JP2019521973A - 抗ｂｈ７−ｈ３抗体及び抗体薬物コンジュゲート - Google Patents
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Abstract
本発明は、Ｂ７相同性３タンパク質（Ｂ７−Ｈ３）抗体及び抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）（前記抗体及びＡＤＣを使用する組成物及び方法を含む）に関する。
Description
本出願は、２０１６年６月８日に出願された米国仮特許出願第６２／３４７，３９４号及び２０１６年７月２５日に出願された米国仮特許出願第６２／３６６，４７８号に対する優先権を主張する。上記出願の全ての内容は、参照により本明細書に明確に組み込まれる。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットにおいて電子的に提出し、その全体として参照により本明細書に組み込む配列表を含む。２０１７年６月７日付で作成した前記ＡＳＣＩＩのコピーは、１１７８１３−１０６２０＿ＳＴ２５．ｔｘｔと命名し、サイズ１５９，７４４バイトである。
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットにおいて電子的に提出し、その全体として参照により本明細書に組み込む配列表を含む。２０１７年６月７日付で作成した前記ＡＳＣＩＩのコピーは、１１７８１３−１０６２０＿ＳＴ２５．ｔｘｔと命名し、サイズ１５９，７４４バイトである。
Ｂ７相同性３タンパク質（Ｂ７−Ｈ３）（ＣＤ２７６及びＢ７ＲＰ−２としても知られ、本明細書では「Ｂ７−Ｈ３」と称する）は、免疫グロブリンスーパーファミリーのＩ型膜貫通糖タンパク質である。ヒトＢ７−Ｈ３は、推定シグナルペプチド、Ｖ様及びＣ様Ｉｇドメイン、膜貫通領域及び細胞質ドメインを含む。ヒトにおけるエクソン重複は、単一のＩｇＶ−ＩｇＣ様ドメイン（２ＩｇＢ７−Ｈ３アイソフォーム）又はいくつかの保存されたシステイン残基を含むＩｇＶ−ＩｇＣ−ＩｇＶ−ＩｇＣ−様ドメイン（４ＩｇＢ７−Ｈ３アイソフォーム）のいずれかを有する２つのＢ７−Ｈ３アイソフォームの発現をもたらす。ヒト組織及び細胞株における優勢なＢ７−Ｈ３アイソフォームは４ＩｇＢ７−Ｈ３アイソフォームである（Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７２（４）：２３５２−９（２００４））。
Ｂ７−Ｈ３は、共刺激及び共阻害シグナル伝達機能の両方を有すると報告されている（例えば、Ｃｈａｐｏｖａｌら、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２：２６９−７４（２００１）、Ｓｕｈら、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：８９９−９０６（２００３）、Ｐｒａｓａｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７３：２５００−６（２００４）、及びＷａｎｇら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５：４２８−３８（２００５））。例えば、インビトロ研究により、Ｂ７−Ｈ３は、細胞傷害性Ｔ−リンパ細胞（ＣＴＬ）の増殖を増加し、抗ＣＤ３抗体の存在下でインターフェロンガンマ（ＩＦＮ−γ）産生をアップレギュレートし、Ｔ細胞受容体シグナルを模倣することができるので（Ｃｈａｐｏｖａｌら、２００１）、Ｂ７−Ｈ３の共刺激機能が示されている。さらに、Ｂ７−Ｈ３−／−マウスにおける心臓同種移植片を用いたインビボ研究により、野生型対照と比較した場合に、重要なサイトカイン、ケモカイン及びケモカイン受容体ｍＲＮＡ転写物（例えば、ＩＬ−２、ＩＦＮ−γ、単球走化性タンパク質（ＭＣＰ−１）及びＩＦＮ誘導タンパク質（ＩＰ）−１０））の産生が低減することが示された（Ｗａｎｇら、２００５）。対照的に、Ｂ７−Ｈ３共阻害機能は、例えば、マウスにおいて、Ｂ７−Ｈ３タンパク質によりＴ細胞活性化及びエフェクターサイトカイン産生が阻害されたことが観察されている（Ｓｕｈら、２００３）。ヒトＢ７−Ｈ３に対するリガンドは同定されていないが、マウスＢ７−Ｈ３は、適応及び自然免疫細胞応答の調節剤である（ＴＲＥＭ）様転写物２（ＴＬＴ−２）のような骨髄細胞上に発現される誘発（ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇ）受容体に結合することが見出されている。ＣＤ８＋Ｔ細胞上のＴＬＴ−２へのマウスＢ７−Ｈ３の結合は、増殖、細胞傷害性及びサイトカイン産生のようなＴ細胞エフェクター機能を増強する（Ｈａｓｈｉｇｕｃｈｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１０５（３０）：１０４９５−５００（２００８））。
Ｂ７−Ｈ３は、多くの免疫細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｔ細胞、及び抗原提示細胞（ＡＰＣ））において構成的に発現されない。しかしながら、その発現は誘導され得る。さらに、Ｂ７−Ｈ３の発現は免疫細胞に限定されない。Ｂ７−Ｈ３転写物は、結腸、心臓、肝臓、胎盤、前立腺、小腸、精巣、及び子宮、並びに骨芽細胞、線維芽細胞、上皮細胞、及び他の非リンパ系系統の細胞を含む様々なヒト組織において発現され、免疫学的及び非免疫学的機能を潜在的に示唆する（Ｎｙｇｒｅｎら、Ｆｒｏｎｔ Ｂｉｏｓｃｉ．３：９８９−９３（２０１１））。しかしながら、正常組織におけるタンパク質発現は、典型的には低レベルに維持されており、したがって転写後調節を受ける可能性がある。
Ｂ７−Ｈ３はまた、前立腺がん、腎明細胞癌、神経膠腫、メラノーマ、肺がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺がん、膵臓がん、胃がん、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、卵巣がん、大腸がん、結腸がん、腎がん、肝細胞癌、腎臓がん、頭頸部がん、下咽頭扁平上皮癌、膠芽腫、神経芽細胞腫、乳がん、子宮内膜がん、及び尿路上皮細胞癌を含む、様々なヒトがんにおいて発現される。がん細胞におけるＢ７−Ｈ３の役割は明らかではないが、その発現は、がん細胞を自然免疫及び適応免疫応答から保護する可能性があるシグナル伝達事象を指揮する可能性がある。例えば、Ｂ７−Ｈ３は、前立腺の高悪性度前立腺上皮細胞内腫瘍及び前立腺腺癌において過剰発現されており、これらのがん細胞におけるＢ７−Ｈ３の高発現レベルは、術後のがん進行リスクの増加と関連している（Ｒｏｔｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６７（１６）：７８９３−９００（２００７））。さらに、ＮＳＣＬＣにおける腫瘍Ｂ７−Ｈ３発現は、腫瘍浸潤リンパ球の数と逆相関し、リンパ節転移と有意に相関した（Ｓｕｎら、Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ ５３（２）：１４３−５１（２００６））。ＮＳＣＬＣ患者における循環可溶性Ｂ７−Ｈ３のレベルはまた、より高い腫瘍病期、腫瘍サイズ、リンパ節転移、及び遠隔転移と関連している（Ｙａｍａｔｏら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ １０１（１０）：１７０９−１６（２００９））。
Ｂ７−Ｈ３はまた、文脈依存的にＴ細胞媒介性抗腫瘍反応において重要な役割を果たす可能性がある。例えば、Ｂ７−Ｈ３の胃がん腫瘍細胞発現は、生存期間、浸潤深度、及び組織型と正の相関を示した（Ｗｕら、Ｗｏｒｌｄ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１２（３）：４５７−９（２００６））。さらに、膵臓腫瘍細胞におけるＢ７−Ｈ３の高発現は、外科的切除後の患者の生存と関連し、腫瘍浸潤性ＣＤ８＋Ｔ細胞の数と有意に相関した（Ｌｏｏｓら、ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ ９：４６３（２００９））。
抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、化学リンカーを介して細胞傷害性薬物にコンジュゲートした抗体を含む比較的新しいクラスの治療薬を表す。ＡＤＣの治療概念は、抗体の結合能力を薬物と組み合わせることであり、ここで、抗体は、腫瘍細胞において過剰発現される標的表面抗原を含む標的表面抗原への結合によって薬物を腫瘍細胞に送達するために用いられる。
Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７２（４）：２３５２−９（２００４）
Ｃｈａｐｏｖａｌら、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２：２６９−７４（２００１）
Ｓｕｈら、Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：８９９−９０６（２００３）
Ｐｒａｓａｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７３：２５００−６（２００４）
Ｗａｎｇら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３５：４２８−３８（２００５）
Ｈａｓｈｉｇｕｃｈｉら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１０５（３０）：１０４９５−５００（２００８）
Ｎｙｇｒｅｎら、Ｆｒｏｎｔ Ｂｉｏｓｃｉ．３：９８９−９３（２０１１）
Ｒｏｔｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６７（１６）：７８９３−９００（２００７）
Ｓｕｎら、Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ５３（２）：１４３−５１（２００６））
Ｙａｍａｔｏら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ １０１（１０）：１７０９−１６（２００９）
Ｗｕら、Ｗｏｒｌｄ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１２（３）：４５７−９（２００６）
Ｌｏｏｓら、ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ ９：４６３（２００９）
当技術分野において、がん治療において治療目的のため使用され得る抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣが依然として必要である。
（発明の要旨）
ある特定の態様において、本発明は、ヒトＢ７−Ｈ３に特異的に結合する抗体及び抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。ある特定の態様において、本発明は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤を標的がん細胞、例えば、Ｂ７−Ｈ３発現細胞に選択的に送達することができる新規なＡＤＣを提供する。
ある特定の態様において、本発明は、ヒトＢ７−Ｈ３に特異的に結合する抗体及び抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。ある特定の態様において、本発明は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤を標的がん細胞、例えば、Ｂ７−Ｈ３発現細胞に選択的に送達することができる新規なＡＤＣを提供する。
一態様において、本発明は、ヒトＢ７−Ｈ３（ｈＢ７−Ｈ３）に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分であって、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、配列番号１４０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む重鎖可変領域及び配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む軽鎖可変領域を含む。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む重鎖可変領域及び配列番号１３６又は１３８のいずれかのアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む軽鎖可変領域を含む。
一態様において、本発明は、ヒトＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分であって、配列番号３５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び配列番号３９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、配列番号３４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む重鎖可変領域及び配列番号３８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む軽鎖可変領域を含む。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、配列番号３３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む重鎖可変領域及び配列番号３７のいずれかのアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む軽鎖可変領域を含む。
一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ＩｇＧアイソタイプである。
一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４アイソタイプである。
一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、表面プラズモン共鳴によって決定される１．５ｘ１０−８以下のＫＤを有する。
一態様において、本発明は、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分であって、配列番号１０、１１及び１２のいずれかのＣＤＲセットを含む重鎖可変領域、並びに配列番号１４、７及び１５のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域；又は配列番号３３、３５及び３５のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域、並びに配列番号３７、３８及び３９のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ヒト化されている。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、配列番号１５５、１５６、１６４、１６５、１６６、及び１６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含む。一実施形態において、フレームワークのアミノ酸配列は、ヒトアクセプターフレームワークの配列と少なくとも６５％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個のアミノ酸配列残基を含む。一実施形態において、フレームワークのアミノ酸配列は、ヒトアクセプターフレームワークの配列と少なくとも８５％同一、９０％同一、９５％同一、９６％同一、９７％同一、９８％同一、又は９９％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個、少なくとも７５個、少なくとも８０個、又は少なくとも８５個のアミノ酸配列残基を含む。
一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、キー（ｋｅｙ）残基において少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含み、該キー残基は、ＣＤＲに隣接する残基、グリコシル化部位残基、希少残基、ヒトＢ７−Ｈ３と相互作用することが可能な残基、ＣＤＲと相互作用することが可能な残基、カノニカル残基、重鎖可変領域と軽鎖可変領域の間の接触残基、Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基、及びＣｈｏｔｈｉａで定義される可変重鎖ＣＤＲ１とＫａｂａｔで定義される第１の重鎖フレームワークの間で重複する領域中の残基からなる群から選択される。一実施形態において、キー残基は、４８Ｈ、６７Ｈ、６９Ｈ、７１Ｈ、７３Ｈ、９４Ｈ、及び２Ｌ（Ｈは重鎖を指し、Ｌは軽鎖を指し、Ｋａｂａｔ番号付けシステムで参照されるアミノ酸配列残基）からなる群から選択される。一実施形態において、キー残基置換は、可変重鎖領域中にあり、Ｍ４８Ｉ、Ｖ６７Ａ、Ｉ６９Ｌ、Ａ７１Ｖ、Ｋ７３Ｒ、及びＲ９４Ｇからなる群から選択される。一実施形態において、キー残基置換は、可変軽鎖領域中にあり、Ｉ２Ｖである。
一態様において、本発明は、配列番号２５、２６及び２７のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号２９、３０及び３１のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ヒト化されている。一実施形態において、抗体又はその抗原結合部分は、ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、配列番号１５５〜１５８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
一態様において、本発明は、配列番号３３、３５、及び３５のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号３７、３８及び３９のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ヒト化されている。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ヒト受容体フレームワークをさらに含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、配列番号１５６、１５８、１６６及び１６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含む。一実施形態において、フレームワークのアミノ酸配列は、ヒトアクセプターフレームワークと少なくとも６５％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個のアミノ酸配列残基を含む。一実施形態において、フレームワークのアミノ酸配列は、ヒトアクセプターフレームワークと、少なくとも８５％同一、９０％同一、９５％同一、９６％同一、９７％同一、９８％同一、又は９９％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個、少なくとも７５個、少なくとも８０個、又は少なくとも８５個のアミノ酸配列残基を含む。
一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、キー残基において少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含み、該キー残基は、ＣＤＲに隣接する残基、グリコシル化部位残基、希少残基、ヒトＢ７−Ｈ３と相互作用することが可能な残基、ＣＤＲと相互作用することが可能な残基、カノニカル残基、重鎖可変領域と軽鎖可変領域の間の接触残基、Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基、及びＣｈｏｔｈｉａで定義される可変重鎖ＣＤＲ１とＫａｂａｔで定義される第１の重鎖フレームワークの間で重複する領域中の残基からなる群から選択される。一実施形態において、キー残基は、６９Ｈ、４６Ｌ、４７Ｌ、６４Ｌ、及び７１Ｌ（Ｈは重鎖を指し、Ｌは軽鎖を指し、Ｋａｂａｔ番号付けシステムで参照されるアミノ酸配列残基）からなる群から選択される。一実施形態において、キー残基置換は、可変重鎖領域中にあり、Ｌ６９Ｉである。一実施形態において、キー残基置換は、可変軽鎖領域中にあり、Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｇ６４Ｖ、及びＦ７１Ｈからなる群から選択される。
一実施形態において、本発明は、配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１３６又は１３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２及び配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
別の実施形態において、本発明は、配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、配列番号３５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２及び配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号１３５と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖及び／又は配列番号１３７と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１４７のアミノ酸配列と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有する重鎖及び／又は配列番号１４４と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を提供する。
一態様において、本発明は、ヒトＢ７−Ｈ３（ｈＢ７−Ｈ３）に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体であって、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗Ｂ７Ｈ３抗体を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、配列番号１４０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む重鎖可変領域及び配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む軽鎖可変領域を含む。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む重鎖可変領域及び配列番号１３６又は１３８のいずれかのアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む軽鎖可変領域を含む。
一態様において、本発明は、ヒトＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体であって、配列番号３５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び配列番号３９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗Ｂ７Ｈ３抗体を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、配列番号３４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む重鎖可変領域及び配列番号３８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む軽鎖可変領域を含む。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む重鎖可変領域及び配列番号３７のいずれかのアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む軽鎖可変領域を含む。
一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、ＩｇＧアイソタイプである。
一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４アイソタイプである。
一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、表面プラズモン共鳴によって決定される、１．５ｘ１０−８以下のＫＤを有する。
一態様において、本発明は、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体を提供し、該抗Ｂ７Ｈ３抗体は、配列番号１０、１１及び１２のいずれかのＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号１４、７及び１５のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域；又は配列番号３３、３５、及び３５のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号３７、３８及び３９のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、ヒト化されている。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、配列番号１５５、１５６、１６４、１６５、１６６、及び１６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含む。一実施形態において、フレームワークのアミノ酸配列は、ヒトアクセプターフレームワークの配列と少なくとも６５％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個のアミノ酸配列残基を含む。一実施形態において、フレームワークのアミノ酸配列は、ヒトアクセプターフレームワークの配列と少なくとも８５％同一、９０％同一、９５％同一、９６％同一、９７％同一、９８％同一、又は９９％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個、少なくとも７５個、少なくとも８０個、又は少なくとも８５個のアミノ酸残基を含む。
一態様において、本発明は、配列番号２５、２６及び２７のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号２９、３０及び３１のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、ヒト化されている。一実施形態において、抗体は、ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、配列番号１５５〜１５８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
一態様において、本発明は、配列番号３３、３５、及び３５のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号３７、３８及び３９のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗Ｂ７Ｈ３抗体を提供する。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、ヒト化されている。一実施形態において、抗Ｂ７Ｈ３抗体は、ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む。一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、配列番号１５６、１５８、１６６及び１６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
一実施形態において、ヒトアクセプターフレームワークは、キー残基において少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含み、該キー残基は、ＣＤＲに隣接する残基、グリコシル化部位残基、希少残基、ヒトＢ７−Ｈ３と相互作用することが可能な残基、ＣＤＲと相互作用することが可能な残基、カノニカル残基、重鎖可変領域と軽鎖可変領域の間の接触残基、Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基、及びＣｈｏｔｈｉａで定義される可変重鎖ＣＤＲ１とＫａｂａｔで定義される第１の重鎖フレームワークの間で重複する領域中の残基からなる群から選択される。一実施形態において、キー残基は、６９Ｈ、４６Ｌ、４７Ｌ、６４Ｌ、及び７１Ｌからなる群から選択される（Ｈは重鎖を指し、Ｌは軽鎖を指し、Ｋａｂａｔ番号付けシステムで参照されるアミノ酸配列残基）。一実施形態において、キー残基置換は、可変重鎖領域中にあり、Ｌ６９Ｉである。一実施形態において、キー残基置換は、可変軽鎖領域中にあり、Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｇ６４Ｖ、及びＦ７１Ｈからなる群から選択される。
一実施形態において、本発明は、配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１３６又は１３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２及び配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
別の実施形態において、本発明は、配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、配列番号３５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２及び配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖及び／又は配列番号１３５と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１３９と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖及び／又は配列番号１３７と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、本発明は、配列番号１４７と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖及び／又は配列番号１４４と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、本明細書で提供される抗体又はその抗原結合部分は、カニクイザル（ｃｙｎｏ）Ｂ７−Ｈ３に結合する。
一実施形態において、抗体又はその抗原結合部分は、約１０−７Ｍ以下、約１０−８Ｍ以下、約１０−９Ｍ以下、約１０−１０Ｍ以下、約１０−１１Ｍ以下、約１０−１２Ｍ以下、及び１０−１３Ｍ以下からなる群から選択されるｈＢ７−Ｈ３に対する解離定数（ＫＤ）を有する。
一実施形態において、抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＩｇＭ定常ドメイン、ヒトＩｇＧ１定常ドメイン、ヒトＩｇＧ２定常ドメイン、ヒトＩｇＧ３定常ドメイン、ヒトＩｇＧ４定常ドメイン、ヒトＩｇＡ定常ドメイン又はヒトＩｇＥ定常ドメインの重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む。一実施形態において、抗体は、カッパ軽鎖を含むＩｇＧ１モノクローナル抗体である。一実施形態において、ヒトＩｇＧ１定常ドメインは、配列番号１５９又は配列番号１６０のアミノ酸配列を含む。
一態様において、本発明は、ａ）配列番号１６８のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１６９のアミノ酸配列を含む軽鎖、ｂ）配列番号１７０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７１のアミノ酸配列を含む軽鎖；並びにｃ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号１７３のアミノ酸配列含む軽鎖からなる群から選択される配列セットを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を提供する。
一実施形態において、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１に対応する重鎖ＣＤＲセット、及びに抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１対応する軽鎖ＣＤＲセットを含む。一実施形態において、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１に対応する重鎖可変領域及び抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１に対応する軽鎖可変領域を含む。
一実施形態において、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、抗体ｈｕＡｂ３ｖ２．５に対応する重鎖ＣＤＲセット及び抗体ｈｕＡｂ３ｖ２．５に対応する軽鎖ＣＤＲセットを含む。一実施形態において、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、抗体ｈｕＡｂ３ｖ２．５に対応する重鎖可変領域及び抗体ｈｕＡｂ３ｖ２．５に対応する軽鎖可変領域を含む。
一実施形態において、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、本明細書に開示の抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分のいずれか１つの抗体又はその抗原結合部分と競合する。
一実施形態において、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体は、２つの重鎖及び２つの軽鎖である４つのポリペプチド鎖を有するＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１である。
一態様において、本発明は、本明細書に開示の抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物を提供する。
別の態様において、本発明は、リンカーを介して薬物にコンジュゲートされた本明細書に開示の抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。一実施形態において、薬物は、オーリスタチン、又はピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）である。一実施形態において、薬物は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤である。
一態様において、本発明は、リンカーによって抗ヒトＢ７−Ｈ３（ｈＢ７−Ｈ３）抗体に連結されている薬物を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供し、ここで、薬物は、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）に従うＢｃｌ−ｘＬ阻害剤であり、
Ａｒ２は、
一実施形態において、ＡＤＣは、構造式（Ｉ）に従う化合物であり：
一実施形態において、Ａｒ１は、置換されていない。一実施形態において、Ａｒ１は、
一実施形態において、Ａｒ２は、置換されていない。一実施形態において、Ａｒ２は、５位においてヒドロキシル、Ｃ１〜４アルコキシ、及びシアノから選択される基で置換されていてもよい
一実施形態において、Ｚ１は、Ｎである。
一実施形態において、Ｚ２ａは、Ｏである。
一実施形態において、Ｒ１は、メチル又はクロロである。
一実施形態において、Ｒ２は、水素又はメチルである。一実施形態において、Ｒ２は、水素である。
一実施形態において、Ｒ４は、水素又は低級アルキルであり、低級アルキルは、Ｃ１〜４アルコキシ又はＣ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂで置換されていてもよい。
一実施形態において、Ｚ１はＮであり、Ｚ２ａはＯであり、Ｒ１はメチル又はクロロであり、Ｒ２は、水素であり、Ａｒ２は、
一実施形態において、薬物は、構造式（ＩＩａ）に従うＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である。
一実施形態において、薬物は、構造式（ＩＩａ）に従うＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である。
一実施形態において、Ｚ２ａは、ＣＨ２又はＯである。
一実施形態において、Ｒ１３は、低級アルキレン又は低級ヘテロアルキレンから選択される。
一実施形態において、
一実施形態において、
一実施形態において、
一実施形態において、
一実施形態において、Ｚ２ａは、酸素であり、Ｒ１３は、ＣＨ２ＣＨ２であり、Ｒ４は、水素又はＣ１〜４アルコキシ又はＣ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂで置換されていてもよい低級アルキルである。
一実施形態において、ＡＤＣは、構造式（ＩＩｂ）に従う化合物である。
一実施形態において、Ｚ２ｂは、結合、Ｏ又はＮＲ６であり、又は及びＲ１３は、エチレン又は置換されていてもよいヘテロシクリルである。
一実施形態において、Ｚ２ｃは、Ｏであり、Ｒ１２は、１つ以上のハロ又はＣ１〜４アルコキシで置換されていてもよい低級アルキルである。
一実施形態において、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）の＃の位置に対応する水素が存在せず一価基を形成しているという点で変更されている、以下の化合物からなる群から選択される。６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（オキセタン−３−イルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［６−（３−アミノピロリジン−１−イル）−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルファモイルエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［５−アミノ−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−［３−（メチルアミノ）プロパ−１−イン−１−イル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）アゼチジン−３−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロ
ピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）エチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノアセトアミド）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；３−［１−（｛３−［（２−アミノエチル）スルファニル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（３−アミノプロピル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛５−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］キノリン−３−イル｝ピリジン−２−カルボン酸。
ピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）エチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノアセトアミド）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；３−［１−（｛３−［（２−アミノエチル）スルファニル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（３−アミノプロピル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛５−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］キノリン−３−イル｝ピリジン−２−カルボン酸。
一実施形態において、リンカーは、リソソーム酵素によって切断可能である。
一実施形態において、リソソーム酵素は、カテプシンＢである。
一実施形態において、リンカーは、構造式（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）、又は（ＩＶｄ）に従うセグメントを含む。
一実施形態において、ペプチドは、Ｖａｌ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ａｌａ；Ａｌａ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｌａ；Ａｓｎ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｎ；Ｃｉｔ−Ｃｉｔ；Ｖａｌ−Ｇｌｕ；Ｇｌｕ−Ｖａｌ；Ｓｅｒ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｓｅｒ；Ｌｙｓ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｙｓ；Ａｓｐ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｐ；Ａｌａ−Ｖａｌ；Ｖａｌ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｐｈｅ；Ｖａｌ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｐｈｅ；Ｌｅｕ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｅｕ；Ｉｌｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｉｌｅ；Ｐｈｅ−Ａｒｇ；Ａｒｇ−Ｐｈｅ；Ｃｉｔ−Ｔｒｐ；及びＴｒｐ−Ｃｉｔからなる群から選択される。
一実施形態において、リソソーム酵素は、β−グルクロニダーゼ又はβ−ガラクトシダーゼである。
一実施形態において、リンカーは、構造式（Ｖａ）、（Ｖｂ）、（Ｖｃ）、（Ｖｄ）、又は（Ｖｅ）に従うセグメントを含む。
一実施形態において、リンカーは、構造式（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）若しくは（ＶＩＩＩｃ）に従うセグメント、
一実施形態において、リンカーは、１〜６個のエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコールセグメントを含む。
一実施形態において、ｍは、２、３又は４である。
一実施形態において、リンカーＬは、構造式（ＩＶａ）又は（ＩＶｂ）に従うセグメントを含む。
一実施形態において、リンカーＬは、閉鎖型又は開放型のいずれかの、ＩＶａ．１−ＩＶａ．８、ＩＶｂ．１−ＩＶｂ．１９、ＩＶｃ．１−ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．１−ＩＶｄ．４、Ｖａ．１−Ｖａ．１２、Ｖｂ．１−Ｖｂ．１０、Ｖｃ．１−Ｖｃ．１１、Ｖｄ．１−Ｖｄ．６、Ｖｅ．１−Ｖｅ．２、ＶＩａ．１、ＶＩｃ．１−Ｖ１ｃ．２、ＶＩｄ．１−ＶＩｄ．４、ＶＩＩａ．１−ＶＩＩａ．４、ＶＩＩｂ．１−ＶＩＩｂ．８、ＶＩＩｃ．１−ＶＩＩｃ．６からなる群から選択される。
一実施形態において、リンカーＬは、ＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．４、Ｖｂ．９、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４及びＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、各リンカーのマレイミドは、抗体Ａｂと反応して、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成している。
一実施形態において、リンカーＬは、ＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｄ．４、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４、ＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、各リンカーのマレイミドは、抗体Ａｂと反応して、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成している。
一実施形態において、リンカーＬは、ＩＶｂ．２、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．３、ＩＶｃ．６、及びＶＩＩｃ．１からなる群から選択され、
一実施形態において、ＬＫは、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体Ａｂ上のアミノ基と形成される連結である。
一実施形態において、ＬＫは、アミド、又はチオ尿素である。
一実施形態において、ＬＫは、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体Ａｂ上のスルフヒドリル基と形成される連結である。
一実施形態において、ＬＫは、チオエーテルである。
一実施形態において、ＬＫは、アミド、チオ尿素及びチオエーテルからなる群から選択され、ｍは、１〜８の範囲の整数である。
一実施形態において、Ｄは、本明細書に記載のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤（例えば、Ｗ３．０１、Ｗ３．０２、Ｗ３．０３、Ｗ３．０４、Ｗ３．０５、Ｗ３．０６、Ｗ３．０７、Ｗ３．０８、Ｗ３．０９、Ｗ３．１０、Ｗ３．１１、Ｗ３．１２、Ｗ３．１３、Ｗ３．１４、Ｗ３．１５、Ｗ３．１６、Ｗ３．１７、Ｗ３．１８、Ｗ３．１９、Ｗ３．２０、Ｗ３．２１、Ｗ３．２２、Ｗ３．２３、Ｗ３．２４、Ｗ３．２５、Ｗ３．２６、Ｗ３．２７、Ｗ３．２８、Ｗ３．２９、Ｗ３．３０、Ｗ３．３１、Ｗ３．３２、Ｗ３．３３、Ｗ３．３４、Ｗ３．３５、Ｗ３．３６、Ｗ３．３７、Ｗ３．３８、Ｗ３．３９、Ｗ３．４０、Ｗ３．４１、Ｗ３．４２、Ｗ３．４３及びそれらの薬学的に許容される塩）であり、Ｌは、リンカーＩＶａ．１−ＩＶａ．８、ＩＶｂ．１−ＩＶｂ．１９、ＩＶｃ．１−ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．１−ＩＶｄ．４、Ｖａ．１−Ｖａ．１２、Ｖｂ．１−Ｖｂ．１０、Ｖｃ．１−Ｖｃ．１１、Ｖｄ．１−Ｖｄ．６、Ｖｅ．１−Ｖｅ．２、ＶＩａ．１、ＶＩｃ．１−Ｖ１ｃ．２、ＶＩｄ．１−ＶＩｄ．４、ＶＩＩａ．１−ＶＩＩａ．４、ＶＩＩｂ．１−ＶＩＩｂ．８及びＶＩＩｃ．１−ＶＩＩｃ．６からなる群から選択され、各リンカーは、抗体Ａｂと反応して共有結合を形成しており、ＬＫは、チオエーテルであり、ｍは、１〜８の範囲の整数である。
一実施形態において、Ｄは、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）の＃位置に対応する水素が存在しないとき、モノラジカルを形成するように修飾された、以下の化合物からなる群から選択されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である：３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；Ｌは、閉鎖型又は開放型のいずれかの、リンカーＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．４、Ｖｂ．９、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４及びＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、ＬＫは、チオエーテルであり、ｍは、２〜４の範囲の整数である。
一実施形態において、ＡＤＣは、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＴ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＺ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＥ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＥ及びｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＲからなる群から選択され、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５及びｈｕＡｂ３ｖ２．６は、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体であり、ＫＺ、ＳＲ、ＳＥ、ＸＷ、ＹＧ、ＺＴ及びＺＺは、表Ｂに開示されるシントンであり、ここで、コンジュゲートしたシントンは、開放型又は閉鎖型のいずれかである。
一実施形態において、ＡＤＣは、式ｉ〜ｖｉｉｉからなる群から選択される：
一実施形態において、ｍは、２〜６の整数である。一実施形態において、ｍは、２である。
一実施形態において、ＡＤＣは、配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１ドメイン、配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１３６又は１３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を含む。
一実施形態において、ＡＤＣは、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗体を含む。
一実施形態において、ＡＤＣは、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗体を含む。
一実施形態において、ＡＤＣは、配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１ドメイン；並びに配列番号３５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１ドメインを含む、抗体を含む。
一実施形態において、ＡＤＣは、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、抗体を含む。
一実施形態において、ＡＤＣは、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＹＧ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＫＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＹＧ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＫＺ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＴ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＺ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＸＷ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＥ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＲ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＹＧ、及びｈｕＡｂ１３ｖ１−ＫＺからなる群から選択される。
一態様において、本発明は、有効量の本明細書に記載のＡＤＣ、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物を提供する。
一実施形態において、医薬組成物は、複数の本明細書に記載のＡＤＣを含むＡＤＣ混合物、及び薬学的に許容される担体を含む。
一実施形態において、医薬組成物は、１．５〜４の平均薬物抗体比（ＤＡＲ）を有するＡＤＣ混合物を含む。
一実施形態において、医薬組成物は、各々が１．５〜８のＤＡＲを有するＡＤＣを含むＡＤＣ混合物を含む。
一態様において、本発明は、治療上有効量の本明細書に記載のＡＤＣをそれが必要な対象に投与することを含む、がんを治療するための方法を提供する。
一実施形態において、がんは、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、乳がん、卵巣がん、膠芽腫、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、胃がん、メラノーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、白血病、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、及びリンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）からなる群から選択される。一実施形態において、がんは、扁平上皮癌である。一実施形態において、扁平上皮癌は、扁平上皮肺がん又は扁平頭頸部がんである。一実施形態において、がんは、トリプルネガティブ乳がんである。一実施形態において、がんは、非小細胞肺がんである。
一態様において、本発明は、固形腫瘍を有する対象における固形腫瘍の成長を阻害又は低減させる方法であって、有効量の本明細書に記載のＡＤＣを固形腫瘍を有する対象に投与して、固形腫瘍の増殖を阻害又は低減させることを含む、方法を提供する。
一実施形態において、固形腫瘍は、非小細胞肺がんである
一実施形態において、がんは、活性化ＥＧＦＲ突然変異を有することを特徴としている。一実施形態において、活性化ＥＧＦＲ変異は、エクソン１９欠失変異、エクソン２１の一点置換変異Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍ点変異、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
一実施形態において、がんは、活性化ＥＧＦＲ突然変異を有することを特徴としている。一実施形態において、活性化ＥＧＦＲ変異は、エクソン１９欠失変異、エクソン２１の一点置換変異Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍ点変異、及びそれらの組合せからなる群から選択される。
一実施形態において、ＡＤＣは追加の薬剤又は追加の療法と組み合わせて投与される。一実施形態において、追加の薬剤は、抗ＰＤ１抗体（例えば、ペムブロリズマブ）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（例えば、アテゾリズマブ）、抗ＣＴＬＡ−４抗体（例えば、イピリムマブ）、ＭＥＫ阻害剤（例：トラメチニブ）、ＥＲＫ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤（例：ダブラフェニブ）、オシメルチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、ＣＤＫ９阻害剤（例：ジナシクリブ）、ＭＣＬ−１阻害剤、テモゾロミド、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤（例えば、ベネトクラックス）、イブルチニブ、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、エベロリムス）、ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えば、ブパリシブ）、デュベリシブ、イデラリシブ、ＡＫＴ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤（例えばラパチニブ）、タキサン（例えばドセタキセル、パクリタキセル、ナブパクリタキセル）、オーリスタチンを含むＡＤＣ、ＰＢＤを含むＡＤＣ（例えばロバルピツズマブ・テシリン）、メイタンシノイドを含むＡＤＣ（例えばＴＤＭ１）、ＴＲＡＩＬアゴニスト、プロテアソーム阻害剤（例えばボルテゾミブ）、及びニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤からなる群から選択される。
一実施形態において、追加の治療法は、放射線である。他の実施形態において、追加の薬剤は、化学療法剤である。
一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）の治療のためにヒト対象にベネトクラクスと組み合わせて投与される。
一態様において、本発明は、構造式（Ｉ）に従うＡＤＣの調製方法を提供し、
Ｄは、本明細書に開示されている式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＢｃｌ−ｘＬ阻害薬であり、
Ｌは、本明細書に記載されるリンカーであり、
Ａｂは、ｈＢ７−Ｈ３抗体であり、ここで、ｈＢ７−Ｈ３抗体は、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６、又はｈｕＡｂ１３ｖ１の重鎖及び軽鎖のＣＤＲを含み、
ＬＫは、リンカーＬと抗体Ａｂとを連結する共有結合を表し、
ｍは、１〜２０の範囲の整数であり、
この方法は、
水溶液中の抗体を有効量のジスルフィド還元剤で少なくとも１５分間３０〜４０℃で処理し、次いで抗体溶液を２０〜２７℃に冷却することと、
２．１〜２．３１及び２．３４〜２．７２（表Ｂ）の群から選択されるシントンを含む水／ジメチルスルホキシドの溶液を還元抗体溶液に添加すること、
溶液のｐＨを７．５〜８．５のｐＨに調整すること、
反応を４８〜８０時間にわたって進ませて、ＡＤＣを形成すること
を含み、
エレクトロスプレー質量分析によって測定すると、スクシンイミドからスクシンアミドへの加水分解ごとに質量が１８±２ａｍｕずつ変わり、
ＡＤＣは、疎水性相互作用クロマトグラフィーにより任意選択的に精製される。
一実施形態において、ｍは、２である。
別の態様において、本発明は、上記の方法によって調製されたＡＤＣを提供する。
本発明の様々な態様は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び抗体断片、抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ及びこれらの医薬組成物、並びにかかる抗体及び断片を作製するための核酸、組換え発現ベクター及び宿主細胞に関する。本明細書に記載の抗体、フラグメント、及びＡＤＣを使用して、ヒトＢ７−Ｈ３を検出し、ヒトＢ７−Ｈ３活性を（インビトロ又はインビボで）阻害し、及びがんを治療する方法もまた、本発明に含まれる。ある特定の実施形態において、本発明は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤を含むＡＤＣを含む抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ、ＡＤＣを合成するのに有用なシントン、ＡＤＣを含む組成物、ＡＤＣの作製方法、及びＡＤＣの様々な使用方法を提供する。
当業者には理解されるように、本明細書に開示されるＡＤＣは、本質的に「モジュール型」である。本開示全体を通して、ＡＤＣを含む様々な「モジュール」の様々な特定の実施形態、及びＡＤＣを合成するのに有用なシントンを記載する。特定の非限定例として、抗体、リンカー、ＡＤＣ及びシントンを含み得るＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の特定の実施形態を記載する。記載された特定の実施形態の全ては、各々の特定の組合せが個々に明示的に記載されているかのように、互いに組み合わせることができることが意図される。
本明細書に記載されている様々なＡＤＣ及び／又はＡＤＣシントンは塩の形態であってもよく、ある特定の実施形態において、特に薬学的に許容される塩であってもよいことを理解されたい。十分に酸性、十分に塩基性、又は両方の官能基を有する本開示の化合物は、任意の多くの無機塩基並びに無機酸及び有機酸と反応して、塩を形成することができる。あるいは、四級窒素を有するもののような本来的に荷電している化合物は、適切な対イオン、例えば、臭化物、塩化物、又はフッ化物のようなハロゲン化物と塩を形成することができる。
酸付加塩を形成するために一般に使用される酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸のような無機酸、及びｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモフェニル−スルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸のような有機酸である。塩基付加塩には、アンモニウム及びアルカリ又はアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩のような無機塩基から誘導されたものが含まれる。
以下の開示において、構造図及び命名法の両方が含まれ、命名法が構造図と矛盾する場合、構造図に従う。
本発明の詳細な説明の概要を以下に示す：
Ｉ．定義
ＩＩ．抗Ｂ７−Ｈ３抗体
ＩＩ．Ａ．抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体
ＩＩ．Ｂ．ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体
ＩＩＩ．抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）
ＩＩＩ．Ａ． 抗Ｂ７−Ｈ３／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ＡＤＣ
ＩＩＩ．Ａ．１． Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤
ＩＩＩ．Ａ．２． Ｂｃｌ−ｘＬリンカー
切断可能なリンカー
切断不可能なリンカー
リンカーと抗Ｂ７−Ｈ３抗体との結合に使用される基
リンカーの選択に関する考慮事項
ＩＩＩ．Ａ．３． Ｂｃｌ−ｘＬＡＤＣシントン
ＩＩＩ．Ａ．４． Ｂｃｌ−ｘＬＡＤＣの合成方法
ＩＩＩ．Ａ．５． Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤の一般的合成方法
ＩＩＩ．Ａ．６． シントンの一般的合成方法
ＩＩＩ．Ａ．７． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの一般的合成方法
ＩＩＩ．Ｂ． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ：コンジュゲーションのための他の例示的な薬物
ＩＩＩ．Ｃ． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ：他の例示的なリンカー
ＩＶ． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの精製
Ｖ． 抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの使用
ＶＩ． 医薬組成物
Ｉ．定義
ＩＩ．抗Ｂ７−Ｈ３抗体
ＩＩ．Ａ．抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体
ＩＩ．Ｂ．ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体
ＩＩＩ．抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）
ＩＩＩ．Ａ． 抗Ｂ７−Ｈ３／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ＡＤＣ
ＩＩＩ．Ａ．１． Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤
ＩＩＩ．Ａ．２． Ｂｃｌ−ｘＬリンカー
切断可能なリンカー
切断不可能なリンカー
リンカーと抗Ｂ７−Ｈ３抗体との結合に使用される基
リンカーの選択に関する考慮事項
ＩＩＩ．Ａ．３． Ｂｃｌ−ｘＬＡＤＣシントン
ＩＩＩ．Ａ．４． Ｂｃｌ−ｘＬＡＤＣの合成方法
ＩＩＩ．Ａ．５． Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤の一般的合成方法
ＩＩＩ．Ａ．６． シントンの一般的合成方法
ＩＩＩ．Ａ．７． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの一般的合成方法
ＩＩＩ．Ｂ． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ：コンジュゲーションのための他の例示的な薬物
ＩＩＩ．Ｃ． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ：他の例示的なリンカー
ＩＶ． 抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの精製
Ｖ． 抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの使用
ＶＩ． 医薬組成物
Ｉ．定義
本発明がより容易に理解され得るために、ある特定の用語がまず定義される。加えて、パラメーターの値又は値の範囲が列挙されるときはいつでも、列挙される値の間にある値及び範囲も、本発明の一部であることが意図されることが意図されることは、注意されるできである。
本発明がより容易に理解され得るために、ある特定の用語がまず定義される。加えて、パラメーターの値又は値の範囲が列挙されるときはいつでも、列挙される値の間にある値及び範囲も、本発明の一部であることが意図されることが意図されることは、注意されるできである。
「抗Ｂ７−Ｈ３抗体」という用語は、Ｂ７−Ｈ３に特異的に結合する抗体を指す。目的の抗原、すなわちＢ７−Ｈ３に「結合する」抗体は、該抗体が抗原を発現する細胞を標的とするのに有用であるように十分な親和性でその抗原に結合することができるものである。好ましい実施形態において、抗体はヒトＢ７−Ｈ３（ｈＢ７−Ｈ３）に特異的に結合する。抗Ｂ７−Ｈ３抗体の例は、以下の実施例に開示されている。特に明記しない限り、「抗Ｂ７−Ｈ３抗体」との用語は、野生型Ｂ７−Ｈ３（例えば、Ｂ７−Ｈ３の４ＩｇＢ７−Ｈ３アイソフォーム）又はＢ７−Ｈ３の任意のバリアントに結合する抗体を指すことを意味する。野生型ヒトＢ７−Ｈ３のアミノ酸配列は、シグナルペプチド（アミノ酸残基１〜２８）に下線が引かれている配列番号１４９として以下に提供されている。
したがって、本発明の一実施形態において、抗体又はＡＤＣは、配列番号１４９で定義されるヒトＢ７−Ｈ３に結合する。ヒトＢ７−Ｈ３の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）は、配列番号１５２（Ｈｉｓタグを含む）に提供されている。したがって、本発明の一実施形態において、ＡＤＣの抗体は、配列番号１５２のＥＣＤに記載されるヒトＢ７−Ｈ３のＥＣＤに結合する。
抗体又はＡＤＣの第２の化学種との相互作用に関して本明細書において使用される用語「特異的な結合」又は「特異的に結合すること」は、相互作用が、化学種上の特定の構造（例えば抗原決定基又はエピトープ）の存在に依存すること；例えば抗体が、一般にタンパク質よりむしろ特定のタンパク質構造を認識し、結合することを意味する。抗体又はＡＤＣが、エピトープ「Ａ」に特異的である場合、標識された「Ａ」及び抗体を含有する反応におけるエピトープＡ（又はフリーの、標識されていないＡ）を含有する分子の存在が、抗体又はＡＤＣに結合した標識されたＡの量を減少させる。例として、標識されているとき、抗体が、対応する標識されていない抗体によりその標的から離れるように競合し得る場合、抗体は、標的に「特異的に結合する」。一実施形態において、抗体が、少なくとも約１０−４Ｍ、１０−５Ｍ、１０−６Ｍ、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍ、１０−１０Ｍ、１０−１１Ｍ、１０−１２Ｍ又はそれ未満（１０−１２未満である数値、例えば１０−１３を意味する。）の標的に対するＫＤを有する場合、抗体は、標的、例えばＢ７−Ｈ３に特異的に結合する。一実施形態において、本明細書において使用される用語「Ｂ７−Ｈ３への特異的な結合」又は「Ｂ７−Ｈ３に特異的に結合する」は、Ｂ７−Ｈ３に結合し、表面プラズモン共鳴によって決定される１．０×１０−７Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）を有する抗体又はＡＤＣを指す。しかしながら、抗体又はＡＤＣが、配列において関連する２つ以上の抗原に特異的に結合する能力があり得ることは理解される。例えば一実施形態において、抗体は、Ｂ７−Ｈ３のヒトと非ヒト（例えばマウス又は非ヒト霊長類）オルソログの両方に特異的に結合することができる。
用語「抗体」又は「Ａｂ」は、抗原に特異的に結合し、重（Ｈ）鎖及び軽（Ｌ鎖）を含む免疫グロブリン分子を指す。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書においてＨＣＶＲ又はＶＨと略される）及び重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３からなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書においてＬＣＶＲ又はＶＬと略される）及び軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬからなる。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存されている領域が分散された相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる、超可変性の領域にさらに分けることができる。各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端に以下の順：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４で配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＲからなる。抗体は、任意の種類（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＹ）並びにクラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）又はサブクラスのものであり得る。用語「抗体」は、抗体（以下で定義される）の抗原結合部分を含むことを意図されていない一方、ある特定の実施形態において、重鎖のカルボキシ末端からの少数のアミノ酸欠失を含む抗体を記載することが意図される。したがって、一実施形態において、抗体は、重鎖のカルボキシ末端の１〜５個のアミノ酸欠失を有する重鎖を含む。一実施形態において、抗体は、ｈＢ７−Ｈ３に結合することができる４つのポリペプチド鎖、２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ鎖）を有するＩｇＧであるモノクローナル抗体である。一実施形態において、抗体は、λ又はκ軽鎖を含むモノクローナルＩｇＧ抗体である。
本明細書において使用される、抗体の用語「抗原結合部分」又は「抗原結合断片」（又は単に「抗体部分」若しくは「抗体断片」）は、抗原（例えばｈＢ７−Ｈ３）に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ以上の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片により果たされ得ることが示されている。かかる抗体の実施形態はまた、二重特異性、二重に特異性又は多特異性フォーマットであってもよく、２つ以上の異なる抗原に特異的に結合する。抗体の用語「抗原結合部分」内に包含される結合断片の例は、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域においてジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価の断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の１本のアームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）単一の可変ドメインを含むｄＡｂ断片（参照により本明細書に組み込む、Ｗａｒｄら、（１９８９年）、Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４〜５４６頁、Ｗｉｎｔｅｒら、ＰＣＴ公開ＷＯ９０／０５１４４Ａ１）；並びに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは、別々の遺伝子によりコードされるが、これらは、ＶＬ及びＶＨ領域が対を成して一価の分子（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている；例えばＢｉｒｄら、（１９８８年）、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３〜４２６頁；及びＨｕｓｔｏｎら（１９８８年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８５：５８７９〜５８８３頁を参照）を形成する単一タンパク質鎖としてこれらが作製されるのを可能にする合成リンカーによって組換え方法を使用して一体にされ得る。かかる単鎖抗体はまた、抗体の用語「抗原結合部分」内に包含されることが意図される。本発明のある特定の実施形態において、ｓｃＦｖ分子は、融合タンパク質に組み込まれてもよい。ダイアボディのような他の形態の単鎖抗体もまた包含される。ダイアボディは、ＶＨ及びＶＬドメインが単一ポリペプチド鎖上で発現され、同じ鎖上の２つのドメイン間での対形成を可能にするにはあまりに短いリンカーを使用するが、これにより、ドメインを別の鎖の相補ドメインと対形成させ、２つの抗原結合部位を生じる、二価の二重特異性抗体である（例えばＨｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．ら（１９９３年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、９０：６４４４〜６４４８頁；Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊ．ら（１９９４年）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ、２：１１２１〜１１２３頁を参照）。かかる抗体結合部分は、当技術分野において公知である（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ａｎｄ Ｄｕｂｅｌ編、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（２００１年）Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、７９０頁（ＩＳＢＮ３−５４０−４１３５４−５））。
ＩｇＧ（免疫グロブリンＧ）は、Ｙの形で配置された２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む抗体のクラスである。例示的なヒトＩｇＧ重鎖及び軽鎖定常ドメインアミノ酸配列は、当技術分野において公知であり、以下に表Ａで表される。
本明細書において使用される、「単離された抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すことが意図される（例えばＢ７−Ｈ３に特異的に結合する単離された抗体は、Ｂ７−Ｈ３以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかしながら、Ｂ７−Ｈ３に特異的に結合する単離された抗体は、他の種由来のＢ７−Ｈ３分子のような他の抗原に対する交差反応性を有してもよい。さらに、単離された抗体は、他の細胞物質及び／又は化学物質を実質的に含み得ない。
用語「ヒト化抗体」は、非ヒト種（例えばマウス）由来の重鎖及び軽鎖可変領域配列を含むが、ＶＨ及び／又はＶＬ配列の少なくとも一部が、より「ヒト様」、すなわち、ヒト生殖系列可変配列により類似するように変更された抗体を指す。特に、用語「ヒト化抗体」は、目的の抗原に免疫特異的に結合し、ヒト抗体のアミノ酸配列を実質的に有するフレームワーク（ＦＲ）領域及び非ヒト抗体のアミノ酸配列を実質的に有する相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、抗体又はそのバリアント、誘導体、類似体若しくは断片である。本明細書において使用される場合、ＣＤＲの文脈における用語「実質的に」は、非ヒト抗体ＣＤＲのアミノ酸配列に少なくとも８０％、好ましくは、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を有するＣＤＲを指す。ヒト化抗体は、ＣＤＲ領域の全て又は実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリン（すなわち、ドナー抗体）のものに対応し、フレームワーク領域の全て又は実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン共通配列のものである、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメイン（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ＦａｂＣ、Ｆｖ）の実質的に全てを含む。好ましくは、ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも部分、典型的には、ヒト免疫グロブリンのものを含む。一部の実施形態において、ヒト化抗体は、軽鎖並びに重鎖の少なくとも可変ドメインの両方を含有する。抗体はまた、重鎖のＣＨ１、ヒンジ、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＨ４領域を含んでもよい。一部の実施形態において、ヒト化抗体は、ヒト化軽鎖のみを含有する。他の実施形態において、ヒト化抗体は、ヒト化重鎖のみを含有する。特定の実施形態において、ヒト化抗体は、軽鎖のヒト化可変ドメイン及び／又はヒト化重鎖のみを含有する。
ヒト化抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ及びＩｇＥを含む免疫グロブリンの任意のクラス、並びに限定することなくＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含む任意のアイソタイプから選択され得る。ヒト化抗体は、１つより多くのクラス又はアイソタイプ由来の配列を含んでもよく、特定の定常ドメインは、当技術分野において周知の技術を使用して所望のエフェクター機能が最適化するように選択されてもよい。
用語「Ｋａｂａｔ番号付け」、「Ｋａｂａｔ定義」及び「Ｋａｂａｔラベリング」は、本明細書において互換的に使用される。これらの用語は、当技術分野において認識されており、抗体又はその抗原結合部分の重鎖及び軽鎖可変領域における他のアミノ酸残基より可変（すなわち、超可変性）であるアミノ酸残基に番号を付けるシステムを指す（Ｋａｂａｔら（１９７１年）Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ，Ｓｃｉ．１９０：３８２〜３９１頁及びＫａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ら（１９９１年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ公開番号第９１〜３２４２）。重鎖可変領域について、超可変領域は、ＣＤＲ１についてアミノ酸位３１〜３５の範囲であり、ＣＤＲ２についてアミノ酸位５０〜６５の範囲であり、ＣＤＲ３についてアミノ酸位９５〜１０２の範囲である。軽鎖可変領域について、超可変領域範囲は、ＣＤＲ１についてアミノ酸位２４〜３４の範囲であり、ＣＤＲ２についてアミノ酸位５０〜５６の範囲であり、ＣＤＲ３についてアミノ酸位８９〜９７の範囲である。
本明細書において使用される場合、用語「ＣＤＲ」は、抗体可変配列内の相補性決定領域を指す。重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）の可変領域のそれぞれにおいて３つのＣＤＲが存在し、３つのＣＤＲが、可変領域のそれぞれについてＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３（又は具体的には、ＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２、ＨＣ ＣＤＲ３、ＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２、及びＬＣ ＣＤＲ３）と命名される。本明細書において使用される用語「ＣＤＲセット」は、抗原を結合する能力がある単一の可変領域において生じる３つのＣＤＲの群を指す。これらのＣＤＲの正確な境界は、異なるシステムに従い異なって定義されてきた。Ｋａｂａｔにより記載されたシステム（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９８７年）及び（１９９１年））は、抗体の任意の可変領域に適用可能な明白な残基番号付けシステムを提供するだけでなく、３つのＣＤＲを定義する正確な残基境界を提供する。これらのＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲと称され得る。Ｃｈｏｔｈｉａ及び共同研究者ら（Ｃｈｏｔｈｉａ ＆ Ｌｅｓｋ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９６：９０１〜９１７頁、（１９８７年）及びＣｈｏｔｈｉａら、Ｎａｔｕｒｅ、３４２：８７７〜８８３頁（１９８９年））は、Ｋａｂａｔ ＣＤＲ内のある特定の下位部分が、アミノ酸配列のレベルで大きな多様性を有するにも関わらず、ほぼ同一のペプチド骨格立体構造をとることを見出した。これらの下位部分は、「Ｌ」及び「Ｈ」が、それぞれ軽鎖及び重鎖領域を命名する、Ｌ１、Ｌ２及びＬ３又はＨ１、Ｈ２及びＨ３と命名される。これらの領域は、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲと称され得、これらの領域は、Ｋａｂａｔ ＣＤＲと重複する境界を有する。Ｋａｂａｔ ＣＤＲと重複するＣＤＲを定義する他の境界は、Ｐａｄｌａｎ（ＦＡＳＥＢ Ｊ、９：１３３〜１３９頁（１９９５年））及びＭａｃＣａｌｌｕｍ（Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ、２６２（５）：７３２〜４５頁（１９９６年））により記載されている。これらは、特定の残基又は残基の群又はＣＤＲの全体でさえ、抗原結合に有意に影響を与えないという予測又は実験的知見に照らして、短くされ得る又は長くされ得るにもかかわらず、なお他のＣＤＲ境界の定義は、上記のシステムの１つに厳密に従わなくてもよいが、それにも関わらずＫａｂａｔ ＣＤＲと重複する。好ましい実施形態は、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａにより定義されたＣＤＲを使用するが、本明細書において使用される方法は、これらのシステムのいずれかに従い定義されるＣＤＲを利用してもよい。
本明細書において使用される場合、用語「フレームワーク」又は「フレームワーク配列」は、ＣＤＲを引いた可変領域の残りの配列を指す。ＣＤＲ配列の正確な定義は、異なるシステムにより定義することができるので、フレームワーク配列の意味は、対応する異なる解釈の対象である。６つのＣＤＲ（軽鎖のＣＤＲ−Ｌ１、ＣＤＲ−Ｌ２及びＣＤＲ−Ｌ３並びに重鎖のＣＤＲ−Ｈ１、ＣＤＲ−Ｈ２及びＣＤＲ−Ｈ３）はまた、ＣＤＲ１が、ＦＲ１とＦＲ２の間に位置し、ＣＤＲ２が、ＦＲ２とＦＲ３の間に位置し、ＣＤＲ３が、ＦＲ３とＦＲ４の間に位置する、軽鎖及び重鎖上のフレームワーク領域を各鎖上の４つの下位領域（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３及びＦＲ４）に分ける。特定の下位領域をＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４と特定することなく、他のものにより言及されるフレームワーク領域は、単一の天然に存在する免疫グロブリン鎖の可変領域内の組み合わされたＦＲのものを表す。本明細書において使用される場合、ＦＲは、４つのうち１つの下位領域を表し、ＦＲは、フレームワーク領域を構成する４つのうち２つ以上の下位領域を表す。
ヒト化抗体のフレームワーク及びＣＤＲ領域は、親配列に正確に対応する必要はなく、例えばドナー抗体ＣＤＲ又は共通フレームワークは、この部位のＣＤＲ又はフレームワーク残基が、ドナー抗体又は共通フレームワークのいずれかに対応しないように、少なくとも１つのアミノ酸残基の置換、挿入及び／又は欠失により変異誘発されてもよい。しかしながら、好ましい実施形態において、かかる変異は広範ではない。通常、ヒト化抗体残基の少なくとも８０％、好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％、最も好ましくは少なくとも９５％が、親ＦＲ及びＣＤＲ配列のものに対応する。本明細書において使用される場合、用語「共通フレームワーク」は、共通免疫グロブリン配列中のフレームワーク領域を指す。本明細書において使用される場合、用語「共通免疫グロブリン配列」は、関連する免疫グロブリン配列のファミリーにおいて最も頻繁に生じるアミノ酸（又はヌクレオチド）から形成された配列を指す（例えばＷｉｎｎａｋｅｒ、Ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅｓ ｔｏ Ｃｌｏｎｅｓ（Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、ドイツ、１９８７年を参照）。免疫グロブリンのファミリーにおいて、共通配列におけるそれぞれの位置は、ファミリーにおけるこの位置で最も頻繁に生じるアミノ酸により占められる。２つのアミノ酸が、等しい頻度で生じる場合、いずれかが、共通配列に含まれ得る。
本明細書において使用される、用語「ヒトアクセプターフレームワーク」は、非ヒト種由来のＣＤＲが組み込まれ得るヒト抗体若しくはその抗体断片又はヒト共通配列フレームワークから誘導されたＶＨ又はＶＬフレームワークのアミノ酸配列を含む抗体又はその抗体断片のフレームワークを指すことを意味する。
ペプチド又はポリペプチド配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列同一性の一部として保存的置換を考慮することなく、最大のパーセント配列同一性を達成するために、配列を整列させ、必要に応じてギャップを導入した後に、特定のペプチド又はポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基の割合と定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的のためのアラインメントは、当技術分野における技術の範囲内である様々な方法、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ又はＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアのような公的に入手可能なコンピューターソフトウェアを使用して達成することができる。当業者は、比較される配列の全長にわたり最大のアラインメントを達成するのに必要とされる任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメーターを決定することができる。一実施形態において、本発明は、配列番号１〜１４８のいずれか１つに記載のアミノ酸配列と少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％又は少なくとも９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。
用語「多価抗体」は、２つ以上の抗原結合部位を含む抗体を表示するために本明細書において使用される。ある特定の実施形態において、多価抗体は、３つ以上の抗原結合部位を有するように操作されてもよく、一般に、天然に存在する抗体ではない。
用語「多重特異性抗体」は、２つ以上の無関連の抗原と結合する能力がある抗体を指す。一実施形態において、多重特異性抗体は、２つの無関連の抗原に結合する能力がある二重特異性抗体、例えばＢ７−Ｈ３及びＣＤ３に結合する二重特異性抗体又はその抗原結合部分である。
本明細書において互換的に使用される用語「二重可変ドメイン」又は「ＤＶＤ」は、２つ以上の抗原結合部位を含む抗原結合タンパク質であり、四価又は多価結合タンパク質である。かかるＤＶＤは、単一特異性、すなわち、１つの抗原に結合する能力がある、又は多重特異性、すなわち、２つ以上の抗原に結合する能力があってもよい。２つの重鎖ＤＶＤポリペプチド及び２つの軽鎖ＤＶＤポリペプチドを含むＤＶＤ結合タンパク質は、ＤＶＤ Ｉｇと呼ばれる。ＤＶＤ Ｉｇのそれぞれの半分が、重鎖ＤＶＤポリペプチド及び軽鎖ＤＶＤポリペプチド、並びに２つの抗原結合部位を含む。各結合部位は、１つの抗原結合部位当たり抗原結合に関与する６つのＣＤＲの総数で、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含む。一実施形態において、本明細書に記載されるＣＤＲは、抗Ｂ７−Ｈ３ ＤＶＤにおいて使用される。
用語「キメラ抗原受容体」又は「ＣＡＲ」は、少なくとも（１）抗原結合領域、例えば抗体の可変重鎖又は軽鎖、（２）ＣＡＲをＴ細胞内に固定するための膜貫通ドメイン及び（３）１つ以上の細胞内シグナル伝達ドメインを含む組換えタンパク質を指す。
「活性」という用語は、抗原に対する抗体又はＡＤＣ、例えば、ｈＢ７−Ｈ３抗原に結合する抗ｈＢ７−Ｈ３抗体の結合特異性／親和性、及び／又は抗体、例えば、ｈＢ７−Ｈ３への結合がｈＢ７−Ｈ３の生物学的活性を阻害する抗ｈＢ７−Ｈ３抗体の中和能力、例えば、Ｂ７−Ｈ３発現細胞株、例えばヒトＨ１４６肺がん細胞、ヒトＨ１６５０肺がん細胞、又はヒトＥＢＣ１肺がん細胞の増殖阻害のような活性を含む。
本明細書において使用される用語「非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）異種移植アッセイ」は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体若しくはＡＤＣが、腫瘍成長（例えばさらなる成長）を阻害し得る及び／又は免疫不全マウスへのＮＳＣＬＣ細胞の移植から生じる腫瘍成長を減少させ得るかどうかを決定するために使用されるインビボアッセイを指す。ＮＳＣＬＣ異種移植アッセイは、腫瘍が所望されるサイズ、例えば２００〜２５０ｍｍ３まで成長し、その際抗体又はＡＤＣが、抗体又はＡＤＣが腫瘍成長を阻害し得る及び／又は減少させ得るかどうかを決定するためにマウスに投与されるように、免疫不全マウスへのＮＳＣＬＣ細胞の移植を含む。ある特定の実施形態において、抗体又はＡＤＣの活性は、対照抗体、例えば腫瘍細胞に特異的に結合しない、例えばがんと関連しない抗原に指向される又は非がん性である供給源（例えば正常ヒト血清）から得られるヒトＩｇＧ抗体（又はその集合物）と比較してパーセント腫瘍成長阻害（％ＴＧＩ）に従い決定される。かかる実施形態において、抗体（又はＡＤＣ）及び対照抗体は、同じ用量、同じ頻度及び同じ経路を介してマウスに投与される。一実施形態において、ＮＳＣＬＣ異種移植アッセイにおいて使用されるマウスは、重度の合併免疫不全（ＳＣＩＤ）マウス及び／又は胸腺欠損ＣＤ−１ヌードマウスである。ＮＳＣＬＣ異種移植片アッセイにおいて使用され得るＮＳＣＬＣ細胞の例には、限定するものではないが、Ｈ１２９９細胞（ＮＣＩ−Ｈ１２９９［Ｈ−１２９９］（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−５８０３））、Ｈ１６５０細胞（ＮＣＩ−Ｈ１６５０［Ｈ−１６５０］（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−５８８３（商標）））、Ｈ１９７５細胞（ＮＣＩ−Ｈ１９７５細胞［Ｈ１９７５］（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−５９０８（商標））、及びＥＢＣ−１細胞が含まれる。
本明細書で使用される「小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）異種移植アッセイ」という用語は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣが、免疫不全マウスへのＳＣＬＣ細胞の移植から生じる、腫瘍増殖（例えば、さらなる増殖）を阻害する及び／又は腫瘍増殖を低減することができるかどうかを決定するために使用されるインビボアッセイを指す。ＳＣＬＣ異種移植アッセイは、ＳＣＬＣ細胞を免疫不全マウスに移植することを含み、腫瘍が所望のサイズ、例えば２００〜２５０ｍｍ３となるまで増殖させ、その際、抗体又はＡＤＣをマウスに投与して、抗体又はＡＤＣが腫瘍増殖を阻害及び／又は低減させることができるかどうかを決定する。ある特定の実施形態において、抗体又はＡＤＣの活性は、対照抗体、例えば腫瘍細胞に特異的に結合しない（例えば、がんに関連しない抗原を対象とする。か、又は非がん性の供給源（例えば、正常ヒト血清）から得られる）ヒトＩｇＧ抗体（又はその集合物）に対する腫瘍増殖阻害パーセント（ＴＧＩパーセント）に従って決定される。かかる実施形態において、抗体（又はＡＤＣ）及び対照抗体は、同じ用量で、同じ頻度で、同じ経路を介してマウスに投与される。一実施形態において、ＮＳＣＬＣ異種移植アッセイに使用されるマウスは、重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ）マウス及び／又は無胸腺ＣＤ−１ヌードマウスである。ＳＣＬＣ異種移植片アッセイにおいて使用し得るＳＣＬＣ細胞の例には、限定するものではないが、Ｈ１４６細胞（ＮＣＩ−Ｈ１４６細胞［Ｈ１４６］（ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＴＢ−１７３）（商標））及びＨ８４７細胞（ＮＣＩ−Ｈ８４７［Ｈ８４７］（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−５８４６）（商標））が含まれる。
用語「エピトープ」は、抗体又はＡＤＣにより結合される抗原の領域を指す。ある特定の実施形態において、エピトープ決定基は、アミノ酸、糖側鎖、ホスホリル又はスルホニルのような分子の化学的に活性な表面分類を含み、ある特定の実施形態において、特定の３次元構造特徴及び／又は特定の荷電特徴を有してもよい。ある特定の実施形態において、抗体は、それが、タンパク質及び／又は高分子の複合混合物においてその標的抗原を優先的に認識するとき、抗原に特異的に結合すると述べられる。
本明細書において使用される、用語「表面プラズモン共鳴」は、例えばＢＩＡｃｏｒｅシステム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ ＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ、スウェーデン及びＰｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を使用したバイオセンサーマトリックス内のタンパク質濃度における変化の検出により、リアルタイム生体特異的相互作用の解析を可能にする光学的現象を指す。さらなる記載については、Ｊｏｎｓｓｏｎ，Ｕ．ら（１９９３年）Ａｎｎ．Ｂｉｏｌ．Ｃｌｉｎ．５１：１９〜２６頁；Ｊｏｎｓｓｏｎ，Ｕ．ら（１９９１年）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、１１：６２０〜６２７頁；Ｊｏｈｎｓｓｏｎ，Ｂ．ら（１９９５年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．、８：１２５〜１３１頁；及びＪｏｈｎｎｓｏｎ，Ｂ．ら（１９９１年）Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９８：２６８〜２７７を参照。一実施形態において、表面プラズモン共鳴は、実施例２において記載される方法に従い決定される。
本明細書において使用される用語「ｋｏｎ」又は「ｋａ」は、抗体／抗原複合体を形成するための抗原への抗体の結合についての結合速度定数を指すことが意図される。
本明細書において使用される用語「ｋｏｆｆ」又は「ｋｄ」は、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についての解離速度定数を指すことが意図される。
本明細書において使用される、用語「ＫＤ」は、特定の抗体−抗原相互作用（例えばｈｕＡｂ１３抗体及びＢ７−Ｈ３）の平衡解離定数を指すことが意図される。ＫＤは、ｋａ／ｋｄにより計算される。
本明細書において使用される用語「競合的結合」は、第１の抗体が、第３の分子、例えば抗原上の結合部位について第２の抗体と競合する状況を指す。一実施形態において、２つの抗体の間での競合的結合は、ＦＡＣＳ解析を使用して決定される。
用語「競合的結合アッセイ」は、２つ以上の抗体が同じエピトープに結合するかどうかを決定するために使用されるアッセイである。一実施形態において、競合的結合アッセイは、標識された抗体の蛍光シグナルが、同じエピトープに対する競合が蛍光のレベルを下げる標識されていない抗体の導入に起因して低減されるかどうかを決定することにより、２つ以上の抗体が同じエピトープに結合するかどうかを決定するために使用される競合蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）である。
本明細書において使用される、用語「標識された抗体」は、結合タンパク質、例えば抗体の同定をもたらす取り込まれた標識を有する抗体又はその抗原結合部分を指す。好ましくは、標識は、検出可能なマーカー、例えば放射標識されたアミノ酸の取り込み又は印を付けられたアビジン（例えば蛍光マーカーを含有するストレプトアビジン又は光学的若しくは比色分析方法により検出され得る酵素活性）により検出され得るビオチニル部分のポリペプチドへの結合である。ポリペプチド用の標識の例は、以下の：ラジオアイソトープ又は放射性核種（例えば３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１７７Ｌｕ、１６６Ｈｏ又は１５３Ｓｍ）；蛍光標識（例えばＦＩＴＣ、ローダミン、ランタニドリン光体）、酵素標識（例えば西洋ワサビペルオキシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）；化学発光マーカー；ビオチニル基；第２のレポーター（例えばロイシンジッパー対配列、第２の抗体の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ）により認識される事前に決められたポリペプチドエピトープ；及びガドリニウムキレート剤のような磁性薬剤を含むが、これらに限定されない。
「抗体−薬物−コンジュゲート」又は「ＡＤＣ」という用語は、１つ以上の化学薬物（本明細書では、任意選択的に治療用又は細胞傷害性薬剤であってもよい、薬剤、弾頭、又はペイロード（ｐａｙｌｏａｄ））と称する）に化学的に連結された抗体又はその抗原結合フラグメントのような結合タンパク質を指す。好ましい実施形態において、ＡＤＣは、抗体、薬物（例えば細胞傷害性薬物）、及び薬物の抗体への結合又はコンジュゲーションを可能にするリンカーを含む。ＡＤＣは、典型的には、２、４、６、又は８個の薬物充填種を含む、抗体にコンジュゲートした１〜８個の薬物のいずれかを有する。ＡＤＣに含まれ得る薬物の非限定的な例は、有糸分裂阻害剤、抗腫瘍抗生物質、免疫調節剤、遺伝子治療用ベクター、アルキル化剤、抗血管新生剤、代謝拮抗剤、ホウ素含有剤、化学防護剤、ホルモン、抗ホルモン剤、コルチコステロイド、光活性治療剤、オリゴヌクレオチド、放射性核種剤、トポイソメラーゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤（例：ＴＥＣファミリーキナーゼ阻害剤及びセリン／トレオニンキナーゼ阻害剤）、並びに放射線増感剤である。一実施形態において、薬物はＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である。
「抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート」又は「抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ」との用語は、本明細書において互換的に使用され、Ｂ７−Ｈ３に特異的に結合する抗体を含むＡＤＣを指し、それによって抗体は１つ以上の化学薬剤にコンジュゲートされている。一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、オーリスタチン（例えば、ＭＭＡＥ又はＭＭＡＦ）とコンジュゲートした抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、又はｈｕＡｂ３ｖ２．６を含む。一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートした抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、又はｈｕＡｂ３ｖ２．６を含む。好ましい実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、ヒトＢ７−Ｈ３Ｂ７−Ｈ３Ｂ７−Ｈ３に結合する。
本明細書において使用される用語「Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤」は、細胞においてＢｃｌ−ｘＬ活性と拮抗する化合物を指す。一実施形態において、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、Ｂｃｌ−ｘＬ活性を阻害することにより、細胞のアポトーシスを促進する。
本明細書において使用される用語「オーリスタチン」は、有糸分裂阻害剤のファミリーを指す。オーリスタチン誘導体もまた、用語「オーリスタチン」の定義に含まれる。オーリスタチンの例は、オーリスタチンＥ（ＡＥ）、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）及びドラスタチンの合成類似体を含むが、これらに限定されない。一実施形態において、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、オーリスタチンにコンジュゲートさせて抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを形成する。
本明細書で使用されるとき、「Ａｂ−ｖｃＭＭＡＥ」との用語は、マレイミドカプロイルバリンシトルリンｐ−アミノベンジルオキシカルバミル（ＰＡＢＡ）リンカーを介して、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）にコンジュゲートされた抗体を含むＡＤＣを指すのに使用される。
本明細書で使用されるとき、「ｍｃＭＭＡＦ」との用語は、マレイミドカプロイル−モノメチルオーリスタチン（ＭＭＡＦ）のリンカー／薬物の組合せを指すために使用される。
用語「薬物抗体比」又は「ＤＡＲ」は、ＡＤＣの抗体に結合された薬物、例えばＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の数を指す。より高い負荷、例えば２０がまた、抗体上の連結部位の数に依存して可能であるが、ＡＤＣのＤＡＲは、１〜８の範囲であり得る。用語ＤＡＲは、個々の抗体上に負荷された薬物の数に関して使用されてもよい又はあるいは、ＡＤＣの群の平均若しくは中間のＤＡＲに関して使用されてもよい。
本明細書において使用される用語「所望されないＡＤＣ種」は、異なる薬物負荷を有するＡＤＣ種から分離されるべきである任意の薬物負荷種を指す。一実施形態において、用語所望されないＡＤＣ種は、６以上の薬物負荷種、すなわち、ＤＡＲ６、ＤＡＲ７、ＤＡＲ８及び８より大きいＤＡＲ（すなわち、６、７、８又は８より大きい薬物負荷種）を含む、６以上のＤＡＲを有するＡＤＣを指すことができる。別の実施形態において、用語所望されないＡＤＣ種は、８以上の薬物負荷種、すなわち、ＤＡＲ８及び８より大きいＤＡＲ（すなわち、８又は８より大きい薬物負荷種）を含む、８以上のＤＡＲを有するＡＤＣを指してもよい。
本明細書において使用される用語「ＡＤＣ混合物」は、ＡＤＣの不均一なＤＡＲ分布を含有する組成物を指す。一実施形態において、ＡＤＣ混合物は、１〜８、例えば１．５、２、４、６及び８のＤＡＲ（すなわち、１．５、２、４、６及び８の薬物負荷種）の分布を有するＡＤＣを含有する。特に、分解産物は、１、３、５及び７のＤＡＲがまた、混合物に含まれ得るように生じてもよい。さらに、混合物内のＡＤＣはまた、８より大きいＤＡＲを有してもよい。ＡＤＣ混合物は、鎖間ジスルフィド還元、続いてコンジュゲートから生じる。一実施形態において、ＡＤＣ混合物は、４以下のＤＡＲを有するＡＤＣ（すなわち、４以下の薬物負荷種）と６以上のＤＡＲを有するＡＤＣ（すなわち、６以上の薬物負荷種）の両方を含む。
本明細書において使用される、用語「異種移植アッセイ」は、ヒト腫瘍細胞が、ヒト細胞を拒絶しない免疫不全マウスに、皮下又は腫瘍の起源である臓器型のいずれかに移植される、ヒト腫瘍異種移植アッセイを指す。
用語「がん」は、調節されていない細胞成長により典型的に特徴付けられる哺乳動物における生理的状態を指す又は記載することを意味する。がんの例は、癌、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病又はリンパ系腫瘍を含むが、これらに限定されない。かかるがんのより特定の例には、膠芽腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、非小細胞肺がん、肺がん、結腸がん、大腸がん、頭頸部がん、乳がん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）、膵臓がん、扁平上皮腫瘍、扁平上皮癌（例、扁平上皮肺がん又は扁平上皮頭頸部がん）、肛門がん、皮膚がん、外陰がんが含まれる。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、Ｂ７−Ｈ３を過剰発現する腫瘍を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、Ｂ７−Ｈ３を過剰発現する可能性が高い固形腫瘍を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、扁平上皮非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、進行性固形腫瘍を含む固形腫瘍を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは前立腺がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、非小細胞肺がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、膠芽腫を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、結腸がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、頭頸部がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、腎臓がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、腎明細胞癌を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、神経膠腫を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、メラノーマを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、膵臓がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、胃がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、卵巣がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、大腸がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、腎がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、小細胞肺がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、肝細胞癌を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、下咽頭扁平上皮癌を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、神経芽細胞腫を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、乳がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、子宮内膜がんを有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、尿路上皮細胞癌を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する患者に投与される。一実施形態において、本発明の抗体又はＡＤＣは、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を有する患者に投与される。
本明細書で使用される「Ｂ７−Ｈ３発現腫瘍」という用語は、Ｂ７−Ｈ３タンパク質を発現する腫瘍を指す。一実施形態において、腫瘍におけるＢ７−Ｈ３発現は、腫瘍細胞膜の免疫組織化学的染色を用いて決定され、腫瘍試料中のバックグラウンドレベルを超える任意の免疫組織化学的染色は、腫瘍がＢ７−Ｈ３発現腫瘍であることを示す。腫瘍におけるＢ７−Ｈ３の発現を検出するための方法は当技術分野において既知であり、免疫組織化学的アッセイを含む。対照的に、「Ｂ７−Ｈ３陰性腫瘍」は、免疫組織化学的技術によって決定されるように、腫瘍試料中のバックグラウンドを超えるＢ７−Ｈ３膜染色が存在しない腫瘍として定義される。
用語「過剰発現する」、「過剰発現」又は「過剰発現された」は、互換的に、正常細胞と比較して、通常がん細胞において検出可能なより高いレベルで転写される又は翻訳される遺伝子を指す。したがって、過剰発現は、タンパク質及びＲＮＡの過剰発現（増大した転写、転写後プロセシング、翻訳、翻訳後プロセシング、変化した安定性及び変化したタンパク質分解に起因する）、並びに変化したタンパク質出入パターン（増大した核局在化）及び増強された機能活性、例えば基質の増大した酵素加水分解などに起因する局所過剰発現の両方を指す。したがって、過剰発現は、タンパク質又はＲＮＡレベルのいずれかを指す。過剰発現はまた、正常細胞又は比較細胞と比較して５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又はそれ以上であり得る。ある特定の実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、Ｂ７−Ｈ３を過剰発現しそうである固形腫瘍を処置するために使用される。
本明細書において使用される用語「遺伝子増幅」は、ＤＮＡの任意の特定の断片の複数の複製の産生により特徴付けられる細胞プロセスを指す。例えば腫瘍細胞は、細胞シグナル及びときに環境事象の結果として染色体部分を増幅する又は複製し得る。遺伝子増幅のプロセスは、遺伝子のさらなる複製の産生に至る。一実施形態において、遺伝子は、Ｂ７−Ｈ３、すなわち、「Ｂ７−Ｈ３増幅」である。一実施形態において、本明細書において開示される組成物及び方法は、Ｂ７−Ｈ３が増幅したがんを有する対象を処置するために使用される。
本明細書において使用される、用語「投与すること」は、治療目的（例えばＢ７−Ｈ３関連障害の処置）を達成するための物質（例えば抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣ）の送達を指すことを意味する。投与様式は、非経口、経腸及び局所であってもよい。非経口投与は、通常、注射によるものであり、限定せずに、静脈内、筋肉内、動脈内、くも膜下腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内及び胸骨内注射及び注入を含む。
治療方法（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｍｅｔｈｏｄ）（例えば治療方法（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ））の文脈における「併用療法」又は「組合せ」という用語は、本明細書で使用される場合、例えば２種以上の治療物質、例えば、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣ及び追加の治療剤の投与を指す。さらなる治療剤は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣの投与と同時、投与の前又は投与の後に投与されてもよい。
本明細書において使用される場合、用語「有効量」又は「治療有効量」は、障害、例えばがん若しくはその１つ以上の症状の重症度及び／若しくは期間を低減する若しくは改善する、障害の進行を防止する、障害の退縮を引き起こす、障害に伴う１つ以上の症状の再発、発生、発症若しくは進行を防止する、障害を検出する又は別の療法（例えば予防若しくは治療剤）の予防若しくは治療効果を増強する若しくは改善するのに十分である薬物、例えば抗体又はＡＤＣの量を指す。有効量の抗体又はＡＤＣは、例えば腫瘍成長を阻害する（例えば腫瘍体積の増大を阻害する）、腫瘍成長を減少させる（例えば腫瘍体積を減少させる）、がん細胞の数を低減する及び／又はある程度までがんに伴う症状の１つ以上を軽減してもよい。有効量は、例えば無病生存期間（ＤＦＳ）を改善する、全生存期間（ＯＳ）を改善する又は再発の尤度を減少させてもよい。
様々な化学置換基を以下に定義する。一部の場合において、置換基（例えば、アルキル、アルカニル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、及びアリール）中の炭素原子の数は、接頭辞「Ｃｘ〜Ｃｙ」又は「Ｃｘ〜ｙ」で示され、ここで、ｘは、最小の炭素原子数であり、ｙは、最大の炭素原子数である。したがって、例えば、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を含有するアルキルを指す。さらに例示すると、「Ｃ３−Ｃ８シクロアルキル」は、３〜８個の炭素環原子を含有する飽和ヒドロカルビル環を意味する。置換基が、「置換されている」として記載される場合、炭素又は窒素上の水素原子は、非水素基で置き換えられる。例えば置換されたアルキル置換基は、アルキル上の少なくとも１個の水素原子が非水素基で置き換えられているアルキル置換基である。説明するために、モノフルオロアルキルは、フルオロ基で置換されたアルキルであり、ジフルオロアルキルは、２つのフルオロ基で置換されたアルキルである。置換基上に１つより多くの置換が存在する場合、各置換は、同一であってもよく又は異なっていてもよい（別段述べられない限り）ことは、認識されるべきである。置換基が、「置換されていてもよい」と記載される場合、置換基は、（１）置換されていない又は（２）置換されている、のいずれであってもよい。可能性のある置換基は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ハロゲン、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、オキソ、−ＣＮ、ＮＯ２、−ＯＲｘａ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｘｚ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）２、−ＳＲｘａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｘａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｘａ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒｘａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｘａ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）Ｓ（Ｏ）２Ｒｘｚ、−Ｎ（Ｒｘａ）２、−Ｎ（Ｒｘａ）Ｃ（Ｏ）Ｒｘｚ、−Ｎ（Ｒｘａ）Ｓ（Ｏ）２Ｒｘｚ、−Ｎ（Ｒｘａ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒｘｚ）、−Ｎ（Ｒｘａ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）２、−Ｎ（Ｒｘａ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｘａ）２、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−ＯＲｘａ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒｘｚ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）２、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−ＳＲｘａ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）２Ｒｘａ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｘａ）２、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒｘａ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲｘａ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）２、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）Ｓ（Ｏ）２Ｒｘｚ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｎ（Ｒｘａ）２、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｎ（Ｒｘａ）Ｃ（Ｏ）Ｒｘｚ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｎ（Ｒｘａ）Ｓ（Ｏ）２Ｒｘｚ、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｎ（Ｒｘａ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒｘｚ）、−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｎ（Ｒｘａ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒｘａ）２、又は−（Ｃ１〜Ｃ６アルキレニル）−Ｎ（Ｒｘａ）Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒｘａ）２；（式中、Ｒｘａは、出現ごとに、独立して水素、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はＣ１〜Ｃ６ハロアルキルであり、Ｒｘｚは、出現ごとに、独立してアリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はＣ１〜Ｃ６ハロアルキルである。）を含むが、これらに限定されない。
ＡＤＣ及び／又はシントンを含む様々なＡＤＣ、シントン及びＢｃｌ−ｘＬ阻害剤が、一部の実施形態において、置換基を含む構造式を参照して本明細書に記載される。原子価及び安定性が許容するなら、置換基を含む様々な基が組み合わされ得ることは、理解されるべきである。本開示により想定される置換基及び変数の組合せは、安定な化合物の形成をもたらすもののみである。本明細書において使用される場合、用語「安定な」は、製造を可能にするのに十分な安定性を有し、本明細書において詳しく述べられた目的に有用であるのに十分な期間化合物の完全性を維持する化合物を指す。
本明細書で使用される場合、以下の用語は、以下の意味を有することを意図している
「アルコキシ」との用語は、式−ＯＲｘａの基を指し、ここで、Ｒｘａ’は、アルキル基である。代表的なアルコキシ基には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが含まれる。
「アルコキシ」との用語は、式−ＯＲｘａの基を指し、ここで、Ｒｘａ’は、アルキル基である。代表的なアルコキシ基には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシなどが含まれる。
「アルコキシアルキル」という用語は、アルコキシ基で置換されたアルキル基を意味し、一般式−ＲｂＯＲｘａで表すことができ、ここで、Ｒｂはアルキレン基であり、Ｒｘａはアルキル基である。
単独で又は他の置換基の一部としての「アルキル」という用語は、親のアルカン、アルケン又はアルキンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される、飽和又は不飽和の分枝、直鎖又は環式の一価炭化水素基を指す。典型的なアルキル基には、限定するものではないが、メチル、エタニル、エテニル、エチニルのようなエチル、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、プロプ−２−エン−１−イル、シクロプロプ−１−エン−１−イル、シクロプロプ−２−エン−１−イル、プロプ−１−イン−１−イル、プロプ−２−イン−１−イルのようなプロピル、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロプ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルのようなブチルなどが含まれる。特定のレベルの飽和が意図される場合、命名法「アルカニル」、「アルケニル」及び／又は「アルキニル」が、以下で定義される通り、使用される。用語「低級アルキル」は、１〜６個の炭素を有するアルキル基を指す。
用語「アルカニル」は、それ自体又は別の置換基の一部として、親アルカンの単一の炭素原子からの１つの水素原子の除去により誘導される飽和の分岐、直鎖又は環状のアルキルを指す。典型的なアルカニル基は、メチル；エタニル；プロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなどのようなプロパニル；ブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル）、シクロブタン−１−イルなどのようなブタニルなどを含むが、これらに限定されない。
用語「アルケニル」は、それ自体又は別の置換基の一部として、親アルケンの単一の炭素原子からの１つの水素原子の除去により誘導される少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する不飽和の分岐、直鎖又は環状のアルキルを指す。典型的なアルケニル基は、エテニル；プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル、プロパ−２−エン−２−イル、シクロプロパ−１−エン−１−イル、シクロプロパ−２−エン−１−イルのようなプロペニル；ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなどのようなブテニルなどを含むが、これらに限定されない。
用語「アルキニル」は、それ自体又は別の置換基の一部として、親アルキンの単一の炭素原子からの１つの水素原子の除去により誘導される少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する不飽和の分岐、直鎖又は環状のアルキルを指す。典型的なアルキニル基は、エチニル；プロパ−１−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなどのようなプロピニル；ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルなどのようなブチニルなどを含むが、これらに限定されない。
「アルキルアミン」という用語は、式−ＮＨＲｘａの基を意味し、「ジアルキルアミン」は、式−ＮＲｘａＲｘａ基の基を指し、ここで、各Ｒｘａは、互いに独立して、アルキル基である。
用語「アルキレン」は、２つの末端炭素原子のそれぞれからの１つの水素原子の除去により誘導される２つの末端の一価のラジカル中心を有するアルカン、アルケン又はアルキン基を指す。典型的なアルキレン基は、メチレン；及び飽和又は不飽和エチレン；プロピレン；ブチレンなどを含むが、これらに限定されない。用語「低級アルキレン」は、１〜６個の炭素を有するアルキレン基を指す。
「ヘテロアルキレン」という用語は、チオ、オキシ、又は−ＮＲｘ３−（ここで、Ｒｘ３は、水素、低級アルキル及び低級ヘテロアルキルから選択される）で置換された１つ以上の−ＣＨ２−基を有する二価アルキレンを指す。ヘテロアルキレンは、直鎖、分岐、環状、二環式又はこれらの組合せであり得、最大１０個の炭素原子及び最大４個のヘテロ原子を含み得る。用語「低級ヘテロアルキレン」は、１〜４個の炭素原子及び１〜３個のヘテロ原子を有するアルキレン基を指す。
用語「アリール」は、６〜１４個の炭素環原子を含有する芳香族カルボシクリルを意味する。アリールは、単環式又は多環式であってもよい（すなわち、１つより多くの環を含有してもよい）。多環式芳香環の場合、多環系の１つのみの環が芳香族であることが必要であり、一方、残りの環は、飽和、部分的に飽和又は不飽和であってもよい。アリールの例は、フェニル、ナフタレニル、インデニル、インダニル及びテトラヒドロナフチルを含む。
「アリーレン」という用語は、２個の環炭素の各々から１個の水素原子を除去することによって誘導される、２個の一価のラジカル中心を有するアリール基を指す。例示的なアリーレン基は、フェニレンである
アルキル基は、「カルボニル」によって置換されていてもよく、これは、単一のアルカニレン炭素原子からの２個の水素原子が除去され、酸素原子への二重結合で置き換えられることを意味する。
アルキル基は、「カルボニル」によって置換されていてもよく、これは、単一のアルカニレン炭素原子からの２個の水素原子が除去され、酸素原子への二重結合で置き換えられることを意味する。
接頭語「ハロ」は、接頭語を含む置換基が、１つ以上の独立して選択されたハロゲン基で置換されていることを示す。例えばハロアルキルは、少なくとも１つの水素基がハロゲン基で置き換えられているアルキル置換基を意味する。典型的なハロゲン基は、クロロ、フルオロ、ブロモ及びヨードを含む。ハロアルキルの例は、クロロメチル、１−ブロモエチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル及び１，１，１−トリフルオロエチルを含む。置換基が１つより多くのハロゲン基により置換されている場合、これらのハロゲン基は、同一であってもよく又は異なっていてもよい（別段述べられていない限り）ことは、認識されるべきである。
「ハロアルコキシ」という用語は、式−ＯＲｃの基を指し、ここで、Ｒｃはハロアルキルである。
用語「ヘテロアルキル」、「ヘテロアルカニル」、「ヘテロアルケニル」、「ヘテロアルキニル」及び「ヘテロアルキレン」は、炭素原子の１個以上、例えば１、２又は３個の炭素原子が、同じ又は異なるヘテロ原子又はヘテロ原子基でそれぞれ独立して置き換えられている、それぞれ、アルキル、アルカニル、アルケニル、アルキニル及びアルキレン基を指す。炭素原子を置き換え得る典型的なヘテロ原子及び／又はヘテロ原子基は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｏ−、−ＮＲｃ−、−ＰＨ、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃ−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃ−など（これらの組合せを含む）を含むが、これらに限定されず、式中、各Ｒｃは、独立して、水素又はＣ１〜Ｃ６アルキルである。用語「低級ヘテロアルキル」は、１〜４個の炭素原子及び１〜３個のヘテロ原子を指す。
用語「シクロアルキル」及び「ヘテロシクリル」は、それぞれ、「アルキル」及び「ヘテロアルキル」基の環状バージョンを指す。ヘテロシクリル基について、ヘテロ原子は、分子の残部に結合している位置を占め得る。シクロアルキル又はヘテロシクリル環は、単一の環（単環式）であってもよい又は２つ以上の環を有してもよい（二環式又は多環式）。
単環式シクロアルキル及びヘテロシクリル基は、典型的には３〜７個の環原子、より典型的には３〜６個の環原子、なおより典型的には５〜６個の環原子を含有する。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル；シクロブタニル及びシクロブテニルのようなシクロブチル；シクロペンタニル及びシクロペンテニルのようなシクロペンチル；シクロヘキサニル及びシクロヘキセニルのようなシクロヘキシルなどを含むが、これらに限定されない。単環式ヘテロシクリルの例は、オキセタン、フラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、チオフェニル（チオフラニル）、ジヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオフェニル、ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアゾリニル、イソチアゾリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、チオジアゾリル、オキサジアゾリル（１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル（フラザニル）又は１，３，４−オキサジアゾリルを含む）、オキサトリアゾリル（１，２，３，４−オキサトリアゾリル又は１，２，３，５−オキサトリアゾリルを含む）、ジオキサゾリル（１，２，３−ジオキサゾリル、１，２，４−ジオキサゾリル、１，３，２−ジオキサゾリル又は１，３，４−ジオキサゾリルを含む）、１，４−ジオキサニル、ジオキソチオモルホリニル、オキサチアゾリル、オキサチオリル、オキサチオラニル、ピラニル、ジヒドロピラニル、チオピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピリジニル（アジニル）、ピペリジニル、ジアジニル（ピリダジニル（１，２−ジアジニル）、ピリミジニル（１，３−ジアジニル）又はピラジニル（１，４−ジアジニル）を含む）、ピペラジニル、トリアジニル（１，３，５−トリアジニル、１，２，４−トリアジニル及び１，２，３−トリアジニル）を含む）、オキサジニル（１，２−オキサジニル、１，３−オキサジニル又は１，４−オキサジニル）を含む）、オキサチアジニル（１，２，３−オキサチアジニル、１，２，４−オキサチアジニル、１，２，５−オキサチアジニル又は１，２，６−オキサチアジニル）を含む）、オキサジアジニル（１，２，３−オキサジアジニル、１，２，４−オキサジアジニル、１，４，２−オキサジアジニル又は１，３，５−オキサジアジニル）を含む）、モルホリニル、アゼピニル、オキセピニル、チエピニル、ジアゼピニル、ピリドニル（ピリド−２（１Ｈ）−オンイル及びピリド−４（１Ｈ）−オンイルを含む）、フラン−２（５Ｈ）−オンイル、ピリミドニル（ピラミド−２（１Ｈ）−オンイル及びピラミド−４（３Ｈ）−オンイルを含む）、オキサゾール−２（３Ｈ）−オンイル、１Ｈ−イミダゾール−２（３Ｈ）−オンイル、ピリダジン−３（２Ｈ）−オンイル並びにピラジン−２（１Ｈ）−オンイルを含むが、これらに限定されない。
多環式シクロアルキル及びヘテロシクリル基は、１つより多くの環を含有し、二環式シクロアルキル及びヘテロシクリル基は、２つの環を含有する。環は、架橋された状態であってもよい、縮合された状態であってもよい又はスピロ配向の状態であってもよい。多環式シクロアルキル及びヘテロシクリル基は、架橋された環、縮合された環及び／又はスピロ環の組合せを含んでもよい。スピロ環状のシクロアルキル又はヘテロシクリルにおいて、１個の原子が、２個の異なる環に共通する。スピロシクロアルキルの例は、スピロ［４．５］デカンであり、スピロヘテロシクリルの例は、スピロピラゾリンである。
架橋されたシクロアルキル又はヘテロシクリルにおいて、環は、少なくとも２個の共通の非隣接原子を共有する。架橋されたシクロアルキルの例は、アダマンチル及びノルボルナニル環を含むが、これらに限定されない。架橋されたヘテロシクリルの例は、２−オキサトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカニルを含むが、これに限定されない。
縮合環シクロアルキル又はヘテロシクリルにおいて、２個以上の環は、２個の環が１個の共通の結合を共有するように、一緒に縮合される。縮合環シクロアルキルの例は、デカリン、ナフチレン、テトラリン及びアントラセンを含む。２個又は３個の環を含有する縮合環ヘテロシクリルの例は、イミダゾピラジニル（イミダゾ［１，２−ａ］ピラジニルを含む）、イミダゾピリジニル（イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニルを含む）、イミダゾピリダジニル（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジニルを含む）、チアゾロピリジニル（チアゾロ［５，４−ｃ］ピリジニル、チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジニル、チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニル及びチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジニルを含む）、インドリジニル、ピラノピロリル、４Ｈ−キノリジニル、プリニル、ナフチリジニル、ピリドピリジニル（ピリド［３，４−ｂ］−ピリジニル、ピリド［３，２−ｂ］−ピリジニル又はピリド［４，３−ｂ］−ピリジニルを含む）並びにプテリジニルを含む。縮合環ヘテロシクリルの他の例は、ジヒドロクロメニル、テトラヒドロイソキノリニル、インドリル、イソインドリル（イソベンザゾリル、プソイドイソインドリル）、インドレニニル（プソイドインドリル）、イソインダゾリル（ベンゾピラゾリル）、ベンザジニル（キノリニル（１−ベンザジニル）又はイソキノリニル（２−ベンザジニル）を含む）、フタラジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、ベンゾジアジニル（シンノリニル（１，２−ベンゾジアジニル）又はキナゾリニル（１，３−ベンゾジアジニル）を含む）、ベンゾピラニル（クロマニル又はイソクロマニルを含む）、ベンゾオキサジニル（１，３，２−ベンゾオキサジニル、１，４，２−ベンゾオキサジニル、２，３，１−ベンゾオキサジニル又は３，１，４−ベンゾオキサジニルを含む）、ベンゾ［ｄ］チアゾリル及びベンゾイソオキサジニル（１，２−ベンゾイソオキサジニル又は１，４−ベンゾイソオキサジニルを含む）のようなベンゾ縮合ヘテロシクリルを含む。
用語「ヘテロアリール」は、５〜１４個の環原子を含有する芳香族ヘテロシクリルを指す。ヘテロアリールは、単一の環又は２若しくは３個の縮合環であってもよい。ヘテロアリールの例は、ピリジル、ピラジル、ピリミジニル、ピリダジニル及び１，３，５−、１，２，４−又は１，２，３−トリアジニルのような６員環；トリアゾリル、ピロリル、イミダジル、フラニル、チオフェニル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、１，２，３−、１，２，４−、１，２，５−又は１，３，４−オキサジアゾリル及びイソチアゾリルのような５員環置換基；イミダゾピラジニル（イミダゾ［１，２−ａ］ピラジニルを含む）、イミダゾピリジニル（イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニルを含む）、イミダゾピリダジニル（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジニルを含む）、チアゾロピリジニル（チアゾロ［５，４−ｃ］ピリジニル、チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジニル、チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニル及びチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジニルを含む）、ベンゾ［ｄ］チアゾリル、ベンゾチオフラニル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、プリニル及びアントラニリルのような６／５員の縮合環置換基；並びにベンゾピラニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キナゾリニル及びベンゾオキサジニルのような６／６員の縮合環を含む。ヘテロアリールはまた、ピリドニル（ピリド−２（１Ｈ）−オンイル及びピリド−４（１Ｈ）−オンイルを含む）、ピリミドニル（ピラミド−２（１Ｈ）−オンイル及びピラミド−４（３Ｈ）−オンイルを含む）、ピリダジン−３（２Ｈ）−オンイル並びにピラジン−２（１Ｈ）−オンイルのような芳香族（４Ｎ＋２ｐｉ電子）共鳴寄与体を有する複素環であってもよい。
本明細書で使用される「スルホネート」という用語は、スルホン酸の塩又はエステルを意味する。
本明細書で使用される「メチルスルホネート」という用語は、スルホン酸基のメチルエステルを意味する。
本明細書で使用される「カルボネート」という用語は、カルボン酸の塩又はエステルを意味する。
本明細書において使用される用語「ポリオール」は、２個より多くのヒドロキシル基を独立して又はモノマー単位の部分として含有する基を意味する。ポリオールは、還元型Ｃ２〜Ｃ６炭水化物、エチレングリコール及びグリセリンを含むが、これらに限定されない。
「Ｇ１」の文脈で使用されるときの「糖」という用語は、単糖類及び二糖類の分類のＯ−グリコシド、Ｎ−グリコシド、Ｓ−グリコシド及びＣ−グリコシド（Ｃ−グリコシル）炭水化物誘導体を含み、天然に存在する供給源に由来してもよいし、合成由来であってもよい。例えば「糖」は、「Ｇ１」の文脈で使用されるとき、これらに限定されないが、特に、グルクロン酸、ガラクツロン酸、ガラクトース及びグルコースから誘導されるもののような誘導体を含む。適当な糖置換は、ヒドロキシル、アミン、カルボン酸、スルホン酸、ホスホン酸、エステル及びエーテルを含むが、これらに限定されない。
「ＮＨＳエステル」という用語は、カルボン酸のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル誘導体を意味する。
「アミン」という用語は、環式型を含む、第一級、第二級、及び第三級脂肪族アミンを含む。
用語塩は、「又はその塩」の文脈で使用されるとき、アルカリ金属塩を形成するために、及び遊離酸又は遊離塩基の付加塩を形成するために一般的に使用される塩を含む。一般に、これらの塩は、典型的には、例えば適当な酸又は塩基を本発明の化合物と反応させることにより、従来の手段によって調製され得る。
塩が、患者に投与されること（例えばインビトロの状況において使用することと反対）が意図される場合、塩は、好ましくは、薬学的に許容される及び／又は生理的に適合可能である。用語「薬学的に許容される」は、修飾された名詞が、医薬製品として又は医薬製品の一部としての使用に適当であることを意味するように、本特許出願において形容詞的に使用される。用語「薬学的に許容される塩」は、アルカリ金属塩を形成するために及び遊離酸又は遊離塩基の付加塩を形成するために一般に使用される塩を含む。一般に、これらの塩は、典型的には、例えば適当な酸又は塩基を本発明の化合物と反応させることにより、従来の手段によって調製され得る。
本発明の様々な態様が、以下のサブセクションにおいてさらに詳細に記載される。
ＩＩ．抗Ｂ７−Ｈ３抗体
本発明の一態様は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又はその抗原結合部分を提供する。一実施形態において、本発明は、キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又はその抗原結合部分を提供する。さらに別の実施形態において、本発明は、ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又はその抗原結合部分を提供する。別の態様において、本発明は、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体、及び限定するものではないがＢｃｌ−ｘＬ阻害剤又はオーリスタチンのような、少なくとも１つの薬物を含む、抗体薬物結合体（ＡＤＣ）を特徴とする。本発明の抗体又はＡＤＣは、限定するものではないが、インビトロでの野生型ヒトＢ７−Ｈ３への結合、Ｂ７−Ｈ３を発現する腫瘍細胞上での野生型ヒトＢ７−Ｈ３への結合及びマウスモデルにおける異種移植腫瘍増殖の低減又は阻害を含む、特徴を有する。
本発明の一態様は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又はその抗原結合部分を提供する。一実施形態において、本発明は、キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又はその抗原結合部分を提供する。さらに別の実施形態において、本発明は、ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又はその抗原結合部分を提供する。別の態様において、本発明は、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体、及び限定するものではないがＢｃｌ−ｘＬ阻害剤又はオーリスタチンのような、少なくとも１つの薬物を含む、抗体薬物結合体（ＡＤＣ）を特徴とする。本発明の抗体又はＡＤＣは、限定するものではないが、インビトロでの野生型ヒトＢ７−Ｈ３への結合、Ｂ７−Ｈ３を発現する腫瘍細胞上での野生型ヒトＢ７−Ｈ３への結合及びマウスモデルにおける異種移植腫瘍増殖の低減又は阻害を含む、特徴を有する。
本発明の一態様は、リンカーを介して薬物（ここで、該薬物は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤である）にコンジュゲートした抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を含む、抗ヒトＢ７−Ｈ３（抗ｈＢ７−Ｈ３）抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を特徴とする。本明細書に記載のＡＤＣに使用できる例示的な抗Ｂ７−Ｈ３抗体（及びその配列）。
本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、抗体に結合した細胞傷害性Ｂｃｌ−ｘＬ薬物がＢ７−Ｈ３発現細胞、特に、Ｂ７−Ｈ３発現がん細胞に送達され得るように、本発明のＡＤＣにＢ７−Ｈ３に結合する能力を付与する。
「抗体」という用語が全体を通して使用されているが、抗体断片（すなわち、抗Ｂ７−Ｈ３抗体の抗原結合部分）もまた本発明に含まれ、全体にわたって記載された実施形態（方法及び組成物）に含み得ることに留意すべきである。例えば、抗Ｂ７−Ｈ３抗体断片は、本明細書に記載のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートすることができる。したがって、ある特定の実施形態において、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体の抗体断片がリンカー（以下のセクションＩＩＩ．Ａに記載のものを含む）を介してＢｃｌ−ｘＬ阻害剤（以下のセクションＩＩＩ．Ａに記載のものを含む）にコンジュゲートすることは本発明の範囲内である。ある特定の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体結合部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ジスルフィド結合Ｆｖ、ｓｃＦｖ、単一ドメイン抗体又はダイアボディである。
ＩＩ．Ａ．抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体
キメラ抗体は、マウスモノクローナル抗体から誘導される可変領域及びヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体のような、抗体の異なる部分が異なる動物種から誘導されている分子である。キメラ抗体を産生する方法は、当技術分野において公知である。例えば、それらの全体を参照により本明細書に組み込む、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２９：１２０２（１９８５年）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、４：２１４（１９８６年）；Ｇｉｌｌｉｅｓら、（１９８９年）、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、１２５：１９１〜２０２頁；米国特許第５，８０７，７１５号；第４，８１６，５６７号；及び第４，８１６，３９７号を参照。加えて、適当な抗原特異性のマウス抗体分子由来の遺伝子を、適当な生物学的活性のヒト抗体分子由来の遺伝子と一緒にスプライシングすることによる、「キメラ抗体」の産生のため開発された技術（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、１９８４年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８１：８５１〜８５５頁；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、１９８４年、Ｎａｔｕｒｅ、３１２：６０４〜６０８頁；Ｔａｋｅｄａら、１９８５年、Ｎａｔｕｒｅ、３１４：４５２〜４５４、これらのそれぞれを、それらの全体として参照により本明細書に組み込む）が使用され得る。
キメラ抗体は、マウスモノクローナル抗体から誘導される可変領域及びヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体のような、抗体の異なる部分が異なる動物種から誘導されている分子である。キメラ抗体を産生する方法は、当技術分野において公知である。例えば、それらの全体を参照により本明細書に組み込む、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２９：１２０２（１９８５年）；Ｏｉら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ、４：２１４（１９８６年）；Ｇｉｌｌｉｅｓら、（１９８９年）、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、１２５：１９１〜２０２頁；米国特許第５，８０７，７１５号；第４，８１６，５６７号；及び第４，８１６，３９７号を参照。加えて、適当な抗原特異性のマウス抗体分子由来の遺伝子を、適当な生物学的活性のヒト抗体分子由来の遺伝子と一緒にスプライシングすることによる、「キメラ抗体」の産生のため開発された技術（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、１９８４年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８１：８５１〜８５５頁；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、１９８４年、Ｎａｔｕｒｅ、３１２：６０４〜６０８頁；Ｔａｋｅｄａら、１９８５年、Ｎａｔｕｒｅ、３１４：４５２〜４５４、これらのそれぞれを、それらの全体として参照により本明細書に組み込む）が使用され得る。
実施例３に記載するように、ヒト及びカニクイザルＢ７−Ｈ３に対して高い特異的結合活性を有する１８個の抗Ｂ７−Ｈ３マウス抗体を同定した。ヒト免疫グロブリン定常領域の文脈におけるキメラ抗体をこれら１８個の抗体から作製した。
したがって、一態様において、本発明は、配列番号１、９、１６、２４、３２、４０、４８、５６、６４、７２、８０、８７、９５、１０１若しくは１０８に記載のアミノ酸配列セットを含む重鎖可変領域及び／又は配列番号５、１３、２０、２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６、８４、９１、９８、１０５若しくは１１２に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号１１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。 別の態様において、本発明は、配列番号１６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号１８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号２１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号２２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号２４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号２５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号２７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号２９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号３１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号３２に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号３６に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号３３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号３４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号３５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号３７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号３８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１８２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号４０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号４１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号４３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号４５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号４６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号４７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号４８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号５２に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号４９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号５０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号５１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号５３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号５４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号５５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号５６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号６０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号５７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号５８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号５９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号６１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号６２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号６３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号６４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号６８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号６５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号６６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号６７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号６９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号７０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号７１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号７２に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号７６に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号７３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号７４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号７５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号７７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号７８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号７９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号８０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号８４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号８１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号８２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号８３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号８５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号８６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号８７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号９１に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号８８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号８９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号９０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号９２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号９３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号９４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号９５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号９８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号４９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号９７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域、並びに（ａ）配列番号９９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号９３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２及び（ｃ）配列番号１００に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号１０１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１０５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号１０３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１０４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１０６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号４６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１０７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号１０８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１１２に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号１１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１１１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１１３に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１；（ｂ）配列番号１１４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２；及び（ｃ）配列番号１１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
ＩＩ．Ｂ．ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体
本明細書中に開示するキメラ抗体は、ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体の産生において使用され得る。例えば、キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ１−ｃｈＡｂ１８の生成及び特徴付けに続いて、抗体ｃｈＡｂ３、ｃｈＡｂ１３、及びｃｈＡｂ１８をヒト化のために選択した。具体的には、ｃｈＡｂ３に基づいて６個の異なるヒト化抗体（本明細書では、ｈｕＡｂ３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２、ｈｕＡｂ３ｖ３、ｈｕＡｂ３ｖ４、ｈｕＡｂ３ｖ５及びｈｕＡｂ３ｖ６と称する（実施例１２及び１３を参照のこと））を作製し、ｃｈＡｂ１３に基づいて９個の異なるヒト化抗体（本明細書では、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ１３ｖ２、ｈｕＡｂ１３ｖ３、ｈｕＡｂ１３ｖ４、ｈｕＡｂ１３ｖ５、ｈｕＡｂ１３ｖ６、ｈｕＡｂ１３ｖ７、ｈｕＡｂ１３ｖ８、ｈｕＡｂ１３ｖ９と称する）を作製し、ｃｈＡｂ１８に基づいて１０個の異なるヒト化抗体（本明細書では、ｈｕＡｂ１８ｖ１、ｈｕＡｂ１８ｖ２、ｈｕＡｂ１８ｖ３、ｈｕＡｂ１８ｖ４、ｈｕＡｂ１８ｖ５、ｈｕＡｂ１８ｖ６、ｈｕＡｂ１８ｖ７、ｈｕＡｂ１８ｖ８、ｈｕＡｂ１８ｖ９及びｈｕＡｂ１８ｖ１０と称する（実施例９及び実施例１０を参照のこと））を作製した。表８、１２、１６、１８及び１９は、それぞれヒト化ｃｈＡｂ３、ｃｈＡｂ１３及びｃｈＡｂ１８のＣＤＲ、ＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列を提供する。
本明細書中に開示するキメラ抗体は、ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体の産生において使用され得る。例えば、キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ１−ｃｈＡｂ１８の生成及び特徴付けに続いて、抗体ｃｈＡｂ３、ｃｈＡｂ１３、及びｃｈＡｂ１８をヒト化のために選択した。具体的には、ｃｈＡｂ３に基づいて６個の異なるヒト化抗体（本明細書では、ｈｕＡｂ３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２、ｈｕＡｂ３ｖ３、ｈｕＡｂ３ｖ４、ｈｕＡｂ３ｖ５及びｈｕＡｂ３ｖ６と称する（実施例１２及び１３を参照のこと））を作製し、ｃｈＡｂ１３に基づいて９個の異なるヒト化抗体（本明細書では、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ１３ｖ２、ｈｕＡｂ１３ｖ３、ｈｕＡｂ１３ｖ４、ｈｕＡｂ１３ｖ５、ｈｕＡｂ１３ｖ６、ｈｕＡｂ１３ｖ７、ｈｕＡｂ１３ｖ８、ｈｕＡｂ１３ｖ９と称する）を作製し、ｃｈＡｂ１８に基づいて１０個の異なるヒト化抗体（本明細書では、ｈｕＡｂ１８ｖ１、ｈｕＡｂ１８ｖ２、ｈｕＡｂ１８ｖ３、ｈｕＡｂ１８ｖ４、ｈｕＡｂ１８ｖ５、ｈｕＡｂ１８ｖ６、ｈｕＡｂ１８ｖ７、ｈｕＡｂ１８ｖ８、ｈｕＡｂ１８ｖ９及びｈｕＡｂ１８ｖ１０と称する（実施例９及び実施例１０を参照のこと））を作製した。表８、１２、１６、１８及び１９は、それぞれヒト化ｃｈＡｂ３、ｃｈＡｂ１３及びｃｈＡｂ１８のＣＤＲ、ＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列を提供する。
一般的に、ヒト化抗体は、非ヒト種由来の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）及びヒト免疫グロブリン分子由来のフレームワーク領域を有する、所望の抗原に結合する非ヒト種抗体由来の抗体分子である。既知のヒトＩｇ配列が開示されている（例えば、ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｅｎｔｒｅｚ−／ｑｕｅｒｙ．ｆｃｇｉ；ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ／ｐｈａｇｅ／ｈｄｂ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｓｃｉｑｕｅｓｔ．ｃｏｍ／；ｗｗｗ．ａｂｃａｍ．ｃｏｍ／；ｗｗｗ．ａｎｔｉｂｏｄｙｒｅｓｏｕｒｃｅ．ｃｏｍ／ｏｎｌｉｎｅｃｏｍｐ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｐｕｂｌｉｃ．ｉａｓｔａｔｅ．ｅｄｕ／．ａｂｏｕｔ．ｐｅｄｒｏ／ｒｅｓｅａｒｃｈ＿ｔｏｏｌｓ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｍｇｅｎ．ｕｎｉ−ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ．ｄｅ／ＳＤ／ＩＴ／ＩＴ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｗｈｆｒｅｅｍａｎ．ｃｏｍ／ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ／ＣＨ−０５／ｋｕｂｙ０５．ｈｔｍ；ｗｗｗ．ｌｉｂｒａｒｙ．ｔｈｉｎｋｑｕｅｓｔ．ｏｒｇ／１２４２９／Ｉｍｍｕｎｅ／Ａｎｔｉｂｏｄｙ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｈｈｍｉ．ｏｒｇ／ｇｒａｎｔｓ／ｌｅｃｔｕｒｅｓ／１９９６／ｖｌａｂ／；ｗｗｗ．ｐａｔｈ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／．ａｂｏｕｔ．ｍｒｃ７／ｍ−ｉｋｅｉｍａｇｅｓ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ａｎｔｉｂｏｄｙｒｅｓｏｕｒｃｅ．ｃｏｍ／；ｍｃｂ．ｈａｒｖａｒｄ．ｅｄｕ／ＢｉｏＬｉｎｋｓ／Ｉｍｍｕｎｏ−ｌｏｇｙ．ｈｔｍｌ．ｗｗｗ．ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙｌｉｎｋ．ｃｏｍ／；ｐａｔｈｂｏｘ．ｗｕｓｔｌ．ｅｄｕ／．ａｂｏｕｔ．ｈｃｅｎｔｅｒ／ｉｎｄｅｘ．−ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｔｅｃｈ．ｕｆｌ．ｅｄｕ／．ａｂｏｕｔ．ｈｃｌ／；ｗｗｗ．ｐｅｂｉｏ．ｃｏｍ／ｐａ／３４０９１３／３４０９１３．ｈｔｍｌ−；ｗｗｗ．ｎａｌ．ｕｓｄａ．ｇｏｖ／ａｗｉｃ／ｐｕｂｓ／ａｎｔｉｂｏｄｙ／；ｗｗｗ．ｍ．ｅｈｉｍｅ−ｕ．ａｃｊｐ／．ａｂｏｕｔ．ｙａｓｕｈｉｔｏ−／Ｅｌｉｓａ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｄｅｓｉｇｎ．ｃｏｍ／ｔａｂｌｅ．ａｓｐ；ｗｗｗ．ｉｃｎｅｔ．ｕｋ／ａｘｐ／ｆａｃｓ／ｄａｖｉｅｓ／ｌｉｎ−ｋｓ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｔｅｃｈ．ｕｆｌ．ｅｄｕ／．ａｂｏｕｔ．ｆｃｃｌ／ｐｒｏｔｏｃｏｌ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｉｓａｃ−ｎｅｔ．ｏｒｇ／ｓｉｔｅｓ＿ｇｅｏ．ｈｔｍｌ；ａｘｉｍｔｌ．ｉｍｔ．ｕｎｉ−ｍａｒｂｕｒｇ．ｄｅ／．ａｂｏｕｔ．ｒｅｋ／ＡＥＰ−Ｓｔａｒｔ．ｈｔｍｌ；ｂａｓｅｒｖ．ｕｃｉ．ｋｕｎ．ｎｌ／．ａｂｏｕｔ．ｊｒａａｔｓ／ｌｉｎｋｓｌ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｒｅｃａｂ．ｕｎｉ−ｈｄ．ｄｅ／ｉｍｍｕｎｏ．ｂｍｅ．ｎｗｕ．ｅｄｕ／；ｗｗｗ．ｍｒｃ−ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｉｍｔ−ｄｏｃ／ｐｕ−ｂｌｉｃ／ＩＮＴＲＯ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｉｂｔ．ｕｎａｍ．ｍｘ／ｖｉｒ／Ｖ＿ｍｉｃｅ．ｈｔｍｌ；ｉｍｇｔ．ｃｎｕｓｃ．ｆｒ：８１０４／；ｗｗｗ．ｂｉｏｃｈｅｍ．ｕｃｌ．ａｃ．ｕｋ／．ａｂｏｕｔ．ｍａｒｔｉｎ／ａｂｓ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ；ａｎｔｉｂｏｄｙ．ｂａｔｈ．ａｃ．ｕｋ／；ａｂｇｅｎ．ｃｖｍ．ｔａｍｕ．ｅｄｕ／ｌａｂ／ｗｗｗａｂｇｅｎ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｕｎｉｚｈ．ｃｈ／．ａｂｏｕｔ．ｈｏｎｅｇｇｅｒ／ＡＨＯｓｅｍ−ｉｎａｒ／Ｓｌｉｄｅ０１．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｃｒｙｓｔ．ｂｂｋ．ａｃ．ｕｋ／．ａｂｏｕｔ．ｕｂｃｇ０７ｓ／；ｗｗｗ．ｎｉｍｒ．ｍｒｃ．ａｃ．ｕｋ／ＣＣ／ｃｃａｅｗｇ／ｃｃａｅｗｇ．ｈｔｍ；ｗｗｗ．ｐａｔｈ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／．ａｂｏｕｔ．ｍｒｃ７／ｈ−ｕｍａｎｉｓａｔｉｏｎ／ＴＡＨＨＰ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｉｂｔ．ｕｎａｍ．ｍｘ／ｖｉｒ／ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ／ｓｔａｔ＿ａｉｍ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｂｉｏｓｃｉ．ｍｉｓｓｏｕｒｉ．ｅｄｕ／ｓｍｉｔｈｇｐ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｃｒｙｓｔ．ｂｉｏｃ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／．ａｂｏ−ｕｔ．ｆｍｏｌｉｎａ／Ｗｅｂ−ｐａｇｅｓ／Ｐｅｐｔ／ｓｐｏｔｔｅｃｈ．ｈｔｍｌ；ｗｗｗ．ｊｅｒｉｎｉ．ｄｅ／ｆｒ ｒｏｄｕｃｔｓ．ｈｔｍ；ｗｗｗ．ｐａｔｅｎｔｓ．ｉｂｍ．ｃｏｍ／ｉｂｍ．ｈｔｍｌ．Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，米国保健福祉省（１９８３）、それぞれ参照により全体が本明細書に組み込まれる）。かかる移入された配列を使用して、免疫原性を低減させるか、又は当技術分野で既知である、結合、親和性、オン速度（ｏｎ−ｒａｔｅ）、オフ速度（ｏｆｆ−ｒａｔｅ）、結合力、特異性、半減期、又は任意の他の適切な特性を低減、増強又は改変することができる。
ヒトフレームワーク領域中のフレームワーク残基は、抗原結合を変化させる、好ましくは改善するために、ＣＤＲドナー抗体由来の対応する残基で置換されてもよい。これらのフレームワーク置換は、当分野で周知の方法、例えば、抗原結合に重要なフレームワーク残基を同定するためのＣＤＲとフレームワーク残基との相互作用のモデリング及び特定の位置での異常なフレームワーク残基を同定するための配列比較によって同定される（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｑｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３（１９８８）を参照のこと）。三次元免疫グロブリンモデルは一般に入手可能であり、当業者にはよく知られている。選択された候補免疫グロブリン配列の想定される（ｐｒｏｂａｂｌｅ）三次元立体配座構造を例示し表示するコンピュータープログラムが利用可能である。これらの表示の検査により、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の可能性のある役割の分析、すなわち候補免疫グロブリンがその抗原に結合する能力に影響を与える残基の分析が可能になる。このようにして、ＦＲ残基は、標的抗原に対する親和性の増大のような所望の抗体特性が達成されるように、コンセンサス配列及びインポート配列から選択され、組み合わせ得る。一般に、ＣＤＲ残基は抗原結合への影響に直接的かつ最も実質的に関与している。抗体は、限定するものではないが、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２（１９８６）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４（１９８８）），Ｓｉｍｓら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）、Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１（１９８７），Ｃａｒｔｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：４２８５（１９９２）、Ｐｒｅｓｔａら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３），Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ２８（４／５）：４８９〜４９８（１９９１）、Ｓｔｕｄｎｉｃｋａら、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ７（６）：８０５〜８１４（１９９４）、Ｒｏｇｕｓｋａら、ＰＮＡＳ ９１：９６９−９７３（１９９４）、ＰＣＴ国際出願公開第ＷＯ９１／０９９６７号、ＰＣＴ／：ＵＳ９８／１６２８０、ＵＳ９６／１８９７８、ＵＳ９１／０９６３０、ＵＳ９１／０５９３９、ＵＳ９４／０１２３４、ＧＢ８９／０１３３４、ＧＢ９１／０１１３４、ＧＢ９２／０１７５５、ＷＯ９０／１４４４３、ＷＯ９０／１４４２４、ＷＯ９０／１４４３０、ＥＰ２２９２４６、ＥＰ５９２，１０６、ＥＰ５１９，５９６、ＥＰ２３９，４００、米国特許第５，５６５，３３２号、同５，７２３，３２３号、同５，９７６，８６２号，同５，８２４，５１４号、同５，８１７，４８３号、同５８１４４７６号、同５７６３１９２号、同５７２３３２３号、同５，７６６８８６号、同５，７１４，３５２号、同６，２０４，０２３号、同６，１８０，３７０号、同５，６９３，７６２号、同５，５３０，１０１号、同５，５８５，０８９号、同５，２２５，５３９号、同４，８１６，５６７号（これらで引用している参考文献を含め、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているもののような、当技術分野において既知の様々な技術を用いてヒト化することができる。
ｃｈＡｂ３由来のヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体
ｃｈＡｂ３に基づく６個のヒト化された抗体を作製した。各々の配列は以下の通りである：
Ａ）ｈｕＡｂ３ｖ１（配列番号１２５に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２８に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ３ｖ２（配列番号１２７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２８に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ３ｖ３（配列番号１２６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２９に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ３ｖ４（配列番号１２５に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｅ）ｈｕＡｂ３ｖ５（配列番号１２７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、並びに
Ｆ）ｈｕＡｂ３ｖ６（配列番号１２６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）。
ｃｈＡｂ３に基づく６個のヒト化された抗体を作製した。各々の配列は以下の通りである：
Ａ）ｈｕＡｂ３ｖ１（配列番号１２５に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２８に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ３ｖ２（配列番号１２７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２８に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ３ｖ３（配列番号１２６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２９に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ３ｖ４（配列番号１２５に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｅ）ｈｕＡｂ３ｖ５（配列番号１２７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、並びに
Ｆ）ｈｕＡｂ３ｖ６（配列番号１２６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１１及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）。
ｐｈＡｂ３の６個のヒト化バージョンのうち、軽鎖ＣＤＲ１又は重鎖ＣＤＲ２中の潜在的な脱アミド化又は異性化部位を除去するために、ｈｕＡｂ３ｖ２をさらなる修飾のために選択した。ヒト化抗体ｈｕＡｂ３ｖ２の９個のバリアントを作製し、本明細書では、ｈｕＡｂ３ｖ２．１、ｈｕＡｂ３ｖ２．２、ｈｕＡｂ３ｖ２．３、ｈｕＡｂ３ｖ２．４、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６、ｈｕＡｂ３ｖ２．７、ｈｕＡｂ３ｖ２．８、及びｈｕＡｂ３ｖ２．９と称する（ＣＤＲ及び可変ドメイン配列は表１３に提供されている）。ｈｕＡｂ３ｖ２抗体の９個のバリアントは、以下を含む：
Ａ）ｈｕＡｂ３ｖ２．１（配列番号１３１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１３２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ３ｖ２．２（配列番号１３１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１３２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ３ｖ２．３（配列番号１３１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１３２及び１２、それぞれに記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３７に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ３ｖ２．４（配列番号１３９に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４０及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｅ）ｈｕＡｂ３ｖ２．５（配列番号１３９に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４０及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３６、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｆ）ｈｕＡｂ３ｖ２．６（配列番号１３９に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４０及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３７に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｇ）ｈｕＡｂ３ｖ２．７（配列番号１４１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｈ）ｈｕＡｂ３ｖ２．８（配列番号１４１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、及び
Ｉ）ｈｕＡｂ３ｖ２．９（配列番号１４１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３７に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）。
Ａ）ｈｕＡｂ３ｖ２．１（配列番号１３１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１３２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ３ｖ２．２（配列番号１３１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１３２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ３ｖ２．３（配列番号１３１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１３２及び１２、それぞれに記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３７に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ３ｖ２．４（配列番号１３９に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４０及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｅ）ｈｕＡｂ３ｖ２．５（配列番号１３９に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４０及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３６、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｆ）ｈｕＡｂ３ｖ２．６（配列番号１３９に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４０及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３７に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｇ）ｈｕＡｂ３ｖ２．７（配列番号１４１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３４、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｈ）ｈｕＡｂ３ｖ２．８（配列番号１４１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、及び
Ｉ）ｈｕＡｂ３ｖ２．９（配列番号１４１に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１０、１４２及び１２にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１３７に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号１３８、７及び１５にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）。
したがって、一態様において、本発明は、ｃｈＡｂ３由来のヒト化抗体由来の可変及び／又はＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一実施形態において、本発明は、Ａｂ３に由来する抗Ｂ７−Ｈ３抗体が、改善された特徴、例えば、以下の実施例に記載するように、単離されたＢ７−Ｈ３タンパク質への改善された結合親和性及びＢ７−Ｈ３発現細胞への改善された結合を有することを特徴とする。まとめてこれらの新規抗体は、本明細書では「Ａｂ３バリアント抗体」と称する。一般に、Ａｂ３バリアント抗体はＡｂ３と同じエピトープ特異性を保持している。様々な実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合断片は、Ｂ７−Ｈ３の生物学的機能を調節することができる。
一態様において、本発明は、配列番号１２５、１２６、１２７、１３１、１３９、若しくは１４１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域；並びに／又は配列番号１２８、１２９、１３０、１３３、１３５、若しくは１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗体又はその抗原結合部分を提供する。
別の態様において、本発明は、配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号１１、１３２、１４０、又は１４２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域；並びに配列番号１４、１３４、１３６、又は１３８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む軽鎖可変領域を含む、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１２５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１２７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１２５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１２７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１２６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１３１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１３１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１３１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域１３７を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号１７０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７１のアミノ酸配列を含む軽鎖を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。一態様において、本発明は、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、配列番号１７２のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７３のアミノ酸配列を含む軽鎖を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ、（ｂ）配列番号１４２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
ｃｈＡｂ１３に由来するヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体
ｃｈＡｂ１３に基づいて作製された９個の異なるヒト化抗体には、以下が含まれる：
Ａ）ｈｕＡｂ１３ｖ１（配列番号１４７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ１３ｖ２（配列番号１４６に記載のアミノ酸配列ＶＨ及びＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ１３ｖ３（配列番号１４６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ１３ｖ４（配列番号１４６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５それぞれ、に記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列、）、
Ｅ）ｈｕＡｂ１３ｖ５（配列番号１４７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれに記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｆ）ｈｕＡｂ１３ｖ６（配列番号１４７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれに記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｇ）ｈｕＡｂ１３ｖ７（配列番号１４８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｈ）ｈｕＡｂ１３ｖ８（配列番号１４８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｉ）ｈｕＡｂ１３ｖ９（配列番号１４８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）
したがって、一態様において、本発明は、ｃｈＡｂ１３に由来するヒト化抗体由来の可変及び／又はＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一実施形態において、本発明は、ｃｈＡｂ１３由来の抗Ｂ７−Ｈ３抗体が、改善された特徴、例えば、以下の実施例に記載するように、単離されたＢ７−Ｈ３タンパク質への改善された結合親和性及びＢ７−Ｈ３発現細胞への改善された結合を有することを特徴とする。これらの新規抗体をまとめて本明細書では「Ａｂ１３バリアント抗体」と称する。一般に、Ａｂ１３バリアント抗体は、Ａｂ１３と同じエピトープ特異性を保持している。様々な実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合断片は、Ｂ７−Ｈ３の生物学的機能を調節することができる。
ｃｈＡｂ１３に基づいて作製された９個の異なるヒト化抗体には、以下が含まれる：
Ａ）ｈｕＡｂ１３ｖ１（配列番号１４７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ１３ｖ２（配列番号１４６に記載のアミノ酸配列ＶＨ及びＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ１３ｖ３（配列番号１４６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ１３ｖ４（配列番号１４６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５それぞれ、に記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列、）、
Ｅ）ｈｕＡｂ１３ｖ５（配列番号１４７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれに記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｆ）ｈｕＡｂ１３ｖ６（配列番号１４７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれに記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｇ）ｈｕＡｂ１３ｖ７（配列番号１４８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｈ）ｈｕＡｂ１３ｖ８（配列番号１４８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｉ）ｈｕＡｂ１３ｖ９（配列番号１４８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号３３、３４及び３５にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１４５に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号３７、３８及び３９にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）
したがって、一態様において、本発明は、ｃｈＡｂ１３に由来するヒト化抗体由来の可変及び／又はＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一実施形態において、本発明は、ｃｈＡｂ１３由来の抗Ｂ７−Ｈ３抗体が、改善された特徴、例えば、以下の実施例に記載するように、単離されたＢ７−Ｈ３タンパク質への改善された結合親和性及びＢ７−Ｈ３発現細胞への改善された結合を有することを特徴とする。これらの新規抗体をまとめて本明細書では「Ａｂ１３バリアント抗体」と称する。一般に、Ａｂ１３バリアント抗体は、Ａｂ１３と同じエピトープ特異性を保持している。様々な実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合断片は、Ｂ７−Ｈ３の生物学的機能を調節することができる。
一態様において、本発明は、配列番号１４６、１４７、又は１４８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び／又は配列番号１４３、１４４、又は１４５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗体又はその抗原結合部分を提供する。
別の態様において、本発明は、配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン；配列番号３４に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン；及び配列番号３５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域；並びに配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン；配列番号３８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン；及び配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む軽鎖可変領域を含む、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。一実施形態において、本発明は、ｈｕＡｂ１３ｖ１の可変領域（配列番号１４４及び１４７）に記載されるＣＤＲ配列を含む、抗Ｂ７Ｈ３抗体を提供する。
一態様において、本発明は、配列番号１６８のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１６９のアミノ酸配列を含む軽鎖を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１４８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
ｃｈＡｂ１８に由来するヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体
ｃｈＡｂ１８に基づいて作製された１０個の異なるヒト化抗体には、以下が含まれる：
Ａ）ｈｕＡｂ１８ｖ１（配列番号１１６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ１８ｖ２（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ１８ｖ３（配列番号１１７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２１に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ１８ｖ４（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２１に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｅ）ｈｕＡｂ１８ｖ５（配列番号１１６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｆ）ｈｕＡｂ１８ｖ６（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｇ）ｈｕＡｂ１８ｖ７（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｈ）ｈｕＡｂ１８ｖ８（配列番号１１７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２２に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｉ）ｈｕＡｂ１８ｖ９（配列番号１１７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、及び
Ｊ）ｈｕＡｂ１８ｖ１０（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２２に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）。
ｃｈＡｂ１８に基づいて作製された１０個の異なるヒト化抗体には、以下が含まれる：
Ａ）ｈｕＡｂ１８ｖ１（配列番号１１６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｂ）ｈｕＡｂ１８ｖ２（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２０に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｃ）ｈｕＡｂ１８ｖ３（配列番号１１７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２１に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｄ）ｈｕＡｂ１８ｖ４（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２１に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｅ）ｈｕＡｂ１８ｖ５（配列番号１１６に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｆ）ｈｕＡｂ１８ｖ６（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２３に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｇ）ｈｕＡｂ１８ｖ７（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｈ）ｈｕＡｂ１８ｖ８（配列番号１１７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２２に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、
Ｉ）ｈｕＡｂ１８ｖ９（配列番号１１７に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、２６及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２４に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）、及び
Ｊ）ｈｕＡｂ１８ｖ１０（配列番号１１８に記載のＶＨアミノ酸配列及び配列番号２５、１１９及び２７にそれぞれ記載のＶＨ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列；並びに配列番号１２２に記載のＶＬアミノ酸配列及び配列番号２９、３０及び３１にそれぞれ記載のＶＬ ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３アミノ酸配列）。
したがって、一態様において、本発明は、ｃｈＡｂ１８由来のヒト化抗体由来の可変及び／又はＣＤＲ配列を含む抗体を提供する。一実施形態において、本発明は、Ａｂ１８に由来する抗Ｂ７−Ｈ３抗体が、改善された特徴、例えば、以下の実施例に記載するように、単離されたＢ７−Ｈ３タンパク質への改善された結合親和性及びＢ７−Ｈ３発現細胞への改善された結合を有することを特徴を有する。これらの新規抗体をまとめて本明細書では「Ａｂ１８バリアント体抗体」と称する。一般に、Ａｂ１８バリアント抗体は、Ａｂ１８と同じエピトープ特異性を保持している。様々な実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合断片は、Ｂ７−Ｈ３の生物学的機能を調節することができる。
一態様において、本発明は、配列番号１１６、１１７、又は１１８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域；及び／又は配列番号１２０、１２１、１２２、１２３又は１２４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗体又は抗原その結合部分を提供する。
別の態様において、本発明は、配列番号２５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号２６又は１１９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号２７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域；並びに配列番号２９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号３０に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む軽鎖可変領域を含む、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又は抗原その結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２０に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号２５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号２７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号２９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号３１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号に記載のアミノ酸配列１２０を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、（ａ）配列番号２５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号２７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号２９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号３１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２１に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２１に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１６に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２３に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２２に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１８に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２２に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分を対象とする。
一態様において、本発明は、配列番号１１６、１１７、１１８、１４６、１４７、１４８、１２５、１２６、１２７、１３１、１３９、若しくは１４１に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び／又は配列番号１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、１４３、１４４、１４５、１２８、１２９、１３０、１３３、１３５、若しくは１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する、ヒト化された抗体又は抗原その結合部分を提供する。
別の態様において、本発明は、配列番号１０、２５、又は３３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号１１、２６、３４、１１９、１３２、１４０、又は１４２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１２、２７、又は３５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域；並びに配列番号１４、２９、３７、１３４、１３６、又は１３８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号７、３０、又は３８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１５、３１又は３９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む軽鎖可変領域を含む、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又は抗原その結合部分を対象とする。
別の態様において、本発明は、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片と特異的に競合する、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合断片を提供し、該競合は、該抗体、ヒトＢ７−Ｈ３ポリペプチド、及び抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片を用いた競合結合アッセイにおいて検出される。特定の実施形態において、競合抗体又はその抗原結合部分は、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６、又はｈｕＡｂ１３ｖ１と競合する抗体又はその抗原結合部分である。
一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又は抗原その結合部位は、表面プラズモン共鳴によって決定される約１ｘ１０−６Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）で、ヒトＢ７−Ｈ３（配列番号１５２）の細胞外ドメインに結合する。あるいは抗体又は抗原その結合部位は、表面プラズモン共鳴によって決定される約１ｘ１０−６Ｍ〜約１ｘ１０−１１ＭのＫＤで、ヒトＢ７−Ｈ３に結合する。さらにあるいは、抗体又は抗原その結合部位は、表面プラズモン共鳴によって決定される約１ｘ１０−６Ｍ〜約１ｘ１０−７ＭのＫＤで、ヒトＢ７−Ｈ３に結合する。あるいは、本発明の抗体又は抗原その結合部位は、表面プラズモン共鳴によって決定される約１ｘ１０−６Ｍ〜約５ｘ１０−１１Ｍ、約１ｘ１０−６Ｍ〜約５ｘ１０−１０ＭのＫＤ、約１ｘ１０−６Ｍ〜約１ｘ１０−９ＭのＫＤ、約１ｘ１０−６Ｍ〜約５ｘ１０−９ＭのＫＤ、約１ｘ１０−６Ｍ〜約１ｘ１０−８ＭのＫＤ、約１ｘ１０−６Ｍ〜約５ｘ１０−８ＭのＫＤ、約８．４ｘ１０−７Ｍ〜約３．４ｘ１０−１１ＭのＫＤ、約５．９ｘ１０−７ＭのＫＤ及び約２．２ｘ１０−７Ｍで、ヒトＢ７−Ｈ３に結合する。
一実施形態において、本発明の抗体又は抗原その結合部位は、表面プラズモン共鳴によって決定される約１ｘ１０−６Ｍ以下のＫＤで、ヒトＢ７−Ｈ３（配列番号１４９）に結合する。あるいは、本発明の抗体又は抗原その結合部位は、表面プラズモン共鳴によって決定される約８．２ｘ１０−９Ｍ〜約６．３ｘ１０−１０ＭのＫＤ、約８．２ｘ１０−９Ｍ〜約２．０ｘ１０−９ＭのＫＤ、約２．３ｘ１０−９Ｍ〜約１．５ｘ１０−１０ＭのＫＤで、ヒトＢ７−Ｈ３（配列番号１４９）に結合する。
本明細書で提供される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域及びＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含むことができ、ここで、これらのＣＤＲのうちの１つ以上が、本明細書に記載の抗体（例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１又はｈｕＡｂ３ｖ２．５）に基づく特異的なアミノ酸配列又はそれらの保存的修飾を含み、抗体が、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体の所望の機能特性を保持している。したがって、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域及びＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を含むことができ、ここで、（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ３配列が、配列番号１２又は３５、及びそれらの保存的修飾、例えば１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４又は１〜５個の保存的アミノ酸置換を含み、（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ３配列が、配列番号１５又は３９、及びそれらの保存的修飾、例えば１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４又は１〜５個の保存的アミノ酸置換を含み、（ｃ）抗体が、Ｂ７−Ｈ３に特異的に結合し、（ｄ）抗体が、本明細書に記載の以下の機能特性（例えば、可溶性ヒトＢ７−Ｈ３への結合）のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又は全てを示す。一実施形態において、重鎖可変領域ＣＤＲ２配列は、配列番号１４０又は３４、及びその保存的修飾、例えば１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４又は１〜５個の保存的アミノ酸置換を含み、軽鎖可変領域ＣＤＲ２配列は、配列番号７又は３８、及びその保存的修飾、例えば１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４又は１〜５個の保存的アミノ酸置換を含む。別の好ましい実施形態において、重鎖可変領域ＣＤＲ１配列は、配列番号１０又は３３、及びそれらの保存的修飾、例えば、１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４又は１〜５個の保存的アミノ酸置換を含み、軽鎖可変領域ＣＤＲ１配列は、配列番号１３６、１３８、又は１３７、及びそれらの保存的修飾、例えば１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４又は１〜５個の保存的アミノ酸置換を含み、
保存的アミノ酸置換はまた、ＣＤＲ以外の又はＣＤＲに加えて抗体の部分においてなされてもよい。例えば保存的アミノ酸修飾は、フレームワーク領域において又はＦｃ領域においてなされてもよい。可変領域又は重鎖若しくは軽鎖は、本明細書において提供される抗Ｂ７−Ｈ３抗体配列と比較して、１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５又は１〜５０個の保存的アミノ酸置換を含んでもよい。ある特定の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、保存的アミノ酸修飾及び非保存的アミノ酸修飾の組合せを含む。
保存的アミノ酸置換はまた、ＣＤＲ以外の又はＣＤＲに加えて抗体の部分においてなされてもよい。例えば保存的アミノ酸修飾は、フレームワーク領域において又はＦｃ領域においてなされてもよい。可変領域又は重鎖若しくは軽鎖は、本明細書において提供される抗Ｂ７−Ｈ３抗体配列と比較して、１、２、３、４、５、１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、１〜１０、１〜１５、１〜２０、１〜２５又は１〜５０個の保存的アミノ酸置換を含んでもよい。ある特定の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、保存的アミノ酸修飾及び非保存的アミノ酸修飾の組合せを含む。
ｈＢ７−Ｈ３に関して好ましいＢ７−Ｈ３結合及び／又は中和活性を有するＣＤＲを生成及び選択するために、抗体又はその抗原結合部分を生成するための及びそれらの抗体又はその抗原結合部分のＢ７−Ｈ３結合及び／又は中和特性を評価するための当技術分野における既知の標準的な方法（限定するものではないが、本明細書に具体的に記載されているものを含む）を用いることができる。
上記のことは、本発明に従って単離され、本明細書に提供される配列表に列挙されるＣＤＲ配列を含む抗原結合ポリペプチドを含む、Ｂ７−Ｈ３結合タンパク質の新規なファミリーを確立する。
ｈＢ７−Ｈ３に関して好ましいＢ７−Ｈ３結合及び／又は中和活性を有するＣＤＲを生成及び選択するために、抗体又はその抗原結合部分を生成するための及びそれらの抗体又はその抗原結合部分のＢ７−Ｈ３結合及び／又は中和特性を評価するための当技術分野における既知の標準的な方法（本明細書に具体的に記載されているものを含むが、これらに限定されない）を用いることができる。
ある特定の実施形態において、抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ又はＩｇＤ定常領域のような、重鎖定常領域を含む。ある特定の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＩｇＧ定常ドメイン、ヒトＩｇＭ定常ドメイン、ヒトＩｇＥ定常ドメイン及びヒトＩｇＡ定常ドメインからなる群から選択される重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む。さらなる実施形態において、抗体又はその抗原結合部分は、ＩｇＧ１重鎖定常領域、ＩｇＧ２重鎖定常領域、ＩｇＧ３定常領域又はＩｇＧ４重鎖定常領域を有する。好ましくは、重鎖定常領域は、ＩｇＧ１重鎖定常領域又はＩｇＧ４重鎖定常領域である。さらに、抗体は、軽鎖定常領域、κ軽鎖定常領域又はλ軽鎖定常領域のいずれかを含むことができる。好ましくは、抗体は、κ軽鎖定常領域を含む。あるいは、抗体部分は、例えばＦａｂ断片又は単鎖Ｆｖ断片であり得る。
ある特定の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体結合部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ジスルフィド結合Ｆｖ、ｓｃＦｖ、単一ドメイン抗体又はダイアボディである。
ある特定の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分は、多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。
抗体エフェクター機能を変化させるためのＦｃ部分におけるアミノ酸残基の置き換えが、記載されている（参照により本明細書に組み込むＷｉｎｔｅｒら、米国特許第５，６４８，２６０号及び第５，６２４，８２１号）。抗体のＦｃ部分は、いくつかの重要なエフェクター機能、例えば抗体及び抗原−抗体複合体のサイトカイン誘導、ＡＤＣＣ、食作用、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び半減期／クリアランス速度を媒介する。一部の場合では、これらのエフェクター機能は、治療用抗体にとって望ましいが、他の場合では、治療目的に依存して、不必要であり得る又は有害でありさえし得る。ある特定のヒトＩｇＧアイソタイプ、特に、ＩｇＧ１及びＩｇＧ３は、それぞれ、ＦｃγＲ及び補体Ｃ１ｑへの結合を介してＡＤＣＣ及びＣＤＣを媒介する。新生児のＦｃ受容体（ＦｃＲｎ）は、抗体の循環半減期を決定する重要な構成要素である。さらに別の実施形態において、少なくとも１つのアミノ酸残基が、抗体のエフェクター機能が変化するように、抗体の定常領域、例えば抗体のＦｃ領域において置き換えられる。
本発明の一実施形態は、本明細書に記載される抗体の結合領域、例えばｈｕＡｂ１３ｖ１の重鎖及び／又は軽鎖ＣＤＲを含む、組換えキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含む。本明細書に記載される組換えＣＡＲは、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）に依存しない様式で抗原に対してＴ細胞特異性を再指向させるために使用されてもよい。したがって、本発明のＣＡＲは、ヒト対象自身の免疫細胞が対象の腫瘍を認識し、攻撃するよう操作するのを助けるための免疫療法において使用されてもよい（例えば米国特許第６，４１０，３１９号；第８，３８９，２８２号；第８，８２２，６４７号；第８，９０６，６８２号；第８，９１１，９９３号；第８，９１６，３８１号；第８，９７５，０７１号；及び米国特許出願公開第ＵＳ２０１４０３２２２７５号を参照。これらのそれぞれを、ＣＡＲテクノロジーに関して、参照により本明細書に組み込む）。この種類の免疫療法は、養子細胞移入（ＡＣＴ）と呼ばれ、それを必要とする対象においてがんを処置するために使用されてもよい。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ＣＡＲは、好ましくは、Ｂ７−Ｈ３に特異的な細胞外抗原結合ドメイン、ＣＡＲをＴ細胞に固定するために使用される膜貫通ドメイン及び１つ以上の細胞内シグナル伝達ドメインを含有する。本発明の一実施形態において、ＣＡＲは、Ｔ細胞受容体のアルファ、ベータ又はゼータ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７及びＣＤ１５４からなる群から選択されるタンパク質の膜貫通ドメインを含む膜貫通ドメインを含む。本発明の一実施形態において、ＣＡＲは、同時刺激ドメイン、例えばＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ５、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）及び４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）からなる群から選択されるタンパク質の機能的シグナル伝達ドメインを含む同時刺激ドメインを含む。本発明のある特定の実施形態において、ＣＡＲは、本明細書に記載されるＣＤＲ又は可変領域、例えばｈｕＡｂ１３ｖ１抗体由来のＣＤＲ又は可変領域、膜貫通ドメイン、同時刺激ドメイン（例えばＣＤ２８又は４−１ＢＢ由来の機能的シグナル伝達ドメイン）、及びＣＤ３（例えばＣＤ３−ゼータ）由来の機能的シグナル伝達ドメインを含むシグナル伝達ドメインを含むｓｃＦｖを含む。
ある特定の実施形態において、本発明は、本明細書に記載される抗体又は本明細書に記載されるｓｃＦｖの、抗原結合領域、例えばＣＤＲを含むＣＡＲを含むＴ細胞（ＣＡＲ Ｔ細胞とも称される）を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、配列番号１０、２５、又は３３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号１１、２６、３４、１１９、１３２、１４０、又は１４２に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１２、２７、又は３５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域；並びに配列番号１４、２９、３７、１３４、１３６、又は１３８に記載のアミノ酸配列を含ＣＤＲ１ドメイン、配列番号７、３０、又は３８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１５、３１又は３９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１３２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３４に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号１０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１４２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１２に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号１３８に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号１５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域；並びに配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号３８に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及びＣＤＲ３ドメイン配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、配列番号２５に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号２６又は１１９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号２７に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む重鎖可変領域；並びに配列番号２９に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメイン、配列番号３０に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３１に記載のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメインを含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号２５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号２６に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号２７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号２９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号３１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の発明の実施形態において、ＣＡＲは、（ａ）配列番号２５に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号１１９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号２７に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン領域；並びに（ａ）配列番号２９に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１、（ｂ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、及び（ｃ）配列番号３１に記載のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本発明の一実施形態は、抗体が、誘導体化される又は１つ以上の機能的分子（例えば別のペプチド若しくはタンパク質）に連結されている、標識された抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗体部分を含む。例えば標識された抗体は、別の抗体（例えば二重特異性抗体若しくはダイアボディ）、検出可能な薬剤、医薬剤、別の分子との抗体若しくは抗体部分の結合を媒介することができるタンパク質若しくはペプチド（ストレプトアビジンコア領域若しくはポリヒスチジンタグ）及び／又は有糸分裂阻害剤、抗腫瘍抗生物質、免疫調節剤、遺伝子治療用のベクター、アルキル化剤、抗血管新生剤、代謝拮抗物質、ホウ素含有剤、化学保護剤、ホルモン、抗体ホルモン剤、コルチコステロイド、光活性治療剤、オリゴヌクレオチド、放射性核種剤、トポイソメラーゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤、放射線増感剤及びこれらの組合せからなる群から選択される細胞傷害性若しくは治療用薬剤のような１つ以上の他の分子実体に本発明の抗体又は抗体部分を（化学カップリング、遺伝子融合、非共有結合などにより）機能的に連結させることにより、誘導することができる。
抗体若しくはその抗体部分を誘導体化し得る有用な検出可能な薬剤は、蛍光化合物を含む。例示的な蛍光の検出可能な薬剤は、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、５−ジメチルアミン−１−ナフタレンスルホニルクロライド、フィコエリトリン等を含む。抗体はまた、アルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、グルコース酸化酵素などのような検出可能な酵素で誘導体化されてもよい。抗体が、検出可能な酵素で誘導体化されるとき、これは、酵素が検出可能な反応産物を産生するのに使用するさらなる試薬を添加することにより検出される。例えば検出可能な薬剤である西洋ワサビペルオキシダーゼが存在するとき、過酸化水素及びジアミノベンジジンの添加が、検出可能である着色した反応産物をもたらす。抗体はまた、ビオチンで誘導体化され、アビジン又はストレプトアビジン結合の間接的な測定を介して検出されてもよい。
一実施形態において、本発明の抗体は、イメージング剤にコンジュゲートされている。本明細書に記載される組成物及び方法において使用され得るイメージング剤の例は、放射標識（例えばインジウム）、酵素、蛍光標識、発光標識、生物発光標識、磁気標識及びビオチンを含むが、これらに限定されない。
一実施形態において、抗体又はＡＤＣは、これに限定されないが、インジウム（１１１Ｉｎ）のような放射標識に連結される。１１１インジウムは、Ｂ７−Ｈ３陽性腫瘍の同定において使用するための本明細書に記載される抗体及びＡＤＣを標識するために使用されてもよい。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体（又はＡＤＣ）は、二官能性シクロヘキシルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＤＴＰＡ）キレート剤である二官能性キレート剤を介して１１１Ｉで標識される（米国特許第５，１２４，４７１号；第５，４３４，２８７号；及び第５，２８６，８５０号を参照、これらのそれぞれを、参照により本明細書に組み込む）。
本発明の別の実施形態は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分が、１個以上の炭水化物残基を含む、グリコシル化結合タンパク質を提供する。新生のインビボタンパク質生成は、翻訳後修飾として知られているさらなるプロセシングを受けてもよい。特に、糖（グリコシル）残基が酵素的に加えられてもよく、これはグリコシル化として知られているプロセスである。共有結合されたオリゴ糖側鎖を有する、得られたタンパク質は、グリコシル化タンパク質又は糖タンパク質として知られている。抗体は、Ｆｃドメイン及び可変ドメインにおいて１個以上の炭水化物残基を有する糖タンパク質である。Ｆｃドメイン中の炭水化物残基は、抗体の抗原結合又は半減期に対する最小の効果と共に、Ｆｃドメインのエフェクター機能に対する重要な効果を有する（Ｒ．Ｊｅｆｆｅｒｉｓ、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．、２１（２００５年）、１１〜１６頁）。対照的に、可変ドメインのグリコシル化は、抗体の抗原結合活性に対する効果を有し得る。可変ドメインにおけるグリコシル化は、おそらく立体障害に起因して抗体結合親和性に対して負の効果を有し得る（Ｃｏ，Ｍ．Ｓ．ら、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（１９９３年）３０：１３６１〜１３６７頁）、又は抗原に対して増大した親和性をもたらし得る（Ｗａｌｌｉｃｋ，Ｓ．Ｃ．ら、Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．（１９８８年）１６８：１０９９〜１１０９頁；Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．ら、ＥＭＢＯ Ｊ．（１９９１年）１０：２７１７〜２７２３頁）。
本発明の一態様は、結合タンパク質のＯ−又はＮ−結合型グリコシル化部位が変異されているグリコシル化部位変異体を生成することを対象とする。当業者は、標準的な周知のテクノロジーを使用してかかる変異体を生成することができる。生物学的活性を保持するが、増大又は低下した結合活性を有するグリコシル化部位変異体は、本発明の別の目的である。
なお別の実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又は抗原結合部分のグリコシル化が修飾される。例えばアグリコシル化抗体を作製することができる（すなわち、抗体がグリコシル化を欠く。）。グリコシル化は、例えば抗原に対する抗体の親和性を増大させるために変更され得る。かかる炭水化物修飾は、例えば抗体配列内のグリコシル化の１つ以上の部位を変更することにより達成することができる。例えば１つ以上の可変領域グリコシル化部位の除去をもたらし、これにより、この部位でのグリコシル化を除去する、１つ以上のアミノ酸置換がなされ得る。かかるアグリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を増大し得る。かかるアプローチは、ＰＣＴ公開ＷＯ２００３０１６４６６Ａ２並びに米国特許第５，７１４，３５０号及び第６，３５０，８６１号においてさらに詳細に記載され、これらのそれぞれを、その全体として参照により本明細書に組み込む。
さらに又はあるいは、低減した量のフコシル残基を有するハイポフコシル化抗体又は増大した二分するＧｌｃＮＡｃ構造を有する抗体のような、変更された種類のグリコシル化を有する本発明の修飾された抗Ｂ７−Ｈ３抗体を作製することができる。かかる変更されたグリコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能を増大することが示されている。かかる炭水化物修飾は、例えば変更されたグリコシル化機構を有する宿主細胞において抗体を発現させることにより達成することができる。変更されたグリコシル化機構を有する細胞は、当技術分野において記載されており、本発明の組換え抗体を発現させ、これにより、変更されたグリコシル化を有する抗体を産生するための宿主細胞として使用することができる。例えばＳｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ら（２００２年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２７７：２６７３３〜２６７４０頁；Ｕｍａｎａら（１９９９年）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．、１７：１７６〜１頁、並びに欧州特許第ＥＰ１，１７６，１９５号；ＰＣＴ公開ＷＯ０３／０３５８３５；ＷＯ９９／５４３４２８０を参照し、これらのそれぞれを、その全体として参照により本明細書に組み込む。
タンパク質グリコシル化は、目的のタンパク質のアミノ酸配列、及びタンパク質が発現される宿主細胞に依存する。異なる生物は、異なるグリコシル化酵素（例えば糖転移酵素及びグリコシダーゼ）を産生し、利用可能な異なる基質（ヌクレオチド糖）を有し得る。かかる因子に起因して、タンパク質グリコシル化パターン及びグリコシル残基の組成は、特定のタンパク質が発現される宿主系に依存して異なってもよい。本発明において有用なグリコシル残基は、グルコース、ガラクトース、マンノース、フコース、ｎ−アセチルグルコサミン及びシアル酸を含み得るが、これらに限定されない。好ましくは、グリコシル化された結合タンパク質は、グリコシル化パターンがヒトであるように、グリコシル残基を含む。
異なるタンパク質グリコシル化は、異なるタンパク質特徴をもたらし得る。例えば、酵母のような微生物宿主において産生され、酵母内在経路を利用してグリコシル化された治療用タンパク質の有効性は、ＣＨＯ細胞株のような哺乳動物細胞において発現された同じタンパク質のものと比較して低減されていてもよい。かかる糖タンパク質はまた、ヒトにおいて免疫原性であり、投与後の低減したインビボ半減期を示してもよい。ヒト及び他の動物における特定の受容体は、特定のグリコシル残基を認識し、血流からのタンパク質の迅速なクリアランスを促進し得る。他の副作用は、タンパク質フォールディング、溶解度、タンパク質分解酵素に対する感受性、移動、輸送、区画化、分泌、他のタンパク質若しくは因子による認識、抗原性又はアレルゲン性における変化を含み得る。したがって、実施者は、グリコシル化の特定の組成及びパターンを有する治療用タンパク質、例えばヒト細胞において又は意図される対象動物の種特異的な細胞において産生されるものと同一、又は少なくとも類似のグリコシル化組成及びパターンを好んでもよい。
宿主細胞のものと異なるグリコシル化タンパク質の発現は、宿主細胞を遺伝子的に修飾して、異種性グリコシル化酵素を発現させることにより、達成されてもよい。組換え技術を使用して、実施者は、ヒトタンパク質グリコシル化を示す抗体又はその抗原結合部分を生成してもよい。例えば、これらの酵母株において産生されるグリコシル化タンパク質（糖タンパク質）が、動物細胞、特にヒト細胞のものと同一のタンパク質グリコシル化を示すように、酵母株が、天然に存在しないグリコシル化酵素を発現するよう遺伝子的に修飾されている（米国特許公開第２００４００１８５９０号及び第２００２０１３７１３４号並びにＰＣＴ公開ＷＯ２００５１００５８４Ａ２）。
抗体は、いくつかの技術のいずれかにより産生され得る。例えば重鎖及び軽鎖をコードする発現ベクターが、標準的な技術により宿主細胞にトランスフェクトされる、宿主細胞からの発現。用語「トランスフェクション」の様々な形態は、原核又は真核宿主細胞への外来ＤＮＡの導入のため一般に使用される多種多様な技術、例えばエレクトロポレーション、カルシウム−リン酸塩沈殿、ＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクションなどを包含することが意図される。原核又は真核宿主細胞のいずれかにおいて抗体を発現させることが可能であるが、真核細胞における抗体の発現が好ましく、哺乳動物宿主細胞における抗体の発現が最も好ましく、これは、かかる真核細胞（特に哺乳動物細胞）が、原核細胞より、正しくフォールディングされ、免疫学的に活性な抗体を組み立て、分泌する可能性が高いからである。
本発明の組換え抗体の発現に好ましい哺乳動物宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ細胞）（例えばＲ．Ｊ．Ｋａｕｆｍａｎ及びＰ．Ａ．Ｓｈａｒｐ（１９８２年）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１５９：６０１〜６２１頁において記載される、ＤＨＦＲ選択可能なマーカーと共に使用される、Ｕｒｌａｕｂ及びＣｈａｓｉｎ（１９８０年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、ＵＳＡ、７７：４２１６〜４２２０頁において記載されるｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含む）、ＮＳ０ミエローマ細胞、ＣＯＳ細胞及びＳＰ２細胞を含む。抗体遺伝子をコードする組換え発現ベクターが、哺乳動物宿主細胞に導入されるとき、抗体は、宿主細胞において抗体の発現を可能にするのに十分な期間宿主細胞を培養し、又はより好ましくは、宿主細胞が成長する培養培地に抗体を分泌させることにより、産生される。抗体は、標準的なタンパク質精製方法を使用して培養培地から回収することができる。
宿主細胞をまた、Ｆａｂ断片又はｓｃＦｖ分子のような機能的抗体断片を産生するために使用することができる。上記の手順についてのバリエーションが本発明の範囲内であることは、理解される。例えば、宿主細胞に本発明の抗体の軽鎖及び／又は重鎖のいずれかの機能的断片をコードするＤＮＡをトランスフェクトすることが望ましくてもよい。組換えＤＮＡテクノロジーはまた、目的の抗原への結合に必要ではない軽鎖及び重鎖のいずれか又は両方をコードするＤＮＡの一部又は全てを取り除くために使用されてもよい。かかる切断されたＤＮＡ分子から発現された分子もまた、本発明の抗体によって包含される。加えて、標準的な化学架橋方法により本発明の抗体を第２の抗体に架橋することにより、１つの重鎖及び１つの軽鎖が本発明の抗体であり、他の重鎖及び軽鎖が目的の抗原以外の抗原に特異的である、二機能性抗体が産生されてもよい。
抗体又はその抗原結合部分の組換え発現に好ましいシステムにおいて、抗体重鎖と抗体軽鎖の両方をコードする組換え発現ベクターが、リン酸カルシウムにより媒介されるトランスフェクションにより、ｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞に導入される。組換え発現ベクター内で、抗体重鎖及び軽鎖遺伝子はそれぞれ、ＣＭＶエンハンサー／ＡｄＭＬＰプロモーター調節エレメントに作動可能に連結して、高レベルの遺伝子転写を駆動する。組換え発現ベクターはまた、ＤＨＦＲ遺伝子を有し、ＤＨＦＲ遺伝子が、メトトレキサートセレクション／増幅を使用して、ベクターでトランスフェクトされたＣＨＯ細胞のセレクションを可能にする。選択された形質転換体宿主細胞を培養して、抗体重鎖及び軽鎖の発現を可能にし、インタクトな抗体が、培養培地から回収される。標準的な分子生物学技術が、組換え発現ベクターを調製するために、宿主細胞にトランスフェクトするために、形質転換体について選択するために、宿主細胞を培養するために及び培養培地から抗体を回収するために使用される。なおさらに、本発明は、組換え抗体が合成されるまで、適当な培養培地において宿主細胞を培養することにより、本発明の組換え抗体を合成する方法を提供する。本発明の組換え抗体は、本明細書において開示されるアミノ酸配列に対応する核酸分子を使用して、産生されてもよい。方法は、培養培地から組換え抗体を単離することをさらに含み得る。
本発明の抗体ポリペプチド鎖のＮ及びＣ末端は、一般に観察される翻訳後修飾に起因して、予想配列と異なり得る。例えばＣ末端のリジン残基は、しばしば、抗体重鎖から失われる。Ｄｉｃｋら（２００８年）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．１００：１１３２。Ｎ末端のグルタミン残基、及びより低い程度までのグルタミン酸残基は、治療用抗体の軽鎖と重鎖の両方においてピログルタメート残基に頻繁に変換される。Ｄｉｃｋら（２００７年）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．９７：５４４；Ｌｉｕら（２０１１年）、ＪＢＣ ２８６１１２１１；Ｌｉｕら（２０１１年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８６：１１２１１。
ＩＩＩ．抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）
本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を形成するために薬物部分にコンジュゲートされてもよい。抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、腫瘍関連抗原のような標的組織、例えばＢ７−Ｈ３発現腫瘍に１つ以上の薬物部分を選択的に送達するＡＤＣの能力に起因して疾患、例えばがんを処置する際の抗体の治療有効性を増大し得る。したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、治療上の使用、例えばがんの処置のための抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを提供する。
本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）を形成するために薬物部分にコンジュゲートされてもよい。抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、腫瘍関連抗原のような標的組織、例えばＢ７−Ｈ３発現腫瘍に１つ以上の薬物部分を選択的に送達するＡＤＣの能力に起因して疾患、例えばがんを処置する際の抗体の治療有効性を増大し得る。したがって、ある特定の実施形態において、本発明は、治療上の使用、例えばがんの処置のための抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを提供する。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、１つ以上の薬物部分に連結された抗Ｂ７−Ｈ３抗体、すなわち、Ｂ７−Ｈ３に特異的に結合する抗体を含む。ＡＤＣの特異性は、抗体の特異性、すなわち、抗Ｂ７−Ｈ３により同定される。一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、Ｂ７−Ｈ３を発現する形質転換されたがん細胞に内部送達される１つ以上の細胞傷害性薬物に連結される。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得る薬物の例が、以下で提供され、抗体及び１つ以上の薬物をコンジュゲートするために使用され得るリンカーである。用語「薬物」、「薬剤」及び「薬物部分」は、本明細書において互換的に使用される。用語「連結された」及び「コンジュゲートされた」も本明細書において互換的に使用され、抗体及び部分が共有結合されていることを示す。
一部の実施形態において、ＡＤＣは、以下の式（式Ｉ）を有し：
ＩＩＩ．Ａ．抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ：Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、リンカー、シントン及びそれを作製する方法
無調節なアポトーシス経路はまた、がんの病理に関連している。下方制御されたアポトーシス（及びより具体的には、タンパク質のＢｃｌ−２ファミリー）が、がん性悪性腫瘍の発症に関与するという推測により、このなお定義が難しい疾患を標的にする新規の方法が明らかになった。研究により、例えば抗アポトーシスタンパク質、Ｂｃｌ２及びＢｃｌ−ｘＬが、多くのがん細胞型において過剰発現されることが示された。Ｚｈａｎｇ、２００２年、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ／Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ １：１０１；Ｋｉｒｋｉｎら、２００４年、Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ、１６４４：２２９〜２４９頁；及びＡｍｕｎｄｓｏｎら、２０００年、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、６０：６１０１〜６１１０頁を参照。この脱調節の効果は、そうでなければ正常状態でアポトーシスを受けた、変更された細胞の生存である。調節されていない増殖と関連するこれらの欠損の繰り返しが、がん発生の開始点であると考えられている。
無調節なアポトーシス経路はまた、がんの病理に関連している。下方制御されたアポトーシス（及びより具体的には、タンパク質のＢｃｌ−２ファミリー）が、がん性悪性腫瘍の発症に関与するという推測により、このなお定義が難しい疾患を標的にする新規の方法が明らかになった。研究により、例えば抗アポトーシスタンパク質、Ｂｃｌ２及びＢｃｌ−ｘＬが、多くのがん細胞型において過剰発現されることが示された。Ｚｈａｎｇ、２００２年、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ／Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ １：１０１；Ｋｉｒｋｉｎら、２００４年、Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ、１６４４：２２９〜２４９頁；及びＡｍｕｎｄｓｏｎら、２０００年、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、６０：６１０１〜６１１０頁を参照。この脱調節の効果は、そうでなければ正常状態でアポトーシスを受けた、変更された細胞の生存である。調節されていない増殖と関連するこれらの欠損の繰り返しが、がん発生の開始点であると考えられている。
本開示の態様は、リンカーを介して薬物にコンジュゲートされた抗Ｂ７−Ｈ３抗体を含む抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣであって、薬物がＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である、抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣに関する。特定の実施形態において、ＡＤＣは、以下の構造式（Ｉ）に従う化合物又はその薬学的に許容される塩であり、式中、Ａｂは、抗Ｂ７−Ｈ３抗体を表し、Ｄは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害薬（すなわち、以下に示される式ＩＩａ又はＩＩｂの化合物）を表し、Ｌは、リンカーを表し、ＬＫは、リンカー（Ｌ）を抗Ｂ７−Ｈ３抗体（Ａｂ）に連結している共有結合を表し、ｍは、１〜２０の範囲の整数である抗体に連結されたＤ−Ｌ−ＬＫ単位の数を表す。ある特定の実施形態において、ｍは、２、３又は４である。一部の実施形態において、ｍは、１〜８、１〜７、１〜６、２〜６、１〜５、１〜４、１〜３、１〜２又は２〜４の範囲である。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得るＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の例が、以下で提供され、抗体及び１つ以上のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤をコンジュゲートするために使用され得るリンカーである。用語「連結された」及び「コンジュゲートされた」も本明細書において互換的に使用され、抗体及び部分が共有結合されていることを示す。
ＩＩＩ．Ａ．１．Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、本明細書に記載の様々な方法において化合物又は塩それ自体として使用することができ、又は例えば式（Ｄ）の薬物（Ｄ）としてＡＤＣの構成部分として含めることができる。
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、本明細書に記載の様々な方法において化合物又は塩それ自体として使用することができ、又は例えば式（Ｄ）の薬物（Ｄ）としてＡＤＣの構成部分として含めることができる。
コンジュゲートされていない形態で使用することができる、又はＡＤＣの一部として含めることができるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の特定の実施形態には、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）に従う化合物が含まれる。本発明において、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤がＡＤＣの一部として含まれる場合、下記式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）に示される＃はリンカーに対する結合点を表し、これはそれらが一価基形態で表されることを示す。
Ａｒ１は、
Ａｒ２は、
Ｚ１は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ハロ及びＣ−ＣＮから選択され、
Ｚ２ａ、Ｚ２ｂ、及びＺ２ｃはそれぞれ、互いに独立して、結合、ＮＲ６、ＣＲ６ａＲ６ｂ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ６Ｃ（Ｏ）、ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ、及びＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏから選択され、
Ｒ１は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル、エチル及びシアノから選択され、
Ｒ２は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル及びシアノから選択され、
Ｒ３は、水素、低級アルキル及び低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ４は、水素、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、低級ヘテロアルキルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、低級ヘテロアルキルは、１つ以上のハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ、Ｓ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＮＨ２基で置換されていてもよく、
Ｒ６、Ｒ６ａ及びＲ６ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、置換されていてもよい単環式シクロアルキル及び単環式ヘテロシクリルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１０は、シアノ、ＯＲ１４、ＳＲ１４、ＳＯＲ１４、ＳＯ２Ｒ１４、ＳＯ２ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１４及びＮＨＳＯ２Ｒ１４から選択され、
Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、ハロメチル、ヒドロキシル、メトキシ、ＣＮ、及びＳＣＨ３から選択され、
Ｒ１２は、水素、ハロ、シアノ、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、シクロアルキル、又はヘテロシクリルから選択され、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、又はヘテロシクリルは、１つ以上のハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ基で置換されてもよく、
Ｒ１３は、結合、置換されていてもよい低級アルキレン、置換されていてもよい低級ヘテロアルキレン、置換されていてもよいシクロアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクリルから選択され、
Ｒ１４は、水素、置換されていてもよい低級アルキル及び置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ１４ａ及びＲ１４ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、置換されていてもよい低級アルキル、置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択され、又はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、単環式シクロアルキル又は単環式ヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１５は、水素、ハロ、Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、但し、Ｒ１５が存在する場合、Ｒ４は、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルではなく、Ｒ４Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルは、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３及びＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３から独立して選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、
＃は、リンカー又は水素原子に対する結合点を表す。
コンジュゲートされていない形態で使用することができる、又はＡＤＣの一部として含めることができるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の特定の実施形態には、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）に従う化合物：
Ａｒ１は、
Ａｒ２は、
Ｚ１は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ハロ及びＣ−ＣＮから選択され、
Ｚ２ａ、Ｚ２ｂ、及びＺ２ｃはそれぞれ、互いに独立して、結合、ＮＲ６、ＣＲ６ａＲ６ｂ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、Ｓ（Ｏ）２、ＮＲ６Ｃ（Ｏ）、ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ、及びＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏから選択され、
Ｒ１は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル、エチル及びシアノから選択され、
Ｒ２は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル及びシアノから選択され、
Ｒ３は、水素、低級アルキル及び低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ４は、水素、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、及び低級ヘテロアルキルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、及び低級ヘテロアルキルは、１つ以上のハロ、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂ、Ｓ（Ｏ）２ＮＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、Ｓ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＮＨ２基で置換されていてもよく、
Ｒ６、Ｒ６ａ及びＲ６ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、置換されていてもよい単環式シクロアルキル及び単環式ヘテロシクリルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１０は、シアノ、ＯＲ１４、ＳＲ１４、ＳＯＲ１４、ＳＯ２Ｒ１４、ＳＯ２ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１４及びＮＨＳＯ２Ｒ１４から選択され、
Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、ハロメチル、ヒドロキシル、メトキシ、ＣＮ、及びＳＣＨ３から選択され、
Ｒ１２は、水素、ハロ、シアノ、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクリルから選択され、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、及びヘテロシクリルは、１つ以上のハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ基で置換されていてもよく、
Ｒ１３は、結合、置換されていてもよい低級アルキレン、置換されていてもよい低級ヘテロアルキレン、置換されていてもよいシクロアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクリルから選択され、
Ｒ１４は、水素、置換されていてもよい低級アルキル及び置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ１４ａ及びＲ１４ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、置換されていてもよい低級アルキル、及び置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択され、又はそれらが結合する窒素原と一緒になって、置換されていてもよい単環式シクロアルキル又は単環式ヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１５は、水素、ハロ、Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、但し、Ｒ１５が存在する場合、Ｒ４は、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルではなく、Ｒ４Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルは、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３及びＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３から独立して選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、
＃は、リンカー又は水素原子に対する結合点を表す。
コンジュゲートされていない形態で使用することができる、又はＡＤＣの一部として含めることができるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の別の実施形態には、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）に従う化合物：
Ａｒ１は、
Ａｒ２は、
Ｚ１は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ハロ及びＣ−ＣＮから選択され、
Ｚ２ａ、Ｚ２ｂ、及びＺ２ｃはそれぞれ、互いに独立して、結合、ＮＲ６、ＣＲ６ａＲ６ｂ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、ＮＲ６Ｃ（Ｏ）、ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ、及びＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏから選択され、
Ｒ１は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル、エチル及びシアノから選択され、
Ｒ２は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル及びシアノから選択され、
Ｒ３は、水素、低級アルキル及び低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ４は、水素、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、低級ヘテロアルキルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、低級ヘテロアルキルは、１つ以上のハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、ＮＣ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＳ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＳ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ、Ｓ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＮＨ２基で置換されていてもよく、
Ｒ６、Ｒ６ａ及びＲ６ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、置換されていてもよい単環式シクロアルキル及び単環式ヘテロシクリルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１０は、シアノ、ＯＲ１４、ＳＲ１４、ＳＯＲ１４、ＳＯ２Ｒ１４、ＳＯ２ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１４及びＮＨＳＯ２Ｒ１４から選択され、
Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、ハロメチル、ヒドロキシル、メトキシ、ＣＮ、及びＳＣＨ３から選択され、
Ｒ１２は、水素、ハロ、シアノ、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、シクロアルキル、又はヘテロシクリルから選択され、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、又はヘテロシクリルは、１つ以上のハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）ＣＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＣＲ６ａＲ６ｂ基で置換されていてもよく、
Ｒ１３は、結合、置換されていてもよい低級アルキレン、置換されていてもよい低級ヘテロアルキレン、置換されていてもよいシクロアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクリルから選択され、
Ｒ１４は、水素、置換されていてもよい低級アルキル及び置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ１４ａ及びＲ１４ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、置換されていてもよい低級アルキル、置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択され、又はそれらが結合する窒素原子と一緒になって、単環式シクロアルキル又は単環式ヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１５は、水素、ハロ、Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、但し、Ｒ１５が存在する場合、Ｒ４は、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルではなく、Ｒ４Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルは、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、及びＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３から独立して選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、
＃は、リンカー又は水素原子に対する結合点を表す。
構造式（ＩＩａ）及び（ＩＩｂ）のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤がＡＤＣの成分ではない場合、式（ＩＩａ）及び（ＩＩｂ）中の＃は水素原子に対する結合点を表す。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤がＡＤＣの成分である場合、式（ＩＩａ）及び（ＩＩｂ）中の＃はリンカーに対する結合点を表す。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤がＡＤＣの成分である場合、ＡＤＣは、同一であり又は異なってもよいが典型的には同じである、１つ以上のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を含んでもよい。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ１は、
全ての実施形態において、式（ＩＩｂ）の＃−Ｎ（Ｒ４）−Ｒ１３−Ｚ２ｂ−置換基は、置換可能な任意のＡｒ２原子においてＡｒ２に結合している。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、５位においてヒドロキシル、Ｃ１〜４アルコキシ、及びシアノから選択される基で置換されていてもよい
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＡｒ２は、置換されていない。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＡｒ２は、５位においてヒドロキシル、Ｃ１〜４アルコキシ、及びシアノから選択される基で置換された
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＺ１は、Ｎである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ１は、メチル及びクロロから選択される。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ２は、水素及びメチルから選択される。特定の実施形態において、Ｒ２は、水素である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、（ＣＨ２）２ＯＣＨ３である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、水素である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、単環式ヘテロシクリルであり、ここで、単環式ヘテロシクロアルキルは、１個のＳ（Ｏ）２ＣＨ３で置換されている。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、水素又は低級アルキルであり、低級アルキルは、Ｃ１〜４アルコキシ又はＣ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂで置換されていてもよい。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、低級アルキルであり、ここで、低級アルキルは、Ｃ（Ｏ）ＮＨ２で置換されている。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、低級アルキルであり、ここで、低級アルキルは、Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２で置換されている。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、低級アルキルであり、ここで、低級アルキルは、ヒドロキシで置換されている。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、低級アルキルであり、ここで、低級アルキルは、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２で置換されている。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ４は、低級アルキルであり、ここで、低級アルキルは、Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ３で置換されている。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ１１ａ及びＲ１１ｂは、同じである。特定の実施形態において、Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂはそれぞれ、メチルである。別の実施形態において、Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂはそれぞれ、エチルである。別の実施形態において、Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂはそれぞれ、メトキシである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＲ１１ａ及びＲ１１ｂは、Ｆ、Ｂｒ及びＣｌから独立して選択される。
ある特定の実施形態において、Ｚ１は、Ｎであり、Ｚ２ａは、Ｏであり、Ｒ１は、メチル又はクロロであり、Ｒ２は水素であり、及びＡｒ２は、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の化合物に関する。ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、Ｏである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、ＣＨ２又はＯである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、Ｓである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、ＣＨ２である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、ＮＲ６である。一部のかかる実施形態において、Ｒ６は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、ＮＲ６Ｃ（Ｏ）である。一部のかかる実施形態において、Ｒ６は、水素である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、Ｏであり、Ｒ１３は、エチレンであり、Ｒ４は、低級アルキルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、Ｏであり、Ｒ１３はエチレンであり、Ｒ４は、水素又はＣ１〜４アルコキシ又はＣ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂで置換されていてもよい低級アルキルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、Ｏであり、Ｒ１３は、エチレンであり、Ｒ４は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、Ｏであり、Ｒ１３は、エチレンであり、Ｒ４は、水素である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、ＮＲ６Ｃ（Ｏ）であり、Ｒ６は、水素であり、Ｒ１３は、メチレンであり、Ｒ４は、水素である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、Ｓであり、Ｒ１３は、エチレンであり、Ｒ４は、水素である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＺ２ａは、ＣＨ２であり、Ｒ１３は、エチレンであり、Ｒ４は、水素である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＲ１３基は、エチレンである。一部のかかる実施形態において、Ｚ２ａは、Ｏである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＲ１３基は、プロピレンである。一部のかかる実施形態において、Ｚ２ａは、Ｏである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＲ１３基は、低級アルキレン又は低級ヘテロアルキレンから選択される。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＲ１３は、（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）３Ｏ（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）３及び（ＣＨ２）３Ｏ（ＣＨ２）３から選択される。一部のかかる実施形態において、Ｚ２ａは、Ｏである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＲ１３基は、（ＣＨ２）２（ＳＯ２）（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）３（ＳＯ２）（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）２（ＳＯ２）（ＣＨ２）３及び（ＣＨ２）３（ＳＯ２）（ＣＨ２）から選択される。一部のかかる実施形態において、Ｚ２ａは、Ｏである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＲ１３基は、（ＣＨ２）２（ＳＯ）（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）２（ＳＯ）（ＣＨ２）３、（ＣＨ２）３（ＳＯ）（ＣＨ２）２及び（ＣＨ２）３（ＳＯ）（ＣＨ２）３から選択される。一部のかかる実施形態において、Ｚ２ａは、Ｏである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）のＲ１３基は、（ＣＨ２）２Ｓ（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）２Ｓ（ＣＨ２）３、（ＣＨ２）３Ｓ（ＣＨ２）２及び（ＣＨ２）３Ｓ（ＣＨ２）３から選択される。一部のかかる実施形態において、Ｚ２ａは、Ｏである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態において、式（ＩＩａ）の
ある特定の実施形態は、式（ＩＩｂ）の化合物に関する。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、結合、Ｏ又はＮＲ６であり、又は及びＲ１３は、エチレン又は置換されていてもよいヘテロシクリルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、ＮＲ６である。一部のかかる実施形態において、Ｒ６は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、ＮＲ６であり、Ｒ１３は、エチレンである。一部のかかる実施形態において、Ｒ６は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、Ｏであり、Ｒ１３は、エチレンである。一部のかかる実施形態において、Ｒ４は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、ＮＲ６であり、ここで、Ｒ６基は、Ｒ１３の原子と一緒になって、４〜６個の原子を有する環を形成する。一部のかかる実施形態において、環は、５員環である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、メチレンであり、Ｒ１３基は、メチレンである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、メチレンであり、Ｒ１３基は、結合である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）の基Ｚ２ｂは、酸素であり、基Ｒ１３は、（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）３Ｏ（ＣＨ２）２、（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）３及び（ＣＨ２）３Ｏ（ＣＨ２）３から選択される。一部のかかる実施形態において、Ｒ４は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）のＺ２ｃ基は、結合であり、Ｒ１２は、ＯＨである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）のＺ２ｃ基は、結合であり、Ｒ１２は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩから選択される。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）のＺ２ｃ基は、結合であり、Ｒ１２は、低級アルキルである。一部のかかる実施形態において、Ｒ１２は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）のＺ２ｃ基は、Ｏであり、Ｒ１２は、低級ヘテロアルキルである。一部のかかる実施形態において、Ｒ１２は、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＣＨ３である。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）のＺ２ｃ基は、Ｏであり、Ｒ１２は、１つ以上のハロ又はＣ１〜４アルコキシで置換されていてもよい低級アルキルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）のＺ２ｃ基は、Ｏであり、Ｒ１２は、低級アルキルである。特定の実施形態において、Ｒ１２は、メチルである。
ある特定の実施形態において、式（ＩＩｂ）のＺ２ｃ基は、Ｓであり、Ｒ１２は、低級アルキルである。一部のかかる実施形態において、Ｒ１２は、メチルである。
コンジュゲートしていない形態で本明細書に記載の方法に使用することができ、及び／又は本明細書に記載のＡＤＣに含めることができる構造式（ＩＩａ）〜（ＩＩｂ）に従う例示的なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤は、以下の化合物及び／又はその薬学的に許容される塩を含む。
留意すべきことに、本出願のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤がコンジュゲートした形態である場合、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）の＃の位置に対応する水素は存在せず、一価基を形成する。例えば、化合物Ｗ３．０１（実施例１．１）は、６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３、７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸である。
該阻害剤は、コンジュゲートしていない形態である場合、以下の構造を有する：
構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）に示されるように、同じ化合物がＡＤＣに含まれる場合、＃の位置に対応する水素は存在せず、一価基を形成する。
ある特定の実施形態において、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、Ｗ３．０１、Ｗ３．０２、Ｗ３．０３、Ｗ３．０４、Ｗ３．０５、Ｗ３．０６、Ｗ３．０７、Ｗ３．０８、Ｗ３．０９、Ｗ３．１０、Ｗ３．１１、Ｗ３．１２、Ｗ３．１３、Ｗ３．１４、Ｗ３．１５、Ｗ３．１６、Ｗ３．１７、Ｗ３．１８、Ｗ３．１９、Ｗ３．２０、Ｗ３．２１、Ｗ３．２２、Ｗ３．２３、Ｗ３．２４、Ｗ３．２５、Ｗ３．２６、Ｗ３．２７、Ｗ３．２８、Ｗ３．２９、Ｗ３．３０、Ｗ３．３１、Ｗ３．３２、Ｗ３．３３、Ｗ３．３４、Ｗ３．３５、Ｗ３．３６、Ｗ３．３７、Ｗ３．３８、Ｗ３．３９、Ｗ３．４０、Ｗ３．４１、Ｗ３．４２、Ｗ３．４３、及びそれらの薬学的に許容される塩（化合物については実施例１を参照のこと）からなる群から選択される。
ある特定の実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩、リンカーによって抗体に連結されている薬物を含み、ここで、薬物は、Ｗ３．０１、Ｗ３．０２、Ｗ３．０３、Ｗ３．０４、Ｗ３．０５、Ｗ３．０６、Ｗ３．０７、Ｗ３．０８、Ｗ３．０９、Ｗ３．１０、Ｗ３．１１、Ｗ３．１２、Ｗ３．１３、Ｗ３．１４、Ｗ３．１５、Ｗ３．１６、Ｗ３．１７、Ｗ３．１８、Ｗ３．１９、Ｗ３．２０、Ｗ３．２１、Ｗ３．２２、Ｗ３．２３、Ｗ３．２４、Ｗ３．２５、Ｗ３．２６、Ｗ３．２７、Ｗ３．２８、Ｗ３．２９、Ｗ３．３０、Ｗ３．３１、Ｗ３．３２、Ｗ３．３３、Ｗ３．３４、Ｗ３．３５、Ｗ３．３６、Ｗ３．３７、Ｗ３．３８、Ｗ３．３９、Ｗ３．４０、Ｗ３．４１、Ｗ３．４２、Ｗ３．４３からなる群から選択されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である。
ある特定の実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）の＃の位置に対応する水素が存在せず一価基を形成しているという点で変更されている、以下の化合物からなる群から選択される：
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（オキセタン−３−イルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［６−（３−アミノピロリジン−１−イル）−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルファモイルエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［５−アミノ−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−［３−（メチルアミノ）プロパ−１−イン−１−イル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）アゼチジン−３−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）エチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノアセトアミド）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３−［（２−アミノエチル）スルファニル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（３−アミノプロピル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛５−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］キノリン−３−イル｝ピリジン−２−カルボン酸。
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（オキセタン−３−イルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［６−（３−アミノピロリジン−１−イル）−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルファモイルエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［５−アミノ−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−［３−（メチルアミノ）プロパ−１−イン−１−イル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）アゼチジン−３−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）エチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノアセトアミド）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３−［（２−アミノエチル）スルファニル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（３−アミノプロピル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛５−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］キノリン−３−イル｝ピリジン−２−カルボン酸。
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤は、抗アポトーシスＢｃｌ−ｘＬタンパク質に結合してこれを阻害し、アポトーシスを誘導する。構造式（ＩＩａ）〜（ＩＩｂ）に従う特定のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤がＢｃｌ−ｘＬ活性に結合してこれを阻害する能力は、例えば、Ｔａｏら、２０１４，ＡＣＳ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，５：１０８８〜１０９３に記載されるＴＲ−ＦＲＥＴ Ｂｃｌ−ｘＬを含む、標準的な結合及び活性アッセイにおいて確認することができる。Ｂｃｌ−ｘＬ結合を確かめるために使用することができる特定のＴＲ−ＦＲＥＴ Ｂｃｌ−ｘＬ結合アッセイが、以下の実施例４において提供される。典型的には、それ自体及び本明細書に記載されるＡＤＣにおける阻害剤として有用なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤は、約１ｎＭ未満の実施例５の結合アッセイにおけるＫｉを示すが、有意により小さいＫｉ、例えば約１、０．１又はさらに０．０１未満のＫｉを示し得る。
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害活性はまた、Ｔａｏら、２０１４、ＡＣＳ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、５：１０８８〜１０９３頁において記載されるＦＬ５．１２細胞及びＭｏｌｔ−４細胞傷害性アッセイのような、標準的な細胞ベースの細胞傷害性アッセイにおいて確かめられてもよい。細胞膜を透過することができる特定のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤のＢｃｌ−ｘＬ阻害活性を確かめるために使用され得る特定のＭｏｌｔ−４細胞傷害性アッセイは、以下の実施例５において提供される。典型的には、かかる細胞透過可能なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤は、実施例５のＭｏｌｔ−４細胞傷害性アッセイにおいて約５００ｎＭ未満のＥＣ５０を示すが、有意に小さいＥＣ５０、例えば約２５０、１００、５０、２０、１０又はさらに５ｎＭ未満のＥＣ５０を示し得る。
ミトコンドリアの外側の膜透過性（ＭＯＭＰ）のプロセスは、Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質により制御される。具体的には、ＭＯＭＰは、活性化の際、外側のミトコンドリア膜上でオリゴマー形成し、孔を形成し、これが、チトクロムｃ（ｃｙｔ ｃ）の放出を導く、アポトーシス促進性Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質Ｂａｘ及びＢａｋにより促進される。ｃｙｔ ｃの放出は、アポトソームの形成を作動させ、アポトソームは次に、カスパーゼ活性化及び細胞にプログラム細胞死を受けさせる他の事象をもたらす（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら、２００５年、Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、１２：４５３〜４６２頁を参照）。Ｂａｘ及びＢａｋのオリゴマー形成作用は、Ｂｃｌ−２及びＢｃｌ−ｘＬを含む、抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリーのメンバーにより拮抗される。生存についてＢｃｌ−ｘＬに依存する細胞におけるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤は、Ｂａｘ及び／又はＢａｋの活性化、ＭＯＭＰ、ｃｙｔ ｃの放出、並びにアポトーシスを導く下流の事象を引き起こすことができる。ｃｙｔ ｃ放出のプロセスは、細胞内のチトクロムｃのミトコンドリア及びサイトゾル分画双方のウエスタンブロットによって評価でき、細胞のアポトーシスの代替測定として使用できる。
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害活性及び結果としてのｃｙｔ ｃの放出を検出する手段として、細胞は、原形質における選択的孔形成を引き起こすが、ミトコンドリア膜では引き起こさない薬剤で処理することができる。具体的には、コレステロール／リン脂質比は、ミトコンドリア膜より形質膜においてずっと高い。結果として、低い濃度のコレステロール指向性界面活性剤ジギトニンとの短時間のインキュベーションは、ミトコンドリア膜に有意に影響することなく、形質膜を選択的に透過する。この薬剤は、コレステロールと不溶性の複合体を形成し、これが、その正常なリン脂質結合部位からのコレステロールの分離を導く。この作用は、次に、脂質二重層において幅約４０〜５０Åの孔の形成を導く。形質膜を透過処理すると、ジギトニンにより形成された孔を通過することができる細胞質成分は、アポトーシス細胞においてミトコンドリアから細胞質に放出されたチトクロムＣを含み、洗い流すことができる（Ｃａｍｐｏｓ、２００６年、Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ａ、６９（６）：５１５〜５２３頁）。
構造式（ＩＩａ）〜（ＩＩｂ）のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の多くが、他の抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリータンパク質よりＢｃｌ−ｘＬを選択的又は特異的に阻害するが、Ｂｃｌ−ｘＬの選択的及び／又は特異的な阻害は必要ではない。化合物を含むＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びＡＤＣはまた、Ｂｃｌ−ｘＬを阻害することに加えて、例えばＢｃｌ−２のような、１つ以上の他の抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリーのタンパク質を阻害する。一部の実施形態において、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び／又はＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬに選択的であり、及び／又は特異的である。特異的又は選択的とは、特定のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及び／又はＡＤＣが、等しいアッセイ条件下でＢｃｌ−２より高い程度まで、Ｂｃｌ−ｘＬに結合し、又は阻害することを意味する。特定の実施形態において、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及び／又はＡＤＣは、結合アッセイにおいてＢｃｌ−２よりＢｃｌ−ｘＬに対して約１０倍、１００倍又はさらに高い範囲の特異性又は選択性を示す。
ＩＩＩ．Ａ．２ Ｂｃｌ−ｘＬリンカー
本明細書に記載のＡＤＣにおいて、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤（セクションＩＩＩ．Ａに記載される）は、リンカーによって抗Ｂ７−Ｈ３抗体に連結されている。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤をＡＤＣの抗Ｂ７−Ｈ３抗体に連結するリンカーは、短く、長く、疎水性、親水性、可動性若しくは強固であってもよく、又はリンカーが、異なる特性を有するセグメントを含み得るように、それぞれ独立して、上記の特性の１つ以上を有するセグメントから構成されてもよい。リンカーは、これらが、１つより多くのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を抗体上の単一部位に共有結合するように、多価であってもよく、又はこれらが、単一のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を抗体上の単一部位に共有結合するように一価であってもよい。
本明細書に記載のＡＤＣにおいて、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤（セクションＩＩＩ．Ａに記載される）は、リンカーによって抗Ｂ７−Ｈ３抗体に連結されている。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤をＡＤＣの抗Ｂ７−Ｈ３抗体に連結するリンカーは、短く、長く、疎水性、親水性、可動性若しくは強固であってもよく、又はリンカーが、異なる特性を有するセグメントを含み得るように、それぞれ独立して、上記の特性の１つ以上を有するセグメントから構成されてもよい。リンカーは、これらが、１つより多くのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を抗体上の単一部位に共有結合するように、多価であってもよく、又はこれらが、単一のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を抗体上の単一部位に共有結合するように一価であってもよい。
当業者により理解される通り、１つの位置においてＢｃｌ−ｘＬ阻害剤に共有結合、及び別の位置において抗体に共有結合を形成することにより、リンカーはＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を抗Ｂ７−Ｈ３抗体に連結する。リンカー上の官能基と阻害剤及び抗体上の官能基との反応により、共有結合が形成される。本明細書において使用される場合、表現「リンカー」は、（ｉ）リンカーをＢｃｌ−ｘＬ阻害剤に共有結合する能力がある官能基、及びリンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合する能力がある官能基を含む、コンジュゲートされていない形態のリンカー；（ｉｉ）リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合する能力がある官能基を含み、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤に共有結合された、又はその逆である、部分的にコンジュゲートされた形態のリンカー；並びに（ｉｉｉ）Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤と抗Ｂ７−Ｈ３抗体の両方に共有結合される、完全にコンジュゲートされた形態のリンカーを含むことが意図される。本明細書に記載される中間のシントン及びＡＤＣの一部の特定の実施形態において、リンカー上の官能基を含む部分、及びリンカーと抗体の間で形成された共有結合が、それぞれ、Ｒｘ及びＬＫとして具体的に説明される。一実施形態は、シントンが抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合する条件下で、細胞表面受容体又は腫瘍細胞上に発現される腫瘍関連抗原に結合する抗体を本明細書に記載のシントンと接触させることによって形成されるＡＤＣに関する。一実施形態は、シントンが抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合する条件下で、本明細書に記載のシントンを接触させることによって形成されるＡＤＣを作製する方法に関する。一実施形態は、Ｂｃｌ−ｘＬを発現する細胞においてＢｃｌ−ｘＬ活性を阻害する方法であって、ＡＤＣが細胞に結合する条件下で、細胞を細胞に結合することができる本明細書に記載のＡＤＣと接触させることを含む、方法に関する。
多くのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を抗体に連結するのに使用され得る例示的な多価のリンカーは、例えば米国特許第８，３９９，５１２号；米国公開出願第２０１０／０１５２７２５号；米国特許第８，５２４，２１４号；米国特許第８，３４９，３０８号；米国公開出願第２０１３／１８９２１８号；米国公開出願第２０１４／０１７２６５号；ＷＯ２０１４／０９３３７９；ＷＯ２０１４／０９３３９４；ＷＯ２０１４／０９３６４０において記載されており、これらの内容を、それらの全体として参照により本明細書に組み込む。例えばＭｅｒｓａｎａらにより開発されたＦｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカーテクノロジーは、良好な物理化学特性を有する高ＤＡＲ ＡＤＣを可能にする可能性を有する。以下で示される通り、Ｆｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカーテクノロジーは、エステル結合の配列を介して薬物分子を可溶化ポリ−アセタール骨格に取り込むことに基づく。方法論は、良好な物理化学特性を維持しながら、高度に負荷されたＡＤＣ（ＤＡＲ最大２０）をもたらす。この方法論は、以下のスキームにおいて示される通り、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤と共に利用することができる。
上のスキームにおいて描かれるＦｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカーテクノロジーを利用するために、脂肪族アルコールが、存在し得る又はＢｃｌ−ｘＬ阻害剤に導入され得る。次いで、アルコール部分は、アラニン部分にコンジュゲートされ、次いで、これが、Ｆｌｅｘｉｍｅｒ（登録商標）リンカーに合成で取り込まれる。インビトロでのＡＤＣのリポソーム処理により、親アルコール含有薬物が放出される。
樹状タイプのリンカーのさらなる例を、ＵＳ２００６／１１６４２２；ＵＳ２００５／２７１６１５；ｄｅ Ｇｒｏｏｔら、（２００３年）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．編、４２：４４９０〜４４９４頁；Ａｍｉｒら、（２００３年）Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．編、４２：４４９４〜４４９９頁；Ｓｈａｍｉｓら、（２００４年）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１２６：１７２６〜１７３１頁；Ｓｕｎら、（２００２年）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ、１２：２２１３〜２２１５頁；Ｓｕｎら、（２００３年）Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１１：１７６１〜１７６８頁；Ｋｉｎｇら、（２００２年）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ、４３：１９８７〜１９９０頁において見出すことができる。
使用され得る例示的な一価のリンカーが、例えばＮｏｌｔｉｎｇ、２０１３年、Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、１０４５：７１〜１００頁；Ｋｉｔｓｏｎら、２０１３年、ＣＲＯｓ／ＣＭＯｓ−Ｃｈｅｍｉｃａ Ｏｇｇｉ−Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｔｏｄａｙ、３１（４）：３０〜３６頁；Ｄｕｃｒｙら、２０１０年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．、２１：５〜１３頁；Ｚｈａｏら、２０１１年、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、５４：３６０６〜３６２３頁；米国特許第７，２２３，８３７号；米国特許第８，５６８，７２８号；米国特許第８，５３５，６７８号；及びＷＯ２００４０１０９５７において記載され、これらのそれぞれの内容を、それらの全体として参照により本明細書に組み込む。
例として、限定ではなく、本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る、いくつかの切断可能なリンカー及び切断不可能なリンカーが、以下に記載される。
切断可能なリンカー
ある特定の実施形態において、選択されたリンカーは、インビトロ及びインビボで切断可能である。切断可能なリンカーは、化学的又は酵素的に不安定な又は分解可能な結合を含んでもよい。切断可能なリンカーは、一般に、細胞質における還元、リソソームにおける酸性条件への曝露又は細胞内での特定のタンパク質分解酵素若しくは他の酵素による切断のような細胞内部でのプロセスを利用して薬物を遊離させる。切断可能なリンカーは、一般に、化学的又は酵素的のいずれかで切断可能である１つ以上の化学結合を取り込み、一方、リンカーの残部は、切断不可能である。
ある特定の実施形態において、選択されたリンカーは、インビトロ及びインビボで切断可能である。切断可能なリンカーは、化学的又は酵素的に不安定な又は分解可能な結合を含んでもよい。切断可能なリンカーは、一般に、細胞質における還元、リソソームにおける酸性条件への曝露又は細胞内での特定のタンパク質分解酵素若しくは他の酵素による切断のような細胞内部でのプロセスを利用して薬物を遊離させる。切断可能なリンカーは、一般に、化学的又は酵素的のいずれかで切断可能である１つ以上の化学結合を取り込み、一方、リンカーの残部は、切断不可能である。
ある特定の実施形態において、リンカーは、ヒドラゾン及び／又はジスルフィド基のような化学的に不安定な基を含む。化学的に不安定な基を含むリンカーは、原形質といくつかの細胞質区画の間の異なる特性を活用する。ヒドラゾンを含有するリンカーのための薬物放出を促進する細胞内条件は、エンドソーム及びリソソームの酸性環境であり、一方、ジスルフィドを含有するリンカーは、高いチオール濃度、例えばグルタチオンを含む細胞質において還元される。ある特定の実施形態において、化学的に不安定な基を含むリンカーの原形質安定性は、化学的に不安定な基の近くの置換基を使用して、立体障害を導入することにより、増大されてもよい。
ヒドラゾンのような、酸不安定な基は、血液の中性ｐＨ環境（ｐＨ７．３〜７．５）において全身循環中インタクトなままであり、ＡＤＣが、細胞の弱酸性エンドソーム（ｐＨ５．０〜６．５）及びリソソーム（ｐＨ４．５〜５．０）区画に内部移行されると、加水分解を受け、薬物を放出する。このｐＨ依存性放出機序は、薬物の非特異的な放出と関連している。リンカーのヒドラゾン基の安定性を増大させるために、リンカーは、化学修飾、例えば置換により変化し得、これにより、循環中の最小化した喪失で、リソソームにおけるより効率的な放出を達成するのに合わせることが可能になる。
ヒドラゾン含有リンカーは、さらなる酸不安定な切断部位及び／又は酵素的に不安定な切断部位のような、さらなる切断部位を含有してもよい。例示的なヒドラゾン含有リンカーを含むＡＤＣは、以下の構造：
リンカーに含まれ得る他の酸不安定な基は、ｃｉｓ−アコニチル含有リンカーを含む。ｃｉｓ−アコニチル化学は、アミド結合に並置したカルボン酸を使用して、酸性条件下でアミド加水分解を促進する。
切断可能なリンカーはまた、ジスルフィド基を含んでもよい。ジスルフィドは、生理的ｐＨにおいて熱力学的に安定であり、細胞内部での内部移行の際に薬物を放出するよう設計され、ここで、細胞質は、細胞外環境と比較して、有意により還元的な環境をもたらす。ジスルフィド含有リンカーが、循環中合理的に安定であり、これにより、細胞質において薬物を選択的に放出するように、ジスルフィド結合の切断は、一般に、（還元型）グルタチオン（ＧＳＨ）のような、細胞質チオールコファクターの存在を必要とする。細胞内酵素タンパク質ジスルフィドイソメラーゼ又はジスルフィド結合を切断することが可能な同様の酵素はまた、細胞内部でのジスルフィド結合の優先切断に寄与してもよい。ＧＳＨは、有意により低い濃度のＧＳＨ又はシステイン、約５μＭの循環中、最も大量な低分子量チオールと比較して、０．５〜１０ｍＭの濃度範囲で細胞に存在することが報告されている。不規則な血流が低酸素状態を導く、腫瘍細胞は、還元酵素の増強された活性をもたらし、したがって、さらに高いグルタチオン濃度をもたらす。ある特定の実施形態において、ジスルフィド含有リンカーのインビボ安定性は、リンカーの化学的修飾、例えばジスルフィド結合に隣接した立体障害の使用により、増強されてもよい。
例示的なジスルフィド含有リンカーを含むＡＤＣは、以下の構造：
使用され得る別の種類のリンカーは、酵素により特異的に切断されるリンカーである。一実施形態において、リンカーは、リソソーム酵素によって切断可能である。かかるリンカーは、典型的には、ペプチドベースであり、又は酵素の基質として作用するペプチド性領域を含む。ペプチドベースのリンカーは、化学的に不安定なリンカーより、原形質及び細胞外環境においてより安定である傾向がある。リソソームタンパク質分解酵素は、リソソームと比較して、内在性の阻害剤及び血液の好ましくない高いｐＨ値に起因して血液において非常に低い活性を有するので、ペプチド結合は、一般に、良好な血清安定性を有する。抗Ｂ７−Ｈ３抗体からの薬物の放出は、リソソームタンパク質分解酵素、例えばカテプシン及びプラスミンの作用に起因して特異的に生じる。これらのタンパク質分解酵素は、ある特定の腫瘍組織において上昇したレベルで存在してもよい。ある特定の実施形態において、リンカーは、リソソーム酵素によって切断可能である。ある特定の実施形態において、リンカーは、リソソーム酵素によって切断可能であり、リソソーム酵素はカテプシンＢである。ある特定の実施形態において、リンカーは、リソソーム酵素によって切断可能であり、リソソーム酵素は、β−グルクロニダーゼ又はβ−ガラクトシダーゼである。ある特定の実施形態において、リンカーは、リソソーム酵素によって切断可能であり、リソソーム酵素はβ−グルクロニダーゼである。ある特定の実施形態において、リンカーは、リソソーム酵素によって切断可能であり、リソソーム酵素はβ−ガラクトシダーゼである。
例示的な実施形態において、切断可能なペプチドは、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｌｅｕのようなテトラペプチド又はＶａｌ−Ｃｉｔ、Ｖａｌ−Ａｌａ及びＰｈｅ−Ｌｙｓのようなジペプチドから選択される。ある特定の実施形態において、ジペプチドは、より長いペプチドの疎水性に起因して、より長いポリペプチドより好ましい。
ドキソルビシン、マイトマイシン、カンプトテシン、タリソマイシン及びオーリスタチン／オーリスタチンファミリーメンバーのような薬物を抗体に連結させるのに有用な様々なジペプチドベースの切断可能なリンカーが記載されている（Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋら、１９９８年、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、６７：１８６６〜１８７２頁；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋら、１９９８年、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、８：３３４１〜３３４６頁；Ｗａｌｋｅｒら、２００２年、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、１２：２１７〜２１９頁；Ｗａｌｋｅｒら、２００４年、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、１４：４３２３〜４３２７頁；及びＦｒａｎｃｉｓｃｏら、２００３年、Ｂｌｏｏｄ、１０２：１４５８〜１４６５頁を参照、これらのそれぞれの内容を、参照により本明細書に組み込む）。これらのジペプチドリンカー又はこれらのジペプチドリンカーの修飾されたバージョンの全てが、本明細書に記載されるＡＤＣにおいて使用され得る。使用され得る他のジペプチドリンカーは、Ｓｅａｔｔｌｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ’ Ｂｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ Ｖｅｎｄｏｔｉｎ ＳＧＮ−３５（Ａｄｃｅｔｒｉｓ（商標））、Ｓｅａｔｔｌｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ＳＧＮ−７５（抗ＣＤ−７０、ＭＣ−モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）、Ｃｅｌｌｄｅｘ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ｇｌｅｍｂａｔｕｍｕｍａｂ（ＣＤＸ−０１１）（抗ＮＭＢ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ−モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）及びＣｙｔｏｇｅｎ ＰＳＭＡ−ＡＤＣ（ＰＳＭＡ−ＡＤＣ−１３０１）（抗ＰＳＭＡ、Ｖａｌ−Ｃｉｔ−ＭＭＡＥ）のようなＡＤＣにおいて見出されるものを含む。
酵素的に切断可能なリンカーは、薬物を酵素切断の部位から空間的に分けるための自壊性スペーサーを含んでもよい。ペプチドリンカーへの薬物の直接結合は、薬物のアミノ酸付加物のタンパク質分解性放出をもたらし、これにより、その活性を損ない得る。自壊性スペーサーの使用により、アミド結合加水分解の際に、完全に活性な化学的に修飾されていない薬物の除去が可能となる。
１つの自壊性スペーサーは、二官能性パラ−アミノベンジルアルコール基であり、これは、アミノ基を介してペプチドに連結され、アミド結合を形成しており、一方、アミン含有薬物は、（ｐ−アミドベンジルカルバメート、ＰＡＢＣを付与するために）カルバメート官能性を介してリンカーのベンジリックヒドロキシル基に結合されてもよい。得られたプロドラッグは、タンパク質分解酵素により媒介される切断の際に活性化され、修飾されていない薬物、二酸化炭素及びリンカー基のレムナントを放出する１，６−脱離反応を導く。以下のスキームは、ｐ−アミドベンジルカルバメートの断片化及び薬物の放出を描く：
ある特定の実施形態において、酵素的に切断可能なリンカーは、β−グルクロン酸ベースのリンカーである。薬物の容易な放出は、リソソーム酵素β−グルクロニダーゼによるβ−グルクロニドグリコシド結合の切断を介して実現され得る。この酵素は、リソソーム内に大量に存在し、一部の腫瘍型において過剰発現され、一方細胞の外側の酵素活性は低い。β−グルクロン酸ベースのリンカーを使用して、β−グルクロニドの親水性に起因して凝集を経験するＡＤＣの傾向を回避し得る。ある特定の実施形態において、β−グルクロン酸ベースのリンカーは、疎水性薬物に連結されたＡＤＣのためのリンカーとして好ましい。以下のスキームは、ＡＤＣからの薬物の放出、及びβ−グルクロン酸ベースのリンカーを含有するＡＤＣを描く：
オーリスタチン、カンプトテシン及びドキソルビシン類似体、ＣＢＩ小溝結合剤並びにプシムベリンのような薬物を抗体に連結させるのに有用な様々な切断可能なβ−グルクロン酸ベースのリンカーが記載されている（Ｊｅｆｆｒｅｙら、２００６年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．、１７：８３１〜８４０頁；Ｊｅｆｆｒｅｙら、２００７年、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、１７：２２７８〜２２８０頁；及びＪｉａｎｇら、２００５年、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２７：１１２５４〜１１２５５頁を参照、これらのそれぞれの内容を、参照により本明細書に組み込む）。これらのβ−グルクロン酸ベースのリンカーの全てが、本明細書に記載されるＡＤＣにおいて使用され得る。ある特定の実施形態において、酵素的に切断可能なリンカーは、β−ガラクトシドベースのリンカーである。β−ガラクトシドは、リソソーム内に大量に存在し、一方、細胞の外側の酵素活性は低い。
加えて、フェノール基を含有するＢｃ１−ｘＬ阻害剤は、フェノール類酸素を介してリンカーに共有結合することができる。米国特許出願第２００９／０３１８６６８号において記載される、１つのかかるリンカーは、ジアミノ−エタン「ＳｐａｃｅＬｉｎｋ」を、伝統的な「ＰＡＢＯ」ベースの自壊性基と共に使用して、フェノールを送達する、方法論を利用する。リンカーの切断が、本開示のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を使用して、以下で模式的に描かれる。
切断可能なリンカーは、切断不可能な部分若しくはセグメントを含んでもよく、及び／又は切断可能なセグメント若しくは部分は、そうでなければ、それを切断可能にする切断不可能なリンカーに含まれてもよい。単なる例として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び関連するポリマーは、ポリマー骨格において切断可能な基を含んでもよい。例えば、ポリエチレングリコール又はポリマーリンカーは、ジスルフィド、ヒドラゾン又はジペプチドのような１つ以上の切断可能な基を含んでもよい。
リンカーに含まれ得る他の分解可能な結合は、ＰＥＧカルボン酸又は活性化されたＰＥＧカルボン酸の生物学的に活性な薬剤上のアルコール基との反応により形成されるエステル結合を含み、かかるエステル基は、一般に、生理学的条件下で加水分解して、生物学的に活性な薬剤を放出する。加水分解で分解可能な結合は、カーボネート結合；アミンとアルデヒドの反応から生じるイミン結合；アルコールをリン酸基と反応させることにより形成されるリン酸エステル結合；アルデヒド及びアルコールの反応産物であるアセタール結合；ギ酸塩及びアルコールの反応産物であるオルソエステル結合；並びにポリマーの末端にあるものを含むがこれらに限定されないホスホラミダイト基及びオリゴヌクレオチドの５’ヒドロキシル基により形成されるオリゴヌクレオチド結合を含むが、これらに限定されない。
ある特定の実施形態において、リンカーは、酵素的に切断可能なペプチド部分、例えば、構造式（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）、又は（ＩＶｄ）を含むリンカー
ペプチドは、リソソーム酵素によって切断可能なペプチドを表し（Ｎ→Ｃを示し、ペプチドはアミノ及びカルボキシル「末端」を含む）、
Ｔは、１つ以上のエチレングリコール単位若しくはアルキレン鎖又はこれらの組合せを含む、ポリマーを表し、
Ｒａは、水素、Ｃ１〜６アルキル、ＳＯ３Ｈ及びＣＨ２ＳＯ３Ｈから選択され、
Ｒｙは、水素又はＣ１〜４アルキル−（Ｏ）ｒ−（Ｃ１〜４アルキレン）ｓ−Ｇ１又はＣ１〜４アルキル−（Ｎ）−［（Ｃ１〜４アルキレン）−Ｇ１］２であり、
Ｒｚは、Ｃ１〜４アルキル−（Ｏ）ｒ−（Ｃ１〜４アルキレン）ｓ−Ｇ２であり、
Ｇ１は、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＰＥＧ４−３２又は糖部分であり、
Ｇ２は、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ又はＰＥＧ４−３２部分であり、
ｒは、０又は１であり、
ｓは、０又は１であり、
ｐは、０〜５の範囲の整数であり、
ｑは、０又は１であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、０又は１であり、
＊は、リンカーの残部に対する結合点を表す。
ある特定の実施形態において、リンカーは、酵素的に切断可能なペプチド部分、例えば構造式（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）、（ＩＶｄ）を含むリンカー又はその薬学的に許容される塩を含む。
ある特定の実施形態において、リンカーＬは、構造式ＩＶａ又はＩＶｂに従うセグメント又はその薬学的に許容される塩を含む。
ある特定の実施形態において、ペプチドは、トリペプチド又はジペプチドから選択される。特定の実施形態において、ジペプチドは、Ｖａｌ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ａｌａ；Ａｌａ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｌａ；Ａｓｎ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｎ；Ｃｉｔ−Ｃｉｔ；Ｖａｌ−Ｇｌｕ；Ｇｌｕ−Ｖａｌ；Ｓｅｒ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｓｅｒ；Ｌｙｓ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｙｓ；Ａｓｐ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｐ；Ａｌａ−Ｖａｌ；Ｖａｌ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｐｈｅ；Ｖａｌ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｐｈｅ；Ｌｅｕ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｅｕ；Ｉｌｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｉｌｅ；Ｐｈｅ−Ａｒｇ；Ａｒｇ−Ｐｈｅ；Ｃｉｔ−Ｔｒｐ；及びＴｒｐ−Ｃｉｔ；又はその薬学的に許容される塩から選択される。
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（ＩＶａ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）又は（ＩＶｄ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
ある特定の実施形態において、リンカーは、酵素的に切断可能な糖部分、例えば、構造式（Ｖａ）、（Ｖｂ）、（Ｖｃ）、（Ｖｄ）又は（Ｖｅ）：
ｑは、０又は１であり、
ｒは、０又は１であり、
Ｘ１は、ＣＨ２、Ｏ又はＮＨであり、
＊は、リンカーの残部への結合点を表す。）
又はその薬学的に許容される塩を含むリンカーを含む。
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（Ｖａ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（Ｖｂ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（Ｖｃ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（Ｖｄ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（Ｖｅ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
切断不可能なリンカー
切断可能なリンカーは、ある特定の利点をもたらし得るが、本明細書に記載されるＡＤＣを含むリンカーは、切断可能である必要はない。切断不可能なリンカーについて、薬物放出は、原形質と一部の細胞質区画の間の異なる特性に依存しない。薬物の放出は、抗原により媒介されるエンドサイトーシスを介したＡＤＣの内部移行及びリソソーム区画への送達後に生じることが仮定され、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、細胞内タンパク質分解性分解を介してアミノ酸のレベルまで分解される。このプロセスは、薬物、リンカー及びリンカーが共有結合していたアミノ酸残基により形成される薬物誘導体を放出する。切断不可能なリンカーを有するコンジュゲートからのアミノ酸薬物代謝産物は、より親水性であり、一般に、より少なく膜透過性であり、これが、切断可能なリンカーを有するコンジュゲートと比較して、より少ないバイスタンダー効果及びより少ない非特異的毒性を導く。一般に、切断不可能なリンカーを有するＡＤＣは、切断可能なリンカーを有するＡＤＣより循環中より高い安定性を有する。切断不可能なリンカーは、アルキレン鎖であってもよく、又は例えばポリアルキレングリコールポリマー、アミドポリマーに基づくような、事実上ポリマーであってもよく、又はアルキレン鎖、ポリアルキレングリコール及び／若しくはアミドポリマーのセグメントを含んでもよい。ある特定の実施形態において、リンカーは、１〜６個のエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコールセグメントを含む。
切断可能なリンカーは、ある特定の利点をもたらし得るが、本明細書に記載されるＡＤＣを含むリンカーは、切断可能である必要はない。切断不可能なリンカーについて、薬物放出は、原形質と一部の細胞質区画の間の異なる特性に依存しない。薬物の放出は、抗原により媒介されるエンドサイトーシスを介したＡＤＣの内部移行及びリソソーム区画への送達後に生じることが仮定され、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、細胞内タンパク質分解性分解を介してアミノ酸のレベルまで分解される。このプロセスは、薬物、リンカー及びリンカーが共有結合していたアミノ酸残基により形成される薬物誘導体を放出する。切断不可能なリンカーを有するコンジュゲートからのアミノ酸薬物代謝産物は、より親水性であり、一般に、より少なく膜透過性であり、これが、切断可能なリンカーを有するコンジュゲートと比較して、より少ないバイスタンダー効果及びより少ない非特異的毒性を導く。一般に、切断不可能なリンカーを有するＡＤＣは、切断可能なリンカーを有するＡＤＣより循環中より高い安定性を有する。切断不可能なリンカーは、アルキレン鎖であってもよく、又は例えばポリアルキレングリコールポリマー、アミドポリマーに基づくような、事実上ポリマーであってもよく、又はアルキレン鎖、ポリアルキレングリコール及び／若しくはアミドポリマーのセグメントを含んでもよい。ある特定の実施形態において、リンカーは、１〜６個のエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコールセグメントを含む。
薬物を抗体に連結するために使用される様々な切断不可能なリンカーが記載されている。（Ｊｅｆｆｒｅｙら、２００６年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１７；８３１〜８４０頁；Ｊｅｆｆｒｅｙら、２００７年、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、１７：２２７８〜２２８０頁；及びＪｉａｎｇら、２００５年、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１２７：１１２５４〜１１２５５頁を参照、これらの内容を、参照により本明細書に組み込む）。これらのリンカーの全てが、本明細書に記載されるＡＤＣに含まれてもよい。
ある特定の実施形態において、リンカーは、インビボで切断不可能であり、例えば構造式（ＶＩａ）、（ＶＩｂ）、（ＶＩｃ）若しくは（ＶＩｄ）：
Ｒａは、水素、アルキル、スルホネート及びメチルスルホネートから選択され、
Ｒｘは、リンカーを抗体に共有結合させる能力がある官能基を含む部分であり、
又はその薬学的に許容される塩によるリンカーである（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合させるのに適当な基を含む。）。
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（ＶＩａ）〜（ＶＩｄ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に共有結合させるのに適した基を含み、
リンカーを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に結合するために使用される基
結合基は、事実上求電子性であり、マレイミド基、活性化したジスルフィド、ＮＨＳエステル及びＨＯＢｔエステルのような活性エステル、ハロギ酸塩、酸ハロゲン化物、アルキル並びにハロアセトアミドのようなベンジルハロゲン化物を含み得る。以下で論じられる通り、本開示に従い使用することができる「自己安定化」マレイミド及び「架橋ジスルフィド」に関連する新たに発生したテクノロジーも存在する。
結合基は、事実上求電子性であり、マレイミド基、活性化したジスルフィド、ＮＨＳエステル及びＨＯＢｔエステルのような活性エステル、ハロギ酸塩、酸ハロゲン化物、アルキル並びにハロアセトアミドのようなベンジルハロゲン化物を含み得る。以下で論じられる通り、本開示に従い使用することができる「自己安定化」マレイミド及び「架橋ジスルフィド」に関連する新たに発生したテクノロジーも存在する。
ＡＤＣ種に改善された安定性を与えるために抗体コンジュゲーション条件下で自発的に加水分解する「自己安定化」マレイミド基の１つの例が、以下のスキームにおいて描かれる。米国公開出願第２０１３／０３０９２５６号、国際出願公開第ＷＯ２０１３／１７３３３７号、Ｔｕｍｅｙら、２０１４年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．、２５：１８７１〜１８８０頁及びＬｙｏｎら、２０１４年、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、３２：１０５９〜１０６２頁を参照。したがって、マレイミド結合基が、抗体のスルフヒドリルと反応して、中間のスクシンイミド環が得られる。加水分解型の結合基は、原形質タンパク質の存在下で脱コンジュゲーションに抵抗性である。
上で示される通り、リンカーのマレイミド環は、抗体Ａｂと反応し、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成する。
Ｐｏｌｙｔｈｅｒｉｃｓは、天然のヒンジジスルフィド結合の還元から誘導されるスルフヒドリル基の対を架橋する方法を開示した。Ｂａｄｅｓｃｕら、２０１４年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．、２５：１１２４〜１１３６頁を参照。反応が、以下の概略図において描かれる。この方法論の利点は、ＩｇＧの完全な還元（４対のスルフヒドリルを得る）、続いて、４当量のアルキル化剤との反応により、同種のＤＡＲ４ ＡＤＣを合成する能力である。「架橋されたジスルフィド」を含有するＡＤＣはまた、増大した安定性を有することが主張される。
同様に、以下で描かれる通り、１対のスルフヒドリル基を架橋する能力があるマレイミド誘導体が開発された。米国公開出願第２０１３／０２２４２２８号を参照。
ある特定の実施形態において、結合部分は、構造式（ＶＩＩａ）、（ＶＩＩｂ）若しくは（ＶＩＩｃ）：
Ｒｑは、Ｈ又は−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、０又は１であり、
Ｇ３は、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈ又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり；
Ｒｗは、−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈ又は−ＮＨ（ＣＯ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２−ＣＨ３であり、
＊は、リンカーの残部に対する結合点を表す。）
又はその薬学的に許容される塩を含む。
ある特定の実施形態において、リンカーは、構造式（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）若しくは（ＶＩＩＩｃ）に従うセグメント、
Ｒｑは、Ｈ又は−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、０又は１であり、
Ｇ３は、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈ又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり、
Ｒｗは、−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈ又は−ＮＨ（ＣＯ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２−ＣＨ３であり、
＊は、リンカーの残部に対する結合点を表し、
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（ＶＩＩａ）及び（ＶＩＩｂ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
本明細書に記載されるＡＤＣに含まれ得る構造式（ＶＩＩｃ）に従うリンカーの例示的な実施形態は、以下で説明されるリンカーを含む（説明される通り、リンカーは、リンカーを抗体に共有結合させるのに適した基を含む。）：
ある特定の実施形態において、Ｌは、閉鎖型又は開放型のいずれかのＩＶａ．１〜ＩＶａ．８、ＩＶｂ．１〜ＩＶｂ．１９、ＩＶｃ．１〜ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．１〜ＩＶｄ．４、Ｖａ．１〜Ｖａ．１２、Ｖｂ．１〜Ｖｂ．１０、Ｖｃ．１〜Ｖｃ．１１、Ｖｄ．１〜Ｖｄ．６、Ｖｅ．１〜Ｖｅ．２、ＶＩａ．１、ＶＩｃ．１〜Ｖ１ｃ．２、ＶＩｄ．１〜ＶＩｄ．４、ＶＩＩａ．１〜ＶＩＩａ．４、ＶＩＩｂ．１〜ＶＩＩｂ．８、ＶＩＩｃ．１〜ＶＩＩｃ．６からなる群から選択される。
ある特定の実施形態において、Ｌは、ＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．４、Ｖｂ．９、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４及びＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、各リンカーのマレイミドは、抗体Ａｂと反応し、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成する。
ある特定の実施形態において、リンカーＬは、ＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｄ．４、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４、ＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、各リンカーのマレイミドは、抗体Ａｂと反応し、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成する。
ある特定の実施形態において、リンカーＬは、ＩＶｂ．２、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．３、ＩＶｃ．６及びＶＩＩｃ．１からなる群から選択され、
Ｂｃｌ−ｘＬリンカー選択の考慮事項
当業者により知られている通り、特定のＡＤＣのため選択されたリンカーは、抗体への結合の部位（例えばｌｙｓ、ｃｙｓ又は他のアミノ酸残基）、薬物ファルマコフォアの構造上の制約及び薬物の親油性を含むが、これらに限定されない、様々な要因により影響され得る。ＡＤＣのために選択される特定のリンカーは、特定の抗体／薬物の組合せについてこれらの異なる要因のバランスをとろうとするべきである。ＡＤＣにおけるリンカーの選択により影響される要因の概要については、Ｎｏｌｔｉｎｇ、５章、「Ｌｉｎｋｅｒ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ」、Ｉｎ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、１０４５巻、７１〜１００頁、Ｌａｕｒｅｎｔ Ｄｕｃｒｙ（編）、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｍｅｄｉｃａ、ＬＬＣ、２０１３年を参照。
当業者により知られている通り、特定のＡＤＣのため選択されたリンカーは、抗体への結合の部位（例えばｌｙｓ、ｃｙｓ又は他のアミノ酸残基）、薬物ファルマコフォアの構造上の制約及び薬物の親油性を含むが、これらに限定されない、様々な要因により影響され得る。ＡＤＣのために選択される特定のリンカーは、特定の抗体／薬物の組合せについてこれらの異なる要因のバランスをとろうとするべきである。ＡＤＣにおけるリンカーの選択により影響される要因の概要については、Ｎｏｌｔｉｎｇ、５章、「Ｌｉｎｋｅｒ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ」、Ｉｎ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、１０４５巻、７１〜１００頁、Ｌａｕｒｅｎｔ Ｄｕｃｒｙ（編）、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｍｅｄｉｃａ、ＬＬＣ、２０１３年を参照。
例えば、ＡＤＣは、抗原陽性腫瘍細胞の近傍に存在するバイスタンダー抗原陰性細胞の死滅をもたらすことが観察されている。ＡＤＣによるバイスタンダー細胞死滅の機序は、ＡＤＣの細胞内プロセッシング中に形成された代謝産物が、役割を果たし得ることを示した。抗原陽性細胞におけるＡＤＣの代謝により生成される中性の細胞傷害性代謝産物は、バイスタンダー細胞死滅において役割を果たすように思われ、一方、荷電した代謝産物は、膜を渡り培地に拡散することが防止され、したがって、バイスタンダー死滅に影響を与えることができない。ある特定の実施形態において、リンカーを選択して、ＡＤＣの細胞代謝産物により引き起こされるバイスタンダー死滅効果を減弱する。ある特定の実施形態において、リンカーを選択して、バイスタンダー死滅効果を増大させる。
リンカーの特性はまた、使用及び／又は保存の条件下でＡＤＣの凝集に影響を及ぼし得る。典型的には、文献において報告されているＡＤＣは、１つの抗体分子当たり３〜４個以下の薬物分子を含有する（例えばＣｈａｒｉ、２００８年、Ａｃｃ Ｃｈｅｍ Ｒｅｓ、４１：９８〜１０７頁を参照）。特に、薬物とリンカーの両方が疎水性である場合、ＡＤＣの凝集に起因して、より高い薬物抗体比（「ＤＡＲ」）を得るための試みはしばしば失敗した（Ｋｉｎｇら、２００２年、Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ、４５：４３３６〜４３４３頁；Ｈｏｌｌａｎｄｅｒら、２００８年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ １９：３５８〜３６１頁；Ｂｕｒｋｅら、２００９年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ、２０：１２４２〜１２５０頁）。多くの場合において、３〜４より高いＤＡＲは、効力を増大する手段として有益であり得る。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤が事実上疎水性である場合において、特に、３〜４より多いＤＡＲが望まれる場合において、ＡＤＣ凝集を低減する手段として相対的に親水性であるリンカーを選択することが望ましいことがある。したがって、ある特定の実施形態において、リンカーは、保存及び／又は使用中に、ＡＤＣの凝集を低減する化学部分を取り込む。リンカーは、荷電した基又は生理的ｐＨ下で荷電されて、ＡＤＣの凝集を低減する基のような極性又は親水性基を取り込んでもよい。例えば、リンカーは、生理的ｐＨで、例えばカルボキシレートを脱プロトン化する、又は例えばアミンをプロトン化する塩又は基のような荷電した基を取り込んでもよい。
多くのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤を抗体に連結するのに使用され得る２０もの高いＤＡＲを生じることが報告されている例示的な多価のリンカーは、米国特許第８，３９９，５１２号；米国公開出願第２０１０／０１５２７２５号；米国特許第８，５２４，２１４号；米国特許第８，３４９，３０８号；米国公開出願第２０１３／１８９２１８号；米国公開出願第２０１４／０１７２６５号；ＷＯ２０１４／０９３３７９；ＷＯ２０１４／０９３３９４；ＷＯ２０１４／０９３６４０において記載されており、これらの内容を、それらの全体として、参照により本明細書に組み込む。
特定の実施形態において、保存又は使用中のＡＤＣの凝集は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定される約４０％未満である。特定の実施形態において、保存又は使用中のＡＤＣの凝集は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって決定される、約３０％未満のような、約２５％未満のような、約２０％未満のような、約１５％未満のような、約１０％未満のような、約５％未満のような、約４％未満のような、又はさらに低い３５％未満である。
ＩＩＩ．Ａ．３．Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣシントン
抗体−薬物コンジュゲートシントンは、ＡＤＣを形成するのに使用される合成中間体である。シントンは、一般に、構造式（ＩＩＩ）に従う化合物
抗体−薬物コンジュゲートシントンは、ＡＤＣを形成するのに使用される合成中間体である。シントンは、一般に、構造式（ＩＩＩ）に従う化合物
ＡＤＣを合成するために、構造式（ＩＩＩ）に従う中間体シントン又はその塩を、官能基Ｒｘが、抗体、Ｆｘ上で「相補的な」官能基と反応して、共有結合を形成する条件下で、目的の抗体と接触させる。
基Ｒｘ及びＦｘの同一性は、シントンを抗体に連結するために使用される化学に依存する。一般に、使用される化学は、抗体の完全性、例えばその標的に結合するこの能力を変えるべきではない。好ましくは、コンジュゲートされた抗体の結合特性は、コンジュゲートされていない抗体のものと密接に類似する。分子を、抗体のような生体分子にコンジュゲートするための様々な化学及び技術は、当技術分野において公知であり、特に抗体について周知である。例えばＡｍｏｎら、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｉｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｏｆ Ｄｒｕｇｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ」、ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｉｓｆｅｌｄら編、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、１９８５年；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」、ｉｎ：Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら編、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、第２編、１９８７年；Ｔｈｏｒｐｅ、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃａｒｒｉｅｒｓ Ｏｆ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｇｅｎｔｓ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ：Ａ Ｒｅｖｉｅｗ」、ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ’８４：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐｉｎｃｈｅｒａら編、１９８５年；「Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｕｓｅ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ」、ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｂａｌｄｗｉｎら編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９８５年；Ｔｈｏｒｐｅら、１９８２年、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．６２：１１９〜５８頁；ＰＣＴ公開ＷＯ８９／１２６２４を参照。これらの化学のいずれかを使用して、シントンを抗体に連結してもよい。
一実施形態では、Ｒｘは、シントンを抗体上のアミノ基に連結することができる官能基を含む。別の実施形態では、Ｒｘは、ＮＨＳ−エステル又はイソチオシアネートを含む。別の実施形態では、Ｒｘは、シントンを抗体上のスルフヒドリル基に連結することができる官能基を含む。別の実施形態では、Ｒｘは、ハロアセチル又はマレイミドを含む。別の実施形態では、Ｌは、ＩＶａ又はＩＶｂ及びそれらの塩から選択され、Ｒｘは、ＮＨＳ−エステル、イソチオシアネート、ハロアセチル及びマレイミドからなる群から選択される官能基を含む。
典型的には、シントンは、例えば、アクセス可能なリジン残基の１級アミノ基又はアクセス可能なシステイン残基のスルフヒドリル基を含む、抗体のアミノ酸残基の側鎖に連結される。遊離スルフヒドリル基は、鎖間ジスルフィド結合を還元することにより、得られてもよい。
一実施形態では、ＬＫは、抗Ｂ７−Ｈ３抗体Ａｂ上のアミノ基と形成された連結（例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６）である。別の実施形態では、ＬＫは、アミド又はチオ尿素である。別の実施形態では、ＬＫは、抗Ｂ７−Ｈ３抗体Ａｂ上のスルフヒドリル基と形成された結合である。別の実施形態では、ＬＫは、チオエーテルである。
一実施形態では、ＬＫは、アミド、チオ尿素及びチオエーテルからなる群から選択され、ｍは１〜８の範囲の整数である。
シントンをアクセス可能なリジン残基に連結するのに有用ないくつかの官能基Ｒｘ及び化学は公知であり、例として、限定ではなく、ＮＨＳ−エステル及びイソチオシアネートを含む。
シントンをシステイン残基のアクセス可能な遊離スルフヒドリル基に連結するのに有用ないくつかの官能基Ｒｘ及び化学は公知であり、例として、限定ではなく、ハロアセチル及びマレイミドを含む。
しかしながら、コンジュゲーション化学は、利用可能な側鎖基に限定されない。アミンのような側鎖は、適当な小分子をアミンに連結することにより、ヒドロキシルのような他の有用な基に変換されてもよい。このストラテジーを使用して、多機能小分子を抗体のアクセス可能なアミノ酸残基の側鎖にコンジュゲートすることにより、抗体上の利用可能な連結部位の数を増大させることができる。次いで、シントンをこれらの「変換された」官能基に共有結合するのに適当な官能基Ｒｘは、シントンに含まれる。
コンジュゲーションのためのアミノ酸残基を含むように抗体を操作してもよい。ＡＤＣの文脈において薬物をコンジュゲートするのに有用な、非遺伝子的にコードされたアミノ酸残基を含むために、抗体を操作するためのアプローチは、Ａｘｕｐら、２００３年、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ、１０９：１６１０１〜１６１０６頁及びＴｉａｎら、２０１４年、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ、１１１：１７７６〜１７７１頁において記載され、シントンをコードされていないアミノ酸に連結するのに有用な化学及び官能基である。
本明細書に記載されるＡＤＣを作製するのに有用な例示的なシントンは、表Ｂにおいて以下で挙げられる以下のシントンを含むが、これらに限定されない。
ある特定の実施形態において、シントンは、シントンの例２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、２．１０、２．１１、２．１２、２．１３、２．１４、２．１５、２．１６、２．１７、２．１８、２．１９、２．２０、２．２１、２．２２、２．２３、２．２４、２．２５、２．２６、２．２７、２．２８、２．２９、２．３０、２．３１、２．３４、２．３５、２．３６、２．３７、２．３８、２．３９、２．４０、２．４１、２．４２、２．４３、２．４４、２．４５、２．４６、２．４７、２．４８、２．４９、２．５０、２．５１、２．５２、２．５３、２．５４、２．５５、２．５６、２．５７、２．５８、２．５９、２．６０、２．６１、２．６２、２．６３、２．６４、２．６５、２．６６、２．６７、２．６８、２．６９、２．７０、２．７１、２．７２及びそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。これらのシントンの対応する化合物名を以下に示す：
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１〜３，７〜］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（オキセタン−３−イル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［（｛（２Ｅ）−３−［４−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−３−（｛３−［（｛［（２Ｅ）−３−（４−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−３−［（３−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝プロパノイル）アミノ］フェニル）プロパ−２−エン−１−イル］オキシ｝カルボニル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）フェニル］プロパ−２−エン−１−イル｝オキシ）カルボニル］（２−メトキシエチル）アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
４−［（｛［２−（２−｛２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェノキシ｝エトキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛［３４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル−４，３２−ジオキソ−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−３，３１−ジアザテトラトリアコンタ−１−イル］オキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［３−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）プロポキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［３−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）プロポキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［（３Ｓ）−１−｛８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−２−［６−カルボキシ−５−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−イル｝ピロリジン−３−イル］カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｌ−アラニンアミド；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−スルファモイルエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
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４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
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４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
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４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［４−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）ブチル］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−｛６−［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］−２−メチル−３，３−ジオキシド−７−オキソ−８−オキサ−３λ６−チア−２，６−ジアザノナン−９−イル｝−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
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２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−スルファモイルエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
（６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−（２−｛２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝アミノ）フェニル｝エチル）−Ｌ−グロン酸；
（６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−［２−（２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛［Ｎ−（｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセチル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル］アミノ｝フェニル）エチル］−Ｌ−グロン酸；
８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸；
４−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−３−｛３−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］プロポキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２，６−アンヒドロ−８−（２−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル）−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸；
２，６−アンヒドロ−８−（２−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−５−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（２−｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセトアミド）−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝フェニル）−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸；
６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−３−［１−（｛３−［２−（｛［（４−｛［（２Ｓ）−５−（カルバモイルアミノ）−２−｛［（２Ｓ）−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝−３−メチルブタノイル］アミノ｝ペンタノイル］アミノ｝フェニル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）アセトアミド］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び
８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（２−｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセトアミド）−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸。
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１〜３，７〜］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（オキセタン−３−イル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［（｛（２Ｅ）−３−［４−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−３−（｛３−［（｛［（２Ｅ）−３−（４−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−３−［（３−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝プロパノイル）アミノ］フェニル）プロパ−２−エン−１−イル］オキシ｝カルボニル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）フェニル］プロパ−２−エン−１−イル｝オキシ）カルボニル］（２−メトキシエチル）アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
４−［（｛［２−（２−｛２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェノキシ｝エトキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛［３４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル−４，３２−ジオキソ−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−３，３１−ジアザテトラトリアコンタ−１−イル］オキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
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４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−４−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１４−オキソ−４，７，１０−トリオキサ−１３−アザノナデカ−１−イル］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［４−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）ブチル］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−｛６−［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］−２−メチル−３，３−ジオキシド−７−オキソ−８−オキサ−３λ６−チア−２，６−ジアザノナン−９−イル｝−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−スルファモイルエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
（６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−（２−｛２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝アミノ）フェニル｝エチル）−Ｌ−グロン酸；
（６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−［２−（２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛［Ｎ−（｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセチル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル］アミノ｝フェニル）エチル］−Ｌ−グロン酸；
８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸；
４−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−３−｛３−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］プロポキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸；
２，６−アンヒドロ−８−（２−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル）−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸；
２，６−アンヒドロ−８−（２−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−５−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（２−｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセトアミド）−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝フェニル）−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸；
６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−３−［１−（｛３−［２−（｛［（４−｛［（２Ｓ）−５−（カルバモイルアミノ）−２−｛［（２Ｓ）−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝−３−メチルブタノイル］アミノ｝ペンタノイル］アミノ｝フェニル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）アセトアミド］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び
８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（２−｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセトアミド）−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−グロ−オクトン酸。
ある特定の実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩は、を含む。
Ｄは、＃の位置に対応する水素が存在せず一価基を形成しているという点で変更されている、以下の化合物からなる群から選択されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤：Ｗ３．０１、Ｗ３．０２、Ｗ３．０３、Ｗ３．０４、Ｗ３．０５、Ｗ３．０６、Ｗ３．０７、Ｗ３．０８、Ｗ３．０９、Ｗ３．１０、Ｗ３．１１、Ｗ３．１２、Ｗ３．１３、Ｗ３．１４、Ｗ３．１５、Ｗ３．１６、Ｗ３．１７、Ｗ３．１８、Ｗ３．１９、Ｗ３．２０、Ｗ３．２１、Ｗ３．２２、Ｗ３．２３、Ｗ３．２４、Ｗ３．２５、Ｗ３．２６、Ｗ３．２７、Ｗ３．２８、Ｗ３．２９、Ｗ３．３０、Ｗ３．３１、Ｗ３．３２、Ｗ３．３３、Ｗ３．３４、Ｗ３．３５、Ｗ３．３６、Ｗ３．３７、Ｗ３．３８、Ｗ３．３９、Ｗ３．４０、Ｗ３．４１、Ｗ３．４２、及びＷ３．４３並びにそれらの薬学的に許容される塩である。
Ｌは、リンカーＩＶａ．１〜ＩＶａ．４、ＩＶａ．８、ＩＶｂ．１〜ＩＶｂ．１３、ＩＶｂ．１５〜ＩＶｂ．１９、ＩＶｃ．１〜ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．１〜ＩＶｄ．４、Ｖａ．１〜Ｖａ．７、Ｖａ．１０〜Ｖａ．１２、Ｖｂ．１〜Ｖｂ．１０、Ｖｃ．１〜Ｖｃ．１１、Ｖｄ．１〜Ｖｄ．３、Ｖｄ．５〜Ｖｄ．６、Ｖｅ．１〜Ｖｅ．２、ＶＩａ．１、ＶＩｄ．１〜ＶＩｄ．２、ＶＩｄ．４、ＶＩＩａ．１〜ＶＩＩａ．４、ＶＩＩｂ．１〜ＶＩＩｂ．８、ＶＩＩｃ．１〜ＶＩＩｃ．６からなる群から選択され、各リンカーのマレイミドは、抗体Ａｂと反応して、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成している。
ＬＫは、アミド、チオ尿素及びチオエーテルからなる群から選択され、
ｍは、１〜８の範囲の整数である。
ｍは、１〜８の範囲の整数である。
ある特定の実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩、
Ｄは、＃の位置に対応する水素が存在せず一価基を形成しているという点で変更されている、以下の化合物からなる群から選択されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤：
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
及びそれらの薬学的に許容される塩である。
Ｄは、＃の位置に対応する水素が存在せず一価基を形成しているという点で変更されている、以下の化合物からなる群から選択されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤：
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
及びそれらの薬学的に許容される塩である。
Ｌは、閉鎖型又は開放型のいずれかの、リンカーＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｃ．７、Ｖｃ．１１、ＩＶｄ．４、Ｖｂ．９、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４、及びＶＩＩｃ．５並びにそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される。
ＬＫは、チオエーテルであり、
ｍは、２〜４の範囲の整数である。
ｍは、２〜４の範囲の整数である。
ＡＤＣを形成するために、シントンのマレイミド環（例えば、表Ｂに列挙されているシントン）は、抗体Ａｂと反応して、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成することができる。同様に、他の官能基、例えば、ハロゲン化アセチル又はビニルスルホンは、抗体Ａｂと反応して共有結合を形成することができる。
特定の態様において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩は、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＴ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＺ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＸＷ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＥ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＲ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＹＧ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＫＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＹＧ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＫＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＹＧ、及びｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＫＺからなる群から選択され、ＫＺ、ＳＲ、ＳＥ、ＸＷ、ＹＧ、ＺＴ及びＺＺは、表Ｂに開示されているシントンであり、ここで、コンジュゲートされたシントンは開放型又は閉鎖型のいずれかである。特定の実施形態では、ＡＤＣは、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＴ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＺ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＸＷ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＥ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＲ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＹＧ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＫＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＹＧ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＫＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＹＧ、及びｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＫＺであり、ここで、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、及びｈｕＡｂ３ｖ２．６は、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体であり、ＫＺ、ＳＲ、ＳＥ、ＸＷ、ＹＧ、ＺＴ及びＺＺは、表Ｂに開示されているシントンであり、ここで、コンジュゲートされたシントンは開放型又は閉鎖型のいずれかである。
ある特定の実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩は、
一実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩は、
一実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩は、
一実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩は、
一実施形態において、ＡＤＣ又はその薬学的に許容される塩は、
弾頭及びシントンを含むＢｃｌ−ｘＬ阻害剤、及びその生成方法は、参照により本明細書に組み込まれる、ＵＳ２０１６−０１５８３７７（ＡｂｂＶｉｅ Ｉｎｃ．）に記載されている。
ＩＩＩ．Ａ．４ Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣの合成方法
本明細書に記載されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンは、有機化学の標準的な公知の技術を使用して合成されてもよい。完全な範囲の、本明細書に記載されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンを合成するためにそのまま使用され得る又は修飾され得るＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンを合成する一般的なスキームが、以下で提供される。ガイダンスに有用であり得る例示的なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンを合成する特定の方法は、実施例セクションにおいて提供される。
本明細書に記載されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンは、有機化学の標準的な公知の技術を使用して合成されてもよい。完全な範囲の、本明細書に記載されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンを合成するためにそのまま使用され得る又は修飾され得るＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンを合成する一般的なスキームが、以下で提供される。ガイダンスに有用であり得る例示的なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントンを合成する特定の方法は、実施例セクションにおいて提供される。
ＡＤＣは、同様に、Ｈａｍｂｌｅｔｔら、２００４、Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｌｏａｄｉｎｇ ｏｎ ｔｈｅ Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ」、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１０：７０６３−７０７０；Ｄｏｒｏｎｉｎａら、２００３、「Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｉｃａｃｉｏｕｓ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２１（７）：７７８〜７８４、及びＦｒａｎｃｉｓｃｏら、２００３、「ｃＡＣｌＯ−ｖｃＭＭＡＥ，ａｎ ａｎｔｉ−ＣＤ３０−ｍｏｎｏｍｅｔｈｙｌａｕｒｉｓｔａｔｉｎ Ｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ ｗｉｔｈ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ」、Ｂｌｏｏｄ１０２：１４５８−１４６５に記載されたものと類似の方法のような標準的な方法によって調製することができる。例えば１つの抗体当たり４つの薬物を有するＡＤＣは、３７℃において３０分間の過剰量のＤＴＴ又はＴＣＥＰのような還元試薬での抗体の部分的還元、次いで、ＤＰＢＳ中の１ｍＭ ＤＴＰＡでのＳＥＰＨＡＤＥＸ（登録商標）Ｇ−２５樹脂を介した溶出によりバッファー交換により、調製されてもよい。溶出液を、さらなるＤＰＢＳで希釈し、抗体のチオール濃度は、５，５’−ジチオビス（２−ニトロ安息香酸）［エルマン試薬］を使用して測定されてもよい。過剰、例えば５倍のリンカー−薬物シントンは、４℃において１時間添加され、コンジュゲーション反応は、実質的に過剰、例えば２０倍のシステインの添加によりクエンチされてもよい。得られたＡＤＣ混合物は、ＰＢＳにおいて平衡化されたＳＥＰＨＡＤＥＸ Ｇ−２５上で精製されて、未反応のシントンが取り除かれ、所望されるなら脱塩され、サイズ排除クロマトグラフィーにより精製されてもよい。次いで、得られたＡＤＣが、例えば０．２μｍのフィルターを通して、無菌濾過され、保存のために、所望されるなら凍結乾燥されてもよい。ある特定の実施形態において、鎖間システインジスルフィド結合の全てが、リンカー−薬物コンジュゲートにより置き換えられる。一実施形態は、シントンが抗体に共有結合する条件下で本明細書に記載されるシントンを抗体と接触させることを含む、ＡＤＣを作製する方法に関する。
完全な範囲の、本明細書に記載されるＡＤＣを合成するために使用され得る例示的なＡＤＣを合成する特定の方法は、実施例のセクションにおいて提供される。
ＩＩＩ．Ａ．５．Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤を合成する一般的な方法
以下のスキームにおいて、様々な置換基Ａｒ１、Ａｒ２、Ｚ１、Ｒ４、Ｒ１０、Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂは、詳細な説明のセクションにおいて定義される通りである。
以下のスキームにおいて、様々な置換基Ａｒ１、Ａｒ２、Ｚ１、Ｒ４、Ｒ１０、Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂは、詳細な説明のセクションにおいて定義される通りである。
５．１．１．化合物（９）の合成
スキーム１
スキーム１
化合物（９）の合成をスキーム１に記載する。化合物（１）をＢＨ３・ＴＨＦで処理し、化合物（２）を得ることができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがテトラヒドロフランのような溶媒中で周囲温度で行われる。化合物（３）は、シアノメチレントリブチルホスホランの存在下、化合物（２）を
５．１．２．化合物（１２）の合成
スキーム２
スキーム２
中間体（１２）の合成が、スキーム２において記載される。化合物（３）をトリ−ｎ−ブチル−アリルスタンナンで、ＺｎＣｌ２・Ｅｔ２Ｏ又はＮ，Ｎ’−アゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）の存在下で処理して、化合物（１０）をもたらすことができる（Ｙａｍａｍｏｔｏら、１９９８年、Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ、４７：７６５〜７８０頁）。反応は、典型的には、−７８℃で、これに限定されないがジクロロメタンのような溶媒中で行われる。化合物（１０）を、ヒドロホウ素化／酸化のための当技術分野において公知の標準的条件下で処理して、化合物（１１）をもたらすことができる。例えば、これに限定されないがテトラヒドロフランのような溶媒中でのＢＨ３・ＴＨＦのような試薬での化合物（１０）の処理、続いて、これに限定されないが水酸化ナトリウムのような塩基の存在下での、これに限定されないが過酸化水素のような酸化剤での中間体アルキルボラン付加物の処理が、化合物（１１）をもたらす（Ｂｒｏｗｎら、１９６８年、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、８６：３９７頁）。典型的には、ＢＨ３・ＴＨＦの添加は、低温で行われ、その後、周囲温度まで温め、続いて、過酸化水素及び水酸化ナトリウムの添加により、アルコール産物を生成する。化合物（１２）は、化合物（９）について既に記載された通り、スキーム１に従って生成することができる。
５．１．３．化合物（１５）の合成
スキーム３
スキーム３
中間体（１５）の合成が、スキーム３において記載される。化合物（３）を、酢酸と４８％ＨＢｒ水溶液の溶媒混合物中、１００℃においてチオ尿素と反応させ、中間体を得て、これを、続いて、これに限定されないが水中の２０％ｖ／ｖエタノールのような溶媒混合物中で、水酸化ナトリウムで処理して、化合物（１３）をもたらすことができる。化合物（１３）を、これに限定されないがナトリウムエトキシドのような塩基の存在下で２−クロロエタノールと反応させて、化合物（１４）をもたらすことができる。反応は、典型的には、これに限定されないがエタノールのような溶媒中で、周囲温度又は高温で行われる。化合物（１５）は、化合物（９）について既に記載された通り、スキーム１に従って生成することができる。
５．１．４．化合物（２２）の合成
スキーム４
スキーム４
化合物（２２）の合成が、スキーム４において記載される。化合物（１６）を、これに限定されないが炭酸カリウムのような塩基の存在下でヨードメタンと反応させて、化合物（１７）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度又は高温で、これらに限定されないがアセトン又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。化合物（１７）を、光化学条件下で、トシルシアニドと、ベンゾフェノンの存在下で反応させて、化合物（１８）をもたらすことができる（Ｋａｍｉｊｏら、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．２０１１年、１３：５９２８〜５９３１頁を参照）。反応は、典型的には、周囲温度で、これらに限定されないがアセトニトリル又はベンゼンのような溶媒中、Ｒｉｋｏ １００Ｗ中圧水銀ランプを光源として使用して、実行される。化合物（１８）を水酸化リチウムと、これらに限定されないが水とテトラヒドロフラン又は水とメタノールの混合物中で反応させて、化合物（１９）をもたらすことができる。化合物（１９）をＢＨ３・ＴＨＦで処理して、化合物（２０）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがテトラヒドロフランのような溶媒中で行われる。化合物（２１）は、化合物（２０）を
５．１．５．化合物（２４）の合成
スキーム５
スキーム５
化合物（２４）の合成が、スキーム５において記載される。化合物（２２）を、これに限定されないが水素化アルミニウムリチウムのような還元剤で、これらに限定されないがジエチルエーテル又はテトラヒドロフランのような溶媒中で処理して、化合物（２３）をもたらすことができる。典型的には、反応は０℃で行われ、その後、周囲温度又は高温まで温められる。化合物（２３）をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートと、本明細書又は文献において記載される標準的条件下で反応させて、化合物（２４）をもたらすことができる。
５．１．６．化合物（２４ａ）の合成
スキーム６
スキーム６
中間体（２４ａ）の合成が、スキーム６において記載される。化合物（２２ａ）を、文献において記載される条件を使用して加水分解して、化合物（２３ａ）をもたらすことができる。典型的には、反応は、水酸化カリウムの存在下で、これに限定されないがエチレングリコールのような溶媒中で、高温で実行される（Ｒｏｂｅｒｔｓら、１９９４年、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９４年、５９：６４６４〜６４６９頁；Ｙａｎｇら、２０１３年、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．、１５：６９０〜６９３頁を参照）。化合物（２４ａ）は、化合物（２３ａ）からＣｕｒｔｉｕｓ再編成により、文献に記載される条件を使用して作製することができる。例えば化合物（２３ａ）をアジ化ナトリウムと、テトラブチルアンモニウムブロミド、亜鉛（ＩＩ）トリフレート及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネートの存在下で反応させて、化合物（２４ａ）をもたらすことができる（Ｌｅｂｅｌら、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．、２００５年、７：４１０７〜４１１０頁を参照）。典型的には、反応は、高温、好ましくは、４０〜５０℃で、これに限定されないがテトラヒドロフランのような溶媒中で実行される。
５．１．７．化合物（２９）の合成
スキーム７
スキーム７
スキーム７は、アダマンタン環置換基の官能化を記載している。ジメチルスルホキシドを塩化オキサリルと反応させ、続いて、限定するものではないがトリエチルアミンのような塩基の存在下で化合物（２５）を添加して、化合物（２６）を得ることができる。反応は、典型的には、限定するものではないがジクロロメタンのような溶媒中で低温で行われる。化合物（２７）を化合物（２６）と反応させ、続いて水素化ホウ素ナトリウムで処理することにより、化合物（２８）を得ることができる。この反応は、典型的には、周囲温度で、限定するものではないがジクロロメタン、メタノール、又はそれらの混合物のような溶媒中で行われる。化合物（２９）は、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミンの存在下で、化合物（２８）をジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートと反応させることにより調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがテトラヒドロフランのような溶媒中で周囲温度で行われる。
５．１．８ 化合物（３５）の合成
スキーム８
スキーム８
スキーム８に示すように、化合物（３０）を本明細書に記載され、文献において容易に利用可能なＳｕｚｕｋｉカップリング条件下で化合物（３１）と反応させて、化合物（３２）を得ることができる。化合物（３４）は、本明細書に記載され、文献において容易に利用可能な条件下で化合物（３２）を化合物（３３）と反応させることによって調製することができる。化合物（３５）は、化合物（３４）を、限定するものではないがトリフルオロ酢酸のような酸で処理することによって調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがジクロロメタンのような溶媒中で周囲温度で行われる。
５．１．９ 化合物（４３）の合成
スキーム９
スキーム９
スキーム９は、置換１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン中間体の合成を記載している。トリメチルシランカルボニトリルをフッ化テトラブチルアンモニウムで処理し、次いでＸがＢｒ又はＩである化合物（３６）と反応させて、化合物（３７）を得ることができる。この添加は、典型的には、限定するものではないがテトラヒドロフラン、アセトニトリル、又はそれらの混合物のような溶媒中、高温に加熱する前に周囲温度で行われる。化合物（３７）をボランで処理して化合物（３８）を得ることができる。この反応は、典型的には、これに限定されないが、テトラヒドロフランのような溶媒中で周囲温度で行われる。化合物（３９）は、これに限定されないが、トリエチルアミンのような塩基の存在下で、化合物（３８）を無水トリフルオロ酢酸で処理することによって調製することができる。この反応は、最初は低温で行った後、限定するものではないがジクロロメタンのような溶媒中で周囲温度に温められる。化合物（３９）を硫酸の存在下でパラホルムアルデヒドで処理し、化合物（４０）を得ることができる。この反応は、典型的には、周囲温度で行われる。化合物（４１）は、化合物（４０）を、限定するものではないがテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）のような触媒の存在下でジシアノ亜鉛と反応させることによって調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中、窒素雰囲気下にて高温で行われる。化合物（４１）を炭酸カリウムで処理し、化合物（４２）を得ることができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがメタノール、テトラヒドロフラン、水又はそれらの混合物のような溶媒中で周囲温度で行われる。
５．１．１０ 化合物（４７）の合成
スキーム１０
スキーム１０
スキーム１０に示されるように、化合物（４５）は、化合物（４３）を、限定するものではないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン又はトリエチルアミンのような塩基の存在下で３−ブロモ−６−フルオロピコリン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４４）と反応させることによって調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがジメチルスルホキシドのような溶媒中、高温で不活性雰囲気下にて行う。化合物（４５）を本明細書又は文献に記載されるホウ素化条件下で４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（４６）と反応させて、化合物（４７）を得ることができる。
５．１．１１ 化合物（５３）の合成
スキーム１１
スキーム１１
スキーム１１は、置換されていてもよい１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリンＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の合成を記載する。化合物（４７）は、化合物（４５）を、限定するものではないがトリエチルアミンのような塩基及び限定するものではないが［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）のような触媒の存在下でピナコールボランと反応させることによって調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがアセトニトリルのような溶媒中、高温で行われる。化合物（５０）は、化合物（４７）を本明細書に記載され、文献において容易に利用可能なＳｕｚｕｋｉカップリング条件下で化合物（８）と反応させることにより調製することができる。化合物（５０）を水酸化リチウムで処理し、化合物（５１）を得ることができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがテトラヒドロフラン、メタノール、水、又はそれらの混合物のような溶媒中で周囲温度で行われる。化合物（５１）を本明細書に記載され、文献において容易に利用可能なアミド化条件下で化合物（３３）と反応させて、化合物（５２）を得ることができる。化合物（５３）は、化合物（５２）を、限定するものではないがトリフルオロ酢酸のような酸で処理することによって調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがジクロロメタンのような溶媒中で周囲温度で行われる。
５．１．１２ 化合物（６６）の合成
スキーム１２
スキーム１２
スキーム１２は、５−メトキシ１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリンＢｃｌ−ｘＬ阻害剤の合成を記載している。ｔｅｒｔ−ブチル８−ブロモ−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキシレート（５４）は、ｔｅｒｔ−ブチル５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキシレートをＮ−ブロモスクシンイミドで処理することによって調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で周囲温度で行われる。８−ブロモ−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸ブチル（５４）を、限定するものではないが炭酸カリウムのような塩基の存在下で臭化ベンジル（５５）と反応させて、５−（ベンジルオキシ）−８−ブロモ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５６）を得ることができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがアセトンのような溶媒中で高温で行われる。５−（ベンジルオキシ）−８−ブロモ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５６）を、メタノール、及び限定するものではないがトリエチルアミンのような塩基、並びに限定するものではないが［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）のような触媒の存在下で一酸化炭素で処理して、２−ｔｅｒｔ−ブチル８−メチル５−（ベンジルオキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，８（１Ｈ）−ジカルボキシレート（５７）を得ることができる。この反応は、典型的には、高温で行われる。５−（ベンジルオキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチル（５８）は、２−ｔｅｒｔ−ブチル８−メチル５−（ベンジルオキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，８（１Ｈ）−ジカルボキシレート（５７）を塩酸で処理することによって調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがテトラヒドロフラン、ジオキサン、又はそれらの混合物のような溶媒中で周囲温度で行われる。５−（ベンジルオキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチル（５８）を、限定するものではないがトリエチルアミンのような塩基の存在下で３−ブロモ−６−フルオロピコリン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４４）と反応させて、５−（ベンジルオキシ）−２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチル（５９）を得ることができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがジメチルスルホキシドのような溶媒中で高温で行われる。５−（ベンジルオキシ）−２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチル（５９）を、本明細書に記載され、文献で容易に利用可能なＳｕｚｕｋｋｉカップリング条件下で化合物（６０）（式中、Ａｄは、本開示の化合物（例えば、式（ＩＩａ）及び（ＩＩｂ）の化合物）のメチルアダマンタン部分である）と反応させて、化合物（６１）を得ることができる。化合物（６１）を水酸化パラジウムの存在下で水素ガスで処理することにより、化合物（６２）を得ることができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがテトラヒドロフランのような溶媒中で高温で行われる。化合物（６３）は、化合物（６２）を（トリメチルシリル）ジアゾメタンと反応させることにより調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがジクロロメタン、メタノール、ジエチルエーテル、又はそれらの混合物のような溶媒中で周囲温度で行われる。化合物（６３）を水酸化リチウムで処理して、化合物（６４）を得ることができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがテトラヒドロフラン、メタノール、水、又はそれらの混合物のような溶媒中で周囲温度で行われる。化合物（６４）を本明細書に記載され、文献において容易に利用可能なアミド化条件下で化合物（３３）と反応させて、化合物（６５）を得ることができる。化合物（６５）を塩酸で処理することにより、化合物（６６）を調製することができる。この反応は、典型的には、限定するものではないがジオキサンのような溶媒中で周囲温度で行われる。
ＩＩＩ．Ａ．６．シントンを合成する一般的な方法
以下のスキームにおいて、様々な置換基Ａｒ１、Ａｒ２、Ｚ１、Ｒ４、Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂは、詳細な説明のセクションにおいて定義される通りである。
以下のスキームにおいて、様々な置換基Ａｒ１、Ａｒ２、Ｚ１、Ｒ４、Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂは、詳細な説明のセクションにおいて定義される通りである。
５．２．１．化合物（８９）の合成
スキーム１３
スキーム１３
スキーム１３において示される通り、式（７７）（式中、ＰＧは、適当な塩基不安定な保護基であり、ＡＡ（２）は、Ｃｉｔ、Ａｌａ又はＬｙｓである。）の化合物を４−（アミノフェニル）メタノール（７８）と、本明細書において記載される又は文献において容易に入手可能なアミド化条件下で反応させて、化合物（７９）をもたらすことができる。化合物（８０）は、化合物（７９）を、これに限定されないがジエチルアミンのような塩基と反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。化合物（８１）（式中、ＰＧは、適当な塩基又は酸不安定な保護基であり、ＡＡ（１）は、Ｖａｌ又はＰｈｅである。）は、化合物（８０）と、本明細書において記載される又は文献において容易に入手可能なアミド化条件下で反応させて、化合物（８２）をもたらすことができる。化合物（８３）は、化合物（８２）を、必要に応じてジエチルアミン又はトリフルオロ酢酸で処理することにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがジクロロメタンのような溶媒中で行われる。化合物（８４）（式中、Ｓｐはスペーサーである。）を化合物（８３）と反応させて、化合物（８５）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。化合物（８５）をビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（８６）と、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させて、化合物（８７）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。化合物（８７）を、限定するものではないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で式（８８）の化合物と反応させて、化合物（８９）を得ることができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。
５．２．２．化合物（９４）及び（９６）の合成
スキーム１４
スキーム１４
スキーム１４は、１回分の、ジペプチドシントンへの代わりのｍＡｂ−リンカー結合を記載する。化合物（８８）を、限定するものではないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で化合物（９０）と反応させて、化合物（９１）を得ることができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。化合物（９２）は、化合物（９１）をジエチルアミンと反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。化合物（９３）（式中、Ｘ１は、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩである。）を化合物（９２）と本明細書に記載される又は文献において容易に入手可能なアミド化条件下で反応させて、化合物（９４）をもたらすことができる。化合物（９２）を式（９５）の化合物と本明細書に記載される又は文献において容易に入手可能なアミド化条件下で反応させて、化合物（９６）をもたらすことができる。
５．２．３．化合物（１０６）の合成
スキーム１５
スキーム１５
スキーム１５は、ビニルグルクロニドリンカー中間体及びシントンの合成を記載する。（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（９７）を、酸化銀、続いて、４−ブロモ−２−ニトロフェノール（９８）で処理して、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−ブロモ−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（９９）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがアセトニトリルのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−ブロモ−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（９９）を（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチル（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アリル）オキシ）シラン（１００）と、これに限定されないが炭酸ナトリウムのような塩基及びこれに限定されないがトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（Ｐｄ２（ｄｂａ）３）のような触媒の存在下で反応させて、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（（Ｅ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０１）をもたらすことができる。反応は、典型的には、高温で、これに限定されないがテトラヒドロフランのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−アミノ−４−（（Ｅ）−３−ヒドロキシプロパ−１−エン−１−イル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０２）は、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（（Ｅ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０１）を亜鉛と、これに限定されないが塩酸のような酸の存在下で反応させることにより、調製することができる。添加は、典型的には、これらに限定されないがテトラヒドロフラン、水又はこれらの混合物のような溶媒中で、低温で行われ、その後、周囲温度まで温められる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−アミノ−４−（（Ｅ）−３−ヒドロキシプロパ−１−エン−１−イル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０２）は、（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（３−クロロ−３−オキソプロピル）カルバメート（１０３）と、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させて、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（Ｅ）−３−ヒドロキシプロパ−１−エン−１−イル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０４）をもたらすことができる。添加は、典型的には、これに限定されないがジクロロメタンのような溶媒中で低温で行われ、その後、周囲温度まで温められる。化合物（８８）は、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（Ｅ）−３−ヒドロキシプロパ−１−エン−１−イル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０４）と、これに限定されないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で反応させ、続いて、後処理し、化合物（１０５）と、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させて、化合物（１０６）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。
５．２．４．化合物（１１５）の合成
スキーム１６
スキーム１６
スキーム１６は、代表的な２−エーテルグルクロニドリンカー中間体及びシントンの合成を記載する。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（９７）を２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１０７）と、炭酸銀の存在下で反応させて、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−ホルミル−３−ヒドロキシフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０８）をもたらすことができる。反応は、典型的には、高温で、これに限定されないがアセトニトリルのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−ホルミル−３−ヒドロキシフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０８）を水素化ホウ素ナトリウムで処理して、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０９）をもたらすことができる。添加は、典型的には、これらに限定されないがテトラヒドロフラン、メタノール又はこれらの混合物のような溶媒中で低温で行われ、その後、周囲温度まで温められる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−ヒドロキシフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１０）は、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０９）をｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライドとイミダゾールの存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、低温で、これに限定されないがジクロロメタンのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１１）は、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−ヒドロキシフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１０）を（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメートと、トリフェニルホスフィン及びこれに限定されないがジ−ｔｅｒｔ−ブチルジアゼン−１，２−ジカルボキシレートのようなアゾジカルボキシレートの存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがトルエンのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１１）を酢酸で処理して、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１２）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これらに限定されないが水、テトラヒドロフラン又はこれらの混合物のような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１３）は、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（９１）をビス（４−ニトロフェニル）カルボネートと、これに限定されないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１１３）を化合物（８８）で、これに限定されないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で処理し、続いて、水酸化リチウムで処理して、化合物（１１４）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これらに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、メタノール又はこれらの混合物のような溶媒中で行われる。化合物（１１５）は、化合物（１１４）を化合物（８４）と、これに限定されないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。
５．２．５．化合物（１１９）の合成
スキーム１７
スキーム１７
スキーム１７は、糖リンカーへの第２の可溶化基の導入を記載する。化合物（１１６）を（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（１１７）と、本明細書に記載される又は文献において容易に入手可能なアミド化条件下で反応させ、続いて、これに限定されないがジエチルアミンのような塩基で処理して、化合物（１１８）をもたらすことができる。化合物（１１８）を化合物（８４）（式中、Ｓｐはスペーサーである。）と、本明細書に記載される又は文献において容易に入手可能なアミド化条件下で反応させて、化合物（１１９）をもたらすことができる。
５．２．６．化合物（１２９）の合成
スキーム１８
スキーム１８
スキーム１８は、４−エーテルグルクロニドリンカー中間体及びシントンの合成を記載する。４−（２−（２−ブロモエトキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド（１２２）は、２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１２０）を１−ブロモ−２−（２−ブロモエトキシ）エタン（１２１）と、これに限定されないが炭酸カリウムのような塩基の存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、高温で、これに限定されないがアセトニトリルのような溶媒中で行われる。４−（２−（２−ブロモエトキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド（１２２）をアジ化ナトリウムで処理して、４−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド（１２３）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−２−ホルミルフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２５）は、４−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド（１２３）を（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２４）と、酸化銀の存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがアセトニトリルのような溶媒中で行われる。Ｐｄ／Ｃの存在下での（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−２−ホルミルフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２５）の水素化により、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２６）がもたらされる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがテトラヒドロフランのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２７）は、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２６）を（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデートで、これに限定されないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で処理することにより、調製することができる。反応は、典型的には、低温で、これに限定されないがジクロロメタンのような溶媒中で行われる。化合物（８８）を（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１２７）と、これに限定されないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で反応させ、続いて、水酸化リチウムで処理して、化合物（１２８）をもたらすことができる。反応は、典型的には、低温で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。化合物（１２９）は、化合物（１２８）を化合物（８４）と、これに限定されないがＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミンのような塩基の存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。
５．２．７．化合物（１３９）の合成
スキーム１９
スキーム１９
スキーム１９は、カルバメートグルクロニド中間体及びシントンの合成を記載する。２−アミノ−５−（ヒドロキシメチル）フェノール（１３０）を水素化ナトリウムで処理して、次いで、２−（２−アジドエトキシ）エチル４−メチルベンゼンスルホン酸塩（１３１）と反応させて、（４−アミノ−３−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）フェニル）メタノール（１３２）をもたらすことができる。反応は、典型的には、高温で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）アニリン（１３３）は、（４−アミノ−３−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）フェニル）メタノール（１３２）をｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシランと、イミダゾールの存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがテトラヒドロフランのような溶媒中で行われる。２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）アニリン（１３３）をホスゲンで、これに限定されないがトリエチルアミンのような塩基の存在下で処理して、続いて、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３４）と、これに限定されないがトリエチルアミンのような塩基の存在下で反応させて２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェニル）カルバモイル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３５）をもたらすことができる。反応は、典型的には、これに限定されないがトルエンのような溶媒中で行われ、添加は、典型的には、低温で行われ、その後、ホスゲン添加の後に、周囲温度まで温められ、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ヒドロキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３４）添加の後に、高温で加熱される。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（ヒドロキシメチル）フェニル）カルバモイル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３６）は、２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェニル）カルバモイル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３５）をｐ−トルエンスルホン酸一水和物と反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがメタノールのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（ヒドロキシメチル）フェニル）カルバモイル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３６）をビス（４−ニトロフェニル）カルボネートと、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させて、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェニル）カルバモイル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３７）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェニル）カルバモイル）オキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１３７）を化合物と、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させ、続いて、水酸化リチウム水溶液で処理して、化合物（１３８）をもたらすことができる。第１のステップは、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われ、第２のステップは、典型的には、低温で、これに限定されないがメタノールのような溶媒中で行われる。化合物（１３８）をトリス（２−カルボキシエチル））ホスフィンヒドロクロライドで処理して、続いて、化合物（８４）とこれに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させて、化合物（１３９）をもたらすことができる。トリス（２−カルボキシエチル））ホスフィンヒドロクロライドとの反応は、典型的には、周囲温度で、これらに限定されないがテトラヒドロフラン、水又はこれらの混合物のような溶媒中で行われ、Ｎ−スクシンイミジル６−マレイミドヘキサノエートとの反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。
５．２．８．化合物（１４９）の合成
スキーム２０
スキーム２０
スキーム２０は、ガラクトシドリンカー中間体及びシントンの合成を記載する。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２，３，４，５−テトライルテトラアセテート（１４０）を、酢酸中のＨＢｒで処理して、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトオキシメチル）−６−ブロモテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４１）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、窒素雰囲気下で行われる。（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（４−ホルミル−２−ニトロフェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４３）は、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−ブロモテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４１）を酸化銀（Ｉ）で、４−ヒドロキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（１４２）の存在下で処理することにより、調製することができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがアセトニトリルのような溶媒中で行われる。（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（４−ホルミル−２−ニトロフェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４３）を水素化ホウ素ナトリウムで処理して、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（４−（ヒドロキシメチル）−２−ニトロフェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４４）をもたらすことができる。反応は、典型的には、低温で、これらに限定されないがテトラヒドロフラン、メタノール又はこれらの混合物のような溶媒中で行われる。（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（２−アミノ−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４５）は、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（４−（ヒドロキシメチル）−２−ニトロフェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４４）を亜鉛で、塩酸の存在下で処理することにより、調製することができる。反応は、典型的には、低温で、窒素雰囲気下で、これに限定されないがテトラヒドロフランのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４６）は、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−（２−アミノ−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４５）を（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（３−クロロ−３−オキソプロピル）カルバメート（１０３）と、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させることにより、調製することができる。反応は、典型的には、低温で、これに限定されないがジクロロメタンのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４６）をビス（４−ニトロフェニル）カルボネートと、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させて、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４７）をもたらすことができる。反応は、典型的には、低温で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｒ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１４７）を化合物（８８）と、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で反応させ、続いて、水酸化リチウムで処理して、化合物（１４８）をもたらすことができる。第１のステップは、典型的には、低温で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われ、第２のステップは、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがメタノールのような溶媒中で行われる。化合物（１４８）を化合物（８４）（式中、Ｓｐはスペーサーである。）で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下で処理して、化合物（１４９）をもたらすことができる。反応は、典型的には、周囲温度で、これに限定されないがＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で行われる。
ＩＩＩ．Ａ．７．抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを合成する一般的な方法
本発明はまた、構造式（Ｉ）に従う抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを製造する方法を開示する：
本発明はまた、構造式（Ｉ）に従う抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを製造する方法を開示する：
この方法は、
水溶液中の抗体を有効量のジスルフィド還元剤で、少なくとも１５分間、３０〜４０℃で処理し、次いで抗体溶液を２０〜２７℃に冷却すること、
２．１〜２．３１及び２．３４〜２．７２（表Ｂ）の群から選択されるシントンを含む水／ジメチルスルホキシドの溶液を還元抗体溶液に加えること、
溶液のｐＨを７．５〜８．５のｐＨに調整すること、
反応を４８〜８０時間にわたって進ませて、ＡＤＣを形成すること
を含み、
エレクトロスプレー質量分析によって測定すると、スクシンイミドからスクシンアミドへの加水分解ごとに質量が１８±２ａｍｕずつ変わり、
ＡＤＣが、疎水性相互作用クロマトグラフィーにより任意選択的に精製される。
ある特定の実態態様において、Ａｂは、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、又はｈｕＡｂ３ｖ２．６の重鎖及び軽鎖ＣＤＲを含む、抗Ｂ７−Ｈ３抗体である。
本発明はまた、上記の方法により調製される抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを対象とする。
一実施形態において、本出願に開示される抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、式（ＩＩｄ）又は（ＩＩｅ）に示されるようにマレイミド部分を介して薬物−リンカーシントンが抗体に共有結合する条件下で、腫瘍細胞上に発現されるＢ７−Ｈ３細胞表面受容体又は腫瘍関連抗原に結合する抗体を薬物−リンカーシントンと接触させることによって形成される：
ある特定の実施形態において、接触させるステップは、抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣが、１．５、２、３又は４のＤＡＲを有するような条件下で実行される。
ＩＩＩ．Ｂ．抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ：コンジュゲーション用の他の例示的な薬物
抗Ｂ７−Ｈ３抗体を、ＡＤＣにおいて使用して、１つ以上の薬物を目的の細胞、例えばＢ７−Ｈ３を発現するがん細胞に標的化してもよい。１つ以上の薬物が、特定の細胞に送達されるので、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、例えば、抗がん療法でしばしば見られる副作用を低減し得る標的化療法を提供する。
抗Ｂ７−Ｈ３抗体を、ＡＤＣにおいて使用して、１つ以上の薬物を目的の細胞、例えばＢ７−Ｈ３を発現するがん細胞に標的化してもよい。１つ以上の薬物が、特定の細胞に送達されるので、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、例えば、抗がん療法でしばしば見られる副作用を低減し得る標的化療法を提供する。
オーリスタチン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６抗体は、少なくとも１つのオーリスタチンにコンジュゲートすることができる。オーリスタチンは、微小管動態及びＧＴＰ加水分解に干渉し、これにより、細胞分裂を阻害することによる抗がん活性を有することが一般に示されたドラスタチン類似体の群を表す。例えば、オーリスタチンＥ（米国特許第５，６３５，４８３号）は、海洋天然産物ドラスタチン１０、抗がん薬ビンクリスチンと同じチューブリン上の部位への結合により、チューブリン重合作用を阻害する化合物の合成類似体である（Ｇ．Ｒ．Ｐｅｔｔｉｔ、Ｐｒｏｇ．Ｃｈｅｍ．Ｏｒｇ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ、７０：１〜７９頁（１９９７年））。ドラスタチン１０、オーリスタチンＰＥ及びオーリスタチンＥは、４つのアミノ酸を有する直鎖ペプチドであり、これらの３つは、ドラスタチンクラスの化合物に固有である。有糸分裂阻害剤のオーリスタチンサブクラスの例示的な実施形態は、モノメチルオーリスタチンＤ（ＭＭＡＤ又はオーリスタチンＤ誘導体）、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ又はオーリスタチンＥ誘導体）、モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ又はオーリスタチンＦ誘導体）、オーリスタチンＦフェニレンジアミン（ＡＦＰ）、オーリスタチンＥＢ（ＡＥＢ）、オーリスタチンＥＦＰ（ＡＥＦＰ）及び５−ベンゾイル吉草酸−ＡＥエステル（ＡＥＶＢ）を含むが、これらに限定されない。オーリスタチン誘導体の合成及び構造は、米国特許出願公開第２００３−００８３２６３号、第２００５−０２３８６４９号及び第２００５−０００９７５１号；国際特許公開第ＷＯ０４／０１０９５７号、国際特許公開第ＷＯ０２／０８８１７２号、並びに米国特許第６，３２３，３１５号；第６，２３９，１０４号；第６，０３４，０６５号；第５，７８０，５８８号；第５，６６５，８６０号；第５，６６３，１４９号；第５，６３５，４８３号；第５，５９９，９０２号；第５，５５４，７２５号；第５，５３０，０９７号；第５，５２１，２８４号；第５，５０４，１９１号；第５，４１０，０２４号；第５，１３８，０３６号；第５，０７６，９７３号；第４，９８６，９８８号；第４，９７８，７４４号；第４，８７９，２７８号；第４，８１６，４４４号；及び第４，４８６，４１４号において記載され、これらのそれぞれを参照により本明細書に組み込む。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６抗体は、少なくとも１つのオーリスタチンにコンジュゲートすることができる。オーリスタチンは、微小管動態及びＧＴＰ加水分解に干渉し、これにより、細胞分裂を阻害することによる抗がん活性を有することが一般に示されたドラスタチン類似体の群を表す。例えば、オーリスタチンＥ（米国特許第５，６３５，４８３号）は、海洋天然産物ドラスタチン１０、抗がん薬ビンクリスチンと同じチューブリン上の部位への結合により、チューブリン重合作用を阻害する化合物の合成類似体である（Ｇ．Ｒ．Ｐｅｔｔｉｔ、Ｐｒｏｇ．Ｃｈｅｍ．Ｏｒｇ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ、７０：１〜７９頁（１９９７年））。ドラスタチン１０、オーリスタチンＰＥ及びオーリスタチンＥは、４つのアミノ酸を有する直鎖ペプチドであり、これらの３つは、ドラスタチンクラスの化合物に固有である。有糸分裂阻害剤のオーリスタチンサブクラスの例示的な実施形態は、モノメチルオーリスタチンＤ（ＭＭＡＤ又はオーリスタチンＤ誘導体）、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ又はオーリスタチンＥ誘導体）、モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ又はオーリスタチンＦ誘導体）、オーリスタチンＦフェニレンジアミン（ＡＦＰ）、オーリスタチンＥＢ（ＡＥＢ）、オーリスタチンＥＦＰ（ＡＥＦＰ）及び５−ベンゾイル吉草酸−ＡＥエステル（ＡＥＶＢ）を含むが、これらに限定されない。オーリスタチン誘導体の合成及び構造は、米国特許出願公開第２００３−００８３２６３号、第２００５−０２３８６４９号及び第２００５−０００９７５１号；国際特許公開第ＷＯ０４／０１０９５７号、国際特許公開第ＷＯ０２／０８８１７２号、並びに米国特許第６，３２３，３１５号；第６，２３９，１０４号；第６，０３４，０６５号；第５，７８０，５８８号；第５，６６５，８６０号；第５，６６３，１４９号；第５，６３５，４８３号；第５，５９９，９０２号；第５，５５４，７２５号；第５，５３０，０９７号；第５，５２１，２８４号；第５，５０４，１９１号；第５，４１０，０２４号；第５，１３８，０３６号；第５，０７６，９７３号；第４，９８６，９８８号；第４，９７８，７４４号；第４，８７９，２７８号；第４，８１６，４４４号；及び第４，４８６，４１４号において記載され、これらのそれぞれを参照により本明細書に組み込む。
一実施形態では、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６は、少なくとも１つのＭＭＡＥ（モノメチルオーリスタチンＥ）にコンジュゲートされる。モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ、ベドチン）は、チューブリンの重合作用をブロックすることにより、細胞分裂を阻害する。しかしながら、その超毒性に起因して、オーリスタチンＥは、薬物自体として使用することはできない。オーリスタチンＥは、がん細胞において特定のマーカー発現を認識するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）に連結させることができ、ＭＭＡＥをがん細胞に指向させる。一実施形態において、ＭＭＡＥを抗Ｂ７−Ｈ３抗体に連結するリンカーは、細胞外液（すなわち、細胞に対して外側である培地又は環境）において安定であるが、ＡＤＣが、特定のがん細胞抗原に結合し、がん細胞に侵入すると、カテプシンにより切断され、これにより、毒性ＭＭＡＥが放出され、強力な抗有糸分裂機序が活性化される。
一実施形態において、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６は、少なくとも１つのＭＭＡＦ（モノメチルオーリスタチンＦ）にコンジュゲートされる。モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）は、チューブリンの重合作用をブロックすることにより、細胞分裂を阻害する。これは、その荷電していない対応物ＭＭＡＥと比較して、その細胞傷害性活性を減弱する、荷電したＣ末端のフェニルアラニン残基を有する。しかしながら、その超毒性に起因して、オーリスタチンＦは、薬物自体として使用することはできないが、これをがん細胞に指向させるモノクローナル抗体（ｍＡｂ）に連結することができる。一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体に対するリンカーは、細胞外液において安定であるが、コンジュゲートが腫瘍細胞に侵入すると、カテプシンにより切断され、これにより、抗有糸分裂機序が活性化される。
ＭＭＡＦ及びＭＭＡＥの構造が、以下で提供される。
ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６−ｖｃＭＭＡＥの例をまた図３に示す。特に、図３は、抗体（例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６）が１つの薬物と結合しており、したがって、１のＤＡＲを有する場合を記載している。ある特定の実施形態では、ＡＤＣは、２〜８のＤＡＲ又は２〜４のＤＡＲを有する。
コンジュゲーション用の他の薬物
ＡＤＣにおいて使用され得る薬物の例、すなわち、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体にコンジュゲートされ得る薬物が、以下で提供され、有糸分裂阻害剤、抗腫瘍抗生物質、免疫調節剤、遺伝子治療ベクター、アルキル化剤、抗血管新生剤、代謝拮抗物質、ホウ素含有剤、化学保護剤、ホルモン剤、グルココルチコイド、光活性治療剤、オリゴヌクレオチド、放射性同位元素、放射線増感剤、トポイソメラーゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤及びこれらの組合せを含む。
ＡＤＣにおいて使用され得る薬物の例、すなわち、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体にコンジュゲートされ得る薬物が、以下で提供され、有糸分裂阻害剤、抗腫瘍抗生物質、免疫調節剤、遺伝子治療ベクター、アルキル化剤、抗血管新生剤、代謝拮抗物質、ホウ素含有剤、化学保護剤、ホルモン剤、グルココルチコイド、光活性治療剤、オリゴヌクレオチド、放射性同位元素、放射線増感剤、トポイソメラーゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤及びこれらの組合せを含む。
１．有糸分裂阻害剤
一態様において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲートされて、がんの処置のためのＡＤＣを形成してもよい。本明細書において使用される用語「有糸分裂阻害剤」は、有糸分裂又は細胞分裂、がん細胞に特に重要な生物学的プロセスをブロックする細胞傷害性及び／又は治療用薬剤を指す。有糸分裂阻害剤は、細胞分裂が、しばしば微小管重合作用（例えば微小管重合作用を阻害すること）、又は微小管脱重合作用（例えば脱重合作用に対して微小管細胞骨格を安定化させること）をもたらすことにより、防止されるように、微小管を破壊する。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、チューブリン重合作用を阻害することにより、微小管形成を破壊する１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲートされる。別の実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、脱重合作用から微小管細胞骨格を安定化する１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲートされる。一実施形態において、本発明のＡＤＣにおいて使用される有糸分裂阻害剤は、Ｉｘｅｍｐｒａ（イクサベピロン）である。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得る有糸分裂阻害剤の例が、以下で提供される。上で記載されたオーリスタチンは、有糸分裂阻害剤の属に含まれる。
一態様において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲートされて、がんの処置のためのＡＤＣを形成してもよい。本明細書において使用される用語「有糸分裂阻害剤」は、有糸分裂又は細胞分裂、がん細胞に特に重要な生物学的プロセスをブロックする細胞傷害性及び／又は治療用薬剤を指す。有糸分裂阻害剤は、細胞分裂が、しばしば微小管重合作用（例えば微小管重合作用を阻害すること）、又は微小管脱重合作用（例えば脱重合作用に対して微小管細胞骨格を安定化させること）をもたらすことにより、防止されるように、微小管を破壊する。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、チューブリン重合作用を阻害することにより、微小管形成を破壊する１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲートされる。別の実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、脱重合作用から微小管細胞骨格を安定化する１つ以上の有糸分裂阻害剤にコンジュゲートされる。一実施形態において、本発明のＡＤＣにおいて使用される有糸分裂阻害剤は、Ｉｘｅｍｐｒａ（イクサベピロン）である。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得る有糸分裂阻害剤の例が、以下で提供される。上で記載されたオーリスタチンは、有糸分裂阻害剤の属に含まれる。
ａ．ドラスタチン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのドラスタチンにコンジュゲートされて、ＡＤＣを形成してもよい。ドラスタチンは、インド洋アメフラシ科ドラベッラアウリクラリア（Ｄｏｌａｂｅｌｌａ ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ）から単離された短いペプチド性化合物である（Ｐｅｔｔｉｔら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９７６年、９８、４６７７頁を参照）。ドラスタチンの例は、ドラスタチン１０及びドラスタチン１５を含む。ドラスタチン１５、７つのサブユニットデプシペプチドは、ドラベッラアウリクラリアに由来し、同じ生物から得られた５つのサブユニットペプチドである、抗チューブリン剤ドラスタチン１０に構造上関連する、強力な有糸分裂阻害剤である。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び少なくとも１つのドラスタチンを含む。上で記載されたオーリスタチンは、ドラスタチン１０の合成誘導体である。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのドラスタチンにコンジュゲートされて、ＡＤＣを形成してもよい。ドラスタチンは、インド洋アメフラシ科ドラベッラアウリクラリア（Ｄｏｌａｂｅｌｌａ ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ）から単離された短いペプチド性化合物である（Ｐｅｔｔｉｔら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、１９７６年、９８、４６７７頁を参照）。ドラスタチンの例は、ドラスタチン１０及びドラスタチン１５を含む。ドラスタチン１５、７つのサブユニットデプシペプチドは、ドラベッラアウリクラリアに由来し、同じ生物から得られた５つのサブユニットペプチドである、抗チューブリン剤ドラスタチン１０に構造上関連する、強力な有糸分裂阻害剤である。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び少なくとも１つのドラスタチンを含む。上で記載されたオーリスタチンは、ドラスタチン１０の合成誘導体である。
ｂ．メイタンシノイド
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのメイタンシノイドにコンジュゲートされて、ＡＤＣを形成してもよい。メイタンシノイドは、高等植物ファミリーセラストラセアエ（Ｃｅｌａｓｔｒａｃｅａｅ）科、ラムナセアエ（Ｒｈａｍｎａｃｅａｅ）科及びユーフォルビアセアエ（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ）科のメンバー、並びにコケの一部の種から元々単離された強力な抗腫瘍剤である（Ｋｕｐｃｈａｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、９４：１３５４〜１３５６頁［１９７２年］；Ｗａｎｉら、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．、３９０頁：［１９７３年］；Ｐｏｗｅｌｌら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．、４６：６６０〜６６６頁［１９８３年］；Ｓａｋａｉら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．、５１：８４５〜８５０頁［１９８８年］；及びＳｕｗａｎｂｏｒｉｒｕｘら、Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ、４６：１１７〜１２０頁［１９９０年］）。証拠は、メイタンシノイドが、微小管タンパク質チューブリンの重合作用を阻害し、これにより、微小管の形成を防止することにより、有糸分裂を阻害することを示唆している（例えば、米国特許第６，４４１，１６３号及びＲｅｍｉｌｌａｒｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１８９、１００２〜１００５頁（１９７５年）を参照）。メイタンシノイドは、細胞培養モデルを使用してインビトロで、及び実験動物システムを使用してインビボで、腫瘍細胞成長を阻害することが示された。さらに、メイタンシノイドの細胞傷害性は、例えばメトトレキサート、ダウノルビシン及びビンクリスチンのような従来の化学療法剤より１，０００倍大きい（例えば米国特許第５，２０８，０２０号を参照）。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのメイタンシノイドにコンジュゲートされて、ＡＤＣを形成してもよい。メイタンシノイドは、高等植物ファミリーセラストラセアエ（Ｃｅｌａｓｔｒａｃｅａｅ）科、ラムナセアエ（Ｒｈａｍｎａｃｅａｅ）科及びユーフォルビアセアエ（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ）科のメンバー、並びにコケの一部の種から元々単離された強力な抗腫瘍剤である（Ｋｕｐｃｈａｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、９４：１３５４〜１３５６頁［１９７２年］；Ｗａｎｉら、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．、３９０頁：［１９７３年］；Ｐｏｗｅｌｌら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．、４６：６６０〜６６６頁［１９８３年］；Ｓａｋａｉら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．、５１：８４５〜８５０頁［１９８８年］；及びＳｕｗａｎｂｏｒｉｒｕｘら、Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ、４６：１１７〜１２０頁［１９９０年］）。証拠は、メイタンシノイドが、微小管タンパク質チューブリンの重合作用を阻害し、これにより、微小管の形成を防止することにより、有糸分裂を阻害することを示唆している（例えば、米国特許第６，４４１，１６３号及びＲｅｍｉｌｌａｒｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１８９、１００２〜１００５頁（１９７５年）を参照）。メイタンシノイドは、細胞培養モデルを使用してインビトロで、及び実験動物システムを使用してインビボで、腫瘍細胞成長を阻害することが示された。さらに、メイタンシノイドの細胞傷害性は、例えばメトトレキサート、ダウノルビシン及びビンクリスチンのような従来の化学療法剤より１，０００倍大きい（例えば米国特許第５，２０８，０２０号を参照）。
メイタンシノイドは、メイタンシン、メイタンシノール、メイタンシノールのＣ−３エステル並びに他のメイタンシノール類似体及び誘導体を含む（例えば米国特許第５，２０８，０２０号及び第６，４４１，１６３号を参照し、これらのそれぞれを参照により本明細書に組み込む）。メイタンシノールのＣ−３エステルは、天然に存在し得る又は合成的に誘導され得る。さらに、天然に存在するＣ−３メイタンシノールエステルと合成Ｃ−３メイタンシノールエステルの両方が、単純なカルボン酸を有するＣ−３エステル又はＮ−メチル−Ｌ−アラニンの誘導体を有するＣ−３エステルとして分類することができ、後者は前者より細胞傷害性である。合成メイタンシノイド類似体は、例えばＫｕｐｃｈａｎら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２１、３１〜３７頁（１９７８年）において記載される。
本発明のＡＤＣにおける使用に適当なメイタンシノイドは、天然の供給源から単離され、合成的に生産され得る又は半合成的に生産され得る。さらに、メイタンシノイドは、十分な細胞傷害性が、最終コンジュゲート分子において保存される限り、任意の適当な方法で修飾することができる。この関連で、メイタンシノイドは、抗体が連結され得る適当な官能基を欠く。連結部分を、望ましくは、利用して、メイタンシノイドを抗体に連結させて、コンジュゲートを形成し、結合部分は、以下のリンカーのセクションにおいてより詳細に記載される。典型的なメイタンシノイド、メルタンシン（ＤＭ１）の構造が、以下で提供される。
メイタンシノイドの代表的な例は、ＤＭ１（Ｎ２’−デアセチル−Ｎ２’−（３−メルカプト−１−オキソプロピル）−メイタンシン；メルタンシンとも称される、薬物メイタンシノイド１；ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ，Ｉｎｃ．；Ｃｈａｒｉら（１９９２年）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、５２：１２７頁も参照）、ＤＭ２、ＤＭ３（Ｎ２’−デアセチル−Ｎ２’−（４−メルカプト−１−オキソペンチル）−メイタンシン）、ＤＭ４（４−メチル−４−メルカプト−１−オキソペンチル）−メイタンシン）及びメイタンシノール（合成メイタンシノイド類似体）を含むが、これらに限定されない。メイタンシノイドの他の例は、参照により本明細書に組み込む米国特許第８，１４２，７８４号において記載されている。
アンサマイトシンは、様々な細菌供給源から単離されたメイタンシノイド抗生物質の群である。これらの化合物は、強力な抗腫瘍活性を有する。代表的な例は、アンサマイトシンＰ１、アンサマイトシンＰ２、アンサマイトシンＰ３及びアンサマイトシンＰ４を含むが、これらに限定されない。
本発明の一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのＤＭ１にコンジュゲートされる。一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのＤＭ２にコンジュゲートされる。一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのＤＭ３にコンジュゲートされる。一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのＤＭ４にコンジュゲートされる。
ｄ．植物アルカロイド
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの植物アルカロイド、例えばタキサン又はビンカアルカロイドにコンジュゲートされてもよい。植物アルカロイドは、ある種の種類の植物から作られた化学療法処置である。ビンカアルカロイドは、ツルニチニチソウ植物（カタランツス・ロセウス（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅａ）から作られ、一方タキサンは、太平洋イチイ木（タクスス属（ｔａｘｕｓ））の皮から作られる。ビンカアルカロイドとタキサンの両方が、微小管阻害剤として公知であり、以下でより詳細に記載される。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの植物アルカロイド、例えばタキサン又はビンカアルカロイドにコンジュゲートされてもよい。植物アルカロイドは、ある種の種類の植物から作られた化学療法処置である。ビンカアルカロイドは、ツルニチニチソウ植物（カタランツス・ロセウス（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅａ）から作られ、一方タキサンは、太平洋イチイ木（タクスス属（ｔａｘｕｓ））の皮から作られる。ビンカアルカロイドとタキサンの両方が、微小管阻害剤として公知であり、以下でより詳細に記載される。
タキサン
本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのタキサンにコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される、用語「タキサン」は、微小管作用の機序を有し、タキサン環構造及び細胞増殖抑制性活性に必要とされる立体特異的側鎖を含む構造を有する抗新生物剤のクラスを指す。用語「タキサン」内に、親水性誘導体と疎水性誘導体の両方を含む様々な公知の誘導体も含まれる。タキサン誘導体は、国際特許出願第ＷＯ９９／１８１１３号において記載されるガラクトース及びマンノース誘導体；ＷＯ９９／１４２０９において記載されるピペラジノ及び他の誘導体；ＷＯ９９／０９０２１、ＷＯ９８／２２４５１及び米国特許第５，８６９，６８０号において記載されるタキサン誘導体；ＷＯ９８／２８２８８において記載される６−チオ誘導体；米国特許第５，８２１，２６３号において記載されるスルフェンアミド誘導体；並びに米国特許第５，４１５，８６９号において記載されるタキソール誘導体を含むが、これらに限定されず、これらのそれぞれを参照により本明細書に組み込む。タキサン化合物はまた、米国特許第５，６４１，８０３号、第５，６６５，６７１号、第５，３８０，７５１号、第５，７２８，６８７号、第５，４１５，８６９号、第５，４０７，６８３号、第５，３９９，３６３号、第５，４２４，０７３号、第５，１５７，０４９号、第５，７７３，４６４号、第５，８２１，２６３号、第５，８４０，９２９号、第４，８１４，４７０号、第５，４３８，０７２号、第５，４０３，８５８号、第４，９６０，７９０号、第５，４３３，３６４号、第４，９４２，１８４号、第５，３６２，８３１号、第５，７０５，５０３号及び第５，２７８，３２４号において既に記載されており、これらの全てを参照により明白に組み込む。タキサンのさらなる例は、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ；Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ）、パクリタキセル（Ａｂｒａｘａｎｅ又はＴａｘｏｌ；Ａｂｒａｘｉｓ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）、カルバジタキセル、テセタキセル、オパキソ、ラロタキセル、タクサオプレキシン、ＢＭＳ−１８４４７６、紅豆杉Ａ、紅豆杉Ｂ、及び紅豆杉Ｃ、並びにナノ粒子パクリタキセル（ＡＢＩ−００７／Ａｂｒａｘｅｎｅ；Ａｂｒａｘｉｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を含むが、これらに限定されない。
本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのタキサンにコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される、用語「タキサン」は、微小管作用の機序を有し、タキサン環構造及び細胞増殖抑制性活性に必要とされる立体特異的側鎖を含む構造を有する抗新生物剤のクラスを指す。用語「タキサン」内に、親水性誘導体と疎水性誘導体の両方を含む様々な公知の誘導体も含まれる。タキサン誘導体は、国際特許出願第ＷＯ９９／１８１１３号において記載されるガラクトース及びマンノース誘導体；ＷＯ９９／１４２０９において記載されるピペラジノ及び他の誘導体；ＷＯ９９／０９０２１、ＷＯ９８／２２４５１及び米国特許第５，８６９，６８０号において記載されるタキサン誘導体；ＷＯ９８／２８２８８において記載される６−チオ誘導体；米国特許第５，８２１，２６３号において記載されるスルフェンアミド誘導体；並びに米国特許第５，４１５，８６９号において記載されるタキソール誘導体を含むが、これらに限定されず、これらのそれぞれを参照により本明細書に組み込む。タキサン化合物はまた、米国特許第５，６４１，８０３号、第５，６６５，６７１号、第５，３８０，７５１号、第５，７２８，６８７号、第５，４１５，８６９号、第５，４０７，６８３号、第５，３９９，３６３号、第５，４２４，０７３号、第５，１５７，０４９号、第５，７７３，４６４号、第５，８２１，２６３号、第５，８４０，９２９号、第４，８１４，４７０号、第５，４３８，０７２号、第５，４０３，８５８号、第４，９６０，７９０号、第５，４３３，３６４号、第４，９４２，１８４号、第５，３６２，８３１号、第５，７０５，５０３号及び第５，２７８，３２４号において既に記載されており、これらの全てを参照により明白に組み込む。タキサンのさらなる例は、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ；Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ）、パクリタキセル（Ａｂｒａｘａｎｅ又はＴａｘｏｌ；Ａｂｒａｘｉｓ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ）、カルバジタキセル、テセタキセル、オパキソ、ラロタキセル、タクサオプレキシン、ＢＭＳ−１８４４７６、紅豆杉Ａ、紅豆杉Ｂ、及び紅豆杉Ｃ、並びにナノ粒子パクリタキセル（ＡＢＩ−００７／Ａｂｒａｘｅｎｅ；Ａｂｒａｘｉｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を含むが、これらに限定されない。
一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのドセタキセル分子にコンジュゲートされる。一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのパクリタキセル分子にコンジュゲートされる。
ビンカアルカロイド
一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのビンカアルカロイドにコンジュゲートされる。ビンカアルカロイドは、チューブリンに作用し、微小管の形成を防止することにより、がん細胞の分裂する能力を阻害することにより働く細胞周期特異的薬物のクラスである。本発明のＡＤＣにおいて使用され得るビンカアルカロイドの例は、硫酸ビンデシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン及びビノレルビンを含むが、これらに限定されない。
一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのビンカアルカロイドにコンジュゲートされる。ビンカアルカロイドは、チューブリンに作用し、微小管の形成を防止することにより、がん細胞の分裂する能力を阻害することにより働く細胞周期特異的薬物のクラスである。本発明のＡＤＣにおいて使用され得るビンカアルカロイドの例は、硫酸ビンデシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン及びビノレルビンを含むが、これらに限定されない。
２．抗腫瘍抗生物質
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、がんの処置のための１つ以上の抗腫瘍抗生物質にコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される場合、用語「抗腫瘍抗生物質」は、ＤＮＡに干渉することにより細胞成長をブロックし、微生物から作られる抗新生物薬を意味する。しばしば、抗腫瘍抗生物質は、ＤＮＡ鎖を壊し、又はＤＮＡ合成をゆっくりにし、若しくは停止する、のいずれかである。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣに含まれ得る抗腫瘍抗生物質の例は、アクチノマイシン（例えばピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン）、アントラサイクリン、カリチアマイシン及びズオカルマイシンを含むが、これらに限定されず、以下でより詳細に記載される。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、がんの処置のための１つ以上の抗腫瘍抗生物質にコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される場合、用語「抗腫瘍抗生物質」は、ＤＮＡに干渉することにより細胞成長をブロックし、微生物から作られる抗新生物薬を意味する。しばしば、抗腫瘍抗生物質は、ＤＮＡ鎖を壊し、又はＤＮＡ合成をゆっくりにし、若しくは停止する、のいずれかである。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣに含まれ得る抗腫瘍抗生物質の例は、アクチノマイシン（例えばピロロ［２，１−ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン）、アントラサイクリン、カリチアマイシン及びズオカルマイシンを含むが、これらに限定されず、以下でより詳細に記載される。
ａ．アクチノマイシン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアクチノマイシンにコンジュゲートされてもよい。アクチノマイシンは、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである。アクチノマイシンの代表的な例は、アクチノマイシンＤ（Ｃｏｓｍｅｇｅｎ［アクチノマイシン、ダクチノマイシン、アクチノマイシンＩＶ、アクチノマイシンＣ１としても知られている］、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ，Ｉｎｃ．）、アントラマイシン、チカマイシンＡ、ＤＣ−８１、マゼトラマイシン、ネオトラマイシンＡ、ネオトラマイシンＢ、ポロトラマイシン、プロトラカルシンＢ、ＳＧ２２８５、シバノマイシン、シビロマイシン及びトマイマイシンを含むが、これらに限定されない。一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）にコンジュゲートされる。ＰＢＤの例は、アントラマイシン、チカマイシンＡ、ＤＣ−８１、マゼトラマイシン、ネオトラマイシンＡ、ネオトラマイシンＢ、ポロトラマイシン、プロトラカルシンＢ、ＳＧ２０００（ＳＪＧ−１３６）、ＳＧ２２０２（ＺＣ−２０７）、ＳＧ２２８５（ＺＣ−４２３）、シバノマイシン、シビロマイシン及びトマイマイシンを含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアクチノマイシン、例えばアクチノマイシンＤ、又は少なくとも１つのＰＢＤ、例えばピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）ダイマーにコンジュゲートされる。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアクチノマイシンにコンジュゲートされてもよい。アクチノマイシンは、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである。アクチノマイシンの代表的な例は、アクチノマイシンＤ（Ｃｏｓｍｅｇｅｎ［アクチノマイシン、ダクチノマイシン、アクチノマイシンＩＶ、アクチノマイシンＣ１としても知られている］、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ，Ｉｎｃ．）、アントラマイシン、チカマイシンＡ、ＤＣ−８１、マゼトラマイシン、ネオトラマイシンＡ、ネオトラマイシンＢ、ポロトラマイシン、プロトラカルシンＢ、ＳＧ２２８５、シバノマイシン、シビロマイシン及びトマイマイシンを含むが、これらに限定されない。一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）にコンジュゲートされる。ＰＢＤの例は、アントラマイシン、チカマイシンＡ、ＤＣ−８１、マゼトラマイシン、ネオトラマイシンＡ、ネオトラマイシンＢ、ポロトラマイシン、プロトラカルシンＢ、ＳＧ２０００（ＳＪＧ−１３６）、ＳＧ２２０２（ＺＣ−２０７）、ＳＧ２２８５（ＺＣ−４２３）、シバノマイシン、シビロマイシン及びトマイマイシンを含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアクチノマイシン、例えばアクチノマイシンＤ、又は少なくとも１つのＰＢＤ、例えばピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）ダイマーにコンジュゲートされる。
ＰＢＤの構造は、例えば米国特許出願公開第２０１３／００２８９１７号及び第２０１３／００２８９１９号並びにＷＯ２０１１／１３０５９８Ａ１において見出すことができ、これらのそれぞれを、それらの全体として、参照により本明細書に組み込む。ＰＢＤの一般的な構造が、以下で提供される。
以下の式ＸＸＸ：
Ｒ３０は、式ＸＸＸＩ：
（ｉ）Ｑ１は、単結合であり、Ｑ２は、単結合及び−Ｚ−（ＣＨ２）ｎ−（式中、Ｚは、単結合、Ｏ、Ｓ及びＮＨからなる群から選択され、ｎは、１〜３である。）からなる群から選択され、又は
（ｉｉ）Ｑ１は−ＣＨ＝ＣＨ−であり、Ｑ２は単結合である、のいずれかである。）であり、
Ｒ１３０は、ハロ、ニトロ、シアノ、Ｃ１〜１２アルコキシ、Ｃ３〜２０ヘテロシクロアルコキシ、Ｃ５〜２０アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アルキルアルコキシ、アリールアルコキシ、アルキルアリールオキシ、ヘテロアリールアルコキシ、アルキルヘテロアリールオキシ、Ｃ１〜７アルキル、Ｃ３〜７ヘテロシクリル及びビス−オキシ−Ｃ１〜３アルキレンからなる群から選択される１つ以上の置換基により置換されていてもよいＣ５〜１０アリール基であり、
Ｒ３１及びＲ３３は、Ｈ、Ｒｘ、ＯＨ、ＯＲｘ、ＳＨ、ＳＲｘ、ＮＨ２、ＮＨＲｘ、ＮＲｘＲｘｘ’、ニトロ、Ｍｅ３Ｓｎ及びハロからなる群から独立して選択され、
Ｒ及びＲ’は、置換されていてもよいＣ１〜１２アルキル、Ｃ３〜２０ヘテロシクリル及びＣ５〜２０アリール基からなる群から独立して選択され、
Ｒ３２は、Ｈ、Ｒｘ、ＯＨ、ＯＲｘ、ＳＨ、ＳＲｘ、ＮＨ２、ＮＨＲｘ、ＮＨＲｘＲｘｘ、ニトロ、Ｍｅ３Ｓｎ及びハロからなる群から選択され、
（ａ）Ｒ３４は、Ｈであり、Ｒ１１は、ＯＨ、ＯＲｘＡ（式中、ＲｘＡは、Ｃ１〜４アルキルである。）であり、
（ｂ）Ｒ３４及びＲ３５は、これらが結合している窒素と炭素原子の間で窒素−炭素二重結合を形成し、又は
（ｃ）Ｒ３４は、Ｈであり、Ｒ３５は、ＳＯｚＭ（式中、ｚは、２又は３である。）である、のいずれかであり、
Ｒｘｘｘは、Ｃ３〜１２アルキレン基であり、この鎖は、Ｏ、Ｓ、ＮＨ及び芳香環からなる群から選択される１つ以上のヘテロ原子により妨害されてもよく、
Ｙｘ及びＹｘ’は、Ｏ、Ｓ及びＮＨからなる群から選択され、
Ｒ３１’、Ｒ３２’、Ｒ３３’は、それぞれ、Ｒ３１、Ｒ３２及びＲ３３と同じ基から選択され、Ｒ３４’及びＲ３５’は、Ｒ３４及びＲ３５と同じであり、各Ｍは、一価の薬学的に許容されるカチオンであり、又は両方のＭ基が一緒に、二価の薬学的に許容されるカチオンである。）
を有する代表的なＰＢＤダイマーは、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体にコンジュゲートされてもよい。
Ｃ１〜１２アルキル：本明細書において使用される、用語「Ｃ１〜１２アルキル」は、水素原子を、１〜１２個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から取り除くことにより得られる一価の部分に関し、これは、脂肪族又は脂環式であってもよく、飽和又は不飽和（例えば部分的に不飽和、完全に不飽和）であってもよい。したがって、用語「アルキル」は、以下で論じられる、サブクラスのアルケニル、アルキニル、シクロアルキルなどを含む。
飽和アルキル基の例は、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、プロピル（Ｃ３）、ブチル（Ｃ４）、ペンチル（Ｃ５）、ヘキシル（Ｃ６）及びヘプチル（Ｃ７）を含むが、これらに限定されない。
飽和直鎖アルキル基の例は、メチル（Ｃ１）、エチル（Ｃ２）、ｎ−プロピル（Ｃ３）、ｎ−ブチル（Ｃ４）、ｎ−ペンチル（アミル）（Ｃ５）、ｎ−ヘキシル（Ｃ６）及びｎ−ヘプチル（Ｃ７）を含むが、これらに限定されない。
飽和分岐アルキル基の例は、イソ−プロピル（Ｃ３）、イソ−ブチル（Ｃ４）、ｓｅｃ−ブチル（Ｃ４）、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｃ４）、イソ−ペンチル（Ｃ５）及びネオ−ペンチル（Ｃ５）を含む。
Ｃ３〜２０ヘテロシクリル：本明細書において使用される、用語「Ｃ３〜２０ヘテロシクリル」は、水素原子をヘテロ環状化合物の環原子から取り除くことにより得られる一価の部分に関し、この部分は、３〜２０個の環原子を有し、このうち１〜１０個が、環ヘテロ原子である。好ましくは、各環は、３〜７個の環原子を有し、このうち１〜４個が、環ヘテロ原子である。
この文脈において、接頭語（例えばＣ３〜２０、Ｃ３〜７、Ｃ５〜６など）は、炭素原子であれヘテロ原子であれ、環原子の数又は環原子の数の範囲を表示する。例えば本明細書において使用される、用語「Ｃ５〜６ヘテロシクリル」は、５又は６個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。
単環式ヘテロシクリル基の例は：
Ｎ１：アジリジン（Ｃ３）、アゼチジン（Ｃ４）、ピロリジン（テトラヒドロピロール）（Ｃ５）、ピロリン（例えば３−ピロリン、２，５−ジヒドロピロール）（Ｃ５）、２Ｈ−ピロール又は３Ｈ−ピロール（イソピロール、イソアゾール）（Ｃ５）、ピペリジン（Ｃ６）、ジヒドロピリジン（Ｃ６）、テトラヒドロピリジン（Ｃ６）、アゼピン（Ｃ７）；Ｏ１：オキシラン（Ｃ３）、オキセタン（Ｃ４）、オキソラン（テトラヒドロフラン）（Ｃ５）、オキソール（ジヒドロフラン）（Ｃ５）、オキサン（テトラヒドロピラン）（Ｃ６）、ジヒドロピラン（Ｃ６）、ピラン（Ｃ６）、オキセピン（Ｃ７）；Ｓ１：チイラン（Ｃ３）、チエタン（Ｃ４）、チオラン（テトラヒドロチオフェン）（Ｃ５）、チアン（テトラヒドロチオピラン）（Ｃ６）、チエパン（Ｃ７）；Ｏ２：ジオキソラン（Ｃ５）、ジオキサン（Ｃ６）及びジオキセパン（Ｃ７）；Ｏ３：トリオキサン（Ｃ６）；Ｎ２：イミダゾリジン（Ｃ５）、ピラゾリジン（ジアゾリジン）（Ｃ５）、イミダゾリン（Ｃ５）、ピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（Ｃ５）、ピペラジン（Ｃ６）；Ｎ１Ｏ１：テトラヒドロオキサゾール（Ｃ５）、ジヒドロオキサゾール（Ｃ５）、テトラヒドロイソオキサゾール（Ｃ５）、ジヒドロイソオキサゾール（Ｃ５）、モルホリン（Ｃ６）、テトラヒドロオキサジン（Ｃ６）、ジヒドロオキサジン（Ｃ６）、オキサジン（Ｃ６）；Ｎ１Ｓ１：チアゾリン（Ｃ５）、チアゾリジン（Ｃ５）、チオモルホリン（Ｃ６）；Ｎ２Ｏ１：オキサジアジン（Ｃ６）；Ｏ１Ｓ１：オキサチオール（Ｃ５）及びオキサチアン（チオキサン）（Ｃ６）；並びにＮ１Ｏ１Ｓ１：オキサチアジン（Ｃ６）から誘導されるものを含むが、これらに限定されない。
Ｎ１：アジリジン（Ｃ３）、アゼチジン（Ｃ４）、ピロリジン（テトラヒドロピロール）（Ｃ５）、ピロリン（例えば３−ピロリン、２，５−ジヒドロピロール）（Ｃ５）、２Ｈ−ピロール又は３Ｈ−ピロール（イソピロール、イソアゾール）（Ｃ５）、ピペリジン（Ｃ６）、ジヒドロピリジン（Ｃ６）、テトラヒドロピリジン（Ｃ６）、アゼピン（Ｃ７）；Ｏ１：オキシラン（Ｃ３）、オキセタン（Ｃ４）、オキソラン（テトラヒドロフラン）（Ｃ５）、オキソール（ジヒドロフラン）（Ｃ５）、オキサン（テトラヒドロピラン）（Ｃ６）、ジヒドロピラン（Ｃ６）、ピラン（Ｃ６）、オキセピン（Ｃ７）；Ｓ１：チイラン（Ｃ３）、チエタン（Ｃ４）、チオラン（テトラヒドロチオフェン）（Ｃ５）、チアン（テトラヒドロチオピラン）（Ｃ６）、チエパン（Ｃ７）；Ｏ２：ジオキソラン（Ｃ５）、ジオキサン（Ｃ６）及びジオキセパン（Ｃ７）；Ｏ３：トリオキサン（Ｃ６）；Ｎ２：イミダゾリジン（Ｃ５）、ピラゾリジン（ジアゾリジン）（Ｃ５）、イミダゾリン（Ｃ５）、ピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（Ｃ５）、ピペラジン（Ｃ６）；Ｎ１Ｏ１：テトラヒドロオキサゾール（Ｃ５）、ジヒドロオキサゾール（Ｃ５）、テトラヒドロイソオキサゾール（Ｃ５）、ジヒドロイソオキサゾール（Ｃ５）、モルホリン（Ｃ６）、テトラヒドロオキサジン（Ｃ６）、ジヒドロオキサジン（Ｃ６）、オキサジン（Ｃ６）；Ｎ１Ｓ１：チアゾリン（Ｃ５）、チアゾリジン（Ｃ５）、チオモルホリン（Ｃ６）；Ｎ２Ｏ１：オキサジアジン（Ｃ６）；Ｏ１Ｓ１：オキサチオール（Ｃ５）及びオキサチアン（チオキサン）（Ｃ６）；並びにＮ１Ｏ１Ｓ１：オキサチアジン（Ｃ６）から誘導されるものを含むが、これらに限定されない。
置換された単環式ヘテロシクリル基の例は、環状形態の糖類、例えば、アラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノース及びキシロフラノースのような、フラノース（Ｃ５）、並びにアロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノース及びタロピラノースのようなピラノース（Ｃ６）から誘導されるものを含む。
Ｃ５〜２０アリール：本明細書において使用される、用語「Ｃ５〜２０アリール」は、水素原子を芳香族化合物の芳香環原子から取り除くことにより得られる一価の部分に関し、この部分は、３〜２０個の環原子を有する。好ましくは、各環は、５〜７個の環原子を有する。
この文脈において、接頭語（例えばＣ３〜２０、Ｃ５〜７、Ｃ５〜６など）は、炭素原子であれヘテロ原子であれ、環原子の数又は環原子の数の範囲を表示する。例えば、本明細書において使用される、用語「Ｃ５〜６アリール」は、５又は６個の環原子を有するアリール基に関する。
一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、以下の式ＸＸＸＩａ：
別の実施形態において、図４において描かれる通り、ＰＢＤダイマー、ＳＧＤ−１８８２は、薬物リンカーを介して本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体にコンジュゲートされる。ＳＧＤ−１８８２は、Ｓｕｔｈｅｒｌａｎｄら（２０１３年）Ｂｌｏｏｄ、１２２（８）：１４５５頁及び米国特許出願公開第２０１３／００２８９１９号において開示され、これをその全体として参照により本明細書に組み込む。図４において記載される通り、ＰＢＤダイマーＳＧＤ−１８８２は、ｍｃ−ｖａｌ−ａｌａ−ジペプチドリンカー（図４においてＳＧＤ−１９１０と総称される）を介して抗体にコンジュゲートされてもよい。ある特定の実施形態において、本明細書において開示される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、図４において記載されるＰＢＤダイマーにコンジュゲートされる。したがって、さらなる実施形態において、本発明は、本明細書において開示される抗Ｂ７−Ｈ３抗体を含み、図４において記載される通り、ｍｃ−ｖａｌ−ａｌａ−ジペプチドリンカーを介してＰＢＤダイマーにコンジュゲートされる。ある特定の実施形態において、本発明は、配列番号３５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、配列番号３４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを含む重鎖可変領域、並びに配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、配列番号３８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを含む軽鎖可変領域を含み、図４において記載されるＰＢＤダイマーを含むが、これに限定されないＰＢＤにコンジュゲートされる抗Ｂ７−Ｈ３抗体を含む。ある特定の実施形態において、本発明は、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを含む重鎖可変領域並びに配列番号１５のアミノ酸配列含むＣＤＲ３ドメイン、配列番号７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１３６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを含む軽鎖可変領域を含み、限定するものではないが、図４に記載のＰＢＤダイマーを含む、ＰＢＤにコンジュゲートされた、抗Ｂ７−Ｈ３抗体を含む。ある特定の実施形態において、本発明は、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３ドメイン、配列番号１４０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを含む重鎖可変領域並びに配列番号１５のアミノ酸を含む配列ＣＤＲ３ドメイン、配列番号７のアミノ酸を含む配列ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１３８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１ドメインを含む軽鎖可変領域を含み、限定するものではないが、図４に記載のＰＢＤダイマーを含む、ＰＢＤにコンジュゲートされた、抗Ｂ７−Ｈ３抗体を含む。ある特定の実施形態において、本発明は、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列により定義されるｈｕＡｂ１３ｖ１若しくは配列番号１３９に記載のアミノ酸配列により定義されるｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６の重鎖可変領域及びそれぞれｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６に対応する配列番号１４４、１３５又は１３７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、限定するものではないが、図４に記載のＰＢＤダイマーなどの、ＰＢＤにコンジュゲートされた、抗Ｂ７−Ｈ３抗体を含む。
ｂ．アントラサイクリン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアントラサイクリンにコンジュゲートされてもよい。アントラサイクリンは、ストレプトマイセス属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである。代表的な例は、ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、ドキソルビシン（アドリアマイシン、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ；ドキソルビシンヒドロクロライド、ヒドロキシダウノルビシン及びＲｕｂｅｘとも称される）、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ、Ｐｆｉｚｅｒ）、並びにイダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ；Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアントラサイクリン、例えばドキソルビシンにコンジュゲートされる。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアントラサイクリンにコンジュゲートされてもよい。アントラサイクリンは、ストレプトマイセス属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである。代表的な例は、ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、ドキソルビシン（アドリアマイシン、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ；ドキソルビシンヒドロクロライド、ヒドロキシダウノルビシン及びＲｕｂｅｘとも称される）、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ、Ｐｆｉｚｅｒ）、並びにイダルビシン（Ｉｄａｍｙｃｉｎ；Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアントラサイクリン、例えばドキソルビシンにコンジュゲートされる。
ｃ．カリチアマイシン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのカリチアマイシンにコンジュゲートされてもよい。カリチアマイシンは、土壌生物ミクロモノスポラ・エキノスポラ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａ）から誘導されるエンジイン抗生物質のファミリーである。カリチアマイシンは、ＤＮＡの小さな溝に結合し、２本鎖ＤＮＡ切断を誘導し、他の化学療法薬より１００倍増大して細胞死をもたらす（Ｄａｍｌｅら（２００３年）Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、３：３８６頁）。本発明において薬物コンジュゲートとして使用され得るカリチアマイシンの調製が記載されており、米国特許第５，７１２，３７４号；第５，７１４，５８６号；第５，７３９，１１６号；第５，７６７，２８５号；第５，７７０，７０１号；第５，７７０，７１０号；第５，７７３，００１号；及び第５，８７７，２９６号を参照。使用され得るカリチアマイシンの構造上の類似体は、γ１ Ｉ、α２ Ｉ、α３ Ｉ、Ｎ−アセチル−γ１ Ｉ、ＰＳＡＧ及びθＩ １（Ｈｉｎｍａｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５３：３３３６〜３３４２頁（１９９３年）、Ｌｏｄｅら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５８：２９２５〜２９２８頁（１９９８年）並びに前述の米国特許第５，７１２，３７４号；第５，７１４，５８６号；第５，７３９，１１６号；第５，７６７，２８５号；第５，７７０，７０１号；第５，７７０，７１０号；第５，７７３，００１号；及び第５，８７７，２９６号）を含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのカリチアマイシンにコンジュゲートされる。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのカリチアマイシンにコンジュゲートされてもよい。カリチアマイシンは、土壌生物ミクロモノスポラ・エキノスポラ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｅｃｈｉｎｏｓｐｏｒａ）から誘導されるエンジイン抗生物質のファミリーである。カリチアマイシンは、ＤＮＡの小さな溝に結合し、２本鎖ＤＮＡ切断を誘導し、他の化学療法薬より１００倍増大して細胞死をもたらす（Ｄａｍｌｅら（２００３年）Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、３：３８６頁）。本発明において薬物コンジュゲートとして使用され得るカリチアマイシンの調製が記載されており、米国特許第５，７１２，３７４号；第５，７１４，５８６号；第５，７３９，１１６号；第５，７６７，２８５号；第５，７７０，７０１号；第５，７７０，７１０号；第５，７７３，００１号；及び第５，８７７，２９６号を参照。使用され得るカリチアマイシンの構造上の類似体は、γ１ Ｉ、α２ Ｉ、α３ Ｉ、Ｎ−アセチル−γ１ Ｉ、ＰＳＡＧ及びθＩ １（Ｈｉｎｍａｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５３：３３３６〜３３４２頁（１９９３年）、Ｌｏｄｅら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５８：２９２５〜２９２８頁（１９９８年）並びに前述の米国特許第５，７１２，３７４号；第５，７１４，５８６号；第５，７３９，１１６号；第５，７６７，２８５号；第５，７７０，７０１号；第５，７７０，７１０号；第５，７７３，００１号；及び第５，８７７，２９６号）を含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのカリチアマイシンにコンジュゲートされる。
ｄ．ズオカルマイシン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのズオカルマイシンにコンジュゲートされてもよい。ズオカルマイシンは、ストレプトマイセス属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである（Ｎａｇａｍｕｒａ及びＳａｉｔｏ（１９９８年）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、３４巻、第１２号を参照）。ズオカルマイシンは、ＤＮＡの小さな溝に結合し、Ｎ３位置において核酸塩基アデニンをアルキル化する（Ｂｏｇｅｒ（１９９３年）Ｐｕｒｅ ａｎｄ Ａｐｐｌ Ｃｈｅｍ、６５（６）：１１２３頁；並びにＢｏｇｅｒ及びＪｏｈｎｓｏｎ（１９９５年）ＰＮＡＳ ＵＳＡ、９２：３６４２頁）。ズオカルマイシンの合成類似体は、アドゼレシン、ビゼレシン及びカルゼレシンを含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのズオカルマイシンにコンジュゲートされる。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのズオカルマイシンにコンジュゲートされてもよい。ズオカルマイシンは、ストレプトマイセス属の細菌から単離された抗腫瘍抗生物質のサブクラスである（Ｎａｇａｍｕｒａ及びＳａｉｔｏ（１９９８年）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ、３４巻、第１２号を参照）。ズオカルマイシンは、ＤＮＡの小さな溝に結合し、Ｎ３位置において核酸塩基アデニンをアルキル化する（Ｂｏｇｅｒ（１９９３年）Ｐｕｒｅ ａｎｄ Ａｐｐｌ Ｃｈｅｍ、６５（６）：１１２３頁；並びにＢｏｇｅｒ及びＪｏｈｎｓｏｎ（１９９５年）ＰＮＡＳ ＵＳＡ、９２：３６４２頁）。ズオカルマイシンの合成類似体は、アドゼレシン、ビゼレシン及びカルゼレシンを含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのズオカルマイシンにコンジュゲートされる。
ｅ．他の抗腫瘍抗生物質
前述のものに加えて、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得るさらなる抗腫瘍抗生物質は、ブレオマイシン（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、マイトマイシン及びプリカマイシン（ミスラマイシンとしても知られている）を含む。
前述のものに加えて、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得るさらなる抗腫瘍抗生物質は、ブレオマイシン（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、マイトマイシン及びプリカマイシン（ミスラマイシンとしても知られている）を含む。
３．免疫調節剤
一態様において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの免疫調節剤にコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される場合、用語「免疫調節剤」は、免疫応答を刺激し、又は修飾することができる薬剤を指す。一実施形態において、免疫調節剤は、対象の免疫応答を増強する免疫賦活剤である。別の実施形態において、免疫調節剤は、対象の免疫応答を防止する又は低減する免疫抑制剤である。免疫調節剤は、骨髄細胞（単球、マクロファージ、樹状細胞、巨核球及び顆粒球）又はリンパ球系細胞（Ｔ細胞、Ｂ細胞及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）、並びにその任意のさらに分化した細胞を調節してもよい。代表例には、バチルス・カルメットゲラン（ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｌｍｅｔｔｅ−ｇｕｅｒｉｎ）（ＢＣＧ）及びレバミゾール（エルガミソール）が含まれるが、これらに限定されない。本発明のＡＤＣにおいて使用され得る免疫調節剤の他の例は、がんワクチン、サイトカイン及び免疫調節性遺伝子治療を含むが、これらに限定されない。
一態様において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの免疫調節剤にコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される場合、用語「免疫調節剤」は、免疫応答を刺激し、又は修飾することができる薬剤を指す。一実施形態において、免疫調節剤は、対象の免疫応答を増強する免疫賦活剤である。別の実施形態において、免疫調節剤は、対象の免疫応答を防止する又は低減する免疫抑制剤である。免疫調節剤は、骨髄細胞（単球、マクロファージ、樹状細胞、巨核球及び顆粒球）又はリンパ球系細胞（Ｔ細胞、Ｂ細胞及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞）、並びにその任意のさらに分化した細胞を調節してもよい。代表例には、バチルス・カルメットゲラン（ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｌｍｅｔｔｅ−ｇｕｅｒｉｎ）（ＢＣＧ）及びレバミゾール（エルガミソール）が含まれるが、これらに限定されない。本発明のＡＤＣにおいて使用され得る免疫調節剤の他の例は、がんワクチン、サイトカイン及び免疫調節性遺伝子治療を含むが、これらに限定されない。
ａ．がんワクチン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、がんワクチンにコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される場合、用語「がんワクチン」は、腫瘍特異的免疫応答を誘発する組成物（例えば腫瘍抗原及びサイトカイン）を指す。応答は、がんワクチンを投与すること、又は本発明の場合では、抗Ｂ７−Ｈ３抗体及びがんワクチンを含むＡＤＣを投与することにより、対象自身の免疫系から誘発される。好ましい実施形態において、免疫応答は、身体において腫瘍細胞（例えば原発又は転移腫瘍細胞）の根絶をもたらす。がんワクチンの使用は、一般に、例えば、特定のがん細胞の表面上に存在する又はがん形成を促進することが示された特定の感染性病原体の表面上に存在する、特定の抗原又は抗原の群の投与を含む。一部の実施形態において、がんワクチンの使用は、予防目的のためであり、一方、他の実施形態において、使用は治療目的のためである。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得るがんワクチンの非限定的な例は、組換え二価のヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）ワクチンタイプ１６及び１８ワクチン（Ｃｅｒｖａｒｉｘ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、組換え四価のヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）タイプ６、１１、１６及び１８ワクチン（Ｇａｒｄａｓｉｌ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ）並びにシプロイセルＴ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ、Ｄｅｎｄｒｅｏｎ）を含む。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、免疫賦活剤である又は免疫抑制剤である少なくとも１つのがんワクチンにコンジュゲートされる。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、がんワクチンにコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される場合、用語「がんワクチン」は、腫瘍特異的免疫応答を誘発する組成物（例えば腫瘍抗原及びサイトカイン）を指す。応答は、がんワクチンを投与すること、又は本発明の場合では、抗Ｂ７−Ｈ３抗体及びがんワクチンを含むＡＤＣを投与することにより、対象自身の免疫系から誘発される。好ましい実施形態において、免疫応答は、身体において腫瘍細胞（例えば原発又は転移腫瘍細胞）の根絶をもたらす。がんワクチンの使用は、一般に、例えば、特定のがん細胞の表面上に存在する又はがん形成を促進することが示された特定の感染性病原体の表面上に存在する、特定の抗原又は抗原の群の投与を含む。一部の実施形態において、がんワクチンの使用は、予防目的のためであり、一方、他の実施形態において、使用は治療目的のためである。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得るがんワクチンの非限定的な例は、組換え二価のヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）ワクチンタイプ１６及び１８ワクチン（Ｃｅｒｖａｒｉｘ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、組換え四価のヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）タイプ６、１１、１６及び１８ワクチン（Ｇａｒｄａｓｉｌ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ）並びにシプロイセルＴ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ、Ｄｅｎｄｒｅｏｎ）を含む。したがって、一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、免疫賦活剤である又は免疫抑制剤である少なくとも１つのがんワクチンにコンジュゲートされる。
ｂ．サイトカイン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのサイトカインにコンジュゲートされてもよい。用語「サイトカイン」は、一般に、別の細胞に細胞間メディエーターとして作用する１つの細胞集団により放出されるタンパク質を指す。サイトカインは、腫瘍部位において免疫エフェクター細胞及びストロマ細胞を直接的に刺激し、細胞傷害性エフェクター細胞による腫瘍細胞認識を増強する（Ｌｅｅ及びＭａｒｇｏｌｉｎ（２０１１年）Ｃａｎｃｅｒｓ、３：３８５６頁）。多数の動物腫瘍モデル研究は、サイトカインが、広い抗腫瘍活性を有することを示し、これが、がん治療のためのいくつかのサイトカインベースのアプローチに転換されている（Ｌｅｅ及びＭａｒｇｏｌｉ、上記）。近年、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８及びＩＬ−２１を含む、いくつかのサイトカインが観察され、進行したがんを有する患者についての臨床試験に入った（Ｌｅｅ及びＭａｒｇｏｌｉ、上記）。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのサイトカインにコンジュゲートされてもよい。用語「サイトカイン」は、一般に、別の細胞に細胞間メディエーターとして作用する１つの細胞集団により放出されるタンパク質を指す。サイトカインは、腫瘍部位において免疫エフェクター細胞及びストロマ細胞を直接的に刺激し、細胞傷害性エフェクター細胞による腫瘍細胞認識を増強する（Ｌｅｅ及びＭａｒｇｏｌｉｎ（２０１１年）Ｃａｎｃｅｒｓ、３：３８５６頁）。多数の動物腫瘍モデル研究は、サイトカインが、広い抗腫瘍活性を有することを示し、これが、がん治療のためのいくつかのサイトカインベースのアプローチに転換されている（Ｌｅｅ及びＭａｒｇｏｌｉ、上記）。近年、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８及びＩＬ−２１を含む、いくつかのサイトカインが観察され、進行したがんを有する患者についての臨床試験に入った（Ｌｅｅ及びＭａｒｇｏｌｉ、上記）。
本発明のＡＤＣにおいて使用され得るサイトカインの例は、副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；レラキシン；プロレラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）及び黄体形成ホルモン（ＬＨ）のような糖タンパク質ホルモン；肝成長因子；線維芽細胞成長因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；腫瘍壊死因子；ミュラー管抑制因子；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦのような神経成長因子；血小板成長因子；トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子Ｉ及びＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子；インターフェロンα、β及びγ、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）のようなインターフェロン；顆粒球マクロファージ−Ｃ−ＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）；並びに顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）；ＩＬ−１、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２のようなインターロイキン（ＩＬ）；腫瘍壊死因子；並びにＬＩＦ及びｋｉｔリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子を含むが、これらに限定されない。本明細書において使用される場合、用語サイトカインは、天然供給源由来又は組換え細胞培養物由来のタンパク質、及び天然の配列サイトカインの生物学的に活性な均等物を含む。したがって、一実施形態において、本発明は、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体及びサイトカインを含むＡＤＣを提供する。
ｃ．コロニー刺激因子（ＣＳＦ）
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）にコンジュゲートされてもよい。コロニー刺激因子（ＣＳＦ）は、白血球を作るのに骨髄を助ける成長因子である。一部のがん処置（例えば化学療法）は、白血球（感染と闘うのを助ける）に影響を与えることができ、したがって、コロニー刺激因子を導入して、白血球レベルをサポートし、免疫系を強くするのを助けることができる。コロニー刺激因子をまた、骨髄移植の後に使用して、新たな骨髄が白血球を産生し始めるのを助け得る。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得るＣＳＦの代表的な例は、エリスロポエチン（Ｅｐｏｅｔｉｎ）、フィルグラスチム（Ｎｅｏｐｏｇｅｎ（顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）としても知られている；Ａｍｇｅｎ，Ｉｎｃ．）、サルグラモスチム（ｌｅｕｋｉｎｅ（顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子及びＧＭ−ＣＳＦ）；Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、プロメガポエチン及びオプレルベキン（組換えＩＬ−１１；Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明は、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体及びＣＳＦを含むＡＤＣを提供する。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）にコンジュゲートされてもよい。コロニー刺激因子（ＣＳＦ）は、白血球を作るのに骨髄を助ける成長因子である。一部のがん処置（例えば化学療法）は、白血球（感染と闘うのを助ける）に影響を与えることができ、したがって、コロニー刺激因子を導入して、白血球レベルをサポートし、免疫系を強くするのを助けることができる。コロニー刺激因子をまた、骨髄移植の後に使用して、新たな骨髄が白血球を産生し始めるのを助け得る。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用され得るＣＳＦの代表的な例は、エリスロポエチン（Ｅｐｏｅｔｉｎ）、フィルグラスチム（Ｎｅｏｐｏｇｅｎ（顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）としても知られている；Ａｍｇｅｎ，Ｉｎｃ．）、サルグラモスチム（ｌｅｕｋｉｎｅ（顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子及びＧＭ−ＣＳＦ）；Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、プロメガポエチン及びオプレルベキン（組換えＩＬ−１１；Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。したがって、一実施形態において、本発明は、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体及びＣＳＦを含むＡＤＣを提供する。
４．遺伝子治療
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、遺伝子治療のため少なくとも１つの核酸に（直接的又は担体を介して間接的に）コンジュゲートされてもよい。遺伝子治療は、一般に、遺伝子材料が、疾患を処置するように設計されている、遺伝子材料の細胞への導入を指す。これは、免疫調節剤に関するので、遺伝子治療を使用して、がん細胞増殖を阻害し、又はがん細胞を死滅させる対象の天然の能力を刺激する。一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、がんと関連する変異又はそうでなければ機能不全（例えば切断された）遺伝子を置き換えるために使用される機能的な治療用遺伝子をコードする核酸を含む。他の実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、がんを処置するための治療用タンパク質をコードする又はそうでなければその産生をもたらす核酸を含む。治療用遺伝子をコードする核酸は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体に直接的にコンジュゲートされてもよく、又はあるいは、担体を介して抗Ｂ７−Ｈ３抗体にコンジュゲートされてもよい。遺伝子治療のための核酸を送達するのに使用され得る担体の例は、ウイルスベクター又はリポソームを含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、遺伝子治療のため少なくとも１つの核酸に（直接的又は担体を介して間接的に）コンジュゲートされてもよい。遺伝子治療は、一般に、遺伝子材料が、疾患を処置するように設計されている、遺伝子材料の細胞への導入を指す。これは、免疫調節剤に関するので、遺伝子治療を使用して、がん細胞増殖を阻害し、又はがん細胞を死滅させる対象の天然の能力を刺激する。一実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、がんと関連する変異又はそうでなければ機能不全（例えば切断された）遺伝子を置き換えるために使用される機能的な治療用遺伝子をコードする核酸を含む。他の実施形態において、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、がんを処置するための治療用タンパク質をコードする又はそうでなければその産生をもたらす核酸を含む。治療用遺伝子をコードする核酸は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体に直接的にコンジュゲートされてもよく、又はあるいは、担体を介して抗Ｂ７−Ｈ３抗体にコンジュゲートされてもよい。遺伝子治療のための核酸を送達するのに使用され得る担体の例は、ウイルスベクター又はリポソームを含むが、これらに限定されない。
５．アルキル化剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、１つ以上のアルキル化剤にコンジュゲートされてもよい。アルキル化剤は、アルキル基をＤＮＡに結合させる抗新生物化合物のクラスである。本発明のＡＤＣにおいて使用され得るアルキル化剤の例は、スルホン酸アルキル、エチレンイミン、メチルアミン誘導体、エポキシド、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、トリアジン及びヒドラジンを含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、１つ以上のアルキル化剤にコンジュゲートされてもよい。アルキル化剤は、アルキル基をＤＮＡに結合させる抗新生物化合物のクラスである。本発明のＡＤＣにおいて使用され得るアルキル化剤の例は、スルホン酸アルキル、エチレンイミン、メチルアミン誘導体、エポキシド、ナイトロジェンマスタード、ニトロソウレア、トリアジン及びヒドラジンを含むが、これらに限定されない。
ａ．スルホン酸アルキル
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのスルホン酸アルキルにコンジュゲートされてもよい。スルホン酸アルキルは、一般式：Ｒ−ＳＯ２−Ｏ−Ｒ１（式中、Ｒ及びＲ１は、典型的にはアルキル又はアリール基である。）を有するアルキル化剤のサブクラスである。スルホン酸アルキルの代表的な例は、ブスルファン（Ｍｙｌｅｒａｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ；Ｂｕｓｕｌｆｅｘ ＩＶ、ＰＤＬ ＢｉｏＰｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．）を含むが、これに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのスルホン酸アルキルにコンジュゲートされてもよい。スルホン酸アルキルは、一般式：Ｒ−ＳＯ２−Ｏ−Ｒ１（式中、Ｒ及びＲ１は、典型的にはアルキル又はアリール基である。）を有するアルキル化剤のサブクラスである。スルホン酸アルキルの代表的な例は、ブスルファン（Ｍｙｌｅｒａｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ；Ｂｕｓｕｌｆｅｘ ＩＶ、ＰＤＬ ＢｉｏＰｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．）を含むが、これに限定されない。
ｂ．ナイトロジェンマスタード
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのナイトロジェンマスタードにコンジュゲートされてもよい。抗がん化合物のこのサブクラスの代表的な例は、クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ；Ｎｅｏｓａｒ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、エストラムスチン（エストラムスチンホスフェートナトリウム又はＥｓｔｒａｃｙｔ）、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、イホスファミド（Ｉｆｅｘ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、メクロレタミン（Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ Ｉｎｃ．）及びメルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ又はＬ−Ｐａｍ又はフェニルアラニンマスタード；ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのナイトロジェンマスタードにコンジュゲートされてもよい。抗がん化合物のこのサブクラスの代表的な例は、クロラムブシル（Ｌｅｕｋｅｒａｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、シクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ；Ｎｅｏｓａｒ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、エストラムスチン（エストラムスチンホスフェートナトリウム又はＥｓｔｒａｃｙｔ）、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、イホスファミド（Ｉｆｅｘ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、メクロレタミン（Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ Ｉｎｃ．）及びメルファラン（Ａｌｋｅｒａｎ又はＬ−Ｐａｍ又はフェニルアラニンマスタード；ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）を含むが、これらに限定されない。
ｃ．ニトロソウレア
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのニトロソウレアにコンジュゲートされてもよい。ニトロソウレアは、脂質溶解性であるアルキル化剤のサブクラスである。代表的な例は、カルムスチン（ＢＣＮＵ［ＢｉＣＮＵ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソウレア又は１，３−ビス（２−クロロエチル）−ｌ−ニトロソウレアとしても知られている］、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、フォテムスチン（Ｍｕｐｈｏｒａｎとしても知られている）、ロムスチン（ＣＣＮＵ又は１−（２−クロロ−エチル）−３−シクロヘキシル−１−ニトロソウレア、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ニムスチン（ＡＣＮＵとしても知られている）及びストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ、Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのニトロソウレアにコンジュゲートされてもよい。ニトロソウレアは、脂質溶解性であるアルキル化剤のサブクラスである。代表的な例は、カルムスチン（ＢＣＮＵ［ＢｉＣＮＵ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−クロロエチル）−Ｎ−ニトロソウレア又は１，３−ビス（２−クロロエチル）−ｌ−ニトロソウレアとしても知られている］、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、フォテムスチン（Ｍｕｐｈｏｒａｎとしても知られている）、ロムスチン（ＣＣＮＵ又は１−（２−クロロ−エチル）−３−シクロヘキシル−１−ニトロソウレア、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ニムスチン（ＡＣＮＵとしても知られている）及びストレプトゾシン（Ｚａｎｏｓａｒ、Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含むが、これらに限定されない。
ｄ．トリアジン及びヒドラジン
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのトリアジン又はヒドラジンにコンジュゲートされてもよい。トリアジン及びヒドラジンは、窒素含有アルキル化剤のサブクラスである。一部の実施形態において、これらの化合物は、自発的に分解し、又は代謝して、アルキル基の核酸、ペプチド及び／又はポリペプチドへの転移を促進し、これにより、変異誘発、発がん性又は細胞傷害性効果を引き起こすアルキルジアゾニウム中間体を生産することができる。代表的な例は、ダカルバジン（ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ、Ｂａｙｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．）、プロカルバジン（Ｍｕｔａｌａｎｅ、Ｓｉｇｍａ−Ｔａｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）及びテモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのトリアジン又はヒドラジンにコンジュゲートされてもよい。トリアジン及びヒドラジンは、窒素含有アルキル化剤のサブクラスである。一部の実施形態において、これらの化合物は、自発的に分解し、又は代謝して、アルキル基の核酸、ペプチド及び／又はポリペプチドへの転移を促進し、これにより、変異誘発、発がん性又は細胞傷害性効果を引き起こすアルキルジアゾニウム中間体を生産することができる。代表的な例は、ダカルバジン（ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ、Ｂａｙｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．）、プロカルバジン（Ｍｕｔａｌａｎｅ、Ｓｉｇｍａ−Ｔａｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）及びテモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｒ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｌｏｕｇｈ）を含むが、これらに限定されない。
ｅ．他のアルキル化剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのエチレンイミン、メチルアミン誘導体又はエポキシドにコンジュゲートされてもよい。エチレンイミンは、典型的には、少なくとも１つのアジリジン環を含有するアルキル化剤のサブクラスである。エポキシドは、３つの環原子のみを有する環状エーテルと特徴付けられるアルキル化剤のサブクラスを表す。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのエチレンイミン、メチルアミン誘導体又はエポキシドにコンジュゲートされてもよい。エチレンイミンは、典型的には、少なくとも１つのアジリジン環を含有するアルキル化剤のサブクラスである。エポキシドは、３つの環原子のみを有する環状エーテルと特徴付けられるアルキル化剤のサブクラスを表す。
エチレンイミンの代表的な例は、チオペタ（Ｔｈｉｏｐｌｅｘ、Ａｍｇｅｎ）、ジアジクオン（アジリジニルベンゾキノン（ＡＺＱ）としても知られている）及びマイトマイシンＣを含むが、これらに限定されない。マイトマイシンＣは、アジリジン環を含有し、ＤＮＡの架橋結合を介して細胞傷害性を誘導するように思われる天然産物である（Ｄｏｒｒ ＲＴら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、１９８５年；４５：３５１０頁；Ｋｅｎｎｅｄｙ ＫＡら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、１９８５年；４５：３５４１頁）。メチルアミン誘導体及びこれらの類似体の代表的な例は、ヘキサメチルアミン及びヘキサスタットとしても知られているアルトレタミン（Ｈｅｘａｌｅｎ、ＭＧＩ Ｐｈａｒｍａ、Ｉｎｃ．）を含むが、これに限定されない。抗がん化合物のこのクラスのエポキシドの代表的な例は、ジアンヒドロガラクチトールを含むが、これに限定されない。ジアンヒドロガラクチトール（１，２：５，６−ジアンヒドロデュルシトール）は、アジリジンに化学的に関連し、一般に、上で記載されたのと類似の機序を介してアルキル基の転移を促進する。ジブロモデュルシトールは、ジアンヒドロガラクチトールに加水分解され、したがって、エポキシドに対するプロドラッグである（Ｓｅｌｌｅｉ Ｃら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ Ｒｅｐ．、１９６９年；５３：３７７頁）。
６．抗血管新生剤
一態様において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの抗血管新生剤にコンジュゲートされる。抗血管新生剤は、新たな血管の成長を阻害する。抗血管新生剤は、これらの効果を様々な方法で発揮する。一部の実施形態において、これらの薬剤は、成長因子のその標的に達する能力に干渉する。例えば血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、細胞表面上の特定の受容体への結合による血管新生の開始に関与する主要なタンパク質の１つである。したがって、ＶＥＧＦのその同族受容体との相互作用を防止する、ある特定の抗血管新生剤は、ＶＥＧＦが血管新生を開始するのを防止する。他の実施形態において、これらの薬剤は、細胞内シグナル伝達カスケードに干渉する。例えば、細胞表面上の特定の受容体が作動すると、他の化学シグナルのカスケードが開始され、血管の成長を促進する。したがって、例えば細胞増殖に寄与する細胞内シグナル伝達カスケードを促進することが知られている、ある特定の酵素、例えば一部のチロシンキナーゼは、がん処置の標的である。他の実施形態において、これらの薬剤は、細胞間シグナル伝達カスケードに干渉する。なお、他の実施形態において、これらの薬剤は、細胞成長を活性化し促進する特定の標的を無効にする、又は血管細胞の成長に直接干渉することにより無効にする。血管新生阻害特性は、多数の直接的及び間接的阻害効果を有する３００種より多くの物質において発見されている。
一態様において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの抗血管新生剤にコンジュゲートされる。抗血管新生剤は、新たな血管の成長を阻害する。抗血管新生剤は、これらの効果を様々な方法で発揮する。一部の実施形態において、これらの薬剤は、成長因子のその標的に達する能力に干渉する。例えば血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、細胞表面上の特定の受容体への結合による血管新生の開始に関与する主要なタンパク質の１つである。したがって、ＶＥＧＦのその同族受容体との相互作用を防止する、ある特定の抗血管新生剤は、ＶＥＧＦが血管新生を開始するのを防止する。他の実施形態において、これらの薬剤は、細胞内シグナル伝達カスケードに干渉する。例えば、細胞表面上の特定の受容体が作動すると、他の化学シグナルのカスケードが開始され、血管の成長を促進する。したがって、例えば細胞増殖に寄与する細胞内シグナル伝達カスケードを促進することが知られている、ある特定の酵素、例えば一部のチロシンキナーゼは、がん処置の標的である。他の実施形態において、これらの薬剤は、細胞間シグナル伝達カスケードに干渉する。なお、他の実施形態において、これらの薬剤は、細胞成長を活性化し促進する特定の標的を無効にする、又は血管細胞の成長に直接干渉することにより無効にする。血管新生阻害特性は、多数の直接的及び間接的阻害効果を有する３００種より多くの物質において発見されている。
本発明のＡＤＣにおいて使用され得る抗血管新生剤の代表的な例は、アンジオスタチン、ＡＢＸ ＥＧＦ、Ｃ１−１０３３、ＰＫＩ−１６６、ＥＧＦワクチン、ＥＫＢ−５６９、ＧＷ２０１６、ＩＣＲ−６２、ＥＭＤ ５５９００、ＣＰ３５８、ＰＤ１５３０３５、ＡＧ１４７８、ＩＭＣ−Ｃ２２５（Ｅｒｂｉｔｕｘ、ＺＤ１８３９（Ｉｒｅｓｓａ）、ＯＳＩ−７７４、エルロチニブ（タルセバ）、アンジオスタチン、アレスチン、エンドスタチン、ＢＡＹ１２−９５６６及びｗ／フルオロウラシル又はドキソルビシン、カンスタチン、カルボキシアミドトリオゾール及びパクリタキセルを含む、ＥＭＤ１２１９７４、Ｓ−２４、ビタキシン、ジメチルキサンテノン酢酸、ＩＭ８６２、インターロイキン−１２、インターロイキン−２、ＮＭ−３、ＨｕＭＶ８３３、ＰＴＫ７８７、ＲｈｕＭａｂ、ａｎｇｉｏｚｙｍｅ（リボザイム）、ＩＭＣ−１Ｃ１１、Ｎｅｏｖａｓｔａｔ、ｍａｒｉｍｓｔａｔ、プリノマスタット、ＢＭＳ−２７５２９１、ＣＯＬ−３、ＭＭ１２７０、ＳＵ１０１、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＳＵ５４１６、パクリタキセルを含む、ゲムシタビン及びシスプラチンを含む、並びにイリノテカンを含む並びにシスプラチン及び放射線を含む、テコガラン、テモゾロミド及びＰＥＧインターフェロンα２ｂ、テトラチオモリブデート、ＴＮＰ−４７０、サリドマイド、ＣＣ−５０１３及びタキソテールを含む、タムスタチン、２−メトキシエストラジオール、ＶＥＧＦトラップ、ｍＴＯＲ阻害剤（デフォロリムス、エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、及びテムシロリムス（Ｔｏｒｉｓｅｌ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．））、キナーゼ阻害剤（例えばエルロチニブ（タルセバ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ダサチニブ（Ｓｐｒｙｃｅｌ、Ｂｒｙｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、ニロチニブ（Ｔａｓｉｇｎａ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ、Ｂａｙｅｒ及びＯｎｙｘ）、ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）、Ｏｓｉｍｅｒｔｉｎｉｂ、Ｃｏｂｉｍｅｔｉｎｉｂ、Ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ、Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ、Ｄｉｎａｃｉｃｌｉｂ）を含むが、これらに限定されない。
７．代謝拮抗物質
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの代謝拮抗物質にコンジュゲートされてもよい。代謝拮抗物質は、細胞内の正常な物質と非常に類似する化学療法処置の種類である。細胞が、代謝拮抗物質を細胞代謝に取り込むとき、結果は、細胞にとって負であり、例えば細胞は、分裂することができない。代謝拮抗物質は、これらが干渉する物質により分類される。本発明のＡＤＣにおいて使用され得る代謝拮抗物質の例は、以下でより詳細に記載される、葉酸アンタゴニスト（例えばメトトレキサート）、ピリミジンアンタゴニスト（例えば５−フルオロウラシル、Ｆｏｘｕｒｉｄｉｎｅ、シタラビン、カペシタビン及びゲムシタビン）、プリンアンタゴニスト（例えば６−メルカプトプリン及び６−チオグアニン）並びにアデノシンデアミナーゼ阻害剤（例えば、クラドリビン、フルダラビン、ネララビン及びペントスタチン）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの代謝拮抗物質にコンジュゲートされてもよい。代謝拮抗物質は、細胞内の正常な物質と非常に類似する化学療法処置の種類である。細胞が、代謝拮抗物質を細胞代謝に取り込むとき、結果は、細胞にとって負であり、例えば細胞は、分裂することができない。代謝拮抗物質は、これらが干渉する物質により分類される。本発明のＡＤＣにおいて使用され得る代謝拮抗物質の例は、以下でより詳細に記載される、葉酸アンタゴニスト（例えばメトトレキサート）、ピリミジンアンタゴニスト（例えば５−フルオロウラシル、Ｆｏｘｕｒｉｄｉｎｅ、シタラビン、カペシタビン及びゲムシタビン）、プリンアンタゴニスト（例えば６−メルカプトプリン及び６−チオグアニン）並びにアデノシンデアミナーゼ阻害剤（例えば、クラドリビン、フルダラビン、ネララビン及びペントスタチン）を含むが、これらに限定されない。
ａ．葉酸代謝拮抗薬
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの葉酸代謝拮抗薬にコンジュゲートされてもよい。葉酸代謝拮抗薬は、構造上、葉酸塩に類似する代謝拮抗物質のサブクラスである。代表的な例は、メトトレキサート、４−アミノ−葉酸（アミノプテリン及び４−アミノプテロイン酸としても知られている）、ロメトレキソール（ＬＭＴＸ）、ペメトレキセド（Ａｌｉｍｐｔａ、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）並びにトリメトレキサート（Ｎｅｕｔｒｅｘｉｎ、Ｂｅｎ Ｖｅｎｕｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの葉酸代謝拮抗薬にコンジュゲートされてもよい。葉酸代謝拮抗薬は、構造上、葉酸塩に類似する代謝拮抗物質のサブクラスである。代表的な例は、メトトレキサート、４−アミノ−葉酸（アミノプテリン及び４−アミノプテロイン酸としても知られている）、ロメトレキソール（ＬＭＴＸ）、ペメトレキセド（Ａｌｉｍｐｔａ、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）並びにトリメトレキサート（Ｎｅｕｔｒｅｘｉｎ、Ｂｅｎ Ｖｅｎｕｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。
ｂ．プリンアンタゴニスト
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのプリンアンタゴニストにコンジュゲートされてもよい。プリン類似体は、プリンとして知られている化合物の群に構造上類似する代謝拮抗物質のサブクラスである。プリンアンタゴニストの代表的な例は、アザチオプリン（Ａｚａｓａｎ、Ｓａｌｉｘ；Ｉｍｕｒａｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、クラドリビン（Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ［２−ＣｄＡとしても知られている］、Ｊａｎｓｓｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、メルカプトプリン（Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ［６−メルカプトエタノールとしても知られている］、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａ、Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ペントスタチン（Ｎｉｐｅｎｔ、２’−デオキシコフォルマイシン（ＤＣＦ）としても知られている）、６−チオグアニン（Ｌａｎｖｉｓ［チオグアニンとしても知られている］、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのプリンアンタゴニストにコンジュゲートされてもよい。プリン類似体は、プリンとして知られている化合物の群に構造上類似する代謝拮抗物質のサブクラスである。プリンアンタゴニストの代表的な例は、アザチオプリン（Ａｚａｓａｎ、Ｓａｌｉｘ；Ｉｍｕｒａｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、クラドリビン（Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ［２−ＣｄＡとしても知られている］、Ｊａｎｓｓｅｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）、メルカプトプリン（Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ［６−メルカプトエタノールとしても知られている］、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａ、Ｇｅｎｚｙｍｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ペントスタチン（Ｎｉｐｅｎｔ、２’−デオキシコフォルマイシン（ＤＣＦ）としても知られている）、６−チオグアニン（Ｌａｎｖｉｓ［チオグアニンとしても知られている］、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）を含むが、これらに限定されない。
ｃ．ピリミジンアンタゴニスト
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのピリミジンアンタゴニストにコンジュゲートされてもよい。ピリミジンアンタゴニストは、プリンとして知られている化合物の群に構造上類似する代謝拮抗物質のサブクラスである。ピリミジンアンタゴニストの代表的な例は、アザシチジン（Ｖｉｄａｚａ、Ｃｅｌｇｅｎｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ、Ｒｏｃｈｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、シタラビン（シトシンアラビノシド及びアラビノシルシトシンとしても知られている、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、デシタビン（Ｄａｃｏｇｅｎ、Ｅｉｓａｉ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、５−フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ、Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；Ｅｆｕｄｅｘ、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ）、５−フルオロ−２’−デオキシウリジン５’−ホスフェート（ＦｄＵＭＰ）、５−フルオロウリジントリホスフェート並びにゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのピリミジンアンタゴニストにコンジュゲートされてもよい。ピリミジンアンタゴニストは、プリンとして知られている化合物の群に構造上類似する代謝拮抗物質のサブクラスである。ピリミジンアンタゴニストの代表的な例は、アザシチジン（Ｖｉｄａｚａ、Ｃｅｌｇｅｎｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、カペシタビン（Ｘｅｌｏｄａ、Ｒｏｃｈｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、シタラビン（シトシンアラビノシド及びアラビノシルシトシンとしても知られている、Ｂｅｄｆｏｒｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、デシタビン（Ｄａｃｏｇｅｎ、Ｅｉｓａｉ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、５−フルオロウラシル（Ａｄｒｕｃｉｌ、Ｔｅｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；Ｅｆｕｄｅｘ、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ）、５−フルオロ−２’−デオキシウリジン５’−ホスフェート（ＦｄＵＭＰ）、５−フルオロウリジントリホスフェート並びにゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ、Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）を含むが、これらに限定されない。
８．ホウ素含有剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのホウ素含有剤にコンジュゲートされてもよい。ホウ素含有剤は、細胞増殖に干渉するがん治療化合物のクラスを含む。ホウ素含有剤の代表的な例は、ボロフィシン及びボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ、Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのホウ素含有剤にコンジュゲートされてもよい。ホウ素含有剤は、細胞増殖に干渉するがん治療化合物のクラスを含む。ホウ素含有剤の代表的な例は、ボロフィシン及びボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ、Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含むが、これらに限定されない。
９．化学保護剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの化学保護剤にコンジュゲートされてもよい。化学保護薬は、化学療法の特定の毒性効果に対して身体を保護するのを助ける、化合物のクラスである。化学保護剤は、化学療法薬の毒性効果から健常細胞を保護するために様々な化学療法と共に投与されてもよく、一方、がん細胞が、投与された化学療法薬で処置されるのを同時に可能にする。代表的な化学保護剤は、累積用量のシスプラチンと関連する腎毒性を低減するために使用されるアミホスチン（Ｅｔｈｙｏｌ、Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．）、アントラサイクリン（Ｔｏｔｅｃｔ）の投与により引き起こされる血管外漏出の処置のための及び抗腫瘍抗生物質ドキソルビシン（Ｚｉｎｅｃａｒｄ）の投与により引き起こされる心臓関連合併症の処置のためのデクスラゾキサン（Ｔｏｔｅｃｔ、Ａｐｒｉｃｕｓ Ｐｈａｒｍａ；Ｚｉｎｅｃａｒｄ）、並びにイホクファミドでの化学療法処置中の出血性膀胱炎を防止するために使用されるメスナ（Ｍｅｓｎｅｘ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの化学保護剤にコンジュゲートされてもよい。化学保護薬は、化学療法の特定の毒性効果に対して身体を保護するのを助ける、化合物のクラスである。化学保護剤は、化学療法薬の毒性効果から健常細胞を保護するために様々な化学療法と共に投与されてもよく、一方、がん細胞が、投与された化学療法薬で処置されるのを同時に可能にする。代表的な化学保護剤は、累積用量のシスプラチンと関連する腎毒性を低減するために使用されるアミホスチン（Ｅｔｈｙｏｌ、Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．）、アントラサイクリン（Ｔｏｔｅｃｔ）の投与により引き起こされる血管外漏出の処置のための及び抗腫瘍抗生物質ドキソルビシン（Ｚｉｎｅｃａｒｄ）の投与により引き起こされる心臓関連合併症の処置のためのデクスラゾキサン（Ｔｏｔｅｃｔ、Ａｐｒｉｃｕｓ Ｐｈａｒｍａ；Ｚｉｎｅｃａｒｄ）、並びにイホクファミドでの化学療法処置中の出血性膀胱炎を防止するために使用されるメスナ（Ｍｅｓｎｅｘ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）を含むが、これらに限定されない。
１０．ホルモン剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのホルモン剤にコンジュゲートされてもよい。ホルモン剤（合成ホルモンを含む）は、内分泌系の内在性に産生されるホルモンの産生又は活性に干渉する化合物である。一部の実施形態において、これらの化合物は、細胞成長に干渉し、又は細胞傷害性効果を生じる。非限定的な例は、アンドロゲン、エストロゲン、酢酸メドロキシプロゲステロン（Ｐｒｏｖｅｒａ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）及びプロゲスチンを含む。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのホルモン剤にコンジュゲートされてもよい。ホルモン剤（合成ホルモンを含む）は、内分泌系の内在性に産生されるホルモンの産生又は活性に干渉する化合物である。一部の実施形態において、これらの化合物は、細胞成長に干渉し、又は細胞傷害性効果を生じる。非限定的な例は、アンドロゲン、エストロゲン、酢酸メドロキシプロゲステロン（Ｐｒｏｖｅｒａ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）及びプロゲスチンを含む。
１１．抗ホルモン剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの抗ホルモン剤にコンジュゲートされてもよい。「抗ホルモン」剤は、ある特定の内在性ホルモンの産生を抑制し、及び／又はある特定の内在性ホルモンの機能を防止する薬剤である。一実施形態において、抗ホルモン剤は、アンドロゲン、エストロゲン、プロゲステロン及びゴナドトロピン放出ホルモンからなる群から選択されるホルモンの活性に干渉し、これにより、様々ながん細胞の成長に干渉する。抗ホルモン剤の代表的な例は、アミノグルテチミド、アナストロゾール（Ａｒｉｍｉｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、酢酸シプロテロン（Ｃｙｐｒｏｓｔａｔ、Ｂａｙｅｒ ＰＬＣ）、デガレリクス（Ｆｉｒｍａｇｏｎ、Ｆｅｒｒｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、エキセメスタン（Ａｒｏｍａｓｉｎ、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）、フルタミド（Ｄｒｏｇｅｎｉｌ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ Ｌｔｄ）、フルベストラント（Ｆａｓｌｏｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ゴセレリン（Ｚｏｌｏｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、レトロゾール（Ｆｅｍａｒａ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ロイプロリド（Ｐｒｏｓｔａｐ）、リュープロン、酢酸メドロキシプロゲステロン（Ｐｒｏｖｅｒａ、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）、メゲストロールアセテート（Ｍｅｇａｃｅ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ）、タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）及びトリプトレリン（Ｄｅｃａｐｅｔｙｌ、Ｆｅｒｒｉｎｇ）を含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの抗ホルモン剤にコンジュゲートされてもよい。「抗ホルモン」剤は、ある特定の内在性ホルモンの産生を抑制し、及び／又はある特定の内在性ホルモンの機能を防止する薬剤である。一実施形態において、抗ホルモン剤は、アンドロゲン、エストロゲン、プロゲステロン及びゴナドトロピン放出ホルモンからなる群から選択されるホルモンの活性に干渉し、これにより、様々ながん細胞の成長に干渉する。抗ホルモン剤の代表的な例は、アミノグルテチミド、アナストロゾール（Ａｒｉｍｉｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、酢酸シプロテロン（Ｃｙｐｒｏｓｔａｔ、Ｂａｙｅｒ ＰＬＣ）、デガレリクス（Ｆｉｒｍａｇｏｎ、Ｆｅｒｒｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、エキセメスタン（Ａｒｏｍａｓｉｎ、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）、フルタミド（Ｄｒｏｇｅｎｉｌ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ Ｌｔｄ）、フルベストラント（Ｆａｓｌｏｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ゴセレリン（Ｚｏｌｏｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、レトロゾール（Ｆｅｍａｒａ、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、ロイプロリド（Ｐｒｏｓｔａｐ）、リュープロン、酢酸メドロキシプロゲステロン（Ｐｒｏｖｅｒａ、Ｐｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．）、メゲストロールアセテート（Ｍｅｇａｃｅ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ）、タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）及びトリプトレリン（Ｄｅｃａｐｅｔｙｌ、Ｆｅｒｒｉｎｇ）を含むが、これらに限定されない。
１２．コルチコステロイド
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのコルチコステロイドにコンジュゲートされてもよい。コルチコステロイドを本発明のＡＤＣにおいて使用して、炎症を低下させることができる。コルチコステロイドの例は、グルココルチコイド、例えばプレドニゾン（Ｄｅｌｔａｓｏｎｅ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＆ Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．の子会社）を含むが、これに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのコルチコステロイドにコンジュゲートされてもよい。コルチコステロイドを本発明のＡＤＣにおいて使用して、炎症を低下させることができる。コルチコステロイドの例は、グルココルチコイド、例えばプレドニゾン（Ｄｅｌｔａｓｏｎｅ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＆ Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．の子会社）を含むが、これに限定されない。
１３．光活性治療剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの光活性治療剤にコンジュゲートされてもよい。光活性治療剤は、特定の波長の電磁放射への曝露の際に、処置された細胞を死滅させるよう配置され得る化合物を含む。治療上関連する化合物は、組織を透過する波長で電磁放射を吸収する。好ましい実施形態において、化合物は、十分な活性化の際に細胞又は組織に対して毒性である光化学的効果を生じる能力がある非毒性形態で投与される。他の好ましい実施形態において、これらの化合物は、がん性組織により保持され、正常組織から容易に除去される。非限定的な例は、様々なクロマゲン及び色素を含む。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの光活性治療剤にコンジュゲートされてもよい。光活性治療剤は、特定の波長の電磁放射への曝露の際に、処置された細胞を死滅させるよう配置され得る化合物を含む。治療上関連する化合物は、組織を透過する波長で電磁放射を吸収する。好ましい実施形態において、化合物は、十分な活性化の際に細胞又は組織に対して毒性である光化学的効果を生じる能力がある非毒性形態で投与される。他の好ましい実施形態において、これらの化合物は、がん性組織により保持され、正常組織から容易に除去される。非限定的な例は、様々なクロマゲン及び色素を含む。
１４．オリゴヌクレオチド
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされてもよい。オリゴヌクレオチドは、遺伝子情報のプロセシングに干渉することにより働く短い核酸鎖からなる。一部の実施形態において、ＡＤＣにおいて使用するためのオリゴヌクレオチドは、修飾されていない１本鎖及び／又は２本鎖ＤＮＡ又はＲＮＡ分子であり、一方、他の実施形態において、これらの治療用オリゴヌクレオチドは、化学的に修飾された１本鎖及び／又は２本鎖ＤＮＡ又はＲＮＡ分子である。一実施形態において、ＡＤＣにおいて使用されるオリゴヌクレオチドは、比較的短く（１９〜２５個のヌクレオチド）、細胞に存在する核酸標的のトータルのプール中の固有の核酸配列にハイブリダイズする。重要なオリゴヌクレオチドテクノロジーのいくつかは、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を含む）、アプタマー、ＣｐＧオリゴヌクレオチド及びリボザイムを含む。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされてもよい。オリゴヌクレオチドは、遺伝子情報のプロセシングに干渉することにより働く短い核酸鎖からなる。一部の実施形態において、ＡＤＣにおいて使用するためのオリゴヌクレオチドは、修飾されていない１本鎖及び／又は２本鎖ＤＮＡ又はＲＮＡ分子であり、一方、他の実施形態において、これらの治療用オリゴヌクレオチドは、化学的に修飾された１本鎖及び／又は２本鎖ＤＮＡ又はＲＮＡ分子である。一実施形態において、ＡＤＣにおいて使用されるオリゴヌクレオチドは、比較的短く（１９〜２５個のヌクレオチド）、細胞に存在する核酸標的のトータルのプール中の固有の核酸配列にハイブリダイズする。重要なオリゴヌクレオチドテクノロジーのいくつかは、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を含む）、アプタマー、ＣｐＧオリゴヌクレオチド及びリボザイムを含む。
ａ．アンチセンスオリゴヌクレオチド
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされてもよい。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ワトソン−クリックのハイブリダイゼーションを介してＲＮＡに結合するよう設計される。一部の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、Ｂ７−Ｈ３の領域、ドメイン、部分又はセグメントをコードするヌクレオチドに相補的である。一部の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約５〜約１００個のヌクレオチド、約１０〜約５０個のヌクレオチド、約１２〜約３５個及び約１８〜約２５個のヌクレオチドを含む。一部の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、Ｂ７−Ｈ３遺伝子の領域、部分、ドメイン又はセグメントに少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は少なくとも１００％相同である。一部の実施形態において、Ｂ７−Ｈ３遺伝子の少なくとも１５、２０、２５、３０、３５、４０、５０又は１００個の連続ヌクレオチドにわたり実質的な配列相同性が存在する。好ましい実施形態において、これらのアンチセンスオリゴヌクレオチドのサイズは、１２〜２５ヌクレオチドの長さの範囲であり、アンチセンスオリゴヌクレオチドの大部分が、１８〜２１ヌクレオチドの長さである。オリゴヌクレオチドが標的ＲＮＡに結合すると、ＲＮＡの機能を阻害するために活用され得る複数の機序が存在する（Ｃｒｏｏｋｅ ＳＴ．（１９９９年）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、１４８９、３０〜４２頁）。最も特徴付けられたアンチセンス機序は、ＲＮａｓｅＨ又はＲＮＡ干渉機序に付随するヌクレアーゼのような、内在性細胞ヌクレアーゼにより、標的化ＲＮＡの切断をもたらす。しかしながら、スプライシング又は翻訳停止の調節のような、非触媒性機序により標的細胞の発現を阻害するオリゴヌクレオチドはまた、遺伝子機能の強力かつ選択的なモジュレーターであり得る。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアンチセンスオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされてもよい。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ワトソン−クリックのハイブリダイゼーションを介してＲＮＡに結合するよう設計される。一部の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、Ｂ７−Ｈ３の領域、ドメイン、部分又はセグメントをコードするヌクレオチドに相補的である。一部の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、約５〜約１００個のヌクレオチド、約１０〜約５０個のヌクレオチド、約１２〜約３５個及び約１８〜約２５個のヌクレオチドを含む。一部の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、Ｂ７−Ｈ３遺伝子の領域、部分、ドメイン又はセグメントに少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は少なくとも１００％相同である。一部の実施形態において、Ｂ７−Ｈ３遺伝子の少なくとも１５、２０、２５、３０、３５、４０、５０又は１００個の連続ヌクレオチドにわたり実質的な配列相同性が存在する。好ましい実施形態において、これらのアンチセンスオリゴヌクレオチドのサイズは、１２〜２５ヌクレオチドの長さの範囲であり、アンチセンスオリゴヌクレオチドの大部分が、１８〜２１ヌクレオチドの長さである。オリゴヌクレオチドが標的ＲＮＡに結合すると、ＲＮＡの機能を阻害するために活用され得る複数の機序が存在する（Ｃｒｏｏｋｅ ＳＴ．（１９９９年）Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ、１４８９、３０〜４２頁）。最も特徴付けられたアンチセンス機序は、ＲＮａｓｅＨ又はＲＮＡ干渉機序に付随するヌクレアーゼのような、内在性細胞ヌクレアーゼにより、標的化ＲＮＡの切断をもたらす。しかしながら、スプライシング又は翻訳停止の調節のような、非触媒性機序により標的細胞の発現を阻害するオリゴヌクレオチドはまた、遺伝子機能の強力かつ選択的なモジュレーターであり得る。
最近随分注目を集めている別のＲＮａｓｅ依存性アンチセンス機序は、ＲＮＡｉである（Ｆｉｒｅら（１９９８年）Ｎａｔｕｒｅ、３９１、８０６〜８１１頁；Ｚａｍｏｒｅ ＰＤ．（２００２年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、２９６、１２６５〜１２６９頁）。ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）は、２本鎖ＲＮＡが、配列特異的な様式で遺伝子発現を阻害する、転写後プロセスである。一部の実施形態において、ＲＮＡｉ効果は、相対的により長い２本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）の導入を介して達成され、一方、好ましい実施形態において、このＲＮＡｉ効果は、より短い２本鎖ＲＮＡ、例えば低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）及び／又はマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）の導入により達成される。さらに別の実施形態において、ＲＮＡｉはまた、標的遺伝子に相補的なｄｓＲＮＡを生成するプラスミドの導入により達成することができる。前述の実施形態のそれぞれにおいて、２本鎖ＲＮＡは、細胞内で特定の標的配列の遺伝子発現に干渉するよう設計される。一般に、機序は、相同なｍＲＮＡ標的にリボヌクレアーゼを指向させる短いＲＮＡへのｄｓＲＮＡの変換を含み（概説、Ｒｕｖｋｕｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２９４：７９７頁（２００１年））、それが、次いで、対応する内在性ｍＲＮＡを分解し、これにより、遺伝子発現の調節をもたらす。特に、ｄｓＲＮＡは、抗増殖特性を有し、これにより治療適用を予想することも可能にすることが報告されている（Ａｕｂｅｌら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、ＵＳＡ ８８：９０６頁（１９９１年））。例えば、合成ｄｓＲＮＡは、マウスにおいて腫瘍成長を阻害することが示されており（Ｌｅｖｙら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、６２：３５７〜３６１頁（１９６９年））、白血病マウスの処置において有効であり（Ｚｅｌｅｚｎｉｃｋら、Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１３０：１２６〜１２８頁（１９６９年））、マウスの皮膚において化学的に誘導される腫瘍発生を阻害する（Ｇｅｌｂｏｉｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、１６７：２０５〜２０７頁（１９７０年））。したがって、好ましい実施形態において、本発明は、乳がんの処置のためのＡＤＣにおけるアンチセンスオリゴヌクレオチドの使用を提供する。他の実施形態において、本発明は、アンチセンスオリゴヌクレオチド処置を開始するための組成物及び方法であって、ｄｓＲＮＡが、ｍＲＮＡレベルでＢ７−Ｈ３の標的細胞発現に干渉する、組成物及び方法を提供する。上で使用されたｄｓＲＮＡは、天然に存在するＲＮＡ、部分的に精製されたＲＮＡ、組換え生産されたＲＮＡ、合成ＲＮＡ、並びに標準的でないヌクレオチド、非ヌクレオチド材料、ヌクレオチド類似体（例えばロックド核酸（ＬＮＡ））、デオキシリボヌクレオチド及びこれらの任意の組合せの包含により、天然に存在するＲＮＡと異なる変化したＲＮＡを指す。本発明のＲＮＡは、本明細書に記載されるアンチセンスオリゴヌクレオチドベースの調節を媒介する能力を有する天然のＲＮＡと十分に類似することのみを必要とする。
ｂ．アプタマー
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアプタマーにコンジュゲートされてもよい。アプタマーは、他の分子に結合するその能力に基づくランダムプールから選択された核酸分子である。抗体と同様に、アプタマーは、異常な親和性及び特異性で標的分子に結合することができる。多くの実施形態において、アプタマーは、標的タンパク質と相互作用するのを可能にする複雑な配列依存性の３次元形を想定し、抗体−抗原相互作用に類似する堅固に結合した複合体をもたらし、これにより、前記タンパク質の機能に干渉する。アプタマーの、これらの標的タンパク質に堅固にかつ特異的に結合する特定の能力は、標的化分子療法としてのこれらの可能性を強調する。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのアプタマーにコンジュゲートされてもよい。アプタマーは、他の分子に結合するその能力に基づくランダムプールから選択された核酸分子である。抗体と同様に、アプタマーは、異常な親和性及び特異性で標的分子に結合することができる。多くの実施形態において、アプタマーは、標的タンパク質と相互作用するのを可能にする複雑な配列依存性の３次元形を想定し、抗体−抗原相互作用に類似する堅固に結合した複合体をもたらし、これにより、前記タンパク質の機能に干渉する。アプタマーの、これらの標的タンパク質に堅固にかつ特異的に結合する特定の能力は、標的化分子療法としてのこれらの可能性を強調する。
ｃ．ＣｐＧオリゴヌクレオチド
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのＣｐＧオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされてもよい。細菌及びウイルスＤＮＡは、ヒトにおいて自然免疫と特異的免疫の両方の強力な活性化因子であることが知られている。これらの免疫学的特徴は、細菌ＤＮＡにおいて見出されるメチル化されていないＣｐＧジヌクレオチドモチーフと関連している。これらのモチーフはヒトにおいて稀であるという事実のために、ヒト免疫系は、これらのモチーフを感染の早期指標として認識し、続いて免疫応答を開始する能力を発展させた。したがって、このＣｐＧモチーフを含有するオリゴヌクレオチドを活用して、抗腫瘍免疫応答を開始することができる。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのＣｐＧオリゴヌクレオチドにコンジュゲートされてもよい。細菌及びウイルスＤＮＡは、ヒトにおいて自然免疫と特異的免疫の両方の強力な活性化因子であることが知られている。これらの免疫学的特徴は、細菌ＤＮＡにおいて見出されるメチル化されていないＣｐＧジヌクレオチドモチーフと関連している。これらのモチーフはヒトにおいて稀であるという事実のために、ヒト免疫系は、これらのモチーフを感染の早期指標として認識し、続いて免疫応答を開始する能力を発展させた。したがって、このＣｐＧモチーフを含有するオリゴヌクレオチドを活用して、抗腫瘍免疫応答を開始することができる。
ｄ．リボザイム
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのリボザイムにコンジュゲートされてもよい。リボザイムは、約４０〜１５５ヌクレオチドの長さの範囲の触媒性ＲＮＡ分子である。特定のＲＮＡ分子を認識し、切断するリボザイムの能力は、これらを、治療薬の可能性のある候補にする。代表的な例は、アンギオザイムを含む。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのリボザイムにコンジュゲートされてもよい。リボザイムは、約４０〜１５５ヌクレオチドの長さの範囲の触媒性ＲＮＡ分子である。特定のＲＮＡ分子を認識し、切断するリボザイムの能力は、これらを、治療薬の可能性のある候補にする。代表的な例は、アンギオザイムを含む。
１５．放射性核種剤（放射性同位元素）
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの放射性核種剤にコンジュゲートされてもよい。放射性核種剤は、放射性減衰を経験する能力を有する不安定な核により特徴付けられる薬剤を含む。放射性核種処置の成功への基盤は、十分な濃度及びがん細胞による放射性核種の持続的保持に依存する。考慮する他の要因は、放射性核種の半減期、放射された粒子のエネルギー、及び放射された粒子が進むことができる最大範囲を含む。好ましい実施形態において、治療剤は、１１１Ｉｎ、１７７Ｌｕ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１１Ａｔ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、９０Ｙ、Ｉ２５Ｉ、Ｉ３１Ｉ、３２Ｐ、３３Ｐ、４７Ｓｃ、１１１Ａｇ、６７Ｇａ、１４２Ｐｒ、１５３Ｓｍ、１６１Ｔｂ、１６６Ｄｙ、１６６Ｈｏ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１８９Ｒｅ、２１２Ｐｂ、２２３Ｒａ、２２５Ａｃ、５９Ｆｅ、７５Ｓｅ、７７Ａｓ、８９Ｓｒ、９９Ｍｏ、１０５Ｒｈ、Ｉ０９Ｐｄ、１４３Ｐｒ、１４９Ｐｍ、１６９Ｅｒ、１９４Ｉｒ、１９８Ａｕ、１９９Ａｕ、及び２１１Ｐｂからなる群から選択される放射性核種である。オージェ放射粒子と共に実質的に減衰する放射性核種も好ましい。例えば、Ｃｏ−５８、Ｇａ−６７、Ｂｒ−８０ｍ、Ｔｃ−９９ｍ、Ｒｈ−１０３ｍ、Ｐｔ−１０９、Ｉｎ−１１１ １、Ｓｂ−１１９、Ｉ−１２５、Ｈｏ−１６１、Ｏｓ−１８９ｍ及びＩｒ−１９２。有用なベータ粒子放射核種の減衰エネルギーは、好ましくは、Ｄｙ−１５２、Ａｔ−２１１、Ｂｉ−２１２、Ｒａ−２２３、Ｒｎ−２１９、Ｐｏ−２１５、Ｂｉ−２１ １、Ａｃ−２２５、Ｆｒ−２２１、Ａｔ−２１７、Ｂｉ−２１３及びＦｍ−２５５である。有用なアルファ粒子放射放射性核種の減衰エネルギーは、好ましくは、２，０００〜１０，０００ｋｅＶ、より好ましくは３，０００〜８，０００ｋｅＶ、及び最も好ましくは４，０００〜７，０００ｋｅＶである。使用のさらなる可能性のあるラジオアイソトープは、１１Ｃ、１３Ｎ、１５０、７５Ｂｒ、１９８Ａｕ、２２４Ａｃ、１２６Ｉ、１３３Ｉ、７７Ｂｒ、１１３ｍＩｎ、９５Ｒｕ、９７Ｒｕ、Ｉ０３Ｒｕ、１０５Ｒｕ、１０７Ｈｇ、２０３Ｈｇ、１２１ｍＴｅ、１２２ｍＴｅ、１２５ｍＴｅ、１６５Ｔｍ、Ｉ６７Ｔｍ、１６８Ｔｍ、１９７Ｐｔ、１０９Ｐｄ、１０５Ｒｈ、１４２Ｐｒ、１４３Ｐｒ、１６１Ｔｂ、！６６Ｈｏ、１９９Ａｕ、５７Ｃｏ、５８Ｃｏ、５１Ｃｒ、５９Ｆｅ、７５Ｓｅ、２０１Ｔｌ、２２５Ａｃ、７６Ｂｒ、Ｉ６９Ｙｂなどを含む。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの放射性核種剤にコンジュゲートされてもよい。放射性核種剤は、放射性減衰を経験する能力を有する不安定な核により特徴付けられる薬剤を含む。放射性核種処置の成功への基盤は、十分な濃度及びがん細胞による放射性核種の持続的保持に依存する。考慮する他の要因は、放射性核種の半減期、放射された粒子のエネルギー、及び放射された粒子が進むことができる最大範囲を含む。好ましい実施形態において、治療剤は、１１１Ｉｎ、１７７Ｌｕ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１１Ａｔ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、９０Ｙ、Ｉ２５Ｉ、Ｉ３１Ｉ、３２Ｐ、３３Ｐ、４７Ｓｃ、１１１Ａｇ、６７Ｇａ、１４２Ｐｒ、１５３Ｓｍ、１６１Ｔｂ、１６６Ｄｙ、１６６Ｈｏ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１８９Ｒｅ、２１２Ｐｂ、２２３Ｒａ、２２５Ａｃ、５９Ｆｅ、７５Ｓｅ、７７Ａｓ、８９Ｓｒ、９９Ｍｏ、１０５Ｒｈ、Ｉ０９Ｐｄ、１４３Ｐｒ、１４９Ｐｍ、１６９Ｅｒ、１９４Ｉｒ、１９８Ａｕ、１９９Ａｕ、及び２１１Ｐｂからなる群から選択される放射性核種である。オージェ放射粒子と共に実質的に減衰する放射性核種も好ましい。例えば、Ｃｏ−５８、Ｇａ−６７、Ｂｒ−８０ｍ、Ｔｃ−９９ｍ、Ｒｈ−１０３ｍ、Ｐｔ−１０９、Ｉｎ−１１１ １、Ｓｂ−１１９、Ｉ−１２５、Ｈｏ−１６１、Ｏｓ−１８９ｍ及びＩｒ−１９２。有用なベータ粒子放射核種の減衰エネルギーは、好ましくは、Ｄｙ−１５２、Ａｔ−２１１、Ｂｉ−２１２、Ｒａ−２２３、Ｒｎ−２１９、Ｐｏ−２１５、Ｂｉ−２１ １、Ａｃ−２２５、Ｆｒ−２２１、Ａｔ−２１７、Ｂｉ−２１３及びＦｍ−２５５である。有用なアルファ粒子放射放射性核種の減衰エネルギーは、好ましくは、２，０００〜１０，０００ｋｅＶ、より好ましくは３，０００〜８，０００ｋｅＶ、及び最も好ましくは４，０００〜７，０００ｋｅＶである。使用のさらなる可能性のあるラジオアイソトープは、１１Ｃ、１３Ｎ、１５０、７５Ｂｒ、１９８Ａｕ、２２４Ａｃ、１２６Ｉ、１３３Ｉ、７７Ｂｒ、１１３ｍＩｎ、９５Ｒｕ、９７Ｒｕ、Ｉ０３Ｒｕ、１０５Ｒｕ、１０７Ｈｇ、２０３Ｈｇ、１２１ｍＴｅ、１２２ｍＴｅ、１２５ｍＴｅ、１６５Ｔｍ、Ｉ６７Ｔｍ、１６８Ｔｍ、１９７Ｐｔ、１０９Ｐｄ、１０５Ｒｈ、１４２Ｐｒ、１４３Ｐｒ、１６１Ｔｂ、！６６Ｈｏ、１９９Ａｕ、５７Ｃｏ、５８Ｃｏ、５１Ｃｒ、５９Ｆｅ、７５Ｓｅ、２０１Ｔｌ、２２５Ａｃ、７６Ｂｒ、Ｉ６９Ｙｂなどを含む。
１６．放射線増感剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの放射線増感剤にコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される、用語「放射線増感剤」は、放射線増感される細胞の電磁放射線に対する感受性を増大させる、及び／又は電磁放射線で処置可能である疾患の処置を促進するために、動物に治療有効量で投与される分子、好ましくは低分子量の分子と定義される。放射線増感剤は、がん細胞を放射線療法に対してより感受性にする薬剤であり、一方、典型的には、正常細胞に対してずっと少ない効果を有する。したがって、放射線増感剤は、放射標識された抗体又はＡＤＣと組み合わせて使用することができる。放射線増感剤の添加は、放射標識された抗体又は抗体断片単独での処置と比較したとき、増強された有効性をもたらし得る。放射線増感剤は、Ｄ．Ｍ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ（編）、Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ（１９９５年）において記載される。放射線増感剤の例は、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、タキサン及びシスプラチンを含む。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つの放射線増感剤にコンジュゲートされてもよい。本明細書において使用される、用語「放射線増感剤」は、放射線増感される細胞の電磁放射線に対する感受性を増大させる、及び／又は電磁放射線で処置可能である疾患の処置を促進するために、動物に治療有効量で投与される分子、好ましくは低分子量の分子と定義される。放射線増感剤は、がん細胞を放射線療法に対してより感受性にする薬剤であり、一方、典型的には、正常細胞に対してずっと少ない効果を有する。したがって、放射線増感剤は、放射標識された抗体又はＡＤＣと組み合わせて使用することができる。放射線増感剤の添加は、放射標識された抗体又は抗体断片単独での処置と比較したとき、増強された有効性をもたらし得る。放射線増感剤は、Ｄ．Ｍ．Ｇｏｌｄｂｅｒｇ（編）、Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ ｗｉｔｈ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ（１９９５年）において記載される。放射線増感剤の例は、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、タキサン及びシスプラチンを含む。
放射線増感剤は、Ｘ線の電磁放射線により活性化され得る。Ｘ線により活性化される放射線増感剤の代表的な例は、以下の：メトロニダゾール、ミソニダゾール、デスメチルミソニダゾール、ピモニダゾール、エタニダゾール、ニモラゾール、マイトマイシンＣ、ＲＳＵ １０６９、ＳＲ ４２３３、Ｅ０９、ＲＢ ６１４５、ニコチンアミド、５−ブロモデオキシウリジン（ＢＵｄＲ）、５−ヨードデオキシウリジン（ＩＵｄＲ）、ブロモデオキシシチジン、フルオロデオキシウリジン（ＦＵｄＲ）、ヒドロキシウレア、シスプラチン、並びにその治療上有効な類似体及び誘導体を含むが、これらに限定されない。あるいは、放射線増感剤は、光線力学的治療（ＰＤＴ）を使用して活性化され得る。光線力学的放射線増感剤の代表的な例は、ヘマトポルフィリン誘導体、フォトフリン（ｒ）、ベンゾポルフィリン誘導体、ＮＰｅ６、スズエチオポルフィリン（ＳｎＥＴ２）、フェオボルビデａ、バクテリオクロロフィルａ、ナフタロシアニン、フタロシアニン、亜鉛フタロシアニン、並びにその治療上有効な類似体及び誘導体を含むが、これらに限定されない。
１６．トポイソメラーゼ阻害剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのトポイソメラーゼ阻害剤にコンジュゲートされてもよい。トポイソメラーゼ阻害剤はトポイソメラーゼ酵素（トポイソメラーゼＩ及びＩＩ）の作用に干渉するよう設計された化学療法剤であり、これは、正常細胞周期中に、ＤＮＡ鎖のホスホジエステル骨格を触媒し、次いで、破壊し、再結合することにより、ＤＮＡ構造における変化を制御する酵素である。ＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害剤の代表的な例は、カンプトテシン並びにその誘導体、イリノテカン（ＣＰＴ−１１、Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）及びトポテカン（Ｈｙｃａｍｔｉｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含むが、これらに限定されない。ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩ阻害剤の代表的な例は、アムサクリン、ダウノルビシン、ドキソトルビシン、エピポドフィロトキシン、エリプチシン、エピルビシン、エトポシド、ラゾキサン及びテニポシドを含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのトポイソメラーゼ阻害剤にコンジュゲートされてもよい。トポイソメラーゼ阻害剤はトポイソメラーゼ酵素（トポイソメラーゼＩ及びＩＩ）の作用に干渉するよう設計された化学療法剤であり、これは、正常細胞周期中に、ＤＮＡ鎖のホスホジエステル骨格を触媒し、次いで、破壊し、再結合することにより、ＤＮＡ構造における変化を制御する酵素である。ＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害剤の代表的な例は、カンプトテシン並びにその誘導体、イリノテカン（ＣＰＴ−１１、Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）及びトポテカン（Ｈｙｃａｍｔｉｎ、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）を含むが、これらに限定されない。ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩ阻害剤の代表的な例は、アムサクリン、ダウノルビシン、ドキソトルビシン、エピポドフィロトキシン、エリプチシン、エピルビシン、エトポシド、ラゾキサン及びテニポシドを含むが、これらに限定されない。
１７．キナーゼ阻害剤
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのキナーゼ阻害剤にコンジュゲートされてもよい。タンパク質キナーゼの機能する能力をブロックすることにより、腫瘍成長が阻害され得る。本発明のＡＤＣにおいて使用され得るキナーゼ阻害剤の例は、アキシチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマクサニブ、スニチニブ、オシメルチニブ、コビメチニブ、トラメチニブ、ダブラフェニブ、ディナシクリブ及びバンデタニブを含むが、これらに限定されない。
本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、少なくとも１つのキナーゼ阻害剤にコンジュゲートされてもよい。タンパク質キナーゼの機能する能力をブロックすることにより、腫瘍成長が阻害され得る。本発明のＡＤＣにおいて使用され得るキナーゼ阻害剤の例は、アキシチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマクサニブ、スニチニブ、オシメルチニブ、コビメチニブ、トラメチニブ、ダブラフェニブ、ディナシクリブ及びバンデタニブを含むが、これらに限定されない。
１８．他の薬剤
本発明のＡＤＣにおいて使用され得る他の薬剤の例は、アブリン（例えばアブリンＡ鎖）、アルファトキシン、アレウライツ・フォルディイ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質、アマトキシン、クロチン、クルシン、ジアンチンタンパク質、ジフテリア毒素（例えばジフテリアＡ鎖及びジフテリア毒素の非結合活性断片）、デオキシリボヌクレアーゼ（Ｄｎａｓｅ）、ゲロニン、マイトジェリン、モデシンＡ鎖、モモルディカ・カランティア（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ）阻害剤、ネオマイシン、オンコナーゼ、フェノマイシン、フィトラッカ・アメリカーナ（Ｐｈｙｔｏｌａｃａ ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ及びＰＡＰ−Ｓ）、ヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）内毒素、シュードモナス外毒素（例えば外毒素Ａ鎖（シュードモナス・エルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）に由来する）、レストリクトシン、リシンＡ鎖、リボヌクレアーゼ（Ｒｎａｓｅ）、サポナリア・オフィシナリス（ｓａｐｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤、サポリン、α−サルシン、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｃｏｃｃａｌ）エンテロトキシン−Ａ、破傷風毒素、シスプラチン、カルボプラチン及びオキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ、Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ）、プロテアソーム阻害剤（例えばＰＳ−３４１［ボルテゾミブ又はＶｅｌｃａｄｅ］）、ＨＤＡＣ阻害剤（ボリノスタット（Ｚｏｌｉｎｚａ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．））、ベリノスタット、エンチノスタット、モセチノスタット及びパノビノスタット）、ＣＯＸ−２阻害剤、置換された尿素、熱ショックタンパク質阻害剤（例えばゲルダナマイシン及びその多数の類似体）、副腎皮質抑制剤並びにトリコテセンを含むが、これらに限定されない（例えばＷＯ９３／２１２３２を参照）。他の薬剤はまた、アスパラギナーゼ（Ｅｓｐａｒ、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ Ｉｎｃ．）、ヒドロキシウレア、レバミソール、ミトタン（Ｌｙｓｏｄｒｅｎ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）及びトレチノイン（Ｒｅｎｏｖａ、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。
本発明のＡＤＣにおいて使用され得る他の薬剤の例は、アブリン（例えばアブリンＡ鎖）、アルファトキシン、アレウライツ・フォルディイ（Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ ｆｏｒｄｉｉ）タンパク質、アマトキシン、クロチン、クルシン、ジアンチンタンパク質、ジフテリア毒素（例えばジフテリアＡ鎖及びジフテリア毒素の非結合活性断片）、デオキシリボヌクレアーゼ（Ｄｎａｓｅ）、ゲロニン、マイトジェリン、モデシンＡ鎖、モモルディカ・カランティア（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ）阻害剤、ネオマイシン、オンコナーゼ、フェノマイシン、フィトラッカ・アメリカーナ（Ｐｈｙｔｏｌａｃａ ａｍｅｒｉｃａｎａ）タンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ及びＰＡＰ−Ｓ）、ヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）内毒素、シュードモナス外毒素（例えば外毒素Ａ鎖（シュードモナス・エルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）に由来する）、レストリクトシン、リシンＡ鎖、リボヌクレアーゼ（Ｒｎａｓｅ）、サポナリア・オフィシナリス（ｓａｐｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）阻害剤、サポリン、α−サルシン、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙｌｃｏｃｃａｌ）エンテロトキシン−Ａ、破傷風毒素、シスプラチン、カルボプラチン及びオキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ、Ｓａｎｏｆｉ Ａｖｅｎｔｉｓ）、プロテアソーム阻害剤（例えばＰＳ−３４１［ボルテゾミブ又はＶｅｌｃａｄｅ］）、ＨＤＡＣ阻害剤（ボリノスタット（Ｚｏｌｉｎｚａ、Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．））、ベリノスタット、エンチノスタット、モセチノスタット及びパノビノスタット）、ＣＯＸ−２阻害剤、置換された尿素、熱ショックタンパク質阻害剤（例えばゲルダナマイシン及びその多数の類似体）、副腎皮質抑制剤並びにトリコテセンを含むが、これらに限定されない（例えばＷＯ９３／２１２３２を参照）。他の薬剤はまた、アスパラギナーゼ（Ｅｓｐａｒ、Ｌｕｎｄｂｅｃｋ Ｉｎｃ．）、ヒドロキシウレア、レバミソール、ミトタン（Ｌｙｓｏｄｒｅｎ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）及びトレチノイン（Ｒｅｎｏｖａ、Ｖａｌｅａｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．）を含むが、これらに限定されない。
ＩＩＩ．Ｃ．抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ：他の例示的なリンカー
上述されたリンカーに加えて、他の例示的なリンカーは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル（「ＭＰ」）、バリン−シトルリン（「ｖａｌ−ｃｉｔ」又は「ｖｃ」）、アラニン−フェニルアラニン（「ａｌａ−ｐｈｅ」）、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（「ＰＡＢ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）及び４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＭＣＣ」）を含むが、これらに限定されない。
上述されたリンカーに加えて、他の例示的なリンカーは、６−マレイミドカプロイル、マレイミドプロパノイル（「ＭＰ」）、バリン−シトルリン（「ｖａｌ−ｃｉｔ」又は「ｖｃ」）、アラニン−フェニルアラニン（「ａｌａ−ｐｈｅ」）、ｐ−アミノベンジルオキシカルボニル（「ＰＡＢ」）、Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（「ＳＰＰ」）及び４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１カルボキシレート（「ＭＣＣ」）を含むが、これらに限定されない。
一態様において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、マレイミドカプロイル（「ｍｃ」）、バリンシトルリン（ｖａｌ−ｃｉｔ又は「ｖｃ」）及びＰＡＢＡ（「ｍｃ−ｖｃ−ＰＡＢＡリンカー」と称される）を含むリンカーを介して薬物（オーリスタチンのような、例えばＭＭＡＥ）にコンジュゲートされる。マレイミドカプロイルは、抗Ｂ７−Ｈ３抗体に対するリンカーとして働き、切断不可能である。Ｖａｌ−ｃｉｔは、リンカーのアミノ酸単位であり、タンパク質分解酵素、具体的には、タンパク質分解酵素カテプシンＢによるリンカーの切断を可能にするジペプチドである。したがって、リンカーのｖａｌ−ｃｉｔ構成要素は、細胞内環境への曝露の際にＡＤＣからオーリスタチンを放出するための手段を提供する。リンカー内で、ｐ−アミノベンジルアルコール（ＰＡＢＡ）は、スペーサーとして働き、自壊性であり、これにより、ＭＭＡＥの放出を可能にする。ｍｃ−ｖｃ−ＰＡＢＡ−ＭＭＡＥリンカーの構造は、図３において提供される。
上で記載された通り、適当なリンカーは、例えば、切断可能及び切断不可能なリンカーを含む。リンカーは、薬物の放出を促進する「切断可能なリンカー」であってもよい。非限定的な例示的な切断可能なリンカーは、酸に不安定なリンカー（例えばヒドラゾンを含む）、タンパク質分解酵素感受性（例えばペプチダーゼ感受性）リンカー、光に不安定なリンカー又はジスルフィド含有リンカーを含む（Ｃｈａｒｉら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、５２：１２７〜１３１頁（１９９２年）；米国特許第５，２０８，０２０号）。切断可能なリンカーは、典型的には、細胞内条件下で切断の影響を受けやすい。適当な切断可能なリンカーは、例えば、リソソームタンパク質分解酵素又はエンドソームタンパク質分解酵素のような細胞内タンパク質分解酵素によって切断可能なペプチドリンカーを含む。例示的な実施形態において、リンカーは、バリン−シトルリン（ｖａｌ−ｃｉｔ）又はフェニルアラニン−リジン（ｐｈｅ−ｌｙｓ）リンカーのような、ジペプチドリンカーであり得る。
リンカーは、好ましくは、治療上有効であるのに十分な様式で細胞外で安定である。細胞への輸送又は送達の前に、ＡＤＣは、好ましくは、安定であり、インタクトなままであり、すなわち、抗体は、薬物部分にコンジュゲートされたままである。標的細胞の外側で安定であるリンカーは、細胞内部に入ると、ある有効な速度にて切断されてもよい。したがって、有効なリンカーは：（Ｉ）抗体の特異的な結合特性を維持し；（ｉｉ）薬物部分の送達、例えば細胞内送達を可能にし；（ｉｉｉ）薬物部分の治療効果、例えば細胞傷害性効果を維持する。
一実施形態において、リンカーは、リンカーの切断が、治療上有効である細胞内環境において抗体から薬物を十分に放出するように、細胞内条件下で切断可能である。一部の実施形態において、切断可能なリンカーは、ｐＨ感受性であり、すなわち、ある特定のｐＨ値において加水分解に対して感受性である。典型的には、ｐＨ感受性リンカーは、酸性条件下で加水分解可能である。例えば、リソソーム（例えばヒドラゾン、セミカルバゾン、チオセミカルバゾン、ｃｉｓ−アコニット酸アミド、オルソエステル、アセタール、ケタールなど）において加水分解可能である酸に不安定なリンカーを使用することができる。（例えば米国特許第５，１２２，３６８号；第５，８２４，８０５号；第５，６２２，９２９号；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ及びＷａｌｋｅｒ、１９９９年、Ｐｈａｒｍ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、８３：６７〜１２３頁；Ｎｅｖｉｌｌｅら、１９８９年、Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６４：１４６５３〜１４６６１頁を参照。）かかるリンカーは、血液におけるもののような、中性ｐＨ条件下で相対的に安定であるが、リソソームのおよそのｐＨであるｐＨ５．５又は５．０未満において不安定である。ある特定の実施形態において、加水分解可能なリンカーは、チオエーテルリンカー（例えば、アシルヒドラゾン結合を介して治療剤に結合したチオエーテルのような（例えば米国特許第５，６２２，９２９号を参照）である。
他の実施形態において、リンカーは、還元条件下で切断可能である（例えばジスルフィドリンカー）。例えば、ＳＡＴＡ（Ｎ−スクシンイミジル−５−アセチルチオアセテート）、ＳＰＤＰ（Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート）、ＳＰＤＢ（Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）ブチレート）及びＳＭＰＴ（Ｎ−スクシンイミジルオキシカルボニル−アルファ−メチル−アルファ−（２−ピリジル−ジチオ）トルエン）、ＳＰＤＢ及びＳＭＰＴ（例えば、Ｔｈｏｒｐｅら、１９８７年、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、４７：５９２４〜５９３１頁；Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋら、Ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｉｎ Ｒａｄｉｏｉｍａｇｅｒｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ（Ｃ．Ｗ．Ｖｏｇｅｌ編、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕ．Ｐｒｅｓｓ、１９８７年を参照。米国特許第４，８８０，９３５号も参照。）を使用して形成され得るものを含む、様々なジスルフィドリンカーが、当技術分野において公知である。
一部の実施形態において、リンカーは、細胞内環境（例えば、リソソーム又はエンドソーム又はカベオラ内）に存在する切断剤、例えば酵素によって切断可能である。リンカーは、例えば、リソソーム又はエンドソームタンパク質分解酵素を含むが、これらに限定されない、細胞内ペプチダーゼ又はタンパク質分解酵素により切断されるペプチジルリンカーであり得る。一部の実施形態において、ペプチジルリンカーは、少なくとも２アミノ酸長又は少なくとも３アミノ酸長である。切断剤は、カテプシンＢ及びＤ並びにプラスミンを含み得、これらの全てが、ジペプチド薬物誘導体を加水分解し、これにより、標的細胞内部での活性薬物の放出をもたらすことが知られている（例えばＤｕｂｏｗｃｈｉｋ及びＷａｌｋｅｒ、１９９９年、Ｐｈａｒｍ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、８３：６７〜１２３頁を参照）。Ｂ７−Ｈ３発現細胞に存在する酵素によって切断可能なペプチジルリンカーが、最も典型的である。かかるリンカーの例は、例えば、その全体として、全ての目的について、参照により本明細書に組み込む米国特許第６，２１４，３４５号において記載されている。特定の実施形態において、細胞内タンパク質分解酵素によって切断可能なペプチジルリンカーは、Ｖａｌ−Ｃｉｔリンカー又はＰｈｅ−Ｌｙｓリンカーである（例えば、ｖａｌ−ｃｉｔリンカーを有するドキソルビシンの合成を記載する、米国特許第６，２１４，３４５号を参照する）。治療剤の細胞内タンパク質分解性放出を使用することの１つの利点は、コンジュゲートされたとき、薬剤が典型的には減弱され、コンジュゲートの血清安定性が典型的には高いことである。
他の実施形態において、リンカーは、マロネートリンカー（Ｊｏｈｎｓｏｎら、１９９５年、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、１５：１３８７〜９３頁）、マレイミドベンゾイルリンカー（Ｌａｕら、１９９５年、Ｂｉｏｏｒｇ−Ｍｅｄ−Ｃｈｅｍ、３（１０）：１２９９〜１３０４頁）又は３’−Ｎ−アミド類似体（Ｌａｕら、１９９５年、Ｂｉｏｏｒｇ−Ｍｅｄ−Ｃｈｅｍ．、３（１０）：１３０５〜１２頁を参照）である。
さらに他の実施形態において、リンカー単位は切断不可能であり、薬物は、例えば抗体分解により放出される。その全体として参照により本明細書に組み込む、米国公開第２００５０２３８６４９号を参照。切断不可能なリンカーを含むＡＤＣは、ＡＤＣが実質的に細胞の外側に残るように設計されてもよく、ＡＤＣの結合が、特定の細胞シグナル伝達経路を開始する（又は防止する）ように、標的細胞表面上のある特定の受容体と相互作用する。
一部の実施形態において、リンカーは、実質的に親水性のリンカー（例えばＰＥＧ４Ｍａｌ及びスルホ−ＳＰＤＢ）である。親水性リンカーを使用して、薬物が、ＭＤＲ（多剤耐性）又は機能的に類似の輸送体を介して抵抗性がん細胞からくみ出され得る程度を低減してもよい。
他の実施形態において、切断の際、リンカーは、細胞成長及び／又は細胞増殖を直接的又は間接的に阻害するよう機能する。例えば、一部の実施形態において、リンカーは、切断の際、挿入剤として機能し、これにより、高分子の生合成（例えばＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写及び／又はタンパク質合成）を阻害することができる。
他の実施形態において、リンカーは、隣接する細胞へのリンカー−薬物及び／又は薬物単独の拡散を介して、バイスタンダー死滅（隣接する細胞の死滅）を促進するよう設計される。他の実施形態において、リンカーは、細胞の内部移行を促進する。
立体的に障害されたジスルフィドの存在により、特定のジスルフィド結合の安定性を増大させ、これにより、ＡＤＣの効力を増強し得る。したがって、一実施形態において、リンカーは、立体的に障害されたジスルフィド結合を含む。立体的に障害されたジスルフィドは、特定の分子環境内に存在するジスルフィド結合を指し、環境は、典型的には、ジスルフィド結合の還元を防止する、又は少なくとも部分的に阻害する、同じ分子又は化合物内の原子の特定の空間配置又は配向により特徴付けられる。したがって、ジスルフィド結合に近接する巨大な（若しくは立体的に障害されている）化学部分及び／又は巨大なアミノ酸側鎖の存在は、ジスルフィド結合の還元をもたらす、可能な相互作用からジスルフィド結合を防止する、又は少なくとも部分的に阻害する。
特に、前述のリンカー種類は、相互排他的ではない。例えば一実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣにおいて使用されるリンカーは、細胞の内部移行を促進する切断不可能なリンカーである。
一部の実施形態において、リンカー構成要素は、抗体を別のリンカー構成要素に又は薬物部分に連結する「ストレッチャー単位」を含む。参照により本明細書に組み込むＵＳ８，３０９，０９３において記載される、説明的なストレッチャー単位。ある特定の実施形態において、ストレッチャー単位は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体単位の硫黄原子とストレッチャー単位の硫黄原子の間のジスルフィド結合を介して、抗Ｂ７−Ｈ３抗体に連結される。この実施形態の代表的なストレッチャー単位は、参照により本明細書に組み込むＵＳ８，３０９，０９３において描かれる。さらに他の実施形態において、ストレッチャーは、抗体の１級又は２級アミノ基と結合を形成することができる反応性部位を含有する。これらの反応性部位の例は、スクシンイミドエステル、４ニトロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル、テトラフルオロフェニルエステルのような活性化エステル、無水物、酸塩化物、スルホニルクロライド、イソシアネート及びイソチオシアネートを含むが、これらに限定されない。この実施形態の代表的なストレッチャー単位は、参照により本明細書に組み込むＵＳ８，３０９，０９３において描かれる。
一部の実施形態において、ストレッチャーは、抗体上に存在し得る修飾された炭水化物の（−ＣＨＯ）基に対して反応性である反応性部位を含有する。例えば、炭水化物は、過ヨウ素酸ナトリウムのような試薬を使用して、少々酸化することができ、酸化された炭水化物の得られた（−ＣＨＯ）単位は、ヒドラジド、オキシム、１級又は２級アミン、ヒドラジン、チオセミカルバゾン、ヒドラジンカルボキシレート及びＫａｎｅｋｏら、１９９１年、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．、２：１３３〜４１頁により記載されるもののようなアリールヒドラジドのような官能基を含有するストレッチャーと縮合することができる。この実施形態の代表的なストレッチャー単位は、参照により本明細書に組み込むＵＳ８，３０９，０９３において描かれる。
一部の実施形態において、リンカー構成要素は、「アミノ酸単位」を含む。一部のかかる実施形態において、アミノ酸単位は、タンパク質分解酵素によるリンカーの切断を可能にし、これにより、リソソーム酵素のような細胞内タンパク質分解酵素への曝露の際に免疫コンジュゲートからの薬物の放出を促進する（Ｄｏｒｏｎｉｎａら（２００３年）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、２１：７７８〜７８４頁）。例示的なアミノ酸単位は、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド及びペンタペプチドを含むが、これらに限定されない。例示的なジペプチドは、バリン−シトルリン（ｖｃ又はｖａｌ−ｃｉｔ）、アラニン−フェニルアラニン（ａｆ又はａｌａ−ｐｈｅ）；フェニルアラニン−リジン（ｆｋ又はｐｈｅ−ｌｙｓ）；フェニルアラニン−ホモリジン（ｐｈｅ−ｈｏｍｏｌｙｓ）；及びＮ−メチル−バリン−シトルリン（Ｍｅ−ｖａｌ−ｃｉｔ）を含むが、これらに限定されない。例示的なトリペプチドは、グリシン−バリン−シトルリン（ｇｌｙ−ｖａｌ−ｃｉｔ）及びグリシン−グリシン−グリシン（ｇｌｙ−ｇｌｙ−ｇｌｙ）を含むが、これらに限定されない。アミノ酸単位は、天然に存在するアミノ酸残基及び／又は小さなアミノ酸及び／又はシトルリンアミノ酸単位のような天然に存在しないアミノ酸類似体を含み得、特定の酵素、例えば腫瘍関連タンパク質分解酵素、カテプシンＢ、Ｃ及びＤ、又はプラスミンタンパク質分解酵素による酵素切断のために設計され、最適化され得る。
一実施形態において、アミノ酸単位は、バリン−シトルリン（ｖｃ又はｖａｌ−ｃｉｔ）である。別の態様において、アミノ酸単位は、フェニルアラニン−リジン（すなわち、ｆｋ）である。アミノ酸単位のさらに別の態様において、アミノ酸単位は、Ｎ−メチルバリン−シトルリンである。さらに別の態様において、アミノ酸単位は、５−アミノ吉草酸、ホモフェニルアラニンリジン、テトライソキノリンカルボキシレートリジン、シクロヘキシルアラニンリジン、イソニペコチン酸リジン、ベータ−アラニンリジン、グリシンセリンバリングルタミン及びイソニペコチン酸である。
あるいは、一部の実施形態において、アミノ酸単位は、ストレッチャー及びスペーサー単位が存在するなら、ストレッチャー単位をスペーサー単位に連結し、スペーサー単位が存在しないなら、ストレッチャー単位を薬物部分に連結し、ストレッチャー及びスペーサー単位が存在しないなら、リンカー単位を薬物に連結するグルクロニド単位により置き換えられる。グルクロニド単位は、β−グルクロニダーゼ酵素により切断され得る部位を含む（参照により本明細書に組み込むＵＳ２０１２／０１０７３３２も参照）。一部の実施形態において、グルクロニド単位は、以下で描かれる式の自壊性基（Ｚ）へのグリコシド結合（−Ｏ’−）を介して連結された糖部分（Ｓｕ）を含む（参照により本明細書に組み込むＵＳ２０１２／０１０７３３２も参照）。
一部の実施形態において、糖部分（Ｓｕ）は、ピラノースのような環状ヘキソース又はフラノースのような環状ペントースである。一部の実施形態において、ピラノースは、グルクロニド又はヘキソースである。糖部分は、通常、β−Ｄ立体構造である。特定の実施形態において、ピラノースは、β−Ｄ−グルクロニド部分（すなわち、β−グルクロニダーゼによって切断可能であるグリコシド結合を介して、自壊性の基−Ｚ−に連結されたβ−Ｄ−グルクロン酸）である。一部の実施形態において、糖部分は、置換されていない（例えば天然に存在する環状ヘキソース又は環状ペントース）。他の実施形態において、糖部分は、置換されたβ−Ｄ−グルクロニド（すなわち、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、硫黄、窒素又は低級アルキルのような１つ以上の基で置換されたグルクロン酸）であり得る。一部の実施形態において、グルクロニド単位は、参照により本明細書に組み込むＵＳ２０１２／０１０７３３２において記載される式の１つを有する。
一部の実施形態において、リンカーは、存在するとき、アミノ酸単位が存在するとき、アミノ酸単位（又はグルクロニド単位、参照により本明細書に組み込むＵＳ２０１２／０１０７３３２も参照）を薬物部分に連結するスペーサー単位（−Ｙ−）を含む。あるいは、スペーサー単位は、アミノ酸単位が存在しないとき、ストレッチャー単位を薬物部分に連結する。スペーサー単位はまた、アミノ酸単位とストレッチャー単位の両方が存在しないとき、薬物単位を抗体単位に連結し得る。
スペーサー単位は、２つの一般的な種類：非自壊性又は自壊性のものである。非自壊性のスペーサー単位は、スペーサー単位の一部又は全てが、抗体−薬物コンジュゲートからのアミノ酸単位（又はグルクロニド単位）の切断、特に酵素切断後、薬物部分に結合したままのものである。非自壊性のスペーサー単位の例は、（グリシン−グリシン）スペーサー単位及びグリシンスペーサー単位（参照により本明細書に組み込むＵＳ８，３０９，０９３を参照））を含むが、これらに限定されない。自壊性のスペーサーの他の例は、２−アミノイミダゾール−５−メタノール誘導体（Ｈａｙら、１９９９年、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、９：２２３７頁）及びオルト又はパラ−アミノベンジルアセタールのようなＰＡＢ基に電子的に類似する芳香族化合物を含むが、これらに限定されない。置換された及び置換されていない４−アミノ酪酸アミド（Ｒｏｄｒｉｇｕｅｓら、１９９５年、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｂｉｏｌｏｇｙ、２：２２３頁）、適当に置換されたビシクロ［２．２．１］及びビシクロ［２．２．２］環系（Ｓｔｏｒｍら、１９７２年、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、９４：５８１５頁）並びに２−アミノフェニルプロピオン酸アミド（Ａｍｓｂｅｒｒｙら、１９９０年、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５５：５８６７頁）のような、アミド結合加水分解の際に環化を受けるスペーサーを使用することができる。グリシンのα−位において置換されているアミン含有薬物の除去（Ｋｉｎｇｓｂｕｒｙら、１９８４年、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２７：１４４７頁）もまた、自壊性のスペーサーの例である。
自壊性のスペーサーの他の例は、２−アミノイミダゾール−５−メタノール誘導体（例えばＨａｙら、１９９９年、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、９：２２３７頁を参照）及びオルト又はパラ−アミノベンジルアセタールのようなＰＡＢ基に電子的に類似する芳香族化合物を含むが、これらに限定されない。置換された及び置換されていない４−アミノ酪酸アミド（例えばＲｏｄｒｉｇｕｅｓら、１９９５年、Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｂｉｏｌｏｇｙ、２：２２３頁を参照）、適当に置換されたビシクロ［２．２．１］及びビシクロ［２．２．２］環系（例えばＳｔｏｒｍら、１９７２年、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、９４：５８１５頁を参照）並びに２−アミノフェニルプロピオン酸アミド（例えばＡｍｓｂｅｒｒｙら、１９９０年、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、５５：５８６７頁を参照）のような、アミド結合加水分解の際に環化を受けるスペーサーを使用することができる。グリシンのａ−位において置換されているアミン含有薬物の除去（例えばＫｉｎｇｓｂｕｒｙら、１９８４年、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２７：１４４７頁を参照）もまた、自壊性のスペーサーの例である。
他の適当なスペーサー単位は、公開された米国特許出願第２００５−０２３８６４９号において開示され、この開示を参照により本明細書に組み込む。
ＡＤＣを生成する別のアプローチは、抗Ｂ７−Ｈ３抗体を薬物部分に連結するヘテロ二官能性クロスリンカーの使用を含む。使用され得るクロスリンカーの例は、Ｎ−スクシンイミジル４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）−ペンタノエート又は高度に水溶性の類似体Ｎ−スルホスクシンイミジル４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）−ペンタノエート、Ｎ−スクシンイミジル−４−（２−ピリジルジチオ）ブチレート（ＳＰＤＢ）、Ｎ−スクシンイミジル−４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）ブチレート（ＳＮＰＢ）及びＮ−スルホスクシンイミジル−４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）ブチレート（ＳＳＮＰＢ）、Ｎ−スクシンイミジル−４−メチル−４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）ペンタノエート（ＳＭＮＰ）、Ｎ−スクシンイミジル−４−（５−Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド−２−ピリジルジチオ）ブチレート（ＳＣＰＢ）又はＮ−スルホスクシンイミジル４−（５−Ｎ，Ｎ−ジメチルカルボキサミド−２−ピリジルジチオ）ブチレート（ＳＳＣＰＢ））を含む。本発明の抗体は、クロスリンカーで修飾されてもよく、次いで、Ｎ−スクシンイミジル４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）−ペンタノエート、Ｎ−スルホスクシンイミジル４−（５−ニトロ−２−ピリジルジチオ）−ペンタノエート、ＳＰＤＢ、ＳＮＰＢ、ＳＳＮＰＢ、ＳＭＮＰ、ＳＣＰＢ又はＳＳＣＰＢは、優れた収量のＡＤＣを生じるチオール部分を含有する小過剰の特定の薬物と反応することができる。好ましくは、クロスリンカーは、参照により本明細書に組み込む米国特許第６，９１３，７４８号において描かれた式の化合物である。
一実施形態において、荷電したリンカー（前荷電したリンカーとも称される）を使用して、抗Ｂ７−Ｈ３抗体を薬物にコンジュゲートさせて、ＡＤＣを形成する。荷電したリンカーは、細胞プロセシング後に荷電させたリンカーを含む。細胞プロセシング後、特定のＡＤＣのリンカーにおける又は薬物上での荷電した基の存在は、（ｉ）ＡＤＣのより高い水溶性、（ｉｉ）水溶液中のより高い濃度において操作する能力、（ｉｉｉ）潜在的により高い効力をもたらす、１つの抗体当たりより多い数の薬物分子を連結する能力、（ｉｖ）より高い効力をもたらす、標的細胞内部で保持される荷電したコンジュゲート種の可能性、及び（ｖ）荷電した薬物種を細胞から輸送することができない多剤耐性細胞の改善された感受性のような、いくつかの利点をもたらす。いくつかの適当な荷電した又は前荷電したクロスリンカー及びこれらの合成の例は、米国特許第８，２３６，３１９号の図１〜１０において示され、参照により本明細書に組み込む。好ましくは、荷電した又は前荷電したクロスリンカーは、ＡＤＣ、特に、２〜２０個のコンジュゲートされた薬物を有するＡＤＣの溶解度を有意に増大させる、スルホネート、リン酸塩、カルボキシル又は４級アミン置換基を含有するものである。前荷電した部分を含有するリンカーから調製されたコンジュゲートは、コンジュゲートが細胞において代謝された後、１つ以上の荷電した部分を生産する。
組成物及び方法で使用することができるリンカーのさらなる例は、バリン−シトルリン；マレイミドカプロイル；アミノ安息香酸；ｐ−アミノベンジルカルバモイル（ＰＡＢ）；リソソーム酵素切断可能なリンカー；マレイミドカプロイル−ポリエチレングリコール（ＭＣ（ＰＥＧ）６−ＯＨ）；Ｎ−メチル−バリンシトルリン；Ｎ−スクシンイミジル４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）；Ｎ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルジチオ）ブタノエート（ＳＰＤＢ）；及びＮ−スクシンイミジル４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）（ＵＳ２０１１／００７６２３２も参照）を含む。本発明において使用するための別のリンカーは、アビジン−ビオチン含有ＡＤＣを提供するためのアビジン−ビオチン結合を含み（米国特許第４，６７６，９８０号、ＰＣＴ公開第ＷＯ１９９２／０２２３３２Ａ２号、第ＷＯ１９９４／０１６７２９Ａ１号、第ＷＯ１９９５／０１５７７０Ａ１号、第ＷＯ１９９７／０３１６５５Ａ２号、第ＷＯ１９９８／０３５７０４Ａ１号、第ＷＯ１９９９／０１９５００Ａ１号、第ＷＯ２００１／０９７８５Ａ２号、第ＷＯ２００１／０９０１９８Ａ１号、第ＷＯ２００３／０９３７９３Ａ２号、第ＷＯ２００４／０５００１６Ａ２号、第ＷＯ２００５／０８１８９８Ａ２号、第ＷＯ２００６／０８３５６２Ａ２号、第ＷＯ２００６／０８９６６８Ａ１号、第ＷＯ２００７／１５００２０Ａ１号、第ＷＯ２００８／１３５２３７Ａ１号、第ＷＯ２０１０／１１１１９８Ａ１号、第ＷＯ２０１１／０５７２１６Ａ１号、第ＷＯ２０１１／０５８３２１Ａ１号、第ＷＯ２０１２／０２７４９４Ａ１号及びＥＰ７７６７１Ｂ１も参照）、ここで、いくつかのかかるリンカーは、ビオチニダーゼ切断に抵抗性である。本明細書において使用され得るさらなるリンカーは、コヒーシン／ドッケリン対を含んで、コヒーシン−ドッケリン含有ＡＤＣをもたらす（ＰＣＴ公開第ＷＯ２００８／０９７８６６Ａ２号、第ＷＯ２００８／０９７８７０Ａ２号、第ＷＯ２００８／１０３９４７Ａ２号及び第ＷＯ２００８／１０３９５３Ａ２号を参照）。
本発明において使用するためのさらなるリンカーは、非ペプチドポリマー（例は、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリオキシエチル化ポリオール、ポリビニルアルコール、ポリサッカライド、デキストラン、ポリビニルエチルエーテル、ＰＬＡ（ポリ（乳酸））、ＰＬＧＡ（ポリ（乳酸−グリコール酸））、及びこれらの組合せを含むが、これらに限定されず、好ましいポリマーはポリエチレングリコールである。）を含有してもよい（ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１１／０００３７０号も参照）。さらなるリンカーはまた、ＷＯ２００４−０１０９５７、米国公開第２００６００７４００８号、米国公開第２００５０２３８６４９号及び米国公開第２００６００２４３１７号において記載され、これらのそれぞれを、その全体として参照により本明細書に組み込む。
メイタンシノイドを含むＡＤＣについて、メイタンシノイド上の多くの位置は、連結部分を化学的に連結するための位置として働き得る。一実施形態において、メイタンシノイドは、反応性化学基を含有する連結部分を含み、連結部分がジスルフィド結合を含有するメイタンシノール及びその類似体のＣ−３エステルであり、化学反応性基は、Ｎ−スクシンイミジル又はＮ−スルホスクシンイミジルエステルを含む。例えば、ヒドロキシル基を有するＣ−３位、ヒドロキシメチルで修飾されたＣ−１４位、ヒドロキシで修飾されたＣ−１５位及びヒドロキシ基を有するＣ−２０位は、全て有用である。連結部分は、最も好ましくは、メイタンシノールのＣ−３位に連結される。
リンカーを介した抗体への薬物のコンジュゲーションは、当技術分野において公知の任意の技術により達成され得る。いくつかの異なる反応が、抗体への薬物及びリンカーの共有結合のため入手可能である。これは、リジンのアミン基、グルタミン酸及びアスパラギン酸の遊離カルボン酸基、システインのスルフヒドリル基及び芳香族アミノ酸の様々な部分を含む抗体のアミノ酸残基の反応により達成され得る。共有結合の最も一般的に使用される非特異的な方法の１つは、化合物のカルボキシ（又はアミノ）基を抗体のアミノ（又はカルボキシ）基に連結するためのカルボジイミド反応である。加えて、ジアルデヒド又はイミドエステルのような二機能性薬剤を使用して、化合物のアミノ基を抗体のアミノ基に連結させた。また、抗体への薬物の結合のため、シッフ塩基反応が利用可能である。この方法は、グリコール又はヒドロキシ基を含有する薬物の過ヨウ素酸酸化を含み、これにより、次いで結合剤と反応するアルデヒドを形成する。結合は、抗体のアミノ基とのシッフ塩基の形成を介して生じる。イソチオシアネートはまた、抗体に薬物を共有結合させるカップリング剤として使用することができる。他の技術は、当業者に公知であり、本発明の範囲内である。
ある特定の実施形態において、リンカーの前駆体である中間体は、適当な条件下で薬物と反応する。ある特定の実施形態において、反応性基は、薬物又は中間体上で使用される。薬物と中間体の間の反応の産物又は誘導体化された薬物は、続いて、適当な条件下で抗Ｂ７−Ｈ３抗体と反応する。例示的なリンカー、ストレッチャー単位、アミノ酸単位、自壊性のスペーサー単位の合成及び構造は、米国特許出願公開第２００３００８３２６３号、第２００５０２３８６４９号及び第２００５０００９７５１号において記載され、これらのそれぞれを参照により本明細書に組み込む。
ＡＤＣの安定性は、質量分析、ＨＰＬＣ及び分離／分析技術ＬＣ／ＭＳのような標準的な分析技術により測定されてもよい。
ＩＶ．抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの精製
ＡＤＣの精製は、ある特定のＤＡＲを有するＡＤＣを回収するような方法で達成されてもよい。例えばＨＩＣ樹脂を使用して、最適な薬物抗体比（ＤＡＲ）、例えば４以下のＤＡＲを有するＡＤＣから高い薬物負荷ＡＤＣを分離してもよい。一実施形態において、疎水性樹脂は、所望されないＡＤＣ、すなわち、より高い薬物負荷ＡＤＣが、樹脂に結合し、混合物から選択的に除去され得るように、ＡＤＣ混合物に添加される。ある特定の実施形態において、ＡＤＣの分離は、ＡＤＣ混合物（例えば、４以下のＡＤＣの薬物負荷種及び６以上のＡＤＣの薬物負荷種を含む混合物）を疎水性樹脂と接触させることにより達成されてもよく、樹脂の量は、ＡＤＣ混合物から取り除かれる薬物負荷種の結合を可能にするのに十分である。樹脂とＡＤＣ混合物は、取り除かれるＡＤＣ種（例えば６以上の薬物負荷種）が、樹脂に結合し、ＡＤＣ混合物中の他のＡＤＣ種から分離することができるように、一緒に混合される。方法において使用される樹脂の量は、取り除かれるべき種と樹脂の間の重量比に基づき、使用される樹脂の量は、所望される薬物負荷種の十分な結合を可能にしない。したがって、方法を使用して、平均ＤＡＲを４未満まで低減してもよい。さらに、本明細書に記載される精製方法を使用して、薬物負荷種、例えば、４以下の薬物負荷種、３以下の薬物負荷種、２以下の薬物負荷種、１以下の薬物負荷種の任意の所望される範囲を有するＡＤＣを単離してもよい。
ＡＤＣの精製は、ある特定のＤＡＲを有するＡＤＣを回収するような方法で達成されてもよい。例えばＨＩＣ樹脂を使用して、最適な薬物抗体比（ＤＡＲ）、例えば４以下のＤＡＲを有するＡＤＣから高い薬物負荷ＡＤＣを分離してもよい。一実施形態において、疎水性樹脂は、所望されないＡＤＣ、すなわち、より高い薬物負荷ＡＤＣが、樹脂に結合し、混合物から選択的に除去され得るように、ＡＤＣ混合物に添加される。ある特定の実施形態において、ＡＤＣの分離は、ＡＤＣ混合物（例えば、４以下のＡＤＣの薬物負荷種及び６以上のＡＤＣの薬物負荷種を含む混合物）を疎水性樹脂と接触させることにより達成されてもよく、樹脂の量は、ＡＤＣ混合物から取り除かれる薬物負荷種の結合を可能にするのに十分である。樹脂とＡＤＣ混合物は、取り除かれるＡＤＣ種（例えば６以上の薬物負荷種）が、樹脂に結合し、ＡＤＣ混合物中の他のＡＤＣ種から分離することができるように、一緒に混合される。方法において使用される樹脂の量は、取り除かれるべき種と樹脂の間の重量比に基づき、使用される樹脂の量は、所望される薬物負荷種の十分な結合を可能にしない。したがって、方法を使用して、平均ＤＡＲを４未満まで低減してもよい。さらに、本明細書に記載される精製方法を使用して、薬物負荷種、例えば、４以下の薬物負荷種、３以下の薬物負荷種、２以下の薬物負荷種、１以下の薬物負荷種の任意の所望される範囲を有するＡＤＣを単離してもよい。
ある特定の種の分子は、種と疎水性樹脂の間の疎水性相互作用に基づき、表面に結合する。一実施形態において、本発明の方法は、疎水性樹脂とＡＤＣの混合物の相互混合を利用する精製プロセスを指し、混合物に添加される樹脂の量が、どの種（例えば６以上のＤＡＲを有するＡＤＣ）が結合するかを決定する。発現系（例えば哺乳動物発現系）からの抗体の生産及び精製後、抗体は還元され、コンジュゲーション反応を介して薬物にカップリングされる。得られたＡＤＣ混合物は、しばしば、ＤＡＲの範囲、例えば１〜８を有するＡＤＣを含有する。一実施形態において、ＡＤＣ混合物は、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含む。本発明の方法により、４以下の薬物負荷種を有するＡＤＣが選択され、より高い薬物負荷を有するＡＤＣ（例えば６以上の薬物負荷種を有するＡＤＣ）から分離されるように、ＡＤＣ混合物は、これに限定されないがバッチプロセスのようなプロセスを使用して精製されてもよい。特に、本明細書に記載される精製方法を使用して、任意の所望される範囲のＤＡＲ、例えば４以下のＤＡＲ、３以下のＤＡＲ又は２以下のＤＡＲを有するＡＤＣを単離してもよい。
したがって、一実施形態において、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を疎水性樹脂と接触させて、樹脂混合物を形成することができ、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量は、樹脂への６以上の薬物負荷種の結合を可能にするのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にせず；ＡＤＣを含む組成物が得られるように、疎水性樹脂をＡＤＣ混合物から取り除き、ここで組成物は、１５％未満の６以上の薬物負荷種を含み、ＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされた抗体を含む。別の実施形態において、本発明の方法は、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を、疎水性樹脂と接触させて、樹脂混合物を形成するステップであって、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量が、樹脂への６以上の薬物負荷種の結合を可能にするのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にしない、ステップ；及びＡＤＣを含む組成物が得られるように、ＡＤＣ混合物から疎水性樹脂を取り除くステップであって、組成物が、１５％未満の６以上の薬物負荷種を含み、ＡＤＣが、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされた抗体を含み、疎水性樹脂重量が、ＡＤＣ混合物における６以上の薬物負荷種の重量の３〜１２倍である、ステップを含む。
本明細書に記載されるＡＤＣ分離方法は、バッチ精製方法を使用して行われてもよい。バッチ精製プロセスは、一般に、容器内でＡＤＣ混合物を疎水性樹脂に添加すること、混合すること、及び続いて、上清から樹脂を分離することを含む。例えば、バッチ精製の文脈において、疎水性樹脂は、所望される平衡バッファーにおいて調製されてもよく又は平衡化されてもよい。これにより、疎水性樹脂のスラリーが得られ得る。次いで、ＡＤＣ混合物をスラリーと接触させ、疎水性樹脂により分離されるべきＡＤＣの特定の種が吸着され得る。次いで、疎水性樹脂材料に結合しない所望されるＡＤＣを含む溶液は、例えば、濾過により、又はスラリーを沈殿させ、上清を取り除くことにより、スラリーから分離され得る。得られたスラリーは、１回以上の洗浄ステップに供され得る。結合したＡＤＣを溶出するために、塩濃度を下げることができる。一実施形態において、本発明において使用されるプロセスは、５０ｇ以下の疎水性樹脂を含む。
したがって、バッチ方法を使用して、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を疎水性樹脂と接触させて、樹脂混合物を形成することができ、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量は、樹脂への６以上の薬物負荷種の結合を可能にするのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にせず；ＡＤＣを含む組成物が得られるように、疎水性樹脂をＡＤＣ混合物から取り除き、ここで組成物は、１５％未満の６以上の薬物負荷種を含み、ＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされた抗体を含む。別の実施形態において、バッチ方法を使用して、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を、疎水性樹脂と接触させて、樹脂混合物を形成し、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量は、樹脂への６以上の薬物負荷種の結合を可能にするのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にせず；ＡＤＣを含む組成物が得られるように、ＡＤＣ混合物から疎水性樹脂を取り除き、ここで組成物は、１５％未満の６以上の薬物負荷種を含み、ＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされた抗体を含み、疎水性樹脂重量は、ＡＤＣ混合物における６以上の薬物負荷種の重量の３〜１２倍である。
あるいは、別の実施形態において、精製は、循環プロセスを使用して行われてもよく、これにより、樹脂が容器に充填され、分離されるべき特定の種のＡＤＣが除去されるまで、ＡＤＣ混合物は、疎水性樹脂ベッドを通過する。次いで、上清（所望されるＡＤＣ種を含有する）が、容器から汲み上げられ、樹脂ベッドが、洗浄ステップに供されてもよい。
循環プロセスを使用して、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を疎水性樹脂と接触させて、樹脂混合物を形成することができ、ここで、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量は、樹脂への６以上の薬物負荷種の結合を可能にするのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にせず；ＡＤＣを含む組成物が得られるように、疎水性樹脂をＡＤＣ混合物から取り除き、ここで組成物は、１５％未満の６以上の薬物負荷種を含み、ＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされた抗体を含む。別の実施形態において、循環プロセスを使用して、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を、疎水性樹脂と接触させて、樹脂混合物を形成し、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量は、樹脂への６以上の薬物負荷種の結合を可能にするのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にせず；ＡＤＣを含む組成物が得られるように、ＡＤＣ混合物から疎水性樹脂を取り除き、ここで組成物は、１５％未満の６以上の薬物負荷種を含み、ＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされた抗体を含み、疎水性樹脂重量は、ＡＤＣ混合物における６以上の薬物負荷種の重量の３〜１２倍である。
あるいは、フロースループロセスを使用して、ＡＤＣ混合物を精製し、ある特定の所望されるＤＡＲを有するＡＤＣの大部分を含む組成物に達し得る。フロースループロセスにおいて、樹脂は、容器、例えばカラムに充填され、所望されるＡＤＣ種が、樹脂に実質的に結合せず、樹脂中を流れ、所望されないＡＤＣ種が樹脂に結合するように、ＡＤＣ混合物は、充填された樹脂を通過する。フロースループロセスは、単一通過様式（ここで、目的のＡＤＣ種は、容器の樹脂の単一の通過の結果として得られる。）において、又は複数通過様式（ここで、目的のＡＤＣ種は、容器の樹脂の複数の通過の結果として得られる。）において行われてもよい。選択された樹脂の重量が、所望されないＡＤＣ集団に結合し、所望されるＡＤＣ（例えばＤＡＲ２〜４）が樹脂を越えて流れ、１回又は複数回の通過後、フロースルーにおいて集められるように、フロースループロセスは行われる。
フロースループロセスを使用して、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を疎水性樹脂と接触させてもよく、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量は、樹脂への６以上の薬物負荷種の結合を可能にするのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にせず、所望されるＡＤＣ（例えばＤＡＲ２〜４）を含む組成物が得られるように、４以下の薬物負荷種が樹脂を通過し、続いて、１回又は複数回の通過後に集められ、ここで、組成物は、１５％未満の６以上の薬物負荷種を含み、ＡＤＣは、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされた抗体を含む。別の実施形態では、フロースループロセスを使用して、４以下の薬物負荷種及び６以上の薬物負荷種を含むＡＤＣ混合物を樹脂上に通過させることによってＡＤＣ混合物を疎水性樹脂と接触させ、ここで、ＡＤＣ混合物と接触させる疎水性樹脂の量は、６以上の薬物負荷種を樹脂に結合させるのに十分であるが、４以下の薬物負荷種の有意な結合を可能にせず、４以下の薬物負荷種は樹脂を通過し、その後に回収され、これによりＡＤＣを含む組成物が得られ、該組成物は６以上の薬物負荷種を１５％未満含み、ＡＤＣはＢｃｌ−ｘＬ阻害剤のような薬物にコンジュゲートした抗体を含み、疎水性樹脂重量は、ＡＤＣ混合物における６以上の薬物負荷種の重量の３〜１２倍である。
フロースループロセス後、樹脂は、１回以上の洗浄で洗浄され、その後、所望されるＤＡＲ範囲を有するＡＤＣ（洗浄濾液において見られる）をさらに回収してもよい。例えば、低下している伝導性を有する複数の洗浄を使用して、目的のＤＡＲを有するＡＤＣをさらに回収してもよい。樹脂の洗浄から得られた溶出物質は、続いて、目的のＤＡＲを有するＡＤＣの改善された回収のため、フロースループロセスから得られた濾液と合わせてもよい。
前述のバッチ、循環及びフロースループロセス精製方法は、ＡＤＣの高薬物負荷種対低薬物負荷種を分離するための疎水性樹脂の使用に基づく。疎水性樹脂は、ＡＤＣの疎水性と相互作用する疎水性基を含む。ＡＤＣ上の疎水性基は、疎水性樹脂内の疎水性基と相互作用する。より疎水性のタンパク質であるほど、疎水性樹脂とより強く相互作用する。
疎水性樹脂は、通常、疎水性リガンド（例えば、アルキル又はアリール基）がカップリングされる塩基マトリックス（例えば、架橋結合したアガロース又は合成コポリマー物質）を含む。多くの疎水性樹脂が市販されている。例は、低置換又は高置換のＰｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）６高速（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＬＫＢ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＡＢ、Ｓｗｅｄｅｎ）；Ｐｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）高性能（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＬＫＢ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＡＢ、Ｓｗｅｄｅｎ）；Ｏｃｔｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）高性能（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＬＫＢ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＡＢ、Ｓｗｅｄｅｎ）；Ｆｒａｃｔｏｇｅｌ（商標）ＥＭＤプロピル又はＦｒａｃｔｏｇｅｌ（商標）ＥＭＤフェニルカラム（Ｅ．Ｍｅｒｃｋ、Ｇｅｒｍａｎｙ）；Ｍａｃｒｏ−Ｐｒｅｐ（商標）メチル又はＭａｃｒｏ−Ｐｒｅｐ（商標）；ｔ−ブチルサポート（Ｂｉｏ−Ｒａｄ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）；ＷＰ ＨＩ−プロピル（Ｃ３）（商標）（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ）；及びＴｏｙｏｐｅａｒｌ（商標）エーテル、ヘキシル、フェニル又はブチル（ＴｏｓｏＨａａｓ、ＰＡ）を含むが、これらに限定されない。一実施形態において、疎水性樹脂は、ブチル疎水性樹脂である。別の実施形態において、疎水性樹脂は、フェニル疎水性樹脂である。別の実施形態において、疎水性樹脂は、ヘキシル疎水性樹脂、オクチル疎水性樹脂又はデシル疎水性樹脂である。一実施形態において、疎水性樹脂は、ｎ−ブチルリガンドを有するメタクリル系ポリマー（例えばＴＯＹＯＰＥＡＲＬ（登録商標）ブチル−６００Ｍ）である。
所望されるＤＡＲを有する組成物を得るためにＡＤＣ混合物を精製するさらなる方法は、その全体を参照により組み込む米国出願第１４／２１０，６０２号（米国特許出願公開第ＵＳ２０１４／０２８６９６８号）において記載される。
本発明のある特定の実施形態において、ＤＡＲ２を有する本明細書に記載されるＡＤＣは、より高い又はより低いＤＡＲを有するＡＤＣから精製される。かかる精製されたＤＡＲ２ ＡＤＣは、本明細書において「Ｅ２」と称される。Ｅ２抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣを有する組成物を得るための精製方法。本発明の一実施形態において、ＡＤＣ混合物を含む組成物を提供し、ＡＤＣの少なくとも７５％は、ＤＡＲ２を有する抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ（本明細書に記載されるもののような）である。別の実施形態において、本発明は、ＡＤＣ混合物を含む組成物を提供し、ＡＤＣの少なくとも８０％は、ＤＡＲ２を有する抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ（本明細書に記載されるもののような）である。別の実施形態において、本発明は、ＡＤＣ混合物を含む組成物を提供し、ＡＤＣの少なくとも８５％は、ＤＡＲ２を有する抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ（本明細書に記載されるもののような）である。別の実施形態において、本発明は、ＡＤＣ混合物を含む組成物を提供し、ＡＤＣの少なくとも９０％は、ＤＡＲ２を有する抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ（本明細書に記載されるもののような）である。
Ｖ．抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの使用
本発明の抗体及びＡＤＣは、好ましくは、インビボでもヒトＢ７−Ｈ３活性を中和することができる。したがって、本発明のかかる抗体及びＡＤＣを用いて、本発明の抗体が交差反応するＢ７−Ｈ３を有するヒト対象又は他の哺乳動物対象において、例えばｈＢ７−Ｈ３を含む細胞培養物中でｈＢ７−Ｈ３活性を阻害することができる。一実施形態において、本発明は、ｈＢ７−Ｈ３活性が阻害されるようにｈＢ７−Ｈ３を本発明の抗体又はＡＤＣと接触させることを含む、ｈＢ７−Ｈ３活性を阻害する方法を提供する。例えば、ｈＢ７−Ｈ３を含む又は含むことが疑われる細胞培養物において、本発明の抗体又は抗体部分を培養培地に添加して培養物中のｈＢ７−Ｈ３活性を阻害することができる。
本発明の抗体及びＡＤＣは、好ましくは、インビボでもヒトＢ７−Ｈ３活性を中和することができる。したがって、本発明のかかる抗体及びＡＤＣを用いて、本発明の抗体が交差反応するＢ７−Ｈ３を有するヒト対象又は他の哺乳動物対象において、例えばｈＢ７−Ｈ３を含む細胞培養物中でｈＢ７−Ｈ３活性を阻害することができる。一実施形態において、本発明は、ｈＢ７−Ｈ３活性が阻害されるようにｈＢ７−Ｈ３を本発明の抗体又はＡＤＣと接触させることを含む、ｈＢ７−Ｈ３活性を阻害する方法を提供する。例えば、ｈＢ７−Ｈ３を含む又は含むことが疑われる細胞培養物において、本発明の抗体又は抗体部分を培養培地に添加して培養物中のｈＢ７−Ｈ３活性を阻害することができる。
本発明の他の実施形態では、対象において、有利にはＢ７−Ｈ３活性が有害である疾患又は障害に罹患している対象から、ｈＢ７−Ｈ３活性を低減する方法を提供する。本発明は、かかる疾患又は障害に罹患している対象におけるＢ７−Ｈ３活性を低減する方法であって、対象におけるＢ７−Ｈ３活性が低減するように本発明の抗体又はＡＤＣを対象に投与することを含む方法を提供する。Ｂ７−Ｈ３はヒトＢ７−Ｈ３であることが好ましく、対象はヒト対象であることが好ましい。あるいは、対象は、本発明の抗体が結合することができるＢ７−Ｈ３を発現する哺乳動物であり得る。なおさらに、対象は、（例えば、Ｂ７−Ｈ３の投与により又はＢ７−Ｈ３導入遺伝子の発現により）Ｂ７−Ｈ３が導入されている哺乳動物であり得る。本発明の抗体又はＡＤＣは、治療目的のためにヒト対象に投与することができる。さらに、本発明の抗体又はＡＤＣＳは、獣医学的目的のために又はヒト疾患の動物モデルとして抗体が結合することができるＢ７−Ｈ３を発現する非ヒト哺乳動物に投与することができる。後者に関して、かかる動物モデルは、本発明の抗体の治療効果（例えば、投与量の試験及び投与時間推移）を評価するために有用であり得る。
本明細書で使用する場合、「Ｂ７−Ｈ３発現が有害である障害」との用語は、障害及びその障害に罹患している対象においてＢ７−Ｈ３の存在が示されている、又はこの存在が障害の病態生理の原因である若しくはその障害に寄与する因子であるかのいずれかであることが示されている若しくはその疑いがある、疾患及び他の障害を含むことを意図している。例えば、本発明のＡＤＣを使用して、Ｂ７−Ｈ３を発現している腫瘍細胞を標的とすることができる。本発明の抗体又はＡＤＣ、例えばｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ１３ｖ１又はその抗原結合断片を含むＡＤＣで治療することができる障害の非限定的な例には、これらに限定するものではないが、小細胞肺がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、乳がん、卵巣がん、肺がん、神経膠腫、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、頭頸部がん、白血病、例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）及び腎臓がんを含む、様々ながんが含まれる。本明細書において開示される組成物及び方法を使用して処置され得るがんの他の例は、扁平上皮癌（例えば扁平上皮肺がん又は扁平上皮頭頸部がん）、トリプルネガティブ乳がん、非小細胞肺がん、結腸直腸がん及び中皮腫を含む。一実施形態において、本明細書において開示される抗体及びＡＤＣを使用して、固形腫瘍を処置する、例えば、Ｂ７−Ｈ３を過剰発現する又はＢ７−Ｈ３陽性である、固形腫瘍の成長を阻害し、又はサイズを低減する。一実施形態では、本発明は、Ｂ７−Ｈ３発現に伴う扁平上皮肺がんの治療を対象とする。別の実施形態において、本明細書において開示される抗体及びＡＤＣを使用して、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）を処置する。本明細書に記載される疾患及び障害は、本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣ、及びかかる抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣを含む医薬組成物により処置されてもよい。
ある特定の実施形態において、がんは、ＥＧＦＲ過剰発現を有するとして特徴付けられ得る。一実施形態では、本発明のＡＤＣは、活性化ＥＧＦＲ変異に伴うがんを治療するために使用され得る。かかる変異の例には、限定するものではないが、エクソン１９欠失変異、エクソン２１の一点置換変異Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍ点変異及びそれらの組合せが含まれる。
ある特定の実施形態において、本明細書において開示される抗体及びＡＤＣは、上昇したレベルのＢ７−Ｈ３を示しそうである進行した固形腫瘍型を処置するために、それを必要とする対象に投与される。かかる腫瘍の例には、限定するものではないが、小細胞肺がん、乳がん、卵巣がん、頭頸部扁平上皮癌、非小細胞肺がん、トリプルネガティブ乳がん、大腸癌及び多形性膠芽腫が含まれる。
ある特定の実施形態において、本発明は、固形腫瘍を有する対象において固形腫瘍成長を阻害する又は減少させる方法であって、固形腫瘍成長が、阻害される又は減少するように、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣを固形腫瘍を有する対象に投与することを含む方法を含む。ある特定の実施形態において、固形腫瘍は、非小細胞肺がん又は膠芽腫である。さらなる実施形態において、固形腫瘍は、Ｂ７−Ｈ３発現固形腫瘍である。さらなる実施形態において、固形腫瘍は、Ｂ７−Ｈ３過剰発現固形腫瘍である。ある特定の実施形態において、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、単独で又は追加の薬剤、例えば放射線及び／又はテモゾロミドと組み合わせて、多形性膠芽腫を有する対象に投与される。
特定の態様において、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、単独で又は追加の薬剤、例えばＡＢＴ−１９９（ベネトクラックス）と組み合わせて、小細胞肺がんを有する対象に投与される。
ある特定の実施形態において、本明細書に記載されている抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、単独で又は追加の薬剤、例えばタキサンと組み合わせて、非小細胞肺がんを有する対象に投与される。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、単独で又は追加の薬剤、例えばタキサンと組み合わせて、乳がんを有する対象に投与される。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、単独で又は追加の薬剤、例えばタキサンと組み合わせて、卵巣がんを有する対象に投与される。
本発明に含まれる他の併用療法は、抗ＰＤ１抗体（例えば、ペムブロリズマブ）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（例えば、アテゾリズマブ）、抗ＣＴＬＡ−４抗体（例えば、イピリムマブ）、ＭＥＫ阻害剤（例えば、トラメチニブ）、ＥＲＫ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤（例えば、ダブラフェニブ）、オシメルチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、ＣＤＫ９阻害剤（例えば、ジナシクリブ）、ＭＣＬ−１阻害剤、テモゾロミド、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤（例えば、ベネトクラックス）、イブルチニブ、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、エベロリムス）、ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えば、ブパリシブ）、デュベリシブ、イデラリシブ、ＡＫＴ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤（例えば、ラパチニブ）、タキサン（例えば、ドセタキセル、パクリタキセル、ナブパクリタキセル）、オーリスタチンを含むＡＤＣ、ＰＢＤ（例えば、ロバルピツズマブ・テシリン）を含むＡＤＣ、メイタンシノイド（例えば、ＴＤＭ１）を含むＡＤＣ、ＴＲＡＩＬアゴニスト、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）及びニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤からなる群から選択される薬剤との抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣの投与である。
併用療法は、上記に記載のものを含む、追加の治療剤の投与の前、同時、又は後の、本発明のＡＤＣの投与を含む。
ある特定の実施形態において、本発明は、Ｂ７−Ｈ３発現又はＢ７−Ｈ３過剰発現腫瘍として同定された固形腫瘍を有する対象において固形腫瘍成長を阻害する又は減少させる方法であって、固形腫瘍成長が、阻害される又は減少するように、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣを固形腫瘍を有する対象に投与することを含む方法を含む。Ｂ７−Ｈ３発現腫瘍（例えばＢ７−Ｈ３過剰発現腫瘍）を同定する方法は、当技術分野において公知であり、ＦＤＡにより承認された試験及び検証アッセイを含む。例えば、Ｂ７−Ｈ３アッセイは、組織学的評価のために日常定型的な正常組織及び新生物組織におけるＢ７−Ｈ３発現を同定するために使用される定性的免疫組織化学（ＩＨＣ）キットシステムである。加えて、ＰＣＲベースのアッセイも、Ｂ７−Ｈ３過剰発現腫瘍を同定するために使用されてもよい。増幅されたＰＣＲ産物は、続いて、例えば、ＰＣＲ産物のサイズを決定するための当技術分野において公知の標準的方法を使用したゲル電気泳動により、解析されてもよい。かかる試験を使用して、本明細書に記載される方法及び組成物で処置され得る腫瘍を同定してもよい。
当技術分野において利用可能な遺伝子治療の方法のいずれかは、本発明により使用することができる。遺伝子治療の方法の一般的な総説について、Ｇｏｌｄｓｐｉｅｌら、１９９３年、Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｙ、１２：４８８〜５０５頁；Ｗｕ及びＷｕ、１９９１年、Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ、３：８７〜９５頁；Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖ、１９９３年、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．、３２：５７３〜５９６頁；Ｍｕｌｌｉｇａｎ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２６０：９２６〜９３２頁（１９９３年）；並びにＭｏｒｇａｎ及びＡｎｄｅｒｓｏｎ、１９９３年、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ、６２：１９１〜２１７頁；Ｍａｙ、１９９３年、ＴＩＢＴＥＣＨ、１１（５）：１５５〜２１５頁を参照。使用することができる組換えＤＮＡテクノロジーの当技術分野において一般的に公知の方法は、Ａｕｓｕｂｅｌら（編）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、ＮＹ（１９９３年）；及びＫｒｉｅｇｌｅｒ、Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ、ＮＹ（１９９０年）において記載される。遺伝子治療の様々な方法の詳細な説明は、参照により本明細書に組み込むＵＳ２００５００４２６６４Ａ１において提供される。
別の態様において、本出願は、対象におけるＢ７−Ｈ３関連障害を処置（例えば、治癒、抑制、改善、その発症を遅延若しくは防止、又はその再発若しくは再燃を防止）する、又は防止する方法を特徴とする。この方法は、Ｂ７−Ｈ３に伴う障害を治療又は予防するのに十分な量で、対象にＢ７−Ｈ３結合剤、例えば本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片を投与することを含む。Ｂ７−Ｈ３アンタゴニスト、例えば抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片は、単独で又は本明細書に記載の他の治療法と組み合わせて対象に投与することができる。
本発明の抗体若しくはＡＤＣ又はその抗原結合部分を単独で又は組み合わせて使用して、かかる疾患を処置することができる。本発明の抗体又はその抗原結合部分を、単独で又はさらなる薬剤、例えば治療剤と組み合わせて使用することができ、前記さらなる薬剤は、その意図される目的について当業者により選択されることは、理解されるべきである。例えば、さらなる薬剤は、本発明の抗体により処置されている疾患又は状態を処置するのに有用であると当技術分野において認められる治療剤であり得る。さらなる薬剤はまた、治療用組成物に有益な特性を与える薬剤、例えば、組成物の粘度に影響する薬剤であり得る。
本発明に含まれるべきである組合せが、これらの意図される目的について有用な組合せであることは、さらに理解されるべきである。以下で説明される薬剤は、説明を目的とし、限定されることは意図されない。本発明の一部である組合せは、本発明の抗体、及び以下のリストから選択される少なくとも１つのさらなる薬剤であり得る。組合せが、形成された組成物が、その意図される機能を果たし得るようなものであれば、組合せはまた、１つより多くのさらなる薬剤、例えば２つ又は３つのさらなる薬剤を含み得る。
併用療法は、１つ以上の追加の治療剤、例えば、本明細書により詳細に記載される、１種以上のサイトカイン及び成長因子阻害剤、免疫抑制剤、抗炎症剤（例えば全身性抗炎症剤）、抗線維化剤、代謝阻害剤、酵素阻害剤、及び／若しくは細胞傷害性剤若しくは細胞増殖抑制剤、有糸分裂阻害剤、抗腫瘍抗生物質、免疫調節剤、遺伝子治療用ベクター、アルキル化剤、抗血管新生剤、代謝拮抗剤、ホウ素含有剤、化学防護剤、ホルモン、抗ホルモン剤、コルチコステロイド、光活性治療剤、オリゴヌクレオチド、放射性核種剤、トポイソメラーゼ阻害剤、キナーゼ阻害剤又は放射線増感剤とともに製剤化及び／又は同時投与される、１つ以上のＢ７−Ｈ３アンタゴニスト、例えば抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片を含むことができる。
特定の実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３結合タンパク質、例えば抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、抗がん剤又は抗新生物剤と組み合わせて使用される。用語「抗がん剤」及び「抗新生物剤」は、がん性成長のような悪性腫瘍を処置するために使用される薬物を指す。薬物治療は、単独で、又は外科手術若しくは放射線療法のような他の処置と組み合わせて使用されてもよい。いくつかのクラスの薬物は、関与する臓器の性質に依存してがん処置において使用され得る。例えば、乳がんは、一般にエストロゲンにより刺激され、性ホルモンを不活性化する薬物で処置され得る。同様に、前立腺がんは、男性ホルモンであるアンドロゲンを不活性化する薬物で処置され得る。本発明の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣと組み合わせて使用することができる抗がん剤には、特に、抗ＰＤ１抗体（例えば、ペムブロリズマブ）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（例えば、アテゾリズマブ）、抗ＣＴＬＡ−４抗体（例えば、イピリムマブ）、ＭＥＫ阻害剤（例えば、トラメチニブ）、ＥＲＫ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤（例えば、ダブラフェニブ）、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、ＣＤＫ９阻害剤（例えば、ジナシクリブ）、ＭＣＬ−１阻害剤、テモゾロミド、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤（例えば、ベネトクラックス）、イブルチニブ、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、エベロリムス）、ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えば、ブパリシブ）、デュベリシブ、イデラリシブ、ＡＫＴ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤（例えば、ラパチニブ）、ハーセプチン、タキサン（例えば、ドセタキセル、パクリタキセル、ナブパクリタキセル）、オーリスタチンを含むＡＤＣ、ＰＢＤ（例えば、ロバルピツズマブ・テシリン）を含むＡＤＣ、メイタンシノイド（例えば、ＴＤＭ１）を含むＡＤＣ、ＴＲＡＩＬアゴニスト、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）及びニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤、並びに以下の薬剤が含まれる。
上記の抗がん剤に加えて、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体及びＡＤＣは、本明細書に記載される薬剤と組み合わせて投与されてもよい。さらに、前述の抗がん剤はまた、本発明のＡＤＣにおいて使用されてもよい。
特定の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、単独で、又はＢ７−Ｈ３活性と関連する疾患を処置するための抗体と共に若しくは相乗的に作用する別の抗がん剤と共に投与することができる。かかる抗がん剤は、例えば当技術分野において周知の薬剤（例えば、細胞毒、化学療法剤、小分子及び放射線）を含む。抗がん剤の例は、パノレックス（Ｇｌａｘｏ−Ｗｅｌｃｏｍｅ）、リツキサン（ＩＤＥＣ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｈｏｆｆｍａｎ ｌａ Ｒｏｃｈｅ）、マイロターグ（Ｗｙｅｔｈ）、キャンパス（Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ）、ゼヴァリン（ＩＤＥＣ ａｎｄ Ｓｃｈｅｒｉｎｇ ＡＧ）、ベキサール（Ｃｏｒｉｘａ／ＧＳＫ）、アービタックス（Ｉｍｃｌｏｎｅ／ＢＭＳ）、アバスチン（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）及びハーセプチン（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｈｏｆｆｍａｎ ｌａ Ｒｏｃｈｅ）を含むが、これらに限定されない。他の抗がん剤は、米国特許第７，５９８，０２８号及び国際公開第ＷＯ２００８／１００６２４号に開示されるものを含むが、これらに限定されず、これらの内容を、参照により本明細書に組み込む。１つ以上の抗がん剤は、本発明の抗体又はその抗原結合部分の投与と同時、又はその前若しくは後に投与されてもよい。
本発明の特定の実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣを、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤又はＢｃｌ−２（Ｂ細胞リンパ腫２）阻害剤（例えばＡＢＴ−１９９（ベネトクラクス））のようなアポトーシス剤との併用療法において使用して、対象において白血病のようながんを処置することができる。一実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、がんを処置するためのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤との併用療法において使用することができる。一実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、がんを処置するためのベネトクラクスとの併用療法において使用することができる。
本発明の特定の実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣを、ＮＡＭＰＴの阻害剤（参照により本明細書に組み込むＵＳ２０１３／０３０３５０９；ＡｂｂＶｉｅ，Ｉｎｃ．における阻害剤の例を参照）との併用療法において使用して、それを必要とする対象を処置することができる。ＮＡＭＰＴ（前Ｂ細胞コロニー増強因子（ＰＢＥＦ）及びビスファチンとしても知られている）は、ニコチンアミドのホスホリボシル化を触媒する酵素であり、ＮＡＤを救援する２つのうち１つの経路における律速酵素である。本発明の一実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体及びＡＤＣは、対象において、がんの処置のためのＮＡＭＰＴ阻害剤と組み合わせて投与される。
本発明の特定の実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣは、トポイソメラーゼ阻害剤イリノテカンの活性な代謝産物であるＳＮ−３８との併用療法において使用することができる。
本発明の他の実施形態において、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はＡＤＣを、ＰＡＲＰ（ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ）阻害剤、例えばベリパリブとの併用療法において使用して、乳がん、卵巣がん及び非小細胞肺がんを含むがんを処置することができる。
本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又は抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣと同時投与され得る及び／又は製剤化され得るさらなる治療剤のさらなる例は、吸入ステロイド；ベータ−アゴニスト、例えば短時間作用又は長時間作用ベータ−アゴニスト；ロイコトリエン又はロイコトリエン受容体のアンタゴニスト；ＡＤＶＡＩＲのような併用薬；ＩｇＥ阻害剤、例えば抗ＩｇＥ抗体（例えばＸＯＬＡＩＲ（登録商標）、オマリズマブ）；ホスホジエステラーゼ阻害剤（例えばＰＤＥ４阻害剤）；キサンチン；抗コリン薬；クロモリンのようなマスト細胞安定化剤；ＩＬ−４阻害剤；ＩＬ−５阻害剤；エオタキシン／ＣＣＲ３阻害剤；Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３及びＨ４を含む、ヒスタミン又はその受容体のアンタゴニスト、並びにプロスタグランジンＤ又はその受容体（ＤＰ１及びＣＲＴＨ２）のアンタゴニストの１つ以上を含むが、これらに限定されない。かかる組合せを使用して、例えば喘息及び他の呼吸障害を処置することができる。本明細書に記載の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又は抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣとともに同時投与及び／又は製剤化することができる追加の治療剤の他の例には、限定するものではないが、抗ＰＤ１抗体（例えば、ペムブロリズマブ）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（例えば、アテゾリズマブ）、抗ＣＴＬＡ−４抗体（例えば、イピリムマブ）、ＭＥＫ阻害剤（例えば、トラメチニブ）、ＥＲＫ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤（例えば、ダブラフェニブ）、オシメルチニブ（ＡＺＤ９２９１）、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、ＣＤＫ９阻害剤（例えば、ジナシクリブ）、ＭＣＬ−１阻害剤、テモゾロミド、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤（例えば、ベネトクラックス）、イブルチニブ、ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、エベロリムス）、ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えば、ブパリシブ）、デュベリシブ、イデラリシブ、ＡＫＴ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤（例えば、ラパチニブ）、ハーセプチン、タキサン（例えば、ドセタキセル、パクリタキセル、ナブパクリタキセル）、オーリスタチンを含むＡＤＣ、ＰＢＤ（例えば、ロバルピツズマブ・テシリン）を含むＡＤＣ、メイタンシノイド（例えば、ＴＤＭ１）を含むＡＤＣ、ＴＲＡＩＬアゴニスト、プロテアソーム阻害剤（例えば、ボルテゾミブ）及びニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤のうちの１つ以上が含まれる。１つ以上の抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片と同時投与され得る及び／又は製剤化され得る治療剤のさらなる例は、特に、ＴＮＦアンタゴニスト（例えばＴＮＦ受容体の溶解性断片、例えばｐ５５若しくはｐ７５ヒトＴＮＦ受容体又はその誘導体、例えば７５ｋＤ ＴＮＦＲ−ＩｇＧ（７５ｋＤ ＴＮＦ受容体−ＩｇＧ融合タンパク質、ＥＮＢＲＥＬ））；ＴＮＦ酵素アンタゴニスト、例えばＴＮＦ変換酵素（ＴＡＣＥ）阻害剤；ムスカリン性受容体アンタゴニスト；ＴＧＦ−ベータアンタゴニスト；インターフェロンガンマ；ペルフェニドン；化学療法剤、例えばメトトレキサート、レフルノミド若しくはシロリムス（ラパマイシン）又はその類似体、例えばＣＣＩ−７７９；ＣＯＸ２及びｃＰＬＡ２阻害剤；ＮＳＡＩＤ；免疫調節物質；ｐ３８阻害剤、ＴＰＬ−２、ＭＫ−２及びＮＦｋＢ阻害剤の１つ以上を含む。
他の好ましい組合せは、サイトカイン抑制性抗炎症薬（ＣＳＡＩＤ）；他のヒトサイトカイン又は成長因子、例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１８、ＩＬ−２１、ＩＬ−３１、インターフェロン、ＥＭＡＰ−ＩＩ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、ＥＧＦ、ＰＤＧＦ及びエドセリン−１に対する抗体又はこれらのアンタゴニスト、並びにこれらのサイトカイン及び成長因子の受容体である。本発明の抗体又はその抗原結合部分は、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ６９、ＣＤ８０（Ｂ７．１）、ＣＤ８６（Ｂ７．２）、ＣＤ９０、ＣＴＬＡ、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１又はＣＤ１５４を含むこれらのリガンド（ｇｐ３９若しくはＣＤ４０Ｌ）のような、細胞表面分子に対する抗体と組み合わせることができる。
治療剤の好ましい組合せは、炎症カスケードにおける異なるポイントにおいて干渉してもよく；好ましい例は、キメラ、ヒト化又はヒトＴＮＦ抗体のようなＴＮＦアンタゴニスト、アダリムマブ、（ＨＵＭＩＲＡ；Ｄ２Ｅ７；参照により本明細書に組み込むＰＣＴ公開第ＷＯ９７／２９１３１号及び米国特許第６，０９０，３８２号）、ＣＡ２（Ｒｅｍｉｃａｄｅ商標）、ＣＤＰ５７１及び溶解性ｐ５５又はｐ７５ ＴＮＦ受容体、その誘導体（ｐ７５ＴＮＦＲ１ｇＧ（Ｅｎｂｒｅｌ商標）又はｐ５５ＴＮＦＲ１ｇＧ（レネルセプト）を含み、また、ＴＮＦ変換酵素（ＴＡＣＥ）阻害剤；同様に、ＩＬ−１阻害剤（インターロイキン−１変換酵素阻害剤、ＩＬ−１ＲＡなど）が、同じ理由のため有効であり得る。他の好ましい組合せは、インターロイキン４を含む。
本発明の医薬組成物は、「治療有効量」又は「予防有効量」の本発明の抗体又は抗体部分を含んでもよい。「治療有効量」は、所望される治療結果を達成するために必要な投薬量における及び期間の有効な量を指す。治療有効量の抗体又は抗体部分は、当業者により決定されてもよく、個体の疾患状態、年齢、性別及び体重、並びに個体において所望される応答を誘発するための抗体又は抗体部分の能力のような要因により変動してもよい。治療有効量はまた、治療上有益な効果が抗体又は抗体部分の任意の毒性又は有害な作用より勝るものである。「予防有効量」は、所望される予防結果を達成するために必要な投薬量における及び期間の有効な量を指す。典型的には、予防用量は、疾患の前又は早期ステージで対象において使用されるので、予防有効量は、治療有効量未満である。
投与レジメンは、最適な所望される応答（例えば治療又は予防応答）をもたらすよう調整され得る。例えば、単一ボーラスが投与されてもよく、いくつかの分割用量が、時間をかけて投与されてもよく、又は用量が、治療状況の急迫した事情により示される通り、比例的に低減されてもよく若しくは増大されてもよい。投与の容易さ及び投薬量の均一さのため、投薬単位形態の非経口組成物を製剤化することが特に有利である。本明細書において使用される投薬単位形態は、処置されるべき哺乳動物対象のための単位投薬量として合わせた物理的に別個の単位を指し、各単位は、必要とされる医薬担体と共に、予め決められた量の、所望される治療効果をもたらすように計算された活性化合物を含有する。本発明の投薬単位形態についての規格は、（ａ）活性化合物の固有の特徴及び達成されるべき治療又は予防効果、並びに（ｂ）個体における感受性の処置のためのかかる活性化合物の配合の分野における固有の制限により、及びこれらに直接的に依存して指示される。
治療又は予防有効量の本発明のＡＤＣ、抗体又は抗体部分の例示的な非限定的な範囲は、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１〜１０ｍｇ／ｋｇである。一実施形態において、本明細書に記載される抗体又はＡＤＣの用量は、ここで列挙される個々の用量、例えば、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ及び６ｍｇ／ｋｇを含む、１〜６ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態において、本明細書に記載される抗体又はＡＤＣの用量は、ここで列挙される個々の用量、例えば、１μｇ／ｋｇ、２μｇ／ｋｇ、３μｇ／ｋｇ、４μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、２０μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ、４０μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、８０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１４０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ及び２００μｇ／ｋｇを含む、１〜２００μｇ／ｋｇである。投薬量の値は、緩和されるべき状態の種類及び重症度で変動し得ることは注意されるべきである。任意の特定の対象について、特定の投与レジメンが、個々の要求、及び組成物を投与する又は組成物の投与を監督する人の専門的判断により経時的に調整されるべきであること、並びに本明細書に記載の投薬量範囲が、例示的にすぎず、特許請求される組成物の範囲又は実施を限定することは意図されないことは、さらに理解されるべきである。
一実施形態において、抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５又はｈｕＡｂ３ｖ２．６を含むＡＤＣを含む、抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣは、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、０．１〜３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、１〜１５ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に２〜３の用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、１〜４ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
一実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、１〜２００μｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、５〜１５０μｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、５〜１００μｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、５〜９０μｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、５〜８０μｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、５〜７０μｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、５〜６０μｇ／ｋｇの用量で投与される。別の実施形態において、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６又はそれらの抗原結合部分は、ＡＤＣとして、それを必要とする対象、例えばがんを有する対象に、１０〜８０μｇ／ｋｇの用量で投与される。
上で記載された用量は、本明細書において開示される抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣ又は抗体のいずれかの投与に有用であってもよい。
別の態様において、本出願は、インビトロでの試料（例えば血清、血漿、組織、及び生検のような生物学的試料）におけるＢ７−Ｈ３の存在を検出する方法を提供する。本方法を使用して、障害、例えばがんを診断することができる。方法は、（ｉ）試料又は対照試料を、本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片と接触させること；及び（ｉｉ）抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片と試料又は対照試料の間での複合体の形成を検出することを含み、ここで、対照試料に対して、試料における複合体の形成における統計的に有意な変化が、試料におけるＢ７−Ｈ３の存在を示す。
ヒトＢ７−Ｈ３に結合するこれらの能力を考慮すると、本発明の抗ヒトＢ７−Ｈ３抗体又はその部分（並びにそのＡＤＣ）を使用して、酵素結合免疫吸着測定（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）又は組織免疫組織化学のような従来のイムノアッセイを使用して、（例えば血清又は血漿のような、生物学的試料において）ヒトＢ７−Ｈ３を検出することができる。一態様において、本発明は、生物学的試料を、本発明の抗体又はその抗体部分と接触させること、及びヒトＢ７−Ｈ３に結合した抗体（若しくは抗体部分）又は結合していない抗体（若しくは抗体部分）を検出し、これにより、生物学的試料におけるヒトＢ７−Ｈ３を検出することを含む、生物学的試料においてヒトＢ７−Ｈ３を検出する方法を提供する。抗体は、結合した又は結合していない抗体の検出を促進するための検出可能な物質で直接的又は間接的に標識される。適当な検出可能な物質は、様々な酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質及び放射性物質を含む。適当な酵素の例は、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ又はアセチルコリンエステラーゼを含み、適当な補欠分子族複合体の例は、ストレプトアビジン／ビオチン及びアビジン／ビオチンを含み；適当な蛍光物質の例は、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロライド又はフィコエリトリンを含み；発光物質の例は、ルミノールを含み；適当な放射性物質の例は、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１７７Ｌｕ、１６６Ｈｏ又は１５３Ｓｍを含む。
抗体を標識する代わりに、ヒトＢ７−Ｈ３は、生体液において、検出可能な物質で標識されたｒｈＢ７−Ｈ３標準及び標識されていない抗ヒトＢ７−Ｈ３抗体を使用して、競合イムノアッセイによりアッセイすることができる。このアッセイにおいて、生物学的試料、標識されたｒｈＢ７−Ｈ３標準及び抗ヒトＢ７−Ｈ３抗体が組み合わされ、標識されていない抗体に結合した標識されたｒｈＢ７−Ｈ３標準の量が決定される。生物学的試料におけるヒトＢ７−Ｈ３の量は、抗Ｂ７−Ｈ３抗体に結合した標識されたｒｈＢ７−Ｈ３標準の量に反比例する。同様に、ヒトＢ７−Ｈ３はまた、生体液において、検出可能な物質で標識されたｒｈＢ７−Ｈ３標準及び標識されていない抗ヒトＢ７−Ｈ３抗体を使用して、競合イムノアッセイによりアッセイすることができる。
さらに別の態様において、本出願は、インビボでのＢ７−Ｈ３の存在を検出する（例えば対象におけるインビボ画像化）方法を提供する。本方法を使用して、障害、例えばＢ７−Ｈ３関連障害を診断することができる。方法は、（ｉ）本明細書に記載される抗Ｂ７−Ｈ３抗体又はその断片を対象又は対照対象に、Ｂ７−Ｈ３への抗体又は断片の結合を可能にする条件下で投与すること；及び（ｉｉ）抗体又は断片とＢ７−Ｈ３の間での複合体の形成を検出することを含み、ここで、対照対象に対して、対象における複合体の形成における統計的に有意な変化が、Ｂ７−Ｈ３の存在を示す。
ＶＩ．医薬組成物
本発明はまた、本発明の抗体若しくはその抗原結合部分又はＡＤＣ及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。本発明の抗体又はＡＤＣを含む医薬組成物は、これらに限定されないが、障害の診断、検出若しくはモニター、障害若しくはその１つ以上の症状の防止、処置、管理若しくは改善、及び／又は研究において使用される。特定の実施形態において、組成物は、１つ以上の本発明の抗体を含む。別の実施形態において、医薬組成物は、１つ以上の本発明の抗体又はＡＤＣ、及びＢ７−Ｈ３活性が有害である障害を処置するための、本発明の抗体又はＡＤＣ以外の１つ以上の予防又は治療剤を含む。好ましくは、障害又は１つ以上のその症状の防止、処置、管理又は改善に有用であることが公知の、又はこれらにおいて使用されてきた、若しくは現在使用されている予防又は治療剤。これらの実施形態に従い、組成物は、担体、希釈剤又は賦形剤をさらに含んでもよい。
本発明はまた、本発明の抗体若しくはその抗原結合部分又はＡＤＣ及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。本発明の抗体又はＡＤＣを含む医薬組成物は、これらに限定されないが、障害の診断、検出若しくはモニター、障害若しくはその１つ以上の症状の防止、処置、管理若しくは改善、及び／又は研究において使用される。特定の実施形態において、組成物は、１つ以上の本発明の抗体を含む。別の実施形態において、医薬組成物は、１つ以上の本発明の抗体又はＡＤＣ、及びＢ７−Ｈ３活性が有害である障害を処置するための、本発明の抗体又はＡＤＣ以外の１つ以上の予防又は治療剤を含む。好ましくは、障害又は１つ以上のその症状の防止、処置、管理又は改善に有用であることが公知の、又はこれらにおいて使用されてきた、若しくは現在使用されている予防又は治療剤。これらの実施形態に従い、組成物は、担体、希釈剤又は賦形剤をさらに含んでもよい。
本発明の抗体及び抗体部分又はＡＤＣは、対象への投与に適当な医薬組成物に取り込むことができる。典型的には、医薬組成物は、本発明の抗体又は抗体部分及び薬学的に許容される担体を含む。本明細書において使用される場合、「薬学的に許容される担体」は、生理的に適合可能である、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌及び抗真菌剤、等張及び吸収遅延剤などを含む。薬学的に許容される担体の例は、水、食塩水、リン酸緩衝食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなど、及びこれらの組合せの１つ以上を含む。多くの場合において、組成物において、等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールのような多価アルコール、又は塩化ナトリウムを含むことが好ましい。薬学的に許容される担体は、抗体若しくは抗体部分又はＡＤＣの貯蔵寿命又は有効性を増強する、湿潤剤又は乳化剤、保存剤又は緩衝液のような、少量の補助物質をさらに含んでもよい。
様々な送達システムが公知であり、これらを使用して、１つ以上の本発明の抗体若しくはＡＤＣ、又は１つ以上の本発明の抗体、並びに障害若しくは１つ以上のその症状を防止し、管理し、処置し、若しくは改善するのに有用な予防剤若しくは治療剤、例えばリポソームにおけるカプセル封入、微粒子、マイクロカプセル、抗体若しくは抗体断片を発現する能力がある組換え細胞、受容体により媒介されるエンドサイトーシス（例えばＷｕ及びＷｕ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９〜４４３２頁（１９８７年）を参照）、レトロウイルス若しくは他のベクターの一部としての核酸の構築などの組合せを投与することができる。本発明の予防又は治療剤を投与する方法は、非経口投与（例えば皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内及び皮下）、硬膜外投与、腫瘍内投与及び粘膜投与（例えば鼻腔内及び経口経路）を含むが、これらに限定されない。加えて、肺投与は、例えば、吸入器又は噴霧吸入器の使用、及びエアロゾル剤との製剤化により、利用することができる。例えば米国特許第６，０１９，９６８号、第５，９８５，３２０号、第５，９８５，３０９号、第５，９３４，２７２号、第５，８７４，０６４号、第５，８５５，９１３号、第５，２９０，５４０号及び第４，８８０，０７８号；並びにＰＣＴ公開第ＷＯ９２／１９２４４号、第ＷＯ９７／３２５７２号、第ＷＯ９７／４４０１３号、第ＷＯ９８／３１３４６号及び第ＷＯ９９／６６９０３号を参照、これらのそれぞれを、それらの全体として参照により本明細書に組み込む。一実施形態において、本発明の抗体、併用療法又は本発明の組成物は、Ａｌｋｅｒｍｅｓ ＡＩＲ（登録商標）肺薬物送達テクノロジー（Ａｌｋｅｒｍｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｓｓ．）を使用して投与される。特定の実施形態において、本発明の予防又は治療剤は、筋肉内、静脈内、腫瘍内、経口、鼻腔内、肺又は皮下投与される。予防又は治療剤は、任意の便利な経路により、例えば注入又はボーラス注射により、上皮又は皮膚粘膜層（例えば、口腔粘膜、直腸及び腸粘膜など）を介した吸収により、投与されてもよく、他の生物学的に活性な薬剤と一緒に投与されてもよい。投与は全身性又は局所性であり得る。
特定の実施形態において、本発明の予防剤又は治療剤を、処置を必要とする領域に局所的に投与することが望ましくてもよく；これは、例えば、限定ではなく、局所注入により、注射により又はインプラントにより達成されてもよく、前記インプラントは、サイラスティック膜、ポリマー、線維性マトリックス（例えばＴｉｓｓｕｅｌ（登録商標））又はコラーゲンマトリックスのような膜及びマトリックスを含む、多孔性又は非多孔性物質のものである。一実施形態において、有効量の本発明アンタゴニストの１つ以上の抗体は、障害又はその症状を予防、治療、管理及び／又は改善するために対象の患部に局所的に投与される。別の実施形態において、有効量の本発明の１つ以上の抗体は、障害又は１つ以上のその症状を防止し、処置し、管理し、及び／又は改善するために、本発明の抗体以外の、有効量の１つ以上の療法（例えば１つ以上の予防又は治療剤）と組み合わせて、対象の患部に局所的に投与される。
別の実施形態において、本発明の予防又は治療剤は、制御放出又は持続放出システムにおいて送達することができる。一実施形態において、ポンプを使用して、制御又は持続放出を達成してもよい（Ｌａｎｇｅｒ、上記；Ｓｅｆｔｏｎ、１９８７年、ＣＲＣ Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．、１４：２０頁；Ｂｕｃｈｗａｌｄら、１９８０年、Ｓｕｒｇｅｒｙ、８８：５０７頁；Ｓａｕｄｅｋら、１９８９年、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４頁を参照）。別の実施形態において、ポリマー物質を使用して、本発明の療法の制御又は持続放出を達成することができる（例えばＭｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ、Ｌａｎｇｅ及びＷｉｓｅ（編）、ＣＲＣ Ｐｒｅｓ．、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、Ｆｌａ．（１９７４年）；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｄｒｕｇ Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ、Ｄｒｕｇ Ｐｒｏｄｕｃｔ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ、Ｓｍｏｌｅｎ及びＢａｌｌ（編）、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９８４年）；Ｒａｎｇｅｒ及びＰｅｐｐａｓ、１９８３年、Ｊ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２３：６１頁を参照；Ｌｅｖｙら、１９８５年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２８：１９０頁；Ｄｕｒｉｎｇら、１９８９年、Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３５１頁；Ｈｏｗａｒｄら、１９８９年、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．、７ １：１０５頁も参照）；米国特許第５，６７９，３７７号；米国特許第５，９１６，５９７号；米国特許第５，９１２，０１５号；米国特許第５，９８９，４６３号；米国特許第５，１２８，３２６号；ＰＣＴ公開第ＷＯ９９／１５１５４号；及びＰＣＴ公開第ＷＯ９９／２０２５３号。持続放出製剤において使用されるポリマーの例は、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エチレン−ｃｏ−酢酸ビニル）、ポリ（メタクリル酸）、ポリグリコリド（ＰＬＧ）、ポリ無水物、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリアクリルアミド、ポリ（エチレングリコール）、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）及びポリオルトエステルを含むが、これらに限定されない。好ましい実施形態において、持続放出製剤において使用されるポリマーは、不活性であり、浸出可能な不純物がなく、保存上安定であり、無菌であり、生分解性である。さらに別の実施形態において、制御又は持続放出システムを、予防又は治療標的の近くに置き、これにより、全身用量の画分のみを必要とすることができる（例えばＧｏｏｄｓｏｎ、ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ、上記、２巻、１１５〜１３８頁（１９８４年）を参照）。
制御放出システムは、Ｌａｎｇｅｒ（１９９０年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４９：１５２７〜１５３３頁）による総説において論じられている。当業者に公知の任意の技術を使用して、本発明の１つ以上の治療剤を含む持続放出製剤を生産することができる。例えば米国特許第４，５２６，９３８号、ＰＣＴ公開ＷＯ９１／０５５４８、ＰＣＴ公開ＷＯ９６／２０６９８、Ｎｉｎｇら、１９９６年、「Ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｈｙ ｏｆ ａ Ｈｕｍａｎ Ｃｏｌｏｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｘｅｎｏｇｒａｆｔ Ｕｓｉｎｇ ａ Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ−Ｒｅｌｅａｓｅ Ｇｅｌ」、Ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ＆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、３９：１７９〜１８９頁、Ｓｏｎｇら、１９９５年、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｌｕｎｇ Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ Ｌｏｎｇ−Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ」、ＰＤＡ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、５０：３７２〜３９７頁、Ｃｌｅｅｋら、１９９７年、「Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｆｏｒ ａ ｂＦＧＦ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｏｒ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ」、Ｐｒｏ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．、２４：８５３〜８５４頁及びＬａｍら、１９９７年、「Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｏｒ Ｌｏｃａｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」、Ｐｒｏｃ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｓｙｍｐ．Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｒｅｌ．Ｂｉｏａｃｔ．Ｍａｔｅｒ．２４：７５９〜７６０頁を参照、これらのそれぞれを、それらの全体として参照により本明細書に組み込む。
本発明の組成物が、予防又は治療剤をコードする核酸である特定の実施形態において、これを適当な核酸発現ベクターの一部として構築し、例えばレトロウイルスベクター（米国特許第４，９８０，２８６号を参照）の使用により、又は直接的な注射により、又は微粒子銃（例えば遺伝子銃；Ｂｉｏｌｉｓｔｉｃ、Ｄｕｐｏｎｔ）の使用により、又は脂質若しくは細胞表面受容体でコーティングすることにより、又はトランスフェクション剤により、又はこれを、核に侵入することが知られているホメオボックス様ペプチドと結合して投与することにより（例えばＪｏｌｉｏｔら、１９９１年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、ＵＳＡ、８８：１８６４〜１８６８頁を参照）、それが細胞内に至るように、それを投与することにより、核酸をインビボで投与して、そのコードされる予防又は治療剤の発現を促進することができる。あるいは、核酸は、細胞内に導入され、相同組換えによる発現のために宿主細胞ＤＮＡ内に組み込まれ得る。
本発明の医薬組成物は、その意図される投与経路に適合可能であるように製剤化される。投与経路の例は、非経口、例えば静脈内、皮内、皮下、経口、鼻腔内（例えば吸入）、経皮（例えば局所）、経粘膜及び直腸投与を含むが、これらに限定されない。特定の実施形態において、組成物は、ヒトへの静脈内、皮下、筋肉内、経口、鼻腔内又は局所投与に適合させた医薬組成物として、日常的な手法に従い製剤化される。典型的には、静脈内投与のための組成物は、無菌の等張水性バッファー中の溶液である。必要であれば、組成物はまた、可溶化剤、及び注射部位における痛みを軽くするためのリグノカインのような局所麻酔薬を含んでもよい。
本発明の方法が、組成物の鼻腔内投与を含むなら、組成物は、エアロゾル形態、スプレー、ミスト又はドロップの形態で製剤化され得る。特に、本発明による使用のための予防又は治療剤は、便宜的に、適当な噴霧剤（例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適当なガス）を使用して、加圧包装又は噴霧吸入器からのエアロゾルスプレー提示の形態で送達することができる。加圧エアロゾルの場合、投薬単位は、計量された量を送達するための弁を備えることにより、決定されてもよい。化合物と、ラクトース又はスターチのような適当な粉末基剤の粉末混合物を含有する、吸入器又は注入器における使用のためのカプセル剤及びカートリッジ（例えばゼラチンからなる）が製剤化されてもよい。
本発明の方法が、経口投与を含むなら、組成物は、錠剤、カプセル剤、カシェ剤、ゲルキャップ、液剤、懸濁剤などの形態で、経口製剤化することができる。錠剤又はカプセル剤は、結合剤（例えばアルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えばラクトース、微結晶セルロース又はリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）；崩壊剤（例えばジャガイモデンプン又はデンプングリコール酸ナトリウム）；又は湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）のような、薬学的に許容される賦形剤と共に従来の手段により調製することができる。錠剤は、当技術分野において周知の方法によりコーティングされてもよい。経口投与のための液体調製物は、これらに限定されないが、溶液、シロップ若しくは懸濁液の形態をとってもよく、又はこれらは、使用前に水若しくは他の適当なビヒクルとの構成のための乾燥製品として提示されてもよい。かかる液体調製物は、懸濁化剤（例えばソルビトールシロップ、セルロース誘導体又は硬化食用脂）；乳化剤（例えばレシチン又はアカシア）；非水性ビヒクル（例えばアーモンドオイル、油性エステル、エチルアルコール又は分別植物油）；及び保存剤（例えばメチル又はプロピル−ｐ−ヒドロキシ安息香酸塩又はソルビン酸）のような、薬学的に許容される添加剤と共に、従来の手段により調製されてもよい。調製物はまた、必要に応じて、緩衝塩、香味剤、着色剤及び甘味剤を含んでもよい。経口投与のための調製物は、予防又は治療剤の低速放出、制御放出又は持続放出のために適当に製剤化されてもよい。
本発明の方法は、エアロゾル化剤と共に製剤化された組成物の、例えば吸入器又は噴霧吸入器の使用による、肺投与を含んでもよい。例えば米国特許第６，０１９，９６８号、５，９８５，３２０号、第５，９８５，３０９号、第５，９３４，２７２号、第５，８７４，０６４号、第５，８５５，９１３，第５，２９０，５４０号及び第４，８８０，０７８号；並びにＰＣＴ公開第ＷＯ９２／１９２４４号、第ＷＯ９７／３２５７２号、第ＷＯ９７／４４０１３号、第ＷＯ９８／３１３４６号及び第ＷＯ９９／６６９０３号を参照、これらのそれぞれを、それらの全体として参照により本明細書に組み込む。特定の実施形態において、本発明の抗体、併用療法及び／又は本発明の組成物は、Ａｌｋｅｒｍｅｓ ＡＩＲ（登録商標）肺薬物送達テクノロジー（Ａｌｋｅｒｍｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｍａｓｓ．）を使用して投与される。
本発明の方法は、注射による（例えばボーラス注射又は持続注入による）非経口投与用に製剤化された組成物の投与を含んでもよい。注射用製剤は、添加された保存剤と共に、（例えばアンプル剤における又は多用量の容器における）単位投薬形態で提示されてもよい。組成物は、油性若しくは水性ビヒクル中の懸濁液、溶液又はエマルジョンのような形態をとってもよく、懸濁化、安定化及び／又は分散剤のような配合剤を含有してもよい。あるいは、有効成分は、使用前の、適当なビヒクル（例えば無菌パイロジェンフリーの水）との構成のための粉末形態であってもよい。
本発明の方法は、加えて、デポ調製物として製剤化された組成物の投与を含んでもよい。かかる長期作用製剤は、植込み（例えば皮下若しくは筋肉内）又は筋肉内注射により投与されてもよい。したがって、例えば、組成物は、適当なポリマー若しくは疎水性物質と共に（例えば許容可能な油中のエマルジョンとして）又はイオン交換樹脂と共に、又は難溶解性の誘導体として（例えば難溶解性の塩として）製剤化されてもよい。
本発明の方法は、中性又は塩形態として製剤化された組成物の投与を包含する。薬学的に許容される塩は、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などから誘導されるもののような陰イオンと共に形成されたもの、及びナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどから誘導されるもののような陽イオンと共に形成されたものを含む。
一般に、組成物の成分は、単位投薬形態で、例えば、活性薬剤の量を示しているアンプル剤又はサシェのような密閉容器内の乾燥凍結乾燥粉末又は水を含まない濃縮物として別々に、又は一緒に混合されて供給される。投与様式が注入である場合、組成物は、無菌の医薬グレードの水又は食塩水を含有する注入ボトルに分注することができる。投与様式が注射による場合、注射用の無菌水又は食塩水のアンプル剤は、成分が投与前に混合されてもよいように、提供することができる。
特に、本発明はまた、本発明の予防若しくは治療剤、又は医薬組成物の１つ以上が、薬剤の量を示しているアンプル剤又はサシェのような密閉容器に包装されることを提供する。一実施形態において、本発明の予防若しくは治療剤、又は医薬組成物の１つ以上は、密閉容器において乾燥無菌化凍結乾燥粉末又は水を含まない濃縮物として供給され、対象への投与のため適当な濃度まで（例えば水又は食塩水で）再構成することができる。好ましくは、本発明の予防若しくは治療剤又は医薬組成物の１つ以上は、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ又は少なくとも１００ｍｇの単位投薬量で密閉容器において乾燥無菌凍結乾燥粉末として供給される。本発明の凍結乾燥された予防若しくは治療剤又は医薬組成物は、そのオリジナルの容器において２℃〜８℃において保存されるべきであり、本発明の予防若しくは治療剤又は医薬組成物は、再構成された後、１週間以内、５日以内、７２時間以内、４８時間以内、２４時間以内、１２時間以内、６時間以内、５時間以内、３時間以内又は１時間以内に投与されるべきである。代替的な実施形態において、本発明の予防若しくは治療剤又は医薬組成物の１つ以上は、薬剤の量及び濃度を示している密閉容器において液体形態で供給される。好ましくは、液体形態の投与される組成物は、少なくとも０．２５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも０．５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１ｍｇ／ｍｌ、少なくとも２．５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも８ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｍｇ／ｍｌ、少なくとも７５ｍｇ／ｍｌ又は少なくとも１００ｍｇ／ｍｌで、密閉容器において供給される。液体形態は、その本来の容器において２℃〜８℃において保存されるべきである。
本発明の抗体及び抗体部分は、非経口投与に適当な医薬組成物に取り込むことができる。好ましくは、抗体又は抗体部分は、０．１〜２５０ｍｇ／ｍｌ抗体を含有する注射可能な溶液として調製される。注射可能な溶液は、フリント若しくはアンバーバイアル、アンプル又は予め充填されたシリンジにおいて液体又は凍結乾燥された投薬形態のいずれかから構成され得る。緩衝液は、Ｌ−ヒスチジン（１〜５０ｍＭ）、最適には、５〜１０ｍＭ、ｐＨ５．０〜７．０（最適には、ｐＨ６．０）であり得る。他の適当な緩衝液は、コハク酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム又はリン酸カリウムを含むが、これらに限定されない。塩化ナトリウムを使用して、０〜３００ｍＭ（最適には、液体投薬形態について１５０ｍＭ）の濃度の溶液の毒性を改変することができる。凍結保護剤は、凍結乾燥された投薬形態について、主に、０〜１０％スクロース（最適には、０．５〜１．０％）を含めることができる。他の適当な凍結保護剤は、トレハロース及びラクトースを含む。増量剤は、凍結乾燥された投薬形態について、主に、１〜１０％マンニトール（最適には、２〜４％）を含めることができる。安定剤は、液体と凍結乾燥された投薬形態の両方で、主に１〜５０ｍＭ Ｌ−メチオニン（最適には、５〜１０ｍＭ）を使用することができる。他の適当な増量剤は、グリシン、アルギニンを含み、０〜０．０５％ポリソルベート−８０（最適には、０．００５〜０．０１％）として含まれ得る。さらなる界面活性剤は、ポリソルベート２０及びＢＲＩＪ界面活性剤を含むが、これらに限定されない。非経口投与のための注射可能な溶液として調製された本発明の抗体及び抗体部分を含む医薬組成物は、治療用タンパク質（例えば抗体）の吸収又は分散を増大させるために使用されるもののような、アジュバントとして有用な薬剤をさらに含むことができる。特に有用なアジュバントは、Ｈｙｌｅｎｅｘ（登録商標）（組換えヒトヒアルロニダーゼ）のようなヒアルロニダーゼである。注射可能な溶液におけるヒアルロニダーゼの添加は、非経口投与、特に皮下投与の後、ヒトバイオアベイラビリティを改善する。これはまた、より大きな注射部位体積（すなわち、１ｍｌより大きい）を可能にし、ほとんど痛み及び不快感を伴わず、注射部位の反応の発生を最小にする（参照により本明細書に組み込む、ＷＯ２００４０７８１４０、ＵＳ２００６１０４９６８を参照。）
本発明の組成物は、様々な形態であり得る。これらは、例えば液体の溶液（例えば注射可能及び注入可能な溶液）、分散液又は懸濁液、錠剤、ピル、粉剤、リポソーム及び坐剤のような、液体、半固形及び固形の投薬形態を含む。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療適用に依存する。典型的な好ましい組成物は、他の抗体でのヒトの受動免疫化のために使用されるものに類似する組成物のような、注射可能又は注入可能な溶液の形態である。好ましい投与様式は、非経口（例えば静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）である。好ましい実施形態において、抗体は、静脈内注入又は注射により投与される。別の好ましい実施形態において、抗体は、筋肉内又は皮下注射により投与される。
治療用組成物は、典型的には、製造及び保存の条件下で無菌かつ安定でなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、分散液、リポソーム又は高い薬物濃度に適当な他の規則構造として製剤化することができる。無菌の注射可能な溶液は、必要に応じて、上で挙げられた成分の１つ又は組合せと共に適当な溶媒中に要求される量の活性化合物（すなわち、抗体又は抗体部分）を取り込み、続いて、濾過滅菌することにより調製され得る。一般に、分散液は、活性化合物を、基本的な分散媒及び上で挙げられたもの由来の必要な他の成分を含有する無菌のビヒクルに取り込むことにより、調製される。無菌の注射可能な溶液の調製のための無菌の凍結乾燥粉末の場合、好ましい調製方法は、有効成分の粉末、及び予め無菌濾過されたその溶液由来の任意のさらなる所望される成分を生じる、真空乾燥及びスプレー乾燥である。溶液の適切な流動性が、例えばレシチンのようなコーティングの使用により、分散液の場合、要求される粒子サイズの維持により、及び界面活性剤の使用により、維持することができる。注射可能な組成物の持続的吸収は、組成物において、吸収を遅延させる薬剤、例えばモノステアリン酸塩及びゼラチンを含むことにより、もたらすことができる。
多くの治療適用について、好ましい投与経路／様式は、皮下注射、静脈内注射又は注入であるが、本発明の抗体及び抗体部分又はＡＤＣは、当技術分野において公知の様々な方法により投与することができる。当業者に理解される通り、投与経路及び／又は様式は、所望される結果に依存して変動する。ある特定の実施形態において、活性化合物は、インプラント、経皮パッチ及びマイクロカプセル封入された送達システムを含む制御放出製剤のような、迅速放出に対して化合物を保護する担体と共に調製されてもよい。エチレンビニルアセテート、ポリアンヒドリド、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル及びポリ乳酸のような、生分解性の生体適合性ポリマーを使用することができる。かかる製剤の多くの調製方法は、特許をとられている又は当業者に一般に公知である。例えばＳｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ編、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９７８年を参照。
ある特定の実施形態において、本発明の抗体若しくは抗体部分又はＡＤＣは、例えば不活性な希釈剤又は吸収可能な食べられる担体と共に、経口投与されてもよい。化合物（及び所望なら、他の成分）はまた、錠剤に圧縮された、若しくは対象の食事に直接取り込まれた、硬又は軟シェルゼラチンカプセルに封入されてもよい。経口の治療投与のため、化合物は、賦形剤と共に取り込まれ、摂取可能な錠剤、口腔錠剤、トローチ、カプセル剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウェーハなどの形態で使用されてもよい。非経口投与以外により本発明の化合物を投与するために、化合物をその不活性化を防止する物質でコーティングする、又は化合物をその不活性化を防止する物質と同時投与することが必要であってもよい。
他の実施形態において、本発明の抗体若しくは抗体部分又はＡＤＣは、ポリマーベースの種が、本発明の前記抗体又は抗体部分が、増強された透過性及び把持効果（ＥＰＲ効果）から恩恵を受けるように、本発明の前記抗体又は抗体部分に十分なサイズを与え得るように、前記ポリマーベースの種にコンジュゲートされてもよい（ＰＣＴ公開第ＷＯ２００６／０４２１４６Ａ２号及び米国公開第２００４／００２８６８７Ａ１号、第２００９／０２８５７５７Ａ１号及び第２０１１／０２１７３６３Ａ１号並びに米国特許第７，６９５，７１９号（これらのそれぞれを、全ての目的について、その全体として参照により本明細書に組み込む）も参照。
補足の活性化合物はまた、組成物に取り込むことができる。ある特定の実施形態において、本発明の抗体若しくは抗体部分又はＡＤＣは、Ｂ７−Ｈ３活性が有害である障害を処置するのに有用である、１つ以上のさらなる治療剤と共に、製剤化され、及び／又は同時投与される。例えば本発明の抗ｈＢ７−Ｈ３抗体若しくは抗体部分又はＡＤＣは、他の標的に結合する１つ以上のさらなる抗体（例えば、サイトカインに結合する抗体又は細胞表面分子に結合する抗体）と共に製剤化され、及び／又は同時投与されてもよい。さらに、本発明の１つ以上の抗体は、前述の治療剤の２つ以上と組み合わせて使用されてもよい。かかる併用療法は、有利には、投与された治療剤のより少ない投薬量を利用してもよく、これにより、様々な単独療法に付随する可能性のある毒性又は合併症を回避する。
ある特定の実施形態において、Ｂ７−Ｈ３に対する抗体若しくはＡＤＣ又はその断片は、当技術分野において公知の半減期を拡大するビヒクルに結合される。かかるビヒクルは、Ｆｃドメイン、ポリエチレングリコール及びデキストランを含むが、これらに限定されない。かかるビヒクルは、例えば米国出願番号第０９／４２８，０８２号及び公開されたＰＣＴ出願第ＷＯ９９／２５０４４号において記載されており、これらを任意の目的のため参照により本明細書に組み込む。
本明細書に記載される本発明の方法の他の適当な修飾及び適合が、明らかであり、本発明又は本明細書において開示される実施形態の範囲から逸脱することなく適当な均等物を使用してなされ得ることは、当業者に容易に明らかである。ここで、本発明を詳細に記載し、これは、説明の目的のためだけに含まれ、限定することは意図されない、以下の実施例を参照してよりはっきりと理解される。
［実施例１］
例示的Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤の合成
この実施例は、例示的Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤化合物Ｗ３．０１〜Ｗ３．４３のための合成方法を提供する。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤（Ｗ３．０１〜Ｗ３．４３）及びシントン（実施例２．１〜２．１７６）を、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１２年リリース（Ｂｕｉｌｄ５６０８４、２０１２年４月５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１４年リリース（Ｂｕｉｌｄ６６６８７、２０１３年１０月２５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）バージョン９．０．７（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌバージョン１５．０．０．１０６を使用して命名した。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントン中間体を、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１２年リリース（Ｂｕｉｌｄ５６０８４、２０１２年４月５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１４年リリース（Ｂｕｉｌｄ６６６８７、２０１３年１０月２５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）バージョン９．０．７（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌバージョン１５．０．０．１０６を用いて命名した。
例示的Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤の合成
この実施例は、例示的Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤化合物Ｗ３．０１〜Ｗ３．４３のための合成方法を提供する。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤（Ｗ３．０１〜Ｗ３．４３）及びシントン（実施例２．１〜２．１７６）を、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１２年リリース（Ｂｕｉｌｄ５６０８４、２０１２年４月５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１４年リリース（Ｂｕｉｌｄ６６６８７、２０１３年１０月２５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）バージョン９．０．７（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌバージョン１５．０．０．１０６を使用して命名した。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤及びシントン中間体を、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１２年リリース（Ｂｕｉｌｄ５６０８４、２０１２年４月５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ ２０１４年リリース（Ｂｕｉｌｄ６６６８７、２０１３年１０月２５日、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ社、トロント、オンタリオ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）バージョン９．０．７（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ、ケンブリッジ、マサチューセッツ州）又はＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌバージョン１５．０．０．１０６を用いて命名した。
１．１． ６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０１）の合成
１．１．１． ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタンカルボン酸
５０ｍＬ丸底フラスコに、０℃で臭素（１６ｍＬ）を加えた。鉄粉（７ｇ）を加え、反応物を０℃で３０分間撹拌した。次いで３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１２ｇ）を加えた。次いで混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。氷／濃ＨＣｌ混合物を反応混合物中に注ぎ入れた。得られた懸濁液をＮａ２ＳＯ３（水２００ｍＬ中５０ｇ）で２回処理し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、粗製の標題化合物を得た。
５０ｍＬ丸底フラスコに、０℃で臭素（１６ｍＬ）を加えた。鉄粉（７ｇ）を加え、反応物を０℃で３０分間撹拌した。次いで３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１２ｇ）を加えた。次いで混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。氷／濃ＨＣｌ混合物を反応混合物中に注ぎ入れた。得られた懸濁液をＮａ２ＳＯ３（水２００ｍＬ中５０ｇ）で２回処理し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、粗製の標題化合物を得た。
１．１．２． ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタンメタノール
実施例１．１．１（１５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３（テトラヒドロフラン中１Ｍ、１５０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。次いで反応混合物をメタノールを滴下添加することにより注意深くクエンチした。次いで混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）との間で分配した。水性層を酢酸エチルでさらに２回抽出し、合わせた有機抽出物を合わせ、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。
実施例１．１．１（１５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３（テトラヒドロフラン中１Ｍ、１５０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。次いで反応混合物をメタノールを滴下添加することにより注意深くクエンチした。次いで混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）との間で分配した。水性層を酢酸エチルでさらに２回抽出し、合わせた有機抽出物を合わせ、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。
１．１．３． １−（（３−ブロモ−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル）−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．１．２（８．０ｇ）のトルエン（６０ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−ピラゾール（１．５５ｇ）及びシアノメチレントリブチルホスホラン（２．０ｇ）を加えた。混合物を９０℃で終夜撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１ヘキサン：酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．２（８．０ｇ）のトルエン（６０ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−ピラゾール（１．５５ｇ）及びシアノメチレントリブチルホスホラン（２．０ｇ）を加えた。混合物を９０℃で終夜撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１ヘキサン：酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．４. ２−｛［３，５−ジメチル−７−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］オキシ｝エタノール
実施例１．１．３（４．０ｇ）のエタン−１，２−ジオール（１２ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ）下１５０℃で４５分間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）中に注ぎ入れ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをヘキサン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．３（４．０ｇ）のエタン−１，２−ジオール（１２ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ）下１５０℃で４５分間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）中に注ぎ入れ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをヘキサン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．５． ２−（｛３，５−ジメチル−７−［（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エタノール
実施例１．１．４（６．０５ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中冷却（−７８℃）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（４０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加えた。混合物を−７８℃で１．５時間撹拌した。次いでヨードメタン（１０ｍＬ）を注射器を通して加え、混合物を−７８℃で３時間撹拌した。次いで反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中５％メタノール）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．４（６．０５ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中冷却（−７８℃）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（４０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加えた。混合物を−７８℃で１．５時間撹拌した。次いでヨードメタン（１０ｍＬ）を注射器を通して加え、混合物を−７８℃で３時間撹拌した。次いで反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中５％メタノール）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．６． １−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（ヒドロキシ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．１．５（３．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．２ｇ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。次いで反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＳＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中２０％酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．５（３．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．２ｇ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。次いで反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＳＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中２０％酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．７． ２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）オキシ）エチルメタンスルホネート
実施例１．１．６（５．４５ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液（０℃）に、トリエチルアミン（５．１３ｍＬ）及びメタンスルホニルクロリド（０．９５６ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌し、酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、水（１２０ｍＬ）及びブライン（１２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．６（５．４５ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液（０℃）に、トリエチルアミン（５．１３ｍＬ）及びメタンスルホニルクロリド（０．９５６ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌し、酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、水（１２０ｍＬ）及びブライン（１２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．８． ２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）オキシ）−Ｎ−メチルエタンアミン
実施例１．１．７（６．４１ｇ）のエタノール中２Ｍメチルアミン（１５ｍＬ）中溶液を終夜撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．７（６．４１ｇ）のエタノール中２Ｍメチルアミン（１５ｍＬ）中溶液を終夜撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．９．ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛３−［（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］メチルカルバメート
実施例１．１．８（２．２ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．２６ｇ）及び触媒量の４−ジメチルアミノピリジンを加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌し、次いで酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．８（２．２ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．２６ｇ）及び触媒量の４−ジメチルアミノピリジンを加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌し、次いで酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．１０ ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−イル）オキシ）エチル）（メチル）カルバメート
実施例１．１．９（１．２ｇ）のジオキサン中溶液に、ビス（ベンゾニトリル）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．０４ｇ）、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．９３７ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．９ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で終夜加熱し、酢酸エチルで希釈し、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．９（１．２ｇ）のジオキサン中溶液に、ビス（ベンゾニトリル）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．０４ｇ）、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．９３７ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．９ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で終夜加熱し、酢酸エチルで希釈し、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．１１. ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−クロロピコリネート
ジオキサン（２ｍＬ）中の実施例１．１．１０（１００ｍｇ）及びｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（５２．５ｍｇ）に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（８．２ｍｇ）、Ｋ３ＰＯ４（１１４ｍｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−フェニル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（５．２４ｍｇ）及び水（０．８ｍＬ）を加えた。混合物を９５℃で４時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、ヘプタン中２０％酢酸エチルで次いでジクロロメタン中５％メタノールで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６４３．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジオキサン（２ｍＬ）中の実施例１．１．１０（１００ｍｇ）及びｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（５２．５ｍｇ）に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（８．２ｍｇ）、Ｋ３ＰＯ４（１１４ｍｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−フェニル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（５．２４ｍｇ）及び水（０．８ｍＬ）を加えた。混合物を９５℃で４時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、ヘプタン中２０％酢酸エチルで次いでジクロロメタン中５％メタノールで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６４３．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．１２. ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリネート
実施例１．１．１１（４８０ｍｇ）、７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（３８７ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（７８ｍｇ）及びＣｓＦ（３４０ｍｇ）のジオキサン（１２ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中混合物を、１００℃で５時間加熱した。この後、反応混合物を室温に冷却し、次いで酢酸エチルで希釈した。得られた混合物を水及びブラインで洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７４０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．１１（４８０ｍｇ）、７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（３８７ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（７８ｍｇ）及びＣｓＦ（３４０ｍｇ）のジオキサン（１２ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中混合物を、１００℃で５時間加熱した。この後、反応混合物を室温に冷却し、次いで酢酸エチルで希釈した。得られた混合物を水及びブラインで洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７４０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１．１３. ｔｅｒｔ−ブチル６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１１４ｍｇ）のアセトニトリル（５ｍＬ）中溶液に、ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（１９４ｍｇ）を加えた。混合物を１時間撹拌し、アセトニトリル（５ｍＬ）中の実施例１．１．１２（４３２ｍｇ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１１４ｍｇ）のアセトニトリル（５ｍＬ）中溶液に、ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（１９４ｍｇ）を加えた。混合物を１時間撹拌し、アセトニトリル（５ｍＬ）中の実施例１．１．１２（４３２ｍｇ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１．１４. ６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）−３−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（メチルアミノ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の実施例１．１．１３（２００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で終夜処理した。混合物を濃縮して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.40 (s, 1H), 8.30 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.74-7.83 (m, 2H), 7.42-7.53 (m, 2H), 7.38 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 3.93-4.05 (m, 2H), 3.52-3.62 (m, 2H), 2.97-3.10 (m, 2H), 2.84 (t, 2H), 2.56 (t, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.88-2.00 (m, 2H), 1.45 (s, 2H), 1.25-1.39 (m, 4H), 1.12-1.22 (m, 4H), 1.00-1.09 (m, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の実施例１．１．１３（２００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で終夜処理した。混合物を濃縮して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.40 (s, 1H), 8.30 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.74-7.83 (m, 2H), 7.42-7.53 (m, 2H), 7.38 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 3.93-4.05 (m, 2H), 3.52-3.62 (m, 2H), 2.97-3.10 (m, 2H), 2.84 (t, 2H), 2.56 (t, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.88-2.00 (m, 2H), 1.45 (s, 2H), 1.25-1.39 (m, 4H), 1.12-1.22 (m, 4H), 1.00-1.09 (m, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２． ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０２）の合成
１．２．１． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（（−−３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−６−イル）ピコリネート
６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（１２２ｍｇ）のジオキサン（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１１（３００ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３２．７ｍｇ）及びＣｓＦ（２１２ｍｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製物を得、これをカラムクロマトグラフィー（ヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノール）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４２．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン（１２２ｍｇ）のジオキサン（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１１（３００ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３２．７ｍｇ）及びＣｓＦ（２１２ｍｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製物を得、これをカラムクロマトグラフィー（ヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノール）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４２．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２．２． ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（７０．４ｍｇ）のアセトニトリル（４ｍＬ）中周囲温度懸濁液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（４１．３ｍｇ）を加え、混合物を１時間撹拌した。実施例１．２．１（１７０ｍｇ）のアセトニトリル（１ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）中溶液を加え、懸濁液を終夜激しく撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをカラム上に装填し、ヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出した。得られた物質をジクロロメタン中２０％ＴＦＡで終夜処理した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.76 (s, 1H), 8.24-8.46 (m, 2H), 7.97 (d, 1H), 7.70-7.89 (m, 3H), 7.47 (s, 1H), 7.35-7.47 (m, 2H), 7.24 (t, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.32-4.42 (m, 3H), 4.14-4.23 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.57 (t, 3H), 2.93-3.11 (m, 2H), 2.57 (t, 3H), 2.23 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.24-1.39 (m, 4H), 0.98-1.25 (m, 5H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（７０．４ｍｇ）のアセトニトリル（４ｍＬ）中周囲温度懸濁液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（４１．３ｍｇ）を加え、混合物を１時間撹拌した。実施例１．２．１（１７０ｍｇ）のアセトニトリル（１ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）中溶液を加え、懸濁液を終夜激しく撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをカラム上に装填し、ヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出した。得られた物質をジクロロメタン中２０％ＴＦＡで終夜処理した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.76 (s, 1H), 8.24-8.46 (m, 2H), 7.97 (d, 1H), 7.70-7.89 (m, 3H), 7.47 (s, 1H), 7.35-7.47 (m, 2H), 7.24 (t, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.32-4.42 (m, 3H), 4.14-4.23 (m, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.57 (t, 3H), 2.93-3.11 (m, 2H), 2.57 (t, 3H), 2.23 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.24-1.39 (m, 4H), 0.98-1.25 (m, 5H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３． ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０３）の合成
１．３．１． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル）ピコリネート
１−メチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン（１４０ｍｇ）のジオキサン（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１１（３２８ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３５．８ｍｇ）及びＣｓＦ（２３２ｍｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製物を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１−メチル−６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン（１４０ｍｇ）のジオキサン（４ｍＬ）及び水（１ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１１（３２８ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３５．８ｍｇ）及びＣｓＦ（２３２ｍｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製物を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３．２． ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（３０７ｍｇ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中周囲温度懸濁液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１８０ｍｇ）を加え、混合物を１時間撹拌した。実施例１．３．１（６００ｍｇ）のアセトニトリル（３ｍＬ）中溶液を加え、懸濁液を終夜激しく撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをカラム上に装填し、ヘプタン中２０％酢酸エチル（１Ｌ）、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出した。得られた物質をジクロロメタン中２０％ＴＦＡで終夜処理した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.17-8.44 (m, 3H), 7.90 (d, 1H), 7.68-7.84 (m, 3H), 7.45 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.22 (t, 1H), 6.83 (d, 1H), 3.96-4.12 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.57 (t, 2H), 3.44 (t, 2H), 2.93-3.09 (m, 4H), 2.56 (t, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.25-1.39 (m, 4H), 0.99-1.22 (m, 7H), 0.89 (s, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（３０７ｍｇ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中周囲温度懸濁液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１８０ｍｇ）を加え、混合物を１時間撹拌した。実施例１．３．１（６００ｍｇ）のアセトニトリル（３ｍＬ）中溶液を加え、懸濁液を終夜激しく撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをカラム上に装填し、ヘプタン中２０％酢酸エチル（１Ｌ）、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出した。得られた物質をジクロロメタン中２０％ＴＦＡで終夜処理した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.17-8.44 (m, 3H), 7.90 (d, 1H), 7.68-7.84 (m, 3H), 7.45 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.22 (t, 1H), 6.83 (d, 1H), 3.96-4.12 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.57 (t, 2H), 3.44 (t, 2H), 2.93-3.09 (m, 4H), 2.56 (t, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.25-1.39 (m, 4H), 0.99-1.22 (m, 7H), 0.89 (s, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４． ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０４）の合成
１．４．１． ２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）オキシ）エタンアミン
実施例１．１．７（４．５ｇ）のメタノール中７Ｎアンモニウム（１５ｍＬ）中溶液を、マイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１００℃で２０分間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層を脱水（無水Ｎａ２ＳＯ４）し、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．７（４．５ｇ）のメタノール中７Ｎアンモニウム（１５ｍＬ）中溶液を、マイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１００℃で２０分間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層を脱水（無水Ｎａ２ＳＯ４）し、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４．２． ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）オキシ）エチル）カルバメート
実施例１．４．１（４．４ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（２．６ｇ）及びＮ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（１００ｍｇ）を加えた。混合物を１．５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。脱水（無水Ｎａ２ＳＯ４）した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中２０％酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．１（４．４ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（２．６ｇ）及びＮ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（１００ｍｇ）を加えた。混合物を１．５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。脱水（無水Ｎａ２ＳＯ４）した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中２０％酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４．３． ６−フルオロ−３−ブロモピコリン酸
６−アミノ−３−ブロモピコリン酸（２５ｇ）の１：１ジクロロメタン／クロロホルム４００ｍＬ中スラリー液を、５℃で１時間かけてジクロロメタン（１００ｍＬ）中のニトロソニウムテトラフルオロボレート（１８．２ｇ）に加えた。得られた混合物をさらに３０分間撹拌し、３５℃に加温し、終夜撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＮａＨ２ＰＯ４溶液でｐＨを４に調整した。得られた溶液をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
６−アミノ−３−ブロモピコリン酸（２５ｇ）の１：１ジクロロメタン／クロロホルム４００ｍＬ中スラリー液を、５℃で１時間かけてジクロロメタン（１００ｍＬ）中のニトロソニウムテトラフルオロボレート（１８．２ｇ）に加えた。得られた混合物をさらに３０分間撹拌し、３５℃に加温し、終夜撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、ＮａＨ２ＰＯ４溶液でｐＨを４に調整した。得られた溶液をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．４．４． ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−フルオロピコリネート
パラ−トルエンスルホニルクロリド（２７．６ｇ）を、０℃で実施例１．４．３（１４．５ｇ）、ピリジン（２６．７ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（８０ｍＬ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中溶液に加えた。反応物を１５分間撹拌し、室温に加温し、終夜撹拌した。溶液を濃縮し、酢酸エチルとＮａ２ＣＯ３溶液との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＣＯ３溶液及びブラインですすぎ、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
パラ−トルエンスルホニルクロリド（２７．６ｇ）を、０℃で実施例１．４．３（１４．５ｇ）、ピリジン（２６．７ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（８０ｍＬ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中溶液に加えた。反応物を１５分間撹拌し、室温に加温し、終夜撹拌した。溶液を濃縮し、酢酸エチルとＮａ２ＣＯ３溶液との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＣＯ３溶液及びブラインですすぎ、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．４．５． エチル７−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート
エチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート塩酸塩（６９２ｍｇ）及び実施例１．４．４（７５０ｍｇ）をジメチルスルホキシド（６ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．２ｍＬ）を加え、溶液を５０℃で１６時間加熱した。溶液を冷却し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機部分をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濃縮し、１６時間置いた時点で固体の結晶が生成した。結晶をジエチルエーテルで洗浄して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５１、４５３（Ｍ＋Ｈ）＋、３９５、３９７（Ｍ−ｔｅｒｔ−ブチル）＋。
エチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート塩酸塩（６９２ｍｇ）及び実施例１．４．４（７５０ｍｇ）をジメチルスルホキシド（６ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．２ｍＬ）を加え、溶液を５０℃で１６時間加熱した。溶液を冷却し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機部分をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濃縮し、１６時間置いた時点で固体の結晶が生成した。結晶をジエチルエーテルで洗浄して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５１、４５３（Ｍ＋Ｈ）＋、３９５、３９７（Ｍ−ｔｅｒｔ−ブチル）＋。
１．４．６． エチル７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート
実施例１．１．１０において実施例１．４．５を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４９９（Ｍ＋Ｈ）＋、４４３（Ｍ−ｔｅｒｔ−ブチル）＋、５２９（Ｍ＋ＭｅＯＨ−Ｈ）−。
実施例１．１．１０において実施例１．４．５を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４９９（Ｍ＋Ｈ）＋、４４３（Ｍ−ｔｅｒｔ−ブチル）＋、５２９（Ｍ＋ＭｅＯＨ−Ｈ）−。
１．４．７． エチル７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート
実施例１．４．６（１３６ｍｇ）及び実施例１．４．２（１４８ｍｇ）を１，４−ジオキサン（３ｍＬ）及び水（０．８５ｍＬ）に溶解した。リン酸三カリウム（２９０ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１３ｍｇ）及び１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（１２ｍｇ）を加えた。溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュし、７０℃に１６時間加熱した。反応物を冷却し、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び水（３ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、濾液を濃縮し、酢酸エチル中５％メタノールで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０（Ｍ＋Ｈ）＋、７５８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．６（１３６ｍｇ）及び実施例１．４．２（１４８ｍｇ）を１，４−ジオキサン（３ｍＬ）及び水（０．８５ｍＬ）に溶解した。リン酸三カリウム（２９０ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１３ｍｇ）及び１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（１２ｍｇ）を加えた。溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュし、７０℃に１６時間加熱した。反応物を冷却し、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び水（３ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、濾液を濃縮し、酢酸エチル中５％メタノールで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０（Ｍ＋Ｈ）＋、７５８（Ｍ−Ｈ）−。
１．４．８． ７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボン酸
実施例１．４．７（２００ｍｇ）をテトラヒドロフラン（０．７ｍＬ）、メタノール（０．３５ｍＬ）及び水（０．３５ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム一水和物（２１ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。ＨＣｌ（１Ｍ、０．４８ｍＬ）を加え、水を酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回共沸することにより除去した。溶媒を減圧下で除去し、物質を真空乾固した。物質をジクロロメタン（５ｍＬ）及び酢酸エチル（１ｍＬ）に溶解し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０（Ｍ＋Ｈ）＋、７５８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．７（２００ｍｇ）をテトラヒドロフラン（０．７ｍＬ）、メタノール（０．３５ｍＬ）及び水（０．３５ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム一水和物（２１ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。ＨＣｌ（１Ｍ、０．４８ｍＬ）を加え、水を酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回共沸することにより除去した。溶媒を減圧下で除去し、物質を真空乾固した。物質をジクロロメタン（５ｍＬ）及び酢酸エチル（１ｍＬ）に溶解し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０（Ｍ＋Ｈ）＋、７５８（Ｍ−Ｈ）−。
１．４．９． ｔｅｒｔ−ブチル６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．８（１６０ｍｇ）及びベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３５ｍｇ）をジクロロメタン（１．５ｍＬ）に溶解した。１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（８５ｍｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（５４ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。物質を酢酸エチル中２．５〜５％メタノールで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９２（Ｍ＋Ｈ）＋、８９０（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．８（１６０ｍｇ）及びベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３５ｍｇ）をジクロロメタン（１．５ｍＬ）に溶解した。１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（８５ｍｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（５４ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。物質を酢酸エチル中２．５〜５％メタノールで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９２（Ｍ＋Ｈ）＋、８９０（Ｍ−Ｈ）−。
１．４．１０. ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１．１４において実施例１．４．９を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.50 (bs, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.66 (bs, 3H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.15 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.26 (m, 2H), 4.08 (t, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.90 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 1.42 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.15 (m, 2H), 1.04 (q, 4H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３６（Ｍ＋Ｈ）＋、７３４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１．１４において実施例１．４．９を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.50 (bs, 1H), 8.21 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.66 (bs, 3H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.15 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.26 (m, 2H), 4.08 (t, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.90 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 1.42 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.15 (m, 2H), 1.04 (q, 4H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３６（Ｍ＋Ｈ）＋、７３４（Ｍ−Ｈ）−。
１．５． ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０５）の合成
１．５．１． ｔｅｒｔ−ブチルジフェニル（ビニル）シラン
Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ、７０巻（４号）、１４６７頁（２００５年）に記載されている通りに標題化合物を調製した。
Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ、７０巻（４号）、１４６７頁（２００５年）に記載されている通りに標題化合物を調製した。
１．５．２． ２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エタノール
実施例１．５．１（８．２ｇ）をテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）に溶解し、次いで９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナンのテトラヒドロフラン中０．５Ｍ溶液（６３ｍＬ）を加え、反応物を室温で２．５時間撹拌した。反応物を３７℃に加温し、次いで３．０Ｎ ＮａＯＨ水溶液（１１ｍＬ）を加え、続いて３０％Ｈ２Ｏ２水溶液（１１ｍＬ）を非常に慎重に滴下添加した。過酸化物添加が完了したら、反応物を１時間撹拌し、水（２００ｍＬ）及びジエチルエーテル（２００ｍＬ）を加えた。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（３／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．５．１（８．２ｇ）をテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）に溶解し、次いで９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナンのテトラヒドロフラン中０．５Ｍ溶液（６３ｍＬ）を加え、反応物を室温で２．５時間撹拌した。反応物を３７℃に加温し、次いで３．０Ｎ ＮａＯＨ水溶液（１１ｍＬ）を加え、続いて３０％Ｈ２Ｏ２水溶液（１１ｍＬ）を非常に慎重に滴下添加した。過酸化物添加が完了したら、反応物を１時間撹拌し、水（２００ｍＬ）及びジエチルエーテル（２００ｍＬ）を加えた。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（３／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．５．３． ５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）イソキノリン
トリフェニルホスフィン（２６２ｍｇ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。実施例１．５．２（２８５ｍｇ）、イソキノリン−５−オール（１２１ｍｇ）及びジイソプロピルアゾジカルボキシレート（２０３ｍｇ）を加えた。反応物を室温で３０分間撹拌し、次いでさらにイソキノリン−５−オール（４１ｍｇ）を加え、反応物を終夜撹拌した。次いで反応物を濃縮し、ヘプタン／酢酸エチル（８３／１７）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４１２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
トリフェニルホスフィン（２６２ｍｇ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解した。実施例１．５．２（２８５ｍｇ）、イソキノリン−５−オール（１２１ｍｇ）及びジイソプロピルアゾジカルボキシレート（２０３ｍｇ）を加えた。反応物を室温で３０分間撹拌し、次いでさらにイソキノリン−５−オール（４１ｍｇ）を加え、反応物を終夜撹拌した。次いで反応物を濃縮し、ヘプタン／酢酸エチル（８３／１７）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４１２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．４． ８−ブロモ−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）イソキノリン
実施例１．５．３（６．２ｇ）を酢酸（４０ｍＬ）に溶解し、酢酸ナトリウム（２．２ｇ）を加えた。臭素（０．７０ｍＬ）の酢酸（１３ｍＬ）中溶液をゆっくり加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。反応物を２Ｍ Ｎａ２ＣＯ３水溶液に注意深く加え、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（９／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４９０．１、４９２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．３（６．２ｇ）を酢酸（４０ｍＬ）に溶解し、酢酸ナトリウム（２．２ｇ）を加えた。臭素（０．７０ｍＬ）の酢酸（１３ｍＬ）中溶液をゆっくり加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。反応物を２Ｍ Ｎａ２ＣＯ３水溶液に注意深く加え、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（９／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４９０．１、４９２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．５． ８−ブロモ−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン
実施例１．５．４（４．４６ｇ）をメタノール（４５ｍＬ）に溶解した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２．０ｇ）を、続いてトリフルオロボランエーテレート（４．０ｍＬ、３１．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流下で２時間加熱し、次いで室温に冷却した。さらにシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２．０ｇ）及びトリフルオロボランエーテレート（４．０ｍＬ）を加え、混合物を還流下でさらに２時間加熱した。反応物を冷却し、次いで１／１水／２Ｍ Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）に加えた。混合物をジクロロメタンで（１００ｍＬで２回）抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４９４．１、４９６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．４（４．４６ｇ）をメタノール（４５ｍＬ）に溶解した。シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２．０ｇ）を、続いてトリフルオロボランエーテレート（４．０ｍＬ、３１．６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流下で２時間加熱し、次いで室温に冷却した。さらにシアノ水素化ホウ素ナトリウム（２．０ｇ）及びトリフルオロボランエーテレート（４．０ｍＬ）を加え、混合物を還流下でさらに２時間加熱した。反応物を冷却し、次いで１／１水／２Ｍ Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１５０ｍＬ）に加えた。混合物をジクロロメタンで（１００ｍＬで２回）抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４９４．１、４９６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．６． ｔｅｒｔ−ブチル８−ブロモ−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキシレート
実施例１．５．５（３．９ｇ）をジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（３．３ｍＬ）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．９ｇ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。次いで反応物を濃縮し、ヘプタン／酢酸エチル（９６／４）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．５．５（３．９ｇ）をジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（３．３ｍＬ）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．９ｇ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。次いで反応物を濃縮し、ヘプタン／酢酸エチル（９６／４）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．５．７． ２−ｔｅｒｔ−ブチル８−メチル５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，８（１Ｈ）−ジカルボキシレート
実施例１．５．６（３．６ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．０２５ｇ）を２５０ｍＬのＳＳ圧力ボトルに入れ、メタノール（１０ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．４６９ｍＬ）を加えた。反応器をアルゴンで数回脱気した後、フラスコに一酸化炭素を入れ、４０ｐｓｉで１００℃に１６時間加熱した。反応混合物を冷却し、濃縮し、ヘプタン／酢酸エチル（８８／１２）で溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．５．６（３．６ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．０２５ｇ）を２５０ｍＬのＳＳ圧力ボトルに入れ、メタノール（１０ｍＬ）及びトリエチルアミン（０．４６９ｍＬ）を加えた。反応器をアルゴンで数回脱気した後、フラスコに一酸化炭素を入れ、４０ｐｓｉで１００℃に１６時間加熱した。反応混合物を冷却し、濃縮し、ヘプタン／酢酸エチル（８８／１２）で溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．５．８． メチル５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．７（１．８ｇ）をジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（２５ｍＬ）に溶解し、室温で４５分間撹拌した。次いで反応物を濃縮して、標題化合物を塩酸塩として得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４７４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．７（１．８ｇ）をジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（２５ｍＬ）に溶解し、室温で４５分間撹拌した。次いで反応物を濃縮して、標題化合物を塩酸塩として得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４７４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．９． メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．８（１．６ｇ）及び実施例１．４．４（１．０ｇ）のジメチルスルホキシド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ）を加えた。混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物をジエチルエーテルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカゲルカラム精製（ヘキサン中５％酢酸エチルで溶出）により、標題化合物を得た。
実施例１．５．８（１．６ｇ）及び実施例１．４．４（１．０ｇ）のジメチルスルホキシド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍＬ）を加えた。混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物をジエチルエーテルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカゲルカラム精製（ヘキサン中５％酢酸エチルで溶出）により、標題化合物を得た。
１．５．１０． １−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．１．６（２ｇ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．８４ｍＬ）を加えた。反応溶液を５℃に冷却した後、塩化メシル（０．４６ｍＬ）を滴下添加した。冷却浴を除去し、反応物を室温で２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３を加え、層を分離し、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、残渣をＮ，Ｎジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）に溶解し、アジ化ナトリウム（０．８８ｇ）を加え、反応物を８０℃に２時間加熱した。次いで反応物を室温に冷却し、ジエチルエーテル及び水中に注ぎ入れた。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（４／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４７０．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．６（２ｇ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（０．８４ｍＬ）を加えた。反応溶液を５℃に冷却した後、塩化メシル（０．４６ｍＬ）を滴下添加した。冷却浴を除去し、反応物を室温で２時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３を加え、層を分離し、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、残渣をＮ，Ｎジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）に溶解し、アジ化ナトリウム（０．８８ｇ）を加え、反応物を８０℃に２時間加熱した。次いで反応物を室温に冷却し、ジエチルエーテル及び水中に注ぎ入れた。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（４／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４７０．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．１１． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．９（１．５ｇ）、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．４６ｍＬ）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（８６ｍｇ）及びトリエチルアミン（０．５９ｍＬ）を、窒素雰囲気下アセトニトリル（６．５ｍＬ）に溶解し、次いで反応物を還流下で終夜加熱した。次いで反応物を室温に冷却し、酢酸エチル及び水を加えた。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン中１０〜２０％酢酸エチルの濃度勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．９（１．５ｇ）、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．４６ｍＬ）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（８６ｍｇ）及びトリエチルアミン（０．５９ｍＬ）を、窒素雰囲気下アセトニトリル（６．５ｍＬ）に溶解し、次いで反応物を還流下で終夜加熱した。次いで反応物を室温に冷却し、酢酸エチル及び水を加えた。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン中１０〜２０％酢酸エチルの濃度勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．１２． メチル２−（５−（１−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．１１（１．２２ｇ）及び実施例１．５．１０（０．７４ｇ）を、窒素雰囲気下テトラヒドロフラン（１６ｍＬ）に溶解し、リン酸三カリウム（４．５ｇ）及び水（５ｍＬ）を加えた。次いでトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（７０ｍｇ）及び１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（６６ｍｇ）を加え、反応物を還流状態で終夜加熱し、次いで室温に冷却した。次いで酢酸エチル及び水を加え、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、粗製物をヘプタン／酢酸エチル（７／３）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ９９２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１１（１．２２ｇ）及び実施例１．５．１０（０．７４ｇ）を、窒素雰囲気下テトラヒドロフラン（１６ｍＬ）に溶解し、リン酸三カリウム（４．５ｇ）及び水（５ｍＬ）を加えた。次いでトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（７０ｍｇ）及び１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（６６ｍｇ）を加え、反応物を還流状態で終夜加熱し、次いで室温に冷却した。次いで酢酸エチル及び水を加え、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、粗製物をヘプタン／酢酸エチル（７／３）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ９９２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．１３． ２−（５−（１−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．５．１２（１．１５ｇ）をテトラヒドロフラン（４．５ｍＬ）に溶解し、メタノール（２．２ｍＬ）、水（２．２ｍＬ）及び水酸化リチウム一水和物（９６ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で５日間撹拌した。水（２０ｍＬ）及び２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１．１ｍＬ）を加えた。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ジクロロメタン／酢酸エチル（７０／３０）、続いてジクロロメタン／酢酸エチル／酢酸（７０／３０／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．５．１２（１．１５ｇ）をテトラヒドロフラン（４．５ｍＬ）に溶解し、メタノール（２．２ｍＬ）、水（２．２ｍＬ）及び水酸化リチウム一水和物（９６ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で５日間撹拌した。水（２０ｍＬ）及び２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１．１ｍＬ）を加えた。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ジクロロメタン／酢酸エチル（７０／３０）、続いてジクロロメタン／酢酸エチル／酢酸（７０／３０／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．５．１４． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）エトキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリネート
実施例１．５．１３（８０ｍｇ）及びベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１４ｍｇ）をジクロロメタン（１．２ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（１７ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２７ｍｇ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。反応物を濃縮し、粗製の残渣をジクロロメタン／酢酸エチル（９０／１０）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１１０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１３（８０ｍｇ）及びベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１４ｍｇ）をジクロロメタン（１．２ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（１７ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（２７ｍｇ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。反応物を濃縮し、粗製の残渣をジクロロメタン／酢酸エチル（９０／１０）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１１０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．１５． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリネート
実施例１．５．１４（１６０ｍｇ）をテトラブチルアンモニウムフルオリドの９５／５テトラヒドロフラン／水中１．０Ｍ溶液（１．１５ｍＬ）に溶解し、反応物を６０℃で２日間加熱した。粉末４Åモレキュラーシーブスを加え、混合物を６０℃でさらに１日間加熱した。反応物を冷却し、次いで濃縮し、粗製の残渣を７０／３０／１ジクロロメタン／酢酸エチル／酢酸で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１４（１６０ｍｇ）をテトラブチルアンモニウムフルオリドの９５／５テトラヒドロフラン／水中１．０Ｍ溶液（１．１５ｍＬ）に溶解し、反応物を６０℃で２日間加熱した。粉末４Åモレキュラーシーブスを加え、混合物を６０℃でさらに１日間加熱した。反応物を冷却し、次いで濃縮し、粗製の残渣を７０／３０／１ジクロロメタン／酢酸エチル／酢酸で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．５．１６． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリネート
実施例１．５．１５（７０ｍｇ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解し、炭素担持１０％パラジウム（２０ｍｇ）を加え、混合物を水素風船下で終夜撹拌した。珪藻土に通して濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製の標題化合物を０．１％ＴＦＡ水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。
実施例１．５．１５（７０ｍｇ）をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）に溶解し、炭素担持１０％パラジウム（２０ｍｇ）を加え、混合物を水素風船下で終夜撹拌した。珪藻土に通して濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製の標題化合物を０．１％ＴＦＡ水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。
１．５．１７． ３−（１−（（３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．５．１６（１１ｍｇ）をジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（０．５ｍＬ）に溶解し、室温で終夜撹拌した。固体を濾別し、ジオキサンで洗浄して、標題化合物を塩酸塩として得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.60 (v br s, 1H), 10.40 (br s, 1H), 8.00 (d, 1H) 7.76 (d, 1H), 7.75 (br s, 3H), 7.60 ( d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.99 (s, 2H), 3.89 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.50 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 2.79 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.29 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１６（１１ｍｇ）をジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（０．５ｍＬ）に溶解し、室温で終夜撹拌した。固体を濾別し、ジオキサンで洗浄して、標題化合物を塩酸塩として得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.60 (v br s, 1H), 10.40 (br s, 1H), 8.00 (d, 1H) 7.76 (d, 1H), 7.75 (br s, 3H), 7.60 ( d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.82 (d, 1H), 4.99 (s, 2H), 3.89 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.50 (m, 2H), 2.88 (m, 2H), 2.79 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.29 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．６． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０６）の合成
１．６．１． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（メトキシカルボニル）ナフタレン−２−イル）ピコリネート
メチル７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１−ナフトエート（２．４７ｇ）のジオキサン（４０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１１（４．２ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（５５６ｍｇ）及びＣｓＦ（３．６１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
メチル７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１−ナフトエート（２．４７ｇ）のジオキサン（４０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１１（４．２ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（５５６ｍｇ）及びＣｓＦ（３．６１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．６．２． ７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−ナフトエ酸
実施例１．６．１（５００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（４ｍＬ）、メタノール（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（５００ｍｇ）を加えた。混合物を３時間撹拌した。次いで混合物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。有機層を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７９．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．６．１（５００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（４ｍＬ）、メタノール（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（５００ｍｇ）を加えた。混合物を３時間撹拌した。次いで混合物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。有機層を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７９．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．６．３． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．６．２（７９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（２３ｍｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（４１ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１５０ｍｇ）を加えた。混合物を６０℃で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の中間体を得、これをジクロロメタン／ＴＦＡ（１：１、６ｍＬ）に溶解し、終夜置いた。溶媒を蒸発させて残渣を得、これをジメチルスルホキシド／メタノール（１：１、９ｍＬ）に溶解し、ＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）により精製して、純粋な標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.11 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.38 (dd, 1H), 8.26-8.34 (m, 2H), 8.13-8.27 (m, 3H), 8.07 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), , 7.82 (d, 1H), 7.67-7.75 (m, 1H), , 7.44-7.53 (m, 2H), 7.30-7.41 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.94-3.12 (m, 3H), 2.53-2.60 (m, 4H), 2.20-2.31 (m, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.25-1.39 (m, 4H), 0.99-1.23 (m, 4H), 0.89 (s, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．６．２（７９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（２３ｍｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（４１ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１５０ｍｇ）を加えた。混合物を６０℃で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の中間体を得、これをジクロロメタン／ＴＦＡ（１：１、６ｍＬ）に溶解し、終夜置いた。溶媒を蒸発させて残渣を得、これをジメチルスルホキシド／メタノール（１：１、９ｍＬ）に溶解し、ＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）により精製して、純粋な標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.11 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.38 (dd, 1H), 8.26-8.34 (m, 2H), 8.13-8.27 (m, 3H), 8.07 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), , 7.82 (d, 1H), 7.67-7.75 (m, 1H), , 7.44-7.53 (m, 2H), 7.30-7.41 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.94-3.12 (m, 3H), 2.53-2.60 (m, 4H), 2.20-2.31 (m, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.25-1.39 (m, 4H), 0.99-1.23 (m, 4H), 0.89 (s, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．７． ３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０７）の合成
実施例１．６．３においてチアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−アミンをベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミンの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.25 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), , 8.54 (dd, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.14-8.35 (m, 6H), 8.04 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.66-7.75 (m, 1H), 7.55 (dd, 1H), 7.49 (s, 1H), 3.57 (t, 3H), 2.95-3.10 (m, 2H), 2.51-2.62 (m, 3H), 2.19-2.28 (m, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.24-1.38 (m, 4H), 0.98-1.24 (m, 6H), 0.89 (s, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．６．３においてチアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−アミンをベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミンの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.25 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), , 8.54 (dd, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.14-8.35 (m, 6H), 8.04 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.66-7.75 (m, 1H), 7.55 (dd, 1H), 7.49 (s, 1H), 3.57 (t, 3H), 2.95-3.10 (m, 2H), 2.51-2.62 (m, 3H), 2.19-2.28 (m, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.24-1.38 (m, 4H), 0.98-1.24 (m, 6H), 0.89 (s, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．８． ３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０８）の合成
実施例１．６．３においてチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミンをベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミンの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.40 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.62 (dd, 1H), 8.56 (dd, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.13-8.34 (m, 5H), 8.06 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.68-7.79 (m, 1H), 7.45-7.54 (m, 1H), 7.39 (dd, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.54-3.60 (m, 3H), 2.94-3.08 (m, 2H), 2.51-2.60 (m, 4H), 2.18-2.31 (m, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.24-1.40 (m, 4H), 1.01-1.21 (m, 6H), 0.83-0.89 (m, 5 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．６．３においてチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミンをベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミンの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.40 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 8.62 (dd, 1H), 8.56 (dd, 1H), 8.39 (dd, 1H), 8.13-8.34 (m, 5H), 8.06 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.68-7.79 (m, 1H), 7.45-7.54 (m, 1H), 7.39 (dd, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.54-3.60 (m, 3H), 2.94-3.08 (m, 2H), 2.51-2.60 (m, 4H), 2.18-2.31 (m, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.24-1.40 (m, 4H), 1.01-1.21 (m, 6H), 0.83-0.89 (m, 5 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．０９）の合成
１．９．１． ｔｅｒｔ−ブチル８−ブロモ−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキシレート
ｔｅｒｔ−ブチル５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキシレート（９ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（６．４３ｇ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、水（２００ｍＬ）でクエンチした。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
ｔｅｒｔ−ブチル５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキシレート（９ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ブロモスクシンイミド（６．４３ｇ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、水（２００ｍＬ）でクエンチした。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．２． ｔｅｒｔ−ブチル５−（ベンジルオキシ）−８−ブロモ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−カルボキシレート
実施例１．９．１（１１．８ｇ）のアセトン（２００ｍＬ）中溶液に、ベンジルブロミド（７．４２ｇ）及びＫ２ＣＯ３（５ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（６００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）との間で分配した。有機層を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをシリカゲルカラム上で精製し、ヘプタン中１０％酢酸エチルで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４１８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．９．１（１１．８ｇ）のアセトン（２００ｍＬ）中溶液に、ベンジルブロミド（７．４２ｇ）及びＫ２ＣＯ３（５ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（６００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）との間で分配した。有機層を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて粗製の標題化合物を得、これをシリカゲルカラム上で精製し、ヘプタン中１０％酢酸エチルで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４１８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．３． ２−ｔｅｒｔ−ブチル８−メチル５−（ベンジルオキシ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２，８（１Ｈ）−ジカルボキシレート
メタノール（１００ｍＬ）及びトリエチルアミン（９．１５ｍＬ）を、５００ｍＬステンレス鋼製圧力反応器中で実施例１．９．２（１０．８ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（０．４８ｇ）に加えた。容器をアルゴンで数回スパージした。反応器を一酸化炭素で加圧し、６０ｐｓｉの一酸化炭素下１００℃で２時間撹拌した。冷却後、粗製の反応混合物を真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）との間で分配した。有機層を水及びブラインでさらに洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、残渣をヘプタン中１０〜２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラム３３０ｇ上で精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３９８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
メタノール（１００ｍＬ）及びトリエチルアミン（９．１５ｍＬ）を、５００ｍＬステンレス鋼製圧力反応器中で実施例１．９．２（１０．８ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（０．４８ｇ）に加えた。容器をアルゴンで数回スパージした。反応器を一酸化炭素で加圧し、６０ｐｓｉの一酸化炭素下１００℃で２時間撹拌した。冷却後、粗製の反応混合物を真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と水（２００ｍＬ）との間で分配した。有機層を水及びブラインでさらに洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、残渣をヘプタン中１０〜２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラム３３０ｇ上で精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３９８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．４． メチル５−（ベンジルオキシ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩
実施例１．９．３（３．７８ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中溶液に、ジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、混合物を真空下で濃縮し、粗製の標題化合物をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２９８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．９．３（３．７８ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中溶液に、ジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、混合物を真空下で濃縮し、粗製の標題化合物をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２９８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．５． メチル５−（ベンジルオキシ）−２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．９．４（３．０３ｇ）のジメチルスルホキシド（５０ｍＬ）中溶液に、実施例１．４．４（２．５２ｇ）及びトリエチルアミン（３．８ｍＬ）を加えた。混合物を窒素下６０℃で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラム上で精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．９．４（３．０３ｇ）のジメチルスルホキシド（５０ｍＬ）中溶液に、実施例１．４．４（２．５２ｇ）及びトリエチルアミン（３．８ｍＬ）を加えた。混合物を窒素下６０℃で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラム上で精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．６． メチル５−（ベンジルオキシ）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．９．５（２．５８ｇ）のテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１０（２．６６ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−６−フェニル−−２，４，８−トリオキサ−−６−ホスファアダマント（３４１ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（２１４ｍｇ）及びＫ３ＰＯ４（４．９５ｇ）を加えた。混合物を還流状態で４時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラム上で精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９０４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．９．５（２．５８ｇ）のテトラヒドロフラン（４０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１．１０（２．６６ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−６−フェニル−−２，４，８−トリオキサ−−６−ホスファアダマント（３４１ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（２１４ｍｇ）及びＫ３ＰＯ４（４．９５ｇ）を加えた。混合物を還流状態で４時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラム上で精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９０４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．７． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）中の実施例１．９．６（３．０ｇ）を、２５０ｍＬのＳＳ圧力ボトル中でＰｄ（ＯＨ）２（０．６ｇ、Ｄｅｇｕｓｓａ＃Ｅ１０１ＮＥ／Ｗ、炭素担持２０％、水分含量４９％）に加えた。混合物を３０ｐｓｉの水素ガス下５０℃で１６時間撹拌した。次いで混合物をナイロンメンブレンに通して濾過し、溶媒を真空下で濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）中の実施例１．９．６（３．０ｇ）を、２５０ｍＬのＳＳ圧力ボトル中でＰｄ（ＯＨ）２（０．６ｇ、Ｄｅｇｕｓｓａ＃Ｅ１０１ＮＥ／Ｗ、炭素担持２０％、水分含量４９％）に加えた。混合物を３０ｐｓｉの水素ガス下５０℃で１６時間撹拌した。次いで混合物をナイロンメンブレンに通して濾過し、溶媒を真空下で濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．８． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．９．７（１７０ｍｇ）をジクロロメタン（０．８ｍＬ）及びメタノール（０．２ｍＬ）に溶解した。混合物に（トリメチルシリル）ジアゾメタンのジエチルエーテル中２．０Ｍ溶液（０．１７ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。さらにジエチルエーテル中２．０Ｍ（トリメチルシリル）ジアゾメタン（０．１０ｍＬ）を加え、反応物を２４時間撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、標題化合物をさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８２８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．９．７（１７０ｍｇ）をジクロロメタン（０．８ｍＬ）及びメタノール（０．２ｍＬ）に溶解した。混合物に（トリメチルシリル）ジアゾメタンのジエチルエーテル中２．０Ｍ溶液（０．１７ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。さらにジエチルエーテル中２．０Ｍ（トリメチルシリル）ジアゾメタン（０．１０ｍＬ）を加え、反応物を２４時間撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、標題化合物をさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８２８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．９． ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．５．１３において実施例１．９．８を実施例１．５．１２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１３において実施例１．９．８を実施例１．５．１２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．１０． ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．５．１４において実施例１．９．９を実施例１．５．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１４において実施例１．９．９を実施例１．５．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．９．１１． ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（メチルアミノ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例１．５．１７において実施例１．９．１０を実施例１．５．１６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.74 (br s, 2H), 8.02 (d, 1H) 7.77 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.34 (m, 2H), 7.01 (d, 2H), 5.01 (s, 2H), 3.90 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 2H), 3.58 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 2.98 (m, 2H), 2.82 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.30 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９０．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１７において実施例１．９．１０を実施例１．５．１６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.74 (br s, 2H), 8.02 (d, 1H) 7.77 (m, 2H), 7.54 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.34 (m, 2H), 7.01 (d, 2H), 5.01 (s, 2H), 3.90 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.85 (s, 2H), 3.58 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 2.98 (m, 2H), 2.82 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.30 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９０．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１０． ６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１０）の合成
１．１０．１． ３−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）キノリン−５−カルボン酸
３−ブロモキノリン−５−カルボン酸（３００ｍｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３６３ｍｇ）及び酢酸カリウム（３５０ｍｇ）のジオキサン（５ｍＬ）中混合物を窒素ガスで５分間パージし、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（５８．３ｍｇ）を加えた。混合物を１００℃で終夜加熱し、冷却した。この混合物に実施例１．１．１１（５１０ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（８３ｍｇ）、ＣｓＦ（３６２ｍｇ）及び水（３ｍＬ）を加えた。得られた混合物を１００℃で終夜加熱し、珪藻土に通して濾過した。濾液を濃縮し、残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、Ｃ１８カラム（３００ｇ）上に装填し、０．１％ＴＦＡ／水溶液中５０〜１００％アセトニトリルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
３−ブロモキノリン−５−カルボン酸（３００ｍｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３６３ｍｇ）及び酢酸カリウム（３５０ｍｇ）のジオキサン（５ｍＬ）中混合物を窒素ガスで５分間パージし、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（５８．３ｍｇ）を加えた。混合物を１００℃で終夜加熱し、冷却した。この混合物に実施例１．１．１１（５１０ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（８３ｍｇ）、ＣｓＦ（３６２ｍｇ）及び水（３ｍＬ）を加えた。得られた混合物を１００℃で終夜加熱し、珪藻土に通して濾過した。濾液を濃縮し、残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、Ｃ１８カラム（３００ｇ）上に装填し、０．１％ＴＦＡ／水溶液中５０〜１００％アセトニトリルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１０．２． ｔｅｒｔ−ブチル６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１０．１（１２０ｍｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（４６．２ｍｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、１１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中混合物に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１３４μＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、Ｃ１８カラム（３００ｇ）上に装填し、０．１％ＴＦＡ／水溶液中５０〜１００％アセトニトリルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１０．１（１２０ｍｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（４６．２ｍｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、１１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中混合物に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１３４μＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、Ｃ１８カラム（３００ｇ）上に装填し、０．１％ＴＦＡ／水溶液中５０〜１００％アセトニトリルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１０．３． ６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
ジクロロメタン（３ｍＬ）中の実施例１．１０．２（５０ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で終夜処理し、濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドの混合物（５ｍＬ）に溶解し、Ｃ１８カラム（３００ｇ）上に装填し、０．１％ＴＦＡ水溶液中１０〜７０％アセトニトリルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.22 (s, 1H), 9.73 (d, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.34 (dd, 2H), 8.27 (s, 3H), 8.18 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.02-7.93 (m, 2H), 7.82 (d, 1H), 7.55-7.46 (m, 2H), 7.38 (t, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.03 (p, 2H), 2.59-2.53 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.38-1.25 (m, 4H), 1.18 (s, 4H), 1.11-1.01 (m, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジクロロメタン（３ｍＬ）中の実施例１．１０．２（５０ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で終夜処理し、濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドの混合物（５ｍＬ）に溶解し、Ｃ１８カラム（３００ｇ）上に装填し、０．１％ＴＦＡ水溶液中１０〜７０％アセトニトリルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.22 (s, 1H), 9.73 (d, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.34 (dd, 2H), 8.27 (s, 3H), 8.18 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.02-7.93 (m, 2H), 7.82 (d, 1H), 7.55-7.46 (m, 2H), 7.38 (t, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.03 (p, 2H), 2.59-2.53 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.38-1.25 (m, 4H), 1.18 (s, 4H), 1.11-1.01 (m, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１１． ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１１）の合成
１．１１．１． エチル６−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）キノリン−４−カルボキシレート
３−ブロモキノリン−５−カルボン酸をエチル６−ブロモキノリン−４−カルボキシレートで置き換えて、標題化合物を実施例１．１０．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
３−ブロモキノリン−５−カルボン酸をエチル６−ブロモキノリン−４−カルボキシレートで置き換えて、標題化合物を実施例１．１０．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１１．２． ６−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）キノリン−４−カルボン酸
実施例１．１１．１（１００ｍｇ）のジメチルスルホキシド（２ｍＬ）中溶液に、メタノール（２ｍＬ）及び１Ｍ水酸化リチウム（２４８μＬ）を加えた。混合物を３０分間撹拌し、１０％ＨＣｌでｐＨ４に酸性化し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１１．１（１００ｍｇ）のジメチルスルホキシド（２ｍＬ）中溶液に、メタノール（２ｍＬ）及び１Ｍ水酸化リチウム（２４８μＬ）を加えた。混合物を３０分間撹拌し、１０％ＨＣｌでｐＨ４に酸性化し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１１．３． ｔｅｒｔ−ブチル６−（４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１０．１を実施例１．１１．２で置き換えて、標題化合物を実施例１．１０．２に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１０．１を実施例１．１１．２で置き換えて、標題化合物を実施例１．１０．２に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１１．４． ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１０．２を実施例１．１１．３で置き換えて、標題化合物を実施例１．１０．３に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.34 (s, 2H), 9.14 (d, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.27 (dd, 4H), 8.09 (d, 1H), 8.00-7.90 (m, 2H), 7.83 (d, 1H), 7.50 (d, 2H), 7.40 (t, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.03 (p, 2H), 2.56 (t, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.32 (d, 3H), 1.18 (s, 4H), 1.11-0.98 (m, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１０．２を実施例１．１１．３で置き換えて、標題化合物を実施例１．１０．３に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.34 (s, 2H), 9.14 (d, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.27 (dd, 4H), 8.09 (d, 1H), 8.00-7.90 (m, 2H), 7.83 (d, 1H), 7.50 (d, 2H), 7.40 (t, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.03 (p, 2H), 2.56 (t, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.32 (d, 3H), 1.18 (s, 4H), 1.11-0.98 (m, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１２）の合成
１．１２．１． メチル５−（ベンジルオキシ）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．１１において実施例１．９．５を実施例１．５．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ６０１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１１において実施例１．９．５を実施例１．５．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ６０１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．２． ２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）オキシ）アセトアルデヒド
ジメチルスルホキシド（４．８ｍＬ）をジクロロメタン（１５０ｍＬ）に溶解した。混合物を−７５℃に冷却し、塩化オキサリル（２．６ｍＬ）を滴下添加した。反応混合物を−７５℃で４５分間撹拌し、実施例１．１．６（７．１ｇ）のジクロロメタン（４５ｍＬ）中溶液を滴下添加した。反応混合物を−７５℃で３０分間撹拌し、トリエチルアミン（５．０ｍＬ）を加えた。反応物を室温に加温し、水中に注ぎ入れ、ジエチルエーテルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ジクロロメタン／酢酸エチル８５／１５で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４４３．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジメチルスルホキシド（４．８ｍＬ）をジクロロメタン（１５０ｍＬ）に溶解した。混合物を−７５℃に冷却し、塩化オキサリル（２．６ｍＬ）を滴下添加した。反応混合物を−７５℃で４５分間撹拌し、実施例１．１．６（７．１ｇ）のジクロロメタン（４５ｍＬ）中溶液を滴下添加した。反応混合物を−７５℃で３０分間撹拌し、トリエチルアミン（５．０ｍＬ）を加えた。反応物を室温に加温し、水中に注ぎ入れ、ジエチルエーテルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、ジクロロメタン／酢酸エチル８５／１５で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４４３．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．３． ２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）オキシ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）エタンアミン
実施例１．１２．２（４．０ｇ）及び２−メトキシエタンアミン（０．９０ｍＬ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解し、混合物を室温で２時間撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム（５００ｍｇ）のメタノール（７ｍＬ）中懸濁液を加え、得られた混合物を４５分間撹拌した。次いで反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に加え、得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、標題化合物を得、精製せずに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ５０２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１２．２（４．０ｇ）及び２−メトキシエタンアミン（０．９０ｍＬ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解し、混合物を室温で２時間撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム（５００ｍｇ）のメタノール（７ｍＬ）中懸濁液を加え、得られた混合物を４５分間撹拌した。次いで反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に加え、得られた混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、濃縮した後、標題化合物を得、精製せずに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ５０２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．４． ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）オキシ）エチル）（２−メトキシエチル）カルバメート
実施例１．１２．３（４．４ｇ）をテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）に溶解し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３．０ｇ）及びＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（０．１５ｇ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。次いで反応物を濃縮し、ジクロロメタン／酢酸エチル（３／１）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１２．３（４．４ｇ）をテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）に溶解し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（３．０ｇ）及びＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（０．１５ｇ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。次いで反応物を濃縮し、ジクロロメタン／酢酸エチル（３／１）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１２．５． メチル５−（ベンジルオキシ）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．１２において実施例１．１２．１を実施例１．５．１１及び実施例１．１２．４を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１２において実施例１．１２．１を実施例１．５．１１及び実施例１．１２．４を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．６． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−ヒドロキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１２．５（５．２ｇ）をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）に溶解した。次いで活性炭担持２０％水酸化パラジウム（１．０ｇ）を加え、反応混合物を水素雰囲気下Ｐａｒｒ反応器上３０ｐｓｉ及び５０℃で３時間撹拌した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（２／３）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１２．５（５．２ｇ）をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）に溶解した。次いで活性炭担持２０％水酸化パラジウム（１．０ｇ）を加え、反応混合物を水素雰囲気下Ｐａｒｒ反応器上３０ｐｓｉ及び５０℃で３時間撹拌した。濾過し、濃縮した後、ヘプタン／酢酸エチル（２／３）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．７． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．９．８において実施例１．１２．６を実施例１．９．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８７２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．９．８において実施例１．１２．６を実施例１．９．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８７２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．８． ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．５．１３において実施例１．１２．７を実施例１．５．１２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１３において実施例１．１２．７を実施例１．５．１２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．９． ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．５．１４において実施例１．１２．８を実施例１．５．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９９０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１４において実施例１．１２．８を実施例１．５．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９９０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１２．１０． ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（（１ｒ，３ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−３−（２−（（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例１．１２．９（２．６ｇ）をジオキサン（２０ｍＬ）に溶解し、次いでジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（１００ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。沈殿物を静置し、上清を抜き取った。残った固体を０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.41 (v br s, 2H), 8.01 (d, 1H) 7.77 (m, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.01 (dd, 2H), 5.00 (s, 2H), 3.90 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.29 (s, 3H), 3.12 (m, 2H), 3.05 (m, 2H), 2.81 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.30 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８３４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１２．９（２．６ｇ）をジオキサン（２０ｍＬ）に溶解し、次いでジオキサン中４Ｎ ＨＣｌ（１００ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。沈殿物を静置し、上清を抜き取った。残った固体を０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.41 (v br s, 2H), 8.01 (d, 1H) 7.77 (m, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.01 (dd, 2H), 5.00 (s, 2H), 3.90 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.29 (s, 3H), 3.12 (m, 2H), 3.05 (m, 2H), 2.81 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.30 (m, 4H), 1.14 (m, 4H), 1.04 (m, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８３４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３． ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１３）の合成
１．１３．１． ４−ブロモ−３−シアノメチル−安息香酸メチルエステル
トリメチルシランカルボニトリル（３．５９ｍＬ）をテトラヒドロフラン（６ｍＬ）に加えた。１Ｍテトラブチルアンモニウムフルオリド（２６．８ｍＬ）を３０分かけて滴下添加した。次いで溶液を室温で３０分間撹拌した。メチル４−ブロモ−３−（ブロモメチル）ベンゾエート（７．５０ｇ）をアセトニトリル（３０ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を最初の溶液に３０分かけて滴下添加した。次いで溶液を８０℃に３０分間加熱し、次いで室温に冷却した。溶液を減圧下で濃縮し、ヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。
トリメチルシランカルボニトリル（３．５９ｍＬ）をテトラヒドロフラン（６ｍＬ）に加えた。１Ｍテトラブチルアンモニウムフルオリド（２６．８ｍＬ）を３０分かけて滴下添加した。次いで溶液を室温で３０分間撹拌した。メチル４−ブロモ−３−（ブロモメチル）ベンゾエート（７．５０ｇ）をアセトニトリル（３０ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を最初の溶液に３０分かけて滴下添加した。次いで溶液を８０℃に３０分間加熱し、次いで室温に冷却した。溶液を減圧下で濃縮し、ヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。
１．１３．２． ３−（２−アミノエチル）−４−ブロモ安息香酸メチルエステル
実施例１．１３．１（５．６９ｇ）をテトラヒドロフラン（１３５ｍＬ）に溶解し、１Ｍボラン（テトラヒドロフラン中、２４．６ｍＬ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌し、次いでメタノール及び１Ｍ ＨＣＬでゆっくりクエンチした。４Ｍ ＨＣｌ（１５０ｍＬ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、減圧下で減少させ、ｐＨを固体の炭酸カリウムを使用して１１〜１２に調整した。次いで溶液をジクロロメタン（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をジクロロメタン中１０〜２０％メタノールで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２５８、２６０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．１（５．６９ｇ）をテトラヒドロフラン（１３５ｍＬ）に溶解し、１Ｍボラン（テトラヒドロフラン中、２４．６ｍＬ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌し、次いでメタノール及び１Ｍ ＨＣＬでゆっくりクエンチした。４Ｍ ＨＣｌ（１５０ｍＬ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、減圧下で減少させ、ｐＨを固体の炭酸カリウムを使用して１１〜１２に調整した。次いで溶液をジクロロメタン（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をジクロロメタン中１０〜２０％メタノールで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２５８、２６０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．３． ４−ブロモ−３−［２−（２，２，２−トリフルオロアセチルアミノ）−エチル］−安息香酸メチルエステル
実施例１．１３．２（３．２１ｇ）をジクロロメタン（６０ｍＬ）に溶解した。溶液を０℃に冷却し、トリエチルアミン（２．１ｍＬ）を加えた。次いでトリフルオロ酢酸無水物（２．６ｍＬ）を滴下添加した。溶液を０℃で１０分間撹拌し、次いで１時間撹拌しながら室温に加温した。水（５０ｍＬ）を加え、溶液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬ）を加え、有機層を分離し、１Ｍ ＨＣｌで洗浄し、次いでブラインで洗浄した。次いで有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３７１、３７３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．２（３．２１ｇ）をジクロロメタン（６０ｍＬ）に溶解した。溶液を０℃に冷却し、トリエチルアミン（２．１ｍＬ）を加えた。次いでトリフルオロ酢酸無水物（２．６ｍＬ）を滴下添加した。溶液を０℃で１０分間撹拌し、次いで１時間撹拌しながら室温に加温した。水（５０ｍＬ）を加え、溶液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬ）を加え、有機層を分離し、１Ｍ ＨＣｌで洗浄し、次いでブラインで洗浄した。次いで有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３７１、３７３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．４． ５−ブロモ−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．３（４．４０ｇ）及びパラホルムアルデヒド（１．８６５ｇ）をフラスコに入れ、濃硫酸（３２ｍＬ）を加えた。溶液を室温で１時間撹拌した。冷水（１２０ｍＬ）を加えた。溶液を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。抽出物を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３６６、３６８（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．３（４．４０ｇ）及びパラホルムアルデヒド（１．８６５ｇ）をフラスコに入れ、濃硫酸（３２ｍＬ）を加えた。溶液を室温で１時間撹拌した。冷水（１２０ｍＬ）を加えた。溶液を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。抽出物を合わせ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３６６、３６８（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．５． ５−シアノ−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．４（５００ｍｇ）及びジシアノ亜鉛（８８ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（７９ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。次いで溶液を８０℃で１６時間撹拌した。溶液を冷却し、ヘプタン中５０％酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、１Ｍ塩酸（１５ｍＬ）で２回洗浄した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。
実施例１．１３．４（５００ｍｇ）及びジシアノ亜鉛（８８ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）に加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（７９ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。次いで溶液を８０℃で１６時間撹拌した。溶液を冷却し、ヘプタン中５０％酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈し、１Ｍ塩酸（１５ｍＬ）で２回洗浄した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。
１．１３．６． ５−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．５（２．００ｇ）をメタノール（１８ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１８ｍＬ）に溶解した。水（９ｍＬ）を、続いて炭酸カリウム（１．０６４ｇ）を加えた。反応物を室温で１３５分間撹拌し、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。溶液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶媒を濾過し、減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．５（２．００ｇ）をメタノール（１８ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１８ｍＬ）に溶解した。水（９ｍＬ）を、続いて炭酸カリウム（１．０６４ｇ）を加えた。反応物を室温で１３５分間撹拌し、次いで酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。溶液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶媒を濾過し、減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２１７（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．７． ２−（５−ブロモ−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピリジン−２−イル）−５−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．６（１．４２４ｇ）及び実施例１．４．４（１．８２７ｇ）をジメチルスルホキシド（１３ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．７３ｍＬ）を加え、溶液を５０℃に１６時間加熱した。さらに実施例１．４．４（０．６００ｇ）を加え、溶液を５０℃でさらに１６時間加熱した。溶液を室温に冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）で２回洗浄し、ブラインで洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４７２、４７４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．６（１．４２４ｇ）及び実施例１．４．４（１．８２７ｇ）をジメチルスルホキシド（１３ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．７３ｍＬ）を加え、溶液を５０℃に１６時間加熱した。さらに実施例１．４．４（０．６００ｇ）を加え、溶液を５０℃でさらに１６時間加熱した。溶液を室温に冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）で２回洗浄し、ブラインで洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４７２、４７４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．８． ２−［６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イル］−５−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．７（２．２６７ｇ）及びトリエチルアミン（１．３４ｍＬ）をアセトニトリル（１５ｍＬ）に加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０５ｍＬ）を、続いてジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（１９６ｍｇ）を加えた。溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュし、１６時間加熱還流した。溶液を冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（１０ｍＬ）で洗浄し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．７（２．２６７ｇ）及びトリエチルアミン（１．３４ｍＬ）をアセトニトリル（１５ｍＬ）に加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１．０５ｍＬ）を、続いてジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（１９６ｍｇ）を加えた。溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュし、１６時間加熱還流した。溶液を冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（１０ｍＬ）で洗浄し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中２０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．９． ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−｛１−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，７−ジメチル−アダマンタン−１−イルメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ピリジン−２−イル）−５−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．８（１４０ｍｇ）及び実施例１．４．２（１４６ｍｇ）をテトラヒドロフラン（３ｍＬ）に溶解した。リン酸カリウム（２８６ｍｇ）及び水（０．８５ｍＬ）を加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（１１ｍｇ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１２ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。溶液を６２℃に１６時間加熱した。溶液を冷却し、次いで水（５ｍＬ）及び酢酸エチル（２５ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中３０〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．８（１４０ｍｇ）及び実施例１．４．２（１４６ｍｇ）をテトラヒドロフラン（３ｍＬ）に溶解した。リン酸カリウム（２８６ｍｇ）及び水（０．８５ｍＬ）を加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（１１ｍｇ）及びトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１２ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。溶液を６２℃に１６時間加熱した。溶液を冷却し、次いで水（５ｍＬ）及び酢酸エチル（２５ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、物質をヘプタン中３０〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．１０． ２−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−｛１−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，７−ジメチル−アダマンタン−１−イルメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ピリジン−２−イル）−５−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．１３．９（１１４ｍｇ）をテトラヒドロフラン（０．７ｍＬ）及びメタノール（０．３５ｍＬ）に溶解した。水（０．３５ｍＬ）を、続いて水酸化リチウム一水和物（１１ｍｇ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌し、１Ｍ塩酸（０．２７ｍＬ）を加えた。水（１ｍＬ）を加え、溶液を酢酸エチル（５ｍＬ）で３回抽出した。抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．９（１１４ｍｇ）をテトラヒドロフラン（０．７ｍＬ）及びメタノール（０．３５ｍＬ）に溶解した。水（０．３５ｍＬ）を、続いて水酸化リチウム一水和物（１１ｍｇ）を加えた。溶液を室温で１６時間撹拌し、１Ｍ塩酸（０．２７ｍＬ）を加えた。水（１ｍＬ）を加え、溶液を酢酸エチル（５ｍＬ）で３回抽出した。抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．１１． ６−［８−（ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル］−３−｛１−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，７−ジメチル−アダマンタン−１−イルメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ピリジン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例１．１３．１０（８９ｍｇ）及びベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１８ｍｇ）をジクロロメタン（１．２ｍＬ）に溶解した。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（３９ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（２５ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。物質をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．１０（８９ｍｇ）及びベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１８ｍｇ）をジクロロメタン（１．２ｍＬ）に溶解した。Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（３９ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（２５ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。物質をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１３．１２． ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１３．１１（４４ｍｇ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（０．１４４ｍＬ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。次いで溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解し、溶媒を減圧下で除去した。ジエチルエーテル（２ｍＬ）を加え、減圧下で除去した。ジエチルエーテル（２ｍＬ）を再度加え、減圧下で除去して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。1H NMR (400MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.52 (bs, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.82-7.75 (m, 2H), 7.63 (m, 2H), 7.50 (dd, 2H), 7.42-7.28 (m, 3H), 7.16 (t, 1H), 7.04 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.96 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.49 (t, 2H), 3.15 (t, 2H), 2.90 (q, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.35-1.22 (m, 4H), 1.18-0.99 (m, 6H), 0.87 (bs, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．１１（４４ｍｇ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（０．１４４ｍＬ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。次いで溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解し、溶媒を減圧下で除去した。ジエチルエーテル（２ｍＬ）を加え、減圧下で除去した。ジエチルエーテル（２ｍＬ）を再度加え、減圧下で除去して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。1H NMR (400MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.52 (bs, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.82-7.75 (m, 2H), 7.63 (m, 2H), 7.50 (dd, 2H), 7.42-7.28 (m, 3H), 7.16 (t, 1H), 7.04 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.96 (t, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.49 (t, 2H), 3.15 (t, 2H), 2.90 (q, 2H), 2.10 (s, 3H), 1.41 (s, 2H), 1.35-1.22 (m, 4H), 1.18-0.99 (m, 6H), 0.87 (bs, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４． ６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１４）の合成
１．１４．１． ２−（（３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−イル）オキシ）エタノール
実施例１．１．６（４．４５ｇ）及びＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（４０９ｍｇ）のアセトニトリル（６０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（５ｍＬ）及びピナコールボラン（６．４ｍＬ）を加えた。混合物を終夜還流させた。混合物を後処理せずに次のステップに直接使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４４．８０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．６（４．４５ｇ）及びＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）−ＣＨ２Ｃｌ２付加物（４０９ｍｇ）のアセトニトリル（６０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（５ｍＬ）及びピナコールボラン（６．４ｍＬ）を加えた。混合物を終夜還流させた。混合物を後処理せずに次のステップに直接使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４４．８０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．２． ｔｅｒｔ−ブチル６−クロロ−３−（１−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（３．０６ｇ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１４．１（４．４５ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（０．７３２ｇ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．４７９ｇ）及びＫ３ＰＯ４（１１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０〜４０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５３０．２３（Ｍ＋Ｈ）＋。
ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（３．０６ｇ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１４．１（４．４５ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（０．７３２ｇ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．４７９ｇ）及びＫ３ＰＯ４（１１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌し、濃縮した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０〜４０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５３０．２３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．３． ｔｅｒｔ−ブチル６−クロロ−３−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（（メチルスルホニル）オキシ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１４．２（３．８８ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）及びトリエチルアミン（６ｍＬ）中冷却（０℃）撹拌溶液に、メタンスルホニルクロリド（２．５２ｇ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌し、酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６０８．２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１４．２（３．８８ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）及びトリエチルアミン（６ｍＬ）中冷却（０℃）撹拌溶液に、メタンスルホニルクロリド（２．５２ｇ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌し、酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６０８．２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．４． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−クロロピコリネート
実施例１．１４．３（２．２ｇ）のＣＨ３ＯＨ中７Ｎアンモニウム（２０ｍＬ）中溶液を、マイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１００℃で４５分間加熱し、濃縮乾固した。残渣を酢酸エチルに溶解し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２９．３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１４．３（２．２ｇ）のＣＨ３ＯＨ中７Ｎアンモニウム（２０ｍＬ）中溶液を、マイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１００℃で４５分間加熱し、濃縮乾固した。残渣を酢酸エチルに溶解し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２９．３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．５． ｔｅｒｔ−ブチル６−クロロ−３−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（２−（トリメチルシリル）エチルスルホンアミド）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１４．４（３．０ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）、続いて２−（トリメチルシリル）エタンスルホニルクロリド（２．３ｇ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌し、濃縮乾固した。残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。残渣をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、ヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６９３．０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１４．４（３．０ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）、続いて２−（トリメチルシリル）エタンスルホニルクロリド（２．３ｇ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌し、濃縮乾固した。残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）に溶解し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。残渣をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、ヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６９３．０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．６． ｔｅｒｔ−ブチル６−クロロ−３−（１−（（３−（２−（Ｎ−（２−メトキシエチル）−２−（トリメチルシリル）エチルスルホンアミド）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１４．５（４１５ｍｇ）のトルエン（１５ｍＬ）中溶液に、２−メトキシエタノール（９１ｍｇ）、続いてシアノメチレントリブチルホスホラン（２８９ｍｇ）を加えた。混合物を７０℃で３時間撹拌し、濃縮乾固した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５１．０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１４．５（４１５ｍｇ）のトルエン（１５ｍＬ）中溶液に、２−メトキシエタノール（９１ｍｇ）、続いてシアノメチレントリブチルホスホラン（２８９ｍｇ）を加えた。混合物を７０℃で３時間撹拌し、濃縮乾固した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５１．０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．７． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−（Ｎ−（２−メトキシエチル）−２−（トリメチルシリル）エチルスルホンアミド）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリネート
７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（１７２ｍｇ）のジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．１４．６（５００ｍｇ）、（Ｐｈ３Ｐ）２ＰｄＣｌ２（４５．６ｍｇ）及びＣｓＦ（２９６ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４８．０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン（１７２ｍｇ）のジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．１４．６（５００ｍｇ）、（Ｐｈ３Ｐ）２ＰｄＣｌ２（４５．６ｍｇ）及びＣｓＦ（２９６ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４８．０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．８． ｔｅｒｔ−ブチル６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）−３−（１−（（３−（２−（Ｎ−（２−メトキシエチル）−２−（トリメチルシリル）エチルスルホンアミド）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（６３ｍｇ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３７．２ｍｇ）を加えた。混合物を１時間撹拌した。実施例１．１４．７（２１０ｍｇ）のアセトニトリル（２ｍＬ）中溶液を加え、懸濁液を終夜激しく撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０２４．５０（Ｍ＋Ｈ）＋。
ビス（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）カルボネート（６３ｍｇ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３７．２ｍｇ）を加えた。混合物を１時間撹拌した。実施例１．１４．７（２１０ｍｇ）のアセトニトリル（２ｍＬ）中溶液を加え、懸濁液を終夜激しく撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０２４．５０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１４．９． ６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１４．８（２３０ｍｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ１０ｍＬ、テトラヒドロフラン中１Ｍ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）で終夜処理した。混合物を濃縮し、残渣を０．１％ＴＦＡ／水中１０〜８５％アセトニトリルで溶出する逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.40 (d, 3H), 8.00 (d, 1H), 7.90-7.72 (m, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.40-7.32 (m, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.24-7.17 (m, 1H), 3.95 (d, 3H), 3.88 (s, 16H), 3.56 (dt, 5H), 3.28 (s, 3H), 3.18-2.96 (m, 5H), 2.82 (t, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.93 (p, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 5H), 1.21-0.97 (m, 7H), 0.86 (s, 6H)ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１４．８（２３０ｍｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ１０ｍＬ、テトラヒドロフラン中１Ｍ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）で終夜処理した。混合物を濃縮し、残渣を０．１％ＴＦＡ／水中１０〜８５％アセトニトリルで溶出する逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.40 (d, 3H), 8.00 (d, 1H), 7.90-7.72 (m, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.40-7.32 (m, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.24-7.17 (m, 1H), 3.95 (d, 3H), 3.88 (s, 16H), 3.56 (dt, 5H), 3.28 (s, 3H), 3.18-2.96 (m, 5H), 2.82 (t, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.93 (p, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 5H), 1.21-0.97 (m, 7H), 0.86 (s, 6H)ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１５． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１５）の合成
１．１５．１． ７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（Ｎ−（２−メトキシエチル）−２−（トリメチルシリル）エチルスルホンアミド）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−ナフトエ酸
メチル７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１−ナフトエート（２０８ｍｇ）のジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．１４．６（５００ｍｇ）、（Ｐｈ３Ｐ）２ＰｄＣｌ２（４５．６ｍｇ）及びＣｓＦ（２９６ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、エステル中間体を得た。エステルをテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５ｍＬ）の混合物に溶解し、水酸化リチウム一水和物（２００ｍｇ）で処理した。混合物を室温で４時間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。水及びブラインで洗浄した後、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水した。濾過後、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８８．２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
メチル７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１−ナフトエート（２０８ｍｇ）のジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．１４．６（５００ｍｇ）、（Ｐｈ３Ｐ）２ＰｄＣｌ２（４５．６ｍｇ）及びＣｓＦ（２９６ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、エステル中間体を得た。エステルをテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）及びＨ２Ｏ（５ｍＬ）の混合物に溶解し、水酸化リチウム一水和物（２００ｍｇ）で処理した。混合物を室温で４時間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。水及びブラインで洗浄した後、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水した。濾過後、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８８．２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１５．２． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１５．１（５００ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（８５ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（２１６ｍｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１３８ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。次いで有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮乾固した。残渣をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（１０ｍＬ、テトラヒドロフラン中１Ｍ）で終夜処理した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮乾固した。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）で終夜処理した。次いで混合物を濃縮し、残渣を水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出する逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.11 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.60-8.29 (m, 3H), 8.26-8.13 (m, 3H), 8.03 (ddd, 2H), 7.92 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.74-7.62 (m, 1H), 7.51-7.42 (m, 2H), 7.36 (td, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.61-3.52 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.17-2.95 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.23-0.96 (m, 6H), 0.86 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１５．１（５００ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（８５ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（２１６ｍｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１３８ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。次いで有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮乾固した。残渣をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（１０ｍＬ、テトラヒドロフラン中１Ｍ）で終夜処理した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮乾固した。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（５ｍＬ）で終夜処理した。次いで混合物を濃縮し、残渣を水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出する逆相ＨＰＬＣ（Ｇｉｌｓｏｎ）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.11 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.60-8.29 (m, 3H), 8.26-8.13 (m, 3H), 8.03 (ddd, 2H), 7.92 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.74-7.62 (m, 1H), 7.51-7.42 (m, 2H), 7.36 (td, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.61-3.52 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.17-2.95 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.23-0.96 (m, 6H), 0.86 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１６． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（オキセタン−３−イルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１６）の合成
１．１６．１． メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例１．４．４（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加えた。混合物を５０℃で２４時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例１．４．４（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加えた。混合物を５０℃で２４時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１６．２． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１６．１（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出）により、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４９５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１６．１（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出）により、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４９５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１６．３． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１６．２（４．９４ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．４．２（５．５７ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（４１２ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４５７ｍｇ）及びＫ３ＰＯ４（１１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８４．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１６．２（４．９４ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．４．２（５．５７ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（４１２ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４５７ｍｇ）及びＫ３ＰＯ４（１１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、粗製物をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８４．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１６．４． ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．１６．３（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．２ｇ）を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を２％ＨＣｌ水溶液で中和し、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１６．３（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．２ｇ）を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を２％ＨＣｌ水溶液で中和し、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１６．５． ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１６．４（３．６９ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１．１ｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（１．９ｇ）及びＮ，Ｎジイソプロピルエチルアミン（１．８６ｇ）を加えた。混合物を６０℃で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、カラム精製（ヘプタン中２０％酢酸エチル）により、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９０２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１６．４（３．６９ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１．１ｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（１．９ｇ）及びＮ，Ｎジイソプロピルエチルアミン（１．８６ｇ）を加えた。混合物を６０℃で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、カラム精製（ヘプタン中２０％酢酸エチル）により、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９０２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１６．６． ３−（１−（（３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．１６．５（２ｇ）をジクロロメタン中５０％ＴＦＡ（２０ｍＬ）に溶解し、終夜撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣を逆相カラム上に装填し、水中２０〜８０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１６．５（２ｇ）をジクロロメタン中５０％ＴＦＡ（２０ｍＬ）に溶解し、終夜撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣を逆相カラム上に装填し、水中２０〜８０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１６．７． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（オキセタン−３−イルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１６．６（０．０５０ｇ）、オキセタン−３−オン（５ｍｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０１８ｇ）の溶液を、室温でジクロロメタン（１ｍＬ）中にて共に撹拌した。１時間撹拌した後、さらにオキセタン−３−オン（５ｍｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０１８ｇ）を加え、反応物を終夜撹拌した。反応物を濃縮し、ジメチルスルホキシド／メタノールの１：１混合物（２ｍＬ）に溶解し、Ｇｉｌｓｏｎシステム（０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリル）を使用するＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.95 (s, 1H), 9.26 (s, 2H), 8.12 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.63-7.50 (m, 3H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.79 (t, 2H), 4.68 (dd, 2H), 4.54-4.41 (m, 1H), 3.98 (t, 2H), 3.92 (s, 2H), 3.63 (t, 2H), 3.16-3.04 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.52 (s, 2H), 1.47-1.06 (m, 10H), 0.96 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１６．６（０．０５０ｇ）、オキセタン−３−オン（５ｍｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０１８ｇ）の溶液を、室温でジクロロメタン（１ｍＬ）中にて共に撹拌した。１時間撹拌した後、さらにオキセタン−３−オン（５ｍｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０１８ｇ）を加え、反応物を終夜撹拌した。反応物を濃縮し、ジメチルスルホキシド／メタノールの１：１混合物（２ｍＬ）に溶解し、Ｇｉｌｓｏｎシステム（０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリル）を使用するＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.95 (s, 1H), 9.26 (s, 2H), 8.12 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.63-7.50 (m, 3H), 7.50-7.41 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.79 (t, 2H), 4.68 (dd, 2H), 4.54-4.41 (m, 1H), 3.98 (t, 2H), 3.92 (s, 2H), 3.63 (t, 2H), 3.16-3.04 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.52 (s, 2H), 1.47-1.06 (m, 10H), 0.96 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１７． ６−［６−（３−アミノピロリジン−１−イル）−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１７）の合成
１．１７．１． ４−ヨード−１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．１．６（３．００ｇ）を１，４−ジオキサン（４０ｍＬ）に溶解し、水素化ナトリウム（鉱油中６０％、５６８ｍｇ）を加えた。溶液を室温で１５分間混合し、ヨウ化メチル（１．６４ｍＬ）を加えた。溶液を室温で３日間撹拌し、次いで０．０１Ｍ ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）を加えた。溶液をジエチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、溶媒を減圧下、次いで高真空下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．６（３．００ｇ）を１，４−ジオキサン（４０ｍＬ）に溶解し、水素化ナトリウム（鉱油中６０％、５６８ｍｇ）を加えた。溶液を室温で１５分間混合し、ヨウ化メチル（１．６４ｍＬ）を加えた。溶液を室温で３日間撹拌し、次いで０．０１Ｍ ＨＣｌ水溶液（５０ｍＬ）を加えた。溶液をジエチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過後、溶媒を減圧下、次いで高真空下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１７．２． ベンジル４−オキソペンタ−２−イノエート
ジクロロメタン（５００ｍＬ）中のベンジル４−ヒドロキシペンタ−２−イノエート（４０．５ｇ）及びデス−マーチンペルヨージナン（９３．０ｇ）を０℃で１時間撹拌した。溶液をジエチルエーテル（１Ｌ）中に注ぎ入れ、合わせた有機物を１Ｍ ＮａＯＨ水溶液及びブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
ジクロロメタン（５００ｍＬ）中のベンジル４−ヒドロキシペンタ−２−イノエート（４０．５ｇ）及びデス−マーチンペルヨージナン（９３．０ｇ）を０℃で１時間撹拌した。溶液をジエチルエーテル（１Ｌ）中に注ぎ入れ、合わせた有機物を１Ｍ ＮａＯＨ水溶液及びブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．１７．３． （Ｓ）−ベンジル６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
１−（２，２，２−トリフルオロアセチル）ピペリジン−４−オン（６．２９ｇ）、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチルピロリジン−３−イルカルバメート（６．０ｇ）及びｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．６１３ｇ）のエタノール（８０ｍＬ）中溶液を室温で１時間撹拌した。次いで実施例１．１７．２（６．５１ｇ）を加え、反応物を室温で２４時間撹拌し、４５℃に３日間加熱した。次いで反応物を冷却し、ジエチルエーテル（６００ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液を水及びブラインで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、生成物を得た。
１−（２，２，２−トリフルオロアセチル）ピペリジン−４−オン（６．２９ｇ）、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチルピロリジン−３−イルカルバメート（６．０ｇ）及びｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．６１３ｇ）のエタノール（８０ｍＬ）中溶液を室温で１時間撹拌した。次いで実施例１．１７．２（６．５１ｇ）を加え、反応物を室温で２４時間撹拌し、４５℃に３日間加熱した。次いで反応物を冷却し、ジエチルエーテル（６００ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液を水及びブラインで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、生成物を得た。
１．１７．４． （Ｓ）−ベンジル６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１７．３（３．１ｇ）及び炭酸カリウム（１．８ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）、メタノール（１０ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）の混合物中溶液を、４５℃で４８時間撹拌した。次いで反応物を冷却し、ジクロロメタン（３００ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
実施例１．１７．３（３．１ｇ）及び炭酸カリウム（１．８ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）、メタノール（１０ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）の混合物中溶液を、４５℃で４８時間撹拌した。次いで反応物を冷却し、ジクロロメタン（３００ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．１７．５． （Ｓ）−ベンジル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１７．４（１．６ｇ）、実施例１．４．４（１．０８ｇ）及びトリエチルアミン（０．５９ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中溶液を５０℃に２４時間加熱した。反応物を冷却し、酢酸エチル（４００ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液を水及びブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、生成物を得た。
実施例１．１７．４（１．６ｇ）、実施例１．４．４（１．０８ｇ）及びトリエチルアミン（０．５９ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中溶液を５０℃に２４時間加熱した。反応物を冷却し、酢酸エチル（４００ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液を水及びブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、生成物を得た。
１．１７．６． （Ｓ）−ベンジル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１７．５（５００ｍｇ）、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１３６ｍｇ）及びトリエチルアミン（０．２００ｍＬ）のアセトニトリル（５ｍＬ）中溶液を７５℃に２４時間加熱した。反応物を室温に冷却し、濃縮乾固した。次いで粗製物をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１７．５（５００ｍｇ）、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１３６ｍｇ）及びトリエチルアミン（０．２００ｍＬ）のアセトニトリル（５ｍＬ）中溶液を７５℃に２４時間加熱した。反応物を室温に冷却し、濃縮乾固した。次いで粗製物をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１７．７． ベンジル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−６−（（Ｓ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１７．６（２４０ｍｇ）、実施例１．１７．１（１４６ｍｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（１３ｍｇ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１４．６ｍｇ）及びリン酸三カリウム（２７０ｍｇ）のジオキサン（７ｍＬ）及び水（３ｍＬ）中溶液を７０℃に２４時間加熱した。反応物を室温に冷却し、濃縮乾固した。次いで粗製物をヘプタン中５〜２５％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１７．６（２４０ｍｇ）、実施例１．１７．１（１４６ｍｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（１３ｍｇ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１４．６ｍｇ）及びリン酸三カリウム（２７０ｍｇ）のジオキサン（７ｍＬ）及び水（３ｍＬ）中溶液を７０℃に２４時間加熱した。反応物を室温に冷却し、濃縮乾固した。次いで粗製物をヘプタン中５〜２５％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１７．８． ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−６−（（Ｓ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．１７．７（１．６ｇ）及び水酸化リチウム一水和物（５ｍｇ）のテトラヒドロフラン／メタノール／水の３：１：１混合物（１０ｍＬ）中溶液を４日間撹拌した。反応物を１Ｍ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
実施例１．１７．７（１．６ｇ）及び水酸化リチウム一水和物（５ｍｇ）のテトラヒドロフラン／メタノール／水の３：１：１混合物（１０ｍＬ）中溶液を４日間撹拌した。反応物を１Ｍ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．１７．９． ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−６−（（Ｓ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１−イル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１７．８（７８ｍｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１６ｍｇ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（４８ｍｇ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．０２４ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液を５０℃に４８時間加熱した。次いで反応物を冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液を水及びブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０〜１００％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１７．８（７８ｍｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（１６ｍｇ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（４８ｍｇ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．０２４ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液を５０℃に４８時間加熱した。次いで反応物を冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）中に注ぎ入れた。得られた溶液を水及びブラインで３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０〜１００％酢酸エチルで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１７．１０． ６−［６−（３−アミノピロリジン−１−イル）−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸
ジクロロメタン（３ｍＬ）中の実施例１．１７．９（４０ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で終夜処理した。混合物を濃縮して、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４５．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジクロロメタン（３ｍＬ）中の実施例１．１７．９（４０ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で終夜処理した。混合物を濃縮して、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４５．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルファモイルエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（化合物Ｗ３．１８）の合成
１．１８．１． ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタンカルボン酸
５０ｍＬ丸底フラスコ中に、０℃で臭素（１６ｍＬ）を加えた。鉄粉（７ｇ）を加え、反応物を０℃で３０分間撹拌した。３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１２ｇ）を加えた。混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。氷及び濃ＨＣｌの混合物を反応混合物中に注ぎ入れた。得られた懸濁液をＮａ２ＳＯ３（水２００ｍＬ中５０ｇ）で２回処理し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
５０ｍＬ丸底フラスコ中に、０℃で臭素（１６ｍＬ）を加えた。鉄粉（７ｇ）を加え、反応物を０℃で３０分間撹拌した。３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１２ｇ）を加えた。混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。氷及び濃ＨＣｌの混合物を反応混合物中に注ぎ入れた。得られた懸濁液をＮａ２ＳＯ３（水２００ｍＬ中５０ｇ）で２回処理し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．１８．２． ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタンメタノール
実施例１．１８．１（１５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３（テトラヒドロフラン中１Ｍ、１５０ｍＬ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。次いで反応混合物をメタノールを滴下添加することにより注意深くクエンチした。次いで混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）との間で平衡させた。水性層を酢酸エチルでさらに２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１（１５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３（テトラヒドロフラン中１Ｍ、１５０ｍＬ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。次いで反応混合物をメタノールを滴下添加することにより注意深くクエンチした。次いで混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）との間で平衡させた。水性層を酢酸エチルでさらに２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。
１．１８．３． １−（（３−ブロモ−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル）−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．１８．２（８．０ｇ）のトルエン（６０ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−ピラゾール（１．５５ｇ）及びシアノメチレントリブチルホスホラン（２．０ｇ）を加え、混合物を９０℃で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１ヘプタン：酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．２（８．０ｇ）のトルエン（６０ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−ピラゾール（１．５５ｇ）及びシアノメチレントリブチルホスホラン（２．０ｇ）を加え、混合物を９０℃で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１ヘプタン：酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８．４． ２−｛［３，５−ジメチル−７−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］オキシ｝エタノール
実施例１．１８．３（４．０ｇ）のエタン−１，２−ジオール（１２ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１５０℃で４５分間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）中に注ぎ入れ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．３（４．０ｇ）のエタン−１，２−ジオール（１２ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１５０℃で４５分間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）中に注ぎ入れ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８．５． ２−（｛３，５−ジメチル−７−［（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エタノール
実施例１．１８．４（６．０５ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中冷却（−７８℃）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（４０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加え、混合物を−７８℃で１．５時間撹拌した。ヨードメタン（１０ｍＬ）を注射器を通して加え、混合物を−７８℃で３時間撹拌した。次いで反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．４（６．０５ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中冷却（−７８℃）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（４０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加え、混合物を−７８℃で１．５時間撹拌した。ヨードメタン（１０ｍＬ）を注射器を通して加え、混合物を−７８℃で３時間撹拌した。次いで反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄した。硫酸ナトリウムで脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８．６． １−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（ヒドロキシ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．１８．５（３．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．２ｇ）を加え、混合物を室温で１．５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＳＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．５（３．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．２ｇ）を加え、混合物を室温で１．５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＳＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８．７． １−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（５．３４ｍＬ）を、−４０℃で実施例１．１８．６（８．６ｇ）及び２，６−ルチジン（３．１６ｍＬ）のジクロロメタン（１２５ｍＬ）中溶液に加え、反応物を室温に終夜加温した。混合物を濃縮し、残渣をヘプタン中５〜２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（５．３４ｍＬ）を、−４０℃で実施例１．１８．６（８．６ｇ）及び２，６−ルチジン（３．１６ｍＬ）のジクロロメタン（１２５ｍＬ）中溶液に加え、反応物を室温に終夜加温した。混合物を濃縮し、残渣をヘプタン中５〜２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８．８． １−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール
ｎ−ブチルリチウム（８．４２ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を、−７８℃でテトラヒドロフラン１２０ｍＬ中の実施例１．１８．７（９．８ｇ）に加え、反応物を１分間撹拌した。トリメチルボレート（３．９２ｍＬ）を加え、反応物を５分間撹拌した。ピナコール（６．２２ｇ）を加え、反応物を室温に加温し、２時間撹拌した。反応物をｐＨ７緩衝溶液でクエンチし、混合物をエーテル中に注ぎ入れた。層を分離し、有機層を減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１〜２５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
ｎ−ブチルリチウム（８．４２ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を、−７８℃でテトラヒドロフラン１２０ｍＬ中の実施例１．１８．７（９．８ｇ）に加え、反応物を１分間撹拌した。トリメチルボレート（３．９２ｍＬ）を加え、反応物を５分間撹拌した。ピナコール（６．２２ｇ）を加え、反応物を室温に加温し、２時間撹拌した。反応物をｐＨ７緩衝溶液でクエンチし、混合物をエーテル中に注ぎ入れた。層を分離し、有機層を減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１〜２５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１８．９． ６−フルオロ−３−ブロモピコリン酸
６−アミノ−３−ブロモピコリン酸（２５ｇ）の１：１ジクロロメタン／クロロホルム４００ｍＬ中スラリー液を、５℃で１時間かけてジクロロメタン（１００ｍＬ）中のニトロソニウムテトラフルオロボレート（１８．２ｇ）に加えた。得られた混合物をさらに３０分間撹拌し、次いで３５℃に加温し、終夜撹拌した。反応物を室温に冷却し、次いでＮａＨ２ＰＯ４水溶液でｐＨを４に調整した。得られた溶液をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
６−アミノ−３−ブロモピコリン酸（２５ｇ）の１：１ジクロロメタン／クロロホルム４００ｍＬ中スラリー液を、５℃で１時間かけてジクロロメタン（１００ｍＬ）中のニトロソニウムテトラフルオロボレート（１８．２ｇ）に加えた。得られた混合物をさらに３０分間撹拌し、次いで３５℃に加温し、終夜撹拌した。反応物を室温に冷却し、次いでＮａＨ２ＰＯ４水溶液でｐＨを４に調整した。得られた溶液をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．１８．１０． ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−フルオロピコリネート
パラ−トルエンスルホニルクロリド（２７．６ｇ）を、０℃で実施例１．１８．９（１４．５ｇ）及びピリジン（２６．７ｍＬ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（８０ｍＬ）中溶液に加えた。反応物を１５分間撹拌し、次いで室温に加温し、終夜撹拌した。溶液を濃縮し、酢酸エチルとＮａ２ＣＯ３水溶液との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＣＯ３水溶液及びブラインですすぎ、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
パラ−トルエンスルホニルクロリド（２７．６ｇ）を、０℃で実施例１．１８．９（１４．５ｇ）及びピリジン（２６．７ｍＬ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（８０ｍＬ）中溶液に加えた。反応物を１５分間撹拌し、次いで室温に加温し、終夜撹拌した。溶液を濃縮し、酢酸エチルとＮａ２ＣＯ３水溶液との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＣＯ３水溶液及びブラインですすぎ、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．１８．１１. メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例１．１８．１０（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加え、混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例１．１８．１０（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加え、混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８．１２ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１８．１１（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加え、混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリガゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１１（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加え、混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリガゲルクロマトグラフィーにより残渣を精製して、標題化合物を得た。
１．１８．１３． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１８．１２（２．２５ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１８．６（２．０ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−６−フェニル−２，４，８−トリオキサ−６−ホスファアダマンタン（３２９ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（２０６ｍｇ）及びリン酸三カリウム（４．７８ｇ）を加えた。混合物を終夜還流させ、冷却し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈した。得られた混合物を水及びブラインで洗浄し、有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１２（２．２５ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）中溶液に、実施例１．１８．６（２．０ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−６−フェニル−２，４，８−トリオキサ−６−ホスファアダマンタン（３２９ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（２０６ｍｇ）及びリン酸三カリウム（４．７８ｇ）を加えた。混合物を終夜還流させ、冷却し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈した。得られた混合物を水及びブラインで洗浄し、有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１８．１４． メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（（メチルスルホニル）オキシ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１８．１３（３．３２ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液に、氷浴中でトリエチルアミン（３ｍＬ）及びメタンスルホニルクロリド（１．１ｇ）を順次加えた。反応混合物を室温で１．５時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１３（３．３２ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液に、氷浴中でトリエチルアミン（３ｍＬ）及びメタンスルホニルクロリド（１．１ｇ）を順次加えた。反応混合物を室温で１．５時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．１８．１５． メチル２−（５−（１−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１８．１４（１６．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２０ｍＬ）中溶液に、アジ化ナトリウム（４．２２ｇ）を加えた。混合物を８０℃で３時間加熱し、冷却し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１４（１６．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２０ｍＬ）中溶液に、アジ化ナトリウム（４．２２ｇ）を加えた。混合物を８０℃で３時間加熱し、冷却し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１８．１６． ２−（５−（１−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．１８．１５（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）の混合物中溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．２ｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、２％ＨＣｌ水溶液で中和した。得られた混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）に溶解し、ブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１５（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）の混合物中溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．２ｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌し、２％ＨＣｌ水溶液で中和した。得られた混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）に溶解し、ブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．１８．１７． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−アジドエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリネート
実施例１．１８．１６（１０ｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３．２４ｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（５．６９ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．５７ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中混合物を、６０℃で３時間加熱し、冷却し、酢酸エチルで希釈した。得られた混合物を水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１６（１０ｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３．２４ｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（５．６９ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．５７ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中混合物を、６０℃で３時間加熱し、冷却し、酢酸エチルで希釈した。得られた混合物を水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．１８．１８． ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（（３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリネート
実施例１．１８．１７（２．０ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％、２００ｍｇ）を加えた。混合物を水素雰囲気下終夜撹拌した。不溶物を濾別し、濾液を濃縮して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１７（２．０ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％、２００ｍｇ）を加えた。混合物を水素雰囲気下終夜撹拌した。不溶物を濾別し、濾液を濃縮して、標題化合物を得た。
１．１８．１９． ３−（１−（（３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
ジクロロメタン（２．５ｍＬ）中の実施例１．１８．１８（２００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で終夜処理した。反応混合物を濃縮し、残渣を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジクロロメタン（２．５ｍＬ）中の実施例１．１８．１８（２００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で終夜処理した。反応混合物を濃縮し、残渣を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１８．２０． ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルファモイルエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１８．１９（１８ｍｇ）及びエテンスルホンアミド（５．２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及び水（０．３ｍＬ）中混合物を１週間撹拌した。混合物を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.45-7.50 (m, 1H), 7.41-7.44 (m, 1H), 7.33-7.39 (m, 3H), 7.23 (s, 1H), 6.73 (d, 1H), 4.87 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.12-3.20 (m, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.32 (dd, 4H), 1.08-1.19 (m, 5H), 1.04 (d, 4H), 0.86 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．１９（１８ｍｇ）及びエテンスルホンアミド（５．２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及び水（０．３ｍＬ）中混合物を１週間撹拌した。混合物を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.45-7.50 (m, 1H), 7.41-7.44 (m, 1H), 7.33-7.39 (m, 3H), 7.23 (s, 1H), 6.73 (d, 1H), 4.87 (s, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.12-3.20 (m, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.32 (dd, 4H), 1.08-1.19 (m, 5H), 1.04 (d, 4H), 0.86 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１９ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．１９）の合成
１．１９．１ ６，７−ジヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］ピリジン−３，５−ジカルボン酸５−ｔｅｒｔ−ブチルエステル３−メチルエステル
ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−カルボキシレート（１０００ｍｇ）及びジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（６９ｍｇ）を５０ｍＬの圧力ボトルに入れ、メタノール（２０ｍＬ）を、続いてトリメチルアミン（６３６ｍｇ）を加えた。溶液を脱気し、アルゴンで３回フラッシュした。次いで溶液を脱気し、一酸化炭素でフラッシュし、６０ｐｓｉの一酸化炭素下１００℃に１８時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。
ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−カルボキシレート（１０００ｍｇ）及びジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（６９ｍｇ）を５０ｍＬの圧力ボトルに入れ、メタノール（２０ｍＬ）を、続いてトリメチルアミン（６３６ｍｇ）を加えた。溶液を脱気し、アルゴンで３回フラッシュした。次いで溶液を脱気し、一酸化炭素でフラッシュし、６０ｐｓｉの一酸化炭素下１００℃に１８時間加熱した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。
１．１９．２ ４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［３，２−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１９．１（９４０ｍｇ）をジクロロメタン（１２ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（２２２０ｍｇ）を加え、溶液を３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得、これをさらには精製せずに使用した。
実施例１．１９．１（９４０ｍｇ）をジクロロメタン（１２ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（２２２０ｍｇ）を加え、溶液を３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得、これをさらには精製せずに使用した。
１．１９．３ ５−（５−ブロモ−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピリジン−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［３，２−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル
実施例１．４．５において実施例１．１９．２をエチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート塩酸塩の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５２、４５０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．５において実施例１．１９．２をエチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート塩酸塩の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５２、４５０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．１９．４ ５−［６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イル］−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［３，２−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１．１０において実施例１．１９．３を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５００（Ｍ＋Ｈ）＋、５３１（Ｍ＋ＣＨ３ＯＨ−Ｈ）−。
実施例１．１．１０において実施例１．１９．３を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５００（Ｍ＋Ｈ）＋、５３１（Ｍ＋ＣＨ３ＯＨ−Ｈ）−。
１．１９．５ ５−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−｛１−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，７−ジメチル−アダマンタン−１−イルメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ピリジン−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［３，２−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル
実施例１．４．７において実施例１．１９．４を実施例１．４．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
実施例１．４．７において実施例１．１９．４を実施例１．４．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
１．１９．６ ５−（６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−｛１−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，７−ジメチル−アダマンタン−１−イルメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ピリジン−２−イル）−４，５，６，７−テトラヒドロ−チエノ［３，２−ｃ］ピリジン−３−カルボン酸
実施例１．４．８において実施例１．１９．５を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７６（Ｍ＋Ｈ）＋、７７４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．８において実施例１．１９．５を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７６（Ｍ＋Ｈ）＋、７７４（Ｍ−Ｈ）−。
１．１９．７ ６−［３−（ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６，７−ジヒドロ−４Ｈ−チエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５−イル］−３−｛１−［５−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−エトキシ）−３，７−ジメチル−アダマンタン−１−イルメチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−ピリジン−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
実施例１．４．９において実施例１．１９．６を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９２（Ｍ＋Ｈ）＋、８９０（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．９において実施例１．１９．６を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９２（Ｍ＋Ｈ）＋、８９０（Ｍ−Ｈ）−。
１．１９．８ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１．１４において実施例１．１９．７を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.11 (bs, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.68 (bs, 3H), 7.53 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.14 (d, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.99 (t, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.52 (m, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.91 (q, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.16 (m, 4H), 1.05 (q, 2H), 0.88 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５２（Ｍ＋Ｈ）＋、７５０（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１．１４において実施例１．１９．７を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.11 (bs, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.68 (bs, 3H), 7.53 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.14 (d, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.99 (t, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.52 (m, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.91 (q, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.16 (m, 4H), 1.05 (q, 2H), 0.88 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５２（Ｍ＋Ｈ）＋、７５０（Ｍ−Ｈ）−。
１．２０ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２０）の合成
１．２０．１ ７−（５−ブロモ−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピリジン−２−イル）−３−トリフルオロメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボン酸メチルエステル
実施例１．４．５においてメチル３−（トリフルオロメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレートをエチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート塩酸塩の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４９（Ｍ−ｔＢｕ＋Ｈ）＋、５０３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．５においてメチル３−（トリフルオロメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレートをエチル５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート塩酸塩の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４９（Ｍ−ｔＢｕ＋Ｈ）＋、５０３（Ｍ−Ｈ）−。
１．２０．２ ７−［６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イル］−３−トリフルオロメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１．１０において実施例１．２０．１を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．１０において実施例１．２０．１を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２０．３ ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛３−［（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル｝オキシ）エチル］−２−イミドジカルボネート
実施例１．１．６（５．０００ｇ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（１．５４３ｇ）を加え、溶液を氷浴上で冷却した。メタンスルホニルクロリド（１．６９１ｇ）を滴下添加した。溶液を室温に加温し、３０分間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加えた。層を分離し、有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。次いで水性部分を合わせ、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で逆抽出した。有機部分を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノジカルボキシレート（２．６８９ｇ）及び炭酸セシウム（７．３３２ｇ）を加え、溶液を１６時間還流させた。溶液を冷却し、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）に加えた。層を分離した。有機部分をブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。次いで水性部分を合わせ、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）で逆抽出した。有機部分を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。物質をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６６６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例１．１．６（５．０００ｇ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解した。トリエチルアミン（１．５４３ｇ）を加え、溶液を氷浴上で冷却した。メタンスルホニルクロリド（１．６９１ｇ）を滴下添加した。溶液を室温に加温し、３０分間撹拌した。飽和重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加えた。層を分離し、有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。次いで水性部分を合わせ、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で逆抽出した。有機部分を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をアセトニトリル（５０ｍＬ）に溶解した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノジカルボキシレート（２．６８９ｇ）及び炭酸セシウム（７．３３２ｇ）を加え、溶液を１６時間還流させた。溶液を冷却し、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）に加えた。層を分離した。有機部分をブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。次いで水性部分を合わせ、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）で逆抽出した。有機部分を合わせ、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。物質をヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６６６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
１．２０．４ メチル７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボキシレート
実施例１．４．７において実施例１．２０．２を実施例１．４．６及び実施例１．２０．３を実施例１．４．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９６４（Ｍ＋Ｎａ）＋、９４０（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．７において実施例１．２０．２を実施例１．４．６及び実施例１．２０．３を実施例１．４．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９６４（Ｍ＋Ｎａ）＋、９４０（Ｍ−Ｈ）−。
１．２０．５ ７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６，７，８−テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１−カルボン酸
実施例１．４．８において実施例１．２０．４を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８２８（Ｍ＋Ｈ）＋、８２６（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．８において実施例１．２０．４を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８２８（Ｍ＋Ｈ）＋、８２６（Ｍ−Ｈ）−。
１．２０．６ ｔｅｒｔ−ブチル６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（ジ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．９において実施例１．２０．５を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０５８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．９において実施例１．２０．５を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０５８（Ｍ−Ｈ）−。
１．２０．７ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１．１４において実施例１．２０．６を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.99 (bs, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.66 (bs, 3H), 7.61 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.35 (t, 2H), 7.19 (d, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.37 (t, 2H), 4.16 (t, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.51 (t, 2H), 2.91 (q, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.36-1.24 (m, 4H), 1.19-1.02 (m, 6H), 0.88 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０４（Ｍ＋Ｈ）＋、８０２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１．１４において実施例１．２０．６を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.99 (bs, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.66 (bs, 3H), 7.61 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.35 (t, 2H), 7.19 (d, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.37 (t, 2H), 4.16 (t, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.51 (t, 2H), 2.91 (q, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.36-1.24 (m, 4H), 1.19-1.02 (m, 6H), 0.88 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８０４（Ｍ＋Ｈ）＋、８０２（Ｍ−Ｈ）−。
１．２１ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２１）の合成
１．２１．１ メチル３−ブロモ−５−（ブロモメチル）ベンゾエート
ＡＩＢＮ（２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル））（１．７９ｇ）を、アセトニトリル３５０ｍＬ中のメチル３−ブロモ−５−メチルベンゾエート（５０ｇ）及びＮ−ブロモスクシンイミド（４４．７ｇ）に加え、混合物を終夜還流させた。さらにＮ−ブロモスクシンイミド１１ｇ及びＡＩＢＮ（２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル））０．５ｇを加え、還流を３時間続けた。混合物を濃縮し、次いでエーテル５００ｍＬに溶解し、３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、得られた溶液を濃縮した。粗生成物をヘプタン中１０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
ＡＩＢＮ（２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル））（１．７９ｇ）を、アセトニトリル３５０ｍＬ中のメチル３−ブロモ−５−メチルベンゾエート（５０ｇ）及びＮ−ブロモスクシンイミド（４４．７ｇ）に加え、混合物を終夜還流させた。さらにＮ−ブロモスクシンイミド１１ｇ及びＡＩＢＮ（２，２’−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル））０．５ｇを加え、還流を３時間続けた。混合物を濃縮し、次いでエーテル５００ｍＬに溶解し、３０分間撹拌した。次いで混合物を濾過し、得られた溶液を濃縮した。粗生成物をヘプタン中１０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２１．２ メチル３−ブロモ−５−（シアノメチル）ベンゾエート
テトラブチルアンモニウムシアニド（５０ｇ）を、アセトニトリル３００ｍＬ中の実施例１．２１．１（６７．１ｇ）に加え、混合物を７０℃に終夜加熱した。混合物を冷却し、ジエチルエーテル中に注ぎ入れ、水及びブラインですすいだ。混合物を濃縮し、ヘプタン中２〜２０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
テトラブチルアンモニウムシアニド（５０ｇ）を、アセトニトリル３００ｍＬ中の実施例１．２１．１（６７．１ｇ）に加え、混合物を７０℃に終夜加熱した。混合物を冷却し、ジエチルエーテル中に注ぎ入れ、水及びブラインですすいだ。混合物を濃縮し、ヘプタン中２〜２０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２１．３ メチル３−（２−アミノエチル）−５−ブロモベンゾエート
ボラン−テトラヒドロフラン錯体（１２６ｍＬ、１Ｍ溶液）を、実施例１．２１．２（１６ｇ）のテトラヒドロフラン２００ｍＬ中溶液に加え、混合物を終夜撹拌した。反応物をメタノール（５０ｍＬ）で注意深くクエンチし、次いで５０ｍＬ容量に濃縮した。次いで混合物をメタノール１２０ｍＬ／４Ｍ ＨＣｌ １２０ｍＬ／ジオキサン１２０ｍＬに溶解し、終夜撹拌した。有機物を減圧下で蒸発により除去し、残渣をジエチルエーテル（２×）で抽出した。有機抽出物を廃棄した。水性層を固体のＫ２ＣＯ３で塩基性化し、次いで酢酸エチル及びジクロロメタン（２×）で抽出した。抽出物を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
ボラン−テトラヒドロフラン錯体（１２６ｍＬ、１Ｍ溶液）を、実施例１．２１．２（１６ｇ）のテトラヒドロフラン２００ｍＬ中溶液に加え、混合物を終夜撹拌した。反応物をメタノール（５０ｍＬ）で注意深くクエンチし、次いで５０ｍＬ容量に濃縮した。次いで混合物をメタノール１２０ｍＬ／４Ｍ ＨＣｌ １２０ｍＬ／ジオキサン１２０ｍＬに溶解し、終夜撹拌した。有機物を減圧下で蒸発により除去し、残渣をジエチルエーテル（２×）で抽出した。有機抽出物を廃棄した。水性層を固体のＫ２ＣＯ３で塩基性化し、次いで酢酸エチル及びジクロロメタン（２×）で抽出した。抽出物を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
１．２１．４ メチル３−ブロモ−５−（２−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）エチル）ベンゾエート
トリフルオロ酢酸無水物（９．５２ｍＬ）を、０℃で実施例１．２１．３（１４．５ｇ）及びトリエチルアミン（１１．７４ｍＬ）のジクロロメタン２００ｍＬ中混合物に滴下添加した。添加した時点で、混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。混合物をジエチルエーテル中に注ぎ入れ、ＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄した。混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜３０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
トリフルオロ酢酸無水物（９．５２ｍＬ）を、０℃で実施例１．２１．３（１４．５ｇ）及びトリエチルアミン（１１．７４ｍＬ）のジクロロメタン２００ｍＬ中混合物に滴下添加した。添加した時点で、混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。混合物をジエチルエーテル中に注ぎ入れ、ＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄した。混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜３０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２１．５ メチル６−ブロモ−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．２１．４（１０ｇ）が溶液（４０ｍＬ）になるまで硫酸をこれに加え、この時点でパラホルムアルデヒド（４．２４ｇ）を加え、混合物を２時間撹拌した。次いで溶液を氷４００ｍＬ上に注ぎ入れ、１０分撹拌した。次いでこれを酢酸エチル（３×）で抽出し、合わせた抽出物をＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄し、次いで濃縮した。粗生成物をヘプタン中２〜１５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
実施例１．２１．４（１０ｇ）が溶液（４０ｍＬ）になるまで硫酸をこれに加え、この時点でパラホルムアルデヒド（４．２４ｇ）を加え、混合物を２時間撹拌した。次いで溶液を氷４００ｍＬ上に注ぎ入れ、１０分撹拌した。次いでこれを酢酸エチル（３×）で抽出し、合わせた抽出物をＮａＨＣＯ３溶液及びブラインで洗浄し、次いで濃縮した。粗生成物をヘプタン中２〜１５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２１．６ メチル６−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．２１．５（２．２５ｇ）、ｔｅｒｔ−ブチルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（１．２７ｇ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．０８３ｇ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（０．２１３ｇ）及び炭酸セシウム（４．００ｇ）を、８０℃で終夜ジオキサン４０ｍＬ中にて撹拌した。混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
実施例１．２１．５（２．２５ｇ）、ｔｅｒｔ−ブチルメチル（２−（メチルアミノ）エチル）カルバメート（１．２７ｇ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．０８３ｇ）、４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン（０．２１３ｇ）及び炭酸セシウム（４．００ｇ）を、８０℃で終夜ジオキサン４０ｍＬ中にて撹拌した。混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２１．７ メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−６−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．２１．６（３ｇ）及び炭酸カリウム（２．６３ｇ）を、テトラヒドロフラン３０ｍＬ、メタノール２０ｍＬ及び水２５ｍＬ中で終夜撹拌した。混合物を濃縮し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６０ｍＬを加えた。次いでこれに実施例１．４．４（１．０８ｇ）及びトリエチルアミン（０．６ｍＬ）を加え、反応物を５０℃で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、酢酸エチル（２００ｍＬ）中に注ぎ入れた。溶液を水（３×）及びブラインで洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６３５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２１．６（３ｇ）及び炭酸カリウム（２．６３ｇ）を、テトラヒドロフラン３０ｍＬ、メタノール２０ｍＬ及び水２５ｍＬ中で終夜撹拌した。混合物を濃縮し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６０ｍＬを加えた。次いでこれに実施例１．４．４（１．０８ｇ）及びトリエチルアミン（０．６ｍＬ）を加え、反応物を５０℃で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、酢酸エチル（２００ｍＬ）中に注ぎ入れた。溶液を水（３×）及びブラインで洗浄し、次いでＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６３５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２１．８ メチル６−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１．１０において実施例１．２１．７を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
実施例１．１．１０において実施例１．２１．７を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
１．２１．９ メチル６−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．１２において実施例１．２１．８を実施例１．５．１１及び実施例１．１７．１を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８５．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１２において実施例１．２１．８を実施例１．５．１１及び実施例１．１７．１を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８５．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２１．１０ ６−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．４．８において実施例１．２１．９を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
実施例１．４．８において実施例１．２１．９を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
１．２１．１１ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−６−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エチル）（メチル）アミノ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．９において実施例１．２１．１０を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １００３．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．９において実施例１．２１．１０を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １００３．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２１．１２ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．２１．１１（４０ｍｇ）を、トリフルオロ酢酸２ｍＬ及びジクロロメタン３ｍＬ中で終夜撹拌した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＨＰＬＣ（０．１％トリフルオロ酢酸中の水中１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.75 (bs, 1H), 12.50 (br s, 1H), 8.40 (m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 6,78 (d, 1H), 4.72 (m, 2H), 3.98 (m, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.76 (s, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.29 (d, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.15 (m, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.58 (t, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.30 (s, 2H), 1.21 (m, 4H), 1.08 (m, 4H), 0.98 (m, 2H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４７．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２１．１１（４０ｍｇ）を、トリフルオロ酢酸２ｍＬ及びジクロロメタン３ｍＬ中で終夜撹拌した。溶媒を蒸発させた後、残渣をＨＰＬＣ（０．１％トリフルオロ酢酸中の水中１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.75 (bs, 1H), 12.50 (br s, 1H), 8.40 (m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 6,78 (d, 1H), 4.72 (m, 2H), 3.98 (m, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.76 (s, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.29 (d, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.15 (m, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.58 (t, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.30 (s, 2H), 1.21 (m, 4H), 1.08 (m, 4H), 0.98 (m, 2H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４７．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２２）の合成
１．２２．１ メチル６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．２１．５（４．５ｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３．７５ｇ）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．４ｇ）及び酢酸カリウム（３．６２ｇ）の混合物を、７０℃で２４時間ジオキサン６０ｍＬ中にて撹拌した。次いで混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインですすいだ。混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
実施例１．２１．５（４．５ｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３．７５ｇ）、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（０．４ｇ）及び酢酸カリウム（３．６２ｇ）の混合物を、７０℃で２４時間ジオキサン６０ｍＬ中にて撹拌した。次いで混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインですすいだ。混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２２．２ メチル６−ヒドロキシ−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
過酸化水素（３０％、１．１ｍＬ）を、実施例１．２２．１（４ｇ）及び１Ｍ ＮａＯＨ水溶液（９．８６ｍＬ）のテトラヒドロフラン４０ｍＬ及び水４０ｍＬ中混合物に加え、混合物を９０分間撹拌した。溶液を濃ＨＣｌで酸性化し、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄した。次いで混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
過酸化水素（３０％、１．１ｍＬ）を、実施例１．２２．１（４ｇ）及び１Ｍ ＮａＯＨ水溶液（９．８６ｍＬ）のテトラヒドロフラン４０ｍＬ及び水４０ｍＬ中混合物に加え、混合物を９０分間撹拌した。溶液を濃ＨＣｌで酸性化し、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄した。次いで混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．３ メチル６−メトキシ−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
トリメチルシリルジアゾメタン（２．６ｍＬ、ジエチルエーテル中２Ｍ溶液）を、メタノール１０ｍＬ中の実施例１．２２．２（８００ｍｇ）に加え、反応物を２４時間撹拌した。次いで混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜２５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
トリメチルシリルジアゾメタン（２．６ｍＬ、ジエチルエーテル中２Ｍ溶液）を、メタノール１０ｍＬ中の実施例１．２２．２（８００ｍｇ）に加え、反応物を２４時間撹拌した。次いで混合物を濃縮し、ヘプタン中５〜２５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．４ メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．２１．７において実施例１．２２．３を実施例１．２１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４７９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．５ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１．１０において実施例１．２２．４を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２１．７において実施例１．２２．３を実施例１．２１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４７９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．５ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１．１０において実施例１．２２．４を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．６ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．１２において実施例１．２２．５を実施例１．５．１１及び実施例１．１．９を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８２９．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．５．１２において実施例１．２２．５を実施例１．５．１１及び実施例１．１．９を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８２９．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．７ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．４．８において実施例１．２２．６を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１４．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．８において実施例１．２２．６を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１４．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．８ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．９において実施例１．２２．７を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４６．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．９において実施例１．２２．７を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４６．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２２．９ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．２１．１２において実施例１．２２．８を実施例１．２１．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.75 (bs, 1H), 12.50 (br s, 1H), 8.21 (m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.44 (m, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.90 (d, 1H), 4.72 (m, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.55 (s, 3H), 3.50 (d, 3H), 2.98 (m, 4H), 2.51 (t, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.35 (s, 2H), 1.26 (m, 4H), 1.10 (m, 4H), 1.00 (m, 2H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２１．１２において実施例１．２２．８を実施例１．２１．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.75 (bs, 1H), 12.50 (br s, 1H), 8.21 (m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.44 (m, 2H), 7.32 (t, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.90 (d, 1H), 4.72 (m, 2H), 3.80 (m, 4H), 3.55 (s, 3H), 3.50 (d, 3H), 2.98 (m, 4H), 2.51 (t, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.35 (s, 2H), 1.26 (m, 4H), 1.10 (m, 4H), 1.00 (m, 2H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２３ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２３）の合成
１．２３．１ エチル６−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）キノリン−４−カルボキシレート
エチル６−ブロモキノリン−４−カルボキシレート（１４０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（２０ｍｇ）、酢酸カリウム（１４７ｍｇ）及びビス（ピナコラト）ジボロン（１９０ｍｇ）を加えた。混合物を６０℃で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、次の反応に直接使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
エチル６−ブロモキノリン−４−カルボキシレート（１４０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（２０ｍｇ）、酢酸カリウム（１４７ｍｇ）及びビス（ピナコラト）ジボロン（１９０ｍｇ）を加えた。混合物を６０℃で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、次の反応に直接使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２３．２ ジ−ｔｅｒｔ−ブチル｛２−［（３，５−ジメチル−７−｛［５−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝−２−イミドジカルボネート
実施例１．２０．３（１３ｇ）のジオキサン（１００ｍＬ）中溶液に、ジシクロヘキシル（２’，６’−ジメトキシ−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）ホスフィン（Ｓ−Ｐｈｏｓ）（１．０ｇ）及びビス（ベンゾニトリル）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．２３ｇ）を加え、反応物を数回のハウス真空／Ｎ２再充填でパージした。４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（８．８ｍＬ）及びトリエチルアミン（８．４ｍＬ）を加え、続いてさらに２、３回のハウス真空／窒素再充填を行い、次いで反応物を窒素下８５℃に９０分間加熱した。反応物を冷却し、珪藻土に通して濾過し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルですすいだ。次いで溶液を濃縮し、ヘプタン中２５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
実施例１．２０．３（１３ｇ）のジオキサン（１００ｍＬ）中溶液に、ジシクロヘキシル（２’，６’−ジメトキシ−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）ホスフィン（Ｓ−Ｐｈｏｓ）（１．０ｇ）及びビス（ベンゾニトリル）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．２３ｇ）を加え、反応物を数回のハウス真空／Ｎ２再充填でパージした。４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（８．８ｍＬ）及びトリエチルアミン（８．４ｍＬ）を加え、続いてさらに２、３回のハウス真空／窒素再充填を行い、次いで反応物を窒素下８５℃に９０分間加熱した。反応物を冷却し、珪藻土に通して濾過し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルですすいだ。次いで溶液を濃縮し、ヘプタン中２５％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２３．３ ｔｅｒｔ−ブチル３−｛１−［（３−｛２−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−クロロピリジン−２−カルボキシレート
実施例１．２３．２（１２．３ｇ）及びｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（５．９ｇ）のジオキサン（５０ｍＬ）中溶液に、（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，３，５，７−テトラメチル−８−フェニル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（ＣｙＴｏｐ）（０．５２ｇ）及びビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（０．６６ｇ）を加えた。数回のハウス真空／窒素再充填の後、リン酸カリウム（４．０６ｇ）及び水（２５ｍＬ）を加え、反応物を窒素下８０℃で３０分間加熱した。反応物を冷却し、次いで水及び酢酸エチルを加えた。有機層を分離し、ブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、濃縮し、ヘプタン中３３％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
実施例１．２３．２（１２．３ｇ）及びｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（５．９ｇ）のジオキサン（５０ｍＬ）中溶液に、（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，３，５，７−テトラメチル−８−フェニル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（ＣｙＴｏｐ）（０．５２ｇ）及びビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（０．６６ｇ）を加えた。数回のハウス真空／窒素再充填の後、リン酸カリウム（４．０６ｇ）及び水（２５ｍＬ）を加え、反応物を窒素下８０℃で３０分間加熱した。反応物を冷却し、次いで水及び酢酸エチルを加えた。有機層を分離し、ブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで抽出し、硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、濃縮し、ヘプタン中３３％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２３．４ エチル６−［５−｛１−［（３−｛２−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル］キノリン−４−カルボキシレート
実施例１．２３．１（１６４ｍｇ）の１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．２３．３（３６５ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３５ｍｇ）及びＣｓＦ（２２８ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２３．１（１６４ｍｇ）の１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．２３．３（３６５ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（３５ｍｇ）及びＣｓＦ（２２８ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２３．５ ６−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）キノリン−４−カルボン酸
実施例１．２３．４（３．１ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）、メタノール（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）中溶液に、ＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２４０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて標題化合物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２３．４（３．１ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）、メタノール（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）中溶液に、ＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２４０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて標題化合物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２３．６ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．２３．５（４．２ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（７２８ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（１．４０ｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（８９０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、終夜撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.12 (dd, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.61 (dt, 1H), 8.35 - 8.16 (m, 2H), 8.07 (d, 1H), 7.97 - 7.87 (m, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.66 (s, 3H), 7.53 - 7.44 (m, 2H), 7.38 (t, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.49 (t, 2H), 2.89 (q, 2H), 2.22 (s, 4H), 1.43 (s, 2H), 1.29 (q, 4H), 1.15 (s, 4H), 1.09 - 0.96 (m, 2H), 0.86 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２３．５（４．２ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（７２８ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（１．４０ｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（８９０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、終夜撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.12 (dd, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.61 (dt, 1H), 8.35 - 8.16 (m, 2H), 8.07 (d, 1H), 7.97 - 7.87 (m, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.66 (s, 3H), 7.53 - 7.44 (m, 2H), 7.38 (t, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.49 (t, 2H), 2.89 (q, 2H), 2.22 (s, 4H), 1.43 (s, 2H), 1.29 (q, 4H), 1.15 (s, 4H), 1.09 - 0.96 (m, 2H), 0.86 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２４ ６−［５−アミノ−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２４）の合成
１．２４．１ ５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（２，２，２−トリフルオロ−アセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．４（５０００ｍｇ）、ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート（１９２０ｍｇ）及び炭酸セシウム（６６７４ｍｇ）を１，４−ジオキサン（８０ｍＬ）に加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。ジアセトキシパラジウム（３０７ｍｇ）及び（９，９−ジメチル−９Ｈ−キサンテン−４，５−ジイル）ビス（ジフェニルホスフィン）（１５８０ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。溶液を８０℃に１６時間加熱した。溶液を冷却し、１Ｍ ＨＣｌ水溶液（１５０ｍＬ）を加えた。溶液をヘプタン中５０％酢酸エチルで抽出した。有機部分をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、濃縮し、ヘプタン中３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４２０（Ｍ＋ＮＨ４）＋、４０１（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．４（５０００ｍｇ）、ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート（１９２０ｍｇ）及び炭酸セシウム（６６７４ｍｇ）を１，４−ジオキサン（８０ｍＬ）に加えた。溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。ジアセトキシパラジウム（３０７ｍｇ）及び（９，９−ジメチル−９Ｈ−キサンテン−４，５−ジイル）ビス（ジフェニルホスフィン）（１５８０ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。溶液を８０℃に１６時間加熱した。溶液を冷却し、１Ｍ ＨＣｌ水溶液（１５０ｍＬ）を加えた。溶液をヘプタン中５０％酢酸エチルで抽出した。有機部分をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、濃縮し、ヘプタン中３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４２０（Ｍ＋ＮＨ４）＋、４０１（Ｍ−Ｈ）−。
１．２４．２ ５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．６において実施例１．２４．１を実施例１．１３．５の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０７（Ｍ＋Ｈ）＋、３０５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．６において実施例１．２４．１を実施例１．１３．５の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０７（Ｍ＋Ｈ）＋、３０５（Ｍ−Ｈ）−。
１．２４．３ ２−（５−ブロモ−６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピリジン−２−イル）−５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．７において実施例１．２４．２を実施例１．１３．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５６２、５６０（Ｍ＋Ｈ）＋、５６０、５５８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．７において実施例１．２４．２を実施例１．１３．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５６２、５６０（Ｍ＋Ｈ）＋、５６０、５５８（Ｍ−Ｈ）−。
１．２４．４ ５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−［６−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−２−イル］−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−８−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．８において実施例１．２４．３を実施例１．１３．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６１０（Ｍ＋Ｈ）＋、６０８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．８において実施例１．２４．３を実施例１．１３．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６１０（Ｍ＋Ｈ）＋、６０８（Ｍ−Ｈ）−。
１．２４．５ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１３．９において実施例１．２４．４を実施例１．１３．８及び実施例１．１．９を実施例１．４．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１３（Ｍ＋Ｈ）＋、９１１（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．９において実施例１．２４．４を実施例１．１３．８及び実施例１．１．９を実施例１．４．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１３（Ｍ＋Ｈ）＋、９１１（Ｍ−Ｈ）−。
１．２４．６ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．１３．１０において実施例１．２４．５を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９（Ｍ＋Ｈ）＋、８９７（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１０において実施例１．２４．５を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９（Ｍ＋Ｈ）＋、８９７（Ｍ−Ｈ）−。
１．２４．７ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１３．１１において実施例１．２４．６を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３１（Ｍ＋Ｈ）＋、１０２９（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１１において実施例１．２４．６を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３１（Ｍ＋Ｈ）＋、１０２９（Ｍ−Ｈ）−。
１．２４．８ ６−［５−アミノ−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１３．１２において実施例１．２４．７を実施例１．１３．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.42 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.44 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 6.58 (d, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.99 (s, 2H), 3.93 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), , 3.54 (m, 2H), 3.09 (q, 2H), 2.98 (bs, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.35-1.04 (m, 12H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．１２において実施例１．２４．７を実施例１．１３．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.42 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.75 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.44 (t, 2H), 7.31 (t, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 6.58 (d, 1H), 5.74 (s, 2H), 4.99 (s, 2H), 3.93 (t, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), , 3.54 (m, 2H), 3.09 (q, 2H), 2.98 (bs, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.35-1.04 (m, 12H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７７５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２５ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−［３−（メチルアミノ）プロパ−１−イン−１−イル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２５）の合成
１．２５．１ メチル６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパ−１−イン−１−イル）−２−（２，２，２−トリフルオロアセチル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．２１．５（１．９７ｇ）、ｔｅｒｔ−ブチルメチル（プロパ−２−イン−１−イル）カルバメート（１ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．１９ｇ）、ＣｕＩ（０．０４１ｇ）及びトリエチルアミン（２．２５ｍＬ）のジオキサン２０ｍＬ中溶液を、５０℃で終夜撹拌した。次いで混合物を濃縮し、ヘプタン中１０〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
実施例１．２１．５（１．９７ｇ）、ｔｅｒｔ−ブチルメチル（プロパ−２−イン−１−イル）カルバメート（１ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．１９ｇ）、ＣｕＩ（０．０４１ｇ）及びトリエチルアミン（２．２５ｍＬ）のジオキサン２０ｍＬ中溶液を、５０℃で終夜撹拌した。次いで混合物を濃縮し、ヘプタン中１０〜５０％酢酸エチルを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、標題化合物を得た。
１．２５．２ メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパ−１−イン−１−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．２１．７において実施例１．２５．１を実施例１．２１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２１．７において実施例１．２５．１を実施例１．２１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２５．３ メチル６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパ−１−イン−１−イル）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．１．１０において実施例１．２５．２を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６６２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．１０において実施例１．２５．２を実施例１．１．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６６２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２５．４ メチル６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパ−１−イン−１−イル）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．５．１２において実施例１．２５．３を実施例１．５．１１及び実施例１．１７．１を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
１．２５．５ ６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパ−１−イン−１−イル）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．４．８において実施例１．２５．４を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
実施例１．５．１２において実施例１．２５．３を実施例１．５．１１及び実施例１．１７．１を実施例１．５．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
１．２５．５ ６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパ−１−イン−１−イル）−２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．４．８において実施例１．２５．４を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
１．２５．６ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−６−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）プロパ−１−イン−１−イル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．９において実施例１．２５．５を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
実施例１．４．９において実施例１．２５．５を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
１．２５．７ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−［３−（メチルアミノ）プロパ−１−イン−１−イル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．２１．１２において実施例１．２５．６を実施例１．２１．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.95 (bs, 1H), 8.70 (m, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.47 (m, 2H), 7.34 (m, 2H), 7.24 (s, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.78 (m, 1H), 4.92 (s, 2H), 4.28 (t, 2H), 3.95 (t, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.30 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.00 (m, 2H), 2.57 (t, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.85 (m, 2H), 1.29 (d, 2H), 1.10-1.24 (m, 10H), 0.85 (s, 6H).
実施例１．２１．１２において実施例１．２５．６を実施例１．２１．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.95 (bs, 1H), 8.70 (m, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.47 (m, 2H), 7.34 (m, 2H), 7.24 (s, 1H), 6.95 (m, 1H), 6.78 (m, 1H), 4.92 (s, 2H), 4.28 (t, 2H), 3.95 (t, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.30 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.00 (m, 2H), 2.57 (t, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.85 (m, 2H), 1.29 (d, 2H), 1.10-1.24 (m, 10H), 0.85 (s, 6H).
１．２６ ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２６）の合成
１．２６．１ メチル２−（３−ブロモフェニル）−２−シアノアセテート
２−（３−ブロモフェニル）アセトニトリル（５ｇ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中溶液に、２３℃で水素化ナトリウム（３．００ｇ）を少しずつ加えた。混合物を５０℃に２０分間加熱した。炭酸ジメチル（８．６０ｍＬ）を滴下添加した。混合物を還流状態で２時間加熱した。混合物を冷たいわずかに酸性の水中に注ぎ入れた。水性層を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ブフナー漏斗に通して濾過し、濃縮して、残渣を得、これを０％〜２５％ジクロロメタン／石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２５６．０（Ｍ＋Ｈ）＋
２−（３−ブロモフェニル）アセトニトリル（５ｇ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中溶液に、２３℃で水素化ナトリウム（３．００ｇ）を少しずつ加えた。混合物を５０℃に２０分間加熱した。炭酸ジメチル（８．６０ｍＬ）を滴下添加した。混合物を還流状態で２時間加熱した。混合物を冷たいわずかに酸性の水中に注ぎ入れた。水性層を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、ブフナー漏斗に通して濾過し、濃縮して、残渣を得、これを０％〜２５％ジクロロメタン／石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２５６．０（Ｍ＋Ｈ）＋
１．２６．２ メチル３−アミノ−２−（３−ブロモフェニル）プロパノエート
水素化ホウ素ナトリウム（１４．８９ｇ、３９４ｍｍｏｌ）を、−２０℃で実施例１．２６．１（１０ｇ）及び塩化コバルト（ＩＩ）六水和物（１８．７３ｇ）のメタノール（２００ｍＬ）中溶液に少しずつ加えた。混合物を１時間撹拌し、ｐＨを２Ｎ ＨＣｌ水溶液で３に調整した。混合物を濃縮した。残渣を２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で塩基性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２６０．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
水素化ホウ素ナトリウム（１４．８９ｇ、３９４ｍｍｏｌ）を、−２０℃で実施例１．２６．１（１０ｇ）及び塩化コバルト（ＩＩ）六水和物（１８．７３ｇ）のメタノール（２００ｍＬ）中溶液に少しずつ加えた。混合物を１時間撹拌し、ｐＨを２Ｎ ＨＣｌ水溶液で３に調整した。混合物を濃縮した。残渣を２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液で塩基性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２６０．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．３ メチル２−（３−ブロモフェニル）−３−ホルムアミドプロパノエート
実施例１．２６．２（３．６ｇ）のギ酸エチル（５４ｍＬ）中溶液を８０℃で５時間加熱した。溶媒を除去し、残渣を石油／酢酸エチル（２：１〜１：２）で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２８８．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２６．２（３．６ｇ）のギ酸エチル（５４ｍＬ）中溶液を８０℃で５時間加熱した。溶媒を除去し、残渣を石油／酢酸エチル（２：１〜１：２）で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２８８．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．４ メチル８−ブロモ−２，３−ジオキソ−３，５，６，１０ｂ−テトラヒドロ−２Ｈ−オキサゾロ［２，３−ａ］イソキノリン−６−カルボキシレート
塩化オキサリル（１．９０１ｍＬ）を、実施例１．２６．３（５．６５ｇ）のジクロロメタン（１９０ｍＬ）中溶液にゆっくり加えた。得られた混合物を２０℃で２時間撹拌した。混合物を−２０℃に冷却し、塩化鉄（ＩＩＩ）（３．８４ｇ）を加えた。得られた混合物を２０℃で３時間撹拌した。塩酸水溶液（２Ｍ、４５ｍＬ）を一度に加え、得られた二相混合物を室温で０．５時間激しく撹拌した。二相混合物を分液漏斗中に注ぎ入れ、相を分離した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。粗生成物を精製せずに引き続くステップに直接使用した。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ３４２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
塩化オキサリル（１．９０１ｍＬ）を、実施例１．２６．３（５．６５ｇ）のジクロロメタン（１９０ｍＬ）中溶液にゆっくり加えた。得られた混合物を２０℃で２時間撹拌した。混合物を−２０℃に冷却し、塩化鉄（ＩＩＩ）（３．８４ｇ）を加えた。得られた混合物を２０℃で３時間撹拌した。塩酸水溶液（２Ｍ、４５ｍＬ）を一度に加え、得られた二相混合物を室温で０．５時間激しく撹拌した。二相混合物を分液漏斗中に注ぎ入れ、相を分離した。有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過した。溶媒を減圧下で蒸発させて、標題化合物を得た。粗生成物を精製せずに引き続くステップに直接使用した。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ３４２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．５ メチル６−ブロモ−３，４−ジヒドロイソキノリン−４−カルボキシレート
メタノール（３４５ｍＬ）及び硫酸（２３ｍＬ）中の実施例１．２６．４（１３．０ｇ）を８０℃で１６時間加熱した。混合物を濃縮し、残渣を水で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で塩基性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（２：１〜１：２）で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２６８．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
メタノール（３４５ｍＬ）及び硫酸（２３ｍＬ）中の実施例１．２６．４（１３．０ｇ）を８０℃で１６時間加熱した。混合物を濃縮し、残渣を水で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で塩基性化し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（２：１〜１：２）で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２６８．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．６ メチル６−ブロモイソキノリン−４−カルボキシレート
実施例１．２６．５（５．２５ｇ）の１，４−ジオキサン（２００ｍＬ）中溶液に、６０℃で二酸化マンガン（ＩＶ）（８．５ｇ）を加えた。混合物を１１０℃に３時間加熱した。反応混合物を珪藻土のパッドに通して濾過し、ジクロロメタン及び酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮乾固した。粗製物をシリカゲル上に吸着させ、ジクロロメタン中５〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２６７．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２６．５（５．２５ｇ）の１，４−ジオキサン（２００ｍＬ）中溶液に、６０℃で二酸化マンガン（ＩＶ）（８．５ｇ）を加えた。混合物を１１０℃に３時間加熱した。反応混合物を珪藻土のパッドに通して濾過し、ジクロロメタン及び酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮乾固した。粗製物をシリカゲル上に吸着させ、ジクロロメタン中５〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２６７．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．７ メチル６−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）イソキノリン−４−カルボキシレート
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の実施例１．２６．６（２２９ｍｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３２８ｍｇ）及び酢酸カリウム（２５３ｍｇ）をＮ２で５分間パージし、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（４２．２ｍｇ）を加えた。混合物を１００℃で終夜加熱し、冷却した。混合物に、実施例１．１．１１（０．３６９ｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．０６０ｇ）、フッ化セシウム（０．２６１ｇ）及び水（２ｍＬ）を加えた。得られた混合物を１００℃で１０時間加熱し、濾過した。濾液を濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の実施例１．２６．６（２２９ｍｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（３２８ｍｇ）及び酢酸カリウム（２５３ｍｇ）をＮ２で５分間パージし、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（４２．２ｍｇ）を加えた。混合物を１００℃で終夜加熱し、冷却した。混合物に、実施例１．１．１１（０．３６９ｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（０．０６０ｇ）、フッ化セシウム（０．２６１ｇ）及び水（２ｍＬ）を加えた。得られた混合物を１００℃で１０時間加熱し、濾過した。濾液を濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．８ ６−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）イソキノリン−４−カルボン酸
テトラヒドロフラン−メタノール中の実施例１．２６．７（２２０ｍｇ）を、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．６６ｍＬ）で２日間処理した。混合物を酢酸で中和し、濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
テトラヒドロフラン−メタノール中の実施例１．２６．７（２２０ｍｇ）を、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．６６ｍＬ）で２日間処理した。混合物を酢酸で中和し、濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．９ ｔｅｒｔ−ブチル６−（４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．２６．８（１２２ｍｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（４７．０ｍｇ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１１９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中混合物に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２７３μＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、シリカゲルカラム８０ｇ上に装填し、酢酸エチル中５〜１００％ヘプタンで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２６．８（１２２ｍｇ）、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（４７．０ｍｇ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１１９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中混合物に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２７３μＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、シリカゲルカラム８０ｇ上に装填し、酢酸エチル中５〜１００％ヘプタンで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２６．１０ ６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
ジクロロメタン（４ｍＬ）中の実施例１．２６．９（１００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で３時間処理し、混合物を濃縮した。残渣をジメチルスルホキシド（５ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.27 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 9.03 (d, 2H), 8.53 (dd, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.25 (t, 3H), 8.06 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.56 - 7.45 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.54 (t, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.36 - 1.23 (m, 4H), 1.16 (s, 4H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジクロロメタン（４ｍＬ）中の実施例１．２６．９（１００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）で３時間処理し、混合物を濃縮した。残渣をジメチルスルホキシド（５ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.27 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 9.03 (d, 2H), 8.53 (dd, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.25 (t, 3H), 8.06 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.56 - 7.45 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.54 (t, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.44 (s, 2H), 1.36 - 1.23 (m, 4H), 1.16 (s, 4H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２７ ６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２７）の合成
１．２７．１ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート
メチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート（３７０ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（３０ｍｇ）、１，２，３，４，５−ペンタフェニル−１’−（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン（３０ｍｇ）及びリン酸カリウム（５５０ｍｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中撹拌溶液に、実施例１．１．１１（７３５ｍｇ）を加えた。混合物を窒素でパージし、７０℃で３時間撹拌した。反応物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。水性層を酢酸エチルにより逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中０〜２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．４（Ｍ−Ｈ）−。
メチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート（３７０ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（３０ｍｇ）、１，２，３，４，５−ペンタフェニル−１’−（ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ）フェロセン（３０ｍｇ）及びリン酸カリウム（５５０ｍｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中撹拌溶液に、実施例１．１．１１（７３５ｍｇ）を加えた。混合物を窒素でパージし、７０℃で３時間撹拌した。反応物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。水性層を酢酸エチルにより逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中０〜２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．４（Ｍ−Ｈ）−。
１．２７．２ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボン酸
実施例１．４．７を実施例１．２７．１で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．８に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６６．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．７を実施例１．２７．１で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．８に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６６．４（Ｍ−Ｈ）−。
１．２７．３ ｔｅｒｔ−ブチル６−（７−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．８を実施例１．２７．２で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．９に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９８．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．８を実施例１．２７．２で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．９に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９８．４（Ｍ−Ｈ）−。
１．２７．４ ６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１．１４において実施例１．２７．３を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.01 (s, 1H), 11.19 (s, 1H), 8.27 (dd, 4H), 8.04 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 3H), 7.36 (t, 1H), 7.27 (t, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.57 (t, 3H), 3.03 (t, 3H), 2.58 - 2.54 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.38 - 1.27 (m, 4H), 1.24 - 1.01 (m, 6H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．１４において実施例１．２７．３を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.01 (s, 1H), 11.19 (s, 1H), 8.27 (dd, 4H), 8.04 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 3H), 7.36 (t, 1H), 7.27 (t, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.57 (t, 3H), 3.03 (t, 3H), 2.58 - 2.54 (m, 4H), 2.24 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.38 - 1.27 (m, 4H), 1.24 - 1.01 (m, 6H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２８ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２８）の合成
１．２８．１ メチル２−［５−｛１−［（３−｛２−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル］−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート
実施例１．２７．１において実施例１．２３．３を実施例１．１．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８６６．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．２７．１において実施例１．２３．３を実施例１．１．１１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８６６．３（Ｍ−Ｈ）−。
１．２８．２ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボン酸
実施例１．４．７を実施例１．２８．１で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．８に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５４．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．７を実施例１．２８．１で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．８に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５４．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２８．３ ｔｅｒｔ−ブチル６−（７−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．８を実施例１．２８．２で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．９に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８６．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．８を実施例１．２８．２で置き換えて、標題化合物を実施例１．４．９に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８６．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２８．４ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１．１４において実施例１．２８．３を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.00 (s, 1H), 11.19 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.63 (s, 3H), 7.50 (s, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.25 (t, 1H), 3.90 (s, 2H), 2.90 (q, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.23 - 1.00 (m, 7H), 0.88 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３０．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．１４において実施例１．２８．３を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.00 (s, 1H), 11.19 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.63 (s, 3H), 7.50 (s, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.25 (t, 1H), 3.90 (s, 2H), 2.90 (q, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.45 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.23 - 1.00 (m, 7H), 0.88 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３０．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２９ ６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．２９）の合成
１．２９．１ メチル３−メチル−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート
５０ｍＬの圧力ボトル中７−ブロモ−３−メチル−１Ｈ−インドール（１ｇ）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン付加物（０．０７０ｇ）に、メタノール（２０ｍＬ）及びトリメチルアミン（１．３２７ｍＬ）を加えた。反応器を不活性ガスで、続いて一酸化炭素でパージした。反応物を６０ｐｓｉで１００℃に２０時間加熱した。溶液を濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜３０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １８９．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
５０ｍＬの圧力ボトル中７−ブロモ−３−メチル−１Ｈ−インドール（１ｇ）、ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン付加物（０．０７０ｇ）に、メタノール（２０ｍＬ）及びトリメチルアミン（１．３２７ｍＬ）を加えた。反応器を不活性ガスで、続いて一酸化炭素でパージした。反応物を６０ｐｓｉで１００℃に２０時間加熱した。溶液を濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜３０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １８９．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２９．２ メチル２−ブロモ−３−メチル−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート
実施例１．２９．１（７０ｍｇ）及びシリカゲル７０ｍｇのジクロロメタン（２ｍＬ）中撹拌懸濁液に、１−ブロモピロリジン−２，５−ジオン（７０ｍｇ）を加えた。混合物をアルミニウム箔により光から保護し、窒素下室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濾過し、ジクロロメタンで洗浄し、ヘプタン中１０〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２６７．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２９．１（７０ｍｇ）及びシリカゲル７０ｍｇのジクロロメタン（２ｍＬ）中撹拌懸濁液に、１−ブロモピロリジン−２，５−ジオン（７０ｍｇ）を加えた。混合物をアルミニウム箔により光から保護し、窒素下室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濾過し、ジクロロメタンで洗浄し、ヘプタン中１０〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２６７．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２９．３ メチル３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート
実施例１．２９．２（３９８ｍｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．２ｇ）及び酢酸カリウム（４５０ｍｇ）の１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中撹拌懸濁液に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（５５ｍｇ）を加えた。混合物を窒素でパージし、マイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１１５℃で３時間加熱した。反応物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１５．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２９．２（３９８ｍｇ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１．２ｇ）及び酢酸カリウム（４５０ｍｇ）の１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中撹拌懸濁液に、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（５５ｍｇ）を加えた。混合物を窒素でパージし、マイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１１５℃で３時間加熱した。反応物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１５．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．２９．４ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレート
実施例１．２７．１において実施例１．２９．３をメチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレートの代わりに用いることにより、実施例１．２９．４を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９４．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．２７．１において実施例１．２９．３をメチル２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−７−カルボキシレートの代わりに用いることにより、実施例１．２９．４を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９４．４（Ｍ−Ｈ）−。
１．２９．５ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−７−カルボン酸
実施例１．４．８において実施例１．２９．４を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、実施例１．２９．５を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．８において実施例１．２９．４を実施例１．４．７の代わりに用いることにより、実施例１．２９．５を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８０．４（Ｍ−Ｈ）−。
１．２９．６ ｔｅｒｔ−ブチル６−（７−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４．９において実施例１．２９．５を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、実施例１．２９．６を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．４．９において実施例１．２９．５を実施例１．４．８の代わりに用いることにより、実施例１．２９．６を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
１．２９．７ ６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．１．１４において実施例１．２９．６を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.97 (s, 1H), 11.04 (s, 1H), 8.34 - 8.23 (m, 3H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (dd, 2H), 7.93 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.48 (ddd, 1H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.25 (t, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.03 (p, 2H), 2.67 (s, 3H), 2.56 (t, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.38 - 1.26 (m, 4H), 1.24 - 1.13 (m, 4H), 1.06 (q, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．１４において実施例１．２９．６を実施例１．１．１３の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.97 (s, 1H), 11.04 (s, 1H), 8.34 - 8.23 (m, 3H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (dd, 2H), 7.93 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.48 (ddd, 1H), 7.38 - 7.32 (m, 1H), 7.25 (t, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.03 (p, 2H), 2.67 (s, 3H), 2.56 (t, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.46 (s, 2H), 1.38 - 1.26 (m, 4H), 1.24 - 1.13 (m, 4H), 1.06 (q, 2H), 0.89 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３０ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３０）の合成
１．３０．１ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（（１ｒ，７ｒ）−３，５−ジメチル−７−（２−（（１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル）アミノ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１８．１８（０．０６０ｇ）、１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−オン（０．０１５ｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０２４ｇ）の溶液を、室温でジクロロメタン（０．５ｍＬ）中にて撹拌した。３０分後、反応混合物を濃縮した。粗製物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）に溶解し、５％〜８５％アセトニトリル／水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９６３．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．１８（０．０６０ｇ）、１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−オン（０．０１５ｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０２４ｇ）の溶液を、室温でジクロロメタン（０．５ｍＬ）中にて撹拌した。３０分後、反応混合物を濃縮した。粗製物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）に溶解し、５％〜８５％アセトニトリル／水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９６３．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３０．２ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．３０．１（０．０６０ｇ）の溶液をジクロロメタン（０．５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）で終夜処理した。反応混合物を濃縮した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）に溶解し、５％〜８５％アセトニトリル／水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.90 (s, 1H), 8.53 (d, 2H), 8.08 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.58 - 7.45 (m, 4H), 7.41 (td, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.00 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.62 (d, 4H), 3.22 (h, 2H), 3.12, 3.06 (s, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.79 (d, 2H), 2.15 (s, 3H), 2.11 (s, 1H), 1.61 (qd, 2H), 1.48 (s, 2H), 1.37 (s, 2H), 1.19 (s, 4H), 1.10 (s, 2H), 0.91 (s, 8H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９０７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３０．１（０．０６０ｇ）の溶液をジクロロメタン（０．５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）で終夜処理した。反応混合物を濃縮した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）に溶解し、５％〜８５％アセトニトリル／水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.90 (s, 1H), 8.53 (d, 2H), 8.08 (d, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.58 - 7.45 (m, 4H), 7.41 (td, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.00 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.62 (d, 4H), 3.22 (h, 2H), 3.12, 3.06 (s, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.79 (d, 2H), 2.15 (s, 3H), 2.11 (s, 1H), 1.61 (qd, 2H), 1.48 (s, 2H), 1.37 (s, 2H), 1.19 (s, 4H), 1.10 (s, 2H), 0.91 (s, 8H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９０７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３１ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）アゼチジン−３−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３１）の合成
実施例１．１８．１８（０．０５０ｇ）、１−（メチルスルホニル）アゼチジン−３−オン（０．０１４ｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０２０ｇ）の溶液を、室温でジクロロメタン（０．５０ｍＬ）中にて撹拌した。３０分後、酢酸（５．３５μＬ）を加え、室温で撹拌を終夜続けた。トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を反応物に加え、撹拌を終夜続けた。反応混合物を濃縮した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）の混合物に溶解し、５％〜７０％アセトニトリル／水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.86 (s, 1H), 9.13 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.54 - 7.41 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 4.08 (s, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.05 (s, 3H), 3.03 (s, 2H), 3.02 (s, 1H), 2.11 (s, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.14 (s, 4H), 1.06 (s, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８７９．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．１８（０．０５０ｇ）、１−（メチルスルホニル）アゼチジン−３−オン（０．０１４ｇ）及びトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０２０ｇ）の溶液を、室温でジクロロメタン（０．５０ｍＬ）中にて撹拌した。３０分後、酢酸（５．３５μＬ）を加え、室温で撹拌を終夜続けた。トリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）を反応物に加え、撹拌を終夜続けた。反応混合物を濃縮した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）の混合物に溶解し、５％〜７０％アセトニトリル／水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.86 (s, 1H), 9.13 (s, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.54 - 7.41 (m, 3H), 7.36 (td, 2H), 7.29 (s, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 4.08 (s, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.05 (s, 3H), 3.03 (s, 2H), 3.02 (s, 1H), 2.11 (s, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.31 (q, 4H), 1.14 (s, 4H), 1.06 (s, 2H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８７９．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３２ ３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３２）の合成
１．３２．１ ｔｅｒｔ−ブチル３−（１−（（３−（２−（（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリネート
実施例１．１８．１８（２４５ｍｇ）及びアクリルアミド（２１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中混合物を５０℃で３日間加熱し、０．１％トリフルオロ酢酸中の水溶液中３０％〜８０％アセトニトリルで溶出する逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.83 (s, 1H), 8.30 (s, 2H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.44 (ddd, 3H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.91 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.81 (d, 4H), 3.53 (t, 2H), 3.05 (dq, 6H), 2.06 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.27 (q, 4H), 1.13 (d, 15H), 0.82 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８７３．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．１８（２４５ｍｇ）及びアクリルアミド（２１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中混合物を５０℃で３日間加熱し、０．１％トリフルオロ酢酸中の水溶液中３０％〜８０％アセトニトリルで溶出する逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.83 (s, 1H), 8.30 (s, 2H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.44 (ddd, 3H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 7.21 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.91 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.81 (d, 4H), 3.53 (t, 2H), 3.05 (dq, 6H), 2.06 (s, 3H), 1.43 (s, 2H), 1.27 (q, 4H), 1.13 (d, 15H), 0.82 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８７３．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３２．２ ３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．２６．９を実施例１．３２．１で置き換え、実施例１．２６．１０における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.29 (s, 2H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.63 - 7.52 (m, 2H), 7.49 - 7.38 (m, 3H), 7.37 - 7.29 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.04 (ddt, 6H), 2.07 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.26 (q, 4H), 1.16 - 0.93 (m, 6H), 0.83 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２６．９を実施例１．３２．１で置き換え、実施例１．２６．１０における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.29 (s, 2H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.63 - 7.52 (m, 2H), 7.49 - 7.38 (m, 3H), 7.37 - 7.29 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.04 (ddt, 6H), 2.07 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.26 (q, 4H), 1.16 - 0.93 (m, 6H), 0.83 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３３ ６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３３）の合成
１．３３．１ ５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボン酸エチルエステル
エチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート（１０００ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解した。水素化ナトリウム（鉱油中６０％、８３ｍｇ）を加え、溶液を室温で２０分間撹拌した。（２−（クロロメトキシ）エチル）トリメチルシラン（５８０ｍｇ）を加え、溶液を室温で９０分間撹拌した。反応物を飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）でクエンチし、水（９０ｍＬ）で希釈した。溶液をヘプタン中７０％酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機部分を水（２５ｍＬ）次いでブライン（２５ｍＬ）で洗浄した。溶液を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４７（Ｍ＋Ｈ）＋。
エチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート（１０００ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解した。水素化ナトリウム（鉱油中６０％、８３ｍｇ）を加え、溶液を室温で２０分間撹拌した。（２−（クロロメトキシ）エチル）トリメチルシラン（５８０ｍｇ）を加え、溶液を室温で９０分間撹拌した。反応物を飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍＬ）でクエンチし、水（９０ｍＬ）で希釈した。溶液をヘプタン中７０％酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機部分を水（２５ｍＬ）次いでブライン（２５ｍＬ）で洗浄した。溶液を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１０〜３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４７（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３３．２ エチル５−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート
実施例１．３３．１（３３５ｍｇ）及び実施例１．１．１１（４８３ｍｇ）を１，４−ジオキサン（３ｍＬ）に溶解した。２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（１．１３ｍＬ）を加え、溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（６１ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。溶液を７５℃で１６時間加熱した。溶液を冷却し、０．１Ｍ ＨＣｌ水溶液（２５ｍＬ）を加えた。溶液を酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機部分をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、ヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２７（Ｍ＋ＮＨ４−Ｈ２Ｏ）＋。
実施例１．３３．１（３３５ｍｇ）及び実施例１．１．１１（４８３ｍｇ）を１，４−ジオキサン（３ｍＬ）に溶解した。２Ｍ炭酸ナトリウム水溶液（１．１３ｍＬ）を加え、溶液を脱気し、窒素で３回フラッシュした。ジクロロ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）（６１ｍｇ）を加え、溶液を脱気し、窒素で１回フラッシュした。溶液を７５℃で１６時間加熱した。溶液を冷却し、０．１Ｍ ＨＣｌ水溶液（２５ｍＬ）を加えた。溶液を酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機部分をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶液を濾過し、減圧下で濃縮し、ヘプタン中５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を減圧下で除去して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２７（Ｍ＋ＮＨ４−Ｈ２Ｏ）＋。
１．３３．３ ５−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボン酸
実施例１．１３．１０において実施例１．３３．２を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９（Ｍ＋Ｈ）＋、８９７（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１０において実施例１．３３．２を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９（Ｍ＋Ｈ）＋、８９７（Ｍ−Ｈ）−。
１．３３．４ ｔｅｒｔ−ブチル６−（３−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１３．１１において実施例１．３３．３を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３０（Ｍ＋ＮＨ４−Ｈ２Ｏ）＋、１０２９（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１１において実施例１．３３．３を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３０（Ｍ＋ＮＨ４−Ｈ２Ｏ）＋、１０２９（Ｍ−Ｈ）−。
１．３３．５ ６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．３３．４（８３ｍｇ）をジクロロメタン（０．５ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（７４０ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を１，４−ジオキサン（１ｍＬ）に溶解し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．５ｍＬ）を加えた。溶液を室温で６０分間撹拌した。反応物をトリフルオロ酢酸（０．１ｍＬ）でクエンチし、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｌｕｎａ（登録商標）カラム：Ｃ１８（２）、１００Ａ、１５０×３０ｍｍを装着したＧｒａｃｅ Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ（登録商標）上で３０分かけて水中１０〜８５％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸を含む）を用いる逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物フラクションを合わせ、凍結し、凍結乾燥して、標題化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 14.23 (s, 1H), 12.58 (bs, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.34-8.29 (m, 3H), 8.22 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.87-7.81 (m, 2H), 7.51-7.45 (m, 2H), 7.36 (t, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.47 (s, 2H), 1.34 (q, 4H), 1.22-1.14 (m, 4H), 1.07 (q, 2H), 0.89 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４５（Ｍ＋Ｈ）＋、７４３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．３３．４（８３ｍｇ）をジクロロメタン（０．５ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（７４０ｍｇ）を加え、溶液を室温で１６時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を１，４−ジオキサン（１ｍＬ）に溶解し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．５ｍＬ）を加えた。溶液を室温で６０分間撹拌した。反応物をトリフルオロ酢酸（０．１ｍＬ）でクエンチし、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｌｕｎａ（登録商標）カラム：Ｃ１８（２）、１００Ａ、１５０×３０ｍｍを装着したＧｒａｃｅ Ｒｅｖｅｌｅｒｉｓ（登録商標）上で３０分かけて水中１０〜８５％アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸を含む）を用いる逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物フラクションを合わせ、凍結し、凍結乾燥して、標題化合物をビストリフルオロ酢酸塩として得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 14.23 (s, 1H), 12.58 (bs, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.34-8.29 (m, 3H), 8.22 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.87-7.81 (m, 2H), 7.51-7.45 (m, 2H), 7.36 (t, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.58-2.56 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.47 (s, 2H), 1.34 (q, 4H), 1.22-1.14 (m, 4H), 1.07 (q, 2H), 0.89 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４５（Ｍ＋Ｈ）＋、７４３（Ｍ−Ｈ）−。
１．３４ ６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３４）の合成
１．３４．１ ５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸メチルエステル
実施例１．３３．１においてメチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−３−カルボキシレートをエチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレートの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３３．１においてメチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インドール−３−カルボキシレートをエチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレートの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４３２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３４．２ メチル５−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−インドール−３−カルボキシレート
実施例１．３３．２において実施例１．３４．１を実施例１．３３．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３３．２において実施例１．３４．１を実施例１．３３．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３４．３ ５−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−インドール−３−カルボン酸
実施例１．１３．１０において実施例１．３４．２を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９８（Ｍ＋Ｈ）＋、８９６（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１０において実施例１．３４．２を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９８（Ｍ＋Ｈ）＋、８９６（Ｍ−Ｈ）−。
１．３４．４ ｔｅｒｔ−ブチル６−（３−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−インドール−５−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１３．１１において実施例１．３４．３を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３０（Ｍ＋Ｈ）＋、１０２８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１１において実施例１．３４．３を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３０（Ｍ＋Ｈ）＋、１０２８（Ｍ−Ｈ）−。
１．３４．５ ６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．３３．５において実施例１．３４．４を実施例１．３３．４の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.47 (bs, 1H), 12.18 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.70 (d, 1H), 8.28 (bs, 3H), 8.12 (d, 1H), 8.05 (dd, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.46 (td, 1H), 7.32 (t, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.57 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.47 (s, 2H), 1.34 (q, 4H), 1.24-1.14 (m, 4H), 1.08 (m, 2H), 0.90 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４４（Ｍ＋Ｈ）＋、７４２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．３３．５において実施例１．３４．４を実施例１．３３．４の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.47 (bs, 1H), 12.18 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.70 (d, 1H), 8.28 (bs, 3H), 8.12 (d, 1H), 8.05 (dd, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.46 (td, 1H), 7.32 (t, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.57 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.47 (s, 2H), 1.34 (q, 4H), 1.24-1.14 (m, 4H), 1.08 (m, 2H), 0.90 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４４（Ｍ＋Ｈ）＋、７４２（Ｍ−Ｈ）−。
１．３５ ６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３５）の合成
１．３５．１ ５−ブロモ−１−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル
実施例１．３３．１においてメチル５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボキシレートをエチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレートの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３８５、３８７（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３３．１においてメチル５−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボキシレートをエチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレートの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３８５、３８７（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３５．２ ５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−１−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボン酸メチルエステル
実施例１．１３．８において実施例１．３５．１を実施例１．１３．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１３．８において実施例１．３５．１を実施例１．１３．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３５．３ メチル５−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボキシレート
実施例１．３３．２において実施例１．３５．２を実施例１．３３．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３３．２において実施例１．３５．２を実施例１．３３．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３５．４ ５−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボン酸
実施例１．１３．１０において実施例１．３５．３を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９（Ｍ＋Ｈ）＋、８９７（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１０において実施例１．３５．３を実施例１．１３．９の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９（Ｍ＋Ｈ）＋、８９７（Ｍ−Ｈ）−。
１．３５．５ ｔｅｒｔ−ブチル６−（３−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．１３．１１において実施例１．３５．４を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３１（Ｍ＋Ｈ）＋、１０２９（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１３．１１において実施例１．３５．４を実施例１．１３．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０３１（Ｍ＋Ｈ）＋、１０２９（Ｍ−Ｈ）−。
１．３５．６ ６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．３３．５において実施例１．３５．５を実施例１．３３．４の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.74 (d, 1H), 12.62 (bs, 1H), 9.26 (d, 1H), 9.13 (d, 1H), 8.83 (d, 1H), 8.28 (bs, 2H), 8.25 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.58 (t, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.57 (t, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.47 (s, 2H), 1.34 (q, 4H), 1.20 (t, 4H), 1.08 (q, 2H), 0.90 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４５（Ｍ＋Ｈ）＋、７４３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．３３．５において実施例１．３５．５を実施例１．３３．４の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.74 (d, 1H), 12.62 (bs, 1H), 9.26 (d, 1H), 9.13 (d, 1H), 8.83 (d, 1H), 8.28 (bs, 2H), 8.25 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.58 (t, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.57 (t, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.47 (s, 2H), 1.34 (q, 4H), 1.20 (t, 4H), 1.08 (q, 2H), 0.90 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４５（Ｍ＋Ｈ）＋、７４３（Ｍ−Ｈ）−。
１．３６ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）エチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸（Ｗ３．３６）の合成
実施例１．１８．１８（６９．８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルエテンスルホンアミド（１１８ｍｇ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４日間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶媒を蒸発させた後、残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、得られた溶液を終夜撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.82 (s, 1H), 8.53 (s, 2H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.53 - 7.37 (m, 4H), 7.37 - 7.28 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.54 (t, 2H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 3.30 (s, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.77 (s, 6H), 2.07 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.27 (q, 4H), 1.11 (s, 4H), 1.06 - 0.93 (m, 2H), 0.83 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．１８（６９．８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルエテンスルホンアミド（１１８ｍｇ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍＬ）及びＨ２Ｏ（０．２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４日間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。溶媒を蒸発させた後、残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、得られた溶液を終夜撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.82 (s, 1H), 8.53 (s, 2H), 8.00 (dd, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.53 - 7.37 (m, 4H), 7.37 - 7.28 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.54 (t, 2H), 3.44 - 3.34 (m, 2H), 3.30 (s, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.77 (s, 6H), 2.07 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.27 (q, 4H), 1.11 (s, 4H), 1.06 - 0.93 (m, 2H), 0.83 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３７ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３７）の合成
１．３７．１ ２−（（３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−イル）オキシ）エタノール
実施例１．１．６（８．９ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（８１８ｍｇ）のアセトニトリル（１２０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（１０ｍＬ）及びピナコールボラン（１２．８ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、次の反応に直接使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６７．３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例１．１．６（８．９ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）ジクロロメタン（８１８ｍｇ）のアセトニトリル（１２０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（１０ｍＬ）及びピナコールボラン（１２．８ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、次の反応に直接使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６７．３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
１．３７．２ ｔｅｒｔ−ブチル６−クロロ−３−（１−（（３−（２−ヒドロキシエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（６．５２ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．３７．１（９．９０ｇ）、（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（０．７３２ｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１．０２ｇ）及びリン酸カリウム（２３．６４ｇ）を加え、混合物を還流状態で終夜撹拌した。溶媒を真空下で除去した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５３０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−クロロピコリネート（６．５２ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例１．３７．１（９．９０ｇ）、（１Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（０．７３２ｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１．０２ｇ）及びリン酸カリウム（２３．６４ｇ）を加え、混合物を還流状態で終夜撹拌した。溶媒を真空下で除去した。残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）に溶解し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５３０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３７．３ ｔｅｒｔ−ブチル３−｛１−［（３−｛２−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−クロロピリジン−２−カルボキシレートｔｅｒｔ−ブチル６−クロロ−３−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（（メチルスルホニル）オキシ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．３７．２（３．８８ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）及びトリエチルアミン（６ｍＬ）中冷却（０℃）撹拌溶液に、メタンスルホニルクロリド（２．５２ｇ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて標題化合物を得、これをさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６０８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３７．２（３．８８ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）及びトリエチルアミン（６ｍＬ）中冷却（０℃）撹拌溶液に、メタンスルホニルクロリド（２．５２ｇ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて標題化合物を得、これをさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６０８．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３７．４ ｔｅｒｔ−ブチル３−｛１−［（３−｛２−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−クロロピリジン−２−カルボキシレート
実施例１．３７．３（１５１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔ−ブチルイミノジカルボキシレート（５４ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７２９．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３７．３（１５１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔ−ブチルイミノジカルボキシレート（５４ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７２９．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３７．５ ７−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１−ナフトエ酸
メチル７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１−ナフトエート（２５７ｍｇ）の１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．３７．４（６００ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（５７．８ｍｇ）及びフッ化セシウム（３７５ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、中間体ジエステルを得た。残渣をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）及び水（５ｍＬ）に溶解し、ＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５００ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル４００ｍＬに溶解し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７６５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
メチル７−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１−ナフトエート（２５７ｍｇ）の１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．３７．４（６００ｍｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（５７．８ｍｇ）及びフッ化セシウム（３７５ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、中間体ジエステルを得た。残渣をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）及び水（５ｍＬ）に溶解し、ＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５００ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル４００ｍＬに溶解し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７６５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３７．６ ３−（１−（（３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例１．３７．５（５００ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（９８ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（２５１ｍｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１６０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、溶液を終夜撹拌した。溶媒を除去し、残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３７．５（５００ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（９８ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（２５１ｍｇ）及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１６０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、溶液を終夜撹拌した。溶媒を除去し、残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３７．７ ３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパナール
ジメチルスルホキシド（２．５ｍＬ）のジクロロメタン（４０ｍＬ）中溶液に、−７８℃で塩化オキサリル（１．５ｍＬ）を加えた。混合物を−７８℃で２０分撹拌し、（３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパン−１−オール（１．９ｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液を注射器により加えた。１時間後、トリエチルアミン（５ｍＬ）を加えた。冷却浴を除去し、反応物を終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２０６．０（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
ジメチルスルホキシド（２．５ｍＬ）のジクロロメタン（４０ｍＬ）中溶液に、−７８℃で塩化オキサリル（１．５ｍＬ）を加えた。混合物を−７８℃で２０分撹拌し、（３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパン−１−オール（１．９ｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液を注射器により加えた。１時間後、トリエチルアミン（５ｍＬ）を加えた。冷却浴を除去し、反応物を終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２０６．０（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
１．３７．８ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．３７．６（１２５ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、実施例１．３７．７（３２ｍｇ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１０７ｍｇ）を反応混合物に加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）を加え、反応物を４時間撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を２％ＨＣｌ水溶液、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これを０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、固体を得た。残渣をテトラヒドロフラン（６ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（テトラヒドロフラン中１Ｍ、４ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒を真空下で除去した。残渣をジメチルスルホキシド／メタノール（１：１、１２ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.09 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.36 (dd, 1H), 8.20 (ddd, 5H), 8.09 - 8.02 (m, 1H), 8.03 - 7.95 (m, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.53 - 7.43 (m, 2H), 7.36 (ddd, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.47 (t, 2H), 3.10 - 2.93 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.78 - 1.68 (m, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.20 - 1.11 (m, 4H), 1.04 (q, 2H), 0.87 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３７．６（１２５ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、実施例１．３７．７（３２ｍｇ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（１０７ｍｇ）を反応混合物に加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）を加え、反応物を４時間撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で中和し、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を２％ＨＣｌ水溶液、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これを０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、固体を得た。残渣をテトラヒドロフラン（６ｍＬ）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（テトラヒドロフラン中１Ｍ、４ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒を真空下で除去した。残渣をジメチルスルホキシド／メタノール（１：１、１２ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.09 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.36 (dd, 1H), 8.20 (ddd, 5H), 8.09 - 8.02 (m, 1H), 8.03 - 7.95 (m, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.53 - 7.43 (m, 2H), 7.36 (ddd, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.56 (t, 2H), 3.47 (t, 2H), 3.10 - 2.93 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.78 - 1.68 (m, 2H), 1.44 (s, 2H), 1.30 (q, 4H), 1.20 - 1.11 (m, 4H), 1.04 (q, 2H), 0.87 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３８ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３８）の合成
実施例１．１８．１８（５５ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド（７３．４ｍｇ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍＬ）及び水（０．２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４日間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解した。１６時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.22 (s, 3H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.55 - 7.39 (m, 3H), 7.39 - 7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.20 - 2.95 (m, 6H), 2.92 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 2.69 (q, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.40 (s, 2H), 1.28 (q, 4H), 1.14 (d, 4H), 1.07 - 0.94 (m, 2H), 0.85 (s, 8H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１８．１８（５５ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド（７３．４ｍｇ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２ｍＬ）及び水（０．２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４日間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させた後、残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解した。１６時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.22 (s, 3H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.55 - 7.39 (m, 3H), 7.39 - 7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.55 (t, 2H), 3.20 - 2.95 (m, 6H), 2.92 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 2.69 (q, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.40 (s, 2H), 1.28 (q, 4H), 1.14 (d, 4H), 1.07 - 0.94 (m, 2H), 0.85 (s, 8H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．３９ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．３９）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミドをＮ−メチルアクリルアミドで置き換えて、標題化合物を実施例１．３８に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.08 - 7.96 (m, 2H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.52 - 7.40 (m, 3H), 7.39 - 7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.12 (p, 2H), 3.01 (dt, 4H), 2.57 (d, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.40 (s, 2H), 1.28 (q, 5H), 1.18 - 1.07 (m, 4H), 1.02 (q, 2H), 0.85 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８３１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミドをＮ−メチルアクリルアミドで置き換えて、標題化合物を実施例１．３８に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.84 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.08 - 7.96 (m, 2H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.52 - 7.40 (m, 3H), 7.39 - 7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.12 (p, 2H), 3.01 (dt, 4H), 2.57 (d, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.40 (s, 2H), 1.28 (q, 5H), 1.18 - 1.07 (m, 4H), 1.02 (q, 2H), 0.85 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８３１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０ ３−（１−｛［３−（２−アミノアセトアミド）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．４０）の合成
１．４０．１ １−（（３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．１．３（５００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中冷却（−３０℃）溶液に、ｎ−ブチルリチウム（９．６７ｍＬ）を加え、混合物を−３０℃で２時間撹拌した。ヨウ化メチル（１．９３４ｍＬ）を−３０℃で滴下添加した。添加完了後、混合物を−３０℃でさらに２時間撹拌した。氷水中の１Ｎ ＨＣｌ水溶液を温度が０℃未満を維持するように、ｐＨが６に達するまでゆっくり加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、氷水（１０ｍＬ）及び酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水性物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を１５／１〜１０／１石油／酢酸エチルで溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ３３７、３３９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．３（５００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中冷却（−３０℃）溶液に、ｎ−ブチルリチウム（９．６７ｍＬ）を加え、混合物を−３０℃で２時間撹拌した。ヨウ化メチル（１．９３４ｍＬ）を−３０℃で滴下添加した。添加完了後、混合物を−３０℃でさらに２時間撹拌した。氷水中の１Ｎ ＨＣｌ水溶液を温度が０℃未満を維持するように、ｐＨが６に達するまでゆっくり加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、氷水（１０ｍＬ）及び酢酸エチル（２０ｍＬ）で希釈した。層を分離し、水性物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を１５／１〜１０／１石油／酢酸エチルで溶出するフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ３３７、３３９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．２ １−（３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−イル）尿素
実施例１．４０．１（２．７ｇ）及び尿素（４．８１ｇ）を混合し、１４０℃で１６時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、メタノール（２００ｍＬ×２）中で懸濁させた。不溶物を濾過により除去した。濾液を濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ３１７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４０．１（２．７ｇ）及び尿素（４．８１ｇ）を混合し、１４０℃で１６時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、メタノール（２００ｍＬ×２）中で懸濁させた。不溶物を濾過により除去した。濾液を濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ３１７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．３ ３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−アミン
実施例１．４０．２（２．５３ｇ）の水中２０％エタノール（２０ｍＬ）中溶液に、水酸化ナトリウム（１２．７９ｇ）を加えた。混合物を１２０℃で１６時間及び１４０℃でさらに１６時間撹拌した。６Ｎ ＨＣｌ水溶液をｐＨが６に達するまで加えた。混合物を濃縮し、残渣をメタノール（２００ｍＬ）中で懸濁させた。不溶物を濾別した。濾液を濃縮して、標題化合物をＨＣｌ塩として得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２７３．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４０．２（２．５３ｇ）の水中２０％エタノール（２０ｍＬ）中溶液に、水酸化ナトリウム（１２．７９ｇ）を加えた。混合物を１２０℃で１６時間及び１４０℃でさらに１６時間撹拌した。６Ｎ ＨＣｌ水溶液をｐＨが６に達するまで加えた。混合物を濃縮し、残渣をメタノール（２００ｍＬ）中で懸濁させた。不溶物を濾別した。濾液を濃縮して、標題化合物をＨＣｌ塩として得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ２７３．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．４ ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−イル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバメート
実施例１．４０．３（２．１６ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３．３０ｍＬ）、２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）酢酸（１．７９９ｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３．９０ｇ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。水（４０ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（７０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を３／１〜２／１石油／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ４３０．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４０．３（２．１６ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３．３０ｍＬ）、２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）酢酸（１．７９９ｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３．９０ｇ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。水（４０ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（７０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を３／１〜２／１石油／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ４３０．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．５ ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバメート
実施例１．４０．４（１．７ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中周囲温度溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（１．０６６ｇ）を少しずつ加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。氷水（１０ｍＬ）及び飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（１０ｍＬ）を加えた。混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を３／１〜２／１石油／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ５５６．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４０．４（１．７ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中周囲温度溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（１．０６６ｇ）を少しずつ加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。氷水（１０ｍＬ）及び飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（１０ｍＬ）を加えた。混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を３／１〜２／１石油／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＬＣ−ＭＳ）ｍ／ｅ ５５６．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．６ メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例１．４．４（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加え、混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例１．４．４（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加え、混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．７ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．４０．６（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加え、混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製して、標題化合物を得た。
実施例１．４０．６（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加え、混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。ヘキサン中２０％酢酸エチルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより残渣を精製して、標題化合物を得た。
１．４０．８ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）アセトアミド）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．４．６及び実施例１．４．２を実施例１．４０．７及び実施例１．４０．５で各々置き換え、実施例１．４．７における手順を用いて標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９７．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．６及び実施例１．４．２を実施例１．４０．７及び実施例１．４０．５で各々置き換え、実施例１．４．７における手順を用いて標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９７．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．９ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）アセトアミド）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．２６．７を実施例１．４０．８で置き換え、実施例１．２６．８における手順を用いて標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２６．７を実施例１．４０．８で置き換え、実施例１．２６．８における手順を用いて標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．１０ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）アセトアミド）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．２６．８を実施例１．４０．９で置き換え、実施例１．２６．９における手順を用いて標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２６．８を実施例１．４０．９で置き換え、実施例１．２６．９における手順を用いて標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４０．１１ ３−（１−｛［３−（２−アミノアセトアミド）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．２６．９を実施例１．４０．１０で置き換え、実施例１．２６．１０における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.82 (s, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.90 - 7.79 (m, 4H), 7.76 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.49 - 7.38 (m, 3H), 7.37 - 7.29 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.85 (t, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.40 (q, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.63 (s, 2H), 1.57 - 1.38 (m, 4H), 1.15 - 0.93 (m, 6H), 0.80 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．２６．９を実施例１．４０．１０で置き換え、実施例１．２６．１０における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 12.82 (s, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.90 - 7.79 (m, 4H), 7.76 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.49 - 7.38 (m, 3H), 7.37 - 7.29 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 6.92 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.85 (t, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.40 (q, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.07 (s, 3H), 1.63 (s, 2H), 1.57 - 1.38 (m, 4H), 1.15 - 0.93 (m, 6H), 0.80 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１ ３−［１−（｛３−［（２−アミノエチル）スルファニル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．４１）の合成
１．４１．１ ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸
臭素の溶液（１８．７５ｍＬ）に、鉄（１０．１９ｇ）を０℃で加え、混合物を３０分間撹拌した。３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１９ｇ）を上記混合物に少しずつ加えた。混合物を室温で３６時間撹拌した。氷水（５０ｍＬ）及び６Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）を加えた後、混合物をＮａ２ＳＯ３（水５００ｍＬに溶解した１００ｇ）で処理した。水性層をジクロロメタン（３００ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液（３００ｍＬ）及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.23 (s, 2H), 2.01 - 1.74 (m, 4H), 1.61 - 1.47 (m, 6H), 0.93 (s, 6H).ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２８５．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
臭素の溶液（１８．７５ｍＬ）に、鉄（１０．１９ｇ）を０℃で加え、混合物を３０分間撹拌した。３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１９ｇ）を上記混合物に少しずつ加えた。混合物を室温で３６時間撹拌した。氷水（５０ｍＬ）及び６Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）を加えた後、混合物をＮａ２ＳＯ３（水５００ｍＬに溶解した１００ｇ）で処理した。水性層をジクロロメタン（３００ｍＬ×４）で抽出した。合わせた有機層を１Ｎ ＨＣｌ水溶液（３００ｍＬ）及びブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.23 (s, 2H), 2.01 - 1.74 (m, 4H), 1.61 - 1.47 (m, 6H), 0.93 (s, 6H).ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２８５．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．２ ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メタノール
実施例１．４１．１（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３．ＴＨＦ（６９．６ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。反応完了時点で、メタノール（２０ｍＬ）を滴下添加し、得られた混合物を３０分間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（８／１〜５／１）で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.28 (s, 2H), 1.98 - 1.95 (m, 6H), 1.38 - 1.18 (m, 7H), 0.93 (s, 6H).
実施例１．４１．１（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３．ＴＨＦ（６９．６ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。反応完了時点で、メタノール（２０ｍＬ）を滴下添加し、得られた混合物を３０分間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（８／１〜５／１）で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.28 (s, 2H), 1.98 - 1.95 (m, 6H), 1.38 - 1.18 (m, 7H), 0.93 (s, 6H).
１．４１．３ １−（（３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−１Ｈ−ピラゾール
２−（トリブチルホスホラニリデン）アセトニトリル（９１９ｍｇ）、１Ｈ−ピラゾール（２５９ｍｇ）及び実施例１．４１．２（８００ｍｇ）のトルエン（８ｍＬ）中混合物を、９０℃で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。混合物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２−（トリブチルホスホラニリデン）アセトニトリル（９１９ｍｇ）、１Ｈ−ピラゾール（２５９ｍｇ）及び実施例１．４１．２（８００ｍｇ）のトルエン（８ｍＬ）中混合物を、９０℃で１６時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。混合物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．４ ３−（（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−チオール
実施例１．４１．３（２．８ｇ）及びチオ尿素（１５．８２ｇ）の酢酸中３３％（重量／重量）ＨＢｒ（５０ｍＬ）中混合物を１１０℃で１６時間撹拌し、減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣を水中２０％エタノール（容量／容量：２００ｍＬ）に溶解し、水酸化ナトリウム（１９．０６ｇ）を加えた。得られた溶液を室温で１６時間撹拌し、濃縮した。残渣を水（６０ｍＬ）に溶解し、６Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ５〜ｐＨ６に酸性化した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．３（２．８ｇ）及びチオ尿素（１５．８２ｇ）の酢酸中３３％（重量／重量）ＨＢｒ（５０ｍＬ）中混合物を１１０℃で１６時間撹拌し、減圧下で濃縮して、残渣を得た。残渣を水中２０％エタノール（容量／容量：２００ｍＬ）に溶解し、水酸化ナトリウム（１９．０６ｇ）を加えた。得られた溶液を室温で１６時間撹拌し、濃縮した。残渣を水（６０ｍＬ）に溶解し、６Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ５〜ｐＨ６に酸性化した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．５ ２−（（−３−（（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）チオ）エタノール
実施例１．４１．４（３．３ｇ）のエタノール（１２０ｍＬ）中溶液に、ナトリウムエトキシド（２．４３７ｇ）を加えた。混合物を１０分間撹拌し、２−クロロエタノール（１．８０ｍＬ）を滴下添加した。混合物を室温で６時間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ７に中和した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル６／１〜２／１で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．４（３．３ｇ）のエタノール（１２０ｍＬ）中溶液に、ナトリウムエトキシド（２．４３７ｇ）を加えた。混合物を１０分間撹拌し、２−クロロエタノール（１．８０ｍＬ）を滴下添加した。混合物を室温で６時間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ７に中和した。混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル６／１〜２／１で溶出するシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．６ ２−（（−３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−イル）チオ）エタノール
実施例１．４１．５（２．３ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）中溶液に、窒素下−２０℃でｎ−ブチルリチウム（１４．３５ｍＬ、ヘキサン中２Ｍ）を滴下添加した。混合物をこの温度で２時間撹拌した。ヨウ化メチル（４．４９ｍＬ）を−２０℃で得られた混合物に加え、混合物を−２０℃で２時間撹拌した。反応物を−２０℃で飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を滴下添加することによりクエンチした。得られた混合物を１０分間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ５に酸性化した。混合物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３３５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．５（２．３ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）中溶液に、窒素下−２０℃でｎ−ブチルリチウム（１４．３５ｍＬ、ヘキサン中２Ｍ）を滴下添加した。混合物をこの温度で２時間撹拌した。ヨウ化メチル（４．４９ｍＬ）を−２０℃で得られた混合物に加え、混合物を−２０℃で２時間撹拌した。反応物を−２０℃で飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を滴下添加することによりクエンチした。得られた混合物を１０分間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ５に酸性化した。混合物を酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３３５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．７ ２−（（−３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）チオ）エタノール
実施例１．４１．６（３．６５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．６８ｇ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。反応物を氷水（８ｍＬ）及び飽和ＮａＳ２Ｏ３水溶液（８ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物をさらに１０分間撹拌し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（６／１〜３／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．６（３．６５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．６８ｇ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。反応物を氷水（８ｍＬ）及び飽和ＮａＳ２Ｏ３水溶液（８ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物をさらに１０分間撹拌し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（６／１〜３／１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．８ ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛３−［（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル｝スルファニル）エチル］−２−イミドジカルボネート
実施例１．４１．７（３ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液（０℃浴）に、トリエチルアミン（１．１８１ｍＬ）及び塩化メシル（０．５５９ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌し、反応物を氷水（３０ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物をさらに１０分間撹拌し、ジクロロメタン（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をアセトニトリル（１００ｍＬ）に溶解し、ＮＨ（Ｂｏｃ）２（１．６９５ｇ）及びＣｓ２ＣＯ３（４．２４ｇ）を加えた。混合物を８５℃で１６時間撹拌し、反応物を水（２０ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物を１０分間撹拌し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル１０／１〜６／１で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６６０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．７（３ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液（０℃浴）に、トリエチルアミン（１．１８１ｍＬ）及び塩化メシル（０．５５９ｍＬ）を加えた。混合物を室温で４時間撹拌し、反応物を氷水（３０ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物をさらに１０分間撹拌し、ジクロロメタン（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をアセトニトリル（１００ｍＬ）に溶解し、ＮＨ（Ｂｏｃ）２（１．６９５ｇ）及びＣｓ２ＣＯ３（４．２４ｇ）を加えた。混合物を８５℃で１６時間撹拌し、反応物を水（２０ｍＬ）の添加によりクエンチした。混合物を１０分間撹拌し、酢酸エチル（４０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル１０／１〜６／１で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６６０．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．９ メチル２−［５−（１−｛［３−（｛２−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝スルファニル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．４．６及び実施例１．４．２を実施例１．４０．７及び実施例１．４１．８で各々置き換え、実施例１．４．７における手順を用いて標題化合物を調製した。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９００．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．６及び実施例１．４．２を実施例１．４０．７及び実施例１．４１．８で各々置き換え、実施例１．４．７における手順を用いて標題化合物を調製した。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９００．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．１０ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）チオ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
水酸化リチウム（５５３ｍｇ）の水（４．０３ｍＬ）及びメタノール（４ｍＬ）中スラリー液を、１５℃に冷却した。実施例１．４１．９（８００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（３．２３ｍＬ）及びメタノール（４ｍＬ）中溶液をゆっくり加え、反応物を室温で撹拌した。１８時間後、反応物を氷浴中で冷却し、水（４ｍＬ）中のリン酸１．８ｇを加えた。二相混合物を分液漏斗に移し、酢酸エチルで抽出して、標題化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
水酸化リチウム（５５３ｍｇ）の水（４．０３ｍＬ）及びメタノール（４ｍＬ）中スラリー液を、１５℃に冷却した。実施例１．４１．９（８００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（３．２３ｍＬ）及びメタノール（４ｍＬ）中溶液をゆっくり加え、反応物を室温で撹拌した。１８時間後、反応物を氷浴中で冷却し、水（４ｍＬ）中のリン酸１．８ｇを加えた。二相混合物を分液漏斗に移し、酢酸エチルで抽出して、標題化合物を得た。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．１１ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エチル）チオ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４１．１０（６９９ｍｇ）を含む４ｍＬの琥珀色バイアルに、酢酸エチル（５ｍＬ）及び１，１’−カルボニルジイミダゾール（２３１ｍｇ）を入れ、室温で７時間撹拌した。ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（２２７ｍｇ）及び１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（０．２２８ｍＬ）のアセトニトリル（３ｍＬ）中溶液を加え、反応物を７０℃に加熱した。１８時間撹拌した後、反応物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液１０ｍＬの添加によりクエンチし、酢酸エチルで抽出して、標題化合物を得、これをさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．１０（６９９ｍｇ）を含む４ｍＬの琥珀色バイアルに、酢酸エチル（５ｍＬ）及び１，１’−カルボニルジイミダゾール（２３１ｍｇ）を入れ、室温で７時間撹拌した。ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（２２７ｍｇ）及び１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（０．２２８ｍＬ）のアセトニトリル（３ｍＬ）中溶液を加え、反応物を７０℃に加熱した。１８時間撹拌した後、反応物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液１０ｍＬの添加によりクエンチし、酢酸エチルで抽出して、標題化合物を得、これをさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８１８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４１．１２ ３−［１−（｛３−［（２−アミノエチル）スルファニル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．４１．１１（５１０ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加え、反応物を室温で３０分間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチし、ジクロロメタンで抽出した。生成物を０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中５〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.86 (bs, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.76 (m, 2H), 7.62 (d, 1H), 7.39 (m, 6H), 6.95 (t, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 3.85 (m, 4H), 3.01 (t, 2H), 2.97 (t, 2H), 2.90 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.54 (s, 2H), 1.36, (m, 4H), 1.17 (m, 4H), 1.08 (m, 2H), 0.84 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．１１（５１０ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加え、反応物を室温で３０分間撹拌した。反応物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液でクエンチし、ジクロロメタンで抽出した。生成物を０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中５〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.86 (bs, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.76 (m, 2H), 7.62 (d, 1H), 7.39 (m, 6H), 6.95 (t, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.96 (s, 1H), 3.85 (m, 4H), 3.01 (t, 2H), 2.97 (t, 2H), 2.90 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.54 (s, 2H), 1.36, (m, 4H), 1.17 (m, 4H), 1.08 (m, 2H), 0.84 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２ ３−（１−｛［３−（３−アミノプロピル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．４２）の合成
１．４２．１ １−（（３−アリル−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．４１．３（０．８２５ｇ）のトルエン（５ｍＬ）中溶液に、Ｎ、Ｎ’−アゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ、０．４１９ｇ）及びアリルトリブチルスタンナン（２．０３９ｍＬ）を加えた。混合物をＮ２気流で１５分間パージし、８０℃で８時間加熱し、濃縮した。残渣を石油エーテル中５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２８５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４１．３（０．８２５ｇ）のトルエン（５ｍＬ）中溶液に、Ｎ、Ｎ’−アゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ、０．４１９ｇ）及びアリルトリブチルスタンナン（２．０３９ｍＬ）を加えた。混合物をＮ２気流で１５分間パージし、８０℃で８時間加熱し、濃縮した。残渣を石油エーテル中５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２８５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．２ １−（（３−アリル−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例１．４２．１（２００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）中溶液に、Ｎ２下−７８℃でｎ−ブチルリチウム（２．８１ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加えた。温度を−２０℃に昇温しながら混合物を２時間撹拌し、−２０℃で１時間撹拌した。ヨードメタン（０．６５９ｍＬ）を加え、得られた混合物を−２０℃で０．５時間撹拌した。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出した。有機層をブラインで洗浄して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２９９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４２．１（２００ｍｇ）のテトラヒドロフラン（５ｍＬ）中溶液に、Ｎ２下−７８℃でｎ−ブチルリチウム（２．８１ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加えた。温度を−２０℃に昇温しながら混合物を２時間撹拌し、−２０℃で１時間撹拌した。ヨードメタン（０．６５９ｍＬ）を加え、得られた混合物を−２０℃で０．５時間撹拌した。反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出した。有機層をブラインで洗浄して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２９９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．３ ３−（３，５−ジメチル−７−（（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）アダマンタン−１−イル）プロパン−１−オール
窒素雰囲気下、実施例１．４２．２（２．１７５ｇ、７．２９ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（４２．５ｍＬ）中溶液を０℃に冷却した。ＢＨ３・ＴＨＦ（１５．３０ｍＬ）を滴下添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、０℃に冷却した。反応混合物に１０Ｎ ＮａＯＨ水溶液（５．０３ｍＬ）を、続いて３０％Ｈ２Ｏ２水溶液（１６．５２ｍＬ）を滴下添加した。得られた混合物を室温に加温し、９０分間撹拌した。反応物を１０％塩酸水溶液（３５ｍＬ）でクエンチした。有機層を分離し、水性層を酢酸エチル（２×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×６０ｍＬ）で洗浄し、氷浴中で冷却した。亜硫酸ナトリウムの飽和水溶液（１５ｍＬ）を注意深く加え、混合物を数分間撹拌した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、真空で濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（３：１〜１：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
窒素雰囲気下、実施例１．４２．２（２．１７５ｇ、７．２９ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（４２．５ｍＬ）中溶液を０℃に冷却した。ＢＨ３・ＴＨＦ（１５．３０ｍＬ）を滴下添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、０℃に冷却した。反応混合物に１０Ｎ ＮａＯＨ水溶液（５．０３ｍＬ）を、続いて３０％Ｈ２Ｏ２水溶液（１６．５２ｍＬ）を滴下添加した。得られた混合物を室温に加温し、９０分間撹拌した。反応物を１０％塩酸水溶液（３５ｍＬ）でクエンチした。有機層を分離し、水性層を酢酸エチル（２×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×６０ｍＬ）で洗浄し、氷浴中で冷却した。亜硫酸ナトリウムの飽和水溶液（１５ｍＬ）を注意深く加え、混合物を数分間撹拌した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、真空で濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（３：１〜１：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．４ ３−（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）プロパン−１−オール
実施例１．４２．３（１．１９ｇ）及び１−ヨードピロリジン−２，５−ジオン（１．０１５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７．５ｍＬ）中混合物を、室温で１６時間撹拌した。反応物を飽和Ｎａ２ＳＯ３水溶液でクエンチした。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和Ｎａ２ＳＯ３水溶液、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（３：１〜１：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４２．３（１．１９ｇ）及び１−ヨードピロリジン−２，５−ジオン（１．０１５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７．５ｍＬ）中混合物を、室温で１６時間撹拌した。反応物を飽和Ｎａ２ＳＯ３水溶液でクエンチした。混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和Ｎａ２ＳＯ３水溶液、飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（３：１〜１：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．５ ３−（３−（（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）プロピルメタンスルホネート
実施例１．４２．４（１．５５ｇ、３．５０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液に、０℃でトリエチルアミン（０．６９３ｍＬ）及び塩化メシル（０．３７４ｍＬ）をゆっくり加えた。混合物を２０℃で３．５時間撹拌し、ジクロロメタンで希釈した。有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４２．４（１．５５ｇ、３．５０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液に、０℃でトリエチルアミン（０．６９３ｍＬ）及び塩化メシル（０．３７４ｍＬ）をゆっくり加えた。混合物を２０℃で３．５時間撹拌し、ジクロロメタンで希釈した。有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．６ ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（３−｛３−［（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル｝プロピル）−２−イミドジカルボネート
実施例１．４２．５（１．９２ｇ）のアセトニトリル（４０ｍＬ）中溶液に、２０℃でジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノジカルボネート（０．９６２ｇ）及びＣｓ２ＣＯ３（２．４０４ｇ）を加えた。混合物を８０℃で１６時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（１０：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６４２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４２．５（１．９２ｇ）のアセトニトリル（４０ｍＬ）中溶液に、２０℃でジ−ｔｅｒｔ−ブチルイミノジカルボネート（０．９６２ｇ）及びＣｓ２ＣＯ３（２．４０４ｇ）を加えた。混合物を８０℃で１６時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を石油エーテル／酢酸エチル（１０：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６４２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．７ メチル２−［５−｛１−［（３−｛３−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例１．４．６及び実施例１．４．２を実施例１．４０．７及び実施例１．４２．６で各々置き換え、実施例１．４．７における手順を用いて標題化合物を調製した。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８２．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４．６及び実施例１．４．２を実施例１．４０．７及び実施例１．４２．６で各々置き換え、実施例１．４．７における手順を用いて標題化合物を調製した。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８２．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．８ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロピル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例１．４２．７を実施例１．４１．９の代わりに用い、実施例１．４１．１０における手順を用いて標題化合物を調製した。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４２．７を実施例１．４１．９の代わりに用い、実施例１．４１．１０における手順を用いて標題化合物を調製した。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４２．９ ｔｅｒｔ−ブチル６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（３−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロピル）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリネート
実施例１．４２．８を実施例１．４１．１０の代わりに用い、実施例１．４１．１１における手順を用いて標題化合物を調製した。
実施例１．４２．８を実施例１．４１．１０の代わりに用い、実施例１．４１．１１における手順を用いて標題化合物を調製した。
１．４２．１０ ３−（１−｛［３−（３−アミノプロピル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．４２．９を実施例１．４１．１１の代わりに用い、実施例１．４１．１２における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 4H), 7.47 (dt, 3H), 7.36 (q, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.72 (q, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.45 (t, 2H), 1.18 - 1.05 (m, 9H), 1.00 (d, 6H), 0.80 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４２．９を実施例１．４１．１１の代わりに用い、実施例１．４１．１２における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 4H), 7.47 (dt, 3H), 7.36 (q, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.72 (q, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.45 (t, 2H), 1.18 - 1.05 (m, 9H), 1.00 (d, 6H), 0.80 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４６８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４３ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛５−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］キノリン−３−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．４３）の合成
１．４３．１ メチル３−ブロモキノリン−５−カルボキシレート
３−ブロモキノリン−５−カルボン酸（２ｇ）のメタノール（３０ｍＬ）中溶液に、濃Ｈ２ＳＯ４（５ｍＬ）を加えた。溶液を還流状態で終夜撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。無水硫酸ナトリウムで脱水した後、濾過し、溶媒を蒸発させて、標題生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２６６（Ｍ＋Ｈ）＋。
３−ブロモキノリン−５−カルボン酸（２ｇ）のメタノール（３０ｍＬ）中溶液に、濃Ｈ２ＳＯ４（５ｍＬ）を加えた。溶液を還流状態で終夜撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶解し、Ｎａ２ＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。無水硫酸ナトリウムで脱水した後、濾過し、溶媒を蒸発させて、標題生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２６６（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４３．２ メチル３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）キノリン−５−カルボキシレート
実施例１．４３．１（３５６ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中溶液に、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（５５ｍｇ）、酢酸カリウム（１９７ｍｇ）及びビス（ピナコラト）ジボロン（５１０ｍｇ）を加えた。混合物を６０℃で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、さらなる後処理はせずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３３９．２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例１．４３．１（３５６ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中溶液に、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（５５ｍｇ）、酢酸カリウム（１９７ｍｇ）及びビス（ピナコラト）ジボロン（５１０ｍｇ）を加えた。混合物を６０℃で終夜撹拌した。混合物を室温に冷却し、さらなる後処理はせずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３３９．２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
１．４３．３ メチル３−［５−｛１−［（３−｛２−［ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル］キノリン−５−カルボキシレート
実施例１．４３．２（６２６ｍｇ）の１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．２３．３（１．４６ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（１４０ｍｇ）及びＣｓＦ（９１１ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチル（１Ｌ）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４３．２（６２６ｍｇ）の１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、実施例１．２３．３（１．４６ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（１４０ｍｇ）及びＣｓＦ（９１１ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１２０℃で３０分間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中２０％酢酸エチル（１Ｌ）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８８０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４３．４ ３−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）キノリン−５−カルボン酸
実施例１．４３．３（１．３４ｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、ＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（１２０ｍｇ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題生成物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７６６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４３．３（１．３４ｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中溶液に、ＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（１２０ｍｇ）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を２Ｎ ＨＣｌ水溶液で酸性化し、酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題生成物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７６６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４３．５ ３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛５−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］キノリン−３−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
実施例１．４３．４（２００ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３９．２ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（５０ｍｇ）及び４−ジメチルアミノピリジン（３２ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、反応物を終夜撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．４３．４（２００ｍｇ）のジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３９．２ｍｇ）、１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミド塩酸塩（５０ｍｇ）及び４−ジメチルアミノピリジン（３２ｍｇ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン及びトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ、１：１）に溶解し、反応物を終夜撹拌した。混合物を濃縮し、残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ｍＬ）に溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７４２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
１．４４ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルホエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（Ｗ３．４４）の合成
１．４４．１ ｔｅｒｔ−ブチル６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［（２，２，７，７−テトラメチル−１０，１０−ジオキシド−３，３−ジフェニル−４，９−ジオキサ−１０□６−チア−１３−アザ−３−シラペンタデカン−１５−イル）オキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボキシレート
実施例１．１８．１８（５００ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）中溶液に、４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブチルエテンスルホネート（３３４ｍｇ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌し、メチルアミン（０．３ｍＬ）を加えて反応をクエンチした。得られた混合物を２０分間撹拌し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中５０〜１００％アセトニトリルで溶出するＡｎａｌｏｇｉｘシステム（Ｃ１８カラム）を使用する逆相クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１８．１８（５００ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）中溶液に、４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブチルエテンスルホネート（３３４ｍｇ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌し、メチルアミン（０．３ｍＬ）を加えて反応をクエンチした。得られた混合物を２０分間撹拌し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中５０〜１００％アセトニトリルで溶出するＡｎａｌｏｇｉｘシステム（Ｃ１８カラム）を使用する逆相クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
１．４４．２ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルホエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の実施例１．４４．１（２００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で終夜処理した。反応混合物を濃縮し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.40-7.49 (m, 2H), 7.31-7.39 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.15-3.25 (m, 2H), 3.03-3.13 (m, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.79 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.22-1.34 (m, 4H), 0.94-1.18 (m, 6H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
ジクロロメタン（５ｍＬ）中の実施例１．４４．１（２００ｍｇ）をトリフルオロ酢酸（２．５ｍＬ）で終夜処理した。反応混合物を濃縮し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.86 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.02 (d, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.40-7.49 (m, 2H), 7.31-7.39 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.87 (t, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.15-3.25 (m, 2H), 3.03-3.13 (m, 2H), 3.00 (t, 2H), 2.79 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.39 (s, 2H), 1.22-1.34 (m, 4H), 0.94-1.18 (m, 6H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８５４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
［実施例２］
例示的シントンの合成
この実施例は、ＡＤＣを作製するのにさらに有用な例示的シントンの合成方法を提供する。
例示的シントンの合成
この実施例は、ＡＤＣを作製するのにさらに有用な例示的シントンの合成方法を提供する。
２．１ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（シントンＢＳ）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の実施例１．１．１４（７２ｍｇ）及び４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート（９１ｍｇ）を水−氷浴中で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で２時間撹拌し、酢酸（０．０５７ｍＬ）を加えた。溶媒を濃縮した後、残渣をＨＰＬＣ（０．１％ＴＦＡ／水中２０〜８０％アセトニトリル）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.74-7.89 (m, 4H), 7.59 (d, 2H), 7.46 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.18-7.32 (m, 4H), 6.99 (s, 2H), 6.01 (s, 1H), 4.98 (s, 3H), 4.38 (d, 2H), 3.47 (d, 2H), 3.36 (t, 2H), 3.28 (t, 2H), 2.91-3.10 (m, 2H), 2.79-2.91 (m, 4H), 2.19-2.25 (m, 3H), 2.06-2.20 (m, 2H), 1.89-2.02 (m, 3H), 1.53-1.74 (m, 2H), 1.30-1.55 (m, 8H), 1.06-1.29 (m, 10H), 0.91-1.06 (m, 2H), 0.76-0.89 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の実施例１．１．１４（７２ｍｇ）及び４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート（９１ｍｇ）を水−氷浴中で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で２時間撹拌し、酢酸（０．０５７ｍＬ）を加えた。溶媒を濃縮した後、残渣をＨＰＬＣ（０．１％ＴＦＡ／水中２０〜８０％アセトニトリル）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.98 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.74-7.89 (m, 4H), 7.59 (d, 2H), 7.46 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.18-7.32 (m, 4H), 6.99 (s, 2H), 6.01 (s, 1H), 4.98 (s, 3H), 4.38 (d, 2H), 3.47 (d, 2H), 3.36 (t, 2H), 3.28 (t, 2H), 2.91-3.10 (m, 2H), 2.79-2.91 (m, 4H), 2.19-2.25 (m, 3H), 2.06-2.20 (m, 2H), 1.89-2.02 (m, 3H), 1.53-1.74 (m, 2H), 1.30-1.55 (m, 8H), 1.06-1.29 (m, 10H), 0.91-1.06 (m, 2H), 0.76-0.89 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．２ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（シントンＤＫ）の合成
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル４−ニトロフェニルカルボネート（５７ｍｇ）及び実施例１．２．２（５７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、残渣をメタノール（３ｍＬ）及び酢酸（０．３ｍＬ）で希釈し、逆相カラム３００ｇ上に装填し、０．１％ＴＦＡ水溶液中３０〜７０％アセトニトリルで溶出して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.97 (s, 1H), , 8.73 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.90-7.98 (m, 1H), , 7.71-7.87 (m, 4H), 7.54-7.63 (m, 2H), , 7.45 (d, 1H), 7.32-7.42 (m, 2H), 7.17-7.31 (m, 3H), 6.92-7.03 (m, 3H), 5.88-6.08 (m, 1H), 4.97 (s, 3H), 4.29-4.46 (m, 4H), 4.12-4.26 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 3.21-3.41 (m, 8H), 2.78-3.10 (m, 6H), 2.20 (s, 3H), 1.90-2.18 (m, 3H), 0.92-1.77 (m, 24H), 0.75-0.88 (m, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３６０．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル４−ニトロフェニルカルボネート（５７ｍｇ）及び実施例１．２．２（５７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、残渣をメタノール（３ｍＬ）及び酢酸（０．３ｍＬ）で希釈し、逆相カラム３００ｇ上に装填し、０．１％ＴＦＡ水溶液中３０〜７０％アセトニトリルで溶出して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.97 (s, 1H), , 8.73 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.90-7.98 (m, 1H), , 7.71-7.87 (m, 4H), 7.54-7.63 (m, 2H), , 7.45 (d, 1H), 7.32-7.42 (m, 2H), 7.17-7.31 (m, 3H), 6.92-7.03 (m, 3H), 5.88-6.08 (m, 1H), 4.97 (s, 3H), 4.29-4.46 (m, 4H), 4.12-4.26 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 3.21-3.41 (m, 8H), 2.78-3.10 (m, 6H), 2.20 (s, 3H), 1.90-2.18 (m, 3H), 0.92-1.77 (m, 24H), 0.75-0.88 (m, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３６０．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（シントンＤＱ）の合成
実施例２．２において実施例１．３．２を実施例１．２．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.99 (s, 1H), 8.17-8.35 (m, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.71-7.84 (m, 4H), 7.55-7.65 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.28 (d, 2H), 7.21 (t, 1H), 6.99 (s, 2H), 6.83 (d, 1H), 5.97 (s, 1H), 5.28-5.51 (m, 2H), 4.98 (s, 2H), 4.32-4.44 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H), 3.97-4.13 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.29 (d, 3H), 3.00 (s, 3H), 2.80-2.98 (m, 4H), 2.18-2.26 (m, 3H), 1.88-2.17 (m, 3H), 0.91-1.73 (m, 23H), 0.74-0.92 (m, 12 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７３．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．２において実施例１．３．２を実施例１．２．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.99 (s, 1H), 8.17-8.35 (m, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.71-7.84 (m, 4H), 7.55-7.65 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.28 (d, 2H), 7.21 (t, 1H), 6.99 (s, 2H), 6.83 (d, 1H), 5.97 (s, 1H), 5.28-5.51 (m, 2H), 4.98 (s, 2H), 4.32-4.44 (m, 1H), 4.19 (dd, 1H), 3.97-4.13 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.29 (d, 3H), 3.00 (s, 3H), 2.80-2.98 (m, 4H), 2.18-2.26 (m, 3H), 1.88-2.17 (m, 3H), 0.91-1.73 (m, 23H), 0.74-0.92 (m, 12 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７３．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．４ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＤＪ）の合成
２．４．１ （Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチル（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）アリル）オキシ）シラン
ｔｅｒｔ−ブチルジメチル（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）シラン（５ｇ）及びジクロロメタン（１４．７ｍＬ）を仕込んだフラスコに、窒素雰囲気下４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（３．９４ｇ）を滴下添加した。混合物を室温で１分間撹拌し、次いで窒素でスパージしたＣｐ２ＺｒＣｌＨ（クロリドビス（η５−シクロペンタジエニル）ヒドリドジルコニウム、Ｓｃｈｗａｒｔｚ試薬）（３７９ｍｇ）を含むフラスコにカヌーレにより移した。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を水（１５ｍＬ）で注意深くクエンチし、次いでジエチルエーテル（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、０〜８％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３１６．０（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
ｔｅｒｔ−ブチルジメチル（プロパ−２−イン−１−イルオキシ）シラン（５ｇ）及びジクロロメタン（１４．７ｍＬ）を仕込んだフラスコに、窒素雰囲気下４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（３．９４ｇ）を滴下添加した。混合物を室温で１分間撹拌し、次いで窒素でスパージしたＣｐ２ＺｒＣｌＨ（クロリドビス（η５−シクロペンタジエニル）ヒドリドジルコニウム、Ｓｃｈｗａｒｔｚ試薬）（３７９ｍｇ）を含むフラスコにカヌーレにより移した。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を水（１５ｍＬ）で注意深くクエンチし、次いでジエチルエーテル（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を水（１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、０〜８％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３１６．０（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．４．２ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−ブロモ−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（５ｇ）をアセトニトリル（１００ｍＬ）に溶解した。Ａｇ２Ｏ（２．９２ｇ）を溶液に加え、反応物を室温で５分間撹拌した。４−ブロモ−２−ニトロフェノール（２．７４ｇ）を加え、反応混合物を室温で４時間撹拌した。銀塩残渣を珪藻土に通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１０〜７０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ５５０．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（５ｇ）をアセトニトリル（１００ｍＬ）に溶解した。Ａｇ２Ｏ（２．９２ｇ）を溶液に加え、反応物を室温で５分間撹拌した。４−ブロモ−２−ニトロフェノール（２．７４ｇ）を加え、反応混合物を室温で４時間撹拌した。銀塩残渣を珪藻土に通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１０〜７０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ５５０．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．４．３ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（（Ｅ）−３−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．４．２（１ｇ）、炭酸ナトリウム（０．５９５ｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（Ｐｄ２（ｄｂａ）３）（０．０８６ｇ）及び１，３，５，７−テトラメチル−６−フェニル−２，４，８−トリオキサ−６−ホスファアダマンタン（０．０５５ｇ）を、還流冷却器を装着した５０ｍＬの３ツ口丸底フラスコ中で合わせ、システムを窒素で脱気した。別途、実施例２．４．１（０．７２６ｇ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中溶液を窒素で３０分間脱気した。後者の溶液を、固体試薬を含むフラスコ中にカヌーレにより移し、続いて脱気した水（３ｍＬ）を注射器により加えた。反応物を６０℃に２時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル（３×３０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中０〜３５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ６４３．１（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
実施例２．４．２（１ｇ）、炭酸ナトリウム（０．５９５ｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（Ｐｄ２（ｄｂａ）３）（０．０８６ｇ）及び１，３，５，７−テトラメチル−６−フェニル−２，４，８−トリオキサ−６−ホスファアダマンタン（０．０５５ｇ）を、還流冷却器を装着した５０ｍＬの３ツ口丸底フラスコ中で合わせ、システムを窒素で脱気した。別途、実施例２．４．１（０．７２６ｇ）のテトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中溶液を窒素で３０分間脱気した。後者の溶液を、固体試薬を含むフラスコ中にカヌーレにより移し、続いて脱気した水（３ｍＬ）を注射器により加えた。反応物を６０℃に２時間加熱した。反応混合物を酢酸エチル（３×３０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）との間で分配した。合わせた有機相を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中０〜３５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ６４３．１（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．４．４ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−アミノ−４−（（Ｅ）−３−ヒドロキシプロパ−１−エン−１−イル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
均圧添加漏斗を装着した５００ｍＬの３ツ口フラスコを窒素でフラッシュし、これに亜鉛末（８．７７ｇ）を入れた。実施例２．４．３（８．３９ｇ）のテトラヒドロフラン（６７ｍＬ）中脱気溶液をカヌーレにより加えた。得られた懸濁液を氷浴中で冷却し、次いで反応物の内温が３５℃を超えない速度で、６Ｎ ＨＣｌ水溶液（２２．３ｍＬ）を添加漏斗により滴下添加した。添加が完了した後、反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで珪藻土のパッドに通して濾過し、水及び酢酸エチルですすいだ。水性層が酸性で無くなるまで、濾液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で処理し、混合物を濾過して、得られた固体を除去した。濾液を分液漏斗に移し、層を分離した。水性層を酢酸エチル（３×７５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジエチルエーテルで摩砕し、固体を濾取して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ４８２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
均圧添加漏斗を装着した５００ｍＬの３ツ口フラスコを窒素でフラッシュし、これに亜鉛末（８．７７ｇ）を入れた。実施例２．４．３（８．３９ｇ）のテトラヒドロフラン（６７ｍＬ）中脱気溶液をカヌーレにより加えた。得られた懸濁液を氷浴中で冷却し、次いで反応物の内温が３５℃を超えない速度で、６Ｎ ＨＣｌ水溶液（２２．３ｍＬ）を添加漏斗により滴下添加した。添加が完了した後、反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで珪藻土のパッドに通して濾過し、水及び酢酸エチルですすいだ。水性層が酸性で無くなるまで、濾液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で処理し、混合物を濾過して、得られた固体を除去した。濾液を分液漏斗に移し、層を分離した。水性層を酢酸エチル（３×７５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジエチルエーテルで摩砕し、固体を濾取して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ４８２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．４．５ （９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（３−クロロ−３−オキソプロピル）カルバメート
３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸（５．０ｇ）のジクロロメタン（５３．５ｍＬ）中溶液に、亜硫酸ジクロリド（０．７０３ｍＬ）を加えた。混合物を６０℃で１時間撹拌した。混合物を冷却し、濃縮して、標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。
３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸（５．０ｇ）のジクロロメタン（５３．５ｍＬ）中溶液に、亜硫酸ジクロリド（０．７０３ｍＬ）を加えた。混合物を６０℃で１時間撹拌した。混合物を冷却し、濃縮して、標題化合物を得、これをさらには精製せずに次のステップに使用した。
２．４．６ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（Ｅ）−３−ヒドロキシプロパ−１−エン−１−イル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．４．４（６．７８ｇ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で０℃に冷却した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．６４ｇ）を加え、続いて実施例２．４．５（４．８８ｇ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）中溶液を滴下添加した。氷浴を室温にしながら、反応物を１６時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）を加え、層を分離した。水性層をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）でさらに抽出した。抽出物をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、次いで５〜９５％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、出発物のアニリンと所望の標題化合物との分離できない混合物を得た。この混合物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液（４０ｍＬ）とジエチルエーテル及び酢酸エチルの１：１混合物（４０ｍＬ）との間で分配し、次いで水性相を酢酸エチル（２×２５ｍＬ）でさらに抽出した。有機相を合わせ、水（２×２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ７７４．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．４．４（６．７８ｇ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、溶液を氷浴中で０℃に冷却した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．６４ｇ）を加え、続いて実施例２．４．５（４．８８ｇ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）中溶液を滴下添加した。氷浴を室温にしながら、反応物を１６時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）を加え、層を分離した。水性層をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）でさらに抽出した。抽出物をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮し、次いで５〜９５％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、出発物のアニリンと所望の標題化合物との分離できない混合物を得た。この混合物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液（４０ｍＬ）とジエチルエーテル及び酢酸エチルの１：１混合物（４０ｍＬ）との間で分配し、次いで水性相を酢酸エチル（２×２５ｍＬ）でさらに抽出した。有機相を合わせ、水（２×２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ７７４．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．４．７ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（Ｅ）−３−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）プロパ−１−エン−１−イル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．４．６（３．５７ｇ）をジクロロメタン（４５ｍＬ）に溶解し、ビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（２．８０ｇ）を加え、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．８９６ｇ）を滴下添加した。反応を室温で２時間撹拌した。次いでシリカゲル（２０ｇ）を反応溶液に加え、浴温を２５℃又はそれ未満で維持しながら混合物を減圧下で濃縮乾固した。シリカ残渣をカラムに装填し、粗製物を０〜１００％酢酸エチル−ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、部分的に精製された標題化合物を得、これはニトロフェノールを不純物として含んでいた。この物質をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２５０ｍＬ）で摩砕し、得られたスラリー液を１時間置いた。標題化合物を濾取した。連続する３つのクロップを同様の方法で集めて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ９３９．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．４．６（３．５７ｇ）をジクロロメタン（４５ｍＬ）に溶解し、ビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（２．８０ｇ）を加え、続いてＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．８９６ｇ）を滴下添加した。反応を室温で２時間撹拌した。次いでシリカゲル（２０ｇ）を反応溶液に加え、浴温を２５℃又はそれ未満で維持しながら混合物を減圧下で濃縮乾固した。シリカ残渣をカラムに装填し、粗製物を０〜１００％酢酸エチル−ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、部分的に精製された標題化合物を得、これはニトロフェノールを不純物として含んでいた。この物質をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２５０ｍＬ）で摩砕し、得られたスラリー液を１時間置いた。標題化合物を濾取した。連続する３つのクロップを同様の方法で集めて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ ９３９．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．４．８ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の実施例１．１．１４（３１ｍｇ）及び実施例２．４．７（３３．３ｍｇ）に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５μＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をメタノール（２ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、３Ｍ水酸化リチウム水溶液（０．３５ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で４時間撹拌し、濃縮し、０．１％ＴＦＡ／水中０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎＨＰＬＣシステム（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の実施例１．１．１４（３１ｍｇ）及び実施例２．４．７（３３．３ｍｇ）に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５μＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をメタノール（２ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、３Ｍ水酸化リチウム水溶液（０．３５ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で４時間撹拌し、濃縮し、０．１％ＴＦＡ／水中０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎＨＰＬＣシステム（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。
２．４．９ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．４．８（１９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５ｍＬ）中溶液に、０℃で２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（１０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１１．０８μＬ）を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌し、数滴の酢酸を加えた。混合物を０．１％ＴＦＡ／水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎＨＰＬＣシステム（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.73-7.91 (m, 4H), 7.46 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.08-7.13 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.10-6.25 (m, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.64 (d, 2H), 3.95 (d, 2H), 3.86 (d, 4H), 3.24-3.41 (m, 4H), 2.79-2.96 (m, 6H), 2.54 (t, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.90-1.98 (m, 2H), 1.34-1.52 (m, 6H), 1.20-1.30 (m, 5H), 0.89-1.20 (m, 8H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３９１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．４．８（１９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．５ｍＬ）中溶液に、０℃で２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（１０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１１．０８μＬ）を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌し、数滴の酢酸を加えた。混合物を０．１％ＴＦＡ／水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎＨＰＬＣシステム（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.73-7.91 (m, 4H), 7.46 (s, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.08-7.13 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.10-6.25 (m, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.64 (d, 2H), 3.95 (d, 2H), 3.86 (d, 4H), 3.24-3.41 (m, 4H), 2.79-2.96 (m, 6H), 2.54 (t, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.90-1.98 (m, 2H), 1.34-1.52 (m, 6H), 1.20-1.30 (m, 5H), 0.89-1.20 (m, 8H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３９１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＤＯ）の合成
２．５．１ ３−（１−（（３−（２−（（Ｅ）−４−（３−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−Ｎ−メチルブタ−３−エンアミド）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル）ピコリン酸
実施例２．４．７（９８ｍｇ）及び実施例１．３．２（９１ｍｇ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、水性物をさらに酢酸エチル（２×）で抽出した。合わせた有機物を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７６．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．４．７（９８ｍｇ）及び実施例１．３．２（９１ｍｇ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、水性物をさらに酢酸エチル（２×）で抽出した。合わせた有機物を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７６．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル）ピコリン酸
実施例２．５．１（１５８ｍｇ）のテトラヒドロフラン／メタノール／水（２：１：１、４ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（２０ｍｇ）を加えた。反応混合物を終夜撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、ＴＦＡで酸性化し、ジメチルスルホキシド／メタノール（９ｍＬ）に溶解し、精製用にＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上に装填して、純粋な標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．２（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
実施例２．５．１（１５８ｍｇ）のテトラヒドロフラン／メタノール／水（２：１：１、４ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（２０ｍｇ）を加えた。反応混合物を終夜撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、ＴＦＡで酸性化し、ジメチルスルホキシド／メタノール（９ｍＬ）に溶解し、精製用にＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上に装填して、純粋な標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．２（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．５．３ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５．２（２０ｍｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（６．５ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を終夜撹拌した。反応混合物をメタノール（２ｍＬ）で希釈し、ＴＦＡで酸性化した。混合物を濃縮し、ＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、純粋な標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.25 (s, 2H), 7.85-7.95 (m, 2H), 7.72-7.83 (m, 3H), 7.43 (s, 2H), 7.32-7.37 (m, 1H), 7.17-7.25 (m, 1H), 7.08-7.14 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.82 (d, 1H), 6.56 (d, 1H), 6.08-6.25 (m, 1H), 4.82-4.92 (m, 1H), 4.64 (d, 3H), 4.00-4.11 (m, 4H), 3.81-3.94 (m, 6H), 3.27-3.50 (m, 17H), 3.00 (s, 3H), 2.83-2.96 (m, 3H), 2.53-2.59 (m, 2H), 2.20 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.37-1.55 (m, 4H), 0.90-1.29 (m, 10H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．５．２（２０ｍｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（６．５ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を終夜撹拌した。反応混合物をメタノール（２ｍＬ）で希釈し、ＴＦＡで酸性化した。混合物を濃縮し、ＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、純粋な標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.25 (s, 2H), 7.85-7.95 (m, 2H), 7.72-7.83 (m, 3H), 7.43 (s, 2H), 7.32-7.37 (m, 1H), 7.17-7.25 (m, 1H), 7.08-7.14 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.82 (d, 1H), 6.56 (d, 1H), 6.08-6.25 (m, 1H), 4.82-4.92 (m, 1H), 4.64 (d, 3H), 4.00-4.11 (m, 4H), 3.81-3.94 (m, 6H), 3.27-3.50 (m, 17H), 3.00 (s, 3H), 2.83-2.96 (m, 3H), 2.53-2.59 (m, 2H), 2.20 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.37-1.55 (m, 4H), 0.90-1.29 (m, 10H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＤＰ）の合成
２．６．１ ３−（１−（（３−（２−（（Ｅ）−４−（３−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−３，４，５−トリアセトキシ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）−Ｎ−メチルブタ−３−エンアミド）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−６−イル）ピコリン酸
実施例２．４．７（９８ｍｇ）及び実施例１．２．２（９１ｍｇ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、水性層をさらに酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機物を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５４７．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．４．７（９８ｍｇ）及び実施例１．２．２（９１ｍｇ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、水性層をさらに酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機物を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５４７．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ベンゾ［ｂ］［１，４］オキサジン−６−イル）ピコリン酸
実施例２．５．２において実施例２．６．１を実施例２．５．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２００．１（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
実施例２．５．２において実施例２．６．１を実施例２．５．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２００．１（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．６．３ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５．３において実施例２．６．２を実施例２．５．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.04 (s, 1H), , 8.74 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), , 7.96 (d, 1H), 7.71-7.92 (m, 4H), 7.35-7.48 (m, 3H), 7.23 (t, 1H), 7.11 (d, 1H), 6.96-7.07 (m, 4H), 6.57 (d, 1H), 6.11-6.24 (m, 1H), 4.81-4.93 (m, 1H), 4.65 (d, 2H), 4.32-4.40 (m, 2H), 4.17 (s, 3H), 3.23-3.51 (m, 14H), 2.83-2.98 (m, 3H), 2.54 (t, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.34-1.55 (m, 6H), 0.92-1.31 (m, 13H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４１５．２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．５．３において実施例２．６．２を実施例２．５．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.04 (s, 1H), , 8.74 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), , 7.96 (d, 1H), 7.71-7.92 (m, 4H), 7.35-7.48 (m, 3H), 7.23 (t, 1H), 7.11 (d, 1H), 6.96-7.07 (m, 4H), 6.57 (d, 1H), 6.11-6.24 (m, 1H), 4.81-4.93 (m, 1H), 4.65 (d, 2H), 4.32-4.40 (m, 2H), 4.17 (s, 3H), 3.23-3.51 (m, 14H), 2.83-2.98 (m, 3H), 2.54 (t, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.34-1.55 (m, 6H), 0.92-1.31 (m, 13H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４１５．２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．７ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＨＯ）の合成
２．７．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例２．４．７（２２ｍｇ）及び実施例１．６．３（２０ｍｇ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、水性層をさらに酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機物を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製の標題化合物を得、これをテトラヒドロフラン／メタノール／水（２：１：１、４ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム一水和物（４０ｍｇ）を加え、反応混合物を終夜撹拌した。次いで混合物を真空下で濃縮し、ＴＦＡで酸性化し、ジメチルスルホキシド／メタノールに溶解し、ＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、標題化合物を得た。
実施例２．４．７（２２ｍｇ）及び実施例１．６．３（２０ｍｇ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５４ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、水性層をさらに酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機物を無水硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮して、粗製の標題化合物を得、これをテトラヒドロフラン／メタノール／水（２：１：１、４ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム一水和物（４０ｍｇ）を加え、反応混合物を終夜撹拌した。次いで混合物を真空下で濃縮し、ＴＦＡで酸性化し、ジメチルスルホキシド／メタノールに溶解し、ＨＰＬＣ（水中０．１％ＴＦＡ中の１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム）上で精製して、標題化合物を得た。
２．７．２ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５．３において実施例２．７．１を実施例２．５．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.09 (s, 1H), 9.02 (s, 2H), 8.37 (d, 1H), 8.12-8.29 (m, 4H), 8.06 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.76-7.89 (m, 2H), 7.70 (t, 1H), 7.43-7.54 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.00-7.13 (m, 2H), 6.98 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.08-6.25 (m, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.64 (d, 2H), 3.81-3.94 (m, 6H), 3.18-3.51 (m, 12H), 2.78-2.96 (m, 4H), 2.49-2.59 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), , 2.03 (t, 2H), 1.33-1.54 (m, 6H), 0.93-1.30 (m, 12H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０８．３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．５．３において実施例２．７．１を実施例２．５．２の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.09 (s, 1H), 9.02 (s, 2H), 8.37 (d, 1H), 8.12-8.29 (m, 4H), 8.06 (s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.76-7.89 (m, 2H), 7.70 (t, 1H), 7.43-7.54 (m, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.00-7.13 (m, 2H), 6.98 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.08-6.25 (m, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.64 (d, 2H), 3.81-3.94 (m, 6H), 3.18-3.51 (m, 12H), 2.78-2.96 (m, 4H), 2.49-2.59 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), , 2.03 (t, 2H), 1.33-1.54 (m, 6H), 0.93-1.30 (m, 12H), 0.82 (d, 6 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０８．３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．８ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１〜３，７〜］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（オキセタン−３−イル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＩＴ）の合成
２．８．１ ３−（１−（（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（オキセタン−３−イル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸、トリフルオロ酢酸
実施例１．１６．７（０．０３９ｇ）及び実施例２．４．７（０．０４８ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０３７ｍＬ）を加え、反応物を室温で２日間撹拌した。反応物を濃縮し、残渣をメタノール（０．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）の混合物に再度溶解し、水（０．５ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（０．０２７ｇ）で処理し、溶液を室温で撹拌した。１時間撹拌した後、反応物をトリフルオロ酢酸（０．０６６ｍＬ）でクエンチし、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）で希釈し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中１０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用するＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。
実施例１．１６．７（０．０３９ｇ）及び実施例２．４．７（０．０４８ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０３７ｍＬ）を加え、反応物を室温で２日間撹拌した。反応物を濃縮し、残渣をメタノール（０．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）の混合物に再度溶解し、水（０．５ｍＬ）中の水酸化リチウム一水和物（０．０２７ｇ）で処理し、溶液を室温で撹拌した。１時間撹拌した後、反応物をトリフルオロ酢酸（０．０６６ｍＬ）でクエンチし、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）で希釈し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中１０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用するＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。
２．８．２ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（オキセタン−３−イル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．８．１（０．０２４ｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（８．９５ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０１７ｍＬ）を加え、反応物を室温で２時間撹拌した。反応物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及び水（１ｍＬ）で希釈し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中１０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用するＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.86 (t, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.56-7.39 (m, 3H), 7.39-7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.14-6.89 (m, 5H), 6.56 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.83 (t, 1H), 4.63 (t, 2H), 4.54 (t, 1H), 3.93-3.83 (m, 6H), 3.83-3.75 (m, 4H), 3.33 (dt, 10H), 2.99 (t, 2H), 2.54 (d, 2H), 2.08 (d, 3H), 2.02 (t, 2H), 1.54-0.72 (m, 26H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４３３．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．８．１（０．０２４ｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（８．９５ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０１７ｍＬ）を加え、反応物を室温で２時間撹拌した。反応物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）及び水（１ｍＬ）で希釈し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中１０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用するＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.86 (t, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.56-7.39 (m, 3H), 7.39-7.30 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.14-6.89 (m, 5H), 6.56 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.83 (t, 1H), 4.63 (t, 2H), 4.54 (t, 1H), 3.93-3.83 (m, 6H), 3.83-3.75 (m, 4H), 3.33 (dt, 10H), 2.99 (t, 2H), 2.54 (d, 2H), 2.08 (d, 3H), 2.02 (t, 2H), 1.54-0.72 (m, 26H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４３３．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．９ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＫＡ）の合成
２．９．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．１２．１０（１５０ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）に溶解し、実施例２．４．７（１９０ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．３０ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。さらに実施例２．４．７（７０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ）を加え、反応物をさらに１日間撹拌した。次いで反応物を濃縮し、残渣をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）に溶解し、次いで１．９４Ｎ水酸化リチウム一水和物水溶液（１．０ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２７０．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１２．１０（１５０ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）に溶解し、実施例２．４．７（１９０ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．３０ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。さらに実施例２．４．７（７０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ）を加え、反応物をさらに１日間撹拌した。次いで反応物を濃縮し、残渣をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）に溶解し、次いで１．９４Ｎ水酸化リチウム一水和物水溶液（１．０ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２７０．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．９．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３−（３−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）プロパンアミド）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．９．１（１６ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解し、次いで２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（５ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１１μＬ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.71 (v br s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.87 (br m, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.08 (d, 1H), 7.03 (m, 2H), 6.98 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計16H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.45 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．９．１（１６ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解し、次いで２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（５ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１１μＬ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.71 (v br s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.87 (br m, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.08 (d, 1H), 7.03 (m, 2H), 6.98 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計16H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.45 (m, 6H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．１０ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＫＢ）の合成
実施例２．９．１（１６ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解し、次いで２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセテート（４ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１１μＬ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.06 (s, 1H), 8.25 (br m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 7.03 (m, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 4.02 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.57 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０７．４（Ｍ−１）−。
実施例２．９．１（１６ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解し、次いで２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセテート（４ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１１μＬ）を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.06 (s, 1H), 8.25 (br m, 2H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.11 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 7.03 (m, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 4.02 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.57 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.77-0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０７．４（Ｍ−１）−。
２．１１ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＫＴ）の合成
２．１１．１ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−ホルミル−３−ヒドロキシフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１５ｇ）及び（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０ｇ）をアセトニトリルに溶解し、続いて炭酸銀（１０ｇ）を加え、反応物を４９℃に加熱した。４時間撹拌した後、反応物を冷却し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をジクロロメタン中で懸濁させ、珪藻土に通して濾過し、濃縮した。残渣を酢酸エチル／ヘプタンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１５ｇ）及び（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１０ｇ）をアセトニトリルに溶解し、続いて炭酸銀（１０ｇ）を加え、反応物を４９℃に加熱した。４時間撹拌した後、反応物を冷却し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をジクロロメタン中で懸濁させ、珪藻土に通して濾過し、濃縮した。残渣を酢酸エチル／ヘプタンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２．１１．２ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．１１．１（１６．１２ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）及びメタノール（２００ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（１．４７６ｇ）を少しずつ加えた。反応物を２０分間撹拌し、水：飽和重炭酸ナトリウム水溶液の１：１混合物（４００ｍＬ）でクエンチした。得られた固体を濾別し、酢酸エチルですすいだ。相を分離し、水性層を酢酸エチルで４回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４７３．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
実施例２．１１．１（１６．１２ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）及びメタノール（２００ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（１．４７６ｇ）を少しずつ加えた。反応物を２０分間撹拌し、水：飽和重炭酸ナトリウム水溶液の１：１混合物（４００ｍＬ）でクエンチした。得られた固体を濾別し、酢酸エチルですすいだ。相を分離し、水性層を酢酸エチルで４回抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４７３．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．１１．３ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−ヒドロキシフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
ジクロロメタン（１６８ｍＬ）中の実施例２．１１．２（７．６６ｇ）及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（２．７８ｇ）に、−５℃でイミダゾール（２．６３ｇ）を加え、反応物を終夜撹拌して、反応物の内温を１２℃に加温した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液中に注ぎ入れ、ジクロロメタンで４回抽出した。合わせた有機物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５９３．０（Ｍ＋Ｎａ）＋。
ジクロロメタン（１６８ｍＬ）中の実施例２．１１．２（７．６６ｇ）及びｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド（２．７８ｇ）に、−５℃でイミダゾール（２．６３ｇ）を加え、反応物を終夜撹拌して、反応物の内温を１２℃に加温した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液中に注ぎ入れ、ジクロロメタンで４回抽出した。合わせた有機物をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５９３．０（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．１１．４ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
トルエン（８８ｍＬ）中の実施例２．１１．３（５．０３ｇ）及びトリフェニルホスフィン（４．６２ｇ）に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−アゾジカルボキシレート（４．０６ｇ）を加え、反応物を３０分間撹拌した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメートを加え、反応物をさらに１．５時間撹拌した。反応物をシリカゲル上に直接装填し、ヘプタン／酢酸エチルで溶出して、標題化合物を得た。
トルエン（８８ｍＬ）中の実施例２．１１．３（５．０３ｇ）及びトリフェニルホスフィン（４．６２ｇ）に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−アゾジカルボキシレート（４．０６ｇ）を加え、反応物を３０分間撹拌した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル）カルバメートを加え、反応物をさらに１．５時間撹拌した。反応物をシリカゲル上に直接装填し、ヘプタン／酢酸エチルで溶出して、標題化合物を得た。
２．１１．５ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．１１．４（４．２９ｇ）を、酢酸：水：テトラヒドロフランの３：１：１溶液（１００ｍＬ）中で終夜撹拌した。反応物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液中に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例２．１１．４（４．２９ｇ）を、酢酸：水：テトラヒドロフランの３：１：１溶液（１００ｍＬ）中で終夜撹拌した。反応物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液中に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。粗製の標題化合物をヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２．１１．６ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．１１．５（０．５９５ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．４９２ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．２１２ｍＬ）を加えた。１．５時間後、反応物を高真空下で濃縮した。反応物をシリカゲル上に直接装填し、ヘプタン／酢酸エチルを使用して溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２２．９（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．１１．５（０．５９５ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．４９２ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．２１２ｍＬ）を加えた。１．５時間後、反応物を高真空下で濃縮した。反応物をシリカゲル上に直接装填し、ヘプタン／酢酸エチルを使用して溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２２．９（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．１１．７ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．１２．１０（１５０ｍｇ）をジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）に溶解した。実施例２．１１．６（１９０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３０ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。次いでさらに実施例２．１１．６（７０ｍｇ）及びさらにＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ）を加え、反応物をさらに２４時間撹拌した。次いで反応物を濃縮し、残渣をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）に溶解し、次いで１．９４Ｎ水酸化リチウム一水和物水溶液（１．０ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２６１．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１２．１０（１５０ｍｇ）をジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）に溶解した。実施例２．１１．６（１９０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３０ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。次いでさらに実施例２．１１．６（７０ｍｇ）及びさらにＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ）を加え、反応物をさらに２４時間撹拌した。次いで反応物を濃縮し、残渣をテトラヒドロフラン（２ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）に溶解し、次いで１．９４Ｎ水酸化リチウム一水和物水溶液（１．０ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２６１．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．１１．８ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−（２−（２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）エトキシ）エトキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７（１９ｍｇ）をジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解し、次いで２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノエート（６ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１３μＬ）を加えた。反応物を室温で３時間撹拌し、次いで０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.00 (m, 2H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.60 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 3H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．７（１９ｍｇ）をジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解し、次いで２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノエート（６ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１３μＬ）を加えた。反応物を室温で３時間撹拌し、次いで０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.00 (m, 2H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.60 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 3H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．１２ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［（｛（２Ｅ）−３−［４−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−３−（｛３−［（｛［（２Ｅ）−３−（４−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−３−［（３−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝プロパノイル）アミノ］フェニル）プロパ−２−エン−１−イル］オキシ｝カルボニル）アミノ］プロパノイル｝アミノ）フェニル］プロパ−２−エン−１−イル｝オキシ）カルボニル］（２−メトキシエチル）アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（シントンＫＵ）の合成
２．１２．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．９．１を合成する間、標題化合物を副生成物として単離した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １７０８．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．９．１を合成する間、標題化合物を副生成物として単離した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １７０８．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．１２．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３−（３−（（（（（Ｅ）−３−（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３−（３−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）プロパンアミド）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．８において実施例２．１２．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.99 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.17 (br s, 2H), 8.00 (br t, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.70 (dd, 2H), 7.41 (m, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.04 (br d, 2H), 6.97 (d, 2H), 6.93 (m, 2H), 6.89 (s, 2H), 6.52 (d, 1H), 6.49 (d, 1H), 6.11 (m, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.80 (m, 2H), 4.56 (m, 4H), 3.83 (m, 7H), 3.72 (br d, 2H), 3.53 (m, 2H), 3.45-3.28 (m, 28H), 3.15 (s, 3H), 2.74 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 2.26 (t, 2H), 2.02 (s, 3H), 1.28 (br d, 2H), 1.17 (m, 4H), 1.02 (m, 4H), 0.89 (m, 2H), 0.2 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １８５９．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．１２．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.99 (s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.17 (br s, 2H), 8.00 (br t, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.70 (dd, 2H), 7.41 (m, 2H), 7.27 (t, 1H), 7.04 (br d, 2H), 6.97 (d, 2H), 6.93 (m, 2H), 6.89 (s, 2H), 6.52 (d, 1H), 6.49 (d, 1H), 6.11 (m, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.80 (m, 2H), 4.56 (m, 4H), 3.83 (m, 7H), 3.72 (br d, 2H), 3.53 (m, 2H), 3.45-3.28 (m, 28H), 3.15 (s, 3H), 2.74 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 2.26 (t, 2H), 2.02 (s, 3H), 1.28 (br d, 2H), 1.17 (m, 4H), 1.02 (m, 4H), 0.89 (m, 2H), 0.2 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １８５９．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．１３ ４−［（｛［２−（２−｛２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェノキシ｝エトキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＫＶ）の合成
２．１３．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７を合成する間、標題化合物を副生成物として単離した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １６９０．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．７を合成する間、標題化合物を副生成物として単離した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １６９０．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．１３．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−（２−（２−（（（（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−（２−（２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）エトキシ）エトキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．８において実施例２．１３．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.00 (m, 2H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (m, 3H), 6.99 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.66 (m, 2H), 6.60 (m, 2H), 5.07 (m, 2H) 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.09 (m, 4H), 3.90 (m, 7H), 3.80 (br d, 4H), 3.71 (m, 4H), 3.59 (t, 2H), 3.48, 3.44, 3.38 (全m, 計14H), 3.28 (m, 7H), 3.16 (m, 7H), 2.81 (br m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.35 (br d, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １８４２．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．１３．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.00 (m, 2H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (m, 3H), 6.99 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.66 (m, 2H), 6.60 (m, 2H), 5.07 (m, 2H) 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.93 (s, 2H), 4.09 (m, 4H), 3.90 (m, 7H), 3.80 (br d, 4H), 3.71 (m, 4H), 3.59 (t, 2H), 3.48, 3.44, 3.38 (全m, 計14H), 3.28 (m, 7H), 3.16 (m, 7H), 2.81 (br m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.35 (br d, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １８４２．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．１４ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＫＷ）の合成
実施例２．１１．８において２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセテートを２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノエートの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.73 (v br s, 1H), 8.21 (br t, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.99 (t, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.60 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 4.02 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 3H), 3.71 (m, 2H), 3.48 (t, 2H), 3.39 (m, 6H), 3.28, 3.21 (共にm, 8H), 2.82 (br m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.831 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３９８．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセテートを２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノエートの代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.73 (v br s, 1H), 8.21 (br t, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.99 (t, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.60 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 4.02 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 3H), 3.71 (m, 2H), 3.48 (t, 2H), 3.39 (m, 6H), 3.28, 3.21 (共にm, 8H), 2.82 (br m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.831 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３９８．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．１５ ６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛［３４−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−メチル−４，３２−ジオキソ−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−３，３１−ジアザテトラトリアコンタ−１−イル］オキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸（シントンＤＣ）の合成
実施例１．１．１４（３０ｍｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−オキソ−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−４−アザヘントリアコンタン−３１−オエート（ＭＡＬ−ｄＰＥＧ８−ＮＨＳ−エステル）（４０．８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中混合物に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４８μＬ）を加えた。混合物を０℃で２０分間及び室温で１０分間撹拌した。酢酸（２３μＬ）を加え、混合物を０．１％ＴＦＡ／水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１．１４（３０ｍｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−オキソ−７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８−オクタオキサ−４−アザヘントリアコンタン−３１−オエート（ＭＡＬ−ｄＰＥＧ８−ＮＨＳ−エステル）（４０．８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中混合物に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４８μＬ）を加えた。混合物を０℃で２０分間及び室温で１０分間撹拌した。酢酸（２３μＬ）を加え、混合物を０．１％ＴＦＡ／水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．１６ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＫＺ）の合成
２．１６．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７において実施例１．１３．１２を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２００（Ｍ＋Ｈ）＋、１１９８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．７において実施例１．１３．１２を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２００（Ｍ＋Ｈ）＋、１１９８（Ｍ−Ｈ）−。
２．１６．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１１．８において実施例２．１６．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.06 (bs, 2H), 8.04 (d, 1H), 8.01 (t, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.78 (dd, 2H), 7.53 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (t, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.65 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.07 (d, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.92 (1H), 4.09 (m, 2H), 3.96 (t, 2H), 3.90 (d, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.70 (m, 6H), 3.60 (m, 6H), 3.43 (t, 2H), 3.39 (t, 2H), 3.33 (t, 1H), 3.28 (dd, 1H), 3.16 (m, 4H), 3.03 (q, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (s, 2H), 1.25 (q, 4H), 1.11 (q, 4H), 1.00 (dd, 2H), 0.83 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５１（Ｍ＋Ｈ）＋、１３４９（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．１６．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.06 (bs, 2H), 8.04 (d, 1H), 8.01 (t, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.78 (dd, 2H), 7.53 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (t, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.65 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.07 (d, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.92 (1H), 4.09 (m, 2H), 3.96 (t, 2H), 3.90 (d, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.70 (m, 6H), 3.60 (m, 6H), 3.43 (t, 2H), 3.39 (t, 2H), 3.33 (t, 1H), 3.28 (dd, 1H), 3.16 (m, 4H), 3.03 (q, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (s, 2H), 1.25 (q, 4H), 1.11 (q, 4H), 1.00 (dd, 2H), 0.83 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５１（Ｍ＋Ｈ）＋、１３４９（Ｍ−Ｈ）−。
２．１７ ４−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＬＷ）の合成
実施例２．１１．８において実施例２．９．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.25 (br m, 1H), 8.05 (br t, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.96 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４２１．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．９．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.03 (s, 1H), 8.25 (br m, 1H), 8.05 (br t, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.96 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４２１．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．１８ Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド（シントンＬＹ）の合成
２．１８．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）プロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（２９ｍｇ）及び２−（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（２８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．７ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１３ｍＬ）を加えた。２分間撹拌した後、反応物を室温で実施例２．９．１（７０ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０３５ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中溶液に加え、混合物を３時間撹拌した。ジエチルアミン（０．０３５ｍＬ）を反応物に加え、撹拌をさらに２時間続けた。反応物を水（１ｍＬ）で希釈し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４２１．４（Ｍ−Ｈ）。
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（２９ｍｇ）及び２−（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルイソウロニウムヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（２８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．７ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１３ｍＬ）を加えた。２分間撹拌した後、反応物を室温で実施例２．９．１（７０ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０３５ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中溶液に加え、混合物を３時間撹拌した。ジエチルアミン（０．０３５ｍＬ）を反応物に加え、撹拌をさらに２時間続けた。反応物を水（１ｍＬ）で希釈し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中１０〜８５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用する分取ＨＰＬＣにより精製した。所望のフラクションを合わせ、凍結乾固して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４２１．４（Ｍ−Ｈ）。
２．１８．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３−（３−（（Ｒ）−２−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド）−３−スルホプロパンアミド）プロパンアミド）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１０において実施例２．１８．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.12 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.22 (br m, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.97 (br t, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 4.32 (m, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 4H), 2.53 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５５８．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１０において実施例２．１８．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.12 (s, 1H), 8.32 (d, 1H), 8.22 (br m, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.97 (br t, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 4.32 (m, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 4H), 2.53 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５５８．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．１９ Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド（シントンＬＺ）の合成
実施例２．１１．８において実施例２．１８．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.12 (s, 1H), 8.22 (br m, 1H), 8.07 (br d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.89 (br t, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.96 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 4.32 (m, 1H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 4H), 2.53 (m, 2H), 2.37 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５７２．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．１８．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.12 (s, 1H), 8.22 (br m, 1H), 8.07 (br d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.89 (br t, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.96 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 4.32 (m, 1H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 4H), 2.53 (m, 2H), 2.37 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５７２．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２０ Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド（シントンＭＢ）の合成
２．２０．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（３−（３−（３−アミノプロパンアミド）プロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸を（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３４１．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸を（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３４１．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２０．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（（Ｅ）−３−（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−３−（３−（３−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド）プロパンアミド）プロパンアミド）フェニル）アリル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１０において実施例２．２０．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.06 (s, 1H), 8.25 (br m, 1H), 8.14 (br t 1H), 8.01 (d, 1H), 7.99 (br m, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.25 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 2.23 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４７８．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１０において実施例２．２０．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.06 (s, 1H), 8.25 (br m, 1H), 8.14 (br t 1H), 8.01 (d, 1H), 7.99 (br m, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.25 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 2.23 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４７８．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２１ Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル−Ｎ−｛５−［（１Ｅ）−３−（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）プロパ−１−エン−１−イル］−２−（β−Ｄ−グルコピラヌロノシルオキシ）フェニル｝−β−アラニンアミド（シントンＭＣ）の合成
実施例２．１１．８において実施例２．２０．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.06 (s, 1H), 8.25 (br m, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.94 (br m, 2H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 3.18 (m, 2H), 2.80 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 2.29 (t, 2H), 2.20 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４９２．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．２０．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.06 (s, 1H), 8.25 (br m, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.94 (br m, 2H), 7.76 (t, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.05 (m, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.56 (d, 1H), 6.17 (m,1H), 5.00 (s, 2H), 4.86 (br m, 1 H), 4.64 (d, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.79 (br m, 2H), 3.60 (t, 2H), 3.43, 3.35 (m, m, 計14H), 3.22 (s, 3H), 3.18 (m, 2H), 2.80 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 2.29 (t, 2H), 2.20 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.37 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.82, 0.77 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４９２．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＭＥ）の合成
２．２２．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において実施例２．１１．７を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において実施例２．１１．７を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．２２．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−（２−（２−（（Ｒ）−２−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド）−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１０において実施例２．２２．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.32 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (m, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 7.00 (m, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５４９．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１０において実施例２．２２．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.32 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (m, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 7.00 (m, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５４９．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２３ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＭＦ）の合成
実施例２．１１．８において実施例２．２２．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (m, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.33 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．２２．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (m, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.33 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２４ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−β−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＭＨ）の合成
２．２４．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（３−アミノプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸を（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸及び実施例２．１１．７を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３３２．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸を（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸及び実施例２．１１．７を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３３２．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２４．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−（２−（２−（３−（２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド）プロパンアミド）エトキシ）エトキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１０において実施例２．２４．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.14 (t, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.92 (t,1H), 7.76 (t, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 7.00 (m, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 6H), 2.82 (br m, 2H), 2.24 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４６９．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１０において実施例２．２４．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.14 (t, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.92 (t,1H), 7.76 (t, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 7.00 (m, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 6H), 2.82 (br m, 2H), 2.24 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４６９．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２５ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＭＩ）の合成
実施例２．１１．８において実施例２．２４．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.94 (t,1H), 7.88 (t, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 6H), 2.82 (br m, 2H), 2.30 (t, 2H), 2.20 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４８３．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．２４．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.94 (t,1H), 7.88 (t, 1H), 7.76 (t, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 6H), 2.82 (br m, 2H), 2.30 (t, 2H), 2.20 (t, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４８３．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２６ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＮＪ）の合成
２．２６．１ ４−（２−（２−ブロモエトキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド
２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１．０ｇ）、１−ブロモ−２−（２−ブロモエトキシ）エタン（３．４ｇ）及び炭酸カリウム（１．０ｇ）の溶液を、アセトニトリル（３０ｍＬ）中で共に撹拌し、７５℃に加熱した。２日間撹拌した後、反応物を冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。５〜３０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配を使用して溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ２９０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（１．０ｇ）、１−ブロモ−２−（２−ブロモエトキシ）エタン（３．４ｇ）及び炭酸カリウム（１．０ｇ）の溶液を、アセトニトリル（３０ｍＬ）中で共に撹拌し、７５℃に加熱した。２日間撹拌した後、反応物を冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。５〜３０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配を使用して溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ２９０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．２６．２ ４−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシベンズアルデヒド
実施例２．２６．１（１．２６ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中溶液に、アジ化ナトリウム（０．４３ｇ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。反応物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。ヘプタン中５〜３０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ２５１．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．２６．１（１．２６ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中溶液に、アジ化ナトリウム（０．４３ｇ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。反応物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。ヘプタン中５〜３０％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ２５１．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．２６．３ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−２−ホルミルフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．２６．２（０．８４ｇ）、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１．９９ｇ）及び酸化銀（Ｉ）（１．１６ｇ）の溶液をアセトニトリル（１５ｍＬ）中で共に撹拌した。終夜撹拌した後、反応物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、珪藻土を加え、反応物を濾過し、濃縮した。ヘプタン中５〜７５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例２．２６．２（０．８４ｇ）、（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（１．９９ｇ）及び酸化銀（Ｉ）（１．１６ｇ）の溶液をアセトニトリル（１５ｍＬ）中で共に撹拌した。終夜撹拌した後、反応物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、珪藻土を加え、反応物を濾過し、濃縮した。ヘプタン中５〜７５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２．２６．４ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．２６．３（０．６９５ｇ）のメタノール（５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中溶液を０℃に冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（０．０２３ｇ）を加え、反応物を室温に加温した。合計１時間撹拌した後、反応物を酢酸エチル（７５ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）の混合物中に注ぎ入れ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。５〜８５％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ５５１．８（Ｍ−Ｈ２Ｏ）−。
実施例２．２６．３（０．６９５ｇ）のメタノール（５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中溶液を０℃に冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（０．０２３ｇ）を加え、反応物を室温に加温した。合計１時間撹拌した後、反応物を酢酸エチル（７５ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）の混合物中に注ぎ入れ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。５〜８５％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ５５１．８（Ｍ−Ｈ２Ｏ）−。
２．２６．５ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の実施例２．２６．４（０．４６５ｇ）に、５０ｍＬの圧力ボトル中５％Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ）を加え、混合物を３０ｐｓｉの水素で１６時間振盪した。次いで反応物を濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ５４４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の実施例２．２６．４（０．４６５ｇ）に、５０ｍＬの圧力ボトル中５％Ｐｄ／Ｃ（０．１ｇ）を加え、混合物を３０ｐｓｉの水素で１６時間振盪した。次いで反応物を濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ５４４．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．２６．６ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．２６．５（０．４４３ｇ）のジクロロメタン（８ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、次いでＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２１４ｍＬ）及び（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（０．１９０ｇ）を加えた。１時間後、反応物を濃縮し、５〜９５％酢酸エチル／ヘプタンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ７４８．１５（Ｍ−ＯＨ）−。
実施例２．２６．５（０．４４３ｇ）のジクロロメタン（８ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、次いでＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２１４ｍＬ）及び（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（０．１９０ｇ）を加えた。１時間後、反応物を濃縮し、５〜９５％酢酸エチル／ヘプタンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＬＳＤ）ｍ／ｅ ７４８．１５（Ｍ−ＯＨ）−。
２．２６．７ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（２−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）エトキシ）−２−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．２６．６（０．４４４ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５２ｍＬ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．３５３ｇ）を加え、反応物を室温で撹拌した。５時間後、反応物を濃縮し、残渣を５〜９０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例２．２６．６（０．４４４ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５２ｍＬ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．３５３ｇ）を加え、反応物を室温で撹拌した。５時間後、反応物を濃縮し、残渣を５〜９０％酢酸エチル／ヘプタンで溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２．２６．８ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．１２．１０（３６０ｍｇ）をジメチルホルムアミド（２．５ｍＬ）に溶解した。実施例２．２６．７（４５０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３５ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。次いで反応物を濃縮し、残渣をテトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）及びメタノール（２．５ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム一水和物水溶液（１．９４Ｎ、２．２ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２６１．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１２．１０（３６０ｍｇ）をジメチルホルムアミド（２．５ｍＬ）に溶解した。実施例２．２６．７（４５０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３５ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌した。次いで反応物を濃縮し、残渣をテトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）及びメタノール（２．５ｍＬ）に溶解した。水酸化リチウム一水和物水溶液（１．９４Ｎ、２．２ｍＬ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌した。０．１％ＴＦＡ／水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２６１．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．２６．９ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において実施例２．２６．８を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において実施例２．２６．８を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １４１２．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．２６．１０ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−４−（２−（２−（（Ｒ）−２−（３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパンアミド）−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．８において実施例２．２６．９を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (t, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.70 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.33 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．２６．９を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (t, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.70 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.33 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 10H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２７ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＮＫ）の合成
実施例２．９．２において実施例２．２６．９を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (t, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.70 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.33 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.46 (br m, 4H) 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 12H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １６０５．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．９．２において実施例２．２６．９を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.70 (v br s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.76 (t, 3H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.00 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.70 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (br m, 4H), 3.71 (m, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.44, 3.38 (共にm, 計8H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (br m, 3H), 2.72 (m, 1H), 2.33 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.46 (br m, 4H) 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 12H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １６０５．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．２８ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［３−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）プロポキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＮＬ）の合成
２．２８．１ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロポキシ）−４−ホルミルフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（３−ヒドロキシプロピル）カルバメート（０．２４５ｇ）及びトリフェニルホスフィン（０．２１６ｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中溶液に、０℃でジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１６０ｍＬ）を滴下添加した。１５分間撹拌した後、実施例２．１１．１（０．２５０ｇ）を加え、氷浴を除去し、反応物を室温に加温した。２時間後、反応物を濃縮し、シリカゲル上に装填し、５〜７０％酢酸エチル／ヘキサンの濃度勾配を使用して溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ５１２．０（Ｍ−ＦＭＯＣ）−。
（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（３−ヒドロキシプロピル）カルバメート（０．２４５ｇ）及びトリフェニルホスフィン（０．２１６ｇ）のテトラヒドロフラン（２ｍＬ）中溶液に、０℃でジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．１６０ｍＬ）を滴下添加した。１５分間撹拌した後、実施例２．１１．１（０．２５０ｇ）を加え、氷浴を除去し、反応物を室温に加温した。２時間後、反応物を濃縮し、シリカゲル上に装填し、５〜７０％酢酸エチル／ヘキサンの濃度勾配を使用して溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ５１２．０（Ｍ−ＦＭＯＣ）−。
２．２８．２ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロポキシ）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．２８．１（０．２３３ｇ）のメタノール（３ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中懸濁液に、水素化ホウ素ナトリウム（６ｍｇ）を加えた。３０分後、反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）中に注ぎ入れ、続いて重炭酸ナトリウム（５ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。５〜８０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７１８．１（Ｍ−ＯＨ）−。
実施例２．２８．１（０．２３３ｇ）のメタノール（３ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１ｍＬ）中懸濁液に、水素化ホウ素ナトリウム（６ｍｇ）を加えた。３０分後、反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）中に注ぎ入れ、続いて重炭酸ナトリウム（５ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、ブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。５〜８０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより、標題化合物を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ）ｍ／ｅ ７１８．１（Ｍ−ＯＨ）−。
２．２８．３ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロポキシ）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．２８．２（０．１４０ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．１１６ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５０ｍＬ）を加えた。１．５時間後、反応物を高真空下で濃縮し、シリカゲル上に装填し、１０〜７０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配を使用して溶出して、標題化合物を得た。
実施例２．２８．２（０．１４０ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．１１６ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０５０ｍＬ）を加えた。１．５時間後、反応物を高真空下で濃縮し、シリカゲル上に装填し、１０〜７０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配を使用して溶出して、標題化合物を得た。
２．２８．４ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（３−アミノプロポキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．２６．８において実施例２．２８．３を実施例２．２６．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １２３１．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．２６．８において実施例２．２８．３を実施例２．２６．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １２３１．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．２８．５ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）プロポキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において実施例２．２８．４を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３８２．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において実施例２．２８．４を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３８２．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．２８．６ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−（３−（（Ｒ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−スルホプロパンアミド）プロポキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．９．２において実施例２．２８．５を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.01 (d, 1H), 7.85 (m, 2H), 7.76 (m, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.00 (m, 3H), 6.97 (s, 2H), 6.64 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 5.04 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.28 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (m, 2H), 3.71 (m, 2H), 3.37 (m, 8H), 3.27 (m, 4H), 3.17 (m, 4H), 2.90-2.65 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 2.05 (t, 2H), 1.81 (m, 2H), 1.46 (br m, 4H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 12H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５７５．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．９．２において実施例２．２８．５を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.01 (d, 1H), 7.85 (m, 2H), 7.76 (m, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.00 (m, 3H), 6.97 (s, 2H), 6.64 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 5.04 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.28 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (m, 2H), 3.71 (m, 2H), 3.37 (m, 8H), 3.27 (m, 4H), 3.17 (m, 4H), 2.90-2.65 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 2.05 (t, 2H), 1.81 (m, 2H), 1.46 (br m, 4H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 12H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５７５．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．２９ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［３−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）プロポキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＮＭ）の合成
２．２９．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（３−アミノプロポキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．２６．８において実施例２．２８．３を実施例２．２６．７及び実施例１．９．１１を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １１８７．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．２６．８において実施例２．２８．３を実施例２．２６．７及び実施例１．９．１１を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １１８７．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．２９．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）プロポキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において実施例２．２９．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３３８．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において実施例２．２９．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３３８．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．２９．３ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）−２−（３−（（Ｒ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−スルホプロパンアミド）プロポキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．９．２において実施例２．２９．２を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.01 (d, 1H), 7.85 (m, 2H), 7.76 (m, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.00 (m, 3H), 6.97 (s, 2H), 6.64 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 5.04 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.28 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (m, 2H), 3.44 (m, 6H), 3.28 (m, 4H), 3.17 (m, 2H), 2.90-2.65 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 2.05 (t, 2H), 1.81 (m, 2H), 1.46 (br m, 4H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 12H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５３１．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．９．２において実施例２．２９．２を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.01 (d, 1H), 7.85 (m, 2H), 7.76 (m, 2H), 7.52 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.00 (m, 3H), 6.97 (s, 2H), 6.64 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 5.04 (br m, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.28 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.88 (m, 6H), 3.80 (m, 2H), 3.44 (m, 6H), 3.28 (m, 4H), 3.17 (m, 2H), 2.90-2.65 (m, 4H), 2.09 (s, 3H), 2.05 (t, 2H), 1.81 (m, 2H), 1.46 (br m, 4H), 1.33 (br m, 2H), 1.28-0.90 (m, 12H), 0.84, 0.81 (共にs, 計6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５３１．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．３０ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［（３Ｓ）−１−｛８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−２−［６−カルボキシ−５−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−イル｝ピロリジン−３−イル］カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｌ−アラニンアミド（シントンＮＲ）の合成
実施例１．１７．１０（４０ｍｇ）をジメチルスルホキシド（０．３ｍＬ）に溶解し、４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート（３１ｍｇ）及びトリエチルアミン（３３μＬ）を加えた。反応混合物を室温で７２時間撹拌し、０．１％ＴＦＡ水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５７．４（Ｍ＋Ｈ）＋、１３５５．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１７．１０（４０ｍｇ）をジメチルスルホキシド（０．３ｍＬ）に溶解し、４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート（３１ｍｇ）及びトリエチルアミン（３３μＬ）を加えた。反応混合物を室温で７２時間撹拌し、０．１％ＴＦＡ水中１０〜９０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５７．４（Ｍ＋Ｈ）＋、１３５５．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．３１ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−スルファモイルエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（シントンＥＢ）の合成
先の実施例に記載した通りに標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.00-8.09 (m, 2H), 7.78 (t, 2H), 7.61 (t, 3H), 7.40-7.53 (m, 3H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.25-7.30 (m, 3H), 6.86-7.00 (m, 5H), 5.99 (s, 1H), 4.86-5.10 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 4.10-4.26 (m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.33-3.39 (m, 2H), 3.30 (d, 2H), 3.18-3.26 (m, 2H), 2.88-3.06 (m, 5H), 2.04-2.24 (m, 5H), 1.87-2.00 (m, 1H), 1.28-1.74 (m, 10H), 0.89-1.27 (m, 12H), 0.74-0.87 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４５１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
先の実施例に記載した通りに標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.98 (s, 1H), 8.00-8.09 (m, 2H), 7.78 (t, 2H), 7.61 (t, 3H), 7.40-7.53 (m, 3H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.25-7.30 (m, 3H), 6.86-7.00 (m, 5H), 5.99 (s, 1H), 4.86-5.10 (m, 4H), 4.38 (s, 1H), 4.10-4.26 (m, 1H), 3.88 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.33-3.39 (m, 2H), 3.30 (d, 2H), 3.18-3.26 (m, 2H), 2.88-3.06 (m, 5H), 2.04-2.24 (m, 5H), 1.87-2.00 (m, 1H), 1.28-1.74 (m, 10H), 0.89-1.27 (m, 12H), 0.74-0.87 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４５１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２ 対照シントン４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＨ）の合成
２．３２．１ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−ホルミル−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（４ｇ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）中溶液に、酸化銀（Ｉ）（１０．０４ｇ）及び４−ヒドロキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（１．６８３ｇ）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ（Ｍ＋１８）＋。
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（４ｇ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）中溶液に、酸化銀（Ｉ）（１０．０４ｇ）及び４−ヒドロキシ−３−ニトロベンズアルデヒド（１．６８３ｇ）を加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をヘプタン中５〜５０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ（Ｍ＋１８）＋。
２．３２．２ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（ヒドロキシメチル）−２−ニトロフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．３２．１（６ｇ）のクロロホルム（７５ｍＬ）及びイソプロパノール（１８．７５ｍＬ）の混合物中溶液に、シリカゲル０．８７ｇを加えた。得られた混合物を０℃に冷却し、ＮａＢＨ４（０．４７０ｇ）を加え、得られた懸濁液を０℃で４５分間撹拌した。反応混合物をジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、珪藻土に通して濾過した。濾液を水及びブラインで洗浄し、濃縮して粗生成物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ（Ｍ＋ＮＨ４）＋：
実施例２．３２．１（６ｇ）のクロロホルム（７５ｍＬ）及びイソプロパノール（１８．７５ｍＬ）の混合物中溶液に、シリカゲル０．８７ｇを加えた。得られた混合物を０℃に冷却し、ＮａＢＨ４（０．４７０ｇ）を加え、得られた懸濁液を０℃で４５分間撹拌した。反応混合物をジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、珪藻土に通して濾過した。濾液を水及びブラインで洗浄し、濃縮して粗生成物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ（Ｍ＋ＮＨ４）＋：
２．３２．３ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−アミノ−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．３２．２（７ｇ）の酢酸エチル（８１ｍＬ）中撹拌溶液を、２０℃で１気圧のＨ２下触媒として１０％Ｐｄ／Ｃ（１．５３５ｇ）を使用し１２時間水素化した。反応混合物を珪藻土に通して濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣を９５／５ジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例２．３２．２（７ｇ）の酢酸エチル（８１ｍＬ）中撹拌溶液を、２０℃で１気圧のＨ２下触媒として１０％Ｐｄ／Ｃ（１．５３５ｇ）を使用し１２時間水素化した。反応混合物を珪藻土に通して濾過し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣を９５／５ジクロロメタン／メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２．３２．４ ３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパン酸
３−アミノプロパン酸（４．９９ｇ）を５００ｍＬのフラスコ中で１０％Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１２０ｍＬ）に溶解し、氷浴で冷却した。得られた溶液に、１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）中の（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（１４．５ｇ）を徐々に加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌し、次いで水（８００ｍＬ）を加えた。水性層を反応混合物から分離し、ジエチルエーテル（３×７５０ｍＬ）で洗浄した。水性層を２Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ値を２に酸性化し、酢酸エチル（３×７５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を酢酸エチル：ヘキサン１：２の混合溶媒（３００ｍＬ）中で再結晶して、標題化合物を得た。
３−アミノプロパン酸（４．９９ｇ）を５００ｍＬのフラスコ中で１０％Ｎａ２ＣＯ３水溶液（１２０ｍＬ）に溶解し、氷浴で冷却した。得られた溶液に、１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）中の（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（１４．５ｇ）を徐々に加えた。反応混合物を室温で４時間撹拌し、次いで水（８００ｍＬ）を加えた。水性層を反応混合物から分離し、ジエチルエーテル（３×７５０ｍＬ）で洗浄した。水性層を２Ｎ ＨＣｌ水溶液でｐＨ値を２に酸性化し、酢酸エチル（３×７５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を酢酸エチル：ヘキサン１：２の混合溶媒（３００ｍＬ）中で再結晶して、標題化合物を得た。
２．３２．５ （９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（３−クロロ−３−オキソプロピル）カルバメート
実施例２．３２．４のジクロロメタン（１６０ｍＬ）中溶液に、亜硫酸ジクロリド（５０ｍＬ）を加えた。混合物を６０℃で１時間撹拌した。混合物を冷却し、濃縮して、標題化合物を得た。
実施例２．３２．４のジクロロメタン（１６０ｍＬ）中溶液に、亜硫酸ジクロリド（５０ｍＬ）を加えた。混合物を６０℃で１時間撹拌した。混合物を冷却し、濃縮して、標題化合物を得た。
２．３２．６ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．３２．３（６ｇ）のジクロロメタン（４８０ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．６０ｍＬ）を加えた。実施例２．３２．５（５．３４ｇ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液中に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮して残渣を得、これを移動相として石油エーテル中０〜１００％酢酸エチルを使用するラジアルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例２．３２．３（６ｇ）のジクロロメタン（４８０ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．６０ｍＬ）を加えた。実施例２．３２．５（５．３４ｇ）を加え、混合物を室温で３０分間撹拌した。混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液中に注ぎ入れ、酢酸エチルで抽出した。合わせた抽出物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水した。濾過し、濃縮して残渣を得、これを移動相として石油エーテル中０〜１００％酢酸エチルを使用するラジアルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２．３２．７ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（２−（３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．３２．６（５．１ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）中混合物に、ビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（４．１４ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．７８４ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌し、減圧下で濃縮した。粗製物をジクロロメタンに溶解し、１ｍｍラジアルクロマトトロンプレート上に直接吸引し、ヘキサン中５０〜１００％酢酸エチルで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．６（５．１ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）中混合物に、ビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（４．１４ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．７８４ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌し、減圧下で濃縮した。粗製物をジクロロメタンに溶解し、１ｍｍラジアルクロマトトロンプレート上に直接吸引し、ヘキサン中５０〜１００％酢酸エチルで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．８ ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタンカルボン酸
５０ｍＬ丸底フラスコ中に、０℃で臭素（１６ｍＬ）を加えた。次いで鉄粉（７ｇ）を加え、反応物を０℃で３０分間撹拌した。次いで３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１２ｇ）を加えた。混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。氷及び濃ＨＣｌの混合物を反応混合物中に注ぎ入れた。得られた懸濁液をＮａ２ＳＯ３（水２００ｍＬ中５０ｇ）で２回処理して臭素を分解し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、粗製の標題化合物を得た。
５０ｍＬ丸底フラスコ中に、０℃で臭素（１６ｍＬ）を加えた。次いで鉄粉（７ｇ）を加え、反応物を０℃で３０分間撹拌した。次いで３，５−ジメチルアダマンタン−１−カルボン酸（１２ｇ）を加えた。混合物を室温に加温し、３日間撹拌した。氷及び濃ＨＣｌの混合物を反応混合物中に注ぎ入れた。得られた懸濁液をＮａ２ＳＯ３（水２００ｍＬ中５０ｇ）で２回処理して臭素を分解し、ジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機物を１Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、粗製の標題化合物を得た。
２．３２．９ ３−ブロモ−５，７−ジメチルアダマンタンメタノール
実施例２．３２．８（１５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３（テトラヒドロフラン中１Ｍ、１５０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。次いで反応混合物をメタノールを滴下添加することにより注意深くクエンチした。次いで混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）との間で平衡させた。水性層を酢酸エチルでさらに２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。
実施例２．３２．８（１５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中溶液に、ＢＨ３（テトラヒドロフラン中１Ｍ、１５０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。次いで反応混合物をメタノールを滴下添加することにより注意深くクエンチした。次いで混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（５００ｍＬ）と２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１００ｍＬ）との間で平衡させた。水性層を酢酸エチルでさらに２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。
２．３２．１０ １−（（３−ブロモ−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル）−１Ｈ−ピラゾール
実施例２．３２．９（８．０ｇ）のトルエン（６０ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−ピラゾール（１．５５ｇ）及びシアノメチレントリブチルホスホラン（２．０ｇ）を加えた。混合物を９０℃で終夜撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１ヘプタン：酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．９（８．０ｇ）のトルエン（６０ｍＬ）中溶液に、１Ｈ−ピラゾール（１．５５ｇ）及びシアノメチレントリブチルホスホラン（２．０ｇ）を加えた。混合物を９０℃で終夜撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１０：１ヘプタン：酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３２４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．１１ ２−｛［３，５−ジメチル−７−（１Ｈ−ピラゾール−１−イルメチル）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］オキシ｝エタノール
実施例２．３２．１０（４．０ｇ）のエタン−１，２−ジオール（１２ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１５０℃で４５分間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）中に注ぎ入れ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて粗生成物を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．１０（４．０ｇ）のエタン−１，２−ジオール（１２ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）を加えた。混合物をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１５０℃で４５分間撹拌した。混合物を水（１００ｍＬ）中に注ぎ入れ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過した。溶媒を蒸発させて粗生成物を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチル、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３０５．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．１２ ２−（｛３，５−ジメチル−７−［（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エタノール
実施例２．３２．１１（６．０５ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中冷却（−７８℃）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（４０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加えた。混合物を−７８℃で１．５時間撹拌した。ヨードメタン（１０ｍＬ）を注射器を通して加え、混合物を−７８℃で３時間撹拌した。次いで反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．１１（６．０５ｇ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中冷却（−７８℃）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（４０ｍＬ、ヘキサン中２．５Ｍ）を加えた。混合物を−７８℃で１．５時間撹拌した。ヨードメタン（１０ｍＬ）を注射器を通して加え、混合物を−７８℃で３時間撹拌した。次いで反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機抽出物を水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をジクロロメタン中５％メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．１３ １−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（ヒドロキシ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例２．３２．１２（３．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．２ｇ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。次いで反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＳＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中２０％酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．１２（３．５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−ヨードスクシンイミド（３．２ｇ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。次いで反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＳＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン中２０％酢酸エチル）により精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．１４ ２−（｛３−［（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチルメタンスルホネート
実施例２．３２．１３（６．１６ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液に、トリエチルアミン（４．２１ｇ）、続いてメタンスルホニルクロリド（１．６ｇ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。次いで反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．１３（６．１６ｇ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中冷却溶液に、トリエチルアミン（４．２１ｇ）、続いてメタンスルホニルクロリド（１．６ｇ）を加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌した。次いで反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５２３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．１５ １−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール
実施例２．３２．１４（２．５ｇ）のメタノール中２Ｍメチルアミン（１５ｍＬ）中溶液をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１００℃で２０分間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮した。次いで残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．１４（２．５ｇ）のメタノール中２Ｍメチルアミン（１５ｍＬ）中溶液をマイクロ波条件（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ）下１００℃で２０分間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮した。次いで残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３水溶液、水及びブラインで洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で脱水した後、溶液を濾過し、濃縮し、残渣をさらには精製せずに次の反応に使用した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４５８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．１６ ｔｅｒｔ−ブチル［２−（｛３−［（４−ヨード−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］メチルカルバメート
実施例２．３２．１５（２．２ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．２６ｇ）及び触媒量の４−ジメチルアミノピリジンを加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌し、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．１５（２．２ｇ）のテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１．２６ｇ）及び触媒量の４−ジメチルアミノピリジンを加えた。混合物を室温で１．５時間撹拌し、酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液、水（６０ｍＬ）及びブライン（６０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５５８．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．１７ ６−フルオロ−３−ブロモピコリン酸
６−アミノ−３−ブロモピコリン酸（２５ｇ）の１：１ジクロロメタン／クロロホルム４００ｍＬ中スラリー液を、５℃で１時間かけてジクロロメタン（１００ｍＬ）中のニトロソニウムテトラフルオロボレート（１８．２ｇ）に加え、得られた混合物をさらに３０分間撹拌し、次いで３５℃に加温し、終夜撹拌した。反応物を室温に冷却し、次いでＮａＨ２ＰＯ４水溶液でｐＨを４に調整した。得られた溶液をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
６−アミノ−３−ブロモピコリン酸（２５ｇ）の１：１ジクロロメタン／クロロホルム４００ｍＬ中スラリー液を、５℃で１時間かけてジクロロメタン（１００ｍＬ）中のニトロソニウムテトラフルオロボレート（１８．２ｇ）に加え、得られた混合物をさらに３０分間撹拌し、次いで３５℃に加温し、終夜撹拌した。反応物を室温に冷却し、次いでＮａＨ２ＰＯ４水溶液でｐＨを４に調整した。得られた溶液をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた抽出物をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
２．３２．１８ ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−６−フルオロピコリネート
パラ−トルエンスルホニルクロリド（２７．６ｇ）を、０℃で実施例２．３２．１７（１４．５ｇ）及びピリジン（２６．７ｍＬ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（８０ｍＬ）中溶液に加えた。反応物を１５分間撹拌し、室温に加温し、終夜撹拌した。溶液を濃縮し、酢酸エチルとＮａ２ＣＯ３水溶液との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＣＯ３水溶液及びブラインですすぎ、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
パラ−トルエンスルホニルクロリド（２７．６ｇ）を、０℃で実施例２．３２．１７（１４．５ｇ）及びピリジン（２６．７ｍＬ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）及びｔｅｒｔ−ブタノール（８０ｍＬ）中溶液に加えた。反応物を１５分間撹拌し、室温に加温し、終夜撹拌した。溶液を濃縮し、酢酸エチルとＮａ２ＣＯ３水溶液との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＣＯ３水溶液及びブラインですすぎ、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。
２．３２．１９ メチル２−（５−ブロモ−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例２．３２．１８（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加えた。混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
メチル１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート塩酸塩（１２．３７ｇ）及び実施例２．３２．１８（１５ｇ）のジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２ｍＬ）を加えた。混合物を５０℃で２４時間撹拌した。次いで混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４４８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．２０ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例２．３２．１９（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出）により、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４９５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．１９（２．２５ｇ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（２０５ｍｇ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（３ｍＬ）及びピナコールボラン（２ｍＬ）を加えた。混合物を還流状態で３時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出）により、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４９５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．２１ メチル２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボキシレート
実施例２．３２．２０（４．９４ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例２．３２．１６（５．５７ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（４１２ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４５７ｍｇ）及びＫ３ＰＯ４（１１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で２４時間撹拌した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．２０（４．９４ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）中溶液に、実施例２．３２．１６（５．５７ｇ）、１，３，５，７−テトラメチル−８−テトラデシル−２，４，６−トリオキサ−８−ホスファアダマンタン（４１２ｍｇ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４５７ｍｇ）及びＫ３ＰＯ４（１１ｇ）を加えた。混合物を還流状態で２４時間撹拌した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（５００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをヘプタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７９９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．２２ ２−（６−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（１−（（３−（２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル）−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−８−カルボン酸
実施例２．３２．２１（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．２ｇ）を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を２％ＨＣｌ水溶液で中和し、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．２１（１０ｇ）のテトラヒドロフラン（６０ｍＬ）、メタノール（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）中溶液に、水酸化リチウム一水和物（１．２ｇ）を加えた。混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を２％ＨＣｌ水溶液で中和し、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７８５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．２３ ｔｅｒｔ−ブチル６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボキシレート
実施例２．３２．２２（１０ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３．２４ｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（５．６９ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．５７ｇ）を加えた。混合物を６０℃で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（８００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．２２（１０ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中溶液に、ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−アミン（３．２４ｇ）、フルオロ−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート（５．６９ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．５７ｇ）を加えた。混合物を６０℃で３時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（８００ｍＬ）で希釈し、水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水した。濾過し、溶媒を蒸発させて残渣を得、これをジクロロメタン中２０％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９１５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．２４ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例２．３２．２３（５ｇ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液に、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残渣をジメチルスルホキシド／メタノール（１：１、１０ｍＬ）に溶解し、水中１０〜８５％アセトニトリル及び０．１％トリフルオロ酢酸で溶出するＡｎａｌｏｇｉｘシステム及びＣ１８カートリッジ（３００ｇ）を用いる逆相によるクロマトグラフィーにかけて、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。1H NMR (300 MHz, ジメチルスルホキシドd6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.13-8.30 (m, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.32-7.54 (m, 3H), 7.28 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (dd, 1H), 3.80-3.92 (m, 4H), 3.48-3.59 (m, 1H), 2.91-3.11 (m, 2H), 2.51-2.59 (m, 4H), 2.03-2.16 (m, 2H), 1.21-1.49 (m, 6H), 0.97-1.20 (m, 4H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．２３（５ｇ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液に、トリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加えた。混合物を終夜撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残渣をジメチルスルホキシド／メタノール（１：１、１０ｍＬ）に溶解し、水中１０〜８５％アセトニトリル及び０．１％トリフルオロ酢酸で溶出するＡｎａｌｏｇｉｘシステム及びＣ１８カートリッジ（３００ｇ）を用いる逆相によるクロマトグラフィーにかけて、標題化合物をＴＦＡ塩として得た。1H NMR (300 MHz, ジメチルスルホキシドd6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.13-8.30 (m, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.32-7.54 (m, 3H), 7.28 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 4.96 (dd, 1H), 3.80-3.92 (m, 4H), 3.48-3.59 (m, 1H), 2.91-3.11 (m, 2H), 2.51-2.59 (m, 4H), 2.03-2.16 (m, 2H), 1.21-1.49 (m, 6H), 0.97-1.20 (m, 4H), 0.87 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．２５ ３−（１−（（３−（２−（（（（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．３２．２４（３２５ｍｇ）及び実施例２．３２．７（３８２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（４９．１ｍｇ）を加えた。反応混合物を０℃で５時間撹拌し、酢酸（２２．８ｍｇ）を加えた。得られた混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）及びメタノール（５ｍＬ）の混合物に溶解した。この溶液に０℃で１Ｍ水酸化リチウム水溶液（３．８ｍＬ）を加えた。得られた混合物を０℃で１時間撹拌し、酢酸で酸性化し、濃縮した。濃縮物を凍結乾燥して、粉体を得た。粉体をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、氷浴中で冷却し、０℃でピペリジン（１ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌し、酢酸１．５ｍＬを加えた。溶液を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中３０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを用いる逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１７２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．２４（３２５ｍｇ）及び実施例２．３２．７（３８２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（９ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（４９．１ｍｇ）を加えた。反応混合物を０℃で５時間撹拌し、酢酸（２２．８ｍｇ）を加えた。得られた混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）及びメタノール（５ｍＬ）の混合物に溶解した。この溶液に０℃で１Ｍ水酸化リチウム水溶液（３．８ｍＬ）を加えた。得られた混合物を０℃で１時間撹拌し、酢酸で酸性化し、濃縮した。濃縮物を凍結乾燥して、粉体を得た。粉体をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）に溶解し、氷浴中で冷却し、０℃でピペリジン（１ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌し、酢酸１．５ｍＬを加えた。溶液を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中３０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを用いる逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１７２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３２．２６ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の実施例２．３２．２５（２００ｍｇ）に、０℃で２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（１０５ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌し、室温に加温し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中３０〜８０％アセトニトリルで溶出する１００ｇＣ１８カラムを使用するＧｉｌｓｏｎシステム上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 2H) 9.07 (s, 1H) 8.18 (s, 1H) 8.03 (d, 1H) 7.87 (t, 1H) 7.79 (d, 1H) 7.61 (d, 1H) 7.41-7.53 (m, 3H) 7.36 (q, 2H) 7.28 (s, 1H) 7.03-7.09 (m, 1H) 6.96-7.03 (m, 3H) 6.94 (d, 1H) 4.95 (s, 4H) 4.82 (t, 1H) 3.88 (t, 3H) 3.80 (d, 2H) 3.01 (t, 2H) 2.86 (d, 3H) 2.54 (t, 2H) 2.08 (s, 3H) 2.03 (t, 2H) 1.40-1.53 (m, 4H) 1.34 (d, 2H) 0.90-1.28 (m, 12H) 0.82 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３６５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の実施例２．３２．２５（２００ｍｇ）に、０℃で２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（１０５ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で１５分間撹拌し、室温に加温し、０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中３０〜８０％アセトニトリルで溶出する１００ｇＣ１８カラムを使用するＧｉｌｓｏｎシステム上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 2H) 9.07 (s, 1H) 8.18 (s, 1H) 8.03 (d, 1H) 7.87 (t, 1H) 7.79 (d, 1H) 7.61 (d, 1H) 7.41-7.53 (m, 3H) 7.36 (q, 2H) 7.28 (s, 1H) 7.03-7.09 (m, 1H) 6.96-7.03 (m, 3H) 6.94 (d, 1H) 4.95 (s, 4H) 4.82 (t, 1H) 3.88 (t, 3H) 3.80 (d, 2H) 3.01 (t, 2H) 2.86 (d, 3H) 2.54 (t, 2H) 2.08 (s, 3H) 2.03 (t, 2H) 1.40-1.53 (m, 4H) 1.34 (d, 2H) 0.90-1.28 (m, 12H) 0.82 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３６５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．３３ 対照シントン４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−２−（｛Ｎ−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１７−オキソ−４，７，１０，１３−テトラオキサ−１６−アザノナデカン−１−オイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＩ）の合成
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエートを２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−オキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４−アザノナデカン−１９−オエートで置き換え、実施例２．３２．２６における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.95 (s, 1H) 8.16 (s, 1H) 7.99 (d, 1H) 7.57-7.81 (m, 4H) 7.38-7.50 (m, 3H) 7.34 (q, 2H) 7.27 (s, 1H) 7.10 (d, 1H) 7.00 (d, 1H) 6.88-6.95 (m, 2H) 4.97 (d, 4H) 4.76 (d, 2H) 3.89 (t, 2H) 3.84 (d, 2H) 3.80 (s, 2H) 3.57-3.63 (m, 4H) 3.44-3.50 (m, 4H) 3.32-3.43 (m, 6H) 3.29 (t, 2H) 3.16 (q, 2H) 3.02 (t, 2H) 2.87 (s, 3H) 2.52-2.60 (m, 2H) 2.29-2.39 (m, 3H) 2.09 (s, 3H) 1.37 (s, 2H) 1.20-1.29 (m, 4H) 1.06-1.18 (m, 4H) 0.92-1.05 (m, 2H) 0.83 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５６８．６（Ｍ−Ｈ）−。
２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエートを２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−３−オキソ−７，１０，１３，１６−テトラオキサ−４−アザノナデカン−１９−オエートで置き換え、実施例２．３２．２６における手順を用いて標題化合物を調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.95 (s, 1H) 8.16 (s, 1H) 7.99 (d, 1H) 7.57-7.81 (m, 4H) 7.38-7.50 (m, 3H) 7.34 (q, 2H) 7.27 (s, 1H) 7.10 (d, 1H) 7.00 (d, 1H) 6.88-6.95 (m, 2H) 4.97 (d, 4H) 4.76 (d, 2H) 3.89 (t, 2H) 3.84 (d, 2H) 3.80 (s, 2H) 3.57-3.63 (m, 4H) 3.44-3.50 (m, 4H) 3.32-3.43 (m, 6H) 3.29 (t, 2H) 3.16 (q, 2H) 3.02 (t, 2H) 2.87 (s, 3H) 2.52-2.60 (m, 2H) 2.29-2.39 (m, 3H) 2.09 (s, 3H) 1.37 (s, 2H) 1.20-1.29 (m, 4H) 1.06-1.18 (m, 4H) 0.92-1.05 (m, 2H) 0.83 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５６８．６（Ｍ−Ｈ）−。
２．３４ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＧ）の合成
２．３４．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．６（２７９ｍｇ）及び実施例１．１４．９（２４０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５７ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２３３．０（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．６（２７９ｍｇ）及び実施例１．１４．９（２４０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５７ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２３３．０（Ｍ−Ｈ）−。
２．３４．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（４５．７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（４５ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、実施例２．３４．１（９６ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物にジエチルアミン（０．１ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３８２．２（Ｍ−Ｈ）−。
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（４５．７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（４５ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、実施例２．３４．１（９６ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液を加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物にジエチルアミン（０．１ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３８２．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．３４．３ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５．２を実施例２．３４．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．５．３に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.38 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.90 - 7.70 (m, 6H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.24 - 7.14 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.28 (q, 1H), 4.07 (d, 2H), 3.89 (dd, 3H), 3.22 (ddd, 6H), 2.87 - 2.61 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.93 (p, 2H), 1.54 - 0.90 (m, 20H), 0.83 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７５．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５．２を実施例２．３４．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．５．３に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.38 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.90 - 7.70 (m, 6H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.24 - 7.14 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.28 (q, 1H), 4.07 (d, 2H), 3.89 (dd, 3H), 3.22 (ddd, 6H), 2.87 - 2.61 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.93 (p, 2H), 1.54 - 0.90 (m, 20H), 0.83 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７５．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．３５ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＨ）の合成
２．３５．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）ピコリン酸
実施例２．２６．７（７６ｍｇ）及び６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）−３−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（メチルアミノ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸（６２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０４３ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１８３．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．２６．７（７６ｍｇ）及び６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）−３−（１−（（３，５−ジメチル−７−（２−（メチルアミノ）エトキシ）アダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸（６２ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０４３ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１８３．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．３５．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）ピコリン酸
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（２２．３ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２２ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、実施例２．３５．１（４５ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液を加えた。反応物を室温で３時間撹拌した。反応混合物にジエチルアミン（０．１ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３４．５（Ｍ−Ｈ）−。
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（２２．３ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２２ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、実施例２．３５．１（４５ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液を加えた。反応物を室温で３時間撹拌した。反応混合物にジエチルアミン（０．１ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３４．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．３５．３ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５．２を実施例２．３５．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．１に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.72 (d, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.32 (dd, 2H), 8.17 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 - 7.92 (m, 2H), 7.86 (d, 1H), 7.82 - 7.71 (m, 2H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.36 (t, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.69 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.03 (dd, 3H), 4.28 (q, 1H), 4.02 (d, 3H), 3.93 (d, 1H), 3.47 - 3.21 (m, 8H), 3.16 (p, 1H), 2.85 (d, 3H), 2.80 - 2.63 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.53 - 1.30 (m, 6H), 1.32 - 0.90 (m, 12H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５２７．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５．２を実施例２．３５．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．１に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.72 (d, 1H), 9.43 (s, 1H), 8.32 (dd, 2H), 8.17 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.02 - 7.92 (m, 2H), 7.86 (d, 1H), 7.82 - 7.71 (m, 2H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.36 (t, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.69 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.03 (dd, 3H), 4.28 (q, 1H), 4.02 (d, 3H), 3.93 (d, 1H), 3.47 - 3.21 (m, 8H), 3.16 (p, 1H), 2.85 (d, 3H), 2.80 - 2.63 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.53 - 1.30 (m, 6H), 1.32 - 0.90 (m, 12H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５２７．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．３６ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＮ）の合成
２．３６．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸、トリフルオロ酢酸
実施例１．１．１４（１５７ｍｇ）及び実施例２．２６．７（１６７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１８８μＬ）を加えた。混合物を室温に加温し、終夜撹拌し、濃縮した。残渣をメタノール（２ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（３ｍＬ）に溶解した。溶液を氷水浴中で冷却し、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（１．１４ｍＬ）を加えた。混合物を室温０℃で２時間撹拌し、濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
実施例１．１．１４（１５７ｍｇ）及び実施例２．２６．７（１６７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１８８μＬ）を加えた。混合物を室温に加温し、終夜撹拌し、濃縮した。残渣をメタノール（２ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（３ｍＬ）に溶解した。溶液を氷水浴中で冷却し、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（１．１４ｍＬ）を加えた。混合物を室温０℃で２時間撹拌し、濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドに溶解し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
２．３６．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１（１８ｍｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（６．３９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２４μＬ）を加えた。得られた混合物を１時間撹拌し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜７５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.36 (s, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.85 - 7.70 (m, 4H), 7.43 (s, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.23 - 7.10 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.65 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 5.08 - 4.94 (m, 3H), 4.02 (dd, 2H), 3.92 (dd, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.67 (t, 2H), 3.31 - 3.20 (m, 2H), 3.16 (q, 2H), 2.91 - 2.74 (m, 6H), 2.18 (s, 3H), 1.99 (t, 2H), 1.91 (p, 2H), 1.51 - 1.29 (m, 5H), 1.29 - 0.88 (m, 9H), 0.81 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３８０．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．３６．１（１８ｍｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（６．３９ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２４μＬ）を加えた。得られた混合物を１時間撹拌し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜７５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.36 (s, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.85 - 7.70 (m, 4H), 7.43 (s, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.23 - 7.10 (m, 2H), 6.95 (s, 2H), 6.65 (d, 1H), 6.56 (dd, 1H), 5.08 - 4.94 (m, 3H), 4.02 (dd, 2H), 3.92 (dd, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.67 (t, 2H), 3.31 - 3.20 (m, 2H), 3.16 (q, 2H), 2.91 - 2.74 (m, 6H), 2.18 (s, 3H), 1.99 (t, 2H), 1.91 (p, 2H), 1.51 - 1.29 (m, 5H), 1.29 - 0.88 (m, 9H), 0.81 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３８０．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．３７ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＴ）の合成
２．３７．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例２．２６．８において実施例１．６．３を実施例１．１２．１０及び実施例２．１１．６を実施例２．２６．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１８２．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．２６．８において実施例１．６．３を実施例１．１２．１０及び実施例２．１１．６を実施例２．２６．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１８２．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．３７．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において実施例２．３７．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３３．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において実施例２．３７．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３３．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．３７．３ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．９．２において実施例２．３７．２を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.02 (s, 1H), 8.37 (d, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.18 (d, 1H),, 8.06 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.87 (br d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.77 (br t, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.68 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.90 (m, 5H), 3.71 (m, 2H), 3.45 (m, 5H), 3.36 (m, 3H), 3.28 (m, 4H), 3.19 (m, 2H), 2.82 (br d, 2H), 2.76 (dd, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.06 (t, 2H), 1.52-1.32 (m, 6H), 1.32-0.92 (m, 10H), 0.85 (br s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５２６．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．９．２において実施例２．３７．２を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.02 (s, 1H), 8.37 (d, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.18 (d, 1H),, 8.06 (d, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.87 (br d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.77 (br t, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.68 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.90 (m, 5H), 3.71 (m, 2H), 3.45 (m, 5H), 3.36 (m, 3H), 3.28 (m, 4H), 3.19 (m, 2H), 2.82 (br d, 2H), 2.76 (dd, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.06 (t, 2H), 1.52-1.32 (m, 6H), 1.32-0.92 (m, 10H), 0.85 (br s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５２６．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．３８ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＰ）の合成
２．３８．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（４−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル）ピコリン酸
実施例１．１．１４を実施例１．１１．４で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．１に記載した通りに調製した。
実施例１．１．１４を実施例１．１１．４で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．１に記載した通りに調製した。
２．３８．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１を実施例２．３８．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 9.12 (d, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.60 (dd, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.97 - 7.90 (m, 2H), 7.81 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.67 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.11 - 4.96 (m, 3H), 4.04 (dd, 2H), 3.92 (d, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.40 (q, 5H), 3.34 (t, 2H), 3.31 - 3.22 (m, 4H), 3.17 (q, 2H), 2.85 (d, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.00 (t, 2H), 1.51 - 1.31 (m, 6H), 1.30 - 0.88 (m, 13H), 0.82 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４００．３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．３６．１を実施例２．３８．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 9.12 (d, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.60 (dd, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.97 - 7.90 (m, 2H), 7.81 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.37 (t, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.67 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.11 - 4.96 (m, 3H), 4.04 (dd, 2H), 3.92 (d, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.40 (q, 5H), 3.34 (t, 2H), 3.31 - 3.22 (m, 4H), 3.17 (q, 2H), 2.85 (d, 3H), 2.20 (s, 3H), 2.00 (t, 2H), 1.51 - 1.31 (m, 6H), 1.30 - 0.88 (m, 13H), 0.82 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４００．３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．３９ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＵ）の合成
２．３９．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
実施例２．２６．８において実施例１．１．１４を実施例１．１２．１０及び実施例２．１１．６を実施例２．２６．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １１８７．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．２６．８において実施例１．１．１４を実施例１．１２．１０及び実施例２．１１．６を実施例２．２６．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １１８７．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．３９．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において実施例２．３９．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３３８．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１８．１において実施例２．３９．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３３８．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．３９．３ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．９．２において実施例２．３９．２を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.39 (br s 1H), 8.00 (d, 1H), 7.86 (d, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.48 (v br s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.92 (s, 2H), 6.68 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.96 (br t, 2H), 3.88 (br m, 2H), 3.71 (m, 2H), 3.45 (m, 5H), 3.37 (m, 3H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 2H), 2.86 (br m, 5H), 2.75 (dd, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.06 (t, 2H), 1.95 (m, 2H), 1.52-1.32 (m, 6H), 1.32-0.92 (m, 12H), 0.85 (br s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５３１．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．９．２において実施例２．３９．２を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.39 (br s 1H), 8.00 (d, 1H), 7.86 (d, 2H), 7.81 (d, 1H), 7.77 (d, 2H), 7.48 (v br s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.92 (s, 2H), 6.68 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.06 (br m, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 4.09 (m, 2H), 3.96 (br t, 2H), 3.88 (br m, 2H), 3.71 (m, 2H), 3.45 (m, 5H), 3.37 (m, 3H), 3.28 (m, 4H), 3.18 (m, 2H), 2.86 (br m, 5H), 2.75 (dd, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.06 (t, 2H), 1.95 (m, 2H), 1.52-1.32 (m, 6H), 1.32-0.92 (m, 12H), 0.85 (br s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １５３１．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．４０ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−（３−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝プロポキシ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＯ）の合成
２．４０．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（３−アミノプロポキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
実施例２．２６．７を実施例２．２８．３で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１５９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．２６．７を実施例２．２８．３で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１５９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．４０．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−（３−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝プロポキシ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１を実施例２．４０．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.87 - 7.72 (m, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.19 (dd, 2H), 6.96 (s, 2H), 6.62 (d, 1H), 6.57 (dd, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.03 - 3.81 (m, 8H), 3.42 - 3.20 (m, 7H), 3.16 (q, 2H), 2.90 - 2.75 (m, 5H), 2.20 (s, 3H), 2.01 (t, 2H), 1.97 - 1.87 (m, 2H), 1.80 (t, 2H), 1.45 (td, 4H), 1.13 (d, 8H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５０．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．３６．１を実施例２．４０．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.38 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.87 - 7.72 (m, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.19 (dd, 2H), 6.96 (s, 2H), 6.62 (d, 1H), 6.57 (dd, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.03 - 3.81 (m, 8H), 3.42 - 3.20 (m, 7H), 3.16 (q, 2H), 2.90 - 2.75 (m, 5H), 2.20 (s, 3H), 2.01 (t, 2H), 1.97 - 1.87 (m, 2H), 1.80 (t, 2H), 1.45 (td, 4H), 1.13 (d, 8H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５０．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．４１ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［３−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）プロポキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＱ）の合成
２．４１．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（３−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）プロポキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（３５．４ｍｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２９．８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３０μＬ）を加えた。得られた混合物を１５分間撹拌し、実施例２．４０．１（７０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８０μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中混合物に加えた。得られた混合物を１時間撹拌した。ジエチルアミン（６２．２μＬ）を加え、混合物を１時間撹拌した。反応物を氷浴中で冷却し、トリフルオロ酢酸（９３μＬ）を加えた。混合物をジメチルスルホキシド（５．５ｍＬ）で希釈し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜７５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（３５．４ｍｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２９．８ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３０μＬ）を加えた。得られた混合物を１５分間撹拌し、実施例２．４０．１（７０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８０μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中混合物に加えた。得られた混合物を１時間撹拌した。ジエチルアミン（６２．２μＬ）を加え、混合物を１時間撹拌した。反応物を氷浴中で冷却し、トリフルオロ酢酸（９３μＬ）を加えた。混合物をジメチルスルホキシド（５．５ｍＬ）で希釈し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜７５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
２．４１．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［３−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）プロポキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１を実施例２．４１．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.37 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.87 - 7.72 (m, 5H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.20 (t, 1H), 7.16 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.63 (d, 1H), 6.55 (dd, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.26 (q, 1H), 4.04 - 3.79 (m, 8H), 3.32 - 3.08 (m, 4H), 2.89 - 2.66 (m, 7H), 2.35 (q, 0H), 2.20 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.93 (p, 2H), 1.80 (t, 2H), 1.52 - 1.30 (m, 6H), 1.30 - 0.89 (m, 13H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５０２．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．３６．１を実施例２．４１．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.37 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.87 - 7.72 (m, 5H), 7.44 (s, 1H), 7.35 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.20 (t, 1H), 7.16 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.63 (d, 1H), 6.55 (dd, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.26 (q, 1H), 4.04 - 3.79 (m, 8H), 3.32 - 3.08 (m, 4H), 2.89 - 2.66 (m, 7H), 2.35 (q, 0H), 2.20 (s, 3H), 2.03 (t, 2H), 1.93 (p, 2H), 1.80 (t, 2H), 1.52 - 1.30 (m, 6H), 1.30 - 0.89 (m, 13H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５０２．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．４２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＲ）の合成
２．４２．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル）ピコリン酸
実施例２．４０．１を実施例２．３６．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．４１．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３８．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．４２．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１を実施例２．４２．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.39 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.86 (t, 2H), 7.83 - 7.73 (m, 3H), 7.45 (s, 1H), 7.40 - 7.32 (m, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.26 - 7.13 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.70 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.11 - 4.94 (m, 3H), 4.29 (dt, 1H), 4.04 (dd, 2H), 3.99 - 3.91 (m, 3H), 3.87 (d, 2H), 3.69 (t, 2H), 3.40 - 3.07 (m, 7H), 2.91 - 2.74 (m, 6H), 2.69 (dd, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.05 (t, 2H), 1.94 (p, 2H), 1.53 - 1.32 (m, 5H), 1.31 - 0.90 (m, 7H), 0.84 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５３１．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．４０．１を実施例２．３６．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．４１．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３８．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．４２．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１を実施例２．４２．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (500 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 8.39 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.86 (t, 2H), 7.83 - 7.73 (m, 3H), 7.45 (s, 1H), 7.40 - 7.32 (m, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.26 - 7.13 (m, 2H), 6.97 (s, 2H), 6.70 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 5.11 - 4.94 (m, 3H), 4.29 (dt, 1H), 4.04 (dd, 2H), 3.99 - 3.91 (m, 3H), 3.87 (d, 2H), 3.69 (t, 2H), 3.40 - 3.07 (m, 7H), 2.91 - 2.74 (m, 6H), 2.69 (dd, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.05 (t, 2H), 1.94 (p, 2H), 1.53 - 1.32 (m, 5H), 1.31 - 0.90 (m, 7H), 0.84 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５３１．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．４３ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＯＳ）の合成
２．４３．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例２．５．２を実施例１．１５．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．１（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５．２を実施例１．１５．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．１（Ｍ−Ｈ）−。
２．４３．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例２．３４．１を実施例２．４３．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．２に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７９．１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３４．１を実施例２．４３．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．２に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７９．１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．４３．３ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３４．２を実施例２．４３．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.00 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.27 - 8.12 (m, 3H), 8.05 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.75 (t, 1H), 7.69 (t, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.24 - 7.12 (m, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.66 (s, 1H), 6.57 (d, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.29 (q, 1H), 4.15 - 4.01 (m, 2H), 3.86 (d, 3H), 3.46 - 3.11 (m, 16H), 2.84 - 2.62 (m, 2H), 2.21 (d, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.53 - 1.30 (m, 6H), 1.28 - 0.89 (m, 6H), 0.82 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７０．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．３４．２を実施例２．４３．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.00 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.27 - 8.12 (m, 3H), 8.05 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.75 (t, 1H), 7.69 (t, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.24 - 7.12 (m, 1H), 6.95 (s, 2H), 6.66 (s, 1H), 6.57 (d, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.29 (q, 1H), 4.15 - 4.01 (m, 2H), 3.86 (d, 3H), 3.46 - 3.11 (m, 16H), 2.84 - 2.62 (m, 2H), 2.21 (d, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.53 - 1.30 (m, 6H), 1.28 - 0.89 (m, 6H), 0.82 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７０．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．４４ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−［４−（｛［｛２−［｛８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−２−［６−カルボキシ−５−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−イル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−イル｝（メチル）アミノ］エチル｝（メチル）カルバモイル］オキシ｝メチル）フェニル］−Ｌ−アラニンアミド（シントンＯＸ）の合成
実施例１．１７．１０を実施例１．２１．１２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３０に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５９．５（Ｍ＋Ｈ）＋、１３５７．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１７．１０を実施例１．２１．１２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３０に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５９．５（Ｍ＋Ｈ）＋、１３５７．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．４５ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｌ−アラニンアミド（シントンＯＺ）の合成
実施例１．１７．１０を実施例１．２２．９で置き換えて、標題化合物を実施例２．３０に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０２．５（Ｍ＋Ｈ）＋、１３００．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１７．１０を実施例１．２２．９で置き換えて、標題化合物を実施例２．３０に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０２．５（Ｍ＋Ｈ）＋、１３００．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．４６ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＰＡ）の合成
２．４６．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．６を実施例２．２６．７で置き換えて、標題化合物を実施例２．４３．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．１（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．６を実施例２．２６．７で置き換えて、標題化合物を実施例２．４３．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．１（Ｍ−Ｈ）−。
２．４６．２ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例２．３４．１を実施例２．４６．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．２に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７７．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．３４．１を実施例２．４６．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４．２に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７７．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．４６．３ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛２−［２−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３４．２を実施例２．４６．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.08 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.25 - 8.12 (m, 3H), 8.05 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.78 (dd, 2H), 7.72 - 7.65 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.21 - 7.14 (m, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.69 (d, 1H), 6.58 (d, 1H), 5.13 - 4.93 (m, 3H), 4.28 (q, 1H), 4.03 (dd, 2H), 3.94 (d, 1H), 3.86 (d, 2H), 3.67 (t, 2H), 3.31 - 3.08 (m, 8H), 2.83 - 2.64 (m, 2H), 2.21 (d, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.53 - 1.30 (m, 5H), 1.30 - 0.89 (m, 11H), 0.89 - 0.75 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７０．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．３４．２を実施例２．４６．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．３４に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.08 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.25 - 8.12 (m, 3H), 8.05 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.78 (dd, 2H), 7.72 - 7.65 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.35 (t, 1H), 7.21 - 7.14 (m, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.69 (d, 1H), 6.58 (d, 1H), 5.13 - 4.93 (m, 3H), 4.28 (q, 1H), 4.03 (dd, 2H), 3.94 (d, 1H), 3.86 (d, 2H), 3.67 (t, 2H), 3.31 - 3.08 (m, 8H), 2.83 - 2.64 (m, 2H), 2.21 (d, 3H), 2.04 (t, 2H), 1.53 - 1.30 (m, 5H), 1.30 - 0.89 (m, 11H), 0.89 - 0.75 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５７０．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．４７ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＱＬ）の合成
２．４７．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）ピコリン酸
実施例１．１．１４を実施例１．１０．３で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．１に記載した通りに調製した。
実施例１．１．１４を実施例１．１０．３で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．１に記載した通りに調製した。
２．４７．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１を実施例２．４７．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.17 (s, 1H), 9.70 (d, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.31 (dd, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (dd, 1H), 8.01 - 7.90 (m, 2H), 7.83 - 7.71 (m, 2H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.39 - 7.31 (m, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.65 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (dtd, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.70 (t, 2H), 3.40 - 3.14 (m, 7H), 2.85 (d, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.01 (t, 2H), 1.49 - 1.30 (m, 6H), 1.30 - 0.90 (m, 10H), 0.90 - 0.74 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４００．４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．３６．１を実施例２．４７．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.17 (s, 1H), 9.70 (d, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.31 (dd, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (dd, 1H), 8.01 - 7.90 (m, 2H), 7.83 - 7.71 (m, 2H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.39 - 7.31 (m, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.65 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.09 (dtd, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.70 (t, 2H), 3.40 - 3.14 (m, 7H), 2.85 (d, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.01 (t, 2H), 1.49 - 1.30 (m, 6H), 1.30 - 0.90 (m, 10H), 0.90 - 0.74 (m, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４００．４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．４８ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＱＭ）の合成
２．４８．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）ピコリン酸
実施例１．１０．３（２０８ｍｇ）及び実施例２．１１．６（２６７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５１μＬ）を加えた。得られた混合物を室温で終夜撹拌し、濃縮した。残渣をメタノール（３ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に溶解した。溶液を氷水浴中で冷却し、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（２．８７ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で２時間撹拌し、トリフルオロ酢酸で酸性化した。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドで希釈し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜７５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１８５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．１０．３（２０８ｍｇ）及び実施例２．１１．６（２６７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２５１μＬ）を加えた。得られた混合物を室温で終夜撹拌し、濃縮した。残渣をメタノール（３ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に溶解した。溶液を氷水浴中で冷却し、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（２．８７ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で２時間撹拌し、トリフルオロ酢酸で酸性化した。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をジメチルスルホキシドで希釈し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜７５％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１８５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．４８．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．３６．１を実施例２．４８．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.18 (s, 1H), 9.70 (d, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.31 (dd, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.01 - 7.90 (m, 2H), 7.80 (d, 2H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.67 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.11 - 4.90 (m, 3H), 4.03 (d, 2H), 3.95 - 3.82 (m, 3H), 3.68 (t, 2H), 3.48 - 3.23 (m, 10H), 3.18 (t, 2H), 2.85 (d, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.00 (t, 2H), 1.51 - 1.31 (m, 5H), 1.19 (dd, 10H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７６．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．３６．１を実施例２．４８．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.18 (s, 1H), 9.70 (d, 1H), 9.39 (s, 1H), 8.31 (dd, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.01 - 7.90 (m, 2H), 7.80 (d, 2H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.96 (s, 2H), 6.67 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.11 - 4.90 (m, 3H), 4.03 (d, 2H), 3.95 - 3.82 (m, 3H), 3.68 (t, 2H), 3.48 - 3.23 (m, 10H), 3.18 (t, 2H), 2.85 (d, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.00 (t, 2H), 1.51 - 1.31 (m, 5H), 1.19 (dd, 10H), 0.83 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３７６．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．４９ ６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］（メチル）アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（シントンＱＮ）の合成
実施例２．３６．１を実施例１．１０．３で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.21 (s, 1H), 9.70 (d, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.42 - 8.27 (m, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.04 - 7.90 (m, 2H), 7.80 (d, 1H), 7.56 - 7.44 (m, 2H), 7.42 - 7.31 (m, 1H), 6.95 (d, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.55 - 3.18 (m, 5H), 2.95 (s, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.28 (t, 1H), 2.22 (s, 4H), 1.53 - 1.29 (m, 6H), 1.28 - 0.91 (m, 10H), 0.84 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３６．１を実施例１．１０．３で置き換えて、標題化合物を実施例２．３６．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.21 (s, 1H), 9.70 (d, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.42 - 8.27 (m, 2H), 8.16 (d, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.04 - 7.90 (m, 2H), 7.80 (d, 1H), 7.56 - 7.44 (m, 2H), 7.42 - 7.31 (m, 1H), 6.95 (d, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.55 - 3.18 (m, 5H), 2.95 (s, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.28 (t, 1H), 2.22 (s, 4H), 1.53 - 1.29 (m, 6H), 1.28 - 0.91 (m, 10H), 0.84 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９４９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５０ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＱＴ）の合成
２．５０．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（３−（３−アミノプロパンアミド）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（７−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル）ピコリン酸
実施例２．３２．２５において実施例１．２７．４を実施例２．３２．２４の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１１５６．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．３２．２５において実施例１．２７．４を実施例２．３２．２４の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１１５６．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５０．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−β−アラニル｝アミノ）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１１．８において実施例２．５０．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.00 (s, 2H); 9.06 (s, 1H), 8.29 (dd, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.97 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 3H), 7.35 (ddd, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.06 (d, 1H), 7.01 (dd, 1H), 6.94 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.81 (s, 1H), 3.33 - 3.25 (m, 6H), 2.87 (d, 3H), 2.50 (d, 3H), 2.31 (dd, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.38 (d, 2H), 1.30 - 0.77 (m, 18H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０５．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．５０．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.00 (s, 2H); 9.06 (s, 1H), 8.29 (dd, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.97 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 3H), 7.35 (ddd, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.06 (d, 1H), 7.01 (dd, 1H), 6.94 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.81 (s, 1H), 3.33 - 3.25 (m, 6H), 2.87 (d, 3H), 2.50 (d, 3H), 2.31 (dd, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.38 (d, 2H), 1.30 - 0.77 (m, 18H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０５．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．５１ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＲＦ）の合成
２．５１．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（７−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７において実施例１．２７．４を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１１７２．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．１１．７において実施例１．２７．４を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１１７２．９（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５１．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１１．８において実施例２．５１．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.16 (s, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.06 - 7.94 (m, 3H), 7.88 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.50 - 7.39 (m, 3H), 7.33 (t, 1H), 7.26 - 7.13 (m, 2H), 6.93 (s, 2H), 6.63 (d, 1H), 6.57 (dd, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.13 - 4.00 (m, 2H), 3.86 (d, 3H), 3.14 (q, 2H), 2.83 (d, 3H), 2.29 (t, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.36 (d, 2H), 1.28 - 0.73 (m, 16H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３２２．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．５１．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.16 (s, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.06 - 7.94 (m, 3H), 7.88 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.50 - 7.39 (m, 3H), 7.33 (t, 1H), 7.26 - 7.13 (m, 2H), 6.93 (s, 2H), 6.63 (d, 1H), 6.57 (dd, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.13 - 4.00 (m, 2H), 3.86 (d, 3H), 3.14 (q, 2H), 2.83 (d, 3H), 2.29 (t, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.36 (d, 2H), 1.28 - 0.73 (m, 16H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３２２．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．５２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＲＧ）の合成
２．５２．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）エトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（７−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル）ピコリン酸
実施例２．１８．１において実施例２．５１．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１３２５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．１８．１において実施例２．５１．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１３２５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５２．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−｛２−［２−（｛Ｎ−［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）エトキシ］エトキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１１．８において実施例２．５２．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.17 (s, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.03 (dd, 2H), 7.96 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.82 - 7.75 (m, 2H), 7.50 (s, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.24 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.70 (t, 2H), 3.58 (t, 2H), 3.48 - 3.14 (m, 11H), 2.89 - 2.79 (m, 4H), 2.73 (dd, 1H), 2.37 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.45 - 0.73 (m, 19H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４７３．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．５２．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.17 (s, 2H), 8.27 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.03 (dd, 2H), 7.96 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.82 - 7.75 (m, 2H), 7.50 (s, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.24 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.93 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.04 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.70 (t, 2H), 3.58 (t, 2H), 3.48 - 3.14 (m, 11H), 2.89 - 2.79 (m, 4H), 2.73 (dd, 1H), 2.37 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.45 - 0.73 (m, 19H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４７３．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．５３ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＳＦ）の合成
２．５３．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（７−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７において実施例１．２９．７を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１１８７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．１１．７において実施例１．２９．７を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ：１１８７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５３．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）プロパノイル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１１．８において実施例２．５３．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.01 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.06 - 7.94 (m, 4H), 7.91 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 2H), 7.32 (td, 1H), 7.26 - 7.15 (m, 2H), 6.93 (s, 2H), 6.64 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.11 - 3.99 (m, 2H), 3.87 (d, 3H), 3.68 (t, 2H), 3.56 (dd, 2H), 3.47 - 3.33 (m, 5H), 3.33 - 3.19 (m, 4H), 3.14 (q, 2H), 2.84 (d, 3H), 2.63 (s, 3H), 2.30 (dd, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.42 - 0.72 (m, 21H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３６．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．８において実施例２．５３．１を実施例２．１１．７の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 11.01 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.06 - 7.94 (m, 4H), 7.91 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 2H), 7.32 (td, 1H), 7.26 - 7.15 (m, 2H), 6.93 (s, 2H), 6.64 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.11 - 3.99 (m, 2H), 3.87 (d, 3H), 3.68 (t, 2H), 3.56 (dd, 2H), 3.47 - 3.33 (m, 5H), 3.33 - 3.19 (m, 4H), 3.14 (q, 2H), 2.84 (d, 3H), 2.63 (s, 3H), 2.30 (dd, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.42 - 0.72 (m, 21H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３６．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．５４ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（シントンＳＲ）の合成
実施例１．３．２を実施例１．２６．１０で置き換えて、標題化合物を実施例２．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.28 (s, 2H), 9.96 (s, 1H), 9.59 (s, 1H), 9.03 (d, 2H), 8.53 (d, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.05 (t, 2H), 7.97 (d, 1H), 7.78 (dd, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.36 (t, 1H), 7.26 (d, 2H), 6.97 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.45 - 4.29 (m, 1H), 4.17 (t, 1H), 3.51 - 3.18 (m, 6H), 3.07 - 2.75 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (dq, 1H), 2.02 - 1.82 (m, 1H), 1.76 - 0.88 (m, 18H), 0.81 (dd, 14H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５２．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．３．２を実施例１．２６．１０で置き換えて、標題化合物を実施例２．２に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.28 (s, 2H), 9.96 (s, 1H), 9.59 (s, 1H), 9.03 (d, 2H), 8.53 (d, 1H), 8.42 (d, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.05 (t, 2H), 7.97 (d, 1H), 7.78 (dd, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.47 (d, 2H), 7.36 (t, 1H), 7.26 (d, 2H), 6.97 (s, 2H), 5.96 (s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.45 - 4.29 (m, 1H), 4.17 (t, 1H), 3.51 - 3.18 (m, 6H), 3.07 - 2.75 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (dq, 1H), 2.02 - 1.82 (m, 1H), 1.76 - 0.88 (m, 18H), 0.81 (dd, 14H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５２．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．５５ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＹＺ）の合成
２．５５．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７において実施例１．４．１０を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１６５（Ｍ＋Ｈ）＋、１１６３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．７において実施例１．４．１０を実施例１．１２．１０の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１６５（Ｍ＋Ｈ）＋、１１６３（Ｍ−Ｈ）−。
２．５５．２ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［２−（２−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝エトキシ）エトキシ］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１０において実施例２．５５．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (300 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.22 (t, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.35-7.31 (m, 2H), 7.20 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.61 (dd, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.08 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.28 (t, 2H), 4.09 (m, 4H), 4.03 (s, 2H), 3.91 (m, 3H), 3.84 (m, 4H), 3.73 (t, 2H), 3.49 (t, 2H), 3.40 (t, 2H), 3.34 (m, 2H), 3.30 (dd, 2H), 3.26 (m, 2H), 3.06 (q, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.39 (bs, 2H), 1.26 (q, 4H), 1.13 (q, 4H), 1.02 (q, 2H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．１０において実施例２．５５．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (300 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.22 (t, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.35-7.31 (m, 2H), 7.20 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.66 (d, 1H), 6.61 (dd, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.08 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.28 (t, 2H), 4.09 (m, 4H), 4.03 (s, 2H), 3.91 (m, 3H), 3.84 (m, 4H), 3.73 (t, 2H), 3.49 (t, 2H), 3.40 (t, 2H), 3.34 (m, 2H), 3.30 (dd, 2H), 3.26 (m, 2H), 3.06 (q, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.39 (bs, 2H), 1.26 (q, 4H), 1.13 (q, 4H), 1.02 (q, 2H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５６ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−４−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１４−オキソ−４，７，１０−トリオキサ−１３−アザノナデカ−１−イル］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＱＲ）の合成
２．５６．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（５−（３−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）プロピル）−２−（（（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（５−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル）ピコリン酸
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−３−オキソ−２，７，１０，１３−テトラオキサ−４−アザヘキサデカン−１６−イル）−２−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（５６ｍｇ）及び実施例１．４３．５（４７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２５５．４（Ｍ−Ｈ）−。
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（４−（１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−３−オキソ−２，７，１０，１３−テトラオキサ−４−アザヘキサデカン−１６−イル）−２−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（５６ｍｇ）及び実施例１．４３．５（４７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２５５．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．５６．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−４−［１９−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−１４−オキソ−４，７，１０−トリオキサ−１３−アザノナデカ−１−イル］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５６．１（２１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（５．２４ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１２ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.17 (s, 2H), 9.68 (d, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.29 (dd, 2H), 8.14 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 8.01 - 7.88 (m, 2H), 7.82 - 7.69 (m, 2H), 7.51 - 7.40 (m, 2H), 7.38 - 7.29 (m, 1H), 7.17 (t, 1H), 7.13 - 7.01 (m, 2H), 6.95 (s, 3H), 5.02 (s, 2H), 4.94 - 4.86 (m, 1H), 3.91 - 3.79 (m, 4H), 3.33 (td, 9H), 3.29 - 3.22 (m, 2H), 3.12 (q, 2H), 3.04 (d, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.98 (t, 2H), 1.70 (p, 2H), 1.42 (dt, 7H), 1.31 - 0.89 (m, 13H), 0.82 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４４８．３（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５６．１（２１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（５．２４ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１２ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 13.17 (s, 2H), 9.68 (d, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.29 (dd, 2H), 8.14 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 8.01 - 7.88 (m, 2H), 7.82 - 7.69 (m, 2H), 7.51 - 7.40 (m, 2H), 7.38 - 7.29 (m, 1H), 7.17 (t, 1H), 7.13 - 7.01 (m, 2H), 6.95 (s, 3H), 5.02 (s, 2H), 4.94 - 4.86 (m, 1H), 3.91 - 3.79 (m, 4H), 3.33 (td, 9H), 3.29 - 3.22 (m, 2H), 3.12 (q, 2H), 3.04 (d, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.98 (t, 2H), 1.70 (p, 2H), 1.42 (dt, 7H), 1.31 - 0.89 (m, 13H), 0.82 (s, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４４８．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．５７ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［４−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）ブチル］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＳＥ）の合成
２．５７．１ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−ブロモ−４−ホルミルフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（２．６７ｇ）、２−ブロモ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（０．９０ｇ）及び酸化銀（１．５６ｇ）の混合物を、光から保護して室温でアセトニトリル（２０ｍＬ）中にて撹拌した。３時間後、反応物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、珪藻土に通して濾過し、さらにジクロロメタン（４０ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。残渣を３０分かけて５％〜５０％ヘキサン／酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５１７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−ブロモ−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート（２．６７ｇ）、２−ブロモ−４−ヒドロキシベンズアルデヒド（０．９０ｇ）及び酸化銀（１．５６ｇ）の混合物を、光から保護して室温でアセトニトリル（２０ｍＬ）中にて撹拌した。３時間後、反応物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で希釈し、珪藻土に通して濾過し、さらにジクロロメタン（４０ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。残渣を３０分かけて５％〜５０％ヘキサン／酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５１７．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５７．２ （９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルブタ−３−イン−１−イルカルバメート
ブタ−３−イン−１−アミン塩酸塩（９ｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（４４．７ｍＬ）の溶液をジクロロメタン（７０ｍＬ）中で撹拌し、混合物を０℃に冷却した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（２２．０６ｇ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）中溶液を加え、反応物を２時間撹拌した。反応混合物を濃縮した。粗製物をシリカゲル上に置き、シリカゲルカラム上に装填し、石油ジエチルエーテル／酢酸エチル（１０％〜２５％）で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
ブタ−３−イン−１−アミン塩酸塩（９ｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（４４．７ｍＬ）の溶液をジクロロメタン（７０ｍＬ）中で撹拌し、混合物を０℃に冷却した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（２２．０６ｇ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）中溶液を加え、反応物を２時間撹拌した。反応混合物を濃縮した。粗製物をシリカゲル上に置き、シリカゲルカラム上に装填し、石油ジエチルエーテル／酢酸エチル（１０％〜２５％）で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．５７．３ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（４−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）ブタ−１−イン−１−イル）−４−ホルミルフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．５７．１（０．３８９ｇ）、実施例２．５７．２（０．２８５ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン（ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｓｉｎｅ））パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．０５３ｇ）及びヨウ化銅（Ｉ）（０．０１４ｇ）をバイアル中に秤量し、バイアルを窒素の気流でフラッシュした。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２６３ｍＬ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ）及びブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を３０分かけて５％〜６０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７２８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．５７．１（０．３８９ｇ）、実施例２．５７．２（０．２８５ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン（ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｓｉｎｅ））パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．０５３ｇ）及びヨウ化銅（Ｉ）（０．０１４ｇ）をバイアル中に秤量し、バイアルを窒素の気流でフラッシュした。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２６３ｍＬ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）を加え、反応物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をジエチルエーテル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３０ｍＬ）及びブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を３０分かけて５％〜６０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７２８．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５７．４ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（４−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）ブチル）−４−ホルミルフェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．５７．３（２６２ｍｇ）及びテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）を５０ｍＬの圧力ボトル中１０％パラジウム／Ｃ（５０ｍｇ）に加え、混合物を３０ｐｓｉのＨ２下室温で２時間振盪した。反応混合物を濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．５７．３（２６２ｍｇ）及びテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）を５０ｍＬの圧力ボトル中１０％パラジウム／Ｃ（５０ｍｇ）に加え、混合物を３０ｐｓｉのＨ２下室温で２時間振盪した。反応混合物を濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３２．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５７．５ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（４−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）ブチル）−４−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．５７．４（０．２３５ｇ）のテトラヒドロフラン（１．０ｍＬ）及びメタノール（１．０ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（６．０７ｍｇ）を一度に加えた。反応物を１５分間撹拌し、酢酸エチル（７５ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を１０％〜７０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．５７．４（０．２３５ｇ）のテトラヒドロフラン（１．０ｍＬ）及びメタノール（１．０ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（６．０７ｍｇ）を一度に加えた。反応物を１５分間撹拌し、酢酸エチル（７５ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を１０％〜７０％酢酸エチル／ヘプタンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７３４．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５７．６ （２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（３−（４−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）ブチル）−４−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェノキシ）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．５７．５（０．１４８ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．１２３ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中周囲温度溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５３ｍＬ）を加えた。３時間後、反応混合物を濃縮した。残渣を１０％〜６０％酢酸エチル／ヘキサンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．５７．５（０．１４８ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（０．１２３ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．５ｍＬ）中周囲温度溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５３ｍＬ）を加えた。３時間後、反応混合物を濃縮した。残渣を１０％〜６０％酢酸エチル／ヘキサンの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８９９．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５７．７ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（４−アミノブチル）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
実施例１．６．３（０．１０１ｇ）及び実施例２．５７．６（０．０９５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５５ｍＬ）を加え、反応物を室温で３時間撹拌した。反応物を２，２，２−トリフルオロ酢酸（０．２０４ｍＬ）、水（１ｍＬ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）の混合物でクエンチし、３０分かけて５％〜５０％アセトニトリル水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１５２．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．６．３（０．１０１ｇ）及び実施例２．５７．６（０．０９５ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５５ｍＬ）を加え、反応物を室温で３時間撹拌した。反応物を２，２，２−トリフルオロ酢酸（０．２０４ｍＬ）、水（１ｍＬ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）の混合物でクエンチし、３０分かけて５％〜５０％アセトニトリル水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１５２．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５７．８ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（４−（（Ｒ）−２−アミノ−３−スルホプロパンアミド）ブチル）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル）ピコリン酸
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（０．０５８ｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（０．０５４ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５１ｍＬ）を加えた。５分間撹拌した後、混合物を実施例２．５７．７（０．１１３ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５１ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中混合物に加えた。２時間撹拌した後、ジエチルアミン（０．１０２ｍＬ）を加え、反応混合物を３０分間撹拌した。反応混合物を２，２，２−トリフルオロ酢酸（０．１８９ｍＬ）の水（１ｍＬ）中溶液で希釈し、３０分かけて５％〜８５％アセトニトリル水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
（Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−スルホプロパン酸（０．０５８ｇ）及びＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（０．０５４ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５１ｍＬ）を加えた。５分間撹拌した後、混合物を実施例２．５７．７（０．１１３ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０５１ｍＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍＬ）中混合物に加えた。２時間撹拌した後、ジエチルアミン（０．１０２ｍＬ）を加え、反応混合物を３０分間撹拌した。反応混合物を２，２，２−トリフルオロ酢酸（０．１８９ｍＬ）の水（１ｍＬ）中溶液で希釈し、３０分かけて５％〜８５％アセトニトリル水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３０３．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５７．９ ４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−３−［４−（｛Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−３−スルホ−Ｌ−アラニル｝アミノ）ブチル］フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５７．８（０．０４４ｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（０．０１２ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．４ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２７ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を２，２，２−トリフルオロ酢酸（０．０６０ｍＬ）、水（１ｍＬ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）の混合物でクエンチし、３０分かけて５％〜５０％アセトニトリル水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.10 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.38 (dd, 1H), 8.27 - 8.14 (m, 3H), 8.07 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.82 (dd, 2H), 7.79 - 7.66 (m, 2H), 7.53 - 7.44 (m, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.88 (d, 1H), 6.82 (dd, 1H), 5.04 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.29 (q, 2H), 3.57 (s, 2H), 3.44 (s, 4H), 3.41 (d, 1H), 3.40 - 3.27 (m, 3H), 3.30 - 3.21 (m, 2H), 3.03 (t, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.79 (dd, 1H), 2.70 (dd, 1H), 2.58 (s, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.06 (t, 2H), 1.53 - 1.41 (m, 5H), 1.42 (s, 6H), 1.26 (s, 2H), 1.25 - 1.07 (m, 8H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４９４．１（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５７．８（０．０４４ｇ）及び２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノエート（０．０１２ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．４ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２７ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を２，２，２−トリフルオロ酢酸（０．０６０ｍＬ）、水（１ｍＬ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１ｍＬ）の混合物でクエンチし、３０分かけて５％〜５０％アセトニトリル水の濃度勾配を用いるＧｉｌｓｏｎ２０２０システム上での分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを凍結乾燥して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ 13.10 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.38 (dd, 1H), 8.27 - 8.14 (m, 3H), 8.07 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.82 (dd, 2H), 7.79 - 7.66 (m, 2H), 7.53 - 7.44 (m, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.88 (d, 1H), 6.82 (dd, 1H), 5.04 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.29 (q, 2H), 3.57 (s, 2H), 3.44 (s, 4H), 3.41 (d, 1H), 3.40 - 3.27 (m, 3H), 3.30 - 3.21 (m, 2H), 3.03 (t, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.79 (dd, 1H), 2.70 (dd, 1H), 2.58 (s, 2H), 2.23 (s, 3H), 2.06 (t, 2H), 1.53 - 1.41 (m, 5H), 1.42 (s, 6H), 1.26 (s, 2H), 1.25 - 1.07 (m, 8H), 0.85 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４９４．１（Ｍ−Ｈ）−。
２．５８ ２−｛６−［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］−２−メチル−３，３−ジオキシド−７−オキソ−８−オキサ−３λ６−チア−２，６−ジアザノナン−９−イル｝−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＵＨ）の合成
２．５８．１ （９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルブタ−３−イン−１−イルカルバメート
ブタ−３−イン−１−アミン塩酸塩（９ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４４．７ｍＬ）の溶液をジクロロメタン（７０ｍＬ）中で撹拌し、混合物を０℃に冷却した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（２２．０６ｇ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）中溶液を加え、反応混合物を２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜２５％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
ブタ−３−イン−１−アミン塩酸塩（９ｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４４．７ｍＬ）の溶液をジクロロメタン（７０ｍＬ）中で撹拌し、混合物を０℃に冷却した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルカルボノクロリデート（２２．０６ｇ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）中溶液を加え、反応混合物を２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜２５％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３１４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．５８．２ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−メチル６−（５−（４−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）ブタ−１−イニル）−２−ホルミルフェノキシ）−３，４，５−トリアセトキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート
実施例２．５８．３（２．７ｇ）、実施例２．５８．１（２．０９１ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．３３６ｇ）及びヨウ化銅（Ｉ）（０．０９１ｇ）をバイアル中に秤量し、窒素の気流でフラッシュした。トリエチルアミン（２．００１ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（４５ｍＬ）を加え、反応物を室温で撹拌した。１６時間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜５０％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５０（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．５８．３（２．７ｇ）、実施例２．５８．１（２．０９１ｇ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（０．３３６ｇ）及びヨウ化銅（Ｉ）（０．０９１ｇ）をバイアル中に秤量し、窒素の気流でフラッシュした。トリエチルアミン（２．００１ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（４５ｍＬ）を加え、反応物を室温で撹拌した。１６時間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜５０％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５０（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．５８．３ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−メチル６−（５−（４−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）ブチル）−２−ホルミルフェノキシ）−３，４，５−トリアセトキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート
実施例２．５８．２（１．５ｇ）及びテトラヒドロフラン（４５ｍＬ）を１００ｍＬの圧力ボトル中１０％Ｐｄ−Ｃ（０．４８３ｇ）に加え、混合物を１ａｔｍのＨ２下室温で１６時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．５８．２（１．５ｇ）及びテトラヒドロフラン（４５ｍＬ）を１００ｍＬの圧力ボトル中１０％Ｐｄ−Ｃ（０．４８３ｇ）に加え、混合物を１ａｔｍのＨ２下室温で１６時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．５８．４ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−メチル６−（５−（４−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）ブチル）−２−（ヒドロキシメチル）フェノキシ）−３，４，５−トリアセトキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート
実施例２．５８．３（２．０ｇ）のテトラヒドロフラン（７．００ｍＬ）及びメタノール（７ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、ＮａＢＨ４（０．０５２ｇ）を一度に加えた。３０分後、反応混合物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｆｌａｔｅ）で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜４０％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．５８．３（２．０ｇ）のテトラヒドロフラン（７．００ｍＬ）及びメタノール（７ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、ＮａＢＨ４（０．０５２ｇ）を一度に加えた。３０分後、反応混合物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウム（ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｆｌａｔｅ）で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜４０％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．５８．５ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）−メチル６−（５−（４−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）ブチル）−２−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニルオキシ）メチル）フェノキシ）−３，４，５−トリアセトキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート
実施例２．５８．４（３．０ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（２．４８８ｇ）の乾燥アセトニトリル（７０ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０７ｍＬ）を加えた。室温で１６時間撹拌した後、反応混合物を濃縮して残渣を得、これを酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜５０％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．５８．４（３．０ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（２．４８８ｇ）の乾燥アセトニトリル（７０ｍＬ）中溶液に、０℃でＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．０７ｍＬ）を加えた。室温で１６時間撹拌した後、反応混合物を濃縮して残渣を得、これを酢酸エチル中石油エーテル（１０％〜５０％）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９２１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．５８．６ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（４−アミノブチル）−２−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）エチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．５８．５（４０．８ｍｇ）及び実施例１．３６（４０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２７８．７（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５８．５（４０．８ｍｇ）及び実施例１．３６（４０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２７８．７（Ｍ−Ｈ）−。
２．５８．７ ２−｛６−［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］−２−メチル−３，３−ジオキシド−７−オキソ−８−オキサ−３λ６−チア−２，６−ジアザノナン−９−イル｝−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５８．６（３５．１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中溶液に、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセテート（６．９３ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.02 (dd, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.53 - 7.37 (m, 3H), 7.32 (td, 2H), 7.24 (s, 1H), 7.16 (dd, 1H), 7.04 (s, 2H), 6.99 - 6.87 (m, 2H), 6.81 (d, 1H), 5.08 (d, 2H), 4.99 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.86 (q, 3H), 3.47 - 3.14 (m, 9H), 2.99 (dt, 4H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.49 (p, 2H), 1.41 - 1.27 (m, 4H), 1.29 - 0.86 (m, 10H), 0.80 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４１３．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５８．６（３５．１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中溶液に、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセテート（６．９３ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 8.02 (dd, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.53 - 7.37 (m, 3H), 7.32 (td, 2H), 7.24 (s, 1H), 7.16 (dd, 1H), 7.04 (s, 2H), 6.99 - 6.87 (m, 2H), 6.81 (d, 1H), 5.08 (d, 2H), 4.99 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.86 (q, 3H), 3.47 - 3.14 (m, 9H), 2.99 (dt, 4H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.49 (p, 2H), 1.41 - 1.27 (m, 4H), 1.29 - 0.86 (m, 10H), 0.80 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４１３．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．５９ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（シントンＵＩ）の合成
２．５９．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（４−アミノブチル）−２−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．３６を実施例１．３８で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２４３．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３６を実施例１．３８で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２４３．７（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．５９．２ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸
実施例２．５８．６を実施例２．５９．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.02 (dd, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (ddd, 3H), 7.32 (td, 2H), 7.24 (s, 1H), 7.13 (dd, 1H), 7.04 (s, 2H), 6.99 - 6.86 (m, 2H), 6.81 (d, 1H), 5.06 (d, 2H), 4.98 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.85 (q, 3H), 3.77 (d, 2H), 3.39 (q, 5H), 3.27 (q, 4H), 2.99 (dt, 4H), 2.88 (s, 2H), 2.81 - 2.66 (m, 5H), 2.06 (d, 3H), 1.50 (p, 2H), 1.34 (dd, 4H), 1.27 - 0.85 (m, 9H), 0.79 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．５８．６を実施例２．５９．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.02 (dd, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (ddd, 3H), 7.32 (td, 2H), 7.24 (s, 1H), 7.13 (dd, 1H), 7.04 (s, 2H), 6.99 - 6.86 (m, 2H), 6.81 (d, 1H), 5.06 (d, 2H), 4.98 (d, 1H), 4.92 (s, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.85 (q, 3H), 3.77 (d, 2H), 3.39 (q, 5H), 3.27 (q, 4H), 2.99 (dt, 4H), 2.88 (s, 2H), 2.81 - 2.66 (m, 5H), 2.06 (d, 3H), 1.50 (p, 2H), 1.34 (dd, 4H), 1.27 - 0.85 (m, 9H), 0.79 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４０１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６０ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−スルファモイルエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＵＳ）の合成
２．６０．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（４−アミノブチル）−２−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−スルファモイルエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．３６を実施例１．１８．２０で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２５１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３６を実施例１．１８．２０で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２５１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６０．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−スルファモイルエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５８．６を実施例２．６０．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.84 (s, 2H), 8.04 (dd, 2H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.53 - 7.38 (m, 3H), 7.38 - 7.30 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.96 - 6.77 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 5.00 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (q, 3H), 3.48 - 3.16 (m, 5H), 3.09 - 2.94 (m, 4H), 2.07 (s, 3H), 1.50 (d, 2H), 1.36 (d, 3H), 1.29 - 0.88 (m, 9H), 0.81 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３８５．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５８．６を実施例２．６０．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.84 (s, 2H), 8.04 (dd, 2H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.53 - 7.38 (m, 3H), 7.38 - 7.30 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.96 - 6.77 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 5.00 (d, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (q, 3H), 3.48 - 3.16 (m, 5H), 3.09 - 2.94 (m, 4H), 2.07 (s, 3H), 1.50 (d, 2H), 1.36 (d, 3H), 1.29 - 0.88 (m, 9H), 0.81 (d, 7H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３８５．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．６１ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸（シントンＵＹ）の合成
２．６１．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（４−アミノブチル）−２−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．３６を実施例１．３９で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３６を実施例１．３９で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２２８．８（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６１．２ ６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸
実施例２．５８．６を実施例２．６１．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.01 (dd, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.71 (d, 0H), 7.60 (d, 1H), 7.45 (tdd, 3H), 7.38 - 7.29 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.96 - 6.90 (m, 2H), 6.82 (d, 1H), 5.07 (s, 2H), 5.01 (t, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (q, 3H), 3.79 (d, 2H), 3.28 (p, 2H), 3.09 - 2.93 (m, 3H), 2.52 (d, 3H), 2.35 - 2.26 (m, 2H), 2.07 (d, 2H), 1.60 - 1.44 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.29 - 0.88 (m, 6H), 0.81 (d, 5H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５８．６を実施例２．６１．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.83 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.01 (dd, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.71 (d, 0H), 7.60 (d, 1H), 7.45 (tdd, 3H), 7.38 - 7.29 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.96 - 6.90 (m, 2H), 6.82 (d, 1H), 5.07 (s, 2H), 5.01 (t, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (q, 3H), 3.79 (d, 2H), 3.28 (p, 2H), 3.09 - 2.93 (m, 3H), 2.52 (d, 3H), 2.35 - 2.26 (m, 2H), 2.07 (d, 2H), 1.60 - 1.44 (m, 2H), 1.34 (d, 3H), 1.29 - 0.88 (m, 6H), 0.81 (d, 5H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３６３．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．６２ ３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸（シントンＵＸ）の合成
２．６２．１ ３−（１−（（３−（２−（（３−アミノ−３−オキソプロピル）（（（４−（４−アミノブチル）−２−（（（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．３６を実施例１．３２．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２１４．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例１．３６を実施例１．３２．２で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．６に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２１４．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６２．２ ３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）（｛［２−｛［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル］オキシ｝−４−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）ベンジル］オキシ｝カルボニル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸
実施例２．５８．６を実施例２．６２．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.83 (s, 2H), 8.06 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.53 - 7.38 (m, 3H), 7.34 (q, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.93 (d, 2H), 6.87 - 6.73 (m, 2H), 5.07 (d, 2H), 5.04 - 4.97 (m, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (q, 3H), 3.79 (d, 2H), 3.29 (t, 3H), 3.10 - 2.95 (m, 4H), 2.32 (p, 2H), 2.07 (d, 3H), 1.51 (dd, 2H), 1.36 (dd, 5H), 1.30 - 0.86 (m, 8H), 0.81 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３４９．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５８．６を実施例２．６２．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.83 (s, 2H), 8.06 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.77 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.53 - 7.38 (m, 3H), 7.34 (q, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.05 (s, 2H), 6.93 (d, 2H), 6.87 - 6.73 (m, 2H), 5.07 (d, 2H), 5.04 - 4.97 (m, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (q, 3H), 3.79 (d, 2H), 3.29 (t, 3H), 3.10 - 2.95 (m, 4H), 2.32 (p, 2H), 2.07 (d, 3H), 1.51 (dd, 2H), 1.36 (dd, 5H), 1.30 - 0.86 (m, 8H), 0.81 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３４９．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．６３ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＷＺ）の合成
２．６３．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（４−アミノブチル）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（メチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（３−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７において実施例１．３４．５を実施例１．１２．１０及び実施例２．５８．５を実施例２．１１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
実施例２．１１．７において実施例１．３４．５を実施例１．１２．１０及び実施例２．５８．５を実施例２．１１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。
２．６３．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（メチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１０において実施例２．６３．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.47 (bs, 1H), 12.16 (d, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.69 (d, 1H), 8.11-8.04 (m, 4H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.19 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 5.10 (s, 2H), 5.03 (d, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.90 (m, 3H), 3.48 (m, 3H), 3.28 (m, 2H), 3.05 (m, 4H), 2.93 (s, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.54-2.53 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.54 (m, 2H), 1.40 (m, 4H), 1.30-1.22 (m, 6H), 1.20-1.14 (m, 6H), 1.11-0.96 (m, 2H), 0.87 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３００（Ｍ＋Ｎａ）＋、１２７６（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１０において実施例２．６３．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.47 (bs, 1H), 12.16 (d, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.69 (d, 1H), 8.11-8.04 (m, 4H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.19 (t, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 5.10 (s, 2H), 5.03 (d, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.90 (m, 3H), 3.48 (m, 3H), 3.28 (m, 2H), 3.05 (m, 4H), 2.93 (s, 2H), 2.88 (s, 2H), 2.54-2.53 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.54 (m, 2H), 1.40 (m, 4H), 1.30-1.22 (m, 6H), 1.20-1.14 (m, 6H), 1.11-0.96 (m, 2H), 0.87 (d, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３００（Ｍ＋Ｎａ）＋、１２７６（Ｍ−Ｈ）−。
２．６４ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＸＯ）の合成
２．６４．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（４−アミノブチル）−２−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７において実施例１．４．１０を実施例１．１２．１０及び実施例２．５８．５を実施例２．１１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１３３（Ｍ＋Ｈ）＋、１１３１（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．７において実施例１．４．１０を実施例１．１２．１０及び実施例２．５８．５を実施例２．１１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １１３３（Ｍ＋Ｈ）＋、１１３１（Ｍ−Ｈ）−。
２．６４．２ ２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（４−｛［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］アミノ｝ブチル）フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．１０において実施例２．６４．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.08 (t, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.17 (m, 3H), 7.08 (s, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.84 (d, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.05 (s, 2H), 5.02 (d, 1H), 4.27 (m, 2H), 4.10 (m, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.70 (m, 2H), 3.42 (t, 2H), 3.35 (t, 2H), 3.30 (t, 2H), 3.06 (m, 5H), 2.53 (m, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.53 (m, 2H), 1.43-1.35 (m, 4H), 1.27 (m, 4H), 1.14 (q, 4H), 1.03 (dd, 2H), 0.86 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２７０（Ｍ＋Ｈ）＋、１２６８（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１０において実施例２．６４．１を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 8.08 (t, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.46 (t, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.17 (m, 3H), 7.08 (s, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.84 (d, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.05 (s, 2H), 5.02 (d, 1H), 4.27 (m, 2H), 4.10 (m, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.91 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.70 (m, 2H), 3.42 (t, 2H), 3.35 (t, 2H), 3.30 (t, 2H), 3.06 (m, 5H), 2.53 (m, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.53 (m, 2H), 1.43-1.35 (m, 4H), 1.27 (m, 4H), 1.14 (q, 4H), 1.03 (dd, 2H), 0.86 (s, 6H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２７０（Ｍ＋Ｈ）＋、１２６８（Ｍ−Ｈ）−。
２．６５ （６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−（２−｛２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝アミノ）フェニル｝エチル）−Ｌ−グロン酸（シントンＸＷ）の合成
２．６５．１ （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−６−（ベンジルオキシメチル）−テトラヒドロピラン−２−オン
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オール（７５ｇ）のジメチルスルホキシド（４００ｍＬ）中溶液に、０℃で無水酢酸（２２５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した後、０℃に冷却した。多量の水を加え、撹拌を停止し、反応混合物を３時間静置した（粗製のラクトンはフラスコの底部にあった。）。上清を除去し、粗製の混合物を酢酸エチルで希釈し、水で３回洗浄し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で中和し、水で再度２回洗浄した。次いで有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５６１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
（３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−６−（（ベンジルオキシ）メチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オール（７５ｇ）のジメチルスルホキシド（４００ｍＬ）中溶液に、０℃で無水酢酸（２２５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した後、０℃に冷却した。多量の水を加え、撹拌を停止し、反応混合物を３時間静置した（粗製のラクトンはフラスコの底部にあった。）。上清を除去し、粗製の混合物を酢酸エチルで希釈し、水で３回洗浄し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液で中和し、水で再度２回洗浄した。次いで有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５６１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．６５．２ （３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−６−（ベンジルオキシメチル）−２−エチニル−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−オール
窒素下及びドライアイス／アセトン浴（内温−６５℃）中で冷却したエチニルトリメチルシラン（１８．２３ｇ）のテトラヒドロフラン（４００ｍＬ）中溶液に、温度を−６０℃未満に維持しながら、ヘキサン中２．５Ｍ ＢｕＬｉ（５５．７ｍＬ）を滴下添加した。混合物を冷却浴中で４０分間、続いて氷水浴中で（内温は０．４℃に昇温した。）４０分間撹拌し、最後に−７５℃に再度冷却した。実施例２．５５．１（５０ｇ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中溶液を、内温を−７０℃未満に維持しながら、滴下添加した。混合物をドライアイス／アセトン浴中でさらに３時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５０ｍＬ）でクエンチした。混合物を室温に加温し、酢酸エチル（３×３００ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６５９（Ｍ＋Ｎａ）＋。
窒素下及びドライアイス／アセトン浴（内温−６５℃）中で冷却したエチニルトリメチルシラン（１８．２３ｇ）のテトラヒドロフラン（４００ｍＬ）中溶液に、温度を−６０℃未満に維持しながら、ヘキサン中２．５Ｍ ＢｕＬｉ（５５．７ｍＬ）を滴下添加した。混合物を冷却浴中で４０分間、続いて氷水浴中で（内温は０．４℃に昇温した。）４０分間撹拌し、最後に−７５℃に再度冷却した。実施例２．５５．１（５０ｇ）のテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中溶液を、内温を−７０℃未満に維持しながら、滴下添加した。混合物をドライアイス／アセトン浴中でさらに３時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２５０ｍＬ）でクエンチした。混合物を室温に加温し、酢酸エチル（３×３００ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、真空で濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６５９（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．６５．３ トリメチル（（（３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−６−（ベンジルオキシメチル）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチニル）シラン
実施例２．６５．２（６０ｇ）のアセトニトリル（４５０ｍＬ）及びジクロロメタン（１５０ｍＬ）中混合物に、氷塩浴中−１５℃でトリエチルシラン（８１ｍＬ）を滴下添加し、続いて内温が−１０℃を超えない程度の速度で三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（４０．６ｍＬ）を加えた。混合物を−１５℃〜−１０℃の間で２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２７５ｍＬ）でクエンチし、室温で１時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（３×５５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を０％〜７％酢酸エチル／石油エーテルの濃度勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６４３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．６５．２（６０ｇ）のアセトニトリル（４５０ｍＬ）及びジクロロメタン（１５０ｍＬ）中混合物に、氷塩浴中−１５℃でトリエチルシラン（８１ｍＬ）を滴下添加し、続いて内温が−１０℃を超えない程度の速度で三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（４０．６ｍＬ）を加えた。混合物を−１５℃〜−１０℃の間で２時間撹拌した。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２７５ｍＬ）でクエンチし、室温で１時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（３×５５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮した。残渣を０％〜７％酢酸エチル／石油エーテルの濃度勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ６４３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．６５．４ （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−２−（ベンジルオキシメチル）−６−エチニル−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン
実施例２．６５．３（８０ｇ）のジクロロメタン（２００ｍＬ）及びメタノール（１０００ｍＬ）中混合溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（２５８ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を除去した。次いで残渣を水とジクロロメタンとの間で分配した。抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５７１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．６５．３（８０ｇ）のジクロロメタン（２００ｍＬ）及びメタノール（１０００ｍＬ）中混合溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（２５８ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を除去した。次いで残渣を水とジクロロメタンとの間で分配した。抽出物をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ５７１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．６５．５ （２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２−（アセトキシメチル）−６−エチニル−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
氷／水浴により冷却した実施例２．６５．４（６６ｇ）の無水酢酸（５００ｍＬ）中溶液に、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（１５２ｍＬ）を滴下添加した。混合物を室温で１６時間撹拌し、氷／水浴で冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で中和した。混合物を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、真空で濃縮した。残渣を０％〜３０％酢酸エチル／石油エーテルの濃度勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３５７（Ｍ＋Ｈ）＋。
氷／水浴により冷却した実施例２．６５．４（６６ｇ）の無水酢酸（５００ｍＬ）中溶液に、三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体（１５２ｍＬ）を滴下添加した。混合物を室温で１６時間撹拌し、氷／水浴で冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で中和した。混合物を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、真空で濃縮した。残渣を０％〜３０％酢酸エチル／石油エーテルの濃度勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３５７（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６５．６ （３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｒ）−２−エチニル−６−（ヒドロキシメチル）−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリオール
実施例２．６５．５（２５ｇ）のメタノール（４４０ｍＬ）中溶液に、ナトリウムメタノレート（２．１ｇ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、次いでジオキサン中４Ｍ ＨＣｌで中和した。溶媒を除去し、残渣をシリカゲル上に吸着させ、シリカゲルカラム上に装填した。カラムを０〜１００％酢酸エチル／石油エーテル次いで０％〜１２％メタノール／酢酸エチルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２１１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
実施例２．６５．５（２５ｇ）のメタノール（４４０ｍＬ）中溶液に、ナトリウムメタノレート（２．１ｇ）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、次いでジオキサン中４Ｍ ＨＣｌで中和した。溶媒を除去し、残渣をシリカゲル上に吸着させ、シリカゲルカラム上に装填した。カラムを０〜１００％酢酸エチル／石油エーテル次いで０％〜１２％メタノール／酢酸エチルの濃度勾配で溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２１１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
２．６５．７ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−６−エチニル−３，４，５−トリヒドロキシ−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボン酸
３ツ口丸底フラスコに実施例２．６５．６（６．００ｇ）、ＫＢｒ（０．３０ｇ）、テトラブチルアンモニウムブロミド（０．４１ｇ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液６０ｍＬを入れた。ジクロロメタン６０ｍＬ中の（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシダニル（０．１５ｇ）を加えた。混合物を激しく撹拌し、氷塩浴中で内温−２℃に冷却した。ブライン（１２ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（２４ｍＬ）及びＮａＯＣｌ（１５４ｍＬ）の溶液を、内温が２℃未満に維持されるように滴下添加した。反応混合物のｐＨを固体のＮａ２ＣＯ３を加えて８．２〜８．４の範囲で維持した。合計６時間後、反応物を内温３℃に冷却し、エタノール（約２０ｍＬ）を滴下添加し、約３０分間撹拌した。混合物を分液漏斗に移し、ジクロロメタン層を廃棄した。水性層のｐＨを１Ｍ ＨＣｌ水溶液を使用して２〜３に調整した。次いで水性層を濃縮乾固して、固体を得た。メタノール（１００ｍＬ）を乾燥固体に加え、スラリー液を約３０分間撹拌した。混合物を珪藻土のパッド上で濾過し、漏斗中の残渣をメタノール約１００ｍＬで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、標題化合物を得た。
３ツ口丸底フラスコに実施例２．６５．６（６．００ｇ）、ＫＢｒ（０．３０ｇ）、テトラブチルアンモニウムブロミド（０．４１ｇ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液６０ｍＬを入れた。ジクロロメタン６０ｍＬ中の（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−イル）オキシダニル（０．１５ｇ）を加えた。混合物を激しく撹拌し、氷塩浴中で内温−２℃に冷却した。ブライン（１２ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（２４ｍＬ）及びＮａＯＣｌ（１５４ｍＬ）の溶液を、内温が２℃未満に維持されるように滴下添加した。反応混合物のｐＨを固体のＮａ２ＣＯ３を加えて８．２〜８．４の範囲で維持した。合計６時間後、反応物を内温３℃に冷却し、エタノール（約２０ｍＬ）を滴下添加し、約３０分間撹拌した。混合物を分液漏斗に移し、ジクロロメタン層を廃棄した。水性層のｐＨを１Ｍ ＨＣｌ水溶液を使用して２〜３に調整した。次いで水性層を濃縮乾固して、固体を得た。メタノール（１００ｍＬ）を乾燥固体に加え、スラリー液を約３０分間撹拌した。混合物を珪藻土のパッド上で濾過し、漏斗中の残渣をメタノール約１００ｍＬで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、標題化合物を得た。
２．６５．８ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−メチル６−エチニル−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−カルボキシレート
５００ｍＬの３ツ口丸底フラスコに実施例２．６５．７（６．４５ｇ）のメタノール（９６ｍＬ）中懸濁液を入れ、氷塩浴中にて内温−１℃で冷却した。チオニルクロリド（２．７９ｍＬ）を無溶媒で注意深く加えた。内温は添加の間上昇し続けたが、１０℃は超えなかった。反応物を１５〜２０℃に２．５時間かけてゆっくり加温した。２．５時間後、反応物を濃縮して、標題化合物を得た。
５００ｍＬの３ツ口丸底フラスコに実施例２．６５．７（６．４５ｇ）のメタノール（９６ｍＬ）中懸濁液を入れ、氷塩浴中にて内温−１℃で冷却した。チオニルクロリド（２．７９ｍＬ）を無溶媒で注意深く加えた。内温は添加の間上昇し続けたが、１０℃は超えなかった。反応物を１５〜２０℃に２．５時間かけてゆっくり加温した。２．５時間後、反応物を濃縮して、標題化合物を得た。
２．６５．９ （３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−エチニル−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７５ｍＬ）中溶液として実施例２．６５．８（６．９ｇ）に、４−ジメチルアミノピリジン（０．１７ｇ）及び無水酢酸（３６．１ｍＬ）を加えた。懸濁液を氷浴中で冷却し、ピリジン（１８．０４ｍＬ）を注射器により１５分かけて加えた。反応物を室温に終夜加温した。さらに無水酢酸（１２ｍＬ）及びピリジン（６ｍＬ）を加え、撹拌をさらに６時間続けた。反応物を氷浴中で冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液２５０ｍＬを加え、１時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を飽和ＣｕＳＯ４溶液で２回洗浄し、乾燥し、濃縮した。残渣を５０％酢酸エチル／石油エーテルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, メタノール-d4) δ ppm 5.29 (t, 1H), 5.08 (td, 2H), 4.48 (dd, 1H), 4.23 (d, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.04 (d, 1H), 2.03 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.98 (s, 4H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３５９．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７５ｍＬ）中溶液として実施例２．６５．８（６．９ｇ）に、４−ジメチルアミノピリジン（０．１７ｇ）及び無水酢酸（３６．１ｍＬ）を加えた。懸濁液を氷浴中で冷却し、ピリジン（１８．０４ｍＬ）を注射器により１５分かけて加えた。反応物を室温に終夜加温した。さらに無水酢酸（１２ｍＬ）及びピリジン（６ｍＬ）を加え、撹拌をさらに６時間続けた。反応物を氷浴中で冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液２５０ｍＬを加え、１時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を飽和ＣｕＳＯ４溶液で２回洗浄し、乾燥し、濃縮した。残渣を５０％酢酸エチル／石油エーテルで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (500 MHz, メタノール-d4) δ ppm 5.29 (t, 1H), 5.08 (td, 2H), 4.48 (dd, 1H), 4.23 (d, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.04 (d, 1H), 2.03 (s, 3H), 1.99 (s, 3H), 1.98 (s, 4H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ３５９．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．６５．１０ ２−ヨード−４−ニトロ安息香酸
機械撹拌機、温度プローブ及び添加漏斗を装着し、全体をカバーした３Ｌのフラスコに、窒素雰囲気下２−アミノ−４−ニトロ安息香酸（６９．１ｇ、Ｃｏｍｂｉ−Ｂｌｏｃｋｓ）及び硫酸、１．５Ｍ水溶液（６９６ｍＬ）を入れた。得られた懸濁液を内温０℃に冷却し、亜硝酸ナトリウム（２８．８ｇ）の水（２５０ｍＬ）中溶液を、温度を１℃未満に維持しながら４３分かけて滴下添加した。反応混合物を約０℃で１時間撹拌した。ヨウ化カリウム（１０７ｇ）の水（２５０ｍＬ）中溶液を、内温を１℃未満に維持しながら４４分かけて滴下添加した（初期添加は発熱であり、ガスが発生した。）。反応混合物を０℃で１時間撹拌した。温度を２０℃に昇温し、次いで周囲温度で終夜撹拌した。反応混合物は懸濁液になった。反応混合物を濾過し、集めた固体を水で洗浄した。含水固体（約１０８ｇ）を１０％亜硫酸ナトリウム（３５０ｍＬ、固体中に洗浄するために使用した水約２００ｍＬを含む）中で３０分間撹拌した。懸濁液を濃塩酸（３５ｍＬ）で酸性化し、固体を濾取し、水で洗浄した。固体を水（１Ｌ）中でスラリー化し、再度濾過し、固体を漏斗中で終夜乾燥した。次いで固体を真空乾燥機中６０℃で２時間乾燥した。得られた固体をジクロロメタン（５００ｍＬ）で摩砕し、懸濁液を濾過し、さらにジクロロメタンで洗浄した。固体を空気乾燥して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２９１．８（Ｍ−Ｈ）−。
機械撹拌機、温度プローブ及び添加漏斗を装着し、全体をカバーした３Ｌのフラスコに、窒素雰囲気下２−アミノ−４−ニトロ安息香酸（６９．１ｇ、Ｃｏｍｂｉ−Ｂｌｏｃｋｓ）及び硫酸、１．５Ｍ水溶液（６９６ｍＬ）を入れた。得られた懸濁液を内温０℃に冷却し、亜硝酸ナトリウム（２８．８ｇ）の水（２５０ｍＬ）中溶液を、温度を１℃未満に維持しながら４３分かけて滴下添加した。反応混合物を約０℃で１時間撹拌した。ヨウ化カリウム（１０７ｇ）の水（２５０ｍＬ）中溶液を、内温を１℃未満に維持しながら４４分かけて滴下添加した（初期添加は発熱であり、ガスが発生した。）。反応混合物を０℃で１時間撹拌した。温度を２０℃に昇温し、次いで周囲温度で終夜撹拌した。反応混合物は懸濁液になった。反応混合物を濾過し、集めた固体を水で洗浄した。含水固体（約１０８ｇ）を１０％亜硫酸ナトリウム（３５０ｍＬ、固体中に洗浄するために使用した水約２００ｍＬを含む）中で３０分間撹拌した。懸濁液を濃塩酸（３５ｍＬ）で酸性化し、固体を濾取し、水で洗浄した。固体を水（１Ｌ）中でスラリー化し、再度濾過し、固体を漏斗中で終夜乾燥した。次いで固体を真空乾燥機中６０℃で２時間乾燥した。得られた固体をジクロロメタン（５００ｍＬ）で摩砕し、懸濁液を濾過し、さらにジクロロメタンで洗浄した。固体を空気乾燥して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ２９１．８（Ｍ−Ｈ）−。
２．６５．１１ （２−ヨード−４−ニトロフェニル）メタノール
フレーム乾燥した３Ｌの３ツ口フラスコに実施例２．６５．１０（５１．９ｇ）及びテトラヒドロフラン（７００ｍＬ）を入れた。溶液を氷浴中で０．５℃に冷却し、ボラン−テトラヒドロフラン錯体（４４３ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）を５０分かけて滴下添加すると（ガス発生）、最終内温は１．３℃になった。反応混合物を１５分間撹拌し、氷浴を除去した。反応物を３０分かけて周囲温度にした。加熱マントルを取り付け、反応物を内温６５．５℃に３時間加熱し、次いで終夜撹拌しながら室温に冷却した。反応混合物を氷浴中で０℃に冷却し、メタノール（４００ｍＬ）を滴下添加することによりクエンチした。短時間インキュベーションした後、温度はガス発生しながら素早く上昇した。最初１００ｍＬを約３０分かけて加えた後、反応は最早発熱せず、ガス発生は止んだ。氷浴を除去し、混合物を窒素下周囲温度で終夜撹拌した。混合物を濃縮して固体にし、ジクロロメタン／メタノールに溶解し、シリカゲル（約１５０ｇ）上に吸着させた。残渣をシリカゲル（３０００ｍＬ）のプラグ上に装填し、ジクロロメタンで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２９６．８（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
フレーム乾燥した３Ｌの３ツ口フラスコに実施例２．６５．１０（５１．９ｇ）及びテトラヒドロフラン（７００ｍＬ）を入れた。溶液を氷浴中で０．５℃に冷却し、ボラン−テトラヒドロフラン錯体（４４３ｍＬ、ＴＨＦ中１Ｍ）を５０分かけて滴下添加すると（ガス発生）、最終内温は１．３℃になった。反応混合物を１５分間撹拌し、氷浴を除去した。反応物を３０分かけて周囲温度にした。加熱マントルを取り付け、反応物を内温６５．５℃に３時間加熱し、次いで終夜撹拌しながら室温に冷却した。反応混合物を氷浴中で０℃に冷却し、メタノール（４００ｍＬ）を滴下添加することによりクエンチした。短時間インキュベーションした後、温度はガス発生しながら素早く上昇した。最初１００ｍＬを約３０分かけて加えた後、反応は最早発熱せず、ガス発生は止んだ。氷浴を除去し、混合物を窒素下周囲温度で終夜撹拌した。混合物を濃縮して固体にし、ジクロロメタン／メタノールに溶解し、シリカゲル（約１５０ｇ）上に吸着させた。残渣をシリカゲル（３０００ｍＬ）のプラグ上に装填し、ジクロロメタンで溶出して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２９６．８（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．６５．１２ （４−アミノ−２−ヨードフェニル）メタノール
機械撹拌機、ＪＫＥＭ温度プローブにより制御される加熱マントル及び冷却器を装着した５Ｌのフラスコに、実施例２．６５．１１（９８．８３ｇ）及びエタノール（２Ｌ）を入れた。反応物を素早く撹拌し、鉄（９９ｇ）を、続いて塩化アンモニウム（２０．８４ｇ）の水（５００ｍＬ）中溶液を加えた。反応物を内温８０．３℃に２０分かけて加熱し、この時点で激しく還流が始まった。還流が穏やかになるまでマントルを下した。その後、混合物を８０℃に１．５時間加熱した。反応物をメンブランフィルターに通して加熱濾過し、鉄残渣を熱５０％酢酸エチル／メタノール（８００ｍＬ）で洗浄した。溶出液を珪藻土のパッドに通し、濾液を濃縮した。残渣を５０％ブライン（１５００ｍＬ）と酢酸エチル（１５００ｍＬ）との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチル（４００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２６６．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
機械撹拌機、ＪＫＥＭ温度プローブにより制御される加熱マントル及び冷却器を装着した５Ｌのフラスコに、実施例２．６５．１１（９８．８３ｇ）及びエタノール（２Ｌ）を入れた。反応物を素早く撹拌し、鉄（９９ｇ）を、続いて塩化アンモニウム（２０．８４ｇ）の水（５００ｍＬ）中溶液を加えた。反応物を内温８０．３℃に２０分かけて加熱し、この時点で激しく還流が始まった。還流が穏やかになるまでマントルを下した。その後、混合物を８０℃に１．５時間加熱した。反応物をメンブランフィルターに通して加熱濾過し、鉄残渣を熱５０％酢酸エチル／メタノール（８００ｍＬ）で洗浄した。溶出液を珪藻土のパッドに通し、濾液を濃縮した。残渣を５０％ブライン（１５００ｍＬ）と酢酸エチル（１５００ｍＬ）との間で分配した。層を分離し、水性層を酢酸エチル（４００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２６６．９（Ｍ＋ＮＨ４）＋。
２．６５．１３ ４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−ヨードアニリン
機械撹拌機を有する５Ｌのフラスコに実施例２．６５．１２（８８ｇ）及びジクロロメタン（２Ｌ）を入れた。懸濁液を氷浴中で内温２．５℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（５３．３ｇ）を８分かけて少しずつ加えた。１０分後、１Ｈ−イミダゾール（３３．７ｇ）を冷却反応物に少しずつ加えた。内温を１５℃に上げながら反応物を９０分撹拌した。反応混合物を水（３Ｌ）及びジクロロメタン（１Ｌ）で希釈した。層を分離し、有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、油状物にした。残渣をヘプタン中０〜２５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（シリカゲル１６００ｇ）により精製して、標題化合物を得た。
機械撹拌機を有する５Ｌのフラスコに実施例２．６５．１２（８８ｇ）及びジクロロメタン（２Ｌ）を入れた。懸濁液を氷浴中で内温２．５℃に冷却し、ｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（５３．３ｇ）を８分かけて少しずつ加えた。１０分後、１Ｈ−イミダゾール（３３．７ｇ）を冷却反応物に少しずつ加えた。内温を１５℃に上げながら反応物を９０分撹拌した。反応混合物を水（３Ｌ）及びジクロロメタン（１Ｌ）で希釈した。層を分離し、有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、濃縮して、油状物にした。残渣をヘプタン中０〜２５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（シリカゲル１６００ｇ）により精製して、標題化合物を得た。
２．６５．１４ （Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパン酸
（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタン酸（６．５ｇ）のジメトキシエタン（４０ｍＬ）中溶液に、水（４０ｍＬ）中の（Ｓ）−２−アミノプロパン酸（１．３９３ｇ）及び重炭酸ナトリウム（１．３１４ｇ）を加えた。テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）を加えて溶解させた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。クエン酸水溶液（１５％、７５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル中１０％２−プロパノール（２×１００ｍＬ）で抽出した。沈殿物が有機層に生成した。合わせた有機層を水（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮し、次いでジエチルエーテル（８０ｍＬ）で摩砕した。短時間超音波処理した後、標題化合物を濾取した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタン酸（６．５ｇ）のジメトキシエタン（４０ｍＬ）中溶液に、水（４０ｍＬ）中の（Ｓ）−２−アミノプロパン酸（１．３９３ｇ）及び重炭酸ナトリウム（１．３１４ｇ）を加えた。テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）を加えて溶解させた。得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。クエン酸水溶液（１５％、７５ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル中１０％２−プロパノール（２×１００ｍＬ）で抽出した。沈殿物が有機層に生成した。合わせた有機層を水（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を減圧下で濃縮し、次いでジエチルエーテル（８０ｍＬ）で摩砕した。短時間超音波処理した後、標題化合物を濾取した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ４１１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６５．１５ （９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（Ｓ）−１−（（（Ｓ）−１−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−ヨードフェニル）アミノ）−１−オキソプロパン−２−イル）アミノ）−３−メチル−１−オキソブタン−２−イル）カルバメート
実施例２．６５．１３（５．４４ｇ）及び実施例２．６５．１４（６．１５ｇ）のジクロロメタン（７０ｍＬ）及びメタノール（３５．０ｍＬ）の混合物中溶液に、エチル２−エトキシキノリン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（４．０８ｇ）を加え、反応物を終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル上に装填し、酢酸エチル中１０％〜９５％ヘプタンの濃度勾配、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出した。生成物含有フラクションを濃縮し、ジクロロメタン中０．２％メタノール（５０ｍＬ）に溶解し、シリカゲル上に装填し、ジクロロメタン中０．２％〜２％メタノールの濃度勾配で溶出した。生成物を含むフラクションを集めて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６５．１３（５．４４ｇ）及び実施例２．６５．１４（６．１５ｇ）のジクロロメタン（７０ｍＬ）及びメタノール（３５．０ｍＬ）の混合物中溶液に、エチル２−エトキシキノリン−１（２Ｈ）−カルボキシレート（４．０８ｇ）を加え、反応物を終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル上に装填し、酢酸エチル中１０％〜９５％ヘプタンの濃度勾配、続いてジクロロメタン中５％メタノールで溶出した。生成物含有フラクションを濃縮し、ジクロロメタン中０．２％メタノール（５０ｍＬ）に溶解し、シリカゲル上に装填し、ジクロロメタン中０．２％〜２％メタノールの濃度勾配で溶出した。生成物を含むフラクションを集めて、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ７５６．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６５．１６ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（（５−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェニル）エチニル）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．６５．９（４．５００ｇ）、実施例２．６５．１５（６．６２ｇ）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０８３ｇ）及びビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．３０８ｇ）の溶液をバイアル中で合わせ、脱気した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４５ｍＬ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（４．５５ｍＬ）を加え、反応容器を窒素でフラッシュし、室温で終夜撹拌した。反応物を水（１００ｍＬ）と酢酸エチル（２５０ｍＬ）との間で分配した。層を分離し、有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５％〜９５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。生成物を含むフラクションを集め、濃縮し、ジクロロメタン中０．２５％〜２．５％メタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９７０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６５．９（４．５００ｇ）、実施例２．６５．１５（６．６２ｇ）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０８３ｇ）及びビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（０．３０８ｇ）の溶液をバイアル中で合わせ、脱気した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４５ｍＬ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（４．５５ｍＬ）を加え、反応容器を窒素でフラッシュし、室温で終夜撹拌した。反応物を水（１００ｍＬ）と酢酸エチル（２５０ｍＬ）との間で分配した。層を分離し、有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をヘプタン中５％〜９５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。生成物を含むフラクションを集め、濃縮し、ジクロロメタン中０．２５％〜２．５％メタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９７０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６５．１７ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）フェネチル）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．６５．１６（４．７ｇ）及びテトラヒドロフラン（９５ｍＬ）を、５０ｍＬの圧力ボトル中５％Ｐｔ／Ｃ（２．４２ｇ、含水）に加え、反応物を５０ｐｓｉの水素下室温で９０分間振盪した。反応混合物を濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９７４．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６５．１６（４．７ｇ）及びテトラヒドロフラン（９５ｍＬ）を、５０ｍＬの圧力ボトル中５％Ｐｔ／Ｃ（２．４２ｇ、含水）に加え、反応物を５０ｐｓｉの水素下室温で９０分間振盪した。反応混合物を濾過し、濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ９７４．６（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６５．１８ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（ヒドロキシメチル）フェネチル）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．６５．１７（５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（７ｍＬ）、水（７ｍＬ）及び氷酢酸（２１ｍＬ）中溶液を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中０．５％〜５％メタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６５．１７（５．４ｇ）のテトラヒドロフラン（７ｍＬ）、水（７ｍＬ）及び氷酢酸（２１ｍＬ）中溶液を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。残渣をジクロロメタン中０．５％〜５％メタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ ８６０．４（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６５．１９ （２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−２−（５−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）メチル）フェネチル）−６−（メトキシカルボニル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４，５−トリイルトリアセテート
実施例２．６５．１８（４．００ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（２．８３ｇ）のアセトニトリル（８０ｍＬ）中溶液に、室温でＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１．２２ｍＬ）を加えた。終夜撹拌した後、反応混合物を濃縮し、ジクロロメタン（２５０ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。得られた泡状物をヘキサン中５％〜７５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０２５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６５．１８（４．００ｇ）及びビス（４−ニトロフェニル）カルボネート（２．８３ｇ）のアセトニトリル（８０ｍＬ）中溶液に、室温でＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１．２２ｍＬ）を加えた。終夜撹拌した後、反応混合物を濃縮し、ジクロロメタン（２５０ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（４×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、濾過し、濃縮した。得られた泡状物をヘキサン中５％〜７５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １０２５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６５．２０ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（２−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（１−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．１１．７において実施例１．４．１０を実施例１．１２．１０及び実施例２．６５．１９を実施例２．１１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２５７（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１１．７において実施例１．４．１０を実施例１．１２．１０及び実施例２．６５．１９を実施例２．１１．６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２５７（Ｍ−Ｈ）−。
２．６５．２１ （６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−（２−｛２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−（｛Ｎ−［（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセチル］−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル｝アミノ）フェニル｝エチル）−Ｌ−グロン酸
実施例２．１０において実施例２．６５．２０を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.88 (s, 1H), 8.26 (t, 2H), 8.00 (m, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.46 (m, 2H), 7.38-7.30 (m, 3H), 7.21 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.04 (t, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.28 (m, 2H), 4.22 (m, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.58 (m, 4H), 3.33 (m, 4H), 3.18-3.00 (m, 4H), 2.94 (t, 2H), 2.80-2.55 (m, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.08-1.91 (m, 2H), 1.56 (m, 1H), 1.39 (s, 2H), 1.30-1.20 (m, 6H), 1.26-0.95 (m, 6H), 0.85 (m, 12 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３９５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．１０において実施例２．６５．２０を実施例２．９．１の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.88 (s, 1H), 8.26 (t, 2H), 8.00 (m, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.46 (m, 2H), 7.38-7.30 (m, 3H), 7.21 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.04 (t, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.39 (m, 1H), 4.28 (m, 2H), 4.22 (m, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.58 (m, 4H), 3.33 (m, 4H), 3.18-3.00 (m, 4H), 2.94 (t, 2H), 2.80-2.55 (m, 2H), 2.13 (s, 3H), 2.08-1.91 (m, 2H), 1.56 (m, 1H), 1.39 (s, 2H), 1.30-1.20 (m, 6H), 1.26-0.95 (m, 6H), 0.85 (m, 12 H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３９５（Ｍ−Ｈ）−。
２．６６ （６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−［２−（２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛［Ｎ−（｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセチル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル］アミノ｝フェニル）エチル］−Ｌ−グロン酸（シントンＹＧ）の合成
２．６６．１ （３Ｒ，７ａＳ）−３−フェニルテトラヒドロピロロ［１，２−ｃ］オキサゾール−５（３Ｈ）−オン
（Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−２−オン（２５ｇ）、ベンズアルデヒド（２５．５ｇ）及びパラ−トルエンスルホン酸一水和物（０．５０ｇ）のトルエン（３００ｍＬ）中溶液を、乾燥管下Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを使用して１６時間加熱還流した。反応物を室温に冷却し、溶媒を不溶物からデカント除去した。有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２×）及びブライン（１×）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を３５／６５ヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２０４．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
（Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−２−オン（２５ｇ）、ベンズアルデヒド（２５．５ｇ）及びパラ−トルエンスルホン酸一水和物（０．５０ｇ）のトルエン（３００ｍＬ）中溶液を、乾燥管下Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを使用して１６時間加熱還流した。反応物を室温に冷却し、溶媒を不溶物からデカント除去した。有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２×）及びブライン（１×）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を３５／６５ヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２０４．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．２ （３Ｒ，６Ｒ，７ａＳ）−６−ブロモ−３−フェニルテトラヒドロピロロ［１，２−ｃ］オキサゾール−５（３Ｈ）−オン
実施例２．６６．１（４４．６ｇ）のテトラヒドロフラン（６７０ｍＬ）中冷却（−７７℃）溶液に、Ｔｒｘｎ＜−７３℃で維持しながら、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ヘキサン中１．０Ｍ）（２５０ｍＬ）を４０分かけて滴下添加した。反応混合物を−７７℃で２時間撹拌し、Ｔｒｘｎ＜−６４℃で維持しながら臭素（１２．５ｍＬ）を２０分かけて滴下添加した。反応混合物を−７７℃で７５分間撹拌し、冷１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液１５０ｍＬの添加によりクエンチして、反応物を−７７℃にした。反応混合物を室温に加温し、半飽和塩化アンモニウム水溶液と酢酸エチルとの間で分配した。層を分離し、有機物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を８０／２０、７５／２５及び７０／３０ヘプタン／酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２９９．０及び３０１．０（Ｍ＋ＮＨ３＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．１（４４．６ｇ）のテトラヒドロフラン（６７０ｍＬ）中冷却（−７７℃）溶液に、Ｔｒｘｎ＜−７３℃で維持しながら、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（ヘキサン中１．０Ｍ）（２５０ｍＬ）を４０分かけて滴下添加した。反応混合物を−７７℃で２時間撹拌し、Ｔｒｘｎ＜−６４℃で維持しながら臭素（１２．５ｍＬ）を２０分かけて滴下添加した。反応混合物を−７７℃で７５分間撹拌し、冷１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液１５０ｍＬの添加によりクエンチして、反応物を−７７℃にした。反応混合物を室温に加温し、半飽和塩化アンモニウム水溶液と酢酸エチルとの間で分配した。層を分離し、有機物を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を８０／２０、７５／２５及び７０／３０ヘプタン／酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２９９．０及び３０１．０（Ｍ＋ＮＨ３＋Ｈ）＋。
２．６６．３ （３Ｒ，６Ｓ，７ａＳ）−６−ブロモ−３−フェニルテトラヒドロピロロ［１，２−ｃ］オキサゾール−５（３Ｈ）−オン
実施例２．６６．２を合成する間、標題化合物を副生成物として単離した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２９９．０及び３０１．０（Ｍ＋ＮＨ３＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．２を合成する間、標題化合物を副生成物として単離した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２９９．０及び３０１．０（Ｍ＋ＮＨ３＋Ｈ）＋。
２．６６．４ （３Ｒ，６Ｓ，７ａＳ）−６−アジド−３−フェニルテトラヒドロピロロ［１，２−ｃ］オキサゾール−５（３Ｈ）−オン
実施例２．６６．２（１９．３ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中溶液に、アジ化ナトリウム（１３．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に２．５時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水（５００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）の添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を７８／２２ヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２６２．０（Ｍ＋ＮＨ３＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．２（１９．３ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中溶液に、アジ化ナトリウム（１３．５ｇ）を加えた。反応混合物を６０℃に２．５時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水（５００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）の添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣を７８／２２ヘプタン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２６２．０（Ｍ＋ＮＨ３＋Ｈ）＋。
２．６６．５ （３Ｒ，６Ｓ，７ａＳ）−６−アミノ−３−フェニルテトラヒドロピロロ［１，２−ｃ］オキサゾール−５（３Ｈ）−オン
実施例２．６６．４（１３．５ｇ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）中溶液に、ポリマー−担持トリフェニルホスフィン（５５ｇ）を加えた。反応物を機械的に室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル及びトルエンで溶出する珪藻土に通して濾過した。溶液を減圧下で濃縮し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、硫酸ナトリウムで脱水し、次いで濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２１９．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．４（１３．５ｇ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）中溶液に、ポリマー−担持トリフェニルホスフィン（５５ｇ）を加えた。反応物を機械的に室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル及びトルエンで溶出する珪藻土に通して濾過した。溶液を減圧下で濃縮し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、硫酸ナトリウムで脱水し、次いで濾過し、濃縮して標題化合物を得、これをさらには精製せずに引き続くステップに使用した。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ２１９．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．６ （３Ｒ，６Ｓ，７ａＳ）−６−（ジベンジルアミノ）−３−フェニルテトラヒドロピロロ［１，２−ｃ］オキサゾール−５（３Ｈ）−オン
実施例２．６６．５（１１．３ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中溶液に、炭酸カリウム（７．０ｇ）、ヨウ化カリウム（４．２ｇ）及びベンジルブロミド（１４．５ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌し、水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１０〜１５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して固体を得、これをヘプタンで摩砕して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ３９９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．５（１１．３ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中溶液に、炭酸カリウム（７．０ｇ）、ヨウ化カリウム（４．２ｇ）及びベンジルブロミド（１４．５ｍＬ）を加えた。反応物を室温で終夜撹拌し、水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１０〜１５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して固体を得、これをヘプタンで摩砕して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ３９９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．７ （３Ｓ，５Ｓ）−３−（ジベンジルアミノ）−５−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−２−オン
実施例２．６６．６（１３ｇ）のテトラヒドロフラン（１３０ｍＬ）中溶液に、パラ−トルエンスルホン酸一水和物（１２．４ｇ）及び水（５０ｍＬ）を加え、反応物を６５℃に６日間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。蝋状固体をヘプタン（１５０ｍＬ）で摩砕して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ３１１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．６（１３ｇ）のテトラヒドロフラン（１３０ｍＬ）中溶液に、パラ−トルエンスルホン酸一水和物（１２．４ｇ）及び水（５０ｍＬ）を加え、反応物を６５℃に６日間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。蝋状固体をヘプタン（１５０ｍＬ）で摩砕して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ３１１．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．８ （３Ｓ，５Ｓ）−５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−（ジベンジルアミノ）ピロリジン−２−オン
実施例２．６６．７（９．３ｇ）及び１Ｈ−イミダゾール（２．２ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（１１．２ｍＬ、トルエン中５０重量％）を加え、反応物を終夜撹拌した。反応混合物を水及びジエチルエーテルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層をジエチルエーテルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中３５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．７（９．３ｇ）及び１Ｈ−イミダゾール（２．２ｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルクロロジメチルシラン（１１．２ｍＬ、トルエン中５０重量％）を加え、反応物を終夜撹拌した。反応混合物を水及びジエチルエーテルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層をジエチルエーテルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中３５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．９ ｔｅｒｔ−ブチル２−（（３Ｓ，５Ｓ）−５−（（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）メチル）−３−（ジベンジルアミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセテート
実施例２．６６．８（４．５ｇ）のテトラヒドロフラン（４５ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、９５％水素化ナトリウム（３２０ｍｇ）を２回に分けて加えた。冷却溶液を４０分間撹拌し、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモアセテート（３．２ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温に加温し、終夜撹拌した。反応混合物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中５〜１２％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ５３９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．８（４．５ｇ）のテトラヒドロフラン（４５ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、９５％水素化ナトリウム（３２０ｍｇ）を２回に分けて加えた。冷却溶液を４０分間撹拌し、ｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモアセテート（３．２ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温に加温し、終夜撹拌した。反応混合物を水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中５〜１２％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ５３９．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．１０ ｔｅｒｔ−ブチル２−（（３Ｓ，５Ｓ）−３−（ジベンジルアミノ）−５−（ヒドロキシメチル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセテート
実施例２．６６．９（５．３ｇ）のテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）中溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（１１ｍＬ、９５／５テトラヒドロフラン／水中１．０Ｍ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中３５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．９（５．３ｇ）のテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）中溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリド（１１ｍＬ、９５／５テトラヒドロフラン／水中１．０Ｍ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液、水及び酢酸エチルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中３５％酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＤＣＩ）ｍ／ｅ ４２５．１（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．１１ ｔｅｒｔ−ブチル２−（（３Ｓ，５Ｓ）−５−（（２−（（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブトキシ）スルホニル）エトキシ）メチル）−３−（ジベンジルアミノ）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセテート
実施例２．６６．１０（４．７ｇ）のジメチルスルホキシド（１４ｍＬ）中溶液に、４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブチルエテンスルホネート（１４．５ｇ）のジメチルスルホキシド（１４ｍＬ）中溶液を加えた。炭酸カリウム（２．６ｇ）及び水（２８μＬ）を加え、反応物を窒素下６０℃で１日間加熱した。反応物を室温に冷却し、ブライン溶液、水及びジエチルエーテルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層をジエチルエーテルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１５〜２５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｅ ８７１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．１０（４．７ｇ）のジメチルスルホキシド（１４ｍＬ）中溶液に、４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブチルエテンスルホネート（１４．５ｇ）のジメチルスルホキシド（１４ｍＬ）中溶液を加えた。炭酸カリウム（２．６ｇ）及び水（２８μＬ）を加え、反応物を窒素下６０℃で１日間加熱した。反応物を室温に冷却し、ブライン溶液、水及びジエチルエーテルの添加によりクエンチした。層を分離し、有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層をジエチルエーテルで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をヘプタン中１５〜２５％酢酸エチルの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｅ ８７１．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．１２ ｔｅｒｔ−ブチル２−（（３Ｓ，５Ｓ）−３−アミノ−５−（（２−（（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブトキシ）スルホニル）エトキシ）メチル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセテート
実施例２．６６．１１（８７３ｍｇ）を酢酸エチル（５ｍＬ）及びメタノール（１５ｍＬ）に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム、２０重量％（１８０ｍｇ）を加えた。反応混合物を水素雰囲気（３０ｐｓｉ）下室温で３０時間、次いで５０℃で１時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、濾過し、濃縮して、所望の生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｅ ６９１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．６６．１１（８７３ｍｇ）を酢酸エチル（５ｍＬ）及びメタノール（１５ｍＬ）に溶解し、炭素担持水酸化パラジウム、２０重量％（１８０ｍｇ）を加えた。反応混合物を水素雰囲気（３０ｐｓｉ）下室温で３０時間、次いで５０℃で１時間撹拌した。反応物を室温に冷却し、濾過し、濃縮して、所望の生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｅ ６９１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６６．１３ ４−（（（３Ｓ，５Ｓ）−１−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−５−（（２−（（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブトキシ）スルホニル）エトキシ）メチル）−２−オキソピロリジン−３−イル）アミノ）−４−オキソブタ−２−エン酸
無水マレイン酸（１００ｍｇ）をジクロロメタン（０．９０ｍＬ）に溶解し、実施例２．６６．１２（６５０ｍｇ）のジクロロメタン（０．９０ｍＬ）中溶液を滴下添加し、次いで４０℃で２時間加熱した。反応混合物を０．２％酢酸を含むジクロロメタン中１．０〜２．５％メタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより直接精製した。生成物を含むフラクションを濃縮した後、トルエン（１０ｍＬ）を加え、混合物を再度濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ ７８７．３（Ｍ−Ｈ）−。
無水マレイン酸（１００ｍｇ）をジクロロメタン（０．９０ｍＬ）に溶解し、実施例２．６６．１２（６５０ｍｇ）のジクロロメタン（０．９０ｍＬ）中溶液を滴下添加し、次いで４０℃で２時間加熱した。反応混合物を０．２％酢酸を含むジクロロメタン中１．０〜２．５％メタノールの濃度勾配で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより直接精製した。生成物を含むフラクションを濃縮した後、トルエン（１０ｍＬ）を加え、混合物を再度濃縮して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ ７８７．３（Ｍ−Ｈ）−。
２．６６．１４ ｔｅｒｔ−ブチル２−（（３Ｓ，５Ｓ）−５−（（２−（（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシ）−２，２−ジメチルブトキシ）スルホニル）エトキシ）メチル）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセテート
実施例２．６６．１３（５６０ｍｇ）をトルエン（７ｍＬ）中でスラリー化し、トリエチルアミン（２２０μＬ）及び硫酸ナトリウム（５２５ｍｇ）を加えた。反応混合物を窒素雰囲気下還流状態で６時間加熱し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応物を濾過し、固体を酢酸エチルですすいだ。溶出液を減圧下で濃縮し、残渣を４５／５５ヘプタン／酢酸エチル、酢酸エチル、次いで９７．５／２．５／０．２ジクロロメタン／メタノール／酢酸で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
実施例２．６６．１３（５６０ｍｇ）をトルエン（７ｍＬ）中でスラリー化し、トリエチルアミン（２２０μＬ）及び硫酸ナトリウム（５２５ｍｇ）を加えた。反応混合物を窒素雰囲気下還流状態で６時間加熱し、反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応物を濾過し、固体を酢酸エチルですすいだ。溶出液を減圧下で濃縮し、残渣を４５／５５ヘプタン／酢酸エチル、酢酸エチル、次いで９７．５／２．５／０．２ジクロロメタン／メタノール／酢酸で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。
２．６６．１５ ２−（（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−（（２−スルホエトキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）酢酸
実施例２．６６．１４（１．２ｇ）をトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）に溶解し、窒素下６５〜７０℃に終夜加熱した。トリフルオロ酢酸を減圧下で除去した。残渣をアセトニトリル（２．５ｍＬ）に溶解し、３０分かけて０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中５〜７５％アセトニトリルの濃度勾配を使用するＬｕｎａ Ｃ１８（２）ＡＸＩＡカラム（２５０×５０ｍｍ、１０μ粒径）上での分取逆相液体クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ ３７５．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．６６．１４（１．２ｇ）をトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）に溶解し、窒素下６５〜７０℃に終夜加熱した。トリフルオロ酢酸を減圧下で除去した。残渣をアセトニトリル（２．５ｍＬ）に溶解し、３０分かけて０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中５〜７５％アセトニトリルの濃度勾配を使用するＬｕｎａ Ｃ１８（２）ＡＸＩＡカラム（２５０×５０ｍｍ、１０μ粒径）上での分取逆相液体クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ ３７５．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．６６．１６ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（２−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−メトキシエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．１２．１０（７５ｍｇ）及び実施例２．６５．１９（１００ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解した。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（５０μＬ）を加え、反応物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン及びメタノール（各０．３ｍＬ）に溶解し、水（０．６ｍＬ）中の水酸化リチウム水和物（５５ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、トリフルオロ酢酸（０．１５ｍＬ）を含むＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水１／１（１．５ｍＬ）の添加によりクエンチした。溶液をヘプタン（１ｍＬ）で洗浄し、次いで０．１％トリフルオロ酢酸水中２０〜７０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３５５．６（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．１２．１０（７５ｍｇ）及び実施例２．６５．１９（１００ｍｇ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．３ｍＬ）に溶解した。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１３ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（５０μＬ）を加え、反応物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。残渣をテトラヒドロフラン及びメタノール（各０．３ｍＬ）に溶解し、水（０．６ｍＬ）中の水酸化リチウム水和物（５５ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、トリフルオロ酢酸（０．１５ｍＬ）を含むＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水１／１（１．５ｍＬ）の添加によりクエンチした。溶液をヘプタン（１ｍＬ）で洗浄し、次いで０．１％トリフルオロ酢酸水中２０〜７０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １３５５．６（Ｍ−Ｈ）−。
２．６６．１７ （６Ｓ）−２，６−アンヒドロ−６−［２−（２−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−メトキシエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］−５−｛［Ｎ−（｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセチル）−Ｌ−バリル−Ｌ−アラニル］アミノ｝フェニル）エチル］−Ｌ−グロン酸
実施例２．６６．１５（２０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１８μＬ）を加えた。反応混合物を室温で３分間撹拌し、次いで実施例２．６６．１６（５７ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３０μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．７ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水１／１（１．０ｍＬ）で希釈した。溶液を０．１％トリフルオロ酢酸水中２０〜７０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.84 (br d, 1H), 8.18 (br d, 1H), 8.04 (m, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.77 (dd, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.34 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.21 (br d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.01 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 5.00 (s, 4H), 4.64 (t, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.18 (m, 2H), 4.01 (d, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.87 (m, 2H), 3.81 (br d, 2H), 3.73 (br m, 1H), 3.63 (m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.49 (m, 2H), 3.36 (br m, 6H), 3.31 (m, 2H), 3.26 (br m, 2H), 3.19 (m, 2H), 3.14 (m, 1H), 3.10 (br m, 1H), 2.94 (t, 1H), 2.81 (m, 3H), 2.74 (m, 2H), 2.60 (br m, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.00 (m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.55 (br m, 1H), 1.40-0.92 (m, 14H), 0.88, 0.86, 0.83, 0.79 (d,d, s, s, 計12H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １７１３．７（Ｍ−１）。
実施例２．６６．１５（２０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２０ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１８μＬ）を加えた。反応混合物を室温で３分間撹拌し、次いで実施例２．６６．１６（５７ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３０μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．７ｍＬ）中溶液に加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水１／１（１．０ｍＬ）で希釈した。溶液を０．１％トリフルオロ酢酸水中２０〜７０％アセトニトリルで溶出する逆相クロマトグラフィー（Ｃ１８カラム）により精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.84 (br d, 1H), 8.18 (br d, 1H), 8.04 (m, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.77 (dd, 2H), 7.50 (d, 1H), 7.46 (m, 3H), 7.34 (t, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.21 (br d, 1H), 7.07 (s, 2H), 7.01 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 5.00 (s, 4H), 4.64 (t, 1H), 4.37 (m, 1H), 4.18 (m, 2H), 4.01 (d, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.87 (m, 2H), 3.81 (br d, 2H), 3.73 (br m, 1H), 3.63 (m, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.49 (m, 2H), 3.36 (br m, 6H), 3.31 (m, 2H), 3.26 (br m, 2H), 3.19 (m, 2H), 3.14 (m, 1H), 3.10 (br m, 1H), 2.94 (t, 1H), 2.81 (m, 3H), 2.74 (m, 2H), 2.60 (br m, 1H), 2.36 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.00 (m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.55 (br m, 1H), 1.40-0.92 (m, 14H), 0.88, 0.86, 0.83, 0.79 (d,d, s, s, 計12H).ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｅ １７１３．７（Ｍ−１）。
２．６７ ８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−ｇｕｌｏ−オクトン酸（シントンＺＴ）の合成
２．６７．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（２−（（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．６５．１９（６６ｍｇ）及び実施例１．３２．２（６０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１６．２３ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（１ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３８．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．６５．１９（６６ｍｇ）及び実施例１．３２．２（６０ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１６．２３ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（１ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３８．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．６７．２ ８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−ｇｕｌｏ−オクトン酸
実施例２．５８．６を実施例２．６７．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.91 (d, 1H), 8.25 (dd, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 6H), 7.55 - 7.30 (m, 7H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 6.89 - 6.74 (m, 1H), 5.01 (s, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.38 (t, 1H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 4.12 (d, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.79 (d, 1H), 3.41 - 3.30 (m, 3H), 3.24 (s, 2H), 3.12 (dt, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.94 (t, 1H), 2.74 (d, 1H), 2.67 - 2.56 (m, 1H), 2.29 (t, 2H), 2.08 (d, 3H), 1.99 (d, 3H), 1.55 (d, 1H), 1.42 - 0.99 (m, 15H), 0.99 - 0.70 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４７７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
実施例２．５８．６を実施例２．６７．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.91 (d, 1H), 8.25 (dd, 2H), 8.03 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.61 (d, 6H), 7.55 - 7.30 (m, 7H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 6.89 - 6.74 (m, 1H), 5.01 (s, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.38 (t, 1H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 4.12 (d, 2H), 3.88 (t, 2H), 3.79 (d, 1H), 3.41 - 3.30 (m, 3H), 3.24 (s, 2H), 3.12 (dt, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.94 (t, 1H), 2.74 (d, 1H), 2.67 - 2.56 (m, 1H), 2.29 (t, 2H), 2.08 (d, 3H), 1.99 (d, 3H), 1.55 (d, 1H), 1.42 - 0.99 (m, 15H), 0.99 - 0.70 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４７７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．６８ ４−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−３−｛３−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］プロポキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸（シントンＡＡＮ）の合成
２．６８．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（２−（３−アミノプロポキシ）−４−（（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンジル）オキシ）カルボニル）（３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．２８．３（３８．７ｍｇ）及び実施例１．３９（３９．３ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（６．５８ｍｇ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２３０．２（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．２８．３（３８．７ｍｇ）及び実施例１．３９（３９．３ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０２６ｍＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（６．５８ｍｇ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応物に水（２ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（５０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １２３０．２（Ｍ−Ｈ）−。
２．６８．２ ４−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−３−｛３−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］プロポキシ｝フェニルβ−Ｄ−グルコピラノシドウロン酸
実施例２．５８．６を実施例２．６８．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.88 (s, 2H), 9.93 (d, 1H), 8.36 - 8.22 (m, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.76 (d, 0H), 7.62 (d, 1H), 7.56 - 7.42 (m, 5H), 7.41 - 7.33 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.01 (d, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.39 (p, 1H), 4.22 (dd, 1H), 4.12 (d, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.34 (t, 2H), 3.22 (d, 2H), 3.13 (dt, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.94 (t, 1H), 2.86 - 2.71 (m, 1H), 2.60 (s, 2H), 2.54 (d, 4H), 2.29 (q, 2H), 2.09 (d, 3H), 2.07 - 1.90 (m, 3H), 1.60 - 1.48 (m, 1H), 1.39 - 1.00 (m, 17H), 0.97 - 0.74 (m, 15H).（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４８９．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５８．６を実施例２．６８．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.88 (s, 2H), 9.93 (d, 1H), 8.36 - 8.22 (m, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.76 (d, 0H), 7.62 (d, 1H), 7.56 - 7.42 (m, 5H), 7.41 - 7.33 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.01 (d, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.39 (p, 1H), 4.22 (dd, 1H), 4.12 (d, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.34 (t, 2H), 3.22 (d, 2H), 3.13 (dt, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.94 (t, 1H), 2.86 - 2.71 (m, 1H), 2.60 (s, 2H), 2.54 (d, 4H), 2.29 (q, 2H), 2.09 (d, 3H), 2.07 - 1.90 (m, 3H), 1.60 - 1.48 (m, 1H), 1.39 - 1.00 (m, 17H), 0.97 - 0.74 (m, 15H).（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４８９．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．６９ ２，６−アンヒドロ−８−（２−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル）−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−ｇｕｌｏ−オクトン酸（シントンＡＡＯ）の合成
２．６９．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（２−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例１．３２．２を実施例１．３９で置き換えて、標題化合物を実施例２．６７．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５２．６（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．３２．２を実施例１．３９で置き換えて、標題化合物を実施例２．６７．１に記載した通りに調製した。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５２．６（Ｍ−Ｈ）−。
２．６９．２ ２，６−アンヒドロ−８−（２−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−５−｛［（２Ｓ）−２−（｛（２Ｓ）−２−［２−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）アセトアミド］−３−メチルブタノイル｝アミノ）プロパノイル］アミノ｝フェニル）−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−ｇｕｌｏ−オクトン酸
実施例２．５８．６を実施例２．６７．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.88 (s, 2H), 9.93 (d, 1H), 8.36 - 8.22 (m, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.76 (d, 0H), 7.62 (d, 1H), 7.56 - 7.42 (m, 5H), 7.41 - 7.33 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.01 (d, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.39 (p, 1H), 4.22 (dd, 1H), 4.12 (d, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.34 (t, 2H), 3.22 (d, 2H), 3.13 (dt, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.94 (t, 1H), 2.86 - 2.71 (m, 1H), 2.60 (s, 2H), 2.54 (d, 4H), 2.29 (q, 2H), 2.09 (d, 3H), 2.07 - 1.90 (m, 3H), 1.60 - 1.48 (m, 1H), 1.39 - 1.00 (m, 17H), 0.97 - 0.74 (m, 15H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４８９．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．５８．６を実施例２．６７．１で置き換えて、標題化合物を実施例２．５８．７に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.88 (s, 2H), 9.93 (d, 1H), 8.36 - 8.22 (m, 2H), 8.04 (d, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.76 (d, 0H), 7.62 (d, 1H), 7.56 - 7.42 (m, 5H), 7.41 - 7.33 (m, 3H), 7.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 5.01 (d, 3H), 4.96 (s, 2H), 4.39 (p, 1H), 4.22 (dd, 1H), 4.12 (d, 2H), 3.89 (t, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.34 (t, 2H), 3.22 (d, 2H), 3.13 (dt, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.94 (t, 1H), 2.86 - 2.71 (m, 1H), 2.60 (s, 2H), 2.54 (d, 4H), 2.29 (q, 2H), 2.09 (d, 3H), 2.07 - 1.90 (m, 3H), 1.60 - 1.48 (m, 1H), 1.39 - 1.00 (m, 17H), 0.97 - 0.74 (m, 15H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４８９．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．７０ ２，６−アンヒドロ−８−（２−｛［（｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］カルバモイル）オキシ］メチル｝−５−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（２−｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセトアミド）−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝フェニル）−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−ｇｕｌｏ−オクトン酸（シントンＡＡＰ）の合成
実施例２．６６．１５（１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１９ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１７μＬ）を加えた。反応混合物を５分間撹拌し、実施例２．６９．１（３９ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３６μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に加えた。反応混合物を２時間撹拌し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈した。溶液を濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.82 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.00 (dd, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (ddd, 5H), 7.32 (td, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.92 (d, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.92 (s, 2H), 4.61 (t, 1H), 4.33 (p, 1H), 4.21 - 4.08 (m, 2H), 3.98 (d, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.40 - 3.27 (m, 3H), 3.21 (s, 1H), 3.14 - 3.03 (m, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.90 (t, 1H), 2.81 - 2.50 (m, 4H), 2.38 - 2.20 (m, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.74 (m, 1H), 1.60 - 1.43 (m, 1H), 1.36 - 0.95 (m, 14H), 0.95 - 0.62 (m, 13H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １７１０．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．６６．１５（１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１９ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１７μＬ）を加えた。反応混合物を５分間撹拌し、実施例２．６９．１（３９ｍｇ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３６μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に加えた。反応混合物を２時間撹拌し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）で希釈した。溶液を濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.82 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.00 (dd, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (ddd, 5H), 7.32 (td, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.92 (d, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.92 (s, 2H), 4.61 (t, 1H), 4.33 (p, 1H), 4.21 - 4.08 (m, 2H), 3.98 (d, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.40 - 3.27 (m, 3H), 3.21 (s, 1H), 3.14 - 3.03 (m, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.90 (t, 1H), 2.81 - 2.50 (m, 4H), 2.38 - 2.20 (m, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.74 (m, 1H), 1.60 - 1.43 (m, 1H), 1.36 - 0.95 (m, 14H), 0.95 - 0.62 (m, 13H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １７１０．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．７１ ６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−３−［１−（｛３−［２−（｛［（４−｛［（２Ｓ）−５−（カルバモイルアミノ）−２−｛［（２Ｓ）−２−｛［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］アミノ｝−３−メチルブタノイル］アミノ｝ペンタノイル］アミノ｝フェニル）メトキシ］カルボニル｝アミノ）アセトアミド］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸（シントンＡＢＦ）の合成
実施例１．３．２を実施例１．４０．１１で置き換えて、標題化合物を実施例２．２に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.96 (s, 1H), 8.03 (dd, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.59 (dd, 3H), 7.53 - 7.39 (m, 3H), 7.35 (q, 2H), 7.30 - 7.23 (m, 3H), 7.20 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (d, 4H), 4.38 (t, 1H), 4.17 (dd, 1H), 3.87 (t, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.35 (t, 2H), 3.00 (t, 3H), 2.94 (s, 0H), 2.16 (d, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.95 (d, 1H), 1.74 - 1.27 (m, 10H), 1.13 (dq, 5H), 0.87 - 0.71 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５５．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例１．３．２を実施例１．４０．１１で置き換えて、標題化合物を実施例２．２に記載した通りに調製した。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.96 (s, 1H), 8.03 (dd, 2H), 7.78 (d, 2H), 7.59 (dd, 3H), 7.53 - 7.39 (m, 3H), 7.35 (q, 2H), 7.30 - 7.23 (m, 3H), 7.20 (d, 1H), 6.98 (s, 2H), 6.94 (d, 1H), 4.94 (d, 4H), 4.38 (t, 1H), 4.17 (dd, 1H), 3.87 (t, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.35 (t, 2H), 3.00 (t, 3H), 2.94 (s, 0H), 2.16 (d, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.95 (d, 1H), 1.74 - 1.27 (m, 10H), 1.13 (dq, 5H), 0.87 - 0.71 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３５５．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．７２ ８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（２−｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセトアミド）−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−ｇｕｌｏ−オクトン酸（シントンＺＺ）の合成
２．７２．１ ３−（１−（（３−（２−（（（（４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（２−（（３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．６５．１９（６６ｍｇ）及び実施例１．３２．２（６ｍＬ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（０．０２６ｍＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１６．２３ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（１ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３８．５（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．６５．１９（６６ｍｇ）及び実施例１．３２．２（６ｍＬ）の冷却（０℃）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミン（０．０２６ｍＬ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１６．２３ｍｇ）を加えた。反応混合物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（１ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １３３８．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．７２．２ ８−［２−（｛［（３−アミノ−３−オキソプロピル）｛２−［（３−｛［４−（６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝−２−カルボキシピリジン−３−イル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル］メチル｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル）オキシ］エチル｝カルバモイル］オキシ｝メチル）−５−｛［（２Ｓ）−２−｛［（２Ｓ）−２−（２−｛（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−［（２−スルホエトキシ）メチル］ピロリジン−１−イル｝アセトアミド）−３−メチルブタノイル］アミノ｝プロパノイル］アミノ｝フェニル］−２，６−アンヒドロ−７，８−ジデオキシ−Ｌ−グリセロ−Ｌ−ｇｕｌｏ−オクトン酸
２−（（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−（（２−スルホエトキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）酢酸（１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１９ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１７μＬ）を加えた。反応混合物を５分間撹拌し、実施例２．７２．１（５０ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（３６μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に加えた。反応混合物を２時間撹拌した。反応混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水（１／１、１ｍＬ）で希釈し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.82 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.00 (dd, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (ddd, 5H), 7.32 (td, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.92 (d, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.92 (s, 2H), 4.61 (t, 1H), 4.33 (p, 1H), 4.21 - 4.08 (m, 2H), 3.98 (d, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.40 - 3.27 (m, 3H), 3.21 (s, 1H), 3.14 - 3.03 (m, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.90 (t, 1H), 2.81 - 2.50 (m, 4H), 2.38 - 2.20 (m, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.74 (m, 1H), 1.60 - 1.43 (m, 1H), 1.36 - 0.95 (m, 14H), 0.95 - 0.62 (m, 13H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １６９７．５（Ｍ−Ｈ）−。
２−（（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−（（２−スルホエトキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）酢酸（１７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（１９ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（１７μＬ）を加えた。反応混合物を５分間撹拌し、実施例２．７２．１（５０ｍｇ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（３６μＬ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３２０μＬ）中溶液に加えた。反応混合物を２時間撹拌した。反応混合物をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水（１／１、１ｍＬ）で希釈し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (501 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.82 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.00 (dd, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.44 (ddd, 5H), 7.32 (td, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.92 (d, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.92 (s, 2H), 4.61 (t, 1H), 4.33 (p, 1H), 4.21 - 4.08 (m, 2H), 3.98 (d, 1H), 3.84 (t, 2H), 3.40 - 3.27 (m, 3H), 3.21 (s, 1H), 3.14 - 3.03 (m, 2H), 2.98 (t, 2H), 2.90 (t, 1H), 2.81 - 2.50 (m, 4H), 2.38 - 2.20 (m, 3H), 2.05 (s, 3H), 2.01 - 1.90 (m, 2H), 1.88 - 1.74 (m, 1H), 1.60 - 1.43 (m, 1H), 1.36 - 0.95 (m, 14H), 0.95 - 0.62 (m, 13H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １６９７．５（Ｍ−Ｈ）−。
２．７３ Ｎ−［６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリル−Ｎ−｛４−［（｛［２−（｛３−［（４−｛６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−２−カルボキシピリジン−３−イル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝オキシ）エチル］（２−スルホエチル）カルバモイル｝オキシ）メチル］フェニル｝−Ｎ５−カルバモイル−Ｌ−オルニチンアミド（シントンＣＺ）の合成
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７ｍＬ）中の実施例１．４４．２（１００ｍｇ）及び４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート（Ｓｙｎｃｈｅｍから購入、１１４ｍｇ）を水−氷浴中で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で３０分間、次いで室温で終夜撹拌した。反応物を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用する逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.75-7.82 (m, 2H), 7.40-7.63 (m, 6H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.24-7.29 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.83-5.08 (m, 4H), 4.29-4.48 (m, 1H), 4.19 (t, 1H), 3.84-3.94 (m, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.14-3.29 (m, 2H), 2.87-3.06 (m, 4H), 2.57-2.69 (m, 2H), 2.03-2.24 (m, 5H), 1.89-2.02 (m, 1H), 1.53-1.78 (m, 2H), 1.26-1.53 (m, 8H), 0.89-1.27 (m, 12H), 0.75-0.88 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４５２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７ｍＬ）中の実施例１．４４．２（１００ｍｇ）及び４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサンアミド）−３−メチルブタンアミド）−５−ウレイドペンタンアミド）ベンジル（４−ニトロフェニル）カルボネート（Ｓｙｎｃｈｅｍから購入、１１４ｍｇ）を水−氷浴中で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５ｍＬ）を加えた。混合物を０℃で３０分間、次いで室温で終夜撹拌した。反応物を０．１容量／容量％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜６０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステムを使用する逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 12.85 (s, 1H), 9.99 (s, 1H), 8.04 (t, 2H), 7.75-7.82 (m, 2H), 7.40-7.63 (m, 6H), 7.32-7.39 (m, 2H), 7.24-7.29 (m, 3H), 6.99 (s, 2H), 6.95 (d, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.83-5.08 (m, 4H), 4.29-4.48 (m, 1H), 4.19 (t, 1H), 3.84-3.94 (m, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.14-3.29 (m, 2H), 2.87-3.06 (m, 4H), 2.57-2.69 (m, 2H), 2.03-2.24 (m, 5H), 1.89-2.02 (m, 1H), 1.53-1.78 (m, 2H), 1.26-1.53 (m, 8H), 0.89-1.27 (m, 12H), 0.75-0.88 (m, 12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １４５２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
２．７４ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（２−（（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−（（２−スルホエトキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）アセトアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−スルホエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸（シントンＴＸ）の合成
２．７４．１ ３−（１−（（（１ｒ，３ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−３−（２−（（（（４−（（Ｒ）−２−（（Ｒ）−２−アミノ−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）−２−（２−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−スルホエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）ピコリン酸
実施例２．６５．１９（７０ｍｇ）及び実施例１．４４．２（５８．１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（１ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題生成物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５６４．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．６５．１９（７０ｍｇ）及び実施例１．４４．２（５８．１ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中冷却（０℃）溶液に、Ｎ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．０２６ｍＬ）を加えた。反応物を室温にゆっくり加温し、終夜撹拌した。反応混合物に水（１ｍＬ）及びＬｉＯＨ Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ）を加えた。混合物を室温で３時間撹拌した。混合物をトリフルオロ酢酸で酸性化し、濾過し、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中２０〜８０％アセトニトリルで溶出するＧｉｌｓｏｎシステム（Ｃ１８カラム）上での逆相ＨＰＬＣにより精製して、標題生成物を得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １５６４．４（Ｍ−Ｈ）−。
２．７４．２ ６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（（（２−（２−（（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−カルボキシ−３，４，５−トリヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル）−４−（（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（２−（（３Ｓ，５Ｓ）−３−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−オキソ−５−（（２−スルホエトキシ）メチル）ピロリジン−１−イル）アセトアミド）−３−メチルブタンアミド）プロパンアミド）ベンジル）オキシ）カルボニル）（２−スルホエチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸
実施例２．６６．１７において実施例２．７４．１を実施例２．６６．１６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.85 (s, 1H), 8.17 (br d, 1H), 8.01 (d, 2H), 7.77 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.43 (m, 4H), 7.34 (m, 3H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 4.99 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.63 (t, 1H), 4.36 (t, 1H), 4.19 (br m, 1H), 4.16 (d, 1H), 3.98 (d, 1H), 3.87 (br t, 2H), 3.81 (br d, 2H), 3.73 (brm, 1H), 3.63 (t, 2H), 3.53 (m, 2H), 3.44 (m, 4H), 3.31 (t, 2H), 3.21 (br m, 2H), 3.17 (m, 2H), 3.00 (m, 2H), 2.92 (br m, 1H), 2.75 (m, 3H), 2.65 (br m, 3H), 2.35 (br m, 1H), 2.07 (s, 3H), 1.98 (br m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.55 (br m, 1H), 1.34 (br m, 1H), 1.26 (br m, 6H), 1.09 (br m, 7H), 0.93 (br m, 1H), 0.87, 0.83, 0.79 (全d, 計12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １７３３．４（Ｍ−Ｈ）−。
実施例２．６６．１７において実施例２．７４．１を実施例２．６６．１６の代わりに用いることにより、標題化合物を調製した。1H NMR (400 MHz, ジメチルスルホキシド-d6) δ ppm 9.85 (s, 1H), 8.17 (br d, 1H), 8.01 (d, 2H), 7.77 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.43 (m, 4H), 7.34 (m, 3H), 7.19 (d, 1H), 7.06 (s, 2H), 6.96 (d, 1H), 4.99 (m, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.63 (t, 1H), 4.36 (t, 1H), 4.19 (br m, 1H), 4.16 (d, 1H), 3.98 (d, 1H), 3.87 (br t, 2H), 3.81 (br d, 2H), 3.73 (brm, 1H), 3.63 (t, 2H), 3.53 (m, 2H), 3.44 (m, 4H), 3.31 (t, 2H), 3.21 (br m, 2H), 3.17 (m, 2H), 3.00 (m, 2H), 2.92 (br m, 1H), 2.75 (m, 3H), 2.65 (br m, 3H), 2.35 (br m, 1H), 2.07 (s, 3H), 1.98 (br m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.55 (br m, 1H), 1.34 (br m, 1H), 1.26 (br m, 6H), 1.09 (br m, 7H), 0.93 (br m, 1H), 0.87, 0.83, 0.79 (全d, 計12H).ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ １７３３．４（Ｍ−Ｈ）−。
［実施例３］
マウスハイブリドーマ技術によるマウス抗Ｂ７−Ｈ３モノクローナル抗体の生成
Ｂ７−Ｈ３特異的抗体は、マウスハイブリドーマ技術を用いて産生された。具体的には、全長ヒトＢ７−Ｈ３も組換えヒト又はマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃ融合タンパク質も発現するマウス線維芽細胞株（３Ｔ１２）が免疫原として使用され、その配列は、表１に提供される。ヒトＢ７−Ｈ３を発現するヒトＨＣＴ１１６細胞株は、抗血清タイターを決定するため及びスクリーニング抗原特異的抗体のために使用された。細胞株は免疫化の前におよそ３０００ｍＲＥＭのガンマ線源放射に暴露された。２つの異なる系統のマウスは、初回及び追加の免疫化の両方のために、後肢関節において、５×１０６細胞／マウス／注射又は１０ｕｇのタンパク質／マウス／注射を含有する用量で、Ｇｅｒｂｕ ＭＭアジュバント（Ｃｏｏｐｅｒ−Ｃａｓｅｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社、Ｖａｌｌｅｙ Ｃｅｎｔｅｒ、ＣＡ州、米国）の存在下で、免疫化された。マウスＢ７−Ｈ３に対する免疫応答を増大させるために、マウスは、最終追加免疫で、ヒト及びマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃタンパク質の混合物でさらに追加免疫された。簡単に言うと、抗原は、ＰＢＳにおいて以下のように調製された：２００×１０６細胞／ｍＬ又は４００ｕｇ／ｍＬのタンパク質。計算された体積の抗原は、無菌マイクロ遠心分離機チューブに移され、次いで等体積のＧｅｒｂｕ ＭＭが添加された。溶液は、穏やかにボルテックスをかけることによって１分間混合された。アジュバント抗原溶液は、次いで、動物注射のための適切なシリンジ内に引き込まれた。合計で２５μＬの混合物は、マウスの各脚の後肢関節内に注射された。各動物は、血清タイターがグループのために決定される前に、３回追加免疫された。全ての動物に、融合前にアジュバントにおいてマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃ及びヒトＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃタンパク質の等混合物を用いた２回の付加的な追加免疫を行った。
マウスハイブリドーマ技術によるマウス抗Ｂ７−Ｈ３モノクローナル抗体の生成
Ｂ７−Ｈ３特異的抗体は、マウスハイブリドーマ技術を用いて産生された。具体的には、全長ヒトＢ７−Ｈ３も組換えヒト又はマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃ融合タンパク質も発現するマウス線維芽細胞株（３Ｔ１２）が免疫原として使用され、その配列は、表１に提供される。ヒトＢ７−Ｈ３を発現するヒトＨＣＴ１１６細胞株は、抗血清タイターを決定するため及びスクリーニング抗原特異的抗体のために使用された。細胞株は免疫化の前におよそ３０００ｍＲＥＭのガンマ線源放射に暴露された。２つの異なる系統のマウスは、初回及び追加の免疫化の両方のために、後肢関節において、５×１０６細胞／マウス／注射又は１０ｕｇのタンパク質／マウス／注射を含有する用量で、Ｇｅｒｂｕ ＭＭアジュバント（Ｃｏｏｐｅｒ−Ｃａｓｅｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社、Ｖａｌｌｅｙ Ｃｅｎｔｅｒ、ＣＡ州、米国）の存在下で、免疫化された。マウスＢ７−Ｈ３に対する免疫応答を増大させるために、マウスは、最終追加免疫で、ヒト及びマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃタンパク質の混合物でさらに追加免疫された。簡単に言うと、抗原は、ＰＢＳにおいて以下のように調製された：２００×１０６細胞／ｍＬ又は４００ｕｇ／ｍＬのタンパク質。計算された体積の抗原は、無菌マイクロ遠心分離機チューブに移され、次いで等体積のＧｅｒｂｕ ＭＭが添加された。溶液は、穏やかにボルテックスをかけることによって１分間混合された。アジュバント抗原溶液は、次いで、動物注射のための適切なシリンジ内に引き込まれた。合計で２５μＬの混合物は、マウスの各脚の後肢関節内に注射された。各動物は、血清タイターがグループのために決定される前に、３回追加免疫された。全ての動物に、融合前にアジュバントにおいてマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃ及びヒトＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃタンパク質の等混合物を用いた２回の付加的な追加免疫を行った。
ハイブリドーマ融合及びスクリーニング
マウス骨髄腫細胞株（ＮＳ−０、ＥＣＡＣＣ Ｎｏ．８５１１０５０３）の細胞は、融合の直前に対数期段階に到達するように培養された。膝窩及び鼠径リンパ節は、各マウスから取り除かれ、単細胞懸濁液が、無菌的に調製された。リンパ球は、骨髄腫細胞と融合された（Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ，Ｄ．Ｌａｎｅ、Ａｎｔｉｂｏｄｙ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ州、１９９８年）、Ｋｏｈｌｅｒ Ｇ．及びＭｉｌｓｔｅｉｎ Ｃ．、「Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ ｆｕｓｅｄ ｃｅｌｌ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｏｆ ｐｒｅｄｅｆｉｎｅｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ」、Ｎａｔｕｒｅ、２５６巻、４９５〜４９７頁（１９７５年）、ＢＴＸ Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｏｎ、ＭＡ州、米国）ＥＣＭ２００１年 ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｍａｎｕａｌ）。融合された細胞は、ＤＭＥＭ／１０％ＦＢＳ／ＨＡＴ培地における９６ウェルプレートに分配された。生存するハイブリドーマコロニー由来の上清は、組換えヒトＢ７−Ｈ３を発現するヒト細胞株を用いる細胞ベースのスクリーニングに供した。簡単に言うと、ヒトＢ７−Ｈ３を発現するヒト細胞株は、解凍され、増殖培地において９６ウェル（撮像のための透明な底部を備える黒色）プレート内に５０，０００細胞／ウェルで直接的に分配され、２日間、３７℃で５０%の集密度に達するまでインキュベートされた。ハイブリドーマ上清（５０μＬ／ウェル）は、それぞれのプレートに移され、室温で３０分間インキュベートされた。培地は、各ウェルから除去され、ヤギ抗マウスＩｇＧ−ＡＦ４８８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、番号Ａ１１０２９、Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ州、米国）が、ＩｎＣｅｌｌ Ａｎａｌｙｚｅｒ ２０００（ＧＥ社）を用いる検出のために使用された。ヒットは拡大増殖され、結合が、検出のためのヒトＢ７−Ｈ３及びヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＥを発現する、異なるヒト細胞株又はマウス細胞株を用いるＦＡＣＳによって確認された。種特異性は、ＥＬＩＳＡフォーマットを用いて次の手順に従って決定された。ＥＬＩＳＡプレートは、室温において一晩中、ヒトＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃ、カニクイザルＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ｈｉｓ又はマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃタンパク質でコーティングされた。プレートは、洗浄され、ハイブリドーマ上清（１００μＬ）が各ウェルに添加され、室温で１時間インキュベートされた。プレートは、洗浄され、ロバ抗マウスＩｇＧ−ＨＲＰ（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ社、番号１１５−０３５−０７１、Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ、ＰＡ州、米国）が検出のために使用され、結合ＯＤが、６５０ｎｍで観察された。
マウス骨髄腫細胞株（ＮＳ−０、ＥＣＡＣＣ Ｎｏ．８５１１０５０３）の細胞は、融合の直前に対数期段階に到達するように培養された。膝窩及び鼠径リンパ節は、各マウスから取り除かれ、単細胞懸濁液が、無菌的に調製された。リンパ球は、骨髄腫細胞と融合された（Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ，Ｄ．Ｌａｎｅ、Ａｎｔｉｂｏｄｙ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ州、１９９８年）、Ｋｏｈｌｅｒ Ｇ．及びＭｉｌｓｔｅｉｎ Ｃ．、「Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ ｆｕｓｅｄ ｃｅｌｌ ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｏｆ ｐｒｅｄｅｆｉｎｅｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ」、Ｎａｔｕｒｅ、２５６巻、４９５〜４９７頁（１９７５年）、ＢＴＸ Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｏｎ、ＭＡ州、米国）ＥＣＭ２００１年 ｔｅｃｈｎｉｃａｌ ｍａｎｕａｌ）。融合された細胞は、ＤＭＥＭ／１０％ＦＢＳ／ＨＡＴ培地における９６ウェルプレートに分配された。生存するハイブリドーマコロニー由来の上清は、組換えヒトＢ７−Ｈ３を発現するヒト細胞株を用いる細胞ベースのスクリーニングに供した。簡単に言うと、ヒトＢ７−Ｈ３を発現するヒト細胞株は、解凍され、増殖培地において９６ウェル（撮像のための透明な底部を備える黒色）プレート内に５０，０００細胞／ウェルで直接的に分配され、２日間、３７℃で５０%の集密度に達するまでインキュベートされた。ハイブリドーマ上清（５０μＬ／ウェル）は、それぞれのプレートに移され、室温で３０分間インキュベートされた。培地は、各ウェルから除去され、ヤギ抗マウスＩｇＧ−ＡＦ４８８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、番号Ａ１１０２９、Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ州、米国）が、ＩｎＣｅｌｌ Ａｎａｌｙｚｅｒ ２０００（ＧＥ社）を用いる検出のために使用された。ヒットは拡大増殖され、結合が、検出のためのヒトＢ７−Ｈ３及びヤギ抗マウスＩｇＧ−ＰＥを発現する、異なるヒト細胞株又はマウス細胞株を用いるＦＡＣＳによって確認された。種特異性は、ＥＬＩＳＡフォーマットを用いて次の手順に従って決定された。ＥＬＩＳＡプレートは、室温において一晩中、ヒトＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃ、カニクイザルＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ｈｉｓ又はマウスＢ７−Ｈ３−ＥＣＤ−ヒトＦｃタンパク質でコーティングされた。プレートは、洗浄され、ハイブリドーマ上清（１００μＬ）が各ウェルに添加され、室温で１時間インキュベートされた。プレートは、洗浄され、ロバ抗マウスＩｇＧ−ＨＲＰ（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ社、番号１１５−０３５−０７１、Ｗｅｓｔ Ｇｒｏｖｅ、ＰＡ州、米国）が検出のために使用され、結合ＯＤが、６５０ｎｍで観察された。
ヒットの選択は、ＭｏＦｌｏ（Ｂｅｃｋｍａｎ社、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ州、米国）を用いて、細胞株のクローン性を保証するために、単細胞ごとにウェルを９６ウェル細胞培養プレート内に付着させることによって、サブクローニングされた。結果として得られるコロニーは、ヒトＢ７−Ｈ３、カニクイザルＢ７−Ｈ３、又はマウスＢ７−Ｈ３を発現するマウス３Ｔ１２線維芽細胞株を用いるＦＡＣＳによって、特異性に関してスクリーニングされた。各モノクローナル抗体のアイソタイプは、Ｍｏｕｓｅ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ｉｓｏｓｔｙｐｉｎｇ Ｋｉｔ（Ｒｏｃｈｅ社、番号１１−４９３−０２７−００１、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ州、米国）を用いて決定された。ヒト及びカニクイザルＢ７−Ｈ３抗原に対する高比結合活性を示した抗体を産生するハイブリドーマクローンは、サブクローニングされ精製された（表２）。
［実施例４］
抗Ｂ７−Ｈ３マウスモノクローナル抗体のインビトロ特徴付け。
抗Ｂ７−Ｈ３マウスモノクローナル抗体のインビトロ特徴付け。
精製された抗Ｂ７−Ｈ３モノクローナル抗体の結合親和性は、表面プラズマ共鳴によって決定された。表３は、一連の、マウスハイブリドーマ由来の、ヒトＢ７−Ｈ３及びｃｙｎｏＢ７−Ｈ３の可溶性ＥＣＤに結合する抗Ｂ７−Ｈ３モノクローナル抗体（ｍＡｂ）に関する会合速度定数（κａ）、解離速度定数（κｄ）、及び平衡解離定数（ΚＤ）を示す。結合動態は、（以下の材料及び方法に説明されるような）Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００機器及びｍＡｂ捕捉アプローチを用いるＳＰＲ測定に由来した。
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００ＳＰＲ機器上で行われるペアワイズ結合アッセイは、以下の方法において説明されるようなマウス抗Ｂ７−Ｈ３ｍＡｂのための相対的エピトープグルーピングを決定するために使用された。図１は、エピトープグルーピングの図を示し、これは、相対的ヒトＢ７−Ｈ３エピトープの多様性を説明し、本明細書において特定される一連の抗Ｂ７−Ｈ３ｍＡｂと重複する。エピトープグループは、個々の楕円形として表されており、このうちのいくつかは、互いに重複する。異なるエピトープグループにおける抗体は、Ｂ７−Ｈ３に同時に結合することができ、異なるエピトープに結合する可能性があるが、一方、所与のエピトープグループ内の抗体は、Ｂ７−Ｈ３に同時に結合することはできなく、おそらくエピトープと重複することができない。グルーピングの情報は、材料及び方法に説明されるような同時結合アッセイに由来した。Ａｂ３、Ａｂ４、Ａｂ５、Ａｂ１１、Ａｂ１２、及びＡｂ８グルーピングは、不明瞭であった。
材料及び方法：結合動態
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００ＳＰＲ機器は、様々なｍＡｂ（リガンド）に結合するヒトＢ７−Ｈ３（４Ｉｇ−Ｂ７−Ｈ３変異体）（分析物）の結合動態を測定するために使用された。アッセイフォーマットは、固定化された抗マウス（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１７０）又は固定化された抗ヒト（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１２５）を介する、Ｆｃに基づく捕捉であった。標準的なアミンカップリングプロトコルは、ＣＭ５センサーチップ（Ｂｉａｃｏｒｅ）のカルボキシメチル（ＣＭ）デキストラン表面に一級アミンを介して捕捉試薬を固定化するために採用され、捕捉抗体は、およそ５０００ＲＵのレベルまでカップリングされた。結合動態測定のために、アッセイ緩衝液は、ＨＢＳ−ＥＰ＋（Ｂｉａｃｏｒｅ）：１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５%のポリソルベート２０であった。アッセイの間、全ての測定は、捕捉表面だけを対照した。各アッセイサイクルは、以下の工程：１）およそ５０ＲＵまでのリガンドの捕捉、２）対照及び試験表面の両方にわたる、２４０μＬ、８０μＬ／分の分析物の注入、その後、９００秒間、８０μＬ／分で解離がモニターされた、３）低ｐＨグリシンを用いる捕捉表面再生、で構成された。動態決定のために、分析物注入は、９００ｎＭ、１００ｎＭ、及び１１．１１ｎＭの３点、９倍希釈系列であり、緩衝液のみの注入は、二次的な参照のために含まれた。データは、結合動態速度定数κａ（オン速度）及びκｄ（オフ速度）並びに平衡解離定数（親和性、ΚＤ）を決定するために、処理され、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００評価ソフトウェアを用いる１：１結合モデルに適合させた。
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００ＳＰＲ機器は、様々なｍＡｂ（リガンド）に結合するヒトＢ７−Ｈ３（４Ｉｇ−Ｂ７−Ｈ３変異体）（分析物）の結合動態を測定するために使用された。アッセイフォーマットは、固定化された抗マウス（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１７０）又は固定化された抗ヒト（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１２５）を介する、Ｆｃに基づく捕捉であった。標準的なアミンカップリングプロトコルは、ＣＭ５センサーチップ（Ｂｉａｃｏｒｅ）のカルボキシメチル（ＣＭ）デキストラン表面に一級アミンを介して捕捉試薬を固定化するために採用され、捕捉抗体は、およそ５０００ＲＵのレベルまでカップリングされた。結合動態測定のために、アッセイ緩衝液は、ＨＢＳ−ＥＰ＋（Ｂｉａｃｏｒｅ）：１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５%のポリソルベート２０であった。アッセイの間、全ての測定は、捕捉表面だけを対照した。各アッセイサイクルは、以下の工程：１）およそ５０ＲＵまでのリガンドの捕捉、２）対照及び試験表面の両方にわたる、２４０μＬ、８０μＬ／分の分析物の注入、その後、９００秒間、８０μＬ／分で解離がモニターされた、３）低ｐＨグリシンを用いる捕捉表面再生、で構成された。動態決定のために、分析物注入は、９００ｎＭ、１００ｎＭ、及び１１．１１ｎＭの３点、９倍希釈系列であり、緩衝液のみの注入は、二次的な参照のために含まれた。データは、結合動態速度定数κａ（オン速度）及びκｄ（オフ速度）並びに平衡解離定数（親和性、ΚＤ）を決定するために、処理され、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００評価ソフトウェアを用いる１：１結合モデルに適合させた。
材料及び方法：エピトープグルーピング
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００ＳＰＲ機器において行われたペアワイズ結合アッセイは、一連の抗Ｂ７−Ｈ３ｍＡｂに関する相対的エピトープグルーピングを決定するために使用された。アッセイフォーマットは、固定化された抗マウス（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１７０）又は固定化された抗ヒト（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１２５）を介するＦｃに基づく捕捉であった。標準的なアミンカップリングプロトコルは、捕捉試薬を、一級アミンを介してＣＭ５センサーチップ（Ｂｉａｃｏｒｅ）のカルボキシメチル（ＣＭ）デキストラン表面に固定化するように採用され、捕捉抗体は、およそ２０００ＲＵのレベルまでカップリングされた。エピトープグルーピング測定は、１２℃で行われ（低温は、速いオフ速度のｍＡｂに関するグルーピングの情報を可能にする）、アッセイ緩衝液は、ＨＢＳ−ＥＰ＋（Ｂｉａｃｏｒｅ）：１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のポリソルベート２０であった。各アッセイサイクルは、４つのフローセルシステムにおける以下の工程：１）別個の試験ｍＡｂは、フローセル２、３及び４（フローセル１は、対照であり、試験ｍＡｂなし）内に捕捉され、２）４つのフローセル全ては、次いで、アイソタイプ対照ｍＡｂ又はアイソタイプｍＡｂの混液を用いて５０μｇ／ｍＬで注入することによってブロックされ、３）４つのフローセル全ては、次いで、抗原又は緩衝液のみを用いて注入され（緩衝液のみは、二重の対照のためであり、各ｍＡｂ対のために個々に行われた）、４）４つのフローセルの全ては、次いで、２番目の試験ｍＡｂを用いて１０μｇ／ｍＬで注入され、５）４つのフローセル全ては、次いで、グリシン、ｐＨ１．５で再生された、で構成された。アッセイは、交互配置の各試験ｍＡｂ対に関して行われた。同時結合は、２番目の試験ｍＡｂ応答対Ａｇ応答の比（ＲＵｍＡｂ２／ＲＵＡｇ）を試験して評価され、この比が０．２と等しい又は０．２よりも大きかった場合、相互作用は、同時結合剤として記録された。このペアワイズ結合アッセイデータから、「ベン」スタイルの図は、相対的エピトープグルーピングを描くために、手作業で構成された。
Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００ＳＰＲ機器において行われたペアワイズ結合アッセイは、一連の抗Ｂ７−Ｈ３ｍＡｂに関する相対的エピトープグルーピングを決定するために使用された。アッセイフォーマットは、固定化された抗マウス（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１７０）又は固定化された抗ヒト（Ｆｃ）（Ｐｉｅｒｃｅ ３１１２５）を介するＦｃに基づく捕捉であった。標準的なアミンカップリングプロトコルは、捕捉試薬を、一級アミンを介してＣＭ５センサーチップ（Ｂｉａｃｏｒｅ）のカルボキシメチル（ＣＭ）デキストラン表面に固定化するように採用され、捕捉抗体は、およそ２０００ＲＵのレベルまでカップリングされた。エピトープグルーピング測定は、１２℃で行われ（低温は、速いオフ速度のｍＡｂに関するグルーピングの情報を可能にする）、アッセイ緩衝液は、ＨＢＳ−ＥＰ＋（Ｂｉａｃｏｒｅ）：１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＥＤＴＡ、０．０５％のポリソルベート２０であった。各アッセイサイクルは、４つのフローセルシステムにおける以下の工程：１）別個の試験ｍＡｂは、フローセル２、３及び４（フローセル１は、対照であり、試験ｍＡｂなし）内に捕捉され、２）４つのフローセル全ては、次いで、アイソタイプ対照ｍＡｂ又はアイソタイプｍＡｂの混液を用いて５０μｇ／ｍＬで注入することによってブロックされ、３）４つのフローセル全ては、次いで、抗原又は緩衝液のみを用いて注入され（緩衝液のみは、二重の対照のためであり、各ｍＡｂ対のために個々に行われた）、４）４つのフローセルの全ては、次いで、２番目の試験ｍＡｂを用いて１０μｇ／ｍＬで注入され、５）４つのフローセル全ては、次いで、グリシン、ｐＨ１．５で再生された、で構成された。アッセイは、交互配置の各試験ｍＡｂ対に関して行われた。同時結合は、２番目の試験ｍＡｂ応答対Ａｇ応答の比（ＲＵｍＡｂ２／ＲＵＡｇ）を試験して評価され、この比が０．２と等しい又は０．２よりも大きかった場合、相互作用は、同時結合剤として記録された。このペアワイズ結合アッセイデータから、「ベン」スタイルの図は、相対的エピトープグルーピングを描くために、手作業で構成された。
［実施例５］
抗ｈＢ７−Ｈ３キメラ抗体の生成
マウス抗Ｂ７−Ｈ３ハイブリドーマ抗体の同定に続いて、分泌される抗体に対応する重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＨ及びＶＬ）は、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）を用いて細胞から決定された。マウス可変領域は、キメラ抗体を提供するヒト免疫グロブリン定常領域の観点から、哺乳動物宿主細胞において発現された。以下の表４は、マウスのキメラ化されたハイブリドーマに関する可変領域アミノ酸配列を提供する。
抗ｈＢ７−Ｈ３キメラ抗体の生成
マウス抗Ｂ７−Ｈ３ハイブリドーマ抗体の同定に続いて、分泌される抗体に対応する重鎖及び軽鎖可変領域（ＶＨ及びＶＬ）は、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）を用いて細胞から決定された。マウス可変領域は、キメラ抗体を提供するヒト免疫グロブリン定常領域の観点から、哺乳動物宿主細胞において発現された。以下の表４は、マウスのキメラ化されたハイブリドーマに関する可変領域アミノ酸配列を提供する。
［実施例６］
キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体の結合特徴付け
精製されたキメラ抗体を生成するために、発現ベクターは、ＨＥＫ２９３ ６Ｅ懸濁細胞培養物内に、６０％対４０％の軽鎖対重鎖の構築の比で、一時的にトランスフェクトされた。１ｍｇ／ｍｌのポリエチレンイミン（ＰＥＩ）又は２．６μＬ／ｍＬのＥｘｐｉｆｅｃｔａｍｉｎｅは、細胞をトランスフェクトするために使用された。細胞上清は、振とうフラスコ内における５日間の後に回収され、ペレット細胞にスピンダウンされ、０．２２μｍのフィルターを通して濾過されて、培養混入物からＩｇＧを分離した。抗体含有上清は、タンパク質ＡのｍＡｂ ＳｅｌｅｃｔＳｕｒｅを用いてＡｋｔａ Ｐｕｒｅ上で精製された。カラムは、ＰＢＳ、ｐＨ７．４において平衡させられ、上清は、次いでカラムを通され、ＰＢＳ、ｐＨ７．４を用いて洗浄が行われた。ＩｇＧは、０．１Ｍの酢酸、ｐＨ３．５を用いて溶出され、いくつかのアリコートに収集された。ＩｇＧを含有する画分は、プールされ、ＰＢＳにおいて、一晩中、４℃で透析された。成功裏に発現された抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体は、Ｂ７−Ｈ３過剰発現ヒト非小細胞肺がん細胞株ＮＣＩ−Ｈ１６５０（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−５８８３番）に結合する能力に関して、下述される方法を用いてＦＡＣＳによって特徴付けられた。表５は、キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体の結合性を要約する。
キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体の結合特徴付け
精製されたキメラ抗体を生成するために、発現ベクターは、ＨＥＫ２９３ ６Ｅ懸濁細胞培養物内に、６０％対４０％の軽鎖対重鎖の構築の比で、一時的にトランスフェクトされた。１ｍｇ／ｍｌのポリエチレンイミン（ＰＥＩ）又は２．６μＬ／ｍＬのＥｘｐｉｆｅｃｔａｍｉｎｅは、細胞をトランスフェクトするために使用された。細胞上清は、振とうフラスコ内における５日間の後に回収され、ペレット細胞にスピンダウンされ、０．２２μｍのフィルターを通して濾過されて、培養混入物からＩｇＧを分離した。抗体含有上清は、タンパク質ＡのｍＡｂ ＳｅｌｅｃｔＳｕｒｅを用いてＡｋｔａ Ｐｕｒｅ上で精製された。カラムは、ＰＢＳ、ｐＨ７．４において平衡させられ、上清は、次いでカラムを通され、ＰＢＳ、ｐＨ７．４を用いて洗浄が行われた。ＩｇＧは、０．１Ｍの酢酸、ｐＨ３．５を用いて溶出され、いくつかのアリコートに収集された。ＩｇＧを含有する画分は、プールされ、ＰＢＳにおいて、一晩中、４℃で透析された。成功裏に発現された抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体は、Ｂ７−Ｈ３過剰発現ヒト非小細胞肺がん細胞株ＮＣＩ−Ｈ１６５０（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−５８８３番）に結合する能力に関して、下述される方法を用いてＦＡＣＳによって特徴付けられた。表５は、キメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体の結合性を要約する。
ＦＡＣＳ結合方法
細胞は、Ｇｉｂｃｏ（商標登録）細胞解離緩衝液を用いておよそ８０％の集密度に達したときに、フラスコから回収された。細胞は、ＰＢＳ／１％ＦＢＳ（ＦＡＣＳ緩衝液）において一旦洗浄され、次いで、ＦＡＣＳ緩衝液中に２．５×１０６細胞／ｍＬで再懸濁した。１００μＬの細胞／ウェルは、丸底型９６ウェルプレートに添加された。１０μＬの１０×濃度のｍＡｂ／ＡＤＣ（最終的な濃度は、図に示される）。ウェルは、ＦＡＣＳ緩衝液を用いて二回洗浄され、ＦＡＣＳ緩衝液において希釈された５０μＬの二次Ａｂ（ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ４８８）中で再懸濁された。プレートは、４℃で１時間、インキュベートされ、ＦＡＣＳ緩衝液を用いて二回洗浄された。細胞は、１００μＬのＰＢＳ／１％ホルムアルデヒド中で再懸濁され、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社のＬＳＲＩＩフローサイトメーター上で分析された。データは、ＷｉｎＬｉｓｔのフローサイトメトリー分析ソフトウェアを用いて分析された。
細胞は、Ｇｉｂｃｏ（商標登録）細胞解離緩衝液を用いておよそ８０％の集密度に達したときに、フラスコから回収された。細胞は、ＰＢＳ／１％ＦＢＳ（ＦＡＣＳ緩衝液）において一旦洗浄され、次いで、ＦＡＣＳ緩衝液中に２．５×１０６細胞／ｍＬで再懸濁した。１００μＬの細胞／ウェルは、丸底型９６ウェルプレートに添加された。１０μＬの１０×濃度のｍＡｂ／ＡＤＣ（最終的な濃度は、図に示される）。ウェルは、ＦＡＣＳ緩衝液を用いて二回洗浄され、ＦＡＣＳ緩衝液において希釈された５０μＬの二次Ａｂ（ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ４８８）中で再懸濁された。プレートは、４℃で１時間、インキュベートされ、ＦＡＣＳ緩衝液を用いて二回洗浄された。細胞は、１００μＬのＰＢＳ／１％ホルムアルデヒド中で再懸濁され、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ社のＬＳＲＩＩフローサイトメーター上で分析された。データは、ＷｉｎＬｉｓｔのフローサイトメトリー分析ソフトウェアを用いて分析された。
［実施例７］
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害抗体薬物コンジュゲートとしてのキメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体の特徴付け
９つの抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体は、下述されるコンジュゲーション方法Ａを用いて、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害（Ｂｃｌ−ｘＬｉ）シントンＣＺ（実施例２．１）にコンジュゲートされた。結果として得られるＡＤＣ（シントンＣＺにコンジュゲートされる抗Ｂ７−Ｈ３抗体）は、ＦＡＣＳによって細胞表面ヒトＢ７−Ｈ３への結合（実施例６に説明されるように）に関して、及びＢ７−Ｈ３を発現する細胞株における細胞の細胞傷害性に関して、試験された。９つの抗体のうち、３つの抗体（ｃｈＡｂ２、ｃｈＡｂ６、及びｃｈＡｂ１６）は、シントンＣＺへのコンジュゲーションに続いて沈降し、ヒトＢ７−Ｈ３発現細胞において弱い細胞傷害性を示した。表６は、ヒトＢ７−Ｈ３を発現する乳がん細胞ＨＣＣ３８に対抗する、抗Ｂ７−Ｈ３キメラＡＤＣの細胞表面結合及び細胞傷害性活性を提供する。
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害抗体薬物コンジュゲートとしてのキメラ抗Ｂ７−Ｈ３抗体の特徴付け
９つの抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体は、下述されるコンジュゲーション方法Ａを用いて、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害（Ｂｃｌ−ｘＬｉ）シントンＣＺ（実施例２．１）にコンジュゲートされた。結果として得られるＡＤＣ（シントンＣＺにコンジュゲートされる抗Ｂ７−Ｈ３抗体）は、ＦＡＣＳによって細胞表面ヒトＢ７−Ｈ３への結合（実施例６に説明されるように）に関して、及びＢ７−Ｈ３を発現する細胞株における細胞の細胞傷害性に関して、試験された。９つの抗体のうち、３つの抗体（ｃｈＡｂ２、ｃｈＡｂ６、及びｃｈＡｂ１６）は、シントンＣＺへのコンジュゲーションに続いて沈降し、ヒトＢ７−Ｈ３発現細胞において弱い細胞傷害性を示した。表６は、ヒトＢ７−Ｈ３を発現する乳がん細胞ＨＣＣ３８に対抗する、抗Ｂ７−Ｈ３キメラＡＤＣの細胞表面結合及び細胞傷害性活性を提供する。
材料及び方法：Ｂｃｌ−ｘＬ阻害ＡＤＣのコンジュゲーション
ＡＤＣは、下述される方法のうちの１つを用いて合成された。例示的なＡＤＣは、下述される９つの例示的な方法のうちの１つを用いて合成された。
ＡＤＣは、下述される方法のうちの１つを用いて合成された。例示的なＡＤＣは、下述される９つの例示的な方法のうちの１つを用いて合成された。
方法Ａ。Ｂｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（商標）のトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンハイドロクロライド（ＴＣＥＰ）溶液（１０ｍＭ、０．０１７ｍＬ）の溶液は、３７℃に予熱された抗体の溶液（１０ｍｇ／ｍＬ、１ｍＬ）に添加された。反応混合物は、３７℃で１時間、保持された。還元された抗体の溶液は、シントンの溶液（ＤＭＳＯ中、３．３ｍＭ、０．１６０ｍＬ）に添加され、３０分間、穏やかに混合された。反応溶液は、脱塩カラム（ＰＤ１０、ダルベッコのリン酸緩衝食塩水［ＤＰＢＳ］を用いて、使用の前に３回洗浄された）に装填され、その後に、ＤＰＢＳ（３ｍＬ）が続いた。精製されたＡＤＣ溶液は、０．２ミクロンの低タンパク質結合の１３ｍｍシリンジフィルターを通して濾過され、４℃で保管された。
方法Ｂ。Ｂｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（商標）トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）溶液（１０ｍＭ、０．０１７ｍＬ）の溶液を、３７℃に予熱した抗体（１０ｍｇ／ｍＬ、１ｍＬ）の溶液に加えた。反応混合物を３７℃で１時間保持した。ホウ酸緩衝液（０．０５ｍＬ、０．５Ｍ、ｐＨ８）を加えることにより、還元抗体の溶液をｐＨ＝８に調整し、シントンの溶液（３．３ｍＭ、ＤＭＳＯ中０．１６０ｍＬ）に加え、４時間穏やかに混合した。反応溶液を脱塩カラム（ＰＤ１０、使用前にＤＰＢＳで３回洗浄した）上に装填し、続いてＤＰＢＳ（１．６ｍＬ）を装填し、追加のＤＰＢＳ（３ｍＬ）で溶出した。精製したＡＤＣ溶液を０．２ミクロンの低タンパク質結合１３ｍｍシリンジフィルターに通して濾過し、４℃で保管した。
方法Ｃ。拡張デッキ上に、Ｉ２３５／９６チップモジュラーディスペンステクノロジー（ＭＤＴ）、グリッパーアーム（部品７４００３５８）を含有する使い捨てヘッド（部品７０２４３５４０）及び８−チップＶａｒｉｓｐａｎピペッティングアーム（部品７００２３５７）を装備した、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｊａｎｕｓ（部品ＡＪＬ８Ｍ０１）ロボット型液体取り扱いシステムを使用して、コンジュゲーションを行った。ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｊａｎｕｓシステムは、ＷｉｎＰＲＥＰバージョン４．８．３．３１５ソフトウェアを使用して制御した。
Ｐａｌｌフィルタープレート５０５２を、ＭＤＴを使用し１×ＤＰＢＳ １００μＬを用いて予め加湿した。真空をフィルタープレートに１０秒間適用し、続いて５秒間排気して、フィルタープレートからＤＰＢＳを除去した。ＤＰＢＳ中のプロテインＡ樹脂（ＧＥ ＭａｂＳｅｌｅｃｔ Ｓｕｒｅ）の５０％スラリー液を、磁気ボールを備えた８ウェルレザーバー中に注ぎ入れ、レザーバープレートの下にある移動式磁石を通過させることにより樹脂を混合した。導電性チップ１ｍＬを備えた８チップＶａｒｉｓｐａｎアームを使用して、樹脂（２５０μＬ）を吸引し、９６ウェルフィルタープレートに移した。真空を２サイクル適用して、ほとんどの緩衝液を除去した。ＭＤＴを使用して、１×ＰＢＳ １５０μＬを吸引し、樹脂を保持している９６ウェルフィルタープレートに分注した。真空を適用して、樹脂から緩衝液を除去した。すすぎ／真空サイクルを３回繰り返した。２ｍＬの９６ウェルコレクションプレートをＪａｎｕｓデッキに装着し、後ほど使用するために、ＭＤＴにより５×ＤＰＢＳ ４５０μＬをコレクションプレートに移した。ＤＰＢＳ（２００μＬ）中の溶液として還元抗体（２ｍｇ）を、条件Ａに関して上記した通りに調製し、９６ウェルプレート中に予め装填した。樹脂を含有するフィルタープレートウェルに還元抗体の溶液を移し、１サイクル当たり４５秒間ウェル内において１００μＬ容量の吸引／分注を繰り返すことにより、ＭＤＴを用いて混合物を混合した。吸引／分注サイクルを５分間かけて合計５回繰り返した。真空を２サイクルの間フィルタープレートに適用し、これにより過剰の抗体を除去した。ＭＤＴチップを水で５サイクルすすいだ（２００μＬ、合計容量１ｍＬ）。ＭＤＴを吸引し、樹脂結合抗体を含有するフィルタープレートウェルにＤＰＢＳ １５０μＬを分注し、真空を２サイクル適用した。洗浄及び真空の順序をさらに２回繰り返した。最後の真空サイクルの後、１×ＤＰＢＳ １００μＬを樹脂結合抗体を含有するウェルに分注した。次いで、ＭＤＴにより、９６ウェルフォーマット中にプレートされているシントンの３．３ｍＭジメチルスルホキシド溶液３０μＬを各々採集し、これをＤＰＢＳ中の樹脂結合抗体を含有するフィルタープレートに分注した。コンジュゲートした混合物を含有するウェルを、ＭＤＴを用いて、１サイクル当たり４５秒間ウェル内の１００μＬ容量の吸引／分注を繰り返すことにより混合した。吸引／分注の順序を５分間かけて合計５回繰り返した。真空を２サイクル適用して、過剰のシントンを除去し、廃棄した。ＭＤＴチップを水で５サイクルすすいだ（２００μＬ、合計量１ｍＬ）。ＭＤＴにより吸引し、ＤＰＢＳ（１５０μＬ）をコンジュゲートした混合物に分注し、真空を２サイクル適用した。洗浄及び真空の順序をさらに２回繰り返した。次いで、ＭＤＴのグリッパーをフィルタープレートに移動し、保持ステーションに巻き付けた。ＭＤＴにより、真空マニホールド内部に、１０×ＤＰＢＳ ４５０μＬを含有する２ｍＬのコレクションプレートを置いた。ＭＤＴにより、フィルタープレート及び巻き付け体を配置することにより真空マニホールドを再度組み立てた。ＭＤＴチップを水で５サイクルすすいだ（２００μＬ、合計量１ｍＬ）。ＭＤＴにより吸引し、ＩｇＧ Ｅｌｕｔｉｏｎ緩衝液３．７５（Ｐｉｅｒｃｅ）１００μＬをコンジュゲート混合物に分注した。１分後、真空を２サイクル適用し、溶出液を、５×ＤＰＢＳ ４５０μＬを含有する受け用プレート中に捕捉した。吸引／分注の順序をさらに３回繰り返し、ＤＰＢＳ中ｐＨ７．４で１．５〜２．５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度を有するＡＤＣ試料がもたらされた。
方法Ｄ。拡張デッキ上に、Ｉ２３５／９６チップモジュラーディスペンステクノロジー（ＭＤＴ）、グリッパーアーム（部品７４００３５８）を含有する使い捨てヘッド（部品７０２４３５４０）及び８−チップＶａｒｉｓｐａｎピペッティングアーム（部品７００２３５７）を装備した、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｊａｎｕｓ（部品ＡＪＬ８Ｍ０１）ロボット型液体取り扱いシステムを使用して、コンジュゲーションを行った。ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｊａｎｕｓシステムは、ＷｉｎＰＲＥＰバージョン４．８．３．３１５ソフトウェアを使用して制御した。
Ｐａｌｌフィルタープレート５０５２は、ＭＤＴを使用し１００μＬ １×ＤＰＢＳを用いて予め加湿させた。真空をフィルタープレートに１０秒間適用し、続いて５秒間排気して、フィルタープレートからＤＰＢＳを除去した。ＤＰＢＳ中のプロテインＡ樹脂（ＧＥ ＭａｂＳｅｌｅｃｔ Ｓｕｒｅ）の５０％スラリー液を、磁気ボールを備えた８ウェルレザーバー中に注ぎ入れ、レザーバープレートの下にある移動式磁石を通過させることによって樹脂を混合した。導電性チップ１ｍＬを備えた８チップＶａｒｉｓｐａｎアームを使用して、樹脂（２５０μＬ）を吸引し、９６ウェルフィルタープレートに移した。真空をフィルタープレートに２サイクル適用して、ほとんどの緩衝液を除去した。ＭＤＴにより吸引して、樹脂を含有するフィルタープレートウェルにＤＰＢＳ １５０μＬを分注した。洗浄及び真空の順序をさらに２回繰り返した。２ｍＬの９６ウェルコレクションプレートをＪａｎｕｓデッキに装着し、後ほど使用するために、ＭＤＴによりＤＰＢＳ ５×４５０μＬをコレクションプレートに移した。ＤＰＢＳ（２００μＬ）中の溶液としての還元抗体（２ｍｇ）を、条件Ａに関して上記した通りに調製し、９６ウェルプレート中に分注した。次いで、ＭＤＴにより９６ウェルフォーマット中にプレートされているシントンの３．３ｍＭジメチルスルホキシド溶液３０μＬをそれぞれ採集し、これをＤＰＢＳ中の還元抗体を装填したプレートに分注した。ウェル内において１００μＬ容量の吸引／分注を２回繰り返すことにより、ＭＤＴを用いて混合物を混合した。５分後、コンジュゲートした反応混合物（２３０μＬ）を、樹脂を含有する９６ウェルフィルタープレートに移した。コンジュゲートした混合物及び樹脂を含有するウェルを、１サイクル当たり４５秒間ウェル内において１００μＬ容量の吸引／分注を繰り返すことにより、ＭＤＴと混合した。吸引／分注の順序を５分間かけて合計５回繰り返した。真空を２サイクル適用して、過剰のシントン及びタンパク質を除去し、廃棄した。ＭＤＴチップを水で５サイクルすすいだ（２００μＬ、合計容量１ｍＬ）。ＭＤＴにより吸引し、ＤＰＢＳ（１５０μＬ）をコンジュゲートした混合物に分注し、真空を２サイクル適用した。洗浄及び真空の順序をさらに２回繰り返した。次いで、ＭＤＴのグリッパーをフィルタープレートに移動し、保持ステーションに巻き付けた。ＭＤＴにより、真空マニホールド内部にＤＰＢＳ １０×４５０μＬを含有する２ｍＬのコレクションプレートを置いた。ＭＤＴにより、フィルタープレート及び巻き付け体を配置することにより真空マニホールドを再度組み立てた。ＭＤＴチップを水で５サイクルすすいだ（２００μＬ、合計容量１ｍＬ）。ＭＤＴにより吸引し、ＩｇＧ Ｅｌｕｔｉｏｎ緩衝液３．７５（Ｐ）１００μＬをコンジュゲートした混合物に分注した。１分後、真空を２サイクル適用し、ＤＰＢＳ ５×４５０μＬを含有する受け用プレート中に溶出液を捕捉した。吸引／分注の順序をさらに３回繰り返して、ＤＰＢＳ中ｐＨ７．４において１．５〜２．５ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度を有するＡＤＣ試料がもたらされた。
方法Ｅ。抗体（１０ｍｇ／ｍＬ、１ｍＬ）の溶液にＢｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（商標）トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）溶液（１０ｍＭ、０．０１７ｍＬ）の溶液を室温で加えた。反応混合物を３７℃に７５分間加熱した。還元抗体の溶液を室温に冷却し、シントンの溶液（１０ｍＭ、ＤＭＳＯ中０．０４０ｍＬ）に加え、続いてホウ酸緩衝液（０．１ｍＬ、１Ｍ、ｐＨ８）を添加した。反応溶液を室温で３日間静置し、脱塩カラム（ＰＤ１０、使用前にＤＰＢＳ ３×５ｍＬで洗浄した）上に装填し、続いてＤＰＢＳ（１．６ｍＬ）を装填し、追加のＤＰＢＳ（３ｍＬ）を用いて溶出した。精製されたＡＤＣ溶液を０．２ミクロンの低タンパク質結合１３ｍｍシリンジフィルターに通して濾過し、４℃で保管した。
方法Ｆ。コンジュゲーションは、Ｔｅｃａｎ Ｆｒｅｅｄｏｍ Ｅｖｏロボット型液体取り扱いシステムを使用して行った。抗体（１０ｍｇ／ｍＬ）の溶液を３７℃に予熱し、ウェル（０．３ｍＬ）当たり３ｍｇの量の加熱した９６ディープウェルプレートに一定分量を加え、３７℃で保持した。抗体にＢｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（商標）トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）溶液（１ｍＭ、０．０５１ｍＬ／ウェル）の溶液を加え、反応混合物を３７℃で７５分間保持した。還元抗体の溶液を、非加熱９６ディープウェルプレートに移した。還元抗体を含むウェルに、シントンの対応する溶液（５ｍＭ、ＤＭＳＯ中０．０２４ｍＬ）を加え、１５分間処理した。反応溶液を脱塩カラム（ＮＡＰ５、使用前にＤＰＢＳで４回洗浄した）のプラットフォーム（８×１２）上に装填し、続いてＤＰＢＳ（０．３ｍｌ）を装填し、追加のＤＰＢＳ（０．８ｍＬ）を用いて溶出した。精製したＡＤＣ溶液の一定分量を、分析用にさらに採取し、４℃で保管した。
方法Ｇ。コンジュゲーションは、Ｔｅｃａｎ Ｆｒｅｅｄｏｍ Ｅｖｏロボット型液体取り扱いシステムを使用して行った。抗体の溶液（１０ｍｇ／ｍＬ）を３７℃に予め加熱し、ウェル（０．３ｍＬ）当たり３ｍｇの量の加熱した９６ディープウェルプレート上に一定分量を加え、３７℃で保持した。Ｂｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（商標）トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）溶液（１ｍＭ、０．０５１ｍＬ／ウェル）の溶液を抗体に加え、反応混合物を３７℃で７５分間保持した。還元抗体の溶液を、非加熱９６ディープウェルプレートに移した。還元抗体を含むウェルにシントンの対応する溶液（５ｍＭ、ＤＭＳＯ中０．０２４ｍＬ／ウェル）を加え、続いてホウ酸緩衝液（ｐＨ＝８、０．０３ｍＬ／ウェル）を加え、３日間処理した。反応溶液を脱塩カラム（ＮＡＰ５、使用前にＤＰＢＳで４回、洗浄した）のプラットフォーム（８×１２）上に装填し、続いてＤＰＢＳ（０．３ｍＬ）を装填し、追加のＤＰＢＳ（０．８ｍＬ）で溶出した。精製したＡＤＣ溶液の一定分量を、分析用にさらに採取し、４℃で保管した。
方法Ｈ。Ｂｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（商標）トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）溶液（１０ｍＭ、０．１７ｍＬ）の溶液を、室温で抗体の溶液（１０ｍｇ／ｍＬ、１０ｍＬ）に加えた。反応混合物を３７℃に７５分間加熱した。室温に冷却した還元抗体の溶液に、シントンの溶液（１０ｍＭ、ＤＭＳＯ中０．４０ｍＬ）を加えた。反応溶液を室温で３０分間静置した。わずかに濁った溶液が形成するまで、ＡＤＣの溶液を飽和硫酸アンモニウム溶液（約２〜２．５ｍＬ）で処理した。この溶液を、相Ａ中の３０％相Ｂで平衡化したブチルセファロースカラム（ブチルセファロース５ｍＬ）上に装填した（相Ａ：１．５Ｍ硫酸アンモニウム、２５ｍＭリン酸塩；相Ｂ：２５ｍＭリン酸塩、２５容量／容量％イソプロパノール）。濃度勾配Ａ／Ｂを７５％相Ｂに適用して、ＤＡＲ２（「Ｅ２」とも称する。）及びＤＡＲ４（「Ｅ４」とも称する。）を含む個々のフラクションを溶出した。遠心濃縮器又は大規模の場合のＴＦＦを使用して、ＡＤＣ溶液をそれぞれ濃縮し、緩衝液を変更した。精製したＡＤＣ溶液を０．２ミクロンの低タンパク質結合１３ｍｍシリンジフィルターに通して濾過し、４℃で保管した。
方法Ｉ。Ｂｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（商標）トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）溶液（１０ｍＭ、０．１７ｍＬ）の溶液を、室温で抗体の溶液（１０ｍｇ／ｍＬ、１０ｍＬ）に加えた。反応混合物を３７℃に７５分間加熱した。シントンの溶液（１０ｍＭ、ＤＭＳＯ中０．４０ｍＬ）を、室温に冷却した還元抗体の溶液に加えた。反応溶液を室温で３０分間静置した。ＡＤＣの溶液を、わずかに濁った溶液が生成するまで飽和硫酸アンモニウム溶液（約２〜２．５ｍＬ）で処理した。この溶液を、相Ａ中の３０％相Ｂで平衡化したブチルセファロースカラム（ブチルセファロース５ｍＬ）上に装填した（相Ａ：１．５Ｍ硫酸アンモニウム、２５ｍＭリン酸塩；相Ｂ：２５ｍＭリン酸塩、２５容量／容量％イソプロパノール）。濃度勾配Ａ／Ｂを７５％相Ｂに適用して、ＤＡＲ２（「Ｅ２」とも称する。）及びＤＡＲ４（「Ｅ４」とも称する。）を含む個々のフラクションを溶出した。遠心濃縮器又は大規模の場合のＴＦＦを使用して、ＡＤＣ溶液をそれぞれ濃縮し、緩衝液を変更した。ＡＤＣ溶液をホウ酸緩衝液（０．１ｍＬ、１Ｍ、ｐＨ８）で処理した。反応溶液を室温で３日間静置し、次いで脱塩カラム（ＰＤ１０、使用前ＤＰＢＳ ３ｘ５ｍＬで洗浄した）上に装填し、続いてＤＰＢＳ（１．６ｍＬ）を装填し、追加のＤＰＢＳ（３ｍＬ）で溶出した。精製したＡＤＣ溶液を０．２ミクロンの低タンパク質結合１３ｍｍシリンジフィルターに通して濾過し、４℃で保管した。
ＤＡＲ及びＡＤＣの凝集
上記に記載されている通りに合成したＡＤＣのＤＡＲ及び凝集率は、ＬＣ−ＭＳ及びサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により各々決定した。
上記に記載されている通りに合成したＡＤＣのＤＡＲ及び凝集率は、ＬＣ−ＭＳ及びサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により各々決定した。
ＬＣ−ＭＳの一般的方法
ＬＣ−ＭＳ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ ＬＣ／ＭＳＤ ＴＯＦ６２２０ ＥＳＩ質量分析計に接続したＡｇｉｌｅｎｔ １１００ ＨＰＬＣシステムを使用して行った。５ｍＭ（最終濃度）Ｂｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（登録商標）ＴＣＥＰ溶液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、イリノイ州）でＡＤＣを還元し、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｍｉｃｒｏｔｒａｐ（Ｍｉｃｈｒｏｍ Ｂｉｏｒｅｓｏｒｃｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、カリフォルニア州）脱塩カートリッジ上に装填し、周囲温度にて０．２分間で１０％Ｂ〜７５％Ｂの濃度勾配で溶出した。移動相Ａは０．１％ギ酸（ＦＡ）含むＨ２Ｏであり、移動相Ｂは０．１％ＦＡを含むアセトニトリルであり、流速は０．２ｍＬ／分であった。共溶出した軽鎖及び重鎖のエレクトロスプレーイオン化飛行時間型質量スペクトルは、Ａｇｉｌｅｎｔ ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ（商標）収集ソフトウェアを使用して得た。抽出強度対ｍ／ｚスペクトルは、ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒソフトウェアの最大エントロピーフィーチャを使用しデコンボリュートして、各還元抗体断片の質量を決定した。軽鎖及び重鎖に対する生のピーク及び補正ピークの強度を合計することにより、デコンボリュートしたスペクトルからＤＡＲを算出し、結合させた薬物の数により強度を乗算することにより正規化した。合計した正規化強度を、強度の合計により除算し、２本の軽鎖及び２本の重鎖の合計した結果により、全ＡＤＣに対する最終的な平均ＤＡＲ値を求めた。
ＬＣ−ＭＳ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ ＬＣ／ＭＳＤ ＴＯＦ６２２０ ＥＳＩ質量分析計に接続したＡｇｉｌｅｎｔ １１００ ＨＰＬＣシステムを使用して行った。５ｍＭ（最終濃度）Ｂｏｎｄ−Ｂｒｅａｋｅｒ（登録商標）ＴＣＥＰ溶液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、イリノイ州）でＡＤＣを還元し、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｍｉｃｒｏｔｒａｐ（Ｍｉｃｈｒｏｍ Ｂｉｏｒｅｓｏｒｃｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、カリフォルニア州）脱塩カートリッジ上に装填し、周囲温度にて０．２分間で１０％Ｂ〜７５％Ｂの濃度勾配で溶出した。移動相Ａは０．１％ギ酸（ＦＡ）含むＨ２Ｏであり、移動相Ｂは０．１％ＦＡを含むアセトニトリルであり、流速は０．２ｍＬ／分であった。共溶出した軽鎖及び重鎖のエレクトロスプレーイオン化飛行時間型質量スペクトルは、Ａｇｉｌｅｎｔ ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ（商標）収集ソフトウェアを使用して得た。抽出強度対ｍ／ｚスペクトルは、ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒソフトウェアの最大エントロピーフィーチャを使用しデコンボリュートして、各還元抗体断片の質量を決定した。軽鎖及び重鎖に対する生のピーク及び補正ピークの強度を合計することにより、デコンボリュートしたスペクトルからＤＡＲを算出し、結合させた薬物の数により強度を乗算することにより正規化した。合計した正規化強度を、強度の合計により除算し、２本の軽鎖及び２本の重鎖の合計した結果により、全ＡＤＣに対する最終的な平均ＤＡＲ値を求めた。
生体共役反応により形成された物質のチオスクシンイミド加水分解は、コンジュゲートへの水の付加がコンジュゲートの観察され得る分子量に１８Ｄａｌｔｏｎが増加することになるので、エレクトロスプレー質量分析によりモニターすることができる。図２に説明されるように、コンジュゲートが、ヒトＩｇＧ１抗体の鎖間ジスルフィドを完全に還元し、マレイミド誘導体を結果として得られるシステインの各々にコンジュゲートさせることによって調製されるとき、抗体の各軽鎖は、単一のマレイミド修飾を含有することとなり、各重鎖は、３つのマレイミド修飾を含有することとなる。得られたチオスクシンイミドの加水分解が完了した時点で、軽鎖の質量はこのため１８Ｄａｌｔｏｎ増加し、一方各重鎖の質量は５４Ｄａｌｔｏｎ増加する。これを図５に説明し、これはコンジュゲート及び引き続く例示的なマレイミド薬物リンカー（シントンＴＸ、分子量１７３６Ｄａ）の完全還元ｈｕＡｂ１３ｖ１抗体への加水分解を含んでいる。
サイズ排除クロマトグラフィーの一般的方法
サイズ排除クロマトグラフィーは、Ｓｈｏｄｅｘ（登録商標）ＫＷ８０２．５カラムを用いて、０．２Ｍのリン酸カリウム、ｐＨ６．２において、０．２５ｍＭの塩化カリウム及び１５％ＩＰＡを用いて、０．７５ｍｌ／分の流量で行われた。２８０ｎｍにおけるピーク面積吸光度は、高分子量溶出液及びモノマー溶出液の各々に関して、カーブ下の面積の積分によって決定された。コンジュゲート試料の％凝集画分は、高分子量溶出液に関する２８０ｎＭにおけるピーク面積吸光度を、高分子量溶出液及びモノマー溶出液の２８０ｎＭにおけるピーク面積吸光度の合計で割り、１００％を掛けることによって決定された。
サイズ排除クロマトグラフィーは、Ｓｈｏｄｅｘ（登録商標）ＫＷ８０２．５カラムを用いて、０．２Ｍのリン酸カリウム、ｐＨ６．２において、０．２５ｍＭの塩化カリウム及び１５％ＩＰＡを用いて、０．７５ｍｌ／分の流量で行われた。２８０ｎｍにおけるピーク面積吸光度は、高分子量溶出液及びモノマー溶出液の各々に関して、カーブ下の面積の積分によって決定された。コンジュゲート試料の％凝集画分は、高分子量溶出液に関する２８０ｎＭにおけるピーク面積吸光度を、高分子量溶出液及びモノマー溶出液の２８０ｎＭにおけるピーク面積吸光度の合計で割り、１００％を掛けることによって決定された。
インビトロ細胞生存度アッセイ方法
腫瘍細胞株ＨＣＣ３８（乳がん）、ＮＣＩ−Ｈ１６５０（ＮＳＣＬ）、及びＮＣＩ−Ｈ８４７（小細胞肺がん細胞株）は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション社（ＡＴＣＣ）から得た。細胞は、９６ウェル培養プレート内で、推奨される増殖培地を用いて、一晩、５×１０３（ＨＣＣ３８）又は２０×１０３（ＮＣＩ−Ｈ８４７）又は４０×１０３（ＮＣＩ−Ｈ１６５０）毎ウェルの密度で増殖された。翌日、ウェルを３連にするために、新しい培地において処理が追加された。細胞の生存度は、５日後に、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光性細胞生存度アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、製造業者のプロトコルにおいて指示されるように決定された。細胞生存度は、対照未処理細胞のパーセンテージとして評価された。
腫瘍細胞株ＨＣＣ３８（乳がん）、ＮＣＩ−Ｈ１６５０（ＮＳＣＬ）、及びＮＣＩ−Ｈ８４７（小細胞肺がん細胞株）は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション社（ＡＴＣＣ）から得た。細胞は、９６ウェル培養プレート内で、推奨される増殖培地を用いて、一晩、５×１０３（ＨＣＣ３８）又は２０×１０３（ＮＣＩ−Ｈ８４７）又は４０×１０３（ＮＣＩ−Ｈ１６５０）毎ウェルの密度で増殖された。翌日、ウェルを３連にするために、新しい培地において処理が追加された。細胞の生存度は、５日後に、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）発光性細胞生存度アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いて、製造業者のプロトコルにおいて指示されるように決定された。細胞生存度は、対照未処理細胞のパーセンテージとして評価された。
［実施例８］
抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲートのインビボ有効性
インビトロで試験されＣＺシントンにコンジュゲートされる９つのキメラ抗体のうち、４つは、サブナノモルの細胞傷害性を示した（表６）。ｃｈＡｂ３−ＣＺ、ｃｈＡｂ１８−ＣＺ、及びｃｈＡｂ１３−ＣＺは、２．６から４．２に及ぶＤＡＲを達成し（表７参照）、下述される方法を用いて、ヒト起源の、マウス小細胞肺がん細胞株の異種移植モデルＮＣＩ−Ｈ１４６における抗腫瘍活性に関して評価された。抗体ＭＳＬ１０９（サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）糖タンパク質Ｈに結合するＩｇＧ１抗体）が、対照として、ネイキッド抗体として及びＡＤＣとして（ｃｈＡｂ３、ｃｈＡｂ１８、及びｃｈＡｂ１３抗体と同一のシントン（ＣＺ）にコンジュゲートされる）使用された。ＭＳＬ１０９は、ＣＭＶ初期タンパク質に対するモノクローナル抗体であり、アイソタイプ適合非標的化対照である。この異種移植アッセイの方法は、下述される。結果は、表７に表される。結果は、ＡＤＣを阻害する抗Ｂ７−Ｈ３ Ｂｃｌ−ｘＬの各々が、ネイキッド抗体対照（ＭＳＬ１０９）又は非標的特異的Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣ対照（ＭＳＬ１０９−ＣＺ）に対して、腫瘍成長を著しく阻害することができたことを示す。
抗Ｂ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲートのインビボ有効性
インビトロで試験されＣＺシントンにコンジュゲートされる９つのキメラ抗体のうち、４つは、サブナノモルの細胞傷害性を示した（表６）。ｃｈＡｂ３−ＣＺ、ｃｈＡｂ１８−ＣＺ、及びｃｈＡｂ１３−ＣＺは、２．６から４．２に及ぶＤＡＲを達成し（表７参照）、下述される方法を用いて、ヒト起源の、マウス小細胞肺がん細胞株の異種移植モデルＮＣＩ−Ｈ１４６における抗腫瘍活性に関して評価された。抗体ＭＳＬ１０９（サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）糖タンパク質Ｈに結合するＩｇＧ１抗体）が、対照として、ネイキッド抗体として及びＡＤＣとして（ｃｈＡｂ３、ｃｈＡｂ１８、及びｃｈＡｂ１３抗体と同一のシントン（ＣＺ）にコンジュゲートされる）使用された。ＭＳＬ１０９は、ＣＭＶ初期タンパク質に対するモノクローナル抗体であり、アイソタイプ適合非標的化対照である。この異種移植アッセイの方法は、下述される。結果は、表７に表される。結果は、ＡＤＣを阻害する抗Ｂ７−Ｈ３ Ｂｃｌ−ｘＬの各々が、ネイキッド抗体対照（ＭＳＬ１０９）又は非標的特異的Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣ対照（ＭＳＬ１０９−ＣＺ）に対して、腫瘍成長を著しく阻害することができたことを示す。
異種移植モデル方法における有効性の評価
ＮＣＩ−Ｈ１４６細胞、ＮＣＩ−１６５０細胞、及びＥＢＣ−１細胞は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション社（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ州）から得た。細胞は、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ、ＨｙＣｌｏｎｅ、Ｌｏｇａｎ、ＵＴ州）で補充されたＲＰＭＩ−１６４０（ＮＣＩ−Ｈ１４６、ＮＣＩ−Ｈ１６５０）又はＭＥＭ（ＥＢＣ−１）培養培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ州)において、単層として培養された。異種移植を生じさせるために、それぞれ５×１０６個の生存細胞が、免疫不全雌ＳＣＩＤ／ｂｇマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ州）の右脇腹内に皮下接種された。注入体積は、０．２ｍＬであり、Ｓ ＭＥＭ及びＭａｔｒｉｇｅｌ（ＢＤ社、Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ、ＮＪ州）の１：１混合物で構成されていた。腫瘍は、およそ２００ｍｍ３にサイズ適合された。抗体及びコンジュゲートは、注入のために０．９％の塩化ナトリウム中に配合され、腹腔内に注入された。注入体積は、２００μＬを超えなかった。治療は、腫瘍のサイズ適合の後、２４時間以内に開始された。マウスは、治療の開始時においておよそ２２ｇの重さがあった。腫瘍体積は、週に２回から３回、見積もられた。腫瘍の長さ（Ｌ）及び幅（Ｗ）の測定を電子キャリパーにより取得し、容量を以下の式に従って算出した：Ｖ＝Ｌ×Ｗ２／２。腫瘍容量が３，０００ｍｍ３に達する又は皮膚潰瘍が発生した時点でマウスを安楽死させた。ケージ毎に８匹のマウスを収容した。食事及び水は自由に得ることができた。実験開始前の少なくとも１週間、動物施設にマウスを慣れさせた。１２時間明所：１２時間暗所の時間割（０６：００時に点灯）の明期で動物を試験した。上述されるように、ヒトＩｇＧ対照抗体（ＭＳＬ１０９）は、陰性の対照薬として使用された。
ＮＣＩ−Ｈ１４６細胞、ＮＣＩ−１６５０細胞、及びＥＢＣ−１細胞は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション社（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ州）から得た。細胞は、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ、ＨｙＣｌｏｎｅ、Ｌｏｇａｎ、ＵＴ州）で補充されたＲＰＭＩ−１６４０（ＮＣＩ−Ｈ１４６、ＮＣＩ−Ｈ１６５０）又はＭＥＭ（ＥＢＣ−１）培養培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ州)において、単層として培養された。異種移植を生じさせるために、それぞれ５×１０６個の生存細胞が、免疫不全雌ＳＣＩＤ／ｂｇマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ州）の右脇腹内に皮下接種された。注入体積は、０．２ｍＬであり、Ｓ ＭＥＭ及びＭａｔｒｉｇｅｌ（ＢＤ社、Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ、ＮＪ州）の１：１混合物で構成されていた。腫瘍は、およそ２００ｍｍ３にサイズ適合された。抗体及びコンジュゲートは、注入のために０．９％の塩化ナトリウム中に配合され、腹腔内に注入された。注入体積は、２００μＬを超えなかった。治療は、腫瘍のサイズ適合の後、２４時間以内に開始された。マウスは、治療の開始時においておよそ２２ｇの重さがあった。腫瘍体積は、週に２回から３回、見積もられた。腫瘍の長さ（Ｌ）及び幅（Ｗ）の測定を電子キャリパーにより取得し、容量を以下の式に従って算出した：Ｖ＝Ｌ×Ｗ２／２。腫瘍容量が３，０００ｍｍ３に達する又は皮膚潰瘍が発生した時点でマウスを安楽死させた。ケージ毎に８匹のマウスを収容した。食事及び水は自由に得ることができた。実験開始前の少なくとも１週間、動物施設にマウスを慣れさせた。１２時間明所：１２時間暗所の時間割（０６：００時に点灯）の明期で動物を試験した。上述されるように、ヒトＩｇＧ対照抗体（ＭＳＬ１０９）は、陰性の対照薬として使用された。
治療薬の有効性に言及するために、治療応答の振幅（ＴＧＩｍａｘ)、持続性（ＴＧＤ）のパラメーターが使用される。ＴＧＩｍａｘは、実験の間の最大の腫瘍成長阻害である。腫瘍成長阻害は、１００×（１−Ｔｖ／Ｃｖ）によって計算され、式中、Ｔｖ及びＣｖは、それぞれ、処置群及び対照群の平均腫瘍体積である。ＴＧＤ又は腫瘍成長遅延は、対照群に対する、１ｃｍ３の体積に到達するのに必要とされる、処置された腫瘍の延長された時間である。ＴＧＤは、１００×（Ｔｔ／Ｃｔ−１)によって計算され、Ｔｔ及びＣｔは、それぞれ、処置群及び対照群の１ｃｍ３に到達するための中央値時間である。
［実施例９］
抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ１８のヒト化
抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体ｃｈＡｂ１８は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされたときのその特性を含む、その結合特性及びＡＤＣとしての好ましい特性に基づいて、ヒト化のために選択された（例示的なコンジュゲートＣＺとして上述される）。
抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ１８のヒト化
抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体ｃｈＡｂ１８は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされたときのその特性を含む、その結合特性及びＡＤＣとしての好ましい特性に基づいて、ヒト化のために選択された（例示的なコンジュゲートＣＺとして上述される）。
ヒト化抗体は、ｃｈＡｂ１８の可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）ＣＤＲ配列に基づいて生成された。具体的には、ヒト生殖系列配列は、ＶＨ及びＶＬ鎖のＣＤＲドメインが異なるヒト重鎖及び軽鎖アクセプター配列上にグラフトされたときに、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化ｃｈＡｂ１８抗体を構成するために、選択された。モノクローナル抗体ｃｈＡｂ１８のＶＨ及びＶＬ配列とのアラインメントに基づいて、以下のヒト配列が、アクセプターとして選択された。
● 重鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＨＶ１−６９＊０６及びＩＧＨＪ６＊０１
● 軽鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＫＶ１−９＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１
● 軽鎖を構成するためのバックアップアクセプターとしてのＩＧＫＶ６−２１＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１
したがって、ｃｈＡｂ１８のＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、前記アクセプター配列内にグラフトされた。
● 軽鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＫＶ１−９＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１
● 軽鎖を構成するためのバックアップアクセプターとしてのＩＧＫＶ６−２１＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１
したがって、ｃｈＡｂ１８のＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、前記アクセプター配列内にグラフトされた。
ヒト化抗体を生成するために、フレームワーク復帰変異が、特定され、ＣＤＲグラフトされた抗体配列内に、当技術分野においてよく知られる方法によって、可変ドメインのデノボ合成、又は変異オリゴヌクレオチドプライマー及びポリメラーゼ連鎖反応、又は両方によって、導入された。復帰変異及び他の変異の異なる組合せは、下述されるようなＣＤＲグラフトの各々のために構成された。これらの変異のための残基の数は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに基づく。
重鎖ｈｕＡｂ１８ＶＨ．１のために、１つ以上の次のＶｅｒｎｉｅｒ及びＶＨ／ＶＬインターフェース残基は、次のように復帰変異された：Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｇ６４Ｖ、Ｆ７１Ｈ。付加的な変異は、次のものを含む：Ｑ１Ｅ、Ｎ６０Ａ、Ｋ６４Ｑ、Ｄ６５Ｇ。軽鎖ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１のために、１つ以上の次のＶｅｒｎｉｅｒ及びＶＨ／ＶＬインターフェース残基が、次のように復帰変異された：Ａ４３Ｓ、Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｇ６４Ｖ、Ｇ６６Ｖ、Ｆ７１Ｈ。軽鎖ｈｕＡｂ１８ＶＬ．２のために、１つ以上の次のＶｅｒｎｉｅｒ及びＶＨ／ＶＬインターフェース残基は、次のように復帰変異された：Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｋ４９Ｙ、Ｇ６４Ｖ、Ｇ６６Ｖ、Ｆ７１Ｈ。
ヒト化抗体の可変領域及びＣＤＲアミノ酸配列は、以下の表８に説明される。
マウスモノクローナルＡｂ１８のヒト化可変領域（上述される）は、機能的特徴付けのためにＩｇＧ発現ベクター内にクローニングされた。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＨ．１（ｈｕＡｂ１８ＶＨ．１）は、ＩＧＨＶ１−６９＊０６及びＩＧＨＪ６＊０１フレームワーク配列を含有する、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化Ａｂ１８ＶＨである。それは、また、ピログルタミン酸形成を防止するためのＱ１Ｅ変更を含む。ｈｕＡｂ１８ＶＨ．１の可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＨ１．ａ（ｈｕＡｂ１８ＶＨ．１ａ）は、ｈｕＡｂ１８ＶＨ.１に基づくヒト化設計であり、４つの提案されるフレームワーク復帰変異を含む：Ｍ４８Ｉ、Ｖ６７Ｔ、Ｌ６９Ｉ、Ｋ７３Ｒ。ｈｕＡｂ１８ＶＨ.１ａの可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＨ１．ｂ（ｈｕＡｂ１８ＶＨ．１ｂ）は、ｈｕＡｂ１８ＶＨ．１及びｈｕＡｂ１８ＶＨ.１ａに基づくヒト化設計であり、１つの提案されるフレームワーク復帰変異Ｌ６９Ｉ及び３つのＨＣＤＲ２生殖系列列変更Ｎ６０Ａ、Ｋ６４Ｑ、Ｄ６５Ｇを含む。ｈｕＡｂ１８ＶＨ.１ｂの可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＬ．１（ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１）は、ＩＧＫＶ１−９＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１フレームワーク配列を含有する、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化Ａｂ１８ＶＬである。ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１の可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＬ．１ａ（ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１ａ）は、ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１に基づくヒト化設計であり、６つの提案されるフレームワーク復帰変異を含有する：Ａ４３Ｓ、Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｇ６４Ｖ、Ｇ６６Ｖ、Ｆ７１Ｈ。ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１１の可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＬ．１ｂ（ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１ｂ）は、ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１に基づくヒト化設計であり、ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１ａは、４つの提案されるフレームワーク復帰変異を含有する：Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｇ６４Ｖ、Ｆ７１Ｈ。ｈｕＡｂ１８ＶＬ．１ｂの可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＬ．２（ｈｕＡｂ１８ＶＬ．２）は、ＩＧＫＶ６−２１＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１フレームワーク配列を含有するＣＤＲグラフトされた、ヒト化Ａｂ１８ＶＬである。ｈｕＡｂ１８ＶＬ．２の可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
● ヒト化Ａｂ１８ＶＬ．２ａ（ｈｕＡｂ１８ＶＬ．２ａ)は、ｈｕＡｂ１８ＶＬ.２に基づくヒト化設計であり、６つの提案されるフレームワーク復帰変異を含有する：Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｋ４９Ｙ、Ｇ６４Ｖ、Ｇ６６Ｖ、Ｆ７１Ｈ。ｈｕＡｂ１８ＶＬ．２ａの可変及びＣＤＲ配列は、表８に説明される。
したがって、ｃｈＡｂ１８のヒト化は、ｈｕＡｂ１８ｖ１、ｈｕＡｂ１８ｖ２、ｈｕＡｂ１８ｖ３、ｈｕＡｂ１８ｖ４、ｈｕＡｂ１８ｖ５、ｈｕＡｂ１８ｖ６、ｈｕＡｂ１８ｖ７、ｈｕＡｂ１８ｖ８、ｈｕＡｂ１８ｖ９、及びｈｕＡｂ１８ｖ１０を含む、１０個のヒト化抗体をもたらす。Ａｂ１８のこれらのヒト化バージョンの各々に関する可変及び重軽鎖は、以下に提供される。
［実施例１０］
抗Ｂ７−Ｈ３ ｃｈＡｂ１８ヒト化バリアントのインビトロ特徴付け
ｃｈＡｂ１８のヒト化は、ＦＡＣＳによって評価される際に、ヒト及びＣｙｎｏＢ７−Ｈ３に対する結合を保持する１０個のバリアント（表９に上述される）を生成した（その方法は、実施例６に上述される)。これらのバリアントは、ＳＰＲによる結合に関して、さらに特徴付けられ、方法Ａ(上述される)を用いてＢｃｌ−ｘＬ阻害剤シントンＣＺに成功裏にコンジュゲートされ、実施例７に説明されるように、細胞の細胞傷害性に関して評価された。表１０は、様々なヒト化Ａｂ１８バリアントのインビトロ特徴を要約する。バリアントが由来する親ｃｈＡｂ１８は、また、コンパレーターとして試験された。全てのヒト化バリアントは、Ｂｉａｃｏｒｅによって評価された際に同様の結合性を有し、ＣＺシントンを含むコンジュゲートとして発現される細胞表面に対する結合活性を保持した。ＣＺシントンとしてのバリアントの全ての細胞傷害性は、それらが由来するｈＡｂ１８と同様であった。
抗Ｂ７−Ｈ３ ｃｈＡｂ１８ヒト化バリアントのインビトロ特徴付け
ｃｈＡｂ１８のヒト化は、ＦＡＣＳによって評価される際に、ヒト及びＣｙｎｏＢ７−Ｈ３に対する結合を保持する１０個のバリアント（表９に上述される）を生成した（その方法は、実施例６に上述される)。これらのバリアントは、ＳＰＲによる結合に関して、さらに特徴付けられ、方法Ａ(上述される)を用いてＢｃｌ−ｘＬ阻害剤シントンＣＺに成功裏にコンジュゲートされ、実施例７に説明されるように、細胞の細胞傷害性に関して評価された。表１０は、様々なヒト化Ａｂ１８バリアントのインビトロ特徴を要約する。バリアントが由来する親ｃｈＡｂ１８は、また、コンパレーターとして試験された。全てのヒト化バリアントは、Ｂｉａｃｏｒｅによって評価された際に同様の結合性を有し、ＣＺシントンを含むコンジュゲートとして発現される細胞表面に対する結合活性を保持した。ＣＺシントンとしてのバリアントの全ての細胞傷害性は、それらが由来するｈＡｂ１８と同様であった。
ヒト化ｃｈＡｂ１８バリアントは、ＣＺシントンにコンジュゲートされ、ＨＣＣ３８細胞株において細胞傷害性に関して試験された。表１０に説明されるように、ほとんどのヒト化抗体は、対照抗体ｃｈＡｂ１８を用いて観察されたものと同様の、強い細胞傷害性を示した。
［実施例１１］
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ＡＤＣとしてのヒト化Ａｂ１８バリアントのインビボ有効性
ヒト化ｃｈＡｂ１８バリアントのうちの６つは、実施例１０において説明されたインビトロ細胞傷害性の結果に基づいて選択された。具体的には、実施例８に説明されるように、抗体ｈｕＡｂ１８ｖ１、ｈｕＡｂ１８ｖ３、ｈｕＡｂ１８ｖ４、ｈｕＡｂ１８ｖ６、ｈｕＡｂ１８ｖ７、及びｈｕＡｂ１８ｖ９は、各々、小細胞肺がんのインビボ異種移植モデル（ＮＣＩ−Ｈ１４６細胞を用いる）における評価のために、ＣＺシントンにコンジュゲートされた（抗Ｂ７−Ｈ３ＣＺ ＡＤＣを形成するために）。担腫瘍マウスの単回投与処置は、腫瘍成長阻害及び腫瘍成長遅延をもたらし、その結果は、表１１に要約される。Ａｂ０９５は、それが破傷風トキソイドに対抗して産生されるアイソタイプ適合非標的特異的抗体であるので、ＩｇＧの投与の効果に関する陰性の対照として使用された。Ｌａｒｒｉｃｋら、１９９２年「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ」６９〜８５頁参照のこと。マウスは、６ｍｇ／ｋｇのＡＤＣを腹腔内にＱＤｘ１で投与された。
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ＡＤＣとしてのヒト化Ａｂ１８バリアントのインビボ有効性
ヒト化ｃｈＡｂ１８バリアントのうちの６つは、実施例１０において説明されたインビトロ細胞傷害性の結果に基づいて選択された。具体的には、実施例８に説明されるように、抗体ｈｕＡｂ１８ｖ１、ｈｕＡｂ１８ｖ３、ｈｕＡｂ１８ｖ４、ｈｕＡｂ１８ｖ６、ｈｕＡｂ１８ｖ７、及びｈｕＡｂ１８ｖ９は、各々、小細胞肺がんのインビボ異種移植モデル（ＮＣＩ−Ｈ１４６細胞を用いる）における評価のために、ＣＺシントンにコンジュゲートされた（抗Ｂ７−Ｈ３ＣＺ ＡＤＣを形成するために）。担腫瘍マウスの単回投与処置は、腫瘍成長阻害及び腫瘍成長遅延をもたらし、その結果は、表１１に要約される。Ａｂ０９５は、それが破傷風トキソイドに対抗して産生されるアイソタイプ適合非標的特異的抗体であるので、ＩｇＧの投与の効果に関する陰性の対照として使用された。Ｌａｒｒｉｃｋら、１９９２年「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ」６９〜８５頁参照のこと。マウスは、６ｍｇ／ｋｇのＡＤＣを腹腔内にＱＤｘ１で投与された。
表１１に説明されるように、試験されたヒト化抗体の各々は、マウス異種移植モデルにおける腫瘍成長を阻害することができた。
［実施例１２］
抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ３のヒト化
抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体ｃｈＡｂ３は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害（Ｂｃｌ−ｘＬｉ）コンジュゲートとしてのその好ましい特性に基づいて、ヒト化のために選択された。ヒト化抗体は、ｃｈＡｂ３の可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）のＣＤＲ配列に基づいて生成された。具体的には、ヒト生殖系列配列は、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化ｃｈＡｂ３抗体を構成するために構成され、ｃｈＡｂ３のＶＨ及びＶＬ鎖のＣＤＲドメインは、異なるヒト重鎖及び軽鎖アクセプター配列上にグラフトされた。モノクローナル抗体ｈＡｂ３のＶＨ及びＶＬ配列とのアラインメントに基づいて、以下のヒト配列は、アクセプターとして選択された。
抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ３のヒト化
抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体ｃｈＡｂ３は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害（Ｂｃｌ−ｘＬｉ）コンジュゲートとしてのその好ましい特性に基づいて、ヒト化のために選択された。ヒト化抗体は、ｃｈＡｂ３の可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）のＣＤＲ配列に基づいて生成された。具体的には、ヒト生殖系列配列は、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化ｃｈＡｂ３抗体を構成するために構成され、ｃｈＡｂ３のＶＨ及びＶＬ鎖のＣＤＲドメインは、異なるヒト重鎖及び軽鎖アクセプター配列上にグラフトされた。モノクローナル抗体ｈＡｂ３のＶＨ及びＶＬ配列とのアラインメントに基づいて、以下のヒト配列は、アクセプターとして選択された。
● 重鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＨＶ１−６９＊０６及びＩＧＨＪ６＊０１
● 軽鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＫＶ２−２８＊０１及びＩＧＫＪ４＊０１
ｃｈＡｂ３の対応するＶＨ及びＶＬ ＣＤＲを前記アクセプター配列内にグラフトすることによって、ＣＤＲグラフトされ、ヒト化され修飾されたＶＨ及びＶＬ配列が調製された。可能性のあるフレームワーク復帰変異を用いて、ヒト化抗体を生成するために、変異が、特定され、ＣＤＲグラフトされた抗体配列内に、可変ドメインのデノボ合成によって、又は変異オリゴヌクレオチドプライマー及びポリメラーゼ連鎖反応、又は両方によって、導入された。復帰変異及び他の変異の異なる組合せは、以下のようなＣＤＲグラフトの各々のために構成される。これらの変異のための残基数は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに基づく。
● 軽鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＫＶ２−２８＊０１及びＩＧＫＪ４＊０１
ｃｈＡｂ３の対応するＶＨ及びＶＬ ＣＤＲを前記アクセプター配列内にグラフトすることによって、ＣＤＲグラフトされ、ヒト化され修飾されたＶＨ及びＶＬ配列が調製された。可能性のあるフレームワーク復帰変異を用いて、ヒト化抗体を生成するために、変異が、特定され、ＣＤＲグラフトされた抗体配列内に、可変ドメインのデノボ合成によって、又は変異オリゴヌクレオチドプライマー及びポリメラーゼ連鎖反応、又は両方によって、導入された。復帰変異及び他の変異の異なる組合せは、以下のようなＣＤＲグラフトの各々のために構成される。これらの変異のための残基数は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムに基づく。
様々なヒト化重鎖及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列が、表１２に下述される。
重鎖ｈｕＡｂ３ＶＨ．１のために、１つ以上の次のＶｅｒｎｉｅｒ及びＶＨ／ＶＬインターフェース残基が、次のように復帰変異された：Ｍ４８Ｉ、Ｖ６７Ａ、Ｉ６９Ｌ、Ａ７１Ｖ、Ｋ７３Ｒ、Ｍ８０Ｖ、Ｙ９１Ｆ、Ｒ９４Ｇ。軽鎖ｈｕＡｂ３１ＶＬ．１のために、１つ以上の次のＶｅｒｎｉｅｒ及びＶＨ／ＶＬインターフェース残基が、次のように復帰変異された：Ｉ２Ｖ、Ｙ８７Ｆ。
マウスモノクローナルｃｈＡｂ３抗体の次のヒト化可変領域が、機能的特徴付けのために、ＩｇＧ発現ベクターにクローニングされた。
● ヒト化Ａｂ３ＶＨ．１（ｈｕＡｂ３ＶＨ．１)は、ＩＧＨＶ１−６９＊０６及びＩＧＨＪ６＊０１フレームワーク配列を含有する、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化Ａｂ３ＶＨである。それはまた、ピログルタミン酸形成を防止するためのＱ１Ｅ変更を含む。
● ヒト化Ａｂ３ＶＨ．１ａ（ｈｕＡｂ３ＶＨ．１ａ）は、ｈｕＡｂ３ＶＨ．１に基づくヒト化設計であり、８つの提案されるフレームワーク復帰変異を含む：Ｍ４８Ｉ、Ｖ６７Ａ、Ｉ６９Ｌ、Ａ７１Ｖ、Ｋ７３Ｒ、Ｍ８０Ｖ、Ｙ９１Ｆ、Ｒ９４Ｇ。
●ヒト化Ａｂ３ＶＨ１ｂ（ｈｕＡｂ３ＶＨ１ｂ）は、ｈｕＡｂ３ＶＨ．１とｈｕＡｂ３ＶＨ．１ａとの間のヒト化設計であり、６つの提案されるフレームワーク復帰変異を含む：Ｍ４８Ｉ、Ｖ６７Ａ、Ｉ６９Ｌ、Ａ７１Ｖ、Ｋ７３Ｒ、Ｒ９４Ｇ。
● ヒト化Ａｂ３ＶＬ１（ｈｕＡｂ３ＶＬ１）は、ＩＧＫＶ２−２８＊０１及びＩＧＫＪ４＊０１フレームワーク配列を含有する、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化Ａｂ３ ＶＬである。
● ヒト化Ａｂ３ＶＬ１ａ（ｈｕＡｂ３ＶＬ１ａは、ｈｕＡｂ３ＶＬ１に基づくヒト化設計であり、２つの提案されるフレームワーク復帰変異を含む：Ｉ２Ｖ、Ｙ８７Ｆ。
● ヒト化Ａｂ３ＶＬ１ｂ（ｈｕＡｂ３ＶＬ１ｂ)は、ヒト化設計であり、ただ１つの提案されたフレームワーク復帰変異を含む：Ｉ２Ｖ。
上記に加えて、例示的なフレームワーク配列が下述される。
ＩＧＨＶ１−６９＊０６＿ＩＧＨＪ６
ＩＧＫＶ２−２８＊０１＿ＩＧＫＪ4
前述のヒト化抗体の可変領域及びＣＤＲアミノ酸配列は、以下の表１２に説明される。
ｃｈＡｂ３のヒト化は、ｈｕＡｂ３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２、ｈｕＡｂ３ｖ３、ｈｕＡｂ３ｖ４、ｈｕＡｂ１８ｖ５、及びｈｕＡｂ３ｖ６を含む、６つのヒト化抗体をもたらした。Ａｂ１８の、これらのヒト化バージョンの各々のための可変重鎖及び軽鎖は、以下に表１３内に提供される。
［実施例１３］
ｃｈＡｂ３のヒト化バリアントのインビトロ特徴付け
ｃｈＡｂ３のヒト化は、ＦＡＣＳ（実施例６に説明されるような）によって評価される際に、ヒトＢ７−Ｈ３への結合を保持する６つのバリアント（表１３に説明される）を生成した。これらのバリアントは、さらに、ＳＰＲによって結合するために及びＢｃｌ−ｘＬ阻害剤シントン（リンカー弾頭）ＣＺにコンジュゲートされるＡＤＣとして、特徴付けられた。ヒト化Ａｂ３抗体は、また、細胞の細胞傷害性に関しても評価された（実施例７において上述される評価を用いる）。表１４は、ｃｈＡｂ３のヒト化バリアントのインビトロ特徴を要約する。シントンＣＺにコンジュゲートされたｃｈＡｂ３を含むＡＤＣは、対照として使用された。
ｃｈＡｂ３のヒト化バリアントのインビトロ特徴付け
ｃｈＡｂ３のヒト化は、ＦＡＣＳ（実施例６に説明されるような）によって評価される際に、ヒトＢ７−Ｈ３への結合を保持する６つのバリアント（表１３に説明される）を生成した。これらのバリアントは、さらに、ＳＰＲによって結合するために及びＢｃｌ−ｘＬ阻害剤シントン（リンカー弾頭）ＣＺにコンジュゲートされるＡＤＣとして、特徴付けられた。ヒト化Ａｂ３抗体は、また、細胞の細胞傷害性に関しても評価された（実施例７において上述される評価を用いる）。表１４は、ｃｈＡｂ３のヒト化バリアントのインビトロ特徴を要約する。シントンＣＺにコンジュゲートされたｃｈＡｂ３を含むＡＤＣは、対照として使用された。
［実施例１４］
Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣとしての、ｃｈＡｂ３ヒト化バリアントのインビボ有効性
ヒト化バリアントのうちの２つ（ｈｕＡｂ３ｖ２及びｈｕＡｂ３ｖ６）は、実施例８における材料及び方法に説明されるように、小細胞肺がん細胞（ＮＣＩ−Ｈ１４６細胞）のインビボマウス異種移植モデルにおける評価のために、ＣＺコンジュゲートとして、インビトロ細胞傷害性に基づいて選択された。担腫瘍マウスの単回投与処置は、両方の例示的なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされたヒト化抗体に対して腫瘍成長阻害及び腫瘍成長遅延をもたらし、その結果は、表１５に要約される。
Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣとしての、ｃｈＡｂ３ヒト化バリアントのインビボ有効性
ヒト化バリアントのうちの２つ（ｈｕＡｂ３ｖ２及びｈｕＡｂ３ｖ６）は、実施例８における材料及び方法に説明されるように、小細胞肺がん細胞（ＮＣＩ−Ｈ１４６細胞）のインビボマウス異種移植モデルにおける評価のために、ＣＺコンジュゲートとして、インビトロ細胞傷害性に基づいて選択された。担腫瘍マウスの単回投与処置は、両方の例示的なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされたヒト化抗体に対して腫瘍成長阻害及び腫瘍成長遅延をもたらし、その結果は、表１５に要約される。
［実施例１５］
ヒト化バリアント抗体ｈｕＡｂ３ｖ２のＣＤＲの修飾
ｈｕＡｂ３ｖ２は、好ましい結合性及び細胞死滅性を示した。ｈｕＡｂ３ｖ２の可変領域アミノ酸配列の実験は、しかしながら、可能性のある脱アミド部位及び／又は異性化部位を明らかにした。
ヒト化バリアント抗体ｈｕＡｂ３ｖ２のＣＤＲの修飾
ｈｕＡｂ３ｖ２は、好ましい結合性及び細胞死滅性を示した。ｈｕＡｂ３ｖ２の可変領域アミノ酸配列の実験は、しかしながら、可能性のある脱アミド部位及び／又は異性化部位を明らかにした。
ｈｕＡｂ３可変領域のアミノ酸配列は、以下に説明され、軽鎖（ｈｕＡｂ３ＶＬ１）及び重鎖（ｈｕＡｂ３ＶＨ１ｂ）を含む。ＶＨ（アミノ酸のＣＤＲ２「ｄｓ」及びＶＬ（アミノ酸のＣＤＲ１「ｎｇ」）のＣＤＲにおける可能性のある脱アミド及び／又は異性化部位は、イタリック体であり、したがって、抗体生成を改善させるように操作された。ＣＤＲは、以下の配列において小文字で記載される。
これらの可能性のある脱アミド及び／又は異性化部位を欠くｈｕＡｂ３ｖ２バリアントを作製するために、以下に示されるアミノ酸の各々（ｘ及びｚ；ＶＬのＣＤＲ１及びＶＨのＣＤＲ２における可能性のある部位を表す）で変異を起こさせた。結果として得られる３０個のＶＬバリアントは、もともとのｈｕＡｂ３ｖ２ＶＨと対を成され、結合に関して試験された。結果として得られる２９個のＶＨバリアントは、もともとのｈｕＡｂ３ｖ２ＶＬと対を成され、結合に関して試験された。良好なＶＨバリアントを、ＬＣＤＲ１における変化を持つ生産性の高いＶＬバリアントと併用かつ、試験し、ＣＤＲにおいて可能性のある脱アミド及び／又は異性化部位を欠く最終的なヒト化バリアントを作製した。バリアントのアミノ酸配列は、以下の表１６に提供される。ｈｕＡｂ３ｖ２バリアント、ｈｕＡｂ３ｖ２．５の重鎖及び軽鎖の全長アミノ酸配列は、それぞれ、配列番号１７０及び１７１に提供される。ｈｕＡｂ３ｖ２バリアント、ｈｕＡｂ３ｖ２．６の重鎖及び軽鎖の全長アミノ酸配列は、それぞれ、配列番号１７２及び１７３に提供される。
ｈｕＡｂ３ＶＬ１
Ｎｚ（１５バリアント）（配列番号１７９)
ｈｕＡｂ３ＶＨ１ｂ
（１４バリアント） ｄｚ （配列番号１８１）
ここで、（ＶＬ及びＶＨの両方に関して）、
ｘ＝Ｍ、Ｃ、Ｎ、Ｄ、又はＱを除く、全アミノ酸。
ｚ＝Ｍ、Ｃ、Ｇ、Ｓ、Ｎ、又はＰを除く、全アミノ酸。
提案されるフレームワーク復帰変異は、下線が引かれている（実施例１２参照）。
［実施例１６］
ｈｕＡｂ３ｖ２バリアントのインビトロ特徴付け
可能性のある脱アミド及び／又は異性化部位（実施例１５に説明される）の除去は、ＦＡＣＳによって評価される際に（実施例６の方法に説明されるように）、マウス３Ｔ１２線維芽細胞上に外生的に発現される、ヒトＢ７−Ｈ３及びＣｙｎｏＢ７−Ｈ３の両方に対する結合を保持する６つのバリアントのみを生成した。
ｈｕＡｂ３ｖ２バリアントのインビトロ特徴付け
可能性のある脱アミド及び／又は異性化部位（実施例１５に説明される）の除去は、ＦＡＣＳによって評価される際に（実施例６の方法に説明されるように）、マウス３Ｔ１２線維芽細胞上に外生的に発現される、ヒトＢ７−Ｈ３及びＣｙｎｏＢ７−Ｈ３の両方に対する結合を保持する６つのバリアントのみを生成した。
これらの新しい抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、ＳＰＲによる結合に関してさらに特徴付けられ、Ｂｃｌ−ｘＬｉシントンＣＺにコンジュゲートされ、細胞の細胞傷害性に関して評価された（実施例７に説明される方法を用いる）。表１７は、６個のｈｕＡｂ３ｖ２ヒト化バリアントのインビトロ特徴を提供する。
表１７に説明されるように、結果は、６つのｈｕＡｂ３ｖ２バリアント全てが、親ｈｕＡｂ３ｖ２と比較された際に、ヒト又はｃｙｎｏＢ７−Ｈ３発現細胞に対して同様の結合性を有することを示した。６つのｈｕＡｂ３ｖ２バリアントのうち、４つの抗体（ｈｕＡｂ３ｖ２．５、ｈｕＡｂ３ｖ２．６、ｈｕＡｂ３ｖ２．８、ｈｕＡｂ３ｖ２．９）は、例示的なＢｃｌ−ｘＬｉシントンＣＺにコンジュゲートされたときに、Ｈ８４７細胞において強い細胞傷害性を示した。
［実施例１７］
抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ１３のヒト化
抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体ｃｈＡｂ１３は、その結合特性及びＡＤＣ（Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされる）としての好ましい特性に基づいて、ヒト化のために選択された。
抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｃｈＡｂ１３のヒト化
抗Ｂ７−Ｈ３キメラ抗体ｃｈＡｂ１３は、その結合特性及びＡＤＣ（Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤にコンジュゲートされる）としての好ましい特性に基づいて、ヒト化のために選択された。
ヒト化の前に、ｃｈＡｂ１３は、軽鎖ＣＤＲ３（ＱＱＹＮＳＹＰＦＴ（配列番号１８２）における可能性のある脱アミドを最小限にするために修飾された：可能性のある脱アミド部位は、残基「ＮＳ」（イタリック体）で示されている）。ｃｈＡｂ１３の軽鎖ＣＤＲ３内部の「Ｎ」及び／又は「Ｓ」に対応するアミノ酸位置の点変異が、導入され、３０個のバリアントをもたらした。これらのＣＤＲ３軽鎖バリアントを含有する抗体は、次いで、ｃｈＡｂ１３の結合特性を維持するそれらの能力に関してスクリーニングされた。「ＮＳ」モチーフ（すなわち、ＱＱＹＮＷＹＰＦＴ（配列番号３９））におけるセリン「Ｓ」の代わりにトリプトファン（Ｗ）点変異を有するＣＤＲ３を含むバリアントは、親ｃｈＡｂ１３抗体の結合特徴を保持した。ＣＤＲ３は、抗原結合において大きな役割を果たすので、ＣＤＲ３内部のＳ残基のＷ残基による置換は、セリンとトリプトファンとの間の構造的な違いを前提にすると、驚くべきことであった。
ヒト化抗体は、ｃｈＡｂ１３の可変重鎖（ＶＨ）及び可変軽鎖（ＶＬ）ＣＤＲ配列に基づいて生成され、「ＮＷ」軽鎖ＣＤＲ３を含んでいた。具体的には、ヒト生殖系列配列は、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化ｃｈＡｂ１３抗体を構成するために選択され、ＶＨ及びＶＬ鎖のＣＤＲドメインは、異なるヒト重鎖及び軽鎖アクセプター配列にグラフトされた。モノクローナル抗体ｃｈＡｂ１３のＶＨ及びＶＬ配列を持つアラインメントに基づいて、以下のヒト配列が、アクセプターとして選択された。
● 重鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＨＶ４−ｂ＊０１（０−１）及びＩＧＨＪ６＊０１
● 軽鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＫＶ１−３９＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１
● 軽鎖アクセプター配列を構成するためのＩＧＫＶ１−３９＊０１及びＩＧＫＪ２＊０１
ＩＧＨＶ４−ｂ_ＩＧＨＪ６
ＩＧＫＶ１−３９＿ＩＧＫＪ２
次に述べる、マウスモノクローナルｃｈＡｂ１３抗体のヒト化可変領域は、機能的特徴付けのためにＩｇＧ発現ベクター内にクローニングされた。
● ヒト化Ａｂ１３ ＶＨ．１（ｈｕＡｂ１３ＶＨ．１）は、ＩＧＨＶ４−ｂ＊０１（０−１）及びＩＧＨＪ６＊０１フレームワーク配列を含有する、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化Ａｂ１３ ＶＨである。これは、また、ピログルタミン酸形成を防止するために、Ｑ１Ｅ変更を含む。
● ヒト化Ａｂ１３ＶＨ．１（ｈｕＡｂ１３ＶＨ．１ａ）は、ｈｕＡｂ１３ＶＨ.１に基づくヒト化設計であり、９つの提案されるフレームワーク復帰変異：Ｓ２５Ｔ、Ｐ４０Ｆ、Ｋ４３Ｎ、Ｉ４８Ｍ、Ｖ６７Ｉ、Ｔ６８Ｓ、Ｖ７１Ｒ、Ｓ７９Ｆ、Ｒ９４Ｇを含有する。
● ヒト化Ａｂ１３ＶＨ１ｂ（ｈｕＡｂ１３ＶＨ１ｂ）は、ｈｕＡｂ１３ＶＨ．１とｈｕＡｂ１３ＶＨ.１ａとの間の中間体設計であり、４つの提案されるフレームワーク復帰変異：Ｋ４３Ｎ、Ｉ４８Ｍ、Ｖ６７Ｉ、Ｖ７１Ｒを含有する。
● ヒト化Ａｂ１３ＶＬ．１（ｈｕＡｂ１３ＶＬ．１）は、ＩＧＫＶ１−３９＊０１及びＩＧＨＪ６＊０１フレームワーク配列を含有する、ＣＤＲグラフトされた、ヒト化Ａｂ１３ＶＬである。
● ヒト化Ａｂ１３ＶＬ．１ａ（ｈｕＡｂ１３ＶＬ．１ａ）は、ｈｕＡｂ１３ＶＬ．１に基づくヒト化設計であり、４つの提案されるフレームワーク復帰変異：Ａ４３Ｓ、Ｌ４６Ａ、Ｔ８５Ｅ、Ｙ８７Ｆを含有する。
● ヒト化Ａｂ１３ＶＬ．１ｂ（ｈｕＡｂ１３ＶＬ．１ｂ）は、ｈｕＡｂ１３ＶＬ．１とｈｕＡｂ１３ＶＬ．１ａとの間の中間体設計であり、１つの提案されるフレームワーク復帰変異：Ｙ８７Ｆを含有する。
前述の可変領域及びＣＤＲアミノ酸配列は、以下の表１８に説明される。
［実施例１８］
ｈｕＡｂ１３バリアントの生成
表１８に説明されるヒト化Ａｂ１３バリアントの３ＶＨ及び３ＶＬ領域アミノ酸配列は、表１９に説明される９つのｈｕＡｂ１３バリアントを生成するために、対にされた。ｈｕＡｂ１３ｖ１バリアント、ｈｕＡｂ１３ｖ１の重鎖及び軽鎖の全長アミノ酸配列は、それぞれ、配列番号１６８及び１６９において提供される。
ｈｕＡｂ１３バリアントの生成
表１８に説明されるヒト化Ａｂ１３バリアントの３ＶＨ及び３ＶＬ領域アミノ酸配列は、表１９に説明される９つのｈｕＡｂ１３バリアントを生成するために、対にされた。ｈｕＡｂ１３ｖ１バリアント、ｈｕＡｂ１３ｖ１の重鎖及び軽鎖の全長アミノ酸配列は、それぞれ、配列番号１６８及び１６９において提供される。
［実施例１９］
ｈｕＡｂ１３ＶＬ．１ａのヒト化バリアントの特徴付け
実施例１７及び実施例１８に説明される９つのｈｕＡｂ１３バリアントは、ＦＡＣＳによってＢ７−Ｈ３に結合するために生成され試験された（実施例６において説明される方法による）。６つのバリアントは、ヒトＢ７−Ｈ３に結合しなかった。残りの３つのバリアントは、ＳＰＲによる結合に関してさらに特徴付けられ、（方法Ａを介して）Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤（具体的には、リンカー弾頭（又はシントン）ＣＺ）にコンジュゲートされ、細胞の細胞傷害性に関して評価された（実施例７に説明される方法による）。表２０は、これらのバリアントのインビトロ特徴を提供する。
ｈｕＡｂ１３ＶＬ．１ａのヒト化バリアントの特徴付け
実施例１７及び実施例１８に説明される９つのｈｕＡｂ１３バリアントは、ＦＡＣＳによってＢ７−Ｈ３に結合するために生成され試験された（実施例６において説明される方法による）。６つのバリアントは、ヒトＢ７−Ｈ３に結合しなかった。残りの３つのバリアントは、ＳＰＲによる結合に関してさらに特徴付けられ、（方法Ａを介して）Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤（具体的には、リンカー弾頭（又はシントン）ＣＺ）にコンジュゲートされ、細胞の細胞傷害性に関して評価された（実施例７に説明される方法による）。表２０は、これらのバリアントのインビトロ特徴を提供する。
ＨｕＡｂ１３ｖ１は、１つには、Ｈ８４７細胞に対するその強く優勢な細胞傷害性、及びそれから由来するｃｈＡｂ１３と同様の結合特性のために、さらなる研究のために選択された。対照的に、ｈｕＡｂ１３ｖ５及びｈｕＡｂ１３ｖ６は、Ｂｉａｃｏｒｅの実験において不十分なフィット動態を示し、それらの結合性は、ｈｕＡｂ１３ｖ１よりも親ｃｈＡｂ１３から、より相違しており、細胞死滅アッセイにおいて低減された活性を有することを示唆する。
［実施例２０］
例示的なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤リンカー弾頭（シントン）を持つ、選択されたヒト化Ｂ７−Ｈ３抗体のインビトロ効力
ヒト化抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、及びｈｕＡｂ３ｖ２．６は、いくつかのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン）と３ｍｇの規模で実施例７に説明されるような方法Ａ、Ｅ又はＧを用いてコンジュゲートされるように選択された。これらのＡＤＣの抗腫瘍活性は、細胞傷害性アッセイにおいて、実施例７に説明されるようなＮＣＩ−Ｈ１６５０非小細胞肺がん細胞株を用いて試験された。対照として、非標的化抗体ＭＳＬ１０９（Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン）にコンジュゲートされるＣＭＶ糖タンパク質Ｈに結合するモノクローナル抗体）を含むＡＤＣのインビトロ抗腫瘍活性は、同様に評価された。結果は、表２１に説明される。
例示的なＢｃｌ−ｘＬ阻害剤リンカー弾頭（シントン）を持つ、選択されたヒト化Ｂ７−Ｈ３抗体のインビトロ効力
ヒト化抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、及びｈｕＡｂ３ｖ２．６は、いくつかのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン）と３ｍｇの規模で実施例７に説明されるような方法Ａ、Ｅ又はＧを用いてコンジュゲートされるように選択された。これらのＡＤＣの抗腫瘍活性は、細胞傷害性アッセイにおいて、実施例７に説明されるようなＮＣＩ−Ｈ１６５０非小細胞肺がん細胞株を用いて試験された。対照として、非標的化抗体ＭＳＬ１０９（Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン）にコンジュゲートされるＣＭＶ糖タンパク質Ｈに結合するモノクローナル抗体）を含むＡＤＣのインビトロ抗腫瘍活性は、同様に評価された。結果は、表２１に説明される。
表２１に説明されるように、ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体及び特定のシントン、例えばシントンＸＷを含むＢｃｌ−ｘＬｉ ＡＤＣは、インビトロで腫瘍細胞を致死させることができた。Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロードにコンジュゲートされる非標的化抗体ＭＳＬ１０９を含むＡＤＣによって示される低い抗腫瘍活性と対照的に、Ｂ７−Ｈ３標的化ＡＤＣは、より多大な腫瘍細胞死滅を示し、これはＢ７−Ｈ３発現腫瘍細胞へのＢ７−Ｈ３標的化ＡＤＣの抗原依存送達を反映する。
Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロードにコンジュゲートされる非標的化抗体ＭＳＬ１０９を含むＡＤＣによって示される低い抗腫瘍活性と対照的に、Ｂ７−Ｈ３標的化ＡＤＣは、より多大な腫瘍細胞死滅を示し、これはＢ７−Ｈ３発現腫瘍細胞へのＢ７−Ｈ３標的化ＡＤＣの抗原依存送達を反映する。
［実施例２１］
抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣのインビボ分析
ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、及びｈｕＡｂ３ｖ２．６は、いくつかのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン）とコンジュゲートされるように選択され、多数のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン)を用いるコンジュゲートとして、実施例７及び実施例８に説明される方法を用いて、小細胞肺がん（Ｈ１４６）の異種移植モデルにおいて評価された。結果は、表２２及び表２３に要約される。
抗Ｂ７−Ｈ３ ＡＤＣのインビボ分析
ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１、ｈｕＡｂ３ｖ２．５、及びｈｕＡｂ３ｖ２．６は、いくつかのＢｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン）とコンジュゲートされるように選択され、多数のＢｃｌ−ｘＬ阻害剤ペイロード（又はシントン)を用いるコンジュゲートとして、実施例７及び実施例８に説明される方法を用いて、小細胞肺がん（Ｈ１４６）の異種移植モデルにおいて評価された。結果は、表２２及び表２３に要約される。
ヒト化抗Ｂ７−Ｈ３抗体ｈｕＡｂ１３ｖ１は、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤シントンＷＤとコンジュゲートされ、実施例７及び実施例８において説明された方法を用いるコンジュゲートとして、Ｂ７−Ｈ３陽性小細胞肺がん（Ｈ１６５０）の異種移植モデルにおいて評価された。対照として、非標的化ＩｇＧアイソタイプ適合抗体（ＡＢ０９５）のインビボ抗腫瘍活性が、同様に評価された。結果は、表２４に要約される。
非標的化ＩｇＧアイソタイプ適合抗体Ａｂ０９５を用いて観察される活性の欠如と対照的に、Ｂ７−Ｈ３標的化Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣは、表２４及び表２５に示されるように、腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）及び腫瘍成長遅延（ＴＧＤ）示し、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤をこの異種移植マウスモデルにおけるＢ７−Ｈ３発現腫瘍細胞に送達するＢ７−Ｈ３標的化ＡＤＣの抗原依存送達を反映した。付加的な対照として、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤シントンとコンジュゲートされた非標的化抗体ＭＳＬ１０９を含むＡＤＣのインビボ抗腫瘍活性は、Ｂ７−Ｈ３陽性小細胞肺がん（Ｈ１６５０）の異種移植モデルにおいて評価された。これらのＡＤＣの活性は、対照としての、非標的化ＩｇＧアイソタイプ適合抗体、ＡＢ０９５の活性と比較された。表２５に示されるように、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤シントンとコンジュゲートされた非標的化抗体ＭＳＬ１０９を含むＡＤＣは、非常にささやかな腫瘍成長阻害及び腫瘍成長の低遅延又は無遅延を示した。対照的に、Ｂ７−Ｈ３標的化Ｂｃｌ−ｘＬ ＡＤＣ（表２４に示されるような）は、はるかに大きい腫瘍成長阻害（ＴＧＩ）及び腫瘍成長遅延（ＴＧＤ）示し、このマウス異種移植モデルにおけるＢ７−Ｈ３発現細胞へのこれらのＡＤＣの抗原依存送達を反映した。
参照による組み込み
本願の随所に引用されている全文献、特許、係属中の特許出願及び公開特許の内容は、参照により本明細書に特に組み込まれる。
本願の随所に引用されている全文献、特許、係属中の特許出願及び公開特許の内容は、参照により本明細書に特に組み込まれる。
等価物
本明細書に記載されている本発明の特定の実施形態の多くの等価物は、当業者に認識され、又は単なる日常的な実験を使用して確認できる。かかる等価物は、以下の特許請求の範囲に含まれるものとする。
本明細書に記載されている本発明の特定の実施形態の多くの等価物は、当業者に認識され、又は単なる日常的な実験を使用して確認できる。かかる等価物は、以下の特許請求の範囲に含まれるものとする。
Claims (129)
- ヒトＢ７−Ｈ３（ｈＢ７−Ｈ３）に結合する単離された抗体又はその抗原結合部分であって、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び配列番号１５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１４０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む重鎖可変領域及び配列番号７のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１０のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む重鎖可変領域及び配列番号１３６又は１３８のいずれかのアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１又は２に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトＢ７−Ｈ３に結合する単離された抗体又はその抗原結合部分であって、配列番号３５のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び配列番号３９のアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号３４のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む重鎖可変領域及び配列番号３８のアミノ酸配列を有するＣＤＲ２を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号３３のアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む重鎖可変領域及び配列番号３７のいずれかのアミノ酸配列を有するＣＤＲ１を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４又は５に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ＩｇＧアイソタイプである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ＩｇＧ１又はＩｇＧ４アイソタイプである、請求項７に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- 表面プラズモン共鳴によって決定される１．５×１０−８以下のＫＤを有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗体又はその抗原結合部分であって、配列番号１０、１１及び１２のＣＤＲセットのいずれかを含む重鎖可変領域及び配列番号１４、７及び１５のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域、又は配列番号３３、３４及び３５のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号３７、３８及び３９のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、抗体又はその抗原結合部分。
- ヒト化されている、請求項１０に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む、請求項１１に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークが、配列番号１５５、１５６、１６４、１６５、１６６及び１６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークが、少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含む、請求項１３に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- フレームワークのアミノ酸配列が、ヒトアクセプターフレームワークの配列と少なくとも６５％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個のアミノ酸残基を含む、請求項１４に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークが、キー残基において少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含み、キー残基が、
ＣＤＲに隣接する残基、
グリコシル化部位残基、
希少残基、
ヒトＢ７−Ｈ３と相互作用することが可能な残基、
ＣＤＲと相互作用することが可能な残基、
カノニカル残基、
重鎖可変領域と軽鎖可変領域の間の接触残基、
Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基、及び
Ｃｈｏｔｈｉａで定義される可変重鎖ＣＤＲ１とＫａｂａｔで定義される第１の重鎖フレームワークの間で重複する領域中の残基
からなる群から選択される、請求項１４又は１５に記載の抗体又はその抗原結合部分。 - キー残基が、４８Ｈ、６７Ｈ、６９Ｈ、７１Ｈ、７３Ｈ、９４Ｈ及び２Ｌからなる群から選択される、請求項１６に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- キー残基置換が、可変重鎖領域中にあり、Ｍ４８Ｉ、Ｖ６７Ａ、Ｉ６９Ｌ、Ａ７１Ｖ、Ｋ７３Ｒ及びＲ９４Ｇからなる群から選択される、請求項１７に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- キー残基置換が、可変軽鎖領域中にあり、Ｉ２Ｖである、請求項１７又は１８に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号２５、２６及び２７のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号２９、３０及び３１のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗体又はその抗原結合部分。
- ヒト化されている、請求項２０に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む、請求項２１に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークが、配列番号１５５〜１５８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークが、少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含む、請求項２２又は２３に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- フレームワークのアミノ酸配列が、ヒトアクセプターフレームワークの配列と少なくとも６５％同一であり、ヒトアクセプターフレームワークと同一の少なくとも７０個のアミノ酸残基を含む、請求項２４に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークが、キー残基において少なくとも１つのフレームワーク領域アミノ酸置換を含み、キー残基が、
ＣＤＲに隣接する残基、
グリコシル化部位残基、
希少残基、
ヒトＢ７−Ｈ３と相互作用することが可能な残基、
ＣＤＲと相互作用することが可能な残基、
カノニカル残基、
重鎖可変領域と軽鎖可変領域の間の接触残基、
Ｖｅｒｎｉｅｒゾーン内の残基、及び
Ｃｈｏｔｈｉａで定義される可変重鎖ＣＤＲ１とＫａｂａｔで定義される第１の重鎖フレームワークの間で重複する領域中の残基
からなる群から選択される、請求項２４又は２５に記載の抗体又はその抗原結合部分。 - キー残基が、６９Ｈ、４６Ｌ、４７Ｌ、６４Ｌ及び７１Ｌからなる群から選択される、請求項２６に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- キー残基置換が、可変重鎖領域中にあり、Ｌ６９Ｉである、請求項２７に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- キー残基置換が、可変軽鎖領域中にあり、Ｌ４６Ｐ、Ｌ４７Ｗ、Ｇ６４Ｖ及びＦ７１Ｈからなる群から選択される、請求項２７又は２８に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号１３６又は１３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２及び配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２、配列番号３５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２及び配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１３９と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号１３５と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１３９と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号１３７と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 配列番号１４７と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖、及び／又は配列番号１４４と少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- カニクイザルＢ７−Ｈ３に結合する、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- 約１０−７Ｍ以下、約１０−８Ｍ以下、約１０−９Ｍ以下、約１０−１０Ｍ以下、約１０−１１Ｍ以下、約１０−１２Ｍ以下及び１０−１３Ｍ以下からなる群から選択されるｈＢ７−Ｈ３に対する解離定数（ＫＤ）を有する、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトＩｇＭ定常ドメイン、ヒトＩｇＧ１定常ドメイン、ヒトＩｇＧ２定常ドメイン、ヒトＩｇＧ３定常ドメイン、ヒトＩｇＧ４定常ドメイン、ヒトＩｇＡ定常ドメイン若しくはヒトＩｇＥ定常ドメインの重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含み、及び／又はκ軽鎖を含む、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ２つの重鎖及び２つの軽鎖である４つのポリペプチド鎖を有するＩｇＧ１抗体である、請求項１〜４０のいずれか一項に抗体。
- ヒトＩｇＧ１定常ドメインが、配列番号１５９又は配列番号１６０のアミノ酸配列を含む、請求項４１に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ａ）配列番号１６８のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１６９のアミノ酸配列を含む軽鎖、
ｂ）配列番号１７０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７１のアミノ酸配列を含む軽鎖、並びに
ｃ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１７３のアミノ酸配列を含む軽鎖
からなる群から選択される配列セットを含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体。 - 請求項１〜４３のいずれか一項に記載の抗体又はその抗原結合部分と競合する、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分。
- 請求項１〜４４のいずれか一項に記載の抗ｈＢ７−Ｈ３抗体又はその抗原結合部分、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
- リンカーを介して薬物にコンジュゲートされた請求項１〜４４のいずれか一項に記載の抗ｈＢ７−Ｈ３抗体を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）。
- 薬物が、オーリスタチン又はピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）である、請求項４６に記載のＡＤＣ。
- 薬物が、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤である、請求項４６に記載のＡＤＣ。
- リンカーによって抗ヒトＢ７−Ｈ３（ｈＢ７−Ｈ３）抗体に連結されている薬物を含む、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）であって、薬物が、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）に従うＢｃｌ−ｘＬ阻害剤：
Ａｒ１は、
Ａｒ２は、
Ｚ１は、Ｎ、ＣＨ、Ｃ−ハロ及びＣ−ＣＮから選択され、
Ｚ２ａ、Ｚ２ｂ、及びＺ２ｃはそれぞれ、互いに独立して、結合、ＮＲ６、ＣＲ６ａＲ６ｂ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）、ＳＯ２、ＮＲ６Ｃ（Ｏ）、ＮＲ６ａＣ（Ｏ）ＮＲ６ｂ、及びＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｏから選択され、
Ｒ１は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル、エチル及びシアノから選択され、
Ｒ２は、水素、メチル、ハロ、ハロメチル及びシアノから選択され、
Ｒ３は、水素、低級アルキル及び低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ４は、水素、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル及び低級ヘテロアルキルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、低級アルキル、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル及び低級ヘテロアルキルは、１つ以上のハロ、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、Ｃ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂ、Ｓ（Ｏ）２ＮＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、Ｓ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＮＨ２基で置換されていてもよく、
Ｒ６、Ｒ６ａ及びＲ６ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、置換されていてもよい単環式シクロアルキル及び単環式ヘテロシクリルから選択され、又はＲ１３の原子と一緒になって、３〜７個の環原子を有するシクロアルキル又はヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１０は、シアノ、ＯＲ１４、ＳＲ１４、ＳＯＲ１４、ＳＯ２Ｒ１４、ＳＯ２ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＲ１４ａＲ１４ｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１４及びＮＨＳＯ２Ｒ１４から選択され、
Ｒ１１ａ及びＲ１１ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、ハロ、メチル、エチル、ハロメチル、ヒドロキシル、メトキシ、ＣＮ、及びＳＣＨ３から選択され、
Ｒ１２は、水素、ハロ、シアノ、低級アルキル、低級ヘテロアルキル、シクロアルキル、又はヘテロシクリルから選択され、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、又はヘテロシクリルは、１つ以上のハロ、シアノ、Ｃ１〜４アルコキシ、単環式シクロアルキル、単環式ヘテロシクリル、ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）ＣＨＲ６ａＲ６ｂ、ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ又はＳ（Ｏ）２ＣＨＲ６ａＲ６ｂ基で置換されていてもよく、
Ｒ１３は、結合、置換されていてもよい低級アルキレン、置換されていてもよい低級ヘテロアルキレン、置換されていてもよいシクロアルキル又は置換されていてもよいヘテロシクリルから選択され、
Ｒ１４は、水素、置換されていてもよい低級アルキル及び置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択され、
Ｒ１４ａ及びＲ１４ｂはそれぞれ、互いに独立して、水素、置換されていてもよい低級アルキル、及び置換されていてもよい低級ヘテロアルキルから選択される又はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、置換されていてもよい単環式シクロアルキル又は単環式ヘテロシクリル環を形成し、
Ｒ１５は、水素、ハロ、Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、但し、Ｒ１５が存在する場合、Ｒ４は、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルではなく、Ｒ４Ｃ１〜６アルカニル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４ハロアルキル及びＣ１〜４ヒドロキシアルキルは、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３及びＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ３から独立して選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、
＃は、リンカーに対する結合点を表す。）
である、ＡＤＣ。 - 構造式（Ｉ）に従う化合物：
Ｄは、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＢｃｌ−ｘＬ阻害薬であり、
Ｌは、リンカーであり、
Ａｂは、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体であり、
ＬＫは、リンカー（Ｌ）を抗ｈＢ７−Ｈ３抗体（Ａｂ）と連結している共有結合を表し、
ｍは、１〜２０の範囲の整数である。）
である、請求項４９に記載のＡＤＣ。 - Ａｒ１が置換されていない、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ａｒ１が、
- Ａｒ２が置換されていない、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ａｒ２が、５位においてヒドロキシル、Ｃ１〜４アルコキシ、及びシアノから選択される基で置換されていてもよい
- Ｚ１が、Ｎである、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ｚ２ａが、Ｏである、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ｒ１が、メチル又はクロロである、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ｒ２が、水素又はメチルである、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ｒ２が、水素である、請求項５８に記載のＡＤＣ。
- Ｒ４が、水素又は低級アルキルであり、低級アルキルは、Ｃ１〜４アルコキシ又はＣ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂで置換されていてもよい、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ｚ１がＮであり、Ｚ２ａがＯであり、Ｒ１がメチル又はクロロであり、Ｒ２が水素であり、Ａｒ２が、
- 薬物が、構造式（ＩＩａ）に従うＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である、請求項６１に記載のＡＤＣ。
- 薬物が、構造式（ＩＩａ）に従うＢｃｌ−ｘＬ阻害剤である、請求項４９又は５０に記載のＡＤＣ。
- Ｚ２ａが、ＣＨ２又はＯである、請求項６３に記載のＡＤＣ。
- Ｒ１３が、低級アルキレン又は低級ヘテロアルキレンから選択される、請求項６３に記載のＡＤＣ。
-
-
-
-
- Ｚ２ａが酸素であり、Ｒ１３がＣＨ２ＣＨ２であり、Ｒ４が、水素又はＣ１〜４アルコキシ又はＣ（Ｏ）ＮＲ６ａＲ６ｂで置換されていてもよい低級アルキルである、請求項６２に記載のＡＤＣ。
- 構造式（ＩＩｂ）に従う化合物である、請求項５２に記載のＡＤＣ。
- Ｚ２ｂが、結合、Ｏ若しくはＮＲ６であり、又は及びＲ１３が、エチレン若しくは置換されていてもよいヘテロシクリルである、請求項７１に記載のＡＤＣ。
- Ｚ２ｃが、Ｏであり、Ｒ１２が、１つ以上のハロ又はＣ１〜４アルコキシで置換されていてもよい低級アルキルである、請求項７２に記載のＡＤＣ。
- Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤が、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）の＃の位置に対応する水素が存在せず一価基を形成しているという点で変更されている、以下の化合物：
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンゾオキサジン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１−メチル−１，２，３，４−テトラヒドロキノキサリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（［１，３］チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［５−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−３−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（オキセタン−３−イルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［６−（３−アミノピロリジン−１−イル）−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３，５−ジメチル−７−｛２−［（２−スルファモイルエチル）アミノ］エトキシ｝トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−｛メチル［２−（メチルアミノ）エチル］アミノ｝−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）キノリン−６−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［５−アミノ−８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−６−［３−（メチルアミノ）プロパ−１−イン−１−イル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−メトキシエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−２−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［７−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）ピペリジン−４−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［１−（メチルスルホニル）アゼチジン−３−イル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インダゾール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−インドール−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［３−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−（８−（ベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）−３−（１−（（３−（２−（（２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルスルファモイル）エチル）アミノ）エトキシ）−５，７−ジメチルアダマンタン−１−イル）メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピコリン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（３−ヒドロキシプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３−（２−｛［３−（ジメチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−（１−｛［３，５−ジメチル−７−（２−｛［３−（メチルアミノ）−３−オキソプロピル］アミノ｝エトキシ）トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノアセトアミド）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛８−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−［１−（｛３−［（２−アミノエチル）スルファニル］−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（３−アミノプロピル）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−｛５−［（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）カルバモイル］キノリン−３−イル｝ピリジン−２−カルボン酸
からなる群から選択される、請求項５０に記載のＡＤＣ。 - リンカーが、リソソーム酵素によって切断可能である、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- リソソーム酵素がカテプシンＢである、請求項７５に記載のＡＤＣ。
- リンカーが、構造式（ＩＶａ）、（ＩＶｂ）、（ＩＶｃ）又は（ＩＶｄ）に従うセグメント：
（式中、
ペプチドは、リソソーム酵素によって切断可能なペプチドを表し（Ｎ→Ｃで図示されており、ペプチドはアミノ及びカルボキシル「末端」を含む）、
Ｔは、１個以上のエチレングリコール単位若しくはアルキレン鎖又はこれらの組合せを含む、ポリマーを表し、
Ｒａは、水素、Ｃ１〜６アルキル、ＳＯ３Ｈ及びＣＨ２ＳＯ３Ｈから選択され、
Ｒｙは、水素又はＣ１〜４アルキル−（Ｏ）ｒ−（Ｃ１〜４アルキレン）ｓ−Ｇ１若しくはＣ１〜４アルキル−（Ｎ）−［（Ｃ１〜４アルキレン）−Ｇ１］２であり、
Ｒｚは、Ｃ１〜４アルキル−（Ｏ）ｒ−（Ｃ１〜４アルキレン）ｓ−Ｇ２であり、
Ｇ１は、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ、ＰＥＧ４−３２又は糖部分であり、
Ｇ２は、ＳＯ３Ｈ、ＣＯ２Ｈ又はＰＥＧ４−３２部分であり、
ｒは、０又は１であり、
ｓは、０又は１であり、
ｐは、０〜５の範囲の整数であり、
ｑは、０又は１であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、０又は１であり、
＊は、リンカーの残部に対する結合点を表す。）
を含む、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。 - ペプチドが、Ｖａｌ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ａｌａ；Ａｌａ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｌａ；Ａｓｎ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｎ；Ｃｉｔ−Ｃｉｔ；Ｖａｌ−Ｇｌｕ；Ｇｌｕ−Ｖａｌ；Ｓｅｒ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｓｅｒ；Ｌｙｓ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｙｓ；Ａｓｐ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ａｓｐ；Ａｌａ−Ｖａｌ；Ｖａｌ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｐｈｅ；Ｖａｌ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ｖａｌ；Ａｌａ−Ｌｙｓ；Ｌｙｓ−Ａｌａ；Ｐｈｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｐｈｅ；Ｌｅｕ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｌｅｕ；Ｉｌｅ−Ｃｉｔ；Ｃｉｔ−Ｉｌｅ；Ｐｈｅ−Ａｒｇ；Ａｒｇ−Ｐｈｅ；Ｃｉｔ−Ｔｒｐ；及びＴｒｐ−Ｃｉｔから選択される、請求項７７に記載のＡＤＣ。
- リソソーム酵素が、β−グルクロニダーゼ又はβ−ガラクトシダーゼである、請求項７５に記載のＡＤＣ。
- リンカーが、構造式（Ｖａ）、（Ｖｂ）、（Ｖｃ）、（Ｖｄ）又は（Ｖｅ）に従うセグメント：
（式中、
ｑは、０又は１であり、
ｒは、０又は１であり、
Ｘ１は、ＣＨ２、Ｏ又はＮＨであり、
＊は、リンカーの残部に対する結合点を表す。）
を含む、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。 - リンカーが、構造式（ＶＩＩＩａ）、（ＶＩＩＩｂ）、又は（ＶＩＩＩｃ）に従うセグメント：
又はこれらの加水分解された誘導体（式中、
Ｒｑは、Ｈ又は−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、０又は１であり、
Ｇ３は、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈ又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１１−ＣＨ３であり、
Ｒｗは、−Ｏ−ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈ又は−ＮＨ（ＣＯ）−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１２−ＣＨ３であり、
＊は、リンカーの残部に対する結合点を表し、
を含む、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。 - リンカーが、１〜６個のエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコールセグメントを含む、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- ｍが、２，３又は４である、請求項５０〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- リンカーＬが、構造式（ＩＶａ）又は（ＩＶｂ）に従うセグメントを含む、請求項８３に記載のＡＤＣ。
- リンカーＬが、閉鎖型又は開放型のいずれかの、ＩＶａ．１〜ＩＶａ．８、ＩＶｂ．１〜ＩＶｂ．１９、ＩＶｃ．１〜ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．１〜ＩＶｄ．４、Ｖａ．１〜Ｖａ．１２、Ｖｂ．１〜Ｖｂ．１０、Ｖｃ．１〜Ｖｃ．１１、Ｖｄ．１〜Ｖｄ．６、Ｖｅ．１〜Ｖｅ．２、ＶＩａ．１、ＶＩｃ．１〜Ｖ１ｃ．２、ＶＩｄ．１〜ＶＩｄ．４、ＶＩＩａ．１〜ＶＩＩａ．４、ＶＩＩｂ．１〜ＶＩＩｂ．８、ＶＩＩｃ．１〜ＶＩＩｃ．６からなる群から選択される、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- リンカーＬが、ＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．４、Ｖｂ．９、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４、及びＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、各リンカーのマレイミドが、抗体Ａｂと反応して、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成している、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- リンカーＬが、ＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｄ．４、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４、ＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、各リンカーのマレイミドが、抗体Ａｂと反応して、スクシンイミド（閉鎖型）又はスクシンアミド（開放型）のいずれかとして共有結合を形成している、請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- リンカーＬが、ＩＶｂ．２、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．３、ＩＶｃ．６及びＶＩＩｃ．１からなる群から選択され、式中、
＠はこの隣にあるカルボン酸のα−位又はβ−位のいずれかであり得る：
請求項４９〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。 - ＬＫが、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体Ａｂ上のアミノ基と形成された連結である、請求項５０〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- ＬＫが、アミド又はチオ尿素である、請求項８８に記載のＡＤＣ。
- ＬＫが、抗ｈＢ７−Ｈ３抗体Ａｂ上のスルフヒドリル基と形成された連結である、請求項５０〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- ＬＫが、チオエーテルである、請求項９１に記載のＡＤＣ。
- ＬＫが、アミド、チオ尿素及びチオエーテルからなる群から選択され、
ｍが、１〜８の範囲の整数である、
請求項５０〜７４のいずれか一項に記載のＡＤＣ。 - Ｄが、請求項７４で規定されたＢｃｌ−ｘＬ阻害剤であり、
Ｌが、リンカーＩＶａ．１〜ＩＶａ．８、ＩＶｂ．１〜ＩＶｂ．１９、ＩＶｃ．１〜ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．１〜ＩＶｄ．４、Ｖａ．１〜Ｖａ．１２、Ｖｂ．１〜Ｖｂ．１０、Ｖｃ．１〜Ｖｃ．１１、Ｖｄ．１〜Ｖｄ．６、Ｖｅ．１〜Ｖｅ．２、ＶＩａ．１、ＶＩｃ．１〜Ｖ１ｃ．２、ＶＩｄ．１〜ＶＩｄ．４、ＶＩＩａ．１〜ＶＩＩａ．４、ＶＩＩｂ．１〜ＶＩＩｂ．８、及びＶＩＩｃ．１〜ＶＩＩｃ．６からなる群から選択され、各リンカーが抗体Ａｂと反応して、共有結合を形成しており、
ＬＫが、チオエーテルであり、
ｍが、１〜８の範囲の整数である、
請求項５０に記載のＡＤＣ。 - Ｄが、構造式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）の＃の位置に対応する水素が存在せず一価基を形成しているという点で変更されている、以下の化合物：
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［１−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）ナフタレン−２−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メトキシ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］−３−｛１−［（３−｛２−［（２−メトキシエチル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝ピリジン−２−カルボン酸；
３−（１−｛［３−（２−アミノエトキシ）−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル］メチル｝−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−シアノ−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
６−［４−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）イソキノリン−６−イル］−３−［１−（｛３，５−ジメチル−７−［２−（メチルアミノ）エトキシ］トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル｝メチル）−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル］ピリジン−２−カルボン酸；及び
３−｛１−［（３−｛２−［（３−アミノ−３−オキソプロピル）アミノ］エトキシ｝−５，７−ジメチルトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカ−１−イル）メチル］−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル｝−６−［８−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イルカルバモイル）−３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル］ピリジン−２−カルボン酸；
からなる群から選択されるＢｃｌ−ｘＬ阻害剤であり、
Ｌが、閉鎖型又は開放型のいずれかの、リンカーＩＶｂ．２、ＩＶｃ．５、ＩＶｃ．６、ＩＶｃ．７、ＩＶｄ．４、Ｖｂ．９、Ｖｃ．１１、ＶＩＩａ．１、ＶＩＩａ．３、ＶＩＩｃ．１、ＶＩＩｃ．４、及びＶＩＩｃ．５からなる群から選択され、
ＬＫが、チオエーテルであり、
ｍが、２〜４の範囲の整数である、請求項５０に記載のＡＤＣ。 - 式ｉ〜ｖｉｉｉ：
（式中、ｍは、１〜６の整数である。）
からなる群から選択される、請求項５０に記載のＡＤＣ。 - ｍが、２〜６の整数である、請求項９６に記載のＡＤＣ。
- 抗ｈＢ７−Ｈ３抗体が、配列番号１２に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号１４０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１０に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１ドメイン；配列番号１５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号１３６又は１３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１ドメインを含む、請求項４９〜９７のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- 抗体が、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３５に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４９〜９７のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- 抗体が、配列番号１３９に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４９〜９７のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- 抗体が、配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号３８に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１ドメイン；配列番号３５に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３ドメイン、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２ドメイン及び配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１ドメインを含む、請求項４９〜９７のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- 抗体が、配列番号１４７に記載のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４４に記載のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４９〜９７のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＹＧ、ｈｕＡｂ３ｖ２．５−ＫＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＴ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＺＺ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＸＷ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＥ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＳＲ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＹＧ、ｈｕＡｂ３ｖ２．６−ＫＺ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＴ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＺＺ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＸＷ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＥ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＳＲ、ｈｕＡｂ１３ｖ１−ＹＧ、及びｈｕＡｂ１３ｖ１−ＫＺからなる群から選択される、請求項５０に記載のＡＤＣ。
- 有効量の請求項４６〜１０３又は１２５のいずれか一項に記載のＡＤＣ、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
- 請求項４６〜１０３又は１２５のいずれか一項に記載のＡＤＣを複数、含むＡＤＣ混合物、及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
- ＡＤＣ混合物が、１．５〜４の平均薬物抗体比（ＤＡＲ）を有する、請求項１０５に記載の医薬組成物。
- ＡＤＣ混合物が、１．５〜８のＤＡＲをそれぞれ有するＡＤＣを含む、請求項１０５に記載の医薬組成物。
- がんを治療する方法であって、治療有効量の請求項４６〜１０３又は１２５のいずれか一項に記載のＡＤＣをそれを必要とする対象に投与することを含む、方法。
- がんが、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、乳がん、卵巣がん、膠芽腫、前立腺がん、膵臓がん、結腸がん、胃がん、メラノーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、及び腎臓がんからなる群から選択される、請求項１０８に記載の方法。
- がんが、扁平上皮癌である、請求項１０８に記載の方法。
- 扁平上皮癌が、扁平上皮肺がん又は扁平上皮頭頸部がんである、請求項１１０に記載の方法。
- がんが、トリプルネガティブ乳がんである、請求項１０８に記載の方法。
- がんが、非小細胞肺がんである、請求項１０８に記載の方法。
- 固形腫瘍を有する対象において固形腫瘍成長を阻害する又は減少させる方法であって、固形腫瘍成長が阻害される又は減少するように、有効量の請求項４６〜１０３のいずれか一項に記載のＡＤＣを固形腫瘍を有する対象に投与することを含む、方法。
- 固形腫瘍が、非小細胞肺がんである、請求項１１４に記載の方法。
- ＡＤＣが、さらなる薬剤又はさらなる療法と組み合わせて投与される、請求項１０９〜１１５のいずれか一項に記載の方法。
- さらなる薬剤が、抗ＰＤ１抗体（例えばペムブロリズマブ）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（例えばアテゾリズマブ）、抗ＣＴＬＡ−４抗体（例えばイピリムマブ）、ＭＥＫ阻害剤（例えばトラメチニブ）、ＥＲＫ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤（例えばタブラフェニブ）、オシメルチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ソラフェニブ、ＣＤＫ９阻害剤（例えばディナシクリブ）、ＭＣＬ−１阻害剤、テモゾロミド、Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤、Ｂｃｌ−２阻害剤（例えばベネトクラクス）、イブルチニブ、ｍＴＯＲ阻害剤（例えばエベロリムス）、ＰＩ３Ｋ阻害剤（例えばブパルリシブ）、デュベリシブ、イデラリシブ、ＡＫＴ阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤（例えばラパチニブ）、タキサン（例えばドセタキセル、パクリタキセル、ナブパクリタキセル）、オーリスタチンを含むＡＤＣ、ＰＢＤを含むＡＤＣ（例えばロバルピツズマブテシリン）、メイタンシノイドを含むＡＤＣ（例えばＴＤＭ１）、ＴＲＡＩＬアゴニスト、プロテアソーム阻害剤（例えばボルテゾミブ）及びニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＮＡＭＰＴ）阻害剤からなる群から選択される、請求項１１６に記載の方法。
- さらなる療法が、放射線である、請求項１１６に記載の方法。
- さらなる薬剤が、化学療法剤である、請求項１１８に記載の方法。
- がんが、活性化ＥＧＦＲ変異を有すると特徴付けられる、請求項１０８〜１１３のいずれか一項に記載の方法。
- 活性化ＥＧＦＲ変異が、エクソン１９欠失変異、エクソン２１における単一点置換変異Ｌ８５８Ｒ、Ｔ７９０Ｍ点変異及びこれらの組合せからなる群から選択される、請求項１２０に記載の方法。
- 配列番号３３、３５及び３５のＣＤＲセットを含む重鎖可変領域及び配列番号３７、３８及び３９のＣＤＲセットを含む軽鎖可変領域を含む、ｈＢ７−Ｈ３に結合する抗体又はその抗原結合部分。
- ヒト化されている、請求項１２１に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークをさらに含む、請求項１２２に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- ヒトアクセプターフレームワークが、配列番号１５６、１５８、１６６及び１６７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１２３に記載の抗体又はその抗原結合部分。
- 抗体が、２つの重鎖及び２つの軽鎖である４つのポリペプチド鎖を有するＩｇＧである、請求項４９〜９７のいずれか一項に記載のＡＤＣ。
- 構造式（Ｉ）に従うＡＤＣ：
Ｄは、式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）のＢｃｌ−ｘＬ阻害薬であり、
Ｌは、リンカーであり、
Ａｂは、ｈＢ７−Ｈ３抗体であり、ｈＢ７−Ｈ３抗体は、ｈｕＡｂ５ｖ２．５、ｈｕＡｂ５ｖ２．６又はｈｕＡｂ１３ｖ１の重鎖及び軽鎖ＣＤＲを含み、
ＬＫは、リンカーＬを抗体Ａｂと連結している共有結合を表し、
ｍは、１〜２０の範囲の整数である。）
の調製方法であって、
水性溶液中の抗体を有効量のジスルフィド還元剤で、３０〜４０℃で少なくとも１５分間処理し、次いで、抗体溶液を２０〜２７℃に冷却すること、
還元された抗体溶液に、２．１〜２．３１及び２．３４〜２．７２（表Ｂ）の群から選択されるシントンを含む水／ジメチルスルホキシドの溶液を添加すること、
溶液のｐＨを７．５〜８．５のｐＨに調整すること、
反応を４８〜８０時間にわたって進ませて、ＡＤＣを形成すること
を含み、エレクトロスプレー質量分析によって測定すると、スクシンイミドからスクシンアミドへの加水分解ごとに質量が１８±２ａｍｕずつ変わり、
ＡＤＣが、疎水性相互作用クロマトグラフィーによって任意選択的に精製される、方法。 - ｍが２である、請求項１２７に記載の方法。
- 請求項１２７又は１２８に記載の方法によって調製されるＡＤＣ。
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