KR20210109264A - 세포를 배양하는 장치 및 방법 - Google Patents

세포를 배양하는 장치 및 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20210109264A
KR20210109264A KR1020200024322A KR20200024322A KR20210109264A KR 20210109264 A KR20210109264 A KR 20210109264A KR 1020200024322 A KR1020200024322 A KR 1020200024322A KR 20200024322 A KR20200024322 A KR 20200024322A KR 20210109264 A KR20210109264 A KR 20210109264A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
cells
space
culturing cells
culture
fluid
Prior art date
Application number
KR1020200024322A
Other languages
English (en)
Inventor
이희영
Original Assignee
메디칸(주)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 메디칸(주) filed Critical 메디칸(주)
Priority to KR1020200024322A priority Critical patent/KR20210109264A/ko
Publication of KR20210109264A publication Critical patent/KR20210109264A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/18—External loop; Means for reintroduction of fermented biomass or liquid percolate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
    • C12M25/06—Plates; Walls; Drawers; Multilayer plates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M29/00—Means for introduction, extraction or recirculation of materials, e.g. pumps
    • C12M29/04—Filters; Permeable or porous membranes or plates, e.g. dialysis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M39/00—Means for cleaning the apparatus or avoiding unwanted deposits of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • C12M41/14—Incubators; Climatic chambers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/44—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of volume or liquid level

Abstract

본 발명의 세포를 배양하는 장치 및 방법은 배양액, 세포, 이산화탄소가 포함된 공기가 충진된 공간에 배양액 주입, 세포 접종, 기계적 탈리 및 수득이 가능하도록 하는 배양용기로 이루어진 세포 배양 장치에 있어서, 상기 배양용기의 표면에 설치되어 공간이 밀폐된 상태에서도 유체, 기체 및 세포를 공간 내부로 반입 및 반출하는 하나 이상의 유체통로를 포함한다.

Description

세포를 배양하는 장치 및 방법{Apparatus and Method for cell culture}
본 발명은 세포를 배양하는 장치 및 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 살아있는 세포가 들어있는 세포 배양용기 내에 배양액과 고농도 이산화 탄소를 수월하게 강제 주입하거나 제거하고 밀폐할 수 있도록 구성하고 필요에 따라 이산화 탄소의 용해도를 조절하여 pH를 맞추는 세포를 배양하는 장치 및 방법에 관한 것이다.
세포배양에는 세포가 배양기에 부착하여 증식하는 단층배양(부착배양)과 세포가 부유 상태로 증식하는 현탁배양이 있다.
대부분의 동물세포는 표면에 부착하여 생장하며 생장속도가 미생물에 비하여 매우 느리기 때문에 생산성이 낮고 배양 도중 미생물에 의해 오염되기 쉽다.
또한, 세포 평면 부착 배양에서 기존의 방법들은 밀폐성 유지가 힘들고 따라서 일정기간의 세포 수득 과정 후에는 오염되기가 쉬운 문제점을 가지고 있다. 뿐만 아니라 배양 세포를 실험실 외부로 이동시킬경우 별개의 밀폐 수단을 구비해야 하며, 아직까지 완전 밀폐가 성공적인 경우가 없고 용기를 옮길 경우 또 한번의 계대(passage)가 되므로 배양세포의 균일성을 유지하기 어렵다.
기존의 부착 세포 배양 방식에서는 대부분 세포가 들어있는 배양 용기를 밀폐하지 않고 고농도 이산화탄소가 채워진 밀폐 배양기 내부에 방치하여 자연 대류에 의해 이산화탄소를 공급한다.
이로 인해 밀폐가 안된 상태에서 배양 용기를 옮기다 보면 약간의 출렁임만으로도 넘쳐 나오거나 필터와 접촉하여 오염될 가능성이 있다. 또한, 고농도 이산화탄소는 가스 탱크에 보관하였다 배양기에 연결하는데 배양기 문을 여닫을 때마다 밖으로 새어나오므로 이산화탄소 사용량이 증가하게 되고 수시로 탱크를 교체해야 하는 어려움이 있다.
대한민국 공개특허 제10-2009-0050060호(2009년05월19일) 대한민국 등록특허 제10-1292265호(2012년10월24일)
상기의 문제점을 해소하기 위한 본 발명의 세포를 배양하는 장치는 밀폐 가능한 구조가 되어야 하고 공기와 액체가 수월하게 교환될 수 있는 출입구를 구비하도록 하고 밀폐된 상태에서 내부에 부착된 세포를 수거할 수 있는 수단을 공급하도록 하는 데 있다.
아울러, 본 발명의 목적은 유체 교체시에는 정밀하게 조절되는 용량 제어 수단과 밀폐기능 및 필터 기능 등을 활용하도록 하는 데 있다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 세포를 배양하는 장치는 배양액, 세포, 이산화탄소가 포함된 공기가 충진된 공간에 배양액 주입, 세포 접종, 기계적 탈리 및 수득이 가능하도록 하는 배양용기로 이루어진 세포 배양 장치에 있어서, 상기 배양용기의 표면에 설치되어 공간이 밀폐된 상태에서도 유체, 기체 및 세포를 공간 내부로 반입 및 반출하는 하나 이상의 유체통로를 포함하는 것을 그 기술적 구성상의 기본 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 유체통로는, 유체를 밀폐 상태에서 주입할 수 있도록, 바늘 관통 고무 포트, 테이퍼 맞춤형 주사기 포트, 오링밀페형 포트로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 유체통로는, 밀폐마개, 필터, 체크밸브로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 공간에는 스크레퍼가 설치되어 상기 스크레퍼의 이동에 의해 세포를 긁어 공간 바닥면에서 세포를 탈리시키도록 구성한 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 스크레퍼는 외부의 위치에너지에 의해 이동이 가능한 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 스크레퍼는 자력을 통해 공간의 내부 표면을 접촉하면서 회전 또는 이동하여 세포를 긁어내는 것으로, 배양용기에 닿는 모서리가 예각을 갖는 다수의 플라스틱 칩들인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 배양용기의 외주면에 설치되어 공간 내부를 관찰할 수 있는 렌즈, 투명한 평면, 광섬유로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 공간 내부와 외부가 통전될 수 있도록 절연소재로 둘러싸이고 전기 전도성 소재로 이루어진 전극이 복수개 구비되고 Ph측정장치에 연결된 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 유체통로와 연결되어 유체를 공급하는 공급부를 더 포함한다.
본 발명에 따르면, 상기 공급부는, 이산화탄소 캔, 봄베, 주사기로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 상기 유체통로와 연통되게 압력계를 설치하여 공간의 압력을 측정하고 상기 공간의 압력이 높아지면 유체의 공급을 차단하는 유체차단밸브가 공급부에 설치된 것을 포함한다.
본 발명에 따르면, 상기 유체통로와 연결되어 유체를 배출하는 정량토출밸브를 더 포함한다.
본 발명에 따르면, 상기 배양용기 외주면을 감싸는 외피를 더 포함한다.
본 발명에 따르면, 상기 배양용기는 배양액의 온도를 0℃ 내지 42℃로 유지하는 배양환경수단에 보관되어 생체 세포를 배양시키도록 하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 내부에 세포가 부착하는 면을 갖는 세포 배양용기에 1% 내지 1.6% 고농도 이산화 탄소를 포함한 공기를 주입하거나 공간의 압력을 110kP 내지 150kP의 압력으로 유지하고 유체 출입구를 밀폐하는 방법을 활용하여 세포 배양액의 이산화탄소 용해도를 높이는 방법으로 배양액의 pH를 조절하는 방법이 포함된 것을 그 기술적 기본 특징으로 한다.
본 발명에 따르면, 배양액의 pH가 7.0 내지 8.0으로 공간의 배양액 내 이산화탄소 용해량을 늘리도록 하는 것을 특징으로 한다.
상기의 문제점을 해소하기 위한 본 발명의 세포를 배양하는 장치 및 이를 이용한 배양 방법은 밀폐 가능한 구조가 되어야 하고 공기와 액체가 수월하게 교환될 수 있는 출입구를 구비하도록 하고 밀폐된 상태에서 내부에 부착된 세포를 수거할 수 있는 수단을 공급하여, 세포 배양기의 크기와 무게, 기능이 확연히 줄어 온도 제어기능만 하면 되고, 청정 공간이 아니어도 세포 배양에 무리가 없으며, 밀폐 된 상태이므로 배양 용기 단위로 이송이나 휴대가 가능하며 고압 고농도 이산화탄소를 공급할 수 있음에 따라 기존의 배양기 내부와 유사한 환경을 조성할 수 있게 된다. 결국, 세포 배양의 비용이 낮아지고 가정용 또는 휴대용 배양 방법의 구현이 가능해지는 효과가 있다.
아울러, 본 발명의 세포를 배양하는 장치 및 이를 이용한 배양 방법은 유체 교체시에는 정밀하게 조절되는 용량 제어 수단과 밀폐기능 및 필터 기능 등을 활용하도록 하여, 오염을 방지하는 효과를 갖는다.
도 1은 본 발명의 세포를 배양하는 장치를 나타낸 종단면도.
도 2와 도 3은 본 발명의 세포를 배양하는 장치를 이용하여 세포를 배양하는 상태를 나타낸 종단면도.
도 4와 도 5는 본 발명의 세포를 배양하는 장치의 다른 실시예를 나타낸 종단면도.
도 6과 도 7은 본 발명의 세포를 배양하는 장치의 또 다른 실시예를 나타낸 종단면도.
도 8은 본 발명의 세포를 배양하는 장치를 보관하는 배양환경수단을 나타낸 사시도.
이하, 본 발명에 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 일실시예를 상세히 설명하기로 한다.
우선, 도면들 중, 동일한 구성요소 또는 부품들은 가능한 동일한 참조부호로 나타내고 있음에 유의하여야 한다. 본 발명을 설명함에 있어, 관련된 공지기능 혹은 구성에 대한 구체적인 설명은 본 발명의 요지를 모호하지 않기 위하여 생략한다.
도 1은 본 발명의 세포를 배양하는 장치를 나타낸 종단면도이고, 도 2와 도 3은 본 발명의 세포를 배양하는 장치를 이용하여 세포를 배양하는 상태를 나타낸 종단면도이며, 도 4와 도 5는 본 발명의 세포를 배양하는 장치의 다른 실시예를 나타낸 종단면도이고, 도 6과 도 7은 본 발명의 세포를 배양하는 장치의 또 다른 실시예를 나타낸 종단면도이며, 도 8은 본 발명의 세포를 배양하는 장치를 보관하는 배양환경수단을 나타낸 사시도이다.
먼저, 도 1 내지 도 3에서 도시한 바와 같이, 본 발명의 세포를 배양하는 장치는 다각형 또는 원형으로 형성된 배양용기 100가 마련된다.
상기 배양용기 100는 내부가 밀폐된 공간 101이 형성된다.
상기 배양용기 100는 연질의 플라스틱 재질로 이루어져, 외부의 압력 또는 힘에에 의해 공간 101의 크기가 가변 될 수 있다.
상기 배양용기 100는 선택적으로 밀폐상태를 결정할 수 있는 공간을 갖는 배양용기 100를 마련하되, 상기 공간 101이 밀폐된 상태에서 상기 공간 101 내부로 배양액 주입, 세포 접종, 기계적 탈리 및 수득이 가능하도록 하고, 상기 공간이 개방된 상태에서 세포의 배양을 가능하도록 한다.
또한, 세포 11의 수득 과정에서 전체 배양 세포 11 중 일부분을 제외하고 세포 11를 수득하여 배양용기 100 내부에 잔존되어 있는 세포 11의 반복 배양을 가능하도록 한다.
아울러, 세포 11의 수득 과정에서 전체 배양 세포를 수득한 다음 배양용기 100에 배양액 주입, 세포 접종, 배양, 기계적 탈리 및 수득의 반복적으로 행할 수 있도록 한다.
상기 배양용기 100에는 상기와 같은 세포 11의 연속적인 배양을 가능하도록 유체통로 110가 장착된다.
먼저, 유체통로 110는 배양용기 100에 설치되어 공간 101으로 배양액 12의 주입, 배양액 12에 세포 11 접종, 세포 11의 수득 과정을 가능하도록 하고, 상기와 같은 과정의 진행 상황에서도 밀폐용기는 밀폐된 상태가 유지된다.
즉, 상기 유체통로 110는 상기 배양용기 100의 상부면에 설치하여 외부에서 유체, 기체 및 세포 11를 공간 101 내부로 반입 및 반출할 수 있도록 한다.
이때, 유체는 세포 배양액, 1% 이상의 이산화탄소가 포함된 공기, 15%이상의 산소가 포함된 공기 중 하나 이상이다.
여기서, 상기 유체통로 110는 유체를 밀폐 상태에서 주입할 수 있도록, 바늘 관통 고무 포트, 테이퍼 맞춤형 주사기 포트, 오링밀페형 포트로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있다.
이때, 상기 유체통로 110를 통한 배양액 12과 세포 11의 주입 및 외부로 세포 11의 수득과정은 통상적으로 주사기를 이용한다.
또한, 상기 유체통로 110는 밀폐마개, 필터, 체크밸브로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있다.
다시 말해, 주사기의 바늘을 통해 유체통로 110를 관통되게 침투시킨 다음 주사기 내부 충진된 배양액 12을 공간 101으로 주입하거나, 상기 배양용기 100 내부에 배양 후 탈리 된 세포 11를 주사기 음압을 이용하여 주사기로 빨아들여 외부로 수득 가능하게 한다.
그리고, 배양액 12의 주입 또는 세포 11의 수득 후 유체통로 110에서 바늘을 빼내면 유체통로 110의 탄성에 의해 유체통로 110 자체가 밀폐되어 공간 101의 밀폐성을 유지시킬 수 있다.
그리고, 상기 배양용기 100의 공간 101의 바닥면에 배양된 세포 11는 부착력에 의해 쉽게 탈리되지 않기 때문에 세포 11의 탈리를 위한 별도의 도구인 스크레퍼 120를 공간 101 내부에 설치한다.
즉, 상기 스크레퍼 120는 기계적인 외력 또는 자력 또는 위치에너지 등을 통해 공간 101 내부에서 회전 또는 이동하면서 세포 11를 긁어 공간 101 바닥면에서 세포 11를 탈리시키도록 한다.
특히, 상기 스크레이퍼 120는 도 6과 도7에 도시한 바와 같이, 배양용기 100에 닿는 모서리가 예각을 갖는 다수의 플라스틱 칩 125일 수 있다.
이때, 스크레이퍼 120는 자체 하중을 이용하기 위한 SG 3 이상의 고비중 물질을 포함한다.
또한, 자력을 통한 세포 11 탈리 방법은 아래와 같다.
별도로 마련된 이동부재 130를 상기 배양용기 100 외부 하부면에 근접시키되, 상기 스크레퍼 120와 자력으로 연결되도록 하여 이동부재 130의 이동에 의해 스크레퍼 120를 공간 101 내부에서 연동시켜 스크레퍼 120가 마찰되면서 세포 11를 긁어내어 탈리시킨다.
즉, 스크레퍼 120와 이동부재 130에는 각각 금속체 124 또는 자성체 131를 설치하여 자력에 의해 상호 일체로 연동될 수 있다.
그리고, 위치 에너지를 이용한 세포 11 탈리 방법은 배양용기 100를 경사지게 위치시켜 자중을 갖는 스크레퍼 120가 공간 101 바닥면에서 미끄러지면서 세포 11를 긁어내어 탈리시킨다.
이와 같이 구성된 스크레퍼 120는 상부에 배양홈 122을 형성시켜 배양액 12 충진 및 세포 11 배양을 가능하도록 한다.
즉, 본 발명의 연속으로 세포 11를 배양하는 장치는 공간 101에 배양액 12을 주입하거나, 공간 101 및 스크레퍼 120의 배양홈 122에 주입하여 배양액 12에 세포 11의 접종을 진행한다.
그리고, 상기 스크레퍼 120는 공간 101의 바닥면과 접촉되는 하부면이 복수의 블레이드 121를 형성한다.
여기서, 상기 스크레퍼 120는 공간 101의 바닥면과 접촉되는 하부면이 복수의 블레이드 121를 형성하되, 상기 블레이드 121는 모서리각을 갖도록 형성되어 공간 101의 바닥면과 마찰에 의해 세포 11를 바닥면에서 탈리시키도록 한다.
또는, 상기 스크레퍼 120는 공간 101의 바닥면과 접촉되는 하부면이 복수의 블레이드 121를 형성하되, 상기 블레이드 121는 모서리각이 연속으로 형성되도록 형성되어 공간 101의 바닥면과 접촉 또는 비접촉되도록 한다.
또한, 상기 스크레이퍼는 폴리에틸렌(PE), 폴리프로필렌(PP), 폴리아미드(PA), 폴리아세텔(POM), 폴리염화비닐(PVC), 폴리에스테르(PET), 폴리메틸펜텐(PMP), 아이오노머(IO), 에틸렌비닐알코올(EVOH), 폴리염화비닐(PVA), 폴리스틸렌(PS), 메타크릴수지(PMMA), 폴리카보네이트(PC), 초산비닐아세테이트(PVAc), 폴리비닐알코올(PVA), 페놀수지(PF), 우레아수지(UF), 멜라민수지(MF), 에폭시수지(EP), 폴리우레탄(PUR), 불포화폴리에스테르수지(UP) 및 금속에서 선택된 재질을 적용한다.
한편, 도 4에 도시한 바와 같이, 배양용기 100의 외주면에 설치되어 공간 101 내부를 관찰할 수 있는 렌즈 140, 투명한 평면, 광섬유 150로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있다.
나아가, 공간 101 내부와 외부가 통전될 수 있도록 절연소재(미부호)로 둘러싸이고 전기 전도성 소재로 이루어진 전극이 복수개 구비되고 Ph측정장치 151에 연결된다.
아울러, 유체통로 110와 연결되어 유체를 공급하는 공급부 160를 더 포함한다. 이러한, 공급부 160는 이산화탄소 캔, 봄베, 주사기로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있다.
더불어, 유체통로 110와 연통되게 압력계 165를 설치하여 공간 101의 압력을 측정하고 상기 공간 101의 압력이 높아지면 유체의 공급을 차단하는 유체차단밸브 161가 공급부 160에 설치된다.
특히, 유체통로 110와 연결되어 유체를 배출하는 정량토출밸브 163를 더 포함한다. 아울러, 배양용기 100 외주면을 감싸는 외피 170를 더 포함하여 배양용기 100의 압력이 상승하여도 배양용기 100의 변형을 방지한다. 여기서, 배양용기 100 내부의 압력은 110kP 내지 150kP이 바람직하다. 특히, 이산화탄소 13가 공간 101에 가득 차있는 상태이다.
아울러, 도 8에 도시한 바와 같이 배양용기 100는 배양액의 온도를 0℃ 내지 42℃로 유지하는 배양환경수단 200에 보관되어 생체 세포를 배양시키도록 한다.
상기와 같이 구성된 배양장치를 통한 세포를 배양하는 방법은 아래와 같다.
내부에 세포가 부착하는 면을 갖는 세포 배양용기에 1% 내지 1.6% 고농도 이산화 탄소를 포함한 공기를 주입하거나 공간의 압력을 110kP 내지 150kP의 압력으로 유지하고 유체 출입구를 밀폐하는 방법을 활용하여 세포 배양액의 이산화탄소 용해도를 높이는 방법으로 배양액의 pH를 조절한다.
더불어, 배양액의 pH가 7.0 내지 8.0으로 공간의 배양액 내 이산화탄소 용해량을 늘리도록 한다.
이상에서 설명한 본 발명은 전술한 실시예 및 첨부된 도면에 의해 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 여러 가지 치환, 변형 및 변경이 가능함은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 명백할 것이다.
* 도면의 주요부분에 대한 부호의 설명 *
10 : 배양장치 11 : 세포
12 : 배양액
100 : 배양용기 101 : 공간
110 : 유체통로
120 : 스크레퍼 121 : 블레이드
122 : 배양홈 124 : 금속체
125 : 칩
130 : 이동부재 131 : 자성체
140 : 렌즈 150 : 광섬유
151 : ph센서 160 : 공급부
161 : 유체차단밸브 163 : 정량토출밸브
165 : 압력계 170 : 외피
200 : 배양환경수단

Claims (16)

  1. 배양액, 세포, 이산화탄소가 포함된 공기가 충진된 공간에 배양액 주입, 세포 접종, 기계적 탈리 및 수득이 가능하도록 하는 배양용기로 이루어진 세포 배양 장치에 있어서,
    상기 배양용기의 표면에 설치되어 공간이 밀폐된 상태에서도 유체, 기체 및 세포를 공간 내부로 반입 및 반출하는 하나 이상의 유체통로를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 유체통로는,
    유체를 밀폐 상태에서 주입할 수 있도록, 바늘 관통 고무 포트, 테이퍼 맞춤형 주사기 포트, 오링밀페형 포트로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 유체통로는,
    밀폐마개, 필터, 체크밸브로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 공간에는 스크레퍼가 설치되어 상기 스크레퍼의 이동에 의해 세포를 긁어 공간 바닥면에서 세포를 탈리시키도록 구성한 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 스크레퍼는 외부의 위치에너지에 의해 이동이 가능한 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 스크레퍼는 자력을 통해 공간의 내부 표면을 접촉하면서 회전 또는 이동하여 세포를 긁어내는 것으로, 배양용기에 닿는 모서리가 예각을 갖는 다수의 플라스틱 칩들인 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 배양용기의 외주면에 설치되어 공간 내부를 관찰할 수 있는 렌즈, 투명한 평면, 광섬유로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 공간 내부와 외부가 통전될 수 있도록 절연소재로 둘러싸이고 전기 전도성 소재로 이루어진 전극이 복수개 구비되고 Ph측정장치에 연결된 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 유체통로와 연결되어 유체를 공급하는 공급부를 더 포함하는 세포를 배양하는 장치.
  10. 제9항에 있어서,
    상기 공급부는,
    이산화탄소 캔, 봄베, 주사기로 이루어진 군에서 하나 이상을 선택적으로 적용할 수 있는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  11. 제9항에 있어서,
    상기 유체통로와 연통되게 압력계를 설치하여 공간의 압력을 측정하고 상기 공간의 압력이 높아지면 유체의 공급을 차단하는 유체차단밸브가 공급부에 설치된 것을 포함하는 세포를 배양하는 장치.
  12. 제1항에 있어서,
    상기 유체통로와 연결되어 유체를 배출하는 정량토출밸브를 더 포함하는 세포를 배양하는 장치.
  13. 제1항에 있어서,
    상기 배양용기 외주면을 감싸는 외피를 더 포함하는 세포를 배양하는 장치.
  14. 제1항에 있어서,
    상기 배양용기는 배양액의 온도를 0℃ 내지 42℃로 유지하는 배양환경수단에 보관되어 생체 세포를 배양시키도록 하는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 장치.
  15. 내부에 세포가 부착하는 면을 갖는 세포 배양용기에 1% 내지 1.6% 고농도 이산화 탄소를 포함한 공기를 주입하거나 공간의 압력을 110kP 내지 150kP의 압력으로 유지하고 유체 출입구를 밀폐하는 방법을 활용하여 세포 배양액의 이산화탄소 용해도를 높이는 방법으로 배양액의 pH를 조절하는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 방법.
  16. 제15항에 있어서,
    배양액의 pH가 7.0 내지 8.0으로 공간의 배양액 내 이산화탄소 용해량을 늘리도록 하는 것을 특징으로 하는 세포를 배양하는 방법.
KR1020200024322A 2020-02-27 2020-02-27 세포를 배양하는 장치 및 방법 KR20210109264A (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200024322A KR20210109264A (ko) 2020-02-27 2020-02-27 세포를 배양하는 장치 및 방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200024322A KR20210109264A (ko) 2020-02-27 2020-02-27 세포를 배양하는 장치 및 방법

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20210109264A true KR20210109264A (ko) 2021-09-06

Family

ID=77782534

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200024322A KR20210109264A (ko) 2020-02-27 2020-02-27 세포를 배양하는 장치 및 방법

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20210109264A (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090050060A (ko) 2006-07-28 2009-05-19 에우데스 프랑수아 마리 데 크레시 연속방식으로 배양균을 생성하는 이동 용기를 가진 연속 배양장치
KR101292265B1 (ko) 2011-04-15 2013-08-01 메디칸(주) 세포 배양 및 탈리 장치 및 방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090050060A (ko) 2006-07-28 2009-05-19 에우데스 프랑수아 마리 데 크레시 연속방식으로 배양균을 생성하는 이동 용기를 가진 연속 배양장치
KR101292265B1 (ko) 2011-04-15 2013-08-01 메디칸(주) 세포 배양 및 탈리 장치 및 방법

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101731590B1 (ko) 연속으로 세포를 배양하는 장치 및 방법
JP5892216B1 (ja) 細胞培養システムにおける送液方法、及び細胞培養システム
EP3739037A1 (en) Cell culturing method and device
CN104185677A (zh) 用于无菌性测试的盒
EP3072953B1 (en) Cell culture package and package containing cell culture material
US10704017B2 (en) Cell culture carrier module and cell culture system
US20160304823A1 (en) Device and system for cell culture
JP2006204263A (ja) 培養容器および培養方法
KR20170020739A (ko) 배양 용기
JP2011010599A (ja) 細胞培養容器
JP2015188391A (ja) 細胞培養方法、及び細胞培養システム
JP5114378B2 (ja) 自動培養装置、封止容器、スライド弁及びディスポーザブル容器
KR20210109264A (ko) 세포를 배양하는 장치 및 방법
CN102459560A (zh) 可消耗组分试剂盒
JP2016007170A (ja) 細胞培養容器
KR200490369Y1 (ko) 이동의 생존력을 유지하는 연속 세포 배양장치
CN210022193U (zh) 一种生物实验用恒温箱
JPWO2020017067A1 (ja) 灌流培養用アタッチメント
KR102427457B1 (ko) 연속 세포 배양 증식장치 및 방법
CN213357612U (zh) 一种培养稳定且不易泄漏的干细胞培养皿
CN220183298U (zh) 一种磁吸式细胞爬片培养及染色装置
CN215799514U (zh) 生物样本保存装置及病毒采样管
JP2019062855A (ja) 無電源定温細胞移送装置
JP2016077186A (ja) 培養容器及びその下部容器
CN109588407B (zh) 无电源恒温细胞移送装置