JP2976609B2 - α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 - Google Patents
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法Info
- Publication number
- JP2976609B2 JP2976609B2 JP3221331A JP22133191A JP2976609B2 JP 2976609 B2 JP2976609 B2 JP 2976609B2 JP 3221331 A JP3221331 A JP 3221331A JP 22133191 A JP22133191 A JP 22133191A JP 2976609 B2 JP2976609 B2 JP 2976609B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- aspartyl
- apm
- hydrochloride
- phenylalanine
- methyl ester
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はペプチド系甘味料として
有用なα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメ
チルエステル（以下、α−ＡＰＭと略す）またはその塩
酸塩の製造方法に関する。さらに詳しくは、種々の方法
により合成した、少なくともβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体（以下、β−ＡＰ誘導体と略
す）を不純物として含む粗α−ＡＰＭを、塩酸、メタノ
ールの存在下晶析してα−ＡＰＭをその塩酸塩として得
ることにより不純物を淘汰する方法において、α−ＡＰ
Ｍ塩酸塩の結晶が懸濁した溶液中に、粗α−ＡＰＭ、ま
たは晶析中にα−ＡＰＭへと変換され得る化合物を機械
的攪拌を行いながら加えることにより、分離後のα−Ａ
ＰＭ塩酸塩中の不純物含量を著しく低減させることを可
能ならしめたものである。
有用なα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメ
チルエステル（以下、α−ＡＰＭと略す）またはその塩
酸塩の製造方法に関する。さらに詳しくは、種々の方法
により合成した、少なくともβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体（以下、β−ＡＰ誘導体と略
す）を不純物として含む粗α−ＡＰＭを、塩酸、メタノ
ールの存在下晶析してα−ＡＰＭをその塩酸塩として得
ることにより不純物を淘汰する方法において、α−ＡＰ
Ｍ塩酸塩の結晶が懸濁した溶液中に、粗α−ＡＰＭ、ま
たは晶析中にα−ＡＰＭへと変換され得る化合物を機械
的攪拌を行いながら加えることにより、分離後のα−Ａ
ＰＭ塩酸塩中の不純物含量を著しく低減させることを可
能ならしめたものである。
【０００２】α−ＡＰＭは、しょ糖の約２００倍の甘味
を呈するペプチド系甘味料であり、その良質な甘味と低
カロリーであることによって近年ダイエット甘味料とし
て重用され、その需要は１９９５年までに全世界で１万
トンを越えるであろうと予測されている。
を呈するペプチド系甘味料であり、その良質な甘味と低
カロリーであることによって近年ダイエット甘味料とし
て重用され、その需要は１９９５年までに全世界で１万
トンを越えるであろうと予測されている。
【０００３】
【従来の技術】α−ＡＰＭは、Ｌ−アスパラギン酸（以
下、Ｌ−Ａｓｐと略すことがある）とＬ−フェニルアラ
ニン（以下、Ｌ−Ｐｈｅと略すことがある）とからなる
ジペプチド化合物で、その製法に関して多くの方法が知
られているが、その大多数は、α−ＡＰＭを塩酸塩とし
て単離し、得られたα−ＡＰＭ塩酸塩を中和晶析してα
−ＡＰＭを得る方法である。
下、Ｌ−Ａｓｐと略すことがある）とＬ−フェニルアラ
ニン（以下、Ｌ−Ｐｈｅと略すことがある）とからなる
ジペプチド化合物で、その製法に関して多くの方法が知
られているが、その大多数は、α−ＡＰＭを塩酸塩とし
て単離し、得られたα−ＡＰＭ塩酸塩を中和晶析してα
−ＡＰＭを得る方法である。
【０００４】α−ＡＰＭ塩酸塩を中和晶析、精製してα
−ＡＰＭの製品を得る方法としては、α−ＡＰＭの晶癖
改善および不純物淘汰などの面でさまざまな工夫がなさ
れており、逆にいえば何等かの工夫をしなければ純粋な
α−ＡＰＭを得ることは非常に困難であって、通常、中
和晶析によって粗α−ＡＰＭ結晶を得た後、再結晶析を
行う、または水中に懸濁状態で結晶を洗浄する等の精製
を行うことによって純粋なα−ＡＰＭ結晶を得ているた
め、粗α−ＡＰＭ結晶中の微量の不純物の量が精製工程
の効率や設備投資額に大きく影響することになる。とこ
ろで、その不純物のほとんどは原料のα−ＡＰＭ塩酸塩
から持ち込まれてくるものであり、したがって中和晶析
後の粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物含量はα−ＡＰＭ塩酸
塩中の不純物量に大きく依存する。すなわち中和晶析、
精製によって不純物を除くには、精製法に工夫を凝らす
ことも重要であるが、α−ＡＰＭ塩酸塩の段階で不純物
含量の少ないものを得ることがより直接的で効果的な方
法であるといえる。
−ＡＰＭの製品を得る方法としては、α−ＡＰＭの晶癖
改善および不純物淘汰などの面でさまざまな工夫がなさ
れており、逆にいえば何等かの工夫をしなければ純粋な
α−ＡＰＭを得ることは非常に困難であって、通常、中
和晶析によって粗α−ＡＰＭ結晶を得た後、再結晶析を
行う、または水中に懸濁状態で結晶を洗浄する等の精製
を行うことによって純粋なα−ＡＰＭ結晶を得ているた
め、粗α−ＡＰＭ結晶中の微量の不純物の量が精製工程
の効率や設備投資額に大きく影響することになる。とこ
ろで、その不純物のほとんどは原料のα−ＡＰＭ塩酸塩
から持ち込まれてくるものであり、したがって中和晶析
後の粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物含量はα−ＡＰＭ塩酸
塩中の不純物量に大きく依存する。すなわち中和晶析、
精製によって不純物を除くには、精製法に工夫を凝らす
ことも重要であるが、α−ＡＰＭ塩酸塩の段階で不純物
含量の少ないものを得ることがより直接的で効果的な方
法であるといえる。
【０００５】これまでに知られているα−ＡＰＭ塩酸塩
の製造法としては、１）アスパラギン酸無水物の強酸塩
とＬ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、Ｌ−Ｐ
Ｍと略すことがある。）を縮合する方法（例えば特公昭
５１−４００６９）、２）Ｎ−ホルミル−アスパラギン
酸無水物とＬ−ＰＭを縮合し、続いて既知の方法により
脱ホルミル化し、塩酸塩として晶析する方法（例えば特
公平０１−０３３４７９）、３）Ｎ−ホルミル−アスパ
ラギン酸無水物と、Ｌ−Ｐｈｅとを縮合し、精製したＮ
−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチルフェニルアラニン
（以下、Ｆ−α−ＡＰと略す）をメタノール、塩酸の存
在下晶析してエステル化させる方法（例えば特公昭５５
−２６１３３）、４）３−ベンジル−６−カルボキシメ
チル−２，５−ジケトピペラジン（以下、α−ＡＰ・Ｄ
ＫＰと略す）を水、メタノール、強酸の存在下で部分加
水分解する方法（例えば特開昭６０−１７４７９９）な
どがあるが、これらのいずれの方法によっても、β−Ａ
Ｐ誘導体をはじめとする不純物の塩酸塩結晶に対する混
入は避けられず、例えばβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フ
ェニルアラニンメチルエステル（以下、β−ＡＰＭと略
記する）は全ての方法で混入し、また、塩酸塩として結
晶を分離しようとする場合、α−ＡＰＭ塩酸塩の晶析系
は平衡系であるため、エステルが加水分解されたα−Ｌ
−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（以下、α−Ａ
Ｐと略す）の混入は避けられない。また、２）、３）の
方法では、脱保護反応を完全に１００％進行させない限
り、脱保護されなかったＮ−ホルミル−α−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、
Ｆ−α−ＡＰＭと略す）やＦ−α−ＡＰが混入してしま
うというような問題があった。
の製造法としては、１）アスパラギン酸無水物の強酸塩
とＬ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、Ｌ−Ｐ
Ｍと略すことがある。）を縮合する方法（例えば特公昭
５１−４００６９）、２）Ｎ−ホルミル−アスパラギン
酸無水物とＬ−ＰＭを縮合し、続いて既知の方法により
脱ホルミル化し、塩酸塩として晶析する方法（例えば特
公平０１−０３３４７９）、３）Ｎ−ホルミル−アスパ
ラギン酸無水物と、Ｌ−Ｐｈｅとを縮合し、精製したＮ
−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチルフェニルアラニン
（以下、Ｆ−α−ＡＰと略す）をメタノール、塩酸の存
在下晶析してエステル化させる方法（例えば特公昭５５
−２６１３３）、４）３−ベンジル−６−カルボキシメ
チル−２，５−ジケトピペラジン（以下、α−ＡＰ・Ｄ
ＫＰと略す）を水、メタノール、強酸の存在下で部分加
水分解する方法（例えば特開昭６０−１７４７９９）な
どがあるが、これらのいずれの方法によっても、β−Ａ
Ｐ誘導体をはじめとする不純物の塩酸塩結晶に対する混
入は避けられず、例えばβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フ
ェニルアラニンメチルエステル（以下、β−ＡＰＭと略
記する）は全ての方法で混入し、また、塩酸塩として結
晶を分離しようとする場合、α−ＡＰＭ塩酸塩の晶析系
は平衡系であるため、エステルが加水分解されたα−Ｌ
−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（以下、α−Ａ
Ｐと略す）の混入は避けられない。また、２）、３）の
方法では、脱保護反応を完全に１００％進行させない限
り、脱保護されなかったＮ−ホルミル−α−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（以下、
Ｆ−α−ＡＰＭと略す）やＦ−α−ＡＰが混入してしま
うというような問題があった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】解決しようとする課題
は、これまでに知られているいかなる合成ルートを選ん
でも、通常工業的によく用いられる回分式晶析法によっ
て得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量を効果
的に低減させるのが困難な点である。
は、これまでに知られているいかなる合成ルートを選ん
でも、通常工業的によく用いられる回分式晶析法によっ
て得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量を効果
的に低減させるのが困難な点である。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記の課題
を解決するため鋭意検討の結果、回分式晶析法を用い
ず、α−ＡＰＭ塩酸塩の結晶がすでに析出し、懸濁して
いるメタノール、塩酸を含む液中に、何らかの方法によ
り調製した、α−ＡＰＭもしくは晶析中にα−ＡＰＭへ
と変換され得る化合物を含む、晶析に付せられるべき均
一溶液を、機械的攪拌を行いながら加えることにより、
分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量が著しく低減
されることを見いだし、本発明を完成した。
を解決するため鋭意検討の結果、回分式晶析法を用い
ず、α−ＡＰＭ塩酸塩の結晶がすでに析出し、懸濁して
いるメタノール、塩酸を含む液中に、何らかの方法によ
り調製した、α−ＡＰＭもしくは晶析中にα−ＡＰＭへ
と変換され得る化合物を含む、晶析に付せられるべき均
一溶液を、機械的攪拌を行いながら加えることにより、
分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量が著しく低減
されることを見いだし、本発明を完成した。
【０００８】本来、下記一般式（１）で表される４種の
化合物や、下記一般式（４）で表される２種の化合物は
メタノールおよび塩酸の存在下で互いに平衡関係にあり
相互に変換し合う。よって、回分式晶析法により晶析し
た場合、均一溶液からα−ＡＰＭが起晶する際に系内に
存在しているα−ＡＰＭと平衡関係にあるその他の化合
物がα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中にある程度の量混入してし
まう。
化合物や、下記一般式（４）で表される２種の化合物は
メタノールおよび塩酸の存在下で互いに平衡関係にあり
相互に変換し合う。よって、回分式晶析法により晶析し
た場合、均一溶液からα−ＡＰＭが起晶する際に系内に
存在しているα−ＡＰＭと平衡関係にあるその他の化合
物がα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中にある程度の量混入してし
まう。
【０００９】
【化５】
【００１０】
【化６】
【００１１】本発明者は、上記の平衡が、溶解度の低い
α−ＡＰＭ塩酸塩結晶が析出して平衡系外に除かれてい
る過程では、全体としてα−ＡＰＭ側に大きく偏ること
になり、晶析系全体の不純物の割合は経時的に減少して
いくことを見いだし、その過程で何らかの方法で調製し
たα−ＡＰＭを含む液（以下、被晶析液と呼ぶ）を加え
れば、分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量が
著しく減少することを見いだした。
α−ＡＰＭ塩酸塩結晶が析出して平衡系外に除かれてい
る過程では、全体としてα−ＡＰＭ側に大きく偏ること
になり、晶析系全体の不純物の割合は経時的に減少して
いくことを見いだし、その過程で何らかの方法で調製し
たα−ＡＰＭを含む液（以下、被晶析液と呼ぶ）を加え
れば、分離後のα−ＡＰＭ塩酸塩結晶中の不純物含量が
著しく減少することを見いだした。
【００１２】晶析溶媒としては、従来の晶析法で普通に
知られているものでよい。すなわち、一定濃度の塩酸を
使用し、場合に応じてメタノールを加えてもよい。組成
を容量パーセントで表すと、メタノール：０〜２０％、
塩化水素：８〜５５％残りは水という組成が良好であ
る。
知られているものでよい。すなわち、一定濃度の塩酸を
使用し、場合に応じてメタノールを加えてもよい。組成
を容量パーセントで表すと、メタノール：０〜２０％、
塩化水素：８〜５５％残りは水という組成が良好であ
る。
【００１３】晶析温度は、あまり高すぎると不純物含量
が増し、また低すぎると晶析速度が遅くなるため、０〜
６０℃位が適当である。また、晶析滞留時間としては１
０時間以上でないと満足すべき収率が得られないことが
多い。
が増し、また低すぎると晶析速度が遅くなるため、０〜
６０℃位が適当である。また、晶析滞留時間としては１
０時間以上でないと満足すべき収率が得られないことが
多い。
【００１４】晶析中の懸濁液への、被晶析液の加え方
は、できるだけゆっくり連続的に加えた方が不純物を減
少させる効果は大きいが、被晶析液の調製が回分式操作
で行われる場合、被晶析液と懸濁液との容積比が１：２
以上であれば、その液は全量可及的速やかに加えてしま
っても効果がみられる。あまり加える速度を遅くしても
顕著な効果はなく、被晶析液が、塩酸を用いてＦ−α−
ＡＰＭの脱ホルミル化反応を行った液のように塩酸を含
む場合などは、かえって被晶析液中での起晶がおこって
しまったりといった不都合が生じることがある。
は、できるだけゆっくり連続的に加えた方が不純物を減
少させる効果は大きいが、被晶析液の調製が回分式操作
で行われる場合、被晶析液と懸濁液との容積比が１：２
以上であれば、その液は全量可及的速やかに加えてしま
っても効果がみられる。あまり加える速度を遅くしても
顕著な効果はなく、被晶析液が、塩酸を用いてＦ−α−
ＡＰＭの脱ホルミル化反応を行った液のように塩酸を含
む場合などは、かえって被晶析液中での起晶がおこって
しまったりといった不都合が生じることがある。
【００１５】また、晶析時の懸濁液中には、塩化ナトリ
ウム、塩化アンモニウム等の無機塩化物が含まれていて
も、その無機塩化物の飽和溶解度以下の量であれば分離
したα−ＡＰＭ塩酸塩の結晶品質にほとんど影響を与え
ない。従って、請求項３の、β−ＡＰＭ誘導体から、α
−ＡＰＭ誘導体への変換反応に際し、水酸化ナトリウ
ム、炭酸ナトリウムなどの無機塩基を用いた場合も、中
和により生成する無機塩化物の量が飽和溶解度以下であ
るならその反応液を直接α−ＡＰＭが懸濁している溶液
中に加えても差し支えない。
ウム、塩化アンモニウム等の無機塩化物が含まれていて
も、その無機塩化物の飽和溶解度以下の量であれば分離
したα−ＡＰＭ塩酸塩の結晶品質にほとんど影響を与え
ない。従って、請求項３の、β−ＡＰＭ誘導体から、α
−ＡＰＭ誘導体への変換反応に際し、水酸化ナトリウ
ム、炭酸ナトリウムなどの無機塩基を用いた場合も、中
和により生成する無機塩化物の量が飽和溶解度以下であ
るならその反応液を直接α−ＡＰＭが懸濁している溶液
中に加えても差し支えない。
【００１６】本発明における機械的攪拌には特に制約は
なく、攪拌翼による攪拌混合などのように晶析槽内を均
一に混合し得る方法であればいずれの方法を用いてもよ
い。
なく、攪拌翼による攪拌混合などのように晶析槽内を均
一に混合し得る方法であればいずれの方法を用いてもよ
い。
【００１７】なお、以上の方法により得られらα−ＡＰ
Ｍ塩酸塩の結晶は、不純物含量が少ないというばかりで
なく、回分式操作で得られた結晶よりも結晶が大きく分
離性が良好であり、結晶と晶析母液を分離した後の結晶
中の付着母液が少なくなるため洗浄水の量が少量で済
み、ひいては収率の向上につながるという利点をも有し
ていることがわかった。
Ｍ塩酸塩の結晶は、不純物含量が少ないというばかりで
なく、回分式操作で得られた結晶よりも結晶が大きく分
離性が良好であり、結晶と晶析母液を分離した後の結晶
中の付着母液が少なくなるため洗浄水の量が少量で済
み、ひいては収率の向上につながるという利点をも有し
ていることがわかった。
【００１８】
【実施例】以下、実施例により本発明をさらに詳細に説
明する。
明する。
【００１９】実施例１ 図１のような装置を組み立て、下記第１表の組成の、α
−ＡＰＭ塩酸塩を晶析中のスラリー２．４Ｌと、３５％
塩酸４４０ｍｌおよび塩化アンモニウム１７７ｇを張り
込んだ。このスラリーを３０℃に保ち、下記第２表の組
成の脱ホルミル化反応後の均一溶液を４２０ｍｌと、塩
酸塩結晶として析出する分として、３５％塩酸を１２ｍ
ｌ、計５４３ｍｌを約３分間かけて加えた。この操作を
８時間おきに１日３回行い４日間継続した。
−ＡＰＭ塩酸塩を晶析中のスラリー２．４Ｌと、３５％
塩酸４４０ｍｌおよび塩化アンモニウム１７７ｇを張り
込んだ。このスラリーを３０℃に保ち、下記第２表の組
成の脱ホルミル化反応後の均一溶液を４２０ｍｌと、塩
酸塩結晶として析出する分として、３５％塩酸を１２ｍ
ｌ、計５４３ｍｌを約３分間かけて加えた。この操作を
８時間おきに１日３回行い４日間継続した。
【００２０】
【表１】
【００２１】
【表２】
【００２２】一方、第１回目の投入開始と共にラボ用の
スラリーポンプで第１槽から第２槽に１６３０ｍｌ／日
の割合でスラリーを引き抜いた。この第２槽は２４時間
ごとに交換し、貯まったスラリーはその後２０℃で６３
時間晶析し、その後５℃に冷却して４時間後に振り切り
分離して、結晶を２００ｍｌの冷水でよく洗浄した。４
日目の引き抜きスラリーより得られた結晶は５１０ｇで
あり、その組成は下記第３表のようであった（付着水分
２０％）。
スラリーポンプで第１槽から第２槽に１６３０ｍｌ／日
の割合でスラリーを引き抜いた。この第２槽は２４時間
ごとに交換し、貯まったスラリーはその後２０℃で６３
時間晶析し、その後５℃に冷却して４時間後に振り切り
分離して、結晶を２００ｍｌの冷水でよく洗浄した。４
日目の引き抜きスラリーより得られた結晶は５１０ｇで
あり、その組成は下記第３表のようであった（付着水分
２０％）。
【００２３】
【表３】
【００２４】実施例２ 実施例１で得られた結晶５０ｇを、α−ＡＰＭ濃度が４
９ｇ／Ｌとなるように、６０℃で水に加熱溶解し、その
溶解液に２９％アンモニア水を加えてｐＨ＝４．８に調
整し、その液を５℃まで冷却し析出したα−ＡＰＭ結晶
を濾取し、減圧乾燥後不純物含量を測定したところ、α
−ＡＰＭに対して０．８１重量パーセントであった（結
晶収量２８．７ｇ、収率８６．５％）。
９ｇ／Ｌとなるように、６０℃で水に加熱溶解し、その
溶解液に２９％アンモニア水を加えてｐＨ＝４．８に調
整し、その液を５℃まで冷却し析出したα−ＡＰＭ結晶
を濾取し、減圧乾燥後不純物含量を測定したところ、α
−ＡＰＭに対して０．８１重量パーセントであった（結
晶収量２８．７ｇ、収率８６．５％）。
【００２５】実施例３ 内容量３Ｌのジャケット付き反応器４個を、図２のよう
に組み立てた。この第１槽に実施例１と同様に初期スラ
リーを張り込み３０℃に保った。この容器に実施例１と
同様の脱ホルミル化反応液と３５％塩酸を、実施例１と
同様に、１日３回加えた。一方、第１槽から第２槽へ
は、スラリーを１６３０ｍｌ／日の速度で連続的に引き
抜き、第２槽のスラリーが２．８５Ｌになった後、その
量を保つように第３槽へポンプで連続的に引き抜いた。
第２槽と第３槽は２０℃に保った。第３槽中のスラリー
が２．８５Ｌになった後、同様に第３槽中のスラリー量
を保つように第４槽へスラリーを引き抜いた。第４槽は
５℃に保ち、１日ごとに貯まったスラリー中の結晶を実
施例１と同様に分離した後、ＨＰＬＣ等により組成を分
析した。
に組み立てた。この第１槽に実施例１と同様に初期スラ
リーを張り込み３０℃に保った。この容器に実施例１と
同様の脱ホルミル化反応液と３５％塩酸を、実施例１と
同様に、１日３回加えた。一方、第１槽から第２槽へ
は、スラリーを１６３０ｍｌ／日の速度で連続的に引き
抜き、第２槽のスラリーが２．８５Ｌになった後、その
量を保つように第３槽へポンプで連続的に引き抜いた。
第２槽と第３槽は２０℃に保った。第３槽中のスラリー
が２．８５Ｌになった後、同様に第３槽中のスラリー量
を保つように第４槽へスラリーを引き抜いた。第４槽は
５℃に保ち、１日ごとに貯まったスラリー中の結晶を実
施例１と同様に分離した後、ＨＰＬＣ等により組成を分
析した。
【００２６】各槽の滞留時間は、第１槽が４５時間、２
および３槽が各４２時間、第４槽が１２時間である。こ
の連続晶析を１０日間続け、１０日目の分離結晶を分析
したところ下記第４表のような組成であった（結晶収量
５００ｇ、うち付着水分１８％）。
および３槽が各４２時間、第４槽が１２時間である。こ
の連続晶析を１０日間続け、１０日目の分離結晶を分析
したところ下記第４表のような組成であった（結晶収量
５００ｇ、うち付着水分１８％）。
【００２７】
【表４】
【００２８】実施例４ 実施例３で得られた結晶５０ｇを、実施例２と同様に処
理し、得られた粗α−ＡＰＭの不純物含量を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して０．７２重量％であった（結
晶収量３０．０ｇ、収率８６．９％）。
理し、得られた粗α−ＡＰＭの不純物含量を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して０．７２重量％であった（結
晶収量３０．０ｇ、収率８６．９％）。
【００２９】実施例５ β−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンジメチル
エステル塩酸塩（β−ＡＰＭ２・ＨＣｌと略す）５．６
５ｇをメタノールに溶解して１Ｌとした溶液を調製し
た。この溶液２００ｍｌを、６０℃に昇温したのち、無
水炭酸ナトリウムの結晶を８６８ｍｇ加え、懸濁しつつ
６０℃にて攪拌下８時間反応させ、反応液をＨＰＬＣ分
析したところ、α−ＡＰ誘導体（α−ＡＰＭ２＋α−Ａ
Ｐ・ＤＫＰ＋α−ＡＰ・ＤＫＰＯＭｅ）が７５％生成し
ていた。この反応液にＨ２Ｏを３０ｍｌと３５％ＨＣｌ
を１０ｍｌ加え、全量５０ｍｌになるまで濃縮した。そ
の液を、実施例１の初期スラリー１００ｍｌに、機械的
攪拌を行いながら３分間で加え、その後２０℃で８５時
間、５℃で４時間晶析し、結晶を分離して少量の冷水で
洗いＨＰＬＣ分析したところ、水分２６％、α−ＡＰＭ
純度９０．１％であった。
エステル塩酸塩（β−ＡＰＭ２・ＨＣｌと略す）５．６
５ｇをメタノールに溶解して１Ｌとした溶液を調製し
た。この溶液２００ｍｌを、６０℃に昇温したのち、無
水炭酸ナトリウムの結晶を８６８ｍｇ加え、懸濁しつつ
６０℃にて攪拌下８時間反応させ、反応液をＨＰＬＣ分
析したところ、α−ＡＰ誘導体（α−ＡＰＭ２＋α−Ａ
Ｐ・ＤＫＰ＋α−ＡＰ・ＤＫＰＯＭｅ）が７５％生成し
ていた。この反応液にＨ２Ｏを３０ｍｌと３５％ＨＣｌ
を１０ｍｌ加え、全量５０ｍｌになるまで濃縮した。そ
の液を、実施例１の初期スラリー１００ｍｌに、機械的
攪拌を行いながら３分間で加え、その後２０℃で８５時
間、５℃で４時間晶析し、結晶を分離して少量の冷水で
洗いＨＰＬＣ分析したところ、水分２６％、α−ＡＰＭ
純度９０．１％であった。
【００３０】実施例６ 塩酸濃度５．５Ｍ／Ｌ、メタノールと水のモル比０．２
５の混合溶媒４００ｇにα−ＡＰ・ＤＫＰを１０５ｇ懸
濁し、８０℃で約１時間攪拌したところ結晶は完全に溶
解した。この溶解液を、２５℃に保った実施例１と同様
の初期スラリー１．０Ｌに、スラリー温度が２５〜３５
℃を保つように、約１時間かけて加えた。その後スラリ
ーを２５℃で２２時間、２０℃で６３時間、５℃で４時
間晶析したのち、結晶を濾取し、少量の冷水で洗浄した
（収量４７０ｇ）。得られた結晶の分析結果は、水分が
２７％、α−ＡＰＭ純度が８６％であった。
５の混合溶媒４００ｇにα−ＡＰ・ＤＫＰを１０５ｇ懸
濁し、８０℃で約１時間攪拌したところ結晶は完全に溶
解した。この溶解液を、２５℃に保った実施例１と同様
の初期スラリー１．０Ｌに、スラリー温度が２５〜３５
℃を保つように、約１時間かけて加えた。その後スラリ
ーを２５℃で２２時間、２０℃で６３時間、５℃で４時
間晶析したのち、結晶を濾取し、少量の冷水で洗浄した
（収量４７０ｇ）。得られた結晶の分析結果は、水分が
２７％、α−ＡＰＭ純度が８６％であった。
【００３１】参考例１ 実施例１、第２表の均一溶液１２６０ｍｌに３５％塩酸
３７０ｍｌを加え（この量は、実施例１の１日分にあた
る）、その混合液を３０℃に保って攪拌した。すると約
３０分後に結晶が析出し始めた。その後３０℃で計２
２．５時間、２０℃で６３時間、５℃で４時間晶析し、
実施例１と同様に結晶を分離したところ、その組成は下
記第５表のようであり、不純物含量が高かった（結晶収
量：５５０ｇ、付着水分３２％）。
３７０ｍｌを加え（この量は、実施例１の１日分にあた
る）、その混合液を３０℃に保って攪拌した。すると約
３０分後に結晶が析出し始めた。その後３０℃で計２
２．５時間、２０℃で６３時間、５℃で４時間晶析し、
実施例１と同様に結晶を分離したところ、その組成は下
記第５表のようであり、不純物含量が高かった（結晶収
量：５５０ｇ、付着水分３２％）。
【００３２】
【表５】
【００３３】参考例２ 参考例１で得られた結晶を５０ｇ用い、実施例２と同様
の操作で得た粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して１．４３重量％であった（結
晶収量２３．６ｇ、収率８６．３％）。
の操作で得た粗α−ＡＰＭ結晶中の不純物を測定したと
ころ、α−ＡＰＭに対して１．４３重量％であった（結
晶収量２３．６ｇ、収率８６．３％）。
【００３４】
【発明の効果】以上説明したように、本発明の方法によ
って得られるα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量は、回分
式晶析法で得られるものよりも顕著に少なくなるため、
塩酸塩結晶を中和晶析して得られる粗α−ＡＰＭ結晶中
のα−ＡＰＭ純度も高くなり、したがってその後の精製
工程の簡略化が図れるものである。また、本発明の方法
で得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶は、回分式晶析法で得
られる結晶より大きく、従って付着母液量が少なくなる
ため洗浄水量を減らすことができ、それにより収率が向
上するため、工業的にきわめて有利な方法であるといえ
る。
って得られるα−ＡＰＭ塩酸塩中の不純物含量は、回分
式晶析法で得られるものよりも顕著に少なくなるため、
塩酸塩結晶を中和晶析して得られる粗α−ＡＰＭ結晶中
のα−ＡＰＭ純度も高くなり、したがってその後の精製
工程の簡略化が図れるものである。また、本発明の方法
で得られるα−ＡＰＭ塩酸塩結晶は、回分式晶析法で得
られる結晶より大きく、従って付着母液量が少なくなる
ため洗浄水量を減らすことができ、それにより収率が向
上するため、工業的にきわめて有利な方法であるといえ
る。
【図１】実施例１の実験装置を示した図である。
１ 脱ホルミル化反応液、３５％ＨＣｌ投入口 ２ 第１槽スラリー引き抜き口 ３ ラボ用スラリーポンプ ４ 第２槽フィード口 Ｍ モーター
【図２】実施例３の実験装置を示した図である。
１ 脱ホルミル化反応液投入口 ２ ３５％塩酸投入口 ３ 第１槽スラリー引き抜き口 ４、７および１０ ラボ用スラリーポンプ ５ 第２槽フィード口 ６ 第２槽スラリー引き抜き口 ８ 第３槽フィード口 ９ 第３槽スラリー引き抜き口 １０ 第４槽フィード口 １１ 第４槽スラリー引き抜き口 Ｍ モーター
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 武田 英雄 神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１ 味 の素株式会社 中央研究所内 (72)発明者 竹本 正 神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１ 味 の素株式会社 中央研究所内 (56)参考文献 特開 平３−27398（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−197592（ＪＰ，Ａ) 特開 昭57−131746（ＪＰ，Ａ) 特開 昭58−185545（ＪＰ，Ａ) 特開 平１−294690（ＪＰ，Ａ) 特開 昭60−174799（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C07K 5/075
Claims (5)
- 【請求項１】下記一般式（１）で表されるα−Ｌ−アス
パルチル−Ｌ−フェニルアラニン誘導体をメタノール、
塩酸、及び水の存在下に晶析してα−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩を製造す
る方法において、α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニル
アラニン誘導体を含有する液を、α−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の結晶が
懸濁した溶液中に機械的攪拌を行いながら加えることを
特徴とするα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニ
ンメチルエステルまたはその塩酸塩の製造法。 【化１】 - 【請求項２】α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニン誘導体を含有する液が、下記一般式（２）で表され
るＮ−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニル
アラニン誘導体の保護基を除去した液である請求項１に
記載の方法。 【化２】 - 【請求項３】α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニン誘導体を含有する液が、下記一般式（３）で表され
るβ−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン誘導体
を、前記一般式（１）で表されるα−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニン誘導体へと変換した液である請
求項１に記載の方法。 【化３】 - 【請求項４】α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニン誘導体を含有する液が、β−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体をα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ
−フェニルアラニン誘導体の５ｍｏｌ％から３５ｍｏｌ
％含む液である請求項１〜３までのいずれかに記載の方
法。 - 【請求項５】下記一般式（４）で表される３−ベンジル
−６−カルボキシメチル−２，５−ジケトピペラジン誘
導体を、メタノール、塩酸、および水の存在下に晶析し
てα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチル
エステル塩酸塩を製造する方法において、同一般式
（４）の化合物を、α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニ
ルアラニンメチルエステル塩酸塩の結晶が懸濁した溶液
中に機械的攪拌を行いながら加えることを特徴とするα
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエス
テルまたはその塩酸塩の製造法。 【化４】
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3221331A JP2976609B2 (ja) | 1991-05-23 | 1991-05-23 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3221331A JP2976609B2 (ja) | 1991-05-23 | 1991-05-23 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05202094A JPH05202094A (ja) | 1993-08-10 |
| JP2976609B2 true JP2976609B2 (ja) | 1999-11-10 |
Family
ID=16765133
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3221331A Expired - Fee Related JP2976609B2 (ja) | 1991-05-23 | 1991-05-23 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2976609B2 (ja) |
-
1991
- 1991-05-23 JP JP3221331A patent/JP2976609B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05202094A (ja) | 1993-08-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0127411B1 (en) | Method of preparing alpha-l-aspartyl-l-phenylalanine methyl ester and its hydrochloride | |
| EP0466963B1 (en) | A process for the preparation of alpha-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester hydrochloride by use of isolated N-formyl-aspartic anhydride | |
| US4332718A (en) | Process for producing an α-L-aspartyl-L-phenylalanine lower alkyl ester | |
| JP3163661B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル、及びＬ−フェニルアラニン、Ｌ−アスパラギン酸の回収方法 | |
| JP2976609B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル又はその塩酸塩の製造法 | |
| EP0510552B2 (en) | Preparation process of alpha-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester | |
| JPS6257180B2 (ja) | ||
| EP0256812B1 (en) | Process for separation of n-protected alpha-l-aspartyl-l-phenylalanines | |
| JP2662287B2 (ja) | α―Ｌ―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンメチルエステルの分離方法 | |
| JP3239452B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造法 | |
| JP2910228B2 (ja) | α―Ｌ―アスパルチル―Ｌ―フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製法 | |
| JP3178092B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造方法 | |
| JP2970109B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル溶液の濃縮方法 | |
| JP3314515B2 (ja) | Ｌ−フェニルアラニンの回収方法 | |
| JP3162366B2 (ja) | フェニルアラニンの単離方法 | |
| JPH04346996A (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造法 | |
| US5616791A (en) | Method of preparing L-aspartyl-D-α-aminoalkane carboxylic acid-(S)-N-α-alkylbenzylamide | |
| JPH07640B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造法 | |
| JP3316910B2 (ja) | Ｌ−フェニルアラニンの回収方法 | |
| JPH07116225B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルのハロゲン化水素酸塩の製造方法 | |
| JPS61268699A (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルの製造方法 | |
| JPH0730049B2 (ja) | ジケトピペラジン誘導体の製造方法 | |
| JPS61227593A (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルまたはその塩酸塩の製造方法 | |
| JPH07116226B2 (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルまたはそのハロゲン化水素酸塩の製法 | |
| JPS63150295A (ja) | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルの分離法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080910 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090910 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090910 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090910 Year of fee payment: 10 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100910 Year of fee payment: 11 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100910 Year of fee payment: 11 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |