JPH02119787A

JPH02119787A - 新規ｄｃ−８９化合物およびその製造法

Info

Publication number: JPH02119787A
Application number: JP63265580A
Authority: JP
Inventors: Keiichi Takahashi; 恵一高橋; Michiaki Ichimura; 通朗市村; Kenichi Muroi; 室井　健一; Shigeo Katsumata; 勝亦　茂夫; Tatsuhiro Ogawa; 達洋小川; Makoto Morimoto; 森本　眞; Tadashi Ashizawa; 芦沢　忠; Hiromitsu Saito; 博満斉藤; Masaji Kasai; 政次河西; Hiroshi Sano; 浩佐野
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Current assignee: KH Neochem Co Ltd
Priority date: 1988-07-22
Filing date: 1988-10-21
Publication date: 1990-05-07
Anticipated expiration: 2012-08-20
Also published as: ATE122045T1; US5138059A; EP0351865A2; JP2642165B2; EP0351865B1; DE68922442T2; DE68922442D1; EP0351865A3

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野本発明は、ＤＣ−８９化合物およびその製造法に関する
。本発明のＤＣ−８９化合物は、抗菌活性及び抗腫瘍活
性を有し、抗菌剤及び抗腫瘍剤として有用である。

従来の技術従来、抗菌作用及び抗腫瘍作用を有する微生物又は植物
由来の低分子物質としては、アンスラ勺イタリン系化合
物、アンスラキノン系化合物、マイトマイシン系化合物
など多くの化合物が報告されている。

〔シーアールシー　ハンドブック　オン　アンタイハイ
オディソク　コンパウンダ、シーアールシブレス（ＣＲ
ＣＨａｎｄｂｏｏｋ　ｏｆ　ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃＣｏ
ｍｐｏｕｎｄｓ、　ＣＲＣＰｒｅｓｓ）　ＩＪ、　Ｓ＾
、　　１９８１　：］。

］ＤＣ，−８９化合物と類似の化合物としてストレプト
マイセス属に属する微生物が生産する抗菌作用及び抗腫
瘍活性を有するＤＣ−８８Ａ及びＤＣ８９Ａ１が（す０
８７１０６２６５に開示されている。

発明が解決しようとする課題優れた抗生物質および抗腫瘍性化合物は常に求められて
いる。

課題を解決するための手段本発明者らは、天然界より多くの微生物を入手して、抗
生物質の生産性を調べたところ、ＤＣ８８Ａ及びＤＣ−
８９ＡＩ生産菌と同じストレプトマイセス属に属する微
生物の培養物中に抗腫瘍活性も有するＤＣ−８８△及び
ＤＣ−８９Ａ１とは異なる抗生物質を見い出した。この
物質を単離精製した結果、新規化合物であることがわか
り、それぞれをＤＣ，−８９Ａ２．ＤＣ，−８９８１，
ＤＣ８９Ｂ２と命名した。下記にＤＣ−８９Δ２、ＤＣ
−８９Ｂ１、ＤＣ−８９Ｂ２及びＤＣ−８９Ａ１の構造
式を示す。本明細書ではＤＣ−８９Ａ１、Ｉ）（、−８
９Ａ２、ＤＣ−８９８１、ＤＣ８９Ｂ２をＤＣ−８９化
合物と総称する。

Ｈ０ＣＨ３ＤＣ，８９Ａ１　・ＸニーＣ１ｌ□−Ｙ＝ＣＩ！ＤＣ−
８９Ａ２：Ｘ−単結合、　Ｙ＝−ＣＬＣｊ２ＤＣ−８９
Ｂ　１　：　Ｘ　＝−Ｃｔ１２−　　Ｙ　＝ＢｒＤＣ−
８９Ｂ　２　：　Ｘ−単結合、　Ｙ＝−Ｃｔ１２ＢｒＤ
（，８９Ａ２　　　ＤＣ，８９ＢＩ　　　ＤＣ−８９８
２それぞれの理化学的性質を以下に示す。

（１，）　　ＤＣ−８９Δ？ ■元素分析：Ｃ５７，２％１１１４．９％、Ｎ７８％■
分子式：　Ｃ２６Ｈ２６Ｎ３０８Ｃｆｆ■分子重：　５
４３（マススペクトル法）■融　点　２３８〜２４０℃
　（分解）■紫外部吸収スペクトル（メタノール中）：
第１図に示す。

■赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ打錠）：　第２図に示
す。

■旋光度　〔α：ｌ　、　−十７．８０°　（ＣＨＣ！
３溶液）■ＰＭＲスペクトル（ＣＤＣｆｆ３中、内部標
準ＴＭＳ　）９．５９（ｌｔｌ、ｓ）、　８．５Ｈ１）
１．ｓ）　　６．９８（ｌｌｔｄ）６．８３（１）１．
ｓ）、　４．５６（２）１．ｂｒｏａｄ　ｄｄ）、　４
．１３（１，１１ｍ）、　４．１１（３１１，ｓ）、　
３．９５（３Ｈ，ｓ）、　３．９１（３１Ｌｓ）３．７
２（３Ｈ，ｓ）、　３．７０（２１１，ｂｒｏａｄ　ｄ
ｄ）、　１．７０（３ＮＳ） ■ＣＭＲスヘ９　）　ル（ＣＤＣＡ　、中、内部標＄Ｔ
ＭＳ）１９６．６．１６９．６．１６０．５．１５０．
４．１５０．１゜１４４．２．１４０．９．１３８．７
．１３７．７．１２９．１１２６．０．１２３．５．１
１９．５　１１５．６．１１２．５１０７．９．９８．
０．７１．２．６１．５．６１．２．５６．４５５．０
．５３．４．４６．４．４２．３．２２．０■溶解性゛
メタノール、エタノール、酢酸エチル　アセトン　クロ
ロホルム　ジメチルスルホキシドによく溶ける。

水、ｎ−ヘキサノにはほとんど溶けない。

（２）　　ＤＣ−８９８１ ■元素分析：Ｃ５３，４％、８４．７％、Ｎ６．５％■
分子式　Ｃ２６１１，１Ｉ３０．Ｂｒ■分子量　５８８
（マススペクトル法）■融　点　１４８〜１４９℃ ■紫外部吸収スペクトル（メタノール中）：第３図に示
す。

■赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ打錠）、第４図に示す
。

■旋光度　［α：ｌ　ｏ　＝　−０，５８°　（［：Ｈ
Ｃ，ｇ３溶液）■ＰＭＲスペクトル（ＣＤＣｎ３中、内
部標準ＴＭＳ）９．３７（Ｉｌｌｓ）、　８．０６（ｉ
ｌｌｓ）、　７．０９（ＬＨ，ｓ）６．７１［ｔｌ、ｓ
）、　６．６２（ＬＨ，ｒｌ）、　４．５８（ＬＨ，ｄ
ｄ）４．５５（］ｔ１．ｍ）、　４．０９（Ｉｉｌ、ｄ
）、　３．９９（３Ｈ，ｓ）３．８９（３ｆ１．ｓ）、
　３．８１（３Ｈ，ｓ：１．３．７５（ＩＩＩ、ｄｄ）
３．７４（３ｔ１．ｓ）、　３．６３（１１Ｌｄｄ）、
　１．６４（３１１，ｓ）■［ＭＲスヘクトル（ｃＤＣ
β３中、内部様１＄ＴＭｓ）１９６．８．１６９．７．
１６４．５．１５１．７．１５０．２１４１．６．１４
０．４．１３８．９．１２９．１．　］、２８．９１２
６．１．１２３．１．　１１７．１．１１６．６　１１
８２＋０８．３．９７．９．７１．１．６１．５．６１
．２．５６．３５３．４．５３．０．４４８．３３９　
２１８■溶解性：メタノール、エタノール、酢酸エチル
、アセトン　クロｌ−】ホルム　ジメチルスルホキシド
によく溶ける。

水、叶ヘキ勺ンにはほとんど溶けない。

（２）　　ＤＣ−８９Ｂ２ ■元素分析：Ｃ５３，２％、１１４．５％、Ｎ７．２％
■分子式　じｚ６Ｈ２ａＮ３ＤｓＢ　ｒ■分子量＋　５
８８　（マススペクトル法）■融　点　２１４へ一２１
５℃　（分解）■紫外部吸収スペクトル（メタノール中
）：第５図に示す。

■赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ打錠）：　第６図に示
す。

■旋光度　〔α］　ｎ　−４−６，７８°　（Ｃ１，：
β３溶液）■ＰＭＲスヘｔ）　）　ル（［：ＤＣ［３中
、内部様＄ＴＭＳ）９．５２（ＩＨ，ｓ）、　８．５１
（Ｉ）１．ｓ）、　６．９９（Ｉｆｔ、ｄ）６．８４（
ＬＨ，ｓ）、　４．６０（ｌｌＬｄｄ）、　４．５１（
ＩＨ，ｄｄ）。

４．１５（１）１．ｍ）、　４．１３（３Ｎ、ｓ）、　
４．０３（ｌｔｌ、ｄｄ）。

３．９５（３１１，ｓ）、　３．９１（３１ｆ、ｓ＞、
　３．７３（３Ｈ，ｓ）。

３、５９　（ＬＨ，ｄｄ）　、　１．７０　（３Ｈ，ｓ
）■Ｃ１ＡＲスヘク）　ル（ＣＤＣＡ　ｎ中、内部様ｉ
＄ＴＭｓ　）１９６．６．　１６９．５．　１６０．５
．　１５０．４　１５０１１４４．２．　　＋４０．９
．　１３８．７．　１３７．６．　１２９．１゜１２６
．０．　１２３．５．　１２０．２．　１１５．６　１
１２５＋０７．９．　９８．０．　７１．２．　６１．
５．　６１．２．　５６．４゜５６．１．　５３．４．
　４２．０．　３５．６．　２２．０■溶解性°メタノ
ール、エタノール、酢酸エチル、アセトン、クロロホル
ム、ジメチルスルホキシドによく溶ける。

水、ｎ−ヘキサノにはほとんど溶けない。

ＤＣ−８９Ａ２．ＤＣ−８９８１及びＤＣ８９Ｂ２の薄
層クロマトグラフィー〔シリカゲル（商品名　ＨＰＴＩ
−Ｃ−ｐｌａｔｅｓ八ｒｔ、１へ６４７　　Ｅ。

Ｍｅｒｃｋ社西独製）を用い、アセトニ）　ＩＪル、水
９゛１を展開溶媒として、室温で１０分間展開する。〕
でのＲｆ値は第１表の通りである。

第　　　　１　　　　表化合物　　　Ｒｆ値ＤＣ−８９Ａ２　　０．４ＩＤＣ，−８９Ｂ］、　　　０．４６ＤＣ−８９Ｂ２　　０．４２展開後のＤＣ−８９化合物のスポットはバチルス・ズブ
チリス　（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｉｓ）を用
いるバイオアッセイ、熱硫酸、ヨウ素、エールリッヒ試
薬および紫外部吸収より検出できる。

次にＤＣ−８９化合物の生物学的性質について説明する
。

（八）各種細菌に対する抗菌作用抗菌作用はハクト・トリプトン（Ｄｉｆｃｏ社製）３ｇ
、肉エキス３ｇ、酵母エキスＩｇ、クルコースＩｇ、寒
天１６ｇを１！の水に溶解して作成した培地（ｐＨ７）
を用いて寒天希釈法で測定した。

第２表に抗菌活性を最少生育阻止濃度ＣＭＩＣ）で示し
た。

第表各種細菌に対する最少生育阻止濃度（ＭＩＣ；μｇ／ｍ１）（Ｂ）急性毒性マウスに対する腹腔内投与における急性毒性の値（ＬＤ
５．）は、Ｄ（，８９Ａ２について約３．８３ｍｇ／ｋ
ｇ。

ＤＣ−８９８１について約０．３７　ｍｇ／　ｋｇＸＤ
　Ｃ８９Ｂ２について約０．２８ｍｇ／ｋｇであった。

（Ｃ）抗腫瘍作用（１）ザルコーマ１８０固形型腫瘍に対する治療効果体重約２０ｇのｄｄｙ雄マウマウス１群６ツルコーマ１
８０固形型腫瘍細胞５ＸＩＯ’個を腋窩部皮下に移植し
た。移植後２４時間目に第３表に示す濃度のＤＣ−８９
化合物のリン酸緩衝液生理食塩水（以下ＰＢＳという）
溶液０２ｍ１を１回腹腔内に投与した。

ＰＢＳの組成はＮａＣｐｏ、　８　ｇ　／　ａ、ＫＣｊ
！　０．０２　ｇ／ａ〃、　Ｎａ２１ＩＰ０．１．１　
５　　ｇ　／　ａ、　ＫＩＩ２ＰＯ−０，０２ｇ　／　
Ｃ２、ｐＨ７，２である。

比較として、腫瘍細胞移植後２４時間目にマイトマイシ
ンＣを含むＰＢＳ０．２ｍｌを腹腔内に投与した群を設
けた。

移植１０日後のＴ／Ｃ［Ｔ　：試験例の平均腫瘍体積（
ｍｍ３）、Ｃ：対照（Ｐ　Ｂ　Ｓ溶液０．２ｍｌを腹腔
内投与したもの）〕を測定した。

その結果を第３表に示す。

第３表被検物質　　　　投５量（ｍｇ／ｋｇ）　　　Ｔ／ＣＤ
Ｃ−８９Ａ２　　　　３　　　　　　　０．１９ＤＣ−
８９Ｂ１．　　　　０．５　　　　　　０．２２ＤＣ−
８９Ｂ２　　　　０．２５　　　　　０．２８マイトマ
イシンＣ４０，３０（２）　　リンホサイティック・リュウケミアＰ−３８
８腫瘍に対する治療効果体重約２２ｇのＣＤＦ、雄マウス１群５匹に、リンホサ
イティック・リュウケミア（Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｉｃｌ
ｅｕｋｅｍｉａ）　Ｐ−３８８腫瘍細胞ｌＸｌ０”個を
腹腔内移植した。移植後２４時間目にＤＣ−８９化合物
のＰＢＳ溶液０．２ｍｌを１回腹腔内に投与した。比較
として、腫瘍細胞移植後２４時間目にマイトマイシンＣ
のＰＢＳ溶液０．２ｍｌを■ｕ腔内投与した群を設けた
。移植後の延命効果（Ｔ／Ｃ；　Ｔ　：試験例の平均生
存日数、Ｃ９対照の平均生存日数）を第４表に示す。

第表被検物質　　　　　投与量　　　延命効果（Ｔ／Ｃ）Ｄ
Ｃ−、−８９Δ２　　　０．１２５　　　　１．３５Ｄ
Ｃ，−８９Ｂ１　　　０．０１５６　　　１．３５ＤＣ
−８９Ｂ２　　　０．０７８１　　　１．１９マイトマ
イシンＣ４１，６６る。

ＤＣ−８９化合物は、ストレプトマイセス属に属し、Ｄ
Ｃ−８９化合物を生産する能力を有する微生物を培地に
培養し、ＤＣ−８９化合物を培養物中に蓄積させ、該培
養物からＤＣ−８９化合物を採取することによって得る
ことができる。

本発明において使用する微生物は、ストレプトマイセス
属に属し、ＤＣ，８９化合物を生産する能力を有する微
生物であればいずれの微生物も用いることができる。好
適な微生物としては、ＷＯ３７１０６２６５公報記載の
ストレプトマイセス・リデイカスＤＣ−８９株（ＦＥＲ
Ｍ　ＢＰ−９８８）が挙げられる次に培養法について述
べる。

本発明の培養においては、通常の放線菌の培養法が一般
に用いられる。培地としては、微生物の資化可能な炭素
踪、窒素源、無機物及び微生物の生育やＤＣ−８９化合
物の生産を促進する物質を程よく含有する培地であれば
合成培地、天然培地いずれでも使用可能である。

炭素源としてはクルコース、澱粉、デキストリン、マン
ノース、フラクトース、シュクロース、ラクトース、キ
ンロース、アラビノース、マンニトール、糖蜜などが単
独または組み合わせて用いられる。さらに、閑の資化能
によっては炭化水素、アルコール類、有機酸なども用い
られる。窒素源としては塩化アンモニウム、硫酸アンモ
ニウム、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素、ペ
プトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、コーンスチ
ープ・リカー、大豆粉、カザミノ酸などが単独または組
み合わせて用いられる。そのほか、必要に応じて食塩、
塩化カリウム、臭化カリウム、硫酸マクネシウム、炭酸
カルシウム、リン酸三水素カリウム、リン酸水素二カリ
ウド、硫酸第一鉄、塩化カルシウム、硫酸マンガン、硫
酸亜鉛、硫酸銅などの無機塩類を加える。さらに使用菌
の生育やＤＣ−８９化合物の生産を促進する物質、例え
ばビタミンＢ１、ビオチンなどを適当に添加することが
できる。

培養法としては、液体培養法、とくに深部攪拌培養法が
もっとも適している。培養温度は２５〜４０℃、特に２
８〜３８℃が適当であり、培養中の培地のｐＨはアンモ
ニア水や炭酸アンモニウム溶液などを添加しで、ｐＨ４
〜１０、特に６〜８に維持することが望ましい。

液体培養で、通常１〜７日培養すると、目的物質が培養
液中および菌体に生成蓄積される。

培養物中の生成量が最大に達したときに培養を停止し、
培養物中より目的物質を屯離精製する。

培養物からのＤＣ−８９化合物の単離精製は、微生物代
謝生産物をその培養物から単離精製するた必に常用され
る方法に従って行われる。

例えば培養物を濾過により培養ρ液と菌体に分け、菌体
をｎ−プロパツール、クロロホルム、アセトン等で抽出
する。ついで、抽出液と培養Ｐ液とを合わせて、非イオ
ン性多孔性樹脂例えばダイヤイオンＨＰ−２０（三菱化
成社製）等に通路して活性成分を吸着させ、ついでメタ
ノール、アセトン等で溶出する。溶出液を濃縮し、濃縮
物にｐＨ５〜６の水と酢酸エチルを加えて振りまぜ、酢
酸エチル層に活性成分を移行させる。

酢酸エチル層を濃縮乾固してＤＣ−８９化合物の粗粉末
を得る。この粗粉末は結晶化、セファデックス、シリカ
ゲル等を用いるタロマトクラフィ等によってさらに純度
を高めることができる。

ＤＣ−８９化合物は、また、ＤＣ）−８８Ａを塩酸ある
いは臭化水素酸で反応させるか又はｐ　Ｈ３〜６の緩衝
液中で、式％式％（）（式中、Ｍはリチウム、ナトリウム、カリウム、カルシ
ウム、マク不シウム、アルミニウム、亜鉛、銅を表わし
、χは塩素または臭素であり、ｎは１〜３の整数である
。）で表わされる化合物を反応させることにより製造す
ることができる。

ＤＣ，−８９化合物のうちＤＣ−８９Δ１及びＤＣ，−
８９Ａ２はＤＣ−８８Ａを不活性溶媒中、塩酸あるいは
有機溶媒中の塩化水素と反応させることにより、製造す
ることができる。不活性溶媒としてアセトニトリル、塩
化メチレン、ジメチルホルムアミド、酢酸エチル、テト
ラヒドロフラン、アセトン、水等が単独もしくは混合し
て用いられる。塩酸あるいは塩化水素は通常ＤＣ−８８
八に対し１〜５０当量用いられる。反応は通常−２０〜
３０℃で行い、５分〜２時間で終了する。

ＤＣ−８９化合物のうちＤＣ−８９８１及びＤＣ−８９
Ｂ２は上記の反応において、塩酸のかわりに、臭化水素
酸を用いて反応を行うことにより、製造することができ
る。

またＤＣ−８８Ａを不活性溶媒とｐＨ３〜６の緩衝液と
の混合溶媒中式　　　　ＭＸｎ　　　　　　　（Ｉ）（式中、Ｍ、Ｘ
、ｎは前記と同（である）で表わされる化合物〔以下化
合物（Ｉ）という。〕と反応させることに、よりＤＣ−
８９△１、ＤＣ８９Δ２、ＤＣ−８９８１またはＤＣ−
８９Ｂ２を製造することができる。不活性溶媒としてア
セトニトリル、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフ
ラン、アセトン、塩化メチレン等が単独もしくは混合し
て用いられる。

化合物（Ｉ）はＤＣ−８８Ａに対して通常２〜３０当量
用いられる。ｐＨ３〜６の緩衝液として０．０２Ｍ−Ｉ
　Ｍの酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液等が
用いられる。反応は通常Ｏ〜６０℃で行い、１時間〜３
日で終了する。

各工程の反応終了後、必要に応じて緩衝液、水等を加え
、酢酸エチル、クロロホルト、エーテル等の非水溶性溶
媒で抽出する。水、食塩水等で洗浄後、無水硫酸ナトリ
ウト等で乾燥し、溶媒を留去する。残渣をシリカゲルに
よるカラムクロマトクラフィー、薄層クロマトクラフィ
ー、高速液体分取りロマトグラフィー、再結晶等により
精製を行う。

■ＤＣ−８９化合物はそれ自体よりなる、又はその冶効
量と医薬補助剤とを含有してなる抗生物質、抗腫瘍剤き
して用いることができる。７ここに医薬補助剤は常用さ
れる希釈剤、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、基剤等
を包含する。

ＤＣ−８９化合物は各種の投与形態で用いることができ
る。注射剤として用いる場合には、希釈剤としてこの分
野で常用されているもの、例えばエタノールにＤＣ−８
９化合物を溶解後、エタノルを吸引除去するか又はせず
に、注射用蒸留水、生理食塩水又はブドウ糖、フラクト
ース、マンニント等を含有する注射用蒸留水と混合して
製造する。溶解時必要に応じ界面活性剤、可溶化剤を併
用することもできる。

又、エタノール溶液を凍結乾燥した注射剤や塩化す）　
＋Ｊウドとを混合した粉末注射剤としてもよく、これら
の場合は用時溶解して用いる。これらの注射剤は例えば
静脈内投与に供せられるが、筋肉的投与、動脈内股４．
ＩＩ！腔内投与、胸腔内投与等も可能である。

経口投与用製剤はＤＣ−８９化合物及び適当な賦形削、
崩壊剤、結合剤、滑沢剤等を常法により混合、成型して
錠剤、ね剤、粉剤とすることにより製造する。

投与量は投与法、ＤＣ−８９化合物の種類、年齢、症状
等により異なるが、−船釣には人を含む捕乳動物に対し
１日あたりＤＣ−８９化合物として、０．５〜７５ｍｇ
／　６０ｋｇが適当である。

次に本発明の実施例をあげる。実施例中のＤＣ８９化合
物の動向は、バチルス・スブチリスＮ。

１０７０７を用いるハイオアソセイ、または薄層クロマ
トクラフィー又は高速液体クロマトグラフィにおける各
ＤＣ−８９化合物の紫外部吸収を目安にして追跡した。

実施例１種菌とし、てストレプトマイセス・リデイカスＤＯ−８
９（ＦＯＲＭ　ＢＰ−９８８）を用いる。該菌株を２ｐ
容量の三角フラスコ中の種培地〔可溶性デンプン２５ｇ
／ｊｌ！、クルコース５ｇ／β、酵母エキス１ｇ／ｌ、
ペプトン−Ａ（極東製薬社製）１０ｇ／β、炭酸カルシ
ウム１．ｇ／、ｉ！、殺菌前ｐ　Ｈ７，２］２２００ｍ
に植菌し、２８℃で４８時間振盪（２０Ｏｒｐｍ）培養
した。

かくして得られた種培養液を３０ｊｌ’容量のジャファ
ーメンタ−中の上記種培地と同−ａ成のｊ８地１５１に
５％（容量）の割合で移し、２８℃で２４時間攪攪拌式
（回転数２０　Ｏｒｐｍ　、通気量１５１／分）により
培養を行った。かくして得られた培養液を２００Ａ容量
のタンクファーメンタ中の下記組成の発酵培地１５０β
に１０％（容量）の割合で移し、２８℃で通気攪拌方式
（回転数２０Ｏｒｐｍ、通気量１５β／分）により培養
を行った。

発酵培地組成　マルトース５０ｇ／ｊ２、ドライイスト
１５ｇ／β、エビオス（朝日麦酒社製）２５ｇ／β、Ｋ
Ｃｌ　１０ｇ／ＣＫＨ２Ｐ０゜０、５　ｇ／　ｊｌ！、
　Ｍｇ　Ｓ　Ｏ４・７Ｈ２００，５ｇ／Ｃ炭酸力ルンウ
ム５ｇ／１２（殺菌前ｐ　Ｈ５，０，６ＮＨ２Ｓ○４に
て調整）培養中培地のｐＨは制御しないで、１００時間培養した
。培養物より菌体および沈殿物をρ別し、Ｐ液１００β
を拐た。一方、菌体および沈殿物は、ｎ−プロパツール
５［［を加え充分に攪拌後、濾過し、ｎ−プロパツール
抽出液４１を得た。培養Ｐ液およびｎ−プロパツール抽
出液を合わせて（合計］、４１ＪＡ）、ダイアイオンＩ
ＩＰ−２０（三菱化成社製）５！に通塔して活性物質を
吸着させた。水および７０％メタノール水溶液で順次洗
浄し、ついでメタノールで溶出した。メタノール溶出画
分１縮し、酢酸エチル１０１で抽出した。

酢酸エチル抽出液を濃縮後、ｎ−ヘキ勺ンを加えるとＤ
Ｃ−８９Ａ　２の粗粉末が得られた。ＤＣ８９Δ２の粗
粉末をメタノールから再結晶することにより純粋なりＣ
−８９Δ２を１！得た。得られたＤｃ−８９Ａ２の理化
学的性質、抗菌活性、抗腫瘍活性は前記のとおりである
。

実施例２実施例１において発酵培地を次のものに代えて行う以外
は実施例１と同様に培養を行った。

発酵培地組成、マルトース５０ｇ／ｆｆ、ドライイース
ト１５ｇ／ｆｌ、エビオス（朝日麦酒社製）２５ｇ／ｎ
、ＫＢｒ　　　１０ｇ／４７Ｓ　Ｋ８２Ｐ０゜０、５　
ｇ　／　ＲＳＭ　ｇ　Ｓ　Ｏ４・７Ｔ−Ｔ２００５ｇ／
β、炭酸カルシウム５ｇ／、Ｉ２（殺菌前ｐ　！−（５
，０，６ＮＨ２ＳＯ４にて調整）得られた培養物を１２Ｎ−Ｈ（ｌでｐ　Ｈ４，５に調整
後菌体および沈殿物を戸別し、Ｐ液１００．ｉ！を得た
。一方、菌体および沈殿物は、η−プロパツール５０β
を加え充分に攪拌後、濾過し、ηプロパツール抽出液４
５ｊ２を得た。培養ρ液およびｎ−プロパツール抽出液
を合わせて（合計１４０１）、ダイアイオンＨＰ−２０
（三菱化成社製）５！に通塔して活性物質を吸着させた
。水および７０％メタノールで順次洗浄し、ついでメタ
ツルで溶出し、ＤＣ−８９８１を含むメタノール溶出画
分とＤＣ−８９Ｂ２を含むメタノール溶出画分を得た。

Ｄ（，８９Ｂ１を含むメタノール溶出画分は濃縮後、ダ
イアイオンＨＰ−２０ＳＳ　（三菱化成社製）２００ｍ
ｌに通塔し、ｐＪ（４，０の８０％メタノール水溶液で
溶出した。ＤＣ，−８９Ｂ１を含む溶出画分を濃縮し、
酢酸エチルで抽出した。

酢酸エチル抽出液を濃縮後、ｎ−ヘキサノを加えて、純
粋なりＣ−８９Ｂ１　０．５ｇを得た。得られたＤＣ−
８９８１の理化学的性質、抗菌活性、抗腫瘍活性は前記
の通りである。

ＤＣ−８９Ｂ２を含むメタノール溶出画分は濃縮後、ダ
イアイオンＨＰ−２０ＳＳ　（三菱化成社製）５００ｍ
ｌに通塔し、ｐ　Ｈ４，０の８５％メタツル溶液で溶出
した。Ｄ（，８９Ｂ２を含む溶出画分を濃縮し、酢酸エ
チルで抽出した。酢酸エチル抽出液を濃縮後、η−ヘキ
勺ンを加えて、ＤＣ８９Ｂ２の粗粉末を得た。得られた
ＤＣ−８９Ｂ２の粗粉末をメタノールより再結晶して、
純粋なりＣ−８９Ｂ２　１．５ｇを得た。得られたＤＣ
８９Ｂ２の理化学的性質、抗菌活性、抗腫瘍活性は前記
の通りである。

実施例３ＤＣ−８８Ａ　　３０ｍｇをアセトニトリル２ｍｌと０
．１Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ５）２ｍｌに溶解し、塩化
カリウム４４ｍｇを加え、室温で７時間４０分攪拌した
。反応液をそのまま、高速液体クロマトグラフィー（カ
ラム：　Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ　Ｃ＋ａφ２０ｍｍＸ　２
５０ｍｍ、　５０％アセトニ）　ＩＪルー水　１０ｍ１
／分で溶出）で精製してＤＣ−８９Ａ１　５．３ｍｇ（
収率１６．５％）　、ＤＣ−８９Ａ２　２４．２ｍｇ　
（収率７５．３％）を得た。

発明の効果本発明により、抗菌活性及び抗腫瘍活性を有するＤＣ−
８９化合物が提供される。

【図面の簡単な説明】

第１図はＤＣ−８９Ａ２の紫外部吸収スペクトル（メタ
ノール溶液）を示す。第２図はＤＣ−８９Ａ２の赤外部
吸収スペクトル（ＫＢｒ打錠）を示す。第３図はＤＣ−
８９８１の紫外部吸収スペクトル（メタノール溶液）を
示す。第４図はＤＣ８９Ｂ１の赤外部吸収スペクトル（
ＫＢｒ打錠）を示す。第５図はＤＣ−８９Ｂ２の紫外部
吸収スペクトル（メタノール溶液）を示す。第６図はＤ
Ｃ，−８９Ｂ２の赤外部吸収玉ベクトル（ＫＢｒ杓錠）
を示す。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）ＤＣ−８８Ａを塩酸あるいは臭化水素酸と反応さ
せるか又はｐＨ３〜６の緩衝液中で、式ＭＸｎ（ I ）（式中、Ｍはリチウム、ナトリウム、カリウム、カルシ
ウム、マグネシウム、アルミニウム、亜鉛、銅を表わし
、Ｘは塩素または臭素であり、ｎは１〜３の整数である
。）で表わされる化合物を反応させることにより式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘは単結合または−ＣＨ＿２−であり、Ｘが単
結合の場合ＹはＣＨ＿２ＢｒまたはＣＨ＿２Ｃｌであり
、Ｘが−ＣＨ＿２−の場合ＹはＢｒまたはＣｌである。）で表わされるＤＣ−８９化合物を得ることを特徴とす
るＤＣ−８９化合物の製造法。
（２）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘは単結合または−ＣＨ＿２−であり、Ｘが単
結合の場合ＹはＣＨ＿２ＢｒまたはＣＨ＿Ｃｌであり、
Ｘが−ＣＨ＿２−の場合ＹはＢｒである。）で表わされ
る新規ＤＣ−８９化合物。
（３）ストレプトマイセス属に属し、請求項（２）に記
載のＤＣ−８９化合物を生産する能力を有する微生物を
培地に培養し、ＤＣ−８９化合物を培養物中に生成蓄積
させ、該培養物からＤＣ−８９化合物を採取することを
特徴とするＤＣ−８９化合物の製造法。