JPS5890600A - 新規なハプテンステロイドの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、次式■ は水素原子又は億基を表わし、凰、は水素原子を表わし
ｏ　ｎ、は−ＮＺ−（ＯＨ，）。−００，Ｉｆ基（２は
酸素原子又は−ＮＨＯＯＮＨ−基を表わし、Ｃは１〜８
の閣の整数である）を表わす〕 の新規なハプテンステロイドの製造法を目的とする。

基−（ＯＲ，）。−００，Ｈは、好ましくは、２〜５備
の炭素原子な含有する脂肪族カルボン酸１例えば酢酸、
プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸又は吉草酸の残基を表わ
す。

本発明は、Ｒ，が水素原子を表わし、Ｒ１が嗜Ｚ　−（
ＯＭｍ　）。−００，Ｈ基を表わす式ＩＫｐｍするハプ
テンの製造に関する。

これらのハプテンの中でも特に下記のものを例示し得る
。

７−カルボキシメトキシイミノエストラ−１，幻５亀曖
−トリエンー３，１７フージオールフーカルボキシメト
ーシイミノー３−ヒドロキシエストラ−１，３，５輪〜
トリエンー１７−オン３．１７β−ジヒドロキタエスト
ラ−１，３，５鱒−トリエンー７−オンー４′−カルボ
キシメチル−２／−セ（カルバゾン また、本発明は、抗原の製造への式Ｉのハプテンの使用
に関する。

特に１本発明は、式Ｉのハプテンなハ四ぎ酸アルキル、
特にタロルぎ酸イソブチルを使用して混成無水物に変換
し、この無水物を牛血清アルブ建シに固定することを特
徴とする式■のハプテンの使用に応用することができる
。

これらの抗原から出発して、典型的な方法、特Ｋ　Ｉｒ
ｌａｎｇ＠ｒの方法（Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　ｃｈｅｍ、　
２２８．７１３）に従って抗体を調製することが可能で
ある。

このようｋして得られた抗体は、１□、Ｘ、Ｙ及びＲ１
が前記の通りである弐Ｉのステ四イドについて特異的で
ある。例えば、それらは、エストロン、エストツジオー
ル又はエストリオールについて特異的である。この特異
性は、典型的な方法、４１１に平衡透析法によって立証
せしめられる。この特異性は、そのようにして得られた
抗体を、式ムの物質、４ＩＫエストロン、エストラジオ
ール又ハエストリオールを°定量するための試薬として
有用ならしめるものであり、また紙腰した女性の血液及
び尿中のエストリオールの量を定量できることに一関し
て存在する興味の全ては知られており、このことはある
種の胎児の異常を明らかにさせるものである。

本発明は、次式ｘｘｍ の化合物に次式 ％式％ （ここで２及びＣは前記の意味を有する）の化合物を作
用させて次式ｐ■ 基を表わし、Ｙが水嵩原子を表わし且っＲ１が＝ＮＺ−
（ＯＭｍ）ｃ−００声基（２は酸素原子又は−ｙＨｏｏ
ｍ−基を表わし、Ｃは１〜８の間の整数である）を表わ
す式■に相当するハプテンを得、必要ならばこの化合物
Ｋｉｌ化剤化銅用させて次式℃■の（合物、即ちり、が
水素原子を表わし一１Ｘが酸素原子を表わし、Ｙが水素
原子を表わし且つ−が＝８−　（ＯＨ，）ｃ−００，１
１１基（２は酸素原子又は−ＮＨＯＯＮＩＩ−基を表わ
し、Ｃは１〜８０間の整数である）を表わす式■に和尚
するハプテンを得ることを特徴とする、Ｒ１が水素原子
を表わし、ｍ、が擢ｇ−（ＯＨｍ）ｃ−００＊ＩＩ基（
Ｓ及びＣは前記の意味を有する）を表わす式ＩＫｓ幽す
るハプテンの製造法に関する。

前記の製造法の好ましい実施方法において１式％式％ の化合物は塩酸塩の形で使用され、また使用される酸化
剤は前述した酸化剤の無意のもの、好ましくは無水り胃
ム酸である。

本発明の方法の出発時に使用される７−ケドエストツジ
オールは、アメリカ特許第２，４１８，６０３号に記載
の方法に従つ【製造することができる。

下記の例は本発明を例示するものであって、それを制限
するものではない。

１８ＣＣのＩＮソーダに２ｇの３，１７β−ジヒドロキ
シエストラ−１，３，５ｕ　−）リエンー７−オン及び
２ｇのアミノオキシ酢酸ヘミ塩酸塩を攪拌下に且つ窒素
を流しながら溶解する。得られた溶液を加熱還流し、窒
素を流しながら１時間保つ。反応混合物を０℃に冷却し
、ｇｃｃのＩＮ塩酸と１００伽の水を加える。酢酸エチ
ルで抽出し、洗浄し、脱水し、蒸発乾燥させる。しかし
て２，７３５Ｆの生成物を得、これをクロマトグラフィ
ーする。

２、４４　ｆの７−カルポキシメトキシイ々ノエストラ
−１，３，５−一トリエンー３，１フβ−ジオールを得
る。

ＩＲスペクトル ０＝０　　　１７２７ＣＩｌｌ−” 芳香族　　　１６１８ｍ−” １５９２ｃＩｌ−” １５０６Ｃ１ｌ−” １２２ｃＡのアセトンに２．４４９の７−カルゼキシメ
トキシイミノエストラー１．３．５亀嗜−トリエ／−３
，１７β−゛ジオールを入れる。０℃に冷却し。

無水゛り四五酸の８Ｎ希硫蒙溶液（）−イルプレンジョ
ーンズ溶液）０．８４ｃｃを１滴１つ加える。０℃で３
０分間攪拌し、再び０８４ｅｌ：のハイルプｐンジ冒−
ンズ溶液を加える。３時間後に、０．４１ｇのハイルプ
μシジョーンズ溶液を加え、再び３０分間攪拌し、また
２０Ｈのメタノール、次いで１０Ｇの炭酸ナトリウム飽
和水溶液を滴下する。真空−過し、アセトンで洗浄し、
濃縮し、２００６Ｃの酢酸エチルを加える。洗浄し、脱
水し、濃縮乾燥させる。１１３５ｇの樹脂を得、これを
タロマドグラフィーにより精製する。しかして１．８４
８　＃の７−カルポキシメトキシイ２ノー３−ヒトａ今
シエストツーｉ、　ｓ、　ｓ−一トリエンー１７−オン
を得る。

分　析：Ｃ−・Ｈｓ＠Ｏ，Ｎ 計算：０％６７．２１　　Ｈ％＆４８　　Ｎ≦３．９１
実測：　　　６７．１　　　　６．７　　　　３．６攪
拌下に且つ窒素を流しながら１０．２　”のメタノール
Ｋｔ、ｓｚｔの夏−カルボキシヒドラジドグリシン酸カ
リウム及び８９ｇのメタノール塩酸溶液（４−３１１１
１／Ｃ１：）を入れる。得られた懸濁液を窒素下に加熱
還流し、１．０２’Ｏすの３，１７フージヒド四キシエ
ストラ−１，３，５ａ＠−）リエンー７−オンを加える
。３時間後に冷却し、真空−過し、洗浄する。２ｆの樹
脂を得る。この樹脂に５０８Ｃのジｊゾメタン塩化メチ
レン溶液（タイターはＩＬＩｆｌ／ｌ　）を加える。０
℃で１時間保ち、生成した沈殿を真！ｌ！Ｆ遇し、−箪
を乾゛−させる。１．９２６９の樹脂を得、これをりｗ
ｗ）グラフィーし。

８２５１１！Ｐの生成物を得、これをｇｅｅのエタノー
ルに溶解する。得られた溶液ＫＳＣＣの１舅メーダを加
える。この反応混曾−旬をＪｍｊ度で２０分藺゛保ち、
氷冷し、３ｃｃのＩＮ塩酸及び５ｃｃの水を加える。得
られた結晶を真空−過し、洗浄し、乾燥する。しかして
３．４３ｗｇ６３，１７　／　−シ＊　Ｙａｄｔシエス
ト？　−１，：ｌ、　５鱒−トリエン−７−オンＸ４′
−カルボ中ジメチルー２′−セン力★パゾンを得る。

１りの７−ケドエストツー１．３．５−一トリエン−３
，１７β−シｔ−ｋ（米国特許第１４１８．６０３号に
記載の方法に従って製造）をｌ０ＣＣのエタノールに入
れる。次いでＩＦのアぐノキシ酢酸ヘミ埴酸埴を加える
。

得られた懸濁液に８ＣＣのＩＮソーダを加える。

得られた溶液を周囲温度で３時間放置する。８ｃｃのＩ
Ｎ塩酸を加え、希釈し、酢酸エチルで抽出する。洗浄し
、乾燥し、蒸留する。Ｌ２３Ｆの樹脂を集める。

ＩＲスペクトル（エタノール） ０＝０　　　　１７４８ｃｍ−” ＯＲ３６０７ｅｌｌ　” 上の１糧で得−ら−れ−た〜Ｌ　２３９の樹脂をｌ０Ｃ
Ｃの酢酸エチルに入れ、前記溶液にＱ、　５−驚りトリ
エチルアミン及び４ｃｃのメタノールを加える。共沸蒸
留によりメタノールを除くことによって溶液を湊縮し、
酢酸エチルを加えて一定容積に保つ。

メタノールを除去した後、０．・２ａ：のトリエチルア
ミンを加え、氷冷し、真空−過し、洗浄する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１１次式Ｉ 〔ここでＸは酸素原子又はく′　基を表わし、Ｙは水素
   原子又はＯＨ基を表わし、ｌＬ口口承水素原子表わし、
   １．は１Ｚ−（ＯＨ＊）ｃ−００−Ｈ基（２は酸素原子
   又は−ＮＨＯＯＮＨ−基を表わし、Ｃは１〜８の閏の整
   数である）を表わす〕 のハプテンステロイドを製造するｋあたり、次式の化合
   物に次式 ｎ、ｙ　−Ｚ　−（ＯＨ，）。−００，Ｈ（ここで２及
   びＣは前記の意味を有する）の化合物を作用させて次式
   ＸＸＩＶ ル金物、即ち岬が水素原子を表わし、Ｘが〈′。ＨＨ 基を表わし、Ｙが水素原子を表わし且つＲ１が＝ＮＺ−
   （ＯＨ＊　）ｃ　−ｏｏ　ＩＨ基（２は酸素原子又は−
   ｘｏｏｍ−基を表わし、Ｃは１〜８の間の整数である）
   を表わす式ＩＫ相当するハプテンを得、必要ならばこの
   化合物に酸化剤を作用させて次式ｘＷ′の化谷物、即ち
   Ｒ１が水素原子を表わし、Ｘが酸素原子を表わし、Ｙが
   水素原子を表わし且つＩＬ、が＝ＮＺ−（ＯＨ＠）ｃ−
   ００＊Ｈ基（２は酸素原子又は−ＮＨＯＯＮＨ−基・を
   表わし、Ｃは１〜８の間の整数である）を表わす式■に
   相当するハプテンを得ることを特徴とするハブテンステ
   ロイドの製造法。