノクロ ナール抗体によるＥＬＩＳＡ試験の結果を第６図に示す。
第６図における２０の線の各群は、母体レスポンス（Ｅ４．。−２，６２，バッ クグラウンド０．２５）の平均に対して比較したレスポンス％を表わす。
第６図において、２０の線の群の各員は、他のアミノ酸によって置換された、下 に示したアミノ酸を有する。
線の順序はアミノ酸の単一文字記号のアルファベット順である。
２０の線の各群における太い線は、母体連鎖Ｐ−Ｌ−Ａ−Ｑを示す。この第６図 から、母体連鎖の少なくとも半分の活性を有するこのモノクロナール抗体に結合 しうるカタマー標本のためには、バリン、イソロイシン、ロイシン、アラニンま たはセリンによってプロリンを置換できること；ロイシンをフェニルアラニンの みで置換できること；アラニンを他のいづれかのアミノ酸で実質的に置換できる こと；およびグルタミン残基はアスパラギンによってのみ置換可能であることが 明らかである。
マツコラクジラ・ミオグロビン連鎖のすべての重複する４−カタマーのセットを 、実施例１において指定された位置について述べた方法を用いて合成した。これ らのカタマーをＥＬＩＳＡ試験によりモノクロナール抗体と反応させた。結果を 第７図に示す。各線はＥＬＩＳＡ試験において４５０ｎｍで読んだ発色を示す。
各線に番号を付した。、この結果、特定のカタマーのアミノ末端における残基は マツコラクジラ・ミオグロビン連鎖におけると同一数を有する。
第７図から、モノクロナール抗体と反応する唯一の４−カタマーは、マツコラク ジラ連鎖の８８〜９１残基から成ることが明白である。この連鎖はＰ−Ｌ−Ａ− Ｑである。明らかに、モノクロナール抗体はマツコラクジラ・ミオグロビンの特 定の決定因子を認めている。
下記一般式を有する一連の５−カタマーを合成して指定された連鎖に対する最上 の鎖延長を決定した。
アセチル−ＮＨ−Ｄｓ−Ｐ−Ｌ−Ａ−Ｑ−（固体支持体〕および アセチル−Ｎｔｌ−Ｐ−Ｌ−Ａ−Ｑ−Ｄａ−（固体支持体〕最上の結合性標本は 、 アセチル−Ｎｌｌ−に−Ｐ−Ｌ−Ａ−Ｑ−（固体支持体〕アセチル−ＮＨ−Ｐ− Ｌ−八−Ｑ−Ｙ−Ｃ固体支持体〕であった。
連鎖に−Ｐ−Ｌ−Ａ−Ｑは残基８７〜９１におけるマツコラクジラ・ミオグロビ ンの連鎖と同類であることに注目すべきである。更にこの実施例は本発明の技術 が適用可能であることを示している。
第２図 ＡＣＤＥＦＧＨＩＫＬＭＮＰＱＲ５ＴＶＷＹＡＣＤＥＦＧＨＩＫＬＭＮＰＱＲ５ ＴＶＷＹ第４図 ＡＢＤＥＦＧＨ［ＫＬＭＮＰＱＲ５ＴＶＷＹ第６図 第７図 国際調査報告 叩８４０２９８３０に４３６１／８４ＥＰ１３１６２７１Ｌ７０７４６ＡＵ２４ ９３１／８４

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １．対象とする抗体の特定のパラトープに対して相補性のあるエピトープのトポ ロジィー的当量であるモノマーの連鎖を検出または決定する方法であり、該方法 は下記の工程からなる： １．多数のカタマー標本を合成する；該カタマー標本は夫々、各カタマーにおけ る一つ以上の指定された位置における構成が知られており、他の位置における構 成が限定された多数の一連のモノマーから無作為に形成されている多数のカタマ ーから成る；および該多数のカタマー標本は指定された位置における構成が組織 的に変化して、限定されたモノマーの組みの構成モノマーを含む標本から成る； ２．該多数のカタマー標本を対象とする抗体と接触せしめる；そして ３．与えられた該抗体のパラトープに対するミモトープの部分的連鎖を示す、前 記多数のカタマー標本の夫々と該与えられた抗体との間の結合の存在の有無を検 出し、または決定する。 ２．更に下記の追加工程から成る請求の範囲第１項記載の方法： ４．請求の範囲第１項記載のようにして、更に多数のカタマー標本の夫々が、各 々のカタマーが指定位置を更に一つ以上有する更に多数のカタマー標本を合成す る； ５．請求の範囲第１項に定義された工程２および工程３を前記更に多数のカタマ ー標本に関して繰り返す。 ３．前記多数のカタマー標本の夫々が、一連のα−アミノ酸から形成される請求 の範囲第１項記載の方法。 ４．前記多数のカタマー標本の夫々が、多数の４−〜８−カタマーを含む請求の 範囲第３項記載の方法。 ５．前記多数のカタマー標本の夫々が固体支持体上に合成され、下記の一般式を 有する請求の範囲第１項記載の方法。 Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｄ２−Ｄ１−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−〔固体支持体〕、Ｙ−Ｘ−Ｘ−Ｄ２ −Ｘ−Ｄ１−Ｘ−Ｘ−Ｘ−〔固体支持体〕またはＹ−Ｘ−Ｄ２−Ｘ−Ｘ−Ｄ１− Ｘ−Ｘ−Ｘ−〔固体支持体〕。 ６．前記多数のカタマーの夫々が下記一般式を有する請求の範囲第５項記載の方 法。 アセチル−ＮＨ−Ｘ−Ｘ−Ｄ２−Ｄ１−Ｘ−Ｘ−Ｘ−Ｘ−〔固体支持体〕ここで Ｘはα−アミノ酸のセット数であり、かかる多数のカタマーにおいてＸ位置に存 在する各セット数はほぼ等モル量であり、Ｄ２およびＤ１はα−アミノ酸セット の指定された数である。
JP60503303A 1984-07-24 1985-07-23 ミモトープを検出または決定する方法 Expired - Lifetime JPH07119760B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AUPG618884 1984-07-24
AU6188/84 1984-07-24
PCT/AU1985/000165 WO1986000991A1 (en) 1984-07-24 1985-07-23 Method for determining mimotopes

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP7047615A Division JP2640438B2 (ja) 1984-07-24 1995-03-07 口蹄疫ビールスの抗原活性を有するカタマー

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS61502839A true JPS61502839A (ja) 1986-12-04
JPH07119760B2 JPH07119760B2 (ja) 1995-12-20

Family

ID=3770684

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP60503303A Expired - Lifetime JPH07119760B2 (ja) 1984-07-24 1985-07-23 ミモトープを検出または決定する方法
JP7047615A Expired - Lifetime JP2640438B2 (ja) 1984-07-24 1995-03-07 口蹄疫ビールスの抗原活性を有するカタマー
JP8301888A Expired - Fee Related JP2796962B2 (ja) 1984-07-24 1996-11-13 口蹄疫ビールスの抗原活性を有する組成物

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP7047615A Expired - Lifetime JP2640438B2 (ja) 1984-07-24 1995-03-07 口蹄疫ビールスの抗原活性を有するカタマー
JP8301888A Expired - Fee Related JP2796962B2 (ja) 1984-07-24 1996-11-13 口蹄疫ビールスの抗原活性を有する組成物

Country Status (10)

Country Link
US (2) US5194392A (ja)
EP (1) EP0190205B1 (ja)
JP (3) JPH07119760B2 (ja)
AT (1) ATE81722T1 (ja)
CA (1) CA1255586A (ja)
DE (1) DE3586772T2 (ja)
DK (1) DK164942C (ja)
MY (1) MY102885A (ja)
NO (1) NO166465C (ja)
WO (1) WO1986000991A1 (ja)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH03505254A (ja) * 1988-05-02 1991-11-14 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 特定の特性を有するペプチドの製造および選択の一般的な方法
JPH0772151A (ja) * 1987-10-13 1995-03-17 Terrapin Technol Inc 被分析物を特徴付ける方法
JP2002531809A (ja) * 1998-11-13 2002-09-24 ペプスカン システムズ ビー．ブイ． ミモトープシーケンスを決定するための方法

Families Citing this family (138)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ215865A (en) * 1985-04-22 1988-10-28 Commw Serum Lab Commission Method of determining the active site of a receptor-binding analogue
US5866363A (en) 1985-08-28 1999-02-02 Pieczenik; George Method and means for sorting and identifying biological information
WO1987001374A2 (en) * 1985-08-28 1987-03-12 George Pieczenik Method and means for sorting and identifying biological information
US5041381A (en) 1986-07-03 1991-08-20 Schering Corporation Monoclonal antibodies against human interleukin-4 and hybridomas producing the same
US6054438A (en) * 1987-01-07 2000-04-25 Imperial Cancer Research Technology Limited Nucleic acid fragments encoding portions of the core protein of the human mammary epithelial mucin
US5133866A (en) * 1988-03-24 1992-07-28 Terrapin Technologies, Inc. Method to identify analyte-bending ligands
US5217869A (en) * 1987-10-13 1993-06-08 Terrapin Technologies, Inc. Method to produce immunodiagnostic reagents
US5338659A (en) * 1991-04-02 1994-08-16 Terrapin Technologies, Inc. Method for determining analyte concentration by cross-reactivity profiling
US5599903A (en) * 1992-04-03 1997-02-04 Terrapin Technologies, Inc. Glutathione analogs and paralog panels comprising glutathione mimics
US5300425A (en) * 1987-10-13 1994-04-05 Terrapin Technologies, Inc. Method to produce immunodiagnostic reagents
GB8810400D0 (en) 1988-05-03 1988-06-08 Southern E Analysing polynucleotide sequences
US5340474A (en) * 1988-03-24 1994-08-23 Terrapin Technologies, Inc. Panels of analyte-binding ligands
US5409611A (en) * 1988-03-24 1995-04-25 Terrapin Technoogies, Inc. Method to identify analyte-binding ligands
US5225533A (en) * 1988-05-02 1993-07-06 The Regents Of The University Of California General method for producing and selecting peptides with specific properties
US5266684A (en) * 1988-05-02 1993-11-30 The Reagents Of The University Of California Peptide mixtures
US6054270A (en) * 1988-05-03 2000-04-25 Oxford Gene Technology Limited Analying polynucleotide sequences
US7811751B2 (en) 1988-05-03 2010-10-12 Oxford Gene Technology Limited Analysing polynucleotide sequences
US5700637A (en) * 1988-05-03 1997-12-23 Isis Innovation Limited Apparatus and method for analyzing polynucleotide sequences and method of generating oligonucleotide arrays
FR2631451A1 (fr) * 1988-05-13 1989-11-17 Inst Nat Sante Rech Med Procede de caracterisation de l'epitope intervenant dans une reaction antigene anticorps, kit ou necessaire pour la mise en oeuvre du procede
US5286789A (en) * 1989-05-26 1994-02-15 Applied Immune Sciences, Inc. Solid phase multiple peptide synthesis
US5143854A (en) * 1989-06-07 1992-09-01 Affymax Technologies N.V. Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof
US5547839A (en) 1989-06-07 1996-08-20 Affymax Technologies N.V. Sequencing of surface immobilized polymers utilizing microflourescence detection
US5527681A (en) * 1989-06-07 1996-06-18 Affymax Technologies N.V. Immobilized molecular synthesis of systematically substituted compounds
US5959087A (en) * 1989-08-07 1999-09-28 Peptide Technology, Ltd. Tumour necrosis factor binding ligands
US20030225254A1 (en) * 1989-08-07 2003-12-04 Rathjen Deborah Ann Tumour necrosis factor binding ligands
DK0486526T3 (da) * 1989-08-07 1996-06-24 Peptide Technology Ltd Bindingsligander for tumornekrosefaktor
US5498538A (en) * 1990-02-15 1996-03-12 The University Of North Carolina At Chapel Hill Totally synthetic affinity reagents
US5747334A (en) * 1990-02-15 1998-05-05 The University Of North Carolina At Chapel Hill Random peptide library
US5182366A (en) * 1990-05-15 1993-01-26 Huebner Verena D Controlled synthesis of peptide mixtures using mixed resins
US5811387A (en) * 1990-05-15 1998-09-22 Chiron Corporation Peptoid mixtures
US5252296A (en) * 1990-05-15 1993-10-12 Chiron Corporation Method and apparatus for biopolymer synthesis
US5650489A (en) * 1990-07-02 1997-07-22 The Arizona Board Of Regents Random bio-oligomer library, a method of synthesis thereof, and a method of use thereof
US6197529B1 (en) 1990-11-21 2001-03-06 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Linear substituted oligoalkyleneimine libraries
EP0558671B1 (en) * 1990-11-21 1999-01-27 Iterex Pharmaceuticals Ltd. Partnership Synthesis of equimolar multiple oligomer mixtures, especially of oligopeptide mixtures
US5786336A (en) * 1991-04-29 1998-07-28 Terrapin Technologies, Inc. Target-selective protocols based on mimics
CA2107914C (en) * 1991-04-29 2007-04-03 Lawrence M. Kauvar Method to profile and treat abnormal cells
WO1992019768A1 (en) * 1991-05-07 1992-11-12 Oxford Glycosystems Limited Sequencing of oligosaccharides
TW304957B (ja) * 1991-06-18 1997-05-11 Lilly Co Eli
US5747253A (en) * 1991-08-23 1998-05-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Combinatorial oligomer immunoabsorbant screening assay for transcription factors and other biomolecule binding
US5698391A (en) * 1991-08-23 1997-12-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for synthetic unrandomization of oligomer fragments
EP0673435A1 (en) * 1991-08-23 1995-09-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic unrandomization of oligomer fragments
US6943034B1 (en) 1991-11-22 2005-09-13 Affymetrix, Inc. Combinatorial strategies for polymer synthesis
US5955432A (en) * 1992-04-03 1999-09-21 Terrapin Technologies, Inc. Metabolic effects of certain glutathione analogs
US5541061A (en) * 1992-04-29 1996-07-30 Affymax Technologies N.V. Methods for screening factorial chemical libraries
US5591646A (en) * 1992-09-02 1997-01-07 Arris Pharmaceutical Method and apparatus for peptide synthesis and screening
US6582902B1 (en) * 1992-09-30 2003-06-24 Jack D. Keene Method for deriving epitopes
US5877278A (en) * 1992-09-24 1999-03-02 Chiron Corporation Synthesis of N-substituted oligomers
US5721099A (en) * 1992-10-01 1998-02-24 Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
US6503759B1 (en) 1992-10-01 2003-01-07 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
US5565324A (en) * 1992-10-01 1996-10-15 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
US5565325A (en) * 1992-10-30 1996-10-15 Bristol-Myers Squibb Company Iterative methods for screening peptide libraries
US5807683A (en) * 1992-11-19 1998-09-15 Combichem, Inc. Combinatorial libraries and methods for their use
DE4308410A1 (de) * 1993-03-12 1994-09-15 Schering Ag Verfahren zur Synthese und Selektionierung von Sequenzen aus kovalent verbundenen Bausteinen
WO1994020521A1 (de) * 1993-03-12 1994-09-15 Jerini Bio Chemicals Gmbh Verfahren zur synthese und selektionierung von sequenzen aus kovalent verbundenen bausteinen
US6864048B2 (en) * 1993-04-28 2005-03-08 Affymetrix, Inc. Factorial chemical libraries
IT1270939B (it) * 1993-05-11 1997-05-26 Angeletti P Ist Richerche Bio Procedimento per la preparazione di immunogeni e reagenti diagnostici,e immunogeni e reagenti diagnostici cosi' ottenibili.
US5367053A (en) * 1993-05-19 1994-11-22 Houghten Pharmaceuticals, Inc. Opioid peptide inhibitors
US5846731A (en) * 1993-06-17 1998-12-08 Torry Pines Institute For Molecular Studies Peralkylated oligopeptide mixtures
US6008058A (en) * 1993-06-18 1999-12-28 University Of Louisville Cyclic peptide mixtures via side chain or backbone attachment and solid phase synthesis
US5380668A (en) * 1993-07-06 1995-01-10 University Of Utah Research Foundation Compounds having the antigenicity of hCG
CN1525171A (zh) * 1993-10-01 2004-09-01 ŦԼ�и��ױ��Ǵ�ѧ���� 用标示物编码的多元组合化学库
US5908919A (en) * 1993-10-01 1999-06-01 Terrapin Technologies Urethane mediated, GST specific molecular release systems
CA2173990A1 (en) * 1993-10-12 1995-04-20 Narasinga Rao A library of glyco-peptides useful for identification of cell adhesion inhibitors
WO1995013538A1 (en) * 1993-11-12 1995-05-18 Operon Technologies, Inc. Methods of producing and screening complex chemical libraries
US5492807A (en) * 1993-11-19 1996-02-20 Santi; Daniel V. Method of obtaining diagnostic reagents, assays and therapeutics based on clinical manifestations of a disease
US6287787B1 (en) 1993-11-24 2001-09-11 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Dimeric oligopeptide mixture sets
CA2180844A1 (en) * 1994-01-13 1995-07-20 W. Clark Still Synthetic receptors, libraries and uses thereof
US6660276B1 (en) 1994-02-16 2003-12-09 The University Of Virginia Patent Foundation Peptides recognized by melanoma-specific cytotoxic lymphocytes, and uses therefor
US6936477B2 (en) * 1994-04-13 2005-08-30 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags
US5738996A (en) * 1994-06-15 1998-04-14 Pence, Inc. Combinational library composition and method
US5824483A (en) * 1994-05-18 1998-10-20 Pence Inc. Conformationally-restricted combinatiorial library composition and method
US5846841A (en) * 1994-05-20 1998-12-08 Selectide Corporation Motif Libraries
US5582997A (en) * 1994-08-24 1996-12-10 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Lysine/leucine polypeptides, mixture sets and libraries thereof
US5645996A (en) * 1994-08-24 1997-07-08 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Melittin-related polypeptides, mixture sets and libraries thereof
US7597886B2 (en) * 1994-11-07 2009-10-06 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US7820798B2 (en) * 1994-11-07 2010-10-26 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US5747458A (en) * 1995-06-07 1998-05-05 Chiron Corporation Urokinase receptor ligands
US5958792A (en) * 1995-06-07 1999-09-28 Chiron Corporation Combinatorial libraries of substrate-bound cyclic organic compounds
US5763263A (en) * 1995-11-27 1998-06-09 Dehlinger; Peter J. Method and apparatus for producing position addressable combinatorial libraries
WO1997022617A1 (en) * 1995-12-18 1997-06-26 Praecis Pharmaceuticals Incorporated Methods for identifying compounds that bind to a target
GB9609262D0 (en) * 1996-05-02 1996-07-03 Isis Innovation Peptide library and method
EP2025682A3 (en) 1996-08-16 2009-06-17 Human Genome Sciences, Inc. Human endokine alpha
DE69637856D1 (en) 1996-08-30 2009-04-16 Human Genome Sciences Inc Interleukin-19.
WO1998014569A1 (en) 1996-10-02 1998-04-09 Bloch Donald B Leukocyte-specific protein and gene, and methods of use thereof
CN1539970A (zh) 1996-10-25 2004-10-27 �Ϻ���ͨ��ѧ 嗜中性白细胞因子α
US6025371A (en) * 1996-10-28 2000-02-15 Versicor, Inc. Solid phase and combinatorial library syntheses of fused 2,4-pyrimidinediones
US6413724B1 (en) 1996-10-28 2002-07-02 Versicor, Inc. Solid phase and combinatorial library syntheses of fused 2,4-pyrimidinediones
EP0941335A2 (en) 1996-10-31 1999-09-15 Human Genome Sciences Streptococcus pneumoniae polynucleotides and sequences
US6544523B1 (en) * 1996-11-13 2003-04-08 Chiron Corporation Mutant forms of Fas ligand and uses thereof
US6083763A (en) * 1996-12-31 2000-07-04 Genometrix Inc. Multiplexed molecular analysis apparatus and method
EP1015488B1 (en) 1997-09-17 2009-09-09 Human Genome Sciences, Inc. Interleukin-17 receptor-like protein
ATE384732T1 (de) 1997-11-03 2008-02-15 Human Genome Sciences Inc Vegi, ein inhibitor der angiogenese und des tumorwachstums
AU1417999A (en) * 1997-11-21 1999-06-15 Human Genome Sciences, Inc. Chemokine alpha-5
US20030096232A1 (en) 1997-12-19 2003-05-22 Kris Richard M. High throughput assay system
CN1288462A (zh) 1998-01-23 2001-03-21 法玛西雅厄普约翰美国公司 噁唑烷酮组合库、组合物和制备方法
US7002020B1 (en) 1998-01-23 2006-02-21 Pharmacia & Upjohn Company Oxazolidinone combinatorial libraries, compositions and methods of preparation
US6562844B2 (en) 1998-01-23 2003-05-13 Pharmacia & Upjohn Company Oxazolidinone combinatorial libraries, compositions and methods of preparation
JP2002506625A (ja) 1998-03-19 2002-03-05 ヒューマン ジノーム サイエンシーズ， インコーポレイテッド サイトカインレセプター共通γ鎖様
WO2000050620A2 (en) 1999-02-26 2000-08-31 Human Genome Sciences, Inc. Human endokine alpha and methods of use
US9289487B2 (en) * 1999-09-14 2016-03-22 Antigen Express, Inc. II-key/antigenic epitope hybrid peptide vaccines
US6432409B1 (en) * 1999-09-14 2002-08-13 Antigen Express, Inc. Hybrid peptides modulate the immune response
US6545032B1 (en) 1999-09-17 2003-04-08 Torrey Pines Institute For Molecular Studies Synthesis of [3,5,7]-H-imidazo[1,5-a] imidazol-2(3H)-one compounds
CA2392103A1 (en) 1999-11-18 2001-05-25 Chiron Corporation Human fgf-21 gene and gene expression products
WO2001066595A2 (en) 2000-03-08 2001-09-13 Chiron Corporation Human fgf-23 gene and gene expression products
US20020110843A1 (en) * 2000-05-12 2002-08-15 Dumas David P. Compositions and methods for epitope mapping
US6759510B1 (en) 2000-06-30 2004-07-06 Becton, Dickinson And Company Peptides for use in culture media
AUPR279101A0 (en) * 2001-01-30 2001-02-22 Cytopia Pty Ltd Protein kinase signalling
EP2316276A3 (en) 2001-02-23 2011-08-03 DSM IP Assets B.V. Genes encoding proteolytic enzymes from aspargilli
ATE470676T1 (de) 2001-04-13 2010-06-15 Human Genome Sciences Inc Anti-vegf-2 antikörper
US20030013208A1 (en) * 2001-07-13 2003-01-16 Milagen, Inc. Information enhanced antibody arrays
EP1482963A4 (en) 2002-03-08 2010-06-09 Univ Texas CONTROLLED MODULATION OF LATERAL CHAIN LENGTH OF AMINO ACIDS OF ANTIGENS PEPTIDES
EA008607B1 (ru) * 2002-05-21 2007-06-29 ДСМ Ай Пи ЭССЕТС Б.В. Полинуклеотид, кодирующий фосфолипазу aspergillus niger, фосфолипаза aspergillus niger и способы получения и применения полинуклеотида и фосфолипазы
US7550280B2 (en) * 2002-08-19 2009-06-23 Dsm Ip Assets B.V. Lipases and uses thereof
US20040136992A1 (en) 2002-08-28 2004-07-15 Burton Paul B. J. Compositions and method for treating cardiovascular disease
JP2006515744A (ja) 2002-09-17 2006-06-08 アンテイジエン・エクスプレス・インコーポレーテツド Ｉｉ−Ｋｅｙ／抗原性エピトープハイブリッドペプチドワクチン
US7179645B2 (en) * 2002-09-24 2007-02-20 Antigen Express, Inc. Ii-Key/antigenic epitope hybrid peptide vaccines
US6910785B2 (en) * 2003-01-22 2005-06-28 Cooper Technologies Company Industrial luminaire with prismatic refractor
US20040185499A1 (en) * 2003-03-20 2004-09-23 Jolley Michael E. Method of epitope scanning using fluorescence polarization
MXPA06000974A (es) 2003-07-25 2006-08-31 Amgen Inc Antagonistas y agonistas de ldcam y metodos para su uso.
US7396940B2 (en) 2003-10-23 2008-07-08 Hoffmann-La Roche Inc. Combinatorial library of 3-aryl-1H-indole-2-carboxylic acid
US20050095648A1 (en) * 2003-10-30 2005-05-05 Mario Geysen Method for designing linear epitopes and algorithm therefor and polypeptide epitopes
CA2574654C (en) 2004-07-22 2014-02-18 Five Prime Therapeutics, Inc. Compositions and methods of use for mgd-csf in disease treatment
US8945573B2 (en) 2005-09-08 2015-02-03 The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. Targeted identification of immunogenic peptides
WO2009051846A2 (en) 2007-10-18 2009-04-23 Cell Signaling Technology, Inc. Translocation and mutant ros kinase in human non-small cell lung carcinoma
EP2671954B1 (en) 2006-01-20 2018-05-16 Cell Signaling Technology, Inc. Translocation and mutant ROS kinase in human non-small cell lung carcinoma
US20120208824A1 (en) 2006-01-20 2012-08-16 Cell Signaling Technology, Inc. ROS Kinase in Lung Cancer
HUE035732T2 (en) 2006-04-14 2018-05-28 Cell Signaling Technology Inc Gene defects and mutant ALK kinase in human solid tumors
WO2008100596A2 (en) * 2007-02-15 2008-08-21 Burnham Institute For Medical Research Biomarkers of neurodegenerative disease
WO2008116092A1 (en) 2007-03-20 2008-09-25 Brandeis University Compositions and methods for the diagnosis, treatment, and prevention of amyotrophic lateral sclerosis and related neurological diseases
EP2185688A4 (en) 2007-08-06 2010-08-25 Burnham Inst Medical Research ZNF206: NEW REGULATOR FOR AUTOMATIC RENEWAL AND PLURIPOTENCE OF EMBRYONIC STEM CELLS
EP2307456B1 (en) 2008-06-27 2014-10-15 Amgen Inc. Ang-2 inhibition to treat multiple sclerosis
WO2010088393A2 (en) * 2009-01-28 2010-08-05 Antigen Express, Inc. Li-kay hybrid peptides that modulate the immune response to influenza
CA2744236C (en) 2009-02-12 2021-03-16 Cell Signaling Technology, Inc. Mutant ros expression in human cancer
EP2470660A4 (en) 2009-08-27 2013-03-20 Pastoral Greenhouse Gas Res Ltd COMPLETE GENOMIC SEQUENCE OF METHANOBREVIBACTER RUMINANTIUM METHANOGEN
US20120101108A1 (en) 2010-08-06 2012-04-26 Cell Signaling Technology, Inc. Anaplastic Lymphoma Kinase In Kidney Cancer
ES2655842T3 (es) 2012-04-18 2018-02-21 Cell Signaling Technology, Inc. EGFR y ROS1 en el cáncer
US10155987B2 (en) 2012-06-12 2018-12-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods of predicting resistance to JAK inhibitor therapy
KR102672548B1 (ko) * 2018-03-16 2024-06-04 조에티스 서비시즈 엘엘씨 인터루킨-31에 대한 펩티드 백신

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3949064A (en) * 1973-10-26 1976-04-06 Baxter Laboratories, Inc. Method of detecting antigens or antibodies
US4415491A (en) * 1980-01-14 1983-11-15 The Regents Of The University Of California Synthetic vaccine peptide epitomes of hepatitis B surface antigen
US4554101A (en) * 1981-01-09 1985-11-19 New York Blood Center, Inc. Identification and preparation of epitopes on antigens and allergens on the basis of hydrophilicity
US4591552A (en) * 1982-09-29 1986-05-27 New York Blood Center, Inc. Detection of hepatitis B surface antigen (or antibody to same) with labeled synthetic peptide
JP2598893B2 (ja) * 1983-01-21 1997-04-09 プリマス，フレデリック ジェームス 特異性ｃｅａファミリー抗原に対し特異性の抗体を使用するイム／アッセイ
AU573574B2 (en) * 1983-03-08 1988-06-16 Chiron Mimotopes Pty Ltd Immunogenic deteminants of foot and mouth disease virus
NZ207394A (en) * 1983-03-08 1987-03-06 Commw Serum Lab Commission Detecting or determining sequence of amino acids
US4578217A (en) * 1983-05-12 1986-03-25 New York Blood Center, Inc. Synthetic antigenic peptide derived from hepatitis B surface antigen
US4493795A (en) * 1983-10-17 1985-01-15 Syntex (U.S.A.) Inc. Synthetic peptide sequences useful in biological and pharmaceutical applications and methods of manufacture
JPH0720884B2 (ja) * 1983-11-07 1995-03-08 ザ・ウイスタ−・インスティテュ−ト 抗イデイオタイプ抗体によって誘発される、腫瘍およびウイルスに対する免疫応答
EP0291636A1 (en) * 1983-11-07 1988-11-23 The Wistar Institute Immune response to viruses induced by anti-idiotype antibodies
US5266684A (en) * 1988-05-02 1993-11-30 The Reagents Of The University Of California Peptide mixtures

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0772151A (ja) * 1987-10-13 1995-03-17 Terrapin Technol Inc 被分析物を特徴付ける方法
JPH03505254A (ja) * 1988-05-02 1991-11-14 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 特定の特性を有するペプチドの製造および選択の一般的な方法
JP2002531809A (ja) * 1998-11-13 2002-09-24 ペプスカン システムズ ビー．ブイ． ミモトープシーケンスを決定するための方法

Also Published As

Publication number Publication date
DK164942C (da) 1993-02-01
WO1986000991A1 (en) 1986-02-13
ATE81722T1 (de) 1992-11-15
EP0190205A4 (en) 1988-01-28
MY102885A (en) 1993-03-31
EP0190205B1 (en) 1992-10-21
US5998577A (en) 1999-12-07
JP2796962B2 (ja) 1998-09-10
JPH09183796A (ja) 1997-07-15
DE3586772T2 (de) 1993-03-04
NO166465B (no) 1991-04-15
JPH07260783A (ja) 1995-10-13
JPH07119760B2 (ja) 1995-12-20
DE3586772D1 (de) 1992-11-26
US5194392A (en) 1993-03-16
DK164942B (da) 1992-09-14
JP2640438B2 (ja) 1997-08-13
CA1255586A (en) 1989-06-13
NO166465C (no) 1991-07-24
DK136086A (da) 1986-03-24
NO861104L (no) 1986-05-16
EP0190205A1 (en) 1986-08-13
DK136086D0 (da) 1986-03-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPS61502839A (ja) ミモトープを検出または決定する方法
EP0589004B1 (en) Process for the determination of peptides corresponding to immunologically important epitopes of hcv
Moudallal et al. A major part of the polypeptide chain of tobacco mosaic virus protein is antigenic
CA1220420A (en) Method of determining antigenically active amino acid sequences
US5539084A (en) Method for the use and synthesis of peptides
CA1247080A (en) Antigenically active amino acid sequences
Briand et al. Application and limitations of the multiple antigen peptide (MAP) system in the production and evaluation of anti-peptide and anti-protein antibodies
DK165197B (da) Fremgangsmaade til bestemmelse af mimotoper
JPH05503722A (ja) Ｃ型肝炎ウイルスに対する抗体を検出するための合成抗原
Rodda et al. The antibody response to myoglobin—I. Systematic synthesis of myoglobin peptides reveals location and substructure of species-dependent continuous antigenic determinants
KR930004055B1 (ko) 펩티드 및 그의 용도
EP0326490B2 (en) Synthetic peptides and mixtures thereof for detecting HIV antibodies
JP4318458B2 (ja) ｐａｎ特異的モノクローナル抗体
Schwab et al. Mapping antibody binding sites on cytochrome c with synthetic peptides: are results representative of the antigenic structure of proteins?
DE69106998T2 (de) Mit Antikörper gegen Hepatitis-Virus non-A, non-B immunochemisch reagierende Peptide.
Regenmortel et al. Recognition of peptides by antibodies and investigations of affinity using biosensor technology
KR920701236A (ko) 면역분석법에 이용되는 시스테인 티올-보호 펩티드
JP4510292B2 (ja) ミモトープシーケンスを決定するための方法
JPH10259197A (ja) ペプチド混合物の製造方法
JP2004340722A (ja) ポリアミノ酸担体
US6210874B1 (en) Synthetic peptides and mixtures thereof for detecting HIV antibodies
JPH04164097A (ja) ペプチドおよびその用途
JPH03284696A (ja) ペプチドおよびその用途
RU2304146C2 (ru) Способ стабилизации петлеобразной структуры синтетических пептидов с помощью n- и c-концевых модификаций
JPH03287069A (ja) 測定試薬

Legal Events

Date Code Title Description
R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

EXPY Cancellation because of completion of term