JPH04202138A - 活性酸素消去のために使用するホップ抽出物とその利用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本、発明は成人病、悪性関節リウマチ、ベーチェソト病
等の難病など、健康維持上障害となる諸疾患、火傷など
の外傷、ニキビ、シミ等の美容上の障害の予防、治療に
効果を有する新規活性酸素消去作用を有するホップ抽出
物並びに、この抽出物を有効成分として含有する医薬品
、飲食品、ならびに化粧品に関するものである。

（従来の技術） ホップは、ビール醸造において酵母、麦芽と並んで重要
な原料である。ビールの苦味、香気成分はホップに由来
するものが多い。例えば、苦味はビール醸造工程におい
て麦汁煮沸の際、ホップ中のα酸が異性化してできるイ
ソα酸の苦味によるものであり、また香気はフムレン、
カリオフィレンを主成分とした精油、即ちホップ油が関
与している。さらに、ホップは苦味作用ばかりでなく、
同時に貯蔵剤としての作用があり、イソα酸は抗バクテ
リア作用があるとされている。また、ホップは、民間療
法で鎮静剤及び抗催淫剤として通用しており、それらの
作用にも苦味質が関与しているとされている。このよう
にホップには生理作用を持つ種々の有効成分が含まれて
いる可能性がある。

一方、最近、活性酸素および不飽和脂肪酸から生成する
過酸化脂質が人体に悪影響を及ぼすことが明らかになっ
ている。過酸化脂質やその酸化分解物がＤＮＡやＲＮＡ
、タンパク質や膜組織に作用し、細胞の機能低下や動脈
硬化、肝疾患や網膜症などの原因やプロスタグランジン
生合成や薬物代謝における生理作用などの多くの問題に
関わり、ひいては老化や発がんにも関与しているものと
考えられている。美容の面では、シミ、そばかすなどの
原因にもなっている。また、食品分野では酸化による劣
化、特に油脂食品における脂質の自動酸化に基づく嗜好
的品質や栄養の低下から過酸化脂質の生成による毒性の
発現にいたるまで大きな問題になっている。

そこで現在、過酸化脂質生成の抑制手段として抗酸化剤
の探索研究が広く行われている。代表的な天然抗酸化剤
として、脂溶性のトコフェロール（ビタミンＥ）や水溶
性のアスコルビン酸（ビタミンＣ）があり、合成抗酸化
剤としてＢ’ＨＴ（３゜５−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒ
ドロキシトルエン）やＢ　ＨＡ　（２（３）　−ｔｅｒ
ｔ−ブチル−ヒドロキシアニソール）などが挙げられる
。

（発明が解決しようとする課題） 本発明者らは、これらの抗酸化剤の他に同様の過酸化脂
質生成の抑制手段を有する物質の存在を探索し、その結
果、ホップ中に活性酸素消去作用を有する物質が存在す
ることを見出した。

前述したように、ホップはビール醸造に用いられ、また
民間薬として古くから利用されており、抗酸化剤として
はより安全性が高く利用価値も大きいと考えられる。

従って、本発明はホップ中に存在する活性酸素消去作用
を有する物質を提供することを目的とする。

（課題を解決するための手段） 本発明は、ホップを粉砕後、該粉砕物を１種以上の溶媒
で抽出し、溶媒抽出液を濃縮乾固して得られる活性酸素
消去作用を有するホップ抽出物である。

ホップはくわ科に属するつる性、雌雄異株、宿根多年性
の植物の名称である。本発明においてはホップの毬花を
そのまま、あるいは乾燥したものを使用する。また乾燥
圧縮したもの、さらにそれを粉砕したもの、粉砕後ペレ
ット状に固めたものや、篩別したものも使用できる。

ホップの毬花を粉砕後、抽出工程において使用する有機
溶媒としては低級アルコール、アセトン、アルキルケト
ン、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン等が挙げられ、特にｎ−
ヘキサン、酢酸エチルが好適である。また、抽出溶媒と
して、流動パラフィンや、パーシック油のような油脂類
も使用できる。

この際は溶媒が高沸点物質であるので、その抽出？８液
をそのまま力ロエすることもできる。これらの溶媒を１
種または２種以上混合して使用する。抽出操作は常温、
もしくは４℃前後で行うことが好適であるが、６０〜１
２０℃程度の加温下でも行うことができる。

抽出工程により得られた活性酸素消去作用を有する物質
を含む抽出液は、常法により減圧下濃縮乾固する。要す
れば凍結乾燥して、本発明の活性酸素消去作用を有する
抽出物が得られる。尚、得られた活性成分はアルカリ側
でやや不安定であるので、抽出、精製過程は中性乃至酸
性側で行うことが好ましい。

得られた抽出物はその精製度によって、黄緑色乃至深緑
色のあめ状乃至固形状物であり、活性酸素（スーパーオ
キシド、ハイドロオキシラジカル、過酸化水素等）抑制
作用、ＤＰＰＨ（１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒ
ドラチル）に対するラジカルスカベンジャー作用、過酸
化脂質生成抑制作用、ラット心室性不整脈防止作用、抗
炎症作用等を有する。

本発明の活性酸素消去作用を有する抽出物は、一般に使
用される担体、助剤、添加側等とともに製剤化すること
ができ、常法に従って経口、非経口の製品として、医薬
品、医薬部外品、化粧料等の分野で利用することができ
る。

経口剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
シロップ剤等、非経口剤としては軟膏剤、クリーム、水
剤等の外用剤、無菌溶液剤、懸濁液剤等の注射剤等であ
る。

これらの製品を医薬として疾患に投与するときは１００
■〜３００■を１日１乃至数回、即ち１０■〜ｔｏｏｏ
■の全日量で投与し、十分その効果を奏し得るものであ
る。

本発明抽出物は医薬品として生理的に認められるヘヒク
ル、担体、賦形剤、統合剤、防腐剤、安定剤、香味剤等
と共に要求される単位用量形態に混和される。

錠剤、カプセル剤等に混和される佐薬は次のようなもの
である。トラガント、アラビアゴム、コーンスターチ、
ゼラチンのような統合剤、微品性セルロースのような賦
形剤、コーンスターチ、前ゼラチン化澱粉、アルギン酸
のような膨化剤、ステアリン酸マグネシウムのような潤
滑剤、ショ糖、乳糖、サッカリンのような甘味剤、ペパ
ーミント、アカモノ油、チェリーのような香味剤、カプ
セル剤の場合は、上記の材料に更に脂油のような液体担
体を含有することができる。また、他の材料は被覆剤と
して又は製剤の物理的形態を別な方法で変化させるため
に存在させることができる。例えば、錠剤はシェラツク
、砂糖で被覆することができる。シロップ又はエリキシ
ルは活性化合物、甘味剤としてショ糖、防腐剤としてメ
チル又はプロピルパラベン、色素及びチェリーまたはオ
レンジ香味のような香味剤を含有することができる。

注射剤のための無菌組成物は注射用水のようなベヒクル
中の活性物質、ゴマ油、ヤシ油、落花生油、綿実油等の
ような天然産出植物油又はエチルオレートのような合成
脂肪ベヒクルを溶解又は懸濁させる通常の方法によって
処方することができる。また、緩衝剤、防腐剤、酸化防
止剤等を必要に応じて配合することができる。

外用剤としては基剤としてワセリン、パラフィン、油脂
類、ラノリン、マクロゴール等を用い、通常の方法によ
って軟膏剤、クリーム剤等とする。

本発明抽出物を食品に添加する場合は、上記製剤の形態
でもよいが、あめ、せんべい、クツキーなどの形態でそ
れぞれの食品原料に所要量を加えて、一般の製造法によ
り加工製造する。健康食品、機能性食品としての摂取は
、病気予防、健康維持に用いられるので、経口摂取とし
て１日数回に分け、全日量として５０■〜５００■を含
む加工品として摂取される。またビタミンＣ、ビタミン
Ｅ、補酵素Ｑｎなど一部抗酸化性を有する化合物と併用
することが出来る。またこれらの物質は、本抽出物の安
定化剤としての作用も有し、併用することが有用である
。これら抗酸化物質は常用量以下で用いられる。

（発明の効果） ホップから得られた本発明の抽出物は、活性酸素消去作
用を有するので、生体内に生成した活性酸素や過酸化脂
質によって引き起こされる障害を抑制する能力を有する
。従って、健康上の障害、美容上の障害の予防、治療に
有効であり、医薬品、飲食品、化粧品等に応用すること
ができる。

（実施例） 試験例１／ラジカルスカヘンジャー作用（１）試験方法 プロイスの方法（Ｎ、　Ｓ、　ＢＩｏｉｓ＋　Ｎａｔｕ
ｒｅ　１８１＋１１９９（１９５８））に従って行った
。すなわち、試料の１．１−ジフェニル−２−ピクリル
ヒドラジル（ＤＰＰＨ，安定ラジカル）に対するラジカ
ル消去力を測定、これをもって抗酸化力とした。方法は
以下に示すとおりである。

■１００μＭＤＰＰＨエタノール溶液を調製する。

■試料の１■／　ｍｌエタノール溶液を調製し、０．０
５．０．１．０．２．０．３．０．４．０．５　ｒｒｌ
、ずつ取り、それぞれにエタノールを加え、全体を１ｍ
ｌとし、これを試料溶液とする。

■試験管に■のＤＰＰＨエタノール溶液４ｍｌ。

■の試料溶液２００μｌを入れ、１０分間放置する。

■５１７ｎｍの吸光度を測定する。（ブランクはエタノ
ールとする。） ■吸光度の減少（％）を縦軸、試料の添加量を横軸とし
たグラフにより、試料の単位重量（■）あたりのＤＰＰ
ＨＰＰ上ル数（μｍｏｌ）を求め、これを試料の抗酸化
力とした。

（２）供試物質 ■流動パラフィン及びパーシック油の等景況合物（２０
ｇ）によりホップ（Ｌｏｇ）から抽出して得られる抽出
物（厚生省監修、化粧品種別許可基準Ｖｏ１．４．　ｐ
１５０） ■α−トコフェロール（対照） ゛（３）結果 表１ なお、実施例１及び２に記載の抗酸化力（μｍｏｌ／ｍ
ｇ）データは本ＤＰＰＨ法にて測定して得たものである
。

実施例１ （１）　　ホップからの活性酸素消去作用を有する抽出
物の抽出と精製 ペレット状のホップ２０ｇを乳鉢でよく粉砕し、これに
エタノール４００　ｍｌを加え、加熱還流下で１時間抽
出し、濃縮後、深緑色の半固形物８．２ｇを得た。この
熱エタノール抽出物８．２ｇを、１６０　ｍｌのヘキサ
ンと１６０ｍ１の水にて分配し、水相を１６０＋＋＋４
！のヘキサンで２回抽出し、ヘキサン相と水相に分画し
た。ヘキサン相からの抽出物を合わせ、濃縮した。抽出
物の収量、抗酸化力を、対照の精製α−トコフェロール
の抗酸化力とともに表２に示した。

なお、抗酸化力は、試験例１記載の方法にて測定した。

表２の結果から明らかなように、ヘキサン画分の抗酸化
力は、α−トコフェロールの抗酸化力に近似していた。

次に、１７．６　ｇのヘキサン抽出物をシリカゲル３０
０ｇヲ用いてシリカゲルクロマトグラフィーにて精製し
た。移動相はｎ−ヘキサン−酢酸エチルを用い、各５０
０艷の１０段階グラジェント溶出を行った。その各分画
相にお＆Ｊる精製物の収量、収率、抗酸化力を表３に示
した。

１５　：　１　　　０．４１　　　２．３　　　活性な
し１２　：　１　　　１．９２　　　１０．９　　　４
．１０１０　：　１　　　２．４８　　　１４．１　　
　４．３０９：１　　　１．８２　　　１０．３　　　
４．００８　：　２　　　０．４９　　　９．５　　　
１．６７７　：　３　　　０．７０　　　４．０　　　
０．６７６　：　４　　　０．８９　　　５．１　　　
０．８５５　：　５　　　３．０７　　　１７．４　　
　１．７５２　：　８　　　１．６９　　　９．６　　
　２．１３表３の結果から、ヘキサン：酢酸エチル＝１
２＝１．１０：４．９：１において、精製したヘキサン
抽出物は、４．０μｍｏｌ／■以上の強い抗酸化力があ
り、またその収量はヘキサン抽出物全体の３５％にあた
る。また、ＴＬＣ分析（ヘキサン：酢酸エチル−２：１
）で、それらの両分の主成分はＲｆ＝０．８１を示した
。

（２）ホップから抽出、精製した活性酸素消去作用を有
する抽出物の化学的特性 （１）で得られた抽出物のＨＰＬＣ（高性能液体クロマ
トグラフィー）分析を行った。分析、分取条件を表４に
示す。

表４ カラム　　　　　　Ｚｏｒｂａｘ−ＯＤＳ　　　Ｄ−Ｏ
ＤＳ−５（ＹＭＣ）検出波長　　　　　　３０２＊ｍ　
　　、　　　　３０２＊ｍ注入量　　　　　　　１０μ
ｍ２５０μｌ試料濃度　　　　　　　５　ｍｇ／ｍ１　
　１００　ｍｇ／ｍｐ。

流速　　　　　　　　１．５　ｍｌ／ｍｉｎ　　　９．
５　ｍＰ、／ｍｉｎカラム温度　　　　　５０°Ｃ室温 移動相　メタノール　８Ｑ　ｍ；　　　　　９０　ｍｌ
水　　　　　　　２０　　ｍＰ、　　　　　　　１０　
　ｍｌリン酸　　　１．７　ｇ　　　　　１．７　ｇホ
ップの苦味成分の分析用に調製されたサンプル、および
表３のへキサン：酢酸エチル−９：１両分の保持時間を
比較した。表５に示すように、活性成分の主ピークの保
持時間は２４．３４５分および３１．９９４分であり、
ホップ分析用サンプル中のβ酸のコルプロン（２４，３
７７分）、ルプロン＋アドルプロン（３２，０２６分）
によく一致した。従って、得られた強い抗酸化力を示す
成分は苦味成分の１つであるルプロン類（β酸）であり
、ルプロン、コルプロンおよびアドルプロンの混合物で
あると推定された。

表５　主成分ピークの保持時間 ｃｏ　　　　ｎ＋ａｄ　　　　　ｃｏ　　　ｎ＋ａｄ活
性画分　　　　　　　　　　　　　２４．３４５３１．
９９４＊：ＣＯコフムロン、ｎツムロン、ａｄアドフム
ロン＊＊：　　ＣＯコルプロン、ｎルプロン、ａｄアド
ルプロンさらに、活性画分がルプロン類であることを確
認するため、表４に示す条件で表３のヘキサン：酢酸エ
チル−９：１両分の分取ＨＰＬＣを行い、溶離液を減圧
濃縮し、イソオクタンにて抽出、減圧乾固して、コルプ
ロンおよびルプロン＋アドルプロンを得た。

それぞれの抗酸化活性は、４．５および４．３　ｍｏｌ
／ｍｇＴ：あった。’Ｈ−ＮＭＲ，ＩＲ，ＵＶ（７）デ
ータを表６に示す。また分取に用いた両分のルプロンと
アドルプ０ンの比は０）１プロトン（１９，１６ｐｐｍ
、１９．３２ｐｐｍ）の高さより８：１であった。β酸
は２つのタイプのエノール構造を持つが（Ｖｅｒｚｅｌ
ｅ　Ｍ、　：　ｅｄ、　Ｐｏ１ｌｏｃｋ。

Ｊ、　　Ｒ，八、、　　Ｂｒｅｗｉｎｇ　　５ｃｉｅｎ
ｃｅ、　　Ｖｏｌ、　　Ｌ　　ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅ
ｓｓ　（Ｌｏｎｄｏｎ）、　Ｐ、２８０　（１９７９）
）　、これは２本のエノールピーク（表６のｅｎｏＬｌ
および６１ｏ１−２）により確認された。

表６ コルプロン　　　ルプロン＋アドルプロンＩＩ−ＮＭＲ
（ＣＤＩＪ　３）　ｐｐｍ　（ＴＭＳ）５．１５（ＩＬ
　ｍ）　　　　５．１４（１１（、ｍ）４．８０（ＩＨ
Ｘ２．　ｍ）　　　４．７９（ＩＨＸ２．　ｍ）３．１
８（ＬＨ，ｄ）　　　　３．１８（１１（、ｄ）２．６
６（２１Ｌ　ｍ）　　　　２．６２−２．６５（２Ｈ，
ｍ）２．５１（２Ｈ，ｍ）　　　　２．５０（２Ｈ，ｍ
）１．７８（３ＨＸ２．２ｓ）　　’１．７７（３Ｈｘ
２．２ｓ）１．５７（３ＨＸ４．４ｓ）　　１．５５（
３ＨＸ４．４ｓ）２．４６（１８，ｍ） １．１６（３Ｈｘ２．２ｓ） ３．０２．２，９Ｈｎ、　２Ｈ，ｄｄ）２、ｌＨｎ、　
　ＬＨ，ｄ） ０．９８（ｎ、、３ＨＸ２．ｄ） ２．６２−２．６５（ａｄ、　　ＬＨ，ｍ）１、ＩＨａ
ｄ、　　２Ｈ，ｍ） ０．８８（ａｄ、　　３Ｈｘ２．　　ｔ）１９．２７（
ｓ、　　ｅｎｏ’１−１）　　１９．１６（ｎ、、　　
ｓ、　　ｅｎｏｌ−１）１８．２７（ｄ、　　ｅｎｏｌ
−２）　　１９．３２（ａｄ、、　　ｓ、　　ｅｎｏｌ
−１）１８．３６（ｎ、、　　ｓ、　　ｅｎｏｌ−２）
１８．３７（ａｄ、、　　ｓ、　　ｅｎｏｌ−２）ＩＲ
（ｎｅａｔ、　　ＮａＣｆ、　　ｃｍ−’）３４００　
（ＯＨ）　　　　　　　　３４００　（ＯＨ）１７５０
．１７００（Ｃ−０）　　　１７５０．１７１０（Ｃ−
０）１６４０（ｅｎｏｌ）　　　　　　　１６４０（ｅ
ｎｏｌ）ＵＶ（ＥｔＯＨ，ｎｍ） ２４３．２８０，３２０　　　　　２４６．２７１注　
ｎルプロン、ａｄアドルプロン 実施例２ ペレット状ホップＬｏｇを乳鉢でよく粉砕し、これに流
動パラフィン２０ｇを加え、４°Ｃにて１日撹拌した。

これをガーゼごしに絞り、深緑色の油状抽出物１３．４
ｇを得た。

試験例１の方法による本抽出物の抗酸化力は０、１９　
ｐ　ｍｏｌ／ｍｇであった。

実施例３ ペレット状ホップ１０ｇを乳鉢でよく粉砕し、これにパ
ーシック油２０ｇを加え、４℃にて１日撹拌した。これ
をガーゼごしに絞り、深緑色の油状抽出物１３．６ｇを
得た。

試験例１の方法による本抽出物の抗酸化力は０．１９μ
ｍｏｌ／ｍｇであった。

実施例４　（錠剤、カプセル剤） 実施例１（１）の抽出物　　　　１０−乳糖　　　　　
　　　　　　７５ ステアリン酸マグネシウム　１５ 上記の各重量部を均一に混合し、錠剤、およびカプセル
剤とした。

実施例５　（散剤、顆粒剤） 実施例１（１）の抽出物　　　　２０ 澱粉　　　　　　　　　　　３０ 乳Ｉ％ｆ　　　　　　　　　　　　５０上記の各重量部
を均一に混合し、散剤、および顆粒剤とした。

実施例６　（注射剤） 実施例１（１）の抽出物　　　　１ 界面活性剤　　　　　　　　９ 生理食塩水　　　　　　　　９０ 上記の各重量部を加熱混合、滅菌して注射剤とした。

実施例７　（クツキー） 実施例１（１）の抽出物２重量％を含む小麦粉に、食塩
、ショ糖、バターなどで味付けしたものを適量の水でよ
く撹拌し１９０〜２００°Ｃで３０分間焼・き上げてク
ツキーとした。

実施例８（ゼリー） 寒天１３ｇを水１１に加熱溶解し、さらにショ糖５００
ｇ、水あめ１５０ｇ及び塩少々を加え、撹拌しながら加
熱溶解させた後、２重量％の実施例１（１）の抽出物、
果汁、着色料、香料などを加えて冷却しゼリーとした。

実施例９　（あめ） ショ糖２０重量部、水あめ（７５％固型分）１０重量部
に水１０重量部を加え混合し、１５０℃に加熱撹拌後、
２％重量の実施例１（１）の抽出物、及び着色料、香料
等を加え冷却してあめとした。

実施例１０　（ハンドローション剤） カーボワックス１５００を１５重量部、アルコール８重
量部及びプロピレングリコール９０重量部を良く混合溶
解し、水５２．５重量部、実施例１（１）の抽出物２重
量部及び香料、防腐剤の適量を加えハンドローション剤
とした。

実施例１１　（外用剤） パラオキシ安息香酸エチル０．１ パラオキシ安息香酸ブチル　０．１ ラウロマクロゴール　　　　０．５ セタノール　　　　　　　　１８ 白色ワセリン　　　　　　　４０ 水　　　　　　　　　　　　　　　　３８．３実施例１
（１）の抽出物　　　　４ 上記の各重量部の各成分を用い実施例１（１）の抽出物
を水に溶解し、常法に従って軟膏とした。

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）ホップ粉砕物を１種又は２種以上の溶媒で抽出し
   、抽出液を濃縮乾固して得られる活性酸素消去作用を有
   するホップ抽出物。
2. （２）溶媒がヘキサンおよび／又は酢酸エチルである請
   求項１記載のホップ抽出物。
3. （３）溶媒が油脂類である請求項１記載のホップ抽出物
   。
4. （４）抽出物の主成分がルプロン類（β酸）である請求
   項１記載のホップ抽出物。
5. （５）抽出物の主成分がコルプロンである請求項１記載
   のホップ抽出物。
6. （６）抽出物の主成分がルプロンとアドルプロンである
   請求項１記載のホップ抽出物。
7. （７）請求項１記載の抽出物を含有する医薬品。
8. （８）請求項１記載の抽出物を含有する飲食品。
9. （９）請求項１記載の抽出物を含有する化粧品。