KR102086854B1

KR102086854B1 - 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102086854B1
Application number: KR1020180118671A
Authority: KR
Inventors: 박혜윤; 남기흠; 손연경; 이사라
Original assignee: 대한민국
Priority date: 2018-10-05
Filing date: 2018-10-05
Publication date: 2020-03-11

Abstract

본 발명은 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 길뚝사초(Carex bostrychostigma Maxim.), 대사초(Carex siderosticta Hance), 산괭이사초(Carex leiorhyncha C.A.Mey.), 융단사초(Carex miyabei Franch) 또는 괭이사초(Carex neurocarpa Maxim.)의 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물을 제공한다. 상기 사초과 식물 추출물이 함유된 항산화 또는 항염증 화장료 조성물은 비만, 피로, 암, 감기, 성인병, 심뇌혈관질환, 각종 면역 관련 질환 등과 같은 질병의 치료용 조성물 또는 이들 질환의 예방과 개선을 위한 건강기능식품으로서 용이하게 이용될 수 있다.

Description

사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염용 화장료 조성물 {Anti-oxidant or anti-inflammatory cosmetic compositions containing the plants extract of Cyperaceae}

본 발명은 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 길뚝사초(Carex bostrychostigma Maxim.), 대사초(Carex siderosticta Hance), 산괭이사초(Carex leiorhyncha C.A.Mey.), 융단사초(Carex miyabei Franch) 및 괭이사초(Carex neurocarpa Maxim.)로 이루어진 군 중에서 1종 이상 선택되는 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물에 관한 것이다.

항산화 기능은 체내에서 일어나는 산화반응을 억제시키거나 그 속도를 느리게 하는 것인데, 체내에서 일어나는 산화 반응은 노화의 유발과 세포의 변이를 유발하여 암세포를 생성한다. 따라서, 항산화 작용은 이런 체내의 부정적인 반응을 억제하기 위한 예방 방편으로 대중들도 관심이 많다.

체내에서는 세포 호흡과 더불어 에너지에 해당하는 ATP 생성이 주기능인 세포 내의 미토콘드리아가 호흡의 부산물인 자유 라디칼(free radical)을 생성하고, 이는 불안정하여, 지질, 핵산, 단백질 등의 다른 물질과 급격하고 무차별적으로 반응한다. 따라서 이런 자유 라디칼의 생성을 막을 수 있다면 체내의 산화를 예방한다고 볼 수 있으며, 간접적으로는 노화와 암을 예방할 수 있어서 관심이 크다. 이런 항산화 효과는 인체 내에서 발생하는 자유 라디칼을 대상으로 실험하는 것에 무리가 있어 DPPH(1,1-diphenyl-2-picylhydrazyl) 라디칼을 바이오마커로서 사용하고 있다. DPPH 라디칼 소거활성 분석은 시료의 항산화능을 측정하는 방법 중의 하나로, 페놀성 화합물, 방향족 아민류 및 아스코르브산 등에 의해 수소나 전자를 받아 환원되어 DPPH의 보라색이 탈색되는 원리를 이용하여 항산화 활성을 측정하는 방법으로 비교적 간단하고 짧은 시간 내에 항산화 활성을 측정할 수 있으며, 식물체의 항산화 활성과도 높은 연관성을 가지기 때문에 널리 사용되는 방법이다.

염증반응은 물리적 자극, 화학적 자극, 세균감염 등의 원인에 대한 생체의 방어기전 중 하나로, 외부 물질을 제거하고 손상부위를 수복 재생하려는 기전 중 하나이다. 염증 반응과 관련된 자극이 일단 가해지면, 국소적으로 히스타민(histamine), 세로토닌(serotonine), 브래디키닌(bradykinin), 프로스타그란딘(prostaglandin), HETE(hydroxyeicosatetraenoic acid), 류코트리엔(leukotriene)과 같은 혈관 활성 물질이 유리되어 혈관 투과성이 증대되면서 염증이 유발된다.

단구세포는 세균감염 등으로 인해 활성화되어 식세포작용을 하는 대식세포로 변화되며, 대식세포는 NO, 프로스타글란딘 E2, 전구염증성 사이토카인 등을 분비함으로써 염증을 유발하고, 염증, 면역반응 모두에서 중요한 조절세포로 작용하는데, 대식세포가 이렇게 작용하기 위해서는 반드시 활성화 과정을 거쳐야 한다. 그람 음성균의 세포벽 구성성분 중의 하나이며 내독소로 잘 알려진 LPS(lipopolysaccharide)는 대식 세포의 활성화에 관여하는 가장 잘 알려진 외부인자이다. 특히, RAW 264.7 세포와 같은 단구세포나 대식세포에서는 TNF-α(tumor necrosis factor-alpha), IL-6(interleukin-6), IL-1β(interleukin-1 beta)와 같은 전구염증성 사이토카인(pro-inflammatory cytokine)을 분비하여 염증부위에서 LPS(lipopolysaccharide)가 증가된다. LPS가 대식세포를 자극하게 되면 iNOS(inducible nitric oxide synthase)라는 효소에 의해 L-아르지닌(L-arginine)이 L-시트룰린(L-citrulline)으로 변하는 과정에서 NO(nitrogen monoxide)가 생성됨으로써 대식세포가 NO를 생성한다.

포유동물에서 NO는 세 가지 종류의 NO 합성효소(NOS, nitric oxide synthease), 즉 nNOS(neuronal NOS), eNOS(endothelial NOS) 및 iNOS(inducible NOS)에 의해 합성된다. 이 중에서 nNOS와 eNOS에 의해 생성되는 NO는, 정상적인 생체기능을 위해 생성되며, 조직 내에서의 농도는 일정수준으로 낮게 유지된다. 그러나, iNOS에 의해 생성된 NO는 그 양이 과도하여 병리적인 혈관확장, 세포독성, 조직 손상 등과 같은 생체에 유해한 작용을 나타낸다. 또한, 염증인자인 프로스타글란딘 E2(PGE2)는 세포막의 구성성분인 인지질이 LPS에 의해 자극을 받아 포스포리파제 A2(phospholipase A2)라는 효소에 의해 유리된 아라키돈산이 COXs(cyclooxygenase)라고 불리는 효소의 촉매작용을 받아 형성되어 염증반응을 유도하게 된다. COX는 COX-1과 COX-2로 분류되는데, COX-1은 체내에서 혈소판의 형성, 위벽보호, 신장 기능의 유지 등 정상적인 생체기능에 작용하며 COX-2는 염증성 매개물질인 PHE2를 합성한다. PHE2는 염증반응(통증, 발열 등), 면역반응, 그리고 혈관신생(angiogenesis)을 촉진하는 등 암 발생에도 깊이 관여하고 있는 것으로 알려져 있다. iNOS의 억제 약물은 그 작용기전이 COXs의 억제 물질과 연계되어 있어 경우가 대부분이다. 따라서 비교적 검색이 용이한 iNOS의 억제소재를 발굴하여 항염증 소재로 개발하는 경우가 많다.

또한, 선택성 COX-2 억제제(selective COX-2 inhibitors)를 포함하는 비스테로이드성 항염증제(non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs)는 항염증, 해열 및 진통 효과를 나타낸다. 하지만, 이러한 약들의 장기간 복용은 때로 심각한 부작용을 초래할 수 있다. 예를 들어, 위장관계의 소화성 궤양출혈로 인한 이차적 빈혈 초래, 혈소판 기능 억제, 분만 유도 억제, 신장에 대한 부작용, 간장 손상, 과민 반응 등이 있다.

이러한 약물의 부작용을 극복하기 위해서 보다 안전한 소재로 식물과 같은 천연에서 유래한 제품은 선호도가 높으며, 이와 관련하여 천연물에서 그 항염증 소재를 찾아 활용하려는 연구들이 활발히 진행되고 있다.

한편, 사초과 식물로는 예를 들어 길뚝사초, 대사초, 산괭이사초, 융단사초와 괭이사초가 있다. 길뚝사초(Carex bostrychostigma Maxim.)는 산이나 들의 습지 등에서 서식하는 외떡잎식물강 사초과 식물이다. 대사초(Carex siderosticta Hance)는 한국 전역 산에서 서식하는 외떡잎식물강 사초과 식물로써, 흔히 발견되는 식물이나, 본 식물에 대한 염증 개선 효과에 대한 연구는 보고된 바 없다. 산괭이사초(Carex leiorhyncha C. A. Mey.)는 한국, 중국 북동부, 시베리아 등지에서 서식하는 외떡잎식물강 사초과의 여러해식물로, 햇볕이 잘 쬐는 습지에서 흔히 발견되는 식물이다. 융단사초(Carex miyabei Franch.)는 산지의 물가나 강가의 모래땅에서 흔히 발견되는 식물이다. 괭이사초(Carex neurocarpa Maxim.)는 한국, 일본, 중국 등에서 서식하는 외떡잎식물강 사초과의 여러해살이풀로, 산기슭 습한 풀밭, 논둑이나 길가에서 흔히 발견되는 식물이다.

현재까지 상기 식물의 추출물의 항산화 또는 항염증 효과에 대해서는 전혀 개시되어 있지 않은 실정이다. 또한, 본 발명자들은 상기 사초과 식물이 갖는 다양한 생리활성을 연구하던 중, 항산화 또는 항염증 효과가 우수함을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

대한민국 등록특허 제10-1754463호 (발명의 명칭 : 사초과 식물 추출물을 함유하는 화장품 조성물 및 그 제조방법, 출원인 : 순천향대학교 산학협력단, 등록일 : 2017.06.29.) 대한민국 등록특허 제10-0523753호 (발명의 명칭 : 산거울 추출물 함유 항염 조성물, 출원인 : 주식회사 엘지생활건강, 등록일 : 2005.10.18.)

본 발명의 목적은 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물을 제공하는 데에 있다. 보다 상세하게는, 길뚝사초(Carex bostrychostigma Maxim.), 대사초(Carex siderosticta Hance), 산괭이사초(Carex leiorhyncha C.A.Mey.), 융단사초(Carex miyabei Franch) 및 괭이사초(Carex neurocarpa Maxim.)로 이루어진 군 중에서 1종 이상 선택되는 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물을 제공하는 데에 있다.

상기 화장료 조성물은 상기 사초과 식물 추출물을 0.01 내지 20 중량 %로 함유하는 것일 수 있다.

상기 사초과 식물 추출물 내의 총 폴리페놀 함량은 100 내지 700 μg/g인 것이 특징이다.

상기 화장료 조성물은, 스킨로션, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.

또한, 본 발명은 사초과 식물 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화 또는 항염증 건강기능식품에 관한 것일 수 있다.

또 다른 양태에서 본 발명은 사초과 식물 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 항염증 약학 조성물에 관한 것일 수 있다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.

상기 사초과 식물 추출물은 채취한 사초과 식물의 잎, 줄기, 뿌리, 꽃, 열매, 식물 전초, 또는 이들의 혼합물을 추출용매를 이용하여 추출한 것일 수 있다. 상기 사초과 식물은 예를 들어 길뚝사초, 대사초, 산괭이사초, 융단사초, 괭이사초 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 별도로 상기 사초과 식물은 건조 및 파쇄하여 분말화할 수 있다.

사초과 식물의 건조는 채취한 사초과 식물의 유용한 성분들이 파괴되지 않는 범위에서 공지의 방법으로 진행될 수 있고, 예를 들어 4 내지 40℃에서 1 내지 3일 동안 건조할 수 있다. 또한, 상기 파쇄는 이후 추출과정에서 사초과 식물의 유용한 성분들이 충분하게 추출될 수 있을 정도로 파쇄하면 족하며 분말화하는 것이 바람직하다. 상기 건조와 파쇄 공정은 필요에 따라서 순서를 뒤바꿔서 진행하거나 반복하여 실시할 수 있다.

상기 사초과 식물 추출물은 물, C1~C4 알코올 또는 이들의 혼합용액을 용매로 하여 추출할 수 있다. 상기 물은 증류수, 이온화수(DI water) 등 불순물이 없는 물이면 어떤 것이든지 사용할 수 있다. 상기 C1~C4 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 및 이소부탄올로 이루어진 군에서 선택될 수 있다. 이때 사초과 식물 추출물은 물 추출물보다는 C1~C4 알코올 추출물 또는 C1~C4 알코올의 수용액 추출물이 항산화 및 항염 활성이 좋으며, C1~C4 알코올의 수용액 추출물의 항산화 및 항염 활성이 가장 좋다. C1~C4 알코올의 수용액으로서 항산화 및 항염 활성이 좋은 추출물을 제조하기에 적절한 것은 50 내지 90%(v/v) 에탄올 수용액이며, 가장 적절한 것은 60 내지 70%(v/v) 에탄올 수용액이다.

상기 사초과 식물 추출물의 제조 시 상기 사초과 식물 건조 중량의 5 내지 40배, 바람직하게는 10 내지 20배에 달하는 중량의 용매를 이용하여 추출할 수 있다. 상기 범위보다 용매가 너무 적으면 열수반응 등의 열을 가하여 추출물을 제조할 시, 용매의 증발로 인하여 추출이 잘 안 될 수 있으며, 용매가 너무 많으면 추출시간이 너무 길어지는 문제가 있다.

그리고, 상기 추출과정은 10 내지 40℃에서 24 내지 48시간 동안 교반하면서 진행할 수 있으며 1~4번까지 반복하여 추출하여 액상의 추출물을 수득할 수 있다.

상기 액상의 사초과 식물 추출물은 멸균 거즈 또는 여과지를 이용하여 건더기 등을 걸러낼 수 있다. 이러한 여과 과정을 통한 여과액은 회전 진공 농축기를 이용하여 10~40℃에서 감압 농축할 수 있고, 동결건조로 남은 용매를 제거한 후 추출물을 수득할 수 있다. 또한 추출물은 물 또는 에탄올에 녹여서 시료 용액을 제조하여 이용할 수 있다.

본 발명의 사초과 식물 추출물의 총 폴리페놀 함량은 100~700 μg/g, 바람직하게는 200~600 μg/g인 것이 좋다. 상기 사초과 식물 추출물의 총 폴리페놀의 함량이 상기 범위에 속할 때 항산화 효과가 가장 좋을 수 있다.

상기 사초과 식물 추출물은 상기 화장품 조성물에 0.01 내지 20 중량%로 포함할 수 있다. 상기 사초과 식물 추출물은 함량이 0.01 중량% 미만이면 항산화 또는 항염증 효과가 미미할 수 있고, 20 중량%를 넘으면 제제화가 어려워질 수 있다. 또한, 10 중량%를 넘으면 항염증과 항산화 기능성이 향상되는 정도가 미미해질 수 있어서, 상기 사초과 식물 추출물은 상기 화장품 조성물에 0.01 내지 10 중량%가 포함되는 것이 바람직할 수 있다. 이때 사초과 식물 추출물의 중량은 상기 사초과 식물 추출물을 건조하여 분말 형태로 만든 건조된 사초과 식물 추출물을 기준으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 원료 또는 유효성분으로 함유하는 화장료를 제공할 수 있다. 이 때 상기 화장료에는 사초과 식물 추출물이 0.0001~1㎎/㎖로 포함될 수 있다. 상기 화장료로는 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 화장료 제형으로도 제조될 수 있으며, 피부외용연고, 에센스, 미백크림, 로션, 에멀젼, 팩, 일반화장수, 스킨밀크, 스킨, 크림, 세럼, 미용비누, 유연화장수, 약용화장수, 전신세정제, 클렌징 오일, 클렌징 크림, 클렌징 티슈 및 클렌징 워터에서 선택되는 것을 제공할 수 있다.

본 발명의 화장료 제형에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연, 락토스, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더, 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트, 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 사초과 식물 추출물을 함유하는 항염증 약학 조성물을 제공한다. 상기 사초과 식물 추출물은 본 발명의 약학 조성물에 0.01~100 중량%로 하여 첨가될 수 있다.

상기 항염증 조성물은 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물로 이용될 수 있으며, 상기 염증 질환은 염증성 장질환, 염증성 콜라겐 혈관질환, 사구체신염, 유육종증, 아토피 피부염, 망막염, 위염, 간염, 장염, 관절염, 편도선염, 인후염, 기관지염, 폐렴, 췌장염, 방광염, 신경염, 패혈증 및 신장염으로 이루어진 군 중에서 선택될 수 있다.

상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 500㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수 회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 약학 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명의 추출물은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있는 약제이다.

또한, 본 발명은 사초과 식물 추출물을 함유하는 항산화 또는 항염증 건강기능식품을 제공한다. 상기 건강기능식품은 항산화용 조성물이 작용하는 각종 암, 성인병, 성인병, 혈관질환, 대사질환, 피로, 비만, 각종 면역 관련 질환의 예방 또는 개선에 이용될 수 있다.

상기 사초과 식물 추출물은 본 발명의 건강기능식품에 0.01~100 중량%로 하여 첨가될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제 등이 있다.

본 발명에 따른 사초과 식물 추출물은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 라디칼 소거능이 우수하고 총 폴리페놀이 고함량으로 포함되어 있으며, 아질산염 소거능이 우수하여 각종 피부염, 아토피, 알레르기 등으로 인해 발생하는 피부손상억제, 피부세포의 재생 및 보호 기능이 있는 피부 개선용 화장료 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 사초과 식물의 사진을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 사초과 식물 추출물의 DPPH 라디컬 소거능 시험 결과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 따른 사초과 식물 추출물 내의 총 폴리페놀 함량을 그래프로 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명에 따른 사초과 식물 추출물의 아질산염 소거능 시험 결과를 그래프로 나타낸 것이다.

이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화 될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지도록, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.

실시예 1. 사초과 식물 추출물의 제조

사초과 식물의 추출물을 제조하기 위해서 사초과 식물 시료(길뚝사초, 대사초, 산괭이사초, 융단사초, 괭이사초)를 각각 3차 증류수를 이용하여 세척하였고, 작두 등을 이용하여 잘게 분쇄하였다. 분쇄한 사초과 식물 시료를 각각 70%(v/v) 에탄올 수용액을 사용하여 추출하였다. 상기 분쇄한 시료 100g을 중량의 10배에 해당하는 상기 에탄올 수용액 1kg에 충분히 잠기도록 한 후, 25℃에서 24시간 동안 교반하면서 추출을 진행하였다. 상기 추출 과정은 3회 반복하여 실시하였다.

추출한 용액을 1차로 멸균 거즈를 이용하여 여과한 후 여과액을 다시 여과지(Whatman, No. 2: Whatman Ltd., Maidstone, Kent, UK)를 이용하여 분쇄 시료 등을 걸러내었다. 이후, 회전진공농축기를 이용하여 감압 농축하였고, 동결건조기로 남은 용매를 제거한 후 사초과 식물 추출물을 수득하였다. 수득한 추출물은 -20℃에서 보관하였다.

구분	내용
실시예 1-1	길뚝사초 추출물
실시예 1-2	대사초 추출물
실시예 1-3	산괭이사초 추출물
실시예 1-4	융단사초 추출물
실시예 1-5	괭이사초 추출물

비교예 1. 비교대상 사초과 식물 추출물의 제조

상기 실시예 1과 같은 방법으로 제조하되 기존의 공지된 다른 사초과 식물인 좀보리사초(Carex pumila Thunb), 천일사초(Carex scabrifolia Steud) 및 산거울(Carex humilis Leyss)의 각각의 추출물을 비교대상으로써 제조하였다.

구분	내용
비교예 1-1	좀보리사초 추출물
비교예 1-2	천일사초 추출물
비교예 1-3	산거울 추출물

실험예 1. DPPH 라디칼 소거능 시험

먼저, 상기 실시예 1 및 비교예 1에서 제조한 사초과 식물 추출물을 정제수에 100, 500, 1000 ppm의 농도가 되도록 각각 녹여서 시료 용액을 만들었다.

96 well plate의 각 well에 양성대조군으로 사용된 1mM 농도의 퀘르세틴(quercetin) 및 상기 제조한 시료 용액을 10μl씩 각각 분주하고 150μM DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 에탄올 용액 190μl를 첨가하고 반응시켰다. 이후 뚜껑을 덮은 후 25℃에서 30분 동안 반응시켰다. 반응이 종료된 후 분광기(Microplate reader)를 사용하여 DPPH의 색 변화를 517nm에서 흡광도 값을 측정하였다. 상기 과정을 3회 반복하여 평균을 구한 수치를 사용하였으며, 그 결과를 하기 표 3과 도 2에 나타내었다.

구분	DPPH 라디칼 소거능 시험 (%)
구분	100 ppm	500 ppm	1000 ppm
실시예 1-1	6.02±0.90	23.79±1.18	41.44±0.21
실시예 1-2	3.92±0.38	36.17±0.53	66.93±0.38
실시예 1-3	12.44±0.89	66.66±0.17	85.91±0.21
실시예 1-4	-0.85±1.71	11.74±0.49	28.84±1.12
실시예 1-5	6.27±0.47	30.54±1.11	65.35±0.27
비교예 1-1	0.82±0.90	6.79±1.27	16.77±0.85
비교예 1-2	0.02±1.11	8.18±2.77	15.95±3.91
비교예 1-3	1.07±0.76	7.58±1.03	13.91±0.25

상기 표 3과 도 2를 참조하면, 실시예 1-1 내지 1-5의 사초과 식물 추출물은 농도 의존적으로 DPPH 라디칼이 소거됨을 확인할 수 있었으며, 이는 사초과 식물 추출물이 기존의 항산화 기능을 하는 퀘르세틴과 같이 항산화 작용을 갖는 것을 알 수 있었다. 또한, 비교예 1-1 내지 1-3의 사초과 식물 추출물보다 높은 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 2. 총 폴리페놀 함량 측정 시험

상기 실시예 1 및 비교예 1에서 제조한 사초과 식물 추출물에 대한 총 폴리페놀의 함량을 측정하였다.

측정방법은 각각의 사초과 식물 추출물 0.1 ml에 7% Na₂CO₃(Sodium carbonate, Sigma-Aldrich) 2 ml를 넣고 충분히 혼합한 후 3분간 방치한 뒤 1N 농도의 폴린-키오칼토스 시약(Folin-Ciocalteu's phenol reagent) 0.1ml를 넣고 실온에서 30분간 방치한 다음, 분광기로 750nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 표준곡선 작성에는 갈릭산(gallic acid)을 사용하였고 작성한 표준곡선에 대입하여 건조 시료 1g에서 용출되는 총 폴리페놀의 함량을 갈릭산 기준으로 구하였으며 그 결과를 하기 표 4와 도 3에 나타내었다.

구분	총 폴리페놀 함량 (μg/g)
실시예 1-1	456.89
실시예 1-2	436.60
실시예 1-3	600.18
실시예 1-4	285.45
실시예 1-5	272.85
비교예 1-1	105.82
비교예 1-2	118.36
비교예 1-3	105.69

상기 표 4와 도 3을 참조하면, 실시예 1-1 내지 1-5의 총 폴리페놀 함량이 비교예 1-1 내지 1-3 보다 더 높다는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 3. 아질산염 소거능 측정 시험

상기 실시예 1 및 비교예 1에서 제조한 사초과 식물 추출물에 대한 아질산염 소거능을 측정하였다.

측정방법은 NaNO₂를 1차 증류수에 녹인 1mM의 NaNO₂용액에 1N HCl 용액을 첨가하여 pH 1.2로 조절한 후 전체 부피를 1차 증류수로 1mM 용액의 9배로 정용하여 반응액을 제조하였다. 반응액 630μl, 추출물 시료와 대조군으로 사용할 시료 용매 그리고 양성대조군으로 1mM 퀘르세틴(quercetin) 70μl를 첨가한 후 3초간 볼텍싱(vortexing)하여 혼합용액을 제조하였다.

혼합용액을 37℃에서 1시간 동안 반응시킨 후 그리스 시약(A:B=1:1, A: 1% sulfanilic acid in 30% acetic acid, B: 1% naphthylamine in 30% acetic acid) 을 첨가하였다.

반응액 100μl, 2% acetic acid 500μl, 그리스 시약 40μl를 넣고 3초간 볼텍싱한 후 25℃에서 15분간 반응시켰다. 반응이 끝난 후 아조 화합물의 흡광도를 520nm에서 분광기로 측정하여 잔존하는 아질산염의 양을 비교하였다. 대조군으로는 증류수 40μl를 첨가하여 상기와 동일한 방법으로 실험을 진행하였으며 하기 산출식에 근거하여 흡광도 차이에 의한 백분율로 산출하였다. 각 실험값은 3차례 반복하여 평균값을 대입하였고 그 결과를 표 5와 도 4에 나타내었다.

아질산염 소거능(%) = {1-(A-C)/B} × 100

A : NaNO₂ 용액에 추출물 시료와 그리스 시약을 첨가했을 때 흡광도

B : NaNO₂ 용액에 그리스 시약을 첨가했을 때 흡광도

C : NaNO₂ 용액에 추출물 시료와 증류수를 첨가한 흡광도

구분	아질산염 소거능 측정 시험 (%)
구분	100 ppm	500 ppm	1000 ppm
실시예 1-1	11.90±0.82	25.24±1.09	40.48±1.80
실시예 1-2	11.90±1.49	26.90±1.49	41.67±1.09
실시예 1-3	15.48±1.09	45.00±0.71	67.86±4.95
실시예 1-4	8.10±0.41	20.71±0.00	23.10±2.06
실시예 1-5	6.19±1.09	25.24±0.41	38.57±0.71
비교예 1-1	4.15±0.33	12.54±3.21	18.00±1.67
비교예 1-2	4.03±2.11	12.66±1.01	20.88±0.22
비교예 1-3	5.33±2.08	13.57±2.95	15.88±1.99

상기 표 5와 도 4를 참조하면, 사초과 식물 추출물은 농도 의존적으로 아질산염 농도를 낮추는 것을 확인할 수 있었으며, 실시예 1-3의 1000ppm 농도의 경우에는 양성대조군으로 사용한 퀘르세틴과 거의 유사한 정도로 강한 항염증 활성을 나타낸다는 점을 확인할 수 있었다.

<제제예 1. 화장료 제조>

제제예 1-1. 스킨의 제조

실시예 1-3의 사초과 식물 추출물 5.0 중량%, 프로필렌글리콜 5.2 중량%, 올레일알코올 1.5 중량%, 에탄올 3.2 중량%, 폴리솔베이트20 3.2 중량%, 벤조페논-9 2.0 중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0 중량%, 글리세린 3.5 중량% 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 스킨을 제조하였다.

제제예 1-2. 로션의 제조

실시예 1-3의 사초과 식물 추출물 5.0 중량%, 세토스테아릴 알코올 1.0 중량%, 글리세릴모노스테아레이트 0.8 중량%, 소르비탄모노스테아레이트 0.3 중량%, 폴리솔베이트 60 1.0 중량%, 미네랄오일 5.0 중량%, 사이크로메치콘 3.0 중량%, 디메치콘 0.5 중량%, 알란토인 0.1 중량%, 글리세린 5.0 중량%, 알코올 2 중량%, 프로필렌글리콜 3.0 중량%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 로션을 제조하였다.

제제예 1-3. 에센스의 제조

실시예 1-3의 사초과 식물 추출물 5.0 중량%, 프로필렌글리콜 4.0 중량%, 글리세린 3.0 중량%, 알란토인 0.5 중량%, EDTA-2Na 0.01 중량%, 에탄올 5.0 중량%, 트리에탄올아민 1.5 중량%, 스쿠알란 2.0 중량%, 밀랍 2.5 중량%, 폴리솔베이트60 중량%, 카르복실비닐폴리머 1.0 중량%, 솔비탄세스퀴올레이트 2.5 중량%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 에센스를 제조하였다.

제제예 1-4. 크림의 제조

실시예 1-3의 사초과 식물 추출물 10.0%, 폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트 0.7%, 솔비탄세스퀴올레이트 0.5%, 세틸알코올 0.6%, 스테아린산 0.75%, 글리세릴모노스테아레이트 0.6%, 유동파라핀 15.0%, 카르복시비닐폴리머 10.0%, 트리에탄올아민 0.2%, 향 미량, 방부제 미량, 정제수 잔량의 함량으로 통상적인 방법을 사용하여 크림을 제조하였다.

<제제예 2. 약학적 제제>

본 발명의 실시예 1-3의 사초과 식물 추출물 200g을 락토오스 175.9g, 감자전분 180g 및 콜로이드성 규산 32g과 혼합하였다. 이 혼합물에 10% 젤라틴 용액을 첨가시킨 후, 분쇄해서 14 메쉬체를 통과시켰다. 이것을 건조시키고 여기에 감자전분 160g, 활석 50g 및 스테아린산 마그네슘 5g을 첨가해서 얻은 혼합물을 정제로 만들었다.

<제제예 3. 식품 제조>

제제예 3-1. 조리용 양념의 제조

본 발명의 실시예 1-3의 사초과 식물 추출물을 조리용 양념에 1 중량%로 첨가하여 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.

제제예 3-2. 밀가루 식품의 제조

본 발명의 실시예 1-3의 사초과 식물 추출물을 밀가루에 0.1 중량%로 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.

제제예 3-3. 스프 및 육즙(gravies)의 제조

본 발명의 실시예 1-3의 사초과 식물 추출물을 스프 및 육즙에 0.1 중량%로 첨가하여 건강 증진용 수프 및 육즙을 제조하였다.

제제예 3-4. 유제품(dairy products)의 제조

본 발명의 실시예 1-3의 사초과 식물 추출물을 우유에 0.1 중량%로 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.

제제예 3-5. 야채주스의 제조

본 발명의 실시예 1-3의 사초과 식물 추출물 0.5g을 토마토주스 또는 당근주스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 야채주스를 제조하였다.

제제예 3-6. 과일주스의 제조

본 발명의 실시예 1-3의 사초과 식물 추출물 0.1g을 사과주스 또는 포도주스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 과일주스를 제조하였다.

Claims

산괭이사초(Carex leiorhyncha C.A.Mey.) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물.
삭제
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 산괭이사초 추출물을 0.01 내지 20 중량% 함유하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 산괭이사초 추출물의 총 폴리페놀 함량이 200 내지 700 μg/g인 것 특징으로 하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 화장료 조성물은, 스킨로션, 스킨 소프트너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 항산화 또는 항염증 화장료 조성물.
산괭이사초(Carex leiorhyncha C.A.Mey.) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화 또는 항염증 건강기능식품.
삭제
산괭이사초(Carex leiorhyncha C.A.Mey.) 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물로서,
상기 염증질환이 염증성 장질환, 염증성 콜라겐 혈관질환, 사구체신염, 유육종증, 아토피 피부염, 망막염, 위염, 간염, 장염, 관절염, 편도선염, 인후염, 기관지염, 폐렴, 췌장염, 방광염, 신경염, 패혈증 및 신장염으로 이루어진 군 중에서 선택되는 질환인 염증질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
삭제