JPS6310727A - イノシト−ルトリホスフエ−トを含有する医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 この発明け、体内における鉛、水銀、ニッケル又はクロ
ムの存在により惹起され又は悪化される状態の処置又は
軽減Ｋｆ＆Ｌ、さらに詳しくは、その様な処置のための
イノシトールトリホスフェ−）　（ＩＰ３）の少なくと
も１種類の異性体を含有する医薬組成物に関する。

〔従来の技術〕

１９００年代にすでに、多くの研究者が植物中でのフィ
チン酸、すなわち１．２．３．４．５．６−へキサキス
（ジハイドロジエンホスフェート）ミオ−イノシトール
（また、時としてイノシトール−六リン酸とも呼ばれる
）の発見を報告している。

異る植物中のフィチン帳の量はかなシ異る。穀物中の含
有量は若干の例外はあるが一般に約０．５〜２％でおる
。精白米はわずかに０．１％のレベルのフィチン酸を含
むが、玄米は２．２チという多くのフィチン酸を含有す
る。豆は約０．４〜２チ、油植物は約２〜５チ、そして
花粉は約０．３〜２％を含有する。植物中のフィチン酸
の含量は生育期間を通じて変化する。この含量はまた。

特に天候により影響される。

文献中には少数の植物中にイノシトールペンタホスフェ
ート（ＩＰ５）及びイノシトールテトラホスフェ−）　
（ＩＰ４）が存在する旨の報告が存在する。ＩＰ６よシ
低級のリン翫肪導体が穀類の発芽の際に形成されること
も知られている。例えば、発芽における最終生成物はイ
ノシトール及びホスフェートである。これらの文献の多
くの著者が、ＩＰ又はＩＰ６を含有する物質の消費の隙
のヒト及び動物に対する幾つかの負の効果を観魁してい
る。

多過ぎる量のＩＰ６をイヌに供与した場合、例えばクル
病が生ずる。ヒトにおいて、亜鉛の欠乏及びその結果と
して小児の緩慢な成長が観察されている。主として女性
において貧血が観察されている。

ヒト及び動物における鉱物バランスに対する上記のよう
な負の効果のため、従来ＩＰ６及びその誘導体の摂取を
最少にするための試みが行われてきた。

Ｃ，Ａ、Ｖｏｌ、３３（１９３９）、Ａｂｓｔｒ、４７
３５１゜Ａ３／４に、抗りル病食としてイノシトールホ
スフェートを含むホスフェートの使用が報告されている
。しかしながら、特定のイノシトールホスフェートへの
言及はされておらず、そして金属錯体形質についてはな
んら述べられ工いない。

米国特許４４，４７３，５６３は赤血球の体外処理によ
）それにイノシトールホスフェートを導入して臥素の供
給を改善することを開示している。この目的のために体
から取シ出された血液から赤血球を分離する。赤血球の
複雑な処理の後、血液中に再導入する。しかしながら、
イノシトールホスフェートを体内に直接投与することは
開示されていない。さらに、体内における鉛、水銀、ニ
ッケル又はクロムの存在により惹起され又は悪化される
状態の特に選択されたイノシトールホスフェートによる
処置又は軽減については述べられていない。

米国特許４２，７２３，９３８にはペニシリンの水性懸
濁液の分散を安定化するためのイノシトールホスフェー
トの使用が開示されている。これは、長時間貯蔵した後
短時間の簡単な手動振とうが完全且つ均一なペニシリン
の分散を回復することを保証する。

数百年の間、種々の形態の金属が例えば工業的工程にお
いて使用されてきた。早くから、幾つかの金属、特に砒
素、鉛及び水銀がヒトに対して毒性であることが理解さ
れていた。

例えばヒトに対する金属の生理的影響に関する研究は常
に行われている。これはここ数１０年来、段々と重要と
なっている。なぜなら、１莱廃棄物及び他の環境変化の
ために一層多くの人々が有毒金属に暴露されるように力
ったからである。

多くの金属は体のために必要である。しかしながら高す
ぎる濃度においてこれらの金属は有害な効果を与える。

このケースは例えば鉄、−銅、亜鉛及びマグネシウムの
場合にあてはまる。従って、有害金属と無害／必須金り
との限界は区別できない。

非必須金属は生化学的過程を妨害するととＫよって生物
学的障害を生じさせる場合がある。金属又はそのイオン
は生物学的に重要な分子に結合し、酵素及び核酸と負に
共働し、そして細胞膜の性質に影モ）を与えて正常な機
能を撹乱することがある。

まず釦、水銀、二、ケル及びクロムがこの金属群に属し
、第二に砒叱、タリウム、プルトニウム、バリウム、錫
、銅及びコバルトがこの金属群に属する。溶液中で金り
は主としてイオンの形態で存在する。

高濃度での金属の急激な供給が生物学的過程に対する急
性の障害を伴って一時的に吸収を増大せしめることは自
然の理である。

金属への長時間の暴露は生物体、特に組織への金利の蓄
積及びむしろ遅い膨出をもたらす。従って、急激な金属
狗の効果と比較的緩慢な金属前の効果は異るものと々る
。生物体が複数の金属に暴露された場合、相乗的障害作
用が生ずる場合がある。

鉛は環境中に通常的に存在するため、鉛中毒は非常に深
刻な問題である。鉛中毒の急性効果は、炎症的障害、腸
に対する障害、心臓血管系の障害、及びシ１．り状態を
もたらすことがある。この金属はまたホルモン腺１例え
ば下垂体、副腎、及び甲状腺の障害を生じさせる場合が
ある。この事実は水銀について最も明らかである。鉛中
毒の慢性的効果は心臓血管系の障害及び高血圧、そして
さらに脳の購害及び神経障害を生じさせる場合がある。

水銀により惹起される中毒は腎臓の障害、肝臓除害、肺
の障害、及び腸に対する障害を急激に生じさせる場合が
ある。慢性的効果は例えば精神障害、神経障害、及び例
えば自己免疫疾患を生じさせる免疫防御に対する効果で
ある。

二、ケルは腸において大きな比率で吸収される。

ニッケル中毒による急性障害は神経障害の形で現われ、
他方慢性障害はアレルギー及びある種の癌をもたらす。

クロム中毒による急性障害は腸において起ることがらシ
、他方この金しシの慢性的暴露においである七ｉｔのア
レルギーが見出される。

さらに、金属が多くの酵素系、特にチオール基を含有す
る酵素に影響を与えることが知られている。さらに、金
属は第二伝達系の代謝に影響を与える。ニッケル及び鉛
はインビトロでＤＮＡ合成の減少を１起する。

カルボニルアンヒドラーゼのごとき亜鉛依存酵素に対す
るニッケルの影響は酵素活性の消失をもたらす。

鉛は酵素キサンチンオキシダーゼを阻害し、他方鉛及び
水銀はグアニンアミノヒドロラーゼを阻害する。

金属生前により生ずる状態を治癒せしめ又は軽減せしめ
るために色々な種類の金属キレート剤、例えばＢＡＬ　
（２、３−ジメルカプトプロパノール）及びＥＤＴＡ（
エチレンジアミノ四酢酸）が使用されている。

しかしながら、従来使用されて来たキレート剤は、無意
味な臨床的使用をもたらす負の性質を有する。すなわち
、ＢＡＬは水に不溶である。さらに、このものは使用に
際して悪臭を生じさせる。その非特異的キレート能力は
また必須金６に関する鉱物バランスに対して負の効果を
もたらす。

ＥＤＴＡはわずかじか吸収されず、これが制限要因であ
る。なぜなら、経口投与を行うことができないからであ
る。

この物質の尻出速度は高いから、効果を得るためにばか
なり高投与量を用いなければならない。

しかしながら、これは生物体におけるカルシウムレベル
の障害をもたらす。

〔発明の概要〕

この発明に従えば、極めて予想外なことに、鉛、水銀、
二、ケル又はクロムのごとき毒性金属のヒト及び動物に
対する前記の負の効果を解消し、そしてそれ故に関連す
る疾患を予防又は軽減することカニできる。従って、医
薬活性成分としてイノシトールトリホスフェート（ＩＰ
３）の少なくとも１独類の異性体を好ましくは塩の形で
含んで成る医薬組成物が提供される。この発明の組成物
は主として、鉛、水銀、二、ケル又はクロムの摂取によ
り惹起され、訪導され又は促進される状態を予防し又は
軽減することが意図される。

〔具体的な説明〕

予防し又は軽減するために、この発明の組成物が有用で
ある疾患の例として、金属中毒、これらの金属のいずれ
かによって惹起されるアレルギー、炎症状態、結合組織
への障害、肝臓障害、脳障害、免疫不全、ショック状態
、胃腸炎、皮１ｉ炎、及び神経障害を上げることができ
る。

上記の疾患に加えて、細胞増殖の変化、癌、心臓血管系
疾患、高血圧、中枢神経系への障害、肺への障害、及び
腎臓障害が挙げられる。

この発明が上記の状態のすべての形態を予防し又は軽減
する旨を主張するものではないが、体内における鉛、水
銀、二、ケル又はクロムの存在により惹起され又は悪化
される上記の状態を予防し又は軽減するであろう。

この発明の組成物中に存在しそして上記の目的を達成す
るＩＰ、の異性体の製造のため、化合物ＩＰ　　ＩＰ　
もしくはＩＰ４−のＸＳｔ類もしくは複数種類又はこれ
らの化合物の少なくとも１ｆｌｉ類を含有する天然産物
を出発材料として使用することができる。出発材料が天
然産物である場合、０．３チ以上。

好ましくは１％以上のイノシトールホスフェート（ＩＰ
６＋　Ｉｐ５＋ＩＰ４）を含有する材料を選択するのが
好ましい、特に適当な材料は豆類、糠、花粉及び油植物
である。

この発明の組成物は、好ましくは、出発材料のイノシト
ール含ｉ−に対して１０％以上、好ましくは２０％以上
、さらに好ましくは４０％以上のＩＰ３を含有すべきで
ある。下記の実験により示されるように、組成物中のＩ
Ｐ３のレベルを可及的に高くすることにより　ＩＰ、は
最良の治療効果を発揮する。この発明の組成物中・に存
在するＩＰ、は例えば次の様にして製造することができ
る。

１）　　ＩＰ４．　ＩＰ５及び／又はＩＰ６から出発す
る酵素的分解。

２）　　ＩＰ４．　ＩＰ５及び／又はＩＰ６から出発す
る化学的加水分解。

３）例えばイノシトール、ＩＰ又はＩＰ２とホスフエー
トとから出発する化学合成。

４）例えばイノシトール、ＩＰ又はＩＰ２とホスフエー
トとから出発する酵素的合成。

５）微生物的生産（バイブリドＤＮＡ技法も含む）。

６）イノシトールホスフェートの化学的又は酵素的・移
転。

７）　！換されたイノシトールホスフェートの化学的又
は酵素的加水分解。

上記の方法の２以上を組み合わせて使用することもでき
る。

この発明に従えは、例えば、前記の高級イノシトールホ
スフェ−）　ＩＰ６．　ＩＰ５及び／又はＩＰ４をフィ
ターゼ酵素により酵素的に分解するのが好ましい。フィ
ターゼ酵素は一般にすべてのイノシトールホスフェート
含有植物及び種子中に存在する。

このため、この発明に従えば、出発材料として天然産物
が使用される場合、酵素を添加することは通常必要でな
い。天然産物の有する酵素活性が低すぎる場合、あるい
は出発材料としてＩＰ６．　ＩＰ５もしくはＩＰ４又は
これらの混合物を使用する場合、例えば糠からのフイタ
ーゼ酵素を加える。

天然の又は粗製の出発材料を処理する適当な方法は、そ
れを例えば外股の破壊又は除去及び不所望の成分の除去
により前処理することである。すなわち、花粉を使用す
る場合、アレルゲンを除去すべきである。次に、材料を
水に浸漬してイノシトールホスフェートが分解されるよ
うにし、そして酵素を活性化する。追加量の酵素が必要
な場合。

この量をこの段階で加える。次に、意図される程度の加
水分解が達成されるのに必要な時間にわたって酵素を作
用させる。

加水分解は、存在するフィターゼのために適当な温度、
通常２０℃〜７０℃、好ましくは３０℃〜４０℃にて、
そして最適−レベルにて行われる。

意図するレベルにおいて加水分解を停止するため、例え
ば加水分解された出発材料の急速な加熱によって酵素を
破壊又は不活性化する。この操作はまた、組成物が投与
された場合に、胃中でのＩＰ、の制御されない又は不房
望の加水分解が継続しないことを保証する。材料を貯蔵
に適当な形にするため適切に凍結乾燥することができる
。

フイターゼ源として酵母を有利に使用することができる
。好ましくはｉ４ン酵母が使用される。酵母を使用する
場合、ＩＰ５の本質的に唯一の異性体、すなわちＤ−ミ
オ−イノシトール−１，２，６−）リホスフェートが得
られる。

ＩＰ６．　ＩＰ５又はｌＰ４化合物それ自体の１種又は
複数種を出発材料として使用する場合にも、上記の方法
を、場合によっては変更を加えて、使用することができ
る。

この発明の医薬組成物は医薬活性成分としてイノシトー
ルトリホスフェ−）　（ＩＰ、　）の少なくとも一種類
の異性体を、鉛、水銀、ニッケル又はクロムの体内での
負の効果を低下せしめるのに十分な量で含んで成る。

この発明の組成物は単位投与形で存在するのが適当であ
る。この様な単位投与のためＫは錠剤、顆粒又はカプセ
ルが適当な投与形である。さらに、錠剤及び顆粒はこれ
を容易に表面処理して腸内コーティングを与えて胃内で
の制御されない加水分解を防止しそして腸内での所望の
吸収を行わせることができる。他の適当な投与形は徐放
及び経皮投与である。通常の医薬として許容される添加
剤、試剤及び／又はキャリヤーを組成物中に含めること
ができる。錠剤又は顆粒剤はまた、これらを腸内で容易
に崩壊させるだめの崩壊剤を含有することができる。あ
る場合、特に急性状態の場合には、静脈内投与のための
溶液の形の単位投与形を用いるのが好ましい。

医薬組成物はまた、添加剤、賦形剤又はキャリヤーを伴
わないでＩＰ、のみから成ることもできる。

所望により、組成物は他のイノシトールホスフェート、
すなわちＩＰｌ、　ＩＰ２．　ＩＰ４．　ＩＰ５及びＩ
Ｐ６を含有しないことができる。従って、　ＩＰ３異性
体の混合物が９０〜１００％、例えば９３〜１００％又
は好ましくは９５〜１００％の純度を有することかでき
る。

これに代シ、医薬組成物は、それぞれが実質的に純粋な
形態で存在する後記の１又は複数種類の特定のＩＰ３異
性体から成るが、それを含んで成ることができる。すな
わち、異る異性体を実質的に純粋な形に相互に分離する
ことができ、このことはそれらが８０〜１００％、例え
ば８２〜１００チ又は８５〜１００チ、好ましくは９０
〜Ｚｏ。

チの純度を有することを意味する。異性体を純粋な形で
製造することができるので、これらを任意の比率で混合
することができることは言うまでもない。

ＩＰ、のｉ＊＊及びその異る異性体の単離は、１９８５
年ｌＯ月１８日に出願された米国特許出願Ａ７８８．８
２９．及び対応する英国特許出願Ａ２．１６９，６０２
に開示されている。

この発明の組成物中の１又は複数のＩＰｓ異性体が塩の
形態で存在し、とれによって鉱物バランスに負の影響を
与えないととがほとんどの場合に適当である。塩は好ま
しくはナトリウム塩、カルシウム塩、亜鉛塩もしくはマ
グネシウム塩又はこれらの塩の２以上から成る混合物で
あることが好ましい。カルシウム塩もしくは亜鉛塩又は
これらの混合物が特に好ましい。ＩＰ、の異性体はまた
部分的に、ランタミド系すなわちＬａ　、　Ｃａ　、　
Ｐｒ　。

Ｎｄ　、　Ｐｍ　、　Ｓｍ　、　Ｅｕ　、　Ｇｄ　、　
Ｔｂ　、　ｂｙ　、　Ｈｏ。

Ｂｒ　、　Ｔｍ　、　Ｙｂ及びＬｕ　１又は複数の生理
的に許容される化合物の塩として存在することもできる
。

前記の理由により、組成物がカルシウム、亜鉛又はマグ
ネシウムと鉱酸又は有機酸との少なくとも１８類の医薬
として許容される垣を含有することも有利である。これ
は、これらの鉱物がしばしば不足する老人のために特に
価値がある。

この発明の組成物は好ましくはさらに、少なくともＩ　
Ｉｎ類のセレン含有物質、不飽和脂肪酸、例えばγ−リ
ルン酸、ビタミンＥ、ビタミンＣ１又は医薬として許容
される有機酸もしくはその塩、例えばクエン酸塩、蓚酸
塩、マロン酸塩及び酒石酸塩を含有することができる。

これらの物質もまた、鉛、水銀、二、ケル及び／又はク
ロムの体内での負の効果を相殺し、そして／又はこれに
加えである場合には、組成物中のＩＰ５異性体と共に望
ましい効果を与える。組成物中のセレンの含量は、日用
摂取量が約０．７〜８μｌｉ／ｋｇ体重、好ましくは０
．７〜３．３μｇ、４９体重となる量である。ビタミン
Ｅについては、対応する値はそれぞれ約０．１〜２〜、
及び０．１〜１ダである。

組成物はペニシリンを含有しないのが好ましい。

体内における鉛、水銀、ニッケル及び／又はクロムの存
在により惹起され又は悪化される状態を有するヒトの患
者への投与のため、当業者は種々の投与量において動物
において得られた結果を延長することにより、適轟な投
与量を日常的に決定することができる。ヒトのための好
ましい投与量は０．１〜１０　ｍ９ＩＰ３／日／′ｑ体
重ｏｉ囲でｓる。

動物実験において、マウスへの１６０ｍ９／ｋｌ１体重
静脈内注射又はマウスへの１（５００■／ゆ体重の腹腔
内注射という非常に多量のＩＰ３の投与の後、拗性効果
は見られなかった。

この発明の組成物は少なくとも１種類の次の物質を含有
し、これらは上記の必須のＩＰ３異性体に対応する。

Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，６−）リホスフェー
ト （式中、Ｘは水素、少なくとも１個の一価、二価もしく
は多価陽イオン、又はこれらの混合であシ、ｎはイオン
の数であシ、モして２はそれぞれのイオンの電荷である
）； Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，５−）リホスフェー
ト （式中、Ｘ、ｎ及び２は上記の意味を有する）；ミオ−
イノシトール−１，２，３−）リホスフエート（式中、
Ｘ、ｎ及び２は上記の意味を有する）；Ｌ−ミオ−イノ
シトール−１，３，４−）リホスフェート（式中、Ｘ、
ｎ及びｉは上記の意味を有する）；Ｄ−ミオ−イノシト
ール−１，４，５−）リホスフェート（式中、Ｘ、ｎ及
び２は上記の意味を有する）。

上記の各式においてｎは６〜１の範囲にあり、２は１〜
６の範囲にある。好ましくはｎは３〜６の範囲にあり、
そして２は３，２．又は１である。

上記の異性体の内Ｄ−ミオーイノシトール−１゜２．６
−）リホスフェートが好ましい。

ＩＰ、は組成物中の唯一の医某活性成分であることがで
きる。しかしながら、他の医薬活性成分が存在すること
もできる。そして、ＩＰ３の量は前記活性成分の重量に
対して５〜９５重量％、又は１５〜８０重ｆｋ例えば２
５〜６０５〜６０重量％べきである。

さらに、組成物は、医薬活性成分の全重量に対して２〜
６０重量％、例えば２〜４０重量％、又は好ましくは°
２〜２５正１％のＩＰ３を含有する多数ビタミンユニッ
トであることができる。

組成物は通常０．Ｏ１〜１．５Ｎ１例えば０．０５〜１
．３．９．又は好ましくは０．１〜１ｇのＩＰ、を含有
する。

この発明の組成物は、体組織中の鉛、水銀、二、ケル及
び／又はクロムの負の効果を低下せしめる方法のために
使用することができる。この方法は、体内の鉛、水銀、
ニッケル及び／又はクロムのイオンを妨害する量のイノ
シトールトリホスフェートをヒト又は動物、すなわち哨
乳類に投与することを含んて成る。

この発明の組成物はさらに、金属中毒、前記金属のいず
れかにより惹起されるアレルギー、炎症状態、結合組織
への障害、肝臓障害、脳障害、免疫不全、ショック状態
、胃腸炎、皮屑炎、及び神経障害のいずれかを予防し又
は軽減するための方法において用いることができる。

さらに、この発明の組成物は、細胞増殖の変化、癌、心
臓血管系挟患、高血圧、中枢神経系への障害、肺への障
害、腎豚障害の予防又は恥。減のための方法において使
用することができる。

これらの方法は、前記の予防又は軽減のために有効な量
のイノシトールトリホスフェートをヒト又は動物に投与
することを含む。

次に、この発明をさらに第１図及び例と関連させて説明
する。例１はＩＰ、に対するそれぞれ鉛、クロム、ニッ
ケル及び水銀の相対錯体定数に関する実験を示す。例２
はＩＰｓに対する鉛の錯体定数に関する実験を示す。例
３はＰｂ　、　Ｎｉ又はＣｒの存在下での細胞膜の桐造
変化についての実験、及びこれらの変化を中和するＩＰ
２の使用に関する。

例４は、赤血球ＵＫ対するＰｂ　、　Ｈｇ及びＣｒの障
害効果についての実験を示す。例５〜１１は、ＩＰ、の
製造、及びそれの異る異性体への分離に関する。例１２
においては、注射のためのＤ−ミオ−イノシトール−１
，２，６−トリホス７エートのカリウム塩の溶液の製造
を示す。最後に例１３はＤ−ミオ−イノシトール−１，
２，６−トリホスフエートのカルシウム塩の錠剤の製造
を示す。

第１図は例１の実験の結果を示す。

例１゜ Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，６−）リホスフェー
）（ＩＰ、）ト、ｉ、クロム、ニッケル及び水銀との相
対錯体定数を、決定した。

４　ｍＭ　ＩＰｓを含有する溶液を１００　ｍＭ　Ｎａ
ＯＨにより滴定した。Ｐｂ　、　Ｎｉ　、　Ｈｇ（１２
ｍＭ）、又はＣｒ（８ｍＭ）の存在下で同様の滴定を行
う。

強い金属錯体が添加されたある量のＮａＯＨにおける声
の低下をもたらすであろう。第１図は実施された滴定及
び相対的金属結合性を示す。ＰＩ″１９において結合性
はＰｂ　（Ｎｌ　（Ｃｒ　（Ｈｇである。

これかられかるように、ＩＰ、は各金属塩に強く結合す
る。

例２゜ 錯体Ｄ−ミオーイノシトール−１，２，６−）リホス７
エートー鉛の結合定数をＮＭＰにより決定した。

イノシトールトリホスフェート溶液に添加された鉛の量
の関数として　Ｐ−ＮＭＲにおいてシグナルの強度及び
比率を比較することにより錯体の結合定数（Ｋ）を１０
’と算出した。

例３゜ 細胞＆の構造は細胞の適当な機能のために非常に本質的
である。リボゾーム（オキシプラインからのホスホリピ
ド）中のＦｅ　（Ｉｆ）の存在が細胞膜を障害すること
が知られている。障害の１つの測定は、金属が調製物に
加えられた場合に形成されるリピド過酸化物の測定であ
る。

この例においては、Ｐｂ　、　Ｎｉ及びＣｒｆｉ−Ｆｅ
（ｌ［）と共に調製物に添加した際の細胞膜の相剰的障
害効果を研究した。さらに、Ｄ−ミオ−イノシトール−
１，２，６−）リホスフェート（ＩＰ３）の存在の予防
効果を評価した。

反応混合物 リポゾーム、シグマタイプ■　　　　　　　１ｍｔｌ／
ｅｘｔＩＰ３　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
１．ＯｍＭ（ＮＨ４）　２Ｆ＠（ＳＯ４）　２　　　　
　　　　　　０．１ｍＭＰｂ　　、Ｎｉ　　、Ｃｒ　　
それぞれ　　　　　０．４ｍＭ反応反応物（１，０ｍ）
を３７℃に−〔２時間インキュベートシた。インキュベ
ーションＯ後、Ｏ，Ｓ−のチオバルビッール酸、及び０
．５　ｄの２５ｑ６ＨＣ１を添加し、そして混合物を１
００℃にて２０分間加熱した。５３２　ｎｒｎにおける
吸光を坤」定することによりリピド過酸化物の量を測定
した。

以下余白 金属濃度（ｍＭ） １　　−　　−　−　　−−　　　０．０４４２　　０
．１　　−　−　　−−０．４７３　　０．１−−　　
−　　　１．０　　０．２５４　　０．１　　０．４　
−　　−　　−　　　０．５４５　　０．１　　０．４
　−　　−　　　１．０　　０．３７６　　０．１　　
−　０．４　　−　　−　　０．７６７　　０．１　　
−　　０．４　　−　　　１．０　　０．３４８　　０
．１　　−−０．４　　−　　　０．５７９　　０．１
　　−　　−　　　０．４　　１．０　　０．２６Ｆ＠
（Ｕ）によｌ）惹起される細胞の構造変化（実験２）は
ｐｂ　（実験４）、Ｎｌ　（実験６）又はＣｒ（実験８
）により非常に増加した。これらの効果はＩＦ３により
中和された（実験５，７及び９）。

細胞膜の構造の障害により生ずる細胞の機能低下は多く
の疾患と関連する。

例４゜ 赤血球を過酸化水素により処理する場合、リピドの過酸
化を受け、これが細胞膜の構造及び赤血球の機能を障害
する。

この例においては、Ｐｂ　、　Ｈｇ及びＣｒが調製物に
添加された場合の赤血球の障害効果の増加を研究した。

さらに、Ｄ−ミオ−イノシトール−１゜２．６−）リホ
スフェー）　（ＩＰ、　）の存在の予防効果を評価した
。

例３に記載したように、５３２　ｎｍにおける吸光度を
生成したリポ過酸化物の量の測定、モしてそれ故に赤血
球細胞膜の損傷の測定として使用した。

反応混合物（赤血球、緩衝液（ｐｌ−１７，４）及びＨ
２Ｏ２を含有する）への添加効果 ２　　　３ｍＭ　ＩＦ　ｓ　　　　　　　　　０．１０
３　　　　０．４ｍＭＰｂ　　　　　　　　　　　　　
０．２２４　　　　０．４ｚＭＰｂ＋３ｍＭＩＰ　　　
　　　０．１３５　　　０．４ｍＭＨｇ”　　　　　　
　０．２６６　　　０．４ｍＭＨｇ　　＋３ｍＭＩＰ、
　　　０．１５７　　　０．４ｍＭＣｒ”　　　　　　
　０．２１ｐｂ（実験３）、Ｈｇ（実験５）又はＣｒ（
実験７）を添加した場合、赤血球の細胞膜への障害が増
加した。

これらの効果はＩＰ、の存在（実験４，６．及び８）に
より強く中和された。

例５゜ 小麦フィターゼによるフィチン酸ナトリウムの加水分解
及びイノシトールホスフェートの混合物の分画を行った
。

１．６９のフィチン酸ナトリウム（トウモロコシ由来、
シグマケミカル社）を６５０ｄの酢酸ナトリウム緩衝液
（ｐ）１５．２）に溶解した。２．７１のフイタ−−に
−（ＥＣ３，１，３，２６，０，０１５Ｕ／７Ｑ、　シ
ｌ”マケミカル社）を添加し、そして混合物を３８℃に
てインキュベートした。

放出された無機リンを測定することにより脱リン敗北を
追跡した。３時間後５ｏチの無ｉ１Ｊンが放出されたと
き、３０−のアンモニアを加えて−Ｉ１２にすることＫ
よシ加水分解を停止した。イノシトールホスフェートを
含有する液体混合物を得た。

３５０ｍ１の混合物をイオン交換カラム（ダウエックス
１．塩化型、　２５ｍ＋ａＸ　２５０＋ｍ）に通し、そ
して塩酸の直線グラジェント（０〜０．７　Ｎ　ＨＣｌ
　）により溶出した。溶出された画分のアリコードを完
全に加水分解してリン酸及びイノシトールの含量を決定
した。ピークは異るイノシトールホスフェートに相当し
た。すなわち、３：１のリン酸対イノシトールの比率は
イノシトールトリホスフェートから成る、等である。リ
ン酸対イノシトールの比率が３＝１である２つの画分を
得た。

例６゜ イノシトールトリホスフェートの分画を行った。

リン酸：イノシトールの比率３：１を有する例５におい
て得られた第一画分１００ｍ７！を中和し、そして１０
％過剰の０．１Ｍ酢酸バリウム溶液の添加の後バリウム
塩として沈澱せしめた。６００ｍ９の沈澱した塩を５０
ｍｊの希塩酸中に溶解した。この溶液を、溶離剤として
希塩酸を用いてイオン交換カラム（ダウエ、クス１．塩
化型、２５ｍＸ２５００ｉｉ）上で分誼した。溶出した
画分の７リコートをリンについて分析した。イノシトー
ルトリホスフェートの異性体から成る３個のピークを見
ることができた。

例７゜ ＮＭＲＫよるイノシトールトリホスフェートの異性体の
構造決定を行った。

例６において得た３個のピークをＨ−ＮＭＲＩＣよシ分
析した。このデーターにより、これらのピークがそれぞ
れミオ−イノシトール−１，２，６−トリホスフェート
、ミオ−イノシトール−１，２，３−トリホスフェート
及びミオ−イノシトール−１，３，４−）リホスフェー
トから成ることが示された。

リン：イノシトールの比率が３：１である例５において
得た第二両分をＨ−ＮＭＲにより分析した。

このデータにより、この両分がミオ−イノシトール−１
，２，５−）リホスフェートから成ることが示された。

ルカム、工γｌ−レ十水、？！巴凡　１ンクリメー２−
でり１斤したし：３．　１．２．７；−）リホス７．−
）は゛）イ東　１３　牛−トリホスフート吋り件τ、あ
、九。

例９ パン醇母によるフ（チン酸ナトリウムの加水分解、及び
イノシトールホスフェートの混合物の分画を行った。

０．７９のフィチン醗ナトリウム（トウモロコシ由来、
シグマケミカル）を６００ｄの酢酸ナトリウム緩衝液（
ｐＨ４，６）中に溶解した。５０Ｉｉのゼスト？ラダッ
ト、スウェーデンからのノやン酵母（乾物２８％、窒素
含ｉｊ：２％、リン含量０．４％）を攪拌しながら加え
、そして４５℃にてインキュベーションを行った。放出
された無機リンを測定することにより脱す／酸化を追跡
した。７時間後５０％の無核リンが放出された時、３０
−のアンモニアを加えてＰＨ１２とすることにより加水
分解を停止した。懸濁液を遠心分離し、そして上清を集
めた。

４００ｔａ！の上清をイオン交換カラム（ダウエックス
１．塩化型、２５關Ｘ２５０龍）に通し、そして塩酸の
直線グラジェント（０〜０．７　Ｎ　Ｈｃｔ　）により
溶出した。

溶出された画分の７リコートを完全に加水分解してリン
及びイノシトールの含量を決定した。ピークは異るイノ
シトールホスフェートに相当した。

すなわち、リン対イノシトールの比率が３：ｌであるピ
ークがイノシトールトリホスフェートから成る、等であ
る。

［ イノシトールトリホスフェートの異性体の構造決定を行
った。

例８に記載したのと同じ方法を使用した。但し、例１０
に従ってＮＭＲにより決定された化合物１０ダを分析し
た。この化合物は１つの光学異性体り一ミオーイノシト
ール−１，２，６−トリホスフスフエートのカリウム塩
の注射用溶液を駅裏した。

ＩＰ、のカリウム塩ｏ、　ｓ　ｙ及び０．７７１ＯＮａ
Ｃ１を９８．７３−の注射用水に溶解してヒト又は動物
への注射に適当な溶液をＶ、ｔ　製した。

乞旦 Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，６−）リホス７エー
トのカルシウム塩の錠剤を鯛製した。

Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，６−）ジホスフェー
トのカルシウム塩の錠剤を次の株にして製造シタ。Ｄ−
ミオ−イノシトール−１，２，６−トリホスフエートの
カルシウムｍ５０＃、１３２Ｉのラクトース及び６ｇの
アカシアを混合した。

次に、この混合物に精製水を加え、次にこの混合を適当
な稠度が得られるまで続けた。混合物を篩に通し、そし
て乾燥した。次に、混合物を１０ｇのタルク及び２ｇの
ステアリン酸マグネシウムとブレンドした。この混合物
を２００ダの錠剤に圧縮した。

この発明をさらに理熔するため、この発明のＩＰ３の異
性体の式を下記する。さらに、　ＩＰ６゜ＩＰ５．　Ｉ
Ｐ４及びＩＰ２の式も記す。

ミオイノシトールの低級ホスフェートエステルを、リン
酸基がイノシトール頂上に位置する場所に依存し、可能
な限シ小さくなる様に番号を付与する。Ｌ及びＤはそれ
ぞれ時計方向及び逆時計方向を示し、どちらが最小の位
置番号をもたらすかに依存する。軸リン酸基を有する炭
素原子は常：（位動゛番号２を有する。下記の構造式は
醗形に単純化されている。

ミオ−イノシトール：　Ｃ６Ｈ６（ＯＨ）６１．２．３
．４．５．６−へキサキス−（ジハイドロジエンーホス
フェート）−ミオ−イノシトール、又はミオ−イノシト
ールへキサキス（ホスフェ−）　）　又ｉ１１Ｐ６Ｄ−
ミオ−イノシトール−１，２，６−）ジホスフェート、
又はＤ　−１，２，６−ＩＰ３ Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，５−１リホスフエー
ト、又はＤ−１，２，５−ＩＰ。

ミオ−イノシトール−１，２，３−）ジホスフェート、
又は１．２．３−　ＩＰ。

Ｌ−ミオ−イノシトール−１，２−ジホスフェート、又
はＬ−１，２−ＩＰ２ Ｄ−ミオ−イノシトール−Ｃ２，ｓ、６−チトラホスフ
エ義ト、又はＤ−１，２，５，６−ＩＰ４Ｌ−ミオ−イ
ノシトール−１，２，３，４，５−ペンタホスフェート
、又はＬ　−１，２，３，４，５−ＩＰ５

【図面の簡単な説明】

第１図は各種金属の存在下でのＩＰ、の適定曲龜を示す
。 特訂出り人 マティ　シレン 特許出願代理人

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、医薬活性成分としてのイノシトールトリホスフェー
   トの少なくとも１種類の異性体を鉛、水銀、ニッケル及
   びクロムから成る群から選ばれた少なくとも１種類の金
   属の体内での負の効果を低減せしめるのに十分な量にお
   いて、医薬として許容されるキャリヤー、賦形剤又は添
   加剤と共に含んで成る医薬組成物。 ２、金属中毒、鉛、水銀、ニッケル又はクロムにより惹
   起されるアレルギー、結合組織の障害、肝臓障害、脳障
   害、免疫不全、ショック状態、胃腸炎、皮膚炎、及び神
   経障害の治療的又は予防止処置のために使用されること
   が意図されることを特徴とする特許請求の範囲第１項に
   記載の組成物。 ３、前記イノシトールトリホスフェートが塩の形態にあ
   る特許請求の範囲第１項に記載の組成物。 ４、前記イノシトールトリホスフェート塩がナトリウム
   塩、カルシウム塩、亜鉛塩もしくはマグネシウム塩又は
   これらの２種類以上から成る混合物である特許請求の範
   囲第３項に記載の組成物。 ５、錠剤又は顆粒剤の形態である特許請求の範囲第１項
   に記載の化合物。 ６、溶液の形である特許請求の範囲第１項に記載の組成
   物。 ７、鉱酸又は有機酸とカルシウム、亜鉛又はマグネシウ
   ムの内の少なくとも１つとの医薬として許容される塩を
   さらに含んで成る特許請求の範囲第１項に記載の組成物
   。 ８、セレン化合物、γ−リノレン酸のごとき不飽和脂肪
   酸、ビタミンＥ、ビタミンＣ、及び医薬として許容され
   る有機酸又はその塩から成る群から選択された少なくと
   も１種類の添加剤をさらに含んで成る特許請求の範囲第
   １項に記載の組成物。 ９、前記塩がクエン酸塩、蓚酸塩、マロン酸塩又は酒石
   酸塩である特許請求の範囲第８項に記載の組成物。 １０、ペニシリンを含有しない特許請求の範囲第１項に
   記載の組成物。 １１、ＩＰ＿３に加えて少なくとも１種類の他の医薬と
   して活性な成分を含有する特許請求の範囲第１項に記載
   の組成物。 １２、ＩＰ＿３の量が活性成分の５〜９５重量％の範囲
   にある特許請求の範囲第１１項に記載の組成物。 １３、医薬として活性な成分の全重量に対して２〜６０
   重量％のＩＰ＿３を含有する多数ビタミンユニットであ
   る特許請求の範囲第１１項に記載の組成物。 １４、０．０１〜１．５１のＩＰ＿３を含有する特許請
   求の範囲第１項に記載の組成物。 １５、ＩＰ＿３が次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、３個のＡはＯＨでありそして他の３個のＡはＯ
   ＰＯ＿３＾−＾−であり、Ｘは水素及び／又は少なくと
   も１個の一価、二価もしくは多価陽イオンであり、ｎは
   イオンの数であり、そしてｚはそれぞれの場合のイオン
   の電荷である） で表わされる特許請求の範囲第１項に記載の組成物。 １６、ｎが６〜１であり、ｚが１〜６であり、そして好
   ましくはｎが３〜６でありそしてｚが３、２、又は１で
   ある特許請求の範囲第１５項に記載の組成物。 １７、前記ＩＰ＿３が次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘは水素、又は少なくとも１個の一価、二価も
   しくは多価陽イオンであり、ｎはイオンの数であり、そ
   してｚはそれぞれの電荷の数である）で表わされるＤ−
   ミオ−イノシトール−１．２．６−トリホスフェートを
   含んで成る特許請求の範囲第１５項に記載の組成物。 １８、前記ＩＰ＿３が次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘは水素、又は少なくとも１個の一価、二価も
   しくは多価陽イオンであり；ｎはそれぞれのイオンの数
   であり、そしてｚは電荷の数である）で表わされるＤ−
   ミオ−イノシトール−１．２．５−トリホスフェートで
   ある特許請求の範囲第１５項に記載の組成物。 １９、前記ＩＰ＿３が次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘは水素、又は少なくとも１個の一価、二価も
   しくは多価陽イオンであり、　ｎはイオンの数であり、
   そしてｚはそれぞれのイオンの電荷である） で表わされるミオ−イノシトール−１．２．３−トリホ
   スフェートを含んで成る特許請求の範囲第１５項に記載
   の組成物。 ２０、前記ＩＰ＿３が次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘは水素、又は少なくとも１個の一価、二価も
   しくは多価陽イオンであり、ｎはイオンの数であり、そ
   してｚはそれぞれのイオンの電荷である） で表わされるＬ−ミオ−イノシトール−１．３．４−ト
   リホスフェートを含んでなる特許請求の範囲第１５項に
   記載の方法。 ２１、前記ＩＰ＿３が次の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘは水素、及び／又は少なくとも１個の一価、
   二価もしくは多価陽イオンであり、ｎはイオンの数であ
   り、そしてｚはそれぞれのイオンの電荷である） で表わされるＤ−ミオ−イノシトール−１．４．５−ト
   リホスフェートを含んで成る特許請求の範囲第１５項に
   記載の組成物。