JPH08508046A - タキソール製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は癌患者の処置における使用のための医薬組成物に関する。この組成物は医薬的有効量の少なくとも１つのタキサンが及び１つ又はそれ以上の負に帯電したリン脂質と１つ又はそれ以上の両性イオンの（すなわち荷電していない）リン脂質との混合物を含有する。この混合物は少なくとも１つのタキサンをリポソームと信じられる物も中に被包化している。この混合物は負に帯電したリン脂質と両性イオンのリン脂質とを１：９から７：３の比で含有している。存在しているタキソールの量は１.５−８.０モル％タキサンである。この組成物は実質上タキサンの結晶が無い０.０２５から１０ミクロンの大きさの粒子形状である。

Description

【発明の詳細な説明】 タキソール製剤 この発明は国際癌機構、健康国際機構［認可（Ｇｒａｎｔ）ＣＡ５５２５１］ の助力により成し遂げられた。発明の分野 本発明はタキソール（ｔａｘｏｌ）を含有する癌患者の処置に適した組成物に 関する。発明の背景 新しい抗癌剤、薬剤の組み合わせ及び化学療法戦略の開発は継続的に必要とさ れている。新しい抗癌剤の開発を鼓舞するために癌化学療法のスクリーニング及 び開発プログラムが国際癌機構（ＮＣＩ）において１９６０年に確立された。植 物抽出物のスクリーニングは米国農務省の協力で行われた米国の植物相の調査か ら始まった［Ｓ．Ａ．Ｓｃｈｅｐａｒｔｚ，Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ．Ｒｅｐ ｔｓ ，６０，９７５（１９７６）及びＪ．Ａ．Ｈａｒｔｗｅｌｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ．Ｒｅｐｔｓ ，６０，１０３１（１９７６）］。Ｔａｘｕｓ（イチ イ）ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ Ｎｕｔｔ．［タキシアエ（Ｔａｘａｃｅａｅ）族］ 、パシフィック（Ｐａｓｉｆｉｃ）イチイ又はウエスタン（Ｗｅｓｔｅｒｎ）イ チイがワシントン州からのこのプログラムの１部として１９６２年に選択された 。パシフィックイチイはアラスカ南部からカルフォルニア北部の北南の範囲の太 平洋沿岸北西部及びアイダホ及びモンタナの山岳地帯の東まで広がる地域に天然 にゆっくりと小さめに成育する木である。それはダクラスファーの群落の下層に よく見られる。タキシアエ族は世界中に１１種を有するイチイが最も主なもので ある５つの属を有する小さな、いささか分離された、植物学の族である。 タキソールはタキサン類（Ｔａｘａｎｅｓ）として知られている化学化合物の 族の１部分である。Ｍ．Ｓｕｆｆｎｅｓｓ、「第３４章、タキソール：発見から 治療上の使用まで」、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ ａｎｄ Ｍｅｄ．Ｃｈｅ ｍ． （出版）及び米国特許第５，２４８，７９６号（Ｃｈｅｎら）を参照せよ、 そしてこれらは引用により本明細書に挿入される。 タキソールは進行卵巣癌及び乳癌に対して臨床上活性があることが発見された ［Ｔｏｗｉｎｓｋｙ，Ｅ．Ｋ．，Ｃａｚｅｎａｖｅ，Ｌ．Ａ．及びＤｏｎｅｈｏ ｗｅｒ，Ｒ．Ｃ．「タキソール − 新規な研究上の抗微小管試薬」、Ｊ．Ｎａ ｔ．Ｃａｎｃ．Ｉｎｓｔ ．８２：１２４７−５９（１９９０）］。第２相の試み においては、大量に前投与した進行した難治性の卵巣癌患者についての応答割合 は３０％であった［ＭｃＧｕｉｒｅ，Ｗ．Ｐ．，Ｒｏｗｉｎｓｋｙ，Ｅ．Ｋ．， Ｒｏｓｅｎｓｈｅｉｎ，Ｎ．Ｂ．，Ｇｒｕｍｂｉｎｅ，Ｆ．Ｃ．，Ｅｔｔｉｎｇ ｅｒ，Ｄ．Ｓ．，Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ｄ．Ｋ．及びＤｏｎｅｈｏｗｅｒ，Ｒ． Ｃ．「タキソール：進行卵巣上皮新生物において有意な活性を有する特異的な抗 新生物剤」Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．１１１：２７３−２７９（１９８９ ）］。第２相試験における前処置された転移性乳癌患者の全体の応答割合は５６ ％であった［Ｈｏｌｍｅｓ，Ｆ．Ａ．Ｗａｌｔｅｒｓ，Ｒ．Ｓ．，Ｔｈｅｒｉａ ｕｌｔ，Ｒ．Ｓ．，Ｆｏｒｍａｎ，Ａ．Ｄ．，Ｎｅｗｔｏｎ，Ｌ．Ｋ．，Ｒｅｂ ｅｒ，Ｍ．Ｎ．，Ｂｕｚｄａｒ，Ａ．Ｕ．，Ｆｒｙｅ，Ｄ．Ｋ．及びＨｏｒｔｏ ｂａｇｙｅ，Ｇ．Ｎ．，「タキソールの第２相、転移性乳癌の治療に活性な薬物 」、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，８３：１７９７−１８０５（１ ９９１）］。最近米国食品医薬品局が卵巣癌に対するタキソールの使用を許可し た。 タキソールは水及び医薬的に許容された大部分の溶媒に余り溶けないので、臨 床投与のために選択された剤形は５０％無水エタノール（「Ｄｉｌｕｅｎｔ１２ 」）を含むクレモファー（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）ＥＬ（登録商標）（ポリエトキ シ化されたひまし油）に溶解されたタキソールからなる。要求されたタキソール 量を運ぶために必要なクレモファーの量は他のいかなる市販薬と共に投与される 量よりも有意に多い。この溶媒は実験動物［Ｌｏｒｅｎｚ，Ｗ，Ｒｉｅｍａｎｎ ，Ｈ．Ｊ．及びＳｃｈｍａｌ，Ａ．，「クレモファーＥＬ及びその誘導体による 犬におけるヒスタミン放出：オキシエチル化オレイン酸が最も効果的な成分であ る」、Ａｇｅｎｔｓ Ａｃｔｉｏｎｓ ７：６３−７（１９７７）］及びヒト［ Ｗｅｉｓｓ，Ｒ．Ｂ．，Ｄｏｎｅｈｏｗｅｒ，Ｒ．Ｃ．，Ｗｉｅｒｎｉｋ，Ｐ． Ｈ．， Ｏｈｎｕｍａ，Ｔ．，Ｇｒａｌｌａ，Ｒ．Ｊ．，Ｔｒｕｍｐ，Ｄ．Ｌ．，Ｂａｋ ｅｒ，Ｊ．Ｒ．，ＶａｎＥｃｈｏ，Ｄ．Ａ．，ＶｏｎＨｏｆｆ，Ｄ．Ｄ．及びＬ ｅｙｌａｎｄ−Ｊｏｎｅｓ，Ｂ．，「タキソール由来の高過敏症反応」、Ｊ．Ｃ ｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ． ８：１２６３−８（１９９０）］において重篤な致死の高 過敏症状の発現を引き起こすことが示されている。高過敏症反応は注入スケジュ ールがより短期であるほどより頻繁に生じるらしいので、米国における大部分の 第ＩＩ相及び第ＩＩＩ相試験では２４時間スケジュールを使用していた［Ｒｏｗ ｉｎｓｋｙ，Ｅ．Ｋ．，Ｏｎｅｔｔｏ，Ｎ．，Ｃａｎｅｔｔａ，Ｒ．Ｍ．及びＡ ｒｂｕｃｋ，Ｓ．Ｇ．，「タキソール：タキサン類の中で１番の、重要な新規な クラスの抗癌剤」、Ｓｅｍｉｎａｒ Ｏｎｃｏｌ．，１９：６４６−６２（１９ ９２）］。さらにタキソール−クレモファー投与に関連した反応の程度及び発生 率を減じるためにコルチコステロイド（デキサメサゾン）及び抗ヒスタミン類（ Ｈ１及びＨ２受容体の両者のアンタゴニスト）の前投薬が用いられている。この 前投薬のレジメは重篤な高過敏症の発生率を５％以下に減じるが、穏やかな反応 はまだ約３０％の患者に起こる［Ｗｅｉｓｓ，Ｒ．Ｂ．，Ｄｏｎｅｈｏｗｅｒ， Ｒ．Ｃ．，Ｗｉｅｒｎｉｋ，Ｐ．Ｈ．，Ｏｈｎｕｍａ，Ｔ．，Ｇｒａｌｌａ，Ｒ ．Ｊ．，Ｔｒｕｍｐ，Ｄ．Ｌ．，Ｂａｋｅｒ，Ｊ．Ｒ．，ＶａｎＥｃｈｏ，Ｄ． Ａ．，ＶｏｎＨｏｆｆ，Ｄ．Ｄ．及びＬｅｙｌａｎｄ−Ｊｏｎｅｓ，Ｂ．，「タ キソール由来の高過敏症反応」Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．８：１２６３−６８ （１９９０）及びＲｕｎｏｗｉｃｚ，Ｃ．Ｄ．，Ｗｉｅｒｎｉｋ，Ｐ．Ｈ．，Ｅ ｉｎｚｉｇ，Ａ．Ｉ．，Ｇｏｌｄｂｅｒｇ，Ｇ．Ｌ．及びＨｏｒｗｉｔｚ，Ｓ． Ｂ．，「卵巣癌におけるタキソール」、Ｃａｎｃｅｒ ７１：１５９１−９６（ １９９３）］。臨床上、より安全なより良好に許容された製剤に比べて薬理学上 の発明はあまり望ましくない。複数個の薬物が同時に投与された場合、薬物の相 互作用がタキソールの効果又は毒性に影響を与えることがより起こり易いであろ う。 タキソールについての上記の問題の見地から、研究者はタキソールをより良好 に許容された媒質中に再び製剤化することを考えた。これらの努力の中にはタキ ソールの分配のためのリポソームの使用がある。Ｊ．Ｒｉｏｎｄｅｌらにおいて 、 「遊離の及びリポソームの効果−−ヌードマウスへ異種移植された２つの脳腫瘍 に対して被包化されたタキソールを用いて」、Ｉｎ Ｖｉｖｏ，６：２３−２８ （１９９２）、タキソールを大豆のホスファチジルコリンの中へ封入して、腫瘍 を有するマウスに腹膜内投与した。Ｍ−Ｈ，Ｂａｒｔｏｌｉら、「インビトロ系 及びインビボ系における抗腫瘍活性及び遊離の及び被包化されたタキソール」、 Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ，７（２）：１９１−９７（１９９ ０）においては、リポソームによって被包化されたタキソールを細胞に投与し、 動物に腹膜内投与して抗腫瘍活性を調べた。リポソームはホスファチジルコリン から形成した。米国特許第４，５３４，８９９号（Ｓｅａｒｓ）はタキソールを 人工のリン脂質類似体である豆のホスファチジルエタノールアミン サクシニル ポリエチレングリコール モノメチルエーテルに封入した場合の実施例を含んで いる。 その様なリポソームを用いた先の仕事はタキソールを安全かつ効果的に分配し 、血流に直接（すなわち静脈内に）、迅速に投与するのに適したシステムを得れ なかった。この様なシステムにおけるリポソームはタキソールを分配することが できない凝集物を形成する傾向があることを出願人は発見した。静電気的に中性 のリポソームは凝集する傾向がある。タキソールは疎水性の、膜活性化学物質で あり、この凝集を促進する。粒が凝集した大きな塊は静脈内投与には不適である 。タキソールを分配するためにリポソーム（及び大部分の賦形剤）を使用する場 合に遭遇する他の問題は、製剤が不安定になり、溶液から引き出されたタキソー ルがタキソールの結晶を形成することである。その様な結晶の存在によってシス テムは不成功となり、その様な結晶は毛細血管を通過できないので、実際、静脈 内投与には致命的である。その様な塊を投与すれば、腎臓及び肺の炎症が、これ らの重要な臓器への血の供給が遮断されるために起こり、死に至るであろう。し たがって、タキソール分配のためのより良いシステムの開発の大きな必要性が残 存している。本発明の概要 本発明は、癌患者の処置において使用するための医薬組成物に関する。この組 成物は医薬上有効量にて存在する、少なくとも１つのタキサン（ｔａｘａｎｅ） を含有し、１つ又はそれ以上の負に帯電したリン脂質及び１つ又はそれ以上の両 性イオンのリン脂質の混合物を含有している。両性イオンのリン脂質は、正味の 電荷がゼロであるイオン化し得る基を有するあらゆるリン脂質である。この混合 物はリポソームであると信じられる粒子の中に少なくとも１つのタキサンを捕獲 している。この混合物は負に帯電したリン脂質と両性イオンのリン脂質とを１： ９から３：７の比率で含んでいる。タキソールはこの組成物中に１．５−８．０ モル％の量、存在している。この組成物は実質上タキサンの結晶の無い、０．０ ２５から１０ミクロンの大きさの粒子の剤形である。 本発明の医薬組成物を用いると、実質上有害な結晶の形成無しに、リポソーム であると信じられるものの１部分として、静脈内投与又は他の体のコンパートメ ント内に投与されることにより、タキソールを安全にかつ効果的に迅速に（すな わち、１時間又はそれ以下で）分配する。個々のリポソームの各々に負に帯電し たリン脂質を挿入することによって、リポソームは互いに反発し、従って、タキ ソールをリポソーム内にカプセル化するための以前の努力において用いられた両 性イオンのリン脂質のみによって形成されたリポソームの様に凝集しない。両性 イオンのリン脂質のみの使用は、個々のリポソームがお互いに向かって移動し、 吸着し、凝集又は融合によって大きく成長する傾向がある。反対に、過度の負の 荷電はタキソール製剤を不安定にし、結晶の形成を生じる。負に帯電したリン脂 質及び両性イオンのリン脂質の適切な割合における混合物を用いることによって 、タキソール結晶の形成が長期間防止され、安全な静脈内投与が可能となる。本 発明の小粒子の他の効果は、それらが長期間循環系に残ることである。負の荷電 を減じるとこれらの粒子の循環時間はさらに増加する。タキソールを凝集又は結 晶の形成なしに分配するという本発明の利点は従って本分野における実質的な進 歩である。図面の簡単な説明 図１Ａ−Ｅは、大腸（Ｃｏｌｏｎ）−２６腫瘍に対する遊離の又はリポソーム のタキソールの１回投与の抗腫瘍効果を示す腫瘍移植後の日数に対する平均腫瘍 サイズのプロットを示している。皮下の大腸−２６腫瘍を形成し、毎日観察した 。腫瘍が測定可能となった時に（８日）、クレモファーＥＬ（登録商標）／エタ ノール［希釈剤（Ｄｉｌｕｅｎｔ）１２］内又はリポソーム内のいずれかにおけ るタキソールの単一の静脈内ボーラス投与（横座標に沿った黒丸にて示された） を行った。未処置のコントロールはタキソールの無い等容量の塩水又は希釈剤（ Ｄｉｌｕｅｎｔ）１２（１：３に希釈した）を受けた（パネルＡ）。全てのリポ ソーム製剤は超音波処理して小さい一枚膜リポソーム（「ＳＵＶ」）を形成し、 処置は以下の製剤の２５、３５又は４５ｍｇ／ｋｇ投与量であった。タキソール 、ホスファチジルグリセロール（「ＰＧ」）及びホスファチジルコリン（「ＰＣ 」）（Ｂ）；タキソール、水素化されたホスファチジルイノシトール（「ＨＰＩ 」）及びＰＣ（Ｃ）；又はタキソール、ジパルミトイル−ホスファチジルエタノ ールアミンに結合されたポリ（エチレングリコール）（「ＰＥＧ−ＤＰＰＥ」） 及びＰＣ（Ｄ）。別法では、希釈剤１２（塩水で１：３に希釈された）中の遊離 タキソールを１５、２５又は３０ｍｇ／ｋｇの用量にて投与した（Ｅ）。各々の 処置群に投与された用量を各々の図において挿入して示す。各々の処置群は１０ 匹の動物からなる。腫瘍体積が２０００ｍｍ³を越えた時点にて人道的理由から 動物を殺傷した。 図２Ａ−Ｅは、大腸−２６腫瘍に対する遊離の又はリポソームのタキソールの ４回投与の抗腫瘍効果を示す腫瘍移植後の日数に対する平均腫瘍サイズのプロッ トを示している。皮下の大腸−２６腫瘍を形成した。腫瘍が測定可能となった時 に（７日）、静脈内処置を開始し、第８日、１２日及び１３日に繰り返した（横 座標に沿った黒丸にて示された）。未処置のコントロールはタキソールの無い等 容量の塩水又は希釈剤（Ｄｉｌｕｅｎｔ）１２（１：３に希釈した）を受けた（ パネルＡ）。リポソームを基礎としたタキソール製剤の処置は以下の２０、３０ 又は４０ｍｇ／ｋｇ投与量であった。タキソール、及びＰＧ及びＰＣ多重層リポ ソーム（「ＭＬＶ」）（Ｂ）；タキソール、ＰＧ及びＰＣ ＳＵＶ（Ｃ）；又は タキソール、ＰＥＧ−ＤＰＰＥ及びＰＣ ＳＵＶ（Ｄ）。別法では、希釈剤１２ （塩水で１：３に希釈された）中の遊離タキソールを１０、２０又は３０ｍｇ／ ｋｇ の用量にて投与した（Ｅ）。処置群に投与された用量を各々の図において挿入し て示す。腫瘍サイズが２０００ｍｍ³を越えた時点にて人道的理由から動物を殺 傷した。 図３Ａ−Ｃは、大腸−２６腫瘍に対する遊離の又はリポソームのタキソールの ９回投与の抗腫瘍効果を示す腫瘍移植後の日数に対する平均腫瘍サイズのプロッ トを示している。皮下の大腸−２６腫瘍を形成した。腫瘍が測定可能となった時 に（８日）、処置を開始した。横座標に沿った黒丸にて示される様に、動物に週 に３回投与し、処置を３週間行った。未処置のコントロールはタキソールの無い 塩水又は希釈剤（Ｄｉｌｕｅｎｔ）１２（１：３に希釈した）を受けた（パネル Ａ）。リポソームを基礎としたタキソール製剤の処置はタキソール、ＰＧ及びＰ Ｃ ＳＵＶ（Ｂ）の１０、４０又は６０ｍｇ／ｋｇ投与量であった。別法では、 希釈剤１２（塩水で１：３に希釈された）中の遊離タキソールを１０、２０又は ３０ｍｇ／ｋｇの用量にて投与した（Ｃ）。処置群を各々の図において挿入して 示す。各々の処置群は１０匹の動物からなる。腫瘍サイズが２０００ｍｍ³を越 えた時点にて人道的理由から動物を殺傷した。 図４Ａ−Ｃは、遊離の又はリポソームを基礎としたタキソール製剤処置後、腫 瘍の直径が１５００ｍｍ³に達する時間の中央値を示す腫瘍移植後の日数に対す る平均腫瘍サイズのプロットを示している。全ての実験において、各々の動物の 腫瘍容量を頻繁に測定し、ＢＭＤＰ １Ｌプログラムを用いてデーターを統計的 に分析した。腫瘍が１５００ｍｍ³に達するために要求される時間の中央値を各 々の処置群について測定した（挿入により示される様に）。さらに、各々の個々 の動物からのデーターを１５００ｍｍ³までの腫瘍成長に対する種々の処置−− すなわち、（Ａ）１回投与実験（図１Ａ−Ｅ）；（Ｂ）４回投与実験（図２Ａ− Ｅ）；（Ｃ）９回投与実験（図３Ａ−Ｃ）の効果を比較するために分析した。ま た、各々中央値の上及び下の棒によって示された第２５及び第７５の百分位の時 間が示されている。＊，ｐ．＜０．０５；＊＊，ｐ．４＜０．０１；＊＊＊，ｐ ＜０．００５。 図５はモルフラクションのタキソール及び脂質濃度の関数として測定された４ ℃におけるタキソール／リポソームの安定性に関係する表を示している。タキソ ール及び脂質をクロロホルム中にて混合して３つの異なるタキソール：脂質比（ 〜２％、４％及び８％）を得て、減圧下乾燥して薄膜とした。脂質膜をｔ−ブタ ノール中に再溶解し、液体窒素中にてシェル（ｓｈｅｌｌ）−凍結し、凍結乾燥 した。凍結乾燥した粉を緩衝液（ＮａＣｌ：トリス−ヒドロキシエタンスルホン 酸：ＥＤＴＡ）を用いて再構築し、３つの異なる最終脂質濃度（５０、１００及 び１５０ｍＭ）を得た。上記の再構築で形成されたリポソームは大きい（１−１ ０ミクロン）の多重層リポソーム（「ＭＬＶ」）である。次に各々の製剤を３０ 分間超音波処理し、２０，０００ｘｇにて３０分間遠心分離して遊離のタキソー ルをペレットした。超音波処理からの結果生じた及び遠心分離後の懸濁液に残っ ているリポソームは小さく（０．０２５から１．０ミクロン）、一枚膜リポソー ム（「ＳＵＶ」）である。タキソール／リポソームを含む上清をタキソール（Ｈ ＰＬＣ）及び脂質（リン分析）について分析した。その製剤を４℃にて保管し、 再遠心分離し、異なる時間ポイントにて分析してリポソーム内のタキソール保持 量を測定した。結果を異なる保管時間後にリポソーム内に残っているタキソール 濃度の最初のタキソール濃度に対する％として表した。 図６ＡからＢはクロロホルム中にてタキソール及び脂質を混合して１モルの脂 質当たり３％モルのタキソールを得る場合のＰＧ％及び保管温度の関数としてタ キソール／リポソームの安定性を示しているタキソール対ＰＧ％のプロットであ る。使用された脂質はＰＣ：ＰＧが１０：０，９：１，７：３，５：５，３：７ 及び０：１０の比率であった。タキソール／リポソーム製剤を４℃（Ａ）及び２ ０℃（Ｂ）にて保管し、再遠心分離し、異なる時間点において分析し、いくらの タキソールがリポソーム内に残っているかを測定した。結果を最初のタキソール 濃度に対する異なる時間点にリポソーム内に残っているタキソール濃度の％によ り表す。シンボルは（Ａ）については、白い四角：調製直後、黒い四角：１時間 、白丸：４日、黒丸：６日、白い三角：２６日、黒い三角：３４日である。シン ボルは（Ｂ）については、白い四角：調製直後、黒い四角：１時間、白丸：１日 、実線を伴う白い四角：３日、白丸：４日、黒丸：６日、白い三角：２６日、黒 い 三角：３４日である。 図７はタキソール／リポソームの成長阻止特性を遊離のタキソールのそれと比 較している細胞系対ＩＣ５０のプロットである。細胞をマルチウエル内に、２× １０⁴／ｍｌの密度にて置き、一晩着床させた。３倍のウエルを種々のタキソー ル濃度にさらし、タキソールはリポソームとして加えるか（実線の棒）、ＤＭＳ Ｏ中に１００ｘ濃度で保管されたものとして（点刻の棒）又は有機溶媒無しに血 清蛋白質に吸着させて（斜線の棒）各々加えた。細胞を７２時間後に数え、各々 の濃度−効果曲線に対するＩＣ５０（ここではまたＩＣ₅₀として表される）（５ ０％成長阻止）をグラフから計算した。実験を少なくとも２回繰り返した。細胞 系は以下の様である。大腸−２６：ネズミの大腸癌腫、Ｂ１６：ネズミのメラノ ーマ、Ｂ１６Ｆ１０：Ｂ１６ネズミのメラノーマの高い転移性変異体、Ｌ１２１ ０：ネズミ白血病、９Ｌ：ラット神経膠肉腫、Ａ１２１ａ、Ｈｃｙ−１ｂ及びＡ ９０：卵巣腫瘍細胞系。 図８ＡからＢは大腸−２６ネズミモデルにおけるタキソール−リポソームの予 備的な抗腫瘍効果を示す、腫瘍移植後の日数対平均腫瘍サイズのプロットである 。大腸−２６細胞（０．２ｍｌ中１０⁶細胞）をＢＡＬＢ／Ｃマウス（２０ｇｍ 雌）の右の横腹の皮下に移植した。移植８日後に腫瘍が測定可能となり、遊離の タキソール又はタキソール−リポソームの処置を開始した。処置は１：３に塩水 で希釈したセルモファーＥＬ（登録商標）中遊離タキソール１０、２０又は３０ ｍｇ／ｋｇの投与量であり、２ｍｇ／ｍｌの濃度にて投与した（１番上のパネル ）。別法では、塩水中のタキソール−リポソームを３ｍｇ／ｍｌのタキソール濃 度にて、１０、４０又は６０ｍｇ／ｋｇの用量にて与えた（１番下のパネル）。 塩水及びセルモファーＥＬ（登録商標）（１：３に希釈した）をコントロール処 置として使用した。各々の処置群は１０匹の動物からなり、シンボルは群に対す る平均腫瘍体積を表す。明確化のために全ての曲線について標準偏差を含めてい ない；示されたそれらは最も重要なデーターであり、代表的である。横軸に沿っ た黒丸によって示される様に動物は１週間に３回投与され、処置を３週間受けた 。３つの軸に沿った腫瘍の大きさを毎日測定し、腫瘍の体積を計算した。人道的 理由 から腫瘍体積が２ｃｍ³を越えた時に動物を殺傷した。 図９ＡからＬは製剤の組成及び保管時間の関数としてタキソール−リポソーム の形態学を示している。タキソールを小さい一枚膜リポソームに挿入し、異なる 干渉差相顕微鏡（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏ ｎｔｒａｓｔ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）（「ＤＩＣ」）により調べた。全ての像 において、リン脂質濃度は１００ｍＭであり、タキソール：リン脂質比は３％に て定常であった。脂質の配合のみを変化させた。（Ａ）から（Ｆ）の像を調製直 後に撮った；（Ａ）は１００％ＰＣであり、大部分のリポソームが凝集した；（ Ｂ）及び（Ｃ）は各々９：１及び７：３のＰＣ：ＰＧであり、大部分のリポソー ムが顕微鏡解析の限界以下であり、凝集もタキソールの針も観察されなかった； （Ｄ）及び（Ｅ）は各々５：５及び３：７のＰＣ：ＰＧであり、少しはタキソー ルの針が観察された；（Ｆ）は１００％ＰＧであり、多数の微細な針が現れた。 像Ｇ，Ｈ，Ｉ，Ｊ，Ｋ及びＬを各々Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ及びＦの２０℃における ２４時間保管後に撮った。（Ｇ）大部分のリポソームが凝集した。（Ｈ）及び（ Ｉ）大部分のリポソームが顕微鏡解析の限界以下であり、凝集もタキソールの針 も観察されなかった。（Ｊ）、（Ｋ）及び（Ｌ）多数の大きな針が見られた。 図１０は通常の臨床的に使用される剤形（溶媒としてセモルファーＥＬ（登録 商標）／エタノールを用いる）中にて、不安定なリポソーム中にて又は安定なリ ポソーム中にて投与されたタキソールの健康なマウスにおける最大耐性用量（「 ＭＴＤ」）を示している。不安定なリポソーム（「製剤＃ＮＮ」）を比率３：７ ：１（モル：モル：モル）におけるホスファチジルグリセロール、ホスファチジ ルコリン及びタキソールで構成し、リポソームにさらに結晶タキソールを包含し ていることを光学顕微鏡にて観察した。安定なリポソーム（「製剤＃１６５」） を比率３：７：０．３（モル：モル：モル）におけるホスファチジルグリセロー ル、ホスファチジルコリン及びタキソールで構成し、実質上タキソールの結晶が 無いことを観察した。リポソーム中又はセモルファーＥＬ（登録商標）／エタノ ール中のタキソールを塩水で希釈し、所望の用量を与えるために必要な濃度とし 、３０秒かけて、２０グラムＢａｌｂ／Ｃマウスの尾側面静脈に（「ｉ．ｖ．」 ）又 は腹腔内（「ｉ．ｐ．」）注射した。ｉ．ｖ．にて投与した体積は０．２−０． ３ｍｌであり、ｉ．ｐ．にて投与した体積は０．４−１．０ｍｌであった。マウ スを毎日観察し、体重を計り、毒性の兆候を検出した。ＭＴＤはここでは致死的 ではなく、最初の体重の１０％以上の体重損失を生じない薬の最大用量として定 義される。 本発明の詳しい説明 本発明は癌の処置において使用するための医薬組成物に関する。この組成物は 医薬的有効量の１つのタキサン（ｔａｘａｎｅ）及び１つ又はそれ以上の負に帯 電したリン脂質と１つ又はそれ以上の両性イオンのリン脂質との混合物を含む。 この混合物はリポソームの形態を採ると信じられる粒子内に少なくとも１つのタ キサンを包み込んでいる。この混合物は負に帯電したリン脂質と両性イオンのリ ン脂質の比率を１：９から７：３、好ましくは各々１：９から３：７で含んでい る。本発明の医薬組成物の粒子は１から５ミクロン（ＭＬＶ）又は０．０２５か ら１．０ミクロン（ＳＵＶ）のサイズであり、実質上タキサンの結晶を含まない 。 本発明の負に帯電したリン脂質はホスファチジルイノシトール、ホスファチジ ルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファテックアシド（ｐｈｏｓｐｈ ａｔｉｃ ａｃｉｄ）、ジホスファチジルグリセロール、ポリ（エチレングリコ ール）−ホスファチジルエタノールアミン、ジミリストイルホスファチジルグリ セロール、ジオレオイルホスファチジルグリセロール、ジラウリルオイルホスフ ァチジルグリセロール、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、ジステア リルオイルホスファチジルグリセロール、ジミリストイルホスファテックアシド 、ジパルミトイルホスファテックアシド、ジミリストイルホスフィタジル（ｐｈ ｏｓｐｈｉｔａｄｙｌ）セリン、ジパルミトイルホスファチジルセリン、脳のホ スファチジルセリン及びこれらの混合物であり得る。好ましくは負に帯電したリ ン脂質はホスファチジルグリセロールである。 両性イオンのリン脂質はホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールア ミン、スフィンゴミエリン、レシチン、リゾレシチン、リゾファチジルエタノー ルアミン、セレブロシド類、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジパルミト シルホスファチジルコリン、ジステアリルオイルホスファチジルコリン、ジエラ イドイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジラウリ ルオイルホスファチジルコリン、１−ミリルトイル−２−パルミトイルホスファ チジルコリン、１−パルミトイル−２−ミリストイルホスファチジルコリン、１ −パルミトイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−ステアロイル− ２−パルミトイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルエタノ ールアミン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、脳のスフィンゴ ミエリン、ジパルミトイルスフィンゴミエリン、ジステアロイルスフィンゴミエ リン及びこれらの混合物であり得る。好ましくは、両性イオンのリン脂質はホス ファチジルコリンである。両性イオンのリン脂質は、正味の電荷がゼロである、 イオン化し得る基を有するあらゆるリン脂質である。 タキソールはタキソール、７−エピタキソール（ｅｐｉｔａｘｏｌ）、７−ア セチルタキソール、１０−デスアセチルタキソール、１０−デスアセチル−７− エピタキソール、７−キシロシルタキソール（ｘｙｌｏｓｙｌｔａｘｏｌ）、１ ０−デスアセチル−７−シロシルタキソール（ｓｙｌｏｓｙｌｔａｘｏｌ）、７ −グルタリルタキソール、７−Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシルタキソール、７−Ｌ− アラニルタキソール、タキソテレ（ｔａｘｏｔｅｒｅ）及びこれらの混合物であ り得る。好ましくはタキサンはタキソール又はタキソテレである。本発明の医薬 組成物は１．５−８．０モル％、好ましくは１．５から３．５モル％のタキサン を含有する。 リポソームは被包化された水相を含む、完全に閉じた２層膜である。リポソー ムは種々の多重層リポソーム（「ＭＬＶ」）（各々が水層で隔てられた同心円の 膜２層により特徴付けられる玉ねぎの様な構造）又は一枚膜リポソーム（１つの 膜２層を有している）。 リポソーム調製の以下のパラメータは以下の様にベシクルの大きさ及び脂質濃 度の関数である。（１）捕獲された体積、これは特定量の脂質により閉じられた 体積として定義され、総脂質１モル当たりに捕えられたリットル単位として表さ れる（１ｍｏｌ^-1及び（２）被包化効率、これは２層により隔離された水層コ ンパートメントの関数として定義され、百分率で表される。捕獲された体積はリ ポソームの半径及びベシクルの脂質組成により次に影響される内部の膜２層の数 及び溶媒のイオン組成に依存する。被包化効率は脂質濃度に直接的に比例する； より多く脂質が存在する場合にはより多くの溶質がリポソーム内に隔離され得る ［Ｄｅａｍｅｒ及びＵｓｔｅｒ、「リポソーム調製：方法及び機構」、Ｌｉｐｏ ｓｏｍｅｓ 、編集Ｍ．Ｏｓｔｒｏ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，ニ ューヨーク，２７−５１頁（１９８３）を参照せよ、これは引用により本願明細 書に挿入される］。 薬物を含んでいるリポソーム懸濁液の調製方法はＳｚｏｋａらによってレビュ ーされた様な通常のリポソーム調製方法に一般に従う［Ａｍ Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐ ｈｙｓ．Ｂｉｏｅｎｇ ．９：４６７（１９８０）（「Ｓｚｏｋａら」）、これは 引用これは引用により本願明細書に挿入される］。 １つの好ましい方法においては、ベシクルを形成している脂質を適切な有機溶 媒又は溶媒系に取り入れ、減圧下又は不活性ガス下に乾燥（又は凍結乾燥）して 脂質フィルムとする。タキサン化合物をフィルムを形成する脂質に含ませること が好ましい。脂質溶液中の薬物濃度はリポソーム中の最終最大薬物濃度よりも過 度のモルにて含ませて、リポソーム中における最大薬物捕獲を得ても良い。 乾燥した脂質又は脂質／薬物の水和に使用された水性溶媒は生理学的に許容で きる溶媒であり、好ましくは発熱物質不含の生理学的塩水又は水中の５％デキス トロースであり、非径口の流体置換物として使用される様なものである。溶液を 、例えば水溶性鉄キレーター及び／又は溶解性の第２の化合物（例えばペプチド 免疫促進物）などの他のいかなる溶媒成分と所望の溶媒濃度において混合する。 脂質を迅速な状態（振動を用いて）下又は遅い状態（振動無し）下に水和する。 脂質は水和してそのサイズが典型的には約０．５ミクロンから１０ミクロンの間 であるか又はそれ以上の多重層リポソームの懸濁液を形成する。一般に、上記の 工程におけるＭＬＶのサイズの分布は振動の間により迅速に脂質フィルムを水和 することによって、より小さいサイズへと移動させ得る。得られた膜２層の構造 は脂質の疎水性（非極性）「尾」が２層の中心へ配向し、一方、親水性（すなわ ち 極性の）「頭」が水層へと配向している様なものである。 他の方法においては、乾燥したベシクルを形成している脂質及びタキソールを 適切な量、混合し、必要ならば温めて、水混和性有機溶媒中又は溶媒混合物中に 溶解する。その様な溶媒の例としてはエタノール又は種々の比率のエタノール及 びジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）がある。次に薬物／脂質／溶媒混合物を十 分な容量の水性受容体相に加えリポソームの自発的な形成を起こす。この水性受 容体相は必要ならば温めて、全ての脂質を溶解状態に維持しても良い。この受容 体相を迅速に攪拌するか又は穏やかに振動しても良い。薬物／脂質／溶媒混合物 を小さいオリフィスを通して迅速に注入しても良く、又は直接注いでも良い。数 分間から数時間インキュベーションした後、減圧、透析又は透析濾過（ｄｉａｆ ｉｌｔｒａｔｉｏｎ）により有機溶媒を除去し、ヒトに投与するのに適したリポ ソーム懸濁液を残す。 他の方法においては、乾燥したベシクルを形成している脂質及びタキソールを 適切な量、十分高い蒸気圧及び凍結点を用いて凍結−乾燥（凍結乾燥）により除 去ができる好ましい有機溶媒に混合し、必要ならば温めて溶解する。その様な溶 媒の例にはｔｅｒｔ−ブタノール及びベンゼンがある。次に薬物／脂質／溶質混 合物を凍結し、高い真空下に置く。凍結方法の例としては「シェル（ｓｈｅｌｌ ）凍結」があり、これは薬物／脂質／溶媒混合物の含まれている容器に渦を巻か せ、回転させ、脂質とベシクルの壁との接触を最大とし、さらに液体窒素又はア ルコール又はアセトンなどの溶媒と混合した二酸化炭素の氷などの冷却物質中へ その容器を置く。次に薬物／脂質／溶媒混合物の構成物の分離無しにこの混合物 を迅速に凍結する。凍結乾燥により溶媒を除去した結果ふわふわした乾燥粉末が 得られる。構成物の化学的分解又は湿気の吸収を減少する状態にて長期間、この 薬物／脂質粉末を保管してもよい。この様な状態の例には乾燥した不活性ガス（ アルゴン又は窒素など）下に密封すること及び冷所での保管がある。その物質を 投与することが好ましい時に生理学的に許容される水性溶媒、好ましくは非経口 投与の流体置換物として使用される様な発熱性物質不含の生理食塩水又は水中の ５％デキストロースを加えることにより再構築するのが好ましい。再構築により 自然 にリポソームの形成が生じ、それを以下に詳細した方法により大きさを洗練して も良い。 別法では、リポソームを調製して被包化された化合物を含有する場合に、高い 被包化効率を得るリポソーム調製方法が好ましいかもしれない。例えば、Ｓｚｏ ｋａにより記載された逆相蒸発方法によると約５０％もの高い被包化効率を得ら れる。結果として、被包化された化合物（例えばペプチドホルモン）の損失は最 小となる。この方法により製造された逆相蒸発ベシクル（「ＲＥＶ」）はオリゴ 層膜になりがちであり、０．３から２０ミクロンの広い間の異種サイズを有し、 平均は０．４から０．５ミクロンである。 リポソーム懸濁液は選択されたサイズ分布のベシクルとなるようにサイズを合 わせても良い。このサイズ合わせはより大きなリポソームを消去し、最適の薬動 力学的性質を有する一定のサイズを製造するために用いる。 リポソームのサイズ及びサイズの異質性を減少するために複数の技術が利用で きる。槽又はプローブ超音波のいずれかによるリポソーム懸濁液の超音波処理に よりサイズ減少が進行し、サイズが約０．０２５ミクロン以下の小さい一枚膜リ ポソームが製造される。ホモジナイゼーションは、大きいリポソームをより小さ いリポソームに破砕するためのエネルギーを与えることに基づく他の方法である 。選択されたリポソームサイズが観察されるまでＭＬＶを標準的エマルジョンホ モジナイザーにより再度環状化するか又は小さなオリフィスを通して高いせん断 力にて押し出す。両方の方法において、粒子サイズ分布を通常のレーザー光線粒 子サイズ識別器によりモニターできる。 小孔のポリカルボネート膜を通してリポソームを押し出すことは、膜の孔のサ イズに依存して、比較的良好な一定のサイズ分布にリポソームのサイズを減少す る効率的な方法である。典型的には所望のリポソームサイズ分布が得られるまで 数回懸濁液を膜に通すことを繰り返す。リポソームサイズを徐々に減少するため にリポソームを順番により小さい孔の膜を通して押し出しても良い。 遠心分離及び分子サイズクロマトグラフィーは減少した粒子サイズを有するリ ポソーム懸濁液を製造するために使用できる他の方法である。これらの２つの方 法は両者共により大きな粒子をより小さい粒子へと変換するのではなく、むしろ 大きなリポソームの優先的な除去を包含している。リポソームの収率は相応じて 減少する。 脂質２層の物理的性質を変化させるためにコレステロール及びステロール類を 本発明のリポソームに挿入しても良い。コレステロールを含有する多重層及び一 枚膜リポソームをホリン脂質からのリポソーム調製に関する上記の工程により調 製することができる。リポソームに挿入するのに適切なステロール類にはコレス テロール、コレステロール誘導体、コレステリルエステル類、ビタミンＤ、植物 ステロール類、ステロイドホルモン類及びこれらの混合物がある。有効なコレス テロール誘導体にはコレステロールーホスホコリン、コレステロールポリエチレ ングリコール及びコレステロール−ＳＯ₄があり、植物ステロール類はシトステ ロール、カムペステロール及びスチグマステロールであってもよい。米国特許第 ４，８９１，２０８号［（Ｊａｎｏｆｆら）、これは引用により本願明細書に挿 入する］に記載されている様にステロール類の有機酸誘導体の塩の形状を使用す ることも可能であろう。本発明の医薬組成物は０．０１から５０モル％のステロ ールを含有することができる。 本発明の医薬組成物は乾燥した凍結乾燥された形状又は液状の懸濁物の形状と することができる。しかし数カ月までの期間、安定に保管できるので凍結乾燥さ れた形状が好ましい。反対に、緩衝化された中性ｐＨの塩水中の本発明の医薬組 成物の懸濁液は、温度、タキソール含量及びリン脂質構成に依存してたった数時 間から数カ月の期間、安定である。 本発明の医薬組成物の有効量を癌患者に投与することによって本発明の医薬組 成物は癌患者の処置に有用である。本発明のリポソームは単独で投与しても良く 又は適切な医薬的担体又は希釈剤と組み合わせて投与してもよい。 本明細書において、抗癌剤組成物は所望の使用のために適切ないかなる適当な 形状に作り上げてもよい。例えば、経口、非経口又は局所投与。非経口投与の例 は筋肉内、静脈内、腹膜内、経直腸及び皮下投与である。 希釈剤又は担体成分はそれらがタキサン化合物の治療効果を減じることがない 様に選択されねばならない。 経口に使用するための適切な剤形には錠剤、分散可能な粉末剤、カプセル剤、 顆粒剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル剤がある。錠剤用の不活性な希釈剤 及び担体には例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース及びタルク がある。錠剤はまたスターチ及びアルギン酸などの顆粒化剤及び崩壊剤、スター チ、ゼラチン及びアカシアなどの結合剤及びステアリン酸マグネシウム、ステア リン酸及びタルクなどの潤滑剤を含んでもよい。錠剤はコーティングなしでもよ く又は崩壊及び吸収を遅らせるために既知の技術によってコーティングしてもよ い。カプセル中に使用してもよい不活性な希釈剤及び担体には例えば、炭酸カル シウム、リン酸カルシウム及びカオリンがある。懸濁剤、シロップ剤及びエリキ シル剤は通常の賦形剤（例えば、メチルセルロース、トラガカント、アルギン酸 ナトリウム）、湿潤剤（レシチン及びステアリン酸ポリオキシエチレンなど）及 び保存剤（例えばエチル−ｐ−ヒドロキシ安息香酸）を含んでもよい。 非経口投与に適した剤形には溶液、懸濁液、分散剤、乳剤などがある。それら はまた、使用の直前に無菌の注射可能な溶媒中に溶解又は懸濁できる無菌の固体 組成物の形状に製造してもよい。それらは本分野にて公知の懸濁化剤又は分散剤 を含んでもよい。 本発明の１つの態様は本発明化合物に感受性の腫瘍を有する動物宿主における 腫瘍の成長を治療的に阻止することに関する。これは該宿主に、抗腫瘍に有効な 量の該化合物を投与することを包含する。使用される本発明化合物の実際の好ま しい量は特定の化合物、製剤化された特定の組成、投与方法及び特定の位置、宿 主及び処置される病気によって変化するであろうことは承認されるであろう。作 用を修飾する多くの因子を当業者は考慮するだろう。例えば体重、性別、食事、 投与時間、投与経路、排出経路、宿主の状態、薬の組み合わせ、過敏症反応及び 重篤さ及び病気の重篤さ。投与は最大の耐性用量内において連続的に又は間断的 に行うことができる。与えられた状態のセットのための最適な投与経路は当業者 が上記のガイドラインの観点から通常の用量の投与を用いて確認することができ る。実施例 材料 結晶性タキソール、希釈剤（Ｄｉｌｕｅｎｔ）１２および１：１に混合 した希釈剤１２（ポリエトキシ化したひまし油）および無水エタノールに溶解し たタキソール（３０ｍｇ／５ｍｌ）を国立癌機構（Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）か ら得た。セルモファーＥＬ（登録商標）もまたＢＡＳＦ社からの贈与物として得 た。リン脂質をＡｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ（Ｂｒｉｍｉｎｇｈａ ｍ，ＡＬ）又はＰｒｉｎｃｅｔｏｎ Ｌｉｐｉｄｓ（Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ ）から購入し、アルゴン下のクロロホルム中に−７０℃にて保管した。使用した 全ての有機溶媒は試薬又は高性能液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）勾配 であった。体重１５から２０グラムの雌ＢＡＬＢ／ｃマウスをＨａｒｌａｎ Ｓ ｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）から得た。 実施例１ −− タキソール−リポソームの調製 Ｐｅｒｅｚ−Ｓｏｌｅｒ，Ｒ．，Ｌｏｐｅｚ−Ｂｅｒｅｓｔｅｉｎ，Ｇ．，Ｌ ａｕｔｅｒｓｚｔａｉｎ，Ｊ．，Ａｌ−Ｂａｋｅｒ，Ｓ．，Ｆｒａｎｃｉｓ，Ｋ ．，Ｍａｃｉａｓ−Ｋｉｇｅｒ，Ｄ．，Ｒａｂｅｒ，Ｍ．Ｎ．及びＫｈｏｋｈａ ｒからの適合した方法を用いてタキソール及びリン脂質を含有している凍結乾燥 粉末の水和によりタキソール−リポソームを調製した［「リポソームに捕獲され たシス−ビス−ネオデカノエート−トランス−Ｒ，Ｒ，−１，２，−ジアミノシ クロヘキサンプラチニウム（ｉｉ）のＡ．Ｒ．第１相臨床及び薬理学的研究」、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． 、５０：４２５４−４２５９（１９９０）、これは引用 により本願明細書中に挿入される］。簡単には、タキソールをクロロホルムに溶 解し、丸底フラスコ内でリン脂質と混合し、クロロホルムを回転エバポレーター 内で４０℃にて蒸発した。次にタキソール−脂質フィルムをｔｅｒｔ−ブタノー ル中に溶解して、脂質：タキソールのモル比３３：１及び脂質濃度１００ｍＭと した。ブタノール溶液の２つの１０ミル等分を無菌試験管内に入れて、液体窒素 中シェル（ｓｈｅｌｌ）−凍結し、２４時間凍結乾燥した。この凍結乾燥粉末を 緩衝液（ＮａＣｌ／Ｔｅｓ／ＥＤＴＡ：１４０ｍＭ／１０ｍＭ／０１ｍｍ）で水 和して多重層リポソームの懸濁液を製造した。より小さいベシクル（例えばＳＵ Ｖ） を得るためにリポソーム懸濁液をバス ソニケーター（Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｕｐｐｌｉｅｓ Ｃｏ．Ｉｎｃ．，Ｈｉｃｋｓｖｉｌｌｅ，ＮＹ）中アルゴン 下に２０℃にて３０分間超音波処理した。リポソームを逆相ＨＰＬＣによりタキ ソールについて分析し、リン脂質含量について分析した［Ｂａｒｔｌｒｔｔ，Ｇ ．Ｒ．，「カラムクロマトグラフィーにおけるリン分析」、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈ ｅｍ． 、２３４：４６６−８（１９５９）、これは引用により本願明細書中に挿 入される］。 タキソール−リン脂質懸濁液の化学的及び物理的安定性を評価するための詳細 な方法を他の所で得る［Ｓｈａｒｍａ，Ａ．及びＳｔｒａｕｂｉｎｇｅｒ，Ｒ． ，「新規なタキソール製剤：タキソールを含有しているリポソームの調製及び特 徴付け」、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，提出された］。簡単には物理的安定性をいく つかの方法により測定した。第１に、異なる干渉の（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ）顕微鏡を用いて懸濁液を調べてリポソームの凝集 又はタキソールの結晶を観察した。第２に負の染色トランスミッションエレクト ロン顕微鏡を用いて懸濁液を評価した。第３に小さな一枚膜リポソームを間断的 に１５，０００ｘｇにて１５分間の遠心分離にかけた。どちらの状態においても リポソームは懸濁化されて残り、一方タキソール沈殿が沈殿した。第４にリポソ ームを０．１μｍ孔のポリカルボネートフィルムを通してタキソールの沈殿から 分離した。後者の２つの分離方法にかけたタキソール−リポソーム懸濁液をタキ ソール及びリン脂質含量について再分析した。各々の変化を不安定性の徴候とし て説明した。 実施例２−−タキソール−リポソーム製剤の物理的安定性。 タキソール及び脂質をモル比１：３３（薬物：脂質）で含有しているホスファ チジル−グリセロール：ホスファチジルコリン（ＰＧ：ＰＣ１：９）の製剤は物 理的に安定であり、４℃にて２カ月以上その最初のタキソール含量の約１００％ を保持した［Ｓｈａｒｍａ，Ａ．及びＳｔｒａｕｂｉｎｇｅｒ，Ｒ．，「新規な タキソール製剤：タキソールを含有しているリポソームの調製及び特徴付け」、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ． ，提出された］。クロマトグラフから余分なピークもタキ ソール含量の減少もないことが明らかであったので、タキソールはリポソーム中 にて４℃において２カ月以上化学的に安定に残っていた［Ｓｈａｒｍａ，Ａ．及 びＳｔｒａｕｂｉｎｇｅｒ，Ｒ．，「新規なタキソール製剤：タキソールを含有 しているリポソームの調製及び特徴付け」、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，提出された ］。９０％ＰＣ及び１０％ジパルミトイル−ホスファチジルエタノールアミンに 結合したポリ（エチレングリコール）（「ＰＥＧ−ＤＰＰＥ」）又は水素化した ホスファチジルイノシトール（「ＨＰＩ」）のいずれかを含有する製剤は４℃に おいて２日間物理的に安定であった［Ｓｈａｒｍａ，Ａ．及びＳｔｒａｕｂｉｎ ｇｅｒ，Ｒ．，「新規なタキソール製剤：タキソールを含有しているリポソーム の調製及び特徴付け」、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．，提出された］。 実施例３−−タキソール−リポソームの毒性。 静脈内経路にて投与されたタキソール−リポソーム製剤についての最大耐性用 量（「ＭＴＤ」）を健康なＢＡＬＡ／ｃ雌マウスにおいて測定した。ＭＴＤを明 確にするための調査実験を１群２匹の動物について行った。投与量を５ｍｇ／ｋ ｇから開始し、２倍増に増加した。体重変化及び生存率の綿密な観察により薬物 の影響を調べた。投与の中止の１週間以内に１０％より多い体重損失を生じる最 大の非致死的なタキソール用量をＭＴＤとして定義した。２０％を越える体重損 失を示した動物を殺傷した、これはこの程度の変化は致死的毒性を示すことが多 かったからである（Ｅ．Ｍａｙｈｅｗ，未公開の観察）。調査実験の終了後、さ らに８匹のマウスの３群を用いて正確に近いＭＴＤを精密化した。 実施例４−−インビボ系におけるプロトタイプタキソール−リポソームの毒性 。 希釈剤１２中にてｉ．ｖ．経路で投与された遊離のタキソールの１回投与のＭ ＴＤは約３０ｍｇ／ｋｇであることが以前の研究で明らかにされている［Ｓｔｒ ａｕｂｉｎｇｅｒ，Ｒ．，Ｓｈａｒｍａ，Ａ．，Ｍｕｒｒａｙ，Ｍ．及びＭａｙ ｈｅｗ，Ｅ.，「新規なタキソール製剤：タキソールを含有しているリポソーム 」、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，出版（１９３３）］、同様の結 果をここでも得た。用量３０ｍｇ／ｋｇ以上を投与するために必要なセモルファ ー／エタノールベシクルの量もまた毒性であり、その量の賦形剤由来の急性薬物 毒性 を消去することは困難であった。遊離タキソールのＭＴＤにおいて又はそれ以上 で投与されたタキソール−リポソーム製剤は良好に許容された［Ｓｔｒａｕｂｉ ｎｇｅｒ，Ｒ．，Ｓｈａｒｍａ，Ａ．，Ｍｕｒｒａｙ，Ｍ．及びＭａｙｈｅｗ， Ｅ．，「新規なタキソール製剤：タキソールを含有しているリポソーム」、Ｊ． Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ，出版（１９３３）］。その製剤中のタキ ソール濃度（３ｍｇ／ｍｌ）及び注射容積（０．３ｍｌ）の制限のために我々は １回投与にて投与されたリポソーム製剤についてのＭＴＤを見つけることができ なかった。したがって、リポソーム製剤についてのＭＴＤは６０ｍｇ／ｋｇより 大きく（１回投与）及び２００ｍｇ／ｋｇより大きい（３時間をかけて４回投与 ）［Ｓｔｒａｕｂｉｎｇｅｒ，Ｒ．，Ｓｈａｒｍａ，Ａ．，Ｍｕｒｒａｙ，Ｍ． 及びＭａｙｈｅｗ，Ｅ．，「新規なタキソール製剤：タキソールを含有している リポソーム」、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，出版（１９３３）］ 。 実施例５−−細胞成長阻止活性。 雌のＢＡＬＢ／ｃマウス（１６−２０ｇの体重範囲）を大腸−２６（Ｃ−２６ ）、ネズミ大腸腫瘍モデルの宿主として使用した［Ｃｏｒｂｅｔｔ，Ｔ．Ｈ．， Ｇｒｉｓｗｏｌｄ，Ｄ．Ｐ．，Ｒｏｂｅｏｔｓ，Ｂ．Ｊ．，Ｐｅｃｋｈａｍ，Ｊ ．及びＳｃｈａｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．，「実験的治療のためのマウス大腸腫瘍モデル 」、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ.，Ｒｅｐ．５：１６９−１８６（１９ ７５）、これは引用により本明細書に挿入される］。腫瘍を皮下に移植し、コラ ゲナーゼ、プロテアーゼ及びＤＮアーゼを用いて、受容動物の腫瘍から細胞を切 除して移植片を調製した［Ｈｕａｎｇ，Ｓ．Ｋ．，Ｍａｙｈｅｗ，Ｅ．，Ｇｉｌ ａｎｉ，Ｓ．，Ｌａｓｉｃ，Ｄ．Ｄ．，Ｍａｒｔｉｎ，Ｆ．Ｊ．及びＰａｐａｈ ａｄｊｏｐｏｕｌｏｓ，Ｄ．、「Ｃ−２６大腸カルシノーマを有するマウスにお ける立体的に安定化されたリポソームの薬動力学及び治療学」、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． 、５２：６７７４−８１（１９９２）、これは引用により本明細書に挿 入される］。トリパンブルー排除による細胞生存力は８０％より大きかった。 左のわき腹における皮下の腫瘍を０．１ｍｌの体積中１０⁶個の生存能力のあ る細胞を注射することにより形成した。次に種々の処置群にマウスをランダムに 分 けて番号を付けた。１匹のマウス当たりの投与量をその体重に基づいて調整し、 処置の時に決定した。腫瘍の移植７又は８日後に処置を開始し、この処置は尾の 静脈経由のｉ．ｖ．注射であった。コントロールの処置としてタキソールなしの 緩衝液又は希釈剤１２を使用した。動物の体重及び腫瘍体積を腫瘍の体積が２０ ００ｍｍ³に達する（この時点にて人道的理由から動物を殺傷した）まで１週間 に５回測定した。腫瘍の３方向の長さを測定することにより腫瘍体積を決定し、 生成物の直径の１／２として計算した［Ｂｅｇｇ，Ａ．Ｃ．，「腫瘍成長の毎日 のアッセイの原理及び実際」、Ｒｏｄｅｎｔ Ｔｕｍｏｒ（Ｒ．Ｆ．Ｋａｌｌｍ ａｎ（編集））、１１４−１２１頁、ニューヨーク：Ｐｅｒｇａｍｍｏｎ発行（ １９８７）、これは引用により本明細書に挿入される］。ＢＭＤＰ １Ｌプログ ラム（ＢＭＤＰ統計ソフトウエアー会社、ロサンゼルス、ＣＡ）を用いてデータ ーを統計的有意について分析した。 遊離の又はリポソームに被包化されたタキソールの細胞成長阻止活性を種々の 腫瘍細胞系に対してインビボ系にて試験し、遊離のタキソールに対する感受性は ほとんど１００倍に変化した。Ｃ−２６、すなわちネズミの大腸腫瘍系はタキソ ールに対して最低の感受性（ＩＣ₅₀＝９０±１０μＭ）を示し、一方Ａ１２１ａ 、すなわちヒトの卵巣腫瘍系は最高の感受性（ＩＣ₅₀＝１．５±０．７μＭ）を 示した。一般に全てのヒトの腫瘍系はＣ−２６よりもタキソールに対する感受性 が少なくとも１０倍以上であった。 大部分の細胞系についてタキソール−リポソーム製剤（ＰＧ：ＰＣ １：９） は遊離のタキソールと等しい能力であった。Ｃ−２６などの他の系について、タ キソール−リポソームは遊離のタキソールよりも３倍能力が少なかった（ＩＣ₅₀ ＝２５０±７０μＭ）。ある細胞系についてのタキソールの能力の調査において 、０．１％ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）によって、すなわちその媒質 に細胞培養に加える前に薬物を溶かしたことによって、成長阻止活性が増強され ることが発見された。ある腫瘍系に対しては（例えば９Ｌラット神経膠肉腫及び Ａ９０ヒト卵巣腫瘍）、薬物を血清を含有している培養溶媒中に直接溶解する場 合と比較してＤＭＳＯにより約８倍遊離タキソールの活性が増加した（データー は 示されていない）。しかし、Ｃ−２６に対する遊離のタキソールの細胞成長阻止 効果はＤＭＳＯによって影響されなかった。さらなる研究は、インビトロ系にお けるＣ−２６に対するタキソール−リポソームの比較的より低い能力の理解に関 する。 実施例６−−１回投与における抗腫瘍活性。 ヒトの癌においては腫瘍の薬物に対する抵抗が頻繁に致命的に起こるので、タ キソール−リポソーム製剤の抗腫瘍活性を評価するために我々はタキソール−耐 性Ｃ−２６腫瘍モデルを選択した。数個の投与量範囲及び投与スケジュールを用 いて抗腫瘍活性を評価した。Ｃ−２６腫瘍の成長に対するタキソールの１回投与 の効果を調べるために、ｓ．ｃ．腫瘍移植８日後に１回のｉ．ｖ．注射により遊 離又はリポソームに被包化されたタキソールを投与した。希釈剤１２中の遊離タ キソールを１５、２５及び３０ｍｇ／ｋｇにて試験し、後者は希釈剤１２中の薬 物のＭＴＤであった。３つの異なるタキソール−リポソーム製剤を２５、３５及 び４５ｍｇ／ｋｇにて試験した。塩水又は希釈剤１２コントロール（図１Ａ）と 比較して、遊離タキソール（図１Ｅ）は腫瘍成長への影響を示さなかった。対照 的に、ＰＧ：ＰＣ（１：９）からなるＳＵＶ（図１Ｂ）又はＨＰＩ：ＰＣ（１： ９）（図１Ｃ）は腫瘍の成長を遅延させた。ＰＥＧ−ＤＰＰＥ：ＰＣ（１：９） からなるＳＵＶ（図１Ｄ）はコントロールと比較して腫瘍の成長への影響を示さ なかった。 タキソール−リポソームについて観察された成長遅延の有意性を試験するため に、各個々の動物の生の腫瘍体積データーについてもまたＢＭＤＰ １Ｌプログ ラムを用いて統計的分析を行った。過剰反応を示す動物又は実験の間に、（例え ば、処置による死亡の発生において又は殺傷により）群の大きさが変わることに よって大きく影響を受ける処置群の平均データー（図１参照）とは異なり、ＢＭ ＤＰの中央値及び有意性の計算は群の大きさを考慮し、研究基準を満足しないデ ーターを検閲している。腫瘍が１５００ｍｍ³に達するために必要な時間の中央 値を全ての処置群について計算した（図４Ａ）。また図４Ａには中央値の上下の 棒の各々によって示された第１の及び第３の四分位数（すなわち第２５及び第７ ５百分位）が示されている。腫瘍体積１５００ｍｍ³に達するのが最も遅い成長 の及び最も速い成長の四分位数における動物に対する中央値として第２５及び第 ７５百分位を定義することができる。試験したすべての投与量レベルにおいてＰ Ｇ：ＰＣ（１：９）からなるＳＶＵは腫瘍成長を有意に遅延することが統計的分 析により示された（ｐ＜０．０５）。腫瘍成長の遅延は３５ｍｇ／ｋｇにおいて 有意性が高かった（ｐ＜０．００５）。ＨＰＩ：ＰＣ（１：９）からなるＳＵＶ もまた試験した全ての３つの投与量レベルにて腫瘍成長を遅延した（ｐ，０．０ ５）。遊離タキソール又はＰＥＧ−ＤＰＰＥ：ＰＣ（１：９）からなるＳＵＶは ベシクル又は緩衝液コントロールと比較して腫瘍成長に対して有意な遅延を示さ なかった（ｐ．０．０５）。 実施例７−−４回投与における抗腫瘍活性。 １回の薬物のｉ．ｖ．投与を用いて、遊離タキソールのＭＴＤに含まれる及び これを越える投与量においてタキソール−リポソームの有意な抗腫瘍活性が観察 された。１回の注射により投与できた遊離タキソールは３５ｍｇ／ｋｇ以下であ るという限界（希釈剤１２の毒性のために）を迂回するために、多数回投与の数 個のスケジュールを試験した。さらに我々は抗腫瘍活性についての他のリポソー ム形成パラメーターの効果を評価した。あるプロトコールにおいては、ｓ．ｃ． 腫瘍移植後７、８、１２及び１３日において動物に投与した。希釈剤１２中の遊 離タキソールを１０、２０及び３０ｍｇ／ｋｇにおいて試験した（すなわち各々 累積投与量４０、８０及び１２０ｍｇ／ｋｇ）。３つのタキソール−リポソーム 製剤を１回の注射につき２０、３０及び４０ｍｇ／ｋｇにおいて試験した（すな わち各々累積投与量８０、１２０及び１６０ｍｇ／ｋg）。製剤はＰＧ：ＰＣ（ １：９）からなるＭＬＶ又はＳＵＶ（各々、図２Ｂ又は図２Ｃ）及びＰＥＧ−Ｄ ＰＰＥ：ＰＣ（１：９）からなるＳＵＶ（図２Ｄ）を含んでいた。 試験した投与量において、緩衝液又はベシクルコントロール（図２Ａ）と比較 して３つのリポソームに基づく製剤の全ては腫瘍成長を遅延した（図２Ｂ−２Ｄ ）。反対に、１回の注射当たり３０ｍｇ／ｋｇ以下の遊離タキソール（累積投与 量１２０ｍｇ／ｋｇ以下）は腫瘍の進行に影響を示さなかった（図２Ｅ）。 ＢＭＤＰ １Ｌプログラムを用いて上記の様に統計的分析を応用して、腫瘍が １０５５ｍｍ³の大きさに到達するためにかかる時間の中央値を計算し、図４Ｂ にプロットした。緩衝液又はベシクルコントロールと比較して、試験した投与量 において遊離タキソールは腫瘍成長に有意な遅延を示さなかった（ｐ＞０．０５ ）。ＰＧ：ＰＣ（１：９）からなるＳＵＶは１回の注射当たり３０ｍｇ／ｋｇ（ すなわち累積投与量１２０ｍｇ／ｋｇ）において有意に腫瘍成長を遅延し（ｐ， ０．０５）、１回の注射当たり４０ｍｇ／ｋｇ（すなわち累積投与量１６０ｍｇ ／ｋｇ）において高い有意性で腫瘍成長を遅延した（ｐ，０．００５）。ＰＧ： ＰＣ（１：９）からなるＭＬＶは試験した全ての投与量にて有意に腫瘍成長を遅 延した（ｐ，０.０１）。同様にＰＥＧ−ＤＰＰＥ：ＰＣ（１：９）からなるＳ ＵＶもまた試験した全ての投与量にて有意に腫瘍成長を遅延し（ｐ＜０．０５） 、４０ｍｇ／ｋｇにおいて腫瘍の成長は高い有意性で腫瘍成長を遅延した（ｐ＜ ０．００５）。 腫瘍成長に対するリポソームの直径の有意な影響は観察されなかった。対応す る投与量においてＳＵＶ及びＭＬＶは腫瘍成長に同じ遅延（ｐ＞０．０５）を示 した。同様にリポソームの組成による腫瘍成長への影響は認識されなかった。Ｐ Ｇ：ＰＣ（１：９）からなるＳＵＶ及びＰＥＧ−ＤＰＰＥ：ＰＣ（１：９）から なるＳＵＶは腫瘍の進行においてほとんど同じ遅延を示した（ｐ＞０．０５）。 実施例８−−９回投与における抗腫瘍活性。 試験した種々のタキソール−リポソーム製剤の間には有意な抗腫瘍活性の差異 が観察されなかったので、さらに抗腫瘍活性を評価するために我々はＰＧ：ＰＣ （１：９）からなるＳＵＶを選択した。タキソール−リポソーム製剤のＭＴＤに 到達し、これを越えるために、９回投与のスケジュールを試験した。動物に各週 に３日連続して投与し、処置を３週間行った。腫瘍移植８日後に処置を開始し、 尾の静脈経由でｉ．ｖ．注射により投与した。尾の静脈が注射不可能となった動 物のために（大部分が遊離タキソール及びベシクルコントロール群においての動 物である）残りの投与量を腹膜内投与した。全ての動物は少なくとも９回投与量 の内の６回を静脈内に受けた。希釈剤１２中の遊離タキソールを１回の注射当た り１０、２０及び３０ｍｇ／ｋｇにおいて試験した（すなわち各々累積投与量９ ０、１８０及び２７０ｍｇ／ｋｇ）。タキソール−ＳＵＶを１回の注射当たり１ ０、４０及び６０ｍｇ／ｋｇにおいて試験した（すなわち各々累積投与量９０、 ３６０及び５４０ｍｇ／ｋｇ）。 図３Ｃは非処置コントロール（図３Ａ）と比較していかなる投与量においても 遊離タキソールが腫瘍の進行に遅延を与えないことを示している。遊離タキソー ルの最大の投与量、３０ｍｇ／ｋｇは個々の注射として許容されたが、２１日（ すなわちタキソール処置開始１２日後）までに全ての動物に累計的に致死であっ た。遊離タキソールの２０ｍｇ／ｋｇの投与量（すなわち累積投与量１８０ｍｇ ／ｋｇ）において大部分の動物は生き残ったが、腫瘍の進行に対する影響は観察 されなかった。 反対に、４０ｍｇ／ｋｇの投与量（すなわち累積投与量３６０ｍｇ／ｋｇ）に て投与されたタキソール−リポソームは腫瘍の成長を有意に遅延した（図３Ｂ） 。より低い投与量、１０ｍｇ／ｋｇ（すなわち累積投与量９０ｍｇ／ｋｇ）の抗 腫瘍効果は観察されなかった（図３Ｂ）。最大の投与量、６０ｍｇ／ｋｇ（すな わち４回の注射における累積投与量３６０ｍｇ／ｋｇ）は個々の注射として許容 されたが、２１日（すなわちタキソール処置開始１２日後）までに全ての動物に 累計的に致死であった。 腫瘍が１５００ｍｍ³のサイズに到達するのにかかる時間の中央値を計算し、 各々の動物についての腫瘍成長についてのデーターを上記の様にＢＭＤＰ １Ｌ を用いて統計的に分析した（図４Ｃ）。遊離タキソールの致死的濃度に達するま での投与量及び致死的濃度を含むいかなる投与量も腫瘍の進行には有意な効果が なかった。反対に、ＰＧ：ＰＣ（１：９）からなるＳＵＶは試験した全ての投与 量にて腫瘍の成長を有意に遅延した（ｐ＜０．０５）。成長遅延は４０及び６０ ｍｇ／ｋｇにて有意性が高いが（ｐ＜０．００５）、後者は致死的であった。 例示のために本発明を詳細に記載したが、この様な記載は単にその目的のため であり、以下の請求の範囲により定義される精神及び範囲から離れずに当業者は 変形物をその中において作ることができることが理解される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，Ｃ Ｎ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ， ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，Ｎ Ｚ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者 シャルマ、アマルナス アメリカ合衆国14215ニューヨーク、バッ ファロー、ヒューイット・アベニュー360 番 (72)発明者 メイヒュー、エリック アメリカ合衆国14139ニューヨーク、サウ ス・ウェールズ、バーモント・ヒル・ロー ド6421番

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 癌の処置における使用のための医薬組成物であって、該組成物中に医薬 的に有効量の少なくとも１つのタキサンが存在し、さらに１つ又はそれ以上の負 に帯電したリン脂質と１つ又はそれ以上の両性イオンのリン脂質との混合物が存 在し、該混合物は該少なくとも１つのタキサンを捕獲している医薬組成物。 ２． 該混合物が負に帯電したリン脂質と両性イオンのリン脂質とを１：９か ら３：７の比で含有している請求の範囲第１項に記載の医薬組成物。 ３． 該負に帯電したリン脂質が、ホスファチジルイノシトール、ホスファチ ジルセリン、ホスファチジルグリセロール、、ホスファテックアシド、ジホスフ ァチジルグリセロール、ポリ（エチレングリコール）−ホスファチジルエタノー ルアミン、ジミリストイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスファ チジルグリセロール、ジラウリルオイルホスファチジルグリセロール、ジパルミ トチルホスファチジルグリセロール、ジステアリルオイルホスファチジルグリセ ロール、ジミリストイルホスファテックアシド、ジパルミトイルホスファテック アシド、ジミリストイルホスフィタジルセリン、ジパルミトイルホスファチジル セリン、脳のホスファチジルセリン及びこれらの混合物からなる群から選択され る請求の範囲第１項に記載の医薬組成物。 ４． 該両性イオンのリン脂質が、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエ タノールアミン、スフィンゴミエリン、レシチン、リゾレシチン、リゾファチジ ルエタノールアミン、セレブロシド類、ジミリストイルホスファチジルコリン、 ジパルミトシルホスファチジルコリン、ジステアリルオイルホスファチジルコリ ン、ジエライドイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン 、ジラウリルオイルホスファチジルコリン、１−ミリストイル−２−パルミトイ ルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−ミリストイルホスファチジル コリン、１−パルミトイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−ステ アロイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチ ジルエタノールアミン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、脳の スフィンゴミエリン、ジパルミトイルスフィンゴミエリン、ジステアロイルスフ ィ ンゴミエリン及びこれらの混合物からなる群から選択される請求の範囲第１項に 記載の医薬組成物。 ５． 負に帯電したリン脂質が、ホスファチジルグリセロールであり、両性イ オンのリン脂質が、ホスファチジルコリンである請求の範囲第１項に記載の医薬 組成物。 ６． 該組成物が該タキサンを１.５−８.０モル％含有する請求の範囲第１項 に記載の医薬組成物。 ７． 該組成物が該タキサンを１.５−３.３モル％含有する請求の範囲第６項 に記載の医薬組成物。 ８． 該タキサンがタキソール、７−エピタキソール、７−アセチルタキソー ル、１０−デスアセチルタキソール、１０−デスアセチル−７−エピタキソール 、７−キシロシルタキソール、１０−デスアセチル−７−シロシルタキソール、 ７−グタリルタキソール、７−Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシルタキソール、７−Ｌ− アラニルタキソール、タキソテレ及びこれらの混合物からなる群から選択される 請求の範囲第１項に記載の医薬組成物。 ９． 該組成物が０.０２５から１０ミクロンの大きさの粒子の形状である請 求の範囲第１項に記載の医薬組成物。 １０． 該組成物が実質上タキサンの結晶を含有しない請求の範囲第１項に記 載の医薬組成物。 １１． さらにステロールを含有する請求の範囲第１項に記載の医薬組成物。 １２． 該ステロールがコレステロール、コレステロール誘導体、ビタミンＤ 、植物ステロール、ステロイドホルモン類、コレステリルエステル類及びこれら の混合物からなる群から選択される請求の範囲第１１項に記載の医薬組成物。 １３． 該組成物が０.０１から５０モル％の該ステロールを含有する請求の 範囲第１１項に記載の医薬組成物。 １４． 該組成物が乾燥した凍結乾燥された形状である請求の範囲第１項に記 載の医薬組成物。 １５． 該組成物が液状の懸濁物である請求の範囲第１項に記載の医薬組成物 。 １６． 請求の範囲第１項に記載の医薬組成物の有効量を癌患者に投与するこ とを包含する癌患者の処置方法。 １７． 癌の処置において使用するための医薬組成物であって、該組成物中に 医薬的に有効量の少なくとも１つのタキサンが存在し、さらに１つ又はそれ以上 の負に帯電したリン脂質と１つ又はそれ以上の両性イオンのリン脂質との混合物 が存在し、該混合物は該少なくとも１つのタキサンを捕獲しているリポソームの 形状である医薬組成物。 １８． 該混合物が負に帯電したリン脂質と両性イオンのリン脂質とを１：９ から３：７の比で含有している請求の範囲第１７項に記載の医薬組成物。 １９． 該負に帯電したリン脂質が、ホスファチジルイノシトール、ホスファ チジルセリン、ホスファチジルグリセロール、、ホスファテックアシド、ジホス ファチジルグリセロール、ポリ（エチレングリコール）−ホスファチジルエタノ ールアミン、ジミリストイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスフ ァチジルグリセロール、ジラウリルオイルホスファチジルグリセロール、ジパル ミトチルホスファチジルグリセロール、ジステアリルオイルホスファチジルグリ セロール、ジミリストイルホスファテックアシド、ジパルミトイルホスファテッ クアシド、ジミリストイルホスフィタジルセリン、ジパルミトイルホスファチジ ルセリン、脳のホスファチジルセリン及びこれらの混合物からなる群から選択さ れる請求の範囲第１７項に記載の医薬組成物。 ２０． 該両性イオンのリン脂質が、ホスファチジルコリン、ホスファチジル エタノールアミン、スフィンゴミエリン、レシチン、リゾレシチン、リゾファチ ジルエタノールアミン、セレブロシド類、ジミリストイルホスファチジルコリン 、ジパルミトシルホスファチジルコリン、ジステアリルオイルホスファチジルコ リン、ジエライドイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリ ン、ジラウリルオイルホスファチジルコリン、１−ミリストイル−２−パルミト イルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−ミリストイルホスファチジ ルコリン、１−パルミトイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−ス テアロイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファ チジ ルエタノールアミン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、脳のス フィンゴミエリン、ジパルミトイルスフィンゴミエリン、ジステアロイルスフィ ンゴミエリン及びこれらの混合物からなる群から選択される請求の範囲第１７項 に記載の医薬組成物。 ２１． 該組成物が該タキサンを１.５−８.０モル％含有する請求の範囲第１ ７項に記載の医薬組成物。 ２２． 該タキサンがタキソール、７−エピタキソール、７−アセチルタキソ ール、１０−デスアセチルタキソール、１０−デスアセチル−７−エピタキソー ル、７−キシロシルタキソール、１０−デスアセチル−７−シロシルタキソール 、７−グタリルタキソール、７−Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシルタキソール、７−Ｌ −アラニルタキソール、タキソテレ及びこれらの混合物からなる群から選択され る請求の範囲第１７項に記載の医薬組成物。 ２３． 該組成物が１から５ミクロンの大きさの粒子の形状である請求の範囲 第１７項に記載の医薬組成物。 ２４． 請求の範囲第１７項に記載の医薬組成物の有効量を癌患者に投与する ことを包含する癌患者の処置方法。 ２５． 癌の処置において使用するための粒子形状の医薬組成物であって、該 組成物中に医薬的に有効量の少なくとも１つのタキサンが存在し、さらに１つ又 はそれ以上の負に帯電したリン脂質と１つ又はそれ以上の両性イオンのリン脂質 との各モル比が９：１から７：３である混合物が存在し、該混合物は該少なくと も１つのタキサンを１から５ミクロンの大きさを有する粒子内に捕獲し、該組成 物中には実質上タキサンの結晶が無い医薬組成物。 ２６． 該負に帯電したリン脂質が、ホスファチジルイノシトール、ホスファ チジルセリン、ホスファチジルグリセロール、、ホスファテックアシド、ジホス ファチジルグリセロール、ポリ（エチレングリコール）−ホスファチジルエタノ ールアミン、ジミリストイルホスファチジルグリセロール、ジオレオイルホスフ ァチジルグリセロール、ジラウリルオイルホスファチジルグリセロール、ジパル ミトチルホスファチジルグリセロール、ジステアリルオイルホスファチジルグリ セ ロール、ジミリストイルホスファテックアシド、ジパルミトイルホスファテック アシド、ジミリストイルホスフィタジルセリン、ジパルミトイルホスファチジル セリン、脳のホスファチジルセリン及びこれらの混合物からなる群から選択され る請求の範囲第２５項に記載の医薬組成物。 ２７． 該両性イオンのリン脂質が、ホスファチジルコリン、ホスファチジル エタノールアミン、スフィンゴミエリン、レシチン、リゾレシチン、リゾファチ ジルエタノールアミン、セレブロシド類、ジミリストイルホスファチジルコリン 、ジパルミトシルホスファチジルコリン、ジステアリルオイルホスファチジルコ リン、ジエライドイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリ ン、ジラウリルオイルホスファチジルコリン、１−ミリストイル−２−パルミト イルホスファチジルコリン、１−パルミトイル−２−ミリストイルホスファチジ ルコリン、１−パルミトイル−２−ステアロイルホスファチジルコリン、１−ス テアロイル−２−パルミトイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファ チジルエタノールアミン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、脳 のスフィンゴミエリン、ジパルミトイルスフィンゴミエリン、ジステアロイルス フィンゴミエリン及びこれらの混合物からなる群から選択される請求の範囲第２ ５項に記載の医薬組成物。 ２８． 該タキサンがタキソール、７−エピタキソール、７−アセチルタキソ ール、１０−デスアセチルタキソール、１０−デスアセチル−７−エピタキソー ル、７−キシロシルタキソール、１０−デスアセチル−７−シロシルタキソール 、７−グタリルタキソール、７−Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシルタキソール、７−Ｌ −アラニルタキソール、タキソテレ及びこれらの混合物からなる群から選択され る請求の範囲第２５項に記載の医薬組成物。 ２９． さらにステロールを含有する請求の範囲第２５項に記載の医薬組成物 。 ３０． 請求の範囲第２５項に記載の医薬組成物の有効量を癌患者に投与する ことを包含する癌患者の処置方法。