JP2021169478A - 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、国立衛生研究所からの助成金第GM866889、DE014913、およびDE019932号の下での政府による支援、およびニュージャージー州科学技術委員会の幹細胞助成金(第NJCST−2042−014−84号)によりなされた。
(マウス)
雄性C57BL/6、C3H/HeJCrおよびF1(C57BL/6×C3H)マウス、6〜8週齢は米国国立癌研究所(メリーランド州フレデリック)に由来する。IFNγ−R1−/−マウスおよびiNOS−/−マウスはジャクソン研究所(メリーランド州バーハーバー)に由来する。マウスはロバートウッドジョンソン医科大学動物施設で維持した。動物は実験ごとに年齢および性別でマッチングし、いずれも施設内動物実験委員会から承認された。
組換えIFNγおよびマウスTNFα、IL−1α、IL−1βに対するTNFα、IL−1α、およびIL−1βモノクローナル抗体、およびCCR5、FITCコンジュゲート抗マウスCD11b、およびPEコンジュゲート抗マウスF4/80はeBiosciences(カリフォルニア州ラホーヤ)に由来する。組換えマウスM−CSF、およびIL−10およびTGF−βに対する抗体はR&Dシステムズ(ミネソタ州ミネアポリス)に由来する。抗IFNγはハーラン(インディアナ州インディアナポリス)に由来する。抗CXCR3はインビトロジェン(カリフォルニア州カールズバッド)に由来する。インドメタシン、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)、およびNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)はシグマアルドリッチ(ミズーリ州セントルイス)に由来する。
MSCは6〜10週齢のマウスの脛骨および大腿骨の骨髄から作製した。10%FBS、2mMグルタミン、100U/mLペニシリンおよび100μg/mLストレプトマイシン(いずれもインビトロジェン由来)を添加したαMEM培地で細胞を培養した。24時間後に非接着性細胞を除去し、接着性細胞を3日おきに培地を補充しながら維持した。MSCクローンを得るために、集密状態の細胞を回収し、96ウェルプレートに限定希釈によって播種した。次に、個々のクローンを選別および拡大した。細胞は5から20継代で用いた。
ルミネックテクノロジー(バイオプレックスシステム、バイオラッド、カリフォルニア州ハーキュリーズ)を用いて、マルチプレックスビーズアレイキット(インビトロジェン、カリフォルニア州カールズバッド)により培養上清を20種類のサイトカインおよびケモカインについて測定した。IFNγはELISA(BDバイオサイエンス、カリフォルニア州サンホゼ)で測定した。NOは修飾グリース試薬(シグマ−アルドリッチ)を用いて検出した。簡単に述べると、すべてのNO3を硝酸レダクターゼでNO2に変換し、総NO2をグリース試薬で検出した(Miranda, et al.(2001)Nitric Oxide 5:62-71)。
RNEASYミニキットを用いて細胞ペレットからRNAを分離した。ファーストストランドcDNA合成は、ランダム6量体プライマーによるSENSISCRIPT RTキットを用いて実施した(すべてのキットはキアゲン、カリフォルニア州バレンシアに由来)。目的の遺伝子のmRNAは、SYBRグリーンマスターミックス(アプライドバイオシステムズ、カリフォルニア州フォスターシティ)を用いて、リアルタイムPCR(ストラタジーン(カリフォルニア州ラホーヤ)由来のMX−4000)により定量した。mRNAの総量は、内因性ベータアクチンmRNAに対して正規化した。iNOSについてのプライマー配列は:順方向5’−CAG CTG GGC TGT ACA AAC CTT−3’(配列番号:1);逆方向5’−CAT TGG AAG TGA AGC GTT TCG−3’(配列番号:2)であった。他のプライマーはRT2 PROFILER.TM.PCRアレイマウスケモカイン&受容体キット(スーパーアレイ、メリーランド州フレデリック)に由来した。
化学走性は、報告に従い(Shi, et al. (1993) J. Immunol. Meth. 164:149-154)、ニューロプローブCHEMOTX化学走性システム(ニューロプローブ、メリーランド州ゲーサーズバーグ)で試験した。96ウェルプレートの下部チャンバーにIFNγ+TNFα(各20ng/mLまたはSup.CD3−act(1:2希釈)で刺激したMSC由来の上清を充填した。次にポリビニルピロリドンを含有しない孔径5μのポリカーボネート膜でその上を覆った。T細胞芽球(1.25×105)を上部チャンバーに加えた。3時間インキュベートした後、MTT分析を用いて小孔を経て下部ウェルに遊走した細胞を定量した(Shi, et al. (1993)上に同じ)。化学走性指数は、培地単独に向かう遊走数と比較した、MSCに応答して遊走したT細胞芽球数の比率として算出した。
C57BL/6×C3Hの8週齢F1マウスに致死線量(13Gy)を照射し、24時間後に、C57BL/6親マウスより分離した有核骨髄細胞(5×106)および脾細胞(5×106)を、尾静脈注射により点滴した。骨髄移植より3および7日後、レシピエントに、C57BL/6野生型、IFNγR1−/−、またはiNOS−/−マウスに由来するMSC 0.5×106個を尾静脈より投与した。一部の野生型MSC群にも、iNOS阻害剤、NG−モノメチルL−アルギニン(L−NMMA、500μg/マウス)、抗IFNγ(400μg/マウス)、またはTNFα、IL−1αおよびIL−1βに対する3抗体のカクテル(各200μg/マウス)を、初回のMSC投与の直後に開始して7日間連日腹腔内注射した。ネガティブコントロールとして、F1マウスにF1骨髄細胞を注射した。マウスのGvHD徴候を連日観察し(衰弱、毛の乱れ、および円背)、また瀕死状態になった時点で安楽死させ、これにより生存期間を記録した。14日目に様々な組織を採取し、5μmパラフィン切片を作製し、ヘマトキシリン/エオシン(H&E)で染色した。
C57BL/6マウス(6〜8週齢)を、50μLの完全フロイントアジュバントで乳化した卵白アルブミン(OVA、5μL食塩水中10μg)の尾根部注射により免疫した。5日後に、30μL食塩水中の凝集OVA200μgを右後足蹠に注射して誘発することによりDTHを試験した。ネガティブコントロールとして左足蹠に食塩水30μLを注射した。24時間後、ノギスを用いて抗原誘導足蹠厚増加を測定し、RおよびLを右および左足蹠の厚さとし、(Rimm−Limm)−(R.unimm−L.unimm)として算出した。
有意性は対応のない両側スチューデントt検定または分散分析(ANOVA)によって評価した。
背景メカニズムを特定するため、マウスMSCのクローンを用いた。これらのクローンの幹細胞特性は、その脂肪細胞または骨芽細胞への分化能およびその表面マーカー:CD34;CD11b;CD11c;CD45;MHCクラスII;CD44+;Sca−1+;MHCクラスIlowの発現によって定義した。本願に示すすべての結果は、少なくとも異なる3つのMSCクローンを用いて再現された。
それによりサイトカイン曝露MSCによる免疫抑制がもたらされるメカニズムを特定するために、TRANSWELLシステムにおいてMSCと共培養した抗CD3活性化脾細胞(MSC:脾細胞1:20)の反応を、多様な設定で検討した。ウェルの2つのチャンバーで透過性膜(孔径0.4μm膜)により分離されるとMSCはT細胞増殖にほとんど影響せず、細胞膜タンパク質または他の局所作用因子がサイトカイン初回刺激MSCによるT細胞増殖の抑制にとって決定的であることを示す。最近の報告(Sato, et al.(2007)上に同じ)でPGE−2が必要とされるがIDOは必要とされないことが示されたのに対し、PGE−2は関与していないことが確認されている。事実、インドメタシン(10μM、PDE−2遮断剤)、抗IL−10(20μg/mL)、抗TGFβ(20μg/mL)または1メチル−DL−トリプトファン(1−MT、1mM、IDO阻害剤)によるMSCによる免疫抑制への影響は認められないので、これらの因子は除外される。
数件の研究において、インビボで、体細胞100万個に対して1から5個と少数のMSCによりMSCによる有効な免疫抑制が達成され、その多くが数ヶ月間持続し、一部の例では免疫障害が完全に治癒した。MSCは組織に定着した後は移動せず、また免疫抑制はその発生源付近できわめて局所的にのみ作用するNOによって媒介されると考えると、この免疫抑制作用は意外である。サイトカイン誘導性MSCはその近傍に免疫細胞を誘引するメカニズムを有し、そこで局所的に高濃度のNOが標的T細胞に有効に作用する可能性があることが想定される。これを探索するため、MSCと脾細胞の共培養を鏡検下で経時的にモニタリングした。
サイトカインで初期刺激されたMSCに対する活性化T細胞の堅牢な遊走は、MSCがケモカインなどの強力な化学誘引性物質を分泌することを示した。したがって、多様な条件下で培養されたMSCによる白血球ケモカインの産生を、上清を測定することにより判定した。サイトカインを添加せずに単独で培養されたMSCについては有意なサイトカイン産生は認められず、その生得的形態にあるMSCはT細胞を誘引することができないという所見を実証した。しかし抗CD3活性化脾細胞と共培養したところ、MSCは、MSC:脾細胞比率1:60でのCXCL−9(MIG)1.5ng/mL(他の実験では12ng/mL)およびCXCL−10(IP−10)50ng/mLを含む数種類のケモカインを大量に産生した。これらは強力なT細胞特異的ケモカインであり;いずれのケモカインもインビトロにおいて単独でわずか1から10ng/mLの濃度で有意な化学走性を駆動することが示されている(Loetscher, et al. (1998) Eur. J. Immunol. 28:3696-3705; Meyer, et al.(2001)Eur. J. Immunol. 31:2521-2527)。CXCL−9およびCXCL−10の産生は、免疫抑制の誘導に対する効果と同様に、IFNγ単独、または3つのサイトカインTNFα;IL−1α、およびIL−1βすべての抗体中和によって阻害された。ケモカイン産生は、組換えIFNγおよびTNFα(各20ng/mL)をMSC単独に添加することによって同様に誘導され、TNFαはやはりIL−1αおよびIL−1βと互換的であった。したがってこれらのサイトカインは、T細胞のMSCへの化学走性を駆動する原因となる可能性が高い、MSCのケモカイン発現を誘導するのに十分である。これによって、一旦MSCのごく近傍に遊走したならば、活性化T細胞はMSCによるさらなるケモカインの産生を誘導するサイトカインを分泌し、これによりさらに多くのT細胞をMSCの近傍に誘引する正のフィードバックループを生成すると予測されるであろう。
マウスの足蹠にOVA単独またはOVAおよびiNOS欠損または野生型マウス由来のMSCを注射した。次にマウスの足蹠をOVAで誘発し、その結果生じたDTH反応を足蹠浮腫により測定した。この分析の結果より、野生型MSCの投与によりDTH反応における炎症の軽減がもたらされることが示された。これと鋭く対照的に、iNOS欠損MSCは炎症を軽減しなかっただけでなく、実際にはMSCを注射しなかった誘発マウスと比較してDTH反応を亢進した(図2)。足蹠の組織学的分析では、野生型MSCを同時注射した動物由来の皮膚では炎症指標の減少が示されたが、iNOS−/−MSCを同時注射したマウスでは炎症部位における体液および白血球浸潤の増加が示された。この実験は、免疫応答の抑制におけるNOの必要性を実証しただけでなく、NO産生の非存在下においてMSC媒介化学走性が炎症を促進し、かつiNOSおよびIDOの阻害剤を用いてワクチンの効力を高めたりあるいは腫瘍に対する有効な免疫応答を惹起したりするなどの局所免疫応答の増強に用いることも可能であることを示した。
リンパ腫の腫瘍細胞は接着性でないので、p53+/−マウスに発症したリンパ腫から腫瘍ストローマ細胞を分離することが可能である。これらの細胞は、インビトロで継代してさらに脂肪細胞および骨芽細胞様細胞に分化することができることが確認された。興味深いことに、骨髄由来MSCと同様に、これらの腫瘍ストローマ細胞も免疫抑制性でありかつ抗CD3活性化脾細胞の増殖を有効に阻害することができる。抗IFNγINFγおよびiNOS阻害剤は免疫抑制効果を逆転することができたので、この免疫抑制効果もIFNγ+TNFαおよびNO依存性である。
リンパ腫ストローマ細胞の腫瘍成長に対する作用を検討するために、355B細胞リンパ腫細胞株(C3H−gld/gldバックグラウンド、0.5×106個/マウス)をgld/gldマウス由来リンパ腫ストローマ細胞(C3Hバックグラウンド、P5、0.25×106個/マウス)と同時に注射した。ストローマ細胞の同時注射によって死亡率が有意に上昇したことが確認された。興味深いことに、1400W(NOS阻害剤、0、2、4、8、12、16、20、24、および28日目に0.1mg/マウス)の投与は当該作用を有意に逆転した(図4)。したがって、腫瘍ストローマ細胞は腫瘍の成長を有意に促進することが可能であった。
腫瘍ストローマ細胞が産生するNOの腫瘍免疫療法に対する役割を検討するために、0日目にB16−F0メラノーマ細胞をC57BL/6マウスに注射した(0.5×106個/マウス)。4、8、12、16、20日目に、IFNγ(250ng/マウス)または1400W(NOS阻害剤、0.1mg/マウス)を腹腔内注射により投与した。マウスの生存はマウスの瀕死の時に記録した。複合療法はマウスの生存能力を劇的に高めることが確認された(図5)。したがって、IFNγは腫瘍の発症において二重の役割を有し;一方は何らかの抗血管新生因子を産生するかまたは何らかの血管新生因子の産生を阻止することにより腫瘍の発症を防止することであり、もう一方はNO、IDOまたはPGE2などの因子を産生することによって腫瘍ストローマまたは他の環境細胞による免疫抑制を誘導することである。このため、NO、IDOまたはPGEのうち1つまたはそれ以上の阻害は癌の治療を劇的に促進することができる。したがって、サイトカイン、ワクチン接種、抗体、樹状細胞、またはT細胞によるものなどの免疫療法を用いて癌を治療する場合、腫瘍ストローマ細胞は、大半の症例でこれらの治療が腫瘍を完全に根絶することが不可能な原因となっているかもしれない。iNOSおよびIDOに対する阻害剤と免疫療法の複合使用は、腫瘍を根絶するための有効な方法を提供する可能性もある。
マウスMSC媒介性免疫抑制は炎症性サイトカインに依存する。これらのサイトカインがないと、炎症性サイトカインIFNγとTNFαまたはIL−1が存在しない限りMSCは免疫抑制効果を持たず、MSCは刺激されて免疫抑制エフェクターである一酸化窒素(NO)を発現し、これは誘導型NOシンターゼ(iNOS)および数種類のヘルパー分子−ケモカインおよび接着分子によって触媒される。ケモカインおよび接着分子はT細胞および他の免疫細胞をMSCの近傍に保持し、ここで大量のNOが免疫細胞の機能を抑制する。
IL−17A促進性iNOS発現が機能的であるか否か検討するため、MSC−T細胞共培養系を実施してMSCの免疫抑制活性を評価した。図7に示すように、IFNγおよびTNFαの添加によってサイトカイン濃度依存的にT細胞増殖を低下させることが可能であった。印象深い事に、IL−17Aの添加はMSCのT細胞増殖に対する抑制を促進した。したがって、IL−17AはMSC媒介性免疫抑制の促進において機能的である。
(試薬とマウス)
組換えマウスIFNγ、TNFα、IL−17A、およびIL−17Aに対する抗体はeBiosciences(カリフォルニア州ラホーヤ)に由来した。組換えマウスIL−2はR&Dシステムズ(ミネソタ州ミネアポリス)に由来した。β−アクチン、GAPDH、iNOS、p−IκBα、p−P65、p−JNK、およびp−ERK1/2に対する抗体はセル・シグナリング・テクノロジー(マサチューセッツ州ダンバーズ)に由来した。Act1に対する抗体はサンタクルーズバイオテクノロジー(テキサス州ダラス)に由来した。PMSFおよびアクチノマイシンDはシグマアルドリッチ(ミズーリ州セントルイス)より購入した。
MSCは実施例1に記載のプロトコルを用いて作製した。簡単に述べると、6〜8週齢の野生型またはauf1−/−マウスの脛骨および大腿骨骨髄を採取した。10%FBS、2mMグルタミン、100U/mLペニシリンおよび100μg/mLストレプトマイシン(完全培地、いずれもインビトロジェン(カリフォルニア州カールズバッド)由来)を添加したDMEM培地で細胞を培養した。24時間後にすべての非接着性細胞を除去し、接着性細胞を維持した。2〜3日おきに培地を交換した。MSCクローンを得るために、集密状態の細胞を回収し、96ウェルプレートに限定希釈によって播種した。次に、個々のクローンを選別および拡大した。MSCは、それぞれの分化条件下において脂肪細胞および骨細胞に分化することが可能であった。細胞は15継代の前に用いた。
T細胞増殖を試験するため、凍結により培養を停止させる6時間前に、3H−チミジン0.5μCiを96ウェルプレートの各ウェルに添加した。その後プレートを解凍し、細胞を回収し、さらに取り込まれた3H−Tdrをワラックマイクロベータシンチレーションカウンター(パーキンエルマー、マサチューセッツ州ウォルサム)で分析した。
メッセンジャーRNA崩壊分析を原則的に実施した。MSCをサイトカインの組み合わせで6時間インキュベートした。アクチノマイシンD(ActD)を最終濃度5μg/mLで培地に添加して転写を停止した。ActD添加後の様々な測定時に、総RNAの抽出のため細胞を回収した。
RNAprepピュアセル/バクテリアキットで総RNAを分離した。ファーストストランドcDNA合成はcDNA合成キットで実施した。mRNAレベルは、SYBRグリーンマスターミックスを用いて定量的RT−PCR(7900HT;アプライドバイオシステムズ、カリフォルニア州フォスターシティ)により測定し、β−アクチンmRNAレベルに対して正規化した。順方向および逆方向プライマーのペアの配列は以下の通りである:
iNOS、順方向5’−CAGCTGGGCTGTACAAACCTT−3’および逆方向5’−CATTGGAAGTGAAGCGTTTCG−3’;
β−actin:順方向5’−CCACGAGCGGTTCCGATG−3’および逆方向5’−GCCACAGGATTCCATACCCA−3’;
IL−6:順方向5’−GAGGATACCACTCCCAACAGACC−3’および逆方向5’−AAGTGCATCATCGTTGTTCATACA−3’;
CXCL1:順方向5’−CTGCACCCAAACCGAAGTC−3’および逆方向5’−AGCTTCAGGGTCAAGGCAAG−3’;
CCL2:順方向5’−TCTCTCTTCCTCCACCACCATG−3’および逆方向5’−GCGTTAACTGCATCTGGCTGA−3’;
CCL5:順方向5’−TTTCTACACCAGCAGCAAGTGC−3’および逆方向5’−CCTTCGTGTGACAAACACGAC−3’;
CXCL9:順方向5’−AGTGTGGAGTTCGAGGAACCCT−3’および逆方向5’−TGCAGGAGCATCGTGCATT−3’;
CXCL10:順方向5’−TAGCTCAGGCTCGTCAGTTCT−3’および逆方向5’−GATGGTGGTTAAGTTCGTGCT−3’。
細胞を氷冷PBSで2回洗い、回収し、さらにプロテアーゼ阻害剤カクテル(ロッシェ、ニュージャージー州ナットリー)およびPMSF(シグマ)を含有するRIPAバッファー(ミリポア、カリフォルニア州テメキュラー)中で30分間氷上で溶解した。ライセートを16,000gで15分間の遠心分離により清澄化した。ブラッドフォードアッセイ(バイオラッド、カリフォルニア州ハーキュリーズ)により上清のタンパク質濃度を測定した。
培養したMSCを始めにPBSで洗い、さらに氷冷メタノールを用いて−20℃で10分間固定した。0.3%Triton X−100PBS溶液で10分間インキュベートした後、5%BSAを用いて細胞を室温で1時間ブロッキングし、さらに一次抗体である抗IL−17RA(サンタクルーズ)を用いて4℃で一晩インキュベートした。PBSで洗浄した後、アレクサフルオロ594コンジュゲートヤギ抗ウサギ二次抗体およびDAPI(インビトロジェン)を用いて細胞を室温で1時間インキュベートした。その後細胞を撮影前にPBSで洗浄した。
C57BL/6マウス(8〜10週齢)にConA(ベクターラボ、カリフォルニア州バーリンゲーム)のPBA溶液を15mg/kgで静脈内注射して肝損傷を誘導した。野生型マウスまたはauf1−/−マウスに由来するMSC(5×105)を、IL−17Aの存在下または非存在下でIFNγ、TNFαを用いて、または用いずに12時間処理し(各サイトカインにつき10ng/mL)、次にConAを投与したマウスに30分間静脈内投与した。さらに7.5時間後にマウスを安楽死させ、血清および肝組織を採取した。血清アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)検出によりALT活性を測定した。ホルマリン固定肝組織学切片をヘマトキシリンとエオシン(H&E)で染色した。
肝単核球(MNS)を40%/70%グラジエントで精製し、染色バッファー(PBS、3%FCS)中で抗CD3−PE、抗CD4−PerCP/Cy5.5、および抗−CD8a−APC(eBiosciences)により4℃で30分間染色した。クローン化MSCにおけるIL−17RAの表面発現を検出するために、細胞を抗IL−17RA−PE(eBiosciences)で染色し、FACS Caliburフローサイトメーター(ベクトンディッキンソン、カリフォルニア州サンホゼ)でフローサイトメトリーにより分析した。
非線形回帰および統計分析は、PRISMv5ソフトウェア(グラフパッドソフトウェア社)を用いて実施した。サンプル間の比較は対応のないt検定により実施した。p<0.05の差を有意とみなした。(*、p<0.05;**、p<0.01;***、P<0.001)。
本実施例は、MSCの免疫抑制機能が生得的ではなく、炎症促進性サイトカインにより濃度依存的に誘導されることを規定する。MSCに対する免疫抑制作用を可能とするためにIFNγと他の3つの炎症性サイトカイン−TNFα、IL−1α、またはIL−1β−のうち1つの組み合わせが必要とされる。IF−17Aは、多様な炎症性および自己免疫疾患の病因論におけるその決定的役割で知られた多面発現性炎症促進性サイトカインである。興味深いことに、IL−17Aはいくつかのサイトカインと協同し、炎症に必要とされる遺伝子発現プログラムを促進することも知られている。したがって、本発明者らはIL−17Aが至適濃度に満たないIFNγおよびTNFαと協同してMSCの免疫抑制特性を誘導することが可能か検討した。
一酸化窒素(NO)およびケモカインは、協調的に作用し、MSCの免疫抑制作用を媒介する重要な分子である。MSCのケモカインおよびiNOS遺伝子は、IFNγおよびTNFαによって誘導される。しかし、IL−17AはIFNγおよびTNFαで培養したMSCによる免疫抑制を促進した(図9D、9E)。その後、IL−17AがINFγおよびTNFαと協同してMSCのiNOSおよびケモカインの発現を誘導することを示すよう、この試験を設計した。この仮説を検討するために、IFNγ、TNFαおよび/またはIL−17Aの様々な組み合わせを用いてMSC集団を培養し、さらに選択した免疫調節遺伝子の発現に対する作用を評価した。
iNOSおよび多くのサイトカイン/ケモカインをコードするメッセンジャーRNAは速やかに分解され、これはmRNAおよびタンパク質のいずれに対しても量の増加を制限する。シグナル伝達経路の活性化は、特に免疫応答時には、これらのmRNAを安定化してその発現を増加させる。実際、IL−17Aが多くの炎症メディエーター遺伝子の発現を誘導する主なメカニズムは、そのmRNAを安定化させることによる。数多くのタンパク質が、通常は3’−UTRにおいて、特異的なRNA配列と結合しかつRNAを迅速な分解の標的とする。AUリッチ領域(ARE)はそのようなmRNA分解配列のファミリーの1つを含む。AREと結合してそれを内部に持つmRNAの調節発現を誘発するタンパク質は数多い。これらのタンパク質はAUF1、HuR、KSRP、TIA−1/TIAR、およびTTPを含む。これらのタンパク質の標的の一部は、iNOS、IL−6、およびCXCL1をコードするARE−mRNAを含む。ARE結合タンパク質AUF1は、iNOSおよびIL−6 mRNAと結合してその分解を制御する4つのアイソフォーム―p37、p40、p42、およびp45―を含む。したがって、AUF1はiNOSおよびサイトカイン/ケモカインmRNAの発現を制限するよう作用すること、およびIL−17AがAUF1のこの活性を遮断し、これにより遺伝子発現を増加させるという仮説が立てられた。
AUF1ノックアウトがIL−17Aを必要とすることなくケモカイン遺伝子発現を誘導したと考えると(図12および13を参照)、IFNγ+TNFα単独でauf1−/−MSCを培養することは、3つのサイトカインすべてを用いて培養された野生型MCSの免疫抑制活性を表現型模写するのに十分であろうという仮説が立てられる。この仮説を検討するため、野生型およびauf1−/−MSCを、IL−17Aを添加してあるいは添加せずにIFNγ+TNFαを用いて培養した後、T細胞増殖の分析のためにA1.1T細胞ハイブリドーマと共培養した。IL−17Aは、添加しないで培養した細胞と比較して、野生型MSCの免疫抑制活性を増加させたが;しかしIFNγ+TNFαはauf1−/−MSCの最大免疫抑制活性を誘導するのに十分であり、かつIL−17Aは免疫抑制効果をさらに亢進させることはなかった(図14A、14B)。これらの結果を合わせて考えると、AUF1はiNOSおよびサイトカイン/ケモカイン遺伝子発現を制限するという所見と一致し;IL−17Aはこれらの作用を逆転してMSCによる免疫抑制を促進する。
次に発明者らは、野生型およびauf1−/−MSCによるインビボ免疫抑制に対するIL−17Aの作用を検討した。マウスのConA誘導型肝損傷は、主としてT細胞を介する自己免疫性肝炎のインビボモデルにおいて十分に説明されている。先の結果より、IL−17Aはインビトロ系においてMSCの免疫抑制作用を劇的に促進できることが示されているので、マウスにおけるConA誘導型肝損傷を治療する際に、IL−17AがMSCによりすぐれた治療効果を可能とするこができるであろうと予想された。したがって、始めにIL−17Aの存在下または非存在下でIFNγ+TNFαを用いてまたは用いずに野生型およびauf1−/−MSCを12時間処理し、次に30分前にConA注射を受けたマウスに静脈内注射した。未処理またはIFNγ+TNFα前処理した野生型MSCと比較して、IFNγ+TNFαおよびIL−17Aで前処理した野生型MSCは、血清ALT活性および肝壊死および炎症を鋭く減少させ、肝損傷を相当改善することが可能であった(図15A、15D)。しかしauf1−/−MSCについては、IL−17を必要とすることなく、IFNγ+TNFα前処理のみでConA誘導型肝損傷に対する最大治療効果を誘発するであろう(図15A、15D)。IFNγ+TNFαにIL−17Aを添加して前処理した野生型MSC、またはIL−17Aを添加してあるいは添加せずにIFNγ+TNFαで前処理したauf1−/−MSCを投与されたマウスでは、血清ALT活性のパターンと一致して、肝臓の単核球、さらにはCD3+CD4+およびCD3+CD8+T細胞浸潤も劇的に減少した(図15B、15C)。したがって当業者は、IFNγ+TNFαとIL−17Aで同時に前処理したMSCを利用することによるConA誘導性肝損傷を治療する上での新しい新規の治療法を認識することができ、かつIL−17Aの効果はAUF1依存的に発揮される。
IL−17AがどのようにMSCによるiNOS発現および免疫抑制を促進するかというメカニズムを検討するために、サイトカイン誘導下でのiNOSのRNA安定性を試験した。図16Aに示すように、IFNγ+TNFα処理群におけるiNOS mRNAの崩壊半減期は約2.5時間であった。興味深いことに、IL−17Aの添加は検討した測定時内でiNOS mRNAを完全に保護した。
上述のように、IL−17AはMSC媒介性免疫抑制を促進するための潜在的因子となる可能性もある。しかし多くの場合、そのようなインビトロおよびインビボ免疫抑制作用は正または負のいずれかに調節する必要がある。入手可能な成長因子およびサイトカインをスクリーニングし、2つの因子:I型インターフェロンおよび線維芽細胞増殖因子(FGF−2)がMSC媒介性免疫抑制を著しくダウンレギュレートすることを確認した。
MSC媒介性免疫抑制には種間変動があり:NOはマウスMSCに対するエフェクター分子であるのに対し、ヒトおよび霊長類MSCはインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を抑制的エフェクター分子として利用する。
この実施例において、発明者らはGFPをコードするレンチウイルスをMSCに形質導入するか(MSC−GFP)、またはGFPをマウスIFNαと同時に形質導入した(MSC−IFNα)。フローサイトメトリー上でのGFP発現によって示されるように、90%を超える細胞が良好に形質導入された(図18A)。MSC−GFPおよびMSC−IFNαの間で形態および増殖率に明らかな変化は認められなかった。MSC−IFNαのINF産生レベルを検討するために、5×105個/mLで48時間培養したMSCの上清中でIFNαのレベルを定量した(図18B)。
インビボで腫瘍成長に対するMSC−INFαの作用を検討するために、マウスB16メラノーマモデルを用いた。この系においては、すべての細胞およびマウスはC57BL/6バックグラウンドにあった。1×106個のB16メラノーマ細胞を、単独かまたはMSC−GFPまたはMSC−IFNαのいずれか1×106個と同時に筋肉内接種し、さらに12日後に腫瘍を摘出して秤量した。MSC−IFNαが腫瘍成長を完全に停止させた一方で、MSC−GFPは腫瘍成長をわずかに促進したことが予想外に確認された(図19A)。MSC−IFNαの効力を検討するために、1×106個のB16メラノーマ細胞と種々の個数のMSC−INFαを動物に注射した。驚くべきことに、1×104個のMSC−IFNα(MSC−IFNα:B16の比率=1:100)であってもなおインビボで腫瘍成長を強力に阻止することができた(図19B)。さらに、腫瘍細胞を単独接種したマウスはすべて30日以内に死亡したのに対し、腫瘍細胞をMSC−INFIと同時に投与されたマウスのほぼ半数は100日以上生存した(図19C)。
MSC−IFNαの強力な抗腫瘍作用のメカニズムをさらに検討するために、インビボで投与されたMSC−IFNαの運命を追跡した。このため、MSC−IFNαをルシフェラーゼで標識し、BerthodNC100撮影システムを使用する生体撮影技術でその活性をインビボモニタリングした。
インビトロでの組換えIFNαの腫瘍成長に対する直接的作用を検討した。組換えINFαは高濃度であってもB16メラノーマ細胞を僅かにに阻害するのみであることが確認された(MSC−IFNαによって産生される19ng/mLと比較して最高100ng/mL)(図21A)。したがって、MSC−INFαによってインビボで認められた完全な腫瘍成長阻害を考慮し、発明者らは腫瘍成長の直接阻害に追加して関与する他のメカニズムがあるはずであると推測した。
Claims (21)
- 組成物であって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)及び少なくとも1つの別のサイトカイン;及び
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤、を含む前記組成物。 - 分離間葉系幹細胞の集団が一酸化窒素シンターゼ(iNOS)欠損間葉系幹細胞である、請求項1記載の組成物。
- 分離間葉系幹細胞の集団がインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)欠損間葉系幹細胞である、請求項1記載の組成物。
- 分離間葉系幹細胞の集団が一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)の二重欠損間葉系幹細胞である、請求項1記載の組成物。
- 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項1記載の組成物。
- 分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、請求項1記載の組成物。
- 組成物であって、
分離間葉系幹細胞の集団;及び
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤、を含み、
前記分離間葉系幹細胞の集団が
(i)多能性前駆細胞を得ること;
(ii)前記多能性細胞を培地内で培養して間葉系幹細胞の拡大亜集団と分化細胞の亜集団を作製すること;
(iii)前記培地中で分化細胞より間葉系幹細胞を分離すること;及び
(iv)前記の分離された間葉系幹細胞の少なくとも1つのサブセットをインターフェロンガンマ(IFNγ)および少なくとも1つの別のサイトカインで処理すること、という段階を含む方法によって作製される、前記組成物。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項7記載の組成物。
- 免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤が誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)に対する阻害剤及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)に対する阻害剤を含む、請求項7記載の組成物。
- 免疫反応を増強するための組成物であって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)及び少なくとも1つの別のサイトカイン;及び
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤、を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記組成物。 - 分離間葉系幹細胞の集団が一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)の二重欠損間葉系幹細胞である、請求項10記載の組成物。
- 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項10記載の組成物。
- 免疫抑制性疾患に対する免疫反応を促進するための組成物であって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)及び少なくとも1つの別のサイトカイン;
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤;及び
医薬品として許容できる担体、を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記組成物。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項13記載の組成物。
- 免疫抑制性疾患が癌又はウイルス感染である、請求項13記載の組成物。
- 免疫治療と組み合わされて使用される免疫アジュバントであって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)及び少なくとも1つの別のサイトカイン;
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤;及び
医薬品として許容できる担体、を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記免疫アジュバント。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項16記載の免疫アジュバント。
- 免疫反応を促進するための組成物の作製方法であって、
(i)多能性前駆細胞を得ること;
(ii)前記多能性細胞を培地内で培養して間葉系幹細胞の拡大亜集団と分化細胞の亜集団を作製すること;
(iii)前記培地中で分化細胞より間葉系幹細胞を分離すること;及び
(iv)前記の分離された間葉系幹細胞の少なくとも1つのサブセットをインターフェロンガンマ(IFNγ)および少なくとも1つの別のサイトカインで処理すること;及び
(v)誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤を添加すること、
という段階を含む、前記作製方法。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項18記載の方法。
- それを必要とする患者において免疫を促進するためのキットであって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)及び少なくとも1つの別のサイトカイン;及び
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤、を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記キット。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項20記載のキット。
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KR20230172252A (ko) * | 2022-06-15 | 2023-12-22 | 에스씨엠생명과학 주식회사 | 기능강화 줄기세포를 포함하는 관절염 예방 또는 치료용 조성물 |
CN115161276B (zh) * | 2022-08-24 | 2023-09-15 | 深圳市北科生物科技有限公司 | Il4、il21、il27至少两种细胞因子处理获得的间充质干细胞及其外泌体和应用 |
CN115354022A (zh) * | 2022-08-24 | 2022-11-18 | 深圳市北科生物科技有限公司 | Il4、il21、il27至少两种细胞因子处理获得的间充质干细胞及其外泌体和应用 |
KR102522295B1 (ko) * | 2022-08-30 | 2023-04-18 | 주식회사 스마트셀랩 | 말초혈액유래 줄기세포의 분리 및 배양조건과 이를 활용한 전구세포로의 분화유도 |
CN118320101B (zh) * | 2024-06-14 | 2024-09-17 | 天津嘉氏堂科技有限公司 | iNOS抑制剂在制备治疗硬皮病胶原沉积药物中的应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090202479A1 (en) * | 2008-01-31 | 2009-08-13 | Yufang Shi | Method for modulating immune responses using stem cells and cytokines |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE10336152B4 (de) | 2003-08-06 | 2007-02-15 | Nephrogen LLC, Salt Lake City | Aufreinigungsverfahren für humane mesenchymale Stammzellen |
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