JP4280071B2 - 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 - Google Patents
改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4280071B2 JP4280071B2 JP2002568744A JP2002568744A JP4280071B2 JP 4280071 B2 JP4280071 B2 JP 4280071B2 JP 2002568744 A JP2002568744 A JP 2002568744A JP 2002568744 A JP2002568744 A JP 2002568744A JP 4280071 B2 JP4280071 B2 JP 4280071B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- propeptide
- gdf
- modified
- seq
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/06—Anabolic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/51—Bone morphogenetic factor; Osteogenins; Osteogenic factor; Bone-inducing factor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Immunology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
本発明は、増殖分化因子8(GDF−8)タンパク質のインヒビターおよびその使用方法に関する。より詳細には、本発明は、GDF−8の活性を阻害する、GDF−8タンパク質の改変され安定化されたプロペプチドを提供する。本発明は、骨格筋組織の増加が治療上有益であるヒト障害または動物障害を予防または処置するために特に有用である。このような障害としては、筋障害または神経筋障害(例えば、筋萎縮性側索硬化症、筋ジストロフィー、筋萎縮症、うっ血性閉塞性肺疾患、筋るいそう症候群、筋肉減少症(sarcopenia)、悪液質)、代謝疾患または代謝障害(例えば、2型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、高血糖症、または肥満)、脂肪組織障害(例えば、肥満)、または骨変性疾患(例えば、骨粗鬆症)が挙げられる。
増殖および分化因子8(GDF−8)(ミオスタチンとしても公知)は、構造的に関連する増殖因子のトランスフォーミング増殖因子β(TGF−β)スーパーファミリーのメンバーであり、このスーパーファミリーはすべて、重要な増殖調節特性および形態発生特性を有する(Kingsleyら(1994)Genes Dev.8:133−46;Hoodlessら(1998)Curr.Topics Microbiol.Immunol.228:235−72)。GDF−8は、骨格筋量の負のレギュレーターであり、その生物学的活性を調節する因子を同定することにかなり興味が存在する。例えば、GDF−8は、発生中および成体の骨格筋において高度に発現される。トランスジェニックマウスにおけるGDF−8ヌル変異は、骨格筋の顕著な肥大および過形成により特徴づけられる(McPherronら(1997)Nature 387:83−90)。骨格筋量における同様の増加が、ウシにおける天然に存在するGDF−8の変異において明らかである(Ashmoreら(1974)Growth 38:501−507;SwatlandおよびKieffer(1994)J.Anim.Sci.38:752−757;McPherronおよびLee(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.94:12457−12461;Kambadurら(1997)Genome Res.7:910−915)。最近の研究はまた、ヒトHIV感染に関連する筋るいそうが、GDF−8タンパク質発現の増加を伴うことを示した(Gonzalez−Cadavidら(1998)PNAS 95:14938−43)。さらに、GDF−8は、筋特異的酵素(例えば、クレアチンキナーゼ)の生成を調節し得、そして筋芽細胞増殖を調節し得る(WO00/43781)。
GDF−8は、多くの重要な生物学的プロセスの調節に関与する。これらのプロセスにおけるそのGDF−8の重要な機能に起因して、GDF−8は、治療介入のための望ましい標的であり得る。天然に存在するGDF−8プロペプチドは、効力および毒性の予測から、魅力的なGDF調節手段であり得るが、本発明は、天然のプロペプチドの循環半減期が、実際の治療用途または予防用途をこの分子が有するには、短すぎるかもしれないことを発見した。
用語「GDF−8」、「GDF−8タンパク質」または「GDF−8ポリペプチド」とは、配列番号1に示されるもの、ならびに現在既知であるかまたは後に記載される、その任意のホモログ(他の種のホモログを含む)を含むがこれに限らない、特定の増殖および分化因子を指す。特に好ましいのは、哺乳動物ホモログであり、最も好ましいのは、ヒトホモログである。本発明はまた、GDF−8分子および他のすべての供給源に由来するホモログ(ウシ、イヌ、ネコ、ニワトリ、マウス、ラット、ブタ、ヒツジ、シチメンチョウ、ヒヒ、および魚に由来する、GDF−8を含むが、これらに限定されない)を包含する。種々のGDF−8分子が、McPherronら(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94:12457−12461に記載されている。ホモログは、当該分野で周知である。相同性は、当該分野で公知あるかまたは本明細書中に記載される任意の方法によって、決定され得る。このGDF−8またはGDF−8タンパク質は、天然に存在しても、合成であってもよい。これらの用語は、このタンパク質のプロセシングされていない全長前駆形態(「GDF−8前駆体タンパク質」)、ならびにそのプロペプチドの翻訳後切断から生じる成熟形態を包含する。この用語はまた、本明細書中で考察されるGDF−8タンパク質に関連する1つ以上の生物学的活性を維持する、GDF−8タンパク質の任意のフラグメントもしくは改変体(そのアミノ酸配列に対する保存的変化または非保存的変化により改変されている配列を含む)も指す。
本発明は、GDFプロペプチドが、短いインビボ半減期を有し、それにより、GDF−8活性またはBMP−11活性の薬理的インヒビターとしてのこのプロペプチドの有効性を低下させるという発見に一部基づく。従って、1つの局面では、本発明は、改善された薬物動態学的特性(詳細には、増加した循環半減期)を有する改変および安定化されたGDF−8またはBMP−11プロペプチドを特徴とする。
(ペプチドの切断を防止するために変異可能な例示的アミノ酸)
GDF−8(配列番号1で参照されるアミノ酸番号)
Arg−45
Gln−46
Lys−49
Ser−50
Arg−52
Ile−53
Lys−63
Leu−64
Arg−65
Leu−66
Arg−98
Asp−99
BMP−11(配列番号7で参照されるアミノ酸番号)
Asp−122
Ala−123
Glu−286
Leu−287
上記のように、本発明は、GDFプロペプチドが短いインビボ半減期を有するという発見を成し遂げた。従って、治療剤または予防剤として薬学的に有用であるためには、GDFプロペプチドは、生理学的条件下で増加した寿命について、化学的または物理的に安定化されなければならない。
(1)GDFプロペプチド(例えば、ヒトGDF−8プロペプチド、配列番号5、またはヒトBMP−11プロペプチド、配列番号11)(これらは、タンパク質分解切断部位およびIgG分子のFc領域(例えば、ヒトIgG1 Fc領域(配列番号15))を不活化するように改変される)をコードする、cDNA分子を調製する工程、
(2)適切な原核生物発現系または真核生物発現系において、適切な発現プラスミドおよび細胞を使用して、cDNAを発現する工程;および
(3)改変GDFプロペプチドを含む、発現された融合タンパク質を単離および精製する工程であって、ここで、改変GDFプロペプチドは、非改変GDFプロペプチドと比較して、インビボまたはインビトロで増加した半減期を有する、工程、
により、GDF−8/IgG1 Fc融合タンパク質またはBMP−11/IgG1 Fc融合タンパク質を含む改変GDFプロペプチドを調製する工程を包含する。
本発明のGDFプロペプチドは、ヒトまたは動物における種々の医療障害を予防または処置するために有用である。GDFプロペプチドは、好ましくは、GDFタンパク質に関連する1つ以上の活性を阻害または低減させるために使用される。かなり好ましい1つの実施形態において、改変GDFプロペプチドは、同一のプロペプチドによって結合されない成熟GDF−8タンパク質に関連する、成熟GDF−8の1つ以上の活性を阻害または低減する。好ましい実施形態において、成熟GDF−8タンパク質の活性は、1つ以上の改変GDFプロペプチドによって結合される場合、1つ以上の改変GDFプロペプチドによって結合されない成熟GDF−8タンパク質と比較して、少なくとも50%、好ましくは、60%、62%、64%、66%、68%、70%、72%、74%、76%、78%、80%、82%、84%、86%または88%、より好ましくは、少なくとも90%、91%、92%、93%または94%、さらにより好ましくは、少なくとも95%〜100%阻害される。
本発明は、改変GDFプロペプチドを含む組成物を提供する。このような組成物は、患者に対する薬学的用途および投与に適切であり得る。組成物は、典型的には、1つ以上の本発明の改変GDFプロペプチドおよび薬学的に受容可能な賦形剤を含む。本明細書中で使用される場合、句「薬学的に受容可能な賦形剤」としては、薬学的投与に匹敵する以下が挙げられる:溶媒、分散媒体、コーティング、抗微生物剤および抗真菌剤、等張性剤および吸収遅延剤など。薬学的に活性な物質についてのこのような媒体および薬剤の使用は、当該分野において周知である。例示的な薬学的に受容可能な賦形剤は、「The Handbook of Pharmaceutical Excipients」第3編、2000、Am.Pharmaceutical Press,A.E.Kibbe編に見出され得る。組成物はまた、補助的機能、付加的機能または増強された治療的機能を提供する他の活性化合物を含み得る。薬学的組成物はまた、投与のための指示書とともに容器、パックまたはディスペンサー中に含まれ得る。
(実施例1:GDF−8の精製)
組換えヒトGDF−8タンパク質(成熟GDF−8+GDF−8プロペプチド)を発現する選択された細胞株からの馴化培地を、pH6.5に酸性化し、そして80×50mmのPOROS SP陽イオン交換カラムと直列の80×50mmのPOROS HQ陰イオン交換カラム(Perseptive Biosystems)にアプライした。フォロースルーを、pH5.0に調整し、75×20mmのPOROS SP陽イオン交換カラム(Perseptive Biosystems)にアプライし、NaCl勾配で溶出した。ドデシル硫酸ナトリウムゲルポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS−PAGE)で示されるような、GDF−8を含む画分を、プールし、トリフルオロ酢酸(TFA)でpH2〜3に酸性化し、次いで、粘度より低くするために0.1%TFAで200mlまで増やした。次いで、このプールを、60×21.2mmガードカラム(Phenomenex)が先行する250×21.2mm C5カラム(Phenomenex)にアプライし、TFA/CH3CN勾配で溶出し、GDF−8プロペプチドから成熟GDF−8を分離した。成熟GDF−8を含有するプールした画分を、凍結乾燥によって濃縮してアセトニトリルを除去し、20mlの0.1% TFAを添加した。次いで、サンプルを、分離の目的で60℃に過熱された250×10mm C5カラム(Phenomenex)にアプライした。これを、さらなる分離がもはや達成され得なくなるまで反復した。次いで、成熟GDF−8を含む画分を、プールし、40%アセトニトリルまで増やし、そして60×21.2mmガードカラム(Phenomenex)が先行する600×21.2mm BioSep S−3000サイズ排除カラム(Phenomenex)にアプライした。精製された成熟GDF−8を含む画分をプールし、次の実験における使用のために濃縮した。成熟GDF−8ダイマーの典型的な収量は、馴化培地1リットル当たり0.33mgタンパク質であった。
精製成熟GDF−8および精製GDF−8プロペプチドの各々50μgを混合し、50mM リン酸ナトリウム(pH7.0)に透析し、300×7.8mm BioSep S−3000サイズ排除カラム(Phenomenex)に対してクロマトグラフィーにかけた。成熟GDF−8/プロペプチド複合体の分子量は、同じカラムに対してクロマトグラフィーにかけた分子量標準(Bio−Rad Laboratories,Hercules,CA)を用いて、溶出時間から決定した。
GDF−8の活性を実証するために、レポーター遺伝子アッセイ(RGA)を、ルシフェラーゼに連結したレポーターベクターpGL3(CAGA)12配列を用いて開発した。CAGA配列は、以前、TGF−β誘導性遺伝子PAI−1のプロモーター内のTGF−β応答性配列であると報告されている(Dennlerら(1998)EMBO J.17:3091−3100)。
GDF−8潜在性複合体(latent complex)を、20モルのEZ−結合スルホ−NHS−ビオチン(Pierce,Rockford、Illinois,USA、カタログ番号21217) 対 1モルのGDF−8複合体の比にて、2時間氷上でビオチン化して、0.5% TFAで不活性化し、C4 Jupiter 250×4.6mmカラム(Phenomenex)に対してクロマトグラフィーに供して、成熟GDF−8をGDF−8プロペプチドから分離した。TFA/CH3CN勾配で溶出したビオチン化成熟GDF−8画分をプールし、濃縮し、MicroBCAタンパク質アッセイ試薬キット(Pierce,Rockford,IL,USA、カタログ番号23235)により定量した。
GDF−8をGDF−8プロペプチドと室温にて1時間予めインキュベートした場合、GDF−8の生物学的活性が減少した。図3は、GDF−8プロペプチドの存在下で、GDF−8についてのED50(10ng/ml)でのpGL3(CAGA)12レポーター活性の誘導を示す。GDF−8プロペプチドは、用量依存性様式にてGDF−8誘導を減少させた(25ng/ml(0.6nM)のIC50)。GDF−8プロペプチドはまた、同程度までBMP−11の生物学的活性を阻害した。対照的に、このアッセイにおけるアクチビンの活性は、おそらく、GDF−8とアクチビンとの間の比較的低い相同性に起因して、GDF−8およびBMP−11と比較して、GDF−8プロペプチドにより影響を受けなかった。
GDF−8を、100〜200μCi/μgの比活性へとFrolikら(1984)J.Biol.Chem.259:10995−10999により記載されるようにクロラミンTでヨウ化した。ヨウ化GDF−8は、実施例3に記載される(CAGA)12レポーターアッセイにおいて非標識GDF−8と匹敵する生物学的活性を示した。125I標識GDF−8を筋芽細胞株L6に対する特異的結合について評価した。
以下の実施例8に示されるように、マウスGDF−8プロペプチドは、インビボにて比較的短い半減期を有する。GDF−8プロペプチドのバイオアベイラビリティーを増大させるために、GDF−8プロペプチドとマウスIgG2a Fc領域との間の融合物を、標準的な遺伝子操作技術を使用して構築した。
GDF−8プロペプチド(本明細書中「GDF8−Pro」といわれる)およびGDF−8プロペプチド−FC融合タンパク質(本明細書中「GDF8−ProFc」といわれる)の薬物動態(PK)を、1回の静脈内投与の後に、0.2μg/マウス(GDF8−Pro)または2μg/マウス(GDF8−ProFc)の用量にて、C57Bl/6Jマウスにおいて評価した。動物に、非標識GDF8−Proおよび125I標識GDF8−Proの混合物または非標識GDF8−ProFcおよび125I標識GDF8−ProFcの混合物を上記の用量にて与え、血清中の125I放射活性および注射用量の比活性に基づいて、血清濃度を決定した。図10は、GDF8−ProおよびGDF8−ProFc両方についての血清濃度 対 時間曲線を示す。表1は、1回の静脈内注射(2μg/マウス)の後にGDF8−ProおよびGDF8−ProFcについてのPKパラメーターを示す。GDF8−Proについての血清濃度およびPKパラメーターを、比較目的のために、2μg/マウスの用量に対して正規化した。
Cmax:ピーク血清濃度
MRT:平均残留時間
V1:分布の開始容量
Vss:定常状態の分布の容量
註:GDF−8−Pro PKパラメーターは、2μg/マウスの容量に対して正規化した。
2つのGDF−8プロペプチド−Fc融合構築物を、標準的なPCR方法論を使用して、治療可能性の評価のために調製した。ヒトGDF−8プロペプチド(配列番号5)をコードするcDNAを、ヒトIgG1 Fc領域(配列番号15;図11A)またはエフェクター機能の減少のために改変したヒトIgG1Fc領域(配列番号16;図11B)に融合した。
ヒトGDF−8プロペプチド(配列番号5のアミノ酸1〜241および配列番号13に示される23アミノ酸のシグナルペプチドを含む)の最初の264アミノ酸を、ヒンジ領域の最初のアミノ酸にて開始する、ヒトIgG1定常領域の232アミノ酸(配列番号15)とインフレームで融合した。
上記のように、ヒトGDF−8プロペプチドの最初の264アミノ酸を、変異したヒトIgG1 Fc領域の227アミノ酸(配列番号16)とインフレームで融合した。2つの変異(配列番号16に示されるアラニン残基(Ala−14およびAla−17))を、Lundら(1991)J.Immun.147:2657−2662およびMorganら(1995)Immunology 86:319−324に記載されるように、エフェクター機能を減少させるために導入した。
マウスGDF−8プロペプチド−Fc融合タンパク質(実施例9から)を、成体マウスにおいて試験した。7〜9週齡の成体雌性BALB/cマウスを体重に関して無作為化し、7つの群にした(処置なし群は、6匹のマウスであることを除く)。マウスを5週間にわたり、動物1匹あたり、10μg、100μg、または1000μgの1週間の総量を伴って、I.P.注射により1週間に2回投薬した。コントロール注射は、高用量のプロペプチド−Fcに対して等モル量のマウスIgG2a−Fcとした。この研究の終わりに、腓腹筋、四頭筋、精巣上体脂肪パッド、腎臓、および肝臓を取り出し、秤量した。図13は、平均組織質量(エラーバーは、平均の標準誤差を示す)を示す。アスタリスク(*)は、コントロールタンパク質IgG2aFcを用いて処置したマウスと比較した場合の、統計的有意差(p<0.01(ステューデントT検定を使用))を示す。GDF−8プロペプチド−Fc融合タンパク質のI.P.注射(1mg/週)(処置マウス)によるインビボでのGDF−8活性のブロッキングは、GDF−8プロペプチド−Fc融合タンパク質を与えなかったコントロールマウスと比較して、腓腹筋質量において6.2%の増加、および四頭筋質量において11.3%の増加を生じた。さらに、GDF−8プロペプチド−Fc融合タンパク質のI.P.注射(100μg/週)(処置マウス)によるインビボでのGDF−8活性のブロッキングは、脂肪パッド質量において23.0%の増加を生じた。高用量(1mg/週)の処置はまた、脂肪パッド質量の減少をもたらしたが、脂肪パッド質量の変動性に起因して、統計学的有意差はあまりなかった(p=0.047)。試験した他の組織(肝臓および腎臓を含む)の質量に対する処置の効果はなかった。まとめると、改変GDF−8プロペプチドは、インビボでGDF−8活性をブロックし、筋肉質量の増加および脂肪質量の減少をもたらす。まとめると、GDF−8プロペプチド−Fc融合タンパク質のI.P.注射(処置マウス)によるインビボでのGDF−8活性のブロッキングは、GDF−8プロペプチド−Fc融合タンパク質を与えなかったコントロールマウスと比較して、腓腹筋および四頭筋の質量の増加を生じた。
当業者は、本明細書中に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの等価物を、慣用的な実験法のみを使用して認識しまたは確認し得る。このような等価物は、特許請求の範囲により含まれることが意図される。
Claims (35)
- 配列番号5の76位に対応する残基においてアミノ酸配列の変異を有するアミノ酸配列を含む、改変GDF−8プロペプチドであって、
ここで、該改変GDF−8プロペプチドは、対応する未改変GDF−8プロペプチドと比較して、増大したインビボ半減期またはインビトロ半減期を有する、
改変GDF−8プロペプチド。 - 配列番号1の99位に対応する残基においてアミノ酸配列の変異を有するアミノ酸配列を含む、改変GDF−8プロペプチドであって、
ここで、該改変GDF−8プロペプチドは、対応する未改変GDF−8プロペプチドと比較して、増大したインビボ半減期またはインビトロ半減期を有する、改変GDF−8プロペプチド。 - 前記アミノ酸配列が、1または数個のアミノ酸の置換、欠失または付加により、配列番号5の76位に対応する残基においてアミノ酸配列の変異を有する配列番号5のアミノ酸配列から誘導され、GDF−8活性を阻害する活性を有する、請求項1または2に記載の改変GDF−8プロペプチド。
- 前記改変GDF−8プロペプチドが、配列番号5の76位に対応する残基において変異を有することを除いて、配列番号5のアミノ酸配列、またはGDF−8活性を阻害し得るそのフラグメントを含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載の改変GDF−8プロペプチド。
- 前記改変GDF−8プロペプチドが、配列番号5の76位に対応する残基において変異を有することを除いて、配列番号5のアミノ酸配列を含む、請求項4に記載の改変GDF−8プロペプチド。
- 配列番号5の76位に対応する残基におけるアミノ酸配列の前記変異が、置換変異である、請求項1〜5のいずれか1項に記載の改変GDF−8プロペプチド。
- 配列番号5の76位に対応する前記残基が、アラニンである、請求項7に記載の改変GDF−8プロペプチド。
- タンパク質分解切断部位が、該部位への変異によって不活性化されている、請求項1〜7のいずれか1項に記載の改変プロペプチド。
- 前記改変プロペプチドが、該プロペプチドに融合される安定化部分をさらに含む、請求項1〜7のいずれか1項に記載の改変プロペプチド。
- 前記安定化部分が、IgG分子のFc領域を含む、請求項9に記載の改変プロペプチド。
- 前記IgG分子が、IgG1またはIgG4のFc領域を含む、請求項10に記載の改変プロペプチド。
- 前記IgG分子が、IgG1またはIgG4である、請求項10に記載の改変プロペプチド。
- (a)前記IgG分子のアミノ酸配列が、配列番号15のアミノ酸配列によって示されるか、または(b)(a)のアミノ酸配列において1または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加により(a)から誘導され、かつGDF−8プロペプチドに融合する(a)のIgG分子の活性を有するIgG分子である、請求項10に記載の改変プロペプチド。
- (a)前記IgG分子のアミノ酸配列が、配列番号16のアミノ酸配列によって示されるか、または(b)(a)のアミノ酸配列において1または数個のアミノ酸の置換、欠失、または付加により(a)から誘導されかつGDF−8プロペプチドに融合する(a)のIgG分子の活性を有するものである、請求項10に記載の改変プロペプチド。
- 前記IgG分子のアミノ酸配列が、配列番号16である、請求項10に記載の改変プロペプチド。
- 前記プロペプチドが、リンカーペプチドを介して前記IgG分子のFc領域と融合した、請求項10に記載の改変プロペプチド。
- 変更されたグリコシル化部位を有する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の改変プロペプチド。
- 少なくとも1つの炭水化物部分を含む、請求項1〜7のいずれか1項に記載の改変プロペプチド。
- 前記安定化部分が、アルブミンまたはアルブミン誘導体を含む、請求項9に記載の改変プロペプチド。
- 前記安定化部分が、非タンパク質ポリマーを含む、請求項9に記載の改変プロペプチド。
- 精製タグをさらに含む、請求項1〜7のいずれか1項に記載の改変プロペプチド。
- 請求項1〜21のいずれか1項に記載の改変GDF−8プロペプチドをコードする、核酸分子。
- 配列番号2に示される少なくとも20個連続するヌクレオチドを含む、請求項22に記載の核酸分子。
- 配列番号6に示される少なくとも20個連続するヌクレオチドを含む、請求項22に記載の核酸分子。
- 配列番号2に示される少なくとも50個連続するヌクレオチドを含む、請求項22に記載の核酸分子。
- 配列番号6に示される少なくとも50個連続するヌクレオチドを含む、請求項22に記載の核酸分子。
- 請求項1〜21のいずれか1項に記載の改変プロペプチドおよび薬学的に受容可能な賦形剤を含有する、薬学的組成物。
- 請求項22〜26のいずれか1項に記載の核酸分子および薬学的に受容可能なキャリアまたはベクターを含有する、薬学的組成物。
- 請求項1または2に記載の改変GDF−8プロペプチドを作製する方法であって、以下:
(a)該プロペプチドをコードするcDNA分子を調製する工程であって、ここで、タンパク質分解切断部位が改変される、工程;
(b)IgG分子のFc領域をコードするcDNA分子を調製する工程;ならびに
(c)工程(a)および工程(b)からのcDNA分子を融合して、改変GDF−8プロペプチドを生成する工程、
を包含する、方法。 - 請求項29に記載の方法であって、リンカーペプチドをコードする二本鎖オリゴヌクレオチドを調製する工程、ならびに工程(a)および工程(b)から得たcDNA分子を、該リンカーペプチドをコードする二本鎖オリゴヌクレオチドのいずれかの末端に融合する工程をさらに包含する、方法。
- 前記リンカーペプチドが、GSGSからなるアミノ酸配列を含む、請求項30に記載の方法。
- 請求項1〜21のいずれか1項に記載の改変GDF−8プロペプチドをコードする核酸を含む、組換え細胞。
- 前記核酸が、安定化部分をコードする核酸配列を含む、請求項32に記載の組換え細胞。
- 医薬として使用するための、請求項1〜21のいずれか1項に記載の改変GDF−8プロペプチド。
- 筋肉の質量を増大させるための医薬の調製における、請求項1〜21のいずれか1項に記載の改変プロペプチドの使用。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US26750901P | 2001-02-08 | 2001-02-08 | |
PCT/US2002/003467 WO2002068650A2 (en) | 2001-02-08 | 2002-02-08 | Modified and stabilized gdf propeptides and uses thereof |
Related Child Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005209321A Division JP2006001938A (ja) | 2001-02-08 | 2005-07-19 | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 |
JP2008298812A Division JP5013618B2 (ja) | 2001-02-08 | 2008-11-21 | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005507637A JP2005507637A (ja) | 2005-03-24 |
JP2005507637A5 JP2005507637A5 (ja) | 2006-01-05 |
JP4280071B2 true JP4280071B2 (ja) | 2009-06-17 |
Family
ID=23019083
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002568744A Expired - Fee Related JP4280071B2 (ja) | 2001-02-08 | 2002-02-08 | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 |
JP2005209321A Withdrawn JP2006001938A (ja) | 2001-02-08 | 2005-07-19 | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 |
JP2008298812A Expired - Fee Related JP5013618B2 (ja) | 2001-02-08 | 2008-11-21 | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2005209321A Withdrawn JP2006001938A (ja) | 2001-02-08 | 2005-07-19 | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 |
JP2008298812A Expired - Fee Related JP5013618B2 (ja) | 2001-02-08 | 2008-11-21 | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 |
Country Status (23)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US7202210B2 (ja) |
EP (1) | EP1397492B1 (ja) |
JP (3) | JP4280071B2 (ja) |
AR (1) | AR032567A1 (ja) |
AT (1) | ATE357519T1 (ja) |
AU (1) | AU2002243852B2 (ja) |
BR (1) | BR0207110A (ja) |
CA (2) | CA2437218A1 (ja) |
CL (1) | CL2009000648A1 (ja) |
CY (1) | CY1106629T1 (ja) |
DE (1) | DE60219006T2 (ja) |
DK (1) | DK1397492T3 (ja) |
ES (1) | ES2284828T3 (ja) |
HK (1) | HK1062457A1 (ja) |
MX (1) | MXPA03007063A (ja) |
NO (1) | NO333427B1 (ja) |
NZ (2) | NZ550297A (ja) |
PL (2) | PL212078B1 (ja) |
PT (1) | PT1397492E (ja) |
SG (2) | SG165982A1 (ja) |
TW (2) | TW200526779A (ja) |
WO (1) | WO2002068650A2 (ja) |
ZA (2) | ZA200508954B (ja) |
Families Citing this family (81)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TW200526779A (en) | 2001-02-08 | 2005-08-16 | Wyeth Corp | Modified and stabilized GDF propeptides and uses thereof |
US7320789B2 (en) | 2001-09-26 | 2008-01-22 | Wyeth | Antibody inhibitors of GDF-8 and uses thereof |
KR20040096592A (ko) * | 2002-02-21 | 2004-11-16 | 와이어쓰 | 폴리스타틴 도메인을 포함하는 단백질 |
MXPA04008150A (es) | 2002-02-21 | 2005-06-17 | Wyeth Corp | Gasp1: una proteina que contiene dominio de folistatina. |
US20040138118A1 (en) * | 2002-09-16 | 2004-07-15 | Neil Wolfman | Metalloprotease activation of myostatin, and methods of modulating myostatin activity |
US7261893B2 (en) | 2002-10-22 | 2007-08-28 | Wyeth | Neutralizing antibodies against GDF-8 and uses therefor |
US20040223966A1 (en) * | 2002-10-25 | 2004-11-11 | Wolfman Neil M. | ActRIIB fusion polypeptides and uses therefor |
WO2004083432A1 (en) | 2003-03-21 | 2004-09-30 | Academisch Ziekenhuis Leiden | Modulation of exon recognition in pre-mrna by interfering with the secondary rna structure |
CA2526669A1 (en) * | 2003-06-02 | 2004-12-16 | Wyeth | Use of myostatin (gdf8) inhibitors in conjunction with corticosteroids for treating neuromuscular disorders |
EP2332977B1 (en) * | 2004-07-23 | 2015-11-25 | Acceleron Pharma Inc. | ActRII receptor polypeptides |
WO2006020884A2 (en) * | 2004-08-12 | 2006-02-23 | Wyeth | Combination therapy for diabetes, obesity, and cardiovascular diseases using gdf-8 inhibitors |
US7300773B2 (en) | 2004-08-27 | 2007-11-27 | Wyeth Research Ireland Limited | Production of TNFR-Ig |
TWI384069B (zh) | 2004-08-27 | 2013-02-01 | Pfizer Ireland Pharmaceuticals | 多胜肽之製法 |
US7335491B2 (en) | 2004-08-27 | 2008-02-26 | Wyeth Research Ireland Limited | Production of anti-abeta |
US20060216279A1 (en) * | 2005-03-22 | 2006-09-28 | Glass David J | Myostatin inhibiting fusion polypeptides and therapeutic methods thereof |
MX2007011400A (es) * | 2005-03-23 | 2007-10-11 | Wyeth Corp | Deteccion de agentes moduladores de crecimiento y la diferenciacion del factor 8 (gdf 8). |
US20060240488A1 (en) * | 2005-03-23 | 2006-10-26 | Nowak John A | Detection of an immune response to GDF-8 modulating agents |
KR20190006086A (ko) | 2005-11-23 | 2019-01-16 | 악셀레론 파마 인코포레이티드 | 액티빈-actrⅱa 길항제 및 골 성장을 촉진하기 위한 이들의 용도 |
US8128933B2 (en) | 2005-11-23 | 2012-03-06 | Acceleron Pharma, Inc. | Method of promoting bone growth by an anti-activin B antibody |
US20070190056A1 (en) * | 2006-02-07 | 2007-08-16 | Ravi Kambadur | Muscle regeneration compositions and uses therefor |
EP2502628B1 (en) * | 2006-06-23 | 2016-12-14 | Alethia Biotherapeutics Inc. | Polynucleotides and polypeptide sequences involved in cancer |
CA2660523C (en) | 2006-08-11 | 2019-03-19 | Prosensa Technologies B.V. | Methods and means for treating dna repeat instability associated genetic disorders |
EP2446896A1 (en) * | 2006-12-18 | 2012-05-02 | Acceleron Pharma, Inc. | Activin-ActRII Antagonists for use in Increasing Red Blood Cells, increasing reticulocyte levels, or promoting erythropoiesis |
US20100028332A1 (en) * | 2006-12-18 | 2010-02-04 | Acceleron Pharma Inc. | Antagonists of actriib and uses for increasing red blood cell levels |
US8895016B2 (en) | 2006-12-18 | 2014-11-25 | Acceleron Pharma, Inc. | Antagonists of activin-actriia and uses for increasing red blood cell levels |
RU2473362C2 (ru) * | 2007-02-01 | 2013-01-27 | Акселерон Фарма Инк. | АНТАГОНИСТЫ АКТИВИНА-ActRIIa-Fc И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ |
TWI548647B (zh) * | 2007-02-02 | 2016-09-11 | 艾瑟勒朗法瑪公司 | 衍生自ActRIIB的變體與其用途 |
EA025371B1 (ru) * | 2007-02-09 | 2016-12-30 | Акселерон Фарма Инк. | АНТАГОНИСТЫ АКТИВИНА-ActRIIa И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РОСТА КОСТИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ |
CN101790385A (zh) * | 2007-07-12 | 2010-07-28 | 普罗森那技术公司 | 用于使化合物靶向多种选定器官、组织或肿瘤细胞的分子 |
AU2008273096B2 (en) * | 2007-07-12 | 2013-05-02 | Academisch Ziekenhuis Leiden | Molecules for targeting compounds to various selected organs or tissues |
GB0715087D0 (en) | 2007-08-03 | 2007-09-12 | Summit Corp Plc | Drug combinations for the treatment of duchenne muscular dystrophy |
BRPI0811317A2 (pt) | 2007-08-03 | 2015-01-27 | Summit Corp Plc | Combinação, embalagem farmcêutica, kit ou mbalagem par apaciente, agente auxiliar, compsoto, usos de um agente auxiliar e de um composto, e, processo para a produção de uma combinação |
EP3243524A1 (en) | 2007-09-18 | 2017-11-15 | Acceleron Pharma Inc. | Activin-actriia antagonists and uses for decreasing or inhibiting fsh secretion |
EP2614827B1 (en) | 2007-10-26 | 2017-06-28 | Academisch Ziekenhuis Leiden | Means and methods for counteracting muscle disorders |
USRE48468E1 (en) | 2007-10-26 | 2021-03-16 | Biomarin Technologies B.V. | Means and methods for counteracting muscle disorders |
JP2011510678A (ja) * | 2008-02-08 | 2011-04-07 | プロセンサ ホールディング ビーブイ | Dna反復不安定性関連遺伝性障害を治療するための方法及び手段 |
US9119818B2 (en) | 2008-05-14 | 2015-09-01 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Use of angiogenin or angiogenin agonists for treating diseases and disorders |
EP2119783A1 (en) | 2008-05-14 | 2009-11-18 | Prosensa Technologies B.V. | Method for efficient exon (44) skipping in Duchenne Muscular Dystrophy and associated means |
EP3363453A1 (en) * | 2008-06-26 | 2018-08-22 | Acceleron Pharma Inc. | Soluble actriia as activin-actriia antagonist for use in treating anemia or bone-related disorders |
LT3494986T (lt) | 2008-08-14 | 2020-07-10 | Acceleron Pharma Inc. | Gdf gaudyklės |
US8216997B2 (en) | 2008-08-14 | 2012-07-10 | Acceleron Pharma, Inc. | Methods for increasing red blood cell levels and treating anemia using a combination of GDF traps and erythropoietin receptor activators |
MX336869B (es) | 2008-11-03 | 2016-02-04 | Alethia Biotherapeutics Inc | Anticuerpos que bloquean espicificamente la actividad biologica de un antigeno de tumor. |
WO2010083034A1 (en) * | 2009-01-13 | 2010-07-22 | Acceleron Pharma Inc. | Methods for increasing adiponectin |
EP2421971B1 (en) | 2009-04-24 | 2016-07-06 | BioMarin Technologies B.V. | Oligonucleotide comprising an inosine for treating dmd |
US8178488B2 (en) | 2009-06-08 | 2012-05-15 | Acceleron Pharma, Inc. | Methods for increasing thermogenic adipocytes |
KR20190090049A (ko) | 2009-06-12 | 2019-07-31 | 악셀레론 파마 인코포레이티드 | 절두된 ActRIIB-FC 융합 단백질 |
IN2012DN02766A (ja) * | 2009-09-09 | 2015-09-18 | Acceleron Pharma Inc | |
JP5836961B2 (ja) * | 2009-11-03 | 2015-12-24 | アクセルロン ファーマ, インコーポレイテッド | 脂肪肝疾患を処置するための方法 |
TW201120210A (en) | 2009-11-05 | 2011-06-16 | Hoffmann La Roche | Glycosylated repeat-motif-molecule conjugates |
ES2658292T3 (es) | 2009-11-17 | 2018-03-09 | Acceleron Pharma, Inc. | Proteínas ActRIIB y variantes y usos de las mismas con respecto a la inducción de la utrofina para el tratamiento de la distrofia muscular |
ES2616561T3 (es) | 2009-12-24 | 2017-06-13 | Biomarin Technologies B.V. | Molécula para tratar un trastorno inflamatorio |
CA2807607A1 (en) | 2010-08-20 | 2012-02-23 | Wyeth Llc | Cell culture of growth factor-free adapted cells |
US20120121576A1 (en) | 2010-11-08 | 2012-05-17 | Jasbir Seehra | Actriia binding agents and uses thereof |
KR101993259B1 (ko) | 2011-03-31 | 2019-06-27 | 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이 | 신장 결합 항원 1에 대한 항체 및 이의 항원 결합 단편 |
SG11201401220SA (en) | 2011-10-21 | 2014-07-30 | Pfizer | Addition of iron to improve cell culture |
DK2802351T3 (da) | 2012-01-09 | 2019-05-13 | Adc Therapeutics Sa | Midler til behandling af triple-negativ brystkræft |
EP4043039A1 (en) | 2012-01-27 | 2022-08-17 | BioMarin Technologies B.V. | Rna modulating oligonucleotides with improved characteristics for the treatment of duchenne and becker muscular dystrophy |
EP2830646B1 (en) | 2012-03-27 | 2018-03-07 | NGM Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods of use for treating metabolic disorders |
AU2013204740C1 (en) | 2012-05-10 | 2015-10-01 | Agriculture Victoria Services Pty Ltd | Methods of treating cancer using angiogenin or an angiogenin agonist |
WO2014000042A1 (en) * | 2012-06-27 | 2014-01-03 | Prince Henry's Institute Of Medical Research | COMPOSITIONS AND METHODS FOR MODIFYING TGF-β FAMILY LIGANDS |
CA2880649C (en) | 2012-08-01 | 2023-03-14 | Elizabeth MCNALLY | Mitigating tissue damage and fibrosis via latent transforming growth factor beta binding protein (ltbp4) |
WO2014062535A1 (en) | 2012-10-15 | 2014-04-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Mammalian cell culture processes for protein production |
NZ747350A (en) | 2012-10-24 | 2020-07-31 | Celgene Corp | Methods for treating anemia |
CN113604550A (zh) * | 2012-10-24 | 2021-11-05 | 细胞基因公司 | 用于治疗贫血症的生物标志物 |
CA2890217C (en) | 2012-11-02 | 2021-07-20 | Yifu FANG | Activin-actrii antagonists and uses for treating bone and other disorders |
WO2014120619A2 (en) | 2013-01-30 | 2014-08-07 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods of use in treating metabolic disorders |
US9161966B2 (en) | 2013-01-30 | 2015-10-20 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | GDF15 mutein polypeptides |
JP6143270B2 (ja) * | 2013-01-31 | 2017-06-07 | 学校法人東京薬科大学 | マイオスタチン阻害ペプチド |
JP2016518357A (ja) | 2013-04-08 | 2016-06-23 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | 骨格筋幹細胞を若返らせる方法および組成物 |
US20160220640A1 (en) * | 2013-06-11 | 2016-08-04 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Methods and compositions for increasing neurogenesis and angiogenesis |
PT3027642T (pt) * | 2013-07-31 | 2020-10-30 | Amgen Inc | Construtos do fator 15 de diferenciação de crescimento (gdf-15) |
CN104725513A (zh) * | 2013-12-20 | 2015-06-24 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 融合蛋白及其在治疗多发性硬化中的用途 |
AU2015274277B2 (en) | 2014-06-13 | 2021-03-18 | Acceleron Pharma, Inc. | Methods and compositions for treating ulcers |
CN106573966B (zh) | 2014-07-30 | 2022-03-01 | Ngm生物制药有限公司 | 用于治疗代谢异常的组合物和方法 |
MA41052A (fr) | 2014-10-09 | 2017-08-15 | Celgene Corp | Traitement d'une maladie cardiovasculaire à l'aide de pièges de ligands d'actrii |
MD20170035A2 (ro) | 2014-10-31 | 2017-09-30 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Compoziţii şi metode de utilizare pentru tratamentul tulburărilor metabolice |
DK3227675T3 (da) | 2014-12-03 | 2023-05-30 | Celgene Corp | Activin-actrii-antagonister og anvendelser til behandling af myelodysplastisk syndrom |
JP6948331B2 (ja) | 2016-01-06 | 2021-10-13 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | Gdf11での処置は、体重増加を防止し、耐糖能を改善し、そして脂肪肝を低減する |
TWI815793B (zh) | 2016-03-31 | 2023-09-21 | 美商恩格姆生物製藥公司 | 結合蛋白質及其使用方法 |
WO2020132647A1 (en) | 2018-12-21 | 2020-06-25 | Northwestern University | Use of annexins in preventing and treating muscle membrane injury |
US20220062299A1 (en) | 2018-12-26 | 2022-03-03 | Northwestern University | Use of glucocorticoid steroids in preventing and treating conditions of muscle wasting, aging and metabolic disorder |
Family Cites Families (91)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4179337A (en) * | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
EP0105014B1 (en) | 1982-09-24 | 1992-05-20 | THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the Secretary United States Department of Commerce | Repair of tissue in animals |
US4588684A (en) | 1983-04-26 | 1986-05-13 | Chiron Corporation | a-Factor and its processing signals |
NZ210699A (en) | 1984-01-04 | 1989-06-28 | Int Genetic Eng | Isolation of an osteogenic protein of the p3 immunologically related family |
DK518384A (da) | 1984-01-31 | 1985-07-01 | Idaho Res Found | Vektor til fremstilling af et gen-produkt i insektceller, fremgangsmaade til dens fremstilling samt dens anvendelse |
CA1341617C (en) | 1984-06-08 | 2011-06-28 | Henry George Burger | Inhibin isolated from ovarian follicular fluid |
UA39161C2 (uk) | 1984-07-06 | 2001-06-15 | Новартіс Аг | Рекомбінантний білок gm-csf для збільшення продукції гранулоцитів і макрофагів у пацієнтів, вектор і кднк, що його кодують |
ATE128715T1 (de) | 1984-07-16 | 1995-10-15 | Celtrix Pharma | Polypeptide induzierende faktoren in knochen und knorpel. |
US4740587A (en) | 1985-07-18 | 1988-04-26 | The Salk Institute For Biological Studies | Inhibin and method of purifying same |
NZ231899A (en) | 1985-10-03 | 1991-07-26 | Genentech Inc | Human or porcine inhibin peptide compositions and dna encoding them |
US4798885A (en) | 1986-02-07 | 1989-01-17 | Genentech, Inc. | Compositions of hormonally active human and porcine inhibin containing an α chain and 62 chain |
US5215893A (en) | 1985-10-03 | 1993-06-01 | Genentech, Inc. | Nucleic acid encoding the ba chain prodomains of inhibin and method for synthesizing polypeptides using such nucleic acid |
US5089396A (en) | 1985-10-03 | 1992-02-18 | Genentech, Inc. | Nucleic acid encoding β chain prodomains of inhibin and method for synthesizing polypeptides using such nucleic acid |
US4737578A (en) | 1986-02-10 | 1988-04-12 | The Salk Institute For Biological Studies | Human inhibin |
ZA874681B (en) | 1986-07-01 | 1988-04-27 | Genetics Inst | Novel osteoinductive factors |
IL83003A (en) | 1986-07-01 | 1995-07-31 | Genetics Inst | Factors that soak bone formation |
US5013649A (en) | 1986-07-01 | 1991-05-07 | Genetics Institute, Inc. | DNA sequences encoding osteoinductive products |
US5187076A (en) | 1986-07-01 | 1993-02-16 | Genetics Institute, Inc. | DNA sequences encoding BMP-6 proteins |
US5106748A (en) | 1986-07-01 | 1992-04-21 | Genetics Institute, Inc. | Dna sequences encoding 5 proteins |
US5041538A (en) | 1987-08-28 | 1991-08-20 | The Salk Institute For Biological Studies | Mammalian follistatin |
AU645244B2 (en) | 1988-04-08 | 1994-01-13 | Genetics Institute, Llc | Bone and cartilage inductive compositions |
US5071834A (en) | 1988-09-16 | 1991-12-10 | Genentech, Inc. | Purified activin B composition |
ATE162223T1 (de) | 1989-03-28 | 1998-01-15 | Genetics Inst | Osteoinduktive zusammensetzungen |
EP0394827A1 (en) * | 1989-04-26 | 1990-10-31 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Chimaeric CD4-immunoglobulin polypeptides |
CA2020729A1 (en) | 1989-07-19 | 1991-01-20 | Michael C. Kiefer | Bone morphogenetic protein |
US5194596A (en) * | 1989-07-27 | 1993-03-16 | California Biotechnology Inc. | Production of vascular endothelial cell growth factor |
US5350836A (en) * | 1989-10-12 | 1994-09-27 | Ohio University | Growth hormone antagonists |
US5116944A (en) * | 1989-12-29 | 1992-05-26 | Neorx Corporation | Conjugates having improved characteristics for in vivo administration |
US5166190A (en) | 1990-01-08 | 1992-11-24 | Genentech, Inc. | Method for increasing fertility in males |
JPH06500991A (ja) | 1990-05-16 | 1994-01-27 | ジェネティックス・インスティテュート・インコーポレイテッド | 骨および軟骨誘導蛋白質 |
EP0550625B1 (en) | 1990-09-26 | 2003-11-05 | Genetics Institute, LLC | Bmp-5 derivatives |
AU651421B2 (en) | 1990-11-30 | 1994-07-21 | Celtrix Pharmaceuticals, Inc. | Use of a bone morphogenetic protein in synergistic combination with TGF-beta for bone repair |
US5208219A (en) | 1991-02-14 | 1993-05-04 | Celtrix Pharmaceuticals Inc. | Method for inducing bone growth |
US6162896A (en) | 1991-05-10 | 2000-12-19 | The Salk Institute For Biological Studies | Recombinant vertebrate activin receptors |
AU662155B2 (en) | 1991-05-10 | 1995-08-24 | Celtrix Pharmaceuticals, Inc. | Targeted delivery of bone growth factors |
ATE175441T1 (de) | 1991-06-25 | 1999-01-15 | Genetics Inst | Bmp-9 zusammensetzungen |
AU661854B2 (en) * | 1991-06-27 | 1995-08-10 | Bristol-Myers Squibb Company | CTL4A receptor, fusion proteins containing it and uses thereof |
US5171579A (en) | 1991-10-11 | 1992-12-15 | Genetics Institute, Inc. | Formulations of blood clot-polymer matrix for delivery of osteogenic proteins |
WO1993009229A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | Genetics Institute, Inc. | Recombinant bone morphogenetic protein heterodimers, compositions and methods of use |
ATE242639T1 (de) | 1992-07-31 | 2003-06-15 | Curis Inc | Morphogen induzierte nerven wiederherstellung und wiedergutmachung. |
US20030074680A1 (en) | 1993-03-19 | 2003-04-17 | Johns Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor-8 |
US6673534B1 (en) | 1995-10-26 | 2004-01-06 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Methods for detection of mutations in myostatin variants |
US7393682B1 (en) | 1993-03-19 | 2008-07-01 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Polynucleotides encoding promyostatin polypeptides |
US6607884B1 (en) | 1993-03-19 | 2003-08-19 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Methods of detecting growth differentiation factor-8 |
CA2157577C (en) | 1993-03-19 | 2009-11-17 | Se-Jin Lee | Growth differentiation factor-8 |
US5994618A (en) | 1997-02-05 | 1999-11-30 | Johns Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor-8 transgenic mice |
US6465239B1 (en) | 1993-03-19 | 2002-10-15 | The John Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor-8 nucleic acid and polypeptides from aquatic species and non-human transgenic aquatic species |
DK1378572T3 (da) | 1993-05-12 | 2007-02-05 | Genetics Inst Llc | BMP-11-sammensætninger |
WO1995005846A1 (en) | 1993-08-26 | 1995-03-02 | Genetics Institute, Inc. | Neural regeneration using human bone morphogenetic proteins |
US7332575B2 (en) | 1994-03-18 | 2008-02-19 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor-8 nucleic acid and polypeptide from aquatic species, and transgenic aquatic species |
US6008434A (en) | 1994-07-08 | 1999-12-28 | Johns Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor-11 transgenic mice |
ATE305036T1 (de) | 1994-07-08 | 2005-10-15 | Univ Johns Hopkins Med | Wachstums-differenzierungsfaktor-11 |
US5466190A (en) * | 1994-07-25 | 1995-11-14 | Deere & Company | Precleaner for a cleaning shoe |
US5545616A (en) | 1994-09-22 | 1996-08-13 | Genentech, Inc. | Method for predicting and/or preventing preterm labor |
JPH10262688A (ja) * | 1994-11-30 | 1998-10-06 | Univ Rockefeller | 体重のモジュレーター、対応する核酸およびタンパク質、ならびにそれらの診断および治療用途 |
US5723125A (en) * | 1995-12-28 | 1998-03-03 | Tanox Biosystems, Inc. | Hybrid with interferon-alpha and an immunoglobulin Fc linked through a non-immunogenic peptide |
ATE244574T1 (de) | 1996-03-22 | 2003-07-15 | Curis Inc | Verfahren zur verbesserten funktionelle erholung der motorische koordiination, der sprache oder der sinneswahrnehmung nach trauma oder ischämie des zns |
US6696557B1 (en) * | 1996-04-19 | 2004-02-24 | Genentech, Inc. | AL-2 neurotrophic factor nucleic acid |
PE99498A1 (es) * | 1996-07-26 | 1999-01-21 | Novartis Ag | Polipeptidos de fusion |
AU6274298A (en) | 1997-02-05 | 1998-08-25 | Johns Hopkins University School Of Medicine, The | Growth differentiation factor-8 |
PT2045322E (pt) * | 1997-07-14 | 2015-10-16 | Université de Liège | Musculatura dupla em mamíferos |
AU8666398A (en) | 1997-08-01 | 1999-02-22 | Johns Hopkins University School Of Medicine, The | Methods to identify growth differentiation factor (gdf) receptors |
US6891082B2 (en) | 1997-08-01 | 2005-05-10 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Transgenic non-human animals expressing a truncated activintype II receptor |
US6696260B1 (en) | 1997-08-01 | 2004-02-24 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Methods to identify growth differentiation factor (GDF) binding proteins |
US6656475B1 (en) | 1997-08-01 | 2003-12-02 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Growth differentiation factor receptors, agonists and antagonists thereof, and methods of using same |
GB2345397B (en) * | 1997-08-19 | 2001-10-31 | Citizen Watch Co Ltd | Piezoelectric vibrator |
US6372454B2 (en) | 1997-08-29 | 2002-04-16 | Human Genome Sciences, Inc. | Nucleic acid molecules encoding Follistatin-3 |
AU1276399A (en) * | 1997-11-07 | 1999-05-31 | Genetics Institute Inc. | Neuronal uses of bmp-11 |
WO1999024618A1 (en) | 1997-11-10 | 1999-05-20 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Methods for detection of mutations in myostatin variants |
AU2586199A (en) | 1998-02-05 | 1999-08-23 | Johns Hopkins University School Of Medicine, The | Growth differentiation factor-8 |
US6369201B1 (en) | 1998-02-19 | 2002-04-09 | Metamorphix International, Inc. | Myostatin multimers |
US6004937A (en) * | 1998-03-09 | 1999-12-21 | Genetics Institute, Inc. | Use of follistatin to modulate growth and differentiation factor 8 [GDF-8] and bone morphogenic protein 11 [BMP-11] |
DE69941116D1 (de) | 1998-05-06 | 2009-08-27 | Metamorphix Inc | G von gdf-8 |
WO2000011163A1 (en) * | 1998-08-20 | 2000-03-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Dcr5, a bmp-binding protein, and applications thereof |
JP2003517580A (ja) * | 1999-01-21 | 2003-05-27 | メタモーフイクス・インコーポレーテツド | 増殖分化因子インヒビター及びそれらの用途 |
WO2000073337A1 (en) * | 1999-06-01 | 2000-12-07 | Biogen, Inc. | Polymer conjugates of hedgehog proteins and uses |
AU778470B2 (en) | 1999-07-20 | 2004-12-09 | Pharmexa A/S | Method for down-regulating GDF-8 activity |
AU2001241817A1 (en) | 2000-02-29 | 2001-09-12 | Zymogenetics Inc. | Kunitz domain polypeptide zkun8 |
US7037501B2 (en) | 2001-01-04 | 2006-05-02 | Regents Of The University Of Minnesota | Myostatin immnoconjugate |
TW200526779A (en) | 2001-02-08 | 2005-08-16 | Wyeth Corp | Modified and stabilized GDF propeptides and uses thereof |
US7320789B2 (en) | 2001-09-26 | 2008-01-22 | Wyeth | Antibody inhibitors of GDF-8 and uses thereof |
PL350983A1 (en) * | 2001-11-30 | 2003-06-02 | Advanced Digital Broadcast Ltd | Method of scanning a high-frequency signal band and apparatus therefor |
KR20040096592A (ko) | 2002-02-21 | 2004-11-16 | 와이어쓰 | 폴리스타틴 도메인을 포함하는 단백질 |
MXPA04008150A (es) | 2002-02-21 | 2005-06-17 | Wyeth Corp | Gasp1: una proteina que contiene dominio de folistatina. |
US20040138118A1 (en) | 2002-09-16 | 2004-07-15 | Neil Wolfman | Metalloprotease activation of myostatin, and methods of modulating myostatin activity |
US7261893B2 (en) | 2002-10-22 | 2007-08-28 | Wyeth | Neutralizing antibodies against GDF-8 and uses therefor |
US20040223966A1 (en) | 2002-10-25 | 2004-11-11 | Wolfman Neil M. | ActRIIB fusion polypeptides and uses therefor |
US7511012B2 (en) | 2002-12-20 | 2009-03-31 | Amgen Inc. | Myostatin binding agents |
CA2526669A1 (en) | 2003-06-02 | 2004-12-16 | Wyeth | Use of myostatin (gdf8) inhibitors in conjunction with corticosteroids for treating neuromuscular disorders |
MX2007011400A (es) | 2005-03-23 | 2007-10-11 | Wyeth Corp | Deteccion de agentes moduladores de crecimiento y la diferenciacion del factor 8 (gdf 8). |
US20060240488A1 (en) | 2005-03-23 | 2006-10-26 | Nowak John A | Detection of an immune response to GDF-8 modulating agents |
-
2002
- 2002-02-07 TW TW094108366A patent/TW200526779A/zh unknown
- 2002-02-07 TW TW091102268A patent/TWI329129B/zh not_active IP Right Cessation
- 2002-02-08 BR BR0207110-0A patent/BR0207110A/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-02-08 JP JP2002568744A patent/JP4280071B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-08 ZA ZA200508954A patent/ZA200508954B/en unknown
- 2002-02-08 NZ NZ550297A patent/NZ550297A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-02-08 ES ES02709366T patent/ES2284828T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-08 AR ARP020100421A patent/AR032567A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-02-08 WO PCT/US2002/003467 patent/WO2002068650A2/en active IP Right Grant
- 2002-02-08 PL PL390369A patent/PL212078B1/pl unknown
- 2002-02-08 AT AT02709366T patent/ATE357519T1/de active
- 2002-02-08 NZ NZ527286A patent/NZ527286A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-02-08 PL PL372888A patent/PL207202B1/pl unknown
- 2002-02-08 MX MXPA03007063A patent/MXPA03007063A/es active IP Right Grant
- 2002-02-08 US US10/071,499 patent/US7202210B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-08 EP EP02709366A patent/EP1397492B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-08 SG SG200506783-0A patent/SG165982A1/en unknown
- 2002-02-08 CA CA002437218A patent/CA2437218A1/en not_active Abandoned
- 2002-02-08 SG SG2010040194A patent/SG187989A1/en unknown
- 2002-02-08 DE DE60219006T patent/DE60219006T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-08 CA CA002674673A patent/CA2674673A1/en not_active Abandoned
- 2002-02-08 DK DK02709366T patent/DK1397492T3/da active
- 2002-02-08 AU AU2002243852A patent/AU2002243852B2/en not_active Ceased
- 2002-02-08 PT PT02709366T patent/PT1397492E/pt unknown
-
2003
- 2003-08-04 NO NO20033456A patent/NO333427B1/no not_active IP Right Cessation
- 2003-08-06 ZA ZA200306064A patent/ZA200306064B/en unknown
-
2004
- 2004-07-08 HK HK04104973A patent/HK1062457A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-07-19 JP JP2005209321A patent/JP2006001938A/ja not_active Withdrawn
-
2006
- 2006-12-21 US US11/614,702 patent/US7737116B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-12-21 US US11/614,594 patent/US7560441B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2007
- 2007-05-29 CY CY20071100719T patent/CY1106629T1/el unknown
-
2008
- 2008-11-21 JP JP2008298812A patent/JP5013618B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-03-18 CL CL2009000648A patent/CL2009000648A1/es unknown
- 2009-05-04 US US12/434,758 patent/US8222384B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2012
- 2012-06-14 US US13/523,391 patent/US8710025B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-09-19 US US14/032,079 patent/US20140228289A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4280071B2 (ja) | 改変され安定化されたgdfプロペプチドおよびその使用 | |
AU2002243852A1 (en) | Modified and stabilized GDF propeptides and uses thereof | |
JP4429728B2 (ja) | フォリスタチン(follistatin)ドメイン含有タンパク質 | |
JP4429729B2 (ja) | Gasp1;フォリスタチンドメイン含有タンパク質 | |
MXPA05004224A (es) | Polipeptidos de fusion de actriib, y sus usos. | |
EP1790726B1 (en) | Modified and stabilized GDF propeptides and uses thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20041214 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050719 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070802 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20071030 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20071106 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20071129 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20071206 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20071228 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20071228 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080804 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20081031 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20081110 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20081121 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20090227 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20090313 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120319 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130319 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140319 Year of fee payment: 5 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |