JP2016123336A

JP2016123336A - 細胞培養容器

Info

Publication number: JP2016123336A
Application number: JP2014266569A
Authority: JP
Inventors: 恵八巻; Megumi Yamaki
Original assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Current assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Priority date: 2014-12-26
Filing date: 2014-12-26
Publication date: 2016-07-11

Abstract

【課題】種々の器具の挿入に適した最小限の開口を適切な位置に選択的に開口させることができる細胞培養容器を提供する。
【解決手段】細胞及び培地Ｍを開口部から内部に導入して収容する容器１０を備えた細胞培養容器１である。細胞培養容器１は、容器１０に設けられた器具挿入孔１２ａ〜１２ｅと、該器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口可能に密閉する封止部材１４ａ〜１４ｅと、を有する。器具挿入孔１２ａ〜１２ｅは、容器１０の内部に収容される培地よりも高い位置に設けられていてもよい。
【選択図】図１

Description

本発明は、細胞を培養するための細胞培養容器に関する。

細胞を培養するための細胞培養容器の一例として、フレームと、該フレームに対して確実にシールされ、培養チャンバーを形成するガス透過性の膜とを備えた細胞培養装置が知られている（下記特許文献１を参照）。この細胞培養装置は、フレームを通り、物質が培養チャンバー内に導入され又はそこから引き抜かれることを許容する、少なくとも一つの再シール可能な開口部を備えている。フレームの開口部は、培養チャンバーに物質を導入し、又は培養チャンバーから物質を引き抜くための器具を案内する通路として用いられ、例えば、エラストマー材料及び抗微生物剤からなる隔膜でシールされている。

特許文献１の細胞培養装置を用いて細胞を培養するには、まず、細胞の成長を促進すべく、適切な量の組織培養装置内に培養する細胞を懸濁させて懸濁液を得る。次に、細胞培養装置内に懸濁液を注入するための適切な器具、例えば、シリンジ内に懸濁液を導入する。次に、再シール可能な開口部を通して、細胞培養チャンバー内に器具の一部、例えばシリンジの針の先端を挿入し、器具から懸濁液を放出する。その後、細胞培養装置から器具の一部を引き抜き、懸濁液が収容された細胞培養装置を、適切な温度及びＣＯ_２濃度等の条件でインキュベーターによって保温する。

特許第４８９７７５２号公報

細胞培養容器において細胞の培養環境を適切にコントロールするためには、容器内の環境のモニタリングを行うことが必要になる。特に、細胞を用いた再生医療の分野では、細胞の安全性や品質を保証するために、細胞培養容器の内容物や環境のモニタリングが重要になる。具体的には、例えば、細胞培養容器内の温度、Ｐｈ、酸素や二酸化炭素等のガス濃度、細胞の生成物や代謝産物の量、細菌等の微生物やウイルス等による汚染の有無等のモニタリングが行われる。また、培養中の細胞及び培地のサンプリングや培地への薬剤の添加などが頻繁に行われる。

特許文献１の細胞培養装置では、フレームに設けられ、物質が培養チャンバー内に導入され又はそこから引き抜かれることを許容する再シール可能な開口部を介して、細胞培養チャンバーの内容物や環境をモニタリングする器具を導入することになる。しかし、この開口部は、細胞培養容器内に懸濁液を導入し又は引き抜くためのものであり、挿入可能な器具の種類や、器具を挿入可能な位置が著しく制限されるという課題がある。

本発明は、前記課題に鑑みてなされたものであり、種々の器具の挿入に適した最小限の開口を必要なときに適切な位置に開口させることができる細胞培養容器を提供することを目的とする。

前記目的を達成すべく、本発明の細胞培養容器は、細胞及び培地を開口部から内部に導入して収容する容器を備えた細胞培養容器であって、前記容器に設けられた器具挿入孔と、該器具挿入孔を開口可能に密閉する封止部材と、を備えることを特徴とする。

前記容器は、前記培地を収容する培地収容部と、気体を収容する気体収容部とを有し、前記器具挿入孔は、前記気体収容部に設けられていてもよい。また、前記容器に複数の前記器具挿入孔が設けられていてもよい。また、前記器具挿入孔の開口は、前記開口部よりも小さくてもよい。また、前記器具挿入孔は、スリット状に形成されていてもよく、該器具挿入孔に挿入される器具を保持する器具保持部を有してもよい。

また、前記封止部材の厚さは、前記容器の厚さよりも薄くてもよい。また、前記封止部材は、前記容器に貼着された自己吸着性シートであってもよい。また、本発明の細胞培養容器は、前記容器に設けられた複数の通気孔と、該通気孔を開口可能に密閉する通気孔封止部材と、を有してもよい。

本発明の細胞培養容器によれば、種々の器具の挿入に適した最小限の開口を必要なときに適切な位置に開口させることができる。

本発明の細胞培養容器の実施形態１を示す外観斜視図。図１に示す細胞培養容器のII−II線に沿う断面図。図１に示す細胞培養容器のIII−III線に沿う断面図。図１に示す細胞培養容器の器具挿入孔の変形例１から３を示す平面図。図１に示す細胞培養容器の封止部材の変形例を示す平面図。図１に示す細胞培養容器の変形例１から３を示す平面図。本発明の細胞培養容器の実施形態２を示す外観斜視図。本発明の細胞培養容器の実施形態３を示す外観斜視図。

以下、図面を参照して本発明の細胞培養容器の実施形態を説明する。

（実施形態１）
図１は、本発明の実施形態１に係る細胞培養容器１の外観斜視図である。図２は、図１に示す細胞培養容器１のII−II線に沿う断面図である。図３は、図１に示す細胞培養容器１のIII−III線に沿う断面図である。

本実施形態の細胞培養容器１は、主に、動物細胞の培養に用いられるフラスコ型の培養容器であり、例えば、可視光を透過する透明な材料によって製作された扁平角形の容器１０を備えている。容器１０は、細胞及び培地Ｍを導入する開口部１１を有し、開口部１１から導入した細胞及び培地Ｍを内部に収容する。本実施形態の容器１０は、培地Ｍを収容する培地収容部１０ａと、空気等の気体を収容する気体収容部１０ｂとを有している。容器１０は、最も大きい面積を有する対向する一対の壁面のうち一方が底面、他方が上面とされ、一側面に開口部１１が形成されている。培地収容部１０ａは、容器１０内の底面側の部分であり、気体収容部１０ｂは、容器１０内の上面側の部分である。

開口部１１は、例えば、スクリューキャップである蓋部材２０によって、開閉可能に閉塞されている。すなわち、蓋部材２０の内周面に設けられたねじが、容器１０の開口部１１の外周面に設けられたねじに螺合することで、蓋部材２０が容器１０に締結されて開口部１１を閉塞している。本実施形態の蓋部材２０は、例えば、疎水性フィルター２１を有している。疎水性フィルター２１は、通気性を有し、容器１０の内部から外部へ培地Ｍ及び細胞が流出するのを防止するとともに、容器１０の外部から内部へ細菌等が侵入するのを防止している。

容器１０及び蓋部材２０は、例えば、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリプロプレン（ＰＰ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）、シクロオレフィンポリマー（ＣＯＰ）、シクロオレフィンコポリマー（ＣＯＣ）等の樹脂材料によって製作することができる。なお、細胞培養に適した表面処理を容易にする観点から、容器１０は、ＰＳ製であることが好ましい。また、容器１０及び蓋部材２０は、樹脂材料に限定されず、例えば、ガラス、石英、セラミックス、金属等によって製作してもよい。

細胞培養容器１は、容器１０に器具を挿入するための器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを有している。本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０の上面の中央部に正方形の器具挿入孔１２ａを備え、容器１０の上面の開口部１１と反対側の端部に、長方形のスリット状の器具挿入孔１２ｂを備えている。スリット状の器具挿入孔１２ｂは、容器１０の長手方向、すなわち、開口部１１からその反対側の端部へ向く方向に所定の開口幅を有し、該長手方向に直行する容器１０の幅方向に所定の開口長さを有している。器具挿入孔１２ｂの開口幅は、開口長さよりも小さい。

また、本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０の上面の幅方向の一側で、長手方向中央よりも開口部１１側の位置に、長手方向に隣接する２つの円形の器具挿入孔１２ｃ，１２ｄを備えている。２つの円形の器具挿入孔１２ｃ，１２ｄのうち、一方の器具挿入孔１２ｄは、図３に示すように、器具挿入孔１２ｄに挿入される器具Ａを保持する凹状の器具保持部１３を有している。また、本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０の幅方向の両側面に、長手方向に間隔をあけて複数の円形の器具挿入孔１２ｅを備えている。

本実施形態において、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅは、容器１０の底部の培地収容部１０ａよりも鉛直方向の高い位置にある気体収容部１０ｂに設けられている。なお、本実施形態の細胞培養容器１では、例えば、容器１０の容積の約１／３以下の体積の培地Ｍを容器１０の内部に収容して細胞を培養する。すなわち、培地収容部１０ａは、容器１０内の底面から気体収容部１０ｂの下端まで、容器１０内の高さの１／３程度の高さを有している。また、気体収容部１０ｂは、培地収容部１０ａの上端から容器１０内の上面まで、容器１０内の高さの２／３程度の高さを有している。また、スリット状の器具挿入孔１２ｂを除く器具挿入孔１２ａ，１２ｃ〜１２ｅは、開口部１１よりも小さい。すなわち、器具挿入孔１２ａ，１２ｃ〜１２ｅのそれぞれの開口面積は、開口部１１の開口面積よりも小さい。なお、挿入する器具の大きさに応じて、スリット状の器具挿入孔１２ｂの開口面積を、開口部１１の開口面積よりも小さくすることもできる。

本実施形態の細胞培養容器１において、容器１０に設けられた複数の器具挿入孔１２ａ〜１２ｅの数は、必要に応じて適宜増減させることができる。また、形状及び大きさの異なる器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを自由に組み合わせて用いることができる。また、細胞培養容器１は、複数の器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを備える構成に限定されず、容器１０に器具挿入孔１２ａ〜１２ｅのいずれか１つを有する構成であってもよい。

すなわち、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅの数、位置、大きさ及び形状は、挿入される器具に応じて適宜変更することができる。器具挿入孔１２ａ〜１２ｅの形状としては、例えば、円形、半円形、楕円形及び長孔等の曲線を含む形状や、三角形、正方形、長方形及びその他の多角形等の直線のみの形状の他、三日月型、円弧形、波形等、任意の形状を採用することができる。また、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅのそれぞれに器具保持部１３を設けてもよい。

器具挿入孔１２ａ〜１２ｅに挿入する器具としては、例えば、容器１０の内容物や環境をモニタリングするモニタリング用の器具としての各種のセンサを例示することができる。具体的には、容器１０内の温度、二酸化炭素や酸素等のガス濃度、培地ＭのＰｈ、細胞の生成物や代謝産物の量、細菌等の微生物やウイルス等による培地Ｍの汚染の有無等を測定し、又はモニタリングする各種のセンサを例示することができる。

また、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅに挿入する器具としては、例えば、容器１０の内部の培地Ｍや細胞をサンプリングしたり、容器１０の内部に薬剤等を導入したりする培養操作用の各種の器具を例示することができる。培養操作用の器具としては、例えば、シリンジ又はニードル、ピペット又はピペットチップ、カテーテル、チューブ、スクレイパー等を例示することができる。

細胞培養容器１は、容器１０に設けられた器具挿入孔１２ａ〜１２ｅをそれぞれ開口可能に密閉する封止部材１４ａ〜１４ｅを備えている。本実施形態の封止部材１４ａ〜１４ｅは、容器１０に貼着された自己吸着性シートである。自己吸着性シートとしては、例えば、表面にμｍ単位の微小な凹凸を有する発泡樹脂材料を用いることができる。より具体的には、自己吸着性シートの材料として、例えば、アクリル系発泡材、シリコーン系発泡材等のエラストマー発泡材を用いることができる。容器１０内の顕微鏡観察を容易にする観点から、封止部材１４ａ〜１４ｅは可視光を透過する透明性を有することが好ましい。また、封止部材１４ａ〜１４ｅは、酸素や二酸化炭素等のガスを透過させるガス透過性を有してもよい。図２に示すように、本実施形態の封止部材１４の厚さｔは、容器１０の厚さＴよりも薄い。

封止部材１４ａ〜１４ｅは、容器１０に吸着して密着することで、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを封止して密閉するとともに、必要に応じて容器１０から剥離させることで、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを容易に開口させることができる。また、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口させた後、再び封止部材１４ａ〜１４ｅを容器１０に密着させることで、封止部材１４ａ〜１４ｅによって器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを再度密閉し、再封することが可能である。すなわち、封止部材１４ａ〜１４ｅは、容器１０に密着及び剥離可能に設けられ、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開閉可能に密閉している。

なお、封止部材１４ａ〜１４ｅは、一部を容器１０に接合してフラップ状に設けてもよい。また、封止部材１４ａ〜１４ｅは、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅをそれぞれ開口可能に密閉することができる構成であれば、自己吸着性シートに限定されず、例えば、細胞の培養に影響を与えない粘着層を使用した粘着シートであってもよい。また、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口させる際には、封止部材１４ａ〜１４ｅを容器１０から剥離させるだけでなく、例えば、封止部材１４ａ〜１４ｅをニードル等によって穿刺したり、メスや生検パンチ等によって切開したりしてもよい。

本実施形態の細胞培養容器１において、容器１０の上面の中央部に設けられた封止部材１４ａと、開口部１１の反対側の端部に設けられた封止部材１４ｂは、それぞれ器具挿入孔１２ａ，１２ｂに対応する形状を有してこれらを密閉している。ここで、スリット状の器具挿入孔１２ｂを密閉する封止部材１４ｂは、例えば、破線状の薄肉部からなる複数の切取線１５を有している。複数の切取線１５は、それぞれスリット状の器具挿入孔１２ｂを幅方向に横断するように設けられ、スリット状の器具挿入孔１２ｂの長手方向に沿って間隔をあけて設けられている。

また、本実施形態の細胞培養容器１において、容器１０の上面の一側に設けられた封止部材１４ｃ，１４ｄは、例えば、封止部材１４ｂと同様の切取線１５を介して一体に設けられ、器具挿入孔１２ｃ，１２ｄを密閉している。また、容器１０の幅方向の側面に設けられた封止部材１４ｅは、容器１０の長手方向に並んだ複数の器具挿入孔１２ｅを一括して封止している。なお、封止部材１４ｅは、封止部材１４ｂと同様に、長手方向に間隔をあけて複数の切取線１５を有してもよい。

また、本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０に設けられた複数の通気孔１６と、該通気孔１６を開口可能に密閉する通気孔封止部材１７と、を備えている。複数の通気孔１６は、容器１０内の培地Ｍよりも高い位置、例えば、容器１０の側面の上端部近傍に、容器１０の全周に亘って周方向に間隔をあけて設けられている。通気孔封止部材１７としては、例えば、封止部材１４ａ〜１４ｅと同様の自己吸着性シート又は粘着シート等を用いることができる。なお、通気孔１６は、例えば、蓋部材２０の疎水性フィルター２１と同様の通気性を有するフィルターを備えていてもよい。

以下、本実施形態の細胞培養容器１の作用について説明する。

本実施形態の細胞培養容器１によって細胞を培養する際には、まず、容器１０の開口部１１を閉塞する蓋部材２０を取り外し、開口部１１を開放する。次に、開口部１１から容器１０の内部に、培地Ｍ及び細胞を導入し、開口部１１を蓋部材２０によって閉塞する。この段階で、細胞培養容器１をインキュベーターに収容してもよい。この際、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを密閉する封止部材１４ａ〜１４ｅは、薄いシート状であるため、複数の細胞培養容器１を積み重ねて収容する際の支障にならない。

本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０内に培地Ｍと細胞を導入した後、例えば、以下の手順で、容器１０内の環境のモニタリングを行うことができる。まず、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅのうち、モニタリング器具の挿入に適した、例えば、円形の器具挿入孔１２ｃ〜１２ｅの少なくとも一つを開口させる。具体的には、器具挿入孔１２ｃ〜１２ｅを密閉する封止部材１４ｃ〜１４ｅの少なくとも一部を容器１０から剥離させ、器具挿入孔１２ｃ〜１２ｅの少なくとも一つを開口させる。

次に、開口させた器具挿入孔１２ｃ〜１２ｅを介して、例えば、温度センサ、Ｐｈセンサ、ガス濃度センサ等の各種のモニタリング用の器具を容器１０内に挿入する。なお、器具挿入孔１２ｃ〜１２ｅは、封止部材１４ｃ〜１４ｅをメスやパンチによって切開して開口させてもよいし、センサ等のモニタリング用の器具を封止部材１４ｃ〜１４ｅに貫通させて開口させてもよい。封止部材１４ｃ〜１４ｅに器具を貫通させる場合、封止部材１４ｃ〜１４ｅによってモニタリング用の器具を保持することが可能になり、器具挿入孔１２ｃ〜１２ｅの開口も最小限にすることができる。

ここで、容器１０の上面の一側に設けられた器具挿入孔１２ｃ，１２ｄのうち、一方の器具挿入孔１２ｄのみを開口させるには、一体に設けられた封止部材１４ｃ，１４ｄを切取線１５に沿って破断させて分離する。これにより、一方の器具挿入孔１２ｄを密閉する封止部材１４ｄのみを容器１０から剥離させ、器具挿入孔１２ｄを開口させることができる。

また、器具挿入孔１２ｄは、図３に示すように、器具Ａを保持する器具保持部１３を有している。したがって、例えば、温度センサ、Ｐｈセンサ、ガス濃度センサ等のモニタリング用の器具Ａを、器具保持部１３によって保持することができる。これにより、モニタリング用の器具Ａを容器１０に固定し、容器１０内の特定の位置の環境を正確にモニタリングすることが可能になる。

また、本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０内に培地Ｍと細胞を導入した後、例えば、以下の手順で、細胞や培地Ｍの一部を定期的にサンプリングすることができる。まず、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅのうち、サンプリング用の器具の挿入に適した、例えば、矩形の器具挿入孔１２ａ，１２ｂの少なくとも一つを開口させる。具体的には、器具挿入孔１２ａ，１２ｂを密閉する封止部材１４ａ，１４ｂの少なくとも一部を剥離させ、器具挿入孔１２ａ，１２ｂの少なくとも一つを開口させる。

例えば、容器１０の中央部の培地Ｍ及び細胞をサンプリングしたり、容器１０の中央部に薬剤等を導入したりするには、まず、容器１０の上面の中央部の封止部材１４ａを剥離させ、器具挿入孔１２ａを開口させる。そして、器具挿入孔１２ａから容器１０内に、例えば、シリンジ又はニードル、ピペット又はピペットチップ、カテーテル、チューブ等、サンプリング用又は薬剤等導入用の器具を挿入する。なお、これらの器具を封止部材１４ａに貫通させて器具挿入孔１２ａを開口させてもよい。

また、細胞シート等、一定の大きさのサンプルを採取するには、容器１０の上面の開口部１１と反対側の端部のスリット状の器具挿入孔１２ｂを用いることができる。この場合、まず、スリット状の器具挿入孔１２ｂを密閉する封止部材１４ｂを容器１０から剥離させて開口させ、例えば、スクレイパー等の器具を挿入する。ここで、スリット状の器具挿入孔１２ｂを密閉する封止部材１４ｂは、器具挿入孔１２ｂの長手方向に間隔をあけて複数の切取線１５を有している。

そのため、例えば、封止部材１４ｂの複数の切取線１５から破断させる切取線１５を適宜選択し、剥離させる封止部材１４ｂの大きさを調節することで、スリット状の器具挿入孔１２ｂの開口長さを調節することができる。したがって、採取するサンプルの大きさや、挿入する器具の大きさに応じて、スリット状の器具挿入孔１２ｂを適切な開口長さで開口させることができ、例えば、幅の広いスクレイパー等の器具の挿入を容易にすることができる。

このように、本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０に設けられた器具挿入孔１２ａ〜１２ｅと、該器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口可能に密閉する封止部材１４ａ〜１４ｅと、を備えることで、種々の器具の挿入に適した最小限の開口を、必要なときに容器１０の適切な位置に開口させることができる。これにより、容器１０内へ挿入可能な器具の数や種類、測定場所等の制限を大幅に緩和し、容器１０内のモニタリング、容器１０内への薬剤等の導入、及び、培地Ｍや細胞のサンプリングを容易にすることができ、かつ、容器１０内のコンタミネーションのリスクを低減することができる。

また、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを、培地Ｍを収容する培地収容部１０ａよりも高い位置で気体を収容する気体収容部１０ｂに設けることで、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口させたときに、培地Ｍ及び細胞が器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを介して外部に漏洩するのを防止できる。したがって、容器１０内のモニタリング、容器１０内への薬剤等の導入、及び、培地Ｍや細胞のサンプリングを容易にすることができる。

また、容器１０に複数の器具挿入孔１２ａ〜１２ｅが設けられているので、種々の器具の挿入に適した器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを選択して、必要なときに適切な器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口させることができる。また、器具挿入孔１２ａ，１２ｃ〜１２ｅは、開口部１１よりも小さく、器具挿入孔１２ｂは切取線１５を有する封止部材１４ｂによって密閉されている。これにより、容器１０の開口部１１を開放する場合と比較して、器具を挿入する際の器具挿入孔１２ａ〜１２ｅの開口を最小限にして、容器１０内のコンタミネーションのリスクを低減することができる。

また、封止部材１４ａ〜１４ｅの厚さｔは、容器１０の厚さＴよりも薄いので、容器１０の外表面に封止部材１４ａ〜１４ｅを密着させた場合でも、容器１０の外表面と封止部材１４ａ〜１４ｅの外表面との間の段差を最小限にすることができる。また、封止部材１４ａ〜１４ｅに器具を貫通させたり、封止部材１４ａ〜１４ｅをニードルで穿刺したり、メスで切開するのを容易にすることができる。なお、容器１０の外表面に封止部材１４ａ〜１４ｅを収容する凹部を設けてもよい。これにより、容器１０の外表面から封止部材１４ａ〜１４ｅが突出するのをより効果的に防止できる。

また、封止部材１４ａ〜１４ｅが自己吸着性シートである場合には、吸着及び剥離を繰り返し行うことができ、器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口した後に再封止することができる。また、自己吸着性シートは粘着層を有しないので、粘着シートを用いる場合と比較して、容器１０内のコンタミネーションのリスクを低減することができる。

また、本実施形態の細胞培養容器１は、容器１０に設けられた複数の通気孔１６と、該通気孔１６を開口可能に密閉する通気孔封止部材１７とを備えている。これにより、センサ等のモニタリング用の器具の測定結果に応じて、通気孔封止部材１７を剥離又は切開して開口させる通気孔１６の数を調節し、容器１０の内部の酸素や二酸化炭素の濃度を調節することができる。また、封止部材１４ａ〜１４ｅが通気性を有する場合には、容器１０内の通気性をより向上させることができる。したがって、本実施形態の細胞培養容器１によれば、容器１０内の酸素濃度を高め、培養細胞の生存率や生物活性を高めることができる。

以上説明したように、本実施形態の細胞培養容器１によれば、容器１０に設けられた器具挿入孔１２ａ〜１２ｅと、該器具挿入孔１２ａ〜１２ｅを開口可能に密閉する封止部材１４ａ〜１４ｅとによって、種々の器具の挿入に適した最小限の開口を必要なときに適切な位置に開口させることができる。なお、本発明の細胞培養容器は、本実施形態で説明した細胞培養容器１の構成に限定されない。以下、本実施形態の細胞培養容器１の変形例について説明する。

図４は、図１に示す実施形態１の細胞培養容器１の器具挿入孔１２ｄの変形例１から３を示す平面図である。

図１に示す器具挿入孔１２ｄは、円形の開口を有し、開口の一部に半円形状の器具保持部１３が形成されていたが、図４中、（ａ）に示す変形例１の器具挿入孔１２ｄ１は、楔形の器具保持部１３を有する滴状の形状を有している。また、図４中、（ｂ）に示す変形例２の器具挿入孔１２ｄ２は、楔形の器具保持部１３を有する菱形又は平行四辺形の形状を有している。また、図４中、（ｃ）に示す変形例３の器具挿入孔１２ｄ３は、楔形の器具保持部１３を有する五角形の形状を有している。変形例１から３の器具挿入孔１２ｄ１〜１２ｄ３によれば、図１に示す器具挿入孔１２ｄと同様の効果を得られるだけでなく、挿入する器具に適した形状を選択することが可能になる。

図５は、図１に示す実施形態１の細胞培養容器１の封止部材１４ａの変形例を示す断面図である。

図５に示す本変形例の封止部材１４ａ１は、容器１０と同一の材質で容器１０と一体に設けられ、器具挿入孔１２ａを密閉している。封止部材１４ａ１の厚さｔは、容器１０の厚さＴよりも薄く、例えば、ニードル、生検パンチ、又はメス等によって封止部材１４ａ１を穿刺又は切開することで、器具挿入孔１２ａを開口可能な厚さにされている。本変形例の封止部材１４ａ１によれば、開口させる前の器具挿入孔１２ａの密閉性をより向上させることができる。

図６は、図１に示す細胞培養容器１の変形例１から３を示す平面図である。

図６中、（ａ）に示す変形例１の細胞培養容器１Ａでは、容器１０の上面に、容器１０の幅方向に延びる複数のスリット状の器具挿入孔１２ｂが、容器１０の長手方向に間隔をあけて設けられている。図６中、（ｂ）に示す変形例２の細胞培養容器１Ｂでは、容器１０の上面に、容器１０の長手方向に延びる複数のスリット状の器具挿入孔１２ｂが、容器１０の幅方向に間隔をあけて設けられている。スリット状の器具挿入孔１２ｂは、実施形態１の細胞培養容器１と同様に、封止部材１４ｂによって開口可能に密閉することができる。

また、図６中、（ｃ）に示す変形例３の細胞培養容器１Ｃでは、容器１０の上面に、容器１０の幅方向及び長手方向に間隔をあけて、複数の円形の器具挿入孔１２ｃが設けられている。器具挿入孔１２ｃは、前述の細胞培養容器１と同様に、封止部材１４ｃによって開口可能に密閉することができる。変形例１から３の細胞培養容器１Ａ〜１Ｃによれば、実施形態１の細胞培養容器１と同様の効果を得ることができるだけでなく、器具挿入孔１２ｂ，１２ｃをより自由な位置で開口させることができる。

（実施形態２及び３）
以下、本発明の細胞培養容器の実施形態２及び３について図７及び図８を用いて説明する。図７は、本発明の実施形態２に係る細胞培養容器１Ａの外観斜視図である。図８は、本発明の実施形態３に係る細胞培養容器１Ｂの外観斜視図である。

図７に示す実施形態２の細胞培養容器１Ａは、上部に開口部を有する培養皿３１と、培養皿３１の開口部を閉塞する蓋部材３２とによって容器３０が構成され、容器３０の蓋部材３２に器具挿入孔１２ｂ〜１２ｄが設けられている点で、実施形態１の細胞培養容器１と異なっている。また、図８に示す実施形態３の細胞培養容器１Ａは、樹脂フィルムからなるバッグによって開口部４１を有する容器４０が構成され、開口部４１にチューブ５０が連結されている点で、実施形態１の細胞培養容器１と異なっている。実施形態２及び３の細胞培養容器１Ａ，１Ｂのその他の点は、実施形態１の細胞培養容器１と同様であるので、同様の部分には同一の符号を付して説明を省略する。

図７に示す実施形態２の細胞培養容器１Ａは、培養皿３１の上部の開口部から細胞及び培地を容器３０の内部に導入して収容する。また、細胞培養容器１Ａは、実施形態１の細胞培養容器１と同様に、容器３０に設けられた器具挿入孔１２ｂ〜１２ｄと、該器具挿入孔１２ｂ〜１２ｄを開口可能に密閉する封止部材１４ｂ〜１４ｄと、を備える。同様に、図８に示す実施形態３の細胞培養容器１Ｂは、チューブ５０を介して細胞及び培地を開口部４１から容器４０の内部に導入して収容する。また、細胞培養容器１Ｂは、実施形態１の細胞培養容器１と同様に、容器４０に設けられた器具挿入孔１２ｂ〜１２ｄと、該器具挿入孔１２ｂ〜１２ｄを開口可能に密閉する封止部材１４ｂ〜１４ｄと、を備える。

実施形態２及び３の細胞培養容器１Ａ，１Ｂによれば、器具挿入孔１２ｂ〜１２ｄと封止部材１４ｂ〜１４ｄとを備えることにより、実施形態１の細胞培養容器１と同様の効果を得ることができる。また、実施形態２の細胞培養容器１Ａによれば、蓋部材３２を外して培養皿３１の比較的大きな開口部を開放することなく、容器３０内のモニタリングや培地及び細胞のサンプリングを行うことができる。したがって、蓋部材３２を外して容器３０内部を大気中に暴露する必要がなく、コンタミネーションのリスクを大幅に低減することができる。

以上、図面を用いて本発明の実施の形態を詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における設計変更等があっても、それらは本発明に含まれるものである。例えば、前述の実施形態では、主に動物細胞の培養に用いられる細胞培養容器について説明したが、本発明の細胞培養容器は、動物細胞の培養に限られず、植物細胞の培養に適用することも可能である。

１，１Ａ，１Ｂ細胞培養容器、１０容器、１０ａ培地収容部、１０ｂ気体収容部、１１開口部、１２ａ〜１２ｅ器具貫通孔、１３器具保持部、１４ａ〜１４ｅ封止部材（自己吸着シート）、１６通気孔、１７通気孔封止部材、３０，４０容器、４１開口部、Ｍ培地、ｔ封止部材の厚さ、Ｔ容器の厚さ

Claims

細胞及び培地を開口部から内部に導入して収容する容器を備えた細胞培養容器であって、
前記容器に設けられた器具挿入孔と、該器具挿入孔を開口可能に密閉する封止部材と、を備えることを特徴とする細胞培養容器。
前記容器は、前記培地を収容する培地収容部と、気体を収容する気体収容部とを有し、
前記器具挿入孔は、前記気体収容部に設けられていることを特徴とする請求項１に記載の細胞培養容器。
前記容器に複数の前記器具挿入孔が設けられていることを特徴とする請求項１又は請求項２に記載の細胞培養容器。
前記器具挿入孔は、前記開口部よりも小さいことを特徴とする請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の細胞培養容器。
前記器具挿入孔は、スリット状に形成されていることを特徴とする請求項１から請求項４のいずれか一項に記載の細胞培養容器。
前記器具挿入孔は、該器具挿入孔に挿入される器具を保持する器具保持部を有することを特徴とする請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の細胞培養容器。
前記封止部材の厚さは、前記容器の厚さよりも薄いこと特徴とする請求項１から請求項６のいずれか一項に記載の細胞培養容器。
前記封止部材は、前記容器に貼着された自己吸着性シートであることを特徴とする請求項１から請求項７のいずれか一項に記載の細胞培養容器。
前記容器に設けられた複数の通気孔と、該通気孔を開口可能に密閉する通気孔封止部材と、を備えることを特徴とする請求項１から請求項８のいずれか一項に記載の細胞培養容器。