JP2021073263A

JP2021073263A - Ｒｎａ送達のためのイオン化可能なカチオン性脂質

Info

Publication number: JP2021073263A
Application number: JP2021013021A
Authority: JP
Inventors: イー．ペインジョセフ; e payne Joseph; チブクラパッドマナブ; Chivukula Padmanabh; カルマリプリヤ; Karmali Priya; ピー．タニススティーブン; P Tanis Steven
Original assignee: Arcturus Therapeutics Inc
Current assignee: Arcturus Therapeutics Inc
Priority date: 2016-12-21
Filing date: 2021-01-29
Publication date: 2021-05-13
Also published as: AU2017379587A1; IL290592B2; KR102299053B1; FI3558943T3; EP3558942B1; US10383952B2; IL267511B; JP6905062B2; CN114917203A; JP2020504730A; JP2021088588A; CA3046885A1; JP2023071947A; US10980895B2; PT3558943T; HRP20231742T1; IL290592B1; CA3046885C; EP3558942C0; DK3558943T3

Abstract

【課題】ＲＮＡ送達のためのイオン化可能なカチオン性脂質を提供する。【解決手段】式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物とする。式中、Ｒ１が、１０〜３１個の炭素からなる分岐鎖アルキルであり；Ｒ２が、２〜２０個の炭素からなる直鎖アルキルなどであり；Ｌ１およびＬ２が、同一または異なる、それぞれ、１〜２０個の炭素の直鎖アルキレンなどであり；Ｘ１が、ＳまたはＯであり；Ｒ３は、１〜６個の炭素からなる直鎖のアルキレンなどであり；Ｒ４およびＲ５が、同一または異なる、それぞれ、水素などである。【選択図】図１４

Description

関連出願の相互参照
本願は、２０１６年１２月２１日に出願された米国特許出願第１５／３８７，０６７号
の優先権を主張し、その内容全体が、参照によって本明細書に組み込まれる。

２０１５年５月８日に出願された米国特許出願第１４／７０７，８７６号（現在は、２
０１６年６月１４日に発行された米国特許第９，３６５，６１０号）、２０１５年５月８
日に出願された米国特許出願第１４／７０７，７９６号（現在は、２０１７年２月１４日
に発行された米国特許第９，５６７，２９６号）；２０１４年１１月１８日に出願された
米国特許出願第１４／５４６，１０５号（現在は、２０１７年３月１４日に発行された米
国特許第９，５９３，０７７号）；および２０１３年１１月１８日に出願された米国仮特
許出願第６１／９０５，７２４号の開示全体が、参照によって本明細書に組み込まれる。

いくつかの異なる種類の核酸が現在、いくつかの疾患の処置のための治療薬として開発
されている。これらの分子が開発されているので、安定で長い貯蔵寿命を有し、極性水溶
液または非極性溶媒中で起こり得る副反応を伴わずに、無水有機または無水極性非プロト
ン性溶媒に容易に組み入れて核酸のカプセル化を可能にすることができる形態でそれらを
製造する必要性が生じてきた。

本明細書における記載は、生物学的に活性な治療用分子の細胞内送達を促進する新規な
脂質組成物に関する。本記載はまた、そのような脂質組成物を含み、治療有効量の生物学
的に活性な分子を患者の細胞に送達するのに有用である医薬組成物に関する。

被験体への治療用化合物の送達は、その治療効果にとって重要であり、通常それは標的
とする細胞および組織に到達する化合物の限られた能力によって妨げられ得る。そのよう
な化合物を様々な送達手段により組織の、標的とする細胞に進入させるための改良が重要
である。本明細書の記載は、生物活性分子の、標的化された細胞内送達を促進する組成物
および調製方法における新規な脂質に関する。

患者の組織への有効な標的化がしばしば達成されない生物学的に活性な分子の例には、
免疫グロブリン（immunoglobin）タンパク質を含む多数のタンパク質、ゲノムＤＮＡ、ｃ
ＤＮＡ、またはｍＲＮＡアンチセンスポリヌクレオチドなどのポリヌクレオチド；ならび
に、合成であろうと天然に存在するものであろうと、ペプチドホルモンおよび抗生物質な
どの多くの低分子量化合物が含まれる。

現在医師が直面している基本的な課題の１つは、いくつかの異なる種類の核酸が、現在
、いくつかの疾患の処置のための治療薬として開発されていることである。これらの核酸
には、遺伝子発現のためのｍＲＮＡ、遺伝子療法におけるＤＮＡ、プラスミド、ＲＮＡ干
渉（ＲＮＡｉ）において使用するための低分子干渉核酸（ｓｉＮＡ）、ｓｉＲＮＡ、およ
びマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンス分子、リボザイム、アンタゴミア（ａｎ
ｔａｇｏｍｉｒ）、ならびにアプタマーが含まれる。これらの核酸が開発されているので
、作製が容易であり、標的組織に容易に送達することができる脂質製剤を製造する必要が
ある。

式Ｉ

（式中、
Ｒ_１は、１０〜３１個の炭素からなる分岐鎖アルキルであり、
Ｒ_２は、２〜２０個の炭素からなる直鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニルであり
、
Ｌ_１およびＬ_２は、同一または異なる、それぞれ、１〜２０個の炭素の直鎖アルキレン、
または２〜２０個の炭素からなる直鎖アルケニレンであり、
Ｘ_１は、ＳまたはＯであり、
Ｒ_３は、１〜６個の炭素からなる直鎖または分岐状のアルキレンであり、
Ｒ_４およびＲ_５は、同一または異なる、それぞれ、水素、または１〜６個の炭素からなる
直鎖もしくは分岐状のアルキルである）
の化合物、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が記載される。

一実施形態では、以下：

の通りの式ＡＴＸ−４３、ＡＴＸ−５７、ＡＴＸ−５８、ＡＴＸ−６１、ＡＴＸ−６３、
ＡＴＸ−６４、ＡＴＸ−８１、ＡＴＸ−８２、ＡＴＸ−８３、ＡＴＸ−８４、ＡＴＸ−８
６、ＡＴＸ−８７、およびＡＴＸ−８８の化合物からなる群より選択される。

一実施形態では、本明細書で記載されるものは、Ｒ_１が、１０、１１、１２、１３、１
４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７
、２８、２９、３０、または３１個の炭素からなる分岐鎖アルキルであり；Ｒ_２が、２、
３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８
、１９、または２０個の炭素からなる直鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニルであ
り；Ｌ_１およびＬ_２が、同一または異なる、それぞれ、１、２、３、４、５、６、７、８
、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、もしくは２０個
の炭素の直鎖アルキレン、または２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、
１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、もしくは２０個の炭素からなる直鎖アルケ
ニレンであり；Ｘ_１が、ＳまたはＯであり；Ｒ_３が、１、２、３、４、５、６、または６
個の炭素からなる直鎖または分岐状のアルキレンであり；Ｒ_４およびＲ_５が、同一または
異なる、それぞれ、水素、または１、２、３、４、５、もしくは６個の炭素からなる直鎖
もしくは分岐状のアルキルである、化合物からなる。

好ましい実施形態では、Ｒ_１は−ＣＨ（（ＣＨ_２）_ｎＣＨ_３）_２であり、式中、ｎは、
４、５、６、または７個の炭素であり；Ｒ_２は、直鎖アルケニルであり；Ｌ_１は、１、２
、３、または５個の炭素の直鎖アルキレンであり；Ｌ_２は、１、３、または５個の炭素の
直鎖アルキレンであり；Ｘ_１はＳであり；Ｒ_３は、２または３個の炭素の直鎖アルキレン
であり；Ｒ_４およびＲ_５は、同一または異なる、それぞれ、１または２個の炭素である。

一実施形態では、本明細書に記載されるカチオン性脂質は、医薬組成物中に存在する。
医薬組成物は、好ましくは、核酸、好ましくはＲＮＡポリヌクレオチドを含む脂質ナノ粒
子を含む。脂質ナノ粒子は、好ましくは、循環中のＲＮＡの平均寿命を増大させる。別の
実施形態では、医薬組成物の投与の際、その中の脂質ナノ粒子は核酸を体内の細胞に送達
する。好ましくは、核酸は、標的遺伝子の発現を抑制する活性を有する。あるいは、核酸
は、体の細胞内での発現の際、それがコードするタンパク質の産生を増加させる活性を有
する。

また、本明細書に記載されているものは、上記の組成物のいずれかを使用することによ
る、哺乳動物の細胞に核酸を導入するための方法である。細胞は、肝臓、肺、腎臓、脳、
血液、脾臓、または骨の中に存在し得る。組成物は、好ましくは、静脈内、皮下、腹腔内
、または髄腔内に投与される。好ましくは、本明細書に記載される組成物は、がんまたは
炎症性疾患を処置するための方法において使用される。疾患は、免疫障害、がん、腎疾患
、線維症性疾患、遺伝的異常、炎症、および心血管障害からなる群より選択されるもので
あり得る。

図１は、ヘキサノエート（ＳＭ１）、４−アミノブタン酸（ＳＭ２）、および４−ブロモ酪酸（ＳＭ３）からのＡＴＸ−４３（ＲＬ−４３Ａ）の合成経路を示す。中間体（Ｉｎｔ）１〜８および反応は、実施例２に記載されている。

図２は、オクタノエート（ＳＭ１）、４−アミノブタン酸（ＳＭ２）、および４−ブロモ酪酸（ＳＭ３）からのＡＴＸ−５７（ＲＬ−４３Ｃ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜８および反応は、実施例３に記載されている。

図３は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−５８（ＲＬ−４３Ｂ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜７および反応は、実施例４に記載されている。

図４は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−８１（ＲＬ−４８Ｂ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜８および反応は、実施例５に記載されている。

図５は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−８２（ＲＬ−４７Ａ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜７および反応は、実施例６に記載されている。

図６は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−８６（ＲＬ−４８Ａ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜８および反応は、実施例７に記載されている。

図７は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−８７（ＲＬ−４８Ｃ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜８および反応は、実施例８に記載されている。

図８は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−８８（ＲＬ−４８Ｄ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜８および反応は、実施例９に記載されている。

図９は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−８３（ＲＬ−４７Ｂ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜８および反応は、実施例１０に記載されている。

図１０は、図２におけるものと同一であるＳＭ１、ＳＭ２、およびＳＭ３からのＡＴＸ−８４（ＲＬ−４７Ｃ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜８および反応は、実施例１１に記載されている。

図１１は、図１におけるものと同一であるＳＭ１、およびＳＭ２からのＡＴＸ−６１（ＲＬ−４２Ｄ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜５および反応は、実施例１２に記載されている。

図１２は、図１におけるものと同一であるＳＭ１、およびＳＭ２からのＡＴＸ−６３（ＲＬ−４２Ａ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜５および反応は、実施例１３に記載されている。

図１３は、図１におけるものと同一であるＳＭ１、およびＳＭ２からのＡＴＸ−６４（ＲＬ−４２Ｃ）の合成経路を示す。Ｉｎｔ１〜５および反応は、実施例１４に記載されている。

図１４は、ＡＴＸ−２、ＡＴＸ−５７、ＡＴＸ−８１、ＡＴＸ−８２、ＡＴＸ−８３、ＡＴＸ−８４、ＡＴＸ−８５、ＡＴＸ−８６、またはＡＴＸ−８７カチオン性脂質を含むナノ粒子中の０．０３ｍｇ／ｋｇおよび０．１ｍｇ／ｋｇのｍＲＮＡの、マウスへの注射後の、ＥＰＯのｍＲＮＡレベル（ｎｇ／ｍｌ）を示す。

図１５は、ＡＴＸ−５７およびＡＴＸ−５８を有するリポソームの抗第ＶＩＩ因子ノックダウン活性対ＡＴＸ−２および対照（ＰＢＳ単独）の活性を示す。

図１６は、ＡＴＸ−５７を有するリポソームの抗ＥＰＯノックダウン活性ＡＴＸ−２の活性を示す。

定義
「少なくとも１つ」は、１つまたは複数（例えば、１〜３、１〜２、または１）を意味
する。

「組成物」は、特定の成分を特定の量で含む生成物、および特定の成分を特定の量で組
み合わせることから直接的または間接的にもたらされる任意の生成物を意味する。

「〜と組み合わせて」は、本発明の処置方法において式Ｉの化合物を他の医薬と一緒に
投与することを意味し、式Ｉの化合物と他の医薬を別々の剤形で逐次的にもしくは同時に
投与すること、または同一の剤形で同時に投与することを意味する。

「哺乳動物」は、ヒトもしくは他の哺乳動物を意味するか、または人間を意味する。

「患者」は、ヒトと他の哺乳動物の両方、好ましくはヒトを意味する。

「アルキル」は、飽和または不飽和の、直鎖または分岐状の、炭化水素鎖を意味する。
様々な実施形態では、アルキル基は１〜１８個の炭素を有し、すなわち、Ｃ_１〜Ｃ_１８基
であるか、または、Ｃ_１〜Ｃ_１２基、Ｃ_１〜Ｃ_６基、もしくはＣ_１〜Ｃ_４基である。独立
して、様々な実施形態では、アルキル基は、０個の分岐（すなわち直鎖）、１個の分岐、
２個の分岐、または２個より多い分岐を有する。「アルケニル」は、１つの二重結合、２
つの二重結合、または２つより多い二重結合を有し得る不飽和アルキルである。「アルキ
ニル」は、１つの三重結合、２つの三重結合、または２つより多い三重結合を有し得る不
飽和アルキルである。アルキル鎖は、１個の置換基（すなわち、アルキル基が一置換され
ている）、または１〜２個の置換基、または１〜３個の置換基、または１〜４個の置換基
などで必要に応じて置換され得る。置換基は、ヒドロキシ、アミノ、アルキルアミノ、ボ
ロニル、カルボキシ、ニトロ、シアノなどからなる群より選択され得る。アルキル基が１
個または複数のヘテロ原子を組み込んでいる場合、アルキル基は本明細書においてヘテロ
アルキル基と呼ばれる。アルキル基上の置換基が炭化水素である場合には、結果として得
られる基は単に置換アルキルと呼ばれる。様々な態様では、置換基を含むアルキル基は、
２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１
２、１１、１０、９、８、または７個未満の炭素を有する。

「低級アルキル」は、鎖中に１〜６個の炭素を有する基を意味し、その鎖は直鎖でも分
岐状でもよい。適切なアルキル基の非限定的な例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、
イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、およびヘキシルが含まれる。

「アルコキシ」は、アルキル−Ｏ−基を意味し、アルキルは上で定義した通りである。
アルコキシ基の非限定的な例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキ
シ、ｎ−ブトキシ、およびヘプトキシが含まれる。親部分への結合は、エーテル酸素を介
する。

「アルコキシアルキル」は、アルコキシ−アルキル基を意味し、アルコキシおよびアル
キルは、上述の通りである。好ましいアルコキシアルキルは、低級アルキル基を含む。親
部分への結合は、アルキルを介する。

「アルキルアリール」は、アルキル−アリール基を意味し、アルキルおよびアリールは
、上述の通りである。好ましいアルキルアリールは、低級アルキル基を含む。親部分への
結合は、アリールを介する。

「アミノアルキル」は、アルキル基を介して親部分に結合している、ＮＨ２−アルキル
基を意味し、アルキルは上で定義した通りである。

「カルボキシアルキル」は、アルキル基を介して親部分に結合している、ＨＯＯＣ−ア
ルキル基を意味し、アルキルは上で定義した通りである。

「市販の化学物質」および本明細書に記載の実施例で使用される化学物質は、標準的な
商業的供給源から得ることができ、そのような供給源は、例えば、ＡｃｒｏｓＯｒｇａ
ｎｉｃｓ（Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ）、Ｓｉｇｍａ−ＡｄｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａ
ｌ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、Ｗｉｓ．）、ＡｖｏｃａｄｏＲｅｓｅａｒｃｈ（Ｌａｎｃａ
ｓｈｉｒｅ、Ｕ．Ｋ．）、Ｂｉｏｎｅｔ（Ｃｏｒｎｗａｌｌ、Ｕ．Ｋ．）、Ｂｏｒｏｎ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ（ＲｅｓｅａｒｃｈＴｒｉａｎｇｌｅＰａｒｋ、Ｎ．Ｃ．）、Ｃ
ｏｍｂｉ−Ｂｌｏｃｋｓ（ＳａｎＤｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆ．）、ＥａｓｔｍａｎＯｒ
ｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｃａｌｓ、ＥａｓｔｍａｎＫｏｄａｋＣｏｍｐａｎｙ（Ｒｏ
ｃｈｅｓｔｅｒ、Ｎ．Ｙ．）、ＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｏ．（Ｐｉｔｔ
ｓｂｕｒｇｈ、Ｐａ．）、ＦｒｏｎｔｉｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｌｏｇａｎ、Ｕｔ
ａｈ）、ＩＣＮＢｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（ＣｏｓｔａＭｅｓａ、Ｃａｌｉ
ｆ．）、ＬａｎｃａｓｔｅｒＳｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｗｉｎｄｈａｍ、Ｎ．Ｈ．）、Ｍａ
ｙｂｒｉｄｇｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．（Ｃｏｒｎｗａｌｌ、Ｕ．Ｋ．）、Ｐｉｅｒ
ｃｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．（Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌ．）、Ｒｉｅｄｅｌｄｅ
Ｈａｅｎ（Ｈａｎｎｏｖｅｒ、Ｇｅｒｍａｎｙ）、ＳｐｅｃｔｒｕｍＱｕａｌｉｔｙ
Ｐｒｏｄｕｃｔ，Ｉｎｃ．（ＮｅｗＢｒｕｎｓｗｉｃｋ、Ｎ．Ｊ．）、ＴＣＩＡｍ
ｅｒｉｃａ（Ｐｏｒｔｌａｎｄ、Ｏｒｅｇ．）、およびＷａｋｏＣｈｅｍｉｃａｌｓ
ＵＳＡ，Ｉｎｃ．（Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、Ｖａ．）を含む。

「化学文献に記載されている化合物」は、当業者に公知であるように、化学化合物およ
び化学反応に関する参考書およびデータベースによって同定することができる。本明細書
に開示される化合物の調製に有用な反応物の合成を詳述するか、または本明細書に開示さ
れる化合物の調製を記載する論文への参照を提供する適切な参考書および専門書は、例え
ば、「Synthetic Organic Chemistry」、John Wiley and Sons, Inc. New York
；S. R. Sandlerら、「Organic Functional Group Preparations」、第２版、Acade
mic Press、New York、１９８３年；H. O. House、「Modern Synthetic Reactions
」、第２版、W. A. Benjamin, Inc. Menlo Park、Calif.、１９７２年；T. L. Gl
ichrist、「Heterocyclic Chemistry」、第２版、John Wiley and Sons、New York
、１９９２年；J. March、「Advanced Organic Chemistry: reactions, Mechanisms
and Structure」、第５版、Wiley Interscience、New York、２００１年を含む。特
定のおよび類似の反応物はまた、ほとんどの公共および大学の図書館で、ならびにオンラ
インデータベースにより入手できる米国化学会のＣｈｅｍｉｃａｌＡｂｓｔｒａｃｔ
Ｓｅｒｖｉｃｅによって調製された公知の化学物質のインデックスによって同定され得る
（詳細については、米国化学会、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃに問い合わせください）
。カタログでは公知であるが市販されていない化学物質は、カスタム化学合成会社によっ
て調製することができ、多くの標準的な化学物質供給会社（上に列挙したものなど）がカ
スタム合成サービスを提供する。

「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨード基を意味する。フルオロ、クロ
ロ、またはブロモが好ましく、フルオロおよびクロロがより好ましい。

「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。フッ素、塩素、およ
び臭素が好ましい。

「ヘテロアルキル」は、炭素および少なくとも１個のヘテロ原子を含有する、飽和また
は不飽和の、直鎖または分岐状の、鎖を意味する。ヘテロアルキル基は、様々な実施形態
では、１個のヘテロ原子、または１〜２個のヘテロ原子、または１〜３個のヘテロ原子、
または１〜４個のヘテロ原子を有し得る。一態様では、ヘテロアルキル鎖は、１〜１８個
（すなわち、１〜１８）の構成原子（炭素およびヘテロ原子）を含有し、様々な実施形態
では、１〜１２個、または１〜６個、または１〜４個の構成原子を含有する。独立して、
様々な実施形態では、ヘテロアルキル基は、０個の分岐（すなわち直鎖）、１個の分岐、
２個の分岐、または２個より多い分岐を有する。独立して、一実施形態では、ヘテロアル
キル基は飽和している。別の実施形態では、ヘテロアルキル基は不飽和である。様々な実
施形態では、不飽和ヘテロアルキルは、１つの二重結合、２つの二重結合、２つより多い
二重結合、および／または１つの三重結合、２つの三重結合、または２つより多い三重結
合を有し得る。ヘテロアルキル鎖は、置換または非置換であり得る。一実施形態では、ヘ
テロアルキル鎖は非置換である。別の実施形態では、ヘテロアルキル鎖は置換されている
。置換ヘテロアルキル鎖は、１個の置換基（すなわち、一置換による）を有していてもよ
く、または例えば１〜２個の置換基、もしくは１〜３個の置換基、もしくは１〜４個の置
換基を有し得る。例示的なヘテロアルキル置換基には、エステル（−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ）
およびカルボニル（−Ｃ（Ｏ）−）が含まれる。

「ヒドロキシアルキル」は、ＨＯ−アルキル基を意味し、アルキルは先に定義されてい
る。好ましいヒドロキシアルキルは、低級アルキルを含有する。適切なヒドロキシアルキ
ル基の非限定的な例には、ヒドロキシメチルおよび２−ヒドロキシエチルが含まれる。

「水和物」は、溶媒分子がＨ_２Ｏである溶媒和物を意味する。

「脂質」は、脂肪酸のエステルを含む有機化合物を意味し、水に不溶であるが多くの有
機溶媒には可溶であることにより特徴付けられる。脂質は通常、少なくとも３つのクラス
：（１）脂肪および油ならびにワックスを含む「単純脂質」、（２）リン脂質および糖脂
質を含む「複合脂質」、ならびに（３）ステロイドなどの「誘導脂質」、に分けられる。

「脂質粒子」は、目的の標的部位（例えば、細胞、組織、臓器など）に治療用核酸（例
えば、ｍＲＮＡ）を送達するために使用することができる脂質製剤を意味する。好ましい
実施形態では、脂質粒子は核酸−脂質粒子であり、典型的にはカチオン性脂質、非カチオ
ン性脂質（例えば、リン脂質）、粒子の凝集を防止するコンジュゲート脂質（例えば、Ｐ
ＥＧ−脂質）、および必要に応じてコレステロールから形成される。典型的には、治療用
核酸（例えば、ｍＲＮＡ）は、粒子の脂質部分にカプセル化され、それによって酵素的分
解から保護し得る。

脂質粒子は、典型的には、３０ｎｍ〜１５０ｎｍ、４０ｎｍ〜１５０ｎｍ、５０ｎｍ〜
１５０ｎｍ、６０ｎｍ〜１３０ｎｍ、７０ｎｍ〜１１０ｎｍ、７０ｎｍ〜１００ｎｍ、８
０ｎｍ〜１００ｎｍ、９０ｎｍ〜１００ｎｍ、７０〜９０ｎｍ、８０ｎｍ〜９０ｎｍ、７
０ｎｍ〜８０ｎｍ、または３０ｎｍ、３５ｎｍ、４０ｎｍ、４５ｎｍ、５０ｎｍ、５５ｎ
ｍ、６０ｎｍ、６５ｎｍ、７０ｎｍ、７５ｎｍ、８０ｎｍ、８５ｎｍ、９０ｎｍ、９５ｎ
ｍ、１００ｎｍ、１０５ｎｍ、１１０ｎｍ、１１５ｎｍ、１２０ｎｍ、１２５ｎｍ、１３
０ｎｍ、１３５ｎｍ、１４０ｎｍ、１４５ｎｍ、もしくは１５０ｎｍの平均直径を有し、
実質的に非毒性である。さらに、核酸は、本発明の脂質粒子中に存在する場合、ヌクレア
ーゼによる分解に対して水溶液中で耐性がある。

「溶媒和物」は、本開示の化合物と１つまたは複数の溶媒分子との物理的会合を意味す
る。この物理的会合は、水素結合を含む様々な程度のイオン結合および共有結合的結合を
含む。ある特定の場合には、溶媒和物は、例えば１つまたは複数の溶媒分子が結晶性固体
の結晶格子に組み込まれている場合、単離することが可能である。「溶媒和物」は、溶液
相溶媒和物と単離可能溶媒和物の両方を包含する。適切な溶媒和物の非限定的な例には、
エタノレート、メタノレートなどが含まれる。

「カプセル化された脂質」は、完全なカプセル化、部分的なカプセル化、またはその両
方を伴うｍＲＮＡなどの治療用核酸を提供する脂質粒子を意味する。好ましい実施形態で
は、核酸（例えば、ｍＲＮＡ）は、脂質粒子に完全にカプセル化されている。

「脂質コンジュゲート」は、脂質粒子の凝集を阻害するコンジュゲート脂質を意味する
。そのような脂質コンジュゲートには、例えば、ジアルキルオキシプロピルにカップリン
グしたＰＥＧ（例えば、ＰＥＧ−ＤＡＡコンジュゲート）、ジアシルグリセロールにカッ
プリングしたＰＥＧ（例えば、ＰＥＧ−ＤＡＧコンジュゲート）、コレステロールにカッ
プリングしたＰＥＧ、ホスファチジルエタノールアミンにカップリングしたＰＥＧ、およ
びセラミドにコンジュゲートしたＰＥＧ、カチオン性ＰＥＧ脂質、ポリオキサゾリン（Ｐ
ＯＺ）−脂質コンジュゲート、ポリアミドオリゴマー、ならびにそれらの混合物などのＰ
ＥＧ−脂質コンジュゲートが含まれるが、これらに限定されない。ＰＥＧまたはＰＯＺは
、脂質に直接コンジュゲートすることができるか、またはリンカー部分を介して脂質に連
結し得る。例えば、エステル非含有リンカー部分およびエステル含有リンカー部分を含む
、ＰＥＧまたはＰＯＺを脂質にカップリングするのに適した任意のリンカー部分を使用す
ることができる。ある特定の好ましい実施形態では、アミドまたはカルバメートなどのエ
ステル非含有リンカー部分が使用される。

「両親媒性脂質」は、脂質物質の疎水性部分が疎水性相に配向し、親水性部分が水相に
配向する物質を意味する。親水性の特徴は、炭水化物、ホスフェート、カルボン酸、スル
ファト、アミノ、スルフヒドリル、ニトロ、ヒドロキシル、および他の類似の基などの極
性基または荷電基の存在に由来する。疎水性は、長鎖飽和および不飽和脂肪族炭化水素基
、ならびに１つまたは複数の芳香族、脂環式、または複素環式基（複数可）により置換さ
れたそのような基を含むが、これらに限定されない無極性基を含むことによって与えられ
得る。両親媒性化合物の例には、リン脂質、アミノ脂質、およびスフィンゴ脂質が含まれ
るが、これらに限定されない。

リン脂質の代表例には、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホ
スファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸、パルミトイルオ
レオイルホスファチジルコリン、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノ
ールアミン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン
、ジステアロイルホスファチジルコリン、およびジリノレオイルホスファチジルコリンが
含まれるが、これらに限定されない。スフィンゴ脂質、スフィンゴ糖脂質ファミリー、ジ
アシルグリセロール、およびβ−アシルオキシ酸などのリンを欠く他の化合物もまた、両
親媒性脂質として指定される群内にある。さらに、上述の両親媒性脂質は、トリグリセリ
ドおよびステロールを含む他の脂質と混合することができる。

「中性脂質」は、選択されたｐＨにおいて、非荷電または中性双性イオン形態のいずれ
かで存在する脂質種を意味する。生理学的ｐＨにおいて、そのような脂質には、例えば、
ジアシルホスファチジルコリン、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、セラミド、
スフィンゴミエリン、セファリン、コレステロール、セレブロシド、およびジアシルグリ
セロールが含まれる。

「非カチオン性脂質」は、両親媒性脂質または中性脂質もしくはアニオン性脂質を意味
し、以下により詳細に記載される。

「アニオン性脂質」は、生理学的ｐＨにおいて、負に荷電している脂質を意味する。こ
れらの脂質には、ホスファチジルグリセロール、カルジオリピン、ジアシルホスファチジ
ルセリン、ジアシルホスファチジン酸、Ｎ−ドデカノイルホスファチジルエタノールアミ
ン、Ｎ−スクシニルホスファチジルエタノールアミン、Ｎ−グルタリルホスファチジルエ
タノールアミン、リシルホスファチジルグリセロール、パルミトイルオレオイルホスファ
チジルグリセロール（ＰＯＰＧ）、および中性脂質に繋がれている他のアニオン性修飾基
が含まれるが、これらに限定されない。

「疎水性脂質」は、長鎖飽和および不飽和脂肪族炭化水素基、ならびに１つまたは複数
の芳香族、脂環式、または複素環式基（複数可）により必要に応じて置換されたそのよう
な基を含むが、これらに限定されない無極性基を有する化合物を意味する。適切な例には
、ジアシルグリセロール、ジアルキルグリセロール、Ｎ−Ｎ−ジアルキルアミノ、１，２
−ジアシルオキシ−３−アミノプロパン、および１，２−ジアルキル−３−アミノプロパ
ンが含まれるが、これらに限定されない。

「カチオン性脂質」および「アミノ脂質」は交換可能に使用され、１、２、３、または
それよりも多い脂肪酸または脂肪アルキル鎖、およびｐＨ滴定可能なアミノ頭部基（例え
ば、アルキルアミノまたはジアルキルアミノ頭部基）を有する脂質およびその塩を意味す
る。カチオン性脂質は、典型的には、カチオン性脂質のｐＫ_ａ未満のｐＨにおいてプロト
ン化（すなわち、正に荷電）され、ｐＫ_ａを超えるｐＨにおいて実質的に中性である。本
発明のカチオン性脂質はまた、滴定可能なカチオン性脂質とも称される。一部の実施形態
では、カチオン性脂質は：プロトン化可能な第３級アミン（例えば、ｐＨ滴定可能）頭部
基；各アルキル鎖が独立して０〜３つ（例えば、０、１、２、または３つ）の二重結合を
有するＣ_１８アルキル鎖；および、頭部基とアルキル鎖との間のエーテル、エステル、ま
たはケタール連結を含む。そのようなカチオン性脂質には、ＤＳＤＭＡ、ＤＯＤＭＡ、Ｄ
ＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｅｎＤＭＡ、γ−ＤＬｅｎＤＭＡ、ＤＬｉｎ−Ｋ−ＤＭＡ、ＤＬｉｎ
−Ｋ−Ｃ２−ＤＭＡ（ＤＬｉｎ−Ｃ２Ｋ−ＤＭＡ、ＸＴＣ２、およびＣ２Ｋとしても公知
）、ＤＬｉｎ−Ｋ−Ｃ３−ＤＭＡ、ＤＬｉｎ−Ｋ−Ｃ４−ＤＭＡ、ＤＬｅｎ−Ｃ２Ｋ−Ｄ
ＭＡ、ｙ−ＤＬｅｎ−Ｃ２Ｋ−ＤＭＡ、ＤＬｉｎ−Ｍ−Ｃ２−ＤＭＡ（ＭＣ２としても知
られる）、ＤＬｉｎ−Ｍ−Ｃ３−ＤＭＡ（ＭＣ３としても公知）、および（ＤＬｉｎ−Ｍ
Ｐ−ＤＭＡ）（１−Ｂｌ１としても公知）が含まれるが、これらに限定されない。

「置換された」は、水素以外の特定の基、または同一でも異なっていてもよい、例えば
それぞれ独立して選択される、１個または複数の基、部分、またはラジカルでの置換を意
味する。

「アンチセンス核酸」は、ＲＮＡ−ＲＮＡまたはＲＮＡ−ＤＮＡまたはＲＮＡ−ＰＮＡ
（タンパク質核酸；Egholmら、１９９３年、Nature、３６５巻、５６６頁）相互作用によ
って標的ＲＮＡに結合し、標的ＲＮＡの活性を改変する（総説として、SteinおよびCheng
、１９９３年、Science、２６１巻、１００４頁、ならびにWoolfら、米国特許第５，８４
９，９０２号を参照されたい）非酵素的核酸分子を意味する。典型的には、アンチセンス
分子は、アンチセンス分子の単一の連続配列に沿って標的配列と相補的である。しかしな
がら、ある特定の実施形態では、アンチセンス分子は、基質分子がループを形成するよう
に基質に結合することができ、および／またはアンチセンス分子は、アンチセンス分子が
ループを形成するように結合することができる。したがって、アンチセンス分子は、２つ
（またはさらにそれよりも多く）の非連続基質配列に相補的であり得るか、またはアンチ
センス分子の２つ（またはさらにそれよりも多く）の非連続配列部分は、標的配列に相補
的であり得るか、またはその両方であり得る。さらに、アンチセンスＤＮＡは、ＤＮＡ−
ＲＮＡ相互作用によってＲＮＡを標的化するために使用され得、それによって、二重鎖で
ある標的ＲＮＡを消化するＲＮａｓｅＨを活性化する。アンチセンスオリゴヌクレオチ
ドは、標的ＲＮＡのＲＮＡｓｅＨ切断を活性化することが可能である１つまたは複数の
ＲＮＡｓｅＨ活性化領域を含み得る。アンチセンスＤＮＡは化学的に合成する、または
一本鎖ＤＮＡ発現ベクターもしくはその等価物の使用によって発現させることができる。
「アンチセンスＲＮＡ」は、標的遺伝子のｍＲＮＡに結合することによってＲＮＡｉを誘
導することができる、標的遺伝子のｍＲＮＡに相補的な配列を有するＲＮＡ鎖である。「
アンチセンスＲＮＡ」は、標的遺伝子のｍＲＮＡに相補的な配列を有し、標的遺伝子のｍ
ＲＮＡに結合することによってＲＮＡｉを誘導すると考えられているＲＮＡ鎖である。「
センスＲＮＡ」は、アンチセンスＲＮＡに相補的な配列を有し、その相補的なアンチセン
スＲＮＡにアニールされてｉＮＡを形成する。これらのアンチセンスおよびセンスＲＮＡ
は、従来、ＲＮＡ合成機で合成されてきた。

「核酸」は、一本鎖または二本鎖の形態のデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレ
オチドおよびそれらのポリマーを意味する。用語は、合成、天然に存在する、および天然
に存在しない、公知のヌクレオチド類似体または修飾骨格残基または連結を含有する核酸
を包含し、これらは参照核酸と同様の結合特性を有し、参照ヌクレオチドと同様の様式で
代謝される。そのような類似体の例には、非制限的に、ホスホロチオエート、ホスホルア
ミデート、メチルホスホネート、キラル−メチルホスホネート、２’−Ｏ−メチルリボヌ
クレオチド、ペプチド−核酸（ＰＮＡ）が含まれる。

「ＲＮＡ」は、少なくとも１つのリボヌクレオチド残基を含む分子を意味する。「リボ
ヌクレオチド」は、β−Ｄ−リボ−フラノース部分の２’位にヒドロキシル基を有するヌ
クレオチドを意味する。用語は、二本鎖ＲＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、部分精製ＲＮＡなどの単
離されたＲＮＡ、本質的に純粋なＲＮＡ、合成ＲＮＡ、組換え産生されたＲＮＡ、ならび
に１つまたは複数のヌクレオチドの付加、欠失、置換、および／または改変によって天然
に存在するＲＮＡと異なる改変ＲＮＡを含む。そのような改変は、例えば、干渉性ＲＮＡ
の末端（複数可）への、または内部的に、例えばＲＮＡの１つまたは複数のヌクレオチド
での、非ヌクレオチド物質の付加を含み得る。本発明のＲＮＡ分子中のヌクレオチドはま
た、天然に存在しないヌクレオチドまたは化学的に合成されたヌクレオチドもしくはデオ
キシヌクレオチドなどの非標準ヌクレオチドを含み得る。これらの改変ＲＮＡは、類似体
または天然に存在するＲＮＡの類似体と呼ぶことができる。本明細書中で使用される場合
、「リボ核酸」および「ＲＮＡ」という用語は、ｓｉＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、一本
鎖ＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、および多価ＲＮＡを含む、少な
くとも１つのリボヌクレオチド残基を含有する分子を指す。リボヌクレオチドは、β−Ｄ
−リボ−フラノース部分の２’位にヒドロキシル基を有するヌクレオチドである。これら
の用語は、二本鎖ＲＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、部分精製ＲＮＡなどの単離されたＲＮＡ、本質
的に純粋なＲＮＡ、合成ＲＮＡ、組換え産生されたＲＮＡ、ならびに１つまたは複数のヌ
クレオチドの付加、欠失、置換、修飾、改変によって天然に存在するＲＮＡと異なる修飾
ＲＮＡおよび改変ＲＮＡを含む。ＲＮＡの改変は、例えば、干渉性ＲＮＡの末端（複数可
）への、または内部的な、例えばＲＮＡ分子中のＲＮＡヌクレオチドの１つまたは複数の
ヌクレオチドでの、非ヌクレオチド物質の付加を含み、天然に存在しないヌクレオチドま
たは化学的に合成されたヌクレオチドもしくはデオキシヌクレオチドなどの非標準ヌクレ
オチドを含み得る。これらの改変ＲＮＡは、類似体と呼ぶことができる。

「ヌクレオチド」は、当該技術分野において周知の天然塩基（標準）および修飾塩基を
意味する。そのような塩基は一般に、ヌクレオチド糖部分の１’位に位置する。ヌクレオ
チドは一般に、塩基、糖、およびリン酸基を含む。ヌクレオチドは、糖、ホスフェート、
および／または塩基部分（ヌクレオチド類似体、修飾ヌクレオチド、非天然ヌクレオチド
、非標準ヌクレオチドなどとも交換可能に呼ばれる、例えば、全てが本明細書での参照に
より本明細書に組み込まれる、UsmanおよびMcSwiggen、前出；Ecksteinら、国際ＰＣＴ公
開第ＷＯ９２／０７０６５号；Usmanら、国際ＰＣＴ公開第ＷＯ９３／１５１８７号；Uhl
manおよびPeyman、前出を参照されたい）において修飾されないかまたは修飾することが
できる。Limbachら、Nucleic Acids Res.、２２巻、２１８３頁、１９９４年によって
要約されているように、当該技術分野において公知の修飾核酸塩基のいくつかの例がある
。核酸分子に導入することができる塩基修飾の非限定的な例の一部には：イノシン、プリ
ン、ピリジン−４−オン、ピリジン−２−オン、フェニル、シュードウラシル、２，４，
６−トリメトキシベンゼン、３−メチルウラシル、ジヒドロウリジン、ナフチル、アミノ
フェニル、５−アルキルシチジン（例えば、５−メチルシチジン）、５−アルキルウリジ
ン（例えば、リボチミジン）、５−ハロウリジン（例えば、５−ブロモウリジン）、また
は６−アザピリミジン、または６−アルキルピリミジン（例えば６−メチルウリジン）、
プロピン、および他のもの（Burginら、Biochemistry、３５巻：１４０９０頁、１９９６
年；UhlmanおよびPeyman、前出）が含まれる。この態様における「修飾塩基」は、１’位
にあるアデニン、グアニン、シトシン、およびウラシル以外のヌクレオチド塩基またはそ
れらの等価物を意味する。

「相補的ヌクレオチド塩基」は、互いに水素結合を形成する一対のヌクレオチド塩基を
意味する。アデニン（Ａ）はチミン（Ｔ）またはＲＮＡ中のウラシル（Ｕ）と対形成し、
グアニン（Ｇ）はシトシン（Ｃ）と対形成する。核酸の相補的セグメントまたは鎖は、互
いにハイブリダイズする（すなわち、水素結合により繋がれる）。「相補的」は、伝統的
なワトソン−クリックまたは他の非伝統的な結合モードのいずれかによって、核酸が別の
核酸配列と水素結合（複数可）を形成できることを意味する。

「マイクロＲＮＡ」（ｍｉＲＮＡ）は、遺伝子発現を調節する２１〜２３ヌクレオチド
長の一本鎖ＲＮＡ分子を意味する。ｍｉＲＮＡは、ＤＮＡから転写されるがタンパク質に
翻訳されない遺伝子によってコードされ（非コードＲＮＡ）；その代わりに、それらは、
プリｍｉＲＮＡとして公知の一次転写物からプレｍｉＲＮＡと呼ばれる短いステムループ
構造へ、そして最後に機能的ｍｉＲＮＡへとプロセシングされる。成熟ｍｉＲＮＡ分子は
、１つまたは複数のメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）分子と部分的に相補的であり、そ
の主な機能は遺伝子発現を下方制御することである。

「低分子干渉（ｓｍａｌｌｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ）ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）」および
「低分子干渉（ｓｈｏｒｔｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ）ＲＮＡ」および「サイレンシング
ＲＮＡ」は、１６〜４０ヌクレオチド長の二本鎖ＲＮＡ分子のクラスを意味し、生物学に
おいて様々な役割を果たす。最も注目すべきことに、ｓｉＲＮＡは、それが特定の遺伝子
の発現と干渉するＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）経路に関与している。ＲＮＡｉ経路におけるそ
れらの役割に加えて、ｓｉＲＮＡはまた、例えば抗ウイルス機構としてのＲＮＡｉ関連経
路において、またはゲノムのクロマチン構造を形作る上でも作用するが、これらの経路の
複雑さは今になってやっと解明されつつある。

「ＲＮＡｉ」は、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）によって制御され、触
媒ＲＩＳＣ構成成分アルゴノートと相互作用する細胞内の短い二本鎖ＲＮＡ分子によって
開始されるＲＮＡ依存性遺伝子サイレンシングプロセスを意味する。二本鎖ＲＮＡまたは
ＲＮＡ様ｉＮＡまたはｓｉＲＮＡが外因性（ＲＮＡゲノムを有するウイルスによる感染、
またはトランスフェクトされたｉＮＡもしくはｓｉＲＮＡに由来する）である場合、ＲＮ
ＡまたはｉＮＡは細胞質に直接移入され、酵素ｄｉｃｅｒによって短い断片に切断される
。開始ｄｓＲＮＡはまた、ゲノム中のＲＮＡコード遺伝子から発現するプレマイクロＲＮ
Ａの場合のように、内因性（細胞に由来する）であり得る。そのような遺伝子からの一次
転写物は、最初に核内でプレｍｉＲＮＡの特徴的なステムループ構造を形成するようにプ
ロセシングされ、次いで細胞質に輸送されてｄｉｃｅｒによって切断される。したがって
、外因性および内因性の２つのｄｓＲＮＡ経路は、ＲＩＳＣ複合体に集中する。ＲＮＡ誘
導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）の活性構成成分は、アルゴノートタンパク質と呼ば
れるエンドヌクレアーゼであり、これはそれらの結合したｓｉＲＮＡまたはｉＮＡに相補
的な標的ｍＲＮＡ鎖を切断する。ｄｉｃｅｒによって産生される断片は二本鎖であるので
、それらは理論的にはそれぞれ機能的なｓｉＲＮＡまたはｉＮＡを産生することができる
。しかしながら、ガイド鎖として知られている２本の鎖のうち１本だけがアルゴノートタ
ンパク質に結合し、遺伝子サイレンシングを導く。他のアンチガイド鎖またはパッセンジ
ャー鎖は、ＲＩＳＣ活性化中に分解される。

式Ｉの化合物

本明細書中の式Ｉの化合物への言及は、他に示さない限り、その塩への言及を含むと理
解される。本明細書で用いられる場合、「塩（複数可）」という用語は、無機および／ま
たは有機酸と形成された酸性塩、ならびに無機および／または有機塩基と形成された塩基
性塩を意味する。さらに、式Ｉの化合物が、ピリジンまたはイミダゾールなどであるがこ
れらに限定されない塩基性部分と、カルボン酸などであるがこれらに限定されない酸性部
分との両方を含有する場合、双性イオン（「分子内塩」）が形成され得、本明細書で使用
される場合、「塩（複数可）」という用語内に含まれる。塩は薬学的に許容される（すな
わち、非毒性の、生理学的に許容される）塩であり得るが、他の塩もまた有用である。式
Ｉの化合物の塩は、例えば、式Ｉの化合物を、塩が沈殿するような媒体中で、または水性
媒体中で、当量などの量の酸または塩基と反応させた後、凍結乾燥することによって形成
することができる。

例示的な酸付加塩（acid addition salt）には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸
塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸
塩、ホウ酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、シクロ
ペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマ
ル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン
酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳
酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩
、硝酸塩、シュウ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸
塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、
スルホン酸塩（本明細書に記載されたものなど）、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエン
スルホン酸塩（トシレートとしても公知）、ウンデカン酸塩などが含まれる。さらに、塩
基性医薬化合物から薬学的に有用な塩を形成するのに適していると一般に考えられている
酸が、例えば、S. Bergeら、J. Pharmaceutical Sciences（１９７７年）６６巻（１
号）１〜１９頁；P. Gould、International J. Pharmaceutics（１９８６年）３３巻
、２０１〜２１７頁；Andersonら、The Practice of Medicinal Chemistry（１９９
６年）、Academic Press、New Yorkにより；およびThe Orange Book（Food & Drug
Administration、Washington、D.C.、ウェブサイト上にて）で論じられている。これら
の開示は参照により本明細書に組み込まれる。

例示的な塩基性塩には、アンモニウム塩；ナトリウム塩、リチウム塩、およびカリウム
塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩およびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩
；ベンザチン、ジシクロヘキシルアミン、ヒドラバミン（Ｎ，Ｎ−ビス（デヒドロアビエ
チル）エチレンジアミンと形成される）、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、Ｎ−メチル−Ｄ
−グルカミド、ｔ−ブチルアミンなどの有機塩基との塩（例えば有機アミン）；ならびに
アルギニンまたはリシンなどのアミノ酸との塩が含まれる。塩基性窒素含有基は、ハロゲ
ン化低級アルキル（例えば、塩化、臭化、およびヨウ化メチル、エチル、プロピル、およ
びブチル）、硫酸ジアルキル（例えば、硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、ジアミル）
、長鎖ハロゲン化物（例えば、塩化、臭化、およびヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチル
、およびステアリル）、ハロゲン化アリールアルキル（例えば、臭化ベンジルおよびフェ
ネチル）、およびその他などの作用物質で四級化することができる。

全てのそのような酸および塩基の塩は、本開示の範囲内の薬学的に許容される塩である
ことが意図され、本開示の目的では、全ての酸および塩基の塩は対応する式Ｉの化合物の
遊離形態と同等であるとみなされる。

式Ｉの化合物は、水和形態を含む非溶媒和形態および溶媒和形態で存在し得る。一般に
、水、エタノールなどの薬学的に許容される溶媒との溶媒和形態は、本開示の目的では、
非溶媒和形態と同等である。

式Ｉの化合物およびその塩、溶媒和物は、それらの互変異性型で（例えば、アミドまた
はイミノエーテルとして）存在し得る。全てのそのような互変異性型は、本開示の一部と
して本明細書中で企図される。

本開示の化合物の多形体もまた本開示の範囲内である（すなわち、式Ｉの化合物の多形
体は本開示の範囲内である）。

エナンチオマー型（不斉炭素の非存在下でも存在し得る）、回転異性体型、アトロプ異
性体、およびジアステレオマー型を含む、様々な置換基上の不斉炭素のために存在し得る
ものなどの、本化合物の全ての立体異性体（例えば、幾何異性体、光学異性体など）（化
合物の塩、溶媒和物、およびプロドラッグのもの、ならびにプロドラッグの塩および溶媒
和物を含む）は、本開示の範囲内であると企図される。本開示の化合物の個々の立体異性
体は、例えば、他の異性体を実質的に含まないか、あるいは例えばラセミ体として、また
は他の全てのもしくは他の選択された立体異性体と混ぜられ得る。本明細書中の化合物の
キラル中心は、ＩＵＰＡＣ１９７４Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓによって定義さ
れるようにＳまたはＲ配置を有することができる。「塩」、「溶媒和物」などの用語の使
用は、開示された化合物のエナンチオマー、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ラセ
ミ体、またはプロドラッグの塩および溶媒和物に等しく適用されることを意図している。

化学療法剤（抗新生物剤）として使用できる化合物のクラスには、アルキル化剤、代謝
拮抗剤、天然物およびそれらの誘導体、ホルモンおよびステロイド（合成類似体を含む）
、ならびに合成物が含まれる。これらのクラス内の化合物の例を以下に挙げる。

脂質粒子
式Ｉの化合物は、ナノ粒子または脂質分子の二重層を含む脂質組成物中に、その薬学的
に許容される塩を含む。脂質二重層は、好ましくは、中性脂質またはポリマーをさらに含
む。脂質組成物は、好ましくは、液体媒体を含む。組成物は、好ましくは核酸をさらにカ
プセル化する。核酸は、好ましくは、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を利用して標的遺伝子の発
現を抑制する活性を有する。脂質組成物は、好ましくは、核酸および中性脂質またはポリ
マーをさらに含む。脂質組成物は、好ましくは核酸をカプセル化する。

記載は、脂質粒子内にカプセル化された１つまたは複数の治療用ｍＲＮＡ分子を含む脂
質粒子を提供する。

一部の実施形態では、ｍＲＮＡは、脂質粒子中のｍＲＮＡがヌクレアーゼ分解に対して
水溶液中で耐性があるように、脂質粒子の脂質部分内に完全にカプセル化されている。他
の実施形態では、本明細書に記載される脂質粒子は、ヒトなどの哺乳動物に対して実質的
に非毒性である。脂質粒子は、典型的には、３０ｎｍ〜１５０ｎｍ、４０ｎｍ〜１５０ｎ
ｍ、５０ｎｍ〜１５０ｎｍ、６０ｎｍ〜１３０ｎｍ、７０ｎｍ〜１１０ｎｍ、または７０
〜９０ｎｍの平均直径を有する。本発明の脂質粒子はまた、典型的には、１：１〜１００
：１、１：１〜５０：１、２：１〜２５：１、３：１〜２０：１、５：１〜１５：１、ま
たは５：１〜１０：１、または１０：１〜１４：１、または９：１〜２０：１の脂質：Ｒ
ＮＡ比（質量／質量比）を有する。一実施形態では、脂質粒子は、１２：１の脂質：ＲＮ
Ａ比（質量／質量比）を有する。別の実施形態では、脂質粒子は、１３：１の脂質：ｍＲ
ＮＡ比（質量／質量比）を有する。

好ましい実施形態では、脂質粒子は、ｍＲＮＡ、カチオン性脂質（例えば、本明細書に
記載される１つまたは複数のカチオン性脂質またはその塩）、リン脂質、および粒子の凝
集を阻害するコンジュゲート脂質（例えば、１つまたは複数のＰＥＧ−脂質コンジュゲー
ト）を含む。脂質粒子はコレステロールも含み得る。脂質粒子は、少なくとも１、２、３
、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれよりも多い、１つまたは複数のポリペプチ
ドを発現するｍＲＮＡを含み得る。

核酸−脂質粒子において、ｍＲＮＡは粒子の脂質部分内に完全にカプセル化され得、そ
れによって核酸をヌクレアーゼ分解から保護する。好ましい実施形態では、ｍＲＮＡを含
む脂質粒子は、粒子の脂質部分内に完全にカプセル化され、それによって核酸をヌクレア
ーゼ分解から保護する。ある特定の例では、脂質粒子中のｍＲＮＡは、粒子をヌクレアー
ゼに３７℃で少なくとも２０、３０、４５、または６０分間曝露した後、実質的に分解さ
れない。ある特定の他の例では、脂質粒子中のｍＲＮＡは、３７℃で少なくとも３０、４
５、もしくは６０分間、または少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２
、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、もしくは３６
時間、血清中で粒子をインキュベートした後、実質的に分解されない。他の実施形態では
、ｍＲＮＡは粒子の脂質部分と複合体を形成している。本発明の製剤の利点の１つは、核
酸−脂質粒子組成物が、ヒトなどの哺乳動物に対して実質的に非毒性であるということで
ある。

「完全にカプセル化された」は、核酸−脂質粒子中の核酸（例えば、ｍＲＮＡ）が、血
清への曝露または遊離ＲＮＡを顕著に分解するであろうヌクレアーゼアッセイ後に、顕著
に分解されないことを意味する。完全にカプセル化される場合、通常は１００％の遊離核
酸を分解するであろう処理において、好ましくは２５％未満の粒子中の核酸、より好まし
くは１０％未満、最も好ましくは５％未満の粒子中の核酸が分解される。「完全にカプセ
ル化された」はまた、ｉｎｖｉｖｏ投与時に核酸−脂質粒子がそれらの構成成分部分に
急速に分解しないことを意味する。

核酸の文脈では、完全なカプセル化は、核酸と会合したときに蛍光を増強する色素を使
用する膜不透過性蛍光色素排除アッセイを実施することによって決定することができる。
カプセル化は、色素をリポソーム製剤に添加し、得られた蛍光を測定し、そしてそれを少
量の非イオン性洗浄剤の添加時に観察された蛍光と比較することにより決定される。リポ
ソーム二重層の洗浄剤媒介性破壊は、カプセル化された核酸を放出し、それが膜不透過性
色素と相互作用することを可能にする。核酸カプセル化は、Ｅ＝（Ｉ_０−Ｉ）／Ｉ_０とし
て計算することができ、Ｉ_０は、洗浄剤の添加前後の蛍光強度を指す。

他の実施形態では、本発明は、複数の核酸−脂質粒子を含む核酸−脂質粒子組成物を提
供する。

脂質粒子は、粒子の脂質部分内に完全にカプセル化されたｍＲＮＡを含み、その結果、
３０％〜１００％、４０％〜１００％、５０％〜１００％、６０％〜１００％、７０％〜
１００％、８０％〜１００％、９０％〜１００％、３０％〜９５％、４０％〜９５％、５
０％〜９５％、６０％〜９５％、７０％〜９５％、８０％〜９５％、８５％〜９５％、９
０％〜９５％、３０％〜９０％、４０％〜９０％、５０％〜９０％、６０％〜９０％、７
０％〜９０％、８０％〜９０％、または少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％、５
０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９
２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％（またはその
任意の割合もしくはその範囲）の粒子が、その中にカプセル化されたｍＲＮＡを有する。

脂質粒子の意図される使用に応じて、構成成分の割合を変えることができ、特定の製剤
の送達効率は、当該技術分野において公知のアッセイを使用して測定することができる。

カチオン性脂質
記載は、ある特定のカチオン性脂質化合物の合成を含む。化合物は、後続のセクション
に示されるように、ポリヌクレオチドを細胞および組織に送達するのに特に適している。
本明細書に記載されるリポ大環状化合物は、他の目的、ならびに例えばレシピエントおよ
び添加剤のために使用され得る。

カチオン性脂質化合物の合成方法は、当該技術分野の技術によって合成することができ
る。当業者であれば、これらの化合物を産生するための、および記載の他の化合物も産生
するための他の方法を認識するであろう。

カチオン性脂質化合物は、微粒子、ナノ粒子、リポソーム、またはミセルを形成するた
めの作用物質と組み合わせることができる。粒子、リポソーム、またはミセルによって送
達される作用物質は、気体、液体、または固体の形態であり得、作用物質は、ポリヌクレ
オチド、タンパク質、ペプチド、または小分子であり得る。リポ大環状化合物を、他のカ
チオン性脂質化合物、ポリマー（合成または天然）、界面活性剤、コレステロール、炭水
化物、タンパク質、または脂質と組み合わせて粒子を形成し得る。次いでこれらの粒子は
、必要に応じて薬学的賦形剤と組み合わせて医薬組成物を形成することができる。

本明細書は、新規なカチオン性脂質化合物およびそのようなカチオン性脂質化合物の使
用に基づく薬物送達システムを提供する。システムは、ポリヌクレオチド、タンパク質、
小分子、ペプチド、抗原、または薬物を患者、組織、臓器、または細胞に送達するために
薬学的／薬物送達分野で使用され得る。これらの新規な化合物はまた、コーティング用の
物質、添加剤、賦形剤、物質、または生物工学としても使用され得る。

本明細書のカチオン性脂質化合物は、薬物送達分野におけるいくつかの異なる使用を提
供する。カチオン性脂質化合物のアミン含有部分は、ポリヌクレオチドを複合体化し、そ
れによってポリヌクレオチドの送達を増強し、それらの分解を防止するために使用され得
る。カチオン性脂質化合物はまた、送達される作用物質を含有するピコ粒子、ナノ粒子、
微粒子、リポソーム、およびミセルの形成において使用され得る。好ましくは、カチオン
性脂質化合物は生体適合性かつ生分解性であり、形成された粒子もまた生分解性かつ生体
適合性であり、送達される作用物質の制御された持続放出を提供するために使用され得る
。これらの粒子およびそれらの対応する粒子はまた、これらがより低いｐＨでプロトン化
されていることを考慮すると、ｐＨ変化に応答し得る。それらはまた、エンドソーム溶解
を引き起こすための作用物質の細胞への送達においてプロトンスポンジ（proton sponge
）として作用し得る。

ある特定の実施形態では、カチオン性脂質化合物は比較的細胞非傷害性である。カチオ
ン性脂質化合物は、生体適合性かつ生分解性であり得る。カチオン性脂質は、約５．５〜
約７．５、より好ましくは約６．０〜約７．０の間の範囲のｐＫ_ａを有し得る。それは、
約３．０〜約９．０の間、または約５．０〜約８．０の間の所望のｐＫ_ａを有するように
設計され得る。本明細書に記載されるカチオン性脂質化合物は、いくつかの理由で薬物送
達に特に魅力的である：それらは、ＤＮＡ、ＲＮＡ、他のポリヌクレオチド、および他の
負荷電の作用物質と相互作用するため、ｐＨを緩衝するため、内部浸透圧溶解（endo-osm
olysis）を引き起こすため、送達される作用物質を保護するためのアミノ基を含有する；
それらは市販の出発物質から合成することができる；かつ／または、それらはｐＨ応答性
であり、所望のｐＫ_ａで操作することができる。

中性ヘルパー脂質
非カチオン性脂質の非限定的な例には、リン脂質、例えば、レシチン、ホスファチジル
エタノールアミン、リゾレシチン、リゾホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジ
ルセリン、ホスファチジルイノシトール、スフィンゴミエリン、卵スフィンゴミエリン（
ＥＳＭ）、セファリン、カルジオリピン、ホスファチジン酸、セレブロシド、ジセチルホ
スフェート、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジオレオイルホスファ
チジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジオレ
オイルホスファチジルグリセロール（ＤＯＰＧ）、ジパルミトイルホスファチジルグリセ
ロール（ＤＰＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、パル
ミトイルオレオイル−ホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、パルミトイルオレオイル−ホ
スファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、パルミトイルオレオイル−ホスファチジル
グリセロール（ＰＯＰＧ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン４−（Ｎ−マ
レイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＤＯＰＥ−ｍａｌ）、ジパ
ルミトイル−ホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジミリストイル−ホスファ
チジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジステアロイル−ホスファチジルエタノールアミ
ン（ＤＳＰＥ）、モノメチル−ホスファチジルエタノールアミン、ジメチル−ホスファチ
ジルエタノールアミン、ジエライドイル−ホスファチジルエタノールアミン（ＤＥＰＥ）
、ステアロイルオレオイル−ホスファチジルエタノールアミン（ＳＯＰＥ）、リゾホスフ
ァチジルコリン、ジリノレオイルホスファチジルコリン、およびそれらの混合物が含まれ
る。他のジアシルホスファチジルコリンおよびジアシルホスファチジルエタノールアミン
リン脂質もまた使用され得る。これらの脂質中のアシル基は、好ましくはＣ_１０〜Ｃ_２４
炭素鎖を有する脂肪酸から誘導されたアシル基、例えば、ラウロイル、ミリストイル、パ
ルミトイル、ステアロイル、またはオレオイルである。

非カチオン性脂質のさらなる例には、コレステロールおよびその誘導体などのステロー
ルが含まれる。コレステロール誘導体の非限定的な例には、５α−コレスタノール、５α
−コプロスタノール、コレステリル−（２’−ヒドロキシ）−エチルエーテル、コレステ
リル−（４’−ヒドロキシ）−ブチルエーテル、および６−ケトコレスタノールなどの極
性類似体；５α−コレスタン、コレステノン、５α−コレスタノン、５α−コレスタノン
、およびコレステリルデカノエートなどの非極性類似体；ならびにそれらの混合物が含ま
れる。好ましい実施形態では、コレステロール誘導体は、コレステリル−（４’−ヒドロ
キシ）−ブチルエーテルなどの極性類似体である。

一部の実施形態では、脂質粒子中に存在する非カチオン性脂質は、１つもしくは複数の
リン脂質およびコレステロールまたはその誘導体の混合物を含むかまたはそれからなる。
他の実施形態では、脂質粒子中に存在する非カチオン性脂質は、１つまたは複数のリン脂
質、例えば、コレステロールを含まない脂質粒子製剤を含むかまたはそれからなる。さら
に他の実施形態では、脂質粒子中に存在する非カチオン性脂質は、コレステロールまたは
その誘導体、例えばリン脂質を含まない脂質粒子製剤を含むかまたはそれからなる。

非カチオン性脂質の他の例には、非リン含有脂質、例えば、ステアリルアミン、ドデシ
ルアミン、ヘキサデシルアミン、アセチルパルミテート、グリセロールリシノレート、ヘ
キサデシルステアレート、イソプロピルミリステート、両性アクリルポリマー、トリエタ
ノールアミン−ラウリルサルフェート、アルキル−アリールサルフェートポリエチルオキ
シ化脂肪酸アミド（ａｌｋｙｌ−ａｒｙｌｓｕｌｆａｔｅｐｏｌｙｅｔｈｙｌｏｘｙ
ｌａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄａｍｉｄｅ）、ジオクタデシルジメチルアンモニウ
ムブロミド、セラミド、およびスフィンゴミエリンなどが含まれる。

一部の実施形態では、非カチオン性脂質は、粒子中に存在する全脂質の、１０モル％〜
６０モル％、２０モル％〜５５モル％、２０モル％〜４５モル％、２０モル％〜４０モル
％、２５モル％〜５０モル％、２５モル％〜４５モル％、３０モル％〜５０モル％、３０
モル％〜４５モル％、３０モル％〜４０モル％、３５モル％〜４５モル％、３７モル％〜
４２モル％、または３５モル％、３６モル％、３７モル％、３８モル％、３９モル％、４
０モル％、４１モル％、４２モル％、４３モル％、４４モル％、もしくは４５モル％（ま
たはその任意の割合もしくはその範囲）を構成する。

脂質粒子がリン脂質およびコレステロールまたはコレステロール誘導体の混合物を含有
する実施形態では、混合物は、粒子中に存在する全脂質の、最大４０モル％、４５モル％
、５０モル％、５５モル％、または６０モル％を構成し得る。
一部の実施形態では、混合物中のリン脂質構成成分は、粒子中に存在する全脂質の、２
モル％〜２０モル％、２モル％〜１５モル％、２モル％〜１２モル％、４モル％〜１５モ
ル％、または４モル％〜１０モル％（またはその任意の割合もしくはその範囲）を構成し
得る。ある特定の好ましい実施形態では、混合物中のリン脂質構成成分は、粒子中に存在
する全脂質の、５モル％〜１０モル％、５モル％〜９モル％、５モル％〜８モル％、６モ
ル％〜９モル％、６モル％〜８モル％、または５モル％、６モル％、７モル％、８モル％
、９モル％、もしくは１０モル％（またはその任意の割合もしくはその範囲）を構成する
。
他の実施形態では、混合物中のコレステロール構成成分は、粒子中に存在する全脂質の
、２５モル％〜４５モル％、２５モル％〜４０モル％、３０モル％〜４５モル％、３０モ
ル％〜４０モル％、２７モル％〜３７モル％、２５モル％〜３０モル％、または３５モル
％〜４０モル％（またはその任意の割合もしくはその範囲）を構成し得る。ある特定の好
ましい実施形態では、混合物中のコレステロール構成成分は、粒子中に存在する全脂質の
、２５モル％〜３５モル％、２７モル％〜３５モル％、２９モル％〜３５モル％、３０モ
ル％〜３５モル％、３０モル％〜３４モル％、３１モル％〜３３モル％、または３０モル
％、３１モル％、３２モル％、３３モル％、３４モル％、もしくは３５モル％（またはそ
の任意の割合もしくはその範囲）を構成する。
脂質粒子が、リン脂質を含まない実施形態では、コレステロールまたはその誘導体は、
粒子中に存在する全脂質の、最大２５モル％、３０モル％、３５モル％、４０モル％、４
５モル％、５０モル％、５５モル％、または６０モル％を構成し得る。

一部の実施形態では、リン脂質を含まない脂質粒子製剤中のコレステロールまたはその
誘導体は、粒子中に存在する全脂質の、２５モル％〜４５モル％、２５モル％〜４０モル
％、３０モル％〜４５モル％、３０モル％〜４０モル％、３１モル％〜３９モル％、３２
モル％〜３８モル％、３３モル％〜３７モル％、３５モル％〜４５モル％、３０モル％〜
３５モル％、３５モル％〜４０モル％、または３０モル％、３１モル％、３２モル％、３
３モル％、３４モル％、３５モル％、３６モル％、３７モル％、３８モル％、３９モル％
、もしくは４０モル％（またはその任意の割合もしくはその範囲）を構成し得る。

他の実施形態では、非カチオン性脂質は、粒子中に存在する全脂質の、５モル％〜９０
モル％、１０モル％〜８５モル％、２０モル％〜８０モル％、１０モル％（例えば、リン
脂質のみ）、または６０モル％（例えば、リン脂質およびコレステロールまたはその誘導
体）（またはその任意の割合もしくはその範囲）を構成する。

脂質粒子中に存在する非カチオン性脂質の百分率は目標量であり、製剤中に存在する非
カチオン性脂質の実際の量は、例えば±５モル％で変動し得る。

カチオン性脂質化合物を含有する組成物は、３０〜７０％のカチオン性脂質化合物、０
〜６０％のコレステロール、０〜３０％のリン脂質、および１〜１０％のポリエチレング
リコール（ＰＥＧ）であり得る。好ましくは、組成物は、３０〜４０％のカチオン性脂質
化合物、４０〜５０％のコレステロール、および１０〜２０％のＰＥＧである。他の好ま
しい実施形態では、組成物は、５０〜７５％のカチオン性脂質化合物、２０〜４０％のコ
レステロール、および５〜１０％のリン脂質、および１〜１０％のＰＥＧである。組成物
は、６０〜７０％のカチオン性脂質化合物、２５〜３５％のコレステロール、および５〜
１０％のＰＥＧを含有し得る。組成物は、最大９０％のカチオン性脂質化合物および２〜
１５％のヘルパー脂質（helper lipid）を含有し得る。

製剤は脂質粒子製剤であり得、例えば、８〜３０％の化合物、５〜３０％のヘルパー脂
質、および０〜２０％のコレステロール；４〜２５％のカチオン性脂質、４〜２５％のヘ
ルパー脂質、２〜２５％のコレステロール、１０〜３５％のコレステロール−ＰＥＧ、お
よび５％のコレステロール−アミン；または、２〜３０％のカチオン性脂質、２〜３０％
のヘルパー脂質、１〜１５％のコレステロール、２〜３５％のコレステロール−ＰＥＧ、
および１〜２０％のコレステロール−アミン；または、最大９０％のカチオン性脂質、お
よび２〜１０％のヘルパー脂質、もしくは１００％でさえもあるカチオン性脂質を含有す
る。

脂質コンジュゲート
カチオン性に加えて、本明細書に記載される脂質粒子は、脂質コンジュゲートをさらに
含み得る。コンジュゲート脂質は、粒子の凝集を防止するという点で有用である。適切な
コンジュゲート脂質には、ＰＥＧ−脂質コンジュゲート、カチオン性ポリマー−脂質コン
ジュゲート、およびそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。

好ましい実施形態では、脂質コンジュゲートはＰＥＧ−脂質である。ＰＥＧ−脂質の例
には、ジアルキルオキシプロピルにカップリングしたＰＥＧ（ＰＥＧ−ＤＡＡ）、ジアシ
ルグリセロールにカップリングしたＰＥＧ（ＰＥＧ−ＤＡＧ）、ホスファチジルエタノー
ルアミンなどのリン脂質にカップリングしたＰＥＧ（ＰＥＧ−ＰＥ）、セラミドにコンジ
ュゲートしたＰＥＧ、コレステロールまたはその誘導体にコンジュゲートしたＰＥＧ、お
よびそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。

ＰＥＧは、２つの末端ヒドロキシル基を有するエチレンＰＥＧ繰り返し単位の直鎖状の
水溶性ポリマーである。ＰＥＧはそれらの分子量によって分類され、以下を含む：モノメ
トキシポリエチレングリコール（ＭｅＰＥＧ−ＯＨ）、モノメトキシポリエチレングリコ
ール−スクシネート（ＭｅＰＥＧ−Ｓ）、モノメトキシポリエチレングリコール−スクシ
ンイミジルスクシネート（ＭｅＰＥＧ−Ｓ−ＮＨＳ）、モノメトキシポリエチレングリコ
ール−アミン（ＭｅＰＥＧ−ＮＨ_２）、モノメトキシポリエチレングリコール−トレシレ
ート（ＭｅＰＥＧ−ＴＲＥＳ）、モノメトキシポリエチレングリコール−イミダゾリル−
カルボニル（ＭｅＰＥＧ−ＩＭ）、および末端メトキシ基の代わりに末端ヒドロキシル基
を含有するそのような化合物（例えば、ＨＯ−ＰＥＧ−Ｓ、ＨＯ−ＰＥＧ−Ｓ−ＮＨＳ、
ＨＯ−ＰＥＧ−ＮＨ_２）。

本明細書に記載されるＰＥＧ−脂質コンジュゲートのＰＥＧ部分は、５５０ダルトン〜
１０，０００ダルトンの範囲の平均分子量を含み得る。ある特定の例では、ＰＥＧ部分は
、７５０ダルトン〜５，０００ダルトン（例えば、１，０００ダルトン〜５，０００ダル
トン、１，５００ダルトン〜３，０００ダルトン、７５０ダルトン〜３，０００ダルトン
、７５０ダルトン〜２，０００ダルトン）の平均分子量を有する。好ましい実施形態では
、ＰＥＧ部分は、２，０００ダルトンまたは７５０ダルトンの平均分子量を有する。

ある特定の例では、ＰＥＧは、アルキル、アルコキシ、アシル、またはアリール基によ
り必要に応じて置換され得る。ＰＥＧは、脂質に直接コンジュゲートすることができるか
、またはリンカー部分を介して脂質に連結することができる。例えば、エステル非含有リ
ンカー部分およびエステル含有リンカー部分を含む、ＰＥＧを脂質にカップリングするの
に適した任意のリンカー部分を使用することができる。好ましい実施形態では、リンカー
部分は、エステル非含有リンカー部分である。適切なエステル非含有リンカーには、アミ
ド（−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）、アミノ（−ＮＲ−）、カルボニル（−Ｃ（Ｏ）−）、カルバメ
ート（−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−）、尿素（−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−）、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ
−）、エーテル（−０−）、スクシニル（−（０）ＣＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（０）−）、スクシ
ンアミジル（−ＮＨＣ（０）ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（０）ＮＨ−）、エーテル、ジスルフィド、
およびそれらの組み合わせ（カルバメートリンカー部分とアミドリンカー部分の両方を含
有するリンカーなど）が含まれるが、これらに限定されない。好ましい実施形態では、カ
ルバメートリンカーを使用してＰＥＧを脂質にカップリングする。

他の実施形態では、エステル含有リンカー部分を使用してＰＥＧを脂質にカップリング
する。適切なエステル含有リンカー部分には、例えば、カーボネート（−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−
）、スクシノイル、リン酸エステル（−Ｏ−（Ｏ）ＰＯＨ−Ｏ−）、スルホン酸エステル
、およびそれらの組み合わせが含まれる。

様々な鎖長および飽和度の様々なアシル鎖基を有するホスファチジルエタノールアミン
を、ＰＥＧにコンジュゲートして脂質コンジュゲートを形成することができる。そのよう
なホスファチジルエタノールアミンは市販されているか、または当業者に公知の従来の技
術を使用して単離もしくは合成することができる。Ｃ_１０〜Ｃ_２０の範囲の炭素鎖長を有
する飽和または不飽和脂肪酸を含有するホスファチジルエタノールアミンが好ましい。モ
ノ−またはジ−不飽和脂肪酸、ならびに飽和および不飽和脂肪酸の混合物を有するホスフ
ァチジルエタノールアミンもまた使用することができる。適切なホスファチジルエタノー
ルアミンには、ジミリストイル−ホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジパル
ミトイル−ホスファチジルエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、ジオレオイル−ホスファチジ
ルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、およびジステアロイル−ホスファチジルエタノールア
ミン（ＤＳＰＥ）が含まれるが、これらに限定されない。

「ジアシルグリセロール」または「ＤＡＧ」という用語は、両方ともエステル連結によ
ってグリセロールの１位および２位に結合した２〜３０個の間の炭素を独立して有する、
２つの脂肪アシル鎖、Ｒ^１およびＲ^２を有する化合物を含む。アシル基は飽和していても
、様々な不飽和度を有していてもよい。適切なアシル基には、ラウロイル（Ｃ_１２）、ミ
リストイル（Ｃ_１４）、パルミトイル（Ｃ_１６）、ステアロイル（Ｃ_１８）、およびイコ
ソイル（Ｃ_２０）が含まれるが、これらに限定されない。好ましい実施形態では、Ｒ^１お
よびＲ^２は同一であり、すなわち、Ｒ^１およびＲ^２は、両方ともミリストイルであり（す
なわち、ジミリストイル）、Ｒ^１およびＲ^２は、両方ともステアロイルである（すなわち
、ジステアロイル）。

「ジアルキルオキシプロピル」または「ＤＡＡ」という用語は、２つのアルキル鎖、Ｒ
およびＲを有し、それらは両方とも独立して２〜３０個の間の炭素を有する化合物を含む
。アルキル基は飽和していても、様々な不飽和度を有していてもよい。

好ましくは、ＰＥＧ−ＤＡＡコンジュゲートは、ＰＥＧ−ジデシルオキシプロピル（Ｃ
_１０）コンジュゲート、ＰＥＧ−ジラウリルオキシプロピル（Ｃ_１２）コンジュゲート、
ＰＥＧ−ジミリスチルオキシプロピル（Ｃ_１４）コンジュゲート、ＰＥＧ−ジパルミチル
オキシプロピル（Ｃ_１６）コンジュゲート、またはＰＥＧ−ジステアリルオキシプロピル
（Ｃ_１８）コンジュゲートである。これらの実施形態では、ＰＥＧは、好ましくは７５０
または２，０００ダルトンの平均分子量を有する。特定の実施形態では、ＰＥＧの末端ヒ
ドロキシル基は、メチル基で置換されている。

上述に加えて、他の親水性ポリマーを、ＰＥＧの代わりに使用することができる。ＰＥ
Ｇの代わりに使用できる適切なポリマーの例には、ポリビニルピロリドン、ポリメチルオ
キサゾリン、ポリエチルオキサゾリン、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミド、ポリ
メタクリルアミド、およびポリジメチルアクリルアミド、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、
ならびにヒドロキシメチルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロースなどの誘導体化
セルロースが含まれるが、これらに限定されない。

一部の実施形態では、脂質コンジュゲート（例えば、ＰＥＧ−脂質）は、粒子中に存在
する全脂質の、０．１モル％〜２モル％、０．５モル％〜２モル％、１モル％〜２モル％
、０．６モル％〜１．９モル％、０．７モル％〜１．８モル％、０．８モル％〜１．７モ
ル％、０．９モル％〜１．６モル％、０．９モル％〜１．８モル％、１モル％〜１．８モ
ル％、１モル％〜１．７モル％、１．２モル％〜１．８モル％、１．２モル％〜１．７モ
ル％、１．３モル％〜１．６モル％、または１．４モル％〜１．５モル％（またはその任
意の割合もしくはその範囲）を構成する。他の実施形態では、脂質コンジュゲート（例え
ば、ＰＥＧ−脂質）は、粒子中に存在する全脂質の、０モル％〜２０モル％、０．５モル
％〜２０モル％、２モル％〜２０モル％、１．５モル％〜１８モル％、２モル％〜１５モ
ル％、４モル％〜１５モル％、２モル％〜１２モル％、５モル％〜１２モル％、または２
モル％（またはその任意の割合もしくはその範囲）を構成する。

さらなる実施形態では、脂質コンジュゲート（例えば、ＰＥＧ−脂質）は、粒子中に存
在する全脂質の、４モル％〜１０モル％、５モル％〜１０モル％、５モル％〜９モル％、
５モル％〜８モル％、６モル％〜９モル％、６モル％〜８モル％、または５モル％、６モ
ル％、７モル％、８モル％、９モル％、もしくは１０モル％（またはその任意の割合もし
くはその範囲）を構成する。

本発明の脂質粒子中に存在する脂質コンジュゲート（例えば、ＰＥＧ−脂質）の百分率
は目標量であり、製剤中に存在する脂質コンジュゲートの実際の量は、例えば±２モル％
で変動し得る。当業者は、脂質コンジュゲートの濃度は、用いられる脂質コンジュゲート
および脂質粒子が膜融合性になる速度に応じて変動し得ることを理解するであろう。

脂質コンジュゲートの組成および濃度を制御することによって、脂質コンジュゲートが
脂質粒子から交換される速度、ひいては脂質粒子が膜融合性になる速度を制御することが
できる。さらに、例えば、ｐＨ、温度、またはイオン強度を含む他の変数を使用して、脂
質粒子が膜融合性になる速度を変更および／または制御することができる。脂質粒子が膜
融合性になる速度を制御するために使用することができる他の方法は、本開示を読めば当
業者には明らかになるであろう。また、脂質コンジュゲートの組成および濃度を制御する
ことによって、脂質粒子のサイズを制御することができる。

投与のための組成物および製剤

本開示の核酸−脂質組成物は、例えば、静脈内、非経口、腹腔内、または局所経路を介
して全身送達をもたらすために、様々な経路によって投与することができる。一部の実施
形態では、ｓｉＲＮＡは、例えば肺または肝臓などの標的組織の細胞内で、あるいは炎症
組織内で細胞内に送達されてもよい。一部の実施形態では、本開示はｉｎｖｉｖｏでｓ
ｉＲＮＡを送達するための方法を提供する。核酸−脂質組成物は、被験体に、静脈内、皮
下または腹腔内で投与することができる。一部の実施形態では、本開示は、哺乳動物被験
体の肺への干渉ＲＮＡのｉｎｖｉｖｏ送達のための方法を提供する。

一部の実施形態では、本開示は、哺乳動物被験体における疾患または障害を処置する方
法を提供する。核酸、カチオン性脂質、両親媒性物質、リン脂質、コレステロール、およ
びＰＥＧ連結コレステロールを含有する治療有効量の本開示の組成物は、組成物によって
減少、低下、下方制御、またはサイレンシングされ得る遺伝子の発現または過剰発現に関
連する疾患または障害を有する被験体に投与され得る。

本開示の組成物および方法は、経口、直腸、膣、鼻腔内、肺内、または経皮的もしくは
皮膚送達によるもの、あるいは目、耳、皮膚、または他の粘膜表面への局所送達によるも
のを含む、様々な粘膜投与モードによって被験体に投与することができる。本開示の一部
の態様では、粘膜組織層は上皮細胞層を含む。上皮細胞は、肺、気管、気管支、肺胞、鼻
、頬、表皮、または胃腸のものであり得る。本開示の組成物は、機械式スプレー装置など
の従来のアクチュエーター、および加圧式、電気作動式、または他の種類のアクチュエー
ターを使用して投与することができる。

本開示の組成物は、鼻用または肺用スプレーとして水溶液中で投与され得、当業者に公
知の種々の方法によってスプレー形態で投薬され得る。本開示の組成物の肺送達は、滴、
粒子、またはスプレーの形態で組成物を投与することによって達成され、それらは、例え
ば、エアロゾル化、霧化、または噴霧化することができる。組成物、スプレー、またはエ
アロゾルの粒子は、液体または固体のいずれかの形態であり得る。鼻用スプレーとして液
体を投薬するための好ましいシステムは、米国特許第４，５１１，０６９号に開示されて
いる。そのような製剤は、本開示による組成物を水中に溶解させて水溶液を生成し、前記
溶液を無菌にすることによって都合よく調製することができる。製剤は、例えば、米国特
許第４，５１１，０６９号に開示される密封投薬システムの複数回用量容器で提示するこ
とができる。他の適切な鼻用スプレー送達システムは、TRANSDERMAL SYSTEMIC MEDICAT
ION、Y. W. Chien編、Elsevier Publishers、New York、１９８５年；および米国特
許第４，７７８，８１０号に記載されている。追加のエアロゾル送達形態には、例えば、
水、エタノール、またはそれらの混合物などの薬学的溶媒に溶解または懸濁した生物活性
剤を送達する、例えば圧縮空気、ジェット、超音波、および圧電の、ネブライザーが含ま
れ得る。

本開示の鼻用および肺用スプレー溶液は、典型的には、必要に応じて非イオン性界面活
性剤（例えば、ポリソルベート−８０）などの表面活性剤および１つまたは複数の緩衝液
と共に製剤化された薬物または送達される薬物を含む。本開示の一部の実施形態では、鼻
用スプレー溶液は噴霧体をさらに含む。鼻用スプレー溶液のｐＨは、ｐＨ６．８〜７．２
であり得る。用いられる薬学的溶媒はまた、ｐＨ４〜６のわずかに酸性の水性緩衝液であ
り得る。保存剤、界面活性剤、分散剤、またはガスを含む他の構成成分を添加して化学的
安定性を増強または維持することができる。

一部の実施形態では、本開示は、本開示の組成物を含有する溶液、および肺用、粘膜用
、または鼻腔内用のスプレーまたはエアロゾルのためのアクチュエーターを含む医薬製品
である。

本開示の組成物の剤形は、液体であり得るか、液滴もしくはエマルジョンの形態であり
得るか、またはエアロゾルの形態であり得る。

本開示の組成物の剤形は固体であり得、これは投与前に液体中において再構成され得る
。固体は散剤として投与することができる。固体は、カプセル剤、錠剤、またはゲル剤の
形態であり得る。

本開示の範囲内の肺送達のための組成物を製剤化するために、生物活性剤は、様々な薬
学的に許容される添加剤、および活性剤（複数可）を分散させるための基剤または担体と
組み合わせることができる。添加剤の例には、アルギニン、水酸化ナトリウム、グリシン
、塩酸、クエン酸、およびそれらの混合物などのｐＨ調整剤が含まれる。他の添加剤には
、局部麻酔薬（例えば、ベンジルアルコール）、等張化剤（例えば、塩化ナトリウム、マ
ンニトール、ソルビトール）、吸着防止剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ８０）、溶解度促進剤
（例えば、シクロデキストリンおよびその誘導体）、安定剤（例えば、血清アルブミン）
、および還元剤（例えば、グルタチオン）が含まれる。粘膜送達用組成物が液体である場
合、一致するとみなした０．９％（ｗ／ｖ）の生理食塩水の張度を参照して測定するとき
の製剤の張度は、典型的には、投与部位の粘膜に、実質的に、不可逆的な組織損傷が誘導
されないであろう値に調整される。一般に、溶液の張度は、１／３〜３、より典型的には
１／２〜２、最も頻繁には３／４〜１．７の値に調整される。

生物活性剤は、活性剤を分散させる能力を有する親水性化合物および任意の所望の添加
剤を含み得る基剤またはビヒクル中に分散され得る。基剤は、ポリカルボン酸またはその
塩、カルボン酸無水物（例えば、無水マレイン酸）と他のモノマー（例えば、メチル（メ
タ）アクリレート、アクリル酸など）とのコポリマー；ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドンなどの親水性ビニルポリマー；ヒドロキシメチルセルロー
ス、ヒドロキシプロピルセルロースなどのセルロース誘導体；およびキトサン、コラーゲ
ン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、ヒアルロン酸などの天然ポリマー；ならびにそれ
らの非毒性金属塩を含むが、これらに限定されない広範囲の適切な担体から選択できる。
しばしば、例えばポリ乳酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）コポリマー、ポリヒドロキシ酪
酸、ポリ（ヒドロキシ酪酸−グリコール酸）コポリマー、およびそれらの混合物の生分解
性ポリマーが、基剤または担体として選択される。あるいは、またはさらに、ポリグリセ
リン脂肪酸エステル、スクロース脂肪酸エステルなどの合成脂肪酸エステルを担体として
用いることができる。親水性ポリマーおよび他の担体は、単独でまたは組み合わせて使用
することができ、部分的結晶化、イオン結合、架橋などによって、増強された構造的完全
性を担体に付与することができる。担体は、鼻粘膜への直接適用のために、流体または粘
性溶液、ゲル、ペースト、粉末、ミクロスフェア、およびフィルムを含む様々な形態で提
供することができる。この文脈での選択された担体の使用は、生物活性剤の吸収を促進し
得る。

粘膜、鼻、または肺送達のための製剤は、基剤または賦形剤として親水性低分子量化合
物を含有し得る。そのような親水性低分子量化合物は、それを通して生理活性ペプチドま
たはタンパク質などの水溶性活性剤が、活性剤が吸収される体表面へと基剤を通って拡散
することができる通過媒体（passage medium）を提供する。親水性低分子量化合物は、
必要に応じて、粘膜または投与雰囲気から水分を吸収し水溶性活性ペプチドを溶解する。
親水性低分子量化合物の分子量は、一般に、１０，０００以下、好ましくは３，０００以
下である。親水性低分子量化合物の例には、スクロース、マンニトール、ラクトース、Ｌ
−アラビノース、Ｄ−エリトロース、Ｄ−リボース、Ｄ−キシロース、Ｄ−マンノース、
Ｄ−ガラクトース、ラクツロース、セロビオース、ゲンチオビオース、グリセリン、ポリ
エチレングリコール、およびそれらの混合物を含むオリゴサッカリド、ジサッカリドおよ
びモノサッカリドなどのポリオール化合物が含まれる。親水性低分子量化合物のさらなる
例には、Ｎ−メチルピロリドン、アルコール（例えば、オリゴビニルアルコール、エタノ
ール、エチレングリコール、プロピレングリコールなど）、およびそれらの混合物が含ま
れる。

本開示の組成物は、代替的に、ｐＨ調整剤および緩衝化剤、張度調整剤、ならびに湿潤
剤、例えば酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カル
シウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミンオレエート、およびそれらの
混合物などの生理学的条件に近づけるために必要とされるような物質を、薬学的に許容さ
れる担体として含有し得る。固体組成物の場合、例えば、医薬品グレードのマンニトール
、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、
セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウムなどを含む、従来の非毒性の薬
学的に許容される担体を使用することができる。

本開示のある特定の実施形態では、生物活性剤は、時限放出製剤(time release form
ulation)で、例えば緩徐放出ポリマーを含む組成物で投与することができる。活性剤は、
急速放出に対して保護する担体、例えばポリマー、マイクロカプセル化送達システム、ま
たは生体接着性ゲルなどの制御放出ビヒクルを用いて調製することができる。本開示の様
々な組成物中の活性剤の長期送達は、吸収を遅らせる作用物質、例えば、モノステアリン
酸アルミニウムヒドロゲルおよびゼラチンを組成物中に含めることによってもたらすこと
ができる。

本開示はある特定の実施形態に関して記載され、例示の目的で多くの詳細が述べられて
きたが、本開示が追加の実施形態を含み、本明細書に記載された詳細の一部が本開示から
逸脱することなく大幅に変更され得ることは当業者に明らかであろう。本開示は、そのよ
うな追加の実施形態、修正形態、および均等物を含む。特に、本開示は、様々な例示的な
構成成分および例の特色、用語、または要素の任意の組み合わせを含む。

（実施例１：例示的な脂質）
式Ｉの例示的な化合物は、表１に提示される。

（実施例２：ＡＴＸ−４３の合成）
図１は、ＡＴＸ−４３（ＲＬ−４３Ａ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−４３：ステップ１

５００ｍＬの一口丸底フラスコ中に、ジクロロメタン（ＤＣＭ；２００ｍＬ）中に溶解
した２５ｇのヘキサン酸（ＳＭ１；１当量）を入れ、次いで０℃で２７．６ｍＬの塩化オ
キサリル（１．５当量）をゆっくりと添加し、窒素雰囲気下で撹拌し、次いで０．５ｍｌ
のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ；触媒）を添加した。得られた反応混合物を、室温で２
時間撹拌した。

別の１リットルの二口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中の３１．４ｇのＮ，
Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１．５当量）に、添加漏斗を使用して８９．８
ｍｌのトリエチルアミン（Ｅｔ_３Ｎ、３当量）を添加し、０℃で撹拌した。この得られた
溶液に、減圧下で濃縮した後の上述の酸塩化物を、ＤＣＭ（１００ｍｌ）中に溶解するこ
とにより、添加漏斗を使用して２０分間、窒素雰囲気下で滴下添加した。得られた反応溶
液を窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（２０％酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）
／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニターした。反応塊（reaction mass）を水（３０
０ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（３×１００ｍｌ）で洗浄した。合
わせた有機層を減圧下で濃縮した。

粗化合物を、（６０〜１２０シリカゲル；１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカ
ラムクロマトグラフィーに供した。生成量、２０．０ｇ；収率、５８％。

ＡＴＸ−４３：ステップ２

５００ｍｌの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下、０℃で撹拌したテトラヒドロ
フラン（ＴＨＦ；１００ｍｌ）中の３３ｇの臭化ペンチルマグネシウム（１．５当量）の
溶液に、２０ｇのＮ−メトキシ−Ｎ−メチルヘキサンアミド（１当量）溶液（２００ｍｌ
のＴＨＦ中に溶解）を添加し、得られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（１５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３
００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄し
た。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用
するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、１５．０ｇ；収率、６６％。

ＡＴＸ−４３：ステップ３

１５０ｍｌのＴＨＦ中の２５ｍｌのメタノール（ＭｅＯＨ）中に溶解した１５ｇのウン
デカン−６−オン（１当量）の溶液に、４．９ｇの水素化ホウ素ナトリウム（１．５当量
）を０℃で添加し、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（１００ｍｌ）でクエンチした。溶媒を減圧下で除去
し、得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）と水（１５０ｍｌ）との間で分配した。
有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減
圧下で濃縮して、白色の固体を得た。生成量、１４．０ｇ；収率、９３％。

ＡＴＸ−４３：ステップ４

１５０ｍｌのＴＨＦ中に溶解した１５ｇの４−アミノブタン酸（１当量）の溶液に、そ
れぞれ１５分間かけて、添加漏斗を使用して逐次的に、１４５ｍｌの１ＮＮａＯＨ水溶
液（１当量）を０℃で、続いて４３．４ｍｌのＢｏｃ無水物（１．３当量）を添加した。
得られた溶液を室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（クロロホルム（ＣＨＣｌ_３）中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５
）によりモニターした。反応塊を５％ＨＣｌ（１５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯ
Ａｃ（１００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）
で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生成量、２０．
０ｇ；収率、６８％。

ＡＴＸ−４３：ステップ５

０℃未満に冷却したＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解した１２ｇの４−（（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ）ブタン酸（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間隔
で逐次的に、１４．７ｇの１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイ
ミド（ＥＤＣ）・ＨＣｌ（１．３当量）、１０．６ｍｌのＥｔ_３Ｎ（１．３当量）、およ
び０．７２ｇの４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ；０．１当量）を添加した。この
得られた溶液に、添加漏斗を使用して、ＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解することによりアルコ
ールを同一の温度で添加し、窒素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（１００ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽
和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×５０ｍｌ）で抽出
した。有機層を減圧下で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進んだ。生成量、８．５
ｇ；収率、４８％。

ＡＴＸ−４３：ステップ６

７０ｍｌのＤＣＭ中に溶解した８．５ｇのウンデカン−６−イル４−（（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ）ブタノエート（１当量）の溶液に、０℃でトリフルオロ酢酸
（ＴＦＡ；１０当量）を添加し、窒素雰囲気下、室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．２）によりモニター
した。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍｌ
）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３および１
ｍｌのトリエチルアミン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供し、アルコールを回
収した。生成量、５．０ｇ；収率、３３％（アルコールに対して）。

ＡＴＸ−４３：ステップ７

０℃未満に冷却したＤＣＭ（１００ｍｌ）中に溶解した１４ｇの４−ブロモ酪酸（１当
量）の溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、２１ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．
３当量）、１５．２ｍｌのＥｔ_３Ｎ（１．３当量）、および１ｇのＤＭＡＰ（０．１当量
）を添加した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、５０ｍｌのＤＣＭ中に溶解す
ることにより、８．３ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オール（０．７当量）を添加し
、窒素雰囲気下、室温で１６時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を水（５０ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ（
２×５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和
ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×５０ｍｌ）で抽出し
た。有機層を分離し、減圧下で濃縮した。

粗化合物を、５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（６０〜
１２０メッシュシリカゲル）に供した。生成量、１１．０ｇ；収率、６４％。

ＡＴＸ−４３：ステップ８

２５０ｍｌの丸底フラスコに、ＤＭＦ中の２ｇのウンデカン−６−イル４−アミノブタ
ノエート（１当量）および２．２ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタ
ノエート（１当量）、１．２ｇの炭酸カリウム（１．２当量）を添加し、得られた混合物
を窒素雰囲気下、９０℃で４時間還流した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。氷水を反応塊に添加し、次いでＥｔＯＡｃで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、
減圧下で濃縮した。

粗化合物を、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（１０
０〜２００メッシュシリカゲル）に供した。出発アミンおよびブロモ化合物を回収した。
生成量、１．４５ｇ；収率、４０％。

ＡＴＸ−４３：ステップ９

乾燥ＤＣＭ中に溶解した１．４５ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−（（４−
オキソ−４−（ウンデカン−６−イルオキシ）ブチル）アミノ）ブタノエート（１当量）
の溶液に、窒素雰囲気下、０℃で、５分間隔で、１．２９ｍｌのトリエチルアミン（３当
量）および３６０ｍｇのトリホスゲン（０．４当量）を添加した。得られた溶液を、窒素
雰囲気下、室温で１時間撹拌した。得られた反応塊を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下で維
持した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した二口２５０ｍｌの丸底フラスコ中の、乾燥ＴＨＦ（２０
ｍｌ）中に溶解した３６０ｍｇの水素化ナトリウム（５．５当量）に、ＴＨＦ（３０ｍｌ
）中の２．１ｇの２−（ジメチルアミノ）エタン−１−チオール塩酸塩（５．５当量）を
添加し、窒素雰囲気下で５分間撹拌し続けた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（５０ｍＬ）
中に溶解した上述の塩化カルボニルを、添加漏斗を使用して約１５分間ゆっくりと添加し
、この得られた溶液に添加し、室温で１時間撹拌した。

反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍｌ）で洗浄した。合わせ
た有機層を濃縮し、得られた粗製物をカラムクロマトグラフィーに供した。反応の進行を
、ＴＬＣ（６０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）によりモニターした
。

シリカゲル（１００〜２００メッシュ；１８％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）クロマトグラフ
ィーを使用して精製を行った。生成量、５００ｍｇ；収率、２６％；^１ＨＮＭＲ；ＨＰ
ＬＣ；および質量分析（Ｍａｓｓ）によって確認された。

（実施例３：ＡＴＸ−５７の合成）
図２は、ＡＴＸ−５７（ＲＬ−４３Ｃ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−５７：ステップ１：Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルオクタンアミド

２リットルの二口丸底フラスコ中に、ＤＣＭ（３００ｍｌ）中に溶解したオクタン酸（
１当量）を入れ、次いで１．５当量の塩化オキサリルを、窒素雰囲気下で撹拌しながら、
０℃でゆっくりと添加した。得られた反応混合物を、室温で２時間撹拌した。別の２リッ
トルの二口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中の２当量のＮ，Ｏ−ジメチルヒド
ロキシルアミン塩酸塩に、添加漏斗を使用して３当量のトリメチルアミンを添加し、０℃
で撹拌した。この得られた溶液に、減圧下で濃縮した後の上述の酸塩化物を、ＤＣＭ（１
５０ｍｌ）中に溶解することにより、添加漏斗を使用して２０分間、窒素雰囲気下で滴下
添加した。得られた反応溶液を窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（２５０ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（３×１０
０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０
メッシュシリカゲル；１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィ
ーに供した。生成量、８５ｇ；収率、６５％。

ＡＴＸ−５７：ステップ２：ヘキサデカン−８−オン

１リットルの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下、０℃で撹拌したＴＨＦ（１０
０ｍｌ）中の臭化オクチルマグネシウムの溶液に、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルオクタンア
ミド溶液（２００ｍｌのＴＨＦ中に溶解）を添加し、得られた反応混合物を室温で４時間
撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３
５０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄し
た。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲ
ル；２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量
、６５ｇ；収率、６３％。

ＡＴＸ−５７：ステップ３：ヘキサデカン−８−オール

ＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解したヘキサデカン−８−オン（１当量）の溶液に、１当量の
水素化ホウ素ナトリウムを０℃で添加し、得られた溶液を室温で１．５時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（７５ｍｌ）でクエンチした。溶媒を減圧下で除去し
、得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）との間で分配した。有
機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧
下で濃縮して、白色の固体を得た。生成量、６０ｇ；収率、９１％。

ＡＴＸ−５７：ステップ４：４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタン
酸

ＴＨＦ中に溶解した４−アミノブタン酸の溶液に、１５分間かけて、添加漏斗を使用し
て逐次的に、１ＮＮａＯＨ水溶液を０℃で、続いてＢｏｃ無水物を添加した。得られた
溶液を、室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を５％ＨＣｌ（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍｌ）で洗浄した。合わ
せた有機層を減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生成量、８０ｇ；収率、８１％。

ＡＴＸ−５７：ステップ５：ヘキサデカン−８−イル４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカル
ボニル）アミノ）ブタノエート

０℃未満に冷却したＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解した４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカ
ルボニル）アミノ）ブタン酸の溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、ＥＤＣ
・ＨＣｌ、Ｅｔ_３Ｎ、および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）を添加した。この
得られた溶液に、添加漏斗を使用して、ＤＣＭ（１５０ｍｌ）に溶解することにより１当
量のヘキサデカン−８−オールアルコールを同一の温度で添加し、窒素雰囲気下、室温で
２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（１５０ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）を添加
した。有機層を分離し、減圧下で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進んだ。生成量
、８０ｇ（粗製；必要な化合物およびアルコール）。

ＡＴＸ−５７：ステップ６：ヘキサデカン−８−イル４−アミノブタノエート

ＤＣＭ中に溶解したヘキサデカン−８−イル−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
）アミノ）ブタノエートの溶液に、０℃でＴＦＡを添加し、窒素雰囲気下、室温で３時間
撹拌した。反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．３）により
モニターした。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（３
００ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し
、減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／
ＣＨＣｌ_３および１ｍｌのトリエチルアミン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供
し、アルコールを回収した。生成量、４０ｇ；収率、２ステップに対し５９％；Ｍａｓｓ
により確認された。

ＡＴＸ−５７：ステップ７：（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタノエー
ト

０℃未満に冷却したＤＣＭ（４００ｍｌ）中に溶解した４−ブロモ酪酸の溶液に、窒素
雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、ＥＤＣ・ＨＣｌ、Ｅｔ_３Ｎ、およびＤＭＡＰを添加
した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、１００ｍｌのＤＣＭ中に溶解すること
により、（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オールを添加し、窒素雰囲気下、室温で２４時間
撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を水（３００ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２００ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）で抽出
した。有機層を分離し、減圧下で濃縮した。粗化合物を、５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使
用するカラムクロマトグラフィー（６０〜１２０メッシュシリカゲル）に供した。アルコ
ールを回収した。生成量、２７ｇ；収率、５１％。

ＡＴＸ−５７：ステップ８：ヘキサデカン−８−イル（Ｚ）−４−（（４−（ノナ−２
−エン−１−イルオキシ）−４−オキソブチル）アミノ）ブタノエート

アセトニトリル（ＡＣＮ）中のヘキサデカン−８−イル４−アミノブタノエート、（Ｚ
）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタノエートの溶液に、炭酸カリウムを添加し
、得られた混合物を窒素雰囲気下、９０℃で４時間還流した。反応の進行を、ＴＬＣ（Ｃ
ＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニターした。反応塊を濾過し、ＡＣ
Ｎ（２０ｍｌ）で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。粗化合物を、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘ
キサンを使用するカラムクロマトグラフィー（１００〜２００メッシュシリカゲル）に供
した。出発物質である、アミンおよびブロモ化合物を回収した。生成量、２０ｇ；収率、
４０％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−５７：ステップ９

乾燥ＤＣＭ中に溶解したヘキサデカン−８−イル（Ｚ）−４−（（４−（ノナ−２−エ
ン−１−イルオキシ）−４−オキソブチル）アミノ）ブタノエートの溶液に、窒素雰囲気
下、０℃で、５分間隔でトリメチルアミンおよびトリホスゲンを添加した。得られた溶液
を、窒素雰囲気下、室温で１時間撹拌した。得られた反応塊を減圧下で濃縮し、窒素雰囲
気下で維持した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した二口１００ｍｌの丸底フラスコ中の、乾燥ＴＨＦ（５０
ｍｌ）中に溶解した水素化ナトリウムに、２−（ジメチルアミノ）プロパン−１−チオー
ル塩酸塩を添加し、窒素雰囲気下で５分間撹拌し続けた。この得られた溶液に、ＴＨＦ（
８０ｍｌ）中に溶解した上述の塩化カルバモイルをシリンジで約１０分間ゆっくりと添加
した。得られた溶液を窒素雰囲気下、室温で６時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（７５ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔ
ＯＡｃ（１５０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×４０ｍｌ）
で洗浄した。合わせた有機層を濃縮し、得られた粗製物をカラムクロマトグラフィーに供
した。

シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）を使用して第１の精製を行った。２２ｇの粗化合
物を６０ｇのシリカゲルに吸着させ、カラムに入れた５００ｇのシリカゲルに注いだ。化
合物を３５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。ＨＰＬＣグレードの溶媒と共に中性アル
ミナを使用して第２の精製を行った。７．５ｇの粗化合物を１８ｇの中性アルミナに吸着
させ、得られたものをカラムに入れた１３０ｇの中性アルミナに注いだ。化合物を１０％
ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。収率、２９％；^１ＨＮＭＲ、ＨＰＬＣ、およびＭａ
ｓｓによって確認された。

（実施例４：ＡＴＸ−５８の合成）
図３は、ＡＴＸ−５８（ＲＬ−４３Ｂ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−５８：ステップ１

Ｎ_２雰囲気下、５００ｍｌの二口丸底フラスコ中に、２００ｍｌのＤＣＭ中に溶解した
３０ｇの８−ブロモオクタン酸（１当量）を入れ、次いで窒素雰囲気下で撹拌しながら、
０℃で２６．７ｍｌの塩化オキサリル（１．５当量）にゆっくりと添加した。得られた反
応混合物を、室温で２時間撹拌した。

別の１リットルの二口丸底フラスコ中で、３００ｍｌのＤＣＭ中の４０．５ｇのＮ，Ｏ
−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２当量）に、０℃で撹拌した８７ｍｌのトリメチ
ルアミン（３当量）を添加した。この得られた溶液に、減圧下で濃縮後、５００ｍｌのＤ
ＣＭ中に溶解することにより、添加漏斗を使用して１５分間、上述の酸塩化物を滴下添加
した。得られた反応溶液を窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（３００ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（２×１０
０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使
用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、２８ｇ。

ＡＴＸ−５８：ステップ２

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した、ＴＨＦ（１００ｍｌ）中の２８ｇの臭化ヘキシルマグ
ネシウム（１当量）の溶液に、２００ｍｌのＴＨＦ中の３６．８ｇのＮ−メトキシ−Ｎ−
メチルオクタンアミド（１．３当量）を添加し、得られた反応混合物を室温で５時間撹拌
した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（１００ｍｌ）でクエンチした。有機層を分離し、水
層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；２％酢酸エチル／ヘキサン）を使用
するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、２４ｇ；収率、７７％。

ＡＴＸ−５８：ステップ３

ＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解した２４ｇのテトラデカン−７−オン（１当量）の溶液に、
４．２７ｇの水素化ホウ素ナトリウム（１当量）を０℃で添加し、得られた溶液を室温で
１時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（５０ｍｌ）でクエンチした。メタノールを減圧下で
減らした。得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）と水との間で分配した。有機層を
分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×８０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮
して、白色の固体を得た。生成量、２１．５ｇ；収率、８９％。

ＡＴＸ−５８：ステップ４

１４０ｍｌのＴＨＦ中に溶解した２０ｇの４−アミノブタン酸の溶液に、１９６ｍｌの
１ＮＮａＯＨ水溶液を０℃で、続いて漏斗を使用して３６．８ｇのＢｏｃ無水物を添加
した。得られた溶液を、室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を５％ＨＣｌ（１００ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わ
せた有機層を減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生成量、３０ｇ；収率、７６％。

ＡＴＸ−５８：ステップ５

０℃未満に冷却したＤＣＭ（１５０ｍｌ）中に溶解した１０ｇの４−（（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ）ブタン酸（１当量）の溶液に、１０分間隔で逐次的に、１２
．２ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．３当量）、２０．４ｍｌのＥｔ_３Ｎ（３当量）、および４
８８ｍｇのＤＭＡＰ（０．１当量）を添加した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用し
て、ＤＣＭ中に溶解することによりアルコールを添加し、窒素雰囲気下、室温で２４時間
撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（１００ｍｌ）でクエンチし、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（２×
５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和Ｎａ
ＨＣＯ_３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進んだ。生成量、１２．７ｇ（粗製）。

ＡＴＸ−５８：ステップ６

１００ｍｌのＤＣＭ中に溶解した１２．５ｇのテトラデカン−７−イル４−（（ｔｅｒ
ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタノエート（１当量）の溶液に、０℃で２３．９ｍ
ｌのＴＦＡ（１０当量）を添加し、窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３；Ｒｆ：０．３）によりモニター
した。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍｌ
）で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、減圧下で濃縮した
。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）を使用
するカラムクロマトグラフィーに供し、アルコールを回収した。生成量、２ステップに対
し７ｇ；収率、４７％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−５８：ステップ７

０℃に冷却したＤＣＭ（１５０ｍｌ）中に溶解した２０ｇの４−ブロモ酪酸（１当量）
の溶液に、１０分間隔で逐次的に、１．５当量のＥＤＣ・ＨＣｌ、３当量のＥｔ_３Ｎ、お
よび０．１当量のＤＭＡＰを添加した。この得られた溶液に、漏斗を使用して、１００ｍ
ｌのＤＣＭ中に溶解することにより、０．７当量の（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オール
を添加し、窒素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を水（１００ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し
、減圧下で濃縮した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用
するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、１７ｇ；収率、６９％；^１ＨＮＭＲ
によって確認された。

ＡＴＸ−５８：ステップ８

ＡＣＮ（１２５ｍｌ）中の６ｇのテトラデカン−７−イル４−アミノブタノエート（１
当量）、５．８ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタノエート（１当量
）の溶液に、２．７ｇの炭酸カリウム（１．２当量）を添加し、得られたものを窒素雰囲
気下、９０℃で３時間還流した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。

粗化合物を、（１００〜２００メッシュシリカゲル；１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を
使用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、４．５ｇ；収率、４４％；Ｍａｓ
ｓにより確認された。

ＡＴＸ−５８：ステップ９

３０ｍｌの乾燥ＤＣＭ中に溶解した４．４ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−
（（４−オキソ−４−（テトラデカン−７−イルオキシ）ブチル）アミノ）ブタノエート
（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下、０℃で、５分間隔で、０．８３ｍｌのトリメチルア
ミン（３当量）および４１８ｍｇのトリホスゲン（０．５当量）を添加した。得られた溶
液を、窒素雰囲気下、室温で１時間撹拌した。得られた反応塊を減圧下で濃縮し、窒素雰
囲気下で維持した。

二口１００ｍｌの丸底フラスコ中の、乾燥ＴＨＦ（２５ｍｌ）中に溶解した１９２ｍｇ
の水素化ナトリウム（１０当量）に、５６４ｍｇの２−（ジメチルアミノ）プロパン−１
−チオール塩酸塩（５当量）を０℃で添加し、窒素雰囲気下で５分間撹拌し続けた。この
得られた溶液に、ＴＨＦ（３５ｍｌ）中に溶解した上述の塩化カルバモイルをシリンジで
約１０分間ゆっくりと添加した。得られた溶液を窒素雰囲気下、室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ（３０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡ
ｃ（１００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍｌ）で洗
浄した。合わせた有機層を濃縮し、得られた粗製物をカラムクロマトグラフィーに供した
。

シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）を使用して第１の精製を行った。５．０ｇの粗化
合物を９ｇのシリカゲルに吸着させ、カラムに入れた９０ｇのシリカゲルに注いだ。化合
物を３５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。ＨＰＬＣグレードの溶媒と共に中性アルミ
ナを使用して第２の精製を行った。１．５ｇの粗化合物を４ｇの中性アルミナに吸着させ
、得られたものをカラムに入れた４０ｇの中性アルミナに注いだ。化合物を１０％ＥｔＯ
Ａｃ／ヘキサンで溶離した。生成量、１．２ｇ；収率、２１％；^１ＨＮＭＲ、ＨＰＬＣ
、Ｍａｓｓによって確認された。

（実施例５：ＡＴＸ−８１の合成）
図４は、ＡＴＸ−８１（ＲＬ−４８Ｂ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−８１：ステップ１

２リットルの二口丸底フラスコ中に、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解したオクタン酸を
入れ、次いで１．５当量の塩化オキサリルを、窒素雰囲気下で撹拌しながら、０℃でゆっ
くりと添加した。得られた反応混合物を、室温で２時間撹拌した。別の２リットルの二口
丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中の２当量のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルア
ミン塩酸塩に、添加漏斗を使用して３当量のトリメチルアミンを添加し、０℃で撹拌した
。この得られた溶液に、減圧下で濃縮した後の上述の酸塩化物を、ＤＣＭ（１５０ｍｌ）
中に溶解することにより、添加漏斗を使用して２０分間、窒素雰囲気下で滴下添加した。
得られた反応溶液を窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（２５０ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（３×１０
０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０
メッシュシリカゲル；１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィ
ーに供した。生成量、３３ｇ；収率、８４％。

ＡＴＸ−８１：ステップ２

１リットルの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下０℃で撹拌したＴＨＦ（１００
ｍｌ）中の２２ｇの臭化ヘプチルマグネシウム（１．５当量）の溶液に、Ｎ−メトキシ−
Ｎ−メチルオクタンアミド（１当量）溶液（２００ｍｌのＴＨＦ中に溶解）を添加し、得
られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３
５０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄し
た。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲ
ル；２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量
、２２ｇ；収率、６５％。

ＡＴＸ−８１：ステップ３

ＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解した２２ｇのペンタデカン−８−オン（１当量）の溶液に、
１．５当量の水素化ホウ素ナトリウムを０℃で添加し、得られた溶液を室温で１時間撹拌
した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（７５ｍｌ）でクエンチした。溶媒を減圧下で除去し
、得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）との間で分配した。有
機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧
下で濃縮して、白色の固体を得た。生成量、２０ｇ；収率、９０％。

ＡＴＸ−８１：ステップ４

３５０ｍｌのＴＨＦ中に溶解した５０ｇの４−アミノブタン酸の溶液に、１５分間かけ
て、添加漏斗を使用して逐次的に、４９０ｍｌの１ＮＮａＯＨ水溶液を０℃で、続いて
１４０ｍｌのＢｏｃ無水物を添加した。得られた溶液を、室温で４時間撹拌した。

ＡＴＸ−８１：ステップ５

０℃未満に冷却したＤＣＭ（２５０ｍｌ）中に溶解した１０ｇの４−（（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ）ブタン酸の溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に
、１．３当量のＥＤＣ・ＨＣｌ、Ｅｔ_３Ｎ、および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡ
Ｐ）を添加した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、ＤＣＭ（１５０ｍｌ）に溶
解することにより１当量のペンタデカン−７−オールアルコールを同一の温度で添加し、
窒素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（１５０ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）を添加
した。有機層を分離し、減圧下で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進んだ。生成量
、８．５ｇ（粗製；必要な化合物およびアルコール）。

ＡＴＸ−８１：ステップ６

６５ｍｌのＤＣＭ中に溶解した８．５ｇのペンタデカン−８−イル４−（（ｔｅｒｔ−
ブトキシカルボニル）アミノ）ブタノエートの溶液に、０℃で１０当量のＴＦＡを添加し
、窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．３）によりモニター
した。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（３００ｍｌ
）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ
_３および１ｍｌのトリエチルアミン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供し、アル
コールを回収した。生成量、２ステップに対し４ｇ；収率、２５％；Ｍａｓｓにより確認
された。

ＡＴＸ−８１：ステップ７

０℃未満に冷却したＤＣＭ（３００ｍｌ）中に溶解した４−ブロモ酪酸の溶液に、窒素
雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、ＥＤＣ・ＨＣｌ、Ｅｔ_３Ｎ、およびＤＭＡＰを添加
した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、１００ｍｌのＤＣＭ中に溶解すること
により、２０ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オールを添加し、窒素雰囲気下、室温で
２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を水（３００ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２００ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）で抽出
した。有機層を分離し、減圧下で濃縮した。粗化合物を、５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使
用するカラムクロマトグラフィー（６０〜１２０メッシュシリカゲル）に供した。アルコ
ールを回収した。生成量、１９ｇ；収率、５５％。

ＡＴＸ−８１：ステップ８

７０ｍｌのアセトニトリル（ＡＣＮ）中の４．５ｇのペンタデカン−８−イル４−アミ
ノブタノエート、１当量の（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタノエートの
溶液に、１．４当量の炭酸カリウムを添加し、得られた混合物を窒素雰囲気下、９０℃で
４時間還流した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を濾過し、ＡＣＮ（２０ｍｌ）で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。粗化合
物を、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（１００〜２０
０メッシュシリカゲル）に供した。出発物質である、アミンおよびブロモ化合物を回収し
た。生成量、２．１ｇ；収率、２７％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−８１：ステップ９

１５０ｍｌの乾燥ＤＣＭ中に溶解した２．１ｇのペンタデカン−８−イル（Ｚ）−４−
（（４−（ノナ−２−エン−１−イルオキシ）−４−オキソブチル）アミノ）ブタノエー
トの溶液に、窒素雰囲気下、０℃で、５分間隔で３当量のトリエチルアミンおよびトリホ
スゲンを添加した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温で１時間撹拌した。得られた反
応塊を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下で維持した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した二口１００ｍｌの丸底フラスコ中の、乾燥ＴＨＦ（８０
ｍｌ）中に溶解した７当量の水素化ナトリウムに、３．５当量の２−（ジメチルアミノ）
プロパン−１−チオール塩酸塩を添加し、窒素雰囲気下で５分間撹拌し続けた。この得ら
れた溶液に、ＴＨＦ（８０ｍｌ）中に溶解した上述の塩化カルバモイルをシリンジで約１
０分間ゆっくりと添加した。得られた溶液を窒素雰囲気下、０℃〜室温で一晩撹拌した。

粗化合物の第１の精製は、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）を使用して行い、６０
ｇのシリカゲルに吸着させ、カラムに入れた５００ｇのシリカゲルに注いだ。化合物を３
５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。ＨＰＬＣグレードの溶媒と共に中性アルミナを使
用して第２の精製を行った。粗化合物を１８ｇの中性アルミナに吸着させ、得られたもの
をカラムに入れた１３０ｇの中性アルミナに注いだ。化合物を１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサ
ンで溶離した。生成量、１．５ｇ；収率、４５％；^１ＨＮＭＲ、ＨＰＬＣ、およびＭａ
ｓｓによって確認された。

（実施例６：ＡＴＸ−８２の合成）
図５は、ＡＴＸ−８２（ＲＬ−４７Ａ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−８２：ステップ１

２リットルの二口丸底フラスコ中に、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解した３０ｇのオク
タン酸を入れ、次いで１．５当量の塩化オキサリルを、窒素雰囲気下で撹拌しながら、０
℃でゆっくりと添加した。得られた反応混合物を、室温で２時間撹拌した。別の２リット
ルの二口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中の２当量のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロ
キシルアミン塩酸塩に、添加漏斗を使用して３当量のトリメチルアミンを添加し、０℃で
撹拌した。この得られた溶液に、減圧下で濃縮した後の上述の酸塩化物を、ＤＣＭ（１５
０ｍｌ）中に溶解することにより、添加漏斗を使用して２０分間、窒素雰囲気下で滴下添
加した。得られた反応溶液を窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

ＡＴＸ−８２：ステップ２

１リットルの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下、０℃で撹拌したＴＨＦ（１０
０ｍｌ）中の臭化ヘプチルマグネシウム（１．５当量）の溶液に、２８ｇのＮ−メトキシ
−Ｎ−メチルオクタンアミド（１当量）溶液（２００ｍｌのＴＨＦ中に溶解）を添加し、
得られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。

ＡＴＸ−８２：ステップ３

ＡＴＸ−８２：ステップ４

１２０ｍｌのＴＨＦ中に溶解した１５ｇの４−アミノブタン酸の溶液に、１５分間かけ
て、添加漏斗を使用して逐次的に、１８５ｍｌの１ＮＮａＯＨ水溶液を０℃で、続いて
５０ｍｌのＢｏｃ無水物を添加した。得られた溶液を、室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を５％ＨＣｌ（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍｌ）で洗浄した。合わ
せた有機層を減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生成量、２７ｇ；収率、８５％。

ＡＴＸ−８２：ステップ５

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（１５０ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）を添加
した。有機層を分離し、減圧下で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進んだ。生成量
、８ｇ（粗製；必要な化合物およびアルコール）。

ＡＴＸ−８２：ステップ６

６０ｍｌのＤＣＭ中に溶解した８．０ｇのペンタデカン−８−イル４−（（ｔｅｒｔ−
ブトキシカルボニル）アミノ）ブタノエートの溶液に、０℃で１０当量のＴＦＡを添加し
、窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．３）によりモニター
した。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（３００ｍｌ
）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ
_３および１ｍｌのトリエチルアミン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供し、アル
コールを回収した。生成量、４ｇ；収率、２ステップに対し２５％；Ｍａｓｓにより確認
された。

ＡＴＸ−８２：ステップ７

０℃未満に冷却したＤＣＭ（４００ｍｌ）中に溶解した４−ブロモ酪酸の溶液に、窒素
雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、１．５当量のＥＤＣ・ＨＣｌ、３当量のＥｔ_３Ｎ、
およびＤＭＡＰを添加した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、１００ｍｌのＤ
ＣＭ中に溶解することにより、２０ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オールを添加し、
窒素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を水（３００ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２００ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）で抽出
した。有機層を分離し、減圧下で濃縮した。粗化合物を、５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使
用するカラムクロマトグラフィー（６０〜１２０メッシュシリカゲル）に供した。アルコ
ールを回収した。生成量、１８ｇ；収率、５５％。

ＡＴＸ−８２：ステップ８

９０ｍｌのＡＣＮ中の４．０ｇのペンタデカン−８−イル４−アミノブタノエート、１
当量の（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタノエートの溶液に、１．４当量
の炭酸カリウムを添加し、得られた混合物を窒素雰囲気下、９０℃で４時間還流した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を濾過し、ＡＣＮ（２０ｍｌ）で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。粗化合
物を、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（１００〜２０
０メッシュシリカゲル）に供した。出発物質（アミンおよびブロモ化合物）を回収した。
生成量、２．２ｇ；収率、３０％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−８２：ステップ９

２５ｍｌの乾燥ＤＣＭ中に溶解した２．２ｇのペンタデカン−８−イル（Ｚ）−４−（
（４−（ノナ−２−エン−１−イルオキシ）−４−オキソブチル）アミノ）ブタノエート
の溶液に、窒素雰囲気下、０℃で、５分間隔で３当量のトリエチルアミンおよびトリホス
ゲンを添加した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温で１時間撹拌した。得られた反応
塊を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下で維持した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した二口１００ｍｌの丸底フラスコ中の、乾燥ＴＨＦ（１０
０ｍｌ）中に溶解した７当量の水素化ナトリウムに、３．５当量の２−（ジメチルアミノ
）プロパン−１−チオール塩酸塩を添加し、窒素雰囲気下で５分間撹拌し続けた。この得
られた溶液に、ＴＨＦ（１００ｍｌ）中に溶解した上述の塩化カルバモイルをシリンジで
約１０分間ゆっくりと添加した。得られた溶液を窒素雰囲気下、０℃〜室温で一晩撹拌し
た。

粗化合物の第１の精製は、シリカゲル（６０〜１２０メッシュ）を使用して行い、６０
ｇのシリカゲルに吸着させ、カラムに入れた５００ｇのシリカゲルに注いだ。化合物を３
５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。ＨＰＬＣグレードの溶媒と共に中性アルミナを使
用して第２の精製を行った。粗化合物を１８ｇの中性アルミナに吸着させ、得られたもの
をカラムに入れた１３０ｇの中性アルミナに注いだ。化合物を１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサ
ンで溶離した。生成量、１．２ｇ；収率、４３％；^１ＨＮＭＲ、ＨＰＬＣ、およびＭａ
ｓｓによって確認された。

（実施例７：ＡＴＸ−８６の合成）
図６は、ＡＴＸ−８６（ＲＬ−４８Ａ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−８６：ステップ１

反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（２５０ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（３×１０
０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０
メッシュシリカゲル；１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィ
ーに供した。生成量、３８ｇ；収率、８４％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−８６：ステップ２

１リットルの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下、０℃で撹拌したＴＨＦ（１０
０ｍｌ）中の臭化ヘキシルマグネシウム（１．５当量）の溶液に、３８ｇのＮ−メトキシ
−Ｎ−メチルオクタンアミド（１当量）溶液（２００ｍｌのＴＨＦ中に溶解）を添加し、
得られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３
５０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄し
た。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲ
ル；２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量
、４４ｇ；収率、６５％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−８６：ステップ３

ＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解した４４ｇのトリデカン−７−オン（１当量）の溶液に、１
．５当量の水素化ホウ素ナトリウムを０℃で添加し、得られた溶液を室温で１時間撹拌し
た。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（７５ｍｌ）でクエンチした。溶媒を減圧下で除去し
、得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）との間で分配した。有
機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧
下で濃縮して、白色の固体を得た。生成量、４０ｇ；収率、９０％；Ｍａｓｓにより確認
された。

ＡＴＸ−８６：ステップ４

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を５％ＨＣｌ（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍｌ）で洗浄した。合わ
せた有機層を減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生成量、８０ｇ；収率、８１％；
Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−８６：ステップ５

ＡＴＸ−８６：ステップ６

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．３）によりモニター
した。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（３００ｍｌ
）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ
_３および１ｍＬのトリエチルアミン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供し、アル
コールを回収した。生成量、３．５ｇ；収率、２ステップに対し５２％；Ｍａｓｓにより
確認された。

ＡＴＸ−８６：ステップ７

０℃未満に冷却したＤＣＭ（４００ｍｌ）中に溶解した４−ブロモ酪酸の溶液に、窒素
雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、１．５当量のＥＤＣ・ＨＣｌ、２当量のＥｔ_３Ｎ、
およびＤＭＡＰを添加した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、１００ｍｌのＤ
ＣＭ中に溶解することにより、２０ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オールを添加し、
窒素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

ＡＴＸ−８６：ステップ８

９０ｍｌのＡＣＮ中の４．０ｇのトリデカン−７−イル４−アミノブタノエート、１当
量の（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタノエートの溶液に、１．４当量の
炭酸カリウムを添加し、得られた混合物を窒素雰囲気下、９０℃で４時間還流した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を濾過し、ＡＣＮ（２０ｍｌ）で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。粗化合
物を、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（１００〜２０
０メッシュシリカゲル）に供した。出発物質である、アミンおよびブロモ化合物を回収し
た。生成量、２．２ｇ；収率、３０％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−８６：ステップ９

２５ｍｌの乾燥ＤＣＭ中に溶解した２．２ｇのトリデカン−７−イル（Ｚ）−４−（（
４−（ノナ−２−エン−１−イルオキシ）−４−オキソブチル）アミノ）ブタノエートの
溶液に、窒素雰囲気下、０℃で、５分間隔で３当量のトリエチルアミンおよびトリホスゲ
ンを添加した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温で１時間撹拌した。得られた反応塊
を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下で維持した。

（実施例８：ＡＴＸ−８７の合成）
図７は、９つのステップを含むＡＴＸ−８７（ＲＬ−４８Ｃ）の合成経路を示す。

ＡＴＸ−８７：ステップ１

２リットルの二口丸底フラスコ中に、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解した２０ｇのオク
タン酸を入れ、次いで１．５当量の塩化オキサリルを、窒素雰囲気下で撹拌しながら、０
℃でゆっくりと添加した。得られた反応混合物を、室温で２時間撹拌した。別の２リット
ルの二口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（２００ｍｌ）中の２当量のＮ，Ｏ−ジメチルヒドロ
キシルアミン塩酸塩に、添加漏斗を使用して３当量のトリメチルアミンを添加し、０℃で
撹拌した。この得られた溶液に、減圧下で濃縮した後の上述の酸塩化物を、ＤＣＭ（１５
０ｍｌ）中に溶解することにより、添加漏斗を使用して２０分間、窒素雰囲気下で滴下添
加した。得られた反応溶液を窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（２５０ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（３×１０
０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０
メッシュシリカゲル；１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィ
ーに供した。生成量、２０ｇ；収率、８４％。

ＡＴＸ−８７：ステップ２

１リットルの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下、０℃で撹拌したＴＨＦ（１０
０ｍｌ）中の臭化ヘキシルマグネシウム（１．５当量）の溶液に、２０ｇのＮ−メトキシ
−Ｎ−メチルオクタンアミド（１当量）溶液（２００ｍｌのＴＨＦ中に溶解）を添加し、
得られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３
５０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄し
た。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲ
ル；２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量
、２５ｇ；収率、６５％。

ＡＴＸ−８７：ステップ３

ＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解した２５ｇのトリデカン−７−オン（１当量）の溶液に、１
．５当量の水素化ホウ素ナトリウムを０℃で添加し、得られた溶液を室温で１時間撹拌し
た。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（７５ｍｌ）でクエンチした。溶媒を減圧下で除去し
、得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）との間で分配した。有
機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧
下で濃縮して、白色の固体を得た。生成量、２２ｇ；収率、９０％。

ＡＴＸ−８７：ステップ４

３５０ｍｌのＴＨＦ中に溶解した５０ｇの４−アミノブタン酸の溶液に、１５分間かけ
て、添加漏斗を使用して逐次的に、４９０ｍｌの１ＮＮａＯＨ水溶液を０℃で添加し、
続いて１４０ｍｌのＢｏｃ無水物を添加した。得られた溶液を、室温で４時間撹拌した。

ＡＴＸ−８７：ステップ５

０℃未満に冷却したＤＣＭ（２５０ｍｌ）中に溶解した１７ｇの４−（（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ）ブタン酸の溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に
、１．３当量のＥＤＣ・ＨＣｌ、Ｅｔ_３Ｎ、および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡ
Ｐ）を添加した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、ＤＣＭ（１５０ｍｌ）に溶
解することにより１当量のトリデカン−７−オールを同一の温度で添加し、窒素雰囲気下
、室温で２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（１５０ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）を添加
した。有機層を分離し、減圧下で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進んだ。生成量
、１５ｇ（粗製；必要な化合物およびアルコール）。

ＡＴＸ−８７：ステップ６

８０ｍｌのＤＣＭ中に溶解した１５．０ｇのペンタデカン−８−イル４−（（ｔｅｒｔ
−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタノエートの溶液に、０℃で１０当量のＴＦＡを添加
し、窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．３）によりモニター
した。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（３００ｍｌ
）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮した。粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ
_３および１ｍＬのトリエチルアミン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供し、アル
コールを回収した。生成量、７ｇ；収率、２ステップに対し２４％；Ｍａｓｓにより確認
された。

ＡＴＸ−８７：ステップ７

ＡＴＸ−８７：ステップ８

ＡＴＸ−８７：ステップ９

（実施例９：ＡＴＸ−８８の合成）
図８は、ＡＴＸ−８８（ＲＬ−４８Ｄ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−８８：ステップ１

Ｎ_２雰囲気下の５００ｍｌの二口丸底フラスコ中に、２００ｍｌのＤＣＭ中に溶解した
２５ｇの８−ブロモオクタン酸（１当量）を入れ、次いで窒素雰囲気下で撹拌しながら、
０℃で塩化オキサリル１．５当量にゆっくりと添加した。得られた反応混合物を、室温で
２時間撹拌した。

別の１リットルの二口丸底フラスコ中で、３００ｍｌのＤＣＭ中の２当量のＮ，Ｏ−ジ
メチルヒドロキシルアミン塩酸塩に、３当量のトリメチルアミンを添加し、０℃で撹拌し
た。この得られた溶液に、減圧下で濃縮後、５００ｍｌのＤＣＭ中に溶解することにより
、添加漏斗を使用して１５分間、上述の酸塩化物を滴下添加した。得られた反応溶液を窒
素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使
用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、２１ｇ；収率、６６％。

ＡＴＸ−８８：ステップ２

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した、ＴＨＦ（１００ｍｌ）中の１．３当量の臭化オクチル
マグネシウムの溶液に、１００ｍｌのＴＨＦ中の２０ｇのＮ−メトキシ−Ｎ−メチルオク
タンアミドを添加し、得られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；２％酢酸エチル／ヘキサン）を使用
するカラムクロマトグラフィーに供した。収量は１７．４ｇ；６８％であった。

ＡＴＸ−８８：ステップ３

１３５ｍｌのＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解した１７ｇのヘキサデカン−７−オン（１当量
）の溶液に、１．５当量の水素化ホウ素ナトリウムを０℃で添加し、得られた溶液を室温
で１時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（５０ｍｌ）でクエンチした。メタノールを減圧下で
減らした。得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）と水との間で分配した。有機層を
分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×８０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮
して、白色の固体を得た。生成量、１４．５ｇ；収率、８５％。

ＡＴＸ−８８：ステップ４

３５０ｍｌのＴＨＦ中に溶解した５０ｇの４−アミノブタン酸の溶液に、４９０ｍｌの
１ＮＮａＯＨ水溶液を０℃で、続いて漏斗を使用して１４０ｍｌのＢｏｃ無水物を添加
した。得られた溶液を、室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を５％ＨＣｌ（１００ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わ
せた有機層を減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生成量、８０ｇ；収率、８１％。

ＡＴＸ−８８：ステップ５

０℃未満に冷却したＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解した１当量の４−（（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ）ブタン酸の溶液に、１０分間隔で逐次的に、３当量のＥＤＣ
・ＨＣｌ、Ｅｔ_３Ｎ（３当量）、およびＤＭＡＰ（０．１当量）を添加した。この得られ
た溶液に、添加漏斗を使用して、ＤＣＭ中に溶解することによりアルコールを添加し、窒
素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（１００ｍｌ）でクエンチし、有機層を分離した。水層をＤＣＭ（２×
５０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和Ｎａ
ＨＣＯ_３溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進んだ。生成量、１９ｇ（粗製）。

ＡＴＸ−８８：ステップ６

１４０ｍｌのＤＣＭ中に溶解した１９ｇのヘキサデカン−７−イル４−（（ｔｅｒｔ−
ブトキシカルボニル）アミノ）ブタノエート（１当量）の溶液に、０℃で１０当量のＴＦ
Ａを添加し、窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３）を使用
するカラムクロマトグラフィーに供し、アルコールを回収した。生成量、９．４ｇ；収率
、２ステップに対し５０％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−８８：ステップ７

０℃に冷却したＤＣＭ（５００ｍｌ）中に溶解した３０ｇの４−ブロモ酪酸（１当量）
の溶液に、１０分間隔で逐次的に、１．５当量のＥＤＣ・ＨＣｌ、３当量のＥｔ_３Ｎ、お
よび０．１当量のＤＭＡＰを添加した。この得られた溶液に、漏斗を使用して、１００ｍ
ｌのＤＣＭ中に溶解することにより、０．７当量の（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オール
を添加し、窒素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用
するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、２７ｇ；収率、５１％；^１ＨＮＭＲ
によって確認された。

ＡＴＸ−８８：ステップ８

ＡＣＮ（７０ｍｌ）中の６ｇのヘキサデカン−８−イル４−アミノブタノエート（１当
量）、１当量の５（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル４−ブロモブタノエートの溶液に、
１．２当量の炭酸カリウムを添加し、得られたものを窒素雰囲気下、９０℃で３時間還流
した。

ＡＴＸ−８８：ステップ９

反応の進行を、ＴＬＣ（６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（３０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔ
ＯＡｃ（１００ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍｌ）
で洗浄した。合わせた有機層を濃縮し、得られた粗製物をカラムクロマトグラフィーに供
した。

（実施例１０：ＡＴＸ−８３の合成）
図９は、ＡＴＸ−８３（ＲＬ−４７Ｂ）の合成経路を示し、これは以下のようにさらに
記載される。

ＡＴＸ−８３：ステップ１

５００ｍｌの一口丸底フラスコ中に、ＤＣＭ（２００ｍＬ）中に溶解した５０ｇのオク
タン酸（１当量）を入れ、次いで０℃で４４．６ｍｌの塩化オキサリル（１．５当量）を
、添加漏斗を介してゆっくりと添加し、窒素雰囲気下で撹拌し、次いで１ｍｌのＤＭＦ（
触媒）を添加した。得られた反応混合物を、室温で２時間撹拌した。

別の２リットルの二口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（３００ｍｌ）中の６７．４ｇのＮ，
Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２当量）に、添加漏斗を使用して１４４ｍｌの
トリエチルアミン（３当量）を添加し、０℃で撹拌した。この得られた溶液にし、減圧下
で濃縮した後の上述の酸塩化物を、ＤＣＭ（３５０ｍｌ）中に溶解することにより、添加
漏斗を使用して２０分間、窒素雰囲気下で滴下添加した。得られた反応溶液を窒素雰囲気
下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を水（３００ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣ
Ｍ（３×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧
下で濃縮した。

粗化合物を、１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（６０
〜１２０メッシュシリカゲル）に供した。生成量、５５．０ｇ；収率、８４％。

ＡＴＸ−８３：ステップ２

２ｌの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下、０℃で撹拌したエーテル中の５５ｇ
の臭化ヘプチルマグネシウム（１当量）の溶液に、４００ｍｌの乾燥エーテル中に溶解し
た８９．６ｇのＮ−メトキシ−Ｎ−メチルオクタンアミド溶液（１．５当量）を添加し、
得られた反応溶液を室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２５０ｍｌ）でクエンチした。有機層
を分離し、水層をエーテル（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２
ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。

粗化合物を、２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（６０〜
１２０メッシュシリカゲル）に供した。生成量、５０．０ｇ；収率、７５％。

ＡＴＸ−８３：ステップ３

２９０ｍｌのＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解した５０ｇのペンタデカン−８−オン（１当量
）の溶液に、１２．５ｇの水素化ホウ素ナトリウム（１．５当量）を０℃で添加し、得ら
れた溶液を室温で２時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（８０ｍｌ）でクエンチした。溶媒を減
圧下で除去し、得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）との間で
分配した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×８０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有
機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、真空下で乾燥して、白色の固体を
得た。生成量、４６．０ｇ；収率、９０％。

ＡＴＸ−８３：ステップ４

ＴＨＦ中に溶解した５０ｇの４−アミノブタン酸（１当量）の溶液に、１５分間かけて
、添加漏斗を使用して逐次的に、４９０ｍｌの１ＮＮａＯＨ水溶液（１当量）を０℃で
、続いて１４０ｍｌのＢｏｃ無水物（１．３当量）を添加した。得られた溶液を、室温で
４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を５％ＨＣｌ（３５０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍｌ）で洗浄した。合わ
せた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生
成量、７７．０ｇ；収率、７８％。

ＡＴＸ−８３：ステップ５

合成は４バッチで行った。それぞれにおいて、０℃未満に冷却したＤＣＭ（４００ｍｌ
）中の２３ｇの４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタン酸（１当量）の
溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、３２．３ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．５
当量）、４７ｍｌのＥｔ_３Ｎ（３当量）および１．３ｇのＤＭＡＰ（０．１当量）を添加
した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、ＤＣＭ（２００ｍｌ）に溶解すること
により２０ｇのペンタデカン−８−オール（０．７７当量）を添加し、窒素雰囲気下、室
温で２４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．４）によりモニター
した。反応塊を水（２５０ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。この得られた粗製
物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍｌ）で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（２５０ｍｌ）を添加し
た。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、次いで粗製物を用
いて次のステップに進んだ。生成量、１０５ｇ（粗製；必要な化合物およびアルコール）
。

ＡＴＸ−８３：ステップ６

４５０ｍｌのＤＣＭ中に溶解した１０５ｇのペンタデカン−８−イル４−（（ｔｅｒｔ
−ブトキシカルボニル）アミノ）ブタノエート（１当量）の溶液に、０℃で１９４ｍｌの
ＴＦＡ（１０当量）を添加し、窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．３）によりモニター
した。

反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２００ｍｌ）と
共に１０分間、次いでＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ）と共に撹拌した。有機層を分離し、水層
をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥
させ、減圧下で濃縮した。

粗化合物を、４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３および１ｍｌのトリエチルアミンを使用するカ
ラムクロマトグラフィー（シリカゲル６０〜１２０メッシュ）に供した。生成量、２ステ
ップに対し６０．０ｇ；収率、５４％。

ＡＴＸ−８３：ステップ７

反応を２バッチで行い、それぞれにおいて、０℃未満に冷却したＤＣＭ（３００ｍｌ）
中に溶解した２０ｇの６−ブロモヘキサン酸（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で、１０
分間隔で逐次的に、２９．３ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．５当量）、４２．８ｍｌのＥｔ_３
Ｎ（３当量）、および１．２ｇのＤＭＡＰ（０．１当量）を添加した。この得られた溶液
に、添加漏斗を使用して（１００ｍｌのＤＣＭ中に溶解することにより）、１４．５ｇの
（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オール（１当量）を添加し、窒素雰囲気下、室温で２４時
間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を水（２００ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を
飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１５０ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×１５０ｍｌ）で
抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。

粗化合物を、４％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（６０〜
１２０メッシュシリカゲル）に供した。アルコール反応物を回収した。生成量、３６．０
ｇ；収率、５５％。

ＡＴＸ−８３：ステップ８

反応は６バッチで行った。それぞれにおいて、１２０ｍｌのＡＣＮ中の１０ｇのペンタ
デカン−８−イル４−アミノブタノエート（Ｉｎｔ６、１当量）、１０．１ｇの（Ｚ）
−ノナ−２−エン−１−イル６−ブロモヘキサノエート（Ｉｎｔ７、１当量）の溶液に
、６．１ｇの無水炭酸カリウム（１．４当量）を添加し、得られた混合物を窒素雰囲気下
、９０℃で４時間還流した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を濾過し、ＡＣＮ（２×２０ｍｌ）で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。

粗化合物を、２０〜８０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー
（シリカゲル１００〜２００メッシュ）に供した。出発物質を回収した。生成量、３６．
９ｇ；収率、３５％。

ＡＴＸ−８３：ステップ９

反応は３バッチで行った。それぞれにおいて、１００ｍｌの乾燥ＤＣＭ中に溶解した１
０ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル６−（（４−オキソ−４−（ペンタデカン−８
−イルオキシ）ブチル）アミノ）ヘキサノエート（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下、０
℃で、５分間隔で、７．５ｍｌのトリエチルアミン（３当量）および２．６８ｇのトリホ
スゲン（０．５当量）を添加した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温で１時間撹拌し
た。得られた反応塊を減圧下で濃縮し、窒素雰囲気下で維持した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した二口５００ｍｌのＲＢフラスコ中の、乾燥ＴＨＦ（１０
０ｍｌ）中の３ｇの水素化ナトリウム（７当量）の懸濁物に、８．９ｇの２−（ジメチル
アミノ）エタン−１−チオール塩酸塩（３．５当量）を添加し、窒素雰囲気下で５分間撹
拌し続けた。この得られた溶液に、乾燥ＴＨＦ（２００ｍｌ）中に溶解した上述の塩化カ
ルバモイルをシリンジで約１０分間ゆっくりと添加した。得られた溶液を窒素雰囲気下、
室温で一晩撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（１００ｍｌ）でクエンチし、次いでＥ
ｔＯＡｃ（３５０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×８０ｍｌ
）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。

中性アルミナを使用して第１の精製を行った。ヘキサン中に溶解した粗化合物を中性ア
ルミナ（７００ｇをカラムにロードした）の頂部にロードした。化合物を８〜１０％Ｅｔ
ＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。シリカゲル（１００〜２００メッシュ）を使用して第２の
精製を行った。ヘキサン中に溶解した化合物をシリカゲル（５００ｇをカラムにロードし
た）の頂部にロードした。化合物を２０〜２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。最終
化合物（ヘキサンに溶解）を木炭処理（２００ｍｇ／ｇ）に供し、（２０分間撹拌した後
に）セライトベッドを通して濾過し、次いでシリンジエンドメンブレンフィルター（ｓｙ
ｒｉｎｇｅｅｎｄｍｅｍｂｒａｎｅｆｉｌｔｅｒ）（ＰＴＦＥ；０．２ミクロン、
直径２５ｍｍ）に通した。得られた濾液を減圧下で濃縮した。生成量、１５．５ｇ；収率
、４１％。

（実施例１１：ＡＴＸ−８４の合成）
図１０は、ＡＴＸ−８４（ＲＬ−４７Ｃ）の合成経路を示し、これは以下のようにさら
に記載される。

ＡＴＸ−８４：ステップ１

５００ｍｌの一口丸底フラスコ中に、ＤＣＭ（２００ｍＬ）中に溶解した３０ｇのヘプ
タン酸（１当量）を入れ、次いで窒素雰囲気下で撹拌しながら、０℃で２６．７ｇの塩化
オキサリル（１．５当量）をゆっくりと添加し、次いで１ｍｌのＤＭＦ（触媒）を添加し
た。得られた反応混合物を、室温で２時間撹拌した。

別の１ｌの二口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（２５０ｍｌ）中の４０．５ｇのＮ，Ｏ−ジ
メチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２当量）に、添加漏斗を使用して８６．６ｍｌのトリ
メチルアミン（３当量）を添加し、０℃で撹拌した。この得られた溶液に、減圧下で濃縮
した後の上述の酸塩化物を、ＤＣＭ（１００ｍｌ）中に溶解することにより、添加漏斗を
使用して２０分間、窒素雰囲気下で滴下添加した。得られた反応溶液を窒素雰囲気下、室
温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を水（２５０ｍｌ）で希釈した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（３×１０
０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。

粗化合物を、１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用する（６０〜１２０シリカゲル）を使
用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、３８．０ｇ；収率、８４％。

ＡＴＸ−８４：ステップ２

１リットルの二口丸底フラスコ中に入れ、窒素雰囲気下、０℃で撹拌した２５０ｍｌの
乾燥エーテル中の８ｇの臭化ヘキシルマグネシウム（１当量）の溶液に、２５０ｍｌのエ
ーテル中に溶解した２．３ｇのＮ−メトキシ−Ｎ−メチルヘプタンアミド（０．５当量）
を添加し、得られた反応混合物を室温で４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．７）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２００ｍｌ）でクエンチした。有機層を分離し、水
層をエーテル（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥
させ、減圧下で濃縮した。

粗化合物を、２％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用する（６０〜１２０メッシュシリカゲル
）を使用するカラムクロマトグラフィーに供した。生成量、３０．８ｇ；収率、７１％。

ＡＴＸ−８４：ステップ３

２００ｍｌのＭｅＯＨ／ＴＨＦ中に溶解した３０ｇのトリデカン−７−オン（１当量）
の溶液に、８．５ｇの水素化ホウ素ナトリウム（０．５当量）を０℃で添加し、得られた
溶液を室温で２時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（８０ｍｌ）でクエンチした。溶媒を減圧下で除去し
、得られた粗製物をＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）と水（１００ｍｌ）との間で分配した。有
機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×７０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下
で濃縮して、白色の固体を得た。生成量、２７．２ｇ；収率、９０％。

ＡＴＸ−８４：ステップ４

１２０ｍｌのＴＨＦ中に溶解した５ｇの６−アミノヘキサン酸（１当量）の溶液に、１
５分間かけて、添加漏斗を使用して逐次的に、１２５ｍｌの１ＮＮａＯＨ水溶液を０℃
で、続いて３４ｍｌのＢｏｃ無水物（１．３当量）を添加した。得られた溶液を、室温で
４時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応塊を５％ＨＣｌ（１００ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ
）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）で洗浄した。合わ
せた有機層を減圧下で濃縮して、粘着性の液体を得た。生成量、２２．４ｇ；収率、８５
％。

ＡＴＸ−８４：ステップ５

０℃未満に冷却したＤＣＭ（２００ｍｌ）中に溶解した１０ｇの６−（（ｔｅｒｔ−ブ
トキシカルボニル）アミノ）ヘキサン酸（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間
隔で逐次的に、１０．７ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．３当量）、１８ｍｌのＥｔ_３Ｎ（３当
量）、および５２５ｍｇのＤＭＡＰ（０．１当量）を添加した。この得られた溶液に、添
加漏斗を使用して、ＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解することにより６ｇのトリデカン−７−オ
ール（Ｉｎｔ３、０．７当量）を同一の温度で添加し、窒素雰囲気下、室温で２４時間
撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ヘキサン中１０％ＥｔＯＡｃ；Ｒｆ：０．４）によりモニター
した。反応塊を水（１５０ｍｌ）でクエンチし、次いで有機層を分離した。水層をＤＣＭ
（２×７５ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽
和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（２×１００ｍｌ）を添
加して抽出した。有機層を分離し、減圧下で濃縮し、粗製物を用いて次のステップに進ん
だ。生成量、８．５ｇ（粗製；必要な化合物およびアルコール）。

ＡＴＸ−８４：ステップ６

６５ｍｌのＤＣＭ中に溶解した１０ｇのトリデカン−７−イル６−（（ｔｅｒｔ−ブト
キシカルボニル）アミノ）ヘキサノエート（１当量）の溶液に、０℃で１８．５ｍｌのＴ
ＦＡ（１０当量）を添加し、窒素雰囲気下、室温で３時間撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３中１０％ＭｅＯＨ；Ｒｆ：０．３）によりモニター
した。反応塊を減圧下で濃縮した。得られた粗製物を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（１００ｍｌ
）で洗浄し、次いでＥｔＯＡｃ（３×１００ｍｌ）で抽出した。有機層を分離し、減圧下
で濃縮した。

粗化合物を、（６０〜１２０メッシュシリカゲル；４％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３および１
ｍｌのトリエチルアミン）を使用するカラムクロマトグラフィーに供し、アルコール出発
物質を回収した。数量、２ステップに対し４．５ｇ；収率、３３％。

ＡＴＸ−８４：ステップ７

０℃未満に冷却したＤＣＭ（３００ｍｌ）中に溶解した２０ｇの６−ブロモヘキサン酸
（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下で、１０分間隔で逐次的に、２９．３ｇのＥＤＣ・Ｈ
Ｃｌ（１．５当量）、４２．８ｍｌのＥｔ_３Ｎ（３当量）、および１．２ｇのＤＭＡＰ（
０．１当量）を添加した。この得られた溶液に、添加漏斗を使用して、１４．５ｇの（Ｚ
）−ノナ−２−エン−１−オール（１当量）を添加し、１００ｍｌのＤＣＭ中に溶解し、
窒素雰囲気下、室温で２４時間撹拌した。

粗化合物を、４％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（６０〜
１２０メッシュシリカゲル）に供した。アルコール出発物質を回収した。生成量、１８．
０ｇ；収率、５５％。

ＡＴＸ−８４：ステップ８

９０ｍｌのＡＣＮ中の４．５ｇのトリデカン−７−イル６−アミノヘキサノエート（Ｉ
ｎｔ６、１当量）、および４．５ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル６−ブロモヘ
キサノエート（Ｉｎｔ７、１当量）の溶液に、２．７ｇの炭酸カリウム（１．４当量）
を添加し、得られた混合物を窒素雰囲気下、９０℃で４時間還流した。

粗化合物を、２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するカラムクロマトグラフィー（１０
０〜２００メッシュシリカゲル）に供した。出発物質を回収した。生成量、３．０ｇ；収
率、３７％。

ＡＴＸ−８４：ステップ９

３０ｍｌの乾燥ＤＣＭ中に溶解した２．５ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イル６−
（（６−オキソ−６−（トリデカン−７−イルオキシ）ヘキシル）アミノ）ヘキサノエー
ト（１当量）の溶液に、窒素雰囲気下、０℃で、５分間隔で、１．８ｍｌのトリエチルア
ミン（３当量）および６７２ｍｇのトリホスゲン（０．５当量）を添加した。得られた溶
液を、窒素雰囲気下、室温で１時間撹拌した。得られた反応塊を減圧下で濃縮し、窒素雰
囲気下で維持した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した二口２５０ｍｌの丸底フラスコ中の、乾燥ＴＨＦ（５０
ｍｌ）中の７６１ｍｇの水素化ナトリウムの懸濁物に、２．２ｇの２−（ジメチルアミノ
）エタン−１−チオール塩酸塩（３．５当量）を添加し、窒素雰囲気下で５分間撹拌し続
けた。得られた溶液に、ＴＨＦ（６０ｍｌ）中に溶解した上述の塩化カルバモイルをシリ
ンジで約１０分間ゆっくりと添加した。得られた溶液を窒素雰囲気下、室温で一晩撹拌し
た。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５；ＰＭＡ炭化）に
よりモニターした。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（６０ｍｌ）でクエンチし、次いでＥｔ
ＯＡｃ（１３０ｍｌ）を添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（３×４０ｍｌ）
で洗浄した。合わせた有機層を濃縮し、得られた粗製物をカラムクロマトグラフィーに供
した。

シリカゲル（１００〜２００メッシュ）を使用して第１の精製を行った。４．６ｇの粗
化合物を１０．０ｇのシリカゲルに吸着させ、カラムに入れた９０．０ｇのシリカゲルに
注いだ。化合物を５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。ＨＰＬＣグレードの溶媒と共
に中性アルミナを使用して第２の精製を行った。２．０ｇの粗化合物を６．０ｇの中性ア
ルミナに吸着させ、得られたものをカラムに入れた４０．０ｇの中性アルミナに注いだ。
化合物を２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶離した。生成量、１．２ｇ；収率、３８％（３
００ｍｇ混合物）。

（実施例１２：ＡＴＸ−６１の合成）
図１０は、ＡＴＸ−６１（ＲＬ−４２Ｄ）の合成経路を示し、これは以下のようにさら
に記載される。

ＡＴＸ−６１：ステップ１

１２ｇのグリシンエステル（１当量）をＴＨＦ（１００ｍｌ）中に溶解し、０℃未満に
冷却した。この溶液に、添加漏斗を通して、２４．２ｍｌのトリエチルアミン（１．５当
量）および３８．１１ｇのＢｏｃ無水物（１．５当量）を逐次的に添加した。

反応の進行を、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．４を使用するＴＬＣによりモ
ニターした。

１６時間後、反応塊を水でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）を添加した。有機層
を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×４０ｍｌ）で洗浄し、合わせた有機層を硫酸ナトリウ
ムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。

粗生成物を６０〜１２０シリカゲル（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に供した。生成量
、２０．８ｇ；収率、８８％。

ＡＴＸ−６１：ステップ２

ＴＨＦ（１３０ｍｌ）中に溶解した１８．９ｇのＮ−Ｂｏｃグリシンエステル（１当量
）の溶液に、５．８５ｇのＬｉＯＨ（１．５当量）の水溶液を添加し、得られた溶液を室
温で４時間撹拌した。

反応を、ＴＬＣ（６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．３）によりモニターし、Ｓ
Ｍは存在していない。

反応塊を濃縮し、粗製塊を５％ＨＣｌ（ｐＨ３）でクエンチし、次いでＥｔＯＡｃ（４
×８０ｍｌ）で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して、化合物を得た。
生成量、１５ｇ；収率、９２％；Ｍａｓｓにより確認された。

ＡＴＸ−６１：ステップ３

ＤＣＭ（３０ｍｌ）中に溶解し、０℃未満に冷却した５ｇのＮ−Ｂｏｃ−グリシンエス
テル（Ｉｎｔ１、１当量）の溶液に、４．５ｍｌのＥｔ_３Ｎ（１．２当量）および６．
４４ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．２当量）を添加した。この反応溶液に、２０ｍｌのＤＣＭ
中の５．１２ｇのヘプタデン−９−オール（０．７当量）を添加し、室温で一晩撹拌した
。

出発物質はＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．６）により存在しないこ
とが観察された。反応塊を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で希釈し、有機層を分離し、水層をＤＣ
Ｍ（２×３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製物（
６．８ｇ；生成物とアルコールの混合物）を用いて次のステップに進んだ。

ＡＴＸ−６１：ステップ４

４ｇのヘプタデカン−９−イル（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシネート（Ｉｎ
ｔ２、１当量）をＤＣＭ（４０ｍｌ）中に溶解し、０℃に冷却し、７．４ｍｌのＴＦＡ
（１０当量）を添加し、室温で１時間撹拌した。

ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）により反応の完了を２時間で確
認した。

反応塊を減圧下で濃縮し、残留塊を飽和重炭酸ナトリウム溶液（３０ｍｌ）で洗浄し、
ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍｌ）で抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃
縮して、Ｉｎｔ３を得た。

粗生成物を、１〜３％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３および２ｍＬのＥｔ_３Ｎを使用するカラム
クロマトグラフィー（シリカ、６０〜１２０）に供した。生成量、１ｇ；^１Ｈ−ＮＭＲお
よびＭａｓｓによって確認された。

ＡＴＸ−６１：ステップ５

ＤＣＭ（３５ｍｌ）中に溶解し、０℃未満に冷却した４ｇのブロモ酢酸（１当量）の溶
液に、４．７ｍｌのＥｔ_３Ｎ（１．２当量）および３５４ｍｇのＤＭＡＰ（０．１当量）
、続いて１３．２３ｇのＨＡＴＵ（１．２当量）を添加した。この反応溶液に、２０ｍｌ
のＤＣＭ中の２．８８ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オール（０．７当量）を添加し
、室温で一晩撹拌した。

反応を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．７）によりモニターした。

反応塊を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（８０ｍｌ）で希釈し、有機層を分離し、水層をＤＣＭ
（４０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。残留塊をシリカ
ゲル（６０〜１２０）カラムクロマトグラフィー（１．５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によ
り精製した。生成量、４ｇ；収率、５２％。

ＡＴＸ−６１：ステップ６

１ｇのヘプタデカン−９−イルグリシネート（Ｉｎｔ３、１当量）をＴＨＦ（２５ｍ
ｌ）中に溶解し、０．５ｍｌのＴＥＡ（１．３当量）および１．０８ｇの（Ｚ）−ノナ−
２−エン−１−イル２−ブロモアセテート誘導体（Ｉｎｔ４、１．３当量）を添加し、
室温で一晩撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．４）によりモニター
した。反応混合物を水（３０ｍｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ×２）で抽出し、合
わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。

残留塊をカラム（シリカゲル；１００〜２００）クロマトグラフィー（２％ＥｔＯＡｃ
／ヘキサン）により精製した。生成量、７００ｍｇ；収率、４７％；Ｍａｓｓにより確認
された。

ＡＴＸ−６１：ステップ７

１５ｍｌのＤＣＭ中に溶解し、５℃未満に冷却した７００ｍｇのヘプタデカン−９−イ
ル（Ｚ）−（２−（ノナ−２−エン−１−イルオキシ）−２−オキソエチル）グリシネー
ト）（１当量）の溶液に、０．４ｍｌのＥｔ_３Ｎ（３当量）、続いて２０９ｍｇのトリホ
スゲン（０．５当量）を１０分間にわたって小分けして添加した。

反応混合物の進行をＴＬＣによりモニターし、反応を０．５時間完了させ、反応塊を減
圧下で濃縮した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ）およびＤＭＦ（３ｍｌ）中の４
２３ｍｇのＮ，Ｎ−ジメチルエタンチオール塩酸塩（３当量）の溶液に、１４４ｍｇの水
素化ナトリウム（６当量）を添加した。１０分後、この反応塊に、ＴＨＦ（１５ｍｌ）に
溶解することによって上述の溶液を添加した。得られた溶液を、室温で１時間撹拌した。

１時間後、反応の完了をＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３；Ｒｆ：０．５）により
観察した。

反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２０ｍｌ）でクエンチし、水（２０ｍｌ）およびＥｔＯ
Ａｃ（３０ｍｌ）を添加した。水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍｌ）で洗浄し、合わせた有
機層をブライン溶液（２０ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下
で濃縮した。

粗製物を、１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるシリカゲル（１００〜２００）、次い
で１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いる中性アルミナを使用するカラムクロマトグラフィ
ーに供して、純粋な化合物を得た。生成量、５２０ｍｇ；収率、５８％；^１Ｈ−ＮＭＲ、
ＨＰＬＣ、およびＭａｓｓによって確認された。

（実施例１３：ＡＴＸ−６３の合成）
図１２は、ＡＴＸ−６３（ＲＬ−４２Ａ）の合成経路を示し、これは以下のようにさら
に記載される。

ＡＴＸ−６３：ステップ１

ＡＴＸ−６３：ステップ２

反応を、ＴＬＣ（６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．３）によりモニターし、出
発物は反応生成物に存在していなかった。

ＡＴＸ−６３：ステップ３

ＤＣＭ（５０ｍｌ）中に溶解し、０℃未満に冷却した５ｇのＮ−Ｂｏｃ−グリシンエス
テル（Ｉｎｔ１、１当量）の溶液に、４．５ｍｌのＥｔ_３Ｎ（１．２当量）および６．
４ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．２当量）を添加した。この反応溶液に、２０ｍｌのＤＣＭ中
の３．４ｇのウンデカン−６−オール（０．７当量）を添加し、室温で一晩撹拌した。

出発物質はＴＬＣ（１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．６）により存在しないこ
とが観察された。反応塊を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２０ｍｌ）で希釈し、有機層を分離し
、水層をＤＣＭ（２×４０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮し
た。カラム濾過後、粗製物（５．５ｇ；生成物とアルコールの混合物）を用いて次のステ
ップに進んだ。

ＡＴＸ−６３：ステップ４

３．３ｇの粗製ウンデカン−６−イル（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシネート
（Ｉｎｔ２、１当量）をＤＣＭ（２０ｍｌ）中に溶解し、０℃に冷却し、７．６ｍｌの
ＴＦＡ（１０当量）を添加し、室温で１時間撹拌した。

ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ；Ｒｆ：０．５）により反応の完了を２時間で確認し
た。反応塊を減圧下で濃縮し、残留塊を飽和重炭酸ナトリウム溶液（５０ｍｌ）で洗浄し
、ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍｌ）で抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で
濃縮して、Ｉｎｔ３を得た。

粗生成物を、１〜３％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３および２ｍＬのＥｔ_３Ｎを使用するカラム
クロマトグラフィー（シリカ、６０〜１２０）に供した。生成量、１．２ｇ；収率、４０
％；^１Ｈ−ＮＭＲおよびＭａｓｓによって確認された。

ＡＴＸ−６３：ステップ５

ＤＣＭ（３５ｍｌ）中に溶解し、０℃未満に冷却した４ｇのブロモ酢酸（１当量）の溶
液に、４．７ｍｌのＥｔ_３Ｎ（１．２当量）、続いて１３．２３ｇのＨＡＴＵ（１．２当
量）および３５４ｍｇのＤＭＡＰ（０．１当量）を添加した。この反応溶液に、２０ｍＬ
のＤＣＭ中の２．８８ｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−オール（０．７当量）を添加し
、室温で一晩撹拌した。

ＡＴＸ−６３：ステップ６

１．２ｇのウンデカン−６−イルグリシネート（Ｉｎｔ３、１当量）を２５ｍｌのＴ
ＨＦ中に溶解し、０．９ｍｌのＴＥＡ（１．３当量）および１．３７ｇの（Ｚ）−ノナ−
２−エン−１−イル２−ブロモアセテート（Ｉｎｔ４、１当量）を添加し、室温で一晩
撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応混合物を水（３０ｍｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ×２）で抽出し、合
わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。

残留塊をカラム（シリカゲル；１００〜２００）クロマトグラフィー（３％ＥｔＯＡｃ
／ヘキサン）により精製した。生成量、８００ｍｇ；収率、３７％；Ｍａｓｓにより確認
された。

ＡＴＸ−６３：ステップ７

ＤＣＭ中に溶解し、５℃未満に冷却した８００ｍｇの（Ｚ）−ノナ−２−エン−１−イ
ル（２−オキソ−２−（ウンデカン−６−イルオキシ）エチル）グリシネート（１当量）
の溶液に、０．４ｍｌのＥｔ_３Ｎ（３当量）、続いて２０９ｍｇのトリホスゲン（０．５
当量）を１０分間にわたって小分けして添加した。

反応混合物の進行をＴＬＣによりモニターし、反応を１時間完了させ、反応塊を減圧下
で濃縮した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した乾燥ＴＨＦおよびＤＭＦ（それぞれ、１０ｍｌおよび５
ｍｌ）中の４２３ｍｇのＮ，Ｎ−ジメチルエタンチオール塩酸塩（３当量）の溶液に、１
４４ｍｇの水素化ナトリウム（６当量）を添加した。１０分後、この反応塊に、ＴＨＦに
溶解することによって上述の溶液を添加した。得られた溶液を、室温で１時間撹拌した。

１時間後、反応の完了をＴＬＣ（７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．４）により
観察した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２５ｍｌ）でクエンチし、水（２０ｍｌ）およ
びＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）を添加した。水層をＥｔＯＡｃ（２×２０ｍｌ）で洗浄し、合
わせた有機層をブライン溶液（２０ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ
、減圧下で濃縮した。

粗製物を、２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるシリカゲル（１００〜２００）、次い
で５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いる中性アルミナを使用するカラムクロマトグラフィー
に供して、純粋な化合物を得た。生成量、５１０ｍｇ；収率、４８％；^１Ｈ−ＮＭＲ、Ｈ
ＰＬＣ、およびＭａｓｓによって確認された。

（実施例１４：ＡＴＸ−６４の合成）
図１３は、ＡＴＸ−６４（ＲＬ−４２Ｃ）の合成経路を示し、これは以下のようにさら
に記載される。

ＡＴＸ−６４：ステップ１

１２ｇのエチルグリシネート（１当量）をＴＨＦ（１００ｍｌ）中に溶解し、０℃未満
に冷却した。この得られた溶液に、添加漏斗を通して、２４．２ｍｌのトリエチルアミン
（１．５当量）および３８．１１ｇのＢｏｃ無水物（１．５当量）を逐次的に添加した。

粗生成物を６０〜１２０シリカゲル（２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）に供した。生成量
、２０．８；収率、８８％。

ＡＴＸ−６４：ステップ２

反応を、ＴＬＣ（６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．３）によりモニターし、出
発物質は反応生成物に存在していなかった。

ＡＴＸ−６４：ステップ３

ＤＣＭ（５０ｍｌ）中に溶解し、０℃未満に冷却した５ｇのＮ−Ｂｏｃ−グリシンエス
テル（Ｉｎｔ１、１当量）の溶液に、４．５ｍｌのＥｔ_３Ｎ（１．２当量）および６．
４ｇのＥＤＣ・ＨＣｌ（１．２当量）を添加した。この反応溶液に、１５ｍｌのＤＣＭ中
の４．８４ｇのヘキサデカン−１０−オール（０．７当量）を添加し、室温で一晩撹拌し
た。

出発物質はＴＬＣ（１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．６）により存在しないこ
とが観察された。反応塊を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で希釈し、有機層を分離し、水層をＤＣ
Ｍ（２×３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。

カラム濾過後、粗製物（５．５ｇ；生成物とアルコールの混合物）を用いて次のステッ
プに進んだ。

ＡＴＸ−６４：ステップ４

３．８５ｇの粗製ヘプタデカン−９−イル（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシネ
ート（Ｉｎｔ２、１当量）を３０ｍｌのＤＣＭ中に溶解し、０℃に冷却し、７．４ｍｌ
のＴＦＡ（１０当量）を添加し、室温で１時間撹拌した。

ＴＬＣ（１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ；Ｒｆ：０．５）により反応の完了を２時間で確認し
た。

粗生成物を、１〜３％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３および２ｍＬのＥｔ_３Ｎを使用するカラム
クロマトグラフィー（シリカ、６０〜１２０）に供した。生成量、２．２ｇ；^１Ｈ−ＮＭ
ＲおよびＭａｓｓによって確認された。

ＡＴＸ−６４：ステップ５

反応塊を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（８０ｍｌ）で希釈し、有機層を分離し、水層をＤＣＭ
（４０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。

残留塊をシリカゲル（６０〜１２０）カラムクロマトグラフィー（１．５％ＥｔＯＡｃ
／ヘキサン）により精製した。生成量、４ｇ；収率、５２％。

ＡＴＸ−６４：ステップ６

２．１ｇのヘキサデカン−８−イルグリシネート（Ｉｎｔ３、１当量）を５０ｍｌの
ＴＨＦ中に溶解し、１．２ｍｌのＴＥＡ（１．３当量）および２．３９ｇの（Ｚ）−ノナ
−２−エン−１−イル２−ブロモアセテート（Ｉｎｔ４、１．３当量）を添加し、室温
で一晩撹拌した。

反応の進行を、ＴＬＣ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．５）によりモニター
した。反応混合物を水（３０ｍｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×３０ｍｌ）で抽出し、合
わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮した。

残留塊をカラム（シリカゲル；１００〜２００）クロマトグラフィー（３％ＥｔＯＡｃ
／ヘキサン）により精製した。生成量、２．２ｇ；収率、６５％；Ｍａｓｓにより確認さ
れた。

ＡＴＸ−６４：ステップ７

１５ｍｌのＤＣＭ中に溶解し、５℃未満に冷却した２．２ｇのヘプタデカン−９−イル
（Ｚ）−（２−（ノナ−２−エン−１−イルオキシ）−２−オキソエチル）グリシネート
）（１当量）の溶液に、１．６ｍｌのＥｔ_３Ｎ（３当量）、続いて６７８ｍｇのトリホス
ゲン（０．５当量）を１０分間にわたって小分けして添加した。

窒素雰囲気下、０℃で撹拌した乾燥ＴＨＦおよびＤＭＦ（それぞれ、３５ｍｌおよび１
５ｍｌ）中の３．９４ｇのＮ，Ｎ−ジメチルエタンチオール塩酸塩（７当量）の溶液に、
６７２ｍｇの水素化ナトリウム（７当量）を添加した。１０分後、この反応塊に、ＴＨＦ
に溶解することによって上述の溶液を添加した。得られた溶液を、室温で１時間撹拌した
。

１時間後、反応の完了をＴＬＣ（７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；Ｒｆ：０．４）により
観察した。反応塊を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（２５ｍｌ）でクエンチし、水（２０ｍｌ）およ
びＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）を添加した。水層をＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ×２）で洗浄し、合
わせた有機層をブライン溶液（２０ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ
、減圧下で濃縮した。

粗製物を、２５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるシリカゲル（１００〜２００）、次い
で１５〜２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いる中性アルミナを使用するカラムクロマトグ
ラフィーに供して、純粋な化合物を得た。生成量、１．０ｍｇ；収率、４０％；^１Ｈ−Ｎ
ＭＲ、ＨＰＬＣ、およびＭａｓｓによって確認された。

（実施例１５：ｐＫａ値）
脂質を滴定してそれらのｐＫａ値を測定した。結果を以下の表に示す。

（実施例１６：ｉｎｖｉｖｏでのＥＰＯｍＲＮＡ安定性）
異なるカチオン性脂質を含むナノ粒子の注射後に血漿中のｍＲＮＡのレベルを測定し、
比較した。脂質でカプセル化されたマウスｅｐｏｍＲＮＡの注射後のｉｎｖｉｖｏで
の血漿エリスロポエチン（ｅｐｏ）レベルの評価のために、メスのＢａｌｂ／ｃマウス（
６〜８週齢）を使用した。全ての製剤は、５ｍｌ／ｋｇの投薬体積で０．０３および０．
１ｍｇ／ｋｇの用量で尾静脈注射を介して静脈内投与した。製剤注射の６時間後に、２％
イソフルラン下で心臓穿刺を介して最終採血を行った。血液を０．１０９Ｍクエン酸緩衝
液チューブに採取し、５０００ｒｐｍで１０分間の遠心分離により処理した。血清を採取
し、ｅｐｏｍＲＮＡレベルを分析した。結果を図１４に示す。結果は、ＡＴＸ−５７、
ＡＴＸ−８１、ＡＴＸ−８２、ＡＴＸ−８３、ＡＴＸ−８４、ＡＴＸ−８５、ＡＴＸ−８
６、およびＡＴＸ−８７について、ＡＴＸ−２を超える実質的な改善を示す。

（実施例１７：ｉｎｖｉｖｏでのマウス第ＶＩＩ因子サイレンシングおよびＥＰＯ発
現）
リポソームライブラリーの肝臓指向のｉｎｖｉｖｏでのスクリーニングを使用して、
肝実質を構成する細胞である肝細胞における高レベルのｓｉＲＮＡ媒介遺伝子サイレンシ
ングを促進する一連の化合物を試験した。血液凝固因子である第ＶＩＩ因子は、肝臓への
機能的ｓｉＲＮＡ送達をアッセイするための適切な標的遺伝子である。この因子は肝細胞
において特異的に産生されるので、遺伝子サイレンシングは、細網内皮系の細胞（例えば
、クッパー細胞）への送達ではなく、実質への送達の成功を示す。さらに、第ＶＩＩ因子
は血清中で容易に測定することができる分泌タンパク質であり、動物を安楽死させる必要
性を排除する。ｍＲＮＡレベルでのサイレンシングは、タンパク質のレベルを測定するこ
とによって容易に決定することができる。これは、タンパク質の半減期が短い（２〜５時
間）ためである。第ＶＩＩＩ因子を対象とするｓｉＲＮＡを有する組成物を、ＡＴＸ−Ａ
ＴＸ−００２、ＡＴＸ−５７、およびＡＴＸ−５８、ならびに比較例試料のリン酸緩衝生
理食塩水（ＰＢＳ）を用いて製剤化した。メスのＣ５７ＢＬ／６マウス（６〜８週齢）を
、ＦＶＩＩｓｉＲＮＡノックダウン（ＫＤ）実験に使用した。

全ての製剤は、５ｍｇ／ｋｇの投薬体積で０．０３および０．１ｍｇ／ｋｇの用量で尾
静脈注射を介して静脈内投与した。製剤注射の４８時間後に、２％イソフルラン下で心臓
穿刺を介して最終採血を行った。血液を０．１０９Ｍクエン酸緩衝液チューブに採取し、
１２００Ｇで１０分間の遠心分離により処理した。血漿を採取し、第ＶＩＩ因子タンパク
質レベルを発色アッセイ（ＢｉｏｐｈｅｎＦＶＩＩ、ＡｎｉａｒａＣｏｒｐｏｒａｔ
ｉｏｎ）により分析した。ＰＢＳ注射マウスからの試料を使用して標準曲線を構築し、処
置群を未処置のＰＢＳ対照と比較することにより相対的な第ＶＩＩ因子発現を決定した。
結果は、ＡＴＸ−５７およびＡＴＸ−５８が、０．０３と０．１ｍｇ／ｋｇの両方でＡＴ
Ｘ−００２よりも実質的に有効であることを示した（図１５）。

脂質でカプセル化されたマウスｅｐｏｍＲＮＡの送達後のｉｎｖｉｖｏでのｅｐｏ
タンパク質発現の評価のために、メスのＢａｌｂ／ｃマウス（６〜８週齢）を使用した。
全ての製剤は、５ｍＬ／ｋｇの投薬体積で０．０３および０．１ｍｇ／ｋｇの用量で尾静
脈注射を介して静脈内投与した。製剤注射の６時間後に、２％イソフルラン下で心臓穿刺
を介して最終採血を行った。血液を０．１０９Ｍクエン酸緩衝液チューブに採取し、５０
００ｒｐｍで１０分間の遠心分離により処理した。血清を採取し、ｅｐｏタンパク質レベ
ルをｅｐｏＥＬＩＳＡアッセイ（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ）により分析した。ＰＢＳ注
射マウスからの試料を使用して標準曲線を構築し、処置群を未処置のＰＢＳ対照と比較す
ることにより相対的な第ＶＩＩ因子発現を決定した。結果は、ｅｐｏｍＲＮＡが、０．
１ｍｇ／ｍｌで、ＡＴＸ−２よりもＡＴＸ−５７ナノ粒子において実質的に高い量で発現
することを示した（図１６）。

本発明の好ましい実施形態によれば、例えば、以下が提供される。
（項１）
式Ｉ：

の化合物、またはその塩もしくは溶媒和物であって、式中、
Ｒ _１は、１０〜３１個の炭素からなる分岐鎖アルキルであり、
Ｒ _２は、２〜２０個の炭素からなる直鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニルであり
、
Ｒ _３は、１〜６個の炭素からなる直鎖または分岐状のアルキレンであり、
Ｒ _４およびＲ _５は、同一または異なる、それぞれ、水素、または１〜６個の炭素からなる
直鎖もしくは分岐状のアルキルであり、
Ｌ _１およびＬ _２は、同一または異なる、それぞれ、１〜２０個の炭素の直鎖アルキレン、
または２〜２０個の炭素の直鎖アルケニレンであり、
Ｘ _１は、ＳまたはＯである、
化合物、またはその塩もしくは溶媒和物。
（項２）
Ｘ _１が、Ｓからなる、上記項１に記載の化合物。
（項３）
Ｒ _３が、エチレンまたはプロピレンからなる、上記項１に記載の化合物。
（項４）
Ｒ _４およびＲ _５が、別々にメチルまたはエチルである、上記項１に記載の化合物。
（項５）
Ｌ _２が、１、３、または５個の炭素からなるアルケニルである、上記項１に記載の化合
物。
（項６）
Ｌ _１が、１、２、３、または５個の炭素からなるアルケニルである、上記項５に記載の
化合物。
（項７）
Ｒ _２が、アルケニルである、上記項１に記載の化合物。
（項８）
Ｒ _２が、９個の炭素からなるアルケニルである、上記項７に記載の化合物。
（項９）
Ｒ _１が、−ＣＨ（（ＣＨ _２） _ｎＣＨ _３） _２からなり、式中、ｎは４、５、６、または７
である、上記項７に記載の化合物。
（項１０）
ｎが５であり、Ｌ _１が、１または３個の炭素からなるアルケニルである、上記項９に記
載の化合物。
（項１１）
ｎが６であり、Ｌ _１が、３または５個の炭素からなるアルケニルである、上記項９に記
載の化合物。
（項１２）
ｎが７であり、Ｌ _１が、１、２、または３個の炭素からなるアルケニルである、上記項
９に記載の化合物。
（項１３）
ｎが８であり、Ｌ _１が、１または３個の炭素からなるアルケニルである、上記項９に記
載の化合物。
（項１４）
Ｒ _１が、−ＣＨ（（ＣＨ _２） _ｎＣＨ _３）（（ＣＨ _２） _ｎ＋１ＣＨ _３）からなり、式中、
ｎは６または７である、上記項７に記載の化合物。
（項１５）
式ＡＴＸ−４３、ＡＴＸ−５７、ＡＴＸ−５８、ＡＴＸ−６１、ＡＴＸ−６３、ＡＴＸ
−６４、ＡＴＸ−８１、ＡＴＸ−８２、ＡＴＸ−８３、ＡＴＸ−８４、ＡＴＸ−８６、Ａ
ＴＸ−８７、およびＡＴＸ−８８：

の化合物からなる群より選択される、上記項１に記載の化合物。
（項１６）
上記項１に記載の化合物を含む医薬組成物。
（項１７）
脂質ナノ粒子中の上記項１に記載の化合物を含む、上記項１に記載の医薬組成物。
（項１８）
前記脂質ナノ粒子が、中性脂質およびコンジュゲート脂質をさらに含む、上記項１７に
記載の医薬組成物。
（項１９）
前記脂質ナノ粒子が、ｍＲＮＡをカプセル化している、上記項１７に記載の医薬組成物。
（項２０）
生物学的に活性なタンパク質をコードするｍＲＮＡをさらに含む、上記項１７に記載の医薬組成物。
（項２１）
標的細胞中のｍＲＮＡと相同なヌクレオチド配列を含むＲＮＡをさらに含む、上記項１７に記載の医薬組成物。

Claims

明細書に記載の発明。