JPH07165606A - プロテアーゼインヒビターの同定および用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 アルツハイマー病の原因となるβ−アミロイ
ドペプチド(βＡＰ)産生の抑制法を提供すること。 【構成】 式： 【化１】 で示されるアスパルチルプロテアーゼインヒビターを有
効成分とするβＡＰ産生抑制用医薬製剤、該医薬製剤を
投与することを特徴とする、β−アミロイドペプチド
(βＡＰ)産生およびアミロイド斑沈着の抑制法；アルツ
ハイマー病の予防または治療法；βＡＰ関連疾病の予防
または治療法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は細胞におけるβ−アミロ
イドペプチド(βＡＰ)産生の抑制法および抑制用組成物
に関する。さらに詳しくは、本発明はβＡＰの細胞内産
生を抑制しうる細胞プロテアーゼインヒビター、特にア
スパルチルプロテアーゼインヒビターのスクリーニング
および同定、およびβＡＰ産生の抑制法におけるこのよ
うな細胞プロテアーゼインヒビターの利用に関する。

【０００２】

【発明の背景】アルツハイマー病は徐々に激しい精神の
低下を引き起こし、最終的に死に至らせるような記憶、
認識、論考、判断および感情の安定性の進行性損失を臨
床上の特徴とする退行変性脳障害である。アルツハイマ
ー病は老人における進行性精神不全(痴呆)の一般的原因
であり、合衆国においては第４位の死因であると考えら
れている。アルツハイマー病は世界中の人種および民族
にみられ、現在および将来的に大きな公共の健康上の問
題である。合衆国だけで現在約２〜３百万人の人間がこ
の疾病に罹患していると推測される。現在のところ、ア
ルツハイマー病は不治の病であるとされている。

【０００３】アルツハイマー病に罹った個体の脳は神経
単位(ニューロン)の退行変性およびアミロイド斑、血管
のアミロイド性脈管障害および神経原線維のもつれなど
さまざまな特有の障害を示す。一般的に、これらの障
害、特にアミロイド斑および神経原線維のもつれがアル
ツハイマー病患者の記憶および認識機能に重要な脳の領
域の数箇所に多数認められる。臨床上アルツハイマー病
に罹っていない老人のほとんどの脳において、解剖学的
にさらに限定されて分布する少数のこれらの障害が認め
られている。アミロイド斑および血管のアミロイド性脈
管障害はトリソミー２１(ダウン症候群の個体)およびダ
ッチ型アミロイドーシスによる遺伝性脳出血(ＨＣＨＷ
Ａ−Ｄ)を有する個体の脳にも特有である。現在、アル
ツハイマー病の最終的な診断には、この疾病で死亡した
患者の脳組織における前述の障害の観測が要求される
が、まれには侵入的神経外科操作により採取された脳組
織の生検サンプルにおける観測がなされることもある。

【０００４】アルツハイマー病および上述のその他の疾
患に特有のアミロイド斑および血管のアミロイド性脈管
障害の主なタンパク質成分は、β−アミロイドペプチド
(βＡＰ)と呼ばれる約３９〜４３個のアミノ酸からなる
およそ４.２キロダルトン(ｋＤ)のタンパク質である。
βＡＰはβ−アミロイド前駆タンパク質(ＡＰＰ)と呼ば
れる大きな膜スパンニンググリコタンパク質のおよそ３
９〜４３個のアミノ酸断片である。βＡＰはＳＤＳ−ポ
リアルキルアミドゲル電気泳動または高性能液体クロマ
トグラフィー(ＨＰＬＣ)におけるその相対的移動度によ
ってさらに特徴づけられる。βＡＰはアミロイドのコン
ゴレッドおよびチオフラビン−Ｓ色素結合特性ならびに
アップルグリーン複屈折特性を示す繊維ポリマー体で存
在することができる。βＡＰは組織中で非繊維体(“プ
レアミロイド”または“アモルファスあるいは分散沈
殿”)で存在することもでき、この形状においてはコン
ゴレッドによって着色される検出可能な複屈折が存在し
ない。このタンパク質の一部である髄膜血管から得られ
た不溶体が米国特許第４６６６８２９号に記載されてい
る。

【０００５】種々の哺乳類の多くの組織において通常Ａ
ＰＰは細胞で産生される。ＡＰＰはヒト染色体２１の長
いアーム上の遺伝子でコードされる。ＡＰＰをコードす
る遺伝子の構造についての情報から、βＡＰは一種また
は二種以上のこれまでに同定されていないプロテアーゼ
によってＡＰＰから切断されるペプチドフラグメントと
して生じることが解っている。この切断は細胞内的に生
じるように思われる。βＡＰフラグメントがＡＰＰから
分割され、続いて大脳組織および大脳壁ならびに髄膜血
管壁に細胞外的にアミロイド斑として沈着する正確な生
化学的メカニズムは調査中である。色々な系統の証拠か
ら、βＡＰの進行性大脳沈着がアルツハイマー病の発病
において種子のような役割を演じ、年あるいは何十年単
位で認識徴候に先立つものであることが示されている。
セルコー(Selkoe)の「Neuron」６：４８７(１９９１年)参
照。最近、βＡＰが培養で成長させた神経細胞から放出
されること、および正常個体とアルツハイマー病患者の
両方の脳脊髄液(ＣＳＦ)に存在することが明らかになっ
た。スーバート(Seubert)らの「Nature」３５９：３２５
〜３２７(１９９２年)参照。

【０００６】ＡＰＰ遺伝子に起こる、ある遺伝性突然変
異はアルツハイマー病およびアルツハイマー関連身体状
態を引き起こしうる。たとえば、７７０−アミノ酸イソ
体ＡＰＰの７１７アミノ酸におけるミスセンスＤＮＡ突
然変異は、遺伝的に決定された(家族性)アルツハイマー
病を有する幾つかの家族のうち、病気に冒されたメンバ
ーには発見され、冒されていないメンバーには発見され
なかった。ゴウティ(Goate)らの「Nature」３４９：７０
４〜７０６(１９９１年)；チャーティア・ハーラン(Cha
rtier Harlan)らの「Nature」３５３：８４４〜８４６(１
９９１年)；およびマーレル(Murrell)らの「Science」２
５４：９７〜９９(１９９１年)参照。さらに、家族性ア
ルツハイマー病を持つスウェーデン人家族に存在する６
９５−アミノ酸イソ体において、Ｌys₅₉₅−Ｍet₅₉₆がＡ
sp₅₉₅−Ｌeu₅₉₆に突然変異するというスエーデン変異(S
wedish variant)またはスウェーデン突然変異(Swedish
mutation)と呼ばれる二重変異がある。マラン(Mullan)
らの「Nature Genet」１：３４５〜３４７(１９９２年)参
照。

【０００７】遺伝子連結解析により、ＡＰＰにおけるこ
れらの突然変異およびその他の突然変異が、このような
家族のうち病気に冒されたメンバーにおける分子レベル
でのアルツハイマー病の原因であることが証明されてい
る。さらに、７７０−アミノ酸イソ体ＡＰＰの６９３ア
ミノ酸における突然変異がβＡＰ沈着疾病、ＨＣＨＷＡ
−Ｄの原因として同定されており、６９２アミノ酸にお
けるアラニンからグリシンへの変化が、幾らかの患者に
おいてアルツハイマー病に似る表現型を引き起こすが、
それ以外の患者においてはＨＣＨＷＡ−Ｄに似る表現型
を引き起こすように思われる。ユーンキン(Younkin)ら
の「Science」２５９：５１４〜５１６(１９９３年)参
照。

【０００８】アルツハイマー病および他のβＡＰ関連疾
病の根本的なメカニズムの理解が進行しているにもかか
わらず、これらの疾病の治療用組成物および方法を発展
させる必要が残っている。βＡＰの産生を抑制しうる薬
剤に基づいた治療法が有利である。このような薬剤を同
定するために、細胞内βＡＰ産生に対する理解を深め、
特に、切断の原因となる酵素の同定を含むβＡＰタンパ
ク質分解切断通路を理解して、それらに合理的に基づく
スクリーニング法を発展させることが望ましい。そし
て、このようなスクリーニング法によって同定された薬
剤を、インビトロ細胞モデル、アルツハイマー病および
他のβＡＰ関連疾病に罹っている哺乳類およびβ−アミ
ロイド産生およびその抑制の研究に有用な動物モデルに
用い、βＡＰを抑制するために利用することができる。

【０００９】シンハ(Sinha)およびリーバーバーグ(Lieb
erburg)の「Neurodegeneration」１：１６９〜１７５(１
９９２年)およびマークス(Marx)の「Science」２５９：４
５７〜４５８(１９９３年)に、ＡＰＰおよびβＡＰ産生
について論じられている。βＡＰを産生する通路を進行
させる明らかなリソソームＡＰＰがエスタス(Estus)ら
の「Science」２５５：７２６〜７２８およびゴルド(Gold
e)らの「Science」２５５：７２８〜７３０に記載されて
いる。可溶性βＡＰの細胞培養培地への放出がハース(H
aas)らの「Nature」３５９：３２２〜３２５(１９９２年)
およびショージ(Shoji)らの「Science」２５８：１２６〜
１２９(１９９２年)に記載されており、ヒトおよび動物
ＣＳＦへの放出がスーバートらの「Nature」３５９：３２
５〜３２７(１９９２年)に記載されている。シトロン(C
itron)らの「Nature」３６０：６７２〜６７４(１９９２
年)および前述のユーンキンらの文献に記載されている
ように、家族性アルツハイマー病に関連した突然変異Ａ
ＰＰ遺伝子によるヒト細胞系の形質転換が、βＡＰの過
剰産生を引き起こすことが明らかにされている。アルツ
ハイマー病に関連した老人斑においてカテプシンＤなど
の多数のリソソームプロテアーゼが存在することが、カ
タルド(Cataldo)らの「Proc. Natl. Acad. Sci.USA」８
７：３８６１〜３８６５(１９９０年)および「Proc. Nat
l. Acad. Sci. USA」８８：１０９９８〜１１００２(１
９９１年)に記載されている。アスパルチルプロテアー
ゼ(アスパラギン酸プロテアーゼとも呼ばれる)およびア
スパルチルプロテアーゼインヒビターの性質が、タン(T
ang)およびウオン(Wong)の「J. Cell. Biochem.」３３
(１)：５３〜６３(１９８７年)；リッチ(Rich)の「Prote
inase Inhibitors」バレット(Barrett)およびサルベセン
(Salvesen)編,Elsevier SciencePublishers BV,アムス
テルダム(１９８６年)中の“Inhibitors of Aspartic P
roteases"１７９〜２１７頁；およびファン・ノート(va
n Noort)らの「J. Biol. Chem.」２６４：１４１５９〜１
４１６４(１９９２年)に記載されている。

【００１０】

【発明の構成】本発明は有効量のアスパルチルプロテア
ーゼインヒビターを細胞に投与することを特徴とするβ
−アミロイドペプチド(βＡＰ)産生の抑制法を提供す
る。さらに、本発明は有効量のアスパルチルプロテアー
ゼインヒビターを、投与を必要とする哺乳類に投与する
ことを特徴とするβ−アミロイドペプチド(βＡＰ)産生
の抑制法を提供する。さらに、本発明は有効量のアスパ
ルチルプロテアーゼインヒビターを、投与を必要とする
哺乳類に投与することを特徴とするアミロイド斑沈着の
抑制法を提供する。さらにまた、本発明は有効量のアス
パルチルプロテアーゼインヒビターを、投与を必要とす
る哺乳類に投与することを特徴とするアルツハイマー病
の予防または治療法を提供する。さらにまた、本発明は
有効量のアスパルチルプロテアーゼインヒビターを、投
与を必要とする哺乳類に投与することを特徴とするβＡ
Ｐ関連疾病の予防または治療法を提供する。

【００１１】さらに、本発明はアスパルチルプロテアー
ゼインヒビターが式(Ｉ)：

【化１７】 [式中、ｉは１、２、３または４；Ｒ¹はＣ₁〜Ｃ₆アルキ
ル、アリール、シクロヘキシルまたは−Ｓ−Ｒ^1x(ここ
で、Ｒ^1xはアリールまたはシクロヘキシル)；Ｗは

【化１８】 ［ここで、Ｒ^1wおよびＲ^2wは独立して水素、Ｃ₁〜Ｃ₆ア
ルキル、アリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、複素環(Ｃ₁〜Ｃ
₄)アルキル、不飽和複素環(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、あるい
はＲ^1wとＲ^2wがそれらが結合する窒素原子と一緒になっ
て複素環または不飽和複素環を形成(ただし、窒素原子
は４価であってはならない)；ｑは０、１、２、３また
は４；Ｒ^zは水素、ハロ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆
アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルチオまたはアミノであ
る］；あるいはＷは

【化１９】 ［ここで、ｊは１または２；Ｒ^3wは水素、ホルミル、カ
ルバモイルまたは−(Ｂ) _e−Ｘ−Ｒ⁰(ここで、Ｂは−Ｃ
(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)_k−；ｋは０、１または２；ｅは
０または１；Ｘは−(ＣＨ₂)_g−、−(ＣＨ₂)_m−Ｏ−(Ｃ
Ｈ₂)_n−または−(ＣＨ₂)_m−ＮＲ^x−(ＣＨ₂)_n−(ここ
で、ｇは０、１または２；ｍおよびｎは独立して０、１
または２；Ｒ^xは水素またはＣ₁〜Ｃ₄アルキルである)；
Ｒ⁰はＣ₁〜Ｃ₆アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニ
ル、ホルミル、Ｃ₂〜Ｃ₆アルカノイル、アミノ、トリフ
ルオロメチル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルアミノ、ジ(Ｃ₁〜Ｃ₄)
アルキルアミノ、アリール、複素環または不飽和複素環
である）；Ｒ²はそれぞれ独立してアミノ酸側鎖、−Ｃ
Ｈ₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂(ＣＨ₂)₂Ｃ
Ｈ₃、−Ｃ(ＣＨ₃)₃、−ＣＨ₂ＳＯ₂ＮＨ₂、−ＣＨ₂Ｃ
Ｎ、−(ＣＨ₂)_r−Ｘ¹−Ｒ^2a、−(ＣＨ２)_s−Ｃ(Ｏ)ＮＲ
^2bＲ^2cまたは−(ＣＨ₂)_t−Ｓ(Ｏ)_k−[１−Ｎ(Ｒ^2d)−テ
トラゾール−５−イル](ここで、ｒ、ｓおよびｔは独立
して０、１または２；Ｘ¹は単結合、二価の(Ｃ₁〜Ｃ₄)
アルキル、二価の(Ｃ₂〜Ｃ₄)アルケニル、二価の(Ｃ₂〜
Ｃ₄)アルキニル、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ(Ｏ)−、−
Ｃ(Ｏ)ＮＲ^2b−、−ＮＲ^2b−Ｃ(Ｏ)−、−ＮＲ^2b−、−
Ｃ(Ｏ)−、−Ｏ−または−Ｓ(Ｏ)_k−；Ｒ^2aはＣ₁〜Ｃ₆
アルキル、アリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、複素環、複素
環(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、不飽和複素環または不飽和複素
環(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル；Ｒ^2bは水素またはＣ₁〜Ｃ₄アル
キル；Ｒ^2cはアミノ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆ア
ルキル、−(ＣＨ₂)_m−ジ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルアミノ、ア
リール、アリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、複素環、複素環
(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、不飽和複素環または不飽和複素環
(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル；Ｒ^2dは水素、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル、
アリール、不飽和複素環または不飽和複素環(Ｃ₁〜Ｃ₄)
アルキルまたはアリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルである)で
ある］；Ｒは

【化２０】 (ここで、Ａは−ＣＨ₂−または

【化２１】 Ｙはアリールまたは不飽和複素環；Ｙ¹は複素環；Ｒ^4w
は水素またはアミノ；Ｒ^3aは

【化２２】 から選ばれる基；Ｒ^3bは

【化２３】 から選ばれる基(ここで、ｐは４または５；ｌは３、４
または５；Ｒ⁴はそれぞれの位置において独立して水
素、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルまたはヒドロキシ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アル
キル；Ｒ⁵およびＲ⁶は独立して水素、ヒドロキシ、Ｃ₁
〜Ｃ₆アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、アミノ、Ｃ₁〜Ｃ
₄アルキルアミノ、ヒドロキシ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、カ
ルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニル、カルバモイ
ル、Ｎ−(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルカルバモイル、アリール、
複素環または不飽和複素環である)である］である；た
だし、 (１)Ｒが

【化２４】 の場合、Ｗは

【化２５】 Ｒ^3wはホルミル、カルバモイルまたは−(Ｂ)_e−Ｘ−Ｒ⁰
(ここで、ｅは１；およびＢは−Ｃ(Ｏ)−である)； (２)Ｒが

【化２６】 の場合、Ｗは

【化２７】 およびｊは２；および (３)Ｒが

【化２８】 の場合、ｉは１；およびＲ¹はアリール、シクロヘキシ
ルまたは−Ｓ−Ｒ^1x(ここで、Ｒ^1xはアリールまたはシ
クロヘキシルである)である]で示される化合物またはそ
の医薬的に許容しうる塩である前述の方法を提供する。

【００１２】さらに、本発明はアスパルチルプロテアー
ゼが式(ＩＩ)：

【化２９】 [式中、Ｒ⁷はＣ₁〜Ｃ₆アルキル、ホルミルまたはＣ₂〜
Ｃ₆アルカノイル；ｆは１〜６；Ｒ⁸はそれぞれ独立して
アミノ酸残基、スタチンまたはスタチン誘導体である；
ただし、(１)ｆが１の場合、Ｒ⁸はスタチンまたはスタ
チン誘導体でなくてはならず、(２)ｆが２〜６の場合、
−(Ｒ⁸)_f−におけるスタチンおよびスタチン誘導体の合
計数は２を越えてはならない]で示される化合物または
その医薬的に許容しうる塩である前述の方法を提供す
る。

【００１３】さらに、本発明は、 (１)アスパルチルプロテアーゼインヒビターを試験系に
投与し； (２)試験系におけるβＡＰ産生を測定し； (３)試験系におけるβＡＰ産生と、アスパルチルプロテ
アーゼインヒビターを投与していない対照試験系におけ
るβＡＰ産生を比較することからなるβＡＰ産生インヒ
ビターの同定法を提供する。

【００１４】最後に、本発明は (１)アスパルチルプロテアーゼインヒビターを細胞アッ
セイに付し；次いで、 (２)試験動物の体液におけるβＡＰ産生を測定するこ
と；からなるβＡＰ産生インヒビターの同定法を提供す
る。

【００１５】明細書および請求の範囲で用いた用語およ
び語法の定義は下記のとおりである。本発明の分野にお
いて、実際、同じ部分を意味する幾つかの用語が存在す
ることを理解すべきである。本出願の文脈における特定
の用語の使用は、限定であるとみなすべきではない。

【００１６】「β−アミロイドペプチド」(βＡＰ)と
は、アルツハイマー病、ダウン症候群、ダッチ型アミロ
イドーシスによる遺伝性脳出血(ＨＣＨＷＡ−Ｄ)に苦し
む人々の脳および幾らかの正常な老齢の検体において、
アミロイド斑(老人斑)および血管のアミロイド脈管障害
(大脳および髄膜血管における小規模のアミロイド沈着)
を特徴とするアミロイド繊維のサブユニットを形成する
およそ４.２ｋＤのタンパク質を意味する。当業者によ
って使用されたβＡＰの代表的な略語としては、特にＡ
β、ＡβＰおよびβ／Ａ４が挙げられる。培養細胞の細
胞外液中および哺乳類(老人およびアルツハイマー病お
よびβＡＰ関連身体状態になっているヒトなど)の体液
中では、可溶体として認められる。

【００１７】その定義の範囲内において、βＡＰには、
正常遺伝子のβＡＰ領域における突然変異から得られ、
実質的に４３−アミノ酸配列と相同である関連したβＡ
Ｐ配列が含まれる。βＡＰの４３−アミノ酸配列は：

【化３０】 である。

【００１８】「β−アミロイド先駆タンパク質」(ＡＰ
Ｐ)とは、ヒトにおいてその長さのカルボキシル１−３
内にβＡＰを内包する、染色体２１の長いアーム上に位
置する同じ名前の遺伝子によってコードされるポリペプ
チドを意味する。ＡＰＰは、多くの哺乳類組織において
多種多様な細胞中に発現されたグリコシル化された単一
膜スパンニングタンパク質である。ヒトに存在すること
が知られるＡＰＰの特定のイソタイプの例としては、カ
ン(Kang)らの「Nature」３２５：７３３〜７３６に記載さ
れた、正常ＡＰＰと呼ばれる６９５−アミノ酸ポリペプ
チド；ポンテ(Ponte)らの「Nature」３３１：５２５〜５
２７(１９８８年)およびタンジ(Tanzi)らの「Nature」３
３１：５２８〜５３０(１９８８年)に記載された７５１
−アミノ酸ポリペプチド；およびキタグチ(Kitaguchi)
らの「Nature」３３１：５３０〜５３２(１９８８年)に記
載された７７０−アミノ酸ポリペプチドが挙げられる。
ＡＰＰの特異的変異の例には、位置と表現型の両方にお
いて異なることが可能な点変異が含まれる。ハーディ(H
ardy)の「Nature Genet.」１：２３３〜２３４(１９９２
年)参照。

【００１９】細胞内のβＡＰ産生が細胞性プロテアーゼ
によるＡＰＰの切断から得られることが観察されてい
る。細胞内プロテアーゼはアスパルチルプロテアーゼ、
さらに特定するとカテプシンＤであると思われる。さら
に、

【化３１】 [ここで、Ｉvaはイソバレリアン酸、Ｓtaはスタチンで
ある]の配列を有する、公知のカテプシンＤインヒビタ
ーであるペプスタチンが、βＡＰの６個のカルボキシ末
端アミノ酸配列：

【化３２】 と相同であることが観察されている。好ましいカテプシ
ンＤインヒビターとは、少なくとも１個のスタチンまた
はスタチン誘導体(好ましくはアミノ酸４１または４２
と類似する位置に存在する)を含むβＡＰのカルボキシ
末端を模倣する化合物である。それに加えて、好ましい
カテプシンＤインヒビターとは、化合物のカテプシンＤ
抑制能力またはβＡＰ形成抑制能力を強化する薬理学的
特性を有する化合物である。このような薬理学的特性の
例として、経口吸収性、細胞膜または血液脳関門通過能
力などが挙げられる。

【００２０】「ならし培養培地」または「培養培地」と
は、インビトロで成長した細胞を取り囲み、細胞から分
泌されたタンパク質およびペプチドを含有し、その他の
構成成分を混有する水性の細胞外液を意味する。「体
液」とは、測定可能な量のβＡＰおよびβＡＰフラグメ
ントを含む哺乳動物の体液を意味し、特に、血液、ＣＳ
Ｆ、尿および腹腔液が含まれる。「血液」とは、全血
液、および血漿ならびに血清を意味する。「細胞特性」
とは、βＡＰ産生に関連し、調節された培養培地または
体液に認められる構成成分を意味する。代表的な細胞特
性は、βＡＰおよびβＡＰフラグメントおよびその他の
βＡＰ処理中間体などである。

【００２１】「スウェーデン突然変異」とは、遺伝した
家族性のアルツハイマー病の原因となる、ＡＰＰをコー
ドするヒト遺伝子における突然変異を意味する。突然変
異は正常ＡＰＰ遺伝子のＬys₅₉₅−Ｍet₅₉₆で生じ、そこ
でＡsn₅₉₅−Ｌeu₅₉₆への置換が起こる。この突然変異に
感染したヒト細胞系はβＡＰを過剰産生し、そのβＡＰ
を調節された培養培地に分泌することが解っている。β
ＡＰを産生するように細胞系を感染させるために使用し
うるようなＡＰＰ遺伝子の他の家族性突然変異が公知で
ある。ハーディ(前述)参照。

【００２２】「Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル」とは、１〜６個の炭
素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルを意味する。
代表的なＣ₁〜Ｃ₆アルキル基としては、メチル、エチ
ル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、se
c−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、neo−ペンチル、ヘ
キシルなどが挙げられる。「Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル」には、
その定義の中に「Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル」も含まれる。「二
価(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル」とは、炭素数１〜４個の直鎖ま
たは分枝鎖二価アルキルを意味する。代表的な二価(Ｃ₁
〜Ｃ₄)アルキルとしては、メチレン、エチレン、プロピ
レン、２−メチルプロピレン、ブチレンなどが挙げられ
る。

【００２３】「ハロ」とは、クロロ、フルオロ、ブロモ
またはヨードを意味する。「ハロ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル」
とは、炭素に結合する１、２または３個のハロゲン原子
を有する炭素数１〜４の直鎖または分枝鎖アルキルを意
味する。代表的なハロ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル基としては、
クロロメチル、２−ブロモエチル、１−クロロイソプロ
ピル、３−フルオロプロピル、２,３−ジブロモブチ
ル、３−クロロイソブチル、ヨード−ｔ−ブチル、トリ
フルオロメチルなどが挙げられる。「Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル
チオ」とは、炭素に結合する１個の硫黄原子を有する炭
素数１〜６の直鎖または分枝鎖アルキルを意味する。代
表的なＣ₁〜Ｃ₆アルキルチオ基としては、メチルチオ、
エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチル
チオなどが挙げられる。「Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルチオ」に
は、その定義内に「Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルチオ」が含まれ
る。

【００２４】「Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルアミノ」とは、炭素に
結合する１個のアミノ基を有する炭素数１〜４の直鎖ま
たは分枝鎖アルキルを意味する。代表的なＣ₁〜Ｃ₄アル
キルアミノ基としては、メチルアミノ、エチルアミノ、
プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、
sec−ブチルアミノなどが挙げられる。「ジ(Ｃ₁〜Ｃ₄)
アルキルアミノ」とは、炭素に結合する１個のアミノ基
をそれぞれ独立して有する２本の炭素数１〜４のアルキ
ル鎖からなる直鎖または分枝鎖ジアルキルアミノを意味
する。代表的なジ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルアミノ基として
は、ジメチルアミノ、エチルメチルアミノ、メチルイソ
プロピルアミノ、ｔ−ブチルイソプロピルアミノ、ジ−
ｔ−ブチルアミノなどが挙げられる。

【００２５】「Ｃ₂〜Ｃ₆アルカノイル」とは、カルボニ
ル部分に結合する１〜５個の炭素原子を有する直鎖また
は分枝鎖アルキルを意味する。代表的なＣ₂〜Ｃ₆アルカ
ノイル基としては、エタノイル、プロパノイル、イソプ
ロパノイル、ブタノイル、ｔ−ブタノイル、ペンタノイ
ル、ヘキサノイル、３−メチルペンタノイルなどが挙げ
られる。「Ｎ−(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルカルバモイル」と
は、カルバモイル部分の窒素原子に結合する１〜４個の
炭素原子を有する直鎖または分枝鎖アルキルを意味す
る。代表的なＮ−(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルカルバモイル基と
しては、Ｎ−メチルカルバモイル、Ｎ−エチルカルバモ
イル、Ｎ−プロピルカルバモイル、Ｎ−イソプロピルカ
ルバモイル、Ｎ−ブチルカルバモイル、Ｎ−ｔ−ブチル
カルバモイルなどが挙げられる。

【００２６】「複素環」とは、飽和し、炭素原子および
窒素、酸素または硫黄から選ばれる１〜３個のヘテロ原
子からなる非置換または置換の安定な５〜７員単環式ま
たは７〜１０員の二環式複素環基を意味し、窒素および
硫黄原子は要すれば酸化されていてもよく、窒素原子は
要すれば四価になっていてもよい。複素環基は、安定な
構造が得られるようないずれのヘテロ原子あるいは炭素
原子においても結合しうる。複素環は非置換であるかま
たは独立してハロ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、
Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、カルボキシ、
Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニル、カルバモイルまたはア
ミノから選ばれる１、２または３個の置換基で置換され
る。

【００２７】「不飽和複素環」とは、１個または２個以
上の二重結合を有し、炭素原子および窒素、酸素または
硫黄から選ばれる１〜３個のヘテロ原子からなる非置換
または置換の安定な５〜７員単環式または７〜１０員の
二環式複素環基を意味し、窒素および硫黄原子は要すれ
ば酸化されていてもよく、窒素原子は要すれば四価にな
っていてもよい。不飽和複素環基は、安定な構造が得ら
れるようないずれのヘテロ原子あるいは炭素原子におい
ても結合しうる。不飽和複素環は非置換であるかまたは
独立してハロ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、Ｃ₁
〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、カルボキシ、Ｃ₁
〜Ｃ₄アルコキシカルボニル、カルバモイルまたはアミ
ノから選ばれる１、２または３個の置換基で置換されて
いる。

【００２８】このような複素環または不飽和複素環の例
としては、ピペリジニル、ピペラジニル、アゼピニル、
ピロリル、４−ピペリジニル、ピロリジニル、ピラゾリ
ル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、
イミダゾリジニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニ
ル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、
イソキサゾリル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、
チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、キヌク
リジニル、イソチアゾリジニル、インドリル、キノリニ
ル、イソキノリニル、ベンズイミダゾリル、チアジアゾ
リル、ベンソピラニル、ベンゾチアゾリル、フリル、テ
トラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、チエニル、
ベンゾチエニル、チアモルホリニル、チアモルホリニル
スルホキシド、チアモルホリニルスルホン、オキサジア
ゾリル、チアゾリル、テトラヒドロキノリニル、テトラ
ヒドロイソキノリニル、３−メチルイミダゾリル、３−
メトキシピリジル、４−クロロキノリニル、４−アミノ
チアゾリル、８−メチルキノリニル、６−クロロキノキ
サリニル、３−エチルピリジル、６−メトキシベンズイ
ミダゾリル、４−ヒドロキシフリル、４−メチルイソキ
ノリニル、６,８−ジブロモキノリニル、４,８−ジメチ
ルナフチル、２−メチル−１,２,３,４−テトラヒドロ
イソキノリニル、Ｎ−メチルキノリン−２−イル、２−
ｔ−ブトキシカルボニル−１,２,３,４−イソキノリン
−７−イルなどが挙げられる。

【００２９】「アリール」とは、非置換であるかまたは
独立してハロ、ヒドロキシ、トリフルオロメチル、Ｃ₁
〜Ｃ₄アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシ、カルボキシ、Ｃ₁
〜Ｃ₄アルコキシカルボニル、カルバモイル、アミノま
たはモルホリノ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルコキシから選ばれる１、
２または３個の置換基で置換されている置換フェニルま
たはナフチル環を表す。代表的なアリール基としては、
４−メチルフェニル、３−エチルナフチル、２,５−ジ
メチルフェニル、８−クロロナフチル、３−アミノナフ
チル、４−カルボキシフェニルなどが挙げられる。「ア
ミノ酸側鎖」とは、カルボキシル基およびアミノ基とも
結合しているα−炭素原子に結合した特殊な原子または
基を表す。これらの側鎖は２０種の天然に存在するアミ
ノ酸から選ばれる。

【００３０】「アミノ酸残基」とは、その定義内に天然
に存在するアミノ酸および対応する位置異性体およびそ
の変異体が包含される。代表的な位置異性体およびその
変異体としては、２−アミノアジピン酸(Ａａｄ)、３−
アミノアジピン酸(ｂＡａｄ)、β−アラニン(ｂＡｌ
ａ)、２−アミノ酪酸(Ａｂｕ)、４−アミノ酪酸(４Ａｂ
ｕ)、６−アミノカプロン酸(Ａｃｐ)、２−アミノヘプ
タン酸(Ａｈｅ)、２−アミノイソ酪酸(Ａｉｂ)、３−ア
ミノイソ酪酸(ｂＡｉｂ)、２−アミノピメリン酸(Ａｐ
ｍ)、２,４−ジアミノ酪酸(Ｄｂｕ)、デスモシン(Ｄｅ
ｓ)、２,２’−ジアミノピメリン酸(Ｄｐｍ)、２,３−
ジアミノプロピオン酸(Ｄｐｒ)、Ｎ−エチルグリシン
(ＥｔＧｌｙ)、Ｎ−エチルアスパラギン(ＥｔＡｓｎ)、
ヒドロキシリシン(Ｈｙｌ)、アロヒドロキシリシン(ａ
Ｈｙｌ)、３−ヒドロキシプロリン(３Ｈｙｐ)、４−ヒ
ドロキシプロリン(４Ｈｙｐ)、イソデスモシン(Ｉｄ
ｅ)、アロイソロイシン(ａｌｌｅ)、Ｎ−メチルグリシ
ン(ＭｅＧｌｙ)、Ｎ−メチルイソロイシン(ＭｅＩｌ
ｅ)、Ｎ−メチルリシン(ＭｅＬｙｓ)、ノルバリン(Ｎｖ
ａ)、ノルロイシン(Ｎｌｅ)、オルニチン(Ｏｒｎ)、シ
アノアラニン(ＣＡ)、γ−カルボキシグルタメート、Ｏ
−ホスホセリン、α−ナフチルアラニン(ＮＡ)、β−ナ
フチルアラニン(ｂＮＡ)、Ｓ−ガラクトシルシステイ
ン、グリシンアミド、Ｎ−ホルミルメチオニン、チロシ
ン−Ｏ−硫酸塩などが挙げられる。これらのアミノ酸残
基はＤ配置またはＬ配置のいずれであってもよい。本明
細書では、特記しない限り、アミノ酸の引用はＬ配置を
指すものとする。

【００３１】「プロテアーゼ」とは、タンパク質基質に
おいて、ペプチド結合を弱めるかまたは破壊するタンパ
ク質分解酵素を意味する。「リソソームプロテアーゼ」
とは、細胞性リソソームにおいて特徴的に発見されるプ
ロテアーゼを意味する。「アスパルチルプロテアーゼ」
は、通常酸性条件下で作用するペプシンファミリーのタ
ンパク質分解酵素の一群を定義するために用いる。アス
パルチルプロテアーゼの存在は、胃などの身体の特定の
場所および細胞性リソソームに限定されることが多い。
アスパルチルプロテアーゼはＥＣ３.４.２３に分類され
る。本発明に特に興味深いことは、カテプシンＤが細胞
性リソソームで作用するアスパルチルプロテアーゼであ
るということである。カテプシンＤを含め、アスパルチ
ルプロテアーゼの性質および作用がタンおよびウォンの
文献(前述)に記載されている。この文献の全記載内容は
本明細書の参考文献である。

【００３２】「プロテアーゼインヒビター」とは、プロ
テアーゼの作用を阻害する化合物、分子または基質のい
ずれをも意味する。特に、本発明の細胞性プロテアーゼ
インヒビターは、ＡＰＰの細胞内切断によるβＡＰの産
生において必要あるいは原因である細胞性プロテアーゼ
の作用を阻害する。同様に、アスパルチルプロテアーゼ
インヒビターは、ＡＰＰの細胞内切断によるβＡＰの産
生において必要あるいは原因であるアスパルチルプロテ
アーゼの作用を阻害し、カテプシンＤインヒビターはカ
テプシンＤの作用を阻害する。最初にβＡＰ産生の原因
となる細胞性プロテアーゼはアスパルチルプロテアー
ゼ、さらに言えばカテプシンＤであると思われる。適当
なアスパルチルプロテアーゼインヒビターを、本発明の
選択法にしたがって選択してもよい。一般にアスパルチ
ルプロテアーゼインヒビター、特にカテプシンＤについ
て、リッチの「Inhibitors of Aspartic Proteinase」
(前述)に議論されている。この文献の全記載内容は本明
細書の参考文献である。

【００３３】「スタチン誘導体」とは、式：

【化３３】 [式中、ｉおよびＲ¹の定義は化合物(Ｉ)と同意義であ
る]で示される化合物をいう。スタチン(Ｓｔａ)は上記
式において、ｉが１であり、Ｒ¹がイソプロピルである
化合物である。４−アミノ−３−ヒドロキシ−５−フェ
ニルペンタン酸残基(ＡＨＰＰＡ)は上記式において、ｉ
が１であり、Ｒ¹がフェニルである化合物である。

【００３４】好ましいアスパルチルプロテアーゼインヒ
ビターはカテプシンＤインヒビターである。好ましいカ
テプシンＤインヒビターは化合物(Ｉ)および(ＩＩ)であ
る。前記化合物(Ｉ)および(ＩＩ)における変数のすべて
の組み合わせは、カテプシンＤなどのアスパルチルプロ
テアーゼを阻害する能力を持つ化合物を提供するけれど
も、特にこのような用途に好ましい化合物がある。

【００３５】本発明化合物(Ｉ)において、好ましい化合
物は：ｉが１；Ｒ¹が−ＣＨ(ＣＨ₃)₂またはフェニル；
Ｗが

【化３４】 (ここで、Ｒ^3wは水素または−Ｂ−Ｘ−Ｒ⁰(ここで、Ｂ
は−Ｃ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)₂；Ｘは−(ＣＨ₂)_g−また
は−(ＣＨ₂)_m−Ｏ−(ＣＨ₂)_n−(ここでｇは０；ｍおよ
びｎは独立して０、１または２である)；Ｒ⁰はＣ₁〜Ｃ₆
アルキル、アリールまたは不飽和複素環である)；Ｒ²は
アミノ酸側鎖、−ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−
ＣＨ₂(ＣＨ₂)₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂ＣＮまたは−ＣＨ₂−Ｒ^2a
(ここで、Ｒ^2aはアリールである)；Ｒが

【化３５】 (ここで、Ｒ^4wはアミノ；Ｙはフェニル；およびＲ^3aは
−Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ｔ−ブチルである)である；ただし、Ｒが

【化３６】 の場合、ｊが２である化合物またはその医薬的に許容し
うる塩である。

【００３６】これらの好ましい化合物(Ｉ)のうち、特に
好ましい化合物は：Ｂが−Ｃ(Ｏ)−；ｍが１；Ｒ⁰がメ
チル、フェニル、ピリジルまたはキノリニル；Ｒ²が−
ＣＨ(ＣＨ₃)₂、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃または−ＣＨ₂−Ｒ^2a
(ここで、Ｒ^2aはナフチル)；およびＲが

【化３７】 (ここで、Ｒ^4wはアミノ)である化合物またはその医薬的
に許容しうる塩である。

【００３７】最も好ましい化合物(Ｉ)は：

【化３８】 またはその医薬的に許容しうる塩である。

【００３８】上記のとおり、好ましいカテプシンＤイン
ヒビターには、好ましくはβＡＰのカルボキシ末端の４
１番または４２番のアミノ酸と相同の位置に、少なくと
も１個のスタチンまたはスタチン誘導体を持つβＡＰの
カルボキシ末端を模倣する化合物が含まれる。したがっ
て、好ましい化合物(ＩＩ)はｆが３または４の化合物ま
たはその医薬的に許容しうる塩である。これらの好まし
い化合物(ＩＩ)のうち、式：

【化３９】 [式中、ｆは１または２；Ｒ⁸はそれぞれ独立してアミノ
酸残基；(Ｒ⁸)'はＩｌｅ、スタチンまたはスタチン誘導
体；(Ｒ⁸)"はＡｌａ、スタチンまたはスタチン誘導体；
ただし、すくなくとも１個の(Ｒ⁸)'および(Ｒ⁸)"がスタ
チンまたはスタチン誘導体でなければならない]で示さ
れる化合物またはその医薬的に許容しうる塩が、さらに
好ましい。これらの好ましい化合物(ＩＩ)のうち、式：

【化４０】 で示される化合物またはその医薬的に許容しうる塩が、
最も好ましい。

【００３９】本発明方法に使用したペプチド性化合物
(Ｉ)および(ＩＩ)は、段階固相ペプチド合成法である標
準的メリフィールド法を用いて合成してもよい。保護ア
ミノ酸の製造、クロマトグラフィー、ニンヒドリン試験
などの詳細な説明は、スチュワート(Stewart)およびヤ
ング(Young)の「固相ペプチド合成第２版」(ピアス・ケミ
カル・カンパニー(Pierce Chemical Company),１９８４
年)で見ることができる。最初の保護アミノ酸をｐ−メ
チルベンズヒドリルアミン樹脂などの樹脂にカップリン
グさせることからペプチド合成は出発する。約１〜約４
当量、好ましくは２.５当量のｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸を
樹脂に添加することにより各ｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸の付
加が遂行される。代表的には、ｔ−Ｂｏｃ−Ｓｔａまた
はｔ−Ｂｏｃ−ＡＨＰＰＡの付加において、１〜約１.
５当量、好ましくは１.２５当量が用いられた。フー(Hu
i)らの「J. Med. Chem.」３０：１２８７〜１２９５(１９
８７年)およびボウガー(Boger)らの「J. Med. Chem.」２
８：１７７９(１９８５年)の教示に従って、ｔ−Ｂｏｃ
−Ｓｔａ、ｔ−Ｂｏｃ−ＡＨＰＰＡおよび他のスタチン
誘導体を実質上生産することができる。この操作は後記
実施例３６〜４８に詳述する。

【００４０】ニンヒドリン試験を用いて遊離アミノ酸の
存在を検出することができる。エタノール(ＥｔＯＨ)な
どのアルコール中の７０％フェノール溶液をペプチド／
樹脂混合物のサンプルに一滴加え、次いでピリジン溶液
(０.０００２Ｍシアン化カリウム(ＫＣＮ)含有)を一滴
加え、さらにニンヒドリン溶液(０.２８Ｍエタノール溶
液)を一滴加えることによりニンヒドリン試験を行う。
次に、得られる試験混合物を１１０℃で２分間加熱す
る。青色または焦茶色が、遊離アミノ基の存在を指示
し、明黄色が遊離アミノ基の無いことを指示する。

【００４１】別法として、最初に少量のアリコートのペ
プチド／樹脂混合物を５％トリエチルアミン(Ｂｔ₃Ｎ)
／塩化メチレン(ＣＨ₂Ｃｌ₂)で２回洗浄し、次いでＣＨ
₂Ｃｌ₂で３回洗浄し、次いで混合物を減圧濃縮して固体
乾燥樹脂を得ることによりニンヒドリン試験を行うこと
ができる。試験管中でこの固体２〜５mgをＫＣＮ(０.１
ml)(アンバーライトＭＢ−３で処理してアンモニアを除
去したもの)、ニンヒドリン(０.０４ml)およびフェノー
ル(０.０５ml)(これもアンバーライトＭＢ−３で処理)
と合わせる。得られる溶液を１００℃で約１０分間加熱
し、次いで冷水(Ｈ₂Ｏ)で冷却し、６０％ＥｔＯＨ(１m
l)を加える。得られた溶液を混合し、ガラスウール栓で
濾過する。試験管を０.５Ｍ塩化テトラエチルアンモニ
ウム／ＣＨ₂Ｃｌ₂(０.２ml)で２回すすぎ、次いで合わ
せた濾液と洗液に、６０％ＥｔＯＨ溶液(２ml)を加えて
希釈する。試薬ブランクに対する５７０nmにおける吸光
度を読み取る。明黄色が高パーセンテージでカップリン
グが行われたことを指示する。ニンヒドリン試験はスチ
ュワートおよびヤング(前述)およびカイザー(Kaiser)ら
の「Anal. Biochem.」３４：５９５(１９７０年)を応用
して行う。

【００４２】化合物(Ｉ)またはその前駆体は公知の操作
を用いて製造することができる。個々の反応において特
記しない限り、使用する溶媒が進行中の反応に対して不
活性であり、所望の反応を遂行するように反応物が十分
に溶解しさえすれば、溶媒の選択は決定的なものではな
い。さらに詳しくは、式(Ｉ)：

【化４１】 [式中、Ｗは

【化４２】 Ｒは

【化４３】 およびＲ¹、Ｒ^3w、Ｒ²、ｉおよびｊは前記と同意義であ
る]で示される化合物を次の反応式Ｉによって製造する
ことができる。

【００４３】

【化４４】 [ここで、Ｊはハライド、メタンスルホン酸塩、ベンゼ
ンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酢酸塩ま
たはトリフルオロ酢酸塩；およびＷ、Ｒ^3w、Ｒ²、ｉ、
ｊおよびＲ¹は前記と同意義である]

【００４４】上記反応式Ｉはカップリング剤の存在下お
よび反応促進剤の存在または不在下(反応促進剤が存在
するのが好ましい)に化合物(Ｉａ)を化合物(Ｗ−ＯＨ)
とカップリングさせることにより行うことができる。カ
ルボン酸反応物はオキシラン反応物に対して、通常約等
モル比から約３モル過剰の範囲(約２モル過剰が好まし
い)の分量で使用する。カップリング試薬はカルボン酸
反応物に対して、通常約等モル比からわずかに過剰量の
範囲の分量で使用する。この工程で用いるのに適当な溶
媒の代表例としては、ジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)ま
たはテトラヒドロフラン(ＴＨＦ)またはＤＭＦ／ＴＨＦ
混合物が挙げられる。約−１５℃〜混合物の還流温度の
範囲の温度で反応を行った場合、反応は通常約１〜７２
時間後に実質的に完了する。反応は約０℃〜約３０℃の
範囲の温度で、約２４〜４８時間行うのが好ましい。好
ましい反応促進剤はヒドロキシベンゾトリアゾール水和
物(ＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ)である。カップリング試薬の代表
例としては、Ｎ,Ｎ'−ジエチルカルボジイミド、ジシク
ロヘキシルカルボジイミド(ＤＣＣ)などのカルボジイミ
ド；カルボニルジイミダゾールなどのイミダゾール；な
らびに１−ヒドロキシベンゾトリアールメシレート、Ｎ
−エトキシカルボニル−２−エトキシ−１,２−ジヒド
ロキノリン(ＥＥＤＱ)、ヘキサフルオロリン酸ベンゾト
リアゾール−１−イルオキシトリス(ジメチルアミノ)ホ
スホニウム(ＢＯＰ)、ヘキサフルオロリン酸ｏ−ベンゾ
トリアザ−１−イル−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウ
ラニウム(ＨＢＴＵ)およびヘキサフルオロリン酸ベンゾ
トリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニ
ウム(ＰｙＢＯＰ)などの試薬が挙げられる。好ましいカ
ップリング剤はＢＯＰである。後記実施例１において反
応式Ｉを実証する。反応が完了すれば、濾過、あるいは
反応溶媒の抽出除去、蒸発または傾瀉などの公知の方法
で生成物を単離することができる。要すれば、結晶化ま
たはシリカゲルまたはアルミナなどの固体担体クロマト
グラフィーなどの一般的技術によって生成物をさらに精
製してもよい。

【００４５】上記反応式Ｉで用いた化合物(Ｉａ)は下記
の反応工程式ＩＡにより製造することができる。

【化４５】

【化４６】

【化４７】

【００４６】上記反応工程式ＩＡは反応１〜７を順次行
うことによって遂行される。ひとつの反応が完了すれ
ば、中間体化合物を前述の公知の操作を用いて単離およ
び／または精製することができる。製造例１において反
応工程式ＩＡを実証する。反応ＩＡ.１では、相互不活
性溶媒中で２,２−ジメチル−４,５−ジオキシラン−
１,３−ジオキソランと式：Ｒ−(ＣＨ₂)_i-1−Ｚ(ここ
で、Ｚはハロゲン化マグネシウムまたはリチウムであ
る)で示される求核性試薬を合わせることにより反応を
行う。ヨウ化第一銅(ＣｕＩ)または臭化第一銅(ＣｕＢ
ｒ)などの銅塩で触媒することにより、より良い結果が
得られる。求核性試薬はオキシラン反応物に対して、通
常約等モル比から約２モル過剰の範囲(約０.５モル過剰
が好ましい)の分量で使用する。この反応で用いるのに
適当な溶媒の代表例としては、ジエチルエーテル(Ｅｔ₂
Ｏ)またはＴＨＦが挙げられる。約−４０℃〜約１０℃
の範囲の温度で反応を行った場合、反応は通常約１〜２
４時間後に実質的に完了する。反応は約−５℃〜約５℃
の範囲の温度で、約２〜６時間行うのが好ましい。

【００４７】反応ＩＡ.２では、相互不活性溶媒中で反
応ＩＡ.１で製造した化合物と塩化メタンスルホニルを
合わせることにより反応を行う。塩化メタンスルホニル
は、通常約等モル比から約３モル過剰の塩化メタンスル
ホニル反応物となる範囲(約２モル過剰が好ましい)の分
量で使用する。要すれば、２,６−ルチジンまたはトリ
アルキルアミン(Ｅｔ₃Ｎまたはジイソプロピルエチルア
ミンなど)などの塩基を加えて反応を促進することがで
きる。この反応に好ましい塩基はトリアルキルアミン、
特にＥｔ₃Ｎである。この反応で用いるのに適当な溶媒
の代表例としては、ＣＨ₂Ｃｌ₂またはクロロホルム(Ｃ
ＨＣｌ₃)などの中性有機溶媒が挙げられる。約０℃〜反
応混合物の還流温度の範囲の温度で反応を行った場合、
反応は通常約１５分〜２４時間後に実質的に完了する。
反応は約１５℃〜約３０℃の範囲の温度で、約１５分〜
４時間行うのが好ましい。

【００４８】反応ＩＡ.３では、相互不活性溶媒中で反
応ＩＡ.２で製造した化合物とアジドイオンを合わせる
ことにより反応を行う。この反応で使用するアジドイオ
ンは、アルカリ金属アジド(たとえばリチウムアジド)な
どの無機塩またはテトラメチルグアニジニウムアジドな
どの有機塩から得ることができる。アジドイオンは、通
常約等モル比から約３モル過剰のアジドイオンの範囲
(約２モル過剰が好ましい)の分量で使用する。２,６−
ルチジンなどの塩基を加えることにより収量が増加す
る。この反応で用いるのに適当な溶媒の代表例として
は、ヘキサメチルリン酸トリアミド(ＨＭＰＡ)、ＤＭＦ
またはＮ,Ｎ'−ジメチルプロピレンウレア(ＤＭＰＵ)な
どの有機溶媒が挙げられる。約０℃〜反応混合物の還流
温度の範囲の温度で反応を行った場合、反応は通常約１
〜２４時間後に実質的に完了する。反応は約２５℃〜約
１００℃の範囲の温度で、約４〜１２時間行うのが好ま
しい。

【００４９】反応ＩＡ.４では、メタノール(ＭｅＯＨ)
またはエタノール(ＥｔＯＨ)などのアルコール溶媒中で
反応ＩＡ.３で製造した化合物と強酸を合わせることに
より反応を行う。この反応で用いるのに適当な酸の代表
例としては、塩酸(ＨＣｌ)または臭化水素酸(ＨＢｒ)な
どのハロゲン化水素酸、硫酸(Ｈ₂ＳＯ₄)などが挙げられ
る。好ましい酸はハロゲン化水素酸、特にＨＣｌであ
る。酸は、通常約１０モル過剰から約２０モル過剰の酸
反応物の範囲の分量で使用する。約０℃〜約４０℃の範
囲の温度で反応を行った場合、反応は通常約１〜２４時
間後に実質的に完了する。反応は約２０℃〜約３０℃の
範囲の温度で、約２〜４時間行うのが好ましい。

【００５０】反応ＩＡ.５では、反応ＩＡ.４で製造した
化合物を塩化メタンスルホニル反応物に対して、通常約
等モル比から約１モル過剰の範囲の分量で使用する以外
は、塩化メタンスルホニルと反応ＩＡ.４で製造した化
合物を用い、反応ＩＡ.２と同様の方法で行う。反応Ｉ
Ａ.６では、塩基触媒環形成（好ましくは適当な溶媒中
で反応ＩＡ.５で製造した化合物とアルコキシドイオン
を合わせる）を行うことによりオキシラン環を形成す
る。アルコキシドイオンは、アンモニウムまたはアルカ
リ金属アルコキシドなどから得ることができる。この反
応に好ましいアルコキシドイオンはナトリウムメトキシ
ド(ＮａＯＭｅ)およびカリウムメトキシド(ＫＯＭｅ)で
ある。この工程で用いるのに適当な溶媒の代表例として
は、ＭｅＯＨまたはＴＨＦなどの有機溶媒が挙げられ
る。約０℃〜約４０℃の範囲の温度で反応を行った場
合、反応は通常約１〜１２時間後に実質的に完了する。
反応は約２０℃〜約３０℃の範囲の温度で、約１〜２時
間行うのが好ましい。

【００５１】反応ＩＡ.７では、触媒水素添加（好まし
くは酢酸(ＨＯＡｃ)およびパラジウム−炭素触媒(Ｐｄ
／Ｃ)の存在下に反応ＩＡ.６で製造した化合物と水素ガ
ス(Ｈ₂)を合わせる）を行うことにより、アジド置換基
を対応アミンへ還元する。この反応で用いるのに適当な
溶媒の代表例としては、酢酸エチル(ＥｔＯＡｃ)などの
有機溶媒が挙げられる。約０℃〜約４０℃の範囲の温度
で反応を行った場合、反応は通常約１〜２４時間後に実
質的に完了する。反応は約２０℃〜約３０℃の範囲の温
度で、約２〜５時間行うのが好ましい。

【００５２】別法として、水性ＨＯＡｃの存在下に反応
ＩＡ.６で製造した化合物とトリアルキルホスフィンま
たはトリアリールホスフィンを合わせることにより、ア
ジド置換基を対応アミンへ還元してもよい。好ましいホ
スフィン反応物はトリブチルホスフィンである。この反
応で用いるのに適当な溶媒の代表例としては、１０％の
Ｈ₂Ｏを含有するＥｔＯＡｃ／アセトニトリル(ＣＨ₃Ｃ
Ｎ)などの混合物が挙げられる。約０℃〜約４０℃の範
囲の温度で反応を行った場合、反応は通常約１〜１２時
間後に実質的に完了する。反応は約２０℃〜約３０℃の
範囲の温度で、約０.５〜２時間行うのが好ましい。

【００５３】Ｗが

【化４８】 Ｒが

【化４９】 、およびＲ¹、Ｒ^3w、Ｒ²、ｉおよびｊが前記と同意義で
ある化合物(Ｉ)を次の反応式ＩＩにより製造することが
できる。

【化５０】 [ここで、Ｊはハライド、メタンスルホン酸塩、ベンゼ
ンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酢酸塩ま
たはトリフルオロ酢酸塩；およびＷ、Ｒ^3w、Ｒ²、ｊ、
ｉおよびＲ¹は前記と同意義である]

【００５４】上記反応式ＩＩは、反応式Ｉで詳述したよ
うに、カップリング剤の存在下および反応促進剤の存在
または不在下に化合物(Ｉａ')を化合物(Ｗ−ＯＨ)とカ
ップリングさせることにより行うことができる。後記実
施例３３〜３５において反応式ＩＩを実証する。別法と
して、上記反応式Ｉで製造したエポキシド化合物を水性
酸性条件下に置くことにより、これらのジオールを製造
してもよい。また、これらのジオールはエポキシド反応
の副産物として単離できる。

【００５５】上記反応式ＩＩで用いた式(Ｉａ')：

【化５１】 で示される化合物は、上記反応ＩＡ.７で詳述したよう
に、反応ＩＡ.４で製造したアジド中間体を還元するこ
とにより製造することができる。後記製造例１２におい
てこの操作を実証する。

【００５６】Ｗが

【化５２】 であり、ｊが２である化合物Ｗ−ＯＨは、上記反応式Ｉ
で詳述した操作に従って、最初、一般式：Ｈ₂Ｎ−ＣＨ
(Ｒ²）−ＣＯＯＨで示される２つのアミノ酸(ここで、
それぞれのＲ²は独立して前記化合物(Ｉ）で定義したＲ
²置換基のひとつである）をカップリングさせることに
より製造することができる。

【００５７】次いで、公知の操作を用いてアミノ保護基
を除去し、得られるジペプチド化合物をアシル化するか
または化合物とカップリングして式：

【化５３】 で示される化合物を得る。この第２のカップリング反応
式は、反応式Ｉで詳述した操作に従って行うことができ
る。アシル化は、適当なハロゲン化アシル、イソシアン
酸アシルまたはクロロギ酸アシルで、好ましくは第３ア
ミンなどの酸スカベンジャー(Ｅｔ₃Ｎが好ましい）の存
在下に行うことができる。アシル化反応は約−２０℃〜
約２５℃の温度で行う。この反応に用いる代表的な溶媒
は、エーテルおよび塩素化炭化水素であり、Ｅｔ₂Ｏ、
ＣＨＣｌ₃またはＣＨ₂Ｃｌ₂が好ましい。

【００５８】化合物Ｗ−ＯＨは、適当に置換されたカル
ボキシ保護アミノ酸をトリホスゲンと反応させ、次いで
得られる化合物を化合物Ｒ^3w−Ｈ(ここで、Ｒ^3wは前記
と同意義）と反応させることによっても製造することが
できる。後記製造例２においてこの操作を実証する。最
初に、相互不活性溶媒中でカルボキシ保護アミノ酸反応
物をトリホスゲンと合わせる。カルボキシ保護アミノ酸
反応物はトリホスゲンに対して、通常約等モル比から約
２モル過剰の範囲(約１モル過剰が好ましい)の分量で使
用する。塩基、たとえばＥｔ₃Ｎまたはジイソプロピル
エチルアミンなどのトリアルキルアミンを加えて反応を
促進する。この反応に用いるのに適当な溶媒の代表例
は、トルエンなどの有機溶媒である。約２５℃〜反応混
合物の還流温度の範囲の温度で反応を行った場合、反応
は通常約６〜２４時間後に実質的に完了する。反応は約
８０℃〜反応混合物の還流温度の範囲の温度で、約８〜
１２時間行うのが好ましい。

【００５９】次に、相互不活性溶媒中で得られた化合物
を化合物Ｒ^3w−Ｈと合わせる。ＣｕＩまたはＣｕＣｌな
どの銅塩で触媒することにより、より良い結果が得られ
る。該得られた化合物は化合物Ｒ^3w−Ｈに対して、通常
約等モル比から約１モル過剰の範囲の分量で使用する。
この反応で用いるのに適当な溶媒の代表例としては、Ｄ
ＭＦまたはＣＨ₃ＣＮなどの有機溶媒が挙げられる。約
１０℃〜約４０℃の範囲の温度で反応を行った場合、反
応は通常約１５分〜３時間後に実質的に完了する。反応
は約１５℃〜約３０℃の範囲の温度で、約１５分〜２時
間行うのが好ましい。

【００６０】得られた化合物のカルボキシ基を、エステ
ル加水分解などの公知の操作を用いて脱保護し、対応す
るカルボン酸Ｗ−ＯＨを得る。単に相互不活性溶媒中で
得られた化合物を強酸と合わせるだけでエステル加水分
解は遂行される。この反応で用いるのに適当な溶媒の代
表例としては、ジオキサンなどの有機溶媒が挙げられ
る。約２５℃〜反応混合物の還流温度の範囲の温度で反
応を行った場合、反応は通常約１５分〜４時間後に実質
的に完了する。反応は約６０℃〜約１００℃の範囲の温
度で、約１５分〜１時間行うのが好ましい。別法とし
て、触媒水素添加(好ましくはＭｅＯＨまたはＥｔＯＨ
などのアルコール溶媒中で得られた化合物とギ酸アンモ
ニウムおよびパラジウム−炭素触媒(Ｐｄ／Ｃ)を合わせ
る）を行うことにより、カルボキシ保護基を除去しても
よい。約０℃〜反応混合物の還流温度の範囲の温度で反
応を行った場合、反応は通常約１〜４時間後に実質的に
完了する。反応は還流温度で、約２〜５時間行うのが好
ましい。最後に、前記詳述した操作に従って、適当に置
換されたカルボキシ保護アミノ酸を１,１'−カルボニル
ジイミダゾールと反応させ、次いで得られた化合物を化
合物Ｒ^3w−Ｈと反応させることにより化合物Ｗ−ＯＨを
製造することができる。

【００６１】さらなる別法では、最初に相互不活性溶媒
中でカルボキシ保護アミノ酸反応物を１,１'−カルボニ
ルジイミダゾールと反応させる。１,１'−カルボニルジ
イミダゾール反応物はカルボキシ保護アミノ酸反応物に
対して、通常約等モル比から約２モル過剰の範囲の分量
(等モル比が好ましい)で使用する。この反応で用いるの
に適当な溶媒の代表例としては、ＣＨ₃ＣＮなどの標準
的有機溶媒が挙げられる。約１５℃〜約３０℃の範囲の
温度で反応を行った場合、反応は通常約１５分〜２時間
後に実質的に完了する。反応は約２０℃〜約２５℃の範
囲の温度で、約１５分〜１時間行うのが好ましい。次
に、上記詳述した操作に従って、相互不活性溶媒中で、
得られた化合物を化合物Ｒ^3w−Ｈと反応させる。カルボ
キシ基は前述の方法を用いて脱保護することができる。

【００６２】Ｒが

【化５４】 およびＷ、Ｒ¹およびｉが前記と同意義である化合物
(Ｉ）を次の反応式ＩＩＩに従って製造することができ
る。

【化５５】 [ここで、Ｒ、Ｗ、Ｒ¹、ｉ、Ｒ^3a、Ｒ^3b、Ａ、Ｙおよび
Ｙ¹は前記と同意義である］

【００６３】上記反応式ＩＩＩは、化合物Ｗ−ＯＨを化
合物（Ｉｂ）とカップリングさせることにより行うこと
ができる。このカップリング反応は前記反応式Ｉで詳述
した操作に従って遂行することができる。好ましい反応
促進剤はＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏである。好ましいカップリン
グ剤はＤＣＣである。反応式ＩＩＩは後記実施例６にお
いて実証する。ｊが２である化合物(Ｉ）は、最初に化
合物(Ｉｂ）を式：Ｒ^b−ＮＨ−ＣＨ(Ｒ²）−ＣＯＯＨ
(ここで、Ｒ^bはアミノ保護基；Ｒ²は前記と同意義であ
る）のアミノ保護アミノ酸と反応させる。この反応は、
反応式Ｉのカップリング反応に従って遂行される。

【００６４】得られた化合物を脱保護し、次いで、相互
不活性溶媒中で化合物Ｒ^3w−Ｈと反応させる。ＣｕＩま
たはＣｕＣｌなどの銅塩で触媒することにより、より良
い結果が得られる。該得られた化合物は化合物Ｒ^3w−Ｈ
に対して、通常約等モル比から約１モル過剰の範囲の分
量で使用する。この反応で用いるのに適当な溶媒の代表
例としては、ＤＭＦまたはＣＨ₃ＣＮなどの有機溶媒が
挙げられる。約１０℃〜約４０℃の範囲の温度で反応を
行った場合、反応は通常約１５分〜３時間後に実質的に
完了する。反応は約１５℃〜約３０℃の範囲の温度で、
約１５分〜２時間行うのが好ましい。別法として、得ら
れた化合物を脱保護し、次いで、適当なハロゲン化アシ
ル、イソシアン酸アシルまたはクロロギ酸アシルでアシ
ル化するかまたは適当に置換されたハロゲン化スルホン
でスルホニル化するかまたは適当に置換されたカルボン
酸反応物とカップリングさせることにより、化合物
(Ｉ）が得られる。

【００６５】Ｒが

【化５６】 である化合物(Ｉｂ）を下記の反応工程式ＩＩＩＡに示
す操作に従って製造することができる。

【００６６】

【化５７】 [式中、Ｒ^bはアミノ保護基；およびＲ¹、Ｒ^3aおよびＹ
は前記と同意義である]

【００６７】反応工程式ＩＩＩＡは、反応１〜６を順次
行うことにより遂行される。ひとつの反応が完了すれ
ば、要すれば中間体化合物を前述の公知の操作を用いて
単離および／または精製することができる。反応ＩＩＩ
Ａ.１では、公知の操作および反応条件に従って、適当
に置換されたアリールまたは不飽和複素環カルボン酸
を、塩化チオニル、臭化チオニル、三塩化リン、三臭化
リン、五臭化リンまたは五塩化リンとの反応によって活
性化、すなわち変換して対応する塩化アシルまたは臭化
アシルにすることにより反応が行われる。適当なアリー
ル、複素環また不飽和複素環カルボン酸化合物は市販の
ものを用いるかまたは公知の操作で製造する。

【００６８】反応ＩＩＩＡ.２では、非極性中性溶媒ま
たはその混合溶媒中、酸スカベンジャーの存在または不
在下に、反応ＩＩＩＡ.１で製造した塩化アシルまたは
臭化アシルをアンモニアまたは

【化５８】 [ここで、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁶およびｐは前記と同意義であ
る]で示される第１または第２アミンと反応させて対応
するアミドを得る。反応は代表的には約−２０℃〜約２
５℃の温度で行う。この反応に用いる溶媒の代表例とし
ては、エーテルおよび塩素化炭化水素が挙げられ、Ｅｔ
₂Ｏ、ＣＨＣｌ₃またはＣＨ₂Ｃｌ₂が好ましい。好ましく
は、この反応は第３アミン(Ｅｔ₃Ｎなど）などの酸スカ
ベンジャーの存在下に行う。

【００６９】反応ＩＩＩＡ.３では、可溶化剤の存在
下、反応ＩＩＩＡ.２で製造したアミドを強塩基と反応
させて対応するアニオンを得、次いで、これを反応ＩＩ
ＩＡ.４においてワインレブアミドと反応させ、ケトン
を得る。反応ＩＩＩＡ.３は、中性溶媒中、約−７８℃
〜約０℃の温度で行う。反応ＩＩＩＡ.３で用いる塩基
の代表例としては、リチウムアミド塩基およびアルキル
リチウム塩基が挙げられ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルリチウム塩
基およびリチウムジ(Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキルアミド塩基が
好ましい。反応ＩＩＩＡ.３で用いる可溶化剤の代表例
としては、テトラメチル(Ｃ₁〜Ｃ₄）アルキレンジアミ
ンが挙げられ、テトラメチルエチレンジアミンが好まし
い。反応ＩＩＩＡ.４は、中性溶媒中、約−８０℃〜約
−４０℃の温度で行う。反応ＩＩＩＡ.３およびＩＩＩ
Ａ.４で用いる溶媒の代表例としては、エーテルが挙げ
られ、ＴＨＦが好ましい。反応ＩＩＩＡ.４では、アニ
オンはワインレブアミドに対して、通常約等モル比から
約３モル過剰アニオンとなる範囲(約２モル過剰アニオ
ンが好ましい）の分量で使用する。

【００７０】反応ＩＩＩＡ.５では、反応ＩＩＩＡ.３で
製造したケトンを適当な還元剤を用いて還元して対応す
るアルコールを得る。反応は約−２５℃〜約２５℃の温
度で行う。この反応で用いる還元剤の代表例としては、
水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、水素
化ジイソブチルアルミニウムおよび水素化ナトリウムビ
ス(２−メトキシエトキシ）アルミニウムが挙げられ
る。この反応で用いる溶媒の代表例としては、アルコー
ルが挙げられ、ＥｔＯＨが好ましい。反応ＩＩＩＡ.６
では、公知の操作および方法を用いる標準的アミノ脱保
護反応により対応するアミン(Ｉｂ）が得られ、次い
で、これを前記反応式ＩＩＩに用いる。アミンは精製す
ることなく反応させてもよいが、最初に精製するのが好
ましい。

【００７１】Ｒが

【化５９】 である化合物(Ｉｂ）を下記の反応工程式ＩＩＩＢに示
す操作に従って製造することができる。

【００７２】

【化６０】 [式中、Ｒ^b、Ｒ¹、ＹおよびＲ^3aは前記と同意義である]

【００７３】反応工程式ＩＩＩＢは、反応１〜７を順次
行うことにより遂行される。ひとつの反応が完了すれ
ば、要すれば中間体化合物を前述の公知の操作を用いて
単離および／または精製することができる。反応ＩＩＩ
Ｂ.１では、標準的条件下、公知のアミノ保護基を用い
て適当に置換されたアリールまたは不飽和複素環アミン
を保護する。反応ＩＩＩＢ.２〜５は、反応工程式ＩＩ
ＩＢにおいては反応ＩＩＩＢ.１で導入したアミノ保護
基を除去するために追加の脱保護反応である反応ＩＩＩ
Ｂ.５が必要となる以外は、反応工程式ＩＩＩＡの３〜
６で記載した方法を行う。これは公知の操作を用いる標
準的アミノ脱保護反応である。たとえば、反応ＩＩＩ
Ｂ.１に図示したｔ−Ｂｏｃ基は強酸(ＣＦ₃ＣＯ₂Ｈが好
ましい）を用いて除去することができる。

【００７４】反応ＩＩＩＢ.６では、好ましくは第３ア
ミンなど(Ｅｔ₃Ｎが好ましい）の酸スカベンジャーの存
在下、図示した中間体を適当なハロゲン化アシル、イソ
シアン酸アシルまたはクロロギ酸アシルでアシル化す
る。代表的な反応温度は約−２０℃〜約２５℃の温度で
ある。この反応で用いる溶媒の代表例としては、エーテ
ルおよび塩素化炭化水素が挙げられ、Ｅｔ₂Ｏ、ＣＨＣ
ｌ₃またはＣＨ₂Ｃｌ₂が好ましい。反応ＩＩＩＢ.７で
は、公知の操作および方法を用いる標準的アミノ脱保護
反応により対応するアミン(Ｉｂ）が得られ、次いで、
これを前記反応式ＩＩＩに用いる。アミンは精製するこ
となく反応させてもよいが、最初に精製するのが好まし
い。

【００７５】Ｒが

【化６１】 である化合物(Ｉｂ）を下記の反応工程式ＩＩＩＣに示
す操作に従って製造することができる。

【００７６】

【化６２】 [式中、Ｒ¹、Ｒ^3a、Ｒ^bおよびＹ¹は前記と同意義；およ
びＧはハロである］

【００７７】反応工程式ＩＩＩＣは、反応１〜７を順次
行うことにより遂行される。ひとつの反応が完了すれ
ば、要すれば中間体化合物を前述の公知の操作を用いて
単離および／または精製することができる。この反応は
後記製造例９において実証する。反応ＩＩＩＣ．１は、
活性化、すなわち、公知の条件下で式：

【化６３】 の構造をもつアミノ保護カルボン酸反応物を対応する混
合無水物に変換することにより行う。たとえば、アミノ
保護カルボン酸反応物は、好ましくは酸スカベンジャー
の存在下、イソブチルクロロギ酸塩などのＣ₁〜Ｃ₆アル
キルクロロギ酸塩と反応させることができる。好ましい
酸スカベンジャーはトリアルキルアミンであり、Ｅｔ₃
Ｎが好ましい。反応は代表的にはＥｔＯＡｃなどの中性
溶媒中で行う。得られる混合無水物反応物は、それ以上
単離または精製することなく反応ＩＩＩＣ.２で使用す
る。

【００７８】反応ＩＩＩＣ.２は２段階で遂行される。
最初に、表層がエーテル溶媒層(Ｅｔ₂Ｏが好ましい）で
ある水酸化ナトリウム(ＮａＯＨ）の溶液を大過剰のＮ
−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンと反応
させてジアゾメタン反応物を形成する。ＮａＯＨは約４
〜６Ｍ水溶液として用いるのが好ましい。この反応が実
質的に完了すれば、有機層をＫＯＨなどの乾燥剤で乾燥
する。次いで、この溶液を上記反応ＩＩＩＣ.１の混合
無水物と反応させて対応するα−ジアゾカルボニル化合
物を形成する。ジアゾメタン反応物は単離または精製す
ることなくこの反応に用いるのが好ましい。代表的な反
応温度は約−５０℃〜約−２０℃であり、約−３０℃が
好ましい。

【００７９】反応ＩＩＩＣ.３では、Ｅｔ₂Ｏなどの中性
溶媒中、反応ＩＩＩＣ.２で製造したα−ジアゾカルボ
ニル化合物を、酸Ｈ−Ｇ(ここで、Ｇはハロ）と反応さ
せてα−ハロカルボニル化合物を形成する。好ましい酸
反応物は対応するα−クロロカルボニル化合物が得られ
るＨＣｌである。代表的な反応温度は約−３０℃〜約０
℃である。酸反応物は、反応が実質的に完了するまで、
無水ガスの形状で少しずつ増加させながら添加する。反
応は薄層クロマトグラフィー(ＴＬＣ）によって監視で
きる。反応ＩＩＩＣ.４では、公知の標準条件にて、反
応ＩＩＩＣ.３で製造した化合物のカルボニル部分を還
元して対応するα−クロロヒドロキシ化合物を形成す
る。たとえば、混合溶媒中で反応ＩＩＩＣ.３で製造し
た化合物を還元剤と合わせる。代表的な還元剤として
は、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、
水素化ジイソブチルアルミニウムおよび水素化ナトリウ
ムビス(２−メトキシエトキシ）アルミニウムが挙げら
れる。好ましい還元剤は水素化ホウ素ナトリウムであ
る。代表的な反応温度は約−１０℃〜約１０℃であり、
約０℃が好ましい。

【００８０】反応ＩＩＩＣ.５では、公知の標準条件
下、反応ＩＩＩＣ.４で製造したα−クロロヒドロキシ
化合物を強塩基で処理して対応するエポキシドを得る。
たとえば、ＥｔＯＨなどの中性溶媒中、α−クロロヒド
ロキシ化合物をＫＯＨ／ＥｔＯＨ混合物と反応させる。
反応は、約０℃〜約溶媒の還流温度の温度で行う。反応
は室温で行うのが好ましい。反応ＩＩＩＣ.６では、中
性溶媒中、約７０℃〜１００℃の温度で、反応ＩＩＩ
Ｃ.５で製造したエポキシドを式：

【化６４】 の複素環式反応物と反応させる。代表的な溶媒として
は、ＥｔＯＨなどのアルコールが挙げられる。反応は約
８０℃で行うのが好ましい。反応ＩＩＩＣ.７は、公知
の操作および方法を用いる標準的アミノ脱保護反応であ
り、対応するアミン(Ｉｂ）を得、次いで、これを上記
反応式ＩＩＩに用いる。このアミンは精製することなく
使用してもよいが、最初に精製するのが好ましい。

【００８１】反応ＩＩＩＡ.４およびＩＩＩＢ.３におい
て反応物として使用したワインレブアミドは、アミノ保
護アミノ酸とＮ−メトキシ−Ｎ−アミンを酸スカベンジ
ャーなどの反応促進剤およびカップリング剤の存在下に
反応させて製造する。反応は、中性溶媒または溶媒混合
物中、約−２５℃〜２５℃の温度で行う。好ましい反応
促進剤はＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏである。好ましい酸スカベン
ジャーは第三アルキルアミン、好ましくはＥｔ₃Ｎまた
はＮ−メチルモルホリン(ＮＭＭ）である。好ましいカ
ップリング試薬はエチルジメチルアミノプロピルカルボ
ジイミド塩酸塩である。この反応により製造されるワイ
ンレブアミドは、反応ＩＩＩＡ.４およびＩＩＩＢ.３で
使用する前に単離するのが好ましい。

【００８２】Ｒ¹が−Ｓ−Ｒ^1x(ここで、Ｒ^1xはアリール
またはシクロヘキシルである）である化合物(Ｉｂ）
は、式：

【化６５】 で示されるワインレブアミドを用いて、反応ＩＩＩＡ.
４およびＩＩＩＢ.３において製造する。このワインレ
ブアミドは、まずアミノ保護セリンを中性溶媒中、約−
８０℃〜０℃の温度で、トリフェニルホスフィンおよび
ジエチルアゾジカルボン酸塩と反応させて対応するβ−
ラクトンを形成することにより製造する。反応は、代表
的にはＴＨＦなどのエーテル中、約−８０℃〜−５０℃
の温度で行う。次に、該ラクトンを−Ｓ−Ｒ¹(Ｒ¹は前
記式(Ｉ）と同意義）の構造を有する適当な置換チオア
ニオンと反応させてラクトン環を開環し、式：

【化６６】 で示される化合物を得る。チオアニオン化合物は対応す
るチオールを水素化ナトリウムまたは水素化カリウムな
どの強塩基と反応させて形成するのが好ましい。この反
応は、代表的には中性溶媒中、約０℃〜４０℃の温度
で、窒素などの不活性雰囲気下で行う。代表的溶媒とし
てはエーテルが挙げられ、ＴＨＦが好ましい。次いで、
得られるカルボン酸反応物を、酸スカベンジャーなどの
反応促進剤および前述のカップリング剤の存在下でＮ−
メトキシ−Ｎ−メチル−アミンと反応させて所望のアミ
ド反応物を形成する。

【００８３】Ｒが式：

【化６７】 Ａが

【化６８】 およびＲ^3aおよびＹ¹は前記と同意義である化合物(Ｉ
ｂ）は、公知の操作に従って製造することができる。こ
のような化合物を製造するのに特に有用な文献のひとつ
は、Ｒ.ヘランツ(Herranz）らの「J. Org. Chem.」,５
５,２３３２〜２２３４頁(１９９４年）である。

【００８４】式：

【化６９】 で示される反応ＩＩＩＣ.６で用いた複素環反応物は、
公知の操作および方法で製造することができる。たとえ
ば、対応するアミノ保護アミノ酸を酸活性化し、次い
で、アルキルアミンで処理して該複素環反応物を製造す
る。この反応は代表的にはＮＭＭなどの酸スカベンジャ
ーの存在下で行う。次いで、標準的化学脱保護技術を用
いてアミノ保護基を除去し、前記反応ＩＩＩＣ.６で用
いた複素環反応物を得る。特別に、(２Ｓ）−１,２,３,
４−テトラヒドロ−３−イソキノリンカルボン酸を用
い、下記の操作により、[３Ｓ−(３Ｒ＊,４ａＲ＊,８ａ
Ｒ＊）]−デカヒドロイソキノリン−３−Ｎ−ｔ−ブチ
ルカルボキサミドを製造する： １）アミノ保護(ｔ−Ｂｏｃ）； ２）酸活性化／ｔ−ブチルアミンとの反応； ３）触媒水素添加； ４）アミノ脱保護。

【００８５】反応式ＩＩＩで用いた化合物、Ｗ−ＯＨは
現在のところ市販されておらず、公知の操作を用いて製
造することができる。特に、Ｗが

【化７０】 であるＷ−ＯＨは、前記反応工程式ＩＡで述べたように
して製造する。Ｗが

【化７１】 である化合物Ｗ−ＯＨを下記の反応工程式ＩＶに示す操
作に従って製造することができる。

【００８６】

【化７２】 [式中、ｑ、Ｒ^z、Ｒ^1wおよびＲ^2wは前記と同意義；およ
びＥ＊はヨードまたはＣ₁−Ｃ₄アルコキシカルボニルで
ある]

【００８７】Ｅ＊がヨードである場合、反応工程式ＩＶ
は、反応１〜３を順次行うことにより遂行される。ひと
つの反応が完了すれば、要すれば中間体化合物を前述の
公知の操作を用いて単離および／または精製することが
できる。この反応は後記製造例１０において実証する。
Ｅ＊がＣ₁−Ｃ₄アルコキシカルボニルである場合、反応
ＩＶ.１で製造した中間体は、反応ＩＶ.３に詳述した操
作に従って反応させる；すなわち反応ＩＶ.２は不要で
ある。

【００８８】反応ＩＶ.１は、前記反応式Ｉで詳述した
操作に従って行う標準的カップリング反応である。反応
は、単に適当な置換アミノ部分、ＲＲ⁰ＮＨを式：

【化７３】 [式中、Ｅ＊はヨードまたはＣ₁−Ｃ₄アルコキシカルボ
ニル；およびＲ^zおよびｑは前記と同意義である]の化合
物と反応させて行う。非極性中性溶媒または溶媒混合物
中、酸スカベンジャーの存在または不在下で反応を行
い、対応するアミドを得る。この反応に用いる代表的な
溶媒はＴＨＦおよびＤＭＦであり、ＴＨＦが好ましい。
約−３０℃〜約２５℃の温度で反応を行う。通常、等モ
ル量から僅かに過剰のカップリング試薬の存在下、アミ
ン反応物をカルボン酸反応物に対して等モル比で使用す
る。

【００８９】反応ＩＶ.２は、反応ＩＶ.１で製造した化
合物のカルボニル化であり、ヨード置換基がＣ₁−Ｃ₄ア
ルコキシカルボニル部分、好ましくはメトキシカルボニ
ルと交換される。反応は、単に反応ＩＶ.２のヨード中
間体を一酸化炭素雰囲気下、アルコール性溶媒(ＭｅＯ
Ｈが好ましい）中、触媒と合わせることにより行い、所
望化合物であるアルキルエステルが得られる。この反応
は約０℃〜約２５℃の温度で行う。反応ＩＶ.３は、該
アルキルエステルの標準的加水分解反応であり、得られ
る対応するカルボン酸反応物であるＷ−ＯＨを前記反応
式ＩＩＩに用いる。アルキスエステル反応物を適当な溶
媒中で水酸化リチウムと合わせ、次いで反応溶液をｐＨ
２〜３に酸性化して、Ｗが

【化７４】 である所望のカルボン酸反応物Ｗ−ＯＨを得ることによ
り該反応を行う。代表的な溶媒は、エーテルおよびＨ₂
Ｏであり、ＴＨＦ／Ｈ₂Ｏ混合物が好ましい。約０℃〜
約３５℃の温度で反応を行う。水酸化リチウム反応物
は、エステル反応物に対して通常等モル比から約２モル
過剰、好ましくは１Ｍ過剰で使用する。

【００９０】２次的反応を防ぐために、上述の操作を実
行する際に、反応物に化学保護基を導入することが望ま
しいということが当業者には理解されよう。反応物に存
在するいずれのアミン、アルキルアミンまたはカルボキ
シ基でも、所望の反応において反応するための分子の残
りの部分の能力に、逆に影響を及ぼさない標準的アミノ
保護基またはカルボキシ保護基を用いて保護することが
できる。好ましいアミノ保護基はｔ−ＢｏｃおよびＣｂ
ｚである。好ましいカルボキシ保護基はベンズヒドリ
ル、ベンジルまたはアリルである。次に、公知の方法を
用いて、種々の保護基を同時または順次除去する。

【００９１】前述したように、すべての対称体、別の異
性体およびそれらの組み合わせは、本発明の一部とみな
される。このような異性体は、それぞれの前駆体から上
述した操作、ラセミ混合物の光学分割またはジアステレ
オマーの分離によって製造される。分割剤の存在下、ク
ロマトグラフィーを行うことまたは結晶化を繰り返すこ
と、あるいは公知のこれらの技術を組み合わせることに
よって、分割を行うことができる。分割のさらなる詳細
はジャック(Jacques）らの「エナンチオマー、ラセミ体
および分割」,ジョン・ウイリー・アンド・サンズ(John
Wiley & Sons）(１９８１年）に記載されている。

【００９２】本発明化合物の初期出発物質として用いた
化合物は公知物質であり、現在のところ市販されていな
いが、当業界で使用されている一般の標準的操作によっ
て容易に合成することができる。本発明の医薬的に許容
しうる塩類は化合物(Ｉ）を、等モル量または過剰量の
酸または塩基と反応させることにより形成される。反応
物は一般に、酸付加塩用にはＥｔ₂Ｏまたはベンゼンな
ど、塩基付加塩用にはＨ₂Ｏなどの相互溶媒中で合わせ
る。通常、塩類は約１時間から１０日以内に溶液から沈
殿し、濾過または他の常套法で単離することができる。
次の製造例および実施例は本発明をさらに具体的に説明
するものである。しかし、それらは実例としての目的の
みで列挙するものであり、いかなる点においても本発明
の範囲を限定するものではなく、そのように解釈すべき
ではないことを理解すべきである。

【００９３】次の製造例および実施例においては、語句
「融点、核磁気共鳴スペクトル、電子衝撃質量スペクト
ル、電界脱離質量スペクトル、速原子衝撃質量スペクト
ル、赤外線スペクトル、紫外線スペクトル、高性能液体
クロマトグラフィーおよび薄層クロマトグラフィー」
は、それぞれ“m.p.”“ＮＭＲ”“ＥＩＭＳ”“ＭＳ
(ＦＤ）”“ＭＳ(ＦＡＢ）”“ＩＲ”“ＵＶ”“ＨＰＬ
Ｃ”および“ＴＬＣ”と略記する。さらに、ＩＲスペク
トルで列挙した吸収ピークは、興味深いものだけであっ
て観測されたすべてのピークではない。

【００９４】ＮＭＲスペクトルに関連して、次の略語を
用いる：“ｓ”は一重線、“ｄ”は二重線、“ｄｄ”は
２重の二重線、“ｔ”は三重線、“ｑ”は四重線、
“ｍ”は多重線、“ｄｍ”は２重の多重線および“ｂ
ｒ.ｓ”,“ｂｒ.ｄ”,“ｂｒ.ｔ”および“ｂｒ.ｍ”は
それぞれ広幅一重線、二重線、三重線、四重線および多
重線である。“Ｊ”はヘルツ(Ｈｚ）でのカップリング
定数を示す。他にただし書きがない限り、ＮＭＲデータ
は被検化合物の遊離塩基に関するものである。

【００９５】ＮＭＲスペクトルはブルッカー・コーポレ
イション(Bruker Corp.)２７０ＭＨｚ装置またはゼネラ
ル・エリクトリック(General Electric)ＱＥ−３００ ３
００ＭＨｚ装置から得た。化学シフトはデルタ(δ）値
(テトラメチルシランからのずれのｐｐｍ）で表現し
た。ＭＳ(ＦＤ）スペクトルは炭素デンドライトエミッ
ターを用いるVarian-ＭＡＴ７３１分光計から得た。Ｅ
ＩＭＳはコンソリデイテッド・エレクトロダイナミクス
・コーポレイション(Consolidated Electrodynamics Co
rporation）製のＣＥＣ２１−１１０装置から得た。Ｍ
Ｓ(ＦＡＢ)スペクトルはＶＧ ＺＡＢ−３分光計から得
た。ＩＲスペクトルはパーキン−エルマー(Perkin-Elme
r）２８１装置から得た。ＵＶスペクトルはCary１１８
装置から得た。ＴＬＣはエー・メルク・シリカゲルプレ
ートで行った。融点は不正確である。

【００９６】

【実施例】

製造例１ Ａ.２,２−ジメチル−４(Ｒ),５(Ｒ)−ビス(１(Ｒ)−ヒ
ドロキシ−２−フェニルエチル)−１,３−ジオキソラン 窒素(Ｎ₂)下、Ｅｔ₂Ｏ(２４.６ml)中の臭化フェニルマ
グネシウム(１４.６ml、４３.８ミリモル)の溶液をジメ
チルスルフィド(２ml)およびＴＨＦ(２２ml)中のＣｕＩ
(０.２７８g、１.４６ミリモル)の冷溶液(−４０℃)に
加える。この溶液を５〜１０分間撹拌した後、ＴＨＦ
(１２ml)中の１,２：５,６−ジアンヒドロ−３,４−ｏ
−イソプロピリデン−Ｄ−マンニトール(２.７２g、１
４.６ミリモル)の溶液を加える。次いで、反応混合物を
０℃まで暖め、飽和塩化アンモニウム(ＮＨ₄Ｃｌ)溶液
をゆっくりと加えながら２時間１５分反応させる。得ら
れる溶液を５分間激しく撹拌し、次いで、Ｅｔ₂Ｏおよ
びＨ₂Ｏの２：１混合液の入った分液ロートに移す。得
られる層を分離し、有機層を減圧乾燥する。次いで、得
られた物質をカラムクロマトグラフィー(２.５％アセト
ン／ＣＨ₂Ｃｌ₂で溶離)にて精製する。所望生成物含有
画分を合わせ、減圧乾燥して油状物(４.０７g)を得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ7.35 (m, 10); 3.78 (m, 4); 3.15
(dd, 2); 2.90 (d, 2);2.70 (m, 2); 1.45 (s, 6)。 MS: m/e 342 (M⁺)。

【００９７】Ｂ.２,２−ジメチル−４(Ｒ),５(Ｒ)−ビ
ス(１(Ｒ)−メタンスルホニルオキシ−２−フェニルエ
チル)−１,３−ジオキソラン ＣＨ₂Ｃｌ₂(２０ml)中のＥｔ₃Ｎ(５.４７ml、３９.３ミ
リモル)および上記１Ａの標記中間体(６.４g、１８.７
ミリモル)の冷溶液（０℃）に、ＣＨ₂Ｃｌ₂(２０ml)中
の塩化メタンスルホニル(２.９７ml、３８.３ミリモル)
の溶液を加える。次いで、反応混合物を室温まで暖め
る。反応完了後(ＴＬＣにて決定)、反応混合物を０.２
Ｎ ＨＣｌ(５０ml)およびＥｔ₂Ｏ(１５０ml)の溶液に注
ぎ入れる。得られる層を分離し、有機層を飽和重炭酸ナ
トリウム溶液で洗浄し、次いで減圧乾燥する。次いで、
得られた物質をカラムクロマトグラフィー(１：１のＥ
ｔ₂Ｏ／ヘキサンで溶離)にて精製する。所望生成物含有
画分を合わせ、減圧乾燥する。収量３.７g。¹ H NMR (CDCl₃): δ7.30 (m, 10); 4.88 (m, 2); 4.25
(d, 2); 3.10 (m, 4);2.32 (s, 6); 1.52 (s, 6)。 MS: m/e 499 (M⁺ +1)。

【００９８】Ｃ.２,２−ジメチル−４(Ｒ),５(Ｒ)−ビ
ス(１(Ｓ)−アジド−２−フェニルエチル)−１,３−ジ
オキソラン Ｎ,Ｎ’−ジメチルプロピレンウレア(２５ml)中の上記
１Ｂの標記中間体(３.６g、７.２ミリモル)に、リチウ
ムアジド(０.７８４g、１６.０ミリモル)、１８−クラ
ウン−６(４.０g、１４.６ミリモル)および２,６−ルチ
ジン(１.７ml、１４.６ミリモル)の溶液を加える。次い
で、反応混合物を９５〜１００℃まで暖め、約７時間反
応させる。反応完了後(ＴＬＣにて決定)、反応混合物を
０.１Ｎ ＨＣｌおよびＥｔ₂Ｏの１：１混合液(２００m
l)に注ぎ入れる。得られる層を分離し、有機層を硫酸ナ
トリウム(Ｎａ₂ＳＯ₄)で乾燥し、次いで減圧乾燥して油
状物(２.８g)を得る。この油状物をカラムクロマトグラ
フィー(５〜１０％ＣＨ₂Ｃｌ₂／トルエンの勾配溶離)に
て精製する。所望生成物含有画分を合わせ、減圧乾燥し
て標記生成物(１.０３g)を得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ7.30 (m, 10); 4.12 (s, 2); 3.22
(t, 2); 3.05 (m, 4);1.55 (s, 6)。

【００９９】Ｄ.１,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−
ジアジド−３(Ｒ),４(Ｒ)−ジヒドロキシヘキサン メタノール(４ml)中の上記１Ｃの標記中間体(０.３７０
g、０.９４３ミリモル)の溶液に、１２ＭＨＣｌ(１.２
６ml)を３時間かけてゆっくりと加える。反応完了後(Ｔ
ＬＣにて決定)、反応混合物をＣＨ₃ＣＮ(１０ml)で希釈
し、２回濃縮する。得られた物質をＥｔＯＡｃに再溶解
し、次いで、重炭酸ナトリウム(ＮａＨＣＯ₃)の半飽和
溶液で洗浄する。得られる層を分離し、有機層を減圧乾
燥して油状物を得る。この油状物をカラムクロマトグラ
フィー(０〜２０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂の勾配溶離)
にて精製する。所望生成物含有画分を合わせ、減圧乾燥
し、次いで、Ｅｔ₂Ｏおよびヘキサンの溶液から再結晶
して標記中間体(０.３０９g)を得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ7.25 (m, 10); 3.60 (m, 4); 3.0
(m, 4); 2.65 (d, 2)。 MS: m/e 353 (M⁺ +1)。 元素分析値 (C₁₈H₂₀N₆O₂として): 計算値: C 61.35; H 5.72; N 23.85; 実測値: C 61.15; H 5.73; N 23.70。

【０１００】Ｅ.１,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−
ジアジド−３(Ｒ)−メタンスルホニルオキシ−４(Ｒ)−
ヒドロキシヘキサン ＣＨ₂Ｃｌ₂(０.６ml)中の上記１Ｄの標記中間体(８０m
g、０.２３ミリモル)およびＥｔ₃Ｎ(３２μl、０．２３
ミリモル)の冷溶液(０℃)に、ＣＨ₂Ｃｌ₂(３００μl)中
の塩化メタンスルホニル(１３.５μl、０.１７０ミリモ
ル)の溶液を加える。反応混合物を室温まで暖め、１５
分間反応させ、次いで、Ｅｔ₂Ｏおよび０.１Ｎ ＨＣｌ
の３：２混合液(５０ml)に注ぎ入れる。得られる層を分
離し、有機層を半飽和ＮａＨＣＯ₃で洗浄し、次いで減
圧乾燥して泡状物を得る。この泡状物をカラムクロマト
グラフィー(１：２のＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂で溶離)に
て精製する。所望生成物含有画分を合わせ、減圧乾燥し
て所望中間体と出発物質、すなわち１,６−ジフェニル
−２(Ｓ),５(Ｓ)−ジアジド−３(Ｒ),４(Ｒ)−ジヒドロ
キシヘキサンの６０：４０混合物(１００mg)を得る。

【０１０１】Ｆ.１,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−
ジアジド−３,４−ｃｉｓ−エポキシヘキサン メタノール／ＴＨＦの２：１混合溶液(１.５ml)中の上
記１Ｅの標記中間体(６０mg、０.１４ミリモル)の冷溶
液(０℃)に、０.５Ｍ ＮａｏＭｅのメタノール溶液(０.
３２５ml)を加える。次いで、反応混合物を室温まで暖
め、１時間反応させ、次いで、２滴の酢酸(ＨＯＡｃ)を
含むＥｔ₂Ｏ(３ml)を加える。次いで、得られる溶液を
飽和ＮａＨＣＯ₃とＥｔ₂Ｏの８：５混合液(６５ml)に注
ぎ入れる。得られる層を分離し、有機層を減圧乾燥して
油状物を得る。この油状物をカラムクロマトグラフィー
(２０％ヘキサン／ＣＨ₂Ｃｌ₂で溶離)にて精製する。所
望生成物含有画分を合わせ、減圧乾燥して所望標記中間
体(３１mg)を得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ7.30 (m, 10); 3.57 (m, 1); 3.45
(m, 1); 3.18 (m, 2);2.94 (m, 4)。

【０１０２】Ｇ.１,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−
ジアンモニオ−３,４−ｃｉｓ−エポキシヘキサンジヒ
ドロクロリド ＥｔＯＡｃ／ＨＯＡｃ(９：１)溶液(１０ml)中の５％Ｐ
ｄ／Ｃ(３５０mg)の懸濁液に、上記１Ｆの標記中間体
(０.３６８g、１.１１ミリモル)を加える。次いで、混
合物を水素ガス(Ｈ₂)下で約３.５時間急速に撹拌する。
反応完了後(ＴＬＣにて決定)、混合物をＥｔＯＡｃで希
釈し、５％Ｐｄ／Ｃを濾過して除去する。次いで、濾液
を一夜冷却して１,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−ジ
アンモニオ−３,４−ｃｉｓ−エポキシヘキセン二酢酸
塩(０.３２５g)を得る。ＣＨ₂Ｃｌ₂／Ｅｔ₂Ｏ(１：１)
溶液(４ml)中の該二酢酸塩(０.１００g、０.２４９ミリ
モル)の溶液に、ＣＨ₃ＣＮ中の１Ｎ ＨＣｌ(０.４９８m
l)をゆっくりと加えて白色固体(０.０９０g)の形成を得
る。¹ H NMR (d₆-DMSO): δ8.40 (br.s, 6); 7.30 (m, 10);
3.40 (m, 4); 3.05 (m,4)。 MS: m/e 284 (M⁺ -2Cl)。

【０１０３】製造例２ Ａ.２(Ｓ)−アンモニオ−３(Ｓ)−メチルペンタン酸,ｐ
−トルエンスルホン酸ベンズヒドリル ＣＨ₃ＣＮ／ＭｅＯＨ(４：５)溶液(４５０ml)中のｐ−
トルエンスルホン酸Ｌ−イソロイシン(１５.０３g、４
９.５４ミリモル)の溶液に、ジフェニルジアゾメタンを
明桃色が持続するまで加え(１７.１２gのジフェニルジ
アゾメタン(８８.１６ミリモル)を添加)加え、この時点
で氷酢酸(２ml)を加える。得られた溶液を約１５分間撹
拌し、次いで減圧濃縮して黄色固体を得る。次いで、こ
の固体を熱ＣＨ₃ＣＮ中で再結晶することにより精製し
て所望の標記中間体(２１.６４g)を得る。¹ H NMR (CD₃OD): δ7.67 (d, J=9 Hz, 2); 7.37 (m, 1
0); 7.20 (d, J=9 Hz, 2); 6.98 (s, 1); 4.13 (d, J=3
Hz, 1); 2.34 (s, 3); 2.01 (m, 1); 1.17-1.46(m,
2); 0.80-0.97 (m, 6)。

【０１０４】Ｂ.２(Ｓ)−アンモニオ−３(Ｓ)−メチル
ペンタン酸ベンズヒドリル 上記２Ａの標記中間体(２１.６４g、４６.０８ミリモ
ル)の溶液に、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液(４５０ml)を加え、
ガスの放出を起こす。反応完了後、得られた層を分離
し、有機層を減圧乾燥して所望の標記中間体(１３.６１
g)を得る。¹H NMR (CDCl₃): δ7.19-7.45 (m, 10); 7.
93 (s, 1); 3.47 (d, J=3 Hz, 1);1.85 (m, 1); 1.85
(m, 1); 1.33-1.50 (m, 4); 0.92(d, J=8 Hz, 3); 0.83
(t,J=8 Hz, 3)。

【０１０５】Ｃ.２(Ｓ)−カルバモイル−３(Ｓ)−メチ
ルペンタン酸ベンズヒドリル 上記２Ｂの標記中間体(４.９７g、１６.７ミリモル)お
よびＥｔ₃Ｎ(４.７ml、３３.７ミリモル)の溶液を、ト
ルエン(９０ml)中のトリホスゲン(２.５１g、８.46ミリモ
ル)の熱(６０℃)溶液にカニューレにて加える。次いで、
温度を１００℃まで上昇させ、溶液を一夜反応させる。
反応混合物を０℃まで冷却すると沈殿が形成される。こ
の沈殿を濾過して除去し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン(１：
１)溶液で洗浄する。得られる溶液を減圧乾燥して、次
反応に用いるのに十分な純度(ＮＭＲでは約９０％)の所
望の標記中間体(５.４５g)を得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ7.23-7.47 (m, 10); 6.98 (s, 1);
4.05 (d, J=3 Hz, 1);2.05 (m, 1); 1.18 (五重線, J=
8 Hz, 2); 1.00 (d, J=8 Hz, 3); 0.80 (t, J=8Hz, 3)。

【０１０６】Ｄ.２(Ｓ)−Ｎ−[(キノール−２−イルメ
トキシ)カルボニル]アミノ−３(Ｓ)−メチルペンタン酸
ベンズヒドリル 無水ＤＭＦ中の２−ヒドロキシメチルキノリン(０.５０
６g、３.１８ミリモル)および塩化銅(Ｉ)(０.３１５g、
３.１８ミリモル)の溶液に、上記２Ｃの標記中間体(１.
１３g、３.５０ミリモル)を加える。反応完了後(ＴＬＣ
にて決定)、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、半飽和
食塩水で洗浄する。得られる層を分離し、有機層を乾燥
(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、減圧乾燥して茶色の油状物を得る。こ
の油状物をカラムクロマトグラフィー(６５％ヘキサン
／ＥｔＯＡｃで溶離)にて精製して所望の標記中間体
(１.２３g)を得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ8.15 (d, 1); 8.05 (d, 1); 7.8
(d, 1); 7.70 (t, 1); 7.55 (t, 1); 7.45 (d, 1); 7.3
0 (m, 10); 6.92 (s, 1); 5.43 (d, 1); 5.40 (s,2);
4.5 (m, 1); 2.0 (m, 1); 1.2 (m, 2); 0.9 (d, 3); 0.
82 (t, 3)。

【０１０７】Ｅ.２(Ｓ)−Ｎ−[(キノリン−２−イルメ
トキシ)カルボニル]アミノ−３(Ｓ)−メチルペンタン酸 上記２Ｄの標記中間体を濃ＨＣｌ(３ml)を含むジオキサ
ン(１２ml)に溶解する。得られる溶液を１００℃に加熱
し、約５分間反応させ、次いで、室温まで冷却し、反応
が実質的に完了するまで撹拌する(ＴＬＣにて示され
る)。得られる溶液を減圧乾燥し、次いで、飽和ＮａＨ
ＣＯ₃溶液に再溶解する。得られる溶液をＥｔ₂Ｏ(１０
０ml)で洗浄し、次いで、１Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ４ま
で酸性化する。次いで、所望の生成物を１０％イソプロ
パノール(ｉＰｒ)／ＣＨ₂Ｃｌ₂溶液に抽出し、乾燥(Ｎ
ａ₂ＳＯ₄)し、濾過する。次いで、濾液を減圧乾燥して
所望の標記中間体(０.５６７g)を得る。¹ H NMR (d₆-DMSO): δ8.35 (d, 1); 7.92 (d, 2); 7.7
0 (m, 2); 7.53 (m, 2);5.22 (s, 2); 3.92 (m, 1); 1.
78 (m, 1); 1.40 (m, 1); 1.20 (m, 1); 0.90 (m, 6)。

【０１０８】製造例３ Ａ.Ｎ−ｔ−ブチル−２−メチルベンズアミド ＣＨ₂Ｃｌ₂(１００ml)中のｏ−トルオイルクロリド(１
３９.２g、０.９モル)の冷溶液(０℃)に、Ｅｔ₃Ｎ(１８
０.０g、１.８モル)を加え、次いで、ＣＨ₂Ｃｌ₂(２０
０ml)中にｔ−ブチルアミン(７３.１４g、１.０モル)を
含有する溶液を滴下する。得られる反応混合物を室温ま
で暖め、２.５時間反応させる。次いで、反応混合物を
Ｈ₂Ｏ(１８００ml)で希釈する。得られる層を分離し、
有機層を２ＮＮａＯＨ、１.０Ｎ ＨＣｌおよび食塩水で
連続的に洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過し、次い
で、減圧乾燥して灰白色の固体(１６７.６g)を得る。m.
p.７７〜７８℃。収率：９７％。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.41 (s, 9H); 2.41 (s, 3H); 5.5
4 (br.s, 1H); 7.13-7.30 (m, 4H)。 IR (CHCl₃): 3430, 3011, 2971, 2932, 1661, 1510, 1
484, 1452, 1393, 1366,1304, 1216, 876 cm^-1。 MS (FD): m/e 191 (M⁺), 191 (100)。 元素分析値 (C₁₂H₁₇NOとして): 計算値: C 75.35; H 8.76; N 7.32; 実測値: C 75.10; H 9.11; N 7.20。

【０１０９】Ｂ.(Ｓ)−Ｎ−ｔ−ブチル−２−(３−ベン
ジルオキシカルボニル)アミノ−２−オキソ−４−フェ
ニルブチル)ベンズアミド 無水ＴＨＦ(２００ml)中の上記３Ａの標記中間体(７.０
g、３６.５ミリモル）の溶液に、Ｎ，Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テト
ラメチルエチレンジアミン(ＴＭＥＤＡ)(１２.１ml、８
０.３ミリモル)をシリンジにて加える。得られる溶液を
−７８℃に冷却し、次いで、反応物の温度を−６０℃以
下に維持しながらsec−ブチルリチウムをシリンジにて
滴下する。次いで、得られる反応溶液を−７８℃で約１
時間撹拌した後、反応物の温度を−６５℃以下に維持し
ながら無水ＴＨＦ(５０ml)中の(Ｓ)−Ｎ−メトキシ−Ｎ
−メチル−２−(Ｎ−フェニルメチルオキシカルボニル)
アミノ−３−フェニルプロパンアミド(５.００g、１４.
６ミリモル)の溶液をカニューレにて加える。得られる
反応混合物を−２０℃まで暖め、飽和ＮＨ₄Ｃｌ(２０m
l)を加えて反応を停止し、次いで、Ｅｔ₂Ｏ(２００ml)
で希釈する。得られる層を分離し、有機層をＨ₂Ｏ、０.
２Ｎ硫酸水素ナトリウム(ＮａＨＳＯ₄)および食塩水で
連続的に洗浄し、乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、次い
で、減圧乾燥して無色の油状物を得る。この油状物をカ
ラムクロマトグラフィー(２５％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ
₂で溶離)にて精製する。収量：６.０８g(収率８８％)の
無色泡状物。 [a]D -289.26° (c 0.12, メタノール)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.38 (s, 9H); 2.99 (dd, J=15; 6
Hz, 1H); 3.24 (dd, J=15, 6 Hz, 1H); 3.89 (d, J=18
Hz, 1H); 4.16 (d, J=18 Hz, 1H); 4.72 (dd, J=15, 6
Hz, 1H); 5.00-5.09 (m, 2H); 5.56 (d, J=6 Hz, 1H);
5.93 (br.s, 1H); 7.03-7.40 (m, 14H)。 IR (CHCl₃): 3431, 3027, 3012, 2973, 1713, 1658, 1
511, 1454, 1383, 1366,1307, 1231, 1046 cm^-1。 MS (FD): m/e 472 (M⁺), 218 (100)。 元素分析値 (C₂₉H₃₂N₂O₄として): 計算値: C 73.70; H 6.82; N 5.93; 実測値: C 73.41; H 6.98; N 5.83。

【０１１０】Ｃ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブ
チル−２−(３−(Ｎ−ベンジルオキシカルボニル)アミ
ノ−２−ヒドロキシ−４−フェニルブチル)ベンズアミ
ド 無水エタノール(２００ml)中の上記３Ｂの標記中間体
(６.９６g、１４.７ミリモル)の溶液に、窒素下、水素
化ホウ素ナトリウム(２.７８g、７３.５ミリモル)を加
える。反応完了後(ＴＬＣにて示される)、反応混合物を
ＥｔＯＡｃ(２００ml)で希釈し、飽和ＮＨ₄Ｃｌ(２０m
l)を滴下して反応を停止する。得られる層を分離し、有
機層を１Ｎ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ₃および食塩水で連
続的に洗浄し、乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、次いで、
減圧乾燥して無色の油状物(６.４g)を得る。この油状物
をフラッシュクロマトグラフィー(２〜１０％ＣＨ₂Ｃｌ
₂／ＥｔＯＡｃの勾配溶離)にて精製し、主要生成物であ
る所望ジアステレオマー(５.１２g)を得る。収率：７４
％。 [a]D +10.38° (c 0.10, メタノール)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.40 (s, 9H); 2.79 (dd, J=12; 3
Hz, 1H); 2.90-2.98 (m, 2H); 3.04 (44, J=12, 3 Hz,
1H); 3.70-3.81 (m, 1H); 3.97 (m, 1H); 4.96-5.08
(m, 2H); 5.10 (d, J=9 Hz, 1H); 5.88 (d, J=6 Hz, 1
H); 5.93 (s, 1H);7.13-7.42 (m, 14H)。 IR (CHCl₃): 3431, 3028, 3012, 2971, 1773, 1643, 1
515, 1454, 1367, 1229,1028 cm^-1。 MS (FD): m/e 475 (M⁺), 475 (100)。 元素分析値 (C₂₉H₃₄N₂O₄として): 計算値: C 73.39; H 7.22; N 5.99; 実測値: C 73.12; H 7.48; N 5.62。

【０１１１】Ｄ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブ
チル−２−(３−アミノ−２−ヒドロキシ−４−フェニ
ルブチル)ベンズアミド 無水ＥｔＯＨ(１５０ml)中の上記３Ｃの標記中間体(４
１.０g、１２０ミリモル)および１０％Ｐｄ／Ｃ(５００
mg)の懸濁液を調製する。この懸濁液をパール振とう機
にて６０ｐｓｉのＨ₂ガス下で振とうする。１０％Ｐｄ
／Ｃを濾過して除去し、得られた濾液を減圧乾燥して所
望の標記中間体(３１.１g)を明黄色泡状物で得る。この
泡状物はこれ以上精製することなく使用する。 [a]D +34.68° (c 1.0, メタノール)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.46 (s, 9H); 2.71 (dd, J=13.7;
9.5 Hz, 1H); 2.84 (dd, J=13.3; 2.51 Hz, 1H); 2.95
-3.06 (m, 2H); 3.23-3.29 (m, 1H); 3.84-3.90(m, 1
H); 6.23 (s, 1H); 7.19-7.37 (m, 12H)。 IR (CHCl₃): 3440, 3382, 3007, 2970, 2934, 1643, 1
516, 1454, 1367, 1213cm^-1。 MS (FD): m/e 341 (M⁺), 341 (100)。

【０１１２】製造例４は製造例３Ａ〜Ｃに詳述した操作
に準じて行う。得られた化合物は製造例３Ｄに詳述した
反応に付す前に脱保護する。 製造例４ [２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル−２−(３−
(Ｎ−ベンジルオキシカルボニル)アミノ−２−ヒドロキ
シ−４−フェニルブチル)−５−メチルベンズアミド 収量：無色泡状物４.８４mg(収率８２％)。 [a]D +10.31° (c 0.58, メタノール)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.46 (s, 9H); 2.32 (s, 3H); 2.7
6 (d, J=15 Hz, 1H); 2.85-2.95 (m, 2H); 3.04 (dd, J
=15, 5 Hz, 1H); 3.67-3.74 (m, 1H); 3.92-4.05(m, 1
H); 4.92-5.14 (m, 3H); 5.86 (d, J=7 Hz, 1H); 5.91
(s, 1H); 7.03-7.40 (m, 13H)。 IR (CHCl₃): 3431, 3274, 3027, 3012, 2970, 1713, 1
643, 1514, 1496, 1454,1367, 1224, 1039, 910 cm^-1。 MS (FD): m/e 489 (M⁺), 205 (100)。 元素分析値 (C₃₀H₃₆N₂O₄として): 計算値: C 73.74; H 7.43; N 5.73; 実測値: C 73.55; H 7.50; N 5.96。

【０１１３】製造例５ Ａ.キナルジン酸ペンタフルオロフェニルエステル ＴＨＦ(２００ml)中にキナルジン酸(１５.０g、８６.６
ミリモル)およびペンタフルオロフェノール(２０.８g、
１１３ミリモル)を含有する懸濁液に、ＥＤＣ(１８.３
g、９５.３ミリモル)を加える。得られる反応混合物を
室温にて約２時間激しく撹拌する。この間にガム状の沈
殿がフラスコの底に形成される。溶液をガム状物から傾
瀉して分離し、ガム状物をＣＨ₂Ｃｌ₂で抽出して所望の
化合物を得る。次いで、得られた溶液をヘキサンで希釈
し、０.１ＮＮａＨＳＯ₄、１Ｎ炭酸カリウム(Ｋ₂ＣＯ₃)
および食塩水で連続的に洗浄する。得られる層を分離
し、有機層を乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、次いで、減
圧濃縮して淡桃色固体を得る。この固体を熱Ｅｔ₂Ｏ(３
０ml)に再溶解し、次いで、熱ヘキサン(４００ml)で希
釈する。得られる溶液を室温までゆっくりと冷却して無
色針状物(２１.６g)を得る。収率：７３％。¹ H NMR (CDCl₃): δ7.73 (t, J=7.5 Hz, 1H); 7.86
(t, J=7.9 Hz, 1H); 7.95(d, J=8.2 Hz, 1H); 8.29-8.4
2 (m, 3H)。 IR (CHCl₃): 3035, 2997, 1763, 1522, 1285, 1068, 9
98, 842 cm^-1。 元素分析値 (C₁₆H₆NO₂F₅として): 計算値: C 56.65; H 1.78; N 4.13; 実測値: C 56.66; H 1.77; N 4.12。

【０１１４】Ｂ.(Ｓ)−２−Ｎ−(キノリン−２−イルカ
ルボニル)アミノ−３−カルバモイルプロピオン酸 Ｈ₂Ｏ(２６５ml)およびジオキサン(２１９ml)中に上記
５Ａの標記化合物(１７.９g、５１.２ミリモル)および
Ｌ−アスパラギン一水和物(６.９９g、４６.６ミリモ
ル)を含有する溶液を調製する。得られる懸濁液を室温
で一夜激しく撹拌する。次いで、反応混合物を減圧濃縮
してジオキサンを除去し、残りの水性層を２ＮＮａＨＳ
Ｏ₄を用いてｐＨ３に酸性化する。次いで、クロロホル
ム(ＣＨＣｌ₃)／ｉＰｒ(３：１)溶液(６０ml)にて所望
の標記化合物を水性層から抽出する。次いで、有機層を
食塩水で洗浄し、乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、次い
で、減圧乾燥して無色固体を得る。この固体をＥｔ₂Ｏ
(５００ml)および熱ヘキサン(２５０ml)で洗浄し、次い
で、８０℃で３時間減圧乾燥して所望の標記中間体(１
０.６１g)を得る。収率７９％。 [a]D +16.54° (c 1.01, DMSO)。¹ H NMR (DMSO-d₆): δ2.68 (dd, J=16.0, 4.9 Hz, 1
H); 2.81 (dd, J=16.0, 5.7 Hz, 1H); 4.74-4.81 (m, 1
H); 6.96 (s, 1H); 7.70 (t, J=7.5 Hz, 1H); 7.85(t,
J=7.5 Hz, 1H); 8.05-8.15 (m, 3H); 8.56 (d, J=8.5 H
z, 1H); 9.12 (d,J=8.6 Hz, 1H); 12.8 (s, 1H)。 IR (KBr): 3385, 3367, 3216, 1171, 1662, 1523, 149
9, 1427, 780, 592 cm^-1。 MS (FD): m/e 288 (M⁺), 288 (100)。 元素分析値 (C₁₄H₁₃N₃O₄として): 計算値: C 58.53; H 4.56; N 14.63; 実測値: C 58.80; H 4.57; N 14.56。

【０１１５】製造例６〜８は製造例５Ａおよび５Ｂに詳
述した操作に準じて行う。 製造例６ (Ｓ)−２−Ｎ−(キノキサリン−２−イルメチルカルボ
ニル)アミノ−３−カルバモイルプロピオン酸 製造例７ (Ｓ)−２−Ｎ−(ナフト−２−イルメチルカルボニル)ア
ミノ−３−カルバモイルプロピオン酸 製造例８ (Ｓ)−２−Ｎ−(キノリン−２−イルメチルカルボニル)
アミノ−３−カルボキシプロピオン酸

【０１１６】製造例９ Ａ.[(３Ｓ−(３Ｒ＊,４ａＲ＊,８ａＲ＊,２'Ｓ＊,３'Ｒ
＊)]−２−[３'-Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノ
−２'−ヒドロキシ−４'−フェニル]ブチル−Ｎ−(ｔ−
ブチル)デカヒドロイソキノリン−３−カルボキサミド 無水ＥｔＯＨ中の[１Ｒ−(１Ｒ＊,３Ｓ＊,１'Ｓ＊,４ａ
Ｓ＊,８ａＳ＊)]−１−[(１'-Ｎ−ベンジルオキシカル
ボニルアミノ−２'−フェニル)エチル]オキシランおよ
びデカヒドロイソキノリン−３−Ｎ−ｔ−ブチルカルボ
キサミドの溶液を８０℃で一夜加熱する。反応混合物を
減圧乾燥して残渣を得る。この残渣をフラッシュクロマ
トグラフィー(１０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂の
勾配溶離)にて精製し、灰白色の泡状物(６.４７g、収率
７５％)を得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.29 (s, 9H); 1.25-2.05 (m, 2
H); 2.20-2.35 (m, 2H); 2.55-2.70 (m, 11H); 2.85-3.
10 (m, 3H); 3.24 (br.s, 1H); 3.82 (br.s, 1H);3.98
(br.s, 1H); 4.99 (br.s, 2H); 5.16-5.18 (m, 1H); 5.
80 (br.s, 1H); 7.05-7.38 (m, 10H)。 IR (CDCl₃): 3600-3100 (br.), 3031, 2929, 1714, 16
73, 1512, 1455, 1368,1232, 1199, 1047 cm^-1。 MS (FD): m/e 536 (M⁺H), 1068 (100)。

【０１１７】Ｂ.[(３Ｓ−(３Ｒ＊,４ａＲ＊,８ａＲ＊,
２'Ｓ＊,３'Ｒ＊)]−２−[３'-アミノ−２'−ヒドロキ
シ−４'−フェニル]ブチル−デカヒドロイソキノリン−
３−Ｎ−ｔ−カルボキサミド 無水ＥｔＯＨ(２００ml)中の上記９Ａの標記中間体(６.
３７g、１１.９１ミリモル)および１０％Ｐｄ／Ｃ(１.
２g)を用い、製造例３Ｄで詳述した操作に準じて、所望
の標記化合物を製造し、固体(５.０９g)を得る。この化
合物は精製することなく使用する。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.33 (s, 9H); 1.40-1.95 (m, 10
H); 2.25-2.48 (m, 2H);2.59-2.75 (m, 3H); 2.80-3.40
(m, 7H); 3.75-3.90 (m, 1H); 6.19 (br.s, 1H); 7.18
-7.35 (m, 5H)。 IR (CDCl₃): 3600-3100 (br.), 2929, 2865, 1671, 15
15, 1455, 1367, 1245,1047 cm^-1。 MS (FD): m/e 402 (M⁺, 100)。

【０１１８】製造例１０ Ａ.Ｎ−[(１'−オキソ−1'−(３"−ヨード−４"−メチ
ル)フェニル)メチル]−１,２,３,４−テトラヒドロイソ
キノリン ＴＨＦ(８０ml)中に３−ヨード−４−メチル安息香酸
(５.００g、１９.１ミリモル)および１,１−カルボニル
ジイミダゾール(３.４０g、２１.０ミリモル)を含有す
る溶液に、１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン
(２.７ml、２１.０ミリモル)を窒素下、シリンジにて加
える。得られる反応混合物を約２時間反応させ、次い
で、減圧乾燥して残渣を得る。この残渣をＥｔＯＡｃ
(１００ml)に再溶解し、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液および食
塩水で連続的に洗浄し、乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、
次いで、減圧乾燥して明黄色油状物を得る。この油状物
をフラッシュクロマトグラフィー(１４〜２０％ヘキサ
ン／ＥｔＯＡｃの勾配溶離)にて精製し、透明油状物
(６.９２g)を得る。収率：９６％。¹ H NMR (CDCl₃): δ2.46 (s, 3H); 2.90 (br.s, 2H);
3.65 (br.s, 1H); 3.95(br.s, 1H); 4.85 (br.s, 1H);
7.17-7.34 (m, 6H); 7.90 (s, 1H)。 IR (CDCl₃): 3010, 1624, 1586, 1547, 1497, 1370, 1
300, 1253, 1108, 1050,1035, 831 cm^-1。 MS (FD): m/e 377 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₁₇H₁₆NOIとして): 計算値: C 54.13; H 4.28; N 3.71; I 33.64; 実測値: C 53.89; H 4.24; N 3.61; I 33.52。

【０１１９】Ｂ.Ｎ−[１'−オキソ−1'−(３"−メトキ
シカルボニル−４"−メチル)フェニル]メチル−１,２,
３,４−テトラヒドロイソキノリン 無水ＭｅＯＨ(１５０ml)中に上記１０Ａの標記化合物
(６.３５g、１６.８ミリモル)、ジシクロヘキシルアミ
ン(３.３５ml、１６.８ミリモル)および塩化ビス(トリ
フェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)(１.１８g、１.
６８ミリモル)を含有する溶液を、一酸化炭素雰囲気下
で激しく撹拌する。反応完了後(ＴＬＣにて示される)、
混合物を減圧乾燥して残渣を得る。この残渣をＥｔＯＡ
ｃ(２００ml)に再溶解し、得られる混合物をセライトで
濾過し、不溶有機塩を除去する。得られた濾液を飽和Ｎ
ａＨＣＯ₃溶液および食塩水で連続的に洗浄し、乾燥(Ｎ
ａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、次いで、減圧乾燥する。得られ
た物質をフラッシュクロマトグラフィー(１４〜２０％
ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの勾配溶離)にて精製し、透明油
状物(４.５４g)を得る。収率：８７％。¹ H NMR (CDCl₃): δ2.64 (s, 3H); 2.90 (br.s, 2H);
3.89 (s, 3H); 3.98 (br.s, 1H); 4.59 (br.s, 1H); 4.
87 (br.s, 1H); 7.05-7.51 (m, 6H); 8.03 (s, 1H)。 IR (CDCl₃): 3010, 1722, 1626, 1584, 1497, 1436, 1
306, 1268, 1236, 1210,1149, 1109, 1085 cm^-1。 MS (FD): m/e 309 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₁₉H₁₉NO₃として): 計算値: C 73.77; H 6.19; N 4.53; 実測値: C 73.95; H 6.43; N 4.57。

【０１２０】Ｃ.Ｎ−[１'−オキソ−1'−(３"−カルボ
キシ−４"−メチル)フェニル]メチル−１,２,３,４−テ
トラヒドロイソキノリン ＴＨＦ／Ｈ₂Ｏ(３：１)混合液(２００ml)中に上記１０
Ｂの標記化合物(４.２５g、１３.８ミリモル)を含有す
る溶液に、水酸化リチウム(ＬｉＯＨ)(６６１mg、２７.
６ミリモル)を加える。反応混合物を約２４時間反応さ
せ、次いで、減圧濃縮し、１Ｎ ＨＣｌを滴下して酸性
化し(ｐＨ２〜３)、粗生成物の沈殿を得る。得られる懸
濁液にＥｔＯＡｃ(７５ml)を合わせ、得られる水性層と
有機層を分離する。水性層をＥｔＯＡｃで抽出し、有機
層を合わせて食塩水で洗浄し、乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾
過し、減圧乾燥して残渣を得る。この残渣をカラムクロ
マトグラフィー(シリカゲル；１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃ
ｌ₂で溶離)にて精製し、灰白色泡状物(４.０５g)を得
る。¹ H NMR (CDCl₃): δ2.68 (s, 3H); 2.92 (br.s, 2H);
3.67 (br.s, 1H); 4.00(br.s, 1H); 4.62 (br.s, 1H);
4.91 (br.s, 1H); 7.18-7.58 (m, 6H); 8.17 (s, 1H)。 IR (CDCl₃): 3500-2500 (br.), 1699, 1625, 1584, 14
98, 1445, 1371, 1301,1237, 1202, 1167, 1060, 981,
934, 838 cm^-1。 MS (FD): m/e 295 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₁₈H₁₇NO₃として): 計算値： Ｃ ７３．２０； Ｈ ５．８０； Ｎ
４．７４； 実測値： Ｃ ７３．１４； Ｈ ５．９０； Ｎ
４．４４。

【０１２１】製造例１１ Ｎ−[１'−オキソ−1'−(３"−カルボキシ−４"−エチ
ル)フェニル]メチル−１,２,３,４−テトラヒドロイソ
キノリン 製造例１０に準じて標記化合物を製造する。 収量：白色泡状物１.３５g(収率８８％)¹ H NMR (CDCl₃): δ1.27 (t, J=7.5 Hz, 3H); 2.96 (b
r.s, 2H); 3.10 (q, J=7.4 Hz, 2H); 3.66 (br.s, 1H);
3.99 (br.s, 1H); 4.62 (br.s, 1H); 4.89 (br.s, 1
H); 7.13-7.25 (m, 4H); 7.38 (d, J=7.9 Hz, 1H); 7.5
8 (d, J=7.2 Hz, 1H); 8.12 (d, J=1.6 Hz, 1H)。 IR (KBr): 3600-2300 (br.); 1700, 1625, 1497, 144
3, 1300, 1237, 1150, 1109, 1048, 933 cm^-1。 MS (FD): m/e 309 (M⁺, 100)。

【０１２２】製造例１２ １,６−ジフェニル−２(Ｓ)；５(Ｓ)−ジアンモニオ−
３(Ｒ)；(４Ｒ)−ジヒドロキシヘキサン 製造例１Ｄの標記化合物(２８５mg、０.８１ミリモル)
および濃ＨＣｌ(１ml)含有ＥｔＯＨ(９ml)中のＰｄ／Ｃ
(１４３mg)を用い、製造例１Ｇに詳述した操作に準じて
標記化合物を製造し、白色固体(１７５mg、収率５８％)
を得る。¹ H NMR (CD₃OD): δ1.98 (d, J=2 Hz, 2H); 2.79-3.07
(m, 4H); 3.60 (br., 2H); 3.75 (br., 2H); 7.20-7.3
7 (m, 10H)。 MS (FD): 301 (M⁺)。

【０１２３】実施例１ １,６−ジフェニル−２(Ｓ)；５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)
−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−３−メチル−
ブタノイル]アミノ]−３,４−cis−エポキシヘキサン ＤＭＦ(２ml)中の２(Ｓ)−Ｎ(ベンジルオキシカルボニ
ル)アミノ−３−メチル酪酸(２１５mg、０.８１８ミリ
モル)、ＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ(１２mg、０.０８２ミリモ
ル)、ＮＭＭ(１０４μl、０.８１８ミリモル)およびヘ
キサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキ
シトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム(３６２mg、０.
０８２ミリモル)を調製し、室温で約１０分間撹拌す
る。同時に、ＤＭＦ(６ml)中の製造例１Ｇの標記中間体
(７１mg、０.２０ミリモル)の溶液に、Ｎ,Ｎ−ジシクロ
ヘキシルアミン(８０μl、０.４０ミリモル)を加え、白
色固体を形成する。この固体を遠心分離にて除去し、濾
液を上記溶液に加える。得られる反応混合物を減圧濃縮
して体積を２.０mlにし、室温で約４８時間反応させ
る。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ(２０ml)で希釈
し、得られる溶液をＥｔＯＡｃ／０.１ＮＨＣｌ(２：
１)(２０ml)に加える。得られた層を分離し、有機層を
飽和ＮａＨＣＯ₃／食塩水の１：１混合液で洗浄し、乾
燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、次いで、減圧乾燥して物質
(１１０mg)を得る。次いで、この物質をフラッシュクロ
マトグラフィー(６５％トルエン／ＥｔＯＡｃで溶離)を
用いて精製し、所望の標記生成物(５２mg)を得る。¹ H NMR (80% CDCl₃/20% CD₃OD): δ7.35 (s, 10); 7.1
8 (m, 10); 5.12 (s, 4); 4.20 (d, 2); 4.12 (m, 1);
3.90 (d, 1); 3.18 (m, 1); 2.82 (m, 5); 2.05(m, 2);
0.90 (m, 9); (d, 3)。 MS: m/e 749 (M⁺ +1)。 元素分析値 (C₄₄H₅₂N₄O₇として): 計算値: C 70.57; H 7.00; N 7.48; 実測値: C 70.31; H 7.11; N 7.76。

【０１２４】次の実施例２〜５は、ＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ、
ＮＮＭおよびＢＯＰを用い、実施例１で詳述した操作に
準じて製造する。 実施例２ １,６−ジフェニル−２(Ｓ)；５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)
−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノブタノイル]ア
ミノ]−３,４−cis−エポキシヘキサン ２(Ｓ)−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノ酪酸(１
９４mg、０.８１８ミリモル)および製造例１Ｇの標記中
間体(７１mg、０.２０ミリモル)を用いて標記化合物を
製造し、所望の化合物(２１mg)を得る。¹ H NMR (80% CDCl₃/20% CD₃OD): δ7.35 (s, 10); 7.2
0 (m, 10); 5.15 (s, 4); 4.25 (d, 2); 4.10 (m, 1);
3.90 (d, 1); 3.15 (m, 1); 2.80 (m, 5); 1.45(m, 4);
0.8 (m, 6)。

【０１２５】実施例３ １,６−ジフェニル−２(Ｓ)；５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)
−Ｎ[(キノリン−２−イルメトキシ)カルボニル]アミ
ノ]−３(Ｓ)−メチルペンタノイル]アミノ]−３,４−ci
s−エポキシヘキサン 製造例２Ｅの標記中間体(３６５mg、１.１５ミリモル)
および製造例１Ｇの標記中間体(１００mg、０.２８２ミ
リモル)を用いて標記化合物を製造する。得られた物質
を逆相ＨＰＬＣ(０.５％のＮＨ₄ＯＡｃを含有する４５
％ＣＨ₃ＣＮ／３０％ＭｅＯＨ／２０％Ｈ₂Ｏ)を用いて
精製し、所望の生成物(９０mg)を得る。¹H NMR (CD₃O
D): δ8.25 (d, 2); 7.95 (d, 2); 7.85 (d, 2); 7.70
(m, 2); 7.55 (m, 4); 7.10 (m, 10); 5.35 (m, 4);
4.25 (m, 2); 4.20 (d, 1); 4.0 (m,2); 3.22 (m, 1);
2.80 (m, 4); 1.8 (m, 2); 1.5 (m, 1); 1.3 (m, 1);
1.1 (m, 2); 0.8 (m, 12)。 MS: m/e 879 (M⁺ +1)。 元素分析値 (C₅₂H₅₈N₆O₇として): 計算値: C 71.05; H 6.65; N 9.56; 実測値: C 71.05; H 6.70; N 9.75。

【０１２６】実施例４ １,６−ジフェニル−２(Ｓ)；５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)
−Ｎ−[[Ｎ(メチル)−Ｎ(キノリン−２−イルメチル)ア
ミノ]カルボニル]アミノブタノイル]アミノ]−３,４−c
is−エポキシヘキサン ２(Ｓ)−Ｎ−[[Ｎ(メチル)−Ｎ(キノリン−２−イルメ
チル)アミノ]カルバモイル]アミノ酪酸(１８７mg、０.
６２ミリモル)および製造例１Ｇの標記中間体(63mg、
０.１８ミリモル)を用いて標記化合物を製造する。得ら
れた物質を逆相ＨＰＬＣ(０.５％のＮＨ₄ＯＡｃを含有
する５０％ＣＨ₃ＣＮ／２０％ＭｅＯＨ／３０％Ｈ₂Ｏ)
を用いて精製し、所望の生成物(５０mg)を得る。¹ H NMR (CD₃OD): δ8.25 (dd, 2); 7.95 (m, 2); 7.85
(m, 2); 7.70 (m, 2);7.55 (t, 2); 7.40 (dd, 2); 7.
15 (m, 10); 4.80 (ABX, 4); 4.35 (m, 2); 4.15 (m,
2); 4.0 (m, 1); 3.25 (m, 1); 3.02 (s, 3); 2.97 (s,
3); 2.80 (m, 4); 1.7 (m, 4); 0.85 (m, 6)。 MS: m/e 849 (M⁺ +1)。

【０１２７】実施例５ １,６−ジフェニル−２(Ｓ)；５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)
−Ｎ−[[Ｎ(メチル)−Ｎ(キノリン−２−イルメチル)ア
ミノ]カルボニル]アミノ−３(Ｓ)−メチルペンタノイ
ル]アミノ]−３,４−cis−エポキシヘキサン ２(Ｓ)−Ｎ−[[Ｎ(メチル)−Ｎ(キノリン−２−イルメ
チル)アミノ]カルボニル]アミノ−３(Ｓ)−メチルペン
タン酸(２３２mg、０.７０４ミリモル)および製造例１
Ｇの標記中間体(７２mg、０.２０１ミリモル)を用いて
標記化合物を製造する。得られた物質を逆相ＨＰＬＣ
(０.５％のＮＨ₄ＯＡｃを含有する５０％ＣＨ₃ＣＮ／２
０％ＭｅＯＨ／３０％Ｈ₂Ｏ)を用いて精製する。¹ H NMR (CD₃OD): δ8.25 (dd, 2); 7.95 (m, 2); 7.85
(d, 2); 7.70 (m, 2);7.55 (t, 2); 7.40 (d, 2); 7.1
5 (m, 10); 4.75 (ABX, 4); 4.38 (d, 1); 4.28(t, 1);
4.20 (m, 1); 4.0 (m, 2); 3.25 (m, 1); 3.02 (s,
6); 2.75 (m, 4);1.78 (m, 2); 1.05-1.45 (m, 4); 0.7
5 (m, 12)。 MS: m/e 906 (M⁺ +2)。

【０１２８】実施例６ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−[１−(２−アミ
ノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４−
フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−
ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル]
−２−キノリニル・カルボキサミド 無水ＴＨＦ(１０ml)および無水ＤＭＦ(１.７５ml)中に
製造例３Ｄの標記中間体(５００mg、１.４６ミリモ
ル)、(Ｓ)−２−Ｎ(キノリン−２−イルカルボニル)−
アミノ−３−カルバモイルプロピオン酸(４４３mg、１.
５４ミリモル)およびＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ(２０８mg、１.５
４ミリモル)を含有する冷溶液(−１０℃)に、Ｎ₂下、ジ
シクロヘキシルカルボジイミド(ＤＣＣ)(３０９mg、１.
５０ミリモル)を加える。得られる反応混合物を−１０
℃で約２０分間、次いで、０℃で１時間、さらに室温で
一夜反応させる。次いで、反応混合物を０℃に冷却し、
濾過して得られた沈殿を除去する。濾液を減圧濃縮して
残渣を得、この残渣をＥｔＯＡｃ(５０ml)に再溶解し、
Ｈ₂Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ₃、５％クエン酸および食塩水で
連続的に洗浄する。得られた層を分離し、有機層を乾燥
(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過し、次いで、減圧濃縮して泡状物
を得る。この泡状物を放射状クロマトグラフィー(１.０
ｍｍプレート、０〜１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂の勾配
溶離)を用いて精製する。収量：４８７mg(収率５５
％)。 [a]D +11.93° (c 0.10, メタノール)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.46 (s, 9H); 2.71 (dd, J=15, 6
Hz, 1H); 2.81-3.01 (m, 4H); 3.07 (dd, J=15, 3 Hz,
1H); 3.75-3.78 (m, 1H); 4.28-4.32 (m, 1H);4.95 (d
d, J=12, 6 Hz, 1H); 5.74 (br.s, 1H); 6.19 (br.s, 1
H); 6.32 (br.s,1H); 6.90 (t, J=6 Hz, 1H); 7.01 (t,
J=6 Hz, 1H); 7.08-7.38 (m, 6H); 7.64 (t, J=6 Hz,
1H); 7.79 (t, J=9 Hz, 1H); 7.80 (d, J=6 Hz, 1H);
8.17-8.31(m, 3H); 9.22 (d, J=9 Hz, 1H)。¹³ C NMR (75.4 MHz, CDCl₃): δ28.7, 35.3, 37.1, 3
7.2, 50.1, 52.1, 53.5,55.9, 74.8, 118.7, 126.0, 12
7.0, 127.6, 128.2, 129.3, 129.4, 130.0, 130.2, 13
0.3, 130.9, 137.4, 137.5, 138.2, 146.5, 148.8, 16
4.6, 170.4, 170.5。IR (CHCl₃): 3428, 3411, 3359, 3
012, 2975, 1681, 1601, 1565, 1518, 1499,1454, 142
8, 1395, 1367, 1231, 1047 cm^-1。 MS (FD): m/e 610 (M⁺); 221 (100)。 元素分析値 (C₃₅H₃₉N₅O₅として): 計算値: C 68.95; H 6.45; N 11.49; 実測値: Ｃ ６８．７６； Ｈ ６．５５； Ｎ １
１．４９。

【０１２９】実施例７ ［１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−[１−(２−ア
ミノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４
−フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ
−ブチルアミノ−１−オキソメチル)−４−メチルフェ
ニル)ヘキシル]−２−キノリニル・カルボキサミド [２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル−２−(３−
(Ｎ−ベンジルオキシカルボニル)アミノ−２−ヒドロキ
シ−４−フェニルブチル)−５ーメチルベンズアミドお
よび(Ｓ)−２−Ｎ(キノリン−２−イルカルボニル)アミ
ノ−３−カルバモイルプロピオン酸、ＨＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ
およびＤＣＣを用い、実施例６で詳述した操作に準じて
標記化合物を製造する。得られた物質をフラッシュクロ
マトグラフィー(２〜８％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂の勾配
溶離)を用いて精製し、粗物質(２.００g)を得、これを
逆相ＨＰＬＣを用いてさらに精製する。 [a]D +28.57° (c 0.10, メタノール)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.43 (s, 9H); 2.30 (s, 3H); 2.6
3-3.05 (m, 6H); 3.65-3.76 (m, 1H); 4.22-4.35 (m, 1
H); 4.89-4.97 (m, 1H); 5.51 (s, 1H); 5.82-5.88 (b
r.s, 1H); 6.09 (s, 1H); 6.20 (s, 1H); 6.84-7.24
(m, 10H); 7.63 (t,J=7.5 Hz, 1H); 7.78 (t, J=7.5 H
z, 1H); 7.85 (d, J=8 Hz, 1H); 8.19 (t, J=8.4 Hz, 1
H); 8.28 (d, J=8.4 Hz, 1H); 9.20 (d, J=8.1 Hz, 1
H)。 IR (CHCl₃): 3410, 3022, 3013, 1674, 1519, 1497, 1
454, 1428, 1367, 1210,1047, 910 cm^-1。 MS (FD): m/e 624 (M⁺); 234 (100)。 元素分析値 (C₃₆H₄₁N₅O₅として): 計算値: C 69.32; H 6.63; N 11.23; 実測値: C 68.73; H 6.76; N 11.07。

【０１３０】実施例８ Ａ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−(２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)ア
ミノ)−７−カルバモイルヘプチル)ベンズアミド 無水ＤＭＦ(２０ml)中に製造例３Ｄの標記中間体(３.４
g、１０ミリモル)、２−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)
アミノ−３−カルバモイルプロピオン酸(２.６g、１０
ミリモル)、ＮＭＭ(１.０９ml、１０ミリモル)およびＨ
ＯＢＴ・Ｈ₂Ｏ(１.４８mg、１１ミリモル)を含有する冷
溶液(０℃)に、Ｎ₂下、ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド(ＤＣＣ)(２.４mg、１１ミリモル)を加える。反応混
合物を室温まで暖め、一夜反応させる。得られる反応混
合物を濾過し、所望の標記化合物をＥｔＯＡｃを用いて
濾液から抽出する。ＥｔＯＡｃ溶液をＥｔＯＡｃ／Ｈ₂
Ｏ混合物で希釈する。得られる層を分離し、有機層を飽
和ＮａＨＣＯ₃、５％クエン酸、飽和ＮａＨＣＯ₃および
食塩水で連続的に洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、濾過
し、次いで、減圧乾燥して残渣を得る。次いで、この残
渣をＥｔ₂Ｏ／ヘキサン混合物で濯ぎ、次いで、フィル
ターを真空デシケーター内で乾燥する。収量：４.４g
(収率７９％)。

【０１３１】Ｂ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ
−ｔ−ブチル−２−(２−ヒドロキシ−３−フェニルメ
チル−４−アザ−５−オキソ−６−アミノ−７−カルバ
モイルヘプチル)ベンズアミド 実施例８Ａの標記化合物およびＰｄ／Ｃを用い、製造例
３Ｄで詳述した操作に準じて標記化合物を製造し、淡黄
色泡状物(３１.１g、収率９６％)を得る。 Ｃ.[１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−
アミノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−
４−フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−
ｔ−ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシ
ル)−７−メチルキノリン−２−イル・カルボキサミド 無水ＣＨ₂Ｃｌ₂(１５ml)中に２−カルボキシ−７−メチ
ルキノリンおよび１,１−カルボニルジイミダゾール(８
１mg、０.５ミリモル)を含有する溶液に、実施例８Ｂの
標記化合物(２２７mg、０.５ミリモル)を加える。得ら
れる反応混合物を一夜反応させる。反応完了後(ＴＬＣ
にて決定)、反応混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂(１００ml)および
Ｈ₂Ｏ(２５ml)で希釈し、エマルジョンを得る。このエ
マルジョンを飽和ＮａＨＣＯ₃、５％クエン酸、飽和Ｎ
ａＨＣＯ₃および食塩水で連続的に洗浄する。得られる
混合物を乾燥(ＭｇＳＯ₄)し、次いで、減圧乾燥して残
渣を得る。この残渣をＥｔ₂Ｏでスラリー化し、濾過し
て単離し、次いで、真空デシケーター内で室温にて乾燥
し、所望の標記化合物(１１５mg、収率３７％)を得る。 MS (FAB): 623 (M⁺¹)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.46 (s, 9H); 2.6-3.1 (m, 10H);
3.69-3.75 (m, 1H); 4.22-4.32 (m, 1H); 4.28-4.35
(m, 1H); 4.9 (m, 1H); 5.3-5.35 (m, 1H); 5.9-6.05
(2 br.s, 2H); 6.89-8.3 (m, 14H); 9.3 (d, 1H)。

【０１３２】次の実施例９および１０においては、実施
例８Ｂの標記化合物および選定したカルボキシ置換試薬
を用い、実施例８Ｃで詳述した操作に準じて標記化合物
を製造する。 実施例９ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−アミ
ノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４−
フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−
ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル)
−８−メチルキノリン−２−イル・カルボキサミド ２−カルボキシ−８−メチルキノリンを用いて標記化合
物を製造する。収率５７.８％。 MS (FAB): M⁺¹ (623+1)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.46 (s, 9H); 2.6-3.1 (m, 8H);
3.70-3.78 (m, 1H); 4.28-4.32 (m, 1H); 4.9 (m, 1H);
5.2 (br.s, 1H); 6.05 (br.s, 2H); 6.8-7.78 (m, 12
H); 8.2-8.3 (dd, 2H)。 元素分析値 (C₃₆H₄₀N₅O₅として): 計算値: C 69.32; H 6.62; N 11.23; 実測値: C 69.10; H 6.81; N 10.94。

【０１３３】実施例１０ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−アミ
ノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４−
フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−
ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル)
−４−メチルキノリン−２−イル・カルボキサミド ２−カルボキシ−４−メチルキノリンを用いて標記化合
物を製造する。収率３５％。 MS (FAB): 623 (M⁺¹)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.46 (s, 9H); 2.6-3.1 (m, 10H);
3.7-3.78 (m, 1H); 4.23-4.35 (m, 1H); 4.9-4.95 (m,
1H); 5.35-5.40 (br.s, 1H); 5.97-6.08 (2 br.s, 3
H); 6.82-8.2 (m, 14H); 9.18-9.2 (d, 1H)。 元素分析値 (C₃₆H₄₀N₅O₅として): 計算値: C 69.32; H 6.62; N 11.23; 実測値: C 69.06; H 6.64; N 11.25。

【０１３４】次の実施例１１〜１５においては、ＨＯＢ
Ｔ・Ｈ₂ＯおよびＤＣＣを用い、実施例６で詳述した操
作に準じて標記化合物を製造する。 実施例１１ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−アミ
ノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４−
フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−
ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル)
−２−(６,７,８,９−テトラヒドロナフチル)カルボキ
サミド 収量７５mg(収率５４％)の無色泡状物。¹ H NMR (CDCl₃): δ8.0 (d, 1H); 7.5-7.03 (m, 12H);
6.51 (br.s, 1H); 6.22(br.s, 1H); 5.57 (br.s, 1H);
4.84 (m, 1H); 4.23 (m, 1H); 3.75 (m, 1H);3.12-2.5
(m, 10H); 1.81 (m, 4H); 1.43 (s, 9H)。 MS (FD): 629 (M⁺¹)。 元素分析値 (C₃₇H₃₆N₄O₅として): 計算値: C 70.79; H 7.55; N 8.92; 実測値: Ｃ ７０．６３； Ｈ ７．３１； Ｎ
９．２１。

【０１３５】実施例１２ ［１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−イソプロ
ピル−２−オキソ−３−アザ−４−フェニルメチル−５
−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−ブチルアミノ−１−
オキソメチル)フェニル)ヘキシル)−２−キノキサリジ
ニル・アセトアミド 製造例３Ｄおよび６の標記化合物を用いて所望の標記化
合物(５１mg、収率８％)を黄色っぽい泡状物で得る。¹ H NMR (CDCl₃): δ9.69 (s, 1H); 8.31 (d, 1H); 8.2
8-7.0 (m, 13H); 6.78 (m, 2H); 6.12 (m, 2H); 4.43
(m, 2H); 3.82 (m, 1H); 1.5 (s, 9H); 1.0 (dd,6H)。 MS (FD): 597 (M⁺¹)。

【０１３６】実施例１３ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−イソプロ
ピル−２−オキソ−３−アザ−４−フェニルメチル−５
−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−ブチルアミノ−１−
オキソメチル)フェニル)ヘキシル)−２−ナフチル・ア
セトアミド 製造例３Ｄおよび７の標記化合物を用いて所望の標記化
合物(３９.６mg、収率１１％)を黄褐色の泡状物で得
る。¹ H NMR (CDCl₃): δ8.22 (s, 1H); 7.93-6.7 (m, 15
H); 6.1 (d, 1H); 6.0 (s,1H); 4.49 (t, 1H); 4.35
(m, 1H); 3.82 (m, 1H); 3.09-2.77 (m, 4H); 2.2 (m,
1H); 1.47 (s, 9H); 0.98 (t, 6H)。 MS (FD): 594 (M⁺¹)。

【０１３７】実施例１４ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−アミ
ノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４−
フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−
ブチルアミノ−１−オキソメチル)チエン−３−イル)ヘ
キシル)−２−キノリニル・カルボキサミド 収量９０mg(収率５０％)の白色固体。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.42 (s, 9H); 2.75 (dd, J=7 Hz,
1H); 2.95-3.20 (m, 5H); 3.77 (m, 1H); 4.27 (m, 1
H); 4.95 (m, 1H); 5.38 (br.s, 1H); 5.93 (br.s, 1
H); 6.41 (br.s, 1H); 6.95 (m, 5H); 7.20 (m, 4H);
7.66 (t, J=8 Hz, 1H); 7.81 (t, J=8 Hz, 1H); 7.90
(d, J=8 Hz, 1H); 8.20 (m, 2H); 8.34 (d, J=8Hz, 1
H); 9.25 (d, J=8 Hz, 1H)。 IR (KBr): 3302, 1667, 1498, 1427 cm^-1。 MS (FAB): mass 616.2591 (M+H)。 MS (FD): m/e 615 (M⁺)。 元素分析値 (C₃₃H₃₇N₅O₅Sとして): 計算値: C 64.37; H 6.06; N 11.37; 実測値: C 64.60; H 5.98; N 11.42。

【０１３８】実施例１５ [１Ｓ−(１Ｒ＊,Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−ヒドロ
キシ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４
−フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ
−ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシ
ル)−２−キノリニル・カルボキサミド 製造例３Ｄおよび８の標記化合物を用いて所望の標記化
合物(４０mg、収率４０％)を無色固体で得る。¹ H NMR (DMSO-d₆): δ1.38 (s, 9H); 2.58-3.05 (m, 6
H); 3.61 (br.s, 1H); 3.84 (m, 1H); 4.79 (m, 1H);
5.88 (s, 1H); 6.92 (t, J=8 Hz, 1H); 7.02 (t,J=8 H
z, 2H); 7.12-7.37 (m, 6H); 7.75 (t, J=10 Hz, 2H);
7.90 (t, J=10 Hz,2H); 7.98 (d, J=10 Hz, 2H); 8.07-
8.23 (m, 4H); 8.60 (d, J=10 Hz, 1H); 8.89 (d, J=10
Hz, 1H); 12.40 (s, 1H)。 MS (FD): m/e 613 (25), 612 (95), 611 (100)。 元素分析値 (C₃₅H₃₈N₄O₆として): 計算値: C 68.84; H 6.27; N 9.17; 実測値: Ｃ ６８．６１； Ｈ ６．４４； Ｎ
９．１０。

【０１３９】次の実施例１６〜１９においては、１，１
−カルボニルジイミダゾールを用い、実施例８Ｃで詳述
した操作に準じて標記化合物を製造する。 実施例１６ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−(Ｎ
−２−ピリジルメチル)アミノ)−２−オキソエチル)−
２−オキソ−３−アザ−４−フェニルメチル−５−ヒド
ロキシ−６−(２−(１−ｔ−ブチルアミノ−１−オキソ
メチル)フェニル)ヘキシル)−２−キノリニル・カルボ
キサミド 実施例１５の標記化合物(０.２g、０.３３ミリモル)お
よび２−アミノメチルピリジン(０.０７ml、０.６６ミ
リモル)を用いて標記化合物を製造する。収量３３m(収
率１４％)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.48 (s, 9H); 2.77-3.16 (m, 6
H); 3.80 (br.s, 1H); 4.33 (m, 1H); 4.59 (m, 2H);
5.02 (m, 1H); 5.90 (br.s, 1H); 6.23 (s, 1H); 6.90-
7.09 (m, 4H); 7.15 (m, 1H); 7.20-7.42 (m, 8H); 7.5
7-7.70 (m, 2H); 7.82 (t, J=8 Hz, 1H); 7.91 (d, J=8
Hz, 1H); 8.18-8.40 (m, 4H); 9.35 (d, J=8Hz, 1H)。 MS (FD): m/e 701 (100), 700 (15), 481 (28), 220
(90)。 元素分析値 (C₄₁H₄₄N₆O₅・2.2H₂Oとして): 計算値: C 66.50; H 6.56; N 11.40; 実測値: C 66.35; H 6.20; N 11.00。

【０１４０】実施例１７ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−(Ｎ
−２−イミダゾリルメチル)アミノ)−２−オキソエチ
ル)−２−オキソ−３−アザ−４−フェニルメチル−５
−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−ブチルアミノ−１−
オキソメチル)フェニル)ヘキシル)−２−キノリニル・
カルボキサミド 実施例１５の標記化合物(０.５０g、０.８２ミリモル)
およびイミダゾールメチルアミンジヒドロクロリド(０.
２８g、1.６４ミリモル)、１,１−カルボニルジイミダ
ゾールの代わりにＨＯＢＴ・Ｈ₂ＯおよびＤＣＣを用い
て標記化合物を製造し、無色固体(０.２６g、収率４６
％)を得る。¹ H NMR (DMSO-d₆): δ1.33 (s, 9H); 2.69 (m, 5H);
2.95 (dd, J=30 Hz, 14,2H); 3.62 (br.s, 1H); 3.88
(br.s, 1H); 4.22 (d, J=10 Hz, 2H); 4.80 (br.s, 1
H); 6.82 (br.s, 1H); 6.87 (t, J=8 Hz, 1H); 7.05
(t, J=8 Hz, 2H); 7.15-7.25 (m, 4H); 7.30 (t, J=7 H
z, 2H); 7.74 (t, J=7 Hz, 1H); 7.89 (t, J=9Hz, 1H);
7.98-8.14 (m, 6H); 8.45 (t, J=6 Hz, 1H); 8.58 (d,
J=9 Hz, 1H);8.96 (d, J=9 Hz, 1H)。 MS (FD): m/e 691 (80), 690 (100)。 元素分析値 (C₃₉H₄₃N₇O₅として): 計算値: C 67.91; H 6.28; N 14.21; 実測値: C 67.67; H 6.50; N 13.98。

【０１４１】実施例１８ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−(Ｎ
−２−ベンズイミダゾリルメチル)アミノ)−２−オキソ
エチル)−２−オキソ−３−アザ−４−フェニルメチル
−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−ブチルアミノ−
１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル)−２−キノリニ
ル・カルボキサミド 収量：黄色泡状物０.１９９g(収率８２％)。¹ H NMR (DMSO-d₆): δ1.34 (s, 9H); 2.63-3.30 (m, 5
H); 3.60-3.65 (m, 1H);3.88-3.91 (m, 1H); 4.43 (d,
J=5.6 Hz, 2H); 4.84 (dd, J=7.8, 6.0 Hz, 1H); 5.87
(d, J=5.3 Hz, 1H); 6.92-7.47 (m, 14H); 7.69-7.75
(m, 1H); 7.85 (t, J=7.7 Hz, 1H); 8.03-8.20 (m, 6
H); 8.57 (d, J=8.6 Hz, 1H); 8.65 (m, 1H); 9.00 (d,
J=8.2 Hz, 1H)。 MS (FD): m/e 743 (M⁺¹); 740 (29); 739 (50); 354
(100)。 元素分析値 (C₄₃H₄₅N₇O₅・0.4H₂Oとして): 計算値: C 69.13; H 6.18; N 13.12; 実測値: C 68.84; H 6.35; N 13.50。

【０１４２】実施例１９ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−アミ
ノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４−
フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−
ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル)
−４−クロロキノリン−２−イル・カルボキサミド 収量：２９.２mg(収率９％)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.45 (s, 9H); 2.7-3.1 (m, 6H);
3.7-3.8 (m, 1H); 4.3-4.4 (m, 1H); 4.9-5.0 (m, 1H);
5.5 (m, 1H); 6.0 (m, 2H); 6.9-8.3 (m, 17H);9.2
(d, 1H)。 MS (FD): 644。 元素分析値 (C₃₅H₃₈N₅O₅Clとして): 計算値: C 65.26; H 5.95; N 10.87; 実測値: C 65.55; H 6.04; N 10.85。

【０１４３】実施例２０〜２２においては、実施例６で
詳述した操作に準じて製造する。 実施例２０ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−メチ
ルプロピル)−２−オキソ−３−アザ−４−フェニルメ
チル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−ブチルアミ
ノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル)−キノリン
−２−イル・カルボキサミド 収量：４４mg(収率６１％)。 実施例２１ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(プロピ
ル)−２−オキソ−３−アザ−４−フェニルメチル−５
−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−ブチルアミノ−１−
オキソメチル)フェニル)ヘキシル)−キノリン−２−イ
ル・カルボキサミド 収量：４２mg(収率２２％)。 MS (FD): m/e 598 (M⁺⁴)。 実施例２２ [１Ｓ−(１Ｒ＊,４Ｒ＊,５Ｓ＊)]−Ｎ−(１−(２−アミ
ノ−２−オキソエチル)−２−オキソ−３−アザ−４−
フェニルメチル−５−ヒドロキシ−６−(２−(１−ｔ−
ブチルアミノ−１−オキソメチル)フェニル)ヘキシル)
−８−トリフルオロメチル−キノリン−２−イル・カル
ボキサミド 収量：１１６mg(収率３４％)。 MS (FD): m/e 678 (M⁺¹)。

【０１４４】実施例２３ Ａ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミ
ノ−７−メチル]オクチル・ベンズアミド (Ｓ)−２−Ｎ−(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−３−
メチル酪酸(１.３４g、６.１８ミリモル)および製造例
３Ｄの標記中間体(２.００g、５.８８ミリモル)を用
い、実施例６で詳述した操作に準じて標記化合物を製造
し、無色泡状物(３.９５g)を得る。この泡状物の半分を
カラムクロマトグラフィー(ＳｉＯ₂；３％ＭｅＯＨ／Ｃ
ＨＣｌ₃で溶離)を用いて精製し、所望の標記化合物(１.
４５g)を得る。泡状物の残りの半分はそれ以上精製する
ことなく後記実施例５６Ｂで反応に付す。 元素分析値 (C₃₁H₄₅N₃O₅として): 計算値: C 69.12; H 8.23; N 7.80; 実測値: C 69.38; H 8.43; N 7.96。

【０１４５】Ｂ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ
−ｔ−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメ
チル−４−アザ−５−オキソ−６−アミノ−７−メチ
ル]オクチル・ベンズアミド 無水ＥｔＯＨ(７５ml)中の実施例２３Ａの標記化合物
(２.０g、max３.７ミリモル)および水酸化トルエンスル
ホニル水和物(ＴｏｓＯＨ・Ｈ₂Ｏ)(０.７１３g、３.７
ミリモル)の溶液を５５℃に加熱する。反応完了後(ＴＬ
Ｃにより示される)、混合物を室温まで冷却し、減圧濃
縮して残渣を得る。この残渣をＥｔＯＡｃ(１００ml)お
よび１０％ＮＨ₄ＯＨ(５０ml)に分配する。得られる層
を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)
し、濾過し、次いで、減圧乾燥して白色泡状物(１.０g)
を得る。この泡状物をフラッシュクロマトグラフィー
(ＳｉＯ₂；２〜５％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ₃の勾配溶離)を
用いて精製し、所望の標記化合物(０.９７g)を得る。 元素分析値 (C₂₆H₃₇N₃O₃として): 計算値: C 71.04; H 8.48; N 9.56; 実測値: C 70.85; H 8.59; N 9.56。

【０１４６】Ｃ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊,９Ｓ
＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フ
ェニルメチル−４,７−ジアザ−５,８−ジオキソ−６−
(１−メチルエチル)−９−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)
アミノ−１０−ナフト−１−イル]デシル・ベンズアミ
ド (Ｓ)−２−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−３−ナ
フト−１−イルプロピオン酸(２２６mg、０.７１７ミリ
モル)および実施例２３Ｂの標記中間体(３００mg、０.
６８３ミリモル)を用い、実施例６で詳述した操作に準
じて所望の標記化合物を製造し、灰白色泡状物(４９０m
g、収率９８％)を得る。 MS (FD): m/e 737 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₄₄H₅₆N₄O₆として): 計算値: C 71.71; H 7.66; N 7.60; 実測値: C 71.82; H 7.73; N 7.55。

【０１４７】実施例２４ [２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊,９Ｒ＊)]−Ｎ−ｔ−ブ
チル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４,
７−ジアザ−５,８−ジオキソ−６−(１−メチルエチ
ル)−９−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−１０−
ナフト−１−イル]デシル・ベンズアミド (Ｒ)−２−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−３−ナ
フト−１−イルプロピオン酸(２２６mg、０.７１７ミリ
モル)および実施例２３Ｂの標記中間体(３００mg、０.
６８３ミリモル)を用い、実施例６で詳述した操作に準
じて所望の標記化合物を製造し、灰白色泡状物(４９０m
g、収率９８％)を得る。 MS (FD): m/e 737 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₄₄H₅₆N₄O₆として): 計算値: C 71.71; H 7.66; N 7.60; 実測値: C 71.41; H 7.90; N 7.68。

【０１４８】実施例２５ Ａ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)ア
ミノ−７−カルバモイル]ヘプチル・ベンズアミド (Ｓ)−２−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−３−
カルバモイルプロピオン酸(２.６g、１０ミリモル)およ
び製造例３Ｄの標記中間体(３.４g、１０ミリモル)を用
い、反応混合物にＮＭＭ(１.０９ml、１０ミリモル)を
加える以外は実施例６で詳述した操作に準じて所望の標
記化合物を製造し、所望の標記化合物(４.４g、収率７
６％)を得る。 Ｂ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−アミノ−７−カルバモイル]ヘプ
チル・ベンズアミド 実施例２５Ａの標記中間体(４g、６.７ミリモル)および
５％Ｐｄ／Ｃ(０.５g)を用い、製造例３Ｄで詳述した操
作に準じて所望の標記化合物を製造する。収量２.４g
(収率８０％)。 Ｃ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊、９Ｒ＊)]−Ｎ−ｔ
−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル
−４,７−ジアザ−５,８−ジオキソ−６−(２−アミノ
−２−オキソエチル)−９−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニ
ル)アミノ−１０−ナフト−１−イル]デシル・ベンズア
ミド (Ｒ)−２−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−３−ナ
フト−１−イルプロピオン酸(６３０mg、２.０ミリモ
ル)および実施例２５Ｂの標記中間体(９０８mg、２.０
ミリモル)を用い、実施例６で詳述した操作に準じて所
望の標記化合物を製造する。収量９２０mg(６０％)。 MS (FD): m/e 751 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₄₃H₅₃N₅O₇として): 計算値: C 68.69; H 7.10; N 9.31; 実測値: C 68.66; H 7.22; N 9.27。

【０１４９】実施例２６ [２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊、９Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブ
チル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４,
７−ジアザ−５,８−ジオキソ−６−(２−アミノ−２−
オキソエチル)−９−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミ
ノ−１０−ナフト−１−イル]デシル・ベンズアミド (Ｓ)−２−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−３−ナ
フト−１−イルプロピオン酸(６３０mg、２.０ミリモ
ル)および実施例２５Ｂの標記中間体(９０８mg、２.０
ミリモル)を用い、実施例６で詳述した操作に準じて所
望の標記化合物を製造する。収量８９５mg（６０％）。 MS (FD): m/e 751 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₄₃H₅₃N₅O₇として): 計算値: C 68.69; H 7.10; N 9.31; 実測値: C 68.58; H 7.11; N 9.01。

【０１５０】実施例２７ Ａ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)ア
ミノ−７−イミダゾール−４−イル]ヘプチル・ベンズ
アミド (Ｓ)−２−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−３−
イミダゾール−４−イルプロピオン酸(１.７９g、６.１
８ミリモル)および製造例３Ｄの標記中間体(２.００g、
５.８８ミリモル)を用い、実施例６で詳述した操作に準
じて所望の標記化合物を製造し、灰白色の泡状物を得
る。これをそれ以上精製することなく使用する。収量
３.４６g(収率９６％)。 元素分析値 (C₃₅H₄₁N₅O₅として）： 計算値： C 68.72; H 6.76; N 11.45; 実測値: C 65.60; H 6.61; N 10.94。

【０１５１】Ｂ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ
−ｔ−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメ
チル−４−アザ−５−オキソ−６−アミノ−７−イミダ
ゾール−４−イル]ヘプチル・ベンズアミド ５％Ｐｄ／Ｃ(１.９g)および実施例２７Ａの標記中間体
(３.３６g、５.５モル)を用い、製造例３Ｄで詳述した
操作に準じて所望の標記化合物を製造し、淡黄色泡状物
を得る。 元素分析値 (C₂₇H₃₅N₅O₃として): 計算値: C 67.90; H 7.39; N 14.66; 実測値: C 67.94; H 7.50; N 14.36。 MS: m/e 478 (M⁺)。

【０１５２】Ｃ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊、９Ｓ
＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フ
ェニルメチル−４,７−ジアザ−５,８−ジオキソ−６−
(イミダゾール−４−イルメチル)−９−Ｎ(ｔ−ブトキ
シカルボニル)アミノ−１０−ナフト−１−イル]デシル
・ベンズアミド (Ｓ)−２−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−３−ナ
フト−１−イルプロピオン酸(３３０mg、１.０５ミリモ
ル)および実施例２７Ｂの標記中間体(５００mg、１.０
５ミリモル)を用い、実施例６で詳述した操作に準じて
所望の標記化合物を製造する。収量６１２g(収率７６
％)。 MS (FD): m/e 774 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₄₅H₅₄N₆O₆として): 計算値: C 69.74; H 7.02; N 10.84; 実測値: C 69.55; H 6.86; N 10.57。

【０１５３】次の実施例２８〜３０においては、実施例
６で詳述した操作に準じて製造する。 実施例２８ [２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊、９Ｒ＊)]−Ｎ−ｔ−ブ
チル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４,
７−ジアザ−５,８−ジオキソ−６−(イミダゾール−４
−イルメチル)−９−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミ
ノ−１０−ナフト−１−イル]デシル・ベンズアミド (Ｒ)−２−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−３−ナ
フト−１−イルプロピオン酸(３３０mg、１.０５ミリモ
ル)および実施例２７Ｂの標記中間体(５００mg、１.０
５ミリモル)を用いて所望の標記化合物を製造する。収
量６１２g(収率７６％)。 MS (FD): m/e 774 (M⁺, 100)。 元素分析値 (C₄₅H₅₄N₆O₆として): 計算値: C 69.74; H 7.02; N 10.84; 実測値: C 69.75; H 6.98; N 10.88。

【０１５４】実施例２９ [３'''Ｓ−(３'''Ｒ＊,４'''Ｓ＊)]−Ｎ−[１'−オキソ
−１'−(３''−[１'''−オキソ−２'''−アザ−３'''−
フェニルメチル−４'''−ヒドロキシ−５'''−(２'''−
Ｎ−ｔ−ブチルカルバミド)フェニル]ペンチル−４''−
エチル)フェニル]メチル−１,２,３,４−テトラヒドロ
イソキノリン 製造例１１の標記中間体(３００mg、０.９７ミリモル)
および製造例３Ｄの標記中間体(３４１mg、１.１８ミリ
モル)を用いて標記化合物を製造する。灰白色泡状物の
収量４１０mg(収率６７％)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.07 (t, J=7.6 Hz, 3H); 1.45
(s, 9H); 2.54 (q, J=7.5Hz, 2H); 2.70-3.30 (m, 5H);
3.55 (br.s, 1H); 3.91-3.95 (m, 1H); 4.40-4.65 (m,
2H); 4.83 (br.s, 1H); 5.97 (s, 1H); 6.32 (br.d, J
=9.2 Hz, 1H); 6.90-7.60 (m, 16H)。 IR (CDCl₃): 3009, 1645, 1514, 1455, 1236, 1213 cm
^-1。 MS (FD): ｍ／ｅ ６３２ （Ｍ^＋， １００）。

【０１５５】実施例３０ ［３Ｓ−(３Ｒ＊,４ａＲ＊,８ａＲ＊,２'Ｓ＊,３'Ｒ
＊)]−２−[２'−ヒドロキシ−３'−フェニルメチル−
４'−アザ−５'−オキソ−５'-(３''−[１''',２''',
３''',４'''−テトラヒドロイソキノリン−１'''−イル
カルボニル]−６''−メチル)フェニル]ペンチル−デカ
ヒドロイソキノリン−３−Ｎ−ｔ−ブチルカルボキサミ
ド 製造例１０Ｃの標記中間体(３６６mg、１.２４ミリモ
ル)および製造例９Ｂの標記中間体(５００mg、１.２４
ミリモル)を用いて標記化合物を製造する。灰白色泡状
物の収量４８９mg(収率５８％)。 [a]D -69.1017° (c 1.013, メタノール)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.13 (s, 9H); 1.20-2.10 (m, 14
H); 2.20-2.35 (m, 4H);2.50-3.05 (m, 7H); 3.37-3.60
(m, 2H); 3.80-4.10 (m, 2H); 4.40-4.70 (m, 2H); 4.
85 (br.s, 1H); 5.67 (br.s, 1H); 6.72 (br.d, J=8.4
Hz, 1H); 6.95-7.34 (m, 12H)。 IR (KBr): 3600-3150 (br.); 3009, 1627, 1514, 145
5, 1247, 1047 cm^-1。 MS (FD): m/e 679 (M⁺), 578 (100)。 元素分析値 (C₄₂H₅₄N₄O₄として): 計算値: C 74.30; H 8.02; N 8.25; 実測値: C 74.07; H 8.00; N 8.22。

【０１５６】実施例３１ Ａ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｒ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミ
ノ−７−ベンジルオキシカルボニル]ヘプチル・ベンズ
アミド 製造例３Ｄの標記中間体(１.０g、２.９ミリモル)およ
び(２Ｒ)−２−Ｎ(ｔ−ブトキシカルボニル)アミノ−４
−オキソ−４−ベンジルオキシ酪酸(０.９５g、２.９ミ
リモル)を用い、実施例６で詳述した操作に準じて標記
化合物を製造し、白色固体(１.９g、収率８７％)を得る
(m.p.６７〜７２℃)。 元素分析値 (C₃₇H₄₇N₃O₇として): 計算値: C 68.82; H 7.34; N 6.51; 実測値: C 69.16; H 7.50; N 6.56。

【０１５７】Ｂ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｒ＊)]−Ｎ
−ｔ−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメ
チル−４−アザ−５−オキソ−６−アミノ−７−ベンジ
ルオキシカルボニル]ヘプチル・ベンズアミド ＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例３１Ａの標記化合物(２.８９g、
５.５３ミリモル)の冷溶液(０℃)に、トリフルオロ酢酸
(ＣＦ₃ＣＯＯＨ)を加える。得られる反応混合物を約１
時間撹拌し、次いで、減圧濃縮して泡状物を得る。この
泡状物をトルエンでスラリー化し、次いで、減圧濃縮し
て粗物質(２.４g)を得、これをそれ以上精製することな
く使用する。 Ｃ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｒ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−Ｎ(メチルスルホニル)アミノ−７
−ベンジルオキシカルボニル]ヘプチル・ベンズアミド ＣＨ₂Ｃｌ₂中に実施例３１Ｂの標記化合物(０.７５g、
０.９７ミリモル)を含有する溶液に、Ｎ₂下、塩化メタ
ンスルホニル(７５.１μl、０.９７０ミリモル)を加え
る。反応完了後(ＴＬＣにより示される)、反応混合物を
減圧乾燥して残渣を得る。白色固体の収量０.３３g(収
率５４％)。¹ H NMR (CDCl₃): δ1.45 (s, 9H); 2.42 (dd, J=6.12
Hz, 1H); 2.76 (s, 3H);2.63-3.10 (m, 5H); 3.80 (m,
1H); 4.13 (m, 1H); 4.38 (m, 1H); 5.05 (s, 2H); 5.8
0 (d, J=8 Hz, 1H); 5.99 (d, J=6 Hz, 1H); 6.10 (s,
1H); 7.06-7.41(m, 15H)。 MS (FD): m/e 623 (M⁺)。 IR (CHCl₃): 3026, 1660, 1643, 1602, 1517 cm^-1。 UV (EtOH): 203nm (E=44,949)。 元素分析値 (C₃₃H₄₁N₃O₇Sとして): 計算値: C 63.54; H 6.62; N 6.74; 実測値: Ｃ ６３．７３； Ｈ ６．５６； Ｎ
６．５２。

【０１５８】Ｄ．［２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｒ＊)]−
Ｎ−ｔ−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニル
メチル−４−アザ−５−オキソ−６−Ｎ(メチルスルホ
ニル)アミノ−７−カルボキシ]ヘプチル・ベンズアミド メタノール中の実施例３１Ｃの標記化合物(０.１３g、
０.２１ミリモル)の溶液に、ギ酸アンモニウム(０.２
g、３.２ミリモル)および５％Ｐｄ／Ｃ(５０mg)を加え
る。反応混合物を還流温度で約２時間反応させる。反応
完了後(ＴＬＣにて決定)、反応混合物を冷却し、ＥｔＯ
Ａｃで希釈し、濾過する。次いで、溶液をＨ₂Ｏ(５０m
l)と合わせ、次いで、得られる層を分離し、有機層を減
圧乾燥する。白色固体の収量０.１０g(収率９１％)。

【０１５９】実施例３２ Ａ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ−ｔ−ブチル
−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメチル−４−ア
ザ−５−オキソ−６−アミノ−７−カルバモイル]ヘプ
チル・ベンズアミド ５％Ｐｄ／Ｃおよび実施例２５Ａの標記中間体(４g、
６.７ミリモル)を用い、製造例３Ｄで詳述した操作に準
じて所望の標記化合物を製造する。固体の収量２.４g
(収率８０％)。 MS (FAB): m/e 455 (M⁺¹)。

【０１６０】Ｂ.[２Ｒ−(２Ｒ＊,３Ｓ＊,６Ｓ＊)]−Ｎ
−ｔ−ブチル−２−[２−ヒドロキシ−３−フェニルメ
チル−４−アザ−５−オキソ−６−Ｎ−メチルモルホリ
ン(ナフト−１−イルエチルスルホニル)アミノ−７−カ
ルバモイル]ヘプチル・ベンズアミド ナフト−１−イルエチルスルホニルクロリド(１１８m
g、０.４６２ミリモル)および実施例３２Ａの標記化合
物(２００mg、０.４４０ミリモル)を用い(Ｅｔ₃Ｎより
もむしろＮＭＭの存在下に)、実施例３１Ｃで詳述した
操作に準じて所望の標記化合物を製造し、白色泡状物
(１２６mg、収率４２％)を得る。 MS (FD): ｍ／ｅ ６７３ （Ｍ^＋１）。 元素分析値 （Ｃ_３７Ｈ_４４Ｎ_４Ｏ_６Ｓとして): 計算値: C 66.05; H 6.59; N 8.33; 実測値: C 66.30; H 6.72; N 8.22。

【０１６１】実施例３３ １,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)−
Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−３−メチル−ブ
タノイル]アミノ]−３,４−ジヒドロキシヘキサン (Ｓ)−２−Ｎ(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−３−
メチル酪酸、２−クロロ−４,６−ジメトキシ−１,３,
５−トリアゼンおよびＮＭＭ(３６μl)の冷溶液(０℃)
に、ＣＨ₂Ｃｌ₂中に製造例１２の標記中間体(０.１４２
ミリモル)およびＮＭＭ(３６ml)を含有する溶液を加え
る。反応混合物を室温まで暖め、次いで、約５時間反応
させる。反応完了後(ＴＬＣにより示される)、混合物を
ＥｔＯＡｃ／０.２ＮＨＣｌ(２：１)混合物(７５ml)に
注ぎ入れる。得られる層を分離し、有機層をＮａＨＣＯ
₃の半希釈溶液で洗浄し、乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過
し、次いで、減圧濃縮して固体を得る。この固体をフラ
ッシュクロマトグラフィー(シリカ；３０％ヘキサン／
ＥｔＯＡｃで溶離)を用いて精製する。収量４４mg(収率
４４％)。¹ H NMR (CD₃OD): δ0.6 (d, J=6 Hz, 6H); 0.75 (d, J
=6 Hz, 6H); 1.85 (m, 2H); 2.80 (m, 4H); 3.75 (m, 2
H); 4.05 (m, 2H); 5.02 (s, 4H); 5.42 (d, J=8Hz, 2
H); 7.05 (m, 10H); 7.25 (m, 10H)。 MS (FD): m/e 767 (M⁺)。

【０１６２】実施例３４ １,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)−
Ｎ(キノリン−２−イルメトキシカルボニル)アミノ−３
−メチルブタノイル]アミノ]−３,４−ジヒドロキシヘ
キサン 製造例１２の標記中間体(１０２mg、０.２７３ミリモ
ル)、(Ｓ)−２−Ｎ(キノリン−２−イルメトキシカルボ
ニル)−アミノ−３−メチル酪酸(１８４mg、０.608ミリモ
ル)、２−クロロ−４,６−ジメトキシ−１,３,５−トリ
アゼン(１０７mg、０.６０８ミリモル)およびＮＭＭ(６
９μl、０.６２８ミリモル)を用い、反応をＣＨ₂Ｃｌ₂
中で行う以外は実施例３３に詳述した操作に準じて標記
化合物を製造する。収量１５５mg(収率６５％)。¹ H NMR (CD₃OD): δ0.7 (m, 12H); 1.80 (m, 2H); 2.7
8 (m, 4H); 3.40 (m, 2H); 3.75 (d, J=6 Hz, 2H); 4.5
8 (m, 2H); 5.32 (s, 4H); 7.10 (m, 10H); 5.32(s, 4
H); 7.10 (m, 10H); 7.55 (m, 4H); 7.75 (t, J=6 Hz,
2H); 7.85 (d, J=6 Hz, 2H); 7.95 (d, J=6 Hz, 2H);
8.30 (d, J=6 Hz, 2H)。 MS (FD): m/e 868 (M⁺)。 元素分析値 (C₅₀H₅₆N₆O₈として): 計算値: C 69.11; H 6.49; N 9.67; 実測値: C 68.89; H 6.52; N 9.70。

【０１６３】実施例３５ １,６−ジフェニル−２(Ｓ),５(Ｓ)−ジ[Ｎ−[２(Ｓ)−
Ｎ(ピリジ−２−イルメトキシカルボニル)アミノ−３−
メチルブタノイル]アミノ]−３,４−ジヒドロキシヘキ
サン 製造例１２の標記中間体(７２.７mg、０.１９５ミリモ
ル)、(Ｓ)−２−Ｎ(ピリジ−２−イルメトキシカルボニ
ル)−アミノ−３−メチル酪酸(１１０mg、０.４３６ミ
リモル)、２−クロロ−４,６−ジメトキシ−１,３,５−
トリアゼン(７６mg、０.４３３ミリモル)およびＮＭＭ
(５０μl、０.４５５ミリモル)を用い、実施例３４に詳
述した操作に準じて標記化合物を製造する。収量５７.
２mg(収率３８％)。¹ H NMR (CD₃OD): δ0.72 (t, J=8 Hz, 12H); 1.84 (m,
2H); 2.81 (d, J=9 Hz,4H); 3.41 (s, 2H); 3.76 (d,
J=9 Hz, 2H); 4.55 (br.t, J=9 Hz, 2H); 5.17(s, 4H);
7.00-7.40 (m, 12H); 7.45 (d, J=9 Hz, 2H); 7.84
(t, J=9 Hz, 2H);8.48 (br.d, J=2 Hz, 2H)。 IR (CHCl₃): 3428; 3025; 2973; 1723; 1667; 1602; 1
507 cm^-1。 MS (FD): ７７０ （Ｍ^＋１）。

【０１６４】実施例３６ アセチル−β−ナフチルアラニン−バリン−スタチン−
ロイシン−β−ナフチルアラニン−アミド（ＣＨ₃Ｃ
(Ｏ)−ｂＮＡ−Ｖａｌ−Ｓｔａ−Ｌｅｕ−ｂＮＡ−ＮＨ
₂) Ａ.樹脂の調製およびｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸の結合 ｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸を加える前に、ｐ−メチルベンズ
ヒドリルアミン塩酸塩樹脂(遊離アミノ基を０.３３ミリ
モル含有)(０.４５g)を、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の５％Ｎ,Ｎ−ジ
イソプロピルエチルアミン(ＤＩＥＡ)(１０ml)(洗浄毎
に)で３回中和し、次いで、ＣＨ₂Ｃｌ₂(１０ml)(洗浄毎
に)で３回洗浄する。次いで、洗浄した樹脂に、ＣＨ₂Ｃ
ｌ₂中に２.５当量のｔ−Ｂｏｃ−β−ナフチルアラニン
(ｔ−Ｂｏｃ−ｂＮＡ)を含有する溶液(５ml)を加える。
次に、樹脂／ｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸混合物に、ＣＨ₂Ｃ
ｌ₂(１ml)中に２.５当量のＤＣＣを含有する溶液を加え
る。得られる反応混合物を時々撹拌しながら室温で１〜
３時間反応させる。樹脂へのｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸のカ
ップリングをニンヒドリン試験で試験する。

【０１６５】Ｂ.ｔ−Ｂｏｃ保護基の除去 カップリング反応に続いて、上記実施例３６Ａの樹脂を
ＣＨ₂Ｃｌ₂(１０ml)(洗浄毎に)で３回洗浄し、次いで、
ＣＨ₂Ｃｌ₂中の５０％ＣＦ₃ＣＯＯＨ(１５ml)と混合す
る。得られた反応混合物を約１分間反応させ、次いで、
樹脂から上清を除去し、さらにＣＨ₂Ｃｌ₂中の５０％Ｃ
Ｆ₃ＣＯＯＨ(１５ml)を加える。得られた反応混合物を
約３０分間反応させ、次いで、上清を除去し、再び樹脂
をＣＨ₂Ｃｌ₂(１０ml)(洗浄毎に)で３回洗浄する。ニン
ヒドリン試験を行って反応をモニターする。 Ｃ.中和 次のｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸をカップリングさせる前に、
上記実施例３６Ｂのペプチド樹脂をＣＨ₂Ｃｌ₂中の５％
ＤＩＥＡ(１５ml)で中和する。約１分後、上清を除去
し、２回目のＣＨ₂Ｃｌ₂中の５％ＤＩＥＡ(１５ml)を加
える。得られる反応混合物を約５分間反応させ、次い
で、上清を除去し、ペプチド樹脂をＣＨ₂Ｃｌ₂で６回洗
浄する。

【０１６６】Ｄ.最終生成物を形成するための連続カッ
プリング 上記実施例３６Ａ、３６Ｂおよび３６Ｃに詳述した操作
に準じて、次のｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸溶液を加える。適
当なｔ−Ｂｏｃ−アミノ酸を用い、この操作を連続的に
繰り返して標記化合物を得る。この操作における唯一の
変化は、ｔ−Ｂｏｃ−スタチンのカップリングにおいて
生じる。ｔ−Ｂｏｃ−スタチンを添加する場合、１.２
５当量のアミノ酸と１.２５当量の縮合試薬ＤＣＣを使
用する。ｔ−Ｂｏｃ−スタチンのカップリング反応は３
時間以上行う。別法として、大過剰のｔ−Ｂｏｃ−スタ
チンを用いるかまたはカップリング時間を長くすること
もできる。 ｅ.アセチル化 上記実施例３６Ｄの中和されたペプチド樹脂に、無水酢
酸(約５ml)を加えてペプチド樹脂をカバーし、次いで、
ＣＨ₂Ｃｌ₂中の５％ＤＩＥＡ(１ml)を加える。得られる
反応混合物を約１５分間反応させる。反応の完了はニン
ヒドリン試験が指標となる。ニンヒドリン試験において
明黄色を呈することが、ペプチドのアミノ末端がアセチ
ル基で保護されたことを示す。

【０１６７】Ｆ.樹脂からのペプチドの分離 樹脂１部(v/v)に対して１０％アニソール含有フッ化水
素酸(ＨＦ)１０部の溶液中でペプチドを０℃にて４５分
間撹拌することにより、ペプチド樹脂からペプチドが分
離される。すべてのＨＦを減圧除去した後、得られる混
合物を無水Ｅｔ₂Ｏで洗浄する。氷酢酸、５０％酢酸(Ｈ
ＯＡｃ)、次いでＨ₂Ｏにより残渣から遊離ペプチドを抽
出する。抽出物を合わせ、凍結乾燥し、次いで、逆相Ｈ
ＰＬＣを用いて標記ペプチド化合物を精製する。ペプチ
ドを加水分解することにより、標記化合物に特有の比率
に対応する次のアミノ酸組成が得られる：Ｖａｌ,１.０
(１)；Ｌｅｕ,１.１(１)；Ｓｔａ,存在；ｂＮＡ,１.８
(２)。また、ペプチドの分子量(８２２)を確認するＭＳ
(ＦＡＢ)によるペプチドの分析も行う。

【０１６８】実施例３７〜４０では、実施例３６で詳述
した操作に準じて化合物を製造する。

【化７５】 実施例３６〜４０で製造した化合物を用い、加水分解に
よるアミノ酸組成分析とＭＳ(ＦＡＢ)による分子量分析
を行う。結果を下記表１に示す。

【０１６９】

【表１】

【０１７０】次の実施例４１〜４８では、Ｎ−Ｂｏｃ−
Ｏ−ベンジル−Ｌ−スレオニン−４−(オキシメチル)−
フェニルアセトアミド・メチル(Ｐａｍ)樹脂(０.１３６
ミリモル)、適当なｔ−ｂｏｃ−アミノ酸(各５ml)およ
びｔ−Ｂｏｃ−スタチン(１ミリモル)を用い、実施例３
６で詳述した操作に準じて化合物を製造する。すべての
カップリング反応は室温で約１時間行う。実施例４２、
４４、４６、４７および４８で製造した化合物につい
て、ｔ−Ｂｏｃ−グリシンを加えた後、実施例３６Ｂ〜
Ｃで詳述した操作に準じて保護基の除去および中和を行
い、樹脂を１％ＨＯＡｃ／ＤＭＦで２回洗浄し、次い
で、５０％アセトン／ＤＭＦ(３ml)を加える。次いで、
得られた混合物に、１Ｍ水素化シアノホウ素ナトリウム
／ＤＭＦ溶液を加える。得られた反応混合物を室温で約
１時間反応させる。反応完了後、上清を除去し、実施例
３６Ｆで詳述した操作に準じて樹脂から所望のオリゴペ
プチドを分離する。反応はニンヒドリン試験でモニター
する。樹脂が赤みががった色に変わるときに反応が完了
する。

【化７６】

【０１７１】実施例４１〜４８で製造した化合物を用
い、加水分解によるアミノ酸組成分析とＭＳ(ＦＡＢ)に
よる分子量分析を行う。結果を下記表２および表３に示
す。

【表２】

【表３】

【０１７２】次の化合物はこれまでに詳述した操作に準
じて製造する。特に、実施例４９〜７４のエポキシド
は、実施例１の操作を用いて製造する。実施例８２〜１
１３、１４０〜１４５、１４９〜１５２、１７０〜２０
６、２１０、２１２〜２１４、２１８〜２３９、２４２
〜２４３、２４９〜２５８および２７５の化合物は、実
施例６、８および２５Ａの一般操作を用いて製造する。
実施例１２４〜１３９および１４６の化合物は、概して
実施例３１の操作を用いて製造する。実施例１１４〜１
２３、１４７、１４８、１５３、１５４、１５８〜１６
３および２４０〜２４１の化合物は、塩化メタンスルホ
ニルの代わりに塩化アセチル(または他の適当な塩化ア
シル)を用い、実施例３１の操作をに準じて製造する。
実施例１５５〜１５７、１６４〜１６９、２０７〜２０
９、２１１および２１５〜２１７の化合物は、実施例１
６の操作に準じて製造する。実施例２４４〜２４８およ
び２７４の化合物は、製造例１０Ｃで製造した中間体を
用い、実施例２８および２９の操作に準じて製造する。
実施例２５９〜２６２の化合物は、実施例３３〜３５の
操作に準じて製造する。最後に、実施例２６３〜２７３
の化合物は、実施例３６の操作を用いて製造する。

【０１７３】

【表４】

【０１７４】

【表５】

【０１７５】

【表６】

【０１７６】

【表７】

【０１７７】

【表８】

【０１７８】

【表９】

【０１７９】

【表１０】

【０１８０】

【表１１】

【０１８１】

【表１２】

【０１８２】

【表１３】

【０１８３】

【表１４】

【０１８４】

【表１５】

【０１８５】

【表１６】

【０１８６】

【表１７】

【０１８７】

【表１８】

【０１８８】

【表１９】

【０１８９】

【表２０】

【０１９０】

【表２１】

【０１９１】

【表２２】

【０１９２】

【表２３】

【０１９３】

【表２４】

【０１９４】

【表２５】

【０１９５】

【表２６】

【０１９６】

【表２７】

【０１９７】

【表２８】

【０１９８】

【表２９】

【０１９９】

【表３０】

【０２００】

【表３１】

【０２０１】

【表３２】

【０２０２】

【表３３】

【０２０３】

【表３４】

【０２０４】

【表３５】

【０２０５】

【表３６】

【０２０６】上述したように、本発明は、 (１)アスパルチルプロテアーゼインヒビターを試験系に
投与し； (２)試験系におけるβＡＰ産生を測定し； (３)試験系におけるβＡＰ産生と、アスパルチルプロテ
アーゼインヒビターを投与していない対照試験系におけ
るβＡＰ産生を比較する；ことからなるβＡＰ産生イン
ヒビターの同定法を提供する。

【０２０７】本発明のこの態様は、次のようにして行
う。最初に、典型的なアスパルチルプロテアーゼ、特に
カテプシンＤを阻害する試験化合物をアスパルチルプロ
テアーゼインヒビターとして同定する。本明細書で用い
る「試験系」とは、アスパルチルプロテアーゼ阻害活性
を測定するために設計されたアッセイを意味する。この
ような同定に用いる代表的アッセイは、プロテアーゼイ
ンヒビターの投与に起因するプロテアーゼ基質の代謝回
転をモニターする非細胞アッセイである。次いで、プロ
テアーゼインヒビターの代謝回転を、このようなアスパ
ルチルプロテアーゼインヒビターを投与しなかった対照
試験系における基質の代謝回転と比較する。本明細書で
用いる「対照試験系」とは、試験系と並行して行う、ア
スパルチルプロテアーゼインヒビターを投与しないこと
以外は同等な試験系を意味する。この非細胞アッセイを
用いて、非細胞環境において適当なアスパルチルプロテ
アーゼ阻害活性を有する試験化合物を同定する。

【０２０８】インビトロでのアスパルチルプロテアーゼ
阻害活性の測定に使用しうる非細胞アッセイのひとつ
は、不完全精製ヒト脳カテプシンＤをブタレニンテトラ
デカペプチドなどの基質と反応させることである。得ら
れた反応混合物をいくつかの部分に分割し、各部分をそ
れぞれ異なる時間インキュベートする。反応を停止した
後、逆相ＨＰＬＣを用いて各部分の基質の代謝回転を測
定する。このアッセイは、後記アッセイ１で実証する。

【０２０９】インビトロでアスパルチルプロテアーゼ阻
害活性を測定するための第２の非細胞アッセイでは、マ
イクロ滴定プレートを利用し、ここで、カテプシンＤな
どの適当なアスパルチルプロテアーゼおよび対照を各ウ
エルに添加する。適当な蛍光性基質を各ウエルに加え
る。得られた反応混合物を予め選択した時間、たとえば
３０分間反応させる。酵素活性を終結させた後、基質ま
たはその生成物の蛍光強度を測定し、次いで、プロテア
ーゼ阻害活性を基質の代謝回転速度に基づいて算出す
る。このアッセイは後記アッセイ２で実証する。

【０２１０】インビトロでアスパルチルプロテアーゼ阻
害活性を測定するための第３の非細胞アッセイは、ジャ
ップ(Jupp),R.A.らの「Biochem. J.」２６５：８７１〜
８７８(１９９０年)およびラオ(Rao),らの「J. Med. Ch
em.」(印刷中)(１９９３年)に記載されている。該アッ
セイは、試験化合物を適当なアスパルチルプロテアー
ゼ、カテプシンＤなどと発色性基質の存在下にインキュ
ベートすることにより行う。次いで、発色性基質の加水
分解の競合阻害を量的に表すことにより阻害定数Ｋiを
決定することができる。アスパルチルプロテアーゼ活性
のアッセイに有用な種々の発色性基質が、ダン(Dunn)ら
の「Biochem. J.」２３７：８９９〜９０６(１９８６
年)に記載されている。カテプシンＤアッセイ用の好ま
しい発色性基質は、スカーボロウ(Scarborough),P.E.ら
の「Protein Science」２：２６４〜２７６(１９９３
年)に記載されている。

【０２１１】基質溶液および分離した生成物の濃度は、
アミノ酸分析を用いて確認することができる。強固に結
合する阻害物質で酵素試料を滴定して酵素の活性濃度を
定量する。酵素濃度は通常１〜６ｎＭの範囲にある。試
験化合物の貯蔵（ストック）溶液は１.０〜５.０mg/ml
の濃度範囲で調製し、次いで、これらの保存溶液を５０
〜１００μlずつさらに希釈して、代謝回転速度測定用
の５〜３００μＭの濃度範囲にする。最初に、試験化合
物の能力を評価するために、４ｍＭの試験化合物の存在
下における反応の初速度の阻害パーセントを対照反応と
比較して決定する。次いで、たとえば５〜３００μＭの
速度決定用の濃度範囲で試験化合物をアッセイする。２
８４〜３２４nmにおける吸光度の減少を分光光度計でモ
ニターする。吸光度の読み取りは、様々な時点で行う。
次いで、初速度を初期基質濃度に対してプロットする。
発色性基質の熱力学的パラメーターＫmをこれらのデー
タから算出する。次いで、ディクソン・コンストラクシ
ョン(Dixon Construction)を用いてＫiの概算値を決定
する。ディクソン,M.の「Biochem. J.」５５：１７０〜
１７１（１９５３年）参照。

【０２１２】総活性酵素濃度と概算のＫi値との比率
([Ｅ]t／Ｋi)が０.２以下ならば、 式： ｖ＝Ｖmax[Ｓ]／[Ｓ]＋Ｋm(１＋[Ｉ]／Ｋi) [ここで、ｖは初速度、[Ｓ]は初期基質濃度、[Ｉ]はイ
ンヒビター濃度、およびＫiとＫmは前記と同じである]
に基づく非線形曲線フィッティングプログラムを用いて
コンピューターで正確なＫi値を算出する。[Ｅ]t／Ｋi
が０.２〜１０の間ならば、Ｋi値はヘンダーソン(Hende
rson),P.J.F.の「Biochem. J.」１２７：３２１〜３３
３(１９７２年)に記載の方法を用いて算出することがで
きる。このアッセイは、後記アッセイ３で実証する。

【０２１３】アスパルチルプロテアーゼインヒビターが
βＡＰ産生インヒビターとして使用するのに最も適して
いることを同定するために、後続の試験には、細胞環境
においてアスパルチルプロテアーゼ阻害活性を有するよ
うな試験化合物を選択するのが望ましい。アスパルチル
プロテアーゼ阻害活性の初期評価は、これらの被検試験
化合物の相対的順位に基づいてよいが、阻害濃度の測定
などの阻害活性の絶対査定［すなわち、アスパルチルプ
ロテアーゼ阻害が便宜的レベル(たとえば５０％)に到達
するのに必要な濃度］に基づいて評価を行うのがより好
ましい。「ＩＣ₅₀」とは、５０％阻害に達するのに必要
な濃度を意味する。

【０２１４】対照値を決定するために潜在的プロテアー
ゼインヒビターの不在下で最初にアスパルチルプロテア
ーゼ活性を測定することにより、上記のプロトコルのい
ずれかを用いてこのようなＩＣ₅₀値を決定することがで
きる。次いで、濃度を変化させた各試験化合物の存在下
でアスパルチルプロテアーゼ活性を測定し、プロテアー
ゼ活性の５０％阻害が得られる濃度がＩＣ₅₀値である。
選択された閾値において、あるいはそれ以下でＩＣ₅₀値
になるすべての試験化合物は、アスパルチルプロテアー
ゼインヒビターとして適当であるといってよく、本発明
方法に従ってさらに試験してよい。この閾値は任意のも
のであるが、一般的に１０μl／ml、さらに５μl／ml、
しばしば１μl／mlおよびときどき２５０ng／mlを用い
るが、あるいはそれ以下であることもある。

【０２１５】アスパルチルプロテアーゼインヒビターの
同定において、さらにスクリーニングを行って、βＡＰ
の細胞内産生を阻害するアスパルチルプロテアーゼイン
ヒビターを選択する。通常、細胞アッセイまたは動物モ
デル、あるいは両方で、βＡＰ産生阻害活性を測定す
る。アルツハイマー病または他のβＡＰ関連身体状況の
原因となるスウェーデン突然変異または他の突然変異を
形質移入された細胞系など、βＡＰを過剰産生するよう
形質移入された細胞系を利用する細胞アッセイが好まし
い。対照と比較してβＡＰ産生の減少を測定するため
に、これらのアッセイでは、アスパルチルプロテアーゼ
インヒビターを投与した試験系およびアスパルチルプロ
テアーゼインヒビターを投与しなかった対照系において
βＡＰ産生を測定する。これらのアッセイでは、βＡＰ
産生またはβＡＰ産生に関する細胞特性の存在を測定す
る。細胞内βＡＰ産生を阻害するかまたは他の影響を与
えるアスパルチルプロテアーゼインヒビターをさらに試
験する。

【０２１６】βＡＰ産生阻害活性の測定に用いる試験系
は、代表的には細胞アッセイまたは動物モデルである。
同時継続中の米国特許出願第０７／９６５９７２号(こ
の全記載が本発明の参考文献である)に記載されている
ように、細胞アッセイにおけるβＡＰ産生の直接測定に
よりβＡＰ産生阻害活性を得るのが好ましい。このアッ
セイは後記アッセイ４で実証する。たとえば、βＡＰ
が、ならし培養培地へ検出可能な量(約０.１ng／ml〜１
０ng／mlの範囲)分泌されるような条件下で哺乳動物細
胞系、特にヒト細胞系を成長させる。ならし培養培地中
にβＡＰが蓄積されるような条件下で細胞を成長させ、
そして該培養細胞をアスパルチルプロテアーゼインヒビ
ターで処理することことにより、βＡＰ産生におけるア
スパルチルプロテアーゼインヒビターの影響を測定する
ことが可能である。βＡＰを減少させるアスパルチルプ
ロテアーゼインヒビターは、アルツハイマー病および他
のβＡＰ関連身体状況の臨床治療に有用である。

【０２１７】細胞アッセイに用いる代表的な細胞系とし
ては、２９３ヒト腎臓細胞系、ヒト神経膠腫細胞系、ヒ
トヒーラ細胞、原ヒト内皮細胞(ＨＵＶＥＣ細胞など)、
原ヒト腺維芽細胞またはリンパ芽球細胞、原ヒト混合脳
細胞(神経単位、星状細胞および神経膠細胞)、チャイニ
ーズハムスター卵巣細胞などのヒトおよび動物細胞系が
挙げられる。βＡＰを過剰産生するＡＰＰ変異を発現し
うる細胞系が好ましい。本明細書で用いる「過剰産生」
とは、変異ＡＰＰから産生されたβＡＰの量が、正常な
ＡＰＰイソ体(前述の６９５、７５１および７７０−ア
ミノ酸イソ体など)のいずれかまたはすべてから産生さ
れた量より多いことを意味する。特に好ましいＡＰＰ変
異は、βＡＰ分裂部位のアミノ末端の近傍に１個または
数個のアミノ酸置換を有する変異である。たとえば、ス
ウェーデン突然変異を包含するＡＰＰを発現するＫ２９
３細胞は、正常ＡＰＰ発現細胞の６倍〜８倍のβＡＰを
産生する。

【０２１８】ならし培養培地中のβＡＰの測定は、現存
しうる他のＡＰＰフラグメントの存在下で実質的に完全
なβＡＰを同定するための充分な選択性および感受性を
もつどの技術を用いて行ってもよい。抗体、抗体フラグ
メント、組換え抗体などのβＡＰに特異的に結合する物
質を用いる免疫学的検出技術を使用してもよい。βＡＰ
の結合領域にモノ特異的な抗体は、βＡＰを他のフラグ
メントから区別することができる。本明細書中の「βＡ
Ｐ結合領域」とは、アミノ酸残基１６と１７(Ｌys₁₆と
Ｌeu₁₇)間の部位が中心となるβＡＰの領域を意味す
る。βＡＰ結合領域はＡＰＰの正常なタンパク質分解切
断の標的である。このような正常切断の結果、完全βＡ
Ｐ分子に対して潜在的に免疫学的に交差反応性である種
々のＡＰＰフラグメントが得られる。βＡＰのアミノ酸
残基１３〜２８からなる合成ペプチドに対する抗体は、
要素特異性を示すことが解っている。

【０２１９】適当な検出技術としては、ＥＬＩＳＡ、ウ
エスタンブロッティング、ラジオイムノアッセイなどが
挙げられる。βＡＰ産生をアッセイするための代表的な
細胞アッセイが同時継続中の米国特許出願第０７／９６
５９７１号に記載されており、この全記載内容は本発明
の参考文献である。このアッセイは、βＡＰ産生の結果
として細胞培養培地中に産生および分泌されるＡＰＰの
ひとつのフラグメント(βＡＰフラグメント以外の)の測
定に基づくものである。該分泌フラグメントは、βＡＰ
領域に隣接し、完全ＡＰＰに存在するカルボキシ末端残
基(正常なＡＰＰ配列の場合メチオニン)の５個のアミノ
酸内で終結するＡＰＰの実質的に完全なアミノ末端配列
を含んでいる。特に、該分泌フラグメントは本質的にＡ
ＰＰの６９５−アミノ酸イソ体のＭet₅₉₆とＬys₅₉₅の間
で終結する配列からなり、他のイソ体および突然変異Ａ
ＰＰ体でも対応する番号および対応するアミノ酸がある
（スウェーデン突然変異体ではＬys₅₉₅−Ｍet₅₉₆がＡsn
₅₉₅−Ｌeu₅₉₆へ変異する）。

【０２２０】好ましい検出技術としては、捕獲抗体とし
て固相に結合する結合特異的抗体、および捕獲抗体が結
合する以外のエピトープに結合する第二の標識抗体を使
用する二部位または「サンドイッチ」アッセイが挙げら
れる。第二の標識抗体は、βＡＰのアミノ末端を識別す
る抗体が好ましく、本質的にβＡＰのアミノ酸残基１〜
１６からなる合成ペプチド対して免疫反応を起こす抗体
が都合がよい。別法としては、ＷＯ９１／１９８１０
(全記載内容が本発明の参考文献である)に記載されてい
るように、マウス動物モデルなどの動物モデルにおいて
βＡＰ産生をモニターしてもよい。また、他のＡＰＰイ
ソ体および／または変異体を発現する動物モデルを使用
してアスパルチルプロテアーゼインヒビターのスクリー
ニングを行ってもよい。動物モデルにおける試験は、通
常、上述の細胞アッセイに付随して行う。したがって、
本発明は、(１)細胞アッセイにおけるβＡＰ産生を測定
し；次いで、(２)試験動物の体液におけるβＡＰ産生を
測定することからなるβＡＰ産生インヒビターの同定法
も提供する。試験動物の体液におけるβＡＰ産生は、ア
スパルチルプロテアーゼインヒビターの投与前後に試験
動物の体液中のβＡＰまたはβＡＰフラグメントの存在
をアッセイすることにより測定することができる。

【０２２１】本発明は、上述の同定法により選択された
アスパルチルプロテアーゼインヒビターを細胞に投与す
ることからなる細胞におけるβ−アミロイド産生阻害法
を提供する。たとえば、培養細胞によるβＡＰ産生を阻
害するために、アスパルチルプロテアーゼインヒビター
を細胞培養培地に加えてもよい。別法として、アルツハ
イマー病および他のβＡＰ関連疾患に付随するβ−アミ
ロイドの産生およびそれに続くアミロイド斑の沈着を阻
害するために、治療を必要とする哺乳類にアスパルチル
プロテアーゼインヒビターを投与してもよい。次に述べ
るアッセイは、実例として提示するものであり、それら
に限定されるものではない。これらのアッセイは、本発
明方法に使用した化合物のアスパルチルプロテアーゼ
(特に、カテプシンＤ)阻害能力を説明するために行っ
た。

【０２２２】アッセイ１カテプシンＤ阻害活性(非細胞アッセイ) ニクソン(Nixon)およびモロッタ(Morotta)の「J. Neuro
chem.」４３：５０７〜５１６(１９８４年)に記載の方
法に準じて、凍結した死後大脳皮質からヒト脳カテプシ
ンＤを精製した。調製した該大脳皮質物質をＤＥＡＥ−
セファロース(Sepharose)(登録商標)カラムに適用し
た。流動画分を５０mＭトリス−ＨＣｌ(ｐＨ７.５)に対
して透析し、コンカナバリンＡセファロース(登録商標)
に適用し、５０mＭトリス(ｐＨ７.５)、０.５Ｍメチル
α−Ｄ−マンノピラノシドで溶離した。溶離したカテプ
シンＤ活性を２５mＭトリス(ｐＨ７.５)に対して透析
し、使用するまで−４０℃でストックした(ＣｏｎＡプ
ール)。

【０２２３】各アッセイ毎に、ＣｏｎＡプール(５０μ
l)を２００mＭクエン酸ナトリウム(ｐＨ４.５)、１５０
mＭ塩化ナトリウム(ＮａＣｌ)で希釈して２７０μlに
し、ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)で希釈した化合物
ストック(１５μl)とともに、４℃で１０分間インキュ
ベートした。基質、ブタレニンテトラデカペプチド(Ｃ
Ｈ₃Ｃ(Ｏ)−Ａsp−Ａrg−Ｖal−Ｔyr−Ｉlr−Ｈis−Ｐr
o−Ｐhe−Ｈis−Ｌeu−Ｌeu−Ｖal−Ｔyr−Ｓer[配列番
号３]；ベイケム・バイオサイエンス・インコーポレイテ
ッド(Bachem Bioscience,Inc.),フィラデルフィア,ペン
シルバニア)を各反応混合物に加え、最終濃度４４μＭ
を総体積３００μlで得る。試料を３７℃で０、１０、
２０または３０分間インキュベートし、次いで、５分間
煮沸して反応を停止した。試料をマイクロ遠心分離機
で、４℃、１４０００rpmにて１０分間遠心分離する。遠
心分離後、各反応物(２００μl)をPerkin ElmerＩＳＳ
１００オートサンプラーで、Ｃ１８ＲＰＬＣカラム(ヴ
ィダック(Vydac),ヘスペリア,カリフォルニア)に注入
し、０〜５０％ＣＨ₃ＣＮ／０.１％ＣＦ₃ＣＯ₂Ｈの勾配
溶離液で２ml／分にて溶離した。ペプチド生成物のピー
クをPerkin ElmerＬＣ９５検出機を用いて２２０nmでモ
ニターし、活性を定量するために、レイニン・ダイナマ
ックス・ソフトウェア(Rainnin Dynamax Software)を用
いて積分した。

【０２２４】上記アッセイ１の方法で、実施例４１〜４
８で製造した化合物およびペプスタチンのカテプシンＤ
阻害活性を検定した。結果を、各アスパルチルプロテア
ーゼインヒビターの存在下におけるカテプシンＤ活性と
アスパルチルプロテアーゼインヒビターを加えていない
対照におけるカテプシンＤ活性との比較により決定され
たＩＤ₅₀値として、アッセイ表１に示す。

【表３７】

【０２２５】アッセイ２カテプシンＤ阻害活性(非細胞蛍光アッセイ) 蛍光アッセイでは、レニン活性を測定するためにムラカ
ミ(Murakami)らの「Anal. Biochem.」１１０：２３２〜
２３９(１９８１年)に記載の方法を応用した。ヒト肝臓
カテプシンＤ(アシンズ・リサーチ・アンド・テクノロ
ジー(Athens Research and Technology),アシンズ,ジョ
ージア)をアッセイ緩衝液(２００mＭＮａＯＡｃ(ｐＨ
４.５)、１５０mＭＮａＣｌ)で５００ng／mlに希釈し、
次いで、このカテプシンＤ溶液(１００μl)を、アッセ
イ緩衝液(１００μl)を入れた対照ウエルを除いて、９
６ウエルプレートの各ウエルに加えた。ＤＭＳＯ中のア
スパルチルプロテアーゼインヒビターをアッセイで試験
される各濃度になるように溶解して化合物ストックを調
製し、次いで、化合物ストック(５μl)を上記各ウエル
に加えた。ブランクウエルおよび対照ウエルにはそれぞ
れＤＭＳＯビヒクル(５μl)を加えた。

【０２２６】酵素／化合物を相互反応させるために２５
℃で１０分間インキュベートし、ＤＭＳＯ中の５００μ
Ｍ蛍光性基質(５μl)(Ｓuc−Ａrg−Ｐro−Ｐhｅ−Ｈis
−Ｌeu−Ｌeu−Ｖal−Ｔry−ＡＭＣ[配列番号４]；ベイ
ケム・バイオサイエンス・インコーポレイテッド,フィラ
デルフィア,ペンシルバニア)を各ウエル加えて反応を開
始させた。３７℃で３０分間インキュベート後、１Ｍト
リス−ＨＣｌ(ｐＨ８.０)中の４００mＵ／mlのミクロソ
ームロイシンアミノペプチダーゼ(ＥＣ３.４.１１.２,
シグマ(Sigma),セントルイス,ミズーリ)を、ウエル当た
り１００μl加えて、カテプシンＤ活性を終了させた。

【０２２７】次いで、試験化合物によるバックグラウン
ド蛍光を調べるために、蛍光光度計(ＣytoＦlour２３５
０,ミリポア,ベドフォード,マサチューセッツ)を用い、
励起波長３６０nmおよび蛍光波長４６０nmでプレートを
分析した。３７℃で２時間インキュベートして、上記ア
ミノペプチダーゼにカテプシンＤ分離生成物からの蛍光
物質(７−アミド−４−メチルクマリン(ＡＭＣ))を放出
させ、プレートを再度蛍光光度計で分析した。潜在的虚
正数、すなわち、ミクロソームロイシンアミノペプチダ
ーゼの阻害物質を調べるために、２０μl／ウエルの２.
５mＭＬeu−ｐＮＡ(ベイケム・バイオサイエンス・イン
コーポレイテッド,フィラデルフィア,ペンシルバニア)
／１０％ＤＭＳＯを加えて残存のアミノペプチダーゼ活
性を各ウエルにおいて直接モニターした。Ｖｍａｘマイ
クロプレートリーダー(モレキュラー・ディバイス(Mole
cular Devices),メンロパーク,カリフォルニア)を用
い、４０５nmにおける吸光度の増加としてアミノペプチ
ダーゼ活性を測定した。

【０２２８】上記アッセイ法２を用い、１０μg／mlに
おけるカテプシンＤ阻害活性を、実施例９、１２、１
３、２０〜２３、２３Ａ、２４、３０、４１〜４３、４
５および４８で製造した化合物について検定した。カテ
プシンＤ活性はこれらの条件下では直線的であり、結果
を対照活性の阻害パーセントとしてアッセイ表２に示し
た。

【表３８】

【０２２９】アッセイ３カテプシンＤの阻害活性(非細胞アッセイ) 発色性基質を用いるアスパルチルプロテアーゼ活性測定
アッセイを行い、試験化合物の阻害定数Ｋiを測定し
た。。凍結ヒト胎盤組織を解凍し、ワリングブレンダー
(Ｗaring blender)にて１０ｍＭトリス−ＨＣｌ(ｐＨ
７.４)および０.５％Ｂrij３５と共にホモジナイズし
た。ホモジネートをSorvall GSAローターで１００００r
pmにて３０分間遠心分離した。５.７ＮのＨＣｌを用い
て上清をｐＨ３.７に調整し、次いで酢酸ナトリウムを
加えて０.１Ｍに濃縮した。得られた混合物を０℃で３
０分間インキュベートすると沈降物が形成された。この
沈降物を遠心分離により除去した(３０分間、１０００
０rpm)。洗浄廃液のＯＤ₂₈₀がベースラインに戻るまで
洗浄したクロマトグラフィーカラム(０.１Ｍ酢酸ナトリ
ウム(ｐＨ３.５)、０.１％Ｂrij３５および１ＭＮａＣ
ｌで平衡したペプスタチンアガロース)に酸性の上清を
適用し、５０ｍＭ−トリスＨＣｌ(ｐＨ８.６)および０.
１％Ｂrij３５および１ＭＮａＣｌで溶離した。溶離液
を１０ｍＭリン酸ナトリウム(ｐＨ７.０)、０.１％Ｂri
j３５および０.１ＭＮａＣｌに対して透析し、次いで同
じ緩衝液で平衡した１ｍＬＤＥＡＥ−セファセル(Sepha
cel)カラムに適用した。ブレークスルー画分からカテプ
シンＤを回収した。

【０２３０】発色性基質を加える前に、酵素混合物[１
２５μlの緩衝液(０.１Ｍギ酸ナトリウム(ｐＨ３.
７))、１mＭの試験化合物溶液(１μl)、ＤＭＳＯ(４μ
l)、酵素および水を加えて総体積２３０μlとする]を４
分間渦巻き撹拌し、余熱した。暖めた後、６２５μlに
希釈した基質溶液(２０μl)に酵素混合物を加える。対
照混合物は、試験化合物を添加せずに同様に処理して調
製する。特定濃度(すなわち、４μＭ)の試験化合物の存
在下における反応の初速度の阻害パーセントは、対照反
応と平行して反応混合物をモニターすることにより測定
してもよい。

【０２３１】２８４〜３２４nmの範囲における吸光度の
減少は、マルチセルトランスポートを具備したHewlett-
Packard８４５２Ａダイオードアレイ分光光度計を用
い、３７℃に自動温度制御して測定した。吸光度の読み
取りは、標的範囲全体にわたって２nm毎に０.１秒間隔
で行った。各キュベットを５回測定し、得られた読み取
り値を各時点において平均した。各キュベットについ
て、１７.２秒のサイクルで約１０００秒間読み取りを
繰り返した。反応の直線部分の傾きから初速度を算出
し、次いで、反応開始時の基質濃度に対してプロットす
る。これらのデータを、マーカート(Marquardt)分析に
よって標準のミカエリス−メンテン(Michaelis-Menten)
の方程式に適用し、基質のＫmを算出した。Ｋi値は、前
述したようにディクソン・コンストラクションを用いて
概算し、次いで、非線形曲線フィッティングプログラム
([Ｅ]t／Ｋi＜０.２)またはヘンダーソン法(０.２＜
[Ｅ]t／Ｋi＜１０)で算出した。

【０２３２】上記アッセイ法３を用い、カテプシンＤ阻
害活性を、実施例１〜１１、１４〜１９、２２〜２８お
よび３０〜３７で製造した化合物について検定した。結
果をアッセイ表３Ａおよび３Ｂに示した。

【表３９】

【表４０】

【０２３３】アッセイ４βＡＰ産生の阻害(細胞アッセイ) シトロン(Citron)らの「Nature」３６０：６７２〜６７
４(１９９２年)に記載の方法を用い、通常スウェーデン
突然変異と呼ばれる、Ｌys₆₅₁−Ｍet₆₅₂がＡsn₆₅₁−Ｌe
u₆₅₂(ＡＰＰ−７５１の番号)に変化する二重突然変異を
含有するＡＰＰ−７５１に関する遺伝子を、２つの細胞
系(ヒト腎臓細胞系２９３およびチャイニーズハムスタ
ー卵巣細胞系ＣＨＯ)に、安定に形質移入した。形質移
入された細胞系を２９３・７５１・ＳＷＥおよびＣＨＯ
・７５１・ＳＷＥと名付け、それぞれ２.５×１０⁴また
は１×１０⁴細胞／ウエルにて、１０％コウシ血清を含
むダルベッコの最小必須培地とともにコーニング９６ウ
エルプレートに植え付けた。１０％二酸化炭素で平衡に
したインキュベーター内で３７℃にて一夜インキュベー
トし、培地を除去してアスパルチルプロテアーゼインヒ
ビター含有培地(２００μl)と交換する。２時間前処理
した後、培地を再び除去してアスパルチルプロテアーゼ
インヒビターを含有する新鮮な培地と交換し、細胞をさ
らに２時間インキュベートした。

【０２３４】アスパルチルプロテアーゼインヒビターの
ストックを、処理に用いる最終濃度になるようにＤＭＳ
Ｏ中で調製した(ＤＭＳＯの濃度は０.５％を越えな
い)。処理後、ベックマン(Beckman)ＧＰＲにて１２００
ｒｐｍで５分間、室温でプレートを遠心分離して、なら
し培地から細胞破片をペレット化した。各ウエルから、
ならし培地１００μlを取り出し、βＡＰ−１３−２８
に対する２６６抗体(スーバートら、前述)を予め塗布し
たＥＬＩＳＡプレートに移し、４℃で一夜保存した。６
Ｃ６抗体(βＡＰ−１３−２８に対する抗体)を用いるＥ
ＬＩＳＡアッセイを翌日行い、産生されたβＡＰの量を
測定した。

【０２３５】ハンセン(Hansen)らの「J. Immun. Meth.」
１１９：２０３〜２１０(１９８９年)に記載の方法を一
部変更して行い、インヒビター化合物の細胞毒効果を測
定した。組織培養プレートに残っている細胞に、２５μ
lの臭化３,(４,５−ジメチルチアゾール−２−イル)２,
５−ジフェニルテトラゾリウム(ＭＴＴ)ストック溶液
(５mg/ml)を加えて最終濃度を１mg/mlにした。細胞を３
７℃で１時間インキュベートし、等体積のＭＴＴ溶解緩
衝液[２０％w/vドデシル硫酸ナトリウム／５０％ＤＭＦ
(ｐＨ４.７)]を加えて細胞活性を停止した。室温にて一
夜振とうすることにより完全に抽出した。モレキュラー
・デバイスＵＶ_maxマイクロプレートリーダーにて、細
胞生存度の指標としてＯＤ_562nmとＯＤ_650nmの差を測定
した。βＡＰＥＬＩＳＡの結果を標準曲線に適合させ、
ng/mlβＡＰペプチドとして表した。細胞毒性に対して
標準化するために、これらのβＡＰの結果をＭＴＴの結
果で割り、薬物フリーの対照の結果に対するパーセンテ
ージで表した。アッセイ４の方法を用い、各１０μg/ml
にて、実施例９、１２、１３、２０〜２３、２３Ａ、２
４、３０、４１〜４３、４５および４８で製造した化合
物の細胞内のβＡＰ産生阻害活性のアッセイを行った。
下記アッセイ表４に示した結果は少なくとも６回の複数
回のアッセイの平均および標準偏差である。

【０２３６】

【表４１】

【０２３７】本発明化合物は、アルツハイマー病、ダウ
ン症候群および脳の老齢化などのβＡＰの沈着に関連す
る疾患の予防および／または治療処置のために投与する
ことができる。治療的適用においては、疾患にすでに冒
されている患者に化合物を投与する。さらなるβＡＰ斑
の沈着を阻害するに十分な量の化合物を投与する。もち
ろん、治療および／または予防効果を得るために本発明
に従って投与される化合物の服用量は、たとえば、投与
される化合物、投与経路、治療される身体状況、治療さ
れる個人などの患者を取り囲む特定の環境によって決定
される。代表的な一日服用量には、本発明活性化合物が
約０.０１〜約５０mg／kg(体重)／日の投与レベルで含
まれる。好ましい一日投与量は、約０.０５〜２０mg／k
g(体重)／日、さらに好ましくは約０.１〜１０mg／kg
(体重)／日の量で投与する。

【０２３８】予防的適用のためには、すでにアルツハイ
マー病またはβＡＰ関連疾患に冒されている宿主ではな
く、該疾患にかかり易い宿主に本発明化合物を投与す
る。このような宿主は遺伝子スクリーニングおよび臨床
分析により鑑定される。ゴウテの「Nature」３４９：７
０４〜４０６(１９９１年)参照。本発明化合物は、症候
に関する早期段階においてβＡＰ斑の形成を阻害または
予防することができるが、β−アミロイド疾患の最初の
段階で予防するのが好ましい。

【０２３９】本発明化合物は経口、経直腸、経皮膚、皮
下注射、静脈内注射、筋肉内注射および鼻孔内投与など
の種々の経路で投与しうる。本発明化合物は投与前に製
剤するのが好ましい。有効成分は製剤重量の０.１％〜
９９.９％であってよい。「医薬的に許容しうる」と
は、担体、希釈剤または賦形剤が製剤の他成分と両立
し、製剤受容者にとって有害でないことを意味する。た
とえば、筋肉内注射用医薬組成物では、１〜４mlの滅菌
緩衝水に約１μg〜1mgの化合物が含まれる。静脈内注射
用組成物では、１００〜５００mlの滅菌リンゲル液に約
１〜１.５mgの化合物が含まれる。

【０２４０】公知で入手が容易な既知の成分を用い、常
套の操作で医薬製剤を製造する。本発明組成物の製造に
おいて、有効成分は通常担体と混合されるかまたは担体
で希釈されるかあるいはカプセル,薬袋,紙または他の容
器などの担体に封入される。担体が希釈剤である場合、
それはビヒクル、賦形剤または有効成分の媒体となる固
体、半固体または液状物質であってよい。したがって、
該組成物は錠剤、丸薬、粉末薬、トローチ、薬袋剤、オ
ブラート剤、エリキシル剤、懸濁液、乳液剤、溶液剤、
シロップ、エアロゾル(固体としてかまたは液体媒体中
の状態)、たとえば１０重量％以下の活性化合物を含有
する軟膏剤、軟および硬ゼラチンカプセル剤、座薬、滅
菌注射用液、滅菌包装粉末剤などの形状をとることがで
きる。

【０２４１】医薬組成物を直接または間接的に脳へ導入
するのが望ましいかまたは必要である場合がしばしばあ
る。直接的技術としては通常、宿主の脳室系に薬物デリ
バリーカテーテルを配置して血液脳関門を回避する方法
が行われる。親水性薬物を脂溶性薬物に転換することに
よって、組成物が薬物潜在性を備えるように製剤すると
いう間接的技術が、より好ましい。通常、薬物の脂溶性
を高め、血液脳関門を通過して輸送されやすくするため
に、薬物に存在するヒドロキシル基、カルボキシル基お
よび第一アミン基をブロックすることによって、潜在化
が達成される。別法として、血液脳関門を一瞬開くこと
ができる高張液の動脈内注入によっても親水性薬物の輸
送を増強することができる。

【手続補正書】

【提出日】平成６年１０月１７日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０１６９

【補正方法】変更

【補正内容】

【０１６９】

【表１】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 594032791 アテナ・ニュウロサイエンスィズ・インコ ーポレイテッド ＡＴＨＥＮＡ ＮＥＵＲＯＳＣＩＥＮＣＥ Ｓ，ＩＮＣ. アメリカ合衆国94080カリフォルニア州サ ウス・サンフランシスコ、ゲートウェイ・ ブールバード800エフ番 (72)発明者 ハリー・エフ・ドベイ アメリカ合衆国94044カリフォルニア州パ シフィカ、デュラン・コート24番 (72)発明者 バーゲーゼ・ジョン アメリカ合衆国94112カリフォルニア州サ ン・フランシスコ、エイティーンス・アベ ニュー1722番 (72)発明者 ベネット・コールマン・ラグッツァ アメリカ合衆国46250インディアナ州イン ディアナポリス、ノース・グランド・アベ ニュー7340番 (72)発明者 イワン・エム・リーバーバーグ アメリカ合衆国94708カリフォルニア州バ ークレー、シャスタ・ロード3085番 (72)発明者 シェイラ・パークス・リトル アメリカ合衆国46208インディアナ州イン ディアナポリス、ノース・メリディアン・ ストリート4480番 (72)発明者 スカント・シンハ アメリカ合衆国9412カリフォルニア州サ ン・フランシスコ、ジュニペロ・セッラ・ ドライブ808番

Claims (11)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アスパルチルプロテアーゼインヒビター
   またはその医薬的に許容しうる塩、および一種あるいは
   二種以上の医薬的に許容しうる担体、賦形剤または希釈
   剤からなるβ−アミロイドペプチド(βＡＰ)産生抑制用
   医薬製剤。
2. 【請求項２】 アスパルチルプロテアーゼインヒビター
   がカテプシンＤインヒビターである請求項１に記載の医
   薬製剤。
3. 【請求項３】 アスパルチルプロテアーゼインヒビター
   が式(Ｉ)： 【化１】 [式中、ｉは１、２、３または４；Ｒ¹はＣ₁〜Ｃ₆アルキ
   ル、アリール、シクロヘキシルまたは−Ｓ−Ｒ^1x(ここ
   で、Ｒ^1xはアリールまたはシクロヘキシル)；Ｗは 【化２】 ［ここで、Ｒ^1wおよびＲ^2wは独立して水素、Ｃ₁〜Ｃ₆ア
   ルキル、アリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、複素環(Ｃ₁〜Ｃ
   ₄)アルキル、不飽和複素環(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、あるい
   はＲ^1wとＲ^2wがそれらが結合する窒素原子と一緒になっ
   て複素環または不飽和複素環を形成(ただし、窒素原子
   は４価であってはならない)；ｑは０、１、２、３また
   は４；Ｒ^zは水素、ハロ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆
   アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルチオまたはアミノであ
   る］；あるいはＷは 【化３】 ［ここで、ｊは１または２；Ｒ^3wは水素、ホルミル、カ
   ルバモイルまたは−(Ｂ)_e−Ｘ−Ｒ⁰(ここで、Ｂは−Ｃ
   (Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)_k−；ｋは０、１または２；ｅは
   ０または１；Ｘは−(ＣＨ₂)_g−、−(ＣＨ₂)_m−Ｏ−(Ｃ
   Ｈ₂)_n−または−(ＣＨ₂)_m−ＮＲ^x−(ＣＨ₂)_n−(ここ
   で、ｇは０、１または２；ｍおよびｎは独立して０、１
   または２；Ｒ^xは水素またはＣ₁〜Ｃ₄アルキルである)；
   Ｒ⁰はＣ₁〜Ｃ₆アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニ
   ル、ホルミル、Ｃ₂〜Ｃ₆アルカノイル、アミノ、トリフ
   ルオロメチル、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルアミノ、ジ(Ｃ₁〜Ｃ₄)
   アルキルアミノ、アリール、複素環または不飽和複素環
   である）；Ｒ²はそれぞれ独立してアミノ酸側鎖、−Ｃ
   Ｈ₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂(ＣＨ₂)₂Ｃ
   Ｈ₃、−Ｃ(ＣＨ₃)₃、−ＣＨ₂ＳＯ₂ＮＨ₂、−ＣＨ₂Ｃ
   Ｎ、−(ＣＨ₂)_r−Ｘ¹−Ｒ^2a、−(ＣＨ２)_s−Ｃ(Ｏ)ＮＲ
   ^2bＲ^2cまたは−(ＣＨ₂)_t−Ｓ(Ｏ)_k−[１−Ｎ(Ｒ^2d)−テ
   トラゾール−５−イル](ここで、ｒ、ｓおよびｔは独立
   して０、１または２；Ｘ¹は単結合、二価の(Ｃ₁〜Ｃ₄)
   アルキル、二価の(Ｃ₂〜Ｃ₄)アルケニル、二価の(Ｃ₂〜
   Ｃ₄)アルキニル、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ(Ｏ)−、−
   Ｃ(Ｏ)ＮＲ^2b−、−ＮＲ^2b−Ｃ(Ｏ)−、−ＮＲ^2b−、−
   Ｃ(Ｏ)−、−Ｏ−または−Ｓ(Ｏ)_k−；Ｒ^2aはＣ₁〜Ｃ₆
   アルキル、アリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、複素環、複素
   環(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、不飽和複素環または不飽和複素
   環(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル；Ｒ^2bは水素またはＣ₁〜Ｃ₄アル
   キル；Ｒ^2cはアミノ、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、Ｃ₁〜Ｃ₆ア
   ルキル、−(ＣＨ₂)_m−ジ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルアミノ、ア
   リール、アリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、複素環、複素環
   (Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、不飽和複素環または不飽和複素環
   (Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル；Ｒ^2dは水素、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル、
   アリール、不飽和複素環または不飽和複素環(Ｃ₁〜Ｃ₄)
   アルキルまたはアリール(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルである)で
   ある］；Ｒは 【化４】 (ここで、Ａは−ＣＨ₂−または 【化５】 Ｙはアリールまたは不飽和複素環；Ｙ¹は複素環；Ｒ^4w
   は水素またはアミノ；Ｒ^3aは 【化６】 から選ばれる基；Ｒ^3bは 【化７】 から選ばれる基(ここで、ｐは４または５；ｌは３、４
   または５；Ｒ⁴はそれぞれの位置において独立して水
   素、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキルまたはヒドロキシ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アル
   キル；Ｒ⁵およびＲ⁶は独立して水素、ヒドロキシ、Ｃ₁
   〜Ｃ₆アルキル、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ、アミノ、Ｃ₁〜Ｃ
   ₄アルキルアミノ、ヒドロキシ(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキル、カ
   ルボキシ、Ｃ₁〜Ｃ₄アルコキシカルボニル、カルバモイ
   ル、Ｎ−(Ｃ₁〜Ｃ₄)アルキルカルバモイル、アリール、
   複素環または不飽和複素環である)である］である；た
   だし、 (１)Ｒが 【化８】 の場合、Ｗは 【化９】 Ｒ^3wはホルミル、カルバモイルまたは−(Ｂ)_e−Ｘ−Ｒ⁰
   (ここで、ｅは１；およびＢは−Ｃ(Ｏ)−である)；(２)
   Ｒが 【化１０】 の場合、Ｗは 【化１１】 およびｊは２；および(３)Ｒが 【化１２】 の場合、ｉは１；およびＲ¹はアリール、シクロヘキシ
   ルまたは−Ｓ−Ｒ^1x(ここで、Ｒ^1xはアリールまたはシ
   クロヘキシルである）である］で示される化合物または
   その医薬的に許容しうる塩である請求項１に記載の医薬
   製剤。
4. 【請求項４】 アスパルチルプロテアーゼインヒビター
   が、 ｉが１；Ｒ¹が−ＣＨ(ＣＨ₃)₂またはフェニル；Ｗが 【化１３】 (ここで、Ｒ^3wは水素または−Ｂ−Ｘ−Ｒ⁰(ここで、Ｂ
   は−Ｃ(Ｏ)−または−Ｓ(Ｏ)₂；Ｘは−(ＣＨ₂)_g−また
   は−(ＣＨ₂)_m−Ｏ−(ＣＨ₂)_n−(ここでｇは０；ｍおよ
   びｎは独立して０、１または２である)；Ｒ⁰はＣ₁〜Ｃ₆
   アルキル、アリールまたは不飽和複素環である)；Ｒ²は
   アミノ酸側鎖、−ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−
   ＣＨ₂(ＣＨ₂)₂ＣＨ₃、−ＣＨ₂ＣＮまたは−ＣＨ₂−Ｒ^2a
   (ここで、Ｒ^2aはアリールである)；Ｒが 【化１４】 (ここで、Ｒ^4wはアミノ；Ｙはフェニル；およびＲ^3aは
   −Ｃ(Ｏ)ＮＨ(ｔ−ブチルである)である；ただし、 Ｒが 【化１５】 の場合、ｊが２である化合物(Ｉ)またはその医薬的に許
   容しうる塩である請求項３に記載の医薬製剤。
5. 【請求項５】 アスパルチルプロテアーゼインヒビター
   が式(ＩＩ)： 【化１６】 [式中、Ｒ⁷はＣ₁〜Ｃ₆アルキル、ホルミルまたはＣ₂〜
   Ｃ₆アルカノイル；ｆは１〜６；Ｒ⁸はそれぞれ独立して
   アミノ酸残基、スタチンまたはスタチン誘導体である；
   ただし、(１)ｆが１の場合、Ｒ⁸はスタチンまたはスタ
   チン誘導体でなくてはならず、(２)ｆが２〜６の場合、
   −(Ｒ⁸)_f−におけるスタチンおよびスタチン誘導体の合
   計数は２を越えてはならない]で示される化合物または
   その医薬的に許容しうる塩である請求項１に記載の医薬
   製剤。
6. 【請求項６】 アスパルチルプロテアーゼインヒビター
   またはその医薬的に許容しうる塩、および一種あるいは
   二種以上の医薬的に許容しうる担体、添加剤または希釈
   剤からなるアルツハイマー病の予防または治療用医薬製
   剤。
7. 【請求項７】 アスパルチルプロテアーゼインヒビター
   またはその医薬的に許容しうる塩、および一種あるいは
   二種以上の医薬的に許容しうる担体、添加剤または希釈
   剤からなるβＡＰ関連疾患の予防または治療用医薬製
   剤。
8. 【請求項８】 (１)アスパルチルプロテアーゼインヒビ
   ターを試験系に投与し； (２)試験系におけるβＡＰ産生を測定し； (３)試験系におけるβＡＰ産生と、アスパルチルプロテ
   アーゼインヒビターを投与していない対照試験系におけ
   るβＡＰ産生を比較する；ことからなるβＡＰ産生イン
   ヒビターの同定法。
9. 【請求項９】 試験化合物が存在するかまたは存在しな
   い条件下での非細胞アッセイにおけるアスパルチルプロ
   テアーゼの活性を測定することによってアスパルチルプ
   ロテアーゼインヒビターを同定する請求項８に記載の同
   定法。
10. 【請求項１０】 (１)アスパルチルプロテアーゼインヒ
    ビターを細胞アッセイに付し；次いで、 (２)βＡＰ産生に関連するひとつの細胞特特性を測定す
    る；ことによってβＡＰ産生を測定する請求項８に記載
    の同定法。
11. 【請求項１１】 (１)アスパルチルプロテアーゼインヒ
    ビターを同定し； (２)細胞アッセイにおけるβＡＰ産生を測定し；次い
    で、 (３)試験動物の体液におけるβＡＰ産生を測定する；こ
    とからなるβＡＰ産生インヒビターの同定法。