JP2022543710A

JP2022543710A - がんを処置するためのクローディン１８．２に対する抗体と免疫チェックポイント阻害剤を伴う併用療法

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Publication number: JP2022543710A
Application number: JP2022534884A
Authority: JP
Inventors: 知広山田
Original assignee: Astellas Pharma Inc
Current assignee: Astellas Pharma Inc
Priority date: 2019-08-06
Filing date: 2020-08-05
Publication date: 2022-10-13
Also published as: CN114269378A; CA3149801A1; AU2020325981A1; US20220324965A1; BR112022002196A2; CL2023001129A1; JOP20220013A1; KR20220041848A; MX2022000710A; CL2022000277A1; DOP2022000016A; WO2021025177A1; SG11202113365SA; CR20220051A; IL290123A; WO2021024020A1; EP4010375A1

Abstract

本発明は、胃がん、食道がん、膵臓がん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝がん、頭頸部がんおよび胆嚢がん、ならびにこれらの転移などのがん疾患を含む、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞に関連する疾患を有効に処置および／または予防するための、抗クローディン（ＣＬＤＮ）１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を含む併用療法を提供する。【選択図】図１

Description

胃および食道（胃食道；ＧＥ）のがんは、最も高い、満たされていない医療ニーズを有する悪性腫瘍の１つである。胃がんは、世界中でがん死亡の主因の１つである。食道がんの発生率は、組織学的タイプおよび原発腫瘍位置のシフトと一致して、ここ数十年間で増加している。食道の腺癌は現在、米国および西欧で扁平上皮癌よりも流行しており、ほとんどの腫瘍が遠位食道に位置する。ＧＥがんについての全５年生存率は、大きな副作用を伴う確立された標準処置の攻撃性にもかかわらず、２０～２５％である。

患者の大部分は、局所進行または転移性疾患を呈する。これらの患者については、第一選択処置が化学療法である。処置レジメンは、主に第３の化合物（例えば、タキサンまたはアントラサイクリン）と組み合わせた白金およびフルオロピリミジン誘導体の骨格に基づく。にもかかわらず、５～７か月の無増悪生存期間中央値および９～１１か月の全生存期間中央値が、期待できる最良のものである。

これらのがんのための様々なより新しい世代の併用化学療法レジメンからの大きな利益の欠如が、標的化薬剤の使用への研究を刺激した。近年、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ陽性胃食道がんのために、トラスツズマブが承認された。しかしながら、患者の約２０％しかこの処置に適格でないので、医療ニーズは依然として高い。

密着結合分子クローディン１８スプライスバリアント２（クローディン１８．２（ＣＬＤＮ１８．２））は、密着結合タンパク質のクローディンファミリーのメンバーである。ＣＬＤＮ１８．２は、２つの小さな細胞外ループを有する４つの膜貫通ドメインを含む２７．８ｋＤａの膜貫通タンパク質である。

正常組織では、胃を除いて、ＲＴ－ＰＣＲによって検出可能なＣＬＤＮ１８．２の発現はない。ＣＬＤＮ１８．２特異抗体による免疫組織化学は、胃が唯一の陽性組織であることを明らかにする。

ＣＬＤＮ１８．２は、もっぱら短命の分化胃上皮細胞で発現される、高度に選択的な胃系列抗原である。ＣＬＤＮ１８．２は、悪性形質転換の過程で維持され、よって、ヒト胃がん細胞の表面上に頻繁に提示される。さらに、この汎腫瘍抗原は、食道、膵臓および肺腺癌において有意なレベルで異常に発現される。ＣＬＤＮ１８．２タンパク質はまた、胃がん腺癌のリンパ節転移および特に卵巣への遠位転移（いわゆるクルケンベルグ腫瘍）に局在化する。

ＣＬＤＮ１８．２に対して向けられた、キメラＩｇＧ１抗体ＩＭＡＢ３６２（ゾルベツキシマブ［以前はクローディキシマブと呼ばれた］）は、ＧａｎｙｍｅｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓＡＧによって開発された。この抗体は、配列番号５１に示される配列を有する重鎖と、配列番号２４に示される配列を有する軽鎖とを含む。ＩＭＡＢ３６２は、ＣＬＤＮ１８．２の第１の細胞外ドメイン（ＥＣＤ１）を高い親和性および特異性で認識する。ＩＭＡＢ３６２は、クローディン１８の密接に関連するスプライスバリアント１（ＣＬＤＮ１８．１）を含むいずれの他のクローディンファミリーメンバーにも結合しない。ＩＭＡＢ３６２は、正確な腫瘍細胞特異性を示し、２つの独立した高度に強力な作用機序を束ねる。標的結合で、ＩＭＡＢ３６２は、主にＡＤＣＣおよびＣＤＣによって細胞死滅を媒介する。よって、ＩＭＡＢ３６２は、インビトロおよびインビボでヒト胃がん細胞株を含むＣＬＤＮ１８．２陽性細胞を効率的に溶解する。ＩＭＡＢ３６２の抗腫瘍有効性は、ＣＬＤＮ１８．２陽性がん細胞株を接種した異種移植腫瘍を保有するマウスで実証された。

ＩｇＧ１抗体は、典型的にはＦｃドメインと、ＡＤＣＣの主作用因子であるナチュラルキラー細胞を含む様々な免疫細胞上で発現されるＦｃγ受容体（ＦｃγＲ）の相互作用を介して、細胞免疫系に関与する。しかしながら、ＡＤＣＣを誘因するＩｇＧ１モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、集団中の低親和性Ｆｃ受容体バリアントの広範な分布（最大８０％）ならびにｍＡｂ有効性を低下させるインビボＩｇＧ１修飾を含むいくつかの制限に直面する（Ｃｈａｍｅｓ，Ｐ．ら、２００９、ＢｒＪＰｈａｒｍａｃｏｌ、１５７（２）：２２０～２３３）。治療用抗体はまた、患者ＩｇＧと競合して、インビボで必要な高用量のｍＡｂをもたらさなければならない。さらに、治療用抗体は、ＦｃγＲＩＩｂ（Ｂ細胞、マクロファージ、樹状細胞および好中球によって発現される抑制性ＦｃγＲ）と相互作用して、その有効性を減少させる負のシグナル伝達をもたらし得る。

ここ数十年で、免疫チェックポイント阻害剤が、強力ながん処置治療薬として注目されるようになってきた。これらの治療薬は、免疫系の機能を制限する抑制性免疫チェックポイントシグナル伝達を遮断する。よって、免疫チェックポイント阻害剤は、Ｔ細胞の活性化、増殖および／またはそのシグナル伝達の増加をもたらし得る。しかしながら、免疫チェックポイント阻害剤は、いくつかのがんで低い活性を有し、ごく一部の患者でしか有益でないことが分かった（Ｄａｒｖｉｎら、２０１８、ＥｘｐＭｏｌＭｅｄ５０（１２）：１６５）。これらの制限を克服するためのアプローチは、共抑制性チェックポイント受容体を標的化する薬物、抗血管新生治療薬、腫瘍標的の低分子阻害剤、および腫瘍細胞溶解を促進する腫瘍溶解性ウイルスなどの薬物の共投与を含む（Ｌｏｎｇｏら、２０１９、Ｃａｎｃｅｒｓ１１（４）：５３９）。腫瘍微小環境（ＴＭＥ）の高い複雑性および特定のＴＭＥ構成成分が大きな腫瘍不均一性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｅｔｙ）に照らして相乗的に免疫抑制を誘導する多様な機序により、ＴＭＥを正確に評価し、一般集団に適用可能な抗がん戦略を考案する（ｄｅｖｉｃｅ）ことは困難である（Ｄｕａｎら、２０１９、ＣａｎｃｅｒＭｅｄ７（９）：４５１７～４５２９）。したがって、免疫チェックポイント阻害剤療法の有効性を増加させる緊急の必要性があり、米国がん免疫療法学会（ＳＩＴＣ）は、免疫チェックポイント遮断を他の療法と組み合わせることの見込みおよび課題に対処するために併用免疫療法タスクフォースを招集した。

ここで、本発明者らは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の併用投与が改善した効果をもたらすことを実証するデータを提示する。マウス腫瘍モデルにおいて、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体とチェックポイント阻害剤の投与は、単一薬剤としての抗ＣＬＤＮ１８．２抗体または免疫チェックポイント阻害剤の投与と比較して優れた有効性を示す。

本発明は、概して、胃がん、食道がん、膵臓がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）などの肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝がん、頭頸部がん、および胆嚢がん、ならびにこれらの転移、特にクルケンベルグ腫瘍、腹膜転移およびリンパ節転移などの胃がん転移などのがん疾患を含む、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞に関連する疾患を有効に処置および／または予防するための併用療法を提供する。特に好ましいがん疾患は、胃、食道、膵管、胆管、肺および卵巣の腺癌である。

一態様では、本発明は、患者を処置する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法を提供する。

一態様では、本発明は、患者のがんを処置または予防する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法を提供する。

さらなる態様では、本発明は、がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法を提供する。

さらなる態様では、本発明は、患者、例えばがんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法を提供する。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１阻害剤およびＰＤ－Ｌ１阻害剤から選択される。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ－１抗体および抗ＰＤ－Ｌ１抗体から選択される。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ－１抗体である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ；ＢＭＳ－９３６５５８）、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ；ＭＫ－３４７５）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１）、セミプリマブ（ＬＩＢＴＡＹＯ、ＲＥＧＮ２８１０）、スパルタリズマブ（ＰＤＲ００１）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ－５１４）、ドスタルリマブ（ＴＳＲ－０４２）、セトレリマブ（ＪＮＪ６３７２３２８３）、トリパリマブ（ＪＳ００１）、ＡＭＰ－２２４（ＧＳＫ－２６６１３８０）、ＰＦ－０６８０１５９１、チスレリズマブ（ＢＧＢ－Ａ３１７）、ＡＢＢＶ－１８１、ＢＩ７５４０９１、またはＳＨＲ－１２１０である。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ；ＲＧ７４４６；ＭＰＤＬ３２８０Ａ；Ｒ０５５４１２６７）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）、ＢＭＳ－９３６５５９、アベルマブ（ｂａｖｅｎｃｉｏ）、ロダポリマブ（ＬＹ３３０００５４）、ＣＸ－０７２（Ｐｒｏｃｌａｉｍ－ＣＸ－０７２）、ＦＡＺ０５３、ＫＮ０３５、またはＭＤＸ－１１０５である。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤がＣＴＬＡ－４阻害剤である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＴＬＡ－４抗体である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＴＬＡ－４抗体が、イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ；ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、トレビリズマブ、ＡＧＥＮ－１８８４（Ａｇｅｎｕｓ）またはＡＴＯＲ－１０１５である。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、生細胞の表面上に存在するＣＬＤＮ１８．２の天然エピトープに結合する。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、モノクローナル、キメラもしくはヒト化抗体、または抗体の断片である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、毒素、放射性同位体、薬物または細胞傷害剤などの治療剤に結合している。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、ＣＬＤＮ１８．２の第１の細胞外ループに結合する。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）媒介溶解、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）媒介溶解、アポトーシスの誘導および増殖の阻害の１つまたは複数によって、細胞死滅を媒介する。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、
（ｉ）受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７３７、ＤＳＭＡＣＣ２７３８、ＤＳＭＡＣＣ２７３９、ＤＳＭＡＣＣ２７４０、ＤＳＭＡＣＣ２７４１、ＤＳＭＡＣＣ２７４２、ＤＳＭＡＣＣ２７４３、ＤＳＭＡＣＣ２７４５、ＤＳＭＡＣＣ２７４６、ＤＳＭＡＣＣ２７４７、ＤＳＭＡＣＣ２７４８、ＤＳＭＡＣＣ２８０８、ＤＳＭＡＣＣ２８０９、またはＤＳＭＡＣＣ２８１０で寄託されたクローンによって産生される、および／またはから得られる抗体、
（ｉｉ）（ｉ）の抗体のキメラ化形態またはヒト化形態である抗体、
（ｉｉｉ）（ｉ）の抗体の特異性を有する抗体、ならびに、
（ｉｖ）（ｉ）の抗体の抗原結合部分または抗原結合部位、特に可変領域を含み、好ましくは（ｉ）の抗体の特異性を有する抗体、
からなる群から選択される抗体である。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号１７に示される配列の４５～５２位の配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７に示される配列の７０～７７位の配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号１７に示される配列の１１６～１２６位の配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号２４に示される配列の４７～５８位の配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４に示される配列の７６～７８位の配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号２４に示される配列の１１５～１２３位の配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号３２に示される配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖可変領域、ならびに／あるいは配列番号３９に示される配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖可変領域を含む。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号１３もしくは５２に示される配列、もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖定常領域を含む。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号１７もしくは５１に示される配列、もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖、ならびに／あるいは配列番号２４に示される配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖を含む。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、本方法が、最大１０００ｍｇ／ｍ^２の用量で抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を投与するステップを含む。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、本方法が、繰り返し３００～６００ｍｇ／ｍ^２の用量で抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を投与するステップを含む。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、がんがＣＬＤＮ１８．２陽性である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、がんが、胃がん、食道がん、膵臓がん、肺がん、卵巣がん、結腸がん、肝がん、頭頸部がん、胆嚢がん、およびこれらの転移からなる群から選択される。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、がんが、クルケンベルグ腫瘍、腹膜転移および／またはリンパ節転移である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、がんが、腺癌、特に進行腺癌である。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、がんが、胃のがん、食道、特に下部食道のがん、食道胃接合部（ｅｓｏ－ｇａｓｔｒｉｃｊｕｎｃｔｉｏｎ）のがんおよび胃食道がんからなる群から選択される。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、ＣＬＤＮ１８．２が、配列番号１によるアミノ酸配列を有する。

さらなる態様では、本発明は、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を含む医学調製物を提供する。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、医学調製物が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含む第１の容器と免疫チェックポイント阻害剤を含む第２の容器を含むキットである。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、医学調製物が、がんを処置するために調製物を使用するための印刷された説明書をさらに含む。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、医学調製物が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を含む組成物である。

本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、本発明の方法が、細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤を投与するステップをさらに含む。本明細書に開示される全ての態様の一実施形態では、本発明の医学調製物が、細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤をさらに含む。

細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、ＣＬＤＮ１８．２の発現を安定化する、または増加させる薬剤であり得る。ＣＬＤＮ１８．２の発現は、好ましくはがん細胞の細胞表面である。一実施形態では、細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤が、細胞周期停止または細胞周期の１つもしくは複数の期、好ましくはＧ１期以外の細胞周期の１つもしくは複数の期への細胞の蓄積を誘導する薬剤を含む。細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、アントラサイクリン、白金化合物、ヌクレオシド類似体、タキサンおよびカンプトテシン類似体、またはそのプロドラッグ、ならびにこれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含み得る。細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、エピルビシン、オキサリプラチン、シスプラチン、５－フルオロウラシルまたはそのプロドラッグ、例えばカペシタビン、ドセタキセル、イリノテカン、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含み得る。細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、オキサリプラチンと５－フルオロウラシルもしくはそのプロドラッグの組み合わせ、シスプラチンと５－フルオロウラシルもしくはそのプロドラッグの組み合わせ、少なくとも１つのアントラサイクリンとオキサリプラチンの組み合わせ、少なくとも１つのアントラサイクリンとシスプラチンの組み合わせ、少なくとも１つのアントラサイクリンと５－フルオロウラシルもしくはそのプロドラッグの組み合わせ、少なくとも１つのタキサンとオキサリプラチンの組み合わせ、少なくとも１つのタキサンとシスプラチンの組み合わせ、少なくとも１つのタキサンと５－フルオロウラシルもしくはそのプロドラッグの組み合わせ、または少なくとも１つのカンプトテシン類似体と５－フルオロウラシルもしくはそのプロドラッグの組み合わせを含み得る。細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、免疫原性細胞死を誘導する薬剤であり得る。免疫原性細胞死を誘導する薬剤は、アントラサイクリン、オキサリプラチンおよびこれらの組み合わせからなる群から選択される薬剤を含み得る。細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、エピルビシンとオキサリプラチンの組み合わせを含み得る。一実施形態では、本発明の方法が、少なくとも１つのアントラサイクリン、少なくとも１つの白金化合物ならびに少なくとも１つの５－フルオロウラシルおよびそのプロドラッグを投与するステップを含む。一実施形態では、本発明の医学調製物が、少なくとも１つのアントラサイクリン、少なくとも１つの白金化合物ならびに少なくとも１つの５－フルオロウラシルおよびそのプロドラッグを含む。アントラサイクリンは、エピルビシン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、イダルビシンおよびバルルビシンからなる群から選択され得る。好ましくは、アントラサイクリンがエピルビシンである。白金化合物は、オキサリプラチンおよびシスプラチンからなる群から選択され得る。ヌクレオシド類似体は、５－フルオロウラシルおよびそのプロドラッグからなる群から選択され得る。タキサンは、ドセタキセルおよびパクリタキセルからなる群から選択され得る。カンプトテシン類似体は、イリノテカンおよびトポテカンからなる群から選択され得る。一実施形態では、本発明の方法が、（ｉ）エピルビシン、オキサリプラチンおよび５－フルオロウラシル、（ｉｉ）エピルビシン、オキサリプラチンおよびカペシタビン、（ｉｉｉ）エピルビシン、シスプラチンおよび５－フルオロウラシル、（ｉｖ）エピルビシン、シスプラチンおよびカペシタビン、（ｖ）フォリン酸、オキサリプラチンおよび５－フルオロウラシル、（ｖｉ）フォリン酸、オキサリプラチンおよびカペシタビン、または（ｖｉｉ）オキサリプラチンおよびカペシタビンを投与するステップを含む。一実施形態では、本発明の医学調製物が、（ｉ）エピルビシン、オキサリプラチンおよび５－フルオロウラシル、（ｉｉ）エピルビシン、オキサリプラチンおよびカペシタビン、（ｉｉｉ）エピルビシン、シスプラチンおよび５－フルオロウラシル、（ｉｖ）エピルビシン、シスプラチンおよびカペシタビン、（ｖ）フォリン酸、オキサリプラチンおよび５－フルオロウラシル、（ｖｉ）フォリン酸、オキサリプラチンおよびカペシタビン、または（ｖｉｉ）オキサリプラチンおよびカペシタビンを含む。

抗ＣＬＤＮ１８．２抗体および免疫チェックポイント阻害剤、ならびに場合により細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、混合物で、または互いに別々に医学調製物中に存在し得る。医学調製物は、ＣＬＤＮ１８．２抗体を含む第１の容器と、免疫チェックポイント阻害剤を含む容器と、場合により細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤を含む容器とを含むキットであり得る。医学調製物は、特に本発明の方法に調製物を使用するための、がんを処置するために調製物を使用するための印刷された説明書をさらに含み得る。医学調製物、ならびに特に免疫チェックポイント阻害剤ならびに細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤の様々な実施形態は、本発明の方法について上に記載される通りである。

本発明はまた、治療に使用するための抗ＣＬＤＮ１８．２抗体および免疫チェックポイント阻害剤などの本明細書に記載される薬剤を提供する。一実施形態では、このような治療が、がん疾患、例えば本明細書に記載されるものを含む、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞に関連する疾患を処置および／または予防することを含む。

本発明はまた、例えば免疫チェックポイント阻害剤ならびに場合により細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤と組み合わせて投与するための、本明細書に記載される方法に使用するための抗ＣＬＤＮ１８．２抗体などの本明細書に記載される薬剤を提供する。本発明はまた、本明細書に記載される方法に使用するための、例えば免疫チェックポイント阻害剤ならびに場合により細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤と組み合わせて投与するための、医薬組成物を調製するための抗ＣＬＤＮ１８．２抗体などの本明細書に記載される薬剤の使用を提供する。

一態様では、本発明は、患者のがんを処置または予防する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法に使用するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を提供する。さらなる態様では、本発明は、がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法に使用するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を提供する。さらなる態様では、本発明は、患者、例えばがんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法に使用するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を提供する。これらの態様の好ましい実施形態は、本発明の方法について上に記載される通りである。

一態様では、本発明は、患者のがんを処置または予防する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法に使用するための、免疫チェックポイント阻害剤を提供する。さらなる態様では、本発明は、がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法に使用するための、免疫チェックポイント阻害剤を提供する。さらなる態様では、本発明は、患者、例えばがんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を患者に投与するステップを含む方法に使用するための、免疫チェックポイント阻害剤を提供する。これらの態様の好ましい実施形態は、本発明の方法について上に記載される通りである。

一態様では、本発明は、患者のがんを処置または予防する方法に使用するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を提供する。さらなる態様では、本発明は、がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害する方法に使用するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を提供する。さらなる態様では、本発明は、患者、例えばがんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導する方法に使用するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を提供する。これらの態様の好ましい実施形態は、本発明の方法について上に記載される通りである。

一態様では、本発明は、患者のがんを処置または予防するための医薬組成物を調製するための抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の使用であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が免疫チェックポイント阻害剤と一緒に投与される、使用を提供する。さらなる態様では、本発明は、がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害するための医薬組成物を調製するための抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の使用であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が免疫チェックポイント阻害剤と一緒に投与される、使用を提供する。さらなる態様では、本発明は、患者、例えばがんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導するための医薬組成物を調製するための抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の使用であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が免疫チェックポイント阻害剤と一緒に投与される、使用を提供する。これらの態様の好ましい実施形態は、本発明の方法について上に記載される通りである。

一態様では、本発明は、患者のがんを処置または予防するための医薬組成物を調製するための免疫チェックポイント阻害剤の使用であって、免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と一緒に投与される、使用を提供する。さらなる態様では、本発明は、がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害するための医薬組成物を調製するための免疫チェックポイント阻害剤の使用であって、免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と一緒に投与される、使用を提供する。さらなる態様では、本発明は、患者、例えばがんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導するための医薬組成物を調製するための免疫チェックポイント阻害剤の使用であって、免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と一緒に投与される、使用を提供する。これらの態様の好ましい実施形態は、本発明の方法について上に記載される通りである。

一態様では、本発明は、患者のがんを処置または予防するための医薬組成物を調製するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の使用を提供する。さらなる態様では、本発明は、がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害するための医薬組成物を調製するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の使用を提供する。さらなる態様では、本発明は、患者、例えばがんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導するための医薬組成物を調製するための、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の使用を提供する。これらの態様の好ましい実施形態は、本発明の方法について上に記載される通りである。

本明細書に記載される態様の一実施形態では、本明細書に記載される処置が、患者の免疫療法的処置を伴う。本明細書に記載される態様の一実施形態では、本明細書に記載される処置が、患者においてがん細胞の免疫媒介阻害または破壊を誘導することを伴う。本明細書に記載される態様の一実施形態では、本明細書に記載される処置が、患者においてがん細胞の免疫細胞媒介阻害または破壊を誘導することを伴う。本明細書に記載される態様の一実施形態では、本明細書に記載される処置が、患者においてがん細胞のＴ細胞媒介阻害または破壊を誘導することを伴う。本明細書に記載される態様の一実施形態では、本明細書に記載される処置が、患者においてがん細胞のＮＫ細胞媒介阻害または破壊を誘導することを伴う。本明細書に記載される態様の一実施形態では、本明細書に記載される処置が、患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導することを伴う。一実施形態では、ＡＤＣＣが、少なくとも部分的に、ＮＫ細胞によって媒介される。本明細書に記載される態様の一実施形態では、本明細書に記載される処置が、患者においてがん細胞に対する補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導することを伴う。

本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の抗腫瘍有効性を増加させる。本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の有効性を増加させて、患者におけるがん細胞の免疫媒介阻害または破壊を誘導する。本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の有効性を増加させて、患者におけるがん細胞の免疫細胞媒介阻害または破壊を誘導する。本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の有効性を増加させて、患者におけるがん細胞のＴ細胞媒介阻害または破壊を誘導する。本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の有効性を増加させて、患者におけるがん細胞のＮＫ細胞媒介阻害または破壊を誘導する。本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の有効性を増加させて、患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導する。本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の有効性を増加させて、患者においてがん細胞に対する補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導する。本明細書に記載される態様の一実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤の投与が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の有効性を相乗的に増加させる。

本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになるであろう。

ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＲＤ－１Ａｂによる併用療法の効果を示す図である。ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＲＤ－１Ａｂによる併用療法の効果－全ての処置マウスについてのスパイダープロット分析を示す図である。ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－１Ａｂによる併用療法の長期効果－全ての処置マウスについてのスパイダープロット分析を示す図である。ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－１Ａｂによる併用療法の長期効果を示す図である。ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＣＴＬＡ－４Ａｂによる併用療法の効果を示す図である。ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＣＴＬＡ－４Ａｂによる併用療法の効果－全ての処置マウスについてのスパイダープロット分析を示す図である。ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－Ｌ１Ａｂによる併用療法の効果を示す図である。ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２同系腫瘍に対するＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－Ｌ１Ａｂによる併用療法の効果－全ての処置マウスについてのスパイダープロット分析を示す図である。

本発明を以下で詳細に説明するが、本明細書に記載される特定の方法論、プロトコルおよび試薬は変動し得るので、本発明はこれらに限定されないことを理解すべきである。本明細書で使用される用語法は、特定の実施形態を説明する目的のためのものにすぎず、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を限定することを意図するものではないことも理解すべきである。特に定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語および科学用語は、当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。

以下では、本発明の要素を説明する。これらの要素を具体的な実施形態で列挙するが、これらの要素を任意の方法で、および任意の数で組み合わせて、追加の実施形態を作り出すことができることを理解すべきである。様々に記載される例および好ましい実施形態は、本発明を明示的に記載される実施形態のみに限定するものと解釈されるべきではない。この説明は、明示的に記載される実施形態を任意の数の開示される要素および／または好ましい要素と組み合わせる実施形態を支持および包含すると理解すべきである。さらに、本出願中の全ての記載される要素の任意の順列および組み合わせが、文脈が特段の指示をしない限り、本出願の説明によって開示されるとみなされるべきである。

好ましくは、本明細書で使用される用語は、「Ａｍｕｌｔｉｌｉｎｇｕａｌｇｌｏｓｓａｒｙｏｆｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌｔｅｒｍｓ：（ＩＵＰＡＣＲｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ）」、Ｈ．Ｇ．Ｗ．Ｌｅｕｅｎｂｅｒｇｅｒ、Ｂ．ＮａｇｅｌおよびＨ．Ｋｏｌｂｌ編、ＨｅｌｖｅｔｉｃａＣｈｉｍｉｃａＡｃｔａ、ＣＨ－４０１０Ｂａｓｅｌ、スイス（１９９５）に記載されるように定義される。

本発明の実行は、特に指示しない限り、その分野の文献で説明される化学、生化学、細胞生物学、免疫学および組換えＤＮＡ技術の慣用的な方法を使用する（例えば、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ、第２版、Ｊ．Ｓａｍｂｒｏｏｋら編、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ、ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ１９８９参照）。

以下の本明細書および特許請求の範囲全体を通して、文脈が別段の要求をしない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という単語、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形は、明言されるメンバー、整数もしくはステップ、またはメンバー、整数もしくはステップの群の包含を意味するが、他のメンバー、整数もしくはステップ、またはメンバー、整数もしくはステップの群の除外を意味しないと理解され、但し、いくつかの実施形態では、このような他のメンバー、整数もしくはステップ、またはメンバー、整数もしくはステップの群が除外され得る、すなわち、主題は、明言されるメンバー、整数もしくはステップ、またはメンバー、整数もしくはステップの包含からなる。「ａ」および「ａｎ」および「ｔｈｅ」という用語ならびに本発明を説明する文脈（特に特許請求の範囲の文脈）で使用される同様の言及は、本明細書で特に指示しない限り、また文脈上明らかに矛盾しない限り、単数形と複数形の両方を網羅すると解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の列挙は、その範囲に入る各別個の値に個別に言及する速記法として役立つことを意図しているにすぎない。本明細書で特に指示しない限り、各個々の値は、あたかも本明細書中で個別に列挙されているかのように本明細書に組み込まれる。本明細書に記載される全ての方法は、本明細書で特に指示しない限り、また文脈上明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実施することができる。本明細書で提供される、任意のおよび全ての例、または例示的言語（例えば、「など（ｓｕｃｈａｓ）」の使用は、本発明をより良く例示することのみを意図しており、特許請求される本発明の範囲に限定を課すものではない。本明細書中のいずれの言語も、特許請求されていない要素が本発明の実行に必須であることを示すと解釈されるべきでない。

本明細書の本文全体を通していくつかの文献が引用される。上記または下記いずれにおいても、本明細書で引用される文献（全ての特許、特許出願、科学刊行物、製造業者の仕様書、説明書等を含む）の各々が、全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書中のいかなるものも、本発明が先行発明によってこのような開示に先立つ権利がないことの自認として解釈されるべきではない。

「ＣＬＤＮ１８」という用語は、クローディン１８に関し、クローディン１８スプライスバリアント１（クローディン１８．１（ＣＬＤＮ１８．１））およびクローディン１８スプライスバリアント２（クローディン１８．２（ＣＬＤＮ１８．２））を含む、任意のバリアントを含む。

「ＣＬＤＮ１８．２」という用語は、好ましくはヒトＣＬＤＮ１８．２に関し、特に、配列表の配列番号１によるアミノ酸配列または前記アミノ酸配列のバリアントを含む、好ましくはからなるタンパク質に関する。

「ＣＬＤＮ１８．１」という用語は、好ましくはヒトＣＬＤＮ１８．１に関し、特に、配列表の配列番号２によるアミノ酸配列または前記アミノ酸配列のバリアントを含む、好ましくはからなるタンパク質に関する。

本発明による「バリアント（ｖａｒｉａｎｔ）」という用語は、特に、突然変異体、スプライスバリアント、コンフォメーション、アイソフォーム、対立遺伝子バリアント、種バリアントおよび種ホモログ、特に自然に存在するものを指す。対立遺伝子バリアントは、その有意性が通常不明確な、遺伝子の正常配列の変化に関する。完全な遺伝子配列決定は、しばしば、所与の遺伝子についての多数の対立遺伝子バリアントを特定する。種ホモログは、所与の核酸またはアミノ酸配列のものとは異なる起源の種の核酸またはアミノ酸配列である。「バリアント（ｖａｒｉａｎｔ）」という用語は、任意の翻訳後修飾バリアントおよびコンフォメーションバリアントを包含するものとする。

本発明によると、「ＣＬＤＮ１８．２陽性がん（ＣＬＤＮ１８．２ｐｏｓｉｔｉｖｅｃａｎｃｅｒ）」という用語は、好ましくはがん細胞の表面上で、ＣＬＤＮ１８．２を発現するがん細胞を伴うがんを意味する。

「細胞表面（ｃｅｌｌｓｕｒｆａｃｅ）」は、当技術分野における通常の意味に従って使用され、よって、タンパク質および他の分子による結合に利用可能な細胞の外側を含む。

ＣＬＤＮ１８．２は、細胞の表面に位置し、細胞に添加されたＣＬＤＮ１８．２特異抗体による結合に利用可能である場合、細胞の表面上で発現されている。

本発明によると、ＣＬＤＮ１８．２は、発現レベルが胃細胞または胃組織における発現と比較して低い場合、細胞で実質的に発現されていない。好ましくは、発現レベルは、胃細胞もしくは胃組織における発現の１０％未満、好ましくは５％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％もしくは０．０５％未満、またはさらに低い。好ましくは、ＣＬＤＮ１８．２は、発現レベルが胃以外の非がん性組織における発現レベルを２倍以下、好ましくは１．５倍以下しか超えず、好ましくは前記非がん性組織における発現レベルを超えない場合、細胞で実質的に発現されていない。好ましくは、ＣＬＤＮ１８．２は、発現レベルが検出限界未満である場合、および／または発現レベルが低すぎて細胞に添加されたＣＬＤＮ１８．２特異抗体による結合を可能にできない場合、細胞で実質的に発現されていない。

本発明によると、ＣＬＤＮ１８．２は、発現レベルが胃以外の非がん性組織における発現レベルを２倍超、好ましくは１０倍、１００倍、１０００倍または１００００倍超える場合、細胞で発現されている。好ましくは、ＣＬＤＮ１８．２は、発現レベルが検出限界より上である場合、および／または発現レベルが細胞に添加されたＣＬＤＮ１８．２特異抗体による結合を可能にするのに十分高い場合、細胞で発現されている。好ましくは、細胞で発現されているＣＬＤＮ１８．２は、前記細胞の表面上で発現されている、または前記細胞の表面上に露出している。

本発明によると、「疾患（ｄｉｓｅａｓｅ）」という用語は、がん、特に本明細書に記載されるがんの形態を含む任意の病理学的状態を指す。がんまたはがんの特定の形態への本明細書におけるいずれの言及も、そのがん転移を含む。好ましい実施形態では、本出願により処置される疾患が、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞を伴う。

「ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞に関連する疾患（ｄｉｓｅａｓｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｃｅｌｌｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＣＬＤＮ１８．２）」または同様の表現は、本発明によると、ＣＬＤＮ１８．２が疾患組織または器官の細胞で発現されていることを意味する。一実施形態では、疾患組織または器官の細胞におけるＣＬＤＮ１８．２の発現が、健康な組織または器官における状態と比較して増加している。増加とは、少なくとも１０％、特に少なくとも２０％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも２００％、少なくとも５００％、少なくとも１０００％、少なくとも１００００％またはさらに多くの増加を指す。一実施形態では、発現が疾患組織でのみ見られ、健康な組織における発現は抑制される。本発明によると、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞に関連する疾患はがん疾患を含む。さらに、本発明によると、がん疾患は、好ましくはがん細胞がＣＬＤＮ１８．２を発現しているがん疾患である。

本明細書で使用される場合、「がん疾患（ｃａｎｃｅｒｄｉｓｅａｓｅ）」または「がん（ｃａｎｃｅｒ）」は、異常に調節された細胞成長、増殖、分化、接着および／または移動を特徴とする疾患を含む。「がん細胞（ｃａｎｃｅｒｃｅｌｌ）」とは、急速な、制御されない細胞増殖によって増殖し、新たな増殖を開始した刺激が止んだ後に増殖し続ける異常細胞を意味する。好ましくは、「がん疾患（ｃａｎｃｅｒｄｉｓｅａｓｅ）」は、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞を特徴とし、がん細胞はＣＬＤＮ１８．２を発現する。ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞は、好ましくは本明細書に記載されるがんの、がん細胞である。

「腺癌（ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）」は腺組織に起源するがんである。この組織は、上皮組織として知られるより大きな組織カテゴリーの一部でもある。上皮組織は、皮膚、腺、ならびに体の腔および器官をおおう様々な他の組織を含む。上皮は、発生学的に外胚葉、内胚葉および中胚葉に由来する。腺癌として分類されるために、細胞は、分泌特性を有する限り、必ずしも腺の一部である必要はない。この形態の癌腫は、ヒトを含む一部の高等哺乳動物で生じ得る。高分化腺癌は、それらが由来する腺組織に似ている傾向があるが、低分化腺癌はそうでない場合がある。生検からの細胞を染色することによって、病理学者は、腫瘍が腺癌であるか、またはある他の種類のがんであるかを判定する。腺癌は、体内の腺の偏在性の性質のために、体の多くの組織に生じ得る。各腺は同じ物質を分泌していない場合があるが、細胞に対する外分泌機能がある限り、腺とみなされ、したがって、その悪性形態は腺癌と呼ばれる。悪性腺癌は他の組織に侵入し、しばしば、転移するのに十分な時間が与えられると転移する。卵巣腺癌は、卵巣癌の最も一般的な型である。これは、漿液性および粘液腺癌、明細胞腺癌および類内膜腺癌を含む。

「転移（ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）」とは、元の部位から体の別の部分へのがん細胞の拡大を意味する。転移の形成は、非常に複雑なプロセスであり、原発腫瘍からの悪性細胞の剥離、細胞外マトリックスの侵入、体腔および血管に進入するための内皮基底膜の貫通、ならびに次いで、血管によって輸送された後、標的器官の浸潤に依存する。最後に、標的部位での新たな腫瘍の増殖は血管新生に依存する。腫瘍細胞または構成成分は残り、転移能を発達し得るので、原発腫瘍の除去後でさえ、腫瘍転移がしばしば起こる。一実施形態では、本発明による「転移（ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）」という用語が、原発腫瘍および所属リンパ節系から離れた転移に関する、「遠隔転移（ｄｉｓｔａｎｔｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）」に関する。一実施形態では、本発明による「転移（ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ）」という用語が、リンパ節転移に関する。本発明の治療を使用して処置可能である転移の１つの特定の形態は、原発部位としての胃がんに由来する転移である。好ましい実施形態では、このような胃がん転移が、クルケンベルグ腫瘍、腹膜転移および／またはリンパ節転移である。

クルケンベルグ腫瘍は、全卵巣腫瘍の１％～２％を占める卵巣の珍しい転移性腫瘍である。クルケンベルグ腫瘍の予後は依然として非常に悪く、クルケンベルグ腫瘍のための確立された処置はない。クルケンベルグ腫瘍は、卵巣の転移性印環細胞腺癌である。胃が、ほとんどのクルケンベルグ腫瘍症例（７０％）における原発部位である。結腸、虫垂および乳房の癌腫（主に浸潤性小葉癌）が、次に最も一般的な原発部位である。胆嚢、胆道、膵臓、小腸、ファーター膨大部、子宮頸部、および膀胱／尿膜管の癌腫に由来するクルケンベルグ腫瘍のまれな症例が報告されている。原発癌腫の診断とその後の卵巣併発の発見との間の間隔は、通常、６か月以下であるが、より長い期間も報告されている。多くの症例で、原発腫瘍は非常に小さく、検出を逃れ得る。胃または別の器官の以前の癌腫歴は、症例の２０％～３０％でしか得ることができない。クルケンベルグ腫瘍は、最も一般的には胃－卵巣軸の、がんの選択的拡大の例である。この腫瘍拡大の軸は、歴史的に、特に胃新生物が他の組織の併発なしに卵巣に選択的に転移することが分かると、多くの病理学者の関心を集めてきた。胃癌の卵巣への転移経路は長い間謎であったが、現在、逆行性リンパ節拡大が転移の最も可能性が高い経路であることが明らかである。クルケンベルグ腫瘍を有する女性は、典型的には平均年齢４５歳で、４０代であるので、転移癌を有する患者にとって珍しく若い傾向がある。この若い年齢分布は、一部は、若い女性における胃印環細胞癌の頻度の増加に関連し得る。一般的に呈する症状は、通常、卵巣併発に関するものであり、その最も一般的なものは腹痛および膨満（主に通常両側性の、しばしば大型の卵巣腫瘤のため）である。残りの患者は非特異的胃腸症状を有する、または無症候性である。さらに、クルケンベルグ腫瘍は、報告によれば、卵巣支質によるホルモン産生に起因する男性化に関連する。腹水が症例の５０％に存在し、通常、悪性細胞を明らかにする。クルケンベルグ腫瘍は、報告される症例の８０％超で両側性である。卵巣は通常、非対称的に拡大し、瘤の輪郭を有する。断面化された表面は黄色または白色であり；これらは通常固形であるが、時折、嚢胞性である。重要なことに、クルケンベルグ腫瘍を有する卵巣の皮膜表面は、典型的には滑らかであり、接着も腹膜沈着物もない。注目すべきことに、卵巣への他の転移性腫瘍は、表面埋没物を伴う傾向がある。このことは、なぜクルケンベルグ腫瘍の肉眼形態が一見、原発卵巣腫瘍のように現れ得るのかを説明することができる。しかしながら、クルケンベルグ腫瘍の両側性（ｂｉｌａｔｅｒａｌｉｓｍ）はその転移性質と整合している。クルケンベルグ腫瘍を有する患者は、有意に高い全死亡率を有する。ほとんどの患者が２年以内に死ぬ（生存期間中央値、１４か月）。いくつかの研究が、卵巣への転移が発見された後に、原発腫瘍が特定された場合、予後が悪く、原発腫瘍が隠れたままである場合、予後はさらに悪くなることを示している。クルケンベルグ腫瘍のための最適な処置戦略は文献で明確に確立されていない。外科的切除を実施すべきかどうかについては十分に検討されていない。化学療法または放射線療法は、クルケンベルグ腫瘍を有する患者の予後に有意な効果を有さない。

本文脈では、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療介入（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ）」という用語は、疾患または障害などの状態と戦う目的のための、対象の管理およびケアに関する。この用語は、患者が苦しんでいる所与の状態のための処置の全領域、例えば症状もしくは合併症を緩和する、疾患、障害もしくは状態の進行を遅延させる、症状および合併症を緩和もしくは救済する、ならびに／または疾患、障害もしくは状態を治癒もしくは排除する、ならびに状態を予防するための治療上有効な化合物の投与を含むことを意図しており、予防は、疾患、状態または障害と戦う目的のための個体の管理およびケアとして理解されるべきであり、症状または合併症の発症を予防するための活性化合物の投与を含む。

「治療的処置（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、個体の健康状態を改善するおよび／または個体の寿命を延長する（増加させる）任意の処置に関する。前記処置は、個体の疾患を排除する、個体の疾患の発達を停止するもしくは遅延させる、個体の疾患の発達を阻害するもしくは遅延させる、個体の症状の頻度もしくは重症度を減少させる、および／または疾患を現在有するもしくは以前有していた個体の再発を減少させることができる。

「予防的処置（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「予防的処置（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、疾患が個体で生じるのを防ぐことを意図した任意の処置に関する。「予防的処置（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「予防的処置（ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は本明細書で互換的に使用される。

「個体（ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ）」および「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」という用語は、本明細書で互換的に使用される。これらは、疾患もしくは障害（例えば、がん）に罹患し得る、またはかかりやすいが、疾患もしくは障害を有していてもいなくてもよい、ヒトまたは別の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマまたは霊長類）を指す。多くの実施形態では、個体がヒトである。特に明言しない限り、「個体（ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ）」および「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」という用語は、特定の年齢を表さず、よって、成人、高齢者、小児および新生児を包含する。本開示の実施形態では、「個体（ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ）」または「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」が「患者（ｐａｔｉｅｎｔ）」である。

「患者（ｐａｔｉｅｎｔ）」という用語は、処置のための個体または対象、特に疾患個体または対象を意味する。

本明細書で使用される場合、「免疫チェックポイント（ｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ）」は、免疫系の調節因子、特に抗原のＴ細胞受容体認識の大きさおよび量を調節する共刺激性および抑制性シグナルを指す。一定の実施形態では、免疫チェックポイントが抑制性シグナルである。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－Ｌ２との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＣＤ２８結合を置換するためのＣＴＬＡ－４とＣＤ８０またはＣＤ８６との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＬＡＧ－３とＭＨＣクラスＩＩ分子との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＴＩＭ－３と、ガレクチン９、ＰｔｄＳｅｒ、ＨＭＧＢ１およびＣＥＡＣＡＭ１などの１つまたは複数のそのリガンドとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、１つまたは数個のＫＩＲとそのリガンドとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＴＩＧＩＴと、１つまたは複数のそのリガンド、ＰＶＲ、ＰＶＲＬ２およびＰＶＲＬ３との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＣＤ９４／ＮＫＧ２ＡとＨＬＡ－Ｅとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＶＩＳＴＡとその結合パートナー（複数可）との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、１つまたは複数のＳｉｇｌｅｃとそのリガンドとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＧＡＲＰと１つまたは複数のそのリガンドとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＣＤ４７とＳＩＲＰαとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＣＳＦ１ＲとＣＳＦ１との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＢＴＬＡとＨＶＥＭとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、アデノシン作動性経路の一部、例えばＡ２ＡＲおよび／またはＡ２ＢＲと、ＣＤ３９およびＣＤ７３によって産生されるアデノシンとの間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、Ｂ７－Ｈ３とその受容体との間および／またはＢ７－Ｈ４とその受容体との間の相互作用である。一定の実施形態では、抑制性シグナルが、ＩＤＯ、ＣＤ２０、ＮＯＸまたはＴＤＯによって媒介される。

「プログラム細胞死－１（ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＤｅａｔｈ－１）（ＰＤ－１）」受容体は、ＣＤ２８ファミリーに属する免疫抑制性受容体である。ＰＤ－１は、インビボで以前活性化されたＴ細胞で優勢に発現され、ＰＤ－Ｌ１（Ｂ７－Ｈ１またはＣＤ２７４としても知られる）およびＰＤ－Ｌ２（Ｂ７－ＤＣまたはＣＤ２７３としても知られる）の２つのリガンドに結合する。本明細書で使用される「ＰＤ－１」という用語は、ヒトＰＤ－１（ｈＰＤ－１）、ｈＰＤ－１のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＰＤ－１と共通のエピトープを有する類似体を含む。「プログラム細胞死リガンド－１（ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＤｅａｔｈＬｉｇａｎｄ－１）（ＰＤ－Ｌ１）」は、ＰＤ－１に結合するとＴ細胞活性化およびサイトカイン分泌を下方制御する、ＰＤ－１の２つの細胞表面糖タンパク質リガンドのうちの１つ（他方はＰＤ－Ｌ２である）である。本明細書で使用される「ＰＤ－Ｌ１」という用語は、ヒトＰＤ－Ｌ１（ｈＰＤ－Ｌ１）、ｈＰＤ－Ｌ１のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＰＤ－Ｌ１と共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＰＤ－Ｌ２」という用語は、ヒトＰＤ－Ｌ２（ｈＰＤ－Ｌ２）、ｈＰＤ－Ｌ２のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＰＤ－Ｌ２と共通のエピトープを有する類似体を含む。ＰＤ－１のリガンド（ＰＤ－Ｌ１およびＰＤ－Ｌ２）は、樹状細胞またはマクロファージなどの抗原提示細胞、および他の免疫細胞の表面上で発現される。ＰＤ－１のＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－Ｌ２への結合は、Ｔ細胞活性化の下方制御をもたらす。ＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－Ｌ２を発現しているがん細胞は、ＰＤ－１を発現しているＴ細胞のスイッチを切ることができ、これは抗がん免疫応答の抑制をもたらすことができる。ＰＤ－１とそのリガンドとの間の相互作用は、腫瘍浸潤リンパ球の減少、Ｔ細胞受容体媒介増殖の減少、およびがん性細胞による免疫回避をもたらす。免疫抑制は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１の局所的相互作用を阻害することによって逆転させることができ、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ２の相互作用も同様に遮断する場合、この効果は相加的である。

「細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原－４（ＣｙｔｏｔｏｘｉｃＴＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅＡｓｓｏｃｉａｔｅｄＡｎｔｉｇｅｎ－４）（ＣＴＬＡ－４）」（ＣＤ１５２としても知られる）は、Ｔ細胞表面分子であり、免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーである。このタンパク質は、ＣＤ８０（Ｂ７－１）およびＣＤ８６（Ｂ７－２）に結合することによって、免疫系を下方制御する。本明細書で使用される「ＣＴＬＡ－４」という用語は、ヒトＣＴＬＡ－４（ｈＣＴＬＡ－４）、ｈＣＴＬＡ－４のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＣＴＬＡ－４と共通のエピトープを有する類似体を含む。ＣＴＬＡ－４は、ＣＤ８０およびＣＤ８６に対するはるかに高い結合親和性を有する、刺激性チェックポイントタンパク質ＣＤ２８のホモログである。ＣＴＬＡ４は活性化Ｔ細胞の表面上で発現され、そのリガンドは専門の抗原提示細胞の表面上で発現される。ＣＴＬＡ－４のそのリガンドへの結合は、ＣＤ２８の共刺激シグナルを妨げ、抑制性シグナルを生成する。よって、ＣＴＬＡ－４はＴ細胞活性化を下方制御する。

「ＩｇおよびＩＴＩＭドメインを有するＴ細胞免疫受容体（ＴｃｅｌｌｉｍｍｕｎｏｒｅｃｅｐｔｏｒｗｉｔｈＩｇａｎｄＩＴＩＭｄｏｍａｉｎ）」（ＴＩＧＩＴ、ＷＵＣＡＭまたはＶｓｔｍ３としても知られる）は、Ｔ細胞およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞上の免疫受容体であり、ＤＣ、マクロファージ等のＰＶＲ（ＣＤ１５５）、およびＰＶＲＬ２（ＣＤ１１２；ネクチン－２）およびＰＶＲＬ３（ＣＤ１１３；ネクチン－３）に結合し、Ｔ細胞媒介免疫を調節する。本明細書で使用される「ＴＩＧＩＴ」という用語は、ヒトＴＩＧＩＴ（ｈＴＩＧＩＴ）、ｈＴＩＧＩＴのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＴＩＧＩＴと共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＰＶＲ」という用語は、ヒトＰＶＲ（ｈＰＶＲ）、ｈＰＶＲのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＰＶＲと共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＰＶＲＬ２」という用語は、ヒトＰＶＲＬ２（ｈＰＶＲＬ２）、ｈＰＶＲＬ２のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＰＶＲＬ２と共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＰＶＲＬ３」という用語は、ヒトＰＶＲＬ３（ｈＰＶＲＬ３）、ｈＰＶＲＬ３のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＰＶＲＬ３と共通のエピトープを有する類似体を含む。

「Ｂ７ファミリー（Ｂ７ｆａｍｉｌｙ）」は、未定義の受容体の抑制性リガンドを指す。Ｂ７ファミリーは、共に腫瘍細胞および腫瘍浸潤細胞上で上方制御される、Ｂ７－Ｈ３およびＢ７－Ｈ４を包含する。本明細書で使用される「Ｂ７－Ｈ３」および「Ｂ７－Ｈ４」という用語は、ヒトＢ７－Ｈ３（ｈＢ７－Ｈ３）およびヒトＢ７－Ｈ４（ｈＢ７－Ｈ４）、そのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびにそれぞれ少なくとも１つのＢ７－Ｈ３およびＢ７－Ｈ４と共通のエピトープを有する類似体を含む。

「ＢおよびＴリンパ球アテニュエーター（ＢａｎｄＴＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅＡｔｔｅｎｕａｔｏｒ）」（ＢＴＬＡ、ＣＤ２７２としても知られる）は、Ｔｈ１細胞で発現されるが、Ｔｈ２細胞で発現されないＴＮＦＲファミリーメンバーである。ＢＴＬＡ発現は、Ｔ細胞の活性化中に誘導され、特に、ＣＤ８＋Ｔ細胞の表面上で発現される。本明細書で使用される「ＢＴＬＡ」という用語は、ヒトＢＴＬＡ（ｈＢＴＬＡ）、ｈＢＴＬＡのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＢＴＬＡと共通のエピトープを有する類似体を含む。ＢＴＬＡ発現は、ヒトＣＤ８＋Ｔ細胞のエフェクター細胞表現型への分化中に徐々に下方制御される。腫瘍特異的ヒトＣＤ８＋Ｔ細胞は、高レベルのＢＴＬＡを発現する。ＢＴＬＡは、「ヘルペスウイルス侵入メディエーター（Ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓｅｎｔｒｙｍｅｄｉａｔｏｒ）」（ＨＶＥＭ、ＴＮＦＲＳＦ１４またはＣＤ２７０としても知られる）に結合し、Ｔ細胞抑制に関与する。本明細書で使用される「ＨＶＥＭ」という用語は、ヒトＨＶＥＭ（ｈＨＶＥＭ）、ｈＨＶＥＭのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＨＶＥＭと共通のエピトープを有する類似体を含む。ＢＴＬＡ－ＨＶＥＭ複合体はＴ細胞免疫応答を負に調節する。

「キラー細胞免疫グロブリン様受容体（Ｋｉｌｌｅｒ－ｃｅｌｌＩｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ－ｌｉｋｅＲｅｃｅｐｔｏｒ）」（ＫＩＲ）は、健康な細胞と疾患細胞との間の区別に関与する、ＮＫＴ細胞およびＮＫ細胞上のＭＨＣクラスＩ分子の受容体であり、ＫＩＲは、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）Ａ、ＢおよびＣに結合し、これは、正常な免疫細胞活性化を抑制する。本明細書で使用される「ＫＩＲ」という用語は、ヒトＫＩＲ（ｈＫＩＲ）、ｈＫＩＲのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＫＩＲと共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＨＬＡ」という用語は、ＨＬＡのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのＨＬＡと共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用されるＫＩＲは特に、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２および／またはＫＩＲ２ＤＬ３を指す。

「リンパ球活性化遺伝子－３（ＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅＡｃｔｉｖａｔｉｏｎＧｅｎｅ－３）（ＬＡＧ－３）」（ＣＤ２２３としても知られる）は、ＭＨＣクラスＩＩ分子に結合することによってリンパ球活性の阻害に関連する抑制性受容体である。この受容体は、Ｔｒｅｇ細胞の機能を増強し、ＣＤ８＋エフェクターＴ細胞機能を阻害して、免疫応答抑制をもたらす。ＬＡＧ－３は、活性化Ｔ細胞、ＮＫ細胞、Ｂ細胞およびＤＣ上で発現される。本明細書で使用される「ＬＡＧ－３」という用語は、ヒトＬＡＧ－３（ｈＬＡＧ－３）、ｈＬＡＧ－３のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。

「Ｔ細胞膜タンパク質－３（ＴＣｅｌｌＭｅｍｂｒａｎｅＰｒｏｔｅｉｎ－３）（ＴＩＭ－３）」（ＨＡＶｃｒ－２としても知られる）は、Ｔｈ１細胞応答の阻害によってリンパ球活性の阻害に関与する抑制性受容体である。そのリガンドは、様々な種類のがんで上方制御される、ガレクチン９（ＧＡＬ９）である。他のＴＩＭ－３リガンドは、ホスファチジルセリン（ＰｔｄＳｅｒ）、高移動度タンパク質１（ＨＭＧＢ１）および癌胎児性抗原関連細胞接着分子１（ＣＥＡＣＡＭ１）を含む。本明細書で使用される「ＴＩＭ－３」という用語は、ヒトＴＩＭ３（ｈＴＩＭ－３）、ｈＴＩＭ－３のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＧＡＬ９」という用語は、ヒトＧＡＬ９（ｈＧＡＬ９）、ｈＧＡＬ９のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＰｄｔＳｅｒ」という用語は、バリアントおよび少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＨＭＧＢ１」という用語は、ヒトＨＭＧＢ１（ｈＨＭＧＢ１）、ｈＨＭＧＢ１のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＣＥＡＣＡＭ１」という用語は、ヒトＣＥＡＣＡＭ１（ｈＣＥＡＣＡＭ１）、ｈＣＥＡＣＡＭ１のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。

「ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ」は、ナチュラルキラー細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の表面上で優勢に発現される抑制性受容体である。本明細書で使用される「ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ」という用語は、ヒトＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ（ｈＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ）、ｈＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ受容体は、ＣＤ９４およびＮＫＧ２Ａを含むヘテロ二量体である。これは、おそらくＨＬＡ－Ｅなどのリガンドに結合することによって、ＮＫ細胞活性化およびＣＤ８＋Ｔ細胞機能を抑制する。ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａは、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）、ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫ－Ｔ細胞）およびＴ細胞（α／βおよびγ／δ）のサイトカイン放出および細胞傷害性応答を制限する。ＮＫＧ２Ａは腫瘍浸潤細胞で頻繁に発現され、ＨＬＡ－Ｅはいくつかのがんで過剰発現される。

「インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（Ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ）」（ＩＤＯ）は、免疫抑制特性を有するトリプトファン異化酵素である。本明細書で使用される「ＩＤＯ」という用語は、ヒトＩＤＯ（ｈＩＤＯ）、ｈＩＤＯのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。ＩＤＯは、キヌレニンへの変換を触媒するトリプトファン分解における律速酵素である。したがって、ＩＤＯは、必須アミノ酸の枯渇に関与する。これは、ＴおよびＮＫ細胞の抑制、Ｔｒｅｇおよび骨髄由来免疫抑制細胞の産生および活性化、ならびに腫瘍血管新生の促進に関与することが知られている。ＩＤＯは多くのがんで過剰発現され、腫瘍細胞の免疫系回避を促進し、局所的炎症によって誘導されると慢性腫瘍進行を促進することが示された。

本明細書で使用される「アデノシン作動性経路（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｒｇｉｃｐａｔｈｗａｙ）」または「アデノシンシグナル伝達経路（ａｄｅｎｏｓｉｎｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ）」では、ＡＴＰがエクトヌクレオチダーゼＣＤ３９およびＣＤ７３によってアデノシンに変換されて、抑制性アデノシン受容体である「アデノシンＡ２Ａ受容体（ＡｄｅｎｏｓｉｎｅＡ２ＡＲｅｃｅｐｔｏｒ）」（Ａ２ＡＲ、ＡＤＯＲＡ２Ａとしても知られる）および「アデノシンＡ２Ｂ受容体（ＡｄｅｎｏｓｉｎｅＡ２ＢＲｅｃｅｐｔｏｒ）」（Ａ２ＢＲ、ＡＤＯＲＡ２Ｂとしても知られる）の１つまたは複数によるアデノシン結合を通して抑制性シグナル伝達をもたらす。アデノシンは、免疫抑制特性を有するヌクレオシドであり、腫瘍微小環境中に高濃度で存在して、免疫細胞浸潤、細胞傷害性およびサイトカイン産生を制限する。よって、アデノシンシグナル伝達は、がん細胞が宿主免疫系クリアランスを回避する戦略である。Ａ２ＡＲおよびＡ２ＢＲを通したアデノシンシグナル伝達は、腫瘍微小環境中に典型的に存在する高いアデノシン濃度によって活性化される、がん治療における重要なチェックポイントである。ＣＤ３９、ＣＤ７３、Ａ２ＡＲおよびＡ２ＢＲは、Ｔ細胞、インバリアントナチュラルキラー細胞、Ｂ細胞、血小板、肥満細胞および好酸球を含むほとんどの免疫細胞によって発現される。Ａ２ＡＲおよびＡ２ＢＲを通したアデノシンシグナル伝達は、免疫細胞のＴ細胞受容体媒介活性化を妨害し、Ｔｒｅｇ数の増加ならびにＤＣおよびエフェクターＴ細胞の活性化減少をもたらす。本明細書で使用される「ＣＤ３９」という用語は、ヒトＣＤ３９（ｈＣＤ３９）、ｈＣＤ３９のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＣＤ７３」という用語は、ヒトＣＤ７３（ｈＣＤ７３）、ｈＣＤ７３のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「Ａ２ＡＲ」という用語は、ヒトＡ２ＡＲ（ｈＡ２ＡＲ）、ｈＡ２ＡＲのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「Ａ２ＢＲ」という用語は、ヒトＡ２ＢＲ（ｈＡ２ＢＲ）、ｈＡ２ＢＲのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。

「Ｔ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサー（Ｖ－ｄｏｍａｉｎＩｇｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｏｆＴｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）」（ＶＩＳＴＡ、Ｃ１０ｏｒｆ５４としても知られる）は、ＰＤ－Ｌ１との相同性を有するが、造血コンパートメントに制限される特有の発現パターンを示す。本明細書で使用される「ＶＩＳＴＡ」という用語は、ヒトＶＩＳＴＡ（ｈＶＩＳＴＡ）、ｈＶＩＳＴＡのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。ＶＩＳＴＡはＴ細胞抑制を誘導し、腫瘍内で白血球によって発現される。

「シアル酸結合免疫グロブリン型レクチン（Ｓｉａｌｉｃａｃｉｄｂｉｎｄｉｎｇｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｔｙｐｅｌｅｃｔｉｎ）」（Ｓｉｇｌｅｃ）ファミリーメンバーは、シアル酸を認識し、「自己（ｓｅｌｆ）」と「非自己（ｎｏｎ－ｓｅｌｆ）」との間の区別に関与する。本明細書で使用される「Ｓｉｇｌｅｃ」という用語は、ヒトＳｉｇｌｅｃ（ｈＳｉｇｌｅｃ）、ｈＳｉｇｌｅｃのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの、１つまたは複数のｈＳｉｇｌｅｃと共通のエピトープを有する類似体を含む。ヒトゲノムは１４種のＳｉｇｌｅｃを含有し、限定されないが、Ｓｉｇｌｅｃ－２、Ｓｉｇｌｅｃ－３、Ｓｉｇｌｅｃ－７およびＳｉｇｌｅｃ－９を含むそのうちのいくつかは、免疫抑制に関与する。Ｓｉｇｌｅｃ受容体はシアル酸を含有するグリカンに結合するが、シアル酸残基の結合放射化学および空間分布の認識において異なる。ファミリーのメンバーはまた、別個の発現パターンを有する。広範な範囲の悪性腫瘍が１種または複数のＳｉｇｌｅｃを過剰発現する。

「ＣＤ２０」は、ＢおよびＴ細胞の表面上で発現される抗原である。ＣＤ２０の高い発現は、Ｂ細胞リンパ腫、へアリー細胞白血病、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病および黒色腫がん幹細胞などのがんで見られ得る。本明細書で使用される「ＣＤ２０」という用語は、ヒトＣＤ２０（ｈＣＤ２０）、ｈＣＤ２０のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。

「反復優位糖タンパク質Ａ（ＧｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎＡｒｅｐｅｔｉｔｉｏｎｓｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｔ）」（ＧＡＲＰ）は、免疫寛容および腫瘍が患者の免疫系を回避する能力において役割を果たす。本明細書で使用される「ＧＡＲＰ」という用語は、ヒトＧＡＲＰ（ｈＧＡＲＰ）、ｈＧＡＲＰのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つの共通のエピトープを有する類似体を含む。ＧＡＲＰは、末梢血中のＴｒｅｇ細胞および腫瘍部位の腫瘍浸潤Ｔ細胞を含むリンパ球上で発現される。これは、おそらく潜在性「トランスフォーミング増殖因子β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ β）」（ＴＧＦ－β）に結合する。ＴｒｅｇにおけるＧＡＲＰシグナル伝達の破壊は、減少した寛容をもたらし、Ｔｒｅｇの腸への移動および細胞傷害性Ｔ細胞の増殖増加を阻害する。

「ＣＤ４７」は、リガンド「シグナル制御タンパク質アルファ（ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｐｒｏｔｅｉｎａｌｐｈａ）」（ＳＩＲＰα）に結合する膜貫通タンパク質である。本明細書で使用される「ＣＤ４７」という用語は、ヒトＣＤ４７（ｈＣＤ４７）、ｈＣｄ４７のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＣＤ４７と共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＳＩＲＰα」という用語は、ヒトＳＩＲＰα（ｈＳＩＲＰα）、ｈＳＩＲＰαのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＳＩＲＰαと共通のエピトープを有する類似体を含む。ＣＤ４７シグナル伝達は、アポトーシス、増殖、接着および移動を含む一定範囲の細胞プロセスに関与する。ＣＤ４７は多くのがんで過剰発現され、マクロファージに対する「私を食べないで（ｄｏｎ’ｔｅａｔｍｅ）」シグナルとして機能する。抑制性抗ＣＤ４７または抗ＳＩＲＰα抗体を通したＣＤ４７シグナル伝達の遮断は、がん細胞のマクロファージ食作用を可能にし、がん特異的Ｔリンパ球の活性化を促進する。

「ポリオウイルス受容体関連免疫グロブリンドメイン含有（Ｐｏｌｉｏｖｉｒｕｓｒｅｃｅｐｔｏｒｒｅｌａｔｅｄｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｄｏｍａｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」（ＰＶＲＩＧ、ＣＤ１１２Ｒとしても知られる）は、「ポリオウイルス受容体関連２（Ｐｏｌｉｏｖｉｒｕｓｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｒｅｌａｔｅｄ２）」（ＰＶＲＬ２）に結合する。ＰＶＲＩＧおよびＰＶＲＬ２はいくつかのがんで過剰発現される。ＰＶＲＩＧ発現はまた、ＴＩＧＩＴおよびＰＤ－１発現を誘導し、ＰＶＰＬ２およびＰＶＲ（ＴＩＧＩＴリガンド）は、いくつかのがんで共過剰発現される。ＰＶＲＩＧシグナル伝達経路の遮断は、増加したＴ細胞機能およびＣＤ８＋Ｔ細胞応答、したがって、低下した免疫抑制および上昇したインターフェロン応答をもたらす。本明細書で使用される「ＰＶＲＩＧ」という用語は、ヒトＰＶＲＩＧ（ｈＰＶＲＩＧ）、ｈＰＶＲＩＧのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＰＶＲＩＧと共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＰＶＲＬ２」は、上に定義されるｈＰＶＲＬ２を含む。

「コロニー刺激因子１（ｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ１）」経路は、本開示により標的化され得る別のチェックポイントである。ＣＳＦ１Ｒは、ＣＳＦ１に結合する骨髄増殖因子である。ＣＳＦ１Ｒシグナル伝達の遮断は、マクロファージ応答を機能的に再プログラムし、それによって、抗原提示および抗腫瘍Ｔ細胞応答を増強することができる。本明細書で使用される「ＣＳＦ１Ｒ」という用語は、ヒトＣＳＦ１Ｒ（ｈＣＳＦ１Ｒ）、ｈＣＳＦ１Ｒのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＣＳＦ１Ｒと共通のエピトープを有する類似体を含む。本明細書で使用される「ＣＳＦ１」という用語は、ヒトＣＳＦ１（ｈＣＳＦ１）、ｈＣＳＦ１のバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＣＳＦ１と共通のエピトープを有する類似体を含む。

「ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸ＮＡＤＰＨオキシダーゼ（ｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｐｈｏｓｐｈａｔｅＮＡＤＰＨｏｘｉｄａｓｅ）」は、免疫抑制活性酸素種（ＲＯＳ）を生成する骨髄性細胞の酵素のＮＯＸファミリーの酵素を指す。５種のＮＯＸ酵素（ＮＯＸ１～ＮＯＸ５）が、がんの発達および免疫抑制に関与することが分かっている。上昇したＲＯＳレベルは、ほとんど全てのがんで検出され、腫瘍の発達および進行の多くの側面を促進する。ＮＯＸによって生成されたＲＯＳは、ＮＫおよびＴ細胞機能を弱め、骨髄性細胞におけるＮＯＸの阻害は、隣接ＮＫ細胞およびＴ細胞の抗腫瘍機能を改善する。本明細書で使用される「ＮＯＸ」という用語は、ヒトＮＯＸ（ｈＮＯＸ）、ｈＮＯＸのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＮＯＸと共通のエピトープを有する類似体を含む。

本開示により標的化され得る別の免疫チェックポイントは、「トリプトファン－２，３－ジオキシゲナーゼ（ｔｒｙｐｔｏｐｈａｎ－２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ）」（ＴＤＯ）によって媒介されるシグナルである。ＴＤＯは、トリプトファン分解におけるＩＤＯの代替経路となっており、免疫抑制に関与する。腫瘍細胞はＩＤＯの代わりにＴＤＯを介してトリプトファンを異化し得るので、ＴＤＯはチェックポイント遮断の追加の標的となり得る。実際、いくつかのがん細胞株がＴＤＯを上方制御することが分かっており、ＴＤＯはＩＤＯ阻害を補完し得る。本明細書で使用される「ＴＤＯ」という用語は、ヒトＴＤＯ（ｈＴＤＯ）、ｈＴＤＯのバリアント、アイソフォームおよび種ホモログ、ならびに少なくとも１つのｈＴＤＯと共通のエピトープを有する類似体を含む。

免疫チェックポイントの多くは、特異的受容体とリガンドペア、例えば上記のものとの間の相互作用によって調節される。よって、免疫チェックポイントタンパク質は、免疫チェックポイントシグナル伝達を媒介する。例えば、チェックポイントタンパク質は、Ｔ細胞活性化、Ｔ細胞増殖および／またはＴ細胞機能を直接的または間接的に調節する。がん細胞はしばしば、これらのチェックポイント経路を利用して、自身が免疫系によって攻撃されるのを防ぐ。したがって、本開示により調節される、チェックポイントタンパク質の機能は、典型的には、Ｔ細胞活性化、Ｔ細胞増殖および／またはＴ細胞機能の調節である。よって、免疫チェックポイントタンパク質は、自己寛容ならびに生理学的免疫応答の持続期間および大きさを調節および維持する。免疫チェックポイントタンパク質の多くは、Ｂ７：ＣＤ２８ファミリーまたは腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーに属し、特異的リガンドに結合することによって、細胞質ドメインに動員されるシグナル伝達分子を活性化する（Ｓｕｚｕｋｉら、２０１６、ＪａｐＪＣｌｉｎＯｎｃ、４６：１９１～２０３）。

本明細書で使用される場合、「免疫チェックポイントモジュレーター（ｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍｏｄｕｌａｔｏｒ）」または「チェックポイントモジュレーター（ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍｏｄｕｌａｔｏｒ）」という用語は、１つまたは複数のチェックポイントタンパク質の機能を調節する分子または化合物を指す。免疫チェックポイントモジュレーターは、典型的には、自己寛容ならびに／あるいは免疫応答の大きさおよび／または持続時間を調節することができる。好ましくは、本開示により使用される免疫チェックポイントモジュレーターは、１つまたは複数のヒトチェックポイントタンパク質の機能を調節し、よって、「ヒトチェックポイントモジュレーター（ｈｕｍａｎｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｍｏｄｕｌａｔｏｒ）」である。好ましい実施形態では、本明細書で使用されるヒトチェックポイントモジュレーターが免疫チェックポイント阻害剤である。

本明細書で使用される場合、「免疫チェックポイント阻害剤（ｉｍｍｕｎｅｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）」または「チェックポイント阻害剤（ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）」は、１つもしくは複数のチェックポイントタンパク質を完全にもしくは部分的に低下させる、阻害する、妨害するもしくは負に調節する、または１つもしくは複数のチェックポイントタンパク質の発現を完全にもしくは部分的に低下させる、阻害する、妨害するもしくは負に調節する分子を指す。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、１つまたは複数のチェックポイントタンパク質に結合する。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、チェックポイントタンパク質を調節する１つまたは複数の分子に結合する。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、例えばＤＮＡまたはＲＮＡレベルで、１つまたは複数のチェックポイントタンパク質の前駆体に結合する。本開示によるチェックポイント阻害剤として機能する任意の薬剤を使用することができる。

本明細書で使用される「部分的に（ｐａｒｔｉａｌｌｙ）」という用語は、レベル、例えばチェックポイントタンパク質の阻害のレベルにおける、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９８％または９９％を意味する。

一定の実施形態では、本明細書に開示される方法に使用するのに適した免疫チェックポイント阻害剤が、抑制性シグナルのアンタゴニスト、例えばＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＬＡＧ－３、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４またはＴＩＭ－３を標的化する抗体である。これらのリガンドおよび受容体は、Ｐａｒｄｏｌｌ，Ｄ．、Ｎａｔｕｒｅ．１２：２５２～２６４、２０１２に概説される。本開示により標的化され得るさらなる免疫チェックポイントタンパク質が本明細書に記載される。

一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、免疫チェックポイントに関連する抑制性シグナルを妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、免疫チェックポイントに関連する抑制性シグナル伝達を破壊する抗体またはその断片である。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、抑制性シグナル伝達を破壊する低分子阻害剤である。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、抑制性シグナル伝達を破壊するペプチド系阻害剤である。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、抑制性シグナル伝達を破壊する抑制性核酸分子である。

一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、チェックポイント遮断剤タンパク質間の相互作用を妨げる抗体、その断片または抗体模倣物、例えばＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－Ｌ２との間の相互作用を妨げる抗体またはその断片である。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ－４とＣＤ８０またはＣＤ８６との間の相互作用を妨げる抗体、その断片または抗体模倣物である。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＬＡＧ－３とそのリガンドとの間、またはＴＩＭ－３とそのリガンドとの間の相互作用を妨げる抗体、その断片または抗体模倣物である。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＤ３９および／またはＣＤ７３を通した抑制性シグナル伝達、ならびに／あるいはＡ２ＡＲおよび／またはＡ２ＢＲとアデノシンの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、Ｂ７－Ｈ３とその受容体、および／またはＢ７－Ｈ４とその受容体の相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＢＴＬＡとそのリガンドＨＶＥＭの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、１つまたは複数のＫＩＲとそのそれぞれのリガンドの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＬＡＧ－３と１つまたは複数のそのリガンドの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＴＩＭ－３と１つまたは複数のそのリガンドであるガレクチン－９、ＰｔｄＳｅｒ、ＨＭＧＢ１およびＣＥＡＣＡＭ１の相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＴＩＧＩＴと１つまたは複数のそのリガンドであるＰＶＲ、ＰＶＲＬ２およびＰＶＲＬ３の相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＤ９４／ＮＫＧ２ＡとＨＬＡ－Ｅの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＶＩＳＴＡと１つまたは複数のその結合パートナーの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、１つまたは複数のＳｉｇｌｅｃとそのそれぞれのリガンドの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤がＣＤ２０シグナル伝達を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＧＡＲＰと１つまたは複数のそのリガンドの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＤ４７とＳＩＲＰαの相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＶＲＩＧとＰＶＲＬ２の相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＳＦ１ＲとＣＳＦ１の相互作用を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤がＮＯＸシグナル伝達を妨げる。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤がＩＤＯおよび／またはＴＤＯシグナル伝達を妨げる。

本明細書に記載される抑制性免疫チェックポイントシグナル伝達の阻害または遮断は、免疫抑制の防止または逆転、およびがん細胞に対するＴ細胞免疫の確立または増強をもたらす。一実施形態では、本明細書に記載される免疫チェックポイントシグナル伝達の阻害が、免疫系の機能障害を低下させる、または阻害する。一実施形態では、本明細書に記載される免疫チェックポイントシグナル伝達の阻害が、機能障害性免疫細胞をあまり機能障害性でなくする。一実施形態では、本明細書に記載される免疫チェックポイントシグナル伝達の阻害が、機能障害性Ｔ細胞をあまり機能障害性でなくする。

本明細書で使用される「機能障害（ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ）」という用語は、抗原刺激に対する減少した免疫応答性の状態を指す。この用語は、抗原認識が起こり得るが、続く免疫応答が感染も腫瘍増殖も制御するのに無効である、消耗および／またはアネルギーの両方の共通要素を含む。機能障害はまた、抗原認識が機能障害性免疫細胞により遅延させられている状態を含む。

本明細書で使用される「機能障害性（ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）」という用語は、抗原刺激に対する減少した免疫応答性の状態にある免疫細胞を指す。機能障害性は、抗原認識に対して非応答性であること、ならびに抗原認識を下流Ｔ細胞エフェクター機能、例えば増殖、サイトカイン産生（例えば、ＩＬ－２）および／または標的細胞死滅に変換する能力の障害を含む。

本明細書で使用される「アネルギー（ａｎｅｒｇｙ）」という用語は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を通して送達される不完全または不十分なシグナルに起因する、抗原刺激に対して非応答性の状態を指す。Ｔ細胞アネルギーはまた、共刺激の非存在下での抗原による刺激で生じ、共刺激の状況でさえ、抗原によるその後の活性化に不応性になる細胞をもたらし得る。非応答性状態はしばしば、ＩＬ－２の存在によって無効にされ得る。アネルギー性Ｔ細胞は、クローン増殖を受けない、および／またはエフェクター機能を獲得しない。

本明細書で使用される「消耗（ｅｘｈａｕｓｔｉｏｎ）」という用語は、免疫細胞消耗、例えば多くの慢性感染症およびがんの間に生じる持続したＴＣＲシグナル伝達から起こるＴ細胞機能障害の状態としてのＴ細胞消耗を指す。これは、不完全なまたは不十分なシグナル伝達を通してではなく、持続したシグナル伝達から起こるという点でアネルギーと区別される。消耗は、不十分なエフェクター機能、抑制性受容体の持続した発現および機能的エフェクターまたはメモリーＴ細胞とは異なる転写状態によって定義される。消耗は、疾患（例えば、感染症および腫瘍）の最適な制御を妨げる。消耗は、外因性の負の調節経路（例えば、免疫調節性サイトカイン）と細胞固有の負の調節経路（本明細書に記載されるような抑制性免疫チェックポイント経路）の両方に起因し得る。

「Ｔ細胞機能の増強（ｅｎｈａｎｃｉｎｇＴｃｅｌｌｆｕｎｃｔｉｏｎ）」は、Ｔ細胞が持続したもしくは増幅された生物学的機能を有するのを誘導する、引き起こすもしくは刺激する、または消耗したもしくは不活性Ｔ細胞を再生もしくは再活性化することを意味する。Ｔ細胞機能の増強の例としては、介入前のレベルと比較して増加したＣＤ８＋Ｔ細胞からのγ－インターフェロンの分泌、増加した増殖、増加した抗原応答性（例えば、腫瘍クリアランス）が挙げられる。一実施形態では、増強のレベルが、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％、１１０％、１２０％、１３０％、１４０％、１５０％、２００％またはそれ以上である。この増強を測定する方法は、当業者に公知である。

免疫チェックポイント阻害剤は抑制性核酸分子であり得る。本明細書で使用される「抑制性核酸（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ）」または「抑制性核酸分子（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｍｏｌｅｃｕｌｅ）」という用語は、１つまたは複数のチェックポイントタンパク質を完全にまたは部分的に低下させる、阻害する、妨害するまたは負に調節する核酸分子、例えばＤＮＡまたはＲＮＡを指す。抑制性核酸分子は、限定されないが、オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスＤＮＡまたはＲＮＡ分子、およびアプタマー（例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡアプタマー）を含む。

本明細書で使用される「オリゴヌクレオチド（ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）」という用語は、タンパク質発現、特にチェックポイントタンパク質、例えば本明細書に記載されるチェックポイントタンパク質の発現を減少させることができる核酸分子を指す。オリゴヌクレオチドは、典型的には２～５０個のヌクレオチドを含む、短ＤＮＡまたはＲＮＡ分子である。オリゴヌクレオチドは一本鎖または二本鎖であり得る。チェックポイント阻害剤オリゴヌクレオチドはアンチセンスオリゴヌクレオチドであり得る。

アンチセンスオリゴヌクレオチドは、所与の配列、特にチェックポイントタンパク質の核酸配列（またはその断片）の配列に相補的な一本鎖ＤＮＡまたはＲＮＡ分子である。アンチセンスＲＮＡは、典型的にはｍＲＮＡ、例えばチェックポイントタンパク質をコードするｍＲＮＡのタンパク質翻訳を、前記ｍＲＮＡに結合することによって妨げるために使用される。アンチセンスＤＮＡは、典型的には特異的、相補的（コードまたは非コード）ＲＮＡを標的化するために使用される。結合が起こる場合、このようなＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッドは酵素ＲＮアーゼＨによって分解され得る。さらに、モルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチドは脊椎動物における遺伝子ノックダウンに使用され得る。例えば、Ｋｒｙｃｚｅｋら、２００６（ＪＥｘｐＭｅｄ、２０３：８７１－８１）は、腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）特異的Ｔ細胞により、マウスで増加したＴ細胞増殖および低下した腫瘍体積をもたらす、マクロファージでＢ７－Ｈ４発現を特異的に遮断するＢ７－Ｈ４特異的モルホリノを設計した。

「ｓｉＲＮＡ」または「低分子干渉ＲＮＡ（ｓｍａｌｌｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇＲＮＡ）」または「低分子抑制性ＲＮＡ（ｓｍａｌｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙＲＮＡ）」という用語は、本明細書で互換的に使用され、特異的遺伝子、例えば相補的ヌクレオチド配列を有するチェックポイントタンパク質をコードする遺伝子の発現に干渉する２０～２５塩基対の典型的な長さを有する二本鎖ＲＮＡ分子を指す。一実施形態では、ｓｉＲＮＡが、ｍＲＮＡに干渉し、したがって、翻訳、例えば免疫チェックポイントタンパク質の翻訳を遮断する。外因性ｓｉＲＮＡのトランスフェクションは、遺伝子ノックダウンに使用され得るが、その効果は、特に急速に分裂している細胞においては一過的にすぎない可能性がある。安定なトランスフェクションは、例えばＲＮＡ修飾または発現ベクターの使用によって達成され得る。ｓｉＲＮＡによる細胞の安定なトランスフェクションに有用な修飾およびベクターは当技術分野で公知である。ｓｉＲＮＡ配列はまた、２本の鎖の間に短ループを導入して、「小ヘアピンＲＮＡ（ｓｍａｌｌｈａｉｒｐｉｎＲＮＡ）」または「ｓｈＲＮＡ」を得るために修飾され得る。ｓｈＲＮＡはダイサーによって機能的ｓｉＲＮＡにプロセシングされ得る。ｓｈＲＮＡは比較的低い分解速度および代謝回転を有する。したがって、免疫チェックポイント阻害剤はｓｈＲＮＡであり得る。

本明細書で使用される「アプタマー（ａｐｔａｍｅｒ）」という用語は、ポリペプチドなどの標的分子に結合することができる、典型的には２５～７０ヌクレオチド長の、ＤＮＡまたはＲＮＡなどの一本鎖核酸分子を指す。一実施形態では、アプタマーが、免疫チェックポイントタンパク質、例えば本明細書に記載される免疫チェックポイントタンパク質に結合する。例えば、本開示によるアプタマーは、免疫チェックポイントタンパク質もしくはポリペプチド、または免疫チェックポイントタンパク質もしくはポリペプチドの発現を調節するシグナル伝達経路の分子に特異的に結合することができる。アプタマーの作製および治療的使用は当技術分野で周知である（例えば、米国特許第５４７５０９６号参照）。

「低分子阻害剤（ｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）」または「低分子（ｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌｅ）」という用語は、本明細書で互換的に使用され、１つまたは複数の上記のチェックポイントタンパク質を完全にまたは部分的に低下させる、阻害する、妨害する、または負に調節する、通常最大１０００ダルトンの低分子量有機化合物を指す。このような低分子阻害剤は通常、有機化学によって合成されるが、植物、真菌および微生物などの天然源からも単離され得る。低分子量は、低分子阻害剤が細胞膜を横切って急速に拡散することを可能にする。例えば、当技術分野で公知の様々なＡ２ＡＲアンタゴニストは、分子量が５００ダルトン未満の有機化合物である。

免疫チェックポイント阻害剤は、抗体、その抗原結合断片、抗体模倣物、または要求される特異性の抗原結合断片を有する抗体部分を含む融合タンパク質であり得る。抗体またはその抗原結合断片は本明細書に記載される通りである。免疫チェックポイント阻害剤である抗体またはその抗原結合断片は、特に、免疫チェックポイント受容体または免疫チェックポイント受容体リガンドなどの免疫チェックポイントタンパク質に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。抗体または抗原結合断片はまた、本明細書に記載されるさらなる部分にコンジュゲートされ得る。特に、抗体またはその抗原結合断片は、キメラ化、ヒト化またはヒト抗体である。好ましくは、免疫チェックポイント阻害剤抗体またはその抗原結合断片は、免疫チェックポイント受容体または免疫チェックポイント受容体リガンドのアンタゴニストである。

好ましい実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤である抗体が単離抗体である。
本開示による免疫チェックポイント阻害剤である抗体またはその抗原結合断片はまた、任意の公知の免疫チェックポイント阻害剤抗体と抗原結合について交差競合する（ｃｒｏｓｓ－ｃｏｍｐｅｔｅ）抗体であり得る。一定の実施形態では、免疫チェックポイント阻害剤抗体が、１つまたは複数の本明細書に記載される免疫チェックポイント阻害剤抗体と交差競合する。抗体が抗原への結合について交差競合する能力は、これらの抗体が抗原の同じエピトープ領域に結合し得る、または別のエピトープに結合する場合、公知の免疫チェックポイント阻害剤抗体がその特定のエピトープ領域に結合するのを立体的に妨げ得ることを示す。これらの交差競合抗体は、同じエピトープに結合することによって、またはリガンドの結合を立体的に妨げることによって、免疫チェックポイントのそのリガンドへの結合を遮断すると予想されるので、これらが交差競合する抗体と非常に類似の機能的特性を有し得る。交差競合抗体は、表面プラズモン共鳴分析、ＥＬＩＳＡアッセイまたはフローサイトメトリーなどの標準的な結合アッセイにおいて、１つまたは複数の公知の抗体と交差競合する能力に基づいて容易に特定され得る（例えば、国際公開第２０１３／１７３２２３号参照）。

一定の実施形態では、１つもしくは複数の公知の抗体と所与の抗原への結合について交差競合する、または１つもしくは複数の公知の抗体と同じ所与の抗原のエピトープ領域に結合する抗体またはその抗原結合断片がモノクローナル抗体である。ヒト患者に投与するために、これらの交差競合抗体は、キメラ抗体、またはヒト化もしくはヒト抗体であり得る。このようなキメラ、ヒト化またはヒトモノクローナル抗体は、当技術分野で周知の方法によって調製および単離され得る。

チェックポイント阻害剤はまた、分子（またはそのバリアント）自体の可溶性形態、例えば可溶性ＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－Ｌ１融合体の形態であり得る。

本開示の文脈では、２種以上のチェックポイント阻害剤が使用され得、２種以上のチェックポイント阻害剤は別個のチェックポイント経路または同じチェックポイント経路を標的化している。好ましくは、２種以上のチェックポイント阻害剤が別個のチェックポイント阻害剤である。好ましくは、２種以上の別個のチェックポイント阻害剤が使用される場合、特に少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９または１０種の別個のチェックポイント阻害剤が使用される、好ましくは２、３、４または５種の別個のチェックポイント阻害剤が使用される、より好ましくは２、３または４種の別個のチェックポイント阻害剤が使用される、さらにより好ましくは２または３種の別個のチェックポイント阻害剤が使用される、最も好ましくは２種の別個のチェックポイント阻害剤が使用される。別個のチェックポイント阻害剤の組み合わせの好ましい例としては、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＣＴＬＡ－４シグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＴＩＧＩＴシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＢ７－Ｈ３および／またはＢ７ーＨ４シグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＢＴＬＡシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＫＩＲシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＬＡＧ－３シグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＴＩＭ－３シグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＩＤＯシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とアデノシンシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＶＩＳＴＡシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＳｉｇｌｅｃシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＣＤ２０シグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＧＡＲＰシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＣＤ４７シグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＰＶＲＩＧシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＣＳＦ１Ｒシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、ＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＮＯＸシグナル伝達の阻害剤の組み合わせ、およびＰＤ－１シグナル伝達の阻害剤とＴＤＯシグナル伝達の阻害剤の組み合わせが挙げられる。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤（免疫チェックポイント遮断剤）が、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１またはＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ２シグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＰＤ－１シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＰＤ－１阻害剤である。一定の実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤が、ＰＤ－Ｌ１阻害剤またはＰＤ－Ｌ２阻害剤などのＰＤ－１リガンド阻害剤である。好ましい実施形態では、ＰＤ－１シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１受容体と１つまたは複数のそのリガンドであるＰＤ－Ｌ１および／またはＰＤ－Ｌ２との間の相互作用を破壊する抗体またはその抗原結合部分である。ＰＤ－１に結合し、ＰＤ－１と１つまたは複数のそのリガンドとの間の相互作用を破壊する抗体は当技術分野で公知である。一定の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分がＰＤ－１に特異的に結合する。一定の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分が、ＰＤ－Ｌ１に特異的に結合し、ＰＤ－１との相互作用を阻害し、それによって、免疫活性を増加させる。一定の実施形態では、抗体またはその抗原結合部分が、ＰＤ－Ｌ２に特異的に結合し、ＰＤ－１との相互作用を阻害し、それによって、免疫活性を増加させる。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＣＴＬＡ－４シグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＣＴＬＡ－４シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＣＴＬＡ－４シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＴＬＡ－４阻害剤である。一定の実施形態では、ＣＴＬＡ－４シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＴＬＡ－４リガンド阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＴＩＧＩＴシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＴＩＧＩＴシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＴＩＧＩＴシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＴＩＧＩＴ阻害剤である。一定の実施形態では、ＴＩＧＩＴシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＴＩＧＩＴリガンド阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、Ｂ７ファミリーシグナル伝達経路の構成成分である。一定の実施形態では、Ｂ７ファミリーメンバーがＢ７－Ｈ３およびＢ７－Ｈ４である。本開示の一定の実施形態は、Ｂ７－Ｈ３および／またはＢ７－Ｈ４のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。したがって、本開示の一定の実施形態は、Ｂ７－Ｈ３またはＢ７－Ｈ４を標的化する抗体またはその抗原結合部分を対象に投与することを提供する。Ｂ７ファミリーは、定義された受容体を有さないが、これらのリガンドは腫瘍細胞または腫瘍浸潤細胞で上方制御される。前臨床マウスモデルは、これらのリガンドの遮断が抗腫瘍免疫を増強することができることを示している。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＢＴＬＡシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＢＴＬＡシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＢＴＬＡシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＢＴＬＡ阻害剤である。一定の実施形態では、ＢＴＬＡシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＨＶＥＭ阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、１つまたは複数のＫＩＲシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、１つまたは複数のＫＩＲシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、１つまたは複数のＫＩＲシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＫＩＲ阻害剤である。一定の実施形態では、１つまたは複数のＫＩＲシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＫＩＲリガンド阻害剤である。例えば、本開示によるＫＩＲ阻害剤は、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２および／またはＫＩＲ２ＤＬ３に結合する抗ＫＩＲ抗体であり得る。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＬＡＧ－３シグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＬＡＧ－３シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＬＡＧ－３シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＬＡＧ－３阻害剤である。一定の実施形態では、ＬＡＧ－３シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＬＡＧ－３リガンド阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＴＩＭ－３シグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＴＩＭ－３シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＴＩＭ－３シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＴＩＭ－３阻害剤である。一定の実施形態では、ＴＩＭ－３シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＴＩＭ－３リガンド阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ阻害剤である。一定の実施形態では、ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａリガンド阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＩＤＯシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＩＤＯシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤、例えばＩＤＯ阻害剤を対象に投与することを提供する。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、アデノシンシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、アデノシンシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、アデノシンシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＤ３９阻害剤である。一定の実施形態では、アデノシンシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＤ７３阻害剤である。一定の実施形態では、アデノシンシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＡ２ＡＲ阻害剤である。一定の実施形態では、アデノシンシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＡ２ＢＲ阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＶＩＳＴＡシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＶＩＳＴＡシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＶＩＳＴＡシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＶＩＳＴＡ阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、１つまたは複数のＳｉｇｌｅｃシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、１つまたは複数のＳｉｇｌｅｃシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、１つまたは複数のＳｉｇｌｅｃシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＳｉｇｌｅｃ阻害剤である。一定の実施形態では、１つまたは複数のＳｉｇｌｅｃシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＳｉｇｌｅｃリガンド阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＣＤ２０シグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＣＤ２０シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＣＤ２０シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＤ２０阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＧＡＲＰシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＧＡＲＰシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＧＡＲＰシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＧＡＲＰ阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＣＤ４７シグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＣＤ４７シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＣＤ４７シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＤ４７阻害剤である。一定の実施形態では、ＣＤ４７シグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＳＩＲＰα阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＰＶＲＩＧシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＰＶＲＩＧシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＰＶＲＩＧシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＰＶＲＩＧ阻害剤である。一定の実施形態では、ＰＶＲＩＧシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＰＶＲＩＧリガンド阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＣＳＦ１Ｒシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＣＳＦ１Ｒシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤を対象に投与することを提供する。一定の実施形態では、ＣＳＦ１Ｒシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＳＦ１Ｒ阻害剤である。一定の実施形態では、ＣＳＦ１Ｒシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤がＣＳＦ１阻害剤である。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＮＯＸシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＮＯＸシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤、例えばＮＯＸ阻害剤を対象に投与することを提供する。

一定の実施形態では、抑制性免疫調節剤が、ＴＤＯシグナル伝達経路の構成成分である。したがって、本開示の一定の実施形態は、ＴＤＯシグナル伝達経路のチェックポイント阻害剤、例えばＴＤＯ阻害剤を対象に投与することを提供する。

例示的なＰＤ－１阻害剤は、限定されないが、抗ＰＤ－１抗体、例えばＢＧＢ－Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ；米国特許第８７３５５５３号、国際公開第２０１５／３５６０６号および米国特許出願公開第２０１５／００７９１０９号参照）、セミプリマブ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ；国際公開第２０１５／１１２８００号参照）およびランブロリズマブ（例えば、国際公開第２００８／１５６７１２号でｈＰＤ１０９Ａならびにそのヒト化誘導体ｈ４０９Ａ１、ｈ４０９Ａ１６およびｈ４０９Ａ１７として開示される）、ＡＢ１３７１３２（Ａｂｃａｍ）、ＥＨ１２．２Ｈ７およびＲＭＰ１－１４（番号ＢＥ０１４６；ＢｉｏｘｃｅｌｌＬｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓＰｖｔ．ＬＴＤ．）、ＭＩＨ４（ＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ、ＢＭＳ－９３６５５８；ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ；国際公開第２００６／１２１１６８号）、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ；ＭＫ－３４７５；Ｍｅｒｃｋ；国際公開第２００８／１５６７１２号）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１；ＣｕｒｅＴｅｃｈ；Ｈａｒｄｙら、１９９４、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．、５４（２２）：５７９３－６および国際公開第２００９／１０１６１１号参照）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ；国際公開第２０１５／１１２９００号参照）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ－５１４；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；国際公開第２０１２／１４５４９３号参照）、ＴＳＲ－０４２（国際公開第２０１４／１７９６６４号参照）、ＲＥＧＮ－２８１０（Ｈ４Ｈ７７９８Ｎ；米国特許出願公開第２０１５／０２０３５７９号参照）、ＪＳ００１（ＴＡＩＺＨＯＵＪＵＮＳＨＩＰＨＡＲＭＡ；Ｓｉ－ＹａｎｇＬｉｕら、２００７、Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．７０：１３６参照）、ＡＭＰ－２２４（ＧＳＫ－２６６１３８０；Ｌｉら、２０１６、ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉ１７（７）：１１５１および国際公開第２０１０／０２７８２７号および国際公開第２０１１／０６６３４２号参照）、ＰＦ－０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＢＧＢ－Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ；国際公開第２０１５／３５６０６号および米国特許出願公開第２０１５／００７９１０９号参照）、ＢＩ７５４０９１、ＳＨＲ－１２１０（国際公開第２０１５／０８５８４７号参照）、ならびに国際公開第２００６／１２１１６８号に記載される抗体１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、４Ａ１１、７Ｄ３および５Ｆ４、ＩＮＣＳＨＲ１２１０（ＪｉａｎｇｓｕＨｅｎｇｒｕｉＭｅｄｉｃｉｎｅ；ＳＨＲ－１２１０としても知られる；国際公開第２０１５／０８５８４７号参照）、ＴＳＲ－０４２（ＴｅｓａｒｏＢｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ；ＡＮＢ０１１としても知られる；国際公開第２０１４／１７９６６４号参照）、ＧＬＳ－０１０（Ｗｕｘｉ／ＨａｒｂｉｎＧｌｏｒｉａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ；ＷＢＰ３０５５としても知られる；Ｓｉ－Ｙａｎｇら、２０１７、Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．７０：１３６参照）、ＳＴＩ－１１１０（ＳｏｒｒｅｎｔｏＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ；国際公開第２０１４／１９４３０２号参照）、ＡＧＥＮ２０３４（Ａｇｅｎｕｓ；国際公開第２０１７／０４０７９０号参照）、ＭＧＡ０１２（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ；国際公開第２０１７／１９８４６号参照）、ＩＢＩ３０８（Ｉｎｎｏｖｅｎｔ；国際公開第２０１７／０２４４６５号、国際公開第２０１７／０２５０１６号、国際公開第２０１７／１３２８２５号および国際公開第２０１７／１３３５４０号参照）、例えば米国特許第７，４８８，８０２号、米国特許第８，００８，４４９号、米国特許第８，１６８，７５７号、国際公開第０３／０４２４０２号、国際公開第２０１０／０８９４１１号（抗ＰＤ－Ｌ１抗体をさらに開示している）、国際公開第２０１０／０３６９５９号、国際公開第２０１１／１５９８７７号（ＴＩＭ－３に対する抗体をさらに開示している）、国際公開第２０１１／０８２４００号、国際公開第２０１１／１６１６９９号、国際公開第２００９／０１４７０８号、国際公開第０３／０９９１９６号、国際公開第２００９／１１４３３５号、国際公開第２０１２／１４５４９３号（ＰＤ－Ｌ１に対する抗体をさらに開示している）、国際公開第２０１５／０３５６０６号、国際公開第２０１４／０５５６４８号（抗ＫＩＲ抗体をさらに開示している）、米国特許出願公開第２０１８／０１８５４８２号（抗ＰＤ－Ｌ１および抗ＴＩＧＩＴ抗体をさらに開示している）、米国特許第８，００８，４４９号、米国特許第８，７７９，１０５号、米国特許第６，８０８，７１０号、米国特許第８，１６８，７５７号、米国特許出願公開第２０１６／０２７２７０８および米国特許第８，３５４，５０９号に記載される抗ＰＤ－１抗体、例えばＳｈａａｂａｎｉら、２０１８、ＥｘｐｅｒｔＯｐＴｈｅｒＰａｔ．、２８（９）：６６５－６７８およびＳａｓｉｋｕｍａｒおよびＲａｍａｃｈａｎｄｒａ、２０１８、ＢｉｏＤｒｕｇｓ、３２（５）：４８１～４９７に開示されるＰＤ－１シグナル伝達経路に対する低分子アンタゴニスト、例えば国際公開第２０１９／０００１４６号および国際公開第２０１８／１０３５０１号に開示されるＰＤ－１に向けられたｓｉＲＮＡｓ、国際公開第２０１８／２２２７１１号に開示される可溶性ＰＤ－１タンパク質、ならびに例えば国際公開第２０１８／０２２８３１号に記載されるＰＤ－１の可溶性形態を含む腫瘍溶解性ウイルスを含む。

一定の実施形態では、ＰＤ－１阻害剤が、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ；ＢＭＳ－９３６５５８）、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ；ＭＫ－３４７５）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１）、ＰＤＲ００１、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ－５１４）、ＴＳＲ－０４２、ＲＥＧＮ２８１０、ＪＳ００１、ＡＭＰ－２２４（ＧＳＫ－２６６１３８０）、ＰＦ－０６８０１５９１、ＢＧＢ－Ａ３１７、ＢＩ７５４０９１、またはＳＨＲ－１２１０である。

例示的なＰＤ－１リガンド阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１阻害剤およびＰＤ－Ｌ２阻害剤であり、限定されないが、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、例えばＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；国際公開第２０１１／０６６３８９参照）、ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ（米国特許出願公開第２０１４／０３４１９１７号参照）、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０（国際公開第２０１０／０７７６３４号および米国特許第８，２１７，１４９号の配列番号２０参照）、ＭＩＨ１（ＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ；欧州特許第３２３０３１９参照）、ＭＤＸ－１１０５（Ｒｏｃｈｅ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；国際公開第２０１３０１９９０６号および米国特許第８，２１７，１４９号参照）、ＳＴＩ－１０１４（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ；国際公開第２０１３／１８１６３４参照）、ＣＫ－３０１（ＣｈｅｃｋｐｏｉｎｔＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＫＮ０３５（３ＤＭｅｄ／Ａｌｐｈａｍａｂ；Ｚｈａｎｇら、２０１７、ＣｅｌｌＤｉｓｃｏｖ．３：１７００４参照）、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ；ＲＧ７４４６；ＭＰＤＬ３２８０Ａ；Ｒ０５５４１２６７；米国特許第９，７２４，４１３号参照）、ＢＭＳ－９３６５５９（ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ；米国特許第７，９４３，７４３号、国際公開第２０１３／１７３２２３参照）、アベルマブ（ｂａｖｅｎｃｉｏ；米国特許出願公開第２０１４／０３４１９１７号参照）、ＬＹ３３０００５４（ＥｌｉＬｉｌｌｙＣｏ．）、ＣＸ－０７２（Ｐｒｏｃｌａｉｍ－ＣＸ－０７２；ＣｙｔｏｍＸとも呼ばれる；国際公開第２０１６／１４９２０１号参照）、ＦＡＺ０５３、ＫＮ０３５（国際公開第２０１７０２０８０１号および国際公開第２０１７０２０８０２号参照）、ＭＤＸ－１１０５（米国特許出願公開第２０１５／０３２０８５９号参照）、３Ｇ１０、１２Ａ４（ＢＭＳ－９３６５５９とも呼ばれる）、１０Ａ５、５Ｆ８、１０Ｈ１０、１Ｂ１２、７Ｈ１、１１Ｅ６、１２Ｂ７および１３Ｇ４を含む米国特許第７，９４３，７４３号に開示される抗ＰＤ－Ｌ１抗体、国際公開第２０１０／０７７６３４号、米国特許第８，２１７，１４９号、国際公開第２０１０／０３６９５９号、国際公開第２０１０／０７７６３４号、国際公開第２０１１／０６６３４２号、米国特許第８，２１７，１４９号、米国特許第７，９４３，７４３号、国際公開第２０１０／０８９４１１号、米国特許第７，６３５，７５７号、米国特許第８，２１７，１４９号、米国特許出願公開第２００９／０３１７３６８号、国際公開第２０１１／０６６３８９号、国際公開第２０１７／０３４９１６号、国際公開第２０１７／０２０２９１号、国際公開第２０１７／０２０８５８号、国際公開第２０１７／０２０８０１号、国際公開第２０１６／１１１６４５号、国際公開第２０１６／１９７３６７号、国際公開第２０１６／０６１１４２号、国際公開第２０１６／１４９２０１号、国際公開第２０１６／０００６１９号、国際公開第２０１６／１６０７９２号、国際公開第２０１６／０２２６３０号、国際公開第２０１６／００７２３５号、国際公開第２０１５／１７９６５４号、国際公開第２０１５／１７３２６７号、国際公開第２０１５／１８１３４２号、国際公開第２０１５／１０９１２４号、国際公開第２０１８／２２２７１１号、国際公開第２０１５／１１２８０５号、国際公開第２０１５／０６１６６８号、国際公開第２０１４／１５９５６２号、国際公開第２０１４／１６５０８２号、国際公開第２０１４／１０００７９号に記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体を含む。

例示的なＣＴＬＡ－４阻害剤は、限定されないが、モノクローナル抗体イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ；ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）およびトレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ／Ｍｅｄｌｍｍｕｎｅ）、トレビリズマブ、ＡＧＥＮ－１８８４（Ａｇｅｎｕｓ）およびＡＴＯＲ－１０１５、国際公開第２００１／０１４４２４号、米国特許出願公開第２００５／０２０１９９４号、欧州特許第１２１２４２２号、米国特許第５，８１１，０９７号、米国特許第５，８５５，８８７号、米国特許第６，０５１，２２７号、米国特許第６，６８２，７３６号、米国特許第６，９８４，７２０号、国際公開第０１／１４４２４号、国際公開第００／３７５０４号、米国特許出願公開第２００２／００３９５８１号、米国特許出願公開第２００２／０８６０１４号、国際公開第９８／４２７５２号、米国特許第６，２０７，１５６号、米国特許第５，９７７，３１８号、米国特許第７，１０９，００３号および米国特許第７，１３２，２８１号に開示される抗ＣＴＬＡ４抗体、ＣＴＬＡ－４ＥＣＤに融合したＩｇＧ１のＦｅ領域を含むドミナントネガティブタンパク質アバタセプト（Ｏｒｅｎｃｉａ；欧州特許第２８５５５３３号参照）、およびベラタセプト（Ｎｕｌｏｊｉｘ；国際公開第２０１４／２０７７４８号参照）、アバタセプトに対してＣＴＬＡ－４ＥＣＤにおける２つのアミノ酸置換を有する第二世代高親和性ＣＴＬＡ－４－Ｉｇバリアント、可溶性ＣＴＬＡ－４ポリペプチド、例えばＲＧ２０７７およびＣＴＬＡ４－ＩｇＧ４ｍ（米国特許第６，７５０，３３４号参照）、抗ＣＴＬＡ－４アプタマーおよび例えば米国特許出願公開第２０１５／２０３８４８号に開示されるＣＴＬＡ－４に向けられたｓｉＲＮＡを含む。例示的なＣＴＬＡ－４リガンド阻害剤は、Ｐｉｌｅら、２０１５（ＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＩｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙＤｉｓｅａｓｅｓ、Ｍ．Ｐａｒｎｈａｍ（編）、ｄｏｉ：１０．１００７／９７８－３－０３４８－０６２０－６＿２０）に記載される。

ＴＩＧＩＴシグナル伝達経路の例示的なチェックポイント阻害剤は、限定されないが、抗ＴＩＧＩＴ抗体、例えばＢＭＳ－９８６２０７、ＣＯＭ９０２（ＣＧＥＮ－１５１３７；Ｃｏｍｐｕｇｅｎ）、ＡＢ１５４（ＡｒｃｕｓＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）もしくはエチギリマブ（ＯＭＰ－３１３Ｍ３２；ＯｎｃｏＭｅｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、または国際公開第２０１７／０５９０９５号に開示される抗体、特に「ＭＡＢ１０」、米国特許出願公開第２０１８／０１８５４８２号、国際公開第２０１５／００９８５６号および米国特許出願公開第２０１９／００７７８６４号に開示される抗体を含む。

Ｂ７－Ｈ３の例示的なチェックポイント阻害剤は、限定されないが、Ｆｃ最適化モノクローナル抗体エノブリツズマブ（ＭＧＡ２７１；Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ；米国特許出願公開第２０１２／０２９４７９６号）および抗Ｂ７－Ｈ３抗体ＭＧＤ００９（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）およびピジリズマブ（米国特許第７３３２５８２号参照）を含む。

例示的なＢ７－Ｈ４阻害剤は、限定されないが、Ｄａｎｇａｊら、２０１３（ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ７３：４８２０－９）およびＳｍｉｔｈら、２０１４（ＧｙｎｅｃｏｌＯｎｃｏｌ、１３４：１８１～１８９）、国際公開第２０１３／０２５７７９号（例えば、配列番号３および４によってコードされる２Ｄ１、配列番号３７および３９によってコードされる２Ｈ９、ならびに配列番号４１および４３によってコードされる２Ｅ１１）、および国際公開第２０１３／０６７４９２号（例えば、配列番号１～８から選択されるアミノ酸配列を有する抗体）に記載される抗体、例えばＫｒｙｃｚｅｋら、２００６（ＪＥｘｐＭｅｄ、２０３：８７１－８１）によって記載されるモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチド、または例えば米国特許出願公開第２０１２／０１７７６４５号に開示されるＢ７－Ｈ４の可溶性組換え形態を含む。

例示的なＢＴＬＡ阻害剤は、限定されないが、ＣｒａｗｆｏｒｄおよびＷｈｅｒｒｙ、２００９（ＪＬｅｕｋｏｃｙｔｅＢｉｏｌ８６：５～８）、国際公開第２０１１／０１４４３８号（例えば、４Ｃ７あるいは配列番号８および１５、および／または配列番号１１および１８による重鎖および軽鎖を含む抗体）、国際公開第２０１４／１８３８８５号（例えば、番号ＣＮＣＭＩ－４７５２で寄託された抗体）および米国特許出願公開第２０１８／１５５４２８号に記載される抗ＢＴＬＡ抗体を含む。

ＫＩＲシグナル伝達のチェックポイント阻害剤は、限定されないが、モノクローナル抗体リリルマブ（１－７Ｆ９；ＩＰＨ２１０２；米国特許第８，７０９，４１１号参照）、ＩＰＨ４１０２（ＩｎｎａｔｅＰｈａｒｍａ；Ｍａｒｉｅ－Ｃａｒｄｉｎｅら、２０１４、Ｃａｎｃｅｒ７４（２１）：６０６０－７０参照）、例えば米国特許出願公開第２０１８／２０８６５２号、米国特許出願公開第２０１８／１１７１４７号、米国特許出願公開第２０１５／３４４５７６号、国際公開第２００５／００３１６８号、国際公開第２００５／００９４６５号、国際公開第２００６／０７２６２５号、国際公開第２００６／０７２６２６号、国際公開第２００７／０４２５７３号、国際公開第２００８／０８４１０６号（例えば、配列番号２および３による重鎖および軽鎖を含む抗体）、国際公開第２０１０／０６５９３９号、国際公開第２０１２／０７１４１１号、国際公開第２０１２／１６０４４８号および国際公開第２０１４／０５５６４８号に開示される抗ＫＩＲ抗体を含む。

ＬＡＧ－３阻害剤は、限定されないが、抗ＬＡＧ－３抗体ＢＭＳ－９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ－ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ；国際公開第２０１４／００８２１８号および国際公開第２０１５／１１６５３９号参照）、２５Ｆ７（米国特許出願公開第２０１１／０１５０８９２号参照）、ＩＭＰ７３１（国際公開第２００８／１３２６０１号参照）、Ｈ５Ｌ７ＢＷ（国際公開第２０１４１４０１８０号参照）、ＭＫ－４２８０（２８Ｇ－１０；Ｍｅｒｃｋ；国際公開第２０１６／０２８６７２号参照）、ＲＥＧＮ３７６７（Ｒｅｇｎｅｒｏｎ／Ｓａｎｏｆｉ）、ＢＡＰ０５０（国際公開第２０１７／０１９８９４号参照）、ＩＭＰ－７０１（ＬＡＧ－５２５；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、Ｓｙｍ０２２（Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ）、ＴＳＲ－０３３（Ｔｅｓａｒｏ）、ＭＧＤ０１３（ＭａｃｒｏＧｅｎｉｃｓによって開発された、ＬＡＧ－３およびＰＤ－１を標的化する二重特異性ＤＡＲＴ抗体）、ＢＩ７５４１１１（ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＩｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＦＳ１１８（Ｆ－ｓｔａｒによって開発された、ＬＡＧ－３およびＰＤ－１を標的化する二重特異性抗体）、ＧＳＫ２８３１７８１（ＧＳＫ）、および国際公開第２００９／０４４２７３号、国際公開第２００８／１３２６０１号、国際公開第２０１５／０４２２４６号、欧州特許第２３２０９４０号、米国特許出願公開第２０１９／１６９２９４号、米国特許出願公開第２０１９／１６９２９２号、国際公開第２０１６／０２８６７２号、国際公開第２０１６／１２６８５８号、国際公開第２０１６／２００７８２号、国際公開第２０１５／２００１１９号、国際公開第２０１７／２２０５６９号、国際公開第２０１７／０８７５８９号、国際公開第２０１７／２１９９９５号、国際公開第２０１７／０１９８４６号、国際公開第２０１７／１０６１２９号、国際公開第２０１７／０６２８８８号、国際公開第２０１８／０７１５００号、国際公開第２０１７／０８７９０１号、米国特許出願公開第２０１７／０２６０２７１号、国際公開第２０１７／１９８７４１号、国際公開第２０１７／２２０５５５号、国際公開第２０１７／０１５５６０号、国際公開第２０１７／０２５４９８号、国際公開第２０１７／１４９１４３号、国際公開第２０１８／０６９５００号、国際公開第２０１８／０８３０８７号、国際公開第２０１８／０３４２２７号、国際公開第２０１４／１４０１８０号に開示される抗体、ＬＡＧ－３アンタゴニストタンパク質ＡＶＡ－０１７（Ａｖａｃｔａ）、可溶性ＬＡＧ－３融合タンパク質ＩＭＰ３２１（エフチラギモドアルファ；Ｉｍｍｕｔｅｐ；欧州特許第２２０５２５７号およびＢｒｉｇｎｏｎｅら、２００７、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１７９：４２０２～４２１１参照）、および国際公開第２０１８／２２２７１１号に開示される可溶性ＬＡＧ－３タンパク質を含む。

ＴＩＭ－３阻害剤は、限定されないが、ＴＩＭ－３を標的化する抗体、例えばＦ３８－２Ｅ２（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、コボリマブ（ＴＳＲ－０２２；Ｔｅｓａｒｏ）、ＬＹ３３２１３６７（ＥｌｉＬｉｌｌｙ）、ＭＢＧ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、および例えば国際公開第２０１３／００６４９０号、国際公開第２０１８／０８５４６９号（例えば、配列番号３および４による核酸配列によってコードされる重鎖および軽鎖配列を含む抗体）、国際公開第２０１８／１０６５８８号、国際公開第２０１８／１０６５２９号（例えば、配列番号８～１１による重鎖および軽鎖配列を含む抗体）に開示される抗体を含む。

ＴＩＭ－３リガンド阻害剤は、限定されないが、ＣＥＡＣＡＭ阻害剤、例えば抗ＣＥＡＣＡＭ１抗体ＣＭ１０（ｃＣＡＭＢｉｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ；国際公開第２０１３／０５４３３１号参照）、国際公開第２０１５／０７５７２５号に開示される抗体（例えば、ＣＭ－２４、２６Ｈ７、５Ｆ４、ＴＥＣ－１１、１２－１４０－４、４／３／１７、ＣＯＬ－４、Ｆ３６－５４、３４Ｂ１、ＹＧ－Ｃ２８Ｆ２、Ｄ１４ＨＤ１１、Ｍ８．７．７、Ｄ１１－ＡＤ１１、ＨＥＡ８１、Ｂｌ．ｌ、ＣＬＢ－ｇｒａｎ－１０、Ｆ３４－１８７、Ｔ８４．１、Ｂ６．２、Ｂ１．１３、ＹＧ－Ｃ９４Ｇ７、１２－１４０－５、ｓｃＦｖＤＩＡＴＨＩＳ１、ＴＥＴ－２；ｃＣＡＭＢｉｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、Ｗａｔｔら、２００１（Ｂｌｏｏｄ、９８：１４６９～１４７９）および国際公開第２０１０／１２５５７号に記載される抗体、ならびにＰｔｄＳｅｒ阻害剤、例えばバビツキシマブ（Ｐｅｒｅｇｒｉｎｅ）を含む。

ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ阻害剤は、限定されないが、モナリズマブ（ＩＰＨ２２０１；ＩｎｎａｔｅＰｈａｒｍａ）、ならびに米国特許第９，４２２，３６８号（例えば、ヒト化Ｚ１９９；欧州特許第２６２８７５３号参照）、欧州特許第３１９３９２９号および国際公開第２０１６／０３２３３４号（例えば、ヒト化Ｚ２７０；欧州特許第２６２８７５３号参照）に開示される抗体およびそれらの製造方法を含む。

ＩＤＯ阻害剤は、限定されないが、エキシグアミンＡ、エパカドスタット（ＩＮＣＢ０２４３６０；ＩｎＣｙｔｅ；米国特許第９６２４１８５号参照）、インドキシモド（ＮｅｗｌｉｎｋＧｅｎｅｔｉｃｓ；ＣＡＳ番号：１１０１１７－８３－４）、ＮＬＧ９１９（ＮｅｗｌｉｎｋＧｅｎｅｔｉｃｓ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；ＣＡＳ番号：１４０２８３６－５８－１）、ＧＤＣ－０９１９（ＮｅｗｌｉｎｋＧｅｎｅｔｉｃｓ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；ＣＡＳ番号１４０２８３６－５８－１）、Ｆ００１２８７（ＦｌｅｘｕｓＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ／ＢＭＳ；ＣＡＳ番号：２２２１０３４－２９－１）、ＫＨＫ２４５５（Ｃｈｅｏｎｇら、２０１８、ＥｘｐｅｒｔＯｐｉｎＴｈｅｒＰａｔ．２８（４）：３１７～３３０）、ＰＦ－０６８４０００３（国際公開第２０１６／１８１３４８号参照）、ナボキシモド（ＲＧ６０７８、ＧＤＣ－０９１９、ＮＬＧ９１９；ＣＡＳ番号：１４０２８３７－７８－８）、リンロドスタット（ＢＭＳ－９８６２０５；Ｂｒｉｓｔｏｌ－ＭｙｅｒｓＳｕｉｂｂ；ＣＡＳ番号：１９２３８３３－６０－６）、１－メチル－トリプトファン、ピロリジン－２，５－ジオン誘導体などの低分子（国際公開第２０１５／１７３７６４号参照）、ならびにＳｈｅｒｉｄａｎ、２０１５、ＮａｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ３３：３２１～３２２によって開示されるＩＤＯ阻害剤を含む。

ＣＤ３９阻害剤は、限定されないが、Ａ００１４８５（ＡｒｃｕｓＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＰＳＢ０６９（ＣＡＳ番号：７８５１０－３１－３）および抗ＣＤ３９モノクローナル抗体ＩＰＨ５２０１（ＩｎｎａｔｅＰｈａｒｍａ；Ｐｅｒｒｏｔら、２０１９、ＣｅｌｌＲｅｐｏｒｔｓ８：２４１１～２４２５．Ｅ９参照）を含む。

ＣＤ７３阻害剤は、限定されないが、抗ＣＤ７３抗体、例えばＣＰＩ－００６（ＣｏｒｖｕｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＭＥＤＩ９４４７（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ；国際公開第２０１６０７５０９９号参照）、ＩＰＨ５３０１（ＩｎｎａｔｅＰｈａｒｍａ；Ｐｅｒｒｏｔら、２０１９、ＣｅｌｌＲｅｐｏｒｔｓ８：２４１１～２４２５．Ｅ９参照）、国際公開第２０１８／１１０５５５号に記載される抗ＣＤ７３抗体、低分子阻害剤ＰＢＳ１２３７９（ＴｏｃｒｉｓＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ；ＣＡＳ番号：１８０２２２６－７８－３）、Ａ０００８３０、Ａ００１１９０およびＡ００１４２１（ＡｒｃｕｓＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ；Ｂｅｃｋｅｒら、２０１８、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ７８（１３補遺）：３６９１～３６９１、ｄｏｉ：１０．１１５８／１５３８－７４４５．ＡＭ２０１８～３６９１参照）、ＣＢ－７０８（ＣａｌｉｔｈｅｒａＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＡｌｌａｒｄら、２０１８（ＩｍｍｕｎｏｌＲｅｖ．、２７６（１）：１２１～１４４）によって記載されるプリン細胞傷害性ヌクレオシド類似体に基づくジホスホネートを含む。

Ａ２ＡＲ阻害剤は、限定されないが、イストラデフィリン（ＫＷ－６００２；ＣＡＳ番号：１５５２７０－９９－８）、ＰＢＦ－５０９（Ｐａｌｏｂｉｏｐｈａｒｍａ）、シフォラデナント（ＣＰＩ－４４４：ＣｏｒｖｕｓＰｈａｒｍａ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；ＣＡＳ番号：１２０２４０２－４０－１）、ＳＴ１５３５（［２ブチル－９－メチル－８－（２Ｈ－１，２，３－トリアゾール２－イル）－９Ｈ－プリン－６－キシルアミン］；ＣＡＳ番号：４９６９５５－４２－１）、ＳＴ４２０６（Ｓｔａｓｉら、２０１５、ＥｕｒｏｐＪＰｈａｒｍ７６１：３５３～３６１参照；ＣＡＳ番号：１２４６０１８－３６－９）、トザデナント（ＳＹＮ１１５；ＣＡＳ番号：８７００７０－５５－６）、Ｖ８１４４４（国際公開第２００２／０５５０８２号参照）、プレラデナント（ＳＣＨ４２０８１４；Ｍｅｒｃｋ；ＣＡＳ番号：３７７７２７－８７－２）、ビパデナント（ＢＩＩＢ０１４；ＣＡＳ番号：４４２９０８－１０－３）、ＳＴ１５３５（ＣＡＳ番号：４９６９５５－４２－１）、ＳＣＨ４１２３４８（ＣＡＳ番号：３７７７２７－２６－９）、ＳＣＨ４４２４１６（Ａｘｏｎ２２８３；ＡｘｏｎＭｅｄｃｈｅｍ；ＣＡＳ番号：３１６１７３－５７－６）、ＺＭ２４１３８５（４－（２－（７－アミノ－２－（２－フリル）－（１，２，４）トリアゾロ（２，３－ａ）－（１，３，５）トリアジン－５－イル－アミノ）エチル）フェノール；Ｃａｓ番号：１３９１８０－３０－６）、ＡＺＤ４６３５（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＢ９２８（二重Ａ２ＡＲ／Ａ２ＢＲ低分子阻害剤；ＡｒｃｕｓＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＳＣＨ５８２６１（Ｐｏｐｏｌｉら、２０００、Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍ２２：５２２～５２９参照；ＣＡＳ番号：１６００９８－９６－４）などの低分子阻害剤を含む。

Ａ２ＢＲ阻害剤は、限定されないが、ＡＢ９２８（二重Ａ２ＡＲ／Ａ２ＢＲ低分子阻害剤；ＡｒｃｕｓＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＭＲＳ１７０６（ＣＡＳ番号：２６４６２２－５３－９）、ＧＳ６２０１（ＣＡＳ番号：７５２２２２－８３－６）およびＰＢＳ１１１５（ＣＡＳ番号：１５２５２９－７９－８）を含む。

ＶＩＳＴＡ阻害剤は、限定されないが、抗ＶＩＳＴＡ抗体、例えばＪＮＪ－６１６１０５８８（オンバチリマブ；ＪａｎｓｓｅｎＢｉｏｔｅｃｈ）および低分子阻害剤ＣＡ－１７０（抗ＰＤ－Ｌ１／Ｌ２および抗ＶＩＳＴＡ低分子；ＣＡＳ番号：１６７３５３４－７６－３）を含む。

Ｓｉｇｌｅｃ阻害剤は、限定されないが、米国特許出願公開第２０１９／０２３７８６号および国際公開第２０１８／０２７２０３号に開示される抗Ｓｉｇｌｅ－７抗体（例えば、配列番号１による可変重鎖領域および配列番号１５による可変軽鎖領域を含む抗体）、抗Ｓｉｇｌｅｃ－２抗体イノツズマブオゾガマイシン（Ｂｅｓｐｏｎｓａ；米国特許第８１５３７６８号および米国特許第９６４２９１８号参照）、抗Ｓｉｇｌｅｃ－３抗体ゲムツズマブオゾガマイシン（Ｍｙｌｏｔａｒｇ；米国特許第９３５９４４２号参照）または米国特許出願公開第２０１９／０６２４２７号、米国特許出願公開第２０１９／０２３７８６号、国際公開第２０１９／０１１８５５号、国際公開第２０１９／０１１８５２号（例えば、配列番号１７１～１７６、または３および４、または５および６、または７および８、または９および１０、または１１および１２、または１３および１４、または１５および１６、または１７および１８、または１９および２０、または２１および２２、または２３および２４、または２５および２６によるＣＤＲを含む抗体）、米国特許出願公開第２０１７／３０６０１４号および欧州特許第３１４６９７９号に開示される抗Ｓｉｇｌｅｃ－９抗体を含む。

ＣＤ２０阻害剤は、限定されないが、抗ＣＤ２０抗体、例えばリツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ；ＩＤＥＣ－１０２；ＩＤＥＣ－Ｃ２Ｂ８；米国特許第５，８４３，４３９号参照）、ＡＢＰ７９８（リツキシマブバイオシミラー）、オファツムマブ（２Ｆ２；国際公開第２００４／０３５６０７号参照）、オビヌツズマブ、オクレリズマブ（２ｈ７；国際公開第２００４／０５６３１２号参照）、イブリツモマブチウキセタン（Ｚｅｖａｌｉｎ）、トシツモマブ、ウブリツキシマブ（ＬＦＢ－Ｒ６０３；ＬＦＢＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）および米国特許出願公開第２０１８／００３６３０６号に開示される抗体（例えば、配列番号１～３および４～６、または７および８、または９および１０による軽鎖および重鎖を含む抗体）を含む。

ＧＡＲＰ阻害剤は、限定されないが、抗ＧＡＲＰ抗体、例えばＡＲＧＸ－１１５（ａｒＧＥＮ－Ｘ）ならびに米国特許出願公開第２０１９／１２７４８３号、米国特許出願公開第２０１９／０１６８１１号、米国特許出願公開第２０１８／３２７５１１号、米国特許出願公開第２０１６／２５１４３８号、欧州特許第３２５３７９６号に開示される抗体およびそれらの製造方法を含む。

ＣＤ４７阻害剤は、限定されないが、抗ＣＤ４７抗体、例えばＨｕＦ９－Ｇ４（ＳｔａｎｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ／ＦｏｒｔｙＳｅｖｅｎ）、ＣＣ－９０００２／ＩＮＢＲＸ－１０３（Ｃｅｌｇｅｎｅ／Ｉｎｈｉｂｒｘ）、ＳＲＦ２３１（ＳｕｒｆａｃｅＯｎｃｏｌｏｇｙ）、ＩＢＩ１８８（ＩｎｎｏｖｅｎｔＢｉｏｌｏｇｉｃｓ）、ＡＯ－１７６（ＡｒｃｈＯｎｃｏｌｏｇｙ）、ＴＧ－１８０１（ＮＩ－１７０１；ＣＤ４７およびＣＤ１９を標的化する二重特異性モノクローナル抗体；Ｎｏｖｉｍｍｕｎｅ／ＴＧＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）およびＮＩ－１８０１（ＣＤ４７およびメソテリンを標的化する二重特異性モノクローナル抗体；Ｎｏｖｉｍｍｕｎｅ）を含む、ＣＤ４７を標的化する二重特異性抗体、ならびにＣＤ４７融合タンパク質、例えばＡＬＸ１４８（ＡＬＸＯｎｃｏｌｏｇｙ；Ｋａｕｄｅｒら、２０１９、ＰＬｏＳＯｎｅ、ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０２０１８３２参照）を含む。

ＳＩＲＰα阻害剤は、限定されないが、抗ＳＩＲＰα抗体、例えばＯＳＥ－１７２（ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＩｎｇｅｌｈｅｉｍ／ＯＳＥ）、ＦＳＩ－１８９（ＦｏｒｔｙＳｅｖｅｎ）、抗ＳＩＲＰα融合タンパク質、例えばＴＴＩ－６２１およびＴＴＩ－６６２（ＴｒｉｌｌｉｕｍＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ；国際公開第２０１４／０９４１２２号参照）を含む。

ＰＶＲＩＧ阻害剤は、限定されないが、抗ＰＶＲＩＧ抗体、例えばＣＯＭ７０１（ＣＧＥＮ－１５０２９）ならびに例えば国際公開第２０１８／０３３７９８号（例えば、ＣＨＡ．７．５１８．１Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．７．５３８．１．２．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８６Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＰＡ．９．０８３Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．７．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ＣＨＡ．９．５４７．１３．Ｈ４（Ｓ２４１Ｐ）、ならびに国際公開第２０１８／０３３７９８号の配列番号５による可変重鎖ドメインおよび配列番号１０による可変軽鎖ドメインを含む抗体、または配列番号９による重鎖および配列番号１４による軽鎖を含む抗体；国際公開第２０１８／０３３７９８号は、抗ＴＩＧＩＴ抗体、ならびに抗ＴＩＧＩＴ抗体と抗ＰＶＲＩＧ抗体による併用療法をさらに開示する）、国際公開第２０１６１３４３３３号、国際公開第２０１８０１７８６４号（例えば、配列番号１１と少なくとも９０％の配列同一性を有する配列番号５～７による重鎖および／または配列番号１２と少なくとも９０％の配列同一性を有する配列番号８～１０による軽鎖を含む抗体、あるいは配列番号１３および／または１４、または配列番号２４および／または２９によってコードされる抗体、あるいは国際公開第２０１８／０１７８６４号に開示される別の抗体）に開示される抗体およびそれらの製造方法、ならびに国際公開第２０１６／１３４３３５号に開示される抗ＰＶＲＩＧ抗体および融合ペプチドを含む。

ＣＳＦ１Ｒ阻害剤は、限定されないが、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体カビラリズマブ（ＦＰＡ００８；ＦｉｖｅＰｒｉｍｅ；国際公開第２０１１／１４０２４９号、国際公開第２０１３／１６９２６４号および国際公開第２０１４／０３６３５７号参照）、ＩＭＣ－ＣＳ４（ＥｉｉＬｉｌｌｙ）、エマクツズマブ（Ｒ０５５０９５５４；Ｒｏｃｈｅ）、ＲＧ７１５５（国際公開第２０１１／７００２４号、国際公開第２０１１／１０７５５３号、国際公開第２０１１／１３１４０７号、国際公開第２０１３／８７６９９号、国際公開第２０１３／１１９７１６号、国際公開第２０１３／１３２０４４号）および低分子阻害剤ＢＬＺ９４５（ＣＡＳ番号：９５３７６９－４６－５）およびペキシダルチニブ（ＰＬＸ３３９７；Ｓｅｌｌｅｃｋｃｈｅｍ；ＣＡＳ番号：１０２９０４４－１６－３）を含む。

ＣＳＦ１阻害剤は、限定されないが、欧州特許第１２２３９８０号およびＷｅｉｒら、１９９６（ＪＢｏｎｅＭｉｎｅｒａｌＲｅｓ１１：１４７４～１４８１）、国際公開第２０１４／１３２０７２号に開示される抗ＣＳＦ１抗体、ならびに国際公開第２００１／０３０３８１号に開示されるアンチセンスＤＮＡおよびＲＮＡを含む。

例示的なＮＯＸ阻害剤は、限定されないが、ＮＯＸ１阻害剤、例えば低分子ＭＬ１７１（Ｇｉａｎｎｉら、２０１０、ＡＣＳＣｈｅｍＢｉｏｌ５（１０）：９８１－９３、ＮＯＳ３１（Ｙａｍａｍｏｔｏら、２０１８、ＢｉｏｌＰｈａｒｍＢｕｌｌ．４１（３）：４１９－４２６）、ＮＯＸ２阻害剤、例えば低分子セプレン（ｃｅｐｌｅｎｅ）（ヒスタミン二塩酸塩；ＣＡＳ番号：５６－９２－８）、ＢＪ－１３０１（Ｇａｕｔａｍら、２０１７、ＭｏｌＣａｎｃｅｒＴｈｅｒ１６（１０）：２１４４～２１５６；ＣＡＳ番号：１２８７２３４－４８－３）およびＬｕら、２０１７、ＢｉｏｃｈｅｍＰｈａｒｍａｃｏｌ１４３：２５～３８によって記載される阻害剤、ＮＯＸ４阻害剤、例えば低分子阻害剤ＶＡＳ２８７０（Ａｌｔｅｎｈｏｆｅｒら、２０１２、ＣｅｌｌＭｏｌＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ６９（１４）：２３２７～２３４３）、ジフェニレンヨードニウム（ＣＡＳ番号：２４４－５４－２）およびＧＫＴ１３７８３１（ＣＡＳ番号：１２１８９４２－３７－０；Ｔａｎｇら、２０１８、１９（１０）：５７８～５８５参照）を含む。

ＴＤＯ阻害剤は、限定されないが、４－（インドール－３－イル）－ピラゾール誘導体（米国特許第９，１２６，９８４号および米国特許出願公開第２０１６／０２６３０８７号参照）、３－インドール置換誘導体（国際公開第２０１５／１４０７１７号、国際公開第２０１７／０２５８６８号、国際公開第２０１６／１４７１４４号参照）、３－（インドール－３－イル）－ピリジン誘導体（米国特許出願公開第２０１５／０２２５３６７号および国際公開第２０１５／１２１８１２号参照）、二重ＩＤＯ／ＴＤＯアンタゴニスト、例えば国際公開第２０１５／１５００９７号、国際公開第２０１５／０８２４９９号、国際公開第２０１６／０２６７７２号、国際公開第２０１６／０７１２８３号、国際公開第２０１６／０７１２９３号、国際公開第２０１７／００７７００号に開示される低分子二重ＩＤＯ／ＴＤＯ阻害剤、および低分子阻害剤ＣＢ５４８（Ｋｉｍ，Ｃら、２０１８、ＡｎｎａｌｓＯｎｃｏｌ２９（補遺８）：ｖｉｉｉ４００～ｖｉｉｉ４４１）を含む。

本開示によると、免疫チェックポイント阻害剤は、抑制性チェックポイントタンパク質の阻害剤であるが、好ましくは刺激性チェックポイントタンパク質の阻害剤ではない。本明細書に記載されるように、いくつかのＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１、ＴＩＧＩＴ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、ＣＤ９４／ＮＫＧ２Ａ、ＩＤＯ、Ａ２ＡＲ、Ａ２ＢＲ、ＶＩＳＴＡ、Ｓｉｇｌｅｃ、ＣＤ２０、ＣＤ３９、ＣＤ７３、ＧＡＲＰ、ＣＤ４７、ＰＶＲＩＧ、ＣＳＦ１Ｒ、ＮＯＸおよびＴＤＯ阻害剤ならびにそれぞれのリガンドの阻害剤は公知であり、これらのうちのいくつかは既に臨床試験中である、または承認さえされている。これらの公知の免疫チェックポイント阻害剤に基づいて、代替免疫チェックポイント阻害剤が開発され得る。特に、好ましい免疫チェックポイントタンパク質の公知の阻害剤がそのまま使用され得る、またはその類似体、特に抗体のキメラ化、ヒト化もしくはヒト形態および本明細書に記載される抗体のいずれかと交差競合する抗体が使用され得る。

標的化がＴ細胞増殖の増加、増強したＴ細胞活性化および／または増加したサイトカイン産生（例えば、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２）に反映される抗腫瘍免疫応答などの免疫応答の刺激をもたらす限り、アンタゴニストまたは抗体によって他の免疫チェックポイント標的も標的化され得ることが当業者によって理解されよう。

チェックポイント阻害剤は、当技術分野で公知の任意の方法および任意の経路で投与され得る。投与様式および経路は、使用されるチェックポイント阻害剤の種類に依存するであろう。

チェックポイント阻害剤は、本明細書に記載される任意の適切な医薬組成物の形態で投与され得る。

チェックポイント阻害剤は、免疫チェックポイント阻害剤をコードするＤＮＡもしくはＲＮＡ分子などの核酸分子、例えば抑制性核酸分子または抗体もしくはその断片の形態で投与され得る。例えば、抗体は、本明細書に記載されるように、発現ベクターにコードされて送達され得る。核酸分子はそのまま、例えばプラスミドもしくはｍＲＮＡ分子の形態で、または送達ビヒクル、例えばリポソーム、リポプレックスもしくは核酸脂質粒子と複合体化して送達され得る。チェックポイント阻害剤はまた、チェックポイント阻害剤をコードする発現カセットを含む腫瘍溶解性ウイルスを介して投与され得る。チェックポイント阻害剤はまた、例えば細胞療法の形態で、チェックポイント阻害剤を発現することができる内因性細胞または同種細胞の投与によって投与され得る。

「細胞療法（ｃｅｌｌｂａｓｅｄｔｈｅｒａｐｙ）」という用語は、疾患または障害（例えば、がん疾患）を処置する目的のための免疫チェックポイント阻害剤を発現する細胞（例えば、Ｔリンパ球、樹状細胞または幹細胞）の対象への移植を指す。一実施形態では、細胞療法が遺伝子操作細胞を含む。一実施形態では、遺伝子操作細胞が、本明細書に記載されるような免疫チェックポイント阻害剤を発現する。一実施形態では、遺伝子操作細胞が、抑制性核酸分子、例えばｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、アンチセンスＤＮＡもしくはＲＮＡ、アプタマー、抗体もしくはその断片、または可溶性免疫チェックポイントタンパク質もしくは融合体である免疫チェックポイント阻害剤を発現する。遺伝子操作細胞はまた、Ｔ細胞機能を増強するさらなる薬剤を発現し得る。このような薬剤は当技術分野で公知である。免疫チェックポイントシグナル伝達の阻害に使用するための細胞療法は、例えば、全体が参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１８／２２２７１１号に開示される。

本明細書で使用される「腫瘍溶解性ウイルス（ｏｎｃｏｌｙｔｉｃｖｉｒｕｓ）」という用語は、正常細胞に対する効果を有さないまたは最小の効果しか有さないが、インビトロまたはインビボで、がん性細胞または過剰増殖性細胞において選択的に複製し、その増殖を遅延させるまたはその死を誘導することができるウイルスを指す。免疫チェックポイント阻害剤を送達するための腫瘍溶解性ウイルスは、抑制性核酸分子、例えばｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、アンチセンスＤＮＡもしくはＲＮＡ、アプタマー、抗体もしくはその断片、または可溶性免疫チェックポイントタンパク質もしくは融合体である免疫チェックポイント阻害剤をコードし得る発現カセットを含む。腫瘍溶解性ウイルスは、好ましくは複製能があり、発現カセットはウイルスプロモーター、例えば合成初期／後期ポックスウイルスプロモーターの制御下にある。例示的な腫瘍溶解性ウイルスは、水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）、ラブドウイルス（例えば、セネカバレーウイルス；ＳＶＶ－００１などのピコルナウイルス）、コクサッキーウイルス、パルボウイルス、ニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ；ＯｎｃｏＶＥＸＧＭＣＳＦ）、レトロウイルス（例えば、インフルエンザウイルス）、麻疹ウイルス、レオウイルス、シンドビスウイルス（Ｓｉｎｂｉｓｖｉｒｕｓ）、国際公開第２０１７／２０９０５３号に例示的に記載されるワクシニアウイルス（コペンハーゲン、ウエスタンリザーブ、Ｗｙｅｔｈ株を含む）、およびアデノウイルス（例えば、デルタ－２４、デルタ－２４－ＲＧＤ、ＩＣＯＶＩＲ－５、ＩＣＯＶＩＲ－７、Ｏｎｙｘ－０１５、ＣｏｌｏＡｄ１、Ｈ１０１、ＡＤ５／３－Ｄ２４－ＧＭＣＳＦ）を含む。免疫チェックポイント阻害剤の可溶性形態を含む組換え腫瘍溶解性ウイルスの作製およびそれらの使用方法は、全体が参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１８／０２２８３１号に開示されている。腫瘍溶解性ウイルスは弱毒化ウイルスとして使用され得る。

本明細書に記載されるように、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、対象、例えば患者に、チェックポイント阻害剤と一緒に投与される、すなわち、共投与される。一定の実施形態では、チェックポイント阻害剤と抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、単一組成物として対象に投与される。一定の実施形態では、チェックポイント阻害剤と抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、対象に同時発生的に（同時に別々の組成物として）投与される。一定の実施形態では、チェックポイント阻害剤と抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、対象に別々に投与される。一定の実施形態では、チェックポイント阻害剤が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の前に、対象に投与される。一定の実施形態では、チェックポイント阻害剤が、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の後に、対象に投与される。一定の実施形態では、チェックポイント阻害剤と抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、同じ日に対象に投与される。一定の実施形態では、チェックポイント阻害剤と抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、異なる日に対象に投与される。

本発明によると、「細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤（Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃａｎｄ／ｏｒｃｙｔｏｓｔａｔｉｃａｇｅｎｔ）」という用語は、細胞増殖抑制剤などの化学療法剤または化学療法剤の組み合わせを含む。化学療法剤は、以下の方法の１つで細胞に影響を及ぼし得る：（１）細胞がもはや複製できなくなるように、細胞のＤＮＡを損傷する、（２）細胞複製が可能でなくなるように、新たなＤＮＡ鎖の合成を阻害する、（３）細胞が２つの細胞に分裂することができないように細胞の有糸分裂プロセスを停止する。細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、ＣＬＤＮ１８．２の発現を安定化するまたは増加させる薬剤であり得る。

「ＣＬＤＮ１８．２の発現を安定化するまたは増加させる薬剤（ａｇｅｎｔｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇｏｒｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＬＤＮ１８．２）」という用語は、細胞へのその提供が、細胞に薬剤または薬剤の組み合わせが提供されていない状況と比較して、増加したＣＬＤＮ１８．２のＲＮＡおよび／またはタンパク質レベル、好ましくは増加した細胞表面上のＣＬＤＮ１８．２タンパク質のレベルをもたらす、薬剤または薬剤の組み合わせを指す。好ましくは、細胞はがん細胞、特にＣＬＤＮ１８．２を発現しているがん細胞、例えば本明細書に記載されるがん型の細胞である。「ＣＬＤＮ１８．２の発現を安定化するまたは増加させる薬剤（ａｇｅｎｔｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇｏｒｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＬＤＮ１８．２）」という用語は、特に、細胞へのその提供が、細胞に薬剤または薬剤の組み合わせが提供されていない状況と比較して、高い密度の前記細胞の表面上のＣＬＤＮ１８．２をもたらす、薬剤または薬剤の組み合わせを指す。「ＣＬＤＮ１８．２の発現を安定化する（ｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＬＤＮ１８．２）」は、特に、薬剤または薬剤の組み合わせがＣＬＤＮ１８．２の発現の減少を妨げる、または減少を低下させる、例えば、薬剤もしくは薬剤の組み合わせを提供しないとＣＬＤＮ１８．２の発現が減少する、または薬剤もしくは薬剤の組み合わせの提供がＣＬＤＮ１８．２発現の前記減少を妨げる、もしくは前記減少を低下させる状況を含む。「ＣＬＤＮ１８．２の発現を増加させる（ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＬＤＮ１８．２）」は、特に、薬剤または薬剤の組み合わせがＣＬＤＮ１８．２の発現を増加させる、例えば、薬剤または薬剤の組み合わせを提供しないとＣＬＤＮ１８．２の発現が減少する、本質的に一定のままであるまたは増加し、薬剤または薬剤の組み合わせの提供が、薬剤または薬剤の組み合わせを提供しない状況と比較してＣＬＤＮ１８．２発現を増加させ、結果として得られる発現が、薬剤または薬剤の組み合わせを提供しないとＣＬＤＮ１８．２の発現が減少する、本質的に一定のままであるまたは増加する状況と比較して高い状況を含む。

本発明によると、「ＣＬＤＮ１８．２の発現を安定化するまたは増加させる薬剤（ａｇｅｎｔｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇｏｒｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＬＤＮ１８．２）」という用語は、好ましくは細胞、特にがん細胞へのその提供が、細胞を細胞周期の１つまたは複数の期、特にＧ１およびＧ０期以外、好ましくはＧ１期以外の細胞周期の１つまたは複数の期、好ましくは細胞周期のＧ２またはＳ期の１つまたは複数、例えば細胞周期のＧ１／Ｇ２期、Ｓ／Ｇ２期、Ｇ２期またはＳ期に停止させるまたは蓄積させる、細胞増殖抑制性化合物または細胞増殖抑制性化合物の組み合わせなどの薬剤または薬剤の組み合わせに関する。「細胞を細胞周期の１つまたは複数の期に停止させるまたは蓄積させる（ｃｅｌｌｓｂｅｉｎｇａｒｒｅｓｔｅｄｉｎｏｒａｃｃｕｍｕｌａｔｉｎｇｉｎｏｎｅｏｒｍｏｒｅｐｈａｓｅｓｏｆｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅ）」という用語は、細胞周期の前記１つまたは複数の期にある細胞の割合（ｐｒｅｃｅｎｔａｇｅ）が増加することを意味する。各細胞は、自身を複製するために、４つの期を含む周期を通過する。Ｇ１と呼ばれる第１の期は、細胞がその染色体を複製する準備をする時である。第２の期はＳと呼ばれ、この期に、ＤＮＡ合成が行われ、ＤＮＡが複製される。次の期は、ＲＮＡおよびタンパク質が複製するＧ２期である。最後の期は、実際の細胞分裂の段階であるＭ期である。この最後の期で、複製されたＤＮＡおよびＲＮＡが分割して、細胞の別々の端に移動し、細胞が実際に２個の同一の機能的細胞に分裂する。ＤＮＡ損傷剤である化学療法剤は、通常、Ｇ１および／またはＧ２期への細胞の蓄積をもたらす。代謝拮抗薬などのＤＮＡ合成に干渉することによって細胞増殖を遮断する化学療法剤は、通常、Ｓ期への細胞の蓄積をもたらす。これらの薬物の例には６－メルカプトプリンおよび５－フルオロウラシルがある。

本発明によると、「ＣＬＤＮ１８．２の発現を安定化するまたは増加させる薬剤（ａｇｅｎｔｓｔａｂｉｌｉｚｉｎｇｏｒｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣＬＤＮ１８．２）」という用語は、エピルビシンなどのアントラサイクリン、オキサリプラチンおよびシスプラチンなどの白金化合物、５－フルオロウラシルまたはそのプロドラッグなどのヌクレオシド類似体、ドセタキセルなどのタキサン、ならびにイリノテカンおよびトポテカンなどのカンプトテシン類似体、ならびにエピルビシンなどのアントラサイクリン、オキサリプラチンおよび５－フルオロウラシルの１つまたは複数を含む薬物の組み合わせ、例えばオキサリプラチンおよび５－フルオロウラシルを含む薬物の組み合わせまたは本明細書に記載される他の薬物組み合わせなどの薬物の組み合わせを含む。

１つの好ましい実施形態では、「細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤（ｃｙｔｏｔｏｘｉｃａｎｄ／ｏｒｃｙｔｏｓｔａｔｉｃａｇｅｎｔ）」が、「免疫原性細胞死を誘導する薬剤（ａｇｅｎｔｉｎｄｕｃｉｎｇｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｃｅｌｌｄｅａｔｈ）」である。

特定の状況では、がん細胞が、免疫系によって解読されて腫瘍特異的免疫応答を活性化するシグナルの空間時間的に規定された組み合わせの放出に関連する致死ストレス経路に入り得る（ＺｉｔｖｏｇｅｌＬ．ら（２０１０）Ｃｅｌｌ１４０：７９８～８０４）。このようなシナリオでは、がん細胞が、樹状細胞などの自然免疫エフェクターによって感知されるシグナルを放出して、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＩＦＮ－γシグナル伝達を伴う同族（ｃｏｇｎａｔｅ）免疫応答を誘因するように誘因され、結果として細胞死が増殖的抗がん免疫応答を誘発し得る。これらのシグナルは、細胞表面での小胞体（ＥＲ）シャペロンカルレティキュリン（ＣＲＴ）のアポトーシス促進性曝露、ＡＴＰのアポトーシス促進性分泌、および核タンパク質ＨＭＧＢ１のアポトーシス後放出を含む。まとめると、これらのプロセスが、免疫原性細胞死（ＩＣＤ）の分子決定因子を構成する。アントラサイクリン、オキサリプラチンおよびγ線照射はＩＣＤを規定する全てのシグナルを誘導することができるが、例えば、ＥＲから死にかけている細胞の表面へのＣＲＴ転位－ＥＲストレスを要求するプロセスを誘導するには不十分であるシスプラチンは、ＥＲストレス誘導因子であるタプシガルジンによる補完を要する。

本発明によると、「免疫原性細胞死を誘導する薬剤（ａｇｅｎｔｉｎｄｕｃｉｎｇｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｃｅｌｌｄｅａｔｈ）」という用語は、細胞、特にがん細胞に提供されると、細胞が、最終的に腫瘍特異的免疫応答をもたらす致死ストレス経路に入ることを誘導することができる薬剤または薬剤の組み合わせを指す。特に、免疫原性細胞死を誘導する薬剤は、細胞に提供されると、細胞を、特に、細胞表面での小胞体（ＥＲ）シャペロンカルレティキュリン（ＣＲＴ）のアポトーシス促進性曝露、ＡＴＰのアポトーシス促進性分泌、および核タンパク質ＨＭＧＢ１のアポトーシス後放出を含む、シグナルの空間時間的に規定された組み合わせを放出するよう誘導する。

本発明によると、「免疫原性細胞死を誘導する薬剤（ａｇｅｎｔｉｎｄｕｃｉｎｇｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｃｅｌｌｄｅａｔｈ）」という用語は、アントラサイクリンおよびオキサリプラチンを含む。

アントラサイクリンは、抗生物質でもある、がん化学療法に一般的に使用される薬物のクラスである。構造的に、全てのアントラサイクリンは、共通の四環７，８，９，１０－テトラヒドロテトラセン－５，１２－キノン構造を共有し、通常、特定の部位でのグリコシル化を要する。

アントラサイクリンは、好ましくは以下の作用機序の１つまたは複数をもたらす：１．ＤＮＡ／ＲＮＡ鎖の塩基対間に挿入することによってＤＮＡおよびＲＮＡ合成を阻害し、よって、急速に増殖するがん細胞の複製を妨げる。２．トポイソメラーゼＩＩ酵素を阻害し、スーパーコイルＤＮＡの弛緩を妨げ、よって、ＤＮＡ転写および複製を遮断する。３．ＤＮＡおよび細胞膜を損傷する鉄媒介遊離酸素ラジカルを作り出す。

本発明によると、「アントラサイクリン（ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅ）」という用語は、好ましくはトポイソメラーゼＩＩのＤＮＡの再結合を阻害することによって、アポトーシスを誘導するための薬剤、好ましくは抗がん剤に関する。

好ましくは、本発明によると、「アントラサイクリン（ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｅ）」という用語は、概して、その類似体および誘導体、医薬塩、水和物、エステル、コンジュゲートおよびプロドラッグを含む、以下の環構造

を有する化合物のクラスを指す。

アントラサイクリンおよびアントラサイクリン類似体の例としては、それだけに限らないが、ダウノルビシン（ダウノマイシン）、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、イダルビシン、ロドマイシン、ピラルビシン、バルルビシン、Ｎ－トリフルオロ－アセチルドキソルビシン－１４－バレレート、アクラシノマイシン、モルホリノドキソルビシン（モルホリノ－ＤＯＸ）、シアノモルホリノ－ドキソルビシン（シアノモルホリノ－ＤＯＸ）、２－ピロリノ－ドキソルビシン（２－ＰＤＯＸ）、５－イミノダウノマイシン、ミトキサントロンおよびアクラシノマイシンＡ（アクラルビシン）が挙げられる。ミトキサントロンは、アントラサイクリンの糖部分を欠くが、ＤＮＡへの挿入を許す平面多環式芳香環構造を保持するアントラサイクリン類似体であるアントラセンジオンクラスの化合物のメンバーである。

本発明によるアントラサイクリンとして特に好ましいのは、以下の式の化合物：

（式中、
Ｒ_１はＨおよびＯＨからなる群から選択され、Ｒ_２はＨおよびＯＭｅからなる群から選択され、Ｒ_３はＨおよびＯＨからなる群から選択され、Ｒ_４はＨおよびＯＨからなる群から選択される）
である。

一実施形態では、Ｒ_１がＨであり、Ｒ_２がＯＭｅであり、Ｒ_３がＨであり、Ｒ_４がＯＨである。別の実施形態では、Ｒ_１がＯＨであり、Ｒ_２がＯＭｅであり、Ｒ_３がＨであり、Ｒ_４がＯＨである。別の実施形態では、Ｒ_１がＯＨであり、Ｒ_２がＯＭｅであり、Ｒ_３がＯＨであり、Ｒ_４がＨである。別の実施形態では、Ｒ_１がＨであり、Ｒ_２がＨであり、Ｒ_３がＨであり、Ｒ_４がＯＨである。

本発明の文脈でアントラサイクリンとして具体的に企図されるのはエピルビシンである。エピルビシンは、以下の式：

を有するアントラサイクリン薬物であり、米国で商品名Ｅｌｌｅｎｃｅおよび他の場所でＰｈａｒｍｏｒｕｂｉｃｉｎまたはＥｐｉｒｕｂｉｃｉｎＥｂｅｗｅで市販されている。特に、「エピルビシン（ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）」という用語は、化合物（８Ｒ，１０Ｓ）－１０－［（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－４－アミノ－５－ヒドロキシ－６－メチル－オキサン－２－イル］オキシ－６，１１－ジヒドロキシ－８－（２－ヒドロキシアセチル）－１－メトキシ－８－メチル－９，１０－ジヒドロ－７Ｈ－テトラセン－５，１２－ジオンを指す。エピルビシンは、いくつかの化学療法レジメンでは、引き起こす副作用が少ないように見えるので、最も人気のあるアントラサイクリンであるドキソルビシンよりも好まれる。

本発明によると、「白金化合物（ｐｌａｔｉｎｕｍｃｏｍｐｏｕｎｄ）」という用語は、白金錯体などの、その構造に白金を含有する化合物を指し、シスプラチン、カルボプラチンおよびオキサリプラチンなどの化合物を含む。

「シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）」または「シスプラチナム（ｃｉｓｐｌａｔｉｎｕｍ）」という用語は、以下の式：

の化合物シス－ジアミンジクロロ白金（ＩＩ）（ＣＤＤＰ）を指す。

「カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）」という用語は、以下の式：

の化合物シス－ジアミン（１，１－シクロブタンジカルボキシラト）白金（ＩＩ）を指す。

「オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）」という用語は、以下の式：

のジアミノシクロヘキサン担体配位子に錯化した白金化合物である化合物を指す。

特に、「オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）」という用語は、化合物［（１Ｒ，２Ｒ）－シクロヘキサン－１，２－ジアミン］（エタンジオアト－Ｏ，Ｏ’）白金（ＩＩ）を指す。注射用のオキサリプラチンも、商品名Ｅｌｏｘａｔｉｎｅで市販されている。

「ヌクレオシド類似体（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅａｎａｌｏｇ）」という用語は、プリン類似体とピリミジン類似体の両方を含むカテゴリーであるヌクレオシドの構造類似体を指す。特に、「ヌクレオシド類似体（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅａｎａｌｏｇ）」という用語は、フルオロウラシルおよびそのプロドラッグを含むフルオロピリミジン誘導体を指す。

「フルオロウラシル（ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）」または「５－フルオロウラシル（５－ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）」（５－ＦＵまたはｆ５Ｕ）（商品名Ａｄｒｕｃｉｌ、Ｃａｒａｃ、Ｅｆｕｄｉｘ、ＥｆｕｄｅｘおよびＦｌｕｏｒｏｐｌｅｘで販売されている）という用語は、以下の式：

のピリミジン類似体である化合物である。

特に、この用語は、化合物５－フルオロ－１Ｈ－ピリミジン－２，４－ジオンを指す。

「カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）」（Ｘｅｌｏｄａ、Ｒｏｃｈｅ）という用語は、組織中で５－ＦＵに変換されるプロドラッグである化学療法剤を指す。経口投与され得るカペシタビンは、以下の式：

を有する。

特に、この用語は、化合物ペンチル［１－（３，４－ジヒドロキシ－５－メチルテトラヒドロフラン－２－イル）－５－フルオロ－２－オキソ－１Ｈ－ピリミジン－４－イル］カルバメートを指す。

タキサンは、イチイ属（Ｔａｘｕｓ）の植物などの天然源から最初に誘導されたジテルペン化合物のクラスであるが、一部は人工的に合成されている。タキサンクラスの薬物の主要な作用機序は、微小管機能を破壊し、それによって、細胞分裂のプロセスを阻害することである。タキサンはドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ）およびパクリタキセル（Ｔａｘｏｌ）を含む。

本発明によると、「ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）」という用語は、以下の式：

を有する化合物を指す。

本発明によると、「パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）」という用語は、以下の式：

を有する化合物を指す。

本発明によると、「カンプトテシン類似体（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎａｎａｌｏｇ）」という用語は、化合物カンプトテシン（ＣＰＴ；（Ｓ）－４－エチル－４－ヒドロキシ－１Ｈ－ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２－ｂ］キノリン－３，１４－（４Ｈ，１２Ｈ）－ジオン）の誘導体を指す。好ましくは、「カンプトテシン類似体（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎａｎａｌｏｇ）」という用語は、以下の構造：

を含む化合物を指す。

本発明によると、好ましいカンプトテシン類似体は、ＤＮＡ酵素トポイソメラーゼＩ（ｔｏｐｏＩ）の阻害剤である。本発明による好ましいカンプトテシン類似体はイリノテカンおよびトポテカンである。

イリノテカンは、トポイソメラーゼＩの阻害によって、ＤＮＡが巻き戻るのを防ぐ薬物である。化学用語では、これは、以下の式：

を有する天然アルカロイドカンプトテシンの半合成類似体である。

特に、「イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）」という用語は、化合物（Ｓ）－４，１１－ジエチル－３，４，１２，１４－テトラヒドロ－４－ヒドロキシ－３，１４－ジオキソールＨ－ピラノ［３’，４’：６，７］－インドリジノ［１，２－ｂ］キノリン－９－イル－［１，４’ビピペリジン］－１’－カルボキシレートを指す。

トポテカンは、式：

のトポイソメラーゼ阻害剤である。

特に、「トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃｎ）」という用語は、化合物（Ｓ）－１０－［（ジメチルアミノ）メチル］－４－エチル－４，９－ジヒドロキシ－１Ｈ－ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２－ｂ］キノリン－３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）－ジオン一塩酸塩を指す。

本発明によると、細胞傷害剤および／または細胞増殖抑制剤は、化学療法剤、特にがん処置で確立された化学療法剤であり得、がん処置に使用するために確立された薬物の組み合わせなどの薬物の組み合わせの一部であり得る。薬物のこのような組み合わせは、化学療法剤に使用される薬物組み合わせであり得、ＥＯＸ化学療法、ＥＣＦ化学療法、ＥＣＸ化学療法、ＥＯＦ化学療法、ＦＬＯ化学療法、ＣＡＰＯＸ化学療法、ＦＯＬＦＯＸ化学療法、ＦＯＬＦＩＲＩ化学療法、ＤＣＦ化学療法およびＦＬＯＴ化学療法からなる群から選択される化学療法レジメンに使用される薬物組み合わせであり得る。

ＥＯＸ化学療法に使用される薬物組み合わせは、エピルビシン、オキサリプラチンおよびカペシタビンを含む。ＥＣＦ化学療法に使用される薬物組み合わせは、エピルビシン、シスプラチンおよび５－フルオロウラシルを含む。ＥＣＸ化学療法に使用される薬物組み合わせは、エピルビシン、シスプラチンおよびカペシタビンを含む。ＥＯＦ化学療法に使用される薬物組み合わせは、エピルビシン、オキサリプラチンおよび５－フルオロウラシルを含む。

エピルビシンは通常、５０ｍｇ／ｍ２、シスプラチンは６０ｍｇ／ｍ２、オキサリプラチンは１３０ｍｇ／ｍ２、５－フルオロウラシルの長期静脈注入は２００ｍｇ／ｍ２／日および経口カペシタビンは合計８回の３週間サイクルにわたって、１日２回、６２５ｍｇ／ｍ２の用量で与えられる。

ＦＬＯ化学療法に使用される薬物組み合わせは、５－フルオロウラシル、フォリン酸およびオキサリプラチンを含む（通常、５－フルオロウラシル２６００ｍｇ／ｍ２２４時間注入、フォリン酸２００ｍｇ／ｍ２およびオキサリプラチン８５ｍｇ／ｍ２、２週間毎）。

ＦＯＬＦＯＸは、フォリン酸（ロイコボリン）、５－フルオロウラシルおよびオキサリプラチンから構成される化学療法レジメンである。２週間毎に与えられる推奨される投与スケジュールは以下の通りである：１日目：２２時間の連続注入としての、オキサリプラチン８５ｍｇ／ｍ^２ＩＶ注入およびロイコボリン２００ｍｇ／ｍ^２ＩＶ注入、引き続いて５－ＦＵ４００ｍｇ／ｍ^２ＩＶボーラス、引き続いて５－ＦＵ６００ｍｇ／ｍ^２ＩＶ注入；２日目：２２時間連続注入としての、１２０分間にわたるロイコボリン２００ｍｇ／ｍ^２ＩＶ注入、引き続いて２～４分間にわたって与えられる５－ＦＵ４００ｍｇ／ｍ^２ＩＶ、引き続いて５－ＦＵ６００ｍｇ／ｍ^２ＩＶ注入。

ＣＡＰＯＸ化学療法に使用される薬物組み合わせは、カペシタビンおよびオキサリプラチンを含む。

ＦＯＬＦＩＲＩ化学療法に使用される薬物組み合わせは、５－フルオロウラシル、ロイコボリンおよびイリノテカンを含む。

ＤＣＦ化学療法に使用される薬物組み合わせは、ドセタキセル、シスプラチンおよび５－フルオロウラシルを含む。

ＦＬＯＴ化学療法に使用される薬物組み合わせは、ドセタキセル、オキサリプラチン、５－フルオロウラシルおよびフォリン酸を含む。

「フォリン酸（ｆｏｌｉｎｉｃａｃｉｄ）」または「ロイコボリン（ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ）」という用語は、化学療法剤５－フルオロウラシルとの相乗的組み合わせで有用な化合物を指す。フォリン酸は、以下の式：

を有する。

特に、この用語は、化合物（２Ｓ）－２－｛［４－［（２－アミノ－５－ホルミル－４－オキソ－５，６，７，８－テトラヒドロ－１Ｈ－プテリジン－６－イル）メチルアミノ］ベンゾイル］アミノ｝ペンタン二酸を指す。

「抗原（ａｎｔｉｇｅｎ）」という用語は、免疫応答が向けられる、および／または向けられるべきエピトープを含むタンパク質またはペプチドなどの作用因子に関する。好ましい実施形態では、抗原が、ＣＬＤＮ１８．２などの腫瘍関連抗原、すなわち、細胞質、細胞表面および細胞核に由来し得るがん細胞の構成成分、特に細胞内でまたはがん細胞上の表面抗原として、好ましくは大量に産生される抗原である。

本発明の文脈において、「腫瘍関連抗原（ｔｕｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄａｎｔｉｇｅｎ）」という用語は、好ましくは、正常条件下で、限られた数の組織および／または器官で、あるいは特定の発達段階で特異的に発現され、１つまたは複数の腫瘍またはがん組織で発現または異常に発現されるタンパク質に関する。本発明の文脈において、腫瘍関連抗原は、好ましくはがん細胞の細胞表面に関連し、好ましくは正常組織で全くまたはごくまれにしか発現されない。

「エピトープ（ｅｐｉｔｏｐｅ）」という用語は、分子中の抗原決定基、すなわち、免疫系によって認識される、例えば、抗体によって認識される分子中の部分を指す。例えば、エピトープは、免疫系によって認識される、抗原上の離散的な三次元部位である。エピトープは通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面グルーピングからなり、通常、特異的三次元構造特性ならびに特異的電荷特性を有する。コンフォメーションエピトープおよび非コンフォメーションエピトープは、変性溶媒の存在下で、コンフォメーションエピトープへの結合は失われるが、非コンフォメーションエピトープへの結合は失われないという点で区別される。ＣＬＤＮ１８．２などのタンパク質のエピトープは、好ましくは前記タンパク質の連続または不連続部分を含み、好ましくは５～１００の間、好ましくは５～５０の間、より好ましくは８～３０の間、最も好ましくは１０～２５の間のアミノ酸長であり、例えば、エピトープは、好ましくは８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５アミノ酸長であり得る。

「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、ジスルフィド結合によって相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質を指し、その抗原結合部分を含む任意の分子を含む。「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、限定されないが、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、一本鎖抗体、例えばｓｃＦｖおよび抗原結合抗体断片、例えばＦａｂおよびＦａｂ’断片を含む、モノクローナル抗体および抗体の断片または誘導体を含み、抗体の全ての組換え形態、例えば原核生物で発現される抗体、非グリコシル化抗体、ならびに本明細書に記載される任意の抗原結合抗体断片および誘導体も含む。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＨＶと略される）および重鎖定常領域から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと略される）および軽鎖定常領域から構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存された領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域にさらに細分され得る。各ＶＨおよびＶＬは、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端に配列された、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成される。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）および古典的補体系の第１の構成成分（Ｃｌｑ）を含む、宿主組織または因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。

本明細書に記載される抗体はヒト抗体であり得る。本明細書で使用される「ヒト抗体（ｈｕｍａｎａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する抗体を含むことを意図している。本明細書に記載されるヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基を含む（例えば、インビトロでのランダムもしくは部位特異的突然変異またはインビボでの体細胞突然変異によって導入される突然変異）。

「ヒト化抗体（ｈｕｍａｎｉｚｅｄａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、非ヒト種の免疫グロブリンに実質的に由来する抗原結合部位を有する分子を指し、この分子の残りの免疫グロブリン構造は、ヒト免疫グロブリンの構造および／または配列に基づく。抗原結合部位は、定常ドメイン上に融合された完全な可変ドメインまたは可変ドメインの適切なフレームワーク領域上にグラフトされた相補性決定領域（ＣＤＲ）のみを含み得る。抗原結合部位は、野生型であってもよいし、または１つもしくは複数のアミノ酸置換によって修飾されていてもよい、例えば、ヒト免疫グロブリンにより厳密に似ているように修飾されていてもよい。ヒト化抗体の一部の形態は、全てのＣＤＲ配列を保存している（例えば、マウス抗体の６つ全てのＣＤＲを含有するヒト化マウス抗体）。他の形態は、元の抗体に対して変更された１つまたは複数のＣＤＲを有する。

「キメラ抗体（ｃｈｉｍｅｒｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、重鎖および軽鎖のアミノ酸配列の各々のある部分が特定の種に由来するまたは特定のクラスに属する抗体の対応する配列と相同であるが、鎖の残りのセグメントが別のものの対応する配列と相同である抗体を指す。典型的には、軽鎖と重鎖の両方の可変領域がある種の哺乳動物に由来する抗体の可変領域を模倣し、定常部分が別のものに由来する抗体の配列と相同である。このようなキメラ形態の１つの明確な利点は、例えば、ヒト細胞調製物に由来する定常領域と組み合わせて、非ヒト宿主生物から容易に入手可能なＢ細胞またはハイブリドーマを使用して、可変領域が現在公知の供給源から簡便に誘導され得ることである。可変領域は調製の容易さの利点を有し、特異性が供給源によって影響を受けないが、ヒトである定常領域は、抗体を注射した場合に、非ヒト源の定常領域よりも、ヒト対象からの免疫応答を誘発する可能性が低い。しかしながら、定義はこの特定の例に限定されない。

抗体の「抗原結合部分（ａｎｔｉｇｅｎ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｏｒｔｉｏｎ）」（もしくは単に「結合部分（ｂｉｎｄｉｎｇｐｏｒｔｉｏｎ）」）もしくは抗体の「抗原結合断片（ａｎｔｉｇｅｎ－ｂｉｎｄｉｎｇｆｒａｇｍｅｎｔ）」（もしくは単に「結合断片（ｂｉｎｄｉｎｇｆｒａｇｍｅｎｔ）」）という用語または同様の用語は、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つまたは複数の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、完全長抗体の断片によって実施され得ることが示されている。抗体の「抗原結合部分（ａｎｔｉｇｅｎ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｏｒｔｉｏｎ）」という用語内に包含される結合断片の例としては、（ｉ）Ｆａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨドメインからなる一価断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）_２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなる、ｄＡｂ断片（Ｗａｒｄら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ３４１：５４４～５４６）；（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、および（ｖｉｉ）場合により合成リンカーによって結合され得る２つ以上の単離されたＣＤＲの組み合わせが挙げられる。さらに、Ｆｖ断片、ＶＬおよびＶＨの２つのドメインは、別個の遺伝子によってコードされるが、それらが、ＶＬおよびＶＨ領域が対形成して一価分子を形成する一本タンパク質鎖（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる；例えば、Ｂｉｒｄら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ２４２：４２３～４２６；およびＨｕｓｔｏｎら（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５：５８７９～５８８３参照）として作成されることを可能にする合成リンカーによって、組換え方法を使用して、結合され得る。このような一本鎖抗体もまた、抗体の「抗原結合断片（ａｎｔｉｇｅｎ－ｂｉｎｄｉｎｇｆｒａｇｍｅｎｔ）」という用語に包含されることを意図している。さらなる例は、（ｉ）免疫グロブリンヒンジ領域ポリペプチドに融合した結合ドメインポリペプチド、（ｉｉ）ヒンジ領域に融合した免疫グロブリン重鎖ＣＨ２定常領域、および（ｉｉｉ）ＣＨ２定常領域に融合した免疫グロブリン重鎖ＣＨ３定常領域を含む結合ドメイン免疫グロブリン融合タンパク質である。結合ドメインポリペプチドは、重鎖可変領域または軽鎖可変領域であり得る。結合ドメイン免疫グロブリン融合タンパク質は、米国特許出願公開第２００３／０１１８５９２号および米国特許出願公開第２００３／０１３３９３９号にさらに開示されている。これらの抗体断片は当業者に公知の慣用的な技術を使用して得ることができ、断片はインタクトな抗体と同じ方法で有用性についてスクリーニングされる。

「二重特異性分子（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃｍｏｌｅｃｕｌｅ）」という用語は、２つの異なる結合特異性を有する、任意の作用因子、例えばタンパク質、ペプチド、またはタンパク質もしくはペプチド複合体を含むことを意図している。例えば、分子は、（ａ）細胞表面抗原、および（ｂ）エフェクター細胞の表面上のＦｃ受容体、に結合し得る、またはこれと相互作用し得る。「多重特異性分子（ｍｕｌｔｉｓｐｅｃｉｆｉｃｍｏｌｅｃｕｌｅ）」または「ヘテロ特異性分子（ｈｅｔｅｒｏｓｐｅｃｉｆｉｃｍｏｌｅｃｕｌｅ）」という用語は、３つ以上の異なる結合特異性を有する、任意の作用因子、例えばタンパク質、ペプチド、またはタンパク質もしくはペプチド複合体を含むことを意図している。例えば、分子は、（ａ）細胞表面抗原、（ｂ）エフェクター細胞の表面上のＦｃ受容体、および（ｃ）少なくとも１つの他の構成成分、に結合し得る、またはこれと相互作用し得る。したがって、本発明は、それだけに限らないが、ＣＬＤＮ１８．２、および他の標的、例えばエフェクター細胞上のＦｃ受容体に向けられた、二重特異性、三重特異性、四重特異性および他の多重特異性分子を含む。「二重特異性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語はまた、多価抗体、例えば２つの異なる結合特異性を有する三価抗体、２つまたは３つの異なる結合特異性を有する四価抗体などを含む。「二重特異性抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語はまた、ダイアボディを含む。ダイアボディは、ＶＨおよびＶＬドメインが、一本ポリペプチド鎖上で、但し同じ鎖上の２つのドメイン間での対形成を可能にするには短すぎ、それによって、ドメインに別の鎖の相補的ドメインと対形成させ、２つの抗原結合部位を作り出すリンカーを使用して発現される、二価の二重特異性抗体である（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐ．ら（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４～６４４８；Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊ．ら（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ２：１１２１～１１２３参照）。

抗体は、治療用部分または薬剤、例えば細胞毒、薬物（例えば、免疫抑制剤）または放射性同位体にコンジュゲートされ得る。細胞毒または細胞傷害剤は、細胞に有害な、特に細胞を死滅させる任意の薬剤を含む。例としては、メイタンシン（例えば、メルタンシン、ラブタンシンまたはエムタンシド（ｅｍｔａｎｓｉｄｅ））、アウリスタチン（モノメチルアウリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ））、ドラスタチン、カリケアマイシン（例えば、オゾガマイシン）、ピロロベンジジアゼピン二量体（例えば、テシリン、タイリン（ｔａｉｒｉｎｅ））、デュオカルマイシン（例えば、デュオカルマイシンＳＡ、ＣＣ－１０６５、デュオカルマジン）およびα－アマニチン、イリノテカンまたはその誘導体ＳＮ－３８、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラセン（ａｎｔｈｒａｃｉｎ）ジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、およびピューロマイシンおよびその類似体またはホモログ、代謝拮抗薬（例えば、メトトレキサート、６－メルカプトプリン、６－チオグアニン、シタラビン、フルダラビン、５－フルオロウラシルデカルバジン）、アルキル化剤（例えば、メクロレタミン、チオエパクロラムブシル（ｔｈｉｏｅｐａｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）およびロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロホスファミド、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、およびシス－ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリン（例えば、ダウノルビシン（以前はダウノマイシン）およびドキソルビシン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシンおよいアントラマイシン（ＡＭＣ））、ならびに抗有糸分裂薬（例えば、ビンクリスチンおよびビンブラスチン）が挙げられる。好ましい実施形態では、治療剤が細胞傷害剤または放射毒性剤である。別の実施形態では、治療剤が免疫抑制剤である。さらに別の実施形態では、治療剤がＧＭ－ＣＳＦである。好ましい実施形態では、治療剤が、ドキソルビシン、シスプラチン、ブレオマイシン、サルフェート、カルムスチン、クロラムブシル、シクロホスファミドまたはリシンＡである。

抗体はまた、細胞傷害性放射性医薬品を生成するために放射性同位体、例えばヨウ素－１３１、イットリウム－９０またはインジウム－１１１にコンジュゲートされ得る。

本発明の抗体コンジュゲートは、所与の生物学的応答を修飾するために使用され得、薬物部分は、古典的な化学治療剤に限定されると解釈されるべきでない。例えば、薬物部分は、所望の生物学的活性を持つタンパク質またはポリペプチドであり得る。このようなタンパク質は、例えば、アブリン、リシンＡ、緑膿菌外毒素もしくはジフテリア毒素などの酵素的に活性な毒素もしくはその活性断片；腫瘍壊死因子もしくはインターフェロン－γなどのタンパク質；または例えば、リンホカイン、インターロイキン－１（「ＩＬ－１」）、インターロイキン－２（「ＩＬ－２」）、インターロイキン－６（「ＩＬ－６」）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（「ＧＭ－ＣＳＦ」）、顆粒球コロニー刺激因子（「Ｇ－ＣＳＦ」）もしくは他の成長因子などの生物応答修飾剤を含み得る。

このような治療用部分を抗体にコンジュゲートするための技術は周知であり、例えば、Ａｒｎｏｎら、「ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＦｏｒＩｍｍｕｎｏｔａｒｇｅｔｉｎｇＯｆＤｒｕｇｓＩｎＣａｎｃｅｒＴｈｅｒａｐｙ」、ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＡｎｄＣａｎｃｅｒＴｈｅｒａｐｙ、Ｒｅｉｓｆｅｌｄら（編）、２４３－５６頁（ＡｌａｎＲ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９８５）；Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍら、「ＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＦｏｒＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙ」、ＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙ（第２版）、Ｒｏｂｉｎｓｏｎら（編）、６２３－５３頁（ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．１９８７）；Ｔｈｏｒｐｅ、「ＡｎｔｉｂｏｄｙＣａｒｒｉｅｒｓＯｆＣｙｔｏｔｏｘｉｃＡｇｅｎｔｓＩｎＣａｎｃｅｒＴｈｅｒａｐｙ：ＡＲｅｖｉｅｗ」、ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ’８４：ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｐｉｎｃｈｅｒａｅｔら（編）、４７５～５０６頁（１９８５）；「Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｒｅｓｕｌｔｓ，ＡｎｄＦｕｔｕｒｅＰｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅＯｆＴｈｅＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＵｓｅＯｆＲａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄＡｎｔｉｂｏｄｙＩｎＣａｎｃｅｒＴｈｅｒａｐｙ」、ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＦｏｒＣａｎｃｅｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎＡｎｄＴｈｅｒａｐｙ、Ｂａｌｄｗｉｎら（編）、３０３－１６頁（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ１９８５）、およびＴｈｏｒｐｅら、「ＴｈｅＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎＡｎｄＣｙｔｏｔｏｘｉｃＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓＯｆＡｎｔｉｂｏｄｙ－ＴｏｘｉｎＣｏｎｊｕｇａｔｅｓ」、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．、６２：１１９－５８（１９８２）を参照されたい。

本明細書で使用される場合、動物を免疫することによって、または免疫グロブリン遺伝子ライブラリーをスクリーニングすることによって系から抗体が得られる場合に、抗体は特定の生殖細胞系列配列に「由来（ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍ）」し、選択された抗体は、生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列とアミノ酸配列が少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％、さらにより好ましくは少なくとも９６％、９７％、９８％または９９％同一である。典型的には、特定の生殖細胞系列配列に由来する抗体は、生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と１０個以下のアミノ酸差異、より好ましくは５個以下、さらにより好ましくは、４個以下、３個以下、２個以下または１個以下のアミノ酸差異を示す。

本明細書で使用される場合、「異種抗体（ｈｅｔｅｒｏａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、その少なくとも２つが異なる特異性を有する、２つ以上の抗体、その誘導体または連結した抗原結合領域を指す。これらの異なる特異性は、エフェクター細胞上のＦｃ受容体に対する結合特異性、および標的細胞、例えば腫瘍細胞上の抗原またはエピトープに対する結合特異性を含む。

本明細書に記載される抗体はモノクローナル抗体であり得る。本明細書で使用される「モノクローナル抗体（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体は、単一結合特異性および親和性を示す。一実施形態では、モノクローナル抗体が、不死化細胞に融合した、非ヒト動物、例えばマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。

本明細書に記載される抗体は組換え抗体であり得る。本明細書で使用される「組換え抗体（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、組換え手段によって調製、発現、作製または単離された全ての抗体、例えば（ａ）免疫グロブリン遺伝子に関してトランスジェニックもしくはトランスクロモソーマル（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ）である動物（例えば、マウス）またはそこから調製されたハイブリドーマから単離された抗体、（ｂ）抗体を発現するように形質転換された宿主細胞、例えばトランスフェクトーマ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｏｍａ）から単離された抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアル抗体ライブラリーから単離された抗体、および（ｄ）他のＤＮＡ配列への免疫グロブリン遺伝子配列のスプライシングを伴う任意の他の手段によって調製、発現、作製または単離された抗体を含む。

本明細書に記載される抗体は、それだけに限らないが、マウス、ラット、ウサギ、モルモットおよびヒトを含む異なる種に由来してもよい。

本明細書に記載される抗体は、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を含み、ＩｇＡ１またはＩｇＡ２などのＩｇＡ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＥ、ＩｇＭ、およびＩｇＤ抗体を含む。様々な実施形態では、抗体が、ＩｇＧ１抗体、さらに特にＩｇＧ１、カッパ、またはＩｇＧ１、ラムダアイソタイプ（すなわち、ＩｇＧ１、κ、λ）、ＩｇＧ２ａ抗体（例えば、ＩｇＧ２ａ、κ、λ）、ＩｇＧ２ｂ抗体（例えば、ＩｇＧ２ｂ、κ、λ）、ＩｇＧ３抗体（例えば、ＩｇＧ３、κ、λ）またはＩｇＧ４抗体（例えば、ＩｇＧ４、κ、λ）である。

本明細書で使用される「トランスフェクトーマ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｏｍａ）」という用語は、抗体を発現する組換え真核宿主細胞、例えばＣＨＯ細胞、ＮＳ／０細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞、植物細胞、または酵母細胞を含む真菌を含む。

本明細書で使用される場合、「異種抗体（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、このような抗体を産生するトランスジェニック生物に関して定義される。この用語は、トランスジェニック生物からならない生物に見られ、一般的にトランスジェニック生物以外の種に由来するアミノ酸配列またはこれに対応するコード核酸配列を有する抗体を指す。

本明細書で使用される場合、「ヘテロハイブリッド抗体（ｈｅｔｅｒｏｈｙｂｒｉｄａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語は、異なる生命体起源の軽鎖および重鎖を有する抗体を指す。例えば、マウス軽鎖を伴うヒト重鎖を有する抗体がヘテロハイブリッド抗体である。

本発明は、本発明の目的のために、「抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙ）」という用語によって包含される、本明細書に記載される全ての抗体および抗体の誘導体を含む。「抗体誘導体（ａｎｔｉｂｏｄｙｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ）」という用語は、抗体の任意の修飾形態、例えば抗体と別の薬剤または抗体もしくは抗体断片のコンジュゲートを指す。

本明細書に記載される抗体は、好ましくは単離されている。「単離（ｉｓｏｌａｔｅｄ）」という用語は、自然状態から変更されている、または取り出されていることを意味する。例えば、生きた動物に自然に存在する核酸またはペプチドは「単離（ｉｓｏｌａｔｅｄ）」されていないが、その自然状態の共存材料から部分的または完全に分離された同じ核酸またはペプチドは「単離（ｉｓｏｌａｔｅｄ）」されている。単離核酸またはタンパク質は、実質的に精製された形態で存在することができる、または例えば、宿主細胞などの非天然環境で存在することができる。本明細書で使用される「単離抗体（ｉｓｏｌａｔｅｄａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を含むことを意図している（例えば、ＣＬＤＮ１８．２に特異的に結合する単離抗体は、ＣＬＤＮ１８．２以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない）。しかしながら、ヒトＣＬＤＮ１８．２のエピトープ、アイソフォームまたはバリアントに特異的に結合する単離抗体は、例えば他の種の他の関連抗原（例えば、ＣＬＤＮ１８．２種ホモログ）に対する交差反応性を有し得る。さらに、単離抗体は、他の細胞材料および／または化学物質を実質的に含まないことがある。本発明の一実施形態では、「単離（ｉｓｏｌａｔｅｄ）」モノクローナル抗体の組み合わせは、異なる特異性を有し、詳細に規定された組成物または混合物に組み合わせられる抗体に関する。

本発明による「結合（ｂｉｎｄｉｎｇ）」という用語は、好ましくは特異的結合に関する。

本発明によると、抗体は、標準的なアッセイで、所定の標的に対する有意な親和性を有し、所定の標的に結合する場合、前記所定の標的に結合することができる。「親和性（ａｆｆｉｎｉｔｙ）」または「結合親和性（ｂｉｎｄｉｎｇａｆｆｉｎｉｔｙ）」はしばしば、平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）によって測定される。好ましくは、「有意な親和性（ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｆｆｉｎｉｔｙ）」という用語は、１０^－５Ｍ以下、１０^－６Ｍ以下、１０^－７Ｍ以下、１０^－８Ｍ以下、１０^－９Ｍ以下、１０^－１０Ｍ以下、１０^－１１Ｍ以下、または１０^－１２Ｍ以下の解離定数（Ｋ_Ｄ）で所定の標的に結合することを指す。

抗体は、標準的なアッセイで、標的に対する有意な親和性を有さず、標的に有意に結合しない、特に検出可能に結合しない場合、前記標的に（実質的に）結合することができない。好ましくは、抗体は、最大２、好ましくは１０、より好ましくは２０、特に５０もしくは１００μｇ／ｍｌまたはそれ以上の濃度で存在する場合、前記標的に検出可能に結合しない。好ましくは、抗体は、抗体が結合することができる所定の標的への結合についてのＫ_Ｄよりも少なくとも１０倍、１００倍、１０^３倍、１０^４倍、１０^５倍または１０^６倍高いＫ_Ｄで標的に結合する場合、前記標的に対する有意な親和性を有さない。例えば、抗体が結合することができる標的への抗体の結合についてのＫ_Ｄが１０^－７Ｍである場合、抗体が有意な親和性を有さない標的への結合についてのＫ_Ｄは少なくとも１０^－６Ｍ、１０^－５Ｍ、１０^－４Ｍ、１０^－３Ｍ、１０^－２Ｍまたは１０^－１Ｍとなるであろう（ｗｏｕｌｄｂｅｉｓ）。

抗体は、他の標的に結合することができない、すなわち、標準的なアッセイで、他の標的に対する有意な親和性を有さず、他の標的に有意に結合しないが、所定の標的に結合することができる場合、前記所定の標的に特異的である。本発明によると、抗体は、ＣＬＤＮ１８．２に結合することができるが、他の標的に（実質的に）結合することができない場合、ＣＬＤＮ１８．２に特異的である。好ましくは、抗体は、このような他の抗体に対する親和性および結合が、ＣＬＤＮ１８．２非関連タンパク質、例えばウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、カゼイン、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）または非クローディン膜貫通タンパク質、例えばＭＨＣ分子またはトランスフェリン受容体または任意の他の指定されるポリペプチドに対する親和性または結合を有意に超えない場合、ＣＬＤＮ１８．２に特異的である。好ましくは、抗体は、特異的でない標的への結合についてのＫ_Ｄよりも少なくとも１０倍、１００倍、１０^３倍、１０^４倍、１０^５倍または１０^６倍低いＫ_Ｄで所定の標的に結合する場合、前記標的に特異的である。例えば、特異的である標的への抗体の結合についてのＫ_Ｄが１０^－７Ｍである場合、特異的でない標的への結合についてのＫ_Ｄは少なくとも１０^－６Ｍ、１０^－５Ｍ、１０^－４Ｍ、１０^－３Ｍ、１０^－２Ｍまたは１０^－１Ｍとなるであろう。

標的への抗体の結合は、任意の適切な方法を使用して実験的に決定することができる；例えば、Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙら、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ－ＡｎｔｉｇｅｎＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ」ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．編、ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓＮｅｗＹｏｒｋ、ＮＹ（１９８４）、Ｋｕｂｙ，ＪａｎｉｓＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｗ．Ｈ．ＦｒｅｅｍａｎａｎｄＣｏｍｐａｎｙＮｅｗＹｏｒｋ、ＮＹ（１９９２）を参照されたい。親和性は、平衡透析などの慣用的な技術を使用して；製造業者によって概説される一般的な手順を使用してＢＩＡｃｏｒｅ２０００機器を使用して；放射標識標的抗原を使用したラジオイムノアッセイによって；または当業者に公知の別の方法によって容易に決定され得る。親和性データは、例えば、Ｓｃａｔｃｈａｒｄら、ＡｎｎＮ．Ｙ．Ａｃａｄ．ＳｃＬ、５１：６６０（１９４９）の方法によって分析され得る。特定の抗体－抗原相互作用の測定される親和性は、異なる条件、例えば塩濃度、ｐＨ下で測定すると、変動し得る。よって、親和性および他の抗原結合パラメータ、例えばＫ_Ｄ、ＩＣ_５０の測定は、好ましくは、抗体および抗原の標準化溶液、ならびに標準化緩衝液で行われる。

本明細書で使用される場合、「アイソタイプ（ｉｓｏｔｙｐｅ）」は、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる抗体クラス（例えば、ＩｇＭまたはＩｇＧ１）を指す。

本明細書で使用される場合、「アイソタイプスイッチング（ｉｓｏｔｙｐｅｓｗｉｔｃｈｉｎｇ）」は、抗体のクラスまたはアイソタイプがあるＩｇクラスから他のＩｇクラスのものに変化する現象を指す。

物体に適用される、本明細書で使用される「自然に存在する（ｎａｔｕｒａｌｌｙｏｃｃｕｒｒｉｎｇ）」という用語は、物体を自然に見出だすことができるという事実を指す。例えば、自然の供給源から単離することができ、実験室で人によって意図的に修飾されていない生物（ウイルスを含む）に存在するポリペプチドまたはポリヌクレオチド配列は、自然に存在する。

本明細書で使用される「再配列（ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ）」という用語は、Ｖセグメントが、本質的に完全ＶＨまたはＶＬドメインをそれぞれコードするコンフォメーションでＤ－ＪまたはＪセグメントに直に隣接して位置する重鎖または軽鎖免疫グロブリン遺伝子座の配置を指す。再配列免疫グロブリン（抗体）遺伝子座は、生殖細胞系列ＤＮＡと比較することによって特定することができる；再配列遺伝子座は、少なくとも１つの組み換えられた七量体／九量体相同エレメントを有する。

Ｖセグメントに関して本明細書で使用される「非再配列（ｕｎｒｅａｒｒａｎｇｅｄ）」または「生殖細胞系列配置（ｇｅｒｍｌｉｎｅｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ）」という用語は、ＶセグメントがＤまたはＪセグメントに直に隣接するように組み換えられていない配置を指す。

本発明によると、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、ＣＬＤＮ１８．２に存在するエピトープ、好ましくはＣＬＤＮ１８．２の細胞外ドメイン、特に第１の細胞外ドメイン、好ましくはＣＬＤＮ１８．２のアミノ酸２９～７８位内に位置するエピトープに結合することができる抗体である。特定の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、（ｉ）ＣＬＤＮ１８．１上に存在しない、ＣＬＤＮ１８．２上のエピトープ、好ましくは配列番号３、４および５、（ｉｉ）ＣＬＤＮ１８．２－ループ１上に位置するエピトープ、好ましくは配列番号８、（ｉｉｉ）ＣＬＤＮ１８．２－ループ２上に位置するエピトープ、好ましくは配列番号１０、（ｉｖ）ＣＬＤＮ１８．２－ループＤ３上に位置するエピトープ、好ましくは配列番号１１、（ｖ）ＣＬＤＮ１８．２－ループ１およびＣＬＤＮ１８．２－ループＤ３を包含するエピトープ、または（ｖｉ）ＣＬＤＮ１８．２－ループＤ３上に位置する非グリコシル化エピトープ、好ましくは配列番号９に結合することができる抗体である。

本発明によると、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、好ましくはＣＬＤＮ１８．２に結合するが、ＣＬＤＮ１８．１に結合しない抗体である。好ましくは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体はＣＬＤＮ１８．２に特異的である。好ましくは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、細胞表面上で発現されるＣＬＤＮ１８．２に結合する抗体である。特定の好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、生細胞の表面上に存在するＣＬＤＮ１８．２の天然エピトープに結合する。好ましくは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、配列番号１、３～１１、４４、４６および４８～５０からなる群から選択される１つまたは複数のペプチドに結合する。好ましくは、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、上記タンパク質、ペプチドまたはその免疫原性断片もしくは誘導体に特異的である。抗ＣＬＤＮ１８．２抗体は、動物を配列番号１、３～１１、４４、４６および４８～５０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むタンパク質もしくはペプチド、または前記タンパク質もしくはペプチドを発現する核酸もしくは宿主細胞で免疫するステップを含む方法によって得ることができる。好ましくは、抗体は、がん細胞、特に上記のがん型の細胞に結合し、好ましくは、非がん性細胞に実質的に結合しない。

好ましくは、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞への抗ＣＬＤＮ１８．２抗体の結合が、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞の死滅を誘導または媒介する。ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞は、好ましくはがん細胞であり、特に、腫瘍化胃、食道、膵臓、肺、卵巣、結腸、肝、頭頸部および胆嚢がん細胞からなる群から選択される。好ましくは、抗体が、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞の補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）媒介溶解、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）媒介溶解、アポトーシス、および増殖の阻害の１つまたは複数を誘導することによって、細胞の死滅を誘導または媒介する。好ましくは、細胞のＡＤＣＣ媒介溶解が、特定の実施形態では、単球、単核細胞、ＮＫ細胞およびＰＭＮからなる群から選択されるエフェクター細胞の存在下で起こる。細胞の増殖の阻害は、ブロモデオキシウリジン（５－ブロモ－２－デオキシウリジン、ＢｒｄＵ）を使用したアッセイで、細胞の増殖を決定することによって、インビトロで測定することができる。ＢｒｄＵは、チミジンの類似体であり、ＤＮＡ複製中にチミジンに取って代わって、（細胞周期のＳ期の間に）複製細胞の新たに合成されたＤＮＡに組み込まれ得る合成ヌクレオシドである。例えば、ＢｒｄＵに特異的な抗体を使用して取り込まれた化学物質を検出すると、ＤＮＡを活発に複製していた細胞を示す。

好ましい実施形態では、本明細書に記載される抗体が、以下の特異性の１つまたは複数を特徴とし得る：
ａ）ＣＬＤＮ１８．２に対する特異性；
ｂ）約１００ｎＭ以下、好ましくは約５～１０ｎＭ以下、より好ましくは約１～３ｎＭ以下のＣＬＤＮ１８．２に対する結合親和性、
ｃ）ＣＬＤＮ１８．２陽性細胞でＣＤＣを誘導または媒介する能力；
ｄ）ＣＬＤＮ１８．２陽性細胞でＡＤＣＣを誘導または媒介する能力；
ｅ）ＣＬＤＮ１８．２陽性細胞の増殖を阻害する能力；
ｆ）ＣＬＤＮ１８．２陽性細胞のアポトーシスを誘導する能力。

特定の好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、ＤＳＭＺ（ＭａｓｃｈｅｒｏｄｅｒＷｅｇ１ｂ、３１８２４Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、ドイツ；新住所：Ｉｎｈｏｆｆｅｎｓｔｒ．７Ｂ、３１８２４Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、ドイツ）で寄託され、以下の表示および受託番号を有するハイブリドーマによって産生される：
ａ．１８２－Ｄ１１０６－０５５、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７３７、２００５年１０月１９日に寄託
ｂ．１８２－Ｄ１１０６－０５６、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７３８、２００５年１０月１９日に寄託
ｃ．１８２－Ｄ１１０６－０５７、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７３９、２００５年１０月１９日に寄託
ｄ．１８２－Ｄ１１０６－０５８、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４０、２００５年１０月１９日に寄託
ｅ．１８２－Ｄ１１０６－０５９、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４１、２００５年１０月１９日に寄託
ｆ．１８２－Ｄ１１０６－０６２、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４２、２００５年１０月１９日に寄託
ｇ．１８２－Ｄ１１０６－０６７、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４３、２００５年１０月１９日に寄託
ｈ．１８２－Ｄ７５８－０３５、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４５、２００５年１１月１７日に寄託
ｉ．１８２－Ｄ７５８－０３６、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４６、２００５年１１月１７日に寄託
ｊ．１８２－Ｄ７５８－０４０、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４７、２００５年１１月１７日に寄託
ｋ．１８２－Ｄ１１０６－０６１、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７４８、２００５年１１月１７日に寄託
ｌ．１８２－Ｄ１１０６－２７９、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２８０８、２００６年１０月２６日に寄託
ｍ．１８２－Ｄ１１０６－２９４、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２８０９、２００６年１０月２６日に寄託
ｎ．１８２－Ｄ１１０６－３６２、受託番号ＤＳＭＡＣＣ２８１０、２００６年１０月２６日に寄託。

本発明による好ましい抗体は、上記ハイブリドーマによって産生され、上記ハイブリドーマから得ることができるもの、すなわち、１８２－Ｄ１１０６－０５５の場合、３７Ｇ１１、１８２－Ｄ１１０６－０５６の場合、３７Ｈ８、１８２－Ｄ１１０６－０５７の場合、３８Ｇ５、１８２－Ｄ１１０６－０５８の場合、３８Ｈ３、１８２－Ｄ１１０６－０５９の場合、３９Ｆ１１、１８２－Ｄ１１０６－０６２の場合、４３Ａ１１、１８２－Ｄ１１０６－０６７の場合、６１Ｃ２、１８２－Ｄ７５８－０３５の場合、２６Ｂ５、１８２－Ｄ７５８－０３６の場合、２６Ｄ１２、１８２－Ｄ７５８－０４０の場合、２８Ｄ１０、１８２－Ｄ１１０６－０６１の場合、４２Ｅ１２、１８２－Ｄ１１０６－２７９の場合、１２５Ｅ１、１８２－Ｄ１１０６－２９４の場合、１６３Ｅ１２、および１８２－Ｄ１１０６－３６２の場合、１７５Ｄ１０；ならびにこれらのキメラ化およびヒト化形態である。

好ましいキメラ化抗体およびそれらの配列が以下の表に示される。

好ましい実施形態では、本発明による抗体、特に抗体のキメラ化形態が、ヒト重鎖定常領域に由来するアミノ酸配列、例えば配列番号１３もしくは５２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖定常領域（ＣＨ）を含む抗体を含む。さらに好ましい実施形態では、本発明による抗体、特に抗体のキメラ化形態が、ヒト軽鎖定常領域に由来するアミノ酸配列、例えば配列番号１２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖定常領域（ＣＬ）を含む抗体を含む。

特定の好ましい実施形態では、本発明による抗体、特に抗体のキメラ化抗体が、ヒトＣＨに由来するアミノ酸配列、例えば配列番号１３もしくは５２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含むＣＨを含み、ヒトＣＬに由来するアミノ酸配列、例えば配列番号１２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含むＣＬを含む抗体を含む。

一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、カッパ、マウス可変軽鎖、ヒトカッパ軽鎖定常領域アロタイプＫｍ（３）、マウス重鎖可変領域、ヒトＩｇＧ１定常領域、アロタイプＧ１ｍ（３）を含むキメラマウス／ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体である。

一定の好ましい実施形態では、抗体のキメラ化形態が、配列番号１４、１５、１６、１７、１８、１９、５１からなる群から選択されるアミノ酸配列およびその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖を含む、ならびに／あるいは配列番号２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８からなる群から選択されるアミノ酸配列およびその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖を含む抗体を含む。

一定の好ましい実施形態では、抗体のキメラ化形態が、以下の可能性（ｉ）～（ｉｘ）から選択される重鎖と軽鎖の組み合わせを含む抗体を含む：
（ｉ）重鎖が配列番号１４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２１によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｉ）重鎖が配列番号１５によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２０によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｉｉ）重鎖が配列番号１６によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｖ）重鎖が配列番号１８によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２５によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖ）重鎖が配列番号１７によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖｉ）重鎖が配列番号１９によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２３によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖｉｉ）重鎖が配列番号１９によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２６によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖｉｉｉ）重鎖が配列番号１９によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２７によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｘ）重鎖が配列番号１９によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２８によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、および、
（ｘ）重鎖が配列番号５１によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、軽鎖が配列番号２４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む。

１つの特に好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号１７によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖と配列番号２４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖を含む。

１つの特に好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号５１によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖と配列番号２４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖を含む。

配列番号１４、１５、１６、１７、１８、１９、５１、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７および２８からなる群から選択されるアミノ酸配列の断片は、好ましくはＮ末端の１７、１８、１９、２０、２１、２２または２３個のアミノ酸が除去されている前記配列に関する。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４からなる群から選択されるアミノ酸配列およびその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３からなる群から選択されるアミノ酸配列およびその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。

一定の好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、以下の可能性（ｉ）～（ｉｘ）から選択される重鎖可変領域（ＶＨ）と軽鎖可変領域（ＶＬ）の組み合わせを含む：
（ｉ）ＶＨが配列番号２９によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号３６によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｉ）ＶＨが配列番号３０によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号３５によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｉｉ）ＶＨが配列番号３１によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号３７によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｖ）ＶＨが配列番号３３によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号４０によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖ）ＶＨが配列番号３２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号３９によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖｉ）ＶＨが配列番号３４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号３８によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖｉｉ）ＶＨが配列番号３４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号４１によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｖｉｉｉ）ＶＨが配列番号３４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号４２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む、
（ｉｘ）ＶＨが配列番号３４によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含み、ＶＬが配列番号４３によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む。

１つの特に好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号３２によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含むＶＨと配列番号３９によって表されるアミノ酸配列もしくはその機能的バリアント、またはアミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含むＶＬを含む。より好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号３２によって表されるアミノ酸配列を含むＶＨを含み、ＶＬが、配列番号３９によって表されるアミノ酸配列を含み、例えばＩＭＡＢ３６２（Ｚｏｌｂｅｔｕｘｉｍａｂ）である。

「断片（ｆｒａｇｍｅｎｔ）」という用語は、特に、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）の、１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）、場合によりＣＤＲ１配列および／またはＣＤＲ２配列と組み合わせた、好ましくはＣＤＲ３配列を指す。一実施形態では、前記１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）が、相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットから選択される。特に好ましい実施形態では、「断片（ｆｒａｇｍｅｎｔ）」という用語が、重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）の相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を指す。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、以下の実施形態（ｉ）～（ｖｉ）から選択される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットを含むＶＨを含む：
（ｉ）ＣＤＲ１：配列番号１４の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１４の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１４の１１６～１２５位、
（ｉｉ）ＣＤＲ１：配列番号１５の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１５の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１５の１１６～１２６位、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ１：配列番号１６の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１６の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１６の１１６～１２４位、
（ｉｖ）ＣＤＲ１：配列番号１７の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１７の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１７の１１６～１２６位、
（ｖ）ＣＤＲ１：配列番号１８の４４～５１位、ＣＤＲ２：配列番号１８の６９～７６位、ＣＤＲ３：配列番号１８の１１５～１２５位、および、
（ｖｉ）ＣＤＲ１：配列番号１９の４５～５３位、ＣＤＲ２：配列番号１９の７１～７８位、ＣＤＲ３：配列番号１９の１１７～１２８位。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、上記実施形態（ｉ）～（ｖｉ）から選択される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットのＣＤＲ配列の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ全てを含むＶＨを含む。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、以下の実施形態（ｉ）～（ｉｘ）から選択される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットを含むＶＬを含む：
（ｉ）ＣＤＲ１：配列番号２０の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２０の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２０の１１５～１２３位、
（ｉｉ）ＣＤＲ１：配列番号２１の４９～５３位、ＣＤＲ２：配列番号２１の７１～７３位、ＣＤＲ３：配列番号２１の１１０～１１８位、
（ｉｉｉ）ＣＤＲ１：配列番号２２の４７～５２位、ＣＤＲ２：配列番号２２の７０～７２位、ＣＤＲ３：配列番号２２の１０９～１１７位、
（ｉｖ）ＣＤＲ１：配列番号２３の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２３の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２３の１１５～１２３位、
（ｖ）ＣＤＲ１：配列番号２４の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２４の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２４の１１５～１２３位、
（ｖｉ）ＣＤＲ１：配列番号２５の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２５の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２５の１１５～１２２位、
（ｖｉｉ）ＣＤＲ１：配列番号２６の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２６の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２６の１１５～１２３位、
（ｖｉｉｉ）ＣＤＲ１：配列番号２７の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２７の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２７の１１５～１２３位、および、
（ｉｘ）ＣＤＲ１：配列番号２８の４７～５２位、ＣＤＲ２：配列番号２８の７０～７２位、ＣＤＲ３：配列番号２８の１０９～１１７位。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、上記実施形態（ｉ）～（ｉｘ）から選択される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットのＣＤＲ配列の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ全てを含むＶＬを含む。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、それぞれ以下の実施形態（ｉ）～（ｉｘ）から選択される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットを含むＶＨとＶＬの組み合わせを含む：
（ｉ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１４の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１４の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１４の１１６～１２５位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２１の４９～５３位、ＣＤＲ２：配列番号２１の７１～７３位、ＣＤＲ３：配列番号２１の１１０～１１８位、
（ｉｉ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１５の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１５の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１５の１１６～１２６位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２０の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２０の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２０の１１５～１２３位、
（ｉｉｉ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１６の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１６の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１６の１１６～１２４位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２２の４７～５２位、ＣＤＲ２：配列番号２２の７０～７２位、ＣＤＲ３：配列番号２２の１０９～１１７位、
（ｉｖ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１８の４４～５１位、ＣＤＲ２：配列番号１８の６９～７６位、ＣＤＲ３：配列番号１８の１１５～１２５位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２５の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２５の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２５の１１５～１２２位、
（ｖ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１７の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１７の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１７の１１６～１２６位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２４の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２４の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２４の１１５～１２３位、
（ｖｉ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１９の４５～５３位、ＣＤＲ２：配列番号１９の７１～７８位、ＣＤＲ３：配列番号１９の１１７～１２８位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２３の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２３の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２３の１１５～１２３位、
（ｖｉｉ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１９の４５～５３位、ＣＤＲ２：配列番号１９の７１～７８位、ＣＤＲ３：配列番号１９の１１７～１２８位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２６の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２６の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２６の１１５～１２３位、
（ｖｉｉｉ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１９の４５～５３位、ＣＤＲ２：配列番号１９の７１～７８位、ＣＤＲ３：配列番号１９の１１７～１２８位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２７の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２７の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２７の１１５～１２３位、および、
（ｉｘ）ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１９の４５～５３位、ＣＤＲ２：配列番号１９の７１～７８位、ＣＤＲ３：配列番号１９の１１７～１２８位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２８の４７～５２位、ＣＤＲ２：配列番号２８の７０～７２位、ＣＤＲ３：配列番号２８の１０９～１１７位。

好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、上記実施形態（ｉ）～（ｉｘ）から選択される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットのＶＨＣＤＲ配列の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ全てを含むＶＨと上記実施形態（ｉ）～（ｉｘ）から選択される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットのＶＬＣＤＲ配列の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ全てを含むＶＬを含む。

「ＣＤＲ配列の少なくとも１つ、好ましくは２つ、より好ましくは３つ全て（ａｔｌｅａｓｔｏｎｅ，ｐｒｅｆｅｒａｂｌｙｔｗｏ，ｍｏｒｅｐｒｅｆｅｒａｂｌｙａｌｌｔｈｒｅｅｏｆｔｈｅＣＤＲｓｅｑｕｅｎｃｅｓ）」という用語は、好ましくは場合によりＣＤＲ１配列および／またはＣＤＲ２配列と組み合わせた、少なくともＣＤＲ３配列に関する。

１つの特に好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、それぞれ以下の通り相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットを含むＶＨとＶＬの組み合わせを含む：
ＶＨ：ＣＤＲ１：配列番号１７の４５～５２位、ＣＤＲ２：配列番号１７の７０～７７位、ＣＤＲ３：配列番号１７の１１６～１２６位、ＶＬ：ＣＤＲ１：配列番号２４の４７～５８位、ＣＤＲ２：配列番号２４の７６～７８位、ＣＤＲ３：配列番号２４の１１５～１２３位。

さらに好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、好ましくは、ＣＬＤＮ１８．２に対するモノクローナル抗体、好ましくは本明細書に記載されるＣＬＤＮ１８．２に対するモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）の、１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）、好ましくは少なくともＣＤＲ３可変領域を含み、好ましくは、本明細書に記載される重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）の、１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）、好ましくは少なくともＣＤＲ３可変領域を含む。一実施形態では、前記１つまたは複数の相補性決定領域（ＣＤＲ）が、本明細書に記載される相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３のセットから選択される。特に好ましい実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、好ましくは、ＣＬＤＮ１８．２に対するモノクローナル抗体、好ましくは本明細書に記載されるＣＬＤＮ１８．２に対するモノクローナル抗体の重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）の相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含み、好ましくは、本明細書に記載される重鎖可変領域（ＶＨ）および／または軽鎖可変領域（ＶＬ）の相補性決定領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３を含む。

一実施形態では、本明細書に記載される１つもしくは複数のＣＤＲ、ＣＤＲのセット、またはＣＤＲのセットの組み合わせを含む抗体が、その介在フレームワーク領域と一緒に前記ＣＤＲを含む。好ましくは、部分が、第１および第４のフレームワーク領域のいずれかまたは両方の少なくとも約５０％も含み、５０％は第１のフレームワーク領域のＣ末端５０％および第４のフレームワーク領域のＮ末端５０％である。組換えＤＮＡ技術によって作製される抗体の構築は、可変領域を結合するまたは可変領域を本明細書に記載される配列を含むさらなるタンパク質配列に結合するためのリンカーの導入を含め、クローニングまたは他の操作ステップを促進するために導入されるリンカーによってコードされる、可変領域に対してＮ末端またはＣ末端側の残基の導入をもたらし得る。

一実施形態では、本明細書に記載される１つもしくは複数のＣＤＲ、ＣＤＲのセット、またはＣＤＲのセットの組み合わせを含む抗体が、ヒト抗体フレームワーク中に前記ＣＤＲを含む。

その重鎖に関して、特定の鎖または特定の領域もしくは配列を含む抗体への本明細書における言及は、好ましくは、前記抗体の全ての重鎖が前記特定の鎖、領域または配列を含む状況に関する。これを抗体の軽鎖にも準用する。

一実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、ＣＬＤＮ１８．２結合について、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と競合する、および／または本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のＣＬＤＮ１８．２に対する特異性を有する。これらのおよび他の実施形態では、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と高度に相同であり得る。好ましい抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体のＣＤＲ領域と同一のまたは高度に相同なＣＤＲ領域を有することが企図される。「高度に相同（ｈｉｇｈｌｙｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ）」により、１～５個、好ましくは１～４個、例えば１～３個または１個もしくは２個の置換が各ＣＤＲ領域でなされ得ることが企図される。

「競合する（ｃｏｍｐｅｔｅ）」という用語は、標的抗原への結合についての、２つの結合分子、例えば抗体間の競合を指す。２つの結合分子が標的抗原への結合について互いに遮断しない場合、このような結合分子は非競合的であり、これは、前記結合分子が標的抗原の同じ部分、すなわちエピトープに結合しないことを示している。標的抗原への結合についての抗体などの結合分子の競合を試験する方法は当業者に周知である。このような方法の例は、例えばＥＬＩＳＡとして、またはフローサイトメトリーによって実施され得る、いわゆる交差競合アッセイである。例えば、ＥＬＩＳＡベースのアッセイは、ＥＬＩＳＡプレートウェルを抗体の１つでコーティングし；競合抗体およびＨｉｓタグ付き抗原／標的を添加し、例えばビオチン化抗Ｈｉｓ抗体、引き続いてストレプトアビジン－ポリＨＲＰを添加することによって、添加した抗体がＨｉｓタグ付き抗原のコーティング抗体への結合を阻害したかどうかを検出し、反応をＡＢＴＳでさらに展開し、４０５ｎｍでの吸光度を測定することによって実施され得る。例えば、フローサイトメトリーアッセイは、抗原／標的を発現している細胞を過剰の非標識抗体とインキュベートし、細胞を最適以下の濃度のビオチン標識抗体とインキュベートし、引き続いて蛍光標識ストレプトアビジンとインキュベートし、フローサイトメトリーによって分析することによって実施され得る。

２つの結合分子は、同じ抗原および同じエピトープに結合する場合、「同じ特異性（ｓａｍｅｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）」を有する。試験する分子が一定の結合分子と同じエピトープを認識するかどうか、すなわち、結合分子が同じエピトープに結合するかどうかは、例えば同じエピトープについての抗体などの結合分子の競合に基づいて、当業者に公知の様々な方法によって試験することができる。結合分子間の競合は、交差遮断（ｃｒｏｓｓ－ｂｌｏｃｋｉｎｇ）アッセイによって検出することができる。例えば、競合ＥＬＩＳＡアッセイが交差遮断アッセイとして使用され得る。例えば、標的抗原をマイクロタイタープレートのウェル上にコーティングし、抗原結合抗体および候補競合試験抗体を添加することができる。ウェルの抗原に結合した抗原結合抗体の量は、同じエピトープへの結合についてこれと競合する候補競合試験抗体の結合能力と間接的に相関する。具体的には、同じエピトープに対して候補競合試験抗体の親和性が大きいほど、抗原コーティングウェルに結合した抗原結合抗体の量が少なくなる。ウェルに結合した抗原結合抗体の量は、検出可能または測定可能な標識物質で抗体を標識することによって測定することができる。

「相同（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ）」は、２つのポリペプチド間または２つの核酸分子間の配列類似性または配列同一性を指す。２つの比較する配列の両方における位置が同じ塩基またはアミノ酸単量体サブユニットによって占められている場合、これらの分子はその位置で相同である。２つの配列間の相同性のパーセントは、２つの配列によって共有される一致または相同位置の数を比較する位置の数で割って１００を掛けた関数である。例えば、２つの配列の位置の１０のうちの６が一致しているまたは相同である場合、２つの配列は６０％相同である。一般的に、２つの配列を最大の相同性を与えるように整列させた場合の比較が行われる。相同な配列は、本開示によると、アミノ酸またはヌクレオチド残基の少なくとも４０％、特に少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、好ましくは少なくとも９５％、少なくとも９８％または少なくとも９９％の同一性を示す。

アミノ酸配列（ペプチドまたはタンパク質）に関連する「断片（ｆｒａｇｍｅｎｔ）」は、アミノ酸配列の一部、すなわち、Ｎ末端および／またはＣ末端で短縮されたアミノ酸配列を表す配列に関する。Ｃ末端で短縮された断片（Ｎ末端断片）は、例えばオープンリーディングフレームの３’末端を欠く切断型オープンリーディングフレームの翻訳によって得ることができる。Ｎ末端で短縮された断片（Ｃ末端断片）は、例えば切断型オープンリーディングフレームが翻訳を開始するのに役立つ開始コドンを含む限り、オープンリーディングフレームの５’末端を欠く切断型オープンリーディングフレームの翻訳によって得ることができる。アミノ酸配列の断片は、アミノ酸配列のアミノ酸残基の例えば少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％を含む。アミノ酸配列の断片は、好ましくはアミノ酸配列の少なくとも６個、特に少なくとも８個、少なくとも１２個、少なくとも１５個、少なくとも２０個、少なくとも３０個、少なくとも５０個または少なくとも１００個の連続アミノ酸を含む。

抗体配列の「断片（ｆｒａｇｍｅｎｔ）」は、それが抗体の前記抗体配列に取って代わる場合、好ましくは、ＣＬＤＮ１８．２への前記抗体の結合、および好ましくは本明細書に記載される前記抗体の機能、例えばＣＤＣ媒介溶解またはＡＤＣＣ媒介溶解を保持する。

本明細書における「バリアント（ｖａｒｉｅｎｔ）」、「バリアントタンパク質（ｖａｒｉａｎｔｐｒｏｔｅｉｎ）」または「バリアントポリペプチド（ｖａｒｉａｎｔｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾によって親タンパク質とは異なるタンパク質を意味する。親ポリペプチドは、自然に存在するもしくは野生型（ＷＴ）ポリペプチドであり得る、または野生型ポリペプチドの修飾バージョンであり得る。好ましくは、バリアントポリペプチドは、親ポリペプチドと比較して少なくとも１つのアミノ酸修飾、例えば親と比較して１～約２０個のアミノ酸修飾、好ましくは１～約１０個または１～約５個のアミノ酸修飾を有する。

本明細書で使用される「親ポリペプチド（ｐａｒｅｎｔｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）」、「親タンパク質（ｐａｒｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ）」、「前駆体ポリペプチド（ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）」または「前駆体タンパク質（ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｐｒｏｔｅｉｎ）」は、その後修飾されてバリアントを生成する未修飾ポリペプチドを意味する。親ポリペプチドは、野生型ポリペプチド、または野生型ポリペプチドのバリアントもしくは操作されたバージョンであり得る。

本明細書における「野生型（ｗｉｌｄｔｙｐｅ）」または「ＷＴ」または「天然（ｎａｔｉｖｅ）」は、対立遺伝子変異を含む、自然に見られるアミノ酸配列を意味する。野生型タンパク質またはポリペプチドは、意図的に修飾されていないアミノ酸配列を有する。

本開示の目的のために、アミノ酸配列（ペプチド、タンパク質またはポリペプチド）の「バリアント（ｖａｒｉａｎｔ）」は、アミノ酸挿入バリアント、アミノ酸付加バリアント、アミノ酸欠失バリアントおよび／またはアミノ酸置換バリアントを含む。「バリアント（ｖａｒｉａｎｔ）」という用語は、全ての突然変異体、スプライスバリアント、翻訳後修飾バリアント、コンフォメーション、アイソフォーム、対立遺伝子バリアント、種バリアントおよび種ホモログ、特に自然に存在するものを含む。

アミノ酸挿入バリアントは、特定のアミノ酸配列への単一または２つ以上のアミノ酸の挿入を含む。挿入を有するアミノ酸配列バリアントの場合、１つまたは複数のアミノ酸残基がアミノ酸配列中の特定の部位に挿入されるが、得られた生成物の適切なスクリーニングによるランダム挿入も可能である。アミノ酸付加バリアントは、１つまたは複数のアミノ酸、例えば１個、２個、３個、５個、１０個、２０個、３０個、５０個またはそれ以上のアミノ酸のアミノおよび／またはカルボキシ末端融合体を含む。アミノ酸欠失バリアントは、配列からの１つまたは複数のアミノ酸の除去、例えば１個、２個、３個、５個、１０個、２０個、３０個、５０個またはそれ以上のアミノ酸の除去を特徴とする。欠失はタンパク質の任意の位置であり得る。タンパク質のＮ末端および／またはＣ末端での欠失を含むアミノ酸欠失バリアントは、Ｎ末端および／Ｃ末端切断バリアントとも呼ばれる。アミノ酸置換バリアントは、配列中の少なくとも１つの残基が除去され、別の残基がその位置に挿入されていることを特徴とする。修飾が相同タンパク質もしくはペプチド間で保存されていないアミノ酸配列の位置にあること、および／またはアミノ酸を類似の特性を有する他のアミノ酸で置換することが好ましい。好ましくは、ペプチドおよびタンパク質バリアントにおけるアミノ酸変化が保存的アミノ酸変化、すなわち類似に帯電したまたは帯電していないアミノ酸の置換である。保存的アミノ酸変化は、その側鎖に関連するアミノ酸のファミリーの１つの置換を伴う。自然に存在するアミノ酸は、一般的に４つのファミリー：酸性（アスパラギン酸、グルタミン酸）、塩基性（リジン、アルギニン、ヒスチジン）、非極性（アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）および非帯電極性（グリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、トレオニン、チロシン）アミノ酸に分けられる。フェニルアラニン、トリプトファンおよびチロシンは時々、芳香族アミノ酸として一緒に分類される。一実施形態では、保存的アミノ酸置換が、以下のグループ内の置換を含む：
グリシン、アラニン；
バリン、イソロイシン、ロイシン；
アスパラギン酸、グルタミン酸；
アスパラギン、グルタミン；
セリン、トレオニン；
リジン、アルギニン；および、
フェニルアラニン、チロシン。

好ましくは、所与のアミノ酸配列と前記所与のアミノ酸配列のバリアントであるアミノ酸配列との間の類似性、好ましくは同一性の程度は、少なくとも約６０％、６５％、７０％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％である。類似性または同一性の程度は、好ましくは参照アミノ酸配列の全長の少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％または約１００％であるアミノ酸領域について与えられる。例えば、参照アミノ酸配列が２００個のアミノ酸からなる場合、類似性または同一性の程度は、好ましくは少なくとも約２０個、少なくとも約４０個、少なくとも約６０個、少なくとも約８０個、少なくとも約１００個、少なくとも約１２０個、少なくとも約１４０個、少なくとも約１６０個、少なくとも約１８０個または約２００個のアミノ酸、好ましくは連続アミノ酸について与えられる。好ましい実施形態では、類似性または同一性の程度が、参照アミノ酸配列の全長について与えられる。配列類似性、好ましくは配列同一性を決定するためのアラインメントは、好ましくは最良の配列アラインメントを使用して、例えば標準的な設定を使用したＡｌｉｇｎ、好ましくはＥＭＢＯＳＳ：：ｎｅｅｄｌｅ、Ｍａｔｒｉｘ：Ｂｌｏｓｕｍ６２、ＧａｐＯｐｅｎ１０．０、ＧａｐＥｘｔｅｎｄ０．５を使用して、当技術分野で公知のツールにより行うことができる。

「配列類似性（ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ）」は、同一である、または保存的アミノ酸置換を表す、アミノ酸のパーセンテージを示す。２つのアミノ酸配列間の「配列同一性（ｓｅｑｕｅｎｃｅｉｄｅｎｔｉｔｙ）」は、配列間で同一であるアミノ酸のパーセンテージを示す。

「パーセンテージ同一性（ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｉｄｅｎｔｉｔｙ）」という用語は、最良のアラインメント後に得られた、比較される２つの配列間で同一であるアミノ酸残基のパーセンテージを表し、このパーセンテージは純粋に統計学的なものであり、２つの配列間の差はランダムにかつその全長にわたって分布している。２つのアミノ酸配列間の配列比較は、慣用的に、これらの配列を最適に整列させた後にこれらを比較することによって行われ、前記比較は、配列類似性の局所領域を特定および比較するために、セグメントまたは「比較窓（ｗｉｎｄｏｗｏｆｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ）」によって行われる。比較のための配列の最適なアラインメントは、手動に加えて、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔｅｒｍａｎ、１９８１、ＡｄｓＡｐｐ．Ｍａｔｈ．２、４８２のローカル相同性アルゴリズム、ＮｅｄｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ、１９７０、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８、４４３のローカル相同性アルゴリズム、ＰｅａｒｓｏｎおよびＬｉｐｍａｎ、１９８８、Ｐｒｏｃ．ＮａｔｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８５、２４４４の類似性検索法、またはこれらのアルゴリズムを使用するコンピュータプログラム（ＷｉｓｃｏｎｓｉｎＧｅｎｅｔｉｃｓＳｏｆｔｗａｒｅＰａｃｋａｇｅ，ＧｅｎｅｔｉｃｓＣｏｍｐｕｔｅｒＧｒｏｕｐ、５７５ＳｃｉｅｎｃｅＤｒｉｖｅ、Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓ．のＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮおよびＴＦＡＳＴＡ）によって作成され得る。

パーセンテージ同一性は、比較する２つの配列間の同一の位置の数を決定し、この数を比較する位置の数で割り、得られた結果に１００を掛けて、これらの２つの配列間のパーセンテージ同一性を得ることによって計算される。

特定のアミノ酸配列、例えば配列表に示されるものに関連して本明細書で与えられる教示は、前記特定の配列に機能的に等価な配列をもたらす前記特定の配列のバリアント、例えば特定のアミノ酸配列の特性と同一または類似の特性を示すアミノ酸配列に関するように解釈されるべきである。１つの重要な特性は、抗体のその標的への結合を保持すること、または抗体のエフェクター機能を維持することである。好ましくは、特定の配列に関してバリアントである配列は、それが抗体の特定の配列に取って代わる場合、ＣＬＤＮ１８．２への前記抗体の結合、および好ましくは本明細書に記載される前記抗体の機能、例えばＣＤＣ媒介溶解またはＡＤＣＣ媒介溶解を保持する。

特に、ＣＬＤＮ１８．２に結合する能力を喪失することなく、ＣＤＲ、超可変領域および可変領域の配列が修飾され得ることが当業者によって理解されよう。例えば、ＣＤＲ領域は、本明細書で指定される抗体の領域と同一または高度に相同である。「高度に相同（ｈｉｇｈｌｙｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ）」により、ＣＤＲ中で１～５個、好ましくは１～４個、例えば１～３個または１個もしくは２個の置換が行われ得ることが企図される。さらに、超可変領域および可変領域は、本明細書に具体的に開示される抗体の領域との大きな相同性を示すように修飾され得る。

本明細書で使用される「機能的バリアント（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｖａｒｉａｎｔ）」という用語は、親分子または配列のアミノ酸配列と比較して１つまたは複数のアミノ酸によって変更されたアミノ酸配列を含み、依然として親分子または配列の機能の１つまたは複数を果たす、例えば標的分子に結合するまたは標的分子への結合に寄与することができるバリアント分子または配列を指す。親分子または配列が抗体分子または配列である場合、変更は、好ましくは抗体の可変領域になく、より好ましくは抗体のＣＤＲ領域にない。一実施形態では、機能的バリアントが、単独でまたは他のエレメントと組み合わせて、標的分子への結合について、親分子または配列と競合する。換言すれば、親分子または配列のアミノ酸配列における修飾が、分子または配列の結合特性に有意に影響を及ぼさず、またこれを変更もしない。異なる実施形態では、機能的バリアントの結合が低下し得るが、依然として有意に存在し得る、例えば機能的バリアントの結合が、親分子または配列の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％または少なくとも９０％であり得る。しかしながら、他の実施形態では、機能的バリアントの結合が、親分子または配列と比較して増強され得る。

指定されるアミノ酸配列（ペプチド、タンパク質またはポリペプチド）に「由来（ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍ）」するアミノ酸配列（ペプチド、タンパク質またはポリペプチド）は、第１のアミノ酸配列の起源を指す。好ましくは、特定のアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、その特定の配列またはその断片と同一、本質的に同一または相同なアミノ酸配列を有する。特定のアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列は、その特定の配列のバリアントまたはその断片であり得る。

本明細書で使用される「核酸（ｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ）」という用語は、ＤＮＡおよびＲＮＡを含むことを意図している。核酸は一本鎖または二本鎖であり得るが、好ましくは二本鎖ＤＮＡである。

本発明によると、「発現（ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ）」という用語は、その最も一般的な意味で使用され、ＲＮＡまたはＲＮＡおよびタンパク質／ペプチドの産生を含む。この用語はまた、核酸の部分的発現も含む。さらに、発現は一過的または安定的に行われ得る。

「トランスジェニック動物（ｔｒａｎｇｅｎｉｃａｎｉｍａｌ）」という用語は、１つまたは複数の導入遺伝子、好ましくは重／軽鎖導入遺伝子、またはトランスクロモソーム（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ）（動物の自然のゲノムＤＮＡに組み込まれたもしくは組み込まれていない）を含むゲノムを有し、好ましくは導入遺伝子を発現することができる動物を指す。例えば、トランスジェニックマウスは、ヒト軽鎖導入遺伝子およびヒト重鎖導入遺伝子またはヒト重鎖トランスクロモソームのいずれかを有することができ、結果としてマウスが、ＣＬＤＮ１８．２抗原および／またはＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞で免疫すると、ヒト抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を産生する。ヒト重鎖導入遺伝子は、トランスジェニックマウス、例えばＨｕＭＡｂマウス、例えばＨＣｏ７もしくはＨＣｏｌ２マウスの場合にように、マウスの染色体ＤＮＡに組み込むことができる、またはヒト重鎖導入遺伝子は、国際公開第０２／４３４７８号に記載されるトランスクロモソーマル（例えば、ＫＭ）マウスのように、染色体外に維持することができる。このようなトランスジェニックマウスおよびトランスクロモソーマルマウスは、Ｖ－Ｄ－Ｊ組換えおよびアイソタイプスイッチングを受けることによって、ＣＬＤＮ１８．２に対するヒトモノクローナル抗体の複数のアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡおよび／またはＩｇＥ）を産生することができる。

本明細書で使用される「低下させる（ｒｅｄｕｃｅ）」、「減少させる（ｄｅｃｒｅａｓｅ）」または「阻害する（ｉｎｈｉｂｉｔ）」は、レベル、例えば発現レベルまたは細胞の増殖レベルにおける、好ましくは５％以上、１０％以上、２０％以上、より好ましくは５０％以上、最も好ましくは７５％以上の全体的な減少、または全体的な減少を引き起こす能力を意味する。

「増加させる（ｉｎｃｒｅａｓｅ）」または「増強する（ｅｎｈａｎｃｅ）」のような用語は、好ましくは約少なくとも１０％、好ましくは少なくとも２０％、好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、さらにより好ましくは少なくとも８０％、最も好ましくは少なくとも１００％、少なくとも２００％、少なくとも５００％、少なくとも１０００％、少なくとも１００００％またはそれ以上の増加または増強に関する。

「誘導する（ｉｎｄｕｃｉｎｇ）」は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）などの一定の活性または機能に関して使用される場合、誘導前にはこのような活性も機能も存在しなかったことを意味し得るが、誘導前に一定レベルのこのような活性または機能が存在し、誘導後に、前記活性または機能が増強されることも意味し得る。よって、「誘導する（ｉｎｄｕｃｉｎｇ）」という用語は「増強する（ｅｎｈａｎｃｉｎｇ）」も含む。
ｍＡｂ作用機序

以下は本発明の抗体の治療上の有効性の根底にある機序に関する考慮事項を提供するが、いかなる方法でも本発明を限定するものと解釈されるべきでない。

本明細書に記載される抗体は、好ましくはＡＤＣＣまたはＣＤＣを通して、好ましくは免疫系の構成成分と相互作用する。本明細書に記載される抗体はまた、ペイロード（例えば、放射性同位体、薬物もしくは毒素）を標的化して腫瘍細胞を直接死滅させるために使用され得る、または伝統的な化学療法剤と共に使用され、Ｔリンパ球に対する化学療法剤の細胞傷害性副作用によって損なわれた可能性がある抗腫瘍免疫応答を含み得る補足的な作用機序を通して腫瘍を攻撃し得る。しかしながら、本明細書に記載される抗体は、単に細胞表面上のＣＬＤＮ１８．２への結合によって効果を発揮する、よって、例えば細胞の増殖を遮断することもできる。

抗体依存性細胞傷害
ＡＤＣＣは、好ましくは標的細胞が抗体によってマークされることを要する、本明細書に記載されるエフェクター細胞、特にリンパ球の細胞死滅能力を記載するものである。

ＡＤＣＣは、好ましくは、抗体が腫瘍細胞上の抗原に結合し、抗体Ｆｃドメインが免疫エフェクター細胞の表面上のＦｃ受容体（ＦｃＲ）に会合すると起こる。Ｆｃ受容体のいくつかのファミリーが特定されており、特定の細胞集団が、規定のＦｃ受容体を特徴的に発現する。ＡＤＣＣは、抗原提示および腫瘍指向性Ｔ細胞応答につながる様々な程度の即時腫瘍破壊を直接誘導する機序とみなされ得る。好ましくは、ＡＤＣＣのインビボ誘導は、腫瘍指向性Ｔ細胞応答および宿主誘導抗体応答につながる。

補体依存性細胞傷害
ＣＤＣは、抗体によって指向性が定められ得る別の細胞死滅法である。ＩｇＭは、補体活性化のための最も有効なアイソタイプである。ＩｇＧ１およびＩｇＧ３は共に、古典的な補体活性化経路を介してＣＤＣの指向性を定めるのに非常に有効である。好ましくは、このカスケードでは、抗原－抗体複合体の形成が、ＩｇＧ分子などの参加抗体分子のＣ_Ｈ２ドメイン上の接近した複数のＣ１ｑ結合部位のアンクローキング（ｕｎｃｌｏａｋｉｎｇ）をもたらす（Ｃ１ｑは補体Ｃ１の３つの小成分の１つである）。好ましくはこれらのアンクローキングＣ１ｑ結合部位が、以前の低親和性Ｃ１ｑ－ＩｇＧ相互作用を高結合活性のものに変換し、これが一連の他の補体タンパク質を伴うイベントのカスケードを誘因し、エフェクター細胞走化性／活性化作用因子Ｃ３ａおよびＣ５ａのタンパク質分解性放出につながる。好ましくは、補体カスケードは、膜攻撃複合体の形成で終わり、これが水および溶質の細胞の内外への自由な通過を促進する細胞膜中のポアを作り出す。

本明細書に記載される抗体は、慣用的なモノクローナル抗体方法論、例えばＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｎａｔｕｒｅ２５６：４９５（１９７５）の標準的な体細胞ハイブリダイゼーション技術を含む様々な技術によって作製され得る。体細胞ハイブリダイゼーション手順が原則として好ましいが、モノクローナル抗体を作製するための他の技術、例えばＢリンパ球のウイルスもしくは発癌性形質転換、または抗体遺伝子のライブラリーを使用したファージディスプレイ技術も使用され得る。

モノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマを調製するための好ましい動物系はマウス系である。マウスにおけるハイブリドーマ産生は非常によく確立された手順である。免疫化プロトコルおよび融合のために免疫された脾細胞を単離するための技術は、当技術分野で公知である。融合パートナー（例えば、マウス骨髄腫細胞）および融合手順も公知である。

モノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマを調製するための他の好ましい動物系はラットおよびウサギ系である（例えば、Ｓｐｉｅｋｅｒ－Ｐｏｌｅｔら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９２：９３４８（１９９５）に記載される、Ｒｏｓｓｉら、Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐａｔｈｏｌ．１２４：２９５（２００５）も参照されたい）。

さらに別の好ましい実施形態では、マウス系ではなくヒト免疫系の一部を保有するトランスジェニックまたはトランスクロモソーマルマウスを使用して、ヒトモノクローナル抗体が作製され得る。これらのトランスジェニックおよびトランスクロモソーマルマウスは、それぞれＨｕＭＡｂマウスおよびＫＭマウスとして知られるマウスを含み、本明細書でまとめて「トランスジェニックマウス（ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｏｕｓｅ）」と呼ばれる。このようなトランスジェニックマウスにおけるヒト抗体の作製は、国際公開第２００４０３５６０７号でＣＤ２０について詳細に記載されるように実施され得る。

モノクローナル抗体を作製するためのさらに別の戦略は、規定された特異性の抗体を産生するリンパ球から抗体をコードする遺伝子を直接単離することであり、例えばＢａｂｃｏｃｋら、１９９６；規定された特異性の抗体を産生する単一の単離されたリンパ球からモノクローナル抗体を作製するための新規な戦略を参照されたい。組換え抗体操作の詳細については、ＷｅｌｓｃｈｏｆおよびＫｒａｕｓ、ＲｅｃｏｍｏｂｉｎａｎｔａｎｔｉｂｏｄｙｆｏｒｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙＩＳＢＮ－０－８９６０３－９１８－８およびＢｅｎｎｙＫ．Ｃ．ＬｏＡｎｔｉｂｏｄｙＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＩＳＢＮ１－５８８２９－０９２－１も参照されたい。

抗体を作製するために、マウスを、記載されるように、抗原配列、すなわち、抗体の指向性の対象とされる配列に由来する担体コンジュゲートペプチド、組換え的に発現される抗原もしくはその断片および／または抗原を発現する細胞の濃縮調製物で免疫することができる。あるいは、マウスを、抗原またはその断片をコードするＤＮＡで免疫することができる。抗原の精製または濃縮調製物を使用した免疫化が抗体をもたらさない場合、マウスを、抗原を発現する細胞、例えば細胞株で免疫して、免疫応答を促進することもできる。

尾静脈または後眼窩出血によって得られる血漿および血清試料により、免疫化プロトコルの経過にわたって免疫応答が監視され得る。十分な力価の免疫グロブリンを有するマウスが融合に使用され得る。マウスを抗原発現細胞で腹腔内または静脈内ブーストした３日後に、屠殺し、脾臓を取り出して、特異抗体分泌ハイブリドーマの割合を増加させることができる。

モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを作製するために、免疫したマウスの脾細胞およびリンパ節細胞を単離し、適切な不死化細胞株、例えばマウス骨髄腫細胞株に融合することができる。次いで、得られたハイブリドーマを、抗原特異抗体の産生についてスクリーニングすることができる。次いで、個々のウェルを、抗体分泌ハイブリドーマについてＥＬＩＳＡによってスクリーニングすることができる。抗原発現細胞を使用した免疫蛍光およびＦＡＣＳ分析によって、抗原に対する特異性を有する抗体を特定することができる。抗体分泌ハイブリドーマを再播種し、再度スクリーニングし、依然としてモノクローナル抗体について陽性である場合、限界希釈によってサブクローニングすることができる。次いで、安定なサブクローンをインビトロで培養して、特性評価のために組織培養培地で抗体を作製することができる。

例えば、当技術分野で周知のように（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ２２９：１２０２参照）、組換えＤＮＡ技術と遺伝子導入法の組み合わせを使用して、宿主細胞トランスフェクトーマで抗体を産生することもできる。

例えば、一実施形態では、目的の遺伝子（複数可）、例えば抗体遺伝子を、国際公開第８７／０４４６２号、国際公開第８９／０１０３６号および欧州特許第３３８８４１号に開示されるＧＳ遺伝子発現系または当技術分野で周知の他の発現系によって使用されるような真核生物発現プラスミドなどの発現ベクターにライゲーションすることができる。クローニング抗体遺伝子を含む精製プラスミドを、ＣＨＯ細胞、ＮＳ／０細胞、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞もしくはＨＥＫ２９３細胞などの真核宿主細胞、または代わりに植物由来細胞、真菌もしくは酵母細胞などの他の真核細胞に導入することができる。これらの遺伝子を導入するために使用される方法は、電気穿孔、リポフェクチン、リポフェクタミンなどの当技術分野で記載される方法であり得る。これらの抗体遺伝子を宿主細胞に導入した後、抗体を発現する細胞を特定および選択することができる。これらの細胞は、その後に発現レベルについて増幅し、抗体を産生するために規模拡大することができるトランスフェクトーマを表す。これらの培養上清および／または細胞から組換え抗体を単離および精製することができる。

あるいは、クローニング抗体遺伝子を、微生物、例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などの原核細胞を含む他の発現系で発現させることができる。さらに、抗体を、ヒツジおよびウサギの乳、または雌鶏の卵などトランスジェニック非ヒト動物で、あるいはトランスジェニック植物で産生することができる；例えば、Ｖｅｒｍａ，Ｒ．ら（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２１６：１６５～１８１；Ｐｏｌｌｏｃｋら（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２３１：１４７～１５７；およびＦｉｓｃｈｅｒ，Ｒ．ら（１９９９）Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３８０：８２５～８３９を参照されたい。

キメラ化
毒素または放射性同位体で標識した場合、マウスモノクローナル抗体はヒトにおいて治療用抗体として使用され得る。非標識マウス抗体は、繰り返し適用すると、人で高度に免疫原性であり、治療効果の低下につながる。主な免疫原性は重鎖定常領域によって媒介される。人におけるマウス抗体の免疫原性は、それぞれの抗体をキメラ化またはヒト化すると、低下させる、または完全に回避することができる。キメラ抗体は、異なる部分が異なる動物種に由来する抗体、例えばマウス抗体由来の可変領域およびヒト免疫グロブリン定常領域を有する抗体である。抗体のキメラ化は、マウス抗体重鎖および軽鎖の可変領域をヒト重鎖および軽鎖の定常領域と結合することによって達成される（例えば、Ｋｒａｕｓら、ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｓｅｒｉｅｓ、ＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｆｏｒｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙＩＳＢＮ－０－８９６０３－９１８－８に記載される）。好ましい実施形態では、キメラ抗体が、ヒトカッパ軽鎖定常領域をマウス軽鎖可変領域に結合することによって作製される。同様に好ましい実施形態では、ヒトラムダ軽鎖定常領域をマウス軽鎖可変領域に結合することによって、キメラ抗体が作製され得る。キメラ抗体を作製するための好ましい重鎖定常領域はＩｇＧ１、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４である。キメラ抗体を作製するための他の好ましい重鎖定常領域はＩｇＧ２、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＭである。

ヒト化
抗体は、主に６つの重鎖および軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）に位置するアミノ酸残基を通して、標的抗原と相互作用する。この理由のために、ＣＤＲ内のアミノ酸配列は、ＣＤＲ外の配列よりも、個々の抗体間で多様である。ＣＤＲ配列がほとんどの抗体－抗原相互作用を担うので、異なる特性を有する異なる抗体のフレームワーク配列にグラフトされた特定の自然に存在する抗体のＣＤＲ配列を含む発現ベクターを構築することによって、特定の自然に存在する抗体の特性を模倣する組換え抗体を発現させることが可能である（例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，Ｌ．ら（１９９８）Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３～３２７；Ｊｏｎｅｓ，Ｐ．ら（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２～５２５；およびＱｕｅｅｎ，Ｃ．ら（１９８９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：１００２９～１００３３参照）。このようなフレームワーク配列は、生殖細胞系列抗体遺伝子配列を含む公的ＤＮＡデータベースから得ることができる。これらの生殖細胞系列配列は、Ｂ細胞成熟中にＶ（Ｄ）Ｊ結合によって形成される完全に組み立てられた可変遺伝子を含まないので、成熟抗体遺伝子配列とは異なる。生殖細胞系列遺伝子配列は、可変領域にわたって均一に個々に高親和性二次レパートリー抗体の配列とも異なる。

抗体が抗原に結合する能力は、標準的な結合アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット法、免疫蛍光およびフローサイトメトリー分析）を使用して決定することができる。

抗体を精製するために、選択されたハイブリドーマを、モノクローナル抗体精製用の２リットルスピナーフラスコで増殖させることができる。あるいは、抗体を透析ベースのバイオリアクターで作製することができる。上清を濾過し、必要に応じて、プロテインＧセファロースまたはプロテインＡセファロースを用いたアフィニティークロマトグラフィー前に濃縮することができる。溶出したＩｇＧをゲル電気泳動および高速液体クロマトグラフィーによって確認して純度を確保することができる。緩衝液をＰＢＳに交換することができ、１．４３減衰係数を使用してＯＤ２８０によって濃度を決定することができる。モノクローナル抗体を一定分量に分割し、－８０℃で保管することができる。

選択されたモノクローナル抗体が特有のエピトープに結合するかどうかを判定するために、部位特異的突然変異または複数部位特異的突然変異が使用され得る。

抗体のアイソタイプを決定するために、様々な市販のキット（例えば、Ｚｙｍｅｄ、ＲｏｃｈｅＤｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を用いたアイソタイプＥＬＩＳＡが実施され得る。マイクロタイタープレートのウェルを抗マウスＩｇでコーティングすることができる。ブロッキング後、プレートをモノクローナル抗体または精製アイソタイプ対照と周囲温度で２時間反応させる。次いで、ウェルをマウスＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂまたはＩｇＧ３、ＩｇＡ、またはマウスＩｇＭ特異的ペルオキシダーゼコンジュゲートプローブと反応させることができる。洗浄後、プレートをＡＢＴＳ基質（１ｍｇ／ｍｌ）で展開し、ＯＤ４０５～６５０で分析することができる。あるいは、ＩｓｏＳｔｒｉｐＭｏｕｓｅＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙＩｓｏｔｙｐｉｎｇＫｉｔ（Ｒｏｃｈｅ、カタログ番号１４９３０２７）を製造業者によって記載されるように使用することができる。

免疫化マウスの血清中の抗体の存在または抗原を発現している生細胞へのモノクローナル抗体の結合を実証するために、フローサイトメトリーが使用され得る。自然にまたはトランスフェクション後に抗原を発現している細胞株、および抗原発現を欠く陰性対照（標準増殖条件下で増殖）を、ハイブリドーマ上清または１％ＦＢＳを含有するＰＢＳ中で様々な濃度のモノクローナル抗体と混合し、４℃で３０分間インキュベートすることができる。洗浄後、ＡＰＣ－またはＡｌｅｘａ６４７標識抗ＩｇＧ抗体は一次抗体染色と同じ条件下で抗原結合モノクローナル抗体に結合することができる。単一生細胞をゲーティングするために光および側方散乱特性を使用して、ＦＡＣＳ機器を用いたフローサイトメトリーによって、試料を分析することができる。単一測定で抗原特異的モノクローナル抗体を非特異的結合剤と区別するために、コトランスフェクションの方法が使用され得る。抗原をコードするプラスミドを一過的にトランスフェクトした細胞および蛍光マーカーを上記のように染色することができる。トランスフェクト細胞を抗体染色細胞とは異なる蛍光チャネルで検出することができる。トランスフェクト細胞の大部分が両導入遺伝子を発現するので、抗原特異的モノクローナル抗体が蛍光マーカー発現細胞に優先的に結合し、非特異的抗体が同等の比で非トランスフェクト細胞に結合する。フローサイトメトリーアッセイに加えてまたはその代わりに蛍光顕微鏡法を使用した代替アッセイが使用され得る。細胞を上記の通りに染色し、蛍光顕微鏡法によって調べることができる。

免疫化マウスの血清中の抗体の存在または抗原を発現している生細胞へのモノクローナル抗体の結合を実証するために、免疫蛍光顕微鏡分析が使用され得る。例えば、自発的にまたはトランスフェクション後に抗原を発現している細胞株、および抗原発現を欠く陰性対照を、１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）、２ｍＭＬ－グルタミン、１００ＩＵ／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを補足した、ＤＭＥＭ／Ｆ１２培地中、標準的な増殖条件下、チャンバースライドで増殖させる。次いで、細胞をメタノールもしくはパラホルムアルデヒドで固定する、または未処理のままにしておくことができる。次いで、細胞を、２５℃で３０分間、抗原に対するモノクローナル抗体と反応させることができる。洗浄後、細胞を同じ条件下でＡｌｅｘａ５５５標識抗マウスＩｇＧ二次抗体（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｂｅｓ）と反応させることができる。次いで、細胞を蛍光顕微鏡法によって調べることができる。

抗原を発現している細胞および適切な陰性対照からの細胞抽出物を調製し、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）ポリアクリルアミドゲル電気泳動に供することができる。電気泳動後、分離した抗原をニトロセルロース膜に転写し、ブロッキングし、試験するモノクローナル抗体でプロービングする。抗マウスＩｇＧペルオキシダーゼを使用してＩｇＧ結合を検出し、ＦＣＬ基質で展開することができる。

抗体を、例えば日常的な外科的処置中に患者から得られる非がん組織もしくはがん組織試料または自発的にもしくはトランスフェクション後に抗原を発現している細胞株を接種した異種移植腫瘍を保有するマウスからのパラホルムアルデヒドもしくはアセトン固定凍結切片またはパラホルムアルデヒドで固定したパラフィン包埋組織切片を使用して、当業者に周知の方法で免疫組織化学によって抗原との反応性についてさらに試験することができる。免疫染色のために、抗原に反応性の抗体、引き続いて販売業者の指示に従って、西洋ワサビペルオキシダーゼコンジュゲートヤギ抗マウスまたはヤギ抗ウサギ抗体（ＤＡＫＯ）をインキュベートすることができる。

抗体を、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞の食作用および死滅を媒介する能力について試験することができる。インビトロでのモノクローナル抗体活性の試験は、インビボモデルを試験する前の初期スクリーニングを提供する。

抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）：
手短に言えば、健康なドナーからの多形核細胞（ＰＭＮ）、ＮＫ細胞、単球、単核細胞または他のエフェクター細胞を、ＦｉｃｏｌｌＨｙｐａｑｕｅ密度遠心分離によって精製し、引き続いて汚染赤血球を溶解することができる。洗浄したエフェクター細胞を、１０％熱不活性化ウシ胎仔血清、または代わりに５％熱不活性化ヒト血清を補足したＲＰＭＩに再懸濁し、様々な比のエフェクター細胞対標的細胞で、ＣＬＤＮ１８．２を発現している^５１Ｃｒ標識標的細胞と混合することができる。あるいは、標的細胞を蛍光増強リガンド（ＢＡＴＤＡ）で標識することができる。ユーロピウムと死細胞から放出される増強リガンドの高度蛍光キレートを蛍光光度計によって測定することができる。別の代替技術は、ルシフェラーゼによる標的細胞のトランスフェクションを利用し得る。次いで、添加されたルシファーイエローは生細胞によってのみ酸化され得る。次いで、精製抗ＣＬＤＮ１８．２ＩｇＧを様々な濃度で添加することができる。無関係のヒトＩｇＧを陰性対照として使用することができる。使用するエフェクター細胞型に応じて、３７℃で４～２０時間、アッセイを行うことができる。^５１Ｃｒ放出または培養上清中のＥｕＴＤＡキレートの存在を測定することによって、細胞を細胞溶解についてアッセイすることができる。あるいは、ルシファーイエローの酸化に起因する発光が生細胞の尺度となり得る。
抗ＣＬＤＮ１８．２モノクローナル抗体を、様々な組み合わせで試験して、細胞溶解が複数のモノクローナル抗体で増強されるかどうかを判定することもできる。

補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）：
様々な公知の技術を使用して、モノクローナル抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を、ＣＤＣを媒介する能力について試験することができる。例えば、補体のための血清を当業者に公知の方法で血液から得ることができる。ｍＡｂのＣＤＣ活性を決定するために、様々な方法が使用され得る。例えば、^５１Ｃｒが測定され得る、またはヨウ化プロピジウム（ＰＩ）排除アッセイを使用して上昇した膜透過性が評価され得る。手短に言えば、標的細胞を洗浄し、５×１０^５／ｍｌを様々な濃度のｍＡｂと室温または３７℃で１０～３０分間インキュベートすることができる。次いで、血清または血漿を２０％（ｖ／ｖ）の最終濃度まで添加し、細胞を３７℃で２０～３０分間インキュベートすることができる。各試料の全ての細胞をＦＡＣＳチューブ中のＰＩ溶液に添加することができる。次いで、ＦＡＣＳＡｒｒａｙを使用したフローサイトメトリー分析によって直ちに混合物を分析することができる。

代替アッセイでは、ＣＤＣの誘導を接着細胞で決定することができる。このアッセイの一実施形態では、細胞を、アッセイの２４時間前に３×１０４／ウェルの密度で、組織培養平底マイクロタイタープレートに播種する。翌日、増殖培地を除去し、細胞を抗体と３連でインキュベートする。対照細胞を、それぞれバックグラウンド溶解および最大溶解を決定するために、増殖培地または０．２％サポニンを含有する増殖培地とインキュベートする。室温で２０分間のインキュベーション後、上清を除去し、ＤＭＥＭ（３７℃に予熱）中２０％（ｖ／ｖ）ヒト血漿または血清を細胞に添加し、３７℃でさらに２０分間インキュベートする。各試料の全ての細胞をヨウ化プロピジウム溶液（１０μｇ／ｍｌ）に添加する。次いで、上清を、２．５μｇ／ｍｌ臭化エチジウムを含有するＰＢＳによって置き換え、５２０ｎｍ励起での蛍光発光を、ＴｅｃａｎＳａｆｉｒｅを使用して６００ｎｍで測定する。パーセンテージ特異的溶解は以下の通り計算される：％特異的溶解＝（蛍光試料－蛍光バックグラウンド）／（蛍光最大溶解－蛍光バックグラウンド）×１００。

モノクローナル抗体によるアポトーシスの誘導および細胞増殖の阻害：
アポトーシスを開始する能力について試験するために、例えば、モノクローナル抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を、ＣＬＤＮ１８．２陽性腫瘍細胞、例えばＳＮＵ－１６、ＤＡＮ－Ｇ、ＫＡＴＯ－ＩＩＩまたはＣＬＤＮ１８．２トランスフェクト腫瘍細胞と３７℃で約２０時間インキュベートすることができる。細胞を収穫し、Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ結合緩衝液（ＢＤｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で洗浄し、ＦＩＴＣまたはＡＰＣ（ＢＤｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とコンジュゲートしたＡｎｎｅｘｉｎＶと暗所中で１５分間インキュベートすることができる。各試料の全ての細胞をＦＡＣＳチューブ中のＰＩ溶液（ＰＢＳ中１０μｇ／ｍｌ）に添加し、フローサイトメトリー（上記）によって直ちに評価することができる。あるいは、モノクローナル抗体による細胞増殖の全体的な阻害を市販のキットで検出することができる。ＤＥＬＦＩＡＣｅｌｌＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎＫｉｔ（Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ、カタログ番号ＡＤ０２００）は、マイクロプレート中での増殖細胞のＤＮＡ合成中の５－ブロモ－２’－デオキシウリジン（ＢｒｄＵ）取り込みの測定に基づく非同位体イムノアッセイである。取り込まれたＢｒｄＵを、ユーロピウム標識モノクローナル抗体を使用して検出する。抗体検出を可能にするために、Ｆｉｘ溶液を使用して、細胞を固定し、ＤＮＡを変性する。未結合抗体を洗い流し、ＤＥＬＦＩＡ誘導物質を添加して、ユーロピウムイオンを標識抗体から溶液中に解離させ、ここでユーロピウムイオンがＤＥＬＦＩＡ誘導物質の構成成分と高度蛍光キレートを形成する。検出において時間分解蛍光測定を利用して測定した蛍光は、各ウェルの細胞におけるＤＮＡ分析と比例する。

前臨床試験
ＣＬＤＮ１８．２に結合するモノクローナル抗体をインビボモデル（例えば、ＣＬＤＮ１８．２を発現する細胞株、例えばＤＡＮ－Ｇ、ＳＮＵ－１６もしくはＫＡＴＯ－ＩＩＩ、またはトランスフェクション後には、例えばＨＥＫ２９３を接種した異種移植腫瘍を保有する免疫欠損マウス）で試験して、ＣＬＤＮ１８．２発現腫瘍細胞の増殖の制御におけるその有効性を決定することもできる。

本明細書に記載される抗体を使用して、ＣＬＤＮ１８．２発現腫瘍細胞を免疫不全マウスまたは他の動物に異種移植した後のインビボ試験を実施することができる。抗体を、腫瘍を有さないマウスに投与し、引き続いて腫瘍細胞を注射して抗体が腫瘍形成または腫瘍関連症状を予防する効果を測定することができる。抗体を、腫瘍を有するマウスに投与して、それぞれの抗体が腫瘍増殖、転移または腫瘍関連症状を低下させる治療有効性を決定することができる。抗体適用を、免疫チェックポイント阻害剤、細胞増殖抑制薬、成長因子阻害剤、細胞周期遮断剤、血管新生阻害剤または他の抗体としての他の物質の適用と組み合わせて、組み合わせの有効性および潜在的な毒性を決定することができる。抗体によって媒介される毒性副作用を分析するために、動物に抗体または対照試薬を接種して、おそらくＣＬＤＮ１８．２抗体療法に関連する症状を徹底的に調査することができる。ＣＬＤＮ１８．２抗体のインビボ適用の可能性のある副作用は、特に、胃を含むＣＬＤＮ１８．２発現組織での毒性を含む。ヒトおよび他の種、例えばマウスにおいてＣＬＤＮ１８．２を認識する抗体は、ヒトにおいてモノクローナルＣＬＤＮ１８．２抗体の適用によって媒介される可能性のある副作用を予測するのに特に有用である。

抗体によって認識されるエピトープのマッピングは、「ＥｐｉｔｏｐｅＭａｐｐｉｎｇＰｒｏｔｏｃｏｌｓ（ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ）ＧｌｅｎｎＥ．ＭｏｒｒｉｓＩＳＢＮ－０８９６０３－３７５－９および「ＥｐｉｔｏｐｅＭａｐｐｉｎｇ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ」ＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈＳｅｒｉｅｓ、２４８ＯｌｗｙｎＭ．Ｒ．Ｗｅｓｔｗｏｏｄ、ＦｒａｎｋＣ．Ｈａｙに詳細に記載されるように実施され得る。

本明細書に記載される化合物および薬剤は、任意の適切な医薬組成物の形態で投与され得る。

「医薬組成物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）」という用語は、好ましくは薬学的に許容される担体、希釈剤および／または賦形剤と一緒に、治療上有効な薬剤を含む製剤に関する。前記医薬組成物は、前記医薬組成物の対象への投与によって、疾患もしくは障害を処置する、予防するまたはその重症度を低下させるのに有用である。医薬組成物はまた、医薬製剤として当技術分野で知られている。

医薬組成物は通常、均一な剤形で提供され、それ自体公知の方法で調製され得る。医薬組成物は、例えば溶液または懸濁液の形態であり得る。

本開示による医薬組成物は、概して、「薬学的有効量（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙｅｆｆｅｃｔｉｖｅａｍｏｕｎｔ）」で、「薬学的に許容される調製物（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙａｃｃｅｐｔａｂｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）」として適用される。

「薬学的に許容される（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」という用語は、医薬組成物の活性構成成分の作用と相互作用しない材料の非毒性を指す。

「薬学的有効量（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙｅｆｆｅｃｔｉｖｅａｍｏｕｎｔ）」または「治療上有効量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙｅｆｆｅｃｔｉｖｅａｍｏｕｎｔ）」という用語は、単独でまたはさらなる用量と一緒に、所望の反応または所望の効果を達成する量を指す。特定の疾患の処置の場合、所望の反応は、好ましくは疾患の経過の阻害に関する。これは、疾患の進行を減速させること、特に疾患の進行を中断するまたは逆転させることを含む。疾患の処置における所望の反応はまた、前記疾患または前記状態の発症の遅延または発症の予防であり得る。本明細書に記載される組成物の有効量は、処置される状態、疾患の重症度、患者の個々のパラメータ（年齢、生理的条件、サイズおよび体重を含む）、処置の持続時間、（存在する場合）付随する治療の種類、具体的な投与経路、および同様の因子に依存する。したがって、本明細書に記載される組成物の投与される用量は、様々なこのようなパラメータに依存し得る。患者における反応が初期用量で不十分である場合、より高用量（または異なる、より局在化された投与経路によって達成される有効に高い用量）が使用され得る。

本開示の医薬組成物は、塩、緩衝剤、保存剤および場合により他の治療剤を含有し得る。一実施形態では、本開示の医薬組成物が、１種または複数の薬学的に許容される担体、希釈剤および／または賦形剤を含む。

本開示の医薬組成物に使用するのに適した保存剤は、限定されないが、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、パラベンおよびチメロサールを含む。

本明細書で使用される「賦形剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）」という用語は、本開示の医薬組成物中に存在し得るが、有効成分ではない物質を指す。賦形剤の例としては、限定されないが、担体、結合剤、希釈剤、潤滑剤、増粘剤、表面活性剤、保存剤、安定剤、乳化剤、緩衝剤、香味剤または着色剤が挙げられる。

「希釈剤（ｄｉｌｕｅｎｔ）」という用語は、希釈化および／または菲薄化剤に関する。さらに、「希釈剤（ｄｉｌｕｅｎｔ）」という用語は、流体、液体もしくは固体懸濁液および／または混合媒体のいずれか１つまたは複数を含む。適切な希釈剤の例としては、エタノール、グリセロールおよび水が挙げられる。

「担体（ｃａｒｒｉｅｒ）」という用語は、医薬組成物の投与を促進、増強または可能にするために活性構成成分が組み合わされる、天然、合成、有機、無機であり得る構成成分を指す。本明細書で使用される担体は、対象への投与に適した、１種または複数の適合性の固体もしくは液体充填剤、希釈剤またはカプセル化物質であり得る。適切な担体は、限定されないが、滅菌水、リンゲル液、乳酸リンゲル液、滅菌塩化ナトリウム溶液、等張生理食塩水、ポリアルキレングリコール、水素化ナフタレンおよび特に、生体適合性ラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマーまたはポリオキシエチレン／ポリオキシ－プロピレンコポリマーを含む。一実施形態では、本開示の医薬組成物が等張生理食塩水を含む。

治療的使用のための薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤は製薬分野で周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．（Ａ．ＲＧｅｎｎａｒｏ編１９８５）に記載されている。

医薬担体、賦形剤または希釈剤は、意図した投与経路および標準的な薬務に関して選択され得る。

一実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物が、静脈内、動脈内、皮下、皮内または筋肉内投与され得る。一定の実施形態では、医薬組成物が局所投与または全身投与用に製剤化される。全身投与は、消化管を通した吸収を伴う経腸投与、または非経口投与を含み得る。本明細書で使用される場合、「非経口投与（ｐａｒｅｎｔｅｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」は、静脈内注射などの、消化管を通した方法以外の任意の方法での投与を指す。好ましい実施形態では、医薬組成物が全身投与用に製剤化される。別の好ましい実施形態では、全身投与が静脈内投与による。組成物は腫瘍またはリンパ節に直接注射され得る。

本明細書で使用される「共投与する（ｃｏ－ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」という用語は、異なる化合物または組成物が同じ患者に投与されるプロセスを意味する。例えば、本明細書に記載される抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤は、一斉に、本質的に同時に、または順次に投与され得る。投与が順次に行われる場合、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が免疫チェックポイント阻害剤の前または後に投与され得る。投与が一斉に行われる場合、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤が同じ組成物内で投与される必要はない。抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤は１回または複数回投与され得、各構成成分の投与の回数は同じであっても異なっていてもよい。さらに、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤が同時に投与される必要はない。

本明細書に記載される薬剤および組成物は、様々な障害、例えば本明細書に記載されるものを処置または予防するために、例えばインビボで患者に投与され得る。好ましい患者は、本明細書に記載される薬剤および組成物を投与することによって矯正または改善することができる障害を有するヒト患者を含む。これは、ＣＬＤＮ１８．２の発現を特徴とする細胞を伴う障害を含む。

例えば、一実施形態では、本明細書に記載される薬剤が、がん疾患、例えばＣＬＤＮ１８．２を発現するがん細胞の存在を特徴とする、本明細書に記載されるようながん疾患を有する患者を処置するために使用され得る。

本発明により記載される医薬組成物および処置方法はまた、本明細書に記載される疾患を予防するために免疫化またはワクチン接種に使用され得る。

本明細書で使用される場合、「説明資料（ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｌｍａｔｅｒｉａｌ）」または「説明書（ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ）」は、本発明の組成物および方法の有用性を伝達するために使用することができる刊行物、記録、図表または任意の他の表現媒体を含む。本発明のキットの説明資料は、例えば、本発明の組成物を含有する容器に添付され得る、または組成物を含有する容器と一緒に出荷され得る。あるいは、説明資料は、説明資料と組成物がレシピエントによって協同的に使用されることを意図して、容器とは別に出荷され得る。

本発明は以下の実施例によってさらに例示されるが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものとして解釈されない。

実施例１
インビボでの抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせの有効性試験
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせがインビボで単一薬剤単独よりも改善した抗腫瘍活性を提供するかどうかを判定するために、マウスＣＬＤＮ１８．２のレンチウイルス形質導入をしたＣＬＳ－１０３細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を使用して、免疫応答性非近交系Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウスにおける皮下移植同系胃癌モデルで、抗ｍＰＤ－１抗体と組み合わせたＩＭＡＢ３６２の抗腫瘍活性を調べた。リツキシマブをＩＭＡＢ３６２のアイソタイプ対照として使用した。

試験抗体
・抗ＣＬＤＮ１８．２抗体：ＩＭＡＢ３６２（ＡｓｔｅｌｌａｓＰｈａｒｍａＩｎｃ．）
・対照抗体：リツキシマブＢＳ静脈内注入［ＫＨＫ］５００ｍｇ（ＫｙｏｗａＨａｋｋｏＫｉｒｉｎＣｏ．，Ｌｔｄ．、カタログ番号２２９００ＡＭＸ００９７１０００）
・抗ｍＰＤ－１抗体：ＩｎＶｉｖｏＭＡｂ抗マウスＰＤ－１、クローンＲＭＰ１－１４（ＢｉｏＸＣｅｌｌ、カタログ番号ＢＥ０１４６）
・アイソタイプ対照抗体：ＩｎＶｉｖｏＭＡｂラットＩｇＧ２ａアイソタイプ対照、抗トリニトロフェノール、クローン２Ａ３（ＢｉｏＸＣｅｌｌ、カタログ番号ＢＥ００８９）
ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２胃がんマウスモデル

レンチウイルス形質導入マウスＣＬＤＮ１８．２発現腫瘍細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を、２×１０^６細胞／マウスで、雌Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウス（１０週齢）の右側腹部に皮下移植した。移植２日後に測定した腫瘍体積に基づいて、マウスを４つの群（ｎ＝１２／群）に無作為化した。無作為化の日を０日目として定義した。ＩＭＡＢ３６２または対照抗体リツキシマブを８００μｇ／マウスで投与した。抗ｍＰＤ－１抗体またはアイソタイプ対照抗体を１００μｇ／マウスで投与した。全ての抗体を、０日目に開始して、１週間に２回、腹腔内注射によって投与した。腫瘍を１週間に２回測定した。試験エンドポイントを１４日目として定義した。長さ×幅×幅×０．５によって腫瘍体積を決定した。以下に記載される方程式を使用して、各群の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ［％］）を計算した。
ＴＧＩ［％］＝１００×（１－各群の平均腫瘍体積の増加^※÷対照群の平均腫瘍体積の増加^※）
^※：腫瘍体積の増加［ｍｍ^３］＝各群の最後の測定の平均腫瘍体積－無作為化時の平均腫瘍体積
＃、＃＃：ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、各単一薬剤群と比較（スチューデントのｔ検定）。

図１に見られるように、マウスＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２腫瘍試験では、ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－１抗体の併用処置が、単一薬剤対照よりもはるかに大きな程度に腫瘍増殖を阻害した。１４日目に、８００μｇのＩＭＡＢ３６２または１００μｇの抗ｍＰＤ－１抗体による処置がそれぞれ５０％または６０％ＴＧＩをもたらした一方、８００μｇのＩＭＡＢ３６２＋１００μｇの抗ｍＰＤ－１抗体を含む併用処置は９１％ＴＧＩをもたらした。１４日目に、併用群の平均腫瘍体積は、各単一薬剤群と比較して有意に小さかった（スチューデントのｔ検定）。１２匹のマウス／群の各々についての個々のＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２腫瘍体積を全ての処置群について示す（図２）。全ての処置マウスについての個々の腫瘍増殖のこのスパイダープロット分析は、ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－１抗体の組み合わせで処置したマウスにおいて腫瘍増殖の著しい遅延および／または阻害を示した。

実施例２
インビボでの抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせの長期有効性試験
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせが、長期間で、インビボで単一薬剤単独よりも抗腫瘍活性を改善するかどうかを判定するために、マウスＣＬＤＮ１８．２のレンチウイルス形質導入をしたＣＬＳ－１０３細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を使用して、免疫応答性非近交系Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウスにおける皮下移植同系胃癌モデルで、抗ｍＰＤ－１抗体と組み合わせたＩＭＡＢ３６２の抗腫瘍活性を２８日目まで調べた。リツキシマブをＩＭＡＢ３６２のアイソタイプ対照として使用した。

レンチウイルス形質導入マウスＣＬＤＮ１８．２発現腫瘍細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を、２×１０^６細胞／マウスで、雌Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウス（１１週齢）の右側腹部に皮下移植した。移植２日後に測定した腫瘍体積に基づいて、マウスを４つの群（ｎ＝１２／群）に無作為化した。無作為化の日を０日目として定義した。ＩＭＡＢ３６２または対照抗体リツキシマブを８００μｇ／マウスで投与した。抗ｍＰＤ－１抗体またはアイソタイプ対照抗体を１００μｇ／マウスで投与した。全ての抗体を、０日目に開始して、１週間に２回、腹腔内注射によって投与した。腫瘍を１週間に２回測定した。試験エンドポイントを２８日目として定義した。長さ×幅×幅×０．５によって腫瘍体積を決定した。リツキシマブ／アイソタイプ処置群、ならびに抗ｍＰＤ－１抗体単一薬剤群の１２匹のマウスのうちの１匹を、２０００ｍｍ^３を超える腫瘍サイズのために屠殺したので、２１日目まで平均腫瘍体積を計算した。以下に記載される方程式を使用して、２１日目まで得られた測定値に基づいて、各群の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ［％］）を計算した。完全退縮（ＣＲ）を、ゼロに退縮した個体の腫瘍体積として２８日目まで決定した。
ＴＧＩ［％］＝１００×（１－各群の平均腫瘍体積の増加^＃÷対照群の平均腫瘍体積の増加^＃）
^＃：平均腫瘍体積の増加［ｍｍ^３］＝各群の２１日目の測定の平均腫瘍体積－無作為化時（０日目）の平均腫瘍体積
^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、各単一薬剤群と比較（スチューデントのｔ検定）。

結果
このマウスＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２腫瘍試験では、抗ｍＰＤ－１抗体と組み合わせたＩＭＡＢ３６２が、２８日目までのＣＲの数によって決定される長期抗腫瘍効果を相乗的に改善した。図３に示されるように、１２匹のマウス／群の各々についての個々の腫瘍増殖およびＣＲマウスの数を全ての処置群について示す。２８日目に、８００μｇのＩＭＡＢ３６２または１００μｇの抗ｍＰＤ－１抗体による処置はそれぞれ１２匹のマウスの群中２例または１例のＣＲをもたらした一方、８００μｇのＩＭＡＢ３６２＋１００μｇの抗ｍＰＤ－１抗体を含む併用処置は１２匹のマウスの群中６例のＣＲをもたらした。本発明者らの結果は、相乗的に単一薬剤群と比較して増加したＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－１抗体の組み合わせの処置群のＣＲを有するマウスの数を示した。図４に示されるように、２１日目に、８００μｇのＩＭＡＢ３６２または１００μｇの抗ｍＰＤ－１抗体による処置はそれぞれ４０％ＴＧＩをもたらした、または腫瘍増殖阻害を全くもたらさなかった一方、８００μｇのＩＭＡＢ３６２＋１００μｇの抗ｍＰＤ－１抗体を含む併用処置は８７％ＴＧＩをもたらした。併用群の平均腫瘍体積は、各単一薬剤群と比較して有意に小さく、ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－１抗体が相乗的に作用することを実証している。

実施例３
インビボでの抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせの有効性試験
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせがインビボで単一薬剤単独よりも抗腫瘍活性を改善するかどうかを判定するために、マウスＣＬＤＮ１８．２のレンチウイルス形質導入をしたＣＬＳ－１０３細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を使用して、免疫応答性非近交系Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウスにおける皮下移植同系胃癌モデルで、抗ｍＣＴＬＡ－４抗体と組み合わせたＩＭＡＢ３６２の抗腫瘍活性を調べた。リツキシマブをＩＭＡＢ３６２のアイソタイプ対照として使用した。

試験抗体
・抗ＣＬＤＮ１８．２抗体：ＩＭＡＢ３６２（ＡｓｔｅｌｌａｓＰｈａｒｍａＩｎｃ．）
・対照抗体：リツキシマブＢＳ静脈内注入［ＫＨＫ］５００ｍｇ（ＫｙｏｗａＨａｋｋｏＫｉｒｉｎＣｏ．，Ｌｔｄ．、カタログ番号２２９００ＡＭＸ００９７１０００）
・抗ｍＣＴＬＡ－４抗体：ＩｎＶｉｖｏＭＡｂ抗マウスＣＴＬＡ－４、クローン９Ｄ９（ＢｉｏＸＣｅｌｌ、カタログ番号ＢＥ０１６４）
・アイソタイプ対照抗体：ＩｎＶｉｖｏＭＡｂマウスＩｇＧ２ｂアイソタイプ対照、未知の特異性、クローンＭＰＣ－１１（ＢｉｏＸＣｅｌｌ、カタログ番号ＢＥ００８６）
ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２胃がんマウスモデル

レンチウイルス形質導入マウスＣＬＤＮ１８．２発現腫瘍細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を、２×１０^６細胞／マウスで、雌Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウス（１１週齢）の右側腹部に皮下移植した。移植２日後に測定した腫瘍体積に基づいて、マウスを４つの群（ｎ＝１２／群）に無作為化した。無作為化の日を０日目として定義した。ＩＭＡＢ３６２または対照抗体リツキシマブを８００μｇ／マウスで投与した。抗ｍＣＴＬＡ－４抗体またはアイソタイプ対照抗体を３００μｇ／マウスで投与した。全ての抗体を、０日目に開始して、１週間に２回、腹腔内注射によって投与した。腫瘍を１週間に２回測定した。試験エンドポイントを１４日目として定義した。長さ×幅×幅×０．５によって腫瘍体積を決定した。以下に記載される方程式を使用して、各群の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ［％］）または腫瘍退縮率（ＴＲＲ［％］）を計算した。
ＴＧＩ［％］＝１００×（１－各群の平均腫瘍体積の増加^＃÷対照群の平均腫瘍体積の増加^＃）
^＃：平均腫瘍体積の増加［ｍｍ^３］＝各群の１４日目の測定の平均腫瘍体積－無作為化時（０日目）の平均腫瘍体積
ＴＲＲ［％］＝１００×（１－各群の１４日目の測定の平均腫瘍体積÷各群の無作為化時の平均腫瘍体積）
^＊：ｐ＜０．０５、各単一薬剤群と比較（スチューデントのｔ検定）。

結果
図５に見られるように、マウスＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２腫瘍試験で、ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＣＴＬＡ－４抗体の併用処置は、単一薬剤群よりも大きな程度に腫瘍増殖を阻害した。１４日目に、８００μｇのＩＭＡＢ３６２または３００μｇの抗ｍＣＴＬＡ－４抗体による処置はそれぞれ７２％または８７％ＴＧＩをもたらした一方、８００μｇのＩＭＡＢ３６２＋３００μｇの抗ｍＣＴＬＡ－４抗体を含む併用処置は腫瘍を阻害しただけでなく、腫瘍を３％ＴＲＲまで退縮した。１２匹のマウス／群の各々についての個々のＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２腫瘍体積を全ての処置群について示す（図６）。ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＣＴＬＡ－４抗体の組み合わせで処置したマウスでは、全ての処置マウスについての個々の腫瘍増殖が腫瘍増殖の阻害または退縮さえ示した。

実施例４
インビボでの抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせの有効性試験
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせがインビボで単一薬剤単独よりも抗腫瘍活性を改善するかどうかを判定するために、マウスＣＬＤＮ１８．２のレンチウイルス形質導入をしたＣＬＳ－１０３細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を使用して、免疫応答性非近交系Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウスにおける皮下移植同系胃癌モデルで、抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体と組み合わせたＩＭＡＢ３６２の抗腫瘍活性を調べた。リツキシマブをＩＭＡＢ３６２のアイソタイプ対照として使用した。

試験抗体
・抗ＣＬＤＮ１８．２抗体：ＩＭＡＢ３６２（ＡｓｔｅｌｌａｓＰｈａｒｍａＩｎｃ．）
・対照抗体：リツキシマブＢＳ静脈内注入［ＫＨＫ］５００ｍｇ（ＫｙｏｗａＨａｋｋｏＫｉｒｉｎＣｏ．，Ｌｔｄ．、カタログ番号２２９００ＡＭＸ００９７１０００）
・抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体：ＩｎＶｉｖｏＭＡｂ抗マウスＰＤ－Ｌ１、クローン１０Ｆ．９Ｇ２（ＢｉｏＸＣｅｌｌ、カタログ番号ＢＥ０１０１）
・アイソタイプ対照抗体：ＩｎＶｉｖｏＭＡｂラットＩｇＧ２ｂアイソタイプ対照、抗キーホールリンペットヘモシアニン、クローンＬＴＦ－２（ＢｉｏＸＣｅｌｌ、カタログ番号ＢＥ００９０）
ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２胃がんマウスモデル

レンチウイルス形質導入マウスＣＬＤＮ１８．２発現腫瘍細胞（ＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２）を、２×１０^６細胞／マウスで、雌Ｃｒｌ：ＮＭＲＩ（Ｈａｎ）マウス（１１週齢）の右側腹部に皮下移植した。移植２日後に測定した腫瘍体積に基づいて、マウスを４つの群（ｎ＝１２／群）に無作為化した。リツキシマブ／アイソタイプ対照群は、１１日目に起こった１匹の死亡のために、１２匹のマウスのうちの１１匹からのデータからなっていた。無作為化の日を０日目として定義した。ＩＭＡＢ３６２または対照抗体リツキシマブを８００μｇ／マウスで投与した。抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体またはアイソタイプ対照抗体を３００μｇ／マウスで投与した。全ての抗体を、０日目に開始して、１週間に２回、腹腔内注射によって投与した。腫瘍を１週間に２回測定した。試験エンドポイントを１４日目として定義した。長さ×幅×幅×０．５によって腫瘍体積を決定した。以下に記載される方程式を使用して、各群の腫瘍増殖阻害（ＴＧＩ［％］）または腫瘍退縮率（ＴＲＲ［％］）を計算した。
ＴＧＩ［％］＝１００×（１－各群の平均腫瘍体積の増加^＃÷対照群の平均腫瘍体積の増加^＃）
^＃：平均腫瘍体積の増加［ｍｍ^３］＝各群の１４日目の測定の平均腫瘍体積－無作為化時（０日目）の平均腫瘍体積
ＴＲＲ［％］＝１００×（１－各群の１４日目の測定の平均腫瘍体積÷各群の無作為化時の平均腫瘍体積）
^＊、^＊＊：ｐ＜０．０５、ｐ＜０．０１、各単一薬剤群と比較（スチューデントのｔ検定）。

結果
図７中、マウスＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２腫瘍試験では、ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体の併用処置が、単一薬剤群よりもはるかに大きな程度に腫瘍増殖を阻害した。１４日目に、８００μｇのＩＭＡＢ３６２または３００μｇの抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体による処置はそれぞれ６０％または６２％ＴＧＩをもたらした一方、８００μｇのＩＭＡＢ３６２＋３００μｇの抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体を含む併用処置は腫瘍を阻害しただけでなく、１３％ＴＲＲまで腫瘍を退縮した。１４日目に、併用群の平均腫瘍体積は、各単一薬剤群と比較して有意に小さく、ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体が相乗的に作用することを実証している。各マウス／群の個々のＣＬＳ－１０３ＬＶＴ－マウスＣＬＤＮ１８．２腫瘍体積を全ての処置群について示す（図８）。ＩＭＡＢ３６２と抗ｍＰＤ－Ｌ１抗体の組み合わせで処置したマウスでは、全ての処置マウスについての個々の腫瘍増殖が、相乗的に腫瘍増殖の阻害または退縮さえ示した。

Claims

患者のがんを処置または予防する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を前記患者に投与するステップを含む方法。
がんを有する患者において腫瘍の増殖を阻害する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を前記患者に投与するステップを含む方法。
がんを有する患者においてがん細胞に対する抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導する方法であって、抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を前記患者に投与するステップを含む方法。
前記免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１阻害剤およびＰＤ－Ｌ１阻害剤から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
前記免疫チェックポイント阻害剤が、抗ＰＤ－１抗体および抗ＰＤ－Ｌ１抗体から選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
前記免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ－１抗体である、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＰＤ－１抗体が、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ；ＢＭＳ－９３６５５８）、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ；ＭＫ－３４７５）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１）、セミプリマブ（ＬＩＢＴＡＹＯ、ＲＥＧＮ２８１０）、スパルタリズマブ（ＰＤＲ００１）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ－５１４）、ドスタルリマブ（ＴＳＲ－０４２）、セトレリマブ（ＪＮＪ６３７２３２８３）、トリパリマブ（ＪＳ００１）、ＡＭＰ－２２４（ＧＳＫ－２６６１３８０）、ＰＦ－０６８０１５９１、チスレリズマブ（ＢＧＢ－Ａ３１７）、ＡＢＢＶ－１８１、ＢＩ７５４０９１、またはＳＨＲ－１２１０である、請求項６に記載の方法。
前記免疫チェックポイント阻害剤が抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＰＤ－Ｌ１抗体が、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ；ＲＧ７４４６；ＭＰＤＬ３２８０Ａ；Ｒ０５５４１２６７）、デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６）、ＢＭＳ－９３６５５９、アベルマブ（ｂａｖｅｎｃｉｏ）、ロダポリマブ（ＬＹ３３０００５４）、ＣＸ－０７２（Ｐｒｏｃｌａｉｍ－ＣＸ－０７２）、ＦＡＺ０５３、ＫＮ０３５、またはＭＤＸ－１１０５である、請求項８に記載の方法。
前記免疫チェックポイント阻害剤がＣＴＬＡ－４阻害剤である、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
前記免疫チェックポイント阻害剤が抗ＣＴＬＡ－４抗体である、請求項１～３および１０のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＴＬＡ－４抗体が、イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ；ＢｒｉｓｔｏｌＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）、トレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、トレビリズマブ、ＡＧＥＮ－１８８４（Ａｇｅｎｕｓ）またはＡＴＯＲ－１０１５である、請求項１１に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、ＣＬＤＮ１８．２の第１の細胞外ループに結合する、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）媒介溶解、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）媒介溶解、アポトーシスの誘導および増殖の阻害の１つまたは複数によって、細胞死滅を媒介する、請求項１～１３のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、
（ｉ）受託番号ＤＳＭＡＣＣ２７３７、ＤＳＭＡＣＣ２７３８、ＤＳＭＡＣＣ２７３９、ＤＳＭＡＣＣ２７４０、ＤＳＭＡＣＣ２７４１、ＤＳＭＡＣＣ２７４２、ＤＳＭＡＣＣ２７４３、ＤＳＭＡＣＣ２７４５、ＤＳＭＡＣＣ２７４６、ＤＳＭＡＣＣ２７４７、ＤＳＭＡＣＣ２７４８、ＤＳＭＡＣＣ２８０８、ＤＳＭＡＣＣ２８０９、またはＤＳＭＡＣＣ２８１０で寄託されたクローンによって産生される、および／またはから得られる抗体、
（ｉｉ）（ｉ）の抗体のキメラ化形態またはヒト化形態である抗体、
（ｉｉｉ）（ｉ）の抗体の特異性を有する抗体、ならびに、
（ｉｖ）（ｉ）の抗体の抗原結合部分または抗原結合部位、特に可変領域を含み、好ましくは（ｉ）の抗体の特異性を有する抗体、
からなる群から選択される抗体である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号１７に示される配列の４５～５２位の配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１７に示される配列の７０～７７位の配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号１７に示される配列の１１６～１２６位の配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号２４に示される配列の４７～５８位の配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２４に示される配列の７６～７８位の配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および配列番号２４に示される配列の１１５～１２３位の配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号３２に示される配列もしくはその機能的バリアント、または前記アミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖可変領域を含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号３９に示される配列もしくはその機能的バリアント、または前記アミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号１３もしくは５２に示される配列、もしくはその機能的バリアント、または前記アミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖定常領域を含む、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号１７もしくは５１に示される配列、もしくはその機能的バリアント、または前記アミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む重鎖を含む、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体が、配列番号２４に示される配列もしくはその機能的バリアント、または前記アミノ酸配列もしくは機能的バリアントの断片を含む軽鎖を含む、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
最大１０００ｍｇ／ｍ^２の用量で前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を投与するステップを含む、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
繰り返し３００～６００ｍｇ／ｍ^２の用量で前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を投与するステップを含む、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。
前記がんがＣＬＤＮ１８．２陽性である、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記がんが、腺癌、特に進行腺癌である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。
前記がんが、胃のがん、食道、特に下部食道のがん、食道胃接合部のがんおよび胃食道がんからなる群から選択される、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。
ＣＬＤＮ１８．２が、配列番号１によるアミノ酸配列を有する、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。
抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と免疫チェックポイント阻害剤を含む医学調製物。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体を含む第１の容器と前記免疫チェックポイント阻害剤を含む第２の容器を含む、請求項２８に記載の医学調製物。
がんを処置するために前記調製物を使用するための印刷された説明書をさらに含む、請求項２８または２９に記載の医学調製物。
前記抗ＣＬＤＮ１８．２抗体と前記免疫チェックポイント阻害剤を含む組成物である、請求項２８に記載の医学調製物。