JPH04208222A - 抗炎症および抗アレルギー剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明はポリアセチレン系化合物を有効成分とする抗炎
症および抗アレルギー剤に関するものである。

［従来の技術および課題］ 近年、我が国の公害問題や環境変化に伴い、気管支喘息
や花粉症等のアレルギー性疾患の患者が増加し、大きな
社会問題になっており、抗アレルギー作用を有する薬物
の開発が望まれていた。

また抗炎症作用を有する化合物の開発も同時に望まれて
いた。

［課題を解決するための手段］ 本発明者等は、アレルギー性疾患の治療に有効な抗アレ
ルギー作用を有する化合物および抗炎症作用を有する化
合物を求めて、鋭意研究を重ねた結果、臨床的にも広く
用いられている生薬蓋７′１ｔＸ（Ａｔｒａｃｔｙｌｏ
ｄｅｓ　１ａｎｃｅａ　ＤＥ　ＣＡＮＤＯＬＬＥ）また
はその他同属植物に含まれるポリアセチレン系化合物の
中に抗炎症および抗アレルギー作用を有する化合物を見
いだし、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は
、以下に示すごとくである。

下記式 （式中、Ｒは水素原子、水酸基またはアセトキシル基で
ある。）で示されるポリアセチレン系化合物（以下、式
の化合物という）を有効成分とする抗炎症および抗アレ
ルギー剤である。

式の化合物は、例えば次のような方法により得ることが
できる。

すなわち生薬蓋部を、ヘキサン、ジエチルエーテル、石
油エーテル、酢酸エチル、クロロホルム、アセトン、メ
タノール、エタノールより選ばれる少なくとも一つの溶
媒で抽出し、得られた抽出液から溶媒を除去して得た残
渣をヘキサン、ベンゼン、ジエチルエーテル、石油エー
テル、酢酸エチル、クロロホルム、アセトン、テトラヒ
ドロフラン、アセトニトリル、メタノール、エタノール
、水、より選ばれる少なくとも−２の溶媒を溶出溶媒と
して、ダイヤイオンＨＰ−２０、ＭＣＩゲルＣＨＰ２０
Ｐなどのポーラスポリマー、セファデックスＬＨ−２０
などのスターチゲル、逆相系シリカゲル、シリカゲル、
ポリアミドまたはセルロース等を担体に用いたカラムク
ロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーまたは高速
液体クロマトグラフィーに１回または数回付すことによ
り、式の化合物を得ることができる。

−次に、式の化合物が優れた抗アレルギー作用、抗炎症
作用を有することについて実験例を挙げて説明する。

実験例Ｉ ＲＢＬＩ培養細胞を５Ｘ１０６細胞／ｍｌとなるように
１ｍＭエチレンジアミン四酢酸酢酸ＤＴＡ）および１０
％エチレングリコールを含む５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７，４）に浮遊し、超音波処理後、１０，０ＯＯＸＧ
で１０分間、さらに１０５，０００　Ｘ　Ｇで６０分間
遠心分離した上清を５−リポキシゲナーゼ酵素標品とし
た。

基質として、１０／ｉＭアラキドン酸、上記のように調
製して得た酵素標品および具体例で得た化合物のアセト
ン溶液を種々の濃度となるように試験管にとり、３７℃
で１０分間反応させた。内部標準として０．２５Ｍのブ
チル３，５ジニトロベンゾエート１０□１を添加し、ヘ
キサン１．８ｍｌで抽出した。この中の５−ＨＥＴＥの
量を高速液体クロマトグラフィー［カラム、ＴＳＫｇｅ
ｌ　ＯＤＳ−８０ＴＭ（ＴＯＹＯ５ＯＤＡ）移動相、テ
トラヒドロフラン：アセトニトリル：１％酢酸＝５：５
：９流速、１ｍｌ／分；検出、紫外線（２３５ｎｍ）］
により測定した。

この結果から、５−リポキシゲナーゼ阻害率を次式によ
り算出した。

Ｃ：具体例で得た化合物を含まない場合の５−ＨＥＴＥ
のピーク面積 （内部標準により補正） Ｓ：具体例で得た化合物を添加した場合の５−ＨＥＴＥ
のピーク面積 （内部標準により補正） 具体例で得た化合物の１０／、１Ｍでの５−リポキシゲ
ナーゼ阻害率および５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を第１
表に示す。

第１表 以上の結果より式の化合物が５−リポキシゲナーゼ阻害
作用を有することが確認された。

実験例２ 具体例１で得た化合物をオリーブ油に溶解して濃度２ｍ
ｇ　／　ｍｌの薬物を調製し、この薬物０．２ｍｌをバ
ルブＩＣ系マウス（雌性、７週齢）に経口投与し、投与
１時間後に、調製後１時間〜２４時間経過したカラゲニ
ン（ｃａｒｒａｇｅｎｉｎ）　１％を含有する生理的食
塩水溶液０．０５ｍ１をマウスの足蹴に注射し、反応を
惹起した。反応惹起１時間後、３時間後および５時間後
の足浮腫（マウスの足の容積）を測定し、前値（カラゲ
ニン投与前のマウスの足の容積）を引いて強度を求めた
。またコントロール群にはオリーブ油のみを０．２ｍｌ
経口投与し、同様に測定した。その結果を第２表に示す
。

第２表 実験例３ 羊の赤血球（ＳＲＢＣ；５ｅｅｐ　Ｒｅｄ　Ｂｌｏｏｄ
　Ｃｅ１ｌ）　５Ｘ　１０５個を含有する生理的食塩水
０．２ｍｌをバルブＩＣ系マウス（雌性、７週齢）尾静
脈内投与し免疫した。尾静脈内投与より３日後に足の前
値（容積）を測定した。免疫日から４日後に５ＲＢＣＩ
Ｘ１０８個を含有する生理的食塩水２５μｌをマウス足
跡に皮下投与して反応誘発した。反応惹起時と反応惹起
から１６時間後の２回、具体例１で得た化合物をオリー
ブ油に溶解した薬物（濃度１０ｍｇ　／　ｍｌ　）　０
．２ｍｌ　／回を経口投与し、反応惹起から２４時間後
に足の浮腫を測定し、反応２４時間後の値と前値の差か
ら強度を求めた。その結果を第３表に示す。

またコントロール群にはオリーブ？由のみを０．２ｍｌ
経口投与し、同様に測定した。その結果を第３表に示す
。

第３表 実験例４ 洗浄５ＲＢＣ５Ｘ１０８個／　ｍｌを含有する生理的食
塩水溶液０．２ｍｌをバルブＩＣ系マウス（雌性、７週
齢）尾静脈内に投与し免疫した。このマウスに具体例１
で得た化合物をオリーブ油に溶解した濃度１０ｍｇ／ｍ
ｌの薬物０．２ｍｌ　／回を免疫日から３日間（４回）
経口投与した。

５ＲＢＣ免疫４日後、マウスを脱血屠殺した後、肺臓を
摘出した。肺臓をつぶし、金属メツシュ（２００ｍｅｓ
ｈ）に通し、単細胞（ｓｉｎｇｌｅ　ｃｅｌｌ）にした
。溶血斑形成細胞検定（ＰＦＣａｓｓａｙ　）用５ＲＢ
Ｃは免疫に用いた５ＲＢＣと同じロット（ｌｏｔ）のも
のを確保し、生理食塩水に５ＲＢＣを４Ｘ１０９／ｍｌ
になるように調製し、希釈細胞浮遊液０．１ｍｌと［５
ＲＢＣ＋補体（モルモット血清）（１：　１　）］　０
．２５μｍを加えてよく混和し、その後、カーニンガム
チャンバーに０．１ｍＨＪｆｔ、し込みパラフィン：ワ
セリン（１：１）で封入した。

３７°Ｃで１時間インキュベーション後、肺臓細胞１０
６個中の溶血斑（ｐｌａｑｕｅ）形成細胞数を数えて判
定した。その結果を第４表に示す。

第４表 次に、式の化合物の急性毒性試験をＩＣＲ系雄性マウス
を用いて行ったところ、Ｉｇ／ｋｇの経口投与で死亡例
はなかった。

次に、式の化合物の投与量および製剤化について説明す
る。

式の化合物はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に
動物および人に投与することができる。

投与形態としては、特に限定がなく、必要に応じ適宜選
択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、
散剤等の経口剤、注射剤、平割等の非経口剤が挙げられ
る。

経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年
令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で弐の
化合物の重量として５０ｍｇ〜５ｇを、１日数回に分け
ての服用が適当と思われる。

経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、
カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩
類等を用いて常法に従って製造される。

この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩
壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着
色剤、香料等を使用することができる。それぞれの具体
例は以下に示すごとくである。

［結合斉１月 デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、
ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カル
ボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピ
ルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポ
リビニルピロリドン、マクロゴール。

［崩壊前月 デンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロー
スカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒ
ドロキシプロピルセルロース。

［界面活性剤］ ラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸
モスチル、ポリソルベート８ｏ。

［滑沢前１月 タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステ
ル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウ
ム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコー
ル。

［流動性促進剤ｊ 軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケ
イ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム。

また、式の化合物は、懸濁液、エマルジョン剤、シロッ
プ剤、エリキシル剤としても投与することができ、これ
らの各種網形には、矯味矯臭剤、着色剤を含有してもよ
い。

非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の
年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人で式
の化合物の重量として１日０．１ｍｇ〜１ｇまでの静注
、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当と思われる。

この非経口剤は常法に従って製造され、希釈剤として一
般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射
用植物油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロ
コシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコー
ル等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌
剤、防腐剤、安定剤、乳化剤を加えてもよい。

また、この非経口剤は安定性の点から、バイアル等に充
填液冷凍し、通常の凍結乾燥技術により水分を除去し、
使用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することもでき
る。さらに、必要に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防
腐剤、無痛化剤等を加えても良い。

その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤
、直腸内投与のための半割等が挙げられ、常法に従って
製造される。

次に、式の化合物を製造する具体例を以下に示す。

具体例１ 粉砕した生薬蒼ｔ　２ｋｇをヘキサン４２１で抽出し、
得られた抽出液より溶媒を除去してヘキサンエキス７５
ｇを得た。このヘキサンエキスをシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーに付し、ヘキサン：ジエチルエーテル＝
１０：Ｏｓ　７：３．０：１０で順に溶出し、それぞれ
の画分Ａ、画分Ｂ、画分Ｃを得た。

画分Ａをメタノールから再結晶を繰り返し、淡黄色針状
晶１．９ｇを得た。この淡黄色針状晶は、文献［Ｉｔｉ
ｒｏ　Ｙｏｓｉｏｋａ、　５ｈｉｎｔａｒｏ　Ｔａｋａ
ｈａｓｈｉ、　ＨｉｒｏｓｈｉＨｉｋｉｎｏ　ａｎｄ　
Ｙａｓｕｋｏ　５ａｓａｋｉ、　ＹＡＫＵＧＡＫＵＺＡ
ＳＳＨＩ、　８０．１５６４　（１９６０）　；　Ｉｔ
ｉｒｏ　Ｙｏｓｉｏｋａ、　ＨｉｒｏｓｈｉＨｉｋｉｎ
ｏ　ａｎｄ　Ｙａｓｕｋｏ　５ａｓａｋｉ、　Ｃｈｅｍ
、　Ｐｈａｒｍ、　Ｂｕｌｌ、。

８．９４９　（１９６０）　；１ｂｉｄ、、　８．９５
２　（１９６０）　；１ｂｉｄ、、　８．９５７（１９
６０）　；Ｙｏｉｃｈｉ　ＮｉＮ１５ｈｉｋａ、　Ｉｃ
ｈｉｒｏ　Ｙａｓｕｄａ、　ＹｏｈｙａＷａｔａｎａｂ
ｅ　ａｎｄ　Ｔａｋａｋｏ　５ｅｔｏ、　ＹＡＫＵＧＡ
ＫＵＺＡＳＳＨＩ、　９６．１３２２　（１９７６月に
記載０）７トラクチロジン（ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｎ
）と理化学的性質が一致することから、式１中のＲが水
素原子である２−［（ＩＥ、７Ｆ）−１，７−ノナジェ
ン−３，５，シイニイル］フランであると決定した。

具体例２ 具体例１で得た画分Ｂをシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーに付し、クロロホルムで７００ｍ１から１１００
ｍｌまで溶出する両分を再びシリカゲルカラムクロマト
グラフィーに付し、ヘキサン：クロロホルム＝１０：０
．６：４．０：１０で順に溶出し、ヘキサン：クロロホ
ルム＝６：４で溶出した両分をヘキサン−ジエチルエー
テルから再結晶し、淡黄色針状晶９４ｍｇを得た。この
淡黄色針状晶は、文献［ＹｏｉｃｈｉＴａｋａｋｏ　５
ｅｔｏ、　ＹＡＫＵＧＡＫＵ　ＺＡＳＳＨＩ、　９６．
１３２２（１９７６月に記載のアセチルアトラクチロジ
ノール（ａｃｅｔｙｌａｔｒａｃｔｙｌｏｄｉｎｏｌ）
と理化学的性質が一致することから、式中Ｒがアセトキ
シル基である２−［（ＩＥ、７Ｅ）−９−アセトキシル
−１，７−ノナジェン−３，５−シイニイル］フランで
あると決定した。

具体例３ 具体例１で得た画分Ｃをシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーに付し、ヘキサン：ジエチルエーテル＝５５：４
５で溶出した両分をヘキサン−ジエチルエーテルから再
結晶を繰り返し、淡黄色針状晶８９ｍｇを得た。この淡
黄色針状晶は、文献［ＹｏｉｃｈｉＮｉｓｈｉｋａｗａ
、　Ｉｃｈｉｒｏ　Ｙａｓｕｄａ、　Ｙｏｈｙａ　Ｗａ
ｔａｎａｂｅ　ａｎｄＴａｋａｋｏ　８ｅｔｏ、　ＹＡ
ＫＵＧＡＫＵ　ＺＡＳＳＨＩ、　９６．１３２２（１９
７６）　］に記載のアトラクチロジノール（ａｔｒａｃ
ｔｙｌｏｄｉｎｏｌ　）と理化学的性質が一致すること
から、式中Ｒが水酸基である（２Ｅ、８Ｅ）−９−（２
−フリル）一２．８−ノナジェン−４，６−ジイン−１
−オールであると決定した。

次に、製剤例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが
、本発明はこれにより何等制限されるものではない。

［製剤例１］ ■コーンスターチ　　　　　　　　４４ｇ■結晶セルロ
ース　　　　　　　４０ｇ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　　０．５ｇ■ステアリン
酸マグネシウム　　０．５ｇ■具体例１で得られた化合
物　　　１０計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、打錠機にて
圧縮成型して一錠２００ｍｇの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、具体例１で得られた化合物２０ｍｇ
が含有されており、成人１日３〜１０錠を数回にわけて
服用する。

［製剤例２１ ■結晶セルロース　　　　　　８４．５ｇ■ステアリン
酸マグネシウム　　０．５ｇ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　　　５ｇ ■具体例２で得られた化合物　　　１０ｇ計　　　　　
１００ｇ 上記の処方に従って■、■および■の一部を均一に混合
し、圧縮成型した後、粉砕し、■および■の残量を加え
て混合し、打錠機にて圧縮成型して一錠２００ｍｇの錠
剤を得た。

この錠剤−錠には、具体例２で得られた化合物２０ｍｇ
が含有されており、成人１日３〜１０錠を数回にわけて
服用する。

［製剤例３１ ■結晶セルロース　　　　　　３４．５ｇ■１０％ヒド
ロキシプロピル セルロースエタノール溶液　５０ｇ ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　　５ｇ ■ステアリン酸マグネシウム　　０．５ｇ■具体例３で
得られた化合物　　　１０計計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■、■および■を均一に混合し、常
法によりねつ和し、押し出し造粒機により造粒し、乾燥
・解砕した後、■および■を混合し、打錠機にて圧縮成
型して一錠２００ｍｇの錠剤を得た。

この錠剤−錠には、具体例３で得られた化合物２０ｍｇ
が含有されており、成人１日３〜１０錠を数回にわけて
服用する。

［製剤例４１ ■コーンスターチ　　　　　　　　８４ｇ■ステアリン
酸マグネシウム　　０．５ｇ■カルボキシメチル セルロースカルシウム　　　　５ｇ ■軽質無水ケイ酸　　　　　　　０．５ｇ■具体例２で
得られた化合物　　１０計計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、圧縮成型機
にて圧縮成型後、破砕機により粉砕し、篩別して顆粒剤
を得た。

この顆粒剤１ｇには、具体例２で得られた化合物１００
ｍｇが含有されており、成人１日０．６〜２ｇを数回に
わけて服用する。

［製剤例５］ ■結晶セルロース　　　　　　　５５ｇ■１０％ヒドロ
キシプロピル セルロースエタノール溶液　　３５ｇ ■具体例１で得られた化合物　　１０ 計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、ねつ和した
。押し出し造粒機により造粒後、乾燥し、篩別して顆粒
剤を得た。

この顆粒剤１ｇには、具体例１で得られた化合物１００
ｍｇが含有されており、成人１日０．６〜２ｇを数回に
わけて服用する。

［製剤例６］ ■コーンスターチ　　　　　　　８９．５ｇ■軽質無水
ケイ酸　　　　　　　０．５ｇ■具体例３で得られた化
合物　　１０ 計　　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■〜■を均一に混合し、２００ｍｇ
を２号カプセルに充填した。

このカプセル剤１カプセルには、具体例３で得られた化
合物２０ｍｇが含有されており、成人１日３〜１０カプ
セルを数回にわけて服用する。

［製剤例７］ ■注射用蒸留水　　　　　　　　８９．５ｇ■犬豆油　
　　　　　　　　　　　５３■大豆リン脂質　　　　　
　　　　２．５ｇ■グリセリン　　　　　　　　　　２
ｇ■甚体辺Ｙ酉動りν猷罷−１ 全量　　　　１００ｇ 上記の処方に従って■を■および■に溶解し、これに■
と■の溶液を加えて乳化し、注射剤を得た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ （ I ） （式中、Ｒは水素原子、水酸基またはアセトキシル基で
   ある。）で示されるポリアセチレン系化合物を有効成分
   とする抗炎症および抗アレルギー剤。