KR920701236A - 면역분석법에 이용되는 시스테인 티올-보호 펩티드 - Google Patents
면역분석법에 이용되는 시스테인 티올-보호 펩티드Info
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
Claims (47)
- 천연 단백질에 대한 항체와 면역반응성인 펩티드 조성물에 있어서, 펩티드가 6 내지 50개의 아미노산으로 구성된 아미노산 배열로 되고, 이 배열에는 비-Cys 아미노산 잔기 2개 이상 및 20개 미만의 사이를 두고 서로 떨어져 있는 2개의 Cys잔기가 포함되며, 여기서 Cys잔기의 티올기는 화학적 가역 수단에 의해 가역적으로 보호되어 있는 것이 특징인 천연 단백질에 대한 항체와 면역반응성에 펩티드 조성물.
- 제1항에 있어서, Cys잔기가 에틸카르바모일, 아세트아미도메틸, 3-니트로-2-피리딘술피닐 또는 디페닐-4-피리딜메틸에 의해 산화로부터 보호된 것이 특징인 펩티드.
- 제2항에 있어서, Cys잔기가 에틸카르바모일에 의해 산화로부터 보호된 것이 특징인 펩티드.
- 제1항에 있어서, N-말단에 산화로부터 보호되지 않은 Cys잔기가 추가로 함유된 것이 특징인 펩티드.
- 제4항에 있어서, N-말단 아미노산이 Cys-Gly-Gly로 된 것임이 특징인 펩티드.
- 제4항에 있어서, C-말단 아미노산이 아미드화된 것이 특징인 펩티드.
- 제1항에 있어서, Cys잔기들이 약 4개 내지 6개의 비-Cys 잔기만큼 서로 떨어져 있는 것이 특징인 펩티드.
- 제1항에 있어서, 레트로바이러스의 트랜스멤브레인 단백질에 대한 항체와 면역반응성인 것이 특징인 펩티드.
- 제8항에 있어서, 레트로바이러스 단백질 HIV-1 gp 41이고 펩티드는 다음의 아미노산 배열중의 7개 이상의 연속적인 아미노산으로 이루어진 것이 특징인 펩티.Arg-Ile-Leu-Ala-Val-Glu-Arg-Tyr-Leu-Lys-Asp-Gln-Gln-Leu-Leu-Gly-Ile-Trp-Gly-Cys-Ser-Gly-Lys-Leu-Ile-Cys.
- 제9항에 있어서, N-말단이 면역반응성을 증진시키기 위해 첨가된 아미노산으로 구성되고, 여기서 상기 부가된 아미노산중 1개 이상은 산화로부터 보호되지 않은 Cys 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제10항에 있어서, 산화로부터 보호되지 않는 Cys 잔기가 N-말단 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제11항에 있어서, N-말단 배열이 Cys-Gly-Gly인 것이 특징인 펩티드.
- 제11항에 있어서, C-말단 아미노산이 아미드화된 것이 특징인 펩티드.
- 제8항에 있어서, 레트로바이러스 단백질이 HIV-2 gp 36이고 펩티드는 다음의 아미노산 배열중의 7개 이상의 연속적인 아미노산으로 이루어진 것이 특징인 펩티드.Arg-Val-Thr-Ala-Ile-Glu-Lys-Tyr-Leu-Gln-Asp-Gln-Ala-Arg-Leu-Asn-Ser-Trp-Gly-Cys-Ala-Phe-Arg-Gln-Val-Cys.
- 제14항에 있어서, N-말단이 면역반응성을 증진시키기 위해 첨가된 아미노산으로 구성되고, 여기서 상기 부가된 아미노산중 1개 이상은 산화로부터 보호되지 않은 Cys 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제15항에 있어서, 산화로부터 보호되지 않는 Cys 잔기가 N-말단 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제16항에 있어서, N-말단 배열이 Cys-Gly-Gly인 것이 특징인 펩티드.
- 제16항에 있어서, C-말단 아미노산이 아미드화된 것이 특징인 펩티드.
- 제8항에 있어서, 레트로바이러스 트랜스멤브레인 단백질이 HTLV-Ⅰ gp 21이고 펩티드는 다음의 아미노산 배열중의 7개 이상의 연속적인 아미노산으로 이루어진 것이 특징인 펩티드.Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Trp-Glu-Gln-Gly-Gly-Leu-Cys-Lys-Ala-Leu-Gln-Glu-Gln-Cys.
- 제19항에 있어서, N-말단이 면역반응성을 증진시키기 위해 첨가된 아미노산으로 구성되고, 여기서 상기 부가된 아미노산중 1개 이상은 산화로부터 보호되지 않은 Cys 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제20항에 있어서, 산화로부터 보호되지 않은 Cys 잔기가 N-말단 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제21항에 있어서, N-말단 배열이 Cys-Gly-Gly인 것이 특징인 펩티드.
- 제21항에 있어서, C-말단 아미노산이 아미드화된 것이 특징인 펩티드.
- 제8항에 있어서, 레트로바이러스 단백질이 HTLV-Ⅱ gp 21이고 펩티드는 다음의 아미노산 배열중의 7개 이상의 연속적인 아미노산으로 이루어진 것임이 특징인 펩티드.Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Trp-Glu-Gln-Gly-Gly-Leu-Cys-Lys-Ala-Ile-Gln-Glu-Gln-Cys.
- 제24항에 있어서, N-말단이 면역반응성을 증진시키기 위해 첨가된 아미노산으로 구성되고, 여기서 상기 부가된 아미노산중 1개 이상은 산화로부터 보호되지 않은 Cys 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제25항에 있어서, 산화로부터 보호되지 않은 Cys 잔기가 N-말단 잔기인 것이 특징인 펩티드.
- 제26항에 있어서, N-말단 배열이 Cys-Gly-Gly인 것이 특징인 펩티드.
- 제26항에 있어서, C-말단 아미노산이 아미드화된 것이 특징인 펩티드.
- (a) 6 내지 50개의 아미노산 배열로 이루어지고 비-Cys 아미노산 잔기 약 2개이상 및 20개 미만의 사이를 두고 서로 떨어져 있는 2개의 Cys잔기를 포함하는 펩티드를 합성하고, (b) 펩티드중에 코드된 시스페인의 티올기를 화학적 가역수단에 의해 보호하여 보호된 펩티드 조성물을 만들고, (c) 고상에 상기 보호된 펩티드 조성물을 고정시킨다음, (d) 고정된 펩티드 조성물로부터 화학적 가역 보호수단을 제거하고, (e) 디술파이드 결합 형성에 적합한 조건하에서 상기 고정된 펩티드 조성물을 인큐베이션 시키는 단계로 이루어짐을 특징으로 하는, 단백질에 대한 항체의 면역학적 검색 및/또는 정량을 위한 펩티드 코팅 고상의 제조방법.
- 제29항에 있어서, 펩티드 배열 합성전에 시스테인 티올기를 보호시키는 것이 특징인 펩티드 코팅고상의 제조방법.
- 제29항에 있어서, 화학적 가역 보호수단이 에틸카르바모일, 아세트아미도메틸, 3-니트로-2-피리딘술피닐 또는 디페닐-4-피리딜메틸인 것이 특징인 펩티드 코팅 고상의 제조방법.
- 제31항에 있어서, 화학적 가역 보호수단이 에틸카르바모일인 것이 특징인 펩티드 코팅 고상의 제조방법.
- 제29항에 있어서, 흡착에 의해 펩티드를 고정시키는 것이 특징인 펩티드 코팅 고상의 제조방법.
- 제29항에 있어서, 공유적 부착에 의해 펩티드를 고상에 고정시키는 것이 특징인 펩티드 코팅 고상의 제조방법.
- 제29항에 있어서, 고상이 라텍스, 실리카, 셀룰로스, 플루오로카본폴리머, 나일론, 폴리아크릴아미드 또는 폴리스티렌인 것이 특징인 펩티드 코팅 고상의 제조방법.
- 제29항에 있어서, 고상이 실리카, 셀룰로스, 폴리아크릴아미드 또는 폴리스티렌의 라텍스인 것이 특징인 펩티드 코팅 고상의 제조방법.
- 제35항에 있어서, 고상이 폴리스티렌의 라텍스인 것이 특징인 펩티트 코팅 고상의 제조방법.
- 제29항에 있어서, 펩티드 배열이 다음과 같은 것이 특징인 펩티드 코팅 고상의 제조방법.Y-Arg-Ile-Leu-Ala-Val-Glu-Arg-Tyr-Leu-Lys-Asp-Gln-Gln-Leu-Leu-Gly-Ile-Trp-Gly-Cys*-Ser-Gly-Lys-Leu-Ile-Cys*-X,Y-Arg-Val-Thr-Ala-Ile-Glu-Lys-Tyr-Leu-Gln-Asp-Gln-Ala-Arg-Leu-Asn-Ser-Trp-Gly-Cys*-Ala-Phe-Arg-Gln-Val-Cys*-X,Y-Gln-Asp-Gln-Ala-Arg-Leu-Asn-Ser-Trp-Gly-Cys*-Ala-Phe-Arg-Gln-Val-Cys*-X,Y-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Trp-Glu-Gln-Gly-Gly-Leu-Cys*-Lys-Als-Leu-Gln-Glu-Gln-Cys*-X, 또는Y-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Trp-Glu-Gln-Gly-Gly-Leu-Cys*-Lys-Ala-Leu-Gln-Glu-Gln-Cys*-X,상기 중 X는 OH 또는 NH2이고, Y는 반응성을 증진시키기 위해 첨가되는 아미노산들이며, Cys*는 화학적 가역수단에 의해 보호된 티올기를 포함한다.
- (a) 다음의 아미노산 배열로 이루어진 펩티드를 한가지이상 함유하는 조성물을 고정화에 적합한 조건하에서 고상과 접촉시키고,Y-Arg-Ile-Leu-Ala-Val-Glu-Arg-Tyr-Leu-Lys-Asp-Gln-Gln-Leu-Leu-Gly-Ile-Trp-Gly-Cys*-Ser-Gly-Lys-Leu-Ile-Cys*-X,Y-Arg-Val-Thr-Ala-Ile-Glu-Lys-Tyr-Leu-Gln-Asp-Gln-Ala-Arg-Leu-Asn-Ser-Trp-Gly-Cys*-Ala-Phe-Arg-Gln-Val-Cys*-X,Y-Gln-Asp-Gln-Ala-Arg-Leu-Asn-Ser-Trp-Gly-Cys*-Ala-Phe-Arg-Gln-Val-Cys*-X,Y-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Trp-Glu-Gln-Gly-Gly-Leu-Cys*-Lys-Als-Leu-Gln-Glu-Gln-Cys*-X, 또는Y-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Trp-Glu-Gln-Gly-Gly-Leu-Cys*-Lys-Ala-Leu-Gln-Glu-Gln-Cys*-X,상기 중 X는 OH 또는 NH2이고, Y는 펩티드의 반응성을 증진시키기 위해 첨가되는 아미노산들이며, Cys*는 화학적 가역수단에 의해 보호된 티올기를 포함하는 시스테인 잔기임), (b) 고정된 펩티드의 시스테인 티올기로부터 화학적 가역 보호수단을 제거한 다음, (c) 디술파이드 결합 형성에 적합한 조건하에서 상기 고정된 펩티드를 정치시키고, (d) 면역특이적 결합을 허용하는 조건하에서 체액과 상기 고정된 펩티드를 접촉시킴으로써 반응 혼합물을 생성시킨 다음, (e) 고정된 펩티드와 체액의 항체성분 사이에 면역특이적 결합이 일어났는지를 검색(여기서 면역특이적 결합이 일어난 것으로 검색되면 체액중에 HIV바이러스의 항원 또는 HIV 바이어스에 대한 항체의 존재여부를 결합하는 방법.
- 제39항에 있어서, (a) 면역반응 혼합물 중에 생성된 반응 생성물로 부터 비결합 성분을 제거하고, (b) 검색가능한 시그널을 제공하는 표지가 붙어있고, 반응 생성물의 성분에 면역특이적으로 결합할 수 있는, 표지된 항체를 상기 면역반응 혼합물에 첨가한 다음, (c) 표지된 항체가 반응 생성물에 결합되었는지를 검색하는 단계에 의해 면역특이적 결합을 검색하는 것이 특징인 방법.
- 제40항에 있어서, 비결합 성분의 제거 단계가 여과에 의한 것이 특징인 방법.
- 제40항에 있어서, 표지를 형광단, 효소, 발광화합물, 방사능동위체 및 입자중에서 선택하는 것이 특징인 방법.
- 제42항에 있어서, 표지가 효소기질을 첨가함으로써 검색가능한 효소인 것이 특징인 방법.
- 제39항에 있어서, 고상이 라텍스, 실리카, 셀룰로스, 플루오로카본 폴리머, 나일론, 폴리아크릴아미드 및 폴리스티렌 중에서 선택된 것이 특징인 방법.
- 제44항에 있어서, 고상이 폴리아크릴아미드, 폴리스티렌, 실리카 및 셀룰로스의 라텍스 중에서 선택된 것이 특징인 방법.
- 제45항에 있어서, 고상이 폴리스티렌의 라텍스인 것이 특징인 방법.
- (a) 화학적 가역수단에 의해 보호된 시스테인 티올기가 혼입된 펩티드 조성물을 형성함으로써 보호된 펩티드 조성물을 만들고, (b) 분자내 이중결합 형성에 적합한 조건하에서 상기 보호된 펩티드 조성물로부터 화학적 가역 보호수단을 제거한 다음, (c) 상기 펩티드 조성물을 고상에 고정시켜 항원 코팅 고상을 제조하는 단계로 이루어짐을 특징으로 하는, HIV 바이러스에 대한 항체의 면역학적 검색 및/또는 정량을 위한 항원 코팅 고상의 제조방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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