JPH04346996A - α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はＮ−ホルミル−α−Ｌ−
アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（
Ｆ−α−ＡＰＭと略）を含む有機溶剤の合成反応液（そ
れが溶解していても、懸濁状態でもよい。）に水を加え
て加温後抽出、分層し、分層した水層内に溶解している
Ｎ−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルア
ラニンメチルエステルを脱ホルミル化し、生成したα−
Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステ
ル（α−ＡＰＭと略）を塩酸塩として析出させ、単離す
る事を特徴とするα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニル
アラニンメチルエステル塩酸塩（α−ＡＰＭ・ＨＣｌと
略）の製造方法に関するものである。

【０００２】α−ＡＰＭは、しょ糖の約２００倍の甘味
を呈するペプチド系甘味料であり、その良質な甘味と低
カロリーであることによって近年ダイエット甘味料とし
て重用され、その需要は１９９５年までに１万トンを越
えるであろうと予測されている。

【０００３】

【従来の技術】α−ＡＰＭ・ＨＣｌの製法としては、Ｎ
−保護−Ｌ−アスパラギン酸無水物とＬ−フェニルアラ
ニンメチルエステル（Ｌ−ＰｈｅＯＭｅまたはＰＭと略
）を縮合させて生成するＮ−保護−α−Ｌ−アスパルチ
ル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルを脱保護して
ハロゲン化水素塩として得る方法や、Ｎ−保護−Ｌ−ア
スパラギン酸無水物とＬ−フェニルアラニン（Ｌ−Ｐｈ
ｅと略）を縮合させ生成するＮ−保護−α−Ｌ−アスパ
ルチル−Ｌ−フェニルアラニンを脱保護反応後メチルエ
ステル化し、ハロゲン化水素塩として得る方法が代表的
なものである。

【０００４】前者の例としては、米国特許Ｎｏ．３７８
６０３９にあるように、有機溶剤中で縮合し、生成する
Ｆ−α−ＡＰＭを有機溶剤をエバポレートした後、固体
としてＦ−α−ＡＰＭ、またはそのＰＭ塩を単離後、脱
保護しα−ＡＰＭ・ＨＣｌを得る方法が知られている。

【０００５】しかしこの方法では、Ｆ−α−ＡＰＭを一
度分離する必要があり、その分離工程の煩雑さを考えた
場合工業的製法とはいい難い。

【０００６】また後者の例としては米国特許Ｎｏ．３９
３３７８１にあるように氷酢酸中でＮ−ホルミル−Ｌ−
アスパラギン酸無水物とＬ−ＰｈｅからＮ−ホルミル−
α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（Ｆ−α
−ＡＰと略）を生成させ、ホルミル基を除去した後α−
Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニン（α−ＡＰと
略）を分離し、これをエステル化してα−ＡＰＭ・ＨＣ
ｌを得る方法が開示されている。

【０００７】また米国特許Ｎｏ．４１７３５６２ではＦ
−α−ＡＰまたはα−ＡＰを用いて、塩酸とメタノール
でエステル化しα−ＡＰＭ・ＨＣｌを得る方法が開示さ
れている。

【０００８】しかしこれらはいずれもＦ−α−ＡＰまた
はα−ＡＰを分離する必要があり、分離の煩雑さを考え
た場合これらも工業的に適した方法とは言えない。

【０００９】また特開昭６１−１４３３９７に開示され
ているように、水中でＮ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン
酸無水物とＬ−Ｐｈｅを縮合してＦ−α−ＡＰを製造す
る方法においてもα−ＡＰＭ・ＨＣｌを得るためには、
Ｆ−α−ＡＰを分離後、脱保護、エステル化を行う必要
があり、やはり工業的に行うには欠点がある。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】解決しようとする課題
はＮ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水物とＰＭの反
応液から途中で中間体を固液分離することなく、α−Ａ
ＰＭ・ＨＣｌを工業的に簡便に得る方法を提供すること
にある。

【００１１】

【課題を解決するための手段】本発明の目的はこのよう
な従来技術の欠点、すなわちα−ＡＰＭ・ＨＣｌを得る
ために途中で中間体を固液分離しなければならず、その
ために工業的にこれを行おうとすると分離設備と煩雑な
工程操作が必要である。

【００１２】この欠点を解決する為に鋭意検討した結果
、驚くべき事にＮ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸無水
物とＰＭの有機溶媒の反応液から、Ｆ−α−ＡＰＭが４
０°Ｃから８０°Ｃの温水で抽出できる事を発見し、し
かもこの水溶液に塩酸とメタノールを加えて脱保護反応
しさらに晶析することによりα−ＡＰＭ・ＨＣｌが直接
得られる事を見いだし、本発明を完成した。

【００１３】さらに詳しく述べるとＮ−ホルミル−Ｌ−
アスパラギン酸無水物とＰＭの縮合反応は、例えば米国
特許Ｎｏ．３７８６０３９，Ｎｏ．４６８０４０３にあ
るように有機溶媒中で行われるが、その有機溶剤の種類
としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド，酢酸または
エチレンジクロライド、ジクロルメタン、クロロホルム
などのハロゲン化炭化水素，酢酸メチル、酢酸エチルな
どの酢酸エステル類，トルエン、キシレンなどの炭化水
素及びその混合溶剤が用いられる。

【００１４】原料のＮ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸
無水物は例えば米国特許Ｎｏ．４５５０１８０に開示さ
れるような方法で有利に工業的に製造する事ができる。

【００１５】また一方の原料であるＰＭは例えば米国特
許Ｎｏ．４６８０４０３の方法のようにＬ−Ｐｈｅを硫
酸とメタノールによりエステル化した後、有機溶剤中に
抽出、脱メタノールすることにより、ＰＭの有機溶媒溶
液として工業的に製造することができる。

【００１６】反応はＮ−ホルミル−Ｌ−アスパラギン酸
無水物を有機溶剤に溶解あるいは懸濁させてＰＭの有機
溶剤溶液を添加することにより行う。反応温度は０°Ｃ
から５０°Ｃ好ましくは５°Ｃから３０°Ｃである。

【００１７】反応時間はとくに制限はないが、実用的な
面からＰＭの添加に２時間以内その後の反応の熟成に３
時間から１０時間取れば充分である。

【００１８】使用する有機溶剤としては、先に述べた物
の中から適当に選択することができるが特にＮ−ホルミ
ル−Ｌ−アスパラギン酸無水物を溶解するのに酢酸、Ｐ
Ｍを溶解する溶剤にトルエンを使用するのが好適である
。

【００１９】その濃度は実用的な面から無水物の場合０
．１から１．５ＭＯＬ／Ｌ、好ましくは０．５から１．
１ＭＯＬ／Ｌである。ＰＭに関しては０．１から１．２
ＭＯＬ／Ｌ、好ましくは０．５から０．８ＭＯＬ／Ｌで
ある。また縮合反応液のＦ−α−ＡＰＭの濃度は０．１
から０．９ＭＯＬ／Ｌ、好ましくは０．３から０．６Ｍ
ＯＬ／Ｌである。

【００２０】反応中に生成したＦ−α−ＡＰＭがその濃
度によっては析出し、懸濁状態になることもあるが、そ
の後の操作には影響しない。

【００２１】この反応液に温水または水を加えて加温し
、４０°Ｃから８０°Ｃで攪拌後分層させることにより
目的物であるＦ−α−ＡＰＭを水層中に抽出することが
できる。加える水の量としては分層、抽出することがで
きれば特に制限はないが、実用的な面からＦ−α−ＡＰ
Ｍの３０ＷＴ％から４００ＷＴ％の範囲で充分である。

【００２２】また酢酸、トルエン系で反応を行った場合
は抽出前に反応液中の酢酸を、トルエンを差し液しなが
ら濃縮し除去することにより一層効果的にＦ−α−ＡＰ
Ｍを水層に抽出することができる。

【００２３】差し液濃縮により酢酸を除く条件はＰＭが
溶解している有機溶媒によって異なるが、通常真空度は
１０から７６０Ｔｏｒｒの範囲で、温度は９０°Ｃ以下
で実施される。しかし高温下での濃縮操作はＦ−α−Ａ
ＰＭの分解を促進するので、温度が６０°Ｃ以下の範囲
で実施するのが望ましい。

【００２４】このようにして得られたＦ−α−ＡＰＭの
水溶液は例えば、米国特許Ｎｏ．４６８４７４５に開示
されているような方法でメタノールと塩酸により脱保護
した後、晶析を行うことによりα−ＡＰＭ・ＨＣｌを単
離することができる。

【００２５】また通常縮合反応液にはＮ−ホルミル−β
−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエス
テル（Ｆ−β−ＡＰＭと略）が目的物であるＦ−α−Ａ
ＰＭの５ＷＴ％から３５ＷＴ％存在しているが、この場
合もまったく同様に抽出操作を行うことができ、α−Ａ
ＰＭ・ＨＣｌを単離することができ、β−体は次工程た
るＡＰＭＨＣｌ晶析工程でα体と分離することが可能な
ので、支障なくα−ＡＰＭＨＣｌを単離することができ
る。

【００２６】

【発明の効果】本発明の方法によればＦ−α−ＡＰＭの
合成反応液（ただしＦ−β−ＡＰＭを不純物として含ん
でいてもよい。）から途中で中間体を固液分離すること
なしに、α−ＡＰＭ・ＨＣｌまで連続して製造すること
ができる。

【００２７】そのため固液分離のための設備がまったく
必要でなく、煩雑な操作も省略でき工業的にきわめて有
利な方法である。

【００２８】

【実施例】以下、実施例により本発明を詳細に説明する
。

【００２９】

【実施例１】Ｆ−α−ＡＰＭ２０ｇを含む酢酸２５ｇと
トルエン１００ｇの混合溶媒に水５０ｇを加え６０°Ｃ
に加温した。１５分攪拌した後３０分間静置し、分層さ
せた後水層を分離した。

【００３０】この水層に３５％塩酸１０ｍｌとメタノー
ル１０ｍｌを加え、６０°Ｃで２０分加熱し脱ホルミル
反応し、冷却後さらに３５％塩酸２５ｍｌを加えて２０
°Ｃで２日間攪拌晶析した後、更に５°Ｃで３時間攪拌
した。析出した結晶を分離したところ粗ｗｅｔα−ＡＰ
ＭＨＣｌ結晶１２．２ｇが得られた。

【００３１】アミノ酸アナライザーと高速液体クロマト
グラフィーでの分析の結果、この中にはα−ＡＰＭ８．
０ｇ，α−ＡＰＭ２０．３ｇ，α−ＡＰ０．５２ｇが含
まれていた。（α−ＡＰＭ塩酸塩収率４４％／対Ｆ−α
−ＡＰＭ）

【００３２】

【実施例２】Ｆ−α−ＡＰＭ２０ｇとＦ−β−ＡＰＭ４
．３ｇを含む酢酸２５ｇとトルエン１００ｇの混合溶剤
に水５０ｇを加え５０°Ｃに加温した。１５分攪拌した
後３０分間静置し、分層させた後水層を分離した。

【００３３】この水層に３５％塩酸１０ｍｌとメタノー
ル１０ｍｌを加え、６０。Ｃで２０分加熱し脱ホルミル
反応し、冷却後さらに３５％塩酸２５ｍｌを加えて２０
°Ｃで２日間攪拌晶析した後、更に５°Ｃで３時間攪拌
した。析出した結晶を分離したところ粗ｗｅｔα−ＡＰ
Ｍ・ＨＣｌ結晶１１．６ｇが得られた。

【００３４】アミノ酸アナライザーと高速液体クロマト
グラフィーでの分析の結果、この中はα−ＡＰＭ７．６
ｇ，α−ＡＰＭ２０．３５ｇ，α−ＡＰ０．４８ｇが含
まれていた。（α−ＡＰＭ塩酸塩収率４２％／対Ｆ−α
−ＡＰＭ）

【００３５】

【実施例３】Ｆ−α−ＡＰＭ２０ｇを含む酢酸２５ｇと
トルエン１００ｇの混合溶媒にトルエン３００ｍｌを差
し液しながら減圧濃縮し、酢酸をほぼ完全に留去した。 この後水２０ｇを加え６０°Ｃに加温した。１５分攪拌
した後３０分間静置し、分層させた後水層を分離した。

【００３６】この水層に３５％塩酸７ｍｌとメタノール
７ｍｌを加え、６０°Ｃで２０分加熱し脱ホルミル反応
し、冷却後さらに３５％塩酸２５ｍｌを加えて２０°Ｃ
で２日間攪拌晶析した後、更に５°Ｃで３時間攪拌した
。析出した結晶を分離したところ粗ｗｅｔα−ＡＰＭ・
ＨＣｌ結晶１４．８ｇが得られた。

【００３７】アミノ酸アナライザーと高速液体クロマト
グラフィーでの分析の結果、この中にはα−ＡＰＭ９．
５ｇ，α−ＡＰＭ２０．４２ｇ，α−ＡＰ０．５８ｇが
含まれていた。（α−ＡＰＭ塩酸塩収率５２％／対Ｆ−
α−ＡＰＭ）

【００３８】

【実施例４】Ｆ−α−ＡＰＭ４０ｇとＦ−β−ＡＰＭ８
．６ｇを含む酢酸６２ｇとトルエン２００ｇの混合溶剤
にトルエン５００ｍｌを差し液しながら減圧濃縮し酢酸
をほぼ９０％留去した。最終的に２６０ｍｌにした後、
水２５ｍｌを加え６０°Ｃに加温した。これを１５分攪
拌した後３０分間静置し、分層させた後水層を分離した
。

【００３９】この水層に３５％塩酸１４ｍｌとメタノー
ル１４ｍｌを加え実施例１と同様に脱ホルミル反応した
後に晶析を行い、粗ｗｅｔα−ＡＰＭ・ＨＣｌ結晶４７
．１ｇを得た。

【００４０】アミノ酸アナライザーと高速液体クロマト
グラフィーでの分析の結果、この中にはα−ＡＰＭ２９
．６ｇ，α−ＡＰＭ２１．０１ｇ，α−ＡＰ１．３５ｇ
が含まれていた。（α−ＡＰＭ塩酸塩収率８０％／対Ｆ
−α−ＡＰＭ）

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　有機溶媒中で合成したＮ−ホルミル−
   α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
   ステルの反応液に水を加えた後、４０°Ｃから８０°Ｃ
   で抽出、分層し、ついで分層した水層内に溶解している
   Ｎ−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルア
   ラニンメチルエステルのホルミル基を脱離し、生成した
   α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエ
   ステルを難溶性の塩酸塩として析出させて、これを単離
   する事を特徴とするα−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニ
   ルアラニンメチルエステル塩酸塩の製法
2. 【請求項２】　　Ｎ−ホルミル−α−Ｌ−アスパルチル
   −Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルを合成する有機
   溶媒がトルエン、酢酸の混合溶媒である請求項１に記載
   の方法
3. 【請求項３】　　抽出される有機層がＮ−ホルミル−α
   −Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチルエス
   テルのトルエン、酢酸の混合溶媒からトルエンを差し液
   することにより、酢酸を一部または全部除去して調整さ
   れた物である請求項１に記載の方法
4. 【請求項４】　　加える水が有機溶媒中に含まれるＮ−
   ホルミル−α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニ
   ンメチルエステルの３０ｗｔ％から４００ｗｔ％である
   請求項１〜３までのいずれか記載の方法
5. 【請求項５】　　Ｎ−ホルミル−β−Ｌ−アスパルチル
   −Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルをＮ−ホルミル
   −α−Ｌ−アスパルチル−Ｌ−フェニルアラニンメチル
   エステルの５ｗｔ％から３５ｗｔ％含む請求項１〜４ま
   でのいずれか記載の方法