JP6654670B2 - 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 - Google Patents
幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6654670B2 JP6654670B2 JP2018139545A JP2018139545A JP6654670B2 JP 6654670 B2 JP6654670 B2 JP 6654670B2 JP 2018139545 A JP2018139545 A JP 2018139545A JP 2018139545 A JP2018139545 A JP 2018139545A JP 6654670 B2 JP6654670 B2 JP 6654670B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mscs
- cells
- msc
- tnfα
- ifnγ
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 48
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 title claims description 33
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 title description 6
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 463
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 claims description 184
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 claims description 182
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 177
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 177
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 162
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims description 150
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims description 149
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims description 139
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 claims description 115
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 claims description 114
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 100
- 108020004201 indoleamine 2,3-dioxygenase Proteins 0.000 claims description 71
- 102000006639 indoleamine 2,3-dioxygenase Human genes 0.000 claims description 71
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 58
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 53
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 49
- ZADWXFSZEAPBJS-UHFFFAOYSA-N 1-methyltryptophan Chemical compound C1=CC=C2N(C)C=C(CC(N)C(O)=O)C2=C1 ZADWXFSZEAPBJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 32
- NTNWOCRCBQPEKQ-YFKPBYRVSA-N N(omega)-methyl-L-arginine Chemical compound CN=C(N)NCCC[C@H](N)C(O)=O NTNWOCRCBQPEKQ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 24
- NTNWOCRCBQPEKQ-UHFFFAOYSA-N NG-mono-methyl-L-arginine Natural products CN=C(N)NCCCC(N)C(O)=O NTNWOCRCBQPEKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 24
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 18
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 18
- 230000002950 deficient Effects 0.000 claims description 17
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 15
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 claims description 14
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 claims description 14
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 claims description 14
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 claims description 14
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 claims description 12
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 11
- -1 The above kit Chemical compound 0.000 claims description 7
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 claims description 7
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 claims description 7
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 claims description 7
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 claims description 7
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 claims description 7
- 108010082786 Interleukin-1alpha Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004125 Interleukin-1alpha Human genes 0.000 claims description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 7
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 claims description 7
- 230000036039 immunity Effects 0.000 claims description 6
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 claims description 5
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 claims description 5
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 claims description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 claims 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 claims 1
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N nitrogen oxide Inorganic materials O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 113
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 92
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 89
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 66
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 60
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 58
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 45
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 44
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 40
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 39
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 39
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 36
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 31
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 30
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 28
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 28
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 28
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 28
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 24
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 24
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 24
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 24
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 24
- 102100033985 Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein D0 Human genes 0.000 description 23
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 23
- 108091021225 Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein D0 Proteins 0.000 description 22
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 20
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 19
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 18
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 18
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 17
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 17
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 17
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 16
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 16
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 16
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 15
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- 230000006870 function Effects 0.000 description 15
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 14
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 14
- 102100034221 Growth-regulated alpha protein Human genes 0.000 description 13
- 101001069921 Homo sapiens Growth-regulated alpha protein Proteins 0.000 description 13
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 13
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 13
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 12
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 12
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 12
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 12
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 12
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 12
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 12
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 12
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 11
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 11
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 11
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 11
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 11
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 11
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 11
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 11
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 11
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 10
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 10
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 10
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 10
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 10
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 10
- 102100036170 C-X-C motif chemokine 9 Human genes 0.000 description 9
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 9
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 9
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 9
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 9
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 9
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 9
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 9
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 9
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 8
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 8
- 101100025201 Mus musculus Msc gene Proteins 0.000 description 8
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 7
- 101000947172 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 7
- 102100035018 Interleukin-17 receptor A Human genes 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 101001124986 Mus musculus Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 7
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 7
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 7
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 description 6
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 6
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 6
- 102100032367 C-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 6
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 6
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 6
- 101710186083 Interleukin-17 receptor A Proteins 0.000 description 6
- RODUKNYOEVZQPR-UHFFFAOYSA-N N-[3-(aminomethyl)benzyl]acetamidine Chemical compound CC(=N)NCC1=CC=CC(CN)=C1 RODUKNYOEVZQPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 6
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 6
- 101000797762 Homo sapiens C-C motif chemokine 5 Proteins 0.000 description 5
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 5
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 5
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 5
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 5
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 5
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 5
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 5
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 238000010600 3H thymidine incorporation assay Methods 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000897480 Homo sapiens C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 4
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 4
- 101000958041 Homo sapiens Musculin Proteins 0.000 description 4
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 4
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 4
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 4
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 4
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 4
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 4
- 102100028990 C-X-C chemokine receptor type 3 Human genes 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000916050 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 3 Proteins 0.000 description 3
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 3
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 3
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 3
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 3
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 3
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 3
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 3
- 230000003399 chemotactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 230000000779 depleting effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 3
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 3
- 102000046949 human MSC Human genes 0.000 description 3
- 101150091799 ido gene Proteins 0.000 description 3
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 3
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 3
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 3 Isobutyl 1 methylxanthine Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(CC(C)C)C2=C1N=CN2 APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 102100035875 C-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 description 2
- 101710149870 C-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 description 2
- 102100032366 C-C motif chemokine 7 Human genes 0.000 description 2
- 101710098275 C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 2
- 102100025277 C-X-C motif chemokine 13 Human genes 0.000 description 2
- 102100039398 C-X-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 2
- 101710085500 C-X-C motif chemokine 9 Proteins 0.000 description 2
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102000009410 Chemokine receptor Human genes 0.000 description 2
- 108050000299 Chemokine receptor Proteins 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 2
- 101000858064 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 13 Proteins 0.000 description 2
- 101000889128 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 101150109636 Inos gene Proteins 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- 108010017525 Interleukin-17 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000004554 Interleukin-17 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102100035012 Interleukin-17 receptor C Human genes 0.000 description 2
- 101710186068 Interleukin-17 receptor C Proteins 0.000 description 2
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 2
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 2
- 101000998145 Mus musculus Interleukin-17A Proteins 0.000 description 2
- 101000648740 Mus musculus Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 2
- 102000018745 NF-KappaB Inhibitor alpha Human genes 0.000 description 2
- 108010052419 NF-KappaB Inhibitor alpha Proteins 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010090768 Nitric oxide dioxygenase Proteins 0.000 description 2
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 230000033540 T cell apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 230000009809 T cell chemotaxis Effects 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 102000006747 Transforming Growth Factor alpha Human genes 0.000 description 2
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 239000002870 angiogenesis inducing agent Substances 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N benzocaine Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000025084 cell cycle arrest Effects 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 2
- 230000014564 chemokine production Effects 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 230000001819 effect on gene Effects 0.000 description 2
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 2
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 2
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 2
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 2
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 2
- 230000012976 mRNA stabilization Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 2
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 2
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 2
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOFUBOWZWQFQJU-SNOJBQEQSA-N (2r,3s,4s,5r)-2,5-bis(hydroxymethyl)oxolane-2,3,4-triol;(2s,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O.OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AOFUBOWZWQFQJU-SNOJBQEQSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- IHWDSEPNZDYMNF-UHFFFAOYSA-N 1H-indol-2-amine Chemical compound C1=CC=C2NC(N)=CC2=C1 IHWDSEPNZDYMNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNBCLPGEMZEWLU-QXFUBDJGSA-N 2-chloro-n-[[(2r,3s,5r)-3-hydroxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl]acetamide Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CNC(=O)CCl)[C@@H](O)C1 SNBCLPGEMZEWLU-QXFUBDJGSA-N 0.000 description 1
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWRRWBIBNBVHQF-UHFFFAOYSA-N 4-(3-pyridin-2-yl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)butanoic acid Chemical compound O1C(CCCC(=O)O)=NC(C=2N=CC=CC=2)=N1 BWRRWBIBNBVHQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- NMUSYJAQQFHJEW-UHFFFAOYSA-N 5-Azacytidine Natural products O=C1N=C(N)N=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- PCLCDPVEEFVAAQ-UHFFFAOYSA-N BCA 1 Chemical compound CC(CO)CCCC(C)C1=CCC(C)(O)C1CC2=C(O)C(O)CCC2=O PCLCDPVEEFVAAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 101710155834 C-C motif chemokine 7 Proteins 0.000 description 1
- 102100025279 C-X-C motif chemokine 11 Human genes 0.000 description 1
- 102100036150 C-X-C motif chemokine 5 Human genes 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 108700013048 CCL2 Proteins 0.000 description 1
- 102000004274 CCR5 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017088 CCR5 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101150093802 CXCL1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100135858 Caenorhabditis elegans pde-2 gene Proteins 0.000 description 1
- BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L Carbenoxolone sodium Chemical compound [Na+].[Na+].C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C([O-])=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](OC(=O)CCC([O-])=O)C1(C)C BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 102000000018 Chemokine CCL2 Human genes 0.000 description 1
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 1
- 108010078239 Chemokine CX3CL1 Proteins 0.000 description 1
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 1
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 102100032620 Cytotoxic granule associated RNA binding protein TIA1 Human genes 0.000 description 1
- 101710086368 Cytotoxic granule associated RNA binding protein TIA1 Proteins 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 102000055765 ELAV-Like Protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 108700015856 ELAV-Like Protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 102100025137 Early activation antigen CD69 Human genes 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 102100036123 Far upstream element-binding protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710133942 Far upstream element-binding protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000013818 Fractalkine Human genes 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000797758 Homo sapiens C-C motif chemokine 7 Proteins 0.000 description 1
- 101000858060 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 11 Proteins 0.000 description 1
- 101000947186 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000934374 Homo sapiens Early activation antigen CD69 Proteins 0.000 description 1
- 101000998969 Homo sapiens Inositol-3-phosphate synthase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001002634 Homo sapiens Interleukin-1 alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001019598 Homo sapiens Interleukin-17 receptor A Proteins 0.000 description 1
- 101000979342 Homo sapiens Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Proteins 0.000 description 1
- 101000637342 Homo sapiens Nucleolysin TIAR Proteins 0.000 description 1
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 102100036881 Inositol-3-phosphate synthase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 1
- 102100035678 Interferon gamma receptor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 101150110301 MSC gene Proteins 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000001940 Massive Hepatic Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101100450263 Mus musculus Hadh gene Proteins 0.000 description 1
- 101001044384 Mus musculus Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- 101001002629 Mus musculus Interleukin-1 alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001033286 Mus musculus Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101001043827 Mus musculus Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N N(gamma)-nitro-L-arginine methyl ester Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N[N+]([O-])=O KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 238000011789 NOD SCID mouse Methods 0.000 description 1
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 1
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 1
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 102100023050 Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Human genes 0.000 description 1
- 102100032138 Nucleolysin TIAR Human genes 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 208000006735 Periostitis Diseases 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 1
- 108010044012 STAT1 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000006381 STAT1 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 210000000662 T-lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 102000035181 adaptor proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005764 adaptor proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011256 aggressive treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006909 anti-apoptosis Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 208000017760 chronic graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 208000012997 experimental autoimmune encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000022382 heparin binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091012216 heparin binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010019692 hepatic necrosis Diseases 0.000 description 1
- 238000011540 hip replacement Methods 0.000 description 1
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008629 immune suppression Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010820 immunofluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 108010085650 interferon gamma receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000011488 interferon-alpha production Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 238000013150 knee replacement Methods 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000011268 leukocyte chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 208000018191 liver inflammation Diseases 0.000 description 1
- 231100000149 liver necrosis Toxicity 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 230000007108 local immune response Effects 0.000 description 1
- 230000008949 local secretion Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000012913 medium supplement Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000025020 negative regulation of T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000004409 osteocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035778 pathophysiological process Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000003460 periosteum Anatomy 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 230000004983 pleiotropic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 230000005195 poor health Effects 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000002463 transducing effect Effects 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 230000001875 tumorinhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/2006—IL-1
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
- A61K38/217—IFN-gamma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0663—Bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSC)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K2035/122—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells for inducing tolerance or supression of immune responses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/50—Fibroblast growth factor [FGF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/525—Tumour necrosis factor [TNF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/545—IL-1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/56—IFN-alpha
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/57—IFN-gamma
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
- C12N2500/05—Inorganic components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
- C12N2501/2301—Interleukin-1 (IL-1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/23—Interleukins [IL]
- C12N2501/2317—Interleukin-17 (IL-17)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/24—Interferons [IFN]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
- C12N2501/25—Tumour necrosing factors [TNF]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
- C12N2502/11—Coculture with; Conditioned medium produced by blood or immune system cells
- C12N2502/1114—T cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
本発明は、国立衛生研究所からの助成金第GM866889、DE014913、およびDE019932号の下での政府による支援、およびニュージャージー州科学技術委員会の幹細胞助成金(第NJCST−2042−014−84号)によりなされた。
(マウス)
雄性C57BL/6、C3H/HeJCrおよびF1(C57BL/6×C3H)マウス、6〜8週齢は米国国立癌研究所(メリーランド州フレデリック)に由来する。IFNγ−R1−/−マウスおよびiNOS−/−マウスはジャクソン研究所(メリーランド州バーハーバー)に由来する。マウスはロバートウッドジョンソン医科大学動物施設で維持した。動物は実験ごとに年齢および性別でマッチングし、いずれも施設内動物実験委員会から承認された。
組換えIFNγおよびマウスTNFα、IL−1α、IL−1βに対するTNFα、IL−1α、およびIL−1βモノクローナル抗体、およびCCR5、FITCコンジュゲート抗マウスCD11b、およびPEコンジュゲート抗マウスF4/80はeBiosciences(カリフォルニア州ラホーヤ)に由来する。組換えマウスM−CSF、およびIL−10およびTGF−βに対する抗体はR&Dシステムズ(ミネソタ州ミネアポリス)に由来する。抗IFNγはハーラン(インディアナ州インディアナポリス)に由来する。抗CXCR3はインビトロジェン(カリフォルニア州カールズバッド)に由来する。インドメタシン、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)、およびNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)はシグマアルドリッチ(ミズーリ州セントルイス)に由来する。
MSCは6〜10週齢のマウスの脛骨および大腿骨の骨髄から作製した。10%FBS、2mMグルタミン、100U/mLペニシリンおよび100μg/mLストレプトマイシン(いずれもインビトロジェン由来)を添加したαMEM培地で細胞を培養した。24時間後に非接着性細胞を除去し、接着性細胞を3日おきに培地を補充しながら維持した。MSCクローンを得るために、集密状態の細胞を回収し、96ウェルプレートに限定希釈によって播種した。次に、個々のクローンを選別および拡大した。細胞は5から20継代で用いた。
ルミネックテクノロジー(バイオプレックスシステム、バイオラッド、カリフォルニア州ハーキュリーズ)を用いて、マルチプレックスビーズアレイキット(インビトロジェン、カリフォルニア州カールズバッド)により培養上清を20種類のサイトカインおよびケモカインについて測定した。IFNγはELISA(BDバイオサイエンス、カリフォルニア州サンホゼ)で測定した。NOは修飾グリース試薬(シグマ−アルドリッチ)を用いて検出した。簡単に述べると、すべてのNO3を硝酸レダクターゼでNO2に変換し、総NO2をグリース試薬で検出した(Miranda, et al.(2001)Nitric Oxide 5:62-71)。
RNEASYミニキットを用いて細胞ペレットからRNAを分離した。ファーストストランドcDNA合成は、ランダム6量体プライマーによるSENSISCRIPT RTキットを用いて実施した(すべてのキットはキアゲン、カリフォルニア州バレンシアに由来)。目的の遺伝子のmRNAは、SYBRグリーンマスターミックス(アプライドバイオシステムズ、カリフォルニア州フォスターシティ)を用いて、リアルタイムPCR(ストラタジーン(カリフォルニア州ラホーヤ)由来のMX−4000)により定量した。mRNAの総量は、内因性ベータアクチンmRNAに対して正規化した。iNOSについてのプライマー配列は:順方向5’−CAG CTG GGC TGT ACA AAC CTT−3’(配列番号:1);逆方向5’−CAT TGG AAG TGA AGC GTT TCG−3’(配列番号:2)であった。他のプライマーはRT2 PROFILER.TM.PCRアレイマウスケモカイン&受容体キット(スーパーアレイ、メリーランド州フレデリック)に由来した。
化学走性は、報告に従い(Shi, et al. (1993) J. Immunol. Meth. 164:149-154)、ニューロプローブCHEMOTX化学走性システム(ニューロプローブ、メリーランド州ゲーサーズバーグ)で試験した。96ウェルプレートの下部チャンバーにIFNγ+TNFα(各20ng/mLまたはSup.CD3−act(1:2希釈)で刺激したMSC由来の上清を充填した。次にポリビニルピロリドンを含有しない孔径5μのポリカーボネート膜でその上を覆った。T細胞芽球(1.25×105)を上部チャンバーに加えた。3時間インキュベートした後、MTT分析を用いて小孔を経て下部ウェルに遊走した細胞を定量した(Shi, et al. (1993)上に同じ)。化学走性指数は、培地単独に向かう遊走数と比較した、MSCに応答して遊走したT細胞芽球数の比率として算出した。
C57BL/6×C3Hの8週齢F1マウスに致死線量(13Gy)を照射し、24時間後に、C57BL/6親マウスより分離した有核骨髄細胞(5×106)および脾細胞(5×106)を、尾静脈注射により点滴した。骨髄移植より3および7日後、レシピエントに、C57BL/6野生型、IFNγR1−/−、またはiNOS−/−マウスに由来するMSC 0.5×106個を尾静脈より投与した。一部の野生型MSC群にも、iNOS阻害剤、NG−モノメチルL−アルギニン(L−NMMA、500μg/マウス)、抗IFNγ(400μg/マウス)、またはTNFα、IL−1αおよびIL−1βに対する3抗体のカクテル(各200μg/マウス)を、初回のMSC投与の直後に開始して7日間連日腹腔内注射した。ネガティブコントロールとして、F1マウスにF1骨髄細胞を注射した。マウスのGvHD徴候を連日観察し(衰弱、毛の乱れ、および円背)、また瀕死状態になった時点で安楽死させ、これにより生存期間を記録した。14日目に様々な組織を採取し、5μmパラフィン切片を作製し、ヘマトキシリン/エオシン(H&E)で染色した。
C57BL/6マウス(6〜8週齢)を、50μLの完全フロイントアジュバントで乳化した卵白アルブミン(OVA、5μL食塩水中10μg)の尾根部注射により免疫した。5日後に、30μL食塩水中の凝集OVA200μgを右後足蹠に注射して誘発することによりDTHを試験した。ネガティブコントロールとして左足蹠に食塩水30μLを注射した。24時間後、ノギスを用いて抗原誘導足蹠厚増加を測定し、RおよびLを右および左足蹠の厚さとし、(Rimm−Limm)−(R.unimm−L.unimm)として算出した。
有意性は対応のない両側スチューデントt検定または分散分析(ANOVA)によって評価した。
背景メカニズムを特定するため、マウスMSCのクローンを用いた。これらのクローンの幹細胞特性は、その脂肪細胞または骨芽細胞への分化能およびその表面マーカー:CD34;CD11b;CD11c;CD45;MHCクラスII;CD44+;Sca−1+;MHCクラスIlowの発現によって定義した。本願に示すすべての結果は、少なくとも異なる3つのMSCクローンを用いて再現された。
それによりサイトカイン曝露MSCによる免疫抑制がもたらされるメカニズムを特定するために、TRANSWELLシステムにおいてMSCと共培養した抗CD3活性化脾細胞(MSC:脾細胞1:20)の反応を、多様な設定で検討した。ウェルの2つのチャンバーで透過性膜(孔径0.4μm膜)により分離されるとMSCはT細胞増殖にほとんど影響せず、細胞膜タンパク質または他の局所作用因子がサイトカイン初回刺激MSCによるT細胞増殖の抑制にとって決定的であることを示す。最近の報告(Sato, et al.(2007)上に同じ)でPGE−2が必要とされるがIDOは必要とされないことが示されたのに対し、PGE−2は関与していないことが確認されている。事実、インドメタシン(10μM、PDE−2遮断剤)、抗IL−10(20μg/mL)、抗TGFβ(20μg/mL)または1メチル−DL−トリプトファン(1−MT、1mM、IDO阻害剤)によるMSCによる免疫抑制への影響は認められないので、これらの因子は除外される。
数件の研究において、インビボで、体細胞100万個に対して1から5個と少数のMSCによりMSCによる有効な免疫抑制が達成され、その多くが数ヶ月間持続し、一部の例では免疫障害が完全に治癒した。MSCは組織に定着した後は移動せず、また免疫抑制はその発生源付近できわめて局所的にのみ作用するNOによって媒介されると考えると、この免疫抑制作用は意外である。サイトカイン誘導性MSCはその近傍に免疫細胞を誘引するメカニズムを有し、そこで局所的に高濃度のNOが標的T細胞に有効に作用する可能性があることが想定される。これを探索するため、MSCと脾細胞の共培養を鏡検下で経時的にモニタリングした。
サイトカインで初期刺激されたMSCに対する活性化T細胞の堅牢な遊走は、MSCがケモカインなどの強力な化学誘引性物質を分泌することを示した。したがって、多様な条件下で培養されたMSCによる白血球ケモカインの産生を、上清を測定することにより判定した。サイトカインを添加せずに単独で培養されたMSCについては有意なサイトカイン産生は認められず、その生得的形態にあるMSCはT細胞を誘引することができないという所見を実証した。しかし抗CD3活性化脾細胞と共培養したところ、MSCは、MSC:脾細胞比率1:60でのCXCL−9(MIG)1.5ng/mL(他の実験では12ng/mL)およびCXCL−10(IP−10)50ng/mLを含む数種類のケモカインを大量に産生した。これらは強力なT細胞特異的ケモカインであり;いずれのケモカインもインビトロにおいて単独でわずか1から10ng/mLの濃度で有意な化学走性を駆動することが示されている(Loetscher, et al. (1998) Eur. J. Immunol. 28:3696-3705; Meyer, et al.(2001)Eur. J. Immunol. 31:2521-2527)。CXCL−9およびCXCL−10の産生は、免疫抑制の誘導に対する効果と同様に、IFNγ単独、または3つのサイトカインTNFα;IL−1α、およびIL−1βすべての抗体中和によって阻害された。ケモカイン産生は、組換えIFNγおよびTNFα(各20ng/mL)をMSC単独に添加することによって同様に誘導され、TNFαはやはりIL−1αおよびIL−1βと互換的であった。したがってこれらのサイトカインは、T細胞のMSCへの化学走性を駆動する原因となる可能性が高い、MSCのケモカイン発現を誘導するのに十分である。これによって、一旦MSCのごく近傍に遊走したならば、活性化T細胞はMSCによるさらなるケモカインの産生を誘導するサイトカインを分泌し、これによりさらに多くのT細胞をMSCの近傍に誘引する正のフィードバックループを生成すると予測されるであろう。
マウスの足蹠にOVA単独またはOVAおよびiNOS欠損または野生型マウス由来のMSCを注射した。次にマウスの足蹠をOVAで誘発し、その結果生じたDTH反応を足蹠浮腫により測定した。この分析の結果より、野生型MSCの投与によりDTH反応における炎症の軽減がもたらされることが示された。これと鋭く対照的に、iNOS欠損MSCは炎症を軽減しなかっただけでなく、実際にはMSCを注射しなかった誘発マウスと比較してDTH反応を亢進した(図2)。足蹠の組織学的分析では、野生型MSCを同時注射した動物由来の皮膚では炎症指標の減少が示されたが、iNOS−/−MSCを同時注射したマウスでは炎症部位における体液および白血球浸潤の増加が示された。この実験は、免疫応答の抑制におけるNOの必要性を実証しただけでなく、NO産生の非存在下においてMSC媒介化学走性が炎症を促進し、かつiNOSおよびIDOの阻害剤を用いてワクチンの効力を高めたりあるいは腫瘍に対する有効な免疫応答を惹起したりするなどの局所免疫応答の増強に用いることも可能であることを示した。
リンパ腫の腫瘍細胞は接着性でないので、p53+/−マウスに発症したリンパ腫から腫瘍ストローマ細胞を分離することが可能である。これらの細胞は、インビトロで継代してさらに脂肪細胞および骨芽細胞様細胞に分化することができることが確認された。興味深いことに、骨髄由来MSCと同様に、これらの腫瘍ストローマ細胞も免疫抑制性でありかつ抗CD3活性化脾細胞の増殖を有効に阻害することができる。抗IFNγINFγおよびiNOS阻害剤は免疫抑制効果を逆転することができたので、この免疫抑制効果もIFNγ+TNFαおよびNO依存性である。
リンパ腫ストローマ細胞の腫瘍成長に対する作用を検討するために、355B細胞リンパ腫細胞株(C3H−gld/gldバックグラウンド、0.5×106個/マウス)をgld/gldマウス由来リンパ腫ストローマ細胞(C3Hバックグラウンド、P5、0.25×106個/マウス)と同時に注射した。ストローマ細胞の同時注射によって死亡率が有意に上昇したことが確認された。興味深いことに、1400W(NOS阻害剤、0、2、4、8、12、16、20、24、および28日目に0.1mg/マウス)の投与は当該作用を有意に逆転した(図4)。したがって、腫瘍ストローマ細胞は腫瘍の成長を有意に促進することが可能であった。
腫瘍ストローマ細胞が産生するNOの腫瘍免疫療法に対する役割を検討するために、0日目にB16−F0メラノーマ細胞をC57BL/6マウスに注射した(0.5×106個/マウス)。4、8、12、16、20日目に、IFNγ(250ng/マウス)または1400W(NOS阻害剤、0.1mg/マウス)を腹腔内注射により投与した。マウスの生存はマウスの瀕死の時に記録した。複合療法はマウスの生存能力を劇的に高めることが確認された(図5)。したがって、IFNγは腫瘍の発症において二重の役割を有し;一方は何らかの抗血管新生因子を産生するかまたは何らかの血管新生因子の産生を阻止することにより腫瘍の発症を防止することであり、もう一方はNO、IDOまたはPGE2などの因子を産生することによって腫瘍ストローマまたは他の環境細胞による免疫抑制を誘導することである。このため、NO、IDOまたはPGEのうち1つまたはそれ以上の阻害は癌の治療を劇的に促進することができる。したがって、サイトカイン、ワクチン接種、抗体、樹状細胞、またはT細胞によるものなどの免疫療法を用いて癌を治療する場合、腫瘍ストローマ細胞は、大半の症例でこれらの治療が腫瘍を完全に根絶することが不可能な原因となっているかもしれない。iNOSおよびIDOに対する阻害剤と免疫療法の複合使用は、腫瘍を根絶するための有効な方法を提供する可能性もある。
マウスMSC媒介性免疫抑制は炎症性サイトカインに依存する。これらのサイトカインがないと、炎症性サイトカインIFNγとTNFαまたはIL−1が存在しない限りMSCは免疫抑制効果を持たず、MSCは刺激されて免疫抑制エフェクターである一酸化窒素(NO)を発現し、これは誘導型NOシンターゼ(iNOS)および数種類のヘルパー分子−ケモカインおよび接着分子によって触媒される。ケモカインおよび接着分子はT細胞および他の免疫細胞をMSCの近傍に保持し、ここで大量のNOが免疫細胞の機能を抑制する。
IL−17A促進性iNOS発現が機能的であるか否か検討するため、MSC−T細胞共培養系を実施してMSCの免疫抑制活性を評価した。図7に示すように、IFNγおよびTNFαの添加によってサイトカイン濃度依存的にT細胞増殖を低下させることが可能であった。印象深い事に、IL−17Aの添加はMSCのT細胞増殖に対する抑制を促進した。したがって、IL−17AはMSC媒介性免疫抑制の促進において機能的である。
(試薬とマウス)
組換えマウスIFNγ、TNFα、IL−17A、およびIL−17Aに対する抗体はeBiosciences(カリフォルニア州ラホーヤ)に由来した。組換えマウスIL−2はR&Dシステムズ(ミネソタ州ミネアポリス)に由来した。β−アクチン、GAPDH、iNOS、p−IκBα、p−P65、p−JNK、およびp−ERK1/2に対する抗体はセル・シグナリング・テクノロジー(マサチューセッツ州ダンバーズ)に由来した。Act1に対する抗体はサンタクルーズバイオテクノロジー(テキサス州ダラス)に由来した。PMSFおよびアクチノマイシンDはシグマアルドリッチ(ミズーリ州セントルイス)より購入した。
MSCは実施例1に記載のプロトコルを用いて作製した。簡単に述べると、6〜8週齢の野生型またはauf1−/−マウスの脛骨および大腿骨骨髄を採取した。10%FBS、2mMグルタミン、100U/mLペニシリンおよび100μg/mLストレプトマイシン(完全培地、いずれもインビトロジェン(カリフォルニア州カールズバッド)由来)を添加したDMEM培地で細胞を培養した。24時間後にすべての非接着性細胞を除去し、接着性細胞を維持した。2〜3日おきに培地を交換した。MSCクローンを得るために、集密状態の細胞を回収し、96ウェルプレートに限定希釈によって播種した。次に、個々のクローンを選別および拡大した。MSCは、それぞれの分化条件下において脂肪細胞および骨細胞に分化することが可能であった。細胞は15継代の前に用いた。
T細胞増殖を試験するため、凍結により培養を停止させる6時間前に、3H−チミジン0.5μCiを96ウェルプレートの各ウェルに添加した。その後プレートを解凍し、細胞を回収し、さらに取り込まれた3H−Tdrをワラックマイクロベータシンチレーションカウンター(パーキンエルマー、マサチューセッツ州ウォルサム)で分析した。
メッセンジャーRNA崩壊分析を原則的に実施した。MSCをサイトカインの組み合わせで6時間インキュベートした。アクチノマイシンD(ActD)を最終濃度5μg/mLで培地に添加して転写を停止した。ActD添加後の様々な測定時に、総RNAの抽出のため細胞を回収した。
RNAprepピュアセル/バクテリアキットで総RNAを分離した。ファーストストランドcDNA合成はcDNA合成キットで実施した。mRNAレベルは、SYBRグリーンマスターミックスを用いて定量的RT−PCR(7900HT;アプライドバイオシステムズ、カリフォルニア州フォスターシティ)により測定し、β−アクチンmRNAレベルに対して正規化した。順方向および逆方向プライマーのペアの配列は以下の通りである:
iNOS、順方向5’−CAGCTGGGCTGTACAAACCTT−3’および逆方向5’−CATTGGAAGTGAAGCGTTTCG−3’;
β−actin:順方向5’−CCACGAGCGGTTCCGATG−3’および逆方向5’−GCCACAGGATTCCATACCCA−3’;
IL−6:順方向5’−GAGGATACCACTCCCAACAGACC−3’および逆方向5’−AAGTGCATCATCGTTGTTCATACA−3’;
CXCL1:順方向5’−CTGCACCCAAACCGAAGTC−3’および逆方向5’−AGCTTCAGGGTCAAGGCAAG−3’;
CCL2:順方向5’−TCTCTCTTCCTCCACCACCATG−3’および逆方向5’−GCGTTAACTGCATCTGGCTGA−3’;
CCL5:順方向5’−TTTCTACACCAGCAGCAAGTGC−3’および逆方向5’−CCTTCGTGTGACAAACACGAC−3’;
CXCL9:順方向5’−AGTGTGGAGTTCGAGGAACCCT−3’および逆方向5’−TGCAGGAGCATCGTGCATT−3’;
CXCL10:順方向5’−TAGCTCAGGCTCGTCAGTTCT−3’および逆方向5’−GATGGTGGTTAAGTTCGTGCT−3’。
細胞を氷冷PBSで2回洗い、回収し、さらにプロテアーゼ阻害剤カクテル(ロッシェ、ニュージャージー州ナットリー)およびPMSF(シグマ)を含有するRIPAバッファー(ミリポア、カリフォルニア州テメキュラー)中で30分間氷上で溶解した。ライセートを16,000gで15分間の遠心分離により清澄化した。ブラッドフォードアッセイ(バイオラッド、カリフォルニア州ハーキュリーズ)により上清のタンパク質濃度を測定した。
培養したMSCを始めにPBSで洗い、さらに氷冷メタノールを用いて−20℃で10分間固定した。0.3%Triton X−100PBS溶液で10分間インキュベートした後、5%BSAを用いて細胞を室温で1時間ブロッキングし、さらに一次抗体である抗IL−17RA(サンタクルーズ)を用いて4℃で一晩インキュベートした。PBSで洗浄した後、アレクサフルオロ594コンジュゲートヤギ抗ウサギ二次抗体およびDAPI(インビトロジェン)を用いて細胞を室温で1時間インキュベートした。その後細胞を撮影前にPBSで洗浄した。
C57BL/6マウス(8〜10週齢)にConA(ベクターラボ、カリフォルニア州バーリンゲーム)のPBA溶液を15mg/kgで静脈内注射して肝損傷を誘導した。野生型マウスまたはauf1−/−マウスに由来するMSC(5×105)を、IL−17Aの存在下または非存在下でIFNγ、TNFαを用いて、または用いずに12時間処理し(各サイトカインにつき10ng/mL)、次にConAを投与したマウスに30分間静脈内投与した。さらに7.5時間後にマウスを安楽死させ、血清および肝組織を採取した。血清アラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)検出によりALT活性を測定した。ホルマリン固定肝組織学切片をヘマトキシリンとエオシン(H&E)で染色した。
肝単核球(MNS)を40%/70%グラジエントで精製し、染色バッファー(PBS、3%FCS)中で抗CD3−PE、抗CD4−PerCP/Cy5.5、および抗−CD8a−APC(eBiosciences)により4℃で30分間染色した。クローン化MSCにおけるIL−17RAの表面発現を検出するために、細胞を抗IL−17RA−PE(eBiosciences)で染色し、FACS Caliburフローサイトメーター(ベクトンディッキンソン、カリフォルニア州サンホゼ)でフローサイトメトリーにより分析した。
非線形回帰および統計分析は、PRISMv5ソフトウェア(グラフパッドソフトウェア社)を用いて実施した。サンプル間の比較は対応のないt検定により実施した。p<0.05の差を有意とみなした。(*、p<0.05;**、p<0.01;***、P<0.001)。
本実施例は、MSCの免疫抑制機能が生得的ではなく、炎症促進性サイトカインにより濃度依存的に誘導されることを規定する。MSCに対する免疫抑制作用を可能とするためにIFNγと他の3つの炎症性サイトカイン−TNFα、IL−1α、またはIL−1β−のうち1つの組み合わせが必要とされる。IF−17Aは、多様な炎症性および自己免疫疾患の病因論におけるその決定的役割で知られた多面発現性炎症促進性サイトカインである。興味深いことに、IL−17Aはいくつかのサイトカインと協同し、炎症に必要とされる遺伝子発現プログラムを促進することも知られている。したがって、本発明者らはIL−17Aが至適濃度に満たないIFNγおよびTNFαと協同してMSCの免疫抑制特性を誘導することが可能か検討した。
一酸化窒素(NO)およびケモカインは、協調的に作用し、MSCの免疫抑制作用を媒介する重要な分子である。MSCのケモカインおよびiNOS遺伝子は、IFNγおよびTNFαによって誘導される。しかし、IL−17AはIFNγおよびTNFαで培養したMSCによる免疫抑制を促進した(図9D、9E)。その後、IL−17AがINFγおよびTNFαと協同してMSCのiNOSおよびケモカインの発現を誘導することを示すよう、この試験を設計した。この仮説を検討するために、IFNγ、TNFαおよび/またはIL−17Aの様々な組み合わせを用いてMSC集団を培養し、さらに選択した免疫調節遺伝子の発現に対する作用を評価した。
iNOSおよび多くのサイトカイン/ケモカインをコードするメッセンジャーRNAは速やかに分解され、これはmRNAおよびタンパク質のいずれに対しても量の増加を制限する。シグナル伝達経路の活性化は、特に免疫応答時には、これらのmRNAを安定化してその発現を増加させる。実際、IL−17Aが多くの炎症メディエーター遺伝子の発現を誘導する主なメカニズムは、そのmRNAを安定化させることによる。数多くのタンパク質が、通常は3’−UTRにおいて、特異的なRNA配列と結合しかつRNAを迅速な分解の標的とする。AUリッチ領域(ARE)はそのようなmRNA分解配列のファミリーの1つを含む。AREと結合してそれを内部に持つmRNAの調節発現を誘発するタンパク質は数多い。これらのタンパク質はAUF1、HuR、KSRP、TIA−1/TIAR、およびTTPを含む。これらのタンパク質の標的の一部は、iNOS、IL−6、およびCXCL1をコードするARE−mRNAを含む。ARE結合タンパク質AUF1は、iNOSおよびIL−6 mRNAと結合してその分解を制御する4つのアイソフォーム―p37、p40、p42、およびp45―を含む。したがって、AUF1はiNOSおよびサイトカイン/ケモカインmRNAの発現を制限するよう作用すること、およびIL−17AがAUF1のこの活性を遮断し、これにより遺伝子発現を増加させるという仮説が立てられた。
AUF1ノックアウトがIL−17Aを必要とすることなくケモカイン遺伝子発現を誘導したと考えると(図12および13を参照)、IFNγ+TNFα単独でauf1−/−MSCを培養することは、3つのサイトカインすべてを用いて培養された野生型MCSの免疫抑制活性を表現型模写するのに十分であろうという仮説が立てられる。この仮説を検討するため、野生型およびauf1−/−MSCを、IL−17Aを添加してあるいは添加せずにIFNγ+TNFαを用いて培養した後、T細胞増殖の分析のためにA1.1T細胞ハイブリドーマと共培養した。IL−17Aは、添加しないで培養した細胞と比較して、野生型MSCの免疫抑制活性を増加させたが;しかしIFNγ+TNFαはauf1−/−MSCの最大免疫抑制活性を誘導するのに十分であり、かつIL−17Aは免疫抑制効果をさらに亢進させることはなかった(図14A、14B)。これらの結果を合わせて考えると、AUF1はiNOSおよびサイトカイン/ケモカイン遺伝子発現を制限するという所見と一致し;IL−17Aはこれらの作用を逆転してMSCによる免疫抑制を促進する。
次に発明者らは、野生型およびauf1−/−MSCによるインビボ免疫抑制に対するIL−17Aの作用を検討した。マウスのConA誘導型肝損傷は、主としてT細胞を介する自己免疫性肝炎のインビボモデルにおいて十分に説明されている。先の結果より、IL−17Aはインビトロ系においてMSCの免疫抑制作用を劇的に促進できることが示されているので、マウスにおけるConA誘導型肝損傷を治療する際に、IL−17AがMSCによりすぐれた治療効果を可能とするこができるであろうと予想された。したがって、始めにIL−17Aの存在下または非存在下でIFNγ+TNFαを用いてまたは用いずに野生型およびauf1−/−MSCを12時間処理し、次に30分前にConA注射を受けたマウスに静脈内注射した。未処理またはIFNγ+TNFα前処理した野生型MSCと比較して、IFNγ+TNFαおよびIL−17Aで前処理した野生型MSCは、血清ALT活性および肝壊死および炎症を鋭く減少させ、肝損傷を相当改善することが可能であった(図15A、15D)。しかしauf1−/−MSCについては、IL−17を必要とすることなく、IFNγ+TNFα前処理のみでConA誘導型肝損傷に対する最大治療効果を誘発するであろう(図15A、15D)。IFNγ+TNFαにIL−17Aを添加して前処理した野生型MSC、またはIL−17Aを添加してあるいは添加せずにIFNγ+TNFαで前処理したauf1−/−MSCを投与されたマウスでは、血清ALT活性のパターンと一致して、肝臓の単核球、さらにはCD3+CD4+およびCD3+CD8+T細胞浸潤も劇的に減少した(図15B、15C)。したがって当業者は、IFNγ+TNFαとIL−17Aで同時に前処理したMSCを利用することによるConA誘導性肝損傷を治療する上での新しい新規の治療法を認識することができ、かつIL−17Aの効果はAUF1依存的に発揮される。
IL−17AがどのようにMSCによるiNOS発現および免疫抑制を促進するかというメカニズムを検討するために、サイトカイン誘導下でのiNOSのRNA安定性を試験した。図16Aに示すように、IFNγ+TNFα処理群におけるiNOS mRNAの崩壊半減期は約2.5時間であった。興味深いことに、IL−17Aの添加は検討した測定時内でiNOS mRNAを完全に保護した。
上述のように、IL−17AはMSC媒介性免疫抑制を促進するための潜在的因子となる可能性もある。しかし多くの場合、そのようなインビトロおよびインビボ免疫抑制作用は正または負のいずれかに調節する必要がある。入手可能な成長因子およびサイトカインをスクリーニングし、2つの因子:I型インターフェロンおよび線維芽細胞増殖因子(FGF−2)がMSC媒介性免疫抑制を著しくダウンレギュレートすることを確認した。
MSC媒介性免疫抑制には種間変動があり:NOはマウスMSCに対するエフェクター分子であるのに対し、ヒトおよび霊長類MSCはインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を抑制的エフェクター分子として利用する。
この実施例において、発明者らはGFPをコードするレンチウイルスをMSCに形質導入するか(MSC−GFP)、またはGFPをマウスIFNαと同時に形質導入した(MSC−IFNα)。フローサイトメトリー上でのGFP発現によって示されるように、90%を超える細胞が良好に形質導入された(図18A)。MSC−GFPおよびMSC−IFNαの間で形態および増殖率に明らかな変化は認められなかった。MSC−IFNαのINF産生レベルを検討するために、5×105個/mLで48時間培養したMSCの上清中でIFNαのレベルを定量した(図18B)。
インビボで腫瘍成長に対するMSC−INFαの作用を検討するために、マウスB16メラノーマモデルを用いた。この系においては、すべての細胞およびマウスはC57BL/6バックグラウンドにあった。1×106個のB16メラノーマ細胞を、単独かまたはMSC−GFPまたはMSC−IFNαのいずれか1×106個と同時に筋肉内接種し、さらに12日後に腫瘍を摘出して秤量した。MSC−IFNαが腫瘍成長を完全に停止させた一方で、MSC−GFPは腫瘍成長をわずかに促進したことが予想外に確認された(図19A)。MSC−IFNαの効力を検討するために、1×106個のB16メラノーマ細胞と種々の個数のMSC−INFαを動物に注射した。驚くべきことに、1×104個のMSC−IFNα(MSC−IFNα:B16の比率=1:100)であってもなおインビボで腫瘍成長を強力に阻止することができた(図19B)。さらに、腫瘍細胞を単独接種したマウスはすべて30日以内に死亡したのに対し、腫瘍細胞をMSC−INFIと同時に投与されたマウスのほぼ半数は100日以上生存した(図19C)。
MSC−IFNαの強力な抗腫瘍作用のメカニズムをさらに検討するために、インビボで投与されたMSC−IFNαの運命を追跡した。このため、MSC−IFNαをルシフェラーゼで標識し、BerthodNC100撮影システムを使用する生体撮影技術でその活性をインビボモニタリングした。
インビトロでの組換えIFNαの腫瘍成長に対する直接的作用を検討した。組換えINFαは高濃度であってもB16メラノーマ細胞を僅かにに阻害するのみであることが確認された(MSC−IFNαによって産生される19ng/mLと比較して最高100ng/mL)(図21A)。したがって、MSC−INFαによってインビボで認められた完全な腫瘍成長阻害を考慮し、発明者らは腫瘍成長の直接阻害に追加して関与する他のメカニズムがあるはずであると推測した。
Claims (17)
- 免疫反応を促進、増強、又は刺激するための組成物であって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)、並びにインターロイキン−1アルファ(IL−1α)、インターロイキン−1ベータ(IL−1β)、IL−17A、腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)、I型インターフェロン(IFN−I)、TGFβ、及びFGFから成る群から選択される少なくとも1つの別のサイトカイン;及び
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤であって、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)及びNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)の1つ以上から成る群から選択される前記阻害剤を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、
前記組成物。 - 分離間葉系幹細胞の集団が一酸化窒素シンターゼ(iNOS)欠損間葉系幹細胞である、請求項1記載の組成物。
- 分離間葉系幹細胞の集団がインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)欠損間葉系幹細胞である、請求項1記載の組成物。
- 分離間葉系幹細胞の集団が一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)の二重欠損間葉系幹細胞である、請求項1記載の組成物。
- 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項1記載の組成物。
- 免疫反応を増強するための組成物であって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ、)並びにインターロイキン−1アルファ(IL−1α)、インターロイキン−1ベータ(IL−1β)、IL−17A、腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)、I型インターフェロン(IFN−I)、TGFβ、及びFGFから成る群から選択される少なくとも1つの別のサイトカイン;及び
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤であって、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)及びNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)の1つ以上から成る群から選択される前記阻害剤を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記組成物。 - 分離間葉系幹細胞の集団が一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)の二重欠損間葉系幹細胞である、請求項6記載の組成物。
- 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項6記載の組成物。
- 免疫抑制性疾患に対する免疫反応を促進するための組成物であって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)、並びにインターロイキン−1アルファ(IL−1α)、インターロイキン−1ベータ(IL−1β)、IL−17A、腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)、I型インターフェロン(IFN−I)、TGFβ、及びFGFから成る群から選択される少なくとも1つの別のサイトカイン;
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤であって、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)及びNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)の1つ以上から成る群から選択される前記阻害剤;及び
医薬品として許容できる担体、を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記組成物。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項9記載の組成物。
- 免疫抑制性疾患が癌又はウイルス感染である、請求項9記載の組成物。
- 免疫治療と組み合わされて使用される免疫アジュバントであって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)、並びにインターロイキン−1アルファ(IL−1α)、インターロイキン−1ベータ(IL−1β)、IL−17A、腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)、I型インターフェロン(IFN−I)、TGFβ、及びFGFから成る群から選択される少なくとも1つの別のサイトカイン;
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤であって、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)及びNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)の1つ以上から成る群から選択される前記阻害剤;及び
医薬品として許容できる担体、を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記免疫アジュバント。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項12記載の免疫アジュバント。
- 免疫反応を促進するための組成物の作製方法であって、
(i)多能性前駆細胞を得ること;
(ii)前記多能性細胞を培地内で培養して間葉系幹細胞の拡大亜集団と分化細胞の亜集団を作製すること;
(iii)前記培地中で分化細胞より間葉系幹細胞を分離すること;及び
(iv)前記の分離された間葉系幹細胞の少なくとも1つのサブセットをインターフェロンガンマ(IFNγ)、並びにインターロイキン−1アルファ(IL−1α)、インターロイキン−1ベータ(IL−1β)、IL−17A、腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)、I型インターフェロン(IFN−I)、TGFβ、及びFGFから成る群から選択される少なくとも1つの別のサイトカインで処理すること;及び
(v)誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤であって、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)及びNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)の1つ以上から成る群から選択される前記阻害剤を添加すること、
という段階を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記作製方法。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項14記載の方法。
- それを必要とする患者において免疫を促進するためのキットであって、
分離間葉系幹細胞の集団;
分離されたインターフェロンガンマ(IFNγ)、並びにインターロイキン−1アルファ(IL−1α)、インターロイキン−1ベータ(IL−1β)、IL−17A、腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)、I型インターフェロン(IFN−I)、TGFβ、及びFGFから成る群から選択される少なくとも1つの別のサイトカイン;及び
誘導型一酸化窒素シンターゼ(iNOS)及びインドールアミン2,3−ジオキシゲナーゼ(IDO)を含む免疫抑制分子のセットに対する少なくとも一つの阻害剤であって、1−メチル−DL−トリプトファン(1−MT)及びNG−モノメチル−L−アルギニン(L−NMMA)の1つ以上から成る群から選択される前記阻害剤、を含み、
分離間葉系幹細胞においてインターロイキン−17A(IL−17A)の発現が阻害されている、前記キット。 - 少なくとも1つの別のサイトカインが腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)を含む、請求項16記載のキット。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2020013222A JP6920644B2 (ja) | 2012-12-14 | 2020-01-30 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261737616P | 2012-12-14 | 2012-12-14 | |
US61/737,616 | 2012-12-14 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015548026A Division JP6377632B2 (ja) | 2012-12-14 | 2013-12-14 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020013222A Division JP6920644B2 (ja) | 2012-12-14 | 2020-01-30 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018184449A JP2018184449A (ja) | 2018-11-22 |
JP6654670B2 true JP6654670B2 (ja) | 2020-02-26 |
Family
ID=50935021
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015548026A Active JP6377632B2 (ja) | 2012-12-14 | 2013-12-14 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
JP2018139545A Active JP6654670B2 (ja) | 2012-12-14 | 2018-07-25 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
JP2020013222A Active JP6920644B2 (ja) | 2012-12-14 | 2020-01-30 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
JP2021113276A Pending JP2021169478A (ja) | 2012-12-14 | 2021-07-08 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
JP2023065806A Active JP7495695B2 (ja) | 2012-12-14 | 2023-04-13 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015548026A Active JP6377632B2 (ja) | 2012-12-14 | 2013-12-14 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
Family Applications After (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020013222A Active JP6920644B2 (ja) | 2012-12-14 | 2020-01-30 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
JP2021113276A Pending JP2021169478A (ja) | 2012-12-14 | 2021-07-08 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
JP2023065806A Active JP7495695B2 (ja) | 2012-12-14 | 2023-04-13 | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
EP (2) | EP2931877B1 (ja) |
JP (5) | JP6377632B2 (ja) |
KR (2) | KR102188605B1 (ja) |
CN (2) | CN105008521B (ja) |
AU (2) | AU2013358904B2 (ja) |
CA (1) | CA2895148C (ja) |
DK (1) | DK2931877T3 (ja) |
ES (1) | ES2756336T3 (ja) |
HK (1) | HK1217211A1 (ja) |
WO (1) | WO2014093948A1 (ja) |
Families Citing this family (31)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015172659A1 (zh) * | 2014-05-14 | 2015-11-19 | 中国科学院上海生命科学研究院 | Il-17在提高间充质干细胞免疫抑制功能中的应用 |
JP6898706B2 (ja) * | 2015-01-05 | 2021-07-07 | ナショナル ヤン−ミン ユニバーシティ | 肝疾患を治療するための間葉系幹細胞 |
CN105838671A (zh) * | 2015-01-16 | 2016-08-10 | 中国科学院上海生命科学研究院 | I型干扰素及间充质干细胞在制备抗肿瘤药物中的新用途 |
US11607426B2 (en) | 2016-09-19 | 2023-03-21 | University Of South Florida | Method of targeting oncolytic viruses to tumors |
KR101971323B1 (ko) * | 2016-10-17 | 2019-04-23 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | 면역질환 치료를 위한 고효능 줄기세포 선별방법 |
EP3532606A4 (en) * | 2016-10-27 | 2020-07-29 | The Trustees of Columbia University in the City of New York | IMMUNSUPPRESSIVE MESENCHYMAL CELLS AND METHOD FOR THE PRODUCTION THEREOF |
JP7275441B2 (ja) * | 2016-12-12 | 2023-05-18 | ベイジン、ヘルス、アンド、バイオテック、ステム、セル、テクノロジカル、コーポレーション、リミテッド | 周産期組織由来間葉系幹細胞:その作製方法および使用 |
US20200085881A1 (en) * | 2016-12-16 | 2020-03-19 | Osaka Air Machine Service, Ltd. | Tissue healing agent |
CN107916253A (zh) * | 2017-11-01 | 2018-04-17 | 上海隆耀生物科技有限公司 | 一种表达人源免疫刺激因子light的间充质干细胞的制备方法及制得的msc‑l细胞 |
GB2568603A (en) * | 2017-11-06 | 2019-05-22 | King S College London | Therapeutic substances, their preparation and diagnostic procedure |
US20200345781A1 (en) * | 2017-11-09 | 2020-11-05 | Sapporo Medical University | Medicine for tissue regeneration, and preparation method therefor |
KR102096150B1 (ko) * | 2018-01-05 | 2020-04-02 | 재단법인 아산사회복지재단 | 인터페론 감마로 전처리된 유도만능 줄기세포 유래 중간엽 줄기세포 및 이로부터 유래된 엑소좀을 포함하는 피부질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 |
CN108546674B (zh) * | 2018-04-28 | 2021-10-19 | 暨南大学 | 预刺激干细胞及其制备方法和应用 |
KR102074798B1 (ko) * | 2018-06-15 | 2020-02-07 | 코아스템(주) | 자가면역질환 치료에 대한 유효성 예측용 바이오마커, 진단키트 및 치료용 용도 |
AU2019355201A1 (en) * | 2018-10-05 | 2021-05-20 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods for the expansion of mesenchymal stromal cells |
CN109706180A (zh) * | 2019-01-11 | 2019-05-03 | 杭州荣泽生物科技有限公司 | 一种脐带间充质干细胞过表达ido增强免疫抑制的方法及应用 |
CA3127851A1 (en) * | 2019-02-27 | 2020-09-03 | Tigenix, S.A.U. | Improved stem cell populations for allogeneic therapy |
WO2021007180A1 (en) * | 2019-07-05 | 2021-01-14 | Case Western Reserve University | Priming media and methods for stem cell culture and therapy |
CN112940100B (zh) * | 2019-12-10 | 2022-06-07 | 湖南赛奥维生物技术有限公司 | 一种碱性成纤维细胞生长因子替代物及其组合物和应用 |
KR102268242B1 (ko) * | 2020-01-06 | 2021-06-23 | 에스씨엠생명과학 주식회사 | 줄기세포의 기능강화용 조성물 |
WO2021162554A1 (en) * | 2020-02-14 | 2021-08-19 | Academisch Ziekenhuis Leiden H.O.D.N. Lumc | Means and methods for determining mesenchymal stromal cell properties. |
CN111206018A (zh) * | 2020-02-25 | 2020-05-29 | 无锡市人民医院 | 一种用于治疗急性肝衰竭的间充质干细胞的制备方法 |
CN111351942B (zh) * | 2020-02-25 | 2024-03-26 | 北京尚医康华健康管理有限公司 | 肺癌肿瘤标志物筛选系统及肺癌风险分析系统 |
CN112111449A (zh) * | 2020-09-03 | 2020-12-22 | 高连如 | 一种免疫调节功能预授权型间充质干细胞、制备方法及注射液 |
CN113151164B (zh) * | 2021-05-08 | 2023-08-18 | 中山大学 | 一种msc的培养基添加剂及其应用 |
KR20220162394A (ko) * | 2021-06-01 | 2022-12-08 | 에스씨엠생명과학 주식회사 | 기능강화 줄기세포 및 조절 t 세포를 포함하는 아토피 피부염 예방 또는 치료용 병용투여 조성물 |
CN114621919B (zh) * | 2022-05-17 | 2022-12-06 | 天九再生医学(天津)科技有限公司 | 一种增强间充质干细胞免疫调节能力的方法 |
KR20230172252A (ko) * | 2022-06-15 | 2023-12-22 | 에스씨엠생명과학 주식회사 | 기능강화 줄기세포를 포함하는 관절염 예방 또는 치료용 조성물 |
CN115161276B (zh) * | 2022-08-24 | 2023-09-15 | 深圳市北科生物科技有限公司 | Il4、il21、il27至少两种细胞因子处理获得的间充质干细胞及其外泌体和应用 |
CN115354022A (zh) * | 2022-08-24 | 2022-11-18 | 深圳市北科生物科技有限公司 | Il4、il21、il27至少两种细胞因子处理获得的间充质干细胞及其外泌体和应用 |
KR102522295B1 (ko) * | 2022-08-30 | 2023-04-18 | 주식회사 스마트셀랩 | 말초혈액유래 줄기세포의 분리 및 배양조건과 이를 활용한 전구세포로의 분화유도 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE10336152B4 (de) | 2003-08-06 | 2007-02-15 | Nephrogen LLC, Salt Lake City | Aufreinigungsverfahren für humane mesenchymale Stammzellen |
US20090201479A1 (en) | 2005-01-31 | 2009-08-13 | Masayoshi Arai | Laser light source control method, laser light source device, and exposure apparatus |
US20070128722A1 (en) | 2005-12-05 | 2007-06-07 | Industrial Technology Research Institute | Human mesenchymal stem cells and culturing methods thereof |
US8685728B2 (en) * | 2008-01-31 | 2014-04-01 | Rutgers The State University Of New Jersey | Kit containing stem cells and cytokines for use in attenuating immune responses |
-
2013
- 2013-12-14 CA CA2895148A patent/CA2895148C/en active Active
- 2013-12-14 KR KR1020157018893A patent/KR102188605B1/ko active IP Right Grant
- 2013-12-14 JP JP2015548026A patent/JP6377632B2/ja active Active
- 2013-12-14 ES ES13862510T patent/ES2756336T3/es active Active
- 2013-12-14 CN CN201380072996.0A patent/CN105008521B/zh active Active
- 2013-12-14 EP EP13862510.8A patent/EP2931877B1/en active Active
- 2013-12-14 EP EP19188908.8A patent/EP3587562B1/en active Active
- 2013-12-14 WO PCT/US2013/075208 patent/WO2014093948A1/en active Application Filing
- 2013-12-14 KR KR1020207034754A patent/KR102353601B1/ko active IP Right Grant
- 2013-12-14 AU AU2013358904A patent/AU2013358904B2/en active Active
- 2013-12-14 DK DK13862510T patent/DK2931877T3/da active
- 2013-12-14 CN CN201811227664.6A patent/CN109576217A/zh active Pending
-
2016
- 2016-04-27 HK HK16104849.7A patent/HK1217211A1/zh unknown
-
2018
- 2018-07-25 JP JP2018139545A patent/JP6654670B2/ja active Active
-
2020
- 2020-01-30 JP JP2020013222A patent/JP6920644B2/ja active Active
- 2020-03-13 AU AU2020201856A patent/AU2020201856B2/en active Active
-
2021
- 2021-07-08 JP JP2021113276A patent/JP2021169478A/ja active Pending
-
2023
- 2023-04-13 JP JP2023065806A patent/JP7495695B2/ja active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2020201856B2 (en) | 2022-07-14 |
KR20150118100A (ko) | 2015-10-21 |
CN105008521B (zh) | 2018-11-20 |
KR102188605B1 (ko) | 2020-12-08 |
JP2023093589A (ja) | 2023-07-04 |
EP2931877A4 (en) | 2016-05-04 |
JP2021169478A (ja) | 2021-10-28 |
JP6377632B2 (ja) | 2018-08-22 |
CN105008521A (zh) | 2015-10-28 |
KR20200138833A (ko) | 2020-12-10 |
HK1217211A1 (zh) | 2016-12-30 |
EP2931877B1 (en) | 2019-07-31 |
DK2931877T3 (da) | 2019-11-04 |
JP2018184449A (ja) | 2018-11-22 |
CN109576217A (zh) | 2019-04-05 |
AU2013358904B2 (en) | 2020-01-02 |
JP2016504324A (ja) | 2016-02-12 |
CA2895148A1 (en) | 2014-06-19 |
EP3587562B1 (en) | 2021-03-24 |
JP2020075935A (ja) | 2020-05-21 |
CA2895148C (en) | 2023-02-28 |
KR102353601B1 (ko) | 2022-01-19 |
AU2013358904A1 (en) | 2015-07-09 |
ES2756336T3 (es) | 2020-04-27 |
JP7495695B2 (ja) | 2024-06-05 |
EP2931877A1 (en) | 2015-10-21 |
WO2014093948A1 (en) | 2014-06-19 |
EP3587562A1 (en) | 2020-01-01 |
AU2020201856A1 (en) | 2020-04-02 |
JP6920644B2 (ja) | 2021-08-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6654670B2 (ja) | 幹細胞の免疫制御作用を調節する方法 | |
US9301979B2 (en) | Method for attenuating immune response using mesenchymal stem cells and cytokines | |
US11389484B2 (en) | Mesenchymal stem cells and uses therefor | |
US11872250B2 (en) | Methods for inducing an immune response by administering activated mesenchymal stem cells | |
EP3656387A2 (en) | Genetically modified mesenchymal stem cells expressing an immune response-stimulating cytokine to attract and/or activate immune cells | |
JP6449148B2 (ja) | 免疫抑制細胞作成方法、及び、免疫抑制細胞を含む組成物の使用方法 | |
US20080305079A1 (en) | Myeloid Suppressor Cells, Methods For Preparing Them, and Methods For Using Them For Treating Autoimmunity | |
US20150174222A1 (en) | Modification of the immunomodulatory effects of cells | |
EP3873503B1 (en) | Treatment of cachexia using fibroblast cells and products thereof |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180727 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190709 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190918 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200107 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200130 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6654670 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |