JPH045237A

JPH045237A - スーパーオキシド消去剤

Info

Publication number: JPH045237A
Application number: JP2108497A
Authority: JP
Inventors: Mitsuaki Ito; 三明伊藤; Osamu Hirose; 統広瀬
Original assignee: Nonogawa Shoji Ltd
Current assignee: Nonogawa Shoji Ltd
Priority date: 1990-04-24
Filing date: 1990-04-24
Publication date: 1992-01-09
Anticipated expiration: 2016-04-16
Also published as: JP3156787B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、生薬エキスを有効成分とするスーパーオキシ
ド消去剤に関し、化粧品、医薬品、食品等に利用するこ
とができる。

（従来の技術）スーパーオキシド（０テ）は、活性酸素の一種で生体内
において様々な障害を与えることが知られている０例え
ば、脂質の過酸化、放射線や紫外線による障害、炎症、
発ガンや変異、　白内障、動脈硬化などの原因になって
いることがわかってきた。

これらの障害を防ぐためには、○うを消去することが大
切になってくる。

スーパーオキシド消去剤としては、　ＳＯＤ　（スーパ
ーオキシドディスムターゼ）が知られている。

（発明が解決しようとする課題）しかし、　ＳＯＤは高価な酵素であり、　また、水溶液
中ではかなり安定であるが、有機溶媒が含まれる系では
安定性に欠けている。また、　さらに、皮膚に対する感
作性の面でも問題が残されている。

そこで、今回、　０テ消去作用を有するものを検索した
ところ、生薬エキスに優れた○シ消去作用があることが
わかり、さらに、その生薬エキスが安定性に優れ、　ま
た、安全性も問題ないことがわかり本発明を完成した。

（課題を解決するための手段）本発明でいう生薬、チョウジ、ダイオウ、ケイヒ、　ゲ
ンノショウコ、ベニバナ、ホップ、　ボタンビ、　カン
ゾウ、サンザシ、　シャクヤク、　センブリ、カミツレ
、　ゲンチアナ、　オウバク、　センキュウ、ショウキ
ョウ、　チンと、　トウキ、　キキョウ、　ニンジン、
ソウジュツ、オウレン、ニンニク、　ヨクイニン、タイ
ソウは汎用化粧品原料集（日本化粧品工業連合会、薬事
日報社）あるいは日本薬局方解説書（日本公定書協会、
廣用書店）に天然植物あるいは生薬として記載があり、
その記載のある植物あるいは生薬を購入して使用するこ
とができる。

生薬エキスはその植物あるいは生薬に親水性溶媒（例え
ば、　水、　エタノール、　メタノール、　プロピレン
グリコール、１，３−ブチレングリコール等）を単独あ
るいは混合液で加え、室温であるいは加熱して常法によ
り抽出することができる。抽出前に、必要に応じて、ア
セトンで脱脂してもよい。

また、生薬エキスは抽出液（流エキス）の状態でもよい
し、漬縮あるいは乾燥して軟エキスあるいは乾燥エキス
の状態で用いてもよい、抽出方法は、汎用化粧品原料集
および日本薬局方解説書に記載されている製造方法を参
考にすることができる。

本発明のＯｉ消去剤は生薬エキスをそのまま用いてもい
いし、　また、必要に応じて本発明の効果を損なわない
範囲内で化粧品、医薬品、食品等に用いられる各種成分
を添加することができる。その成分としては、油脂類、
ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、合成エ
ステル類、界面活性剤、保湿剤、無機類、香料、薬剤、
水等が挙げられる。剤形は特に選ばない。

本発明の実施に当たって、０乏消去剤の配合量は化粧品
、医薬品、食品等の全量中、生薬エキス（固形物）とし
て０．００００１〜１０重量％、好ましくは、０．０１
〜１．０重量％である。　　０．００００１重量％より
低温度になると効果に乏しくなり、また、１０重量％を
越えると不経済である。−日当りの服用量は性別年齢に
よって異なるが上記固形物として、約１〜１０００ｍｇ
である。以下に、実施例によって本発明を更に詳しく説
明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるもの
ではない。

（実施例）実ＩＭ例１０シ消去剤生薬には、日本薬局方に記載されたチョウジ末、ダイオ
ウ末、　ケイヒ末、　ゲンノショウコ末、　ベニバナ末
、ボタンビ末、カンゾウ末、　シャクヤク末、センブリ
末、　ゲンチアナ末、　オウバク末、センキュウ末、　
ショウキョウ末、　チンビ末、　トウキ末、キキョウ末
、ニンジン末、　ソウジュツ末、オウレン末、　ヨクイ
ニン末、タイソウ末を使用した。

それぞれの生薬１０ｇに精製水１７；を加え、１００”
Ｃで、　２時間抽出した後に、残渣を６０μｍのメツシ
ュで除去した。　このようにして得られた抽出液４０〜
５０ｍ１をそれぞれの生薬エキスとした。

実施例２０シ消去剤実施例１で示したそれぞれの生薬１０ｇに１ｉ！；の精
製水を加え、９０℃で２時間抽出した後に残渣を６０μ
ｍのメツシュで取り除いた。　このようにして得られた
抽出液をそれぞれ凍結乾燥し、生薬エキス５〜６ｇを得
た。

実施例３０に消去剤生薬には、　日本薬局方に記載されたチョウジ、ダイオ
ウ、　ケイヒ、　ゲンノショウコ、　ベニバナ、ボタン
ビ、　カンゾウ、　シャクヤク、セブリ、　ゲンチアナ
、　オウバク、　センキュウ、　ショウキョウ、チンビ
、　トウキ、キキョウ、ニンジン、ソウジュツ、オウレ
ン、ヨクイニン、　タイソウを使用した。

それぞれの生薬１０ｇに３０％（Ｗ／Ｖ）エタノール１
００ｍ１を加え、６０℃で２時間還流抽出した後に残漬
を６０μｍのメツシュを通して除き、それぞれの生薬エ
キス８０〜９０１１を得た。

実施例４０う消去剤実施例３に示した生薬１０ｇにそれぞれ３０％（Ｗ／Ｖ
）エタノール１００ｍ１を加え、６０℃で２時間還流抽
出した後に、残渣を６０μｍのメツシュで除いた。得ら
れた抽出液をそれぞれ凍結乾燥して生薬エキス１〜２　
ｇを　得　た。

実施例５０シ消去剤アルプス薬品工業株式会社より購入したエキス剤（表−
１）を精製水に溶かし、不溶物は６０μｍのメツシュで
取り除いた。この溶液に１．３−ブチレンゲリコール（
終濃度２０％（Ｗ／Ｗ））およびバラオキシ安息香酸メ
チルエステル（終濃度０．１％（１１／Ｗ））を加え、
生薬エキスの温度は固形物として０．１％（（表−１の
続き）ｗ／ｗ）になるように調節した。

表−１生薬エキスの一覧表上言己表において、温度は抽出温度（”Ｃ）を表してい
る。記載のないものは、　「日周」製剤総則、エキス剤
の製法を準用したものである。

（本発明の効果）本発明の○う消去剤は優れたＯｉ消去能を有し、また、
安定性にも優れている。さらに、安全性についても問題
なかった。

以下に、実験例によって、　さらに詳しく本発明の詳細
な説明する。

実験例１表−１に示した生薬エキスを用い、ＰｏｎｔｉらのＮＢ
Ｔ法（Ｃｈｅｍ、−Ｂｉｏｌ、Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ
、　　２３：　　２８１−２９１．１９７８）でＯｔ消
去作用を測定した。すなわち、５．２ｕ　Ｍ　　Ｐ　Ｍ
　Ｓ　（ｐｈｅｎａｚｉｎｅ　　ｍｅｔｈｏｓｕｌｐｈ
ａｔｅ）と７３μＭ　　ＮＡＤＨによって発生する○シ
と８０μＭ　　ＮＥＴ　（ｎ１ｔｒｏ　　ｂｌｕｅ　　
ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ）の反応によって生じるホルマ
ザンを５６０ｎｍの吸光度で測定するものである。

試料無添加と試料添加の場合のホルマザン生成期速度を
測定し、下記の式により０５消去率を計算し　た。

Ｏう消去率（％）＝（１−−）Ｘ１００Ａ：　試料無添
加時のホルマザン生成期速度Ｂ：　試料添加時のホルマ
ザン生成期速度表２にその結果を示した。

表−２生薬エキスの０５消去作用生薬名　　エキス温度（μｇ／ｍｌ）チョウジ゛　　　　　　　　５．０１０．０３０．０ケ゛ンノシゴウコ　　　　１０．０３０．０１００．０り′イオウ　　　　　　　　１０．０１５．０３０゜０ケイと　　　　　　　　　　５．０１０．０５０．０本ツフ＠　　　　　　　　２５．０５０．０１００．００５消去率（％　）３８．８５８．０１９．６５９．４９４．３３４．５６３．７２．６２５．５４６．１６６．０７６．４生薬名オウレン本゛タンヒ０シャクヤクチン七〇オウム０クカンソ゛つ２の続き）エキス濃度（μｇ／ｍ１）１００．０２００．０３００．０２５．０５０．０１００．０５０．０１００．０２００．０９８．０１９６．０２９４．０１０．０３０．０１００．０１０．０３０．０（表−２の続き）生薬名　　エキス濃度（μｇ／ｍ１）１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０ハ゛クモンドウ　　　１００．０トウキタイソウヨクイニンニンニクソウシ゛ユツニンシ１ンキキＪつＳＯＤ０．１０シ消去率（％）２７．５４７．３５９．３８．９４６．４７３．８１Ｂ、３４９．０７４．１２９．８４６．４５６．７１４．６２２．９４６．１３５．７４８．８（表−２の続き）生薬名　　エキス濃度（μｇ／＋１）カンソ゛ウ　　　　　　１００．０へ゛二１ビナ　　　　　　１０．０３０．０１００．０３０．０５０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０シラウつ璽ウカミツレヲンヲ゛シセンキュウケ゛ンチ７すｔンフ゛すＯシ消去牢（％）６６．７４２．０５８．０６６．０２１．１４５．６６５．６２７．７５６．７２１．４５６．１２５．８５５．９２８．１４４．６７．０３３．９ ○シ消去率（％）１６．９３１．７４．３３０．１２３．８２９．８７．８２９．８２４．５１．５２３．５１２．４（表−２の続き）ＳＯＤ　　　　　　Ｏ，２１８，２０，５４６，２１，０？４．２ＳＯＤ：　　ウシ赤血球由来ＳＯＤ実験例２実験例１と同じ生薬エキスを用い、大柳らの亜硝酸法（
活性酸素、監修　八木國夫、中野稔、編集　二木鋭雄、
島崎弘幸、医歯薬出版株式会社）で０５消去作用を測定
した。

すなわち、０．１ｍＭ　　キサンチンと０．０６３ｕｎ
ｉｔ／ｍｌキサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）の系でＯ
ｉを発生させ、そのＯｉとヒドロキシルアミンの反応に
よって生じる亜硝酸を発色剤で発色させた後に５５０ｎ
ｍの吸光度を測定する方法である。

試料無添加の場合と試料添加の場合の吸光度から以下の
計算式でＯｔ消去率を求めた。

Ｏシ消去率（％）　＝　　（１−−）　　Ｘ１００１２
．９Ａ：　試料無添加時の５５０ｎｍの吸光度増加量Ｂ：　
試料添加時の５５０ｎｍの吸光度増加１表−３にその結
果を示した。

表生薬名チ１ウシ′ ケ゛ンノシゴウコダイオウオウハ゛り生薬エキスのＯａ消去作用エキス濃度（μｇ／ｍ１）１０．０３０．０１００．０３００．０１０．０３０．０１００．０３００．０１０．０３０．０１００．０３００．０３０．００う消去率（％）１２．４２１．６４７．４６２．４１４．９３３．０４８．５７２．７９．８１３．９３５．１６３．４８゜０（表生薬名オウｌビクオウレンヲンヲ゛シシャクヤク本゛タンヒ０の続き）エキス濃度（μｇ／ｍ１）１００．０３００．０１０００．０１０．０３０．０１００．０３００．０１００．０３００．０１０００．０３０００．０３０．０１００．０３００．０１０００．０３０．０１００．０（表生薬名本゛タンヒ６チンビ０ケイヒカンソ９ウソウシ′ユツ３の続き）エキス濃度（μｇ／＋１）３００．０１０００．０３０．０１００．０３００．０１０００．０３０．０１００．０３００．０３０．０１００．０３００．０１０００．０１０００．０３０００．０６０００．００う消去率（％）３９．１７１．６１．４２２．８３０．３５８．６１Ｏ０３２３，４３３，８９，０１３，１３１，７６２，８３３，８５６，６７８，６（表−３生薬名ヲンヲ゛シヘ゛ニノビナ本ツフ６キキョウｔンフ゛リタイソウトウキシ！ウキ５つｔンキュウの続き）エキス濃度（μｇ／ｍ１）２００．０４００．０ａｏｏ、。

１０００．０２００．０４００．０８００．０３０．０１００．０３００．０１０００．０１００．０２００．０２００．０１００．０１００．０１００．０Ｏシ消去率（％）１５．６４８．０７５．１１９．６３４．７６３．１８６．７４３゜２６９．８９．３１９．６４０．０７２．０１７．３０矛消去率（％）２３．１６０．３７２．４４３．５６０．８６７．２１５．５５６．７７３．４９．４６．４０．３２．８２．８２．２（表−３の続き）生薬基　　エキス濃度　　　　　　０〉消去率（μｇ／
ｍｌ　）　　　　　　　　（％）ケ°ンチアナ　　　　
　　　　１００．０　　　　　　　　　　　　　　　　
１．７ニンニク　　　　　　　　　　３３０．０　　　
　　　　　　　　　　　　　０．３ニンシ゛ン　　　　
　　　　　１００．０　　　　　　　　　　　　　　　
　０ヨクイニン　　　　　　　　　１００．０　　　　
　　　　　　　　　　　　１．１八〇りそンドウ　　　
　　　１００．０　　　　　　　　　　　　　　　　０
ＳＯＤ　　　　　　　　　　　　　　　　Ｏ，１２７，
５０，２５４５，６０，５８１３，（ＩＳ　００　：　　ウシ赤血球由来ＳＯＤ実駿例３実験例１、２と同じ生薬エキスを用いた。

Ｏｉの測定は吉川らのスピントラップ法（ＥＳＲとフリ
ーラジカル、編集　西用弘恭、吉川敏−日本医学館、　
Ｉ　　ＥＳＲとフリーラジカル−その臨床応用の可能性
−１ｐ　１３−１８）を用い、　トラップ剤としてはＤ
　Ｍ　Ｐ　Ｏ（５，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌ−１−ｐｙｒ
ｒｏｌｉｎ＝−Ｎ−ｏｘｉｄｅ）を使用した。

すなわち、　２＋ｍＭ　　キサンチンと０．０６３ｕｎ
ｉｔ／ｍｌキサンチンオキシダーゼの系によって○テを
発生させ、　・ＤＭＰＯ−０ラスピンアダクトをＥＳＲ
（ｅｌｅｃｔｒｏｎ　　５ｐｉｎ　　ｒｅｓｏｎａｎｃ
ｅ）で検出した０図−１に、そのシグナルビークを示し
た。　このピークのシグナル強度（ＩＯａ）をＭｎＯの
シグナル強度（Ｉ　Ｍｎ０）と比較することによってＯ
ｉを定量した。

図−２、図−３に示したように、　ＳＯＤあるいは生薬
エキスをその系に加えると０５のシグナル強度が小さく
なり、　Ｏｊが消去された。

Ｏｉの消去率は次の計算式で求めた。

Ｏシ消去車（％）　＝　（１−−）　Ｘ１００Ａ：Ｂ：試料無添加時のＩＯｉを試料無添加時のＩ　ＭｎＯで割
った値試料添加時のＩＯｊを試料添加時のＩ　ＭｎＯで割った
値Ｓ　Ｒ（ＪＯＥＬ−ＪＥＳ−ＲＥ２Ｘ、　　日本電子社
）の測定条件はｍａｇｎｅｔｉｃ　　ｆｉｅｌｄ　　３
４０．０±５　、　ＯｍＴ、　　ｍ　ｆ　ｃ　ｒ　ｏ　
ｗ　ａ　ｖ　ｅｐｏｗｅｒｌｏ、ＯｍＷ、ｍｏｄｕｌａ
ｔｉｏｎａＩＩｌｐｌｉｔｕｄｅＯ１ａ＋丁、ｓｗｅｅ
ｐ　　　Ｌｉｍｅ　　　１０ｍＴ／ｍｉｎ、ｒｅｓｐｏ
ｎｃｅ　　　ｔｉｍｅ　　　０．１ｓｅｃ。

ｒｅｃｉｅｖｅｒ　　ｇａｒｎ　　　ｘ　１０００と　
した。

表−４にその結果を示した。

表−４生薬エキスの０う消去作用生薬者　　エキス濃度　　　　　Ｏａ消去率（μｇ／ｍ
ｌ）　　　　　　　　（％）チ３ウン゛　　　　　　　
　　　１．０　　　　　　　　　　　　　　　１４．６
５．０　　　　　　　４７．２１０．０　　　　　　　６７．６２０．０　　　　　　　　Ｂ１．０１００．０　　　　　　　１００．０ケ３ンノシヨウコ　　　　　　　１．０　　　　　　　
　　　　　　　　２１．３５．０　　　　　　　　　　
　　　　　３８．６１０．０　　　　　　　　　　　　
　　　６２．６２０．０　　　　　　　　　　　　　　
　　？８．４１００．０　　　　　　　　　　　　　　
１００．０り゛イオウ　　　　　　　　　　　１．０　
　　　　　　　　　　　　　　　１１．４５・０　　　
　　　　　　　　　　　　４０．２（表−４の続き）生薬基　　エキス濃度（μｇ／ｍ１）１０．０２０．０１００．０１０．０２０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１０．０１００．０１００．０１０、（１１ＱＯ，Ｑチン七〇ダイオウシャクヤク本゛タンヒ０ケイヒ本ツフ６カンソ°つベニハ１す０う消去率（％）５８．７７４゜７１００．０２８．２７４．７８０．２３２．７７８．２１８．６７４．１２８．６６８．４５７．０３８．３１２．８６０．４（表−４の続き）生薬者　　エキス濃度（μｇ／ｍｌ　）ヲンブシ　　　　　　　　　１００．０ｔンフ２リ　　
　　　　　　　１００．０カミツレ　　　　　　　　　
１００．０ケ゛ンチ１す　　　　　　　１００．０オウ
レン　　　　　　　　　１００．Ｏｔンキュウ　　　　
　　　　　１００．０シｊウキまウ　　　　　　　１０
０．０トウキ　　　　　　　　　　１００．０キキＳウ
　　　　　　　　　１００．０ソウジスツ　　　　　　
　１００．０ニンニク　　　　　　　　　１００．０ヨクイニン　　
　　　　　　１００．０タイソウ　　　　　　　　　１
００．０ハ゛クモンドウ　　　　　１００．０ＯＤ０．１０．２０う消去率（％）５１．０４５．３４０．３３８．２３７．１３０．２２９．８２５．０２３．４２１．３１５．５１１．９７．７３４．７４８．６（表−４の続き）ＳＯＤ　　　　　　　１．０　　　　　　　７２．２Ｓ
ＯＤ：　　ウシ赤血球由来ＳＯＤ以上、本発明で用いる生薬エキスは三種類の方法全てに
おいてＯｊ消去作用を示した。特に、　その作用におい
て、ＮＢＴ法とＥＳＲ法は高い相関を示しく　ｐ＜　Ｑ
、ｏｏｔ）、ＥＳＲ法と亜硝酸法においても相関を示し
た（　ｐ＜　０．０５）、　　一部の生薬エキス、例え
ば、チョウジ（エキス濃度１００．０μｇ／ｍｌ）はＸ
ＯＤに対して強い阻害作用を示したが、１０．０μｇ／
ｍｌにおいては阻害作用を示さなくなった。

ＸＯＤ由来の０５による障害、例えば、関節炎などに対
して、　この品種はより有効である。

実験例４実施例１〜５の０５消去剤についても、同様にＮＢＴ法
、亜硝酸法、ＥＳＲ法で０５消去作用を測定したところ
、バクモンドウ以外は全て０襲消去能を有していた。

実験例５実施例１〜５のＯｊ消去剤、そして、ウシ赤血球由来Ｓ
ＯＤを１　ｍｇ／ｍｌの水溶液で、１２０℃、１５ｍ１
ｎ（７）処理をしたところ、ＳＯＤがほとんど失活した
のに対し、実施例１〜５のＯｉ消去剤はまった＜　Ｏｉ
消去能が変化しなかった。

実験例６実施例１〜５の０５消去剤ついて、−次刺激性試験およ
び感作性試験を行った。

その結果、−次刺激性および感作性は問題なかっ　た。

以上示したように、本発明の生薬エキスを有効成分とす
るＯｉ消去剤は、優れた０う消去能を有する。さらに、
本発明のＯｉ消去剤は非常に安定性に様子を示している
。

図−３は、　ＥＳＲ法１：＄５１する・ＤＭＰｏ−Ｏｔ
スピンアダクトのシグナル強度がチョウジエキスによっ
て小さくなる様子を示している。

図−２、図−３において、縦軸はシグナル強度（Ｉｎｔ
ｅｎｓｉｔｙ）を、横軸はｍａｇｎｅｔｉｃ　　ｆｉｅ
ｌｄ　（Ｆｉｅｌｄ）の範囲を示している。また、濃度
（μｇ／ｍｌ）はそれぞれ、ＳＯＤおよびチョウジエキ
スの濃度を示している。

図−１は、　ＥＳＲ法における・ＤＭＰＯ−Ｏｊスピン
アダクトのシグナルビークを示している。　ＩＯｊは０
うのシグナル強度、そして、　Ｉ　ＭｎＯはＭｎＯのシ
グナル強度である。

Claims

【特許請求の範囲】

チョウジ、ゲンノショウコ、ダイオウ、カンゾウ、オウ
レン、タイソウ、ニンジン、ケイヒ、ベニバナ、ホップ
、ボタンビ、サンザシ、シャクヤク、センブリ、カミツ
レ、ゲンチアナ、オウバク、センキュウ、シヨウキヨウ
、チンビ、トウキ、キキョウ、ソウジュツ、ニンニク、
ヨクイニンより選ばれる一種または二種以上の生薬エキ
スを有効成分とするスーパーオキシド消去剤。