JPH0363556B2

JPH0363556B2 -

Info

Publication number: JPH0363556B2
Application number: JP58094477A
Authority: JP
Inventors: Yoichi Ozawa; Shinichi Kishimoto; Emiko Shinohara; Tadashi Takemoto; Arahiko Eguchi
Original assignee: Ajinomoto Co Inc
Current assignee: Ajinomoto Co Inc
Priority date: 1983-05-28
Filing date: 1983-05-28
Publication date: 1991-10-01
Also published as: IE841257L; JPS59219258A; EP0127411A3; KR900008012B1; IE57517B1; CA1258749A; EP0127411B1; DE3473266D1; EP0127411A2; US4606854A; KR840009295A

Description

【発明の詳細な説明】本発明はペプチド系甘味料として有用なα−Ｌ
−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエ
ステル（以下、α−APMと略記する。）又はその
塩酸塩の製造方法に関するものである。 α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン
メチルエステルの製造法には、数々の方法が知ら
れている。それらの方法を見ると、ほとんどの方
法が−Ｌ−アスパラギン酸（以下、Ｌ−Aspと略
記する。）のアミノ基を何らかの方法で、例えば、
カルボベンゾキシ基、ホルミル基、ハロゲン化水
素などで保護した後、無水物化し、Ｌ−フエニル
アラニンメチルエステル（以下、PMと略記す
る。）と縮合させ、アスパラチル−フエニルアラ
ニンメチルエステル骨格を合成し、脱保護を行
い、目的のα−APMを得ている。しかし、これ
らの方法では、β−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエ
ニルアラニンメチルエステル（以下、β−APM
と略記する。）の副成を避けられないから、Ｌ−
Asp或いはＬ−フエニルアラニン（以下、Ｌ−
pheと略記する。）からのα−APMの合成収率に
は自ら限界がある。更にこのために、α、β−
APM混合物からα−APMのみを分離する操作が
必要である。一方、化学的に純粋にα−APMのみを合成す
る方法として、例えば、Ｌ−AspのＮ−チオカル
ボキシ酸無水物とPMとを縮合させる方法（特開
昭56−73053）が発表されているが、生成するα
−APMが臭気を伴うなど、工業的規模での実施
には難点がある。又、Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ
−アスパラギン酸のβ−ベンジルエステルのＮ−
カルボキシ酸無水物をPMと縮合した後、接触還
元で脱保護してα−APMのみを得る方法（特開
昭48−96557）が発表されているが、工業的には
コストその他から実施には難点があると考えられ
る。この他にもいくつかのβ−APMを副成しな
いα−APM製造法が知られているが、いずれも
実験室的には可能であつても工業的にはコストの
点、副原料の点などで実施困難である。本発明者らは、α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フ
エニルアラニンジメチルエステル（H₃COOCCH₂CH（NH₂）CONHCH
（CH₂C₆H₅）COOCH₃。以下、α−APM₂と略記
する。）を用いα−APMを容易にかつ収率よく合
成する方法を発明した。本発明者らは、先に、α−APMをメタノール
（以下、MeOHと略記する。）〜塩酸混合溶媒中
に放置しておくとα−APM塩酸塩が析出してく
ると同時に母液中には、α−APM₂が副成してい
ることをを見い出したが、これは、α−APMが
エステル化をうけて上記の副成化合物を生ずるこ
とによるものと推測された。因みに、これらの化
合物は平衡関係にあると考えられる。本発明者らは、更に研究の結果、α−APM₂
を、このものがエステルの加水分解を受け易いよ
うな特定の割合のMeOH〜塩酸混合溶媒、即ち、
MeOH0〜10％、濃塩酸８〜60％を含み、残りは
水（いずれもVolume％。なお、ここでいう濃塩
酸（conc HCl）は35％塩酸水溶液である。）の混
合溶媒に濃度0.05mol／dlから0.3mol／dlになる
様に溶解し、０〜60℃（この範囲であれば、温度
は、一定であつても経時的に変化させてもよい。）
に保つと、エステルの加水分解が起り、α−
APMが生じ、これはつづいてα−APM塩酸塩と
して析出することを見出し、このようにして高収
率（70％程度以上）で原料のα−APM₂がα−
APM塩酸塩に変換できることを確かめ、この様
な知見に基づき本発明を完成した。この様なエステルの加水分解でα−APMを合
成する方法は今までなされていない。MeOHが
多過ぎるとエステルの加水分解は起らず、少な過
ぎるとエステルの加水分解が過度に生ずる。濃塩
酸量がα−APM塩酸塩が析出するに足る量以上
に多過ぎると濃塩酸の浪費となり、少な過ぎれば
加水分解速度が遅くなり、かつα−APM塩酸塩
が析出しにくくなる。高温に過ぎるとペプチド結
合が切れ、低温に過ぎるとエステルの加水分解が
遅くなる。尚、α−APM塩酸塩を取り出した後の母液に、
再び上記の比率になる様にMeOH、concHClま
たは適当濃度の塩酸、水を加えて調節して、α−
APM₂を更に添加すれば定量的に無駄なく、使用
した原料α−APM₂をα−APM塩酸塩へ変換で
きる。もちろん、α−APM塩酸塩の析出に伴い、
母液の組成が本発明の条件を外れることとなつた
ときは、α−APM塩酸塩を分離することなく、
MeOH、塩酸、α−APM₂で組成を調節してα
−APM塩酸塩を追加析出させてもよい。尚、α−APM塩酸塩をN₂CO₃など適当なアル
カリでHClを中和すれば、α−APMを結晶とし
て得ることができるのはもちろんである。以上、α−APM₂を原料に用いることでα−
APMを合成することが容易に可能になつた。尚、α−APM₂は、例えば、次の様にして容易
に得られる。すなわち、Ｌ−Aspのβ−メチルエ
ステルNCAとPMとを有機溶媒中または水〜有
機溶媒混合物中で縮合させる、あるいは、Ｎ−ホ
ルミルアスパラギン酸無水物とPMとを縮合した
後ドライ塩酸−メタノールで処理すれば、脱ホル
ミル、エステル化が起り、α−APM₂が得られ
る。以下、実施例により、本発明を更に説明する。実施例１ジエステル（α−APM₂・HCl）の合成法Ｌ−PM17.9ｇを含むトルエン溶液200mlにＮ−
ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水物14.3ｇを含
むトルエンスラリー100mlを加えて室温で３時間
撹拌した。反応後は減圧下に濃縮し、濃縮物にドライ塩酸
（13％）〜MeOH1を加え一夜放置後、濃縮す
るとα−APM₂・塩酸塩35ｇ（シロツプ状））が
得られた。実施例１ α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニン
ジメチルエステル（α−APM₂）塩酸塩51.6ｇ
（0.15mol：混合溶媒中の濃度0.21mol／dl）
MeOH3.5ml（混合溶媒に対し、4.96容量％）、
concHCl42ml（混合溶媒に対し、59.57容量％）
および水25mlの混合溶媒に溶解し、25℃に保つ
た。経時的にエステルの加水分解が起り、生成する
α−APMはα−APM塩酸塩として析出しはじ
め、４日後に69.6％、７日目に81％の収率でα−
APM塩酸塩（40.2ｇ）を濾取した。実施例２ α−APM₂塩酸塩51.6ｇ（0.15mol：混合溶媒
中の濃度0.21mol／dl）をconcHCl42ml（混合溶
媒に対し、59.15容量％）および水29mlの混合溶
媒に溶解し、25℃に保つた。８日後の69.6％の収率でα−APM塩酸塩を濾
取できた。実施例３ α−APM₂塩酸塩51.6ｇ（0.15mol：混合溶媒
中の濃度0.21ml／dl）をMeOH4ml（混合溶媒に
対し、5.63容量％）、conCHCl42ml（混合溶媒に
対し、59.15容量％）および水25mlの混合溶媒に
溶解し、最初35℃に１日保ち、ついで25℃に５日
保つた。 α−APM塩酸塩を80％の収率（39.5ｇ）で濾
取できた。参考例２ α−APM塩酸塩４ｇを水100mlに溶解し、
Na₂Co₃の飽和水溶液を用いて冷却しつつ、PH4.8
に中和した。このものを５℃に一夜保つた。析出した結晶を取し、乾燥したところ、2.65
ｇのα−APMを得た。比較実験例実験１（α−APを出発物質とする方法） 35％HCl35mlとメタノール５ml及び水を混合し
て全量を100ｇとし、反応媒体を調製した。この
時反応媒体中のHCl濃度は0.4mol／100ｇであり、
またメタノール濃度か0.12mol／100ｇである。上記反応媒体へα−AP14.02ｇ（50mmol）を
投入し、溶解後種晶としてAPH・HCl塩約2.5ｇ
を加えて、20℃恒温下に７日間撹拌を続けた。更
に一夜氷冷下に晶析を行い、その後析出結晶を濾
過により分離した。濾取した結晶は、20mlの2N−HClで洗浄した
後、多量の水によつて溶解した。洗浄液を含む母液及び結晶溶解液は夫々液量を
計量し、またその組成を液体クロマトグラフイー
により定量した。洗浄液を含む母液へのα−APアナログ（α−
AP、α−APM、Ｂ−エステル、ジエステル）の
ロスはα−AP投入量に対して15.6mol％であつ
た。結晶溶解液中のα−APMは添加種晶分を補正
して、10.62ｇ（36.1mmol）であり、収率は結局
72.2％であつた。また、溶解液中のα−AP及び
ジエステル濃度より、析出結晶中のα−APMを
100とすると、不純物としてのα−AP及びジエス
テル含量は各々16.3mol％及び0.6mol％であつ
た。実験２（α−APM₂を出発物質とる方法） 35HCl31mlとメタノール５ml及び水を混合して
全量を98ｇとし、反応媒体を調製した。（α−
APM₂がHCl塩であるので、この分を補正する
と、HCl及びメタノール濃度は実験１と等しくな
る。）上記反応媒体へα−APM₂のHCl塩17.42ｇ
（50mmol）を投入し、以下実験１と同様の操作
を行つた。洗浄液を含む母液へのα−APアナログのロス
は、9.1mol％であつた。 α−APMの得量は12.09ｇ（41.1mmol）であ
り、収率は82.2％であつた。また、析出結晶中の
α−APMを100とすると不純物としてのα−AP
及びα−APM₂含量は各々8.5mol％及び2.1mol％
であつた。実験１，２の結果をまとめてみると、次の様に
なり、本発明法は、従来法に比較し、10％収率が
高い。【表】

Claims

【特許請求の範囲】

１ α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニ
ンジメチルエステルをメタノール０〜10％および
濃塩酸８〜60％を含み残りが水（いずれも容量
％）である組成に相当するメタノール塩酸混合溶
媒に濃度0.01mol／dlから0.3mol／dlになる様に
溶解し、０〜60℃保ち生成するα−Ｌ−アスパル
チル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルを塩
酸塩として析出させ、これを単離し必要によりア
ルカリで中和して遊離のエステルにすることを特
徴とするα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルア
ラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製法。