JPH02191217A - イノシトールトリホスフェートを含有する組織の損傷に対する医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ヒトを含む咄乳類における組織の損傷の予防
、治療又は抑制のための、イノシトールトリホスフェー
ト（ＩＰ、）の少なくとも１種類を含んで成る医薬に関
する。

〔従来の技術〕

組織の傷害及び破壊は、種々の器官又はその部分、血管
等の内外の特定の機能を有する特定の細胞の集合に対す
る損傷として理解すべきである。

組織の損傷は一連の複雑な現象、例えば血管壁、例えば
動脈、毛細管及び静脈の肥大、例えば血漿蛋白質を含む
液体の透過性の増加、及び血流の増加と関連する。血管
の漏れの増加はしばしば種々の組織の損傷を特徴付ける
浴出及び浮腫の形成をもたらす。

しばしば、組織の損傷は痛み、発熱、赤変、腫脹及び機
能喪失の症状により特徴付けられる。

組織の損傷は病気そのものとしては定義されないが、し
ばしば急性及び慢性の種々の病気の要素である。

組織の損傷は多くの原因で誘導され得る。誘導因子は機
械的効果、免疫的効果又は化学的効果と関連付けること
ができる。ウィルス、細菌及び真菌のごとき微生物は組
織の損傷を誘導する場合があり、そして熱、火、照射、
冷及び打撃への暴露は非常にしばしばこの様な損傷をも
たらす。喘息、湿疹、乾麿、関節リウマチ、糖尿病及び
動脈硬化のごとき多くの疾患もまた種々のタイプの組織
の損傷を含む。

組織の損傷に関連する疾患の既存の処置は薬物、例えば
非ステロイド系抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）　、ステロイド
、抗生物質及び静細胞剤に基いている。

（発明が解決しようとする課題〕 既存の薬物はしばしば、深刻な副作用が伴って効果が限
定される。　Ｎ５ＡＩＤによる処置から生ずる毒性効果
は胃腸の副作用、アレルギー反応及び中枢神経系におけ
る副作用を生じさせる場合がある。

ステロイドによる処置はしばしば骨粗鬆症及び骨折、感
染に対する感受性の上昇並びに消化性潰瘍をもたらす。

〔発明が解決しようとする課題及び課題を解決するための手段〕

本発明によれば、ヒトを含む哺乳類における組織の損傷
を予防し、軽減し又は治療するための医薬の製造のため
にイノシトールトリホスフェート（ｒＰｆｆ）の少なく
とも１つの異性体を使用することにより上記の組織の傷
害又は破壊を克服し又は軽減することが可能となる。

〔具体的な説明〕

本発明の好ましい態様に従えば、本発明の医薬は浮腫の
形成及び血管の漏れに関連する組織の損傷を予防し、軽
減し又は治療するために使用することが意図される０本
発明の他の好ましい態様においては、本発明の医薬は熱
傷、鼻炎及び喘息に関連する組織の損傷を予防し、軽減
し又は治療するために使用することが意図される。

本発明はまた、ヒトを含む哺乳類において組織の損傷を
予防し、軽減少又は治療するための医薬の製造のための
、他の医薬活性化合物と組合わせてのイノシトールトリ
ホスフェート（ＩＰユ）の使用を含む。

ヨーロッパ特許１！１１７９４３９から、医薬活性成分
としてイノシトールトリホスフェートの少なくとも１つ
の異性体を含んで成る医薬組成物が知られている。この
特許においては、この医薬組成物の効果は異る分野、例
えば心臓血管疾患及び関節炎について示されている。

本発明は、例えば下記の状態を予防し、軽減し又は治療
するためのＩＦ５の少なくとも１つの異性体の使用に関
する。

熱及び火によって機械的に誘導される組織の損傷、例え
ば−度、二度又は三度の熱傷、外傷、すなわち物理的損
傷又は冷により惹起される創傷又は傷害あるいはこれら
による組織の損傷；化学的に又は微生物により誘導され
た組織の損傷、例えば照射、敗血症及び例えばハチにさ
されたりヘビにかまれて生ずる傷害あるいはこれらにに
よる組織の損傷； 免疫成分が強（発現される疾患における組織の損傷、例
えば鼻炎、枯草熱、浮腫、乾瑠、脈管炎及び湿疹あるい
はこれらによる組織の損傷。

さらに本発明は、紅斑及び庖疹、外科手術及び移植手術
により又はそれに続いて起る傷害、カテーテル等、並び
に心筋型、脳型又は他の型の梗塞により生ずるか又はこ
れらの境界領域に存在する傷害に関連する組織の損傷の
治療に関する。

ブドウ膜炎、耳炎、胃炎、腹膜炎、静脈洞炎、胃腸炎、
大腸炎及び膀胱炎のごとき疾患に関連する他の組織傷害
も本発明に関する。

本発明の医薬は上記の状態に関連する組織の損傷のみな
らず組織の損傷が起こる他の状態に対しても有効である
。

ＩＰ３の製造及びその種々の異性体の単離は米国特許Ｎ
α４．７７７．１３４に開示されている。ＩＰ３の異性
体はまた、例えばイノシトールとリン源から出発して化
学的又は酵素的合成法により製造することができる。さ
らに、バイブリドＤＮＡ技法を含む微生物学的製造法も
適当である。

ＩＰ３の構造及びその種々の異性体が米国特許Ｎｏ、　
４，７３５，９３６及び米国特許Ｎｏ、　４，７９７，
３９０に開示されている。

本発明に従って使用される医薬は単位投与型で存在する
のが好ましい。このような単位投与のためには錠剤、顆
粒又はカプセルが好ましい。さらに、胃での制御されな
い加水分解を防止し、そして腸での好ましい吸収を行う
ために錠剤及び顆粒に表面処理、例えば腸溶コートを行
うことができる。他の適当な投与形は徐放形及び経皮投
与形である。常用の医薬として許容される添加剤、賦形
剤及び／又はキャリヤーを医薬に含めることができる０
錠剤及び顆粒はまた、これらを腸内で容易に崩壊せしめ
る崩壊剤を含有することができる。

ある場合、特に急性状態の場合には、静脈投与用溶液の
形の単位投与形を用いるのが好ましい。

医薬はまた、添加剤、試剤又はキャリヤーをなんら含有
せずＩＰ３のみから成ることもできる。

所望により、医薬は他のイノシトールホスフェートすな
わちＩＰＩ　　、　ＩＰ２　　、　ＩＰ４　　、　ｒｐ
ｓ及びＩＰ６を含有しないことができる。従って、ＩＰ
、異性体の混合物が９０〜１００％例えば９３〜１００
％、又は好ましくは９５〜１００％の純度を有すること
ができる。

あるいは、この医薬は、それぞれが実質的に純粋な形で
存在する１又は複数の特定のＩＰ、異性体から成るか又
はそれを含んで成ることができる。

すなわち、種々の異性体を純粋な形で単離することがで
きこのことは、これらが８０〜１００％例えば８２〜１
００％、又は８５〜１００％、好ましくは９０〜１００
％の純度を有することを意味する。言うまでもなく、異
性体を純粋な形で製造することができるからそれらを任
意の比率で混合することができる。

医薬は、ＩＰ６．ＩＰ、又はｒｐ、の少なくとも１つと
ＩＰ、を生成せしめるのに適当な酵素のごとき分解性物
質とにより提供されるＩＰ３から成ることができる。

ミネラルバランスに負の影響を与えないように、本発明
の医薬の製造のために使用される１又は複数のＩＰ３異
性体が塩の形で存在するのがほとんどの場合において好
ましい。塩は好ましくはナトリウム塩、カルシウム塩、
亜鉛塩もしくはマグネシウム塩又はこれらの塩の２以上
の混合物である。

カルシウム塩もしくは亜鉛塩又はこれらの混合物が特に
好ましい。　ＩＰ、の異性体はまた一部はランタニド系
の１又は複数の生理的に許容される化合物の塩として存
在することができる。

上記の理由により、鉱酸又は有機酸とカルシウム、亜鉛
又はマグネシウムとの医薬として許容される塩１種類以
上を余分に医薬を含有するのも好ましい。これは特に、
しばしばこれらのミネラルを欠いている老人のために特
に価値がある。

ヒトの患者への投与のため、適当な投与量は、種々の投
与量で動物において得られた結果の延長により当業者に
より日常的に決定され得る。ヒトへの好ましい投与量は
０．１〜１０００■、特に０．１〜２００■ＩＰ、７日
／ｋｇ体重の範囲である。

動物実験に壊いて、１６０■／ｋｇ体重という・高投与
量でのマウスへの腹腔的投与の後、ＩＰ、の毒性効果は
見られなかった。

医薬は、単位投与当り通常０．０１〜１．５ｇ、例えば
０．０５〜１．３、又は好ましくは０．１〜ＩｇのＩＰ
。

を含有する。

上記の混合された医薬において、ＩＰ、の量はこれら複
数の活性成分の５〜９５％又は１５〜８０％、例えば２
５〜６０％（重量）を占めるべきである。１つの好まし
い態様において、　ＩＰＩはＤ−ミオーイノシト−ルー
１．２．６−トリホスフェートである。

他の医薬活性化合物は、サリチル酸塩、ピラゾロン誘導
体、パラアミノフェノール誘導体、インドメタシン誘導
体、プロピオン酸誘導体、ヒロキシカム、グリココルチ
コイド類のごときステロイド類、金化合物、ペニシラミ
ン、抗マラリア剤及び免疫抑制剤から成る群から選択す
ることができる。

医薬がＩＰ３及び少なくとも１種類の医薬活性成分から
作られる場合、投与形は混合形、又は−緒の投与もしく
は分類投与のための分離形であることができる。

この医薬の１つの機能は種々の細胞型の膜、特に血小板
、内皮細胞、マクロファージ、白血球（ｌｅｕｃｏｃｙ
ｔｅ及びｗｈｉｔｅ　ｂｌｏｏｄ　ｃｅｌｌ）　、リン
パ球及び好中球の細胞膜への損傷を回復し、予防し又は
軽減することである。この医薬の使用はこれらの細胞型
の改良された安定性、変形に対する感受性の低下、及び
改良された機能をもたらす。さらに、例えば血管壁への
集合性及び付着のごときパラメーターが低下する。

この医薬が使用される場合、ヒスタミン、ブラジキニン
、血小板活性化因子及びサイトカインのごとき細胞性メ
デイエータ−も正常化される。この医薬の使用の他の結
果は膜流動性の調節、コレステロールのごとき成分の導
入、並びに種々のホスホリピドの生産、導入及びバラン
スである。

この医薬の使用の他の結果は細胞の電解質バランスの調
整である０例えばカルシウム、カリウム、塩素、リン酸
等の細胞内レベルの調整が挙げられる。

細胞表面活性、及び例えばリン酸化による受容体の活性
化／不活性化を介しての外部刺激に対する応答は、この
医薬の使用により影響される他のパラメーターである。

この発明を以下の例によりさらに説明する。例１〜４は
ＩＰ、の製造を示し、他方例５及び６はＩＰｓの溶液及
び錠剤の調製を例示する０例７はＩＰ、による処置によ
る浮腫形成の減少又は低下に関する。出血に対するＩＰ
３の予防効果を例８に示し、他方例９は熱傷により生じ
た損傷に対するＩＰ、の有利な使用を教示する。例１０
はＩＰ３を使用する場合の血管の漏れの減少を記載する
。

１、４　ｋｇのフィチン酸ナトリウム（トウモロコシ由
来、シグマケミカル社製）を１２００　Ｎの酢酸ナトリ
ウム緩衝液（ｐＨ４，６）に溶解する。ジエストボラゲ
ット（Ｊム°ｓｔｂｏｌａｇｅｔ）　、スエーデン（乾
物２８％、窒素含量２％、リン含量０．４％）を撹拌し
ながら加え、そして４５°Ｃにてインキュベーションを
続ける。放出される無機リンを測定する°ことにより脱
リン酸化を追跡する。７時間後５０％の無機リンが放出
された時、アンモニアを加えてｐＨ１２にすることによ
り加水分解を停止せしめる。懸濁液を遠心し、そして上
清を集める。

８００！の上清をイオン交換カラム（ダウエックス１、
塩素形、１００Ｃ１１ｘ　１５０　ｃｍ　）に通し、そ
して塩酸の直線グラジェント（０−０，７ＮＨＣ４）に
より溶出を行う。

劃−」４　イノシ　−ル　！ホス　ニー　のリン／イノ
シトール比が３：１である例１により得られた画分を中
和し、そしてカルシウム塩として沈澱せしめる。１００
ｍｇの沈澱物をＨ−ＮＭＲにより分析する。データが示
すところによればピークはミオ−イノシトール−１，２
，６−トリホスフェートから成る。

０．５ｇのＤ−キロ−イノシトール（Ｄ−ｃｈｉｒｏ−
ｉｎｏｓｉｔｏｌ）を１ｍｌのリン酸に６０°Ｃにて溶
解した。

２０ｇのポリリン酸を添加し、そしてこの混合物を真空
下１５０°Ｃにて６時間加熱した。混合物を水で稀釈し
て２００−にし、そしてイオン交換カラム（ダウエック
ス１１塩素形、２５ｍｍＸ２５０　ｍａｄ）に通し、そ
して塩酸の直線グラジェント（０−２，０ＮＨＣｊ！　
）により溶出した。

リンとイノシトールとの比率が６：１であるピークの成
分を、水酸化カルシウムの添加により沈澱せしめた。こ
の沈澱を濾過し、洗浄し、そして１０ｄの陽イオン交換
樹脂と混合してイノシトールへキサホスフェートの酸形
を得た。水酸化ナトリウムで中和し、そして凍結乾燥し
た後、Ｄ−キロルイノシトールヘキサホスフェートのナ
トリウム塩を得た。

劃−」工 例３に従って製造されたＤ−キローイノシ）　−ルヘキ
サホスフェートのナトリウム塩０．８ｇを３００ＩＩｄ
ｌの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５，２）に溶解した。

１．３ｇの小麦フィツーゼ（ＥＣ３，１，３，２６。

０．０１５Ｕ／■、シグマ・ケミカル社より人手）を添
加し、そして混合物を３８°Ｃにてインキュベートした
。

５０％の無機リンの放出の後、アンモニアを加えてｐＨ
１２にすることにより加水分解を停止せしめた。

Ｄ−キロ−イノシトールホスフェート類を含有する混合
物をイオン交換カラム（ダウエックスｌ、塩素形、２５
ｍｍＸ２５０　ｍｍ）に通し、そして塩酸の直線グラジ
ェント（０−０，７Ｎ　ｏｃＩりにより７容出した。

リンとイノシトールの比が３：ｌであるピークを１．０
Ｍ水酸化ナトリウムにより中和し、そして凍結乾燥した
。

ＮＭＲ及びＩＲによる構造決定により、生成物がＤ−キ
ロ−イノシトールトリホスフェートであることが示され
た。

ＩＰ３のナトリウム塩０．５ｇ及び０．７７ｇのＮａ（
Ｊ！を９８．７３ｄの注射用水に溶解して、ヒト又は動
物に注射するために適当な溶液を得た。

Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，６−トリホスフエー
トのカルシウム塩の錠剤を次の様にして製造した。Ｄ−
ミオ−イノシトール−１，２，６−トリホスフエートの
カルシウム塩５０ｇ　、　　１３２ｇのラクトース及び
６ｇのアカシャガムを混合した。

次に、この混合物に精製水を加え、次に適当な稠度が得
られるまで混合を続けた。この混合物を篩に通し、そし
て乾燥せしめた。次に、この混合物を１０ｇのタルク及
び２ｇのステアリン酸マグネシウムとブレンドした。こ
の混合物を２００■の錠剤に圧縮した。

らす組織の損傷を誘導する。足の周囲を測定することに
より浮腫又は水腫の程度を再現性よく定量することがで
きる。

５匹の雄性マウスから成る２群に、カラギーナンの注射
の２時間及び１時間前に、１０００■／ｋｇのＤ−ミオ
−イノシトール−１，２，６−）リホスフェート（ＩＰ
３）又はクレープス（Ｋｒｅｂｓ）　　リンゲル溶（対
照）を注射した。

足の直径の測定を１時間ごとに行った。

この結果が示すところによれば、ＩＰ３の注射により損
傷の誘導の４時間後に対照と比べて浮腫又は水腫が４０
％小さくなった。すなわち、ＩＰ３で処置された動物の
浮腫は非常に小さくなった。

貫−ｌ ハムスターの頬のうにヒスタミンにより誘導された血管
の透過性及び出血を対照と比較してＤ−ミオーイノシト
ール−１，２，６−トリホスフエー　ト（ＩＰりの存在
下で測定した。

雄性ハムスターを一夜絶食せしめ、そしてナトリウムベ
ンドパルビトンにより麻酔した。頚静脈を通して注入を
行った。ヒスタミンの注射（２，７ｍｇ／ｋｇ）の後に
食塩水（対照）又はＩＰ３　（５，０ｍｇ／ｋｇ）を投
与した。８０分間の間隔を置いて頬のうを顕微鏡観察し
、そして出血部位（点状出血）の数を、ヒスタミンの注
入の開始前及び８０分間の終りにおいて記録した。

結果を次の表に示す。

食塩水（対照）　　　１０　　　８．４この結果かられ
かるように、ＩＰ、は血管の透過性及び出血に対して有
効な化合物である。

ｔｉ 熱プローブを一定圧力でラットの腹の皮膚に適用する場
合、ラットに制御された熱損傷が誘導される。プローブ
は４５℃の表面温度を有し、そしてこの温度が３７°Ｃ
に低下するまでに特定量のエネルギーを与える。熱傷の
誘導の１５分後、食塩水（対照）又はＤ−ミオ−イノシ
トール−１，２，６−トリホスフエートを注射した。こ
の第一の注射（１０ｍｇ／ｋｇのＩＰｓ）の後、０．２
ｍｇ／分でＩＰ３を２時間にわたり注入した。損傷の９
０分後、動物にエバンス・ブルー（Ｅｖａｎｓ　Ｂｌｕ
ｅ）を注射す塾、この化合物は損傷された組織に漏出す
るアルブミンと結合する０次に、アルブミンの漏出量は
、組織の種々の部分のエバンス・ブルーの色の強度を測
定することにより容易に決定される。さらに３０分間後
、動物を殺し、そして組織の損傷を決定する。ＩＰ。

により処置された動物において、熱損傷は対照（ｎ＝１
０）に比べて有意に小さくなった。従って、ＩＰ３は熱
傷による組織の損傷に対して保護的な物質である。

■」仮 毛細血管透過性の上昇のメデイエータ−１例えばヒスタ
ミン、ブラデイキニン及び血小板活性化因子（ＰＡＦ）
に応答しての局所浮腫又は水腫形成をラビットの剃られ
た背面皮膚において測定する。

カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）のごとき
血管拡張剤がメデイエータ−と共に投与される場合、血
液流が増加し、そしてこの系は浮腫又は水腫の形成を減
少せしめる化合物を試験するために確立される。

種々のメデイエータ−の注射に先立ち、麻酔した動物に
エバンス・ブルーを注射する。エバンス・ブルーの拡散
が組織の損傷及び浮腫又は水腫の形成の指標となる。

メデイエータ−の注射の直後に、食塩水（対照）又は５
０■／ｋｇのＤ−ミオ−イノシトール−１，２６−トリ
ホスフエート（ＩＰ３）投与する。

この結果を、対照と比べてＩＰ３による阻害の％として
下記の表に示す。

ブラディキニン ヒスタミン ＰＡＦ この表かられかるように、ＩＰ＋の存在が浮腫又は水腫
の形成を有意に減少せしめる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ヒトを含む哺乳類における組織の損傷を予防、治療
   又は抑制するためのイノシトールトリホスフェート（Ｉ
   Ｐ＿３）の少なくとも１種類の異性体を含んでなる医薬
   。 ２、前記組織の損傷が熱傷に関連する請求項１に記載の
   医薬。 ３、前記組織の損傷が浮腫又は水腫の形成に関連する請
   求項１に記載の医薬。 ４、前記イノシトールトリホスフェートが塩の形である
   請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。 ５、前記イノシトールトリホスフェート塩がナトリウム
   塩、カルシウム塩、亜鉛塩もしくはマグネシウム塩又は
   これらの２種類以上の混合物である、請求項４に記載の
   医薬。 ６、前記医薬が錠剤、顆粒又は溶液の単位投与形である
   請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬。 ７、前記医薬が単位投与当り０．０１〜１．５ｇのＩＰ
   ＿３を含有している、請求項６に記載の医薬。 ８、イノシトールトリホスフェートの前記異性体がＤ−
   ミオ−イノシトール−１，２，６−トリホスフェートで
   ある、請求項１に記載の医薬。 ９、前記医薬がＩＰ＿３に加えて少なくとも１種類の他
   の医薬活性成分を含有する、請求項１に記載の医薬。