JPH02191219A - イノシトールトリホスフェートを含有する骨疾患に対する医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野〕 本発明は、ヒトを含む哺乳類における骨の疾患の予防、
治療又は軽減のための、イノシトールトリホスフェート
（ｔｐ、　）の少なくとも１種類の異性体を含んで成る
医薬に関する。

〔従来の技術〕

骨は、体肢、及び器官を収容する体腔に強固な支持を与
える等、多くの必須の機能を有する。さらに、骨は移動
のために必須であり、そしてカルシウム及びリン酸等の
イオンの大きな貯蔵器である。

骨表面に起こる連続的過程が骨の一体性を維持している
。

これらの更新過程の異常が代謝性の骨疾患及び骨異常を
もたらす。

疾患はしばしば、ビタミンＤ及びその誘導体の状態、カ
ルシウム、リン、マグネシウム、アルカリ性ホスファタ
ーゼ、並びに上皮小体及び下垂体からのホルモンのレベ
ルの変化による。これらの疾患は、例えば老人において
、又は閉経後の女性について比較的高い出現率を有する
。

骨軟化症及びタル病は一般に骨の異常鉱化（ｍｉｎｅｒ
ａｌｉｚａｔｉｏｎ）の例であり、他方例えば過カルシ
ウム血症及び上皮小体機能亢進症はより特定のパラメー
ターに関連する疾患である。骨粗鬆症は、骨の縁対量が
機械的支持のために必要なレベルより少いレベルまで減
少した疾患である。骨炎の異る形、例えばパーゼット病
もまた骨疾患と関連する。

〔発明が解決しようとする課題〕

骨疾患に関連する疾患の治療の努力において種々の療法
剤が使用されるが、しかし成功には限界がある。

ビタミンＤ又はその誘導体、カルシウムの補給又はカル
シトニンによる治療がこの分野で使用される薬剤の例で
ある。骨粗Ｒ症の治療のためにはまたエストロゲンが使
用され、他方イーゼット病の治療のためには弗化物が使
用される。

上記の薬剤は種々の状態の症状を制御するのみであり疾
患の基となる因子に影響を与えない。さらに、使用され
ている薬剤の多くは深刻な副作用を与え、又は患者のた
めに不都合な他の性質を有する０例えば、エストロゲン
の使用は乳癌及び血栓症の発生率を上昇せしめる。カル
シトニンは非経口的に投与されなければならず、そして
患者の幾らかはその生物学的効果に対する耐性、及びア
レルギー反応を出現せしめる。弗化物は非常に毒性が強
（、そして胃の侵食を生じさせる。従って、この分野に
おいて、効果的で且つ安全な薬理学的化合物の顕著な必
要性が存在する。

〔課題を解決するための手段〕

本発明に従えば、驚くべきことに、イノシトールトリホ
スフェート（ＩＰｓ）の少なくとも１１１類の異性体を
用いることにより上記の課題を克服することができる。

ヨーロッパ特許Ｎａ１７９４３９から医薬活性成分とし
てイノシトールトリホスフェートの少なくとも１つの異
性体を含んで成る医薬組成物が知られている。この特許
においては、この医薬組成物の効果は異る分野、例えば
心臓血管疾患及び関節炎について示されている。

本発明は次の骨疾患と関連する：骨粗鬆症、変性（退化
）関節疾患及び骨炎、例えばペーゼット病；骨軟化症及
びタル病；カルシウム、リン又はアルカリ性ホスファタ
ーゼのレベルの異常により特徴付けられる状態、及び種
々の腺、例えば上皮小体、甲状腺及び下垂体の機能及び
代謝の変化に帰せられる状態；骨の侵食、例えば関節表
面の破壊：種々の骨膜炎及び関節症。

本発明の好ましい態様においては、骨の疾患は骨粗鬆症
、骨の侵食、骨膜炎及び骨炎に関連する。

ＩＰ３の製造及びその種々の異性体の単離は米国特許Ｎ
α４．７７７．１３４に開示されている。ＩＰ３の異性
体はまた、例えばイノシトールとリン酸源から出発して
化学的又は酵素的合成法により製造することができる。

さらにバイブリドＤＮＡ技法を含む微生物学的製造法も
適当である。

ＩＰ、の構造及びその種々の異性体が米国特許漱４．７
３５，９３６及び米国特許Ｎａ　４，７９７．３９０に
開示されている。

本発明に従って使用される医薬は単位投与型で存在する
のが好ましい、このような単位投与のためには錠剤、顆
粒又はカプセルが好ましい、さらに、胃で制御されない
加水分解を防止し、そして腸での好ましい吸収を行うた
めに錠剤及び顆粒に表面処理例えば腸溶コートを行うこ
とができる。

他の適当な投与形は徐放形及び経皮投与形である。

常用の医薬として許容される添加剤、賦形剤及び／又は
キャリヤーを医薬に含めることができる。

錠剤及び顆粒はまた、これらを腸内で容易に崩壊せしめ
る崩壊剤を含有することができる。ある場合、特に急性
状態の場合には、静脈投与用溶液の形の単位投与形を用
いるのが好ましい。

医薬はまた、添加剤、試剤又はキャリヤーをなんら含有
せずＩｈのみから成ることもできる。

所望により、医薬は他のイノシトールホスフェートすな
わちＩＰｌ、　ＩＰｌ、　ＩＰ４．ＩＰｓ及びＩＰ、を
含有しないことができる。従って、ＩＰ、異性体の混合
物が９０〜１００％、例えば９３〜１００％又は好まし
くは９５〜１００％の純度を有することができる。

あるいは、この医薬は、それぞれが実質的に純粋な形で
存在するｌ又は複数の特定のＩＰ、異性体から成るか又
はそれを含んで成ることができる。

すなわち、種々の異性体を純粋な形で単離することがで
きこのことは、これらが８０〜１００％例えば８２〜１
００％、又は８５〜１００％、好ましくは９０〜１００
％の純度を有することを意味する。言うまでもなく、異
性体を純粋な形で製造することができるからそれらを任
意の比率で混合することができる。

医薬は、ＩＰ＆、　ＩＰＳ又はＩＰ、の少な（とも１つ
とＩＰ、を生成せしめるのに適当な酵素のごとき分解性
物質とにより提供されるＩｐｘから成ることができる。

ミネラルバランスに負の影響を与えないように、本発明
の医薬の製造のために使用される１又は複数のＩＰ、異
性体が塩の形で存在するのがほとんどの場合において好
ましい、塩は好ましくはナトリウム塩、カルシウム塩、
亜鉛塩もしくはマグネシウム塩又はこれらの塩の２以上
の混合物である。

カルシウム塩もしくは亜鉛塩又はこれらの混合物が特に
好ましい、Ｉｈの異性体はまた一部はランタニド系の１
又は複数の生理的に許容される化合物め塩として存在す
ることができる。

上記の理由により、鉱酸又は有機酸とカルシウム亜鉛又
はマグネシウムとの医薬として許容される塩１種類以上
を余分に医薬を含有するのも好ましい、これは特に、し
ばしばこれらのミネラルを欠いている老人のために特に
価値がある。

ヒトの患者への投与のため、適当な投与量は、種々の投
与量で動物において得られた結果の延長により当業者に
より日常的に決定され得る。ヒトへの好ましい投与量は
０．１−１０００■、特に０．１〜２００■ＩＰ、　／
日／ｋｇ体重の範囲である。

動物実験において、１６０■／ｋｇ体重という高投与量
でのマウスへの腹腔的投与の後、ＩＰ、の毒性効果は見
られなかった。

医薬は、単位投与当り通常０．０１〜１．５ｇ、例えば
０．０５〜１．３又は好ましくは０．１−１　ｇのＩＰ
３を含有する。

１つの好ましい態様において、ＩＰ、はＤ−ミオ−イノ
シトール−１，２，６−）リホスフェートである。

この医薬の１つの機能は種々の細胞型の膜、特に血小板
、内皮細胞及び赤血球の細胞膜への損傷を回復し、予防
し又は軽減することである。この医薬の使用はこれらの
細胞型の改良された安定性、変形に対する感受性の低下
、及び改良された機能をもたらす、さらに、例えば血管
壁への集合性及び付着のごときパラメーターが低下する
。

この医薬の使用はアルカリ性ホスファターゼのレベル及
び活性に影響を与える。

さらに、この医薬が使用される場合、イノシトールの代
謝が正常化される。この医薬の使用の他の結果は膜流動
性の調節、コレステロールのごとき成分の導入、並びに
種々のホスホリピドの生産、導入及びバランスである。

この医薬の使用の他の結果は細胞の電解質バランスの調
整である０例えばカルシウム、カリウム、塩素、リン酸
等の細胞内レベルの調整が挙げられる。

細胞表面の活性、及び例えばリン酸化による受容体の活
性化／不活性化を介しての外部刺激に対する応答は、こ
の医薬の使用により影響される他のパラメーターである
。

この発明を以下の例によりさらに説明する０例１〜４は
ＩＰｓの製造を示し、他方例５及び６はＩＰｌの溶液及
び錠剤の調製を例示する０例７〜９は種々のタイプの骨
疾患に対するＩＰ３の効率に関する。

劃」−イノシト−シト１ホスフエートの　　　の１、４
　ｋｇのフィチン酸ナトリウム（トウモロコシ由来、シ
グマケミカル社製）を１２００ｆの酢酸ナトリウム緩衝
液（ｐＨ４，６）に溶解する。ジェストボラゲット（Ｊ
Ｍｓｔｂｏｌａｇｅｔ）　、スエーデン（乾物２８％、
窒素含量２％、リン含量０．４％）を撹拌しながら加え
、そして４５°Ｃにてインキュベーションを続ける。放
出される無機リンを測定することにより脱リン酸化を追
跡する。７時間後５０％の無機リンが放出された時、ア
ンモニアを加えて一旧２にすることにより加水分解を停
止せしめる。懸濁液を遠心し、そして上清を集める。

８００　ｆの上清をイオン交換カラム（ダウエックスｌ
、塩素形、１００ＣＩＩＸ　１５０ｃ１１１）に通し、
そして塩酸の直線グラジェント（０−０，７Ｎ　Ｈ（Ｊ
！　）により溶出を行う。

リン／イノシトール比が３：１である例１により得られ
た両分を中和し、そしてカルシウム塩として沈澱せしめ
る１００■の沈澱物をＨ−ＮＭＲにより分析する。デー
タが示すところによればピークはミオ−イノシトール−
１，２，６−１−リホスフェートから成る。

■ユ ０．５ｇのＤ−キロ−イノシトール（Ｄ−ｃｈｉｒｏ−
ｉｎｏｓｉｔｏｌ）をｌｄのリン酸に６０°Ｃにて溶解
した。

２０ｇのポリリン酸を添加し、そしてこの混合物を真空
下１５０°Ｃにて６時間加熱した。混合物を水で稀釈、
して２００ｄにし、そしてイオン交換カラム（ダウエッ
クス１、塩素形、２５ｍｍＸ　２５０ｍｎ＋）に通し、
そして塩酸の直線グラジェント（０−２，０Ｎ）１ｃｌ
）により溶出した。

リンとイノシトールとの比率が６＝１であるピークの成
分を、−水酸化カルシウムの添加により沈澱せしめた。

この沈澱を濾過し、洗浄し、そして１０Ｊｄの陽イオン
交換樹脂と混合してイノシトールへキサホスフェートの
酸形を得た。水酸化す）　ＩＪウムで中和し、そして凍
結乾燥した後、Ｄ−キロ−イノシトールヘキサホスフェ
ートのナトリウム塩を得た。

班土 例３に従って製造されたＤ−キロ−イノシトールへキサ
ホスフェートのナトリウム塩０．８ｇを３００Ｊ！１！
の酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５，２）に溶解した。１
．３ｇの小麦フィツーゼ（ＥＣ３，１，３，２６゜０．
０１５０／■、シグマ・ケミカル社より入手）を添加し
、そして混合物を３８°Ｃにてインキュ、ベートした。

５０％の無機リンの放出の後、アンモニアを加えてｐＨ
１２にすることにより加水分解を停止せしめた。

Ｄ−キロ−イノシトールホスフェート類を含有する混合
物をイオン交換カラム（ダウエックスｌ、塩素形、２５
ＭＸ　２５０ｍ１１ｍ）に通し、そして塩酸の直線グラ
ジェント（０−０，７Ｎ　ＨＣＪ　）により溶出した。

リンとイノシトールの比が３：１であるピークを１．０
　Ｍ水酸化ナトリウムにより中和し、そして凍結乾燥し
た。

ＮＭＲ及びＩＲによる構造決定により、生成物がＤ−キ
ロ−イノシトールホスフェートであることが示された。

戒 ＩＰ、のナトリウム塩０．５ｇ及び０．７７ｇのＮａＣ
Ｊを９８．７３−の注射用水に溶解して、ヒト又は動物
に注射するために適当な溶液を得た。

Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，６−）リホスフェー
トのカルシウム塩の錠剤を次の様にして製造した。Ｄ−
ミオ−イノシトール−１，２，６−トリホスフェートの
カルシウム塩５０　ｇ　、　　１３２　ｇのラクトース
及び６ｇのアカシャガムを混合した。

次に、この混合物に精製水を加え、次に適当な稠度が得
られるまで混合を続けた。この混合物を篩に通し、そし
て乾燥せしめた。次に、この混合物を１０ｇのタルク及
び２ｇのステアリン酸マグネシウムとブレンドした。こ
の混合物を２００■の錠剤に圧縮した。

貫ユ フロインドの完全アジュバントのラットへの注射は種々
のタイプの骨疾患の出現をもたらす。約２００ｇの体重
のラットを２群に分けた。両群の動物をハロサン（ｈａ
ｌｏｔｈａｎｅ）により麻酔し、そして０日月に０．１
−のアジュバント？容液〔パラフィン油中１０ｍｇ／ｄ
のミオ−バクテリウム・プチルリカム（Ｍｙｏ−ｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ　ｂｕｔｙｌｒｉｃｕｍ）を尾基部に皮肉
注射した。

１群中の７匹のラットには実験期間（２５日）中毎日５
０ｍｇのローミオ−イノシトール−１，２，６トリホス
フエー１−　（ＩＦ５）を皮下注射し、他方２群中の６
匹のラントには対照として食塩水を毎日注射した。実験
の終りにおいて動物を殺し、そして左後肢を食塩溶液中
に固定し、水中で洗浄し、そしてＸ−線観察した。Ｘ−
線ユニットはマイクロフォーカス型であり、そして得ら
れたラジオグラフは１０倍の倍率である。

各ラジオグラフを下記のグレードにより骨鉱化の存在及
び重症度についても盲検観察した。

グレードｌ：正常 グレード２：中程度の関節骨粗■症 グレード３：病的骨折を伴う重症の汎化骨１１髭症 結果を下記の表に示す。

（数値はグレードを示す） 上記の結果から明らかなように、ＩＰｉ−処置′（群１
）は対照（群２）に比べて骨粗Ｎ症の発生及び重症度を
下げる。

劃」− 例７に記載したようにして得たＸ−線の結果を、下記の
グレードにより骨の侵食の存在及び重症度について盲検
観察した。

グレード０：正常 グレートｌ：関節表面の角における小さな骨の不整 グレード２：関節表面における完全な破壊結果を下記の
表に示す。

ＩＦ５−処置（群１）は対照（群２）に比べて骨膜炎の
発生及び重症度を下げる。

ＩＦ５−処理（群１）は対照（群２）に比べて骨の侵食
の発生及び重症度を下げる。

尉衰 例７に記載したようにして得たＸ−線の結果を、下記の
グレードにより骨膜炎の存在及び重症度について盲検観
察した。

グレード０：正常 グレート１：新生骨の薄層 グレード２：非常に不規則な骨増殖

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ヒトを含む哺乳類における骨の疾患を予防し、治療
   し又は軽減するための、イノシトールトリホスフェート
   （ＩＰ＿３）の少なくとも１種類の異性体を含んで成る
   医薬。 ２、前記骨の疾患が骨の鉱化、骨粗鬆症及びベーゼット
   病に関連する、請求項１に記載の医薬。 ３、前記骨の疾患が骨の侵食に関連する、請求項１に記
   載の医薬。 ４、前記骨の疾患が骨膜炎に関連する、請求項１に記載
   の医薬。 ５、前記イノシトールトリホスフェートが塩の形である
   請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬。 ６、前記イノシトールトリホスフェート塩がナトリウム
   塩、カリウム塩、カルシウム塩又は亜鉛塩である、請求
   項５に記載の医薬。 ７、前記医薬が錠剤、又は顆粒の形である請求項１〜６
   のいずれか１項に記載の医薬。 ８、前記医薬が溶液の形である、請求項１〜６のいずれ
   か１項に記載の方法。 ９、前記イノシトールトリホスフェートがＤ−ミオ−イ
   ノシトール−１，２，６−トリホスフェートである、請
   求項１〜６のいずれか１項に記載の医薬。