JP2016533177A - 連続的に細胞を培養する装置および方法 - Google Patents
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Abstract
Description
ここで、図9に示すように、前記細胞11を収得する段階は、脱離した細胞11のうちの一部分を残し、残存した細胞11が反復増殖することができるようにする。
11 細胞
12 培養液
100 培養容器
101 空間
110 密閉通路
120 循環フィルター
121 管路
122 バルブ
123 フィルター
124 クリップ
130 スクレーパー
131 ブレード
132 培養溝
133 中心軸
134 金属体
140 移動部材
141 磁性体
200 培養環境手段
Claims (32)
- 選択的に密閉状態を決定することが可能な空間を持つ培養容器を用意し、
前記空間が密閉された状態で前記空間内への培養液の注入と細胞の接種、脱離および収得を行うことを可能にし、
前記空間が開放された状態で細胞の培養を可能にする、連続的に細胞を培養する装置。 - 細胞の収得過程で全培養細胞のうちの一部分を除いた細胞を収得し、培養容器の内部に残存している細胞の反復培養を可能にすることを特徴とする、請求項1に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 細胞の収得過程で全体培養細胞を収得した後、培養容器への培養液の注入と細胞の接種、培養、脱離および収得を繰り返し行うことができるようにすることを特徴とする、請求項1に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記培養容器には密閉通路を設置することにより、外部から流体、気体および細胞を空間の内部に対して搬入および搬出することを特徴とする、請求項1に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記培養容器は、空間へ細胞培養に必要な気体を循環させることができる循環フィルターを設置することを特徴とする、請求項1に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記空間にはスクレーパーが設置され、前記スクレーパーの移動によって細胞を掻き取って空間の底面から細胞を脱離させるように構成することを特徴とする、請求項1に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記空間にはスクレーパーが設置され、該スクレーパーの回転によって細胞を掻き取って空間の底面から細胞を脱離させるように構成することを特徴とする、請求項1に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記密閉通路は、培養容器の表面に1つ以上設置し、
前記密閉通路は、軟質のブロックでから構成されて空間を密閉し、
注射器の針の刺入時に空間に対して流体、気体および細胞の搬出入を可能にするとともに、針が取り除かれると、密閉通路の弾性により空間が密閉されることを特徴とする、請求項4に記載の連続的に細胞を培養する装置。 - 前記循環フィルターを介して空間の内部へ循環するように出入りする気体は二酸化炭素および酸素の少なくとも1種上を含むことを特徴とする、請求項5に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記循環フィルターは、培養容器の側面に設置される管路、
前記管路の末端に設置されるバルブ、及び
前記バルブの内部に設置されるフィルターから構成することを特徴とする、請求項5に記載の連続的に細胞を培養する装置。 - 前記培養容器は、培養液の温度を0℃〜42℃に維持する培養環境手段に保管され、生体細胞を培養させるようにすることを特徴とする、請求項1に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記培養容器を保管する培養環境手段の内部に陰圧を発生させて前記培養容器の空間のサイズ変化を持つようにして、循環フィルターを介して培養環境手段内の培養容器の空間へ細胞の培養に必要な気体を供給することができるようにすることを特徴とする、請求項5に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記培養容器は一つ以上備えられ、この複数の培養容器は前記循環フィルターを介して連続的に連結されて一体化して気体循環を可能にすることを特徴とする、請求項5に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記スクレーパーは、外部の位置エネルギーによって移動が可能であることを特徴とする、請求項6に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記スクレーパーは、外部の機械的な力によって空間の内部表面に接触しながら回転または移動して細胞を掻き取ることを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記スクレーパーは、磁力によって空間の内部表面に接触しながら回転または移動して細胞を掻き取ることを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記スクレーパーは、空間の底面に接触する下部面が複数のブレードを形成することを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記スクレーパーは、上部に培養溝を形成させることにより、培養液の充填および細胞培養を可能にすることを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記スクレーパーは、ポリエチレン(PE)、ポリプロピレン(PP)、ポリアミド(PA)、ポリアセタール(POM)、ポリ塩化ビニル(PVC)、ポリエステル(PET)、ポリメチルペンテン(PMP)、アイオノマー(IO)、エチレンビニルアルコール(EVOH)、ポリスチレン(PS)、メタクリル樹脂(PMMA)、ポリカーボネート(PC)、ポリ酢酸ビニル(PVAc)、ポリビニルアルコール(PVA)、フェノール樹脂(PF)、尿素樹脂(UF)、メラミン樹脂(MF)、エポキシ樹脂(EP)、ポリウレタン(PUR)、不飽和ポリエステル樹脂(UP)および金属から選ばれた材質であることを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記培養容器の下部外面に移動部材を近接させて移動させると、スクレーパーと移動部材が磁力によって連動することを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 前記スクレーパーは、空間の底面に接触する下部面が複数のブレードを形成し、
前記ブレードは、稜角を持つように形成され、空間の底面との摩擦によって細胞を底面から脱離させることを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。 - 前記スクレーパーは、空間の底面に接触する下部面が複数のブレードを形成し、
前記ブレードは、稜角が連設されるように形成され、空間の底面に対して接触または非接触するようにすることを特徴とする、請求項6または7に記載の連続的に細胞を培養する装置。 - 前記循環フィルターは、管路にクリップを装着して管路の密閉および開放を選択的に行えるようにすることを特徴とする、請求項10に記載の連続的に細胞を培養する装置。
- 密閉された培養容器の内部空間に培養液を注入した後、細胞を接種して細胞を培養する段階と、
前記培養容器の空間で培養された細胞の密度が基準値以上になると、前記付着した細胞を脱離させる段階と、
密閉された状態を維持する培養容器から脱離した細胞を収得する段階とを含んでなる、連続的に細胞を培養する方法。 - 前記細胞を培養する段階は、
前記空間に培養液を注入する段階と、
前記培養液に細胞を接種する段階と、
前記細胞を培養液で増殖させる段階とから構成されることを特徴とする、請求項24に記載の連続的に細胞を培養する方法。 - 前記培養液注入、細胞接種、細胞脱離および細胞収得段階は、密閉容器が常に密閉された状態で行われるようにして、収得後に細胞の安定的かつ反復的培養を可能にすることを特徴とする、請求項24に記載の連続的に細胞を培養する方法。
- 前記細胞を脱離させる段階は、空間の内部に設置されたスクレーパーが機械的エネルギーまたは位置エネルギーによって移動しながら、細胞を掻き取って空間の底部から脱離させることを特徴とする、請求項24に記載の連続的に細胞を培養する方法。
- 前記細胞を脱離させる段階は、空間の内部に設置されたスクレーパーが、培養容器の外部に配置された磁力を持つ手段と連動して空間の内部で移動しながら細胞を空間の底部から脱離させることを特徴とする、請求項24に記載の連続的に細胞を培養する方法。
- 前記細胞を収得する段階は、脱離した細胞のうちの一部分を残し、残存した細胞を培養容器で繰り返し増殖することができるようにすることを特徴とする、請求項24に記載の連続的に細胞を培養する方法。
- 細胞を培養液で増殖させる段階は、細胞を培養液に接種した後、培養環境手段に培養容器を保管して細胞を培養し、
前記培養環境手段は、0℃〜−42℃の培養温度を有し、細胞培養に必要な気体を培養容器へ供給することができるようにして最適の培養環境を持たせることを特徴とする、請求項25に記載の連続的に細胞を培養する方法。 - 前記細胞を培養液で増殖させる段階は、
前記密閉容器の空間を密閉状態から開放状態に転換して前記培養環境手段に密閉容器を保管し、
前記培養環境手段の内部に供給される気体と陰圧によって培養容器の内部に対して気体が繰り返し出入りすることを特徴とする、請求項25に記載の連続的に細胞を培養する方法。 - 前記密閉容器は、外部に対して選択的に開閉されるようにし、
前記培養環境手段からの培養容器の搬出の際に、密閉容器の空間が外部と密閉された後で搬出および輸送されるようにすることを特徴とする、請求項24に記載の連続的に細胞を培養する方法。
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