JP6446994B2

JP6446994B2 - 培養容器

Info

Publication number: JP6446994B2
Application number: JP2014215132A
Authority: JP
Inventors: 太郎長井
Original assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Current assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Priority date: 2014-10-22
Filing date: 2014-10-22
Publication date: 2019-01-09
Anticipated expiration: 2034-10-22
Also published as: JP2016077263A

Description

本発明は、細胞又は組織を培養するために用いられる培養容器に関する。

従来から細胞又は組織の培養物を生体外で成長させるための細胞培養挿入体を備えた培養容器が知られている（例えば、下記特許文献１を参照）。特許文献１に記載された細胞培養挿入体は、特定の大きさのウェルを持つ複数ウェル組織培養容器で使用できるような大きさにされ、底端に透過性の膜が取り付けられている。この細胞培養挿入体は、その上端に連結されたフランジによって栄養物を収容したウェルの頂部上に支持され、組織の試料を付着させた透過性の膜を通して栄養物の濃度勾配を生じさせる。特許文献１では、組織培養容器と細胞培養挿入体との間の空間によって、ピペットは容器の底に達することができ、膜の下方及び細胞培養挿入体の側壁の外面の周りから膜の上部を汚すことなく培地を取り出すことができ、又、培地を導入することができる、としている。

また、下部のガス透過性フィルムと、選定したサイズの化合物を選択的に透過し得る上部シートとによって区画される細胞培養区画室を有する容器を含む細胞培養装置が知られている（例えば、下記特許文献２を参照）。特許文献２に記載された装置は、培養培地を上部シートと下部ガス透過性フィルムとの間に存在させるように適応させ、基底培地区画室を上部シートよりも上に配置しかつ基底培地を上部シート上に存在させるように適応させる。各々の区画室は、アクセス口を収容する。ガス透過性フィルムの下にかつ該フィルムと一部接触するガスフィルム支持体は、ガス透過性フィルムを、懸濁又は粘着細胞がガス透過性フィルムの水平部分を横断して分布することができるように実質的に水平な位置に保つ。

特開平６−１８９７４２号公報特表平１０−５０４７１０号公報

特許文献１に記載された培養容器は、ウェルの内側の壁面と細胞培養挿入体の側壁の外面との間に隙間を有しているため、例えば、ピペット操作等、各種の培養操作によって、組織培養容器のウェル内の細胞が細胞培養挿入体に混入する虞がある。培養対象である細胞や組織を培養する細胞培養挿入体に、培養対象でないウェル内の細胞が混入することは、例えば、培養した細胞や組織を医療用途に用いる場合に、安全性の観点から問題になる。

特許文献２に記載された細胞培養装置は、上部シートと下部ガスフィルムとの間に培養培地が存在する細胞培養区画室のアクセス口と、上部シートよりも上に基底培地が存在する基底培地区画室のアクセス口とを、互いに離隔した位置に独立して設け、それぞれキャップによって塞いでいる。この細胞培養装置は、キャップによって基底培地の細胞が培養培地に混入するのを防止することができるが、前記基底培地区画室のアクセス口は、該基底培地区画室に存在する前記上部シートよりも小さい。そのため、例えば、細胞シート等の細胞集合体や組織を培養した場合に、これらをアクセス口から取出すのが困難である。

本発明は、前記課題に鑑みてなされたものであり、培養対象の細胞への培養対象外の細胞の混入を防止することができ、かつ、細胞シート等の細胞集合体や組織の培養に適した培養容器を提供することを目的とする。

前記目的を達成すべく、本発明の培養容器は、細胞又は組織を培養する培養部と、該培養部の下方で培養液を貯留する貯留部と、前記培養部の底部に設けられて前記培養液を透過する膜と、を備えた培養容器であって、前記培養部は、前記膜と鉛直方向に重なる位置に開口する開口部を有し、前記貯留部は、前記開口部の平面視で前記培養部の側方に隣接して上方に開口する培養液口を有し、前記開口部と前記培養液口の一方を閉塞して他方を開放可能な蓋部材を有することを特徴とする。

前記培養容器において、前記開口部の開口面積は、前記細胞又は前記組織を培養する培養領域の面積以上であってもよい。この場合、前記培養領域の面積は、前記膜の面積以下であってもよい。

前記培養容器において、前記蓋部材は、前記開口部を閉塞する培養部蓋を有し、前記培養部蓋は、気体を通過させる通気部を有してもよい。この場合、前記通気部は、液体を遮蔽するフィルターであってもよい。

前記培養容器において、前記蓋部材は、前記培養液口を閉塞する貯留部蓋を有し、前記貯留部蓋は、前記培養液口を密閉する密閉部を有してもよい。この場合、密閉部は、前記培養液口の外周面又は内周面に螺合するネジ部であってもよい。また、前記密閉部は、前記培養液口に係合して前記培養液口を封止する係合部であってもよい。

本発明によれば、培養部内の培養対象の細胞を培養する培地としての培養液への培養対象外の細胞の混入を防止することができ、かつ、細胞シート等の細胞集合体や組織の培養に適した培養容器を提供することができる。

本発明の培養容器の実施形態に係る斜視図。図１に示す培養容器のII-II線に沿う断面図。図２に示す培養容器の培養部及び蓋部材の変形例１を示す拡大断面図。図２に示す培養容器の貯留部及び蓋部材の変形例２を示す拡大断面図。図２に示す培養容器の貯留部及び蓋部材の変形例３を示す拡大断面図。図２に示す培養容器の貯留部及び蓋部材の変形例４を示す拡大断面図。

以下、図面を参照して本発明の培養容器の実施形態を説明する。

図１は、本発明の実施形態１に係る培養容器１の斜視図である。図２は、図１に示す培養容器１のII-II線に沿う断面図である。

本実施形態の培養容器１は、細胞又は組織を培養する培養部３と、培養部３の下方で培養液Ｌを貯留する貯留部２と、培養部３の底部に設けられて培養液Ｌを透過する膜４と、を備えている。培養部３と貯留部２は、個別に成形して組み合わせてもよいが、例えば、鋳造や射出成形によって、一体に成形されていてもよい。培養部３及び貯留部２の材料は、特に限定されず、例えば、樹脂材料、ガラス、石英、セラミックス、金属等を用いることができるが、細胞や組織の顕微鏡等による観察を容易にする観点から、可視光を透過することが好ましい。また、成形の容易性、軽量性、耐久性等の観点から、培養部３及び貯留部２の材料として、樹脂材料を用いることが好ましい。

培養部３及び貯留部２の材料として用いられる樹脂材料としては、例えば、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリプロプレン（ＰＰ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）、シクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ）、シクロオレフィンコポリマー（ＣＯＣ）等を挙げることができる。また、細胞培養に適した表面処理を容易にする観点から、培養部３及び貯留部２の材料として、ＰＳを用いることが好ましい。

膜４は、培養部３で培養される細胞又は組織を透過させず、培養液Ｌ及びそれに含まれる栄養素のみを透過させる。膜４の培養液Ｌを透過する領域は、細胞又は組織を培養する培養領域ＣＡとなる。例えば、膜４の周縁部が培養部３の側壁に固定される場合には、培養領域ＣＡの面積は、膜４の面積以下になる。

膜４は、例えば、細胞接着性、タンパク質透過性及び細胞遮蔽性、光学顕微鏡観察が可能な光透過性、並びに、培養操作に耐えられる強度等を有するものであれば特に限定されないが、不織布を含む公知の多孔質膜、酸素透過性膜、及びこれらの組み合わせ、又はコラーゲンゲル膜等を用いることができる。例えば、細胞の大きさが１０μｍ程度であれば、０．１μｍ程度の径の微細孔を有する多孔質膜を用いることができる。

培養部３は、概ね円筒形の形状を有し、下端が培養液Ｌを透過する膜４によって閉塞され、上端が開放されている。培養部３の上端の開口部３１は、培養部３の底部に設けられた膜４と上下に重なる位置に開口している。例えば、培養容器１の底面又は開口部３１が水平になるように、培養容器１を水平に配置した状態で、培養部３の開口部３１は、培養部３の底部に設けられた膜４と鉛直方向に重なる位置に開口している。なお、培養部３の形状は円筒形に限定されず、矩形筒状、多角形筒状、その他、任意の形状を選択することができる。

培養部３の開口部３１の開口面積ＯＡは、細胞又は前記組織を培養する培養領域ＣＡの面積より小さくてもよいが、培養部３で培養された細胞シート等の細胞集合体又は組織の取り出しを容易にする観点から、膜４の面積又は培養領域ＣＡの面積の５０％以上であることが好ましい。本実施形態の培養容器１では、培養部３の開口部３１の開口面積ＯＡは、培養領域ＣＡの面積以上である。より詳細には、培養部３の開口部３１の開口面積ＯＡは、培養領域ＣＡの面積よりも大きくなっている。

貯留部２は、培養部３の下方に設けられ、膜４を介して培養部３に供給する培養液Ｌを貯留するとともに、培養部３の開口部３１の平面視で、培養部３の側方に隣接して上方に開口する培養液口２４を有している。なお、培養部３の開口部３１の高さ位置と培養液口２４の高さ位置は、同じであっても異なっていてもよい。本実施形態では、培養液口２４の高さ位置は、培養部３の開口部３１の高さ位置よりも低くなっている。また、本実施形態において、貯留部２は、培養部３の下端に連結された第１貯留部２１と、第１貯留部２１から側方に延出する第２貯留部２２とを有している。

第１貯留部２１は、例えば、培養部３と同様に概ね円筒形の形状を有し、底部が閉塞された有底筒状に形成されている。第１貯留部２１は、側壁に開口２３を有し、開口２３を介して第２貯留部２２と連通している。第２貯留部２２は、例えば、曲管状に形成され、一端が第１貯留部２１の側壁に連結され、第１貯留部２１及びその上方に連続する培養部３の径方向外側に延出し、さらに上方に向けて湾曲し、培養部３の開口部３１の平面視で、培養部３の側方に隣接する他端に培養液口２４が形成されている。

培養容器１は、培養部３の開口部３１と貯留部２の培養液口２４の一方を閉塞して他方を開放可能な蓋部材５を有している。本実施形態において、蓋部材５は、培養部３の開口部３１を閉塞する培養部蓋６と、貯留部２の培養液口２４を閉塞する貯留部蓋７と、を有している。すなわち、本実施形態の蓋部材５は、培養部３の開口部３１と貯留部２の培養液口２４とを、それぞれ独立して閉塞又は開放する培養部蓋６と貯留部蓋７とを有することで、培養部３の開口部３１と貯留部２の培養液口２４のうち一方を閉塞した状態で、他方を開放することができるようなっている。なお、培養部蓋６と貯留部蓋７とは、例えば、弾性を有する連結部や、ヒンジ等によって連結されていてもよい。

培養部蓋６及び貯留部蓋７は、それぞれ、培養部３の開口部３１及び貯留部２の培養液口２４を覆う円盤状の蓋部６１、７１と、その周縁部から下方に延びる円環状の縁部６２、７２とを有している。培養部蓋６の蓋部６１は、周縁部の下面が培養部３の開口部３１の縁に当接して下方から支持され、培養部３の上端に載置されている。培養部蓋６の縁部６２の内周面は、培養部３の開口部３１の外側の外周面に対向している。同様に、貯留部蓋７の蓋部７１は、周縁部の下面が貯留部２の培養液口２４の縁に当接して下方から支持され、第２貯留部２２の上端に載置されている。貯留部蓋７の縁部７２の内周面は、第２貯留部２２の培養液口２４の外側の外周面に対向している。

本実施形態において、培養部蓋６の蓋部６１と培養部３の上端との間、及び、培養部蓋６の縁部６２と培養部３の外周面との間は、密閉されておらず、気体を通過させることができる微小な隙間が形成されている。すなわち、本実施形態では、培養部蓋６の蓋部６１と培養部３の上端との間の隙間と、培養部蓋６の縁部６２と培養部３の上端部の外周面との間の隙間が、気体を通過させる通気部Ａとなっている。

同様に、貯留部蓋７の蓋部７１と第２貯留部２２の上端との間、及び、貯留部蓋７の縁部７２と第２貯留部２２の上端部の外周面との間は、密閉されておらず、気体を通過させることができる微小な隙間が形成されている。すなわち、本実施形態では、貯留部蓋７の蓋部７１と第２貯留部２２の上端との間の隙間と、貯留部蓋７の縁部７２と第２貯留部２２の上端部の外周面との間の隙間が、気体を通過させる通気部Ａとなっている。

培養部蓋６は、通気部Ａによって培養容器１の外部と培養部３の内部との間の通気性を確保しつつ、培養液Ｌの液滴や飛沫、それに含まれる培養対象外の細胞、又は塵芥等を遮蔽して、これらが培養容器１の外部から開口部３１に侵入することを防止する。同様に、貯留部蓋７は、通気部Ａによって培養容器１の外部と第２貯留部２２の内部との間の通気性を確保しつつ、培養液Ｌの液滴や飛沫、それに含まれる培養対象の細胞、又は塵芥等を遮蔽して、これらが培養容器１の外部から培養液口２４に侵入することを防止する。

以下、本実施形態の培養容器１の作用について説明する。

本実施形態の培養容器１を使用する際には、培養部３の開口部３１を蓋部材５の培養部蓋６で閉塞した状態で、貯留部２の培養液口２４を開放し、培養液口２４から貯留部２に培養液Ｌを注入する。培養液Ｌは、培養対象となる細胞や組織に必要な栄養素又はその栄養素を供給する細胞等を含んでもよい。貯留部２に培養液Ｌを満たすことで、培養部３の底部に設けられた膜４は、培養液Ｌに浸漬又は浸潤される。貯留部２に培養液Ｌを満たした後は、培養液口２４を蓋部材５の貯留部蓋７で閉塞する。

このように、本実施形態の培養容器１は、培養部３の開口部３１と貯留部２の培養液口２４のうち、一方の開口部３１を閉塞して、他方の培養液口２４を開放可能な蓋部材５を有している。そのため、培養液口２４から貯留部２に培養液Ｌを注入する際に、培養液Ｌの液滴や飛沫が飛散した場合でも、これらを蓋部材５によって遮蔽することができる。したがって、培養液Ｌに含まれる培養対象外の細胞等が、培養部３の開口部３１から培養部３の内部の培養液Ｌに混入することが防止される。

また、貯留部２は、培養部３の開口部３１の平面視で、培養部３の側方に隣接して上方に開口する培養液口２４を有しているので、培養部３の下層に設けられた貯留部２に培養液Ｌを容易に注入することができる。また、培養液口２４を有する第２貯留部２２の上端に蓋部材５の培養部蓋７を載置し又は培養部蓋７を取り除くことによって、培養液口２４を容易に閉塞及び開放することができる。また、培養液口２４を培養部３の開口部３１よりも低い位置に設けることで、培養液口２４に培養液Ｌを注入する際に、培養部３の開口部３１に培養液Ｌの飛沫等が侵入するのを防止できる。

次に、貯留部２の培養液口２４を蓋部材５の貯留部蓋７で閉塞した状態で、蓋部材５の培養部蓋６を取り外して培養部３の開口部３１を開放し、開口部３１を介して培養部３の内部に培養対象となる細胞又は組織を収容又は配置する。その後、培養部３の開口部３１を蓋部材５によって閉塞し、培養対象となる細胞又は組織を、膜４の上面の培養領域ＣＡにおいて培養する。なお、貯留部２に培養液Ｌを注入する工程と、培養部３に細胞又は組織を収容又は配置する工程は、この順序に限定されず、逆の順序で行ってもよい。

ここで、本実施形態の培養容器１は、培養部３の開口部３１と貯留部２の培養液口２４のうち、一方の培養液口２４を閉塞して、他方の開口部３１を開放可能な蓋部材５を有している。そのため、開口部３１から培養部３内に培養対象となる細胞又は組織を収容又は配置する際に、培養液Ｌの液滴や飛沫が飛散した場合でも、これらを蓋部材５によって遮蔽することができる。したがって、培養液Ｌに含まれる培養対象の細胞等が、培養液口２４から貯留部２の内部の培養液Ｌに混入することが防止される。

また、培養部蓋６は、培養部３の開口部３１を閉塞した状態で、培養部３との間に通気部Ａを有している。そのため、培養部３の開口部３１を培養部蓋６によって閉塞した状態で、培養容器１の外部と培養部３の内部との間の通気性を確保することができる。したがって、培養部３の内部の二酸化炭素の濃度等を適切な範囲に維持し、細胞又は組織を良好に培養することができる。

培養部３の膜４の上面の培養領域ＣＡにおいて培養された細胞又は組織は、例えば、細胞シート等の細胞集合体のように培養領域ＣＡと同等の面積に培養される。培養された細胞集合体又は組織は、通常、そのままの状態で取り出して使用される。この場合、培養した所定の大きさの細胞集合体又は組織の取り出し経路が確保されていないと、細胞集合体又は組織が損傷する虞がある。

本実施形態の培養容器１において、培養部３は、膜４と鉛直方向に重なる位置に開口する開口部３１を有している。そのため、培養部３の開口部３１に、例えば、ピンセットやトレー等、培養した細胞集合体又は組織を取り出すための器具を挿入することで、膜４の上面で培養された細胞集合体又は組織を容易に取り出すことができる。

また、培養部３の開口部３１の開口面積ＯＡは、細胞又は組織を培養する培養領域ＣＡの面積以上とされている。したがって、開口部３１の大きさを、培養領域ＣＡで培養した細胞集合体又は組織を取り出すのに十分な大きさにして、細胞集合体又は組織の取出しを容易にすることができる。また、培養領域ＣＡの面積を膜４の面積以下とすることで、例えば、膜４の周縁部を培養部３に対して固定することができる。

以上説明したように、本実施形態の培養容器１によれば、培養対象の細胞を培養する培地への培養対象外の細胞の混入を防止することができ、かつ、細胞シート等の細胞集合体や組織の培養に適した培養容器を提供することができる。

なお、本発明の培養容器は、前述の実施形態で説明した培養容器１の構成に限定されない。以下、前述の実施形態で説明した培養容器１の変形例について説明する。

（変形例１）
図３は、前述の実施形態で説明した培養容器１の変形例１を示す培養部３Ａの開口部３１近傍の拡大断面図である。

本変形例の培養容器は、培養部３Ａの開口部３１を閉塞する蓋部材５の培養部蓋６Ａが、気体を通過させる通気部Ａとして、液体を遮蔽するフィルター６３を備えている点、及び、培養部蓋６Ａが培養部３Ａに螺合されるスクリューキャップ（密閉部Ｓ）である点で、前述の実施形態で説明した培養容器１と異なっている。本変形例の培養容器のその他の点は、前述の実施形態で説明した培養容器１と同一であるので、同一の部分には同一の符号を付して説明を省略する。

本変形例の培養部蓋６Ａは、蓋部６１の中央部に通気部Ａとしてのフィルター６３を備え、縁部６２の内周面にネジ部６４が形成されている。フィルター６３は、防水性、防塵性、及び通気性を有するものであれば特に限定されず、例えば、不織布や微多孔質の樹脂フィルム等、公知のフィルターを用いることができる。本変形例の培養部３Ａは、開口部３１の近傍の上端部の外周面に、培養部蓋６Ａのネジ部６４と螺合するネジ部３２を有している。培養部蓋６Ａは、縁部６２の内周面のネジ部６４を培養部３Ａの外周面のネジ部３２に螺合させることで、培養部３Ａの上端に固定されて開口部３１を閉塞している。

本変形例の培養容器によれば、前述の実施形態の培養容器１と同様の効果を得られるだけでなく、培養部蓋６Ａの脱落を防止することができる。また、培養部蓋６Ａの蓋部６１及びフィルター６３によって、培養液Ｌの液滴や飛沫、それに含まれる培養対象外の細胞、又は塵芥等を確実に遮蔽しつつ、フィルター６３によって培養部３Ａの通気性を確保することができる。

（変形例２、３及び４）
図４Ａ、４Ｂ及び４Ｃは、前述の実施形態で説明した培養容器１の変形例２、３及び４を示す貯留部２Ａ、２Ｂ及び２Ｃの培養液口２４近傍の拡大断面図である。

変形例２、３及び４の培養容器は、蓋部材５が培養液口２４を閉塞する貯留部蓋７Ａ、７Ｂ、７Ｃを有し、貯留部蓋７Ａ、７Ｂ、７Ｃが培養液口２４を密閉する密閉部Ｓを有する点で、前述の実施形態で説明した培養容器１と異なっている。変形例２、３及び４の培養容器のその他の点は、前述の実施形態で説明した培養容器１と同一であるので、同一の部分には同一の符号を付して説明を省略する。

図４Ａ、４Ｂに示す変形例２、３の培養容器において、貯留部２Ａ、２Ｂの培養液口２４を閉塞する蓋部材５の貯留部蓋７Ａ、７Ｂは、スクリューキャップである。貯留部蓋７Ａ、７Ｂでは、第２貯留部２２Ａ、２２Ｂの培養液口２４の内周面又は外周面のネジ部２５、２６に螺合するネジ部７３、７５によって、培養液口２４を密閉する密閉部Ｓが形成されている。

図４Ａに示す変形例２の培養容器では、貯留部蓋７Ａの縁部７２の内周面に形成されたネジ部７３が、貯留部２Ａの第２貯留部２２Ａの上端部の外周面に形成されたネジ部２５に螺合することで、培養液口２４が貯留部蓋７Ａによって密閉されている。図４Ｂに示す変形例３の培養容器では、貯留部蓋７Ｂの蓋部７１の下面から突出する突起部７４の外周面に形成されたネジ部７５が、貯留部２Ｂの培養液口２４の内側の内周面に形成されたネジ部２６に螺合することで、培養液口２４が貯留部蓋７Ｂによって密閉されている。

また、図４Ｃに示す変形例４の培養容器では、貯留部蓋７Ｃは、蓋部７１の下面から突出して培養液口２４に陥入される円環状の凸部７６を有している。凸部７６は、外周面から径方向外側に突出する係合部７７を有している。また、貯留部２Ｃの第２貯留部２２Ｃの上端に開口する培養液口２４の内側の内周面には、貯留部蓋７Ｃの凸部７６の係合部７７を係合させる凹部２７が形成されている。貯留部蓋７Ｃは、凸部７６を弾性変形させて培養液口２４に陥入し、凸部７６の係合部７７を凹部２７に係合させることで、培養液口２４を封止している。すなわち、変形例４の貯留部蓋７Ｃにおいて、凸部７６の係合部７７は、貯留部２Ｃの凹部２７に係合し、貯留部２Ｃに密着して培養液口２４を封止することで、気密性を有する密閉部Ｓとして機能する。

変形例２、３及び４の培養容器は、前述の実施形態で説明した培養容器１と同様の効果を得ることができるだけでなく、蓋部材５が培養液口２４を密閉する貯留部蓋７Ａ、７Ｂ、７Ｃを有し、貯留部蓋７Ａ、７Ｂ、７Ｃが気密性を有する密閉部Ｓを有することで、蓋部材５による培養液口２４の密閉性を向上させることができる。また、貯留部蓋７Ａ、７Ｂの密閉部Ｓが、培養液口２４の外周面又は内周面のネジ部２５又は２６に螺合するネジ部７３又は７５である場合には、蓋部材５の貯留部蓋７Ａ、７Ｂの脱落をより確実に防止することができる。また、貯留部蓋７Ｃの密閉部Ｓが、培養液口２４に係合して培養液口２４を封止する係合部７７である場合には、蓋部材５の貯留部蓋７Ｃの開閉を容易にすることができる。

以上、図面を用いて本発明の実施の形態を詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における設計変更等があっても、それらは本発明に含まれるものである。

１培養容器、２，２Ａ−２Ｃ貯留部、３，３Ａ培養部、４膜、５蓋部材、６培養部蓋、７貯留部蓋、２４培養液口、３１開口部、６３フィルター、７３ネジ部、７５ネジ部、７７係合部、Ａ通気部、ＣＡ培養領域、Ｌ培養液、ＯＡ開口面積、Ｓ密閉部

Claims

細胞又は組織を培養する単一の培養部と、該培養部と一体に成形されて該培養部の下方で培養液を貯留する単一の貯留部と、前記培養部の底部に設けられて前記培養液を透過する単一の膜と、を備えた培養容器であって、
前記培養部は、前記膜と鉛直方向に重なる位置に開口する開口部を有し、
前記開口部の開口面積は、前記細胞又は前記組織を培養する培養領域の面積以上であり、
前記貯留部は、前記開口部の平面視で前記培養部の側方に隣接して上方に開口する培養液口を有し、
前記開口部と前記培養液口の一方を閉塞して他方を開放可能な蓋部材を有し、
前記培養液口の高さ位置は、前記開口部の高さ位置よりも低いことを特徴とする培養容器。
前記培養領域の面積は、前記膜の面積以下であることを特徴とする請求項１に記載の培養容器。
前記蓋部材は、前記開口部を閉塞する培養部蓋を有し、
前記培養部蓋は、気体を通過させる通気部を有することを特徴とする請求項１または請求項２に記載の培養容器。
前記通気部は、液体を遮蔽するフィルターであることを特徴とする請求項３に記載の培養容器。
前記蓋部材は、前記培養液口を閉塞する貯留部蓋を有し、
前記貯留部蓋は、前記培養液口を密閉する密閉部を有することを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の培養容器。
前記密閉部は、前記培養液口の外周面又は内周面に螺合するネジ部であることを特徴とする請求項５に記載の培養容器。
前記密閉部は、前記培養液口に係合して前記培養液口を封止する係合部であることを特徴とする請求項５に記載の培養容器。