JP3178092B2 - α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造方法 - Google Patents
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造方法Info
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- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
- C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
- C07K5/06121—Asp- or Asn-amino acid the second amino acid being aromatic or cycloaliphatic
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は塩酸、メタノールを含む
水溶液中Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン及び
そのメチルエステル誘導体（Ｎ−保護物質を含む）とＬ
−アスパルチル−Ｄ−フェニルアラニン及びそのメチル
エステル誘導体（Ｎ−保護物質を含む）を撹拌下又は無
撹拌下で放置しα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルア
ラニンメチルエステル塩酸塩（以下α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ
・ＨＣｌ塩と略記する。）を析出させるα−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（以下α
−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭと略記する）の塩酸塩の製造法に関す
る。
水溶液中Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン及び
そのメチルエステル誘導体（Ｎ−保護物質を含む）とＬ
−アスパルチル−Ｄ−フェニルアラニン及びそのメチル
エステル誘導体（Ｎ−保護物質を含む）を撹拌下又は無
撹拌下で放置しα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルア
ラニンメチルエステル塩酸塩（以下α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ
・ＨＣｌ塩と略記する。）を析出させるα−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（以下α
−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭと略記する）の塩酸塩の製造法に関す
る。
【０００２】α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭは良質で低カロリーの
甘味剤である。一方α−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−フェニ
ルアラニンメチルエステル（以下α−Ｌ−Ｄ−ＡＰＭと
略記する）は無味であり、甘味料としての有用性はな
い。
甘味剤である。一方α−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−フェニ
ルアラニンメチルエステル（以下α−Ｌ−Ｄ−ＡＰＭと
略記する）は無味であり、甘味料としての有用性はな
い。
【０００３】
【従来技術と問題点】α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭの製造法は種
々知られている。例えば、Ｎ−保護−Ｌ−アスパラギン
酸無水物とＬ−フェニルアラニンメチルエステルを縮合
させて常法によりＮ−保護基を脱離させる方法（米国特
許第３，７８６，０３９号）、Ｎ−保護−Ｌ−アスパラ
ギン酸無水物とＬ−フェニルアラニンを縮合させ常法に
よりＮ−保護基を脱離し塩酸，メタノール水溶液中晶析
させα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩を得る方法（特公昭
４９−４１４２５）、Ｌ−アスパラギン酸無水物の強酸
付加塩にＬ−フェニルアラニンメチルエステルを直接縮
合させる方法（特公昭４９−１４２１７号）、Ｎ−保護
−Ｌ−アスパラギン酸とＬ−フェニルアラニンメチルエ
ステルを酵素の存在下に縮合させてから常法によりＮ−
保護基を脱離する方法（特開昭５５−１３５５９５号）
などが知られている。
々知られている。例えば、Ｎ−保護−Ｌ−アスパラギン
酸無水物とＬ−フェニルアラニンメチルエステルを縮合
させて常法によりＮ−保護基を脱離させる方法（米国特
許第３，７８６，０３９号）、Ｎ−保護−Ｌ−アスパラ
ギン酸無水物とＬ−フェニルアラニンを縮合させ常法に
よりＮ−保護基を脱離し塩酸，メタノール水溶液中晶析
させα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩を得る方法（特公昭
４９−４１４２５）、Ｌ−アスパラギン酸無水物の強酸
付加塩にＬ−フェニルアラニンメチルエステルを直接縮
合させる方法（特公昭４９−１４２１７号）、Ｎ−保護
−Ｌ−アスパラギン酸とＬ−フェニルアラニンメチルエ
ステルを酵素の存在下に縮合させてから常法によりＮ−
保護基を脱離する方法（特開昭５５−１３５５９５号）
などが知られている。
【０００４】これらの製造法の原料はＬ−アスパラギン
酸（以下Ｌ−Ａｓｐと略記する）とＬ−フェニルアラニ
ン（以下Ｌ−Ｐｈｅと略記する）である。Ｌ−Ａｓｐは
フマール酸とアンモニアを基質として酵素反応すると容
易に製造でき、安価に入手可能である。一方Ｌ−Ｐｈｅ
は例えば合成法で安価にＤＬ−フェニルアラニン（以下
ＤＬ−Ｐｈｅと略記する）が得られるが光学分割費用が
かかり、また発酵法での製造では副生物を除去するため
の精製費用がかかりきわめて高価な原料となっている。
もしＤＬ−Ｐｈｅがα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭの製造法に使用
可能であれば工業的に有利な製造法として期待されてい
る。
酸（以下Ｌ−Ａｓｐと略記する）とＬ−フェニルアラニ
ン（以下Ｌ−Ｐｈｅと略記する）である。Ｌ−Ａｓｐは
フマール酸とアンモニアを基質として酵素反応すると容
易に製造でき、安価に入手可能である。一方Ｌ−Ｐｈｅ
は例えば合成法で安価にＤＬ−フェニルアラニン（以下
ＤＬ−Ｐｈｅと略記する）が得られるが光学分割費用が
かかり、また発酵法での製造では副生物を除去するため
の精製費用がかかりきわめて高価な原料となっている。
もしＤＬ−Ｐｈｅがα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭの製造法に使用
可能であれば工業的に有利な製造法として期待されてい
る。
【０００５】このためＬ−ＡｓｐとＤＬ−Ｐｈｅを原料
とした製造法もすでに知られている。例えばＮ−保護−
Ｌ−ＡｓｐとＤＬ−Ｐｈｅを常法で縮合しＮ−保護−α
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（以下Ｎ−
保護−α−Ｌ−Ｌ−ＡＰと略記する。）とＮ−保護−α
−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−フェニルアラニン（以下Ｎ−
保護−α−Ｌ−Ｄ−ＡＰと略記する）を得た後Ｎ−保護
−α−Ｌ−Ｌ−ＡＰを晶析で分離（特開昭６３−４４５
９４）し、続いてＮ−保護基を脱離し常法でα−Ｌ−Ｌ
−ＡＰＭに導びく方法がある。この製造法はＮ−保護−
α−Ｌ−Ｌ−ＡＰとＮ−保護−α−Ｌ−Ｄ−ＡＰの溶解
度差を利用するため高収率にＮ−保護−α−Ｌ−Ｌ−Ａ
Ｐを取得できないという致命的な欠点を有している。
とした製造法もすでに知られている。例えばＮ−保護−
Ｌ−ＡｓｐとＤＬ−Ｐｈｅを常法で縮合しＮ−保護−α
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（以下Ｎ−
保護−α−Ｌ−Ｌ−ＡＰと略記する。）とＮ−保護−α
−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−フェニルアラニン（以下Ｎ−
保護−α−Ｌ−Ｄ−ＡＰと略記する）を得た後Ｎ−保護
−α−Ｌ−Ｌ−ＡＰを晶析で分離（特開昭６３−４４５
９４）し、続いてＮ−保護基を脱離し常法でα−Ｌ−Ｌ
−ＡＰＭに導びく方法がある。この製造法はＮ−保護−
α−Ｌ−Ｌ−ＡＰとＮ−保護−α−Ｌ−Ｄ−ＡＰの溶解
度差を利用するため高収率にＮ−保護−α−Ｌ−Ｌ−Ａ
Ｐを取得できないという致命的な欠点を有している。
【０００６】言うまでもなくＮ−保護−α−Ｌ−Ｌ−Ａ
ＰとＮ−保護−α−Ｌ−Ｄ−ＡＰの混合液から最初に保
護基を離脱しα−Ｌ−Ｌ−ＡＰとα−Ｌ−Ｄ−ＡＰとし
た後α−Ｌ−Ｌ−ＡＰを公知の溶解、冷却晶析したとし
ても上述のＮ−保護−ＡＰと同様の欠点を有している。
すなわちＤＬ−Ｐｈｅを用い、α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭを製
造する上で不要な異性体を前もって除く必要があり、収
率が低く、晶析分離操作が煩雑という工業的な問題を抱
えている。
ＰとＮ−保護−α−Ｌ−Ｄ−ＡＰの混合液から最初に保
護基を離脱しα−Ｌ−Ｌ−ＡＰとα−Ｌ−Ｄ−ＡＰとし
た後α−Ｌ−Ｌ−ＡＰを公知の溶解、冷却晶析したとし
ても上述のＮ−保護−ＡＰと同様の欠点を有している。
すなわちＤＬ−Ｐｈｅを用い、α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭを製
造する上で不要な異性体を前もって除く必要があり、収
率が低く、晶析分離操作が煩雑という工業的な問題を抱
えている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、α−Ｌ−Ｌ
−ＡＰＭの製造に際しＤＬ−Ｐｈｅ及びＤ−フェニルア
ラニン（以下Ｄ−Ｐｈｅと略記する）を含むＬ−Ｐｈｅ
を原料として用いた場合におけるＬ−Ｄ−ＡＰ（又はそ
のメチルエステル誘導体）の副生による目的物質α−Ｌ
−Ｌ−ＡＰＭの収率低下を回避し、Ｎ−保護又は無保護
−Ｌ−Ｄ−ＡＰ（又はそのメチルエステル誘導体）を含
む反応混合液から直接α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩を
選択的にかつ高収率で析出させ、α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭを
製造する方法を提供するものである。
−ＡＰＭの製造に際しＤＬ−Ｐｈｅ及びＤ−フェニルア
ラニン（以下Ｄ−Ｐｈｅと略記する）を含むＬ−Ｐｈｅ
を原料として用いた場合におけるＬ−Ｄ−ＡＰ（又はそ
のメチルエステル誘導体）の副生による目的物質α−Ｌ
−Ｌ−ＡＰＭの収率低下を回避し、Ｎ−保護又は無保護
−Ｌ−Ｄ−ＡＰ（又はそのメチルエステル誘導体）を含
む反応混合液から直接α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩を
選択的にかつ高収率で析出させ、α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭを
製造する方法を提供するものである。
【０００８】
【課題を解決する手段】本発明者らはかかる課題を解決
すべく鋭意検討した結果Ｌ−Ｌ−ＡＰ及びそのメチルエ
ステル誘導体（Ｎ保護基が導入されたものを含む）とＬ
−Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体（Ｎ保護基が
導入されたものを含む）を塩酸−メタノール水溶液中撹
拌又は無撹拌下で放置すればα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣ
ｌ塩が選択的に析出し、高収率でα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭが
製造できることを見い出し本発明を完成するにいたっ
た。
すべく鋭意検討した結果Ｌ−Ｌ−ＡＰ及びそのメチルエ
ステル誘導体（Ｎ保護基が導入されたものを含む）とＬ
−Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体（Ｎ保護基が
導入されたものを含む）を塩酸−メタノール水溶液中撹
拌又は無撹拌下で放置すればα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣ
ｌ塩が選択的に析出し、高収率でα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭが
製造できることを見い出し本発明を完成するにいたっ
た。
【０００９】おどろくべきことに本発明においてＬ−Ｄ
−ＡＰ、そのメチルエステル誘導体及びその塩酸塩の析
出はなく、この異性体が多量に含有されてもα−Ｌ−Ｌ
−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩の晶析阻害がない。この新発見によ
り、前もって不要の異性体を除去する必要はなくなっ
た。
−ＡＰ、そのメチルエステル誘導体及びその塩酸塩の析
出はなく、この異性体が多量に含有されてもα−Ｌ−Ｌ
−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩の晶析阻害がない。この新発見によ
り、前もって不要の異性体を除去する必要はなくなっ
た。
【００１０】α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩は水溶液中
炭酸ナトリウムで中和する等公知の方法でα−Ｌ−Ｌ−
ＡＰＭにできる。又α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩を晶
析した母液から公知の方法でフェニルアラニンを回収し
必要に応じてラセミ化後再使用できる。
炭酸ナトリウムで中和する等公知の方法でα−Ｌ−Ｌ−
ＡＰＭにできる。又α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩を晶
析した母液から公知の方法でフェニルアラニンを回収し
必要に応じてラセミ化後再使用できる。
【００１１】このようにＤＬ−Ｐｈｅ及びＤ−Ｐｈｅを
含むＬ−Ｐｈｅを原料としてその全量をα−Ｌ−Ｌ−Ａ
ＰＭに導びくことができる。
含むＬ−Ｐｈｅを原料としてその全量をα−Ｌ−Ｌ−Ａ
ＰＭに導びくことができる。
【００１２】本発明に使用するＮ−保護−ＡＰ，ＡＰ又
はそのメチルエステル誘導体は公知のα−Ｌ−Ｌ−ＡＰ
Ｍ製造法によって得ることができる。ここで述べるＮ−
保護基はホルミル基、１−アルキル−２−アシル−ビニ
ル基のような本発明の酸性条件下で脱離するものであれ
ばよい。
はそのメチルエステル誘導体は公知のα−Ｌ−Ｌ−ＡＰ
Ｍ製造法によって得ることができる。ここで述べるＮ−
保護基はホルミル基、１−アルキル−２−アシル−ビニ
ル基のような本発明の酸性条件下で脱離するものであれ
ばよい。
【００１３】本発明の詳細な条件について説明する。Ｎ
−保護−α−Ｌ−Ｌ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導
体、又はその保護基を脱離したα−Ｌ−Ｌ−ＡＰ及びそ
のメチルエステル誘導体の濃度は晶析液中０．１〜２．
５Ｍ／ｌであればよい。０．１Ｍ／ｌ以下ではα−Ｌ−
Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩の晶析率が低く、一般に０．５Ｍ
／ｌ以上では液の粘性が高まる傾向にある。実用上は
０．２〜２Ｍ／ｌが好ましい。晶析液中α又はβ−Ｌ−
Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体の濃度は特に限
定せずとも原料から由来する量で支障ない。
−保護−α−Ｌ−Ｌ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導
体、又はその保護基を脱離したα−Ｌ−Ｌ−ＡＰ及びそ
のメチルエステル誘導体の濃度は晶析液中０．１〜２．
５Ｍ／ｌであればよい。０．１Ｍ／ｌ以下ではα−Ｌ−
Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩の晶析率が低く、一般に０．５Ｍ
／ｌ以上では液の粘性が高まる傾向にある。実用上は
０．２〜２Ｍ／ｌが好ましい。晶析液中α又はβ−Ｌ−
Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体の濃度は特に限
定せずとも原料から由来する量で支障ない。
【００１４】酸の種類は塩酸であり、ガス状の塩化水素
を用いてもよい。酸の濃度は晶析液中０．５〜６Ｍ／ｌ
であればよい。０．５Ｍ／ｌ以下ではα−Ｌ−Ｌ−ＡＰ
Ｍ・ＨＣｌ塩の析出速度がおそく、６Ｍ／ｌ以上ではペ
プチドの解裂があるので好ましくない。実用上は１〜５
Ｍ／ｌが好ましい。
を用いてもよい。酸の濃度は晶析液中０．５〜６Ｍ／ｌ
であればよい。０．５Ｍ／ｌ以下ではα−Ｌ−Ｌ−ＡＰ
Ｍ・ＨＣｌ塩の析出速度がおそく、６Ｍ／ｌ以上ではペ
プチドの解裂があるので好ましくない。実用上は１〜５
Ｍ／ｌが好ましい。
【００１５】メタノール濃度は２．５Ｍ／ｌ以下であれ
ばよい。２．５Ｍ／ｌ以上ではα−Ｌ−Ｌ−ＡＰのジメ
チルエステルの生成量が増すので好ましくない。実用上
は２Ｍ／ｌ以下が好ましい。
ばよい。２．５Ｍ／ｌ以上ではα−Ｌ−Ｌ−ＡＰのジメ
チルエステルの生成量が増すので好ましくない。実用上
は２Ｍ／ｌ以下が好ましい。
【００１６】晶析温度は−５〜６０℃であればよい。−
５℃以下ではα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩の析出速度
がおそく、６０℃以上ではペプチドの解裂があるので好
ましくない。実用上は５〜４５℃が好ましい。
５℃以下ではα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩の析出速度
がおそく、６０℃以上ではペプチドの解裂があるので好
ましくない。実用上は５〜４５℃が好ましい。
【００１７】晶析時間はＮ−保護基の種類やα−Ｌ−Ｌ
−ＡＰのメチルエステル誘導体の含量によって異なるが
通常は１５日間以下である。実用的には、１０日間以下
が普通である。
−ＡＰのメチルエステル誘導体の含量によって異なるが
通常は１５日間以下である。実用的には、１０日間以下
が普通である。
【００１８】当然ながら、ＤＬ−Ｐｈｅは必ずしもＤ体
とＬ体が１対１である必要がない。Ｄ体を含むフェニル
アラニンを示すものである。このＤＬ−Ｐｈｅを用い公
知法で生成したＮ−保護−ＡＰ及びそのメチルエステル
誘導体又はＡＰ及びそのメチルエステル誘導体が本発明
の出発原料となる。出発原料中ＰｈｅのＤ体が０．５％
〜７０％の範囲であればよい。
とＬ体が１対１である必要がない。Ｄ体を含むフェニル
アラニンを示すものである。このＤＬ−Ｐｈｅを用い公
知法で生成したＮ−保護−ＡＰ及びそのメチルエステル
誘導体又はＡＰ及びそのメチルエステル誘導体が本発明
の出発原料となる。出発原料中ＰｈｅのＤ体が０．５％
〜７０％の範囲であればよい。
【００１９】
【発明の効果】以上のように従来アスパルチル−フェニ
ルアラニンのフェニルアラニン部分がＤ体である化合物
はα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ晶析前に分離する必要があった
が、本発明によれば分離は必要ない。しかも高収率で、
エネルギーの使用量を大巾に削減し、さらに安価にα−
Ｌ−Ｌ−ＡＰＭを工業的に製造できる。
ルアラニンのフェニルアラニン部分がＤ体である化合物
はα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ晶析前に分離する必要があった
が、本発明によれば分離は必要ない。しかも高収率で、
エネルギーの使用量を大巾に削減し、さらに安価にα−
Ｌ−Ｌ−ＡＰＭを工業的に製造できる。
【００２０】以下実施例により本発明をさらに詳細に説
明する。尚、実施例中の高速液体クロマトグラフィー
（ＨＰＬＣと略記する。）の分析条件は次の通りであ
る。 カラム：Ｃｒｏｗｎ Ｐａｋ ＣＲ（＋）４ｍｍφ×１
５０ｍｍ 移動相：１０％メタノール水溶液（ｐＨ２．０に過塩素
酸で調整） 流量：０．７ｍｌ／ｍｉｎ 温度：室温 検出波長：２１０ｎｍ
明する。尚、実施例中の高速液体クロマトグラフィー
（ＨＰＬＣと略記する。）の分析条件は次の通りであ
る。 カラム：Ｃｒｏｗｎ Ｐａｋ ＣＲ（＋）４ｍｍφ×１
５０ｍｍ 移動相：１０％メタノール水溶液（ｐＨ２．０に過塩素
酸で調整） 流量：０．７ｍｌ／ｍｉｎ 温度：室温 検出波長：２１０ｎｍ
【００２１】
実施例１ α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ１０．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）にα−
Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ１０．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）、３５％塩
酸２３ｍｌ（２６０ｍｍｏｌ）、メタノール０．５ｍｌ
（１２ｍｍｏｌ）、水２５ｍｌを加え２０℃で１日間撹
拌し、続いて１０℃で５時間撹拌した。
Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ１０．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）、３５％塩
酸２３ｍｌ（２６０ｍｍｏｌ）、メタノール０．５ｍｌ
（１２ｍｍｏｌ）、水２５ｍｌを加え２０℃で１日間撹
拌し、続いて１０℃で５時間撹拌した。
【００２２】析出した結晶を吸引濾過分離し、２規定塩
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．１ｇを得た。ＨＰＬＣ分析した結果α−Ｌ−
Ｌ−ＡＰＭ（収率８０％）であり、α−Ｌ−Ｄ−ＡＰ及
びそのメチルエステル誘導体は検出されなかった。
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．１ｇを得た。ＨＰＬＣ分析した結果α−Ｌ−
Ｌ−ＡＰＭ（収率８０％）であり、α−Ｌ−Ｄ−ＡＰ及
びそのメチルエステル誘導体は検出されなかった。
【００２３】実施例２ α−Ｌ−Ｌ−ＡＰ９．５ｇ（３４ｍｍｏｌ）にα−Ｌ−
Ｄ−ＡＰジメチルエステル５．２ｇ（１７ｍｍｏｌ）、
３５％ＨＣｌ １７ｍｌ（１９２ｍｍｏｌ）、メタノー
ル２．６ｍｌ（６４ｍｍｏｌ）、水２５ｍｌを加え２０
℃で１日間撹拌し、続いて１０℃で３時間撹拌した。
Ｄ−ＡＰジメチルエステル５．２ｇ（１７ｍｍｏｌ）、
３５％ＨＣｌ １７ｍｌ（１９２ｍｍｏｌ）、メタノー
ル２．６ｍｌ（６４ｍｍｏｌ）、水２５ｍｌを加え２０
℃で１日間撹拌し、続いて１０℃で３時間撹拌した。
【００２４】析出した結晶を吸引濾過分離し、２規定塩
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．２ｇを得た。この結晶は、ＨＰＬＣ分析した
結果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８２％）であり、α−Ｌ
−Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されな
かった。
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．２ｇを得た。この結晶は、ＨＰＬＣ分析した
結果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８２％）であり、α−Ｌ
−Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されな
かった。
【００２５】実施例３ α−Ｌ−Ｌ−ＡＰのアスパラギン酸のカルボキシル残基
がメチルスエステル化されたもの１０．０ｇ（３４ｍｍ
ｏｌ）にα−Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、
３５％塩酸２７ｍｌ（３０６ｍｍｏｌ）、メタノール
１．０ｍｌ（２５ｍｍｏｌ）、水２５ｍｌを加え２０℃
で１日間撹拌し、続いて５℃で４時間撹拌した。
がメチルスエステル化されたもの１０．０ｇ（３４ｍｍ
ｏｌ）にα−Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、
３５％塩酸２７ｍｌ（３０６ｍｍｏｌ）、メタノール
１．０ｍｌ（２５ｍｍｏｌ）、水２５ｍｌを加え２０℃
で１日間撹拌し、続いて５℃で４時間撹拌した。
【００２６】析出した結晶を吸引濾過分離し、２規定塩
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．５ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結
果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８４％）であり、α−Ｌ−
Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなか
った。
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．５ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結
果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８４％）であり、α−Ｌ−
Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなか
った。
【００２７】実施例４ α−Ｌ−Ｌ−ＡＰ９．５ｇ（３４ｍｍｏｌ）にα−Ｌ−
Ｄ−ＡＰＭ１０．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｌ−
ＡＰ１．９ｇ（７ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｄ−ＡＰ１．９
ｇ（７ｍｍｏｌ）、３５％塩酸３２ｍｌ（３６２ｍｍｏ
ｌ）、メタノール４．９ｍｌ（１２１ｍｍｏｌ）、水３
５ｍｌを加え２０℃で２日間撹拌し、続いて１０℃で２
日間撹拌した。
Ｄ−ＡＰＭ１０．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｌ−
ＡＰ１．９ｇ（７ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｄ−ＡＰ１．９
ｇ（７ｍｍｏｌ）、３５％塩酸３２ｍｌ（３６２ｍｍｏ
ｌ）、メタノール４．９ｍｌ（１２１ｍｍｏｌ）、水３
５ｍｌを加え２０℃で２日間撹拌し、続いて１０℃で２
日間撹拌した。
【００２８】析出した結晶を吸引濾過分離し、２規定塩
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．２ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結
果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８１％）であり、Ｌ−Ｄ−
ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなかっ
た。
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．２ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結
果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８１％）であり、Ｌ−Ｄ−
ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなかっ
た。
【００２９】実施例５ α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ１０．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）にα−
Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｄ−
ＡＰＭ２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ
２．０ｇ（７ｍｍｏｌ）、ＤＬ−Ｐｈｅ０．１ｇ（１ｍ
ｍｏｌ）、３５％塩酸２５ｍｌ（２８３ｍｍｏｌ）、メ
タノール４．９ｍｌ（１２１ｍｍｏｌ）、水３５ｍｌを
加え２０℃で３日間撹拌し続いて５℃で１日撹拌した。
Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｄ−
ＡＰＭ２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ
２．０ｇ（７ｍｍｏｌ）、ＤＬ−Ｐｈｅ０．１ｇ（１ｍ
ｍｏｌ）、３５％塩酸２５ｍｌ（２８３ｍｍｏｌ）、メ
タノール４．９ｍｌ（１２１ｍｍｏｌ）、水３５ｍｌを
加え２０℃で３日間撹拌し続いて５℃で１日撹拌した。
【００３０】析出した結晶を吸引濾過分離し、２規定塩
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物を１１．２ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した
結果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８１％）であり、Ｌ−Ｄ
−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなかっ
た。
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物を１１．２ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した
結果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８１％）であり、Ｌ−Ｄ
−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなかっ
た。
【００３１】実施例６ アスパラギン酸のアミノ基がフォルミル化されたα−Ｌ
−Ｌ−ＡＰＭ１１．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）にアスパラギ
ン酸のアミノ基がフォルミル化されたα−Ｌ−Ｄ−ＡＰ
Ｍ１１．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ
２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ２．５ｇ
（８ｍｍｏｌ）、３５％塩酸２８ｍｌ（３１７ｍｍｏ
ｌ）、メタノール５．３ｍｌ（１３１ｍｍｏｌ）、水３
５ｍｌを加え２０℃で５日間撹拌し、続いて５℃で１０
時間撹拌した。
−Ｌ−ＡＰＭ１１．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）にアスパラギ
ン酸のアミノ基がフォルミル化されたα−Ｌ−Ｄ−ＡＰ
Ｍ１１．０ｇ（３４ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｄ−ＡＰＭ
２．５ｇ（８ｍｍｏｌ）、β−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ２．５ｇ
（８ｍｍｏｌ）、３５％塩酸２８ｍｌ（３１７ｍｍｏ
ｌ）、メタノール５．３ｍｌ（１３１ｍｍｏｌ）、水３
５ｍｌを加え２０℃で５日間撹拌し、続いて５℃で１０
時間撹拌した。
【００３２】析出した結晶を吸引濾過分離し、２規定塩
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．３ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結
果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８２％）でありＬ−Ｄ−Ａ
Ｐ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなかった。
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物１１．３ｇを得た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結
果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ（収率８２％）でありＬ−Ｄ−Ａ
Ｐ及びそのメチルエステル誘導体は検出されなかった。
【００３３】実施例７ ＤＬ−Ｐｈｅ６．６ｇ（４０ｍｍｏｌ）を硫酸存在下で
メタノールを加え加熱反応させた後トルエンで抽出して
ＤＬ−Ｐｈｅメチルエステルトルエン抽出液とした。本
溶液をＮ−フォルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水物５．
８ｇ（４１ｍｍｏｌ）と酢酸存在下で縮合させた。本溶
液を常法により後処理脱保護し溶液中の塩酸濃度が４規
定、メタノール濃度が１．５Ｍ／ｌとなるようにそれぞ
れを加え、２０℃で５日間、続いて１０℃で１日間晶析
した。
メタノールを加え加熱反応させた後トルエンで抽出して
ＤＬ−Ｐｈｅメチルエステルトルエン抽出液とした。本
溶液をＮ−フォルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水物５．
８ｇ（４１ｍｍｏｌ）と酢酸存在下で縮合させた。本溶
液を常法により後処理脱保護し溶液中の塩酸濃度が４規
定、メタノール濃度が１．５Ｍ／ｌとなるようにそれぞ
れを加え、２０℃で５日間、続いて１０℃で１日間晶析
した。
【００３４】析出した結晶を吸引濾過分離し、２規定塩
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物を５．８ｇ（Ｌ−Ｐｈｅに対して収率７１％）を得
た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰ
ＭでありＬ−Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は
検出されなかった。
酸で洗い乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣｌ塩２水
和物を５．８ｇ（Ｌ−Ｐｈｅに対して収率７１％）を得
た。この結晶はＨＰＬＣ分析した結果α−Ｌ−Ｌ−ＡＰ
ＭでありＬ−Ｄ−ＡＰ及びそのメチルエステル誘導体は
検出されなかった。
【００３５】さらに取得したα−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ・ＨＣ
ｌ塩に水９０ｍｌを加え、１５％Ｎａ2 ＣＯ3 水溶液で
ｐＨ４．８に調整後５０℃で加熱溶解し、５℃で１日間
放置した。析出した結晶を吸引濾過分離し、冷水で洗浄
後乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ２．９ｇ（Ｌ−Ｐｈｅ
に対して収率４８％）を得た。ＨＰＬＣ分析した結果α
−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭであり、Ｌ−Ｄ−ＡＰ及びそのメチル
エステル誘導体は検出されなかった。またこのα−Ｌ−
Ｌ−ＡＰＭは良好な甘味を有した。
ｌ塩に水９０ｍｌを加え、１５％Ｎａ2 ＣＯ3 水溶液で
ｐＨ４．８に調整後５０℃で加熱溶解し、５℃で１日間
放置した。析出した結晶を吸引濾過分離し、冷水で洗浄
後乾燥した。α−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭ２．９ｇ（Ｌ−Ｐｈｅ
に対して収率４８％）を得た。ＨＰＬＣ分析した結果α
−Ｌ−Ｌ−ＡＰＭであり、Ｌ−Ｄ−ＡＰ及びそのメチル
エステル誘導体は検出されなかった。またこのα−Ｌ−
Ｌ−ＡＰＭは良好な甘味を有した。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07K 5/075 C07K 1/14 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (2)
- 【請求項１】 Ｎ−保護又は無保護−Ｌ−アスパルチル
−Ｌ−フェニルアラニン及び／又はそのメチルエステル
誘導体とＮ−保護又は無保護−Ｌ−アスパルチル−Ｄ−
フェニルアラニン及び／又はそのメチルエステル誘導体
とを塩酸及びメタノールを含む水溶液中に撹拌又は無撹
拌下で放置しα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラ
ニンメチルエステル塩酸塩を析出させることを特徴とす
るα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチル
エステル塩酸塩の製造方法。 - 【請求項２】 Ｎ−保護基がホルミル又は１−アルキル
−２−アシル−ビニル基である請求項１記載の製造方
法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18083792A JP3178092B2 (ja) | 1992-06-29 | 1992-07-08 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造方法 |
| US08/079,552 US5371269A (en) | 1992-06-29 | 1993-06-22 | Method for production of α-L-aspartyl-L phenylalanine methyl ester hydrochloride |
| EP93110382A EP0581032B1 (en) | 1992-06-29 | 1993-06-29 | Method for production of alpha-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester hydrochloride |
| DE69311453T DE69311453T2 (de) | 1992-06-29 | 1993-06-29 | Verfahren zur Herstellung von Alpha-L-Aspartyl-L-Phenylalaninmethylesterhydrochlorid |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17065492 | 1992-06-29 | ||
| JP4-170654 | 1992-06-29 | ||
| JP18083792A JP3178092B2 (ja) | 1992-06-29 | 1992-07-08 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0673091A JPH0673091A (ja) | 1994-03-15 |
| JP3178092B2 true JP3178092B2 (ja) | 2001-06-18 |
Family
ID=26493584
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18083792A Expired - Fee Related JP3178092B2 (ja) | 1992-06-29 | 1992-07-08 | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5371269A (ja) |
| EP (1) | EP0581032B1 (ja) |
| JP (1) | JP3178092B2 (ja) |
| DE (1) | DE69311453T2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6657073B1 (en) | 1999-08-18 | 2003-12-02 | Daesang Corporation | Crystallization of α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58185545A (ja) * | 1982-04-22 | 1983-10-29 | Ajinomoto Co Inc | α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステルまたはその塩酸塩の製法 |
| JPS6344594A (ja) * | 1986-08-11 | 1988-02-25 | Ajinomoto Co Inc | Ｎ−保護−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フエニルアラニンの分離方法 |
-
1992
- 1992-07-08 JP JP18083792A patent/JP3178092B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1993
- 1993-06-22 US US08/079,552 patent/US5371269A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-06-29 DE DE69311453T patent/DE69311453T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-06-29 EP EP93110382A patent/EP0581032B1/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0581032A1 (en) | 1994-02-02 |
| EP0581032B1 (en) | 1997-06-11 |
| JPH0673091A (ja) | 1994-03-15 |
| DE69311453T2 (de) | 1998-02-05 |
| US5371269A (en) | 1994-12-06 |
| DE69311453D1 (de) | 1997-07-17 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |