JPH02191220A - イノシトールトリホスフェートを含有するリポ蛋白質の異常レベルに対する医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、ヒトを含む哺乳類におけるリポ蛋白質のレベ
ルの異常の予防、治療又は軽減のための、イノシトール
トリホスフェート（Ｉｐ３）の少なくとも１種類の異性
体を含んで成る医薬に関する。

〔従来の技術〕

リボ蛋白質代謝の障害は血漿リポ蛋白質の合成及び分解
の異常に関する。これらの異常は代謝の一次的生来的な
誤まりが生じ、又は真正糖尿病、甲状腺機能低下、アル
コール過飲及び肥満のごとき他の種々の状態に対して二
次的である。

高リボ蛋白質血症は血漿中のコレステロール担持リボ蛋
白質又はトリグリセラード担持リボ蛋白質の濃度が無作
為集団の２５パーセンタイルとして定義される通常の正
常レベルを超木る状態である。

リボ蛋白質の濃度の上昇が動脈硬化、血栓症及び感染の
出現を促進すると考えられる。

多くの異るタイプのリボ蛋白質、例えばキロミクロン（
ｃｈｙｌｏｍｉｃｒｏｎ）　、非常に低密度のリポ蛋白
質（ＶＬＤＬ）、低密度リボ蛋白質（ＬＤＬ）　、及び
高密度蛋白質（ＨＤＬ）が存在し、これらは異る量のト
リグリセラード、コレステロール又はその誘導体を含有
する。

すべての高リボ蛋白質血症の治療の原理は正常体重を維
持する食餌を与え、そして血漿中の脂質の濃度を低下せ
しめることである。しかしながら、この治療は不十分で
あり、そしてそれ故に種々のタイプの薬物が使用される
。

ニコチン酸は胃腸の撹乱及び肝臓不全のごとき副作用の
ために使用が制限される。クロフィブレート（Ｃ１ｏｆ
ｉｂｒａｔｅ）はこの分野において使用される他の薬剤
であるが、陽性結果を得るためには投与量が多くなけれ
ばならない、さらに、冠疾患を有する患者の場合、この
薬剤による治療が状態を悪くすると考えられる。他の使
用されている薬剤はゲムフィプロジル（ｇｅａ＋ｆｉｂ
ｒｏｚｉｌ）及びコレスチラミン（ｃｈｏ　ｌｅｓ　ｔ
ｙｒａａ　１ｎｅ）である、前者による臨床経験は比較
的限定されており、そしてその長期間安全性は確立され
ていない、後者は腸内で胆汁酸と結合し、そして必要な
投与量が大であるため患者にとって非常に不愉快である
。

〔発明が解決しようとする課題〕

この分野において種々の薬剤があるにもかかわらず、な
んらの不都合な効果も伴わない効果的な治療が必要であ
る。

〔課題を解決するための手段〕

本発明によれば、驚くべきことに、イノシトールトリホ
スフェート　（ＩＰｓ）の少なくとも１種類の異性体を
用いることにより上記の課題が達成される。

ヨーロッパ特許Ｎａ１７９４３９から、医薬活性成分と
してイノシトールトリホスフェートの少なくとも１つの
異性体を含んで成る医薬組成物が知られている。この特
許において、この医薬組成物の効果は異る分野、例えば
心臓血管疾患及び関節炎について示されている。

本発明の医薬はリボ蛋白質の異常レベル、例えばコレス
テロール又はその誘導体のレベルの上昇、トリグリセラ
ードのレベルの上昇、及びキロミクロン（ｃｈｙｌｏｓ
ｉｃｒｏｍ）　、Ｌ　Ｄ　Ｌ又はＶＬＤＬのレベルの上
昇に関連する状態に対して使用する・ことができる。

１１”ｔの製造及びその種々の異性体の単離は米国特許
Ｎα４．７７７、１３４に開示されている。ＩＰｓの異
性体はまた、例えばイノシトールとリン酸源から出発し
て化学的又は酵素的合成法により製造することができる
。さらに、バイブリドＤＮＡ技法を含む微住物学的製造
法も適当である。

ＩＰ３の構造及びその種々の異性体が米国特許Ｎα４．
７３５，９３６及び米国特許Ｎａ　４，７９７，３９０
に開示されている。

本発明に従って使用される医薬は単位投与型で存在する
のが好ましい、このような単位投与のためには錠剤、顆
粒又はカプセルが好ましい、さらに、胃で制御されない
加水分解を防止し、そして腸での好ましい吸収を行うた
めに錠剤及び顆粒に表面処理例えば腸溶コートを行うこ
とができる。

他の適当な投与形は徐放形及び経皮投与形である。

常用の医薬として許容される添加剤、賦形剤及び／又は
キャリヤーを医薬に含めることができる。

錠剤及び顆粒はまた、これらを腸内で容易に崩壊せしめ
る崩壊剤を含有することができる。ある場合、特に急性
状態の場合には、静脈投与用溶液の形の単位投与形を用
いるのが好ましい。

医薬はまた、添加剤、賦形剤又はキャリヤーをなんら含
有せずＩＰ、のみから成ることもできる。

所望により、医薬は他のイノシトールホスフェートすな
わち、ＩＰ＋　、　ＩＰｚ、　ＩＰａ、　ＩＰｓ及びＩ
Ｐａを含有しないことができる。従って、Ｉｐｓ異性体
の混合物が９０〜１００％例えば９３〜１００％又は好
ましくは９５〜１００％の純度を有することができる。

あるいは、この医薬は、それぞれが実質的に純粋な形で
存在する１又は複数の特定のＩＰ、異性体から成るか又
はそれを含んで成ることができる。

すなわち、種々の異性体を純粋な形で単離することがで
きこのことは、これらが８０〜１００％例えば８２〜１
００％、又は８５〜１００％、好ましくは９０〜１００
％の純度を有することを意味する。言うまでもなく、異
性体を純粋な形で製造することができるからそれを任意
の比率で混合することができる。

医薬は、ＩＰ＆、　ＩＰｓ又はＩＰ、の少なくとも１つ
とＩＰ、を生成せしめるのに適当な酵素のごとき分解性
物質とにより提供されるＩＰ、から成ることができる。

ミネラルバランスに負の影響を与えないように、本発明
の医薬の製造のために使用される１又は複数のＩＰ、異
性体が塩の形で存在するのがほとんどの場合においても
好ましい、塩は好ましくはナトリウム塩、カルシウム塩
、亜鉛塩もしくはマグネシウム塩又はこれらの塩の２以
上の混合物である。

カルシウム塩もしくは亜鉛塩又はこれらの混合物が特に
好ましい、　　ＩＰ、の異性体はまた一部はランタニド
系の１又は複数の生理的に許容される化合物の塩として
存在することができる。

上記の理由により、鉱酸又は有機酸とカルシウム、亜鉛
又はマグネシウムとの医薬として許容される塩１種類以
上を余分に医薬を含有するのも好ましい、これは特に、
しばしばこれらのミネラルを欠いている老人のために特
に価値がある。

ヒトの患者への投与のため、適当な投与量は、種々の投
与量で動物において得られた結果の延長により当業者に
より日常的に決定され得る。ヒトへの好ましい投与量は
０．１〜１０００■、特に０．１〜２００■ＩＰ！／日
／ｋｇ体重の範囲である。

動物実験において、１６０■／ｋｇ体重という高投与量
でのマウスへの腹腔内投与の後、Ｉｈの毒性効果は見ら
れなかった。

医薬は、単位投与当り通常０．０１〜１．５ｇ、例えば
０，０５〜１．３、又は好ましくはｏ、　ｉ〜ｔｇのＩ
Ｐ。

を含有する。

１つの好ましい態様において、ＩＰ３は、Ｄ−ミオ−イ
ノシトール−１，２，６−）リホスフエートである。

この医薬の１つの機能は種々の細胞型の膜、特に血小板
、内皮細胞／及び赤血球の細胞膜への損傷を回復し、予
防し又は軽減することである。この医薬の使用はこれら
の細胞型の改良された安定性、変形に対する感受性の低
下、及び改良された機能をもたらす、さらに、例えば血
管壁への集合性及び付着のごときパラメーターが低下す
る。この医薬の使用は、アルカル性ホスファターゼのご
ときある種の酵素のレベル及び活性に影響を与える。さ
らに、この医薬を使用する場合、イノシトール代謝の正
常化が得られる。この医薬の使用の他の結果は膜流動性
の調節、コレステロールのごとき成分の導入、並びに種
々のホスホリピドの生産、導入及びバランスである。

この医薬の使用の他の結果は細胞の電解質バランスの調
整である０例えばカルシウム、カリウム、塩素、リン酸
等の細胞内レベルの調整が挙げられる。

細胞表面活性、及び例えばリン酸化による受容体の活性
化／不活性化を介しての外部刺激に対する応答は、この
医薬の使用により影響される他のパラメーターである。

この発明を以下の例によりさらに説明する。例１〜４は
ＩＰｓの製造を示し、他方例５及び６はＩＰ３の溶液及
び錠剤の調製を例示する０例７〜９はリポ蛋白質の異常
の種々のレベルに対するＩｈの効果に関する。

１．４ｋｇのフィチン酸ナトリウム（トウモロコシ由来
、シグマケミカル社製）を１２００　ｆの酢酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐＨ４，６）に溶解する。ジェストボラゲッ
ト（ＪＭｓｔｂｏｌａｇｅｔ）　、スエーデン（乾物２
８％、窒素含量２％、リン含量０．４％）を撹拌しなが
ら加え、そして４５°Ｃにてインキュベーシヨンを続け
る。放出される無機リンを測定することにより脱リン酸
化を追跡する。７時間後５０％の無機リンが放出された
時、アンモニアを加えてｐＨ１２にすることにより加水
分解を停止せしめる。懸濁液を遠心し、そして上清を集
める。

８００２の上清をイオン交換カラム（ダウエックス１、
塩素形、１００　ｃｔＸ１５（ｌ　ｃｍ）に通し、そし
て塩酸の直線グラジェント　（０−０，７Ｎ　ＨＣＩ　
）により溶出を行う。

リン／イノシトール比が３：１である例１により得られ
た両分を中和し、そしてカルシウム塩として沈澱せしめ
る１００■の沈澱物をＨ−ＮＭＲにより分析する。デー
タが示すところによれば、ピークはミオ−イノシトール
−１，２，６−１−リボスフエトから成る。

１゜ ０．５ｇのＤ−十ローイノシトール（Ｄ−ｃｈｉｒｏ−
ｉｎｏｓｉｔｏｌ）をｌｌｄのリン酸に６０°Ｃにて溶
解した。

２０ｇのボリソン酸を添加し、そしてこの混合物を真空
下１５０℃にて６時間加熱した。混合物を水で稀釈して
２００ａｄ！にし、そしてイオン交換カラム（ダウエッ
クス１、塩素形２５閤×２５０■）に通し、そして塩酸
の直線グラジェント　（０−２，ＯＮ　ＨＣＩ　）によ
り溶出した。

リンとイノシトールとの比率が６：１であるピークの成
分を、水酸化カルシウムの添加により沈澱せしめた。こ
の沈澱を濾過し、洗浄し、そして１０ｊｄｌの陽イオン
交換樹脂と混合してイノシトールヘキサホスフェートの
酸形を得た。水酸化ナトリウムで中和し、そして凍結乾
燥した後、Ｄ−キロ−イノシトールへキサホスフェート
のナトリウム塩を得た。

■土。

例３に従って製造されたＤ−キロ−イノシトールへキサ
ホスフェートのナトリウム塩０．８　ｇを３００ｄの酢
酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５，２）に溶解した。１．３
ｇの小麦フィターゼ（ＥＣ３，１，３，２６゜０．０１
５Ｕ／■、シグマ・ケミカル社より入手）を添加し、そ
して混合物を３８℃にてインキュベートした。

５０％の無機リンの放出の後、アンモニアを加えてｐＨ
１２にすることにより加水分解を停止せしめた。

Ｄ−キロ−イノシトールホスフェート類を含有する混合
物をイオン交換カラム（ダウエックスｌ、塩素形、２５
ｍｍＸ２５０　ｍ）に通し、そして塩酸の直線グラジェ
ント（０−０，７Ｎ　Ｈ（Ｊ　）により溶出した。

リンとイノシトールの比が３：１であるピークを１．０
Ｍ水酸化ナトリウムにより中和し、そして凍結乾燥した
。

ＮＭＲ及びＩＲによる構造決定にょ゛す、生成物がＤ−
キロ−イノシトールホスフェートであることが示された
。

丘 ＩＲ３のナトリウム塩０．５　ｇ及び０．７７ｇのＮａ
Ｃ１を９８．７３ａｅｆｆｉの注射用水に溶解して、ヒ
ト又は動物に注射するために適当な溶液を得た。

肛、Ｄ−ミオ−イノシトール−１，２，６−）Ｄ−ミオ
−イノシトール−１，２，６−１−リボスフェートのカ
ルシウム塩の錠剤を次の様にして製造した。Ｄ−ミオ−
イノシトール−１，２，６−トリホスフエートのカルシ
ウム塩５０ｇ　、　　１３２ｇのラクトース及び６ｇの
アカシャガムを混合した。

次に、この混合物に精製水を加え、次に適当な稠度が得
られるまで混合を続けた。この混合物を篩に通し、そし
て乾燥せしめた０次に、この混合物を１０ｇのタルク及
び２ｇのステアリン酸マグネシウムとブレンドした。こ
の混合物を２００■の錠剤に圧縮した。

班工。

ＨＤＬのレベルの上昇及びβ−リボ蛋白質のレベルの低
下はリボ蛋白質の異常レベルの有効な治療のために有利
な性質である。

３０匹の雄性ラットに２％のコレステロール及び１％の
コール酸を補充された標準飼料を、１４日間の前処置期
間にわたり与えた。これに続＜１４日間の処置期間のあ
いだラットの一群に０．２％Ｄ−ミオーイノシトールー
１．２．６−１−リボスフエー）　（ＩＰ３）を添加し
た前記飼料を与え、他方のラットには対照として前処置
飼料を与え続けた。脂質−及びコレステロール代謝物の
血清中濃度に対する効果を次の表にまとめる（％）。

処　置　　全コレステ　）ＩＤＬコレステ　β−リボロ
ール　　　ロール　　　　蛋白質 対照　１００　　１００　　１００ すなわち上の表かられかるように、Ｉ’ｈで処置された
動物においてコレステロール及びβ−リボ蛋白質のレベ
ルが低下し、他方ＨＯＬ−コレステロールのレベルは上
昇する。これらのデーターは、ＩＰ。

が体内のりポ蛋白質に有利な効果を与えることを示して
いる。

■工。

ラットへのストレプトシトシン（Ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔ
ｏｃｉｎ）の注射が血漿のリボ蛋白質の増加をもたらす
、約３００ｇ体重の１９匹の雄性ラットを２群に分けた
。

実験の第１日日に群１　（８動物）及び群２（１１動物
）の両方にクエン酸ナトリウム溶液中に稀釈したストレ
プトシトシン（シグマ）を腹腔的注射した。第−週に、
両群に通常の飼料を与え、これに続き、カゼイン、澱粉
、グルコース及びフラクトース、バター並びに種々の油
を含有する飼料を与えた。第２週から始めて、群２には
さらに飼料中に混合したＤ−ミオ−イノシトール−１，
２゜６−トリホスフエー）　（ＩＰ３，１６０■／ｋｇ
飼料）を与えた。

６週間後、動物を６時間絶食せしめ、そして頚静脈から
採血した。トリグリセラードを測定した。

この結果を下記の表に示す。

対照（群１） ＩＰ３（群２） 上の結果かられかるように、ＩＰ、−処置（群２）はト
リグリセラードのレベルを顕著に低下せしめる。

■工。

多量のバターを含有する飼料は血漿及び大動脈の両者に
おいてコレステロールのレベルを上昇せしめる。

約２８００　ｇの体重のラビット３６頭を２群に分けた
。

群１（１９動物）及び群２（１７動物）の両者に、カゼ
イン２５％、シュークロース３３％、ビタミン混合物１
．５％、無機塩２．５％、セルロース８％、コガクズ１
２％及びバター１８％を含有する飼料を与えた。

群２にはさらに、飼料中に混合したＤ−ミオ−イノシト
ール−１，２，６−トリホスフエート（ＩＰ、。

２００■／ｋｇ飼料）を与えた。

６ケ月後、血液サンプルを採取した後に動物を殺した。

大動脈の生検体を抽出してコレステロールの量を測定し
た。血漿及び大動脈中コレステロール濃度の測定結果を
下に示す。

群１（対照） ４．５ ＩＰ、処置により、血清中のコレステロールレベルが低
下し、そして大動脈に取り込まれるコレステロールの量
が減少する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ヒトを含む哺乳類におけるリポ蛋白質の異常レベル
   を予防し、治療し又は軽減するための、イノシトールト
   リホスフェート（ＩＰ＿３）の少なくとも１種類の異性
   体を含んで成る医薬。 ２、前記リポ蛋白質の異常レベルがトリグリセラードに
   関連する、請求項１に記載の医薬。 ３、前記リポ蛋白質の異常レベルがコレステロールに関
   連する、請求項１に記載の医薬。 ４、前記イノシトールトリホスフェートが塩の形である
   請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬。 ５、前記イノシトールトリホスフェート塩がナトリウム
   塩、カリウム塩、カルシウム塩又は亜鉛塩である、請求
   項４に記載の医薬。 ６、前記医薬が錠剤、又は顆粒の形である請求項１〜５
   のいずれか１項に記載の医薬。 ７、前記医薬が溶液の形である、請求項１〜５のいずれ
   か１項に記載の方法。 ８、前記イノシトールトリホスフェートがＤ−ミオ−イ
   ノシトール１，２，６−トリホスフェートである、請求
   項１〜５のいずれか１項に記載の医薬。