JP2021512949A

JP2021512949A - Ｆａｐ阻害物質

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Publication number: JP2021512949A
Application number: JP2020563822A
Authority: JP
Inventors: ウーヴェ・ハーベルコルン; アナスタシア・ロクテフ; トーマス・リントナー; ヴァルター・ミアー; フレデリク・ギーゼル; クレメンス・クラトホヴィル
Original assignee: ウニベルジテートハイデルベルク
Priority date: 2018-02-06
Filing date: 2019-02-06
Publication date: 2021-05-20
Also published as: US20230112012A1; AU2019219057A1; CA3088326A1; EP3749663A1; CL2020002026A1; CO2020009625A2; IL276594B2; RU2020126278A; IL276594A; CN111699181A; MX2020008271A; KR20200123148A; US20210038749A1; BR112020015985A2; WO2019154886A1; IL276594B1; AU2019219057B2; SG11202007180QA; RU2020126278A3; AU2023201120A1

Abstract

本発明は、線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患の診断または処置における、化合物、該化合物を含むか、または該化合物からなる医薬組成物、該化合物または医薬組成物を含むか、またはそれらからなるキット、および該化合物または医薬組成物の使用に関する。

Description

腫瘍の増殖や拡散は、癌細胞だけで決定されるのでなく、間質なる用語に分類される、悪性病変における非悪性成分によっても決定される。間質は、乳癌、結腸癌、膵臓癌などの、線維形成反応を伴う腫瘍では、腫瘍量の９０％以上を占めることがある。特に、癌関連線維芽細胞(ＣＡＦ)と称される線維芽細胞の亜集団は、腫瘍の増殖、転移および進行に関与していることが知られている。したがって、これらの細胞は、診断および抗腫瘍療法のための魅力的な標的である。

ＣＡＦの際立った特徴は、ジペプチジルペプチダーゼ４(ＤＰＰ４)ファミリーに属するII型膜結合糖タンパク質であるセプラーゼまたは線維芽細胞活性化タンパク質α(ＦＡＰ−α)の発現である。ＦＡＰ−αは、ジペプチジルペプチダーゼ活性とエンドペプチダーゼ活性の両方を有する。エンドペプチダーゼ活性は、ＦＡＰ−αをＤＰＰ４ファミリーの他のメンバーと区別する。これまでに同定されたエンドペプチダーゼ活性の基質は、変性I型コラーゲン、α1−アンチトリプシンおよびいくつかの神経ペプチドである。ＦＡＰ−αは、胚発生期間や組織モデリングにおける正常な発生過程に役割を果たしている。これは、成人の正常組織では発現していないか、または極めて少ないレベルでしか発現していない。しかしながら、創傷治癒、関節炎、アテローム硬化性プラーク、線維症および９０％を超える上皮癌では、高く発現している。

多くの上皮腫瘍のＣＡＦにＦＡＰ−αが出現し、過剰発現が癌患者の予後悪化と関連している事実から、ＦＡＰ−α活性は癌の発生、および癌細胞の転移や拡散にも関与しているという仮説が立てられている。したがって、この酵素を画像化や内部放射線療法の標的にすることは、悪性腫瘍の検出および処置のための有望な戦略と考えることができる。本発明者らは、ＦＡＰ-α特異的な阻害物質に基づいた低分子を開発し、動物モデルおよび腫瘍患者において、特異的な取り込み、迅速なインターナリゼーション(内在化)および腫瘍の画像化の成功を示すことができた。一般的に使用されている放射性追跡子(トレーサー)である^１８Ｆ−フルオロデオキシグルコース(^１８Ｆ−ＦＤＧ)との比較により、局所進行性肺腺癌患者においてこの新しいＦＡＰ−αリガンドが明白に優位であることが明らかになった。したがって、本発明はとりわけ、(ｉ)より小さな原発性腫瘍の検出、それによる早期診断の可能性、(ｉｉ)より小さな転移の検出、それによる腫瘍の病期のより良い診断、(ｉｉｉ)腫瘍組織の完全な外科切除を容易にする正確な術中指導、(ｉｖ)炎症と腫瘍組織のより良い鑑別、(ｖ)腫瘍患者のより正確な病期分類、(ｖｉ)抗腫瘍療法後の腫瘍病変のより良い経過観察、(ｖｉｉ)診断および治療のためのセラノスティック(特定の治療を採用する診断テストに関する)剤として本発明の分子を使用する機会、を提供する。本発明の分子はさらに、慢性炎症、アテローム性動脈硬化症、線維症、組織リモデリングおよびケロイド障害などの非悪性疾患の診断および処置にも使用できる。

第一の態様において、本発明は、式(Ｉ)：

［式中、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺの中の少なくとも三つが存在する条件で、独立して存在するか、または不存在であり；
Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、独立してＯ、ＣＨ_２、ＮＲ^４、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＲ^４、ＨＣＲ^４およびＲ^４ＣＲ^４からなる群から選択され、ただし二つのＯは互いに直接隣接しない；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、Ｓ−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^３は、−Ｈ、−ＣＮ、−Ｂ(ＯＨ)_２、−Ｃ(Ｏ)−アルキル、−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｓ(Ｏ)_２−アリール、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＰＯ_３Ｈ_２および５−テトラゾリルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、−Ｈ、−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｓ−Ｃ_１−６−アルキル、アリールおよび−Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択され、各−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨ、オキソ、ハロから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよく、また、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹまたはＺに結合されていてよく；
Ｒ^５は、−Ｈ、ハロおよびＣ_１−６−アルキルからなる群から選択され；

Ｒ^６およびＲ^７は、独立して-Ｈ、

からなる群から選択され、ただしＲ^６およびＲ^７は同時にＨではない；
ここで、Ｌはリンカーであり；
Ｄ、Ａ、ＥおよびＢは独立して存在するか、または不存在であり、好ましくは、少なくともＡ、ＥおよびＢは存在し、ここで、存在する場合：
Ｄはリンカーであり；
Ａは、ＮＲ^４、Ｏ、ＳおよびＣＨ_２からなる群から選択され；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキル、

からなる群から選択され；
ここで、ｉは１、２または３であり；
ここで、ｊは１、２または３であり；
ここで、ｋは１、２または３であり；
ここで、ｍは１、２または３であり；

ＡおよびＥは一緒になって、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される基を形成し、ここで、ＡおよびＥは、単環式、ニ環式および多環式であってもよく、好ましくは単環式であり；各ＡおよびＥは、−Ｈ、−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｓ−Ｃ_１−６−アルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルケニル、アルキニル、アリールおよび−Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜４個の残基によって置換されていてよく、各−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨ、オキソおよびハロから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよく、また、Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅまたは

に結合されていてよく；
Ｂは、Ｓ、ＮＲ^４、ＮＲ^４−Ｏ、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環からなる群から選択され、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されており；そして、
R⁸は、放射性部分、キレート剤、蛍光色素、造影剤およびそれらの組み合わせからなる群から選択され；

は、１−ナフチル基部分または５〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、ここに該ヘテロ環はＮ原子とＸとの間に２個の環原子が存在し；また、該ヘテロ環はＯ、ＮおよびＳから選択される１、２または３個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく；そして、ＸはＣ原子である］
で示される化合物、またはその薬学的に許容できる互変異性体、ラセミ体、水和物、溶媒和物もしくは塩、を提供する。

第２の態様において、本発明は、少なくとも一つの第１の態様の化合物、および製薬的に許容できる担体および／または添加物を含むか、またはそれらからなる医薬組成物に関する。

第３の態様において、本発明は、動物またはヒトの対象における線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患の診断または処置に使用するための、第１の態様の化合物または第２の態様の医薬組成物に関する。

第４の態様において、本発明は、第１の態様の化合物もしくは第２の態様の医薬組成物および疾患の診断のためのインストラクションを含むか、またはそれらからなるキットに関する。

以下では、本明細書に含まれる図の内容について説明する。なお、この文脈においては、上記および／または以下の本発明の詳細な説明を参照すること。

^１２５Ｉ−ＦＡＰＩ−０１および ^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０２のインビトロ特性評価Ａ.６０分間のインキュベーション後の、放射性標識ＦＡＰＩ−０１およびＦＡＰＩ−０２のさまざまなヒト癌細胞株ならびにヒトＦＡＰ−αでトランスフェクトされた細胞株(ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ)、マウスのＦＡＰ−αでトランスフェクトされた細胞株(ＨＥＫ−ｍｕＦＡＰ)およびヒトＣＤ２６でトランスフェクトされた細胞株(ＨＥＫ−ＣＤ２６)への結合。Ｂ.１０分〜２４時間のインキュベーション後の放射性標識ＦＡＰＩ−０１およびＦＡＰＩ−０２のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への内在化。内在化された割合はそれぞれ灰色と黒色で示し；細胞外結合画分は白色バーで示している。Ｃ.濃度を増加させた非標識ＦＡＰＩ−０１およびＬｕ−ＦＡＰＩ−０２を添加した後の放射性標識ＦＡＰＩ−０１およびＦＡＰＩ−０２のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への競合結合。Ｄ.ＦＡＰＩ−０２のＦＡＰ−α陽性細胞株およびＦＡＰ−α陰性細胞株への内在化。青：ＤＡＰＩ；緑：ＦＡＰＩ−０２−Ａｔｔｏ４８８。Ｅ＋Ｆ.ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞を放射性標識化合物と１時間インキュベートした後、化合物を含まない培地で１〜２４時間インキュベートした後のＦＡＰＩ−０１およびＦＡＰＩ−０２の流出動態。すべての値は、１００万細胞に正規化した総適用量のパーセンテージ(％ＩＤ／１ｍｉｏ細胞)で示している。

ＦＡＰＩ誘導体の結合特異性および相対的な内在化率。Ａ−Ｃ.ＦＡＰＩ−０２(１００％と定義)に関してのＦＡＰＩ−０３〜ＦＡＰＩ−１５の結合率及び内在化率。１時間、４時間および２４時間のインキュベーション後の内在化率を灰色で示し；細胞外結合画分を白色バーで示している。D.６０分間のインキュベーション後のマウスのＦＡＰ−αおよびヒトＣＤ２６を発現するＨＥＫ細胞への選択されたＦＡＰＩ誘導体の結合。右側：ｍｕＦＡＰとＣＤ２６の結合率。Ｅ.濃度を増加させた非標識化合物を添加した後の選択されたＦＡＰＩ誘導体のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への競合結合。

ヒトＦＡＰ陽性(ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ)および陰性(Ｃａｐａｎ−２、ＳＫ−ＬＭＳ−１)腫瘍異種移植担持マウスにおけるＦＡＰＩ−０２および−０４のイメージング。Ａ＋Ｃ、Ｅ＋Ｇ.小動物ＰＥＴイメージングは、^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２および−０４(それぞれ１０ＭＢｑ)４ｎｍｏｌを静脈内投与後に示された時刻で行った。放射性追跡子は非癌性組織には蓄積されないが、腫瘍内で急速に濃縮される(赤い矢印で示される)。さらに、腎臓および膀胱を介した急速な排出が見られる。Ｂ＋Ｄ、Ｆ＋Ｈ.ＰＥＴ画像の定量化は、心血管系からの６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２および−０４の固体クリアランスならびに腫瘍への一定の取り込みを証明している。

インビボでの結合特異性を分析するためのブロッキング実験Ａ＋Ｄ.非標識化合物３０ｎｍｏｌをＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスに共同投与することによる^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２および−０４の腫瘍蓄積のブロッキング。Ｂ＋Ｃ、Ｅ＋Ｆ.競合物質として非標識化合物を使用する場合と使用しない場合の静脈内投与後の選択された臓器における^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２および−０４の時間放射活性曲線(time activity curve)。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持ヌードマウスにおける^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０２および−０４の臓器分布Ａ−Ｃ.^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０２および−０４の生体内分布は、１ＭＢｑをヒトＦＡＰ陽性のＨＴ−１０８０腫瘍異種移植担持マウスに静脈内投与した後、指示された時刻でエクスビボで測定し；各時点でｎ＝３。記載された値は、組織１グラムあたりの投与量に対するパーセンテージ(％ＩＤ／ｇ)として示している。放射性追跡子がＦＡＰ発現腫瘍内に蓄積することを示し、最大の濃縮は１時間後にＦＡＰＩ−０２(４.５％ＩＤ／ｇ)で、２時間後にＦＡＰＩ−０４(５.４％ＩＤ／ｇ)でを示している。D-F.^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０２および−０４の静脈内投与１時間後、４時間後および２４時間後の腫瘍対正常組織の比。

癌患者におけるＦＡＰＩ−０２のＰＥＴ／ＣＴイメージング６Ａ−Ｃ.転移性乳癌に罹患している患者のＰＥＴ／ＣＴスキャンの最大強度予測(ＭＩＰ)。Ｄ.^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２の転移性乳癌患者への静脈内投与１０分後、１時間後、３時間後の最大組織取り込み。

癌患者におけるＦＡＰＩ−０２のＰＥＴ／ＣＴイメージング膵臓癌、非小細胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)、食道癌、直腸癌患者における^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２投与１時間後のＰＥＴ／ＣＴスキャンのＭＩＰ。

癌患者におけるＦＡＰＩ−０２のＰＥＴ／ＣＴイメージング鼻咽頭および喉頭癌患者における^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２投与１時間後のＰＥＴ／ＣＴスキャンのＭＩＰ。

癌患者におけるＦＡＰＩ−０２のＰＥＴ／ＣＴイメージング９Ａ＋Ｂ.１８Ｆ−ＦＤＧおよび６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２を局所進行性肺腺癌患者に投与して１時間後の全身ＰＥＴ／ＣＴイメージング(ＭＩＰ)。Ｃ＋Ｄ.肺腺癌患者の^１８Ｆ−ＦＤＧおよび^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２投与１時間後の経軸写真。ＦＡＰＩ−０２はＦＡＰ−α発現組織に選択的に蓄積され、^１８Ｆ−ＦＤＧと比較して悪性病変への有意に高い取り込みを示している。

癌患者におけるＦＡＰＩ−０４のＰＥＴ／ＣＴイメージング１０.転移性乳癌患者の^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０４投与１０分後、１時間後、３時間後のＰＥＴ／ＣＴスキャンの最大値投影(ＭＩＰ)。

シグマ癌、下咽頭癌、神経内分泌腫瘍、胆管癌、卵巣癌および小腸癌患者における^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０４投与１時間後のＰＥＴ／ＣＴスキャンのＭＩＰ。

肺癌患者における^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０４投与１時間後のＰＥＴ／ＣＴスキャンのＭＩＰ。

発癌性くる病患者における^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０４投与１時間後のＰＥＴ／ＣＴスキャンのＭＩＰ。

転移性前立腺癌患者１名の比較画像診断。放射性標識ＤＯＴＡＴＡＴＯＣ、ＰＳＭＡおよびＦＡＰＩ−０４適用１時間後のＰＥＴ／ＣＴスキャンのＭＩＰ。

膵臓癌患者における動的な^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０４のＰＥＴ／ＣＴスキャンの最大強度投影(ＭＩＰ)および時間放射活性曲線。

ＦＡＰ発現ＨＴ−１０８０細胞上で１、４および２４時間インキュベーションした後のＬｕ−１７７標識ＦＡＰＩ誘導体のＦＡＰＩ−０４(１００％に設定)と比較した相対的な結合率；ｎ＝３。

濃度を増加させた非標識化合物(１０^−１０〜１０^−５Ｍ、６０分間インキュベーション、ｎ＝３)を添加した後の選択されたＦＡＰＩ誘導体のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への競合結合。

６０分間のインキュベーション後のＦＡＰＩ誘導体のマウスＦＡＰおよびヒトＣＤ２６を発現するＨＥＫ細胞への結合、ｎ＝３。値は、１ｍｉｏ細胞あたりの適用量(％ＩＤ)に対するパーセンテージとして示している。

放射性追跡子静脈内投与１時間後、４時間後２４時間後のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植における選択されたＦＡＰＩ誘導体の生体内分布、ｎ＝３。値は、組織の１グラムあたりの投与量に対するパーセンテージとして示している(％ＩＤ／ｇ)。

放射性追跡子静脈内投与１時間後、４時間後および２４時間後のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植における選択されたＦＡＰＩ誘導体の腫瘍対血液の比、ｎ＝３。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスにおけるＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−２１およびＦＡＰＩ−４６のＰＥＴイメージング；ｎ＝１。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスにおける選択されたＦＡＰＩ誘導体の最大標準化取り込み値(ＳＵＶ)；ｎ＝１。

癌患者におけるＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−０２およびＦＡＰＩ−０４の最大(ＳＵＶｍａｘ、図２３Ａ)および平均(ＳＵＶｍｅａｎ、図２３Ｂ)標準化取り込み値；ｎ＝２５。

９日以内にＦＤＧ−ＰＥＴおよびＦＡＰＩ−ＰＥＴイメージングを受けた６種類の異なる腫瘍実体を有する患者６人の交差比較(Intra-individual comparison)。

注射1時間後(１ｈ p.i.)の癌性腹膜炎(Ａ)、心筋炎(Ｂ)および股関節症(hip joint arthrosis)患者におけるＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−０４ＰＥＴ／ＣＴイメージング。

注射１時間後(１ｈ p.i.)の癌患者におけるＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−２１のＰＥＴ／ＣＴイメージング

癌患者における注射１時間後(１ｈ p.i.)のＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−４６のＰＥＴ／ＣＴイメージングおよび注射３０分後(３０ｍｉｎ p.i.)のＳｍ−１５３標識ＦＡＰＩ−４６治療用イメージング(intratherapeutical imaging)

注射２０時間後(２０ｈ p.i.)までのＳｍ−１５３標識ＦＡＰＩ−４６の治療用イメージング

Ａ.転移性結腸直腸癌患者への^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−４６静脈内投与１時間後の最大値投影(ＭＩＰ)。Ｂ.^９０Ｙ−ＦＡＰＩ−４６で同一患者を治療処置して２時間後の制動放射イメージング

特発性肺線維症を有する肺癌患者における注射１時間後(１ｈ p.i.)のＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−４６のＰＥＴ／ＣＴイメージング。Ａ、Ｂ.腫瘍組織への追跡子最大取り込みは、非増悪性線維性病変への追跡子最大取り込みより有意に高い。Ｃ.腫瘍組織への追跡子最大取り込みは、増悪線維性組織への追跡子最大取り込みより若干低い。

Ａ.Ｔｃ−９９ｍ標識ＦＡＰＩ−１９のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への結合、ｎ＝３。Ｂ.濃度を増加させた非標識化合物を添加した後のＴｃ−９９ｍ標識ＦＡＰＩ−１９のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への結合(１０^−１０〜１０^−５Ｍ、６０分間のインキュベーション、ｎ＝３)。Ｃ.ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植におけるＴｃ−９９ｍ標識ＦＡＰＩ−１９のシンチグラフィー、ｎ＝１。

Ａ.Ｔｃ−９９ｍ標識ＦＡＰＩ−３４のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への結合、ｎ＝３。Ｂ.ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植におけるＴｃ−９９ｍ標識ＦＡＰＩ−３４のシンチグラフィー、ｎ＝１。

一人の転移性膵臓癌患者におけるＴｃ−９９ｍ標識ＦＡＰＩ−３４のシンチグラフィー。

Ａ.Ｐｂ−２０３標識ＦＡＰＩ誘導体のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への結合、ｎ＝３。Ｂ.ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞を放射性標識化合物と６０分間インキュベートし、非放射性培地で１〜時間続いてインキュベートした後のＰｂ−２０３標識ＦＡＰＩ誘導体の流出動態、ｎ＝３。Ｃ.濃度を増加させた非標識化合物を添加した後のＰｂ−２０３標識ＦＡＰＩのＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への競合結合(１０^−１０〜１０^−５Ｍ、６０分間のインキュベーション、ｎ＝３)。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植におけるＰｂ−２０３標識ＦＡＰＩ−０４およびＦＡＰＩ−４６のシンチグラフィー、ｎ＝１。

放射性追跡子静脈内投与１時間後、４時間後、６時間後および２４時間後のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植におけるＰｂ−２０３標識ＦＡＰＩ−０４およびＦＡＰＩ−４６の生体内分布ｎ＝３。値は、組織１グラム当たりの注入された量のパーセンテージ(％ＩＤ／ｇ)として示されている。

Ａ.Ｃｕ−６４標識ＦＡＰＩ−４２およびＦＡＰＩ−５２のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への結合、ｎ＝３。Ｂ.濃度を増加させた非標識化合物を添加した後のＣｕ−６４標識ＦＡＰＩ−４２およびＦＡＰＩ−５２のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への競合結合(１０^−１０〜１０^−５Ｍ、６０分間のインキュベーション、ｎ＝３)。Ｃ.ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞を放射性標識化合物と６０分間インキュベートし、非放射性培地で１〜２４時間続いてインキュベートした後のＣｕ−６４標識ＦＡＰＩ−４２およびＦＡＰＩ−５２の流出動態、ｎ＝３。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスにおけるＣｕ−６４標識ＦＡＰＩ−４２およびＦＡＰＩ−５２のＰＥＴイメージング；ｎ＝１。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスにおけるＡｌＦ−１８標識ＦＡＰＩ−４２およびＦＡＰＩ−５２のＰＥＴイメージング；ｎ＝１。

ａ.放射性追跡子静脈内投与後１４０分までのＵ８７ＭＧ腫瘍担持ヌードマウスにおける６８Ｇａ標識ＦＡＰＩ−０２の小動物ＰＥＴイメージング。腫瘍は赤い矢印で示している。ｂ.放射性追跡子静脈内投与１時間後、４時間後および２４時間後のＵ８７ＭＧ腫瘍担持ヌードマウスにおける１７７Ｌｕ−標識ＦＡＰＩ−０２およびＦＡＰＩ−０４の生体内分布；ｎ＝３。

静脈内投与１時間後、４時間後および２４時間後のＵ８７ＭＧ腫瘍担持マウスにおける１７７Ｌｕ−標識ＦＡＰＩ−０２および−０４の腫瘍対臓器の比。

６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２投与１０分後、１時間後および３時間後の神経膠芽腫患者におけるＰＥＴ／ＣＴスキャンの最大値投影(ＭＩＰ)。

ＩＤＨｗｔ神経膠芽腫、ＩＤＨ変異神経膠腫ＷＨＯグレードＩＩおよびＩＤＨ変異神経膠芽腫の例示的な画像(コントラスト強化Ｔ１強調ＭＲＩ、ＦＡＰＩ−ＰＥＴおよび両モダリティの融合画像)。

１８種類の神経膠腫すべての絶対ＳＵＶｍａｘ値。

ＳＵＶｍａｘ／ＢＧ値の統計分析。ＧＢＭ対非ＧＢＭ(ａ、ｂ)、ＩＤＨ変異型ｖｓＩＤＨ野生型神経膠腫(ｃ、ｄ)および神経膠腫グレードＩＩ対神経膠腫グレードＩＩＩ／ＩＶ(ｅ、ｆ)におけるＳＵＶｍａｘ／ＢＧ値の箱ひげ図および対応するＲＯＣ曲線。

ＦＡＰＩ−０４およびタラボスタットによる酵素的ＦＡＰ活性の用量依存性阻害。限界的なＦＡＰ活性を有する強力なＤＰＰ４阻害物質であるタラボスタットとは対照的に、ＦＡＰＩ−０４はロバストな用量依存性ＦＡＰ阻害を証明している。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞における^１７７Ｌｕ−標識ＦＡＰＩ−０４およびＦＡＰＩ−４６の再取り込み。３７℃で細胞を放射性追跡子と６０分間インキュベートした後、化合物を除去し、非標識化合物を含む(＋Ｃｏｍｐ.)および含まない(−Ｃｏｍｐ.)非放射性培地を加え、１０分〜６時間インキュベートする。インキュベーションの最初の１０分以内にすでに、非標識ＦＡＰＩ誘導体の新たな取り込みが発生し、放射性標識画分の一部が置換され、その結果、競合相手のない純粋な培地と比較して、放射活性値が優位に低下する。６時間のインキュベーション後、放射性標識ＦＡＰＩのほぼ完全な置換が発生している。これらの所見は、最初の内在化時に細胞膜に戻ったインタクトなＦＡＰ分子の継続的な再取り込みを示し、ＦＡＰリガンドの新たな結合および内在化を可能にする。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持ヌードマウスにおける単回および多回注射後の^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０４の臓器分布。等量の^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０４を４時間間隔で２回投与することにより、最初の注射８時間後と２４時間後に測定された、腫瘍を含む全体的な臓器活性の増加をもたらした。これに対して、３回投与(初期投与量を高くし、その後の投与量を低くした)では、全体的な臓器活性に変化がないことを明らかにする。

１０分、３０分、６０分および９０分のインキュベーション後のＦ−１８−ＦＡＰＩ誘導体のヒトＦＡＰ発現ＨＴ１０８０細胞への結合、ｎ＝３。値は、１ｍｉｏ細胞あたりの適用された量のパーセンテージ(％ＩＤ)として示されている。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスにおけるＡｌＦ−１８標識ＦＡＰＩ−７４およびＦＡＰＩ−５２のＰＥＴイメージング；ｎ＝１。

放射性追跡子静脈内投与１時間後、４時間後および２４時間後のＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植におけるＦＡＰＩ−７５の生体内分布、ｎ＝３。値は、組織１グラムあたりの投与量に対するパーセンテージ(％ＩＤ／ｇ)として示されている。

非小細胞性肺癌患者のＰＥＴイメージング：多重転移におけるＦ１８−標識ＦＡＰＩ−７４のロバストな蓄積。

高速血液プールクリアランスの図示としてのＦＡＰＩ−０４および−４６の心臓領域(ＳＵＶｍｅａｎ)の時間放射活性曲線。

転移性乳癌患者２人における異なるイメージング時点(注射１０分後、１時間後、３時間後)でのＦＡＰＩ−０２とＦＡＰＩ−０４。急速な腫瘍標的化および迅速な血液クリアランスの後に、画像コントラストに関連する変化がない長いプラトー期が続く(上)。ＦＡＰＩ−０２と比較して、リガンドＦＡＰＩ−０４は長期腫瘍保持時間を特徴とする(下)。

ＦＡＰＩ−０２の実効線量は、ＯＬＩＮＤＡで計算して１.８０Ｅ−０２ｍＳｖ／ＭＢｑであった(ＩＤＡＣ１／ＩＣＲＰ６０では１.８２Ｅ−０２、ＩＤＡＣ２／ＩＣＲＰ１０３では１.７９Ｅ−０２)。ＦＡＰＩ−０４ＰＥＴ／ＣＴの実効線量は、ＯＬＩＮＤＡで計算して１.６４Ｅ−０２ｍＳｖ／ＭＢｑであった(ＩＤＡＣ１／ＩＣＲＰ６０では１.６６Ｅ−０２、ＩＤＡＣ２／ＩＣＲＰ１０３では１.３５Ｅ−０２)。臨床現場で注射３時間後での遅延スキャンを省略すれば、ＦＡＰＩ検査のルーチン活動は２００ＭＢｑの６８Ｇａに減少でき、このようなＦＡＰＩ−ＰＥＴ／ＣＴスキャンの放射線量は連続して３−４ｍＳｖとなる。

Ａ)ＰＥＴＣＴにおける異なる腫瘍実体への注射１時間後の６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０４。最も高い平均ＳＵＶｍａｘ(＞１２)は、肉腫癌、食道癌、乳房癌、胆管細胞癌および肺癌で見つかられた。最も低いＦＡＰＩ取り込み(平均ＳＵＶｍａｘ＜６)は、腎細胞癌、分化型甲状腺癌、腺様嚢胞癌、胃癌および褐色細胞腫で観察された。肝細胞癌、結腸直腸癌、頭頸部癌、卵巣癌、膵臓癌の平均ＳＵＶｍａｘは中間(ＳＵＶ６＜ｘ＜１２)だった。すべての腫瘍実体内で、高い個体間変動が観察された。低バックグラウンド放射活性(ＳＵＶ２)のため、腫瘍対バックグラウンドの比は、中間取り込み群では＞２倍、高強度取り込み群では＞４倍である。Ｂ)原発性腫瘍実体では、ＦＡＰＩ−０４を使用した腫瘍実体と比較して、類似のＳＵＶ取り込みを示した。

図５６のＡ-Ｂに示される定量化に使用された、異なる腫瘍実体の例示的なＰＥＴ画像。

本発明の詳細な説明
本発明を以下に詳細に説明する前に、本発明は、本明細書に記載される特定の方法プロトコールおよび試薬が変化し得るので、これらに限定されないことが理解されるであろう。また、本明細書で使用される用語は、特定の実施態様のみを説明する目的のためのものであり、添付の特許請求の範囲のみによって限定される本発明の範囲を限定することを意図していないことが理解される。別に定義しない限り、本明細書で使用されるすべての技術的および科学的用語は、当業者が一般的に理解するのと同じ意味を有する。

好ましくは、本明細書で使用される用語は、「A multilingual glossary of biotechnological terms: (IUPAC Recommendations)」、Leuenberger, H.G.W, Nagel, B. and Klbl, H. eds. (1995), Helvetica Chimica Acta, CH-4010 Basel, Switzerland)に記載されているように定義する。

本明細書およびそれに続く特許請求の範囲全体を通して、文脈上別段の要求がない限り、用語「comprise」および「comprises」および「comprising」のような変動は、記載される整数または工程または整数もしくは工程のグループを包含することを意味し、他の整数または工程または整数もしくは工程のグループを除外することを意味しないと理解されるであろう。以下のパッセージでは、本発明のさまざまな態様をより詳細に定義する。このように定義される各態様は、反対に明確に示されない限り、他の態様(aspect)または態様(aspects)と組み合わせてもよい。特に、任意であること、好ましいこと、または有利であることが示されているいずれかの特徴は、任意であること、好ましいこと、または有利であることが示されている他の特徴(feature)または特徴(features)と組み合わせてもよい。

本明細書の本文全体にわたっていくつかの文書が引用されている。本明細書に引用される各文書(すべての特許、特許出願、科学出版物、製造業者の仕様書、インストラクションなどを含む)は、上記または下記にかかわらず、その全体を参照することにより、ここに組み込まれる。本明細書のいかなる記述も、本発明が先行発明を理由に、そのような開示を先取りする権利を有していないことを認めるものと解釈されるものではない。本明細書に引用される文書の一部は、「参照により組み込まれている」ことを特徴とする。このような組み込まれる文献の定義または教示と、本明細書で引用される定義または教示との間に矛盾がある場合には、本明細書の本文が優先される。

以下では、本発明の要素について説明する。これらの要素は、特定の実施態様で列挙されているが、さらなる実施態様を作成するために、いずれかの方法でおよびいずれかの数で組み合わせてもよいことが理解されるべきである。さまざまに記載される実施例および好ましい実施態様は、本発明を明示的に記載される実施態様のみに限定するように解釈されるべきではない。本明細書は、明示的に記載される実施態様を、あらゆる開示されるおよび／または好ましい要素と組み合わせる実施態様を支持し、包含すると理解されるべきである。さらに、本願に記載されるすべての要素のいずれかの順列および組み合わせは、文脈がそうでないことを示さない限り、本願の説明によって開示されているとみなされるべきである。

定義
以下では、本明細書でよく使用される用語の定義をいくつか示す。これらの用語は、その使用の各実例において、本明細書の残りの部分において、それぞれ定義される意味および好ましい意味を有する。

本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、内容が明らかに他のことを指示しない限り、複数の指示対象を含む。

以下に用語：アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、アルケニルおよびアルキニルの定義を提供する。これらの用語は、本明細書の残りの部分で使用される各実例において、それぞれ定義される意味および好ましい意味を有する。

用語「アルキル」は、飽和の直鎖または分岐炭素鎖を意味する。好ましくは、該鎖は、１〜１０個、すなわち１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個の炭素原子を含む(例えばメチル、エチルメチル、エチル、プロピル、イソープロピル、ブチル、イソーブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチルまたはオクチル)。アルキル基は置換されていてよい。

用語「ヘテロアルキル」は、飽和の直鎖または分岐炭素鎖を意味する。好ましくは、該鎖は、１〜９個、すなわち１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個または９個の炭素原子を含み(例えばメチル、エチル、プロピル、イソープロピル、ブチル、イソーブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、オクチル)、これらは、同一または異なるヘテロ原子によって１回またはそれ以上、例えば１回、２回、３回、４回または５回中断される。好ましくは、ヘテロ原子は、Ｏ、ＳおよびＮから選択され、例えば−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｓ−ＣＨ_３、−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_３、−ＣＨ_２−Ｏ−Ｃ_２Ｈ_５、−ＣＨ_２−Ｓ−ＣＨ_３、−ＣＨ_２−Ｓ−Ｃ_２Ｈ_５、−Ｃ_２Ｈ_４−Ｏ−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_４−Ｏ−Ｃ_２Ｈ_５、−Ｃ_２Ｈ_４−Ｓ−ＣＨ_３、−Ｃ_２Ｈ_４−Ｓ−Ｃ_２Ｈ_５などである。ヘテロアルキル基は置換されていてよい。

用語「シクロアルキル」および「ヘテロシクロアルキル」は、別段の記載がない限り、それ自体または他の用語と組み合わせて、「アルキル」および「ヘテロアルキル」の環状バージョンをそれぞれ示し、好ましくは、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個の原子が環、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルなどを形成する。用語「シクロアルキル」および「ヘテロシクロアルキル」はまた、それらの二環式、三環式および多環式バージョンを含むことを意味する。用語「ヘテロシクロアルキル」は、好ましくは、５員飽和環(少なくとも１員がＮ、ＯまたはＳ原子であり、１つのさらなるＯまたは１つのさらなるＮを含んでいてよい)；６員飽和環(少なくとも１員がＮ、ＯまたはＳ原子であり、１つのさらなるＯまたは１つのさらなるＮまたは２つのさらなるＮ原子を含んでいてよい)；または９員または１０員飽和二環式環(少なくとも１員がＮ、ＯまたはＳ原子であり、１つのさらなるＮ原子、２つのさらなるＮまたは３つのさらなるＮ原子を含んでいてよい)を意味する。「シクロアルキル」および「ヘテロシクロアルキル」基は、置換されていてよい。さらに、ヘテロシクロアルキルの場合、ヘテロ原子は、分子の残りの部分にヘテロ環が結合している位置を占めることができる。シクロアルキルの例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、１−シクロヘキセニル、３−シクロヘキセニル、シクロヘプチル、スピロ［３,３］ヘプチル、スピロ［３,４］オクチル、スピロ［４,３］オクチル、スピロ［３,５］ノニル、スピロ［５,３］ノニル、スピロ［３,６］デシル、スピロ［６,３］デシル、スピロ［４,５］デシル、スピロ［５,４］デシル、ビシクロ［２.２.１］ヘプチル、ビシクロ［２.２.２］オクチル、アダマンチルなどがある。ヘテロシクロアルキルの例としては、１−(１,２,５,６−テトラヒドロピリジル)、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、１,８ジアゾ−スピロ−［４,５］デシル、１,７ジアゾ−スピロ−［４,５］デシル、１,６ジアゾ−スピロ−［４,５］デシル、２,８ジアゾ−スピロ［４,５］デシル、２,７ジアゾ−スピロ［４,５］デシル、２,６ジアゾ−スピロ［４,５］デシル、１,８ジアゾ−スピロ−［５,４］デシル、１,７ジアゾ−スピロ−［５,４］デシル、２,８ジアゾ−スピロ−［５,４］デシル、２,７ジアゾ−スピロ［５,４］デシル、３,８ジアゾ−スピロ［５,４］デシル、３,７ジアゾ−スピロ［５,４］デシル、１−アゾ−７,１１−ジオキソ−スピロ［５,５］ウンデシル、１,４−ジアザビシクロ［２.２.２］オクタ−２−イル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニルなどがある。

用語「アリール」とは、好ましくは６個の炭素原子を含有する芳香族単環式環、１０個の炭素原子を含有する芳香族二環式環系または１４個の炭素原子を含有する芳香族三環式環系を意味する。例としては、フェニル、ナフチルまたはアントラセニルがある。アリール基は置換されていてよい。

用語「アラルキル」とは、アリールによって置換されているアルキル部分を意味し、ここで、アルキルおよびアリールは、上記で概説された意味を有する。例としてはベンジル基がある。好ましくは、この文脈において、アルキル鎖は、１〜８個、すなわち１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個または８個の炭素原子を含む(例えばメチル、エチルメチル、エチル、プロピル、イソープロピル、ブチル、イソーブチル、ｓｅｃ−ブテニル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、オクチル)。アラルキル基は、基のアルキルおよび／またはアリール部分で置換されていてよい。

用語「ヘテロアリール」とは、好ましくは、炭素原子の中の少なくとも１個が、好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される同一または異なる１個、２個、３個または４個(５員環の場合)または１個、２個、３個、４個または５個（６員環の場合）のヘテロ原子によって置換されている５または６−員芳香族単環式環；８個、９個、１０個、１１個または１２個の炭素原子の中の１個、２個、３個、４個、５個または６個の炭素原子が、好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される同一または異なるヘテロ原子によって置換されている芳香族二環式環系；または１３個、１４個、１５個または１６個の炭素原子の中の１個、２個、３個、４個、５個または６個の炭素原子が、好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される同一または異なるヘテロ原子によって置換されている芳香族三環式環系を意味する。例としては、オキサゾリル、イソオキサゾリル、１,２,５−オキサジアゾリル、１,２,３−オキサジアゾリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、１,２,３−トリアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、１,２,３,−チアジアゾリル、１,２,５−チアジアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１,２,３−トリアジニル、１,２,４−トリアジニル、１,３,５−トリアジニル、１−ベンゾフラニル、２−ベンゾフラニル、インドイル(ｉｎｄｏｙｌ)、イソインドイル(ｉｓｏｉｎｄｏｙｌ)、ベンゾチオフェニル、２−ベンゾチオフェニル、１Ｈ−インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、インドオキサジニル(ｉｎｄｏｘａｚｉｎｙｌ)、２,１−ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、１,２−ベンゾイソチアゾリル、２,１−ベンゾイソチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、キノリニル、１,２,３−ベンゾトリアジニルまたは１,２,４−ベンゾトリアジニルがある。

用語「ヘテロアラルキル」とは、ヘテロアリールによって置換されているアルキル部分を意味し、ここで、アルキルおよびヘテロアリールは、上記で概説された意味を有する。例としては、２−アルキルピリジニル、３−アルキルピリジニルまたは２−メチルピリジニルがある。好ましくは、この文脈において、アルキル鎖は、１〜８個、すなわち１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個または８個の炭素原子を含む(例えばメチル、エチルメチル、エチル、プロピル、イソープロピル、ブチル、イソーブチル、ｓｅｃ−ブテニル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ペンチル、オクチル)。ヘテロアラルキル基は、基のアルキルおよび／またはヘテロアリールで置換されていてよい。

「アルケニル」および「シクロアルケニル」とは、一つまたはそれ以上の二重結合を有する鎖または環を含有するオレフィン不飽和炭素原子を意味する。例としては、プロペニルおよびシクロヘキセニルがある。好ましくは、アルケニル鎖は、２〜８個、すなわち２個、３個、４個、５個、６個、７個または８個の炭素原子を含む(例えばエテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、イソ−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、イソ−ブテニル、ｓｅｃ−ブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、ヘキセニル、ペンテニル、オクテニル)。好ましくは、シクロアルケニル環は、３〜８個、すなわち３個、４個、５個、６個、７個または８個の炭素原子を含む(例えば１−シクロプロペニル、２−シクロプロペニル、１−シクロブテニル、２−シクロブテニル、１−シクロペンテニル、２−シクロペンテニル、３−シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロペンテニル、シクロオクテニル)。

用語「アルキニル」とは、一つまたはそれ以上の三重結合を有する鎖または環を含有する不飽和炭素原子を意味する。例としてはプロパルギル基がある。好ましくは、アルキニル鎖は、２〜８個、すなわち２個、３個、４個、５個、６個、７個または８個の炭素原子を含む(例えばエチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、ヘキシニル、ペンチニル、オクチニル)。

一実施態様において、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、アリール、アラルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル基中の炭素原子または水素原子は、互いに独立して、Ｏ、ＳおよびＮからなる群から選択される一つまたはそれ以上の元素によって置換されていてよく、またはＯ、ＳおよびＮからなる群から選択される一つまたはそれ以上の元素を含む基によって置換されていてよい。

実施態様としては、アルコキシ、シクロアルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アルケニルオキシ、シクロアルケニルオキシ、アルキニルオキシ、アルキルチオ、シクロアルキルチオ、アリールチオ、アラルキルチオ、アルケニルチオ、シクロアルケニルチオ、アルキニルチオ、アルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アルケニルアミノ、シクロアルケニルアミノ、アルキニルアミノ基がある。

他の実施態様としては、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシシクロアルキル、ヒドロキシアリール、ヒドロキシアラルキル、ヒドロキシアルケニル、ヒドロキシシクロアルケニル、ヒドロキシアリニル、メルカプトアルキル、メルカプトシクロアルキル、メルカプトアリール、メルカプトアラルキル、メルカプトアルケニル、メルカプトシクロアルケニル、メルカプトアルキニル、アミノアルキル、アミノシクロアルキル、アミノアリール、アミノアラルキル、アミノアルケニル、アミノシクロアルケニル、アミノアルキニル基がある。

別の実施態様において、アルキル基、ヘテロアルキル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、アルケニル基、シクロアルケニル基、アルキニル基中の水素原子は、互いに独立して、１つまたはそれ以上のハロゲン原子によって置換され得る。一つの基としては、トリフルオロメチル基がある。

２つもしくは２つ以上の基または２つもしくは２つ以上の残基が互いに独立して選択され得る場合、用語「独立して」とは、基または残基が同一であってもよく、異なっていてもよいことを意味する。

本明細書で使用されるように、例えば「１〜６」のような長さの範囲の限定を定義する語句は、１から６までのいずれかの整数、すなわち１、２、３、４、５および６を意味する。言い換えれば、明示的に記載された２つの整数によって定義されるいずれかの範囲は、上記の限定を定義するいずれかの整数と、前記範囲に含まれるいずれかの整数とを含み、開示することを意味する。

本明細書で使用される用語「ハロ」とは、Ｆ、Ｂｒ、ＩおよびＣｌからなる群から選択されるハロゲン残基を意味する。好ましくは、ハロゲンはＦである。

本明細書で使用される用語「リンカー」とはいずれかの化学的に適当なリンカーを意味する。好ましくは、リンカーは、生理学的条件下では切断されないか、またはゆっくりとしか切断されない。このように、好ましくは、リンカーは、プロテアーゼに対する認識配列や他の分解酵素に対する認識構造を含まない。本発明の化合物は、全身的に投与され、体内のすべての区画への広範なアクセスを可能にし、続いて、体内のどこに腫瘍が位置していても本発明の化合物が濃縮されることが好ましいため、リンカーは、血中では切断されないか、またはゆっくりとしか切断されないような形で選択されることが好ましい。化合物をヒト患者に投与してから２時間後にリンカーの５０％未満が切断される場合、切断はゆっくりと見なされる。適当なリンカーは、例えば置換されていてよいアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルケニル、アルキニル、スルホニル、アミン類、エーテル類、チオエーテル類、ホスフィーン類、ホスホルアミデート類、カルボキサミド類、エステル類、イミドエステル類、アミジン類、チオエステル類、スルホンアミド類、３−チオピロリジン−２,５−ジオン、カルバメート類、尿素類、グアニジン類、チオ尿素類、ジスルフィド類、オキシム類、ヒドラジン類、ヒドラジド類、ヒドラゾン類、ジアザ結合類、トリアゾール類、トリアゾリン類、テトラジン類、白金錯体類およびアミノ酸類またはそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる。好ましくは、該リンカーは、１,４−ピペラジン、１,３−プロパンおよびフェノール系エーテルまたはそれらの組み合わせを含むか、またはそれらからなる。

表現「置換されていてよい」とは、１個、２個、３個またはそれ以上の水素原子が、互いに独立してそれぞれの置換基によって置換されていてもよい群を意味する。

本明細書で使用されるように、用語「アミノ酸」は、１つまたはそれ以上のアミノ置換基、例えばα−、β−またはγ−アミノを含むいずれかの有機酸、脂肪族カルボン酸の誘導体を意味する。本明細書で使用されるポリペプチド表記、例えばＸａａ５、すなわちＸａａ１Ｘａａ２Ｘａａ３Ｘａａ４Ｘａａ５において、Ｘａａ１〜Ｘａａ５は、それぞれ独立して定義されるアミノ酸から選択され、左手方向はアミノ末端方向であり、右手方向はカルボキシ末端方向であり、標準的な使用法および慣例に従ったものである。

用語「従来のアミノ酸」とは、２０種類の天然に存在するアミノ酸を意味し、それらの立体異性体すべて、すなわちＤ,Ｌ−、Ｄ−およびＬ−アミノ酸を包含する。これらの従来のアミノ酸は、本明細書において、従来の３文字または１文字の略語で言及されることができ、それらの略語は、従来の使用法に従う(例えばImmunology−A Synthesis, 2nd Edition, E. S. Golub and D. R. Gren, Eds., Sinauer Associates, Sunderland Mass. (1991)を参照)。

用語「非従来的なアミノ酸」とは、非天然アミノ酸または化学的アミノ酸類似体、例えばα,α-二置換アミノ酸、Ｎ-アルキルアミノ酸、ホモアミノ酸、デヒドロアミノ酸、芳香族アミノ酸(フェニルアラニン、チロシンおよびトリプトファン以外の)、およびオルトアミノ安息香酸、メタアミノ安息香酸またはパラアミノ安息香酸を意味する。非従来的なアミノ酸には、アミンとカルボキシル官能基が１,３またはそれ以上の置換パターンで分かれている化合物、例えば、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、フライディンガーラクタム(Freidinger lactam)、二環式ジペプチド(ＢＴＤ)、アミノ−メチル安息香酸および当技術分野で一般的に知られている他の化合物も含まれる。また、スタチン様イソスター、ヒドロキシエチレンイソスター、還元アミド結合イソスター、チオアミドイソスター、尿素イソスター、カルバメートイソスター、チオエーテルイソスター、ビニルイソスターおよび当技術分野で一般的に知られている他のアミド結合イソスターも使用することができる。類似体または非従来型のアミノ酸を使用することにより、生理的条件下での分解耐性が高まるため、添加されたペプチドの安定性および生物学的半減期を改善し得る。当業者は、同様のタイプの置換が行われ得ることを認識するであろう。ペプチドの適当な構成要素として使用し得る非従来的なアミノ酸の非限定的なリストおよびそれらの標準的な略語(括弧内)は、以下の通りである：α−アミノ酪酸(Ａｂｕ)、Ｌ−Ｎ−メチルアラニン(Ｎｍａｌａ)、α−アミノ−α−メチルブチラート(Ｍｇａｂｕ)、Ｌ−Ｎ−メチルアルギニン(Ｎｍａｒｇ)、アミノシクロプロパン(Ｃｐｒｏ)、Ｌ−Ｎ−メチルアスパラギン(Ｎｍａｓｎ)、カルボキシレートＬ−Ｎ−メチルアスパラギン酸(Ｎｍａｓｐ)、アミノイソ酪酸(Ａｉｂ)、Ｌ−Ｎ−メチルシステイン(Ｎｍｃｙｓ)、アミノノルボルニル(Ｎｏｒｂ)、Ｌ−Ｎ−メチルグルタミン(Ｎｍｇｌｎ)、カルボキシレートＬ−Ｎ−メチルグルタミン酸(Ｎｍｇｌｕ)、シクロヘキシルアラニン(Ｃｈｅｘａ)、Ｌ−Ｎ−メチルヒスチジン(Ｎｍｈｉｓ)、シクロペンチルアラニン(Ｃｐｅｎ)、Ｌ−Ｎ−メチルイソロイシン(Ｎｍｉｌｅ)、Ｌ−Ｎ−メチルロイシン(Ｎｍｌｅｕ)、Ｌ−Ｎ−メチルリシン(Ｎｍｌｙｓ)、Ｌ−Ｎ−メチルメチオニン(Ｎｍｍｅｔ)、Ｌ−Ｎ−メチルノルロイシン(Ｎｍｎｌｅ)、Ｌ−Ｎ−メチルノルバリン(Ｎｍｎｖａ)、Ｌ−Ｎ−メチルオルニチン(Ｎｍｏｒｎ)、Ｌ−Ｎ−メチルフェニルアラニン(Ｎｍｐｈｅ)、Ｌ−Ｎ−メチルプロリン(Ｎｍｐｒｏ)、Ｌ−Ｎ−メチルセリン(Ｎｍｓｅｒ)、Ｌ−Ｎ−メチルスレオニン(Ｎｍｔｈｒ)、Ｌ−Ｎ−メチルトリプトファン(Ｎｍｔｒｐ)、Ｄ−オルニチン(Ｄｏｒｎ)、Ｌ−Ｎ−メチルチロシン(Ｎｍｔｙｒ)、Ｌ−Ｎ−メチルバリン(Ｎｍｖａｌ)、Ｌ−Ｎ−メチルエチルグリシン(Ｎｍｅｔｇ)、Ｌ−Ｎ−メチル−ｔ−ブチルグリシン(Ｎｍｔｂｕｇ)、Ｌ−ノルロイシン(ＮＩｅ)、Ｌ−ノルバリン(Ｎｖａ)、α−メチル−アミノイソブチラート(Ｍａｉｂ)、α−メチル−γ−アミノブチラート(Ｍｇａｂｕ)、Ｄ−α−メチルアラニン(Ｄｍａｌａ)、α−メチルシクロヘキシルアラニン(Ｍｃｈｅｘａ)、Ｄ−α−メチルアルギニン(Ｄｍａｒｇ)、α-メチルシルコペンチルアラニン(α−ｍｅｔｈｙｌｃｙｌｃｏｐｅｎｔｙｌａｌａｎｉｎｅ、Ｍｃｐｅｎ)、Ｄ−α−メチルアスパラギン(Ｄｍａｓｎ)、α−メチル−α−ナプチルアラニン(Ｍａｎａｐ)、Ｄ−α−メチルアスパルタート(Ｄｍａｓｐ)、α−メチルペニシラミン(Ｍｐｅｎ)、Ｄ−α−メチルシステイン(Ｄｍｃｙｓ)、Ｎ−(４−アミノブチル)グリシン(ＮｇＩｕ)、Ｄ−α−メチルグルタミン(Ｄｍｇｌｎ)、Ｎ−(２−アミノエチル)グリシン(Ｎａｅｇ)、Ｄ−α−メチルヒスチジン(Ｄｍｈｉｓ)、Ｎ−(３−アミノプロピル)グリシン(Ｎｏｒｎ)、Ｄ−α−メチルイソロイシン(Ｄｍｉｌｅ)、Ｎ−アミノ−α−メチルブチラート(Ｎｍａａｂｕ)、Ｄ−α−メチルロイシン(Ｄｍｌｅｕ)、α−ナプチルアラニン(Ａｎａｐ)、Ｄ−α−メチルリシン(Ｄｍｌｙｓ)、Ｎ−ベンジルグリシン(Ｎｐｈｅ)、Ｄ−α−メチルメチオニン(Ｄｍｍｅｔ)、Ｎ−(２−カルバミルエチル)グリシン(ＮｇＩｎ)、Ｄ−α−メチルオルニチン(Ｄｍｏｒｎ)、Ｎ−(カルバミルメチル)グリシン(Ｎａｓｎ)、Ｄ−α−メチルフェニルアラニン(Ｄｍｐｈｅ)、Ｎ−(２−カルボキシエチル)グリシン(ＮｇＩｕ)、Ｄ−α−メチルプロリン(Ｄｍｐｒｏ)、Ｎ−(カルボキシメチル)グリシン(Ｎａｓｐ)、Ｄ−α−メチルセリン(Ｄｍｓｅｒ)、Ｎ−シクロブチルグリシン(Ｎｃｂｕｔ)、Ｄ−α−メチルスレオニン(Ｄｍｔｈｒ)、Ｎ−シクロヘプチルグリシン(Ｎｃｈｅｐ)、Ｄ−α−メチルトリプトファン(Ｄｍｔｒｐ)、Ｎ−シクロヘキシルグリシン(Ｎｃｈｅｘ)、Ｄ−α−メチルチロシン(Ｄｍｔｙ)、Ｎ−シクロデシルグリシン(Ｎｃｄｅｃ)、Ｄ−α−メチルバリン(Ｄｍｖａｌ)、Ｎ−シクロドデシルグリシン(Ｎｃｄｏｄ)、Ｄ−Ｎ−メチルアラニン(Ｄｎｍａｌａ)、Ｎ−シクロオクチルグリシン(Ｎｃｏｃｔ)、Ｄ−Ｎ−メチルアルギニン(Ｄｎｍａｒｇ)、Ｎ−シクロプロピルグリシン(Ｎｃｐｒｏ)、Ｄ−Ｎ−メチルアスパラギン(Ｄｎｍａｓｎ)、Ｎ−シクロウンデシルグリシン(Ｎｃｕｎｄ)、Ｄ−Ｎ−メチルアスパルタート(Ｄｎｍａｓｐ)、Ｎ−(２,２−ジフェニルエチル)グリシン(Ｎｂｈｍ)、Ｄ−Ｎ−メチルシステイン(Ｄｎｍｃｙｓ)、Ｎ−(３,３−ジフェニルプロピル)グリシン(Ｎｂｈｅ)、Ｄ−Ｎ−メチルグルタミン(Ｄｎｍｇｌｎ)、Ｎ−(３−グアニジノプロピル)グリシン(Ｎａｒｇ)、Ｄ−Ｎ−メチルグルタマート(Ｄｎｍｇｌｕ)、Ｎ−(１−ヒドロキシエチル)グリシン(Ｎｔｂｘ)、Ｄ−Ｎ−メチルヒスチジン(Ｄｎｍｈｉｓ)、Ｎ−(ヒドロキシエチル))グリシン(Ｎｓｅｒ)、Ｄ−Ｎ−メチルイソロイシン(Ｄｎｍｉｌｅ)、Ｎ−(イミダゾリルエチル))グリシン(Ｎｈｉｓ)、Ｄ−Ｎ−メチルロイシン(Ｄｎｍｌｅｕ)、Ｎ−(３−インドリルエチル)グリシン(Ｎｈｔｒｐ)、Ｄ−Ｎ−メチルリシン(Ｄｎｎｉｌｙｓ)、Ｎ−メチル−γ−アミノブチラート(Ｎｍｇａｂｕ)、Ｎ−メチルシクロヘキシルアラニン(Ｎｍｃｈｅｘａ)、Ｄ−Ｎ−メチルメチオニン(Ｄｎｍｍｅｔ)、Ｄ−Ｎ−メチルオルニチン(Ｄｎｍｏｒｎ)、Ｎ−メチルシクロペンチルアラニン(Ｎｍｃｐｅｎ)、Ｎ−メチルグリシン(ＮａＩａ)、Ｄ−Ｎ−メチルフェニルアラニン(Ｄｎｍｐｈｅ)、Ｎ−メチルアミノイソブチラート(Ｎｍａｉｂ)、Ｄ−Ｎ−メチルプロリン(Ｄｎｍｐｒｏ)、Ｎ−(１−メチルプロピル)グリシン(Ｎｉｌｅ)、Ｄ−Ｎ−メチルセリン(Ｄｎｍｓｅｒ)、Ｎ−(２−メチルプロピル)グリシン(Ｎｌｅｕ)、Ｄ−Ｎ−メチルスレオニン(Ｄｎｍｔｈｒ)、Ｄ−Ｎ−メチルトリプトファン(Ｄｎｍｔｒｐ)、Ｎ−(１−メチルエチル)グリシン(Ｎｖａｌ)、Ｄ−Ｎ−メチルチロシン(Ｄｎｍｔｙｒ)、Ｎ−メチルａ−ナプチルアラニン(Ｎｍａｎａｐ)、Ｄ−Ｎ−メチルバリン(Ｄｎｍｖａｌ)、Ｎ−メチルペニシラミン(Ｎｍｐｅｎ)、γ−アミノ酪酸(Ｇａｂｕ)、Ｎ−(ｐ−ヒドロキシフェニル)グリシン(Ｎｈｔｙｒ)、Ｌ−／−ブチルグリシン(Ｔｂｕｇ)、Ｎ−(チオメチル)グリシン(Ｎｃｙｓ)、Ｌ−エチルグリシン(Ｅｔｇ)、ペニシラミン(Ｐｅｎ)、Ｌ−ホモフェニルアラニン(Ｈｐｈｅ)、Ｌ−α−メチルアラニン(Ｍａｌａ)、Ｌ−α−メチルアルギニン(Ｍａｒｇ)、Ｌ−α−メチルアスパラギン(Ｍａｓｎ)、Ｌ−α−メチルアスパルタート(Ｍａｓｐ)、Ｌ−α−メチル−ｔ−ブチルグリシン(Ｍｔｂｕｇ)、Ｌ−α−メチルシステイン(Ｍｃｙｓ)、Ｌ−メチルエチルグリシン(Ｍｅｔｇ)、Ｌ−α−メチルグルタミン(ＭｇＩｎ)、Ｌ−α−メチルグルタマート(ＭｇＩｕ)、Ｌ−α−メチルヒスチジン(Ｍｈｉｓ)、Ｌ−α−メチルホモフェニルアラニン(Ｍｈｐｈｅ)、Ｌ−α−メチルイソロイシン(Ｍｉｌｅ)、Ｎ−(２−メチルチオエチル)グリシン(Ｎｍｅｔ)、Ｌ−α−メチルロイシン(Ｍｌｅｕ)、Ｌ−α−メチルリシン(Ｍｌｙｓ)、Ｌ−α−メチルメチオニン(Ｍｍｅｔ)、Ｌ−α−メチルノルロイシン(ＭｎＩｅ)、Ｌ−α−メチルノルバリン(Ｍｎｖａ)、Ｌ−α−メチルオルニチン(Ｍｏｒｎ)、Ｌ−α−メチルフェニルアラニン(Ｍｐｈｅ)、Ｌ−α−メチルプロリン(Ｍｐｒｏ)、Ｌ−α−メチルセリン(Ｍｓｅｒ)、Ｌ−α−メチルスレオニン(Ｍｔｈｒ)、Ｌ−α−メチルトリプトファン(Ｍｔｒｐ)、Ｌ−α−メチルチロシン(Ｍｔｙｒ)、Ｌ−α−メチルバリン(Ｍｖａｌ)、Ｌ−Ｎ−メチルホモフェニルアラニン(Ｎｍｈｐｈｅ)、Ｎ−(Ｎ−(２,２−ジフェニルエチル)カルバミルメチル)グリシン(Ｎｎｂｈｍ)、Ｎ−(Ｎ−(３,３−ジフェニル−プロピル)カルバミルメチル)グリシン(Ｎｎｂｈｅ)、１−カルボキシ−１−(２,２−ジフェニル−エチルアミノ)シクロプロパン(Ｎｍｂｃ)、Ｌ−Ｏ−メチルセリン(Ｏｍｓｅｒ)、Ｌ−Ｏ−メチルホモセリン(Ｏｍｈｓｅｒ)。

本明細書で使用される用語「Ｎ含有芳香族または非芳香族単環式または二環式ヘテロ環」とは、環状鎖の構成要素として少なくとも１つの窒素原子を含有する環状飽和または不飽和炭化水素化合物を意味する。

本明細書で使用される用語「放射性部分」とは、放射性核種を持つ分子集合体を意味する。核種は、生理学的条件下で安定的に維持される共有結合または配位結合のどちらかによって結合される。例としては、［^１３１Ｉ］−３−ヨード安息香酸または^６８Ｇａ−ＤＯＴＡがある。

本明細書で使用される「蛍光同位体」は、より短い波長の電磁放射線によって励起された後に電磁放射線を放出する。

本明細書で使用される「放射性同位体」とは、α−、β−および／またはγ−放射線を放出する元素(用語「放射性核種」によって含まれる)の放射性同位体である。

用語「放射性薬剤」は、本発明の文脈では、放射性同位体によって修飾される生物学的活性化合物を指すために使用される。特にインターカレート物質は、放射活性をＤＮＡの直接の近くに送達するために使用することができる(例えばＨｏｅｃｈｓｔ−３３２５８の^１３１Ｉ−担持誘導体)。

用語「キレート剤」または「キレート」とは、本発明の文脈で互換的に使用され、金属イオンに供与するために利用可能な２つまたはそれ以上の非共有電子対を有する分子、多くの場合、有機物、および多くの場合、ルイス塩基を意味する。金属イオンは、通常、キレート剤に二つまたはそれ以上の電子対で配位している。用語「二配位子キレート剤」、「三配位子キレート剤」および「四配位子キレート剤」とは、それぞれ、キレート剤によって配位された金属イオンに同時に供与するために容易に利用可能な二つ、三つおよび四つの電子対を有するキレート剤を意味する。通常、キレート剤の電子対は、単一の金属イオンと配位結合を形成するが、特定の例では、キレート剤は、一つを超える金属イオンと配位結合を形成してもよく、さまざまな結合様式が可能である。

本発明の文脈で使用される用語「蛍光色素」は、より短くて適当な波長の電磁放射線によって励起された後に可視光または赤外光を放出する化合物を指すために使用される。。各蛍光色素が所定の励起波長を有することは、当業者には理解されている。

用語「造影剤」は、本発明の文脈において、医用イメージングにおいて構造または流体のコントラストを増加させる化合物を指すために使用される。強化は、電磁放射線を吸収するか、または電磁場を変更することによって達成される。

本明細書で使用される用語「常磁性の」とは、媒体中の不対電子によって誘導される常磁性を意味する。常磁性物質は、外部磁場が印加されると磁場を誘導する。反磁性とは異なり、誘導磁場の方向は外部磁場と同一であり、強磁性とは異なり、磁場は外部磁場がない場合は維持されない。

本明細書で使用される用語「ナノ粒子」とは、好ましくは、１〜１００ナノメートルの間の大きさの直径を有する球形の粒子を意味する。組成に応じて、ナノ粒子は、評価可能な磁気的、光学的または物理化学的な品質を有することができる。さらに、多くの種類のナノ粒子の表面修飾が達成可能である。

用語「薬学的に許容できる塩」とは、本発明の化合物の塩を意味する。本発明の化合物適切な薬学的に許容できる塩には、例えば、コリンまたはその誘導体の溶液を、塩酸、硫酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸またはリン酸などの薬学的に許容できる酸の溶液と混合することによって形成され得る酸付加塩が含まれる。さらに、本発明の化合物が酸性部分を有する場合、その適切な薬学的に許容できる塩には、アルカリ金属塩類(例えば、ナトリウム塩またはカリウム塩);アルカリ土類金属塩類(例えば、カルシウム塩またはマグネシウム塩類);および適切な有機リガンドで形成される塩(例えば、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、スルホン酸アルキルおよびスルホン酸アリールなどの対アニオンを用いて形成されるアンモニウム、第四級アンモニウムおよびアミンカチオン)が含まれる。薬学的に許容できる塩の用例として以下の塩があるがこれらに限定されない：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、臭化物、酪酸塩、エデト酸カルシウム、樟脳酸塩(camphorate)、樟脳スルホン酸塩、カンシル酸塩（camsylate）、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、クラブラン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、二塩酸塩、硫酸ドデシル、エデト酸塩、エジシル酸塩、ストレート(estolate)、エシレート(esylate)、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩(gluceptate)、グルコヘプトン酸塩(glucoheptonate)、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩(glycolylarsanilate)、ヘミ硫酸塩(hemisulfate)、ヘプタン酸塩(heptanoate)、ヘキサン酸塩(hexanoate)、レゾルシン酸ヘキシル(hexylresorcinate)、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩(hydroiodide)、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イソチオシアネート(Isothiocyanate)、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩(mesylate)、メタンスルホン酸塩、硫酸メチル、ムチン酸塩(mucate)、２−ナフタレンスルホン酸塩、ナプシル酸塩(napsylate)、ニコチン酸塩、硝酸塩、Ｎ−メチルグルカミンアンモニウム塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩(エンボン酸塩)、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、ペクチン酸塩(pectinate)、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩(pivalate)、ポリガラクツロ酸塩(polygalacturonate)、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、硫酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩(tosylate)、トリエチオダイド、ウンデカン酸塩、吉草酸塩など(例えばBerge, S. M., et al, "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19を参照)。本発明の特定の特定の化合物は、化合物が塩基または酸付加塩のいずれかに変換されることを可能にする塩基性および酸性の両方の官能基を含む。

化合物の中性形態は、塩を塩基または酸に接触させ、親化合物を従来の方法で単離することにより再生してもよい。化合物の親形態は、極性溶媒への溶解性のような特定の物理的性質において様々な塩の形態とは異なるが、それ以外の塩は、本発明の目的のために化合物の親形態と同等である。

塩の形態に加えて、本発明は、プロドラッグの形態の化合物を提供する。本明細書に記載の化合物のプロドラッグは、生理学的条件下で容易に化学変化を受けて式（Ｉ）の化合物を提供する化合物である。プロドラッグは、プロドラッグを患者に投与した後に、加水分解、代謝などのインビボ生理学的作用によって本発明の化合物に化学的に修飾される活性または不活性の化合物である。さらに、プロドラッグは、エクスビボ環境下で化学的または生化学的方法によって本発明の化合物に変換することができる。例えば、プロドラッグは、適切な酵素で経皮パッチリザーバーに配置すると、ゆっくりと本発明の化合物に変換され得る。プロドラッグの製造および使用に関与する適合性および技術は、当業者によく知られている。エステルに関与するプロドラッグの一般的な議論については、Svensson and Tunek Drug Metabolism Reviews 16.5 (1988) and Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)を参照すること。マスクされたカルボン酸塩陰イオンの例としては、アルキル(例えばメチル、エチル)、シクロアルキル(例えばシクロヘキシル)、アラルキル(例えばベンジル、p-メトキシベンジル)およびアルキルカルボニルオキシアルキル(例えばピバロイルオキシメチル)などのさまざまななエステルがある。アミンは、アリールカルボニルオキシメチル置換誘導体としてマスクされており、インビボでエステラーゼによって切断され、遊離薬物およびホルムアルデヒドを放出する(Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989))。また、イミダゾール、イミド、インドールなどの酸性ＮＨ基を含有する薬剤は、Ｎ−アシルオキシメチル基でマスクされている(Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985))。ヒドロキシル基は、エステルおよびエーテルとしてマスクされている。EP 0 0 039 051(Sloan and Little, Apr. 11, 1981)には、マンニッヒ塩基性ヒドロキサム酸プロドラッグ、その調製および使用が開示されている。

本発明による化合物は、以下の方法のうちの１種またはそれ以上の方法によって合成することができる。一般的な手順は、不特定の立体化学を有する化合物の調製に関連して示されていることに留意すべきである。しかしながら、そのような手順は、一般に、特定の立体化学の化合物、例えば、基に関する立体化学が(Ｓ)または(Ｒ)である場合に適用可能である。さらに、一方の立体化学(例えば、(Ｒ))を有する化合物は、よく知られている方法、例えば、反転によって、反対の立体化学(すなわち、(Ｓ))を有する化合物を製造するために利用され得ることが多い。

本発明の特定の化合物は、非溶媒和形態、ならびに水和物形態を含む溶媒和形態で存在することができる。一般に、溶媒和形態は、非溶媒和形態と同等であり、本発明の範囲内に包含されることが意図されている。本発明の特定の化合物は、複数の結晶または非晶質形態で存在してもよい。一般に、すべての物理的形態は、現在の発明により考慮された用途に同等であり、現在の発明の範囲内にあるように意図されている。

本発明の特定の化合物は、不斉炭素原子(光学中心)または二重結合を有し；ラセミ体、ジアステレオマー、幾何学的異性体および個々の異性体は、すべて本発明の範囲内に包含されると意図されている。

本発明の化合物はまた、そのような化合物を構成する１つまたはそれ以上の原子に不自然な割合の原子同位体を含み得る。例えば、化合物は、例えばトリチウム(^３Ｈ)、ヨウ素−１２５(^１２５Ｉ)または炭素−１４(^１４Ｃ)のような放射性同位体で放射性標識され得る。本発明の化合物のすべての同位体変動は、放射性であるか否かにかかわらず、本発明の範囲内に包含されると意図されている。

本出願で使用される用語「医薬組成物」とは、組織の状態または疾患の同定、予防または処置のために使用される物質および／または物質の組み合わせを意味する。医薬組成物は、疾患を予防および／または処置するために患者に投与するのに適しているように製剤化する。さらに、医薬組成物は、活性剤、不活性または活性の担体との組み合わせを意味し、組成物を治療的使用に適したものにする。医薬組成物は、その化学的および物理的特性に応じて、経口、非経口、局所、吸入（inhalative）、直腸、舌下、経皮、皮下または膣への適用経路用に製剤化することができる。医薬組成物は、固体、半固体、液体、経皮吸収治療システム(ＴＴＳ)を含む。固体組成物は、錠剤、コーティング錠、粉末、粒状、ペレット、カプセル、発泡性錠剤または経皮吸収治療システムからなる群から選択される。また、溶液、シロップ、輸液、抽出物、静脈内適用のための溶液、輸液のための溶液または本発明の担体システム溶液からなる群から選択される液体組成物も含まれる。本発明の文脈で使用することができる半固形組成物には、エマルジョン、懸濁液、クリーム、ローション、ゲル、グロビュール、口腔内錠剤および座薬が含まれる。

「薬学的に許容できる」とは、連邦政府または州政府の規制当局によって承認されたか、または動物、特に人間に使用するための米国薬局方またはその他の一般的に認められている薬局方にリストされていることを意味する。

本明細書で使用されるように、用語「担体」とは、治療剤とともに投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤またはビヒクルを意味する。このような医薬担体は、無菌液体、例えば生理食塩水水溶液（saline solutions in water）および、石油由来油、動物由来油、植物由来油または合成由来油、例えばピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などを含む油類であってもよい。医薬組成物を静脈内投与する場合、生理食塩水が好ましい担体である。また、生理食塩水、水性デキストロースおよびグリセロール溶液も液体担体として、特に注射用の溶液として採用することができる。適切な医薬品添加剤には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、モルト、米、小麦粉、粉乳(ｃｈａｌｋ)、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどが含まれる。所望であれば、組成物はまた、少量の湿潤剤または乳化剤またはｐＨ緩衝剤を含み得る。好適な薬剤担体の例は、E. W. Martinによる"Remington's Pharmaceutical Sciences"に記載されている。

本明細書で使用される用語「線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)」とは、「セプラーゼ」という用語でも知られている。両方の用語は、本明細書において互換的に使用することができる。線維芽細胞活性化タンパク質は、ジペプチジルペプチダーゼIV(DPPIV)様フォールドを有するホモ二量体統合タンパク質であり、α／βヒドロラーゼドメインおよび８ブレードβプロペラドメインを特徴とする。

実施態様
以下では、本発明のさまざまな態様をより詳細に定義する。このように定義される各態様は、反対に明確に示されない限り、他の態様と組み合わせてもよい。特に、好ましいまたは有利であると示されるいずれかの特徴は、好ましいまたは有利であると示される他の特徴と組み合わせてもよい。

第１の態様において、本発明は、式(Ｉ)：

［式中、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺの中の少なくとも３個が存在する条件で、独立して存在するか、または不存在であり；
Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、独立してＯ、ＣＨ_２、ＮＲ^４、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＲ^４、ＨＣＲ^４およびＲ^４ＣＲ^４からなる群から選択され、ただし二つのＯは互いに直接隣接してない；好ましくは、６個の基のうちの４個が存在し、ここで、２個はＣ＝Ｏであり、１個はＣＨ_２であり、そして１個はＮＨであり；より好ましくは、４個の基が存在し、ここで、２個はＣ＝Ｏであり、１個はＣＨ_２であり、そして１個はＮＨであり；最も好ましくは、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺが存在し、ここで、ＶおよびＺはＣ＝Ｏであり、ＷおよびＹは、独立してＣＨ_２およびＮＨから選択され；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキルおよびＳ−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され；

Ｒ^３は、−Ｈ、−ＣＮ、−Ｂ(ＯＨ)_２、−Ｃ(Ｏ)−アルキル、−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｓ(Ｏ)_２−アリール、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＰＯ_３Ｈ_２および５−テトラゾリルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、−Ｈ、−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｓ−Ｃ_１−６−アルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルケニル、アルキニル、アリールおよび−Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択され、各−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨ、オキソ、ハロから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよく、また、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹまたはＺに結合されていてよく；
Ｒ^５は、−Ｈ、ハロおよびＣ_１−６−アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^６およびＲ^７は、独立して−Ｈ、

からなる群から選択され、ただしＲ^６およびＲ^７が同時にＨでない；好ましくは、Ｒ^６は７−または８−キノリルの位置に結合し、Ｒ^７は５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^６は７−キノリルの位置に結合し、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し；
ここで、Ｌはリンカーであり；
Ｄ、Ａ、ＥおよびＢは独立して存在するか、または不存在であり、好ましくは、少なくともＡ、ＥおよびＢが存在し、ここで、存在する場合：
Ｄはリンカーであり；

Ａは、ＮＲ^４、Ｏ、ＳおよびＣＨ_２からなる群から選択され；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキル、

からなる群から選択され；
ここで、ｉは１、２または３であり；
ここで、ｊは１、２または３であり；
ここで、ｋは１、２または３であり；
ここで、ｍは１、２または３であり；
より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；
ＡおよびＥは一緒になって、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される基、好ましくはヘテロシクロアルキルを形成し、ここで、ＡおよびＥは、単環式、ニ環式および多環式であってもよく、好ましくは単環式であり；各ＡおよびＥは、−Ｈ、−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｓ−Ｃ_１−６−アルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルケニル、アルキニル、アリールおよび−Ｃ_１−６−アラルキルから選択される１〜４個の置換基によって置換されていてよく、各−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨ、オキソおよびハロから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよく；また、Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅまたは

に結合されていてよく；

Ｂは、Ｓ、ＮＲ^４、ＮＲ^４−Ｏ、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環からなる群から選択され、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されており；そして、
Ｒ^８は、放射性部分、キレート剤、蛍光色素、造影剤およびそれらの組み合わせからなる群から選択され；

は、１−ナフチル基部分または５〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、ここに該ヘテロ環はＮ原子とＸとの間に２個の環原子が存在すし；また、該ヘテロ環は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１、２または３個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく；そして、ＸはＣ原子である］
で示される化合物、または薬学的に許容できる互変異性体、ラセミ体、水和物、溶媒和物もしくは塩を提供する。
好ましい実施態様において、ＡおよびＥは一緒になって、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７およびＣ_８単環式ヘテロシクロアルキルから選択される基を形成し、好ましくはＣ_５またはＣ_６単環式、またはＣ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、Ｃ_１０Ｃ_１１もしくはＣ_１２二環式ヘテロシクロアルキルから選択される基を形成し、好ましくはＣ_７、Ｃ_８、Ｃ_９およびＣ_１０二環式ヘテロシクロアルキルから選択される基を形成し、ここに該ヘテロシクロアルキルは独立してＮ、ＯおよびＳ、好ましくはＮおよびＯからなる群から選択される１、２、３または４個、好ましくは１または２個のヘテロ原子を含み、最も好ましくは１または２個のＮを含む。

本発明の第１の態様の好ましい実施態様において、式(Ｉ)：

［式中、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺの中の少なくとも３個が存在する条件で、独立して存在するか、または不存在であり；
Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、独立してＯ、ＣＨ_２、ＮＲ^４、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＲ^４、ＨＣＲ^４およびＲ^４ＣＲ^４からなる群から選択され、ただし二つのＯが互いに直接隣接しない；好ましくは、６個の基のうちの４個が存在し、ここで、２個はＣ＝Ｏであり、１個はＣＨ_２であり、そして１個はＮＨであり；より好ましくは、４個の基が存在し、ここで、２個はＣ＝Ｏであり、１個はＣＨ_２であり、そして１個はＮＨであり；最も好ましくは、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺが存在し、ここで、ＶおよびＺはＣ＝Ｏであり、ＷおよびＹは、独立してＣＨ_２およびＮＨから選択され；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキルおよびＳ−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され；

からなる群から選択され、ただしＲ^６およびＲ^７は同時にＨではない、好ましくは、Ｒ^６は７−または８−キノリルの位置に結合し、Ｒ^７は５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^６は７−キノリルの位置に結合し、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し；
ここで、Ｌはリンカーであり；
Ｄ、Ａ、ＥおよびＢは独立して存在するか、または不存在であり、好ましくは、少なくともＡ、ＥおよびＢは存在し、ここで、存在する場合：
Ｄはリンカーであり；

からなる群から選択され；
ここで、ｉは１、２または３であり；
ここで、ｊは１、２または３であり；
ここで、ｋは１、２または３であり；
ここで、ｍは１、２または３であり；
より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；

は、１−ナフチル基部分または５〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環はＮ原子とＸとの間に２個の環原子が存在し；また、該ヘテロ環は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１、２または３個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく；そして、ＸはＣ原子である］
で示される化合物、または薬学的に許容できる互変異性体、ラセミ体、水和物、溶媒和物もしくは塩を提供する。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、ＡおよびＥは一緒になって、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７およびＣ_８単環式ヘテロシクロアルキルからなる基を形成し、好ましくはＣ_５もしくはＣ_６単環式、またはＣ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、Ｃ_１０、Ｃ_１１もしくはＣ_１２二環式ヘテロシクロアルキルからなる基を形成し、好ましくはＣ_７、Ｃ_８、Ｃ_９およびＣ_１０二環式ヘテロシクロアルキルからなる基を形成し、ここに該ヘテロシクロアルキルは独立してＮ、ＯおよびＳ、好ましくはＮおよびＯから選択される１、２、３または４個、好ましくは１または２個のヘテロ原子を含み、最も好ましくは１または２個のＮを含む。好ましい単環式ヘテロシクロアルキルは、ピロリジニル、ピペリジニル、イミダゾリジニル、１,２−ジアザシクロヘキサニル、１,３−ジアザシクロヘキサニル、ピペラジニル、１−オキソ−２−アザシクロヘキサニル、１−オキソ−３−アザシクロヘキサニルまたはモルホリニル、好ましくは、ピペリジニル、ピペラジニルおよびピロリジニルからなる群から選択される。好ましい二環式ヘテロシクロアルキルは、ビシクロ［２.２.１］２,５−ジアザヘプタニル、３,６−ジアザビシクロ［３.２.１］オクタニル、３,６−ジアザビシクロ［３.２.２］ノニル、オクタヒドロピロロ［２,３−ｂ］ピロリル、オクタヒドロピロロ［３,２−ｂ］ピロリル、オクタヒドロピロロ［３,４−ｂ］ピロリル、オクタヒドロピロロ［３,４−ｃ］ピロリル、９−メチル−３,７,９−トリアザビシクロ［３.３.１］ノナニルからなる群から選択される。

一方ではＡおよびＥおよびＢ、ならびに／または他方ではＲ^６もしくはＲ^７によって形成されるヘテロ環の間の結合は、好ましくはヘテロ原子、好ましくはＮを介して形成される。

特に、ＡおよびＥによって形成されるヘテロ環の好ましい例としては、

から選択される。

本発明の第１の態様の好ましい実施態様において、
Ｑ、ＲおよびＵはＣＨ_２であり、独立して存在するか、または不存在であり；好ましくは、ＱおよびＲは不存在であり；
Ｖは、ＣＨ_２、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ^４であり；好ましくは、ＶはＣ＝Ｏであり；
ＷはＮＲ^４であり；好ましくは、ＷはＮＨであり；
ＹはＨＣＲ^４であり；好ましくは、ＹはＣＨ_２であり；そして
ＺはＣ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ^４であり、好ましくは、ＺはＣ＝Ｏである。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；
ＶはＣＨ_２であり；
ＷはＮＨであり；
ＹはＣＨ_２であり；そして
ＺはＣ＝Ｏである。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２はハロであり；より好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２はＦであり；
Ｒ^３は、−Ｈ、−ＣＮおよび−Ｂ(ＯＨ)_２からなる群から選択され；好ましくは、Ｒ^３は−ＣＮまたは−Ｂ(ＯＨ)_２であり；より好ましくは、Ｒ^３は−ＣＮであり；
Ｒ^４は、−Ｈおよび−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され、ここで、−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよい。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施様態において、
Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；
ＶはＣＨ_２であり；
ＷはＮＨであり；
ＹはＣＨ_２であり；
ＺはＣ＝Ｏであり；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２はハロであり；より好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２はＦであり；
Ｒ^３は、−Ｈ、−ＣＮおよび−Ｂ(ＯＨ)_２からなる群から選択され；好ましくは、Ｒ^３は−ＣＮまたは−Ｂ(ＯＨ)_２であり；より好ましくは、Ｒ^３は-ＣＮであり；
Ｒ^４は、−Ｈおよび−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され、ここで、−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよい。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施様態において、
Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；
ＶはＣＨ_２であり；
ＷはＣＨ_２であり；
ＹはＮＨであり；
ＺはＣ＝Ｏであり；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２はハロであり；より好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２はＦであり；
Ｒ^３は、−Ｈ、−ＣＮおよび−Ｂ(ＯＨ)_２からなる群から選択され；好ましくは、Ｒ^３は−ＣＮまたは−Ｂ(ＯＨ)_２であり；より好ましくは、Ｒ^３は-ＣＮであり；
Ｒ^４は、−Ｈおよび−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され、ここで、−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよい。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

本発明の第１態様のさらなる好ましい実施様態において、

は、

からなる群から選択される、これらは、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子を含んでいてよい。

本発明の第１態様のさらなる好ましい実施態様において、

は、

であり、これは、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子を含んでいてよい。

本発明の第１態様のさらなる好ましい実施態様において、

は、

からなる群から選択される。Ｒ^６およびＲ^７は、独立して-Ｈ、

からなる群から選択され、ただしＲ^６およびＲ^７が同時にＨではない；好ましくは、Ｒ^６およびＲ^７は、５、６または７位に結合する。

好ましい実施態様において、

は、

からなる群から選択される。
他の好ましい実施態様において、

は、

である。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施様態において、
Ｒ^５およびＲ^６はＨであり；
Ｒ^７は

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
Ａは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ_２、ＮＨまたはＮＣＨ_３であり；
ＥはＣ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され；より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；または
ＡおよびＥは一緒になって、

から選択される基を形成し；
Ｂは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４または５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されている。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施様態において、
Ｒ^５およびＲ^６はＨであり；
Ｒ^７は、

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
ＥはＣ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され；より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；
Ｂは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４または、好ましくはさらに１または２個のＯ、ＮおよびＳから選択されるヘテロ原子を含み、好ましくはさらに１または２個の窒素原子を含む５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、好ましくは、ここで、該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されている。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｒ^５およびＲ^６はＨであり；
Ｒ^７は

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで
Ｄは不存在であり；
ＡはＳであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され；より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；
Ｂは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４または５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されている。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＣＨ_２であり；
ＥはＣ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され；より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；
Ｂは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキルまたは５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されている。好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＮＨであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄはアミノ酸であり、好ましくは荷電側鎖を有するアミノ酸であり；
ＡはＯであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄはアミノ酸であり、好ましくは荷電側鎖を有するアミノ酸であり；
ＡはＳであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄはアミノ酸であり、好ましくは荷電側鎖を有するアミノ酸であり；
ＡはＣＨ_２であり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄはアミノ酸であり、好ましくは荷電側鎖を有するアミノ酸であり；
ＡはＮＨであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

でり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、該Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され；より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；
Ｂは、５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環は好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含む。

であり、好ましくは、Ｒ^７は、５−または６−キノリルの位置に結合し；より好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；より好ましくは、Ｅはプロピルまたはブチルであり；
Ｂは、５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環は好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含む。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は、式：

［式中、ヘテロ環は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく、１個の窒素を含んでいてよく；

は、１、２または３位に結合し、好ましくは２位に結合し；
ｌは１または２である］
で示される芳香族または非芳香族単環式ヘテロ環である。

［式中、ヘテロ環は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく、１個の窒素をさらに含んでいてよく；

は、１、２または３位に結合し、好ましくは２位に結合し；
ここで、Ｎ−含有ヘテロ環はＣ_１−６−アルキルによって置換されている］
で示される芳香族または非芳香族単環式ヘテロ環である。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は、

からなる群から選択され、
ここで、Ｎ−含有ヘテロ環はＣ_１−６−アルキルによって置換されており、
ここで、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は

である場合、該ヘテロ環は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく、１個の窒素をさらに含んでよく、また、一つまたはそれ以上の(例えばアミノ酸由来)側鎖を含んでいてよく；

は、１、２または３位に結合し、好ましくは、２位に結合し；
ｏは１または２であり；

好ましくは、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は、

からなる群から選択され；より好ましくは、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は

である。

からなる群から選択され、
ここで、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

は、１、２または３位に結合し、好ましくは、２位に結合し；
ｏは１または２であり；
好ましくは、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は、

である場合、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は

である。

からなる群から選択される。

からなる群から選択され、ここで、ＢはＣ_１−３アルキルによって置換されている。

であり、好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
Ｅはプロピルまたはブチルであり；
Ｂは

である。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；
ＶはＣ＝Ｏであり；
ＷはＮＨであり；
ＹはＣＨ_２であり；
ＺはＣ＝Ｏであり；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−ＨおよびＦからなる群から選択され；より好ましくは、Ｒ^１およびＲ^２は同一であり、−ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ^３は−ＣＮであり；
Ｒ^５およびＲ^６はＨであり；
Ｒ^７は

であり、好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；

ＡはＯであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり；好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され；より好ましくは、ＥはＣ_１−６−アルキルであり、最も好ましくは、ＥはＣ３またはＣ４アルキルであり；
ＢはＮＨ−Ｃ_１−６−アルキル、

であり；好ましくは、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され；好ましくは、Ｂは

であり；そして

は

である。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；
ＶはＣ＝Ｏであり；
ＷはＮＨであり；
ＹはＣＨ_２であり；
ＺはＣ＝Ｏであり；
Ｒ^１およびＲ^２は同一であり、−ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ^３は−ＣＮであり；
Ｒ^５およびＲ^６はＨであり；
Ｒ^７は

であり、好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯ、Ｓ、ＣＨ_２、ＮＨまたはＮＣＨ_３であり；
Ｅは、メチル、エチル、プロピルまたはブチルであり；

ＡおよびＥは一緒になって

から選択される基を形成し；
Ｂは

であり、Ｂは、Ｃ_１−３アルキルによって置換されていてよく；好ましくは、Ｂは

であり；そして

は

である。

であり、好ましくは、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
Ｅは、メチル、エチル、プロピルまたはブチルであり；
Ｂは、

であり；好ましくは、Ｂは

であり；そして、

は

である。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、
Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；
ＶはＣ＝Ｏであり；
ＷはＮＨであり；
ＹはＣＨ_２であり；
ＺはＣ＝Ｏであり；
Ｒ^１およびＲ^２は同一であり、−ＨおよびＦからなる群から選択され；
Ｒ^３はＣＮであり；
Ｒ^５およびＲ^６はＨであり；
Ｒ^７は

であり、Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
Ｅは、メチル、エチル、プロピルまたはブチルであり；
Ｂは、

でり；好ましくは、Ｂは

であり；そして、

は

である。

本発明の第１のさらなる好ましい実施態様において、Ｃ_１−６−アルキルは、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択される。

本発明の第１のさらなる好ましい実施態様において、Ｃ_１−３−アルキルは、メチル、エチル、プロピルおよびｉ−プロピルからなる群から選択される。

本発明の第１のさらなる好ましい実施態様において、Ｃ_１−６−アラルキルは、ベンジル、フェニル−エチル、フェニル−プロピルおよびフェニル−ブチルからなる群から選択される。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、本発明の第１の態様の化合物は表１の化合物から選択される。より好ましくは、本発明の第１の態様の化合物は表２の化合物から選択される。より好ましくは、本発明の第１の態様の化合物は、ＦＡＰＩ−０２およびＦＡＰＩ−０４からなる群から選択される。

本発明の第１の態様の好ましい実施態様において、本発明の第１の態様の化合物は、表１および／または表３の化合物から選択される。より好ましくは、本発明の第１の態様化合物は表２および／または表４の化合物から選択される。より好ましくは、本発明の第１の態様の化合物は、ＦＡＰＩ−０２、ＦＡＰＩ−０４、ＦＡＰＩ−４６、ＦＡＰＩ−３４、ＦＡＰＩ−４２、ＦＡＰＩ−５２、ＦＡＰＩ−６９、ＦＡＰＩ−７０、ＦＡＰＩ−７１、ＦＡＰＩ−７２およびＦＡＰＩ−７３からなる群から選択される。

表１：本発明の第１の態様の好ましい化合物
§蛍光化合物；＄^９９ｍＴｃ−キレート剤；＊Ｐｂ−キレート剤；Ｒ^１およびＲ^２は４−ピロリジンの位置にあり；Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；

は

であり、Ｒ^５はＨであり；Ｒ^６は７−キノリルの位置に結合し；Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し；「−」は、Ｒ^６またはＲ^７がＨであることを示し；「＋」は、Ｒ^６またはＲ^７が

であることを示し；ＶはＣ＝Ｏであり；ＷはＮＨであり；ＹはＣＨ_２であり；ＺはＣ＝Ｏであり；Ｒ^３は-ＣＮであり；ＡはＯである(Ａが不存在であり、Ｒ^７が５−キノリルの位置に結合するＦＡＰＩ−０１除外)。

表２：特に興味深い化合物。Ｑ、Ｒ、ＵおよびＤは不存在であり；Ｒ^１およびＲ^２は４−ピロリジンの位置にあり；

は

であり、Ｒ^５、Ｒ^６はＨであり；Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し；ＶはＣ＝Ｏであり；ＷはＮＨであり；ＹはＣＨ_２であり；ＺはＣ＝Ｏであり；Ｒ^３は−ＣＮであり；Ｂは１,４−ピペラジンであり；Ｅは１,３−プロパンであり；ＡはＯである。

表３：本発明の第１の態様のさらなる好ましい化合物。
§蛍光化合物；＄^９９ｍＴｃ−キレート剤；＊^１８Ｆ−標識の前駆体；Ｑ、ＲおよびＵは不存在であり；Ｒ^１およびＲ^２は４−ピロリジンの位置にあり；

は

であり、Ｒ^５およびＲ^６はＨであり；Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し、

であり；ＶはＣ＝Ｏであり；ＷはＮＨであり；ＹはＣＨ_２であり；ＺはＣ＝Ｏであり；Ｒ^３は-ＣＮである。

表４：特に興味深い化合物。Ｑ、Ｒ、ＵおよびＤは不存在であり；Ｒ^１およびＲ^２は、４−ピロリジンの位置にあるフッ素原子であり；

は

であり；Ｒ^５、Ｒ^６はＨであり；Ｒ^７は６−キノリルの位置に結合し；ＶはＣ＝Ｏであり；ＷはＮＨであり；ＹはＣＨ_２であり；ＺはＣ＝Ｏであり；Ｒ^３は-ＣＮであり；Ｂは１,４−ピペラジンであり；Ｅは１,３−プロパンであり；ＡはＯである。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、Ｒ^８は、蛍光同位体、放射性同位体、放射性薬剤またはそれらの組み合わせである放射性部分である。好ましくは、該放射性部分は、α放射線放出同位体、β放射線放出同位体、γ放射線放出同位体、オージェ電子放出同位体、Ｘ−ｒａｙ放出同位体、蛍光放出同位体、例えば^１１Ｃ、^１８Ｆ、^５１Ｃｒ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^１１１Ｉｎ、^９９ｍＴｃ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^１３９Ｌａ、^１４０Ｌａ、^１７５Ｙｂ、^１５３Ｓｍ、^１６６Ｈｏ、^８８Ｙ、^９０Ｙ、^１４９Ｐｍ、^１６５Ｄｙ、^１６９Ｅｒ、^１７７Ｌｕ、^４７Ｓｃ、^１４２Ｐｒ、^１５９Ｇｄ、^２１２Ｂｉ、^２１３Ｂｉ、^７２Ａｓ、^７２Ｓｅ、^９７Ｒｕ、^１０９Ｐｄ、^１０５Ｒｈ、^１０１ｍＲｈ、^１１９Ｓｂ、^１２８Ｂａ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１３１Ｉ、^１９７Ｈｇ、^２１１Ａｔ、^１５１Ｅｕ、^１５３Ｅｕ、^１６９Ｅｕ、^２０１Ｔｌ、^２０３Ｐｂ、^２１２Ｐｂ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^１８８Ｒｅ、^１８６Ｒｅ、^１９８Ａｕ、^２２５Ａｃ、^２２７Ｔｈおよび^１９９Ａｇからなる群から選択される。好ましくは、^１８Ｆ、^６４Ｃｕ、^６８Ｇａ、^９０Ｙ、^９９ｍＴｃ、^１５３Ｓｍ、^１７７Ｌｕ、^１８８Ｒｅなどのからなる群から選択される。

本発明の第１の態様のさらなる好ましい実施態様において、Ｒ^８は、以下の種類の蛍光色素：キサンテン、アクリジン、オキサジン、シアニン、スチリル色素、クマリン、ポルフィーン、金属−配位子錯体、蛍光タンパク質、ナノ結晶、ペリレン、ホウ素−ジピロメテンおよびフタロシアニンからなる群から選択される蛍光色素、ならびにこれらの種類の色素の複合物および組み合わせである。

本発明の第１の様態のさらなる好ましい実施様態において、Ｒ^８は、２価または３価の金属カチオンと錯体を形成するキレート剤である。好ましくは、キレート剤は、１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ,Ｎ',Ｎ,Ｎ'−テトラ酢酸(ＤＯＴＡ)、エチレンジアミンテトラ酢酸(ＥＤＴＡ)、１,４,７−トリアザシクロノナン−１,４,７−トリ酢酸(ＮＯＴＡ)、トリエチレンテトラミン(ＴＥＴＡ)、イミノ二酢酸、ジエチレントリアミン−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ',Ｎ''−ペンタ酢酸(ＤＴＰＡ)、ビス−(カルボキシメチルイミダゾール)グリシンおよび６−フィードラジノピリジン３−カルボン酸(ＨＹＮＩＣ)からなる群から選択される。

本発明の第１のさらなる好ましい実施態様において、Ｒ^８は、常磁性剤を含むか、またはそらからなる造影剤であって、好ましくは、ここで、常磁性剤が、常磁性ナノ粒子を含むか、またはそれからなる。

本発明の第１のさらなる好ましい実施態様において、Ｒ^８は、表１〜５のいずれかのＲ^８である。

第３の態様において、本発明は、動物またはヒトの対象における線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患の診断または処置に使用するための、第１の態様の化合物または第２の態様の医薬組成物に関する。好ましくは、線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患は、癌、慢性炎症、アテローム性動脈硬化症、線維症、組織リモデリングおよびケロイド障害からなる群から選択される。

好ましくは、線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴する疾患が癌である場合、該癌は、乳癌、膵臓癌、小腸癌、結腸癌、直腸癌、肺癌、頭頸部癌、卵巣癌、肝細胞癌、食道癌、下咽頭癌、上咽頭癌、喉頭癌、骨髄腫細胞、膀胱癌、胆管細胞癌、腎明細胞癌、神経内分泌腫瘍、腫瘍誘発性骨軟化症、肉腫、ＣＵＰ(未知の初期癌)、胸腺癌、類腱腫、神経膠腫、星細胞腫、頸癌および前立腺癌からなる群から選択される。好ましくは、該癌は、神経膠腫、乳癌、結腸癌、肺癌、頭頸部癌、肝臓癌または膵臓癌である。より好ましくは、該癌は神経膠腫である。

好ましくは、線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患が慢性炎症である場合、該慢性炎症は、リウマチ性関節炎、骨関節症およびクロ−ン病からなる群から選択される。好ましくは、該慢性炎症はリウマチ性関節炎である。

好ましくは、線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患が線維症である場合、該線維症は、特発性肺線維症などの肺線維症および肝臓硬変からなる群から選択される。

好ましくは、線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患が組織リモデリングである場合、該組織リモデリングは、心筋梗塞の後に発生する。

好ましくは、線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患がケロイド障害である場合、該ケロイド障害は、瘢痕形成、ケロイド腫瘍およびケロイド瘢痕からなる群から選択される。

第４の態様において、本発明は、第１の態様の化合物もしくは第２の態様の医薬組成物および疾患の診断または処置のためのインストラクションを含むか、またはそれらからなるキットに関する。好ましくは、該疾患は前記特定の疾患である。

実施例１：化合物の合成および放射化学
ＦＡＰ−α特異的な阻害物質(Jansen et al., ACS Med Chem Lett, 2013)に基づき、二つの放射性追跡子(放射性トレーサー)を合成した。放射性ヨウ素標識ＦＡＰＩ−０１は、パラジウム触媒による臭素／スズ交換により調製した有機スズスタニル化前駆体を介して得た。ＦＡＰＩ−０２は、５段階で合成した放射性金属キレートのための前駆体である。同じ操作または若干変更した操作を適用することにより、追加の化合物を調製した。これらの化合物の構造を表１および表２に列挙する。スタンニル化前駆体の放射性ヨウ素化は、過酢酸を用いて行った。Ｌｕ−１７７およびＧａ−６８とのキレート化のために、反応混合物のｐＨを酢酸ナトリウムで調節し、９５℃に１０分間加熱した。ヒト血清における安定性は、沈殿および上清のラジオ-ＨＰＬＣ分析によって分析した。

試薬
全ての溶媒および非放射性試薬は、ＡＢＣＲ(Karlsruhe, Germany)、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ(Muenchen, Germany)、ＡｃｒｏｓＯｒｇａｎｉｃｓ(Geel, Belgium)またはＶＷＲ(Bruchsal, Germany)から試薬グレードで入手し、さらなる精製なしで使用した。Ａｔｔｏ４８８ＮＨＳ−エステルはＡｔｔｏＴｅｃ(Siegen, Germany)から入手した。２,２’,２’’−(１０−(２−(４−ニトロフェニル)オキシ)−２−オキソエチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１,４,７トリイル)トリ酢酸(ＤＯＴＡ−ＰＮＰ)は、Ｍｉｅｒらのプロトコールによって合成した(Mier et al., Bioconjug Chem, 2005)。中間体である６−メトキシキノリン−４−カルボン酸(７)、５−ブロモキノリン−４−カルボン酸(３)および(Ｓ)−１−(２−アミノアセチル)ピロリジン−２−カルボニトリル４−ベンゼンスルホン酸メチルは、Ｊａｎｓｅｎらのプロトコールによって合成した。(Jansen et al., ACS Med Chem Lett, 2013)。物質(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−５−ブロモキノリンカールボキサミドは修飾ＨＢＴＵアミド化プロトコールによって合成した。

化合物の合成
スキーム１は、５−ブロモキノリル−４−カルボン酸(３)において、ｎ−ブチルリチウムを用いてＢｒ／Ｌｉ交換を行い、元素状ヨウ素でクエンチングしてヨードキノリン４を得るＦＡＰＩ−０１の初期合成を示している。この化合物をＨＢＴＵ／ＨＯＢｔ−活性化によりＧｌｙ−Ｐｒｏ−ＣＮフラグメントにカップリングさせ、ＦＡＰＩ−０１の非放射性の対照物質(１)を得た。

スキーム１.非放射性ＦＡＰＩ−０１の合成。ｉ)ｎＢｕＬｉ、次にＩ_２、ＴＨＦ；ｉｉ)ＨＢＴＵ／ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＣＮ、ＤＭＦ。

放射性ＦＡＰＩ−０１(１＊)の合成において、８０℃、ジオキサン中、阻害物質５のパラジウム触媒スタンニル化によって、スタンニル化前駆体６を得た(スキーム２)。

スキーム２.スタニル化前駆体４を介した放射性ＦＡＰＩ−１の合成。ｉ)(Ｍｅ_３Ｓｎ)_２；(ＰＰｈ_３)_２ＰｄＣｌ_２；ジオキサン８０℃；ｉｉ)Ｉ−１２５またはＩ−１３１；ＡｃＯＯＨ；１ＭＨＣｌ；ＭｅＯＨ。

放射性金属の取り込みによる放射性標識を可能にするために、キレート剤であるDOTAをFAP阻害物質の基本的な骨格に化学的に結合させた。Jansenら(Jansen et al. ACS Med Chem Lett, 2013)によって示されたように、キノリン−４−カルボン酸の６−位置での修飾は、標的親和性および特異性を損なうことなく耐性が高い。したがって、したがって、二官能性リンカーを、エーテル結合を介して８のヒドロキシル基に結合させ、これはスキーム３に示される合成の主な方法になっている。すぐに入手可能な１-ブロモ-３-クロロプロパンを選択し、ワンポットプロセスの最後に同時に形成されたエステル結合の鹸化の間に無傷であるスペーサーを作った。化合物９をＮ−Ｂｏｃ保護キノリネカルボン酸１０に変換し、これをさらにＨＢＴＵによりＨ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＣＮに結合させた。遊離アミンは吸湿性が高いため、化合物１１はＢｏｃ除去、溶媒交換および過剰なｐ−トルエンスルホン酸の中和後に、直接ＦＡＰＩ−０２(２)に変換された。

スキーム３.ＦＡＰＩ−０２の化学合成。ｉ)適量ＨＢｒ４８％、１３０℃；ｉｉ)１−ブロモ−３−クロロプロパン、Ｃｓ_２ＣＯ_３、ＤＭＦ次に６ＭＮａＯＨ；ｉｉｉ)１−Ｂｏｃ−ピペラジン、ＫＩ、ＤＭＦ；ｉｖ)ＨＢＴＵ／ＨＯＢｔ、ＤＩＰＥＡ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＣＮ、ＤＭＦ；ｖ)ＴｏｓＯＨ、ＭｅＣＮ、次にＤＯＴＡ−ＰＮＰ、ＤＩＰＥＡ、ＤＭＦ。

基Ａ≠Ｏを組み込んでいる化合物の場合は、キノリン−４−カルボン酸中間体を別の反応スキームによって合成した。このアプローチの鍵となる工程は、パラジウム触媒によるカップリング反応(例えば、ブッフバルト−ハートウィッグクロス−カップリング)であり、これは、クロス−カップリング反応の前に追加の保護を必要とし、クロス−カップリング反応の後にカルボン酸機能の脱保護を必要とする(スキーム４)。

スキーム４.ＦＡＰＩ−４６の合成のための構成要素である６−(３−(４−Ｂｏｃ−ピペラジン−１−イル)プロピル−１−(メチル)アミノ)キノリン−４−カルボン酸の合成。ｉ)ＤＣＣ、ｔＢｕＯＨ、ＣｕＣｌ；ｉｉ)３−メチルアミノ−１−プロパノ−ル、Ｃｓ_２ＣＯ_３、Ｐｄ_２(ｄｂａ)_３、ＢＩＮＡＰ；ｉｉｉ)ＭｓＣｌ、ＮＥｔ_３、ＤＣＭ次に１−Ｂｏｃ−ピペラジン、ＫＩ、ＤＭＦ；ｉｖ)ＴＦＡ次にＢｏｃ_２Ｏ、ＮＥｔ_３、ＤＭＦ。

(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−５−トリメチルスタンニルキノリンカルボキサミド(６)
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−５−ブロモキノリンカルボキサミド３.８８ｍｇ(１０.０μｍｏｌ)、ヘキサメチル二スズ２０μＬ(３２ｍｇ；９６μｍｏｌ)およびビス(トリフェニルホスフィーン)パラジウム(ＩＩ)ジクロライド０.７５ｍｇ(１.０７μｍｏｌ)を乾燥ジオキサン１ｍＬ中で、不活性雰囲気下、８０℃で一晩撹拌する。揮発性物質を除去し、残留物を５０％アセトニトリル／水２ｍＬに取り入れ、Ｃ１８ライトカートリッジで濾過した後、ＨＰＬＣ精製する。凍結乾燥後、生成物２.７８ｍｇ(５.９０μｍｏｌ；５９％)を得る。
LC-MS R_t 14.77 min, m/z 473.0786 [M(¹²⁰Sn)+H]⁺

５−ヨードキノール−４−カルボン酸(４)
水素化ナトリウム懸濁液(鉱油中６０％)５.４２ｍｇ(１３６μｍｏｌ)を、０℃、Ａｒの下、５−ブロモキノリン−４−カルボン酸(３)３０.２７ｍｇ(１２０μｍｏｌ)の乾燥ＴＨＦ３ｍＬ中の溶液に添加する。氷浴を除去し、反応混合物を−７８℃に冷却した後、ｎＢｕＬｉ(ヘキサン中１.６ｍ)１００μＬ(１６０μｍｏｌ)を滴下する。１５分後、ＴＨＦ２ｍＬ中のヨウ素６４.７１ｍｇ(２５４μｍｏｌ)を滴下し、反応物を−７８℃で３０分間撹拌した後、室温に到達させる。１時間後、０.５ＭＮａＨＣＯ_３１ｍＬと亜ジチオン酸ナトリウム約３０ｍｇ(１７０μｍｏｌ)を加え、過剰なヨウ素を除去することによって反応を停止させる。ＴＨＦを減圧下で除去した後、混合物をｐＨ２に酸性化し、酢酸エチル(２５ｍＬ)で３回抽出する。有機相を一緒にし、蒸発乾固し、ＨＰＬＣで精製する。凍結乾燥後、表題の化合物１８.１４ｍｇ(６０.７μｍｏｌ；４５％)を得る。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 13.95 (br, 0.3H), 8.93 (s, 1H), 8.34 (d, J =7.2 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.52 (t, J = 7.9 Hz, 1H); ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d6) 168.8, 150.3, 148.8, 141.3, 130.6, 121.0, 109.5; LC-MS R_t 8.65 min, m/z 299.9383 [M+H]⁺

(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−５−トリメチルスタンニルキノリンカルボキサミド(１；ＦＡＰＩ−０１)
ＤＭＦ５０μＬ中のＨＢＴＵ９.０７ｍｇ(２３.９μｍｏｌ)を、ＤＭＦ５０μＬ中の５−ヨ−ドキノリン−４−カルボン酸６.２１ｍｇ(２０.８μｍｏｌ)、ＨＯＢｔ７.４５ｍｇ(５５.２μｍｏｌ)およびＤＩＰＥＡ１０μＬの溶液に添加する。１５分後、ＤＭＦ５０μＬ中の(Ｓ)−１−(２−アミノアセチル)ピロリジン−２−カルボニトリル４−ベンゼンスルホン酸メチル(２９.９μｍｏｌ)を添加する。反応を水８５０μＬで停止させ、ＨＰＬＣで精製する。凍結乾燥し、生成物６.８６ｍｇ(１５.８μｍｏｌ；７６％)を得る。
¹H NMR (600 MHz, DMSO-d6) 9.06, 8.97, 8.33, 8.13, 7.56, 7.51, 4.81, 4.34, 4.06, 3.74, 3.56, 2.21, 2.17, 2.09, 2.05; ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d6) 167.1, 150.2, 148.8, 145.3, 141.5, 130.7, 125.3, 121.9, 119.3, 92.0, 46.3, 45.4, 42.1, 29.5, 24.9; LC-MS R_t 11.95 min, m/z 435.0102 [M+H]⁺

6-ヒドロキシキノリン-4-カルボン酸(8)
生６−メトキシキノリン−４−カルボン酸(７)１０５ｍｇ(４７７μｍｏｌ)を、４８％臭化水素酸水溶液３ｍＬに溶解する。この溶液を１３０℃に４時間加熱する。この溶液を、室温に到達させた後、６ＭＮａＯＨで弱塩基性ｐＨにする。ＨＰＬＣ−精製および凍結乾燥後、生成物７９.２ｍｇ(４１９μｍｏｌ；８８％)を得る。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 13.65 (br, 0.6H) 10.24 (s, 1H), 8.78 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 9.1, 2.6 Hz, 1H), ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d6) 167.7, 156.9, 146.5, 144.1, 133.4, 131.2, 126.2, 122.3, 122.6, 106.5; LC-MS R_t 6.66 min, m/z 190.0415 [M+H]⁺

６−ブロモキノリン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
６−ブロモキノリン-4-カルボン酸(生)９８.３ｍｇ(３９０μｍｏｌ)をテトラヒドロフラン5mLおよびトリエチルアミン２５.０μＬ(１８.３ｍｇ；１８１μｍｏｌ)に懸濁させ、Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｎ,Ｎ’−ジシクロヘキシル尿素(前日、純ジシクロヘキシルカルボジミド４２６ｍｇ(２.０７ｍｍｏｌ)、純ｔｅｒｔ−ブタノール１７３ｍｇ(２.３３ｍｍｏｌ)、純銅(Ｉ)塩化物１０.２ｍｇ(１０３μｍｏｌ)から調製)に添加する。この混合物を一晩５０℃に加熱した。この混合物を濾過し、溶媒を蒸発させ、生成物をＨＰＬＣで単離させた。凍結乾燥後、表題の化合物４９.７ｍｇ(１６１μｍｏｌ；４１％) を得た。
LC-MS R_t 20.40 min, m/z 251.9642 [M-tBu]⁺

６−(３−クロロ−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボン酸(９)
１−ブロモ−１−クロロプロパン４２.４μＬ(６７.４ｍｇ；４３０μｍｏｌ)を、ＤＭＦ２５０μＬ中の６−ヒドロキシキノリン−４−カルボン酸(８)２３.２ｍｇ(１２３μｍｏｌ)および炭酸カリウム１９０ｍｇ(１.３８μｍｏｌ)の懸濁液に添加し、一晩、６０℃に加熱する。この反応混合物を室温に冷却し、水５００μＬおよびアセトニトリル５００μＬで希釈した後、６ＭＮａＯＨ１００μＬを添加する。この反応混合物を、完全なエステル加水分解が達成した後、ＨＰＬＣ(５〜４０％)によって直接精製する。凍結乾燥後、生成物２６.４５ｍｇ(９９.４μｍｏｌ；８１％)を得る。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 13.75 (br, 0.4H), 8.88 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 9.2, 2.0 Hz, 1H), 4.24 (t, J = 5.95 Hz, 2H), 3.85 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.27 (m, 2H); ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d6) 167.6, 157.5, 147.6, 144.8, 134.0, 131.2, 125.9, 122.7, 122.2, 104.5, 64.7, 41.9, 31.6; LC-MS R_t 11.46 min, m/z 266.0461 [M+H]⁺

６−(３−ヒドロキシプロピルメチルアミノ)キノリン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
６−ブロモキノリン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル２０４.６ｍｇ(６６４μｍｏｌ)、ＢＩＮＡＰ３４.１０ｍｇ(５４.７μｍｏｌ)、Ｐｄ_２(ｄｂａ)_３２１.５１ｍｇ(２３.５μｍｏｌ)および炭酸セシウム４８０.３ｍｇ(１.４７ｍｍｏｌ)をトルエン６ｍＬに溶解し、Ｎ−メチル−１,３−プロパノ−ルアミン１２８.０μＬ(１１８ｍｇ；１.３２ｍｍｏｌ)を添加した。この混合物を９０℃で一晩撹拌した後、溶媒を除去し、残留物を１：１の水／アセトニトリルに懸濁させ、濾過した後、ＨＰＬＣによって精製した。凍結乾燥後、表題の化合物１７２.７ｍｇ(５４７μｍｏｌ；８２％)を得た。
LC-MS R_t 13.41 min, m/z 261.1213 [M-tBu+H]⁺

６−(３−(４−Ｂｏｃ−ピペラジン−１−イル)プロピル−１−(メチル)アミノ)キノリン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
６−(３−ヒドロキシプロピルメチルアミノ)キノリン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル６２.８ｍｇ(１９９μｍｏｌ)をジクロロメーターン５ｍＬおよびトリエチルアミン９０.０μＬ(６６.６ｍｇ；６５９μｍｏｌ)に溶解した。メーターンスルホニルクロライド２０.０μＬ(２９.６ｍｇ；２５８μｍｏｌ)を０℃で添加し、この混合物を６０分間反応させた。１−Ｂｏｃ−ピペラジン１９４.６ｍｇ(１.０５ｍｍｏｌ)を添加した後、揮発性物質を除去した。ジメチルホルムアミド５００μＬおよびヨウ化カリウム(potaqssium ヨウ化物)４７.４ｍｇ(２８６μｍｏｌ)を残留物に加えた。この混合物を６０℃で１２０分間振盪した後、ＨＰＬＣで生成物を単離させた。凍結乾燥後、表題の化合物８１.０５ｍｇ(１６７μｍｏｌ；８４％) を得た。
LC-MS R_t 13.99 min, m/z 485.3086 [M+H]⁺

６−(３−(４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボン酸(１０)
６−(３−クロロ−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボン酸(９)１５.１３ｍｇ(５６.９μｍｏｌ)、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン５５.４３ｍｇ(２９８μｍｏｌ)およびヨウ化カリウム５１.０５ｍｇ(３０.８μｍｏｌ)をＤＭＦ２５０μＬに溶解する。この混合物を６０℃で一晩振盪する。得られた懸濁液を水７５０μＬで希釈した後、生成物をＨＰＬＣで精製する。凍結乾燥後、生成物を対応するＴＦＡ−塩として２８.７３ｍｇ(５４.３μｍｏｌ；９５％)得る。
¹H NMR (500 MHz, D₂O) 8.93 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 9.3, 2,5 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.36 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 4.27 (d, J = 13.55 Hz, 2H), 3.67 (d, J = 11.95 Hz), 3.47 (t, J = 15.5 Hz, 2 H), 3.27 (t, J = 12.7 Hz), 3.12 (td, J = 12.2, 2.65 Hz), 2.37 (m2 H), 1.47 (s, 9H); ¹³C NMR (125 MHz, D₂O) 155.5, 153.5, 149.0, 141.4, 134.4, 127.9, 126.6, 122.3, 118.4, 110.0, 105.1, 82.8, 65.5, 54.3, 51.5, 48.6, 40.7, 29.6, 27.4; LC-MS R_t 10.62 min, m/z 416.1997 [M+H]⁺

６−(３−(４−Ｂｏｃ−ピペラジン−１−イル)プロピル−１−(メチル)アミノ)キノリン−４−カルボン酸
６−(３−(４−Ｂｏｃ−ピペラジン−１−イル)プロピル−１−(メチル)アミノ)キノリン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル１００.１２ｍｇ(２０６μｍｏｌ)を、トリフルオロ酢酸９００μＬ、トリイソプロピルシラン２５μＬ、水２５μＬおよびトリフルオロメーターンスルホン酸５０μＬで６０分間処理した。脱保護された化合物をジエチルエーテルで沈殿させ、乾燥させ、ジメチルホルムアミド１ｍＬ中の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル６０.８３ｍｇ(２７９μｍｏｌ)およびトリエチルアミン５０.０μＬ(３６.５ｍｇ；３６１μｍｏｌ)とさらに６０分間反応させた。ＨＰＬＣ−精製および凍結乾燥後、５５.４２ｍｇ(１２９μｍｏｌ；６５％２工程をかけで)を得た。
LC-MS R_t 10.52 min, m/z 429.2463 [M+H]⁺

(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド(１１)
ＤＭＦ５０μＬ中のＨＢＴＵ９.４３ｍｇ(２４.９μｍｏｌ)を、ＤＭＦ５０μＬ中の６−(３−(４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボン酸(１０)１０.５６ｍｇ(１９.９μｍｏｌ)、ＨＯＢｔ５.３８ｍｇ(３９.８μｍｏｌ)およびＤＩＰＥＡ１０μＬの溶液に添加する。１５分後、ＤＭＦ５０μＬ中の(Ｓ)−１−(２−アミノアセチル)ピロリジン−２−カルボニトリル４−ベンゼンスルホン酸メチル(２９.９μｍｏｌ)を添加する。この反応を水８５０μＬで停止させ、ＨＰＬＣで精製する。凍結乾燥させ、表題の化合物１２.８８ｍｇ(１９.４μｍｏｌ；９７％)を得る。
¹H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 9.04 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 9.6, 2.3 Hz, 1H), 4.84 (t, J = 6 Hz, 1 H), 4.46-4.36 (m, 4H), 4.26 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 3.83 (m, 1H), 3.67 (m, 3H), 3.47 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.27 (br, 2H), 3.11 (t, J = 11.5 Hz), 2.37 (m, 4H), 2.22 (m, 2H), 1.46 (s, 9H); ¹³C NMR (125 MHz, DMSO-d6) 168.6, 168.0, 159.4, 155.5, 147.7, 141.8, 135.1, 128.2, 127.5, 123.1, 120.0, 119.1, 104.7, 82.9, 66.0, 54.3, 51.5, 47.0, 46.3, 42.3, 29.4, 27.4, 24.7, 23.1; LC-MS R_t 11.81 min, m/z 551.2736 [M+H]⁺

(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド
前のプロトコールを行い、１３.２ｍｇ(２２.４μｍｏｌ；７５％)を得た。
LC-MS R_t 11.84 min, m/z 605.2610 [M+H]⁺

Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−Ｂｏｃ−ピペラジン−１−イル)プロピル−１−(メチル)アミノ)キノリン−４−カルボキサミド
前のプロトコールを行い、１.１７ｍｇ(１.９５μｍｏｌ；９２％)を得た。
LC-MS R_t 12.66 min, m/z 600.3057 [M+H]⁺

ＦＡＰＩ−０２(２)
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−（３−（４−tert-ブトキシカルボニル-ピペラジン-1-イル)-1-プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド(１１)４.８５ｍｇ(８.８０ｍｍｏｌ)をアセトニトリル１ｍＬに溶解し、それに４−メチルベンゼンスルホン酸一水和物４.２ｍｇ(２２.０μｍｏｌ)を添加する。この反応物を４５℃で一晩振盪した後、減圧下で揮発性物質を除去する。残留物をジメチルホルムアミド１９０μＬおよびトリエチルアミン１０μＬ(７.３ｍｇ；７２μｍｏｌ)に取り入れた後、ＤＯＴＡ−ｐ−ニトロフェノールエステル６.７７ｍｇ(１２.９ｍｍｏｌ)を添加する。この反応混合物を水１ｍＬで希釈し、２時間振盪した後、ＨＰＬＣで精製する。凍結乾燥後、５.０４ｍｇ(６.０２μｍｏｌ；６８％)を得る。
¹H NMR (600 MHz, D₂O) 9.02, 8.23, 8.07, 7.87, 7.83, 4.85, 4.45, 4.41, 4.40, 4.39, 3.83, 3.67, 3.50, 3.49, 2.40, 2.38, 2.36, 2.26, 2.22, 2.16; ¹³C NMR (150 MHz, D₂O) 167.9, 159.1, 147.2, 141.8, 135.4, 127.9, 127.2, 119.8, 119.0, 104.5, 65.8, 54.1, 46.8, 46.1, 42.1, 29.2, 24.5, 23.0: LC-MS R_t 8.37 min, m/z 837.3872 [M+H]⁺

ＦＡＰＩ−０４
前のプロトコールを行い、３.９７ｍｇ(４.５５μｍｏｌ；５７％)を得た。
LC-MS R_t 8.80 min, m/z 873.3664 [M+H]⁺

ＦＡＰＩ−４２
前のプロトコールを行い、１.９１ｍｇ(２.４７μｍｏｌ；８８％)を得た。
LC-MS R_t 9.37 min, m/z 386.6807 [M+2H]²⁺

ＦＡＰＩ−４６
前のプロトコールを行い、３９.２１ｍｇ(４４.３μｍｏｌ；８５％)を得た。
LC-MS R_t 9.03 min, m/z 443.7196 [M+2H]²⁺

ＦＡＰＩ−１９
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド１.０９ｍｇ(１.８６μｍｏｌ)を、ＨＢＴＵ２.１３ｍｇ(５.６２μｍｏｌ)およびＤＩＰＥＡ２.５０μＬ(１.８５ｍｇ；１４.３μｍｏｌ)で予め活性化し、ＦＡＰＩ−０２に適用した方法によってＢｏｃ−脱保護し、ビス((１−(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１Ｈ−イミダゾール−２−イル)メチル)グリシン２.７４ｍｇ(５.９１μｍｏｌ)と反応させた。ＨＰＬＣ精製および溶媒除去後、残留物を１：１アセトニトリル／トリフルオロ酢酸中の２.５％トリフルオロメーターンスルホン酸２００μＬで処理した。ジエチルエーテルで沈殿させ、ＨＰＬＣ精製した後、表題の化合物１.０６ｍｇ(１.２９μｍｏｌ；７０％)を得た。
LC-MS R_t 8.91 min, m/z 820.2933 [M+H]⁺

ＦＡＰＩ−２８
ＤＩＰＥＡ１.００μＬ(０.７４ｍｇ；５.７３μｍｏｌ)を、ＤＭＦ５０μＬ中のＦＡＰＩ−１９０.９５ｍｇ(１.１６μｍｏｌ)、ＨＯＢｔ０.４２ｍｇ(３.１４μｍｏｌ)およびＨＢＴＵ１.１０ｍｇ(２.８９μｍｏｌ)の溶液に添加した。１０分後、Ｈ−Ａｓｎ(Ｔｒｔ)−ＯｔＢｕ２.３０ｍｇ(５.３４μｍｏｌ)を添加し、１２０分間反応させた。８：２のＴＦＡ／アセトニトリル中の２.５％ＴｆＯＨでｔｅｒｔ−ブチル保護基を除去した。ＨＰＬＣ−精製および凍結乾燥後、表題の化合物０.７９ｍｇ(０.７５μｍｏｌ；６５％)を得た。
LC-MS R_t 9.23 min, m/z 524.7100 [M+2H]²⁺

ＦＡＰＩ−３４
前のプロトコールを行い、１.０１ｍｇ(０.８７μｍｏｌ；５２％)を得た。
LC-MS R_t 8.87 min, m/z 583.6988 [M+2H]²⁺

ＦＡＰＩ−６０
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド３.９１ｍｇ(６.６６μｍｏｌ)を、アセトニトリル５０μＬおよびトリフルオロ酢酸１００μＬで３０分間脱保護した。溶媒を蒸発させ、ジエチルエーテルで洗浄した後、１０分間プレインキュベートした、ジメチルホルムアミド１５０μＬおよびＤＩＰＥＡ２.５０μＬ(１.８５ｍｇ；１４.３μｍｏｌ)中のアセチル−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ(Ｔｒｔ)−Ｇｌｙ−ＯＨ８.０２ｍｇ(９.２７μｍｏｌ)、ＨＯＢｔ４.３１ｍｇ(３１.９μｍｏｌ)およびＨＢＴＵ４.４７ｍｇ(１１.８μｍｏｌ)の混合物を残留物に加え、１２０分間反応させた。ＨＰＬＣ−精製および凍結乾燥後、Ｓ−トリチル保護された表題の化合物４.６６ｍｇ(３.４９μｍｏｌ；５２％)を得た。
トリチル保護化合物３.３６ｍｇ(２.５２μｍｏｌ)をアセトニトリル５０μＬに溶解した。トリエチルシラン３μＬおよびトリフルオロ酢酸１００μＬを添加し、３０分間反応させた。ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥後、表題の化合物２.０１ｍｇ(２.３６μｍｏｌ；９４％；４９％二つの工程にかけて)を得た。
LC-MS R_t 10.26 min, m/z 871.2703 [M+Na]⁺

ＦＡＰＩ−６９
前のプロトコールを行い、０.５９ｍｇ(０.６０μｍｏｌ；３９％)を得た。
LC-MS R_t 10.25 min, m/z 991.3490 [M+H] ⁺

ＦＡＰＩ−７０
前のプロトコールを行い、０.６１ｍｇ(０.５４μｍｏｌ；３３％)を得た。
LC-MS R_t 10.14 min, m/z 1120.3884 [M+H] ⁺

ＦＡＰＩ−７１
前のプロトコールを行い、０.７９ｍｇ(０.６６μｍｏｌ；３４％)を得た。
LC-MS R_t 10.17 min, m/z 596.7075 [M+2H]²⁺

Ａｔｔｏ４８８−ＦＡＰＩ−０２(１４)
化合物１１０.６６ｍｇ(１.２０μｍｏｌ)を、４５℃でアセトニトリル２５０μＬ中の４−メチルベンゼンスルホン酸一水和物１.３３ｍｇ(６.９６μｍｏｌ)で４時間処理した。溶媒を除去した後、残留物をジメチルホルムアミド９５μＬおよびトリエチルアミン５μＬ(３.６５ｍｇ；３６.１μｍｏｌ)に溶解する。ＤＭＳＯ２５μＬ中のＡｔｔｏ４８８ＮＨＳ−エステル０.５４ｍｇ(０.５５μｍｏｌ)を添加した。６０分後、ＨＰＬＣで表題の化合物０.４９ｍｇ(０.４３μｍｏｌ；７８％)を単離させ、凍結乾燥させた。
LC-MS R_t 10.19 min, m/z 1022.2706 [M]⁺

ＦＡＰＩ−７３
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド１０.９５ｍｇ(１８.７μｍｏｌ)を、アセトニトリル１００μＬおよびトリフルオロ酢酸２００μＬで３０分間脱保護した。溶媒を蒸発させ、ジエチルエーテルで洗浄した後、Ｎ,Ｎ,Ｎ−トリメチル−５−((２,３,５,６−テトラフルオロフェノキシ)−カルボニル)ピリジン−２−アミニウムクロライド１５.０２ｍｇ(９.２７μｍｏｌ)を添加し、この混合物をジメチルホルムアミド２００μＬおよびトリエチルアミン１０.０μＬ(７.３０ｍｇ；７２.３μｍｏｌ)に溶解した。１２０分後、混合物をＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥させ、表題の化合物１１.２４ｍｇ(１４.７μｍｏｌ；７９％)を得た。
LC-MS R_t 9.37 min, m/z 649.2892 [M-CF₃CO₂]⁺

ＦＡＰＩ−７２
前のプロトコールを行い、９.８０ｍｇ(１２.６μｍｏｌ；７０％)を得た。
LC-MS R_t 9.28 min, m/z 662.3237 [M-CF₃CO₂]⁺

側鎖保護Ｆｍｏｃ−アミノ酸の一般的な接合

(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−(γ,γ−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル)−Ｌ−カルボキシ−グルタミルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペリジン−４−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド１４.０４ｍｇ(２３.９μｍｏｌ)を、アセトニトリル５０μＬおよびトリフルオロ酢酸１００μＬに溶解した。１０分後、揮発性物質を除去し、残留物をジエチルエーテルで洗浄した。ジメチルホルムアミド２００μＬ中のＦｍｏｃ−Ｌ−Ｇｌａ(ｔＢｕ)_２−ＯＨ１４.９５ｍｇ(２８.４μｍｏｌ)、ＨＯＢｔ７.７４ｍｇ(５７.４μｍｏｌ)、ＨＢＴＵ１３.４６ｍｇ(３５.５μｍｏｌ)およびＤＩＰＥＡ２０.０μＬ(１４.８ｍｇ；１１５μｍｏｌ)の溶液を乾燥された残留物に添加した。６０分後、モルホリン５０.０μＬ(５０.４ｍｇ；５７８μｍｏｌ)を添加し、３０分後ＨＰＬＣで生成物を単離させた。凍結乾燥後、表題の化合物１５.９５ｍｇ(２０.７μｍｏｌ；８６％)を得た。
LC-MS R_t 12.85 min, m/z 772.3643 [M+H]⁺

ＦＡＰＩ−７５
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(４−(γ,γ−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル)−Ｌ−カルボキシグルタミルピペラジン−１−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド３.３７ｍｇ(４.３７μｍｏｌ)およびＮＯＴＡ−ｐ−ニトロフェノール４.５２ｍｇ(１０.７μｍｏｌ)をジメチルホルムアミド１００μＬおよびトリエチルアミン１０.０μＬ(７.３０ｍｇ；７２.３μｍｏｌ)に溶解した。ＨＰＬＣ−精製および凍結乾燥後、中間体化合物を、アセトニトリル５０μＬ、トリフルオロ酢酸１００μＬ、トリイソプロピルシラン２.５μＬおよび水２.５μＬの溶液中で６０分間インキュベートすることによって脱保護した。ＨＰＬＣ−精製および凍結乾燥後、２.６２ｍｇ(２.７７μｍｏｌ；６３％)を得た。
LC-MS R_t 9.38 min, m/z 945.3668 [M+H]⁺

ＦＡＰＩ−７７−前駆体
一般的な活性エステル修飾プロトコールを行い、３.２３ｍｇ(３.０６μｍｏｌ；７３％)を得た。注：ＳＰＥを行った後、放射性フッ素化、ＨＰＬＣ−精製および９５℃下純ＴＦＡでの３分間処理による溶媒蒸発後、ｔｅｒｔ−ブチル保護基を除去した。
LC-MS R_t 16.02 min, m/z 1219.5858 [M+H]⁺

２−(２−(４,７,１０−トリス(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル)アセトキシ)酢酸
トリス−ｔＢｕ−ＤＯＴＡ２８.９９ｍｇ(５０.６μｍｏｌ)、炭酸セシウム９０.６５(２７８μｍｏｌ)および２−ブロモ酢酸ベンジル１０.２８μＬ(１５.０ｍｇ；６５.５μｍｏｌ)をジメチルホルムアミド３００μＬに懸濁させ、２時間振盪した。生成物をＨＰＬＣで単離させ、凍結乾燥し、メーターノール中の１０％酢酸２５ｍＬに溶解した。１０％Ｐｄ／Ｃ５０ｍｇおよび水素(雰囲気圧)を添加した。２時間後、溶媒を除去し、ＨＰＬＣで表題の化合物を単離させた。凍結乾燥後、表題の化合物２５.１９ｍｇ(３９.９μｍｏｌ；７９％)を得た。
LC-MS R_t 14.14 min, m/z 631.4784 [M+H]⁺

ｔＢｕ−ＦＡＰＩ−７９
(Ｓ)−Ｎ−(２−(２−シアノ−４,４−ジフルオロピロリジン−１−イル)−２−オキソエチル)−６−(３−(１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−ピペリジン−４−イル)−１−プロポキシ)キノリン−４−カルボキサミド２.００ｍｇ(３.４１μｍｏｌ)を、アセトニトリル５０μＬおよびトリフルオロ酢酸１００μＬに溶解した。１０分後、揮発性物質を除去し、残留物をジエチルエーテルで洗浄した。２−(２−(４,７,１０−トリス(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシ)−２−オキソエチル)−１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル)アセトキシ)酢酸４.２０ｍｇ(６.６０μｍｏｌ)およびＨＢＴＵ３.３５ｍｇ(８.８４μｍｏｌ)をジメチルホルムアミド１００μＬに溶解し、ＤＩＰＥＡ１０.０μＬ(７.４０ｍｇ；５７.４μｍｏｌ)を乾燥された残留物に添加し、６０分間反応させた。ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥後、表題の化合物２.２６ｍｇ(２.０６μｍｏｌ；６０％)を得た。
LC-MS R_t 12.98 min, m/z 1099.7481 [M+H]⁺

ＦＡＰＩ−７９
ｔＢｕ−ＦＡＰＩ−７９２.２６ｍｇ(２.０６μｍｏｌ)をアセトニトリル２５μＬおよびトリフルオロ酢酸１００μＬに溶解し、３５℃で３０分間振盪した。溶媒を蒸発させた後、生成物をＨＰＬＣで単離させた。凍結乾燥後、表題の化合物１.５８ｍｇ(１.７０μｍｏｌ；８２％)を得た。
LC-MS R_t 8.84 min, m/z 466.2737 [M+2H]²⁺

化合物の分析
逆相高速液体クロマトグラフィー(ＲＰ−ＨＰＬＣ)は、Chromolith Performance RP-18eカラム(100 × 3 mm; Merck KGaA Darmstadt, Germany)でのアセトニトリル水溶液の直線勾配(５分あたりアセトニトリル０−１００％、０.１％ＴＦＡ、流量２ｍＬ／分)を用いて行った。ＵＶ−吸光度は２１４ｎｍで検出した。放射性化合物のＨＰＬＣ分析には、付加的なγ-検出器を使用した。ＨＰＬＣ−ＭＳの特性評価は、Hypersil Gold C18 １.９μｍカラム(２００×２.１ｍｍ、２０分あたりアセトニトリル０−１００％、流量２００μＬ／分)を備えたAgilent 1200 HPLCシステムに接続したＥＳＩ質量分析計(Exactive, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)を用いて行った。分析用ラジオ−ＨＰＬＣは、Chromolith Performance RP-18eカラム(１００×３ｍｍ；Ｍｅｒｃｋ；１０分あたりアセトニトリル０−３０％；流量２ｍＬ／分)を用いて行った。ＨＰＬＣ−精製は、LaPrep P110-system(Knauer, Berlin, Germany)およびReprosil Pur 120カラム(C18-aq 5 μm 250 × 25mm; Dr. Maisch, Ammerbuch-Entringen, Germany)で行った。水/アセトニトリル-勾配(１５または２５分；０.１％ＴＦＡ；流量２０ｍＬ／分)は個々の生成物に対して変更した。

放射化学
放射性ヨウ素(Ｉ−１２５)は、Hartmann Analytik(Goettingen, Germany)から購入し;放射性ルテチウム(Ｌｕ−１７７)はITG(Muenchen, Germany)から得；放射性ガリウム(Ｇａ−６８)は、Themba Labs(Somerset West, South Africa)から購入したＧｅ−６８／Ｇａ−６８ジェネレータから溶出させた。Ｔｃ−９９ｍは、Ｍｏ−９９／Ｔｃ−９９ｍジェネレータ(Curium Pharma, Berlin, Germany)から溶出させた。Ｃｕ−６４は、UKT Tuebingen(Tuebingen, Germany)により提供された。Ｓｍ−１５３は、DSD Pharma(Purkersdorf, Austria)により提供された。Ｐｂ−２０３は、Lantheus(N. Billerica MA, USA)により提供された。Ｆ−１８−ＦＤＧおよびＦ−１８−フッ化物は、ZAG Zyklotron AG(Eggenstein, Germany)により提供された。トリカルボニルのためのＣＲＳキットは、Paul Scherrer Institut(Villingen-PSI, Switzerland)から得た。

ヨウ素化において、ＦＡＰＩ−０１の有機スズ前駆体(エタノール中１μｍｏｌ／ｍＬ)１０μＬを１Ｍ塩酸１０μＬおよび水１０μＬで希釈した後、０.０５ＭＮａＯＨ中のヨウ素−１２５を１−２０ＭＢｑ添加した。氷酢酸中の新鮮な１.９％過酢酸溶液を５μＬ添加することにより反応を開始させた。６０秒後、１ＭＮａＯＨを１５μＬ添加し、５％アスコルビン酸の水溶液を５μＬ添加することによって反応を停止させた後、ＨＰＬＣ精製を行った。得られた溶液をインビトロ実験に直接使用するか、または動物研究の場合には減圧下で蒸発乾固させ、０.９％ＮａＣｌ(Braun, Melsungen, Germany)に取り入れて使用する。

ＤＯＴＡ−化合物のＣｕ−６４、Ｌｕ−１７７およびＰｂ−２０３標識は、放射性核種５ＭＢｑを０.１ＭＮａＯＡｃ(ｐＨ５)中の個々の前駆体の１０μＭ溶液１００μＬに添加し、９５℃で１０分間インキュベートすることによって行った、この溶液は、インビトロ実験に直接使用するか、または生体内分布研究の場合には０.９％ＮａＣｌ(Braun, Melsungen, Germany)で希釈して使用する。マウスのイメージング研究(シンチグラフィー、PET)において、放射性追跡子を固相抽出(sep-pak light C18, Waters)で後処理した。

Ｔｃ(Ｉ)標識の前に、０.９％食塩水中のＴｃ−９９ｍ−過テクネチウム酸塩１ｍＬをＣＲＳキットに添加し、２０分間インキュベートした。室温に冷めた後、前駆体(水中１ｍＭ)２５.０μＬ、リン酸緩衝液(０.４Ｍ、ｐＨ７.４)１５０μＬおよび塩酸(１.０Ｍ)２４０μＬの混合物を添加し、最終混合物を必要に応じてｐＨ５に調整した。この反応は９５℃で２０分間行い、固相抽出(sep-pak light C18, Waters)で後処理した。インビボ実験や動物研究において、Ｔｃ(ＶＩＩ)還元後、試薬の５分の１とＣＲＳキット溶液２００μＬを用いて標識を行った。

Ｔｃ(Ｖ)標識の前に、２００ｍＭグルコヘプトン酸塩を含有するＳｎＣｌ２溶液３０μＬを０.９％生理食塩水中のＴｃ−９９ｍ−過テクネチウム酸塩２００μＬで、室温で１０分間インキュベートした。前駆体(水中１ｍＭ)５.００μＬおよび水酸化ナトリウム溶液(水中０.１Ｍ)３.７５μＬを添加し、最終混合物を９５℃で２０分間反応させた。マウスのイメージング研究(シンチグラフィー)において、放射性追跡子を固相抽出(sep-pak light C18, Waters)で後処理した。

動物研究のためのGａ−６８での標識は、ジェネレーター溶出液(０.６ＭＨＣｌ、約２３０ＭＢｑ)２５５μＬを９５℃でＤＯＴＡ−前駆体１ｎｍｏｌ、２０％アスコルビン酸水溶液１μＬおよびＮａＯＡｃ(２.５Ｍ)７２μＬの混合物で１０分間インキュベートすることによって行った。残った遊離放射活性は、水２ｍＬでの希釈、固相抽出(sep-pak light C18, Waters)、水２ｍＬでの洗浄、１：１水／エタノール１ｍＬでの溶出によって除去した。得られた溶液を減圧下で蒸発乾固させ、残留物を０.９％ＮａＣｌ(Ｂｒａｕｎ)に取り取り入れた。

ＡｌＦ−ＮＯＴＡ錯体の形成において、Ｆ−１８フッ化物を水Sep-Pak QMA plus lightカートリッジ(吸着剤４６ｍｇ、０.５ＭＮａＯＡｃで前処理、ｐＨ３.９)にトラップし、水で洗浄し、０.１ＭＮａＯＡｃ(ｐＨ３.９)５００μＬで溶出させた。動物研究におよて、溶離液１５０μＬをＡｌＣｌ_３溶液(水中１０ｍＭ)２μＬおよびＤＭＳＯ５０μＬでプレインキュベートした。５分後、この混合物をＮＯＴＡ−前駆体(４ｍＭ水溶液１０μＬ)４０ｎｍｏｌおよび２０％アスコルビン酸の水溶液１μＬに添加した。この溶液を９５℃で１５分間反応させた。生成物をＨＰＬＣ(１０分あたりアセトニトリル０−２０％)で単離させ、溶媒を除去し、０.９％食塩水に取り入れた後注射した。

６−フルオロニコチンアミドの形成において、Ｆ−１８フッ化物をWaters Sep-Pak QMA plus lightカートリッジ(吸着剤４６ｍｇ；０.５ＭＫＨＣＯ_３で前処理)にトラップし、水で洗浄し、乾燥させ、アセトニトリル４５０μＬおよび水５０μＬ中のcryptofix ２２２７.５０ｍｇ(１９.９μｍｏｌ)、ＫＨＣＯ_３１.９９ｍｇ(１.９９μｍｏｌ)の混合物で溶出させた。溶媒を除去した後、残留物をアセトニトリル３×１ｍＬで共沸蒸留によって乾燥させた。この残留物を１：１ｔｅｒｔ−ブタノール／アセトニトリル１００μＬに取り入れ、トリメチルピリジン−２−アミニウム前駆体１ｍｇ(約１.３μｍｏｌ)に添加した。この溶液を７５℃で１０分間反応させた。生成物をＨＰＬＣ(１０分あたりアセトニトリル０−３０％)で単離させ、溶媒を除去し、０.９％食塩水に取り入れた後、注射した。

その代わりに、６−フルオロニコチンアミドは、Ｆ−１８フッ化物をWaters Sep-Pak QMA plus lightカートリッジ(吸着剤４６ｍｇ；０.５ＭＫＨＣＯ_３で前処理)にトラップし、アセトニトリルで洗浄し、乾燥させ、メーターノール０.５ｍＬ中の(保護)ＦＡＰＩ−前駆体０.５ｍｇ(約０.４−０.６μｍｏｌ)で溶出させることによって合成した。減圧下で溶媒を除去し、残留物を１：４アセトニトリル／ｔｅｒｔ-ブタノール１００μＬに取り入れた。７０℃で２０分後、反応混合物を水で希釈し、保護された中間体を固相抽出(sep-pak light C18, Waters)で後処理した。溶媒を除去し、トリフルオロ酢酸２００μＬを残留物に加えた。この混合物を９５℃に３分間加熱し、減圧下で乾燥させ、水で希釈した後、生成物をＨＰＬＣで単離させ、これは、保護基を欠く化合物の場合、希釈された反応混合物で直接行われた。動物研究の場合は、生成物を溶媒を除去し、０.９％生理食塩水に取り入れた後注射した(無補正の放射化学的収量約２５％)。

ヒト血清中の安定性の測定において、放射性標識化合物(Ｉ−１２５では約２.５ＭＢｑ、Ｌｕ−１７７では約１５ＭＢｑ)を精製(ＨＰＬＣまたは固相抽出)し、溶媒を除去した。残留物をヒト血清(Sigma-Aldrich)２５０μＬに取り入れ、３７℃でインキュベートした。試料をアセトニトリル３０μＬで沈殿させ、ＨＰＬＣ(１０分あたりアセトニトリル０−３０％)で分析した。

実施例２：ＦＡＰＩ誘導体のインビトロ特性評価
インビトロ結合研究は、ヒト腫瘍細胞株ＢｘＰＣ３、Ｃａｐａｎ−２、ＭＣＦ−７(Sigma Aldrich Chemie GmbHから購入)およびＳＫ−ＬＭＳ−１(ATCCから購入)ならびに安定的にトランスフェクトされたＦＡＰ−細胞株ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ、ＨＥＫ−ｍｕＦＡＰおよびＣＤ２６発現細胞株ＨＥＫ−ＣＤ２６(Stefan Bauer、NCT Heidelbergから得た)を用いて行った。全ての細胞を３７℃／５％二酸化炭素下、１０％ウシ胎児血清含有ダルベッコ変法イーグル培地(ＤＭＥＭ)中で培養した。蛍光内在化実験において、細胞をカバーガラス上に播種し、ＦＡＰＩ−０２−Ａｔｔｏ４８８およびＤＡＰＩで染色して、細胞核染色を行った。画像は、６３倍油浸対物レンズを用いたレーザー走査型共焦点顕微鏡で取得した。放射性リガンド結合研究はＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞を用いて行った。放射性標識化合物を細胞培養物に加え、１０分〜２４時間の範囲の異なる時間間隔でインキュベートした。競合実験は、非標識化合物(１０^−５Ｍ〜１０^−９Ｍ)および放射性標識化合物に同時に６０分間曝露させることによって行った。流出実験において、６０分間インキュベートした後に放射性培地を除去し、１〜２４時間の範囲の時間間隔で非放射性培地に置き換えた。内在化実験において、細胞を１Ｍグリシン−ＨＣｌ緩衝液で１０分間インキュベートすることによって、表面結合活性を除去した。放射活性は、γカウンターを用いて測定し、１ｍｉｏ細胞に正規化し、適用線量のパーセンテージ(％ＩＤ)として計算した。

細胞染色および顕微鏡観察
内在化実験において、ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞およびＨＥＫｍｕＦＡＰ細胞を２４-ウェルプレートのコーティングされていないカバースリップ上に播種し、１０％ウシ胎児血清含有培地で培養して、最終的に約８０−９０％のコンフルエンスにした。培地を除去し、ｐＨ７.４のＰＢＳ０.５ｍＬで２回洗浄した。ＦＡＰＩ−０２−Ａｔｔｏ４８８(ＤＭＥＭ中２０μＭ)を細胞に添加し、３７℃で２時間インキュベートした。細胞をｐＨ７.４のＰＢＳ０.５ｍＬで３回洗浄し、パラホルムアルデヒド(ＰＢＳ中２％)で１５分間固定した。過成長したカバーガラスを、細胞核染色のためのＤＡＰＩ含有マウンティング培地を用いてスライドグラス上に配置した(Fluoroshield, Sigma-Aldrich)。画像は、使用された各蛍光色素分子(ＦＡＰＩ−０２−Ａｔｔｏ４８８に対して４８８、ＤＡＰＩに対して４０５ｎｍ)に対して、Zeiss Plan-Apochromat ６３ｘ／１.４油ＤＩＣＩＩＩ浸液対物レンズ(63x/1.4 Oil DIC III immersion objective)を用いて、０.０９９ｘ０.０９９μｍのｘｙ画素設定および１Ａｉｒｙ単位のピンホールサイズでレーザー走査型共焦点顕微鏡(Zeiss LSM 700; Zeiss, Oberkochen, Germany)上で取得した。写真は、Z ZEN 2008 softwareおよびImageJを用いて一貫して処理した。

放射性リガンド結合試験
放射性リガンド結合試験において、細胞を６−ウェルプレートに播種し、４８時間培養して、最終的に約８０−９０％のコンフルエンス(１.２−２ｍｉｏ細胞／ウェル)にした。培地を、ウシ胎児血清を含まない新鮮な培地１ｍＬに置き換えた。放射性標識化合物を細胞培養物に加え、１０分〜２４時間の範囲の異なる時間間隔でインキュベートした。競合実験は、非標識(１０^−５Ｍ〜１０^−９Ｍ)および放射性標識化合物に６０分間同時に暴露させることによって行った。流出実験において、６０分間インキュベートした後に放射性培地を除去し、1〜２４時間の範囲の時間間隔で非放射性培地に置き換えた。全ての実験において、細胞をｐＨ７.４のリン酸緩衝食塩水１ｍＬで２回洗浄し、続いて溶解緩衝液(０.３ＭＮａＯＨ、０.２％のＳＤＳ)１.４ｍｌ溶解した。放射活性は、カウンター(Cobra II, Packard)を用いて測定し、１ｍｉｏ細胞に正規化し、適用線量のパーセンテージ(％ＩＤ)として計算した。各実験を３回行い、独立実験ごとに３回繰り返した。

内在化実験において、細胞を３７℃および４℃下で、放射性標識化合物とともに６０分間インキュベートした。細胞の取り込みは、培地を細胞から除去し、ＰＢＳ１ｍＬで２回洗浄することによって終了させた。続いて、細胞を室温でグリシン−ＨＣｌ(ＰＢＳ中１Ｍ、ｐＨ２.２)１ｍＬで１０分間インキュベートし、表面結合活性を除去した。細胞を、氷冷のＰＢＳ２ｍＬで洗浄し、溶解緩衝液１.４ｍＬで溶解し、内在化画分(内在化された画分)を測定した。４℃でインキュベートする細胞において、全ての洗浄および溶出工程は氷冷の緩衝液を用いて行った。放射活性は、γカウンターを用いて測定し、１ｍｉｏ細胞に正規化し、適用線量のパーセンテージ(％ＩＤ)として計算した。

ＦＡＰＩ−０１は、ヒトおよびマウスのＦＡＰ−αを選択的に標的とする。
ＦＡＰＩ−０１のその標的タンパク質への結合性質を分析するために、放射性リガンド結合アッセイを、異なる癌細胞株ならびに、ヒトおよびマウスのＦＡＰならびにＤＰＰＩＶとしても知られる密接に関連する膜タンパク質であるＣＤ２６でトランスフェクトされた細胞株、を用いて行った。マウスのＦＡＰとＣＤ２６は両方とも、ヒトのＦＡＰ−αと高い相同性を示した(ｍｕＦＡＰ：アミノ酸レベルでの９０％の同一性と９４％の類似性；ＣＤ２６：５２％の同一性と７１％の構造的に高い類似性)( Kelly T., Drug Resist Updat, 2005)。

図１Ａに示されるように、ＦＡＰＩ−０１は、ＦＡＰ−陰性癌細胞株には有意に結合せず、ヒトおよびマウスのＦＡＰ−α発現細胞を高親和性で標的とした (ＩＣ_５０ヒトのＦＡＰ−α＝３９.４ｎＭ)。また、ＣＤ２６発現細胞への実質的な結合は観察されなかった(０.０５±０.０１％)ことから、ＦＡＰＩ−０１がＦＡＰ−αを選択的に標的としていることが証明された。これは、ＣＤ２６が腎臓、肝臓、小腸を含む様々な正常組織で高度に発現していることから、特に重要である。非特異的なＣＤ２６結合による高いバックグラウンドシグナルを避けるためには、ＦＡＰ-αに対するリガンドの高い選択性が大きな利点であり、結果的に最適な画像品質をもたらす。

ＦＡＰＩ−０１は、ＦＡＰ陽性細胞に急速に内在化したが、時間依存性の流出およびロバストな脱ヨウ素化を示している。
細胞ベースの内在化アッセイは、ＦＡＰＩ−０１の細胞への迅速な取り込みを示している(図１Ｂ)。１０分間のインキュベーション後、全結合画分の９５％が細胞内に位置している(合計１９.７０±０.２８％)。４時間の経過でも、活性の低下は限定的でしか観察されなかった(合計１７.００±０.４０％、そのうち９４％が内在化された)。

ヨウ素-標識化合物は、しばしば時間依存性の酵素脱ヨウ素化を示す。これは、ＦＡＰＩ−０１においても観察され、結果的により長いインキュベーション時間後にこの化合物の細胞内放射活性が低下した(２４時間後に３.２５±０.２９％)。脱ヨウ素化は、温度を４℃に下げた後、脱ヨウ素酵素の活性を低下させることによって最低限に抑えることができ、結果的に、２４時間後に２６.６６±１.５９％の放射活性が増加した。

ＦＡＰＩ−０２は、ＦＡＰＩ−０１と比べて、ヒトＦＡＰ−αへの結合および取り込みが強化されていることを示している。
酵素脱ヨウ素化によるＦＡＰＩ−０１の活性の急速な損失を避けるために、ＦＡＰ結合部分をキレート剤ＤＯＴＡに化学結合させたノンハロゲン誘導体ＦＡＰＩ−０２を設計した。この修飾は、結果的に強化された安定性に加え、診断または治療用放射性核種のいずれを容易に繰り込む可能性を提供し、ＦＡＰＩ−０２の不燃性化合物としての使用を可能にした。ＦＡＰＩ−０２は、このヨウ素化アナログと類似して、ＣＤ２６をアドレスすることなく、ヒトおよびマウスのＦＡＰ−(ＩＣ_５０ヒトのＦＡＰ−α＝２１ｎＭ)発現細胞に特異的に結合する(％ＩＤ＝０.１３±０.０１％；図１Ａ)。ＦＡＰＩ−０２は、ＦＡＰ−α発現細胞に急速に内在化し(６０分後２０.１５±１.７４％ＩＤ、そのうち９６％が内在化した；図１Ｂ)、これは時間の経過とともに、より安定した、より高い取り込み率を示している。ＦＡＰＩ−０１の１０分間のインキュベーション後の結合と比べて、２４時間後には５％の活性しか残っていない。一方、ＦＡＰＩ−０２の初期放射活性は、２４時間のインキュベーション後に３４％が検出された。流出実験では、ＦＡＰＩ−０２がＦＡＰＩ−０１より有意的に遅く除去されることを実証し、これは２４時間後には最初に蓄積されていた放射活性の１２％を保持していることを示している(ＦＡＰＩ−０１は２４時間後に１.１％のＩＤを保持している；図１Ｅ)。

蛍光レーザー走査顕微鏡観察によって、ヒトおよびマウスのＦＡＰ−α発現細胞へのＦＡＰＩ−０２のロバストな内在化を確認した。この目的のために、ＨＴ−１０８０−ＦＡＰおよびＨＥＫ−ｍｕＦＡＰ細胞を、蛍光標識ＦＡＰＩ−０２誘導体(ＦＡＰＩ−０２−Ａｔｔｏ４８８)で１〜２時間染色した。図１Ｄに示されるように、化合物はＦＡＰ-α発現細胞の内部に完全に内在化され、蓄積されるが、ＦＡＰ-α陰性のＨＥＫ-ＣＤ２６細胞では取り込みが検出されていない。

結合性質と薬物動態が向上されたＦＡＰＩ誘導体の設計
ＦＡＰＩ−０２のさらなるバリアント(変異体)を、セラノスティックなＦＡＰ−標的化剤の開発を目指して、腫瘍の保持時間を増加させるように設計した。バリアントＦＡＰＩ−０３〜ＦＡＰＩ−１５を、標的結合、内在化率および標的特異性に関して特徴付けた。その結果を図２に示す。

実施例３：マウスのＰＥＴイメージングおよび生体内分布分析
すべての実験は、ドイツ動物保護法に従って行われ、実験動物のケアと使用のための欧州委員会の規制に準拠していた。マウスはイソフルラン吸入により麻酔をかけた。

インビボ実験において、８週齢のＢＡＬＢ／ｃｎｕ／ｎｕマウス(Charles River)を、ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ、Ｃａｐａｎ−２またはＳＫ−ＬＭＳ−１細胞をそれぞれ５×１０６で右幹に皮下接種した。腫瘍の大きさが約１ｃｍ^３に達したとき、放射性標識化合物を、尾静脈を介して注射した(小動物ＰＥＴイメージングでは約１０ＭＢｑ、臓器分布では約１ＭＢｑ)。ＰＥＴイメージングは、マウス1匹あたり約１ＭＢｑのＧａ−６８標識化合物を静脈内注射した後、Inveon PET小動物PETスキャナー(Siemens)を用いて、１４０分後まで行った。画像は３Ｄ−ＯＳＥＭ＋ＭＡＰ法を用いて反復的に再構成され、標準化取り込み値(ＳＵＶ)画像に転換させた。ＲＯＩ技術を用いて定量化を行い、ＳＵＶｍｅａｎとして示した。Ｌｕ−１７７標識化合物(マウス１匹あたり約１０ＭＢｑ)の臓器分布において、指示された時間点(３０分〜２４時間)の後に動物(各時間点のｎ＝３)を犠牲にした。分布された放射活性は、γ-カウンター(Cobra Autogamma, Packard)を用いて、解剖されたすべての臓器および血液で測定した。値は、組織１グラム当たりの注射された用量のパーセンテージ(％ＩＤ／ｇ)として示した。

薬物動態学的モデル化において、輸送定数Ｋ１および速度定数ｋ２−ｋ４は、ＶＯＩ内の組織と交換する血液の体積に関連する血管画分(ｖＢ)を考慮して、ＰＭＯＤソフトウェア［４］に実装された２−組織コンパートメントモデルを用いて計算した。コンパートメントフラックス(コンパートメントal flux)を説明する速度定数は、腫瘍組織内のｋ１(受容体への結合)、ｋ２(剥離)ならびにｋ３(内在化)およびｋ４(流出)を含む。このモデルでは、分布の分画体積(ＤＶ＝Ｋ１／ｋ２)は、^１５Ｏ−標識水が分布している関心領域の割合である。

ＦＡＰＩバリアントは、マウス線維芽細胞の動員および活性化により、ヒトＦＡＰ発現異種移植片およびＦＡＰ発現していない異種移植片においても蓄積される。
ＦＡＰＩ−０２および−０４の腫瘍蓄積は、ヒトＦＡＰ陽性腫瘍細胞および陰性腫瘍細胞の両方からの異種移植片を有するマウスの小動物ＰＥＴイメージングによって評価された。どちらの場合も、放射性追跡子は腫瘍内で急速に濃縮され、少なくとも１４０分間維持された(図３Ａ、Ｃ、Ｅ、Ｇ)。同時に、ＦＡＰＩ−０２および−０４は、無視してよい程度に低い非特異的な結合、主に腎臓および膀胱を介して血液から迅速に除去されることを示しており、その結果、低バックグラウンドおよび有益な腫瘍対臓器の比をもたらす。非標識化合物を競合相手として同時に投与すると、腫瘍に放射活性が完全になくなり、これは放射性追跡子の標的タンパク質に対する特異性を実証している(図４)。興味深いことに、ＦＡＰ−α陽性(ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ)およびＦＡＰ−α陰性(Ｃａｐａｎ−２)腫瘍細胞株を有するマウスで活性化マウス線維芽細胞の動員と活性化による、ＦＡＰＩ−０２の高い腫瘍取り込みが観察された。Burger et al., Nucl Med, 1997による２-組織コンパートメントモデルを用いてＰＥＴデータから計算した放射性追跡子の薬物動態特性を表６に示す。

表６. Burger et al., Nucl Med, 1997による２−組織コンパートメントモデルを用いてＰＥＴデータから計算した^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２の薬物動態特性。ｖＢ：ＶＯＩ(関心体積)内の組織と交換する血液の体積に関連する血管画分；ｋ１−ｋ４：計算した速度定数；Ｖｓ：平衡状態での総ペアレントに対する特定の結合濃度の比；Ｖｔ：総分布体積

これらの観察では、生体内分布研究で^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０２および−０４を用いて確認され、他のすべての臓器で非常に低い活性を示すとともに、ヒトＦＡＰ−α陽性および陰性腫瘍の両方への急速な腫瘍蓄積を証明し(定量化取り込み値は表７を参照)、結果的に有益な腫瘍対臓器の比が得られた(図５Ｄ−Ｆ)。ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍を有するマウスにおける^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０４で類似の結果が得られた。ＦＡＰＩ−０２と比較して、ＦＡＰＩ−０４は、特に２４時間後に高い腫瘍取り込みを示している(図５Ｃ)。曲線下面積(AUC)の計算を表8に示す。

表７.Ｌｕ−１７７標識ＦＡＰＩ−０２および−０４を、腫瘍を有するＢａｌｂ／ｃヌードマウスへの静脈内投与１時間後の生体内分布データの定量化；ｎ＝３；平均として報告された値％ＩＤ／ｇ±ＳＤ

表８.ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍を有するヌードマウスにおける選択されたＦＡＰＩ誘導体の腫瘍取り込み、ｎ＝３。値は平均として報告される(ＩＤ／ｇ±ＳＤ)。

実施例４：臨床ＰＥＴ／ＣＴ研究
１００人を超える患者の画像診断は、ヘルシンキ宣言§３７(臨床現場での実証されていない介入)の更新の条件下で、ドイツ医薬品法§１３(２ｂ)に従って、医療上の理由から^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２または−０４のいずれかを用いて行い、追跡子静脈内投与(２０ｎｍｏｌ、１２２−３３６ＭＢｑ)１０分後、１時間後、３時間後に適用した。注射された放射性追跡子の活性の変動は、^６８Ｇａの短い半減期と、^６８Ｇｅ／^６８Ｇａジェネレーターの寿命中に得られた変動する溶出効率によるものである。１人の患者を対象に、^１８Ｆ−ＦＤＧを３５８ＭＢｑ静脈内注射して１時間後にＦＤＧイメージングを行った。ＰＥＴ／ＣＴスキャンは、Biograph mCT Flow^TM PET/CT-Scanner(Siemens Medical Solution)で、以下のパラメータを用いて行った：スライス厚５ｍｍ、増分３〜４ｍｍ、軟部組織再建カーネル、ケア線量。ＣＴスキャンの直後に、全身ＰＥＴをFlowMotion^TMの３Ｄ(マトリックス２００ｘ２００)で０.７ｃｍ／分で取得した。放出データを、ランダム、散乱、減衰について補正した。再構成は、２反復／２１サブセットの順序部分集合期待値最大(ＯＳＥＭ)アルゴリズムで実行し、半値全幅(ＦＷＨＭ)で５ｍｍの横軸解像度にガウスフィルター処理した。低線量非強調ＣＴデータを用いて減衰補正を行った。関心領域技術を用いて標準化取り込み値(ＳＵＶ)の定量的評価を行った。

ＦＡＰＩ−０２および−０４は、ヒトの転移性乳癌、膵臓癌、肺癌、ＨＮＯ癌、小腸癌および卵巣癌に急速に蓄積される。
転移性乳癌、肺癌、膵臓癌、ＨＮＯ癌、小腸癌、卵巣癌患者に^６８Ｇａ−ＦＡＰＩ−０２および−０４静脈内投与１時間後に診断ＰＥＴ／ＣＴスキャンを行った。すべての患者において、原発性腫瘍ならびにリンパ節および骨において追跡子のロバストな蓄積が観察され、転移の最大ＳＵＶ値は４８.０であった。対照的に、正常組織への追跡子の取り込みは非常に低かった(図６−１４)。放射活性は血流から急速に除去され、大部分は腎臓を経由して排泄され、結果的に高コントラスト画像が得られた。１人の局所進行性肺腺癌患者における比較画像診断により、一般的に使用されているＰＥＴ追跡子^１８Ｆ−ＦＤＧと比較して、ＦＡＰＩ−０２の明らかな優位性が明らかになった。図９に示されるように、ＦＡＰＩ−０２は、より低いバックグラウンド放射活性(background activity)とともに高い取り込みを示し、これは転移性病変のより良い可視性のより高いコントラストにつながる。ＦＡＰＩ−０２は、脳などのブドウ糖消費量の多い細胞に多く蓄積されるＦＤＧとは異なり、ＦＡＰ−αが発現している組織を選択的に標的としている。１人の前立腺癌患者における比較画像処理により、一般的に使用されているＰＥＴ追跡子^６８Ｇａ−ＤＯＴＡＴＯＣおよび^６８Ｇａ−ＰＳＭＡと比較して、ＦＡＰＩ−０４の明らかな利点が明らかになり、これは腎臓への追跡子蓄積が減少されたより小さな腫瘍病変の検出を可能にした(図１４)。

考察
原発性腫瘍、転移性病変および発症したリンパ節の信頼できる診断は、腫瘍病期分類および処置の選択を含むものを計画している効果的かつ適した療法を可能にするのに最も重要なものである。この目的のために、画像処理技術は多くの種類の癌の診断のために不可欠な手段である。ＰＥＴ／ＣＴの組み合わせは、その高い診断精度ならびに解剖学的および生理学的詳細の両方を評価する可能性のため、最新の腫瘍診断のための選択法である。しかしながら、ＰＥＴ／ＣＴの組み合わせは、ＭＲＴやＣＴ単独のような非侵襲性画像処理技術とは対照的に、腫瘍内での発現が正常組織と比較して増強された標的構造に対して高い親和性を有する放射性追跡子の使用を必要とする。理想的な追跡子は、癌性組織と健康的な組織の信頼できる区別ならびに高コントラスト画像をもたらす低バックグラウンドシグナルを確保するように、その標的タンパク質に特異的に結合する必要がある。放射性追跡子がセラノスティックな化合物を示す場合、すなわち、標的化および個別化処置を容易にしかつ改善する診断用核種または治療用核種のいずれかを搭載する可能性を提供する場合、親和性および特異性はさらに重要となる。治療的な目的のための追跡子の潜在的応用については、高い標的特異性は副作用の軽減を保証し、これは、骨髄、生殖器および消化器などの放射線感受性組織の保護に特に重要である。

そのことを念頭に置いて、発明者らは、腫瘍間質の主要成分を形成する癌関連線維芽細胞を標的とするセラノスティックな追跡子を開発した。それらは、腫瘍の増殖、転移および進行に重要な役割を果たすことが知られており、癌細胞よりも遺伝的に安定しているため、療法抵抗性の発生の影響を受けにくくなっている。ＣＡＦは、正常な線維芽細胞とは対照的に、腫瘍特異的マーカーとして使用できる特定のタンパク質を発現している。これらの中には、様々な腫瘍の微小環境に広く発現している膜タンパク質ＦＡＰ−αが含まれており、これによって、固形腫瘍全体の大部分を占めている膵臓癌、乳癌、肺癌を含むさまざまな腫瘍の実体の標的化を可能にする。

この標的タンパク質に対する親和性の高い小分子酵素阻害物質を基に、化学修飾を集中的に行うことにより、ＦＡＰＩ−０１〜ＦＡＰＩ−７３の放射性追跡子を開発した。すべての化合物は、密接に関連するタンパク質ＣＤ２６／ＤＰＰ４をアドレスすることなく、ヒトおよびマウスのＦＡＰ−αへの迅速かつほぼ完全な内在化の特異的な結合を示している。ヨウ素化分子は遊離ヨウ素の流出とともに酵素的な脱ヨウ素化を受けるため、インキュベーション時間が長くなると細胞内放射活性が低くなる。このため、ＦＡＰＩ−０２および後続の化合物は、ＦＡＰ結合部分がキレート剤ＤＯＴＡに化学的に結合されるように設計した。この結果、好ましい薬物動態および生化学的な性質を有する一連のセラノスティックな化合物が得られ、そのうち、ＦＡＰＩ−０２、ＦＡＰＩ−０４、ＦＡＰＩ−４６、ＦＡＰＩ−３４、ＦＡＰＩ−４２、ＦＡＰＩ−５２、ＦＡＰＩ−６９、ＦＡＰＩ−７０、ＦＡＰＩ−７１、ＦＡＰＩ−７２およびＦＡＰＩ−７３が、最も好ましいリガンドである。ＦＡＰＩ−０２およびＦＡＰＩ−０４の両方は、ＦＡＰＩ−０１より有意に遅く除去され、２４時間後には元の蓄積放射活性の１２％(ＦＡＰＩ−０２)と４９％(ＦＡＰＩ−０４)が保持され(ＦＡＰＩ−０１は１.１％)、他の好ましい化合物はさらなる強い結合力を有している(図１６)。それらはＦＡＰ−α発現細胞に急速に内在化し、腫瘍担持マウスおよび転移性上皮癌患者の両方で高い腫瘍取り込み率を示している。対照的に、正常組織には蓄積がなく、血液系からのクリアランスが早いため、高コントラスト画像が得られる。ヒトおよびマウスのＦＡＰ−α発現細胞の両方へのロバストな内在化は、蛍光標識ＦＡＰＩ−０２を用いて共焦点顕微鏡によって確認された。内在化されずにその標的タンパク質に対して高い親和性を有する第１世代ＦＡＰ抗体Ｆ１９とは対照的に、ＦＡＰＩ−０２は、１時間のインキュベーション後に完全な細胞内取り込みを示している。ＦＡＰ結合後の内在化のメカニズムは、ＳＫ−Ｍｅｌ−１８７細胞におけるＦＡＰ抗体断片(Ｆａｂｓ)およびＤｙＬｉｇｈｔ５４９抗マウス抗体を用いた、Ｆｉｓｃｈｅｒらによって研究されている。３７℃でのインキュベーションにより、ＦＡＰ−抗体複錯体の内在化が生じた。我々の小分子と同様に、内在化プロセスは、ほぼ完全な内在化を伴って急速に起こった。２０分後に初期エンドソームのマーカーとＦａｂの共存が、４０分後に後期エンドソームおよびリソソームのマーカーとＦａｂの共存が観察された。Ｆａｂ介在ＦＡＰ−α内在化は、ダイナミン依存性エンドサイトーシスの阻害物質によって抑制されており、これはエンドサイトーシスがダイナミン依存性メカニズムによって発生することを示している。

ＦＡＰＩ−０２および−０４は、腎実質に保持されずに腎クリアランスによって生物からすぐに除去される。炎症組織または脳を含むブドウ糖消費量の多い細胞に多く蓄積する^１８Ｆ−ＦＤＧとは異なり、ＦＡＰＩ−０２は標的タンパク質が発現している組織に選択的に濃縮される。これにより、これらの領域の悪性病変を検出するための新しい展望が開かれる。さらに、ＦＡＰ−αはまた、リウマチ性関節炎および骨関節症、アテローム性動脈硬化症、線維症患者ならびに心筋梗塞後の虚血性心臓組織において、リウマチ筋線維芽細胞様滑膜細胞によって発現されることも示された。これらの観察は、さらなる適応症のためのイメージング追跡子としてのＦＡＰＩ−０２と−０４の適用を示唆している。

腫瘍病変の検出のための制限因子は、腫瘍内のＦＡＰ−α発現の程度である。これは、活性化線維芽細胞の数、すなわち間質含有量、および／または微小環境によって決定され得る線維芽細胞あたりのＦＡＰ−α分子の数におおいに左右される。１〜２ｍｍを超えるサイズの腫瘍の増殖は、基本的に支持間質の形成を必要とするため、ＦＡＰＩ−ＰＥＴ／ＣＴを用いて３〜５ｍｍの範囲の小さな病変を可視化することが可能である。

他の標的化アプローチと同様に、ＦＡＰＩ誘導体は、異なる癌型や患者においてかなり不均一であると知られている十分に高いＦＡＰ−α発現を伴う組織でのみ最適な結果を達成する。ＦＡＰＩイメージングの優れた候補である乳癌、結腸癌、膵臓癌の他に、肺癌、頭頸部癌、卵巣癌、肝腫などの他の腫瘍実体が好ましいターゲットであるかどうかを探究する必要がある。

また、ＦＡＰ−αの発現は、創傷治癒および線維性組織で実証されたが、これは放射線所見を解釈する際に留意すべきである。これらの事実は、どの患者が潜在的なＦＡＰＩ療法の利益を受ける可能性が高いかを適切に評価する必要性を強調している。診断用または治療用核種のいずれかを使用する能力を考えると、ＦＡＰＩ−０２および−０４は、適切な患者コホートの簡単な層別化を可能にする。いずれにしても、ＦＡＰＩ追跡子は両方とも標的化放射性医薬品の開発に理想的な候補であることはすでに明らかである。その高い標的親和性、迅速な腫瘍内在化および迅速な全身クリアランスにより、それらはすでに腫瘍イメージングに理想的に適している。

実施例５：インビトロおよびインビボでのＦＡＰＩの特性評価
実験方法と臨床的評価
ＦＡＰＩ誘導体の臨床評価と同様に、すべてのインビトロおよびインビボ実験は、上記のように、Ｌｏｋｔｅｖら^１およびＬｉｎｄｎｅｒら^２に従って行った。ＦＡＰＩ−０２およびＦＡＰＩ−０４の予備的な線量推定値は、ＱＤＯＳＥ線量推定ソフトウェアスーツを用いて、追跡子を注射して０.２時間後、１時間後および３時間後で検査された２人の患者に基づいている。腫瘍患者に対するさらなるＰＥＴ／ＣＴスキャンは、ＦＡＰＩ−０２(ｎ＝２５)またはＦＡＰＩ−０４(ｎ＝２５)のいずれかの注射１時間後に取得された；６人の患者については、個人内関連ＦＤＧスキャン(同じく１時間後に取得された)が利用可能であった。１６の臓器の正常組織については、２ｃｍのＳｐｈｅｒｉｃ−ＶＯＩを柔組織に配置し、腫瘍病変については閾値分割ＶＯＩを用いてＳＵＶｍｅａｎ／ｍａｘ^３を定量化した。

ＤＯＴＡ−ＦＡＰＩ誘導体のインビトロ特性評価
ＤＯＴＡ−ＦＡＰＩ誘導体の標的結合および内在化率をＦＡＰＩ−０４と比較して評価するために、Ｌｕ−１７７標識化合物をＦＡＰ発現ＨＴ−１０８０細胞とそれぞれ１時間、４時間および２４時間インキュベートした(図１６)。膜結合画分は、ｐＨ２.２のグリシン−ＨＣｌを用いた酸性溶出によって除去し、その後アルカリ細胞溶解を行い、内在化画分(内在化された画分)を測定した。図１６に示されるように、すべての誘導体は、ＦＡＰＩ−０４と比べて、結合値が１時間のインキュベーション後に最大リード化合物の５００％(４時間後に最大７５０％)となるようにより高い細胞結合を示している。

標的親和性および特異性を評価するために、Ｌｕ−１７７標識化合物の競合相手として非標識化合物の濃度を増加させて、競合結合アッセイを行った(図１７；表９に記載されているそれぞれのＩＣ_５０値)。

表９.競合結合アッセイによって測定された、選択されたＦＡＰＩ誘導体のＩＣ_５０値

腫瘍担持マウスにおけるＤＯＴＡ−ＦＡＰＩ誘導体の臓器分布
薬物動態プロファイルならびにインビボでの腫瘍取り込みを分析するために、Ｌｕ−標識ＤＯＴＡ−ＦＡＰＩ誘導体をＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスに静脈内投与した。放射性標識化合物の臓器分布は、血液、健康な組織、腫瘍においてエクスビボで測定した。図１９に示されるように、ほとんどの化合物は、ＦＡＰＩ−０２およびＦＡＰＩ−０４と比較して、特に投与２４時間後により高い腫瘍取り込み率を示している。親油性の増加により、一部の放射性追跡子はより高い血液活性ならびに腎臓での保持の増加を示している。腫瘍-血液比の測定は、実験においていつもＦＡＰＩ−０４より有意に高い比率を示している化合物ＦＡＰＩ−２１およびＦＡＰＩ−４６の明確な利点を明らかにする(図２０)。

腫瘍担持マウスにおけるＤＯＴＡ−ＦＡＰＩ誘導体の小動物イメージング
これらの所見に基づき、Ｇａ−６８標識ＤＯＴＡ−ＦＡＰＩ誘導体を用いて放射性追跡子をＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスに静脈内投与した後、１４０分後まで小動物ＰＥＴイメージングを行った。ＦＡＰＩ−２１およびＦＡＰＩ−４６の有益な腫瘍-血液比は、高コントラスト画像をもたらし、ＦＡＰ陽性腫瘍の優れた可視化を可能にする(図２１)。腫瘍、腎臓、肝臓および筋肉組織における追跡子蓄積の定量分析(ＳＵＶｍａｘ値として与えられる)では、ＦＡＰＩ−２１と比較してＦＡＰＩ−４６の筋肉、腎臓および肝臓活性がわずかに低いことを示している(図２２)。

癌患者におけるＦＤＧと比較したＦＡＰＩ−０２およびＦＡＰＩ−０４の生体内分布および線量測定推定値
Ｆ−１８−ＦＤＧ、Ｇａ−６８−ＤＯＴＡＴＡＴＥまたはＧａ−６８−ＰＳＭＡ−１１の文献値と類似して、２００ＭＢｑのＧａ−６８−ＦＡＰＩ−０２および−０４の実験では、約３−４ｍＳｖの等価線量に相当する。注射１０分後〜３時間後の間に、腎臓を経由して迅速にクリアランスされた後、正常な臓器では、最小限度の変化しかない低い追跡子取り込みを示している。ＦＡＰＩ−０２において、注射１時間後〜３時間後の腫瘍取り込みは７５％減少されるが、ＦＡＰＩ−０４(５０％洗い流し)では腫瘍の保持がわずかに延長されている。注射１時間後、両方のＦＡＰＩ−追跡子の腫瘍の取り込みは等しく技能している(図２３)。ＦＤＧと比較して、腫瘍の取り込みはほぼ等しく(平均ＳＵＶｍａｘＦＤＧ７.４１；ＳＵＶｍａｘＦＡＰＩ−０２７.３７；ｎ.ｓ.)；ＦＡＰＩ−０２での脳(１１.０１ｖｓ０.３２)、肝臓(２.７７ｖｓ１.６９)および口腔／咽頭粘膜(４.８８ｖｓ２.５７)におけるバックグラウンド取り込みは有意に低く；他の臓器ではＦＤＧとＦＡＰＩ−０２の間に関連性のある違いはない(図２４)。詳細な情報および結果については、参照により本文中に組み込まれているＧｉｅｓｅｌら^３を参照すること。

さまざまな癌ならびに非癌性悪性腫瘍患者におけるＦＡＰＩ−０４のＰＥＴイメージング
乳癌、膵臓癌、卵巣癌、ＨＮＯ腫瘍を含むさまざまな癌におけるＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−０４の迅速な取り込みに加えて、癌性腹膜炎(図２５Ａ)ならびに心筋炎(図２５Ｂ)や関節症(図２５Ｃ)のようないくつかの炎症性悪性腫瘍においても追跡子蓄積が示された。これらの結果は、活性化線維芽細胞の動員に関与する慢性炎症のプロセスを特徴とする非癌性悪性腫瘍の検出へのＧａ−６８標識ＦＡＰＩの潜在的応用を示している。

各種癌患者におけるＦＡＰＩ−２１とＦＡＰＩ−４６のＰＥＴイメージング
図２６に示されるように、卵巣癌、直腸癌および粘液性類表皮癌を含むさまざまな癌においてＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−２１のロバストな蓄積が観察された。胆管細胞性癌および結腸直腸癌、肺癌ならびに単発性線維性肉腫に急速に蓄積したＧａ−６８標識ＦＡＰＩ−４６では類似の腫瘍取り込みが示された(図２７)。Ｇａ−６８標識ＦＡＰＩ−４６を用いたＰＥＴ／ＣＴ検査に続いて、Ｓｍ−１５３標識放射性追跡子を用いた最初の治療的アプローチを２人の癌患者で行った。図２８に示されるように、追跡子のロバストな腫瘍蓄積は、投与後２０時間まで検出可能である。
特発性肺線維症肺癌患者３人のＦＡＰＩ−４６−ＰＥＴ／ＣＴイメージングでは、癌性病変と線維性病変での追跡子蓄積に明確な違いがあることが示された。図３０に示されるように、Ｇａ−６８標識ＦＡＰＩ−４６の腫瘍取り込みは、線維組織で測定された活性と比較して、２人の患者(Ａ、Ｂ)では有意に高かったが、１人の患者(Ｃ)ではわずかに低かった。図Ｃに示される患者は、２つの非増悪例と比較して、増悪肺線維症を患っていた。したがって、この追跡子は、予後の悪い線維症患者と予後の良い患者を鑑別するのに有用であり得る。

代替放射性核種、例えばＴｃ−９９ｍ、Ｐｂ−２０３、Ｃｕ−６４およびＦ１８での放射性標識のためのＦＡＰＩ誘導体
代替放射性核種の使用を可能にするために、一連のＦＡＰＩ誘導体が設計され、標的親和性、特異性及び薬物動態に関して特徴づけられている。これらの化合物のいくつかにおいて、元のキレート剤ＤＯＴＡは、Ｔｃ−９９ｍ(ＦＡＰＩ−１９、−２７、−２８、−２９、−３３、−３４、−４３、−４４、−４５、−６０、−６１、−６２)の取り込みに理想的に適した異なるキレート化部分によって置き換えられている。ＦＡＰＩ−１９およびＦＡＰＩ−３４について、ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植マウスにおけるインビトロでのＦＡＰ親和性および生物分布が例示されている。両方の化合物は、インビトロでのヒトＦＡＰへのロバストな結合を示している(ＩＣ_５０ＦＡＰＩ−１９：６.４ｎＭ)。インビボでの腫瘍取り込みが不十分であり、ならびに腎臓から肝臓の方への排出により肝臓に急速に蓄積することを示しているＦＡＰＩ−１９とは対照的に、ＦＡＰＩ−３４は、腫瘍内に継続的に濃縮され、が有意に少ない肝臓取り込みを示している(図３１、３２)。肝臓転移を伴う膵臓癌患者におけるＴｃ−９９ｍ標識ＦＡＰＩ−３４の最初の診断的適用では、投与後４時間まで追跡子の安定した腫瘍蓄積を示している。また、全体的なバックグラウンド放射活性が比較的低いため、高コントラスト画像が得られる(図３３)。これにより、Ｒｅ−１８８で標識した後、シンチグラフィーおよび療法による診断のための広範な応用を提供している。

Ｐｂ−２０３放射性標識ＦＡＰＩ誘導体(ＦＡＰＩ−０４、−３２、−４６およびＦＡＰＩ−０４ｔｃｍｃ)は、ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞への同等の細胞結合を示しており、６０分間のインキュベーション後にＦＡＰＩ−３２およびＦＡＰＩ−０４ｔｃｍｃが最も高い結合値に達している(２６.９３±０.８４６および２１.６２±０.６１％ＩＤ／１ｍｉｏ細胞、図３４Ａ)。ＦＡＰＩ−３２が最初の結合(ｔ1/2＝２時間)時に腫瘍細胞から急速に排除されるのに対し、ＦＡＰＩ−０４ｔｃｍｃは、かなり遅い細胞流出(ｔ1/2＝７時間)を示すだけでなく、競合アッセイ(ＩＣ_５０＝５.７μＭ、図３４Ｃ)によって示されるように、最も低いＦＡＰ親和性も示している。この理由により、インビボでのさらなる分析のために、最適な半減期およびＩＣ_５０値を特徴とするＦＡＰＩ−０４およびＦＡＰＩ−４６を選択した。図３５に示されるように、両方の化合物は、健康な組織への結合が無視してよい程度に低いことを示しているが、腫瘍内で継続的に濃縮されている。シンチグラフィーによる所見は生体内分布研究で確認されており、ここで、両方の放射性追跡子はロバストな腫瘍取り込み、全体的に低い臓器活性ならびに急速な腎臓排泄を示している(図３６)。

Ｃｕ−６４を用いた放射性標識を可能にするために、ＮＯＴＡ誘導体ＦＡＰＩ−４２およびＦＡＰＩ−５２が開発し、標的親和性、特異性および薬物動態に関して特徴付けている。図３７に示されるように、両方の追跡子は、より低いナノモル範囲において類似のＩＣ_５０値でのインキュベーション２４時間までＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞へのロバストな結合を示している(図３７Ａ、Ｂ)。それでも、ＦＡＰＩ−４２はＦＡＰＩ−５２より有意にゆっくり排除され、計算されたインビトロ半減期は１２時間になっている(図３７Ｃ)。これらの結果は、ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ異種移植マウスの小動物イメージングによって確認される。図３８に示されるように、両方の化合物は、ロバストな腫瘍取り込みならびにインビボ血流からの迅速なクリアランスを示している。特に、ＦＡＰＩ−４２の腎臓排泄は、ＦＡＰＩ−５２と比較して有意に速いが、その腫瘍活性は、投与後２〜２４時間の間にわずかに高いままである。

ＮＯＴＡ誘導体ＦＡＰＩ−４２およびＦＡＰＩ−５２は、Ｆ−１８でのイメージングを可能にするフッ化アルミニウム錯体の形成のために配置された。図３９に示されるように、両方の化合物は、ＨＴ-１０８０-ＦＡＰ異種移植マウスの小動物イメージングにおいて、迅速な腫瘍取り込みを示している。両方の化合物は主に腎臓経路によって排出されるが、胆汁排出も観察されている。腎臓排泄はＦＡＰＩ−５２の方が速いが、腫瘍蓄積がより多く、腫瘍の滞留時間がより長く、胆道経路の割合がより低いことは、ＦＡＰＩ−４２が有利である。

参考文献
1 Loktev, A. et al. A new method for tumor imaging by targeting cancer associated fibroblasts. Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine, doi:10.2967/jnumed.118.210435 (2018).
2 Lindner, T. et al. Development of quinoline based theranostic ligands for the targeting of fibroblast activation protein. Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine, doi:10.2967/jnumed.118.210443 (2018).
3 Giesel, F. et al. FAPI-PET/CT: biodistribution and preliminary dosimetry estimate of two DOTA-containing FAP-targeting agents in patients with various cancers. Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine, doi:10.2967/jnumed.118.215913 (2018).

実施例６：インビトロおよびインビボでのＦＡＰＩ特性評価
前臨床データ
ＦＡＰ陽性脳腫瘍を選択的に標的化することを目的として、ヒト神経膠芽腫異種移植モデルＵ８７ＭＧを用いて、腫瘍担持マウスで初期実験を行った。放射性標識ＦＡＰＩ−０２および−０４の腫瘍蓄積および臓器分布は、小動物ＰＥＴイメージングならびに生体内分布研究で分析した。図４０および４１に示されるように、ＦＡＰＩ−０２および−０４の両方は、迅速な腫瘍取り込みを示し、健康な臓器および血液中では、無視してよい程度に低い活性を示している。

臨床データ
２０１６年のＷＨＯ分類によると、神経膠腫はＩＤＨ野生型神経膠腫ＷＨＯグレードＩ〜ＩＶとＩＤＨ変異神経膠腫ＷＨＯグレードＩＩ〜ＩＶに細分化されている。最も頻度の高いＷＨＯグレードＩＶ神経膠腫は神経膠芽腫である。
神経膠腫患者１８人(ＩＤＨ変異神経膠腫５人、ＩＤＨ野生型神経膠芽腫１３人；表１０参照)で臨床ＰＥＴイメージングを行った。図４２−４４に示されるように、ＩＤＨ野生型神経膠芽腫およびグレードＩＩを除いたグレードＩＩＩ／ＩＶのＩＤＨ変異体神経膠腫で追跡子取り込みを示した。神経膠芽腫において、コントラスト向上領域への投影において取り込みが増加したスポットが観察された。

結論
ＩＤＨ野生型神経膠芽腫および高悪性度ＩＤＨ変異星細胞腫における追跡子取り込みは増加するが、びまん性星細胞腫では増加しないことから、低悪性度ＩＤＨ変異と高悪性度神経膠腫の非侵襲性区別を可能にし、追跡研究に有用であり得る。神経膠芽腫における不均一な追跡子取り込みは、生検計画に役に立ち得る。

実施例７：ＦＡＰＩのインビトロおよびインビボ特性評価
再取り込み実験
再取り込み実験において、^１７７Ｌｕ−標識ＦＡＰＩ−０４および−４６(ＤＭＥＭ中５ＭＢｑ／ｎｍｏｌ)をＨＴ−１０８０−ＦＡＰ細胞に添加し、それぞれ４℃および３７℃で６０分間インキュベートした。放射性培地を除去し、細胞をｐＨ７.４のリン酸緩衝食塩水(ＰＢＳ)で２回洗浄した。続いて、１０分〜６時間の範囲の時間間隔で、非標識ＦＡＰＩ(１μＭ)を含む、または含まない非放射性培地を加えた。この細胞をｐＨ７.４のＰＢＳで２回洗浄した。表面結合活性を除去するために、細胞を室温でグリシン−ＨＣｌ(ＰＢＳ中１Ｍ、ｐＨ２.２)で１０分間インキュベートした。氷冷のＰＢＳで２回洗浄した後、細胞を溶解緩衝液(０.３ＭＮａＯＨ、０.２％ＳＤＳ)１.４ｍＬで溶解し、内在化画分(内在化された画分)を測定した。４℃でインキュベートする細胞について、すべての洗浄および溶出工程は、氷冷の緩衝液を用いて行った。放射活性は、γカウンター(Packard Cobra II)を用いて測定し、１ｍｉｏ細胞に正規化し、適用線量のパーセンテージとして計算した(％ＡＤ；図４７を参照)。

酵素阻害アッセイ
ＦＡＰＩ-０４の酵素FAP活性に対する潜在的な阻害効果を測定するために、４８ウェルプレート中で組換えヒトＦＡＰタンパク質(１ｐｍｏｌ／ウェル)を用いて酵素阻害アッセイを行った。３７℃でＦＡＰＩ−０４またはタラボスタット(０〜１０００ｎＭ／ウェル)をヒトＦＡＰと３０分間インキュベートした後、蛍光性ＦＡＰ基質Ｚ−ＧＰ−ＡＭＣを添加して最終濃度を０〜２００μＭ／ウェルにし、３７℃で６０分間インキュベートした。ＦＡＰの酵素活性は、SpectraMax M2プレートリーダー(Molecular Devices, San Jose, USA)を用いて、３６０／４６０ｎｍで反応生成物ＡＭＣの蛍光強度を測定することにより決定した(図４６を参照)。

ＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍を有するマウスへのＦＡＰＩ−０４の多重投与
生体内分布実験において、８週齢のBALB/c nu/nuマウス(Challless River)を、それぞれ５ｍｉｏのＨＴ-１０８０-ＦＡＰ細胞を右体幹に皮下接種した。腫瘍のサイズが約１ｃｍ^３に達したら、放射性標識化合物を尾静脈を介して注射した。動物の第１群には^１７７Ｌｕ−ＦＡＰＩ−０４(動物あたり２ＭＢｑ)を一回投与し、一方、第２群には１ＭＢｑずつ２回投与し、１回目の注射の４時間後に二回目の投与を行った。第３群には合計３回の投与を行い、最初の投与はマウス１匹あたり１ＭＢｑ、その後２時間後に０.５ＭＢｑ、４時間後に追加で０.５ＭＢｑを投与した。動物(各時点でｎ＝３)を、最初の注射の８時間後と２４時間後に犠牲にした。分布された放射活性は、γカウンター(Cobra Autogamma, Packard)を用いて、解剖したすべての臓器および血液中の放射活性を測定した。値は、組織１グラムあたりの投与量に対するパーセンテージ(％ＩＤ／ｇ)として示す(図４８を参照)。

実施例８：ＦＡＰＩのインビトロおよびインビボ特性評価
実験操作および臨床評価
FAPI誘導体のすべてのインビトロおよびインビボ実験ならびに臨床評価は、最初の文献に記載されているように、Loktevら¹およびLindnerら²に従って行った。

結果
Ｆ−１８−ＦＡＰＩ誘導体のインビトロ特性評価
すべての実験は、ＦＡＰＩ−４２(ＡｌＦ−１８標識)またはＦＡＰＩ−７２(Ｆ−１８ニコチンアミド標識)と類似する方法で実施した。

表１１：競合結合アッセイによって測定された、選択されたＦＡＰＩ誘導体のＥＣ_５０値

血液プールクリアランスの測定
化合物のクリアランス率を推定するために、推定された二相指数関数的減衰によって血液プールの表現として心臓のＳＵＶｍｅａｎ値(０.３７５−６０分)から半減期を計算した。選択されたすべての化合物は、１０分未満の半減期で非常に速くクリアされた。計算されたプラトー値(Plateau value)は、Ｇａ−６８標識ＦＡＰＩ−１３、−２１、−３６およびＡｌＦ−１８標識ＦＡＰＩ−７４の方がより高かったが、これは理論的に、非特異的な結合のために、または循環中に残っていることによってクリアされていないより高い画分の化合物に相当する(表１２)。速いクリアランスの例として、０〜１５分間の間のＦＡＰＩ−０４および−４６の時間放射活性曲線を図５３に示す。

表１２.推定された２相指数関数的減衰によってＳＵＶｍｅａｎ値から計算された、選択されたＦＡＰＩ誘導体の血液プール半減期および仮想プラトー値。明確にするために、律速半減期の値のみを列挙する。

腫瘍担持マウスにおけるＦ−１８−ＦＡＰＩ誘導体の小動物イメージング
これらの所見に基づき、小動物ＰＥＴ−イメージングは、放射性追跡子をＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスに投与後１４０分までのＦ−１８−標識ＮＯＴＡ−およびＦ−１８−ニコチンアミド−標識ＦＡＰＩ誘導体を用いて行った。Ｆ−１８−ニコチンアミド誘導体であるＦＡＰＩ−７２、−７３および−７７は肝臓への好ましくない蓄積と胆汁排泄を示し、一方ＦＡＰＩ−７８は腎臓から排出されたが、腫瘍取り込みは示していない。ＡｌＦ−１８標識ＮＯＴＡ誘導体であるＦＡＰＩ−７４および−７５の場合には、高い標的特異性および速いクリアランスが観察され、その結果、ＦＡＰ陽性腫瘍の優れた可視化を可能にする高コントラスト画像が得られた(図５０)。

腫瘍担持マウスにおけるＦ−１８−ＦＡＰＩ誘導体の臓器分布
薬物動態プロファイルならびにインビボでの腫瘍取り込みの分析において、ＡｌＦ−１８標識ＦＡＰＩ−７５をＨＴ−１０８０−ＦＡＰ腫瘍担持マウスに静脈内投与した。放射性標識化合物の臓器分布は、血液、健康な組織および腫瘍におけるエクスビボで測定した。図５１に示されるように、この化合物は高い腫瘍取り込みを示すが、Ｇａ-６８標識ＤＯＴＡ誘導体と比較して、健康な組織でのより高い蓄積が観察され、ＰＥＴイメージングにおける性能は同等だった。

項目
以下の項目は、本発明の好ましい実施態様を示す。
１.式(Ｉ)：

［式中、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺの中の少なくとも三つが存在する条件で、独立して存在するか、または不存在であり；
Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、独立してＯ、ＣＨ_２、ＮＲ^４、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＲ^４、ＨＣＲ^４およびＲ^４ＣＲ^４からなる群から選択され、ただし二つのＯは互いに直接隣接しない；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、Ｓ−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^３は、−Ｈ、−ＣＮ、−Ｂ(ＯＨ)_２、−Ｃ(Ｏ)−アルキル、−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｓ(Ｏ)_２−アリール、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＰＯ_３Ｈ_２および５−テトラゾリルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、−Ｈ、−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｓ−Ｃ_１−６−アルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルケニル、アルキニル、アリールおよび−Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択され、各−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨ、オキソおよびハロから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよく、またＱ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹまたはＺに結合されていてよく；

Ｒ^５は、−Ｈ、ハロおよびＣ_１−６−アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^６およびＲ^７は、独立して−Ｈ、

ＡおよびＥは一緒になって、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールから選択される基、好ましくはヘテロシクロアルキルを形成し、ここで、ＡおよびＥは、単環式、ニ環式および多環式であってもよく、好ましくは単環式であり；各ＡおよびＥは、−Ｈ、−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｓ−Ｃ_１−６−アルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルケニル、アルキニル、アリールおよび−Ｃ_１−６−アラルキルから選択される１〜４個の置換基によって置換されていてよく、各−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨ、オキソおよびハロから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよく；また、Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅまたは

に結合されていてよく；
Ｂは、Ｓ、ＮＲ^４、ＮＲ^４−Ｏ、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環からなる群から選択され、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されており；そして、
Ｒ^８は、放射性部分、キレート剤、蛍光色素、造影剤およびそれらの組み合わせからなる群から選択され；

は、１−ナフチル部分または５〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、ここに該ヘテロ環はＮ原子とＸとの間に２個の環原子が存在し；また、該ヘテロ環はＯ、ＮおよびＳから選択される１、２または３個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく；そして、ＸはＣ原子である］
で示される化合物、またはその薬学的に許容できる互変異性体、ラセミ体、水和物、溶媒和物もしくは塩。

２.(ｉ)Ｑ、ＲおよびＵがＣＨ_２であり、独立して存在するか、または不存在であり；
Ｖが、ＣＨ_２、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ^４であり；
ＷがＮＲ^４であり；
ＹがＨＣＲ^４であり；そして
ＺがＣ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ^４であり；および／または
(ｉｉ)ＱおよびＲが不存在であり；
ＵがＣＨ_２であり、存在するか、または不存在であり；
Ｒ^１およびＲ^２が、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；
Ｒ^３が、−Ｈ、−ＣＮおよび−Ｂ(ＯＨ)_２からなる群から選択され；
Ｒ^４が、−Ｈおよび−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され、ここに−Ｃ_１−６−アルキルは−ＯＨから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよい、項目１に記載の化合物。

３.

が、

からなる群から選択され、これらは、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよい、請求項１または２に記載の化合物。

４.

が

からなる群から選択される、項目１〜３のいずれか一項に記載の化合物。

５.Ｒ^５およびＲ^６がＨであり；
Ｒ^７が、

であり、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍが１、２または３であり；
ＡおよびＥは一緒になって、

から選択される基を形成し；
Ｂが、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキルまたは５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくはまたは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、Ｎ−含有ヘテロ環はＣ_１−６−アルキル、アリールおよびＣ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されている、項目１〜４のいずれか一項に記載の化合物。

６.(ｉ)Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が、式：

［式中、ヘテロ環はＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく、１個の窒素をさらに含んでいてよく；

は、１、２または３位に結合し、好ましくは２位に結合し；
ｌは１または２である］
で示される芳香族または非芳香族単環式ヘテロ環であり；および／または
(ｉｉ)Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が、

からなる群から選択され、ここで、N-含有ヘテロ環はＣ_１−６−アルキルによって置換されており；
ここで、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、該ヘテロ環は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく、さらに１個の窒素を含んでいてよく、また、一つまたはそれ以上の(例えばアミノ酸由来)側鎖を含んでいてよく；

は、１、２または３位に結合し、好ましくは２位に結合し；
ｏは１または２であり、
好ましくは、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、該Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は

であり；より好ましくは、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、該Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は

である、項目１〜５のいずれか一項に記載の化合物。

７. Ｑ、ＲおよびＵが不存在であり；
ＶがＣ＝Ｏであり；
ＷがＮＨであり；
ＹがＣＨ_２であり；
ＺがＣ＝Ｏであり；
Ｒ^１およびＲ^２が、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；
Ｒ^３が−ＣＮであり；
Ｒ^５およびＲ^６がＨであり；
Ｒ^７が

であり、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯ、Ｓ、ＣＨ_２、ＮＨまたはＮＣＨ_３であり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；または
ＡおよびＥは一緒になって

から選択される基を形成し；
Ｂは、ＮＨ−Ｃ_１−６−アルキル、

であり、ＢはＣ_１−３アルキルによって置換されていてよく；そして

は

である、項目１〜６のいずれか一項に記載の化合物。

８．Ｃ_１−６−アルキルが、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され、および／または
Ｃ_１−６−アラルキルが、ベンジル、フェニル−エチル、フェニル−プロピルおよびフェニル−ブチルからなる群から選択される、項目１〜７のいずれか一項に記載の化合物。

９.Ｒ^８が、蛍光同位体、放射性同位体、放射性薬剤またはそれらの組み合わせである放射性部分であって、好ましくは、α放射線放出同位体、β放射線放出同位体、γ放射線放出同位体、オージェ電子放出同位体、Ｘ−ｒａｙ放出同位体、蛍光放出同位体、例えば^１８Ｆ、^５１Ｃｒ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^１１１Ｉｎ、^９９ｍＴｃ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^１３９Ｌａ、^１４０Ｌａ、^１７５Ｙｂ、^１５３Ｓｍ、^１６６Ｈｏ、^８８Ｙ、^９０Ｙ、^１４９Ｐｍ、^１６５Ｄｙ、^１６９Ｅｒ、^１７７Ｌｕ、^４７Ｓｃ、^１４２Ｐｒ、^１５９Ｇｄ、^２１２Ｂｉ、^２１３Ｂｉ、^７２Ａｓ、^７２Ｓｅ、^９７Ｒｕ、^１０９Ｐｄ、^１０５Ｒｈ、^１０１ｍＲｈ、^１１９Ｓｂ、^１２８Ｂａ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１３１Ｉ、^１９７Ｈｇ、^２１１Ａｔ、^１５１Ｅｕ、^１５３Ｅｕ、^１６９Ｅｕ、^２０１Ｔｌ、^２０３Ｐｂ、^２１２Ｐｂ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^１８８Ｒｅ、^１８６Ｒｅ、^１９８Ａｕ、^２２５Ａｃ、^２２７Ｔｈおよび^１９９Ａｇからなる群から選択される放射性部分である、項目１〜８のいずれか一項に記載の化合物。

１０.Ｒ^８が、以下の種類の蛍光色素：キサンテン、アクリジン、オキサジン、シアニン、スチリル色素、クマリン、ポルフィン、金属−配位子錯体、蛍光タンパク質、ナノ結晶、ペリレン、ホウ素-ジピロメテンおよびフタロシアニンからなる群から選択される蛍光色素、ならびにこれらの種類の色素の複合物および組み合わせである、項目1〜８のいずれか一項に記載の化合物。

１１.Ｒ^８が、２価または３価金属カチオンを有する錯体の形態のキレート剤であって、好ましくは、１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ,Ｎ',Ｎ,Ｎ'−テトラ酢酸(ＤＯＴＡ)、エチレンジアミンテトラ酢酸(ＥＤＴＡ)、１,４,７−トリアザシクロノナン−１,４,７−トリ酢酸(ＮＯＴＡ)、トリエチレンテトラミン(ＴＥＴＡ)、イミノ二酢酸、ジエチレントリアミン−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ',Ｎ''−ペンタ酢酸(ＤＴＰＡ)、ビス−(カルボキシメチルイミダゾ−ル)グリシンおよび６−ヒドラジノピリジン３−カルボン酸(ＨＹＮＩＣ)からなる群から選択されるキレート剤である、項目１〜８のいずれか一項に記載の化合物。

１２.Ｒ^８が、常磁性剤を含むか、またはそれからなる造影剤であって、好ましくは、ここで、常磁性剤が、常磁性ナノ粒子を含むか、またはそれからなる、項目１〜８のいずれか一項に記載の化合物。

１３.少なくとも一つの項目１〜１２による化合物、および場合により製薬的に許容できる担体および／または添加物を含むか、またはそれらからなる医薬組成物。

１４.動物またはヒトの対象における線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患の診断または処置に使用するための、項目１〜１２のいずれか一項に記載の化合物または項目１３に記載の医薬組成物であって、好ましくは、該線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患が、癌、慢性炎症、アテローム性動脈硬化症、線維症、組織リモデリングおよびケロイド障害からなる群から選択され、好ましくは、癌が乳癌、膵臓癌、小腸癌、結腸癌、直腸癌、肺癌、頭頸部癌、卵巣癌、肝細胞癌、食道癌、下咽頭癌、上咽頭癌、喉頭癌、骨髄腫細胞、膀胱癌、胆管細胞癌、腎明細胞癌、神経内分泌腫瘍、腫瘍誘発性骨軟化症、肉腫、ＣＵＰ(未知の初期癌)、胸腺癌、類腱腫、神経膠腫、星状細胞腫、頸癌および前立腺癌からなる群から選択される、化合物または医薬組成物。

１５.項目１〜１２のいずれか一項に記載の化合物もしくは項目１３に記載の医薬組成物および疾患の診断のためのインストラクションを含むか、またはそれらからなるキット。

Claims

式(Ｉ)：

［式中、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺの中の少なくとも三つが存在する条件で、独立して存在するか、または不存在であり；
Ｑ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹおよびＺは、独立してＯ、ＣＨ_２、ＮＲ^４、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、Ｃ＝ＮＲ^４、ＨＣＲ^４およびＲ^４ＣＲ^４からなる群から選択され、ただし二つのＯは互いに直接隣接しない；
Ｒ^１およびＲ^２は、独立して−Ｈ、−ＯＨ、ハロ、Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、Ｓ−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^３は、−Ｈ、−ＣＮ、−Ｂ(ＯＨ)_２、−Ｃ(Ｏ)−アルキル、−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｃ(Ｏ)−アリール、−Ｃ＝Ｃ−Ｓ(Ｏ)_２−アリール、−ＣＯ_２Ｈ、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２ＮＨ_２、−ＰＯ_３Ｈ_２および５−テトラゾリルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、−Ｈ、−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｏ−Ｃ_１−６−アルキル、−Ｓ−Ｃ_１−６−アルキル、アルケニル、ヘテロアルケニル、シクロアルケニル、シクロヘテロアルケニル、アルキニル、アリールおよび−Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択され、各−Ｃ_１−６−アルキルは、−ＯＨ、オキソおよびハロから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよく、またＱ、Ｒ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、ＹまたはＺに結合されていてよく；
Ｒ^５は、−Ｈ、ハロおよびＣ_１−６−アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^６およびＲ^７は、独立して−Ｈ、

からなる群から選択され、ただしＲ^６およびＲ^７は同時にＨではない；
ここで、Ｌはリンカーであり；
Ｄ、Ａ、ＥおよびＢは独立して存在するか、または不存在であり、好ましくは、少なくともＡ、ＥおよびＢは存在し、ここで、存在する場合：
Ｄはリンカーであり；
Ａは、ＮＲ^４、Ｏ、ＳおよびＣＨ_２からなる群から選択され；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキル、

からなる群から選択され；
ここで、ｉは１、２または３であり；
ここで、ｊは１、２または３であり；
ここで、ｋは１、２または３であり；
ここで、ｍは１、２または３であり；
Ｂは、Ｓ、ＮＲ^４、ＮＲ^４−Ｏ、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環からなる群から選択され、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキル−ＮＲ^４および該Ｎ−含有ヘテロ環は、Ｃ_１−６−アルキル、アリール、Ｃ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されており；そして、
Ｒ^８は、放射性部分、キレート剤、蛍光色素、造影剤およびそれらの組み合わせからなる群から選択され；

は、１−ナフチル部分または、５〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくは二環式ヘテロ環であり、ここに該ヘテロ環はＮ原子とＸとの間に２個の環原子が存在し；また、該ヘテロ環はＯ、ＮおよびＳから選択される１、２または３個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく；そして、ＸはＣ原子である］
で示される化合物、またはその薬学的に許容できる互変異性体、ラセミ体、水和物、溶媒和物もしくは塩。
(ｉ)Ｑ、ＲおよびＵがＣＨ_２であり、独立して存在するか、または不存在であり；
Ｖが、ＣＨ_２、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ^４であり；
ＷがＮＲ^４であり；
ＹがＨＣＲ^４であり；そして
ＺがＣ＝Ｏ、Ｃ＝ＳまたはＣ＝ＮＲ^４であり；および／または
(ｉｉ)ＱおよびＲが不存在であり；
ＵがＣＨ_２であり、存在するか、または不存在であり；
Ｒ^１およびＲ^２が、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；
Ｒ^３が、−Ｈ、−ＣＮおよび−Ｂ(ＯＨ)_２からなる群から選択され；
Ｒ^４が、−Ｈおよび−Ｃ_１−６−アルキルからなる群から選択され、ここに−Ｃ_１−６−アルキルは−ＯＨから選択される１〜３個の置換基によって置換されていてよい、請求項１に記載の化合物。
が、

からなる群から選択され、これらは、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよい、請求項１または２に記載の化合物。
が、

からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
Ｒ^５およびＲ^６がＨであり；
Ｒ^７が、

であり、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍが１、２または３であり；
Ｂが、ＮＲ^４−Ｃ_１−６−アルキルまたは５−〜１０−員Ｎ−含有芳香族または非芳香族単環式もしくはまたは二環式ヘテロ環であり、該ヘテロ環は好ましくはＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含み、好ましくは１または２個の窒素原子をさらに含み、ここに好ましくは、Ｎ−含有ヘテロ環はＣ_１−６−アルキル、アリールおよびＣ_１−６−アラルキルからなる群から選択される１〜３個の置換基によって置換されている、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
(ｉ)Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が、式：

［式中、ヘテロ環はＯ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく、さらに１個の窒素を含んでいてよく；

は、１、２または３位に結合し、好ましくは２位に結合し；
ｌは１または２である］
で示される芳香族または非芳香族単環式ヘテロ環であり；および／または
(ｉｉ)Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が、

からなる群から選択され、
ここで、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、該ヘテロ環は、Ｏ、ＮおよびＳから選択される１または２個のヘテロ原子をさらに含んでいてよく、さらに１個の窒素を含んでいてよく、また、一つまたはそれ以上の(例えばアミノ酸由来)側鎖を含んでいてよく；

は、１、２または３位に結合し、好ましくは２位に結合し；
ｏは１または２であり、
好ましくは、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、該Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は

であり；より好ましくは、Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環が

である場合、該Ｂに含まれるＮ−含有ヘテロ環は

である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
Ｑ、ＲおよびＵが不存在であり；
ＶがＣ＝Ｏであり；
ＷがＮＨであり；
ＹがＣＨ_２であり；
ＺがＣ＝Ｏであり；
Ｒ^１およびＲ^２が、独立して−Ｈおよびハロからなる群から選択され；
Ｒ^３が−ＣＮであり；
Ｒ^５およびＲ^６がＨであり；
Ｒ^７が

であり、ここで、
Ｄは不存在であり；
ＡはＯであり；
Ｅは、Ｃ_１−６−アルキルまたは

であり、ここで、ｍは１、２または３であり；
Ｂは、ＮＨ−Ｃ_１−６−アルキル、

であり；そして

は

である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
Ｃ_１−６−アルキルが、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルからなる群から選択され、および／または
Ｃ_１−６−アラルキルが、ベンジル、フェニル−エチル、フェニル−プロピルおよびフェニル−ブチルからなる群から選択される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
Ｒ^８が、蛍光同位体、放射性同位体、放射性薬剤またはそれらの組み合わせである放射性部分であって、好ましくは、α放射線放出同位体、β放射線放出同位体、γ放射線放出同位体、オージェ電子放出同位体、Ｘ−ｒａｙ放出同位体、蛍光放出同位体、例えば^１８Ｆ、^５１Ｃｒ、^６７Ｇａ、^６８Ｇａ、^１１１Ｉｎ、^９９ｍＴｃ、^１８６Ｒｅ、^１８８Ｒｅ、^１３９Ｌａ、^１４０Ｌａ、^１７５Ｙｂ、^１５３Ｓｍ、^１６６Ｈｏ、^８８Ｙ、^９０Ｙ、^１４９Ｐｍ、^１６５Ｄｙ、^１６９Ｅｒ、^１７７Ｌｕ、^４７Ｓｃ、^１４２Ｐｒ、^１５９Ｇｄ、^２１２Ｂｉ、^２１３Ｂｉ、^７２Ａｓ、^７２Ｓｅ、^９７Ｒｕ、^１０９Ｐｄ、^１０５Ｒｈ、^１０１ｍＲｈ、^１１９Ｓｂ、^１２８Ｂａ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１３１Ｉ、^１９７Ｈｇ、^２１１Ａｔ、^１５１Ｅｕ、^１５３Ｅｕ、^１６９Ｅｕ、^２０１Ｔｌ、^２０３Ｐｂ、^２１２Ｐｂ、^６４Ｃｕ、^６７Ｃｕ、^１８８Ｒｅ、^１８６Ｒｅ、^１９８Ａｕ、^２２５Ａｃ、^２２７Ｔｈおよび^１９９Ａｇからなる群から選択される放射性部分である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
Ｒ^８が、以下の種類の蛍光色素：キサンテン、アクリジン、オキサジン、シアニン、スチリル色素、クマリン、ポルフィン、金属−配位子錯体、蛍光タンパク質、ナノ結晶、ペリレン、ホウ素-ジピロメテンおよびフタロシアニンからなる群から選択される蛍光色素、ならびにこれらの種類の色素の複合物および組み合わせである、請求項1〜８のいずれか一項に記載の化合物。
Ｒ^８が、２価または３価金属カチオンを有する錯体の形態のキレート剤であって、好ましくは、１,４,７,１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ,Ｎ',Ｎ,Ｎ'−テトラ酢酸(ＤＯＴＡ)、エチレンジアミンテトラ酢酸(ＥＤＴＡ)、１,４,７−トリアザシクロノナン−１,４,７−トリ酢酸(ＮＯＴＡ)、トリエチレンテトラミン(ＴＥＴＡ)、イミノ二酢酸、ジエチレントリアミン−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ',Ｎ''−ペンタ酢酸(ＤＴＰＡ)、ビス−(カルボキシメチルイミダゾ−ル)グリシンおよび６−ヒドラジノピリジン３−カルボン酸(ＨＹＮＩＣ)からなる群から選択されるキレート剤である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
Ｒ^８が、常磁性剤を含むか、またはそれからなる造影剤であって、好ましくは、ここで、常磁性剤が、常磁性ナノ粒子を含むか、またはそれからなる、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
少なくとも一つの請求項１〜１２による化合物、および場合により製薬的に許容できる担体および／または添加物を含むか、またはそれらからなる医薬組成物。
動物またはヒトの対象における線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患の診断または処置に使用するための、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物または請求項１３に記載の医薬組成物であって、好ましくは、該線維芽細胞活性化タンパク質(ＦＡＰ)の過剰発現を特徴とする疾患が、癌、慢性炎症、アテローム性動脈硬化症、線維症、組織リモデリングおよびケロイド障害からなる群から選択され、好ましくは、癌が乳癌、膵臓癌、小腸癌、結腸癌、直腸癌、肺癌、頭頸部癌、卵巣癌、肝細胞癌、食道癌、下咽頭癌、上咽頭癌、喉頭癌、骨髄腫細胞、膀胱癌、胆管細胞癌、腎明細胞癌、神経内分泌腫瘍、腫瘍誘発性骨軟化症、肉腫、ＣＵＰ(未知の初期癌)、胸腺癌、類腱腫、神経膠腫、星状細胞腫、頸癌および前立腺癌からなる群から選択される、化合物または医薬組成物。
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物もしくは請求項１３に記載の医薬組成物および疾患の診断のためのインストラクションを含むか、またはそれらからなるキット。