JP2016077186A

JP2016077186A - 培養容器及びその下部容器

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Publication number: JP2016077186A
Application number: JP2014209851A
Authority: JP
Inventors: 太郎長井; Taro Nagai
Original assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Current assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Priority date: 2014-10-14
Filing date: 2014-10-14
Publication date: 2016-05-16

Abstract

【課題】培養液を収容する収容部を有する下部容器と、該下部容器の前記収容部に収容される上部容器とを有する培養容器において、細胞や組織の培養面積を減少させることなく、ピペット操作を容易にしてコンタミネーションのリスクを低減する。【解決手段】培養容器１００は、上部容器２０の底部に、培養液Ｌに浸漬される透過性の膜２２が設けられ、下部容器１０は、液体を吸引又は補充するピペットＰを挿入可能なピペット挿入路１３を有し、ピペット挿入路１３は、収容部１１の底部に連通するとともに収容部１１の外側に開口するピペット挿入口１４を有する。【選択図】図３

Description

本発明は、細胞又は組織を培養するために用いられる培養容器及びその下部容器に関する。

従来から細胞又は組織の培養物を生体外で成長させるための細胞培養挿入体を備えた培養容器が知られている（例えば、下記特許文献１を参照）。特許文献１に記載された細胞培養挿入体は、特定の大きさのウェルを持つ複数ウェル組織培養容器で使用できるような大きさにされ、底端に透過性の膜が取り付けられている。この細胞培養挿入体は、その上端に連結されたフランジによって栄養物を収容したウェルの頂部上に支持され、組織の試料を付着させた透過性の膜を通して栄養物の濃度勾配を生じさせる。

特許文献１に記載された細胞培養挿入体のウェル内での細胞培養挿入体の移動の制限は、ウェルと挿入体との間の空間での毛管作用を無くすように、挿入体の外壁面から延びる突出部によって行われる。また、組織培養容器のウェル内の細胞培養挿入体の部分の外側寸法は、流体を満たすため又は流体を吸い出すためピペット又は同様の装置を細胞培養容器と細胞培養挿入体との間に位置決めできるように、ウェル内側寸法よりも十分に小さくされている。

特許文献１では、この組織培養容器と細胞培養挿入体との間の空間によって、ピペットは容器の底に達することができ、膜の下方及び細胞培養挿入体の側壁の外面の周りから膜の上部を汚すことなく培地を取り出すことができ、又、培地を導入することができる、としている。

特開平６−１８９７４２号公報

特許文献１に記載された培養容器を用いてウェル内の培地のピペット操作を行う際には、ウェルの内側の壁面と細胞培養挿入体の側壁の外面との間の狭い隙間にピペットを挿入する必要がある。しかし、隙間の大きさとピペットの寸法との関係によっては、ピペットの先端を滞りなく挿入することが困難になる場合がある。そのため、特許文献１に記載された培養容器では、ピペット操作を行う際に、ピペットの先端がウェルの外側で組織培養容器に接触したり、ウェルから細胞培養挿入体を取り外すことが必要になったりする場合がある。このような場合、ウェル内や細胞培養挿入体内の培地等に対するコンタミネーションのリスクが高くなる。

また、特許文献１に記載された組織培養容器では、ウェルの内径に対して細胞培養挿入体の外径を小さくすると、組織培養容器と細胞培養挿入体との間の空間が広くなってピペットを挿入しやすくなることが考えられる。しかし、この場合には、細胞培養挿入体の底端の面積が減少し、細胞や組織の培養面積が減少する。

本発明は、前記課題に鑑みてなされたものであり、培養液を収容する収容部を有する下部容器と、該下部容器の前記収容部に収容される上部容器とを有する培養容器、及びその下部容器において、細胞や組織の培養面積を減少させることなく、ピペット操作によるコンタミネーションのリスクを低減することを目的とする。

前記目的を達成すべく、本発明の培養容器は、培養液を収容する収容部を有する下部容器と、該下部容器の前記収容部に収容される上部容器とを備えた培養容器であって、前記上部容器は、前記培養液に浸漬される透過性の膜を有し、前記下部容器は、液体を吸引又は補充するピペットを挿入可能なピペット挿入路を有し、前記ピペット挿入路は、前記収容部の底部に連通するとともに前記収容部の外側に開口するピペット挿入口を有することを特徴とする。

本発明の培養容器において、ピペット挿入口は、下部容器の上面に開口してもよい。また、ピペット挿入路は、下部容器の側壁を貫通してもよい。この場合、ピペット挿入路の一部は、側壁から延出するピペット導入管によって形成されていてもよい。また、ピペット挿入路は、収容部の底部側の内径を、ピペット挿入口の内径よりも小さくすることができ、収容部の底壁に対して４５°以上の角度で延びることができる。

また、本発明の培養容器は、ピペット挿入路の下端と収容部の底部とを連通する培養液連通路を有してもよい。この場合、培養液連通路は、収容部の底壁に対して４５°未満の角度で設けられていてもよい。また、下部容器は、複数の収容部を備えてもよく、この場合、培養液連通路は、１つのピペット挿入路と複数の収容部とを連通するようにしてもよい。

また、本発明の培養容器は、下部容器の収容部の開口部に、上部容器の上端部が固定されていてもよい。また、下部容器の収容部の開口部と上部容器の上端部との間は、密閉されていてもよい。本発明の培養容器は、下部容器の収容部、上部容器の開口部、及びピペット挿入口を覆う蓋を備えてもよい。

また、本発明の下部容器は、培養液を収容する収容部を有し、前記培養液に浸漬される透過性の膜を有する上部容器を前記収容部に収容可能な下部容器であって、液体を吸引又は補充するピペットを挿入可能なピペット挿入路を有し、前記ピペット挿入路は、前記収容部の底部に連通するとともに前記収容部の外側に開口するピペット挿入口を有することを特徴とする。

本発明の培養容器及び下部容器において、下部容器は、ピペットを挿入可能なピペット挿入路を有し、ピペット挿入路は、収容部の底部に連通するとともに収容部の外側に開口するピペット挿入口を有している。そのため、下部容器と上部容器との間の空間によらず、収容部の外側に設けられたピペット挿入口を介してピペットをピペット挿入路に容易に挿入することができ、ピペット挿入路を介して下部容器の収容部に培養液等の液体を補充したり、下部容器の収容部に収容された培養液等の液体を吸引したりすることができる。

したがって、本発明の培養容器及び下部容器によれば、細胞や組織の培養面積を減少させることなく、ピペット操作を容易にして、ピペット操作によるコンタミネーションのリスクを低減することができる。

本発明の培養容器の実施形態１に係る平面図。図１に示す培養容器の分解斜視図。図１に示す培養容器のIII-III線に沿う断面図。本発明の培養容器の実施形態２に係る図３に対応する断面図。本発明の培養容器の実施形態３に係る平面図。図５に示す培養容器のVI-VI線に沿う断面図。本発明の培養容器の実施形態４に係る平面図。図７に示す培養容器のVIII-VIII線に沿う断面図。

以下、図面を参照して本発明の培養容器の実施形態を説明する。

（実施形態１）
図１は、本発明の培養容器１００及びその下部容器１０の実施形態１に係る平面図である。図２は、図１に示す培養容器１００及びその下部容器１０の斜視図である。図３は、図１に示す培養容器１００及びその下部容器１０のIII-III線に沿う断面図である。

本実施形態の培養容器１００は、培養液Ｌ等の液体を収容する収容部１１を有する下部容器１０と、下部容器１０の収容部１１に収容される上部容器２０と、を備えている。下部容器１０及び上部容器２０の材料は、特に限定されず、例えば、樹脂材料、ガラス、石英、セラミックス、金属等を用いることができるが、細胞や組織の顕微鏡等による観察を容易にする観点から、可視光を透過することが好ましい。また、成形の容易性、軽量性、耐久性等の観点から、下部容器１０及び上部容器２０の材料として、樹脂材料を用いることが好ましい。

培養容器１００の材料として用いられる樹脂材料としては、例えば、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリプロプレン（ＰＰ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）、シクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ）、シクロオレフィンコポリマー（ＣＯＣ）等を挙げることができる。また、細胞培養に適した表面処理を容易にする観点から、下部容器１０及び上部容器２０の材料として、ＰＳを用いることが好ましい。

本実施形態において、下部容器１０は、概ね直方体形状の矩形の立体形状を有し、上面１２に開口部１１ａを有する６つの独立した円筒状の収容部（ウェル）１１を有している。収容部１１は、底壁１１ｂと内側壁１１ｃとを有する有底筒状に形成されている。収容部１１の形状は、円筒状に限られず、例えば四角形筒状等、多角形筒状であってもよい。また、下部容器１０に設けられる収容部１１の数は、１つであってもよいし、２つ以上の任意の数であってもよい。

下部容器１０は、液体を吸引又は補充するピペットＰを挿入可能なピペット挿入路１３を有している。ピペット挿入路１３は、収容部１１の底部に連通するとともに、収容部１１の外側に開口するピペット挿入口１４を有している。本実施形態において、ピペット挿入路１３及びピペット挿入口１４は、個々の収容部１１に対してそれぞれ個別に設けられている。

ピペット挿入口１４の開口位置は、収容部１１の外側であれば特に限定されないが、本実施形態の下部容器１０では、下部容器１０の上面１２に開口している。ピペット挿入口１４の内径は、ピペットＰをピペット挿入路１３に容易に挿入することができるように、ピペットＰの挿入される部分の最大径よりも一回り大きくすることが好ましい。

ピペット挿入路１３が下部容器１０に開口する位置は、特に限定されない。本実施形態の下部容器１０では、ピペット挿入路１３は、上面１２に開口するピペット挿入口１４を有するとともに、収容部１１の内側壁１１ｃの底部に開口する収容部連通口１５を有し、収容部連通口１５を介して収容部１１の底部に連通している。収容部１１内の培養液Ｌ等の吸引を容易にする観点から、収容部連通口１５の下端は、収容部１１の底壁１１ｂと段差なく連続して面一に設けること、又は収容部１１の底壁１１ｂよりも鉛直方向下方に設けることが好ましい。

ピペット挿入路１３に挿入されるピペットＰは、通常、中心線Ｃｐに沿って延びる管状の部分が先細のテーパ形状を有している。したがって、ピペット挿入路１３は、ピペット挿入口１４から収容部連通口１５まで内径が一様であってもよいが、挿入されるピペットＰの中心線Ｃｐに沿って延びる部分が、ピペットＰの先細形状に対応する先細形状に形成されていてもよい。すなわち、ピペット挿入路１３は、収容部１１の底部側の内径が、ピペット挿入口１４側の内径よりも小さいテーパ形状であってもよい。換言すると、ピペット挿入路１３は、ピペット挿入口１４において内径が最大となり、収容部１１の底部に近づくに従って内径が漸次減少し、収容部連通口１５において内径が最小になるように形成することができる。

培養液Ｌ等の無駄を極力抑制する観点から、ピペット挿入路１３は、収容部１１の底壁１１ｂに対して４５°以上の角度αで上下に延びることが好ましい。ピペット挿入路１３の角度αは、例えば、延在方向の中心線Ｃ１と収容部１１の底壁１１ｂとのなす角度とすることができる。収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αは、例えば、ピペット挿入路１３に挿入するピペットＰとの関係によって決定することができる。具体的には、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αは、例えば、収容部１１の底壁１１ｂを水平にして、ピペット挿入路１３にピペットＰを挿入し、ピペットＰの先端を収容部連通口１５に到達させたときに、ピペットＰを把持するための基端部が、収容部１１の開口部１１ａと鉛直方向に重ならない位置となる角度に設定することができる。

また、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αは、例えば、ピペット挿入口１４の位置と収容部連通口１５の位置に基づいて決定することができる。具体的には、例えば、ピペット挿入口１４の位置を、収容部１１の開口部１１ａとの間に少なくともピペット挿入口１４の半径以上の間隔をあけるように決定する。そして、ピペット挿入口１４と収容部１１の底部とを最短距離で連通するように収容部連通口１５の位置を決定することで、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αを決定することができる。

上部容器２０は、下部容器１０の収容部１１の内側に収容される筒状の上部容器本体２１と、上部容器本体２１の下端に設けられた透過性の膜２２を有している。なお、図１及び図２においては、簡単のため１つの上部容器２０のみを図示しているが、下部容器１０の複数の収容部１１のすべてに上部容器２０を配置することができる。

透過性の膜２２は、例えば、細胞接着性、タンパク質透過性及び細胞遮蔽性、光学顕微鏡観察が可能な光透過性、並びに、培養操作に耐えられる強度等を有するものであれば特に限定されないが、公知の多孔質膜、酸素透過性膜、及びこれらの組み合わせ、又はコラーゲンゲル膜等を用いることができる。

上部容器本体２１は、下部容器１０の収容部１１に対応する筒状に形成され、上端が開放されて開口部２１ａとされ、下端の開口が透過性の膜２２によって閉鎖されている。上部容器本体２１の開口部２１ａの周囲の一部には、開口部２１ａの径方向外側に延出するフランジ部２３が設けられている。フランジ部２３は、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａの周囲で下部容器１０の上面１２に当接し、下部容器１０によって下方から支持される。

これにより、上部容器２０は、図３に示すように、上端の開口部２１ａが下部容器１０の収容部１１の上端の開口部１１ａの内側に保持され、下部容器１０の収容部１１の内側に吊り下げられた状態になる。そして、上部容器２０の下端の膜２２と下部容器１０の収容部１１内の底壁１１ｂとの間には、所定の大きさの空間が形成されている。また、下部容器１０の収容部１１内に所定量の培養液Ｌを収容することで、上部容器２０の下端の膜２２は、下部容器１０の収容部１１内の培養液Ｌに浸漬又は浸潤される。

本実施形態において、上部容器２０は、上端よりも下端の径が小さいテーパ状の外側壁２１ｃを有し、上部容器２０の上端から下端に近付くほど、上部容器２０の外側壁２１ｃと下部容器１０の収容部１１の内側壁１１ｃとの間の間隔が広くなっている。

なお、上部容器２０の外側壁２１ｃは、テーパ状に限定されず、収容部１１の底壁１１ｂに対して垂直に形成されていてもよいが、毛管現象を抑制する観点から、上部容器２０の外側壁２１ｃと下部容器１０の収容部１１の内側壁１１ｃとは所定の間隔を有することが好ましい。また、本実施形態において、上部容器２０は、上端部に設けられたフランジ部２３によって下部容器１０の上面１２に支持されているが、上部容器２０はフランジ部２３を有する構成に限定されない。また、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａに上部容器２０の上端部を固定してもよく、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａと上部容器２０の上端部との間を密閉してもよい。

例えば、上部容器２０の外側壁２１ｃをテーパ状に設ける場合には、上部容器２０の上端の外径を下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａの内径よりも大きくして、上部容器２０の上端を下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａに係合させて支持するようにしてもよい。この場合、上部容器２０の外周側面と収容部１１の開口部１１ａとを隙間なく密着させることができるので、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａに上部容器２０の上端部を固定することができるだけでなく、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａと上部容器２０の上端部との間を密閉することができる。

下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａに、上部容器２０の上端部を固定する際の固定方法は特に限定されないが、例えば、上部容器２０と下部容器１０を一体成型したり、上部容器２０と下部容器１０に係合部を設けたりすることができる。この場合、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａと上部容器２０の上端部との間は、密閉されていてもよいが、隙間を有していてもよい。

図示は省略するが、本実施形態の培養容器１００は、下部容器１０の収容部１１、上部容器２０の開口部２１ａ、及びピペット挿入口１４を覆う蓋を備えていてもよい。培養容器１００の蓋は、例えば、下部容器１０の上面１２全体を覆う矩形状の形状を有するとともに、外縁部に下方に延びる部分を有し、下部容器１０の側面の上部を覆うように形成することができる。

以下、本実施形態の培養容器１００及び下部容器１０の作用について説明する。

本実施形態の培養容器１００及び下部容器１０は、下部容器１０の収容部１１に上部容器２０を挿入し、下部容器１０の収容部１１内に収容された培養液Ｌに上部容器２０の下端の透過性の膜２２が浸漬又は浸潤された状態で使用される。上部容器２０内では、例えば、透過性の膜２２の表面において、培養の対象となる細胞又は組織が培養される。下部容器１０の収容部１１内では、培養液Ｌを収容し、例えば、上部容器２０内の培養の対象となる細胞又は組織に対して、タンパク質等の培養に必要な要素を供給する細胞等を培養することができる。

上部容器２０内の細胞又は組織は、下部容器１０の収容部１１内の培養液Ｌに含まれる培養に必要な要素を、上部容器２０の下端の透過性の膜２２を介して受け取ることができる。これにより、上部容器２０内の細胞又は組織を適切に培養することができる。

培養容器１００において、例えば、下部容器１０の収容部１１に培養液Ｌ又はその他の液体を補充又は供給したり、下部容器１０の収容部１１内の培養液Ｌ等の液体及びそれに含まれる細胞を回収したりするために、ピペット操作が行われる。ピペット操作では、ピペットＰの先端が下部容器１０の上面１２に触れた場合等は、細胞又は組織を培養する上部容器２０や、培養液Ｌを収容する下部容器１０の収容部１１のコンタミネーションが問題となる。しかし、従来の培養容器では、上部容器２０に相当する部材と下部容器１０に相当する部材との隙間にピペットＰを挿入する必要があり、コンタミネーションのリスクが高かった。

本実施形態の培養容器１００では、下部容器１０が液体を吸引又は補充するピペットＰを挿入可能なピペット挿入路１３を有している。そして、ピペット挿入路１３は、下部容器１０の収容部１１の底部に連通するとともに、収容部１１の外側に開口するピペット挿入口１４を有している。そのため、ピペット操作を行う者は、ピペットＰの先端を下部容器１０の収容部１１の外側に開口するピペット挿入口１４に挿入することで、下部容器１０と上部容器２０との間の空間の大きさに関わらず、下部容器１０の収容部１１の底部に連通するピペット挿入路１３を介して、下部容器１０の収容部１１内の培養液Ｌ等の液体を吸引し、又は収容部１１内に液体を供給することができる。

本実施形態の培養容器１００では、下部容器１０と上部容器２０との間にピペットＰを挿入するための空間を設ける必要がないので、上部容器２０の外径を十分に確保することができ、細胞や組織の培養面積が減少するのを防止できる。加えて、下部容器１０の収容部１１の内径を必要以上に大きくする必要がないので、必要な培地の量を最小限に留めることができる。したがって、本実施形態の培養容器１００及びその下部容器１０によれば、細胞や組織の培養面積を減少させることなく、ピペット操作によるコンタミネーションのリスクを低減することができる。

また、ピペット挿入口１４は、下部容器１０の上面１２に開口しているので、ピペットＰを操作する者は、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａの位置とピペット挿入口１４の位置とを確認しながら、容易かつ確実にピペットＰの先端をピペット挿入口１４に挿入することができる。したがって、ピペットＰの先端が下部容器１０の上面１２に触れるリスクを低減して、コンタミネーションが発生するリスクを低減することができる。また、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａの周囲のスペースを有効活用して、下部容器１０が必要以上に大きくなるのを防止して、下部容器１０をコンパクトにすることができる。

また、ピペット挿入路１３及びピペット挿入口１４は、個々の収容部１１に対してそれぞれ個別に設けられているので、個々の収容部１１において異なる条件で細胞又は組織を培養することができるだけでなく、例えば、１つの収容部１１においてコンタミネーションが発生したときの影響を最小限に留めることができる。

また、ピペット挿入路１３は、収容部１１の底部の内側壁１１ｃに開口する収容部連通口１５を有し、収容部連通口１５を介して収容部１１の底部に連通している。そのため、収容部１１内の培養液Ｌ等の液体及びそれに含まれる細胞等を、収容部１１の底部から収容部連通口１５を介して効率よくピペット挿入路１３に導出することができ、ピペットＰによる収容部１１内の液体の吸引を容易にすることができる。

また、ピペット挿入路１３は、収容部１１の底部側の内径が、ピペット挿入口１４側の内径よりも小さいので、下部容器１０の収容部１１からピペット挿入路１３に流出する培養液Ｌ等の液体の量を最小限にすることができ、培養液Ｌ等に無駄が生じるのを抑制することができる。また、ピペット挿入口１４を相対的に大きくすることができ、ピペットＰの挿入を容易にしてコンタミネーションのリスクを低減することができる。

また、ピペット挿入路１３は、下部容器１０の収容部１１の底壁１１ｂに対して４５°以上の角度αで上下に延びることで、下部容器１０の収容部１１からピペット挿入路１３に流出する培養液Ｌ等の液体の量を最小限にすることができ、培養液Ｌ等に無駄が生じるのを抑制することができる。また、ピペット挿入口１４を下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａに比較的近い位置に形成することができる。

また、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αを適切に設定することによって、コンタミネーションのリスクをより低減することができる。例えば、前記したように、下部容器１０の収容部１１の底壁１１ｂを水平にして、ピペット挿入路１３にピペットＰを挿入し、ピペットＰの先端を収容部連通口１５に到達させたときに、ピペットＰを把持するための基端部が、収容部１１の開口部１１ａと鉛直方向に重ならない位置となる角度に、ピペット挿入路１３の角度αを設定する。これにより、例えば、ピペットＰを操作する者の手から落下した塵芥等が、収容部１１の開口部１１ａ内及び上部容器２０の開口部１１ａ内に落下することを防止することができ、コンタミネーションのリスクをより低減することができる。

ピペットＰの操作を行う者は、下部容器１０の長手方向両側を片手で保持した状態で、下部容器１０の手前側が奥側よりも低くなるように、下部容器１０を傾けてピペット操作を行う場合がある。この場合、下部容器１０の短手方向の奥側から手前側に傾斜するようにピペット挿入路１３の角度αを設定することで、ピペット操作を行う者の手が、鉛直方向において下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａ又は上部容器２０の開口部２１ａに重なるのをより確実に防止できる。

また、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αを設定する際に、ピペット挿入口１４の位置を、収容部１１の開口部１１ａとの間に少なくともピペット挿入口１４の半径以上の間隔をあけるように設定することで、ピペットＰの先端が誤って上部容器２０の開口部２１ａに挿入されるのを防止できる。したがって、ピペット操作によるコンタミネーションのリスクを低減することができる。

また、上部容器２０は、上端よりも下端の径が小さいテーパ状の外側壁２１ｃを有し、上部容器２０の上端から下端に近付くほど、上部容器２０の外側壁２１ｃと下部容器１０の収容部１１の内側壁１１ｃとの間の間隔が広くなっている。そのため、下部容器１０の収容部１１に上部容器２０の下端部を容易に挿入することができる。また、下部容器１０の収容部１１の内側壁１１ｃと上部容器２０の外側壁２１ｃとの間に適切な隙間を形成して、下部容器１０の収容部１１の内側壁１１ｃと上部容器２０の外側壁２１ｃとの間における毛管現象を抑制することができる。

また、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａに、上部容器２０の上端部を固定することで、下部容器１０と上部容器２０との相対的な移動が防止され、顕微鏡観察を確実かつ容易に行うことができる。また、下部容器１０の収容部１１の開口部１１ａと上部容器２０の上端部との間を密閉することで、これらの間の隙間を介したコンタミネーションのリスクを低減することができる。さらに、培養容器１００が下部容器１０の収容部１１、上部容器２０の開口部２１ａ、及びピペット挿入口１４を覆う蓋を備えている場合には、これらに塵芥、菌等が侵入して発生するコンタミネーションのリスクを低減することができる。

以上説明したように、本実施形態の培養容器１００及びその下部容器１０によれば、細胞や組織の培養面積を減少させることなく、ピペット操作を容易にして、ピペット操作によるコンタミネーションのリスクを低減することができる。

（実施形態２）
以下、本発明の培養容器及びその下部容器の実施形態２について説明する。図４は、実施形態１の培養容器１００の図３に示す断面図に相当する、本実施形態の培養容器１００Ａの断面図である。

本実施形態の培養容器１００Ａ及びその下部容器１０Ａは、ピペット挿入路１３の下端と収容部１１の底部とを連通する培養液連通路１６を備え、ピペット挿入路１３の角度αが収容部１１の底壁１１ｂに対して垂直に近づけている点で、前述の実施形態１で説明した培養容器１００及びその下部容器１０と異なっている。本実施形態の培養容器１００Ａ及びその下部容器１０Ａのその他の点は、前述の実施形態１で説明した培養容器１００及びその下部容器１０と同一であるので、同一の部分には同一の符号を付して説明を省略する。

本実施形態の培養容器１００Ａは、下部容器１０Ａに設けられたピペット挿入路１３の下端と収容部１１の底部とを連通する培養液連通路１６を有している。培養液連通路１６は、例えば、延在方向の全長に亘って内径が一様な直管状に設けられ、収容部１１の内側壁１１ｃの底部に設けられた収容部連通口１５とピペット挿入路１３の下端とを連通している。培養液連通路１６は、収容部１１の底壁１１ｂに対して４５°未満の角度βで設けられている。より具体的には、培養液連通路１６の中心線Ｃ２は直線であり、収容部１１の底壁１１ｂに対して４５°未満の角度βを有している。

本実施形態の培養容器１００Ａ及びその下部容器１０Ａによれば、実施形態１の培養容器１００及びその下部容器１０と同様に、ピペット挿入路１３及びピペット挿入口１４を有しているので、実施形態１の培養容器１００及びその下部容器１０と同様の効果を得ることができる。また、本実施形態の培養容器１００Ａ及びその下部容器１０Ａは、ピペット挿入路１３の下端と収容部１１の底部とを連通する培養液連通路１６を有している。そのため、ピペット挿入路１３の角度αが下部容器１０Ａの収容部１１の底壁１１ｂに対して垂直に近づけ、ピペット挿入口１４を収容部１１の開口部１１ａの近傍に設けた場合でも、ピペット挿入路１３と収容部１１の底部とを連通させることができる。

また、本実施形態の培養容器１００Ａ及びその下部容器１０Ａにおいて、培養液連通路１６は、下部容器１０Ａの収容部１１の底壁１１ｂに対して４５°未満の角度βで設けられている。そのため、下部容器１０Ａの収容部１１の底壁１１ｂを水平から４５°未満の角度βで傾けることで、培養液連通路１６を水平にすることができる。したがって、下部容器１０Ａの収容部１１内のすべての液体等をピペットＰによって吸引する際に、下部容器１０Ａを傾けたときの鉛直方向に対するピペットＰの角度を小さくしてピペット操作を容易にすることができる。

より詳細には、図３に示す実施形態１の培養容器１００は、培養液連通路１６を有しないため、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αを垂直に近づけることが困難である。これに対し、図４に示す本実施形態の培養容器１００Ａは、培養液連通路１６を有しているため、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αを垂直に近づけることができる。そのため、実施形態１の培養容器１００よりも、実施形態２の培養容器１００Ａの方が、収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３の角度αが大きくなる。したがって、ピペット操作の際に、収容部１１の底壁１１ｂを水平面に対して角度βで傾ける必要がある場合、ピペットＰの鉛直方向に対する角度、すなわち９０°−α＋βは、実施形態１の培養容器１００よりも、実施形態２の培養容器１００Ａの方が小さくなる。これにより、ピペット操作を容易にすることができる。

（実施形態３）
以下、本発明の培養容器及びその下部容器の実施形態３について説明する。図５は、実施形態１の培養容器１００の図１に示す平面図に相当する、本実施形態の培養容器１００Ｂの平面図である。図６は、図５のVI-VI線に沿う断面図である。

本実施形態の培養容器１００Ｂ及びその下部容器１０Ｂは、複数の培養液連通路１６が１つの共通するピペット挿入路１３に連通している点で、前述の実施形態２で説明した培養容器１００Ａ及びその下部容器１０Ａと異なっている。本実施形態の培養容器１００Ｂ及びその下部容器１０Ｂのその他の点は、前述の実施形態２で説明した培養容器１００Ａ及びその下部容器１０Ａと同様であるので、同一の部分には同一の符号を付して説明を省略する。

本実施形態の培養容器１００Ｂ及びその下部容器１０Ｂは、複数の収容部１１を備え、培養液連通路１６は、１つのピペット挿入路１３と複数の収容部１１とを連通している。より具体的には、本実施形態において、下部容器１０Ｂの４つの隣接する収容部１１の間に１つのピペット挿入路１３が設けられ、その１つのピペット挿入路１３とそれを囲む４つの隣接する収容部１１のそれぞれが、培養液連通路１６によって連通している。

下部容器１０Ｂの収容部１１の底壁１１ｂに対するピペット挿入路１３及び培養液連通路１６の角度は特に限定されないが、本実施形態において、ピペット挿入路１３は、下部容器１０Ｂの収容部１１の底壁１１ｂに対して垂直又は略垂直であり、培養液連通路１６は、下部容器１０Ｂの収容部１１の底壁１１ｂに対して平行又は略平行である。なお、下部容器１０Ｂの外側の底面を水平にした状態で、下部容器１０Ｂの収容部１１の底壁１１ｂ及び培養液連通路１６は、ピペット挿入路１３に近いほど低くなるように傾斜を有していてもよい。

本実施形態の培養容器１００Ｂ及びその下部容器１０Ｂによれば、１つのピペット挿入路１３にピペットＰを挿入して、下部容器１０Ｂの複数の収容部１１に収容された培養液Ｌ等の液体を一括して吸引し、又は下部容器１０Ｂの複数の収容部１１に培養液Ｌ等の液体を一括して供給することができる。また、下部容器１０Ｂの収容部１１の底壁１１ｂ及びピペット挿入路１３が前記した傾斜を有する場合には、ピペットＰによって下部容器１０Ｂの複数の収容部１１に収容された液体等を一括して吸引する操作を容易にすることができる。

（実施形態４）
以下、本発明の培養容器及びその下部容器の実施形態４について説明する。図７は、実施形態１の培養容器１００の図１に示す平面図に相当する、本実施形態の培養容器１００Ｃの平面図である。図８は、図７のVIII-VIII線に沿う断面図である。

本実施形態の培養容器１００Ｃ及びその下部容器１０Ｃは、ピペット挿入路１３が下部容器１０Ｃの側壁１０ｓを貫通している点で、前述の実施形態１で説明した培養容器１００及びその下部容器１０と異なっている。本実施形態の培養容器１００Ｃ及びその下部容器１０Ｃのその他の点は、前述の実施形態１で説明した培養容器１００及びその下部容器１０と同様であるので、同一の部分には同一の符号を付して説明を省略する。

本実施形態の培養容器１００Ｃ及びその下部容器１０Ｃにおいて、ピペット挿入路１３は、例えば、下部容器１０Ｃの側壁１０ｓを貫通する直管状に設けられている。特に限定はされないが、本実施形態において、ピペット挿入路１３は、下部容器１０Ｃの長手方向に沿う側壁１０ｓを貫通している。また、ピペット挿入路１３の一部は、側壁１０ｓから延出するピペット導入管１７によって形成されている。なお、ピペット挿入路１３は、直管状に限定されず、ピペットＰの先端形状に対応する先細形状に形成してもよい。

下部容器１０Ｃの短手方向の側壁に沿って隣接する収容部１１は、実施形態３の下部容器１０Ｂと同様に、収容部１１の底壁１１ｂと平行又は略平行に設けられた培養液連通路１６によって互いに連通している。また、本実施形態の培養容器１００Ｃにおいても、蓋１８は、下部容器１０Ｃの収容部１１、上部容器２０の開口部２１ａ、及びピペット挿入口１４を覆うように設けられる。

本実施形態の培養容器１００Ｃ及びその下部容器１０Ｃによれば、実施形態１と同様の効果を得られるだけでなく、ピペットＰの操作を行う者の手が、より確実に下部容器１０Ｃの上面１２と鉛直方向に重ならない位置で、ピペットＰを把持することができる。したがって、ピペット操作によるコンタミネーションのリスクを低減することができる。

また、ピペット挿入路１３が貫通する下部容器１０Ｃの長手方向に沿う側壁１０ｓを手前にして、奥側よりも手前側が低くなるように下部容器１０Ｃを傾けることで、隣接する２つの収容部１１に収容された液体等を一括して吸引することができる。なお、ピペット挿入路１３及びピペット導入管１７は、個々の収容部１１に対して設けてもよい。

以上、図面を用いて本発明の実施の形態を詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における設計変更等があっても、それらは本発明に含まれるものである。

１０，１０Ａ−１０Ｃ下部容器、１０ｓ側壁、１１収容部、１１ａ開口部、１１ｂ底壁、１２上面、１３ピペット挿入路、１４ピペット挿入口、１６培養液連通路、１７ピペット導入管、１８蓋、２０上部容器、２２膜、１００，１００Ａ−１００Ｃ培養容器、α ピペット挿入路の角度、β 培養液連通路の角度、Ｌ培養液、Ｐピペット

Claims

培養液を収容する収容部を有する下部容器と、該下部容器の前記収容部に収容される上部容器とを備えた培養容器であって、
前記上部容器は、前記培養液に浸漬される透過性の膜を有し、
前記下部容器は、液体を吸引又は補充するピペットを挿入可能なピペット挿入路を有し、
前記ピペット挿入路は、前記収容部の底部に連通するとともに前記収容部の外側に開口するピペット挿入口を有することを特徴とする培養容器。
前記ピペット挿入口は、前記下部容器の上面に開口していることを特徴とする請求項１に記載の培養容器。
前記ピペット挿入路は、前記下部容器の側壁を貫通していることを特徴とする請求項１に記載の培養容器。
前記ピペット挿入路の一部は、前記側壁から延出するピペット導入管によって形成されていることを特徴とする請求項３に記載の培養容器。
前記ピペット挿入路は、前記収容部の前記底部側の内径が、前記ピペット挿入口側の内径よりも小さいことを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか一項に記載の培養容器。
前記ピペット挿入路は、前記収容部の底壁に対して４５°以上の角度で延びることを特徴とする請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の培養容器。
前記ピペット挿入路の下端と前記収容部の前記底部とを連通する培養液連通路を有し、
前記培養液連通路は、前記収容部の底壁に対して４５°未満の角度で設けられていることを特徴とする請求項６に記載の培養容器。
前記下部容器は、複数の前記収容部を備え、
前記培養液連通路は、１つの前記ピペット挿入路と複数の前記収容部とを連通することを特徴とする請求項７に記載の培養容器。
前記下部容器の前記収容部の開口部に、前記上部容器の上端部が固定されていることを特徴とする請求項１から請求項８のいずれか一項に記載の培養容器。
前記下部容器の前記収容部の開口部と前記上部容器の上端部との間が密閉されていることを特徴とする請求項１から請求項９のいずれか一項に記載の培養容器。
前記下部容器の前記収容部、前記上部容器の開口部、及び前記ピペット挿入口を覆う蓋を備えることを特徴とする請求項１から請求項１０のいずれか一項に記載の培養容器。
培養液を収容する収容部を有し、前記培養液に浸漬される透過性の膜を有する上部容器を前記収容部に収容可能な下部容器であって、
液体を吸引又は補充するピペットを挿入可能なピペット挿入路を有し、
前記ピペット挿入路は、前記収容部の底部に連通するとともに前記収容部の外側に開口するピペット挿入口を有することを特徴とする下部容器。