JPH09107831A - 花卉植物の種苗の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 花卉植物の種苗を効率よく、かつ、簡便に発
根させる方法を提供する。 【解決手段】（Ａ）花卉植物の細胞または組織片から得
られたカルスを液体培地中で培養して、カルスから不定
芽を形成・増殖させ、（Ｂ）前記カルスから不定芽を分
離、採取し、これをオーキシン系植物ホルモン溶液に浸
漬するか、あるいは前記カルスから分離、採取した不定
芽に前記ホルモン溶液を塗布するかした後、その不定芽
を容器内に充填した支持体上で育成して、不定芽を発根
させる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、花卉植物の種苗の
製造方法に関し、詳しくは、花卉植物の発根した種苗を
効率的に製造する方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】これまで、花卉植物の不定芽の発根方法
としては、ＮＡＡ（ナフタレン酢酸）、ショ糖を含有す
る公知の植物組織培養の液体培地を、パーライト、バー
ミキュライト等の水に不溶性の支持体に含浸させた培地
を用いてシクラメンの不定芽を発根させる方法が知られ
ている（特開平５−２１９８５３号公報）。

【０００３】一方、花木の培養苗条の発根方法として
は、バラ属の苗条を、１％以下のショ糖等の炭素源や極
微量のオーキシン類を含む液体培地を水に不溶性の吸水
性支持体に含浸させた発根用培地で炭酸ガスを供給して
培養する発根方法が知られている（特開平１−３０４８
２４号公報）。また、シャクナゲ属植物の茎頂部の組織
片をオーキシン系植物ホルモン及びサイトカイニン系植
物ホルモンを含む固体培地で無菌的に茎頂部を伸張させ
て根を持たない苗条を培養し、ついでこの苗条を該両植
物ホルモンを含む固体培地に移植して増殖を行い、更に
この苗条の基部から切除した葉をオーキシン系植物ホル
モン溶液に浸漬した後、発根用床土に移植して発根させ
る方法が開示されている（特開平６−１８９６４６号公
報）。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】上記のように、不定芽
あるいは苗条の発根方法がいくつか知られているが、特
開平５−２１９８５３号公報記載の方法は、発根効率と
いう点においては満足できるものの、無菌状態での操作
を行うために、例えば培地の殺菌操作、芽の分割や培地
への移植等に労力がかかり、効率的な生産方法とはいい
がたい。

【０００５】また、特開平１−３０４８２４号公報記載
の方法も、同様に炭素源を含む培地で培養する工程を含
み、培地の殺菌操作が必要である。さらに、特開平６−
１８９６４６号公報記載の方法は、固体培地での無菌的
な培養工程を含む上に、３段階の培養工程を前提とする
ものであって、効率的な方法とはいいがたい。

【０００６】これらの方法に対し、花卉植物の器官の一
部を用いて、ピートモス等に葉挿し、挿し穂、芽挿しな
どして発根させる方法もあるが、種苗の増殖率が低いと
いう問題が残る。

【０００７】同一形質の花卉植物の種苗を大量生産する
ためには組織培養方法によって得られた不定芽を順化工
程に移行する際に効率的に作業が行え、しかも発根率を
高め、健苗を得る方法を開発することが重要である。

【０００８】本発明は、上記観点からなされたものであ
り、花卉植物の種苗を効率よく、かつ、簡便に発根させ
る方法を提供することを課題とする。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意研究した結果、カルスを液体培地
中で培養して不定芽を形成させ、この不定芽をオーキシ
ン系植物ホルモン溶液に浸漬するか、あるいはこの不定
芽に前記ホルモン溶液を塗布した後、支持体上で育成さ
せることによって、従来の植物培養用培地を用いること
なく効率よく発根させることができることを見出し、本
発明を完成するに至った。

【００１０】すなわち、本発明は、（Ａ）花卉植物の細
胞または組織片から得られたカルスを液体培地中で培養
して、カルスから不定芽を形成・増殖させる不定芽形成
・増殖工程と、（Ｂ）前記カルスから不定芽を分離、採
取し、これをオーキシン系植物ホルモン溶液に浸漬する
か、あるいは前記カルスから分離、採取した不定芽に前
記ホルモン溶液を塗布するかした後、その不定芽を容器
内に充填した支持体上で育成して、不定芽を発根させる
発根工程と、を含むことを特徴とする花卉植物の種苗の
製造方法である。以下、本発明を詳細に説明する。

【００１１】本発明の方法が適用できる植物は、花卉植
物であり、園芸植物として栽培されている植物であれば
特に制限はない。好ましくはキク科、シュウカイドウ
科、リンドウ科などの花卉植物が挙げられ、さらに好ま
しくはシネラリア属、ベゴニア属、ユーストマ属などの
花卉植物が挙げられる。

【００１２】

【発明の実施の形態】以下、本発明に係わる花卉植物の
種苗の製造方法を、不定芽の形成・増殖工程と、不定芽
の発根工程に分けて、具体的に説明する。 （Ａ）不定芽形成・増殖工程 本工程では、花卉植物の細胞または組織片から得たカル
スを原材料とし、このカルスを液体培地上で培養して不
定芽を生産する。

【００１３】まず、花卉植物の植物体、例えば葉等を殺
菌した後、これを切断、分離等して得た細胞または組織
片を植物ホルモンを含む不定芽形成・増殖用固体培地に
置床して所定期間培養すると組織片の周辺からカルスが
形成する。

【００１４】植物体の殺菌は、組織培養における通常の
方法でよく、例えば、７０％エタノールに１０〜６０秒
浸漬し、続いて１０％次亜塩素酸ナトリウム溶液に５〜
３０分浸漬した後に滅菌水で十分洗浄すればよい。

【００１５】前記細胞または組織片は、植物体より切
断、分離等したものであればよく、好ましくは葉から分
離、切断した細胞または組織片が挙げられる。切断、分
離の方法には特に制限はなく、通常の方法でよい。

【００１６】また、カルスの培養方法も、通常の方法に
よればよい。例えば、基本培地としてＬＳ培地、ムラシ
ゲ・スクーグ培地（以下、「ＭＳ培地」という）、ガン
ボルグのＢ５培地（以下、単に「Ｂ５培地」という）、
ホワイト培地、ニッチ−ニッチ培地、Ｎ６培地等が挙げ
られ、好ましくはＭＳ培地、Ｂ５培地が挙げられる。

【００１７】次に、上記のようにして得られる花卉植物
のカルスを、液体培地中にて培養することにより不定芽
を形成させる。このような、不定芽形成・増殖用培地に
は、基本培地に、炭素源を加え、ｐＨを調整して得られ
る。

【００１８】基本培地は、植物の培養に必要な窒素、リ
ン、カリウム、マグネシウム、カルシウム、マンガン、
銅、亜鉛、ホウ素、モリブデン及び鉄等の元素を含む無
機塩、各種ビタミン、アミノ酸が、含まれた水溶液であ
り、従来より植物体の培養に広く用いられた何れであっ
てもよい。具体的には、例えば、ＭＳ培地、ガンボルグ
のＢ５培地、ホワイト培地、ニッチ−ニッチ培地、Ｎ６
培地等が挙げられる。これらの培地は、これをそのまま
用いても、水を加えて１／３〜１／２に希釈したものを
用いてもよい。

【００１９】培地に添加される炭素源としては、ショ
糖、ブドウ糖などの糖類が挙げられ、このうち、ショ糖
が好ましい。例えば、１０〜６０ｇ／Ｌの濃度で用いる
のが望ましい。これらの炭素源を前記基本培地に添加
し、所望のｐＨ、具体的には、ｐＨ４〜７に調整したも
のが、不定芽形成・増殖工程で用いる液体培地として用
いられる。

【００２０】上記液体培地は、通常植物ホルモンの添加
をしないか、必要に応じてベンジルアデニン（ＢＡ）、
カイネチン、ゼアチン等のサイトカイニン類を０．０１
〜５ｍｇ／Ｌの濃度で、また、インドール酢酸、α−ナ
フタレン酢酸（ＮＡＡ）、インドール酪酸等のオーキシ
ン類を０．０１〜５ｍｇ／Ｌの濃度で添加させてもよ
い。

【００２１】上記のような液体培地に、上記組織片から
得たカルスを移植し、これを照明下で培養することによ
り、カルスから不定芽を形成する。なお、ここでいう、
不定芽とは、葉が１〜４枚で葉の展開した不定芽で、好
ましくは成長点を有するものである。

【００２２】このような不定芽形成・増殖の期間は、通
常２０〜６０日間、好ましくは３０日間行われる。ま
た、このような不定芽・増殖の培養条件は、温度が通常
１５〜３０℃、好ましくは２０〜２８℃で、通常光照射
が５００〜１０００００ルクス、好ましくは４０００ル
クスで、１日に５〜２０時間、好ましくは１６時間で行
われることが望ましい。 （Ｂ）不定芽の発根工程 本工程は、上記の工程で形成された不定芽を、１枚の葉
を含むように個々に分離、採取し、これをオーキシン系
植物ホルモン溶液に浸漬するか、あるいは不定芽に前記
ホルモン溶液を塗布するかした後、その不定芽を容器内
に充填した支持体上で育成して、不定芽を発根させる工
程である。

【００２３】この発根工程で用いられる支持体として
は、一般に植物の栽培用、挿し木用培地や資材を広く用
いることができる。具体的には、ピートモス、パーライ
ト、バーミキュライト、赤玉土、鹿沼土、畑土、砂、砂
利、ロックウールなどの繊維質資材などが挙げられ、好
ましくはピートモス、パーライト、バーミキュライトで
ある。また、これらの培土を混合し組み合わせて用いる
ことができる。不定芽を支持することができるものであ
ればどのような材質のものでもかまわない。このように
して調製される支持体は、必要に応じて殺菌処理しても
よい。しかし、この殺菌処理は本発明の方法に必須では
ない。

【００２４】また、支持体を充填するための発根用容器
としては、プラグトレイ、ポット、バット等を挙げるこ
とができ、特にプラグトレイが好ましい。これらの発根
用容器に充填した支持体に、上記の不定芽を１本づつ、
切断面を埋め込むように挿して移植する。この際、不定
芽の発根を促進するために、オーキシン系の植物ホルモ
ンで処理する。オーキシン系植物ホルモンとしては、イ
ンドール酪酸（ＩＢＡ）、インドール酢酸（ＩＡＡ）、
ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）が挙げられ、好ましくはＩＢ
Ａが用いられる。また、オーキシン系植物ホルモンは、
その種類に応じて、その処理量を選択されるが、例え
ば、ＩＢＡは１〜１００ｐｐｍ、好ましくは、１０〜５
０ｐｐｍの濃度で用いられるのが望ましい。

【００２５】オーキシン系植物ホルモンで不定芽を処理
する方法としては、不定芽をオーキシン系植物ホルモン
溶液に浸漬する方法、及び、不定芽の切断面等にオーキ
シン系植物ホルモン溶液を塗布する方法がある。

【００２６】オーキシン系植物ホルモンで処理した不定
芽を前記支持体上で育成することにより、効率よく発根
させ、幼植物を得ることができる。不定芽の発根は、温
室などで、通常１５〜３０℃、好ましくは、２０〜２８
℃の温度で、２０〜６０日間、好ましくは、３０〜５０
日間栽培することにより行われる。

【００２７】上記のように、本発明によれば、不定芽の
発根と不定芽から幼植物体（種苗）への育成を、単一の
工程で行うことができるため、従来の方法に比べて簡便
であり、短期間で種苗を製造することができる。

【００２８】

【実施例】以下、実施例により、本発明を更に具体的に
説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるもので
はない。

【００２９】

【実施例１】シネラリア（Ｓｅｎｅｃｉｏ ｃｒｕｅｎ
ｔｕｓ ＤＣ．）の花茎を、７０％エタノール溶液に１
０秒間、ついで１０％の次亜塩素酸ナトリウム溶液に１
５分間浸漬して殺菌処理した後、滅菌水で３回洗浄し
た。滅菌処理した花茎をメスで５ｍｍ長に切断して組織
片を得た。これらの組織片をＢ５培地に、ＢＡ０．５ｍ
ｇ／Ｌ、ＮＡＡ５ｍｇ／Ｌ、ショ糖３０ｇ／Ｌ、ゲルラ
イト３ｇ／Ｌを添加した固体培地上に置床し、温度２５
℃、光照射下で６０日培養し、カルスを形成させた。 （Ａ）不定芽形成・増殖工程 上記で得たカルスを、Ｂ５培地に、ショ糖３０ｇ／Ｌを
加えた液体培地に移植した。

【００３０】移植後、カルスを温度２５℃、１日当たり
４０００ルクスの明期１６時間及び暗期８時間からなる
光照射下にて、３０日間培養し、カルスから不定芽を分
化・形成させた。このようなカルス培養によって、カル
ス表面に正常な不定芽を得た。 （Ｂ）発根工程 上記（Ａ）工程で得た不定芽を形成したカルスから１枚
の葉を付けた不定芽となるようメスで切断した。この不
定芽の基部をＩＢＡ ４０ｐｐｍ溶液に１０秒間浸漬し
た。これらの不定芽を、ピートモスとパーライトを８：
２の割合で組み合わせた培土として詰めたプラグトレイ
（直径２ｃｍ穴）に挿し、液肥としてハイポネックス
（登録商標；Ｎ：Ｐ：Ｋ＝１５：３０：１５を含有する
もの）の３０００倍希釈溶液を灌水して、温室内で栽培
した。栽培１か月後に供試不定芽数と発根した不定芽数
を調べ、下記式により発根率（％）を求めた。その結果
を表１に示した。

【００３１】

【数１】発根率（％）＝（発根した不定芽／供試不定
芽）×１００

【００３２】

【実施例２】エラチオールベゴニア（Ｂｅｇｏｎｉａ
× ｈｉｅｍａｌｉｓ）の葉柄を実施例１と同様に滅菌
処理後、切断して組織片を得た。これらの組織片をＭＳ
培地に、ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ、
ショ糖３０ｇ／Ｌ、ゲルライト３ｇ／Ｌを添加した固体
培地上に置床し、温度２５℃、光照射下で６０日間培養
し、カルスを形成させた。 （Ａ）不定芽形成・増殖工程 上記で得たカルスを、ＭＳ培地にＮＡＡ０．１ｍｇ／
Ｌ、ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ、ショ糖３０ｇ／Ｌを加えた液
体培地に移植した。移植後カルスを実施例１の不定芽形
成工程と同様に培養してカルス表面に正常な不定芽を得
た。 （Ｂ）発根工程 上記（Ａ）工程で得た不定芽を用い、実施例１の発根工
程と同様に行った。また、発根率も実施例１と同様にし
て求めた。その結果を表１に示した。

【００３３】

【実施例３】ユーストマ（Ｅｕｓｔｏｍａ ｇｒａｎｄ
ｉｆｌｏｒｕｍ）の葉身を実施例１と同様に滅菌処理後
切断して組織片を得た。これらの組織片をＭＳ培地に、
ＢＡ１ｍｇ／Ｌ、ショ糖３０ｇ／Ｌ、ゲルライト３ｇ／
Ｌを添加した固体培地上に置床し、温度２５℃、光照射
下６０日間培養し、カルスを形成させた。 （Ａ）不定芽形成・増殖工程 上記で得たカルスを、ＭＳ培地にショ糖３０ｇ／Ｌを加
えた液体培地に移植した。

【００３４】移植後、カルスを実施例１の不定芽形成工
程と同様に培養してカルス表面に正常な不定芽を得た。 （Ｂ）発根工程 上記（Ａ）工程で得た不定芽を用い実施例１の発根方法
と同様に行った。発根率も実施例１と同様にして求め
た。その結果を表１に示した。

【００３５】

【表１】

【００３６】

【実施例４】シネラリア（Ｓｅｎｅｃｉｏ ｃｒｕｅｎ
ｔｕｓ ＤＣ．）の開花盛期の親株の花茎を実施例１と
同様に滅菌処理後、切断して組織片を得た。これらの組
織片を実施例１と同じ方法で培養してカルスを形成させ
た後、（Ａ）工程と同じ方法で不定芽を形成させ、次い
で（Ｂ）工程と同じ方法で発根させて幼植物を得た。結
果を表２に示した。

【００３７】

【比較例１】シネラリア（Ｓｅｎｅｃｉｏ ｃｒｕｅｎ
ｔｕｓ ＤＣ．）の開花盛期の親株から腋芽と葉１枚を
含む状態に切断して組織片（５ｍｍ長）を得た。これら
の組織片１００本をＩＢＡ４０ｐｐｍ溶液に１０秒間浸
漬した。これらの組織片をピートモスとパーライトを
８：２の割合で組み合わせて培地として詰めたプラグト
レイ（直径２ｃｍ穴）に挿し、液肥としてハイポネック
ス（登録商標；Ｎ：Ｐ：Ｋ＝１５：３０：１５を含有す
るもの）の３０００倍希釈溶液を灌水して、温室内で栽
培した。結果を表２に示す。

【００３８】

【比較例２】シネラリア（Ｓｅｎｅｃｉｏ ｃｒｕｅｎ
ｔｕｓ ＤＣ，）の開花盛期の親株の花茎を実施例１と
同様に殺菌処理後、切断して１００本の組織片を得た。
これらの組織片を実施例１と同じ方法で培養してカルス
形成させた後、（Ａ）工程と同じ方法で不定芽を形成さ
せた。次いで（Ａ）工程で得た不定芽を形成したカルス
から１枚の葉をつけた不定芽となるようにメスで切断し
た。不定芽をＢ５培地に、ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ、ショ
糖３０ｇ／Ｌ、ゲルライト２ｇ／Ｌを添加した固体培地
に置床し、温度２５℃、光照射下で培養して発根させ
た。発根した不定芽を培地から抜き取り、ピートモスと
バーミキュライトを８：２の割合で組み合わせた培土と
して詰めたプラグトレイ（直径２ｃｍ）に挿し、ハイポ
ネックス（登録商標；Ｎ：Ｐ：Ｋ＝１５：３０：１５を
含有するもの）の３０００倍希釈溶液を灌水して温室内
で栽培した。結果を表２に示す。

【００３９】

【表２】

【００４０】表２において発根率と幼植物体を得るまで
の日数を比べると、本発明の実施例４は発根率９８％で
３０日で不定芽から健苗が得られるのに対し、比較例１
（葉挿し）では、発根率はその４分の１の２４％であ
り、４５日の日数が必要である。

【００４１】一方、特開平６−１８９６４６号公報記載
の発明において苗条の増殖に固体培地を使用しているの
と同様に、不定芽の形成や増殖に固体培地を使用した比
較例２では、実施例４と同じ発根率であり、健苗が得ら
れるが日数が２０日も多くかかる。

【００４２】

【発明の効果】本発明の方法は、操作が簡単であり、発
根率が高いため、健全な幼苗を効率よく生産することが
できる。よって、花卉植物の種苗の大量生産に有用であ
る。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 （Ａ）花卉植物の細胞または組織片から
   得られたカルスを液体培地中で培養して、カルスから不
   定芽を形成・増殖させる不定芽形成・増殖工程と、
   （Ｂ）前記カルスから不定芽を分離、採取し、これをオ
   ーキシン系植物ホルモン溶液に浸漬するか、あるいは前
   記カルスから分離、採取した不定芽に前記ホルモン溶液
   を塗布するかした後、その不定芽を容器内に充填した支
   持体上で育成して、不定芽を発根させる発根工程と、 を含むことを特徴とする花卉植物の種苗の製造方法。